LT3768B - Novel peptides derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions and use starting materials in synthesis of a serine protease inhibitors - Google Patents

Novel peptides derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions and use starting materials in synthesis of a serine protease inhibitors Download PDF

Info

Publication number
LT3768B
LT3768B LTIP1947A LTIP1947A LT3768B LT 3768 B LT3768 B LT 3768B LT IP1947 A LTIP1947 A LT IP1947A LT IP1947 A LTIP1947 A LT IP1947A LT 3768 B LT3768 B LT 3768B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
pab
cha
pro
group
hooc
Prior art date
Application number
LTIP1947A
Other languages
English (en)
Inventor
Karl Thomas Antonsson
Ruth Elvy Bylund
Nils David Gustafsson
Nils Olov Ingemar Nilsson
Original Assignee
Astra Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astra Ab filed Critical Astra Ab
Publication of LTIP1947A publication Critical patent/LTIP1947A/xx
Publication of LT3768B publication Critical patent/LT3768B/lt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D239/08—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms directly attached in position 2
    • C07D239/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D239/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to said nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/62—Compounds containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. N-acylcarbamates
    • C07C271/64—Y being a hydrogen or a carbon atom, e.g. benzoylcarbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D205/00—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D205/02—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D205/04—Heterocyclic compounds containing four-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D207/09—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06165—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and Pro-amino acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

