RU2236441C2 - Способ экстракции липидов (варианты), экстракт липидов криля и полная липидная фракция (варианты) - Google Patents

Способ экстракции липидов (варианты), экстракт липидов криля и полная липидная фракция (варианты) Download PDF

Info

Publication number
RU2236441C2
RU2236441C2 RU2001113503A RU2001113503A RU2236441C2 RU 2236441 C2 RU2236441 C2 RU 2236441C2 RU 2001113503 A RU2001113503 A RU 2001113503A RU 2001113503 A RU2001113503 A RU 2001113503A RU 2236441 C2 RU2236441 C2 RU 2236441C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
lipid
marine
extraction
solvent
products
Prior art date
Application number
RU2001113503A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2001113503A (ru
Inventor
Адриен БОДУАН (CA)
Адриен БОДУАН
Женевьев МАРТЭН (CA)
Женевьев МАРТЭН
Original Assignee
Юниверситэ де Шербрук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=4162941&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2236441(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Юниверситэ де Шербрук filed Critical Юниверситэ де Шербрук
Publication of RU2001113503A publication Critical patent/RU2001113503A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2236441C2 publication Critical patent/RU2236441C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
    • C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
  • Edible Oils And Fats (AREA)
  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)

Abstract

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно, к масложировой промышленности. Способ экстракции всех липидных фракций из материала морских и пресноводных животных включает помещение материала в кетоновый растворитель, разделение жидкого и твердого содержимого, извлечение первой богатой всеми липидами фракции из жидкого содержимого выпариванием растворителя, помещение указанного твердого содержимого в органический растворитель, выбранный из группы растворителей, состоящей из спирта, разделение жидкого и твердого содержимого, извлечение второй богатой всеми липидами фракции выпариванием растворителя из жидкого содержимого, извлечение твердого содержимого. Вышеописанным способом выделяют липидную фракцию из зоопланктона и рыбы. Экстракт липидов криля с содержанием каротиноидов в расчете на астаксантин составляет 75 мкг/г или более экстракта криля, а содержание каротиноидов в расчете на кантаксантин составляет 250 мкг/г или более экстракта криля. Полная липидная фракция, свободная от токсичных растворителей, экстрагированная из морских или пресноводных животных. Изобретение позволяет повысить выход липидов при экстракции. 9 с. и 45 з.п. ф-лы, 20 ил., 19 табл.

