CN102746204B - 一种利用ve粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯并分离ve的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯并分离VE的方法:向干南极磷虾的正已烷或环已烷或石油醚或6#汽油的提取液中加入白色VE粉搅拌吸附,可将提取液中的虾青素及其酯吸附,再将分离得到的红色VE粉用丙酮洗脱至VE粉变白得红色膏状物,取红色膏状物,加入二氯甲烷,再加入乙醇,混匀,得澄明的红色液体,再加入去离子水,混匀,液体静置后分为上下两层,将上下两层分离;再重复该过程4次,最后得到的下层液体蒸发去除溶剂后,即得虾青素及其酯,将上层液合并,蒸发得VE。本发明的一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,吸附快速、效果好,可以将VE和虾青素及其酯分开,可应用于工业化大规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯并进行分离的方法。
背景技术
南极磷虾(Euphausia superba),又名大磷虾,生活在南冰洋的南极洲水域。以群集方式生活,有时密度达1万~3万只/m3。它们可能是地球上最成功的动物物种,大约有5-50亿吨(因估量方法不同有较大差异)。南极磷虾渔业每年约10万吨。主要渔业国家为日本和波兰。在日本主要用作为料理,而世界其他地方则作为动物饲料及鱼饵。
天然虾青素90%以上以酯化形式存在,较稳定。大多产品的制备、储存和应用均以虾青素酯的形式进行。南极磷虾含有虾青素和虾青素与脂肪酸结合的虾青素酯,虾青素和虾青素酯应用在养殖业,进入动物体后可以不经修饰或生化转化而直接贮存在组织中,使一些水生动物的皮肤和肌肉出现健康而鲜艳的颜色,使禽蛋及禽的羽毛、皮肤、脚、喙呈现健康的金黄色和红色,目前已被作为食品添加剂用于食品的着色,保鲜及营养。
虾青素是一种优良的抗氧化剂,在抗氧化剂淬灭自由基的产生方面起着重要的作用,虾青素的抗氧化能力比β-胡萝卜素和VE高许多倍。
虾青素有促进生长繁殖的作用,可促进鱼的生产繁殖,促进鱼卵受精,减少胚胎发育的死亡率,加快个体生长,增加成熟速度和生殖力,还能提高家禽的产蛋率。
虾青素能够增强免疫并具有抗癌作用,可促进抗体的产生,增强动物免疫功能,也可以调节部分基因的活性,抑制恶性肿瘤的转移,具有有效地预防或减缓癌症的作用。动物实验已表明,虾青素对口腔癌和膀胱癌有预防作用。在抑制肝癌方面也有明显的效果。通过对裸鼠表皮实验说明虾青素抑制肿瘤发生的效应在于对肿瘤增殖的抑制。
虾青素能通过血脑屏障有效防止视网膜的氧化和感光器细胞的损伤,可用于预防和治疗年龄相关性黄斑变性,改善视网膜功能。虾青素还具有保护神经系统尤其是大脑和脊髓受到氧化损伤的功效,能有效治疗缺血性的重复灌注损伤、脊髓损伤、帕金森综合症、老年性痴呆综合症等中枢神经系统疾病。
随着虾青素生物功能研究和药理药效试验的逐步深入,虾青素在药品、化妆品和高级营养保健食品产业应用广泛。化妆品中添加虾青素可起到抗衰老、防晒等效果,用于唇膏可长时间保持着色且利于皮肤健康。
虾青素制备的原料有虾、蟹、虾壳、虾蛋白等动物原料,也有用红球藻或红法夫酵母、 粘红酵母BF-6发酵。瑞士的罗氏公司用化学合成法生产含量5-10%的虾青素。虾青素的制备有食用油提取法;有机溶剂提取法常见的有丙酮、乙醇、石油醚、氯仿、正已烷等,各种溶剂提取效果不同,也有的用二氧化碳超临界提取法等。去除萃取剂后所得的是虾青素及其酯、磷脂和甘油三酯类等的混合物。欲制备虾青素及其酯还要用其他溶剂或其他方法进一步提取富集,不管实验室制备还是工业生产,工艺都较为复杂。
发明内容
