SE509359C2 - Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel - Google Patents

Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel

Info

Publication number
SE509359C2
SE509359C2 SE8902638A SE8902638A SE509359C2 SE 509359 C2 SE509359 C2 SE 509359C2 SE 8902638 A SE8902638 A SE 8902638A SE 8902638 A SE8902638 A SE 8902638A SE 509359 C2 SE509359 C2 SE 509359C2
Authority
SE
Sweden
Prior art keywords
protein
binding
peptide
life
vivo
Prior art date
Application number
SE8902638A
Other languages
English (en)
Other versions
SE8902638L (sv
SE8902638D0 (sv
Inventor
Per-Aake Nygren
Hans Wigzell
Mathias Uhlen
Original Assignee
Cemu Bioteknik Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cemu Bioteknik Ab filed Critical Cemu Bioteknik Ab
Priority to SE8902638A priority Critical patent/SE509359C2/sv
Publication of SE8902638D0 publication Critical patent/SE8902638D0/sv
Priority to CA002064689A priority patent/CA2064689C/en
Priority to AT90911434T priority patent/ATE107514T1/de
Priority to EP90911434A priority patent/EP0486525B1/en
Priority to AU61439/90A priority patent/AU652124B2/en
Priority to JP51095890A priority patent/JP3477196B2/ja
Priority to DE69010206T priority patent/DE69010206T2/de
Priority to PCT/SE1990/000509 priority patent/WO1991001743A1/en
Publication of SE8902638L publication Critical patent/SE8902638L/sv
Priority to US08/162,906 priority patent/US6267964B1/en
Publication of SE509359C2 publication Critical patent/SE509359C2/sv

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/305—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F)
    • C07K14/31—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F) from Staphylococcus (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