Description

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение касается экстракции липидных фракций из морских и пресноводных животных, таких как криль, Calanus, рыба и морские млекопитающие. Более конкретно данное изобретение относится к улучшенному способу экстракции липидных фракций посредством дегидратации растворителями и выделения твердого остатка, богатого активными ферментами.
ИЗВЕСТНЫЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Липидные фракции, полученные из морских и пресноводных животных, таких как криль, Calanus, рыба и морские млекопитающие, находят разнообразные применения
Применения в медицине
Масла морских и пресноводных животных и их фракции содержат различные терапевтические средства. Например, сообщается, что различные масла морских и пресноводных животных обладают противовоспалительными свойствами. Также сообщается, что масла морских и пресноводных животных полезны для снижения частоты сердечно-сосудистых заболеваний. Кроме того, сообщается, что некоторые масла морских и пресноводных организмов подавляют развитие некоторых форм волчанки и болезней почек. В качестве дополнительного примера криль может использоваться как источник ферментов для очищения язв и ран, или облегчения переваривания пищи. Также масла морских и пресноводных животных содержат различные антиоксиданты, которые могут обладать потенциальными терапевтическими свойствами.
Пищевые продукты, обладающие лекарственными свойствами
Учитывая целебные действия омега-3 жирных кислот, масла криля, Calanus и рыб можно использовать в качестве диетических добавок к пище человека. Эти жирные кислоты необходимы для правильного развития мозга и глаз. Масла морских и пресноводных животных также богаты жирорастворимыми витаминами A, D и Е и каротиноидами.
Косметические средства
Различные масла морских и пресноводных животных используются для приготовления увлажняющих кремов.
Разведение рыбы
Среди липидов, обнаруженных в криле, Calanus и рыбе, в высокой концентрации присутствуют жирные кислоты 20:5 (эйкозапентаеновая кислота) и 22:6 (докозогексаеновая кислота). Данные жирные кислоты являются важными питательными веществами и полезны в качестве корма для рыб. Кроме того, эти важные питательные вещества переходят в пищу человека при питании рыбой, выращенной на таких кормах.
Корм для животных
Рационы питания животных, обогащенные омега-3 жирными кислотами, могут увеличивать уровень ненасыщенных жирных кислот и снижать уровень холестерина в мясе. Данное свойство уже используется в производстве домашней птицы, чтобы улучшить качество яиц.
Известны различные способы экстракции масел морских и пресноводных животных. Например, известно, что рыбий жир экстрагируют с использованием таких органических растворителей, как гексан и этанол. Также известно, что содержание жира в мышечной ткани рыб измеряется с использованием таких растворителей, как ацетон.
В патенте США 4331695 описан способ, в котором используются растворители под давлением, которые являются газообразными при комнатной температуре, такие как пропан, бутан или гексан. Экстракцию выполняют при предпочтительных температурах от 15 до 80°C на перемолотых растительных или тонко измельченных животных продуктах. Затем экстрагированные масла переводят в осадок при высоком давлении и повышенных температурах от 50 до 200°С. Однако гексан является плохим растворителем для экстракции из морских животных, таких как криль. Кроме того, высокие температуры, используемые на этапе осаждения, приводят к негативным изменениям липидов.
В заявке на патент Канады 2115571 описан способ экстракции масел из различных видов бурых и красных водорослей. В способе предлагается, например, экстракция по Сокслету с использованием почти чистого этанола в течение 40 часов.
В патенте США 5006281 описан способ экстракции масла из морских и пресноводных животных, таких как рыбы. Морское и пресноводное животное сначала обрабатывают антиоксидантным соединением, тонко измельчают и центрифугируют, чтобы отделить масляную фазу от водной фазы и твердой фазы. Затем масляную фазу дополнительно обрабатывают антиоксидантом, чтобы удалить нежелательный запах или вкус.
В патенте Канады 1098900 описан способ экстрагирования масел из криля. Способ включает эмульгирование свежего или размороженного криля в водной среде. Масляную фракцию выделяют центрифугированием.
Folch в статье, опубликованной в 1957 году в J. biol. Chem. 226: 497-509 "A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues" предлагает способ экстракции с использованием хлороформа и метанола. Данный способ невозможен в промышленном масштабе из-за токсичности используемых растворителей.
Однако способы предшествующего уровня техники в основном невыполнимы в промышленном масштабе или дают низкий количественный выход. Таким образом, целью настоящего изобретения является обеспечение усовершенствованного способа экстракции масел морских и пресноводных животных, позволяющего извлекать ценную липидную фракцию и отдельно получать твердый остаток, обогащенный полезными белками, который содержит активные ферменты.
Другие цели и дополнительные рамки применения настоящего изобретения станут очевидными из детального описания, приведенного ниже. Однако следует понимать, что данное детальное описание, хотя и показывает предпочтительные варианты изобретения, дается только с целью иллюстрации, поскольку специалистам в данной области станут очевидными различные изменения и модификации в рамках сути и объема изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фигура 1. Газожидкостная хроматография жирных кислот из сушеного криля (хлороформ-метанол).
Фигура 2. Газожидкостная хроматография жирных кислот из сушеного криля (ацетон).
Фигура 3. Газожидкостная хроматография жирных кислот из замороженного криля (ацетон).
Фигура 4. Газожидкостная хроматография жирных кислот из замороженного криля (этанол).
Фигура 5. Газожидкостная хроматография жирных кислот из замороженного криля (трет-бутанол).
Фигура 6. Газожидкостная хроматография жирных кислот из замороженного криля (этилацетат).
Фигура 7. Тонкослойная хроматография нейтральных липидов Calanus sp. и М. norvegica.
Фигура 8. Тонкослойная хроматография нейтральных липидов Е. pacifica.
Фигура 9. Тонкослойная хроматография нейтральных липидов М. schmitti.
Фигура 10. Тонкослойная хроматография нейтральных липидов G. galeus.
Фигура 11. Тонкослойная хроматография нейтральных липидов морского ангела.
Фигура 12. Тонкослойная хроматография фосфолипидов Calanus sp. и М. norvegica.
Фигура 13. Тонкослойная хроматография фосфолипидов Е. pacifica.
Фигура 14. Тонкослойная хроматография фосфолипидов М. schmitti.
Фигура 15. Тонкослойная хроматография фосфолипидов G. galeus.
Фигура 16. Тонкослойная хроматография фосфолипидов морского ангела.
Фигура 17. Влияние объема ацетона на экстракцию липидов (Е. pacifica).
Фигура 18. Влияние времени инкубации в ацетоне на экстракцию липидов (Е. pacifica).
Фигура 19. Влияние объема этанола на экстракцию липидов (Е. pacifica).
Фигура 20. Влияние времени инкубации в этаноле на экстракцию липидов (Т. raschii).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНОГО ВАРИАНТА
Перед подробным описанием настоящего изобретения следует понять, что изобретение не ограничено в своих применениях описанным здесь в деталях способом. Изобретение допускает другие варианты реализации и использования на практике различным образом. Также следует понимать, что используемая здесь фразеология или терминология предназначена для описания, а не для ограничения.
Способ изобретения включает в себя суспендирование свежесобранного морского или пресноводного материала в ацетоне. Липиды экстрагируются кетоном, таким как ацетон. Это дает возможность для быстрой дегидратации животной ткани и миграции липидной фракции в растворитель. Сухой остаток является ценным продуктом, богатым активными ферментами.
В предпочтительном варианте экстракцию проводят последовательными обработками ацетоном и спиртом. Предпочтительными спиртами являются изопропанол и трет-бутанол. Спирт также может быть заменен сложным эфиром уксусной кислоты, таким как этилацетат. Такая методика дает две последовательные липидные фракции и сухой остаток, обогащенный белком, включая активные ферменты. Извлечение суммарных липидов сравнимо с процедурой Folch et al. (1957), описанной в разделе "Известный уровень техники". Способ тестировали на криле, Calanus, тканях рыб и акул.
Неожиданно было обнаружено, что последовательные экстрагирующие обработки, которые предлагаются в настоящем изобретении, дают лучший выход при экстракции липидов, чем экстракции в системе одного растворителя. Экстракция с использованием двух последовательных растворителей, которая начинается кетоном, таким как ацетон, обладает особым преимуществом, поскольку ацетон в сущности дегидратирует животную ткань. Наличие животной ткани в дегидратированной форме значительно облегчает процесс экстракции вторым растворителем, спиртом или сложным эфиром уксусной кислоты, таким как этилацетат.
