MXPA04001464A - Terapia de combinacion para el tratamiento del cancer. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a metodos para el tratamiento o prevencion de trastornos neoplasicos utilizando inhibidores de la proteina tirosina cinasa en combinacion con inhibidores de ciclooxigenasa, en particular inhibidores selectivos a ciclooxigenasa-2.

Description

TERAPIA PE COMBINACION PARA EL TRATAMIENTO DEL CANCER ANTECEDENTES DE LA INVENCION CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a métodos para el tratamiento o prevención de trastornos neoplásicos utilizando inhibidores de la proteína tirosina cinasa en combinación con inhibidores de la ciclooxigenasa, en particular inhibidores selectivos de la ciclooxigenasa-2.

ESTADO DE LA TECNICA Un neoplasma, o tumor, es una proliferación anormal, no regulada, y desorganizada del crecimiento celular. Un neoplasma es maligno, o canceroso, si éste tiene propiedades de crecimiento destructivo, invasión y metástasis. La invasión se refiere a la extensión local de un neoplasma mediante la infiltración o destrucción del tejido que lo rodea, típicamente rompiendo a través de las láminas básales que definen los límites de los tejidos, por lo tanto entrando frecuentemente en el sistema circulatorio del cuerpo. La metástasis típicamente se refiere a la diseminación de las células tumorales por los vasos linfáticos o vasos sanguíneos. La metástasis también se refiere a la migración de las células tumorales mediante la extensión directa a través de cavidades serosas, o subaracnoideas u otros espacios. A través del proceso de metástasis, la migración de la célula tumoral a otras áreas del cuerpo establece neoplasmas en áreas lejanas a partir del sitio • inicia! de aparición. Actualmente el cáncer es la segunda causa de muerte en los Estados Unidos y más de 8,000,000 de personas en los Estados Unidos han sido diagnosticadas con cáncer. En 1995, el cáncer fue la causa de 23.3% de todas las muertes en los Estados Unidos. (Véase U. S. Dept. of Health and Human Services, National Center for Health Statistics, Health United States 996-97 e Injury Chartbook 1 17 (1997)). El cáncer no está completamente entendido al nivel molecular. Se sabe que la exposición de una célula a un carcinógeno tal como ciertos virus, ciertos químicos, o radiación, produce alteraciones en el ADN que inactivan un gen "supresor" o activan un "oncogen". Los genes supresores son genes reguladores del crecimiento, los cuales después de la mutación, ya no pueden controlar el crecimiento celular. Inicialmente los oncogenes son genes normales (denominados prooncogenes) que mediante mutación o contexto alterado de la expresión se vuelven genes transformados. Los productos de los genes transformados ocasionan un crecimiento celular inapropiado. Más de veinte diferentes genes celulares normales se pueden volver oncogenes mediante alteración genética. Las células transformadas difieren de las células normales en muchas formas, incluyendo morfología celular, interacciones célula-a-célula, contenido de la membrana, estructura del cite-esqueleto, secreción de proteína, expresión génica y mortalidad (las células transformadas pueden crecer indefinidamente). Actualmente el cáncer se trata principalmente con una o una combinación de tres tipos de terapias: cirugía, radiación, y quimioterapia. La cirugía implica la remoción en masa del tejido enfermo. A pesar de que la cirugía es efectiva en algunas ocasiones para remover los tumores localizados en ciertos sitios, por ejemplo, en la mama, colon, y en la piel, no se puede utilizar en el tratamiento de tumores localizados en otras áreas, tal como en la columna vertebral, ni en el tratamiento de condiciones neopláslcas diseminadas tales como la leucemia. La quimioterapia implica la alteración de la replicaclón celular o del metabolismo celular. Se utiliza más frecuentemente en el tratamiento del cáncer de mama, de pulmón, y en el cáncer testicular. Los efectos adversos de la quimioterapia sistémica utilizada en el tratamiento de la enfermedad neoplásica son los más temidos por los pacientes que se someten a tratamiento para cáncer. De estos efectos adversos la náusea y el vómito son los efectos laterales más comunes y severos. Otros efectos laterales incluyen cltopenia, infección, caquexia, mucositis en pacientes que reciben altas dosis de quimioterapia con rescate de médula ósea o terapia de radiación; alopecia (pérdida de cabello); complicaciones cutáneas (véase M. D. Abeloff, et al: Alopecia and Cutaneous Complications. P. 755-56. En Abeloff, M. D., Armltage, J. O., Lichter, A. S., y Niederhuber, J. E. (eds) Clinical Oncology. Churchill Livingston, New York, 1992, para reacciones cutáneas a los agentes de quimioterapia), tales como prurito, urticaria, y angioedema; complicaciones neurológicas; complicaciones pulmonares y cardiacas en pacientes que reciben radiación o quimioterapia; y complicaciones reproductivas y endocrinas. Los efectos laterales inducidos por la quimioterapia tienen un efecto significativo en la calidad de vida del paciente y pueden influir dramáticamente en la conformidad del paciente con el tratamiento. Adicionalmente, los efectos laterales adversos asociados con los agentes quimioterapéuticos generalmente son la toxicidad grave limitada por la dosis (DLT) en la administración de estos fármacos. Por ejemplo, la mucositis, es una de las toxicidades graves limitadas por la dosis para diversos agentes anti-cancerosos, incluyendo los agentes citotóxicos anti-metabolito 5-FU, metotrexato, y antibióticos anti-tumorales, tales como la doxorubicina. Muchos de estos efectos laterales inducidos por la quimioterapia, si son severos, pueden llevar a la hospitalización, o requieren el tratamiento con analgésicos para el tratamiento del dolor. Los efectos laterales adversos inducidos por los agentes quimioterapéuticos y por la terapia por radiación se han vuelto de gran importancia para el manejo clínico de los pacientes con cáncer. Actualmente, los científicos están buscando el tratamiento de cánceres mediante el uso de agentes anti-angiogénicos. Se cree que la angiogénesis es el mecanismo mediante el cual los tumores obtienen los nutrientes necesarios para crecer y formar metástasis hacia otras ubicaciones en el cuerpo. Los agentes anti- angiogénicos interfieren con estos procesos y destruyen o controlan a los tumores. Por ejemplo, la Patente de E.U.A. No. 5, 854, 205 describe una proteína endostatina aislada que es un inhibidor de la proliferación y angiogénesis de la célula endotelial; la Patente de E.U.A. No. 5,843,925 describe un método para inhibir la angiogénesis y la proliferación de la célula endotelial utilizando una 7- [amino sustituido]-9-[(gliciloamido sustituid a]-6-demetil-6-deoxitetraciclina; la Patente de E.U.A. No. 5, 861 , 372 describe el uso de un inhibidor del agregamiento endotelial, angiostatina, y su uso en la inhibición de la angiogénesis, PCT/GB97/00650 describe el uso de derivados de cinnolina para el uso en la producción de un efecto reductor anti-angiogénico y/o de la permeabilidad vascular; Tai-Ping, D. describe terapias potenciales anti- angiogénicas, véase Trends Pharmacol. Sci. 16, No. 2,57-66, 1995; Lode, H. et al. describen sinergia entre un antagonista anti-angiogénico de la integrina alfa v y una proteína de fusión anticuerpo- citosina que erradica la metástasis tumoral espontánea, véase Proc. Nat. Acad. Sci. USA., 96 (4), 1591-1596, 1999; Giannis, A. et al describen antagonistas de la integrina y otros compuestos de bajo peso molecular como inhibidores de la angiogénesis, véase New drugs in cáncer therapy. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 36 (6), 588-590, 1997; WO 97/41 ,844 describe un método para utilizar combinaciones de compuestos angiostáticos para la prevención y/o tratamiento de la neovascularización en pacientes humanos; WO 98/22,101 describe un método para utilizar [pirozol-1 -il] bencensulfonamidas como agentes anti- angiogénicos; y la Patente de E.U.A. 5, 792, 783 describe el uso de 3-heteroaril-2-indoiinona que son inhibidores de la proteína cinasa y agentes anti-angiogénicos para el tratamiento de diversos cánceres. Recientemente, se ha reportado que el tratamiento del cáncer colorectal con un inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2, específicamente Celecoxib®, en combinación con un inhibidor de ART-2, específicamente Herceptina®, es más efectivo que cuando cualquiera de los agentes se utiliza de manera independiente. Por consiguiente, existe una necesidad para descubrir nuevas combinaciones de agentes quimioterapéuticos que cuando se utilizan juntos son más eficaces que cuando se utilizan de manera independiente. La presente invención satisface esta necesidad. .

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION En un aspecto, esta invención se dirige a un método de tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesita de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (I): en donde: R se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, piperazin-1-ilmetilo, 4- metilpiperazin-1-ilmetilo, piperidin-1 -ilmetilo, 2- hidroximetilpirrolidin-1-ilmetilo, 2- carboxipirrolid¡n-1-ilmetilo, y pirrolidin-1- ilmetilo; R se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, cicloalquilalquilo sustituido, cicloalquilo sustituido, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi,- C(0)NR8R9, -NR13R 4,-(CO)R15, y - (CH2)rR16; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, • halo, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, ciano, -NR13R14, - NR13C(0)R14, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, arilo, heteroarilo, -NR13R14, -NR13S(0)2R14, -S(0)2NR13R14, -NR13C(0)R14, - NR13C(0)OR14, -(CO)R15, y -S02R19; R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, hidroxi, alcoxi, y -NR13R14; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, heteroarilo, -C(0)R17, y -C(0)R10 con la condición de que cuando R es hidrógeno entonces a! menos uno de R5, R6 y R7 es -C(0)R10; o R6 y R7 se pueden combinar para formar un grupo seleccionado a partir del grupo que consiste de -(CH2)4-, -(CH2)5- y -(CH2)6-; R8 y R9 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y arilo; R10 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi, ariloxi,- N(R 1)(alquileno)nR12 en donde el grupo alquileno está opcionalmente sustituido con un grupo hidroxi, y -N 3R14; R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y alquilo sustituido; R 2 se selecciona a partir del grupo que consiste de -NR 3R14, hidroxi, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, -N+(0~)R13R14, -N(OH)R13, y -NHC(0)R18 (en donde R 8 es alquilo, alquilo sustituido, haloalquilo, o aralquilo); R13 y R14 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, cianoalquiio, cicioalquilo, cicloaiquilo sustituido, arilo y heteroarilo; o R13 y R 4 se pueden combinar para formar un grupo heterociclo; R15 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi y ariloxi; R16 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, -NR13R14, -C(0)R15, y -C(0)NR13R14; R17 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, cicloaiquilo, arilo y heteroarilo; R19 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, arilo, alquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; y n y r son independientemente 1 , 2, 3, ó 4; en combinación con un inhibidor de ciclooxigenasa; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Preferiblemente, el inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (l) se utiliza en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 seleccionado a partir del grupo que consiste de: (i) un compuesto de la fórmula (II): en donde: G se selecciona a partir del grupo que consiste de O, S, y -NRa-en donde Ra es hidrógeno o alquilo; R10a se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y arilo; R 1a se selecciona a partir del grupo que consiste de carboxilo, alquilo, aralquilo, aminocarbonilo, alquilsulfonilaminocarbonilo, y alcoxicarbonilo; R12a se selecciona a partir del grupo que consiste de haloalquilo, alquilo, aralquilo, cicloalquilo y arilo opcionaimente sustituido con uno o más radicales seleccionados a partir de alquiltio, nitro y alquilsulfonilo; y R13a es uno o más radicales independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, aralquilo, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, aralquiloxi, heteroaralquiloxi, haloalquilo, haloalcoxi, alquilamino, arilamino, aralquilamino, heteroarilamino, heteroarilalquilamino, nitro, amino, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, heteroarilaminosulfonilo, aralquilaminosulfonilo, heteroaralquilaminosulfonilo, heterociclosulfonilo, alquilsulfonilo, hidroxiarilcarbonilo, nitroarilo, . arilo opcionaimente sustituido, heteroarilo opcionaimente sustituido, aralquilcarbonilo, heteroarilcarbonilo, arilcarbonilo, aminocarbonilo, y alquilcarbonilo; o R13a junto con el anillo E forma un anillo naftilo; o (ii) un compuesto de la fórmula (ill): en donde: A se selecciona a partir del grupo que consiste de heterociclilo parcialmente insaturado o insaturado y anillos de carbociclo parcialmente insaturados o ¡nsaturados - R b se selecciona a partir del grupo que consiste de heterociclilo, cicloalquilo, cicloalquenilo y arilo, en donde R1b esta opcionalmente sustituido en una posición sustituible con uno o más radicales independientemente seleccionados a partir de alquilo, haloalquilo, ciano, carboxilo, alcoxicarbonilo, hídroxilo, hidroxialquilo, haloalcoxi, amino, alquilamino, arilamino, nitro, alcoxialquiio, alquilsulfinllo, halo, alcoxi, y alquiltio; R2b se selecciona a partir del grupo que consiste de metilo y amino; y R3b se selecciona a partir del grupo que consiste de un radica! seleccionado a partir de hidrógeno, halo, alquilo, alquenilo, alquinilo, oxo, ciano, carboxilo, cianoalquilo, heterocicliloxi, alquiloxi, alquíltio, alquilcarbonilo, cicloalquilo, arilo, haloalquilo, heterociclilo, cicloalquenilo, aralquilo, heterociclilalquilo, acilo, alquiltioalquilo, hidroxialquilo, alcoxicarbonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, aralquenilo, alcoxialquiio, ariltioalquilo, ariloxialquilo, aralquiltioalquilo, aralcoxialquilo, alcoxiaralcoxialquilo, alcoxicarbonilalquilo, aminocarbonilo, aminocarbonilalquilo, alquilaminocarbonilo, N- arilaminocarbonilo, N- alquil-N- ariiaminocarbonilo, alquilaminocarbonilalquilo, carboxialquilo, alquilamino, N- arilamino, N-aralquilamino, N- alquil-N- aralquilamino, N- alquil-N- arilamino, aminoalquilo, alquilaminoalquilo, N- arilaminoalquilo, N- aralquilaminoalquilo, N- alquil-N-aralquilaminoalquilo, N- alquil-N- arilaminoalquilo, ariloxi, aralcoxi, ariltio, aralquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, aminosulfonilo, alquilaminosulfoniló, N-arilaminosulfonilo, arilsulfonilo, y N- alquil-N- arilaminosulfonilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Preferiblemente, los compuestos anteriormente mencionados se administran como una composición farmacéutica que comprende uno o más de los compuestos anteriormente mencionados y un excipiente farmacéuticamente aceptable. Específicamente, los agentes terapéuticos de esta invención se pueden formular como composiciones separadas las cuales se dan al mismo tiempo o a tiempos diferentes, o los agentes terapéuticos se pueden dar como una composición particular. Los métodos de la presente invención son útiles para el tratamiento o prevención de trastornos neoplasicos incluyendo melanoma acral lentiginoso, melanoma actínico queratoso, adenocarcinoma, carcinoma adenoide quístico, adenomas, adenosarcoma, carcinoma adenoescamoso, tumores astrocíticos, carcinoma de glándula de bartholin, carcinoma de célula basal, carcinomas de glándula bronquial, capilar, carcinoides, carcinoma, carcinosarcoma, cavernoso, colangiocarcinoma, condosarcoma, papiloma/carcinoma del plexo coroide, carcinoma de célula clara, cistadenoma, tumor de seno endodermal, hiperplasia endometrial, sarcoma de estroma endometrial, adenocarcinoma endometrioide, ependimario, epitelioide, sarcoma de Ewing, fibrolamelar, hiperplasia focal nodular, gastrinoma, ' tumores de célula germinal, glioblastoma, glucagonoma, hemangioblastomas, hemangioendotelioma, hemangiomas, adenoma hepático, adenomatosis hepática, carcinoma hepatocelular, insulinoma, neoplasia intaepitelial, neoplasia de célula escamosa interepitelial, carcinoma invasivo de célula escamosa, carcinoma de célula grande, leiomiosarcoma, melanomas lentigo maligna, melanoma maligno, tumores mesoteliales malignos, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, meningeal, mesotelial, carcinoma metastásico, carcinoma mucoepidermoide, neuroblastoma, melanoma nodular por adenocarcinoma neuroepitelial, carcinoma de célula de la avena, oligodendroglial, osteosarcoma, polipéptido pancreático, adenocarcinoma seroso papilar, célula pineal, tumores de la pituitaria, plasmacitoma, pseudosarcoma, blastema pulmonar, carcinoma de célula renal, retinoblastoma, rabdomiosarcoma, sarcoma, carcinoma seroso, carcinoma de célula pequeña, carcinomas de tejido blando, tumor que secreta somatostatina, carcinoma escamoso, carcinoma de célula escamosa, submesotelial, melanoma de extensión superficial, carcinoma no diferenciado, melanoma uveal, carcinoma verrucose, vlpoma, carcinoma bien diferenciado, y tumor de Wilm.