15 20 25 30 35 509 359 rapeutiskt intressanta proteiner kan göra det nödvändigt att tillföra patienten föreningen endera med en hög ursprunglig dos eller med manga upprepade administrationer för att halla nivan av föreningen vid en kliniskt relevant niva. Detta reducerar läkemedlets kostnadseffektivitet och kan förorsaka negativa si- doeffekter till följd av de nödvändiga höga doserna.
För att undvika dessa problem har ett flertal system för långsam frigöring av läkemedel utarbetats, i vilka det terapeu- tiska medlet är inkapslat pa fysikalisk väg för frigöring av läkemedlet på fördröjt sätt (dvs entero- eller depatabletter) eller ges som ett förläkemedel som är inaktivt till dess att det kemiskt modifierats inne i patienten. Pa detta sätt är det i vissa fall möjligt att förlänga verkan av det terapeutiska med- let, ehuru den verkliga halveringstiden in vivo av föreningen i cirkulation ej förhöjts.
Nyligen har en alternativ strategi beskrivits med använd- ning av fusioner mellan ett rekombinant protein och ett värdpro- tein, såsom IgG (Capon et al., Nature 337, 1989, 525-531) eller IgM (Karjalainen et al., Nature 339 (1989), 68-70). Pa detta sätt visades halveringstiden för rekombinant lösligt CD4 in vivo vara väsentligt förlängd. Denna strategi för administration av terapeutiskt intressanta föreningar har emellertid nackdelen av att icke önskvärda immunologiska reaktioner är möjliga och att halveringstiden för det sålunda producerade rekombinant fusions- proteinet måhända ej är väsentligt förlängd. Även för utvecklingen av vacciner och andra immunostimule- rande beredningar kan snabbt avlägsnande av antigenet fran cir- kulationen minska immunresponsen. För att presentera antigenet för immunsystemet pà ett effektivt sätt har olika bärare utveck- late vilka förhöjer immunresponsen. (Allison et al., Journ. of Imm.Methods, 95 (1986), 157-168).
Denna strategi beledsagas ofta av simultaninjektion med försvagade eller avdödade patogener, sasom i Freunds kompletta adjuvant (FCA). Dessa formler har emellertid den potentiella risken av att vara toxiska i mottagaren och kan leda till dena- turering av proteinet, vilket sålunda begränsar användningen av denna strategi för distribution av terapeutiska proteiner.
Genom föreliggande uppfinning astadkommes nya förbättrade medel för att underlätta stabiliseringen av proteiner och poly- 10 15 20 25 30 35 509 559 peptidprodukter in vivo. Enligt föreliggande uppfinning astad- kommes detta genom koppling, sasom genom fusion av önskat biolo- giskt aktivt protein eller polypeptid till ett bindprotein med förmåga att selektivt binda till ett värdprotein eller -makromo- lekyl, sa att det önskade proteinet salunda stabiliseras i nämn- da värd. Genom selektiv bindning till ett patientprotein med en relativt lang halveringstid fördröjes utarmningen av fusionspro- teinet. Med det i föreliggande framställning använda uttrycket "patient" avses ett levande djur, speciellt ett däggdjur inne- fattande människan.
I enlighet med en föredragen sida av föreliggande uppfin- ning användes genfusion för att kombinera en första DNAsekvens kodande för ett bindprotein med en andra DNA-sekvens kodande för ett önskat protein eller polypeptid till en funktionell gen med förmåga att uttrycka fusionsprodukten av nämnda önskade bindpro- teindel.
Till följd av bindningsförmagan stabiliseras det produce- rade proteinet eller polypeptiden in vivo i mottagarvärden.
Föreliggande uppfinning baserar sig följaktligen på det överraskande rönet, att halveringstiden in vivo av ett biolo- giskt aktivt protein eller peptid kan väsentligt förlängas genom kovalent koppling av ett sadant protein eller peptid till ett polypeptidfragment med förmåga att binda till ett serumprotein.
Denna upptäckt var helt oväntad och kunde ej förutses fràn till- gänglig vetenskaplig kunskap.
Enligt en sida av uppfinningen astadkommes sålunda ett förfarande för att utsträcka halveringstiden in vivo av ett bio- logiskt aktivt protein eller peptid, vilket förfarande innefat- tar stegen kovalent koppling av proteinet eller peptiden till ett polypeptidfragment med förmaga att binda till ett serumpro- tein. Vid administration av det fran detta förfarande erhallna protein- eller peptidkonjugatet resulterar dess bindning till serumproteinet i en väsentligt utsträckt biologisk aktivitet till följd av förhöjd halveringstid.
Enligt en föredragen utföringsform av denna sida av upp- finningen har nämnda polypeptidfragment förmaga att binda till serumalbumin, sasom ett serumalbumin av däggdjursursprung, exem- pelvis humant serumalbumin. 10 15 20 25 30 35 509 559 Bindpolypeptidfragmentet i konjugatet härrör företrädesvis från stafylokockprotein G.
En annan sida av uppfinningen utgöres av användningen av protein- eller peptidkonjugatet såsom det definierats ovan för framställning av ett läkemedel eller en medicin, som när den administreras pa ett däggdjur innefattande människan uppvisar utsträckt halveringstid in vivo, sa att salunda konjugatets bio- logiska aktivitet förlängas.
En föredragen sida av föreliggande uppfinning ligger sa- lunda i ästadkommandet av en rekombinant DNA-kloningsvehikel eller -vektor innefattande en DNA-sekvens kodande för ett önskat protein eller polypeptid operativt knuten till en DNA-sekvens kodande för en bindningsmedierande del, sä att nämnda DNA-sek- venser tillsammans kodar för ett fusionsprotein av nämnda önska- de protein eller polypeptid, varvid nämnda bindning medierande del har förmaga att selektivt binda till ett protein eller en makromolekyl som är närvarande i den patient som behandlas.
Genom transformering av en kompatibel värdorganism med nämnda vektor för att möjliggöra expression av ovan kombinerade DNA-sekvens och odling av värdorganismen i ett näringsmedium produceras motsvarande bindningsmedierande fusionsprotein eller polypeptid. Värdceller producerande funktionella fusionsprotei- ner bör användas, vilka kan vara bakterieceller, såsom Escheri- chia, eller eukaryota celler, säsom fungi, insektsceller, växt- eller mammaliecellkulturer. Transformationen av värdarna kan åstadkommas genom välkända förfaranden.
Nämnda fusionsprotein av det önskade proteinet eller poly- peptiden och nämnda bindning medierande protein producerat av den odlade värdorganismen kan effektivt isoleras från cellkultu- ren medelst standardmetoder för proteinrening, såsom storleksex- klusionskromatografi, jonbytarkromatografi eller affinitetsre- ning under användning av en lämplig ligand immobiliserad till en lämplig bärare.
Om fusionsprodukten utsöndras i det omgivande mediet kan reningen utföras direkt ur mediet. Om a andra sidan fusionpro- dukten kvarstannar inne i cellerna maste de senare brytas ned innan sådan rening kan utföras. Nedbrytning av cellväggarna kan åstadkommas pa konventionellt sätt genom, exempelvis högt tryck, ultraljudbehandling, homogenisering, skakning med glaspärlor 10 15 20 25 30 35 509 359 etc. I de fall när produkten är innesluten i periplasmautrymmet mellan tva cellmembraner, sasom i gramnsgativa bakterier, kan en procedur med osmotisk chock användas för att frigöra produkten till suspensionsmediet. Vilken som helst annan behandling av de odlade cellerna eller näringsmediet före isoleringen av fusions- produkten ligger naturligtvis även inom ramen för uppfinningen.
Pa konventionellt sätt injiceras nämnda fusionsprotsin i lösning in vivo i recipienten. Tack vare den delen som medierar bindning till ett patientprotein eller -makromolekyl förhöjes stabiliteten av det önskade proteinet eller polypeptiden.
Alternativt kan bildning av komplex mellan nämnda fusione- protein och motsvarande patientprotein eller -makromolekyl ä- stadkommas in vitro, varefter nämnda komplex injiceras i recipi- enten.
Förfaranden för framställning av en lösning av nämnda fu- sionsprotein för injektion är välkända och behöver ej beskrivas i detalj häri.
Lämpliga betingelser för bildning av komplex in vitro bör naturligtvis väljas med avseende pà det speciella bindningsmedi- erande proteinet och aktuellt protein eller polypeptid.
Ett exempel pà en sàdan del som medierar specifik bindning till ett patientprotein är de albuminbindande regionerna av streptokockprotein G (Nygren et al., Journ.of Mol.Recogn. 1, (1988), 69-74). Serumalbumin med en halveringstid i människor av 19 dygn är det protein som rikligast förekommer i serum (40g/1) och en av dess funktioner är att binda molekyler, såsom lipider och bilirubin. (T. Peters Jr., Advances in Protein Chemistry, 37 (1985) 161-245).
Eftersom de albuminbindande regionerna av streptokockpro- tein G, betecknade A1B1A2B2A3, eller delar därav har en hög spe- cifik bindning till serumalbumin (Nygren et al., Journ. of Molec.Recogn. 1 (1988) 69-74) är det uppenbart att detta protein kan användas för att konstruera rekombinanta fusionsproteiner, vilka binder till serumalbumin och transporteras omkring i pati- enten med en fördelning som liknar den för serumalbumin.
Andra exempel pä delar som medierar specifik bindning till värdproteiner eller -makromolekyler är receptorer, sasom de IgG- -bindande regionerna av stafylokockprotein A (Uhlen et al., i J.Biol.Chem. 259, 1695-1702 (1984)) eller streptokockprotein G 10 15 20 25 30 35 509 359 (Guss et al., EMBO. J. 5, fibronektinreceptor (Kuusela R., Nature 276, 718-720 (1978)). 1567-1575 (1986)) eller stafylokock- En värdefull användning av en sadan fusionsprodukt är när det protein som är fuserat till den del som medierar bindning till patientproteiner eller -makromolekyler har en terapeutisk funktion. I sadana fall är utsträckt halveringstid in vivo av det önskade proteinet eller polypeptiden väsentlig för dess kli- niska användning. Exempel pa sådana terapeutiska proteiner eller polypeptider är lösliga CD4-receptorer för AIDS/HIV-behandling, vävnadsplasminogenaktivator (tPA) för upplösning av blodproppar närvarande i den behandlade recipienten och hormoner använda för IGF-I, IGF-II, TNF, EGF) eller någon annan kliniskt relevant funktion (exempelvis insulin, re- stimulering av tillväxt (hGH, laxin>.
En annan värdefull användning av uppfinningen är för fram- ställning av monoklonala och polyklonala antikroppar.
Enligt uppfinningen fuseras ett rekombinant protein, mot vilket man önskar erhalla antikroppar, till ett bindprotein för utsträckning av halveringstiden i cirkulation in vivo av detta rekombinantprotein. Den förlängda halveringstiden ger längre exponering för immunsystemet och ger sålunda högre titrar än konventionella metoder.
Ytterligare en annan värdefull användning av uppfinningen bestar i framställning av vacciner. Rekombinanta proteiner an- vända i vacciner kan sàlunda stabiliseras in vivo, vilket kan göra adjuvanter överflödiga och i allmänhet ge högre immunolo- gisk reaktion.
Såsom framgar av det ovanstående utgör en kritisk del av föreliggande uppfinning astadkommandet av rekombinant-DNA-struk- turen eller -vektorn innefattande den kombinerade genen som ko- dar för föreliggande fusionsprotein eller polypeptid och som kan transformera en värdcell så att den kan uttrycka och producera fusionsprodukten. Föreliggande uppfinning är avsedd att innefat- ta vilken som helst sådan vektor oberoende av hur den erhallits under användning av exempelvis olika restriktionsenzymspjälk- ning, ligerings-, transformerings- och screeningsteknik välkänd inom tekniken, liksom även vilka som helst lämpliga vektormate- rial och värdorganismer. Den DNA-sekvens som kodar för önskat protein eller polypeptid kan salunda införas i en lämplig vektor 10 15 20 25 30 35 509 559 och den bindningekodande DNA-sekvensen därefter införas, eller vice versa, eller de två DNA-sekvenserna kan införas samtidigt i vektorn. Det är även möjligt att införa respektive DNA-sekvenser i form av delar därav i vektorn. Vidare kan de två DNA-sekven- serna anordnas med endera bindkodningssekvensen eller sekvensen kodande för önskat protein eller polypeptid vid 5'-änden eller starten av den kombinerade genen. Den speciella tekniken för àstadkommande av sådana införanden och kombinationer med bibe- hållna korrekta avläsningsramar innefattande åstadkommandet av lämpliga restriktionsställen för detta, är välkända som sådana inom tekniken.
