PL181968B1 - Nowe pochodne peptydowe, sposób wytwarzania pochodnych peptydowych oraz kompozycje farmaceutyczne zawierajace pochodne peptydowe PL - Google Patents

Nowe pochodne peptydowe, sposób wytwarzania pochodnych peptydowych oraz kompozycje farmaceutyczne zawierajace pochodne peptydowe PL

Info

Publication number
PL181968B1
PL181968B1 PL94311819A PL31181994A PL181968B1 PL 181968 B1 PL181968 B1 PL 181968B1 PL 94311819 A PL94311819 A PL 94311819A PL 31181994 A PL31181994 A PL 31181994A PL 181968 B1 PL181968 B1 PL 181968B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
pab
cha
pro
carbon atoms
alkyl group
Prior art date
Application number
PL94311819A
Other languages
English (en)
Other versions
PL311819A1 (en
Inventor
Karl Thomas Antonsson
Ruth Elvy Bylund
Nils David Gustafsson
Nils Olov Ingemar Nilsson
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of PL311819A1 publication Critical patent/PL311819A1/xx
Publication of PL181968B1 publication Critical patent/PL181968B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D239/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D239/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to said nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/62—Compounds containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylcarbamates
    • C07C271/64—Y being a hydrogen or a carbon atom, e.g. benzoylcarbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D207/09—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06165—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Abstract

1 Nowa pochodna peptydowa o wzorze ogólnym A1-A 2 -N H -(C H 2 )n-B Wzór I w którym A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IIa, IIb, IIc lub IId, w którym IId k jest liczba calkowita 0, 1, 2 , 3 lub 4; q jest liczba calkowita 0, 1, 2 lub 3, R 1 reprezentuje H, grupe alkilowa majaca 1 do 4 atomów wegla, lub R 1 1 OOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów wegla i moze byc podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupa R1 7 -(CH 2)p-, w której p wynosi 0 , 1 lub 2 i R 1 7 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR1 2 , CO- ONHR1 2 , gdzie R 1 2 reprezentuje H lub grupe alkilowa majaca 1 do 4 atomów wegla, a R1 2 reprezentuje H lub grupe alkilowa m ajaca 1 do 6 atomów wegla, lub R1 reprezentuje Ph(4-COORl2)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyzej, lub R1 reprezentuje R 1 3 -NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów wegla i jest ewentualnie podstawiona w polozeniu alfa do karbonylu grupa alki- lowa majaca 1 do 4 atomów wegla i gdzie R1 3 reprezentuje H lub grupe alkilowa majaca 1 do 4 atomów wegla lub -CH2 COOR1 2 , gdzie R 1 2 jest takie, jak zdefinio- wano powyzej, lub R1 reprezentuje R 1 2 OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów wegla i jest ewentualnie podstawiona w polozeniu alfa do karbonylu grupa alkilowa majaca 1 do 4 atomów wegla i gdzie R jest takie, jak zdefiniowano powyzej, lub R 1 reprezentuje R1 4 SO2 -Ph(4-COOR12)-SO2 -, Ph(3-COOR 1 2)SO2 -, Ph(2-COOR 1 2 )-SO2 -, gdzie R1 2 jest takie, jak zdefiniowano powyzej, a R 1 4 jest grupa al- kilowa majaca 1-4 atomów wegla, lub R1 reprezentuje -CO-R1 5 , w którym R 1 3 jest grupa alkilowa majaca 1-4 atomów wegla, lub R1 reprezentuje -CO-OR1 5 , gdzie R1 5 jest takie, jak zdefiniowano powyzej, lub R 1 reprezentuje -CO-(CH2 )p-COOR1 2 , gdzie R1 2 jest takie, jak zdefiniowano powyzej i p jest liczba calkowita 0, 1 lub 2; ................................................... IIa IIb IIc PL

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne peptydowe, współzawodniczące inhibitory trypsynopodobnych proteaz seryny, szczególnie trombiny i kininogenazy takie jak kallikreina, sposoby ich wytwarzania oraz kompozycje farmaceutyczne zawierające te związki jako składniki aktywne.
Koagulacja krwi jest kluczowym procesem związanym z hemostazą (to jest zapobieganiem utraty krwi z uszkodzonego naczynia) i trombozą (to jest patologiczną okluzją naczynia krwionośnego skrzepem). Koagulacja jest wynikiem złożonej serii reakcji enzymatycznych, w których jednym z końcowych etapów jest konewrsja proenzymu protrombiny do aktywnego enzymu trombiny.
Trombina gra główną rolę w koagulacji. Aktywuje płytki krwi, przekształca fibrynogen w monomery fibryny, które polimeryzują spontanicznie we włókna, i aktywuje czynnik XIII, który z kolei sieciuje polimer do nierozpuszczalnej fibryny. Trombina ponadto aktywuje czynnik V i czynnik VIII w reakcji dodatniego sprzężenia zwrotnego. Inhibitory trombiny powinny być skutecznymi antykoagulantami inhibicji płytek krwi, tworzenia fibryn i stabilizacji fibryn przez inhibicję dodatniego sprzężenia zwrotnego w łańcuchu wydarzeń prowadzącym do koagulacji i trombozy.
181 968
Kininogenazy są proteazami seryny działającymi na kininogeny z wytworzeniem kinin (bradykiniany, kallidyny, i Met-Liz-bradykiniany). Kallikreina z osocza, kallikreina tkankowa i tryptaza komórek tucznych reprezentują ważne kininogenazy.
Kininy (bradykinina, kallidyna) biorą zwykle udział w zapaleniu. Na przykład, proces aktywnego zapalenia jest związany ze zwiększoną przepuszczalnością naczyń krwionośnych prowadzącą do wynaczynienia osocza do tkanki. Powstały wysięk osocza zawiera wszystkie układy białek krążącej krwi. Pochodzące z osocza kininogeny w sposób nieunikniony będą oddziaływać na różne kallikreiny, tworząc kininy w sposób ciągły, jak długo trwa proces aktywnego wysięku osocza. Wysięk osocza zachodzi niezależnie od mechanizmów biorących udział w zapaleniu, czy to jest alergia, infekcja, czy inne czynniki (Persson i in., Editorial, Thorax, 1992, 47:993-1000). Wysięk osocza jest więc cechą wielu chorób w tym astmy, kataru, przeziębienia i zapalenie jelit. W szczególności w alergii tryptaza komórek tucznych uwalnia się (Salomonsson i in., Am. Rev. Respir. Dis., 1992, 146:1535-1542) dając swój wkład do tworzenia kinin i innych patogennych wydarzeń w astmie, katarze i wewnętrznych chorobach.
Kininy są biologicznie bardzo aktywnymi substancjami z wpływem na mięśnie gładkie, wydzielanie, wpływem neurogennym i działaniem, które może utrwalić zapalne procesy, w tym aktywację fosfolipazy A2 i zwiększanie przepuszczalności naczyń. To ostatnie działanie potencjalnie indukuje błędne koło kininy sprzyjającej wytwarzaniu większej ilości kiniany i tym podobne.
Tkankowa kallikreina wydziela przede wszystkim kininogen o niskiej masie cząsteczkowej wytwarzając kallidynę, a kallikreina osocza korzystnie wydziela bradykinin z kininogenu o wysokiej masie cząsteczkowej.
Inhibitory trombiny oparte na sekwencji aminokwasowej wokół miejsca rozszczepienia łańcucha fibrynogenu Aa najpierw opisywał Blomback i in. w J. Clin. Lab. Inwest. 24, dodatek 107, 59, (1969), który proponował sekwencje Fen-Wal-Arg (P9-P2-P1, określany tu jako sekwencja P3-P2-P1) jako najlepszy inhibitor.
W opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4346078 S. Bajusz i in. opisali inhibitor trombiny H-DFen-Pro-Agm, pochodną dipeptydylową z aminoalkiloguanidyną w pozycji PI.
Inhibitory trombiny oparte na pochodnych peptydów z cykliczną aminoalkiloguanidyną np. 3-aminometylo-l-amidynopiperydyną w pozycji PI opisano w europejskim zgłoszeniu patentowym nr EP-A2-0468231.
W europejskim zgłoszeniu patentowym nr-EP-A2-0185390 S. Bajusz i in. opisano zastąpienie agmatyny aldehydem argininowym dawało inhibitor trombiny o znacznie silniejszym działaniu.
Inhibitory kallikreiny oparte na sekwencji aminokwasowej wokół miejsca rozszczepienia Arg-Ser opisywano już wcześniej.
Chlorometyloketony argininy H-DPro-Fen-Arg-CH2Cl i H-DFen-Fen-Arg-CH2Cl były opisywane jako inhibitory kallikreiny osocza przez Kettnera i Shawa w Biochemistry 1978, 17:4778-4784 i Meth. Enzym. 1981, 80:826-842.
Podobnie, estry i amidy zawierające sekwencję H-DPro-Fen-Arg były opisywane przez Fareeda i in. w Ann. N. Y. Acad. Sci. 1981, 370:765-784 jako inhibitory kallikreiny osocza.
Inhibitory proteazy seryny oparte na elektrofilowych ketonach zamiast na aldehydach w pozycji PI opisano w następujących dokumentach patentowych:
europejskie zgłoszenie patentowe nr EP-A2-0195212 opisujące peptydowe a-keto- estry i amidy, europejskie zgłoszenie patentowe nr EP-A1-0362002 opisujące fluoroalkiloamidoketony i europejskie zgłoszenie patentowe nr EP-A2-0364344 opisujący a,b,ó-triketozwiązki mające różne właściwości inhibicji peptydazy.
Inhibitory trypsynopodobnych proteaz seryny, takie jak trombina i kallikreina, oparte na C-terminalnych pochodnych kwasu bornego i arginine oraz ich izotiouroniowych analogów opisano w europejskim zgłoszeniu patentowym nr EP-A2-0293881.
Publikacja WO 92/04371 opisuje inhibitory kininogenazy, np. inhibitory kallikreiny oparte na pochodnych argininy.
181 968
Europejskie zgłoszenie patentowe nr EP-A1-0530167 opisuje α-alkoksyketonowe pochodne argininy jako inhibitory trombiny.
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne peptydowe będące silnymi inhibitorami trypsynopodobnych proteaz seryny, szczególnie antykoagulanty i związki przeciwzapalne ze współzawodniczącą aktywnością inhibicyjną skierowaną na ich enzym, to jest powodujące odwracalną inhibicję. Dokładniej są nimi antykoagulanty do profilaktyki i leczenia chorób zakrzepowo-zatorowych takich jak zakrzepica żylna, zatory płucne, zakrzepica tętnicza, w szczególności zawał mięśnia sercowego i zakrzepica mózgowa, ogólne stany nadkrzepliwości i lokalne stany nadkrzepliwości, np. po operacjach plastyki naczyniowej i przepływu omijającego wieńcowego, i w innych sytuacjach, w których uważa się, że trombina gra pewną rolę, np. chorobie Alzheimera, a także do inhibicji kiniogenazy przy leczeniu chorób zapalnych, np. astmy, kataru, pokrzywek i zapalenie jelit oraz zapalenia stawów.
Przedmiotem wynalazku są więc nowe pochodne peptydowe o ogólnym wzorze I:
A1 - A2 - NH - (CH2)n - B
Wzórl w którym:
A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, Ilb, lic lub lid;
I 3
R
w którym:
k jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
q jest liczbą całkowitą 0, 1, 2 lub 3;
R1 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub RnOOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfajest grupą R17-(CH2)p-, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R12 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H lub grupę alki Iową mającą 1 do 6 atomów węgla, lub
R1 reprezentuje Ph(4-COORI2)-CH2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje Rl3-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
181 968
R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a R14 jest grupąalkilowąmającą 1 -4 atomów węgla, lub
R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje -CO-(-CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
R2 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów i, gdzie R21 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla;
R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
R1 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową który może, lecz nie musi być podstawiony grupą alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, lub
R3 reprezentuje grupę fenylowąpodstawionąOR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0, 1 lub
R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową
R4 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową
A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, Illb lub IIIc
w którym:
p jest liczbą całkowitą 0,1 lub 2;
mjest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
Y reprezentuje grupę metylenową lub
Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść wpozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
181 968
R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilową mająca 1 do 4 atomów węgla;
n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
IVa
w którym:
r jest liczbą całkowitą 0 lub 1;
X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
X4 reprezentuje CH2 lub NH;
X5 reprezentuje C(NH)-NH2;
R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Odkryto, że związki o wzorze ogólnym I, jako takie lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnych soli, w tym stereoizomerów, są silnymi inhibitorami proteazy seryny, szczególnie trombiny i kininogenaz takich jak kallikreina.
Korzystnymi związkami są te w których A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila lub Hb.
Korzystnymi związkami są także związki, w których R1 reprezentuje RHOOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla a R11 reprezentuje H.
Korzystnymi związkami, działającymi zwłaszcza jako inhibitory trombiny są związki, w których A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia.
Korzystnymi związkami, działającymi zwłaszcza przeciwzapalnie są związki, w których A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IHb.
Do korzystnych związków według wynalazku należą związki w których
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentuje CH2, X3 reprezentuje CH-C(NH)-NH2 r wynosi 1 i n wynosi 1;
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1 i n wynosi 1 lub 2;
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2, R6 reprezentuje H i n wynosi 1;
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 i X3 reprezentująNH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1 i n wynosi 2.
Do korzystnych związków działających zwłaszcza jako silne inhibitory trombiny należą związki, w których
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 i n wynosi 1 lub 2;
n wynosi 1 lub 2, A* reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R1IOOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową A2 reprezentuje strukturalny fragment o
181 968 wzorze Ula, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentuj ąCH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2 lub CH-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1, albo X1 i X3 reprezentująNH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1, albo X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0.
n wynosi 1, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R1 OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2 i R6 wynosi H, a zwłaszcza następujące związki
HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (HOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab
H-(R) Cgl-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R, S) CH(COOH)-(R) Cgl-Pic-Pab
H-(R) Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R, S) CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/a
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/b
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
H-(R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/a
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/b HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab Ph(4-COOH)-SO2-(R) Cha-Pro-Pab
H-(R) Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pic-Pab/a
HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pic-Pab/b
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
HOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
Me-OOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
H2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
Boc-(R) Cha-Pic-Pab
Ac-(R) Cha-Pic-Pab
Me-SO2-(R) Cha-Pic-Pab
H-(R) Cha-(R, S) beta Pic-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R, S) beta Pic-Pab
181 968
HOOC-CH2-(R) Cha-Val-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Val-Pab
H-(R)Hoc-Aze-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R, S) CH(COOH)-(R) Hoc-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R) Pro(3-(S) Ph) -Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(5)Ph)-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Tic-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
H-(R) Cha-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac
H-(R) Cha-Pro-Pac
H-(R) Cgl-Ile-Pab
H-(R) Cgl-Aze-Pab
HOOC-(R ,S) CH(Me)-(R) Cha-Pro-Pab
MeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nBuOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nHeksOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
H-(R) Cgl-Pro-Pac
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac
HOOC-CH2(R) Cha-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig
HOOC-CH2-CHr(R) Cha-Pro-Pig (HOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig
HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig
HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-(R, S) Itp
HOOC-CH2(R) Cha-Aze-(R, S) Itp
H-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp
HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp
H-(R) Cgl-Pro- (R, S) Hig
HOOC-CH2(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig
H-(R) Cha-Pro-(R, S) Hig
H-(R) Cgl-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-(R) Itp
H-(R) Cha-Pro-(R, S) Nig
H-(R) Cha-Pro-Mig
H-(R) Cha-Pro-Dig
H-(R) Cha-Aze-Dig jako takie lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, najkorzystniej
HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
181 968
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig jako takie lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Korzystnymi związkami przeciwzapalnymi są następujące związki
H-(R) Pro-Phe-Pab
HOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab
H-(R) Phe-Phe-Pab
HOOC-CO-(R) Phe-Phe-Pab
HOOC-CH2-(R) Phe-Phe-Pab jako takie lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Związki o wzorze I mające konfigurację S na aminokwasie A2 reprezentująkorzystne związki, a z tych związki mające także konfigurację R na aminokwasie A1 reprezentująszczególnie korzystne.
W niniejszym kontekście termin „grupa alkilowa mająca 1 do 4 atomów węgla” może oznaczać grupę prostą lub rozgałęzioną jeśli nie podano inaczej. Grupą alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla może być metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, s-butyl i t-butyl.
W niniejszym kontekście termin „grupa alkilowa mająca 1 do 6 atomów węgla” może oznaczać grupę prostą lub rozgałęzioną jeśli nie podano inaczej. Grupę alkilowąmającą 1 do 6 atomów węgla może być metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, s-butyl, t-butyl, n-pentyl, i-pentyl, t-pentyl, neo-pentyl, n-heksyl lub i-heksyl. Gdy mowa o nienasyceniu, domyślnie jest to podwójne wiązanie węgiel-węgiel.
Faliste linie na atomie węgla w grupie karbonylowej we wzorach Ha, Ilb, lic, lid, Ula, Illb i IIIc, na atomie azotu we wzorach Ilia, IITb i Hic na atomie węgla w układzie pierścieni we wzorach IVa, IVb, IVc oznaczają pozycję wiązania fragmentu. Skróty podano na końcu opisu.
Przedmiotem wynalazku są również nowe pochodne peptydowe o ogólnym wzorze V:
A1 - A2 - NH- (CH2)n - B D
WzórV gdzie:
A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, Ilb, lic lub Ud;
Ud
181 968 w którym:
k jest liczbą całkowitą O, 1, 2, 3 lub 4;
q jest liczbą całkowitą 0, 1, 2 lub 3;
R1 reprezentuje RnOOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupą R17-(CH2)_-, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R 2 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową, a R11 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 6 atomów węgla lub grupę benzylową, lub
R’ reprezentuje Ph(4-COOR12)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a R14 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupąalkilowąmającą 1 -4 atomów węgla, lub
R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
R1 reprezentuje -CO(CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową;
R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0,1 lub
R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową;
R4 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową;
A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, Illb lub IIIc
Ilia Illb
(CH2)m
IIIc w którym:
p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
181 968 m jest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
Y reprezentuje grupę metylenową lub
Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
R5 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, lub
R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla;
n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
IVa IVb IVc w którym:
r jest liczbą całkowitą 0 lub 1;
X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
X4 reprezentuje CH2 lub NH;
X5 reprezentuje C(NH)-NH2 lub NH-C(NH)-NH2;
R6 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1-4 atomy węgla;
D reprezentuje Z lub (Z)2,
Z reprezentuje grupę benzyloksykarbonylową która wiąże do amidynowych lub guanidynowych azotów obecnych w B jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Odkryto, że związki o wzorze ogólnym V, jako takie lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnych soli, w tym stereoizomerów, są silnymi inhibitorami proteazy seryny, szczególnie trombiny i kininogenaz takich jak kallikreina po podaniu doustnym lub pozajelitowym.
Grupa benzyloksykarbonylową (Z lub (Z)^ będzie się wiązała z amidynowymi lub guanidynowymi atomami azotu obecnymi w B.
Korzystne i szczególnie korzystne kombinacje są takie same jak opisano powyżej dla wzoru I, z tym że R11 oznacza dodatkowo grupę benzylową.
Do korzystnych związków o wzorze V będących silnymi inhibitorami trombiny należą
BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
181 968 (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cgl-Pic-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R lub S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)/a BnOOC-CH2-(R lub S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)/b BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) Ph(4-COOH)-SO2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
Boc-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
BnOOC-CH9-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z) EtOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab (Z) MeOOC-CH2-CO(R) Cha-Pic-Pab (Z) H2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z) Ac-(R) Cha-Pic-Pab (Z) Me-SO(R) Cha-Pic-Pab (Z) BnOOĆ-CH2-(R) Cha-Val-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R, S) Val-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Hoc-Pro-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Pro (3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2(R) Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Tic -Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig (Z)2 BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)2 BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac (Z) BnOOC-(R, S) CH(Me)-(R) Cha-Pro-Pab (Z) MeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nBuOOC-CH2(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nHeksOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pig (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z) BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp (Z) BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig (Z) BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig (2)
181 968
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig (Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, a zwłaszcza
BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)2
EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z)
BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Do korzystnych związków o wzorze V wykazujących zwłaszcza działanie przeciwzapalne należą
Boc-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
Boc-(R) Phe-Phe-Pab (Z)
MeOOC-CO-(R) Phe-Phe-Pab (Z)
BnOOC-CH2-(R) Phe Phe-Pab (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
W powyższych tabelach związków, litery/a i /b odnoszą się do zasadniczo czystego stereoizomeru na atomie węgla oznaczonym „R lub S”. Stereoizomer można zidentyfikować dla każdego związku w odniesieniu do części doświadczalnej. „R, S” odnosi się do mieszaniny stereoizomerów.
Związki według wynalazku inhibitujące trombinę powinny być przydatne w szczególności u zwierząt, w tym ludzi, w leczeniu lub profilaktyce zakrzepicy i nadkrzepliwości w krwi i tkankach. Są one ponadto prawdopodobnie przydatne w sytuacjach gdzie występuje niepożądany nadmiar trombiny bez objawów nadkrzepliwości, na przykład jak w chorobie Alzheimera i zapaleniu trzustki. Stany chorobowe, w których te związki sąbardzo przydatne, w leczeniu i/lub profilaktyce, obejmują żylną zakrzepicę i płucne zatory, tętniczą zakrzepicę, jak w zawale mięśnia sercowego, nietrwałej anginie, udarze zakrzepicowym i obwodowej tętniczej zakrzepicy oraz układowych zatorach zwykle z przedsionka w czasie tętniczej fibrylacji lub z lewej komory po przezściennym zawale mięśnia sercowego. Ponadto związki te mogą znaleźć zastosowanie w profilaktyce miażdżycy tętnic, takiej jak choroba wieńcowa, mózgowa choroba tętnicza i obwodowa choroba tętnicza. Ponadto związki te powinny mieć synergiczny antyzakrzepowy wpływ w połączeniu z jakimkolwiek środkiem antyzakrzepowym o innym mechanizmie działania, takie jak środek antypłytkowy, kwas acetylosalicylowy.
Ponadto związki te powinny być przydatne wraz z trombolitykami w chorobach zakrzepowych, w szczególności zawale mięśnia sercowego. Ponadto związki te mogą znaleźć zastosowanie w profilaktyce reokluzji po trombolizie, przezskómej plastyce światła naczynia (PTCA) i operacjach wieńcowych przypływów omijających. Ponadto związki te mogą znaleźć zastosowanie w zapobieganiu powtórnej zakrzepicy po mikrochirurgii i chirurgii naczyniowej w ogóle. Ponadto związki te mogą znaleźć zastosowanie w leczeniu i profilaktyce rozsianej naczyniowej koagulacji powodowanej przez bakterie, wielokrotny uraz, zatrucie lub jakikolwiek inny mechanizm.
Ponadto związki te powinny być przydatne w leczeniu antykoagulacyjnym, gdy krew styka się z obcymi powierzchniami w ciele, takimi jak przeszczepy naczyniowe, zamknięcia naczyniowe, katetery naczyniowe, protezy mechaniczne i biologiczne lub jakiekolwiek inne medyczne urządzenie. Ponadto związki te mogą znaleźć zastosowanie w leczeniu antykoagulacyjnym, gdy krew styka się z medycznymi urządzeniami poza ciałem, jak w czasie chirurgii sercowo/naczyniowej z zastosowaniem płuco-serca lub hemodializy.
Dalsze spodziewane zastosowanie antykoagulacyjnych związków według wynalazku to przemywanie kateterów i urządzeń mechanicznych używanych w pacjentach in vivo, i zastosowanie jako antykoagulatów przy przechowywaniu krwi, osocza i inny preparatów krwi in vitro.
181 968
Przeciwzapalne inhibitujące związki według wynalazku powinny być przydatne w szczególności u zwierząt, w tym ludzi, w leczeniu lub profilaktyce chorób zapalnych, takich jak astma, katar, zapalenie trzustki, pokrzywka, zapalenie jelit i stawów. Skuteczną ilość związków inhibitujących kininogenazę w obecności lub bez fizjologicznie dopuszczalnego nośnika lub rozcieńczalnika można stosować oddzielnie lub w połączeniu z innymi środkami leczniczymi.
Związki inhibitują aktywność kalikreiny, co przetestowano na chromatogenicznych podłożach zgodnie ze znanymi procedurami. Działanie przeciwzapalne obecnych związków można na przykład badać przez inhibicję indukowanych alergenem wysiękowych procesów w śluzówce dróg oddechowych lub wnętrzności.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania związków. Związki o wzorze I i V można wytwarzać w procesach obejmujących sprzęganie N-terminalnie zabezpieczonego dipeptydu lub aminokwasu, gdy stosuje się N-trminalnie zabezpieczony aminokwas, drugi aminokwas dodaje się później stosując standardowe sposoby do związku
H2N----(CH2)n----X w którym n jest liczbą całkowitą 0,1,2,3 lub 4, X reprezentuje B lub B-D, gdzie B jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I i D jest takie, jak zdefiniowano we wzorze V jako takie lub mające guanidynowe lub amidynowe atomy azotu mono- lub dizabezpieczone grupą zabezpieczającą grupę aminową, takąjak benzyloksykarbonyl-, tertbutyloksykarbonyl- lub grupa p-toluenosulfonylowa lub X jest grupą nadającą się do przemiany w B, następnie usuwanie grup zabezpieczających lub odbezpieczanie N-terminalnego atomu azotu i alkilacja się N-terminalny azot, i w razie potrzeby odbezpieczania znanymi sposobami i także w razie potrzeby tworzenie fizjologicznie dopuszczalnej soli, i w tych przypadkach, gdzie w wyniku reakcji powstaje mieszanina stereoizomerów, ewentualnie rozdzielanie standardowymi chromatograficznymi lub rekrystalizacyjnymi technikami, i w razie potrzeby wydzielanie pojedynczy stereoizomer.
Sposób wytwarzania pochodnych peptydowych o wzorze I, w którym wszystkie podstawniki mają podane wyżej znaczenie dla wzoru I jako takich lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, polega na tym, że
a) sprzęga się n-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę amino, takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q* reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2, N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q’ reprezentuje -CN, -CO-NH2 lub -CS-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynową, albo Q' reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynową dla Q1=-NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q' reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, znanymi sposobami; lub
181 968
b) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
w którym n, W1 i Q* są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie a) powyżej; lub
c) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
1 ?
W -- A1 -- A --OH
Η2Ν-<™2)η—O-Q' ▼
w1 -- A1 -- A2 -- NH-(CH2) n--ΛΛ— Q 1 w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową taką jak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q' reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH -C (NH)-NHW2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową taką jak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q’ reprezentuje -CN, -CO-NH2 lub -CS-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynową albo Q* reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynową dla Q‘= -NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q* reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1), znanymi sposobami; lub
d) sprzęga się N-terminalne zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
W 1 --- A2 ---OH
H2N-(CH2)n—θ—q' ▼
w1 -- A -- NH-(CH2)n --ΛΆ—Ql
181 968 w którym n, W1 i są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie c) powyżej; lub
e) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I i standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I i r wynosi 0,1 gdy X1, X2 i X4 reprezentują CH2 lub r wynosi 0 gdy X2 i X4 reprezentują CH2 i X1 nie występuje, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającąN-terminalnągrupę aminową takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q2reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2lub -C(NH)-NH-W2, gdzie W2reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową takąjak tert-butyloksykafbonyl lub benzyloksykarbonyl, lub Q2 reprezentuje W2, gdzie grupę aminową po odbezpieczaniu grupy W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, przekształca się następnie w grupę guanidynową stosując niezabezpieczony, N-zabezpieczony lub N^-di-zabezpieczony reagent guanidacji znanymi sposobami; lub
i) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybrany spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
w którym n, r, X1, X2 i X4, W1 i Q2 są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie e) powyżej,
181 968
g) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
W1 -- A1 --- a2 ---OH
w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową taką jak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, i W3 reprezentuje H lub grupę zabezpieczającą grupę aminową taką jak arylosulfonyl, benzyloksykarbonyl lub tert-butyloksykarbonyl; lub
h) sprzęga się N-terminalne zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
OH
w którym n, W1 i W3 sątakie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie g), przy czym końcowe związki wytwarza się w jakikolwiek następujący sposób, w zależności od natury użytej grupy Q‘ lub O2: usuwa się grupy zabezpieczające gdy Q‘=-C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, lub selektywnie odbezpiecza się grupę W1, zwłaszcza gdy Q* lub O2 = C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH- C(NH) -NH-W2, -Ń(W2)C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1 i następnie alkiluje się N-terminalny azot i w razie potrzeby odbezpiecza.
Sposób wytwarzania pochodnych peptydowych o wzorze ogólnym V, w którym wszystkie podstawniki mają podane wyżej znaczenie dla wzoru V jako takich lub w postaci stereoizome
181 968 rów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, polega na tych samych czynnościach, co sposób wytwarzania pochodnych peptydowych o wzorze I.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna do stosowania jako środek antykoagulacyjny, przeciwzakrzepowy lub przeciwzapalny, zawierająca substancję czynną w połączeniu z jednym lub wieloma farmaceutycznymi nośnikami, przy czym jako substancję czynną zawiera ona skuteczną dawkę związku o wzorze ogólnym I, w którym znaczenia podstawników są takie jak podano wyżej dla wzoru I, jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Kompozycje korzystne zawierająte związki o wzorze I, które są wymienione jako związki korzystne w części opisu dotyczącego związków wraz z ich wskazaniami medycznymi.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna do stosowania jako środek antykoagulacyjny, przeciwzakrzepowy lub przeciwzapalny, zawierająca substancję czynną w połączeniu z jednym lub wieloma farmaceutycznymi nośnikami, przy czym jako substancję czynną zawiera ona skuteczną dawkę związku o wzorze ogólnym V, w którym znaczenia podstawników są takie jak podano wyżej dla wzoru V, jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub wpostaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
Kompozycje korzystne zawierająte związki o wzorze V, które są wymienione jako związki korzystne w części opisu dotyczącego związków wraz z ich wskazaniami medycznymi.
Związki według wynalazku będą zwykle podawane doustnie, doodbytniczo, skórnie, do nosa, do tchawicy, do oskrzeli, pozajelitowe lub inhalacyjnie, w postaci farmaceutycznych kompozycji zawierających składnik aktywny jako wolną zasadę lub farmaceutycznie dopuszczalne nietoksyczne organiczne lub nieorganiczne sole addycyjne kwasów, np. chlorowodorek, bromowodorek, siarczan, wodorosiarczan, azotan, mleczan, octan, cytrynian, benzoesan, bursztynian, winian, trifluorooctan i tym podobne w farmaceutycznie dopuszczalnej postaci dawki. W zależności od zaburzenia, leczonego pacjenta i drogi podawania kompozycja może być podawana w różnych dawkach.
Dawką może być stała, półstała lub ciekła kompozycja wytworzona znanymi technikami. Zwykle aktywna substancja będzie stanowiła pomiędzy 0,1 a 99% wagowych kompozycji, dokładniej pomiędzy 0,1 a 50% wagowych dla preparatów przeznaczonych do pozajelitowego podawania i pomiędzy 0,2 a 75% wagowych dla preparatów przeznaczonych do doustnego podawania.
Odpowiednie dzienne dawki związków według wynalazku w leczeniu ludzi wynoszą około 0,001-100 mg/kg wagi ciała przy podawaniu doustnym i 0,001-50 mg/kg wagi ciała przy podawaniu pozajelitowym.
Poniżej podano przykłady wykonania wynalazku.
Widma masowe zarejestrowano na potrójnym kwadrupolowym spektrometrze masowym Finnigan MAT TSQ 700 wyposażonym w elektrowtrysk.
Pomiary 'H NMR i 13C NMR wykonywano na spektrometrze BRUKER AC-P 300 i BRUKER AM 500, ten pierwszy operujący z częstotliwością *H 500,14 MHz i 13C 125,76MHz, drugiz częstotliwością *H i 13C 300,13 MHz i 75,46 MHz. Próbki były 10-50 mg rozpuszczonymi w 0,6 ml jednego z następujących rozpuszczalników: CDC13 (czystość izotopowa > 99,8%), CD3OD (czystość izotopowa > 99,95%), D2O (czystość izotopowa > 99,98%) lub DMSO-d6 (czystość izotopowa > 99,8%). Wszystkie rozpuszczalniki pochodziły z firmy Dr. Glaser AG, Basel.
Wartości przesunięcia chemicznego ’H i 13C w CDC13 i CD3OD liczone są względem tetrametylosilanu jako zewnętrznego standardu. Przesunięcia chemiczne Ή w D2O liczone są względem soli sodowej kwasu 3-(trimetylosililo)-d4-propanowego, przesunięcia chemiczne i3Cw D2O odnoszą się do 1,4-dioksanu (67,3 ppm), obu użytych jako zewnętrzne standardy. Kalibracja zewnętrzna standardem może w pewnych przypadkach powodować niewielkie różnice przesunięcia w, porównaniu z wewnętrznym standardem, jednak, ta różnica przesunięcia chemicznego dla ’H jest mniejsza niż 0,02 ppm i dla 13C mniejsza niż 0,1 ppm.
Widmo 'HNMR sekwencji peptydowych zawierających reszty proliny lub „prolinopodobne” często wykazują dwa zestawy rezonansów. Odpowiada to istnieniu dwu dających wkład konformerów względem rotacji wokół wiązania amidowego, gdzie prolina jest N-częścią wiązania
181 968 amidowego. Konformery nazwano cis i tras. W naszych związkach sekwencje (R)Cha-Aze-, (R)Cha-Pro- i (R)Cha-Pic- często dająrównowagę cis-trans z jednym z konformerów jako przeważającym konformerem (> 90%). W tych przypadkach podano tylko przesunięcia chemiczne Ή głównego rotameru. Tylko w przypadkach, gdy sygnały podrzędnego rotameru są wyraźnie rozdzielone, są podane w dokumentacji NMR. Takie samo kryterium obowiązuje dla sygnałów NH w CDC13, tylko w przypadkach, gdy sygnały są wyraźnie rozdzielone, sąpodane w dokumentacji NMR. Z tego powodu liczby protonów podane dla niektórych związków pośrednich są mniejsze, niż liczby protonów spodziewane na podstawie wzrostu chemicznego.
Cienkowarstwową chromatografię prowadzono na płytkach szklanych lub aluminiowych powlekanych handlowym Merck Silicagel 60F254. Wizualizacji dokonywano przy pomocy kombinacji światła nadfioletowego, a następnie spryskiwania roztworem wytwarzanym przez zmieszanie 372 ml of EtOH (95%), 13,8 ml stężonego H2SO4, 4,2 ml stężonego kwasu octowego i 10,2 ml p-metoksybenzaldehydu lub kwasu fosfomolibdenowego (5-10% wagowych w EtOH (95%)) i ogrzewania.
Chromatografię rzutową prowadzono na Merck Silica gel 60 (40-63 mm, 230-400 mesh) pod ciśnieniem atmosferycznym.
Wysoko wydajną chromatografię cieczową z odwróconymi fazami (w przykładach określaną skrótem RPLC) prowadzono na urządzeniu Waters M-590 wyposażony w trzy kolumny z odwróconymi fazami Kromasil 100, C8 (Eka-Nobel) o różnych wymiarach do analitycznej (4,6 mm x 250 mm), półpreparatywnej (1” x 250 mm) i preparatywnej (2” x 500 mm) chromatografii, z detekcją przy 226 nm.
Suszenie przez wymrażanie wykonywano na urządzeniu Leybold-Heraeus, model Lyovac GT2.
WYTWARZANIE SUBSTRATÓW
Boc-(R)Pgl-OH
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc(R)Cha-OH (patrz dalej) z H-(R)Pgl-OH. Boc-(R)Cha-OH
Do roztworu H-(R)Cha-OH, 21,55 g (125,8 mmol), w 130 ml 1 M NaOH i 65 ml THF dodano 30 g (137,5 mmol) (Boc)2O i mieszaninę mieszano przez 4,5 godziny w temperaturze pokojowej. THF odparowano i dodano dodatkowe 150 ml wody. Zasadową wodną fazę przemyto dwukrotnie EtOAc, następnie zakwaszono 2 M KHSO4 i ekstrahowano 3 x 150 ml EtOAc. Połączoną fazę organicznąprzemyto wodą solankąi osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 30,9 g (90,5%) związku tytułowego jako białego ciała stałego.
Boc-(R)Hop-OH
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc(R)Cha-OH rozpoczynając od H-(R)Hop-OH.
’H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,45 (s, 9H), 2,00 (m, 1H), 2,22 (m, 1H), 2,75 (bt, 2H)4,36 (bs, 1H), 5,05 (bs, 1H), 7,15-7,33 (m, 5H).
4-(tert-butyloksykarbonyloaminometylo)pirydyna
Do roztworu 10,81 g (100 mmol) 4-aminometylopirydyny w 100 ml THF dodano 24 g (110 mmol) Boc2O rozpuszczonego w 70 ml THF w temperaturze 100°C przez 20 minut. Roztworowi pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i mieszano przez 4 godziny (osad powstał w czasie reakcji i zawiesina stała się czerwona). Rozpuszczalnik usunięto i pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przesączono przez żel krzemionkowy. Odparowanie rozpuszczalnika dało związek tytułowy jako czerwony olej, który krystalizował po odstawieniu. Surowy produkt użyto bez dalszego oczyszczania.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,45 (s, 9H), 4,32 (d, 2H), 5,05 (bs, 1H (NH)), 7,2 (d, 2H) 8,55 (d, 2H).
4-aminometylo-l -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-benzen (H-Pab(Z)) (i) azydek 4-cyjanobenzylu
Roztwór 20,23 g (0,31 mol) azydku sodu w 50 ml wody dodano do 49,15 g (251 mmol) bromku 4-cyjanobenzylu w 200 ml DMF w temperaturze otoczenia. Zaszła reakcja egzotermiczna i
181 968 po 1,5 godziny reakcji mieszaninę rozcieńczono 200 ml toluenu (uwaga: w celu uniknięcia wydzielenia potencjalnie silnego środka wybuchowego, związku azydkowego, doradza się dodawać toluen do mieszaniny reakcyjnej przed dodaniem wody) i 500 ml wody. Wodną fazę ekstrahowano dodatkowymi 2x50 ml toluenu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto 2x50 ml wody i solankąi na koniec osuszono (MgSO4) i odsączono. Roztwór użyto jako taki w następnym etapie.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 4,4 (s, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,7 (d, 2H).
(ii) azydek 4-amidynobenzylu
Chlorowodór barbotowano w mieszaninie 250 ml absolutnego etanolu i roztwór z etapu (i) (około 200 ml) powyżej w temperaturze -5°C aż do nasycenia. Przechowywanie w temperaturze 8°C przez 24 godziny i odparowanie większości rozpuszczalnika, a następnie strącenie przez dodanie bezwodnego eteru dało białe kryształy, które odsączono i rozpuszczono w 1,81 alkoholowego roztworu amoniaku. Po 48 godzinach większość rozpuszczalnika usunięto i dodano 200 ml 3,75 M roztworu NaOH, przy czym wytrącił się azydek 4-amidynobenzylu jako bezbarwne kryształy. Kryształy odsączono. W tym miejscu wydajność azydku 4-amidynobenzylu wynosiła 22,5 g (51%).
Chlorowodorek azydku etylimidanobenzylu:
'H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,6 (t, 3H), 4,5 (s, 2H), 4,65 (q, 2H), 4,8 (br s, 2H) 7,6 (d, 2H), 8,1 (d, 2H).
Azydek 4-amidynobenzylu:
'H-NMR (500 Hz, CDC13): δ 4,3 (s, 2H), 5,7 (br s, 3H), 7,3 (d, 2H), 7,6 (d, 2H).
13C-NMR (125 Mz, CDC13): węgiel amidynowy: δ 165,5, (iii) azydek 4-(benzyloksykarbonylamidyno)benzylu
Kryształy z (ii) powyżej rozpuszczono w 500 ml chlorku metylenu i powstający roztwór osuszono (K2CO3), odsączono i dodano 27 ml (194 mmol) trietyloaminy. Dodano powoli 25 ml chloromrówczanu benzylu do mieszanego roztworu jednocześnie chłodząc mieszaninę reakcyjną na łaźni lodowej. Po 3 0 minutach dodatkowe 2 ml dodano chloromrówczan benzylu i mieszanie kontynuowano przez jeszcze 30 minut. Następnie, dodano wodę i wodną fazę zakwaszono do pH 7 2M HC1. Fazę organiczną osuszono (MgSO4) i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Azydek 4-(benzyloksykarbonylamidyno)benzylu wydzielono na koniec jako bezbarwne kryształy z eteru/chlorku metylenu/heksanu.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 4,4 (s, 2H), 5,3 (s, 2H), 6,3-7,0 (br s, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H) 7,5 (d, 2H), 7,9 (d, 2H), 9,3-9,6 (br s, 1H).
I3C-NMR (125 MHz, CDC13): węgiel amidynowy: δ 167,5, (iv) 4-aminometylo-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-benzen (H-Pab(Z))
26,3 g (100 mmol) trifenylofosfiny dodano w temperaturze pokojowej do azydku 4-(benzyloksykarbonyloamidyno)benzylu z (iii) powyżej rozpuszczonego w 160 ml THF. Po 16 godzinach dodano dodatkowe 6,6 g (25 mmol) trifenylofosfiny i roztwór odstawiono na 4 godziny przed usunięciem rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w chlorku metylenu i ekstrahowano 2M HC1. Wodną fazę przemyto chlorkiem metylenu i eterem i zalkalizowano następnie 3,75M roztworem wodorotlenku sodu. Ekstrakcja chlorkiem metylenu a następnie suszenie (K2CO3) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 20 g (całkowita wydajność rozpoczynając od bromku cyjanobenzylu wynosi 28%) żółtego oleju, który zestalił się po odstawieniu.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,2-2,2 (br s, 2H), 3,8 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,35 (m, 5H), 7,4 (d, 2H), 7,8 (d, 2H), 9,1-9,6 (br s, 1H).
13C-NMR (125 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,6 i 168,17.
H-Pig(Z)2 (i) 4-(tert-butyloksykarbonyloaminometylo)piperydyna
Do roztworu 17,7 g 4-tert-butyloksykarbonyloaminometylopirydyny w 125 ml MeOH dodano 2 g 5% Rh/Al2O3 i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem 0,34 MPa przez noc. 'H-NMR wykazał, że uwodornienie było niekompletne. Wobec tego katalizator odsączono i rozpuszczał
181 968 nik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozpuszczono w 100 ml kwasu octowego, 2 g 5% Rh/Al2O3 dodano i mieszaninę uwodorniano przez 4 dni pod ciśnieniem 0,34 MPa. Katalizator odsączono i większość kwasu octowego usunięto od zmniejszonym ciśnieniem. Po dodaniu 50 ml wody do pozostałości mieszaninę zalkalizowano 5 M NaOH i wodną fazę ekstrahowano 1 x 200 + 1 x 100 ml CH2C12, połączoną fazę organiczną przemyto 25 ml wody i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało a 17,2 g brązowawego oleju, który rozpuszczono w 50 ml eteru dietylowego. Dodanie 200 ml pentanu dało osad, który odsączono otrzymując 7,7 g brunatnego proszku. Odparowanie cieczy macierzystej dało 7 g białego oleju. Brunatny proszek rozpuszczono w 100 ml EtOAc i fazę organiczną przemyto 1 x 50 ml + 1 x 25 ml 1 M KHSO4. Połączone fazy kwasowe zalkalizowano 2 M NaOH i ekstrahowano 1 x 200 + 1 x 75 ml EtOAc. Połączoną fazę organiczną osuszono i odparowano otrzymując 5,2 g związku tytułowego jako biały proszek.
Obróbka białego oleju otrzymanego z cieczy macierzystej powyżej w taki sam sposób dała dodatkowe 3,4 g produktu. Całkowita wydajność 40%.
!H-NMR (500 MHz, CDC13, mieszanina dwu rotamerów, 3:1): główny rotamer: δ 1,11 (dq, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,49-1,60 (m, 1H), 1,63-1,70 (m, 2H), 2,58 (dt, 2H), 2,93-3,03 (m, 2H), 3,07 (m, 2H), 4,75 (bs, 1H (NH)).
Oddzielone sygnały powstałe z podrzędnego rotamerupojawiająsię przy δ 1,21 (dq) i 1,91 (dt).