Los métodos de la presente invención proveen uno o más beneficios. Uno de estos beneficios es que las composiciones, agentes y terapias de la presente invención se administran en combinación a una dosis baja, es decir, a una dosis más baja que la que se ha utilizado convencionalmente en situaciones clínicas para cada uno de los componentes individuales administrados por separado. Un beneficio de disminuir las dosis de los compuestos, composiciones, agentes y terapias de la presente invención administradas a un mamífero incluye una disminución en la incidencia de los efectos adversos asociados con las dosis mayores. Por ejemplo, mediante la disminución de la dosis de un agente quimioterapéutico tal como el metotrexato, se producirá una reducción en la frecuencia y en la severidad de la náusea y del vómito cuando se compara con aquella observada a dosis mayores. Beneficios similares se contemplan cuando un inhibidor de la proteina cinasa de la presente invención se utiliza en combinación con un inhibidor de ciclooxigenasa, en particular un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2. Mediante la disminución de la incidencia de efectos adversos, se contempla una mejoría en la calidad de vida de un paciente que se somete a tratamiento para cáncer. Los beneficios adicionales de la disminución de la incidencia de los efectos adversos incluyen una mejoría en la conformidad del paciente, una reducción en el número de hospitalizaciones necesarias para el tratamiento de efectos adversos, y una reducción en la administración de agentes analgésicos necesarios para tratar el dolor asociado con los efectos adversos. Otro beneficio que se contempla es que la inhibición de los tumores es mayor cuando se administra un inhibidor de la proteína cinasa en combinación con un inhibidor de la ciclooxigenasa, preferiblemente un inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 que la que se observa cuando cualesquiera de estos agentes se administran por separado. La presente invención incluye adicicnalmente equipos que comprende un inhibidor de COX-2 y un inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (I).

