CN102731360B - 一种从南极磷虾中提取虾青素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从南极磷虾中提取虾青素的方法，步骤如下：取干的南极磷虾，加入正己烷，搅拌提取过滤，滤液旋转蒸发去除正己烷，得红色虾油；向红色虾油中加丙酮溶解，过滤得丙酮提取液，旋转蒸发去除丙酮，得虾青素红色虾油样品，用石油醚溶解，备用；取层析柱，装柱、上样、洗脱得红色条带，取出，加入二氯甲烷溶解，得含虾青素的溶液，旋转蒸发去除溶剂，即得虾青素。本发明的从南极磷虾中提取虾青素的方法，采用正己烷和丙酮提取、柱层析制备虾青素，溶剂用量少，工艺过程简单易行，为南极磷虾中虾青素的提取制备提供了技术参考。

Description

一种从南极磷虾中提取虾青素的方法

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾中提取虾青素的方法。

背景技术

南极磷虾是地球上数量最大的单种生物资源，据估计南极磷虾的生物量有5-50亿吨（估计的方法不一样，有差异），可捕捞量在1亿吨以上，与目前全球鱼类和甲壳动物总捕捞量（0.99亿吨）相当。目前，随着近海渔业的减少，开发丰富的远洋渔业资源日益受到重视。在其他国家南极磷虾捕捞后主要用作饲料，饵料，在日本更多地是用作日本料理等。不管在世界上哪个国家，南极磷虾利用的附加值都比较低，这也是我国南极磷虾捕捞后深加工面临的重大研究课题。

虾青素是类胡萝卜素家族成员，但由于结构上的差异，其抗氧化能力差异大，实验发现虾青素的抗氧化能力是β-胡萝卜素的10倍，叶黄素的4倍，比维生素E抗氧化能力强许多倍，是抵抗自由基、延缓衰老很好的抗氧化物质。虾青素对脑和神经系统的健康是极为有益的，由于其可以穿过血脑屏障，脑和中枢神经系统可直接利用。

虾青素具有增强免疫和抗癌作用，可以调节基因的活性、抑制恶性肿瘤的转移，可以有效地预防和减缓癌症，对口腔癌、膀胱癌有预防作用，在抑制肝癌方面有显著效果。研究表明，虾青素抑制肿瘤发生的效应在于对肿瘤增殖的抑制。

虾青素有促进生长繁殖的作用，水生动物的卵子中虾青素的含量很高。这种高含量的虾青素可削弱鱼对光的敏感度，促进鱼类的生长繁殖，它作为激素能促进鱼卵受精，减少胚胎发育的死亡率，加快个体生长，增加成熟速度和生殖力。

虾青素可作为新型化妆品的原料以其优良的性能广泛用于膏霜、乳剂、唇用香脂、护肤品等名类化妆品中，具有抗衰老、除皱、防晒、美白以及除去因年龄所致的黄褐斑。虾青素作为脂溶性色素在化妆品中不仅能有效地起到保色、保味、保质等作用，而且还可以作为长时间保持的着色剂，如唇膏和口红等。

许多动物体内不能合成虾青素，而且绝大多数动物也不能把类胡萝卜素转化成虾青素，因此必须从食物中摄取。据不完全测算，目前全球每年对天然虾青素的需求量为750吨（按纯虾青素计），随着科技的进步，虾青素会有更新、更大、更广阔的用途，其需求量还要大大增加，而截至2005年底，全球的虾青素的总产量不到4吨，仅为需求量的0.5%，作为保健品和化妆品的原料，天然虾青素的价格每公斤在4-10万元人民币，很明显，从南极磷虾中提取制备虾青素是提高其南极磷虾附加值利用的重要技术之一。

目前，南极磷虾的深加工还存在不足，由于磷虾中含有多种具有医疗、保健功能的有效成分，因此这些成分的分离制备研究成为其深加工技术的突破点。虾青素因其强抗氧化性以及多种医疗保健价值，有必要采用一种简单、高效的制备方法从南极磷虾中获取。

发明内容

针对上述现有技术，针对当前南极磷虾深加工存在的不足，本发明提供了一种从南极磷虾中提取虾青素的方法，其工艺过程简单易行。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种从南极磷虾中提取虾青素的方法，步骤如下：

（1）取1公斤干的南极磷虾，加入5～7升正己烷，搅拌提取1～2h，提取液过滤，再反复提取3次，合并4次的滤液；

（2）上述得到的滤液在25～35℃下旋转蒸发去除正己烷，得红色虾油；

（3）向上述得到的红色虾油中加10倍体积的丙酮溶解，过滤得丙酮提取液，在25～35℃下旋转蒸发去除丙酮，得虾青素红色虾油样品；

（4）将上述得到的虾青素红色虾油样品用适量石油醚溶解，备用；

（5）称取40～60g的200～300目的柱层析硅胶，在100～120℃下活化12～18h；

（6）按石油醚：乙酸乙酯=10:1和8:1（V/V）的比例配制两份混合液，各300mL，作为洗脱液；

（7）取层析柱，用步骤（6）中的石油醚：乙酸乙酯=10:1的混合液和步骤（5）中的硅胶湿法装柱；

（8）取1～3mL步骤（4）的样品上样；

（9）用步骤（6）中的石油醚：乙酸乙酯=10:1的洗脱液按80～100滴/min的速度洗脱，首先洗脱下一个浅黄色的1～2cm的色带，然后有一个8～12cm的黄色带被洗脱下来，此时，改用石油醚：乙酸乙酯=8：1的洗脱液洗脱，可见有一个1～2cm的粉红色带与上样液分离逐渐下移，当该色带下移离上样液远至5cm以上时，停止洗脱；