В случае зоопланктона, такого как криль и Calanus, и в случае побочных продуктов разделки рыбы на филе, таких как внутренности рыб, отмечается, что экстракция одним ацетоном может быть достаточна, чтобы дать возможность для рентабельного извлечения липидных фракций и отдельного получения сухого твердого продукта, богатого белками, включая активные ферменты.
Далее будет описан общий способ экстракции данного изобретения. Исходный материал, состоящий из свежесобранного и предпочтительно тонко измельченного материала морских и пресноводных животных, подвергают экстракции ацетоном в течение примерно двух часов и предпочтительно в течение ночи. Однако время экстракции не является критическим для выхода продукта экстракции липидов. Чтобы облегчить экстракцию, предпочтительно использовать частицы меньше 5 мм в диаметре. Экстракцию предпочтительно проводят в инертной атмосфере и при температуре порядка примерно 5°С или ниже.
Предпочтительно начало экстракции проводят при перемешивании в течение примерно от 10 до 40 минут, предпочтительно 20 минут. Хотя время экстракции не является критическим, было обнаружено, что наилучшей является 2-часовая экстракция при объемном отношении ацетона к материалу морских или пресноводных животных 6:1.
Солюбилизированные липидные фракции отделяют от твердого материала с использованием стандартных технологий, включая, например, фильтрацию, центрифугирование или осаждение. Предпочтительно используют фильтрацию.
После разделения фильтрацией на устойчивом к органическим растворителям фильтре (металл, стекло или бумага) остаток необязательно промывают чистым ацетоном, предпочтительно двумя объемами (исходный объем материала), чтобы извлечь еще больше липидов. Объединенные фильтраты выпаривают при пониженном давлении. Необязательно можно использовать однократное испарение или распылительную сушку. Водному остатку, полученному после выпаривания, дают возможность отделиться от масляной фазы (фракция I) при низкой температуре.
Твердый остаток, собранный на фильтре, суспендируют и экстрагируют спиртом, таким как этанол, изопропанол, трет-бутанол, или, в альтернативном случае, этилацетатом, предпочтительно двумя объемами (исходный объем материала). Фильтрат выпаривают, получая вторую фракцию липидов (обозначенную как фракция II). Хотя длительность экстракции не является критической, было обнаружено, что время экстракции примерно 30 минут является достаточным при температурах ниже примерно 5°С.
Температура органических растворителей, за исключением трет-бутанола, и температура образца не являются критическими параметрами, но предпочтительно, чтобы они были как можно холоднее. Однако в случае трет-бутанола, который является твердым веществом при комнатной температуре, важно нагреть его перед использованием и сразу же выполнить экстракцию при 25°С.
Сравнительные примеры
Чтобы сравнить эффективность способов экстракции, к крилю была применена классическая технология (Folch et al. 1957) с использованием хлороформа и метанола. Данный способ является эталоном для измерения эффективности способа экстракции. Другое сравнение было проведено с технологией, использующей в качестве растворителя при экстракции гексан. Извлечение липидов оценивали путем суспендирования липидных фракций в небольших объемах их исходных растворителей и гравиметрического измерения небольших аликвот после выпаривания.
Для всех предоставленных здесь примеров способ настоящего изобретения включает в себя экстракцию ацетоном с последующей экстракцией вторым растворителем (например, этил-ацетатом), давая полупрозрачное масло, имеющее вид и свойства более привлекательные, чем у любого масла, полученного с помощью классической технологии Folch et al. (1957).
Чтобы проанализировать липидный состав, 780 мкг каждого экстракта наносили на пластинки силикагеля и фракционировали тонкослойной хроматографией, ТСХ (Bowyer et al. 1962) следующими растворителями. Нейтральные липиды: гексан, этиловый эфир, уксусная кислота (90:10:1, об./об.) и фосфолипиды: хлороформ, метанол, вода (80:25:2, об./об.). Состав жирных кислот Е. pacifica анализировали газожидкостной хроматографией, ГЖХ (Bowyer et al. 1962), включающей некоторые модификации исходной технологии: 2 ч при 65°С вместо 1 ч при 80°С, три промывки гексаном вместо двух и отсутствие промывки водой.
Чтобы избавиться от следов органических растворителей, лилидные фракции I и II нагревали примерно до 125°С в течение примерно 15 минут в инертной атмосфере.
Жир анализировали в соответствии с методикой AOCS (American Oil Chemist's Society). Для анализа экстрагированных липидов использовали следующие критерии: число омыления и йодное число Wijs, и уровни содержания влаги - летучего материала. Также определяли содержание холестерина методом Plummer 1987. Такие же и другие анализы были сделаны независимой лабораторией, которой заведует профессор Роберт Акман (Robert Ackman, Canadian Institute of Fisheries Technology, DalTech, Dalhousie University, Halifax, Nova Scotia, Canada). Данные анализы включают йодное число Wijs, значения пероксида и анизидина, состав классов липидов, состав жирных кислот, содержание МЭЖК свободных жирных кислот, холестерина, токоферола, всего транс-ретинола, холекальциферола, астаксантина и кантаксантина.
В таблице 1 показано, что более высокие уровни липидов экстрагируются из сушеного криля ацетоном, а затем этанолом по сравнению с классической процедурой Folch et al. (1957).
В таблице 2 показаны результаты экстракции липидов из замороженных Euphausia pacifica, вида криля из Тихого океана. Если допустить, что содержание воды составляет восемьдесят процентов, содержание липидов сравнимо с сушеным крилем, как показано в таблице 1. Изопропанол, трет-бутанол и этил-ацетат в качестве растворителя для второй экстракции дают менее существенный выход, чем этанол, но не обязательно являются менее эффективными при извлечении липидов, так как этанол несет больше примесей, чем изопропанол, трет-бутанол или этилацетат. Значит, они также могут быть использованы в качестве второго растворителя после ацетона. Различия между результатами ацетоновых экстракций главным образом обусловлены разделением фаз вода-масло. На эти разделения влияет количество остаточного ацетона в водно-масляном растворе после выпаривания ацетона. Это количество ацетона варьирует от одного эксперимента к другому, поскольку система выпаривания, используемая в небольшом масштабе, менее воспроизводима (в промышленном масштабе этап выпаривания будет оптимизирован). Также были испытаны растворители по отдельности на экстракцию всего количества липидов из криля. При этом видно, что этилацетат (степень экстракции 1,37%), так же как гексан в отдельности (степень экстракции 0,23%) не являются достаточно хорошими растворителями по сравнению с ацетоном в отдельности (степень экстракции 1,86%, и даже более высокие степени экстракции при эффективной системе выпаривания ацетона).
Одним из основных преимуществ процедуры является удаление бактерий из экстрактов (липидная фракция и твердый, богатый белками материал). Действительно, образцы Е. pacifica, инкубированные при различных соотношениях ацетона при 4°С в течение 112 дней, высевали на среду NA, содержащую 0,3% мясного экстракта BactoTM, 0,5% пептона BactoTM и 1,5% агара BactoTM (Difco Laboratories, Detroit, USA), затем инкубировали при комнатной температуре или 4°С в течение 18 дней. Не наблюдалось значительного бактериального роста при соотношении 1 объема ацетона на грамм криля. При более высоких пропорциях ацетона (2 объема и 5 объемов) вообще не было бактериального роста, что означает, что ацетон консервирует образцы криля. Ацетон известен как эффективное бактерицидное и противовирусное средство (Goodman et al. 1980).
В таблице 3 показаны выходы липидов из М. norvegica. Процент липидов (3,67%) сравним с процентом, полученным с Е. pacifica (3,11%), показанным в таблице 2. Отклонения могут быть отнесены на счет питания и времени (сезона) сбора, которые отличаются для этих двух видов.
В таблице 4 показано влияние измельчения на эффективность экстракции липидов М. norvegica. Данные экстракции проводили при оптимальных условиях, и они показали несомненное преимущество данной процедуры над классическим способом (4,46% против 3,30%). Также показано, что измельчение может быть важным фактором в том случае, когда вид крупный (4,46% против 3,53%).
В таблице 5 представлены данные по экстракции липидов из Calanus. Были получены большие количества липидов. Некоторые вариации в составе вида Calanus могут объяснить различия между экспериментами 1 и 2 (8,22% и 10,90% сырого веса).
В таблицах 6-8 сообщается об общем количестве липидов, экстрагированных из ткани рыб. Способ данного изобретения был продемонстрирован на макрели, форели и сельди. Способ был продемонстрирован на периферических тканях (главным образом мышцах) и внутренностях. Преимущественно данное изобретение позволяет извлекать ценные липидные фракции из частей рыбы, которые обычно идут в отходы после изъятия филейных частей рыбы. Такие ткани рыб, не используемые после переработки рыбы для потребления человеком, можно хранить в ацетоне, и из них можно экстрагировать липиды согласно данному изобретению, даже если способ Folch [1957] извлекает больше липидов, чем способ заявителей. Действительно небольшие количества липидов были экстрагированы из макрели (0,52% из внутренностей и 1,45% из тканей) способом Folch после первой экстракции ацетоном и этанолом, как описано в данном изобретении. Сравнительные экстракции способом, описанным в данном изобретении, выполненные в параллели со способом Folch на форели и сельди, показали большее извлечение последним способом. Однако заслуживает внимания тот факт, что способ Folch не может применяться для извлечения липидов для коммерческого использования (вследствие токсичности).
