JP2004516286A - ベンジルアミン誘導体およびそれのトロンビン阻害薬としての使用 - Google Patents

Abstract

本発明の化合物は、トロンビンおよび関連する血栓性閉塞を阻害する上で有用であり、下記構造を有するかそれの製薬上許容される塩であり、例えば式中でＲ^３は−ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２または−ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３である。

Description

【０００１】
（背景技術）
トロンビンは、前駆体であるプロトロンビンの形で血漿に存在するセリンプロテアーゼである。トロンビンは、溶液血漿蛋白であるフィブリノゲンを不溶性のフィブリンに変換することで、血液凝固の機序において中心的役割を果たす。
【０００２】
エドワーズら（Ｅｄｗａｒｄｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ａｍｅｒ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． （１９９２） ｖｏｌ． １１４， ｐｐ． １８５４−６３）は、セリンプロテアーゼ類であるヒト白血球エラスターゼおよびブタ膵臓エラスターゼの可逆的阻害薬であるピペリジルａ−ケトベンゾオキサゾール類について記載している。欧州特許公開３６３２８４号には、基質ペプチドの切れやすいアミド基の窒素原子が水素または置換カルボニル部分によって置き換わったペプチダーゼ基質の類縁体について記載されている。オーストラリア特許公開８６２４５６７７号にも、フルオロメチレンケトンまたはａ−ケトカルボニル誘導体などの活性化親電子ケトン部分を有するペプチダーゼ阻害薬について記載されている。ブラウンら（Ｒ． Ｊ． Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｖｏｌ． ３７， ｐｐ． １２５９−１２６１ （１９９４））は、トリフルオロメチルケトン部分およびピリジノン部分を有する、経口活性で非ペプチド系のヒト白血球エラスターゼ阻害薬について記載している。マックら（Ｈ． Ｍａｃｋ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ， Ｖｏｌ． ９， ｐｐ． ７３−８６ （１９９５））は、中心的な核構造としてピリミジノン部分を有する堅牢なアミジノ−フェニルアラニン系トロンビン阻害薬について記載している。米国特許第５５３６７０８号、同５６７２５８２号、同５５１０３６９号および同５７４１４８５号には、シクロヘキシルアミノ末端基を有するプロリン系トロンビン阻害薬が記載されている。本発明には、アンモニオエチルまたはアンモニオメチル部分で置換されたフェニル環末端基を有するプロリン系トロンビン阻害薬であって、所望の効力および薬物動態特性を有する治療上有効なトロンビン阻害薬を提供することが認められているものが含まれる。
【０００３】
（発明の概要）
本発明は、医薬的に許容される担体中での本発明の化合物を含めて、哺乳動物において血小板の損失を阻害し；血小板凝集物形成を阻害し；フィブリンの形成を阻害し；血栓形成を阻害し；塞栓形成を阻害する化合物を含むものである。それらの化合物には適宜に、抗凝血剤、抗血小板剤および血栓溶解剤を含有させることができる。該化合物は、血液、血液製剤または哺乳動物臓器に添加／投与することで、所望の阻害を行うことができる。
【０００４】
本発明にはさらに、医薬的に許容される担体中での本発明の化合物を含めて、哺乳動物における不安定狭心症、難治性狭心症、心筋梗塞、一過性虚血発作、心房細動、血栓性卒中、塞栓性卒中、深部静脈血栓症、播種性血管内凝固、フィブリンの眼球堆積および再疎通化血管の再閉塞もしくは再狭窄を予防もしくは治療する化合物をも含むものである。それらの化合物には適宜に、抗凝血剤、抗血小板剤および血栓溶解剤を含有させることができる。
【０００５】
本発明はさらに、本発明の化合物を共有結合的または非共有結合的に表面に結合させることで、哺乳動物における表面の血栓形成性を低下させる方法をも含むものである。
【０００６】
（発明の詳細な説明）
本発明の化合物はトロンビン阻害薬として有用であり、例えば冠動脈疾患の予防において治療上の価値を有する。
【０００７】
本発明は、下記一般式の化合物またはその化合物の製薬上許容される塩を含む。
【０００８】
【化１９】

式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｒ_ｗおよびＲ_ｖは独立に、水素、Ｃ_１−４アルキルおよびハロゲンからなる群から選択され；
Ｒ_ｔは、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルであり；
Ｒ^１は、
１）
【０００９】
【化２０】

［式中、Ｒ^４およびＲ^５は独立に、水素、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−６アルキル、−ＯＨおよびシアノからなる群から選択され；
Ｘは、結合、ＯまたはＳである。］；ならびに
２）
【００１０】
【化２１】

［式中、
Ｒ^６は、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−６アルキル、
ｃ）−ＯＨ、
ｄ）−ＮＲ^２４Ｒ^２５（Ｒ^２４およびＲ^２５は独立に、水素あるいは未置換であるか−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルもしくはＣＯＯＲ^１７の１以上で置換されたＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^１７はＣ_１−６アルキルである）、
ｅ）ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ^１８、
ｆ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１８、
ｇ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、
ｈ）ＮＨＳＯ_２Ｒ^１８、
ｉ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、および
ｊ）ＮＨＣＮ
からなる群から選択され；
Ｒ^１８は、Ｃ_１−６アルキル、アリールおよびＣ_３−７シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ^７およびＲ^８は独立に、
ａ）水素、
ｂ）−ＣＦ_３、
ｃ）Ｃ_１−６アルキル、
ｄ）フェニル（未置換であるか、Ｃ_１−６アルキル、ＣＯＯＲ^２６もしくはハロゲンで置換されており；Ｒ^２６はＣ_１−６アルキルまたは水素である）、
ｅ）
【００１１】
【化２２】

ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
ｇ）
【００１２】
【化２３】

（Ｒ^２７はＣ_１−６アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルである）、
ｈ）
【００１３】
【化２４】

（Ｒ_ｘおよびＲ_ｙは独立に、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、未置換フェニルまたはハロゲン、Ｃ_１−４アルキル、ＯＨもしくはＣ_１−４アルコキシで置換されたフェニルからなる群から選択され；ｎは０、１、２もしくは３であり
ｉ）
ｉ）未置換であるかＣ_１−４アルキルで置換されたＣ_３−７シクロアルキル、
ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
ｉｉｉ）−ＯＨ、
ｉｖ）
【００１４】
【化２５】

ｖ）
【００１５】
【化２６】

（Ｒ^９およびＲ^１０は独立に、
ａａ）水素、
ｂｂ）ハロゲン、
ｃｃ）Ｃ_１−４アルコキシ、
ｄｄ）Ｃ_１−４アルキル、
ｅｅ）ヒドロキシ、
ｆｆ）ＣＦ_３、
ｇｇ）シアノ、
ｈｈ）ＣＯＯＲ^２８（Ｒ^２８はＣ_１−６アルキルまたは水素である）
からなる群から選択される）
からなる群のうちの１個または２個で置換されたＣ_１−６アルキル
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^７とＲ^８が一体となって、未置換であるか独立に１個もしくは２個のＣ_１−６アルキル基で置換されたＣ_３−７炭素環を形成している。］
からなる群から選択され；
Ｒ^３は、
１）−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、
２）−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）および
３）
【００１６】
【化２７】

（ｎは０、１または２である）
からなる群から選択され；
Ｒ^１１およびＲ^１２は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｆ、
ｃ）Ｃ_１−４アルキル、
ｄ）ＣＦ_３、
ｅ）ＣＨＦ_２、
ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル
からなる群から選択されるか；
あるいはＲ^１１とＲ^１２が一体となって、３〜７員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１３およびＲ^１４は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−４アルキル、
ｃ）−ＣＦ_３、
ｄ）−ＣＨＦ_２、
ｅ）−ＣＨ_２ＯＨ、
ｆ）Ｃ_３−６シクロアルキル
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^１３とＲ^１４が一体となって３〜７員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１５およびＲ^１６は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−６アルキル（未置換であるか、−ＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはＣ（Ｏ）ＯＲ^１９で置換されており；Ｒ^１９は、水素およびＣ_１−６アルキルからなる群から選択される）、
ｃ）Ｃ_３−７シクロアルキル、および
ｄ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２０（Ｒ^２０は、Ｃ_１−６アルキル、−ＯＲ^２１および−ＮＨＲ^２１からなる群から選択され；Ｒ^２１は、水素、Ｃ_１−６アルキルまたはベンジルである）
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^１５とＲ^１６が一体となって、未置換であるか水酸基またはハロゲンで置換された４〜７員の複素環を形成している。
【００１７】
これら化合物のある分類またはそれの製薬上許容される塩において、その化合物は下記式を有する。
【００１８】
【化２８】

式中、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）または−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００１９】
この分類の小分類では、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００２０】
その小分類の１群では、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）ＮＨ_２である。
【００２１】
その群の１小群では、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨＦ_２）ＮＨ_２または−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＦ_３）ＮＨ_２である。
【００２２】
その小群の１系統では、
ｘは結合であり；
Ｒ^６は、水素、−ＯＨ、−ＣＨ_３または−ＮＨ_２であり；
Ｒ^７は、水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
Ｒ^８は、フェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、２−ピリジル、３−ピリジル、
【００２３】
【化２９】

または
【００２４】
【化３０】

で置換されたＣ_１−６アルキルである。
【００２５】
この系統の１小系統では、Ｒ^９は水素またはＣｌであり；Ｒ^１０は水素である。
【００２６】
この小系統の１集合では、Ｒ^１は下記のものからなる群から選択される。
【００２７】
【化３１】

この集合の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００２８】
【化３２】

前記分類の第２の小分類では、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００２９】
その第２の小分類の１群では、Ｒ^３は−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、ＣＨ（ＣＨＦ_２）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）または−ＣＨ（ＣＨ_３）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００３０】
その群の１小群では、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨＦ_２）ＮＨ_２、−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）ＮＨ_２または−ＣＨ（ＣＨ_３）ＮＨ_２である。
【００３１】
この小群の１系統では、
ｘは結合であり；
Ｒ^６は水素、−ＯＨまたは−ＮＨ_２であり；
Ｒ^７は水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
Ｒ^８はフェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、２−ピリジル、３−ピリジルまたは
【００３２】
【化３３】

で置換されたＣ_１−６アルキルである。
【００３３】
この系統の１小系統では、Ｒ^９は水素またはＣｌであり；Ｒ^１０は水素である。
【００３４】
この小系統の１集合では、Ｒ^１は下記のものからなる群から選択される。
【００３５】
【化３４】

この集合の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００３６】
【化３５】

これらの例の特定の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００３７】
【化３６】

「^＊」の印を施した化合物は、２．０以下のＫｉを有する。
【００３８】
本発明の化合物はトロンビン阻害薬として有用であり、例えば冠動脈疾患の予防において治療上の価値を有する。本発明は、下記の構造を有する化合物を含む。
【００３９】
【化３７】

式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｒ^１は、
１）
【００４０】
【化３８】

［式中、Ｒ^４およびＲ^５は独立に、水素、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４アルキル、−ＯＨおよびシアノからなる群から選択され；
Ｘは、結合またはＯである。］；ならびに
２）
【００４１】
【化３９】

［式中、
Ｒ^６は、
ａ）−ＯＨ、
ｂ）−ＮＨ_２、
ｃ）未置換であるか−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルもしくはＣＯＯＲ^１７の１以上で置換されたＣ_１−６アルキル（Ｒ^１７はＣ_１−４アルキルである）、
ｄ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
ｅ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１８、
ｆ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^１８、
ｇ）Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、
ｈ）ＳＯ_２Ｒ^１８、
ｉ）Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２および
ｊ）ＣＮ
からなる群から選択され；
Ｒ^１８は、Ｃ_１−４アルキルおよびＣ_３−７シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ^７およびＲ^８は独立に、
ａ）水素、
ｂ）−ＣＦ_３、
ｃ）未置換Ｃ_１−６アルキル、
ｄ）Ｃ_３−６シクロアルキル、
ｅ）
ｉ）Ｃ_３−６シクロアルキル、
ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
ｉｉｉ）−ＯＨ、
ｉｖ）
【００４２】
【化４０】

ｖ）
【００４３】
【化４１】

ｖｉ）
【００４４】
【化４２】

（Ｒ^９およびＲ^１０は独立に、
ａａ）水素、
ｂｂ）ハロゲン、
ｃｃ）Ｃ_１−４アルコキシ、
ｄｄ）Ｃ_１−４アルキル、
ｅｅ）ヒドロキシ、
ｆｆ）ＣＦ_３および
ｇｇ）シアノ
からなる群から選択される）
からなる群のうちの一つで置換されたＣ_１−６アルキル
からなる群から選択され；
Ｒ^３は、
１）
【００４５】
【化４３】

および
２）
【００４６】
【化４４】

からなる群から選択され；
Ｒ^１１およびＲ^１２は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｆ、
ｃ）Ｃ_１−４アルキル、
ｄ）ＣＦ_３、
ｅ）ＣＨＦ_２、
ｆ）Ｃ_３−６シクロアルキル
からなる群から選択されるか；
あるいはＲ^１１とＲ^１２が一体となって、３〜６員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１３およびＲ^１４は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−４アルキル、
ｃ）ＣＦ_３、
ｄ）ＣＨＦ_２、
ｅ）Ｃ_３−６シクロアルキル
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^１１とＲ^１２が一体となって３〜６員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１５およびＲ^１６は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−６アルキル（未置換であるか、−ＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはＣ（Ｏ）ＯＲ^１９で置換されており；Ｒ^１９は、水素およびＣ_１−４アルキルからなる群から選択される）、
ｃ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
ｄ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２０（Ｒ^２０は、−ＯＲ^２１および−ＮＨＲ^２１からなる群から選択され；Ｒ^２１は、水素、Ｃ_１−４アルキルまたはベンジルである）、および
ｅ）−ＣＯ_２Ｒ^２２（Ｒ^２２はＣ_１−４アルキルである）
からなる群から選択される。
【００４７】
化合物の１小分類およびそれの製薬上許容される塩において、ｍは１であり；Ｘは結合であり；Ｒ^６はＮＨ_２であり；Ｒ^７は水素であり；Ｒ^８は
【００４８】
【化４５】

で置換されたＣ_１−６アルキルである。
【００４９】
化合物のその小分類の１小群およびそれの製薬上許容される塩では、Ｒ^１は
【００５０】
【化４６】

からなる群から選択され；
Ｒ^３は−ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２または−ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３である。
【００５１】
その小群の例には、下記のもの：
【００５２】
【化４７】

およびこれらの製薬上許容される塩などがある。
【００５３】
本発明の化合物はトロンビン阻害薬として有用であり、例えば冠動脈疾患の予防において治療上の価値を有する。本発明は、下記の構造を有する化合物またはその化合物の製薬上許容される塩を含む。
【００５４】
【化４８】

式中、
ｍは０、１または２であり；
Ｒ^１は、
１）
【００５５】
【化４９】

［式中、Ｒ^４およびＲ^５は独立に、水素、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−６アルキル、−ＯＨおよびシアノからなる群から選択され；
Ｘは、結合、ＯまたはＳである。］；ならびに
２）
【００５６】
【化５０】

［式中、
Ｒ^６は、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−６アルキル、
ｃ）−ＯＨ、
ｄ）−ＮＲ^２４Ｒ^２５（Ｒ^２４およびＲ^２５は独立に、水素あるいは未置換であるか−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルもしくはＣＯＯＲ^１７の１以上で置換されたＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^１７はＣ_１−６アルキルである）、
ｅ）ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ^１８、
ｆ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１８、
ｇ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、
ｈ）ＮＨＳＯ_２Ｒ^１８、
ｉ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２および
ｊ）ＮＨＣＮ
からなる群から選択され；
Ｒ^１８は、Ｃ_１−６アルキル、アリールおよびＣ_３−７シクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ^７およびＲ^８は独立に、
ａ）水素、
ｂ）−ＣＦ_３、
ｃ）Ｃ_１−６アルキル、
ｄ）フェニル（未置換であるか、Ｃ_１−６アルキル、ＣＯＯＲ^２６もしくはハロゲンで置換されており；Ｒ^２６はＣ_１−６アルキルまたは水素である）、
ｅ）
【００５７】
【化５１】

ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
ｇ）
【００５８】
【化５２】

（Ｒ^２７はＣ_１−６アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルである）、
ｈ）
ｉ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
ｉｉｉ）−ＯＨ、
ｉｖ）
【００５９】
【化５３】

ｖ）
【００６０】
【化５４】

（Ｒ^９およびＲ^１０は独立に、
ａａ）水素、
ｂｂ）ハロゲン、
ｃｃ）Ｃ_１−４アルコキシ、
ｄｄ）Ｃ_１−４アルキル、
ｅｅ）ヒドロキシ、
ｆｆ）ＣＦ_３、
ｇｇ）シアノ、
ｈｈ）ＣＯＯＲ^２８（Ｒ^２８はＣ_１−４アルキルまたは水素である）
からなる群から選択される）
からなる群のうちの１個または２個で置換されたＣ_１−６アルキル
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^７とＲ^８が一体となって、未置換であるか独立に１個もしくは２個のＣ_１−６アルキル基で置換されたＣ_３−７炭素環を形成している。］
からなる群から選択され；
Ｒ^３は、
１）−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、
２）−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）および
３）
【００６１】
【化５５】

（ｎは０、１または２である）
からなる群から選択され；
Ｒ^１１およびＲ^１２は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｆ、
ｃ）Ｃ_１−４アルキル、
ｄ）ＣＦ_３、
ｅ）ＣＨＦ_２、
ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル
からなる群から選択されるか；
あるいはＲ^１１とＲ^１２が一体となって、３〜７員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１３およびＲ^１４は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−４アルキル、
ｃ）−ＣＦ_３、
ｄ）−ＣＨＦ_２、
ｅ）−ＣＨ_２ＯＨ、
ｆ）Ｃ_３−６シクロアルキル
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^１３とＲ^１４が一体となって３〜７員の炭素環を形成しており；
Ｒ^１５およびＲ^１６は独立に、
ａ）水素、
ｂ）Ｃ_１−６アルキル（未置換であるか、−ＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはＣ（Ｏ）ＯＲ^１９で置換されており；Ｒ^１９は、水素およびＣ_１−６アルキルからなる群から選択される）、
ｃ）Ｃ_３−７シクロアルキル、および
ｄ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２０（Ｒ^２０は、−ＯＲ^２１および−ＮＨＲ^２１からなる群から選択され；Ｒ^２１は、水素、Ｃ_１−６アルキルまたはベンジルである）
からなる群から選択されるか；あるいは
Ｒ^１５とＲ^１６が一体となって、未置換であるか水酸基またはハロゲンで置換された４〜７員の複素環を形成している。
【００６２】
これら化合物の１分類またはそれの製薬上許容される塩において、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）または−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００６３】
その分類の１小分類において、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００６４】
その小分類の１群において、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）ＮＨ_２である。
【００６５】
その群の１小群において、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２である。
【００６６】
その小群の１系統において、
ｘは結合であり；
Ｒ^６は水素、−ＯＨ、−ＣＨ_３または−ＮＨ_２であり；
Ｒ^７は水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
Ｒ^８は、フェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、２−ピリジル、３−ピリジルまたは
【００６７】
【化５６】

で置換されたＣ_１−６アルキルである。
【００６８】
その系統の１小系統では、Ｒ^９は水素またはＣｌであり；Ｒ^１０は水素である。
【００６９】
その小系統の１集合では、Ｒ^１は下記のものからなる群から選択される。
【００７０】
【化５７】

その集合の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００７１】
【化５８】

前記分類の第２の小分類では、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００７２】
その第２の小分類の１群では、Ｒ^３は−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。
【００７３】
その群の１小群では、Ｒ^３は−ＣＨ_２ＮＨ_２または−ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３である。
【００７４】
その小群の１系統では、
ｘは結合であり；
Ｒ^６は、水素、−ＯＨ、−ＣＨ_３または−ＮＨ_２であり；
Ｒ^７は、水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
Ｒ^８は、フェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、２−ピリジル、３−ピリジルまたは
【００７５】
【化５９】

で置換されたＣ_１−６アルキルである。
【００７６】
その系統の１小系統では、Ｒ^９は水素またはＣｌであり；Ｒ^１０は水素である。
【００７７】
その小系統の１集合では、Ｒ^１は下記のものからからなる群選択される。
【００７８】
【化６０】

その集合の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００７９】
【化６１】

これらの例の特定の例は、下記のものからなる群から選択される。
【００８０】
【化６２】

本発明の化合物はキラル中心を有することができ、ラセミ体、ラセミ混合物および個々のジアステレオマーもしくはエナンチオマーとして得られる場合があり、全ての異性体は本発明の範囲に含まれる。本発明の化合物はさらに、多形結晶体を有する場合もあり、全ての多形結晶体は本発明に含まれる。
【００８１】
いずれかの構成要素または式Ｉの化合物において、いずれかの変数が複数存在する場合には、各場合におけるそれの定義は、他の全ての場合での定義から独立である。さらに、置換基および／または変数の組み合わせは、そのような組み合わせによって安定な化合物が得られる場合にのみ許容される。
【００８２】
本願で使用される場合があるいくつかの略称は以下の通りである。
【００８３】
略称
名称
ＡｃＯＨ：酢酸
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
（Ｂｏｃ）_２Ｏ：ジ−ｔ−ブチルジカーボネート
ＢＯＰ試薬：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＣＡＮ：硝酸セリウムアンモニウム
ＤＡＳＴ：三フッ化ジエチルアミノ硫黄
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン
ＤＣＥ：１，２−ジクロロエタン
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ：ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＰＰＡ：ジフェニルホスホリルアジド
ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
Ｅｔ_２Ｏ：ジエチルエーテル
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ：（Ｏ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスフェート
ＨＣｌ：塩酸
ＨＯＡｃ：酢酸
ＨＯＡＴ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢＴ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＩＰｒＯＨ：２−プロパノール
ＫＯＨ：水酸化カリウム
ＬＡＨ：水素化リチウムアルミニウム
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析スペクトラム
ＭＣＰＢＡ：ｍ−クロロ過安息香酸
ＭｅＯＨ：メタノール
ＭｇＳＯ_４：硫酸マグネシウム
ｎ−ＢｕＬｉ：ｎ−ブチルリチウム
Ｎ_３ＰＯ（Ｐｈ）_２：ジフェニルホスホリルアジド
ＮａＢＨ_４：水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＨＣＯ_３：炭酸水素ナトリウム
ＮａＮ_３：アジ化ナトリウム
Ｎａ_２ＳＯ_４：硫酸ナトリウム
Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３：チオ硫酸ナトリウム
ＮＣＳ：Ｎ−クロロコハク酸イミド
ＮＨ_４Ｃｌ：塩化アンモニウム
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＰＭＰ：パラ−メトキシフェニル
ＰＰｈ_３：トリフェニルホスフィン
Ｐｄ−Ｃ：パラジウム／活性炭触媒
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４：テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム
ＰｈＣＨ_３：トルエン
ＰＯＢｒ_３：オキシ臭化リン
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｔｆ_２Ｏ：無水トリフルオロメタンスルホン酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層薄層クロマトグラフィー
ＳｉＯ_２：酸化ケイ素
Ｚｎ（ＣＮ）_２：シアン化亜鉛。
【００８４】
別段の断りがない限り、本明細書で使用する場合の「アルキル」という用語は、指定数の炭素原子を有する分岐および直鎖の両方の飽和脂肪族炭化水素基を含むものとし（Ｍｅはメチルであり；Ｅｔはエチルであり；Ｐｒはプロピルであり；Ｂｕはブチルである）；「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合した指定数の炭素原子の直鎖もしくは分岐アルキル基を表し；本明細書で使用される「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を意味し；「対イオン」とは、塩素イオン、臭素イオン、水酸イオン、酢酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン、過塩素酸イオン、硝酸イオン、安息香酸イオン、マレイン酸イオン、硫酸イオン、酒石酸イオン、ヘミ酒石酸イオン、ベンゼンスルホン酸イオンなどの小型で１価の負電荷を有する化学種を表すのに用いられる。
【００８５】
「シクロＣ_３−７アルキル」という用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルなどを含むものとする。
【００８６】
本明細書で使用する場合の「アリール」という用語は、別段の断りがない限り、フェニルまたはナフチルなどの安定な６〜１０員の単環系または二環系を表す。そのアリール環は未置換であっても、１以上のＣ_１−４低級アルキル；水酸基；アルコキシ；ハロゲン；アミノによって置換されていても良い。
【００８７】
本発明の化合物のピリジルＮ−オキサイド部分は、等価な意味を有する下記の従来表記を用いて構造を描く。
【００８８】
【化６３】

本明細書においては、メチル置換基は下記式によって表すことができる。
【００８９】
【化６４】

例えば、
【００９０】
【化６５】

の構造は等価な意味を有する。
【００９１】
式Ｉの化合物の製薬上許容される塩（水溶性もしくは油溶性もしくは分散性の薬剤の形で）には、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸から誘導される塩あるいは例えば無機もしくは有機の酸もしくは塩基から形成される４級アンモニウム塩のような従来の無毒性塩などがある。酸付加塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩などがある。塩基塩には、アンモニウム塩；ナトリウム塩およびカリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩およびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；ジシクロヘキシルアミン塩などの有機塩基との塩；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；ならびにアルギニン、リジンなどのアミノ酸との塩などがある。さらに、メチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物などの低級アルキルハライド；ジメチル硫酸、ジエチル硫酸、ジブチル硫酸およびジアミル硫酸などのジアルキル硫酸；デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物などの長鎖ハライド；ベンジルおよびフェネチルの臭化物などのアラルキルハライドその他のような薬剤によって、含塩基性窒素基を４級化することができる。
【００９２】
トロンビン阻害薬−治療的使用−使用方法
抗凝血療法は、各種血栓状態、特に冠動脈および脳血管の疾患の治療および予防が適応である。当業者であれば、抗凝血療法が必要な状況は容易に理解できる。本明細書で使用する「患者」という用語は、ヒトを含めた霊長類、ヒツジ、ウマ、畜牛、ブタ、イヌ、ネコ、ラットおよびマウスなどの哺乳動物を意味するものとする。
【００９３】
トロンビン阻害は、血栓状態の患者の抗凝血療法においてだけでなく、保存全血の凝集防止ならびに検査用もしくは保存用の他の生物検体での凝血防止などのために凝血阻害が必要ないかなる場合においても有用である。従って、トロンビンを含有するまたはトロンビンを含有すると予想される媒体であって、例えば人工血管、ステント、整形外科的補綴具、心臓補綴具および体外循環系からなる群から選択される材料と哺乳動物血液との接触の場合のように、凝血を阻害することが望ましい媒体に、トロンビン阻害薬を加えるかまたはその媒体とトロンビン阻害薬とを接触させることができる。
【００９４】
本発明の化合物は、哺乳動物における静脈血栓塞栓症（例えば、剥離血栓による静脈の血流障害もしくは閉塞；剥離血栓による肺動脈の血流障害もしくは閉塞）、心原性血栓塞栓症（例えば、剥離血栓による心臓の血流障害もしくは閉塞）、動脈血栓症（例えば、動脈によって血液供給される組織の梗塞を引き起こし得るその動脈内での血栓形成）、アテローム性動脈硬化（例えば、不規則に分布した脂質沈着物を特徴とするアテローム性動脈硬化）の治療または予防において、さらには血液と接触して血液を凝固させる医療機器の性向を低下させる上で有用である。
【００９５】
本発明の化合物によって治療もしくは予防することができる静脈血栓塞栓症の例としては、静脈の血流障害；肺動脈の血流障害（肺塞栓症）；深在静脈血栓症；癌および癌の化学療法に関連する血栓症；蛋白Ｃ欠乏症、蛋白Ｓ欠乏症、抗トロンビンＩＩＩ欠乏症および因子Ｖライデン（Ｌｅｉｄｅｎ）などの血栓形成性疾患に固有の血栓症；全身エリテマトーデス（炎症性結合組織疾患）などの後天性血栓形成性障害によって生じる血栓症などがある。静脈血栓塞栓症に関しても、本発明の化合物は留置カテーテルの開通性維持に有用である。
【００９６】
本発明の化合物によって治療もしくは予防することができる心原性血栓塞栓症の例としては、血栓塞栓性卒中（脳への血液供給障害に関連する神経障害を起こす剥離血栓）、心房細動に関連する心原性血栓塞栓症（心腔上部筋原線維の急速な不規則攣縮）、人工心臓弁などの補綴心臓弁に関連する心原性血栓塞栓症ならびに心疾患に関連する心原性血栓塞栓症などがある。
【００９７】
動脈血栓症の例としては、不安定狭心症（冠動脈起源の胸部における重度の収斂性疼痛）、心筋梗塞（血液供給不足によって生じる心筋細胞の死）、虚血性心疾患（血液供給の障害（動脈狭窄など）が原因の局所貧血）、経皮経管冠動脈血管形成術時またはその後の再閉塞、経皮経管冠動脈血管形成術後の再狭窄、大動脈冠動脈バイパス人工血管の閉塞および閉塞性脳血管疾患などがある。動脈血栓症に関しても、本発明の化合物は、動静脈カニューレにおける開通性維持に有用である。
【００９８】
アテローム性動脈硬化の例としては、動脈硬化症などがある。
【００９９】
血液と接触する医療機器の例としては、人工血管、ステント類、整形外科補綴具、心臓補綴具および体外循環システムなどがある。
【０１００】
本発明のトロンビン阻害薬は、錠剤、カプセル（それぞれ、徐放製剤または持続性製剤を含む）、丸薬、粉剤、粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁液、シロップおよび乳濁液などの経口製剤で投与することができる。同様にその化合物は、静脈投与剤（ボラスまたは注入）、腹腔内投与剤、皮下投与剤または筋肉投与剤の形で投与することができ、それら使用形態はいずれも医薬業界の当業者には公知である。抗凝血剤としては、有効であるが無毒性の量の所望の化合物を用いることができる。フィブリンの眼球堆積治療のためには、その化合物を眼内投与もしくは局所投与しても、経口投与もしくは非経口投与しても良い。
【０１０１】
これらトロンビン阻害薬は、有効成分の徐放が行えるような形で製剤できるデポー注射または植込物製剤の形で投与することができる。有効成分は、圧縮してペレットまたは小円筒とし、デポー注射または植込物として皮下または筋肉内に植え込むことができる。植込物には、例えばダウ・コーニング社（Ｄｏｗ−Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）製造のシラスティック（Ｓｉｌａｓｔｉｃ）、シリコーンゴムその他のポリマーなどの生物分解性ポリマーまたは合成シリコーンのような不活性材料を用いることができる。
【０１０２】
当該トロンビン阻害薬はさらに、小単ラメラ小胞、大単ラメラ小胞および多ラメラ小胞などのリポソーム投与系の形で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン類などの各種リン脂質から形成することができる。
【０１０３】
当該トロンビン阻害薬はさらに、その化合物分子が結合した個々の担体としてモノクローナル抗体を利用して投与することもできる。当該トロンビン阻害薬は、標的指向性（ｔａｒｇｅｔａｂｌｅ）医薬担体としての可溶性ポリマーと結合させることもできる。そのようなポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピラン共重合体、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルトアミド−フェノールまたはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキサイド−ポリリジンなどがあり得る。さらに、当該トロンビン阻害薬は、例えばポリ酢酸、ポリグリコール酸、ポリ酢酸とポリグリコール酸との共重合体、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル類、ポリアセタール類、ポリジヒドロピラン類、ポリシアノアクリレート類およびヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロック共重合体のような薬剤の徐放を行う上で有用な種類の生物分解性ポリマーに結合させることができる。
【０１０４】
当該トロンビン阻害薬を用いる投与法は、患者の種類、動物種、年齢、体重、性別および医学的状態；治療すべき状態の重度；投与経路；患者の腎機能および肝機能；ならびに使用する特定の化合物またはその化合物の塩などの各種要素に応じて選択される。通常の技術を有する医師または獣医であれば、状態の進行を予防、処置または停止させる上で必要な薬剤の有効量を容易に決定・処方することができる。
【０１０５】
上記の効果を得るべく使用する場合の当該トロンビン阻害薬の経口用量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０２５〜７．５ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．１〜２．５ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは０．１〜０．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である（別段の断りがない限り、有効成分の量は遊離塩基基準である）。例えば、体重８０ｋｇの患者には、約０．８ｍｇ／日〜２．４ｇ／日、好ましくは２〜６００ｍｇ／日、より好ましくは８〜２００ｍｇ／日、最も好ましくは８〜４０ｍｇ／日を投与することになろう。そこで、１日１回投与用に好適に調製された医薬品には、０．８ｍｇ〜２．４ｇ、好ましくは２ｍｇ〜６００ｍｇ、より好ましくは８ｍｇ〜２００ｍｇ、最も好ましくは８ｍｇ〜４０ｍｇが含まれることになると考えられ、例えば８ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇおよび４０ｍｇを含有させる。有利には、そのトロンビン阻害薬は、１日２回、３回または４回の分割用量で投与することができる。１日２回投与の場合、好適に調製された医薬品には、０．４ｍｇ〜４ｇ、好ましくは１ｍｇ〜３００ｍｇ、より好ましくは４ｍｇ〜１００ｍｇ、最も好ましくは４ｍｇ〜２０ｍｇが含まれることになると考えられ、例えば４ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇおよび２０ｍｇを含有させる。
【０１０６】
静脈投与では、患者には０．０２５〜７．５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜２．５ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．１〜０．５ｍｇ／ｋｇ／日を送達できるだけの量で有効成分を投与することになると考えられる。そのような量は、多くの好適な方法、例えば１回の長時間または１日数回で低濃度の有効成分を大量に投与したり、例えば１日１回で短時間に高濃度の有効成分を低量にて投与する等で投与することができる。代表的には、約０．０１〜１．０ｍｇ／ｍＬ（例：０．１ｍｇ／ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬおよび０．６ｍｇ／ｍＬ）の濃度の有効成分を含む従来の静脈投与製剤を調製し、それを０．０１ｍＬ／ｋｇ〜１０．０ｍＬ／ｋｇ（例：０．１ｍＬ／ｋｇ、０．２ｍＬ／ｋｇおよび０．５ｍＬ／ｋｇ）の１日量で投与することができる。１例を挙げると、有効成分濃度０．５ｍｇ／ｍＬの静脈投与製剤８ｍＬを１日２回投与される体重８０ｋｇの患者は、有効成分を１日当たり８ｍｇ投与されることになる。静脈投与で許容されるｐＨ範囲で妥当な緩衝能力を有するグルクロン酸、Ｌ−乳酸、酢酸、クエン酸または製薬上許容される酸／共役塩基を緩衝剤として用いることができる。選択においては、薬剤の溶解度を考慮する必要がある。当業者であれば、投与する薬剤の溶解度に応じて、適切な緩衝液および製剤のｐＨを選択することは容易である。
【０１０７】
当該化合物はさらに、好適な経鼻媒体の局所使用により、あるいは当業者には公知の経皮貼付剤の形を用いる経皮経路によって、経鼻製剤で投与することができる。経皮投与系の形で投与するには当然のことながら、投与は、投与法を通じて間歇的ではなく連続的に行う。
【０１０８】
当該トロンビン阻害薬は代表的には、所期の投与形態、すなわち経口錠剤、カプセル、エリキシル剤、シロップなどに関して好適に選択され、従来の医薬実務に適合する好適な医薬用の希釈剤、賦形剤または担体（本明細書では総称して「担体」材料と称する）との混合で、有効成分として投与される。
【０１０９】
例えば、錠剤もしくはカプセルの形での経口投与の場合、活性薬剤成分を、ラクトース、デンプン、ショ糖、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、マニトール、ソルビトールなどの経口用の無毒性で製薬上許容される不活性の担体と組み合わせることができ；液体製剤での経口投与の場合、経口薬剤成分を、エタノール、グリセリン、水などの経口用の無毒性で製薬上許容される不活性担体と組み合わせることができる。さらに、所望もしくは必要に応じて、その混合物に、好適な結合剤、潤滑剤、崩壊剤および着色剤を組み込むこともできる。好適な結合剤には、デンプン；ゼラチン；グルコースもしくはβ−ラクトースなどの天然糖類；コーン甘味剤；アカシア、トラガカントもしくはアルギン酸ナトリウムなどの天然および合成のガム；カルボキシメチルセルロース；ポリエチレングリコール；ロウなどがある。これら製剤で使用される潤滑剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどがある。崩壊剤には、デンプンメチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどがあるが、これらに限定されるものではない。
【０１１０】
当該トロンビン阻害薬は、フィブリノーゲン受容体拮抗薬（例えば、不安定狭心症の治療もしくは予防のため、あるいは血管形成術後再閉塞および再狭窄を予防するため）、アスピリンなどの抗凝血剤、プラスミノーゲン活性化剤またはストレプトキナーゼなどの血栓溶解剤等（これらに限定されるものではない）の好適な抗血小板薬との併用で投与して、各種血管病の治療において相乗効果を得るようにすることができるか、あるいは抗高コレステロール血症薬などの脂質低下剤（例えば、ロバスタチン、ＨＭＧＣｏＡシンターゼ阻害薬などのＨＭＧＣｏＡレダクターゼ阻害薬）と併用してアテローム性動脈硬化を治療もしくは予防することができる。例えば、冠動脈疾患を患う患者および血管形成術を受けた患者には、フィブリノーゲン受容体拮抗薬とトロンビン阻害薬との併用が有効であると考えられる。さらにトロンビン阻害薬は、組織プラスミノーゲン活性化因子介在の血栓溶解性再潅流の有効性を高める。最初に、血栓形成後にトロンビン阻害薬を投与することができ、後に、組織プラスミノーゲン活性化因子その他のプラスミノーゲン活性化因子を投与する。
【０１１１】
他の好適な抗血小板薬、抗凝血薬または血栓溶解剤と併用する本発明のトロンビン阻害薬の代表的な用量は、別の抗血小板薬、抗凝血薬または血栓溶解剤との併用を行わない場合に投与されるトロンビン阻害薬の用量と同じとすることができるか、あるいは別の抗血小板薬、抗凝血薬または血栓溶解剤との併用を行わない場合に投与されるトロンビン阻害薬の用量より実質的に少なくすることができ、それは患者の治療上のニーズによって決まる。
【０１１２】
別段の断りがない限り、ＮＭＲ測定はいずれも４００ＭＨｚ磁場強度を用いて行った。
【０１１３】
【化６６】