Šis išradimas yra apie naujus konkurentinius tripsino tipo serino proteazių, ypač trombino ir kininogenazių, tokių kaip kalikreinas, inhibitorius, jų sintezę, farmacines kompozicijas, kurių veikliąsias sudėtines dalis tie junginiai sudaro, ir tų junginių panaudojimą kaip trombino inhibitorių ir antikoaguliantų bei kaip priešuždegiminių reagentų. Išradimas taipgi liečia naują junginių, kaip pradinių, panaudojimą serino proteazių inhibitorių sintezėje. Išradime taip pat kalbama apie naujus serino proteazių inhibitorių struktūrinius fragmentus.
TECHNIKOS LYGIS
Svarbiausią vaidmenį stabdant kraujavimą (t.y. neleidžiant kraujui nutekėti iš pažeisto kraujo indo) ir trombozę (t.y. patologinį kraujo indo užkimšimą kraujo krešuliu) vaidina kraujo krešėjimas. Krešėjimas - tai pasekmė sudėtingos grandinės fermentinių reakcijų, kurios vienoje iš galutinių grandžių vyksta profermento protrombino virtimas aktyviu trombino fermentu.
Trombinas yra itin svarbus krešėjimo procese. Jis skatina trombocitus, skaido fibrinogeną į fibrino monomerus, kurie savaimingai polimerizuojasi į skaidulas, ir aktyvuoja faktorių XIII, kuris savo ruožtu, skersinių ryšių pagalba paverčia polimerą į netirpų fibriną. Be to, trombinas aktyvuoja faktorių V ir faktorių VIII teigiamo grįžtamojo ryšio reakcijoje. Tuo būdu trombino inhibitoriai turėtų būti efektyvūs antikoaguliantai, slopinantys trombocitus, fibrino susidarymą bei fibrino stabilizavimą. Manoma, kad slopindami teigiamo grįžtamojo ryšio mechanizmą, jie slopina pradinių grandžių reakcijas, sukeliančias krešėjimą ir trombozę.
Kininogenazės yra serino proteazės, veikiančios kininogenus, kurie gamina kininus (bradikininą, kalidiną ir Met-Lys-bradikininą). Svarbios kininogenazės yra kraujo plazmos kalikreinas, audinių kalikreinas bei pieno liaukų ląstelių triptazė.
Kininai (bradikininas, kalidinas) paprastai dalyvauja uždegime. Pavyzdžiui, aktyvus uždegimo procesas yra susijęs su padidėjusiu kraujo indų pralaidumu, dėl kurio įvyksta kraujo plazmos išsiliejimas j audinius. Išsisunkusiame plazmos eksudate yra visos cirkuliuojančio kraujo baltymų sistemos. Plazminės kilmės kininogenai neišvengiamai sąveikaus su įvairiais kalikreinais, sudarydamos kininus tol, kol vyks aktyvus plazmos eksudato išsiskyrimo procesas. Plazmos eksudato išsiskyrimas vyksta nepriklausomai nuo uždegiminio proceso mechanizmų, t.y. alergijos, infekcijos ar kt. faktorių [Persson et ai., Editorial, Thorax, 1992, 47:993-1000]. Taigi, plazmos eksudato išsiskyrimas yra daugelio ligų, kaip antai, astmos, nosies gleivinės uždegimo, peršalimo, užkrečiamų žarnyno ligų, požymis. Ypa alergijos atveju, kai atpalaiduota pieno liaukų ląstelių triptazė [Salomonsson et ai., Am. Rev. Respir. Dis., 1992, 146:1535-1542] yra įjungiama į kinino susidarymą ir kitus patogeninius astmos, nosies gleivinės uždegimo ir vidurių ligų procesus.
Kininai yra biologiškai labai veiklios medžiagos, pasižyminčios poveikiu lygiesiems raumenims, sekrecijai, neurogeniniu poveikiu ir tokiu veikimu, kuris palaiko uždegiminius procesus, kaip antai, fosfolipazės A2 aktyvavimą ir padidintą indų pralaidumą. Pastarasis veikimas gali sukelti besikartojantį kininų gamybos ciklą, skatinantį vis naujų kininų atsiradimą.
Audinių kalikreinas, kad pagamintų kalidiną, pirmiausia atskelia mažo molekulinio svorio kininogeną, tuo tarpu kraujo plazmos kalikreinas daugiausia atpalaiduoja bradikininą nuo didelio molekulinio svorio kininogeno.
ANKSTESNIS TECHNIKOS LYGIS
Blomback ir kt., pirmieji leidinyje J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl 107, 59, (1969) paskelbę trombino inhibitoriaus skaldančios fibrinogeno A grandinę srities aminorūgščių seką, laikė, kad seka Phe-Val-Arg (čia P9P2-P1 reiškia P3-P2-P1 seką) yra geriausias inhibitorius.
JAV patente Nr. 4.346.078 S. Bajusz et ai. aprašė trombino inhibitorių H-DPhe-Pro-Agm, dipeptidilo darinį su aminoalkilo guanidinu P1-padėtyje.
Peptidiniai trombino inhibitorių dariniai, turintys ciklinį aminoalkilo guanidiną, pvz., 3-aminometil-1-amidinopiperidiną, P1padėtyje buvo aprašyti patente EP-A2-0.468.231.
S. Bajusz ir kt. patente EP-A2-0.185.390 paskelbė, kad agmatiną pakeitus arginino aldehidu, yra gaunamas žymiai stipresnis trombino inhibitorius.
Anksčiau buvo aprašyti kalikreino inhibitoriai, kurių skaldančiosios srities aminorūgščių seka yra Arg-Ser.
Kettner ir Shaw žurnaluose Biochemistry 1978, 17:4778-4784 ir
Meth. Enzym. 1981, 80:826-842 aprašė arginino chlormetilo ketonus HDPro-Phe-Arg-CH2CI ir H-DPhe-Phe-Arg-CH2CI kaip plazmos kalikreino inhibitorius.
Panašiai, Fareed ir kt. leidinyje Ann. N.Y. Acad. Sci. 1981, 370:765-784, skelbė, kad esteriai ir amidai, turintys H-DPro-Phe-Arg seką, esti plazmos kalikreino inhibitoriai.
Serino proteazių inhibitoriai, kuriuose vietoje aldehidų P1padėtyje yra elektrofiliniai ketonai, aprašyti šiuose patentuose: EP-A20.195.212 aprašo peptidilo a -ketono esterius ir amidus, EP-A1-0.362.002 aprašo fluoralkilamido ketonus ir EP-A2-0.364.344 aprašo α, β , δ triketonų junginius, pasižyminčius skirtingomis peptidazės slopinimo savybėmmis.
Patente EP-A2-0.293.881 buvo aprašyti tripsino tipo serino proteazių inhibitoriai, kaip antai, trombinas ir kalikreinas, sudaryti iš arginino C-terminalinių boro rūgšties darinių ir jų izotiokarbamido analogų.
Patente WO 92/04371 aprašyti kininogenazių inhibitoriai, pvz., kalikreino inhibitoriai, kurių pagrindą sudaro arginino dariniai.
Patente EP-A1-0.530.167 kaip trombino inhibitoriai aprašyti arginino α-alkoksiketonų dariniai.
IŠRADIMO ESMĖ
Išradimo tikslas yra naujų ir stiprių tripsino tipo serino proteazių inhibitorių gavimas, ypač antikoaguliacinių ir priešuždegiminių junginių, pasižyminčių atitinkamų fermentų konkurentiniu slopinančiu aktyvumu, t.y. sukeliančių grįžtamąjį slopinimą. Labiau apibrėžtai, tai antikoaguliantai, skirti profilaktikai ir gydymui trombinės embolijos ligų, tokių kaip venų trombozė, plaučių arterijos embolija, arterinė trombozė, ypatingai miokardo infarktas ir smegenų trombozė, bendros koaguliacinės būsenos ir vietinės koaguliacinės būsenos, pvz., po angioplastinių ir koronarinių šuntų operacijų, ir kitais atvejais, kai manoma, esant trombino poveikio, pvz., Alzheimer'io ligų atvejais, o taipgi slopinant kininogenazes, kai gydomi uždegiminiai sutrikimai, pvz., astma, nosies gleivinės uždegimas, dilgėlinė, uždegiminės žarnyno ligos, bei artritas. Kitas tikslas yra gauti trombino inhibitorius, kuriuos galima būtų vartoti pro burną ir kurie kitų serino proteazių atžvilgiu selektyviai slopintų trombiną. Dar vienas išradimo tikslas yra gauti kininogenazes inhibitorius, kuriuos galima būtų vartoti pro burną, pro tiesiąją žarną, vietiškai, pvz., pro odą, arba inhaliacijos būdu.
Junginiai
Pagal išradimą buvo nustatyta, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule I, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs serino proteazių, ypatingai trombino ir kininogenazių, tokių kaip kalikreino, inhibitoriai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B,
Formulė I kur A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, llc, lld ar He;
c;
u
kur k yra sveikasis skaičius O, 1, 2, 3 ar 4;
m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 ar 4;
q yra sveikasis skaičius O, 1, 2, ar 3;
11 R yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOCalkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17(CH2)p-, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra metilas, fenilas, OH, COOR12,
12
CONHR , kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R11 yra H ar alkilo2 grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, arba R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba
13
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupe turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4
12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba
12
R yra R OOC-CH^-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 14
COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0, 1, ar 2, arba
R1 yra -CH2PO(OR16)2> -ChįSOgH ar -CH2-(5-(1H)-tetrazolilas), kur R16 yra, kiekvienu atveju atskirai, H, metilas ar etilas;
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba ne vieną ar daugiau fluoro atomų, arba
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba ne alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
31 31
R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k esti 0, 1, arba
R yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba
R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas ar 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas arba 31 31 ne OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k esti 0, 1, arba
30 30
R yra Si(Me)2 ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R4 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė;
i
A yra struktūrinis fragmentas, apibudinamas formulėmis Iįla, lllb ar IIIc,
Λ
O (CH2)m
O
R llla lllb
Ule kur p yra sveikasis skaičius 0, 1 ar 2;
m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 ar 4;
Y yra metileno grupė, arba
Y yra -CH^-O-, -CH2-S-, -CH2-SO-, turinčiomis funkcinę grupę su heteroatomais 4-oje padėtyje, arba
Y yra etileno grupė ir susidaręs 5-naris žiedas gali turėti arba neturėti vieną ar du fluoro atomus, hidroksigrupę ar oksogrupę 4-oje padėtyje, ar gali būti arba nebūti neprisotintas, arba
Y yra n-propileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba neturėti
5-oje padėtyje fluoro atomą, hidroksigrupę ar oksogrupę, turėti du fluoro atomus vienoje iš padėčių, 4-oje ar 5-oje, ar būti neprisotintas 4-oje ar 5oje padėtyje, ar turėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 1-4 anglies atomų, arba
Y yra -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-SO-CH2-, arba
Y yra -CH2-CH2-CH2-CH2-;
R yra apibrėžta aukščiau;
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
R5 yra -(CH2)p-COOR5^, kur p esti O, 1 ar 2, ir R51 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
n yra sveikasis skaičius O, 1,2, 3 ar 4;
B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis IVa, IVb, IVc ar IVd,
kur r yra sveikasis skaičius 0 ar 1;
χ1 esti CH2, NH arba neesti;
X2 yra CH2, NH ar C = NH;
X3 yra NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CH-NH-C(NH)-NH2 ar CH-CH2-C(NH)-NH2;
X4 yra GH2 ar NH;
3 4
Geresni deriniai is X , X , X , X ir r yra tie, kurių
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra 0, 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0, 1, arba
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra O, 1, arba
X1 ir X4 yra CH2, X2 yra C=NH, X3 yra NH ir r yra 0, 1, arba
X1 yra CH2, X2 ir X4 yra NH, X3 yra C=NH ir r yra 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-NH-C(NH)-NH2 ir r yra 0, 1, arba
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra O, arba
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0;
3 4
Dar geresni deriniai is X , X , X , X ir r yra tie, kurių
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra 1;
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra O ar 1;
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0;
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra 1;
X5 yra C(NH)-NH2 ar NH-C(NH)-NH2;
o
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
X6 yra CH ar N;
- v
Formulės I junginiai, turintys S-konfiguraciją A aminorugstyje, yra geresni junginiai, o tie, kurie dar turi R-konfigūraciją A1 aminorūgštyje, yra dar geresni junginiai.
Šiame kontekste terminas alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų reiškia, kad ji gali būti linijinė ar šakota, jei kitaip neapibrėžta. Alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, esti metilas, etilas, n-propilas, i-propilas, n-butilas, i-butilas, s-butilas ir t-butilas.
Terminas alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų reiškia, kad ji gali būti linijinė ar šakota, jei kitaip neapibrėžta. Alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 6 anglies atomų, esti metilas, etilas, n-propilas, i-propilas, nbutilas, i-butilas, s-butilas, t-butilas, n-pentilas, i-pentilas, t-pentilas, neo-pentilas, n-heksilas ar i-heksilas. Kuomet kalbama apie neprisotinimą, turima galvoje dviguba anglis-anglis jungtis.
Banguotos linijos prie karbonilo grupės anglies atomo formulėse lla, llb, llc, lld, lle, llla, lllb, lllc, prie azoto atomo formulėse llla, lllb, lllc, ir prie anglies atomo žiedinėje sistemoje formulėse IVa, IVb, IVc, IVd reiškia fragmento prisijungimo vietą.
Sutrumpinimai yra pateikti šio aprašymo pabaigoje.
Išradime teigiama, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule Ia, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs trombino inhibitoriai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B,
Formulė Ia kur A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, llc ar lld, geriau lla ar llb;
kur k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 ar 4, geriau 0, 1;
q yra sveikasis skaičius 0,1,2, ar 3, geriau 1;
R1 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R11OOCalkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17(CHp) -, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra metilas, fenilas, OH, COOR12,
t. p/
12
CONHR , kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R11 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, arba R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba n
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 12 12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 v „ „ 14
COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0, 1, ar 2, arba
R1 yra -CH2PO(OR16)2, -CHgSOgH ar -CH2-(5-(1H)-tetrazolilas), kur R16 yra, kiekvienu atveju atskirai, H, metilas ar etilas;
Geriau, kai R1 esti R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė, turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir R11 yra H.
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
o
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną ar daugiau fluoro atomų, arba
O
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba R3 yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
O
R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba o 32 32
R yra Si(Me)3 ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R4 yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė, geriau cikloheksilo ar fenilo grupė;
A yra struktūrinis fragmentas, apibudinamas formulėmis llla, lllb ar lllc, geriau llla;
kur p yra sveikasis skaičius 0, 1 ar 2;
m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 ar 4, geriau 2, 3;
Y yra metileno grupė, arba
Y yra etileno grupė ir susidaręs 5-naris žiedas gali turėti arba neturėti vieną ar du fluoro atomus, hidroksigrupę ar oksogrupę 4-oje padėtyje, ar gali būti arba negali būti neprisotintas, arba
Y yra -CH2-O-, -CH2-S-, -CH2-SO-, 4-oje padėtyje esti heteroatomas, arba
Y yra n-propileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba ne 5-oje padėtyje fluoro atomą, hidroksigrupę ar oksogrupę, turėti du fluoro atomus vienoje iš padėčių, 4-oje ar 5-oje, ar būti neprisotintas 4-oje ar 5oje padėtyje, ar turėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 1-4 anglies atomų, arba
Y yra -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-SO-CH2-, arba
Y yra -CH2-CH2-CH2-CH2-; o
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
R yra Si(Me)3 grupė;
n
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, geriau H ar metilo grupę, arba
R5 yra -(CH2)p-COOR51, kur p esti O, 1 ar 2, ir R51 yra H ar alkilo grupė, 51 turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, geriau p esti O ir R yra H;
n yra sveikasis skaičius O, 1,2, 3 ar 4, geriau 1, 2, 3;
i L
B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis IVa, IVb, IVc ar
IVd, geriau IVa ar IVb, kur
X1, X2, X3, X4, X5 ir X6 apibrėžti aukščiau;
r yra sveikasis skaičius 0 ar 1; *
O
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, geriau H;
3 4
Geresni deriniai iš X , X , X , X ir r yra tie, kurių
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra 0 ar 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0 ar 1, arba
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra 0 ar 1, arba
X1 ir X4 yra CH2, X2 yra C=NH, X3 yra NH ir r yra 0 ar 1, arba
X1 yra CH2, X2 ir X4 yra NH, X3 yra C=NH ir r yra 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-NH-C(NH)-NH2 ir r = 0 ar 1, arba χ1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra 0, arba
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0;
3 4
Dar geresni deriniai iš X , X , X , X ir r yra tie, kurių
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 0, arba X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r = 1, arba;
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r = 0 ar 1, arba;
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra 1;
X5 yra C(NH)-NH2 ar NH-C(NH)-NH2, geriau C(NH)-NH2;
X6 yra CH ar N;
Geresnis variantas yra tas, kuriame išradimo junginiai apibūdinami formule la, kur
A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule Ila, kur k yra 0 ar 1;
R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų, ypač metilenas, etilenas ir R^ esti H;
R2 yra H; o
R yra cikloheksilo grupė;
O
A yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule 11la, kur
Y yra metileno grupė, etileno grupė, ar n-propileno grupė ir susidaręs 6naris žiedas gali turėti arba ne 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 1-4 anglies atomų, geriau Y yra metilenas, etilenas;
R5 yra H;
B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule IVa, kur
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2, r yra O ir n yra 1 ar 2;
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra 1 ir n yra 2, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2> r yra 1 ir n yra 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2, r yra O ar 1 ir n yra 1 ar 2, arba žymiai geresni junginiai yra tie, kurių B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule IVb, kur X5 yra C(NH)-NH2, R6 yra H, n = 1.
Geresni išradimo junginiai yra šie:
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab
H-(R)Cgl-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)-Cgl-Pic-Pab
H-(R)Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab '4
H-(R)Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab
H-(R)Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab
HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
Me-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
Boc-(R)Cha-Pic-Pab
Ac-(R)Cha-Pic-Pab
Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab
H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab
H-(R)Hoc-Aze-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab
HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig
H-(R)Cha-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac
H-(R)Cha-Pro-Pac
H-(R)Cgl-lle-Pab
H-(R)Cgl-Aze-Pab
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab
MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
H-(R)Cgl-Pro-Pac
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig
HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp
H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp
H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig
H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig
H-(R)Cgl-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp
H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig
H-(R)Cha-Pro-Mig
H-(R)Cha-Pro-Dig
H-(R)Cha-Aze-Dig
Čia dar geresni junginiai, apibūdinami formule la, yra HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig
Aukščiau pateiktose junginių lentelėse žymėjimai /a ir /b reiškia iš esmės gryną stereoizomerą prie anglies atomo, pažymėto RorS. Kiekvieno junginio stereoizomerą galima identifikuoti pagal šio aprašymo eksperimentinę dalį. R,S reiškia stereoizomerų mišinį.
Išradime teigiama, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule Ib, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs kininogenazių inhibitoriai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B,
Formulė Ib kur
A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis Ha, llb ar lle, geriau Ha ar llb;
kur k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 ar 4, geriau 0, 1;
q yra sveikasis skaičius 0,1,2, ar 3, geriau 1;
R1 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R11OOCalkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17(CHp) -, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra metilas, fenilas, OH, COOR12, c- H
12
CONHR , kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R11 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, arba
R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki anglies atomų, arba 1 13
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 12 12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupe turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
R1 yra R14SO2, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 14
COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2) -COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0, 1, ar 2, arba
R1 yra -CH2PO(OR13)2, -CH^O^H ar -CH2-(5-(1H)-tetrazolilas), kur R13 yra, kiekvienu atveju atskirai, H, metilas ar etilas;
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC- 21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilas, turintis nuo 1 iki 4 anglies atomų;
o
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną ar daugiau fluoro atomų, arba o
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba o 3j 31
R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k esti 0, 1, arba
O
R yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
O
R yra cis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba
Q
R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas ar 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas ar nepakeistas OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k esti 0, 1, arba r3 yra Si(Me)g ar CH(R^)2, kur R^^ yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R4 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė, geriau H;
A yra struktūrinis fragmentas, apibudinamas formulėmis lllb ar lllc, geriau lllb;
kur p yra sveikasis skaičius 0, 1 ar 2;
m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 ar 4, geriau 2, 3;
R yra apibrėžta aukščiau;
n yra sveikasis skaičius 0,1, 2, 3 ar 4, geriau 1,2, 3;
B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis IVa, IVb, IVc ar
IVd, geriau IVa ar IVb, kur
3 4
X , X , X , X yra apibrėžti aukščiau;
o
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, geriau H ar metilo grupė;
r yra sveikasis skaičius 0 ar 1;
3 4 geresni deriniai iš X , X ,X ir X yra tie, kurių :9
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra O ar 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra O ar 1, arba
X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2 ir r yra O ar 1, arba χ1 ir X4 yra CH2, X2 yra C=NH, X3 yra NH ir r yra O ar 1, arba
X1 yra CH2, X2 ir X4 yra NH, X3 yra C=NH ir r yra 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-NH-C(NH)-NH2, r yra O ar 1, arba
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra O, arba
X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)~NH2 ir r yra 0;
3 4 dar geresni deriniai iš X , X , X ir X yra tie, kurių
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra CH-C(NH)-NH2 ir r yra 1, arba
X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2 ir r yra 1;
X5 yra C(NH)-NH2 ar NH-C(NH)-NH2, geriau C(NH)-NH2;
X6 yra CH ar N.
Geresni išradimo junginiai yra:
H-(R)Pro-Phe-Pab
HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab
H-(R)Phe-Phe-Pab
HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab
HOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab
H-(R)Cha-Phe-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Phe-Pab
H-(R)Phe-Cha-Pab
HOOC-CH2-(R)Phe-Cha-Pab
H-(R)Cha-Cha-Pab
HOOC-CH2-(R)Cha-Cha-Pab.
Toliau, nustatyta, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule V, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs serino proteazių, ypatingai trombino ir kininogenazių, kaip antai, kalikreino, inhibitoriai, vartojant juos pro burną ar parenteraliai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B_D,
Formulė V kur
A^ esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, IIc, lld ar lle;
kur k yra sveikasis skaičius 0, 1, 2, 3 ar 4; m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 ar 4; q yra sveikasis skaičius 0, 1,2 ar 3;
2ϊ
R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17-(CH2)p-, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra COOR12, CONHR12, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų ar benzilo grupė, ir R11 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, ar benzilo grupė, arba
R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba 1 13
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 12 12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 v w 14
COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0,1, ar 2, arba
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar benzilo grupė;
Q
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną ar daugiau fluoro atomų, arba o
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba q 31 31
R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k esti 0, 1, arba o
R yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
O
R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba
O
R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas ar 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas ar 31 31 nepakeistas OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k esti 0,1, arba
99 9?
R yra Si(Me)3 ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R4 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė;
p
A , B ir n apibrėžta aukščiau pagal formulę I;
D yra Z ar (Z)2, kur Z yra benziloksikarbonilo grupė.
Benziloksikarbonilo grupė (Z ar (Z)2) prisiriša prie amidino ar guanidino azoto atomų, esančių struktūriniame fragmente B.
Geresni ir dar geresni deriniai yra tokie patys kaip ir aukščiau aprašytos formulės I atveju.
Toliau, nustatyta, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule Va, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs trombino inhibitoriai, vartojant juos pro burną ar parenteraliai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B_D
Formulė Va kur
A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, llc ar lld, geriau lla ar llb;
kur k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 ar 4, geriau 0, 1;
q yra sveikasis skaičius 0, 1,2 ar 3, geriau 1;
r1 yra R^OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas
2J yra grupė R17-(CH2) -, kur p yra O, 1 ar 2 ir R17 yra COOR12, CONHR12,
C. p kur R yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų ar benzilo grupė, ir R11 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, ar benzilo grupė, arba
R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba 1 13
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4
12 v v anglies atomų, ar -CH^COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
R yra R OOC-CH^-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 14
COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0,1, ar 2, arba geriau R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir R11 yra apibrėžta aukščiau.
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar benzilo grupė;
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną ar daugiau fluoro atomų, arba o
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
2R3 yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
O
R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba
O OO
R yra Si(Me)3 ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R4 yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė, geriau cikloheksilo ar fenilo grupė;
O
A , B ir n apibrėžta aukščiau pagal formulę la;
D ir Z ar (Z)2;
Z yra benziloksikarbonilo grupė.
Tinkami sveikieji skaičiai, grupės ar deriniai ir dar geresni deriniai yra tokie patys kaip ir aukščiau aprašytos formulės la atveju, tik R11 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, ar benzilo grupė.
Geresni formulės Va junginiai yra: BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a
BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)
BnOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
3nOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
BnOOO-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig (Z)
3nOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
3nOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z)
3nOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)
3nOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
3nOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
3nOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
Dar geresni junginiai yra šie: 3nOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) 3nOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH9-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)9
EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
Bn OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
Toliau, nustatyta, kad junginiai, apibūdinami bendrąja formule Vb, ar fiziologiškai tinkamos jų druskos ir stereoizomerai yra stiprūs kalikreino inhibitoriai, vartojant juos pro burną ar parenteraliai:
A1_A2_NH_(CH2)n_B_D
Formulė Vb kur
A1 esti struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb ar lle, geriau lla ar llb;
kur k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 ar 4, geriau 0, 1;
q yra sveikasis skaičius 0, 1,2 ar 3, geriau 1;
R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17-(CH2)p-, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra COOR12, CONHR12, kur R1 1 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R1 1 yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, ar benzilo grupė, arba R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba
13
R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 12 12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, v 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(219 12 w 14
COOR )-S02-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
15 15
R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra 0, 1, ar 2, arba
21
R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar benzilo grupė;
R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną ar daugiau fluoro atomų, arba
R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
31 31
R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k yra 0, 1 arba
R yra 1 -naftilo ar 2-naftilo grupė ir k esti 0, 1, arba
R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k esti 0, 1, arba
R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas ar 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas arba 31 31 ne OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k esti 0, 1, arba
22 32
R yra Si(Me)3 ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
R yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė, geriau H;
A , B ir n apibrėžta aukščiau pagal formulę lb;
D yra Z ar (Z)2_
Geresni sveikieji skaičiai, grupės ar deriniai ir dar geresni deriniai yra tokie patys kaip ir aukščiau aprašytos formulės lb atveju, tik R1 1 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, ar benzilo grupė.
Geresni formulės Vb junginiai yra:
Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
Kitu aspektu išradimas liečia naują panaudojimą junginio, apibūdinamo formule,
NH nh2 kaip pradinės medžiagos peptidinio serino proteazės inhibitoriaus sintezėje, o ypatingai peptidinių trombino inhibitorių ar kininogenazių inhibitorių sintezėje. Jis gali būti naudojamas tokia forma ar turėti amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, pvz., benziloksikarbonilu. Amidino darinių apsauga atliekama žinomais srityje metodais, taikomais amidinų junginiams. Šis junginys vadinamas 1amidino-4-aminometilbenzolu ar H-Pab šiame aprašyme. Tarp kitko, apie junginį buvo skelbta Biochem. Pharm. vol. 23, p. 2247-2256.
Tačiau struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule,
NH nh2 ankščiau nebuvo aprašytas kaip farmaceptiškai veiklaus junginio struktūrinis fragmentas, ypač peptidinio junginio. Fragmentas atlieka serino proteazės inhibitoriaus vaidmenį, ypač trombino ar kininogenazių inhibitoriaus.
Sekančiu aspektu išradimas liečia naują panaudojimą junginio, apibūdinamo formule,
NH
NH2 kaip pradinės medžiagos trombino inhibitoriaus sintezėje. Junginio amidino grupė gali būti apsaugota prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, pvz., benziloksikarbonilu. Amidino darinių apsauga atliekama žinomais srityje metodais, taikomais amidinų junginiams. Šis junginys vadinamas 1-amidino-4-aminometilcikloheksanu ar H-Pac šiame aprašyme. Junginys buvo aprašytas Vakarų Vokietijos patente DE Nr. 2748295.
Tačiau struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule,
NH
NH2 ankstesniuose aprašymuose nebuvo laikomas trombino inhibitoriaus struktūriniu fragmentu.
Kitu aspektu išradime kalbama apie naują junginį, apibūdinamą formule,
ir jo panaudojimą kaip pradinės medžiagos serino proteazes inhibitoriaus sintezėje, ypatingai trombino inhibitoriaus ar kininogenazės inhibitoriaus. Junginio amidino grupė gali būti apsaugota prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, pvz., benziloksikarbonilu. Amidino darinių apsauga atliekama žinomais srityje metodais, taikomais amidinų junginiams. Šis junginys vadinamas 4aminoetil-1-amidinopiperidinu ar Ή-Rig šiame aprašyme.
Tačiau struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule,
ankščiau nebuvo aprašytas kaip farmaceptiškai veiklaus junginio struktūrinis fragmentas, ypač peptidinio junginio. Fragmentas atlieka serino proteazės inhibitoriaus vaidmenį, ypač trombino ar kininogenazių inhibitoriaus.
Dar vienu aspektu išradime kalbama apie naują junginį, apibūdinamą formule,
ir jo panaudojimą kaip pradinės medžiagos serino proteazės inhibitoriaus sintezėje, ypatingai trombino inhibitoriaus ar kininogenazės inhibitoriaus. Junginio amidino grupė gali būti apsaugota prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, pvz., benziloksikarbonilu. Amidino darinių apsauga atliekama žinomais srityje metodais, taikomais amidinų junginiams. Šis junginys vadinamas 1,3-diazo-2-imino-4aminoetilcikloheksanu ar Ή-ltp šiame aprašyme.
Tačiau struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule,
ankščiau nebuvo aprašytas kaip farmaceptiškai veiklaus junginio struktūrinis fragmentas, ypač peptidinio junginio. Fragmentas atlieka serino proteazės inhibitoriaus vaidmenį, ypač trombino ar kininogenazių inhibitoriaus.
Dar išradime kalbama apie naujus junginius, apibūdinamus formule,
kur n yra 1 ar 2, s yra 0 ar 1, ir minėtų junginių panaudojimą kaip pradinių medžiagų serino proteazių inhibitorių sintezėje, ypatingai trombino inhibitorių ar kininogenazių inhibitorių. Junginio amidino grupė gali būti apsaugota prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, pvz., benziloksikarbonilu. Amidino darinių apsauga atliekama žinomais srityje metodais, taikomais amidinų junginiams. Šie junginiai vadinami taip:
1-amidino-3-aminometilpirolidinas ar H-Nig, kai n yra 1 ir s yra 1;
1-amidino-3-aminoetilpirolidinas ar H-Hig, kai n yra 2 ir s yra 1;
3-aminometil-1-amidinoazetidinas ar H-Mig, kai n yra 1 ir s yra 0;
3-aminoetil-1-amidinoazetidinas ar H-Dig, kai nyra 2 ir s yra 0;
Tačiau struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule,
ankščiau nebuvo aprašytas kaip farmaceptiškai veiklaus junginio struktūrinis fragmentas, ypač peptidinio junginio. Fragmentas atlieka serino proteazės inhibitoriaus vaidmenį, o ypač trombino ar kininogenazių inhibitoriaus.
Kitas išradimo aspektas yra nauji junginiai, kurių amidino grupė apsaugota prie vieno ar dviejų azoto atomų benziloksikarbonilo grupe. Šiuos junginius sudaro:
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)benzolas (H-Pab(Z)),
4-aminometil-1-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)benzolas (H-Pab(Z)2),
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)cikloheksanas (H-Pac(Z)),
4-aminometil-1-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)cikloheksanas (H-Pab(Z)2),
4-aminoetil-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)piperidinas (H-Rig(Z)),
4-aminoetil-1-N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)piperidinas (H-Rig(Z)2), (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminoetilpirolidinas (H-Nig(Z)), (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminometilpiroiidinas (H-Nig(Z)), (3RS)-1-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)-3-aminometil-pirolidinas (HNig(Z)2), (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminoetilpirolidinas (H-Hig(Z)), (3RS)-1-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)-3-aminoetil-pirolidinas (HHig(Z)2),
3-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (H-Mig(Z)),
3-aminometil-1-(N,N,-di(benziloksikarbonil)amidino)azetidinas (H-Mig(Z)2),
3-aminoetil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (H-Dig(Z)),
3-aminoetil-1-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidino)azetidinas (H-Dig(Z)2).
Minėti junginiai yra naudojami kaip pradinės medžiagos gaunant į apibrėžtį įtrauktus peptidinius darinius, apibūdinamus formulėmis I, la, Ib, V, Va ir Vb.
Panaudojimas medicinoje ir farmacijoje
Išradimas taipgi apima kompozicijas ir būdus, kurių pagalba žmonių bei gyvūnų organizmuose įtakojamos trombino slopinimo sąlygos ir gydomi fiziologiniai sutrikimai, ypač uždegiminės ligos.
Manoma, kad trombiną slopinantys išradimo junginiai, yra ypač naudingi gydant gyvūnų, o taipgi žmogaus, trombozes ir hiperkoaguliaciją kraujyje ir audiniuose, bei profilaktikai. Be to, laikoma, kad jie yra naudingi, kai esama nepageidaujamo trombino pertekliaus nesant hiperkoaguliacijos požymių, pavyzdžiui, Alzheimer'io ligos ir kasos uždegimo atvejais. Didžiausią pritaikymą šie junginiai, gydant ir/ar profilaktikoje, rastų kai yra susirgimai, kaip antai, venų trombozė, plaučių arterijos embolija, arterinė trombozė, tokia kaip esant miokardo infarktui,
5b ūminė angina, trombozės sukeltas smūgis ir periferinė arterinė trombozė bei sisteminė embolija, kylanti iš prieširdžio, esant arteriniam virpėjimui, arba iš kairiojo skilvelio, esant tarpskilvekinės pertvaros miokardo infarktui. Toliau, šie junginiai pasižymi lauktomis aterosklerozinių susirgimų, tokių kaip vainikinių arterijų ligų, smegenų arterinių ir periferinių arterinių susirgimų profilaktikos savybėmis. Be to, manoma, kad šie junginiai pasižymi sinergetiniu antitromboziniu poveikiu, sujungus juos su kuriuo nors kraujo krešumą silpninančiu agentu, kaip antai, antitrombocitiniu reagentu acetilsalicilo rūgštimi. Toliau, laukiama, kad šie junginiai bus naudingi taikant juos kartu su trombolitikais trombozinių ligų atveju, ypač miokardo infarkto. Dar, šie junginiai pasižymi lauktomis profilaktinėmis savybėmis, vertingomis atstatant kraujagyslių praeinamumą po trombolizės, atlikus poodinės transliuminarinės kraujagyslių chirurgijos operacijas (PTCA) ir koronarų šuntavimo operacijas. Taip pat laikoma, kad šie junginiai apskritai padeda išvengti trombozės pasikartojimo po mikrochirurginių ir kraujagyslių chirurgijos operacijų. Be to, minėti junginiai pasižymi lauktomis intravaskuliarinės koaguliacijos išplitimo, sukelto bakterijų, sudėtingų traumų, intoksikacijos ar kt. mechanizmo, gydymo ir profilaktikos savybėmis. Be to, manoma, kad šių junginių kraujo krešumą slopinantis veikimas esti svarbus, kai kraujas kontaktuoja su organizmui svetimo daikto paviršiais, kaip antai, kraujagyslių transplantantais, kraujagyslių vamzdeliais, kraujagyslių kateteriais, mechaniniais ir biologiniais protezais arba bet kuriais kitais medicininiais įtaisais. Toliau, minėti junginiai pasižymi lauktu krešumą slopinančiu veikimu kraujui kontaktuojant su medicininiais prietaisais, esančiais organizmo išorėje, kaip antai, širdies kraujagyslių operacijos metu naudojant dirbtinės kraujotakos aparatą ar vykdant hemodializę. Be to, krešumą slopinančiais išradimo junginiais galima praplauti kateterius ir medicininius prietaisus, naudojamus ligonių organizmuose in vivo, bei vartoti kaip antikoaguliantus konservuojant kraują, plazmą ir kt. kraujo preparatus in vitro.
Laikoma, kad priešuždegiminiai slopinantys išradimo junginiai yra ypač naudingi gydant gyvūnus, o taipgi žmogų, bei profilaktikai nuo tokių uždegiminių ligų kaip astma, nosies gleivinės uždegimas, kasos uždegimas, dilgėlinė, uždegiminės žarnyno ligos bei artritas. Veiklusis ja kininogenazę slopinančių junginių kiekis su ar be fiziologiškai tinkamų nešiklių ar skiediklių gali būti vartojamas atskirai ar drauge su kt. terapiniais ragentais.
Junginiai slopina kalikreinų aktyvumą, įvertinamą dažančiais substratais pagal žinomas procedūras.
Priešuždegiminis minėtų junginių veikimas gali būti tiriamas, pavyzdžiui, pagal alergeno sukelto uždegiminio eksudacinio proceso slopinimą kvėpavimo takų gleivinėje ar žarnyno gleivinėje.
Farmaciniai preparatai
Išradimo junginiai paprastai skiriami vartoti per burną, tiesiąją žarną, odą, nosies ertmę, trachėją, bronchus, parenteraliai arba inhaliacijos būdu, farmacinių preparatų pavidalu, kurių sudėtyje esanti veiklioji sudėtinė dalis yra laisva bazė arba farmaciškai tinkama netoksinė organinės ar neorganinės rūgšties druska, pvz., hidrochloridas, hidrobromidas, sulfatas, hidrosulfatas, nitratas, laktatas, acetatas, citratas, benzoatas, sukcinatas, tartratas, trifluoracetatas ir pan. farmacijai priimtinu dozavimo pavidalu. Priklausomai nuo susirgimo ir gydomojo ligonio bei vartojimo pobūdžio kompozicijos gali būti skiriamos įvairiomis dozėmis.
Ruošiamos žinomomis metodikomis dozuotės gali būti kietų, pusiau kietų ar skystų preparatų pavidalo. Paprastai veiklioji medžiaga sudaro nuo 0,1 iki 99 % preparato svorio, konkrečiau, vartojant parenteraliai, nuo 0,1 iki 50 % svorio, ir vartojant pro burną, nuo 0,2 iki 75 % svorio. Žmonių terapiniam gydymui tinkamos išradimo junginių dienos dozės yra maždaug 0,001-100 mg/kg kūno svorio, skiriant pro burną, ir 0,001-50 mg/kg kūno svorio, skiriant parenteraliai.
Gavimas
Kitas išradimo tikslas yra junginių gavimo būdas. Junginiai, apibūdinami formulėmis I ir V, gali būti gauti prijungiant apsaugotą Nterminaliniame gale dipeptidą ar aminorūgštį, kai naudojama Nterminalinė aminorūgštis, įprastais metodais prijungiama antra aminorūgštis prie junginio
H2N_(CH2)n_X, kur n yra sveikasis skaičius O, 1, 2, 3 ar 4, X yra B ar B-D, kur B yra apibrėžta formulės I aprašyme, o D yra apibrėžta formulės V aprašyme, tokia forma ar turinti guanidiną ar amidiną, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine aminogrupe, kaip antai, benziloksikarbonilu, tretiniu butiloksikarbonilu ar p-toluolsulfonilo grupe, arba X yra į B pernešama grupė, po to atliekant apsauginės grupės(ių) pašalinimą ar Nterminalinio azoto deprotekciją su po to sekančiu N-terminalinio azoto alkilinimu ir, jei reikalinga, atliekant deprotekciją žinomais metodais, ir, jei reikalinga, sudarant fiziologiškai tinkamą druską, o tais atvejais, kai reakcijos produktas yra stereoizomerų mišinys, šie esti pagal poreikį išskiriami chromatografiškai ar perkristalizuojant, ir, jei reikia, išskiriamas atskiras stereoizomeras.
Detaliau, junginius, apibūdinamus formulėmis I ar V, galima gauti bet kuriuo iš žemiau aprašytų metodų.
Metodas Ia
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugotas dipeptidas, 12 kuris pasirinktas is A ir A , apibudinamų formulėse I ar V, bei gautas įprastai sujungiant peptidus, su junginiu
H2N-(CH2)n // atliekant įprastą peptidų sujungimą:
W1-A1-A2-OH
kur n apibrėžtas formulėje I, W1 yra N-terminalinio amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, O1 yra -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2, kur W2 esti apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ar benziloksikarbonilas, arba Q1 yra -CN, -CO-NH2 ar -CS-NH2, ir kur grupė vėliau paverčiama amidino grupe (pvz., kai Q1 yra -C(NH)-NH2) metodais, 1 2 2 žinomais srityje, arba Q yra NH2 ar NH-W , kur W apibrėžta aukščiau, ir kur aminogrupė vėliau paverčiama j guanidino grupę (kai O1 yra -NH2 1 2 2 C(NH)-NH2), nuėmus apsaugą nuo W grupės, kai Q yra -NH-W (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W1 atžvilgiu), būdais, žinomais srityje.
Galutiniai junginiai, priklausomai nuo grupės Q1, gali būti gauti vienu iš šių kelių: pašalinant apsauginę grupę(es) (kai Q1 yra -C(NH)NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2 -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2), arba selektyviai pašalinant grupės W1 apsaugą (pvz., kai Q1 yra -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)NH-W2, -NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2 (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W atžvilgiu), vėliau atliekant žinomais metodais N-terminalinio azoto alkilinimą ir, jei reikia, apsaugos pašalinimą.
Metodas Ib
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugota aminorūgštis, 2 kuri pasirinkta iš A , apibudinamos formulėse I ar V, bei gauta įprastai sujungiant peptidus, su junginiu, apibūdinamu formule,
H2N-(CHžjn —-Q1 atliekant įprastą peptidų sujungimą:
W1- A2 —OH
kur n, W1, ir apibrėžta aukščiau, vėliau atliekant grupės deprotekciją ir sujungiant su N-terminaline apsaugotos formos aminorūgštimi, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą skirsnyje Metodas la. Tuomet galutinių peptidų sintezė tęsiama pagal metodą la.
Metodas Ha
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugotas dipeptidas, 1 2 kuris pasirinktas iš A ir A , apibūdinamų formulėse I ar V, bei gautas įprastai sujungiant peptidus, su junginiu atliekant įprastą peptidų sujungimą:
W1-A1-A2-OH
HoN(CH2)n
W1-A1-A2-HN-(CH2)n kur n apibrėžta formulėje I, yra N-terminalinė apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, Q1 yra C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NHC(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2, kur W2 esti apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, arba Q1 yra -CN, -CO-NH2 ar -CS-NH2, ir kur grupė vėliau paverčiama amidino grupe (pvz., kai yra -C(NH)-NH2) metodais, v 1 2 2 žinomais srityje, arba Q yra NH2 ar NH-W , kur W apibrėžta aukščiau, ir kur aminogrupė vėliau paverčiama į guanidino grupę (kai yra -NH2 1 2 9
C(NH)-NH2), nuėmus apsaugą nuo W grupės, kai Q yra -NH-W (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W1 atžvilgiu), būdais, žinomais srityje.
Galutiniai junginiai, priklausomai nuo grupės Q1, gali būti gauti vienu iš šių kelių: pašalinant apsauginę grupę(es) (kai Q1 yra -C(NH)NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2), arba selektyviai pašalinant grupės W1 apsaugą (pvz., kai Q1 yra -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)NH-W2, -NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2 v _ 1 (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W atžvilgiu), vėliau atliekant žinomais metodais N-terminalinio azoto alkilinimą ir, jei reikia, apsaugos pašalinimą įprastais srityje metodais.
Metodas Hb
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugota aminorūgštis, o kuri pasirinkta iš A , apibudinamos formulėse I ar V, bei gauta įprastais peptidų sujungimo metodais, su junginiu, apibūdinamu formule,
H2N-(CH2)n atliekant įprastą peptidų sujungimą:
W1- A2 -OH
kur n, W1 ir Q1 apibrėžta aukščiau, atliekant vėliau grupės W1 deprotekciją ir sujungiant su N-terminaline apsaugotos formos aminorūgštimi, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą skirsnyje Metodas Ha. Tuomet galutinių peptidų sintezė tęsiama pagal metodą II a.
Metodas llla
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugotas dipeptidas, 12kuris pasirinktas iš A ir A , apibudinamų formulėse I ar V, bei gautas įprastai sujungiant peptidus, su junginiu
H2N-(CH2)n (CH2)r_X 4 \
N—Q
X1-X2 atliekant įprastą peptidų sujungimą:
w1 — A1— A2— OH
H2N— (CH2)n (CH2)r_X 4 'X1-X2 (CH2)r_X 4
W1 — A1— A2— NH — (CH2)nV \ 2
N—-Q2 /
-X2
4 kur n apibrėžtas formule I ir r yra 0, 1, kai X , X ir X yra CH2 ar r yra 0,
4 11 kai X ir X yra CH2 ir X nėra, W yra N-terminalinė apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, Q2 yra -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, ar -C(NH)-NH-W2, kur W2 esti apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir o benziloksikarbonilas, arba Q yra lygi W2, kai amino grupė po W2 grupės apsaugos pašalinimo (W2 šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W1 atžvilgiu) yra vėliau paverčiama į guanidino grupę, naudojant neapsaugotą , N-apsaugotą ar N-N1 dvigubai apsaugotą guanidininimo _ 2 2 reagentą budais, žinomais srityje (kai Q lygi C(NH)-NH2, -C(NW )-NHW2 ar -C(NH-NH-W2).
Galutiniai junginiai, priklausomai nuo grupės Q , gali būti gauti 2 vienu iš šių kelių: pasalininant apsauginę grupę(es) (kai Q yra -C(NH)NH2, -C(NW2)-NH-W2 ar -C(NH)-NH-W2), arba selektyviai pašalininant grupės apsaugą (pvz., kai Q2 yra -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W atžvilgiu), vėliau atliekant žinomais metodais N-terminalinio azoto alkilinimą ir, jei reikia, apsaugos pašalinimą įprastatais metodais.
Metodas Hlb
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugota aminorūgštis, kuri pasirinkta iš A , apibudinamos formulėse I ar V, bei gauta įprastais peptidų sujungimo metodais, su junginiu, apibūdinamu formule h2n— (CH2)n (CH2)r_X 4 \ 2
N—Cr x1-X2 atliekant įprastą peptidų sujungimą:
A —OH (CH2)r_X 4
H2N (CH2)n—·/ \—Q2 'X1-X2
- A2 -NH-(CH2)n
(CH2)r_x4 \ 2
N—Q
X1-X2
1241 2 v kur n, r, X , X ir X , W ir Q apibrėžta aukščiau, atliekant vėliau grupės W1 deprotekciją ir sujungiant su N-terminaline apsaugotos formos aminorūgštimi, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą skirsnyje Metodas llla. Tuomet galutinių peptidų sintezė tęsiama pagal metodą llla.
Metodas IVa
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugotas dipeptidas, 12kuris pasirinktas iš A ir A , apibudinamų formulėse I ar V, bei gautas įprastai sujungiant peptidus, su junginiu
atliekant įprastą peptidų sujungimą pagal formulę, w1-A1-A2—OH
kur n apibrėžtas formule I, W1 yra N-terminalinė apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, ir W yra H ar apsauginė aminogrupė, kaip antai, arilsulfonilas, benziloksikarbonilas ar tretinis butiloksikarbonilas. Galutiniai junginiai gaunami vienu iš šių kelių: pašalinant apsauginę grupę(es), ar selektyviai pašalinant grupės
1 - 3
W apsaugą (W privalo būti ortogonalinė W atžvilgiu), vėliau atliekant N-terminalinio azoto alkilinimą ir, jei reikia, apsaugos pašalinimą.
Metodas IVb
Sujungiama N-terminaliniame gale apsaugota aminorūgštis, v 2 kuri pasirinkta is A , apibūdinamos formulėse I ar V, bei gauta įprastai sujungiant peptidus, su junginiu, apibūdinamu formule,
H2N-(^Η2)π
NH atliekant įprastą peptidų sujungimą:
o j kur n, W ir W apibrėžta aukščiau, atliekant vėliau grupės W 1 3 deprotekciją (W privalo būti ortogonalinė W ) ir sujungiant su Nterminaline apsaugotos formos aminorūgštimi, taip gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą skirsnyje Metodas IVa. Tuomet galutinių peptidų sintezė tęsiama pagal metodą IVa.
DETALUS IŠRADIMO APRAŠYMAS
Žemiau pateiktas aprašymas nušviečia išradimo aspektus.
EKSPERIMENTINĖ DALIS
Bendrosios eksperimentinės procedūros
Masių spektrai buvo registruojami tripletiniu kvadrupoliniu masių spektrometru Finnigan MAT TSQ 700, turinčiu elektroninį suderinimo įrenginį.
1H BMR ir 13C BMR spektrų matavimai buvo atlikti BRUKER AC-P 300 ir BRUKER AM 500 spektrometrais. Pirmojo darbinis dažnis lygus 500,14 MHz, naudojant 1H, ir 125,76 MHz, naudojant 13C, o antrojo
- 300,13 MHz ir 75,46 MHz, atitinkamai, naudojant 1H ir 13C.
Maždaug 10-15 mg sveriantys pavyzdžiai ištirpinti kuriame nors iš šių tirpiklių (0,6 ml); CDCIg (tinkamas izotopinei analizei, daugiau už
99,8 %), CD3OD (tinkamas izotopinei analizei, daugiau už 99,95 %), D2O (tinkamas izotopinei analizei, daugiau už 99,98 %) ar DMSO-dg (tinkamas izotopinei analizei, daugiau už 99,8 %). Visi tirpikliai gauti iš Dr. Glaser AG, Basei.
13
H ir C cheminio poslinkio reikšmės, esant CDCIg ir CD^OD, yra lyginamos su išorinio standarto, tetrametilsilano, cheminio poslinkio vertėmis. 1H cheminio poslinkio vertės, esant D2O, yra lyginamos su 3v 13 (trimetilsilil)-d4-propiono rūgšties natrio druska, o C cheminio poslinkio vertės, esant D2O, yra lyginamos su 1,4-dioksano (67,3 m.d.) cheminių poslinkių vertėmis, abiem atvejais laikant juos išoriniais standartais. Kalibravimo metu naudojamas išorinis standartas kai kuriais atvejais gali, lyginant su vidiniu standartu, sumažinti cheminių poslinkių skirtumus, bet v 13 apskritai, cheminis poslinkis H atveju yra mažesnis, nei 0,02 m.d., o C
- mažesnis, nei 0,1 md.
Peptidinių sekų, turinčių prolino ar prolino tipo liekanų, 1H BMR spektruose dažnai stebimi du rezonansinių kreivių tipai. Tas yra todėl, kad posūkio aplink amidinę jungtį, kurioje prolinas sudaro N-dalj, atžvilgiu esti du skirtingą konformaciją turintys junginiai. Šie junginiai, arba konformerai, yra vadinami cis ir trans. Dėl sekų (R)Cha-Aze-, (R)Cha-Proir (R)Cha-Pic-, esančių išradimo junginiuose, susidaro tokia cis-trans pusiausvyra, kuomet nusveria vienas kuris nors konformerų tipas (daugiau, nei 90 %). Šiuo atveju nurodomi tik nusveriančiojo rotamero H cheminiai poslinkiai. Mažesnę dalį sudarantis rotameras BMR spektrų aprašymuose nurodomas tik tada, kai jo atsakas yra aiškiai išskiriamas rezonansinėse kreivėse. Toks pat kriterijus taikomas ir NH-atsako atveju, esant CDCIg, t.y. BMR spektrų aprašymuose nurodomas tik tuomet, kai aiškiai išskiriamas rezonansinėse kreivėse. Tai reiškia, kad nurodytas kai kurių tarpinių junginių protonų skaičius esti mažesnis už tą, kurio galima būtų laukti, remiantis chemine formule.
Plonasluoksnė chromatografija buvo atliekama ant pramoniniu būdu gaminamo stiklo, padengto Merck silikageliu 60F254, ar aliuminio pokštelių. Vizualizuojama derinant ultravioletinį apšvietimą ir vėliau atliekamą apipurškimą tirpalu, gautu sumaišius 372 ml EtOH (95 %), 13,8 ml koncentruotos H2SO4, 4,2 ml koncentruotos acto rūgšties ir 10,2 ml pmetoksibenzaldehido ar fosfomolibdeno rūgšties reagento (5-10 % s.v., ištirpintų EtOH (95 %)) bei pakaitinus.
Greitoji (flash) chromatografija buvo atliekama naudojant kolonėlę su Merck silikageliu 60 (40-63 mm, 230-400 mišinys) ir esant padidintam oro slėgimui.
Priešingos fazės didelės skiriamosios gebos skystinė chromatografija (Pavyzdžių aprašymuose sutrumpintai žymima RPLC) buvo atliekama Waters M-590 prietaisu su trimis priešingos fazės Kromsil 100, C8 kolonėlėmis (Eka-Nobel), turinčias skirtingus išmatavimus ir skirtas analitiniams (4,6 mm x 250 mm), pusiau preparatyviniams (Τ' x 250 mm) ir preparatyviniams (2 x 500 mm) chromatografiniams tyrimams, matuojant optinį tankį ties 226 nm.
Liofilizacija buvo atliekama Leybold-Heraeus, Lyovac GT 2 modelio aparatu.
Pradiniu medžiagų gavimas
Boc-(R)Pgl-OH
Gaunama iš H-(R)Pgl-OH, taip pat kaip ir Boc-(R)Cha-OH gavimo atveju (žr. toliau).
Boc-(R)Cha-OH
Į 21,55 g (125,8 mmol) H-(R)Cha-OH, ištirpinto 130 ml 1 M NaOH ir 65 ml THF, tirpalą pridedama 30 g (137,5 mmol) (Boc)2O ir mišinys 4,5 vai. maišomas kambario temperatūroje. Išgarinus THF pridedama 150 ml vandens. Šarminė vandeninė fazė praplaunama du kartus EtOAc, tuomet parūgštinama 2 M KHSO4 ir ekstrahuojama 3x150 ml EtOAc (t.y. tris kartus naudojant 150 ml EtOAc tirpalo). Sujungta organinė fazė praplaunama vandeniu, sūrymu ir išdžiovinama (Na2SO4).
Išgarinus tirpiklį, gaunama 30,9 g (90,5 %) baltos spalvos kieto pavidalo išradimo junginio.
Boc-(R)Hop-OH
Gaunama iš H-(R)Hop-OH tuo pačiu būdu, kaip aprašyta Boc(R)Cha-OH gavimo atveju.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 1,45 (s,9H), 2,00 (m, 1H), 2,22 (m, 1H), 2,75 (plt, 2H), 4,36 (pis, 1H), 5,05 (pis, 1H), 7,15-7,33 (m, 5H).
4-(tret-butiloksikarbonilaminometil)piridinas
J 10,81 g (100 mmol) 4-aminometilpiridino, ištirpinto 100 ml THF, pridedama 24 g (110 mmol) Boc2O, tirpinto 70-yje ml THF 20 min. ir
10°C temperatūroje. Tirpalas 4 vai. maišomas, jo temperatūrai pasiekiant kambario temperatūrą (reakcijos metu susidariusios netirpios skystojo molio pavidalo nuosėdos parausvėja). Tirpiklis pašalinamas, nuosėdos ištirpinamos EtOAc ir filtruojamos per silikagelį. Išgarinus tirpiklį, gaunamas rausvas aliejaus pavidalo junginys, kuris paliktas kristalizuojasi. Gautas žaliavinis produktas naudojamas neatlikus tolimesnio valymo.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): o 1,45 (s, 9H), 4,32 (d, 2H), 5,05 (pis, 1H(NH)),7,2 (d, 2H), 8,55 (d, 2H).
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)benzenas (H-Pab (Z)) (i) 4-cianobenzilazidas
20,23 g (0,31 mol) natrio azido, ištirpinto 50 ml vandens, tirpalo pridedama j 49,15 g (251 mmol) 4-cianobenzilbromido, ištirpinto 200 ml DMF, tirpalą aplinkos temperatūroje. Po egzoterminės reakcijos pabaigos praėjus 1,5 vai., reakcijos mišinys praskiedžiamas 200 ml tolueno (dėmesio: kad būtų išvengta galinčių sprogti azido junginių atsiskyrimo, patartina tolueną pridėti į reakcijos mišinį ankščiau, negu vandenį) ir 500 ml vandens. Vandeninė fazė ekstrahuojama papildomai pridėjus 2x50 ml tolueno. Susidarę organiniai ekstraktai praplaunami 2x50 ml vandens ir sūrymo, ir galiausiai džiovinami (MgSO4) bei filtruojami. Taip gautas tirpalas naudojamas sekančiame etape.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg); δ 4,4 (s, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,7 (d, 2H).
(ii) 4-amidinobenzilazidas
Vandenilio chlorido dujos yra pučiamos per 250 ml absoliutaus etanolio ir tirpalo (maždaug 200 ml), gauto etape (i), mišinį iki prisotinimo, esant aukštesnei negu -5°C temperatūrai. Palaikius 24 vai. 8°C temperatūroje ir išgarinus didžiąją dalį tirpiklio bei susidarius nuosėdoms, kai buvo pridėtas eterio anhidridas, gaunami balti kristalai, kurie atskiriami filtruojant ir ištirpinant 1,8 I amoniako alkoholyje. Po 48 vai. pašalinus didžiąją tirpiklio dalį ir pridėjus 200 ml 3,75 M NaOH tirpalo, gaunamos bespalvės 4-amidinobenzilazido kristalų nuosėdos. Kristalai atskiriami filtruojant. Tuo būdu gaunama 22,5 g (iš viso 51%) 4-amidinobenzilazido.
Etilimidatobenzilazido hidrochloridas:
1H-BMR (500 MHz, CDgOD); δ 1,6 (t, 3H), 4.5 (s, 2H), 4,65 (q, 2H),
4,8 (pis, 2H), 7,6 (d, 2H), 8.1 (d, 2H)
4-amidinobenzilazidas:
1H-BMR (500 MHz, CDCIg); δ 4,3 (s, 2H), 5,7 (pis, 3H), 7,3 (d, 2H),
7,6 (d, 2H).
13C-BMR (125 MHz, CDCIg): amidino anglis: δ 165,5.
(iii) 4-(benziloksikarbonilamidino)benzilazidas
Etape (ii) gauti kristalai ištirpinami 500 ml metileno chlorido ir gautas tirpalas išdžiovinamas (KgCOg), filtruojamas ir pridedama 27 ml (194 mmol) trietilamino. 25 ml benzilchlorformiato lėtai pridedama į maišomą tirpalą, šaldant reakcijos mišinį ledo vonioje. Po 30 min. pridedamas papildomas 2 ml benzilchlorformiato kiekis ir maišoma dar 30 min. Vėliau pridedama vandens ir nustatomas vandens fazės pH 7, naudojant 2M HCI. Organinė fazė išdžiovinama (MgSO4) ir tirpiklis išgarinamas vakuume. Galiausiai atskiriami bespalviai 4-(benziloksikarbonilamidino)benzilazido kristalai iš eterio/metileno chorido/heksano.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg); δ 4,4 (s, 2H), 5,3 (s, 2H), 6,3-7,0 (pis , 1H), 7,3-7,4 (m, 5H), 7,5 (d, 2H), 7,9 (d, 2H), 9,3-9,6 (pis, 1H).
13C-BMR (125 MHz, CDCIg): amidino anglis: δ 167,5.
(iv) 4-aminometil-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)benzenas (H-Pab(Z))