(ii) Boc-Pig(Z)2
Do roztworu 2 g (9,33 mmoli) 4-(tert-butyloksykarbonyloaminometylo)piperydyny w 60 ml CH3CN dodano 3,34 g (9,33 mmol) N,N-(dibenzyloksykarbonylo)metyloizotiomocznika i mieszaninę mieszano w temperaturze 60°C przez 22 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w EtOAc. Fazę organicznąprzemyto 2 x 20 ml 1 H KHSO4,1 x 20 ml wody, 1 x 20 ml solanką i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem eteru naflowego/EtOAc (1/1) jako eluentu dało 2,43 g (50%) żądanego produktu.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie mędzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,7 do 4,5 ppm.
δ 1,19-1,31 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,63-1,80 (m, 3H), 2,66-3,05 (m, 4H), 3,7-4,5 (bs, 2H), 4,65 (bt, 1H(NH)), 5,13 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 1 OH), 10,5 (bs, 1H(NH)).
(iii) H-Pig(Z)2
Roztwór 163 mg (0,31 mmol) Boc-Pig(Z)2 w 5 ml EtOAc nasycony HC1 (g) mieszano w temperaturze otoczenia przez 3 godziny i 20 minut. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 30 ml CH2C12. Fazę organicznąprzemyto 5 ml 2 M NaOH, 1 x 5 ml wody, 1 x 5 ml solanką i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 100 mg (76%) związku tytułowego.
*H-NMR (500 MHz, CDC13): Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,7 do 4,5 ppm.
δ 1,18-1,37 (m, 2H), 1,46-1,63 (m, 1H), 1,68-1,83 (m, 2H), 2,57 (d, 2H), 2,86-3,03 (m, 2H), 3,7-4,5 (bs, 2H), 5,13 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 1 OH).
4-aminometylo-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)cykloheksanu (H-Pac(Z) x 2HC1).
(i) karbaminian N-[N-4-(benzyloksykarbonylo)amidynobenzylo]tert-butylu
1,466 g (6,7 mmol) (Boc)2O dodano do mieszanego ochłodzonego do temperatury lodu roztworu 1,81 g (6,4 mmol) 4-(benzyloksykarbonylo)amidynobenzyloaminy i 1 ml (7,1 mmol) trietyloaminy w 25 ml chlorku metylu. Po 20 minutach dodano więcej chlorku metylenu i mieszaninę przemyto 5% kwasu octowego i 10% roztworem węglanu sodu. Suszenie (siarczan magnezu) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą można krystalizować z chlorku metylenu/heksanu. Wydajność wynosiła 1,66 g (68%).
(ii) karbaminian N-[N-4-amidyno benzyl)tert-butylu
181 968
Mieszaninę 1,60 g (4,2 mmol) karbaminianu N-[4-(benzyloksykarbonylo)amidynobenzylo]tert-butylu, 5 ml kwasu octowego i 160 mg 10% palladu na węglu w 50 ml etanolu mieszano w atmosferze wodoru przez 2 godziny. Katalizator usunięto przez odsączenie przez celit i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując octan związku tytułowego z ilościową wydajnością.
(iii) karbaminian N-[4-amidynocykloheksylometylo]-tert-butylu mmol octtanu N-[4-amidynobenzylo]tertbutylokarbaminianu uwodorniano w 100 ml metanolu w obecności 863 mg 5% rodu na tlenku glinu pod ciśnieniem 3,4 MPa przez 20 godzin. Katalizator odsączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w wodzie i roztwór zalkalizowano wodorotlenkiem sodu. Ekstrakcja chlorkiem metylenu, suszenie połączonych faz organicznych (węglan potasu) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 3,8 g (87%) związku tytułowego.
(iv) karbaminian N-[N-4-(benzyloksykarbonylo)amidynocykloheksylometylo]tert-butylu
1,25 ml (8,8 mmoli) chloromrówczanu benzylu dodano w temperaturze 0°C do mieszanego roztworu 2,04 g (8 mmol) karbaminianu N-[4-amidynocykloheksylo)tert-butylu, 1,23 ml (8,8 mmol) trietyloaminy, i 197 mg DMAP w 40 ml chlorku metylenu. Po 10 minutach mieszaninę reakcyjną rozcieńczono chlorkiem metylenu i ekstrahowano wodą, rozcieńczonym kwasem octowym i roztworem wodorowęglanu sodu. Fazę organiczną podano na kolumnę z krzemionką, i elucja chlorkiem metylenu zawierającym rosnące ilości octanu etylu dala 2,49 g (80%) związku tytułowego.
(v) 4-aminometyl-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)cykloheksan (H-Pac(Z) x 2HC1).
Chlorowodór przepuszczono przez roztwór 2 g (5,1 mmol) karbaminianu N-(4-(benzyloksykarbonylo)amidynocykloheksylometylo]tert-butylu w 40 ml octanu etylu. Po 10 minutach dodano metanol i po usunięciu pewnej ilości rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem wykrystalizował się dichlorowodorek związku tytułowego.
4-aminometylo-l-(H-benzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna (H-Pig(Z) x HC1) (i) 4-(N-tert-butyloksykarbonyloaminometylo)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna (Boc-Pig(Z))
7,8 g (36.4 mmol) 4-(N-tert-butyloksykarbonyloaminometylo)piperydyny i 8,98 g (40 mmole) N-benzyloksykarbonylo-S-metyloizotiomocznika zmieszano w 25 ml etanolu. Mieszaninę ogrzewano w temperaturze 60-70°C przez sześć godzin i pozostawiono w temperaturze pokojowej na dwa dni. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w CH2C12. Warstwę organiczną przemyto dwukrotnie 0,3 M KHSO4 i raz solanką. Połączone warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (100/0, 97/3, 95/5, 90/10) jako eluentu otrzymując 5,22 g (37%) tytułowego produktu.
(ii) H-Pig(Z) x HC1 (4-amiometylo-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna
5,22 g (13,5 mmole) Boc-Pig(Z) rozpuszczono w 100 ml octanu etylu nasyconego HC1 (g). Mieszaninę odstawiono na godzinę i następnie odparowano. Pozostałość rozpuszczono w wodzie i przemyto mieszaniną eteru dietylowego i octanu etylu. Warstwę wodną osuszono przez wymrożenie otrzymując 4,0 g (91%) związku tytułowego.
Ή-NMR (D20,300 MHz): δ 1,40-1,60 (m, 2H), 2,05 (bd, 2H), 2,19 (m, 1H), 3,07 (d, 2H), 3,34 (bt, 2H), 4,08 (bd, 2H), 5,40 (s, 2H), 7,5-7,63 (m, 5H)
MS m/z291 (M++l)
4-Aminoetylo-1 -benzyloksykarbonyloamidynopiperydyna (HRig(Z)) (i) 1 -Benzyloksykarbonyloamidyno-4-hydroksyetylopiperydyna
Mieszaninę 6,2 g (0,028 mol) 4-hydroksyetylopiperydyny i 3,6 g (0,028 mol) N-benzyloksykarbonylo-S-metyloizotiomocznika w 50 ml acetonitrylu ogrzewano w temperaturze wrzenia przez noc. Odparowanie i chromatografia rzutowa na żelu krzemionkowym z octanem etylu dała 3,5 g (41%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,1 -1,85 (m, 7H), 2,83 (bt, 2H), 4,70 (bt, 2H), 4,18 (bd, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
181 968 (ii) 1 -Benzyloksykarbonyloamidyno-4-mezyloksyetylopiperydyna
Do ochłodzonego lodem roztworu 3,50 g (0,0115 mol) 1-benzyloksy-karbonyloamidyno-4-hydroksyetylopiperydyny, 1,15 g (0,0115 mol) trietyloaminy w 40 ml chlorku metylenu i 10 ml tetrahydrofuran dodano kroplami 1,30 g (0,115 mol) chlorku mezylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę. Mieszaninę wylano do wody i warstwę organiczną zatrzymano. Warstwę wodną ekstrahowano chlorkiem metylenu i połączone warstwy organiczne przemyto wodą, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Produkt użyto bez dalszego oczyszczania w następnym etapie. Wydajność: 4,4 g (100%).
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): d 1,15-1,3 (m, 2H), 1,65-1,8 (m, 5H), 2,84 (bt, 2H), 3,01 (s, 3H), 4,20 (bd, 2H), 4,27 (t, 2H), 5,12 (s, 2H), 7,1-7,5 (m, 7H).
(iii) 4-Azydoetylo-1 -benzyloksykarbonyloamidynopiperydyna
W 100 ml dimetyloformamidu rozpuszczono 4,4 g (0,0115 mol) surowej 1-benzyloksykarbonyloamidyno-4-mezyloksyetylopiperydyny i dodano 4,5 g (0,069 mol) azydku sodu. Mieszaninę ogrzewano w temperaturze 100°C przez 2,5 godziny. Wylano ją następnie do wody i ekstrahowano z octanem etylu trzy razy. Połączoną fazę organiczną przemyto wodą, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Pozostałość poddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem octanu etylu/heptanu 1/1 jako eluentu. Wydajność: 3,0 g (79%).
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,20 (dq, 2H), 1,5-1,8 (m, 5H), 2,85 (dt, 2H), 3,35 (t, 2H), 4,22 (bd, 2H), 5,13 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H).
(iv) 4-Aminoetyl-l-benzyloksykarbonyloamidynopiperydyna (H-Rig(Z))
Do 30 ml wody dodano 0,40 g 10% Pd/C. Borowodorek sodu, 1,0 g (0,031 mol), rozpuszczono w 30 ml wody i dodano ostrożnie do mieszanej i ochłodzonej lodem zawiesiny Pd/C i wody. 4-Azydoetyl-l-benzyloksykarbonyloamidynopiperydynę, 2,9 g (8,8 mmol), rozpuszczono w 80 ml tetrahydrofuranu i ten roztwór dodano kroplami do powyższej ochłodzonej lodem wodnej zawiesiny. Po 4 godzinach mieszania w temperaturze pokojowej mieszaninę ochłodzono ponownie lodem i dodano 30 ml 2 M HC1. Mieszaninę odsączono przez celit i celit przemyto dodatkowąilościąwody. Tetrahydrofuran odparowano i wodną fazę przemyto octanem etylu. Wodna fazę zalkalizowano 2 M NaOH i ekstrahowano chlorkiem metylenu trzy razy. Połączoną fazę organiczną przemyto wodą, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Produkt użyto w następującym etapie bez dalszego oczyszczania.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,1-1,5 (m, 6H), 1,55-1,65 (m, 1H), 1,73 (bd, 2H),2,72(b, 2H), 2,81 (dt, 2H), 4,20 (bd, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
(3R S)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-aminometylopirolidyna (H-(R, S)Hig(Z)) (i) (3RS)-3-hydroksymetylopirolidyna
16,4 g (0,0857 mol) (3RS)-l-benzylo-3-hydroksymetylopirolidyny (patrz H-(R, S)Hig(Z) (i) wyżej) zmieszano z 1,6 g Pd/C (10%), 5 ml wody i 150 ml etanolu i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem 0,26 MPa przez noc. Po przesączenu przez hyflo (ziemia okrzemkowa) i odparowaniu rozpuszczalnika Ή-NMR wykazał, że reakcja nie zakończyła się. Uwodornienie kontynuowane pod ciśnieniem 0,26 MPa nad 1,6 g Pd/C (10%) w 5 ml wody/150 ml etanolu przez trzy dni zakończyło redukcję. Przesączenie przez hyflo i odparowanie rozpuszczalnika dało produkt z ilościową wydajnością.
(ii) (3RS)-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-hydroksymetylopirolidyna
1,01 g (0,01 mol) (3RS)-3-hydroksymetylopirolidyny i 2,29 g (0,011 mol) N-benzyloksykarbonylo-O-metyloizomocznika rozpuszczono (amina nie rozpuszcza się dobrze) w toluenie i ogrzewano do 60°C przez trzy godziny, a następnie mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę odparowano i Ή-NMR wykazał, że reakcja nie zakończyła się. Mieszaninę rozpuszczono więc w 15 ml acetonitrylu i ogrzewano do 60°C przez trzy godziny, a następnie mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano i mieszaninę rozpuszczono w CH2C12, przemyto raz wodą, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH 95/5 jako eluentu otrzymując 0,70 g (25%) produktu.
MS m/z 278 (M++l)
181 968 (iii) (3RS)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-mezyloksymetylopirolidyna
0,7 g (2,53 mmole) (3RS)-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-hydroksymetylopirolidyny i 0,70 ml (5,05 mmol) trietyloaminy rozpuszczono w 15 ml dietylowego eteru/CH2Cl2 1/1 i mieszaninę ochłodzono do 0°C. Dodano powoli 0,25 ml (3,29 mmole) chlorku metanosulfonylu w 3 ml eteru dietylowego i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez trzy godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu i ekstrahowano 0,3 M roztworu KHSO4. Warstwę wodnąprzemyto raz CH2C12. Warstwę wodną zobojętniano 10 M roztworem NaOH i ekstrahowano dwukrotnie CH2C12. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 0,450 g (50·) związku tytułowego.
(iv) (3RS)-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-azydometylopirolidyna
0,450 g (1,27 mmole) (3RS)- l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-mezyloksymetylopirolidyny i 0,124 g (1,9 mmoli) azydku sodu rozpuszczono w 10 ml dimetyloformamidu i ogrzewano do 60°C przez 4 godziny, a następnie mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano wody i mieszaninę ekstrahowano dwukrotnie toluenem/octanem etylu 2/1. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH 95/5 jako eluentu otrzymując 0,262 g (68%) produktu.
MS m/z 303 (M++l) (v) (3RS)-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-aminometylopirolidyna (H-(R, S) Hig(Z)) mg Pd/C (10%) i 2,6 ml H2O zmieszano i przepuszczono łagodny strumień azotu. Dodano 98 mg NaBH4 w 2,6 ml H2O, a następnie powoli 262 mg (0,87 mmol) (3RS)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-mezyloksymetylopirolidyny rozpuszczonej w 7 ml MeOH. Mieszaninę odstawiono na godzinę. Dodano 5 ml IM HC1 i mieszaninę odsączono przez hyflo. Organiczny rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałą warstwę wodnąprzemyto raz z octanem etylu, zalkalizowano roztworem NaOH i ekstrahowano kilkakrotnie CH2C12. Połączonąwarstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 130 mg (54t) produktu. MS m/z 277 (M++1).
(3RS)-1 -(H-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-aminoetylopirolidyna (H-(R, S)Hig(Z)) (i) (3RS)-1 -benzylo-3-hydroksymetylopirolidyna
25,2 g (0,1063 mol) (3RS)-l-benzylo-2-okso-4-metoksykarbonylopirolidyny dodano powoli do zawiesiny 6,22 g wodorku litowo-glinowe go w 160 ml eteru dietylowego w atmosferze argonu. Mieszaninę mieszano przez noc i następnie ogrzewano do wrzenia przez godzinę. Mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury pokojowej i dodano 0,2 g Na2SO4 x 10 H2O a następnie powoli, w tej kolejności, 6 ml wody, 18 ml 3,75 M roztworu NaOH i 6 ml wody. Zawiesinę osuszono z nadmiaru wody Na2SO4/celitem, odsączono i odparowano otrzymując 20,3 g produktu.
'H-NMR (CDC13,300 MHz): δ 1,64-1,77 (m, 1H), 1,93-2,07 (m, 1H), 2,27-2,40 (m, 2H), 2,51 (dd, lH),2,62(dd, lH),2,82(m, lH),3,52(dd, 1H) 3,59 (s,2H), 3,67 (dd, 1H), 7,15-7,40 (m,5H) (ii) (3RS)-1 -benzylo-3 -chlorometylopirolidyna
Do wrzącego roztworu 15,3 g (0,08 mol) (3RS)-l-benzylo-3-hydroksymetylopirolidyny w 220 ml CHC13 dodano powoli roztwór 330 ml chlorku tionylu w 60 ml CHC13, i wrzenia kontynuowano przez godzinę. Mieszaninę odparowano i pozostałość rozpuszczono w wodzie. Warstwę wodną przemyto octanem etylu i następnie zalkalizowano 0,2 M roztworu NaOH. Warstwę wodną ekstrahowano trzy razy octanem etylu i połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując produkt z ilościową wydajnością (16,8 g).
'H-NMR (CDC13,300 MHz): δ 1,55 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 2,38 (dd, 1H) 2,48-2,64 (m, 3H; w nim 2,58 (t, 2H))), 2,73 (dd, 1H), 3,51 (d, 2H), 3,60 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H) (iii) (3 RS)-1 -benzylo-3-cyjanometylopirolidyna
16,8 g (0,08 mol) (3RS)-l-benzylo-3-chlorometylopirolidyna i 5,88 g (0,12 mol) cyjanku sodu rozpuszczono w 250 ml dimetylosulfotlenku. Mieszaninę mieszano w temperaturze 60°C przez dwa dni i w temperaturze pokojowej przez tydzień. Dodano wody i mieszaninę ekstraho
181 968 wano trzy razy z octanem etylu. Połączoną warstwę organiczną przemyto solanką osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 14,7 g (92%) produktu.
*H-NMR (CDC13, 500 MHz): δ 1,55 (m, 1H), 2,13 (m, 1H), 2,35 (dd, 1H) 2,42 (t, 2H), 2,44-2,59 (m, 2H), 2,65 (m, 1H), 2,73 (dd, 1H), 3,61 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H) (iv) (3RS)-1 -benzylo-3-aminoetylopirolidyna
14,7 g (0,0734 mol) (3RS)-l-benzylo-cyjanometylopirolidyny rozpuszczonej w 220 ml eteru dietylowego dodano powoli do zawiesiny 2,94 wodorku litowo-glinowego w 74 ml eteru dietylowego w atmosferze argonu. Mieszaninę mieszano przez noc, i do mieszaniny dodano 6 ml wody, 18 ml 3,75 M roztworu NaOH i 6 ml wody. Zawiesinę osuszono z nadmiaru wody Na2SO4/celitem, odsączono przez odessanie i odparowano otrzymując 14,84 g (99%) produktu.
Ή-NMR (CDCI3, 300 MHz): δ 1,41 (m, 1H), 1,51 (q, 2H), 1,90-2,10 (m, 2H; w nim 2,05 (dd, lH))),2,18(m, 1H),2,43(m, 1H),2,55-2,73(m,3H),2,80(pozomyt, 1H),3,58(pozornyd, 2H), 7,15-7,4 (m, 5H) (v) (3 RS)-1 -benzylo-3 -(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)pirolidyna
Do mieszaniny 14,84 g (0,0726 mol) (3RS)-l-benzylo-3-aminoetylopirolidyny, 72,6 ml IM roztworu NaOH, 76 ml wody i 145 ml THF dodano 17,44 g (0,08 mol) diwęglanu ditert-butylu i mieszaninę mieszano przez noc. Roztwór zatężono i ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Połączoną warstwę organicznąprzemyto solanką osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (95/5, 90/10) jako eluentu otrzymując 14,69 g (80%) produktu.
1H-NMR(CDCL3,300 MHz): δ 1,25-1,65 (m, 12H; wnim 1,40 (s, 9H), 1,90-2,25 (m, 3H), 2,46 (m, 1H), 2,67 (m, 1H), 2,80 (pozorny t, 1H), 3,09 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 4,60 (bs, NH), 7,15-7,35 (m, 5H) (vi) (3RS)-3-(N-tert-butyIoksykarbonyloaminoetylo)-pirolidyna
3,1 g (0,01 mol) (3RS)-l-benzylo-3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)pirolidyny uwodorniono pod ciśnieniem 0,28 MPa nad 0,6 g katalizatora Pearlmana (PdiOH)^) w 40 ml etanolu (95%) przez noc. Po przesączeniu katalizatora przez celit i odparowanie rozpuszczalnika Ή-NMR wykazał, że reakcja nie zakończyła się. Wobec tego dodano 0,6 g katalizatora Pearlmana w 40 ml etanolu (95%) jeszcze raz i mieszaninę potraktowano w atmosferze wodoru pod ciśnieniem 0,28 MPa przez noc. Przesączenie przez celit i odparowane rozpuszczalnika dało produkt z ilościową wydajnością (2,18 g).
MS m/z 214 (M+) (vii) (3RS)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-aminoetylopirolidyna (H-(R, S)Hig (Z))
2,18 g (0,0102 mmol) (3RS)-3-N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)pirolidyny i 2,81 g (0,0125 mol) benzyloksykarbonylo-S-metyloizotiomocznika rozpuszczono w 30 ml toluen i ogrzewano do 60-70°C przez 8 godzin, a następnie mieszano w temperaturze pokojowej przez jeden dzień. Dodano 0,3 M roztworu KHSO4 i warstwę wodnąprzemyto mieszaniną toluenu i octanu etylu i pozostawiono na 2 dni, po czym usunięto grupę Boc. Kwaśną wodną fazę zalkalizowano i ekstrahowano cztery razy CH2C12. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 2,0 g (51%) związku tytułowego.
'H-NMR (CDCI3,330 K, 300 MHz): δ 1,45-1,7 (m, 3H), 2,07 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 2,74 (t, 2H), 3,00 (pozomyt, 1H), 3,33 (pozorny q, 1H), 3,45-3,80 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,72 (bs, 2 NH), 7,15-7,45 (m, 5H) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-aminoetylocykloheksan (H-(R, S)Itp(Ts)) (i) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-karboksycyklohekan
Wytworzony z zastosowaniem takich samych sposobów jak opisano w Journal Org. Chem., str. 46,1971.
(ii) (4RS)-1,3 -diaza-2-tosylimino-4-hydroksymetylocykloheksan
12,9 g (345 mmol) LiAlH4 ostrożnie dodano do zimnej zawiesiny (temperatura łaźni lodowej) 9,9 g (33 mmol) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-karboksycykloheksanu w 330 ml suchego THF. Reakcję mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną przetworzono według Fieser & Fieser, np. dodając 12,9 g wody, 38,7 g 3,75 M NaOH, 12,9 g wody,
181 968
Na2SO4, CH2C12 i celite do mieszaniny, i odsączono. Odparowanie rozpuszczalnika dało 7,0 g (75%) żądanego produktu.
MS m/z 284 (M++l) (iii) (4RS)- l,3-diaza-2-tosylimino-4-mezyloksymetylocykloheksan
2,9 ml MsCl (37,1 mmol) dodano ostrożnie do zimnej (temperatura łaźni lodowej) zawiesiny 7,0 g (24,7 mmol) (4RS)-l,3-diaza-2-tosylimino-4-hydroksymetylocykloheksanu w 6,9 ml (49,4 mmol) trietyloaminy i 125 ml CH2C12. Dodano wody po 1 godzinie 15 min i fazę organiczną oddzielono, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując związek tytułowy z ilościową wydajnością.
MS m/z 362 (M++l)) (iv) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-cyjanometylocykloheksan
8,9g(24,7 mmol) (4RS)-l,3-diaza-2-tosylimino-4-mezyloksymetylocykloheksanui 1,3 g (27,2 mmol) NaCN rozpuszczono w 75 ml DMSO. Po mieszaniu w temperaturze 40°C przez 60 godzin dodano dodatkową ilość 0,31 g (6 mmol) NaCN i roztwór mieszano w temperaturze 65°C przez trzy godziny. Dodano 150 ml wody i z roztworu wytrąciły się kryształy. Odsączono je i osuszono otrzymując 5,4 g (75%) żądanego produktu.
MS m/z 293 (M++l)) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-aminoetylocykloheksan (H-(R, S)Itp(Ts))
935 mg LiAlH4 dodano ostrożnie do ochłodzonej (temperatura łaźni lodowej) zawiesiny 2,4 g (8,2 mmol) (4RS)-l,3-diaza-2-tosylimino-4-cyjanometylocykloheksanu w 90 ml THF. Po mieszaniu przez 2 godziny dodano 1 gH2O,3g3,75MNaOH, 1 gH2O,Na2SO4, celit i CH2C12.
Mieszaninę odsączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 2,2 g (90%) żądanego produktu.
‘H-NMR (500 MHz, MeOD); δ 1,52-1,71 (m, 3H), 1,88-1,96 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,64-2,73 (m, 2H), 3,2-3,4 (m, 2H, częściowo zachodzi na sygnał rozpuszczalnika), 3,44-3,53 (m, 1H), 7,28 (d, 2H), 7,71 (d, 2H) (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-aminoetylocykloheksan (H-(S)Itp(Ts))
Wytworzony w traki sam sposób, jak opisano dla H-(R, S)Itp(Ts) rozpoczynając od optycznie czystego kwasu 2,4-diaminomasłowego.
'H-NMR (300,13 MHz, CDC13); δ 0,97-1,15 (s br, 1H), 1,48-1,69 (m, 3H), 1,84-1,95 (m, 1H), 2,37 (s, 3H),· 0 2,68-2,82 (m, 1H), 2,86-2,98 (m, 1H), 3,22-3,44 (m, 2H), 3,45-3,58 (m, 1H), 7,19 (d, 2H), 7,72 (d, 2H) 13C NMR (300,13 MHz, CDC13); δ węgiel guanidynowy 154,05
H-Aze-OEt x HC1
Wytworzony w taki sam sposób, jak opisano dla H-Pic-OEt x HC1 z H-Aze-OH (patrz dalej).
H-Aze-OMe x HC1
Wytworzony według procedury opisanej prze Seebacha D. i in. w Liebigs Ann. Chem., str. 687, 1990.
H-Pab(Z) x HC1
Wytworzono dodając 1 mol równoważnik 5 M HC1 w izopropanolu do roztworu surowego H-Pab(Z) w EtOH (około 1 g/10 ml) z natychmiastowym wytrąceniem H-Pab(Z) x HC1 z roztworu. Po przesączeniu osad przemyto 2 razy zimnym EtOH i osuszono otrzymując związek tytułowy z prawie ilościową wydajnością.
H-Pic-OEt z HC1
Kwas L-Pipekolinowy, 4,0 g (0,031 mol), umieszczono w zawiesinie w 100 ml abs. etanolu i barbotowano przez niego ostrożnie HC1 (g) aż do przejrzystości roztworu. Ochłodzono go na łaźni lodowej i dodano kroplami 17 ml chlorku tionylu w ciągu 15 min. Łaźnię wodną usunięto i mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 2,5 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i produkt otrzymano jako chlorowodorek z ilościową wydajnością.
'H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,33 (t, 3H), 1,8-2,1 (m, 5H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,1 -3,3 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,14 (dd, 1H), 4,44 (q, 2H).
H-(R, S)betaPic-OMe x HC1
181 968
Mieszaninę 2,0 g (15,5 mmol) kwasu nipekotowego w 8 ml metanolu ochłodzono na łaźni wodnej i dodano 2,76 g (23,2 mmol) chlorku tionylu. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w małej ilości metanolu, dodano eter dietylowy i H(R, S)betaPic-OMe x HCI wytrącił się jako białe kryształy. Kryształy, 2,57 g (92%), odsączono.
Boc-(R)Cgl-OH
Boc-(R)-Pgl-OH, 32,6 g (0,13 mol), rozpuszczono w 300 ml metanolu i dodano 5 g Rh/Al2O3. Roztwór uwodorniano pod ciśnieniem 5,2 do 2,8 MPa przez 3 dni. Po przesączeniu i odparowaniu rozpuszczalnika NMR wykazał obecność około 25% metylowego estru związku tytułowego. Surową substancję rozpuszczono w 500 ml THF i dodano 300 ml wody i 20 g LiOH. Mieszaninę mieszano przez noc i THF odparowano. Pozostałą wodną fazę zakwaszono KHSO4 i ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Połączoną warstwę organicznąprzemyto wodą, osuszono (Na2SO4) i odparowano otrzymując 28,3 g (83%) żądanego produktu.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,9-1,7 (m, 20H), 4,0-4,2 (m, 1H), 5,2 (d, 1H).
Boc-(R)Cgl-OH
Do ochłodzonego lodem roztworu 2,01 g (7,81 mmol) Boc(R)Cgl-OH i 1,83 g (15,6 mmol) HOSu w 25 ml CH3CN dodano 1,69 g (8,2 mmol) DCC i reakcji pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej. Po mieszaniu przez 3 dni wytrącony DCU odsączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość rozpuszczono w EtOAc i fazę organicznąprzemyto H2O, KHSO4, NaHCO3, solanką i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało związek tytułowy w ilościową wydajnością.
Boc-(R)Cha-OSu
Boc-(R)Cha-OH (1 równoważnik), HOSu (1,1 równoważnika) i DCC lub CME-CDI (1,1 równoważnika) rozpuszczono w acetonitrylu (około 2,5 ml/mmol kwasu) i mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Osad powstały w czasie reakcji odsączono, rozpuszczalnik odparowano i produkt osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem. (Gdy CME-CDI użyto w reakcji, pozostałość, po odparowaniu CH3CN, rozpuszczono w EtOAc i fazę organicznąprzemyto wodą i osuszono). Odparowanie rozpuszczalnika dało związek tytułowy.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13,2 rotamery około 1:1) δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,48 (m, 4H), l,5-l,98(m, 16H;wnim 1,55 (bs9H), 2,82 (bs,4H),4,72 (bs, 1H, główny rotamer), 4,85 (bs, 1H, podrzędny).
Boc-(R)Hoc-OH
Boc-(R)Hop-OH (patrz powyżej), 3,2 g (11,46 mmol) rozpuszczono w metanolu (75 ml). Dodano rod na aktywowanym tlenku glinu (Rh/Al2O3), 0,5 g, i mieszaninę mieszano w atmosferze wodoru pod ciśnieniem 0,41 MPa przez 18 godzin. Katalizator odsączono przez hyflo i rozpuszczalnik odparowano otrzymując produkt z prawie ilościową wydajnością.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,90 (m, 2H), 1,08-1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,60-1,74 (m, 6H), 1,88 (bs, 1H), 4,27 (bs, 1H).
Boc-(R)Hoc-OSii
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-OSu z Boc-(R)Hoc-OH.
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH
Wytworzony według sposobu opisanego przez J.Y.L Chunga i in. w Journal of Organie Chemistry, nr 1, str. 270-275, 1990
Hoc-(R)Cgl-Aze-OH (i) Boc-(R)Cgl-Aze-OMe
Do mieszanej mieszaniny 3,86 g (15 mmol) Boc-(R)Cgl-OH i 2,27 g (15 mmol) H-Aze-OMe x HCI i 2,75 g (22,5 mmol) DMAP w 40 ml CH3CN w temperaturze 5°C dodano 3,16 g (16,5 mmol) EDC. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 48 godzin. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 150 ml EtOAc i 20 ml H2O, oddzieloną warstwę organicznąprzemyto 2 x 20 ml 0,5 M KHSO4,2 x 10 ml NaHCO3 (nasycony), 1 x 10 ml H20,1 x 10 ml solanki i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 4,91 g (92%) związku tytułowego, który użyto bez dalszego oczyszczania w następnym etapie.
181 968 ‘H-NMR (500 MHz, CDC13, 0,1 g/ml): główny rotamer, 0,83-1,35 (m, 5H), 1,38 (s, 9H), 1,47-1,84 (m, 6H), 2,18-2,27 (m, 1H), 2,50-2,62 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,94-4,06 (Zn, 1H), 4,07-4,15 (m, 1H), 4,39-4,47 (m, 1H),4,68 (dd, >9,1, >5,1,1H),5,O9 (d, J=9,2, 1H). Oddzielone piki z podrzędnego rotameru, 2,27-2,35 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,80-3,87 (m, 1H), 3,88-3,95 (m, 1H), 4,92 (d, J=9,2, 1H), 5,21 (dd, J=9,1, 1, J-5, 1H).
(ii) Boc-(R)Cgl-Aze-OH
Hydrolizę Boc-(R)Cgl-Aze-OMe prowadzono według procedury opisanej dla Boc-(R)Cha-Pic-OEt (patrz dalej). Produkt krystalizowano z EtOH/acetonu/wody (1/1/3,95)wydajność 80%.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,85-1,3 (m, 5H), 1,40 (s, 9H), 1,5-1,9 (m, 6H), 1,95-2,2 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,95 (m, 1H), 5,16 (bd, 1H).
Hoc-(R)Cgl-Pic-OH (i) Boc-(R)Cgl-Pic-OMe
Chlorek piwaloilu (1,0 ml, 8,1 mmol) dodano do roztworu Boc-(R)Cgl-OH (2,086 g, 8,1 mmol) i trietyloaminy (1,13 ml, 8,1 mmol) w toluenie (25 ml) i DMF (5 ml). Mieszaninę H-Pic-OMexHCl(l,46 g, 8,1 mmol) itrietyloaminy(1,13 ml, 8,1 mmol) wDMF (20 ml)dodano następnie w temperaturze łaźni lodowej. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się powoli ogrzać do temperatury pokojowej i po 24 godzinach rozcieńczono ją wodą i ekstrahowano toluenem. Po przemyciu 0,3 M KHSO4, 10% Na2CO3 i solanką rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 2,52 g (81 %) bezbarwnego oleju, który użyto bez dalszego oczyszczania.
'H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamery, stosunek 5:1): δ 0,8-1,8 (m, 25H), 2,25 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, podrzędny rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,85 (d, 1H), 4,3 (t, 1H, podrzędny rotamer), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,25 (d, 1H), 5,30 (d, 1H).
(ii) Boc-(R)Cgl-Pic-OH
Wytworzony według procedury dla hydrolizy Boc-(R)Cha-Pic-OEt (patrz dalej) z zastosowaniem produktu z (i) powyżej. Produkt krystalizowano z eteru diizopropylowego i heksanu.
'H-NMR (500 MHz, CDC13,2 rotamery, stosunek 5:1): δ 0,8-1,8 (m, 25H), 2,3 (d, 1H), 2,8 (t, 1H,podrzędnyrotamer),3,3 (t, 1H),3,9(d, lH),4,4(t, 1H,podrzędny),4,5-4,6(m, 1H), 5,1 (s, 1H, podrzędny rotamer), 5,3 (d, 1H), 5,40 (d, 1H).
Boc-(R)Cgl-Pro-OH
3,59 g (31,24 mmol) L-proliny zmieszano z 20 ml wody i 1,18 g (29,7 mmol) wodorotlenku sodu. Do mieszaniny dodano 2,8 g (7,8 mmol) Boc-(R)Cgl-OSu w 10 ml DMF. Ze względu na problem rozpuszczalności dodano dodatkowe 30 ml DMF i mieszaninę reakcyjną mieszano przez trzy dni. Rozpuszczalnik odparowano i dodano wody. Wodną fazę przemyto octanem etylu, zakwaszono 0,3 M roztworu KHSO4 i ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Fazę organiczną przemyto raz wodA i raz solanką, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 2,3 g (83%) produktu.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,89-2,17 (m, 23H), 2,37 (m, 1H), 3,55 (q, 1H), 3,90 (bs, 1H), 4,28 (t, 1H), 4,52 (bs, 1H), 5,22 (bs, 1H (NH)).
Hoc-(R)Cha-Aze-OH
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-Pic-OH rozpoczynając od Boc-(R)Cha-OH i H-Aze-OEt x HC1 (patrz dalej).
Hoc-(R)Cha-Pro-OH
H-(S)Pro-OH (680 mmol) rozpuszczono w 0,87 M wodorotlenku sodu (750 ml). Dodano kroplami Hoc-(R)Cha-OSu (170 mmol) rozpuszczony w DMF (375 ml) w czasie 20 min. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Mieszaninę zakwaszono (2M KHSO4) i ekstrahowano trzy razy z octanem etylu. Warstwy organiczne połączono i przemyto trzy razy wodą i raz solanką. Po osuszeniu nad siarczan sodu i odparowanie rozpuszczalnika, syropowaty olej rozpuszczono w eterze dietylowym, rozpuszczalnik odparowano i na koniec produkt osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując Boc-(R)Cha-Pro-OH jako biały proszek z prawie ilościową wydajnością.
181 968
Ή-NMR (500 MHz, CDC13, mieszanina dwu rotamerów 9:1) δ 0,8-1,05 (m, 2H), 1,05-1-55 (m, 15H; w nim 1,5 (bs, 9H)), 1,55-1,8 (m, 5H), 1,8-2,15 (m, 3H), 2,47 (m,lH), 3,48 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 5,06 (m, 1H); Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 2,27 (m), 3,58 (m), 4,33 (m), 5,0 (m).
Hoc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu (i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH
Wytworzono w taki sam sposób opisano powyżej dla Boc(R)Cha-Pro-OH rozpoczynając od Boc-(Me)(R)Cha-OSu i H-Pro-OH.
(ii) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-OSu rozpoczynając od Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH.
Boc- (R)Cha-Pic-OH (ia) Boc-(R)Cha-Pic-OEt
Boc-(R)Cha-OH, 6,3 g (0,023 mol), rozpuszczono w 150 ml CH2C12. Roztwór ochłodzono na łaźni lodowej i dodano 6,3 g (0,047 mol) N-hydroksybenzotriazolu i 11,2 g (0,0265 mol) CME-CDI. Łaźnię wodną usunięto o 15 min i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 4 godziny w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 150 ml DME i ochłodzono na łaźni lodowej. Dodano H-Pic-OEtx HC1,4,1 g (0,021 mol), i pH zmieniono na około 9 przez dodanie N-metylomorfoliny. Łaźnię wodnąusunięto po 15 min i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 dni. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu i przemyto rozcieńczonym KHSO4 (aq), NaHCO3 (aq) i wodą. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4) i odparowano otrzymując 7,7 g (89%) Boc-(R)Cha-Pic-OEt, który użyto bez dalszego oczyszczania.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13,2 rotamery, 3:1 stosunek) d 0,7-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 29H; w nim 1,28 (t, 3H)), 1,45 (bs, 9H), 2,01 (bd, 1H, główny rotamer), 2,31 (bd, 1H), 2,88 (bt, 1H, podrzędny), 3,30 (bt, 1H, główny), 3,80 (bd, 1H, główny), 4,15-4,3 (m, 2H), 4,5-4,7 (m, 2H, podrzędny), 4,77 (bq, 1H, główny), 4,90 (bd, 1H, podrzędny), 5,28 (bd, 1H, główny), 5,33 (bd, 1H, główny).
(ib) Boc-(R)Cha-Pic-OMe
400 μΐ (3,23 mmol) chlorku piwaloilu dodano do mieszanej mieszaniny 875 mg (3,22 mmol) Boc-(R)Cha-OH i 450 μΐ (3,23 mmol) trietyloaminy w 10 ml toluenu i 2 ml DME Mieszaninę 596 mg (3,32 mmol) chlorowodorku (S)-pipekolanianiu metylu i 463 μΐ (3,32 mmol) trietyloaminy w 5 ml DMF dodano do powstającej zawiesiny po 45 minut. Po 2 godzinach dodano 100 μΐ (0,72 mmol) trietyloaminy i mieszanie kontynuowano przez jeszcze 18 godzin. Do mieszaniny reakcyjnej dodano wodę i toluen i fazę organicznąprzemyto 0,3 M KHSO4,10% Na2CO3 i solanką. Suszenie (MgSO4) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 1,16 g związku tytułowego.
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-OH
Boc-(R)Cha-Pic-OEt, 5,6 g (0,014 mol), zmieszano ze 100 ml THF, 100 ml wody i 7 g LiOH. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. THF odparowano i wodny roztwór zakwaszono KHSO4 (aq) i ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Połączone fazy organiczne przemyto wodą osuszono (Na2SO4) i odparowano otrzymując 4,9 g (94%) Boc-(R)ChaPic-OH, który użyto bez dalszego oczyszczania. Związek można krystalizować z eteru diizopropylowego/heksanu.
Ester metylowy powstały w procedurze (ib) powyżej można hydrolizować z zastosowaniem takiej samej procedury, jak opisano dla estru etylowego (ii).
Ή-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamery, stosunek 3,5:1) δ 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-2,1 (m, 27H; w nim 1,43 (s, 9H, główny rotamer), 1,46 (s, 9H, podrzędny)), 2,33 (bd, 1H), 2,80 (bt, 1H, podrzędny), 3,33 (bt, 1H, główny), 3,85 (bd, 1H, główny), 4,57 (bd, 1H, podrzędny), 4,68 (m, 1H, podrzędny), 4,77 (bq, 1H, główny), 5,03 (bs, 1H, podrzędny), 5,33 (bd, 1H, główny), 5,56 (m, 1H, główny).
Boc-(R)Cha-(R,8)betaPic-OH
181 968 (i) Boc-(R)Cha-(R, S)betaPic-OMe
Chlorek piwaloilu, 0,9 ml (7,3 mmol), dodano do roztworu 2,0 g (7,3 mmol) Boc-(R)Cha-OH i 0,81 ml (7,3 mmol) 4-N-metylomorfoliny w 20 ml acetonitrylu. Po mieszaniu przez 1 godzinę i 30 minut dodano 1,3 g (7,3 mmol) H-(R, S)betaPic-OMe x HC1 i 1,62 ml (14,6 mmol) 4-N-metylomorfoliny i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 24 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w toluenie i pewnej ilości eteru dietylowego. Po przemyciu 0,3 M KHSO4 i roztworem KHCO3, i osuszeniu Na2SO4 rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Chromatografia rzutowa z zastosowaniem heptan/octanu etylu (7/3) jako eluentu dała 2,4 g (83%) żądanego produktu.
(ii) Boc-(R)Cha-(R, S)betaPic-OH
W temperaturze pokojowej 2,35 g (5,9 mmol) Boc-(R)Cha(R, S)betaPic-OH rozpuszczono w 35 ml THF i dodano 2,1 g LiOH w 35 ml wody. Po mieszaniu przez 5 godzin THF usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Wodną fazę zakwaszono 2M KHSO4 i ekstrahowano z octanem etylu, osuszono nad Na2SO4 i odparowano otrzymując 2,0 g (89%) produktu.
Hoc-(R)Cha-Val-OH (i) Boc-(R)Cha-Val-OMe
3,1 ml (25 mmol) chlorku piwaloilu dodano w temperaturze otoczenia do mieszanej mieszaniny 6,75 g (25 mmol) Boc-(R)Cha-OH i 3,5 ml (25 mmol) trietyloaminy w 50 ml DMF. Po 3 godzinach dodano 4,16 (25 mmol) chlorowodorku estru metylowego waliny w 50 ml DMF i 3,5 ml trietyloaminy dodano. Po mieszaniu przez noc, dodano kilka kryształów DMAP dodano i mieszaninę reakcyjną ogrzano do 50°C przez 5 minut. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i do pozostałości dodano eter i toluen. Przemycie 0,3 M KHSO4 i 10% Na2CO3 a następnie suszenie (MgSO4) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem toluenu/octanu etylu jako eluentu. Wydajność związku tytułowego wynosiła 6,99 g (73%).
(ii) Boc-(R)Cha-Val-OH
Mieszaninę 8,73 g (23 mmol) Boc-(R)Cha-Val-OMe i 5,6 g (230 mmol) wodorotlenku litu w 75 ml THF i 75 ml wody mieszano przez 4 godziny. THF usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostały roztwór rozcieńczono wodą i ekstrahowano eterem. Zakwaszenie 2 M KHSO4 i ekstrakcja z octanem etylu a następnie suszenie (MgSO4) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 8,15 g (96%) związku tytułowego.
Boc-(R)Hoc-Aze-OH (i) Boc-(R)Hoc-Aze-OEt
W temperaturze pokojowej 1,0 g (3,5 mmol) Boc-(R)Hoc-OH i 0,95 g (7,0 mmol) H O Bt rozpuszczono w 15 ml CH2C12. Roztwór ochłodzono na łaźni lodowej i dodano 0,77 g (4,0 mmol) EDC. Łaźnię wodną usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3 godziny w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 20 ml DMF. Dodano 0,58 g (3,5 mmol) H-(R)Aze-OH i pH zmieniono na około 9 przez dodanie N-metylomorfoliny. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez jeden dzień. Podzielono ją pomiędzy wodę i toluen. Fazę organiczną oddzielono i przemyto 0,3 M KHSO4, rozcieńczono KHCO3, solanką, osuszono NaSO4 i odparowano. Chromatografia rzutowa (1% EtOH w CH2C12 i heptan: EtOAc) dała 0,35 g (25%) żądanego produktu.