【０１１４】
【化６７】

【０１１５】
【化６８】

【０１１６】
【化６９】

【０１１７】
【化７０】

【０１１８】
【化７１】

【０１１９】
【化７２】

【０１２０】
【化７３】

【０１２１】
段階Ａ：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン
【０１２２】
【化７４】

７−クロロ−３，４−ジヒドロイソキノリン−１−オン（１１．６ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）の脱水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下で室温にて撹拌しながら、それにを加えジイソプロピルエチルアミン（１７．０ｍＬ、９５．８ｍｍｏｌ、１．５当量）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１５．３３ｇ、７０．２６ｍｍｏｌ、１．１当量）および触媒量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加えた。それを室温で２時間撹拌し、減圧下に濃縮し、塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。残留物を、溶離液として塩化メチレンを用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮して、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（２）を透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．５５分、方法Ａ；質量分析：ｍ／ｚ＝２８２．１）。
【０１２３】
段階Ｂ：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアルコール
【０１２４】
【化７５】

２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（１８．４ｇ、６４．３８ｍｍｏｌ）の脱水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下に０℃で撹拌しながら、それに２．０Ｍ ＬｉＢＨ_４のテトラヒドロフラン溶液（６４．３８ｍＬ、１２８．７６ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。それを０℃で１．５時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。それによって、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアルコールを透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分、方法Ａ；質量分析：ｍ／ｚ＝２８６．２）。
【０１２５】
【化７６】

【０１２６】
【化７７】

【０１２７】
【化７８】

【０１２８】
【化７９】

【０１２９】
本発明の化合物は、当業者には公知の手順および化学中間体を用いて合成される。本発明の化合物は本質的に、互いに２つのアミド結合で連結されたＰ１、Ｐ２およびＰ３サブユニットと称される３個のサブユニットからなる。中央のサブユニットであるＰ２サブユニットはアミノ酸である。そのＰ２アミノ酸は、それのカルボキシ末端でアミド結合を介して、Ｐ１サブユニットに連結されており、そのＰ２アミノ酸は、それのアミノ末端でアミド結合を介してＰ３サブユニットに連結されている。標準的なアミノ酸カップリング手順および保護基化学によって、いずれの方向でも最終化合物を合成することができる。すなわち、Ｐ２−Ｐ１アミド結合を最初に形成し（図式１、２、４、６および７に例示したように）、次にＰ３−Ｐ２アミド結合を形成することができるか、あるいはＰ３−Ｐ２アミド結合を最初に形成し（図式３および５に例示したように）、次にＰ２−Ｐ１アミド結合を形成することができる。必要に応じてＰ１およびＰ３サブユニットで標準的な保護基化学を用いて、各種サブユニット間での選択的アミド結合形成ができるようにすることが可能である。２つのアミド結合を介してこれらのサブユニットを連結してＰ３−Ｐ２−Ｐ１構造を形成した後、Ｐ１および／またはＰ３サブユニットに存在し得る別の保護基を標準法を用いて脱離させて、最終化合物を得ることができる。図式１、２、４および５には、本発明に含まれるＰ１サブユニットのいくつかの具体例の合成を示してある。これらのＰ１サブユニットは、５−クロロベンジルアミンからなり、それのアミノ基はアミド結合を介してＰ２アミノ酸のカルボキシル末端に連結されている。５−クロロベンジルアミンＰ１サブユニットはさらに、アミノメチル基（図式１、３、４、６および７）またはアミノエチル基（図式２および５）によって２位で置換されており、それらの基も炭素原子上または窒素原子上で置換されていても良い。アミノメチルおよびアミノエチル置換基型の範囲は、本発明の最も広い属に完全に記載されており、別の具体的な置換基型は実験の部にある。中央のＰ２アミノ酸サブユニットは、プロリンなどの環状アミノ酸（図式１、２、３、４、５および７）またはＮ−置換グリシン（図式６）から誘導することができる。Ｐ２サブユニットはまた、各種大きさの環の環状アミノ酸から誘導することもでき、その環状アミノ酸Ｐ２サブユニットも、本発明の最も広い属に記載されているように、各種基で置換されていたり、ないしは二重結合を有することができる。例えば、アルキル基、フッ素、水酸基で置換された、あるいは環に二重結合を有するプロリン誘導体は文献で公知であるか（例えば、Ｄｅｍａｎｇｅ， Ｌ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９８， ３９ （１０）， １１６９−１１７２； Ｒｏｂｉｎｓｏｎ， Ｊ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９８， ５４ （５）， ９８１−９９６； Ｓｈｕｍａｃｈｅｒ， Ｋ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｎｔｅｔｒｙ １９９８， ９（１）， ４７−５３； Ｓｉｂｉ， Ｍ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９５， ３６（３５）， ６２１３−６２１６； Ｍａｃｋ， Ｈ．， ｅｔ ａｌ． ドイツ特許第１９６３００８２号； Ｍｏｏｄｙ， Ｃ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９４， ３５（３９）， ７２７７−７２８０； Ｐｅｄｒｅｇａｌ， Ｃ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． １９９４， ３５（１３）， ２０５３−２０５６； Ｓｏｕｃｙ， Ｆ．， ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， Ｐｅｒｋ Ｉ １９９１， （１１）， ２８８５−２８８７；米国特許第４０６０６０３号； Ｈｏｌｌａｄａｙ， Ｍ．， ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍ． １９９１，３４（１）， ４５５−４５７； Ｃｈｕｎｇ， Ｊ．， ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９０， ５５（１）， ２７０−２７５； Ｅｓｃｈ， Ｐ．， ｅｔ ａｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９２， ４８（２２）， ４６５９； Ｓａｓａｋｉ， Ａ．， ｅｔ ａｌ． Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９７， ６２（３）， ７６５−７７０； Ｍｕｌｚｅｒ， Ｊ．， ｅｔ ａｌ． Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９９６，１２３参照）、ないしは市販されている。最も広い属に記載されているこれらのＰ２の各種形態を用いて、本発明の化合物を製造することができる。Ｐ３サブユニットは、中央のＰ２アミノ酸サブユニットのアミノ末端をアシル化するのに用いられるカルボン酸である。これらＰ３サブユニットの多くは、α−アミノ酸（図式１および５）またはα−ヒドロキシ酸（図式２、３、４、６および７）から誘導される。広範囲のＰ３サブユニットを用いて、本発明の最も広い属に記載の、ならびに実験の部の別の具体的な化合物で例示されている強力なトロンビン阻害薬を製造することができる。
【０１３０】
実施例１
３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−（２−（２−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１３１】
【化８０】

【０１３２】
段階１：７−クロロ−３，４−ジヒドロイソキノリン−１−オン（１１．６ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）の脱水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにジイソプロピルエチルアミン（１７．０ｍＬ、９５．８ｍｍｏｌ、１．５当量）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１５．３３ｇ、７０．２６ｍｍｏｌ、１．１当量）および触媒量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加えた。その溶液を室温で２時間撹拌し、減圧下に濃縮し、塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。残留物を、溶離液として塩化メチレンを用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮して、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オンを透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．５５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８２．１）。
【０１３３】
段階２：前段階からの２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（１８．４ｇ、６４．３８ｍｍｏｌ）の脱水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下に０℃で撹拌しながら、それに２．０ＭＬｉＢＨ_４のテトラヒドロフラン溶液を加えた（６４．３８ｍＬ、１２８．７６ｍｍｏｌ、２当量）。その溶液を０℃で１．５時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。それによって、２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアルコールを透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８６．２）。
【０１３４】
段階３：前段階からの２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアルコール６４９ｍｇ（２．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に０℃で、ＤＰＰＡ ０．６７４ｍＬ（３．１３ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ ０．４６８ｍＬ（３．１３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で１０分間、次に室温で撹拌した。３時間後、反応液を飽和炭酸ナトリウム水溶液で処理し、酢酸エチルで抽出した（３回）。有機抽出液を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固して粗油状物９６３ｍｇを得た。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）によって、ｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアジドを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ７．４４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．３６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０および８．２Ｈｚ）、７．２６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、６．９２（ｂｒｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、４．５３（ｓ、２Ｈ）、３．１０（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．３および７．６Ｈｚ）、２．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３３３．０；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３２（１５％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０１３５】
段階４：前段階からの２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアジド６２９ｍｇ（２．０２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０．０ｍＬ、水３．１ｍＬを含有）溶液に、１．０６ｇ（４．０５ｍｍｏｌ）トリフェニルホスフィンを加え、反応液を室温で終夜撹拌した。ＴＨＦを減圧下に除去し、残留水相を塩化メチレンで抽出した（３回）。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（直線勾配で２６６／１０／１から２００／１０／１の塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）によって、２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミンを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ７．４５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．７Ｈｚ）、７．１８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１および８．２Ｈｚ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．０１（ｂｒｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、３．７３（ｓ、２Ｈ）、３．０７（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．５および７．３Ｈｚ）、２．６８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｈ＝２８５．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３３（１６０／１０／１の塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０１３６】
段階５：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニン１．０ｇ（３．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に、Ｌ−プロリンメチルエステル塩酸塩０．６２ｇ（３．８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．５２ｍＬ（３．８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ０．５１ｇ（０．３８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ１．１ｇ（５．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃ３００ｍＬで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液、水およびブラインそれぞれ２００ｍＬで洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。自動フラッシュクロマトグラフィー精製（ＩＳＣＯコンビフラッシュ（ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ）、シリカゲル７０ｇ、直線勾配：５０％から１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンで３０分間、次に６０ｍＬ／分で２％から１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）によって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｌ−プロリンメチルエステル０．９ｇを得た。そのうちの０．４４ｇ（１．２ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ７ｍＬに溶解させた。それにＬｉＯＨ１．２ｍＬ（１．２ｍｍｏｌ、１Ｍ水溶液）を加え、反応混合物を６時間撹拌し、追加のＬｉＯＨ ０．１２ｍＬ（０．１２ｍｍｏｌ、１Ｍ水溶液）を加え、反応混合物をさらに１６時間撹拌してから、濃ＨＣｌ（１．４４ｍｍｏｌ、１２Ｍ水溶液）０．１２ｍＬを加え、反応液を濃縮してＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｌ−プロリンを泡状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ８．４７（ｍ、１Ｈ）；７．７８（ｍ、１Ｈ）；７．３４（ｍ、２Ｈ，）；４．３１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．２１，８．８Ｈｚ）；３．７８（ｂｒｍ、１Ｈ）；３．５４（ｂｒｍ、１Ｈ）；３．１７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．２３および１３．５Ｈｚ）；３．０２（ｍ、２Ｈ）；２．３〜１．８（ｂｒｍ、４Ｈ）；１．３５（ｓ、９Ｈ）；電気スプレー質量分析スペクトラム：３６４。
【０１３７】
段階６：実施例１５の段階７および８に記載のものと同様のカップリング、脱保護および精製手順を用いて、段階４からの２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミンおよび段階５からのＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｌ−プロリンから、標題化合物を製造した。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ８．８４（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、８．７２〜８．６２（ｂｒｍ、４Ｈ）、８．１２〜８．００（ｂｒｍ、４Ｈ）、７．５４（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、７．３３〜７．１９（ｍ、４Ｈ）、４．５８（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４０〜４．２０（ｍ、３Ｈ）、３．８８〜３．８０（ｍ、２Ｈ）、３．４３〜３．２８（ｍ、３Ｈ）、２．９６（ｂｒｓ、４Ｈ）、１．９０〜１．７５（ｂｒｍ、２Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｈ＝４３０．２；ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．１３（８０／１０／１の塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０１３８】
実施例２
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１３９】
【化８１】

【０１４０】
段階１：２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミン（０．３８ｇ、１．４ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（０．４９ｇ、１．４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（０．２２ｇ、１．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．３５ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（約０．２ｍＬ）を徐々に加えることで、溶液のｐＨを徐々に上げてｐＨ６とした（濡れたイー・メルク（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ）ｐＨ試験紙で測定）。３時間の反応時間後、ＨＰＬＣ分析でベンジルアミン原料の完全な消費が示された。溶媒をロータリーエバポレータ（浴温：３０℃、約０．５トル）で除去し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒をロータリーエバポレータで除去した。残留物を、１：１、３：１、１：０のＥｔＯＡｃ：ヘキサンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを泡状物として得た（０．７５ｇ；９０％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．９５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６０４）。
【０１４１】
段階２：前段階からの１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．７０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにピペリジン（２ｍＬ）を加えた。１５分間の反応時間後、ＨＰＬＣ分析によって、原料が完全に消費されていることが示された。溶媒および過剰のピペリジンをロータリーエバポレータ（浴温：４０℃、約０．５トル）で除去した。残留物を９５：５から９０：１０そして８５：１５ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ａ（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）アミドをガム状物として得た（０．３５ｇ；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ；ヨウ素での肉眼観察）；
ＨＰＬＣ保持時間＝２．８３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２）。
【０１４２】
段階３：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．５０ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．２１５ｇ、１．４）および２Ｒ−ヒドロキシ−２−フェニルプロピオン酸（０．２１５ｇ、１．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（０．２９ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。濡れたイー・メルク試験紙で測定して溶液がｐＨ６となるまで、撹拌溶液にＤＩＥＡ（約０．１４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。有機相を分液し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を、９８：２ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、溶媒の減圧下での除去によって、１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドをガム状物として得た（０．６２ｇ；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９８：２ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５３０）。
【０１４３】
段階４：前段階からの１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．６２ｇ、１．２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＨＣｌガスを１５分間吹き込んだ。混合物を０℃で２時間撹拌し、溶媒および過剰のＨＣｌを減圧下に除去した。残留物を、５％から１０％、次に１５％のＡ：ＣＨ_２Ｃｌ_２（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）という勾配溶離を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせて、溶媒の減圧下での除去後に標題化合物を非晶質固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３０）。
【０１４４】
実施例３
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（メチルスルホニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１４５】
【化８２】

１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（９０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリエチルアミン（５０μＬ、０．３５ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロライド（１６μＬ、０．２１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）で洗浄した。有機相を分液し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を減圧下に除去して標題化合物を非晶質固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．２（９８：２ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．０５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５０８）。
【０１４６】
実施例４
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（エトキシカルボニルエチルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１４７】
【化８３】

１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（９０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにアクリル酸エチル（２５μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を５％から７．５％ＭｅＯＨ／ＣＨ_２Ｃｌ_２の勾配溶離を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせて、溶媒を減圧下に除去して標題化合物を非晶質固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９５：５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５３０）。
【０１４８】
実施例５
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（カルボキシエチルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１４９】
【化８４】

１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−（２−（エトキシカルボニルエチルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（６０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＮａＯＨ水溶液（３．０Ｍ溶液４５μＬ、０．１３５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をアセトニトリル：水：０．１％ＴＦＡ勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、凍結乾燥して、標題化合物のＴＦＡ塩をガム状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７２分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５０２）。
【０１５０】
実施例６
１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−（１−アミノ−２，２，２−トリフルオロエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１５１】
【化８５】

Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（−２，２，２−トリフルオロエチリデン）アミンの製造。Ｉｎｇｒａｓｓｉａ， Ｌａｕｒｅｎｔ； Ｍｕｌｌｉｅｚ， Ｍｉｃｈｅｌ． Ｅｘｐｅｄｉｅｎｔ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｐｅｒｈａｌｏ ａｌｄｅｈｙｄｅ Ｎ−ａｃｙｌ ｈｅｍｉａｍｉｎａｌｓ． Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ （１９９９）， （１０）， １７３１−１７３８）
【０１５２】
段階１：２−クロロ−５−ヨードベンジルアルコール（０．５３７ｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、水素化ナトリウム（６０％鉱油中分散品８８ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）に０℃で窒素下にて撹拌しながら加えた。５分後、混合物を冷却して−７８℃とし、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍのヘキサン溶液１．６６ｍＬ、４．１５ｍｍｏｌ）を６分間かけて加えた。さらに５分後、Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（２，２，２−トリフルオロエチリデン）アミン（０．４０６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を５分間かけて加えた。さらに５分後、反応液を飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、混合物を昇温させて室温とし、酢酸エチルとブラインとの間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してガム状物を得た。それをシリカでのクロマトグラフィー（２％メタノール／クロロホルムを溶離液とする）によって精製して、Ｎ−｛１−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミンを、３−クロロベンジルアルコール（０．３８ｇ）との１：１．７混合物として、ガム状物として得た。ＭＳ３４６．４（Ｍ＋１）。
【０１５３】
段階２：Ｎ−（１−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（３−クロロベンジルアルコールとの１：１．７混合物０．４６ｇ）およびＤＰＰＡ（０．６９６ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＤＢＵ（０．４８３ｍＬ、３．２３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を昇温させて室温とし、３時間後にエーテルと水との間で分配した。有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去して油状物を得た。それをシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、０％から１５％酢酸エチル／ヘキサンを溶離液とする）によって精製して、Ｎ−１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．１９９ｇ）を油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．９７（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７（ｄ、Ｊ＝１４．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．４８（ｄ、Ｊ＝１４．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．２０（５重線、Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、６．６３（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．３７（ｍ、２Ｈ）、７．５５（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１５４】
段階３：Ｎ−｛１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２，２，２−トリフルオロエチル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．１９９ｍｇ、０．５３８ｍｍｏｌ）の水（１ｍＬ）および水（３０μＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフェニルホスフィン（０．１５７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、揮発分を減圧下に溶媒留去し、残留物をメタノール（１ｍＬ）に溶解させ、水酸化カリウム（１ペレット）を加え、混合物を６０℃で１５分間撹拌した。反応混合物を冷却し、エーテルと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してガム状物を得た。その粗アミン、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン（１１５．８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（３６．６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中混合物を撹拌したものに、ＥＤＣ（１５４．７ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３溶液との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してガム状物を得た。それをシリカゲルでのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３、１：５を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−２，２，２−トリフルオロエチル｝ベンジル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（１９６ｍｇ）をガラス状物として得た。ＭＳ：５４２．３（Ｍ＋１）。
【０１５５】
段階４：Ｎ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−２，２，２−トリフルオロエチル）ベンジル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（１９６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１．５ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＴＦＡ（２．５ｍＬ）を加えた。１時間後、溶液を濃縮し、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２と１０％ＮａＨＣＯ_３溶液との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してＮ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−２，２，２−トリフルオロエチル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１３６ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．６７（ｍ、２Ｈ）、１．８２〜１．９４（ｍ、３Ｈ）、２．１６（ｍ、１Ｈ）、２．８１（ｍ、１Ｈ）、２．９５（ｍ、１Ｈ）、３．６５（ｍ、０．５Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、３．７７（ｍ、０．５Ｈ）、３．９８（ｄ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、０．５Ｈ）、４．０３（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、０．５Ｈ）、４．３６（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｍ、１Ｈ）、５．２６（ｍ、１Ｈ）、６．６５〜６．７７（ｍ、４Ｈ）、７．３３（ｍ、２Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、０．５Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、０．５Ｈ）、７．９４（ｂｒｓ、０．５Ｈ）、８．０５（ｂｒｓ、０．５Ｈ）。
【０１５６】
段階５：Ｎ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ−２，２，２−トリフルオロエチル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（６８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（−）−ヘキサヒドロマンデル酸（２４．２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（１０．４ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（４４．０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３溶液との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３、１：２を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−２，２，２−トリフルオロエチル｝ベンジル）−１−［（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル］−Ｌ−プロリンアミド（４４．４ｍｇ）をガラス状物として得た。ＭＳ：５８２．４（Ｍ＋１）。
【０１５７】
段階６：Ｎ−（５−クロロ−２−｛１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−２，２，２−トリフルオロエチル）ベンジル）−１−［（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル］−Ｌ−プロリンアミド（４４．４ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（２ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＣＡＮ（８３．６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の（１．５ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、反応混合物を水とＣＨ_２Ｃｌ_２との間で分配した。水層を１Ｍ ＮａＯＨ溶液でｐＨ＝８．５に調節し、ＮａＣｌで飽和させた。得られた混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（アンモニア飽和ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９８：２）によって精製して、標題化合物をガラス状物として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）計算値：Ｃ_２２Ｈ_３０ＣｌＦ_３Ｎ_３Ｏ_３（Ｍ＋１）４７６．１９２２、実測値：４７６．１９２６。
【０１５８】
実施例７
１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−（１−アミノ−２，２−ジフルオロエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１５９】
【化８６】

Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（２，２，２−トリフルオロエチリデン）アミンの合成について記載の方法によって、ジフルオロアセトアルデヒドエチルヘミアセタールからＮ−（４−メトキシフェニル）アミンを製造した。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．８３（ｓ、３Ｈ）、６．１６（ｄｔ、Ｊ＝５．３および５４．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｍ、２Ｈ）、７．２３（ｍ、２Ｈ）、７．８５（ｄｔ、Ｊ＝２．６および５．３Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１６０】
段階１：ＮａＨ（０．１５５ｇ、３．８９ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（９ｍＬ）懸濁液を０℃で撹拌しながら、それに５−クロロ−２−ヨードベンジルアルコール（０．９４８ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（２７ｍＬ）溶液を、脱水ＴＨＦで洗いながら加えた。５分後、混合物を冷却して−７８℃とし、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍのヘキサン溶液２．９７ｍＬ、７．４２ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下した。さらに１０分後、Ｎ−（２，２−ジフルオロエチリデン）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．６５４ｇ、３．５３ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（９ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、混合物を−７８℃で過剰の飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液によって反応停止し、室温で１５分間撹拌した。その溶液をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去し、残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、５％から３０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝フェニル）メタノール（０．４３９ｇ）を油状物として得た。ＭＳ３２８．４（Ｍ＋１）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ２．００（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．７０（ｓ、３Ｈ）、４．１４（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．８２（ｍ、２Ｈ）、５．０２（ｍ、１Ｈ）、６．０８（ｄｔ、Ｊ＝３．０Ｈｚ、５６．０Ｈｚ、１Ｈ）、６．５７（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、６．７１（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、２Ｈ）、７．２９（ｄｄ、Ｊ＝２．２および８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１６１】
段階２：（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝フェニル）メタノール（０．４３９ｇ、１．３４ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（０．２９ｍＬ、１．３４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．７ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＤＢＵ（０．２０ｍＬ、１．３４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を昇温させて室温とした。３時間後、溶液をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を１ＭＮａＯＨ（１０ｍＬ）およびブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に減量してＮ−｛１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２，２−ジフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．４６３ｇ）を油状物として得た。ＭＳ３５３．５（Ｍ＋１）。
【０１６２】
段階３：Ｎ−｛１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２，２−ジフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．４６３ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）および水（０．０２ｍＬ、１．３１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２．６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフェニルホスフィン（０．３４４ｇ、１．３１ｍｍｏｌ）を加えた。その溶液を室温で２時間撹拌し、溶媒を減圧下に除去した。残留物をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶解させた。ＫＯＨペレット１個を加え、混合物を５分間還流した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃと１Ｍ ＨＣｌとの間で分配した。水層を１Ｍ ＮａＯＨで塩基性とし、溶液をジエチルエーテルで抽出した。有機相を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に減量し、残留物をシリカでのカラムクロマトグラフィー（水酸化アンモニウム／メタノール／クロロホルム、１：９：９０を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］−２，２−ジフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．３１４ｇ）を油状物として得た。ＭＳ３２７．５（Ｍ＋１）。
【０１６３】
段階４：Ｎ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル）−２，２−ジフルオロエチル）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．３１４ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−プロリン（０．２０７ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．１７１、１．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．１７１ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層を１Ｍクエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に減量し、残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、１０％から５０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２５６ｇ）を泡状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２４．３。
【０１６４】
段階５：Ｎ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２５６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５．０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＴＦＡ（２．５０ｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してＮ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２０７ｇ）をガム状物として得た。
【０１６５】
段階６：Ｎ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０６９１ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−ヘキサヒドロマンデル酸（０．０２５８ｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．０１１１ｇ、０．０８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．０ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．０４６９ｇ、０．２４ｍｍｏｌを加えた。２時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去し、残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、１０％から７０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−１−［（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル］−Ｌ−プロリンアミド（０．０３３２ｇ）を白色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５６４．４。
【０１６６】
段階７：Ｎ−（５−クロロ−２−｛２，２−ジフルオロ−１−［（４−メトキシフェニル）アミノ］エチル｝ベンジル）−１−［（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル］−Ｌ−プロリンアミド（０．０３３２ｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（１．５ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＣＡＮ（０．０６４７ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の水溶液（水０．４ｍＬ）を加え、溶液を昇温させて室温とした。４時間後、溶液をＥｔＯＡｃと１０％水溶液ＮＨ_４ＯＨとの間で分配した。得られた２相懸濁液を濾過し、ＥｔＯＡｃ層を１０％亜硫酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をシリカでのカラムクロマトグラフィー（１％から１０％の１０％水酸化アンモニウム／メタノール／クロロホルム勾配を溶離液とする）によって精製して、標題化合物をガム状物として得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４５８．４。
【０１６７】
実施例８
Ｎ−（５−クロロ−２−（（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル）ベンジル）−１−（（２Ｒ）−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１６８】
【化８７】

３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩の製造。Ｃａｒｌｉｎｇ， Ｗｉｌｌｉａｍ Ｒｏｂｅｒｔ； Ｍｉｔｃｈｉｎｓｏｎ， Ａｎｄｒｅｗ； Ｒｕｓｓｅｌｌ， Ｍｉｃｈａｅｌ Ｇｅｏｆｆｒｅｙ Ｎｅｉｌ； Ｓｔｒｅｅｔ， Ｌｅｓｌｉｅ Ｊｏｓｅｐｈ
ＧＡＢＡＡ受容体リガンドとしてのトリアゾリルメトキシトリアゾロピリダジン類の製造。ＰＣＴ国際出願（２０００）、ＷＯ ００４７５８２Ａ１ ２００００８１７
２−ブロモメチル−５−クロロベンゾニトリルの製造。Ｎａｎｎｉｎｉ， Ｇ．； Ｇｉｒａｌｄｉ， Ｐ． Ｎ．； Ｍｏｌｇｏｒａ， Ｇ．； Ｂｉａｓｏｌｉ， Ｇ．； Ｓｐｉｎｅｌｌｉ， Ｆ．； Ｌｏｇｅｍａｎｎ， Ｗ．； Ｄｒａｄｉ， Ｅ．； Ｚａｎｎｉ， Ｇ．； Ｂｕｔｔｉｎｏｎｉ， Ａ．； Ｔｏｍｍａｓｉｎｉ， Ｒ． Ｎｅｗ ａｎａｌｇｅｓｉｃ−ａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｒｕｇｓ． １−Ｏｘｏ−２−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ｉｓｏｉｎｄｏｌｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ． Ａｒｚｎｅｉｍ．−Ｆｏｒｓｃｈ． （１９７３）， ２３（８）， １０９０−１００
【０１６９】
段階１：３，３−ジフルオロアゼチジン塩酸塩（６４．８ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）および２−ブロモメチル−５−クロロベンゾニトリル（１２１．０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（７ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＤＩＥＡ（０．１９６ｍＬ、１．１２ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、反応液をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物を１Ｎ ＨＣｌとエーテルとの間で分配した。水層をＮａＨＣＯ_３で中性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒留去して５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル（６７．８ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．６８（ｔ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ、４Ｈ）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１７０】
段階２：５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル（６７．８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）のエーテル（５ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに１Ｍ ＬＡＨのエーテル溶液（０．４２ｍＬ、０．４２ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、反応液を水（１６μＬ）、１５％ＮａＯＨ（１６μＬ）および水（３２μＬ）の順で処理した。１５分間撹拌後、混合物を濾過し、濾液を溶媒留去した。残留物をＩＮ ＨＣｌとエーテルとの間で分配した。水層をＮａＨＣＯ_３で中性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒留去して５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジルアミン（６１ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．５６（ｔ、Ｊ＝１１．９Ｈｚ、４Ｈ）、３．７３（ｓ、２Ｈ）、３．８５（ｓ、２Ｈ）、７．２６（ｍ、３Ｈ）。
【０１７１】
段階３：５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジルアミン（６８．８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−プロリン（６０．０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（１９．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．５ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（８０．２ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を加えた。６６時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３、１：５を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（６４．２ｍｇ）をガラス状物として得た。ＭＳ：４４４．４（Ｍ＋１）。
【０１７２】
段階４：Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（６４．２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。３時間後、追加のＴＦＡ０．３ｍＬを加えた。さらに３０分後、反応混合物を濃縮し、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２と１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してＮ−｛５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−Ｌ−プロリンアミド（４５．０ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．７０（ｍ、２Ｈ）、１．９０（ｍ、２Ｈ）、２．１６（ｍ、１Ｈ）、２．８５〜３．０４（ｍ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝１２．１Ｈｚ、４Ｈ）、３．７３（ｍ、３Ｈ）、４．３７〜４．５２（ｍ、２Ｈ）、７．１９（ｍ、２Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝２．１９Ｈｚ、１Ｈ）、８．４５（ｂｒｓ、１Ｈ）。
【０１７３】
段階５：Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３，３−ジフルオロアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−Ｌ−プロリン（４５．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−（−）−ヘキサヒドロマンデル酸（２１．７ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（８．９ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（３７．６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加えた。４時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９８：２を溶離液とする）によって精製して、標題化合物をガラス状物として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）計算値：Ｃ_２４Ｈ_３３ＣｌＦ_２Ｎ_３Ｏ_３（Ｍ＋１）４８４．２１７３、実測値：４８４．２１４０。
【０１７４】
実施例９
１−（（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（２−アミノ−３，３−ジフルオロプロピル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１７５】
【化８８】

