RU2605289C2

RU2605289C2 - Состав, набор и фармацевтическая композиция, содержащие производные децитабина, их получение и применение

Info

Publication number: RU2605289C2
Application number: RU2014112108/15A
Authority: RU
Inventors: Раджашри ДЖОШИ-ХАНГАЛ; Чунлин ТАНГ; Санджив РЕДКАР; Хариш РАВИВАРАПУ
Original assignee: Астекс Фармасьютикалз, Инк.
Priority date: 2011-08-30
Filing date: 2012-08-29
Publication date: 2016-12-20
Also published as: CN108635367B; US20160346310A1; CN103945902B; JP2017052775A; PT2750768T; MX2014002433A; US20180369267A1; UA116528C2; CY1122168T1; EP2750768B1; MY186676A; HK1199715A1; EP3431142B1; AU2017204536B2; IL231209A0; US20140303107A1; RU2014112108A; AU2012302051B2; US20200155588A1; CN103945902A

Abstract

Группа изобретений относится к медицине. Описаны производные децитабина с более высокими химической стабильностью и сроком годности, обладающие аналогичной физиологической активностью. Описаны способы лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкоза или солидных опухолей с использованием составов. Производные децитабина поставляются в неводном составе, что дополнительно стабилизирует производные децитабина. 7 н. и 27 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 табл., 4 пр.

Description

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] В соответствии с 35 U.S.С. §119 провозглашается приоритет настоящей заявки в отношении предварительной патентной заявки США 61/529,081, поданной 30 августа 2011, содержание которой включено сюда посредством ссылки во всей полноте.

ВКЛЮЧЕНИЕ ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ

[0002] Все публикации, патенты и патентные заявки, упомянутые в этой спецификации, включены сюда посредством ссылки в той же степени, как если бы для каждой отдельной публикации, патента или патентной заявки было конкретно и отдельно указано о включении посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] В настоящее время децитабин исследуется в качестве средства для лечения хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ), миелодиспластического синдрома (МДС), немелкоклеточного рака легкого (НМКЛ), серповидноклеточной анемии и острого миелолейкоза (ОМЛ). Децитабин обладает множеством фармакологических свойств. Децитабин может быть встроен в ДНК в течение S-фазы клеточного цикла или может индуцировать дифференцирование клетки и проявлять гематологическую токсичность. Несмотря на малый физиологический период полужизни, децитабин обладает превосходным распределением в тканях.

[0004] Несмотря на доказанные противолейкозные эффекты при ХМЛ, МДС и ОМЛ, потенциальное применение децитабина затрудняется по причине отложенной и продолжительной миелосупрессии. Низкие дозы децитабина при введении в течение более длительного периода времени минимизировали миелосупрессию до корректируемых уровней, не затрагивая способность подавлять онкологическое заболевание посредством эффекта гипометилирования. Использовать более высокие дозы не позволяла токсичность. Однако лечение гематологических и солидных опухолей децитабином в максимально переносимых дозах было неэффективным. Причины миелосупрессии не установлены. Правдоподобно предположение о том, что поскольку децитабин случайно и активно встраивается в ДНК клеток на S-фазе, включая клетки костного мозга, которые участвуют в нормальном гемопоэзе, тяжелое повреждение ДНК вследствие нестабильности децитабина приводит к некрозу. Поскольку включение децитабина не ограничивается только CpG-богатыми последовательностями, ДНК может распадаться вследствие нестабильности децитабина и требовать восстановления на множестве участков вне островков CpG.

[0005] Децитабин и азацитидин нестабильны в водной среде и подвергаются в ней гидролитическому разложению. Распад происходит медленнее всего при нейтральном pH.

[0006] Динуклеотидные соединения, производные от децитабина и предназначенные для терапевтических испытаний по тем же показаниям, были описаны в Патенте США №7,700,567, который включен во всей полноте посредством ссылки.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0007] В первом аспекте по настоящему изобретению предлагается состав, содержащий:

(а) соединение формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль; растворенный в (б) практически безводном растворителе, содержащем от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола.

[0008] В некоторых вариантах воплощения указанный растворитель содержит от приблизительно 65% до приблизительно 70% пропиленгликоля, от приблизительно 25% до приблизительно 30% глицерина и от 0% до приблизительно 10% этанола.

[0009] Было обнаружено, что при использовании практически безводного растворителя в составах по изобретению происходит выраженное повышение растворимости (от приблизительно 130 до приблизительно 150 мг/мл для соединения с формулой I-1). Это совершенствует подкожное введение, поскольку при таких высоких концентрациях снижается объем инъекции и повышается безопасность соединения, поскольку требуются меньшие количества вспомогательных компонентов в сравнении со случаями низких концентраций того же соединения.

[0010] Также было обнаружено, что при использовании практически безводных растворителей в составах по изобретению наблюдается повышение стабильности при хранении (см. Пример 2 здесь). К примеру, восстановленные дозированные формы, имеющие содержание воды, равное 0,1%, остаются стабильными при 2-8°C в течение по меньшей мере 12 месяцев.

[0011] Этанол может включаться в качестве добавки для снижения вязкости или может исключаться с сохранением подходящих характеристик обращения/восстановления.

[0012] В некоторых вариантах воплощения указанный растворитель содержит приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола, например, 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

[0013] В некоторых вариантах воплощения указанный растворитель содержит от 65% до 70% пропиленгликоля и от 25% до 30% глицерина, а остаток приходится на этанол.

[0014] В некоторых вариантах воплощения указанный растворитель содержит приблизительно 70% пропиленгликоля и приблизительно 30% глицерина, а этанол отсутствует.

[0015] В некоторых вариантах воплощения указанный растворитель содержит: от 45% до 85% пропиленгликоля, от 5% до 45% глицерина и от 0% до 30% этанола или от 65% до 70% пропиленгликоля, от 25% до 30% глицерина и от 0% до 10% этанола.

[0016] Неограничивающие примеры фармацевтически приемлемых солей включают любую соль, описанную здесь. В некоторых вариантах воплощения указанная соль является натриевой солью. Соединение может находиться в концентрации от приблизительно 80 мг/мл до приблизительно 110 мг/мл, к примеру, приблизительно 100 мг/мл.

[0017] В некоторых вариантах воплощения состав дополнительно содержит диметилсульфоксид (ДМСО), необязательно, в соотношении ДМСО : соединение, равном приблизительно 2: приблизительно 1; приблизительно 1: приблизительно 1; приблизительно 0,5: приблизительно 1; приблизительно 0,3: приблизительно 1; или приблизительно 0,2 - приблизительно 0,3: приблизительно 1.

[0018] В некоторых вариантах воплощения состав, раскрытый здесь, пригоден для введения путем подкожной инъекции.

[0019] В другом аспекте по изобретению предлагается набор, содержащий: (а) первый сосуд, содержащий соединение или его фармацевтически приемлемую соль, как описано здесь; и (б) второй сосуд, содержащий практически безводный растворитель, включающий от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола.

[0020] В некоторых вариантах воплощения соединение в наборе по изобретению находится в форме практически безводного порошка, к примеру, лиофилизированного порошка. Соединение может находиться в первом сосуде в количестве от приблизительно 80 мг до приблизительно 110 мг, к примеру, приблизительно 100 мг. В некоторых вариантах воплощения к набору дополнительно прилагаются инструкции по введению путем подкожной инъекции.

[0021] В другом аспекте по изобретению предлагается процесс изготовления фармацевтической композиции, процесс, включающий растворение соединения, описанного здесь, в практически безводном растворителе. Неограничивающие примеры такого практически безводного растворителя включают любой практически безводный растворитель, описанный здесь.

[0022] В некоторых вариантах воплощения процесс дополнительно содержит этапы: растворения указанного соединения в ДМСО с получением раствора указанного соединения в ДМСО; и лиофилизации указанного раствора для получения упомянутого соединения в виде практически безводного порошка.

[0023] В другом аспекте по изобретению предлагается процесс изготовления соединения с формулой:

или его фармацевтически приемлемой соли в форме практически безводного порошка, процесс, содержащий растворение указанного соединения или его соли в ДМСО с получением раствора в ДМСО и последующую лиофилизацию указанного раствора для получения упомянутого соединения или его соли в виде практически безводного порошка. Указанный практически безводный порошок может содержать ДМСО, к примеру, в количестве вплоть до приблизительно 2000 мг/г, до приблизительно 1000 мг/г, до приблизительно 600 мг/г, до приблизительно 500 мг/г, до приблизительно 400 мг/г, до приблизительно 300 мг/г или приблизительно 200 - приблизительно 300 мг/г указанного соединения формулы I-1. В некоторых вариантах воплощения порошок содержит вплоть до приблизительно 200%, до приблизительно 100%, до приблизительно 60%, до приблизительно 50%, до приблизительно 40%, до приблизительно 30% или приблизительно 20% - приблизительно 30% масс/масс ДМСО/соединение формулы I-1.

[0024] В другом аспекте по изобретению предлагается практически безводный порошок, состоящий преимущественно из соединения с формулой:

[0025] или его фармацевтически приемлемой соли и ДМСО, ДМСО присутствует в количестве вплоть до приблизительно 200% масс/масс ДМСО/соединение формулы I-1. В одном варианте воплощения ДМСО присутствует в количестве вплоть до приблизительно 100%, до приблизительно 60%, до приблизительно 50%, до приблизительно 40% или до приблизительно 30% масс/масс ДМСО/соединение формулы I-1. В некоторых вариантах воплощения ДМСО присутствует в количестве приблизительно 20% - приблизительно 30% масс/масс ДМСО/соединение формулы I-1. В некоторых вариантах воплощения соль в порошке является натриевой солью.

[0026] В другом аспекте по изобретению предлагается фармацевтическая композиция, получаемая способом согласно изобретению.

[0027] В другом аспекте по изобретению предлагается способ лечения онкологического заболевания, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, содержащий введение состава, набора, порошка или композиции по изобретению субъекту, нуждающемуся в этом или испытывающему в этом потребность.

[0028] В другом аспекте по изобретению предлагается состав, набор, порошок или композиция по изобретению для использования в способе лечения онкологического заболевания, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, указанный способ содержит введение указанных состава, набора, порошка или композиции по изобретению субъекту.

[0029] В другом аспекте по изобретению предлагается использование состава, набора, порошка или композиции по изобретению для производства лекарственного препарата, используемого в способе лечения онкологического заболевания, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, указанный способ содержит введение указанных состава, набора, порошка или композиции по изобретению субъекту.

[0030] Способы, составы, композиции, наборы, порошки или виды использования по изобретению находят применение для лечения большого количества заболеваний, чувствительных к лечению децитабином, включая те, которые описаны здесь, в качестве неограничивающих примеров.

[0031] В некоторых вариантах воплощения введение представляет собой подкожное введение.

[0032] Любое соединение, описанное здесь, пригодно для использования в любых составах, порошках или наборах, описанных здесь.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0033] На ФИГУРЕ 1 показаны средние концентрации соединения I-1 в плазме у самцов и самок яванских макак при еженедельном подкожном введении доз соединения I-1 в течение фармакокинетического исследования.

[0034] На ФИГУРЕ 2 показаны средние концентрации в плазме децитабина у самцов и самок яванских макак при еженедельном подкожном введении доз децитабина в фармакокинетическом исследовании.

[0035] На ФИГУРЕ 3 показано снижение уровней метилирования LINE1, наблюдавшееся в образцах крови, взятых у яванских макак на различные сутки (D) после предварительного анализа.

[0036] На ФИГУРЕ 4 показано изменение суммы родственных примесей в натриевой соли для соединения Формулы I-1 в различных составах ДМСО и ДМСО/вода.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0037] В рамках текущей клинической терапии децитабином для минимизации распада децитабин поставляют в виде лиофилизированного порошка и перед введением восстанавливают в холодном растворе, содержащем по меньшей мере 40% воды (объем/объем), таком как вода для инъекций (ВДИ). По этому способу требуется охлаждение децитабина после растворения, но такой вид хранения неудобен и экономически менее желателен, чем хранение при комнатной температуре. Вследствие быстрого распада децитабина в водном растворе восстановленный раствор децитабина можно переливать только в течение нескольких часов после восстановления. Охлаждение после восстановления нежелательно, поскольку переливание холодной жидкости может вызывать дискомфорт, боль и, впоследствии, неприверженность терапии у субъекта. В изобретениях, описанных здесь, решены эти проблемы путем предоставления составов с производными децитабина в составах, устойчивых к химическому разложению и обеспечивающих большие удобство и универсальность терапевтического режима.