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Definiciones A menos que se establezca de otra manera los siguientes términos utilizados en la especificación y en las reivindicaciones tienen los significados discutidos a continuación: "Alquilo" se refiere a un radical hidrocarburo alifático saturado que incluye grupos de 1 a 20 átomos de carbono de cadena recta y ramificada (en donde un intervalo numérico; por ejemplo "1-20", se establece en la presente invención, que significa que el grupo, en este caso el grupo alquilo, puede contener 1 átomo de carbono, 2 átomos de carbono, 3 átomos de carbono, etc. hasta e incluyendo los 20 átomos de carbono). Los grupos alquilo que contienen de 1 a 4 átomos de carbono se refieren como grupos alquilo inferiores. Cuando dichos grupos alquilo inferiores carecen de sustituyentes, éstos se refieren como grupos alquilo inferiores. Más preferiblemente, un grupo alquilo es un alquilo de tamaño medio que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, 2- propilo, n-butilo, iso- butilo, tert- butilo, pentilo, y los similares. Más preferiblemente, es un alquilo inferior que tiene de 1 a 4 átomos de carbono por ejemplo, metilo, etilo, propilo, 2- propilo, n- butilo, iso- butilo, o tert- butilo, y los similares. "Alquilo sustituido" significa que el grupo alquilo como se definió anteriormente está sustituido con uno o más, más preferiblemente uno a tres, incluso más preferiblemente uno o dos sustituyente(s) independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de halo, hidroxi, alcoxi inferior, arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, ariloxi opcionalmente sustituido con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inférior o alcoxi inferior, heteroarilo de 6 miembros que tiene de 1 a 3 átomos de nitrógeno en el anillo, los carbonos en el anillo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroarilo de 5 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, los átomos de carbono y de nitrógeno en el grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, grupo heteroalicíclico de 5 ó 6 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, los átomos de carbono y de nitrógeno (si están presentes) en el grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos haio, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, mercapto, tio(aiquilo inferior), ariltio opcionalmente sustituido con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, cíano, acilo, tioacilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, N-amido, nitro, N-sulfonamido, S-sulfonamido, R18S(0)-, R18S(0)2-, -C(0)OR18, R18C(0)0-, y -NR18R19, en donde R 8 y R19 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, trihalometilo, cicloalquilo de (C3-C6), alquenilo inferior, alquinilo inferior y arilo opcionalmente sustituido con uno o más, grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior. Preferiblemente, el grupo alquilo se sustituye con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidroxi, grupo heteroalicíclico de 5 ó 6 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, los átomos de carbono y de nitrógeno (si están presentes) en el grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres, grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroarilo de 5 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, los átomos de carbono y de nitrógeno en el grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroarilo de 6 miembros que tiene de 1 a 3 átomos de nitrógeno en el anillo, los carbonos en el anillo están opcionalmente sustituidos con uno o más grupos, preferiblemente uno, dos o tres grupos los cuales son independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, o -NR18R19, en donde R18 y R 9 se seleccionan independientemente partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior. Incluso más preferiblemente el grupo alquilo se sustituye con uno o dos sustituyentes los cuales son independientes de cualesquiera otros hidroxi, dimetilamino, etilamino, dietilamino, dlpropilamino, pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino, 4-alquilpiperazino inferior, fenilo, imidazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, oxazolilo, triazinilo, y los similares. "Cicloalquilo" se refiere a un grupo anillo monocíclico sólo de carbono de 3 a 8 miembros, a un anillo bicíclico sólo de carbono de 5 miembros/6 miembros o a un anillo bicíclico de 6 miembros/ o a un anillo bicíclico fusionado de 6 miembros o a un anillo multicíclico fusionado de 6 miembros (un sistema de anillo "fusionado" significa que cada anillo en el sistema comparte un par adyacente de átomos de carbono con cada otro anillo en el sistema) en donde uno o más de los anillos puede contener uno o más enlaces dobles pero ninguno de los anillos tiene un sistema completamente conjugado del electrón-pi. Los ejemplos, sin limitación, de grupos cicloalquilo son ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano, cicfopenteno, ciclohexano, ciclohexadieno, adamantana, cicloheptano, ciclo heptatrieno, y los similares. "Cicloalquilo sustituido" significa un grupo cicloalquilo como se definió anteriormente que está sustituido con uno o más, preferiblemente uno o dos sustituyentes, independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, trihaloalquilo, halo, hidroxi, alcoxi inferior, arilo opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, ariloxi opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroarilo de 6 miembros que tiene de 1 a 3 átomos de nitrógeno en el anillo, los carbonos en el anillo están opcionalmente sustituidos con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroarilo de 5 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, ios átomos de carbono y de nitrógeno del grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, heteroalicíclico de 5 ó 6 miembros que tiene de 1 a 3 heteroátomos seleccionados a partir del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno y azufre, los átomos de carbono y de nitrógeno (si están presentes) en el grupo están opcionalmente sustituidos con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, mercapto, tio(alquilo inferior), ariltio opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno o dos grupos independientes de cualesquiera otros grupos halo, hidroxi, alquilo inferior o alcoxi inferior, ciano, acilo, tioacilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, N-amido, nitro, N-sulfonamido, S-sulfonamido, R 8S(0)-, R18S(0)2-, -C(0)OR18, R 8C(0)0-, y -NR18R19 son como se definió anteriormente. "Alquenilo" se refiere a un grupo alquilo inferior, como se define en la presente invención, que consiste de al menos dos átomos de carbono y de al menos un doble enlace carbono-carbono. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etenilo, 1-propenilo, 2-propenllo, 1-, 2-, ó 3-butenilo, y los similares. "Alquinilo" se refiere a un grupo alquilo inferior, como se define en la presente invención, que consiste de al menos dos átomos de carbono y de al menos un triple enlace carbono-carbono. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-, 2-, ó 3- butinilo, y los similares. "Arilo" se refiere a grupos de un anillo monocíclico o de un anillo policíclico fusionado sólo de carbono (por ejemplo, anillos que comparten pares adyacentes de átomos de carbono) de 1 a 12 átomos de carbono que tienen un sistema completamente conjugado del electrón-pi. Los ejemplos, sin ¦ limitación, de los grupos arilo son fenilo, naftalenilo y antracenilo. El grupo arilo puede estar sustituido o no sustituido. Cuando está sustituido, el grupo(s) sustituido es preferiblemente uno o más, más preferiblemente uno, dos o tres, incluso más preferiblemente uno o dos, independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, trihaloalquilo, halo, hidroxi, alcoxi inferior, mercapto, tio(alquilo inferior), ciano, acilo, tioacilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamllo, C-amido, N-amido, nitro, N- sulfonamido, S-sulfonamido, R18S(0)-, R18S(0)2-, -C(0)OR18, R18C(0)0-, y - NR 8R19, con R 8 y R 9 como se definió anteriormente. Preferiblemente, el grupo arilo esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, alquilo inferior, trihaloalquilo, hidroxi, mercapto, ciano, N-amido, mono o díalquilamino, carboxi, o N-sulfonamido. "Heteroarilo" se refiere a un grupo de un anillo monocíclico o de un anillo fusionado (por ejemplo, anillos que comparten un par adyacente de átomos) de 5 a 12 átomos en el anillo que contiene uno, dos, o tres heteroátomos en el anillo seleccionados a partir de N, O, o S, los átomos remanentes del anillo siendo C, y, además, teniendo un sistema completamente conjugado del electrón-p¡. Los ejemplos, sin limitación, de los grupos heteroarüo no sustituidos son pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, pirazol, piridina, pirimidina, quinolina, isoquinolina, purina y carbazol. El grupo heteroarüo puede estar sustituido o no sustituido. Cuando está sustituido, el grupo(s) sustituido es preferiblemente uno o más, más preferiblemente uno, dos, o tres, incluso más preferiblemente uno o dos, independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, trihaloalquilo, halo, hidroxi, alcoxi inferior, mercapto, tio(alquilo inferior), ciano, acilo, tioacilo, O-carbamilo, N-carbami!o, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, N-amido, nitro, N-sulfonamido, S-sulfonamido, R 8S(0)-, R 80)2-, -C(0)OR18, R 8C(0)0-, y -NR18R19, con R18 y R19 como se definió anteriormente. Preferiblemente, el grupo heteroarilo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, alquilo inferior, trihaloalquilo, hidroxi, mercapto, ciano, N-amido, mono o dialquilamino, carboxi, o N-sulfonamido. "Heteroalicíclico" se refiere a un grupo de anillo monocíclico o fusionado que tiene en el anillo(s) de 5 a 9 átomos en el cual uno o dos átomos del anillo son heteroátomos seleccionados a partir de N, O, o S(0)n (en donde n es un entero a partir de 0 a 2), los átomos remanentes del anillo siendo C. Los anillos también pueden tener uno o más enlaces dobles. No obstante, los anillos no tienen un sistema completamente conjugado del electrón pi. Los ejemplos, sin limitación, de los grupos heteroalicíclicos no sustituidos son pirrolidino, piperidino, piperazino, morfolino, tiomorfolino, homopiperazino, y los similares. El anillo heteroalicíclico puede estar sustituido o no sustituido. Cuando está sustituido, el grupo(s) sustituido preferiblemente es uno o más, más preferiblemente uno, dos o tres, incluso más preferiblemente uno o dos, independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, trihaloalquilo, halo, hidroxi, alcoxi inferior, mercapto, tio(alquilo inferior), ciano, acilo, tioacilo, O-carbamilo, N-carbamilo, O-tiocarbamilo, N-tiocarbamilo, C-amido, N-amido, nitro, N-sulfonamido, S-sulfonamido, R18S(0) -, R18S(0)2-, -C(0)OR18, R18C(0)0-, y -NR18R19, con R18 y R19 como se definió anteriormente. Preferiblemente, el grupo heteroalicíclico está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, alquilo inferior, trihaloalquilo, hidroxi, mercapto, ciano, N-amido, mono o dialquilamino, carboxi, o N-sulfonamido. Preferiblemente, el grupo heteroalicíclico está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, alquilo inferior, trihaloalquilo, hidroxi, mercapto, ciano, N-amido, mono o dialquilamino, carboxi, o N-sulfonamido. "Heterociclo" significa un radical cíclico saturado de 3 a 8 átomos en el anillo en el cual uno o dos átomos en el anillo son heteroátomos seleccionados a partir de N, O, o S(0)n (en donde n es un entero a partir de 0 a 2), los átomos remanentes del anillo siendo C, en donde uno o dos átomos de C pueden estar opcionalmente reemplazados por un grupo carbonilo. El anillo heterociclilo puede estar opcionalmente sustituido independientemente con uno, dos, o tres sustituyentes seleccionados a partir de alquilo inferior opcionalmente sustituido (sustituido con 1 ó 2 sustituyentes independientemente seleccionados a partir de carboxi o de éster), haloalquilo, cianoalquilo, halo, nitro, ciano, hidroxi, alcoxi, amino, monoalquilamino, dialquilamino, aralquilo, heteroaralquilo, -COR (en donde R es alquilo) o -COOR en donde R es (hidrógeno o alquilo). Más específicamente el término heterociclilo incluye, pero no se limita a, tetrahidropiranilo, 2, 2-dimetil-1 , 3-dioxolano, piperidino, N-metilpiperidin-3-ilo, piperazino, N-metilpirrolidin-3-ilo, 3-pirrolidino, morfolino, tiomorfolino, tiomorfolino-1 -óxido, tiomorfolino-1 , 1-dióxido, 4- etiloxicarbonilpiperazino, 3-oxopiperazino, 2-imidazolidona, 2-pirrolidinona, 2- oxohomopiperazino, tetrahidropirimidin-2-ona, y los derivados de los mismos. Preferiblemente, el grupo heterociclo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes independientemente seleccionados a partir de halo, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido con carboxi, hidróxido de éster, mono o dialquilamino. "Hidroxi" se refiere a un grupo -OH. "Alcoxi" se refiere tanto a un grupo -O-(alquilo) como a un grupo -O-(cicloalquilo). Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, ciclopropiloxi, ciclobutiloxi, ciclopentiloxi, ciclohexiloxi, y los similares. "Ariloxi" se refiere tanto a un grupo -O-alilo como a un grupo -O-heteroarilo, como se definió en la presente invención. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, fenoxi, piridiniloxi, furaniloxi, tieniloxi, pirimidiniloxi, piraziniloxi, y los similares, y derivados de los mismos. "Me rea pío" se refiere a un grupo -SH. "Alquiltio" se refiere tanto a un grupo -S-alquilo como a un grupo -S-cicloalquilo. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, por ejemplo, metiltio, etiltio, propiltio, butiltio, ciclopropiltio, ciclobutiltio, ciclopentiltio, ciclohexiltio, y los similares. "Ariitio" se refiere tanto a un grupo -S-alilo como a un grupo -S-heteroarilo, como se definió en la presente invención. Los ejemplos representativos incluyen, pero no se limitan a, feniltio, piridiniltio, furaniltio, tientiltio, pirimidiniltio, y los similares y derivados de los mismos. "Acilo" se refiere a un grupo -C(0)-R", en donde R" se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, trihalometilo, cicloalquilo, arilo opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno, dos, o tres sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de los grupos alquilo inferior, trihalometilo, alcoxi inferior, halo y -NR18R19, heteroarilo (unido a través de un anillo de carbono) opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno, dos, o tres sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de los grupos de alquilo inferior, trihaloalquilo, alcoxi inferior, halo y - NR18R19 y heteroalicíclico (unido a través de un anillo de carbono) opcionalmente sustituido con uno o más, preferiblemente uno, dos, o tres sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de los grupos de alquilo inferior, trihaloalquilo, alcoxi inferior, halo y -NR 8R19. Los grupos acilo representativos incluyen, pero no se limitan a, acetilo, trifluoroacetilo, benzoilo, y los similares. "Aldehido" se refiere a un grupo acilo en el cual R" es hidrógeno. "Tioacilo" se refiere a un grupo -C(S)-R", con R" como se define en la presente invención. "Ester" se refiere a un grupo -C(0)0-R" con R" como se define en la presente invención excepto que R" no puede ser hidrógeno. El grupo "acetilo" se refiere a un grupo -C(0)CH3. El grupo "halo" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo, preferiblemente flúor o cloro. El grupo "trihalometilo" se refiere a un grupo -CX3 en donde X es un grupo halo como se define en la presente invención. El grupo "trihalometansulfonilo" se refiere a los grupos X3CS(=0) 2- con X como se define en la presente invención. "Ciano" se refiere a un grupo -C=N. "Metilendioxi" se refiere a un grupo -OCH2O- en donde los dos átomos de oxígeno están unidos a átomos de carbono adyacentes. El grupo "etilendioxi" se refiere a -OCH2CH2O- en donde los dos átomos de oxígeno están unidos a átomos de carbono adyacentes. "S-sulfonamido" se refiere a un grupo -S(0)2NR18R19, con R 8 y R19 como se define en la presente invención. "N-sulfonamido" se refiere a un grupo -NR 8S(0)2R19, con R18 y R 9 como se define en la presente invención. El grupo "O-carbamilo" se refiere a un grupo -OC(0)NR18R19 con R y R como se define en la presente invención. "N-carbamilo" se refiere a un grupo R18OC(0)NR19-, con R 8 y R19 como se define en la presente invención. "O-tiocarbamilo" se refiere a un grupo -OC(S)NR18R19 con R18 y R19 como se define en la presente invención. "N- tiocarbamilo" se refiere a un grupo R18OC(S)NR19-, con R18 y R19 como se define en la presente invención. "Amino" se refiere a un grupo -NR18R19, en donde R18 y R19 son ambos hidrógeno. "C-amido" se refiere a un grupo -C(0)NR 8R19 con R18 y R 9 como se define en la presente invención. "N-amido" se refiere a un grupo R18C(0)NR19-, con R18 y R19 como se define en la presente invención. "Nitro" se refiere a un grupo -NC½. "Haloalquilo" significa un alquilo, preferiblemente alquilo inferior como se definió anteriormente que está sustituido con uno o más átomos halo que son los mismos o que son diferentes, por ejemplo, -CH2CI, -CF3, -CH2CF3, -CHZCCI3, y los similares. "Aralquilo" significa alquilo, preferiblemente alquilo inferior como se definió anteriormente el cual está sustituido con un grupo arilo como se definió anteriormente, por ejemplo, -CF^fenilo, -(CH2)2fenilo, -(Cf-ysfenilo, CH3CH(CH3)CH2fenilo, y los similares y derivados de los mismos. El grupo "heteroaralquilo" significa alquilo, preferiblemente alquilo inferior como se definió anteriormente el cual está sustituido con un grupo heteroarilo, por ejemplo, -CH2piridinilo, -(CH2)2pirimidinilo, -(CH2)3Ímidazolilo, y los similares, y derivados de los mismos. "Monoalquilamino" significa un radical -NHR en donde R es un grupo alquilo o cicloalquilo no sustituido como se definió anteriormente, por ejemplo, metilamino, (l-metiletil)amino, ciclohexiloamino, y los similares. "Dialquilamino" significa un radical -NRR en donde cada R es independientemente un grupo alquilo o cicloalquilo no sustituido como se definió anteriormente, por ejemplo, dimetilamino, dietilamino, (1 -metiletil)-etilamino, ciclohexilmetilamino, ciclopentilmetilamino, y los similares. "Cianoalquilo" significa un alquilo, preferiblemente alquilo inferior como se definió anteriormente, el cual está sustituido con 1 ó 2 grupos ciano. Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o circunstancia subsecuentemente descrita puede ocurrir, pero no ocurre necesariamente, y que la descripción incluye casos en donde el evento o la circunstancia ocurre y casos en donde ésta no ocurre. Por ejemplo," grupo heterociclo opcionalmente sustituido con un grupo alquilo" significa que el alquilo puede estar presente, pero no esta presente necesariamente, y la descripción incluye situaciones en donde el grupo heterociclo está sustituido con un grupo alquilo y situaciones en donde el grupo heterociclo no está sustituido con el grupo alquilo. Los términos "2-indolinona", "indolin-2-ona" y "2-oxindol" se utilizan de manera intercambiable en la presente invención para referirse a una molécula que tiene la estructura química: El término "pirrol" se refiere a una molécula que tiene estructura química: i h El término "2-mdolinona sustituida con pirrol" y "3-pirrolidenil-2-indolinona" se utilizan de manera intercambiable en la presente invención para referirse a un compuesto químico que tiene la estructura general mostrada en la fórmula (I). Los compuestos que tiene la misma fórmula molecular pero que difieren en la naturaleza o secuencias de los enlaces de sus átomos o en el arreglo de sus átomos en el espacio son denominados "isómeros". Los isómeros que difieren en el arreglo de sus átomos en el espacio son denominados "estereoisómeros". Los estereoisómeros que no son imágenes en espejo entre sí son denominados' "diaestereómeros" y aquellos que no son imágenes en espejo superimpuestas entre sí son denominados "enantiómeros". Cuando un compuesto tiene un centro asimétrico, por ejemplo, está unido a cuatro grupos diferentes, es posible la formación de un par de enantiómeros. Un enantiómero se puede caracterizar por la configuración absoluta de su centro asimétrico y se describe por las reglas de secuenciación R- y S- de Cahn y Prelog, o por la manera en la cual la molécula rota en el plano de luz polarizada y se designa como dextrorotatoria o levorotatoria (por ejemplo, como isómeros (+) o (-) respectivamente). Un compuesto quiral puede existir ya sea como un enantiómero individual o como una mezcla de los mismos. Una mezcla que contiene proporciones iguales de los enantiómeros es denominada una "mezcla racémica". Los compuestos de esta invención pueden poseer uno o más centros asimétricos; por lo tanto dichos compuestos pueden producirse como estereoisómeros individuales (R) o (S) o como mezclas de los mismos. Por ejemplo, si el sustituyente R6 en un compuesto de la fórmula (I) es 2-hidroxietilo, entonces el carbono al cual el grupo hidroxi está unido es un centro asimétrico y por lo tanto el compuesto de la fórmula (I) puede existir como un estereoisómeros (R) o (S). A menos que se indique de otra manera, la descripción o nombramiento de un compuesto particular en la especificación y en las reivindicaciones se pretende que incluya tanto a los enantiómeros individuales como a las mezclas racémicas, u otras, de los mismos. Los métodos para la determinación de la estereoquímica y la separación de los estereoisómeros son bien conocidos en la técnica (véase la discusión en el capítulo 4 de "Advanced Organic Chemistry", 4a edición J. March, John Wiley and Sons, New York, 1992).