26,3 g (100 mmol) trifenilfosfino pridedama kambario temperatūroje į gautą (iii) etape 4-(benziloksikarbonilamidino)-benzilazidą, ištirpintą 160 ml THF. Po 16 vai. pridedamas papildomas 6,6 g (25 mmol) trifenilfosfino kiekis ir, prieš pašalinant tirpiklį vakuume, tirpalas laikomas 4 vai. Nuosėdos ištirpinamos metileno chloride ir ekstrahuojamos 2M HCI. Vandeninė fazė praplaunama metileno chloridu ir eteriu, po to pašarminama 3,75 M natrio hidroksido tirpalu. Po ekstrakcijos metileno chloridu, džiovinimo (K2CO3) ir tirpiklio pašalinimo vakuume, gaunama 20 g (bendra išeiga, skaičiuojant nuo ciano-benzilbromido, yra 28%) geltono aliejaus, kuris laikui bėgant kietėja.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg); δ 1,2-2,2 (pis, 2H), 3,8 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,35 (m, 5H), 7,4 (d, 2H), 7,8 (d, 2H), 9,1-9,6 (pis, 1H).
13C-BMR (125 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ
164,6 ir 168,17.
H-Pig(Z)2 (i) 4-(tret-butiloksikarbonilaminometil)piperidinas j 17,7 g 4-tret-butiloksikarbonilaminometilpiridino, ištirpinto 125 ml MeOH, pridedama 2 g 5%-ų Rh/AlgOg ir mišinys hidrinamas 0,34 MPa slėgyje per naktį. Apie hidrinimo eigą sprendžiama iš 1H-BMR spektro. Jam nepasibaigus, katalizatorius filtruojamas, tirpiklis pašalinamas vakuume ir nuosėdos ištirpinamos 100 ml acto rūgšties, pridedama 2 g 5%-ų Rh/AI2O3 ir mišinys hidrinamas 0,34 MPa slėgyje 4 dienas. Katalizatorius nufiltruojamas ir didžioji dalis acto rūgšties pašalinama vakuume. Į nuosėdas pridėjus 50 ml vandens, mišinys šarminamas naudojant 5M NaOH, vandens fazė ekstrahuojama 1x200 + 1x100 ml CHgCIg. Sujungti organiniai sluoksniai praplaunami 25 ml vandens ir išdžiovinami (MgSO4).
Išgarinus tirpiklį, gaunama 17,2 g rausvo aliejaus, kuris ištirpinamas 50 ml dietilo eterio. Pridėjus 200 ml pentano, iškrenta nuosėdos, kurias nufiltravus, gaunama 7,7 g rudų miltelių. Išgarinus motininį tirpalą, gaunama 7 g balto aliejaus. Rudi milteliai ištirpinami 100 ml EtOAc ir organinė fazė praplaunama 1x50 ml + 1x25 ml 1 M KHSO4- Sujungta rūgštinė fazė šarminama 2 M NaOH ir ekstrahuojama 1x200 + 1x75 ml EtOAc. Išdžiovinus ir išgarinus susidariusią organinę fazę, gaunama 5,2 g baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
Tokiu pat būdu paveikus baltus miltelius, gautus iš aukščiau minėto motininio tirpalo, susidaro papildomi 3,4 g produkto. Bendra išeiga 40 %.
ς c 0/_ 1H-BMR (500 MHz, CDCIg, dviejų rotamerų mišinys, 3:1):
gausesnis rotameras: δ 1,11 (dq, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,49-1,60 (m, 1H), 1,63-1,70 (m, 2H), 2,58 (dt, 2H), 2,93-3,03 (m, 2H), 3,07 (m, 2H), 4,75 (pis, 1H (NH)).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami, esant δ 1,21 (dq) ir 1,91 (dt).
(ii) Boc-Pig(Z)2
3,34 g (9,33 mmol) N,N'-(dibenziloksikarbonil)metilizotiokarbamido pridedama į 2 g (9,33 mmol) 4-(tret-butiloksikarbonilaminometil)piperidino, ištirpinto 60 ml CHgCN, tirpalą ir mišinys maišomas 22 vai. 60°C temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos EtOAc. Organinė fazė praplaunama 2x20 ml 1 M KHSO4 tirpalu, 1x20 ml vandens, 1x20 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO^).
Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant petrolio eterio/EtOAC (1/1) eliuentą, gaunama 2,43 g (50%) reikiamo produkto.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): Dėl tarpmolekulinės sąveikos kai kurių registruojamų signalų maksimumai, ypač piperidino žiedo, yra selektyviai praplatėję. Tas itin pasakytina apie CH2 grupę prie 2-o ir 6-o anglies atomo piperidino žiede, kai gaunamas platus maksimumas, esantis nuo 3,7 iki 4,5 m.d.
δ 1,19-1,31 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,63-1,80 (m, 3H), 2,66-3,05 (m, 4H),
3,7-4,5 (pis, 2H), 4,65 (pis, 1H(NH)), 5,13 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 10H), 10,5 (pis, 1H(NH)).
(iii) H-Pig(Z)2
163 mg (0,31 mmol) Boc-Pig(Z)2, ištirpinto 5 ml EtOAc, tirpalo, kuris prisotinamas HCI dujomis, maišoma aplinkos temperatūroje 3 vai. 20 min. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos 30 ml CH2CI2. Organinė fazė praplaunama 5 ml 2 M NaOH, 1x5 ml vandens, 1x5 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO^). Išgarinus tirpiklį, gaunama 100 mg (76%) išradimo junginio.
^H-BMR (500 MHz, CDCIg): Dėl tarpmolekulinės sąveikos kai kurių registruojamų signalų maksimumai, ypač piperidino žiedo, yra selektyviai praplatėję. Tas itin pasakytina apie CH2 grupę prie 2-o ir 6-o anglies atomo piperidino žiede, kai gaunamas platus maksimumas, esantis nuo 3,7 iki 4,5 m.d.
δ 1,18-1,37 (m, 2H), 1,46-1,63 (m, 1H), 1,68-1,83 (m, 2H), 2,57 (d, 2H), 2,86-3,03 (m, 2H), 3,7-4,5 (pis, 2H), 5,13 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 10H).
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)cikloheksanas (H-Pac(Z) x 2HCI).
(i) N-[N-4-(benziloksikarbonil)amidinobenzil]tret-butil-karbamatas
1,466 g (6,7 mmol) (Boc)2O pridedama j maišomą tirpstančio ledo temperatūros 1,81 g (6,4 mmol) 4-(benziloksikarbonil)amidinobenzilamino ir 1 ml (7,1 mmol) trietilamino, ištirpinto 25 ml metileno chlorido, tirpalą. Po 20 min. pridedama metileno chlorido ir mišinys praplaunamas 5% acto rūgšties ir 10% natrio karbonato tirpalu. Išdžiovinus (magnio sulfatu) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurias galima kristalizuoti iš metileno chlorido/heksano. Išeiga sudaro 1,66 g (68%).
(ii) N-[N-4-amidinobenzil]tret-butilkarbamatas
1,60 g (4,2 mmol) N-[4-(benziloksikarbonil)amidino-benzil-tretbutilkarbamato, 5 ml acto rūgšties ir 160 mg 10% paladžio su medžio anglimi, ištirpinto 50 ml etanolio, mišinys maišomas vandenilio atmosferoje 2 vai. Pašalinus katalizatorių filtruojant per ceiitą ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamas išradimo junginio acetatas.
(iii) N-[4-amidinocikloheksilmetil]tret-butilkarbamatas mmol N-[4-amidinobenzil]tret-butilkarbamato hidrinama 100 ml metanolio, esant 863 mg 5%-ų rodžiui ant aliuminio 3,4 MPa slėgyje 20 vai. Katalizatorius pašalinamas filtruojant, tirpiklis išgarinamas vakuume. Nuosėdos ištirpinamos vandenyje ir tirpalas šarminamas natrio hidroksidu. Po ekstrakcijos metileno chloridu, išdžiovinus susidariusias organines fazes (kalio karbonatu) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunama
3.8 g (87%) išradimo junginio.
(iv) N-[N-4-(benziloksikarbonil)amidinocikloheksilmetil]tretbutilkarbamatas
0°C temperatūroje 1,25 ml (8,8 mmol) benzilchlorformato pridedama į maišomą 2,04 g (8 mmol) N-[4-amidinociklo-heksil]tretbutilkarbamato, 1,23 ml (8,8 mmol) trietilamino ir 197 mg DMAP, ištirpinto 40 ml metileno chlorido, tirpalą. Po 10 min. reakcijos mišinys praskiedžiamas metileno chloridu ir ekstrahuojamas vandeniu, praskiesta acto rūgštimi ir natrio hidrokarbonato tirpalu. Organinė fazė gryninama silikagelio kolonėlėje plaunant metileno chlorido, turinčio didėjantį kiekį etilo acetato, eliuentu. Taip gaunama 2,49 g (80%) išradimo junginio.
(v) 4-aminometil-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)cikloheksanas (H-Pac(Z) x2HCI).
Vandenilio chlorido dujos praleidžiamos per 2 g (5,1 mmol) N-[4-(benziloksikarbonil)amidinocikloheksilmetil]tret-butilkarbamato, ištirpinto 40 ml etilo acetato, tirpalą. Po 10 min. pridedama metanolio ir, pašalinus dalį tirpiklio vakuume, kristalizuojamas išradimo junginio dihidrochloridas.
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)piperidinas (H-Pig(Z) x HCI) (i) 4-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)piperidinas (Boc-Pig(Z))
7,8 g (36,4 mmol) 4-(N-tret-butiIoksikarbonilaminometil)piperidino ir 8,98 g (40 mmol) N-benziloksikarbonil-Smetilizotiokarbamido sumaišoma 25 ml etanolio. Mišinys 6 vai. šildomas
60-70°C temperatūroje ir dviem dienom paliekamas kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos CH2CI2. Organinis sluoksnis praplaunamas du kartus 0,3 M KHSO^ ir vieną kartą sūrymu. Susidaręs organinis sluoksnis džiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant eliuento CH2CI2/MeOH laiptinį gradientą (100/0, 97/3, 95/5, 90/10). Taip gaunama 5,22 g (37%) išradimo junginio.
(ii) H-Pig(Z) x HCI (4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)piperidinas
5,22 g (13,5 mmol) Boc-Pig(Z) ištirpinama 100 mL etilo acetato, prisotinto HCI dujų. Mišinys paliekamas vienai valandai, tuomet garinamas. Nuosėdos ištirpinamos vandenyje ir praplaunamos dietilo eterio ir etilo acetato mišiniu. Pašalinus vandens sluoksnį liofilizuojant, gaunama 4,0 g (91%) išradimo junginio.
1H-BMR (D2O, 300 MHz): δ 1,40-1,60 (m, 2H), 2,05 (pld, 2H),
2,19 (m, 1H), 3,07 (d, 2H), 3,34 (plt, 2H), 4,08 (pld, 2H), 5,40 (s, 2H), 7,57,63 (m, 5H)
MS m/z 291 (M+ +1)
4-aminoetil-1 -benziloksikarbonilamidinopiperidinas (H-Rig(Z)) (i) 1 -benziloksikarbonilamidino-4-hidroksietilpiperidinas
6,2 g (0,028 mol) 4-hidroksietilpiperidino ir 3,6 g (0,028 mol) N-benziloksikarbonil-S-metilizotiokarbamido mišinio, ištirpinto 50 ml acetonitrilo, laikoma per naktį su grįžtamuoju šaldytuvu. Išgarinus ir apdorojus greitosios chromatografijos būdu silikagelio kolonėlėje, naudojant etilo acetato eliuentą, gaunama 3,5 g (41%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,1-1,85 (m, 7H), 2,83 (plt, 2H), 4,70 (plt, 2H), 4,18 (pld, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
(ii) 1 -benziloksikarbonilamidino-4-mesiloksietilpiperidinas
Į ledais atšaldytą 3,50 g (0,0115 mol) 1-benziloksikarbonilamldino-4-hidroksietilpiperidino, 1,15 g (0,0115 mol) trietilamino, ištirpinto metileno chloride ir 10 ml tetrahidro-furano, tirpalą įlašinama 1,30 g (0,115 mol) mezilo chlorido. Po to reakcijos mišinys maišomas 1 vai. Supylus mišinį į vandenį, gaunamas organinis sluoksnis. Vandens sluoksnis ekstrahuojamas metileno chloridu ir susidarę organiniai sluoksniai praplaunami vandeniu, džiovinami (Na2SO4) ir garinami.
Produktas naudojamas jo nevalant sekančiuose etapuose. Išeiga 4,4 g (100%).
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg) δ 1,15-1,3 (m, 2H), 1,65-1,8 (m,
5H), 2,84 (plt, 2H), 3,01 (s, 3H), 4,20 (pld, 2H), 4,27 (t, 2H), 5,12 (s, 2H),
7,1-7,5 (m, 7H).
(iii) 4-azidetil-1 -benziloksikarbonilamidinopiperidinas
4,4 g (0,0115 mol) nevalyto 1-benziloksikarbonilamidino-4mesiloksietilpiperidino ištirpinama 100 ml dimetilformamido ir pridedama
4.5 g (0,069 mol) natrio azido. Mišinys kaitinamas 100°C temperatūroje
2.5 vai. Tuomet mišinys supilamas į vandenį ir tris kartus ekstrahuojamas etilo acetatu. Susidariusi organinė fazė praplaunama vandeniu, džiovinama (Na2SO4) ir garinama. Nuosėdos chromatografuojamos silikagelyje, naudojant acetato/heptano eliuentą santykiu 1/1. Išeiga 3,0 g (79%).
1H-BMR (500 MHz, CDCIg) δ 1,20 (dq, 2H), 1,5-1,8 (m, 5H),
2,85 (dt, 2H), 3,35 (t, 2H), 4,22 (pld, 2H), 5,13 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,27,45 (m, 5H).
(iv) 4-aminoetil-1 -benziloksikarbonilamidinopiperidinas (H-Rig(Z))
Į 30 ml vandens pridedama 0,40 g 10% Pd/C. 1,0 g (0,031 mol) natrio borhidrido ištirpinama 30 ml vandens ir atsargiai pridedama j maišomą ir ledais šaldomą skystojo molio pavidalo Pd/C ir vandenį. 2,9 g (8,8 mmol) 4-azidetil-1-benziloksi-karbonilamidinopiperidino ištirpinama 80 ml tetrahidrofurano ir šis tirpalas sulašinamas į aukščiau minėtą, ledais šaldomą, vandeninį skystąjį molj. Po 4 vai. maišymo kambario temperatūroje mišinys vėl atšaldomas ledais ir pridedama 30 ml 2 M HCI. Mišinys filtruojamas per celitą, celitas skalaujamas papildomu kiekiu vandens. Išgarinamas tetrahidrofuranas ir vandeninė fazė praplaunama etilo acetatu. Vandeninė fazė šarminama 2 M NaOH ir ekstrahuojama tris kartus metileno chloridu. Susidariusi organinė fazė praplaunama vandeniu, džiovinama (Na2SO4) ir garinama. Produktas naudojamas sekančiuose etapuose daugiau jo nevalant.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg) δ 1,1-1.5 (m, 6H), 1,55-1,65 (m,
H), 1,73 (pld, 2H), 2,72 (b, 2H), 2,81 (dt, 2H), 4,20 (pld, 2H), 5,12 (s, 2H),
6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
(3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminometilpirolidinas (H(R,S)Nig(Z)) (i) (3RS)-3-hidroksimetilpirolidinas
16,4 g (0,0857 mol) (3RS)-1-benzil-3-hidroksimetil-pirolidino (žr. H-(R,S)Hig(Z) (i) dalies aprašymą) sumaišomas su 1,6 g Pd/C (10%), 5 ml vandens ir 150 ml etanolio, ir mišinys hidrinamas 0,26 MPa slėgyje per naktį. Nufiltravus per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį, pagal 1H-BMR spektrą nustatoma, kad reakcija nėra baigta. Tęsiant hidrinimą tris dienas 0,26 MPa slėgyje ir esant 1,6 g Pd/C (10%), ištirpinto 5 ml vandens/150 ml etanolio, yra baigiama redukcija. Nufiltravus per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį, gaunamas produktas.
(ii) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-hidroksimetil-pirolidinas
1,01 g (0,01 mol) (3RS)-3-hidroksimetilpirolidino ir 2,29 g (0,011 mol) N-benziloksikarbonil-O-metilizokarbamido ištirpinama (aminas nėra itin tirpus) toluene ir šildoma tris valandas temperatūroje iki 60°C, po to maišoma per naktį kambario temperatūroje. Mišinys garinamas, pagal 1H-BMR spektrą nustatoma, kad reakcija nėra baigta. Tuomet mišinys ištirpinamas 15 ml acetonitrilo ir kaitinamas tris valandas temperatūroje iki 60°C, vėliau maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpiklis išgarinamas ir mišinys ištirpinamas CH2CI2, vieną sykį praplaunamas vandeniu, džiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5, ir gaunama 0,70 g (25%) produkto.
MS m/z278 (M + + 1) (iii) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-meziloksimetil-pirolidinas
0,7 g (2,53 mmol) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3hidroksimetilpirolidino ir 0,70 ml (5,05 mmol) trietilamino ištirpinama 15 ml dietilo eterio/CH2CI2 tirpale (1/1) ir mišinys atšaldomas iki 0°C. Lėtai supilama 0,25 ml (3,29 mmol) metansulfonilo chlorido, ištirpinto 3 ml dietilo eterio, ir reakcijos mišinys maišomas tris valandas 0°C temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos etilo acetate ir ekstrahuojamos 0,3 M KHSO4 tirpale. Vandens sluoksnis praplaunamas vieną kartą CH2CI2. Vandens sluoksnis neutralizuojamas, naudojant 10 M NaOH tirpalą ir ekstrahuojamas du kartus CH2CI2·
Išdžiovinus susidariusį organinį sluoksnį (Na2SO4), nufiltravus ir nugarinus, gaunama 0,450 g (50%) išradimo junginio.
(iv) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-azidometil-pirolidinas
0,450 g (1,27 mmol) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonil-amidino)3-meziloksimetilpirolidino ir 0,124 g (1,9 mmol) natrio azido ištirpinama 10 ml dimetilformamido ir kaitinama keturias valandas temperatūroje iki 60°C, po to maišoma kambario temperatūroje per naktį. Pridėjus vandens, mišinys ekstrahuojamas du kartus tolueno/etilo acetato tirpalu santykiu 2/1. Susidaręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5 ir gaunama 0,262 g (68%) produkto.
MS m/z 303 (M + + 1) (v) (3RS)-1 -(N-benziIoksikarbonilamidino)-3-aminometilpirolidinas (H(R.S)Nig(Z))
Sumaišoma 32 mg Pd/C (10%) ir 2,6 ml H2O ir praleidžiama nestipri azoto srovė. Pridedama 98 mg NaBH4, ištirpinto 2,6 ml H2O, po to lėtai pridedama 262 mg (0,87 mmol) (3RS)-1-(Nbenziloksikarbonilamidino)-3-meziloksimetilpirolidino, ištirpinto 7 ml MeOH. Mišinys paliekamas vienai valandai. Pridedama 5 ml 1 M HCI ir mišinys filtruojamas per hyflo filtrą. Organinis tirpiklis išgarinamas esant mažesniam slėgiui, likęs vandens sluoksnis praplaunamas vieną kartą etilo acetatu, šarminamas NaOH tirpalu ir ekstrahuojamas kelis kartus CH2CI2. Išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir nugarinus susidariusį organinį sluoksnį, gaunama 130 mg (54%) produkto.
MS m/z 277 (M + + 1) (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminoetilpirolidinas (H-(R,S)Hig(Z)) (i) (3RS)-1 -benzil-3-hidroksimetilpirolidinas
25,2 g (0,1063 mol) (3RS)-1-benzil-2-okso-4-metoksikarbonilpirolidino lėtai pridedama j skystąjį molį, sudarytą iš 6,22 g ličio aliuminio hidrido, ištirpinto 160 ml dietilo eterio argono atmosferoje. Mišinys maišomas per naktį, tuomet kaitinamas vieną valandą su grįžtamuoju šaldytuvu. Reakcijos mišinys atšaldomas iki kambario temperatūros ir pridedama 0,2 g Na2SO4 x 10 H2O, o po to, lėtai, nurodyta tvarka pridedama 6 ml vandens, 18 ml 3,75 M NaOH tirpalo ir 6 ml vandens. Išdžiovinus skystąjį molį (nuo vandens pertekliaus) Na2SO4/celitu, nufiltravus ir išgarinus, gaunama 20,3 g produkto.
1H-BMR (CDCIg, 300 MHz): δ 1,64-1,77 (m, 1H), 1,93-2,07 (m,
1H), 2,27-2,40 (m, 2H), 2,51 (dd, 1H), 2,62 (dd, 1H), 2,82 (m, 1H), 3,52 (dd, 1H), 3,59 (s, 2H), 3,67 (dd, 1H), 7,15-7,40 (m, 5H).
(ii) (3RS)-1 -benzil-3-chlormetilpirolidinas
J virinamą tirpalą, sujungtą su grįžtamuoju šaldytuvu, kuriame yra 15,3 g (0,08 mol) (3RS)-1-benzil-3-hidroksimetilpirolidino, ištirpinto 220 ml CHCI3, lėtai pridedama 330 ml tionilo chlorido, ištirpinto 60 ml CHCIg, po to virinama su grįžtamuoju šaldytuvu dar valandą. Mišinys garinamas ir nuosėdos ištirpinamos vandenyje. Vandens sluoksnis praplaunamas etilo acetatu, po to šarminamas 0,2 M NaOH tirpalu. Vandens sluoksnis ekstrahuojamas tris kartus etilo acetatu ir susidaręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Taip gaunama 16,8 g produkto.
1H-BMR (CDCIg, 300 MHz): δ 1,55 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 2,38 (dd, 1H), 2,48-2,64 (m, 3H; iš ten 2,58 (t, 2H))), 2,73 (dd, 1H), 3,51 (d, 2H),
3,60 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H)
U (iii) (3RS)-1-benzil-3 cianometilpirolidinas
16,8 g (0,08 mmol) (3RS)-1-benzil-3-chlormetilpirolidino ir 5,88 g (0,12 mmol) natrio cianido ištirpinama 250 ml dimetilo sulfoksido. Mišinys maišomas 2 dienas 60°C temperatūroje ir vieną savaitę kambario temperatūroje. Pridedama vandens ir mišinys ekstrahuojamas tris kartus etilo acetatu. Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas sūrymu, išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Taip gaunama 14,7 g (92%) produkto.
1H-BMR (CDCIg, 500 MHz): δ 1,55 (m, 1H), 2,13 (m, 1H), 2,35 (dd, 1H), 2,42 (t, 2H), 2,44-2,59 (m,2H), 2,65 (m, 1H), 2,73 (dd, 1H), 3,61 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H).
(iv) (3RS)-1 -benzil-3-aminoetilpirolidinas
14,7 g (0,0734 mol) (3RS)-1-benzil-3-chlormetil-pirolidino, ištirpinto 220 ml dietilo eterio, lėtai pridedama į skystąjį molį, sudarytą iš
2,94 g ličio aliuminio hidrido, ištirpinto 74 ml dietilo eterio argono atmosferoje. Mišinys maišomas per naktį, po to į jį pridedama 6 ml vandens, 18 ml 3,75 M NaOH tirpalo ir 6 ml vandens. Išdžiovinus skystąjį molį (nuo vandens pertekliaus) Na2SO4/celitu, nufiltravus siurbiant ir nugarinus, gaunama 14,84 g (99%) produkto.
1H-BMR (CDCIg, 300 MHz): δ 1,41 (m, 1H), 1,51 (q, 2H), 1,902,10 (m, 2H; iš ten 2,05 (dd, 1Η»), 2,18 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,55-2,73 (m, 3H), 2,80 (neryškus t, 1H), 3,58 (neryškus d, 2H), 7,15-7,4 (m, 5H).
(v) (3RS)-1-benzil-3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)-pirolidinas
J 14,84 g (0,0726 mol) (3RS)-1-benzil-3-aminoetil-pirolidino,
72,6 ml 1M NaOH tirpalo, 76 ml vandens ir 145 ml THF mišinį pridedama 17,44 g (0,08 mol) di-tret-butildikarbonato ir šis mišinys maišomas per naktį. Tirpalas koncentruojamas ir ekstrahuojamas tris kartus etilo acetatu.
Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas sūrymu, išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos budu, naudojant eliuento CH^C^/MeOH laiptinį gradientą (95/5, 90/10). Taip gaunama 14,69 g (80%) produkto.
1H-BMR (CDCIg, 300 MHz): δ 1,25-1,65 (m, 12H; iš ten 1,40 (s,
9H)), 1,90-2,25 (m, 3H), 2,46 (m, 1H), 2,67 (m, 1H), 2,80 (neryškus t, 1H), 3,09 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 4,60 (pis, NH), 7,15-7,35 (m, 5H).
(vi) (3RS)-3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)pirolidinas
3,1 g (0,01 mol) (3RS)-1-benzil-3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetiljpirolidino hidrinama 0,28 MPa slėgyje, esant 0,6 g Pearlman'o katalizatoriui (Pd(OH)2), 40 ml etanolio (95%) per naktį.
Nufiltravus katalizatorių per celitą ir išgarinus tirpiklį iš 1BMR spektro nustatoma, kad reakcija nėra baigta. Todėl pridedama dar 0,6 g
Pearlman'o katalizatoriaus, ištirpinto 40 ml etanolio (95%), ir mišinys veikiamas H2 atmosferoje, esant 0,28 MPa slėgiui. Nufiltravus katalizatorių per celitą ir išgarinus tirpiklį, gaunama 2,18 g produkto.
MS m/z214 (M+) (vii) (3RS)-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminoetil-pirolidinas (H(R.S)Hig(Z))
2,18 g (0,0102 mmol) (3RS)-3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)pirolidino ir 2,18 g (0,0125 mol) N-benziloksi-karbonil-Smetilizotiokarbamido ištirpinama 30 ml tolueno ir šildoma 60-70°C temperatūroje 8 vai., po to vieną dieną maišoma kambario temperatūroje. Pridedama 0,3 M KHSO4 tirpalo ir vandens sluoksnis praplaunamas tolueno ir etilo acetato mišiniu, po to paliekama 2 dienoms, per kurias Boc grupė pasišalina. Rūgštinė vandens fazė šarminama ir ekstrahuojama 4 kartus CH2CI2· Susidaręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas, garinamas ir gaunama 2,0 g (51%) išradimo junginio.
1H-BMR (CDCI3, 330 K, 300 MHz): δ 1,45-1,7 (m,3H), 2,07 (m,
1H), 2,26 (m, 1H), 2,74 (t, 2H), 3.00 (neryškus t, 1H), 3,33 (neryškus q,
1H), 3,45-3,80 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,72 (pis, 2NH), 7,15-7,45 (m, 5H).
C J (4RS)-1,3-diazo-2-tosilimino-4-aminoetilcikloheksanas (H-(R,S)ltp(Ts)) (i) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-karboksicikloheksanas
Gaunama pagal metodą, aprašytą Journal of Org. Chem., p.46,
1971.
(ii) (RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-hidroksimetilcikloheksanas
12,9 g (345 mmol) LiAIH4 atsargiai pridedama į atvėsintą skystąjį molį (ledo vonios temperatūros), sudarytą iš 9,9 g (33 mmol) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-karboksicikloheksano, ištirpinto 330 ml sauso THF. Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Reakcijos mišinys apdorojamas pagal Fieser & Fieser, pvz., pridedant į mišinį 12,9 g vandens, 38,7 g 3,75 M NaOH, 12,9 g vandens, Na2SO4, CH2CI2, celito ir filtruojant. Išgarinus tirpiklį, gaunama 7,0 g (75%) reikiamo produkto.
MS m/z 284 (M+ + 1) (iii) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-meziloksimetilcikloheksanas
2,9 ml (37,1 mmol) atsargiai pridedama į atvėsintą (ledo vonios temperatūros) skystąjį molį, sudarytą iš 7,0 g (24,7 mmol) (4RS)-1,3diazo-2-tozilimino-4-hidroksicikloheksano, ištirpintą 6,9 ml (49,4 mmol) trietilamino ir 125 ml CH2CI2· Po vienos vai. 15 min. pridedama vandens ir organinė fazė atskiriama, išdžiovinama (Na2SO4), filtruojama ir garinama. Taip gaunamas išradimo junginys.
MS m/z 362 (M+ +1).
(iv) (4RS)-1,3-diazo-2-tozih'mino-4-cianometilcikloheksanas
8,9 g (24,7 mmol) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4meziloksimetilcikloheksano ir 1,3 g (27,2 mmol) NaCN ištirpinama 75 ml DMSO. Po 60 vai. maišymo 40°C temperatūroje papildomai pridedama
0,31 g (6 mmol) NaCN ir tirpalas maišomas 65°C temperatūroje tris valandas. Pridėjus 150 vandens iš tirpalo išsiskiria kristalinės nuosėdos. Jas nufiltravus ir išdžiovinus, gaunama 5,4 g (75%) reikiamo produkto.
MS m/z 293 (M+ +1) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-aminoetilcikloheksanas (H(R.S)ltp(Ts))
935 mg LiAIH^ atsargiai pridedama j atvėsintą skystąjį molį (ledo vonios temperatūros), sudarytą iš 2,4 g (8,2 mmol) (4RS)-1,3-diazo2-tozilimino-4-cianometilcikloheksano, ištirpinto 90 ml THF. Po 2 vai. maišymo pridedama 1 g HgO, 3 g 3,75 M NaOH, 1 g HpO, Na2SO4, celito ir CH2CI2· Mišinį nufiltravus ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunama 2,2 g (90%) reikiamo produkto.
1H-BMR (500 MHz, MeOD); δ 1,52-1,71 (m, 3H), 1,88-1,96 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,64-2,73 (m, 2H), 3,2-3,4 (m, 2H, iš dalies sutampa su tirpiklio signalu), 3,44-3,53 (m, 1H), 7,28 (d,2H), 7,71 (d, 2H).
(4S)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-aminoetilcikloheksanas (H(S)ltp(Ts))
Gaunama tuo pačiu būdu, kaip ir H-(R,S)ltp(Ts), esant pradiniam junginiui optiškai grynai diaminosviesto rūgščiai.
1H-BMR (300,13 MHz, CDCIg); δ 0,97-1,15 (s platus, 1H), 1,481,69 (m,3H), 1,84-1,95 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,68-2,82 (m, 1H), 2,86-2,98 (m, 1H), 3,22-3,44 (m, 2H), 3,45-3,58 (m, 1H), 7,19 (d, 2H), 7,72 (d, 2H).
13C-BMR (300,13 MHz, CDCIg); δ guanidino anglis 154,05.
H-Aze-OEt x HCI
Gaunama tuo pačiu būdu, kaip ir H-Pic-OEt x HCI, esant pradiniam junginiui H-Aze-OH (žr. žemiau).
H-Aze-OMe x HCl
Gaunama pagal procedūrą, aprašytą Seebach D. ir kt. leidinyje Liebigs Ann. Chem., p.687, 1990.
H-Pab(Z) x HCl
Gaunama pridedant 5 M druskos rūgšties, ištirpintos izopropanolyje, 1 molio ekvivalentą į nevalyto H-Pab(Z), ištirpinto EtOH (apie 1 g/10 ml), tirpalą, kuriame H-Pab(Z) x HCl tuojau pat iškrenta į nuosėdas. Nufiltravus, nuosėdos praplaunamos 2 kartus šaltu EtOH ir išdžiovinamos. Taip gaunama beveik kiekybinė išradimo junginio išeiga.
H-Pic-OEt x HCl
4,0 g (0,031 mol) L-pipekolino rūgšties įmaišoma į 100 ml absoliutaus etanolio ir per šj tirpalą atsargiai praleidžiama HCl dujų burbulų srovė, kol tirpalas pasidaro skaidrus. Atšaldžius tirpalą ledo vonioje, į jį per 15 min. sulašinama 17 ml tionilo chlorido. Pašalinus ledo vonią, tirpalas virinamas 2,5 vai. su grįžtamuoju šaldytuvu. Išgarinus tirpiklį, gaunama produkto hidrochloridas.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,33 (t, 3H), 1,8-2,1 (m, 5H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,1-3,3 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,14 (dd, 1H), 4,44 (q, 2H).
H-(R,S)betaPic-OMe x HCl
2,0 g (15,5 mmol) nipekotino rūgšties, ištirpintos 8 ml metanolio, mišinys atšaldomas ledo vonioje ir pridedama 2,76 g (23,2 mmol) tionilo chlorido. Mišinys maišomas kambario temperatūroje 20 vai. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos nedideliame kiekyje metanolio, pridedama dietilo eterio, ir balti H-(RS)betaPic-OMe x HCl kristalai iškrenta į nuosėdas. Filtruojant išskiriama 2,57 g (92%) kristalų.
Boc-(R)Cgl-OH
32,6 g (0,13 mol) Boc-(R)-Pgl-OH ištirpinama 300 ml metanolio ir pridedama 5 g Rh/AI2O3. Tirpalas hidrinamas 3 dienas nuo 5,2 iki 2,8
MPa slėgyje. Nufiltravus ir išgarinus tirpiklį, iš BMR spektro matoma, kad yra susidarę maždaug 25% išradimo junginio metilo esterio. Nevalyta medžiaga ištirpinama 500 ml THF ir pridedama 300 ml vandens bei 20 g LiOH. Mišinys maišomas per naktį ir išgarinamas THF. Likusi vandeninė fazė rūgštinama KHSO4 ir tris kartus ekstrahuojama etilo acetatu.
Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir garinamas. Taip gaunama 28,3 g (83%) reikiamo produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,9-1,7 (m, 2OH), 4,0-4,2 (m, 1H),
5,2 (d, 1 H).
Boc-(R)Cgl-OSu
Į 2,01 g (7,81 mmol) Boc-(R)Cgl-OH ir 1,83 g (15,6 mmol) HOSu, ištirpinto 25 ml CHgCN, ledu atšaldytą tirpalą pridedama 1,69 g (8,2 mmol) DCC ir reakcija vykdoma iki bus pasiekta kambario temperatūra. Po 3 dienas trunkančio maišymo nufiltruojamas į nuosėdas iškritęs DCU ir išgarinamas tirpiklis. Nuosėdos ištirpinamos EtOAc ir organinė fazė praplaunama H2O, KHSO4, NaHCOg, sūrymu ir išdžiovinama (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį, gaunamas išradimo junginys.
Boc-(R)Cha-OSu
Acetonitrile (maždaug 2,5 ml/mmol rūgšties) ištirpinama Boc(R)Cha-OH (1 ekv.), HOSu (1,1 ekv.) ir DCC ar CME-CDI (1,1 ekv.) ir maišoma per naktį kambario temperatūroje. Nuosėdos, susidariusios reakcijos metu nufiltruojamos, tirpiklis išgarinamas ir produktas išdžiovinamas vakuume. (Reakcijoje naudojant CME-CDI, nuosėdos, išgarinus CHgCN, yra ištirpinamos EtOAc ir organinė tazė praplaunama vandeniu ir išdžiovinama). Išgarinus tirpiklį, gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, CDCI^, 2 rotamerai santykiu maždaug 1:1):
0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,48 (m, 4H), 1,5-1,98 (m, 16H; iš ten 1,55 (pis, 9H)), 2,82(pls, 4H), 4,72 (pis, 1H, gausesnis rotameras), 4,85 (pis, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras).
D/
Boc-(R)Hoc-OH
3,2 g (11,46 mmol) Boc-(R)Hop-OH (žr. aukščiau) ištirpinama metanolyje (75 ml). Pridedama 0,5 g rodžio ant aktyvuoto aliuminio oksido (Rh/AI2O3) ir gautas mišinys maišomas 18 vai. vandenilio atmosferoje 0,41 MPa slėgyje. Nufiltravus katalizatorių per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį, gaunama beveik kiekybinė produkto išeiga.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,90 (m, 2H), 1,08-1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,60-1,74 (m, 6H), 1,88 (pis, 1H), 4,27 (pis, 1H).
Boc-(R)Hoc-OSu
Gaunama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-OSu atveju, pradedant nuo Boc-(R)Hoc-OH.
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH
Gaunama pagal metodą, aprašytą J.Y.L. Chung ir kt. leidinyje Journal of Organic Chemistry, No 1, pp. 270-275, 1990.
Boc-(R)Cgl-Aze-OH (i) Boc-(R)Cgl-Aze-OMe j maišomą 3,86 g (15 mmol) Boc-(R)Cgl-OH, 2,27 g (15 mmol) H-Aze-OMe x HCI ir 2,75 g (22,5 mmol) DMAP, ištirpinto 40 ml CHgCN
5°C temperatūroje, mišinį pridedama 3,16 g (16,5 mmol) EDC. Reakcijos mišinys maišomas 48 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos 150 ml EtOAc ir 20 ml H2O. Atsiskyręs organinis sluoksnis praplaunamas 2x20 ml 0,5M KHSO4, 2x10 ml NaHCOg (sotaus), 1x10 ml H2O, 1x10 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO4).
Išgarinus tirpiklį, gaunama 4,91 g (92%) išradimo junginio, kuris sekančiame etape naudojamas daugiau jo nevalant.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg, 0,1 g/ml): gausesnis rotameras,
0,83-1,35 (m, 5H), 1,38 (s, 9H), 1,47-1,84 (m, 6H), 2,18-2,27 (m, 1H), 2,502,62 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,94-4,06 (m, 1H), 4,07-4,15 (m, 1H), 4,39-4,47 (m, 1H), 4,68 (dd, J=9,1, J=5,1, 1H), 5,09 (d, J=9,2, 1H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero išskiriami maksimumai:
2,27-2,35 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,80-3,87 (m, 1H), 3,88-3,95 (m, 1H), 4,92 (d, J=9,2, 1H), 5,21 (dd, J=9,1, J-5, 1H).
(ii) Boc-(R)Cgl-Aze-OH
Boc-(R)Cgl-Aze-OMe hidrolizė vykdoma pagal procedūrą, aprašytą Boc-(R)Cha-Pic-OEt (žr. žemiau). Produktas kristali-zuojamas iš EtOH/acetono/vandens (1/1/3,95), išeiga 80%.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,85-1,3 (m, 5H), 1,40 (s, 9H),
1,5-1,9 (m, 6H), 1,95-2,2 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,09 (m, 1H), 4,35 (m, 1H),
4,95 (m, 1H), 5,16 (pld, 1H).
Boc-(R)Cgl-Pic-OH (i) Boc-(R)Cgl-Pic-OMe
1,0 ml pivaloilo chlorido (8,1 mmol) pridedama į Boc-(R)Cgl-OH (2,086 g, 8,1 mmol), trietilamino (1,13 ml, 8,1 mmol), ištirpinto toluene (25 ml) ir DMF (5 ml), tirpalą. Po to, ledo vonios temperatūroje pridedamas HPic-OMe x HCI (1,46 g, 8,1 mmol) ir trietilamino (1,13 ml, 8,1 mmol), ištirpinto DMF (5 ml), mišinys. Reakcijos mišinys paliekamas lėtai sušilti iki kambario temperatūros ir po 24 vai. jis praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas toluenu. Praplovus 0,3 M KHSO^, 10%-ų Na2COg ir sūrymu bei išgarinus vakuume tirpiklį, gaunama 2,52 g (81%) bespalvio aliejaus, kuris naudojamas daugiau jo nevalant.
^H-BMR (500 MHz, CDCIg, 2 rotamerai santykiu 5:1) δ 0,8-1,8 (m, 25H), 2,25 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras),
3,3 (t, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,85 (d, 1H), 4,3 (t, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,25 (d, 1H), 5,30 (d, 1H).
(ii) Boc-(R)Cgl-Pic-OH
Gaunama pagal Boc-(R)Cha-Pic-OEt hidrolizės procedūrą (žr. žemiau), naudojant produktą, minėtą aukščiau skirsnyje (i). Produktas kristalizuojamas iš diizopropilo eterio ir heksano.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg, 2 rotamerai santykiu 5:1) δ 0,8-1,8 (m, 25H), 2,3 (d, 1H), 2,8 (t, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 3,3 (t, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,4 (t, 1H, minor), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,1 (s, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 5,3 (d, 1H), 5,40 (d, 1H).
Boc-(R)Cgl-Pro-OH
3,59 g (31,24 mmol) L-prolino sumaišoma su 20 ml vandens ir
1,18 g (29,7 mmol) natrio hidroksido. J mišinį pridedama 2,8 g (7,8 mmol)
Boc-(R)Cgl-OSu, ištirpinto 10 ml DMF. Kad pagerėtų tirpumas, papildomai pridedama 30 ml DMF ir reakcijos mišinys maišomas 3 dienas. Išgarinus tirpiklį, pridedama vandens. Vandens fazė praplaunama etilo acetatu, rūgštinama 0,3 M KHSO4 tirpalu ir ekstrahuojama tris kartus etilo acetatu.
Organinė fazė vieną kartą praplaunama vandeniu ir vieną kartą sūrymu, išdžiovinama (Na2SO4), filtruojama ir garinama. Taip gaunama 2,3 g (83%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,89-2,17 (m, 23H), 2,37 (m, 1H), 3,55 (q, 1H), 3,90 (pis, 1H), 4,28 (t, 1H), 4,52 (pis, 1H), 5,22 (pis, 1 H(NH)).
Boc-(R)Cha-Aze-OH
Gaunama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-Pic-OH atveju, pradedant gavimą nuo Boc-(R)Cha-OH ir H-Aze-OEt x HCI (žr. žemiau).
Boc-(R)Cha-Pro-OH
H-(S)Pro-OH (680 mmol) ištirpinama 0,87 M natrio hidroksido (750 ml). Boc-(R)Cha-OSu (170 mmol), ištirpinto DMF (375 ml), sulašinama per 20 min. Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 20 vai. Mišinys rūgštinamas (2M KHSO4) ir ekstrahuojamas tris kartus etilo acetatu. Organiniai sluoksniai sujungiami ir praplaunami tris kartus vandeniu ir vieną kartą sūrymu. Išdžiovinus natrio sulfatu ir išgarinus tirpiklį, ištirpinus sirupo pavidalo aliejų dietilo eteryje, išgarinus tirpiklį ir galiausiai išdžiovinus produktą vakuume, gaunama beveik kiekybinė baltų Boc-(R)Cha-Pro-OH miltelių išeiga.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg, dviejų rotamerų mišinys 9:1) δ 0,81,05 (m, 2H), 1,05-1,55 (m, 15H; iš ten 1,5 (pis, 9H)), 1,55-1,8 (m, 5H), 1,82,15 (m, 3H), 2,47 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,89 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 5,06 (m, 1H);
Mažesnę dalį sudarančio rotamero išskiriami signalai: δ 2,27 (m), 3,58 (m), 4,33 (m), 5,0 (m).
Boc-(Me) (R)Cha-Pro-OSu (i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH
Gaunama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-Pro-OH, pradedant gavimą nuo Boc-(Me)(R)Cha-OSu ir H-Pro-OH.
(ii) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu
Gaunama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-OSu, pradedant gavimą nuo Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH.
Boc-(R)Cha-Pic-OH (ia) Boc-(R)Cha-Pic-OEt
6,3 g (0,023 mol) Boc-(R)Cha-OH ištirpinama 150 ml CHgCIg. Tirpalas atšaldomas ledo vonioje ir pridedama 6,3 g (0,047 mol) NLT 3768 B hidroksibenzotriazolo ir 11,2 g (0,0265 mol) CME-CDI. Ledo vonia pašalinama po 15 min. ir reakcijos mišinys maišomas 4 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos 150 ml DMF ir atšaldomos ledo vonioje. Pridedama 4,1 g (0.021 mol) H-Pic-OEt x HCI, ir, pridedant N-metilmorfolino, nustatomas pH apie 9. Ledo vonia pašalinama po 15 min. ir reakcijos mišinys maišomas 3 dienas. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos etilo acetate ir praplaunamos praskiestu KHSO^ (vand.), NaHCOg (vand.) ir vandeniu. Išdžiovinus organinį sluoksnį (Na2SO4) ir jį nugarinus, gaunama 7,7 g (89%) Boc(R)Cha-Pic-OEt, kuris naudojamas toliau jo nevalant.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg, 2 rotamerai santykiu 3:1) d 0,7-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 29H; iš ten 1,28 (t, 3H)), 1,45 (pis, 9H), 2,01 (pld, 1H, gausesnis rotameras), 2,31 (pld, 1H), 2,88 (plt, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 3,30 (plt, 1H, gausesnis rotameras), 3,80 (pld, 1H, gausesnis rotameras), 4,15-4,3 (m, 2H), 4,5-4,7 (m, 2H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 4,77 (plq, 1 H, gausesnis rotameras), 4,90 (pld, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 5,28 (pld, 1H, gausesnis rotameras),
5,33 (pld, 1H, gausesnis rotameras).
(ib) Boc-(R)Cha-Pic-OMe
400 μΙ (3,23 mmol) pivaloilo chlorido pridedama į maišomą 875 mg (3,22 mmol) Boc-(R)Cha-OH ir 450 ul (3,23 mmol) trietilamino, ištirpintų 10 ml tolueno ir 2 ml DMF, mišinį. Po 45 min. 596 mg (3,32 mmol) metil-(S)-pipekolato hidrochlorido ir 463 ul (3,32 mmol) trietilamino, ištirpintų 5 ml DMF, mišinys pridedamas j susidariusį skystąjį molį. Po 2 vai. pridedama 100 μΙ (0,72 mmol) trietilamino ir maišoma dar 18 vai. Į reakcijos mišinį pridėjus vandens ir tolueno, organinė fazė praplaunama 0,3 M KHSO4, 10% Na2CO3 ir sūrymu. Išdžiovinus (MgSO4) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunama 1,16 g išradimo junginio.
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-OH
5,6 g (0,014 mol) Boc-(R)Cha-Pic-OEt sumaišoma su 100 ml THF, 100 ml vandens ir 7 g LiOH. Mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. TMF išgarinamas ir vandeninis tirpalas rūgštinamas
KHSO^ vandeniniu tirpalu ir ekstrahuojamas tris kartus etilo acetatu.
Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir garinamas. Taip gaunama 4,9 g (94%) Boc-(R)Cha-Pic-OH, kuris naudojamas sekančiuose etapuose jo daugiau nevalant. Junginys gali būti kristalizuotas iš diizopropilo eterio/heksano.
Metilo esteris, susidaręs aukščiau minėtoje (ib) procedūroje, gali būti hidrolizuotas, atliekant tokią pačią, kaip ir etilo esterio atveju, procedūrą, aprašytą skirsnyje (ii).
1H-BMR (500 MHz, CDCIg, 2 rotamerai santykiu 3,5:1) δ 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-2,1 (m, 27H; iš ten 1,43 (s, 9H, gausesnis rotameras), 1,46 (s, 9H, mažesnę dalį sudarantis rotameras)), 2,33 (pld, 1H), 2,80 (plt, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 3,33 (plt, 1H, gausesnis rotameras),
3,85 (pld, 1H, gausesnis rotameras), 4,57 (pld, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 4,68 (m, 1H, mažesnę dalj sudarantis rotameras),
4,77 (plq, 1H, gausesnis rotameras), 5,03 (pis, 1H, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 5,33 (pld, 1H, gausesnis rotameras), 5,56 (m, 1H, gausesnis rotameras).
Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH (i) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OMe
0,9 ml (7,3 mmol) pivaloilo chlorido pridedama j 2,0 g (7,3 mmol) Boc-(R)Cha-OH ir 0,81 ml (7,3 mmol) 4-N-metilmorfolino, ištirpinto 20 ml acetonitrilo, tirpalą. Po 1 vai. ir 30 min. maišymo pridedama 1,3 g (7,3 mmol) H-(R,S)betaPic-OMe x HCI ir 1,62 ml (14,6 mmol) 4-Nmetilmorfolino ir reakcijos mišinys maišomas 24 vai. Išgarinus tirpiklį, nuosėdos ištirpinamos toluene ir nedideliame kiekyje dietilo eterio. Praplovus 0,3 M KHSO4 ir KHCOg tirpalu, ir išdžiovinus (Na2SO4), tirpiklis pašalinamas vakuume. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant heptano/etilo acetato (7/3) eliuentą, gaunama 2,4 g (83%) reikiamo produkto.
(ii) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH
Kambario temperatūroje 2,35 g (5,9 mmol) Boc-(R)Cha(R.S)betaPic-OMe ištirpinama 35 ml THF ir pridedama 2,1 g LiOH, ištirpinto 35 ml vandens. Po 5 vai maišymo THF pašalinamas vakuume. Vandeninė fazė rūgštinama 2M KHSO^ ir ekstrahuojama etilo acetatu, išdžiovinama Na2SO4 ir garinama. Taip gaunama 2,0 g (89%) produkto.
Boc-(R)Cha-Val-OH (i) Boc-(R)Cha-Val-OMe
3,1 ml (25 mmol) pivaloilo chlorido pridedama aplinkos temperatūroje į maišomą 6,75 g (25 mmol) Boc-(R)Cha-OH ir 3,5 ml (25 mmol) trietilamino, ištirpintų 50 ml DMF, mišinį. Po 3 vai. pridedama 4,16 g (25 mmol) valino metilo esterio hidrochlorido, ištirpinto 50 ml DMF, ir 3,5 ml trietilamino. Po maišymo per naktį pridedami keli kristalai DMAP ir reakcijos mišinys kaitinamas 5 min. temperatūroje iki 50°C. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir į nuosėdas pridedama eterio ir tolueno. Praplovus 0,3 M KHSO4 ir 10% Na2COg, po to išdžiovinus (MgSO4) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios apdorojamos chromatografiškai, naudojant tolueno/etilo acetato eliuentą. Išradimo junginio išeiga 6,99 g (73%).
(ii) Boc-(R)Cha-Val-OH
8,73 g (23 mmol) Boc-(R)Cha-Val-OMe ir 5,6 g (230 mmol) ličio hidroksido, ištirpintų 75 ml THF ir 75 ml vandens, mišinys maišomas 4 vai.
THF pašalinamas vakuume ir likęs tirpalas praskiedžiamas vandeniu ir išekstrahuojamas eteriu. Parūgštinus 2M KHSO4 ir ekstrahavus etilo acetatu, po to išdžiovinus (MgSO4) ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama
8,15 g (96%) išradimo junginio.
Boc-(R) Hoc-Aze-OH (i) Boc-(R)Hoc-Aze-OEt
Kambario temperatūroje 1,0 g (3,5 mmol) Boc-(R)Hoc-OH ir 0,95 g (7,0 mmol) HOBt ištirpinama 15-oje ml Ch^Clp- Tirpalas atšaldomas ledo vonioje ir pridedama 0,77 g (4,0 mmol) EDC. Ledo vonia pašalinama ir reakcijos mišinys maišomas 3 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos 20 ml DMF. Pridedama 0,58 g (3,5 mmol) H-(R)Aze-OH ir N-metilmorfolino pridėjimu nustatomas tirpalo pH apie 9. Reakcijos mišinys maišomas vieną dieną. Reakcijos mišinys paskirstomas tarp vandens ir tolueno. Organinė fazė atskiriama ir praplaunama 0,3 M KHSO4, praskiedžiama KHCOg, sūrymu, išdžiovinama Na2SO4 ir garinama. Apdorojus greitosios chromatografijos būdu (1% EtOH, ištirpinto CH2CI2, ir heptano/EtOAc eliuentas), gaunama 0,35 g (25%) reikiamo produkto.
(ii) Boc-(R)Hoc-Aze-OH
Kambario temperatūroje 0,65 g (1,6 mmol) Boc-(R)Hoc-AzeOEt ištirpinama 10 ml THF ir pridedama 0,59 g LiOH, ištirpinto 10 ml vandens. Po 24 vai. maišymo pridedama 2M KHSO4 ir THF pašalinamas vakuume. Vandeninę fazę parūgštinus didesniu kiekiu 2M KHSO4 ir išekstrahavus etilo acetatu, išdžiovinus Na2SO4 ir nugarinus, gaunama 0,5 g (85%) išradimo junginio.
Boc-(R)Hoc-Pro-OH
Gaunama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-Pro-OH atveju, pradedant nuo Boc-(R)Hoc-OSu.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,80-0,94 (m, 2H), 1,05-1,36 (m,
7H), 1,36-1,48 (pis, 9H), 1,48-1,78 (m, 7H), 1,98-2,14 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,52 (pld, 1H), 5,26 (pld, 1H), mažesnę dalį sudarančio rotamero signalai registruojami: δ 1,92, 2,25, 3,58, 4,20 ir 4,93.
Boc-(R)Hoc-Pic-OH (i) Boc-(R)Hoc-Pic-OMe
Gaunama tokiu pačiu būdu, kaip ir Boc-(R)Cha-Pic-OEt (žr. aukščiau), pradedant gavimą nuo Boc-(R)Hoc-OH ir H-Pic-OMe x Hcl.
(ii) Boc-(R)Hoc-Pic-OH
Gaunama tokiu pačiu būdu, kaip ir Boc-(R)Cha-Pic-OH (žr. aukščiau), pradedant gavimą nuo Boc-(R)Hoc-Pic-OMe.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,82-0,97 (m, 2H), 1,10-1,36 (m,
7H), 1,36-1,50 (pis, 9H), 1,50-1,82 (m, 11 H), 2,35 (pld, 1H) 3,28 (plt, 1H),
3,85 (pld, 1H) 4,63 (m, 1H), 5,33 (pis, 1H), 5,44 (pld, 1H), mažesnę dalį sudarančio rotamero signalai registruojami: δ 1,88, 2,80, 4,25, 4,55 ir 4,97.
Boc-(R)Pro-Phe-OH (i) Boc-(R)Pro-Phe-OMe
1,12 g (9,29 mmol) pivaloilchlorido pridedama į 2,0 g (9,29 mmol) Boc-(R)Pro-OH ir 0,94 g (9,29 mmol) trietilamino, ištirpinto 70 ml tolueno/DMF (5/2), tirpalą ir reakcijos mišinys maišomas 30 min. kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys atšaldomas iki 0°C ir į jį pridedamas 2,0 g (9,29 mmol) H-Phe-OMe ir 0,94 g trietilamino, ištirpinto 40 ml DMF, mišinys ir susidaręs mišinys maišomas per naktj kambario temperatūroje.
Reakcijos mišinys praskiedžiamas toluenu ir organinė fazė praplaunama 3x50 ml 0,3 M KHSO4, 1x50 ml vandens ir išdžiovinama (Na2SO4).
Išgarinus tirpiklį, gaunamas išradimo junginys, kuris toliau jo nevalant yra naudojamas sekančiame etape.
(ii) Boc-(R)Pro-Phe-OH
4,0 g (10,6 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-OMe ir 8,93 g (21,3 mmol) LiOH x H2O, ištirpinto 140 ml vandens/THF (1/1), mišinys intensyviai maišomas per naktį kambario temperatūroje. THF išgarinamas ir vandens fazė parūgštinama 1M KHSO4 ir ekstrahuojama 3x75 ml EtOAc. Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas vandeniu ir išdžiovinamas (Na2SO4).
Nufiltravus ir išgarinus tirpiklį, gaunamos nuosėdos, kurias išgryninus kristalizuojant diizopropilo eteryje, gaunama 2,329 g (60%) baltų kietų kristalų pavidalo išradimo junginio.
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH (i) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn
Kambario temperatūroje 0,84 ml NMM ir 2,92 g CME-CDI pridedama j 1,61 g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH, 1,65 g H-Pro-OBn x HCI ir 0,75 g HOBt, ištirpino 11 ml DMF, tirpalą ir reakcijos mišinys maišomas tris dienas. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 300 ml EtOAc. Organinė fazė praplaunama 2x100 ml H2O, 2x100 ml 1M KHSO4, 3x100 ml 1M NaOH, 3x100 ml H2O ir išdžiovinama (MgSO4). Išgarinus tirpiklį, gaunama 2,53 g aliejaus, kurį išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH (97/3) eliuentą, gaunama 2,11 g (88%) išradimo junginio.
(ii) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH
0,94 g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn ištirpinama 70 ml EtOH ir hidrinama 3,5 vai., esant 0,42 g 5%-ų Pd/C katalizatoriui. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį, gaunamas baltų kristalų pavidalo išradimo junginys.
Boc-(R)Tic-Pro-OH
Gaunama pagal procedūrą, aprašytą P.D.Gesellchen ir R.T.Shuman Europos patente EP Nr.0.479.489-A2.
/ /
BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br
2-bromacto rūgšties (5 mmol), ištirpintos 10 ml CH2CI2 ir dicikloheksilkarbodiimido (5 mmol) pridedama į p-TsOH x H-Gly-OBn (5 mmol) ir trietilamino (5 mmol), ištirpintų 10 ml CH2CI2, tirpalą. Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį ir nufiltruojamas. Organinė fazė plaunama du kartus 0,2 M KHSO4, 0,2 M NaOH, sūrymu ir išdžiovinama. Po garinimo ir greitosios chromatografijos būdu, naudojant (CH2CI2/MeOH, 95/5) gaunamas reikiamas junginys.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 3,89 (s, 2H), 4,05-4,11 (d, 2H),
5,19 (s, 2H), 7,06 (pis, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H).
Boc-(R)Cgl-lle-OH
Gaunama tokiu pačiu būdu, kaip ir Boc-(R)Cgl-Pro-OH naudojant H-lle-OH vietoj H-Pro-OH, esant išeigai 91%.
Boc-(R)Phe-Phe-OH (i) Boc-(R)Phe-Phe-OMe
Boc-(R)Phe-OH (18,8 mmol; Bachem Feinchemicalien AG gamybos), Phe-OMe (20,7 mmol) ir 4-dimetilaminopiridinas (37,7 mmol) ištirpinami 30 ml acetonitrilo. Tirpalas atšaldomas iki ledo vandens temperatūros ir pridedama 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimido hidrochlorido (24,5 mmol). Pašalinus šaldymo vonią, reakcijos mišinys maišomas per naktį. Tuomet tirpiklis pašalinamas, esant sumažintam slėgiui, ir nuosėdos ištirpinamos 50 ml etilo acetato. Po organinės fazės ekstrakcijos vienodais kiekiais (po 50 mL) 0,5 M kalio hidrosulfato, 1 M natrio bikarbonato ir galiausiai vandens, tirpiklio išgarinimo gaunama 7,5 g Boc-(R)Phe-Phe-OMe (94%), kuris toliau nevalant naudojamas sekančiame etape.
(ii) Boc-(R)Phe-Phe-OH
Boc-(R)Phe-Phe-OMe (16,4 mmol) ištirpinama 40 ml tetrahidrofurano ir tuojau pridedama ličio hidroksido (32,8 mmol), ištirpinto 20 ml vandens. Reakcijos mišinys maišomas 3,5 vai., po to tirpiklis pašalinamas esant mažesniam slėgiui. Nuosėdos ištirpinamos 50 ml etilo acetato ir ekstrahuojamos 50-ia ml 0,5 M kalio sulfato, vėliau 50 ml vandens. Pašalinus tirpiklį, esant mažesniam slėgiui, gaunama 8,0 g amorfinio kietos medžiagos pavidalo Boc-(R)Phe-Phe-OH.
1H-BMR (200 MHz, d-CHCIg); δ 7,4-6,7 (m; 10H), 5,7-4,2 (m, 6H), 1,34 (s, 9H).
HO-CH2-COOBn
Gaunama pagal procedūrą, aprašytą Lattes A. ir kt. leidinyje Bull. Soc. Chim. France., No11, pp. 4018-4023, 1971.
Benzil-2-(orto-nitrobenzensulfoniloksi)acetatas (2-NO2)Ph-SO2OCH2-COOBn
1,66 g (10 mmol) benzilglikolato ištirpinama 25 ml CH2CI2 ir 25 ml dietilo eterio. Mišinį atšaldžius iki 0°C, pridedama 2,8 ml (20 mmol) trietilamino. Palaikant 0°C temperatūrą, mažais kiekiais per 15 min. pridedama 2,44 g (11 mmol) ortonitrobenzensulfonilchlorido. Skystojo molio masė maišoma 0°C temperatūroje 50 min., tuomet pridedama 20 ml vandens ir 30 ml CH2CI2· Fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama 20 ml 1 M HCI ir 20 ml H2O, išdžiovinama (Na2SO4), filtruojama ir garinama vakuume, ir gaunama 3,34 g nuosėdų, kurias paveikus greitosios chromatografijos būdu, naudojant heptano/EtOAc (2/1) eliuentą, gaunama 1,18 g (34%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 4,92 (s, 2H), 5,17 (s, 2H), 7,83 (m, 5H), 7,76 (m, 3H), 8,16 (dd, 1H).
Benzil-2-(para-nitrobenzensulfoniloksi)acetatas (4-NO2)Ph-SO2OCH2-COOBn
Gaunama taip, kaip aprašyta aukščiau benzil-2-(ortonitrobenzensulfoniloksi)acetato atveju. Išgarinus tirpiklį, gaunamas pakankamai grynas kristalinio pavidalo galutinis junginys (išeiga 64%), todėl jį galima naudoti daugiau nevalant.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 4,79 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H), 8,10 (d, 2H), 8,30 (d, 2H).
Tfo-CHgCOOMe
10,09 ml (60 mmol) trifluormetansulforūgšties anhidrido, ištirpinto CH2CI2, sulašinama per 25 min. 0°C temperatūroje j 4,05 ml (50 mmol) metilglikoliato ir 4,04 ml (50 mmol) piridino, ištirpinto CH2CI2, (iš viso 62,5 ml), mišinį ir po to maišoma 0°C temperatūroje 1 vai. Praplovus 0,3 M KHSO4 ir prisotinus Na2CO3, išdžiovinus (Na2SO4) ir nufiltravus, išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 9,94 g (90%) išradimo junginio.
Tfo-CH2COOEt
Gaunama taip pat, kaip ir Tfo-CH2COOMe, pradedant gavimą nuo etilglikoliato.
Tfo-CH2COOnBu
Gaunama taip pat, kaip ir Tfo-CH2COOMe, pradedant gavimą nuo butilglikoliato.
Tfo-CH2COOBn
Gaunama taip pat, kaip ir Tfo-CH2COOMe, pradedant gavimą nuo HO-CH2COOBn.
Tfo-CH2COOnHex (i) HO-CH2COOnHex
J 215 mg (2,82 mmol) glikolio rūgšties, ištirpintos 12,8 ml CHgCN, pridedama 719 mg (3,39 mmol) 1-heksilo jodido ir 429 mg (2,82 mmol) DBU. Po maišymo per naktį ir virinimo su grįžtamuoju šaldytuvu 4 vai. tirpiklis išgarinamas, pridedama etilacetato ir 1 M KHSO4 ir atskiriamos fazės. Praplovus organinį sluoksnį sūrymu, išdžiovinus (MgSO4) , nufiltravus ir išgarinus vakuume, gaunama'333 mg (74%) produkto.
(ii) Tfo-CH2COOnHex
Gaunama taip pat, kaip ir Tfo-CH2COOMe, pradedant gavimą nuo HO-CH2COOnHex.
H-Mig(Z) (3-aminoetil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (i) 3-aminometil-1-benzhidrilazetidinas gaunamas, remiantis skelbiamu literatūroje aprašymu, žr. A.G. Anderson, Jr., ir R. Lok, leidinyje J. Org. Chem., v.37, p.3953, 1972.
(ii) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1-benzhidril-azetidinas
Į 3,50 g (13,9 mmol) 3-aminometil-1-benzhidrilazetidino, ištirpinto 45 ml THF, tirpalą pridedama 0,56 g (13,9 mmol) NaOH, ištirpino 45 ml H2O. Atšaldžius reakcijos mišinį iki 0°C, pridedama 3,03 (13,9 mmol) ditret-butildikarbonato. Po kelių minučių šaldymo vonia pašalinama ir mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. THF išgarinamas ir nuosėdos ekstrahuojamos 3x45 ml dietilo eteriu. Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas sūrymu, išdžiovinamas Na2SO4 ir filtruojamos. Išgarinus tirpiklį, gaunama 4,6 g (94%) išradimo junginio.
(iii) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)azetidinas
3,4 g (9,6 mmol) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1benzhidrilazetidino ištirpinama 170 ml MeOH ir hidrinama per naktį, esant 0,30 g Pd(OH)2 ir 5 MPa. Po to, katalizatorius nufiltruojamas ir tirpiklis išgarinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant MeOH/CH2CI2, 1/9, po to MeOH (prisotintas ΝΗθ dujų)/CH2CI2, 1/9 eliuentus. Taip gaunama 1,2 g (67%) išradimo junginio.
(iv) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (Boc-Mig(Z))
0,9 g (4,8 mmol) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)azetidino ir 1,3 g (6,3 mmol) N-benziloksikarbonil-O-metilizo-karbamido sumaišoma 6,5 ml tolueno ir šildoma 72 vai. temperatūroje iki 70°C, tuomet paliekama kambario temperatūroje dar 72 vai. Nugarinus ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant EtOAc ir po to MeOH (prisotintas NHg dujų)/CH2CI2, 1/9 eliuentus, gaunama 0,67 g (38%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
(v) 3-aminometil-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (H-Mig(Z))
0,67 g (1,85 mmol) Boc-Mig(Z) ištirpinama 10 ml EtOAc, prisotinto HCI (duj.), ir maišoma 10 min. kambario temperatūroje. Tuomet sulašinama 10 ml prisotinto KOH (vand.) tirpalo. Atskyrus sluoksnius, vandeninė fazė ekstrahuojama 3x8 ml EtOAc. Susidarę organiniai sluoksniai praplaunami sūrymu, išdžiovinami Na2SO4 ir garinami. Taip gaunama 0,43 g (89%) išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 2,55-2,65 (m, 1H), 2,84 (d, 2H), 3,66 (dd, 2H), 4,03 (dd, 2H) 5,07 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H). MS m/z 263 (M+ +1)
3-aminoetil-1-(N-benziloksikarboniIamidino)azetidinas (H-Dig(Z)) (i) 3-karboksilinės rūgšties-1-benzhidrilazetidinas gaunamas, remiantis skelbiamu literatūroje aprašymu, žr. A.G. Anderson, Jr., ir R. Lok, leidinyje J. Org. Chem., v.37, p.3953, 1972.
(ii) 3-hidroksimetil-1 -benzhidrilazetidinas
Kambario temperatūroje į 4,9 g (130,2 mmol) LiAIH^, ištirpinto ml THF, suspensiją lėtai pridedama 8,7 g (32,5 mmol) 3-karboksilinės rūgšties-1-benzhidrilazetidino, ištirpinto 80 ml sauso THF. Reakcijos mišinys virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 3,5 vai. Hidridinio reagento perteklius hidroli zuojamas atsargiai pridedant, tuo pačiu metu šaldant, NH4CI (vand.). Gautas želatinos pavidalo mišinys nufiltruojamas ir filtratas praplaunamas kelis kartus THF. Išgarinus tirpiklį, gaunama 7,1 g (86%) blyškiai gelsvos spalvos kristalinio išradimo junginio.
(iii) 3-metansulfonatmetil-1 -benzhidrilazetidinas
4,50 g (39,2 mmol) metansulfonilchlorido pridedama j 6,62 g (26,1 mmol) 3-hidroksimetil-1-benzhidrilazetidino, ištirpinto 50 ml sauso piridino, tirpalą 0°C temperatūroje. Reakcijos mišinys maišomas 1 vai. ir, po to, patalpinamas nakčiai j šaldytuvą. Reakcijos mišinys supilamas į ledo ir H2O mišinį. Surinkus nuosėdas, praplovus jas H2O ir išdžiovinus vakuume, gaunama 7,75 g (89,5%) išradimo junginio.
(iv) 3-cianometil-1 -benzhidrilazetinidas
Į 7,75 g (23,4 mmol) 3-metansulfonatmetil-1-benzhidrilazetidino, ištirpinto 50 ml DMF, tirpalą pridedama 3,44 g (70,0 mmol) NaCN, ištirpinto 10 ml H2O, tirpalas. Mišinys šildomas 20 vai. 65°C temperatūroje, atšaldomas ir supilamas į ledo ir vandens mišinį. Surinkus nuosėdas, praplovus H2O ir išdžiovinus vakuume, gaunama 5,7 g (93%) išradimo junginio.
(v) 3-aminoetil-1 -benzhidrilazetidinas
Kambario temperatūroje 5,7 g (21,7 mmol) 3-cianometil-1benzhidrilazetidino lėtai pridedama į 2,9 g (76,0 mmol) LiAIH^, ištirpinto ml sauso THF, suspensiją. Reakcijos mišinys virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu 4 vai. Hidridinio reagento perteklius hidrolizuojamas atsargiai pridedant, tuo pačiu metu šaldant, NH^CI (vand.). Gautas želatinos pavidalo mišinys nufiltruojamas ir filtratas praplaunamas kelis kartus THF
Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos dietilo eteryje, praplaunamo; sūrymu ir išdžiovinamos NapSO^. Išgarinus tirpiklį, gaunama 5,0 g (87% išradimo junginio.
(vi) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)-1-benzhidril-azetidinas
Išradimo junginys gaunamas iš 3-aminoetil-1-benzhidril azetidino pagal procedūrą, tinkamą gauti 3-(N-tret-butiloksi karbonilaminoetil)-1-benzhidrilazetidinui. Išeiga 6,5 g (95%).
(vii) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)azetidinas
Išradimo junginys gaunamas iš 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)-1-benzhidrilazetidino pagal procedūrą, tinkamą gauti 3(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)azetidinui. Išeiga 1,2 g (70%).
(viii) 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas (Boc-Dig(Z))
Išradimo junginys gaunamas iš 3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)azetidino pagal procedūrą, tinkamą gauti 3-(N-tretbutiloksikarbonilaminoetil)-1-(N-benziloksikarbonil amidino)azetidinui. Išeiga 0,090 g (34%).
(ix) 3-aminoetil-1-(N-benziloksi-karbonilamidino)azetidinas (H-Dig(Z))
0,589 g (1,56 mmol) Boc-Dig(Z) ištirpinama 10 ml EtOAc, prisotintu HCI (duj.), ir maišoma 10 min. kambario temperatūroje. Sulašinama 10 ml prisotinto KOH (vand.) tirpalo. Atskyrus sluoksnius, vandeninė fazė ekstrahuojama 3x8 ml EtOAc. Susidarę organiniai sluoksniai praplaunami sūrymu, išdžiovinami Na2SO4 ir garinami. Taip gaunama 0,415 g (96%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,60 (dt, 2H), 2,52-2,54 (m, 3H),
3,53 (pis, 2H), 4,0 (plt, 2H), 5,00 (s, 2H), 7,17-7,31 (m, 5H).
gi
Gavimo pavyzdžiai
Pavyzdys 1
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Į maišomą 3,40 g (10 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 5,13 g DMAP (42 mmol), ištirpintą 120 ml CHgCN, mišinį pridedama 3,18 g H-Pab(Z) x HCI (žr. Pradinių medžiagų gavimas). Po 2 vai. maišymo kambario temperatūroje mišinys ataušinamas iki -8°C ir pridedama 2,01 g (10,5 mmol) EDC. Mišinys paliekamas sušilti iki kambario temperatūros ir vėl maišoma 47 vai.
Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 200 ml EtOAc. Organinė fazė praplaunama 1x50 ml vandens, 1x50 ml + 2x25 ml 0,5 M KHSO4, 2x25 ml NaHCOg (prisotintu), 1x50 ml vandens ir išdžiovinama. Išgarinus tirpiklį, gaunama 5,21 g (86%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,9 (m, 20H; iš ten 1,30 (s,
9H), 2,35-2,6 (m, 2H), 3,74 (plt, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,25-4,4 (m, 2H), 4,454,6 (m, 1H, rotamerai), 4,75-5,0 (m, 1H, rotamerai), 5,08 (pld, 2H), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,41 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,21 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Į šaltą (ledo vonios temperatūros) 18,8 g HCI (duj.), ištirpinto 195 ml EtOAc, tirpalą pridedama 4,69 g (7,743 mmol) Boc-(R)Cgl-AzePab(Z) kartu su 40 ml EtOAc. Reakcijos mišinys paliekamas sušilti iki kambario temperatūros ir maišomas 30 min. Į skaidrų tirpalą pridėjus 140 ml Et2O, susidaro nuosėdos. Reakcijai leidžiama vykti kambario temperatūroje dar 1 vai. 40 min. Nuosėdos nufiltruojamos, greitai praplaunamos Et2O ir išdžiovinamos vakuume. Nuosėdos ištirpinamos 50 ml vandens ir šarminamos, naudojant 15 ml 2 M NaOH. Šarminė vandens fazė ekstrahuojama 1x100 ml + 1x50 ml CH2CI2. Susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas 1x20 ml vandens, 1x20 ml sūrymo ir išdžiovinamos (MgSO4). Išgarinus tirpiklį, gaunama 3,44 g (88%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,0 (m, 11 H), 2,51 (m, 1H),
2,67 (m, 1H), 3,07 (d, 1H), 4,11 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,43 (dd, 1H), 4,53 (dd, 1H), 4,91 (m, 1H), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 7H), 7,45 (d, 2H), 8,51 (d, 2H).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
1,13 g (2,2 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,9 g (2,6 mmol) benzil-2-(orto-nitrobenzensulfoniloksi)acetato ((2-NO2)Ph-SO2-OCH2COOBn) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,99 g (5,6 mmol) Κ2ΟΟθ ir 113 ml CH3CN sumaišoma ir kaitinama 60°C aliejaus vonioje 3 vai.
Tirpiklis išgarinamas vakuume. Pridedama EtOAc ir mišinys praplaunamas vandeniu, organinė fazė ekstrahuojama 1 M KHSO4 ir ši vandens fazė praplaunama EtOAc. Rūgšti vandens fazė šarminama 1 N
NaOH iki pH daugiau 8 ir ekstrahuojama EtOAc. Organinę fazę praplovus vandeniu, išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir nugarinus vakuume, gaunama 1,17 g nuosėdų, kurias du kartus apdorojus greitosios chromatografijos būdu, naudojant iš pradžių eliuentą CH2CI2/MeOH(NH3prisotintas) santykiu 95/5, o po to eliuentą dietileterį/MeOH(NH3prisotintas) santykiu 9/1, gaunama 0,525 g (36%) išradimo junginio.
Alkilinimą taip pat galima atlikti, naudojant benzil-2-(paranitrobenzensulfoniloksi)acetatą ((4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn) (žr.