[0038] В изобретениях описаны составы соединений, производных от децитабина, с улучшенной химической стабильностью и более высокой способностью к доставке фармацевтически активного агента субъекту, нуждающемуся в этом или испытывающему в этом потребность. Соединения содержат 5-аза-цитозиновую группу, необязательно, в виде 5-аза-2′-дезоксицитидиновой группы (децитабина) или 5-аза-цитидиновой группы. Соединения также содержат гуаниновую группу, необязательно, в виде 2′-дезоксигуанидиновой группы или гуанидиновой группы. 5-аза-цитозиновая группа и гуаниновая группа связаны одним из множества фосфорсодержащих линкеров.

[0039] Фосфорсодержащий линкер представляет собой группу, содержащую атом фосфора. В некоторых вариантах воплощения количество атомов фосфора в фосфорсодержащем линкере равно 1. Неограничивающие примеры фосфорсодержащих линкеров включают группы, содержащие сложный фосфодиэфир, сложный фосфоротиоатный диэфир, сложный боранофосфатный диэфир и сложный метилфосфонатный диэфир.

[0040] Соединения предоставляются в составах, которые способствуют сохранению эффективности соединений путем обеспечения среды, в которой соединения обладают хорошей химической стабильностью.

Соединения

[0041] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1; и (б) растворитель, содержащий: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент.

[0042] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий: а) соединение формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль; (б) растворитель, содержащий приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола, при этом растворитель практически безводен; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент.

[0043] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1; (б) растворитель, содержащий: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент.

[0044] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения формулы:

или его фармацевтически приемлемой соли; (б) растворитель, содержащий приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола, при этом растворитель практически безводен; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент.

[0045] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагаются составы, содержащие соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1.

[0046] L является группой, пригодной для связывания 5-азацитозиновой группы с гуаниновой группой. В некоторых вариантах воплощения L включает углевод. В некоторых вариантах воплощения L включает более чем один углевод. В некоторых вариантах воплощения L включает два углевода. Если L включает более чем один углевод, то углеводы могут быть одинаковыми или разными. Углевод может быть моносахаридом в форме закрытого кольца, такой как пиранозная или фуранозная форма. Углевод может быть замещен в любом положении или деоксигенирован в любом положении, которое оксигенировано во встречающейся в природе форме углевода. В некоторых вариантах воплощения углевод является рибозой. В некоторых вариантах воплощения углевод является 2-дезоксирибозой. Рибоза или 2-дезоксирибоза могут быть замещены в любом положении.

[0047] Атом фосфора в L может находиться в любой природной или синтетической функциональной группе, содержащей атом фосфора. Неограничивающие примеры таких функциональных групп включают сложные фосфодиэфиры, сложные фосфоротиоатные диэфиры, сложные боранофосфатные диэфиры и сложные метилфосфонатные диэфиры.

[0048] В некоторых вариантах воплощения L содержит Формулу II. В некоторых вариантах воплощения L является Формулой II:

где R¹ и R² независимо являются Н, ОН, алкоксильной группой, алкоксиалкоксильной группой, ацилоксильной группой, карбонатной группой, карбаматной группой или галогеном; R³ является Н или R³, вместе атомом кислорода, с которым связан R³, образует простой эфир, сложный эфир, карбонат или карбамат; R⁴ является Н или R⁴, вместе с атомом кислорода, с которым связан R⁴, образует простой эфир, сложный эфир, карбонат или карбамат; а X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир, сложный фосфоротиоатный диэфир, сложный боранофосфатный диэфир или сложный метилфосфонатный диэфир.

[0049] 5-азацитозиновая группа может быть соединена с любым концом L, а гуаниновая группа может быть связана с другим концом L, пока соединение содержит одну 5-азацитозиновую группу и одну гуаниновую группу. Таким образом, структурные изомеры могут быть получены путем изменения взаимосвязи 5-азацитозиновой группы и гуаниновой группы.

[0050] R¹ и R² могут быть одинаковыми или различными. В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, OPh, ОСН₂СН₂ОМе, OCH₂CH₂OEt, OCH₂CH₂OBn, OBn, OAc, OBz, OCOOMe, OCOOEt, OCOOBn, OCONH₂, OCONMe₂, OCONEt₂, OCONBn₂, OCONHMe, OCONHEt, OCONHBn, F, Cl, Br или I. В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F. В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² независимо являются Н или ОН. В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² являются Н. В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² являются ОН.

[0051] R³ и R⁴ могут быть одинаковыми или различными.

[0052] В некоторых вариантах воплощения R³ является Н или R³, вместе с атомом кислорода, с которым связан R³, образует ОН, ОМе, OEt, OPh, ОСН₂СН₂ОМе, OCH₂CH₂OEt, OCH₂CH₂OBn, OBn, OAc, OBz, OCOOMe, OCOOEt, OCOOBn, OCONH₂, OCONMe₂, OCONEt₂, OCONBn₂, OCONHMe, OCONHEt или OCONHBn. В некоторых вариантах воплощения R³ является Н или R³, вместе с атомом кислорода, с которым связан R³, образует ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе или OBn. В некоторых вариантах воплощения R³ является Н.

[0053] В некоторых вариантах воплощения R⁴ является Н или R⁴, вместе с атомом кислорода, с которым связан R⁴, образует ОН, ОМе, OEt, OPh, ОСН₂СН₂ОМе, OCH₂CH₂OEt, OCH₂CH₂OBn, OBn, OAc, OBz, OCOOMe, OCOOEt, OCOOBn, OCONH₂, OCONMe₂, OCONEt₂, OCONBn₂, OCONHMe, OCONHEt или OCONHBn. В некоторых вариантах воплощения R⁴ является Н или R⁴, вместе с атомом кислорода, с которым связан R⁴, образует ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе или OBn. В некоторых вариантах воплощения R⁴ является Н.

[0054] В некоторых вариантах воплощения X является Р(O)ОН, P(O)SH,

P (\to O) B H_{3}^{-}

или Р(O)Ме. В некоторых вариантах воплощения X является Р(O)ОН. В некоторых вариантах воплощения X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

[0055] Неограничивающие примеры алкилов включают линейные, разветвленные и циклические алкильные группы. Неограничивающие примеры линейных алкильных групп включают метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил и децил.

[0056] Разветвленные алкильные группы включают любую линейную алкильную группу, замещенную любым количеством алкильных групп. Неограничивающие примеры разветвленных алкильных групп включают изопропил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил.

[0057] Неограничивающие примеры циклических алкильных групп включают группы циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Циклические алкильные группы также включают слитые, мостиковые и спиро-бицикло, а также высшие слитые, мостиковые и спиро-системы. Циклическая алкильная группа может быть замещена любым количеством линейных или разветвленных алкильных групп.

[0058] Галоалкильная группа может быть любой алкильной группой, замещенной любым количеством атомов галогена, например, атомами фтора, хлора, брома и йода.

[0059] Алкоксильная группа может быть, к примеру, атомом кислорода, замещенным любой алкильной группой. Простой эфир или простая эфирная группа содержат алкоксильную группу. Неограничивающие примеры алкоксильных групп содержат метокси, этокси, пропокси, изопропокси и изобутокси.

[0060] Алкоксиалкоксильная группа может быть, к примеру, алкоксильной группой, замещенной в любом положении любой алкоксильной группой. Неограничивающие примеры алкоксиалкоксильных групп включают метоксиэтокси, этоксиэтокси, этоксиэтоксиэтокси, группы, производные от любого типа глима, и группы, производные от полиэтиленгликоля.

[0061] Арильная группа может быть гетероциклической или негетероциклической. Арильная группа может быть моноциклической или полициклической. Арильная группа может быть замещена, к примеру, любым количеством гидрокарбильных групп, алкильных групп и атомов галогена. Неограничивающие примеры арильных групп включают фенил, толуил, нафтил, пирролил, пиридил, имидазолил, тиофенил и фурил.

[0062] Арилоксильная группа может быть, к примеру, атомом кислорода, замещенным любой арильной группой, такой как фенокси.

[0063] Арилалкильная группа может быть, к примеру, любой алкильной группой, замещенной любой арильной группой, такой как бензил.

[0064] Арилалкоксильная группа может быть, к примеру, атомом кислорода, замещенным любой арилалкильной группой, такой как бензилокси.

[0065] Гетероцикл может быть любым кольцом, содержащим в кольце атом, отличный от углерода. Гетероцикл может быть замещен, к примеру, любым количеством алкильных групп и атомов галогена. Неограничивающие примеры гетероциклов включают пиррол, пирролидин, пиридин, пиперидин, сукцинамид, малеимид, морфолин, имидазол, тиофен, фуран, тетрагидрофуран, пиран и тетрагидропиран.

[0066] Ацильная группа может быть, к примеру, карбонильной группой, замещенной гидрокарбилом, алкилом, гидрокарбилоксильной группой, алкоксильной группой, арилом, арилоксильной группой, арилалкилом, арилалкоксильной группой или гетероциклом. Неограничивающие примеры ацилов включают ацетил, бензоил, бензилоксикарбонил, феноксикарбонил, метоксикарбонил и этоксикарбонил.

[0067] Ацилоксильная группа может быть атомом кислорода, замещенным ацильной группой. Сложный эфир или сложноэфирная группа содержат ацилоксильную группу.

[0068] Карбонатная группа может быть атомом кислорода, замещенным гидрокарбилоксикарбонилом, алкоксикарбонилом, арилоксикарбонилом или арилалкоксикарбонилом.

[0069] Карбаматная группа может быть атомом кислорода, замещенным карбамоильной группой, в которой атом азота карбамоильной группы незамещен, однозамещен или двузамещен одним или более из гидрокарбила, алкила, арила, гетероциклила или аралкила. Если атом азота двузамещен, то два заместителя вместе с атомом азота могут образовывать гетероцикл.

[0070] Любая функциональная группа соединения, описанного здесь, может быть, необязательно, заблокирована защитной группой. Примеры защитных групп см. в Greene′s Protective Groups In Organic Synthesis, 4th Ed. (Wiley 2006) (1980) и Protecting Groups, 3d Ed. (Thieme 2005) (1994), каждый из которых включен во всей полноте посредством ссылки.

[0071] Неограничивающие примеры подходящих защитных групп для гидроксильной группы включают алкильную, галоалкильную, арильную, арилалкильную, карбонатную, карбаматную и ацильную группы.

[0072] Неограничивающие примеры подходящих защитных групп для азотных функциональных групп включают алкил, арил, арилалкил, ацильную группу, алкоксикарбонильную группу, арилоксикарбонильную группу и аминокарбонильную группу. Защитная группа, вместе с атомом азота, к которому присоединена защитная группа, может образовывать, к примеру, амид, карбамат, уретан, гетероцикл или амин. Две защитные группы, связанные с одним и тем же атомом азота, могут образовывать, вместе с атомом азота, гетероцикл.

[0073] По изобретению предлагаются фармацевтически приемлемые соли любого соединения, описанного здесь. Фармацевтически приемлемые соли включают, к примеру, соли присоединения кислоты и соли присоединения основания. Кислота, которая добавлена к соединению для образования соли присоединения кислоты, может быть органической кислотой или неорганической кислотой. Основание, которое добавлено к соединению для образования соли присоединения основания, может быть органическим основанием или неорганическим основанием. В некоторых вариантах воплощения фармацевтически приемлемая соль является солью металла. В некоторых вариантах воплощения фармацевтически приемлемая соль является солью аммония.