Uppfinningen innefattar även en rekombinant DNA-molekyl innehållande rekombinant-DNA-sekvensen såsom beskrivits ovan och fuserat 3' därtill på DNA-nivå en produktionsgen. Genom detta arrangemang erhåller en sådan molekyl möjligheten att uttrycka ett fuserat protein i en lämplig värd.
Slutligen innefattar uppfinningen en plasmidvektor inne- hållande den ovan beskrivna rekombinant-DNA-molekylen. Uppfin- ningen avser även bakteriella eukaryota celler innehållande den ovan definierade rekombinant-DNA-molekylen_ Molekylen kan infö- ras i cellkromosomen men kan även innehållas i en autonomt rep- likerande vektor, såsom plasmid, fag eller virus.
Uppfinningen kommer i det följande att illustreras ytter- ligare genom icke inskränkande exempel under hänvisning till bilagda ritningar, vari: Pig. 1 är en schematisk ritning av streptokockprotein-G- -genen (Såsom beskrivits av Olsson et al. i Eur.J. of Biochem. 168, 318-324) och konstruktioner innehållande fragment därav.
För jämförelsens skull visas även konstruktionen kodande för Z-proteinet. I rad A: pEZT; rad B: pB2T; rad C: protein-G-genen och i rad D: pBBCD4; Pig. 2 visar nivåerna av märkning kvarvarande i blodcirku- lationen under en 18-dygnsperiod i Maqaqueapor injicerade med 125I-märkta proteiner B2 och 2. Värdena är relativt i förhållan- de till de nivåer som observerades 20 minuter efter injektion; Fig. 3 visar i kolumn 1 och 2 en analys med SDS-PAGE av HSA-affinitetsrenade proteiner från odlingsmediet av E.coli-cel- ler innehållande pBBCD4 (materialet i kolumn 2 är utspätt 10 10 15 20 25 30 35 509 359 ganger relativt kolumn 1). Kolumn M: markeringsproteiner med molekylvikter såsom angivits.
Utgangsmategial E.coli stam RRIAM15 (Langley et al. Proc.Natl.Acad. of Sci., USA, 72, kloningsvehiklar var: 1254-1257 (1975)) användes i exemplen. Använda pE2ZT308 (Nygren et al., J.of Molec.Recogn. 1, 69-74 (1988)) pEG (Eliasson et al., J.of Biol.Chem. 263, 4323-4327 (1988)) pUC418 (erhållet fran Dan R. Littman vid University of California, San Francisco). pB1B2 (Nygren et al., J.of Molec.Recogn. 1, 69-74 (1988)).
Samtliga stammar och vektorer är tillgängliga vid Kungliga Tekniska Högskolan i Stockholm, Sverige.
Plasmid pNP-3 har deponerats 14 juni 1989 vid Deutsche Sammlung von Mikroroganismen und Zellkulturen GmbH i Braun- schweig, Västtyskland, och har tilldelats accessionsnumret DSM 5394, i enlighet med Budapestfördraget.
Oligonukleotider: NYPE-1: 5'-CGAATTCGCCTAACGGTATGCAGGGAAACAAAGTGGTGCTGGGC-3' NYPE-2: 5'-CGGATCCAGGCATCACGATGTCTATTTTGAACTCGAGC-3' tillverkades hos KabiGen AB under användning av fast fasteknik.
PCR-reaktioner utfördes i en Techne programbar Dri-Block PCH-1. ßuffgrtgr ocg Media TSB: Tryptic Soy Broth, spådd till en liter och autoklaverad.
TST: TRIS/HCl (25mM) pH 7.4, 150 mh NaC1, 0.05! Tween 80.
Lösning I för osmotisk chock: 20% sukros, 0.3 M TRIS/HCI pH 8.1, 1mM EDTA.
Lösning II för osmotisk chock: 5mM MgCl2 (0°C).
SDS-PAGE loading buffert: 2.52 SDS (natriumdodecylsulfat), 5% ditiotreitol (DTT), 0.01! bromfenolblàtt. 10 15 20 25 30 35 509 359 10mM TRIS/HCI, pH 8.3, 5mM KCl, 1.5 mM MgCl2, 0.011 gelatin PBS: 0.05 M natriumfosfat pH 7.1, 0.9! NaCl. 10x PCR-buffert: PCR-amglifigring En amplifieringblandning bereddes bestående av templat pUC418 (8ng/pl), oligonukleotider NYPE-1 och NYPE-2 (vardera 0,2 uM), 1xPCR-buffert, dNTP (vardera 0,2 mM> och 2 enheter Taq-po- lymeras (Stratagene>. Tid/temp-profilen som användes var 92°C (1 min), 50°C (2 min) och 72°C (1 min). Denna cykel upprepades 35 gånger.
Proteinmärkning Efter lyofilisering resolubiliserades proteinerna i des- tillerat vatten till en koncentration av Qmg/ml. 100 pg (25 ul) protein, 50 ul av 0,2 M Na-fosfatbuffert (pH 7,2), 50 ul Enzymo- beads Na125 (10 pl) och inkuberades i 20 min. Supernatanten överfördes sedan pa en 5 ml G-25 Superfine Sephadex-kolonn (Pharmacia, Sve- rige) som i förväg bringats i jämvikt med PBS (0,1% gelatin).
Eluering med samma buffert och uppsamling i sma fraktioner sepa- rerade effektivt märkta proteiner fran fri Naïzsl.
Affinitetgrening av proteiner Celler bärande pà de olika konstruktionerna odlades över natten i Tryptic Soy Broth (TSB) supplementerad med Ampicillin 70 mg/l. Efter centrifugering i 5000 g frigjordes periplasmain- nehállet under användning av en procedur med osmotisk chock en- ligt Nossal och Heppel (J. of Biol.Chem. 244, 3049-3062) innebä- rande inkubation först med 20% sukros, 0,3 M TRIS/HCl pH 8,0, 1mM EDTA átföljt av 0,5 mM MgCl2 (0°C). Chocklysaten överfördes direkt pà IgG-Sepharos (Z) respektive HSA-Sepharos (B2). Efter tvättning med 1xTST (25 mM TRIS/HCl pH 7,4, 0,15 M NaCl, 0,05% Tween® 80) atföljt av 0,5 mM NH4Ac, pH 6,0, eluerades proteiner med 0,5 M HAc, pH 2,8. Absorption vid 280 nm uppmättes och rele- vanta fraktioner lyofiliserades. 10 15 20 25 30 35 10 509 359 Ov r " i av o ' r a Ma a u s Fyra Maqaques i intervallet 6-7 kg injicerades med ca 100 ug märkt protein under användning av en ven i benet. Vid varje försök uttogs 0,5 ml blod för ytterligare analys. För samtliga prover uttagna under 18-dygnsperioden utfördes den verkliga mät- ningen av radioaktivitst dag 18 för att eliminera fel till följd av isotopens halveringstid.
Fraktio erad ammon umsu fa tfä l in Utfällning med ammoniumsulfat utfördes under användning av standardteknik vid 40 och 70% mättnad pa 150 ul plasma uppsamlad 24 timmar efter injektion.
Rutinmetoder De metoder som rutinmässigt användes inom molekylärbiolo- gin beskrivas ej (liksom användningen av kommersiella restrik- tionsenzymer, DNA-ligeringar, Bal 31 exonukleas, S1-nukleas och Klenow-polymeras, transformation av E.coli och isolering av plasmid-DNA).
För att analysera proteinfraktioner genom SDS-PAGE under användning av PHAST-systemet (Pharmacia, Uppsala, Sverige) upp- löstes proverna i loadingbuffert [2,5% SDS, 5% Ditiotreitol (DTT) och 0,01% Bromfenolblattl. Gradient (8-25$)-polyakrylamid- geler med 5% SDS kördes vid 10mA i 30 minuter och färgades sedan med Coomassie-blått.
EXEHPEL 1 Plasmiden pEZZT308 (Nygren et al., Journ. 1, 69-74 (1988)) kodande för en syntetisk divalent IgG-bindande of Mol.Recogn. domän, ZZ, föregangen av transkriptions-, translations-, och sekretionssignaler av stafylokockprotein A (SPA) uppslöts med reetriktionsendonukleas BglII under frigöring av 174 baspar fragment. Efter återvinning fran agarosgel religerades vektorde- len till bildning av pEZT kodande för en enkel IgG-bindande do- man 2 (fig. 1). of Biol.Chem. 263, 4323-4327 (1988)) har beskrivit konstruktionen av plasmiden pEG kodande Eliasson et al. (Journ. för ett protein bestående av B2-, A3-, C1-, D1- och C3-regioner- na av streptokockprotein G medierande bindning till bade IgG och 10 15 20 25 30 35 n 509 359 HSA. För subkloning av ett fragment kodande för endast ett HSA- -bindande protein uppslöts plasmiden pEG med restriktionsendo- nukleas Not I och Pst I under frigöring av ett 640 basparsfrag- ment. Detta ligerades till det renade vektorfragmentet av pEZZT308 som i förväg uppslutits med samma sndonukleaser. Den resulterande plasmiden pB2T (fig. 1) kodar för ett HSA-bindande protein betecknat B2 under samma kontrollsignaler av SPA som ovan.
Overnattenkulturer av E.coli-celler innehållande plasmiden pEZT eller pB2T skördades under användning av en procedur med osmotisk chock. Lysaten överfördes direkt pa kolonner av IgG-(2) eller HSA-Sepharos (B2) för affinitetskromatografi. Efter lyofi- lisering resolubiliserades de renade proteinerna och 125I-märk- tes.
Totalt fyra Maqaque-apor injicerades intravenöst med märk- ta proteiner. Individerna #300 och 233 gavs Z-protein och indi- viderna fl277 och 278 B-protein. Tjugofyra timmar efter injektion analyserades distributionen av det märkta proteinet i plasmat genom fraktionerad ammoniumsulfatutfällning vid 40% respektive 70% mättnad.
TABELL 1 Individ Protein cpm.-start cpm.-pellet cpm.-pellet 40; 70§, 300 Z 14833 11733(?9%) 440(3.0%) 233 Z 8615 6069<70%) 425(4.9%) 277 B 17197 260(1.5X) 14273(83%) 278 B 22170 346(1.62) 18242(82X) Såsom visas i Tabell 1 aterfanns i serum härrörande fràn apor injicerade md Z-protein majoriteten av märkning i fällning- en vid 401 mättnad. Detta resultat var förväntat, eftersom vid denna mattnadsnivà fällningen huvudsakligen bestar av serumets immunoglobulininneháll.
I motsats härtill återfanns i plasma fran apor injicerade med B2-protein märkningen i fällningen vid 70% mättnad. Vid den- na mättnadeniva består fällningen huvudsakligen av ssrumalbumin.
Dessa tva resultat anger, att bada rekombinantproteiner beter sig pà förväntat sätt in vivo beträffande deras respektive affir nitet. 10 15 20 25 30 35 509 359 12 Vidare följdes avlägsnandet av de två proteinerna i aporna under en 18-dygnsperiod. Tjugo minuter efter injektion bestämdes mängden märkning närvarande i blodet som ett referensvärde. Ni- våerna av märkning kvarvarande i blodet under perioden jämfördes med detta utgångsvärde.
Såsom framgår av fig. 2 minskar nivåerna av märkning i bada aporna injicerade med Z-protein snabbt och närmar sig 10% redan efter 5 dygn. Detta effektiva avlägsnande kan delvis för- klaras med immunologiska reaktioner för komplex bildade mellan Z-protein och lgG.
I apor injicerade med B2-protein är det intressant att notera att nivåerna av märkt protein närvarande i blodet förblir höga under hela 18-dygnsperioden. Efter en initiell nedgång, förmodligen till följd av en distribution av 82/HSA-komplex till den extravaskulära albuminpoolen, motsvarar de nivåer som kvar- star i bada aporna den förväntade nedgången beträffande omsätt- ningen av en normal HSA-molekyl med en halveringstid i människor av 19 dygn. (T. Peters Jr., Advances in Protein Chemistry, 37, 161-245 (1985)).
EXEMPEL 2 Plasmiden p81B2 uppslöts med restriktionsenzymerna EcoRI och Sall, behandlades med Klenows polymeras och religerades till bildning av pB1B2 AR/S. En syntetisk oligonukleotid (5'-TGCAAGATCTTTCAATTTCCCTATCCTCGAGAATTCTAAGCTT-3' och dess komplementära sekvens) infördes i pB1B2 AR/S som i förväg spjäl- kats med Pstl och Hindlll till bildning av plasmiden pB1B2HIV resistent mot Pstl. En multipurpose kloningslinker härledd från M13mp18 klonades mellan EcoRI- och HindllI-restriktionsetällena resulterande i expression av LacZ'-genen placerad omedelbart nedströms. Den erhållna plasmiden betecknades pB1B2HIVmpl8.
En region kodande för aminosyrorna 1-177 av den mogna hu- mana CD4 T-cell-receptorn amplifierades in vitro från plasmiden pUC418 under användning av oligonukleotiderna NYPE-1 och NYPE-2 som primers för polymeraskedjereaktionen (PCR). Efter uppslut- ning med restriktionsenzymerna EcoRI och BamHI ligerades frag- mentet till multilinkern av pB1B2HIVmpi8 kodande för de serum- albuminbindande domänerna av etreptokockprotein G. Den erhållna plasmiden betecknad pNP-3 kodar sålunda för ett fusionsprotein 10 13 509 359 bestående av nämnda eerumalbuminbindande region och domanerna E1 och E2 av den humana CD4-molekylen som är involverad i bindning till glykoprotein gp12O av HIV-I (Bedinger et al., Nature 334 (1988) 182-164).
E.co1i RRIAMIS-celler innehållande plasmiden pNP-3 odlades vid 30°C över natten. Analys pa SDS-PAGE med avseende pa protei- ner från odlingsmediet affinitetsrenade pà HSA-Sepharos visar att fusionsproteinet är stabilt i värden och har en skenbar mo- lekylvikt av 48 kDa (fig. 3), vilka star i överensstämmelse med uppskattningar från den deducerade aminosyrasekvensen.