(ii) Boc-(R)Hoc-Aze-OH
W temperaturze pokojowej 0,65 g (1,6 mmol) Boc-(R)Hoc-AzeOEt rozpuszczono w 10 ml THF i dodano 0,59 g LiOH w 10 ml wody. Po mieszaniu przez 24 godziny dodano 2M KHSO4 i THF usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Wodną fazę zakwaszono następnie 2M KHSO4 i ekstrahowano octanem etylu, osuszono nad Na2SO4 i odparowano otrzymując 0,5 g (85%) związku tytułowego.
Boc-(R)Hoc-Pro-OH
Wytworzone w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)ChaPro-OH z Boc-(R)Hoc-O Su.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): 80,80-0,94 (m, 2H), 1,05-1,36 (m, 7H), 1,36-1,48 (bs, 9H), 1,48-1,78 (m, 7H), 1,98-2,14 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,43 (m, 1H),
181 968
4,52(bd, lH),5,26(bd, 1H), sygnały podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 1,92,2,25,3,58, 4,20 i 4,93.
Boc-(R)Hoc-Pic-OH (i) Boc-(R)Hoc-Pic-OMe
Wytworzony w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-Pic-OEt (patrz wyżej) z Hoc-(R)Hoc-OH i H-Pic-OMe x HC1.
(ii) Boc-(R)Hoc-Pic-OH
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)ChaPic-OH (patrz wyżej) z Boc-(R)Hoc-Pic-OMe.
1 H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,82-0,97 (m, 2H), 1,10-1,36 (m, 7H), 1,36-1,50 (bs, 9H), l,50-l,82(m, 11H),2,35 (bd, lH),3,28(bt, lH),3,85 (bd, 1H),4,63 (m, lH),5,33(bs, 1H),5,44 (bd, 1H), sygnały podrzędnego rotameru pojawiają się przy: δ 1,88, 2,80, 4,25, 4,55 i 4,97 Boc-(R)Pro-Phe-OH (i) Boc-(R)Pro-Phe-OMe
Do roztworu 2,0 g (9,29 mmol) Boc-(R)Pro-OH i 0,94 g (9,29mmol) trietyloaminy w 70 ml toluenu/DMF (5/2) dodano 1,12 g (9,29 mmol) chlorku piwaloilu i całość mieszano przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Ochłodzono ją do 0°C i dodano mieszaninę 2,0 g (9,29 mmol) H-Phe-OMe i 0,94 g trietyloaminy w 40 ml DMF i całość mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjnąrozcieńczono toluenem i fazę organicznąprzemyto 3 x 50 ml 0,3 M KHSO4,1 x 50 ml wody i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało z ilościową wydajnością związek tytułowy, który użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
(ii) Boc-(R)Pro-Phe-OH
Mieszaninę 4,0 g (10,6 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-OMe i 8,93 g (21,3 mmol) LiOH x H2O w 140 ml wody/THF (1/1) mieszano intensywnie przez noc w temperaturze pokojowej. THF odparowano i wodną fazę waz zakwaszono 1 M KHSO4 i ekstrahowano 3 x 75 ml EtOAc. Połączoną fazę organicznąprzemyto wodą i osuszono (Na2SO4). Przesączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało pozostałość, którą oczyszczono przez krystalizację z eteru diizopropylowego otrzymując 2,329 g (60%) związku tytułowego jako białe krystaliczne ciało stałe.
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH (i) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn
Do mieszaniny 1,61 g Boc-(R)Pro-(3-(S)PH)-OH, 1,65 g H-Pro-OBn x HC1 i 0,75 g HOBt w 11 ml DMF dodano 0,84 ml NMM i 2,92 g CME-CDI w temperaturze pokojowej i mieszaninę reakcyjną mieszano trzy dni. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 300 ml EtOAc. Fazę organicznąprzemyto 2 x 100 ml H20,2 x 100 mml 1 M KHSO4, 3 x 100 ml 1 M NaOH, 3 x 100 ml H2O i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 2,53 g oleju, który oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH (97/3) jako eluentu otrzymując 2,11 g (88%) związku tytułowego.
(ii) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH
0,94 g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn rozpuszczono w 70 ml EtOH i uwodorniano nad 0,42 g 5% Pd/C przez 3,5 godziny. Odsączono katalizator i odparowanie rozpuszczalnika dało związek tytułowy jako białe kryształy z ilościową wydajnością.
Boc-(R)Tic-Pro-OH
Wytworzony według procedury opisanej przez P.D. Gesellchena i R.T. Shumana, europejskie zgłoszenie patentowe nr EP-0479489-A2.
BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br
Do roztworu p-TsOH x H-Gly-OBn (5 mmol) i trietyloaminy (5 mmol) w 10 ml CH2C12 dodano kwas 2-bromooctowy (5 mmol) rozpuszczony w 10 ml CH2C12 i dicykloheksylokarbodiimid (5 mmol). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i odsączono. Fazę organicznąprzemyto dwukrotnie 0,2 M KHSO4,0,2 M NaOH, solankąi osuszono. Odparowanie i chromatografia rzutowa (CH2Cl2/MeOH, 95/5) dała ilościową wydajność żądanego związku.
181 968
Ή-NMR (300 MHz,CDCl3): δ 3,89 (s, 2H), 4,05-4,11 (d, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,06 (bs, 1H) 1,3-7,4 (m, 5H).
HOC-(R)Cgl-Il -OH
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cgl-Pro-OH z zastosowaniem H-Ile-OH, zamiast H-Pro-OH z 91% wydajnością.
Boc-(R)Phe-Phe-OH (i) Boc-(R)Phe-Phe-OMe
Boc-(R)Phe-OH (18,8 mmol; nabyty z Bachem Feinchemicalien AG), Phe-OMe (20,7 mmol) i 4-dimetylaminopirydynę (37,7 mmol) rozpuszczono w 30 ml acetonitrylu. Roztwór ochłodzono do temperatury wody z lodem i dodano chlorowodorek l-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu (24,5 mmol). Łaźnię chłodzącą usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Rozpuszczalnik usunięto następnie pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w 50 ml octanu etylu. Ekstrakcja fazy organicznej 50 ml porcjami 0,5 M wodorosiarczanu potasu, 1 M wodorowęglanu sodu i na koniec wody, a następnie odparowanie rozpuszczalnika dała 7,5 g Boc-(R)Phe-Phe-OMe (94%), który użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
(ii) Boc-(R)Phe-Phe-OH
Boc-(R)Phe-Phe-OMe (16,4 mmol) rozpuszczono w 40 ml tetrahydrofuranu i szybko dodano wodorotlenek litu (32,8 mmol) rozpuszczony w 20 ml wody. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 3,5 godziny, po czym rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w 50 ml octanu etylu i ekstrahowano 50 ml 0,5 M siarczanu potasu, a następni 50 ml wody. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 8,0 g Boc-(R)Phe-Phe-OH (ilościowo) jako bezpostaciowe ciało stałe.
lH NMR (200 MHz, d-CHCl 3); δ 7,4-6,7 (m, 10H), 5,7-4,2 (m, 6H), 1,34 (s, 9H).
HO-CH2-COOBn
Wytworzono według procedury opisanej przez Lattesa A. i in. w Buli. Soc. Chim. France, nr 11, str. 4018-23,1971.
2-(orto-nitrobenzenosulfonyloksy)octan benzylu (2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn
1,66 g (10 mmol) glikolanu benzylu rozpuszczono w 25 ml CH2C12 i 25 ml eteru dietylowego. Mieszaninę ochłodzono do 0°C i dodano 2,8 ml (20 mmol) trietyloaminy. Utrzymując temperaturę 0°C dodano 2,44 g (11 mmol) chlorku ortonitrobenzenosulfonylu w małych porcjach w czasie 15 minut. Zawiesinę mieszano w temperaturze 0°C przez 50 minut i następnie dodano 20 ml wody i 30 ml CH2C12. Fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto 20 ml 1 M HC1 i 20 ml H2O, osuszono (Na2SO4), przesączono i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 3,34 g pozostałości, którą poddano chromatografii rzutowej, z zastosowaniem heptanu/EtOAc 2:1 jako eluentu otrzymując 1,18 g (34%) związku tytułowego.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 4,92 (s, 2H), 5,17 (s, 2H), 7,83 (m, 5H), 7,76 (m, 3H), 8,16 (dd, 1H).
2-(para-nitrobenzenesulfonyloksy)octan benzylu (4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn
Wytworzono według takiej samej procedury, jak opisano dla 2-(orto-nitrobenzesulfonyloksy)octanu benzylu powyżej. Końcowy związek otrzymano w postaci krystalicznej po odparowaniu rozpuszczalnika i był on dostatecznie czysty do stosowania bez dalszego oczyszczania (64% wydajności).
'H-NMR (300 MHz, CDC13): 64,79 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H), 8,10 (d, 2H), 8,30 (d, 2H).
TfO-CH2 COOMe
10,09 ml (60 mmol) bezwodnika trifluorometanosulfonowego rozpuszczonego w CH2C12 dodano kroplami do mieszaniny 4,05 ml (50 mmol) glikolanu metylu i 4,04 ml (50 mmol) pirydyny w CH2C12 (łącznie 62,5 ml) w temperaturze 0°C w czasie 25 minut, i następnie mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę. Po przemyciu 0,3 M KHSO4 i nasyconym Na2CO3, osuszeniu (Na2SO4) i przesączeniu, odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 9,94 g (90%) związku tytułowego.
TfO-CH2 COOEt
181 968
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla TfO-CH2COOMe rozpoczynając od glikolanu etylu.
TfO-CH2 COOnBu
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla TfO-CH2COOMe rozpoczynając od glikolanu butylu.
TfO-CH2COOBn
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla TfO-CH2COOMe rozpoczynając od HO-CH2COOBn.
TfO-CH2 COOn Heks (i) HO-CH2 COOn Heks
Do 215 mg (2,82 mmol) kwasu glikolowego w 12,8 ml CH3CN dodano 719 mg (3,39 mmol) jodku 1-heksylu i 429 mg (2,82 mmol) DBU. Po mieszaniu przez noc i gotowaniu przez 4 godziny, rozpuszczalnik odparowano, dodano octan etylu i 1 M KHSO4 i fazy oddzielono. Warstwę organicznąprzemyto solanką, osuszono (MgSO4), odsączono i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 333 mg (74%) produktu.
(ii) TfO-CH2 COOn Heks
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla TfO-CH2COOMe rozpoczynając od HO-CH2COOnHeks.
H-Mig(Z) (3 -aminometylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna (i) 3-aminometyl-l-benzhydryloazetydynę wytworzono według literatury, patrz A.G. Anderson, Jr., i R. Lok, J. Org. Chem., 37, 3953, 1972.
(ii) 3 -(N-tert-butyloksykarbonyloaminometyl)-1 -benzhydryloazetydyna
Do 3,50 g (13,9 mmol) 3-aminometylo-1-benzhydryloazety dyny rozpuszczonej w 45 ml THF dodano roztwór 0,56 g (13,9 mmol) NaOH w 45 ml H2O, mieszaninę treakcyjnąochłodzono do 0°C i dodano 3,03 g (13,9 mmol) diwęglanu ditert-butylu. Łaźnię chłodzącąusunięto po kilku minutach i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. THF odparowano i pozostałość ekstrahowano 3x45 ml eteru dietylowego. Połączoną warstwę organiczną przemyto solanką osuszono Na2SO4 i odsączono. Odparowanie rozpuszczalnika dało 4,6 g (94%) związku tytułowego.
(iii) 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminometylo)azetydyna
3,4 g (9,6 mmol) 3-(Ń-tert-butyloksykarbonyloaminometylo)-l-benzhydryloazetydyny rozpuszczono w 170 ml MeOH i uwodorniano nad 0,30 g (Pd(OH)2 pod ciśnieniem 5 MPa przez noc. Katalizator odsączono i rozpuszczalnik odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem MeOH/CH2Cl2,1/9, a następnie MeOH (nasyconym NH3(g))/CH2Cl2, 1/9, jako eluentu otrzymując 1,2 g (67%) związku tytułowego.
(iv) 3-(N-(tert-butyloksykarbonyloamiometylo)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna (Boc-Mig(Z))
0,9 g (4,8 mmol) 3-(N-tert butyloksykarbonyloaminometylo)azetydynę i 1,3 g (56,3 mmol) N-benzyloksykarbonylo-O-metyloizomocznika zmieszano w 6,5 ml toluenu i ogrzewano do 70°C przez 72 godziny, a następnie pozostawiono w temperaturze pokojowej przez jeszcze 72 godziny. Odparowanie, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem EtOAc, a następnie MeOH (nasycony NH3(g))/CH2Cl2,1/9, jako eluentu dało 0,67 g (38%) związku tytułowego jako biały proszek.
(v) 3-aminometylo-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna (H-Mig(Z))
0,67 g (1,85 mmol) Boc-Mig(Z) rozpuszczono w 10 ml EtOAc nasyconego HC1 (g) i mieszano przez 10 min w temperaturze pokojowej. Dodano kroplami 10 ml nasyconego roztworu KOH(aq). Warstwy oddzielono i wodną fazę ekstrahowano 3x8 ml EtOAc. Warstwy organiczne połączono, przemyto solanką osuszono Na2SO4 i odparowano otrzymując 0,43 g (89%) związku tytułowego.
’H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 2,55-2,65 (m, 1H), 2,84 (d, 2H), 3,66 (dd, 2H), 4,03 (dd, 2H), 5,07 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H).
MS m/z 263 (M+ + 1)
181 968
3-aminoetylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna (H-Dig(Z)) (i) 3-karboksylo-l-benzhydryloazetydynę wytworzono według literatury, patrz A. g. Anderson, Jr., i R. Lok, J. Org. Chem., 37, 3953, 1972 (ii) 3-hydroksymetylo-1 -benzhydryloazetydyna
Roztwór 8,7 g (32,5 mmol)3-karboksylo-l-benzhydryloazetydyny w 80 ml suchego THF dodano powoli do zawiesiny 4,9 g (130,2 mmol) LiAlH4 w 30 ml THF w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 3,5 godziny. Nadmiar wodorku hydrolizowano przez ostrożne dodawanie z chłodzeniem, NH4Cl(aq), żelową mieszaninę odsączono i placek filtracyjny przemyto kilkakrotnie THF. Odparowanie rozpuszczalnika dało 1,1 g (86%) związku tytułowego jako bladożółtych kryształów.
(iii) 3-metanosulfonianometylo-1-benzhydryloazetydyna
Do roztworu 6,62 g (26,1 mmol) 3-hydroksymetylo-l-benzhydryloazetydyny w 50 ml suchej pirydyny dodano 4,50 g (39,2 mmol) chlorku metanosulfonylu w temperaturze 0°C. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 1 godzinę i następnie odstawiono w lodowce przez noc. Mieszaninę reakcyjną wylano do mieszaniny lodu i H2O, osad zebrano, przemyto H2O i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 7,75 g (89,5%) związku tytułowego.
(iv) 3-cyjanometylo-1 -benzhydryloazetydyna
Do roztworu 7,75 g (23,4 mmol) 3-metanosulfonianometylo-1-benzhydryloazetydyny w 50 mlDMF dodano roztwór3,44 g(70,0mmol)NaCNw 10mlH2O,mieszaninę ogrzewanowtemperaturze 65°C przez 20 godzin, ochłodzono, i wylano do mieszaniny lodu i H2O, osad zebrano, przemyto H2O i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 5,7 g (93%) związku tytułowego.
(v) 3-aminometylo-1 -benzhydrylazetydyna
5,7 g (21,7 mmol) 3-cyjanometylo-1-benzhydryloazetydyny dodano powoli do zawiesiny 2,9 g (76,0 mmol) LiAlH4 w 80 ml suchego THF w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia przez 4 godziny. Nadmiar reagentu wodorkowego hydrolizowano przez ostrożne dodanie, z chłodzeniem, NH4C1 (aq), żelowąmieszaninę odsączono i placek filtracyjny przemyto kilkakrotnie THF. Rozpuszczalnik odparowano, pozostałość rozpuszczono w eterze dietylowym, przemyto solanką i osuszono Na2SO4, odparowanie rozpuszczalnika dało 5,0 g (87%) związku tytułowego.
(vi) 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminetyl)-1 -benzhydryloazetydyna
Związek tytułowy wytworzono z 3-aminoetylo- 1-benzhydryloazetydyny zgodnie z procedurą dla 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminometyl)-l-benzhydryloazetydyny, z wydajnością 6,5 g (95%).
(vii) 3 -(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetyl)azetydyna
Związek tytułowy wytworzono z 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)- 1-benzhydryloazetydyny zgodnie z procedurą dla 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)azetydyny, z wydajnością 1,2 g (70%).
(viii) 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna (Hoc-Dig(Z))
Związek tytułowy wytworzono z 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)azetydyny zgodnie z procedurą dla 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminometylo)-l-(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyny, z wydajnością 0,090 g (34%).
(ix) 3-aminoetylo- l-(N-butyloksykarbonyloamidyno)azetydyny (H-Dig(Z))
0,589 g (1,56 mmol) Boc-Dig(2) rozpuszczono w 10 ml, EtOAc nasyconego HC1 (g) i mieszano przez 10 min w temperaturze pokojowej. 10 ml a nasycony roztwór KOH(aq) dodano kroplami. Warstwy oddzielono i wodną fazę ekstrahowano 3 x 8 ml EtOAc. Warstwy organiczne połączono, przemyto solanką osuszono Na2SO4 i odparowano otrzymując 0,415 g (96%) związku tytułowego.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,60 (dt, 2H), 2,52-2,54 (m, 3H), 3,53 (bs, 2H), 4,0 (bt, 2H), 5,00 (s, 2H), 7,17-7,31 (m, 5H)
PRZYKŁADY ROBOCZE
181 968
Przykład 1
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Do mieszanej mieszaniny 3,40 g (10 mmol) Boc-(R)CglAze-OH (patrz wytwarzanie substratów) i 5,13 g DMAP (42 mmol) w 120 ml CH3CN dodano 3,18 g H-Pab(Z) x HC1 (patrz wytwarzanie substratów).
Po mieszaniu przez 2 godziny w temperaturze pokojowej mieszaninę ochłodzono do -8°C i dodano 2,01 g (10,5 mmol) EDC. Reakcji pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i mieszanie kontynuowano przez dodatkowe 47 godzin. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 200 ml EtOAc. Fazę organiczną przemyto 1 x 50 ml wody, 1 x 50 + 2 x 25 ml 0,5 M KHSO4, 2 x 25 ml NaHCO3 (nasycony), 1 x 50 ml wody i osuszono. Odparowanie rozpuszczalnika dało 5,21 g (86%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,8-1,9 (m, 20H; w nim 1,30 (s, 9H), 2,35-2,6 (m, 2H), 3,74 (bt, lH),4,10(m, 1H),4,25-4,4(m,2H),4,45-4,6(m, lH,rotamery),4,75-5,0(m, lH,rotamery), 5,08 (bd, 2H), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,41 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,21 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pab (2)
Do zimnego (temperatura łaźni lodowej) roztworu 18,8 g HC1 (g) w 195 ml EtOAc dodano 4,69 g (7,743 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) wraz z 40 ml EtOAc. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i mieszano przez 30 min. 140 ml Et2O dodano do przejrzystego roztworu, dzięki czemu powstał osad. Reakcję was pozostawiono w temperaturze pokojowej na dodatkową 1 godzinę i 40 minut. Osad odsączono, przemyto szybko 150 ml E^O i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem. Osad rozpuszczono w 50 ml wody i zalkalizowano 15 ml 2 M NaOH. Zasadową fazę wodną ekstrahowano 1 x 100 + 1 x 50 ml CH2C12, połączoną fazę organiczną przemyto 1 x 20 ml wody, 1 x 20 ml solanki i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 3,44 g (88%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,8-2,0 (m, 11H), 2,51 (m, 1H),2,67 (m, 1H),3,O7 (d, 1H), 4,11 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,43 (dd, 1H), 4,53 (dd, 1H), 4,91 (m, 1H), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 7H), 7,45 (d, 2H), 8,51 (d, 2H).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
1,13 g (2,2 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,9 g (2,6 mmol) 2-(orto-nitrobenzenesulfonyloksy)octanu benzylu ((2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn) (patrz wytwarzanie substratów), 0,99 g (5,6 mmol) K2CO3 i 113 ml CHCN zmieszano i ogrzewano w temperaturze 60°C na łaźni olejowej przez 3 godziny. Rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodano EtOAc i mieszaninę przemyto wodą, fazę organiczną ekstrahowano 1 M KHSO4, a fazę wodną przemyło EtOAc. Kwasową fazę wodną zalkalizowano 1 NNaOH to pH > 8 i ekstrahowano EtOAc. Fazę organiczną przemyto wodą, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 1,17 g pozostałości, którą dwukrotnie poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem najpierw CH2Cl2/MeOH(NH3-nasycony) 95/5 i następnie eter dietylowy /MeOH(NH3-nasycony) 9/1 jako eluentów otrzymując 0,525 g (36%) związku tytułowego.
Alkilowanie prowadzono także z zastosowaniem 2-(para-nitrobenzenesulfonyloksy)octanu benzylu ((4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn) (patrz wytwarzanie substratów) z zastosowaniem takiej samej procedury, jak powyżej otrzymując związek tytułowy z 52% wydajnością.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,85-2,15 (m, 11H), 2,48 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,88 (d, 1H), 3,24 (d, 1H), 3,27 (d, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,91 (m, 1H), 5,07 (s, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 1 OH), 7,45 (d, 2H), 7,79 (d, 2H), 8,42 (m, 1H).
(iva) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 20 mg (0,031 mmol), rozpuszczono w 5 ml metanolu. Dodatkowo kilka kropli chloroformu i 5% Pd/C i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Po przesączeniu i odparowaniu produkt liofilizowano z wody otrzymując 11 mg (72%) związku tytułowego.
‘H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,0-2,0 (m, 11H), 2,10 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 3,90 (s, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,4-4,55 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 5,08 (m, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,89 (d, 2H).
181 968 l3C-NMR · (75,5 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,3, 167,9, 169,9 i 172,4.
(ivb) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w EtOH (99%) i uwodorniano nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 5 godzin. Przesączenie katalizatora przez celit i odparowanie rozpuszczalnika dało związek tytułowy z 97% wydajnością.
Ή- NMR (500 MHz, CD3OD, mieszanina dwu rotamerów): główny rotamer: 61,00-1,12 (m, 1H), 1,13-1,34 (m, 4H), 1,55- 1,70 (m,3H), 1,73-1,85 (m, 2H), 1,94-2,02 (bd, 1H), 2,32-2,42 (m, 1H), 2,54-2,64 (m, 1H), 2,95-3,10 (układ AB plus d, 3H), 4,18-4,25 (bq, 1H), 4,28-4,32 (bq, 1H), 4,43-4,60 (układ AB, 2H), 4,80-4,85 (dd, 1H), 7,48-7,54 (d, 2H), 7,66-7,71 (d, 2H).
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 0,95 (m), 1,43 (m), 2,24 (m), 2,84 (d), 3,96 (m), 4,03 (m), 7,57 (bd), 7,78 (bd).
13C-NMR (125 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,0, 173,0, 176,3 i 179,0
Przykład 2
HOOC-CH2CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1 (i) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Wytworzono w taki sam sposób jak opisano w przykładzie 1 (ii) przez potraktowanie powstałego chlorowodorku zasadą z utworzeniem wolnej zasady.
(ii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,19 g (0,38 mmol), i 70 mg (0,43 mmol) akrylanu benzylu rozpuszczono w 2 ml izopropanolu. Mieszaninę pozostawiono na 6 dni. Chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2C12/THF - 8/2 jako eluentu dało 0,12 g (48%) związku tytułowego.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13) 60,8-1,9 (m, 10H), 1,95 (bd, 1H), 2,4-2,6 (m,4H), 2,7-2,8 (m, 3H; w nim 2,79 (d, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,37 (dd, 1H), 4,60 (dd, 1H), 4,97 (dd, 1H), 5,09 (dd, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,25-7,4 (m, 10H), 7,47 (d, 2H), 7,83 (d, 2H), 8,61 (bt, 1H).
(iii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,10 g (0,15 mmol), rozpuszczono w 10 ml etanolu i uwodorniono nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzmę.
Roztwór odsączono, odparowano i surowy produkt oczyszczono metodą RPLC z zastosowaniem CH3CN/01 M NH4OAc (1/4). Powstający produkt osuszono przez wymrożenie, potraktowano nadmiarem stężonego HC1 i osuszono przez wymrożenie ponownie otrzymując 31 mg dichlorowodorku.
Ή-NMR (300 MHz, D2O) δ 0,8-2,1 (m, 11H), 2,38 (m, 1H), 2,7-2,9 (m, 3H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,98 (d, 1H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,60 (s, 2H), 5,04 (dd, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,83 (d, 2H).
13C- NMR(75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2,167,8,172,3 i 175,5
Przykład 3
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
Boc-(R)Cgl-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 2,3 g (6,49 mmol), DMAP, 2,38 g (19,47 mmol), i H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów), 1,84 g (6,49 mmol) zmieszano w 30 ml acetonitrylu. Mieszaninę ochłodzono dol5°C i dodano EDC 1,31 g (6,81 mmol). Temperaturze pozwolono się podnieść do temperatury pokojowej i mieszaninę mieszano przez noc. Po odparowaniu, pozostałość rozpuszczono w octanie etylu i 0,3 M roztworze KHSO4. Kwasową wodną fazę ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Fazę organiczną przemyto dwukrotnie 0,3 M roztworem KHSO4, dwukrotnie roztworem NaHCO3 i raz solanką, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu otrzymując 1,77 g (44%) produktu.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,9-1,49 (m, 14H), 1,5-2,1 (m, 9H),2,37(bs, 1H),3,53 (q, 1H), 3,94 (bs, 1H), 4,02 (m, 1H),4,43 (bs, 2H), 4,65 (d, 1H), 5,09 (bs, 1H), 5,20 (5,2H), 7,18-7,4 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,62 (bs, 1H), 7,81 (m, 2H).
(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
181 968
1,45 g (2,34 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) rozpuszczono w 75 ml nasyconego HC1 octanu etylu. Mieszaninę odstawiono na 10 min w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano otrzymując 1,3 g dichlorowęglanu.
'H-NMR (300 MHz, D2O) δ 1,0-1,45 (m, 5H), 1,58-2,2 (m, 9H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,75-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, 2H), 4,5-4,66 (m, 3H), 5,49 (s, 2H), 7,45-7,7 (m, 7H), 7,87 (d, 2H).
Aminę otrzymano rozpuszczając dichlorowodorek w 0,1 M roztworze NaOH i ekstrahując wodną fazę trzy razy octanem etylu. Fazę organiczną przemyto raz solanką osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 1,19 g (97%) związku tytułowego.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
0,340 g (0,65 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pab(2) zmieszano z 0,215 g (0,65 mmol) BnOOC-CH2-OTf (patrz wytwarzanie substratów), 0,299 g (2,17 mmol) K2CO3 w 4 ml dichlorometanu i ogrzewano w temperaturze wrzenia przez pół godziny. Mieszaninę reakcyjną mieszano następnie przez noc w temperaturze pokojowej. Rozcieńczono ją CH2C12 i warstwę organiczną przemyto raz wodą i solanką osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (97/3, a następnie 95/5) otrzymując 299 mg mieszaninę dwu produktów według TLC. Mieszaninę oczyszczono wobec tego dalej metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu octan etylenu/toluen (9/1,93/7, 95/5,100/0) otrzymując 46 mg (9%) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z), który eluowano najpierw z kolumny, a następnie 133 mg (31%) żądanego produktu BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z).
Ή-NMR δ (300 MHz, CDC13): BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z): δ 0,9-1,3 (m, 5H), 1,4-2,1 (m, 9H), 2,3-2,4 (m, 1H), 3,05 (d, 1H), 3,20-3,37 (układ AH centrowany na δ 3,29, 2H), 3,5-3,6 (m, 2H), 4,29-4,57 (układ ΑΒΧ centrowany na d 4,43, 12), 4,62 (d, 1H), 4,91 (pozorny singlet, 2H), 5,19 (s, 2H), 6,75 (bs, NH), 7,1-7,5 (m, 12H), 8,7-8,8 (m, 2H+NH), 9,45 (bs, NH).
'H-NMR (300 MHz, CDC13): (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z): δ 0,68-0,9 (m, 2H), 1,0-1,3 (m, 3H), 1,43 (bd, 1H), 1,55-2,0 (m, 7H), 2,05 (bd, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H), 3,15 (d, 1H), 3,25-3,48 (m, 2H), 3,55-3,79 (układ AB centrowany na δ 3,67,4H), 4,38-4,58 (układ ΑΒΧ centrowany na δ 4,48,2H), 4,68 (d, 1H), 4, 82-4,98 (układ AB centrowany na δ 4,91, 4H), 5,19 (s, 2H(, 6,66 (bs, NH), 7,1-7,5 (m, 17H), 7,75 (d, 2H), 7,80 (t, NH), 9,37 (bs, NH).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,7, 168,1, 171,5, 172,3 i 172,6 (iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1
0,133 g (0,20 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) zmieszano z 0,060 g 5% Pd/C, 1 ml IM roztworem HC1 i 10 ml etanolu. Mieszaninę potraktowano w atmosferze H2 przez godzinę. Po przesączeniu przez hyflo i odparowaniu rozpuszczalnika produkt z 90% wydajnością 93 mg, otrzymnao przez dwukrotne suszenie wymrażające z wody.
'H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,45 (m, 5H), 1,5-2,1 (m, 9H), 2,2-2,4 (m, 1H), 3,55-3,85 (m, 4H; w nim 3,79 (s, 2H)), 4,23 (d, 1H), 4,33-4,57 (m, 3H), 7,44 (d, 2H), 7,69 (d, 2H) 13C -NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,9,167,2,169,1,174,5
Przykład 4
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab (Z)
0,406 g (0,782 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 3) rozpuszczono w 3 ml etanolu i dodano 132 μΐ (0,861 mmol)akrylanu benzylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez trzy dni w temperaturze pokojowej. Mieszaninę odparowano i surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2:MeOH 95/5 i 90/10 jako eleuentu otrzymując 0,399 g (75%) produktu.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,8-1,0 (m, 1H), 1,0-1,3 (m,4H), 1,35-2,2 (m,9H), 2,3-2,6 (m, 4H), 2,65-2,78 (m, 1H), 3,05 (d, 1H), 3,4-3,6 (m, 2H), 4,25-4,52 (układ ΑΒΧ centrowany naó 4,40,2H), 4,64 (dd, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,2-7,38 (m, 1 OH), 7,43 (d, 2H), 7,78 (d, 2H) 13Ć-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,7, 167,9, 171,3, 172,7 i 175,4
181 968 (ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1
0,261 g (0,383 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) zmieszano z 0,075 g 5% Pd/C, 1 ml IM roztworu HC1 i 10 ml etanolu. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 2 godziny. Po przesączeniu przez hyflo i odparowaniu rozpuszczalnika produkt 0,196 g (96%) otrzymano przez dwukrotne suszenie wymrażające z wody.
Ή-NMR (300 MHz, D2O): 5 1,17-1,40 (m, 5H), 1,60-1,92 (m, 5H), 1,92-2,2 (m, 4H), 2,32-2,48 (m, 1H), 2,81 (t, 2H), 3,11-3,36 (układ ABX2 centrowany na δ 3,24,2H), 3,63-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, 1H), 4,42-4,63 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,78 (d, 2H) 13C-N MR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,0,167,30,174,6 i 174,7
Przykład 5 (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1 mg (0,056 mmol) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 3) zmieszano z 25 mg 5% Pd/C, 0,7 ml IM roztworu HC1 i 7 ml etanolu. Mieszaninę uwodorniono pod ciśnieniem atmosferycznym przez godzinę. Katalizator odsączono przez hyflo i rozpuszczalnik odparowano. Końcowy produkt 25 mg (77%) otrzymano przez suszenie wymrażające dwukrotnie z wody.
Ή-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,4 (m, 5H), 1,45-2,2 (m, 9H), 2,25-2,45 (m, 1H), 3,53-3,84 (m, 2H), 3,84-4,22 (układ AB centrowany na δ 4,03, 4H), 4,26 (d, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H) 13C- NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,1,167,3,170,6 i 174,5
Przykład 6
H-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
0,478 g (2,49 mmol) EDC dodano w temperaturze -18°C do mieszanego roztworu 0,875 g (2,37 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,22 g (9,97 mmol) DMAP, i 0,706 g (2,49 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w mieszaninie 30 ml acetonitrylu i 1 ml DMF. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej w czasie kilku godzin i mieszanie kontynuowano przez 48 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w 50 ml octanu etylu. Roztwór przemyto 15 ml wody, 3x15 ml 0,3 M KHSO4, 2x15 ml roztworu Na2CO3, i wodą. Usunięcie rozpuszczalnika dało pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/heptanu 9:1 jako eluentu. Wydajność wynosiła 0,96 g (64%).
(ii) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
Chlorowodór barbotowano przez roztwór 0,56 g (0,88 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) w 25 ml octanu etylu. Po kilku minutach z roztworu wytrąciły się kryształy. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano 50 ml octanu etylu. Przemycie 2x15 ml 2M roztworem wodorotlenku sodu i ekstrakcja wodnej fazy 25 ml octanu etylu, a następnie suszenie (siarczan sodu) połączonych ekstraktów i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 0,448 g (95%) żądanego produktu.
(iii) H-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1
Roztwór 98 mg (0,18 mmol) H-Cgl-Pic-Pab(Z) w 5 ml 95% etanolu i 1 ml wody mieszano w atmosferze wodoru przez 4 godziny w obecności 5% Pd/C. Mieszaninę odsączono i dodano 0,3 ml 1 M kwasu chlorowodorowego. Etanol usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość osuszono przez wymrożenie otrzymując 70 mg (81%) żądanego związku.
'H-NMR (300 MHz, CD3OD): δ 1,00-1,56 (m, 7H), 1,56-1,94 (m, 9H) 2,32 (bd, 1H), 3,32-3,45 (m, 1H), 3,90 (bd, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,50 (s, 2H), 5,10-5,20 (m, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,76 (d,2H) 13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2, 170,5 i 173,4
Przykład 7
HOOC-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
181 968
Mieszaninę 350 mg (0,66 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 6) i 233 mg maleinianu dibenzylu w 2,5 ml etanolu trzymano w temperaturze pokojowej prze 4 dni. Etanol usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/heptanu 9:1 jako eluentu otrzymując 0,108 mg produktu.
(ii) HOOC-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1
105 mg (0,13 mmol) BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w 5 ml 95% etanolu i 1 ml wody uwodorniano przez 5 godzin w obecności 5% Pd/C. Dodano 0,3 ml 1 M kwasu chlorowodorowego i mieszaninę odsączono, a rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w wodzie i osuszono przez wymrożenie otrzymując 54 mg (73%) żądanej substancji.
'H-NMR (300 MHz, CD3OD, mieszanina dwu diastereomerów 5/4): δ 1,10-1,60 (m, 7H), 1,60-2,04 (m, 9H), 2,23-2,42 (m, 1H), 2,93-3,15 (m, 2H), 3,30-3,42 (m, 1H, częściowo zakryte przez pik MeOD) 3,71-3,95 (m, 1H), 3,98-4,10 (m, 1H), 4,40-4,60 (m, 3H), 5,10-5,20 (m, 1H), 7,49-7,60 (m, 2H), 7,70-7,81 (m, 2H) 13C-NMR(75MHz,D2O): węgleamidynoweikarbonylowe:6167,l, 168,95,169,6 i 173,1
MS m/z516(M++ 1)
Przykład 8
H(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pab (Z)
409 mg (2,13 mmol) EDC dodano w temperaturze -18°C do mieszanej mieszaniny 0,72 g (2,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,04 g (8,53 mmol) DMAP, i 604 mg (2,13 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 20 ml acetonitrylu. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez noc i następnie rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w 40 ml octanu etylu i fazę organiczną przemyto kolejno 10 ml wody, 3x10 ml 0,3M KHSO4, 2x10 ml Na2CO3-NaCl (aq), i na koniec 10 ml solanką. Suszenie (Na2SO4) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którąpoddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 9:1 jako eluentu otrzymując 645 mg (51%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
Chlorowodór barbotowano przez roztwór 640 mg (1,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z) w 25 ml octanu etylu. Po kilku minutach analiza TLC wykazała zakończenie reakcji. Zastosowano niskie ciśnienie do usunięcia nadmiaru chlorowodoru i mieszaninę rozcieńczono następnie do 50 ml octanem etylu. Przemycie 2x15 ml Na2CO3 (aq), poprzedzało ekstrakcję fazy wodnej 15 ml octanu etylu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto wodą i osuszono (Na2CO3) i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 513 mg (96%) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1 mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w 5 ml 95% etanolu i 1 ml wody uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, dodanie 0,4 ml IM kwasu chlorowodorowego i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 2 ml wody. Suszenie przez wymrożenie dało 57 mg (85%) produktu.
'H-NMR (500 MHz, D20,2 rotamery, mieszanina 3:1) δ 1,02-1,20 (m, 2H), 1,22-1,92 (m, 11H), 2,40-2,50 (m, 1H), 2,80-2,90 (m, 1H), 4,25 (bt, 1H), 4,40 (dq, 1H), 4,53 (dq, 1H), 4,65 (s, 2H), 5,05-5,10 (m, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,88 (d, 2H).
Przesunięcia chemiczne oddzielające sygnały z podrzędnego rotameru: δ 0,57 (m), 0,85 (m), 2,95 (m), 4,06 (dq), 4,17 (dq), 4,63 (s), 5,33 (m), 7,70 (d), 7,93 (d).
13C-NMR (125 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2, 170,4 i 172,8
Przykład 9
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
0,119 g (0,52 mmol) bromooctanu benzylu dodano do mieszanin y 0,27 g (0,52 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 8) i 0,158 g (1,14 mmol) K2CO3 w 5,2 ml acetonitrylu i
181 968 ogrzewano do 60°C w łaźni olejowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik usunięto i dodano octan etylu i wodę. Fazy oddzielono i fazę organicznąprzemyto solankąi osuszono (Na2SO4). Odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem dało 0,344 g pozostałości, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu, i następnie jeszcze raz z zastosowaniem octanu etylu/tetrahydrofuranu: nasyconego NH3 ,metanolu (60:5:2) otrzymując 0,163 g żądanego produktu.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,7-1,0 (m, 2H), 1,05-2,05 (m, 11H), 2,35-2,55 (m, 1H), 2,55-2,75 (m, 1H), 3,15-3,32 (m, 3H), 3,95-4,05 (t, 2H), 4,4 i 4,5 (układ ΑΒΧ, 2H), 4,8-4,95 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,5 (m, 12H), 7,7-7,85 (d, 2H), 8,3-8,45 (t, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 167,8, 170,7, 171,9 i 175,9.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI
0,163 g (0,243 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) rozpuszczony w 5,5 ml etanolu (99,5%) i 0,7 ml chlorowodoru (IN) uwodorniano w obecności 0,17 g 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 107 mg (85%) związku tytułowego.
Ή-NMR (500 MHz, CD3OD, mieszanina dwu rotamerów): główny rotamer: δ 0,95-1,95 (m, 13H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,6-2,75 (m, 1H), 3,5-3,75 (m, 2H), 4,05-4,15 (m, 1H), 4,15-4,23 (m, 1H), 4,36-4,43 (m, 1H), 4,43-4,5 (m, 1H), 4,58-4,65 (m, 1H), 4,83-4,88 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,73-7,82 (m, 2H).
Oddzielone sygnały z poprzedniego rotameru pojawiają się przy δ 2,2-2,3 (m), 3,95-4,05 (m), 5,1-5,17 (m), 7,6-7,67 (m).
13C-NMR(75MHz,CD3OD):węgleamidynoweikarbonylowe;6168,2,169,8,168,9i 172,3 Przykład 10
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
Mieszaninę 230 mg (0,443 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 8) i 144 mg (0,487 mmol) maleinianu dibenzylu w 1,5 ml 95% etanolu mieszano w temperaturze otoczenia przez 5 dni. Po usunięciu etanolu pod zmniejszonym ciśnieniem, pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 95/5 jako eluentu otrzymując 54 mg (15%) produktu.
(ii) HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab mg (0,06 mmol) BnOOC-CH2-(R,S) CH (COOBn) - (R)Cha-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w 5 ml 95% etanolu i 1 ml wody i uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4,5 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 2 ml wody i 0,2 ml IM kwasu chlorowodorowego. Suszenie przez wymrożenie dało 32 mg (93%) produktu.
Widmo Ή-NMR związku tytułowego w D20 wykazuje dwa zestawy silnie nałożonych sygnałów dwu diastereomerów. Dodatkowe wyodrębnione rezonanse podrzędnego rotameru, całkowane do około 15% także pojawiają się w widmie.
Ή-NMR (300 MHz, D20): δ 1,03-2,00 (m, 13H), 2,32-2,53 (m, 1H), 2,72-2,96 (m, 1H), 3,06-3,28 (m, 2H), 4,10-4,55 (m, 4H), 4,62 (bs, 2H), 5,00-5,10 (m, 1H), 7,55-7,68 (m, 2H), 7,80-7,94 (m, 2H)
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 0,65 (m), 0,80 (m), 4,00 (m), 5,24 (m), 5,35 (m).
13C-N MR(75 MHz, D20): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2,169,0,171,0,172,3 i 174,1
Przykład 11
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-Cha-Aze-Pab/a x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a
Mieszaninę 2,0 g (3,8491 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 8) i 1,37 g maleinianu dibenzylu w 10 ml 95% etanolu mieszano w temperaturze otoczenia przez 4 dni. Po usunię
181 968 ciu etanolu pod zmniejszonym ciśnieniem, pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 98/2 jako eluentu otrzymując 1,024 g (32%) BnOOC-CH2-(R,5)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z). Dwa diastereomery oddzielono metodą RPLC z zastosowaniem (CH3CN/0,1 M NH4OAc 65/35) jako eluentu. Ten diastereomer eluował najpierw z kolumny. Po usunięciu acetonitrylu pod zmniejszonym ciśnieniem wodną fazę ekstrahowano trzy razy octanem etylu. Fazę organiczną przemyto raz wodą osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 0,3 52 g związku tytułowego jako czystego stereoizomeru.
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a x 2HC1
350 mg (0,43 mmol) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (diastereomer z (i) powyżej) rozpuszczony w 15 ml 95% etanolu i 3 ml wody uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4,5 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 5 ml wody i 1,0 ml IM kwasu chlorowodorowego. Suszenie przez wymrożenie dało 214 mg (87%) produktu jako czystego stereoizomeru.
‘H-NMR (300 MHz, MeOD, mieszanina dwu rotamerów): δ 0,85-1,93 (m, 13H), 2,25-2,38 (m, 1H), 2,60-2,75 (m, 1H), 2,88 (dd, 2H), 3,92 (t, 1H), 4,15-4,25 (m, 2H), 4,30-4,43 (m, 1H), 4,56 (układ AB, 2H), 4,76-4,86 (m, 1H, częściowo zasłonięte przez sygnał rozpuszczalnika), 7,59 (d, 2H), 7,78 (d, 2H).
Oddzielone sygnały powstałe z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 0,70,2,95,3,82, 4,00, 5,08 i 7,83 l3C-N MR (75 MHz D20): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,9,168,8,171,7,172,3 i 173,8
Przykład 12
HOOC-CH2-(Ror B)CH(COOH)-(R)CHa-Aze-Pab/b: 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b
Związek tytułowy otrzymano z zastosowaniem takiej samej procedury, jak opisano w przykładzie 11 powyżej, z BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z). Ten diasereomer wydostał się najpierw z kolumny. Wydajność 0,537 g.
(ii)HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b x 2 HC1
530 mg (0,65 mmol) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b rozpuszczone w 15 ml 95% etanolu i 3 ml wody uwodorniono w obecności 5% Pd/C przez 5 godzin. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 6 ml wody i 1,0 ml IM kwasu chlorowodorowego. Suszenie przez wymrożenie dało 290 mg (78%) produktu.