[0074] Соли присоединения кислоты могут получаться при добавлении кислоты к соединению, описанному здесь. В некоторых вариантах воплощения кислота является органической. В некоторых вариантах воплощения кислота является неорганической. Неограничивающие примеры подходящих кислот включают соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, йодистоводородную кислоту, азотную кислоту, азотистую кислоту, серную кислоту, сернистую кислоту, фосфорную кислоту, никотиновую кислоту, изоникотиновую кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, 4-аминосалициловую кислоту, винную кислоту, аскорбиновую кислоту, гентизиновую кислоту, глюконовую кислоту, глюкуроновую кислоту, сахарную кислоту, муравьиную кислоту, бензойную кислоту, глутаминовую кислоту, пантотеновую кислоту, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, масляную кислоту, фумаровую кислоту, янтарную кислоту, лимонную кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, гидроксималеиновую кислоту, метилмалеиновую кислоту, гликолевую кислоту, яблочную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, 2-феноксибензойную кислоту, 2-ацетоксибензойную кислоту, эмбоновую кислоту, фенилуксусную кислоту, N-циклогексилсульфамовую кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, 2-гидроксиэтансульфоновую кислоту, этан-1,2-дисульфоновую кислоту, 4-метилбензолсульфоновую кислоту, нафталин-2-сульфоновую кислоту, нафталин-1,5-дисульфоновую кислоту, 2-фосфоглицериновую кислоту, 3-фосфоглицериновую кислоту, глюкозо-6-фосфорную кислоту и аминокислоту.

[0075] Неограничивающие примеры подходящих кислых солей присоединения включают гидрохлоридную соль, гидробромидную соль, гидроиодидную соль, нитратную соль, нитритную соль, сульфатную соль, сульфитную соль, фосфатную соль, гидрофосфатную соль, дигидрофосфатную соль, карбонатную соль, бикарбонатную соль, никотинатную соль, изоникотинатную соль, лактатную соль, салицилатную соль, 4-аминосалицилатную соль, тартратную соль, аскорбатную соль, гентизинатную соль, глюконатную соль, глюкуронатную соль, сахаратную соль, формиатную соль, бензоатную соль, глутаматную соль, пантотенатную соль, ацетатную соль, пропионатную соль, бутиратную соль, фумаратную соль, сукцинатную соль, цитратную соль, оксалатную соль, малеатную соль, гидроксималеатную соль, метилмалеатную соль, гликолятную соль, малатную соль, циннаматную соль, манделятную соль, 2-феноксибензоатную соль, 2-ацетоксибензоатную соль, эмбонатную соль, фенилацетатную соль, N-циклогексилсульфаматную соль, метансульфонатную соль, этансульфонатную соль, бензолсульфонатную соль, п-толуолсульфонатную соль, 2-гидроксиэтансульфонатную соль, этан-1,2-дисульфонатную соль, 4-метилбензолсульфонатную соль, нафталин-2-сульфонатную соль, нафталин-1,5-дисульфонатную соль, 2-фосфоглицератную соль, 3-фосфоглицератную соль, глюкозо-6-фосфатную соль и аминокислотную соль.

[0076] Металлические соли могут получаться при добавлении неорганического основания к соединению, описанному здесь. Неорганическое основание состоит из катиона металла, соединенного с основным противоионом, таким как, к примеру, гидроксид, карбонат, бикарбонат или фосфат. Металл может быть щелочным металлом, щелочноземельным металлом, переходным металлом или металлом главной группы. Неограничивающие примеры подходящих металлов включают литий, натрий, калий, цезий, церий, магний, марганец, железо, кальций, стронций, кобальт, титан, алюминий, медь, кадмий и цинк.

[0077] Неограничивающие примеры подходящих солей металлов включают соль лития, соль натрия, соль калия, соль цезия, соль церия, соль магния, соль марганца, соль железа, соль кальция, соль стронция, соль кобальта, соль титана, соль алюминия, соль меди, соль кадмия и соль цинка.

[0078] Соли аммония могут получаться при добавлении аммиака или органического амина к соединению, описанному здесь. Неограничивающие примеры подходящих органических аминов включают триэтиламин, диизопропиламин, этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, морфолин, N-метилморфолин, пиперидин, N-метилпиперидин, N-этилпиперидин, дибензиламин, пиперазин, пиридин, пиразол, пиперазол, имидазол, пиразин, пиперазин, этилендиамин, N,N′-дибензилэтилендиамин, прокаин, хлорпрокаин, холин, дициклогексиламин и N-метилглюкамин.

[0079] Неограничивающие примеры подходящих аммонийных солей включают соль триэтиламина, соль диизопропиламина, соль этаноламина, соль диэтаноламина, соль триэтаноламина, соль морфолина, соль N-метилморфолина, соль пиперидина, соль N-метилпиперидина, соль N-этилпиперидина, соль дибензиламина, соль пиперазина, соль пиридина, соль пиразола, соль пиперазола, соль имидазола, соль пиразина, соль пиперазина, соль этилендиамина, соль N,N′-дибензилэтилендиамина, соль прокаина, соль хлорпрокаина, соль холина, соль дициклогексиламина и соль N-метилглюкамина.

[0080] Неограничивающие примеры соединений Формулы I включают:

и фармацевтически приемлемые соли любого из перечисленного.

[0081] Соединения, описанные здесь, могут быть синтезированы способами, известными в области техники, к примеру, синтезом в растворе или твердофазным синтезом. Описания синтеза соединений по изобретению и описание механизма действия соединений по изобретению см. в Патенте США №7,700,567, который включен сюда во всей полноте посредством ссылки.

Составы по изобретению

[0082] Составы, описанные здесь, обеспечивают фармацевтически полезные составы, содержащие любое соединение, описанное здесь в форме с высокой растворимостью, малым объемом инъекции и с хорошей химической стабильностью, и сроком хранения. Благодаря этим свойствам получаются составы, которые сохраняют высокий процентный уровень от исходной эффективности и доставляют терапевтически эффективное количество соединения даже после длительного хранения при комнатной температуре или ниже ее. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1; и (б) растворитель, содержащий: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для использования в составах по изобретению, включают соединения Формулы I, в которых L имеет Формулу II. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для использования в составах по изобретению, включают соединения I-(1-44).

[0083] Составы могут быть растворами или суспензиями соединения в растворителе или смеси растворителей. Неограничивающие примеры подходящих растворителей включают пропиленгликоль, глицерин, этанол и любые комбинации перечисленного. Составы могут изготавливаться в виде неводных составов. Составы могут быть безводными или практически безводными.

[0084] Смесь растворителей может содержать процентное количество пропиленгликоля по массе или по объему. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание пропиленгликоля может быть по меньшей мере 10%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере приблизительно 10%, по меньшей мере приблизительно 20%, по меньшей мере приблизительно 30%, по меньшей мере приблизительно 40% или по меньшей мере приблизительно 50%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание пропиленгликоля может быть максимально 90%, максимально 80%, максимально 70%, максимально 60%, максимально примерно 90%, максимально примерно 80%, максимально примерно 70% или максимально примерно 60%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание пропиленгликоля может составлять от 30% до 90%, от 45% до 85%, от 55% до 75%, от 60% до 70%, от приблизительно 30% до приблизительно 90%, от приблизительно 45% до приблизительно 85%, от приблизительно 55% до приблизительно 75% или от приблизительно 60% до приблизительно 70%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание пропиленгликоля может составлять 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, приблизительно 30%, приблизительно 35%, приблизительно 40%, приблизительно 45%, приблизительно 50%, приблизительно 55%, приблизительно 60%, приблизительно 65%, приблизительно 70%, приблизительно 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85% или приблизительно 90%.

[0085] Смесь растворителей может содержать процентное количество глицерина по массе или по объему. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание глицерина может составлять по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 10%, по меньшей мере приблизительно 15%, по меньшей мере приблизительно 25% или по меньшей мере приблизительно 30%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание глицерина может быть максимально 70%, максимально 60%, максимально 50%, максимально 40%, максимально 30%, максимально приблизительно 10%, максимально приблизительно 60%, максимально приблизительно 50%, максимально приблизительно 40% или максимально приблизительно 30%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание глицерина может составлять от 0% до 50%, от 5% до 45%, от 15% до 35%, от 20% до 30%, от 0% до приблизительно 50%, от приблизительно 5% до приблизительно 45%, от приблизительно 15% до приблизительно 35% или от приблизительно 20% до приблизительно 30%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание глицерина может составлять 0%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, приблизительно 5%, приблизительно 10%, приблизительно 15%, приблизительно 20%, приблизительно 25%, приблизительно 30%, приблизительно 35%, приблизительно 40%, приблизительно 45% или приблизительно 50%.

[0086] Смесь растворителей может содержать процентное количество этанола по массе или по объему. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание этанола может составлять по меньшей мере 1%, по меньшей мере 3%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере приблизительно 1%, по меньшей мере приблизительно 3%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 10% или по меньшей мере приблизительно 15%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание этанола может быть максимально 30%, максимально 25%, максимально 20%, максимально 15%, максимально 10%, максимально примерно 30%, максимально примерно 25%, максимально примерно 20%, максимально примерно 15% или максимально примерно 10%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание этанола может составлять от 0% до 30%, от 0% до 25%, от 0% до 20%, от 5% до 15%, от 0% до приблизительно 30%, от 0% до приблизительно 25%, от 0% до приблизительно 20% или от приблизительно 5% до приблизительно 15%. В некоторых вариантах воплощения процентное содержание этанола может составлять 0%, 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14% или приблизительно 15%.

[0087] В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от 45% до 85% пропиленгликоля, от 5% до 45% глицерина и от 0% до 30% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от 45% до 85%, глицерина в количестве от 5% до 45% и этанола в количестве от 0% до 30%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от приблизительно 45% до приблизительно 85%, глицерина в количестве от приблизительно 5% до приблизительно 45% и этанола в количестве от 0% до приблизительно 30%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от 45% до 85% пропиленгликоля, от 5% до 45% глицерина и от 0% до 30% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола.

[0088] В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от 55% до 75% пропиленгликоля, от 15% до 35% глицерина и от 0% до 20% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от приблизительно 55% до приблизительно 75% пропиленгликоля, от приблизительно 15% до приблизительно 35% глицерина и от 0% до приблизительно 20% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от 55% до 75%, глицерина в количестве от 15% до 35% и этанола в количестве от 0% до 20%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от приблизительно 55% до приблизительно 75%, глицерина в количестве от приблизительно 15% до приблизительно 35% и этанола в количестве от 0% до приблизительно 20%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от 55% до 75% пропиленгликоля, от 15% до 35% глицерина и от 0% до 20% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от приблизительно 55% до приблизительно 75% пропиленгликоля, от приблизительно 15% до приблизительно 35% глицерина и от 0% до приблизительно 20% этанола.

[0089] В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и от 5% до 15% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит от приблизительно 60% до приблизительно 70% пропиленгликоля, от приблизительно 20% до приблизительно 30% глицерина и от приблизительно 5% до приблизительно 15% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от 60% до 70%, глицерина в количестве от 20% до 30% и этанола в количестве от 5% до 15%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит, по существу, из пропиленгликоля в количестве от приблизительно 60% до приблизительно 70%, глицерина в количестве от приблизительно 20% до приблизительно 30% и этанола в количестве от приблизительно 5% до приблизительно 15%. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и от 5% до 15% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является от приблизительно 60% до приблизительно 70% пропиленгликоля, от приблизительно 20% до приблизительно 30% глицерина и от приблизительно 5% до приблизительно 15% этанола.

[0090] В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей содержит приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит в основном из 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей состоит в основном из приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола. В некоторых вариантах воплощения растворитель или смесь растворителей является приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

[0091] Состав может изготавливаться, храниться, транспортироваться и использоваться в безводной или практически безводной форме. Растворитель может быть высушен перед изготовлением состава, а соединение может быть высушено, например, лиофилизацией. Осушитель, или дессикант, может использоваться при изготовлении, хранении, транспортировке или использовании для регулирования содержания воды. Неограничивающие примеры осушителей включают силикагель, кальция сульфат, кальция хлорид, кальция фосфат, натрия хлорид, натрия бикарбонат, натрия сульфат, натрия фосфат, монтмориллонит, молекулярные сита (гранулированные или в порошке), оксид алюминия, оксид титана, оксид циркония и натрия пирофосфат. Осушитель может непосредственно контактировать с составом, может быть внедрен в композицию в виде пакетика с проницаемой мембраной или храниться с составом в закрытой среде, например, в эксикаторе, так, чтобы осушитель и состав одновременно находились в контакте с контролируемой атмосферой. Осушитель может быть удален из композиции, например, фильтрованием или канюляцией. Помимо этого, композиция может храниться в запечатанном контейнере в контролируемой атмосфере, состоящей преимущественно из азота или аргона, либо обогащенной ими.