【０１７６】
段階１：５−クロロ−２−メチルベンゾニトリル（３．０３ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（１０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＬＡＨ溶液（１Ｍエーテル溶液、４０ｍＬ）を加え、得られた溶液を昇温させて室温とした。３０分後、溶液を冷却して０℃とし、水（１．５２ｍＬ）、１５％ＮａＯＨ（１．５２ｍＬ）および水（４．５６ｍＬ）をその順に加えた。固体を濾去し、濾液を減圧下に溶媒留去して５−クロロ−２−メチルベンジルアミン（３．１１ｇ）を油状物として得た。
【０１７７】
段階２：５−クロロ−２−メチルベンジルアミン（３．１１ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＢｏｃ_２Ｏ（５．２４ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、溶液を減圧下に溶媒留去し、残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、５％から１５％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、５−クロロ−２−メチルベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．７８ｇ）を固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．４７（ｓ、９Ｈ）、２．２７（ｓ、３Ｈ）、４．２８（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．７３（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．０８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．１５（ｄｄ、Ｊ＝２．０および８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．２２（ｓ、１Ｈ）。
【０１７８】
段階３：５−クロロ−２−メチルベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．７８１ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１４ｍＬ）溶液を窒素下に−７８℃で撹拌しながら、それにｓｅｃ−ブチルリチウム（１．３Ｍシクロヘキサン溶液、１０．７２ｍＬ）を加えて、深赤色溶液を得た。１０分後、Ｎ−（−２，２−ジフルオロエチリデン）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（１．２９ｇ、６．９６ｍｍｏｌ）を加え、さらに５分後、溶液を過剰の飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で反応停止し、昇温させて室温とした。溶液をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、５％から１５％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、５−クロロ−２−（３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５１６ｇ）を泡状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４１．１。
【０１７９】
段階４：５−クロロ−２−（３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．５１６ｇ、１．１７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５．２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＴＦＡ（５．２ｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してＮ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロベンジル］−２，２−ジフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．５５０ｇ）を泡状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３４１．１。
【０１８０】
段階５：Ｎ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロベンジル］−２，２−ジフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．５５０ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン（０．３４７ｇ、１．６１ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．２８６ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．８ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．４０２ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を加えた。１８時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機相を１Ｍクエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してＮ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピルベンジル）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−プロリンアミド（０．６２６ｇ）を油状物として得た。ＭＳ ｍ／ｚ＝５３８．４。
【０１８１】
段階６：Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピルベンジル）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−プロリンアミド（０．６２６ｇ、１．２０ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（５．３ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＴＦＡ（５．３ｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してＮ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．４３９ｇ）を泡状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３８．４。
【０１８２】
段階７：Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１００ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−シクロヘキシルグリシン（０．０５８７ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．０１５５ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２．８ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．０６５６ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルグリシル｝−Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−プロピル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１８４５ｇ）を油状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝６７７．４。
【０１８３】
段階８：１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルグリシル｝−Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３−ジフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル）ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１６８ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（３．０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＣＡＮ（０．２７４ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の水溶液（水２．０ｍＬ）を加え、得られた溶液を昇温させて室温とした。１８時間後、溶液をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）と１０％水溶液ＮＨ_４ＯＨ（１０ｍＬ）との間で分配した。得られた２相懸濁液を濾過し、有機層を１０％亜硫酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、７０％酢酸エチル／ヘキサンと次に水酸化アンモニウム／メタノール／クロロホルム、１：９：９０を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−［２−（アミノ−３，３−ジフルオロプロピル）−５−クロロベンジル］−１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｌ−プロリンアミド（０．０８０１ｇ）を油状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７１．４。
【０１８４】
段階９：Ｎ−［２−（２−アミノ−３，３−ジフルオロプロピル）−５−クロロベンジル］−１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノール｝−Ｌ−プロリンアミド（０．０８０ｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（０．７ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＴＦＡ（０．６５ｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をＥｔＯＡｃと１Ｍ ＨＣｌとの間で分配した。水層を減圧下に溶媒留去して、標題化合物のＨＣｌ塩をオフホワイト固体として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７１．５。
【０１８５】
実施例１０
１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［２−（２−アミノ−３，３，３−トリフルオロプロピル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０１８６】
【化８９】

【０１８７】
段階１：５−クロロ−２−メチルベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．６１ｇ、１４．１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を−７８℃で窒素下に撹拌しながら、ｓｅｃ−ブチルリチウム（１．３Ｍシクロヘキサン溶液、２１．７２ｍＬ）を加えて、深赤色溶液を得た。１０分後、Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（２，２，２−トリフルオロエチリデン）アミン（３．０１ｇ、１４．１２ｍｍｏｌ）を加え、さらに５分後、溶液を過剰の飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で反応停止し、昇温させて室温とした。溶液をＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン、５％から２０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、５−クロロ−２−｛２−［（４−メトキシフェニル）アミノ−３，３，３−トリフルオロプロピル｝ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．６９ｇ）をガム状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．４７（ｓ、９Ｈ）、２．９０（ｄｄ、Ｊ＝１０．７および１４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．１６（ｄｄ、Ｊ＝３．４および１４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．６２（ｂｒｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．７１（ｓ、３Ｈ）、４．０３（ｂｒｍ、１Ｈ）、４．２９（ｄｄ、Ｊ＝５．６および１４．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｂｒｄｄ、１Ｈ）、４．８７（ｂｒｓ、１Ｈ）、６．４７（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、２Ｈ）、６．６９（ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．１４（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．１９（ｄｄ、Ｊ＝８．２および２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．２３（ｓ、１Ｈ）。
【０１８８】
段階２：５−クロロ−２−（２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−３，３，３−トリフルオロプロピル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．２０５ｇ、０．４４７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＴＦＡ（ＩｍＬ）を加えた。１時間後、溶媒を減圧下に留去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してＮ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロベンジル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．１８２ｇ）を固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．０２（ｄｄ、Ｊ＝１０．９および１４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．１１（ｄｄ、Ｊ＝３．４および１４．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．６９（ｓ、３Ｈ）、３．８６（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７（ｄ、Ｊ＝１２．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．９８（不明瞭なｍ、１Ｈ）、６．４４（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、６．６６（ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、２Ｈ）、７．１９（ｓ、２Ｈ）、７．２２（ｓ、１Ｈ）。
【０１８９】
段階３：Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｌプロリン（０．３２５ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）、Ｎ−｛１−［２−（アミノメチル）−４−クロロベンジル］−２，２，２−トリフルオロエチル｝−Ｎ−（４−メトキシフェニル）アミン（０．３２９ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．１６２ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．２２９ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、溶液をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して１−（（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３，３−トリフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．７９８ｇ）を油状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝６９５．４。
【０１９０】
段階４：１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルグリシル｝−Ｎ−（５−クロロ−２−｛３，３，３−トリフルオロ−２−［（４−メトキシフェニル）アミノ］プロピル｝ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．７９８ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）のＣＨ_３ＣＮ（２０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＣＡＮ（１．２５９ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）の水溶液（水１２ｍＬ）を加え、得られた溶液を昇温させて室温とした。溶液をＥｔＯＡｃと１０％水溶液ＮＨ_４ＯＨとの間で分配し、得られた２相懸濁液を濾過し、有機層を１０％亜硫酸ナトリウムおよびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去した。残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（１％から１０％の１０％水酸化アンモニウム／メタノール／クロロホルム勾配を溶離液とする）によって精製して、Ｎ−［２−（２−アミノ−３，３，３−トリフルオロプロピル）−５−クロロベンジル］−１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｌ−プロリンアミド（０．２８２ｇ）を泡状物として得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝５８９．６。
【０１９１】
実施例１１
１−（（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（アゼチジン−１−イルメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０１９２】
【化９０】

【０１９３】
段階１：５−クロロ−２−ヨードベンジルアルコール（５００ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＤＰＰＡ（０．４４２ｍＬ、２．０５ｍｍｏｌ）および次にＤＢＵ（０．３０６ｍＬ、２．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を昇温させて室温とした。１６時間後、混合物を昇温させて７０℃とし、２時間経過させた。反応液を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去して５−クロロ−２−ヨードベンジルアジド（５８８ｍｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ４．４３（ｓ、２Ｈ）、７．０３（ｄｄ、Ｊ＝２．６，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝２．６，１Ｈ）、７．７８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１９４】
段階２：５−クロロ−２−ヨードベンジルアジド（０．５５ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１７．５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＰＰｈ_３（１．４６ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）を加え、水（３．５ｍＬ）を加え、室温で撹拌した。１６時間後、混合物を昇温させて８０℃とし、３時間経過させた。反応液を濃縮し、残留物をエーテルと１Ｎ ＨＣｌとの間で分配した。水層をＮａＨＣＯ_３でｐＨ＝８に調節し、ＮａＣｌで飽和させ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去して５−クロロ−２−ヨードベンジルアミン（４２８ｍｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．８３（ｓ、２Ｈ）、６．９５（ｄｄ、Ｊ＝２．６，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１９５】
段階３：５−クロロ−２−ヨードベンジルアミン（４２８ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｌ−プロリン（６２７ｍｇ、１．７７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（１２１ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（５０９ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物を、シリカでのクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３、１：３を溶離液とする）によって精製して、Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（５−クロロ−２−ヨードベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（７４５ｍｇ）をガラス状物として得た。^１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．０５〜１．２４（ｍ、６Ｈ）、１．２６（ｄ、Ｊ＝２．９Ｈｚ、９Ｈ）、１．６８〜１．８０（ｍ、６Ｈ）、１．８９（ｄ、Ｊ＝１２．６Ｈｚ、１Ｈ）、２．００〜２．０７（不明瞭）（ｍ、１Ｈ）、２．４１（ｍ、１Ｈ）、３．５７（ｄｄ、Ｊ＝９．２，１６．５Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７〜４．０９（ｍ、２Ｈ）、４．２８（ｄｄ、Ｊ＝５．７，１６．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．４０（ｄｄ、Ｊ＝６．６，１６．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．７０（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１Ｈ）、５．０８（ｄ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｄｄ、Ｊ＝２．６，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９（ｄ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．６１（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．６８（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１９６】
段階４：Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（５−クロロ−２−ヨードベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（６７０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）およびＰＰｈ_３（４６．６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を一酸化炭素雰囲気下で撹拌しながら、それに水素化トリ−ｎ−ブチルスズ（３８８ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９ｍＬ）溶液を３時間かけて加えた。室温で１６時間後、反応液を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去し、残留物をシリカでのクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９７：３を溶離液とする）によって精製して、Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（５−クロロ−２−ホルミルベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（２２１ｍｇ）をガラス状物として得た。ＭＳ：５０６．５（Ｍ＋１）。
【０１９７】
段階５：アゼチジン塩酸塩（２０４ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）および１，２−ジクロロエタン（７ｍＬ）の撹拌混合物に、ＴＥＡ（２２１ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）を加えた。２分後、Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（５−クロロ−２−ホルミルベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（２２１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）、水素化ホウ素ナトリウムトリアセトキシ（４６３ｍｇ、２．１８ｍｍｏｌ）および酢酸（３０μＬ、０．５２ｍｍｏｌ）を加え、さらに１６時間後、反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２と１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物を冷１Ｎ ＨＣｌとエーテルとの間で分配した。水層をＮａＨＣＯ_３溶液でｐＨ＝８に調節し、ＮａＣｌで飽和させ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。ＣＨ_２Ｃｌ_２層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去してＢｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−［２−（アゼチジン−１−イルメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（１０５ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．０２〜２．３０（ｍ、２６Ｈ）、３．１９（ｍ、４Ｈ）、３．４６〜３．６６（ｍ、３Ｈ）、３．９２（ｍ、１Ｈ）、４．１５（ｍ、１Ｈ）、４．４７（ｍ、２Ｈ）、４．７８（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．１４（ｄ、Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．１６（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｄｄ、Ｊ＝２．０，８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、８．０５（ｂｒｓ、１Ｈ）。
【０１９８】
段階６：Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−［２−（アゼチジン−１−イルメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（１０５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＴＦＡ（１ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を濃縮し、残留物をアンモニアで飽和したＣＨＣｌ_３溶液に取った。次に、その混合物を濾過し、濃縮した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（アンモニア飽和ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９６：４）によって精製して、標題化合物をガラス状物として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ_２４Ｈ_３６ＣｌＮ_４Ｏ_２（Ｍ＋１）計算値：４４７．２５２１、実測値：４４７．２５１３。
【０１９９】
実施例１２
Ｎ−（２−アゼチジン−２−イル−５−クロロベンジル）−１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２００】
【化９１】

【０２０１】
段階１：内部温度を２０〜２５℃に維持しながら、５−クロロ−２−ヨード安息香酸（１７．１７ｇ、６０．７９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）およびホウ酸トリメチル（２０ｍＬ）の溶液を撹拌しながら、それにボラン・硫化メチル（７．３ｍＬ、７３ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、メタノール（８．８７ｍＬ、０．２１９ｍｏｌ）を注意深く加え、溶液を、メタノールと共沸させながら減圧下に溶媒留去した（５０ｍＬで３回）。得られた固体を再結晶して（ヘキサン／酢酸エチル、５：１、１２０ｍＬ）、５−クロロ−２−ヨードベンジル−アルコール（１２．２ｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ２．００（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．６４（ｓ、２Ｈ）、７．００（ｄｄ、Ｊ＝２．６，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝２．４、１Ｈ）、７．７２（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２０２】
段階２：５−クロロ−２−ヨードベンジルアルコール（１２．２ｇ、４５．４４ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（４．６４ｇ、６８．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリイソプロピルシリルクロライド（１４．５９ｍＬ、６８．１６ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、混合物をヘキサンと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。それをシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン／ヘキサンを溶離液とする）によって精製して、［（５−クロロ−２−ヨードベンジル）オキシ］（トリイソプロピル）シランを油状物として得た（１６．１１ｇ）。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．１１（ｄ、Ｊ＝６．８Ｈｚ、１８Ｈ）、１．２０（７重線、Ｊ＝６．８Ｈｚ、３Ｈ）、４．６５（ｓ、２Ｈ）、６．９６（ｄｄ、Ｊ＝２．６，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝２．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２０３】
段階３：［（５−クロロ−２−ヨードベンジル）オキシ］（トリイソプロピル）シラン（３．８２ｇ、９．０ｍｍｏｌ）のエーテル（１８ｍＬ）溶液を窒素下に−７８℃で撹拌しながら、それにｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、３．６ｍＬ）を加えた。１０分後、臭化銅（Ｉ）−硫化ジメチル錯体（０．９２５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）のジメチルスルフィド（３６ｍＬ）溶液を加え、得られた溶液を昇温させて−５０℃とした。４−アセトキシ−２−アゼチジノン（０．２９１ｇ、２．２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を加え、溶液を昇温させて−３０℃とした。さらに１時間後、反応液を水酸化アンモニウムで塩基性とした１０％塩化アンモニウム溶液に投入し、エーテルで抽出した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。それをシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン／０％から５０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、４−（４−クロロ−２−｛［（トリイソプロピルシリル）オキシ］メチル｝フェニル）アゼチジン−２−オン（０．７１２ｇ）を粘稠油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．０８（ｄ、Ｊ＝６．４Ｈｚ、１８Ｈ）、１．１６（７重線、Ｊ＝６．４Ｈｚ、３Ｈ）、２．７８（ｄｄ、Ｊ＝２．６，１４．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．４５（ｄｑ、Ｊ＝１４．８，２．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．７２（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．７８（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．９４（ｑ、Ｊ＝２．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．０６（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．３０（ｄｄ、Ｊ＝２．１，８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．４３（ｍ、２Ｈ）。
【０２０４】
段階４：４−（４−クロロ−２−｛［（トリイソプロピルシリル）オキシ］メチル｝フェニル）アゼチジン−２−オン（０．７１２２ｇ、１．９３５ｍｍｏｌ）のエーテル（２ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＬＡＨ（１Ｍエーテル溶液、７．７４ｍＬ）を加えた。溶液を加熱還流し、２時間後に冷却して０℃とし、水（０．２９４ｍＬ）、１５％水酸化ナトリウム溶液（０．２９４ｍＬ）および水（０．８８１ｍＬ）で反応停止した。混合物を超音波処理して均一な沈殿を得て、濾過し、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。油状物をエタノール（１０ｍＬ）に溶解させ、０℃で撹拌しながら濃ＨＣｌ（０．１６７ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を昇温させて室温とし、３０分後にエタノールと共沸させながら溶媒の減圧留去を行って、（２−アゼチジン−２−イル−５−クロロフェニル）メタノール塩酸塩（０．４５３ｇ）を結晶固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ２．７９（ｍ、１Ｈ）、３．１４（ｍ、１Ｈ）、３．８７（ｄｔ、Ｊ＝４．５および１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８（ｑ、Ｊ＝９．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．６１（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．６８（ｄ、Ｊ＝１３．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．９３（ｔ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４９（ｍ、２Ｈ）、７．６９（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２０５】
段階５：（２−アゼチジン−２−イル−５−クロロフェニル）メタノール塩酸塩（０．３１２ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）およびトリクロロエトキシカルボニルクロライド（０．１８４ｍＬ、１．３３ｍｍｏｌ）のジオキサン（８ｍＬ）および水（０．４ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに水酸化ナトリウム水溶液（１Ｍ、２．６７ｍＬ）を加えた。反応液を昇温させて室温とし、１時間後、１Ｍ ＨＣｌ溶液で酸性とし、エーテルで抽出し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。粗生成物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（５％塩化メチレン／１０％から５０％酢酸エチル／ヘキサン勾配を溶離液とする）によって精製して、２−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（２８３ｍｇ）を無色ガム状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ２．２４（ｂｒｍ、１Ｈ）、２．７８（ｍ、１Ｈ）、４．２０（ｂｒｓ、２Ｈ）、４．６１（ｂｒｍ、２Ｈ）、４．６８（ｂｒｍ、２Ｈ）、５．６６（ｄｄ、Ｊ＝８．６，６．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｍ、２Ｈ）、７．５６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２０６】
段階６：２−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（０．３４６ｇ、０．９２７ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（０．３０２ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＤＢＵ（０．２０９ｍＬ、１．４０ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、反応液をエーテルと水との間で分配し、有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム溶液（２回）および１Ｍ ＨＣｌ溶液で洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。この油状物のＴＨＦ（２ｍＬ）および水（４滴）溶液を撹拌しながら、それにトリフェニルホスフィン（０．２６２ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、メタノール（２ｍＬ）、水（１ｍＬ）および水酸化ナトリウム（ペレット１個）を加え、混合物をさらに１５分間撹拌し、エーテルと水との間で分配した。有機層を希酢酸水溶液で抽出し、その抽出液を水酸化ナトリウムで塩基性とし、エーテルで抽出した。その有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して油状物を得た。それをシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／１０％水酸化アンモニウム／メタノールの勾配、１％から４％水酸化アンモニウム／メタノールを溶離液とする）によって精製して、２−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（２７５ｍｇ）を油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ２．１１（ｍ、１Ｈ）、２．７８（ｍ、１Ｈ）、３．７７（ｂｒｄ、Ｊ＝１４．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８７（ｂｒｄ、Ｊ＝１４．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．１６（ｂｒｍ、２Ｈ）、４．６４（ｂｒｍ、２Ｈ）、５．６３（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２７（不明瞭なｍ、１Ｈ）、７．３５（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｂｒｓ、１Ｈ）。
【０２０７】
段階７：２−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（０．２７５ｇ、０．７３９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．２１３ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（５０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＮ−Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（０．２４９ｇ、０．７３９ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、反応混合物を酢酸エチルと希ＨＣｌ溶液との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して泡状物を得た。その取得物をＤＭＦ（２ｍＬ）およびピペリジン（０．５ｍＬ）に溶解させ、３０分間撹拌した。溶液を水（５０ｍＬ）に投入し、沈殿固体を濾過によって除去し、水（１０ｍＬで５回；それは回収し、保存した）およびメタノールで洗浄した。メタノールを減圧下に留去し、残留物をシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチルと次にクロロホルム／メタノール／水酸化アンモニウム、９０：９：１を溶離液とする）によって精製して、２−｛４−クロロ−２−［（Ｌ−プロピルアミノ）メチル］フェニル｝アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（６６ｍｇ）をガム状物として得た。乳濁した水系洗浄液を酢酸エチル（ブラインを加えて乳濁を解消）で抽出し、有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去して追加の所望化合物（０．２０６ｇ）をガム状物として得た。ＭＳ４６８．５（Ｍ＋１）（４個の塩素と一致する同位体分布を有する）。
【０２０８】
段階８：２−｛４−クロロ−２−［（Ｌ−プロリルアミノ）メチル］フェニル｝アゼチジン−１−カルボン酸２，２，２−トリクロロエチル（４６．９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（６．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（２８．８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、混合物を希ＨＣｌ／ブラインと酢酸エチルとの間で分配し、有機層を炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してガラス状物を得た。その取得物を氷酢酸（１ｍＬ）に溶解させ、亜鉛末（１００ｍｇ）を加え、得られた混合物を１６時間撹拌した。混合物をセライト濾過し、ＴＨＦおよびエタノールで洗浄し、濾液を減圧下に溶媒留去した。残留物をエーテルと水との間で分配し、水層を水酸化ナトリウムで塩基性とし、酢酸エチルで抽出した（２回）。合わせた有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に溶媒留去してガム状物を得た。それをシリカでのフラッシュカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／１０％水酸化アンモニウム／メタノール勾配、１％から１６％水酸化アンモニウム／メタノールを溶離液とする）によって精製して、標題化合物をガラス状物として得た。ＭＳ４０８．３（Ｍ＋１）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）ジアステレオマーの１：１混合物と一致するシグナル集合：δ１．９６（ｍ、２Ｈ）、２．１２（ｍ、１Ｈ）、２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．６２（ｍ、１Ｈ）、３．３７（ｍ、０．５Ｈ）、３．４５（ｍ、０．５Ｈ）、３．５５〜３．７６（ｍ、２Ｈ）、３．８０（ｑ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７（ｓ、０．５Ｈ）、４．０１（ｓ、０．５Ｈ）、４．２９（ｄｄ、Ｊ＝５．０および１４．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３８（ｍ、１Ｈ）、４．５６（ｍ、１Ｈ）、５．１４（ｔ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４〜７．３２（不明瞭なｍ、２Ｈ）、７．５２（ｂｒｍ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、０．５Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、０．５Ｈ）。
【０２０９】
実施例１３
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２１０】
【化９２】

【０２１１】
段階１：（Ｓ）−（−）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド（１．０ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）およびアセトアルデヒド（２．０ｍＬ、３５．６１ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２０ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＣｕＳＯ_４（２．９ｇ、１８．１５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応液をセライト濾過し、濾液の溶媒を減圧下に除去した。Ｎ−エチリデン−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミドを透明無色油状物として得た（１．１８ｇ）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．８ｐｐｍ（ｑ、１Ｈ）、２．２４ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２１２】
段階２：ｉＰｒ_２ＮＨ（０．３１ｍＬ、２．２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に−７８℃で撹拌しながら、それに２．５Ｍ ｎ−ＢｕＬｉのＴＨＦ溶液（０．７５ｍＬ、１．８６ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を−７８℃で１５分間撹拌し、それに２−ヨード−５−クロロベンジルアルコール（０．５ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を一気に加えた。その溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、を減圧下に濃縮し、高真空下に１時間置いた。窒素雰囲気下で残留物をＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解させ、冷却して−７８℃とし、２．５Ｍ ｎ−ＢｕＬｉのＴＨＦ溶液（０．７５ｍＬ、１．８６ｍｍｏｌ）を加えた。その溶液を−７８℃で１５分間撹拌し、前段階からのＮ−エチリデン−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミド（０．２７４ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶かした溶液を滴下した。その溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、１時間かけて室温で平衡とした。飽和ＮＨ_４Ｃｌを加え（３ｍＬ）、混合物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物をメタノール／塩化メチレン勾配（０．５％刻みで１％から３％ＭｅＯＨ）を溶離液とするフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮した後、２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィナミジルエチル）−５−クロロベンジルアルコールの別個の異性体を黄色油状物として得た（異性体１（極性が低い方）１２０ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２９０．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．３６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．８６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．８２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．５４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．９４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．５４ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）；異性体２（極性が高い方）３８ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６９分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２９０．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．８６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．７８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．６４ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、３．６７ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．５２ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．１８ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２１３】
段階３：前段階からの２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィナミジルエチル）−５−クロロベンジルアルコール（異性体１、０．４１０ｇ、１．４２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに４Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液（０．７１ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で０．５時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３溶液でｐＨ＝８の塩基性とした水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジルアルコールをピンク油状物として得て、それは放置していると結晶化した（０．２ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．０６分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．２８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．７３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．５２ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）。
【０２１４】
段階４：前段階からの２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジルアルコール（０．２ｇ、１．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＢｏｃ_２Ｏ（０．２５ｇ、１．１５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物を塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアルコールを黄色油状物として得た（０．２７２ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２４分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２６ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、５．１２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．２２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．４２ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．３６ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２１５】
段階５：前段階からの２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアルコール（０．２７２ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）のトルエン（２０．０ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＤＢＵ（０．１５ｍＬｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（０．２５ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応液をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を溶離液として塩化メチレンを用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロ−ベンジルアジドを黄色油状物として得た（０．２８ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．７１分、方法Ａ）。
【０２１６】
段階６：前段階からの２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアジド（０．２８ｇ、０．９０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０．０ｍＬ）および水（１ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それにＰｈ_３Ｐ（０．２９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３時間還流した。反応液をＥｔ_２Ｏと希１Ｎ ＨＣｌとの間で分配した。Ｅｔ_２Ｏ層を除去し、水層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で塩基性とした。水層をＥｔ_２Ｏで抽出し、それを分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミンをピンク油状物として得た（０．２０５ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３３ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、５．２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、３．８５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．７（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．４ｐｐｍ（ｓ、１２Ｈ））。
【０２１７】
段階７：２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアミン（０．１０５ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（０．１２４ｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（０．０５５ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにｉＰｒ_２ＮＥｔ（６４μＬ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（０．１０６ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを黄色泡状物として得た（０．２３７ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．９３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６０４．０）。
【０２１８】
段階８：前段階からの１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２３７ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に室温で、ピペリジン（１ｍＬ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を１０％ＭｅＯＨ／塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）アミドを、所望の分画を減圧下に濃縮することで橙赤色−赤色油状物として得た（０．１０７ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．８５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．９ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２５ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）、５．１８ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．８３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．６ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．３８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．３６ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、２．３５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９６ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、１．３６ｐｐｍ（ｓ、１２Ｈ））。
【０２１９】
段階９：前段階からのＬ−プロリン−Ｎ−（２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジル）アミド（５４．６ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）、Ｒ−（−）−ヘキサヒドロマンデル酸（２２．６２ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（１６μＬ、０．１４３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（７６ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を７．５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンを展開液とする分取厚層シリカゲルプレートクロマトグラフィー（２０００μＭ×２０ｃｍ×２０ｃｍ）によって精製した。所望の帯域を取り、５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで溶出し、それを減圧下に濃縮して１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを透明無色油状物として得た（４０ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．５１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２２．１）。
【０２２０】
段階１０：前段階からの１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．４０ｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌下に冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空下での乾燥によって、標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７２分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４２２．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３５ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．２５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．８１ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、４．２４ｐｐｍ（ｑ、１Ｈ）、４．１ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．７４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．９４ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、１．６ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｍ、７Ｈ））。
【０２２１】
実施例１４
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２２２】
【化９３】

【０２２３】
段階１：Ｌ−５１９５０２合成の段階２からの２−（１−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィナミジルエチル）−５−クロロベンジルアルコール（異性体２、０．６５４ｇ、２．２３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに４Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液（１．１２ｍＬ、４．４６ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で０．５時間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３溶液でｐＨ＝８の塩基性とした水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジルアルコールをピンク油状物として得た。それは静置していると結晶化した（０．３ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．０７分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２４ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．７６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３４ｐｐｍ（ｑ、１Ｈ）、３．４ｐｐｍ（ｂｒｓ、３Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）。
【０２２４】
段階２：前段階からの２−（１−アミノエチル）−５−クロロベンジルアルコール（０．３ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＢｏｃ_２Ｏ（０．４ｇ、１．８３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアルコールを黄色油状物として得た（０．４７５ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２２分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．２６ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、５．１２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．２２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．４２ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．３６ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２２５】
段階３：前段階からの２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアルコール（０．４７５ｇ、１．６７ｍｍｏｌ）のトルエン（２０．０ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＤＢＵ（０．２６ｍＬｇ、１．７４ｍｍｏｌ）およびＤＰＰＡ（０．４３ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で７２時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、ＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアジドを、所望の分画を減圧下に濃縮することで黄色油状物として得た（０．５３ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．７１分、方法Ａ）。
【０２２６】
段階４：前段階からの２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアジド（０．５３ｇ、１．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０．０ｍＬ）および水（１ｍＬ）を室温で撹拌しながら、それにＰｈ_３Ｐ（０．５３６ｇ、２．０５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、Ｅｔ_２Ｏと希１Ｎ ＨＣｌとの間で分配した。Ｅｔ_２Ｏ層を除去し、水層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で塩基性とした。水層をＥｔ_２Ｏで抽出し、それを分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミンを透明無色油状物として得た。それは静置していると結晶化した（０．３６６ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８５．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．３３ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、５．２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、３．８５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．６２（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．４ｐｐｍ（ｓ、１２Ｈ））。
【０２２７】
段階５：２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジルアミン（０．１５５ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（０．１８４ｇ、０．５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（０．０８１ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにｉＰｒ_２ＮＥｔ（９５μＬ、０．５４ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（０．１５６ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温で１時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を１％ＭｅＯＨ／塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮した後、１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを透明無色油状物として得た。それは静置していると結晶化した（０．２９８ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．９３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６０４．１）。
【０２２８】
段階６：前段階からの１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２９８ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液に室温で、ピペリジン（１ｍＬ）を加えた。反応液を室温で２時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を１０％ＭｅＯＨ／塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）アミドを透明無色油状物として得た（０．１５０ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．８４分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２２〜７．２８ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、５．０２ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．８８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．５８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．４２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．８４ｐｐｍ（ｑ、１Ｈ）、３．３６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．３８ｐｐｍ（ｓ、１２Ｈ））。
【０２２９】
段階７：前段階からのＬ−プロリン−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）アミド（７５ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）、Ｒ−（−）−ヘキサヒドロ−マンデル酸（３４．２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（２２μＬ、０．１９６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（１０４ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で５時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を７．５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで展開する分取厚層シリカゲルプレートクロマトグラフィー（２０００μＭ×２０ｃｍ×２０ｃｍ）によって精製した。所望の帯域を取り、５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで溶出した。それを減圧下に濃縮して、１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを透明無色油状物として得た（８５ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．５１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２２．２）。
【０２３０】
段階８：前段階からの１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−（１−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）エチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．８５ｍｇ、０．１６３ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空下での乾燥によって、標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４２２．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４３ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．４４ｐｐｍ（ｄｄ、２Ｈ）、４．３２ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．０６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、３．７４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．９４ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、１．６ｐｐｍ（ｄ、３Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｍ、７Ｈ））。
【０２３１】
実施例１５
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２３２】
【化９４】

【０２３３】
段階１：２−ブロモ−５−クロロ安息香酸（１１ｇ、４６．７ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．９９分）のメタノール（２５０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＨＣｌガスを吹き込んだ。反応液を昇温させて室温とし、終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して橙赤色油状物を得て、それをヘキサンを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、２−ブロモ−５−クロロ安息香酸メチルを無色油状物として得た（１０．７ｇ、収率９２％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．６（５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４８分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）７．７８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．６Ｈｚ）；７．５９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２．８１Ｈｚ）；７．３０ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．６，２．５Ｈｚ）；３．９４ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）。
【０２３４】
段階２：前段階からの２−ブロモ−５−クロロ安息香酸メチル（１１．５ｇ、４６ｍｍｏｌ）の脱気ＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにシアン化亜鉛（２．８２ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）およびパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（１．０ｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を９０℃で１８時間加熱した。反応液をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配した。有機相を減圧下に濃縮し、残留物を１０％、１５％、２０％酢酸エチル／ヘキサンの勾配を溶離液とするフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、５−クロロ−２−シアノ安息香酸メチルを白色固体として得た（８．０ｇ、収率８８％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（１５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．１３分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）８．１３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．８３Ｈｚ）；８．０９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２４Ｈｚ）；７．２９ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３４，２．１０Ｈｚ）；４．０２ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）。
【０２３５】
段階３：水素化リチウムアルミニウム（１．０Ｍエーテル溶液１０４ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに前段階からの５−クロロ−２−シアノ安息香酸メチル（９．２８ｇ、４７ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を加えた。１時間後、反応液を０℃で、水（３．９ｍＬ）、３．０Ｎ ＮａＯＨ水溶液（４．０ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）および水（３．９ｍＬ）で反応停止した。エーテル（２００ｍＬ）を加え、生成した粘稠沈殿を濾過によって除去し、ＴＨＦで洗浄した。濾液を減圧下に濃縮し、粗生成物である２−アミノメチル−５−クロロベンジルアルコールを次の段階でそのまま用いた。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）７．１７〜７．３６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）；４．６０ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）；３．９８ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）。
【０２３６】
段階４：前段階からの粗１−ヒドロキシメチル−２−アミノメチル−５−クロロベンゼンの塩化メチレン（２００ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１１．３８ｇ、５２．１８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。１時間後、反応液を水（２００ｍＬ）で分配した。有機層を減圧下に濃縮し、残留物を２０％、３０％、４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配を溶離液とするフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。得られた褐色油状物を塩化メチレン（５００ｍＬ）に取り、活性炭で処理して２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアルコールをオフホワイト固体として得た（９．２ｇ、２段階で収率７２％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（２５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．１５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７２；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）７．３６ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）；７．２〜７．５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）；４．６９ｐｐｍ（ｂｓ、２Ｈ）；４．３２ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝６．０４Ｈｚ）；１．４３ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）。
【０２３７】
段階５：前段階からの２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−アミノメチル）−５−クロロベンジルアルコール（１０ｇ、３６．８ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＤＰＰＡ（８．３ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（５．７９ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で１時間、室温で１８時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、減圧下に濃縮した。残留物を１０％、１５％、２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配を溶離液とするフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、１−アジドメチル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼンを油状物として得た（９．２ｇ、収率８５％）。ＨＰＬＣ保持時間＝３．６５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１５２（親イオンは認められなかった）；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）７．２５〜７．３９ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）；４．４１ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、４．３２ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．８６Ｈｚ）；１．４５ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）。
【０２３８】
段階６：前段階からの１−アジドメチル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（１０．９ｇ、３６．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）および水（６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフェニルホスフィン（１０．５９ｇ、４０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を加熱して５０℃とし、１８時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残留物を２％、３％、４％、５％Ａ／塩化メチレン（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含有する分画を減圧下に濃縮して、２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミンを固体として得た（８．８ｇ、収率８８％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９５：５：０．２５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６４分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７１；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）７．２１〜７．５２ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）；４．３２ｐｐｍ（ｂｄ、２Ｈ）；３．９０ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）；１．４４ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）。
【０２３９】
段階７：前段階からの２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（０．１４ｍｍｏｌ、３７ｍｇ）、ＥＤＣ（０．２１ｍｍｏｌ、４０ｍｇ）およびＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌ−Ｐｒｏ−ＯＨ（０．１４ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）のジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、ＨＯＡＴ（０．１５ｍｍｏｌ、２１ｍｇ）を加えた。溶液を終夜撹拌し、０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを得た。質量分析ＥＳ（Ｍ＋１）＝６１５．２。
【０２４０】
段階８：前段階からのＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０７３ｍｍｏｌ、４５ｍｇ）の酢酸エチル（１ｍＬ）溶液を０℃とし、それに２分間にわたってＨＣｌガスを吹き込んだ。混合物を１時間撹拌し、減圧下に濃縮して標題化合物の塩酸塩を固体として得た。質量分析ＥＳ（Ｍ＋１）＝４１５．１。
【０２４１】
実施例１６
１−（（２Ｒ）−３，３−ジメチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２ −アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２４２】
【化９５】