针对上述现有技术,本发明提供了一种利用VE粉快速吸附并分离得到南极磷虾虾青素及其酯的方法,可以实现工业化生产。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯并分离VE的方法,步骤如下:
(1)取干的南极磷虾1公斤,加入6升正已烷或石油醚或6#汽油,搅拌提取1~3h,过滤得滤液,再重复该过程两次,将3次的滤液合并;
(2)按600~1000ml滤液加入2~20g白色VE粉(白色VE粉为市场上常规的产品,含VE50%,,硅胶50%)的比例向滤液中加入白色VE粉,同时搅拌,不到5秒钟,滤液中的红色被白色VE粉迅速吸附,倒出液体得红色VE粉;或:将白色VE粉等量分次加入,每次吸附完成后,分离出吸附过的VE粉后再加入,然后将多次吸附的VE粉合并在一起;
(3)将红色VE粉用丙酮洗脱至白色,其比例为每1ml红色VE粉加入3~5ml丙酮,过滤得洗脱液,同样洗脱方法再重复1~2次,合并洗脱液,将丙酮蒸发除去,得含有虾青素及其酯的红色膏状物;
(4)取1g红色膏状物,加入5~20ml二氯甲烷配成混合溶液,再向混合溶液中加入5~16ml乙醇,混匀,得澄明的红色液体,向溶液体中再加入5~10ml去离子水,混匀,液体静置后分为上下两层:上层为乳白色浑浊液,下层为澄清的红色液体,将上下两层分离;
(5)向下层红色液体中加入5~15ml乙醇和5~10ml去离子水,混匀,静止分离出上下两层,将上下两层分离;再重复该过程3次,共提取5次,最后得到的下层液体蒸发去除溶剂后,即得虾青素及其酯;将5次的上层液合并,蒸发得VE,回收利用。
整个操作过程在避光条件下进行。
检测:将上述方法得到的VE采用高效液相法与VE标准品对照检测,检测条件为:柱(250mm×4.6mm)填料孔径:5um,流动相:甲醇,流速:1ml/min.温度30℃,进样量:20ml,检测波长291nm,可在10.38min出现检测峰,峰高及面积随VE的升高而增大增高(加样回收率实验),并且与VE标准品液VE峰对齐,可证明上层液蒸发后得到的是VE。
本发明的一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,利用白色VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯后,对其进行了分离,经检测表明,可以将VE和虾青素及其酯分开。本发明的一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,吸附快速、效果好,可应用于工业化大规模生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
干南极磷虾100g,每次用600ml正已烷提取3h,提取3次,合并提取液过滤得1200ml滤液,向滤液中加入14g白色VE粉(含VE50%,硅胶50%),搅拌吸附,静止分离出红色VE粉、向红色VE粉中加入210ml丙酮洗脱虾青素及其酯,每次加入丙酮量相同共洗3次,合并洗脱液,蒸去丙酮得红色膏状物(少量VE及虾青素及其酯混合物)。
取1g膏状物加入15ml二氯甲烷混匀,加入10ml乙醇混匀,加入5ml去离子水混匀,静止,液体分为上层的乳白色浑浊液和下层的红色澄明液,将上下两层各自分离,下层红色液再加入同量乙醇和去离子水重复以上过程4次,合并5次上层液蒸发出液体得VE,下层液体蒸发后得虾青素及其酯,整个操作过程在避光条件下进行。
实施例2
南极磷虾虾青素及其酯用白色VE粉快速吸附,洗脱得红色膏状物原料方法同实施例1,膏状物中VE和虾青素及其酯的分离方法同实施例1,只不过所用溶剂的量为二氯甲烷为10ml,乙醇7ml,水5ml。
实施例3
VE和虾青素及其酯红色膏状物原料的制法及VE和虾青素及其酯的分离方法同实施例1,所不同的是分离时溶剂的用量为二氯甲烷为20ml,乙醇为15ml,水为10ml。
实施例4
实施步骤同实施例1,所用乙醇浓度为95%(体积分数),去离子水PH=7。