Los compuestos de la presente invención pueden exhibir el fenómeno de tautomerismo e ¡somerismo estructural. Por ejemplo, los compuestos de la fórmula (I) descritos en la presente invención pueden adoptar una configuración E o Z alrededor del enlace doble que conecta a la porción de la 2-indolinona con la porción de pirrol o éstos pueden ser una mezcla de E y de Z. Esta invención abarca cualquier forma tautomérica o isomérica estructural y mezclas de las mismas que poseen la capacidad para modular la actividad de RTK, CTK y/o STK y no se limitan a ninguna otra forma tautomérica u isomérica estructural. Una "composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más de los compuestos descritos en la presente invención, o sales o profármacos de los mismos fisiológicamente/farmacéuticamente aceptables, con otros componentes químicos, tales como vehículos y excipientes fisiológicamente/farmacéuticamente aceptables. El propósito de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo. Los compuestos de la presente invención también pueden actuar como un profármaco. Un "profármaco" se refiere a un agente el cual se convierte hacia el fármaco parental in vivo. Los profármacos frecuentemente son útiles debido a que, en ciertas situaciones, pueden ser más fáciles de administrar que el fármaco parental. Estos pueden, por ejemplo, estar biodisponibles para administración oral mientras que el fármaco parental no lo está. El profármaco también puede tener una solubilidad mejorada en composiciones farmacéuticas sobre el fármaco parental. Un ejemplo, sin limitación, de un profármaco podría ser un compuesto de la presente invención e¡ cual se administra como un éster (el "profármaco") para facilitar la transmisión a través de una membrana celular en donde la solubilidad al agua es detrimental para la movilidad pero entonces es metabólicamente hidrolizada hacia el ácido carboxílico, la entidad activa, una vez dentro de la célula en donde la solubilidad al agua es benéfica. Un ejemplo adicional de un profármaco puede ser un polipéptido corto, por ejemplo, sin limitación, un polipéptido de 2-10 aminoácidos, unido a través de un grupo amino terminal a un grupo carboxi de un compuesto de esta invención en donde el polipéptido es hidrolizado o metabolizado in vivo para liberar la molécula activa. Los profármacos de un compuesto de la fórmula (I) están dentro del alcance de esta invención. Adicionalmente, se contempla que un compuesto de la fórmula (I) podría ser metabolizado mediante enzimas en el cuerpo del organismo tal como un ser humano para generar un metabolito que puede modular la actividad de las proteína cinasas. Dichos metabolitos están dentro del alcance de la presente invención. Como se utiliza en la presente invención, un "vehículo fisiológicamente/farmacéuticamente aceptable" se refiere a un vehículo o diluyente que no ocasiona irritación significativa a un organismo y que no anula la actividad biológica y propiedades del compuesto administrado. Un "excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sustancia inerte añadida a una composición farmacéutica para facilitar adicionalmente la administración de un compuesto. Los ejemplos, sin limitación, de los excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares y tipos de almidón, derivados de celulosa, gelatina, aceites vegetales y polietilenglicoles. Como se utiliza en la presente invención, el término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellas sales las cuales retienen la efectividad biológica y propiedades del compuesto parental. Dichas sales incluyen: (1) sales de adicional ácidas las cuales se obtienen mediante la reacción de la base libre del compuesto parental con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, y ácido perclórico y los similares, o con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido oxálico, (D) o (L) ácido mélico, ácido maléico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido p- toluensulfónico, ácido salicílico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico o ácido malónico y los similares, preferiblemente ácido clorhídrico o (L) ácido mélico tal como fa sal de L-malato de la 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol- 3- ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida; o (2) las sales formadas cuando ya sea un protón ácido presente en el compuesto parental se reemplaza por un ion metálico, por ejemplo, un ion de metal alcalino, a un ion térreo alcalino; o se coordina con una base orgánica. Los iones ejemplares incluyen aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc en sus valencias usuales. Las bases orgánicas preferidas incluyen aminas terciarias protonadas y cationes de amonio cuaternario, incluyendo en parte, trimetilamina, dietilamina, ?,?'- dibenciletilendiamina, cloroprocaíne, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (N-metilglucamina) y procaína. "Método" se refiere a las maneras, modos, técnicas y procedimientos para lograr una tarea dada incluyendo, pero no limitado a, aquellas maneras, modos, técnicas y procedimientos ya sea conocidos para, o ya desarrollados a partir de maneras conocidas, modos, técnicas y procedimientos por, practicantes de las técnicas químicas, farmacéuticas, biológicas, bioquímicas y médicas. "Trato", "tratar" y "tratamiento" se refiere a cualquier procedimiento, acción, aplicación, terapia, o los similares, en donde un mamífero, incluyendo un ser humano, se somete a ayuda médica con el objeto de mejorar la condición del mamífero, directamente o indirectamente. Con respecto particularmente al cáncer, estos términos significan simplemente que la esperanza de vida de un individuo afectado con cáncer será incrementada o que uno o más de los síntomas de la enfermedad. Esto se puede monitorear mediante la aparición retrasada de tumores primarios o secundarios, desarrollo más lento de los tumores primarios o secundarios, ocurrencia disminuida de los tumores primarios o secundarios, severidad más lenta o disminuida de los efectos secundarios de la enfermedad, detención del crecimiento del tumor y regresión de los tumores, entre otros.

El término "prevención" incluye ya sea la prevención por completo del inicio de la evidencia clínica de neoplasia o la prevención del inicio de una etapa preclínica evidente de la neoplasia en individuos con riesgo. También se pretende que se abarque por esta definición la prevención del inicio de las células malignas o la detención o reversión de la progresión de las células premalignas hacia células malignas. Esto incluye el tratamiento profilático de aquellos en riesgo de desarrollar la neoplasia. La frase "terapéuticamente efectivo" se pretende que limite la cantidad de cada agente que logrará el objetivo de mejoría en la severidad de la enfermedad neoplásica y la frecuencia de enfermedad neoplásica sobre el tratamiento de cada agente por sí mismo, mientras que evita los efectos laterales adversos típicamente asociados con las terapias alternativas. Un "efecto terapéutico" o "cantidad de efecto terapéutico" se pretende que limite la cantidad de un agente anti- cáncer requerida para aliviar hasta cierto grado uno o más de los síntomas de un trastorno de neoplasia, incluyendo, pero no limitado a: 1 ) reducción en el número de células cancerosas; 2) reducción en el tamaño del tumor; 3) inhibición (por ejemplo, crecimiento más lento hasta cierto grado, preferiblemente detención) de la infiltración de la célula cancerosa hacia los órganos periféricos; 3) inhibición (por ejemplo, crecimiento más lento hasta cierto grado, preferiblemente detención) de las metástasis tumorales; 4) inhibición, hasta cierto grado, del crecimiento del tumor; 5) alivio o reducción hasta cierto grado de uno o más de los síntomas asociados con el trastorno; y/o 6) alivio o reducción de los efectos laterales asociados con la administración de los agentes anti- cáncer. La frase "terapia de combinación" (o "co-terapia") abarca la administración de un inhibidor de la proteína cinasa y de un inhibidor de la ciclooxigenasa -2 como parte de un régimen de tratamiento específico que pretende proveer un efecto benéfico a partir de la co-acción de estos agentes terapéuticos. El efecto benéfico de la combinación incluye, pero no se limita a, co- acción farmacocinética o farmacodinámica que resulta de la combinación de los agentes terapéuticos. La administración de estos agentes terapéuticos en combinación típicamente se lleva a cabo durante un período -de tiempo definido (usualmente minutos, horas, días o semanas dependiendo de la combinación seleccionada). Generalmente no se pretende que la "terapia de combinación" abarque la administración de dos o más de estos agentes terapéuticos como parte de regímenes separados de monoterapia que incidentalmente y arbitrariamente resultan en las combinaciones de la presente invención. Se pretende que la "terapia de combinación" abarque la administración de estos agentes terapéuticos en una manera secuencial, es decir, en donde cada agente terapéutico se administra a un tiempo diferente, • así como la administración de estos agentes terapéuticos, o al menos dos de los agentes terapéuticos, en una manera sustancialmente simultánea. La administración sustancialmente simultánea se puede lograr, por ejemplo, mediante la administración al sujeto de una sola cápsula que tiene una relación fija de cada agente terapéutico o en cápsulas múltiples, particulares para cada uno de los agentes terapéuticos. La administración secuencial o sustancialmente simultánea de cada agente terapéutico se puede efectuar mediante cualquier ruta apropiada incluyendo, pero no limitada a, rutas orales, rutas intravenosas, rutas intramusculares, y absorción directa a través de los tejidos membranales mucosos. Los agentes terapéuticos se pueden administrar por la misma ruta o por rutas diferentes. Por ejemplo, un primer agente terapéutico de la combinación seleccionada se puede administrar mediante inyección intravenosa mientras que los otros agentes terapéuticos de la combinación se pueden administrar oralmente. Alternativamente, por ejemplo, ambos agentes terapéuticos se pueden administrar oralmente o ambos agentes terapéuticos se pueden administrar mediante inyección intravenosa. La secuencia en la cual se administran los agentes terapéuticos no es precisamente crítica. La "terapia de combinación" también puede abarcar la administración de los agentes terapéuticos como se describió anteriormente en combinación adicional con otros ingredientes biológicamente activos (tales como, pero no limitados a, un segundo y diferente agente anti-neoplásico) y las terapias de no fármaco (tales como, pero no limitadas a, cirugía o- tratamiento con radiación). En donde la terapia de combinación comprende adicionalmente un tratamiento con radiación, el tratamiento con radiación se puede llevar a cabo en cualquier momento adecuado siempre y cuando tenga un efecto benéfico a partir de la co-acción de ia combinación de los agentes terapéuticos y se realice el tratamiento con radiación. Por ejemplo, en casos apropiados, el efecto benéfico se logra aún cuando el tratamiento con radiación se retira temporalmente a partir de la administración de los agentes terapéuticos, tal vez por días o incluso por semanas. La "terapia adjunta" abarca el tratamiento de un sujeto con agentes que reducen o que evitan los efectos laterales asociados con la terapia de combinación de la presente invención, incluyendo, pero ¦ no limitados a, aquellos agentes, por ejemplo, que reducen el efecto tóxico de los fármacos anti-cáncer, por ejemplo, inhibidores de la reabsorción del hueso, agentes cardioprotectores; que previenen o reducen la incidencia de la náusea y del vómito asociado con la quimioterapia, radioterapia u operación; o que reducen la incidencia de la infección asociada con la administración de fármacos mielosupresores anti-cáncer.

Modalidades preferidas A pesar de que la definición más amplia se establece en el resumen de la invención, ciertos compuestos de la fórmula (I), (II) y (III) que se establecen a continuación se prefieren para llevar a cabo la presente invención.