【０２４３】
段階１：２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（３．８０ｇ、１４．１ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．６３分）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（４．９８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２６分）およびＨＯＢＴ水和物（２．１５ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（３．５１ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（約２ｍＬ）を徐々に加えることで、溶液のｐＨを徐々に上昇させてｐＨ６とした（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）。２時間の反応時間後、ＨＰＬＣ分析でベンジルアミン原料が完全に消費されていることが示された。溶媒をロータリーエバポレータで除去し（浴温：３０℃、約０．５トル）、残留物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒をロータリーエバポレータで除去した。残留物をエーテル（１００ｍＬ）中で数時間撹拌し、固体を濾取し、エーテルで洗浄し、乾燥して１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを白色結晶固体として得た（７．８ｇ；９４％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５９０）。
【０２４４】
段階２：前段階からの１−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（７．０ｇ、１２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにピペリジン（７．５ｍＬ）を加えた。１５分間の反応時間後、ＨＰＬＣ分析によって原料が完全に消費されていることが示され、２種類の新たな非常に近く溶出する成分が生成していた（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分の所望生成物、２．８０分のＦｍｏｃ−誘導副生成物）。溶媒および過剰のピペリジンをロータリーエバポレータで除去した（浴温：４０℃、約０．５トル）。残留物を、９６：４から９２：８そして８８：１２ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ａ（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミドをガム状物として得た（３．９ｇ、９０％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ；ヨウ素での肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．０４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２〜７．３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、５．２４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４〜４．５ｐｐｍ（ＡＢＸ、２Ｈ）、４．２８ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ）、３．８０ｐｐｍ（ｄｄ、Ｊ＝５．４，９．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９〜３．０ｐｐｍ（ＡＢＸＹ、２Ｈ）、２．１〜２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９〜２．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜１．８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４４ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ））。
【０２４５】
段階３：（２Ｒ）−２−アミノ−３，３−ジメチル酪酸（５．０ｇ、３８．１２ｍｍｏｌ）の１Ｎ硫酸（８０ｍＬ）溶液を−１０Ｃで撹拌しながら、それに水２５ｍＬに溶かした亜硝酸ナトリウム（５．２６ｇ、７６．２３ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり滴下した。滴下後、反応液を２０時間かけて徐々に室温での平衡状態とした。塩化ナトリウム（１０ｇ）を加え、溶液をジエチルエーテル１００ｍＬで２回抽出した。有機層を分液し、合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去した。残留物を流量８０ｍＬ／分の０．２％ＴＦＡ含有５％エタノール／９５％ヘキサンを移動相として用いるキラルパック（ｃｈｉｒａｌｐａｋ）ＡＤカラム（５ｃｍ×５０ｃｍ）を使用する分取ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む分画を減圧下に濃縮した。（２Ｒ）−３，３−ジメチル−２−ヒドロキシ酪酸を油状物として得て、それは静置していると結晶化した（２．２ｇ、４４％）。
【０２４６】
段階４：段階２からのＬ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（３．９０ｇ、１０．６ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、段階３からの（２Ｒ）−３，３−ジメチル−Ｒ−ヒドロキシ酪酸（１．４０ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（１．６８ｇ、１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（２．６５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを加え少量ずつゆっくり加えて（合計で約１．５ｍＬ）、溶液のｐＨを濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して６〜７とした。混合物を室温で６時間撹拌し、その時点においてＨＰＬＣ分析でプロリン原料が完全に消費されていることが示された。水（１０ｍＬ）を加え、溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を２：１、４：１および１：０ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。１−（（２Ｒ）−３，３−ジメチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを無色ガム状物として得た（４．６５ｇ、９１％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．７（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ：保持時間＝３．３５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４８２）。
【０２４７】
段階５：前段階からの１−（（２Ｒ）−３，３−ジメチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（４．６５ｇ、９．６５ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．３５分）をＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。無水ＨＣｌのエーテル溶液（１Ｍ溶液３８ｍＬ、３８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。得られた溶液を０℃で１０分間、次に室温で２０時間撹拌した。生成した固体を濾取し、エーテルで数回洗浄した。固体を、０．０５％濃ＨＣｌを含むアセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、凍結乾燥して標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．５２分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２；Ｃ、Ｈ、Ｎ燃焼分析、Ｃ_１９Ｈ_２８ＣｌＮ_３Ｏ_３・１．０ＨＣｌ・１．５Ｈ_２Ｏの計算値：Ｃ５１．２４、Ｈ７．２４、Ｎ９．４３；実測値：Ｃ５１．３２、Ｈ７．１７、Ｎ９．３３）。
【０２４８】
実施例１７
１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２４９】
【化９６】

【０２５０】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１．２３ｇ、３．３２ｍｍｏｌ、１．０当量、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、Ｒ−ヘキサヒドロマンデル酸（０．５５２ｇ、３．４９ｍｍｏｌ、１．０５当量）およびＨＯＢＴ水和物（０．５２４ｇ、３．３２ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．８５５ｇ、４．３２ｍｍｏｌ、１．３当量）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつ加えて（合計で約０．５ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して溶液のｐＨを６〜７とした。混合物を室温で２時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によりプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを無色ガム状物として得た（１．８７ｇ、９０％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．７（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５０８）。
【０２５１】
段階２：前段階からの１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１．８７ｇ、３．６８ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．４５分）をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。溶液に１０分間にわたりＨＣｌガスを吹き込んだ。０℃で２時間後、ＨＰＬＣ分析によって原料が完全に消費されていることが示され、溶媒を減圧下に除去した。得られた固体をＥｔＯＡｃで磨砕し、濾過し、真空乾燥して標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４０８）。
【０２５２】
実施例１８
１−（（２Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−（エトキシカルボニルメチルアミノ）エタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２５３】
【化９７】

【０２５４】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．３０ｇ、０．８２ｍｍｏｌ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、ＨＯＢＴ水和物（０．１３ｇ、０．８３）およびＦｍｏｃ−Ｄ−シクロヘキシルグリシン（０．３０ｇ、０．８２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．６２分）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液に、ＥＤＣ（０．２０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。その撹拌溶液に、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して溶液のｐＨが６となるまでＤＩＥＡ（約０．１２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。有機相を分液し、脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧下に濃縮した。残留物を２：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドをガム状物として得た（０．４６ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝４．１６分、方法Ａ、ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝７１５）。
【０２５５】
段階２：前段階からのＮ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．４６ｇ、０．６４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、ピペリジン（２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌し、溶媒および過剰のピペリジンを減圧下に除去した。残留物を２％から４％そして８％Ａ：ＣＨ_２Ｃｌ_２（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせて、Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを、溶媒を減圧下に除去した後に非晶質固体として得た（０．２８ｇ；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（９５：５：０．２５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．０７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５０７）。
【０２５６】
段階３：前段階からのＤ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１８ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに炭酸カリウム（０．１５ｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびブロモ酢酸エチル（０．１１ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。固体を濾去し、濾液の溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせて、Ｎ−エトキシカルボニルメチル−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを非晶質固体として得た（０．１９ｇ；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５９３）。
【０２５７】
段階４：前段階からのＮ−エトキシカルボニルメチル−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１８５ｇ、０．３１２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空下での乾燥後に、標題化合物のＨＣｌ塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．４９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４９３．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３９ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．５４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．３９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｑ、２Ｈ）、４．２４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．９ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、３．７６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜２．５ｐｐｍ（ｍ、１０Ｈ）、１．５１ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）、１．１６〜１．３６（ｍ、５Ｈ））。
【０２５８】
実施例１９
１−（（２Ｒ）−２−カルボキシメチルアミノ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２５９】
【化９８】

Ｎ−エトキシカルボニルメチル−Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１００ｍｇ、０．２０３ｍｍｏｌ）の１：１：１ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水（２０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに１Ｎ ＮａＯＨ（０．４０ｍＬ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ＝１の酸性とし、減圧下に濃縮した。残留物を流量１８ｍＬ／分で３０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮した後、残留物をＥｔ_２Ｏで磨砕した。固体を濾取し、真空乾燥した。標題化合物のＴＦＡ塩を白色粉末として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．３３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６５．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．４８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．５６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４６ｐｐｍ（ｑ、１Ｈ）、４．３３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．２３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、３．７４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６９ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、３．６２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７８〜２．０６ｐｐｍ（ｍ、７Ｈ）、１．７２ｐｐｍ（ｍ、１２Ｈ）、１．５ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ））。
【０２６０】
実施例２０
１−（（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２６１】
【化９９】

Ｄ−シクロヘキシルグリシル−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０３０ｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空での乾燥後に、標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．３７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４０７．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．５３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４３ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．３８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．２４ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、４．０４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、３．８６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．０ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、１．８２ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．１２〜１．３６（ｍ、５Ｈ））。
【０２６２】
実施例２１
１−（（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２６３】
【化１００】

【０２６４】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．２３ｇ、０．６２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（７７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（９９ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．１６ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつ加えて（合計で約０．１ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して溶液のｐＨを６〜７とした。混合物を室温で２時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によってプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。１−（（２Ｒ）−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを無色ガム状物として得た（０．２６ｇ、９０％；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．７（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６８）。
【０２６５】
段階２：前段階からの１−（（２Ｒ）−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２６ｇ、０．５６ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分）をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。溶液にＨＣｌガスを１０分間吹き込んだ。０℃で２時間後、ＨＰＬＣ分析によって原料が完全に消費されていることが示され、溶媒を減圧下に除去した。得られた固体をＥｔＯＡｃで磨砕し、濾過し、真空乾燥して標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．３８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、回転異性体の約３．５：１混合物、代表的なシグナル：８．８４ｐｐｍ（少量成分）および８．６４ｐｐｍ（主成分）（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）、０．８７，０．８３ｐｐｍ（主成分）および０．７４，０．５８ｐｐｍ（少量成分）（２つの二重線、Ｊ＝７Ｈｚ、３Ｈ））。
【０２６６】
実施例２２
１−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２６７】
【化１０１】

【０２６８】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（９０ｍｇ、０．２４５ｍｍｏｌ）、（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルプロパン酸（４１ｍｇ、０．２４５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（３６ｍｇ、０．２６９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＥＤＣ（７１ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を溶離液として２％メタノール／塩化メチレンを用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。１−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニル−プロパノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを透明無色油状物として得た（０．１２５ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１６．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．４ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ）、７．２〜７．３４ｐｐｍ（ｍ、６Ｈ）、５．４５ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０８ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．２４〜４．５７ｐｐｍ（ｂｒｍ、５Ｈ）、３．４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．１２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１８ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、２．０４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７２ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）、１．５６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．４５ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２６９】
段階２：前段階からの１−（（２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−フェニル−プロパノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１２５ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空下で終夜乾燥させることで、標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．６６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４１６．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５４ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、７．３４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．２６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．５４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．２４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．０８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．６ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）、１．５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０２７０】
実施例２３
１−（１−ヒドロキシシクロプロピルカルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２７１】
【化１０２】

【０２７２】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１０９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシシクロプロピルカルボン酸（３３．３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（３３Ｌ、０．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（１５７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで展開を行う分取厚層シリカゲルプレートクロマトグラフィー（２０００μＭ×２０ｃｍ×２０ｃｍ）によって精製した。所望の帯域を取り、５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで溶出した。濾液の溶媒を減圧下に濃縮して、１−（１−ヒドロキシシクロプロピルカルボニル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｎ−プロリンアミドを黄色油状物として得た（１００ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．０１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４５２．１）。
【０２７３】
段階２：前段階からの１−（１−ヒドロキシシクロプロピルカルボニル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｎ−プロリンアミド（０．１００ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液にＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、反応液を容量を減圧下に５０％低減した。生成した固体をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾取し、エーテルで数回洗浄した。高真空下で乾燥した後に、標題化合物の塩酸塩を黄色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．１７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３５２．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、４．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．８５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜２．２ｐｐｍ（ｂｒｍ、４Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．９ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０２７４】
実施例２４
１−（３−エチル−２−ヒドロキシペンタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２７５】
【化１０３】

【０２７６】
段階１：２−エチルブチルアルデヒド（６ｇ、６０ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（７５ｍＬ）溶液を重亜硫酸ナトリウム（９．４ｇ、９０ｍｍｏｌ）の水溶液（水３５ｍＬ）とともに高撹拌した。生成した粘稠沈殿を濾取し、ＣＨ_２Ｃｌ_２で洗浄し、真空乾燥した。重亜硫酸付加物（１０ｇ、４９ｍｍｏｌ）を水（６０ｍＬ）に溶解させ、その溶液にシアン化ナトリウム（３．６ｇ、７３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で４８時間撹拌した。混合物をエーテルで抽出し（１００ｍＬで２回）、合わせた抽出液を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残留物を１０％、１２．５％、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配溶離を用いるフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせて、溶媒を減圧下に除去した後に１−シアノ−２−エチルブタノールを液体として得た（５．０ｇ；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）；４００ＭＨｚ^１Ｈ ＮＭＲ、ＣＤＣｌ_３、４．５１ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、２．４５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．４〜１．７ｐｐｍ（重複ｍ、５Ｈ）、０．９８ｐｐｍ（重複ｔ、６Ｈ））。
【０２７７】
段階２：前段階からの１−シアノ−２−エチルブタノール（５ｇ、３９ｍｍｏｌ）を、６Ｎ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）中で室温にて１８撹拌した。混合物を昇温させて７０℃とし、６時間撹拌した。室温まで冷却した後、溶液をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した（７５ｍＬで２回）。合わせた抽出液を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を減圧下に除去して２−ヒドロキシ−３−エチルペンタン酸を結晶固体として得た（４．１ｇ；４００ＭＨｚ^１Ｈ ＮＭＲ、ＣＤＣｌ_３、４．３５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、１．６８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．４９ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．３６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、０．９８ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）、０．９３（ｔ、３Ｈ））。
【０２７８】
段階３：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１７１ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、２−ヒドロキシ−３−エチルペンタン酸（６８ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（５１μＬ、０．４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（２４７ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで展開を行う分取厚層シリカゲルプレートクロマトグラフィー（２０００μＭ×２０ｃｍ×２０ｃｍ）によって精製した。所望の帯域を取り、５％ＭｅＯＨ／塩化メチレンで溶出した。濾液の溶媒を減圧下に濃縮して、１−（３−エチル−２−ヒドロキシペンタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを黄色油状物として得た（２００ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４５分間、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４９６．１）。
【０２７９】
段階４：前段階からの１−（３−エチル−２−ヒドロキシペンタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２００ｇ、０．４ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌し、減圧下に濃縮した。残留物を、流量１８ｍＬ／分で３０分かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ）の勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮して、高真空下で乾燥した後に、標題化合物の個々のジアステレオマーのＴＦＡ塩を白色固体として得た（異性体２−極性が高い方；ＨＰＬＣ保持時間＝２．５８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３９６．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．４９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３８ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．４８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３２〜４．４２ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、４．２４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．７２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．５８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．０６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８〜２．０ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．５５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、１．２６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．９６ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）、０．８２ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）。異性体１−極性が低い方；２２ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６４分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３９６．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．４８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３９ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．２２〜４．３８ｐｐｍ（ｍ、５Ｈ）．３．７４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．６１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８６〜２．０６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、１．２６〜１．５６ｐｐｍ（ｍ、６Ｈ）、０．９６ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）、０．８２ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ））。
【０２８０】
実施例２５
１−（２−シクロプロピル−２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）エタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２８１】
【化１０４】

【０２８２】
段階１：２−（２−ピリジル）−２−オキソ酢酸エチル（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−７８℃で窒素雰囲気下にて撹拌しながら、それに０．９２ＭシクロプロピルマグネシウムブロマイドのＴＨＦ溶液（６．７ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０℃で平衡とし、１時間撹拌した。反応液を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液で反応停止し、ＥｔＯＡｃと水との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を１％メタノール／塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシ酢酸エチルを黄色油状物として得た（０．９ｇ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．５２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．２５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、５．１８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．２３ｐｐｍ（ｑ、２Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．２４ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ）、０．７２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．４７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、０．３７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０２８３】
段階２：前段階からの２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシ酢酸エチル（０．９ｇ、４．０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに１Ｎ ＮａＯＨ（６．０ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で１８時間撹拌し、減圧下にＭｅＯＨから数回濃縮した。２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシ酢酸のナトリウム塩を黄色固体として得た（０．７９ｇ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１９４．０）。
【０２８４】
段階３：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１２０ｍｇ、０．３１６ｍｍｏｌ）、前段階からの２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシ酢酸のナトリウム塩（６３ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（３６μＬ、０．３２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（１７３ｍｇ、０．３９１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を流量６０ｍＬ／分で６０分間かけて９５：５から０：１００（０．１％ＴＦＡ含有水：ＣＨ_３ＣＮ）の勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、１−（２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシアセチル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドの２つのジアステレオマーを非晶質固体として得た（異性体１（極性の低い方）５０ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．０６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５４３．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．８１ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７４ｐｐｍ（ｔ、２Ｈ）、７．２８ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．１４ｐｐｍ（ｔ、１Ｈ）、５．４５ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．０ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．６ｐｐｍ（ｄｄ、１Ｈ）、４．４２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．４３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．１ｐｐｍ（ｂｒｔ、１Ｈ）、２．２５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．４５ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）、１．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．８５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．６５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、０．５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）；異性体２（極性が高い方）３８ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５４３．２）。
【０２８５】
段階４：前段階からの１−（２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシアセチル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（極性が高い方の異性体、３８ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を流量６０ｍＬ／分で６０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、標題化合物のＴＦＡ塩を淡黄色結晶固体として得た（０．０２１ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．２４５分間、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４３．２）。
【０２８６】
段階５：前段階からのＮ−（２−シクロプロピル−２−（２−ピリジル）ヒドロキシアセチル）−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（極性が低い方の異性体、５０ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を流量６０ｍＬ／分で６０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、標題化合物のＴＦＡ塩を淡黄色結晶固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．２５５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４４３．１）。
【０２８７】
実施例２６
１−（２−エチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２８８】
【化１０５】

【０２８９】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、２−エチル−２−ヒドロキシブタン酸（３６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（３０μＬ、０．２７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を室温で窒素雰囲気下に撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（１４４ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を７２時間室温で撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を流量１８ｍＬ／分で３０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、１−（２−エチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを非晶質固体として得た（５５ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．３２分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４８２．２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．２５ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、７．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．１ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．４５ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．５５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、３．７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）、０．８ｐｐｍ（ｍ、６Ｈ））。
【０２９０】
段階２：前段階からの１−（２−エチル−２−ヒドロキシブタノイル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（５５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を流量１８ｍＬ／分で３０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、標題化合物のＴＦＡ塩を非晶質固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．４１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．８５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜２．２ｐｐｍ（ｂｒｍ、８Ｈ）、１．６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、０．８ｐｐｍ（ｍ、６Ｈ））。
【０２９１】
実施例２７
１−（（２Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２９２】
【化１０６】

【０２９３】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、Ｒ−（−）−３−クロロマンデル酸（５１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（６０μＬ、０．５４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（１４４ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を溶離液として２％メタノール／塩化メチレンを用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、１−（（２Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを黄色油状物として得た（１１０ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．４５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５３６．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．１ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７８ｐｐｍ（ｔ、１Ｈ）、７．６８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５５ｐｐｍ（ｔ、１Ｈ）、７．３３ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、５．４８ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１５ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．６２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．９５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４５ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ））。
【０２９４】
段階２：前段階からの１−（（２Ｒ）−２−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１１０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を流量１８ｍＬ／分で３０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、標題化合物のＴＦＡ塩を白色粉末として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．６８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４３６．０；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、７．３４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、５．３４ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．２〜４．３６ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、３．７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．２３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０２９５】
実施例２８
１−（２−ヒドロキシ−２−フェニル−３，３，３−トリフルオロプロパノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２９６】
【化１０７】

【０２９７】
段階１：２−オキソ−フェニル酢酸エチル（１．０ｇ、５．６ｍｍｏｌ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにトリメチル（トリフルオロメチル）シラン（１．０ｍＬ、６．７３ｍｍｏｌ）および１．０ＴＢＡＦのＴＨＦ溶液（６．２ｍＬ、６．２ｍｍｏｌ）を加えた。その混合物を室温で７２時間撹拌した。その反応液に、５Ｎ ＨＣｌ溶液（１０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物をＥｔ_２Ｏと水との間で分配した。Ｅｔ_２Ｏ層を分液し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。粗２−フェニル−２−ヒドロキシ−３，３，３−トリフルオロプロパン酸エチルを、黄色油状物として得た（０．９ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．３０分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、４．４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．３５ｐｐｍ（ｔ、３Ｈ））。
【０２９８】
段階２：前段階からの２−フェニル−２−ヒドロキシ−３，３，３−トリフルオロプロパン酸エチル（０．９ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２００ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに１Ｎ ＮａＯＨ（６．０ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で１８時間撹拌し、減圧下に濃縮し、得られた固体をＥｔ_２Ｏで磨砕した。沈殿を濾取して、２−フェニル−２−ヒドロキシ−３，３，３−トリフルオロプロパン酸のナトリウム塩を褐色固体として得た（０．７９ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分、方法Ａ）。
【０２９９】
段階３：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（２００ｍｇ、０．５４４ｍｍｏｌ）および前段階からの２−フェニル−２−ヒドロキシ−３，３，３−トリフルオロプロパン酸ナトリウム塩（１４４ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにＢＯＰ試薬（２８８ｍｇ、０．６５２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で７２時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物を流量６０ｍＬ／分で６０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、１−（２−ヒドロキシ−２−フェニル−３，３，３−トリフルオロプロパノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドの２つのジアステレオマーを非晶質固体として得た（異性体１（極性が高い方）８．５ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．７０分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７０．１；異性体２（極性が低い方）７０ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．５７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７０．１）。
【０３００】
段階４：前段階からの１−（２−ヒドロキシ−２−フェニル−３，３，３−トリフルオロプロパノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（極性が低い方の異性体、４０ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、残留物を流量６０ｍＬ／分で６０分間かけて９５：５から０：１００（水：ＣＨ_３ＣＮ、０．１％ＴＦＡ）とする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮することで、標題化合物のＴＦＡ塩を白色結晶固体として得た（８．７ｍｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９０分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７０．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、４．５８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．３４ｐｐｍ（ｔ、１Ｈ）、４．２６ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、３．６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、３．４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．４２（ｍ、１Ｈ））。
【０３０１】
段階５：段階３からの１−（２−ヒドロキシ−２−フェニル−３，３，３−トリフルオロプロパノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（極性が高い方の異性体、８．５ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。その溶液に、ＨＣｌガスを５分間吹き込んだ。得られた溶液を０℃で３０分間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮した後、標題化合物の塩酸塩を白色結晶固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７０．１；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、７．５４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、７．４４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．３ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、３．７５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ））。
【０３０２】
実施例２９
１−（２，２−ジフェニル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３０３】
【化１０８】

【０３０４】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．１７ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を撹拌しながら、ベンジル酸（０．２３ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（ｐＨ＝８まで；濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）およびＢＯＰ試薬（０．３１ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１時間混合後、ＨＰＬＣ分析で原料のアミンが完全に消費されていることが示された。混合物を濾過し、分取ＨＰＬＣで精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して１−（２，２−ジフェニル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを固体として得た（０．２３ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．７５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７８）。
【０３０５】
段階２：１−（２，２−ジフェニル−２−ヒドロキシエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２３ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をメチルアルコール（１５ｍＬ）に溶解させ、冷却して０℃とし、無水ＨＣｌガスで飽和させた。その反応液を３時間混合し、溶媒を減圧下にロータリーエバポレータで除去した。残留物をＤＭＦに溶解させ、分取ＨＰＬＣで精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して、標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を固体として得た（ＨＰＬＣ；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７８）。
【０３０６】
実施例３０
１−（２−（４−カルボキシフェニル）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエタ ノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３０７】
【化１０９】

【０３０８】
段階１：４−ヨード安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．３０４ｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を−４０℃で撹拌しながら、それにイソプロピルマグネシウムブロマイド溶液（１．０５ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ、１Ｍ ＴＨＦ溶液）を滴下した。−４０℃で１時間撹拌後、ベンゾイルギ酸エチル（０．１７５ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を滴下し、冷却浴を４０分間かけて昇温させて室温とした。反応液を、２０％塩化アンモニウム水溶液を加えることで反応停止した。反応混合物をエーテルで２回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒留去して油状物を得た。それを、０％から４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配を用いるシリカゲル１０ｇでのクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、濃縮して（４−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）（ヒドロキシ）フェニル酢酸エチル（０．０７８ｇ、２２％）を無色油状物として得た。ＮＭＲ、４００ＭＨｚ（ＣＤＣｌ_３）７．９５ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝８．５５Ｈｚ、２Ｈ）、７．５２ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝８．５５Ｈｚ、２Ｈ）、７．３０〜７．４０ｐｐｍ（ｍ、５Ｈ）、４．３３ｐｐｍ（ｑ、Ｊ＝７．０８Ｈｚ、２Ｈ）、４．２９ｐｐｍ（ｓ、ＯＨ、１Ｈ）、１．５９ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）、１．２８ｐｐｍ（ｔ、Ｊ＝７．０８Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３０９】
段階２：前段階からの（４−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）（ヒドロキシ）フェニル酢酸エチル（７８ｍｇ、０．２１８ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．９５分）のＣＨ_３ＯＨ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに１Ｎ ＮａＯＨ溶液０．３ｍＬを加えた。反応液を室温で４時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析で、メチルエステルへの変換が急速に起こっているが、酸へのケン化が遅いことが示された。１Ｎ ＮａＯＨ ０．１ｍＬを加えることで、反応完結を促進させた。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）と１Ｎ ＨＣｌ（５ｍＬ）との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒をロータリーエバポレータで除去した。（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルフェニル）（ヒドロキシ）フェニル酢酸を、白色固体として得た（６２ｍｇ、８７％）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．５３分、方法Ｂ。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、１３．４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）；７．８５ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）；７．５０ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝７．３２Ｈｚ、２Ｈ）；７．３４ｐｐｍ（ｍ、５Ｈ）；および１．５３ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）。
【０３１０】
段階３：前段階からの（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルフェニル）（ヒドロキシ）フェニル酢酸（０．０３０ｇ、．０９ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．５３分）、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．０３７ｇ、０．１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（０．０１５ｇ、０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．０２１ｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつ加えて（合計で約０．０６ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙での測定でｐＨを６〜７とした。混合物を室温で２日間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によってプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、油状物残留物を、溶離液を６０分間かけて０．１％ＴＦＡ含有１０％から１００％ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏとするウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）プレプパック（ＰｒｅｐＰａｋ）での分取によって精製した。生成物を含む分画を合わせ、アセトニトリルを減圧下に除去した。水層を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２２０ｍＬで４回抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去して、１−（２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを白色固体として得た（０．０３０ｇ、４６％；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２５分間、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝６７８）。
【０３１１】
段階４：前段階からの１−（２−（４−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエタノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０１７ｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２５分）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。ＴＦＡ（２ｍＬ）を加えた。０℃で２時間後、ＨＰＬＣ分析によって、反応が半分のみ進行しており、ラクトン副生成物も生成していることが示された。反応を室温で終夜撹拌した。溶媒をロータリーエバポレータで除去し（浴温：３０℃、約５０トル）、残留物を、溶離液として３０分間かけて０．１％ＴＦＡ含有の５％から９５％へのＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏとして用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含有する分画を合わせ、凍結乾燥して標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝１．６１分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝５２１）。ジアステレオマーの混合物：^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、１２．８７ｐｐｍ（ｂｒ、ｓ、１Ｈ）、８．５５ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、８．０７〜８．１５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．８３〜７．８５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．２５〜７．８３ｐｐｍ（ｍ、７Ｈ）、４．３４〜４．４２ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、４．１１ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、３．４２〜３．５９ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０４〜２．０８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．６３〜１．６５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）。
【０３１２】
実施例３１
１−（２，５−ジメチル−２−ヒドロキシ−３−ヘキシノイル）−Ｎ−（２− アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３１３】
【化１１０】

【０３１４】
段階１：３−メチルブト−１−イン（０．５ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１２ｍＬ）溶液に、０℃としたｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（１．６Ｎ溶液４．５７ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）を滴下した。０℃で０．２５時間撹拌後、溶液を−７８℃で冷却し、−７８℃としたピルビン酸エチル（０．８０ｍＬ、０．７３ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１２ｍＬ）溶液にカニューレで滴下した。得られた溶液を−７８℃で０．５時間撹拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）を加えることで反応停止した。混合物をＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒をロータリーエバポレータで除去して、２−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３−ヘキシン酸エチルを透明油状物として得た（０．８５ｇ、６３％）。ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝１８５。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、４．２６〜４．３２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）；３．３８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）；２．５３〜２．５８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）；１．６３ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）；１．３２ｐｐｍ（ｔ、Ｊ＝７．１４Ｈｚ、３Ｈ）；および１．１５ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝６．９６Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３１５】
段階２：前段階からの２−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３−ヘキシン酸エチル（０．３５ｇ、１．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＨ_２Ｏ（２ｍＬ）および１Ｎ ＮａＯＨ溶液（２ｍＬ）を加えた。反応液を室温で３時間撹拌した。混合物を１Ｎ ＨＣｌ（２ｍＬ）で酸性とし、Ｅｔ_２Ｏ（１０ｍＬ）で２回抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒をロータリーエバポレータで除去して、２−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３−ヘキシン酸を白色固体として得た（０．２７２ｇ、９２％）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、４．８１ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）；２．５６〜２．６２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）；１．７０ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）；１．１７ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝３．１８Ｈｚ、６Ｈ）。
【０３１６】
段階３：前段階からの２−ヒドロキシ−２，５−ジメチル−３−ヘキシン酸エチル（０．０３３ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．０８０ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（０．０８８ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（．０３２ｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつ加えて（合計で約０．１５ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して溶液のｐＨを６〜７とした。混合物を室温で２日間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によってプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、油状物残留物を、ウォーターズ・プレプパックカラムおよび溶離液として６０分間かけて０．１％ＴＦＡ含有５％から９５％へのＣＨ_３ＣＮ：Ｈ_２Ｏとする勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物含有分画を合わせ、凍結乾燥して１−（２，５−ジメチル−２−ヒドロキシ−３−ヘキシノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを白色固体として得た（７２ｍｇ、６８％；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６１分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝５０６）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、８．２２ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、２Ｈ）；７．１７〜７．３２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）；４．２５〜４．３０ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、４．０６ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）；３．６９〜３．７３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）；２．５１〜２．５６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）；２．０７〜２．０９ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）；１．９１〜１．９４ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）；１．６８〜１．７８ｐｐｍ、（ｍ、２Ｈ）；１．４５ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝７．６９Ｈｚ、３Ｈ）；１．３５ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）；１．０４〜１．０８ｐｐｍ（ｍ、６Ｈ）。
【０３１７】
段階４：前段階からの１−（２，５−ジメチル−２−ヒドロキシ−３−ヘキシノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０３５ｇ、０．０７ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．６１分）をＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。ＴＦＡ（２ｍＬ）を加えた。０℃で２時間後、ＨＰＬＣ分析で反応完結が示された。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、得られたガラス状物をＥｔＯＡｃおよび４Ｍ ＨＣｌのジオキサン溶液２滴で処理した。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、残留物をＥｔ_２Ｏで磨砕して、標題化合物の塩酸塩を白色固体として得た。ＨＰＬＣ保持時間＝１．４２分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝４０６、４０８。ジアステレオマー混合物：^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、代表的シグナル：８．５０ｐｐｍおよび８．３１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．４１ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４６ｐｐｍ（ｄ、Ｊ＝１０．７Ｈｚ、３Ｈ）、１．０７ｐｐｍ（ｓ、６Ｈ）。
【０３１８】
実施例３２
１−（Ｎ−（２−カルボキシ−２−プロピル）−Ｄ−フェニルグリシル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３１９】
【化１１１】