Claims (4)

509 359 10 15 1% PATENTKRAV
1. Användning av ett protein- eller peptidkonjugat innefattande ett biologiskt aktivt protein eller peptid kovalent kopplad till ett polypeptidfragment av en rekombinant receptor med förmåga att binda till ett serumalbumin eller immunoglobulin av däggdjursursprung för framställning av ett läkemedel, vilket uppvisar förbättrad stabilitet in vivo jämfört med stabiliteten av proteinet eller peptiden som sådan.
2. Användning enligt patentkravet l, vari läkemedlet föreligger i injicerbar form.
3. Användning enligt patentkravet 2, vari läkemedlet föreligger i form av en injicerbar lösning eller suspen- sion.
4. Användning enligt något av de föregående patent- kraven, vari nämnda polypeptidfragment härrör från stafylokockprotein A eller streptokockprotein G.
SE8902638A 1989-08-01 1989-08-01 Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel SE509359C2 (sv)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8902638A SE509359C2 (sv) 1989-08-01 1989-08-01 Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel
PCT/SE1990/000509 WO1991001743A1 (en) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilized protein or peptide conjugates
AU61439/90A AU652124B2 (en) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilized protein or peptide conjugates
AT90911434T ATE107514T1 (de) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilisierte protein- oder peptidkonjugate.
EP90911434A EP0486525B1 (en) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilized protein or peptide conjugates
CA002064689A CA2064689C (en) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilized protein or peptide conjugates
JP51095890A JP3477196B2 (ja) 1989-08-01 1990-07-31 安定化されたタンパク質またはペプチド接合体
DE69010206T DE69010206T2 (de) 1989-08-01 1990-07-31 Stabilisierte protein- oder peptidkonjugate.
US08/162,906 US6267964B1 (en) 1989-08-01 1993-12-08 Stabilized protein or peptide conjugates able to bond albumin having extended biological half-lives

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8902638A SE509359C2 (sv) 1989-08-01 1989-08-01 Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel

Publications (3)

Publication Number Publication Date
SE8902638D0 SE8902638D0 (sv) 1989-08-01
SE8902638L SE8902638L (sv) 1991-02-02
SE509359C2 true SE509359C2 (sv) 1999-01-18

Family

ID=20376608

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE8902638A SE509359C2 (sv) 1989-08-01 1989-08-01 Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel

Country Status (8)

Country Link
EP (1) EP0486525B1 (sv)
JP (1) JP3477196B2 (sv)
AT (1) ATE107514T1 (sv)
AU (1) AU652124B2 (sv)
CA (1) CA2064689C (sv)
DE (1) DE69010206T2 (sv)
SE (1) SE509359C2 (sv)
WO (1) WO1991001743A1 (sv)