[0092] Безводные или практически безводные условия продлевают срок хранения при комнатной и пониженной температурах состава, раскрытого здесь. Это преимущество снижает затраты, связанные с хранением, транспортировкой и утечками состава, повышает удобство хранения и использования и позволяет избежать необходимости введения холодных составов, тем самым повышая толерантность и приверженность субъекта режиму с составом по изобретению.

[0093] Состав может дополнительно включать фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент. Неограничивающие примеры вспомогательных компонентов включают маннитол, сорбитол, лактозу, декстрозу и циклодекстрины. Вспомогательные компоненты могут добавляться для изменения плотности, реологических свойств, однородности и вязкости состава.

[0094] Состав может содержать кислотные или щелочные вспомогательные компоненты для модулирования кислотности или щелочности состава. Неограничивающие примеры кислот, пригодных для повышения кислотности состава, включают соляную кислоту, бромистоводородную кислоту, йодистоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, азотную кислоту, аскорбиновую кислоту, лимонную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, щавелевую кислоту, муравьиную кислоту, бензолсульфоновую кислоту, бензойную кислоту, малеиновую кислоту, глутаминовую кислоту, янтарную кислоту, аспарагиновую кислоту, диатризойную кислоту и уксусную кислоту. Неограничивающие примеры оснований, пригодных для повышения щелочности состава, включают лития гидроксид, натрия гидроксид, калия гидроксид, натрия карбонат, натрия бикарбонат, натрия фосфат, калия фосфат, натрия ацетат, натрия бензоат, тетрабутиламмония ацетат, тетрабутиламмония бензоат и триалкиламины. Также для модулирования кислотности или щелочности могут использоваться многофункциональные добавки, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА).

[0095] Соединение, раскрытое здесь, может присутствовать в составе в любом количестве. В некоторых вариантах воплощения соединение находится в концентрации от 1 мг/мл до 130 мг/мл, от 10 мг/мл до 130 мг/мл, от 40 мг/мл до 120 мг/мл, от 80 мг/мл до 110 мг/мл, от приблизительно 1 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл, от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл, от приблизительно 40 мг/мл до приблизительно 120 мг/мл или от приблизительно 80 мг/мл до приблизительно 110 мг/мл. В некоторых вариантах воплощения соединение находится в концентрации 10 мг/мл, 20 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл, 50 мг/мл, 60 мг/мл, 70 мг/мл, 80 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, 110 мг/мл, 120 мг/мл, 130 мг/мл, 140 мг/мл, 150 мг/мл, 160 мг/мл, 170 мг/мл, 180 мг/мл, 190 мг/мл, 200 мг/мл, приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 30 мг/мл, приблизительно 40 мг/мл, приблизительно 50 мг/мл, приблизительно 60 мг/мл, приблизительно 70 мг/мл, приблизительно 80 мг/мл, приблизительно 90 мг/мл, приблизительно 100 мг/мл, приблизительно 110 мг/мл, приблизительно 120 мг/мл, приблизительно 130 мг/мл, приблизительно 140 мг/мл, приблизительно 150 мг/мл, приблизительно 160 мг/мл, приблизительно 170 мг/мл, приблизительно 180 мг/мл, приблизительно 190 мг/мл или приблизительно 200 мг/мл. В некоторых вариантах воплощения соединение присутствует в концентрации 100 мг/мл. В некоторых вариантах воплощения соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

[0096] Состав может быть изготовлен путем контактирования соединения, описанного здесь, с растворителем или смесью растворителей. Альтернативно соединение может контактировать с одним растворителем с последовательным добавлением остальных растворителей в смеси или по отдельности. Если итоговая форма является раствором, то полное растворение может быть достигнуто на любом этапе процесса, удобном для производства. Необязательные добавки могут вводиться в состав на любом этапе процесса, удобном для производства.

[0097] Изготовление состава, необязательно, может быть ускорено путем перемешивания, подогрева или продления периода растворения. Неограничивающие примеры перемешивания включают встряхивание, обработку ультразвуком, смешивание, взбалтывание, вихревое перемешивание и их комбинации.

[0098] В некоторых вариантах воплощения состав, необязательно, стерилизуют. Неограничивающие примеры методик стерилизации включают фильтрование, химическую дезинфекцию, облучение и нагрев.

[0099] Составы по изобретению эффективны для сохранения терапевтического соединения и замедления разложения при хранении и работе с ним, тем самым поддерживая эффективность соединения и состава с ним.

[00100] Одним примером условий хранения является хранение состава по изобретению при 2-8°C в течение периода времени, к примеру, равного суткам, неделе, месяцу, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 месяцам, примерно году или дольше года. В некоторых вариантах воплощения состав сохраняет примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 2-8°C.

[00101] Одним примером условий хранения является хранение состава по изобретению при 25°C и 60% относительной влажности в течение периода времени, к примеру, равного суткам, неделе, месяцу, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12 месяцам, примерно году или дольше года. В некоторых вариантах воплощения состав сохраняет примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90%, примерно 95% или примерно 100% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 25°C и 60% относительной влажности.

Диметилсульфоксид (ДМСО) для использования по изобретению

[00102] При использовании ДМСО в качестве растворителя по изобретению можно уменьшить нефасованный объем и объем наполнения (нефасованный объем и объем наполнения могут быть снижены до 1/5-ой от объема водных систем) и устранить временные и температурные ограничения при масштабировании. Помимо этого, при использовании практически безводного ДМСО существенно повышается стабильность: повышение концентрации воды коррелирует со снижением стабильности (как показано на Фигуре 4, где представлено % изменение общего количества родственных примесей в натриевой соли соединения формулы I-1 при хранении в ДМСО или ДМСО/вода (вода для инъекций, «ВДИ») при 25°C/60% относительной влажности в течение 24 часов).

[00103] По изобретению может использоваться любой источник ДМСО. В некоторых вариантах воплощения источник ДМСО пригоден для медицинского и лекарственного применения, к примеру, соответствует статьям фармакопеи США или Европейской фармакопеи, либо производится в соответствии с рекомендациями по надлежащей производственной практике активных фармацевтических компонентов. По изобретению могут использоваться такие марки как безводный, для анализа, для ВЭЖХ или фармацевтический растворитель.

[00104] В некоторых вариантах воплощения ДМСО для использования по изобретению содержит малые количества примесей, к примеру, <0,2% воды по Карлу Фишеру, <0,01% нелетучего остатка и/или <0,1% родственных соединений.

[00105] В некоторых вариантах воплощения вместо ДМСО могут использоваться изостерные аналоги ДМСО. В некоторых вариантах воплощения изостерным аналогом ДМСО является вещество, в котором один или более атом(ов) замещено на родственный изотоп, к примеру, водород на дейтерий.

ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ВАРИАНТЫ ВОПЛОЩЕНИЯ

Вариант воплощения 1. Состав, содержащий: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

Вариант воплощения 2. Состав по варианту воплощения 1, отличающийся тем, что L имеет формулу (II)

где R¹ и R² независимо являются Н, ОН, алкоксильной группой, алкоксиалкоксильной группой, ацилоксильной группой, карбонатной группой, карбаматной группой или галогеном; R³ является Н или R³, вместе с атомом кислорода, с которым связан R³, образует простой эфир, сложный эфир, карбонат или карбамат; R⁴ является Н или R⁴, вместе с атомом кислорода, с которым связан R⁴, образует простой эфир, сложный эфир, карбонат или карбамат; а X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир, сложный фосфоротиоатный диэфир, сложный боранофосфатный диэфир или сложный метилфосфонатный диэфир.

Вариант воплощения 3. Состав по варианту воплощения 2, отличающийся тем, что R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F.

Вариант воплощения 4. Состав по любому из вариантов воплощения 2 и 3, отличающийся тем, что X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

Вариант воплощения 5. Состав по любому из вариантов воплощения 2-4, отличающийся тем, что R¹ и R² являются Н.

Вариант воплощения 6. Состав по любому из вариантов воплощения 1-5, отличающийся тем, что соединение Формулы I является любым из I-(1-44).

Вариант воплощения 7. Состав по любому из вариантов воплощения 1-6, отличающийся тем, что соединение Формулы I является:

Вариант воплощения 8. Состав по любому из вариантов воплощения 1-7, отличающийся тем, что растворитель содержит: приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

Вариант воплощения 9. Состав по любому из вариантов воплощения 1-8, отличающийся тем, что состав практически безводен.

Вариант воплощения 10. Состав по любому из вариантов воплощения 1-9, отличающийся тем, что соединение присутствует в концентрации от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл.

Вариант воплощения 11. Состав по любому из вариантов воплощения 1-10, отличающийся тем, что состав является раствором.

Вариант воплощения 12. Состав по любому из вариантов воплощения 1-11, отличающийся тем, что состав сохраняет примерно 95% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 2-8°C или приблизительно 68% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 25°C и 60% относительной влажности.

Вариант воплощения 13. Состав, содержащий: а) соединение формулы:

Вариант воплощения 14. Состав по варианту воплощения 13, отличающийся тем, что соединение существует в виде натриевой соли.

Вариант воплощения 15. Состав по любому из вариантов воплощения 13 и 14, отличающийся тем, что растворитель является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

Вариант воплощения 16. Состав по любому из вариантов воплощения 13-15, отличающийся тем, что соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

Вариант воплощения 17. Способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

Вариант воплощения 18. Способ по варианту воплощения 17, отличающийся тем, что L имеет формулу (II)

где R¹ и R² независимо являются Н, ОН, алкоксильной группой, алкоксиалкоксильной группой, ацилоксильной группой, карбонатной группой, карбаматной группой или галогеном; R³ является Н или R³, вместе с атомом кислорода, с которым связан R³, образует простой эфир, сложный эфир или карбамат; R⁴ является Н или R⁴, вместе с атомом кислорода, с которым связан R⁴, образует простой эфир, сложный эфир или карбамат; а X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир, сложный фосфоротиоатный диэфир, сложный боранофосфатный диэфир или сложный метилфосфонатный диэфир.

Вариант воплощения 19. Способ по варианту воплощения 18, отличающийся тем, что R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F.

Вариант воплощения 20. Способ по любому из вариантов воплощения 18 и 19, отличающийся тем, что X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

Вариант воплощения 21. Способ по любому из вариантов воплощения 18-20, отличающийся тем, что R¹ и R² являются Н.

Вариант воплощения 22. Способ по любому из вариантов воплощения 17-21, отличающийся тем, что соединение Формулы I является любым из I-(1-44).

Вариант воплощения 23. Способ по любому из вариантов воплощения 17-22, отличающийся тем, что соединение Формулы I является:

Вариант воплощения 24. Способ по любому из вариантов воплощения 17-23, отличающийся тем, что растворитель содержит: приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

Вариант воплощения 25. Способ по любому из вариантов воплощения 17-24, отличающийся тем, что состав практически безводен.

Вариант воплощения 26. Способ по любому из вариантов воплощения 17-25, отличающийся тем, что соединение присутствует в концентрации от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл.

Вариант воплощения 27. Способ по любому из вариантов воплощения 17-26, отличающийся тем, что состав является раствором.

Вариант воплощения 28. Способ по любому из вариантов воплощения 17-27, отличающийся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 29. Способ по любому из вариантов воплощения 17-28, отличающийся тем, что введение выполняется подкожно.

Вариант воплощения 30. Способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения формулы:

Вариант воплощения 31. Способ по варианту воплощения 30, отличающийся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 32. Способ по любому из вариантов воплощения 30 и 31, отличающийся тем, что соединение существует в виде натриевой соли.

Вариант воплощения 33. Способ по любому из вариантов воплощения 30-32, отличающийся тем, что растворителем является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

Вариант воплощения 34. Способ по любому из вариантов воплощения 30-33, отличающийся тем, что соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

Вариант воплощения 35. Способ по любому из вариантов воплощения 30-34, отличающийся тем, что введение является подкожным введением.

Вариант воплощения 36. Применение соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, лекарственного средства, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

Вариант воплощения 37. Применение по варианту воплощения 36, отличающееся тем, что L имеет формулу (II)

Вариант воплощения 38. Применение по варианту воплощения 37, отличающееся тем, что R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F.