‘H-NMR (300 MHz, MeOD, mieszanina dwu rotamerów): δ 0,86-1,90 (m, 13H), 2,30-2,42 (m, 1H), 2,60-2,75 (m, 1H), 2,75-2,85 (m, 1H), 2,95-3,05 (m, 1H), 3,65-3,71 (m, 1H), 4,00-4,10 (m, 1H), 4,14-4,24 (m, 1H), 4,36-4,62 (m, 3H), 4,78-4,86 (m, 1H częściowo zasłonięte przez sygnał rozpuszczalnika), 7,57 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
Oddzielone sygnały powstałe z podrzędnego rotameru pojawiająsię przy δ 0,78,2,92,3,82, 5,36 i 7,80 13C-NMR (75 MHzD2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,8,169,0,172,0,172,4 i 175,2
Przykład 13
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab (2)
Mieszaninę 182 mg (0,35 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 8) i 62,5 mg (0,385 mmol) akrylanu benzylu w 1,5 ml 95% etanolu mieszano w temperaturze pokojowej przez 4 dni. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 9:1 jako eluentu otrzymując 200 mg (84%) związku tytułowego.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1
181 968
195 mg (0,29 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w 10 ml 95% etanolu i 2 ml wody uwdomiano w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 2 ml wody i 0,4 ml IM kwasu chlorowodorowego. Suszenie przez wymrożenie dało 130 mg (86%) produktu.
'H-NMR(500MHz,CD3OD):60,98-l,27(m,2H), 1,30-1,90 (m, 11H), 2,27-2,35 (m, 1H), 2,65-2,74 (m, 1H), 2,77 (t, 2H), 3,32 (t, 2H), 4,10 (t, 1H), 4,17-4,25 (m, 1H), 4,40-4,49 (m, 1H), 4,55 (AB, 2H), 4,83-4,90 (m, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).
13C-NMR(125 MHzD2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,0,168,9,172,4 i 174,6
Przykład 14
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1 (i) BNOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
Mieszaninę 0,212 g (0,408 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 8), 0,124 g (0,89 mmol) K2CO3 i 0,128 g (0,449 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br (patrz wytwarzanie substratów) w 6 ml acetonitrylu mieszano w temperaturze 50°C przez 2 godziny. Po odparowaniu rozpuszczalnika pozostałość rozpuszczono w wodzie i octanie etylu. Warstwę wodną ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu i połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu octanu etylu/tetrahydrofuranu (85/15, 4/1, 7/3) otrzymując 0,190 g (64%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 Mhz,CDCl3): δ 0,75-2,1 (m, 13H),2,43(m, lH),2,56(d, lH),2,79(m, 1H), 3,0-3,15 (m, 2H; wnim 3,05 (d, 1H)), 3,89-4,18 (m, 5H), 4,8-4,98 (m, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,2-7,47 (m, 12H), 7,72 (t, NH), 7,86 (d, 2H), 8,14 (bs, NH), 8,31 (dd, NH), 9,42 (bs, NH) 13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 168,7, 169,22, 169,83, 171,7, 175,5 (ii) HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1
0,19 g (0,26 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-AzePab(Z) zmieszano z 0,075 g 5% Pd/C, 1,5 ml 1N roztworu HC1,3 ml wody i 17 ml etanolu i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym na godzinę. Przesączenie katalizatora, odparowanie rozpuszczalnika a następnie suszenie przez wymrożenie z wody dało 144 mg (97%) związku tytułowego.
Ή-NMR (D2O, 300 MHz, dwa rotamery 4:1); δ 0,88-1,88 (m, 13H), 2,25-2,42 (m, 1H), 2,63-2,89(m, lH),3,94(s,2H),3,99(pozomydublet,2H),4,16(t, lH),4,28(q, 1H),4,41 (q, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,98 (dd, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H),
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 0,50 (bq), 0,77 (bq), 5,21 (dd), 7,56 (d) i 7,81 (d).
13C-N MR (D2O, 75 MHz): węgle amidynowe i karbonylowe przy δ 166,8, 166,9, 168,6, 172,3 i 173,4
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ: 166,6, 169,6 i 172,0
Przykład 15
H-(R)Cha-ProPab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,135 ml (1,1 mmol) chlorku piwaloilu dodano w temperaturze pokojowej do mieszaniny 0,155 ml (1.1 mmol) trietyloaminy i 405 mg (1.1 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów) w 5 ml DMF. PO 3 godzinach dodano 340 mg (1.1 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 5 ml DMF i mieszanie kontynuowano przez noc. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą i ekstrahowano octanem etylu/toluenem 1:1, fazę organiczną osuszono (MgSO4) i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu. Wydajność wynosiła 309 mg (49%) (ii) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Chlorowodór aż do nasycenia barbotowano przez roztwór 1,246 g (2 mmol) Boc-(R)ChaPro-Pab(Z) w 20 ml octanu etylu w temperaturze pokojowej. Po 30 minutach dodano roztwór wę74
181 968 glanu sodu (10%) i fazę organiczną którą oddzielono, osuszono (K2CO3). Środek suszący przemyto chlorkiem metylenu i rozpuszczalnik odparowano z połączonych faz organicznych otrzymując 1,11 g (100%) związku tytułowego.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1
100 mg (0,19 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rozpuszczone w 15 ml etanolu uwodorniano w obecności 38 mg 10% Pd?C przez 1,5 godziny. Rozcieńczenie mieszaniny reakcyjnej wodą destylowana i usunięcie katalizatora przez odsączenie, a następnie usunięcie etanolu pod zmniejszonym ciśnieniem i suszenie przez wymrożenie dało związek tytułowy jako bezbarwny proszek. Peptyd przekształcono na koniec w dichlorowodorek przez rozpuszczenie w kwasie chlorowodorowym a następnie suszenie przez wymrożenie otrzymując 90 mg (100%) związku tytułowego.
1H-NMR (300 MHz, D2O); 5 1,0-2,0 (m, 13H), 2,0-2,3 (m, 3H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 1H), 3,8-3,9 (m, 1H), 4,3-4,5 (t, 1H), 4,5-4,6 (m, 3H), 7,4-7,6 (m, 3H), 7,6-7,9 (m, 2H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i kart>onylowe: δ 167,2, 170,0, 174,9
Przykład 16
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Mieszaninę 268 mg (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15), 90 μΐ (0,55 mmol) bromooctanu benzylu i 181 mg (1,3 mmol) K2CO3 w 2 ml acetonitrylu poddano działaniu ultradźwięków w temperaturze 40°C przez 2,5 godziny. Mieszaninę odsączono przez hyflo i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując pozostałość, którąpoddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etyhi jako eluentu otrzymując 194 mg (57%) związku tytułowego.
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1
194 mg (0,28 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rozpuszczonego w 10 ml etanolu uwodorniano w obecności 77 mg 10% Pd na węglu przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą i katalizator usunięto przez odsączenie. Odparowanie etanolu pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie suszenie przez wymrożenie dało białą pozostałość. Dodano kwas chlorowodorowy i powstający roztwór osuszono na koniec przez wymrożenie otrzymując 115 (68%) żądanego produktu.
‘H-NMR (300 MHz, D2O); δ 1,0-1,2 (m, 2H), 1,2-1,5 (m, 3H), 1,5-2,0 (m, 8H), 2,0-2,3 (m, 3H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,6-3,8 (m, 1H), 3,8-4,0 (m, 3H), 4,4-4,7 (m, 4H), 7,5-7,7 (d, 2H), 7,7-7,9 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,1,168,2,169,3,174,6
Przykład 17
HOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab (i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Do roztworu 0,8 g (1,67 mmol) Boc-(Me) (R)Cha-Pro-OSu (patrz wytwarzanie substratów) w 3 ml DMF dodano roztwór 0,562 g (1,85 mmol) HPab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 3 ml DMF, i pH powstającego roztworu ustawiono na 8-9 N-metylomorfoliną po czym roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 dni.
Roztwór wylano na wodę, i powstającą mieszaninę ekstrahowano 3x25 ml octanu etylu. Organicznie roztwór przemyto IM roztworu KHSO4,10% roztworem NaHCO3, wodą i solanką i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 0,65 g (60%) związku tytułowego jako żółtawo-białego proszku.
(ii) Me-(R)Cha-Pro-Pab(2)
Roztwór 0,60 g (0,92 mmol) Boc-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z) w 50 ml EtOH kwas nasycony HC1 w temperaturze 0°C i roztwór przechowywano w lodówce przez noc. Powstały roztwór odparowano do suchej masy, i pozostałość rozpuszczono w roztworze Ńa2CO3, ekstrahowano 3x25 ml octanu etylu. Ekstrakt przemyto solanką i odparowano otrzymując 0,4 g (79%) związku jako białego puszystego proszku.
'H-NMR (CDC13,300 MHz): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1 -1,4 (m, 5H), 1,4-1,5 5 (m, 1 Η), 1,6-1,9 (m, 1 OH), 1,9-2,05 (m, 2H), 2,05-2,2 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,4-2,5 (m, 1H), 3,28 (dd, 1H), 3,41
181 968 (q, 1H), 3,62 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 4,61 (d, 1H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,45 (m, 7H), 7,72 (t, 1H), 7,19 (d, 2H).
(iii) BnOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z)
Mieszaninę 0,40 g (0,73 mmol) Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z), 0,17 g BnOOC-CH2Br i 0,20 g (2 równoważniki) K2CO3 (utarty) w 15 ml CH3CN mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Powstającą mieszaninę odparowano, dodano octan etylu, i mieszaninę przemyto wodą i solanką, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Surowy produkt (0,69 g) poddano chromatografii rzutowej (CH2Cl2/MeOH 10/1) otrzymując 0,39 g (77%) jasnożółtego o dużej lepkości oleju.
HOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab
Do roztworu 0,39 g (0,56 mmol) BnOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z) w 30 ml EtOH dodano 0,1 g Pd/C (10%) i substancję uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym. Roztwór odsączono i odparowano, po czym pozostałąsyropowatąsubstancję osuszono przez wymrożenie otrzymując 0,25 g (95%) związku jako białego krystalicznego proszku.
Ή-NMR (300 MHz, CD3OD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 6H), 1,5-1,85 (m, 9H), 1,9-2,05 (m, 3H), 2,05-2,15 (m, 1H), 2,15-2,3 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 3,32 (d, 1H), 3,55-3,75 (m, 2H), 3,95-4,1 (m, 2H), 4,35-4,5 (m, 3H), 7,55 (d, 2H), 7,72 (d, 2H).
13C- NMR (75 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,4,171,5,174,7,175,1
Przykład 18
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Mieszaninę 149 mg (0,28 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15) i 66 mg (0,4 mmol) akrylanu benzylu w 1,5 ml etanolu trzymano w temperaturze pokojowej przez 36 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu otrzymując 124 mg (64%) żądanego produktu.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1
124 mg (0,18 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rozpuszczone w 10 ml etanolu uwodorniano przez 1 godzinę w obecności 55 mg 10% Pd/C. Katalizator usunięto przez odsączenie i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w kwasie chlorowodorowym i powstający roztwór osuszono przez wymrożenie otrzymując 87 mg (79%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-2,0 (m, 13H), 2,0-2,2 (m, 3H), 2,2-2,4 (m, 1H), 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, 1H), 3,3-3,4 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 3,7-3,9 (m, 1H), 4,3-4,6 (m, 4H), 7,4-7,6 (m, 2H), 7,6-7,8 (m, 2H).
,3C-N MR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,0,168,3 i 174,6 (dwa atomy węgla nakładają się).
Przykład 19
HOOC-CH2-CH2-(He) (R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z)
Do roztworu 274 mg (0,5 mmol) Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 17) w 5 ml EtOH (99%) dodano 97,3 mg (0,6 mmol) akrylanu benzylu i całość mieszano w temperaturze pokojowej. Po 72 godzinach dodano dodatkową ilość 16,2 mg (0,1 mmol) akrylanu benzylu i mieszanie kontynuowano przez 24 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość poddano chromatografii rzutowej (CH2Cl2/MeOH (nasycony NH3), 95/5) otzymując 198 mg (56%) związku tytułowego.
'H-MR (500 MHz, CDC13): δ 0,8-2,0 (kilka m, 16 H), 2,14 (s, 3H), 2,24-2,33 (m, 2H), 2,38-2,46 (m, 1H), 2,67 (t, 2H), 3,32-3,40 (m, 2H), 3,71 (m, 1H), 4,36-4,44 (m, 2H), 4,58 (m, 1H), 5,03 (pozorny s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,25-7,37 (m, 1 OH), 7,43 (d, 2H), 7,64 (t, 1H (NH)), 7,81 (d, 2H).
13C-NMR (125 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,7, 167,9, 171,7, 172,3 i 172,6.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1
Do roztworu 198 mg (0,27 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(2) w 10 ml EtOH i 1 ml IM HC1 dodano 60 mg 5% Pd/C (zawierający 50% wagowych H2O) i mieszaninę
181 968 uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 4 godziny. Katalizator odsączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostały olej rozpuszczono w wodzie i osuszono przez wymrożenie otrzymując związek tytułowy z ilościową wydajnością.
Ή-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,08-1,2 (m, 2H), 1,2-1,42 (m, 4H), 1,68-1,91 (m, 5H), 1,93-2,08 (m, 2H), 2,09-2,26 (m, 3H), 2,49 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 3,03 (s, 3H), 3,60 (pozorny bs, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 4,53 (m, 1H), 4,61 (bs, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,63 (d, 2H), 7,97 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2,167,8 i 174,5 Dwa piki prawdopodobnie nakładają się.
Przykład 20
HOOC-CH2-(RorS) CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R,S) CH (COOBn) - (R)Cha-Pro-Pab(Z)
Mieszaninę 0,50 g (0,94 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15) i 0,28 g (0,94 mmol) maleinianu dibenzylu w 20 ml EtOH trzymano w temperaturze pokojowej przez 5 dni. Odparowanie rozpuszczalnika a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH jako eluentu dało 0,15 g (19%) diastereomerycznej mieszaniny.
Ή NMR (500 MHz, CDC13) δ 0,7-2,1 (m, 17 H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,5-2,8 (m, 2H), 3,2-3,7 (m, 4H),4,46 (d, lH),4,65(bd, 1H),4,81 (d, 1H), 4,9-5,1 (m, 3H), 5,20 (s,2H), 7,1 -7,4 (m, 15H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,6-7,8 (m, 3H).
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a x 2 HC1
Mieszaninę 0,15 g (0,18 mmol) BnOOC-CH2(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rozpuszczono w 5 ml etanolu i uwodorniano nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Otrzymano HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab. Dwa diastereomery oddzielono metodą RPLC z zastosowaniem (CH3CN/0,l M NH4OAc 15/85) jako eluentu a następnie suszeniem przez wymrożenie z HC1. Diastereomer ten eluował pierwszy z kolumny. Wydajność 19 mg (18%).
Ή-NMR (500 MHz, D2O, mieszanina dwu rotamerów) główny rotamer: δ 1,0-2,0 (m, 15H), 2,15 (m, 2H), 2,44 (m, 1H), 3,00 (bd, 1H), 3,05 (bd, 1 H), 3,69 (m, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,97 (bs, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 7,62 (d, 2H), 7,87 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,2,168,3,173,8,174,6 i 178,2.
Przykład 21
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b x 2 HC1
Związek tytułowy otrzymano z zastosowaniem takich samych procedur zgodnie z opisem w przykładzie 20 dla HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab. Ten diastereomer wydostał się po pierwszym z kolumny. Wydajność 19 mg (18%).
’H-NMR (500 MHz, D2O, mieszanina dwu rotamerów) główny rotamer: δ 1,0-2,0 (m, 14H), 2,15-2,25 (m,3H), 2,44 (m, 1H), 3,11 (bd, lH),3,19(bd, 1H), 3,71 (m, 1H),3,92 (m, 1H), 4,03 (bs, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 7,58 (d, 2H), 7,84 (d, 2H).
Rozdzielone sygnały powstałe z podrzędnego rotameru pojawiająsię przy: δ 7,66 (d) i 7,91 (d).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,3,168,5 i 174,7. Dwa atomy węgla prawdopodobnie nakładają się.
Przykład 22
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,246 g (0,460 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15), 0,140 g (1,01 mmol) K2CO3 i 0,145 g (0,506 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br (patrz wytwarzanie substratów) zmieszano w 6 ml acetonitrylu. Mieszaninę mieszano w temperaturze 50°C przez 2 godziny 30 minut, rozpuszczalnik odparowano i pozostałość podzielono pomiędzy wodę i octan etylu. Warstwy oddzielono i warstwę wodną ekstrahowano jeszcze raz octanem etylu. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 0,350 g oleju. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH 97/3,95/5,92,5/7,5 otrzymując 0,227 g (67%) związku tytułowego
181 968 13C-NMR (75 MHz, CDC13): δ 25,0, 26,0, 26,2, 26,4, 26,7, 32,4, 34,2, 34,4, 40,8, 40,9, 42,9, 46,7, 50,5, 58,4, 60,2, 67,0, 67,2, 127,5, 127,8, 128,3, 128,2, 128,4, 128,5, 128,6, 134,1, 135,2, 137,0, 142,6, 164,7, 168,9, 169,3, 170,4, 172,2, 175,0 (ii) HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1
0,089 g (0,12 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) zmieszano z 30 mg 5% Pd/C i rozpuszczono w 10 ml kwasu octowego. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez półtorej godziny. Przesączenie katalizatora przez hyflo i suszenie przez wymrożenie z 1 ml IN kwasu chlorowodorowego dało 0,058 g (82%) żądanego produktu.
'H-NMR (300 MHz, D2O): δ 0,9-2,2 (m, 16H), 2,25-2,47 (m, 1H), 3,55-3,7 (m, 1H), 3,7-4,1 (m, 5H), 4,42 (t, 1H), 4,48-4,6 (m, 3H), 7,51 (d, 2H), 7,77 (d, 2H) 13C-N MR(75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,8,167,1,168,2,173,6 i 174,6
Przykład 23
EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc (i)EtOOC-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15) (275 mg, 0,51 mmol) potraktowano K2CO3 (141 mg, 1,02 mmol) i BrCH2CH=CHCOOEt (108 mg, 0,56 mmol) w CH3CN (10 ml) w temperaturze 20°C przez 20 godzin. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w EtOAc (5 ml)/H20 (2 ml). Warstwę organiczną oddzielono, osuszono (Na2SO4), i zatężono otrzymując 397 mg oleju, który oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem EtOAc/heptanu, 1/4 jako eluentu otrzymując 252 mg (77%) związku tytułowego.
'H-NMR(500MHz,CDC13): δ 0,8-1,05 (m, 2H), 1,1-1,45(m,3H), l,3(t,3H), 1,5-1,9(m, 8H), 1,95-2,05 (m, 1H), 2,1-2,15 (m, 1H), 2,45-2,55 (m, 1H), 3,0 i 3,15 (dwa d, 2H), 3,35-3,45 (m, 2H), 3,55-3,65 (m, 1H), 4,15 (q, 2H), 4,3 (d, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,85 (d, 1H), 6,75 (dt, 1H), 5,3-5,4 (m, 4H), 7,45 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
13C- NMR (75,0 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 165,7, 171,2 i 175,7 (Dwa piki prawdopodobnie nakładają się).
(ii) EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc
EtOOCCH=CHCH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (250 mg, 0,38 mmol) rozpuszczono w etanolu i uwodorniano w obecności 5% Pd/C w czasie około 2 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało po oczyszczeniu metodą RPLC z zastosowaniem (CH3CN/0,l MNH4OAc)jako eluentu 70 mg (36%) żądanego produktu.
Ή NMR (500 MHz, CD3OD): δ 0,9-1,05 (m, 2H), 1,15-1,55 (m, 5H), 1,25 (t, 3H), 1,6-1,85 (m, 7H), 1,95-2,6 (m, 8H), 3,55-3,65 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 4,1 (q, 2H), 4,45 (m i d, 2H), 4,55 (d, 1H), 7,55 i 7,75 (dwa d, 4H).
I3C-N MR (75,0 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,3,173,2,174,6 i 174,9.
Przykład 24
Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab x HC1 (i) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) mg (0,32 mmol) kwasu 4-chlorosulfonylo-benzoesowego dodano w temperaturze łaźni lodowej do roztworu 156 mg (0,29 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15) i 59 mg (0,58 mmol) trietyloaminy w 4 ml chlorku metylenu. Mieszaninie pozwolono się powoli ogrzać do temperatury pokojowej i po 24 godzinach przemyto ją wodą i osuszono (Na2SO4). Usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i oczyszczenie pozostałości metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 9:1 a następnie chlorku metylenu/metanolu 3:1 jako eluentów dało 82 mg (39%) produktu.
(ii) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab x HC1 mg (0,11 mmol) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) uwodorniano nad 5% Pd/C w EtOH. Katalizator odsączono, rozpuszczalnik odparowano i surowy produkt oczyszczono metodą RPLC z zastosowaniem (CH3CN/0,l M NH4OAc 1/4) jako eluentu i na koniec prze
181 968 kształcono w chlorowodorek przez suszenie wymrażające z HC1, które dało 21 mg (29%) produktu.
Ή-NMR (300 MHz, CD3OD, mieszanina dwu rotamerów): δ 0,45-1,82 (m, 13H), 1,90-2,30 (m, 4H), 2,95-4,16 (kilka m, całkowita 3H), 4,35-4,68 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,74 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,90-8,00 (m, 2H), 8,05-8,22 (m, 2H).
13C-NMR (75 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,4, 173,4, 173,9 i 174,2
MSm/2 584 (M++ 1)
Przykład 25
H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1 (i) Hoc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
3,57 g (18,6 mmol) EDC dodano w temperaturze -15°C do mieszaniny 7,11 g (18,6 mmol) Hoc-(R)Cha-Pic-OH (patrz wytwarzanie substratów), 9,07 g (74,2 mmol) DMAP i 5,26 g (18,6 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 200 ml DMF. Temperaturze pozwolono się podnieść do 20°C przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano toluen i wodę. Fazę organiczną przemyto wodą, IM KHSO4, 10% Na2CO3 i solanką. Suszenie (MgSO4) i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 13,63 g pozostałości, którąpoddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem octanu etylu/toluenu 2:1 jako eluentu otrzymując 9,5 g (79%) związku tytułowego.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,7-1,0 (m, 2H), 1,0-2,2 (m, 25H), 2,3-2,5 (m, 1H), 2,9-3,1 (m, 1H), 3,8 (d, 1H), 4,3 (dd, 1H), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,1 (5,2H), 5,1-5,3 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,35 (d, 2H), 7,4-7,5 (m, 1H), 7,75 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, CDCI3): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 156,8, 164,6, 168,2, 170,0 i 173,4.
(ii) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Chlorowodór barbotowano przez roztwór 9,5 g (14,7 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) w 100 ml octanu etylu w temperaturze pokojowej aż do nasycenia. Po 10 minutach dodano roztwór Na2CO3 (10%) i fazę organiczną, która wydzieliła się, osuszono (K2CO3) i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując związek tytułowy z ilościową wydajnością.
Ή-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 0,85-1,05 (m, 2H), 1,15-12,90 (m, 16H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,20-3,30 (m, 1H), 3,80-3,90 (d, 1H), 3,90-4,0 (m, 1H), 4,4-4,5 (dwa d, 2H), 4,7 (br s, 5H) 5,15 (s, 2H), 5,20 (m, 1H), 7,25-7,45 (m, 7H), 7,85 (d, 2H).
(iii) H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1 mg (0,1 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w mieszaninie 5 ml etanolu i 0,45 ml IMkwasu chlorowodorowego uwodorniano w obecności 33 mg 10% Pd/C przez 1,5 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którąpoddano RPLC z zastosowaniem 0,1 M NH4OAc/CH3CN jako eluent. Oczyszczony peptyd na koniec przekształcono w dichlorowodorek przez rozpuszczenie w kwasie chlorodoworowym a następnie suszenie przez wymrożenie. Wydajność 17 mg (35%) związku tytułowego.
Ή-NMR (300 MHz, D2O, 2 rotamery, mieszanina 3:1): δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,33 (d, 1H), 3,4-3,5(m, 1H), 3,8-3,9 (m, 1H), 4,4-4,8 (m,3H), 5,15-5,25 (m, lH),7,5-7,7(m,2H),7,8-8,0(m,2H).
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotamerupojawiająsię przy δ: 0,5-0,7 (m)i3,0-3,1 (m) 13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,3, 171,6 i 173,6. Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 170,6 i 172,4 Przykład 26 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Mieszaninę 742 mg (1,35 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25), 230 ml (1,45 mmol) bromooctanu benzylu i 558 mg (4 mmol) K2CO3 w 4 ml acetonitrylu poddano działaniu ultradźwięków w temperaturze 40°C przez 40 minut. Rozpuszczalnik usunięto i pozostałość poddano chromatografii rzutowej otrzymując 720 mg (77%) żądanego produktu.
181 968
Ή-NMR (500 MHz, CDC13); δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H), 2,1-2,4 (brs, 1 lub2H), 2,4 (d, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,25 (d, 1H), 3,45 (d, 1H), 3,55-3,65 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,55 (dd, 1H), 4,80 (dwa d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3 (m, 1H), 7,2-7,4 (m, 12H), 7,8 (d, 2H).
13C-NMR (125 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 167,9, 170,5, 173,4 i 175,5.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1
509 mg (0,73 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w 25 ml etanolu uwodorniano w obecności 259 mg 10% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w wodzie destylowanej. Dodano kwas chlorowodorowy i roztwór osuszono na koniec przez wymrożenie otrzymując 281 mg (79%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, D2O), mieszanina rotamerów 4:1): główny rotamer: δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,40 (m, 1H), 3,4-3,5 (m, 1H), 3,8-3,95 (m, 3H), 4,55-4,65 (dwa d, 2H), 5,15 (m, 1H), 7,55-7,75 (m, 2H), 7,8-8,0 (m, 2H).
13C-NMR (125 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,3, 169,9, 170,3 i 173,5.
Rozdzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 166,9, 169,2 i 172,0.
Przykład 27
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Mieszaninę 592 mg (1,1 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) i 332 mg (1,1 mmol) maleinianu dibenzylu w 1 ml etanolu trzymano w temperaturze pokojowej przez 1 tydzień. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem metanolu/chlorku metylenu jako eluentu otrzymując 275 mg (30%) diastereomerycznej mieszaniny.
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a x 2 HC1
275 mg BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczono w 20 ml 95% etanolu uwodorniano przez 18 godzin w obecności 75 mg 10% Pd/C. Mieszaninę odsączono przez hyflo i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Dodanie wody, a następnie suszenie przez wymrożenie dało 166 mg HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab. Dwa diastereomery oddzielono metodą RPLC z zastosowaniem (CH3CN/0,l M NH4OAc 1/4) jako eluentu, a następnie suszenie przez wymrożenie z HC1. Ten diastereomer eluował najpierw z kolumny. Wydajność 9 mg.
'H-NMR (300 MHz, D2O, mieszanina rotamerów): δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,4 (m, 1H), 3,0-3,2 (m,2H), 3,4 (t,lH), 3,8 (d, 1H),4,O5 (t, 1H), 4,5-4,7 (m,3H), 5,2 (s, 1H), 7,55 (d,2H), 7,9 (d, 2H).
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 4,0 (t) i 7,7 (d).
Przykład 28
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b x 2 HC1
Związek tytułowy otrzymano z zastosowaniem takich samych procedur jak opisano w przykładzie 27 dla HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab. Ten diastereomer wydostał się po pierwszym z kolumny.
'H-NMR (500 MHz, D2O, mieszanina rotamerów) δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,4 (m, 1H), 3,0-3,2 (m, 2H), 3,5 (t, 1H), 3,85 (d, 1H), 4,15 (s, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 5,15 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,8 (d, 2H).
Oddzielone sygnały z podrzędnego rotameru pojawiająsię przyó4,35(s), 7,65(d) i 7,9(d).
Przykład 29
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1 (i)HnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Mieszaninę 851 mg (1,55 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) i 269 mg (1,71 mmol) akrylanu benzylu w 5 ml etanolu trzymano w temperaturze pokojowej przez 40 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii
181 968 rzutowej z zastosowaniem chlorku metylenu/metanolu jako eluentu otrzymując 812 mg (74%) produktu.
Ή-NMR (500 MHz, CDC13): 80,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H), 2,3-2,5 (m, 3H), 2,6-2,8 (m, 2H), 3,0 (m, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 1H), 4,3 (dd, 1H), 4,6 (dd, 1H), 4,95-5,05 (dwa d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3 (m, 1H), 6,5-6,9 (br s, 1H), 7,0-7,1 (m, 1H), 7,2-7,5 (m, 12H), 7,75-7,85 (d, 2H), 9,3-9,7 (br s, 1H).
(ii) HOOC-CH2-CH2(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1
780 mg (1,1 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczono w 25 ml etanolu uwodorniano przez 4 godziny w obecności 306 mg 15% Pd/C. Katalizator odsączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w kwasie chlorowodorowym i powstający roztwór osuszono przez wymrożenie otrzymując 481 mg (78%) związku tytułowego.
Ή-NMR (500 MHz, D2O): 8 0,95-1,1 (m,2H), 1,15-1,9 (m, 16H), 2,2-2,3 (m, 1H), 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, 3H), 3,4-3,5 (m, 1H), 3,75-3,85 (m, 1H), 4,4-4,6 (m, 3H), 5,15 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,8-7,9 (m, 2H), 8,6-8,7 (m, 1H).
13C-NMR (125 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: 5 170,6, 175,9,179,5 i 183,5
Przykład 30
HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc (i) EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,12 g chlorku etyloksalilu dodano do mieszaniny 0,42 g (0,77 mmol) H-(R)Cha-PicPab(Z) (patrz przykład 25) i 0,21 g (1,5 mmol) K2CO3 w 10 ml CH3CN w temperaturze pokojowej. Po 2 godzinach dodatkową ilość 0,07 g (0,5 mmol) chlorku etyloksalilu dodano. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w CH2C12 i przemyto wodą. Odparowanie i chromatografia rzutowa (toluen/octan etylu 1:2 a następnie CH2Cl2/metanol) dała 0,21 g (42%) produktu.
(ii) HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Dodano 0,21 g (0,32 mmol) EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w 3 ml THF do 0,17 g (4,2 mmol) LiOH rozpuszczone w 3 ml wody. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i następnie wylano na octan etylu/wody. Fazy oddzielono i fazę organiczną ekstrahowano roztworem KHCO3. Wodną fazę zakwaszono 0,5M HC1 (pH 1) i ekstrahowano CH2C12, osuszono nad Na2SO4 i odparowano otrzymując 80 mg produktu.
(iii) HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc
HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) uwodorniano nad 5% Pd/C w EtOH. Katalizator odsączono i rozpuszczalnik odparowano. Pozostałość poddano oczyszczeniu metodąRPLC otrzymując związek tytułowy.
Ή NMR (500 MHz, DMSO-d6): 80,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,75 (m, 15H), 1,86-1,94 (m, 1H), 2,13-2,2(m, 1H),3,75-3,81 (m, 1H), 4,32,4,44 (AB, 2H), 4,71-4,77 (m, 1H)-, 4,98-5,02 (m, 1H), 7,41 (d,2H),7,75(d,2H), 8,1-8,15 (m, 1H), 8,22-8,27 (m, 1H), 9,32 (brs), 9,90 (brs). Sygnałjednego z protonów (3,25) jest częściowo zasłonięty przez sygnał rozpuszczalnika.
MS m/z 486 (M+ + 1)
Przykład 31
HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab (i) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,39 g (0,72 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(2) (patrz przykład 25) i 0,9 g (0,8 mmol) malonianu monometylu rozpuszczono w 40 ml CH2C12 i dodano 0,16 g (0,8 mmol) DCC. Roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Wytrącony DCU usunięto przez odsączenie i przesącz przemyto 0,3M KHSO4 i roztworem KHCO3 i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem toluenu/octanu etylu (1/3) jako eluentu dało 0,27 g (58%) żądanego produktu.
(ii) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
181 968 mg (0,14 mmol) Me OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczono w 10 ml etanolu i uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 5 godzin. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało 50 mg (70%) tytułowego produktu.
Ή NMR (300 MHz, CD3OD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H), 2,35-2,45 (m, 1H), 3,2-3,4 (m, 3H), 3,7 (s, 3H), 3,95-4,05 (m, 1H), 4,4-4,55 (m, 3H), 5,15-5,25 (m, 1H), 7,4-7,55 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).
13C NMR (75 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,2, 168,7, 170,0, 172,4 i 174,6.
MS m/z 514 (M++ 1) (iii) HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
Do roztworu 0,14 g (0,27 mmol) MeOOC-CH2-CO(R)Cha-Pic-Pab w 5 ml metanolu dodano 2 ml 0,5 M NaOH w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu przez 5 godzin dodano wody i metanolu usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Wodną fazę osuszono przez wymrożenie. Rozpuszczalną substancję wyekstrahowano z nierozpuszczalnych nieorganicznych soli absolutnym etanolem. Pozostałe ciało stałe po odparowaniu etanolu było zawieszone w wodzie i odsączono 70 mg (52%) związku tytułowego.
Ή NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,0-1,9 (m, 16H), 2,15-2,30 (m, 1H), 2,58,2,86 (AB, 2H), 3,8-3,95 (m, lH),4,2-4,5(m,2H),4,7-4,85(m, 1H), 4,95-5,05 (m, 1H),7,4O (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,2-8,3 (m, 1H), 9,3-9,4 (m, 1H), 9,90 (br s, 3H). Sygnał jednego z protonów (3,21) jest częściowo zasłonięty przez sygnał rozpuszczalnika.
13C- NMR (75 MHz, DMSO-d6): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 165,8,168,8, 169,9, 172,2 i 172,4.
MS m/z 500 (M++ 1)
Przykład 32
Me OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
Patrz przykład 31 (ii) powyżej.
Przykład 33
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab (i) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Próba alkilowania 455 mg (0,83 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) 80 mg (0,86 mmol) chloroacetamidu w 3 ml acetonitrylu w obecności 395 mg (2>86 mmol) węglan potasu przez działanie ultradźwiękami w temperaturze 40°C okazało się być bardzo powolną reakcją. Nawet dodanie 230 mg (2,6 mmol) bromku litu nie poprawiło szybkości reakcji. Jednak, dodanie jodku litu i ogrzanie/ultradźwięki dało małe ilości produktu, zgodnie z TLC. Obróbka przez dodanie wody, ekstrakcja z octanem etylu/toluenu, suszenie fazy organicznej (MgSO4) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem MeOH/CH2Cl2 jako eluentu otrzymując 118 mg (24%) żądanego produktu.
(ii) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1
118 mg (0,2 mmol) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczono w 10 ml 95% etanolu uwodorniano w obecności 143 mg 10% Pd/C przez 2 godziny. Mieszaninę rozcieńczono wodą destylowaną i kwasem chlorowodorowym i odsączono przez hyflo. Suszenie przez wymrożenie dało 26 mg (24%) żądanego produktu.
‘H-NMR(300MHz,CD3OD):δ0,9-1,1 (m,2H), l,l-l,9(m, 16H),2,3 (d, lH),3,4(t, 1H), 3,6 (układ AB, 2H), 3,8 (d, 2H), 4,35 (t, 1H), 4,5 (s, 2H), 5,2 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,8 (d, 2H).
Przykład 34
Boc-(R)Cha-Pic-Pab mg (0,015 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) rozpuszczonego w 5 ml etanolu uwodorniano w obecności 38 mg 10% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem a następnie rozpuszczenie pozostałości w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 7,6 mg (95%) produktu.
‘H-NMR(300MHz,CD3OD):b0,9-l,l (m,2H), l,l-l,9(m, 16H),2,4(d, lH).3,25(t, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,5 (układ AH, 2H), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,25 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
181 968
Przykład 35
Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HC1 (i) Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Chlorek acetylu 0,06 g (0,8 mmol) dodano do mieszaniny 0,37 g (0,68 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(2) (patrz przykład 25) i 0,19 g (1,35 mmol) K2CO3 w 10 ml CH3CN w temperaturze pokojowej. Po mieszaniu przez dodatkowe 30 minut w temperaturze pokojowej rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w CH2C12 i przemyto wodą. Odparowanie i chromatografia rzutowa z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (99,9/0,1, 99,8/0,2, 99,6/0,4, 99,2/0,8 i 98,4/1,6) dało 0,24 g (60%) produktu.
(ii) Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HC1
Ac-(R)Cha-Pic-Pab(2) uwodorniano nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym. Po odsączeniu katalizatora i odparowaniu rozpuszczalnika surową substancję poddano oczyszczeniu metodąRPLC z zastosowaniem CH3CN/0,1M NH4OAc (35/65) jako eluentu. Usunięcie rozpuszczalnika i nadmiaru NH4OAc a następnie suszenie przez wymrożenie z IM HC1 dało związek tytułowy.
Ή-NMR (300 MHz, CD3OD): 60,85-1,1 (m, 2H), 1,15-2,0 (m, 19H), 2,35-2,47 (m, 1H), 3,2-3,33 (m, 1H), 3,95-4,05 (m, 1H), 4,46-4,57 (ΑΒΧ, 2H), 5,16-5,22 (m, 1H), 7,51 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,23 (m, 1H). Sygnał jednego z protonów jest całkowicie zasłonięty przez rozpuszczalnik-signal.
13C-N MR (75 MHz, CD3OD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,3, 172,5, 173,8, 175,1
MS m/z 456 (M+ + 1)
Przykład 36
Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab x HC1 (i) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Roztwór 48 mg (0,42 mmol) chlorku metanosulfonylu w 0,5 ml chlorku metylenu dodano w temperaturze 0°C do mieszanego roztworu 209 mg (0,382 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) i 0,11 ml (0,763 mmol) trietyloaminy w 5 ml chlorku metylenu. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez noc. Przemycie wodą, a następnie suszenie (Na2SO4) i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/metanolu (95/5) jako eluentu otrzymując 159 mg (67%) produktu.
(ii) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab x HC1
150 mg (0,24 mmol) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w 5 ml 95% etanolu i 1 ml wody uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, dodanie 0,2 ml IM kwasu chlorowodorowego i odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą rozpuszczono w 2 ml 2 wody i osuszono przez wymrożenie otrzymując 116 mg (86%) produktu.
'H-NMR (500 MHz, CD3OD): 6 0,90-1,10 (m, 2H), 1,15-1,85 (m, 15H), 1,90 (bd, 1H), 2,30 (bd, 1H), 2,85 (s, 3H), 3,35 (dt, 1H), 3,90 (bd, 1H), 4,45 (układ AB, 2H) 4,50-4,55 (m, 1H), 5,13 (dd, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
13C-N MR, 125 MHz D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,8, 173,0 i 174,6.
Przykład 37
H(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)
EDC dodano w temperaturze -18°C do mieszanego roztworu 1,0 g (2,6 mmol) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,28 g (10,5 mmol) DMAP, 0,74 g (2,6 mmol) H-Pab-(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 35 ml DMF. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez noc i rozpuszczalnik usunięto następnie pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w CH2C12 i warstwę organiczną przemyto kolejno 0,3M KHSO4, roztworem KHCO3 i solanką. Suszenie (Na2SO4) i usunięcie rozpuszczalnika
181 968 dało pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem heptanu/octanu etylu z 4% metanolu jako eluentu otrzymując 0,74 g (44%) żądanego produktu.
(ii) H-(R)Cha-(R,S)beta Pic-Pab(Z)
0,68 g (1,05 mmol) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) rozpuszczono w octanie etylu nasyconym HCI (g). Roztwór mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Dodano wody i mieszaninę zalkalizowano K2CO3. Wodną fazę ekstrahowano z octanem etylu. Następnie fazę organiczną przemyto wodą i osuszono (Na2SO4). Odparowanie dało 0,5 g (87%) żądanego produktu.
(iii) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HCI mg (0,19 mmol) H-(R)Cha-betaPic(R,S)-Pab(Z) rozpuszczono w 7 ml etanolu i uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z IM HCI i wody dało 41 mg (71%) produktu.
’H NMR (300 MHz, D20,2 diastereomery 4/5 i rotamery); δ 0,8-2,16 (m), 2,5-2,77 (m, 3H), 3,13-3,43 (m, 3H), 3,68-3,94 (m, 1H), 4,18-4,41 (m, 1H), 4,41-4,52 (m, 3H), 7,46-7,57 (m, 2H), 7,72-7,83 (m, 2H).
Przykład 38
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,B)betaPic-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)
0,21 g (0,38 mmol) H-(R)Cha-(R,5)betaPic-Pab(Z) (patrzprzykład 37) rozpuszczono w 2 ml etanolu. Dodano 0,68 g (0,42 mmol) akrylanu benzylu i roztwór mieszano przez 5 dni. Odparowanie i chromatografia rzutowa z CH2Cl2/MeOH (95/5) jako eluentem dało 0,19 g (70%) żądanego produktu.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC 1
170 mg (0,24 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)beta PicPab(Z) rozpuszczono w 10 ml etanolu i uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z 1M HCI i wody dało 103 mg (77%) produktu.
Ή NMR (300 MHz, D2O, mieszanina 2 diastereomerów 4/5 i rotamery); δ 0,92-2,03 (m, H), 2,51-2,78 (m, 1H), 3,21-3,52 (m, 1H), 3,88-4,01 (m, lH),4,07-4,3(m,2H),4,4-4,71 (m, 2H), 7,59 (d, 2H), 7,86 (d, 2H) 13C-N MR (300,13 MHz, D2O, mieszanina 2 diastereomerów 4/5 i rotamery): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,0, 168,0, 168,1,175,9,176,0, 176,3, 176,4 i 178,2.
Przykład 39
HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HCI (i) Hoc-(R)Cha-Val-Pab(Z)
1,77 g (9,2 mmol) EDC dodano w temperaturze -12°C do mieszaniny 3,41 g (9,2 mmol) Boc-(R)Cha-Val-OH (patrz wytwarzanie substratów), 2,61 g (9,2 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów), i 4,5 g (36,8 mmol) DMAP w 50 ml DMF. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez noc i rozcieńczono wodą, a następnie ekstrahowano toluenem, eterem i octanem etylu. Następnie suszenie (MgSO4) połączonych ekstraktów organicznych, usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH jako eluentu dała 2,77 g (47%) żądanego produktu.
(ii) H-(R)Cha-Val-Pab(Z)
Chlorowodór barbotowano przez roztwór 2,77 g (4,4 mmol) Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z) w 75 ml octanu etylu. Po 15 minutach roztwór węglanu sodu dodano do pH 10 i wodną fazę ekstrahowano z octanem etylu. Suszenie (węglan potasu) i usuniecie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało 1,8 g (77%) H-(R)Cha-Val-Pab(Z).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)
Mieszaninę 326 mg (0,61 mmol) H-(R)Cha-Val-Pab(Z), 105 ml (0,67 mmol) bromooctanu benzylu, i 252 mg (1,83 mmol) węglanu potasu w 2 ml acetonitrylu poddano działaniu ultradźwięków przez 2,5 godziny w temperaturze 40° C. Dodano więcej acetonitrylu w celu rozpusz
181 968 czenia produktu, mieszaninę odsączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem metanolu/chlorku metylenu jako eluentu. Produkt na koniec krystalizowano z octanu etylu otrzymując 124 mg (30%) bezbarwnych kryształów.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1
124 mg (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z) w 20 ml etanolu uwodorniano przez 2 godziny w obecności 25 mg 10% Pd/C. Dodano 10 ml THF iuwodomianojeszczeprzez2 godziny w temperaturze 50°C. Mieszaninę przesączono przez hyflo i placek filtracyjny przemyto rozcieńczonym kwasem chlorowodorowym. Rozpuszczalniki organiczne usunięto z połączonych przesączów pod zmniejszonym ciśnieniem. Suszenie przez wymrożenie pozostałego roztworu dało 55 mg (50%) żądanego związku.
‘H-NMR (500 MHz, D2O); ó 0,75-1,4 (m, 12H), 1,5-1,9 (m, 7H), 2,0-2,15 (bs, 1H), 3,45 (układ AB, 2H), 4,1 (m, 2H), 4,5 (m, 2H), 7,5 (s, 2H), 7,7 (s, 2H), 8,9 (s, 1H).
Przykład 40
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1 (i) H-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
Związek tytułowy wytworzono przez sprzęganie Boc-(R)Cha-Val-OH z H-Pab(Z), stosując piwaloilowe sprzęganie według opisu dla Boc-(R)Cha-Pic-OMe (patrz wytwarzanie substratów). Zaszła całkowita epimeryzacja waliny dając Boc-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z). Zabezpieczającą grupę Boc usunięto według opisu dla Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z) (patrz przykład 39) otrzymując tytułowy związek.
