RU2002108336A

RU2002108336A - Способ получения непротеиногенных L-аминокислот

Info

Publication number: RU2002108336A
Application number: RU2002108336/13A
Authority: RU
Inventors: Томас МАЙЕР (DE); Томас Майер; Карстен ГЭБЕРТ (DE); Карстен ГЭБЕРТ
Original assignee: Консорциум Фюр Электрохемише Индустри Гмбх (De); Консорциум фюр электрохемише Индустри ГмбХ
Priority date: 2001-04-04
Filing date: 2002-04-03
Publication date: 2004-03-10
Also published as: EP1247869A1; PL353085A1; KR100469592B1; HU0201152D0; AU773173B2; CN1200110C; US6579705B2; CN1379111A; US20020177196A1; ATE341640T1; MXPA02003402A; EP1247869B1; JP4240900B2; SK4332002A3; JP2002315595A; HUP0201152A3; RU2230789C2; DE50208306D1; KR20020079402A; JP2006325607A

Claims

1. Способ получения непротеиногенной L-аминокислоты с помощью ферментативной биотрансформации путем катализируемого О-ацетил-L-серинсульфгидрилазой взаимодействия О-ацетил-L-серина с нуклеофильным соединением, отличающийся тем, что реакцию осуществляют при значении рН в диапазоне от 5,0 до 7,4.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что реакцию осуществляют при значении рН в диапазоне от 6,0 до 7,1.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что реакцию осуществляют при значении рН в диапазоне от 6,0 до 6,99.

4. Способ получения непротеиногенной L-аминокислоты путем катализируемого О-ацетил-L-серинсульфгидрилазой взаимодействия O-ацетил-L-серина с нуклеофильным соединением, отличающийся тем, что в качестве O-ацетил-L-серинсульфгидрилазы используют CysM.

5. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что О-ацетил-L-серинсульфгидрилаза в реакционной смеси обладает объемной активностью A_Cys, составляющей по меньшей мере 2 ед./мл.

6. Способ получения непротеиногенной L-аминокислоты путем катализируемого О-ацетил-L-серинсульфгидрилазой взаимодействия O-ацетил-L-серина с нуклеофильным соединением, отличающийся тем, что непрерывно добавляют О-ацетил-L-серин, О-ацетил-L-серинсульфгидрилазу и нуклеофильное соединение и одновременно отводят раствор, содержащий непротеиногенную L-аминокислоту.

7. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что О-ацетил-L-серинсульфгидрилазу применяют в очищенном виде.

8. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что применяют O-ацетил-L-серинсульфгидрилазу, иммобилизированную на носителе.

9. Способ получения непротеиногенной аминокислоты путем катализируемого О-ацетил-L-серинсульфгидрилазой взаимодействия O-ацетил-L-серина с нуклеофильным соединением, отличающийся тем, что в качестве источника О-ацетил-L-серина используют содержащий его ферментационный бульон.

10. Способ по любому из пп.1-6 или по п.9, отличающийся тем, что в качестве источника О-ацетил-L-серинсульфгидрилазы применяют иммобилизованные клетки микроорганизма, которые обладают О-ацетил-L-серинсульфгидрилазной активностью.

11. Способ по любому из пп.1-10, отличающийся тем, что нуклеофильное соединение содержит фрагмент, выбранный из группы, включающей

-S-, -Se-, -N=N⁺=N^-, -C≡N,

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что нуклеофильное соединение выбирают из группы, включающей тиосульфаты, тиолы общей формулы (1)

в которой R¹ обозначает одновалентную замещенную или незамещенную алкильную, алкокси-, арильную или гетероарильную группу, содержащую 1-15 атомов углерода, селениды, селенолы общей формулы (2)

в которой R¹ имеет значения, указанные для формулы (1), азиды, цианиды, азолы общей формулы (3) или (4)

в которой Х и Y могут иметь одинаковые или различные значения и обозначают CR⁴ или N, где R⁴ представляет собой -Н, -СООН, -ОН, -NH₂, -NO