Pradinių medžiagų gavimas), pagal aukščiau aprašytą procedūrą ir gauti išradimo junginį, esant 52% išeigai.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,85-2,15 (m, 11H), 2,48 (m, 1H),
2,63 (m, 1H), 2,88 (d, 1H), 3,24 (d, 1H), 3,27 (d, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,91 (m, 1H), 5,07 (s, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 10H), 7,45 (d, 2H), 7,79 (d, 2H), 8,42 (m, 1H).
(iva) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI mg (0,031 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) ištirpinama 5 ml metanolio. Pridedama keli lašai chloroformo ir 5% Pd/C, ir mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje 1 vai. Nufiltravus ir išgarinus, produktas yra liofilizuojamas ir gaunama 11 mg (72%) išradimo junginio.
1H-BMR(500 MHz, DgO): δ 1,0-2,0 (m, 11H), 2,10 (m, 1 H), 2,44 (m, 1H), 2,82 (m, 1H), 3,90 (s, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,4-4,55 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 5,08 (m, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,89 (d, 2H).
13C-BMR (75,5 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,3; 167,9; 169,9 ir 172,4.
(ivb) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) ištirpinama EtOH (99%) ir hidrinama atmosferos slėgyje 5 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite filtrą ir išgarinus tirpiklį, gaunama 97%-ų išeigos išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CD^OD, dviejų ratamerų mišinys): gausesnis rotameras: δ 1,00-1,12 (m, 1H), 1,13-1,34 (m, 4H), 1,55-1,70 (m, 3H), 1,731,85 (m, 2H), 1,94-2,02 (pld, 1H), 2,32-2,42 (m, 1H), 2,54-2,64 (m, 1H),
2,95-3,10 (AB-sistema plius d, 3H), 4,18-4,25 (plq, 1H), 4,28-4,32 (plq,
1H), 4,43-4,60 (AB-sistema, 2H), 4,80-4,85 (dd, 1H), 7,48-7,54 (d, 2H),
7,66-7,71 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai: δ 0,95 (m), 1,43 (m), 2,24 (m), 2,84 (d), 3,96 (m), 4,03 (m), 7,57 (pld), 7,78 (pld).
13C-BMR (125 MHz, CD^OD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,0; 173,0; 176,3 ir 179,0.
Pavyzdys 2
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI (i) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Gaunama taip, kaip aprašyta Pavyzdžio 1 dalyje (ii), paveikiant gautą hidrochloridą baze, kad susidarytų laisva bazė.
(ii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,19 g (0,38 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) ir 70 mg (0,43 mmol) benzilakrilato ištirpinama 2 ml izopropanolio. Mišinys paliekamas 6 dienoms. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant eliuentą CH2CI2/THF santykiu 8/2, gaunama 0,12 g (48%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,9 (m, 10H), 1,95 (pld, 1H),
2,4-2,6 (m, 4H), 2,7-2,8 (m, 3H; iš ten 2,79 (d, 1 H)), 4,13 (m, 1H), 4,37 (dd, 1H), 4,60 (dd, 1H), 4,97 (dd, 1H), 5,09 (dd, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,25-7,4 (m, 10H), 7,47 (d, 2H), 7,83 (d, 2H), 8,61 (plt, 1H).
(iii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI
0,10 g (0,15 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) ištirpinama 10 ml etanolio ir hidrinama, esant 5% Pd/C, atmosferos slėgyje 1 vai. Tirpalas nufiltruojamas, išgarinamas ir nevalytas produktas gryninamas RPLC būdu, naudojant eliuentą CHgCN/0,1 M NH4OAc santykiu 1/4. Gautą produktą liofilizavus, paveikus koncentruotos HCI pertekliumi ir dar kartą liofilizavus, gaunama 31 mg dihidrochlorido druskos.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 0,8-2,1 (m, 11 H), 2,38 (m, 1H), 2,72,9 (m, 3H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,98 (d, 1H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,60 (s, 2H), 5,04 (dd, 1H), 7,59 (d, 2H), 7,83 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, D20): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 167,8; 172,3 ir 175,5.
Pavyzdys 3
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
2,3 g (6,49 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 2,38 g (19,47 mmol) DMAP ir 1,84 g (6,49 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) sumaišoma 30 ml acetonitrilo. Mišinys atšaldomas iki -15°C ir pridedama 1,31 g (6,81 mmol) EDC. Mišinio temperatūrai pasiekus kambario temperatūrą, mišinys maišomas per naktį. Po garinimo nuosėdos ištirpinamos etilo acetate ir 0,3 M KHSO^ tirpale. Rūgštinė vandens fazė ekstrahuojama tris kartus etilo acetatu. Organinė fazė praplaunama du kartus 0,3 M KHSO4 tirpalu, du kartus NaHCOg tirpalu, ir kartą sūrymu, išdžiovinama (Na2SO4), filtruojama ir garinama. Gautas produktas gryninamas silikagelio kolonėlėje greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Gaunama 1,77 g (44%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,9-1,49 (m, 14H), 1,5-2,1 (m,
9H), 2,37 (pis, 1H), 3,53 (q, 1H), 3,94 (pis, 1H), 4,02 (m, 1H), 4,43 (pis, 2H), 4,65 (d, 1H), 5,09 (pis, 1H), 5,20 (s, 2H), 7,18-7,4 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,62 (pis, 1H), 7,81 (m, 2H).
(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
1,45 g (2,34 mmol) Boc-(R)Cgi-Pro-Pab(Z) ištirpinama 75 ml HCI prisotinto etilo acetato. Mišinys palaikomas 10 min. kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklį, gaunama 1,3 g produkto dihidrochlorido druskos.
1H-BMR (300 MHz, DgO): δ 1,0-1,45 (m, 5H), 1,58-2,2 (m, 9H),
2,3-2,5 (m, 1H), 3,75-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, 2H), 4,5-4,66 (m, 3H), 5,49 (s, 2H), 7,45-7,7 (m, 7H), 7,87 (d, 2H).
Aminas gaunamas ištirpinus dihidrochloridą 0,1 M NaOH tirpale ir išekstrahavus vandens fazę tris kartus etilo acetatu. Praplovus organinę fazę vieną kartą sūrymu, išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir išgarinus, gaunama 1,19 g (97%) išradimo junginio.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
0,340 g (0,65 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) sumaišoma su 0,125 g (0,65 mmol) BnOOC-CH2-OTf (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,299 g (2,17 mmol) K2COg, ištirpinto 4 ml dichlormetano, ir viriname su grįžtamuoju šaldytuvu pusę valandos. Po to, reakcijos mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. Reakcijos mišinys praskiedžiamas CH2CI2 ir organinis sluoksnis praplaunamas vieną kartą vandeniu ir sūrymu, išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Gautas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (iš pradžių santykis 97/3, po to
95/5). Taip gaunama 299 mg mišinio (įvertinama plonasluoksnės chromatografijos (TLC) metodo pagalba), susidedančio iš dviejų produktų. Toliau mišinys gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento acetato/toluolo gradientą (9/1, 93/7, 95/5, 100/0). Gaunama 46 mg (9%) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z), kuris iš kolonėlės išsiplauna pirmas, ir 133 mg (31%) reikiamo produkto BnOOCCH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z), išsiplovusio vėliau.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z): δ
0,9-1,3 (m, 5H), 1,4-2,1 (m, 9H), 2,3-2,4 (m, 1H), 3,05 (d, 1H), 3,20-3,37 (AB-sistema, centruota prie δ 3,29, 2H), 3,5-3,6 (m, 2H), 4,29-4,57 (ΑΒΧsistema, centruota prie d 4,43, 2H), 4,62 (d, 1H), 4,91 (neryškus singletas, 2H), 5,19 (s, 2H), 6,75 (pis, NH), 7,1-7,5 (m, 12H), 8,7-8,8 (m, 2H + NH),
9,45 (pis, NH).
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-ProPab(Z): δ 0,68-0,9 (m, 2H), 1,0-1,3 (m, 3H), 1,43 (pld, 1H), 1,55-2,0 (m, 7H), 2,05 (pld, 1H), 2,3-2,4 (m, 1H), 3,15 (d, 1H), 3,25-3,48 (m, 2H), 3,553,79 (AB-sistema, centruota prie d 3,67, 4H), 4,38-4,58 (ABX-sistema, centruota prie d 4,48, 2H), 4,68 (d, 1H), 4,82-4,98 (AB-sistema, centruota prie d 4,91, 4H), 5,19 (s, 2H), 6,66 (pis, NH), 7,1-7,5 (m, 17H), 7,75 (d, 2H), 7,80 (t, NH), 9,37 (pis, NH).
C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglių atomai: δ 164,7; 168,1; 171,5; 172,3 ir 172,6 (iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HCI
0,133 g (0,20 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) sumaišoma su 0,060 g 5% Pd/C, 1 ml HCI tirpalu ir 10 ml etanolio. Mišinys veikiamas vandenilio dujų atmosfera vieną valandą. Nufiltravus per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį bei du kartus liofilizavus vandenenyje, gaunama 93 mg (90%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,45 (m, 5H), 1,5-2,1 (m, 9H),
2,2-2,4 (m, 1H), 3,55-3,85 (m, 4H; iš ten 3,79 (s, 2H)), 4,23 (d, 1H), 4,334,57 (m, 3H), 7,44 (d, 2H), 7,69 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,9; 167,2; 169,1; 174,5.
Pavyzdys 4
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
0,406 g (0,782 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 3) ištirpinama 3 ml etanolio ir pridedama 132 ui (0,861 mmol) benzilakrilato. Reakcijos mišinys maišomas tris dienas kambario temperatūroje. Mišinį nugarinus ir gautą produktą išgryninus greitosios chromatografijos budu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (95/5 ir 90/10), gaunama 0,399 g (75%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,0 (m, 1H), 1,0-1,3 (m, 4H),
1,35-2,2 (m, 9H), 2,3-2,6 (m, 4H), 2,65-2,78 (m, 1H), 3,05 (d, 1H), 3,4-3,6 (m, 2H), 4,25-4,52 (ΑΒΧ-sistema, centruota prie d 4,40, 2H), 4,64 (dd, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,2-7,38 (m, 10H), 7,43 (d, 2H), 7,78 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,7; 167,9; 171,3; 172,7 ir 175,4.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HCI
0,261 g (0,383 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) sumaišoma su 0,075 g 5% Pd/C, 1 ml HCI tirpalu ir 10 ml etanolio. Mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje dvi valandas. Nufiltravus per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį bei du kartus liofilizavus vandenenyje, gaunama 0,196 g (96%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,17-1,40 (m, 5H), 1,60-1,92 (m, 5H), 1,92-2,2 (m, 4H), 2,32-2,48 (m, 1H), 2,81 (t, 2H), 3,11-3,36 (ABX2sistema, centruota prie δ 3,24, 2H), 3,63-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, 1H), 4,424,63 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,78 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,0; 167,30; 174,6 ir 174,7.
Pavyzdys 5 (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HCI mg (0,056 mmol) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (žr.
Pavyzdį 3) sumaišomas su 25 mg 5% Pd/C, 0,7 ml 1M HCI tirpalu ir 7 ml etanolio. Mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje vieną valandą. Nufiltravus
O D j/ per hyflo filtrą ir išgarinus tirpiklį bei du kartus liofilizavus vandenenyje, gaunama 25 mg (77%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,4 (m, 5H), 1,45-2,2 (m, 9H),
2,25-2,45 (m, 1H), 3,53-3,84 (m, 2H), 3,84-4,22 (AB-sistema, centruota prie d 4,03, 4H), 4,26 (d, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,1; 167,3; 170,6 ir 174,5.
Pavyzdys 6
H-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)
0,478 g (2,49 mmol) EDC pridedama, esant -18°C, į maišomą 0,875 g (2,37 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,22 g (9,97 mmol) DMAP ir 0,706 g (2,49 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto mišinyje iš 30 ml acetonitrilo ir 1 ml DMF, mišinį. Per porą valandų mišiniui sušilus iki kambario temperatūros vėl maišoma 48 vai. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir nuosėdos ištirpinamos 50 ml etilo acetato. Tirpalas praplaunamas 15 ml vandens, 3x15 ml 0,3 M KHSO^, 2x15 ml Na2COg tirpalu ir vandeniu.
Pašalinus tirpiklį, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/heptano eliuentą santykiu 9/1. Išeiga 0,96 g (64%).
(ii) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamas per 0,56 g (0,88 mmol) Boc-(R)Ogl-Pic-Pab(Z), ištirpinto 25 ml etilo acetato, tirpalą. Po poros minučių tirpale iškrinta kristalų nuosėdos. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir pridedama 50 ml etilo acetato. Praplovus 2x15 ml 2M natrio hidroksido tirpalu ir ekstrahavus vandens fazę 25-iais ml etilo acetato, po to
7 išdžiovinus (natrio sulfatu) susidariusius ekstraktus ir pašalinus vakuume tirpiklius, gaunama 0,448 g (95%) reikiamo produkto.
(iii) H-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HCI mg (0,18 mmol) H-Cgl-Pic-Pab(Z), ištirpinto 5 ml 95% etanolio ir 1 ml vandens, tirpalas maišomas vandenilio atmosferoje 4 vai., esant 5% Pd/C. Mišinys nufiltruojamas ir pridedama 0,3 ml 1M druskos rūgšties. Pašalinus etanolį vakuume ir nuosėdas liofilizavus, gaunama 70 mg (81%) reikiamo junginio.
1H-BMR (300 MHz, ΟΰθΟΰ): δ 1,00-1,56 (m, 7H), 1,56-1,94 (m,
9H), 2,32 (pld, 1H), 3,32-3,45 (m, 1H), 3,90 (pld, 1H), 4,35 (d, 1H), 4,50 (s, 2H), 5,10-5,20 (m, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,76 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 170,5 ir 173,4.
Pavyzdys 7
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)
350 mg (0,66 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 6) ir 233 mg dibenzilmaleato, ištirpinto 2,5 ml etanolio, mišinys laikomas kambario temperatūroje 4 dienas. Pašalinus etanolį vakuume ir išgryninus nuosėdas greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/heptano eliuentą santykiu 9/1, gaunama 0,108 mg produkto.
(ii) HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HCI
105 mg (0,13 mmol) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)CglPic-Pab(Z), ištirpinto 5 ml 95% etanolio ir 1 ml vandens, hidrinama 5 vai., esant 5% Pd/C. Pridėjus 0,3 ml 1M druskos rūgšties, mišinys nufiltruojamas ir tirpiklis pašalinamas vakuume. Ištirpinus nuosėdas vandenyje ir liofilizavus, gaunama 54 mg (73%) reikiamo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDgOD, dviejų diastereomerų 5/4 mišinys):
δ 1,10-1,16 (m, 7H), 1,60-2,04 (m, 9H), 2,23-2,42 (m, 1H), 2,93-3,15 (m, 2H), 3,30-3,42 (m, 1H, dalinai paslėptas MeOD maksimumo), 3,71-3,95 (m, 1H), 3,98-4,10 (m, 1H), 4,40-4,60 (m, 3H), 5,10-5,20 (m, 1H), 7,49-7,60 (m, 2H), 7,70-7,81 (m, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,1; 168,95; 169,6 ir 173,1.
MS m/z 516 (M+ +1).
Pavyzdys 8
H-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCl (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
409 mg (2,13 mmol) EDC pridedama, esant -18°C, j maišomą 0,72 g (2,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,04 g (8,53 mmol) DMAP ir 604 mg (2,13 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) mišinį, ištirpintą 20 ml acetonitrilo. Per naktį mišinys sušyla iki kambario temperatūros, po to tirpiklis pašalinamas vakuume. Nuosėdos ištirpinamos 40 ml etilo acetato ir organinė fazė praplaunama paeiliui 10 ml vandens, 3x10 ml 0,3M KHSO^, 2x10 ml Na2COg-NaCI vandeniniu tirpalu, ir galiausiai 10 ml sūrymo. Išdžiovinus (Na2SO4) ir pašalinus vakuume tirpiklį, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą santykiu 9/1. Taip gaunama 645 mg (51%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos per 640 mg (1,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z), ištirpinto 25 ml etilo acetato, tirpalą. Po poros minučių iš TLC analizės nustatoma, kad reakcija pasibaigusi. Vakuume pašalinus vandenilio chlorido dujų perteklių, mišinys praskiedžiamas 50 ml etilo acetato. Praplovus 2x15 ml Na2COg vandeniniu tirpalu, vandens fazė ekstrahuojama 15 ml etilo acetato. Susidarę organiniai ekstraktai praplaunami vandeniu ir išdžiovinami (Na2COg) ir tirpiklis pašalinamas vakuume. Taip gaunama 513 mg (96%) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) ištirpinama 5 ml 95% etanolio ir 1 ml vandens, hidrinama 4 vai. atmosferos slėgyje, esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių, pridėjus 0,4 ml 1 M druskos rūgšties ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos 2 ml vandens. Po liofilizacijos gaunama 57 mg (85%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, D2O, 2 rotamerai, mišinys 3:1): δ 1,02-1,20 (m, 2H), 1,22-1,92 (m, 11 H), 2,40-2,50 (m, 1H), 2,80-2,90 (m, 1H), 4,25 (plt, 1H), 4,40 (dq, 1H), 4,53 (dq, 1H), 4,65 (s, 2H), 5,05-5,10 (m, 1H), 7,65 (d, 2H), 7,88 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero išskiriamų signalų cheminiai poslinkiai: δ 0,57 (m), 0,85 (m), 2,95 (m), 4,06 (dq), 4,17 (dq), 4,63 (s),
5,33 (m), 7,70 (d), 7,93 (d).
C-BMR (125 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 170,4 ir 172,8.
Pavyzdys 9
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
0,119 g (0,52 mmol) benzilbromacetato pridedama į 0,27 g (0,52 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 8) ir 0,158 g (1,14 mmol) K2CO3, ištirpinto 5,2 ml acetonitrilo, mišinį ir kaitinama 1 vai.
temperatūroje iki 60°C aliejaus vonioje. Tirpiklis pašalinamas ir pridedama etilo acetato bei vandens. Fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama sūrymu ir išdžiovinama (Na2SO4). Po garinimo vakuume, gaunama 0,344 g nuosėdų, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant, pirma, etilo acetato eliuentą, o po to, etilo acetato/tetrahidrofurano/NHg-prisotinto metanolio eliuentą santykiu 60/5/2. Taip gaunama 0,163 g reikiamo produkto.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,7-1,0 (m, 2H), 1,05-2,05 (m,
H), 2,35-2,55 (m, 1H), 2,55-2,75 (m, 1H), 3,15-3,32 (m, 3H), 3,95-4,05 (t, 2H), 4,4 ir 4,5 (ΑΒΧ-sistema, 2H), 4,8-4,95 (m, 1H), 5,05 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,5 (m, 12H), 7,7-7,85 (d, 2H), 8,3-8,45 (t, 1H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 167,8; 170,7; 171,9 ir 175,9.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI
0,163 g (0,243 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z), ištirpinto 5,5 ml etanolio (99,5%) ir 0,7 ml druskos rūgšties (1 N), hidrinama 4 vai., esant 0,17 g 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį, po to ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, gaunama 107 mg (85%) išradimo junginio.
1 H-BMR (500 MHz, CDgOD, dviejų rotamerų mišinys): gausesnis rotameras: δ 0,95-1,95 (m, 13H), 2,3-2,4 (m, 1H), 2,6-2,75 (m,
H), 3,5-3,75 (m, 2H), 4,05-4,15 (m, 1H), 4,15-4,23 (m, 1H), 4,36-4,43 (m, 1H), 4,43-4,5 (m, 1H), 4,58-4,65 (m, 1H), 4,83-4,88 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,73-7,82 (m, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skinamieji signalai registruojami δ 2,2-2,3 (m), 3,95-4,05 (m), 5,1-5,17 (m), 7,6-7,67 (m).
12C-BMR (75 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,2; 169,8; 168,9 ir 172,3.
Pavyzdys 10
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
230 mg (0,443 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 8) ir 144 mg (0,487 mmol) dibenzilmaleato, ištirpinto 1,5 ml 95% etanolyje, mišinys maišomas kambario temperatūroje 5 dienas. Išgarinus etanolį vakuume, nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą santykiu 95/5, gaunama 54 mg (15%) produkto.
(ii) HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab mg (0,06 mmol) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)ChaAze-Pab(Z), ištirpinto 5 ml 95%-ų etanolio ir 1 ml vandens, hidrinama 4,5 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos 2 ml vandens ir 0,2 ml 1 M druskos rūgšties. Po liofilizacijos gaunama 32 mg (93%) produkto.
Išradimo junginio, esančio D2O, 1H-BMR spektras rodo dvi kreives stipriai persiklojančių signalų, kuriuos skleidžia du diastereomerai. Spektre taip pat galima išskirti mažesnę dalį sudarančio rotamero, užimančio maždaug 15%, rezonansinius maksimumus.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,03-2,00 (m, 13H), 2,32-2,53 (m,
1H), 2,72-2,96 (m, 1H), 3,06-3,28 (m, 2H), 4,10-4,55 (m, 4H), 4,62 (pis, 2H), 5,00-5,10 (m, 1H), 7,55-7,68 (m, 2H), 7,80-7,94 (m, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,65 (m), 0,80 (m), 4,00 (m), 5,24 (m), 5,35 (m).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 169,0; 171,0; 172,3 ir 174,1.
Pavyzdys 11
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)Cha-Aze-Pab/a x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a
2,0 g (3,8491 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 8) ir
1,37 g dibenzilmaleato, ištirpinto 10 ml 95%-ų etanolio, mišinys maišomas 4 dienas kambario temperatūroje. Pašalinus etanolį vakuume, nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą santykiu 98/2, gaunama 1,024 g (32%) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z). Du diastereomerai atskiriami RPLC būdu, naudojant CHgCN/Ο,ΙΜ NH^OAc eliuentą santykiu
65/35. Šis diastereomeras iš kolonėlės išsiplauna pirmas. Pašalinus vakuume acetonitrilą, vandens fazė ekstrahuojama tris kartus etilo acetatu. Organinė fazė praplaunama vieną kartą vandeniu, išdžiovinama (Na2SO4), filtruojama ir garinama. Taip gaunama 0,352 g išradimo junginio gryno stereoizomero forma.
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a 2 x HCI
350 mg (0,43 mmol) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)ChaAze-Pab(Z)/a (diastereomero, minėto aukščiau (i)), ištirpinto 15 ml 95%-ų etanolio ir 3 ml vandens, hidrinama 4,5 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos 5 ml vandens ir 1,0 ml 1 M druskos rūgšties. Po liofilizacijos gaunama 214 mg (87%) produkto gryno stereoizomero forma.
^H-BMR (300 MHz, MeOD, dviejų rotamerų mišinys): δ 0,851,93 (m, 13H), 2,25-2,38 (m, 1H), 2,60-2,75 (m, 1H), 2,88 (dd, 2H), 3,92 (t, 1H), 4,15-4,25 (m, 2H), 4,30-4,43 (m, 1H), 4,56 (AB-sistema, 2H), 4,764,86 (m, 1H, iš dalies uždengtas tirpiklio signalo), 7,59 (d, 2H), 7,78 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,70; 2,95; 3,82; 4,00; 5,08 ir 7,83.
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,9; 168,8; 171,7; 172,3 ir 173,8.
Pavyzdys 12
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b
Išradimo junginys gaunamas pagal aukščiau aprašytą Pavyzdyje 11 procedūrą junginiui BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)ChaAze-Pab(Z) gauti. Šis diastereomeras iš kolonėlės išsiplauna pirmas. Išeiga 0,537 g.
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/bx2 HCI
530 mg (0,65 mmol) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)ChaAze-Pab(Z)/b, ištirpinto 15 ml 95% etanolio ir 3 ml vandens, hidrinama 5 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos 6 ml vandens ir 1,0 ml 1 M druskos rūgšties. Po liofilizacijos gaunama 290 mg (78%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, MeOD, dviejų rotamerų mišinys): δ 0,861,90 (m, 13H), 2,30-2,42 (m, 1H), 2,60-2,75 (m, 1H), 2,75-2,85 (m, 1H),
2,95-3,05 (m, 1H), 3,65-3,71 (m, 1H), 4,00-4,10 (m, 1H), 4,14-4,24 (m, 1H),
4,36-4,62 (m, 3H), 4,78-4,86 (m, 1H iš dalies uždengatas tirpiklio signalo),
7,57 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,78; 2,92; 3,82; 5,36 ir 7,80.
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,8; 169,0; 172,0; 172,4 ir 175,2.
Pavyzdys 13
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
182 mg (0,35 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 8) ir
62,5 mg (0,385 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 1,5 ml 95% etanolio, mišinys maišomas 4 dienas kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą santykiu 9/1. Taip gaunama 200 mg (84%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI
195 mg (0,29 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z), ištirpinto 10 ml 95% etanolio ir 2 ml vandens, hidrinama 4 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos 2 ml vandens ir 0,4 ml 1 M druskos rūgšties. Po liofilizacijos gaunama 130 mg (86%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, CDgOD): δ 0,98-1,27 (m, 2H), 1,30-1,90 (m,
H), 2,27-2,35 (m, 1H), 2,65-2,74 (m, 1H), 2,77 (t, 2H), 3,32 (t, 2H), 4,10 (t, 1H), 4,17-4,25 (m, 1H), 4,40-4,49 (m, 1H), 4,55 (AB, 2H), 4,83-4,90 (m, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).
C-BMR (125 MHz, D20): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,0; 168,9; 172,4 ir 174,6.
Pavyzdys 14
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)
Mišinys iš 0,212 g (0,408 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 8), 0,124 (0,89 mmol) K2COg ir 0,128 g (0,049 mmol) BnOOCCH2-NH-CO-CH2-Br (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 6 ml acetonitrilo, maišomas dvi valandas 50°C temperatūroje. Išgarinus tirpiklį, nuosėdos ištirpinamos vandenyje ir etilo acetate. Vandens sluoksnis ekstrahuojamas du kartus etilo acetatu ir susidaręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento etilo acetato/tetrhidrofurano gradientą (85/15, 4/1, 7/3). Taip gaunama 0,190 g (64%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,75-2,1 (m, 13H), 2,43(m, 1H),
2,56 (d, 1H), 2,79 (m, 1 H), 3,0-3,15 (m, 2H; iš ten 3,05 (d, 1 H)), 3,89-4,18 (m, 5H), 4,8-4,98 (m, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,2-7,47 (m, 12H), 7,72 (t, NH), 7,86 (d, 2H), 8,14 (pis, NH), 8,31 (dd, NH), 9,42 (pis, NH).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 168,7; 169,22; 169,83; 171,7 ir 175,5.
(ii) HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HCI
0,19 g (0,26 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-AzePab(Z) sumaišoma su 0,075 g 5% Pd/C, 1,5 ml 1 N HCI tirpalu, 3 ml vandens ir 17 ml etanolio ir gautas mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje '02 vieną valandą. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus vandenyje, gaunama 144 mg (97%) išradimo junginio.
^H-BMR (D2O, 300 MHz, du rotamerai 4:1): δ 0,88-1,88 (m,
13H), 2,25-2,42 (m, 1H), 2,63-2,89 (m, 1H), 3,94 (s, 2H), 3,99 (neryškus dubletas, 2H), 4,16 (t, 1H), 4,28 (q, 1H), 4,41 (q, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,98 (dd, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,50 (plq), 0,77 (plq), 5,21 (dd), 7,56 (d) ir 7,81 (d).
C-BMR (D2O, 75 MHz): anglies ir amidino anglies atomai: δ
166,8; 166,9; 168,6; 172,3 ir 173,4.
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ: 166,6; 169,6 ir 172,0.
Pavyzdys 15
H-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,135 ml (1,1 mmol) pivaloilo chlorido pridedama kambario temperatūroje j maišomą 0,155 ml (1,1 mmol) trietilamino ir 405 mg (1,1 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr, Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 5 ml DMF, mišinį. Po 3 vai. pridedama 340 mg (1,1 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 5 ml DMF, ir toliau maišoma per naktį. Reakcijos mišinys praskiedžiamas vandeniu ir ekstrahuojamas etilo acetato/toluolo tirpalu (1/1). Organinę fazę išdžiovinus (MgSO4) ir pašalinus vakuume tirpiklį, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Išeiga 309 mg (49%).
103 (ii) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos kambario temperatūroje per 1,246 g (2 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto 20 ml etilo acetato, tirpalą, kol jį prisotins. Po 30 min. pridedama natrio karbonato tirpalo (10%) ir atsiskyręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (K2CO3).
Džiovinimo reagentą praplovus metileno chloridu ir išgarinus tirpiklį iš susidariusių organinių sluoksnių, gaunama 1,11 g (100%) išradimo junginio.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI
100 mg (0,19 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto 15 ml etanolio, hidrinama 1,5 vai., esant 38 mg 10% Pd/C. Praskiedus reakcijos mišinį distiliuotu vandeniu ir nufiltravus katalizatorių, po to pašalinus etanolį vakuume ir liofilizavus, gaunami bespalviai išradimo junginio milteliai. Galiausiai , ištirpinus druskos rūgštyje, peptidas paverčiamas dihidrochloridu, po to liofilizavus, gaunama 90 mg (100%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O); δ 1,0-2,0 (m, 13H), 2,0-2,3 (m, 3H),
2,3-2,5 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 1H), 3,8-3,9 (m, 1H), 4,3-4,5 (t, 1H), 4,5-4,6 (m, 3H), 7,4-7,6 (m, 3H), 7,6-7,9 (m, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 170,0 ir 174,9.
Pavyzdys 16
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
268 mg (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr Pavyzdį 15), 90 μΙ (0,55 mmol) benzilbromacetato ir 181 mg (1,3 mmol) K2CO3, ištirpinto 2 ml acetonitrilo, mišinys homogenizuojamas ultragarsu 2,5 vai., esant
40°C temperatūrai. Mišinį nufiltravus per hyflo ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Taip gaunama 194 mg (57%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI
194 mg (0,28 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto ml etanolio, hidrinama 3 vai., esant 77 mg 10% paladžio ant medžio anglies katalizatoriui. Reakcijos mišinys praskiedžiamas vandeniu ir katalizatorius pašalinamas filtruojant. Išgarinus etanolį vakuume ir liofilizavus, gaunamos baltos nuosėdos. Pridėjus druskos rūgšties ir gautą tirpalą liofilizavus, gaunama 115 mg (68%) reikiamo produkto.
1 H-BMR (300 MHz, D2O); δ 1,0-1,2 (m, 2H), 1,2-1,5 (m, 3H),
1,5-2,0 (m, 8H), 2,0-2,3 (m, 3H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,6-3,8 (m, 1H), 3,8-4,0 (m, 3H), 4,4-4,7 (m, 4H), 7,5-7,7 (d, 2H), 7,7-7,9 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,1; 168,2; 169,3; 174,6.
Pavyzdys 17
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab (i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Į 0,8 g (1,67 mmol) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 3 ml DMF, tirpalą pridedamas 0,562 g (1,85 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 3 ml DMF, tirpalas. Gautojo tirpalo pH nustatomas 8-9, naudojant Nmetilmorfoliną, po to tirpalas maišomas kambario temperatūroje 2 dienas.
Tirpalas supilamas į vandenį ir ekstrahuojamas 3x25 ml etilo acetato.
Organinis tirpalas praplaunamas 1 M KH2SO4 tirpalu, 10%-ų NaHCOg
105 tirpalu, vandeniu ir surymu, ir išdžiovinamas (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį, gaunama 0,65 g (60%) gelsvai baltų išradimo junginio miltelių.
(ii) Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,60 g (0,92 mmol) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto 50 ml
EtOH, tirpalas prisotinamas HCI, esant 0°C temperatūrai, ir laikomas per naktį šaldytuve. Gautas tirpalas garinamas iki sausumo, ir nuosėdos ištirpinamos Na2CO3 tirpale, ekstrahuojamos 3x25 ml etilo acetato.
Ekstraktą praplovus sūrymu ir nugarinus, gaunama 0,4 g (79%) balto pūkuotų miltelių junginio.
1H-BMR (CDCIg, 300 MHz): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 5H),
1,4-1,55 (m, 1H), 1,6-1,9 (m, 10H), 1,9-2,05 (m, 2H), 2,05-2,2 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,4-2,5 (m, 1H), 3,28 (dd, 1H), 3,41 (q, 1H), 3,62 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 4,61 (d, 1H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,45 (m, 7H), 7,72 (t, 1H), 7,79 (d, 2H).
(iii) BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,40 g (0,73 mmol) Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z), 0,17 g BnOOCCH2Br ir 0,20 g (2 ekv.) K2COg, sugrūsto 15 ml CHgCN, mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. Gautas mišinys garinamas, pridedama etilo acetato, po to mišinys praplaunamas vandeniu ir sūrymu, išdžiovinamas (Na2SO4), ir garinamas. Nevalytas produktas (0,69 g) gryninamas greitosios chromatografijos būdu (eliuentas CH2CI2/MeOH, 10/1) ir gaunama 0,39 g (77%) šviesaus labai klampaus aliejaus.
(iv) HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab
Į 0,39 g (0,56 mmol) BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto 30 ml EtOH, tirpalą pridedama 0,1 g Pd/C (10%), ir viskas hidrinama atmosferos slėgyje. Po tirpalo filtravimo ir garinimo likusi sirupo pavidalo medžiaga liofilizuojama ir gaunama 0,25 g (95%) baltų kristalinių miltelių pavidalo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDgOD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,4 (m,
6H), 1,5-1,85 (m, 9H), 1,9-2,05 (m, 3H), 2,05-2,15 (m, 1H), 2,15-2,3 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 3,32 (d, 1H), 3,55-3,75 (m, 2H), 3,95-4,1 (m, 2H), 4,354,5 (m, 3H), 7,55 (d, 2H), 7,72 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,4; 171,5; 174,7 ir 175,1.
Pavyzdys 18
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCl (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
Mišinys iš 149 mg (0,28 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15) ir 66 mg (0,4 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 1,5 ml etanolio, laikomas 36 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Gaunama 124 mg (64%) reikiamo produkto.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCl
124 mg (0,18 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z), ištirpinto 10 ml etanolio, hidrinama 1 vai., esant 55 mg 10% Pd/C. Katalizatorius nufiltruojamas ir tirpiklis pašalinamas vakuume. Nuosėdas ištirpinus druskos rūgštyje ir gautą tirpalą liofilizavus, gaunama 87 mg (79%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-2,0 (m, 13H), 2,0-2,2 (m, 3H),
2,2-2,4 (m, 1H), 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, 1H), 3,3-3,4 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 3,7-3,9 (m, 1H), 4,3-4,6 (m, 4H), 7,4-7,6 (m, 2H), 7,76-7,8 (m, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,0; 168,3 ir 174,6 (Dviejų anglies atomų signalai persikloja).
107
Pavyzdys 19
HOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z)
J 274 mg (0,5 mmol) Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 17), ištirpinto 5 ml EtOH (99%), tirpalą pridedama 97,3 mg (0,6 mmol) benzilakrilato ir reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje. Po 72 vai. pridedama dar 16,2 mg (0,1 mmol) benzilakrilato ir toliau maišoma vai. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH(NHg-prisotintas) eliuentą santykiu 95/5. Gaunama 198 mg (56%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,0 (keli m, 16H), 2,14 (s,
3H), 2,24-2,33 (m, 2H), 2,38-2,46 (m, 1H), 2,67 (t, 2H), 3,32-3,40 (m, 2H), 3,71 (m, 1H), 4,36-4,44 (m, 2H), 4,58 (m, 1H), 5,03 (neryškus s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,25-7,37 (m, 10H), 7,43 (d, 2H), 7,64 (t, 1H(NH)), 7,81 (d, 2H).
I^C-BMR (125 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,7; 167,9; 171,7; 172,3 ir 172,6.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI
Į 198 mg (0,27 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-ProPab(Z), ištirpinto 10 ml EtOH ir 1 ml 1 M HCI, tirpalą pridedama 60 mg 5% Pd/C (turinčio 50% vandens pagal svorį) ir mišinys hidrinamas 4 vai. atmosferos slėgyje. Katalizatorius nufiltruojamas ir tirpiklis išgarinamas. Ištirpinus likusį aliejų vandenyje ir liofilizavus, gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,08-1,2 (m, 2H), 1,2-1,42 (m, 4H),
1,68-1,91 (m, 5H), 1,93-2,08 (m, 2H), 2,09-2,26 (m, 3H), 2,49 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 3,03 (s, 3H), 3,60 (neryškus pis, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,98 (m, 1H),
4,53 (m, 1H), 4,61 (pis, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,63 (d, 2H), 7,97 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, DgO): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 167,8 ir 174,5. Greičiausia, du maksimumai yra persikloję.
Pavyzdys 20
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,50 g (0,94 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15) ir 0,28 g (0,94 mmol) dibenzilmaleato, ištirpinto 20 ml EtOH, mišinys laikomas 5 dienas kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą, gaunama 0,15 g (19%) diastereomerinio mišinio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,7-2,1 (m, 17H), 2,3-2,4 (m, 1H),
2,5-2,8 (m, 2H), 3,2-3,7 (m, 4H), 4,46 (d, 1H), 4,65 (pld, 1H), 4,81 (d, 1H),
4,9-5,1 (m, 3H), 5,20 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 15H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,6-7,8 (m, 3H).
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a x 2 HCI
0,15 g (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-ProPab(Z), ištirpinto 5 ml etanolio, mišinys hidrinamas 1 vai. atmosferos slėgyje, esant 5% Pd/C, ir gaunama HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)ChaPro-Pab. Du diastereomerai atskiriami RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH^OAc eliuentą santykiu 15/85, po to liofilizuojama druskos rūgštyje.
Pastarasis diastereomeras išsiplauna iš kolonėlės pirmas. Išeiga 19 mg (18%).
1H-BMR (500 MHz, DgO, dviejų rotamerų mišinys) gausesnis rotameras: δ 1,0-2,0 (m, 15H), 2,15 (m, 2H), 2,44 (m, 1H), 3,00 (pld, 1H), 3,05 (pld, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,84 (m, 1 H), 3,97 (pis, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 7,62 (d, 2H), 7,87 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,2; 168,3; 173,8; 174,8 ir 178,2.
Pavyzdys 21
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b x 2 HCI
Išradimo junginys gaunamas pagal procedūrą junginiui HOOCCH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab gauti, aprašytą Pavyzdyje 20. Šis diastereomeras išsiplauna iš kolonėlės po pirmojo. Išeiga 19 mg (18%).
1H-BMR (500 MHz, D2O, dviejų rotamerų mišinys) gausesnis rotameras: δ 1,0-2,0 (m, 14H), 2.15-2,25 (m, 3H), 2,44 (m, 1H), 3,11 (pld, 1H), 3,19 (pld, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 4,03 (pis, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 7,58 (d, 2H), 7,84 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 7,66 (d) ir 7,91 (d).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,3; 168,5 ir 174,7. Du maksimumai yra greičiausiai persikloję.
Pavyzdys 22
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,246 g (0,460 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15), 0,140 g (1,01 mmol) K2COg ir 0,145 g (0,506 mmol) BnOOC-CH2-NHCO-CH2-Br (žr. Pradinių medžiagų gavimas) sumaišoma 6 ml acetonitrilo. Mišinys maišomas 2 vai. 30 min. 50°C temperatūroje, tirpiklis išgarinamas, nuosėdos paskirstomos tarp vandens ir etilo acetato. Sluoksniai atskiriami ir vandens sluoksnis dar kartą ekstrahuojamas etilo
ΊΟ acetatu. Susidariusį organinį sluoksnį išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir išgarinus, gaunama 0,350 g aliejaus. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (97/3, 95/5, 92,5/7,5), gaunama 0,227 g (67%) išradimo junginio.
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): δ 25,0; 26,0; 26,2; 26,4; 26,7; 32,4;
34,2; 34,4; 40,8; 40,9; 42,9; 46,7; 50,5; 58,4; 60,2; 67,0; 67,2; 127,5; 127,8; 128,2; 128,3; 128,4; 128,5; 128,6; 128,6; 134,1; 135,2; 137,0; 142,6; 164,7; 168,9; 169,3; 170,4; 172,2; 175,0.
(ii) HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HCI
0,089 g (0,12 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-ProPab(Z) sumaišoma su 30 mg 5% Pd/C ir ištirpinama 10 ml acto rūgšties. Mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje pusantros valandos. Nufiltravus katalizatorių per hyflo ir liofilizavus esant 1 ml 1 N druskos rūgšties, gaunama 0,058 g (82%) reikiamo produkto.
1H-BMR (300 MHz, DgO): δ 0,9-2,2 (m, 16H), 2,25-2,47 (m,
1H), 3,55-3,7 (m, 1H), 3,7-4,1 (m, 5H), 4,42 (t, 1H), 4,48-4,6(m, 3H), 7,51 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, DgO): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,8; 167,1; 168,2; 173,6 ir 174,6.
Pavyzdys 23
EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha Pro-Pab x HOAc (i) EtOOC-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15) (275 mg, 0,51 mmol) veikiamas 20 vai. 20°C temperatūroje K2COg (141 mg, 1,02 mmol) tirpalu ir BrCH2=CHCOOEt (108 mg, 0,56 mmol), ištirpintu CHgCN (10 ml).
Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos EtOAc (5 ml)/H2O (2ml). Atskyrus organinį sluoksnį, išdžiovinus (Na2SO4) ir sukoncentravus, gaunama 397 mg aliejaus, kuris gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant EtOAc/heptano eliuentą santykiu 1/4. Gaunama 252 mg (77%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCį): δ 0,8-1,05 (m, 2H), 1,1-1,45 (m,
3H), 1,3 (t, 3H), 1,5-1,9 (m, 8H), 1,95-2,05 (m, 1H), 2,1-2,15 (m, 1H), 2,452,55(m, 1H), 3,0 ir 3,15 (du d, 2H), 3,35-3,45 (m, 2H), 3,55-3,65 (m, 1H),
4,15 (q, 2H), 4,3 (d, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,85 (d, 1H), 6,75 (dt, 1H), 5,3-5,4 (m, 4H), 7,45 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
13C-BMR (75,0 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 165,7; 171,2 ir 175,7 (Du maksimumai, greičiausiai, persikloja).
(ii) EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pabx HOAc
EtOOCCH=CHCH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (250 mg, 0,38 mmol) ištirpinama etanolyje ir hidrinama maždaug 2 vai., esant 5% Pd/C.
Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume bei išgryninus RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH^OAc eliuentą, yra gaunama 70 mg (36%) reikiamo produkto.
1H-BMR (500 MHz, CD3OD): δ 0,9-1,05 (m, 2H), 1,15-1,55 (m,
5H), 1,25 (t, 3H), 1,6-1,85 (m, 7H), 1,95-2,6 (m, 8H), 3,55-3,65 (m, 2H), 3,8 (m, 1 H), 4,1 (q, 2H), 4,45 (m ir d, 2H), 4,55 (d, 1 H), 7,55 ir 7,75 (du d, 4H).
13C-BMR (75,0 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,3; 173,2; 174,6 ir 174,9.
!Z
Pavyzdys 24
Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab x HCI (i) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) mg (0,32 mmol) 4-chlorsulfonilbenzoinės rūgšties pridedama ledo vonios temperatūroje j 156 mg (0,29 mmol) H-(R)ChaPro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15) ir 59 mg (0,58 mmol) trietilamino, ištirpinto 4 ml metileno chlorido. Mišinio temperatūrai lėtai pakilus iki kambario temperatūros, mišinys praplaunamas vandeniu ir išdžiovinamas (Na2SO4). Pašalinus tirpiklį vakuume ir išgryninus nuosėdas greitosios chromatografijos būdu, naudojant eliuentus etilo acetatą/metanolį santykiu 9/1, o po to metileno chloridą/metanolj santykiu 3/1, gaunama 82 mg (39%) produkto.
(ii) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab x HCI mg (0,11 mmol) Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) hidrinama EtOH tirpale, esant 5% Pd/C. Katalizatorius nufiltruojamas ir tirpiklis išgarinamas. Nevalyta medžiaga gryninama RPLC būdu, naudojant CH^CN/OJ M NH^OAc eliuentą (1/4), ir galiausiai, liofilizuojant druskos rūgštyje, paverčiama hidrochloridu. Taip gaunama 21 mg (29%) produkto.
1H-BMR ( 300 MHz, CDgOD, dviejų rotamerų mišinys): δ 0,451,82 (m, 13H), 1,90-2,30 (m, 4H), 2,95-4,16 (keletas m, bendras 3H), 4,354,68 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,74 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,90-8,00 (m, 2H), 8,05-8,22 (m, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,4; 173,4; 173,9 ir 174,2.
MS m/z 584 (M+ +1)
Pavyzdys 25
H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Į 7,11 g (18,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 9,07 g (74,2 mmol) DMAP ir 5,26 g (18,6 mmol) HPab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpintų 200 ml DMF, mišinį pridedama 3,57 g (18,6 mmol) EDC, esant -15°C temperatūrai. Per naktį temperatūrai leidžiama pakilti iki 20°C. Tirpiklis pašalinamas vakuume, pridedama vandens ir tolueno. Organinė fazė praplaunama vandeniu, 1 M KHSO4, 10%-ų Na2CO3 ir sūrymu. Išdžiovinus (MgSO^) ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 13,63 g nuosėdų, kurias apdorojus silikagelio kolonėlėje greitosios chromatografijos pagalba, naudojant etilo acetato/tolueno eliuentą santykiu 2/1, gaunama 9,5 g (79%) išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,7-1,0 (m, 2H), 1,0-2,2 (m, 25H),
2,3-2,5 (m, 1H), 2,9-3,1 (m, 1H), 3,8 (d, 1H), 4,3 (dd, 1H), 4,4-4,6 (m, 2H),
5,1 (s, 2H), 5,1-5,3 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,35 (d, 2H), 7,4-7,5 (m, 1H),
7,75 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,8; 164,6; 168,2; 170,0 ir 173,4.
(ii) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos kambario temperatūroje per 9,5 g (14,7 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto 100 ml etilo acetato, tirpalą, kol jį prisotins. Po 10 min. pridedama natrio karbonato tirpalo (10%), atsiskyręs organinis sluoksnis išdžiovinamas (K2CO3) ir tirpiklis pašalinamas vakuume. Gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, CDgOD): δ 0,85-1,05 (m, 2H), 1,15-1,90 (m,
16H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,20-3,30 (m, 1H), 3,80-3,90 (d, 1H), 3,90-4,0 (m, 1H), 4,4-4,5 (du d, 2H), 4,7 (pi s, 5H), 5,15 (s, 2H), 5,20 (m, 1H), 7,25-7,45 (m, 7H), 7,85 (d, 2H).
(iii) H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI mg (0,1 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto 5 ml etanolio ir 0,45 ml 1 M druskos rūgšties mišinyje, hidrinama 1,5 vai., esant 33 mg 10% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos RPLC būdu, naudojant 0,1 M NH4OAc/CH3CN eliuentą. Išvalytas peptidas galiausiai paverčiamas dihidrochloridu, ištirpinus jį druskos rūgštyje ir po to liofilizavus. Gaunama 17 mg (35%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O, du rotamerai, mišinys santykiu 3:1): δ
1,0-2,0 (m, 18H), 2,33 (d, 1H), 3,4-3,5 (m, 1H), 3,8-3,9 (m, 1H), 4,4-4,8 (m, 3H), 5,15-5,25 (m, 1H), 7,5-7,7 (m, 2H), 7,8-8,0 (m, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,5-0,7 (m) ir 3,0-3,1 (m).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,3; 171,6 ir 173,6.
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 170,6 ir 172,4.
Pavyzdys 26
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
742 mg (1,35 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25), 230 ml (1,45 mmol) benzilbromacetato ir 558 mg (4 mmol) K2CO3, ištirpinto 4 ml acetonitrilo, mišinys homogenizuojamas ultragarsu 40 min. 40°C temperatūroje. Pašalinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu nuosėdas, gaunama 720 mg (77%) reikiamo produkto.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H),
2,1-2,4 (pi s, 1 arba 2H), 2,4 (d, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,25 (d, 1H), 3,45 (d, 1H), 3,55-3,65 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 4,35 (dd, 1H), 4,55 (dd, 1H), 4,80 (du d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3 (m, 1H), 7,2-7,4 (m, 12H), 7,8 (d, 2H).
13C-BMR (125 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 167,9; 170,5; 173,4 ir 175,5.
115 (ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI
509 mg (0,73 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto ml etanolio, hidrinama 4 vai., esant 259 mg 10% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios ištirpinamos distiliuotame vandenyje. Pridėjus druskos rūgšties ir galiausiai liofilizavus tirpalą, gaunama 281 mg (79%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O, rotamerų mišinys santykiu 4:1):
gausesnis rotameras: δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,40 (m, 1H), 3,4-3,5 (m, 1H), 3,8-3,95 (m, 3H), 4,55-4,65 (du d, 2H), 5,15 (m, 1H), 7,55-7,75 (m,
2H), 7,8-8,0 (m, 2H).
C-BMR (125 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,3; 169,9; 170,3 ir 173,5.
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 166,9; 169,2; 172,0.
Pavyzdys 27
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
592 mg (1,1 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 332 mg (1,1 mmol) dibenzilmaleato, ištirpinto 1 ml etanolio, mišinys laikomas savaitę kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant metanolio/metileno chlorido eliuentą. Gaunama 275 mg (30%) diastereomerinio mišinio.
(ii) HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/ax2 HCI
275 mg BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto 20 ml 95%-ų etanolio, hidrinama 18 vai., esant 75 mg 10% Pd/C.
Mišinys filtruojamas per hyflo ir tirpiklis pašalinamas vakuume. Pridėjus vandens ir liofilizavus, gaunama 166 mg HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)(R)Cha-Pic-Pab. Du diastereo-merai atskiriami RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH4OAc eliuentą santykiu 1/4, po to liofilizuojami druskos rūgštyje. Šis diastereomeras išsiplauna iš kolonėlės pirmasis. Išeiga 9 mg.
1 H-BMR (300 MHz, DgO, dviejų rotamerų mišinys): δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,4 (m, 1H), 3,0-3,2 (m, 2H), 3,4 (t, 1H), 3,8 (d, 1 H), 4,05 (t, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 5,2 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,9 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 4,0 (t) ir 7,7 (d).
Pavyzdys 28
HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b x 2 HCI
Išradimo junginys gaunamas vykdant tą pačią procedūrą, kaip aprašyta HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab atveju Pavyzdyje
27. Šis diastereomeras išsiplauna iš kolonėlės po pirmojo.
H-BMR (500 MHz, D2O, dviejų rotamerų mišinys): δ 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,4 (m, 1H), 3,0-3,2 (m, 2H), 3,5 (t, 1H), 3,85 (d, 1H), 4,15 (s, 1H), 4,5-4,7 (m, 3H), 5,15 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,8 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 4,35 (s), 7,65 (d) ir 7,9 (d).
Pavyzdys 29
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
851 mg (1,55 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 269 mg (1,71 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 5 ml etanolio, mišinys laikomas kambario temperatūroje 40 vai. Pašalinus tirpiklį vakuume ir išgryninus nuosėdas greitosios chromatografijos būdu, naudojant metileno chlorido/metanolio eliuentą, gaunama 812 mg (74%) produkto.
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H),
2,3-2,5 (m, 3H), 2,6-2,8 (m, 2H), 3,0 (m, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 1H),
4,3 (dd, 1H), 4,6 (dd, 1H), 4,95-5,05 (du d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3(m, 1H),
6,5-6,9 (pi s, 1H), 7,0-7,1 (m, 1H), 7,2-7,5 (m, 12H), 7,75-7,85 (d, 2H), 9,39,7 (pi s, 1H).
117 (ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI
780 mg (1,1 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto 25 ml etanolio, hidrinama 4 vai., esant 306 mg 15% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, nuosėdos ištirpinamos druskos rūgštyje. Gautą tirpalą liofilizavus, gaunama 481 mg (78%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 0,95-1,1 (m, 2H), 1,15-1,9 (m,
16H), 2,2-2,3 (m, 1H), 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, 3H), 3,4-3,5 (m, 1H), 3,75-3,85 (m, 1H), 4,4-4,6 (m, 3H), 5,15 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,8-7,9 (m, 2H), 8,6-8,7 (m, 1H).
13C-BMR (125 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 170,6; 175,9; 179,5 ir 183,5.
Pavyzdys 30
HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc (i) EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,12 g etiloksalilo chlorido pridedama kambario temperatūroje į
0,42 g (0,77 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 0,21 g (1,5 mmol) K2CO3, ištirpinto 10 ml CHgCN, mišinį. Po dviejų valandų pridedamas papildomas 0,07 g (0,5 mmol) etiloksalilo chlorido kiekis. Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos ištirpinamos CH2CI2 ir praplaunamos vandenyje. Išgarinus ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant tolueno/etilo acetato santykiu 1/2, δ po to CH2CI2/metanolio eliuentus, gaunama 0,21 g (42%) produkto.
(ii) HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,21 g (0,32 mmol) EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) ištirpinama 3 ml THF ir pridedama 0,17 g (4,2 mmol) LiOH, ištirpinto 3 ml vandens. Mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje ir tuomet supilamas į etilo acetato ir vandens tirpalą. Fazės atskiriamos ir organinė fazė ekstrahuojama KHCO3 tirpalu. Vandeninė fazė rūgštinama 0,5 M HCI (pH
1) ir ekstrahuojama CH2CI2, išdžiovinama Na2SO4 ir išgarinama. Taip gaunama 80 mg produkto.
(iii) HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc
HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) hidrinama EtOH tirpale, esant 5%
Pd/C. Katalizatorius nufiltruojamas ir tirpiklis išgarinamas. Nuosėdas išgryninus RPLC būdu, gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, DMSO-dg): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,75 (m,
15H), 1,86-1,94 (m, 1H), 2,13-2,2 (m, 1H), 3,75-3,81 (m, 1H), 4,32, 4,44 (AB, 2H), 4,71-4,77 (m, 1H), 4,98-5,02 (m, 1H), 7,41 (d, 2H), 7,75 (d, 2H),
8,1-8,15 (m, 1H), 8,22-8,27 (m, 1H), 9,32 (platus s), 9,90 (platus s). Vieno iš protonų (3,25) atsakas yra iš dalies uždengiamas tirpiklio signalo.
MS m/z486 (M+ +1).
Pavyzdys 31
HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab (i) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,39 g (0,72 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 0,9 g (0,8 mmol) monometilmalonato ištirpinama 40 ml CH2CI2 ir pridedama
0,16 g (0,8 mmol) DCC. Tirpalas maišomas kambario temperatūroje per naktį. Iškritęs j nuosėdas DCU nufiltruojamas, filtratas praplaunamas 0,3 M KHSO^ ir KHCOg tirpalais bei išdžiovinamas (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant tolueno/etilo acetato (1/3) eliuentą, gaunama 0,27 g (58%) reikiamo produkto.
(ii) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab mg (0,14 mmol) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) ištirpinama 10 ml etanolio ir hidrinama 5 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį, gaunama 50 mg (70%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CD3OD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m,
16H), 2,35-2,45 (m, 1H), 3,2-3,4 (m, 3H), 3,7 (s, 3H), 3,95-4,05 (m, 1H),
4,4-4,55 (s, 3H), 5,15-5,25 (m, 1H), 7,4-7,55 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,2; 168,7; 170,0; 172,4 ir 174,6.
MS m/z 514 (M+ +1) (iii) HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
Kambario temperatūroje į 0,14 g (0,27 mmol) MeOOC-CH2-CO(R)Cha-Pic-Pab, ištirpinto 5 ml metanolio, tirpalą pridedama 2 ml 0,5 M NaOH. Pamaišius 5 vai. pridedama vandens ir metanolis pašalinamas vakuume. Vandens sluoksnis liofilizuojamas. Tirpios medžiagos ekstrahuojamos iš netirpių neorganinių druskų absoliučiu etanoliu. Išgarinus etanolį, likusi kietoji medžiaga suspenduojama vandenyje ir filtruojant gaunama 70 mg (52%) išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, DMSO-dg): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,0-1,9 (m,
16H), 2,15-2,30 (m, 1H), 2,58, 2,86 (AB, 2H), 3,8-3,95 (m, 1H), 4,2-4,5 (m, 2H), 4,7-4,85 (m, 1H), 4,95-5,05 (m, 1H), 7,40 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,2-8,3 (m, 1H), 9,3-9,4 (m, 1H), 9,90 (platus s, 3H). Vieno iš protonų (3,21) atsakas yra iš dalies uždengiamas tirpiklio signalo.
13C-BMR (75 MHz, DMSO-dg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 165,8; 168,8; 169,9; 172,2 ir 172,4.
MS m/z 500 (M+ +1)
Pavyzdys 32
MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
Žr. Pavyzdžio 31 (ii) skirsnį.
Pavyzdys 33
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab (i) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
40°C temperatūroje bandant alkilinti homogenizuojant ultragarsu 455 mg (0,83 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25), kai esama 80 mg (0,86 mmol) chloracetamido, ištirpinto 3 ml acetonitrilo, ir
120
395 mg (2,86 mmol) kalio karbonato, paaiškėjo, kad reakcija vyksta itin vangiai. Net pridėjus 230 mg (2,6 mmol) ličio bromido, reakcija nepagreitėja. Tačiau, jei pridedama ličio jodido ir šildoma homogenizuojant ultragarsu, gaunama nedidelių produkto kiekių, ką patvirtina plonasluoksnė chromatografija (TLC). Apdorojus pridedant vandens, išekstrahavus etilo acetatu/toluenu, išdžiovinus organinę fazę (MgSO4) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurias išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant MeOH/CH2CI2 eliuentą, gaunama 118 mg (24%) reikiamo produkto.
(ii) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HCI
118 mg (0,2 mmol) H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto ml 95% etanolio, hidrinama 2 vai., esant 143 mg 10% Pd/C. Mišinys praskiedžiamas distiliuotu vandeniu ir druskos rūgštimi, ir filtruojamas per hyflo filtrą. Liofilizavus, gaunama 26 mg (24%) reikiamo produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDgOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m,
16H), 2,3 (d, 1H), 3,4 (t, 1H), 3,6 (AB-sistema, 2H), 3,8 (d, 2H), 4,35 (t, 1H), 4,5 (s, 2H), 5,2 (s, 1H), 7,55 (d, 2H), 7,8 (d, 2H).
Pavyzdys 34
Boc-(R)Cha-Pic-Pab mg (0,015 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25), ištirpinto 5 ml etanolio, hidrinama 4 vai., esant 38 mg 10% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, δ po to ištirpinus nuosėdas vandenyje ir liofilizavus, gaunama 7,6 mg (95%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, CD3OD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m,
16H), 2,4 (d, 1H), 3,25 (t, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,5 (AB-sistema, 2H), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,25 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
121
Pavyzdys 35
Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HCI (i) Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
0,06 g (0,8 mmol) acetilo chlorido pridedama kambario temperatūroje į 0,37 g (0,68 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 0,19 g (1,35 mmol) K2COg, ištirpinto 10 ml CHgCN, mišinį. Pamaišius dar min. kambario temperatūroje, tirpiklis pašalinamas vakuume. Nuosėdos ištirpinamos CH2CI2 ir praplaunamos vandeniu. Išgarinus ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (99,9/0,1; 99,8/0,2; 99,6/0,4; 99,2/0,8 ir 98,4/1,6), gaunama 0,24 g (60%) produkto.
(ii) Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HCI
Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z) hidrinamas atmosferos slėgyje, esant 5%
Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį, nevalyta medžiaga gryninama RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH^OAc eliuentą (35/65). Išradimo junginys gaunamas pašalinus tirpiklį ir paveikus NH4OAc pertekliumi bei liofilizavus 1M druskos rūgšties.
1H-BMR (300 MHz, CD3OD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,15-2,0 (m,
19H), 2,35-2,47 (m, 1H), 3,2-3,33 (m, 1H), 3,95-4,05 (m, 1H), 4,46; 4,57 (ΑΒΧ, 2H), 5,16-5,22 (m, 1H), 7,51 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,23 (m, 1H). Vieno iš protonų atsakas yra visiškai uždengiamas tirpiklio signalo.
^C-BMR (75 MHz, CDgOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,3; 172,5; 173,8; 175,1.
MS m/z456 (M+ +1).
Pavyzdys 36
Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab x HCI (i) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) mg (0,42 mmol) metansulfonilo chlorido, ištirpinto 0,5 ml metileno chlorido, tirpalas 0°C temperatūroje pridedamas į maišomą 209
122 mg (0,382 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) ir 0,11 ml (0,763 mmol) trietilamino, ištirpinto 5 ml metileno chlorido, tirpalą. Per naktį mišinio temperatūra susilygina su kambario temperatūra. Praplovus vandeniu, po to išdžiovinus (Na2SO4) ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurias išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą (95/5), gaunama 159 mg (67%) produkto.
(ii) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab x HCI
150 mg (0,24 mmol) Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z), ištirpinto 5 ml
95% etanolio ir 1 ml vandens, hidrinama 4 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių, pridėjus 0,2 ml 1M druskos rūgšties ir išgarinus tirpiklį vakuume, yra gaunamos nuosėdos, kurias ištirpinus 2 ml vandens ir liofilizavus gaunama 116 mg (86%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, CDgOD): δ 0,90-1,10 (m, 2H), 1,15-1,85 (m,
15H), 1,90 (pld, 1H), 2,30 (pld, 1H), 2,85 (s, 3H), 3,35 (dt, 1H), 3,90 (pld, 1H), 4,45 (AB-sistema, 2H), 4,50-4,55 (m, 1H), 5,13 (dd, 1H), 7,50 (d, 2H),
7,75 (d, 2H).
C-BMR (125 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,8; 173,0 ir 174,6.
Pavyzdys 37
H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)