(ii) Bn OOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
Roztwór 1,007 g (1,9 mmol) H-(R)Cha-(R,5)Val-Pab(Z) i 308 mg (1,9 mmol) akrylanu benzylu w 3 ml etanolu trzymano w temperaturze 40°C przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem metanolu/chlorku metylenu (10/90) jako eluentu otrzymując 1,086 g (82%) związku tytułowego.
(iii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1
1,086 g (1,6 mmol) BnOOC-CH2-CH2(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z) uwodorniano w 25 ml THF i 14 ml 0,5 M kwasu chlorowodorowego w obecności 223 mg 10% Pd/C przez 2 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie przez celit i usunięcie THF pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie suszenie przez wymrożenie pozostałą wodny roztwór dało pozostałość, której około 300 mg poddano HPLC z zastosowaniem 25% acetonitrylu w 0,1M buforze octanu amonu jako eleuentu. Wydzielono dwie główne frakcje, z których druga frakcja zawierała związek tytułowy. Wydzielono 67 mg związku tytułowego jako dichlorowodorku.
‘H-NMR (500 MHz, D2O); δ 1,0-1,15 (m, 12H), 1,2-1,4 (m, 7H), 1,65-1,9 (m, 7H), 2,15-2,25(m, lH)2,85(t,2H),3,15-3,2(m, 1H),3,3-3,35(m, 1H),4,15-4,2(m, lH),4,25(d, 1H), 4,55-4,65 (układ AB, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
13C- NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,0, 169,8, 173,96 i 174,04.
Przykład 41
H-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) zastępując Hoc(R)Cha-Pic-OH Hoc-(R)Hoc-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów). Surowy produkt poddano chromatografii rzutowej (toluen/EtOAc 1/6) otrzymując 0,32 g (37%) żądanego produktu.
(ii) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) potraktowano w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) w przykładzie 25 otrzymując 0,23 g (88%) związku tytułowego.
(iii) H-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 HC1
181 968 mg (0,037 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w 3 ml etanolu i uwodorniano w obecności 5% Pd/C przez 4 godziny pod ciśnieniem atmosferycznym. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z IM HC1 dało 11 mg (63%) produktu.
'H-NMR (300,13 MHz, D2O, mieszanina dwu rotamerów 3:1): główny rotamer: 80,9-2,1 (m, 15H), 2,4-2,6 (m, 1H), 2,7-3,0 (m, 1H), 4,1-4,3 (m, 1H), 4,35-4,56 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 5,0-5,11 (m, 1H), 7,62 (d, 2H), 7,9 (d, 2H). Sygnał jednego z protonów jest całkowicie zasłonięty przez sygnał H-O-D.
Przykład 42
HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 TPA (i)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
0,067 g (0,41 mmol) akrylanu benzylu dodano do roztworu 0,2 g (0,37 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 41) w 2 ml etanolu (95%) w temperaturze pokojowej. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze pokojowej na 5 dni. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość oczyszczono metodą chromatografii rzutowej (CH2Cl2/MeOH, 96/4) otrzymując 0,16 g (62%) żądanego produktu.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 TFA
160 mg (0,23 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) rozpuszczono w 10 ml etanolu i poddano uwodornieniu pod ciśnieniem atmosferycznym w obecności 5% Pd na węglu przez 3 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z wody i TFA dało 120 mg (87%) produktu.
'H-NMR (300,13 MHz, D2O, 2 rotamery 3:1): główny rotamer: 8 0,9-1,9 (m, 13H), 1,94-2,16 (m, 2H), 2,38-2,55 (m, 1H), 2,7-2,97 (m, 3H), 3,2-3,44 (m, 2H), 4,16 (m, 1H), 4,35-4,58 (m, 2H), 4,65 (5, 2H), 5,0-5,12 (m, 1H), 7,63 (d, 2H), 7,87 (d, 2H) l3C-NMR (300,13 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: 8 167,3, 168,7, 172,5 i 176,6.
Przykład 43
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
Wytworzony z Boc-(R)Hoc-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów) w taki sam sposób, jak opisano dla Boc(R)Cha-Pic-Pab(Z) w przykładzie 25. Chromatografia rzutowa z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu dała 0,886 g (58%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): 8 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-2,1 (m, 27 H (w nim 1,2 (s, 9H)), 2,l-2,4(m, 1H), 3,3-3,5 (m, 1H), 3,65-3,95 (m, 1H), 4,0-4,2 (m, 1H) 4,2-4,45 m2H), 4,45-4,6 (d, 1H), 5,15 (pozorny bs, 2H), 5,2-5,3 (d, 1H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,65 (m, 1H), 7,7-7,8 (d, 2H), 9,4 (bs, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: 8 156,3, 164,6, 168,1, 171,4 i 172,4.
(ii) H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) ml octanu etylu nasycony chlorowodór dodano to 0,82 g (1,266 mmol) Boc-(R)HocPro-Pab(Z) w temperaturze 0°C. Temperaturze pozwolono się podnieść do pokojowej. Reakcja nie zakończyła się po 1,5 godziny i wobec tego chlorowodór barbotowano przez mieszaninę reakcyjnąw czasie 5 minut. Rozpuszczalnik odparowano i octan etylu i nasycony węglan sodu dodano i fazy oddzielono. Fazę organiczną przemyto solanką i osuszono (Ńa2SO4) i rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując związek tytułowy z prawie ilościową wydajnością.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): 8 0,75-0,95 (m, 2H), 0,95-2,4 (m, 17H), 3,3-3,55 (m, 2H), 3,55-3,7 (m, 1H), 4,25-4,45 (m, 2H), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,6-7,7 (m, 1H), 7,7-7,85 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz. CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: 8 164,5, 167,8, 171,4 i 175,3.
(iii) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
181 968
Do 0,15 g (0,5 mmol) akrylanu benzylu w 1,5 ml EtOH (99%) dodano 0,273 g (0,498 mmol) H-(R)Hoc-Pro-Pab(2) i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 10 dni. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano chromatografii rzutowej, z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu otrzymując 0,103 g (25%) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z).
‘H-NMR (300 MHz CDC13); δ 0,75-2,05 (m, 18H), 2,3-2,45 (m, 1H), 2,45-2,8 (m, 3H), 3,15-3,45 (m, 3H), 3,5-3,65 (m, 1H), 4,3-4,5 (m, 2H), 4,55-4,7 (m, 1H), 4,8 (s, 1H), 4,9-5,1 (m, 3H), 5,2 (s, 2H), 7,1-7,2 (m, 1H), 7,2-7,4 (m, 13H), 7,4-7,45 (d, 2H), 7,6-7,8 (m, 3H).
(iv) HOOC-CH2-(R,5)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HC1
103 mg (0,122 mmol) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) rozpuszczone w 4 ml etanolu (99,5%) i 0,3 ml chloroformu uwodorniano w obecności 111 mg 5% Pd/C przez 2 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie wykazało niecałkowite uwodornienie. Uwodornienie kontynuowano w obecności etanolu, 1 N HC1 i 5% Pd/C przez 5 godzin.
Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało związek tytułowy.
'H-NMR (500 MHz, CD3OD, mieszanina dwu diadtereomerów); δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,4 (m,6H), 1,6-1,8(m,5H), l,9-2,15(m,5H)2,25-2,35(m, 1H),2,9-3,2(m,2H),3,5-3,65(m, 1H), 3,7-3,9 (2m, całkowita 1H), 4,15-4,4 (2m, całkowita 1H), 4,4-4,6 (m, 4H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).
13C -NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,9, 168,2, 168,3, 172,8, 173,6, 174,3 i 174,4. Sygnały dwu diastereomerów nakładają się częściowo.
Przykład 44
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1 (i) Hoc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
Wytworzony z Boc-(R)Hoc-Pic-OH (patrz wytwarzanie substratów) i H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w taki sam sposób, jak opisano dla Boc(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25). Chromatografia rzutowa z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu dało 1,3 g (78%) związku tytułowego.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,75-0,95 (m,2H), 0,95-2,0 (m, 31H (w nim 1,3 (s, 9H), 2,4-2,5 (m, 1H), 3,0-3,1 (m, lH),3,8(m, 1H), 4,2-4,45 (m, 2H),4,45-4,55 (m,2H), 5,15 (pozorny bs, 3H), 5,25-5,3 (m, 1H), 7,0 (bs, 1H), 7,15-7,5 (m, 7H), 7,7-7,85 (d, 2H), 9,45 (bs, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 156,6, 164,7, 168,1, 170,0 i 173,0.
(ii) H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
100 ml octanu etylu nasyconego chlorowodorem dodano do 1,3 g (1,96 mmol) Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) w temperaturze 0°C. Temperaturze pozwolono się podnieść do pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano po 40 minutach, dodano octan etylu i nasycony węglan sodu i fazy oddzielono. Fazę organiczną przemyto solanką i osuszono (Na2SO4), a rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 0,85 g (77,5%) produktu.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,75-0,95 (m, 2H), 1,05-2,3 (m, 25H), 3,0-3,15 (m, 1H), 3,6-3,75 (m, 2H), 4,25-4,4 (m, 2H), 5,15 (pozorny bs, 3H), 7,05-7,2 (d, 2H), 7,2-7,35 (m, 4H), 7,35-7,4 (d, 1H), 7,6-7,8 (d, 2H).
13 C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 167,9, 170,8 i 175,7.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
0,171 g (0,748 mmol) bromooctanu benzylu dodano do mieszaniny 0,4 g (0,712 mmol) H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) i 0,127 g (1,57 mmol) K2CO3 w 7 ml acetonitrylu. Mieszaninę ogrzewano do 60°C w łaźni olejowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik usunięto i dodano octan etylu i wodę. Fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto solanką i osuszono (Na2SO4). Odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem dało 0,626 g pozostałości, którą poddano chromatografii rzutowej z
181 968 zastosowaniem octanu etylu jako eluentu, otrzymując 2 produkty. Pierwszym związkiem ehiowanym z kolumny był (BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z) (0,28 g), a drugim tytułowy (0,27 g).
BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z):
'H-NMR(300MHz, CDC13): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 1,0-1,75 (m, 18H), 2,3-2,5 (m, 1 lub2H), 2,9-3,05 (m, 1H), 3,2-3,3 (m, 1H), 3,35-3,5 (m, 2H), 3,6-3,7 (m, 1H), 4,35, 4,55 (układ ΑΒΧ, 2H), 4,75 (s, 2H), 5,15 (pozorny s, 3H), 5,25-5,3 (m, 1H), 7,1-7,45 (m, 12H), 7,7-7,9 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,6, 167,9, 170,5, 173,4 i 175,0.
(iv) HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1
259 mg (0,365 mmol) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) rozpuszczono w 7,8 ml etanolu (99,5%) i 1,2 ml chlorowodoru (IN) uwodorniano w obecności 280 mg 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 170 mg (83%) związku tytułowego.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,4-1,85 (m, 20H), 1,85-2,2 (m, 1H), 2,9-3,2 (m, 1H), 3,4-3,9 (m, 3H), 4,05-4,3 (m, 2H), 4,3-5,05 (m, 2H), 7,1-7,4 (m, 2H), 7,4-7,7 (m, 2H).
13C -NMR· (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,8, 168,6, 169,6 i 172,3.
Przykład 45 (HOOc-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1 (i) (BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
Związek tytułowy otrzymano przez alkilowanie H(R)Hoc-Pic-Pab(Z), jak opisano w przykładzie 44 powyżej.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-1,95 (m, 18 H), 2,35-2,5 (m, 1H), 2,9-3,05 (m, 1H), 3,5-3,85 (m, 6H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,9 (2s, 4H), 5,2 (s, 2H), 5,25-5,35 (m, 1H), 7,1-7,45 (m, 16H), 7,5-7,65 (m, 1H), 7,7-7,85 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,7, 167,9, 170,5, 172,0 i 172,4.
(ii) (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1
153 mg (0,178 mmol) (BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) rozpuszczone w 4,5 ml etanolu (99,5%) i 0,5 ml chlorowodór (1 N) uwodorniano w obecności 150 mg 5% Pd/C przez 3,5 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie rozpuszczalnika a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 109 mg (99%) dichlorowodorku (HOOCCH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab. Tę surową substancję (80% czystości) poddano oczyszczeniu metodą RPLC z zastosowaniem CH3CN/0,l M NH4OAc, 1:4, jako eluentu. Usunięcie rozpuszczalnika i nadmiaru NH4OAc, a następnie suszenie przez wymrożenie z 1 M HC1 dało związek tytułowy.
*H-NMR (500 MHz, D2O, mieszanina dwu rotamerów): główny rotamer: δ 0,95-2,15 (m, 2H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,45-3,55 (m, 1H), 3,95-4,25 (m, 5H), 4,6-4,65 (m, 2H), 4,92-5,01 (m, 1H), 5,15-5,20 (m, 1H), 7,58-7,63 (d, 2H), 7,84-7,89 (d, 2H).
Oddzielone sygnały powstałe z podrzędnego rotameru pojawiają się przy: δ 0,7-0,85 (m), 2,35-3,45 (m), 3,05-3,15 (m), 4,47-4,55 (m), 4,55-4,6 (m), 4,65-4,7 (m), 7,63-7,67 (d), 7,89-7,95 (d).
i3C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 168,20, 169,70, 170,20 i 172,71.
Przykład 46
HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Po(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
Do roztworu 570 mg (1,5 mmol) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 425 mg (1,5 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów), i 733 mg (6 mmol) DMAP w 25 ml CH3CNZDMF (1,5/1) dodano 310 mg (1,62 mmol) EDC i mieszaninę mieszano przez 23 godziny w temperaturze pokojowej. Większość rozpuszczalnika odparowano i do pozostałości dodano 50 ml wody. Wodną fazę ekstrahowano 1 x 75 i 2 x 50 ml EtOAc. Połączoną fazę orga
181 968 nicznąprzemyto 1 χ 20 + 1 χ 10 ml IM KHSO4,1 x 15 ml NaHCO3(aq), 3 x 15 ml wody, 1 x 15 ml solanki i osuszono (MgSO4). Przesączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało 670 mg oleju, który oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem EtOAc jako eluentu otrzymując 529 mg (55%) związku tytułowego.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,26 (s, 9H), 1,53-1,88 (m, 3H), 2,1-2,31 (m, 3H), 2,52 (q, 1H), 3,58-3,77 (m, 4H), 4,31 (d, 1H), 4,35 i 4,47 (układ ΑΒΧ, 2H), 4,65 (dd, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,1-7,37 (m, 10H), 7,42 (d, 2H), 7,81 (d, 2H), 8,0 (t, 1H (NH)).
I3C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 154,6, 164,6, 168,1, 171,1 i 171,3 (ii) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
529 mg (0,81 mmol) Hoc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) rozpuszczono w 15 ml EtOAc/HCl (g, nasycony) w temperaturze pokojowej i mieszano przez 3 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 70 ml ĆH2C12. Fazę organiczną przemyto 1 χ 10 ml 2 M NaOH, 1 x 10 ml wody, 1 x 10 ml solanki i osuszono (MgSO4). Przesączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało 403 mg (90%) związku tytułowego jako białego proszku.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,44-1,57 (m, 1H), 1,62-1,86 (m, 2H), 1,96-2,35 (m, 3H), 2,45 (q, 1H), 3,05-3,35 (m, 4H), 3,83 (bd, 1H), 4,25-4,45 (m, 2H), 4,53 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,16-7,37 (m, 10H), 7,42 (d, 2H), 7,66 (t, 1H, (NH)), 7,77 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,4, 167,9, 171,1 i 173,0.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
Mieszaninę 200 mg (0,36 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z), 105 mg (0,46 mmol) Br-CH2COOBn i 125 mg (0,90 mmol) K2CO3 w 10 ml CH3CN ogrzewano do 50°C przez 1 godzinę i 30 minut. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 70 ml EtOAc. Fazę organiczną przemyto 10 ml wody i osuszono (MgSO4). Przesączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało 260 mg oleju. Surową substancję oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH(NH3-nasycony) (95/5, a następnie 9/1) otrzymując 182 mg (72%) związku tytułowego jako białego ciała stałego.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,43-1,82 (m, 3H), 1,96-2,13 (m, 1H), 2,14-2,22 (m, 1H), 2,26-2,43 (m, 2H), 3,02-3,14 (m, 2H), 3,24-3,51 (m, 4H), 3,83 (d, 1H), 4,29-4,46 (układ ΑΒΧ centrowany na 4,37, 2H), 4,58 (dd, 1H), 4,97-5,1 (układ AB centrowany na 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,16-7,38 (m, 15H), 7,43 (d, 2H), 7,5-7,8 (m, 3H, jedno NH).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 167,9, 171,15, 171,2 i 172,7.
(iv) HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1
0,18 g (0,26 mmol) BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) zmieszano z 0,075 g 5% Pd/C, 1,0 ml IN HC1- roztwór, 1 ml wody i 10 ml etanolu i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym na godzinę. Przesączenie katalizatora przez hyflo, odparowanie rozpuszczalnika, a następnie suszenie przez wymrożenie dwukrotnie z wody dało 129 mg surowego produktu. Surowy produkt oczyszczono metodą RPLC z zastosowaniem krokowego gradientu 0,1 M NH4OAc/CH3CN 4/1, a następnie 3/1. Odparowanie a następnie suszenie przez wymrożenie z wody i IN roztworu HC1 dało 70 mg (50%) czystego produktu.
‘H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,42-1,60 (m, 1H), 1,65-1,83 (m, 1H), 1,83-1,98 (m, 1H), 2,03-2,20 (m, 2H), 2,63 (t, 2H), 3,28-3,40 (m, 1H), 3,55-3,78 (m, 2H), 3,81-3,96 (układ AB centrowany na δ 3,88, 2 H), 4,06-4,19 (m, 1H), 4,37-4,61 (układ AB centrowany na δ 4,49,2 H),4,48 (dd, 1H), 4,70 (d, 1H), 7,35-7,58 (m, 7H), 7,74 (d, 2H) 13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,02, 167,2, 169,3 i 174,4.
Przykład 47
HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
181 968
Do roztworu 190 mg (0,34 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)Pro-Pab(Z) (patrz przykład 46) w 7 ml EtOH (99%) dodano 114 mg (0,70 mmol) akrylanu benzylu i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH(NH3-nasycony) (95/5 a następnie 9/1) dała 202 mg (83%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 1,5-1,71 (m, 2H), 1,74-1,9 (m, 1H), 1,9-2,05 (m, 1H), 2,2-2,64 (m, 5H), 2,69-2,82 (m, 2H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,18-3,48 (m, 4H), 4,28-4,44 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 4,48-5,08 (układ AB centrowany na 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,15-7,37 (m, 15H), 7,44 (d, 2H), 7,75-7,85 (m, 3H, jedno NH).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,6, 168,0, 171,2, 172,5 i 172,9 (ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1
0,20g (0,28 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) zmieszano z 0,075 g 5% Pd/C, 1,0 ml IN roztworu HC1,1 ml wody i 10 ml etanolu i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym na godzinę. Przesączenie katalizatora przez hyflo, odparowanie rozpuszczalnika a następnie suszenie przez wymrożenie dwukrotnie z wody dało 125 mg, 79%, związku tytułowego.
‘H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,44 (m, 1H), 1,65-1,9 (m, 2H), 2,0-2,2 (m, 2H), 2,62 (q, 2H), 2,83 (t, 2H), 3,27-3,4 (m, 1H), 3,4-3,8 (m, 4H), 4,0-4,15 (m, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,68 (d, 1H), 7,35-7,6 (m, 7H), 7,77 (d, 2H) 13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,2, 167,1, 174,1 i 174,2
Przykład 48
HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (patrz przykład 25) z zastosowaniem Boc-(R)Tic-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów) zamiast Boc-(R)Cha-Pic-OH. Chromatografia rzutowa z zastosowaniem heptanu/EtOAc (4/1), a następnie EtOAc jako eluentów dało 425 mg (37%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,35 (s, 9H), 1,95-2,15 (m, 3H), 2,4 (m, 1H), 2,8 (m, 1H), 3,3 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 4,25-4,4 (dwam, 2H), 4,55-4,7 (dwa m, 2H), 7,15-7,5 (m, 10H), 7,85 (d, 2H).
I3C-NMR (75,0 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,6, 171,5 i 171,6 (dwa piki prawdopodobnie nakładają się) (ii) H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (379 mg, 0,59 mmol) rozpuszczono w EtOAc nasyconym HC1 (g) i mieszano w temperaturze pokojowej. Odparowanie rozpuszczalnika dało 251 mg (79%) związku tytułowego jako białego proszku.
'H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,65-2,15 (dwa m, 7H), 2,45 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,75 (d, 1H), 4,9 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 6,8-7,45 (kilka m, 8H), 7,5 i 7,85 (dwa d, 4H).
13C-NMR (75,0 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 164,5, 171,3 i 172,7 (dwa piki prawdopodobnie nakładają się).
(iii) BnO2C-CH2-CH2-(R) Tic-Pro-Pab(Z)
H-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (140 mg, 0,26 mmol) potraktowano akrylanem benzylu (63 mg, 0,39 mmol) w EtOH (1,3 ml) w temperaturze 20°C w czasie 48 godzin. Odparowanie rozpuszczalnika i chromatografia rzutowa z zastosowaniem 50% EtOAc/Hept, następnie 10% MeOH/EtOAc jako eluentu dała 133 mg (73%) żądanego produktu jako białego ciała stałego.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 1,75-2,0 (dwa m, 4H), 2,25 (m, 1H), 1,4-1,65 (m, 3H), 2,7-2,95 (dwam, 4H), 3,05-3,2 (m, 2H), 3,9 (m, 1H), 4,45 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 5,1 (dwad, 2H), 5,25 (s, 2H), 6,85-7,45 (kilka m, 12H), 7,5 i 7,9 (dwa d, 4H).
181 968 l3C-NMR (75,0 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 171,5, 171,9 i 172,1 (dwa piki prawdopodobnie nakładają się).
(iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab x 2 HC1
BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (125 mg, 0,17 mmol) uwodorniano nad 5% Pd/C z zastosowaniem EtOH/HCl jako rozpuszczalnika. Przesączenie katalizatora i suszenie przez wymrożenie dało 73 mg (77%) związku tytułowego jako białego proszku.
‘H-NMR (500 MHz, D2O): δ 2,1-2,35 (dwam, 3H), 2,6 (m, 1H), 2,95-3,1 (m, 2H), 3,25-3,5 (dwa m, 2H), 3,65 (m, 3H), 4,65 (s, 2H), 4,75 (m, 1H), 5,85 (s, 1H), 7,15-7,6 (trzy m, 4H), 7,6 i 7,85 (dwa d, 4H).
*3C-NMR(75,0 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,9,167,1 i 174,3 (dwa piki prawdopodobnie nakładają się).
Przykład 49
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
Do mieszaniny 0,623 g (1,83 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,816 g (1,92 mmol) H-Pig(Z)2 (patrz wytwarzanie substratów) i 0,89 g (7,3 mmol) DMAP w 10 ml dichlorometanu dodano 0,368 g (1,92 mmol) EDC i mieszaninę mieszano przez noc. Mieszaninę rozcieńczono i przemyto 0,3 M KHSO4 i raz solanką. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 1,4 g surowego produktu. Oczyszczenie metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu dało 0,3 g (22%) czystego produktu.
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
0,3 g (0,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 zmieszano z 10 ml dichlorometanu i 2,5 ml kwasu trifluorooctowego. Mieszaninę mieszano przez półtorej godziny. Po odparowaniu rozpuszczalnika pozostałość rozpuszczono w dichlorometanie i przemyto dwukrotnie 0,2 M roztworem NaOH. Połączoną warstwę wodną ekstrahowano jeszcze raz dichlorometanem. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 0,24 g (93%) produktu.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13,339K): δ 0,9-1,9 (m, 15H), 1,94 (bd, 1H), 2,37-2,52 (m, 1H), 2,65-2,8 (m, 1H), 2,9-3,08 (m, 3H), 3,20 (t, 2H), 4,05-4,28 (m, 4H), 4,86 (dd, 1H), 5,16 (s, 4H), 7,2-7,42 (m, 10H), 7,98 (bs, NH).
(iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
0,231 g (0,36 mmol) rozpuszczono w 2 ml etanolu i dodano 61 μΐ (0,40 mmol) akrylanu benzylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 5 dni w temperaturze pokojowej. Mieszaninę odparowano i surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (95/5,90/10) jako eluentu otrzymując 0,218 g (75%) czystego produktu.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13, 335K): δ 0,93 (bq, 1H), 1,02-1,85 (m, 14H), 1,94 (bd, 1H), 2,33-2,5 (m, 3H), 2,5E-2,77 (m, 2H), 2,79-3,02 (m, 4H), 3,17 (t, 2H), 4,0-4,25 (m, 4H), 4,86 (dd, 1H), 5,11 (s, 2H), 5,12 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 15H), 8,03 (bs, NH), 10,35 (bs, NH) (iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig x 2 HC1
0,218 g (0,27 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 zmieszano z 0,10 g 5% Pd/C, 1 ml IM roztworu HC1, 1 ml wody i 10 ml etanolu i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym na godzinę. Przesączenie katalizatora przez hyflo, odparowanie rozpuszczalnika a następnie suszenie przez wymrożenie dwukrotnie z wody dało 134 mg (95%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,4 (m, 7H), 1,55-2,05 (m, 9H), 2,22-2,34 (m, 1H), 2,61 -2,76 (m, 1H), 2,88 (t, 2H), 3,08 (bt, 2H), 3,19 (d, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,83 (bd, 2H), 3,95 (d, 1H), 4,29-4,49 (m, 2H), 4,90 (dd, 1H) *3C-NMR(75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 156,4,167,6,172,1 i 174,7
Przykład 50
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
181 968
0,568 g (2,96 mmol) EDC dodano w temperaturze -15°C do mieszaniny 1 g (2,82 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,197 g (2,82 mmol) H-Pig(Z)2 (patrz wytwarzanie substratów) i 1,38 g (11,28 mmol) DMAP w acetonitrylu. Temperaturze pozwolono się podnieść do pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano chlorek metylenu i 1 M KHSO4 dodano. Fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto nasyconym NaHCO3, wodą i solanką suszenie (Na2SO4) i odparowanie rozpuszczalników dało 2,033 g pozostałości, którąpoddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu. Dało to dwa produkty, 720 mg (34%) związku tytułowego, który eluował najpierw z kolumny, a następnie 775 mg (44%) Boc-(R)Cgl-ProPig(Z) powstałego przez usunięcie jednej z zabezpieczających grup Z.
'H-NMR (300 MHz, CDC13); Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazującym szeroki pik od 3,5 do 4,5 ppm.
δ 0,85-2,1 (m, 19H), 2,3-2,45 (m, 1H), 2,8-3,2 (m, 4H), 3,45-3,55 (m, 1H), 3,55-3,65 (ta, podrzędny rotamer), 3,8-3,93 (m, 1H),3,97-4,1 (m, 1H), 4,52-4,62 (d, 1H),5,1 (pozorny bs, 5H), 7,12-7,41 (m, 1 OH).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 155,2, 156,3, 171,0 i 172,1, (ii) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
720 mg (0,946 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 rozpuszczono w 35 ml TFA/CH2C12,1/4 i mieszano przez 30 minut. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i octanu etylu i 2M NaOH dodano. Warstwę organiczną przemyto solanką osuszono (Na2SO4) i rozpuszczalnik odparo wano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując związek tytułowy z ilościową wydajnością.
'H-NMR (300 MHz, CDC13); Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,5 do 4,5 ppm.
60,8-2,15 (m, 19H), 2,22-2,4 (m, 1H), 2,75-2,98 (m, 2H), 2,98-3,18 (m, 2H), 3,18-3,35 (m, 1H), 3,35-3,5 (q, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,42-4,58 (d, 1H), 5,1 (s, 4H), 7,1-7,5 (m, 10H).
13C-NMR (75 MHz, CDC13): węgle amidynowe i karbonylowe; δ 154,96,171,31,174,82.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
0,298 g (0,999 mmol) BnOOC-CH2-OTf (patrz wytwarzanie substratów) dodano do mieszaniny 0,64 g (0,999 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 i 0,531 g (2,996 mmol) K2CO3 w 6,4 ml acetonitrylu i ogrzewano do wrzenia. Po 1 godzinie 20 min. mieszaninę przemyto wodą osuszono (Na2SO4) i rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 729 mg pozostałości, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu. Dało to dwa produkty: 120 mg (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2, który eluował najpierw z kolumny i 142 mg (18%) związku tytułowego.
'H-NMR (300 MHz, CDCł3); Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,5 do 4,6 ppm.
δ 0,94-2,27 (m, 19H), 2,28-2,43 (m, 1H), 2,8-2,98 (m, 2H), 2,98-3,06 (m, 1H), 3,06-3,15 (d, 1H), 3,15-3,25 (m, 1H), 3,3-3,5 (m,4H), 4,5-4,61 (d, 1H), 5,1 (s, 6H),7,l-7,6(m, 15H), 10,52 (bs, 1H).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1
142 mg (0,176 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 uwodorniano w obecności 0,88 ml 1 M kwasu chlorowodorowego, 10 ml etanolu (99,5%) i 180 mg 5% Pd/C przez 2 godzin. Usunięcie katalizatora przez odsączenie on hyflo i filtrze mikroporowym, a następnie odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i suszenie przez wymrożenie dało 95 mg HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1. Tę surowa substancję (79% czystości) oczyszczono metodą RPLC z zastosowaniem CH3CN/0,l M NH4OAc 15/85 jako eluentu. Usunięcie rozpuszczalnika i nadmiaru NH4OAc przez suszenie wymrażające, konwersja do soli kwasu chlorowodorowego
181 968 przez rozpuszczenie w 1 M kwasie chlorowodorowym, a następnie suszenie przez wymrożenie dało związek tytułowy.
1 H-NMR (500 MHz, D2O); δ 1,1-1,35 (m, 6H), 1,63-2,14 (m, 13H), 2,26-2,36 (m, 1H), 3,01-3,23 (m, 4H), 3,49-3,62 (q,2H), 3,62-3,77 (m, 2H), 3,77-3,88 (pozorny d, 2H), 4,18-4,32 (d, 1H), 4,37-4,5 (m, 1H).
Przykład 51
H-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2
Do dobrze mieszanej mieszaniny 86 mg (0,243 mmol) Boc(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 100 mg (0,236 mmol) H-Pig(Z)2 (patrz wytwarzanie substratów) i 115 mg (0,944 mmol) DMAP w 5 ml CH3CN dodano 50 mg (0,260 mmol) EDC i całość mieszano przez 20 godzin w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 70 ml EtOAc, fazę organiczną przemyto 3 x 5 ml 1 M KHSO4,1 x 5 ml NaHCO3,3 x 5 ml H2O, 1 x 5 ml solanki i osuszono (MgSO4). Przesączenie i odparowanie rozpuszczalnika dało 141 mg oleju. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej (36 g SiO2) z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (97/3 a następnie 95/5) otrzymując 43 mg (24%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2
Chlorowodór barbotowano przez mieszaninę 43 mg (0,0565 mmol) Boc-(R)Cha-AzePig(Z)2 w 10 ml octanu etylu w czasie 5 minut. Rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano octan etylu i 0,1 M roztworu NaOH. Fazy oddzielono i fazę organicznąprzemyto wodą solanką i osuszono (Na2SO4). Rozpuszczalnik odparowano otrzymując 38 mg produktu, który poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem 10% nasyconego NH3 metanolu w octanie etylu jako eluentu otrzymując 28 mg żądanego produktu.
'H-NMR (300 MHz, CDC13); Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,7 do 4,5 ppm.
δ 0,75-1,85 (m, 18H), 2,35-2,53 (m, 1H), 2,62-2,78 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 3,0-3,28 (m, 2H), 3,28-3,37 (m, 1H), 3,97-4,18 (m, 2H), 4,8-4,9 (m, 1H), 5,1 (s, 4H), 7,2-7,45 (m, 9H), 8,05-8,15 (m, 1H).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1 mg (0,042 mmol) H-(R)CHa-Aze-Pig(Z)2 rozpuszczone w 2 ml etanolu (99,5%) i 0,13 ml chlorowodór (1N) uwodorniano w obecności 35 mg 5% Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie i odparowanie pod zmniejszonym ciśnieniem rozpuszczalnika, a następnie rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 12 mg (60%) dichlorowodorku H-(R)Cha-Aze-Pig.
*H-NMR (500 MHz, 300 K, CD3OD); Pewne sygnały, szczególnie w pierścieniu piperydynowym, są selektywnie szersze dzięki wymianie międzycząsteczkowej. Szczególnie silnie widać to dla grup 2- i 6-CH2 pierścienia piperydynowego, wykazujących szeroki pik od 3,7 do 4,5 ppm.
δ 0,75-2,1 (m, 18H), 2,2-2,35 (m, 1H), 2,62-2,75 (m, 1H), 3,0-3,12 (t,2H), 3,12-3,23 (d,2H), 3,85-3,95 (d, 2H), 3,95-4,0 (dd, 1H), 4,15-4,23 (m, 1H), 4,35-4,42 (m, 1H), 4,72-4,78 (m, 1H).
13C-NMR (75 MHz, CD3OD): guanidyna: δ 157,6; węgle karbonylowe: δ 170,0 i 172,6
Przykład 52
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)
Do roztworu 0,47 g (1,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,40 g (1,4 mmol) H-Pac(Z) (patrz wytwarzanie substratów) i 0,67 g (5,5 mmol) DMAP w 5 ml acetonitrylu dodano 0,27 g EDC w temperaturze 0°C. Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i następnie rozcieńczono octanem etylu. Roztwór przemyto KHSO4(aq) i NaHCO3 (aq), osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano. Chromatografia rzutowa z zastosowaniem octanu etylu, a następnie octan etylu/metanolu 98/2 jako eluentów dało 0,25 g (30%) związku tytułowego jako mieszaniny produktów 1,4-cis- i trans- w odniesieniu do części cząsteczki Pac.
181 968 1 H-NMR (500 MHz, CDC13). δ 0,8-2,0 (m, 29 H; w nim 1,45 (s, 9 H), 2,15 i 2,34 (m, 1 H, izomery), 2,45-2,7 (m, 2 H), 3,0-3,4 (m, 2 H), 3,85 (m, 1 H), 4,14 (m, 1 H), 4,33 (m, 1H), 4,85 (m, 1 H), 4,98 (m, 1 H), 5,04 (s, 2 H), 7,25-7,45 (m, 5 H), 7,8-7,9 (m, 1 H), 9,2-9,5 (m, 1 H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x HC1
Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z), 0,25 g (0,41 mmol), rozpuszczono w 100 ml octanu etylu i ochłodzono na łaźni lodowej. HC1 (g) barbotowano przez 5 minut i rozpuszczalnik odparowano.
Ή-NMR (300 MHz, MeOD). δ 0,8-2,0 (m, 22 H), 2,05-2,35 (m, 1 H), 2,4-2,55 (m, 1 H), 2,6-2,75 (m, 1 H), 3,00 (d, 1 H), 3,05 i 3,37 (multiplety, 0,6 H i 0,4 H odpowiednio izomery), 3,15-3,3 (m, 1 H), 4,05-4,2 (m, 2 H), 4,88 (dd, 1 H), 5,11 (s, 2 H), 7,2-7,45 (m, 5 H), 8,0-8,15 (m, 1 H).
(iii) BnO2 C-CH2- (R) Cgl-Aze-Pac(Z)
Mieszaninę 0,17 g (0,33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x HC1,0,11 g (0,37 mmol) trifiloksyoctanu benzylu i 0,14 g (1,0 mmol) K2CO3 w 5 ml acetonitrylu mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 dni. Surową substancję poddano chromatografii rzutowej z EtOAc/CH2Cl2/MeOH 95/20/5. Wydajność: 70 mg (32%).
Ή-NMR (500 MHz, CDC13). δ 0,85-2,3 (m, 20 H), 2,48 (m, 1 H), 2,63 (m, 1 H), 2,87 (m, 1 H), 3,05-3,25 (m, 1 H), 3,25-3,35 (m, 2 H), 3,38 (dd, 1 H), 3,95 (m, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 4,88 (m, 1 H), 5,1-5,2 (m, 4 H), 5,9-6,3 (m, 1H), 7,25-7,5 (m, 1 OH), 8,00 i 8,08 (szerokie tryplety, 1H, izomery).
(iv) HO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HC1
BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z), 70 mg (0,11 mmol), rozpuszczono w 5 ml etanolu i dodano 5% Pd/C i 0,1 ml stężonego HC1. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Po przesączeniu i odparowaniu produkt oczyszczono metodą preparatywnej RPLC z zastosowaniem 0,1 M NH4OAc/CH3CN 4/1 jako eluentu. Po zamianie soli na chlorowodorek i suszeniu przez wymrożenie otrzymano związek tytułowy jako 45/55 mieszaninę 1,4-cis-i trans-izomerów w odniesieniu do części cząsteczki Pac. Wydajność: 40 mg (74%).
Ή-NMR (500 MHz, D2O) δ 1,1-2,1 (m, 20 H), 2,32 (m, 1 H), 2,52 (m, 1 H), 2,63 (m, 1 H), 2,72 (m, 1 H), 3,1-3,3 (m, 1 H), 3,40 (m, 1 H), 3,8-3,95 (m, 2 H), 4,04 (d, 1 H), 4,39 (m, 1 H), 4,93 (m, 1 H).
13C -NMR (125 MHz, D2O) węgle amidynowe i karbonylowe: δ 167,7,172,0,174,9 i 175,2.
Przykład 53
H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
211 mg (1,1 mmol) EDC dodano w temperaturze 0°C do mieszanego roztworu 0,4 g (1,1 mmol) H-Pac(Z) x 2 HC1 (patrz wytwarzanie substratów), 0,4 g (1,1 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), i 0,55 g DMAP w 7 ml acetonitrylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze 0°C przez 1 godzinę i w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozcieńczono octanem etylu i wodą. Fazę organiczną przemyto kwasem octowym, wodą roztworem wodorowęglanu sodu i osuszono (MgSO4). Usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, która oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu jako eluentu otrzymując 196 mg (27%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
Chlorowodór barbotowano przez roztwór 196 mg Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z) w 25 ml octanu etylu. Po 10 minutach mieszaninę reakcyjną rozcieńczono chlorkiem metylenu i dodano roztwór wodorotlenku sodu. Wodna fazę ekstrahowano kilkakrotnie chlorkiem metylenu, połączone fazy organiczne osuszono (K2CO3 rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 86 mg (52%) związku tytułowego (iii) H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HC1
Związek tytułowy wytworzono przez uwodornienie H-(R)Cha-Pro-Pac(Z) w etanolu w obecności 10% Pd/C.
H-NMR (300 MHz, D2O); mieszanina około 1:1 izomerów 1,4-cis- i 1,4-trans w części cząsteczki Pac); δ 1,15-1,3 (g), 1,6-1,85 (m), 1,9-2,0 (m), 2,0-2,1 (d), 2,1-2,15 (m), 2,15-2,2 (m), 2,65-2,7 (m), 2,7 - 2,8(m) 2,95-3,0 (d), 3,15-3,2 (d), 5,4 (s), 7,45-7,55 (m).
181 968
Przykład 54
H-(R)Cgl-Ile-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)
Do mieszanej mieszaniny 1,33 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cgl-Ile-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,12 g (3,9 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) i 1,76 g (14,4 mmol) DMAP w 50 ml CH3CN/DMF (1/1) dodano 0,75 g (3,9 mmol) EDC w temperaturze +5°C. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i pozostawiono na 60 godzin. CH3CN usunięto przez odparowanie i pozostałość wylano do 100 ml wody (powstał żółty osad). Mieszaninę ekstrahowano 2 x 50 ml EtOAc i połączone fazą organiczną przemyto 2 x 30 ml NaHCO3 (nasycony), 2 x 50 ml 0,2 M HC1,1 x 50 ml solanki i osuszono (MgSO4). Odparowanie, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2C12/THF (85/15) jako eluentu dało 510 mg (24%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)
530 mg Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z) rozpuszczono w 14 ml CH2C12/TFA (2,5/1) i mieszano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej. Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH(nasycony NH3) (95/5) jako eluentu dało związek tytułowy.
(iii) H-(R)Cgl-Ile-Pab x 2 HC1 mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z) uwodorniano nad 10% Pd/C w 5 ml EtOH, który zawierał nadmiar HC1 (g) w celu wytworzenia dichlorowodorku, pod ciśnieniem atmosferycznym przez 6 godzin. Dodanie 2 g węgla aktywowanego i 20 ml EtOH, a następnie przesączenie przez celit, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z wody dało 50 mg (89%) związku tutułowego jako białego proszku.
'H-NMR (500 MHz, MeOD):50,90 (t, 3H), 0,94 (d,3H), 1,1-2,0 (m, 14H),3,83 (bs, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,50 (m, 2H), 7,57 (bd, 2H), 7,78 (bd, 2H).
Przykład 55
H-(R)Cgl-Aze-Pab
Uwodornienie 257 mg (5,08 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 1 (ii)) nad 5% Pd/C w 6 ml EtOH/H2O pod ciśnieniem atmosferycznym przez 6 godzin, a następnie przesączenie katalizatora, odparowanie rozpuszczalnika i suszenie przez wymrożenie z wody dało 200 mg (89%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,0-2,0 (m, 11H) 2,25 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 7,60 (m, 2H), 7,77 (m, 2H).
MS m/z 372 (M+ + 1).
Przykład 56
HOOC-(R, S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc (i) BnOOC-(R, S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,250 g (0,47 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (patrz przykład 15) rozpuszczone w 5 ml CH2C12 ochłodzono do temperatury -10°C i dodano powoli 150 mg (0,48 mmol) TfOCH2COOBn (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczonego w 3 ml CH2C12. Dodano 200 mg (1,45 mmol) węglanu potasu i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Mieszaninę rozcieńczono CH2C12, ekstrahowano wodą i osuszono (MgSO4). Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH 9/1 jako eluentu dała 150 mg (46%) związku tytułowego.
(ii) HOOC-(R, S)CH(Me) - (R)Cha-Pro-Pab x HOAc
150 mg (0,2 mmol) BnOOC-(R, S)CH(Me) - (R)Cha-Pro-Pab(Z) uwodorniano nad 50 mg 5% Pd/C w 20 ml EtOH pod ciśnieniem atmosferycznym przez 4 godziny. Przesączenie katalizatora, odparowanie rozpuszczalnika, a następnie oczyszczenie metodą RPLC, z zastosowaniem CH3CN/0,l M NH4OAc 1/4 jako eluentu, dało 35 mg (37%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, MeOD): δΙ,ΟΟ (m, 1H), 1,20-1,45 (m, 5H), 1,5 (m, 1H), 1,6-1,8 (m, 6H), 1,9-2,1 (m, 6H), 2,25 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,9 (m, częściowo zakryte przez linię HOD, 6H), 7,55 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
181 968
Przykład 57
MeOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1 (i) MeOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,186 g (0,841 mmol) TfO-CH2-COOMe (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczono w CH2C12 i powoli dodano do mieszaniny 0,425 g (0,841 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 1), 0,894 g (5,04 mmol) K2CO3 w CH2C12 (łącznie 4,3 ml) w temperaturze pokojowej i mieszano przez noc. Dodano więcej CH2C12 i mieszaninę przemyto wodą i solanką osuszono, odsączono i rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 0,51 g pozostałości, którą trzy razy poddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem najpierw CH2Cl2/THF/MeOH (16/4/1), następnie CH2C12/THF(2%NH3) (8/2) i na koniec eteru dietylowego/MeOH(nasycony NH3) (95/5) jako eluentu. Dało to 0,324 g (67%) związku tytułowego.
(ii) MeOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1
220 mg (0,38 mmol) MeOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(Z) uwodorniano w obecności 1,14 ml IN HC1, 6,5 ml MeOH i 300 mg Pd/C przez 2 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie na celicie i filtrze mikroporowym a następnie odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i dwukrotne suszenie przez wymrożenie dało 178 mg (91%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,12-1,4 (m, 5H) 1,68,1,81 (m, 2H), 1,81-1,9 (m, 3H), 1,97-2,1 (m, 1H), 2,29-2,4 (m, 1H), 2,68-2,8 (m, 1H), 3,86 (s, 3H) 4,1 (s, 2H), 4,1-4,5 (d, 1H), 4,36-4,42 (t, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,99-5,04 (m, 1H), 7,65-7,7 (d, 2H), 7,8-7,85 (d, 2H).