【０３２０】
段階１：マンデル酸Ｓ−メチル（１．６６ｇ、１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５０ｍＬ）溶液を−７８℃でＡｒ下に撹拌しながら、それに無水トリフルオロメタンスルホン酸（１．８５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）、２，６−ルチジン（１．３４ｍＬ、１１．５ｍｍｏｌ）および２−アミノイソ酪酸ｔ−ブチル（２．３９ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加えた。−７８℃で３０分間撹拌後、冷却浴を終夜で室温に戻した。反応混合物を水とＣＨ_２Ｃｌ_２との間で分配し、水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒を除去して油状物を得た。それはＮＭＲ分析により、所望のトリフ酸エステルとルチジンを含有していた。その取得物をＤＭＦ５ｍＬに溶解させ、２−アミノイソ酪酸ｔ−ブチル（２．０２ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．３８ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をＡｒ下に８０℃で４日間加熱した。反応混合物を酢酸エチルと水との間で分配し、水層を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒を除去して黄色油状物を得た。それを分取逆相ＨＰＬＣ（５０ｍＬ／分、勾配溶離：１時間かけて９５：５から３５：６５への０．１％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ：ＣＨ_３ＣＮ）によって精製した。ＬＣ−ＭＳによって分画の分析を行った後、生成物を含む分画を濃縮し、１０％Ｎａ_２ＣＯ_３で塩基性とし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、溶媒を除去して（Ｎ−（２−ｔ−ブチルオキシカルボニルイソプロピル）−Ｓ−フェニルグリシン酸メチル（７８２ｍｇ）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ、３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、７．４４（ｄｄ、Ｊ＝８．３，１．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．２６〜７．３５（ｍ、３Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、３．６７（ｓ、３Ｈ）、１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．３０（ｓ、３Ｈ）、１．１５（ｓ、３Ｈ）。Ｍ＋Ｈ＝３０８．５。
【０３２１】
段階２：（Ｎ−（２−ｔ−ブチルオキシカルボニルイソプロピル）−Ｓ−フェニルグリシン酸メチル（３０７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍＬ）溶液をＡｒ下に撹拌しながら、それに１Ｍ ＮａＯＨ水溶液２．０ｍＬを加えた。３．５時間撹拌後、追加の１Ｍ ＮａＯＨ １．０ｍＬを加え、さらに３．５時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮し、１Ｍクエン酸５ｍＬで反応停止し、ＥｔＯＡｃで２回抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、減圧下に濃縮して、（Ｎ−（２−ｔ−ブチルオキシカルボニルイソプロピル）−Ｓ−フェニルグリシン１８０ｍｇを無色油状物として得た。Ｍ＋Ｈ＝２９４．５。
【０３２２】
段階３：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（５０ｍｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）、（Ｎ−（２−ｔ−ブチルオキシカルボニルイソプロピル）−Ｓ−フェニルグリシン（４３ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（２０ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（２８ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によってプロリン原料が完全に消費されていることが示された。水およびＮａ_２ＣＯ_３で希釈した後、反応混合物をＣＨＣｌ_３で３回抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、減圧下で濃縮して、無色油状物８６ｍｇを得た。Ｍ＋Ｈ＝６４３．５。
【０３２３】
段階４：前段階からの１−（Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−２−プロピル）−Ｄ−フェニルグリシル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（８６ｍｇ、０．１３４ｍｍｏｌ）をＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）に溶解させ、室温でトリフルオロ酢酸５ｍＬで処理した。４．５時間撹拌後、反応混合物を減圧下に濃縮し、分取ＨＰＬＣ、ウォーターズＣ−１８デルタプレプ（Ｄｅｌｔａ Ｐｒｅｐ）、１時間かけた９５：５から５０：５０の０．１％ＴＦＡ含有水：ＣＨ_３ＣＮによって精製した。分画をＨＰＬＣによって分析し、混合し、濃縮し、凍結乾燥して、標題化合物のＴＦＡ塩を無色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、回転異性体の３：２混合物、代表的なシグナル：８．６４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、８．２０（ｂｒｓ、２Ｈ）、１．４９および１．４２（ｓ、３Ｈ、少量成分）、１．４６および１．３６（ｓ、３Ｈ、主成分）。Ｍ＋Ｈ＝４８７．５。
【０３２４】
実施例３３
１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（３−カルボキシフェニル）−３−（２−ピリジル）−２−ヒドロキシプロパノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３２５】
【化１１２】

【０３２６】
段階１：ＮａＨ（０．９７９ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中スラリーを冷却し（０℃）、それにホスホノ酢酸トリエチル（４．９ｍＬ、２４．５ｍｍｏｌ）を加えた。冷却浴を外し、全てが溶解するまで混合物を撹拌した。溶液を冷却して０℃とし、３−ホルミル安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．８９ｇ、２４．５ｍｍｏｌ； Ｓｙｎ． Ｃｏｍｍ．， ２９， ｐｐ． ３４０１−３４０７， １９９９）をＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液で５分間滴下した。冷却浴を外し、２時間後にＴＬＣで判定して反応が完結した。飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を加え、エーテルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残留物を、４０分間かけて０％から２５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを用いる１１０ｇＩＳＣＯカラムでクロマトグラフィー精製した。生成物分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、（２Ｅ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］プロプ−２−エン酸エチルを粘稠油状物として得た（３．４４ｇ、７６％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（１：４ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．００分、方法Ａ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．１４（ｓ、１Ｈ）；７．９７〜８．０４（ｍ、１Ｈ）；７．７１（ｄ、Ｊ＝１６Ｈｚ、１Ｈ）；７．６４〜７．６８（ｍ、１Ｈ）；７．４４（ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ）；６．５０（ｄ、Ｊ＝１６Ｈｚ、１Ｈ）；４．２８（ｑ、Ｊ＝５Ｈｚ、２Ｈ）；１．５１（ｓ、９Ｈ）；１．３６（ｔ、Ｊ＝５Ｈｚ、３Ｈ）。
【０３２７】
段階２：前段階からの（２Ｅ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］プロプ−２−エン酸エチル（３．４４ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに１Ｎ ＮａＯＨ（１５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２時間撹拌した。反応液を減圧下に濃縮して約２０ｍＬとし、１０％クエン酸水溶液で酸性とし、ＥｔＯＡｃ１００ｍＬで２回抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去して（２Ｅ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］プロプ−２−エン酸を油状物として得た。それは静置していると固化した（３．１ｇ、１００％）。ＨＰＬＣ保持時間＝２．４３分、方法Ｂ；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．１６、（ｓ、１Ｈ）；８．０３（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ）；７．８１（ｄ、Ｊ＝１６Ｈｚ、１Ｈ）；７．７０（ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ）；７．４７（ｔ、Ｊ＝８Ｈｚ、１Ｈ）；６．５２（ｄ、Ｊ＝１６Ｈｚ、１Ｈ）；１．６２（ｓ、９Ｈ）。
【０３２８】
段階３：前段階からの（２Ｅ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］プロプ−２−エン酸（０．１８６ｇ、０．７４９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリエチルアミン（０．１１０ｍＬ、０．７８７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を冷却して−２０℃とした。ピバロイルクロライド（０．０９６９ｍＬ、０．７８７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を−２０℃で１５分間撹拌し、昇温させて０℃とし、４０分間撹拌した。一方で、（Ｒ）−４−ベンジル−２−オキサゾリジノン（０．３０５ｇ、１．７２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を冷却し（−７８℃）、それにｎ−ＢｕＬｉ（１．１ｍＬ、１．６Ｍヘキサン溶液）を滴下し、混合物を３０分間撹拌した。スラリーを昇温させて０℃とし、カニューレを介して前記アニオン溶液に加えた。１時間後、２０％ＮＨ_４Ｃｌ水溶液１０ｍＬを加えることで反応停止し、昇温して室温とし、エーテル５０ｍＬで２回抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去し、１８％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンを用いる約１０．１ｃｍ（４インチ）×２５ｍｍＳｉＯ_２カラムでのクロマトグラフィーを行った。純度の高い分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、３−｛（１Ｅ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−３−オキソプロプ−１−エンイル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルを油状物として得た（０．２７３ｇ、８９％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（１：４ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．９分、方法Ｂ；Ｍ＋Ｈ＝４０８。
【０３２９】
段階４：１．０Ｍイソプロピルマグネシウムクロライド（１．０ｍＬ、２．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液に、２−ブロモピリジン（０．１９８ｍＬ、２．０８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１．５時間撹拌した。その暗色溶液を０℃で、ＣｕＢｒ・ＤＭＳ錯体（０．２０６ｇ、１．０１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）およびジメチルスルフィド（１ｍＬ）溶液を冷却したもの（−４０℃）に一気に加え、得られた混合物を−４０℃で１０分間撹拌し、氷浴に入れた。ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶かした前段階からの３−｛（１Ｅ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−３−オキソプロプ−１−エンイル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルを滴下し、混合物を１．５時間撹拌した。２０％ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で反応停止し、ジメチルスルフィドを減圧下に除去し、混合物をＥｔＯＡｃとＨ_２Ｏとの間で分配した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層をＨ_２Ｏおよびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残留物を、４０分間かけて０％から４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる１０ｇＩＳＣＯカラムでクロマトグラフィー精製した。低い方のジアステレオマーを合わせて、３−｛（１Ｒ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−３−オキソ−１−ピリジン−２−イルプロピル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルを油状物として得た（０．１２ｇ、３７％）。絶対キラリティを、文献の先例に基づいて決定した。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．１分、方法Ｂ；Ｍ＋Ｈ＝４８８。
【０３３０】
段階５：ナトリウムヘキサメチルジシラジド（０．３８ｍＬ、０．３８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液を冷却し（−７８℃）、それに前段階からの３−｛（１Ｒ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−３−オキソ−１−ピリジン−２−イルプロピル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１５３ｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１ｍＬ）溶液を滴下し、４５分間撹拌した。ＴＨＦ（０．５ｍＬ）に溶かした２−（フェニルスルホニル）−３−フェニルオキサジリジン（０．１６７ｇ、．６２９ｍｍｏｌ）をその冷溶液に加え、混合物を１０分間撹拌した。ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶かしたカンファースルホン酸を一気に加え、浴を外した。反応液を昇温させて室温とし、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残留物について、４０分間かけて０％から５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンとする３５ｇＩＳＣＯカラムでのクロマトグラフィーを行い、最も下のスポットの分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して油状物を得た。この油状物を、溶離液として６０分間かけて０．１％ＴＦＡを含む１０％から１００％ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏとするものを用いるウォーターズプレプパックでの分取ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、アセトニトリルを減圧下に除去した。残った水系溶液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２２０ｍＬで４回抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去して、３−｛（１Ｒ，２Ｒ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−ヒドロキシ−３−オキソ−１−ピリジン−２−イルプロピル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルを油状物として得た（０．０６８ｇ、４３％）。ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．６１分、方法Ｂ；Ｍ＋Ｈ＝５０３。
【０３３１】
段階６：前段階からの３−｛（１Ｒ，２Ｒ）−３−［（４Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソ−１，３−オキサゾリジン−３−イル］−２−ヒドロキシ−３−オキソ−１−ピリジン−２−イルプロピル｝安息香酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．０６８ｇ、０．１３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を冷却し（０℃）、それに３５％過酸化水素（０．０６１ｍＬ、０．５４１ｍｍｏｌ）を滴下し、次に１．０Ｍ ＬｉＯＨ（０．２７１ｍＬ、０．２７１ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（０．４ｍＬ）溶液を滴下した。反応液を１．５時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣによって反応が完結していないことが示された。従って、追加の３５％過酸化水素（０．０３０ｍＬ、０．２７１ｍｍｏｌ）および１．０Ｍ ＬｉＯＨ（０．１３５ｍＬ、０．１３５ｍｍｏｌ）Ｈ_２Ｏ（０．２ｍＬ）溶液を加え、撹拌を１時間続けた。ＨＰＬＣ分析で、原料が完全に消費されていることが示された。混合物を１０％Ｎａ_２ＳＯ_３水溶液（１ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１ｍＬ）で反応停止し、Ｈ_２Ｏ（２０ｍＬ）で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２２０ｍＬで２回洗浄した。水層を１０％クエン酸水溶液で酸性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２３０ｍＬで２回抽出し、ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去して（２Ｒ，３Ｒ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］−２−ヒドロキシ−３−ピリジン−２−イルプロパン酸を黄色油状物として得た（０．０２０ｇ、４３％）。ＨＰＬＣ保持時間＝１．４４分、方法Ｂ；Ｍ＋Ｈ＝３４４。
【０３３２】
段階７：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．０２６ｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、段階６からの（２Ｒ，３Ｒ）−３−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）フェニル］−２−ヒドロキシ−３−ピリジン−２−イルプロパン酸（２０ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（１２ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．０１７ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（０．０１２２ｍＬ、０．０７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３日間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によってプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と１０％Ｎａ_２ＣＯ_３水溶液（２０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を６０分間かけて０．１％ＴＦＡ含有１０％から１００％ＣＨ_３ＣＮ：Ｈ_２Ｏを溶離液として用いるウォーターズ・プレプパックでの分取ＨＰＬＣによって精製した。生成物含有分画を合わせ、アセトニトリルを減圧下に除去した。残った水系溶液を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で塩基性とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２２０ｍＬで４回抽出し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去して、１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）−３−（２−ピリジル）−２−ヒドロキシプロパノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを油状物として得た（０．０１８ｇ、４５％）。ＨＰＬＣ保持時間＝２．５４分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝６９３，６９５。
【０３３３】
段階８：前段階からの１−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−（３−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルフェニル）−３−（２−ピリジル）−２−ヒドロキシプロパノイル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０１８ｇ、０．０２６ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．５４分）をＥｔＯＡｃ（１ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（３．５５Ｍ、１．５ｍＬ）を加えた。０℃で２時間後、浴を外し、終夜撹拌した。ＨＰＬＣ分析で反応完了が示され、溶媒を減圧下に除去した。残留物を、６０分間かけて０．１％ＴＦＡ含有１０％から１００％ＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏを溶離液として用いるウォーターズ・プレプパックで精製した。生成物を含む分画を合わせ、凍結乾燥して標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を得た。ＨＰＬＣ保持時間＝１．１分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５３７、５３９；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、１２．８５（ｂｒｓ、１Ｈ）；８．５（ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ、１Ｈ）；８．４２（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、１Ｈ）；８．０３〜８．２３（ｍ、３Ｈ）；７．９８（ｓ、１Ｈ）；７．７６〜７．７８（ｍ、１Ｈ）；７．６５〜７．６８（ｍ、２Ｈ）；７．３７〜７．４６（ｍ、４Ｈ）；７．２４〜７．２６（ｍ、１Ｈ）；７．１９〜７．２２（ｍ、１Ｈ）；５．１３（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ）；４．５１（ｄ、Ｊ＝１０Ｈｚ、１Ｈ）；４．３４〜４．３９（ｍ、１Ｈ）；４．２３〜４．２９（ｍ、１Ｈ）；４．０５〜４．１２（ｍ、２Ｈ）；３．９３〜３．９７（ｍ、１Ｈ）；３．５８〜３．７１（ｍ、２Ｈ）；１．８２〜１．９９（ｍ、２Ｈ）；１．６６〜１．８２（ｍ、２Ｈ）。
【０３３４】
実施例３４
１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３３５】
【化１１３】

【０３３６】
段階１：９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸（５．０４ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）溶液を窒素下に冷却して０℃とし、それに（Ｏ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（９．３２ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリンベンジルエステル塩酸塩（５．９３ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．５ｍＬ、４８．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で３時間撹拌し、濃縮し、シリカゲル（酢酸エチル−ヘキサン、１：２）で精製して９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステルを得た。ＨＰＬＣ＝９６％、保持時間＝３．７分、方法Ａ；Ｍ＋１＝４１４．１。
【０３３７】
段階２：上記段階１からの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステル（３．８ｇ、９．３ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム／炭素（３９０ｍｇ）の酢酸エチル（１００ｍＬ）中混合物を、水素雰囲気（風船圧）下で２４時間撹拌した。混合物をセライト濾過し、減圧下に濃縮して９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンを得た。ＨＰＬＣ＝９０％、保持時間＝２．９７分、方法Ａ；Ｍ＋１＝３２４．１；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）７．７８〜７．７５（ｍ、２Ｈ）、７．４７〜７．３２（ｍ、６Ｈ）、４．４９〜４．４５（ｑ、１Ｈ）、２．４２〜２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０１〜１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．７８〜１．７１（ｍ、１Ｈ）、１．５８〜１．４１（ｍ、２Ｈ）。
【０３３８】
段階３：上記段階２からの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリン（１．８ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジルアミン（１．８ｇ、６．８ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（１２滴）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（３．０ｇ、６．７ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）溶液を室温で２４時間撹拌し、減圧下に濃縮し、シリカゲル（酢酸エチル−ヘキサン、１：２）で精製して、１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを得た。ＨＰＬＣ＝９９％、保持時間＝３．６９分、方法Ａ；Ｍ＋１＝５７６．２。
【０３３９】
段階４：上記段階３からの１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液を冷却して０℃とし、無水ＨＣｌガスで飽和させた。０℃で１時間撹拌後、混合物を減圧下に濃縮し、逆相Ｃ１８ＨＰＬＣカラムで精製して、標題化合物のＴＦＡ塩を固体として得た。ＨＰＬＣ保持時間＝２．８３分、方法Ａ；Ｍ＋１＝４７６．１；燃焼分析Ｃ_２７Ｈ_２６ＣｌＮ_３Ｏ_３・１．２５ＴＦＡ・１．００水の計算値Ｃ：５５．６７、Ｈ：４．６３、Ｎ：６．６０；実測値：Ｃ：５５．６４、Ｈ：４．６０、Ｎ：６．７０；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ８．４４〜８．２７（ｓ、３Ｈ）、７．６７〜７．６４（ｍ、２Ｈ）、７．４３〜７．１９（ｍ、６Ｈ）、４．８１〜４．７５（ｍ、１Ｈ）４．４５〜４．４２（ｍ、１Ｈ）、４．１５〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．３９〜２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０２〜１．８３（ｍ、１Ｈ）、１．７６〜１．６８（ｍ、１Ｈ）、１．６５〜１．５４（ｍ、１Ｈ）、１．４６〜１．３７（ｍ、１Ｈ）。
【０３４０】
実施例３５
Ｎ−（１−（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イルカルボニル）アゼチジン−２Ｓ−イルカルボニル）−５−クロロベンジルアミン
【０３４１】
【化１１４】

【０３４２】
段階１：Ｎ−Ｆｍｏｃ−Ｌ−アゼチジンカルボン酸（０．１５ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１ｍＬ）の撹拌溶液に、ＨＯＢＴ水和物（０．０８１ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．１３ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（ｐＨ＝７まで）および２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（０．１４ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、反応混合物を減圧下に溶媒留去し、酢酸エチル：ヘキサン（１：１，３：１）を移動相として用いるシリカゲルカラムで精製して、１−（Ｎ−（フルオレニルメトキシカルボニル）−アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（０．２０ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．８３分、方法Ａ）を得た。
【０３４３】
段階２：前段階からの１−（Ｎ−（フルオレニルメトキシカルボニル）アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（０．２０ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解させ、ピペリジン（１．０ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物を移動相として塩化メチレン／メタノール混合物（９８：２、９０：１０）を用いるシリカゲルで精製して、１−（アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（０．１１ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．８２分、方法Ａ）を得た。
【０３４４】
段階３：前段階からの１−（アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（０．１１ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸（０．０８ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（０．１０ｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．１１ｇ、０．５８ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ｐＨ＝７まで）を加えた。３時間後、反応液を減圧下に溶媒留去し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を水で３回洗浄し、ロータリーエバポレータで蒸発乾固させ、真空乾燥して１−（Ｎ−（９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル）アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼン（ＨＰＬＣ保持時間＝３．５７分、方法Ａ）。
【０３４５】
段階４：前段階からの１−（Ｎ−（９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル）アゼチジン−２Ｓ−イル−カルボニルアミノメチル）−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンゼンをメチルアルコール（１０ｍＬ）に溶解させ、冷却して０℃とした。溶液を無水ＨＣｌガスで飽和させ、１．５時間撹拌した。混合物を減圧下に溶媒留去し、ジメチルホルムアミドに溶かし、アセトニトリル：水（０．１％ＴＦＡ）勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣで精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して標題化合物のＴＦＡ塩を固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６２）。
【０３４６】
実施例３６
Ｎ−（１−（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イルカルボニル）−Ｎ−シクロプロピルグリシン−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）アミド
【０３４７】
【化１１５】

【０３４８】
段階１：２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（０．５２ｇ、１．９３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにジイソプロピルエチルアミン（０．３４ｍＬ、１．９５ｍｍｏｌ）を加え、溶液を冷却して−７８℃とした。ブロモアセチルブロマイド（０．１９ｍＬ、２．１２ｍｍｏｌ）をゆっくり加え、添加完了後に昇温させて０℃とした。移動相として塩化メチレン／メタノールの９５：５混合物を用いるシリカゲルＴＬＣでの原料アミンの消失に基づいて、反応は１５分間以下に完結した。溶媒をロータリーエバポレータで除去して、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）ブロモアセトアミド（０．７５ｇ）を得た。
【０３４９】
段階２：Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）ブロモアセトアミド（０．７５ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにシクロプロピルアミン（１．３ｍＬ、１９．３ｍｍｏｌ）を加えた。シリカゲルＴＬＣ（移動相として塩化メチレン／メチルアルコール９５：５）での原料消失に基づいて、反応は１時間以内に完結した。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、残留物を移動相として塩化メチレン／メチルアルコールの９５：５混合物を用いるシリカゲルカラムで精製した。純粋な分画を合わせ、減圧下に溶媒留去して、液体のＮ−シクロプロピルグリシン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）アミド（０．６７ｇ、ＨＰＬＣで純度９６％；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８）。
【０３５０】
段階３：前段階からのＮ−シクロプロピルグリシン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）アミド（０．２２ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．８ｍＬ）および塩化メチレン（１．２ｍＬ）に溶解させた。その溶液に、９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸（０．１５ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（０．１８ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．１８ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（ｐＨ＝７．５まで；濡れたイー・メルク試験紙に基づいて）を加えた。反応を２４時間続け、濾過し、０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣで精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して固体Ｎ−（１−（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イルカルボニル）−Ｎ−シクロプロピルグリシン−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）アミドを得た（０．０９０ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．７３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７６）。
【０３５１】
段階４：前段階からのＮ−（１−（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イルカルボニル）−Ｎ−シクロプロピルグリシン−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）アミド（０．０９０ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）および塩化メチレン（５ｍＬ）に溶解させ、室温で１時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析により原料は残っていなかったことから、溶媒をロータリーエバポレータで除去し、０．１％ＴＦＡを含有するアセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣで残留物を精製して、標題化合物の固体ＴＦＡ塩を得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．８９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７６）。
【０３５２】
実施例３７
１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−（１−アミノ−２−ヒドロキシエチル）−５−クロロベンジル）−プロリンアミド
【０３５３】
【化１１６】

【０３５４】
段階１：（Ｓ）−Ｎ−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドを、実質的にバローらの報告（Ｂａｒｒｏｗ， Ｊ． Ｃ．； Ｎｇｏ， Ｐ． Ｌ． Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ． ２０００， ＰＡＧＥＳ）の手順に従って、（Ｓ）−（−）−２−メチル−２−プロパンスルフィンアミドおよび（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）アセトアルデヒドから製造した。
【０３５５】
段階２：（５−クロロ−２−ヨードフェニル）メタノール（６２６ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ、１当量）の脱水ＴＨＦ（１４ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに水素化ナトリウム（１６０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ、１．７当量）を一気に加えた。混合物を０℃で５分間、室温で５分間撹拌し、冷却してとし−７８℃とした。２．５Ｍ ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（２．０ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ、２．１当量）を滴下した。得られた黄色混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、大口径のカニューレを介して、（Ｓ）−Ｎ−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミド（６４７ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の脱水ＴＨＦ（２．３ｍＬ）溶液を冷却したもの（−７８℃）に移し入れた。３０分間後に、−７８℃で飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液を加えることで反応停止した。混合物を室温で１５分間撹拌し、ＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせた有機抽出液をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濃縮して明黄色油状物を得た。順相ＭＰＬＣ（４０ｍｍカラム、３０分勾配１０：８５：５から７０：２５：５ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：ＣＨ_２Ｃｌ_２）での精製によって、Ｎ−｛２−｛ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル｝オキシ｝−１−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドの２種類のジアステレオマーを分離した。ジアステレオマーＡ（２１３ｍｇ、ＬＣＭＳにより＞９６％のジアステレオマー純度、ＬＣＭＳ保持時間＝２．７３分）：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．４２〜７．２８（ｍ、３Ｈ）、４．８４〜４．７９（ｍ、２Ｈ）、４．６７〜４．６２（ｍ、１Ｈ）、４．３２（ｓ、１Ｈ）、３．８０〜３．６９（ｍ、２Ｈ）、３．０９（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．２１（ｓ、９Ｈ）、０．９０（ｓ、９Ｈ）、０．０７（ｓ、３Ｈ）、０．００（ｓ、３Ｈ）；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４２０．４。ジアステレオマーＢ（６３ｍｇ、ＬＣＭＳにより８０％のジアステレオマー純度、ＬＣＭＳ保持時間＝２．６８分）：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．４４〜７．３１（ｍ、３Ｈ）、４．８２〜４．６７（ｍ、３Ｈ）、４．０１〜３．９８（ｍ、１Ｈ）、３．９２（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．８５〜３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．６７（ｂｒｓ、１Ｈ）、１．２３（ｓ、９Ｈ）、０．８５（ｓ、９Ｈ）、０．０２（ｓ、３Ｈ）、０．００（ｓ、３Ｈ）；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４２０．４。
【０３５６】
段階３：Ｎ−｛２−｛ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル｝オキシ｝−１−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドのジアステレオマーＡ（上記の方法に従って製造、１９５ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ、１当量）の脱水ＴＨＦ（２．５ｍＬ）溶液に０℃でアルゴン雰囲気下にて、ＤＰＰＡ（１１０μＬ、０．５１ｍｍｏｌ、１．１当量）およびＤＢＵ（７３μＬ、０．４９ｍｍｏｌ、１．０５当量）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌し、６０℃まで加熱して２．５時間経過させた。混合物を冷却して室温とし、ＥｔＯＡｃとブラインとの間で分配した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出液を、１０％クエン酸水溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液およびブラインの順で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、濃縮して黄色油状物を得た。シリカゲルクロマトグラフィー（３：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃによる定組成溶離）による精製で、Ｎ−（１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドのジアステレオマーＡを透明油状物として得た（１３９ｍｇ、６７％）．^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．４２〜７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．３５〜７．３２（ｍ、１Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、４．７０（ｄｄ、Ｊ＝４．２，９．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．５４（ｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．４４（ｄ、Ｊ＝１３．７Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．８０（ｄｄ、Ｊ＝４．２，１０．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．６４（見かけのｔ、Ｊ＝９．９Ｈｚ、１Ｈ）、１．２１（ｓ、９Ｈ）、０．９２（ｓ、９Ｈ）、０．１０（ｓ、３Ｈ）、０．０８（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝３．２８分、（Ｍ＋Ｈ）＝４４５．２。上記段階２からのジアステレオマーＢ（６３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）についてもこれらの反応条件で処理して、粗アジドを橙赤色油状物として得た。シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離４：１から３：１ヘキサン：ＥｔＯＡｃ）によって、前記アジドの純粋なジアステレオマーＢ（原料中に存在していたアルコールのジアステレオマーＡから誘導されたアジドの痕跡量のジアステレオマーＡから分離）を透明油状物として得た（２０ｍｇ、３０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．５２〜７．４９（ｍ、１Ｈ）、７．４０〜７．３０（ｍ、２Ｈ）、４．６７（ｄｄ、Ｊ＝５．６，１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．５０（ｓ、２Ｈ）、４．０５（ｄ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２〜３．８２（ｍ、２Ｈ）、１．２３（ｓ、９Ｈ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．０４（ｓ、３Ｈ）、０．０１（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝３．０７分、（Ｍ＋Ｈ）＝４４５．３。
【０３５７】
段階４：Ｎ−（１−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドのジアステレオマーＡ（前段階から、１３６ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（５．６ｍＬ）溶液に室温で、トリフェニルホスフィン（１６０ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。２０分後に水（１１１μＬ）を加え、反応混合物を５５℃で６時間加熱した。混合物を室温で終夜撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離：１００％ＥｔＯＡｃから９：１ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、そして９：１：０．５ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）によって精製して、Ｎ−（１−［２−（アミノメチル）４−クロロフェニル］−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ）エチル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドのジアステレオマーＡをほぼ無色の油状物として得た（１２３ｍｇ、９６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．３７〜７．３４（ｍ、２Ｈ）、７．２５〜７．２２（ｍ、１Ｈ）、４．８０（ｄｄ、Ｊ＝４．４，９．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．３５（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．０４（ｄ、Ｊ＝１４．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６（ｄ、Ｊ＝１４．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．７９（ｄｄ、Ｊ＝４．４，１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．６２（見かけのｔ、Ｊ＝１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、１．６４（ｂｒｓ、２Ｈ）、１．２１（ｓ、９Ｈ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、０．０８（ｓ、３Ｈ）、０．０７（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝１．９３分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４１９．４。このアジドのジアステレオマーＢ（２０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）についてもこれらの反応条件で処理を行って（６０℃で終夜加熱）、粗アミンを明ピンク油状物として得た。シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離：１００％ＥｔＯＡｃから９：１：１ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）によって、標題化合物のジアステレオマーＢを淡黄色油状物として得た（１７ｍｇ）。少量のトリフェニルホスフィンオキサイドが生成物とともに共溶出した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．４０〜７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．３１〜７．２９（ｍ、１Ｈ）、４．７８（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．４２（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．０６〜３．９５（ｍ、３Ｈ）、３．８６（ｄｄ、Ｊ＝６．０，１０．０Ｈｚ、１Ｈ）、１．２５（ｓ、（Ｈ）、０．８７（ｓ、９Ｈ）、０．０５（ｓ、３Ｈ）、０．０２（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝１．７６分、（Ｍ＋Ｈ）＝４１９．３。
【０３５８】
段階５：Ｎ−（１−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］−２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ）エチル）−２−メチルプロパン−２−スルフィンアミドのジアステレオマーＡ（前段階から、６７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、１．０７当量）、１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（４８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＥＤＣ（４３ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、１．５当量）、トリエチルアミン（２２μＬ、０．１６ｍｍｏｌ、１．０７当量）およびＨＯＡｔ（１０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、０．５当量）の脱水ＤＭＦ（１ｍＬ）中混合物を室温で終夜撹拌した。ほとんどのＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（定組成溶離：１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、Ｎ−（２−｛２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチルシリル）オキシ）−１−［（ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ］エチル）−５−クロロベンジル）−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡを白色固体として得た（６６ｍｇ、６１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．６６〜７．６４（ｍ、２Ｈ）、７．４４〜７．００（ｍ、９Ｈ）、５．９１（ｍ、１Ｈ）、４．７１〜４．５８（ｍ、３Ｈ）、４．４０（ｍ、１Ｈ）、４．３５（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．７５（ｄｄ、Ｊ＝４．４，１０．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．６７（見かけのｔ、Ｊ＝９．７Ｈｚ、１Ｈ）、２．３８〜２．２８（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｍ、１Ｈ）、１．８１（ｍ、１Ｈ）、１．６５（ｍ、１Ｈ）、１．４５（ｍ、１Ｈ）、１．２３（ｓ、９Ｈ）、０．９１（ｓ、９Ｈ）、０．０８（ｓ、３Ｈ）、０．００（ｓ、３Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝３．０５分、（Ｍ＋Ｈ）＝７２４．６。前記アミンのジアステレオマーＢ（前段階からの１７ｍｇ）について、同様の条件下でカップリングおよび精製を行って、Ｎ−（２−｛２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチルシリル）オキシ｝−１−［（ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ］エチル）−５−クロロベンジル）−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＢを淡黄色油状物（２０ｍｇ）として得た。それは前段階からのトリフェニルホスフィンオキサイドを痕跡量含有していた。ＬＣＭＳ保持時間＝３．０１分、（Ｍ＋Ｈ）＝７２４．６。
【０３５９】
段階６：Ｎ−（２−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチルシリル）オキシ｝−１−［（ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ］エチル｝−５−クロロベンジル）−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（６６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１当量）の純粋ＭｅＯＨ（３ｍＬ）溶液に０℃で、２Ｍ ＨＣｌのジエチルエーテル溶液（６８３μＬ、１．３ｍｍｏｌ、１５当量）を加えた。混合物を終夜で、撹拌しながら昇温させて室温とした。溶媒を減圧下に除去して、黄色油状物を得た。逆相ＨＰＬＣで精製することで、標題化合物のジアステレオマーＡを白色フィルム状物として得た（３５ｍｇ、ＴＦＡ塩、６２％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）：δ８．４（ｍ、１Ｈ）、７．７８（ｄｄ、Ｊ＝４．０，７．５Ｈｚ、２Ｈ）、７．５６〜７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．４９〜７．４４（ｍ、３Ｈ）、７．３９〜７．２６（ｍ、４Ｈ）、４．７１〜４．６８（ｍ、２Ｈ）、４．３７（ｄｄ、Ｊ＝５．０，８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．２８（ｄ、Ｊ＝１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．０５（ｄｄ、Ｊ＝４．５Ｈｚ，１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８５（ｄｄ、Ｊ＝８．５，１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．４６〜２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．００〜１．９３（ｍ、１Ｈ）、１．６９〜１．５７（ｍ、２Ｈ）、１．４７〜１．３８（ｍ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝１．３１分、（Ｍ＋Ｈ）＝５０６．４。Ｎ−（２−｛２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチルシリル）オキシ｝−１−［（ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）アミノ］エチル｝−５−クロロベンジル）−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＢ（２０ｍｇ）についても同様に脱保護および精製を行って、標題化合物のジアステレオマーＢをほぼ無色の油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）：δ７．７９（ｄｄ、Ｊ＝３．５，７．５Ｈｚ、２Ｈ）、７．５７〜７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．４９〜７．４５（ｍ、３Ｈ）、７．３８〜７．３２（ｍ、４Ｈ）、４．８３（ｄｄ、Ｊ＝５．５，１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．７４（ｄｄ、Ｊ＝４．５，７．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．３３（ｄｄ、Ｊ＝５．８，８．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．１３（ｄ、Ｊ＝１５．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．９２（ｄｄ、Ｊ＝４．３，１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．８２（ｄｄ、Ｊ＝８．０，１２．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．４１〜２．３８（ｍ、２Ｈ）、２．００〜１．９３（ｍ、１Ｈ）、１．７０〜１．６０（ｍ、２Ｈ）、１．４４〜１．４０（ｍ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ保持時間＝１．３３分、（Ｍ＋Ｈ）＝５０６。
【０３６０】
実施例３８
１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−（２−ヒドロキシエチルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−プロリンアミド
【０３６１】
【化１１７】

１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのＴＦＡ塩（０．０７４ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）に溶解させた。その溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．０４６ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）および（２−ブロモエトキシ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン（０．０２８ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を圧力容器中にて９８℃で１時間加熱した。次に混合物を濾過し、分取ＨＰＬＣで精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．８４分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５２０）。
【０３６２】
実施例３９
１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−（ビス−（Ｎ−２−ヒドロキシエチル）アミノメチル）−５−クロロベンジル）−プロリンアミド
【０３６３】
【化１１８】

標題化合物のＴＦＡ塩も、前実施例に記載の反応および精製から得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５６４）。
【０３６４】
実施例４０
１−（（９−ヒドロキシ−９−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（５−クロロ−２−（（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル）ベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３６５】
【化１１９】