A. Compuestos inhibidores de la proteína tirosina cinasa de la fórmula (I): (1 ) Un grupo preferido de compuestos de la fórmula (!) es aquél en donde R , R3, y R4 son hidrógeno. (2) Otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R1, R2, y R4 son hidrógeno. (3) Otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (I) es aquél en donde R1, R2, y R3 son hidrógeno. (4) Otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (l) es aquél en donde R2, R3, y R4 son hidrógeno. (5) Otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R1, R2, R3 y R4 son hidrógeno. (6) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R5, R6 o R7, preferiblemente R5 o R6, más preferiblemente R6 es -COR10 en donde R10 es -NR (CH2)nR12 en donde: R1 es hidrógeno o alquilo inferior, preferiblemente hidrógeno o metilo; n es 2, 3 ó 4, preferiblemente 2 ó 3; y R 2 es -NR 3R14 en donde R13 y R14 son independientemente alquilo, más preferiblemente alquilo inferior o R13 y R14 se combinan para formar un grupo seleccionado a partir de -(CH2) -, -(CH2)5-, -(CH2)2-O-(CH2)2-o -(CH2)2 (CH3)(CH2)2-, preferiblemente R13 y R 4 son independientemente hidrógeno, metilo, etilo, o se combinan para formar morfolin-4-ilo, pirrolidin-1-ilo, piperazin-1 -ilo, o 4-met¡lpiperazin-1 -ilo. Más preferiblemente, R5 o R6 en (6) anteriormente mencionado es N-(2-dimetilaminoetil-)aminocarbonilo! N-(2-etilaminoetil)-N-metilaminocarbonilo, N-(3-dimetilaminopropil)-aminocarbonilo, N-(2-dietilaminoetil)aminocarbonilo, N-(3-etilaminopropil)aminocarbonilo, N-(3-dietilaminopropil)aminocarbonilo, 3-pirrolidin-1-il-propilaminocarbonilo, 3- morfolin-4-ilpropil-am¡nocarbon¡lo, 2~piYrolidin-1 -iletilaminocarbonilo, 2-morfolin-4-ilet¡laminocarboniIo, 2-(4-metilpiperaz¡n-1 -il)et¡lam¡nocarbonilo, 2-(4-metilpiperazin-1-il)propilaminocarbonilo, 2-(3,5-dimetilp¡perazin-1-il) etilaminocarbonilo o 2-(3,5- dimetilpiperazin-1-il)propilaminocarbonilo, incluso más preferiblemente N-(2-dietil-aminoetil)aminocarboni!o o N-(2-etilaminoetil) amino-carbonilo. (7) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R5, R6 o R7, preferiblemente R5 o R6, más preferiblemente R6 es -COR10 en donde R10 es -NR13R14 en donde R 3 es hidrógeno y R 4 es alquilo, preferiblemente alquilo inferior sustituido con hidroxi, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, o carboxi, más preferiblemente metilo, etilo, propilo o butilo sustituido con hidroxi, arilo, heteroalicíclico tal como piperidina, piperazina, morfolina y los similares, heteroarilo, o carboxi. Incluso más preferiblemente dentro de este grupo (7), R5 o R6 es 2-etoxicarbonilmetil-aminocarbonil, carboximetilamino- carbonilo, 3-hidroxipropll-aminocarbonilo, 2-hidroxietilaminocarbonilo, 3-triazin- -ilpropilamino-carbonllo, triazin- -iletilaminocarbonilo, 4-hidroxl-feniletilaminocarbonilo, 3-imidazoi-1 -ilpropil-aminocarbonilo, piridin-4-llmetllamlnocarbonilo, 2-piridin-2-iletilaminocarbonilo o 2- imidazol-1 -iletilaminocarbonilo. (8) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (I) es aquél en donde R5, R6 o R7, preferiblemente R5 o R6, más preferiblemente R6 es -COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde: R11 es hidrógeno o alquilo, preferiblemente hidrógeno o metilo; n es 2, 3 ó 4, preferiblemente 2 ó 3; y R 2 es -NR13R14 en donde R13 y R14 juntos se combinan para formar una heterociclo, preferiblemente un heterociclo de 5, 6 ó 7 miembros que contiene un grupo carbonilo y 1 ó 2 átomos de nitrógeno. Preferiblemente, R5 o R6 es 2-(3-etoxicarbonilmetilpipera2¡n-1 -il)etilaminocarbonilo, 2-(3-oxopiperazin-1 -il)etilaminocarbonilo, 2-(imidazolidin-1 -il-2-ona) etilaminocarbonilo, 2-(tetrahídropirimidin-1-il-2-ona)etílaminocarbonilo, 2-(2-oxopirrolidin-1-il)-etilaminocarbonilo, 3-(4-metilpiperazin-1-iI)-propilaminocarbonilo, 3-(3-etoxicarbonilmetilpiperazin-1 -il)-propilaminocarbonilo, 3-(3-oxopiperazin-1-il)propil-aminocarbonilo, 3-(imidazolidin-1 -il-2-ona)propil-aminocarbonilo, 3-(tetrahidropirimidin-1-il-2-ona)-propilaminocarbonilo, 3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil-aminocarbonilo, 2- (2-oxohomopiperidin-1 -il)etilamino-carbonilo o 3-(2-oxohomopiperidin-1 -il) propilaminocarbonilo. (9) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (I) es aquél en donde R5, R6 o R7, preferiblemente R5 o R6, más preferiblemente R6 es -COR10 en donde: (a) R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde: R11 es hidrógeno o alquilo, preferiblemente hidrógeno o metilo; n es 2, 3 ó 4, preferiblemente 2 ó 3; y R12 es -NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R14 es cianoalquilo o -NHCOR3 en donde Ra es alquilo; o (b) R 0 es -NR 3R14 en donde R13 y R 4 juntos se combinan para formar un heterociclo que no contiene un grupo carboniio dentro del anillo. Preferiblemente, R5 o R6 es 2-(2-cianoetilamino)etilaminocarbonilo, 2-(acetilamino)-etilaminocarbonilo, morfolinocarbonilo, piperidin-1 -il-carbonilo, 2-cianometilaminoetilaminocarbonilo o piperidin-1 -ilcarbonilo. ( 0) Otro grupo preferido de los compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R5 es -COR10 en donde R10 es -NR13R14 en donde R 3 es hidrógeno y R 4 es alquilo inferior sustituido con hidroxi, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, carboxi, o -NR18R19 en donde R 8 y R19 son independientemente hidrógeno o alquilo inferior, más preferiblemente R5 es 2-[(dietilamino)-2-hidroxietil]aminocarbonilo, 2-(N-etil-N-2-hidroxietilamino)etilam¡nocarbonilo, carboximetilamino-carbonilo, o 2-(2-hidroxietilamino)etilam¡no-carbonilo. (11 ) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R6 es -COR10 en donde R10 es -NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R 4 es alquilo inferior sustituido con hidroxi, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, carboxi, o -NR18R19 en donde R 8 y R19 son independientemente hidrógeno o alquilo inferior; más preferiblemente R6 es [2-(dietilamino)-2-hidroxi]etilaminocarboniIo, 2-(N-etil-N-2-hidroxietil-amino)etilaminocarbonilo, carboximetilaminocarbonilo, o 2-(2-hidroxietilamino) etilamino-carbonilo. (12) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R5 es - COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde R12 es -N+(0~)NR13R14 o -N(OH)R13 en donde R 3 y R 4 son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior, preferiblemente R5 es 2-(N-hidroxi-N-etilamino)- -etilaminocarbonilo o 2-[N+(0~)(C2H5)2]etil-aminocarbonilo. (13) Incluso otro grupo preferido de compuestos de la fórmula (1 ) es aquél en donde R6 es -COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde R12 es -N+(CQNR13R14 o -N(OH)R13 en donde R13 y R14 son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior, preferiblemente R6 es 2-(N-hidroxi-N-etilamino)etilaminocarbonilo o 2-[N+(0~)(C2H5)2]etil-aminocarboniIo. (14) En los grupos preferidos anteriormente mencionados (6)- (13) en donde R5 es -COR10, entonces un grupo más preferido de compuestos es aquél en donde: Rs se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo, preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, isobutilo, o n-butilo, más preferiblemente hidrógeno o metilo; y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, y -C(0)R17 en donde R17 es hidroxi, alquilo o arilo, más preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, n-, iso o tert-butilo, fenilo, benzoilo, acetilo o carboxi, incluso más preferiblemente metilo, hidrógeno o fenilo. (15) En los grupos preferidos anteriormente mencionados (6)-(13) cuando R5 es -COR10, entonces otro grupo más preferido de compuestos es aquél en donde R6 y R7 se combinan para formar -(CH2)4-. (16) En los grupos preferidos anteriormente mencionados (6)- (13) cuando R6 es -COR10, entonces un grupo más preferido de compuestos es aquél en donde: R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo, preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, isobutilo, o n-butilo, más preferiblemente hidrógeno o metilo; y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, y -C(0)R17, en donde R17 es hidroxi, alquilo o arilo, más preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, n-, iso o tert-butilo, fenilo, benzoilo, acetilo o carboxi, incluso más preferiblemente metilo, hidrógeno o fenilo. (17) Dentro de los grupos preferidos anteriormente mencionados y de los grupos más preferidos anteriormente mencionados (6)- (16), un grupo incluso más preferido de compuestos es aquél en donde: R1 es hidrógeno, alquilo, -C(0)NR8R9, cicloalquilo o arilo, preferiblemente hidrógeno, fenilo, 3,4-dimetoxifenilaminocarbonilo, 4-metoxi-3-clorofenil-aminocarbonilo, incluso más preferiblemente hidrógeno o metilo, más preferiblemente hidrógeno; R2 es ciano, hidrógeno, halo, alcoxi inferior, arilo o -S(0)2NR 3R14 en donde R13 es hidrógeno y R14 es hidrógeno, arilo o alquilo, preferiblemente R2 es hidrógeno, cloro, bromo, fluoro, metoxi, etoxi, fenilo, dimetilaminosulfonilo, 3-clorofenil-aminosulfonilo, carboxi, metoxi, aminosulfonilo, metilaminosulfonilo, fenilaminosulfonilo, piridin-3-il- aminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, isopropilamino-sulfonilo, más preferiblemente hidrógeno, fluoro, o bromo; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alcoxi inferior, -C(0)R15, -NR13C(0)R14, arilo preferiblemente arilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, halo, o alcoxi inferior, y heteroarilo, preferiblemente heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, halo, o alcoxi inferior, preferiblemente hidrógeno, metoxi, carboxi, fenilo, piridin-3-ilo, 3,4-diclorofenilo, 2-metoxi-5-isopropilfenilo, - 4-n-butilfenilo, 3-¡sopropilfenilo, más preferiblemente hidrógeno o fenilo; y R4 es hidrógeno. (18) Otro grupo más preferido de compuestos de la fórmula (I) es aquél en donde: R1 es hidrógeno, alquilo, -C(0)NR8R9, cicloalquilo o arilo, preferiblemente hidrógeno, 3,4-dimetoxi-fenil-aminocarbonilo, 4-metoxi-3-clorofenilaminocarbonilo, incluso más preferiblemente hidrógeno o metilo, particularmente hidrógeno; R2 es ciano, hidrógeno, halo, alcoxi inferior, arilo o -S(0)2NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R 4 es hidrógeno, arilo o alquilo, preferiblemente R2 es hidrógeno, cloro, bromo, fluoro, metoxi, etoxi, fenilo, dimetilaminosulfonilo, 3-clorofenil-aminosulfonilo, carboxi, metoxi, aminosulfonilo, metilaminosulfonilo, fenilaminosulfonilo, piridin-3-il- aminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, isopropilamino-sulfonilo, más preferiblemente hidrógeno, fluoro, o bromo; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alcoxi inferior, -C(0)R15, -NR13C(0)R14, arilo preferiblemente arilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, halo, o alcoxi inferior, y heteroarilo, preferiblemente heteroarilo opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, halo, o alcoxi inferior, preferiblemente hidrógeno, metoxi, carboxi, fenilo, piridin-3-ilo, 3,4-diclorofenilo, 2-metoxi-5-isopropilfenilo, 4-n-butilfenilo, 3-isopropilfenilo, más preferiblemente hidrógeno o fenilo; y R4 es hidrógeno. Dentro del grupo preferido anteriormente mencionado (18) un grupo más preferido de compuestos es en donde: R5 es -COR10 en donde R10 es como se definió en el resumen de la invención, preferiblemente -NR11(CH2)nR12 o -NR13R14 como se definió en el resumen de la invención. R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo, preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, isobutilo, o n-butilo, más preferiblemente hidrógeno o metilo; y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, y -C(0)R17 en donde R17 es hidroxi, alquilo o arilo, más preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, n-, iso o tert-butilo, fenilo, benzoilo, acetilo o carboxi, incluso más preferiblemente metilo, hidrógeno o fenilo. En el grupo preferido anteriormente mencionado (18) otro grupo más preferido de compuestos es aquél en donde: R6 es -COR10 en donde R 0 es como se definió en el resumen de la invención, preferiblemente -NR 1(CH2)nR12 o -NR13R14 como se definió en el resumen de la invención. R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo, preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, isobutilo, o n-butilo, más preferiblemente hidrógeno o metilo; y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, y -C(0)R17 en donde R 7 es hidroxi, alquilo o arilo, más preferiblemente hidrógeno, metilo, etilo, isopropilo, n-, iso o tert-butilo, fenilo, benzoilo, acetilo o carboxi, incluso más preferiblemente metilo, hidrógeno o fenilo. (19) Otro grupo más preferido de los compuestos de la fórmula (I) es aquél en donde: R1 y R4 son hidrógeno; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alcoxi inferior, -C(0)R15 y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alcoxi inferior, -C(0)R15, -S(0)2NR 3R14, arilo y heteroarilo; R5 es -C(0)R10; R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior; y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior y -C(0)R17. Es otra modalidad actualmente preferida de esta invención que, en un compuesto que tiene una estructura como se describe en (15): R10 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi inferior y -NR11(CH2)nR12, en donde n es 2 ó 3; R 1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior; y, R12 se selecciona a partir del grupo que consiste de arilo y - NR 3R14. Es una modalidad adicional actualmente preferida de esta invención que, en un compuesto que tiene una estructura como se describe en los dos párrafos anteriores, R13 y R 4 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, y, combinados, -(CH2)4-, -(CH2)5-, -(CH2)20(CH2)2- o -(CH2)2N(CH3)(CH2)2- . (20) Otra modalidad actualmente preferida de esta invención es un compuesto en el cual: R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, -(CH2)rR16 y -C(0)NR8R9; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, arilo y -S(0)2NR 3R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, alcoxí inferior, arilo, heteroarilo y -C(0)R15; R4 es hidrógeno; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior; R6 es -C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior y arilo; R16 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi y - C(0)R15; y, r es 2 ó 3. Una modalidad actualmente preferida de esta invención es un compuesto que tiene la estructura descrita en el párrafo anterior en la cual R3 es arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior, alcoxi inferior y halo. (21 ) De manera similar, es una modalidad actualmente preferida de esta invención que, en un compuesto en el cual: R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, -(CH2)rR16 y -C(0)NR8R9; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, arilo y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, arilo, heteroarilo y -C(0)R15; R4 es hidrógeno; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior; R6 es -C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior y arilo; R16 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi y - C(0)R15; y, r es 2 ó 3, R1Q se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi inferior, -NR1 R14 y -NR (CH2)nR12, en donde n es 1 , 2 ó 3, R11 es hidrógeno y R 2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi inferior, -C(0)R15, heteroarilo y -NR13R14 (22) Una modalidad adicional actualmente preferida de esta invención es un compuesto que tiene una estructura como se describe en el párrafo inmediatamente anterior en el cual R13 y R 4 son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, heteroarilo y, combinados, -(CH2)4-, -(CH2)5-, -(CH2)2O(CH2)2-, o -(CH2)2N (CH3)(CH2)2-. (23) Otra modalidad actualmente preferida de esta invención es un compuesto en el cual: R1 es -C(0)NR8R9, en donde R8 es hidrógeno y R9 es arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados a partir del grupo que consiste de halo, hidroxi y alcoxi inferior; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, arilo y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, arilo, heteroarilo y -C(0)R15; R4 es hidrógeno; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste que hidrógeno y alquilo inferior; R6 es -C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior y arilo; R 6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi y - C(0)R15; y, r es 2 ó 3, (24). Incluso una modalidad adicional actualmente preferida de esta invención es un compuesto en el cual: R1 selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y alquilo inferior; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alcoxi inferior, arilo, -C(0)R15 y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, arilo, heteroarilo y -C(0)R15; R4 es hidrógeno; R5 es -C(0)R10; y, R6 y R7 se combinan para formar un grupo -(CH2)4-. En un compuesto que tiene una estructura como se describe en el párrafo inmediatamente anterior, es una modalidad actualmente preferida que R10 se seleccione a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi,-NR13R14 y -NH(CH2)nNR13R14 en donde n es 2 ó 3. Es una modalidad actualmente preferida de esta invención que, en un compuesto que tiene una estructura como se describe en los dos párrafos inmediatos anteriormente mencionados, R13 y R14 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, y, combinados, -(CH2)4-, -(CH2)5-, -(CH2)20(CH2)2- o -(CH2)2N(CH3)(CH2)2-. Los compuestos representativos de la fórmula (1) se muestran en el cuadro 1 a continuación.