（10）将层析柱顶端1～2cm厚的红色溶液连同部分硅胶取出，加入同体积的二氯甲烷，混匀，沉淀倒出，得上清液，再用二氯甲烷清洗沉淀至硅胶为白色，将上清液合并，25～35℃下旋转蒸发去除溶剂，即得虾青素。

所述层析柱的规格为2～3cm×30cm。

本发明的从南极磷虾中提取虾青素的方法，采用正己烷和丙酮提取、柱层析制备虾青素，溶剂用量少，工艺过程简单易行，有利于南极磷虾中有效成分的充分利用，为南极磷虾中虾青素的提取制备提供了技术参考。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

取干的南极磷虾100g，加入600mL正己烷，搅拌提取2h得提取液，提取液过滤，再反复提取3次，合并4次的滤液；滤液在30℃旋转蒸发去除正己烷，得5g红色虾油；向红色虾油中加入50mL丙酮混匀溶解，静沉，过滤得丙酮提取液；丙酮提取液在30℃旋转蒸发除去丙酮，得含南极磷虾天然游离虾青素的红色虾油样品，用适量石油醚溶解，备用。

称取300目硅胶60g，120℃活化12h。按石油醚：乙酸乙酯=10:1,8:1（V/V）比例配制洗脱液各300mL；用石油醚：乙酸乙酯=10:1的洗脱液对3cm×30cm的层析柱采用湿法将硅胶装柱；取2mL备用样品上样；用石油醚：乙酸乙酯=10:1的洗脱液洗脱，洗脱速度90滴/min，先洗下一个2cm的浅黄色带和一个9cm的黄色带，然后改用石油醚：乙酸乙酯=8:1的洗脱液洗脱，可见到一个2cm的粉红色带下移，继续洗脱使该带下移至离顶端样品远离至5cm以上，可停止洗脱；将上部2cm厚的红色溶液连同部分硅胶取出，加入同体积的二氯甲烷，混匀沉淀，倒出上清液，硅胶再用二氯甲烷清洗两次至硅胶为白色，将3次的二氯甲烷溶液合并，在30℃旋转蒸发除去溶剂，得产品虾青素。

实施例2

取干的南极磷虾100g，加入500mL正己烷，搅拌提取1h得提取液，提取液过滤，再反复提取3次，合并4次的滤液；滤液在25℃旋转蒸发去除正己烷，得4g红色虾油；向红色虾油中加入40mL丙酮混匀溶解，静沉，过滤得丙酮提取液；丙酮提取液在25℃旋转蒸发除去丙酮，得含南极磷虾天然游离虾青素的红色虾油样品，用适量石油醚溶解，备用。

称取200目硅胶40g，100℃活化18h；层析柱为2cm×30cm，配制石油醚：乙酸乙酯=10：1的混合液湿法装柱，取1mL备用样品上样；洗脱速度为80滴/min，洗脱方法同实施例1，第一条浅黄色带为1cm，第二条黄色带8cm，第三条粉红色带1cm，顶端剩余的红色溶液带为1cm，取出该带，处理方法同实施例1，得产品虾青素。

实施例3

取干的南极磷虾100g，加入700mL正己烷，搅拌提取1h得提取液，提取液过滤，再反复提取3次，合并4次的滤液；滤液在35℃旋转蒸发去除正己烷，得6g红色虾油；向红色虾油中加入60mL丙酮混匀溶解，静沉，过滤得丙酮提取液；丙酮提取液在35℃旋转蒸发除去丙酮，得含南极磷虾天然游离虾青素的红色虾油样品，用适量石油醚溶解，备用。

称取300目硅胶50g，110℃活化15h；层析柱为3cm×30cm，配制石油醚：乙酸乙酯=10：1的混合液湿法装柱，取1mL备用样品上样；洗脱速度为100滴/min，洗脱方法同实施例1，第一条浅黄色带为2cm，第二条黄色带12cm，第三条粉红色带2cm，顶端剩余的红色溶液带为2cm，取出该带，处理方法同实施例1，得产品虾青素。

Claims (1)

1.一种从南极磷虾中提取虾青素的方法，其特征在于，步骤如下：

（1）取干的南极磷虾100g，加入600mL正己烷，搅拌提取2h得提取液，提取液过滤，再反复提取3次，合并4次的滤液；

（2）滤液在30℃旋转蒸发去除正己烷，得5g红色虾油；

（3）向红色虾油中加入50mL丙酮混匀溶解，静沉，过滤得丙酮提取液；

（4）丙酮提取液在30℃旋转蒸发除去丙酮，得含南极磷虾天然游离虾青素的红色虾油样品，用适量石油醚溶解，备用；

（5）称取300目硅胶60g，120℃活化12h，按体积比石油醚：乙酸乙酯=10:1,8:1配制洗脱液各300mL；

（6）用石油醚：乙酸乙酯=10:1的洗脱液对3cm×30cm的层析柱采用湿法将硅胶装柱；取2mL备用样品上样；

（7）用石油醚：乙酸乙酯=10:1的洗脱液洗脱，洗脱速度90滴/min，先洗下一个2cm的浅黄色带和一个9cm的黄色带，然后改用石油醚：乙酸乙酯=8:1的洗脱液洗脱，可见到一个2cm的粉红色带下移，继续洗脱使该带下移至离顶端样品远离至5cm以上，可停止洗脱；

（8）将上部2cm厚的红色溶液连同部分硅胶取出，加入同体积的二氯甲烷，混匀沉淀，倒出上清液，硅胶再用二氯甲烷清洗两次至硅胶为白色，将3次的二氯甲烷溶液合并，在30℃旋转蒸发除去溶剂，得产品虾青素。