Families Citing this family (209)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5612034A (en) * 1990-10-03 1997-03-18 Redcell, Inc. Super-globuling for in vivo extended lifetimes
WO1995022992A2 (en) * 1994-02-23 1995-08-31 Chiron Corp Method and compositions for increasing the serum half-life of pharmacologically active agents
FR2726471B1 (fr) 1994-11-07 1997-01-31 Pf Medicament Procede pour ameliorer l'immunogenicite d'un compose immunogene ou d'un haptene et application a la preparation de vaccins
PL326078A1 (en) * 1995-09-21 1998-08-17 Andaris Ltd Transcytotic carriers and enhancers for delivery of drugs
DE69734443T2 (de) * 1996-01-08 2006-07-13 Genentech, Inc., South San Francisco Ob-rezeptor und liganden
US20050019325A1 (en) 1996-01-08 2005-01-27 Carter Paul J. WSX receptor agonist antibodies
US7074397B1 (en) 1996-01-08 2006-07-11 Genentech, Inc. Method for enhancing proliferation or differentiation of a cell using ob protein
US6541604B1 (en) 1996-01-08 2003-04-01 Genentech, Inc. Leptin receptor having a WSX motif
ATE473759T1 (de) 1998-05-22 2010-07-15 Univ Leland Stanford Junior Bifunktionelle moleküle sowie darauf basierende therapien.
BR9914519A (pt) 1998-10-13 2001-07-03 Univ Georgia Res Found Peptìdios bioativos estabilizados e métodos de identificação, sìntese e uso
US20030190740A1 (en) 1998-10-13 2003-10-09 The University Of Georgia Research Foundation, Inc Stabilized bioactive peptides and methods of identification, synthesis, and use
EP1229793A4 (en) * 1999-11-19 2003-01-22 Univ Leland Stanford Junior BIFUNCTIONAL MOLECULES HAVING MODULATED PHARMACOKINETIC PROPERTIES, AND THERAPIES BASED ON SUCH MOLECULES
AU2044001A (en) 1999-11-19 2001-05-30 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Targeted bifunctional molecules and therapies based thereon
US6887842B1 (en) 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
EP1757701A1 (en) * 1999-12-24 2007-02-28 Genentech, Inc. Methods and compositions for prolonging elimination half-times of bioactive compounds
ES2270893T3 (es) * 1999-12-24 2007-04-16 Genentech, Inc. Procedimiento y composiciones para prolongar la vida media de compuestos bioactivos.
CA2440582A1 (en) 2001-03-09 2002-10-03 Dyax Corp. Serum albumin binding moieties
US20030157561A1 (en) * 2001-11-19 2003-08-21 Kolkman Joost A. Combinatorial libraries of monomer domains
EP2075256A2 (en) 2002-01-14 2009-07-01 William Herman Multispecific binding molecules
US7041790B2 (en) 2002-03-26 2006-05-09 Dyax Corp. Fibrinogen binding moieties
EP1837031B1 (en) 2002-06-07 2009-10-14 Waratah Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating diabetes
US9321832B2 (en) 2002-06-28 2016-04-26 Domantis Limited Ligand
EP1517921B1 (en) * 2002-06-28 2006-06-07 Domantis Limited Dual specific ligands with increased serum half-life
US20060034845A1 (en) 2002-11-08 2006-02-16 Karen Silence Single domain antibodies directed against tumor necrosis factor alpha and uses therefor
WO2004041862A2 (en) 2002-11-08 2004-05-21 Ablynx N.V. Single domain antibodies directed against tumour necrosis factor-alpha and uses therefor
US9320792B2 (en) 2002-11-08 2016-04-26 Ablynx N.V. Pulmonary administration of immunoglobulin single variable domains and constructs thereof
JP5634008B2 (ja) * 2004-04-06 2014-12-03 アフィボディ・アーベー 新規の使用および方法
TW200607523A (en) * 2004-06-01 2006-03-01 Domantis Ltd Drug compositions, fusions and conjugates
US7563443B2 (en) 2004-09-17 2009-07-21 Domantis Limited Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof
RU2007116973A (ru) * 2004-10-05 2008-11-20 Дженентек, Инк. (Us) Терапевтические средства с пониженной токсичностью
GB0426146D0 (en) 2004-11-29 2004-12-29 Bioxell Spa Therapeutic peptides and method
JP5185624B2 (ja) 2004-12-02 2013-04-17 ドマンティス リミテッド 血清アルブミンおよびｇｌｐ−１またはｐｙｙを標的とする二重特異性抗体
RU2007119989A (ru) * 2004-12-02 2009-01-10 Домантис Лимитед (Gb) Композиции, слитые конструкции и конъюгаты plad домена
WO2006059108A2 (en) * 2004-12-02 2006-06-08 Domantis Limited ANTI-IL-IRl SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AND THERAPEUTIC USES
RU2464276C2 (ru) 2005-05-18 2012-10-20 Аблинкс Н.В. Улучшенные нанотела против фактора некроза опухоли-альфа
EP1940880A2 (en) * 2005-10-14 2008-07-09 Novo Nordisk A/S Treating diabetes using inhibitors of il-1
AU2007306340A1 (en) * 2006-10-11 2008-04-17 Ablynx N.V. Amino acid sequences that bind to serum proteins in a manner that is essentially independent of the pH, compounds comprising the same, and use thereof
GB0621513D0 (en) 2006-10-30 2006-12-06 Domantis Ltd Novel polypeptides and uses thereof
US9512236B2 (en) 2006-12-19 2016-12-06 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against GPCRS and polypeptides comprising the same for the treatment of GPCR-related diseases and disorders
WO2012130874A1 (en) 2011-03-28 2012-10-04 Ablynx Nv Bispecific anti-cxcr7 immunoglobulin single variable domains
AU2007336243B2 (en) 2006-12-19 2012-07-26 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against a metalloproteinase from the ADAM family and polypeptides comprising the same for the treatment of ADAM-related diseases and disorders
AU2007336242B2 (en) 2006-12-19 2012-08-30 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against GPCRs and polypeptides comprising the same for the treatment of GPCR-related diseases and disorders
AU2008281913B2 (en) 2007-07-31 2013-11-07 Affibody Ab New albumin binding compositions, methods and uses
JP5592792B2 (ja) 2007-09-26 2014-09-17 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム 二重特異性抗体の融合体
TWI489993B (zh) 2007-10-12 2015-07-01 Novartis Ag 骨硬化素（ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ）抗體組合物及使用方法
CN101970490A (zh) 2007-11-27 2011-02-09 埃博灵克斯股份有限公司 针对异二聚体细胞因子和/或其受体的氨基酸序列以及包括所述氨基酸序列的多肽
EP2077272A1 (en) 2007-12-21 2009-07-08 Affibody AB Polypeptide libraries with a predetermined scaffold
US9187535B2 (en) 2007-12-19 2015-11-17 Affibody Ab Polypeptide derived from protein A and able to bind PDGF
ES2373832T3 (es) 2007-12-19 2012-02-09 Affibody Ab Polipéptido derivado de proteína a y capaz de unirse a pdgf.
EP2072525A1 (en) 2007-12-21 2009-06-24 Affibody AB New polypeptides having affinity for HER2
WO2009124931A2 (en) 2008-04-07 2009-10-15 Ablynx Nv Amino acid sequences directed against the notch pathways and uses thereof
AU2009248049B2 (en) 2008-05-16 2015-07-23 Ablynx N.V. Amino acid sequences directed against CXCR4 and other GPCRs and compounds comprising the same
ES2713864T3 (es) 2008-06-05 2019-05-24 Ablynx Nv Secuencias de aminoácidos dirigidas contra proteínas de la envuelta de un virus y polipéptidos que comprenden las mismas para el tratamiento de enfermedades virales
LT2334705T (lt) 2008-09-26 2017-03-27 Ucb Biopharma Sprl Biologiniai produktai
KR20110079693A (ko) 2008-10-29 2011-07-07 와이어쓰 엘엘씨 단일 도메인 항원 결합 분자의 정제 방법
EP2362767B1 (en) 2008-10-29 2017-12-06 Ablynx N.V. Formulations of single domain antigen binding molecules
DK2370465T3 (da) 2008-12-19 2019-05-06 Ablynx Nv Genetisk immunisering til fremstilling af immunoglobuliner mod celleassocierede antigener, såsom p2x7, cxcr7 eller cxcr4
US20120165650A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 General Electric Company Her2 binders
KR20120057563A (ko) 2009-03-31 2012-06-05 노파르티스 아게 Ｉｌ-１２ 수용체 베타ｌ 서부유닛에 대해 특이적인 치료용 항체를 사용하는 조성물 및 방법
AU2010233658B2 (en) 2009-04-10 2013-11-28 Ablynx Nv Improved amino acid sequences directed against IL-6R and polypeptides comprising the same for the treatment of IL-6R related diseases and disorders
EA027071B1 (ru) 2009-04-27 2017-06-30 Новартис Аг АНТИТЕЛО К ActRIIB И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО КОМПОЗИЦИЯ
EP2438087B1 (en) 2009-06-05 2017-05-10 Ablynx N.V. Trivalent anti human respiratory syncytial virus (hrsv) nanobody constructs for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
WO2011029823A1 (en) 2009-09-09 2011-03-17 Novartis Ag Monoclonal antibody reactive with cd63 when expressed at the surface of degranulated mast cells
GB201005063D0 (en) 2010-03-25 2010-05-12 Ucb Pharma Sa Biological products
JP5960598B2 (ja) 2009-11-04 2016-08-02 アフィボディ・アーベー Ｈｅｒ３結合ポリペプチド
WO2011064382A1 (en) 2009-11-30 2011-06-03 Ablynx N.V. Improved amino acid sequences directed against human respiratory syncytial virus (hrsv) and polypeptides comprising the same for the prevention and/or treatment of respiratory tract infections
RS67588B1 (sr) 2009-12-14 2026-01-30 Ablynx Nv Antitela sa pojedinačnim varijabilnim domenom imunoglobulina protiv ox40l, konstrukti i njihova terapijska upotreba