В таблицах с 9 по 11 показаны результаты экстракции липидов из тканей печени акулы. Для этого вида нет заметных различий в результатах между технологиями.
В таблице 12 показаны некоторые характерные свойства фракции I (ацетон) и фракции II (спирт или этилацетат) масла криля (Е. pacifica). Прежде всего, число омыления фракции I (130,6) свидетельствует о том, что данная фракция содержит жирные кислоты с более длинными цепями по сравнению с фракцией II (185,7). Йодное число Wijs фракции I показывает, что данная фракция содержит высокие уровни полиненасыщенных жирных кислот по сравнению с оливковым маслом, которое имеет число 81.1. Это объясняет, почему фракция I является жидкой при комнатной температуре. Хорошо известно, что полиненасыщенные жирные кислоты имеют точку плавления ниже точки плавления их насыщенных гомологов. Такие же наблюдения сделаны для фракции II, которая имеет йодное число 127,2. Состав жирных кислот, показанный в таблице 14, подтверждает данные йодные числа: фракция I имеет высокий процент (30,24%) полиненасыщенных жирных кислот (пентаены + гексаены), равно как и фракция II (22,98%). Наконец в таблице 12 также показано, что фракция I после выпаривания растворителя на 10,0% состоит из летучего вещества и влаги. В таком же тесте фракция II дает значение 6,8%. Чтобы избавиться от следов растворителей важно за короткое время нагреть (примерно до 125°С в течение примерно 15 мин) масло в атмосфере азота.
Результаты, полученные для масел криля в соответствии со способом данного изобретения (фракция I, экстрагированная ацетоном, и фракция II, экстрагированная этилацетатом), представлены в таблицах 12, 13, 14, 15, 16 и 17. Заслуживает упоминания тот факт, что в таблице 17 содержание каротиноидов было существенно высоким, как измерено на основе двух каротиноидов, а именно астаксантина и кантаксантина. Действительно, анализы в двух повторах показали значения от 92 до 124 мкг/г липидной фракции для астаксантина и от 262 до 734 мкг/г для кантаксантина. Такие образом, можно сказать, что для целей данного изобретения экстракт криля содержит астаксантина, по меньшей мере, 75 и предпочтительно, по меньшей мере, 90 мкг/г липидной фракции. В случае кантаксантина содержание составляет, по меньшей мере, 250 и предпочтительно, по меньшей мере, 270 мкг/г липидной фракции. Низкие значения для пероксида и анизидина являются благоприятными и являются следствием наличия высоких уровней природных антиоксидантов (астаксантина и кантаксантина). Данные соединения являются показателями благоприятных фармацевтических и косметологических свойств экстракта криля, поскольку высокие уровни каротиноидов свидетельствуют о превосходных характеристиках трансдермального переноса. Таким образом, экстракт криля является хорошим кандидатом для трансдермальной доставки лекарственных средств.
В таблице 18 показан наилучший вариант способа согласно данному изобретению для экстракции липидов тканей пресноводных животных.
Таблица 19 показывает, что ферментативная активность твердой фракции сохраняется после осуществления способа данного изобретения. Действительно, демонстрация этого факта осуществлена для твердого остатка криля, полученного после последовательной экстракции ацетоном и этилацетатом. Протеолитические активности измеряли по освобождению аминогрупп путем спектрофотометрического анализа с использованием в качестве реагента о-фталевого диальдегида. Концентрации белка измеряли методом Бредфорда. Растворимые белки экстрагировали водой и добавляли к 10% концентрату белка сыворотки молока, полученному ультрафильтрацией. В конце инкубации при 37°С в буфере с 50 мМ фосфатом калия добавляли трихлоруксусную кислоту, и измеряли количество NН3 групп в супернатанте в соответствии с методом Church et al. [1983, J. Dairy Sci. 66: 1219-1227].
На фигурах с 1 по 6 показаны хроматограммы композиции жирных кислот в липидах Е. pacifica. На каждой из них видны и представлены двумя отдельными пиками высокие соотношения 20:5 и 22:6 жирных кислот (типичные для масел морских и пресноводных животных).
Вариации липидных наборов нейтральных липидов (с фигуры 7 по фигуру 11) от одного вида к другому объясняются различиями в источниках питания. В пределах вида (например, Е. pacifica) нет заметных вариаций в наборе липидов, полученных с использованием различных технологий экстракции липидов. Что касается фосфолипидов (фигуры с 12 по 16) наблюдается противоположное: вариации объясняются различными способами экстракции липидов, так как использование одного и того же вида не приводит к одинаковому набору липидов. Липиды видов акулы (экстрагированные указанными способами) и коммерческого рыбьего жира из печени трески (образец, имеющийся в аптеках Uniprix, Province of Quebec, Canada) главным образом состоят из нейтральных липидов, в противоположность фосфолипидам.
Влияние объема растворителя и времени инкубации на эффективность экстракции ацетоном липидов из Е. pacifica показано на фигурах 17 и 18 соответственно. Соотношение 1:6 (мас./об.) давало оптимальный выход, близкий к полной экстракции, через 2 час. Эксперимент этапа второй экстракции выполняли с этанолом. Объем данного растворителя, по-видимому, не является критическим, так как один и тот же выход получали с различными объемами этанола (фигура 19), но время выдерживания в этаноле должно быть, по меньшей мере, 30 минут, о чем свидетельствуют результаты на фигуре 20.
Один из заявителей доктор Adrien Beaudoin исследовал различные фракции липидов криля. Не наблюдалось признаков побочного действия.
Хотя изобретение описано выше по отношению к одной конкретной форме, специалисту в данной области будет очевидно, что его можно модифицировать и усовершенствовать различными способами. Поэтому желательно понимать, что данное изобретение не должно быть ограничено рамками, за исключением условий приведенной далее формулы изобретения.
Демонстрация того, что остаток криля, полученный после экстракции ацетоном и этилацетатом, содержит активности протеолитических ферментов. Протеолитические активности измеряли по освобождению аминогрупп с помощью спектрофотометрического анализа, используя в качестве реагента о-фталевый диальдегид. Концентрации белка измеряли методом Бредфорда.
Источником ферментов был остаток, полученный после экстракции липидов ацетоном и этилацетатом. Растворимые белки экстрагировали водой и добавляли к 10% концентрату белка сыворотки молока, полученному ультрафильтрацией.
В конце инкубации при 37°С в буфере с 50 мМ фосфатом калия добавляли трихлоруксусную кислоту и измеряли количество NН3 групп в супернатанте в соответствии с методом Church et al. 1983.
Источники информации
Bowyer, D.E., Leat, W.M.F., Howard, A.N. and Gresham, G.A. 1962. The determination of the fatty acid composition of serum lipids separated by thin-layer chromatography; and a comparison with column chromatography. BBA. 70:423-431.
Chandrasekar, В., Troyer, D.A., Venkatraman, J.T. and Fernandes, G. 1996. Tissue specific regulation of transforming growth factor beta by omega-3 lipid-rich krill oil in autoimmune murine lupus. Nutr Res. 16(3): 489-503.
Christensen, M.S., Hoy, C-E. and Redgrave, T.G. 1994. Lymphatic absorption of n-3 polyunsaturated fatty acids from marine oils with different intramolecular fatty acid distributions. BBA. 1215: 198-204.
Church, F.C., Swaisgood, H.E., Porter, D.H. and Catignani, G.L. 1983. Spectrophotometric assay using o- Phthaldialdehyde for determination of proteolysis in milk and isolated milk proteins. J Dairy Sci. 66: 1219-1227.
Difco laboratories. 1984. Difco Manual Dehydrated Culture Media and Reagents for Microbiology. 10th ed. Detroit.
Folch, J., Lees, M. and Sloane-Stanley, G.H. 1957. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J. biol. Chem. 226:497-509.
Goodman Gilman, A., Goodman, L.L and Gilman, A. 1980. The Pharmacological Basis of Therapeutics. 6th ed. Collier Macmillan Canada ltd, Toronto.
Harwood, H.J. and Geyer. R.P. 1964. Biology Data Book. The Federation of American Societies for Experimental Biology, Washington.
Hellgren, L., Karlstam, В., Mohr, V. and Vincent. J. 1991. Krill enzymes. A new concept for efficient debridement of necrotic ulcers. Int J Dermatol. 30(2): 102-103.
Plummer, D.T. 1987. An introduction to practical biochemistry. 3th ed. McGraw-Hill Book Company, London.
Rawn. J.D. 1990.
Figure 00000002
de biochimie. De Boeck-Wesmael, Bruxelles.
Runge, J.A. and Joly. P. 1994. Rapport sur
Figure 00000003
des
Figure 00000004
en 1994: 7:0 Zooplancton
Figure 00000005
et Calanus) de I'Estuaire et du Golfe du Saint-Laurent. Sargent, J.R. 1997. Fish oils and human diet. Br J Nutr.78 Suppl 1: S5-S13.
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030