Вариант воплощения 39. Применение по любому из вариантов воплощения 37 и 38, отличающееся тем, что X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

Вариант воплощения 40. Применение по любому из вариантов воплощения 37-39, отличающееся тем, что R¹ и R² являются Н.

Вариант воплощения 41. Применение по любому из вариантов воплощения 36-40, отличающееся тем, что соединение Формулы I является любым из I-(1-44).

Вариант воплощения 42. Применение по любому из вариантов воплощения 36-41, отличающееся тем, что соединение Формулы I является:

Вариант воплощения 43. Применение по любому из вариантов воплощения 36-42, отличающееся тем, что растворитель содержит: приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

Вариант воплощения 44. Применение по любому из вариантов воплощения 36-43, отличающееся тем, что лекарственное средство практически безводно. Вариант воплощения 45. Применение по любому из вариантов воплощения 36-44, отличающееся тем, что соединение присутствует в концентрации от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл.

Вариант воплощения 46. Применение по любому из вариантов воплощения 36-45, отличающееся тем, что лекарственное средство является раствором.

Вариант воплощения 47. Применение по любому из вариантов воплощения 36-46, отличающееся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 48. Применение по любому из вариантов воплощения 36-47, отличающееся тем, что лекарственное средство пригодно для подкожного введения.

Вариант воплощения 49. Применение соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкоза или солидных опухолей, лекарственного средства, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения формулы:

Вариант воплощения 50. Применение по варианту воплощения 49, отличающееся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 51. Применение по любому из вариантов воплощения 49 и 50, отличающееся тем, что соединение существует в виде натриевой соли.

Вариант воплощения 52. Применение по любому из вариантов воплощения 49-51, отличающееся тем, что растворитель является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

Вариант воплощения 53. Применение по любому из вариантов воплощения 49-52, отличающееся тем, что соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

Вариант воплощения 54. Применение по любому из вариантов воплощения 49-53, отличающееся тем, что лекарственное средство пригодно для подкожного введения.

Вариант воплощения 55. Соединение для применения при лечении одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, соединение, содержащее терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1, причем соединение поставляется в растворителе, содержащем: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола, и, необязательно, с фармацевтически приемлемым вспомогательным компонентом.

Вариант воплощения 56. Соединение по варианту воплощения 55, отличающееся тем, что L имеет формулу (II)

Вариант воплощения 57. Соединение по варианту воплощения 56, отличающееся тем, что R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F.

Вариант воплощения 58. Соединение по любому из вариантов воплощения 56 и 57, отличающееся тем, что X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

Вариант воплощения 59. Соединение по любому из вариантов воплощения 56-58, отличающееся тем, что R¹ и R² являются Н.

Вариант воплощения 60. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-59, отличающееся тем, что соединение Формулы I является любым из I-(1-44).

Вариант воплощения 61. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-60, отличающееся тем, что соединение Формулы I является:

Вариант воплощения 62. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-61, отличающееся тем, что растворитель содержит: приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

Вариант воплощения 63. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-62, отличающееся тем, что растворитель практически безводен.

Вариант воплощения 64. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-63, отличающееся тем, что соединение присутствует в концентрации от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130 мг/мл.

Вариант воплощения 65. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-64, отличающееся тем, что соединение образует раствор с растворителем.

Вариант воплощения 66. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-65, отличающееся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 67. Соединение по любому из вариантов воплощения 55-66, отличающееся тем, что соединение в растворителе пригодно для подкожного введения.

Вариант воплощения 68. Соединение для применения при лечении одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, соединение, имеющее формулу:

или его фармацевтически приемлемая соль, причем соединение находится в растворителе, содержащем приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола, при этом растворитель практически безводен, и, необязательно, с фармацевтически приемлемым вспомогательным компонентом.

Вариант воплощения 69. Соединение по варианту воплощения 68, отличающееся тем, что миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

Вариант воплощения 70. Соединение по любому из вариантов воплощения 68 и 69, отличающееся тем, что соединение существует в виде натриевой соли.

Вариант воплощения 71. Соединение по любому из вариантов воплощения 68-70, отличающееся тем, что растворитель является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

Вариант воплощения 72. Соединение по любому из вариантов воплощения 68-71, отличающееся тем, что соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

Вариант воплощения 73. Соединение по любому из вариантов воплощения 68-72, отличающееся тем, что соединение в растворителе пригодно для подкожного введения.

Дозирование и Введение

[00106] Дозы составов по изобретению могут вводиться субъекту способом, известным в области техники. Неограничивающие примеры способов введения включают подкожную инъекцию, внутривенную инъекцию и переливание. В некоторых вариантах воплощения субъект испытывает необходимость или потребность в составе.

[00107] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается дозированная форма, содержащая соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается дозированная форма, содержащая: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1; и (б) растворитель, содержащий: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для использования в дозированных формах по изобретению, включают соединения Формулы I, в которых L имеет Формулу II. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для использования в дозированных формах по изобретению, включают соединения I-(1-44).

[00108] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ введения дозированной формы, содержащей соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ введения дозированной формы, содержащей: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1; и (б) растворитель, содержащий: от приблизительно 45% до приблизительно 85% пропиленгликоля, от приблизительно 5% до приблизительно 45% глицерина и от 0% до приблизительно 30% этанола; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для введения, включают соединения Формулы I, в которых L имеет Формулу II. Неограничивающие примеры соединений, пригодных для введения, включают соединения I-(1-44).

[00109] Доза состава содержит количество, которое терапевтически эффективно для показания. В некоторых вариантах воплощения субъект испытывает необходимость или потребность в терапии по поводу показания.

[00110] Терапевтически эффективное количество соединения по изобретению может выражаться в мг соединения на кг массы тела субъекта. В некоторых вариантах воплощения терапевтически эффективное количество составляет 1-1000 мг/кг, 1-500 мг/кг, 1-250 мг/кг, 1-100; мг/кг, 1-50 мг/кг, 1-25 мг/кг или 1-10 мг/кг. В некоторых вариантах воплощения терапевтически эффективное количество составляет 5 мг/кг, 10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг, 75 мг/кг, 100 мг/кг, 150 мг/кг, 200 мг/кг, 250 мг/кг, 300 мг/кг, 400 мг/кг, 500 мг/кг, 600 мг/кг, 700 мг/кг, 800 мг/кг, 900 мг/кг, 1000 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 50 мг/кг, приблизительно 75 мг/кг, приблизительно 100 мг/кг, приблизительно 150 мг/кг, приблизительно 200 мг/кг, приблизительно 250 мг/кг, приблизительно 300 мг/кг, приблизительно 400 мг/кг, приблизительно 500 мг/кг, приблизительно 600 мг/кг, приблизительно 700 мг/кг, приблизительно 800 мг/кг, приблизительно 900 мг/кг или приблизительно 1000 мг/кг.

[00111] В некоторых вариантах воплощения терапевтически эффективное количество может вводиться 1-35 раз в неделю, 1-14 раз в неделю или 1-7 раз в неделю. В некоторых вариантах воплощения терапевтически эффективное количество может вводиться 1-10 раз в день, 1-5 раз в день, 1 раз, 2 раза или 3 раза в день.

Терапевтическое применение

[00112] Фармацевтические составы по настоящему изобретению могут использоваться для лечения большого количества заболеваний, чувствительных к лечению децитабином, включая те, которые описаны здесь.

[00113] Примеры показаний, которые можно лечить при помощи фармацевтических составов по настоящему изобретению, включают те, которые характеризуются нежелательной или неконтролируемой пролиферацией клеток. Такие показания включают доброкачественные опухоли, различные типы злокачественных онкологических заболеваний, такие как первичные опухоли и опухолевые метастазы, рестенозы (например, коронарные, каротидные и церебральные поражения), гематологические нарушения, аномальное стимулирование эндотелиальных клеток (атеросклероз), хирургические повреждения тканей тела, аномальное заживление ран, аномальный ангиогенез, заболевания, приводящие к фиброзу тканей, нарушения от повторяющихся движений, повреждения слабоваскуляризированных тканей и пролиферативные ответные реакции, связанные с трансплантатами органов.

[00114] В общем клетки в доброкачественной опухоли сохраняют черты дифференциации и не делятся полностью бесконтрольно. Доброкачественная опухоль обычно локализована и не метастазирует. Конкретные типы доброкачественных опухолей, которые можно лечить, используя настоящее изобретение, включают гемангиомы, печеночноклеточную аденому, кавернозную гемангиому, фокальную узелковую гиперплазию, невриному слухового нерва, нейрофиброму, аденому желчного протока, кистому желчного протока, фиброму, липомы, лейомиомы, мезотелиомы, тератомы, миксомы, узелковую регенеративную гиперплазию, трахомы и пиогенные гранулемы.

[00115] В злокачественной опухоли клетки становятся недифференцированными, не отвечают на сигналы контроля роста организма и растут неконтролируемым образом. Злокачественная опухоль инвазивна и может распространяться в дальние участки (метастазировать). Злокачественные опухоли обычно подразделяют на две категории: первичные и вторичные. Первичные опухоли возникают непосредственно из ткани, в которой находятся. Вторичная опухоль, или метастаз, является опухолью, зародившейся в другом месте организма, но проникшей в удаленный орган. Обычными путями метастазирования являются прямое прорастание в соседние структуры, распространение через сосудистую или лимфатическую системы и продвижение по тканевым плоскостям и в полостях организма (перитонеальная жидкость, цереброспинальная жидкость и т.д.).

[00116] Специфические типы онкологических заболеваний или злокачественных опухолей, как первичных, так и вторичных, которые можно лечить, используя данное изобретение, включают рак молочной железы, рак кожи, рак костей, рак предстательной железы, рак печени, рак легкого, рак головного мозга, рак гортани, желчного пузыря, поджелудочной железы, прямой кишки, паращитовидной железы, щитовидной железы, надпочечника, нервной ткани, головы и шеи, ободочной кишки, желудка, бронхов, почек, базальноклеточную карциному, плоскоклеточную карциному изъязвляющего и папиллярного типов, метастатическую карциному кожи, остеосаркому, саркому Юинга, ретикулярноклеточную саркому, миелому, гигантскоклеточную опухоль, мелкоклеточную опухоль легкого, желчные камни, опухоль островковых клеток, первичную опухоль мозга, острые и хронические лимфоцитные и гранулоцитные опухоли, опухоль волосатых клеток, аденому, гиперплазию, медуллярную карциному, феохромоцитому, мукозальные невриномы, кишечные ганглионевриномы, гиперпластическую корнеальную нервную опухоль, опухоль при марфаноидном габитусе, опухоль Вильмса, семиному, опухоль яичника, лейомиомную опухоль, цервикальную дисплазию и карциному in situ, нейробластому, ретинобластому, саркому мягких тканей, злокачественный карциноид, местные поражения кожи, грибковые микозы, рабдомиосаркому, саркому Калоши, остеогенные и иные виды саркомы, злокачественную гиперкальциемию, опухоль почечных клеток, полицитемию вера, аденокарциному, мультиформную глиобластому, лейкозы, лимфомы, злокачественные меланомы, эпидермальные карциномы и другие карциномы и саркомы.

[00117] Гематологические нарушения включают аномальный рост клеток крови, который может приводить к диспластическим изменениям клеток крови и гематологическим злокачественным опухолям, таким как различные виды лейкемии. Примеры гематологических расстройств включают, не ограничиваясь перечисленным, острый миелолейкоз, острый промиелоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, миелодиспластические синдромы и серповидноклеточную анемию.

[00118] Лечение аномальной пролиферации клеток при хирургических повреждениях тканей возможно при множестве хирургических процедур, включая хирургию суставов, кишечника и келоидных рубцов. Это касается заболеваний, приводящих к образованию фиброзной ткани, включают эмфизему.

[00119] Нарушения от повторяющихся движений, которые можно лечить, используя настоящее изобретение, включают туннельный синдром запястья. Примером клеточного пролиферативного расстройства, которое можно лечить, используя данное изобретение, служит костная опухоль.