CUADRO 1 Ejemplo Estructura Nombre 1 4- et¡l-5- (2-0X0-1 , 2- dihidroihdoi-3- (V 0 ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- K ácido carboxílico 2 4- etil-5- (1-metil-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-2 íViJ OH ácido carboxílico \ 3 4-Metil-5- (2-0X0-1 , 2- dihidroindol-3- ? /T **0 ¡lidenmetil)-1 H-pirroI-2- (Yvd* 0 ácido carboxílico metil éster 4 5- (5-Cloro-2-oxo-1 , 2- di idroindol-3-' ¡lidenmetil)-4-metil-1 H- Y ° pirrol-2 ácido carboxílico etil éster 5 5-(5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-4-metil-1 H- pirrol-2 ácido H carboxílico 6 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-4-metil-1 H- pirrol-2 ácido carboxílico (3-pirrolidin- 1-ilpropil) amida 7 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindoI-3- ílidenmetil)-4-metil-1 H- pirrol-2 ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 8 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindoI-3- H ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (2- dietilaminoeti!) amida 9 5- (2-Oxo-6-fenil-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetii)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 10 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) metilamida 11 5- (2-Oxo-6-fenil-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- íVvo o ^ ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) metilamida 12 3-Metil-5-(2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (3- dieti!aminopropil) amida 13 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2 ácido M carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 14 3- etil-5- (2-oxo-6-fenil- 1 , 2-dihidroindol-3- H ilidenmetil)-1 H-pirrol-2 ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 15 5- (5-Metoxi-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- iiidenmetil)-3-metil-1 H- pirro! 2-ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 16 5- (6-Metoxi-2-oxo- , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirroi 2-ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 17 3- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol- 1 -ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 18 3- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil) 4, 5, 6, 7- 8 YVW1 * tetrahidro-2H-isoindoI- 1 -ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 19 3- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol- H r 1 -ácido carboxílico (3- ? pirrolidin-1-ilpropil) amida 20 3- (2-Oxo-6-pir¡din-3-il- Q . 1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol- 1-ácido carboxílico (2- dietilamínoetií) amida 21 4-Benzoil-5- (5-bromo- 2-???-1 , 2-dihidroindol- 3-ilidenmetil)-3-metil- 1 H-pirrol-2-ácido H carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 22 4-Benzoü-5- (5-bromo- 2-0X0-1 , 2-dihidroindol- 3-ilidenmetil)-3-metil- 1 H-pirrol-2-ácido carboxilico (3-morfolin- 4-ilpropil) amida 23 4-Benzoil-3-metil-5-(2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol- 2- ácido carboxílico (3- H pirrolidin-1 -ilpropii) amida 24 4-Benzoil-5- (5-bromo- 2-0X0-1 , 2-dihidroindol- 3-ilidenmetil)-3-metil- 1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (3-pirrolidin- 1-ilpropi!) amida 25 4-Benzoil-3-metil-5-(2- oxo-6-fenil-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (3- pirrolidin-1-ilpropil) amida 26 4-Benzoil-5- (6-metoxi- 2-0X0-1 , 2-dihidroindol- 3-iiidenmetil)-3-metil- 1 H-pirrol-2 -ácido carboxílico (3-pirrolidin- 1-ilpropil) amida 27 4-Benzoil-5- (5-metoxi- 2-oxo- , 2-dihidroindol- 3-ilidenmetil)-3-metil- 1 H-pirrol-2-ácido n carboxílico (3-pirrolidin- 1-ilpropil) amida 28 4-Benzoil-5- (5-fluoro-2- - 0 oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxílico (3-pirrolidin- 1-ilpropil) amida 29 0 4-Acetil-5-(5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- il¡denmetil)-3-metil-1 H- pirroi-2-ácido carboxilico (3- dietilaminopropil) amida 30 4-Aceti-5-(5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (3-pirrolidin- 1-ilpropil) amida 31 4-Acetil-5- (5-bromo-2- 0 oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-meti-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (3-morfolin- 4-ilpropil) amida 32 0 4-Acetil-5- (5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (3-hidroxi- propii) amida 33 o 4-Acetil-5-(5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (2-hidroxi- etil) amida 34 0 4-Acetil-5-(5-bromo-2- — » oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (2-morfolin- 4-il-etil) amida 35 0 4-Acetil-5-(5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (2-pirrolidin- 1-il-etil) amida 36 4-Acetil-5-(5-bromo-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ¡l¡denmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxílico [2- (4- hidroxi-fenil)et¡llamida 37 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- 5 dihidroindol-3- iiidenmetil)-2-isoprop¡l- 4-fen¡l-1 H-pirrol-3-ác'ido carboxílico (3- d¡etilaminopropil)amida 38 5-(5-Bromo-2-oxo-1, 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-2-isopropil- 4-fenil- 1H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- 10 pirrolidin-1-ilpropil) amida 39 5-(5-Bromo-2-oxo- ,2- i ,J 0 N-' dihidroindol-3- r H ilidenmetil)-2-isopropil- 4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 40 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- Q iM~-0- dihidroindol-3- 15 ilidenmetil)-2-isoprop¡l- 4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido H carboxílico [3- (4-metil- piperazin-1-il)-propil] amida 41 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-2-isopropil- 4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico 20 42 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-2-metil-4- fenil-1 H-pirrol-3-ácido H carboxílico (2-pirroiidin- 1-il-etil) amida 43 5-[6-(2- etox¡-fen¡I)-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmet¡I]-2-metil- 4- rr< fenil-1 H-pirrol-3-ácido Q. - carboxílico (2-pirrolidin- 1-il-etil) amida 44 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- Q i dihidroindoI-3- ilidenmetil)-2-metil-4- a- G* fenil-1 H-pirrol-3-ácido ? carboxílico (2- dimetilamino-etil) amida 45 5-[6-(2- etoxi-fenil)-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil]-2-metil- 4- fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dimetilamino-etii) amida 46 5-(5 Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidro¡ndol-3- ilidenmetil)-2-metil-4- fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster 47 5- (-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihídroindol-3- ilidenmetil)-2-metil-4- fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 48 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindol)-3- ilidenmetil)-2, 4- i % Va d¡metil)-1 H- pirrol-3- H ácido carboxílico (2- dimetilamino-etil) amida 49 2, 4-Dimetil-5- (2-oxo-6- fen¡l-1 , 2-dihidroindoi-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- dimetilamino-etil) amida 50 5-(5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetii)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2- dimetilamino-etil) amida 51 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindo!-3- ilidenmetil)-2, 4-dimetiI- 1 H- pirrol-3-ácido carboxilico (2- dietilaminoetil) amida 52 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido H carboxilico (2-pirrolidin- 1-il-etil) amida 53 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- . „ ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (3-imidazol- 1-ilpropii) amida 54 5-[6-(2-Metoxi-fenil)-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2- dimetilamino-etil) amida 55 5-[6-(3- etoxi-fenil)-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil]-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2- dimetilamino-etil) amida 56 o 2, 4-Dimetii-5- (2-oxo-5- fenil-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- dietilaminoetii) amida 57 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-5- fenil-1 , 2 dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-il-etil) amida 58 2, 4-Dimet¡l-5- (2-oxo- fenil-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- H imidazol-1-ilpropil) amida 59 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-6- feníl-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 60 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-6- fenil-1 , 2-dihidroindol)- 3-ilidenmetil)-1 H-pirrol- 3-ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-il-etil) amida 61 2, 4-Dimetil-5- (2-0X0-6- fenil-1 , 2-d¡ idroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- imidazol-1 -ilpropil) amida 62 5- [6- (3, 5-Dicloro- o r- fenil)-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ¡lidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 63 2, 4-Dimetil-5- (2-oxo-6- O V piridin-3-il-l , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 64 2, 4-Dimeti-5- (2-oxo-6- O ft~- p¡ridin-3-il-1 , 2- dihidroindoi-3- ilidenmetil)-1 H- pirrol-3- 0 ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-il-etil) amida 65 2, 4-Dimetii-5-(2-oxo-6- p¡ridin-3-¡l-1 , 2- dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- dimetiiamino-propii) amida 66 2, 4-Dimeti!-5- (2-oxo-5- 0 fenil-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmet¡l)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- H dimetilamino-propil) amida 67 2, 4-Dimeíil-5- (2-oxo-5- fenil-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3- dietilaminopropii) amida 68 2, 4-Dimeíil-5- (2-oxo-6- fenil-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3- dietilamínopropil) amida 69 3- [4- (3-Dietilamino- prop¡lcarbamoil)-3, 5- dimetii-1 H-pirrol-2- ¡lmetilen]-2-oxo-2, 3- dihidro-1 H-indol-4-ácido carboxílico (3-cloro-4- metoxi-fenil) amida 70 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ¡lidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3- dietilaminopropil) amida 71 5-(5-Bromo-2 -oxo-1 , 2- dihidroindol-3- iüdenmetil-2, 4- düsopropil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- ? dietílaminoetil) amida 72 / 0 µ 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindol-3- ilidenmet¡l)-2, 4- düsopropil-1 H-pirrol-3- H ácido carboxílico (3- diet¡iaminopropil)amida 73 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- _/ °- ? dihidroindol-3- ilidenmetil)-2, 4- diisopropil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3- pirrolidin-1-ilpropil) amida 74 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2- dihidroindol-3- ÍJ <~? ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (piridin-4- ¡Imetil) amida 75 5- [6- (4-Butil-fenil)-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- r-, ¡lidenmetil]-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin- 1-iI-etil) amida 76 5-[6-(5-lsopropil-2- o metoxi-fen¡l)-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ¡lidenmetilJ-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin- -il-etil) amida 7 5- [6- (4-Etil-fenil)-2- 0 oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil]-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido .JO ¾ carboxílico (2-pirrolidin- 1 -il-etil) amida 78 5-[6- (2, 4-Dimetox¡- C "i- fenil)-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3- ¡l¡denmet¡l]-2, 4- dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin- 1 -il-etil) amida 79 5- [6- (3-Isopropil-fenil)- 2-OXO-1 , 2-dihidroindol- 3-ilidenmetil]- 2, 4- M dimetil- H-pirrol-3-ácido -A carboxílico (2-pirrolidin- 1-ii-etil) amida 80 5- (5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- o dihidroindol-3- ilidenmetil)-2, 4-dimetil- H- pirrol-3-ácido M carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 81 3- [4- (2- o "- dietilaminoetilcarbamoil) -3, 5-dimetil-1 H-pirrol-2- ilmetilen]-2-oxo-2, 3- CH dihidro-1 H-indol-6-ácido carboxílico 82 5- (5-Dimetilsulfamoil-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- iiidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin- 1 -il-etil) amida 83 5-[5- (3-Cloro- fenilsulfamoil)-2-oxo-1 , CXX, 0 kN 2-dihidroindol-3- ilidenmetil]- 2, 4-dimetiI- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidín- 1-iletil) amida 84 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo-5- (p¡ridin-3-¡lsulfamo¡l)-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil]-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-il-etil) amida 85 3-[3, 5-Dimetil-4- (4- metil-piperazina-1- carbonil)-1 H-pirrol-2- ilmetilen]-4- (2-hidroxi- et¡l]-1 , 3-d¡hidraindoI-2- ona 86 3- [3, 5-Dimetil-4- (4- metil-piperazina-1 - carbonil)-1 H-pirrol-2- ilmetilen]-2-oxo-2, 3- d¡hidro-1 H-indol-5-ác¡do sulfónico fenilamida 87 