Claims (4)
1.一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,其特征在于:步骤如下:
干南极磷虾100g,每次用600ml正已烷提取3h,提取3次,合并提取液过滤得1200ml滤液,向滤液中加入14g白色VE粉,搅拌吸附,静止分离出红色VE粉、向红色VE粉中加入210ml丙酮洗脱虾青素及其酯,每次加入丙酮量相同,共洗3次,合并洗脱液,蒸去丙酮得红色膏状物;所述白色VE粉含VE50%,硅胶50%;所述红色膏状物为含少量VE及虾青素及其酯的混合物;
取1g膏状物加入15ml二氯甲烷混匀,加入10ml乙醇混匀,加入5ml去离子水混匀,静止,液体分为上层的乳白色浑浊液和下层的红色澄明液,将上下两层各自分离,下层红色液再加入同量乙醇和去离子水重复以上过程4次,合并5次上层液蒸发出液体得VE,下层液体蒸发后得虾青素及其酯,整个操作过程在避光条件下进行。
2.一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,其特征在于:步骤如下:
干南极磷虾100g,每次用600ml正已烷提取3h,提取3次,合并提取液过滤得1200ml滤液,向滤液中加入14g白色VE粉,搅拌吸附,静止分离出红色VE粉、向红色VE粉中加入210ml丙酮洗脱虾青素及其酯,每次加入丙酮量相同,共洗3次,合并洗脱液,蒸去丙酮得红色膏状物;所述白色VE粉含VE50%,硅胶50%;所述红色膏状物为含少量VE及虾青素及其酯的混合物;
取1g膏状物加入10ml二氯甲烷混匀,加入7ml乙醇混匀,加入5ml去离子水混匀,静止,液体分为上层的乳白色浑浊液和下层的红色澄明液,将上下两层各自分离,下层红色液再加入同量乙醇和去离子水重复以上过程4次,合并5次上层液蒸发出液体得VE,下层液体蒸发后得虾青素及其酯,整个操作过程在避光条件下进行。
3.一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,其特征在于:步骤如下:
干南极磷虾100g,每次用600ml正已烷提取3h,提取3次,合并提取液过滤得1200ml滤液,向滤液中加入14g白色VE粉,搅拌吸附,静止分离出红色VE粉、向红色VE粉中加入210ml丙酮洗脱虾青素及其酯,每次加入丙酮量相同,共洗3次,合并洗脱液,蒸去丙酮得红色膏状物;所述白色VE粉含VE50%,硅胶50%;所述红色膏状物为含少量VE及虾青素及其酯的混合物;
取1g膏状物加入20ml二氯甲烷混匀,加入15ml乙醇混匀,加入10ml去离子水混匀,静止,液体分为上层的乳白色浑浊液和下层的红色澄明液,将上下两层各自分离,下层红色液再加入同量乙醇和去离子水重复以上过程4次,合并5次上层液蒸发出液体得VE,下层液体蒸发后得虾青素及其酯,整个操作过程在避光条件下进行。
4.一种利用VE粉快速吸附南极磷虾虾青素及其酯的方法,其特征在于:步骤如下:
干南极磷虾100g,每次用600ml正已烷提取3h,提取3次,合并提取液过滤得1200ml滤液,向滤液中加入14g白色VE粉,搅拌吸附,静止分离出红色VE粉、向红色VE粉中加入210ml丙酮洗脱虾青素及其酯,每次加入丙酮量相同,共洗3次,合并洗脱液,蒸去丙酮得红色膏状物;所述白色VE粉含VE50%,硅胶50%;所述红色膏状物为含少量VE及虾青素及其酯的混合物;
取1g膏状物加入15ml二氯甲烷混匀,加入10ml体积分数95%乙醇混匀,加入5ml去离子水混匀,静止,液体分为上层的乳白色浑浊液和下层的红色澄明液,将上下两层各自分离,下层红色液再加入同量乙醇和去离子水重复以上过程4次,合并5次上层液蒸发出液体得VE,下层液体蒸发后得虾青素及其酯,整个操作过程在避光条件下进行;所述去离子水PH=7。
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