-18°C temperatūroje į maišomą 1,0 g (2,6 mmol) Boc-(R)Cha(R,S)betaPic-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,28 g (10,5 mmol) DMAP, 0,74 g (2,6 mmol) H-Pab-(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 35 ml DMF, tirpalą pridedama EDC. Per naktį mišinio temperatūrai susilyginus su kambario temperatūra, tirpiklis pašalinamas vakuume. Nuosėdos ištirpinamos CH2CI2, po to organinis sluoksnis praplaunamas 0,3M KHSO4, KHCOg tirpalu ir sūrymu. Išdžiovinus (Na2SO4) ir pašalinus tirpiklį, yra gaunamos nuosėdos, kurias išgryninus
123 greitosios chromatografijos budu, naudojant heptano/etilo acetato su 4% metanolio eliuentą, gaunama 0,74 g (44%) reikiamo produkto.
(ii) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)
0,68 g (1,05 mmol) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) ištirpinama etilo acetate, prisotintame HCI dujų. Tirpalas maišomas 1 vai.
kambario temperatūroje. Pridėjus vandens tirpalas šarminamas, naudojant K2COg. Vandens fazė ekstrahuojama etilo acetatu. Tuomet organinė fazė praplaunama vandeniu, išdžiovinama (Na2SO4). Po garinimo gaunama 0,5 g (87%) reikiamo produkto.
(iii) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HCI mg (0,19 mmol) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) ištirpinama 7 ml etanolio ir hidrinama 4 vai., esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus 1 M druskos rūgšties ir vandenyje, gaunama 41 mg (71%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, D2O, 2 diastereomerai 4/5, ir rotamerai): δ
0,8-2,16 (m, ), 2,5-2,77 (m, 3H), 3,13-3,43 (m, 3H), 3,68-3,94 (m, 1H), 4,18-4,41 (m, 1H), 4,41-4,52 (m, 3H), 7,46-7,57 (m, 2H), 7,72-7,83 (m, 2H).
Pavyzdys 38
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)
0,21 g (0,38 mmol) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 37) ištirpinama 2 ml etanolio. Pridedama 0,68 g (0,42 mmol) benzilakrilato ir tirpalas maišomas 5 dienas. Po garinimo ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5, gaunama 0,19 g (70%) reikiamo produkto.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HCI
170 mg (0,24 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPicPab(Z) ištirpinama 10 ml etanolio ir hidrinama 4 vai., esant 5% Pd/C.
3/1 i Z-r
Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus 1 M druskos rūgšties ir vandenyje, gaunama 103 mg (77%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, D2O, dviejų diastereomerų mišinys santykiu 4/5 ir rotamerai): δ 0,92-2,03 (m, H), 2,51-2,78 (m, 1H), 3,21-3,52 (m, 1H), 3,88-4,01 (m, 1H), 4,07-4,3 (m, 2H), 4,4-4,71 (m, 2H), 7,59 (d, 2H), 7,86 (d, 2H).
15C-BMR (300,13 MHz, D2O, dviejų diastereomerų mišinys santykiu 4/5 ir rotamerai): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,0; 168,0; 168,1; 175,9; 176,0; 176,3; 176,4 ir 178,2.
Pavyzdys 39
HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)
-12°C temperatūroje į 3,41 g (9,2 mmol) Boc-(R)Cha-Val-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 2,61 g (9,2 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 4,5 g (36,8 mmol) DMAP, ištirpinto 50 ml DMF, mišinį pridedama 1,77 g (9,2 mmol) EDC. Per naktį mišinio temperatūrai susilyginus su kambario temperatūra, mišinys praskiedžiamas vandeniu, po to ekstrahuojamas toluenu, eteriu ir etilo acetatu. Sujungtus organinius ekstraktus išdžiovinus (MgSO4), pašalinus vakuume tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą, gaunama 2,77 g (47%) reikiamo produkto.
(ii) H-(R)Cha-Val-Pab(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos per 2,77 g (4,4 mmol) Boc(R)Cha-Val-Pab(Z), ištirpinto 75 ml etilo acetato, tirpalą. Po 15 min. pridedama natrio karbonato tirpalo, kol pH bus lygus 10, ir vandens fazė ekstrahuojama etilo acetatu. Išdžiovinus (kalio karbonatu) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunama 1,8 g (77%) H-(R)Cha-Val-Pab(Z).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)
326 mg (0,61 mmol) H-(R)Cha-Val-Pab(Z), 105 ml (0,67 mmol) benzilbromacetato ir 252 mg (1,83 mmol) kalio karbonato, ištirpinto 2 ml
125 acetonitrilo, mišinys homogenizuojamas ultragarsu 2,5 vai. 40°C temperatūroje. Kad produktas ištirptų, pridedama dar acetonitrilo ir mišinys nufiltruojamas bei vakuume pašalinamas tirpiklis. Nuosėdos gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant metanolio/metileno chlorido eliuentą. Galiausiai produktas kristalizuojamas iš etilo acetato ir gaunama 124 mg (30%) bespalvių kristalų.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HCl
124 mg (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z), ištirpinto ml etanolio, hidrinama 2 vai., esant 25 mg 10% Pd/C. Pridedama 10 ml THF ir hidrinama dar 2 vai. 50°C temperatūroje. Mišinys filtruojamas per hyflo, nufiltruota medžiaga praplaunama praskiesta druskos rūgštimi. Organiniai tirpikliai pašalinami iš sujungtų filtratų vakuume. Liofilizavus likusį tirpalą gaunama 55 mg (50%) reikiamo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 0,75-1,4 (m, 12H), 1,5-1,9 (m, 7H),
2,0-2,15 (pis, H), 3,45 (AB-sistema, 2H), 4,1 (m, 2H), 4,5 (m, 2H), 7,5 (s, 2H), 7,7 (s, 2H), 8,9 (s, 1H).
Pavyzdys 40
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HCl (i) H-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
Išradimo junginys yra gaunamas jungiant Boc-(R)Cha-Val-OH su H-Pab(Z). Tuo tikslu pivaloilas jungiamas pagal Boc-(R)Cha-Pic-OMe gavimo aprašymą (žr. Pradinių medžiagų gavimas). Boc-(R)Cha(R.S)Val-Pab(Z) yra gaunamas, pilnai įvykus valino epimerizacijai. Boc apsauginė grupė pašalinama taip pat, kaip ir Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z) atveju (žr. Pavyzdį 39). Taip gaunamas išradimo junginys.
(ii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
1,007 g (1,9 mmol) H-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z) ir 308 mg (1,9 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 3 ml etanolio, tirpalas laikomas per naktį 40°C temperatūroje. Pašalinus tirpiklį vakuume ir nuosėdas išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant metanolio/metileno chlorido eliuentą santykiu 10/90, gaunama 1,086 g (82%) išradimo junginio.
(iii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HCI
1,086 g (1,6 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z) hidrinama 2 valandas 25 ml THF ir 14 ml 0,5 M druskos rūgšties tirpale, esant 223 mg 10% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per celitą ir pašalinus THF vakuume ir, po to, liofilizavus likusį vandeninį tirpalą, gaunamos nuosėdos, kurių maždaug 300 mg paveikiama HPLC būdu, naudojant 25% acetonitrilo, ištirpinto 0,1 M amonio acetato buferyje, eliuentą. Išradimo junginys yra antrojoje iš dviejų atskirtų pagrindinių frakcijų. Tuo būdu, išskiriama 67 mg išradimo junginio dihidrochlorido.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,0-1,15 (m, 12H), 1,2-1,4 (m, 7H),
1,65-1,9 (m, 7H), 2,15-2,25 (m, 1H), 2,85 (t, 2H), 3,15-3,2 (m, 1H), 3,3-3,35 (m, 1H), 4,15-4,2 (m, 1H), 4,25 (d, 1H), 4,55-4,65 (AB-sistema, 2H), 7,65 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,0; 169,8; 173,96 ir 174,04.
Pavyzdys 41
H-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
Gaunama tuo pačiu būdu, kaip aprašyta Boc-(R)Cha-PicPab(Z) gavimo atveju (žr. Pavyzdį 25), pakeitus Boc-(R)Cha-Pic-OH su Boc-(R)Hoc-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas). Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant tolueno/EtOAc eliuentą santykiu 1/6, gaunama 0,32 g (37%) reikiamo produkto.
(ii) H-(R)Hoc-Aze-Pab
Kad būtų gauta 0,23 g (88%) išradimo junginio, Boc-(R)HocAze-Pab(Z) paveikiamas tuo pačiu būdu, kaip ir Pavyzdžio 25 junginys Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z).
ί 27 (iii) H-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 HCI mg (0,037 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) ištirpinama 3 ml etanolio ir hidrinama 4 vai. atmosferos slėgyje, esant 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus 1 M druskos rūgšties, gaunama 11 mg (63%) produkto.
1H-BMR (300,13 MHz, D2O, dviejų rotamerų mišinys 3/1):
gausesnis rotameras: δ 0,9-2,1 (m, 15H), 2,4-2,6 (m, 1H), 2,7-3,0 (m, 1H),
4,1-4,3 (m, 1H), 4,35-4,56 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 5,0-5,11 (m, 1H), 7,62 (d, 2H), 7,9 (d, 2H). Vieno iš protonų atsakas yra visiškai uždengiamas H-O-D signalo.
Pavyzdys 42
HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 TFA (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
0,067 g (0,41 mmol) benzilakrilato pridedama kambario temperatūroje j 0,2 g (0,37 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 41), ištirpinto 2 ml etanolio (95%), tirpalą. Reakcija vykdoma kambario temperatūroje 5 dienas. Pašalinus tirpiklį vakuume ir išgryninus nuosėdas greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 96/4, gaunama 0,16 g (62%) reikiamo produkto.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 TFA
160 mg (0,23 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) ištirpinama 10 ml etanolio ir hidrinama atmosferos slėgyje 3 vai., esant 5% Pd su medžio anglimi. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį, liofilizavus vandenyje ir TFA, gaunama 120 mg (87%) produkto.
^H-BMR (300,13 MHz, D2O, du rotamerai santykiu 3/1):
gausesnis rotameras: δ 0,9-1,9 (m, 13H), 1,94-2,16 (m, 2H), 2,38-2,55 (m, 1H), 2,7-2,97 (m, 3H), 3,2-3,44 (m, 2H), 4,16 (m, 1H), 4,35-4,58 (m, 2H),
4,65 (s, 2H), 5,0-5,12 (m, 1H), 7,63 (d, 2H), 7,87 (d, 2H).
13C-BMR (300,13 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,3; 168,7; 172,5 ir 176,6.
123
Pavyzdys 43
HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
Gaunama iš Boc-(R)Hoc-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) taip pat kaip ir Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) Pavyzdyje 25. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą, gaunama 0,886 g (58%) išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-2,1 (m,
27H; iš ten 1,2 (s, 9H)), 2,1-2,4 (m, 1H), 3,3-3,5 (m, 1H), 3,65-3,95 (m, 1H), 4,0-4,2 (m, 1H), 4,2-4,45 (m, 2H), 4,45-4,6 (d, 1H), 5,15 (neryškus pis, 2H),
5,2-5,3 (d, 1H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,65 (m, 1H), 7,7-7,8 (d, 2H), 9,4 (pis, H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,3; 164,6; 168,1; 171,4 ir 172,4.
(ii) H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) ml etilo acetato, prisotinto vandenilio chloridu, pridedama 0°C temperatūroje į 0,82 g (1,266 mmol) Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z). Temperatūrai laidžiama susilyginti su kambario temperatūra. Po 1,5 vai. reakcija nesibaigia, todėl vandenilio chlorido dujos pučiamos per reakcijos mišinį dar 5 min. Tirpiklis išgarinamas, pridedama etilo acetato ir prisotinto natrio karbonato, atskiriamos fazės. Praplovus organinę fazę sūrymu ir išdžiovinus (Na2SO4) ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamas beveik visos išeigos išradimo junginys.
1 H-BMR (300 MHz, CDCI3): δ 0,75-0,95 (m, 2H), 0,95-2,4 (m,
17H), 3,3-3,55 (m, 2H), 3,55-3,7 (m, 1H), 4,25-4,45 (m, 2H), 4,5-4,6 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,6-7,7 (m, 1H),
7,7-7,85 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 167,8; 171,4 ir 175,3.
129 (iii) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
J 0,15 g (0,5 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 1,5 ml EtOH (99%), pridedama 0,273 g (0,498 mmol) H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 10 dienų. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Gaunama 0,103 g (25%) BnOOC-CH2(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z).
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,75-2,05 (m, 18H), 2,3-2,45 (m,
1H), 2,45-2,8 (m, 3H), 3,15-3,45 (m, 3H), 3,5-3,65 (m, 1H), 4,3-4,5 (m, 2H),
4,55-4,7 (m, 1H), 4,8 (s, 1H), 4,9-5,1 (m, 3H), 5,2 (s, 2H), 7,1-7,2 (m, 1H),
7,2-7,4 (m, 13H), 7,4-7,45 (d, 2H), 7,6-7,8 (m, 3H).
(iv) HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HCI
103 mg (0,122 mmol) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z), ištirpinto 4 ml etanolio (99,5%) ir 0,3 ml chloroformo, hidrinama 2 vai., esant 111 mg 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį, ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, hidrinimas nėra baigtas. Todėl hidrinimas tęsiamas dar 5 vai., esant etanoliui, 1 N HCI ir 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį bei ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, yra gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, CDgOD, dviejų diastereomerų mišinys): δ
0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 6H), 1,6-1,8 (m, 5H), 1,9-2,15 (m, 5H), 2,252,35 (m, 1H), 2,9-3,2 (m, 2H), 3,5-3,65 (m, 1H), 3,7-3,9 (2m, visas 1H), 4,15-4,4 (2m, visas 1H), 4,4-4,6 (m, 4H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).
^3C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,9; 168,2; 168,3; 172,8; 173,6; 174,3 ir 174,4. Dviejų diastereomerų atsakai iš dalies persikloja.
Pavyzdys 44
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
Gaunama iš Boc-(R)Hoc-Pic-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) taip pat kaip ir
Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) Pavyzdyje 25. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą, gaunama 1,3 g (78%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,75-0,95 (m, 2H), 0,95-2,0 (m,
31H (iš ten 1,3 (s, 9H)), 2,4-2,5 (m, 1H), 3,0-3,1 (m, 1H), 3,8 (m, 1H), 4,24,25 (m, 2H), 4,45-4,55 (m, 2H), 5,15 (neryškus pis, 3H), 5,25-5,3 (m, 1H),
7,0 (pis, 1H), 7,15-7,5 (m, 7H), 7,7-7,85 (d, 2H), 9,45 (pis, 1H).
C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,6; 164,7; 168,1; 170,0 ir 173,0.
(ii) H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
100 ml etilo acetato, prisotinto vandenilio chloridu, pridedama 0°C temperatūroje j 1,3 g (1,96 mmol) Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z). Temperatūrai susilyginus su kambario temperatūra, tirpiklis išgarinamas po 40 min., pridedama etilo acetato ir prisotinto natrio karbonato, atskiriamos fazės. Praplovus organinę fazę sūrymu ir išdžiovinus (Na2SO4) bei išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 0,85 g (77,5%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,75-0,95 (m, 2H), 1,05-2,3 (m,
25H), 3,0-3,15 (m, 1H), 3,6-3,75 (m, 2H), 4,25-4,4 (m, 2H), 5,15 (neryškus pis, 3H), 7,05-7,2 (d, 2H), 7,2-7,35 (m, 4H), 7,35-7,4 (d, 1H), 7,6-7,8 (d, 2H).
I^C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 167,9; 170,8 ir 175,7.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
0,171 g (0,748 mmol) benzilbromacetato pridedama j 0,4 g (0,712 mmol) H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) ir 0,217 g (1,57 mmol) K2COg, ištirpinto 7 ml acetonitrilo, mišinį. Mišinys šildomas aliejaus vonioje, esant temperatūrai iki 60°C, aliejaus vonioje 1 vai. Tirpiklis pašalinamas ir pridedama etilo acetato ir vandens. Atskyrus fazes, organinė fazė praplaunama sūrymu ir išdžiovinama (Na2SO4). Išgarinus vakuume, gaunama 0,626 g nuosėdų, kurias išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą, gaunami 2 produktai. Pirmas
13' išsiplovęs iš kolonėlės junginys yra (BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z) (0,28 g), antras - yra išradimo junginys (0,27 g).
BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z):
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 1,0-1,75 (m,
18H), 2,3-2,5 (m, 1 ar 2H), 2,9-3,05 (m, 1H), 3,2-3,3 (m, 1H), 3,35-3,5 (m, 2H), 3,6-3,7 (m, 1H), 4,35-4,55 (ΑΒΧ-sistema, 2H), 4,75 (s, 2H), 5,15 (neryškus s, 3H), 5,25-5,3 (m, 1H), 7,1-7,45 (m, 12H), 7,7-7,8 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,6; 167,9; 170,5; 173,4 ir 175,0.
(iv) HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HCI
259 mg (0,365 mmol) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z), ištirpinto 7,8 ml etanolio (99,5%), ir 1,2 ml druskos rūgšties (1 N) hidrinama 4 vai., esant 280 mg 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatoriųir išgarinus tirpiklį bei ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, yra gaunama 170 mg (83%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,4-1,85 (m, 20H), 1,85-2,2 (m,
1H), 2,9-3,2 (m, 1H), 3,4-3,9 (m, 3H), 4,05-4,3 (m, 2H), 4,3-5,05 (m, 2H),
7,1-7,4 (m, 2H), 7,4-7,7 (m, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,8; 168,6; 169,6 ir 172,3.
Pavyzdys 45 (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HCI (i) (BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
Išradimo junginys yra gaunamas alkilinant H-(R)Hoc-PicPab(Z), kaip aprašyta Pavyzdyje 44.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-1,95 (m,
18H), 2,35-2,5 (m, 1H), 2,9-3,05 (m, 1H), 3,5-3,85 (m, 6H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,9 (2s, 4H), 5,2 (s, 2H), 5,25-5,35 (m, 1H), 7,1-7,45 (m, 16H), 7,57,65 (m, 1H), 7,7-7,85(d, 2H).
152 13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,7; 167,9; 170,5; 172,0 ir 172,4.
(ii) (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HCI
153 mg (0,178 mmol) (BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z), ištirpinto 4,5 ml etanolio (99,5%) ir 0,5 ml druskos rūgšties (1 N), hidrinama 3,5 vai., esant 150 mg 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį bei ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, yra gaunama 109 mg (99%) (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab dihidrochlorido. Šis nevalytas produktas (80% grynumo) gryninamas RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH^OAc eliuentą santykiu 1/4. Pašalinus tirpiklį ir paveikus NH^OAc pertekliumi ir liofilizavus, esant produktui 1 M HCI, gaunamas išradimo junginys.
^H-BMR (500 MHz, D2O, dviejų rotamerų mišinys): gausesnis rotameras: δ 0,95-2,15 (m, 20H), 2,25-2,35 (m, 1H), 3,45-3,55 (m, 1H),
3,95-4,25 (m, 5H), 4,6-4,65 (m, 2H), 4,92-5,01 (m, 1H), 5,15-5,20 (m, 1H), 7,58-7,63 (d, 2H), 7,84-7,89 (d, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami δ 0,7-0,85 (m), 2,35-3,45 (m), 3,05-3,15 (m), 4,47-4,55 (m),
4,55-4,6 (m), 4,65-4,7 (m), 7,63-7,67 (d), 7,89-7,95 (d).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 168,20; 169,70; 170,20 ir 172,71.
Pavyzdys 46
HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
Į 570 mg (1,5 mmol) Boc-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 425 mg (1,5 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 733 mg (6 mmol) DMAP, ištirpintų 25 ml CHgCN/DMF santykiu 1,5/1, tirpalą pridedama 310 mg (1,62 mmol) EDC ir mišinys maišomas 23 vai. kambario temperatūroje. Išgarinus didžiąją dalį tirpiklio, į gautas nuosėdas pridedama 50 ml vandens. Vandens fazė ekstrahuojama 1x75 ml ir 2x50 ml EtOAc. Susisdariusi organinė fazė praplaunama 1x20 ml + 1x10 ml 1M KHSO^, 1x15 ml NaHCOg (vand.), 3x15 ml vandens, 1x15 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO^). Nufiltravus ir išgarinus tirpiklį, gaunama 670 mg aliejaus, kurį išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant EtOAc eliuentą, gaunama 529 mg (55%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,26 (s, 9H), 1,53-1,88 (m, 3H),
2,1-2,31 (m, 3H), 2,52 (q, 1H), 3,58-3,77 (m, 4H), 4,31 (d, 1H), 4,35 ir 4,47 (ΑΒΧ-sistema, 2H), 4,65 (dd, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,1-7,37 (m, 10H), 7,42 (d, 2H), 7,81 (d, 2H), 8,0 (t, 1H (NH)).
13C-BMR (75 MHz, CDCI3): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,6; 164,6; 168,1; 171,1 ir 171,3.
(ii) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
529 mg (0,81 mmol) Boc-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) ištirpinama 15 ml EtOAc/HCI(duj., prisotintas) kambario temperatūroje ir maišoma 3 vai. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 70 ml CH2CI2, organinė fazė praplaunama 1x10 ml 2M NaOH, 1x10 ml vandens, 1x10 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO4). Nufiltravus ir išgarinus tirpiklį, gaunama 403 mg (90%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 1,44-1,57 (m, 1H), 1,62-1,86 (m,
2H), 1,96-2,35 (m, 3H), 2,45 (q, 1H), 3,05-3,35 (m, 4H), 3,83 (pld, 1H),
4,25-4,45 (m, 2H), 4,53 (m, 1H), 5,19 (s, 2H), 7,16-7,37 (m, 10H), 7,42 (d,
2H), 7,66 (t, 1H, (NH)), 7,77 (d, 2H).
°C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,4; 167,9; 171,1 ir 173,0.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
200 mg (0,36 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z), 105 mg (0,46 mmol) Br-CH2COOBn ir 125 mg (0,90 mmol) K2CO3, ištirpinto 10 ml CH3CN, mišinys šildomas temperatūroje iki 50°C 1 vai. 30 min.
Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 70 ml EtOAc. Organinė fazė praplaunama 10 ml vandens ir išdžiovinama (MgSO4). Nufiltravus ir
J'r išgarinus tirpiklį, gaunama 260 mg aliejaus. Nevalytas produktas yra gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH(NH3-prisotintas) gradientą (95/5, po to 9/1). Taip gaunama 182 mg (72%) baltos kietos medžiagos pavidalo išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 1,43-1,82 (m, 3H), 1,96-2,13 (m,
1H), 2,14-2,22 (m, 1H), 2,26-2,43 (m, 2H), 3,02-3,14 (m, 2H), 3,24-3,51 (m, 4H), 3,83 (d, 1H), 4,29-4,46 (ΑΒΧ-sistema, centruota prie 4,37; 2H), 4,58 (dd, 1H), 4,97-5,1 (AB-sistema, centruota prie 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,167,38 (m, 15H), 7,43 (d, 2H), 7,5-7,8 (m, 3H, vienas NH).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 167,9; 171,15; 171,2 ir 172,7.
(iv) HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HCI
0,18 g (0,26 mmol) BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) sumaišoma su 0,075 g 5% Pd/C, 1,0 ml 1N HCI tirpalu, 1 ml vandens ir 10 ml etanolio ir šis mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje vieną valandą. Nufiltravus katalizatorių per hyflo, išgarinus tirpiklį ir po to du kartus pašalinus vandenį liofilizuojant, gaunama 129 mg nevalyto produkto.
Nevalytas produktas gryninamas RPLC būdu, naudojant laiptinį eliuento 0,1 M NH^OAc/CHgCN gradientą (santykiu 4/1, po to 3/1). Nugarinus, o po to liofilizavus vandens ir 1N HCI tirpalo terpėje, gaunama 70 mg (50%) gryno produkto.
1 H-BMR (300 MHz, DgO): δ 1,42-1,60 (m, 1H), 1,65-1,83(m,
1H), 1,83-1,98 (m, 1H), 2,03-2,20 (m, 2H), 2,63 (t, 2H), 3,28-3,40 (m, 1H),
3,55-3,78 (m, 2H), 3,81-3,96 (AB-sistema, centruota prie δ 3,88, 2H), 4,064,19 (m, 1H), 4,37-4,61 (AB-sistema, centruota prie δ 4,49; 2H), 4,48 (dd, 1H), 4,70 (d, 1H), 7,35-7,58 (m, 7H), 7,74 (d, 2H).
^3C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,02; 167,2; 169,3 ir 174,4.
135
Pavyzdys 47
HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
J 190 mg (0,34 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 46), ištirpinto 7 ml EtOH (99%), tirpalą pridedama 114 mg (0,70 mmol) benzilakrilato ir reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 24 vai. Išgarinus tirpiklį ir po to išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH(NH3prisotintas) gradientą (95/5, po to 9/1), gaunama 202 mg (83%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 1,5-1,71 (m, 2H), 1,74-1,9 (m,
1H), 1,9-2,05 (m, 1H), 2,2-2,64 (m, 5H), 2,69-2,82 (m, 2H), 2,84-2,96 (m, 1H), 3,18-3,48 (m, 4H), 4,28-4,44 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 4,48-5,08 (ABsistema, centruota prie 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,15-7,37 (m, 15H), 7,44 (d, 2H), 7,75-7,85 (m, 3H, vienas NH).
13C-BMR (75 MHz, CDCI3): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,6; 168,0; 171,2; 172,5 ir 172,9.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pabx2 HCI
0,20 g (0,28 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-ProPab(Z) sumaišoma su 0,075 g 5% Pd/C, 1,0 ml 1N HCI tirpalu, 1 ml vandens ir 10 ml etanolio ir gautas mišinys hidrinamas 1 vai. atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių per hyflo, išgarinus tirpiklį ir po to du kartus pašalinus vandenį liofilizuojant, gaunama 125 mg (79%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,44 (m, 1H), 1,65-1,9 (m, 2H), 2,02,2 (m, 2H), 2,62 (q, 2H), 2,83 (t, 2H), 3,27-3,4 (m, 1H), 3,4-3,8 (m, 4H), 4,0-4,15 (m, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,68 (d, 1H), 7,35-7,6 (m, 7H), 7,77 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,2; 167,1; 174,1 ir 174,2.
136
Pavyzdys 48
HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
Gaunama tuo pačiu būdu kaip ir Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 25) atveju, naudojant Boc-(R)Tic-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) vietoj Boc-(R)Cha-Pic-OH. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant iš pradžių heptano/EtOAc eliuentą (4/1), po to EtOAc eliuentą, gaunama 425 mg (37%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,35 (s, 9H), 1,95-2,15 (m, 3H),
2,4 (m, 1H), 2,8 (m, 1H), 3,3 (m, 1H), 3,55 (m, 2H), 4,25-4,4 (du m, 2H),
4,55-4,7 (du m, 2H), 7,15-7,5 (m, 10H), 7,85 (d, 2H).
^3C-BMR (75,0 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,6; 171,5 ir 171,6 (greičiausia, du maksimumai yra persikloję).
(ii) H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
379 mg (0,59 mmol) Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z) ištirpinama EtOAc, prisotintame HCI dujų, ir maišoma kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklį, gaunama 251 mg (79%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,65-2,15 (du m, 7H), 2,45 (m,
1H), 2,75 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 3,0 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,55 (m, 1H),
3,85 (m, 1H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,75 (d, 1H), 4,9 (s, 1H), 5,25 (s, 2H), 6,87,45 (keli m, 8H), 7,5 ir 7,85 (du d, 4H).
13C-BMR (75,0 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 164,5; 171,3 ir 172,7 (greičiausia, du maksimumai yra persikloję).
(iii) BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
H-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (140 mg, 0,26 mmol) veikiamas 48 vai. 20°C temperatūroje benzilakrilatu (63 mg, 0,39 mmol), ištirpintu EtOH (1,3 ml). Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant 50% EtOAc/heptano, po to 10% MeOH/EtOAc eliuentus,
157 gaunama 133 mg (73%) baltos kietos medžiagos pavidalo reikiamo produkto.
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,75-2,0 (du m, 4H), 2,25 (m,
1H), 1,4-1,65 (m, 3H), 2,7-2,95 (du m, 4H), 3,05-3,2 (m, 2H), 3,9 (m, 1H),
4,45 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 5,1 (du d, 2H), 5,25 (s, 2H), 6,85-7,45 (keletas m, 12H), 7,5 ir 7,9 (du d, 4H).
13C-BMR (75,0 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 171,5; 171,9 ir 172,1 (greičiausia, du maksimumai yra persikloję).
(iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab x 2 HCI
125 mg (0,17 mmol) BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z) hidrinami, esant 5% Pd/C ir EtOH/HCI tirpikliui. Nufiltravus katalizatorių ir liofilizavus, gaunama 73 mg (77%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
1 H-BMR (500 MHz, D2O): δ 2,1-2,35 (du m, 3H), 2,6 (m, 1H),
2,95-3,1 (m, 2H), 3,25-3,5 (du m, 2H), 3,65 (m, 3H), 4,65 (s, 2H), 4,75 (m, 1H), 5,85 (s, 1H), 7,15-7,6 (trys m, 4H), 7,6-7,85 (du d, 4H).
13C-BMR (75,0 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,9; 167,1 ir 174,3 (greičiausia, du maksimumai yra persikloję).
Pavyzdys 49
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
Į 0,623 g (1,83 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,816 g (1,92 mmol) H-Pig(Z)2 (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,89 g (7,3 mmol) DMAP, ištirpinto 10 ml dichlormetano, mišinį pridedama 0,368 g (1,92 mmol) EDC ir mišinys maišomas per naktį. Mišinys praskiedžiamas ir praplaunamas 0,3 M KHSO4 tirpalu ir vieną kartą sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Gaunama 1,4 g nevalyto produkto,
138 kuris gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Gaunama 0,3 g (22%) gryno produkto.
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
0,3 g (0,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 sumaišoma su 10 ml dichlormetano ir 2,5 ml trifluoracto rūgšties. Mišinys maišomas pusantros valandos. Išgarinus tirpiklį, gautos nuosėdos ištirpinamos dichlormetane ir du kartus praplaunamos 0,2 M NaOH tirpalu. Susisdaręs organinis sluoksnis dar kartą ekstrahuojamas dichlormetanu. Išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir nugarinus susidariusį organinį sluoksnį gaunama 0,24 g (93%) produkto.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg, 339K): δ 0,9-1,9 (m, 15H), 1,94 (pld,
1H), 2,37-2,52 (m, 1H), 2,65-2,8 (m, 1H), 2,9-3,08 (m, 3H), 3,20 (t, 2H), 4,05-4,28 (m, 4H), 4,86 (dd, 1H), 5,16 (s, 4H), 7,2-7,42 (m, 10H), 7,98 (pis, NH), (iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
0,231 g (0,36 mmol) ištirpinama 2 ml etanolio ir pridedama 61 ul(0,40 mmol) benzilakrilato. Reakcijos mišinys maišomas penkias dienas kambario temperatūroje. Mišinys garinamas ir nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (95/5, 90/10). Gaunama 0,218 g (75%) gryno produkto.
1 H-BMR (500 MHz, ČDCIg, 335K): δ 0,93(plq, 1H), 1,02-1,85 (m, 14H), 1,94 (pld, 1H), 2,33-2,5 (m, 3H), 2,58-2,77 (m, 2H), 2,79-3,02 (m, 4H), 3,17 (t, 2H), 4,0-4,25 (m, 4H), 4,86 (dd, 1H), 5,11 (s, 2H), 5,12 (s, 4H),
7,2-7,4 (m, 15H), 8,03 (pis, NH), 10,35 (pis, NH), (iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig x 2 HCI
0,218 g (0,27 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 sumaišoma su 0,10 g 5% Pd/C, 1 ml 1M HCI tirpalu, 1 ml vandens ir 10 ml etanolio ir gautas mišinys hidrinamas 1 vai. atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių per hyflo, išgarinus tirpiklį ir du kartus liofilizavus vandenyje, gaunama 134 mg (95%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-1,4 (m, 7H), 1,55-2,05 (m, 9H),
2.22-2,34 (m, 1H), 2,61-2,76 (m, 1H), 2,88 (t, 2H), 3,08 (plt, 2H), 3,19 (d, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,83 (pld, 2H), 3,95 (d, 1 H), 4,29-4,49 (m, 2H), 4,90 (dd, 1H).
9
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,4; 167,6; 172,1 ir 174,7.
Pavyzdys 50
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
-15°C temperatūroje 0,568 g (2,96 mmol) EDC pridedama į 1 g (2,82 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,197 g (2,82 mmol) H-Pig(Z)2 (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 1,38 g (11,28 mmol) DMAP, ištirpinto acetonitrile, mišinį. Temperatūra per naktį susilygina su kambario temperatūra. Išgarinus tirpiklį vakuume, pridedama metileno chlorido ir 1M KHSO4- Fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama prisotintu NaHCOg tirpalu, vandeniu ir sūrymu, išdžiovinama (Na2SO4) ir išgarinami tirpikliai. Gautos nuosėdos (2,033 g) gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Tuo būdu gaunami du produktai: 720 mg (34%) išradimo junginio, kuris išsiplauna iš kolonėlės pirmas, ir 775 mg (44%) Boc(R)Cgl-Pro-Pig(Z), susidarančio praradus vieną iš Z-apsauginių grupių.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg); Kai kurie signalai, ypač piperidino žiedo, yra išskirtinai platesni dėl tarpmolekulinės sąveikos procesų. Tas itin ryšku 2- ir 6-CH2 grupėse piperidino žiede, kurioms būdingas platus maksimumas nuo 3,5 iki 4,5 m.d.
δ 0,85-2,1 (m, 19H), 2,3-2,45 (m, 1H), 2,8-3,2 (m, 4H), 3,45-3,55 (m, 1H), 3,55-3,65 (m, mažesnę dalį sudarantis rotameras), 3,8-3,93 (m, 1H), 3,97-4,1 (m, 1H), 4,52-4,62 (d, 1H), 5,1 (neryškus pis, 5H), 7,12-7,41 (m, 10H).
^C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 155,2; 156,3; 171,0 ir 172,1.
(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
720 mg (0,946 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 ištirpinama 35 ml TFA/CH2CI2 santykiu 1/4 ir maišoma 30 min. Išgarinus tirpiklį vakuume, pridedama etilo acetato ir 2 M NaOH. Organinis sluoksnis praplaunamas vandeniu ir sūrymu, išdžiovinamas (Na2SO4), tirpiklis išgarinamas vakuume. Taip gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg); Kai kurie signalai, ypač piperidino žiedo, yra išskirtinai platesni dėl tarpmolekulinės sąveikos procesų. Tas itin ryšku 2- ir 6-CH2 grupėse piperidino žiede, kurioms būdingas platus maksimumas nuo 3,5 iki 4,5 m.d.
δ 0,8-2,15 (m, 19H), 2,22-2,4 (m, 1H), 2,75-2,98 (m, 2H), 2,98-3,18 (m, 2H), 3,18-3,35 (m, 1H), 3,35-3,5 (kvart., 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,42-4,58 (d, 1H), 5,1 (s, 4H), 7,1-7,5 (m, 10H).
15C-BMR (75 MHz, CDCIg): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,96; 171,31; 174,82.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
0,298 g (0,999 mmol) BnOOC-CH2-OTf (žr. Pradinių medžiagų gavimas) pridedama j 0,64 g (0,999 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 ir 0,531 g (2,996 mmol) K2COg, ištirpinto 6,4 ml acetonitrilo, mišinį ir virinama su grįžtamuoju šaldytuvu. Po 1 vai. 20 min. mišinys praplaunamas vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir tirpiklis išgarinamas vakuume. Gaunama 729 mg nuosėdų, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Taip gaunami du produktai: 120 mg (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2, kuris iš kolonėlės išsiplauna pirmas, ir
142 mg (18%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg); Kai kurie signalai, ypač piperidino žiedo, yra išskirtinai platesni dėl tarpmolekulinės sąveikos procesų. Tas itin ryšku 2- ir 6-CH2 grupėse piperidino žiede, kurioms būdingas platus maksimumas nuo 3,5 iki 4,6 m.d.
δ 0,94-2,27 (m, 19H), 2,28-2,43 (m, 1H), 2,8-2,98 (m, 2H), 2,983,06 (m, 1H), 3,06-3,15 (d, 1H), 3,15-3,25 (m, 1H), 3,3-3,5 (m, 4H), 4,54,61 (d, 1H), 5,1 (s, 6H), 7,1-7,6 (m, 15H), 10,52 (pis, 1H).
141 (iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HCI
142 mg (0,176 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 hidrinama 2 vai., esant 0,88 ml 1 M druskos rūgšties, 10 ml etanolio (99,5%) ir 180 mg 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per hyflo ir millipore filtrus, po to išgarinus tirpiklį vakuume ir liofilizavus, gaunama 95 mg HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HCI. Ši nevalyta medžiaga (79% grynumo) valoma RPLC pagalba, naudojant CHgCN/0,1M NH4OAc eliuentą santykiu 15/85. Liofilizavimo metu pašalinus tirpiklį ir HN4OAc perteklių, pavertus hidrochloridu ištirpinant 1M druskos rūgšties tirpale, ir po to liofilizavus, gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,1-1,35 (m, 6H), 1,63-2,14 (m,
13H), 2,26-2,36 (m, 1H), 3,01-3,23 (m, 4H), 3,49-3,62 (kvart., 2H), 3,623,77 (m, 2H), 3,77-3,88 (neryškus d, 2H), 4,18-4,32 (d, 1H), 4,37-4,5 (m, 1H).
Pavyzdys 51
H-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2 j gerai maišomą 86 mg (0,243 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 100 mg (0,236 mmol) H-Pig(Z)2 (žr.
Pradinių medžiagų gavimas) ir 115 mg (0,944 mmol) DMAP, ištirpinto 5 ml CHgCN, mišinį pridedama 50 mg (0,260 mmol) EDC ir gautas mišinys maišomas kambario temperatūroje 20 vai. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos 70 ml EtOAc ir organinė fazė praplaunama 3x5 ml 1M KHSO4> 1x5 ml NaHCOg, 3x5 ml H2O, 1x5 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO4). Nufiltravus ir išgarinus tirpiklį, gaunama 141 mg aliejaus. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos (36 g SiO2) būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą (97/3, po to 95/5), gaunama 43 mg (24%) išradimo junginio.
142 (ii) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2
Vandenilio chlorido dujos pučiamos 5 min. per 43 mg (0,0565 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2, ištirpinto 10 ml etilo acetato. Išgarinus tirpiklį vakuume, pridedama 0,1 M NaOH tirpalo. Atskyrus fazes, organinė fazė praplaunama vandeniu ir sūrymu, ir išdžiovinama (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį, gaunama 38 mg medžiagos, kuri gryninama greitosios chromatografijos būdu, naudojant 10% NH^-prisotinto metanolio, ištirpinto etilo acetate, eliuentą, gaunama 28 mg reikiamo produkto.
^H-BMR (300 MHz, CDCIg); Kai kurie signalai, ypač piperidino žiedo, yra išskirtinai platesni dėl tarpmolekulinės sąveikos procesų. Tas itin ryšku 2- ir 6-CH2 grupėse piperidino žiede, kurioms būdingas platus maksimumas nuo 3,5 iki 4,5 m.d.
δ 0,75-1,85 (m, 18H), 2,35-2,53 (m, 1H), 2,62-2,78 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 3,0-3,28 (m, 2H), 3,28-3,37 (m, 1H), 3,97-4,18 (m, 2H), 4,8-4,9 (m, 1H), 5,1 (s, 4H), 7,2-7,45 (m, 9H), 8,05-8,15 (m, 1H).
(iii) H-(R)Cha-Aze-Pig x HCI mg (0,042 mmo!) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2, ištirpinto 2 ml etanolio (99,5%), ir 0,13 ml druskos rūgšties (1 N) hidrinama 4 vai., esant 35 mg 5% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį vakuume, po to ištirpinus vandenyje ir liofilizavus, gaunama 12 mg (60%) H-(R)ChaAze-Pig dihidro-chlorido.
^H-BMR (500 MHz, 300 K, CD^OD); Kai kurie signalai, ypač piperidino žiedo, yra išskirtinai platesni dėl tarpmolekulinės sąveikos procesų. Tas itin ryšku 2- ir 6-CH2 grupėse piperidino žiede, kurioms būdingas platus maksimumas nuo 3,7 iki 4,5 m.d.
δ 0,75-2,1 (m, 18H), 2,2-2,35 (m, 1H), 2,62-2,75 (m, 1H), 3,0-3,12 (t, 2H), 3,12-3,23 (d, 2H), 3,85-3,95 (d, 2H), 3,95-4,0 (dd, 1H), 4,15-4,23 (m, 1H), 4,35-4,42 (m, 1H), 4,72-4,78 (m, 1H).
13C-BMR (75 MHz, CD^OD): guanidinas: δ 157,6; karbonilo anglies atomai: δ 170,0 ir 172,6.
148
Pavyzdys 52
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)
0°C temperatūroje į 0,47 g (1,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,40 g (1,4 mmol) H-Pac(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,67 g (5,5 mmol) DMAP, ištirpinto 5 ml acetonitrilo, tirpalą pridedama 0,27 g EDC. Mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį ir po to praskiedžiama etilo acetatu. Tirpalas praplaunamas KHSO4 (vand.) ir NaHCOg (vand.), džiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato ir, po to, etilo acetato/metanolio eliuentus santykiu 98/2, gaunama 0,25 g (30%) išradimo junginio, kaip mišinio, sudaryto iš
1,4-cis- ir trans-produktų molekulės Pac dalies atžvilgiu.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,0 (m, 29H; iš ten 1,45 (s,
9H)), 2,15 ir 2,34 (m, 1H, izomerai), 2,45-2,7 (m, 2H), 3,0-3,4 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 4,14 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 5,04 (s, 2H), 7,25-7,45 (m, 5H), 7,8-7,9 (m, 1H), 9,2-9,5 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x HCI
0,25 g (0,41 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) ištirpinama 100 ml etilo acetato ir atšaldoma ledo vonioje. Vandenilio chlorido dujos 5 minutes pučiamos per tirpalą ir išgarinamas tirpiklis.
1H-BMR (300 MHz, MeOD): δ 0,8-2,0 (m, 22H), 2,05-2,35 (m, 1H), 2,4-2,55 (m, 1H), 2,6-2,75 (m, 1H), 3,00 (d, 1H), 3,05 ir 3,37 (m uiti pi etai, izomerai 0,6 H ir 0,4 H, atitinkamai), 3,15-3,3 (m, 1H), 4,05-4,2 (m, 2H), 4,88 (dd, 1H), 5,11 (s, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H), 8,0-8,15 (m, 1H).
(iii) BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)
0,17 g (0,33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x HCI, 0,11 g (0,37 mmol) benziltrifliloksiacetato ir 0,14 g (1,0 mmol) K2COg, ištirpinto 5 ml acetonitrilo, mišinys maišomas kambario temperatūroje 3 dienas. Nevalyta medžiaga gryninama greitosios chromatografijos būdu,
144 naudojant eliuentą EtOAc/CH2CI2/MeOH santykiu 95/20/5. Gaunama 70 mg (32%).
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,85-2,3 (m, 20H), 2,48 (m, 1H),
2,63 (m, 1H), 2,87 (m, 1H), 3,05-3,25 (m, 1H), 3,25-3,35 (m, 2H), 3,38 (dd, 1H), 3,95 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,1-5,2 (m, 4H), 5,9-6,3 (m, 1H), 7,25-7,5 (m, 10H), 8,00 ir 8,08 (platūs tripletai, 1H, izomerai).
(iv) HO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HCI mg (0,11 mmol) BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) ištirpinama 5 ml etanolio ir pridedama 5% Pd/C ir 0,1 ml kone. HCI. Atmosferos slėgyje mišinys hidrinamas 1 valandą. Po filtravimo ir garinimo produktas gryninamas preparatyvinės RPLC būdu, naudojant 0,1 M NH^OAc/CHgCN eliuentą santykiu 4/1. Pavertus druską hidrochloridu ir liofilizavus, išradimo junginys gaunamas kaip mišinys, sudarytas iš 1,4cis- ir trans-izomerų molekulės Pac dalies atžvilgiu, santykiu 45/55. Išeiga: 40 mg (74%).
1 H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,1-2,1 (m, 20H), 2,32 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,72 (m, 1H), 3,1-3,3 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,8-3,95 (m, 2H), 4,04 (d, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,93 (m, 1H).
C-BMR (125 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 167,7; 172,0; 174,9 ir 175,2.
Pavyzdys 53
H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
0°C temperatūroje 211 mg (1,1 mmol) EDC pridedama į maišomą 0,4 g (1,1 mmol) H-Pac(Z) x 2 HCI (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,4 g (1,1 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,55 g DMAP, ištirpinto 7 ml acetonitrilo, tirpalą. Reakcijos mišinys maišomas 0°C temperatūroje 1 vai., po to 2 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos praskiedžiamos etilo acetatu ir vandeniu. Organinė fazė praplaunama acto rūgštimi,
145 vandeniu ir natrio hidrokarbonato tirpalu bei išdžiovinama (MgSO4).
Pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato eliuentą. Gaunama 196 mg (27%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos per 196 mg Boc-(R)ChaPro-Pac(Z), ištirpinto 25 ml etilo acetato, tirpalą. Po 10 min. reakcijos mišinys praskiedžiamas metileno chloridu ir pridedama natrio hidroksido tirpalo. Vandeninė fazė ekstrahuojama kelis kartus metileno chloridu ir susidarę organiniai sluoksniai džiovinami (K2CO3), tirpiklis pašalinamas vakuume. Gaunama 86 mg (52%) išradimo junginio.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HCI
Išradimo junginys gaunamas hidrinant H-(R)Cha-Pro-Pac(Z), ištirpinto etanolyje ir esant 10% Pd/C.
1H-BMR (300 MHz, D2O; A apytiksliai: 1,4-cis- ir 1,4-trans izomerų mišinys santykiu 1/1 molekulės Pac dalyje): δ 1,15-1,3 (q), 1,61,85 (m), 1,9-2,0 (m), 2,0-2,1 (d), 2,1-2,15 (m), 2,15-2,2 (m), 2,65-2,7 (m),
2,7-2,8 (m), 2,95-3,0 (d), 3,15-3,2 (d), 5,4 (s), 7,45-7,55 (m).
Pavyzdys 54
H-(R)Cgl-lle-Pab x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-lle-Pab(Z)
Į maišomą 1,33 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cgl-lle-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,12 g (3,9 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 1,76 g (14,4 mmol) DMAP, ištirpinto 50 ml CHgCN/DMF (1/1), mišinį pridedama 0,75 g (3,9 mmol) EDC +5°C temperatūroje. Reakcijos mišinio temperatūrai susilyginus su kambario temperatūra, mišinys paliekamas 60 vai. CH^CN pašalinamas garinant ir nuosėdos supilamos į
100 ml vandens (susiformuoja gelsvos nuosėdos). Mišinys ekstrahuojamas 2x50 ml EtOAc ir susidariusi organinė fazė praplaunama 2x30 ml NaHCO3(sotus), 2x50 ml 0,2 M HCI, 1x50 ml sūrymo ir išdžiovinama (MgSO4). Nugarinus ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH^CL/THF eliuentą (85/15), gaunama 510 mg (24%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cgl-lle-Pab(Z)
530 mg Boc-(R)CgI-lle-Pab(Z) ištirpinama 14 ml CH2CI2/TFA, santykiu 2,5/1, ir maišoma 2 vai. kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH(NH3-prisotintas) eliuentą (95/5), gaunamas išradimo junginys.
(iii) H-(R)Cgl-lle-Pab x 2 HCl mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-lle-Pab(Z) hidrinama 6 vai. atmosferos slėgyje, esant 10% Pd/C, ištirpinto 5 ml EtOH, turinčio HCl dujų perteklių, kad susidarytų dihidrochloridas. Pridėjus 2 g aktyvuotos medžio anglies ir 20 ml EtOH, po to nufiltravus per celitą, išgarinus tirpiklį ir pašalinus vandenį liofilizuojant, gaunama 50 mg (89%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 0,90 (t, 3H), 0,94 (d, 3H), 1,1-2,0 (m, 14H), 3,83 (pis, 1H), 4,26 (d, 1H), 4,50 (m, 2H), 7,57 (pld, 2H), 7,78 (pld, 2H).
Pavyzdys 55
H-(R)Cgl-Aze-Pab
Atmosferos slėgyje, esant 5% Pd/C, ištirpinto 6 ml EtOH/H2O, 6 vai. hidrinama 257 mg (5,08 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 1, skirsnį (ii)), po to nufiltruojamas katalizatorius, išgarinamas tirpiklis ir liofilizuojama vandenyje. Gaunama 200 mg (89%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,0-2,0 (m, 11 H), 2,25 (m, 1H),
2,70(m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,55 (m, 2H), 7,60 (m, 2H), 7,77 (m, 2H).
MS m/z 372 (M+ +1).
Pavyzdys 56
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc (i) BnOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
0,250 g (0,47 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 15), ištirpinto 5 ml CH2CI2, atšaldyta iki -10°C temperatūros ir lėtai pridedama 150 mg (0,48 mmol) TfOCH2COOBn (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 3 ml CH2Ol2. Pridėjus 200 mg (1,45 mmol) kalio karbonato, mišinys maišomas kambario temperatūroje 20 vai. Mišinys praskiedžiamas CH2CI2, ekstrahuojamas vandeniu ir išdžiovinamas (MgSO4). Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 9/1, gaunama 150 mg (46%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc
150 mg (0,2 mmol) BnOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z) hidrinama atmosferos slėgyje 4 vai., esant 50 mg 5% Pd/C, ištirpinto 20 ml
EtOH. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir išgryninus RPLC būdu, naudojant CHgCN/0,1 M NH^OAc eliuentą santykiu 1/4, gaunama 35 mg (37%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 1,00 (m, 1H), 1,20-1,45 (m, 5H),
1,5 (m, 1H), 1,6-1,8 (m, 6H), 1,9-2,1 (m, 6H), 2,25 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,5(m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,9 (m, iš dalies dengiamas HOD linijos, 6H), 7,55 (d, 2H).
Pavyzdys 57
MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI (i) MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,186 g (0,841 mmol) TfO-CH2-COOMe (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ištirpinama CH2CI2 ir lėtai pridedama kambario temperatūroje į
0,425 g (0,841 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 1), 0,894 g (5,04 mmol) K2COg, ištirpinto CH2CI2 (iš viso 4,3 ml), mišinį ir maišoma per naktį. Pridėjus dar CH2CI2, mišinys praplaunamas vandeniu ir sūrymu, išdžiovinamas, nufiltruojamas, tirpiklis išgarinamas vakuume. Gaunama 0,51 g nuosėdų, kurios tris kartus gryninamos silikagelio kolonėlėje greitosios chromatografijos būdu, naudojant iš pradžių CH2CI2/THF/MeOH (16/4/1), po to CH2CI2/THF(2%NH3) (8/2) ir galiausiai dietilo eterio/MeOH(NHg-prisotintas) (95/5) eliuentus. Taip gaunama 0,324 g (67 %) išradimo junginio.
(ii) MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI
220 mg (0,38 mmol) MeOOC-CH2-(R)Cg!-Aze-Pab(Z) hidrinama 2 vai., esant 1,14 ml 1N HCI, 6,5 ml MeOH ir 300 mg Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite ir millipore filtrus, išgarinus tirpiklį vakuume ir liofilizavus du kartus, gaunama 178 mg (91%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,12-1,4 (m, 5H), 1,68-1,81 (m,
2H), 1,81-1,9 (m, 3H), 1,97-2,1 (m, 1H), 2,29-2,4 (m, 1H), 2,68-2,8 (m, 1 H),
3,86 (s, 3H), 4,1 (s, 2H), 4,1-4,5 (d, 1H), 4,36-4,42 (t, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,99-5,04 (m, 1H), 7,65-7,7 (d, 2H), 7,8-7,85 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, MeOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 146,78; 167,68; 168,15; 172,29.
Pavyzdys 58
EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI (i) EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,208 g (0,876 mmol) TfO-CH2-COOEt (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ištirpinama CH2CI2 ir lėtai pridedama į 0,443 g (0,876 mmol) H(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 1) ir 0,931 g (5,26 mmol) K2COg, ištirpinto CH2CI2 (iš viso 4 ml), mišinį, šaldomą ledo vonioje. Po 2 vai. ledo vonia pašalinama ir maišoma kambario temperatūroje dar 2 vai. Pridėjus dar CH2CI2 ir praplovus mišinį vandeniu ir sūrymu, išdžiovinus, nufiltravus ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 0,51 g nuosėdų, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant dietilo eterio/MeOH(NHgprisotintas) eliuentą (95/5). Taip gaunama 0,387 g (75%) išradimo junginio.
(ii) EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI
395 mg (0,668 mmol) EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) hidrinama 5 vai., esant 12 ml EtOH (99,5%) ir 390 mg Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite ir millipore filtrus, išgarinus tirpiklį vakuume ir du kartus liofilizavus, gaunama 281 mg (88%) EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab.
Pridėjus 2 ekvivalentus 1N HCI tirpalo ir tris kartus liofilizavus, gaunama 288 mg (81%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,05-1,48 (m, 8H), 1,6-2,05 (m,
6H), 2,15-2,33 (m, 1H), 2,58-2,79 (m, 1H), 3,89-4,0 (m, 3H), 4,2-4,33 (m, 3H), 4,33-4,44 (m, 1H), 4,44-4,66 (m, 2H), 4,91 (m, 1H (iš dalies uždengtas H-O-D signalo)), 7,54-7,63 (d, 2H), 7,72-7,84 (d, 2H).
DU
Pavyzdys 59 nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x HOAc (i) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
Gaunama tuo pačiu budu kaip ir nHexOOC-CH2-(R)Cgl-AzePab(Z) (žr. Pavyzdį 60, skirsnį (i)), naudojant TfO-CH2-COOnBu, kaip alkilinimo veiksnį. Nevalytą produktą išgryninus greitosios chromatografijos būdu du kartus, naudojant CH2CI2/MeOH (95/1) ir po to CHgCIg/i-propilalkoholio (90/7) eliuentus, gaunama 324 mg (47%) išradimo junginio.
(ii) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x HOAc
Apsauginės grupės nuėmimas vykdomas pagal procedūrą, aprašytą Pavyzdyje 57, skirsnyje (ii). Nevalytą produktą išgryninus RPLC būdu, naudojant CHgCN (30%), ištirpinto 0,05 M NH4OAc ir 0,05 M HOAc, eliuentą, gaunama 100 mg (53%) išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, MeOD): δ 0,85-2,1 (m, 18H), 2,15-2,37 (m, 1H), 2,58-2,8 (m, 1H), 3,7-5,0 (m, 10H), 4,88-5,0 (iš dalies uždengtas H-OD signalo)), 7,46-7,65 (d, 2H), 7,71-7,78 (d, 2H).
13C-BMR (75 MHz, MeOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 146,8; 168,12; 168,2; 172,2.
Pavyzdys 60 nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HCI (i) nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
0,402 g (1,375 mmol) TfO-CH2-COOnHex (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ištirpinama CH2CI2 ir lėtai pridedama į 0,695 g (1,375 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 1), 1,463 (8,25 mmol) K2COg, ištirpinto CH2CI2 (iš viso 4 ml), mišinį žemesnėje, negu -10°C temperatūroje. Po 1 vai. CO2-ledo vonia pašalinama ir maišoma kambario temperatūroje dar 45 min. Pridedama dar CH2CI2 ir mišinys praplaunamas vandeniu bei sūrymu, išdžiovinamas, filtruojamas. Išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 0,828 g nuosėdų, kurios gryninamos du kartus greitosios chromatografijos būdu, naudojant, iš pradžių, dietilo eterio/MeOH(NHg-prisotintas) eliuentą santykiu 95/5, ir po to, CH2CI2/MeOH(NHg-prisotintas) eliuentą santykiu 95/5. Taip gaunama 0,42 g (47%) išradimo junginio.
(ii) nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) x 2 HCI
1,5 vai. trunkantis 400 mg (0,617 mmol) nHexOOC-CH2-(R)CglAze-Pab(Z) hidrinimas, esant 12 ml THF ir 400 mg Pd/C, neleidžia visiškai pašalinti apsaugą. Hidrinimas baigiamas po 4 vai., esant 1,7 ml 1N HCI, 12 ml MeOH ir 340 mg Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite ir millipore filtrus, išgarinus tirpiklį vakuume ir du kartus liofilizavus, gaunama 287 mg (79%) išradimo junginio.
1 H-BMR (300 MHz, MeOD): δ 0,8-2,13 (m, 22H), 2,13-2,31 (m, 1H), 2,61-2,81 (m, 1H), 3,93-4,15 (m, 3H), 4,15-4,37 (m, 3H), 4,37-4,7 (m,
19/
3H), 4,88-5,0 (m, 1H (iš dalies uždengtas H-O-D signalo)), 7,52-7,69 (d, 2H), 7,75-7,9 (d, 2H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 146,84; 167,67; 167,84; 172,17.
Pavyzdys 61
H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
377 mg (1,97 mmol) EDC pridedama 0°C temperatūroje į maišomą 708 mg (1,95 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 714 mg (2,0 mmol) H-Pac(Z) x HCI (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 1,078 g (8,8 mmol) DMAP, ištirpinto 12,5 ml acetonitrilo, tirpalą. Per naktį reakcijos mišinio temperatūra susilygina su kambario temperatūra. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir nuosėdos, iš pradžių, gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant 10% metanolio, ištirpinto metileno chloride, eliuentą, po to gryninamas RPLC pagalba. Išskiriamos dvi frakcijos (51 mg ir 150 mg), kurių MS m/z = 626 (M +1).
(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos per 141 mg (0,22 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z), ištirpinto 50 ml etilo acetato, tirpalą. Po 15 min.
pridedama 10% natrio karbonato tirpalo ir organinė fazė atskiriama ir išdžiovinama (K2COg). Išgarinus tirpiklį, gaunama 71 mg (61%) produkto.
(iii) H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2 HCI mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) ir nedidelė mentelė 10% Pd/C, ištirpinto 10 ml etanolio hidrinama 2 vai. kambario temperatūroje atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus ξ ' JJ tirpiklį vakuume. Nuosėdas ištirpinus 50 ml vandens ir 0,6 g 1M druskos rūgšties. Liofilizavus, gaunama 38 mg (58%) išradimo junginio.
MS m/z 392 (M +1).
Pavyzdys 62
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac x HOAc (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z) (žr. Pavyzdį 53, skirsnį (ii) ), viena mentelė kalio karbonato ir 47 mg TfOCH2-COOBn (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 3 ml metileno chlorido, mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. Nufiltravus reakcijos mišinį ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metileno chlorido/metanolio eliuentą santykiu 95/20/5. Išskiriama 29 mg reikiamo produkto.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac x HOAc mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) ir 37 mg 10% Pd/C, ištirpinto 5 ml etanolio, mišinys maišomas 4 vai. kambario temperatūroje atmosferos slėgyje. Reikiamas junginys gaunamas nufiltravus katalizatorių, pašalinus tirpiklį ir išgryninus RPLC būdu.
MS m/z = 464 (M +1).
154
Pavyzdys 63
HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
0,35 g (0,64 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) (žr. Pavyzdį 61, skirsnį (ii) ), 124 mg (0,76 mmol) benzilakrilato ir 280 ui (2 mmol) tietilamino, ištirpinto 1 ml etanolio, laikoma kambario temperatūroje 3 dienas. Pašalinus tirpiklį ir išgryninus HPLC būdu, gaunama 18 mg (4%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) ir nedidelė mentelė
10% Pd/C, ištirpintų EtOH, hidrinama 2 vai. kambario temperatūroje atmosferos slėgyje. Nufiltravus, išgarinus tirpiklį vakuume ir ištirpinus vandenyje bei liofilizavus, gaunama 7 mg (78%) išradimo junginio. MS m/z = 464 (M +1).
Pavyzdys 64
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
0,4 g (1,38 mmol) H-Pac(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas, H-Pac(Z) x 2 HCI gavimą), 0,5 g (1,41 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,67 g (5,5 mmol) DMAP, ištirpinto 20 ml acetonitrilo, tirpalas sumaišomas 0°C temperatūroje su 0,26 g (1,4 mmol) EDC, ištirpinto 15 ml acetonitrilo. Reakcijos mišinys laikomas per naktį kambario temperatūroje, po to tirpiklis pašalinamas vakuume. Nuosėdos paskirstomos tarp etilo acetato ir vandens. Vandens fazė dar kartą ekstrahuojama etilo acetatu ir susidariusios organinės fazės
155 praplaunamos natrio hidrosulfato tirpalu, natrio karbonato tirpalu, sūrymu ir išdžiovinamos (natrio sulfatu). Išgarinus tirpiklį, gaunama 0,54 g (63%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
Vandenilio chlorido dujos pučiamos per 0,54 g (0,9 mmol) Boc(R)Cha-Aze-Pac(Z), ištirpinto etilo acetate, tirpalą. Tirpalas laikomas per naktį šaldytuve, po to tirpiklis pašalinams vakuume ir nuosėdos ištirpinamos etilo acetate. Tirpalas praplaunamas vandeniniu natrio hidrokarbonato tirpalu, vandeniu ir sūrymu ir išdžiovinamas (natrio sulfatu). Pašalinus tirpiklį, gaunama 0,35 g (77%) produkto.
(iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
180 mg (0,33 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z) ir 53 mg (0,33 mmol) benzilakrilato, ištirpinto etanolyje, tirpalas laikomas 60 vai. kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume, nuosėdos ištirpinamos etilo acetate. Tirpalas praplaunamas kalio hidrosulfato tirpalu natrio hidrokarbonato tirpalu bei sūrymu. Išdžiovinus (natrio sulfatu) ir pašalinus tirpiklį vakuume, gaunamos nuosėdos, kurias išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant 10% metanolio, ištirpinto metileno chloride, eliuentą, gaunama 150 mg (66%) išradimo junginio.
(iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac x 2 HCI
115 mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z) ir 67 mg 10%
Pd/C, ištirpinto 10 ml etanolio, mišinys hidrinamas 1,5 vai. kambario temperatūroje atmosferos slėgyje. Nufiltravus, po to pašalinus tirpiklį vakuume ir nuosėdas ištirpinus vandenyje ir 1,5 ml 1M druskos rūgšties tirpale, gaunamas tirpalas, kurį liofilizavus gaunama 30 mg (33%) išradimo junginio.
MS m/z 464 (M + 1).
156
Pavyzdys 65
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)
Temperatūroje, žemesnėje negu minus 15°C, 0,249 g (1,298 mmol) EDC pridedama į 0,473 g (1,236 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,404 g (1,236 mmol) H-Pig(Z) x HCI (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,604 g (4,94 mmol) DMAP, ištirpinto
13,5 ml DMF, mišinį. Per naktj temperatūra susilygina su kambario temperatūra. Išgarinus tirpiklį vakuume, yra pridedama EtOAc ir 2M KHSO4· Fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama prisotintu Na2CO3 ir sūrymu. Pakartojus ekstrahavimo procedūrą, išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir išgarinus tirpiklius, gaunama 0,612 g nuosėdų, kurios gryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant EtOAc/MeOH eliuentą santykiu 9/1. Taip gaunama 407 mg (53%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)
0,4 g (0,638 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z) ištirpinama 24,4 ml TFA/CH2CI2 santykiu 1/4, maišoma 30 min. ledo vonioje ir 30 min.
kambario temperatūroje. Tirpiklis pašalinamas vakuume ir pridedama EtOAc ir sotaus Na2CO3 tirpalo. Atskyrus fazes ir praplovus organinę fazę vandeniu ir sūrymu, išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 336 mg (100%) išradimo junginio.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) ml (0,562 mmol) BnOOC-CH2-Br lėtai pridedama į 0,296 g (0,562 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z) ir 0,171 g (1,236 mmol) K2CO3, ištirpintų 6 ml CHgCN, mišinį, kaitinamą temperatūroje iki 60°C aliejaus vonioje. Po 1 vai. 45 min. tirpiklis išgarinamas, pridedama EtOAc. Mišinį praplovus vandeniu, išdžiovinus (NaSO4), nufiltravus ir išgarinus tirpiklį vakuume, gaunama 346 mg nuosėdų, kurios išgryninamos greitosios chromatografijos būdu, naudojant Ch^C^/THF/MeOH eliuentą santykiu 8/2/1. Taip gaunama 297 mg (78%) išradimo junginio.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HCI
243 mg (0,36 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) hidrinama 2 vai., esant 1,7 ml 1N HCI, 10 ml EtOH (99,5%) ir 300 mg Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite ir millipore filtrą, po to išgarinus tirpiklį vakuume ir du kartus liofilizavus, gaunama 166 mg (88%) išradimo junginio.
1 H-BMR (500 MHz, D20); δ 0,6-1,9 (m, 18H), 2,1-2,27 (m, 1H),
2,52-2,76 (m, 1H), 2,82-3,2 (m, 4H), 3,46-3,61 (m, 1H), 3,61-3,81 (m, 2H), 3,81-4,0 (m, 2H), 4,0-4,24 (m, 2H), 4,24-4,4 (m, 1H).
Pavyzdys 66
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2HCI (i) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