【０３６６】
段階１：３−ヒドロキシアゼチジン塩酸塩（１．００ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）および２−ブロモメチル−５−クロロベンゾニトリル（２．１０ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（７５ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＤＩＥＡ（３．５７ｍＬ、２０．５０ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をエーテルと１Ｎ ＨＣｌとの間で分配した。水層をエーテルで洗浄し、ＮａＨＣＯ_３で中性とし、ＮａＣｌで飽和させ、ＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去して５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル（１．６７ｇ）をガム状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ３．０３（ｍ、２Ｈ）、３．６８（ｍ、２Ｈ）、４．４９（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．４６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５３（ｄｄ、Ｊ＝２．２，６．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６０（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３６７】
段階２：５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンゾニトリル（１．６７ｇ、７．５０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに１Ｍ ＬＡＨのエーテル溶液（１１．２５ｍＬ、１１．２５ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、ＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で反応停止し、濃縮した。残留物をエーテル（１５０ｍＬ）とともに撹拌し、それを水（０．４３ｍＬ）、１５％ＮａＯＨ（０．４３ｍＬ）および水（１．２９ｍＬ）の順で処理した。１５分間撹拌後、混合物を濾過し、溶媒留去して５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジルアミン（１．１９ｇ）をガム状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ２．９９（ｍ、２Ｈ）、３．６４（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｓ、２Ｈ）、４．３８（ｄ、Ｊ＝５．３Ｈｚ、２Ｈ）、４．５０（ｍ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．２１（ｄｄ、Ｊ＝２．２，９．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝２．２Ｈｚ、１Ｈ）。
【０３６８】
段階３：５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジルアミン（１．１９ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン（１．１３ｇ、５．２５ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（０．３６ｇ、２．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（１．５１ｇ、７．８７ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をＥｔＯＡｃと１Ｍクエン酸との間で分配した。水層をＮａＨＣＯ_３で中性とし、をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層を溶媒留去し、残留物をシリカでのクロマトグラフィー（アンモニア飽和ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９５：５）によって精製して、Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（２１０ｍｇ）をガラス状物として得た。ＭＳ：４２４．５（Ｍ＋１）。
【０３６９】
段階４：Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリンアミド（２１０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（６ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにＴＦＡ（３ｍＬ）を加えた。９０分後、溶液を濃縮し、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２と１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。水層をＮａＣｌで飽和させ、追加のＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、で脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（アンモニア飽和ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９３：７）によって精製して、Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−Ｌ−プロリンアミド（５５．８ｍｇ）をガラス状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ１．７１（ｍ、２Ｈ）、１．９３（ｍ、１Ｈ）、２．１６（ｍ、１Ｈ）、２．９２（ｍ、２Ｈ）、３．０５（ｍ、２Ｈ）、３．３９（ｍ、２Ｈ）、３．６１（ｄｄ、Ｊ＝１２．３，２０．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．７２（ｄｄ、Ｊ＝６．４，８．６Ｈｚ、２Ｈ）、４．２８〜４．４６（ｍ、３Ｈ）、７．１２（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．１９（ｄｄ、Ｊ＝２．２，８．１Ｈｚ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、９．０９（ｂｒｓ、１Ｈ）。
【０３７０】
段階５：Ｎ−（５−クロロ−２−［（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）メチル］ベンジル｝−Ｌ−プロリンアミド（５５．８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、９−ヒドロキシ−９−Ｈ−フルオレン−９−イルカルボン酸（４０．９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡＴ（１１．７ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．２５ｍＬ）中混合物を撹拌しながら、それにＥＤＣ（４９．５，０．２６ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間後、混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃと１０％ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。有機層を水およびブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、溶媒留去した。残留物をシリカでのクロマトグラフィー（アンモニア飽和ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ、９８：２）によって精製して、標題化合物をガラス状物として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）計算値：Ｃ_３０Ｈ_３１ＣｌＮ_３Ｏ_４（Ｍ＋１）５５４．１８１７、実測値：５５４．１８５５。
【０３７１】
実施例４１
１−（（９−ヒドロキシ−９−Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（５−クロロ−２−（（（２，２−ジフルオロエチル）アミノ）メチル）ベンジル−Ｌ−プロリンアミド
【０３７２】
【化１２０】

【０３７３】
段階１：１−（（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（６５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の脱水トルエン（１．０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それにジフルオロアセトアルデヒドエチルヘミアセタール（２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。混合物を窒素雰囲気下に加熱して１００℃とし、４０分間経過させ、ＭｇＳＯ_４で処理した。加熱をさらに２時間続けた。混合物を冷却して室温とし、ＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈した。溶液をＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過し、濃縮して橙赤色油状物を得た。それを高真空下で長時間乾燥することで、Ｎ−（５−クロロ−２−｛［（２，２−ジフルオロエチリデン）アミノ］−メチル｝ベンジル−１−［（９−ヒドロキシ−９−Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドを泡状物として得た（６６ｍｇ、９０％）。
【０３７４】
段階２：Ｎ−（５−クロロ−２−（［（２，２−ジフルオロエチリデン）アミノ］メチル｝ベンジル−１−［（９−ヒドロキシ−９−Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（前段階から、６６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の純粋ＭｅＯＨ（２．０ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、それに水素化ホウ素ナトリウム（９．０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。溶液を終夜撹拌しながら、昇温させて室温とした。追加の水素化ホウ素ナトリウム（１２ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに２時間撹拌したところ、その時点でＬＣＭＳによりそれ以上の変化は認められなかった。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液との間で分配した。分液を行い、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濃縮して黄褐色泡状物を得た。逆相ＨＰＬＣ精製によって、標題化合物を油状物として得た。それは高真空下で固化して黄褐色泡状物となった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）：δ７．７７（ｄ、Ｊ＝７．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．５６〜７．２８（ｍ、９Ｈ）、６．３４（ｔｔ、Ｊ＝３．５，５４Ｈｚ、１Ｈ）、４．８７〜４．３５（ｍ、５Ｈ）、３．７４〜３．６０（ｍ、２Ｈ）、２．４０〜２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．００〜１．９０（ｍ、１Ｈ）、１．６４〜１．５７（ｍ、２Ｈ）、１．５６〜１．３８（ｍ、１Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５４０．３。ＬＣＭＳ保持時間＝１．８３分。
【０３７５】
実施例４２
１−（（４−アザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニ ル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３７６】
【化１２１】

【０３７７】
段階１：２−クロロ−３−シアノピリジン（４．０６ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）のトルエン（６０ｍＬ）溶液に、フェニルボロン酸（５．４ｇ、４３．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（６．１ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．７ｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下に２４時間還流し、溶媒を減圧下に除去した。残留物を１００％ＣＨ_２Ｃｌ_２と次に９９：１ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨを移動相として用いるシリカゲルカラムで精製した。純粋な分画を合わせ、真空乾燥して、固体の２−フェニル−３−シアノピリジン（５．０ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．９８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１８１）を得た。
【０３７８】
段階２：前段階からの２−フェニル−３−シアノピリジン（５．０ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）を濃塩酸（１４０ｍＬ）に溶解させ、ＨＰＬＣによって原料がなくなるまで６日間還流した。溶媒を減圧下に留去して、２−フェニル−３−ピリジンカルボン酸のＨＣｌ塩を固体として得た（７．９７ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝１．０８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２００）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、９．０３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、８．９７〜８．９５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、８．１８〜８．１４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．６８〜７．６２ｐｐｍ（ｍ、５Ｈ）。
【０３７９】
段階３：２−フェニル−３−ピリジンカルボン酸（７．９７ｇ、４０．０ｍｍｏｌ）およびポリリン酸（１６２．２ｇ）を合わせ、原料が消費するまで（７時間）、混合しながらゆっくり加熱して２００℃とした。混合物を冷却して１４０℃とし、砕いた氷に注意深く投入し、５時間混合した。生成物を塩化メチレンで抽出した（２００ｍＬで４回）。合わせた有機相を（ＭｇＳＯ_４）を脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去して４−アザフルオレノンを淡黄色固体として得た（４．７ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．９１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１８２；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、８．６２〜８．６０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．９８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．８７ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７４〜７．６８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．５４〜７．５２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．３９〜７．３５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０３８０】
段階４：前段階からの４−アザフルオレノン（４．７ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、ヨウ化亜鉛（０．８１ｇ、２．５ｍｍｏｌ）およびシアン化トリメチルシリル（３１ｍＬ、２３３ｍｍｏｌ）を加えた。ＨＰＬＣによる測定で４−アザフルオレノンが消費されるまで（２４時間）、混合物を加熱還流した。混合物に乾燥下で窒素を流し、４−アザ−９−トリメチルシロキシ−９−シアノフルオレンを得た。それをそれ以上精製せずに用いた（ＨＰＬＣ保持時間＝３．７１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８１）。
【０３８１】
段階５：前段階からの粗４−アザ−９−トリメチルシロキシ−９−シアノフルオレンを直ちにメチルアルコール（４０ｍＬ）に溶かし、冷却して０℃とした。溶液をＨＣｌガスで飽和させ、原料がＨＰＬＣ分析による判断で消費されるまで（４時間）混合した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機相を分液し、減圧下に溶媒留去した。残留物を、９５：５塩化メチレン：ＭｅＯＨを溶離液として用いるシリカゲルで精製した。４−アザ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸メチルエステルを固体として得た（４．４ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．０８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４２）。
【０３８２】
段階６：前段階からの４−アザ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸メチルエステル（４．４ｇ、１８．１ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（１００ｍＬ）溶液を撹拌しながら、ヒドラジン（２．８４ｍＬ、９０．５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を窒素下に１６時間加熱還流した。溶媒を減圧下に留去し、粗生成物をシリカゲル（塩化メチレン／メタノールの９０：１０混合物を溶離液として用いる）で精製して、４−アザ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸ヒドラジドを固体として得た（２．２ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝０．６５分間、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４２）。
【０３８３】
段階７：前段階からの４−アザ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸ヒドラジド（１．６７ｇ、６．９ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、冷却して−２０℃とした。その溶液に、ＨＣｌ飽和テトラヒドロフランをｐＨ＜２（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙での測定で）まで加え、次に亜硝酸アミル（０．９ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ）を加えて、原料のヒドラジドが全てアシルアジド（ＨＰＬＣ保持時間＝２．２８分、方法Ａ）に変換されるまで撹拌を続けた。溶液のｐＨをジイソプロピルエチルアミンで６．５に調節し、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（２．５４ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を加えた。追加のジイソプロピルエチルアミンを加えることで、溶液のｐＨを８に調節した。反応液を昇温させて０℃とし、２４時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒を減圧下に除去した。残留物をシリカゲルカラム（勾配溶離：９８：２から９５：５、そして９３：７ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ）で精製した。純粋な分画を合わせ、乾燥させて、Ｎ−（４−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを得た（３．４ｇ、ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９５：５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７７）。
【０３８４】
段階８：Ｎ−（４−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（３．４ｇ、５．９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、減圧下に溶媒留去して乾固させた。残留物を０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣで精製した。キラルパックＡＤカラム（５×５０ｃｍ）、移動相として流量６０ｍＬ／分の３５：６５Ａ：Ｂ（Ａ＝０．１％ジエチルアミン／ヘキサン、Ｂ＝エタノール）を用いて、得られたジアステレオマー混合物を分離した。次に各ジアステレオマーを、０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって再度精製した。生成物を含む分画を合わせ、凍結乾燥して、標題化合物の各ジアステレオマーのＴＦＡ塩を固体として得た。最初に溶出したジアステレオマー：ＨＰＬＣ保持時間＝２．３４７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７７；キラルパックＡＤカラム、２５０×４．６ｍｍ、移動相として流量１．５ｍＬ／分での３５：６５Ａ：Ｂ（Ａ＝０．１％ジエチルアミン／ヘキサン、Ｂ＝エタノールで保持時間＝５．７分）；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．６３ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、８．５２ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、８．４１ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、８．０２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５４〜７．５１ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．３９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．３３〜７．２７ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、７．２２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．９１〜４．８５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．４５〜４．４２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．１９〜４．０９ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．０３〜３．９９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、２．４４〜２．３６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．９７〜１．８８ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．８０〜１．７０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．６８〜１．６３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．５３〜１．４５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）。２番目に溶出したジアステレオマー：０．４５ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．３４９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７７；キラルパックＡＤカラム、２５０×４．６ｍｍ、移動相として流量１．５ｍＬ／分での３５：６５Ａ：Ｂ（Ａ＝０．１％ジエチルアミン／ヘキサン、Ｂ＝エタノールで保持時間＝７．９分）；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．６６〜８．６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、８．５２〜８．５１ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、８．１０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５７〜７．５４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．４７〜７．４０ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．３７〜７．２６ｐｐｍ（ｍ、４Ｈ）、４．８８〜４．８３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．４７〜４．４４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．２３〜４．００ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．３２〜２．１７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０１〜１．９２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７６〜１．６３（ｍ、２Ｈ）、１．６１〜１．４５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）。
【０３８５】
実施例４３
１−（（４−オキシドアザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３８６】
【化１２２】

【０３８７】
段階１：１−（（４−アザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．１１ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（２ｍＬ）溶液を撹拌しながら冷却して０℃とし、３−クロロ過安息香酸（０．０５４ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を０℃で２４時間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をアセトニトリル：水（０．１％ＴＦＡ）勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥して１−（（４−オキシドアザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを固体として得た（０．５２ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．１３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５９３）。
【０３８８】
段階２：前段階からの１−（（４−オキシドアザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．５２ｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）を塩化メチレンに溶解させ（４ｍＬ）、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１時間撹拌し、減圧下に溶媒留去した。残留物をジメチルホルムアミドに溶解させ、アセトニトリル：水（０．１％ＴＦＡ）勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物を含有する分画を合わせ、凍結乾燥して、標題化合物のトリフルオロ酢酸塩を固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．３１分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４９３）。
【０３８９】
実施例４４
１−（（４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３９０】
【化１２３】

【０３９１】
段階１：２−ブロモニコチン酸メチル（５．６ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）のトルエン（１４０ｍＬ）溶液に、４−クロロフェニルボロン酸（６．１ｇ、３８．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．４ｇ、３９ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．５３ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３．５時間加熱還流し、減圧下に溶媒留去し、酢酸エチル：ヘキサンの１：４混合物を移動相として用いるシリカゲルカラムで精製した。純粋な分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して２−（４−クロロフェニル）ニコチン酸メチル（６．０ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．０４分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４８）を得た。
【０３９２】
段階２：前段階からの２−（４−クロロフェニル）ニコチン酸メチル（６．０ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）のメチルアルコール（３０ｍＬ）溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム（２９ｍＬ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、１Ｎ塩酸（２９ｍＬ）で中和し、減圧下に溶媒留去し、終夜乾燥して、固体の２−（４−クロロフェニル）ニコチン酸（７．３ｇ、理論収量＝５．６５ｇ、残りはＮａＣｌである。ＨＰＬＣ保持時間＝２．１７分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２３４）。
【０３９３】
段階３：前段階からの２−（４−クロロフェニル）ニコチン酸（７．３ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）をポリリン酸（１５７．７ｇ）に加え、混合物を撹拌しながらゆっくり加熱して２００℃とした。８時間後、混合物を冷却して１４０℃とし、砕いた氷にゆっくり投入し、４８時間撹拌した。固体を濾取し、水で洗浄し、真空乾燥して、４−アザ−７−クロロフルオレノン（４．２ｇ；ＨＰＬＣ保持時間＝３．３４分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２１６；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、８．６２ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、８．００ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．９９〜７．８４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．６９〜７．６７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．４０〜７．３７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ））。
【０３９４】
段階４：前段階からの４−アザ−７−クロロフルオレノン（４．１ｇ、１９．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに１０重量％のヨウ化亜鉛（０．４６ｇ）およびシアン化トリメチルシリル（１８ｍＬ、１３４．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、ＨＰＬＣにより原料ケトンが消失するまで還流した（２４時間）。完了後、混合物に乾燥下で窒素を流し、メチルアルコール（４０ｍＬ）に溶かし、冷却して０℃とし、無水ＨＣｌガスで飽和させた。１．５時間後、混合物を減圧下に溶媒留去し、塩化メチレンと５％重炭酸ナトリウム溶液との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、減圧下に溶媒留去した。残留物を、９５：５塩化メチレン／メチルアルコールを移動相として用いるシリカゲルカラムで精製した。乾燥させた純粋な分画から、４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸メチルエステルを固体として得た（４．８ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．５５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７６）。
【０３９５】
段階５：４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸メチルエステル（４．８ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）をヒドラジン（２０ｍＬ）に溶解させ、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を減圧下に溶媒留去し、得られた固体を塩化メチレンに懸濁させ、濾過し、塩化メチレンで洗浄し、真空乾燥して４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸ヒドラジドを粉末として得た（３．８ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝１．７５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７６）。
【０３９６】
段階６：前段階からの４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシフルオレン−９−カルボン酸ヒドラジド（０．７２ｇ、２．６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（７ｍＬ）に溶解させ、冷却して−２０℃とした。ＨＣｌ飽和テトラヒドロフランをｐＨ＜２（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）となるまで加え、次に亜硝酸アミル（０．４ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ）を加えた。ヒドラジドが完全に消費されるまで、混合物を数時間撹拌した（アシルアジド；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７８分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２８７）。溶液のｐＨをジイソプロピルエチルアミンで調節して６．５とし、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１．０ｇ、２．８ｍｍｏｌ）を加えた。追加のジイソプロピルエチルアミンを加えることで、溶液のｐＨを調節して８とした。反応液を−２０℃で３時間撹拌し、昇温させて室温とし、５日間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、残留物をシリカゲルカラム（９５：５塩化メチレン／メタノール）で精製した。純粋な分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、１−（（４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを得た（０．４２ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．３９分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝６１１）。
【０３９７】
段階７：前段階からの１−（（４−アザ−７−クロロ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．４２ｇ、０．７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（６ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下に留去し、残留物をアセトニトリル：水（０．１％ＴＦＡ）勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物をジアステレオマー混合物として得た。そのジアステレオマーを、重炭酸アンモニウム緩衝移動相：デルタパックＣ１８ １００Ａカラム、４０×１００ｍｍ、直列３本、６０分間かけての流量５０ｍＬ／分での９５：５Ａ：Ｂから５：９５Ａ：Ｂの勾配（Ａ＝０．１％重炭酸アンモニウム水溶液）および（Ｂ＝アセトニトリル））を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって分離した。個々のジアステレオマーをそれぞれ、アセトニトリル：水（０．１％ＴＦＡ）勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって再精製して、標題化合物のＴＦＡ塩を凍結乾燥後に固体として得た。最初に溶出したジアステレオマー（ＨＰＬＣ保持時間＝２．５８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１１）；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚＣＤ_３ＯＤ、８．５８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．９４ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．８３ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．５６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．５０ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、７．４２ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．３８〜７．３５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．６０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４３〜４．３９ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．３２ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．２８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．２７ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、２．６７〜２．６３ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、２．０８〜１．９９ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７４〜１．６１ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．５９〜１．５４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）。第２に溶出したジアステレオマー（０．０８ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．６０分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５１１）；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、８．５９ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．９５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．８０ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．６０〜７．５７ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．５２〜７．４６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．４４〜７．４１ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．３９〜７．３６ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．６１ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、４．４４〜４．４１ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、４．３０ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、４．２７ｐｐｍ（ｓ、２Ｈ）、２．７１〜２．６０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．５９〜２．５４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、２．１１〜２．０２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７２〜１．５６ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）。
【０３９８】
実施例４５
１−（（２−アザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３９９】
【化１２４】

【０４００】
段階１：ニコチン酸メチル（３．９ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）およびヨウ化銅（０．２７ｇ、１．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４８ｍＬ）に溶解させ、窒素下に冷却して−２０℃とした。その撹拌溶液に、硫化メチル（１４．７ｍＬ、１９９．５ｍｍｏｌ）を加え、次にクロルギ酸フェニル（３．６ｍＬ、２８．５ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を１５分間撹拌し、フェニルマグネシウムブロマイドの１．０Ｍ ＴＨＦ溶液（２８．５ｍＬ）を滴下した。３０分後、反応がＨＰＬＣによる判定で完結した。反応液を昇温させて室温とし、２０％塩化アンモニウム水溶液で反応停止し（１６０ｍＬ）、エチルエーテルとで分配を行った。エーテル層を２０％ＮＨ_４Ｃｌ水溶液およびＮＨ_４ＯＨの１：１混合液、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで脱水した。次に、エーテル層を濾過し、エーテルを減圧下に除去して粗ジヒドロピリジンを粘稠油状物として得た（９．２ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．８３分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３３６）。
【０４０１】
段階２：段階１からの粗ジヒドロピリジン（９．２ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を硫黄（０．８８ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）と混合し、デカヒドロナフタレン（１００ｍＬ）に溶かした。混合物を窒素雰囲気下に２４時間還流した。混合物を冷却して室温とし、エチルエーテル（３００ｍＬ）で希釈し、冷１０％塩酸１００ｍＬずつで４回抽出した。酸部分を塩化メチレン（４００ｍＬ）と合わせ、１０％水酸化ナトリウム溶液で塩基性とし、塩化メチレンで抽出した。有機抽出液を無水硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、溶媒を減圧下に除去して、粗４−フェニルニコチン酸メチル（４．８ｇ）を得た。粗取得物を、酢酸エチル／ヘキサンの１：２混合物を移動相として用いるシリカゲルで精製した。４−フェニルニコチン酸メチルを、無色油状物として得た（３．８ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．５７分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２１４；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、９．０３ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、８．７３〜８．６８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４７〜７．４２ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、７．３６〜７．３１ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、３．７０ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）。
【０４０２】
段階３：前段階からの４−フェニルニコチン酸メチル（３．８ｇ、１７．８ｍｍｏｌ）のメチルアルコール（２０ｍＬ）溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム（２１．４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で６時間撹拌し、１Ｎ塩酸で中和し、減圧下に溶媒留去し、終夜乾燥して、固体の４−フェニルニコチン酸（４．７ｇ、理論収量＝３．６ｇ、残りはＮａＣｌである）。ＨＰＬＣ保持時間＝１．８０分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２００；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、８．９１ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、８．６６ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．４６〜７．４１ｐｐｍ（ｍ、５Ｈ）。
【０４０３】
段階４：前段階からの４−フェニルニコチン酸（４．７ｇ、２３．８ｍｍｏｌ）をポリリン酸（１６０．３ｇ）に懸濁させ、撹拌しながらゆっくり加熱して２００℃とした。５時間後、混合物を冷却して１４０℃とし、砕いた氷に投入し、２４時間撹拌した。混合物を５０％水酸化ナトリウム溶液で中和してｐＨ＝４とし、塩化メチレンで３回抽出した。塩化メチレン抽出液を合わせ、溶媒を減圧下に除去して２−アザフルオレノンの黄色固体を得た（３．１ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．１６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝１８２）；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＨＣｌ_３、８．７２ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、８．７５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．７５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．６５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．６２〜７．５５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．５１〜７．４６ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）。
【０４０４】
段階５：前段階からの２−アザフルオレノン（３．１ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それに１０重量％のヨウ化亜鉛（０．３３ｇ）およびシアン化トリメチルシリル（１６ｍＬ、１２０．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次に４８時間還流した。上記手順に従って、シアノヒドリンへの変換が完了するまで、追加のヨウ化亜鉛およびシアン化トリメチルシリルを加えた。完了後、混合物に乾燥で窒素を流し、メチルアルコール（４０ｍＬ）に溶かし、冷却して０℃とし、無水ＨＣｌガスで飽和させた。終夜撹拌後、混合物を減圧下に溶媒留去し、塩化メチレンと５％重炭酸ナトリウム溶液との間で分配した。塩化メチレン層を減圧下に溶媒留去し、残留物を移動相として塩化メチレン／メチルアルコールの９８：２混合液を用いるシリカゲルカラムで精製した。２−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸メチルエステルを、固体として得た（１．３ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．０６分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４２）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＨＣｌ_３、８．６７〜８．６５ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、７．７５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５７ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５１〜７．４４ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、４．５０ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、３．６４ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ）。
【０４０５】
段階６：前段階からの２−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸メチルエステル（１．３ｇ、５．３ｍｍｏｌ）をヒドラジン（１３ｍＬ）に溶解させ、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。過剰のヒドラジンを減圧下に留去し、固体を終夜真空乾燥して、２−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレン−カルボキシヒドラジドを得た（１．４ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝０．８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４２）。^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ、８．５８ｐｐｍ（ｓ、１Ｈ）、８．５５ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．９〜７．８５ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．７８ｐｐｍ（ｄ、１Ｈ）、７．５９〜７．５４ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、７．５２〜７．４７ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）。
【０４０６】
段階７：２−アザ−９−ヒドロキシ−９−フルオレン−カルボキシヒドラジド（１．１７ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解させ、窒素下に冷却して−２０℃とした。ＨＣｌ飽和テトラヒドロフランをｐＨ＜２となるまで（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）加え、次に亜硝酸アミル（０．７ｍＬ、４．８５ｍｍｏｌ）を加え、全ての原料ヒドラジドがアジドに変換されるまで（ＨＰＬＣおよびＬＣ−ＭＳによって測定）、撹拌を続けた。ジイソプロピルエチルアミンでｐＨを調節して６．０とし、Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（１．５ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンでｐＨを８に調節し、反応液を０℃で４８時間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレータで除去し、残留物を移動相として塩化メチレン／メタノールの９９：１および次に９５：５混合物を用いるシリカゲルカラムで精製した。純粋な分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、１−（（２−アザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを固体として得た（０．２７ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５７７）。
【０４０７】
段階８：前段階からの１−（（２−アザ−９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル）−Ｎ−（２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．２７ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（４ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１．５時間撹拌し、溶媒を減圧下に除去した・残留物を０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物をジアステレオマー混合物として得た。移動相に酢酸アンモニウムを含むアセトニトリル：水勾配を用いる２回目の分取逆相ＨＰＬＣ分離を行って、標題化合物の２種類のジアステレオマーを得た。各ジアステレオマーについて、０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣを行って、凍結乾燥後に、固体である標題化合物のＴＦＡ塩を得た。最初に溶出したジアステレオマー（ＨＰＬＣ保持時間＝２．２５分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７７）；第２に溶出したジアステレオマー（０．０３４ｇ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．２８分、方法Ａ；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４７７）。
【０４０８】
実施例４６
３−エチルプロリル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０４０９】
【化１２５】

【０４１０】
段階１：４−エチル−５，５−ジカルボエトキシ−２−ピロリン（ＬＣＭＳ保持時間＝１．４７分、ＬＣ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２４２．５）を蒸留せず、精製せずに用いるという変更を加えて、米国特許第４０６０６０３号（１９７７年１１月２９日）に記載のトランス−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリンの製造手順に従った。４Ｎ ＨＣｌを用いて加水分解生成物を酸性とした後、水層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。ＬＣＭＳ分析により、所望の生成物は水層に残っていた。それを減圧下に濃縮して、トランス−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリンを橙赤色固体として得た。
【０４１１】
段階２：前段階からのトランス−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリン（１．６１ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（１１．３ｍＬ）、１Ｎ ＮａＯＨ（１２．４ｍＬ）およびジオキサン（２２．５ｍＬ）溶液を０℃で撹拌しながら、Ｂｏｃ無水物（２．７０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。反応液を昇温させて室温とし、７２時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去した。残留物をＨ_２Ｏに取り、１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ２の酸性とした。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリンを褐色固体として得た。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２４４．６；ＬＣＭＳ保持時間＝１．６４分。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ４．２５〜４．１４（ｍ、１Ｈ）、３．８７〜３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．６１〜３．４９（ｍ、１Ｈ）、３．４３〜３．３８（ｍ、１Ｈ）、２．１６〜２．０１（ｍ、２Ｈ）、１．３８（ｓ、９Ｈ）、１．０２〜０．９２（ｍ、３Ｈ）。
【０４１２】
段階３：前段階からの粗１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリン（７３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（１１１ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（８７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ_２下に室温で撹拌した。追加の２当量の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−エチル−Ｄ，Ｌ−プロリンを加え、ＬＣＭＳによって反応の完結性をモニタリングした。１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−エチルプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーを、逆相ＨＰＬＣ（３０分間かけての勾配溶離：９５：５Ｈ_２Ｏ／０．１％ＴＦＡ：ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡから５：９５Ｈ_２Ｏ／０．１％ＴＦＡ：ＣＨ_３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ）によって分離した。ジアステレオマーＡ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．４８分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５９３．５。ジアステレオマーＢ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．６２分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５９３．２。
【０４１３】
段階４：前段階からの１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−エチルプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（３４ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）のジオキサン（２．０ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに過剰量の４．０Ｎ ＨＣｌのジオキサン溶液を加えた。ＬＣＭＳで反応の完結性をモニタリングした。溶媒を減圧下に除去して、３−エチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［２−（アミノメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのＨＣｌ塩を淡黄色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．７４分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９３．３。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ８．９３（ｍ、１Ｈ）、７．５１（ｓ、１Ｈ）、７．４２〜７．３７（ｍ、２Ｈ）、４．５４〜４．４７（ｍ、２Ｈ）、４．４１〜４．３１（ｍ、２Ｈ）、４．２３（ｓ、２Ｈ）、３．７８〜３．７０（ｍ、１Ｈ）、３．６４〜３．５２（ｍ、１Ｈ）、３．５０〜３．４５（ｍ、１Ｈ）、３．４４〜３．３４（ｍ、１Ｈ）、２．４３（ｂｒｍ、１Ｈ）、２．３４〜２．２７（ｍ、１Ｈ）、２．１６〜１．６７（ｂｒｍ、６Ｈ）、１．５３〜１．４５（ｍ、１Ｈ）、１．０３（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。ジアステレオマーＢ（３７ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）を同様にして脱保護して、３−エチル−Ｌ−プロリル−Ｎ−［２−（アミノメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのＨＣｌを黄色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．７３分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９３．３。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ８．９５（ｍ、１Ｈ）、７．５２（ｓ、１Ｈ）、７．４３〜７．４０（ｍ、２Ｈ）、４．５５（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．４４（ｄｄ、Ｊ＝３．２Ｈｚ、８．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．３７（ｄ、Ｊ＝１５．２Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｄ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．２５（ｓ、２Ｈ）、３．８４〜３．８１（ｍ、１Ｈ）、３．６６〜３．５９（ｍ、１Ｈ）、３．５７〜３．４６（ｍ、１Ｈ）、３．４２〜３．３５（ｍ、１Ｈ）、２．４１〜２．３８（ｍ、１Ｈ）、２．３１〜１．８４（ｍ、６Ｈ）、１．７１〜１．６６（ｍ、１Ｈ）、１．５６〜１．５０（ｍ、１Ｈ）、１．０４（ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、３Ｈ）。
【０４１４】
実施例４７
３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０４１５】
【化１２６】

【０４１６】
段階１：変更点として、中間体２，２−ジカルボエトキシ−３，３−ジメチル−ピロリジンを５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルカラムでクロマトグラフィー精製して、米国特許第４０６０６０３号（１９７７年１１月２９日）に記載の３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリンの製造手順を行った。ＬＣＭＳ保持時間＝１．４１分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２４２．５。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ４．２３〜４．１６（ｍ、４Ｈ）、３．１６〜３．１２（ｍ、２Ｈ）、１．９７〜１．９４（ｍ、２Ｈ）、１．３０〜１．２６（ｍ、６Ｈ）、１．１６（ｓ、６Ｈ）。米国特許第４０６０６０３号に記載の酸加水分解によって、３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリンを褐色固体として得た。それをそれ以上精製せずに用いた。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ３．９７（ｓ、１Ｈ）、３．４０（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、３Ｈ）、１．０７（ｓ、３Ｈ）。
【０４１７】
段階２：前段階からの３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリン（１．００ｇ、６．９８ｍｍｏｌ）を、実施例４６の段階２に示した前記手順に従ってＢｏｃ保護した。シリカゲルクロマトグラフィー（勾配溶離：３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから１００％ＥｔＯＡｃ、そして５％ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ）によって、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリンを褐色固体として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝１．５６分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２４４．１。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ３．８１および３．７８（ｍ、回転異性体、１Ｈ）、３．５０（ｍ、１Ｈ）、３．４０（ｍ、１Ｈ）、１．８５（ｍ、１Ｈ）、１．６２（ｍ、１Ｈ）、１．４５および１．４２（ｓ、Ｂｏｃ回転異性体、９Ｈ）、１．１６（ｓ、３Ｈ）、１．０７（ｓ、３Ｈ）。
【０４１８】
段階３：実施例４６の段階３に記載のＥＤＣカップリング手順に実質的に従って、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリン（７３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＬ−プロリン−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）アミド（１１１ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）から、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを、ジアステレオマー混合物として得た。得られたジアステレオマー生成物を実施例４６段階３に記載の逆相ＨＰＬＣによって分離した。ジアステレオマーＡ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．４４分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５９３．４。ジアステレオマーＢ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．５８分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５９３．５。
【０４１９】
段階４：前段階からの１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−（２｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡのＣＨ_２Ｃｌ_２（約１ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに過剰のＴＦＡ（０．５ｍＬ）を加えた。２時間後、ＬＣＭＳによって反応が完結していることが確認された。溶媒を減圧下に除去して、標題化合物のＴＦＡ塩を無色油状物として得た。ジアステレオマーＡ：ＬＣＭＳ保持時間＝０．７１分；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９３．１。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ７．５１（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄｄ、Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．５３（ｄ、Ｊ＝１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．５１〜４．４８（ｍ、１Ｈ）、４．３５〜４．２８（ｍ、２Ｈ）、４．２４（ｓ、２Ｈ）、３．８３〜３．７９（ｍ、１Ｈ）、３．６２〜３．５７（ｍ、１Ｈ）、３．５１〜３．４５（ｍ、１Ｈ）、３．４２〜３．３５（ｍ、１Ｈ）、２．３１〜２．２７（ｍ、１Ｈ）、２．１４〜２．０９（ｍ、１Ｈ）、２．００〜１．８５（ｍ、４Ｈ）、１．３５（ｓ、３Ｈ）、１．０７（ｓ、３Ｈ）。ジアステレオマーＢを同様に脱保護して、標題化合物のＴＦＡ塩を無色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．７１分；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３９３．０。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ７．４９（ｄ、Ｊ＝２．０Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３８（ｄｄ、Ｊ＝２．０，８．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．５６（ｄ、Ｊ＝１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、１Ｈ）、４．４２（ｄｄ、Ｊ＝３．９，８．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４〜４．３０（ｍ、２Ｈ）、４．２４（ｓ、２Ｈ）、３．８２〜３．８０（ｍ、１Ｈ）、３．６５〜３．６３（ｍ、１Ｈ）、３．５２〜３．４９（ｍ、１Ｈ）、３．４０〜３．３８（ｍ、１Ｈ）、２．２９〜２．２７（ｍ、１Ｈ）、２．０７〜１．９４（ｍ、５Ｈ）、１．３４（ｓ、３Ｈ）、１．０９（ｓ、３Ｈ）；ＨＲＭＳ（ＦＴ／ＩＣＲ）Ｍ＋Ｈ：３９３．２０７６。
【０４２０】
実施例４８
３−フェニルプロリル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０４２１】
【化１２７】