[00120] Пролиферативные ответы, ассоциированные с трансплантацией органа, которые можно лечить, используя настоящее изобретение, включают пролиферативные ответы, которые делают свой вклад в потенциальное отторжение органов или в ассоциированные осложнения. В частности, эти пролиферативные ответы могут возникать при трансплантации сердца, легкого, печени, почки и иных органов или систем органов тела.

[00121] Аномальный ангиогенез, который можно лечить, используя настоящее изобретение, включает виды аномального ангиогенеза, которые сопровождают ревматоидный артрит, отек и повреждение мозга, связанные с ишемической реперфузией, кортикальную ишемию, гиперплазию и гиперваскуляризацию яичника (поликистозный синдром яичника), эндометриоз, псориаз, диабетическую ретинопатию и другие глазные ангиогенные заболевания, такие как ретинопатия недоношенных (ретролентальная фибропластическая), мышечная дегенерация, отторжение роговичного трансплантата, нейроокулярную глаукому и синдром Остера-Уэббера.

[00122] Заболевания, ассоциированные с аномальным ангиогенезом, индуцируют рост сосудов. К примеру, корнеальный ангиогенез включает три фазы: доваскулярный латентный период, активную неоваскуляризацию и созревание, и регрессию сосудов. Еще предстоит определить принадлежность и механизм различных ангиогенных факторов, включая элементы воспалительного ответа, такие как лейкоциты, тромбоциты, цитокины и эйкозаноиды, или неидентифицированные составляющие плазмы.

[00123] В некоторых вариантах воплощения фармацевтические составы по настоящему изобретению могут использоваться для лечения заболеваний, ассоциированных с нежелательным или аномальным ангиогенезом. Способ содержит введение пациенту, страдающему от нежелательного или аномального ангиогенеза, фармацевтических составов по настоящему изобретению по отдельности или в комбинации с противоопухолевым средством, активность которого в качестве противоопухолевого средства in vivo в значительной степени затрагивается высокими уровнями метилирования ДНК. Конкретная дозировка этих средств, необходимая для ингибирования ангиогенеза и/или заболеваний, связанных с ангиогенезом, может зависеть от тяжести состояния, пути введения и связанных факторов, о которых может судить лечащий врач. В общем приемлемыми и эффективными суточными дозами являются такие количества, которых достаточно для эффективного ингибирования ангиогенеза и/или заболеваний, связанных с ангиогенезом.

[00124] Фармацевтические составы по настоящему изобретению могут применяться для лечения множества заболеваний, ассоциированных с нежелательным ангиогенезом, таких как ретинальная/хороидальная неоваскуляризация и корнеальная неоваскуляризация. Примеры ретинальной/хороидальной неоваскуляризации включают, не ограничиваясь перечисленным, болезнь Беста, миопию, ямки диска зрительного нерва, болезнь Штаргардта, болезнь Педжета, окклюзию вен, окклюзию артерий, серповидноклеточную анемию, саркоидоз, сифилис, эластическую псевдоксантому, обструктивные заболевания сонной артерии, хронический увеит/витрит, микобактериальные инфекции, болезнь Лайма, системную красную волчанку, ретинопатию недоношенных, болезнь Илза, диабетическую ретинопатию, макулярную дегенерацию, болезнь Бехчетта, инфекции, вызывающие ретинит или хороидит, предполагаемый окулярный гистоплазмоз, промежуточный увеит, хроническое отслаивание сетчатки, синдромы повышенной вязкости, токсоплазмоз, осложнения после травм и лазерных вмешательств, заболевания, ассоциированные с рубеозом (неоваскуляризацией угла) и заболевания, вызванные аномальной пролиферацией фиброваскулярной или фиброзной ткани, включая все формы пролиферативной витреоретинопатии. Примеры корнеальной неоваскуляризации включают, не ограничиваясь перечисленным, эпидемический кератоконъюктивит, дефицит витамина А, избыточное ношение контактных линз, атопический кератит, кератит верхних конечностей, сухой птеригиум кератит, синдром Шегрена, акне розацена, филектенулез, диабетическую ретинопатию, ретинопатию недоношенных, отторжение роговичного трансплантата, язву Мурена, краевую дегенерацию Териена, краевой кератолизис, полиартериит, саркоидоз Вегенера, склерит, перифигоидную радиальную кератотомию, неоваскулярную глаукому и ретролентальную фиброплазию, сифилис, инфекции микобактерий, липидную дегенерацию, химические ожоги, бактериальные изъязвления, грибковые изъязвления, инфекции вируса простого герпеса, инфекции вируса опоясывающего герпеса, протозойные инфекции и саркому Капоши.

[00125] В некоторых вариантах воплощения фармацевтические составы по настоящему изобретению могут использоваться для лечения хронических воспалительных заболеваний, ассоциированных с аномальным ангиогенезом. Способ содержит введение пациенту, страдающему от хронического воспалительного заболевания, ассоциированного с аномальным ангиогенезом, фармацевтических составов по настоящему изобретению по отдельности или в комбинации с противоопухолевым средством, активность которого в качестве противоопухолевого средства in vivo в значительной степени затрагивается высокими уровнями метилирования ДНК. Хроническое воспаление зависит от непрерывного образования капиллярных путей для поддерживания притока воспалительных клеток. Приток и присутствие воспалительных клеток приводит к гранулемам и тем самым поддерживает хроническое воспалительное состояние. Ингибирование ангиогенеза с использованием фармацевтических составов по настоящему изобретению может предотвращать образование гранулем, тем самым облегчая течение болезни. Примеры хронических воспалительных заболеваний включают, не ограничиваясь перечисленным, воспалительные заболевания кишечника, такие как болезнь Крона и язвенный колит, псориаз, саркоидоз и ревматоидный артрит.

[00126] Воспалительные заболевания кишечника, такие как болезнь Крона и язвенный колит, характеризуются хроническим воспалением и ангиогенезом в различных участках желудочно-кишечного тракта. К примеру, болезнь Крона развивается как хроническая трансмуральная воспалительная болезнь, которая чаще всего затрагивает дистальный участок подвздошной кишки и ободочную кишку, но также может развиться в любой части желудочно-кишечного тракта от рта до ануса и перианальной области. У пациентов с болезнью Крона обычно имеется хроническая диарея, ассоциированная с болью в животе, лихорадкой, анорексией, потерей массы тела и вздутием живота. Язвенный колит также является хроническим, неспецифическим, воспалительным и изъязвляющим заболеванием, возникающим в слизистой ободочной кишке, и характеризуется кровавым поносом. Эти воспалительные заболевания кишечника обычно вызываются хроническим гранулематозным воспалением в желудочно-кишечном тракте с образованием новых капиллярных протоков, окруженных цилиндрами воспалительных клеток. Ингибирование ангиогенеза с использованием фармацевтических составов по настоящему изобретению может ингибировать образование протоков и предотвращать образование гранулем. Воспалительные болезни кишечника также проявляются дополнительными кишечными проявлениями, такими как поражения кожи. Такие поражения характеризуются воспалением и ангиогенезом и могут появляться на множестве участков вне желудочно-кишечного тракта. Ингибирование ангиогенеза с использованием фармацевтических составов по настоящему изобретению может снижать приток воспалительных клеток и предотвращать образование поражений.

[00127] Саркоидоз, другое хроническое воспалительное заболевание, характеризуется как мультисистемное гранулематозное нарушение. Гранулемы при этом заболевании могут образовываться в любом месте организма и, таким образом, симптомы зависят от места расположения гранулем и участка активности заболевания. Гранулемы образуются, поскольку ангиогенные капиллярные протоки обеспечивают постоянный приток воспалительных клеток. Используя фармацевтические составы по настоящему изобретению для ингибирования ангиогенеза, можно ингибировать образование подобных гранулем. Псориаз, который также является хроническим рецидивирующим заболеванием, характеризуется папулами и бляшками разных размеров. Лечение с использованием фармацевтических составов по настоящему изобретению должно предотвращать образование новых кровеносных сосудов, необходимых для поддержания характерных поражений, и обеспечивать пациенту ослабление симптомов.

[00128] Ревматоидный артрит (РА) тоже является хроническим воспалительным заболеванием, характеризующимся неспецифическим воспалением периферических суставов. Считается, что кровеносные сосуды синовиальной оболочки суставов подвергаются ангиогенезу. Помимо образования новых сосудистых сетей, эндотелиальные клетки выпускают факторы и виды реактивного кислорода, которые приводят к росту паннуса и деструкции хряща. Факторы, вовлеченные в ангиогенез, могут давать активный вклад и поддерживать хронически воспаленное состояние при ревматоидном артрите. Лечение с использованием фармацевтических составов по настоящему изобретению по отдельности или совместно с другими противоревматоидными средствами может предотвращать образование новых кровеносных сосудов, необходимых для поддержания хронического воспаления, и обеспечивать больному РА ослабление симптомов.

[00129] В некоторых вариантах воплощения фармацевтические составы по настоящему изобретению могут использоваться для лечения заболеваний, ассоциированных с аномальным синтезом гемоглобина. Способ содержит введение фармацевтических составов по настоящему изобретению пациенту, страдающему от заболевания, ассоциированного с аномальным синтезом гемоглобина. Составы, содержащие децитабин, стимулируют синтез фетального гемоглобина, поскольку механизм инкорпорирования в ДНК связан с гипометилированием ДНК. Примеры заболеваний, ассоциированных с аномальным синтезом гемоглобина, включают, не ограничиваясь перечисленным, серповидноклеточную анемию и β-талассемию.

[00130] В некоторых вариантах воплощения фармацевтические составы по настоящему изобретению могут использоваться для контроля экспрессии внутриклеточного гена. Способ содержит введение фармацевтических составов по настоящему изобретению пациенту, страдающему от заболевания, ассоциированного с аномальными уровнями экспрессии гена. Метилирование ДНК ассоциировано с контролем экспрессии гена. В частности, метилирование в промоторе или рядом с ним ингибирует транскрипцию, в то время как деметилирование восстанавливает экспрессию. Примеры возможных применений описанных механизмов включают, не ограничиваясь перечисленным, терапевтически модулированное ингибирование роста, индуцирование апоптоза и дифференциацию клеток.

[00131] Активация гена, которой способствуют фармацевтические составы по настоящему изобретению, может индуцировать дифференциацию клеток для терапевтических целей. Клеточная дифференциация индуцируется посредством механизма гипометилирования. Примеры морфологической и функциональной дифференциации включают, не ограничиваясь перечисленным, дифференциацию в сторону образования мышечных клеток, мышечных трубочек, клеток эритроидного и лимфоидного ростка.

[00132] Миелодиспластические синдромы (МДС) являются гетерогенными нарушениями клональных гемопоэтических стволовых клеток, ассоциированными с наличием диспластических изменений в одном или более из гемопоэтических ростков, включая диспластические изменения миелоидной, эритроидной и мегакариоцитной серий. Эти изменения приводят к цитопении в одном или более из трех ростков. У субъектов, страдающих МДС, обычно развиваются осложнения, связанные с анемией, нейтропенией (инфекциями) или тромбоцитопенией (кровоточивостью). В общем примерно у 10%-70% субъектов с МДС развивается острый лейкоз. Типичные миелодиспластические синдромы включают острый миелолейкоз, острый промиелоцитарный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз и хронический миелогенный лейкоз.

[00133] Острый миелолейкоз (ОМЛ) является самым частым типом острого лейкоза у взрослых. С повышенным риском ОМЛ ассоциированы некоторые наследственные генетические нарушения и иммунодефицитные состояния. К ним относятся нарушения с дефектами стабильности ДНК, приводящие к случайным поломкам хромосом, такие как синдром Блума, анемия Фанкони, синдром Ли-Фраумени, атаксия-телеангиэктазия и X-связанная агаммаглобулинемия.

[00134] Острый промиелоцитарный лейкоз (ОПМЛ) представляет собой отдельную подгруппу ОМЛ. Этот подтип характеризуется промиелоцитарными бластами, содержащими хромосомную транслокацию 15; 17. Эта транслокация приводит к образованию слитого транскрипта, содержащего последовательность рецептора ретиноевой кислоты и последовательность промиелоцитарного лейкоза.

[00135] Острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) является гетерогенным заболеванием с отдельными клиническими признаками, отображающимися в различных подтипах. Было показано, что при ОЛЛ наблюдаются рецидивирующие цитогенетические аномалии. Наиболее частой ассоциированной цитогенетической аномалией является транслокация 9; 22, которая приводит к образованию филадельфийской хромосомы.