Į 0,3495 g (0,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,464 g (3,8 mmol) DMAP, 0,310 g (0,95 mmol) HPig(Z) x HCI (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 5 ml CH2CI2, mišinį pridedama 0,192 g (1 mmol) EDC ir gautas mišinys maišomas per naktį kambario temperatūroje. Mišinys garinamas ir nuosėdos ištirpinamos etilo acetate. Organinė fazė praplaunama du kartus 0,3 M KHSO^ ir kartą sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Nevalytą produktą išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH
158 gradientą santykiu 100/0, 97/3, 95/5, 90/10, gaunama 307 mg išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
0,306 g (0,48 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z) ištirpinama 30 ml
HCI tirpalo, prisotinto etilo acetatu. Mišinys paliekamas pusei valandos. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos CH2CI2. Organinis sluoksnis praplaunamas du kartus 0,2 M NaOH tirpalu. Susidariusį vandens sluoksnį vieną kartą ekstrahavus CH2CI2, o susidariusį organinį sluoksnį išdžiovinus (Na2SO4), nufiltravus ir nugarinus, gaunama 257 mg (99%) išradimo junginio.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
0,256 g (0,473 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z), 0,144 g (1,04 mmol) K2COg ir 82 μΙ (0,521 mmol) benzilbromacetato, ištirpinto 6 ml acetonitrilo, mišinys kaitinamas 60°C temperatūroje maišant dvi valandas. Tirpiklis išgarinamas, nuosėdos ištirpinamos CH2CI2, praplaunamos vieną kartą vandeniu ir vieną kartą sūrymu, išdžiovinamos (Na2SO4), filtruojamos ir tirpiklis išgarinamas. Nevalytą produktą išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą santykiu 97/3, 95/5, 90/10, gaunama 0,2 g produkto (sprendžiant pagal RPLC duomenis, 90% grynumo). Galutinis gryninimas atliekamas chromatotrono (Harrison research, modelis 7924T) 2 mm silicio dioksido plokštelėje su CH2CI2/MeOH eliuentu (95/5). Tuo būdu gaunama 0,158 g (48%) grynojo produkto.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI
0,158 g (0,227 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) sumaišoma su 0,075 g Pd/C (5%), 1,0 ml 1N HCI tirpalu ir 10 ml etanolio. Mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje vieną valandą. Nufiltravus per celitą ir išgarinus tirpiklį bei po to du kartus liofilizavus vandenyje, gaunama 119 mg (97%) produkto.
1H-BMR (D20, 300 MHz): δ 0,95-1,44 (m, 7H), 1,52 (m, 1H),
1,60-2,20 (m, 13H), 2,39 (m, 1H), 3,07-3,32 (m, 4H), 3,68 (m, 1H), 3,774,02 (m, 5H; iš ten 3,98 (s, 2H), 4,44-4,58 (m, 2H).
13C-BMR (D2O, 75 MHz): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,5; 168,3; 169,6; 174,5.
Pavyzdys 67
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
0,297 g (0,55 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (žr. Pavyzdį 66, skirsnį (ii)) ištirpinama 2 ml etanolio ir pridedama 90 μΙ (0,59 mmol) benzilakrilato. Reakcijos mišinys maišomas 4 dienas kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nevalyto produkto gryninamas atliekamas chromatografiškai chromatotronu (Harrison research, modelis 7924T) 2 mm silicio dioksido plokštelėje, naudojant laiptinį eliuento CH2CI2/MeOH gradientą santykiu 95/5, 90/10. Gaunama 0,338 g (87%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI
0,238 g (0,227 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) sumaišoma su 0,120 g Pd/C (5%), 1,2 ml 1N HCI tirpalu ir 15 ml etanolio. Mišinys hidrinamas vieną valandą atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių per celitą ir išgarinus tirpiklį bei du kartus liofilizavus vandenyje, gaunama 178 mg (95%) produkto.
1H-BMR (D2O, 300 MHz): δ 0,82-1,45 (m, 8H), 1,45-2,15 (m,
13H), 2,29 (m, 1H), 2,83 (t, 2H), 2,9-3,4 (m, 6H), 3,57 (bq, 1H), 3,67-3,87 (m, 3H), 4,25-4,43 (m, 2H).
A
C-BMR (D2O, 75 MHz): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,3; 168,2; 174,3; 174,6.
MS m/z 479 (M+ +1).
i 60
Pavyzdys 68 (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HCI
120 mg (0,126 mmol) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 (žr.
Pavyzdį 50, skirsnį (iii)) hidrinama 4 vai., esant 0,75 ml 1N HCI, 7 ml EtOH (99,5%) ir 150 mg Pd/C. Nufiltravus katalizatorių per cellite ir millipore filtrus, išgarinus tirpiklį vakuume ir liofilizavus, gaunama 66 mg (90%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,05-1,38 (m, 7H), 1,53-1,64 (d,
1H), 1,64-2,14 (m, 11 H), 2,27-2,39 (m, 1H), 3,03-3,28 (m, 4H), 3,58-3,70 (m, 1H), 3,7-3,8 (m, 1H), 3,8-3,9 (d, 2H), 4,07-4,22 (m, 2H), 4,22-4,35 (m, 1H), 4,38-4,5 (m, 1H).
C-BMR (75 MHz, D2O): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 156,28; 166,73; 170,14; 174,01.
Pavyzdys 69
HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z) j šaltą (ledo vonios temperatūros) 100 mg (0,14 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (žr. Pavyzdį 67, skirsnį (i)) ir 80 mg (0,57 mmol) kalio karbonato, ištirpinto 4 ml CH2CI2, mišinį atsrgiai pridedama 64 mg (0,21 mmol) Tfo-CH2-COOBn, ištirpinto 1 ml CH2CI2, tirpalo. Reakcijos mišinys paliekamas 0°C temperatūroje 30 min., po to per 2 vai. leidžiama mišinio temperatūrai susilyginti su kambario temperatūra, tuomet 30 min. virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu ir galiausiai paliekamas kambario temperatūroje per naktį. Išgarinus tirpiklį, po to išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą (97/3), gaunama 65 mg (54%) išradimo junginio.
(ii) HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HCI mg (0,08 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)ChaPro-Pig(Z) ištirpinama 10 ml EtOH/1M HCI (9/1) ir hidrinama 3 vai. atmosferos slėgyje, esant 10% Pd/C. Nufiltravus katalizatorių, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus vandenyje, gaunama 40 mg (97%) baltų miltelių pavidalo išradimo junginio.
13C-BMR (125 MHz, MeOD): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 157,5; 167,2; 169,1; 173,7 ir 174,1.
Pavyzdys 70
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts)
400 mg (1,17 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 366 mg (1,23 mmol) H-(R,S)ltp(Ts) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 286 mg (2,34 mmol) DMAP ištirpinama CHgCN (6 ml) ir atšaldoma iki 5°C. Pridedama 236 mg (1,23 mmol) EDC ir gautas mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Pašalinamas CHgCN ir nuosėdos ištirpinamos MeOH/EtOAc/H2O. Atsiskyręs organinis sluoksnis praplaunamas K2COg (sot.), 2M KHSO4, sūrymu ir išdžiovinamas (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį gaunama kieta balta medžiaga, 688 mg (85%).
MS m/z 620 (M+ +1).
162 (ii) H-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts)
Ištirpinus 500 mg (0,8 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts) 50 ml CH2CI2, per tirpalą maždaug 4 min. pučiamos HCI dujos. Po 45 min. tirpiklis išgarinamas ir gautas produktas ištirpinamas EtOAc/MeOH/H2O ir rūgštinis tirpalas šarminamas 2M NaOH (vand.) iki pH, lygaus 8-9. Organinis sluoksnis atskiriamas ir išdžiovinamas (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį gaunama 425 mg (100%) baltos spalvos kietos medžiagos pavidalo išradimo junginio.
MS m/z 520 (M+ +1).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts)
400 mg (0,77 mmol) H-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts), 325 mg (0,92 mmol) benzil-2-(para-nitrobenzensulfoniloksi)acetato (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 235 mg (1,7 mmol) K2CO3 maišoma 5 ml CH^CN
45°C temperatūroje. Po kelių valandų susijungia tik 25%, todėl temperatūra pakeliama iki 60°C ir papildomai pridedama benzil-2-(paranitrobenzensulfoniloksi)-acetato. Reakcijos mišinys maišomas 48 vai.
(pradinių medžiagų ir produkto santykis 25/63), tuomet nustojama. Išgarinus tirpiklį, j nuosėdas pridedama EtOAc/H2O. Fazės atskiriamos ir vandens fazė praplaunama du kartus EtOAc ir tuomet susidaręs organinis sluoksnis praplaunamas K2COg (sot.), 2M KHSO^, H2O ir išdžiovinamas (Na2SO4). Tai duoda, pašalinus ekstrahuojant rūgštinį KHSO4, apie 340 mg, kurie gryninami RPLC. Taip gaunama 34 mg (7%) išradimo junginio.
MS m/z 668 (M+ +1).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp x 2 HCI mg (0,05 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts) ištirpinama 5 ml THF ir į reakcijos indą su sauso ledo šaldytuvu pridedama distiliuojant 40 ml NH^ (duj.). Pridėjus Na druskos, tirpalas nusidažo tamsiai mėlyna spalva. Reakcijos mišinys maišomas 5 min., po to reakcija sustabdoma pridedant 50 μΙ HOAc. Pašalinus sauso ledo šaldytuvą, išgarinamas NHg (skyst.). Į nuosėdas pridedant H2O ir HOAc, nustatomas jų pH, lygus 7. Liofilizavus ir išgryninus RPLC būdu, gaunamos kelios frakcijos, kurios analizuojamos FAB-MS pagalba. Dviejose frakcijose esama reikiamo junginio, liofilizavus, esant 2,2 ekv. 1M HCI, gaunami 3 mg (10%).
MS m/z 424 (M+ +1).
Pavyzdys 71
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp (i) Boc-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts)
169 mg (0,5 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 155 mg (0,52 mmol) H-(R,S)ltp(Ts), 122 mg (1 mmol) DMAP ištirpinama 2,5 ml CHgCN tirpale ir atšaldoma iki 5°C temperatūros. Pridedama EDC x HCI (115 mg, 0,6 mmol) ir gautas mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tuomet pridedama dar (0,5 ekv.) H-(R,S)ltp(Ts) ir EDC. Reakcijos mišinys maišomas dar vieną naktį ir yra veikiamas tokiu būdu, kaip aprašyta aukščiau Boc(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts) (žr. Pavyzdį 70) atveju. Gaunama 260 mg nevalyto produkto. Grynininant RPLC būdu gaunama 180 mg (57%) išradimo junginio.
MS m/z 634 (M+ +1).
(ii) H-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts)
180 mg (0,28 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts) ištirpinama 20 ml CH2CI2, ir HCI dujos pučiamos per tirpalą maždaug 4 min. Po 45 min. tirpiklis pašalinamas garinant ir gautas produktas ištirpinamas
CH2CI2, praplaunamas 2M NaOH tirpalu, gaunant pH, lygų 8-9. Fazės atskiriamos ir organinė fazė išdžiovinama (Na2SO4) ir nugarinama. Taip gaunami 163 mg (maždaug 100%).
MS m/z 534 (M+ +1).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts) mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts), 45 mg (0,33 mmol) K2CO3 ir 39 mg (0,17 mmol) Br-CH2COOBn maišoma 15 ml
CHgCN tirpale 2,5 vai. 60°C temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos EtOAc/H2O. Fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama 10% citrinos rūgštimi ir išdžiovinama (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį gaunama 171 mg nevalyto produkto, kurį išgryninus RPLC būdu gaunama 53 mg (52%) išradimo junginio.
MS m/z 681 (M+ +1).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp
BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp(Ts) (50 mg, 0,07 mmol) veikiamas taip pat, kaip ir BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp(Ts) (žr.
Pavyzdį 70, skirsnį (iv)). Taip gaunamas produktų mišinys, kurio gryninimas RPLC duoda 12 mg mišinio, sudaryto iš išradimo junginio ir jo redukuotos formos mišinio santykiu 1:1. Pastarosios masė 439 (m/z).
MS m/z 438 (M+ +1).
Pavyzdys 72
H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Ts)
Kambario temperatūroje 2,1 g (5,5 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,0 g (8,2 mmol) DMAP ir 1,7 g (5,8 mmol) H-(R,S)ltp(Ts) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ištirpinama 40 mL acetonitrilo. Pamaišius kelias minutes pridedama 1,1 g (5,8 mmol) EDC ir maišoma dar 60 vai. Išgarinus tirpiklį vakuume, nuosėdos ištirpinamos CH2CI2, praplaunamos vandeniu, 0,3M KHSO4 ir ΚΗΟΟθ (vand.) ir išdžiovinamos (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį ir nufiltravus per silikagelį, gaunama 2,43 g (67%) produkto.
MS m/z 661 (M+ +1).
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp
2,4 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Ts) ištirpinama 15 mL THF, ir NHg (duj.) kondensuojamos inde, po to pridedama Na. Reakcija sustabdoma po 5 min. pridedant acto rūgšties ir išgarinama ΝΗθ bei THF.
Liofilizavus nuosėdas, esančias vandens terpėje, ir išgryninus RPLC pagalba, naudojant CHgCN/Ο,ΙΜ NH4OAc eliuentą santykiu 6/4, gaunama 0,93 g (51%) reikiamo produkto.
MS m/z 507 (M+ +1).
(iii) H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp x 2 HCI mg (0,099 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp ištirpinama kambario temperatūroje etilo acetate, prisotintame HCI dujų. Po 2 vai. maišymo tirpiklis pašalinamas vakuume. Liofilizavus nuosėdas, esančias vandens terpėje, tris kartus, yra gaunama 35 mg (74%) reikiamo produkto.
MS m/z 407 (M+ +1).
C o
Pavyzdys 73
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp x 2 HCl (i) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z)
Kambario temperatūroje 0,84 g (1,66 mmol) Boc-(R)Cha-Pic(R,S)ltp (žr. Pavyzdį 72) ištirpinama 10 mL CH2CI2 ir 10 mL 0,5M NaOH tirpaluose. Sulašinama 0,29 mL (1,82 mmol) Z-CI. Po 3 vai. maišymo fazės atskiriamos ir organinė fazė praplaunama vandeniu ir išdžiovinama, naudojant Na2SO4- Išgarinus ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/heptano eliuentą santykiu 9/1, gaunama 0,5 g (47%) reikiamo produkto.
MS m/z 641 (M+ +1).
(ii) H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z)
0,5 g (0,78 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z) ištirpinama kambario temperatūroje etilo acetate, prisotintame HCl. Pridedama vandens ir mišinys šarminamas K2CO3 tirpalu. Atskiriamos fazės. Vandens fazė ekstrahuojama CH2CI2, ir organinė fazė praplaunama vandeniu. Tuomet susidariusi organinė fazė išdžiovinama (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį gaunama 0,3 g (71%) reikiamo produkto.
MS m/z 541 (M+ +1).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z)
0,29 g (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z) ir 0,15 g (1 mmol) K2CO3 pridedama į 25 mL acetonitrilo. Pridedama 154 mg (0,6 mmol) benzilbromacetato ir mišinys maišomas 4 vai. 50°C temperatūroje. Nugarinus ir išgryninus RPLC pagalba (acetonitrilo/0,1 M NH4OAc eliuentas santykiu 70/30), gaunama 200 mg reikiamo produkto.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp x 2 HCI
200 mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z) ištirpinama etanolyje. Pridedamas nedidelis šaukštelis 10% Pd su medžio anglimi ir mišinys hidrinamas 4 vai. Nufiltravus per hyflo filtrą, išgarinus tirpiklį ir liofilizavus iš vandens, gaunama 53 mg reikiamo produkto.
1 H-BMR (300,13 MHz, D2O): δ 1,0-2,35 (persiklojantis m, 22H),
3,28-3,51 (m, 5H), 3,51-3,64 (m, 1H), 3,75-4,03 (m, 3H), 5,03-5,14 (s platus, 1H), Vieno iš protonų atsakas yra iš dalies uždengtas H-O-D signalo.
MS m/z 465 (M+ +1).
Pavyzdys 74
H-(R)Cgl-Pro(R,S)-Hig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Pro(R,S)-Hig(Z)
Į 1,0 (2,95 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 1,44 g (11,8 mmol) DMAP, 1,12 g (3,25 mmol) H-(R,S)Hig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 15 ml CH2CI2, mišinį pridedama 0,62g (3,2 mmol) EDC ir mišinys maišomas kambario temperatūroje per naktį. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos etilo acetate. Du kartus praplovus organinį sluoksnį 0,3M KHSO4 tirpalu, iš organinio sluoksnio atsiskiria aliejus. Etilo acetato sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4) ir filtruojamas. Aliejaus ir vandens sluoksnis ekstrahuojamas CH2CI2. Organinis sluoksnis džiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir sujungiamas su EtOAc faze, aprašyta aukščiau. Garinama ir gryninama chromatotrono (Harrison research, modelis 7924T) 2 mm silicio dioksido plokštelėje, naudojant eliuento CH2CI2/MeOH laiptinį gradientą (97/3, 95/5, 90/10). Tuo būdu gaunama 1,1 g (59%) išradimo junginio.
168 (ii) H-(R)Cgl-Pro(R,S)-Hig x 2 HCI mg (0,13 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro(R,S)-Hig(Z) ištirpinama 50 ml etilo acetato, prisotinto HCI, tirpale. Mišinys paliekamas vienai valandai, garinamas ir nuosėdos ištirpinamos 10 ml etanolio. Pridėjus 40 mg Pd/C (5%), 1 ml vandens ir 0,5 ml 1M HCI tirpalo, mišinys hidrinamas per naktį atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių per celitą ir išgarinus tirpiklį, po to liofilizavus 3 kartus iš vandens gaunama išradimo junginio 75% išeiga.
1H-BMR (D2O, 300 MHz): δ 0,95-1,35 (m, 5H), 1,50-2,45 (m, 15H), 3,02 (plt, 1H), 3,1-3,8 (m, 7H), 4,13 (d, 1H), 4,38 (pld, 1H).
13C-BMR (D2O, 75 MHz): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,8; 168,9; 174,4.
MS m/z 393 (M+ +1).
Pavyzdys 75
HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig x 2 HCI (i) H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z) g (1,6 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro(R,S)-Hig(Z) (žr. Pavyzdį 74, skirsnį (i)) ištirpinama 100 ml etilo acetato, prisotinto HCI, tirpale ir mišinys paliekamas vienai valandai. Mišinys garinamas ir nuosėdos ištirpinamos CH2CI2· Organinis sluoksnis praplaunamas du kartus 0,2M NaOH tirpalu, džiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas. Gaunama 0,825 g (98%) išradimo junginio.
169 (ii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)
0,442 g (0,839 mmol) H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z), 0,256 g (1,85 mmol) K2COg ir 145 μΙ (0,521 mmol) benzilbromacetato sumaišoma 12oje ml THF. Mišinys maišomas vieną valandą 40°C temperatūroje ir per naktį kambario temperatūroje. Išgarinus tirpiklį nuosėdos ištirpinamos CH2CI2 ir vieną kartą praplaunamos vandeniu ir sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas, nevalytas produktas gryninamas chromatotrono (Harrison research11, modelis
7924T) 2 mm silicio dioksido plokštelėje, naudojant eliuento
CH2CI2/MeOH laiptinį gradientą (97/3, 95/5, 90/10). Tuo būdu gaunama 0,165 g (29%) išradimo junginio.
(iii) HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig x 2 HCI
0,165 g (0,25 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z) sumaišoma su 0,050 g Pd/C (5%), 0,7 ml 1M HCI tirpalo ir 10 ml etanolio. Mišinys hidrinamas 4 vai. atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių pro celitą ir išgarinus tirpiklį, po to liofilizavus du kartus vandenyje, gaunama 0,1 g (75%) produkto.
1H-BMR (D2O, 300 MHz): δ 1,05-1,45 (m, 5H), 1,55-2,5 (m, 15H), 3,08 (plt, 1H), 3,2-4,05 (m, 9H), 4,30 (d, 1H), 4,44 (m, 1H).
I^C-BMR (D2O, 75 MHz): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,9; 167,2; 169,4; 174,1.
170
Pavyzdys 76
H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig(Z)
Į 0,72 g (1,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,95 g (7,8 mmol) DMAP, 0,74 g (2,14 mmol) 82% grynumo H-(R,S)Hig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 10 ml CHgClg, pridedama 0,486 g (2,54 mmol) EDC ir mišinys maišomas kambario temperatūroje 3 dienas. Mišinys praskiedžiamas CHpCIg ir praplaunamas vandeniu, du kartus 0,3M KHSO4 tirpalu ir kartą sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas, nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5. Gaunama 0,450 g (33%) produkto.
(ii) H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig x 2 HCI mg (0,078 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig(Z) ištirpinama 20-yje ml etilo acetato, prisotinto HCI. Mišinys paliekamas vienai valandai, garinamas ir nuosėdos ištirpinamos 10 ml etanolio. Pridėjus 20 mg Pd/C (5%) ir 3 ml 1 M HCI tirpalo mišinys hidrinamas 2 vai. atmosferos slėgyje. Katalizatorių nufiltravus per celitą ir išgarinus tirpiklį, liofilizavus du kartus vandenyje, gaunama 28 mg (76%) išradimo junginio.
1H-BMR (D2O, 300 MHz): δ 0,9-1,6 (m, 6H), 1,6-2,5 (m, 16H),
3,09 (t, 1H), 3,31 (t, 1H), 3,37-3,74 (m, 4H), 3,81 (m, 1H), 4,35-4,47 (m, 2H).
C-BMR (D2O, 75 MHz): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,9; 169,8; 174,5.
Pavyzdys 77
H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
Į 0,50 g (1,6 mmol) H-Rig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,59 g (1,6 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,84 g (6,9 mmol) dimetilaminopiridino, ištirpinto 30 ml acetonitrilo ir 5 ml dimetilformamido, tirpalą pridedama 0,33 g (1,7 mmol) N-(3dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimido hidrochlorido. Mišinys maišomas 3 dienas, tuomet garinamas ir paskirstomas tarp vandeninio kalio hidrosulfato ir metileno chlorido tirpalų. Metileno chlorido sluoksnis praplaunamas vandeniniu natrio bikarbonatu ir vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir garinamas. Nevalyta medžiaga filtruojama siurbiant per silikagelio su metileno chlorido/metanolio santykiu 9/1 tarpiklį ir garinama. Taip gaunama 0,78 g (76%) reikiamo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,9 (m, 27H), 2,4-2,6 (m, 2H),
2,78 (plt, 2H), 3,15-3,4 (m, 2H), 3,80 (plt, 1H), 4,0-4,4 (m, 4H), 4,75 (plt, 1H), 4,97 (pld, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,74 (b, 1H).
(ii) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) x 2 HCI
Kolba su 0,76 g (1,2 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), ištirpinto 50 ml etilo acetato, atšaldomas ledo vonioje. Sausos HCI dujos pučiamos per tirpalą 5 min. Išgarinus tirpalą gaunama 0,74 g (100%) baltų miltelių pavidalo produkto dihidrochlorido.
1H-BMR (300 MHz, MeOD): δ 1,1-2,0 (m, 18H), 2,23 (m, 1H),
2,68 (m, 1H), 3,15-3,45 (m, 4H), 3,72 (pld, 1H), 3,9-4,0 (pld, 2H), 4,27 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 5,30 (s, 2H), 7,3-7,5 (m, 5H).
(iii) H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HCI
Kolba su 20 mg H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) tirpalu ir nedideliu kiekiu Pd/C (5%) hidrinama 1 vai. atmosferos slėgyje. Mišinys filtruojamas per celitą ir garinamas. Liofilizavus nuosėdas, esant keliems lašams kone. HCI, gaunama 8 mg (52%) produkto.
1 H-BMR (300 MHz, D2O): δ 1,1-2,0 (m, 18H), 2,37 (m, 1H), 2,75 (m,
1H), 3,08 (plt, 2H), 3,39 (plt, 2H), 3,8-4,0 (m, 3H), 4,35-4,5 (m, 2H), 4,90 (m, 1H).
C-BMR (75,5 MHz, D2O): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 172,2; 169,4; 156,4.
Pavyzdys 78
HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HCI (i) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
0,20 g (0,33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) (žr. Pavyzdį 77), 0,13 g kalio karbonato, 80 mg natrio jodido, 10 ml tetrahidrofurano ir 10 ml acetonitrilo mišinys kaitinamas 60°C temperatūroje 10 vai. Tirpikliai išgarinami ir nevalyta medžiaga gryninama greitosios chromatografijos būdu silikagelio kolonėlėje, naudojant metileno chlorido/metanolio eliuentą santykiu 92/8. Gaunama 0,13 g (58%).
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,9-2,1 (m, 18H), 2,45 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,88 (d, 1H), 3,2-3,5 (m, 4H), 3,94 (m, 1H), 4,0-4,25 (m, 3H), 4,85 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,5 (m, 10H),
7,95 (m, 1H).
173 (ii) HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HCI
0,12 g (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), 5 ml etanolio, 3jų lašų kone. druskos rūgšties ir nedidelio kiekio 5% Pd/C mišinys hidrinamas 1 vai. atmosferos slėgyje. Mišinys filtruojamas per celitą ir garinamas. Nuosėdas liofilizavus, vandenyje gaunama 91 mg (98%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, D2O): δ 1,1-1,9 (m, 17H), 2,00 (m, 1H), 2,29 (m,
1H), 2,70 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,34 (t, 2H), 3,83 (pld, 2H), 3,89 (dd, 2H), 4,00 (d, 1H), 4,35 (m, 2H), 4,87 (m, 1H).
C-BMR (125,8 MHz, D2O): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 171,8; 169,6; 167,7; 156,3.
Pavyzdys 79
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig x 2 Hcl (i) Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
Į 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoetil-1-benziloksikarbonilamidinopiperidino (H-Rig(Z)) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,32 g (0,82 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,40 g (3,3 mmol) dimetilaminopiridino, ištirpinto 10 ml acetonitrilo ir 2 ml dimetilformamido, tirpalą pridedama 0,165 g (0,86 mmol) N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimido hidrochlorido. Reakcijos mišinys maišomas 3 dienas, tuomet garinamas ir paskirstomas tarp vandeninio kalio hidrosulfato ir metileno chlorido tirpalo. Metileno chlorido sluoksnis praplaunamas vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu ir vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir garinamas. Iš BMR spektro duomenų nustačius pakankamą nevalyto produkto kiekį, šis, turintis tam tikrą dimetilformamido kiekį, naudojamas sekančiame etape daugiau jo negryninant.
174 1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,2 (m, 32H; iš ten 1,41 (s, 9H)),
2,34 (m, 1H), 2,77 (plt, 2H), 3,10 (m, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 4,17 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 4,54 (m, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 7,03 (m, 1H), 7,05-7,4 (m, 7H).
(ii) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
Kolba su nevalytu produktu, Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z), ištirpintu 100 ml etilo acetato, atšaldoma ledo vonioje. Sausos HCI dujos pučiamos per tirpalą 5 min., po to tirpalas garinamas, kad būtų pašalintas HCI perteklius. Produktas ištirpinamas vandenyje ir ekstrahuojamas du kartus etilo acetatu, siekiant pašalinti dimetilformamidą, susidariusį ankstesniame etape. Vandeninė fazė pašarminama NaHCOg (vand.) ir ekstrahuojama du kartus metileno chloridu. Susidariusi organinė fazė praplaunama vandeniu, džiovinama (Na2SO4) ir garinama. Po dviejų etapų gaunama 0,37 g (81%).
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,4 (m, 24H), 2,82 (plt, 2H), 3,26 (m, 2H), 3,42 (plq, 1H), 3,70 (m, 2H), 4,19 (m, 2H), 4,49 (pld, 1H), 5,11 (s, 2H),
6,9-7,5 (m, 8H).
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
0,18 g (0,32 mmol) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z), kalio karbonato pertekliaus ir 10 ml acetonitrilo mišinys kaitinamas 60°C temperatūroje 2 vai. Išgarinus tirpiklius, nevalyta medžiaga gryninama greitosios chromatografijos būdu silikagelio kolonėlėje, naudojant metileno chlorido/metanolio eliuentą santykiu 95/5. Išeiga 0,20 g (88%).
’H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,8-2,1 (m, 23H), 2,37 (m, 1H), 3,1-3,5 (m, 7H), 4,0-4,2 (m, 2H), 4,54 (m, 1H), 5,1 (m, 4H), 6,9-7,5 (m, 13H).
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig x 2 HCI
0,15 g (0,21 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z), 10 ml etanolio, lašai kone. HCI tirpalo ir nedidelio kiekio 5% Pd/C mišinys hidrinamas 1 vai. atmosferos slėgyje. Mišinys filtruojamas pro celitą ir garinamas. Nuosėdos liofilizuojamos vandenyje ir gaunama 95 mg (64%) produkto.
1H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-2,1 (m, 23H), 2,30 (m, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,54 (m, 1H), 3,85-4,0 (m, 3H), 4,03 (d, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,50 (m, 1H).
C-BMR (125,8 MHz, D2O): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 174,0; 168,9; 168,1; 157,5.
Pavyzdys 80
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig x 2 HCI (i) Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z) j 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoetil-1-benziloksikarbonilamidinopiperidino (H-Rig(Z)) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,31 g (0,86 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,40 g (3,3 mmol) dimetilaminopiridino, ištirpinto 10 ml acetonitrilo ir 2 ml dimetilformamido, tirpalą pridedama 0,17g (0,86 mmol) N-(3dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimido hidrochlorido. Reakcijos mišinys maišomas 3 dienas, tuomet garinamas ir paskirstomas tarp vandeninio kalio hidrosulfato ir metileno chlorido tirpalo. Metileno chlorido sluoksnis praplaunamas vandeniniu natrio bikarbonato tirpalu ir vandeniu, išdžiovinamas (Na2SO4) ir garinamas. Nevalytas produktas, turintis tam tikrą dimetilformamido kiekį, naudojamas sekančiame etape daugiau jo negryninant.
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,85 (m, 1H), 0,97 (m, 1H), 1,1-1,75 (m, 26H; iš ten 1,41 (s, 9H)), 1,82 (pld, 1H), 2,53 (m, 2H), 2,77 (plt, 2H), 3,25 (m, 2H), 4,03 (q, 1H), 4,08 (m, 1H), 4,18 (m, 2H), 4,29 (m, 1 H), 4,78 (m, 1H),
4,97 (m, 1H), 5,09 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,65 (m, 1H).
(ii) H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
Kolba su nevalytu produktu, Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z), ištirpintu 100 ml etilo acetato, atšaldoma ledo vonioje. Sausos HCI dujos pučiamos per tirpalą 5 min., po to tirpalas garinamas, kad būtų pašalintas HCI perteklius. Produktas ištirpinamas vandenyje ir ekstrahuojamas du kartus etilo acetatu, siekiant pašalinti dimetilformamidą, susidariusį ankstesniame etape. Vandeninė fazė pašarminama NaHCOg (vand.) ir ekstrahuojama du kartus metileno chloridu. Susidariusi organinė fazė praplaunama vandeniu, išdžiovinama (Na2SO4) ir garinama. Po dviejų etapų gaunama 0,31 g (70%).
1 H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,9 (m, 20H), 2,48 (m, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,85 (plt, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 4,05 (q, 1H), 4,1-4,25 (m, 3H), 4,86 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H), 7,93 (m, 1H).
(iii) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
0,31 g (0,57 mmol) H-(R)Cha-Aze-Rig(Z) ir 93 mg (0,57 mmol) benzilakrilato, ištirpinto 5 ml etanolio, tirpalas laikomas kambario temperatūroje savaitę. Po garinimo išgryninus greitosios chromatografijos būdu silikagelio kolonėlėje, naudojant metileno chlorido/metanolio eliuentą santykiu 94/6, gaunama 0,20 g (49%) produkto.
1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,8 (m, 18H), 2,48 (m, 1H), 2,54 (plt, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,81 (plt, 2H), 2,87 (m, 1H), 3,20 (m, 1H),
3,25 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 4,04 (q, 1H), 4,1-4,2 (m, 3H), 4,84 (dd, 1H), 5,055,15 (m, 4H), 7,0-7,5 (m, 12H), 8,03 (m, 1H).
r/7 (iv) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig x 2 HCI
Išradimo junginys gaunamas ir gryninamas taip pat, kaip aprašoma Pavyzdyje 80, iš 0,20 g (0,28 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z). Gaunama 30 mg (19%) dihidrochlorido.
1H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,0-1,9 (m, 20H), 2,33 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 2,83 (m, 2H), 3,10 (m, 2H), 3,3-3,4 (m, 4H), 3,85 (pld, 2H), 3,92 (m, rotameras), 4,14 (t, 1H), 4,17 (m, rotameras), 4,31 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 5,18 (m, rotameras).
G-BMR (125,8 MHz, D2O): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 175,4; 171,8; 168,8; 156,3.
Pavyzdys 81
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp x 2 Hcl (i) Boc-(R)Cha-Pro-(S)ltp(Ts)
Kambario temperatūroje 0,87 g (2,36 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,78 g (4,72 mmol) DMAP ir 0,70 g (2,36 mmol) H-(S)ltp(Ts) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ištirpinama 12-oje ml_ acetonitrilo. Pamaišius 20 min. pridedama 0,59 g (3,07 mmol) EDC. Po 18 vai. tirpiklis pašalinamas vakuume ir nuosėdos ištirpinamos CH2CI2> praplaunamos vandeniu, citrinos rūgštimi (10%), KHCOg vandeniniu tirpalu, vandeniu ir išdžiovinamos (Na2SO4). Po garinimo gaunama 1,74 g (išeiga mažiau 100%, apie 60% grynumo) reikiamo produkto, kuris sekančiame etape naudojamas daugiau jo negryninant.
FAB-MS: m/z = 647 (M+ +1) r/8 (ii) H-(R)Cha-Pro-(S)ltp(Ts)
Boc apsauginė grupė pašalinama taip, kaip ir Boc-(R)Cha-Pic(R,S)ltp(Z) atveju (žr. Pavyzdį 72, skirsnį (ii)). Gaunama 0,75 g (81%) išradimo junginio.
FAB-MS: m/z = 547 (M+ +1) (iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp(Ts)
0,75 g (1,37 mmol) H-(R)Cha-Pro-(S)ltp(Ts), 0,38 g (2,74 mmol) K2CO3 pridedama į 15 mL acetonitrilo. Pridedama 0,39 g (1,65 mmol) benzilbromacetato ir mišinys maišomas 50°C temperatūroje 2 vai. Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant etilo acetato/metanolio eliuentą santykiu 95/5, gaunama 530 mg reikiamo produkto.
FAB-MS: m/z = 695 (M+ +1) (iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp x 2 HCI
0,53 g (0,76 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp(Ts) ištirpinama 15 mL THF. NH^ (duj.) kondensuojamos kolboje ir pridedama Na (metai.). Reakcija sustabdoma po 30 min., pridėjus acto rūgšties, NH^ ir THF išgarinami.
Nuosėdos liofilizuojamos vandenyje ir nevalytas produktas gryninamas RPLC pagalba, naudojant acetonitrilo/0,1M HOAc eliuentą santykiu 15/85. Liofilizavus vandeniniame HCI tirpale, gaunama 0,25 g (61%) reikiamo produkto.
1H-BMR (500,13 MHz, D2O); δ 0,9-2,09 (persiklojantis m, 2 OH),
2,22-2,35 (m, 1H), 3,2-3,36 (m, 4H), 3,44-3,62 (persiklojantis m, 2H), 3,7-3,8 (m, 1H), 3,87-3,99 (m, 2H), 4,33-4,48 (persiklojantis m, 2H).
C-BMR (500,13 MHz, D2O); guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 154,3; 168,1; 169,0 ir 174,2.
179
Pavyzdys 82
H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig x 2 Hcl (i) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig(Z)
174 mg (0,471 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 229 mg (1,87 mmol) DMAP, 130 mg (0,471 mmol) H-(R,S)Nig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) sumaišoma 2-uose ml CH2CI2 ir pridedama 117 mg (0,61 mmol) EDC ir mišinys maišomas keturias dienas. Mišinys praskiedžiamas CH2CI2 ir praplaunamas vandeniu, du kartus 0,3 KHSO^ tirpalu ir vieną kartą sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas (Na2SO4), filtruojamas ir garinamas, ir nevalytas produktas du kartus gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant, pirmą kartą, CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5, o antrą - CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 97/3. Gaunama 0,104 g (35%) išradimo junginio.
MS m/z 627 (M+ +1) (ii) H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig x 2 HCI mg (0,016 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig(Z) ištirpinama 15 ml etilo acetato, prisotinto HCI. Mišinys paliekamas 0,5 valandos. Mišinys garinamas ir nuosėdos ištirpinamos 6 ml etanolio ir 8 mg 5% Pd/C ir pridedama 0,1 ml 1M HCI tirpalo, po to mišinys hidrinamas atmosferos slėgyje 1,5 vai. Nufiltravus per hyflo ir išgarinus tirpiklį gaunama 4 mg išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, D2O): δ 0,9-1,58 (m, 6H), 1,58-2,45(m, 13H),
2,65 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,34 (d, 2H), 3,4-3,73 (m, 4H), 3,82 (m, 1H), 4,344,49 (m, 2H).
C-BMR (75 MHz, DgO): guanidino ir karbonilo anglies atomai: δ 155,1; 169,9 ir 174,8.
Pavyzdys 83
H-(R)Pro-Phe-Pab x 2 Hcl (i) Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
Į 1,2 g (3,31 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 1,70 g (13,91 mmol) DMAP, ištirpinto 40 ml CHgCN kambario temperatūroje, mišinį pridedama 0,98 g (3,35 mmol) H-Pab(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), ištirpinto 1 ml DMF. Po 2 vai. maišymo reakcijos mišinys atšaldomas iki -18°C temperatūros ir dalimis pridedama 0,66 g (3,48 mmol) EDC, ir reakcijos mišinys paliekamas per naktį kambario temperatūroje.
Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 100 ml EtOAc ir praplaunamos 1x30 ml vandens, 3x30 ml 0,3M KHSO4, 1x30 ml Na2COg, 1x30 ml vandens ir išdžiovinamos. Išgarinus tirpiklį, po to išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 95/5, gaunama 0,691 g (38%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
0,673 g Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z) ištirpinama 30 ml EtOAc ir tirpalas kelioms minutėms prisotinamas HCI dujomis (tirpale iškrinta baltos kieto pavidalo nuosėdos). Tirpiklis ir HCI perteklius išgarinamas ir į nuosėdas pridedama 60 ml EtOAc. Organinė fazė praplaunama 2x20 ml 2M NaOH tirpalu. Skalavimo vanduo ekstrahuojamas 1x25 ml EtOAc, gautas ekstraktas sujungiamas su kitu EtOAc kiekiu ir susidariusi organinė fazė praplaunama vandeniu, džiovinama ir garinama. Taip gaunama 560 mg (98%) reikiamo produkto.
181 1 H-BMR (500 MHz, CDCIg): δ 1,5-1,74 (m, 3H), 1,98-2,05 (m, 1H),
2,78-2,85 (m, 1H), 2,90-2,96 (m, 1H), 3,0-3,2 (ΑΒΧ-sistema centruota 3,1, 2H),
3,62 (dd, 1H), 4,3-4,45 (ΑΒΧ-sistema centruota 4,37, 2H), 4,58 (q, 1H), 5,22 (s, 2H), 6,96 (plt, 1H), 7,1-7,4 (m, 10H), 7,46 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,12 (d, 1H).
(iii) H-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HCI
200 mg H-(R)Pro-Phe-Pab(Z) ištirpinama 10 ml 95% EtOH bei 2 ml vandens ir mišinys hidrinamas 5 vai., esant 5% Pd/C atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių ir pridėjus 1 ml 1M HCI, po to nugarinus ir liofilizavus vandenyje, gaunama 88% išradimo junginio išeigos.
1 H-BMR (500 MHz, CDgOD): δ 1,51-1,59 (m, 1H), 1,69-1,80 (m, 1H),
1,87-1,97 (m, 1H), 2,19-2,29 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,20-3,33 (m, 3H, iš dalies uždengtas tirpiklio maksimumo), 4,27 (m, 1H), 4,43-4,54 (AB-sistema centruota 4,48, 2H), 4,75-4,81 (m, 1H), 4,87 (s, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).
C-BMR (125 MHz, DgO): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,7; 170,1 ir 173,4.
Pavyzdys 84
HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 Hcl (i) BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
Į skystojo molio pavidalo mišinį, sudarytą iš 244 mg (0,463 mmol) H(R)Pro-Phe-Pab(Z) (žr. Pavyzdį 83%) ir 159,9 mg (1,157 mmol) K2COg, ištirpinto 8 ml DMF/CHgCN (5/3), pridedama 127,2 mg (0,555 mmol) benzilbromacetato, ištirpinto 2 ml DMF, ir gautas mišinys maišomas 1,5 vai.
182
60°C temperatūroje ir per naktį kambario temperatūroje. Tirpiklis išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos 50 ml EtOAc, praplaunamos 2x20 ml vandens ir išdžiovinamos (Na2SO4). Išgarinus tirpiklį ir išgryninus greitosios chromatografijos būdu, naudojant CH2CI2/MeOH eliuentą santykiu 9/1, gaunama 176 mg (56%) baltos kietos medžiagos pavidalo išradimo junginio.
1H-BMR (300 MHz, CDCIg): δ 1,45-1,80 (m, 3H), 2,06 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,92-3,28 (m, 6H), 4,3-4,5 (ΑΒΧ-sistema centruota δ = 4,4, 2H), 4,60 (dd, 1H), 5,10 (neryškus s, 2H), 5,2 (neryškus s, 2H), 7,1-7,4 (m, 15H), 7,43 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,932 (d, 1H).
(ii) HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HCI
170 mg (0,252 mmol) BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z) ištirpinama ml EtOH/vandens santykiu 5/1 ir hidrinama 4,5 vai., esant 5% Pd/C atmosferos slėgyje. Nufiltravus katalizatorių ir išgarinus tirpiklį bei liofilizavus nuosėdas vandeniniame HCI, tirpale gaunamas išradimo junginys.
1H-BMR (500 MHz, CDgOD): δ 1,62 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 2,08 (m,
1H), 2,38 (m, 1H), 2,90 (dd, 1H), 3,25-3,35 (m, 2H, iš dalies uždengtas tirpiklio maksimumo), 3,80 (m, 1H), 4,08-4,19 (AB-sistema centruota δ = 4,19, 2H),
4,39 (m, 1H), 4,45-4,58 (AB-sistema centruota δ = 4,50, 2H), 4,80 (m, 1H), 7,20-7,35 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (D, 2H).
13C-BMR (125 MHz, DgO): amidino ir karbonilo anglies atomai: δ 166,8; 169,1; 169,5 ir 173,2.
'88
Pavyzdys 85
H-(R)Phe-Phe-Pab (i) Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
Boc-(R)Phe-Phe-OH (16,4 mmol) (žr. Pradinių medžiagų gavimas), PaB(Z)-HCI (18,0 mmol) ir 4-dimetilaminopiridinas (24,6 mmol) ištirpinami 50 ml acetonitrilo. Tirpalas atšaldomas iki ledo vandens temperatūros ir pridedama
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimido hidrochlorido (21,3 mmol). Pašalinus šaldymo vonią, reakcijos mišinys maišomas per naktį. Tirpiklis išgarinamas žemesniame slėgyje, nuosėdos ištirpinamos 50 ml_ etilacetato ir gautas tirpalas ekstrahuojamas 50-ia mL vandens. Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z), iškritęs į nuosėdas dviejų fazių mišinyje, filtruojamas ir praplaunamas vandeniu. Po 24 vai. trunkančio džiovinimo vakuume, esant 45°C, gaunama 8,7 g (78%) produkto.
1H-BMR (200 MHz, d-CHCIg ir d4-CH3OH); δ 8,35-7,0 (m, 19H), 4,63 (t, 1H), 4,3-4,1 (m, 1H), 3,40-2,70 (m, 6H), 1,30 (s, 9H).
(ii) H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (10,3 mmol) įmaišomas į 70 mL etilo acetato ir pridedama 31 ml_ 3,3M etilo acetato/HCI. Skystojo molio pavidalo mišinys maišomas 4 vai., po to nufiltruojamas H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) hidrochloridas ir kelis kartus praplaunamas etilo acetatu. Druska ištirpinama 50 mL metilenchlorido, 50 ml_ 1M kalio karbonato ir maždaug 5 mL etanolio mišinyje. Sujungus organinį sluoksnį ir išgarinus tirpiklį žemesniame slėgyje, gaunama 5,0 g H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (84%).
18Δ 1H-BMR (200 MHz, dg-DMSO); δ 9,1 (s, 2H), 8,59 (m, 1H), 8,1 (m,
1H), 7,90 (d, 2H), 7,4-7,0 (m, 17H), 5,09 (s, 2H), 4,58 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 3,12,7 (m, 4H).
(iii) H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,42 mmol) ištirpinama 10 mL tetrahidrofurano ir 1 mL vandens. Į tirpalą įdedama paladžio su medžio anglimi (42 mg) ir gautas mišinys hidrinamas 2 dienas Parr kratytuve, esant 45 psi vandenilio slėgiui. Visiškai sureagavus vandeniliui, mišinys praskiedžiamas metanoliu ir katalizatorius nufiltruojamas. Išgarinus tirpiklus, gaunama nevalyto H-(R)PhePhe-Pab, kuris gryninamas chromatografiškai, naudojant neutralų aliuminio oksidą (70-230 mišinys) ir metileno chlorido/metanolio/amonio hidroksido eliuentą santykiu 80/20/2. Taip gaunama 76 mg (41%) išradimo junginio.
1H-BMR (200 MHz, dg-DMSO); δ 7,61 (d, 2H), 7,4-7,0 (m, 12H), 4,64 (m, 1H), 4,4 (m, 2H), 4,13 (t, 1H), 3,1-2,8 (m, 4H).
Pavyzdys 86
HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab (i) MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (žr. Pavyzdį 85, skirsnį (ii)) ištirpinamas 10 mL tetrahidrofurano. Tirpalas atšaldomas ledo ir vandens vonioje ir pridedama trietilamino (1,73 mmol), po to metiloksalilchlorido (0,95 mmol). Pašalinus šaldymo vonią, reakcijos mišinys maišomas 18 vai. aplinkos temperatūroje. Reakcijos mišinys praskiedžiamas etilo acetatu ir ekstrahuojamas vandeniu. Sujungus organinę fazę ir išgarinus tirpiklį žemesniame slėgyje, gaunama 0,45 g (78%) MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z), kuris, daugiau jo negryninant,
185 naudojamas sekančiame etape. TSP-MS spektriniai duomenys: m/z 664 (skaičiuota MH+ (CgyHggNgOy) 664).
(ii) HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,68 mmol) ištirpinamas 4 mL tetrahidrofurano ir 2 mL vandens. Pridedama ličio hidroksido (2,6 mmol) ir reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje 1,5 vai. Užsibaigus hidrolizei, reakcijos mišinys praskiedžiamas 25 mL vandens ir rūgštinamas pridedant 0,5 mL acto rūgšties. Nuosėdos nufiltruojamos ir praplaunamos kelis kartus vandeniu. Po 24 vai. džiovinimo vakuume, esant 45°C temperatūrai, gaunama 0,40 g nevalyto HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z). Nevalytas produktas įmaišomas j 10 mL etanolio ir 1 mL vandens. Tirpalas virinamas su grįžtamuoju šaldytuvu ir, nufiltravus netirpų išradimo junginį, gaunama 0,23 g HOOC-CO(R)Phe-Phe-Pab(Z) (41% po dviejų etapų).
1H-BMR (200 MHz, dg-DMSO); δ 8,62 (m, 2H), 8,41 (d, 1H), 7,89 (d, 2H), 7,4-6,9 (m, 17H), 5,10 (s, 2H), 4,54 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 3,2-2,6 (m, 4H).
(iii) HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab
HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,20 mmol) įmaišoma į 20 mL tetrahidrofurano ir 5 mL vandens. Į tirpalą įdedama paladžio su medžio anglimi (52 mg) ir mišinys hidrinamas 2 dienas Parr kratytuve, esant 45 psi vandenilio slėgiui. Visiškai sureagavus vandeniliui, mišinys praskiedžiamas 40 mL metanolio ir katalizatorius nufiltruojamas. Išgarinus tirpiklius, gaunama 50 mg išradimo junginio (49%).
1H-BMR (200 MHz, dg-DMSO); δ 9,2 (s), 8,78 (d), 8,60 (m), 7,91 (m),
7,79 (d, 2H), 7,35-6,8 (m, 12H), 4,6-4,0 (m, 4H), 3,0-2,6 (m, 4H).
186
Pavyzdys 87
HOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab (i) BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (žr. Pavyzdį 85, skirsnį (ii)) ir kalio karbonatas (2,6 mmol) įmaišomas į 10 mL acetonitrilo. į mišinį pridedama jodbenzilacetato (0,95 mmol) ir tirpalas kaitinamas iki 30°C temperatūros ir toje temperatūroje maišomas 2 dienas. Užsibaigus alkilinimui, tirpiklis pašalinamas ir nuosėdos ištirpinamos 10 mL etilo acetato. Tirpalas nedelsiant ekstrahuojamas 10 mL vandens ir susidariusioje organinėje fazėje išradimo junginys iškrinta į nuosėdas. BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z) nufiltruojamas, džiovinamas vakuume 24 vai., esant 45°C. Gaunama 177 mg (28%) BnOOCCH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z).
1 H-BMR (200 MHz, CDCIg): δ 7,79 (d, 2H), 7,5-7,1 (m, 22H), 6,55 (t, 1H), 5,21 (s, 2H), 5,03 (s, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,41 (m, 2H), 3,3-2,6 (m, 7H).
(ii) BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,32 mmol) įmaišomas j 30 ml_ tetrahidrofurano ir 3 mL vandens. Į tirpalą įdedama paladžio ant medžio anglies (41 mg) ir mišinys hidrinamas 2 dienas Parr kratytuve, esant 45 psi vandenilio slėgiui. Visiškai sureagavus vandeniliui, mišinys praskiedžiamas 40 mL vandens ir katalizatorius nufiltruojamas. Išgarinus tirpiklį gaunama 95 mg išradimo junginio (59%). TSP-MS spektriniai duomenys: m/z 502 (skaičiuota MH+ (C28H32N5O4) 502).
187
Pavyzdys 88
H-(R)Cha-Pro-Mig (i) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)
J maišomą 0,344 g (0,93 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,245 g (0,93 mmol) H-Mig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,227 g (1,86 mmol) DMAP, ištirpinto 10 mL CHgCN, mišinį -10°C temperatūroje pridedama 0,232 g (1,21 mmol) EDC. Mišinio temperatūra susilygina su kambario temperatūra ir mišinys laikomas 5 dienas. CHgCN išgarinamas ir nuosėdos ištirpinamos EtOAc ir praplaunamos HgO, vandeniniu Na2HCO3 tirpalu ir sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas Na2SO4 ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento EtOAc/MeOH gradientą nuo 95/5 iki 90/10. Taip gaunama 0,340 g (60%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)
0,34 g (0,55 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z) ištirpinama 8 mL EtOAc, prisotinto HCI dujomis ir maišoma 10 min. kambario temperatūroje. Sulašinama 10 mL sotaus vandeninio KOH tirpalo. Atskyrus sluoksnius, vandeninė fazė ekstrahuojama 3x8 ml_ EtOAc. Sujungus organinus sluoksnius, praplovus juos sūrymu, išdžiovinus Na2SO4 ir nugarinus, gaunama 0,286 g (100%) išradimo junginio.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Mig
0,050 g (0,132 mmol) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z) ištirpinama 3 ml_ MeOH ir hidrinama per naktį atmosferos slėgyje, esant 10% Pd/C. Tirpalą nufiltravus per celitą ir išgarinus tirpiklį, gaunama 0,040 g (80%) išradimo junginio.
188 1 H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 0,92-1,02 (m, 2H), 1,18-1,47 (m, 6H),
1,66-1,73 (m, 4H), 1,84-2,04 (m, 4H), 2,17-2,22 (m, 1H), 2,95-2,98 (m, 1H), 3,12-3,16 (m, 1H), 3,47-3,55 (m, 2H), 3,62-3,66 (m, 1H), 3,75-3,78 (m, 1H), 3,85-3,89 (m, 1H), 4,05-4,12 (m, 3H), 4,34-4,37 (m, 1H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami: δ 3,4; 3,7; 4,13-4,16; 4,3.
MS m/z 379 (M+ +1).
Pavyzdys 89
H-(R)Cha-Pro-Dig (i) Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)
Į maišomą 0,280 g (0,76 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (žr. Pradinių medžiagų gavimas), 0,210 g (0,76 mmol) H-Dig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) ir 0,186 g (1,52 mmol) DMAP, ištirpinto 8 mL CH^CN, mišinį -10°C temperatūroje pridedama 0,189 g (0,99 mmol) EDC. Mišinio temperatūra susilygina su kambario temperatūra ir mišinys laikomas 4 dienas. CHgCN išgarinamas, ir nuosėdos ištirpinamos EtOAc ir praplaunamos HpO, vandeniniu Na2HCOg tirpalu ir sūrymu. Organinis sluoksnis išdžiovinamas Na2SO4 ir garinamas. Nevalytas produktas gryninamas greitosios chromatografijos būdu, naudojant laiptinį eliuento EtOAc/MeOH gradientą nuo 95/5 iki 90/10. Taip gaunama 0,210 g (44%) išradimo junginio.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)
0,210 g (0,33 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z) ištirpinama 8 mL EtOAc, prisotinto HCI dujomis, ir maišoma 10 min. kambario temperatūroje. Sulašinama 8 mL sotaus vandeninio KOH tirpalo. Atskyrus sluoksnius, vandeninė fazė ekstrahuojama 3x8 mL EtOAc. Sujungus organinus sluoksnius,
189 praplovus surymu, išdžiovinus Na2SO4 ir nugarinus, gaunama 0,146 g (83%) išradimo junginio.
(iii) H-(R)Cha-Pro-Dig
0,046 g (0,087 mmol) H-(R)Cha-Pro-Dig(Z) ištirpinama 3 mL MeOH ir hidrinama per naktį atmosferos slėgyje, esant 10% Pd/C. Tirpalą nufiltravus per celitą ir išgarinus tirpiklį, gaunama 0,040 g (100%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 0,90-1,04 (m, 2H), 1,10-1,47 (m, 6H),
1,66-1,74 (m, 4H), 1,78-2,05 (m, 4H), 2,13-2,21 (m, 1H), 2,74-2,83 (m, 1H), 2,94-2,99 (m, 1H), 3,15-3,29 (m, 1H), 3,44-3,57 (m, 2H), 3,65-3,87 (m, 3H), 4,07-4,25 (m, 3H), 4,35-4,39 (m, 2H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami: δ 4,29-4,32.
MS m/z 393 (M+ +1).
Pavyzdys 90
H-(R)Cha-Aze-Dig (i) Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
Išradimo junginys gaunamas iš Boc-(R)Cha-Aze-OH ir H-Dig(Z) (žr. Pradinių medžiagų gavimas) pagal Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z) gavimo procedūrą. Gaunama 0,253 g (54%).
(ii) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
Išradimo junginys gaunamas iš Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z) pagal Boc(R)Cha-Pro-Dig(Z) gavimo procedūrą. Gaunama 0,210 g (100%).
190 (iii) H-(R)Cha-Aze-Dig
0,060 g (0,117 mmol) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z) ištirpinama 3 ml_ MeOH ir hidrinama per naktį atmosferos slėgyje, esant 10% Pd/C. Tirpalą nufiltravus per celitą ir išgarinus tirpiklį, gaunama 0,042 g (95%) išradimo junginio.
1H-BMR (500 MHz, MeOD): δ 0,91-1,02 (m, 2H), 1,18-1,48 (m, 6H),
1,66-1,90 (m, 8H), 2,15-2,17 (m, 1H), 2,66-2,68 (m, 1H), 2,80-2,83 (m, 1H),
3.14- 3,29 (m, 1H), 3,39-3,44 (m, 1H), 3,72-3,80 (m, 2H), 4,01-4,04 (m, 1H),
4.14- 4,23 (m, 2H), 4,48-4,49 (m, 1H), 4,60-4,64 (m, 1H).
Mažesnę dalį sudarančio rotamero skiriamieji signalai registruojami: δ 2,25; 2,6; 4,3; 4,67.
MS m/z 379 (M+ +1).
:oi
Farmacinių preparatų pavyzdžiai
Išradimo junginius galima paruošti kietų dozuočių, skirtų vartoti per burną, pavidalu, kaip antai, paprastų tablečių, padengtų tablečių ar modifikuoto patekimo tablečių; skystų ar kietų-pusiau kietų dozuočių, vartojamų per tiesiąją žarną; liofilizuotų medžiagų ar skysčių, kaip antai, emulsijų ar suspensijų, vartojamų parenteraliai; skystų, kietų ar pusiau kietų dozuočių, vartojamų vietiškai; padidinto slėgio aerozolių ar drėgnų įkvepiamųjų miltelių, vartojamų inhaliacijoms per burną ar nosj.
Pavyzdys P1
Tabletės vartoti per burną
1000 tablečių yra gaminama iš šių sudedamųjų dalių:
Veiklusis junginys 100 g
Laktozė 200 g
Polivinilo pirolidonas 30 g
Mikrokristalinė celiuliozė 30 g
Magnio stearatas θ9
Veiklioji sudėtinė dalis ir laktozė yra sumaišoma su vandeniniu polivinilo pirolidono tirpalu. Mišinys išdžiovinamas ir sumalamas iki granulių. Tuomet įmaišoma mikrokristalinė celiuliozė ir po to magnio stearatas. Mišinys talpinamas į tablečių presavimo mašiną, gaminančią po 1000 tablečių, kurių kiekvienoje esama 100 mg veikliosios sudėtinės dalies.
192
Pavyzdys P2
Tirpalas vartoti parenteraliai
Tirpalas yra gaminamas iš šių sudedamųjų dalių:
Veiklusis junginys 5 g
Natrio chloridas injekcijoms 6 g
Natrio hidroksidas naudojamas nustatyti pH nuo 5 iki 7.
Tirpalas papildomas vandeniu injekcijoms iki 1000 ml.
Veiklioji sudėtinė dalis ir natrio chloridas yra ištirpinami vandenyje. Tirpalo pH nustatomas nuo 3 iki 9, naudojant 2M NaOH, ir tirpalas išpilstomas j sterilias ampules.
Pavyzdys P3
Tabletės vartoti per burną
Veiklusis junginys 150 g
Natrio aliuminio silikatas 20 g
Parafinas 120 g
Mikrokristalinė celiuliozė 20 g
Hidroksipropilo celiuliozė
Natrio stearilo fumaratas 3g
Sudėtinės dalys 1-4 yra sumaišomos ir pridedama 5-osios sudėtinės dalies vandeninis tirpalas. Mišinys išdžiovinamas, sumalamas ir įmaišoma 6-oji sudėtinė dalis. Tada mišinys presuojamas tablečių mašinoje.
198
Pavyzdys B6
Įkvepiamieji milteliai
Veiklusis junginys disperguojamas reaktyviniame malūne į daleles, tinkamas inhaliacijai (masės diametras mažiau negu 4 ųm).
100 mg disperguotų miltelių pripildoma j miltelių dozavimo inhaliatorių (Turbohaler®). Inhaliatorius turi dozavimo skyrių, skirstantį 1 mg dozes.
Biologiniai tyrimai
Trombinu skatinamo krešėjimo laiko (TT) nustatymas
100 μΙ žmogaus trombino (T 6769, Sigma Chem Co), ištirpinto buferiniame tirpale, pH 7,4, ir 100 μΙ tirpalo su inhibitoriumi yra inkubuojama 1 min. Po to pridedama 100 μΙ normalios citratu paveiktos žmogaus plazmos ir automatiniu prietaisu (KC 10, Amelung) matuojamas krešėjimo laikas.
Nubrėžus krešėjimo laiko (sekundės) priklausomybę nuo inhibitoriaus koncentracijos, interpoliacijos būdu nustatoma IC5qTT.
IC50TT - inhibitoriaus koncnetracija, kuriai esant trombinu skatinamas krešėjimo laikas žmogaus plazmoje pailgėja dvigubai.
Tromboplastino dalinės aktyvacijos laiko (APTT) nustatymas
APTT yra nustatomas normalioje citratu paveiktoje žmogaus plazmoje, naudojant reagentą PTT (Automated 5, pagaminta Stago). Pridėjus į plazmą inhibitoriaus (10 μΙ tirpalo su inhibitoriumi į 90 μΙ plazmos) pagal
194 reagento gamintojo instrukcijas, gautame mišinyje yra nustatomas APPT koaguliacijos analiazatoriaus (KC 10, Amelung) pagalba. Nubrėžus krešėjimo laiko (s) priklausomybę nuo esančio plazmoje inhibitoriaus koncentracijos, interpoliacijos būdu randama ΙΟ^θΑΡΤΤ.
IC5qAPTT. - inhibitoriaus koncentracija, kuriai esant plazmoje dvigubai pailgėja tromboplastino dalinės aktyvacijos laikas.
Trombino slopinimo laiko nustatymas ex vivo
Trombino slopinimo laikas tiriamas įvedant junginius per burną aktyvioms žiurkėms, kurioms prieš dvi dienas pritaisytas kateteris kraujo pavyzdžių paėmimui iš miego arterijos. Eksperimento dieną kraujo pavyzdžiai, įvedus junginius, imami nustatytu laiku į plastmasinį mėgintuvėlį, talpinantį 1 dalį natrio citrato tirpalo (0,13 mol/L) ir 9 dalis kraujo. Mėgintuvėliai centrifuguojami, siekiant iš plazmos pašalinti trombocitus. Taip gauta plazma naudojama trombino slopinimo laikui įvertinti (žr. žemiau).
100 μΙ citratu apdorotos žiurkių plazmos praskiedžiama 100 μΙ (0,9%) fiziologiniu tirpalu, po to, pridėjus žmogaus trombino (T 6769, Sigma Chem Co, JAV), ištirpinto buferiniame tirpale (pH 7,4; 100 μΙ ), sukeliama koaguliacija. Krešėjimo laikas matuojamas automatiniu prietaisu (KC 10, Amelung, Vokietija).
Plazmos kalikreino slopinimo pastoviosios Kj nustatymas
Pastovioji Kj randama chromogeninio substrato metodo pagalba, naudojant centrifuginj analizatorių Cobas Βίο, pagamintą Roche (Bazelis, Šveicarija). Liekamasis fermentinis aktyvumas, po žmogaus plazmos kalikreino inkubacijos su skirtingų koncentracijų testuojamuoju junginiu, yra nustatomas matuojant trijų skirtingų koncentracijų substratų optinės absorbcijos pokyčius, esant 405 nm 37°C temperatūrai.
Žmogaus plazmos kalikreinas (E.C.3.4.21.34, Chromogenix AB, Molndal, Švedija), 250 μΙ, 0,4 nkat/ml, esančio buferiniame tirpale (0,05 mol/l Tris-HCI, pH 7,4, 0,15 I, nustatoma NaCI), ir 5 g/l (cat no 810033, ICI Biochemicals Ltd, High VVycombe, Bucks, D.Britanija) jaučio albumino
19;i inkubuojama 300 s kartu su 80 μΙ testuojamojo junginio, ištirpinto 0,15 mol/l NaCl, tirpalo, kuriame yra 10 g/l albumino. Šiame etape pridedama 10 μΙ vandens. Po to pridedama 40 μΙ kalikreino substrato (S-2302, Chromogenix AB, vandeninė koncentracija 1,25, 2,0 arba 4,0 mmol/l) ir dar 20 μΙ vandens, ir išmatuojamas absorbcijos pokytis.
Kj reikšmė nustatoma iš Dixon'o grafikų, t.y. inhibitoriaus koncentracijos priklausomybių nuo dydžio 1/(dA/min) grafikuose, kur reikšmės, esant skirtingoms koncentracijoms, sudaro tieses, susikertančias taške x = -Kj.
SUTRUMPINIMAI
Ac
Aze betaPic
Boc
Boc-Dig(Z)
Boc-Mig(Z)
Boc-Pig(Z)
Boc-Pig(Z)2
Bn
Bu
Cgl
Cha
CME-CDI
DBU
DCC
DCU
DMAP
DMF
DMSO
EDC acetilas azetidin-2-karboksilo rūgštis piperidin-3-karboksilo rūgštis tret-butiloksikarbonilas
3-(N-tret-butiloksikarbonilaminoetil)1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas
3- (N-tret-butiloksikarbonilaminometil)1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas
4- (N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1(N-benziloksikarbonilamidino)piperidinas
4-(N-tret-butiloksikarbonilaminometil)-1(N,N'-dibenziloksikarbonilamidino)piperidinas benzilas butilas cikloheksilglicinas β-cikloheksilalaninas
1-cikloheksil-3-(2-morfolinetil)karbodiimidometotp-toluensulfonatas
1,8-diazobiciklo[5,4,0]undek-7-enas dicikloheksilkarbodiimidas dicikloheksilkarbamidas
N,N-dimetilaminopiridinas dimetilformamidas dimetilsulfoksidas
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimido
7
hidrochloridas
Et etilas
EtOAC etilo acetatas
EtOH etanolis
Gly glicinas
HCI druskos rūgštis
Hex heksilas
HOAc acto rūgštis
HOBt N-hidroksibenzotriazolas
Hoc homocikloheksilalaninas
Hop homofenilalaninas
HOSu N-hidroksisukcinimidas
H-Dig(Z) 3-aminoetil-1 -(N-benziloksikarbonilamidino) azetidinas
H-Dig 3-aminoetil-1 -amidinoazetidinas
H-(R,S)Hig(Z) (3RS)-1 -(N-benziloksikarbonilamidino)-3- aminoetilpirolidinas
H-(R,S)Hig (3RS)-1 -amidino-3-aminoetilpirolidinas
H-Hig 1 -amidino-3-aminoetilpirolidinas
H-(R,S)ltp(Ts) (4RS)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-aminoetil- cikloheksanas
H-(R,S)ltp (4RS)-1,3-diazo-2-imino-4-aminoetil- cikloheksanas
H-(S)ltp(Ts) (4S)-1,3-diazo-2-tozilimino-4-aminoetil- cikloheksanas
H-(S)ltp (4S)-1,3-diazo-2-imino-4-aminoetil- cikloheksanas
H-ltp
H-Mig(Z)
H-Mig
H-(R,S)Nig(Z)
H-(R,S)Nig
H-Nig
H-Pab
H-Pab(Z)
H-Pac
H-Pac(Z)
H-Pig
H-Pig(Z)
H-Pig(Z)2
H-Rig(Z)
H-Rig
Me
MeOH
Mpa
198
1,3-diazo-2-imino-4-aminoetilcikloheksanas
3-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas
3- aminometil-1-amidinoazetidinas (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3aminometilpirolidinas (3RS)-1-amidino-3-aminometilpirolidinas
1-amidino-3-aminometilpirolidinas
-amidino-4-aminometilbenzoenas
4- aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino) benzolas
1-amidino-4-aminometilcikloheksanas
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino) cikloheksanas
4-aminometil-1-amidinopiperidinas
4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino) piperidinas
4-aminometil-1-(N,N'-dibenziloksikarbonilamidino)piperidinas
4-aminoetil-1-benziloksikarbonilamidinopiperidinas
4-aminoetil-1-amidinopiperidinas metilas metanolis megapaskalis
Ms
NMM
Pd/C
Pgi
Phe
Pic
Pro
RPLC sūrymas
Tf
TFA
THF
Tie
Ts
Vai vai.
vand.
Z mezilas
N-metilmorfolinas paladis ant medžio anglies fenilglicinas fenilalaninas pipekolino rūgštis prolinas priešingos fazės aukštos skiriamosios gebos skystinė chromatografija sotus vandeninis NaCI tirpalas trifluormetilsulfonilas trifluoracto rūgštis tetrahidrofuranas
-karboksi-1,2,3,4-tetrahidroizochinolinas tozilas valinas valanda(os) vandeninis benziloksikarbonilas.
Priešdėliai n, s, i ir t turi įprastas reikšmes: normalus, ižo, antrinis ir tretinis. Amino rūgščių stereoizomerai pagal nutylėjimą žymimi (S), jeigu nepažymėta kitaip.
200
SUTRUMPINIMAI (tęsinys, vingiuotos linijos prie azoto atomų žymi fragmento jungties padėtį žemiau pateiktose struktūrinėse formulėse).
NH
NH
NH
Pab (n=1) (CH2)n
Pig (n=1) Rig (n=2)
Pac (n = 1)
NH
NH (CH2)n
Nig (n=1) Hig (n=2)
NH
Mig (n=1) Dig (n=2)
Itp (n=2)
20'
IŠRADIMO APIBRĖŽTIS