【０４２２】
段階１：２，２−ジカルボエトキシ−３，３−ジメチル−ピロリジンの製造についての米国特許第４０６０６０３号に記載の手順に実質的に従って、３−フェニルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチルを、シンナムアルデヒド（１．２２ｍＬ、９．７０ｍｍｏｌ）から製造した。得られた黄色油状物を、精製せずに次の段階で用いた。ＬＣＭＳ保持時間＝１．２６分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝２９２．１。
【０４２３】
段階２：２，２−ジカルボエトキシ−３，３−ジメチルピロリジンからの３，３−ジメチル−Ｄ，Ｌ−プロリンの製造について米国特許第４０６０６０３号に記載の手順に実質的に従って、３−フェニル−Ｄ，Ｌ−プロリンを３−フェニルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチル（２．８２ｇ、９．７０ｍｍｏｌ）から製造した。生成物を褐色油状物として単離した。ＬＣＭＳ保持時間＝０．６２分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝１９１．９。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ７．３６〜７．２８（ｍ、５Ｈ）、４．６０（ｄ、Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．９７（見かけのｑ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７〜３．７１（ｍ、１Ｈ）、３．４８〜３．４１（ｍ、１Ｈ）、２．５８〜２．５０（ｍ、１Ｈ）、２．４３〜２．３３（ｍ、１Ｈ）。
【０４２４】
段階３：前段階からの３−フェニル−Ｄ，Ｌ−プロリン（１．８５ｇ、９．７０ｍｍｏｌ）を、実施例４６の段階２に記載の手順に従ってＢｏｃ保護した。生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−ｄｌ−プロリンを橙赤色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．５２〜７．１７（ｍ、５Ｈ）、４．６０および４．４８（回転異性体、ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、３．９０〜３．６６（ｍ、２Ｈ）、３．５０〜３．４０（ｍ、１Ｈ）、２．６２〜２．４８（ｍ、１Ｈ）、２．２１〜２．１２（ｍ、１Ｈ）、１．４８および１．４０（Ｂｏｃ基の回転異性体、ｓ、９Ｈ）。
【０４２５】
段階４：実施例４６の段階３に記載のＥＤＣカップリングに実質的に従って、前段階からの１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−フェニル−Ｄ，Ｌ−プロリン（８８ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＬ−プロリン−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）アミド（１１１ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）から１−（ｔｅｒｔ−ブトキシルカルボニル）−３−フェニルプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドをジアステレオマー混合物として製造した。それらのジアステレオマー生成物を、分析条件：キラルセル（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ）ＯＤ（２５０×４．６ｍ）カラム、溶離液：Ａ／Ｂ８５／１５（Ａ＝ヘキサン／０．１％ジエチルアミンおよびＢ＝エタノール）、検出：２２０ｎｍおよび流量：１．０ｍＬ／分下で分離した。これらの条件下で、最初のピークは４．８７分で溶出し、後のピークは８．５１分で溶出する。生成物を、これらの条件を用いて分取規模で分離した。ジアステレオマーＡ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．７２分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６４１．２。ジアステレオマーＢ：ＬＣＭＳ保持時間＝２．７５分間。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝６４１．０。
【０４２６】
段階５：前段階からの１−（ｔｅｒｔ−ブトキシルカルボニル）−３−フェニルプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（６０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（約２ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに過剰の１．０Ｍ ＨＣｌのエーテル溶液を加えた。反応の完結性をＬＣＭＳによってモニタリングした。溶媒を減圧下に除去して、標題化合物のＨＣｌ塩を白色固体として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．９４分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４４１．１。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ７．５０〜７．２３（ｍ、８Ｈ）、４．５８〜４．５１（ｍ、１Ｈ）、４．４１〜４．２４（ｍ、３Ｈ）、４．０８〜３．９６（ｍ、１Ｈ）、３．８０〜３．７４（ｍ、１Ｈ）、３．４９〜３．４３（ｍ、１Ｈ）、３．３９〜３．３１（ｍ、３Ｈ）、３．０５〜２．９２（ｍ、１Ｈ）、２．５７〜２．３７（ｍ、２Ｈ）、２．０６〜１．６４（ｍ、２Ｈ）、１．５６〜１．２６（ｍ、２Ｈ）。ジアステレオマーＢ（７３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を同様に脱保護して、標題化合物のＨＣｌ塩を白色固体として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．９８分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４４１．２。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ８．９０（ｍ、１Ｈ）、７．４９〜７．３２（ｍ、８Ｈ）、４．４９（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．３１（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２３（ｓ、２Ｈ）、４．０２〜３．９５（ｍ、１Ｈ）、３．９０〜３．８７（ｍ、１Ｈ）、３．７９〜３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．４８〜３．３０（ｍ、２Ｈ）、３．１３〜３．０３（ｍ、１Ｈ）、２．９１〜２．８５（ｍ、１Ｈ）、２．５０〜２．４３（ｍ、１Ｈ）、２．３９〜２．２８（ｍ、１Ｈ）、１．７３〜１．５９（ｍ、３Ｈ）、１．１８〜１．１２（ｍ、１Ｈ）。
【０４２７】
実施例４９
Ｄ−ホモプロリル−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０４２８】
【化１２８】

【０４２９】
段階１：Ｂｏｃ−Ｄ−ホモｐｒｏ−ＯＨ（０．５０ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリンベンジルエステル塩酸塩（０．５３ｇ、２．１８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（１４８ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（０．６３ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（０．３０ｍＬ、２．１８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５．０ｍＬ）中混合物をＮ_２下に室温で４時間撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残った黄色残留物をＥｔＯＡｃに取り、飽和Ｋ_２ＣＯ_３水溶液で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出液をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で脱水し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって、Ｂｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｌ−プロリンベンジルエステルを無色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝２．４０分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝４１７．３。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ、スペクトラムは回転異性体のためにかなり広がっていた）：δ７．３６〜７．３１（ｍ、５Ｈ）、５．２５〜５．１６（ｍ、１Ｈ）、５．１１〜５．０８（ｍ、１Ｈ）、４．９６および４．８０（回転異性体、ｂｒｍ、１Ｈ）、４．５３（ｂｒｍ、１Ｈ）、３．８４〜３．８１（ｂｒｍ、１Ｈ）、３．６１〜３．５１（ｂｒｍ、２Ｈ）、３．２０〜２．９０（ｂｒｍ、１Ｈ）、２．２３〜２．２０（ｍ、１Ｈ）、１．９８〜１．８６（ｍ、３Ｈ）、１．５８〜１．３６（ｂｒｍ、１５Ｈ）。
【０４３０】
段階２：前段階からのＢｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｌ−プロリンベンジルエステル（０．８４ｇ、２．０２ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム／炭素（８０ｍｇ）のＥｔＯＡｃ（２９．０ｍＬ）中混合物を、Ｈ_２の風船雰囲気下に撹拌した。数時間後、反応液をセライト濾過し、フィルターケーキをＭｅＯＨで洗浄した。濾液を減圧下に濃縮して、Ｂｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｌ−プロリンを白色固体として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝１．５７分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３２７．１。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）：δ４．６４〜４．６２（ｍ、１Ｈ）、４．３６（ｂｒｍ、１Ｈ）、３．９０〜３．５１（ｂｒｍ、４Ｈ）、２．２５〜２．２１（ｍ、２Ｈ）、１．９８〜１．９３（ｍ、４Ｈ）、１．７０〜１．５５（ｍ、４Ｈ）、１．４６および１．４４（Ｂｏｃ回転異性体、ｓ、９Ｈ）。
【０４３１】
段階３：前段階からのＢｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｌ−プロリン（９７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（８１ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（２０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（８６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）中混合物をＮ_２下に室温で終夜撹拌した。溶媒を減圧下に除去し、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）によって精製して、Ｂｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド化合物を黄色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝２．４９分。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝５７９．５。
【０４３２】
段階４：前段階からのＢｏｃ−Ｄ−ホモプロリル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドのＣＨ_２Ｃｌ_２（約２ｍＬ）溶液を室温で撹拌しながら、それに過剰のＴＦＡ（０．５ｍＬ）を加えた。２時間後、溶媒を減圧下に除去し、残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製して、標題化合物のビス−ＴＦＡ塩を無色油状物として得た。ＬＣＭＳ保持時間＝０．６０分間。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＝３７９．６。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ７．４７（ｄ、Ｊ＝１．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．４２（ｄ、Ｊ＝８．３Ｈｚ、１Ｈ）、７．３４（ｄｄ、Ｊ＝１．７，８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．５１（ｄ、Ｊ＝１５．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．３９（ｄｄ、Ｊ＝３．４，９．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｄ、Ｊ＝１５．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．２４（ｓ、２Ｈ）、４．１６（ｍ、１Ｈ）、３．８２〜３．７８（ｍ、１Ｈ）、３．６１〜３．５６（ｍ、１Ｈ）、３．４２〜３．４０（ｍ、１Ｈ）、３．１０〜３．０８（ｍ、１Ｈ）、２．２６〜２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．０７〜１．８６（ｍ、５Ｈ）、１．７９〜１．５８（ｍ、３Ｈ）。
【０４３３】
実施例５０
１−（３，３−ジフェニルプロパノイル）−Ｎ−（２−アミノメチル−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０４３４】
【化１２９】

【０４３５】
段階１：Ｌ−プロリン−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジル）アミド（０．０３０ｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）、３，３−ジフェニルプロパン酸（２０ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（１３ｍｇ、０．０９８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．０２３ｇ、０．１２２ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（０．０１４２ｍＬ、０．０８２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によりでプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と１Ｎ ＨＣｌとの間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、水、１０％水溶液Ｎａ_２ＣＯ_３およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を４０分間かけての１０％から１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる１０ｇＩＳＣＯカラムでのクロマトグラフィーによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、溶媒を減圧下に除去して、Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル）−５−クロロベンジル）−１−（３，３−ジフェニルプロパノイル）−Ｌ−プロリンアミドを油状物として得た（０．０５０ｇ、９９％）。ＨＰＬＣ保持時間＝２．９分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ Ｍ＋Ｈ＝５７６、５７８。
【０４３６】
段階２：前段階からのＮ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−１−（３，３−ジフェニルプロパノイル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０５０ｇ、０．０８２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．９分）をＥｔＯＡｃ（２ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（３．５５Ｍ、１．５ｍＬ）を加えた。浴を外し、２時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によって反応完結が示され、溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔ_２Ｏで磨砕し、濾過して標題化合物の塩酸塩を固体として得た。ＨＰＬＣ保持時間＝１．８４分、方法Ｂ；ＬＣ−ＭＳ Ｍ＋Ｈ＝４７６、４７８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、８．４０（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）；８．１６（ｂｒｓ、２Ｈ）；７．４０〜７．４４（ｍ、４Ｈ）；７．１０〜７．３２（ｍ、９Ｈ）；４．４８〜４．５２（ｍ、１Ｈ）；４．３０〜４．３１（ｍ、２Ｈ）；４．１５〜４．１７（ｍ、１Ｈ）；４．０７（ｓ、２Ｈ）；３．５８〜３．６０（ｍ、１Ｈ）；３．４８〜３．５１（ｍ、１Ｈ）；２．９４（ｄｄ、Ｊ＝５，１６Ｈｚ、１Ｈ）；１．７２〜１．９９（ｍ、５Ｈ）。
【０４３７】
ＨＰＬＣ法Ａ：
固定相：
ヒューレット−パッカード（Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ）ゾルバックス（Ｚｏｒｂａｘ）ＳＢ−Ｃ８カラム、７５×４．６ｍｍ、３．５ミクロン。
移動相：
Ａ＝０．１体積％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ
Ｂ＝０．１体積％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ。
勾配：４．５分かけて９５：５Ａ：Ｂから０：１００Ａ：Ｂ
流量：３．０ｍＬ／分。
ＵＶ検出：２１５ｎｍ。
【０４３８】
ＨＰＬＣ法Ｂ：
固定相：
ウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）エクステラ（Ｘｔｅｒｒａ）ＲＰ１８カラム、５０×４．６ｍｍ、３．５ミクロン。
移動相：
Ａ＝０．１体積％Ｈ_３ＰＯ_４含有Ｈ_２Ｏ
Ｂ＝ＣＨ_３ＣＮ。
勾配：４．０分間かけて９５：５Ａ：Ｂから５：９５Ａ：Ｂ
流量：４．０ｍＬ／分。
ＵＶ検出：２１５ｎｍ。
【０４３９】
ＬＣ−ＭＳ ＨＰＬＣ法：
固定相：
ＹＭＣＰｒｏ Ｃ１８ ５ミクロン １２０Å ３．０×５０ｍｍ。
移動相：
Ａ＝０．０５体積％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ
Ｂ＝０．０４２５体積％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ
勾配：３．６分間かけて９２：８Ａ：Ｂから１００：０Ａ：Ｂ
流量：３．６分間かけて１．５から２．０ｍＬ／分。
ＵＶ検出：２１５ｎｍ。
質量検出器のための電気スプレーイオン化。
【０４４０】
実施例５１
２−［２−（アミノメチル）フェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
段階Ａ：２−ブロモメチルフェニル酢酸：
ｏ−トリル酢酸９７．０ｇ（０．６４６ｍｏｌ）の四塩化炭素（１．７５リットル）溶液に、Ｎ−ブロモコハク酸イミド１１５．０ｇ（０．６４６ｍｏｌ）および２，２′−アゾビスイソブチロニトリル３．４ｇ（０．０２１ｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下に４時間加熱還流した。混合物を冷却して０〜５℃として３０分間経過させた後、固体を濾過によって取り、少量の四塩化炭素で洗浄した。その固体を水（０．８リットル）で磨砕し、濾取し、水５００ｍＬで洗浄して、２−ブロモメチルフェニル酢酸を得た。濾液を濃縮して容量を１５０ｍＬとし、得られたスラリーを冷却して０〜５℃として３０分間経過させた。第２のロットの生成物を得た。
【０４４１】
段階Ｂ：２−ブロモメチルフェニル酢酸ｔ−ブチルエステル
２リットルの厚肉フラスコに入った２−ブロモメチルフェニル酢酸８０ｇ（０．３４９ｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（７００ｍＬ）溶液に、濃硫酸８４ｍＬ（１．５７１ｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を冷却して−１５℃とし、イソブチレン５８０ｍＬを反応容器中に直接凝縮させた。密閉した圧力フラスコを、室温で４時間にわたり機械振盪した（この段階中、フラスコ内の圧力は約０．１４ＭＰａ（約２０ｐｓｉ）まで上昇）。混合物をｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル１．２リットルおよび固体重炭酸ナトリウム３３６ｇ（４．０ｍｏｌ）の０〜５℃の撹拌混合物に混合物をゆっくり投入することで、注意深く反応停止してから、氷水１．２リットルでゆっくり希釈した。分離した有機相をブライン０．８リットルで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮して油状物を得た。それをそれ以上精製せずに用いた。
【０４４２】
段階Ｃ：２−アジドメチルフェニル酢酸ｔ−ブチルエステル
粗２−ブロモメチルフェニル酢酸ｔ−ブチルエステル（０．３４９ｍｏｌ）のＤＭＦ（６００ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム３４．１ｇ（０．５２４ｍｏｌ）を加え、混合物を６５℃で３時間撹拌した。室温まで冷却した後、混合物を酢酸エチル１．２リットルで希釈した。有機層を水で洗浄し（８００ｍＬで３回）、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮して標題化合物を黄色油状物として得た。この取得物をそれ以上精製せずに用いた。
【０４４３】
段階Ｄ：［２−（アミノメチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル・シュウ酸塩
２−アジドメチルフェニル酢酸ｔ−ブチルエステル７８．０ｇ（０．３１２ｍｏｌ）のＴＨＦ（１．３６リットル）溶液に、５％Ｐｄ／Ｃ ７．８ｇ（５０％含水品）を加え、混合物を２リットルの厚肉フラスコ中、約０．３１ＭＰａ（４５ｐｓｉ）のＨ_２下に２時間にわたって機械で振盪した。触媒をセライト層での濾過によって除去し、ＴＨＦ２５０ｍＬで洗浄した。濾液に、シュウ酸３１．２５ｇ（０．３４７ｍｏｌ）のメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５００ｍＬ）溶液を加え、得られた懸濁液を室温で３０分間撹拌した。固体を濾取し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル３００ｍＬで洗浄した（濾過は非常にゆっくりで、約３時間を要した）。６０℃で１８時間真空乾燥して、［２−（アミノメチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル・シュウ酸塩４２．４ｇ（２−ブロモメチルフェニル酢酸からの全体収率３９％）を白色粉末として得た。生成物は遊離塩基としては不安定であり、室温で数時間かけて環化してアミドとなる。
【０４４４】
【化１３０】

段階Ｅ：［２−（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル
［２−（アミノメチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル３．０ｇ（９．６４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１００ｍＬ）溶液を冷却して０℃としたものに、クロルギ酸ベンジル０．８２５ｍＬ（５．７８ｍｍｏｌ）および次に４−ジメチルアミノピリジン１．４７ｇ（１２．０５ｍｍｏｌ）、そして２回目のクロルギ酸ベンジル０．８２５ｍＬ（５．７８ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、反応液を１０％硫酸水素カリウム（水溶液）（３０ｍＬで２回）、水（３０ｍＬで１回）およびブライン（３０ｍＬで１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固した。得られた粗油状物（３．６９ｇ）について、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）を行って、［２−（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３８〜７．３０（ｍ、５Ｈ）、７．２８〜７．２１（ｍ、４Ｈ）、５．４０（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、４．４０（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、３．６１（ｓ、２Ｈ）、１．４１（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３７８．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３０（１５％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０４４５】
段階Ｆ：２−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル
［２（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］酢酸ｔｅｒｔ−ブチル３．１５ｇ（８．８６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３２ｍＬ）溶液を窒素雰囲気下に冷却して０℃とし、それに２．０Ｍ水素化ホウ素リチウムのＴＨＦ溶液６．６５ｍＬを３０分間かけて滴下した。室温で終夜撹拌後、反応液を氷浴で冷却し、１０％硫酸水素カリウム（水溶液）を発泡が止むまで少量ずつ加え、酢酸エチルで抽出した（３回）。有機抽出液を合わせ、ブラインで洗浄し（１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固して粗明黄色油状物２．５８ｇを得た。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（５％から４０％酢酸エチル／ヘキサンの直線勾配）によって、２−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３７〜７．１９（ｍ、９Ｈ）、５．４４（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、４．４２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、３．９０〜３．８２（ｂｒｔ、２Ｈ）、２．９５〜２．８８（ｂｒｔ、２Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３０８．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．２８（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０４４６】
段階Ｇ：メタンスルホン酸２−［２−（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］エチル
２−（２−ヒドロキシエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル１．０６ｇ（３．７２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍＬ）溶液を冷却して０℃とし、それにトリエチルアミン０．５７０ｍＬ（４．０９ｍｍｏｌ）および次にメタンスルホニルクロライド０．３１６ｍＬ（４．０９ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、反応液をシリカゲルで直接フラッシュクロマトグラフィー精製して（４０％酢酸エチル／ヘキサン）、メタンスルホン酸２−［２−（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］エチルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３８〜７．２１（ｍ、９Ｈ）、５．２１（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１３（ｓ、２Ｈ）、４．４５〜４．３８（ｍ、４Ｈ）、３．１２（ｂｒｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、２．８４（ｓ、３Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３８６．０；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３５（４０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０４４７】
段階Ｈ：２−（２−アジドエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル
メタンスルホン酸２−［２−（｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝メチル）フェニル］エチル１．１５ｇ（３．１６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８．０ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム０．４１ｇ（６．３３ｍｍｏｌ）を加えた。室温で終夜撹拌後、追加のアジ化ナトリウム０．２０５ｇ（３．１５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を昇温させて４０℃とし、４時間経過させた。反応液を冷却して室温とし、飽和炭酸ナトリウム（水溶液）で処理し、酢酸エチルで抽出した（３回）。有機抽出液を合わせ、水（１回）およびブライン（１回）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、減圧下に濃縮乾固して粗油状物１．２ｇを得た。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル／ヘキサン）によって、２−（２−アジドエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３９〜７．２０（ｍ、９Ｈ）、５．１４（ｓ、２Ｈ）、５．０５（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、３．５６〜３．４９（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、２．９７〜２．９１（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３３３．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３２（２０％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０４４８】
段階Ｉ：２−（２−アミノエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル
２−（２−アジドエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル９０４ｍｇ（２．９１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０．０ｍＬ、水４．０ｍＬ含有）溶液に、トリフェニルホスフィン１．５３ｇ（５．２８ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。ＴＨＦを減圧下に除去し、残留水相を塩化メチレンで抽出した（３回）。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し（１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（１６０／１０／１から１１４／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウムの直線勾配）によって、２−（２−アミノエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３８〜７．１７（ｍ、９Ｈ）、６．１４（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１２（ｓ、２Ｈ）、４．４１（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝４．５Ｈｚ）、３．０１〜３．９５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）、２．８２〜２．７５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．７Ｈｚ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｈ＝２８５．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．１８（１６０／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０４４９】
段階Ｊ：２−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝ベンジルカルバミン酸ベンジル
２−（２−アミノエチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル５８４ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（６．０ｍＬ）溶液に０℃で、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート４９３ｍｇ（２．２６ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（３．０ｍＬ）溶液を加えた。反応液を０℃で０．５時間撹拌し、昇温させて室温として２時間経過させた。反応液のシリカゲルでの直接フラッシュクロマトグラフィー（６％ジエチルエーテル／塩化メチレン）によって、２−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル）ベンジルカルバミン酸ベンジルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３８〜７．１５（ｍ、９Ｈ）、５．５６（ｂｒｓ、１Ｈ）、５．１３（ｓ、２Ｈ）、４．６７（ｂｒｓ１Ｈ）、４．４１（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、３．３４〜３．２７（ｍ、２Ｈ）、２．８８〜２．８０（ｂｒｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝４０７．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４２（５％ジエチルエーテル／塩化メチレン）。
【０４５０】
段階Ｋ：２−［２−（アミノメチル）フェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
２−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル）ベンジルカルバミン酸ベンジル７５０ｍｇ（１．９５ｍｍｏｌ）の純粋エタノール（６．０ｍＬ）溶液に、１０％パラジウム／炭素触媒１５０ｍｇを加えた。風船の水素を撹拌懸濁液に室温で２時間吹き込んだ。反応液をセライト濾過し、フィルター層を新鮮な純粋エタノールで洗浄した（２回）。濾液を減圧下に濃縮乾固して、２−［２−（アミノメチル）フェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．３１〜７．１９（ｍ、４Ｈ）、５．６８（ｂｒｓ、１Ｈ）、３．９０（ｓ、２Ｈ）、３．４１〜３．３４（ｂｒｍ、２Ｈ）、２．９０〜２．８３（ｂｒｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８Ｈｚ）、１．４１（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋ＮＨ＝２５１．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．２４（１６０／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０４５１】
実施例５２
２−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０４５２】
段階Ａ：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン
【０４５３】
【化１３１】

７−クロロ−３，４−ジヒドロイソキノリン−１−オン（１１．６ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）の脱水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下に室温で撹拌しながら、それにジイソプロピルエチルアミン（１７．０ｍＬ、９５．８ｍｍｏｌ、１．５当量）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１５．３３ｇ、７０．２６ｍｍｏｌ、１．１当量）および触媒量の４−（ジメチルアミノ）ピリジンを加えた。それを室温で２時間撹拌し、減圧下に濃縮し、塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。残留物を、塩化メチレンを溶離液として用いるフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。所望の分画を減圧下に濃縮して、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（２）を透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．５５分、方法Ａ；質量分析ｍ／ｚ＝２８２．１）。
【０４５４】
段階Ｂ：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベ ンジルアルコール
【０４５５】
【化１３２】