Claims (54)

1. Способ экстракции всех липидных фракций из материала морских и пресноводных животных, включающий следующие стадии: (a) помещение материала морских и пресноводных животных в кетоновый растворитель, предпочтительно ацетон, чтобы достичь экстракции растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; (b) разделение жидкого и твердого содержимого; (c) извлечение первой богатой всеми липидами фракции из жидкого содержимого, полученного на стадии b) выпариванием растворителя, присутствующего в жидком содержимом; (d) помещение указанного твердого содержимого в органический растворитель, выбранный из группы растворителей, состоящей из спирта, предпочтительно этанола, изопропанола или трет-бутанола, и сложных эфиров уксусной кислоты, предпочтительно этилацетата, чтобы достичь экстракции оставшейся растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; e) разделение жидкого и твердого содержимого; f) извлечение второй богатой всеми липидами фракции выпариванием растворителя из жидкого содержимого, полученного на стадии е); g) извлечение твердого содержимого.
2. Способ по п.1, где во время стадии (а) растворитель и животный материал гомогенизируют.
3. Способ по п.1, где во время стадии (d) растворитель и твердое содержимое гомогенизируют.
4. Способ по любому из пп.1-3, где стадии (b) и (d) проводят в атмосфере инертного газа.
5. Способ по любому из пп.1-4, где стадии (b) и (е) осуществляют с помощью методики, выбранной из фильтрации, центрифугирования и осаждения.
6. Способ по любому из пп.1-5, где стадии (с) и (f) осуществляют с помощью методики, выбранной из вакуумного испарения, мгновенного испарения и распылительной сушки.
7. Способ по любому из пп.1-6, где после стадии (b) и перед стадией (с) способ дополнительно включает в себя промежуточный этап промывки твердого содержимого растворителем и добавления полученного в результате промывки раствора к жидкому содержимому стадии (b).
8. Способ по любому из пп.1-7, где после стадии (е) и перед стадией (f), способ дополнительно включает промежуточную стадию промывки твердого содержимого органическим растворителем, выбранным на стадии (d).
9. Способ по любому из пп.1-8, где перед стадией (а) материал морских и пресноводных животных тонко измельчают, предпочтительно до среднего размера частиц 5 мм или меньше.
10. Способ по любому из пп.1-9, где стадию (а) и стадию (b) проводят при температурах растворителя примерно 5°С или ниже.
11. Способ по любому из пп.1-10, где указанным морским и пресноводным животным является зоопланктон.
12. Способ по п.11, где указанным зоопланктоном является криль.
13. Способ по п.12, где указанным зоопланктоном является Calanus.
14. Способ по пп.1-10, где указанное морское и пресноводное животное представляет собой рыбу.
15. Способ экстракции по любому из пп.1-14, в котором извлекают твердое содержимое стадий b) и/или е), и оно состоит из дегидратированного остатка, содержащего активные ферменты.
16. Способ экстракции всех липидных фракций, содержащих астаксантин и кантаксантин, из материала морских и пресноводных животных, выбранных из зоопланктона и рыбы, который включает следующие стадии: (a) помещение указанного животного материала в кетоновый растворитель, предпочтительно ацетон, чтобы достичь экстракции растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; (b) разделение жидкого и твердого содержимого; (c) извлечение богатой липидами фракции из жидкого содержимого выпариванием растворителя, присутствующего в жидком содержимом, посредством чего получают полную липидную фракцию, содержащую астаксантин и кантаксантин.
17. Способ по п.16, где животным материалом является криль.
18. Способ по п.16, где животным материалом является Calanus.
19. Способ по любому из пп.16-18, где во время стадии (a) животный материал гомогенизируют.
20. Способ по любому из пп.16-19, где стадии (b) и (d) проводят в атмосфере инертного газа.
21. Способ по любому из пп.16-20, где стадию (b) осуществляют с помощью методики, выбранной из фильтрации, центрифугирования и осаждения.
22. Способ по любому из пп.16-21, где стадию (с) осуществляют с помощью методики, выбранной из вакуумного испарения, мгновенного испарения и распылительной сушки.
23. Способ по любому из пп.16-22, где, после стадии (b) и перед стадией (с), способ дополнительно включает стадию промывки указанного твердого содержимого растворителем и добавления полученного в результате промывки раствора к жидкому содержимому, полученному на стадии (b).
24. Способ по любому из пп.16-23, где перед стадией (а) материал морских и пресноводных животных тонко измельчают, предпочтительно до среднего размера частиц 5 мм или меньше.
25. Способ по любому из пп.16-23, где стадии (а) и (b) проводят при температурах растворителя примерно 5°С или ниже.
26. Способ экстракции липидов по любому из пп.16-25, в котором извлекают твердое содержимое со стадии b), и оно состоит из дегидратированного остатка, содержащего активные ферменты.
27. Способ экстракции всех липидных фракций из материала морских и пресноводных животных, выбранных из зоопланктона и рыб, который включает следующие стадии: (a) помещение указанного животного материала в смесь растворителей, содержащую ацетон и этанол, чтобы достичь экстракции растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; (b) разделение жидкого и твердого содержимого; (c) извлечение богатой липидами фракции из жидкого содержимого выпариванием растворителя, присутствующего в жидком содержимом, посредством чего получают полную липидную фракцию.
28. Способ по п.27, где животным материалом является криль.
29. Способ по п.27, где животным материалом является Calanus.
30. Способ по любому из пп.27-29, где во время стадии (а) животный материал гомогенизируют.
31. Способ по любому из пп.27-30, где стадии (b) и (d) проводят в атмосфере инертного газа.
32. Способ по любому из пп.27-31, где стадию (b) осуществляют с помощью методики, выбранной из фильтрации, центрифугирования и осаждения.
33. Способ по любому из пп.27-32, где стадию (с) осуществляют с помощью методики, выбранной из вакуумного испарения, мгновенного испарения и распылительной сушки.
34. Способ по любому из пп.27-33, где, после стадии (b) и перед стадией (с), способ дополнительно включает стадию промывки указанного твердого содержимого растворителем и добавления полученного в результате промывки раствора к жидкому содержимому, полученному на стадии (b).
35. Способ по любому из пп.27-34, где перед стадией (а) материал морских и пресноводных животных тонко измельчают, предпочтительно до среднего размера частиц 5 мм или меньше.
36. Способ по любому из пп.27-34, где стадии (а) и (b) проводят при температурах растворителя примерно 5°С или ниже.
37. Способ экстракции липидов по любому из пп.27-36, в котором извлекают твердое содержимое со стадии b), и оно состоит из дегидратированного остатка, содержащего активные ферменты.
38. Экстракт липидов криля, отличающийся тем, что содержание каротиноидов в расчете на астаксантин составляет 75 или более и, предпочтительно, 90 или более мкг/г экстракта криля, а содержание каротиноидов в расчете на кантаксантин составляет 250 или более и, предпочтительно, 270 или более мкг/г экстракта криля.
39. Экстракт липидов криля по п.38, отличающийся тем, что он выбран из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
40. Экстракт липидов криля по п.38, применимый в производстве продукта, выбранного из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
41. Способ экстракции всех липидных фракций из материала морских и пресноводных животных, который включает следующие стадии: (a) помещение материала морских и пресноводных животных в кетоновый растворитель, предпочтительно ацетон, чтобы достичь экстракции растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; (b) разделение жидкого и твердого содержимого; (c) извлечение первой богатой всеми липидами фракции из жидкого содержимого, полученного на стадии b), выпариванием растворителя, присутствующего в жидком содержимом; (d) помещение указанного твердого содержимого в органический растворитель, выбранный из группы растворителей, состоящей из спирта, предпочтительно этанола, изопропанола или трет-бутанола, и сложных эфиров уксусной кислоты, предпочтительно этилацетата, чтобы достичь экстракции оставшейся растворимой липидной фракции из указанного материала морских и пресноводных животных; e) разделение жидкого и твердого содержимого; f) извлечение второй богатой всеми липидами фракции выпариванием растворителя из жидкого содержимого, полученного на стадии е), посредством чего получают полную липидную фракцию.
42. Способ экстракции липидов по п.41, где извлекают твердое содержимое со стадии b) и/или е), и оно состоит из дегидратированного остатка, содержащего активные ферменты.
43. Полная липидная фракция, свободная от токсичных растворителей, экстрагированная из морских или пресноводных животных способом по любому из пп.1-15.
44. Фракция липидов по п.43, отличающая тем, что она выбрана из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
45. Фракция липидов по п.43, применимая в производстве продукта, выбранного из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
46. Полная липидная фракция, свободная от токсичных растворителей, экстрагированная из морских или пресноводных животных способом по любому из пп.16-26.
47. Фракция липидов по п.46, отличающаяся тем, что она выбрана из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
48. Фракция липидов по п.46, применимая в производстве продукта, выбранного из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
49. Полная липидная фракция, свободная от токсичных растворителей, экстрагированная из морских или пресноводных животных способом по любому из пп.27-37.
50. Фракция липидов по п.49, отличающаяся тем, что она выбрана из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
51. Фракция липидов по п.49, применимая в производстве продукта, выбранного из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
52. Полная липидная фракция, свободная от токсичных растворителей, экстрагированная из морских или пресноводных животных способом по любому из пп.41 и 42.
53. Фракция липидов по п.52, отличающаяся тем, что она выбрана из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
54. Фракция липидов по п.53, применимая в производстве продукта, выбранного из группы, состоящей из медицинских продуктов, пищевых добавок с лекарственными свойствами, косметических продуктов, продуктов для разведения рыб и кормления животных.
RU2001113503A 1998-10-21 1999-10-21 Способ экстракции липидов (варианты), экстракт липидов криля и полная липидная фракция (варианты) RU2236441C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA002251265A CA2251265A1 (en) 1998-10-21 1998-10-21 Process for lipid extraction of aquatic animal tissues producing a dehydrated residue
CA2,251,265 1998-10-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001113503A RU2001113503A (ru) 2003-03-20
RU2236441C2 true RU2236441C2 (ru) 2004-09-20