JP2013514795A (ja) 2009-12-22 2013-05-02 ノバルティス アーゲー 治療における使用のための四価ｃｄ４７抗体定常領域融合タンパク質
WO2011083140A1 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Ablynx Nv Immunoglobulin single variable domain directed against human cxcr4
US9120855B2 (en) 2010-02-10 2015-09-01 Novartis Ag Biologic compounds directed against death receptor 5
US8937164B2 (en) 2010-03-26 2015-01-20 Ablynx N.V. Biological materials related to CXCR7
JP5827218B2 (ja) * 2010-04-30 2015-12-02 株式会社三和化学研究所 生理活性物質等の生体内安定性向上のためのペプチド及び生体内安定性が向上した生理活性物質
AU2011254557B2 (en) 2010-05-20 2015-09-03 Ablynx Nv Biological materials related to HER3
WO2012004384A2 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Affibody Ab Polypeptides
EA201390450A1 (ru) 2010-09-28 2013-07-30 Амилин Фармасьютикалс, Ллк. Полипептиды с увеличенной продолжительностью действия
WO2012042026A1 (en) 2010-09-30 2012-04-05 Ablynx Nv Biological materials related to c-met
JP2013543384A (ja) 2010-10-05 2013-12-05 ノバルティス アーゲー 抗−ｉｌ１２ｒベータ１抗体ならびに自己免疫性および炎症性疾患の処置おけるその使用
JP5933573B2 (ja) 2010-11-08 2016-06-15 ノバルティス アーゲー Ｃｘｃｒ２結合ポリペプチド
EP2643349B1 (en) 2010-11-26 2019-09-04 Molecular Partners AG Designed repeat proteins binding to serum albumin
US20120213781A1 (en) 2011-02-11 2012-08-23 Zyngenia, Inc. Monovalent and Multivalent Multispecific Complexes and Uses Thereof
UA117218C2 (uk) 2011-05-05 2018-07-10 Мерк Патент Гмбх Поліпептид, спрямований проти il-17a, il-17f та/або il17-a/f
WO2012156309A1 (en) 2011-05-13 2012-11-22 Millegen Antibodies against her3
CN108329391A (zh) 2011-05-27 2018-07-27 埃博灵克斯股份有限公司 使用rankl结合肽抑制骨质吸收
US20140193408A1 (en) 2011-06-16 2014-07-10 Novartis Ag Soluble proteins for use as therapeutics
JP6033293B2 (ja) 2011-06-22 2016-11-30 インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル）Ｉｎｓｅｒｍ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｄｅｌａ Ｓａｎｔｅ Ｅｔ Ｄｅ Ｌａ Ｒｅｃｈｅｒｃｈｅ Ｍｅｄｉｃａｌｅ） 抗Ａｘｌ抗体及びその使用
WO2012175692A1 (en) 2011-06-22 2012-12-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-axl antibodies and uses thereof
AU2012273928A1 (en) 2011-06-23 2014-02-06 Ablynx Nv Immunoglobulin single variable domains directed against IgE
JP6472999B2 (ja) 2011-07-01 2019-02-20 ノバルティス アーゲー 代謝障害を治療するための方法
US20150044208A1 (en) 2011-09-23 2015-02-12 Technophage, Investigaçäo E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Modified Albumin-Binding Domains and Uses Thereof to Improve Pharmacokinetics
US10138302B2 (en) 2011-09-23 2018-11-27 Ablynx N.V. Methods for treating rheumatoid arthritis by administering interleukin-6 receptor antibodies
CA2849409A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Anti-tumor necrosis factor-alpha agents and uses thereof
CN106046161B (zh) 2011-09-30 2019-09-13 埃博灵克斯股份有限公司 与C-Met相关的生物物质
SI2776466T1 (sl) 2011-11-11 2017-12-29 Ucb Biopharma Sprl Protitelesa, ki se vežejo na albumin in njihovi vezavni fragmenti
EP3511339B1 (en) 2012-02-20 2025-04-09 IPC Research, LLC Polypeptides binding to human complement c5
JP2020033372A (ja) * 2012-03-28 2020-03-05 アフィボディ・アーベー 経口投与
KR20140142298A (ko) * 2012-03-28 2014-12-11 애피바디 에이비 경구투여
US9328174B2 (en) 2012-05-09 2016-05-03 Novartis Ag Chemokine receptor binding polypeptides
WO2013172967A1 (en) 2012-05-17 2013-11-21 Extend Biosciences, Inc Carriers for improved drug delivery
WO2014048977A1 (en) 2012-09-25 2014-04-03 Affibody Ab Albumin binding polzpeptide
WO2014053586A1 (en) 2012-10-05 2014-04-10 Affibody Ab Her3 binding polypeptides
PL2912051T3 (pl) 2012-10-25 2018-08-31 Affibody Ab Sposób rozdzielania białek zawierających domenę wiążącą albuminę
ES2639099T3 (es) 2012-10-25 2017-10-25 Affibody Ab Polipéptido de unión a albúmina
WO2014076179A1 (en) 2012-11-14 2014-05-22 Affibody Ab New polypeptide
EP2752426A1 (en) 2013-01-03 2014-07-09 Covagen AG Human serum albumin binding compounds and fusion proteins thereof
SI2953969T1 (sl) 2013-02-08 2020-01-31 Novartis Ag Protitelesa proti-IL-17A in njihova uporaba v zdravljenju avtoimunskih in vnetnih motenj
EP2968587A2 (en) 2013-03-13 2016-01-20 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold domains linked to serum albumin or a moiety binding thereto
EP3013370A1 (en) 2013-06-24 2016-05-04 Riogin Corporation Double binding constructs
EP3033358A2 (en) 2013-08-14 2016-06-22 Novartis AG Methods of treating sporadic inclusion body myositis
JP6767865B2 (ja) 2013-08-28 2020-10-14 スウェディッシュ・オーファン・バイオヴィトラム・アーベー（ペーウーベーエル） ヒト補体ｃ５に結合する安定なポリペプチド
AU2014314214C1 (en) 2013-08-28 2019-01-24 Affibody Ab Binding polypeptides having a mutated scaffold
BR112016010336A2 (pt) 2013-11-07 2017-10-03 Inst Nat Sante Rech Med Anticorpo anti-humano-her3 alostérico não competitivo com neuregulina, fragmento de anticorpo, sequência de ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, composição farmacêutica e método para tratamento de câncer
US10167322B2 (en) 2013-12-20 2019-01-01 Affibody Ab Engineered albumin binding polypeptide
TW201622746A (zh) 2014-04-24 2016-07-01 諾華公司 改善或加速髖部骨折術後身體復原之方法
NL2013661B1 (en) 2014-10-21 2016-10-05 Ablynx Nv KV1.3 Binding immunoglobulins.
US20170291939A1 (en) 2014-06-25 2017-10-12 Novartis Ag Antibodies specific for il-17a fused to hyaluronan binding peptide tags
US9789197B2 (en) 2014-10-22 2017-10-17 Extend Biosciences, Inc. RNAi vitamin D conjugates
US9585934B2 (en) 2014-10-22 2017-03-07 Extend Biosciences, Inc. Therapeutic vitamin D conjugates
WO2016065052A1 (en) 2014-10-22 2016-04-28 Extend Biosciences, Inc. Insulin vitamin d conjugates
BR112017011398A2 (pt) * 2014-12-04 2018-04-03 Novartis Ag métodos e composições que usam polipeptídeos variantes de klotho
USRE49529E1 (en) 2014-12-19 2023-05-16 Inozyme Pharma, Inc. Methods of treating tissue calcification
US9458211B1 (en) 2015-04-02 2016-10-04 Molecular Partners Ag Recombinant proteins that simultaneously bind HGF, VEGF-A and serum albumin, comprising ankyrin repeat domains
WO2016156570A1 (en) 2015-04-02 2016-10-06 Ablynx N.V. Bispecific cxcr4-cd-4 polypeptides with potent anti-hiv activity
PL3294319T3 (pl) 2015-05-13 2024-10-07 Ablynx Nv Polipeptydy rekrutujące komórki t na podstawie reaktywności cd3
ES2754427T3 (es) 2015-05-13 2020-04-17 Ablynx Nv Polipéptidos de reclutamiento de células T basados en la reactividad de TCR alfa/beta
EP3298044B1 (en) 2015-05-22 2021-08-25 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies fragments inhibiting both the cath-d catalytic activity and its binding to the lrp1 receptor
ES2784603T3 (es) 2015-06-02 2020-09-29 Novo Nordisk As Insulinas con extensiones recombinantes polares
AU2016303688B2 (en) 2015-07-31 2023-06-15 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Peptides and antibodies for the removal of biofilms
EP3355931B1 (en) 2015-10-01 2024-06-26 Novo Nordisk A/S Protein conjugates
WO2017066719A2 (en) 2015-10-14 2017-04-20 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Hu specific interfering agents
DK3368571T5 (da) 2015-10-30 2024-09-30 Univ California Transformerende, vækstfaktor-beta-responsive polypeptider og fremgangsmåder til anvendelse deraf
AU2016360987A1 (en) 2015-11-27 2018-06-07 Ablynx Nv Polypeptides inhibiting CD40L
EP3827835A1 (en) 2016-06-16 2021-06-02 Inozyme Pharma, Inc. Methods of treating myointimal proliferation
WO2018007442A1 (en) 2016-07-06 2018-01-11 Ablynx N.V. Treatment of il-6r related diseases
JP7219207B2 (ja) 2016-07-29 2023-02-07 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 腫瘍関連マクロファージを標的化する抗体及びその使用
WO2018029182A1 (en) 2016-08-08 2018-02-15 Ablynx N.V. Il-6r single variable domain antibodies for treatment of il-6r related diseases
KR20190057308A (ko) 2016-09-02 2019-05-28 더 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 인터류킨-6 수용체 알파-결합 단일 사슬 가변 단편을 포함하는 방법 및 조성물
US11098113B2 (en) 2016-09-15 2021-08-24 Vib Vzw Immunoglobulin single variable domains directed against macrophage migration inhibitory factor
AR109680A1 (es) 2016-09-22 2019-01-09 Molecular Partners Ag Proteínas recombinantes y sus usos
CA3043515A1 (en) 2016-11-16 2018-05-24 Ablynx Nv T cell recruiting polypeptides capable of binding cd123 and tcr alpha/beta
JP7514621B2 (ja) 2017-01-04 2024-07-11 リサーチ インスティチュート アット ネイションワイド チルドレンズ ホスピタル Ｄｎａｂｉｉワクチンおよび強化された活性を有する抗体
AU2018206560B9 (en) 2017-01-04 2025-04-03 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Antibody fragments for the treatment of biofilm-related disorders
WO2018158398A1 (en) 2017-03-02 2018-09-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antibodies having specificity to nectin-4 and uses thereof
US11746136B2 (en) 2017-03-15 2023-09-05 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Composition and methods for disruption of bacterial biofilms without accompanying inflammation