5-(5-dimetilsulfamoil-2- oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 88 5-[5- (3-Cloro- fenilsulfamoil)-2-oxo-1 , Q vi- 2-dihidroindol-3- ¡lidenmetii]- 2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida 89 3- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-3- ¡lidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol-1 - ácido carboxílico (2- dimetilamino-etil)-amida 90 3-(2-Oxo-1 , 2-dihídro- indol-3-ilidenmetil)-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H- isoindol-1 -ácido C "° -! carboxílico etil éster 98 3- (5-Dimetilsulfamoil-2- O oxo-1, 2-dihidro-indol-3- ilidenmet¡l)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindoI-1 - ácido carboxílico etil éster 99 3- (2-0x0-5- fenilsu!famoil- , 2- dihidro-indol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol-1- ácido carboxílico etil éster 100 3- (6-Bromo-2-oxo- , 2- dihido-indol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol-1 - ácido carboxílico etil éster 101 3- (2-Oxo-6-fenil-1 , 2- <7 dihidro-indol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol-1- ácido carboxílico etil éster 102 3- (3-Etoxicarbonil-4, 5, 6, 7~tetrahidro-2H- N' * ¡soindol-1 -ilmetilen)-2- oxo-2, 3-dihidro-1H- indol-6-ácido carboxílico 103 3- (6-Metoxi-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-3- ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro- 2H-isoindol- 1 -ácido carboxílico etil éster 104 3- (5-lsopropilsulfamoil- 2- OXO-1 , 2-dihidro-indol- 3- ilidenmetii)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H-isoindol-1 - ácido carboxílico etil éster 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- 0 C'"S dihidro-indol- (3Z)- 0 iiidenmetilJ-2, 4- dimetil-1 H-pirrol- 3- 399 [M-1] ácido carboxílico (2- acetilamino-etil)- amida 5-[5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 383 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- acetilamino-etil)amida 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 365 [M-1] 3- ácido carboxílico (2-acetilamirio-etil)- amida 0 5- [5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 500 [M+1] ácido carboxílico [3- 502 [M+1] (2-oxo-tetrahidro- pirimidin-1-il)-propil]- amida 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 454 [M-1] ácído carboxílico [3- (2-oxo-tetrahidro- pirimidin-1-il)-propil]- amida 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 438 [M-1] ácido carboxílico [3- (2-oxo-tetrahidro- pirimidin-1-il)-propil]- amida 139 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- c 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 3-ácido carboxílico [3- 422 [ +1] (2-oxo-tetrahidro- pirimidin-1-il)-propil]- amida 0 o 5- [5-Ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- i!idenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 447 [M+1] i: ; =o ácido carboxílico [3- (2-oxo-tetrahidro- pirimidin-1-il)-propil]- amida 141 C Trifluoro-acetato-4- [2- ({5- [5-bromo-2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol- 486 [M+1] (3Z)-ilidenmetil]-2, 4- 488 [M+1] , CÍ H dimetil-1 H-pirrol-3- carbonil}amino)-etil]-2- oxo-piperazin-1-io; 126 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- .-— c«, 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 381 [M+1] 3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil)-amida 127 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)- Nidenmetil]-2, 4- 415 [M+1] dimetil-1 H-pirroi-3- ácido carboxílico (2- dietilaminoetil)-amida 128 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- f « ilidenmetil]-2, 4- 379 [M+1] dimetil-1 H-pirroi-3- ácido carboxílico (2- pirrolidin-1- iletil)- amida 129 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 397 [M+1] , F dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-iletil)am¡da 130 5- [5-Cloro-2-oxo- , 2- dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 413 [M+1] 3-ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-iletil)- amida 131 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol- C (3Z)-ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 353 [M+1] ácido carboxílico (2- dímetilaminoetil)- amida 132 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 371 [M+1] ácido carboxílico (2- dimetilaminoetil)- amida 142 5- [5-Ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmet¡l]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 430 [M-1 ] ;: ¦ >=o ácído carboxílico [3- (2-oxo- pirrolidin-1 -il)- propil]-amida 43 5- [5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 470 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- 472 [M-1] ácido carboxílico [2- (2-oxo-ímidazolidin-1- il)-etü]-amida 150 {4- [2- ({5- [5-Fluoro-2- oxo-1 , 2-dihidro-indol- !f o (3Z)-ilidenmet¡l]-2, 4- i— < dimetil-1 H-pirrol-3- 498 [M+1] carbonil}-amino)-etil]- piperazin-1-il}-ácido acético etil éster 53 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 362 [M-1] 3-ác¡do carboxílico [2- !¦ · -0 (cianometil-amino)- etil]-amida 154 5- [5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- il¡denmet¡l]-2, 4- 51 1 [M-1] dimetíl- H-pirrol-3- 513 [M-1] ácido carboxílico [3- (2-oxo-azepan-1-il)- propil]-amida 155 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)- 0 ilidenmetii]- 2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 469 [M+1] ácido carboxílico [3- (2-oxo-azepan-1 -il)- propil]-amida 156 5- [5-Fluoro-2-oxo- , 2-dihidro-indol- (3Z)- ¡iidenmetil]-2, 4- dimetii-1 H-pirrol-3- 453 [M+1] ácido carboxílico [3- (2-oxo-azepan-1 -il)- propil]-amida 157 o 2, 4-Dimetil-5- {2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 435 [M+1] 3-ácido carboxílico [3- i. ' ?- 0 (2-oxo-azepan-1 -il)- propil]-amida 164 5- [5-Cloro-2-oxo- , 2- ? dihidro-indol-(3Z)- ilidenmeti!]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 410 [M-1] ácido carboxílico [2- (2-ciano- etilamino)- etiij-amida 165 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 394 [M-1] ácido carboxílico [2- 0 (2-ciano-etilamino)- etilj-amida 166 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol- 376 [M-1] 3-ácido carboxílico [2- (2-ciano- etilamino)- etil]-amida 167 5- [5-Ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 401 [M-1] ácido carboxílico [2- (2-ciano-etilamino)- etil]-amida 168 Trifluoro-acetato-4- [2- ({5- [5-cloro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 440 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- carbonil}-amino)-etil]- 2-oxo-piperazin-1 -io; 68 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 424 [M-1] ácido carboxílico [2- (4-metil-piperazin-1 - il)-etil]-amida 175 5- [5-Bromo-2-oxo-1, 2-dihidro-indol-(3Z)- 0 ilidenmetil]-2, 4- 498 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- 500 [M-1] ácido carboxílico [2- H (3, 5-dimetil-piperazin- 1-¡l)-et¡l]-amida 176 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- Vf,'~- M », 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirro!- 422 [M+1] 3-ácido carboxílico [3- =0 (4-metil-piperazin-1- i!)-propil]-amida 177 5- [5-Fluoro-2-oxo-1, 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 438 [ -1] h ácido carboxílico [3- (4-metil-piperazin-1 - il)- N propil]-amida 78 5- [5-Cioro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil)-1 H-pirrol)-3- 454 [M-1] ácido carboxílico [3- (4-metil-piperazin-1- il)- propilj-amida 179 5- [5-Bromo-2-oxo- , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 498 [M-1] dimetil-1 H-pirro!-3- 500 [M-1] ácido carboxílico [3- (4-metil-piperazin-1- il)-propil]-amida 180 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-1H- pirrol-3-ácido 482 [M-1] carboxílico [2-(4- bencil-piperazin-1 -il)- etil]- amida 181 5- [5-Fiuoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- il¡denmetil]-2, 4- *s; -„'* dimetil-1 H-pirrol-3- 500 [M-1] ácido carboxílico [2- || I (4-bencil-piperazin-1 - il)- etil]-amida 82 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- ? ¾^ dihidro-indol-(3Z)- ¡lidenmetil]-2, 4- · dimetil-1 H-pirrol-3- 517 [M-1] ácido carboxílico [2- (4-bencil-piperazin-1 - il)- etilj-amida 183 5- [5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- *. ) ilidenmetii]-2, 4- 560 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- "562 [M-1] ácido carboxílico [2- (4-bencil-piperazin-1 - il)- etil]-amida 184 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- i '^? " dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- 480 [M+1] ácido carboxílico (3- pirrolidin-1 -il-2-ona)- amida 185 Trifluoroacetato 4- [2- ({5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- 440 [M-1] dimetil-1 H-pirrol-3- carbonil} amino)-etil]- 2-oxo-piperazi.n-1-io 186 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- ? ? dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirroi-3- ácido carboxílico (3- pirrolidin-1-il-2-ona)- amida 187 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- f dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3- pirrolidin-1 -il-2-ona)- amida 188 5- [2-OXO-1 , 2-dihidro- Í -° indol-(3Z)-ilidenmetii]- 2, 4-dimetil-1 H-pirroI- 3-ácido carboxílico (3- pirrolidin-1 -il-2-ona)- amida 189 5- [5-Cloro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-2, 4- _ " dimetil-1 H-pirrol-3- ?1 C F . C O .H ácido carboxílico (2- piridin-2-iletil)-amida 190 sal de trifluoroacetato de 5- [5-Fluoro-2-oxo- 1 , 2-dihidro-¡ndol-(3Z)- ? >- 0 C F j C O .H ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- piridin-2-iletil)-amída 91 sal de clorhidrato de 5- [2-???-1, 2-dihidro- indol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-d¡metil-1 H-pirrol- 3-ácido carboxílico (2- p¡ridin-2-iletil)-amida 92 sal de trifluoroacetato tt ^ de 5- [5-Bromo-2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- B r . ilidenmetilj-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2- piridin-2-iletil)-amida 193 5- [5-Fluoro-2-oxc~1 , 2- di idro-indol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-etilaminoetil)- i ! >=0 amida N 194 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-¡ndol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-dimet¡l-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-aminoetil)- amida 195 5-[5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro- o indol-(3Z)-ilidenmetiI]-2, 4- dimetil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietil-N- oxoaminoetil)-amida 196 O H 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-etil-N-hidroxi- aminoetil)-amida 197 5-[5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro- indol-(3Z)-ilidenmetil]-1 H- ,? ' ? " Oí pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilamino-2-hidroxietil)- amida 198 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol)-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-d¡metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico [2-etil-2-(2- hidroxietil)aminoet¡Q-amida 199 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ác¡do carboxílico [2-etil-2-(1- hidroxietil)aminoetil]-amida 200 5- [5-Ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro- indol-(3Z)-ilidenmetil]-2, 4- 0 dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-N- acetilaminoetil)-amida 201 5-[5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro- 5 indol-(3Z)-ilidenmetil]-2, 4- dirnetil-1 H-pirrol-3-ácido '; H M, =Q carboxilico (carboximetil)- amida 202 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico [2-(2-hidroxetiiamino)etil]- amida 10 203 trifluoroacetato de 5- [5-Ciano- 2-???-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)- ilidenmetil]-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-piridin-2-iletil)- amida 204 trifluoroacetato de 5- [5- Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro- indol-(3Z)-ilidenmetil]-1 H- 15 pirrol-3-ácido carboxilico (3- pirrolidin-1 -il-2-onapropil)- amida 205 3- (3, 5-dimetilpirrol-2- ilmetiliden)-1- (4- metilpiperazin-1 -ilmetil)-2- indolinona 206 3- (3, 5-dimetiIpirrol-2- ilmetlliden)-1-(pirrolidin-1- 20 ilmetil)-2-indolinona Los números de los compuestos corresponden a los números del ejemplo en la sección de ejemplos. Es decir, la síntesis del compuesto 1 en el cuadro 1 se describe en el ejemplo 1. Los compuestos presentados en el cuadro 1 son ejemplares solamente y no se consideran como limitantes del alcance de esta invención de ninguna forma. Los inhibidores adicionales de la proteína cinasa que pueden ser utilizados en este método incluyen 3- (3, 5-dimetilpirrol-2-ilmetiliden) -2-indoünona (su 5416); 3- [3, 5-dimetil-4- (2-carboxietil) pirrol-2-ilmetiliden] -2-indolinona (su 6668), y 3- [3- (2-carboxietil)-5- metilpirrol-2-ilmetiliden)-2-indol¡nona.