[00136] Хронический миелолейкоз (ХМЛ) является клональным миелопролиферативным нарушением плюрипотентных стволовых клеток, обычно вызываемым ионизирующим излучением. ХМЛ характеризуется специфической хромосомной аномалией, при которой происходит транслокация хромосом 9 и 22 с образованием филадельфийской хромосомы.

[00137] Соединения, описанные здесь, и составы с ними могут использоваться для обеспечения лечения по поводу МДС. В некоторых вариантах воплощения соединение или состав с ним могут обеспечивать лечение более чем одного МДС в одном введении. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

где L является фосфорсодержащим линкером, в котором количество атомов фосфора в L равно 1. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

[00138] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения миелодиспластического синдрома (МДС). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкоза или солидных опухолей. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения острого миелолейкоза (ОМЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения острого промиелоцитарного лейкоза (ОПМЛ) у субъекта. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ).

[00139] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения миелодиспластического синдрома (МДС). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкоза или солидных опухолей. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения острого миелолейкоза (ОМЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения острого промиелоцитарного лейкоза (ОПМЛ) у субъекта. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается использование соединения при изготовлении лекарственного средства для лечения хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ).

[00140] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении миелодиспластического синдрома (МДС). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении одного или более миелодиспластических синдромов, лейкоза или солидных опухолей. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении острого миелолейкоза (ОМЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении острого промиелоцитарного лейкоза (ОПМЛ) у субъекта. В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ). В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается соединение для использования при лечении хронического миелогенного лейкоза (ХМЛ).

[00141] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий: а) соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль:

[00142] В некоторых вариантах воплощения L имеет Формулу (II):

[00143] В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² независимо являются Н, ОН, ОМе, OEt, ОСН₂СН₂ОМе, OBn или F.

[00144] В некоторых вариантах воплощения X, вместе с атомами кислорода, с которыми связан X, образует сложный фосфодиэфир.

[00145] В некоторых вариантах воплощения R¹ и R² являются Н.

[00146] В некоторых вариантах воплощения соединение Формулы I является:

[00147] В некоторых вариантах воплощения растворитель содержит: приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола.

[00148] В некоторых вариантах воплощения состав практически безводен.

[00149] В некоторых вариантах воплощения соединение присутствует в концентрации от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 130-150 мг/мл.

[00150] В некоторых вариантах воплощения состав является раствором.

[00151] В некоторых вариантах воплощения состав сохраняет примерно 95% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 2-8°C или приблизительно 68% эффективности после хранения в течение 3 месяцев при 25°C и 60% относительной влажности.

[00152] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается состав, содержащий: а) соединение формулы:

[00153] В некоторых вариантах воплощения соединение существует в виде натриевой соли.

[00154] В некоторых вариантах воплощения растворитель является 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола.

[00155] В некоторых вариантах воплощения соединение присутствует в концентрации приблизительно 100 мг/мл.

[00156] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

[00157] В некоторых вариантах воплощения миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

[00158] В некоторых вариантах воплощения введение является подкожным введением.

[00159] В некоторых вариантах воплощения по изобретению предлагается способ лечения одного или более миелодиспластических синдромов, лейкемии или солидных опухолей, способ, включающий введение состава субъекту, нуждающемуся или испытывающему в этом потребность, состава, содержащего: а) терапевтически эффективное количество соединения формулы:

или его фармацевтически приемлемой соли; (б) растворитель, содержащий приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола, при этом растворитель практически безводен; и в) необязательно, фармацевтически приемлемый вспомогательный компонент. В некоторых вариантах воплощения, миелодиспластическим синдромом является острый миелолейкоз (ОМЛ), острый промиелоцитарный лейкоз (ОПЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) или хронический миелолейкоз (ХМЛ).

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1: Ингибирование метилирования ДНК соединениями по изобретению.

[00160] Деметилирующая активность соединений по изобретению испытывалась в клеточном анализе по зеленому флуоресцентному белку (GFP). По анализу снижение метилирования происходит при экспозиции ингибитору метилирования, что приводит к экспрессии GFP, уровень которого можно легко измерить.

[00161] Клеточная линия CMV-EE210, содержащая эпигенетически заглушенный трансген GFP, использовалась для анализа путем проточной цитометрии реактивации экспрессии GFP. CMV-EE210 была получена трансфекцией клеток NIH 3Т3 плазмидой pTR-UF/UF1/UF2, которая содержала pBS(+) (Stratagene, Inc.) с промотором цитомегаловируса (ЦМВ), управляющим гуманизированным геном GFP, адаптированным для экспрессии в клетках млекопитающих. После трансфекции клетки с высоким уровнем экспрессии GFP были выбраны с помощью клеточной флуоресцентной сортировки и отсортированы на цитометре MoFlo (Cytomation, Inc.).

[00162] Децитабин, активный ингибитор DNMT1 млекопитающих, использовался в качестве положительного контроля. Для скрининга реактивации CMV-EE210 в полную среду (DMEM без фенолового красного (Gibco, Life Technologies) с 10% добавкой фетальной телячьей сыворотки (Hyclone)) добавляли децитабин (1 мкМ) или испытуемое соединение (30-50 мкМ). Клетки были высеяны до 30%-й конфлюэнтности (~5000 клеток/лунку) в 96-луночный планшет, содержащий испытуемые соединения, после чего их выращивали трое суток при 37°C в 5% CO₂.

[00163] Планшеты были исследованы под флуоресцентным микроскопом с использованием 450-490 возбуждающим фильтром (13 фильтр куб, Leica, Deerfield, Иллинойс). Лунки оценивались как g1 положительные, g2 положительные или g3, если GFP экспрессировался в 10%, 30%, >75% жизнеспособных клеток, соответственно.

[00164] В Таблице 1 представлены результаты испытаний децитабина и испытуемых соединений в качестве ингибиторов метилирования ДНК. Под GFP₅₀ понимается концентрация ингибитора, при которой уровень экспрессии Зеленого Флуоресцентного Белка (GFP) снижается от g3 до g1/2. В таблице 1 показано, что испытанные соединения эффективно ингибировали метилирование ДНК в низких концентрациях, что приводило к реактивации транскрипции гена GFP.

ПРИМЕР 2: Стабильность репрезентативного соединения в составах растворителей.

[00165] Исследовалась стабильность соединения по изобретению в различных составах при различных условиях. Стабильность определялась по ВЭЖХ с предустановленными интервалами времени. В таблице 2 показаны результаты для составов, содержащих натриевую соль соединения I-1:

[00166] В случае раствора соединения I-1 в воде с рН 7, т.е. рН, при котором соединения этого класса наиболее стабильны, наблюдалось быстрое разложение в течение нескольких часов, даже при низких температурах. В случае ДМСО/воды (1:1) наблюдались несколько лучшие результаты при более высоких температурах. Улучшение наблюдалось при использовании состава 3:1 ДМСО/вода. Соединение было стабильным в безводном ДМСО. Подобная стабильность может облегчать производственный процесс.

[00167] При выборе фармацевтически приемлемых растворителей для итогового состава, готового для введения, наилучшая стабильность была достигнута в системе безводного пропиленгликоля/глицерина. Итоговый состав была получен путем замещения малых количеств пропиленгликоля и глицерина на этанол, до получения смеси пропиленгликоль/глицерин/этанол (65:25:10). Для данного состава наблюдалось существенное повышение растворимости и стабильности соединения как при высокой, так и при низкой температурах.

[00168] Исходя из экспериментов, проведенных в воде, ожидалось 10-кратное повышение стабильности при изменении условий хранения с комнатной температуры на более холодную (2-8°C). Однако для системы пропиленгликоль/глицерин/этанол (65:25:10) при изменении условий хранения с теплых на холодные достигалось 40-кратное повышение стабильности. При комбинировании эффектов охлаждения и введения этанола в систему пропиленгликоль/глицерин достигалось 66-кратное повышение стабильности. Такое существенное повышение стабильности соединения I-1 при хранении было неожиданным.

[00169] При растворении соединения I-1 в системе пропиленгликоль/глицерин/этанол (65:25:10) получался чистый, текущий раствор, проходящий через иглу 23 калибра без затруднения или засорения. Максимальная растворимость соединения в этой среде, как было определено, составляет приблизительно 130-150 мг/мл, что превосходит растворимость в воде, равную 20 мг/мл. Хорошая химическая стабильность вместе с превосходной растворимостью делают систему гликоль/глицерин/этанол (65:25:10) пригодной для использования в экспериментах на животных.

ПРИМЕР 3: Исследования на животных с использованием состава из ПРИМЕРА 2.

[00170] Состав гликоль/глицерин/этанол (65:25:10) по ПРИМЕРУ 2, содержащий 100 мг/мл эквивалента свободного основания в виде натриевой соли соединения I-1, вводился живым животным. Для сравнения применялся аналогичный состав с децитабином (50 мг лиофилизированного порошка децитабина на флакон, восстановленного до 10 мг/мл водой для инъекций и вводившегося в виде инфузий при разбавлении в инфузионных пакетах).

[00171] При введении одной дозы состава обезьянам (10 мг/кг) достигались более высокие физиологические концентрации соединения I-1 (C_max 1130 нг/мл; AUC 1469 нг*ч/мл), чем децитабина (C_max 160 нг/мл; AUC 340 нг·ч/мл).

[00172] В исследовании повторной дозы обезьянам вводили дозу 3 раза в неделю подкожно (3 мг/кг). На 15 сутки системная экспозиция для соединения I-1 (C_max 181 нг/мл; AUC 592 нг*ч/мл) была выше, чем для децитабина (C_max 28 нг/мл; AUC 99 нг·ч/мл). Фармакокинетические параметры соединений не варьировались значительно в течение 22 суток периода наблюдения, и была установлена минимальная аккумуляция (ФИГУРЫ 1 и 2.) Отслеживались фармакодинамические характеристики (не показаны), которые были приемлемы. Периодически брались образцы крови для определения метилирования ДНК LINE-1.

[00173] Наблюдалось снижение метилирования ДНК LINE-1, что служит показателем биологической активности, и это снижение длилось до прекращения исследования на 22 сутки. Наблюдаемое метилирование LINE-1 значительно отличалось (р<0,05) от уровня метилирования, наблюдавшегося до первичного введения дозы (ФИГУРА 3).

[00174] Составы хорошо переносились испытанными видами. Оценивались три режима: а) один раз в сутки подкожной дозой крысам и кроликам в течение 5 дней; б) один раз в неделю подкожной дозой кроликам и яванским макакам в течение 28 дней по мере переносимости; и в) два раза в неделю подкожной дозой крысам в течение 28 дней по мере переносимости. Кролики хорошо переносили 5-дневный режим вплоть до дозы 1,5 мг/кг/сутки, которая эквивалентна 18 мг/кг/сутки для человека, и режим введения раз в неделю вплоть до дозы 1,5 мг/кг/неделю в течение 3 недель.

[00175] Яванские макаки хорошо переносили режим введения раз в неделю вплоть до дозы 3,0 мг/кг/неделю в течение 3 недель, которая эквивалентна 36 мг/кг/неделю. Крысы переносили гораздо более высокие дозы: 30 мг/кг/сутки в течение 5 дней и 20 мг/кг два раза в неделю в течение 4 недель.

[00176] Основная токсичность во всех экспериментах была связана с миелосупрессией. Однако состав для подкожного введения показывал меньшую миелосупрессию и наблюдалось более быстрое восстановление.