13C-N MR (75 MHz, MeOD): węgle amidynowe i karbonylowe δ 146,78, 167,68, 168,15, 172, 29.
Przykład 58
EtOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1 (i) EtOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,208 g (0,876 mmol) TfO-CH2COOEt (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczono w CH2C12 i powoli dodano do mieszaniny 0,443 g (0,876 mmol) H(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 1) i 0,931 g (5,26 mmol) K2CO3 w CH2C12 (łącznie 4 ml) ochłodzonej na łaźni wodnej. Po 2 godziny łaźnię wodną usunięto i mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Dodano więcej CH2C12 i mieszaninę przemyto wodąi solanką osuszono, odsączono i rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 0,51 g pozostałości, która poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem eteru dietylowego/MeOH (nasycony NH3) (95/5) jako eluentu. Dało to 0,387 g (75%) związku tytułowego.
(ii) EtOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1
395 mg (0,668 mmol) EtOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(Z) uwodorniano w obecności 12 ml EtOH (99,5%) i 390 mg Pd/C przez 5 godzin. Usunięcie katalizatora przez odsączenie na celicie i filtrze mikroporowym, a następnie odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i dwukrotne suszenie przez wymrożenie, dało 281 mg (88%) EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab. Dodano 2 równoważniki IN HC1 i trzykrotne suszenie przez wymrożenie dało 288 mg (81%) związku tytułowego.
‘H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,05-1,48 (m, 8H), 1,6-2,05 (m, 6H), 2,15-2,33 (m, 1H), 2,58-2,79 (m, 1H), 3,89-4,0 (m, 3H), 4,2-4,33 (m, 3H), 4,33-4,44 (m, 1H), 4,44-4,66 (m, 2H), 4,91 (m, 1H) (częściowo zakryte przez sygnał H-O-D)), 7,54-7,63 (d, 2H), 7,72-7,84 (d, 2H).
Przykład 59 nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x HOAc (i) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Wytworzono w taki sam sposób, jak opisano dla nHeks- OOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 60 (i)) z zastosowaniem TfO-CH2-COOnBu jako środka alkilującego. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej dwukrotnie, najpierw z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH (95/1) i następnie CH2Cl2/i-alkohol propylowy (90/7) jako eluentu otrzymując 324 mg (47%) związku tytułowego.
(ii) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x HOAc
181 968
Odbezpieczanie wykonano według procedury opisano w przykładzie 57 (ii). Surową substancję oczyszczono metodą RPLC z zastosowaniem CH3CN (30%) w 0,05 M NH4OAc i 0,05 M HOAc jako eluentu otrzymując 100 mg (53%) związku tytułowego.
Ή-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,85-2,1 (m, 18H), 2,15-2,37 (m, 1H), 2,58-2,8 (m, 1H), 3,7-5,0 (m, 10H), 4,88-5,0 (częściowo zakryte przez sygnał H-O-D)), 7,46-7,65 (d, 2H), 7,71-7,88 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, MeOD): węgle anidynowe i karbonylowe: δ 146,8, 168,12, 168,2, 172,2.
Przykład 60 nHeksOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1 (i)nHeksOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,402 g (1,375 mmol) TfO-CH2-COOnHeks (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczono w CH2C12 i powoli dodano do mieszaniny 0,695 g (1,375 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (patrz przykład 1), 1,463 g (8,25 mmol) K2CO3 w CH2C12 (łącznie 4 ml) w temperaturze < -10°C. Po 1 godzinie łaźnię z suchym lodem usunięto i mieszano w temperaturze pokojowej przez 45 minut. Dodano więcej CH2C12 i mieszaninę przemyto wodą i solanką, osuszono, odsączono i rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 0,828 g pozostałości, którą dwukrotnie poddano chromatografii rzutowej, najpierw z zastosowaniem eteru dietylowego/MeOH (nasycony NH3) (95/5) i następnie CH2Cl2/MeOH nasycony NH3) (95/5) jako eluentu. Dało to 0,42 g (47%) związku tytułowego.
(ii) nHeksOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1
Uwodornienie 400 mg (0,617 mmol) nHeksOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) w obecności 12 ml THF i 400 mg Pd/C przez 1,5 godziny nie dało kompletnego odbezpieczenia. Uwodornienie zakończono w ciągu 4 godzin w obecności 1,7 ml 1NHC1,12 mlMeOH i 340 mg Pd/C. Usunięcie katalizatora przez odsączenie na celicie i filtrze mikroporowatym, a następnie odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i dwukrotne suszenie przez wymrożenie dało 287 mg (79%) związku tytułowego.
Ή-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,8-2,13 (m, 22H), 2,13-2,31 (m, 1H), 2,61-2,81 (m, 1H), 3,93-4,15 (m, 3H), 4,15-4,37 (m, 3H), 4,37-4,7 (m, 3H), 4,88-5,0 (m, 1H) częściowo zakryte przez sygnał H-O-D)), 7,52-7,69 (d, 2H), 7,75-7,9 (d, 2H).
13C-NMR (75 MHz, MeOD): węgle amidynowe i karbonylowe; δ 146,84,167,67,167,84, 172,17
Przykład 61
H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
377 mg (1,97 mmol) EDC dodano w temperaturze 0°C do mieszanego roztworu 708 mg (1,95 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 714 mg (2,0 mmol) HPac (Z) x 2 HC1 (patrz wytwarzanie substratów) i 1,078 g (8,8 mmol) DMAP w 12,5 ml acetonitrylu. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość najpierw oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem 10% metanolu w chlorku metylenu jako eluentu, a następnie metodą RPLC. Wydzielono dwie frakcje (51 mg i 150 mg) o MS m/z = 626 (M+l).
(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
Chlorowodór barbotowano w roztworze 141 mg (0,22 mmol)Hoc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) w 50 ml octanu etylu. Po 15 minutach dodano 10% roztwór węglanu sodu i fazę organiczną oddzielono i osuszono (K2CO3). Odparowanie rozpuszczalnika dało 71 mg (61%) produktu.
(iii) H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2 HC1
Mieszaninę 71 mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) i małąszpatułkę 10% Pd/C w 10 ml etanolu uwodorniano w temperaturze pokojowej i pod ciśnieniem atmosferycznym przez 2 godziny. Katalizator usunięto przez odsączenie i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozpuszczono w 50 ml wody i 0,6 g IM kwasu chlorowodorowego. Suszenie przez wymrożenie dało 38 mg (58%) związku tytułowego.
181 968
MS m/z 392 (M + 1)
Przykład 62
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac x HOAc (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
Mieszaninę 84 mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z) (patrz przykład 53 (ii)), jednąszpatułkę węglan potasu i 47 mg TfOCH2-COOBn (patrz wytwarzanie substratów) w 3 ml chlorku metylenu mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną odsączono i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując pozostałość, którą poddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem octanu etylu/chlorku metylenu/metanolu 95:20:5 jako eluentu. Wydzielono 29 mg żądanego produktu.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac x HOAc
Mieszaninę 29 mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) i 37 mg 10% Pd-C w 5 ml etanolu mieszano przez 4 godziny w temperaturze pokojowej i pod ciśnieniem atmosferycznym. Przesączenie katalizatora, a następnie usunięcie rozpuszczalnika i oczyszczenie metodą RPLC dało żądany związek.
MS m/z = 464 (M + 1).
Przykład 63
HOOC-CH2-CH2- (R)Cgl-Pro-Pac (i) BnOOC-CH2-CH2- (R)Cgl-Pro-Pac(Z)
Roztwór 0,35 g (0,64 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) (patrz przykład 61 (ii)), 124 mg (0,76 mmol) akrylanu benzylu i 280 ml (2 mmol) trietyloaminy w 1 ml etanolu trzymano w temperaturze pokojowej przez 3 dni. Usunięcie rozpuszczalnika, a następnie oczyszczanie metodą HPLC dało 18 mg (4%) związku tytułowego.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac
Mieszaninę 18 mg BnOOC-CH2-CH2- (R)Cgl-Pro-Pac(Z) i małą szpatułkę 10% Pd/C uwodorniano przez 2 godziny w temperaturze pokojowej i pod ciśnieniem atmosferycznym w EtOS. Przesączenie, a następnie usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, rozpuszczenie w wodzie i suszenie przez wymrożenie dało 7 mg (78%) związku tytułowego. MS m/z = 464 (M + 1).
Przykład 64
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
Roztwór 0,4 g (1,3 8 mmol) H-Pac(Z) (patrz wytwarzanie substratu, H-Pac(Z) x 2 HC1), 0,5 g (1,41 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów) i 0,67 g (5,5 mmol) DMAP w 20 ml acetonitrylu zmieszano w temperaturze 0°C z roztworem 0,26 g (1,4 mmol) EDC w 15 ml acetonitrylu. Mieszaninę reakcyjną trzymano w temperaturze pokojowej przez noc i rozpuszczalnik usunięto następnie pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość podzielono pomiędzy octan etylu i wodę. Wodną fazę ekstrahowano jeszcze raz octanem etylu i połączone fazy organiczne przemyto roztworem wodorosiarczanu sodu, roztworem węglanu sodu i solanką, a następnie osuszono (siarczan sodu), odparowanie rozpuszczalnika dało 0,54 g (63%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
Chlorowodór barbotowano do roztworu 0,54 g (0,9 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z) w octanie etylu. Roztwór trzymano w lodówce przez noc i rozpuszczalnik usunięto następnie pod zmniejszonym ciśnieniem, a pozostałość rozpuszczono w octanie etylu. Roztwór przemyto wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, wodąi solankąi osuszono (siarczan sodu). Usunięcie rozpuszczalnika dało 0,35 g (77%) produktu.
(iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
Roztwór 180 mg (0,33 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z) i 53 mg (0,33 mmol) akrylanu benzylu trzymano w temperaturze pokojowej przez 60 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu. Roztwór przemyto roztworem wodorosiarczanu potasu, roztworem wodorowęglanu sodu i solanką. Suszenie (siarczan sodu) i usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem dało pozostałość, którą oczyszczono
181 968 metodą chromatografii rzutowej, stosując 10% metanolu w chlorku metylenu jako eluentu i otrzymując 150 mg (66%) związku tytułowego.
(iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac x 2 HC1
Mieszaninę 115 mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z) i 67 mg 10% Pd-C w 10 ml etanolu uwodorniano przez 1,5 godzin w temperaturze pokojowej i pod ciśnieniem atmosferycznym. Przesączenie, a następnie usunięcie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i rozpuszczenie pozostałości w wodzie i 1,5 ml IM chlorowodorowego dało roztwór, który osuszono przez wymrożenie otrzymując 30 mg (33%) związku tytułowego.
MSm/z464(M+ 1)
Przykład 65
BoC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)
0,249 g (1,298 mmol) EDC dodano w temperaturze < -15°C do mieszaniny 0,473 g (1,236 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,404 g (1,236 mmol) H-Pig(Z) x HC1 (patrz wytwarzanie substratów) i 0,604 g (4,94 mmol) DMAP w 13,5 ml DME Temperaturze pozwolono się podnieść do temperatury pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano EtOAc i 2M KHSO4. Fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto nasyconym Na2CO3 i solanką. Powtarzanie ekstrakcji, suszenie (Na2SO4), przesączenie i odparowanie rozpuszczalników dało 0,612 g pozostałości, którąpoddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem EtOAc/MeOH 9/1 jako eluentu. Otrzymano 407 (53%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)-Cha-Aze-Pig(Z)
0,4 g (0,638 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z) rozpuszczono w 24,4 ml TFA/CH2C12, 1/4, mieszano przez 30 minut na łaźni wodnej i przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i dodano EtOAc i nasycony Na2CO3. fazy oddzielono i warstwę organiczną przemyto wodą i solanką, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 336 mg (100%) związku tytułowego.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) ml (0,562 mmol) BnOOC-CH2-Br dodano powoli do mieszaniny 0,296 g (0,562 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z) i 0,171 g (1,236 mmol) K2CO3 w 6 ml CH3CN ogrzanej do temperatury 60°C na łaźni olejowej. Po 1 godzinie 45 minutach rozpuszczalnik odparowano, dodano EtOAc i mieszaninę przemyto wodą, osuszono (Na2SO4), odsączono i rozpuszczalnik odparowano zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 346 mg pozostałości, którąpoddano chromatografii rzutowej z zastosowaniem CH2Cl2/THF/MeOH (8/2/1) jako eluentu. Dało to 297 mg (78%) związku tytułowego.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1
243 mg (0,36 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) uwodorniano w obecności 1,7 ml IN HC1, 10 ml EtOH (99,5%) i 300 mg Pd/C przez 2 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie na celicie i filtrze mikroporowym, a następnie odparowanie rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem i dwukrotne suszenie przez wymrożenie dało 166 mg (88%) związku tytułowego.
‘H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,6-1,9 (m, 18H), 2,1-2,27 (m, 1H), 2,52-2,76 (m, 1H), 2,82-3,2 (m, 4H), 3,46-3,61 (m, 1H), 3,61-3,81 (m, 2H), 3,81-4,0 (m, 2H), 4,0-4,24 (m, 2H), 4,24-4,4 (m, 1H).
Przykład 66
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
Do mieszaniny 0,3495 g (0,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,464 g (3,8 mmol) DMAP, 0,310 g (0,95 mmol) H-Pig(Z) x HC1 (patrz wytwarzanie substratów) w 5 ml CH2C12 dodano 0,192 g (1 mmol) EDC i mieszaninę mieszano przez noc w temperaturze pokojowej. Mieszaninę odparowano i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu.
181 968
Fazę organicznąprzemyto dwukrotnie 0,3 M KHSO4 i raz solanką. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4),odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (100/0, 97/3, 95/5, 90/10) jako eluentu otrzymując 307 mg związku tytułowego.
(ii) H-(R) Cha-Pro-Pig(Z)
0,306 g (0,48 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z) rozpuszczono w 30 ml nasyconego HCI octanu etylu. Mieszaninę odstawiono na pół godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w CH2C12. Warstwę organiczną przemyto dwukrotnie 0,2 M NaOH. Połączoną warstwę wodną ekstrahowano raz CH2C12. Połączoną warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 257 mg (99%) związku tytułowego.
(iii) BnOOC-CH2(R)Cha-Pro-Pig(Z)
Mieszaninę 0,256 g (0,473 mmol) H-(R)Cha-ProPig(Z), 0,144 g (1,04 mmol) K2CO3i 82μ1 (0,521 mmol) bromo-octanu benzylu w 6 ml acetonitrylu ogrzewano do temperatury 60°C przez 2 godziny z mieszaniem. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w CH2C12, przemyto raz wodą i raz solanką osuszono (Na2SO4), odsączono i rozpuszczalnik odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem krokowego gradientu CH2Cl2/MeOH (97/3,95/5,90/10) jako eluentu otrzymując 0,2 g produktu (90% czystości według RPLC). Końcowego oczyszczenia dokonano na chromatotronie (Harrison research, model 7924T) na 2 mm płytce z krzemionką CH2Cl2/MeOH 95/5 otrzymując 0,158 g (48%) czystego produktu.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI
0,158 g (0,227 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) zmieszano z 0,075 g Pd/C (5%), 1,0 ml IN roztworem HCI i 10 ml etanolu. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez godzinę. Przesączenie przez celit i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie suszenie przez wymrożenie dwukrotnie z wody dało 119 mg (97%) produktu.
'H-NMR (D20,300 MHz): δ 0,95-1,44 (m,7H), 1,52 (m 1H) 1,60-2,20 (m, 13H),2,39(m, 1H), 3,07-3,32 (m, 4H), 3,68 (m, 1H), 3,77-4,02 (m, 5H; w nim 3,98 (s, 2H), 4,44-4,58 (m, 2H).
13C -NMR(D20,75 MHz): węgle karbonylowe i guanidyny: δ 156,5,168,3,169,6,174,5
Przykład 67
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
0,297 g (0,55 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (patrz przykład 66 (ii)) rozpuszczono w 2 ml etanolu i dodano 90 μΐ (0,59 mmol) akrylanu benzylu. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez cztery dni w temperaturze pokojowej. Rozpuszczalnik odparowano i surowy produkt poddano chromatografii na chromatotronie (Harrison Research, model 7924T) z zastosowaniem 2 mm płytki z krzemionką z krokowym gradientem CH2Cl2/MeOH (95/5,90/10) jako eluentem otrzymując 0,338 g (87%) związku tytułowego.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI
0,238 g (0,227 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-ProPig(Z) zmieszano z 0,120 g Pd/C (5%), 1,2 ml IN roztworu HCI i 15 ml etanolu. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym na godzinę. Przesączenie katalizatora przez celit, odparowanie rozpuszczalnika a następnie dwukrotne suszenie przez wymrożenie z wody dało 178 mg (95%) związku tytułowego.
Ή-NMR (D20,300 MHz): δ 0,82-1,45 (m, 8H), 1,45-2,15 (m, 13H), 2,29 (m, 1H), 2,83 (t, 2H), 2,9-3,4 (m, 6H), 3,57 (bq, 1H), 3,67-3,87 (m, 3H), 4,25-4,43 (m, 2H) 13C-NMR(D20,75 MHz): węgle karbonylowe i guanidyny: δ 156,3,168,2,174,3,174,6.
MS m/z 479 (M++l)
Przykład 68 (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HCI
120 mg (0,126) mmol (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 (patrz przykład 50 (iii)) uwodorniano w obecności 0,75 ml IN HCI, 7 ml EtoH (99,5%) i 150 mg Pd/C przez 4 godziny. Usunięcie katalizatora przez odsączenie na celicie i filtrze mikroporowym i odparowanie rozpuszczalnika
100
181 968 pod zmniejszonym ciśnieniem, a następnie suszenie przez wymrożenie dało 66 mg (90%) związku tytułowego.
Ή-NMR ( 500 MHz D2O): δ 1,05-1,38 (m, 7H), 1,53-1,64 (d, 1H), 1,64-2,14 (m, 11H), 2,27-2,39 (m, 1H), 3,03-3,28 (m, 4H), 3,58-3,70 (m, 1H), 3,7-3,8 (m, 1H), 3,8-3,9 (d, 2H), 4,07-4,22 (m, 2H), 4,22-4,35 (m, 1H), 4,38-4,5 (m, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 156,28, 166,73, 170,14, 174,01.
Przykład 69.
HOOC-CH2 -CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2 -CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
Do zimnej (temperatura łaźni wodnej) mieszaniny 100 mg (0,14 mmol) BnOOC-CH2 -CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (patrz przykład 67 (i)) i 80 mg (0,57 mmol) węglanu potasu w 4 ml CH2C12 ostrożnie dodano roztwór 64 mg (0,21 mmol) TfO-CH2-COOBn rozpuszczony w 1 ml CH2C12. Mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze 0°C przez 30 minut i następnie pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej przez 2 godziny, po których ogrzewano ją do wrzenia przez 30 minut, na koniec pozostawiono na noc w temperaturze pokojowej. Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH (97/3) jako eluentu dało 65 mg (54%) związku tytułowego.
(ii) HOOC-CH2 -CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1 mg (0,08 mmol) BnOOC-CH2 -CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z) rozpuszczono w 10 ml EtOH/1 M HC1 (9/1) i uwodorniano nad 10% Pd/C przez 3 godziny pod ciśnieniem atmosferycznym. Przesączenie katalizatora, odparowanie rozpuszczalnika, a następnie suszenie przez wymrożenie z wody dało 40 mg (97%) związku tytułowego jako białego proszku.
13C-N MR (125 MHz, MeOD): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 157,5, 167,2 169,1 173,7 i 174,1.
Przykład 70
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R, 8)Itp x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts)
Boc-(R)Cgl-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów) (400 mg, 1,17 mmol), H-(R, S)Itp(Ts) (patrz wytwarzanie substratów) (366 mg, 1,23 mmol) i DMAP (286 mg, 2,34 mmol) rozpuszczono w CH3CN (6 ml) i ochłodzono do temperatury 5°C. Dodano EDC (236 mg 1,23 mmol) i powstałą mieszaninę w temperaturze pokojowej przez noc. CH3CN usunięto i pozostałość rozpuszczono w MeOH/EtOAc/H2O, oddzieloną warstwę organiczną przemyto K2CO3(nasyc.), 2 M KHSO4, solanką i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało białe ciało stałe, 688 mg (85%).
MS m/z 620 (M+ + 1) (ii) H-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts)
Boc-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts) (500 mg, 0,8 mmol) rozpuszczono w CH2C12 (50 ml) i HC1 (g) barbotowano przez roztwór przez około 4 min. Po 45 min. rozpuszczalnik odparowano i powstały produkt rozpuszczono w EtOAc/MeOH/H2O, a kwasowy roztwór potraktowano w 2 M NaOH(aq) do uzyskania pH=8-9, warstwę organiczną oddzielono i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 425 mg (100%) związku tytułowego jako białego ciała stałego.
MS m/z 520 (M++l) (iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts)
H-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts) (400 mg, 0,77 mmol), 2-para-nitrobenzenesulfonyloksy)octan benzylu (patrz wytwarzanie substratów) (325 mg, 0,92 mmol) i K2CO3 (235 mg, 1,7 mmol) mieszano w CH3CN (5 ml) w temperaturze 45°C. Po kilku godzinach konwersja wynosiła tylko 25% i wobec tego temperaturę podniesiono do 60°C i dodano dodatkową ilość 2-(para-nitrobenzenesulfonyloksy)octanu benzylu. Całość mieszano przez 48 godzin, (substrat:produkt 25:63), i następnie rozpuszczono. Rozpuszczalnik odparowano i do pozostałości dodano EtOAc/H2O. Fazy oddzielono i fazę wodnąprzemyto dwukrotnie EtOAc, a następnie połączoną fazę organicznąprzemyto K2CO3 (nasyć.), 2 M KHSO4, H2O i osuszono Na2SO4). Dało to, po odwrot
181 968
101 nej ekstrakcji kwasowym KHSO4, około 340 mg produktu, który oczyszczono metodąRPLC. Otrzymano 34 mg (7%) związku tytułowego.
MS m/z 668 (M++ 1).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp x 2 HC1
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R, S)Itp(Ts) (3 mg, 0,05 mmol) rozpuszczono w THF (5 ml) i NH3(g) (40 ml) wdestylowano do kolby z chłodzeniem suchym lodem. Dodano Na(s) i pojawiło się ciemnoniebieskie zabarwienie. Całość mieszano przez 5 min przed zalaniem HOAc (50μ1). Chłodzenie suchym lodem usunięto i pozwolono odparować NH3(c). Do pozostałości dodano H2O i HOAc do pH = 7. Suszenie przez wymrażanie i preparatywna RPLC dała kilka frakcji, które zanalizowano FAB-MS. Dwie frakcje zawierały żądany związek, 3 mg (10%), po osuszeniu przez wymrożenie z 2,2 równoważnika 1 M HC1:
MS m/z 424 (M+ + 1).
Przykład 71
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp (i) Boc-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp(Ts)
Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów) (169 mg, 0,5 mmol), H-(R, S)Itp(Ts) (patrz wytwarzanie substratów) (155 mg, 0,52 mmol), DMAP (122 mg, 1 mmol) rozpuszczono w CH3CN (2,5 ml) i ochłodzono do 5°C. Dodano EDC x HC1 (115 mg, 0,6 mmol) i powstałą mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodatkową ilość (0,5 równoważnik) H (R, S)Itp(Ts) i EDC dodano po mieszaniu przez noc. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez kolejną noc i przetworzono jak opisano dla Boc-(R)Cgl-Aze-(R, S) Itp(Ts) (patrz przykład 70) powyżej. Dało to 260 mg surowego produktu. Oczyszczenie metodąRPLC dało 180 mg (57%) związku tytułowego.
MS m/z 634 (M+ + 1).
(ii) H-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp(Ts)
Boc- H-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp(Ts) (180 mg, 0,28 mmol) rozpuszczono w CH2C12 (20 ml) i HC1 (g) barbotowano przez roztwór przez około 4 min. Po 45 min. rozpuszczalnik odparowano i powstały produkt rozpuszczono w CH2C12 i przemyto 2 M NaOH do uzyskania pH=8-9, fazy oddzielono i fazę organiczną osuszono (Na2SO) i odparowano otrzymując 163 mg (około 100%).
MS m/z 534 (M+ +1).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp(Ts)
H-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp(Ts) (80 mg, 0,15 mmol), K2CO3(45 mg, 0,33 mmol) i Br-CH2COOBn (39 mg, 0,17 mmol) mieszano w CH3CN (1,5 ml) w temperaturze 60°C przez 2,5 godziny. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w EtOAc/H2O, fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto 10% kwasem cytrynowym i osuszono (Na2SO4). odparowanie rozpuszczalnika dało 171 mg surowego produktu, który oczyszczono metodąRPLC otrzymując 53 mg (52%) związku tytułowego.
MS m/z 681 (M++ 1).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R, S)Itp
BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R, 5)Itp(Ts) (50 mg, 0,07 mmol) potraktowano tak, jak opisano dla BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze(R, S)Itp(Ts) (patrz przykład 70 (iv)). Dało to mieszaninę produktów, którą oczyszczono metodą RPLC otrzymując 12 mg mieszaniny 1:1 związku tytułowego wraz z postacią zredukowaną która ujawnia się przy masie 439 (m/z).
MS m/z 438 (M++1)
Przykład 72
H-(R)Cha-Pic-(R, B) Itp x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Ts)
W temperaturze pokojowej 2,1 g (5,5 mmol) Hoc-(R)Cha-Pic-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,0 g (8,2 mmol) DMAP i 1,7 g (5,8 mmol) H-(R, S)Itp(Ts) (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczono w 40 ml acetonitrylu. Po kilku minutach mieszania dodano 1,1 g (5,8 mmol) EDC i mieszanie kontynuowano przez 60 godzin. Rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w CH2C12, przemyto wodą 0,3 M KHSO4 i KHCO3 (aq) i
102
181 968 osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika i przesączenie przez żel krzemionkowy dało 2,43 g (67%) produktu.
MS m/z 661 (M++ 1).
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp
2,4 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Ts) rozpuszczono w 15 ml THF i NH3 (g), skroplono do kolby, a następnie dodano Na. Całość zalano po 5 min. kwasem octowym i odparowano NH3 i THF. Pozostałość osuszono przez wymrożenie z wody i oczyszczono metodą RPLC (CH3CN/0,l M NH4OAc, 6/4) otrzymując 0,93 g (15%) żądanego produktu.
MS m/z 507 (M+ + 1).
(iii) H-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp x 2 HC1
W temperaturze pokojowej 50 mg (0,099 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp rozpuszczono w octanie etylu nasyconym HC1 (g). Po mieszaniu 2 godziny rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość osuszono pizez trzykrotne wymrożenie z wody otrzymując 35 mg (74%) żądanego produktu.
MS m/2 407 (M+ + 1).
Przykład 73
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z)
W temperaturze pokojowej 0,84 g (1,66 mmol) Hoc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp (patrz przykład 72) rozpuszczono w 10 ml CH2C12 i 10 ml 0,5M NaOH. Dodano kroplami 0,29 ml (1,82 mmol) Z-Cl. Po mieszaniu przez 3 godziny fazy oddzielono i fazę organiczną przemyto wodąi osuszono nad Na2SO4. Odparowanie i chromatografia rzutowa (octan etylu/heptan 9/1) dała 0,5 g (47%) żądanego produktu.
MS m/z 641 (M++ 1) (ii) H-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z)
W temperaturze pokojowej 0,5 g (0,78 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z) rozpuszczono w octanie etylu nasycony HC1. Dodano wody i mieszaninę zalkalizowano K2CO3. Fazy oddzielono. Fazę wodną ekstrahowano CH2C12, a fazę organiczną przemyto wodą. Połączoną fazę organiczną osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika dało 0,3 g (71 %) żądanego produktu.
MS m/z 541 (M++ 1) (iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z)
0,29 g (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z), 0,15 g (1 mmol) K2CO3 roztworzono w 25 ml acetonitrylu. Dodano 154 mg (0,6 mmol) bromooctanu benzylu i mieszaninę mieszano w temperaturze 50°C przez 4 godziny. Odparowanie i oczyszczenie metodą RPLC (acetonitryl:0,l M NH2OAc 70:30) dało około 200 mg żądanego produktu.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp x 2 HC1
200 mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp(Z) rozpuszczono w etanolu. Dodano małą łyżeczkę 10% Pd na węglu i mieszaninę uwodorniano przez 4 godziny. Przesączenie przez hyflo, odparowanie rozpuszczalnika, a następnie suszenie przez wymrażanie z wody dało 53 mg żądanego produktu.
*H- NMR (300, 13 MHz, D2O); δ 1,0-2,35 (nakładające się m, 22H), 3,28-3,51 (m, 5H), 3,51-3,64 (m, 1H), 3,75-4,03 (m, 3H), 5,03-5,14 (s, br, 1H). Sygnał jednego z protonów jest częściowo zasłonięty przez sygnał H-O-D.
MS m/z 465 (M+ + 1)
Przykład 74
H-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Pro-(R, S) Hig(Z)
Do mieszaniny 1,0 g (2,95 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 1,44 g (11,8 mmol) DMAP, 1,12 g (3,25 mmol) H-(R, S)Hig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 15 ml w CH2C12 dodano 0,62 g (3,2 mmol) EDC i mieszaninę mieszani w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w octanie etylu. Gdy warstwę organicznąprzemyto dwukrotnie 0,3 M roztworem KHSO4, z warstwy organicznej wy
181 968
103 dzielił się olej. Warstwę octanu etylu osuszono (Na2SO4) i odsączono. Olej i warstwę wodną ekstrahowano następnie CH2C12. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i połączono z powyższą fazą EtOAc. Odparowanie i oczyszczenie surowego produktu na chromatotronie (Harrison Research, model 7924T) z zastosowaniem 2 mm płytki z krzemionką z krokowym gradientem CH2Cl2/MeOH (97/3,95/5,90/10) jako eluentem dało 1,1 g (59%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1 mg (0,13 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z) rozpuszczono w 50 ml octanu etylu nasyconym HCL Mieszaninę odstawiono na godzinę, odparowano i pozostałość rozpuszczono w 10 ml etanolu. Dodano 40 mg Pd/C (5%), 1 ml wody i 0,5 ml 1M roztworu HC1 i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez noc. Przesączenie katalizatora przez celit i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie suszenie przez wymrożenie trzykrotnie z wody dało związek tytułowy w 75% wydajnością.
'H-NMR (D2O 300 MHz); δ 0,95-1,35 (m, 5H), 1,50-2,45 (m, 15H), 3,02 (bt, 1H), 3,1-3,8 (m, 7H), 4,13(d, 1H), 4,38 (bd, 1H) 13C-N MR ((D2O, 75 MHz): węgle karbonylowe i guanidyny: δ 154,8, 168,9, 174,4
MS m/z 393 (M+ + 1)
Przykład 75
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1 (i) H-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z) g (1,6 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z) (patrz przykład 74 (i)) rozpuszczono w 100 ml octanu etylu nasyconym HC1, i mieszaninę odstawiono na godzinę. Mieszaninę odparowano i pozostałość rozpuszczono w CH2C12. Warstwę organiczną przemyto dwukrotnie 0,2 M roztworu NaOH, osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano otrzymując 0,825 g (98%) związku tytułowego.
(ii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z)
0,442 g (0,839 mmol) H-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z), 0,256 g (1,85 mmol) K2CO3 i 145 ml (0,521 mmol) bromooctan benzylu zmieszano w 12 ml THF. Mieszaninę mieszano w temperaturze 40°C na godzinę i w temperaturze pokojowej przez noc. Po odparowaniu rozpuszczalnika pozostałość rozpuszczono w CH2C12 i przemyto raz wodą i raz solanką. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano i surowy produkt oczyszczono na chromatotronie (Harrison research, model 7924T) z zastosowaniem 2 mm płytki z krzemionką z krokowym gradientem CH2Cl2/MeOH (97/3, 95/5, 90/10) jako eluentu otrzymując 0,165 g (29%) związku tytułowego.
(iii) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1
0,165 g (0,25 mmol BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R, S)Hig(Z) zmieszano z 0,050 g Pd/C (5%), 0.7 ml 1 M roztworu HC1 i 10 ml etanolu. Mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 4 godziny. Przesączenie katalizatora przez celit i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie dwukrotne suszenie przez wymrożenie z wody dało 0,1 g (75%) produktu.
Ή-NMR (D2O 300 MHz); δ 1,05-1,45 (m, 5H), 1,55-2,5 (m, 15H), 3,08 (bt, 1H), 3,2-4,05 (m, 9H), 4,30 (d, 1H), 4,44 (m, 1H) l3C- NMR(D2Ó, 75 MHz): węgle karbonylowe i guanidyny: δ 154,9,167,2,169,4,174,1
Przykład 76
H-(R)Cha-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-(R, S)Hig(Z)
0,72 g (1,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,95 g (7,8 mmol) DMAP, 0,74 g (2,14 mmol) czystego w 82% H (R, S)Hig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) w 10 ml CH2C12 dodano do 0,486 g (2,54 mmol) EDC i mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 3 dni. Mieszaninę rozcieńczono CH2C12 i przemyto wodą, dwukrotnie 0,3 M roztworem KHSO4 i raz solanką. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono i odparowano i surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH 95/5 jako eluentu otrzymując 0,450 g (33%) produktu.
(ii) H-(R)Cha-Pro-(R, S)Hig x 2 HC1
104
181 968 mg (0,078 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-(R, S)Hig(Z) rozpuszczono w 20 ml octanu etylu nasyconego HC1. Mieszaninę odstawiono na godzinę, odparowano i pozostałość rozpuszczono w 10 ml etanolu. Dodano 20 mg Pd/C (5%) i 0,3 ml ί M roztworze HC1 i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 2 godziny. Przesączenie katalizatora przez celit i odparowanie rozpuszczalnika, a następnie dwukrotne suszenie przez wymrożenie z wody dało 28 mg (76%) związku tytułowego.
‘H-NMR (D2O 300 MHz); δ 0,9-1,6 (m, 6H), 1,6-2,5 (m, 16H), 3,09 (t, 1H), 3,31 (t, 1H), 3,37-3,74 (m, 4H), 3,81 (m, 1H), 4,35-4,47 (m, 2H) 13C-NMR (D2O, 75 MHz): węgle karbonylowe i guanidyny: δ 154,9, 169,8, 174,1
Przykład 77
H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
Do roztworu 0,50 g (1,6 mmol) H-Rig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) 0,59 g (1,6 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,84 g (6,9 mmol) dimetyloaminopirydyny w 30 ml acetonitrylu i 5 ml dimetyloformamidu dodano 0,33 g (1,7 mmol) chlorowodorku N-(30dimetyloaminopropylo)-N'-etylokarbodiimidu. Całość mieszano przez 3 dni, następnie odparowano i podzielono pomiędzy wodny roztwór wodorosiarczanu potasu i chlorek metylenu. Warstwę chlorku metylenu przemyto wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i wody, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Surową substancję odsączono pod niskim ciśnieniem przez wkładkę z żelem krzemionkowym z chlorkiem metylenu/metanolem 9/1 otrzymując 0,78 (76%) żądanego związku po odparowaniu.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,8-1,9 (m, 27H), 2,4-2,6 (m, 2H), 2,78 (bt, 2H), 3,15, 3,4 (m, 27H), 3,80 (bt, 1H), 4,0-4,4 (m, 4H), 4,75 (bd, 1H), 4,97 (bt, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,74 (b, 1H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) x 2HC1
Kolbę zawierającą Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), 0,76 g (1,2 mmol), w 50 ml octanu etylu ochłodzono na łaźni lodowej. Suchy HC1 barbotowano przez 5 min i roztwór odparowano otrzymując 0,74 g (100%) dichlorowodorku jako białego proszku.
1 H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 1,1-2,0 (m, 18H), 2,23 (m, 1H), 2,68 (m, 1H), 3,15-3,45 (m, 4H), 3,72 (bd, 1H), 3,9-4,0 (bd, 2H), 4,27 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,30 (s, 2H), 7,3-7,5 (m, 5H).
(iii) H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1
Kolbę zawierającą roztwór 20 mg H-(R)CglAze-Rig(Z) i w małej ilości 5% Pd/C uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Mieszaninę odsączono przez celit i odparowano. Pozostałość liofilozowano z kilkoma kroplami stężonego HC1 otrzymując produkt. Wydajność: 8 mg (52%).
‘H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,1-2,0 (m, 18H), 2,37 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 3,08 (bt, 2H), 3,39 (bt, 2H), 3,8-4,0 (m, 3H), 4,35-4,5 (m, 2H), 4,90 (m, 1H).
I3C- NMR (75,5 MHz, D2O): węgle guanidyny i karbonylowe: δ 172,2, 169,4, 156,4.
Przykład 78
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig z 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
Mieszaninę 0,20 g (0,33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) (patrz przykład 77), 0,13 g węglan potasu, 80 mg jodku sodu, 10 ml tetrahydrofuranu i 10 ml acetonitrylu ogrzewano w temperaturze 60°C przez 10 godzin. Rozpuszczalniki odparowano i surową substancję poddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem chlorku metylenu/metanolu 92/8 jako eluent. Wydajność: 0,13 g (58%).
‘H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 0,9-2,1 (m, 18H),2,45(m, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,88 (d, 1H), 3,2-3,5 (m, 4H), 3,94 (m, 1H), 4,0-4,25 (m, 3H), 4,85 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,5 (m, 10H), 7,95 (m, 1H).
(ii) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1
181 968
105
Mieszaninę 0,12 g (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), 5 ml etanolu, 3 kropli stężonego HC1 i w małej ilości 5% Pd/C uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Mieszaninę odsączono przez celit i odparowano. Pozostałość liofilizowano w wodzie otrzymując 91 mg (98%) produktu.
Ή-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,1-1,9 (m, 17H), 2,00 (m, 1H), 2,29 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,34 (t, 2H), 3,83 (bd, 2H), 3,89 (dd, 2H),4,00 (d, 1H), 4,35 (m, 2H), 4,87 (m, 1H).
13C-NMR (125,8 MHz, D2O): węgle guanidyny i karbonylowe: δ 171,8, 169,6, 167,7, 156,3.
Przykład 79
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
Do roztworu 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoetylobenzyloksykarbonyloamidynopiperydyny (H-Rig(Z) (patrz wytwarzanie substratów), 0,32 (0,82 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,40 g (3,3 mmol) dimetyloaminopirydyny w 10 ml acetonitrylu i 2 ml dimetyloformamidu dodano 0,165 g (0,86 mmol) chlorowodorku N-(3-dimetyloaminopropylo)-N'-etyloakarbodiimidu. Całość mieszano przez 3 dni, następnie odparowano i podzielono pomiędzy wodny roztwór wodorosiarczanu potasu i chlorek metylenu. Warstwę chlorku metylenu przemyto wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i wody, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Widmo NMR surowego produktu było zadowalające i produkt, który zawierał nieco dimetyloformamidu, użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
‘H-NMR (500 MHz, CDC13) δ 0,8-2,2 (m, 32 H; w nim 1,41 (s, 9H), 2,34 (m, 1H), 2,77 (bt, 2H), 3,10 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 4,17 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,03 (m, 1H), 7,05-7,4 (m, 7H).
(ii) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
Kolbę zawierającą surowy produkt Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z) w 100 ml octanu etylu ochłodzono na łaźni lodowej. Suchy HC1 barbotowano przez 5 min i roztwór odparowano, aby pozbyć się nadmiaru HC1. Produkt rozpuszczono w wodzie i ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu dla usunięcia dimetyloformamidu z poprzedniego etapu. Wodną fazę zalkalizowano NaHCO3 (aq) i ekstrahowano dwukrotnie chlorkiem metylenu. Połączoną fazę organiczną przemyto wodą osuszono (Na2SO4) i odparowano. Wydajność: 0,37 g (81 %) w dwu etapach.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 0,8-2,4 (m, 24H), 2,82 (bt, 2H), 3,26 (m, 2H), 3,42 (bq, 1H), 3,70 (m, 2H), 4,19 (m, 2H), 4,49 (bd, 1H), 5,11 (s, 2H), 6,9-7,5 (m, 8H).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
Mieszanina 0,18 g (0,32 mmol) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z), nadmiaru węglanu potasu i 10 ml acetonitrylu ogrzewano w temperaturze 60°C przez 2 godziny. Rozpuszczalniki odparowano i surową substancję poddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem chlorku metylenu/metanolu 95/5 jako eluentu. Wydajność: 0,20 g.
‘H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 0,8-2,1 (m, 23H), 2,37 (m, 1H), 3,1,3,5 (m, 7H), 4,0-4,2 (m, 2H), 4,54 (m, 1H), 5,1 (m, 4H), 6,9-7,5 (m, 13H).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig x 2 HC1
Mieszaninę 0,15 g (0,21 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z), 10 ml etanolu, 4 kropli stężonego HC1 i w małej ilości 5% Pd/C uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez 1 godzinę. Mieszaninę odsączono przez celit i odparowano. Pozostałość liofilizowano w wodzie otrzymując 95 mg (64%) produktu.
‘H-NMR (500 MHz, MeOD) δ 0,85-2,1 (m, 23H), 2,30 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 3,85-4,0 (m, 3H), 4,03 (d, Ih), 4,41 (m, 1H), 4,50 (m, 1H).
13C-NMR(125,8MHz,D2O):węgleguanidynyikarbonylowe:6174,0,168,9 168,1,157,5.
Przykład 80
HOOC-CH2-CH2 -(R)Cha-Aze-Rig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
Do roztworu 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoetylo-benzyloksy-karbonyloamidynopiperydyny (H-Rig(Z)) (patrz wytwarzanie substratów), 0,31 (0,86 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (patrz wy106
181 968 twarzanie substratów), 0,40 g (3,3 mmol) dimetyloaminopirydyny w 10 ml acetonitrylu i 2 ml dimetyloformamidu dodano 0,17 g (0,86 mmol) chlorowodorku N-(3-dimetyloaminopropylo)-N'-etylokarbodiimidu. Całość mieszano przez 3 dni, następnie odparowano i podzielono pomiędzy wodny roztwór wodorosiarczanu potasu i chlorek metylenu. Warstwę chlorku metylenu przemyto wodnym roztworem wodorowęglanu sodu i wody, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Surowy produkt, który zawierał pewną ilość dimetyloformamidu, użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
1 H-NMR (500 MHz, CDC13)ÓO,85 (m, 1H) 0,97 (m, 1H), 1,1-1,75 (m, 26H;wnim 1,41 (s, 9H)), 1,82 (bd, 1H), 2,53 (m, 2H), 2,77 (bt, 2H), 3,25 (m, H), 4,03 (q, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 4,29 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 4,97 (m, 1H), 5,09 (s, 2 · 4 (m, 7H), 7,65 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
Kolbę zawierającą surowy produkt Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z) w 100 ml octanu etylu ochłodzono na łaźni lodowej. Suchy HC1 barbotowano przez 5 min. i roztwór odparowano, aby pozbyć się nadmiaru HC1. Produkt rozpuszczono w wodzie i ekstrahowano dwukrotnie octanem etylu dla usunięcia dimetyloformamidu z poprzedniego etapu. Wodną fazę zalkalizowano NaHCO3 (aq) i ekstrahowano dwukrotnie chlorkiem metylenu. Połączoną fazę organiczną przemyto wodą, osuszono (Na2SO4) i odparowano. Wydajność: 0,31 g (70%) w dwu etapach.
Ή-NMR (300 MHz, CDC13)5O,8-1,9 (m, 20H), 2,48 (m, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,85 (bt, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 4,05 (q, 1H), 4,1-4,25 (m, 3H), 4,86 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H), 7,93 (m, 1H).
(iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
Roztwór 0,31 g (0,57 mmol) H-(R)Cha-AzeRig(Z) i 93 mg (0,57 mmol) akrylanu benzylu w 5 ml etanolu odstawiono w temperaturze pokojowej na tydzień. Następnie odparowano i poddano chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym z zastosowaniem chlorku metylenu/metanolu 94/6 jako eluentu. Wydajność: 0,20 g (49%).
Ή-NMR (500 MHz, CDC13) 5 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,8 (m, 18H), 2,48 (m, 1H), 2,54 (bt, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,81 (bt, 2H), 2,87 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 4,04 (q, 1H), 4,1-4,2 (m, 3H), 4,84 (dd, 1H), 5,05-5,15 (m, 4H), 7,0-7,5 (m, 12H), 8,03 (m, 1H).
(iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig x 2 HC1
Związek tytułowy wytworzono i oczyszczono w taki sam sposób, jak opisano w przykładzie 80, z 0,20 g (0,28 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z). Wydajność: 30 mg (19%) dichlorowodorku.
Ή-ΝΜΚ(500ΜΗζ^θα3)δ1,0-,1,9(ιη,20Η),2,33 (m, lH),2,70(m, lH),2,83(m,2H), 3,10 (m, 2H), 3,3-3,4 (m, 4H), 3,85 (bd, 2H), 3,92 (m, rotamer) 4,14 (t, 1H), 4,17 (m, rotamer), 4,31 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 5,18 (m, rotamer).
i3C -NMR (125,8 MHz, D2O): węgle guanidyny i karbonylowe: δ 175,4, 171,8 168,8, 156,3.
Przykład 81
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)
W temperaturze pokojowej 0,87 g (2,36 mmol) Boc(R)Cha-ProOH (patrz wytwarzanie substratów), 0,78 g (4,72 mmol) DMAP i 0,70 g (2,36 mmol) H-(S)Itp(Ts) (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczono w 12 ml acenitrylu. Po mi zaniu przez 20 minut dodano 0,59 g (3,07 mmol) EDC. Po 18 godzinach rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w CH2C12, przemyto wodą, kwasem cytrynowym (10%), KHCO3 (a,q), wodą i osuszono Na2SO4. Odparowanie dało 1,74 g ( > 100% wydajność (czystość około 60%)) żądanego produktu, który użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
FAB-MS: m/z = 647 (M+ + 1) (ii) H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)
Grupę zabezpieczającą Boc usunięto w taki sam sposób, jak opisano dla Boc-(R)ChaPic-(R, 5)Itp(Z) (patrz przykład 72 (ii)) otrzymując 0,75 g (81%) związku tytułowego.
FAB-MS: m/z = 547 (M+ + 1)
181 968
107 (iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)
0,75 g (1,37 mmol) H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts), 0,38 2,74 mmol) K2CO3 roztworzono w 15 ml acetonitrylu. Dodano 0,39 g (1,65 mmol) bromooctanu benzylu i mieszaninę mieszano w temperaturze 50°C przez 2 godziny. Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem octanu etylu/metanolu 95/5 jako eluentu dało około 530 mg żądanego produktu.
FAB-MS: m/z = 695 (M+ + 1) (iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp x 2 HC1
0,53 g (0,76 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts) rozpuszczono w 15 ml THF. NH3 (g) skroplono do kolby i dodano Na(m) dodano. Całość zalano po 30 min. kwasem octowym i odparowano NH3 i THF. Pozostałość osuszono przez wymrożenie z wody i surowy produkt oczyszczono metodą RPLC (acetonitryl/Ο,ΙΜ HOAc 15/85) otrzymując 0,25 g (61%) żądanego produktu po suszeniu przez wymrożenie z wodnego roztworu HC1.
'H-NMR (500,13 MHz, D2O); 80,9-2,09 (nałożone m, 20H), 2,22-2,35 (m, 1H), 3,2-3,36 (m, 4H), 3,44-3,62 (nałożonem, 2H), 3,7-3,8 (m, 1H) 3,87-3,99 (m, 2H), 4,33-4,48 (nałożonem, 2H).
13C -NMR (500,13 MHz, D2O): węgle guanidyny i karbonylowe: 8 154,3, 168,1, 169,0 i 174,2
Przykład 82
H-(R)Cha-Pro-(R, S)Nig x 2 HC1 (i) Boc-(R)Cha-Pro-(R, S)Nig(Z)
174 mg (0,471 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 229 mg (1,87 mmol) DMAP, 130 mg (0,471 mmol) H-(R, S)Nig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) zmieszano z 2 ml CH2C12, dodano 117 mg (0,61 mmol) EDC i mieszaninę mieszano przez cztery dni. Mieszaninę rozcieńczono CH2C12 i przemyto wodą, dwukrotnie 0,3 M roztworem KHSO4 i raz solanką. Warstwę organiczną osuszono (Na2SO4), odsączono, odparowano i surowy produkt oczyszczono dwukrotnie metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem najpierw CH2Cl2/MeOH 95/5, a następnie CH2Cl2/MeOH 97/3 jako eluentu, otrzymując 0,104 g (35%) związku tytułowego.
MS m/z 627 (M+ + 1) (ii) H-(R)Cha-Pro-(R, S)Nig x 2 HC1 mg (0,016 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-(R, S)Nig(Z) rozpuszczono w 15 ml octanu etylu nasyconym HC1. Mieszaninę odstawiono na pół godziny. Mieszaninę odparowano i pozostałość rozpuszczono w 6 ml etanolu i 8 mg 5% Pd/C (5%), dodano 0,1 ml 1M roztworu HC1 i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem atmosferycznym przez półtorej godziny. Po przesączeniu przez hyflo i odparowaniu rozpuszczalnika otrzymano 4 mg związku tytułowego.
'H-NMR(300MHz,D2O);80,9-1,58(m,6H), 1,58-2,45(m, 13H),2,65(m, lH),3,19(m, 1H), 3,34 (d, 2H) 3,4-3,73 (m, 4H), 3,82 (m, 1H), 4,34-4,49 (m, 2H).
,3C-NMR (75 MHz, D2O): węgle karbonylowe i guanidyny: 8 155,1 169,9 i 174,8.
Przykład 83
H-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1 (i) Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
Do mieszaniny 1,2 g (3,31 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-OH (patrz wytwarzanie substratów) i 1,70 g (13,91 mmol) DMAP w 40 ml CH3CN w temperaturze pokojowej dodano 0,98 g (3,35 mmol) H-Pab(Z) (patrz wytwarzanie substratów) rozpuszczone w 1 ml DMF. Po mieszaniu przez 2 godziny mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury -18°C i dodano porcjami 0,66 g (3,48 mmol) EDC, po czym mieszaninę reakcyjną pozostawiono w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 100 ml EtOAc i przemyto 1 x 30 ml wody, 3 x 30 ml 0,3 M KHSO4,1 x 30 ml Na2CO3,1 x 30 ml wody i osuszono. Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH (95/5) jako eluentu dała 0,691 g (38%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
108
181 968
0,673 g Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z) rozpuszczono w 30 ml EtOAc i roztwór nasycono HC1 (g) w ciągu kilku minut (białe ciało stałe wytrąciło się z roztworu). Rozpuszczalnik i nadmiar HC1 odparowano, 60 ml EtOAc dodano do pozostałości i fazę organiczną przemyto 2 x 20 ml 2 M NaOH. Przemywającą wodę ekstrahowano 1 x 25 ml EtOAc, który połączono z drugą fazą EtOAc i połączone fazą organiczną przemyto wodą osuszono i odparowano otrzymując 560 mg (98%) żądanego produktu.
'H-NMR (500 MHz, CDC13) δ 1,5-1,74 (m, 3H), 1,98-2,05 (m, 1H), 2,78-2,85 (m, 1H), 2,90-2,96 (m, 1H), 3,0-3,2 (układ ΑΒΧ centrowany na 3,1, 2H), 3,62 (dd, 1H), 4,3-4,45 (układ ΑΒΧ centrowany na 4,37,2H,), 4,58 (q, 1H,5,22 (s, 2H), 6,96 (bt, lH)7,l-7,4(m, 1OH),7,46 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,12 (d, 1H).
(iii) H-(R)-Pro-Phe-Pab x 2 HC1
200 mg H-(R)Pro-Phe-Pab(Z) rozpuszczono w 10 ml 95% EtOH i 2 ml wody i mieszaninę uwodorniano nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 5 godzin. Przesączenie katalizatora i dodanie 1 ml IM HC1, a następnie odparowanie i suszenie przez wymrożenie z wody dało związek tytułowy z 88% wydajnością.
'H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,51-1,59 (m, 1H), 1,69-1,80 (m, 1H), 1,87-1,97 (m, 1H), 2,19-2,29 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,20-3,33 (m, 3H, częściowo zakryte przez pik rozpuszczalnika), 4,27 (m, 1H), 4,43-4,54 (układ AB centrowany na 4,48,2H), 4,75-4,81 (m, 1H), 4,87 (s, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
I3C- NMR (125 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,1, 170,1 i 173,4.
Przykład 84
HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1 (i) BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
Do zawiesiny 244 mg (0,463 mmol) H-(R)Pro-Phe-Pab(Z) (patrz przykład 83) i 159,9 mg (1,157 mmol) K2CO3 w 8 ml DMF/CH3CN (5/3) dodano 127,2 mg (0,555 mmol) bromooctanu benzylu rozpuszczone w 2 ml DMF i mieszaninę mieszano w temperaturze 60°C przez 1,5 godziny i w temperaturze pokojowej przez noc. Rozpuszczalnik odparowano i pozostałość rozpuszczono w 50 ml EtOAc, przemyto 2 x 20 ml wody i osuszono (Na2SO4). Odparowanie rozpuszczalnika, a następnie chromatografia rzutowa z zastosowaniem CH2Cl2/MeOH (9/1) jako eluentu dała 176 mg (56%) związku tytułowego jako białego ciała stałego.
'H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 1,45-1,80 (m, 3H), 2,06 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,92-3,28 (m, 6H), 4,3-4,5 (układ ΑΒΧ centrowany naó=4,4,2h), 4,60 (dd, 1H), 5,10 (pozorny s, 2H), 5,2 (pozorny s, 2H), 7,1-7,4 (m, 15H), 1,43 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,932 (d, 1H).
(ii) HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1
170 mg (0,252 mmol) BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(2) rozpuszczono w 12 ml EtOH/wody (5/1) i uwodorniano nad 5% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez 4,5 godzin. Katalizator odsączono, rozpuszczalnik odparowano i pozostałość osuszono przez wymrożenie z HC1 (aq) otrzymując związek tytułowy.
‘H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 1,62 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 2,38 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,25-3,35 (m, 2H), częściowo zakryte przez pik rozpuszczalnika), 3,80 (m, 1H), 4,08-4,19 (układ AB centrowany nad = 4,19 2H), 4,39 (m, 1H), 4,45-4,58 (układ AB centrowany na δ = 4,50, 2H), 4,80 (m, 1H), 7,20-7,35 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (D, 2H).
13C-N MR (125 MHz, D2O): węgle amidynowe i karbonylowe: δ 166,8, 169,1, 169,5 i 173,2.
Przykład 85
H-(R)Phe-Phe-Pab (i) Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
Boc-(R)Phe-Phe-OH (16,4 mmol) (patrz wytwarzanie substratów, Pab(Z)-HCl (18,0 mmol) i 4-dimetyloaminopirydyny (24,6 mmol) rozpuszczono w 50 ml acetonitrylu. Roztwór ochłodzono do temperatury wody z lodem i dodano chlorowodorek l-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu (21,3 mmol). Łaźnię chłodzącą usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano przez noc. Rozpuszczalnik odparowano następnie pod zmniejszonym ciśnieniem, pozostałość rozpuszczono
181 968
109 w 50 ml octanu etylu i powstający roztwór ekstrahowano 50 ml wody. Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z) wytrącony z dwufazowej mieszaniny odsączono i przemyto wodą otrzymując 8,7 g (78%, po suszeniu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 45 °C przez 24 godziny.
’HNMR(200MHz, d-CHCl3id4-CH3OH);Ó8,35 -7,00 (m, 19H),4,63 (t, 1H), 4,3-4,1 (m, 1H), 3,40-2,70 (m, 6H), 1,30 (s, 9H).
(ii) H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (10,3 mmol) umieszczono w zawiesinie w 70 ml octanu etylu i dodano 31 ml 3,3 M octanu etylu/HCl. Zawiesinę mieszano przez 4 godziny, po czym chlorowodorek H(R)Phe-Phe-Pab(Z) odsączono i przemyto kilkoma porcjami octanu etylu. Sól rozpuszczono w mieszaninie 50 ml chlorku metylenu, 50 ml IM węglanu potasu i około 5 ml etanolu. Warstwę organiczną zebrano i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 5,0 g H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (84%).
Ή MHz (200 MHz d6-DMSO): δ 9,1 (s, 2H), 8,59 (m, 1H), 8,1 (m, 1H), 7,90 (d, 2H), 7,4-7,0 (m, 17H), 5,09 (s, 2H), 4,58 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 3,1-2,7 (m, 4H).
(iii) H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,42 mmol) rozpuszczono w 10 ml tetrahydrofuranu i 1 ml wody. Do roztworu dodano pallad na węglu (42 mg) i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem wodoru 3,1 MPa w wytrząsarce Parra przez 2 dni. Po zakończeniu hydrogenolizy mieszaninę rozcieńczono metanolem i katalizator odsączono. Odparowanie rozpuszczalników dało surowy H-(R)Phe-Phe-Pab, który oczyszczono chromatograficznie na obojętnym tlenku glinu (70-230mesh) eluując chlorkiem metylenu/metanolem/wodorotlenkiem amonu (80:20:20). Wydajność 76 mg związku tytułowego (41%).
Ή NMR (200 MHz, d6-DMSO); δ 7,61 (d, 2H, 7,4-7,0 (m, 12H), 4,64 (m, 1H), 4,44 (m, 2H), 4,13 (t, 1H), 3,l-2,8(m, 4H).
Przykład 86
HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab (i) MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (patrz przykład 85 (ii)) rozpuszczono w 10 ml tetrahydrofuranu. Roztwór ochłodzono na łaźni lodowej i dodano trietyloaminę (1,73 mmol), a następnie chlorek metyloksalilu (0,95 mmol). Łaźnię chłodzącą usunięto i mieszaninę reakcyjną mieszano przez 18 godzin w temperaturze otoczenia. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono octanem etylu i ekstrahowano wodą. Fazę organiczną zebrano i rozpuszczalnik usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem otrzymując 0,45 g MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (78%), który użyto w następnym etapie bez dalszego oczyszczania. TSP-MS dał m/2 664 (obliczone dla MH+ (C37H38N5O7) 664). .
(ii) HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,68 mmol) rozpuszczono w 4 ml tetrahydrofuranie i 2 ml wody. Dodano wodorotlenek litu (2,6 mmol) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1,5 godziny. Po zakończeniu hydrolizy mieszaninę reakcyjną rozcieńczono 25 ml wody i zakwaszono przez dodanie 0,5 ml kwasu octowego.Osad odsączono i przemyto kilka porcjami wody otrzymując 0,40 g surowego HOOC-CO-(R)Phe-PhePab(Z) po osuszeniu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 45°C przez 24 godziny. Surowy produkt umieszczono w zawiesinie w 10 ml etanolu i 1 ml wody. Roztwór doprowadzono do wrzenia i nierozpuszczalny związek tytułowy odsączono, otrzymując 0,23 g HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (41% w dwu etapach).
'H-NMR (200 MHz, d6-DMSO); δ 8,62 (m, 2H), 8,41 (d, 1H), 7,89 (d, 2H), 7,4-6,9 (m, 17H), 5,10 (s, 2H), 4,54 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 3,2-2,6 (m, 4H).
(iii) HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab
HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,20 mmol) umieszczono w zawiesinie w 20 ml tetrahydrofuranu i 5 ml wody. Do roztworu dodano pallad na węglu (52 mg) i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem wodoru 3,1 MPa w wytrząsarce Parra przez 2 dni. Po zakończeniu uwodornienia mieszaninę rozcieńczono 40 ml metanolu i katalizator odsączono. Odparowanie rozpuszczalnika dało 50 mg związku tytułowego (49%).
110
181 968 'H-NMR (200 MHz, d6-DMSO); δ 9,2 (s), 8,78 (d), 8,60 (m), 7,91 (m), 7,79(d, 2H), 7,35-6,8 (m, 12H), 4,6-4,0 (m, 4H), 3,0-2,6 (m, 4H).
Przykład 87
HOOC-CH2-(R)(Phe-Phe-Pab (i) BnOOC-CH2-(R)(Phe-Phe-Pab(Z)
H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (patrz przykład 85 (ii)) i węglan potasu (2,6 mmol) umieszczono w zawiesinie w 10 ml acetonitrylu. Do mieszaniny dodano octan jodobenzylu (0,95 mmol) i roztwór ogrzano do 30°C i mieszano w tej temperaturze przez 2 dni. Po zakończeniu alkilowania rozpuszczalnik usunięto i pozostałość rozpuszczono w 10 ml octanu etylu. Roztwór szybko ekstrahowano 10 ml wody i z zebranej fazy organicznej wytrącił się tytułowy związek. BnOOC-CH2(R)Phe-Phe-Pab(Z) odsączono i osuszono pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 45° przez 24 godziny otrzymując 177 mg HnOOC-CH2-(R)(Phe-Phe-Pab(Z) (28%).
'H-NMR (200 MHz, CDC13); δ 7,79 (d, 2H), 7,5-7,1 (m, 22H), 6,55 (t, 1H), 5,21 (s, 2H) 5,03 (s, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,41 (m, 2H), 3,3-2,6 (m, 7H).
(ii)BnOOC-CH2-(R)(Phe-Phe-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)(Phe-Phe-Pab(Z) (0,32 mmol) umieszczono w zawiesinie w 30 ml tetrahydrofyranu i 3 ml wody. Do roztworu dodano pallad na węglu (41 mg) i mieszaninę uwodorniano pod ciśnieniem wodoru 3,1 MPa w wtrząsarce Parra przez 2 dni. Po zakończeniu uwodornienia mieszaninę rozcieńczono 40 ml wody i katalizator odsączono. Odparowanie rozpuszczalnika dało 95 mg związku tytułowego (59%). TSP-MS wykazał m/z 502 (obliczone dla MH+(C28H32N5O4) 502).
Przykład 88
H(R)Cha-Pro-Mig (i) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)
Do mieszanej mieszaniny 0,344 g (0,93 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,245 g (0,93 mmol) H-Mig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) i 0,227 g (1,86 mmol) DMAP w 10 ml CH3CN dodano 0,232 g (1,21 mmol) EDC w temperaturze -100°C. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i pozostawiono na 5 dni. CH3CN odparowano i pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przemyto H2O, NaHCO3 (aq) i solanką. Warstwę organiczną osuszono Na2SO4 i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem gradientu EtOAc/MeOH 95/5 to 90/10, jako eluentu otrzymując 0,340 g (60%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)
0,34 g (0,55 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z) rozpuszczono w 8 ml EtOAc nasyconym HC1 (g) i mieszano przez 10 min. w temperaturze pokojowej. Dodano kroplami 10 ml nasyconego roztworu KOH (aq). Warstwy oddzielono i wodną fazę ekstrahowano 3 x 8 ml EtOA. Warstwy organiczne połączono, przemyto solanką, osuszono Na2SO4 i odparowano otrzymując 0,286 g (100%) związku tytułowego.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Mig
0,050 g (0,132 mmol) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z) rozpuszczono w 3 ml MeOH i uwodorniano nad 10% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez noc. Roztwór odsączono przez celit i rozpuszczalnik odparowano otrzymując 0,040 g (80%) związku tytułowego.
’H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,92-1,02 (m, 2H), 1,18-1,47 (m, 6H), 1,66-1,73 (m, 4H), l,85-2,04(m, 4H), 2,17-2,22 (m, 1H), 2,95-2,98 (m, 1H), 3,12-3,16 (m, 1H), 3,47-3,55 (m, 2H), 3,62-3,66(m, 1H), 3,75-3,78 (m, 1H), 3,85-3,89 (m, 1H) 4,05-4,12 (m,3H), 4,34-4,37 (m, 1H).
Sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 3,4, 3,7, 4,13-4,16, 4,3.
MS m/z 379 (M+ +1)
Przykład 89
H-(R)Cha-Pro-Dig (i) Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)
Do mieszanej mieszaniny 0,280 g (0,76 mmol) Boc(R)Cha-Pro-OH (patrz wytwarzanie substratów), 0,210 g (0,76 mmol) H-Dig(Z) (patrz wytwarzanie substratów) i 0,186 (1,52 mmol)
181 968
111
DMAP w 8 ml CH3CN dodano 0,189 g (0,99 mmol) EDC w temperaturze -10°C. Mieszaninie reakcyjnej pozwolono się ogrzać do temperatury pokojowej i pozostawiono na 4 dni. CH3CN odparowano i pozostałość rozpuszczono w EtOAc i przemyto H2O, NaHCO3 (aq) i solanką. Warstwę organiczną osuszono Na2SO2 i odparowano. Surowy produkt oczyszczono metodą chromatografii rzutowej z zastosowaniem gradient EtOAc/MeOH, 95/5 to 90/10, jako eluentu otrzymując 0,210 g (44%) związku tytułowego.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)
0,210 g (0,33 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Dig (Z) rozpuszczono w 8 ml EtOAc nasyconego HC1 (g) i mieszano przez 10 min. W temperaturze pokojowej. Dodano kroplami 8 ml nasyconego roztworu KOH (aq). Warstwy oddzielono i wodną fazę ekstrahowano 3 x 8 ml EtOAc. Warstwy organiczne połączono, przemyto solanką, osuszono Na2SO2i odparowano otrzymując 0,146 g (83%) związku tytułowego.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Dig
0,046 g (0,087 mmol) H-(R)Cha-Pro-Dig(Z) rozpuszczono w 3 ml MeOH i uwodorniano nad 10% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez noc. Roztwór odsączono przez celit i rozpuszczalnik odparowano otrzymując 0,040 g (100%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,90-1,04 (m, 2H), 1,10-1,47 (m, 6H), 1,66-1,74 (m, 4H), 1,78-2,05 (m, 4H), 2,13-2,21 (m, 1H), 2,74-2,83 (m, 1H), 2,94-2,99 (m, 1H), 3,15-3,29 (m, 1H), 3,44-3,57 (m, 2H), 3,65-3,87 (m, 3H), 4,07-4,25 (m, 3H) 4,35-4,39 (m, 2H), Sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy δ 4,29-4,32.
MS m/z 393 (M+ +1)
Przykład 90
H-(R)Cha-Aze-Dig (i) Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
Związek tytułowy wytworzono z Boc-(R)Cha-Aze-OH i H-Dig(Z) (patrz wytwarzanie substratu) według procedury dla Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z) z wydajnością 0,253 g (54%).
(ii) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
Związek tytułowy wytworzono z Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z) zgodnie z procedurą dla Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z) z wydajnością 0,210 g (100%).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Dig
0,060 g (0,117 mmol) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z) rozpuszczono w 3 ml MeOH i uwodorniano nad 10% Pd/C pod ciśnieniem atmosferycznym przez noc. Roztwór odsączono przez celit i rozpuszczalnik odparowano otrzymując 0,042 g (95%) związku tytułowego.
'H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,91-1,02 (m, 2H), 1,18-1,48 (m, 6H), 1,66-1,90 (m, 8H), 2,15-2,17 (m, 1H), 2,66-2,68 (m, 1H), 2,80-2,83 (m, 1H), 3,14-3,29 (m, 1H), 3,39-3,44 (m, 1H), 3,72-3,80(m,2H),4,01-4,04(m, 1H), 4,14-4,23 (m,2H) 4,48-4,49 (m, 1H), 4,60-4,64 (m, 1H).
Sygnały z podrzędnego rotameru pojawiają się przy: δ 2,25, 2,6, 4,3, 4,67.
MS m/z 379 (M+ + 1)
Przykłady kompozycji farmaceutycznych
Związek według wynalazku można komponować w stałe dawki do doustnego podawania, takie jak zwykle tabletki, powlekane tabletki lub tabletki o modyfikowanym uwalnianiu. Ciekłe lub stałe-półstałe dawki do podawania doodbytniczego. Liofilizowane substancje lub ciecze jako emulsje lub zawiesiny do pozajelitowego stosowania. Ciekłe lub stałe-półstałe dawki do podawania miejscowego. W ciśnieniowych aerozolach lub w inhalatorach suchego proszku do doustnych lub nosowych inhalacji.
Przykład PI
Tabletki do doustnego podawania
1000 tabletek wytworzono z następujących składników:
Aktywny związek 100g
Laktoza 200g
Poliwinylopirolidon 30g
Celuloza mikrokrystaliczna 30g
112
181 968
Stearynian magnezu 6 g
Aktywny składnik i laktozę miesza się z wodnym roztworem poliwinylopirolidonu. Mieszaninę suszy się i miele tworząc granulki. Następnie dodaje się celulozę mikrokrystaliczną! stearynian magnezu. Mieszaninę prasuje się następnie w tabletece otrzymując 1000 tabletek, każda zawierająca 100 mg aktywnego składnika.
Przykład P2
Roztwór do podawania pozajelitowego
Roztwór wytwarza się z następujących składników:
Aktywny związek 5 g
Chlorek sodu do iniekcji 6 g
Wodorotlenek sodu do ustawienia pH do pH 5-7
Woda do iniekcji do 1000 ml
Aktywny składnik i chlorek sodu rozpuszcza się w wodzie pH ustawia się 2M NaOH do pH 3-9 i roztwór wprowadza się do sterylnych ampułek.
Przykład P3
Tabletki do podawania doustnego
1. Aktywny związek150 g
2. Glinokrzemian sodu20 g
3. Parafina120 g
4. Celuloza mikrokrystaliczna20 g
5. Hydroksypropylo celuloza5 g
6. Stearylofiimaran sodu3 g
1-4 miesza się i dodaje się wodny roztwór 5. Mieszaninę suszy się i miele i dodaje się 6. Mieszaninę prasuje się następnie w tabletkarce.
P r z y k ł ad B6
Proszek do inhalacji
Aktywny związek rozdrabnia się w młynie strumieniowym do rozmiarów cząstek właściwych do inhalacji (średnia średnica < 4 pm).
100 mg rozdrobnionego proszku wprowadza się do wielodawkowego inhalatora proszku (Turbohaler®). Inhalator jest wyposażony w element dawkujący, który dostarcza dawkę 1 mg.
BIOLOGIA
Określenie czasu krzepnięcia trombiny (TT).
Ludzkątrombinę (T 7669, Sigma Chem. Co) w roztworze buforowym, pH 7,4 100 pl, i roztwór inhibitora, 100 pl inkubowano przez 1 min. Następnie dodano zebrane zwykłe ludzkie osocze, 100 pl, zmierzono czas krzepnięcia w automatycznym urządzeniu (KC 10, Amelung).
Czas krzepnięcia w sekundach wykreślono w funkcji stężenia inhibitora i określono interpolacyjnie IC50TT.
IC50TT jest stężeniem inhibitora podwajającym czas krzepnięcia trombiny w ludzkim osoczu.
Określenie czasu aktywowanej częściowej tromboplastyny (APTT)
APTT określono w zebranym zwykłym ludzkim osoczu przy pomocy reagentu PTT Automated 5 produkcji Stago. Dodano inhibitory do osocza (10 pl roztworu inhibitora do 90 pl osocza) i określono APTT w mieszaninie stosując analizator koagulacji KC10 (Amelung) według instrukcji producenta reagentu. Czas krzepnięcia w sekundach wykreślono w funkcji stężenia inhibitora i określono interpolacyjnie IC50APTT.
IC50APTT jest stężeniem inhibitora w osoczu podwajającym czas aktywowanej częściowej tromboplastyny.
Określenie czasu trombiny ex vivo
Inhibicję trombiny po doustnym podawaniu związków zbadano na żywych szczurach, które na 2 dni przed eksperymentem wyposażono w kateter do próbkowania krwi z tętnicy szyjnej. W dniu eksperymentu próbki krwi pobierano w ustalonych odstępach po podaniu związku do plastikowych probówek zawierających 1 część roztworu azotanu sodu (0,13 mol/1) i 9 części
181 968
113 krwi. Probówki odwirowano otrzymując osocze ubogie w płytki. Osocza użyto do określenia czasu trombiny, jak opisano poniżej.
Osocze szczura z cytrynianem, 100 μΐ, rozcieńczono roztworem solanki, 0,9% 100 μΐ, i rozpoczęto koagulację osocza przez dodanie ludzkiej trombiny (T 6769, Sigma Chem Co USA) w roztworze buforowym, pH 7,4 100 μΐ. Czas krzepnięcia mierzono w automatycznym urządzeniu (KC 10, Amelumg, Niemcy).
Określenie stałej inhibicji Kt dla kallikreiny osocza
Określenie Kj wykonano metodą podłoża chromogeniczego na analizatorze wirówkowym Cobas Bio produkcji Roche (Basel, Szwajcaria). Określono resztową aktywność enzymu po inkubacji kallikreiny ludzkiego osocza przy różnych stężeniach badanego związku dla trzech różnych stężeń podłoża, mierzonąjako zmianę optycznej absorbancji przy długości 405 nm i 37°C.
Kallikreinę ludzkiego osocza (E.C.3.4.21.34, Chromogenix AB, Mólndal, Szwecja), 250 μΐ przy 0,4 nkat/ml w buforze (0,05 mol/1 Tris-HCl, pH 7,4 adiustowane 0,15 mol/1 NaCl) z albuminą bydlęcą5 g/1 (kat. nr 810033, ICI Biochemicals Ltd, High Wycombe, Bucks, Wielka Brytania), inkubowano przez 300 s z 80 μΐ roztworu związku badanego w 0,15 mol/1 NaCl zawierającego 10 g/1 albuminy. W tym etapie dodano 10 μΐ wody. Następnie dodano 40 μΐ podłoża kallikreiny (S-2302, Chromogenix AB, 1,25, 2,0 lub 4,0 mmol/1 w wodzie) wraz z kolejnymi 20 μΐ wody, i obserwowano zmianę absorbancji.
K] obliczono z wykresów Dixona, to jest diagramów stężenia inhibitora względem l/(A/min, gdzie dane dla różnych stężeń podłoża tworzą proste linie przecinające się przy X = -Kj.
SKRÓTY
Ac aq Aze beta Pic Boc Boc-Dig(Z)
Boc-Mig(Z)
Boc-Pig(Z)
Boc-Pig(Z)2=
Solanka Bn Bu
Cgl Cha CME-CDI
DBU DCC DCU DMAP DMF DMSO EDC Et EtOAc EtOH Gly = acetyl = wodny = kwas azetydyno-2-karboksylowy = kwas piperydyno-3-karboksylowy = tert-butyloksykarbonyl = 3-(N-tert-butyloksykarbonyloaminoetylo)-l -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna
- 3 -(N-tert-butyloksykarbonylo-aminometylo)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-azetydyna = 4-(N-tert-butyloksykarbonylo-aminometylo)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-piperydyna
4-(N-tert-butyloksykarbonylo-aminometylo)-1 -(N,N'-dibenzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna = nasycony wodny roztwór NaCl = benzyl = butyl = Cykloheksyloglicyna = β-cykloheksyloalanina = 1 -Cykloheksylo-3-(2-morfolinoetylo)karbodiimidometylo-p-toluenosulfonian = 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-en = dicykloheksylokarbodiimid = dicykloheksylomocznik = N,N-dimetyloaminopirydyna
- dimetyloformamid = dimetylosulfotlenek = Chlorowodorek l-(3-Dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu = etyl = octan etylu = etanol = glicyna
114
181 968
h = godziny
Hel = kwas chlorowodorowy
Heks = heksyl
HOAc = kwas octowy
HOBt = N-hydroksybenzotriazol
Hoc = Homocykloheksyloalanina
Hop = Homofenyloalanina
HOSu = N-hydroksysukcynimid
H-Dig(Z) = 3-aminoetylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna
H-Dig = 3-aminoetylo-1-amidynoazetydyna
H-(R, S)Hig(Z) = (3RS)-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-3-aminoetylopirolidyna
H-(R, S)Hig = (3 RS)-1 -amidyno-3-aminoetylopirolidyna
H-Hig = l-amidyno-3-aminoetylopirolidyna
H-(R, S)Itp(Ts) = (4RS)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-aminoetylocykloheksanu
H-(R, S)Itp = (4RS)-1,3-diaza-2-imino-4-aminoetylocykloheksanu
H-(S)Itp(Ts) = (4S)-1,3-diaza-2-tosylimino-4-aminoetylocykloheksan
H-(5)Itp = (4S)-1,3-diaza-2-imino-4-aminoetylocykloheksan
H-Itp = 1,3-diaza-2-imino-4-aminoetylocykloheksan
H-Mig(Z) = 3-aminometylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)azetydyna
H-Mig = 3-aminometylo-1-amidynoazetydyna
H-(R, S)Nig(Z) = (3RS)- l-(N-benzyloksykarbonylamidyno)-3-aminometylopirolidyna
H-(R, S)Nig = (3RS)-1 -amidyno-3 -aminometylopirolidyna
H-Nig = 1 -amidyno-3-aminometylopirolidyna
H-Pab = l-amidyno-4-aminometylobenzen
H-Pab(Z) = 4-aminometylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)benzen
H-Pac = 1 -amidyno-4-aminometylocykloheksan
H-Pac(Z) = 4-aminometylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)cykloheksan
H-Pig = 4-aminometylo-1-amidynopiperydyna
H-Pig(Z) = 4-aminometylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)-piperydyna
H-Pig(Z)2 = 4-aminometylo-1 -(N,N-dibenzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna
H-Rig(Z) = 4-aminoetylo-1 -(N-benzyloksykarbonyloamidyno)piperydyna
H-Rig = 4-aminoetylo-1 -N-amidynopiperydyna
Me = metyl
MeOH = metanol
Mpa = megapaskal
Ms = mezyl
NMM = N-metylomorfolina
Pd/C = pallad na węglu
Pgl = fenyloglicyna
Phe = fenyloalanina
Pic = kwas pipekolinowy
Pro = prolina
RPLC = Wysokowydajna chromatografia cieczowa z odwróconymi fazami
Tf = trifluorometylosulfonyl
TFA = kwas trifluorooctowy
THF = tetrahydrofuran
Tic = 1 -karboksy-1,2,3,4-tetrahydroizochinolina
sT = tosyl
Val = walina
Z = benzyloksykarbonyl
Przedrostki n, s i oraz t mają zwykłe znaczenia: normalny, izo, drugorzędowy i trzeciorzę-
dowy. Stereochemia aminokwasów jest domyślnie (S) jeśli nie podano inaczej.
181 968
115
Skróty, ciąg dalszy (linie faliste na atomach azotu w poniższych wzorach strukturalnych oznaczają pozycje związania fragmentu).
Pab (n=l)
Pig (n=l)
Rig (n=2)
Itp (n=2)
Nig (n=l)
Hig (n=2)
Mig (n=l)
Dig (n=2)
181 968
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 6,00 zł.

Claims (61)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Nowa pochodna peptydowa o wzorze ogólnym A1 - A2 - NH - (CH2)n - B
    Wzórl w którym:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, Ilb, lic lub lid;
    Ha
    lic
    Ud w którym:
    k jest liczbą całkowitą 0,1, 2, 3 lub 4;
    q jest liczbą całkowitą 0, 1,2 lub 3;
    Rl reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub RnOOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupąRl7-(CH2)p-, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R12 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 6 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COOR12)-CH2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    181 968
    R1 reprezentuje RI4SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2? Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a R14 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15jestgrupąalkilowąmającą 1-4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje -CO-(CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową która może, lecz nie musi być podstawiona grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
    R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0,1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową
    R4 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, Illb lub Hic
    w którym:
    p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    m jest liczbą całkowitą 1, 2,3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową lub
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla;
    n jest liczbą całkowitą 0, 1,2, 3 lub 4:
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
    181 968
    IVb IVc
    IVa w którym:
    r jest liczbą całkowitą 0 lub 1:
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
    X3 reprezentuje NH, ONH, N-C(NH)-NH2, CH-C (NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C (NH)-NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  2. 2. Pochodna peptydową według zastrz. 1, w której A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila lub Hb.
  3. 3. Pochodna peptydową według zastrz. 1, albo 2, w której R1 reprezentuje R11 OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H.
  4. 4. Pochodna peptydową według zastrz. 3, w której A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia.
  5. 5. Pochodna peptydową według zastrz. 3, w której A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Illb.
  6. 6. Pochodna peptydową według zastrz. 4, albo 5, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentująCH2, X3 reprezentuje CH-C(NH)-NH2, r wynosi 1 i n wynosi 1.
  7. 7. Pochodna peptydową według zastrz. 4, albo 5, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentująCH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1 i n wynosi 1 lub 2.
  8. 8. Pochodna peptydową według zastrz. 4, albo 5, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym R5 reprezentuje C(NH)-NH2, R6 reprezentuje H i n wynosi 1.
  9. 9. Pochodna peptydową według zastrz. 4, albo 5, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 i X3 reprezentująNH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1 i n wynosi 2.
  10. 10. Pochodna peptydową według zastrz. 4, albo 5, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 i n wynosi 1 lub 2.
  11. 11. Pochodna peptydową według zastrz. 1, w której n wynosi 1 lub 2, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R1 'OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentująCH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2 lub CH-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1, albo X1 i X3 reprezentująNH,
    181 968
    X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1, albo X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0.
  12. 12. Pochodna peptydowa według zastrz. 1, w której n wynosi 1, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje RnÓOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ula, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2 i R6 wynosi H.
  13. 13. Pochodna peptydowa według zastrz. 1, którą wybiera się spośród:
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2(R)Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab
    H-(R)Cgl-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab
    H-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S) CH (COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/a
    HOOC-CH2-(R lub S) CH (COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    H-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S) CH (COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/a
    HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/b HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab Ph(4-COOH)-SO2(R) Cha-Pro-Pab H-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pic-Pab/a
    HOOC-CH2-(R lub S) CH(COOH)-(R) Cha-Pic-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    Me-OCC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    H2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    Boc-(R) Cha-Pic-Pab
    Ac-(R) Cha-Pic-Pab
    Me-SO2-(R) Cha-Pic-Pab
    H-(R) Cha-(R,S) beta Pic-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R,S) beta Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Val-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Val-Pab
    H-(R) Hoc-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab
    181 968
    HOOC-CH2-(R,S) CH (COOH)-(R) Hoc-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Pro (3-(S) Ph)-Pro-Pab
    HOOC-CH2CH2-(R) Pro (3-(5)Ph)-Pro-Pab
    HOOC-CH2CH2-(R) Tic-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
    H-(R) Cha-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac
    H-(R) Cha-Pro-Pac
    H-(R) Cgl-Ile-Pab
    H-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-(R, S) CH(Me)-(R) Cha-Pro-Pab
    MeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nBuOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nHeksOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    H-(R) Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac
    HOOC-CH2-(R) Chn-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig
    HOOC-CH2-CH,-(R) Cha-Pro-Pig (HOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig
    HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-(R, S) Itp
    HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-(R, S) Itp
    H-(R) Cha-Pic-(R,S) Itp
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp
    H-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig
    H-(R) Cha-Pro-(R, S) Hig
    H-(R) Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-(S) Itp
    H-(R) Cha-Pro-(R, S) Nig
    H-(R) Cha-Pro-Mig
    H-(R) Cha-Pro-Dig
    H-(R) Cha-Aze-Dig jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  14. 14. Pochodna peptydowa według zastrz. 13, którą wybiera się spośród:
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    181 968
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  15. 15. Pochodna peptydowa według zastrz. 1, którą wybiera się spośród:
    H-(R) Pro-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab
    H-(R) Phe-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R) Phe-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R) Phe-Phe-Pab jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  16. 16. Pochodna peptydowa o wzorze ogólnym
    A1 - A2 - NH - (CH2)n - B - D
    Wzór V gdzie:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ha, Ilb, lic lub Ud;
    Ilb
    Ud w którym:
    kjest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    q jest liczbą całkowitą 0, 1, 2 lub 3;
    R1 reprezentuje RHOOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupą R^-fCH^p-, w której p wynosi 0,1, lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R12 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową, a R11 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 6 atomów węgla lub grupę benzylową lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COOR12)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    181 968
    R1 reprezentuje R14SO2-> Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-> gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a R14 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje -CO-(CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową który może, lecz nie musi być podstawiony grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
    R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupąOR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0,1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cyklohekyl- lub grupę fenylową;
    R4 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową;
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, nib lub IIIc
    w którym:
    p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    mjest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową, lub
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
    181 968
    IVb IVc
    IVa w którym:
    r jest liczbą całkowitą 0 lub 1;
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
    X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C(NH)-NH2 lub NH-C(NH)-NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    D reprezentuje Z lub (Z)2,
    Z reprezentuje grupę benzyloksykarbonylową, która wiąże do amidynowych lub guanidynowych azotów obecnych w B jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  17. 17. Pochodna peptydowa według zastrz. 16, w którym A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ha lub Ilb.
  18. 18. Pochodna peptydowa według zastrz. 16, albo 17, w którym R1 reprezentuje R1 *OCC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H.
  19. 19. Pochodna peptydowa według zastrz. 18, w której A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia.
  20. 20. Pochodna peptydowa według zastrz. 18, w której A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IHb.
  21. 21. Pochodna peptydowa według zastrz. 19, albo 20, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentująCH2, X3 reprezentuje CH-C(NH)-NH2, r wynosi 1 i n wynosi 1.
  22. 22. Pochodna peptydowa według zastrz. 19, albo 20, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1 i n wynosi 1 lub 2.
  23. 23. Pochodna peptydowa według zastrz. 19, albo 20, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2, R6 reprezentuje H i n wynosi 1.
  24. 24. Pochodna peptydowa według zastrz. 19, albo 20, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 i X3 reprezentująNH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1 i n wynosi 2.
  25. 25. Pochodna peptydowa według zastrz. 19, albo 20, w której B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 i n wynosi 1 lub 2.
  26. 26. Pochodnapeptydowa według zastrz. 16, w której n wynosi 1 lub 2, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ha w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R1 ’OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze lila, a którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B
    181 968 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2 lub CH-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1, albo X1 i X3 reprezentują NH, X2 reprezentuje C-NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1, albo X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0.
  27. 27. Pochodna peptydowa według zastrz. 16, w której n wynosi 1, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R1 OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2 i R6 wynosi H.