Claims (47)

  1. 20'
    IŠRADIMO APIBRĖŽTIS
    1. Junginys, apibudinamas bendrąja formule,
    A1_A2_NH_(CH2)n_B,
    Formulė I kurioje
    A^ yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, lle, lld ar lle;
    lld lle c ? L 'u Z kuriose k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 arba 4;
    m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 arba 4;
    q yra sveikasis skaičius 0,1,2, arba 3;
    R1 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba R11OOCalkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17(CH^p-, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R^7 yra metilas, fenilas, OH, COOR12,
    12 12
    CONHR , kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R11 yra H ar alkilo2 grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, arba R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba
    1 13
    R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 12 12 anglies atomų, ar -CH2COOR , kur R apibrėžta aukščiau, arba 1 12
    R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
    R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 14
    COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba 1 15 15
    R yra -CO-R , kur R esti alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2)p-COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius 0, 1, ar 2, arba
    R1 yra -CH2PO(OR16)2, -CH2SC>3H ar -CH2-(5-(1 H)-tetrazolilas), kur R16 yra, kiekvienu atveju atskirai, H, metilas ar etilas;
    233 p 21
    R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
    R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba ne vieną ar daugiau fluoro atomų, arba o
    R yra ciklopentilo, cikloheksilo ar fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba ne alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba q 31 31
    R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k esti 0,1, arba q
    R yra 1-naftilo ar 2-naftilo grupe ir k yra 0,1, arba
    R yra eis- ar trans-dekalino grupė ir k yra 0, 1, arba o
    R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas ar 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas arba 31 31 ne OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k yra 0, 1, arba
    9 99 99
    R yra Si(Me)g ar CH(R )2, kur R yra cikloheksilo ar fenilo grupė;
    R4 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo ar fenilo grupė;
    p
    A yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis llla, lilb ar Ule, kuriose p yra sveikasis skaičius 0, 1 arba 2; m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 arba 4;
    204
    Y yra metileno grupė, arba
    Y yra etileno grupė ir susidaręs 5-naris žiedas gali turėti arba neturėti vieną ar du fluoro atomus, hidroksigrupę ar oksogrupę 4-oje padėtyje, ar gali būti arba nebūti neprisotintas, arba
    Y yra -Ch^-O-, -CH2-S-, -CH2-SO-, turinčiomis funkcinę grupę su heteroatomais 4-oje padėtyje, arba
    Y yra n-propileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba neturėti
    5-oje padėtyje fluoro atomą, hidroksigrupę ar oksogrupę, turėti du fluoro atomus vienoje iš padėčių, 4-oje ar 5-oje, ar būti neprisotintas 4-oje ar 5oje padėtyje, ar turėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 1-4 anglies atomų, arba
    Y yra -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-SO-CH2-, arba
    Y yra -CH2-CH2-CH2-CH2-;
    R yra apibrėžta aukščiau;
    R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
    R5 yra -(CH2)p-COOR51, kur p yra O, 1 arba 2, ir R51 yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
    n yra sveikasis skaičius O, 1,2, 3 arba 4;
    B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis IVa, IVb, IVc ar IVd, kuriose r yra sveikasis skaičius O ar 1;
    X1 yra CH2, NH arba jo nėra;
    X2 yra CH2, NH arba C=NH;
    X3 yra NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CH-NH-C(NH)-NH2 arba CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 yra CH2 arba NH;
    X5 yra C(NH)-NH2 arba NH-C(NH)-NH2;
    X6 yra CH arba N;
    R yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
    arba jo stereoizomerai, arba fiziologiškai tinkama druska.
  2. 2. Junginys, apibudinamas bendrąja formule A1_A2_NH_(CH2)n_B_D,
    Formulė V kurioje
    A1 yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis lla, llb, lle lld ar lle;
    lla llb lle kuriose k yra sveikasis skaičius 0, 1,2, 3 arba 4;
    m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 arba 4;
    q yra sveikasis skaičius 0,1,2 arba 3;
    R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo grupės atžvilgiu, ir alfa-pakaitas yra grupė R17-(CH2) -, kur p yra 0, 1 ar 2 ir R17 yra COOR12, CONHR12, H kur R yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų arba benzilo grupė, ir R11 yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 6 anglies atomų, arba benzilo grupė, arba
    R1 yra Ph(4-COOR12)-CH2-, kur R12 apibrėžtas aukščiau, arba 1 13
    R yra R -NH-CO-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, turinčia 13 nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
    -CH2COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, arba
    1 12
    R yra R OOC-CH2-OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir gali būti pakeista alfa-padėtyje karbonilo atžvilgiu alkilo grupe, 12 turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R apibrėžta aukščiau, arba
    R1 yra R14SO2-, Ph(4-COOR12)-SO2-, Ph(3-COOR12)-SO2-, Ph(212 12 14
    COOR )-SO2-, kur R yra apibrėžta aukščiau, ir R yra alkilo grupė, turinti 1-4 anglies atomus, arba
    207
    1 15 15
    R yra -CO-R , kur R yra alkilo grupė, turinti 1 -4 anglies atomus, arba R1 yra -CO-OR15, kur R15 apibrėžta aukščiau, arba R1 yra -CO-(CH2) -COOR12, kur R12 apibrėžta aukščiau, ir p yra sveikasis skaičius O, 1, ar 2, arba o 21
    R yra H ar alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ar R OOC21 alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų ir kur R yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba benzilo grupė;
    o
    R yra alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, alkilo grupė gali būti prisijungusi arba neprisijungusi vieną arba daugiau fluoro atomų, arba o
    R yra ciklopentilo, cikloheksilo arba fenilo grupė, kuri gali būti pakeista arba nepakeista alkilo grupe, turinčia nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba o 31 31
    R yra fenilo grupė, pakeista OR grupe, kur R yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir k yra O, 1, arba
    O
    R yra 1 -naftilo arba 2-naftilo grupė ir k yra O, 1, arba o
    R yra eis- arba trans-dekalino grupė ir k yra O, 1, arba
    O
    R yra 4-piridilas, 3-pirolidilas arba 3-indolilas, kuris gali būti pakeistas 31 31 arba nepakeistas OR grupe, kur R apibrėžta aukščiau ir k yra O, 1, arba
  3. 3 32 32
    R yra Si(Me)3 arba CH(R )2, kur R yra cikloheksilo arba fenilo grupė;
    R4 yra H, alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, cikloheksilo arba fenilo grupė;
    A2 yra struktūrinis fragmentas, apibudinamas formulėmis llla, lllb ar lllc, llla lllb lllc
    Z Ji kuriose p yra sveikasis skaičius 0, 1 arba 2;
    m yra sveikasis skaičius 1,2, 3 arba 4;
    Y yra metileno grupė, arba
    Y yra -CH2~O-, -CH2-S-, -CH2-SO-, turinčiomis funkcinę grupę su heteroatomais 4-oje padėtyje, arba
    Y yra etileno grupė ir susidaręs 5-naris žiedas gali turėti arba neturėti vieną arba du fluoro atomus, hidroksigrupę arba oksogrupę 4-oje padėtyje, ar gali būti arba nebūti neprisotintas, arba
    Y yra n-propileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba neturėti
    5-oje padėtyje fluoro atomą, hidroksigrupę arba oksogrupę, turėti du fluoro atomus vienoje iš padėčių, 4-oje arba 5-oje, ar būti neprisotintas 4oje arba 5-oje padėtyje, ar turėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 14 anglies atomų, arba
    Y yra -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-SO-CH2-, arba
    Y yra -CH2-CH2-CH2-CH2-; o
    R yra apibrėžta aukščiau;
    R yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų, arba
    R5 yra -(CHJ -COOR51, kur p yra O, 1 ar 2, ir R51 yra H arba alkilo p/ grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
    n yra sveikasis skaičius O, 1,2, 3 arba 4;
    B yra struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formulėmis IVa, IVb, IVc arba IVd,
    209 kuriose r yra sveikasis skaičius 0 arba 1;
    X1 yra arba nėra CH2> NH;
    X2 yra CH2, NHarbaC=NH;
    X3 yra NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CH-NH-C(NH)-NH2 arba CH-CH2-C(NH)-NH2;
    X4 yra CH2 arba NH;
    X5 yra C(NH)-NH2 arba NH-C(NH)-NH2;
    X6 * * yra CH arba N;
    c
    R° yra H arba alkilo grupė, turinti nuo 1 iki 4 anglies atomų;
    D yra Z arba (Z)2;
    Z yra beziloksikarbonilo grupė;
    arba jo stereoizomerai, arba fiziologiškai tinkama druska.
    3. Junginys pagal 1 arba 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad A1 yra formulių Ila arba llb struktūrinis fragmentas.
  4. 4. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-3 punktų, besiskiriantis tuo, kad yra R^OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4 anglies atomų, ir R11 yra H.
  5. 5. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1 -4 punktų, b e s i s k i 2 r i a n t i s tuo, kad A yra formulės Ii la struktūrinis fragmentas.
  6. 6. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-4 punktų, b e s i s k i 2 r i a n t i s tuo, kad A yra formulės IIIb struktūrinis fragmentas.
  7. 7. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-6 punktų, besiskiriantis tuo, kad B yra formulės IVa struktūrinis fragmentas, kurioje X1, X2 ir X4 yra CH2, Χθ yra CH-C(NH)-NH2, r yra 1, ir n yra 1.
  8. 8. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-6 punktų, besiskiriantis tuo, kad B yra formulės IVa struktūrinis fragmentas, kurioje X1, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2, r yra 0 ar 1, ir n yra 1 arba 2.
  9. 9. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-6 punktų, b e s i s k i C r i a n t i s tuo, kad B yra formulės IVb struktūrinis fragmentas, kurioje X yra CH-C(NH)-NH2 ir R6 yra H, ir n yra 1.
  10. 10. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-6 punktų, besiskiriantis tuo, kad B yra formulės IVa struktūrinis elementas, kurioje X1 ir X3 yra NH, X2 yra C=NH, X4 yra CH2, r yra 1, ir n yra 2.
  11. 11. Junginys pagal vieną arba kelis iš 1-6 punktų, besiskiriantis tuo, kad B yra formulės IVa struktūrinis elementas , kurioje X1 nėra, X2 ir X4 yra CH2, X3 yra N-C(NH)-NH2, r yra 0, ir n yra 1 arba 2.
  12. 12. Junginys pagal 1 arba 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad jame n yra 1 ar 2, A1 yra formulės Ha struktūrinis fragmentas, kurioje k yra 0 arba 1, R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4
    2 3 2 anglies atomų, R yra H, R yra cikloheksilo grupė; A yra formulės llla struktūrinis fragmentas, kurioje Y yra metileno grupė, etileno grupė, ar npropileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba neturėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą iš 1-4 anglies atomų, R yra H; B yra 12 4 3 formulės IVa struktūrinis fragmentas, kurioje X , X ir X yra CH2, X yra CH-C(NH)-NH2 arba N-C(NH)-NH2, r yra 0 arba 1, arba X1 ir X3 yra NH,
    211
    X2 yra C=NH, X4 yra CH2, r yra 1, arba X1 nėra, X2 ir X4 yra CHp, X3 yra N-C(NH)-NH2, r yra 0.
  13. 13. Junginys pagal 1 arba 2 punktą, besiskiriantis tuo, kad jame n yra 1, A1 yra formulės Ha struktūrinis fragmentas, kurioje k yra 0 arba 1, R1 yra R11OOC-alkilas, kur alkilo grupė turi nuo 1 iki 4
    2 3 2 anglies atomų, ir R yra H, R yra cikloheksilo grupė; A yra formulės llla struktūrinis fragmentas, kurioje Y yra metileno grupė, etileno grupė, arba n-propileno grupė ir susidaręs 6-naris žiedas gali turėti arba neturėti 4-oje padėtyje alkilo grupę, sudarytą is 1-4 anglies atomų, R yra H; B yra 5 6 formulės IVb struktūrinis fragmentas, kurioje X yra C(NH)-NH2 ir R yra H.
  14. 14. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių: HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab H-(R)Cgl-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)-Cgl-Pic-Pab
    H-(R)Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
    HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab
    212
    H-(R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(Me) (R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b
    HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab
    H-(R)Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a
    HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
    HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
    Me-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab
    H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
    Boc-(R)Cha-Pic-Pab
    Ac-(R)Cha-Pic-Pab
    Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab
    H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab
    H-(R)Hoc-Aze-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab H00C-CH2-(R) Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CHp-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig
    H-(R)Cha-Aze-Pig
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac
    H-(R)Cha-Pro-Pac
    H-(R)Cgl-lle-Pab
    H-(R)Cgl-Aze-Pab
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab
    MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
    EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
    H-(R)Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac
    HOOC-GH2-(R)Cha-Aze-Pig
    2 :z
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig (HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig
    HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)ltp
    HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)ltp
    H-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp
    H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig
    H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig
    H-(R)Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ltp
    H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig
    H-(R)Cha-Pro-Mig
    H-(R)Cha-Pro-Dig
    H-(R)Cha-Aze-Dig arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  15. 15. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių: HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
    215
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig
    EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  16. 16. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių: BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    MeOOC-CHp-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2
    BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
    BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)
    BnOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)
    217
    MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
    EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)
    BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)ltp(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)
    BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z) arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  17. 17. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių: BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2
    218
    EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)
    Bn OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  18. 18. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių:
    H-(R)Pro-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab
    H-(R)Phe-Phe-Pab
    HOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab
    HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  19. 19. Junginys, pasirenkamas iš šių junginių:
    Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)
    Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
    MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
    BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z) arba pasirinktojo junginio stereoizomeras, arba fiziologiškai tinkama druska.
  20. 20. Būdas gauti junginį pagal bet kurį iš 1-19 punktų, b e s i s k i r i a n t i s tuo, kad sujungia apsaugotą N-terminaliniame gale aminorūgštį arba dipeptidą arba aminorūgštį, turint N-terminalinę aminorūgštį, sekančią aminorūgštį prijungia įprastais metodais, su junginiu
    219
    H2N_(CH2)n_X, kurioje n yra sveikasis skaičius 0, 1, 2, 3 arba 4, X yra B arba B-D, kur B yra apibrėžtas formulėje I ir D yra apibrėžtas formulėje V ar turi guanidiną arba amidiną, apsaugotą prie vieno arba dviejų azoto atomų amino apsaugine grupe, kaip antai, benziloksi-karbonilo, tretinio butiloksikarbonilo arba p-toluensulfonilo grupe, arba X yra į B pernešama grupė, po to atlieka apsauginės grupės(ių) pašalinimą arba N-terminalinio azoto deprotekciją su po to sekančiu N-terminalinio azoto alkilinimu ir, jei reikalinga, atlieka apsauginei grupei pašalinimą žinomais metodais, ir, jei reikalinga, gauna fiziologiškai tinkamą druską, o tais atvejais, kai reakcijos produktas yra stereoizomerų mišinys, juos pagal poreikį išskiria chromatografiškai arba perkristalizuoja ir, jei reikalinga, išskiria atskirą stereoizomerą.
  21. 21. Būdas pagal 20 punktą gauti junginį pagal bet kurį iš 1-19 punktų, besiskiriantis tuo, kad:
    a) (Metodas la) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą dipeptidą, „ 1 2 kuris pasirinktas is apibūdinamų I arba V formulėse A ir A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje, kurioje n apibrėžtas formulėje I, W1 yra N-terminalinio amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, ir Q1 yra -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NHC(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 arba -NH-C(NW2)-NH-W2, kur W2
    220 yra amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ar benziloksikarbonilas, arba O1 yra -CN, -CO-NH2 ar -CS-NH2, kur grupę
    1 2 ? vėliau paverčia amidino grupe, arba O yra NH2 arba NH-W , kur W apibrėžta aukščiau, kur aminogrupę vėliau paverčia guanidino grupe (kai
    1 2 1 O yra -NH-C(NH)-NH2), nuimant apsaugą nuo grupės W , kai G yra 2 2 - 1 NH-W (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W atžvilgiu), žinomais šioje srityje metodais,
    b) (Metodas Ib) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą aminorugštj, o kuri pasirinkta is apibūdinamo I arba V formulėse A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje, w1- A2 —OH
    A2 -HN — (CH2)n_/ \-Q1 w1 kurioje n, W1, ir G1 apibrėžta aukščiau, po to nuima apsaugą nuo grupės w* ir sujungia su N-terminaline aminorūgštimi apsaugotoje formoje, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą aukščiau skirsnyje Metodas la,
    c) (Metodas lla) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą dipeptidą, 12 kuris pasirinktas iš apibudinamų I arba V formulėse A ir A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje,
    221 w1-A1-A2-OH
    W1-A1-A2-HN-(CH2)n kurioje n apibrėžta formulėje I, yra N-terminalinė amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, yra-C(NH)-NH2,-C(NW2)-NH-W2,-C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2> -NHC(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 arba -NH-C(NW2)-NH-W2, kur W2 yra apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, arba yra -CN, -CO-NH2 arba -CS-NH2, kur grupę
    1 9 2 vėliau paverčia amidino grupe, arba Q yra NH2 arba NH-W , kur W apibrėžta aukščiau, kur aminogrupę vėliau paverčia į guanidino grupę (kai
    1 2 1 Q yra-NH-C(NH)-NH2), nuimant apsaugą nuo grupės W , kai C yra2 2 - 1 NH-W (W šiuo atveju privalo būti ortogonaiinė W atžvilgiu), žinomais šioje srityje metodais.
    d) (Metodas llb) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą aminorūgštj, 2 kuri pasirinkta is apibudinamo I arba V formulėse A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje,
    W1- A2 —OH
    HN -(CH2)n
    222 kurioje n, W1, ir Q1 apibrėžta aukščiau, po to nuima apsaugą nuo grupės W1 ir sujungia su N-terminaline aminorūgštimi apsaugotoje formoje, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą aukščiau skirsnyje Metodas Ha,
    e) (Metodas llla) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą dipeptidą, 12 kuris pasirinktas is apibudinamų I arba V formulėse A ir A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje, w1 — A1— A2—OH (CH2)r_X 4
    H2N (CH2)n—/ \—Q2 'X1-X2 (CH2)r_ X4 \ 2
    N—CT
    X1-X2
    12 4 kurioje n yra apibrėžtas formulėje I, ir r yra 0 ar 1, kai X , X ir X yra CH2 arba r yra 0, kai X2 ir X4 yra CH2 ir X1 nėra, W1 yra N-terminalinė amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas ir benziloksikarbonilas, ir Q2 yra -C(NH)-NH2, -C(NW2)-NH-W2, ar -C(NH)2 2
    NH-W , kur W yra amino apsauginė grupė, kaip antai, tretinis 2 2 butiloksikarbonilas arba benziloksikarbonilas, arba Q yra lygi W , kur 2 2 aminogrupę po apsaugos pašalinimo nuo grupės W (W šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W1 atžvilgiu) vėliau paverčia į guanidino grupę, naudojant neapsaugotą, N-apsaugotą arba N-Ν' dvigubai apsaugotą guanidinimo reagentą, žinomais šioje srityje metodais,
    f) (Metodas lllb) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą aminorugštį, 2 kuri pasirinkta iš apibūdinamo I arba V formulėse A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje,
    225
    W1 — A — OH ,(CH2)r_X4 \ ?
    H2N-(CH2)n N—Q2 kX1-Χ2 1 - A2 -NH-(CH2)n (CH2)r_X 4 \ 2 N— Q2
    X1-X2
    12 4 1 2 kurioje n, r, X , X ir X , W ir Q apibrėžta aukščiau, po to apsaugą nuima nuo grupės W1 ir sujungia su N-terminaline aminorūgštimi apsaugotoje formoje, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą aukščiau skirsnyje Metodas llla,
    g) (Metodas IVa) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą dipeptidą, 12 kuris pasirinktas is apibudinamų I arba V formulėse A ir A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje, w1-A1-A2—OH kurioje n yra apibrėžtas formulėje I, W1 yra N-terminalinė apsauginė aminogrupė, kaip antai, tretinis butiloksikarbonilas arba benziloksikarbonilas, ir W yra H arba amino apsauginė grupė, kaip antai, arilsulfonilas, benziloksikarbonilas ar tretinis butiloksikarbonilas,
    224
    h) (Metodas IVb) Sujungia N-terminaliniame gale apsaugotą aminorūgštį, kuri pasirinkta is apibudinamo I arba V formulėse A , atliekant įprastą peptidų sujungimą, parodytą lygtyje, vv1
    OH
    1 3 kurioje n, W ir W apibrėžta aukščiau, po to nuima apsaugą nuo grupės W1 ir sujungia su N-terminaline aminorūgštimi apsaugotoje formoje, gaunant apsaugotą peptidą, aprašytą skirsnyje Metodas IVa,
    1 2 ir gauna galutinį junginį priklausomai nuo grupių Q ir Q tipo pagal bet kurį iš šių metodų: apsauginės grupės(ių) pašalinimą (kai Q1 yra -C(NH)NH2, -C(NW2)-NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NHW2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar -NH-C(NW2)-NH-W2), arba selektyvų
    1 12 2 apsaugos nuėmimą nuo grupės W (pvz., kai Q arba Q yra -C(NW )NH-W2, -C(NH)-NH-W2, -NH-C(NH)-NH-W2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ar NH-C(NW2)-NH-W2 (W2 šiuo atveju privalo būti ortogonalinė W1) ir po to alkilina N-terminalinį azotą ir, jei reikalinga, pašalina apsaugą.
  22. 22. Junginys pagal bet kurį iš 1-19 punktų, skirtas panaudoti kaip vaistinis agentas.
  23. 23. Junginys pagal bet kurį iš 1-5 arba 1-17 punktų, skirtas panaudoti kaip antikoaguliantas.
    225
  24. 24. Junginys pagal bet kurį iš 1-4, 6-10 arba 18-19 punktų, skirtas panaudoti kaip priešuždegiminis agentas.
  25. 25. Junginys pagal 1-4, 6-10 arba 18-19 punktus, skirtas panaudoti slopinimui kininogenazių žmogaus arba gyvūno organizme.
  26. 26. Junginys pagal 1-5 arba 7-17 punktus, skirtas panaudoti kaip anitrombocitinis agentas.
  27. 27. Farmacinis preparatas, besiskiriantis tuo, kad jį sudaro veiklusis kiekis junginio pagal 1-19 punktus ir vienas arba keli farmaciniai nešikliai.
  28. 28. Farmacinis preparatas, besiskiriantis tuo, kad jį sudaro veiklusis kiekis junginio pagal bet kurį iš 1-5 arba 1-17 punktų ir vienas arba keli farmaciniai nešikliai, skirtas panaudoti kaip antikoaguliantas arba antitrombocitinis agentas.
  29. 29. Farmacinis preparatas, besiskiriantis tuo, kad jį sudaro veiklusis kiekis junginio pagal bet kurį iš 1-4, 6-10 arba 18-19 punktų ir vienas ar keli farmaciniai nešikliai, skirtas panaudoti kaip priešuždegiminis reagentas.
  30. 30. Panaudojimas junginio pagal bet kurį iš 1-5 arba 7-17 punktų kaip veikliosios sudėtinės dalies farmacinių preparatų, slopinančių trombiną žmogaus arba gyvūno organizme, gamyboje.
  31. 31. Panaudojimas junginio pagal bet kurį iš 1-4, 6-10 arba 1819 punktų kaip veikliosios sudėtinės dalies farmacinių preparatų, skirtų slopinti kininogenazes žmogaus arba gyvūno organizme, gamyboje.
    226
  32. 32. Panaudojimas junginio, apibūdinamo formule,
    NH nh2 arba šio junginio, turinčio amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, arba jo druskos, kaip pradinės medžiagos peptidinio serino proteazės sintezėje, ypač peptidinio trombino inhibitoriaus ar peptidinio kininogenazių inhibitoriaus sintezėje.
  33. 33. Struktūrinis fragmentas, apibudinamas formule,
    NH nh2 kaip farmaciškai veiklaus junginio struktūrinis elementas, ypač peptidinio junginio.
    arba šio junginio, turinčio amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, arba jo druskos, kaip pradinės medžiagos trombino sintezėje, ypač peptidinio trombino inhibitoriaus sintezėje.
  34. 35. Struktūrinis fragmentas, apibūdinamas formule, kaip farmaciškai veiklaus junginio struktūrinis elementas, ypač peptidinio trombino inhibitoriaus.
  35. 36. Junginys, apibudinamas formule, arba šio junginio, turinčio amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, arba jo druskos.
  36. 37. Panaudojimas junginio pagal 36 punktą, kaip pradinės medžiagos serino proteazės inhibitoriaus sintezėje.
  37. 38. Struktūrinis fragmentas, apibudinamas formule, kaip struktūrinis trombino inhibitoriaus elementas, ypač peptidinio trombino inhibitoriaus.
    ζ/ΰ
  38. 39. Junginys, apibudinamas formule, NH / \arba šio junginio, turinčio amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, arba jo druskos.
  39. 40. Panaudojimas junginio pagal 39 punktą, kaip pradinės medžiagos serino proteazės inhibitoriaus sintezėje.
  40. 41. Struktūrinis fragmentas, apibudinamas formule, kaip struktūrinis trombino inhibitoriaus elementas, ypač peptidinio trombino inhibitoriaus.
  41. 42. Junginys, apibudinamas formule, kur n yra 1 ar 2, ir s yra 0 arba 1, arba šio junginio, turinčio amidino grupę, apsaugotą prie vieno ar dviejų azoto atomų apsaugine grupe, arba jo druskos.
  42. 43. Panaudojimas junginio pagal 42 punktą, kaip pradinės medžiagos serino proteazės inhibitoriaus sintezėje.
  43. 44. Struktūrinis fragmentas, apibudinamas formule, o kur n yra 1 ar 2, ir s yra 0 arba 1, kaip struktūrinis trombino inhibitoriaus elementas, ypač kaip peptidinio trombino inhibitoriaus.
  44. 45. Junginys 4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)benzenas arba jo druska arba šis junginys, apsaugotas benziloksikarbonilo grupe prie kito azoto atomo.
  45. 46. Junginys 4-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)cikloheksanas arba jo druska arba šis junginys, apsaugotas benziloksikarbonilo grupe prie kito azoto atomo.
  46. 47. Junginys 4-aminoetil-1-benziloksikarbonilamidinopiperidinas arba jo druska arba šis junginys, apsaugotas benziloksikarbonilo grupe prie kito azoto atomo.
  47. 48. Junginys, kuris yra (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3aminometilpirolidinas, (3RS)-1-(N-benziloksikarbonilamidino)-3-aminoetilpirolidinas, 3-aminometil-1-(N-benziloksikarbonilamidino) azetidinas, 3aminoetil-1-(N-benziloksikarbonilamidino)azetidinas, arba jo druska arba šis junginys, apsaugotas benziloksikarbonilo grupe prie kito azoto atomo.
LTIP1947A 1993-06-03 1994-06-03 Novel peptides derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions and use starting materials in synthesis of a serine protease inhibitors LT3768B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE19939301916A SE9301916D0 (sv) 1993-06-03 1993-06-03 New peptides derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LTIP1947A LTIP1947A (en) 1994-12-27
LT3768B true LT3768B (en) 1996-03-25