CN110461359B (zh) 2017-03-24 2025-01-21 诺华股份有限公司 用于预防和治疗心脏病的方法
JP2020513019A (ja) 2017-04-05 2020-04-30 ノヴォ ノルディスク アー／エス オリゴマー伸長インスリン−Ｆｃコンジュゲート
US11813307B2 (en) 2017-06-02 2023-11-14 Merck Patent Gmbh Polypeptides binding ADAMTS5, MMP13 and aggrecan
WO2018220235A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Merck Patent Gmbh Mmp13 binding immunoglobulins
WO2018220225A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Ablynx Nv Aggrecan binding immunoglobulins
BR112019024333A2 (pt) 2017-06-02 2020-07-28 Merck Patent Gmbh imunoglobulinas de ligação adamts
JP2020525421A (ja) 2017-06-28 2020-08-27 ノバルティス アーゲー 尿失禁を予防及び治療するための方法
IL307197B1 (en) 2017-07-11 2025-11-01 Alexion Pharma Inc Polypeptides that bind complement component c5 or serum albumin and fusion proteins thereof
WO2019067502A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Alexion Pharmaceuticals, Inc. METHODS FOR IMPROVING CARDIOVASCULAR FUNCTION AND TREATING CARDIOVASCULAR DISEASE USING RECOMBINANT ECTO-NUCLEOTIDE PYROPHOSPHATASE / PHOSPHODIESTERASE
EP3470426A1 (en) 2017-10-10 2019-04-17 Numab Therapeutics AG Multispecific antibody
PE20200849A1 (es) 2017-10-10 2020-08-20 Numab Therapeutics AG Anticuerpo multiespecifico
EP3552631A1 (en) 2018-04-10 2019-10-16 Inatherys Antibody-drug conjugates and their uses for the treatment of cancer
DK3794024T5 (da) 2018-05-14 2024-08-19 Werewolf Therapeutics Inc Aktiverbare interleukin-2 polypeptider og fremgangsmåder til anvendelse heraf
EP3794023A1 (en) 2018-05-14 2021-03-24 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin 12 polypeptides and methods of use thereof
EP3806889A4 (en) 2018-06-18 2022-07-13 Anwita Biosciences, Inc. CYTOKI FUSION PROTEINS AND USES THEREOF
FI3830119T3 (fi) 2018-08-01 2026-01-23 Imcheck Therapeutics Anti-btn3a-vasta-aineita ja niiden käyttö syövän tai infektiosairauksien hoitamisessa
EP3849602A1 (en) 2018-09-10 2021-07-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Combination of her2/neu antibody with heme for treating cancer
US20220002370A1 (en) 2018-09-27 2022-01-06 Xilio Development, Inc. Masked cytokine polypeptides
EP3861021B1 (en) 2018-10-05 2025-02-12 Research Institute at Nationwide Children's Hospital Compositions and methods for enzymatic disruption of bacterial biofilms
JP2022526334A (ja) 2019-03-25 2022-05-24 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル 新たなタウ種を標的化することによるタウオパチー障害の処置の方法
MX2021013766A (es) 2019-05-14 2022-02-21 Werewolf Therapeutics Inc Restos de separacion y metodos de uso de los mismos.
CA3138805A1 (en) 2019-06-04 2020-12-10 Johannes Schilling Designed ankyrin repeat domain with improved stability
BR112021024938A2 (pt) 2019-06-12 2022-01-25 Novartis Ag Anticorpos de receptor 1 de peptídeo natriurético e métodos de uso
CA3145385A1 (en) 2019-07-08 2021-01-14 Steven D. Goodman Antibody compositions for disrupting biofilms
EP4017521A1 (en) 2019-09-02 2022-06-29 Biotest AG Factor viii protein with increased half-life
EP3785726A1 (en) 2019-09-02 2021-03-03 Biotest AG Factor viii protein with increased half-life
WO2021058729A1 (en) 2019-09-27 2021-04-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-müllerian inhibiting substance type i receptor antibodies and uses thereof
EP4034560A1 (en) 2019-09-27 2022-08-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-müllerian inhibiting substance antibodies and uses thereof
TW202128160A (zh) 2019-10-18 2021-08-01 美國加利福尼亞大學董事會 用於治療病原性血管病症之方法及組合物
EP3816185A1 (en) 2019-11-04 2021-05-05 Numab Therapeutics AG Multispecific antibody directed against pd-l1 and a tumor-associated antigen
AU2020384375A1 (en) 2019-11-14 2022-05-26 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable cytokine polypeptides and methods of use thereof
WO2021116119A1 (en) 2019-12-09 2021-06-17 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antibodies having specificity to her4 and uses thereof
GB201919061D0 (en) 2019-12-20 2020-02-05 Ucb Biopharma Sprl Multi-specific antibody
JP7767289B2 (ja) 2020-01-10 2025-11-11 アンセルム（アンスティチュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル） Ｒｓｐｏ１タンパク質およびその使用
EP4106798A1 (en) 2020-02-17 2022-12-28 Biotest AG Subcutaneous administration of factor viii
CN115551553A (zh) 2020-05-12 2022-12-30 Inserm(法国国家健康医学研究院) 治疗皮肤t细胞淋巴瘤和tfh起源淋巴瘤的新方法
EP3915580A1 (en) 2020-05-29 2021-12-01 Numab Therapeutics AG Multispecific antibody
CA3187283A1 (en) 2020-06-29 2022-01-06 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-protein s single-domain antibodies and polypeptides comprising thereof
EP3988568A1 (en) 2020-10-21 2022-04-27 Numab Therapeutics AG Combination treatment
WO2022098745A1 (en) 2020-11-03 2022-05-12 Indi Molecular, Inc. Compositions, delivery systems, and methods useful in tumor therapy
WO2022098743A1 (en) 2020-11-03 2022-05-12 Indi Molecular, Inc. Compositions, imaging, and therapeutic methods targeting folate receptor 1 (folr1)
TW202235431A (zh) 2020-11-25 2022-09-16 美商艾希利歐發展股份有限公司 腫瘤特異性可裂解連接子
EP4255926A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 UCB Biopharma SRL Multi-specific antibodies and antibody combinations
US20240052042A1 (en) 2020-12-14 2024-02-15 Novartis Ag Reversal binding agents for anti-natriuretic peptide receptor i (npri) antibodies and uses thereof
KR20230166075A (ko) 2021-02-02 2023-12-06 누맙 세러퓨틱스 아게 Ror1 및 cd3에 대한 특이성을 가지는 다중 특이적 항체
WO2022171892A1 (en) 2021-02-15 2022-08-18 Affibody Ab New her2-binding polypeptide
AU2022224636A1 (en) 2021-02-19 2023-09-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single domain antibodies that neutralize sars-cov-2
WO2023052541A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Imcheck Therapeutics Combination of an anti-btn3a activating antibody and an il-2 agonist for use in therapy
EP4183800A1 (en) 2021-11-19 2023-05-24 Medizinische Hochschule Hannover Novel sars-cov-2 neutralizing antibodies
CA3254560A1 (en) 2022-03-30 2023-10-05 Novartis Ag METHODS OF TREATMENT OF DISORDERS USING ANTI-NATRIURETIC PEPTIDE RECEPTOR 1 (NPR1) ANTIBODIES
WO2024038095A1 (en) 2022-08-16 2024-02-22 Iome Bio NOVEL ANTI-RGMb ANTIBODIES
EP4584291A1 (en) 2022-09-08 2025-07-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
WO2024056668A1 (en) 2022-09-12 2024-03-21 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale New anti-itgb8 antibodies and its uses thereof
US12233115B2 (en) 2022-09-30 2025-02-25 Extend Biosciences, Inc. Long-acting parathyroid hormone
CN120239711A (zh) 2022-10-04 2025-07-01 感应检查疗法公司 用于治疗癌症的btn3a活化抗体、bcl2抑制剂和去甲基化剂的组合
WO2024083843A1 (en) 2022-10-18 2024-04-25 Confo Therapeutics N.V. Amino acid sequences directed against the melanocortin 4 receptor and polypeptides comprising the same for the treatment of mc4r-related diseases and disorders
WO2024175699A1 (en) 2023-02-23 2024-08-29 Imcheck Therapeutics Combination of btn3a activating antibody and immune checkpoint inhibitors
AU2024245676A1 (en) 2023-03-30 2025-10-09 272BIO Limited Gnrh-binding polypeptides and uses thereof
CN121511261A (zh) 2023-05-17 2026-02-10 国家健康与医学研究院 抗组织蛋白酶-d抗体
EP4477236A1 (en) 2023-06-14 2024-12-18 Inatherys Combination therapy for treating a tumor using adc comprising anti-cd71 antibodies and bh3 mimetics
WO2025012417A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-neurotensin long fragment and anti-neuromedin n long fragment antibodies and uses thereof
TW202545983A (zh) 2024-01-25 2025-12-01 瑞典商艾菲博迪公司 新穎多肽
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025242732A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Pan antibodies against sars-cov-2 spike protein and uses thereof for therapeutical purposes
WO2025257181A1 (en) 2024-06-11 2025-12-18 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies targeting trans-active response dna-binding protein-43 (tdp-43)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2148299B (en) * 1983-09-01 1988-01-06 Hybritech Inc Antibody compositions of therapeutic agents having an extended serum half-life
US4666884A (en) * 1984-04-10 1987-05-19 New England Deaconess Hospital Method of inhibiting binding of von Willebrand factor to human platelets and inducing interaction of platelets with vessel walls
SE8505922D0 (sv) * 1985-12-13 1985-12-13 Kabigen Ab Construction of an igg binding protein to facilitate downstream processing using protein engineering
WO1988009343A1 (fr) * 1987-05-29 1988-12-01 Sagami Chemical Research Center Proteine fusionnee contenant une lymphotoxine
GB8728856D0 (en) * 1987-12-10 1988-01-27 Bradwell A R Tumour-locating agents & method of locating tumours