\binom{-}{2}

, -SH, -SO

\binom{-}{3}

, -F, -Cl, -Br, -I, С₁-С₅алкилкарбонил, а также их сложные эфиры, амиды или соли или представляет собой R¹, где R¹ имеет значения, указанные для формулы (1), при этом R² и R³ имеют одинаковые или различные значения и обозначают R⁴, или С¹ и С² в формуле (4) вместо заместителей R² и R³ присоединены к кольцу с помощью мостика [-CR⁵R⁶-]_a, где а равно 1, 2, 3 или 4, а R⁵ и R⁶ имеют одинаковые или различные значения и обозначают R⁴, при этом одна или несколько групп [-CR⁵R⁶-], которые не являются соседними, могут быть заменены на кислород, серу или иминогруппу, необязательно замещенную C₁-С₅алкилом, а две соседние группы [-CR⁵R⁶-] могут быть заменены на группу [-CR⁵=CR⁶-] или группу [-CR⁵=N-], изоксазолиноны общей формулы (5) или (6)

в которой X, R¹, R² и R³ имеют указанные выше значения, при этом С¹ и С² в формуле (6) вместо заместителей R² и R³ могут быть присоединены к кольцу с помощью мостика, указанного для формулы (4).

13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что нуклеофильное соединение выбирают из группы, включающей 2-меркаптоэтанол, 3-меркаптопропанол, 3-меркаптопропионовую кислоту, 3-меркапто-1-пропансульфоновую кислоту, меркаптоэтансульфоновую кислоту, 2-меркаптоэтиламин, тиогликолевую кислоту, тиомолочную кислоту, тиоуксусную кислоту, меркаптоянтарную кислоту, меркаптопировиноградную кислоту, дитиотреитол, дитиоэритритол, 1-тиоглицерин, тиофенол, 4-фтортиофенол, 4-хлортиофенол, 4-меркаптофенол, паратиокрезол, 5-тио-2-нитробензойную кислоту, 2-меркаптотиазол, 2-меркаптотиазолин, 2-меркаптоимидазол, 3-меркапто-1,2,4-триазол, 2-тиофентиол, 2-меркаптопиридин, 2-меркаптопиримидин, 2-тиоцитозин, 2-меркаптоникотиновую кислоту, 2-меркапто-1-метилимидазол, 2-меркаптобензотиазол, 2-меркаптобензоксазол, 6-меркаптопурин, тиосульфат натрия, тиосульфат калия, тиосульфат аммония, азид натрия, азид калия, азид аммония, цианид калия, цианид натрия, цианид аммония, метилселенол, этилселенол, пропилселенол, фенилселенол, 1,2-пиразол, 3-метилпиразол, 4-метилпиразол, 3,5-диметилпиразол, 3-аминопиразол, 4-аминопиразол, пиразол-4-карбоновую кислоту, пиразол-3,5-дикарбоновую кислоту, 1,2,3-триазол, 1,2,4-триазол, 3-амино-1,2,4-триазол, 1,2,3,4-тетразол, индазол, индазол-3-карбоновую кислоту, индазол-5-карбоновую кислоту, 5-аминоиндазол, бензотриазол, бензотриазол-5-карбоновую кислоту, 5-аминобензотриазол, аминопиразолопиримидин, 8-азагуанин, 8-азааденин, изоксазолин-5-он, 3-метилизоксазолин-5-он, 4-метилизоксазолин-5-он, 4,5-диметилизоксазолин-2-он, 1,2,4-оксадиазолидин-3,5-дион.

14. Способ по любому из пп.1-13, отличающийся тем, что концентрацию нуклеофильного соединения подбирают с таким расчетом, чтобы она была эквимолярна концентрации О-ацетил-L-серина.

15. Способ по любому из пп.1-14, отличающийся тем, что реакцию осуществляют при температуре от 5 до 70°С,

16. Способ по любому из пп.1-15, отличающийся тем, что не встречающуюся в естественных условиях L-аминокислоту выбирают из группы имеющих L-конфигурацию аминокислот общей формулы (7)

где Z обозначает одновалентный фрагмент одной из формул (8)-(19)

а также их сложные эфиры, простые эфиры и соли и R¹, R², R³, R⁴, Х и Y имеют значения, указанные для формул (1)-(6).

17. Способ по любому из пп.1-16, отличающийся тем, что по завершении реакции непротеиногенные L-аминокислоты выделяют по известным методам.

18. Способ по п.17, отличающийся тем, что выделение осуществляют путем фильтрации, центрифугирования, экстракции, адсорбции, ионообменной хроматографии, преципитации или кристаллизации.