Family

ID=20390165

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LTIP1947A LT3768B (en) 1993-06-03 1994-06-03 Novel peptides derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions and use starting materials in synthesis of a serine protease inhibitors

Country Status (40)

Country Link
US (4) US5602253A (lt)
EP (2) EP0701568B1 (lt)
JP (3) JP3205558B2 (lt)
KR (1) KR100339456B1 (lt)
CN (2) CN1099425C (lt)
AT (1) ATE200783T1 (lt)
BR (1) BR9406746A (lt)
CA (1) CA2162900C (lt)
CZ (1) CZ290104B6 (lt)
DE (3) DE69427150T2 (lt)
DK (1) DK0701568T3 (lt)
EE (1) EE03264B1 (lt)
EG (1) EG20671A (lt)
ES (1) ES2128277T3 (lt)
FI (1) FI119812B (lt)
GR (1) GR3036258T3 (lt)
HK (1) HK1031375A1 (lt)
HR (1) HRP940311B1 (lt)
HU (2) HU226825B1 (lt)
IL (2) IL123996A (lt)
IS (1) IS1805B (lt)
LT (1) LT3768B (lt)
LU (1) LU91173I2 (lt)
MX (1) MX9404114A (lt)
MY (1) MY119155A (lt)
NL (1) NL300178I2 (lt)
NO (2) NO314406B1 (lt)
NZ (1) NZ267534A (lt)
PL (1) PL181968B1 (lt)
PT (1) PT701568E (lt)
RS (1) RS49576B (lt)
RU (1) RU2142469C1 (lt)
SA (1) SA94150051B1 (lt)
SE (1) SE9301916D0 (lt)
SG (1) SG48013A1 (lt)
SI (1) SI0701568T1 (lt)
SK (1) SK283150B6 (lt)
TW (1) TW403731B (lt)
UA (1) UA65518C2 (lt)
WO (1) WO1994029336A1 (lt)

Families Citing this family (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
US6984627B1 (en) * 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9900043D0 (sv) * 1999-01-11 1999-01-11 Astra Ab New use
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
ATE177078T1 (de) * 1993-10-21 1999-03-15 Searle & Co Amidino-derivate als no-synthetase inhibitoren
JP4561696B2 (ja) * 1994-01-27 2010-10-13 三菱化学株式会社 プロリンアミド誘導体
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951617B (en) 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
CA2143533A1 (en) * 1994-03-04 1995-09-05 Kenneth D. Kurz Antithrombotic agents
US6090786A (en) * 1994-06-10 2000-07-18 Fondatech Benelux N.V. Serine proteases, their activity and their synthetic inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
WO1997021725A1 (en) * 1995-12-09 1997-06-19 Boehringer Mannheim Gmbh 3-aminoethyl-n-amidino-2,5-dihydropyrrole derivatives having arginine mimetic properties
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
DE4443390A1 (de) * 1994-12-06 1996-06-13 Basf Ag Neue dipeptidische p-Amidinobenzylamide mit N-terminalen Sulfonyl- bzw. Aminosulfonylresten
US5932567A (en) * 1995-02-10 1999-08-03 Basf Aktiengesellschaft Thrombin inhibitors
WO1996025426A1 (de) * 1995-02-17 1996-08-22 Basf Aktiengesellschaft Neue dipeptidische amidine als thrombin-inhibitoren
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5629324A (en) * 1995-04-10 1997-05-13 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5610308A (en) * 1995-05-18 1997-03-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing intermediates for thrombin inhibitors
SA96170106A (ar) * 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
JP2008024720A (ja) * 1995-07-26 2008-02-07 Mitsubishi Chemicals Corp ペニシラミンアミド誘導体
US6239150B1 (en) 1995-07-26 2001-05-29 Mitsubishi Chemical Corporation Penicillaminamide derivatives
GB9526273D0 (en) * 1995-12-21 1996-02-21 Astra Ab New prodrugs
AR005245A1 (es) * 1995-12-21 1999-04-28 Astrazeneca Ab Prodrogas de inhibidores de trombina, una formulación farmaceutica que las comprende, el uso de dichas prodrogas para la manufactura de un medicamento y un procedimiento para su preparacion
SE9600216D0 (sv) * 1996-01-18 1996-01-18 Hans Arne Hansson Styrning av läkningsprocesser
CN1212706A (zh) * 1996-02-13 1999-03-31 阿克佐诺贝尔公司 丝氨酸蛋白酶抑制剂
TW442452B (en) * 1996-03-01 2001-06-23 Akzo Nobel Nv Serine protease inhibitors having an alkynylamino side chain
TW523513B (en) * 1996-03-01 2003-03-11 Akzo Nobel Nv Serine protease inhibitors
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
SE9602145D0 (sv) 1996-05-31 1996-05-31 Astra Ab New improved formulation for treatment of thromboembolism
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
WO1997049404A1 (en) * 1996-06-25 1997-12-31 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
US6756389B2 (en) * 1996-08-09 2004-06-29 Cambridge Neuroscience, Inc. Pharmaceutically active compounds and methods of use
US5792761A (en) * 1996-08-12 1998-08-11 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
DE19632773A1 (de) * 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren
DE19632772A1 (de) 1996-08-14 1998-02-19 Basf Ag Neue Benzamidine
IL121474A0 (en) * 1996-08-23 1998-02-08 Akzo Nobel Nv Thrombin inhibitors
SE9603724D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
US5798377A (en) * 1996-10-21 1998-08-25 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US5869487A (en) * 1996-10-24 1999-02-09 Merck & Co., Inc. Pyrido 3,4-B!pyrazines for use as thrombin inhibitors
AR013084A1 (es) * 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
US6740682B2 (en) 1997-08-29 2004-05-25 Tularik Limited Meta-benzamidine derivatives as serine protease inhibitors
US6262069B1 (en) * 1997-08-29 2001-07-17 Protherics Molecular Design Limited 1-amino-7-isoquinoline derivatives as serine protease inhibitors
US6087373A (en) * 1997-09-23 2000-07-11 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
DE19755682A1 (de) * 1997-12-15 1999-06-17 Knoll Ag Verfahren zur Ermittlung eines Dosierungschemas für Thrombininhibitoren
CN1289341A (zh) 1998-01-26 2001-03-28 Basf公司 凝血酶抑制剂
EP1049673A1 (de) * 1998-01-26 2000-11-08 Basf Aktiengesellschaft Heterocyclische amidine als kallikrein protease inhibitoren
US6417161B1 (en) 1998-04-24 2002-07-09 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9802938D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802939D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab New process
SE9802973D0 (sv) * 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9802974D0 (sv) 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab New crystalline forms
EP0987274A1 (en) * 1998-09-15 2000-03-22 Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH Factor VIIa Inhibitors
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
KR20000047461A (ko) * 1998-12-29 2000-07-25 성재갑 트롬빈 억제제
SE9900070D0 (sv) 1999-01-13 1999-01-13 Astra Ab New use
CA2355792A1 (en) 1999-01-13 2000-07-20 Astrazeneca Ab New amidinobenzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
HUP0203167A3 (en) * 1999-04-09 2003-09-29 Basf Ag Peptidic substances, their preparations and their use as complement protease inhibitors
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
US6239132B1 (en) 1999-04-23 2001-05-29 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
AR023819A1 (es) * 1999-05-03 2002-09-04 Astrazeneca Ab FORMULACIoN FARMACEUTICA, KIT DE PARTES Y UTILIZACION DE DICHA FORMULACION
EP1054017B1 (de) * 1999-05-10 2004-10-13 Abbott GmbH & Co. KG Salze von Thrombininhibitoren
JP2003501389A (ja) 1999-06-04 2003-01-14 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド トロンビン阻害物質
EP1059302A1 (en) * 1999-06-08 2000-12-13 Aventis Pharma Deutschland GmbH Factor VIIa inhibitors
SE9902550D0 (sv) * 1999-07-02 1999-07-02 Astra Ab New crystalline forms
WO2001016324A2 (en) * 1999-08-31 2001-03-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions of a novel serine protease inhibitor
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
DE10029014A1 (de) 2000-06-15 2001-12-20 Univ Schiller Jena Urokinase-Hemmstoffe
DE10029015A1 (de) * 2000-06-15 2001-12-20 Curacyte Ag Hemmstoffe für den Gerinnungsfaktor Xa
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
DE10049937A1 (de) * 2000-10-06 2002-04-11 Knoll Ag Niedermolekulare Inhibitoren von Serinproteasen mit Polyhydroxyalkyl- und Polyhydroxycycloalkylresten
US7144877B2 (en) 2000-10-06 2006-12-05 Xenoport, Inc. Bile-acid derived compounds for enhancing oral absorption and systemic bioavailability of drugs
US6462021B1 (en) 2000-11-06 2002-10-08 Astrazeneca Ab Use of low molecular weight thrombin inhibitor
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
CA2431588A1 (en) 2000-12-18 2002-06-27 Merck & Co., Inc. Benzylamine derivatives and their use as thrombin inhibitors
US6528503B2 (en) 2000-12-18 2003-03-04 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
US7144899B2 (en) 2001-02-09 2006-12-05 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
DE10117730A1 (de) 2001-04-09 2002-10-10 Basf Ag Umsetzung von (Di)Aminen in Gegenwart einer Lysinoxidase und eines Reduktionsmittels
AR034517A1 (es) * 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
DE10133786A1 (de) * 2001-07-16 2003-02-06 Boehringer Ingelheim Pharma Verwendung von Thrombin-Inhibitoren zur Behandlung von Arthritis
SE0103590D0 (sv) 2001-10-26 2001-10-26 Astrazeneca Ab New Combination
SE0200198D0 (sv) 2002-01-23 2002-01-23 Astrazeneca Ab New use
DE10210590A1 (de) * 2002-03-11 2003-10-02 Curacyte Ag Hemmstoffe des Gerinnungsfaktors Xa, ihre Herstellung und Verwendung
JP4898091B2 (ja) 2002-03-11 2012-03-14 ザ メディシンズ カンパニー （ライプツィヒ） ゲーエムベーハー ウロキナーゼの阻害剤、それらの製造および使用
US7084134B2 (en) 2002-05-02 2006-08-01 Merk & Co., Inc. Thrombin inhibitors
WO2003099328A1 (en) * 2002-05-21 2003-12-04 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating inflammatory conditions
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
US7479502B2 (en) 2002-12-03 2009-01-20 Pharmacyclics, Inc. 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1H-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor VIIA inhibitors
DE10301300B4 (de) 2003-01-15 2009-07-16 Curacyte Chemistry Gmbh Verwendung von acylierten 4-Amidino- und 4-Guanidinobenzylaminen zur Inhibierung von Plasmakallikrein
US7781424B2 (en) * 2003-05-27 2010-08-24 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0301879D0 (sv) * 2003-06-25 2003-06-25 Astrazeneca Ab New process
DE10342108A1 (de) * 2003-09-11 2005-04-14 Curacyte Chemistry Gmbh Basisch-substituierte Benzylaminanaloga als Inhibitoren des Gerinnungsfaktors Xa, ihre Herstellung und Verwendung
FR2867780B1 (fr) * 2004-03-19 2006-05-19 Servier Lab Nouveaux derives de 4-oxo-4,6,7,8-tetrahydropyrrolo (1,2-a) pyrazine-6-carboxamides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
EP1736465A4 (en) 2004-03-31 2009-06-17 Ajinomoto Kk ANILINE DERIVATIVES
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
US7907985B2 (en) * 2005-02-14 2011-03-15 Optiscan Biomedical Corporation Fluid handling cassette with a fluid control interface and sample separator
JP2008540372A (ja) * 2005-05-03 2008-11-20 バイエル・クロツプサイエンス・エス・アー 新規ヘテロシクリルエチルアミド誘導体
US7524354B2 (en) * 2005-07-07 2009-04-28 Research Foundation Of State University Of New York Controlled synthesis of highly monodispersed gold nanoparticles
RU2008139428A (ru) * 2006-03-06 2010-05-20 Хьюмэджин, Инк. (Us) Способ получения рекомбинантного тромбина и фибриногена человека
DE102006050672A1 (de) 2006-10-24 2008-04-30 Curacyte Discovery Gmbh Hemmstoffe des Plasmins und des Plasmakallikreins
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
US20090061000A1 (en) * 2007-08-31 2009-03-05 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation use 030
GB0807828D0 (en) * 2008-04-29 2008-06-04 Vantia Ltd Aminopyridine derivatives
CN102924567B (zh) * 2008-10-28 2014-06-04 上海医药工业研究院 一类肽化合物、其制备方法及用途
TWI419700B (zh) * 2010-01-06 2013-12-21 Academia Sinica 甘藷胰蛋白酶抑制因子用於治療發炎及痛敏感之用途
WO2012004678A2 (en) 2010-07-07 2012-01-12 The Medicines Company (Leipzig) Gmbh Serine protease inhibitors
CN102464701B (zh) 2010-11-08 2015-10-21 上海医药工业研究院 一类新型化合物、其制备方法及用途
US9193762B2 (en) 2010-12-01 2015-11-24 University Of Mississippi Selective inhibitors of prolylcarboxypeptidase
DE102014108210A1 (de) 2014-06-11 2015-12-17 Dietrich Gulba Rodentizid
CA3099753A1 (en) * 2018-05-29 2019-12-05 Omeros Corporation Masp-2 inhibitors and methods of use
US11584714B2 (en) 2018-05-29 2023-02-21 Omeros Corporation MASP-2 inhibitors and methods of use
IL293551A (en) 2019-12-04 2022-08-01 Omeros Corp 2-masp inhibitor compounds, preparations containing them and their uses
CA3159172A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Michael Cicirelli Masp-2 inhibitors and methods of use
EP4070658A1 (de) 2021-04-06 2022-10-12 BIORoxx GmbH Verwendung von blutgerinnungshemmenden verbindungen als rodentizide

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4346078A (en) 1979-06-12 1982-08-24 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Novel anticoagulant agmatine derivatives and process for the preparation thereof
EP0185390A2 (de) 1984-12-21 1986-06-25 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R.T. Tripeptidyl-argininaldehyde, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel sowie N-(Monoalkyl)- und N,N-Di-(alkyl)-Xxx-L-prolin-Dipeptide
EP0195212A2 (en) 1985-02-04 1986-09-24 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0293881A2 (en) 1987-06-05 1988-12-07 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
EP0362002A1 (en) 1988-09-01 1990-04-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
EP0364344A2 (en) 1988-10-07 1990-04-18 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0468231A2 (de) 1990-07-05 1992-01-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Guanidine
WO1992004371A1 (en) 1990-09-07 1992-03-19 Ferring Peptide Research Partnership Kb Kininogenase inhibitors
EP0530167A1 (en) 1991-08-28 1993-03-03 Astra Aktiebolag New isosteric peptides

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2748295A1 (de) * 1977-10-27 1979-05-03 Bayer Ag Neue derivate des bpti
US4568636A (en) * 1981-03-25 1986-02-04 Pentapharm Ag Tripeptide derivatives
US4395401A (en) * 1981-09-09 1983-07-26 Smithkline Beckman Corporation Renally active dipeptides
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
PT84170B (pt) * 1986-01-24 1989-03-30 Sanofi Sa Processo para a preparacao de derivados n alfa-substituidos das n alfa-aril-sulfonilaminoacil d-amidinofenil-alaninamidas
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5273982A (en) * 1990-03-09 1993-12-28 Hoffmann-La Roche Inc. Acetic acid derivatives
US5037819A (en) * 1990-06-04 1991-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
US5110812A (en) * 1990-06-04 1992-05-05 Bristol-Myers Squibb Co. Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
GB9017694D0 (en) * 1990-08-13 1990-09-26 Sandoz Ltd Improvements in or relating to organic chemistry
NZ239846A (en) * 1990-09-27 1994-11-25 Merck & Co Inc Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
NZ239876A (en) * 1990-09-27 1993-12-23 Merck & Co Inc Glycyl-b-alanine derivatives and pharmaceutical compositions thereof.
IL99527A (en) * 1990-09-28 1997-08-14 Lilly Co Eli Tripeptide antithrombotic agents
GB9024129D0 (en) * 1990-11-06 1990-12-19 Thrombosis Research Trust Inhibitors and substrates of thrombin
CA2073776A1 (en) * 1990-11-15 1992-05-16 Joerg Stuerzebecher Meta-substituted phenyl alanine derivatives
DE4115468A1 (de) * 1991-05-11 1992-11-12 Behringwerke Ag Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien
ZA928581B (en) * 1991-11-12 1994-05-06 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
SE9103612D0 (sv) * 1991-12-04 1991-12-04 Astra Ab New peptide derivatives
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US5783563A (en) * 1993-06-03 1998-07-21 Astra Aktiebolag Method for treatment or prophylaxis of venous thrombosis
CA2140598C (en) * 1994-01-27 2010-03-09 Masahiro Ohshima Prolineamide derivatives
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
SE504185C2 (sv) * 1994-11-08 1996-12-02 Astra Ab Lagringsstabil vattenlösning för infusion av trombininhibitorer
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
AR005245A1 (es) * 1995-12-21 1999-04-28 Astrazeneca Ab Prodrogas de inhibidores de trombina, una formulación farmaceutica que las comprende, el uso de dichas prodrogas para la manufactura de un medicamento y un procedimiento para su preparacion

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4346078A (en) 1979-06-12 1982-08-24 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Novel anticoagulant agmatine derivatives and process for the preparation thereof
EP0185390A2 (de) 1984-12-21 1986-06-25 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar R.T. Tripeptidyl-argininaldehyde, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel sowie N-(Monoalkyl)- und N,N-Di-(alkyl)-Xxx-L-prolin-Dipeptide
EP0195212A2 (en) 1985-02-04 1986-09-24 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0293881A2 (en) 1987-06-05 1988-12-07 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
EP0362002A1 (en) 1988-09-01 1990-04-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. HIV protease inhibitors
EP0364344A2 (en) 1988-10-07 1990-04-18 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel peptidase inhibitors
EP0468231A2 (de) 1990-07-05 1992-01-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Guanidine
WO1992004371A1 (en) 1990-09-07 1992-03-19 Ferring Peptide Research Partnership Kb Kininogenase inhibitors
EP0530167A1 (en) 1991-08-28 1993-03-03 Astra Aktiebolag New isosteric peptides

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BLOMBÄCK B. ET AL.: "Synthetic peptides with anticoagulant and vasodilating activity", SCAND J CLIN LAB INVEST SUPPL., 1969, pages 59
C. G. A. PERSSON ET AL.: "Editorial: Use of the nose to study the inflammatory response of the respiratory tract", THORAX, 1992, pages 993 - 1000
CHARLES KETTNER, ELLIOTT SHAW: "Synthesis of peptides of arginine chloromethyl ketone. Selective inactivation of human plasma kallikrein", BIOCHEMISTRY, 1978, pages 4778 - 4784
FAREED J, MESSMORE HL, KINDEL G, BALIS JU: "Inhibition of serine proteases by low molecular weight peptides and their derivatives", ANN N Y ACAD SCI., 1981, pages 765 - 784
KETTNER C, SHAW E: "Inactivation of trypsin-like enzymes with peptides of arginine chloromethyl ketone", METHODS ENZYMOL., 1981, pages 826 - 842
SALOMONSSON, P, GRONNBERG, R, GOLLJAM, H ET A: "Bronchial exudation of bulk plasma at allergen challenge in allergic asthma", AM REV RESPIR DIS, 1992, pages 1535 - 1542

Also Published As

Publication number Publication date
NO2004009I1 (no) 2004-12-20
CN1278530A (zh) 2001-01-03
LU91173I2 (fr) 2005-07-11
NZ267534A (en) 1997-08-22
BR9406746A (pt) 1996-03-19
PL311819A1 (en) 1996-03-18
DE69427150T2 (de) 2001-09-06
SK283150B6 (sk) 2003-03-04
DE69427150D1 (de) 2001-05-31
SI0701568T1 (en) 2001-08-31
US5602253A (en) 1997-02-11
JP2001322974A (ja) 2001-11-20
FI119812B (fi) 2009-03-31
PT701568E (pt) 2001-08-30
HUT74739A (en) 1997-02-28
DE122004000045I2 (de) 2011-06-16
CA2162900A1 (en) 1994-12-22
JPH08511018A (ja) 1996-11-19
JP3205558B2 (ja) 2001-09-04
EP0701568B1 (en) 2001-04-25
SG48013A1 (en) 1998-04-17
ES2128277T1 (es) 1999-05-16
CN1178905C (zh) 2004-12-08
AU684086B2 (en) 1997-12-04
IS1805B (is) 2002-03-08
LTIP1947A (en) 1994-12-27
MY119155A (en) 2005-04-30
SA94150051B1 (ar) 2006-06-12
EP0701568A1 (en) 1996-03-20
RS49576B (sr) 2007-04-10
DE122004000045I1 (de) 2005-04-21
HU226825B1 (en) 2009-11-30
TW403731B (en) 2000-09-01
NO954873D0 (no) 1995-11-30
HRP940311A2 (en) 1996-10-31
DK0701568T3 (da) 2001-06-18
CA2162900C (en) 2009-06-09
IS4166A (is) 1994-12-04
US5939392A (en) 1999-08-17
HU9503445D0 (en) 1996-01-29
JP2002047264A (ja) 2002-02-12
HU0103039D0 (en) 2001-09-28
DE701568T1 (de) 1999-06-02
SK145495A3 (en) 1996-10-02
ES2128277T3 (es) 2001-07-01
RU2142469C1 (ru) 1999-12-10
MX9404114A (es) 1995-01-31
AU6986994A (en) 1995-01-03
IL109634A0 (en) 1994-08-26
PL181968B1 (pl) 2001-10-31
GR3036258T3 (en) 2001-10-31
KR100339456B1 (ko) 2002-12-06
WO1994029336A1 (en) 1994-12-22
NL300178I2 (nl) 2005-10-03
FI955828A0 (fi) 1995-12-04
US20050222395A1 (en) 2005-10-06
UA65518C2 (en) 2004-04-15
NL300178I1 (nl) 2005-05-02
IL109634A (en) 1999-04-11
NO954873L (no) 1996-02-01
CN1127509A (zh) 1996-07-24
ATE200783T1 (de) 2001-05-15
US5723444A (en) 1998-03-03
SE9301916D0 (sv) 1993-06-03
YU33694A (sh) 1997-12-05
EG20671A (en) 1999-11-30
CZ290104B6 (cs) 2002-05-15
CZ302095A3 (en) 1996-04-17
IL123996A (en) 2008-07-08
EE03264B1 (et) 2000-04-17
NO314406B1 (no) 2003-03-17
HK1031375A1 (en) 2001-06-15
HRP940311B1 (en) 2002-02-28
FI955828A (fi) 1995-12-04
CN1099425C (zh) 2003-01-22
EP1067136A1 (en) 2001-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
LT3768B (en) Novel peptides derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions and use starting materials in synthesis of a serine protease inhibitors
US5856307A (en) Peptide derivatives as kininogenase inhibitors
JP3453357B2 (ja) トロンビンの阻害剤および基質
CZ129694A3 (en) Novel peptide derivatives
WO1991004746A1 (en) Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides
US6984627B1 (en) Peptide derivatives
AU703854B2 (en) Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides
AU684086C (en) New peptide derivatives
US6274705B1 (en) Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides

Legal Events

Date Code Title Description
PD9A Change of patent owner

Free format text: ASTRAZENECA AB,15185 SODERTALJE,SE,20001117

MM9A Lapsed patents

Effective date: 20110603