ПРИМЕР 4: Изготовление набора по изобретению

Первый сосуд: Соединение формулы I-1 для инъекций, 100 мг

[00177] Натриевая соль соединения формулы:

была получена так, как описано в US 7700567 (содержание которого включено сюда посредством ссылки), связыванием 1s (где R₁ = карбаматная защитная группа) с фосфорамидитным структурным блоком 1d:

,

[00178] Защищенная твердая 2′-дезоксигуанозин-связанная подложка из стекла с контролируемым размером пор 1s (где R₁ = трет-бутилфеноксиацетил) была связана с 2-2,5 эквивалентами феноксиацетилдецитабина фосфорамидита (1d, где R₁ = феноксиацетил) в присутствии 60% 0,3 М бензилтиотетразольного активатора (в ацетонитриле) в течение 10 минут. Твердая подложка из стекла с контролируемым размером пор, содержащая защищенный динуклеотид DpG, была обработана 20 мл 50 мМ K₂CO₃ в метаноле в течение 1 часа и 20 минут. Спаренный продукт был окислен, защитная группа была удалена, и полученное соединение было промыто, профильтровано и очищено ВЭЖХ на AKTA Explorer 100 с препаративной колонкой Gemini С18 (Phenomenex), 250×21,2 мм, 10 мкм с защитной колонкой (Phenomenex), 50×21,2 мм, 10 мкм, с 50 мМ триэтиламмония ацетата (рН 7) в воде MilliQ (подвижная фаза А) и 80% ацетонитрила в воде MilliQ (подвижная фаза В), с 2% - 20/25% подвижной фазы В на объем колонки.

[00179] МС-ИЭР динуклеотида DpG 2b:

,

где Х⁺ = триэтиламмоний (расчетная точная масса нейтрального соединения C₁₈H₂₄N₉O₁₀P составляет 557,14), установленная m/z 556,1 [М-Н]^- и 1113,1 для [2М-Н]^- (см. масс-спектр на Фигуре 31 патента US 7700567).

[00180] Натриевая соль соединения формулы I-1, т.е. динуклеотида DpG 2b, где Х⁺ = натрий, была получена повторным растворением триэтиламмонийной соли в 4 мл воды и 0,2 мл 2М раствора NaClO₄. После добавления 36 мл ацетона динуклеотид выпадал в осадок. Раствор сохраняли при -20°C в течение нескольких часов и центрифугировали при 4000 оборотов/мин. в течение 20 минут. Супернатант отбрасывали, а твердый осадок промывали 30 мл ацетона с последующим дополнительным центрифугированием при 4000 оборотов/мин. в течение 20 минут. Осадок, который был растворен в воде и высушен при замораживании, обладал m/z 556,0 [М-Н]^- (см. масс-спектр на Фигуре 36 патента US 7700567).

Приготовление и наполнение нефасованного состава

[00181] 1. Исходя из количественного анализа партии натриевой соли соединения формулы I-1, рассчитывались и навешивались необходимые для серии количества соли и ДМСО.

[00182] 2. Натриевую соль соединения формулы I-1 растворяли в ДМСО при помощи вертикальной мешалки в подходящем по размеру сосуде из нержавеющей стали (SS).

[00183] 3. После полного растворения препарата в ДМСО образцы нефасованного раствора были испытаны УФ- и ВЭЖХ-текущим контролем для подтверждения того, что количество натриевой соли соединения формулы I-1 находится в пределах 95-105% от целевой концентрации.

[00184] 4. Нефасованный раствор фильтровали через набор из двух предварительно стерилизованных стерилизующих фильтров по 0,2 микрон, совместимых с ДМСО, и собирали в буферный сосуд из нержавеющей стали вместимостью 2 л.

[00185] 5. Скорость фильтрования постоянно корректировали путем визуального контроля количества, доступного для наполнения, имеющегося в буферном сосуде.

[00186] 6. По одному грамму профильтрованного нефасованного раствора наполняли в депирогенизированные прозрачные стеклянные флаконы вместимостью 5 куб. см и операцию продолжали до расфасовывания всего профильтрованного нефасованного раствора.

[00187] 7. Каждый флакон автоматически и частично укупоривали на линии наполнения предварительно простерилизованными пробками из хлорбутиловой резины с фторполимерным покрытием.

[00188] 8. Флаконы с продуктом были перенесены в лиофилизатор в асептических условиях переноса и приступали к циклу лиофилизации.

Лиофилизация и укупорка флаконов

[00189] 1. Флаконы были лиофилизированы с параметрами цикла, указанными ниже.

[00190] 2. По завершении цикла лиофилизации лиофилизатор был заполнен противотоком азота, и флаконы были окончательно и автоматически укупорены.

[00191] 3. Флаконы были асептически перенесены в изолятор, в котором каждый флакон был автоматически закрыт синей алюминиевой откидной крышкой.

[00192] 4. Флаконы проходили визуальный контроль перед передачей на отбор для выпускной проверки и операций маркировки и упаковки. До готовности флаконы сохранялись при 2-8°С.

Маркировка и упаковка

[00193] Каждый флакон маркировался в соответствии с содержимым и упаковывался под вакуумом отдельно в термоусадочный пакет из алюминиевой фольги с осушителем. Пакет из фольги помечался снаружи такой же этикеткой, что и флакон с продуктом. Промаркированные и упакованные флаконы сохранялись при 2-8°C до дальнейшего распределения.

Остаточный ДМСО

[00194] По процессу, описанному выше, были произведены четыре серии одного размера по 3000 флаконов/серию. ДМСО последовательно удаляли до следующих остаточных уровней для получения твердого белого порошка, что свидетельствует о том, что лиофилизация натриевой соли соединения формулы I-1 из ДМСО, как описано выше, дает безопасную и химически стабильную натриевую соль соединения формулы I-1 в виде порошка:

№	ДМСО, мг/флакон
Серия 1	25
Серия 2	28
Серия 3	27
Серия 4	29

Второй сосуд: Растворитель для восстановления натриевой соли соединения формулы I-1, 3 мл

[00195] 1. Расчетные количества (см. таблицу ниже) пропиленгликоля, этанола и глицерина в указанном выше порядке добавлялись в сосуд подходящего размера из нержавеющей стали с вертикальной мешалкой.

[00196] 2. После периодического перемешивания во время добавления компонентов смесь перемешивали в течение по меньшей мере 30 минут для получения хорошо перемешанного раствора.

[00197] 3. Нефасованный раствор фильтровали через набор из двух предварительно стерилизованных совместимых стерилизующих фильтров по 0,2 микрон и собирали в буферный сосуд из нержавеющей стали вместимостью 2 л.

[00198] 4. Скорость фильтрования корректировали путем визуального контроля количества, доступного для наполнения, имеющегося в буферном сосуде.

[00199] 5. По меньшей мере по 3,15 г, что соответствует 3,0 мл, профильтрованного нефасованного раствора наполняли в депирогенизированные прозрачные стеклянные флаконы вместимостью 5 куб. см с последующей автоматической укупоркой пробками из хлорбутиловой резины с фторполимерным покрытием.

[00200] 6. Укупоренные флаконы закрывались простерилизованными белыми откидными алюминиевыми крышками.

[00201] 7. Флаконы проходили визуальный контроль перед передачей на отбор для выпускной проверки и операций маркировки и сохранялись до готовности при 2-30°C.

Маркировка и упаковка

[00202] Каждый растворитель помечался согласно утвержденному составу. Промаркированные флаконы сохранялись при 2-30°C до дальнейшего распределения.

Claims

1. Состав для лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, содержащий:
(а) соединение формулы:

или его фармацевтически приемлемую соль; растворенное в
(б) практически безводном растворителе, содержащем от приблизительно 60% до 70% пропиленгликоля, от приблизительно 20% до 30% глицерина и от приблизительно 5% до 15% этанола (мас./мас./мас.).

2. Состав по п. 1, где указанный растворитель содержит от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и от 5% до 15% этанола (мас./мас./мас.).

3. Состав по п. 1, где указанный растворитель состоит по существу из приблизительно от 60% до 70% пропиленгликоля, приблизительно от 20% до 30% глицерина и приблизительно от 5% до 15% этанола (мас./мас./мас.).

4. Состав по п. 1, где указанный растворитель состоит по существу из от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и от 5% до 15% этанола (мас./мас./мас.).

5. Состав по п. 1, где указанный растворитель представляет собой приблизительно от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и приблизительно от 5% до 15% этанола (мас./мас./мас.).

6. Состав по п. 1, где указанный растворитель представляет собой от 60% до 70% пропиленгликоля, от 20% до 30% глицерина и от 5% до 15%) этанола (мас./мас./мас.).

7. Состав по п. 1, где указанный растворитель содержит приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола (мас./мас./мас.).

8. Состав по п. 1, где указанный растворитель содержит 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола (мас./мас./мас.).

9. Состав по п. 1, где указанный растворитель состоит по существу из приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола (мас./мас./мас.).

10. Состав по п. 1, где указанный растворитель состоит по существу из 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола (мас./мас./мас.).

11. Состав по п. 1, где указанный растворитель представляет собой приблизительно 65% пропиленгликоля, приблизительно 25% глицерина и приблизительно 10% этанола (мас./мас./мас.).

12. Состав по п. 1, где указанный растворитель представляет собой 65% пропиленгликоля, 25% глицерина и 10% этанола (мас./мас./мас).

13. Состав по любому из предшествующих пунктов, где указанная соль является натриевой солью.

14. Состав по любому из пп. 1-12, где соединение присутствует в концентрации от приблизительно 80 мг/мл до приблизительно 110 мг/мл, необязательно, приблизительно 100 мг/мл.

15. Состав по любому из пп. 1-12, который дополнительно содержит ДМСО, необязательно, в соотношении ДМСО:соединение, равном приблизительно 2 : приблизительно 1, приблизительно 1 : приблизительно 1, приблизительно 0,5 : приблизительно 1, приблизительно 0,3 : приблизительно 1 или приблизительно 0,2 - приблизительно 0,3 : приблизительно 1.

16. Состав по любому из пп. 1-12, пригодный для введения путем подкожной инъекции.

17. Набор для лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, содержащий:
(а) первый контейнер, содержащий соединение, как определено в п. 1 или 13;
(б) второй контейнер, содержащий практически безводный растворитель, как определено в любом из пп. 1-12.

18. Набор по п. 17, где соединение находится в форме практически безводного порошка.

19. Набор по п. 18, где соединение лиофилизировано.

20. Набор по любому из пп. 17-19, где в первом контейнере содержится от приблизительно 80 мг до приблизительно 110 мг указанного соединения.

21. Набор по любому из пп. 17-19, где в первом контейнере содержится приблизительно 100 мг указанного соединения.

22. Набор по любому из пп. 17-19, который дополнительно содержит инструкции по введению путем подкожной инъекции.

23. Набор по п. 18 или 19, где практически безводный порошок состоит по существу из указанного соединения и ДМСО, при этом ДМСО присутствует в количестве вплоть до приблизительно 200% мас./мас.

24. Набор по п. 23, где ДМСО присутствует в количестве вплоть до приблизительно 100%, до приблизительно 60%, до приблизительно 50%, до приблизительно 40% или до приблизительно 30% мас./мас. ДМСО/соединение.

25. Набор по п. 24, где ДМСО присутствует в количестве приблизительно 20% - приблизительно 30% мас./мас. ДМСО/соединение.

26. Способ получения фармацевтической композиции для лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, включающий растворение соединения, как оно определено в п. 1 или 13, или практически безводного порошка, как он определен в пп. 18 и 23-25, в практически безводном растворителе, как он определен в любом из пп. 1-12.

27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что дополнительно включает этапы:
(а) растворения указанного соединения в ДМСО с получением раствора указанного соединения в ДМСО; и
(б) лиофилизации указанного раствора, полученного на этапе (а), для получения указанного соединения в виде практически безводного порошка.

28. Фармацевтическая композиция для лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, полученная способом по п. 26 или 27.

29. Способ лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкемии или солидной опухоли, содержащий введение состава по любому из пп. 1-16, набора по любому из пп. 17-25 или композиции по п. 28 субъекту, нуждающемуся в этом или испытывающему в этом потребность.

30. Способ по п. 29, где введение представляет собой подкожное введение.

31. Применение состава по любому из пп. 1-16, набора по любому из пп. 17-25 или композиции по п. 28 для лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкоза или солидной опухоли, где указанное применение включает введение указанного состава или композиции субъекту.

32. Применение по п. 31, где введение представляет собой подкожное введение.

33. Применение состава по любому из пп. 1-16, набора по любому из пп. 17-25 или композиции по п. 28 для получения лекарственного средства для применения в способе лечения рака, миелодиспластического синдрома, лейкоза или солидной опухоли, где указанный способ включает введение указанного состава или композиции субъекту.

34. Применение по п. 33, где введение является подкожным введением.