Family

ID=4162941

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001113503A RU2236441C2 (ru) 1998-10-21 1999-10-21 Способ экстракции липидов (варианты), экстракт липидов криля и полная липидная фракция (варианты)

Country Status (20)

Country Link
US (1) US6800299B1 (ru)
EP (1) EP1123368B1 (ru)
JP (2) JP4181305B2 (ru)
KR (1) KR100454899B1 (ru)
CN (1) CN1269940C (ru)
AT (1) ATE391763T1 (ru)
AU (1) AU765464B2 (ru)
BR (1) BR9914699B1 (ru)
CA (1) CA2251265A1 (ru)
DE (1) DE69938504T2 (ru)
DK (1) DK1123368T3 (ru)
ES (1) ES2306527T3 (ru)
HK (1) HK1038765A1 (ru)
NO (1) NO321481B1 (ru)
PL (1) PL201771B1 (ru)
PT (1) PT1123368E (ru)
RU (1) RU2236441C2 (ru)
UA (1) UA75029C2 (ru)
WO (1) WO2000023546A1 (ru)
ZA (1) ZA200103235B (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9820958B2 (en) 2009-01-05 2017-11-21 Calanus As Biological oil composition, formulations comprising the oil composition, and use thereof to prevent or treat cardiovascular disease
RU2718983C2 (ru) * 2015-02-11 2020-04-15 Акер Биомарин Антарктик Ас Композиции липидов