  28. 28. Pochodna peptydowa według zastrz. 16, którą wybiera się spośród:
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R) Cgl-Pic-Pab (Z)
    BnGOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R lub S)CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z) /a
    BnOOC-CH2-(R lub S)CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z) /b BnOOC-CH2CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R, S) CH(CCOBn)-(R) Cha-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) Ph(4-COOH)-SO2-(R) Cha-Pro-Pab (Z) Boc-(R) Cha-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R) Cha-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z) EtOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab (Z) MeOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab (Z) H2N-CO-CH2(R) Cha-Pic-Pab (Z) Ac-(R) Cha-Pic-Pab (Z) Me-SO2-(R) Cha-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Cha-Val-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R, S) Val-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Hoc-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z) BnOOC-CH2-(R) Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2CH2-(R) Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Tic-Pro-Pab (Z) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig (Z)2 BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)2 BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac (Z)
    181 968
    BnOOC-(R, S) CH(Me)-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    MeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nBuOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nHekśOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp (Z)
    BnOOC-CH2- (R) Cgl-Pro-(R, S) Hig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig (2)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  29. 29. Pochodna peptydowa według zastrz. 28, którą wybiera się spośród:
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)2
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  30. 30. Pochodna peptydowa według zastrz. 16, którą wybiera się spośród:
    Boc-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
    Boc-(R)Phe-Phe-Pab (Z)
    MeOOC-CO-(R)-Phe-Phe-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab (Z) jako taka lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  31. 31. Sposób wytwarzania pochodnych peptydowych o wzorze ogólnym
    A1 - A2 - NH - (CH2)n - B
    Wzór I w którym:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, Ilb, lic lub Ud;
    Ilb
    lic
    181 968
    w którym:
    kjest liczbą całkowitą O, 1, 2, 3 lub 4;
    q jest liczbą całkowitą O, 1, 2 lub 3;
    R1 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub R”OOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupą R17-(CH2)p-, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R12 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 6 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COORI2)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje RI2OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COORl2)-SO2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, aR14 jest grupą alkilową mającą 1-4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje-CO-R15, wktórymRl5jestgrupąalkilowąmającą 1-4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentują -CO-iCH^p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R12 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową który może, lecz nie musi być podstawiony grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
    R3 reprezentuje 3-pirolidy 1, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0, 1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową;
    R4 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową;
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, lUb lub IIIc
    181 968
    w którym:
    p jest liczbą całkowitą O, 1 lub 2;
    m jest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową lub
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub Ivc
    IVa IVb IVc w którym:
    r jest liczbą całkowitą 0 lub 1;
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
    X3 reprezentuje NH, ONH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C(NH)-NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    jako takich lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, znamienny tym, że
    181 968
    a) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    W1 -- A1 --- A2 --OH
    w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę amino, takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q’ reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2, -N (W2) -C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową taką jak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q’ reprezentuje -CN, -CO-NH2 lub -CS-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynową albo Q’ reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynową dla Q1=NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q' reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, znanymi sposobami; lub
    b) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    w którym n, W1 i Q' sątakie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie a) powyżej; lub
    c) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    1 17
    W* -- A1 --- A“ OH
    H,N-(CH,)nq' ▼
    W1 -- a1 -- A2 -- NH-(CH2) n--ΛΛ— Q 1
    181 968 w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową, taką jak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q' reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2, -N(W2)-C(NH) -NH -W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminowa, taką jak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q* reprezentuje -CN, -CO-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynową albo Q* reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynowądla Q! -NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q' reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, znanymi sposobami; lub
    d) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony amkinokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    W 1 --- A2 ---OH
    w którym n, W1 i Q* są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-teminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie
    c) powyżej; lub
    e) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A* i A2 we wzorze I i standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    W1 -- A1 --- A2 ---OH
    NH-(CH
    (CH2)r— χ4^
    N-Q2 w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I i r wynosi 0,1 gdy X1, X2 i X4 reprezentują CH2 lub r wynosi 0 gdy X2 i X4 reprezentująCH2 i X1 nie występuje, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającąN-terminalnągrupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl ibenzyloksykarbonyl, a O2 reprezentuje -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, lub C(NH)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, lub Q2 reprezentuje W2, gdzie grupę aminową, po odbezpieczaniu grupy W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, przekształca się następnie w grupę guanidinową stosując niezabezpieczony, N-zabezpieczony lub N,N'-di-zabezpieczony reagent guanidacji znanymi sposobami; lub
    181 968
    f) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybrany spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem w 1 --- A2 ---OH
    H2N-(CH2)n— (CH2)r —
    X1-----
    (CH )r — χ4
    NH-(CH2)n-< N-Q2 'X1 -- X2w którym n, r, X1, X2 i X4, W1 i Q2 są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-teminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie e) powyżej,
    g) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    1 1 7
    W1 A1 A OH
    w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze I, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową taką jak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, i W3 reprezentuje H lub grupę zabezpieczającą grupę aminową taką jak arylosulfonyl, benzyloksykarbonyl lub tert-butyloksykarbonyl; lub
    h) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze I standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    181 968
    1 2
    W 1 --- A ---OH
    ---A' --- NH-(CH9)n--
    w którym n, W1 i W3 są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie g), przy czym końcowe związki wytwarza się w jakikolwiek następujący sposób, w zależności od natury użytej grupy Q’ lub Q2: usuwa się grupy zabezpieczające gdy Q’= -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH- C(NH) -NH2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, lub selektywne odbezpiecza się grupę W1, zwłaszcza gdy Q’ lub O2 = C(NW2)-NH-W2, -(CNH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1 i następnie alkiluje się N-terminalny azot i w razie potrzeby odbezpiecza.
  32. 32. Sposób wytwarzania pochodnych peptydowych o wzorze ogólnym
    A1 - A2 - NH - (CH2)n - B - D
    WzórV gdzie:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, Ilb, lic lub Ud;
    Ha
    w którym:
    k jest liczbą całkowitą 0, 1,2, 3 lub 4;
    181 968 q jest liczbą całkowitą O, 1, 2 lub 3;
    R1 reprezentuje RnOÓC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupą R17-(CH2)p-, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R2 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową a R11 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 6 atomów węgla lub grupę benzylową lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COOR12)-CH2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, a R14 jest grupą alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupą alkilowąmającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje -CO-(CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową
    R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową który może, lecz nie musi być podstawiona grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0,1, lub
    R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0, 1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową
    R4 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, IHb lub IIIc
    w którym:
    pjest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    m jest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową lub
    181 968
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
    IVa IVb IVc w którym:
    r jest liczba całkowitą 0 lub 1;
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
    X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C(NH)-NH2 lub NH-C(NH)-NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    D reprezentuje Z lub (Z)2,
    Z reprezentuje grupę benzyloksykarbonylową, która wiąże do amidynowych lub guanidynowych azotów obecnych w B jako takich lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli, znamienny tym, że
    a) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    W1 -- A1 --- a2 ---OH
    w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze V, W1 reprezentuje grupę zabezpieczaj ącąN-terminalną grupę amino, takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q*
    181 968 reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH- C(NH) -NHW2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q’ reprezentuje -CN, -CO-NH2 lub -CS-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynową, albo Q' reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynową dla Q1= -NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q* reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, znanymi sposobami; lub
    b) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    W 1 --- A2 ---OH
    w którym n, W1 i Q’ są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się z N-terminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie a) powyżej.
    c) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    1 1 9
    W1 A1 --- a2 OH
    w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze V, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q* reprezentuje -C(NH)-NH2, C(NW2)-NH-W2, - C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NHC(MH)-NHW2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, albo Q’ reprezentuje -CN, -CO-NH2 lub -CS-NH2, przy czym grupę przekształca się następnie w grupę amidynowąalbo Q* reprezentuje NH2 lub NH-W2, gdzie W2 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, przy czym grupę aminową przekształca się następnie w grupę guanidynową dla Q’= - NH-C(NH)-NH2, po odbezpieczenie grupy W2 gdy Q* reprezentuje -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, znanymi sposobami; lub
    d) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    181 968 w1 -- A2 --OH
    H,N<CH2)n—<θ—O1 ¥
    w1 -- A2 -- NH-(CH,)n--ΛΛ— Q' w którym n, W1 i ę1 są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-teminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie c) powyżej,
    e) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze V i standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    1 1 7 w1 A* A OH
    , 2 /CH2>r~X4\ 2
    -- A -- A --- NH-(CH?)n--< N-Q2 “ ^Xl — χ*·w którym n jest takie, jak zdefiniowano we wzorze V i r wynosi 0,1 gdy X1, X2 i X4 reprezentują CH2 lub r wynosi 0 gdy X2 i X4 reprezentują CH2 i X1 nie występuje, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającąN-terminalną grupę aminową takąjaktert-butyloksykarbonyl i benzyloksykarbonyl, a Q2 reprezentuje -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, lub C(NH)-NH-W2, gdzie W2 reprezentuje grupę zabezpieczającą grupę aminową takąjak tert-butyloksykarbonyl lub benzyloksykarbonyl, lub O2 reprezentuje W2, gdzie grupę aminową po odbezpieczaniu grupy W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1, przekształca się następnie w grupę guanidynową stosując niezabezpieczony, N-zabezpieczony łub NJ^-di-zabezpieczony reagent guanidacji znanymi sposobami,
    f) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybrany spośród A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    181 968
    W 1 --- a2 ---OH
    (CH2)r — X4^
    NH-(CH2)n —< N-Q2 XXl -w którym n, r, X1, X2 i X4, W1 i Q2 są takie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga z N-teminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie e) powyżej; lub
    g) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony dipeptyd, wybrany spośród A1 i A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego, zgodnie ze schematem
    1 1 ?
    w1 A1 --- a2 ---OH
    H2N-(CH2)n
    1 a1 *2
    W -- A --A --- NH-(CH2)n
    w którym njest takie, jak zdefiniowano we wzorze V, W1 reprezentuje grupę zabezpieczającą N-terminalną grupę aminową, takąjak tert-butyloksykarbonyl i benzyloksykaibonyl, i W3 reprezentuje H lub grupę zabezpieczającą grupę aminową, takąjak arylosulfonyl, benzyloksykarbonyl lub tert-butyloksykarbonyl; lub
    h) sprzęga się N-terminalnie zabezpieczony aminokwas, wybranego spośród A2 we wzorze V standardową metodą sprzęgania peptydowego zgodnie ze schematem
    181 968
    1 2
    W 1 --- A ---OH
    H2N-(CH
    NH-(CH2)n--
    j w którym n, W1 i W3 sątakie, jak zdefiniowano powyżej, a następnie odbezpiecza się grupę W1 i sprzęga się zN-teminalnym aminokwasem w postaci zabezpieczonej, co prowadzi do otrzymania zabezpieczonego peptydu opisanego w sposobie g); przy czym końcowe związki wytwarza się w jakikolwiek następujący sposób, w zależności od natury użytej grupy Q' lub O2: usuwa się grupy zabezpieczające (gdy Q - -C(NH)-NH2, -C(NW2) -NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH) -NH2 -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2-C(NH)-NH-W2 lub -NH-C(NW2) -NH-W2), lub selektywne odbezpiecza się grupę W1 zwłaszcza, gdy O1 lub O2 = C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH) -NH-W2, -N(W2)C(NH) -NH-W2 lub -NH-C(NW2) -NH-W2, przy czym W2 jest wtedy ortogonalne do W1 i następnie alkiluje się N-terminalny azot i w razie potrzeby odbezpiecza.
  33. 33. Kompozycja farmaceutyczna do stosowania jako środek antykoagulacyjny, przeciwzakrzepowy lub przeciwzapalny, zawierająca substancję czynnąw połączeniu z jednym lub wieloma farmaceutycznymi nośnikami, znamienna tym, że jako substancję czynnązawiera skuteczną dawkę związku o wzorze ogólnym
    A1 - A2 - NH - (CH2)n - B
    Wzórl w którym:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ha, Rb, lic lub Ud;
    IIa Hb iic
    Ud
    181 968 w którym:
    kjest liczbą O, 1, 2, 3 lub 4;
    q jest liczbą całkowitą O, 1, 2 lub 3;
    R1 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, lub RnOOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupąR17-(CH2) -, w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12 gdzie R*2 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H lub grupę alkilowąmającą 1 do 6 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COORI2)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R* reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R12OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, aR14 jest grupąalkilową mającą 1-4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupąalkilowąmającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie jak, zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje -CO-(CH2)p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilowąmającą 1-4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi, nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową który może, lecz nie musi być podstawiony grupą alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0, 1, lub
    R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0, 1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową
    R4 reprezentuje H, grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, Hlb lub IIIc
    Ilia Hlb IIIc w którym:
    p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    181 968 m jest liczbą całkowitą 1,2, 3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową lub
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenową i powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilowąz 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla;
    n jest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
    IVa IVb IVc w którym:
    r jest liczbą całkowitą 0 lub 1;
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub ONH;
    X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH) -NH2, CH-C(NH) -NH2, CHNH-C(NH) -NH2 lub CH-CH2-C(NH) -NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C(NH) -NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  34. 34. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w którym A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila lub Ilb.
  35. 35. Kompozycja według zastrz. 33, albo 34, znamienna tym, żejako substancję czynnązawiera związek, w którym R1 reprezentuje ROOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H.
  36. 36. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, żejako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia.
  37. 37. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, żejako przeciwzapalną substancję czynną zawiera związek, w którym A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Illb.
  38. 38. Kompozycja według zastrz. 36, albo 37, znamienna tym, żejako substancję czynnązawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje CH-C(NH) -NH2, r wynosi 1 i n wynosi 1.
    181 968
  39. 39. Kompozycja według zastrz. 36, albo 37, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH) -NH2, r wynosi 0 lub 1 i n wynosi 1 lub 2.
  40. 40. Kompozycja według zastrz. 36, albo 37, znamienna tym, że jako substancję czynnązawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH) -NH2, R6 reprezentuje H i n wynosi 1.
  41. 41. Kompozycja według zastrz. 36, albo 37, znamienna tym, że jako substancję czynnązawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 i X3 reprezentują NH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1 i n wynosi 2.
  42. 42. Kompozycja według zastrz. 36, albo 37, znamienna tym, że jako antykoagulacyjnąlub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH) -NH2, r wynosi 0 i n wynosi 1 lub 2.
  43. 43. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że jako antykoagulacyjnąlub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym n wynosi 1 lub 2, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje RnOOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje H, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentująCH2, X3 reprezentuje N-C(NH) -NH2 lub CH-C(NH) -NH2, r wynosi 0 lub 1, albo X1 i X3 reprezentują NH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1, albo X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH) -NH2, r wynosi 0.
  44. 44. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że jako antykoagulacyjnąlub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym n wynosi 1, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje RnOOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylowa, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje H, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH) -NH2 i R6 wynosi H.
  45. 45. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że jako antykoagulacyjnąlub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (HOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab
    H-(R) Cgl-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R, S) CH(COOH)-(R) Cgl-Pic-Pab
    H-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/a
    HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    H-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
    181 968
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/a HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R) Cha-Pro-Pab/b HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    Ph(4-COOH)-SO2-(R) Cha-Pro-Pab
    H-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R)( Cha-Pic-Pab/a
    HOOC-CH2-(R lub S)CH(COOH)-(R) Cha-Pic-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    Me-OOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab
    H2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    Boc-(R) Cha-Pic-Pab
    Ac-(R) Cha-Pic-Pab
    Me-SO2-(R) Cha-Pic-Pab
    H-(R) Cha-(R,S)beta Pic-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R, S) betaPic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Val-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Val-Pab
    H-(R) Hoc-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R) Hoc-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab HOOC-CH2-(R) Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab HOOC-CH2-CH2-(R) Pro(3-(5) Ph)-Pro-Pab HOOC-CH2-CH2-(R) Tic-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
    H-(R) Cha-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac
    H-(R) Cha-Pro-Pac
    H-(R) Cgl-Ile-Pab
    H-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-(R, S)CH(Me)-(R) Cha-Pro-Pab
    MeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nBuOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab nHeksOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab H-(R) Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac
    HOOC-CH2-(R) Chn-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig
    HOOC-CH2-CHr(R)Cha-Pro-Pig (HOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig
    181 968
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-(R, S) Itp
    HOOC-CH2-(R) Cha-Aze-(R, S) Itp
    H-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp
    H-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig
    H-(R) Cha-Pro-(R, S) Hig
    H-(R) Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig
    HOOC-CH2 -(R) Cha-Pro-(S) Itp
    H-(R) Cha-Pro-(R, S) Nig
    H-(R) Cha-Pro-Mig
    H-(R) Cha-Pro-Dig
    H-(R) Cha-Aze-Dig jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  46. 46. Kompozycja według zastrz. 45, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznei dopuszczalnej soli.
  47. 47. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że jako przeciwzapalną substancję C2ynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    H-(R) Pro-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab
    H-(R) Phe-Phe-Pab
    HOOC-CO-(R) Phe-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R) Phe-Phe-Pab jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  48. 48. Kompozycja farmaceutyczna do stosowania jako środek antykoagulacyjny, przeciwzakrzepowy lub przeciwzapalny zawierająca substancję czynną w połączeniu z jednym lub wieloma farmaceutycznymi nośnikami, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera skuteczną dawkę związku o wzorze ogólnym
    A1 - A2 - NH - (CH2)n - B - D
    WzórV gdzie:
    A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ha, Ilb, lic lub lid;
    181 968
    Ud w którym:
    k jest liczbą całkowitą O, 1, 2, 3 lub 4;
    q jest liczbą całkowitą 0,1, 2 lub 3;
    R1 reprezentuje R11OOC-alkil, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i może być podstawiona w pozycji alfa do grupy karbonylowej, a podstawnik alfa jest grupą R17-(CH2)n w której p wynosi 0,1 lub 2 i R17 reprezentuje metyl, fenyl, OH, COOR12, COONHR12, gdzie R2 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową, a R11 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 6 atomów węgla lub grupę benzylową, lub
    R1 reprezentuje Ph(4-COOR12)-CH2-, gdzie R12jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R13-NH-CO-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R13 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub -CH2COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje Rl2OOC-CH2-OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i jest ewentualnie podstawiona w położeniu alfa do karbonylu grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje R14SO?-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)SO2-, Ph(2-COOR12)-SO2-, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, aR14 jest grupą alki Iową mającą 1-4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-R15, w którym R15 jest grupąalkilowąmającą 1 -4 atomów węgla, lub
    R1 reprezentuje -CO-OR15, gdzie R15 jest takie, jak zdefiniowano powyżej, lub
    R1 reprezentuje -CO-^H^p-COOR12, gdzie R12 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i p jest liczbą całkowitą 0, 1 lub 2;
    R2 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla lub R21OOC-alkil-, gdzie grupa alkilowa ma 1 do 4 atomów węgla i, gdzie R21 reprezentuje H, grupę alki Iową mającą 1 do 4 atomów węgla lub grupę benzylową;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 -4 atomów węgla, i grupa alkilowa może, lecz nie musi nieść jeden lub większą liczbę atomów fluoru, lub
    R3 reprezentuje cyklopentyl, cykloheksyl- lub grupę fenylową, który może, lecz nie musi być podstawiona grupą alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R3 reprezentuje grupę fenylową podstawioną OR31, gdzie R31 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla i k oznacza 0,1, lub
    181 968
    R3 reprezentuje 3-pirolidyl, który może, lecz nie musi być podstawiony grupą OR31, gdzie R31 jest takie, jak zdefiniowano powyżej i k wynosi 0, 1, lub
    R3 reprezentuje Si(Me)3 lub CH(R32)2, w którym R32 reprezentuje cykloheksyl- lub grupę fenylową;
    R4 reprezentuje H, grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cykloheksyl- lub grupę fenylową;
    A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, Illb lub IIIc
    w którym:
    p jest liczbą całkowita 0, 1 lub 2;
    m jest liczbą całkowitą 1, 2, 3 lub 4;
    Y reprezentuje grupę metylenową, lub
    Y reprezentuje grupę etylenową i powstający 5-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść jeden lub dwa atomy fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso w pozycji 4, lub może, lecz nie musi być nienasycony, lub
    Y reprezentuje grupę n-propylenowąi powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 5 atom fluoru, grupę hydroksylową lub grupę okso, dwa atomy fluoru w jednej z pozycji 4 lub 5 lub być nienasycony w pozycji 4 i 5, lub nieść w pozycji 4 grupę alkilową z 1 do 4 atomów węgla;
    R3 reprezentuje grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, cyklopentyl, cykloheksyl lub fenyl;
    R5 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla, lub
    R5 reprezentuje -(CH2)p-COOR51, gdzie p wynosi 0,1 lub 2 i R51 reprezentuje H lub grupę alkilowa mającą 1 do 4 atomów węgla;
    njest liczbą całkowitą 0, 1, 2, 3 lub 4;
    B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, IVb lub IVc
    IVa IVb IVc w którym:
    r jest liczba całkowitą 0 lub 1;
    X1 reprezentuje CH2, NH lub nie istnieje;
    X2 reprezentuje CH2, NH lub C=NH;
    181 968
    X3 reprezentuje NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CHNH-C(NH)-NH2 lub CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 reprezentuje CH2 lub NH;
    X5 reprezentuje C(NH)-NH2 lub NH-C(NH)-NH2;
    R6 reprezentuje H lub grupę alkilową mającą 1-4 atomy węgla;
    D reprezentuje Z lub (Z)2,
    Z reprezentuje grupę benzyloksykarbonylową, która wiąże do amidynowych lub guanidynowych azotów obecnych w B jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  49. 49. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w którym A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila lub Ilb.
  50. 50. Kompozycja według zastrz. 48, albo 49, znamienna tym, że jako substancje czynnązawiera związek, w którym R1 reprezentuje R11 OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, a R11 reprezentuje H.
  51. 51. Kompozycja według zastrz. 50, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancje czynną zawiera związek, w którym A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia.
  52. 52. Kompozycja według zastrz. 50, znamienna tym, że jako przeciwzapalną substancję czynną zawiera związek, w którym A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Illb.
  53. 53. Kompozycja według zastrz. 51, albo 52, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentuje CH2, X3 reprezentuje CH-C(NH)-NH2, r wynosi 1 i n wynosi 1.
  54. 54. Kompozycja według zastrz. 51, albo 52, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1 i n wynosi 1 lub 2.
  55. 55. Kompozycja według zastrz. 51, albo 52, znamienna tym, że jako substancję czynnązawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2, R6 reprezentuje H i n wynosi 1.
  56. 56. Kompozycja według zastrz. 51, albo 52, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek, w któiym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w X1 i X3 reprezentują NH, X2 reprezentuje C=NH, X4 reprezentuje CH2, r wynosi 1 i n wynosi 2.
  57. 57. Kompozycja według zastrz. 51, albo 52, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2 X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0 i n wynosi 1 lub 2.
  58. 58. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym n wynosi 1 lub 2, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje R11 OOC-alkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może, lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilową mającą 1 do 4 atomów węgla R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVa, w którym X1, X2 i X4 reprezentuje CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2 lub CH-C(NH)-NH2, r wynosi 0 lub 1, albo X1 i X3 reprezentująNH, X2 reprezentujeC=NH, X4 reprezentuje CH2,r wynosi 1 albo X1 jest nieobecna, X2 i X4 reprezentują CH2, X3 reprezentuje N-C(NH)-NH2, r wynosi 0.
  59. 59. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, w którym n wynosi 1, A1 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ila, w którym k wynosi 0 lub 1, R1 reprezentuje RHOOC-aIkil-, w którym grupa alkilowa ma od 1 do 4 atomów węgla, R2 reprezentuje H, R3 reprezentuje grupę cykloheksylową, A2 reprezentuje strukturalny fragment o wzorze Ilia, w którym Y reprezentuje grupę metylenową, etylenową lub n-propylenową, a powstający 6-członowy pierścień może,
    181 968 lecz nie musi nieść w pozycji 4 grupę alkilowąmającą 1 do 4 atomów węgla, R5 reprezentuje Η, B reprezentuje strukturalny fragment o wzorze IVb, w którym X5 reprezentuje C(NH)-NH2 i R6 wynosi H.
  60. 60. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R,S) CH(COOBn)-(R) Cgl-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R lub S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)/a
    BnOOC-CH2-(R lub S) CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)/b
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    Ph(4-COOH)-SO2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    Boc-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    EtOOC-CO-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    MeOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    H2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    Ac-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    Me-SO2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Val-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-(R, S) Vał-PAb (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Hoc-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R, S) CH(COOBn)-(R) Hoc-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Hoc-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Pro(3-(S)-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Tic-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig (Z)2
    BnOOC-CH2-(R) Cgl Pro-Pig (Z)2
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac (Z)
    BnOOC-(R,S)CH (Me)-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    MeOOC-CH2(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nBuOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z) nHeksOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pac (Z)
    181 968
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) (BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R) Cha-Pro-Pig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-(R, S) Itp (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-(R, S) Hig (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pig (2)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Rig (Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Aze-Rig (Z) jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
    63. Kompozycja według zastrz. 60, znamienna tym, że jako antykoagulacyjną lub przeciwzakrzepową substancję czynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    BnOOC-CH2(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cgl-Pro-Pig (Z)2
    EtOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pac (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Cha-Pro-Pig (Z) jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
  61. 62. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że jako przeciwzapalną substancję czynną zawiera związek, który wybiera się spośród:
    Boc-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Pro-Phe-Pab (Z)
    Boc-(R) Phe-Phe-Pab (Z)
    MeOOC-CO-(R) Phe-Phe-Pab (Z)
    BnOOC-CH2-(R) Phe-Phe-Pab (Z) jako taką lub w postaci stereoizomerów, lub w postaci fizjologicznie dopuszczalnej soli.
    * * *
PL94311819A 1993-06-03 1994-06-02 Nowe pochodne peptydowe, sposób wytwarzania pochodnych peptydowych oraz kompozycje farmaceutyczne zawierajace pochodne peptydowe PL PL181968B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE19939301916A SE9301916D0 (sv) 1993-06-03 1993-06-03 New peptides derivatives
PCT/SE1994/000535 WO1994029336A1 (en) 1993-06-03 1994-06-02 New peptide derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL311819A1 PL311819A1 (en) 1996-03-18
PL181968B1 true PL181968B1 (pl) 2001-10-31

Family

ID=20390165

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL94311819A PL181968B1 (pl) 1993-06-03 1994-06-02 Nowe pochodne peptydowe, sposób wytwarzania pochodnych peptydowych oraz kompozycje farmaceutyczne zawierajace pochodne peptydowe PL

Country Status (39)

Country Link
US (4) US5602253A (pl)
EP (2) EP0701568B1 (pl)
JP (3) JP3205558B2 (pl)
KR (1) KR100339456B1 (pl)
CN (2) CN1099425C (pl)
AT (1) ATE200783T1 (pl)
BR (1) BR9406746A (pl)
CA (1) CA2162900C (pl)
CZ (1) CZ290104B6 (pl)
DE (3) DE701568T1 (pl)
DK (1) DK0701568T3 (pl)
EE (1) EE03264B1 (pl)
EG (1) EG20671A (pl)
ES (1) ES2128277T3 (pl)
FI (1) FI119812B (pl)
GR (1) GR3036258T3 (pl)
HR (1) HRP940311B1 (pl)
HU (2) HU0103039D0 (pl)
IL (2) IL123996A (pl)
IS (1) IS1805B (pl)
LT (1) LT3768B (pl)
LU (1) LU91173I2 (pl)
MX (1) MX9404114A (pl)
MY (1) MY119155A (pl)
NL (1) NL300178I2 (pl)
NO (2) NO314406B1 (pl)
NZ (1) NZ267534A (pl)
PL (1) PL181968B1 (pl)
PT (1) PT701568E (pl)
RS (1) RS49576B (pl)
RU (1) RU2142469C1 (pl)
SA (1) SA94150051B1 (pl)
SE (1) SE9301916D0 (pl)
SG (1) SG48013A1 (pl)
SI (1) SI0701568T1 (pl)
SK (1) SK283150B6 (pl)
TW (1) TW403731B (pl)
UA (1) UA65518C2 (pl)
WO (1) WO1994029336A1 (pl)

Families Citing this family (129)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
SE9900043D0 (sv) * 1999-01-11 1999-01-11 Astra Ab New use
US6984627B1 (en) * 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
CN1077886C (zh) * 1993-10-21 2002-01-16 G·D·瑟尔公司 用作一氧化一氮合酶抑制剂的脒基衍生物
JP4561696B2 (ja) * 1994-01-27 2010-10-13 三菱化学株式会社 プロリンアミド誘導体
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
ZA951617B (en) 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
CA2143533A1 (en) * 1994-03-04 1995-09-05 Kenneth D. Kurz Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
AU2790895A (en) * 1994-06-10 1996-01-05 Universitaire Instelling Antwerpen Purification of serine protease and synthetic inhibitors thereof
DE4421052A1 (de) * 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
DE4443390A1 (de) * 1994-12-06 1996-06-13 Basf Ag Neue dipeptidische p-Amidinobenzylamide mit N-terminalen Sulfonyl- bzw. Aminosulfonylresten
EA002767B1 (ru) * 1995-02-10 2002-08-29 Басф Акциенгезельшафт Ингибиторы тромбина
CZ245797A3 (cs) * 1995-02-17 1998-06-17 Basf Aktiengesellschaft Derivát amidinu dipeptidu jako inhibitor thrombinu
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5629324A (en) * 1995-04-10 1997-05-13 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5610308A (en) * 1995-05-18 1997-03-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing intermediates for thrombin inhibitors
US5523308A (en) * 1995-06-07 1996-06-04 Costanzo; Michael J. Peptidyl heterocycles useful in the treatment of thrombin related disorders
SA96170106A (ar) * 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
JP2008024720A (ja) * 1995-07-26 2008-02-07 Mitsubishi Chemicals Corp ペニシラミンアミド誘導体
KR100445094B1 (ko) * 1995-07-26 2005-06-17 미쓰비시 가가꾸 가부시키가이샤 페니실라민아미드유도체
DE69627184D1 (de) * 1995-12-09 2003-05-08 Akzo Nobel Nv 3-aminoethyl-n-amidino-2,5-dihydropyrrol derivative mit arginine-mimetischen eigenschaften
TWI238827B (en) * 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
GB9526273D0 (en) * 1995-12-21 1996-02-21 Astra Ab New prodrugs
SE9600216D0 (sv) * 1996-01-18 1996-01-18 Hans Arne Hansson Styrning av läkningsprocesser
EP1007544A1 (en) * 1996-02-13 2000-06-14 Akzo Nobel N.V. Serine protease inhibitors
IL120310A (en) * 1996-03-01 2002-02-10 Akzo Nobel Nv Serine protease inhibitors and pharmaceuticals containing them
IL120311A (en) * 1996-03-01 2001-10-31 Akzo Nobel Nv Serine protease inhibitors and pharmaceuticals containing them
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
SE9602145D0 (sv) * 1996-05-31 1996-05-31 Astra Ab New improved formulation for treatment of thromboembolism
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
CA2258915A1 (en) * 1996-06-25 1997-12-31 Michael Robert Wiley Anticoagulant agents
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
US6756389B2 (en) * 1996-08-09 2004-06-29 Cambridge Neuroscience, Inc. Pharmaceutically active compounds and methods of use
US5792761A (en) * 1996-08-12 1998-08-11 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
DE19632772A1 (de) * 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Benzamidine
DE19632773A1 (de) * 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren
IL121474A0 (en) * 1996-08-23 1998-02-08 Akzo Nobel Nv Thrombin inhibitors
SE9603724D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
US5798377A (en) * 1996-10-21 1998-08-25 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5869487A (en) * 1996-10-24 1999-02-09 Merck & Co., Inc. Pyrido 3,4-B!pyrazines for use as thrombin inhibitors
AR013084A1 (es) * 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
WO1999011657A1 (en) * 1997-08-29 1999-03-11 Proteus Molecular Design Ltd. 1-amino-7-isoquinoline derivatives as serine protease inhibitors
US6740682B2 (en) 1997-08-29 2004-05-25 Tularik Limited Meta-benzamidine derivatives as serine protease inhibitors
US6087373A (en) * 1997-09-23 2000-07-11 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
DE19755682A1 (de) * 1997-12-15 1999-06-17 Knoll Ag Verfahren zur Ermittlung eines Dosierungschemas für Thrombininhibitoren
WO1999037611A1 (de) * 1998-01-26 1999-07-29 Basf Aktiengesellschaft Heterocyclische amidine als kallikrein protease inhibitoren
KR100689923B1 (ko) 1998-01-26 2007-03-09 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 트롬빈 억제제
CA2329929A1 (en) 1998-04-24 1999-11-04 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9802939D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab New process
SE9802938D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802974D0 (sv) * 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab New crystalline forms
SE9802973D0 (sv) * 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
EP0987274A1 (en) * 1998-09-15 2000-03-22 Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH Factor VIIa Inhibitors
SE9804313D0 (sv) * 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
KR20000047461A (ko) * 1998-12-29 2000-07-25 성재갑 트롬빈 억제제
SE9900070D0 (sv) 1999-01-13 1999-01-13 Astra Ab New use
CN1170842C (zh) 1999-01-13 2004-10-13 阿斯特拉曾尼卡有限公司 新的脒基苄基胺衍生物及其作为凝血酶抑制剂的用途
DE50008510D1 (de) * 1999-04-09 2004-12-09 Abbott Gmbh & Co Kg Niedermolekulare inhibitoren von komplementproteasen
AR023510A1 (es) * 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
US6239132B1 (en) 1999-04-23 2001-05-29 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
AR023819A1 (es) * 1999-05-03 2002-09-04 Astrazeneca Ab FORMULACIoN FARMACEUTICA, KIT DE PARTES Y UTILIZACION DE DICHA FORMULACION
EP1054017B1 (de) * 1999-05-10 2004-10-13 Abbott GmbH & Co. KG Salze von Thrombininhibitoren
EP1189618A4 (en) 1999-06-04 2002-06-19 Merck & Co Inc thrombin
EP1059302A1 (en) * 1999-06-08 2000-12-13 Aventis Pharma Deutschland GmbH Factor VIIa inhibitors
SE9902550D0 (sv) * 1999-07-02 1999-07-02 Astra Ab New crystalline forms
WO2001016324A2 (en) * 1999-08-31 2001-03-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions of a novel serine protease inhibitor
WO2001055175A2 (en) * 2000-01-28 2001-08-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Process for the preparation of acetyl-amidiniophenylalanyl-cyclohexylglycyl-pyridinioalaninamides
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
DE10029015A1 (de) 2000-06-15 2001-12-20 Curacyte Ag Hemmstoffe für den Gerinnungsfaktor Xa
DE10029014A1 (de) 2000-06-15 2001-12-20 Univ Schiller Jena Urokinase-Hemmstoffe
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
DE10049937A1 (de) * 2000-10-06 2002-04-11 Knoll Ag Niedermolekulare Inhibitoren von Serinproteasen mit Polyhydroxyalkyl- und Polyhydroxycycloalkylresten
WO2002028411A1 (en) 2000-10-06 2002-04-11 Xenoport, Inc. Compounds for sustained release of orally delivered drugs
US6462021B1 (en) 2000-11-06 2002-10-08 Astrazeneca Ab Use of low molecular weight thrombin inhibitor
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR035216A1 (es) * 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US6528503B2 (en) 2000-12-18 2003-03-04 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
WO2002050056A1 (en) 2000-12-18 2002-06-27 Merck & Co., Inc. Benzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
JP2005504003A (ja) 2001-02-09 2005-02-10 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド トロンビン阻害剤
DE10117730A1 (de) 2001-04-09 2002-10-10 Basf Ag Umsetzung von (Di)Aminen in Gegenwart einer Lysinoxidase und eines Reduktionsmittels
AR034517A1 (es) * 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
DE10133786A1 (de) * 2001-07-16 2003-02-06 Boehringer Ingelheim Pharma Verwendung von Thrombin-Inhibitoren zur Behandlung von Arthritis
SE0103590D0 (sv) 2001-10-26 2001-10-26 Astrazeneca Ab New Combination
EP1569912B1 (en) 2002-12-03 2015-04-29 Pharmacyclics, Inc. 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors
SE0200198D0 (sv) 2002-01-23 2002-01-23 Astrazeneca Ab New use
EP1485345B1 (de) 2002-03-11 2008-06-25 Curacyte AG Hemmstoffe der urokinase, ihre herstellung und verwendung
DE10210590A1 (de) * 2002-03-11 2003-10-02 Curacyte Ag Hemmstoffe des Gerinnungsfaktors Xa, ihre Herstellung und Verwendung
US7084134B2 (en) 2002-05-02 2006-08-01 Merk & Co., Inc. Thrombin inhibitors
WO2003099328A1 (en) * 2002-05-21 2003-12-04 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating inflammatory conditions
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
DE10301300B4 (de) 2003-01-15 2009-07-16 Curacyte Chemistry Gmbh Verwendung von acylierten 4-Amidino- und 4-Guanidinobenzylaminen zur Inhibierung von Plasmakallikrein
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0301879D0 (sv) * 2003-06-25 2003-06-25 Astrazeneca Ab New process
DE10342108A1 (de) 2003-09-11 2005-04-14 Curacyte Chemistry Gmbh Basisch-substituierte Benzylaminanaloga als Inhibitoren des Gerinnungsfaktors Xa, ihre Herstellung und Verwendung
FR2867780B1 (fr) * 2004-03-19 2006-05-19 Servier Lab Nouveaux derives de 4-oxo-4,6,7,8-tetrahydropyrrolo (1,2-a) pyrazine-6-carboxamides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
WO2005095327A1 (ja) 2004-03-31 2005-10-13 Ajinomoto Co., Inc. アニリン誘導体
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
US20060194325A1 (en) * 2005-02-14 2006-08-31 Gable Jennifer H Fluid handling cassette with a fluid control interface
US20100105702A1 (en) * 2005-05-03 2010-04-29 Darren Mansfield Heterocyclylethylamide derivatives
US7524354B2 (en) * 2005-07-07 2009-04-28 Research Foundation Of State University Of New York Controlled synthesis of highly monodispersed gold nanoparticles
US20100159512A1 (en) * 2006-03-06 2010-06-24 Kurt Osther Method for the preparation of recombinant human thrombin and fibrinogen
DE102006050672A1 (de) 2006-10-24 2008-04-30 Curacyte Discovery Gmbh Hemmstoffe des Plasmins und des Plasmakallikreins
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
GB0807828D0 (en) * 2008-04-29 2008-06-04 Vantia Ltd Aminopyridine derivatives
CN102924567B (zh) * 2008-10-28 2014-06-04 上海医药工业研究院 一类肽化合物、其制备方法及用途
TWI419700B (zh) * 2010-01-06 2013-12-21 Academia Sinica 甘藷胰蛋白酶抑制因子用於治療發炎及痛敏感之用途
ES2483802T3 (es) 2010-07-07 2014-08-07 The Medicines Company (Leipzig) Gmbh Inhibidores de serina proteasa
CN102464701B (zh) * 2010-11-08 2015-10-21 上海医药工业研究院 一类新型化合物、其制备方法及用途
US9193762B2 (en) 2010-12-01 2015-11-24 University Of Mississippi Selective inhibitors of prolylcarboxypeptidase
DE102014108210A1 (de) 2014-06-11 2015-12-17 Dietrich Gulba Rodentizid
KR20210016545A (ko) * 2018-05-29 2021-02-16 오메로스 코포레이션 Masp-2 억제제 및 사용 방법
US11584714B2 (en) 2018-05-29 2023-02-21 Omeros Corporation MASP-2 inhibitors and methods of use
EP4069676A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Omeros Corporation Masp-2 inhibitors and methods of use
EP4069678A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Omeros Corporation Masp-2 inhibitors and methods of use
WO2021113682A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Omeros Corporation Masp-2 inhibitors and methods of use
WO2021113686A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Omeros Corporation Masp-2 inhibitors and methods of use
EP4070658A1 (de) 2021-04-06 2022-10-12 BIORoxx GmbH Verwendung von blutgerinnungshemmenden verbindungen als rodentizide

Family Cites Families (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2748295A1 (de) * 1977-10-27 1979-05-03 Bayer Ag Neue derivate des bpti
HU178398B (en) * 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
US4568636A (en) * 1981-03-25 1986-02-04 Pentapharm Ag Tripeptide derivatives
US4395401A (en) * 1981-09-09 1983-07-26 Smithkline Beckman Corporation Renally active dipeptides
HU192646B (en) * 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
CA1341029C (en) 1985-02-04 2000-06-20 Michael Kolb Peptidase inhibitors
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
PT84170B (pt) * 1986-01-24 1989-03-30 Sanofi Sa Processo para a preparacao de derivados n alfa-substituidos das n alfa-aril-sulfonilaminoacil d-amidinofenil-alaninamidas
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5187157A (en) * 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
EP0362002B1 (en) * 1988-09-01 1995-07-26 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
ZA897515B (en) * 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
US5273982A (en) * 1990-03-09 1993-12-28 Hoffmann-La Roche Inc. Acetic acid derivatives
US5110812A (en) * 1990-06-04 1992-05-05 Bristol-Myers Squibb Co. Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
US5037819A (en) * 1990-06-04 1991-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
TW201303B (pl) * 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
GB9017694D0 (en) * 1990-08-13 1990-09-26 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic chemistry
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
NZ239846A (en) * 1990-09-27 1994-11-25 Merck & Co Inc Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
IL99538A0 (en) * 1990-09-27 1992-08-18 Merck & Co Inc Fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical compositions containing them
IL99527A (en) * 1990-09-28 1997-08-14 Lilly Co Eli Tripeptide antithrombotic agents
GB9024129D0 (en) * 1990-11-06 1990-12-19 Thrombosis Research Trust Inhibitors and substrates of thrombin
KR920703558A (ko) * 1990-11-15 1992-12-18 원본미기재 메타-치환 페닐알라닌 유도체
DE4115468A1 (de) * 1991-05-11 1992-11-12 Behringwerke Ag Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien
SE9102462D0 (sv) * 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
CZ333492A3 (en) * 1991-11-12 1993-09-15 Lilly Co Eli Dipeptide of l-azetidine-2-carboxylic acids and l-argininaldehyde, process of its preparation and pharmaceutical preparation in which said dipeptide is comprised
SE9103612D0 (sv) * 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
AU1025795A (en) * 1994-01-27 1995-08-03 Mitsubishi Chemical Corporation Prolineamide derivatives
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
SE504185C2 (sv) * 1994-11-08 1996-12-02 Astra Ab Lagringsstabil vattenlösning för infusion av trombininhibitorer
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
TWI238827B (en) * 1995-12-21 2005-09-01 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CN1178905C (zh) 2004-12-08
FI119812B (fi) 2009-03-31
JP3205558B2 (ja) 2001-09-04
IL123996A (en) 2008-07-08
HU9503445D0 (en) 1996-01-29
HRP940311B1 (en) 2002-02-28
IS4166A (is) 1994-12-04
CN1278530A (zh) 2001-01-03
HU226825B1 (en) 2009-11-30
KR100339456B1 (ko) 2002-12-06
US5602253A (en) 1997-02-11
US20050222395A1 (en) 2005-10-06
ATE200783T1 (de) 2001-05-15
GR3036258T3 (en) 2001-10-31
NO2004009I1 (no) 2004-12-20
IL109634A (en) 1999-04-11
EP0701568B1 (en) 2001-04-25
CA2162900A1 (en) 1994-12-22
AU6986994A (en) 1995-01-03
LT3768B (en) 1996-03-25
NZ267534A (en) 1997-08-22
IS1805B (is) 2002-03-08
NL300178I2 (nl) 2005-10-03
FI955828A7 (fi) 1995-12-04
DE122004000045I1 (de) 2005-04-21
HUT74739A (en) 1997-02-28
JPH08511018A (ja) 1996-11-19
MX9404114A (es) 1995-01-31
NO954873L (no) 1996-02-01
SG48013A1 (en) 1998-04-17
DE122004000045I2 (de) 2011-06-16
WO1994029336A1 (en) 1994-12-22
EP0701568A1 (en) 1996-03-20
RU2142469C1 (ru) 1999-12-10
SK283150B6 (sk) 2003-03-04
IL109634A0 (en) 1994-08-26
SE9301916D0 (sv) 1993-06-03
RS49576B (sr) 2007-04-10
CN1127509A (zh) 1996-07-24
NO314406B1 (no) 2003-03-17
DK0701568T3 (da) 2001-06-18
CN1099425C (zh) 2003-01-22
LTIP1947A (en) 1994-12-27
SK145495A3 (en) 1996-10-02
TW403731B (en) 2000-09-01
JP2002047264A (ja) 2002-02-12
CA2162900C (en) 2009-06-09
US5723444A (en) 1998-03-03
CZ302095A3 (en) 1996-04-17
ES2128277T3 (es) 2001-07-01
ES2128277T1 (es) 1999-05-16
YU33694A (sh) 1997-12-05
PT701568E (pt) 2001-08-30
CZ290104B6 (cs) 2002-05-15
BR9406746A (pt) 1996-03-19
FI955828A0 (fi) 1995-12-04
EG20671A (en) 1999-11-30
PL311819A1 (en) 1996-03-18
DE69427150T2 (de) 2001-09-06
HU0103039D0 (en) 2001-09-28
DE69427150D1 (de) 2001-05-31
NO954873D0 (no) 1995-11-30
MY119155A (en) 2005-04-30
HRP940311A2 (en) 1996-10-31
NL300178I1 (nl) 2005-05-02
UA65518C2 (en) 2004-04-15
HK1031375A1 (en) 2001-06-15
DE701568T1 (de) 1999-06-02
EP1067136A1 (en) 2001-01-10
JP2001322974A (ja) 2001-11-20
SI0701568T1 (en) 2001-08-31
SA94150051B1 (ar) 2006-06-12
AU684086B2 (en) 1997-12-04
EE03264B1 (et) 2000-04-17
US5939392A (en) 1999-08-17
LU91173I2 (fr) 2005-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5723444A (en) Starting materials in the synthesis of thrombin and kinogenase inhibitors
US5856307A (en) Peptide derivatives as kininogenase inhibitors
US5955433A (en) Method of thrombin inhibition
JP4089981B2 (ja) トロンビン阻害剤
WO1992007869A1 (en) Inhibitors and substrates of thrombin
SK180497A3 (en) New thrombin inhibitors, their preparation and use
WO1991004746A1 (en) Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides
US6984627B1 (en) Peptide derivatives
SK47796A3 (en) Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides
EP1635816B1 (en) Enalapril-nitroxyderivatives derivatives and related compounds as ace inhibitors for the treatment of cardiovascular diseases
AU684086C (en) New peptide derivatives
HK1033139A (en) New peptide derivatives
HK1025777A (en) Inhibitors and substrates of thrombin

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20110602