Also Published As

Publication number Publication date
DE69010206D1 (de) 1994-07-28
JP3477196B2 (ja) 2003-12-10
ATE107514T1 (de) 1994-07-15
WO1991001743A1 (en) 1991-02-21
DE69010206T2 (de) 1994-10-13
EP0486525A1 (en) 1992-05-27
AU652124B2 (en) 1994-08-18
CA2064689C (en) 2002-04-30
AU6143990A (en) 1991-03-11
EP0486525B1 (en) 1994-06-22
JPH04507242A (ja) 1992-12-17
CA2064689A1 (en) 1991-02-02
SE8902638L (sv) 1991-02-02
SE8902638D0 (sv) 1989-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SE509359C2 (sv) Användning av stabiliserade protein- eller peptidkonjugat för framställning av ett läkemedel
US6267964B1 (en) Stabilized protein or peptide conjugates able to bond albumin having extended biological half-lives
US11060097B2 (en) Immunotherapy methods using anti-PD-L1 antibodies in combination with EGFR1 targeted-TGF-beta immunomodulatory fusion proteins
KR100484084B1 (ko) 키메라성 폴리펩타이드, 이의 제조 방법 및 용도
KR100376544B1 (ko) 티(t)세포조절물질및방법
EP0335243A2 (en) Mutant human angiogenin (angiogenesis factor with superior angiogenin activity) genes therefor and methods of expression
JPS63251095A (ja) 新規融合蛋白質およびその精製方法
NL8104400A (nl) Microbiele bereiding van menselijk fibroblast interferon.
JPH06505631A (ja) 巨核球刺激因子
CA3103684A1 (en) Solubilized apyrases, methods and use
CN108840951A (zh) 一种由猪白蛋白、猪干扰素γ和猪干扰素α组成的融合蛋白及其制备方法
CN109776653B (zh) 一种人血清白蛋白黏附肽及其应用
CA2234042A1 (en) Novel g-csf receptor agonists
CN113896805B (zh) 一种vegf-crm197重组融合蛋白疫苗及其制备方法和应用
WO1993003061A1 (fr) Multiplicateur de cellules souches hematopoietiques
EA023541B1 (ru) Пептиды, связывающиеся с рецептором инсулиноподобного фактора роста 1
Sjolander et al. Bacterial Expression Systems Based on a Protein A and Protein G Designed for the Production of Immunogens: Applications to Plasmodium falciparum Malaria Antigens
CN111808202B (zh) 产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗、其制备方法及应用
CN112552389B (zh) 一种活性肽融合蛋白及其制备方法
CN102260352A (zh) 靶向性白细胞介素融合蛋白及其制备方法与应用
US7223412B1 (en) Staphylococcal enterotoxin SEC-SER, expression vector and host cell, production method thereof, and manufacturing method of vaccine
JP2519561B2 (ja) 酸性糖タンパク質
CN101812135B (zh) 具有高效升血小板作用的融合蛋白及其制备方法
CN119161495B (zh) 呼吸道合胞病毒重构多肽及其应用
JPH02500640A (ja) 所定のポリペプチドと糖に対して親和性のタンパク質とをコードする核酸配列を含む組換体ｄｎａにより形質転換された宿主生物中で該ポリペプチドを製造する方法。応用、特にワクチン組成物の製造への応用

Legal Events

Date Code Title Description
NUG Patent has lapsed