Families Citing this family (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2251265A1 (en) * 1998-10-21 2000-04-21 Universite De Sherbrooke Process for lipid extraction of aquatic animal tissues producing a dehydrated residue
AUPQ480399A0 (en) * 1999-12-22 2000-02-03 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Unsaturated fatty acids and their uses in therapy
EP1406641B1 (en) * 2001-06-18 2009-01-07 Neptune Technologies & Bioressources Inc. Krill extracts for prevention and/or treatment of cardiovascular diseases
AU2013205515B2 (en) * 2001-07-27 2015-07-02 Aker Biomarine Antarctic As Natural marine source phospholipids comprising flavonoids, polyunsaturated fatty acids and their applications
DK1417211T3 (da) * 2001-07-27 2007-10-08 Neptune Technologies & Bioress Naturlige phospholipider af marin oprindelse, der indeholder flavonoider og polyumættede phospholipider, og deres anvendelse
US8052992B2 (en) 2003-10-22 2011-11-08 Enzymotec Ltd. Glycerophospholipids containing omega-3 and omega-6 fatty acids and their use in the treatment and improvement of cognitive functions
US7935365B2 (en) 2003-10-22 2011-05-03 Enzymotec, Ltd. Glycerophospholipids for the improvement of cognitive functions
US20050130937A1 (en) 2003-10-22 2005-06-16 Enzymotec Ltd. Lipids containing omega-3 and omega-6 fatty acids
US7572464B2 (en) 2004-01-30 2009-08-11 Bionovate Limited Solvent extraction of lipids such as essential fatty acids
CA2555281C (en) * 2004-02-06 2012-11-13 Adrien Beaudoin Method for preventing the oxidation of lipids in animal and vegetable oils and compositions used by the method
US7666447B2 (en) * 2004-10-08 2010-02-23 Pharmanutrients Compositions including Krill extracts and conjugated linoleic acid and methods of using same
US8404875B2 (en) 2005-02-07 2013-03-26 Adrien Beaudoin Method for preventing the oxidation of lipids in animal and vegetable oils and compositions produced by the method thereof
GB0506788D0 (en) * 2005-04-04 2005-05-11 Biosea Man As Process
AR059659A1 (es) * 2006-01-13 2008-04-23 Alfa Copenhagen S S Metodo para la extraccion
WO2008050219A2 (en) * 2006-10-24 2008-05-02 Krill A/S Method and equipment' for improved extraction of lipid fractions from aquatic animals and from marine origin
CA2669847A1 (en) * 2006-11-16 2008-05-22 Pronova Biopharma Norge As Process for production of omega-3 rich marine phospholipids from krill
JP2008239500A (ja) * 2007-03-25 2008-10-09 Nippon Suisan Kaisha Ltd レプチン分泌促進剤
AU2014100735B4 (en) * 2007-03-28 2014-09-11 Aker Biomarine Antarctic As Processes and products thereof
US8697138B2 (en) 2007-03-28 2014-04-15 Aker Biomarine As Methods of using krill oil to treat risk factors for cardiovascular, metabolic, and inflammatory disorders
PT2144618E (pt) 2007-03-28 2013-07-08 Aker Biomarine Asa Composições bioeficazes de óleo de krill
AU2011213836B2 (en) * 2007-03-28 2013-11-14 Aker Biomarine Antarctic As Bioeffective krill oil compositions
US20080254135A1 (en) * 2007-04-10 2008-10-16 Marvin Heuer Resveratrol-containing compositions for general health and vitality
CA2697730C (en) * 2007-08-29 2014-04-08 Aker Biomarine Asa A new method for making krill meal
AU2014100741B4 (en) * 2007-08-29 2014-09-11 Aker Biomarine Antarctic As Processes and products thereof
US20100226977A1 (en) * 2007-08-29 2010-09-09 Aker Biomarine Asa Low viscosity phospholipid compositions
EP2110027A1 (en) * 2008-04-01 2009-10-21 Nestec S.A. Long-chain polyunsaturated fatty acids (LC-PUFA) in maternal nutrition during pregnancy and lactation
EP2291499B1 (en) 2008-05-15 2020-02-12 Basf As Krill oil process
NZ592160A (en) 2008-09-12 2012-11-30 Emerald Fisheries As Enzymatic process for reducing the fluoride content of proteinaceous concentrates ferived from crustaceans
US9814256B2 (en) 2009-09-14 2017-11-14 Rimfrost Technologies As Method for processing crustaceans to produce low fluoride/low trimethyl amine products thereof
US8557297B2 (en) 2008-09-12 2013-10-15 Olympic Seafood, As Method for processing crustaceans and products thereof
US20100077654A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing biofuels from algae
JP5703022B2 (ja) * 2008-09-26 2015-04-15 日本水産株式会社 脂質の製造方法
WO2010038964A2 (ko) * 2008-09-30 2010-04-08 주식회사 유맥스 크릴로부터 유용성분 추출분리방법 및 관련 제품
KR101024491B1 (ko) * 2008-12-31 2011-03-31 인성실업(주) 해양 동물로부터 지질을 추출하는 방법
EP2399054B1 (en) 2009-02-18 2013-05-01 Walsh Intellectual Property Ltd. A tubular duct member
US8372812B2 (en) * 2009-02-26 2013-02-12 Aker Biomarine Asa Phospholipid and protein tablets
US8753851B2 (en) 2009-04-17 2014-06-17 LiveFuels, Inc. Systems and methods for culturing algae with bivalves
EP2435055A2 (en) 2009-05-28 2012-04-04 Aker Biomarine ASA Methods of using krill oil to treat risk factors for metabolic disorders and obesity
DK2440065T3 (en) 2009-06-12 2018-12-10 Calanus As COPYPOD OIL COMPOSITION, FORMULATIONS CONTAINING THE OIL COMPOSITION, AND ITS APPLICATION FOR REDUCING VISCAL FAT COLLECTION, IMPROVEMENT OF GLUCOSET TOLERANCE AND PREVENTION OR TREATMENT OF PATIENTS
WO2010147955A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 LiveFuels, Inc. Systems and methods for harvesting algae
US9399047B2 (en) 2009-07-23 2016-07-26 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using phospholipids and roe extract
US9913810B2 (en) 2009-07-23 2018-03-13 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using phospholipids and astaxanthin
US9216164B2 (en) 2009-07-23 2015-12-22 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using a mixture of fish oil and fish oil derived, choline based, phospholipid bound fatty acid mixture including polyunsaturated EPA and DHA
US8481072B2 (en) 2009-07-23 2013-07-09 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain
US9238043B2 (en) 2009-07-23 2016-01-19 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using algae based oils
US9402857B2 (en) 2009-07-23 2016-08-02 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using low molecular weight hyaluronic acid and astaxanthin
US8557275B2 (en) 2009-07-23 2013-10-15 U.S. Nutraceuticals, LLC Composition and method to alleviate joint pain using a mixture of fish oil and fish oil derived, choline based, phospholipid bound fatty acid mixture including polyunsaturated EPA and DHA
RU2642653C2 (ru) * 2009-10-29 2018-01-25 Акасти Фарма, Инк. Концентрированные терапевтические фосфолипидные композиции
MX2012005065A (es) * 2009-10-30 2012-06-13 Tharos Ltd Proceso sin solventes para la obtencion de aceites de krill enriquecidos con fosfolipidos y lipidos neutros.
EP2499093B1 (en) * 2009-11-11 2017-05-31 Dynasep Inc. Energy efficient acetone drying method
KR101204391B1 (ko) * 2010-03-10 2012-11-26 인성실업(주) 지질추출장치，이 장치를 가지는 어분제조기
WO2012029898A1 (ja) * 2010-09-01 2012-03-08 日本水産株式会社 アルコール性障害緩和剤
CN102071101B (zh) * 2011-01-21 2012-10-10 山东科芮尔生物制品有限公司 一种从南极磷虾中提取富含磷脂的磷虾油的方法
US20120231087A1 (en) 2011-03-07 2012-09-13 Olympic Seafood Compositions And Methods for Nutritional Supplementation
US20120284165A1 (en) * 2011-05-06 2012-11-08 LiveFuels, Inc. Method for removing carbon dioxide from ocean water and quantifying the carbon dioxide so removed
US9487716B2 (en) 2011-05-06 2016-11-08 LiveFuels, Inc. Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems
CN102224855B (zh) * 2011-05-13 2013-05-08 中国海洋大学 一种南极磷虾中脂质的富集方法
WO2013033618A1 (en) 2011-09-02 2013-03-07 Arctic Nutrition As Lipid compositions with high dha content
WO2013149384A1 (en) * 2012-04-05 2013-10-10 Nippon Suisan Kaisha, Ltd. Brain atrophy prevention agent
RU2506314C2 (ru) * 2012-05-04 2014-02-10 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанский (Приволжский) Федеральный Университет" (ФГАОУ ВПО КФУ) Способ качественного и количественного анализа липидов, прочносвязанных с геномной днк
CN102732382B (zh) * 2012-07-18 2013-07-03 山东师范大学 一种从南极磷虾中提取蜡的方法
CN102731360B (zh) * 2012-07-18 2015-03-25 山东师范大学 一种从南极磷虾中提取虾青素的方法
EP2897595B1 (en) * 2012-09-24 2020-06-03 Aker Biomarine Antarctic As Omega -3 compositions
US20150252285A1 (en) * 2012-09-25 2015-09-10 The Johns Hopkins University Methods for extraction of lipids from wet algal biomass
WO2014184655A1 (en) 2013-02-07 2014-11-20 Olympic Seafood As Methods for using crustacean phospholipid-peptide-protein complexes
AU2014203179C1 (en) 2013-06-14 2017-05-04 Aker Biomarine Antarctic As Lipid extraction processes
WO2015023783A1 (en) 2013-08-13 2015-02-19 Darling Ingredients Inc. Lipid extraction
CN103773596B (zh) * 2013-12-31 2016-05-18 上海复力生物医药科技有限公司 磷虾油的制备方法
GB201400431D0 (en) 2014-01-10 2014-02-26 Aker Biomarine As Phospholipid compositions and their preparation
WO2015121733A1 (en) 2014-02-11 2015-08-20 Enzymotec Ltd. Krill oil preparations with optimal mineral and metal composition, low impurities and low and stable tma levels
CN103864841A (zh) * 2014-03-12 2014-06-18 威海博宇食品有限公司 一种从水产动物卵中提取与精制磷脂的方法
PL3137070T3 (pl) 2014-04-30 2020-07-13 Aker Biomarine Antarctic As Preparaty z oleju z kryla i ich zastosowania
US9701923B2 (en) 2014-10-24 2017-07-11 Darling Ingredients Inc. Lipid extraction
WO2016128830A1 (en) 2015-02-11 2016-08-18 Aker Biomarine Antarctic As Lipid extraction processes
CN105152910B (zh) * 2015-07-23 2017-06-30 山东师范大学 一种从脱脂南极磷虾中提取及检测棕榈酸的方法
US20190230950A1 (en) * 2016-08-24 2019-08-01 Philip Samuel Improved Method for Processing and Extracting Oil from Marine Organisms
US11352380B2 (en) 2017-03-31 2022-06-07 Avoca Llc Methods for the preparation of phospholipid enriched krill compositions
JP7246057B2 (ja) 2017-11-17 2023-03-27 株式会社新富士空調 角ダクト用ボタンパンチはぜ構造および角ダクト
CN111432654A (zh) 2017-12-04 2020-07-17 雾凇科技有限公司 从甲壳类捕获物中生产蛋白质磷脂复合物的方法
CN108130193B (zh) * 2017-12-21 2021-04-02 山东师范大学 一种提高南极磷虾油脂提取率的方法
RS64705B1 (sr) 2017-12-22 2023-11-30 Pharmalink International Ltd Kompozicije koje sadrže ekstrakt lipida dagnјi i ulje krila, i nјihove medicinske primene
CN109053420B (zh) * 2018-08-21 2021-03-16 浙江海洋大学 一种从桡足类中提取dha和epa的方法
KR20210113322A (ko) 2019-03-15 2021-09-15 야마하하쓰도키 가부시키가이샤 기정 루트 주행 차량
CN110361497B (zh) * 2019-08-02 2021-06-25 山东师范大学 一种南极磷虾中氨基酸的检测方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT331374B (de) 1972-12-22 1976-08-25 Studiengesellschaft Kohle Mbh Verfahren zur gewinnung von fetten und olen aus pflanzlichen und tierischen produkten
JPS5248191B2 (ru) * 1974-12-27 1977-12-08
JPS53112195A (en) 1977-03-10 1978-09-30 Nippon Paint Co Ltd Method for producing food for fish
CA1098900A (en) 1977-12-14 1981-04-07 Sergei V. Rogozhin Method for the processing of krill to produce protein, lipids and chitin
NO147365C (no) * 1980-11-27 1983-03-30 Jan Raa Fremgangsmaate til fremstilling av astaxanthin i en form som er egnet for innlemmelse i for for oppdrettfisk.
WO1984001715A1 (en) * 1982-10-25 1984-05-10 Hellgren Lars G I Enzyme composition for therapeutical and/or non-therapeutical cleaning, the use thereof and preparation of the composition
JPS59196032A (ja) * 1983-04-23 1984-11-07 Fumio Nishikawa オキアミの変性防止及び鮮度保持の方法
JPS6035057A (ja) 1984-06-27 1985-02-22 San Ei Chem Ind Ltd 黄橙色ないし赤橙色色素の製法
US5006281A (en) 1985-03-26 1991-04-09 Century Laboratories, Inc. Process for the production of a marine animal oil
JPS6390598A (ja) * 1986-10-03 1988-04-21 日本油脂株式会社 ドコサヘキサエン酸を含む脂質の製造法
JPS63162793A (ja) * 1986-12-26 1988-07-06 焼津水産化学工業株式会社 脂質の抽出方法
JP2963152B2 (ja) * 1990-06-28 1999-10-12 クロリンエンジニアズ株式会社 オキアミからの色素の抽出分離方法
DE4219360C2 (de) 1992-06-12 1994-07-28 Milupa Ag Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fettsäuren
JPH07107920A (ja) * 1993-10-12 1995-04-25 Nichiwa Sangyo Kk 鶏用飼料
JPH08198754A (ja) * 1995-01-23 1996-08-06 Yakult Honsha Co Ltd 脳機能改善剤
JP3398248B2 (ja) * 1995-03-16 2003-04-21 新日本石油株式会社 キサントフィル化合物の精製方法
JPH09143063A (ja) * 1995-11-22 1997-06-03 Kose Corp 外用に適する組成物
JPH09308459A (ja) * 1996-05-20 1997-12-02 Nof Corp 高度不飽和脂肪酸含有栄養組成物
US6055936A (en) * 1997-01-21 2000-05-02 Collin; Peter Donald Sea cucumber carotenoid lipid fractions and process
CA2251265A1 (en) * 1998-10-21 2000-04-21 Universite De Sherbrooke Process for lipid extraction of aquatic animal tissues producing a dehydrated residue