２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−１−オン（１８．４ｇ、６４．３８ｍｍｏｌ）の脱水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）溶液を不活性雰囲気下に０℃で撹拌しながら、それに２．０Ｍ ＬｉＢＨ_４のテトラヒドロフラン溶液（６４．３８ｍＬ、１２８．７６ｍｍｏｌ、２当量）を加えた。それを０℃で１．５時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム溶液で反応停止し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下に濃縮した。それによって、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノエチル）−５−クロロベンジルアルコールを透明無色油状物として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分、方法Ａ；質量分析ｍ／ｚ＝２８６．２）。
【０４５６】
段階Ｃ：２−［２−アジドメチル）−４−クロロフェニルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
２−［４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル６４９ｍｇ（２．２７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５．０ｍＬ）溶液に０℃で、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰＡ）０．６７４ｍＬ（３．１３ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）０．４６８ｍＬ（３．１３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で１０分間、次に室温で撹拌した。３時間後、反応液を飽和炭酸ナトリウム（水溶液）で処理し、酢酸エチルで抽出した（３回）。有機抽出液を合わせ、ブラインで洗浄し（１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固して、粗油状物９６３ｍｇを得た。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）によって、２−［２−アジドメチル）−４−クロロフェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ７．４４（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．３６（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．０および８．２Ｈｚ）、７．２６（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、６．９２（ｂｒｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．５Ｈｚ）、４．５３（ｓ、２Ｈ）、３．１０（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．３および７．６Ｈｚ）、２．７３（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｎａ＝３３３．０；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３２（１５％酢酸エチル／ヘキサン）。
【０４５７】
段階Ｄ：２−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
２−［２−アジドメチル）−４−クロロフェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル６２９ｍｇ（２．０２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０．０ｍＬ；水３．１ｍＬ含有）溶液に、トリフェニルホスフィン１．０６ｇ（４．０５ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で終夜撹拌した。ＴＨＦを減圧下に除去し、残留水相を塩化メチレンで抽出した（３回）。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し（１回）、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下に濃縮乾固した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（２６６／１０／１から２００／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウムの直線勾配）によって、２−［２−（アミノメチル）−４−クロロフェニル］エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ７．４５（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．７Ｈｚ）、７．１８（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．１および８．２Ｈｚ）、７．１２（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．０１（ｂｒｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．２Ｈｚ）、３．７３（ｓ、２Ｈ）、３．０７（ｄｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．５および７．３Ｈｚ）、２．６８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、１．３６（ｓ、９Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｈ＝２８５．１；ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３３（１６０／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０４５８】
実施例５３
２−（アミノメチル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０４５９】
段階Ａ：２−（アジドメチル）ベンゾニトリル
２−シアノベンジルブロマイド９０ｇ（４５９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６００ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム３ｇ（５５３ｍｍｏｌ）の水溶液（水１００ｍＬ）を一気に加えた。得られた２相混合物を２２３℃で１８時間撹拌した。ＴＨＦ層を下層の水層から分液し、次の段階でそれ以上精製せずに用いた。
【０４６０】
段階Ｂ：２−シアノベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
前段階からのＴＨＦ層を希釈して容量１．６リットルとし、等量ずつに二分し、それぞれ５％パラジウム／炭素（５０重量％含水）６ｇの入ったパール圧力管中で約０．３１ＭＰａ（４５ｐｓｉ）にて水素化した。５〜１０℃の発熱が３０分以内で認められ、振盪を計１．５時間続けた。個々のバッチをセライトで濾過し、新鮮なＴＨＦ１００ｍＬで２回洗浄し、濾液を一つに混合した。そのアミン混合物を濃縮せずに（注意：溶液を濃縮しようとしたら、かなり発熱してバッチが黒色に変わった）、それにジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート８７．５ｍＬ（３８１ｍｍｏｌ）を無希釈で加えた。２時間後、ＴＨＦを減圧下に除去し、１５％酢酸エチル／ヘキサン２５０ｍＬで洗った。得られた半固体を１５％酢酸エチル２５０ｍＬ中でスラリーとし、濾過した。濾液を減圧下に濃縮し、１０％酢酸エチル／ヘキサン（１７５ｍＬ）で希釈し、冷却して０℃とし、濾過して２−シアノベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを灰色固体として得た。
【０４６１】
段階Ｃ：２−（アミノメチル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル・ヘミ硫酸塩
温度計、冷却管および窒素導入管を取り付けた３リットルの三頸フラスコに、塩化コバルト３ｇ（２３ｍｍｏｌ）、次にＴＨＦ１２００ｍＬ、次に２−シアノベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル５９ｇ（２５４ｍｍｏｌ）および氷水６００ｍＬを入れた。得られた明ピンク溶液に１５℃で、水素化ホウ素ナトリウム２６ｇ（６８４ｍｍｏｌ）を以下のように少量ずつ加えた。最初の水素化ホウ素ナトリウム３ｇで激しく水素ガスが発生して、黒色懸濁液を生じた。２時間以内に浴温度は３５℃に達し、加熱マントルでその温度に維持した。追加の水素化ホウ素ナトリウムおよび塩化コバルトを必要に応じて加えて、反応を促進させて完結させた。代表的には、１２時間間隔で、追加の水素化ホウ素ナトリウム７．５ｇを２回、塩化コバルト１ｇずつを２回加えた。完了後、二層を静置し、透明な上側のＴＨＦ層を傾斜法によって黒色水層から分離した。水層を新鮮なＴＨＦ７５０ｍＬで洗浄し、これら２つのＴＨＦ層を合わせ、セライト層で濾過した。橙赤色−黄色濾液を減圧下に濃縮して約３００ｍＬとしたところ、生成物が油状の下層となっている水層が得られた。混合物を酢酸エチル２５０ｍＬで２回抽出し、合わせた抽出液を固体硫酸水素ナトリウム２４ｇ（２００ｍｍｏｌ）と反応させた。固体が直ちに生成し、得られたスラリーを３０分間撹拌し、濾過し、酢酸エチル１００ｍＬで２回洗浄して、白色粉末６２ｇを得た。得られた粉末を水１７５ｍＬでスラリーとし、冷却して０℃とし、濾過し、冷水４０ｍＬで２回洗浄し、固体を５５℃の真空乾燥機で２４時間乾燥して、２−（アミノメチル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル・ヘミ硫酸塩を白色粉末として得た。
【０４６２】
実施例５４
２−（アミノメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【０４６３】
段階Ａ：２−ブロモ−５−クロロ安息香酸エステル
２−ブロモ−クロロ安息香酸（１１ｇ、４６．７ｍｍｏｌ）のメタノール（２５０ｍＬ）溶液に、ＨＣｌガスを吹き込んだ。反応液を昇温させて室温とし、終夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して橙赤色油状物を得た。それをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン）によって精製して、標題化合物を無色油状物として得た。
【０４６４】
^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．７８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝２．６Ｈｚ）；７．５９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１２．８１Ｈｚ）；７．３０（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．６，２．５Ｈｚ）；３．９４（ｓ、３Ｈ）。
【０４６５】
段階Ｂ：５−クロロ−２−シアノ安息香酸メチル
２−ブロモ−５−クロロ安息香酸メチル（１．１５ｇ、４．６ｍｍｏｌ）の脱気ＤＭＦ溶液に、シアン化亜鉛（２８２ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）およびパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（１００ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を加え、反応液を９０℃で終夜撹拌した。反応液を酢酸エチルと水との間で分配した。有機層を減圧下に濃縮し、１０％から２５％酢酸エチル／ヘキサンの勾配で溶離を行うフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、白色固体を得た（５−クロロ−２−シアノ安息香酸メチル）。
【０４６６】
Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ８．１３（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝１．８３Ｈｚ）；３．０９（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．２４Ｈｚ）；７．２９（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝８．３４，２．１０Ｈｚ）；４．０２（ｓ、３Ｈ）。
【０４６７】
段階Ｃ：［２−（アミノメチル）−５−クロロフェニル］メタノール
ＬＡＨ（１Ｍ／Ｅｔ_２Ｏ、１０４．４ｍＬ、１０４．４ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液に０℃で、温度を２０℃以下に維持しながら、５−クロロ−２−シアノ安息香酸メチル（９．２８ｇ、０．５１２ｍｍｏｌ）を加えた。１．５時間後、水（３．９７ｍＬ）、ＮａＯＨ（１Ｎ、１１．９ｍＬ、１１．９ｍｍｏｌ）および水（３．９７ｍＬ）で０℃にて反応停止した。沈殿を濾過し、ＴＨＦで洗浄した。濾液を減圧下に濃縮し、次の段階でそのまま使用した。
【０４６８】
Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．１７〜７．３６（ｍ、３Ｈ）；４．６０（ｓ、２Ｈ）；３．９８（ｓ、２Ｈ）。
【０４６９】
段階Ｄ：４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
［２−（アミノメチル）−５−クロロフェニル］メタノールの塩化メチレン（２００ｍＬ）溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（１１．３８ｇ、５２．１８ｍｍｏｌ）を室温で加えた。１時間後、反応液を分配した。有機層を減圧下に濃縮し、酢酸エチル／ヘキサンの勾配を溶離液とするフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、褐色油状物を得た。それを塩化メチレン（５００ｍＬ）に取り、活性炭で処理してピンク固体を得た。
【０４７０】
Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：７．３６（ｓ、１Ｈ）；７．２〜７．５（ｍ、２Ｈ）；４．６９（ｂｓ、２Ｈ）；４．３２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝６．０４Ｈｚ）；１．４３（ｓ、９Ｈ）。
【０４７１】
段階Ｅ：２−（アジドメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
４−クロロ−２−（ヒドロキシメチル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０ｇ、３６．８ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に、ＤＰＰＡ（８．３ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）およびＤＢＵ（５．７９ｍＬ、３８．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、酢酸エチルと水との間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、減圧下に濃縮して粗油状物を得た（１４．６ｇ）。酢酸エチル−ヘキサン（１０、１５、２０、２５、５０％）の勾配で溶離を行うシリカゲルクロマトグラフィーによって精製を行って、２−（アミノメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
【０４７２】
Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ７．２５〜７．３９（ｍ、３Ｈ）；４．４１（ｓ、２Ｈ）、４．３２（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．８６Ｈｚ）；１．４５（ｓ、９Ｈ）。
【０４７３】
段階Ｆ：２−（アミノメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
２−（アジドメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．９ｇ、３６．７３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）および水（６ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（１０．５９ｇ、４０．４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を加熱して６５℃とし、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下に濃縮し、４％（１０％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ）／塩化メチレンで洗浄した。３％から５％（１０％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ）／ジクロロメタンの注意深い勾配を行うシリカゲルカラムクロマトグラフィーでの第２の精製によって、標題化合物を得た。
【０４７４】
Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）δ７．２１〜７．５２（ｍ、３Ｈ）；４．３２（ｂｄ、２Ｈ）；３．９０（ｓ、２Ｈ）；１．４４（ｓ、９Ｈ）。
【０４７５】
実施例５５
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）
【０４７６】
段階Ａ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシアセチル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
２−（アミノメチル）−４−クロロベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．１４ｍｍｏｌ、３７ｍｇ）、ＥＤＣ（０．２１ｍｍｏｌ、４０ｍｇ）およびＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＨ（０．１４ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）のジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）溶液に、ＨＯＡＴ（０．１５ｍｍｏｌ、２１ｍｇ）を加えた。溶液を終夜撹拌し、分取ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシアセチル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−（［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル｝−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミドを得た。質量分析スペクトラム：ＥＳ（Ｍ＋１）＝６１５．２。
【０４７７】
段階Ｂ：Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシアセチル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−（２−｛［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］メチル）−５−クロロベンジル）−Ｌ−プロリンアミド（０．０７３ｍｍｏｌ、４５ｍｇ）の酢酸エチル（０．５００ｍＬ）溶液に０℃で、ＨＣｌガスを２分間吹き込んだ。１時間撹拌し、減圧下に濃縮して、Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）を得た。質量分析スペクトラム：ＥＳ（Ｍ＋１）＝４１５．１。
【０４７８】
下記の実施例化合物を、実施例５１〜５４の生成物および適切なカルボン酸を用いて、実施例５５について前述の方法と同様の手順によって製造した。
【０４７９】
実施例５６
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（トリフルオロ酢酸塩）
質量分析スペクトラム：ＥＳ（Ｍ＋１）＝３８１．１。
【０４８０】
実施例５７
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（２−アンモニオエチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）
質量分析スペクトラム：ＥＳ（Ｍ＋１）＝３９５．２。
【０４８１】
実施例５８
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（２−アンモニオエチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）
質量分析スペクトラム：ＥＳ（Ｍ＋１）＝４２９．１。
【０４８２】
実施例５９
３−ピリジニウム−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［２−（２−アンモニオエチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・トリクロライド
【０４８３】
段階Ａ
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラ ニル−Ｌ−プロリン
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニン１．０ｇ（３．８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７ｍＬ）溶液に、Ｌ−プロリン酸メチル塩酸塩０．６２ｇ（３．８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．５２ｍＬ（３．８ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ０．５１ｇ（０．３８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ１．１ｇ（５．７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で３時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃ３００ｍＬで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液、水およびｍＬブライン各２００ｍＬで洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で脱水し、濾過し、減圧下に濃縮した。自動フラッシュクロマトグラフィー精製（ＩＳＣＯコンビフラッシュ（ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ）、シリカゲル７０ｇ、流量６０ｍＬ／分で５０％から１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサンで３０分間、次に２％から１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃの直線勾配）によって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニル−Ｌ−プロリン０．９ｇを得た。そのうちの０．４４ｇ（１．２ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ７ｍＬに溶解させた。それに、ＬｉＯＨ １．２ｍＬ（１．２ｍｍｏｌ、１Ｍ水溶液）を加え、反応混合物を６時間撹拌し、追加のＬｉＯＨ ０．１２ｍＬ（０．１２ｍｍｏｌ、１Ｍ水溶液溶液）を加え、反応混合物をさらに１６時間撹拌してから、濃ＨＣｌ ０．１２ｍＬ（１．４４ｍｍｏｌ、１２Ｍ水溶液）を加え、反応液を濃縮して泡状物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ８．４７（ｍ、１Ｈ）；７．７８（ｍ、１Ｈ）；７．３４（ｍ、２Ｈ）；４．３１（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝４．２１，８．８Ｈｚ）；３．７８（ｂｒｍ、１Ｈ）；３．５４（ｂｒｍ、１Ｈ）；３．１７（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝６．２３および１３．５Ｈｚ）；３．０２（ｍ、２Ｈ）；２．３〜１．８（ｂｒｍ、４Ｈ）；１．３５（ｓ、９Ｈ）；電気スプレー質量分析スペクトラム３６４。
【０４８４】
段階Ｂ
３−ピリジニウム−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［２−（２−アンモニオエチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・トリクロライド
実施例５５段階Ｂの合成について記載のものと同様の手順を用いて、標題化合物が製造される。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６、４００ＭＨｚ）：δ８．８４（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．８Ｈｚ）、８．７２〜８．６２（ｂｒｍ、４Ｈ）、８．１２〜８．００（ｂｒｍ、４Ｈ）、７．５４（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．９Ｈｚ）、７．３３〜７．１９（ｍ、４Ｈ）、４．５８（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４０〜４．２０（ｍ、３Ｈ）、３．８８〜３．８０（ｍ、２Ｈ）、３．４３〜３．２８（ｍ、３Ｈ）、２．９６（ｂｒｓ、４Ｈ）、１．９０〜１．７５（ｂｒｍ、２Ｈ）；ＭＳ（電気スプレー）：Ｍ＋Ｈ＝４３０．２；ＴＬＣ：Ｒ_ｆ＝０．１３（８０／１０／１塩化メチレン／メタノール／濃水酸化アンモニウム）。
【０４８５】
実施例６０
Ｎ−［２−（アミノメチル）−５−クロロベンジル］−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］プロリンアミド
【０４８６】
段階Ａ
９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステル
９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸（５．０４ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）溶液を窒素下に冷却して０℃とし、それに（Ｏ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（９．３２ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）、Ｌ−プロリン−ベンジルエステル塩酸塩（５．９３ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．５ｍＬ、４８．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を０℃で３時間撹拌し、濃縮し、シリカゲルで精製して（酢酸エチル−ヘキサン、１：２）、９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステルを得た。ＨＰＬＣ＝９６％、保持時間＝３．７分；Ｍ＋１＝４１４．１。
【０４８７】
段階Ｂ
９−ヒドロキシ−９−フルオレンルカルボニル−Ｌ−プロリン
上記段階１からの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステル（３．８ｇ、９．３ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム／炭素（３９０ｍｇ）の酢酸エチル（１００ｍＬ）中混合物を、水素雰囲気下に（風船圧）２４時間撹拌した。混合物をセライト濾過し、減圧下に濃縮して９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンを得た。ＨＰＬＣ＝９０％、保持時間＝２．９７分；Ｍ＋１＝３２４．１；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ）７．７８〜７．７５（ｍ、２Ｈ）、７．４７〜７．３２（ｍ、６Ｈ）、４．４９〜４．４５（ｑ、１Ｈ）、２．４２〜２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０１〜１．９４（ｍ、１Ｈ）、１．７８〜１．７１（ｍ、１Ｈ）、１．５８〜１．４１（ｍ、２Ｈ）。
【０４８８】
段階Ｃ
９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリル−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジルアミド
上記段階２からの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリン（１．８ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジルアミン（１．８ｇ、６．８ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（１２滴）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスフェート（３．０ｇ、６．７ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）溶液を室温で２４時間撹拌し、減圧下に濃縮し、シリカゲル（酢酸エチル−ヘキサン、１：２）で精製して、９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリル−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジルアミドを得た。ＨＰＬＣ＝９９％、保持時間＝３．６９分；Ｍ＋１＝５７６．２。
【０４８９】
段階Ｄ
９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミド
上記段階３からの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリル−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル−５−クロロベンジルアミド（１．４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）のメタノール（４０ｍＬ）溶液を冷却して０℃とし、無水ＨＣｌガスで飽和させた。０℃で１時間撹拌後、混合物を減圧下に濃縮し、逆相Ｃ１８ＨＰＬＣカラムで精製して、９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミドのＴＦＡ塩を得た。ＨＰＬＣ＝９９％、保持時間＝２．８３分；Ｍ＋１＝４７６．１；Ｃ_２７Ｈ_２６ＣｌＮ_３Ｏ_３・１．２５ＴＦＡ・１．００水の燃焼分析；計算値：Ｃ：５５．６７、Ｈ：４．６３、Ｎ：６．６０；実測値：Ｃ：５５．６４、Ｈ：４．６０、Ｎ：６．７０；^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ８．４４〜８．２７（ｓ、３Ｈ）、７．６７〜７．６４（ｍ、２Ｈ）、７．４３〜７．１９（ｍ、６Ｈ）、４．８１〜４．７５（ｍ、１Ｈ）４．４５〜４．４２（ｍ、１Ｈ）、４．１５〜３．９９（ｍ、３Ｈ）、２．３９〜２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０２〜１．８３（ｍ、１Ｈ）、１．７６〜１．６８（ｍ、１Ｈ）、１．６５〜１．５４（ｍ、１Ｈ）、１．４６〜１．３７（ｍ、１Ｈ）。
【０４９０】
ＨＰＬＣ法
移動相：勾配：４．５分間かけて９５：５から０：１００Ａ：Ｂ；Ａ＝０．１％ＴＦＡ含有水、Ｂ＝０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル；流量：３．０ｍＬ／分。
固定相：ゾルバックス（Ｚｏｒｂａｘ）Ｃ８カラム、内径４．５ｍｍ×７．５ｃｍ；３．５ミクロン。
【０４９１】
実施例６１
Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミド
【０４９２】
段階１：２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（３．８０ｇ、１４．１ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．６３分）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（４．９８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２６分）およびＨＯＢＴ水和物（２．１５ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（３．５１ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（約２ｍＬ）を徐々に加えることで、溶液のｐＨを徐々に上昇させてｐＨ６とした（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）。２時間の反応時間後、ＨＰＬＣ分析でベンジルアミン原料が完全に消費されていることが示された。溶媒をロータリーエバポレータ（浴温：３０℃、約０．５トル）で除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒をロータリーエバポレータ（浴温：３０℃、約５０トル）で除去した。残留物を、１：１から３：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドを、ガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５９０）。
【０４９３】
段階２：前段階からのＮ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（７．０ｇ、１２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにピペリジン（７．５ｍＬ）を加えた。１５分間の反応時間で、ＨＰＬＣ分析でＦｍｏｃ−プロリン誘導体が完全に消費されており、２種類の新たな近接して溶出する成分があることが示された（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分：所望の生成物、２．８０分：Ｆｍｏｃ副生成物）。溶媒および過剰のピペリジンをロータリーエバポレータ（浴温：４０℃、約０．５トル）で除去した。残留物を、９６：４から９２：８から８８：１２ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ａ（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドをガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ；ヨウ素で肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．０４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２〜７．３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、５．２４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４〜４．５ｐｐｍ（ＡＢＸ、２Ｈ）、４．２８ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ）、３．８０ｐｐｍ（ｄｄ、Ｊ＝５．４，９．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９〜３．０ｐｐｍ（ＡＢＸＹ、２Ｈ）、２．１〜２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９〜２．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜１．８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４４ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ））。
【０４９４】
段階３：前段階からのＬ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（０．２３ｇ、０．６２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、２Ｒ−ヒドロキシ−３−メチル酪酸（７７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（９９ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（０．１６ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつ加えて（合計約０．１ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定した溶液のｐＨを６〜７とした。混合物を室温で２時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によりプロリン原料が完全に消費されていることが示された。ＤＭＦを減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物をＥｔＯＡｃを溶離液として用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドを無色ガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．７（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４６８）。
【０４９５】
段階４：前段階からのＮ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（０．２６ｇ、０．５６ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２１分）をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。ＨＣｌガスを溶液に１０分間吹き込んだ。０℃で２時間後、ＨＰＬＣ分析によって原料が完全に消費されていることが示され、溶媒を減圧下に除去した。得られた固体をＥｔＯＡｃ中で磨砕し、濾過し、真空乾燥して、Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３−メチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミドの塩酸塩を白色固体として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．３（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．３８分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、回転異性体の約３．５：１混合物、代表的シグナル：８．８４ｐｐｍ（少量成分）および８．６４ｐｐｍ（主成分）（ｔ、Ｊ＝６Ｈｚ、１Ｈ）、０．８７，０．８３ｐｐｍ（主成分）および０．７４，０．５８ｐｐｍ（少量成分）（２つの二重線、Ｊ＝７Ｈｚ、３Ｈ））。
【０４９６】
ＨＰＬＣ条件：
固定相：ヒューレット−パッカード・ゾルバックスＳＢ−Ｃ８カラム７５×４．６ｍｍ、３．５ミクロン；
移動相：Ａ＝０．１体積％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ；Ｂ＝０．１体積％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ；
勾配：４．５分間かけて９５：５Ａ：Ｂから０：１００Ａ：Ｂ；
流量：３．０ｍＬ／分；
ＵＶ検出：２１５ｎｍ。
【０４９７】
実施例６２
Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミド
【０４９８】
段階１：２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミン（３．８０ｇ、１４．１ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．６３分）、Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロリン（４．９８ｇ、１４．８ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．２６分）およびＨＯＢＴ水和物（２．１５ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（３．５１ｇ、１８．３ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミン（約２ｍＬ）を徐々に加えることで、溶液のｐＨを徐々に上昇させてｐＨ６とした（濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定）。２時間の反応時間で、ＨＰＬＣ分析でベンジルアミン原料が完全に消費されていることが示された。溶媒をロータリーエバポレータ（浴温：３０Ｃ、約０．５トル）で除去し、残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配した。有機相を脱水し（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、溶媒をロータリーエバポレータ（浴温：３０Ｃ、約５０トル）で除去した。残留物を１：１から３：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドをガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．５（１：１ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ＵＶで肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝５９０）。
【０４９９】
段階２：前段階からのＮ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（７．０ｇ、１２ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．８７分）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにピペリジン（７．５ｍＬ）を加えた。１５分の反応時間で、ＨＰＬＣ分析でＦｍｏｃ−プロリン誘導体が完全に消費され、２種類の新たな近接して溶離する成分があることが示された（ＨＰＬＣ保持時間＝２．７６分：所望の生成物、２．８０分：Ｆｍｏｃ副生成物）。溶媒および過剰のピペリジンをロータリーエバポレータ（浴温：４０Ｃ、約０．５トル）で除去した。残留物を、９６：４から９２：８から８８：１２ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ａ（Ａ＝９５：５ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ）の勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドをガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．４（９０：１０：０．５ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_４ＯＨ；ヨウ素で肉眼観察）；ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８；^１Ｈ ＮＭＲ、４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３、８．０４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．２〜７．３ｐｐｍ（ｍ、３Ｈ）、５．２４ｐｐｍ（ｂｒｓ、１Ｈ）、４．４〜４．５ｐｐｍ（ＡＢＸ、２Ｈ）、４．２８ｐｐｍ（ｄ、２Ｈ）、３．８０ｐｐｍ（ｄｄ、Ｊ＝５．４，９．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．９〜３．０ｐｐｍ（ＡＢＸＹ、２Ｈ）、２．１〜２．２ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．９〜２．０ｐｐｍ（ｍ、１Ｈ）、１．７〜１．８ｐｐｍ（ｍ、２Ｈ）、１．４４ｐｐｍ（ｓ、３Ｈ））。
【０５００】
段階３：前段階からのＬ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（３．９０ｇ、１０．６ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分）、２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸（１．４０ｇ、１０．６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢＴ水和物（１．６８ｇ、１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６０ｍＬ）溶液を撹拌しながら、それにＥＤＣ（２．６５ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルエチルアミンを少量ずつゆっくり加えて（計約１．５ｍＬ）、濡れたイー・メルクｐＨ試験紙で測定して溶液のｐＨを６〜７とした。混合物を室温で６時間撹拌したところ、その時点でＨＰＬＣ分析によりプロリン原料が完全に消費されていることが示された。水（１０ｍＬ）を加え、溶媒を減圧下に除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（２００ｍＬ）との間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を分液し、無水ＭｇＳＯ_４で脱水し、濾過した。濾液の溶媒を減圧下に除去し、残留物を２：１、４：１および１：０ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの勾配溶離を用いるフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミドを無色ガム状物として得た（ＴＬＣ Ｒ_ｆ＝０．７（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ保持時間＝３．３５分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝４８２）。
【０５０１】
段階４：前段階からのＮ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノメチル）−５−クロロベンジルアミド（４．６５ｇ、９．６５ｍｍｏｌ、ＨＰＬＣ保持時間＝３．３５分）をＣＨ_２Ｃｌ_２（１５ｍＬ）に溶解させ、撹拌しながら冷却して０℃とした。無水ＨＣｌのエーテル溶液（１Ｍ溶液３８ｍＬ、３８ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。得られた溶液を０℃で１０分間撹拌し、室温で２０時間撹拌した。生成した固体を濾取し、エーテルで数回洗浄した。固体を、０．０５％濃ＨＣｌ含有のアセトニトリル：水勾配を用いる分取逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む分画を合わせ、凍結乾燥して、Ｎ−（２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル）−Ｌ−プロリル−２−アミノメチル−５−クロロベンジルアミドの塩酸塩を白色固体として得た（ＨＰＬＣ保持時間＝２．５２分；ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２；Ｃ、Ｈ、Ｎ燃焼分析、Ｃ_１９Ｈ_２８ＣｌＮ_３Ｏ_３・１．０ＨＣｌ・１．５Ｈ_２Ｏの計算値：Ｃ５１．２４、Ｈ７．２４、Ｎ９．４３；実測値：Ｃ５１．３２、Ｈ７．１７、Ｎ９．３３）。
【０５０２】
ＨＰＬＣ条件：
固定相：ヒューレット−パッカード・ゾルバックスＳＢ−Ｃ８カラム；７５×４．６ｍｍ、３．５ミクロン；
移動相：Ａ＝０．１体積％ＴＦＡ含有Ｈ_２Ｏ；Ｂ＝０．１体積％ＴＦＡ含有ＣＨ_３ＣＮ；
勾配：４．５分間かけて９５：５Ａ：Ｂから０：１００Ａ：Ｂ；
流量：３．０ｍＬ／分；
ＵＶ検出：２１５ｎｍ。
【０５０３】
当該トロンビン阻害薬の投与に好適な代表的な錠剤核は、以下の標準成分量で構成されるが、これらに限定されるものではない。
【０５０４】
【表１】

マニトール、微結晶セルロースおよびステアリン酸マグネシウムは、別の製薬上許容される賦形剤に代えることができる。
【０５０５】
プロテイナーゼ阻害測定のための ｉｎ ｖｉｔｒｏ アッセイ
ヒトα−トロンビンおよびヒトトリプシンのアッセイを、ルイスらの著作（Ｌｅｗｉｓ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｉｓｓｕｅ Ｎｏ．７０， ｐ．１７３ （１９９３））に記載の方法にほぼ従って行った。
【０５０６】
そのアッセイは、０．０５Ｍ ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）、０．１５Ｍ ＮａＣｌ、０．１％ＰＥＧ中２５℃で行った。トリプシンアッセイでは１ｍＭ ＣａＣｌ_２も含有させた。ｐ−ニトロアニリド（ｐｎａ）基質の加水分解速度を測定したアッセイでは、サーモマックス（Ｔｈｅｒｍｏｍａｘ）９６ウェルプレート読取装置を用いて、ｐ−ニトロアニリンの時間依存的出現を測定した（４０５ｎｍ）。ｓａｒ−ＰＲ−ｐｎａを用いて、ヒトα−トロンビン（Ｋ_ｍ＝１２５μＭ）およびウシトリプシン（Ｋ_ｍ＝１２５μＭ）のアッセイを行った。ｐ−ニトロアニリド基質濃度は、吸光係数８２７０ｃｍ^−１Ｍ^−１を用いた３４２ｎｍでの吸光度測定値から求めた。
【０５０７】
トロンビンの阻害度が高い強力な阻害薬（Ｋ_ｉ＜１０ｎＭ）を用いたある種の試験では、さらに感受性の高い活性アッセイを用いた。そのアッセイでは、蛍光発生基質ベンジルオキシカルボニル−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリン（Ｚ−ＧＰＲ−ａｆｃ、（Ｌｅｗｉｓ Ｓ． Ｄ． ｅｔ ａｌ． （１９９８） Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７３， ｐｐ． ４８４３−４８５４））（Ｋ_ｍ＝２７μＭ）のトロンビン触媒加水分解速度を、７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリン産生に関連する５００ｎｍ（４００ｎｍで励起）での蛍光増加から求めた。Ｚ−ＧＰＲ−ａｆｃのストック液の濃度は、ストック液小分けサンプルのトロンビンによる完全な加水分解で産生された７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリンの３８０ｎｍでの吸光度の測定値から求めた。
【０５０８】
活性のアッセイは、基質のストック液を１０倍以上に希釈して、最終濃度≦０．１Ｋ_ｍとし、酵素または阻害薬と平衡となった酵素を含む溶液とすることで行った。酵素と阻害薬との間で平衡を得るのに必要な時間は、対照実験で決定した。阻害薬非存在下での生成物形成の初期速度（Ｖ_０）または阻害薬存在下での生成物形成の初期速度（Ｖ_ｉ）を測定した。競争的阻害があり、Ｋ_ｍ／［Ｓ］、［Ｉ］／ｅおよび［Ｉ］／ｅ（［Ｓ］、［Ｉ］およびｅはそれぞれ、基質、阻害薬および酵素の総濃度を表す）と比較して１が無視できるものと仮定すると、阻害薬の酵素からの解離についての平衡定数（Ｋ_ｉ）は、下記式で示した［Ｉ］へのＶ_０／Ｖ_ｉの依存性から得ることができる。
【０５０９】
【数１】

このアッセイによって示された活性は、本発明の化合物が、不安定狭心症、難治性狭心症、心筋梗塞、一過性虚血発作、心房細動、血栓性卒中、塞栓性卒中、深部静脈血栓症、播種性血管内凝固、ならびに再疎通化血管の再閉塞もしくは再狭窄を患う患者における各種状態を治療する上で、治療用有用であることを示している。
【０５１０】
実施例６３
錠剤製造
以下の活性化合物をそれぞれ２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇおよび１００．０ｍｇ含む錠剤を、以下に示すように製造する（組成Ａ〜Ｃ）。有効成分ＩはＤ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）である。
【０５１１】
【表２】

活性化合物、セルロースおよびコーンスターチの一部を全て混和し、造粒して、１０％コーンスターチペーストを得る。得られた細粒を篩にかけ、乾燥し、残りのコーンスターチおよびステアリン酸マグネシウムと混合する。次に、得られた細粒を打錠して、１錠当たり有効成分をそれぞれ２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇおよび１００．０ｍｇ含有する錠剤とする。
【０５１２】
実施例６４
錠剤製造
化合物Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）（有効成分Ｉ）錠の組成例を以下に示す。
【０５１３】
【表３】

２ｍｇ錠、１０ｍｇ錠および５０ｍｇ錠は、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび酸化チタンの水系分散液でフィルムコーティングし、公称重量増２．４％とした。
【０５１４】
直接打錠による錠剤製造
有効成分Ｉ、マニトールおよび微結晶セルロースを、指定の径（一般には２５０〜７５０μｍ）のメッシュスクリーンで篩い、好適な混合機で合わせた。次に、得られる乾燥粉末混合物中に薬剤が均等に分散するまで、混合物を混合した（代表的には１５〜３０分間）。ステアリン酸マグネシウムを篩にかけ、混合機に加え、その後さらに混和して（代表的には２〜１０分間）、前圧縮錠混合物を得た。次に、その前圧縮錠混合物に、許容される崩壊時間を有する（規格は、圧縮錠の大きさおよび力価によって変動する）好適な物理的強度の錠剤が得られるだけの力を加えることで（代表的には０．５〜２．５メートルトンの範囲）、圧縮を行った。力価２ｍｇ、１０ｍｇおよび５０ｍｇの場合、錠剤を除塵し、水溶性ポリマーおよび顔料の水系分散液でフィルムコーティングした。
【０５１５】
乾燥細粒を用いた錠剤製造
別法として、乾燥粉末混合物を軽く力を加えることで圧縮し、再度粉砕して、所定粒径の細粒を得る。その細粒をステアリン酸マグネシウムと混和し、上記のように打錠する。
【０５１６】
実施例６５
静脈投与製剤
一般的な静脈投与製剤法に従って、化合物Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（アンモニオメチル）−５−クロロベンジル］−Ｌ−プロリンアミド・ビス（塩酸塩）（有効成分Ｉ）の静脈投与製剤を製造した。
【０５１７】
【表４】

グルクロン酸に代えて、静脈投与に好適なｐＨ範囲で妥当な緩衝能力を有するＬ−乳酸、酢酸、クエン酸またはいずれかの製薬上許容される酸／共役塩基などの他の各種緩衝剤酸を用いることができる。

Claims (24)

1. 下記一般式の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
   

   

   ［式中、
   ｍは０、１または２であり；
   Ｒ_ｗおよびＲ_ｖは独立に、水素、Ｃ_１−４アルキルおよびハロゲンからなる群から選択され；
   Ｒ_ｔは、Ｃ_１−６アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルであり；
   Ｒ^１は、
   １）
   

   

   ［式中、Ｒ^４およびＲ^５は独立に、水素、ハロゲン、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−６アルキル、−ＯＨおよびシアノからなる群から選択され；
   Ｘは、結合、ＯまたはＳである。］；ならびに
   ２）
   

   

   ［式中、
   Ｒ^６は、
   ａ）水素、
   ｂ）Ｃ_１−６アルキル、
   ｃ）−ＯＨ、
   ｄ）−ＮＲ^２４Ｒ^２５（Ｒ^２４およびＲ^２５は独立に、水素あるいは未置換であるか−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルもしくはＣＯＯＲ^１７の１以上で置換されたＣ_１−６アルキルであり；Ｒ^１７はＣ_１−６アルキルである）、
   ｅ）ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ^１８、
   ｆ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^１８、
   ｇ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＲ^１８、
   ｈ）ＮＨＳＯ_２Ｒ^１８、
   ｉ）ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ_２、および
   ｊ）ＮＨＣＮ
   からなる群から選択され；
   Ｒ^１８は、Ｃ_１−６アルキル、アリールおよびＣ_３−７シクロアルキルからなる群から選択され；
   Ｒ^７およびＲ^８は独立に、
   ａ）水素、
   ｂ）−ＣＦ_３、
   ｃ）Ｃ_１−６アルキル、
   ｄ）フェニル（未置換であるか、Ｃ_１−６アルキル、ＣＯＯＲ^２６もしくはハロゲンで置換されており；Ｒ^２６はＣ_１−６アルキルまたは水素である）、
   ｅ）
   

   

   ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル、
   ｇ）
   

   

   （Ｒ^２７はＣ_１−６アルキルまたはＣ_３−７シクロアルキルである）、
   ｈ）
   

   

   （Ｒ_ｘおよびＲ_ｙは独立に、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、未置換フェニルまたはハロゲン、Ｃ_１−４アルキル、ＯＨもしくはＣ_１−４アルコキシで置換されたフェニルからなる群から選択され；ｎは０、１、２もしくは３であり
   ｉ）
   ｉ）未置換であるかＣ_１−４アルキルで置換されたＣ_３−７シクロアルキル、
   ｉｉ）−ＣＯＯＨ、
   ｉｉｉ）−ＯＨ、
   ｉｖ）
   

   

   ｖ）
   

   

   （Ｒ^９およびＲ^１０は独立に、
   ａａ）水素、
   ｂｂ）ハロゲン、
   ｃｃ）Ｃ_１−４アルコキシ、
   ｄｄ）Ｃ_１−４アルキル、
   ｅｅ）ヒドロキシ、
   ｆｆ）ＣＦ_３、
   ｇｇ）シアノ、
   ｈｈ）ＣＯＯＲ^２８（Ｒ^２８はＣ_１−４アルキルまたは水素である）
   からなる群から選択される）
   からなる群のうちの１個または２個で置換されたＣ_１−６アルキル
   からなる群から選択されるか；あるいは
   Ｒ^７とＲ^８が一体となって、未置換であるか独立に１個もしくは２個のＣ_１−６アルキル基で置換されたＣ_３−７炭素環を形成している。］
   からなる群から選択され；
   Ｒ^３は、
   １）−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、
   ２）−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）および
   ３）
   

   

   （ｎは０、１または２である）
   からなる群から選択され；
   Ｒ^１１およびＲ^１２は独立に、
   ａ）水素、
   ｂ）Ｆ、
   ｃ）Ｃ_１−４アルキル、
   ｄ）ＣＦ_３、
   ｅ）ＣＨＦ_２、
   ｆ）Ｃ_３−７シクロアルキル
   からなる群から選択されるか；
   あるいはＲ^１１とＲ^１２が一体となって、３〜７員の炭素環を形成しており；
   Ｒ^１３およびＲ^１４は独立に、
   ａ）水素、
   ｂ）Ｃ_１−４アルキル、
   ｃ）−ＣＦ_３、
   ｄ）−ＣＨＦ_２、
   ｅ）−ＣＨ_２ＯＨ、
   ｆ）Ｃ_３−６シクロアルキル
   からなる群から選択されるか；あるいは
   Ｒ^１３とＲ^１４が一体となって３〜７員の炭素環を形成しており；
   Ｒ^１５およびＲ^１６は独立に、
   ａ）水素、
   ｂ）Ｃ_１−６アルキル（未置換であるか、−ＯＨ、Ｃ_３−７シクロアルキルまたはＣ（Ｏ）ＯＲ^１９で置換されており；Ｒ^１９は、水素およびＣ_１−６アルキルからなる群から選択される）、
   ｃ）Ｃ_３−７シクロアルキル、および
   ｄ）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^２０（Ｒ^２０は、−ＯＲ^２１および−ＮＨＲ^２１からなる群から選択され；Ｒ^２１は、水素、Ｃ_１−６アルキルまたはベンジルである）
   からなる群から選択されるか；あるいは
   Ｒ^１５とＲ^１６が一体となって、未置換であるか水酸基またはハロゲンで置換された４〜７員の複素環を形成している。］
2. 前記化合物が下記式を有する請求項１に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
   

   

   ［式中、Ｒ^３は−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）または−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である。］
3. Ｒ^３が−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である請求項２に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
4. Ｒ^３が−Ｃ（Ｒ^１１）（Ｒ^１２）Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）ＮＨ_２である請求項３に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
5. Ｒ^３が−ＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨＦ_２）ＮＨ_２または−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＦ_３）ＮＨ_２である請求項４に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
6. ｘが結合であり；
   Ｒ^６が、水素、−ＯＨ、−ＣＨ_３または−ＮＨ_２であり；
   Ｒ^７が、水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
   Ｒ^８が、フェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、２−ピリジル、３−ピリジル、
   

   

   または
   

   

   で置換されたＣ_１−６アルキルである請求項５に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
7. Ｒ^９が水素またはＣｌでありＲ^１０が水素である請求項６に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
8. Ｒ^１が下記のものからなる群から選択される請求項７に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
   

   
9. 下記のものからなる群から選択される請求項８に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
   

   

   
10. Ｒ^３が−Ｃ（Ｒ^１３）（Ｒ^１４）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である請求項２に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
11. Ｒ^３が−ＣＨ_２Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、ＣＨ（ＣＨＦ_２）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）、−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）または−ＣＨ（ＣＨ_３）Ｎ（Ｒ^１５）（Ｒ^１６）である請求項１０に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
12. Ｒ^３が−ＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨＦ_２）ＮＨ_２、−ＣＨ（ＣＨ_２ＯＨ）ＮＨ_２または−ＣＨ（ＣＨ_３）ＮＨ_２である請求項１１に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
13. ｘが結合であり；
    Ｒ^６が水素、−ＯＨまたは−ＮＨ_２であり；
    Ｒ^７が水素、−ＣＨ_３、フェニル、３−クロロフェニル、シクロプロピルまたは−ＣＨ_２ＣＨ_３であり；
    Ｒ^８がフェニル、３−クロロフェニル、シクロヘキシル、−ＣＨ_３、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、２−ピリジル、３−ピリジルまたは
    

    

    で置換されたＣ_１−６アルキルである請求項１２に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
14. Ｒ^９が水素またはＣｌでありＲ^１０が水素である請求項１３に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
15. 

    である請求項１４に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
16. 下記のものからなる群から選択される請求項１５に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
    

    

    

    

    
17. 下記のものからなる群から選択される請求項１６に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩。
    

    
18. 請求項１に記載の化合物および製薬上許容される担体を含む、血液での血栓形成を阻害する組成物。
19. 請求項１８に記載の組成物を患者に投与する段階を有する、患者における血栓形成の阻害方法。
20. 請求項１８に記載の組成物を患者に投与する段階を有する、患者における血小板凝集物の形成を阻害する方法。
21. 哺乳動物においてトロンビンを阻害し、血栓形成を阻害し、血栓形成を治療し、あるいは血栓形成を予防する医薬品の製造での、請求項１に記載の化合物または該化合物の製薬上許容される塩の使用。
22. 哺乳動物における静脈血栓塞栓症および肺塞栓症の治療または予防方法であって、請求項１８に記載の組成物を該哺乳動物に投与する段階を有する方法。
23. 哺乳動物における深部静脈血栓症の治療または予防方法であって、請求項１８に記載の組成物を該哺乳動物に投与する段階を有する方法。
24. ヒトおよび他の哺乳動物における血栓塞栓性卒中の治療または予防方法であって、請求項１８に記載の組成物を該哺乳動物に投与する段階を有する方法。