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9820958B2 (en) 2009-01-05 2017-11-21 Calanus As Biological oil composition, formulations comprising the oil composition, and use thereof to prevent or treat cardiovascular disease
RU2718983C2 (ru) * 2015-02-11 2020-04-15 Акер Биомарин Антарктик Ас Композиции липидов

Also Published As

Publication number Publication date
NO20011915D0 (no) 2001-04-18
EP1123368B1 (en) 2008-04-09
PL347396A1 (en) 2002-04-08
NO20011915L (no) 2001-06-21
US6800299B1 (en) 2004-10-05
ZA200103235B (en) 2002-06-20
WO2000023546A1 (en) 2000-04-27
CN1324394A (zh) 2001-11-28
PL201771B1 (pl) 2009-05-29
HK1038765A1 (en) 2002-03-28
ATE391763T1 (de) 2008-04-15
DE69938504D1 (de) 2008-05-21
NO321481B1 (no) 2006-05-15
DE69938504T2 (de) 2009-06-10
AU6455299A (en) 2000-05-08
DK1123368T3 (da) 2008-08-04
JP2008150586A (ja) 2008-07-03
CN1269940C (zh) 2006-08-16
UA75029C2 (en) 2006-03-15
AU765464B2 (en) 2003-09-18
JP2002527604A (ja) 2002-08-27
PT1123368E (pt) 2008-07-18
JP5172281B2 (ja) 2013-03-27
BR9914699B1 (pt) 2009-12-01
ES2306527T3 (es) 2008-11-01
CA2251265A1 (en) 2000-04-21
EP1123368A1 (en) 2001-08-16
BR9914699A (pt) 2001-07-10
KR20010103615A (ko) 2001-11-23
KR100454899B1 (ko) 2004-11-06
JP4181305B2 (ja) 2008-11-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2236441C2 (ru) Способ экстракции липидов (варианты), экстракт липидов криля и полная липидная фракция (варианты)
US6713447B2 (en) Method for purifying marine mammal oil enriched in omega 3 fatty acids and compositions comprising same
Njinkoué et al. Lipids and fatty acids in muscle, liver and skin of three edible fish from the Senegalese coast: Sardinella maderensis, Sardinella aurita and Cephalopholis taeniops
US6055936A (en) Sea cucumber carotenoid lipid fractions and process
El-Sebaiy et al. Changes in some chemical characteristics and lipid composition of salted fermented Bouri fish muscle (Mugil cephalus)
CA2346979C (en) Method of extracting lipids from marine and aquatic animal tissues
US20080268117A1 (en) Method of purifying oils containing epa and dha
MXPA01003955A (en) Method of extracting lipids from marine and aquatic animal tissues
Ali-Nehari Characterization of Bioactive Compounds Obtained from Antarctic Krill (E. superba) by Sub-and Supercritical Fluids

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20181022