B. Compuestos inhibidores selectivos de ciclooxiqenasa-2 de las fórmulas (11) v (III): Los ejemplos no limitantes de los inhibidores COX-2 que pueden ser utilizados en la presente invención se Identifican en los cuadros II y III a continuación.

CUADRO II Compuesto industria/ Referencia Dosis Nombre del investigador 1-Metilsulfonil-4 WO 96/38418. [1 , 1- dimetii4 (4- WO 95/30656. fluoro- WO 95/30652. feni!)ciclopenta- WO 96/38442. 2,4-d¡en-3-il]benceno 4, 4-dimetil-2-fenil-3- [4-(metilsulfonil)fenil ]ciclo-butenona 2-(4-metoxifenil)- EP 799823 4-metil- -(4-sulfamoilfenil)-pirrol N-[5-(4- RWJ-63556 fluoro)fenoxi]t¡ofe n-2- metansulfon-amida 5 (E)~(3,5-d¡-tert- S-2474 EP 595546 butil-4-hidrox¡) benciliden-2-et¡l 1 ,2-isotiazolidin- 1 ,1-dióxido 3-fomilamino-7- T-614 DE 38/34204 metilsulfonilamino -6- fenoxi-4H-1-benzopiran-4-ona Bencensulfonami celexocib US 5466823 da, 4- (5-(4-metilfenil)-3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1- il)- CS 502 (Sankyo) 2-[(2-cloro-6- Lumiracoxib WO 99/11605 fluorofen¡l)amino] -5- metilbencen (Cox- 89) ácido acético Compuesto Industria/ Referencia Dosis Nombre del investigador 5-cloro-6'-metil-3- etoricoxib (MK WO 98/03484 [4- 663) (metilsulfonil)fenil 1-2,3'- bipiridin BMS 34070 US 6180651 15-30 mg/día meloxicam US 4233299 nimesulida US 3840597 CUADRO lll WO 99/30721 WO 99/30729 US 5760068 WO 98/15528 WO 99/25695 WO 99/24404 WO 99/23087 FR 27/71005 EP 9211 19 FR 27/70131 WO 99/18960 WO 99/15505 WO 99/15503 WO 99/14205 WO 99/14195 WO 99/14194 WO 99/13799 GB 23/30833 US 5859036 WO 99/12930 WO 99/1 1605 WO 99/10332 WO 99/10331 WO 99/09988 US 5869524 WO 99/05104 US 5859257 WO 98/47890 WO 98/47871 US 5830911 US 5824699 WO 98/45294 WO 98/43966 WO 98/41511 WO .98/41864 WO 98/41516 WO 98/37235 EP 86/3134 JP 10/175861 US 5776967 WO 98/29382 WO 98/25896 ZA 97/04806 EP 84/6,689 WO 98/21 195 GB 23/19772 WO 98/1 1080 WO 98/06715 WO 98/06708 WO 98/07425 WO 98/04527 WO 98/03484 FR 27/51966 WO 97/38986 WO 97/46524 WO 97/44027 WO 97/34882 US 5681842 WO 97/37984 US 5686460 WO 97/36863 WO 97/40012 WO 97/36497 WO 97/29776 WO 97/29775 WO 97/29774 WO 97/28121 WO 97/28120 WO 97/27181 WO 95/11883 WO 97/14691 WO 97/13755 WO 97/13755 CA 21 80624 WO 97/11701 WO 96/41645 WO 96/41626 WO 96/41625 WO 96/38418 WO 96/37467 WO 96/37469 WO 96/36623 WO 96/36617 WO 96/31509 WO 96/25405 WO 96/24584 WO 96/23786 WO 96/19469 WO 96/16934 WO 96/13483 WO 96/03385 US 5510368 WO 96/09304 WO 96/06840 WO 96/06840 WO 96/03387 WO 95/21817 GB 22/83745 WO 94/27980 WO 94/26731 WO 94/20480 WO 94/13635 FR 27/70, 131 US 5859036 WO 98/47890 US 5830911 US 5776967 WO 98/22101 DE 9/753463 WO 98/21 195 WO 98/16227 US 5733909 WO 98/05639 WO 97/44028 WO 97/44027 WO 97/40012 WO 97/38986 US 5677318 WO 97/34882 WO 97/16435 WO 97/03678 WO 97/03667 WO 96/36623 WO 96/31509 WO 96/25928 WO 96/06840 WO 96/21667 WO 96/19469 US 5510368 WO 96/09304 GB 22/83745 WO 96/03392 WO 94/25431 WO 94/20480 WO 94/13635 JP 09052882 GB 22/94879 WO 95/15316 WO 95/15315 WO 96/03388 WO 96/24585 US 5344991 WO 95/00501 US 5968974 US 5945539 US 5994381 US 6180651 Los pirazoles se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 95/163 6. Los pirazoles se pueden preparar adicionalmente mediante los métodos descritos en WO 95/15315. Los pirazoles también se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/03385. Los análogos de tiofeno se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 95/00501. La preparación de los análogos de tiofeno también se describe en WO 94/15932. Los oxazoles se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 95/00501. La preparación de los oxazoles también se describe en WO 94/27980. Los isoxazoles se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/25405. Los imidazoles se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/03388. La preparación de los imidazoles también se describe en WO 96/03387. Los inhibidores de la ciclopenten ciclooxigenasa-2 se pueden preparar mediante los métodos descritos en la Patente de E.U.A. No. 5,344,991. La preparación de los inhibidores de la ciclopentano Cox-2 también se describe en WO 95/00501. Los compuestos terfenilo se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/16934. Los compuestos tlazol se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/03,392. Los compuestos piridina se pueden preparar mediante los métodos descritos en WO 96/03392. La preparación de los compuestos piridina también se describe en WO 96/24585. El celecoxib utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en la Patente de E.U.A. No. 5,466,823. El valdecoxib utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en la Patente de E.U.A. No. 5,633,272. El parecoxib utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en la Patente de E.U.A. No. 5,932,598. El rofecoxib utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en la Patente de E.U.A. No. 5,968,974. El tabaco japonés JTE-522 utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en JP 90/52,882. The lumiracoxib (Cox- 89) utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en WO 99/11605. El etoricoxib (MK 663) utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en WO 98/03484. El BMS 34070 de Bristol Meyers Squibb utilizado en las combinaciones terapéuticas de la presente invención se puede preparar de la manera establecida en la Patente de E.U.A. No. 6,180,651. Las referencias anteriormente mencionadas listadas en los cuadros II y II! anteriores describen diversos inhibidores de COX-2 adecuados para uso en la presente invención descritos aquí, y procedimientos para su elaboración, y son incorporadas en la presente invención individualmente o como referencias. Los inhibidores COX-2 preferidos que pueden ser utilizados en la presente invención incluyen, pero no se limitan a: C1 ) JTE-522, 4-(4-ciclohexil-2-metiloxazol-5-il)-2-fluorobencensulfonamida; C2) 5-cloro-3-(4-(metilsulfonil)fenil)-2-(metil-5-piridinil)piridina; C3) 2-(3, 5-d¡fluorofen¡l)-3-4-(metilsulfon¡l)fenil)-2-ciclopenten-1-ona; C4) 4- [5- (4-metilfenil)-3- (trifluorometii)- H-pirazol-1-il]-bencensulfonamida; C5) rofecoxib, 4- (4- (metilsulfonil) fenil]-3-fenil-2 (5H)-furanona; C6) 4- (5-metil-3-fenilisoxazol-4-il) bencensulfonamida; C7) N-[[4-(5-metil-3-fenilisoxazol-4il]fenil]sulfonil]propanamida; 4- [5- (4-clorofenil)-3- (trifluorometil)-l H-pirazol-1-il] bencensulfonamida; C9) 6-[[5-(4-clorobenzoil)-1 ,4-dimetiM H-p¡rroi-2-il]met¡!]-3 (2H)-piridazinona; C12) N- (4-nitro-2-fenoxifen¡l) metansulfonamida; C13) 3-(3,4-difluorofenoxi)-5,5-dimetii-4-[4-(metilsulfonil)fenil]-2(5H)-furanona; C15) N-[6-[(2, 4-difluorofenil) tio] -2, 3-dihidro-1-oxo-1 H-inden-5-il] metansulfonamida; 3- (4-clorofenil)-4- [4- (metilsulfonil) fenil]-2(3H) -oxazolona; C17) 4- [3- (4-fluorofenil)-2, 3-dihidro-2-oxo-4-oxazolil] bencensulfonamida; C18) 3-[4-(met¡lsulfonil)fenil]-2-fenil-2-ciclopenten-1-ona; 4-(2-metil-4-fenil-5-oxazolii) bencensulfonamida; C20) -(4-fluorofenil)-4-[4-(metilsulfonil)fenil]-2-(3H)-oxazolona.

C21 ) 5- (4-fluorofenil)-1- [4- (metiisulfonil) fenil]-3- (trifluorometil)-l H-pirazol; C22) 4- [5-fenil)-3- (trifluorometil)-1 H-pirazol-1-il) bencensulfonamida; C23) 4- [1 -fenil-3- (trifluorometil)-l H-pirazol-5-il] bencensulfonamida; C24) 4- [5- (4-fluorofenil)-3- (trifluorometil)-l H-pirazol-1 -il] [bencensulfonamida; C25) N-[2-(ciclohexiloxi)-4-nitrofenil] metansulfonamida; C26) N-[6-(2,4-difluorofenoxi)-2,3-dihidro-1 -oxo-1 H-inden-5-il] metansulfonamida; C27) 3-(4-clorofenoxi)-4-[(metilsulfonil)amino]bencensulfonamida; C28) 3- (4-fluorofenoxi)-4- [(metilsulfonil) amino] bencensulfonamida; C29) H2 3-[(1-meti!-1H-imidazol-2-il)tio]-4 [(metilsulfonil) amino] bencensulfonamida; C30) CH- 5, 5-dimetil-4- [4- (metilsulfonil) fenil] -3-fenoxi-2(5H)-furanona; C31 ) N-[6-[(4-etil-2-tiazolil)tio]-1 ,3-dihidr< isobenzofuranil]metansulfonamida; C32) 3- [(2, 4-diclorofenil) tio]-4- [(metilsulfonil)] amino] bencensulfonamida; 1-fluoro-4- [2- [4- (metilsulfonil) fenil] ciclopenten-1-il] benceno; C34) 4- [5- (4-clorofenil)-3- (difluorometil)-l H-pirazol-1- il] bencensulfonamida; C35) 3- [1- [4-(metilsulfonil) fenil]-4- (trifluorometil)-1 H-imidazoi-2-il] piridiha; C36) 4- [2- (3-piridinil)-4- (trifluorometil)-1 H-imidazol-1-il] bencensuifonamida; C37) 4-[5-(hidroximetil)-3-fenilisoxazol-4-il]bencensulfonamida; C38) (4-clorofenil)-2, 3-dihidro-2-oxo-4-oxazolil] bencensulfonamida; 4- [5-(difluorometil)-3-fenilisoxazol-4-¡I] bencensulfonamida; C40) [1 , 1 ': 2', 1 "-terfenil]-4-sulfonamida; C41 ) 4- (metilsulfonil)-l , V, 2], 1 "-terfenilo; C42) 4- (2-fenil-3-piridinil) bencensulfonamida; C43) N- (2, 3-d¡h¡dro-1 , 1-dióxido-6-fenox¡-1 , 2-bencisotiazol-5-il) metansulfonamida; y C44) N- [3- (formilamino)-4-oxo-6-fenoxi-4H-1-benzopiran-7-iljmetansulfonamida; C45) C49) lumiracoxib (COX-189) Acido 2-[(2~cloro-6-fluorofenil) amino]-5-metiIbencenacético C50) etoricoxib (MK 663) 5-cloro-6'-metil-3- [4- (metiisulfonil) fenil]-2, 3'-bipirid¡na C51 ) BMS 34070 Los inhibidores COX-2 más preferidos que pueden ser utilizados en la presente invención se seleccionan a partir del grupo que consiste de: 0 JTE-522, 4- (4-ciclohexil-2-metiloxazol-5-il)-2-fluorobencensulfonamida; II) 5-cloro-3-(4-(metilsulfonil)fenil)-2-(metiI-5-p¡ridinil)pirid¡na; III) 2-(3,5-difluorofenil)-3-4-(metilsulfonil)fenil)-2-ciclopenten-1-ona; IV) Cf- 4- [5- (4-metilfenil)-3-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -il]-] bencensulfonamida; V) rofecoxib, 4-(4-(meti!sulfonil)fenil]-3-fenil-2(5H)-furanona; VI) 4- (5-metil-3-fenilisoxazol-4-il) bencensulfonamida; VII) N-[[4-(5-metil-3-fenilisoxazol-4il] fenil] sulfonil] propanamida; VIII) 4- [5- (4-clorofenil)-3- (trifluorometii)-l H-pírazol-1 -il] bencensulfonamlda; y IX) lumiracoxib (COX-189) Acido 2-[(2-cloro-6-fluorofenil)amino]-5-metilbencenacético Incluso más preferiblemente, los inhibidores COX-2 que pueden ser utilizados en la presente invención incluyen, pero no se limitan a celecoxib, valdecoxib, parecoxib, rofecoxib, lumiracoxib y tabaco japonés JTE-522. También incluidas en la combinación de la invención están las formas isoméricas, profármacos y tauíómeros de los compuestos descritos y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Las sales farmacéuticamente aceptables ilustrativas se preparan a partir de ácidos fórmico, acético, propiónico, succínico, glicólico, glucólico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, glucurónico, maléico, fumáríco, pirúvico, aspártico, glutámico, benzoico, antranílico, mesílico, esteárico, salicílico, p-hidroxibenzoico, fenüacético, mandélico, embónico (pamoico), metansulfónico, etansulfónico, bencensulfónico, pantoténico, toluensulfónico, 2-hidroxietansulfónico, sulfanífico, ciclohexilaminosulfónico, algénico, tihidroxibutírico, galactárico y galacturónico.

Utilidad Los compuestos de la presente invención son inhibidores de las proteína cinasas (PKs) y de la enzima ciclooxigenasa, en particular de la enzima ciclooxigenasa-2, y por lo tanto son útiles en el tratamiento del cáncer. Las PKs cuya actividad catalítica está modulada por los compuestos de la fórmula (I) de esta invención incluyen a las proteínas tirosina cinasas tales como ios receptores de tirosina cinasas (RTKs), tirosina cinasas celulares (CTKs), y serina-treonina cinasas (STKs). La transducción de la señal mediada por las RTK se inicia por la interacción exíracelular con un factor de crecimiento específico (ligando), seguido por la dimerización del receptor, estimulación transitoria de la actividad intrínseca de la proteína tirosina cinasa y fosforilación. Por lo tanto se crean los sitios de unión para las moléculas relacionadas con la transducción intracelular de la señal y se lleva a la formación de complejos con un espectro de moléculas citoplásmicas de señalización que facilita la respuesta celular apropiada (por ejemplo, división celular, efectos metabólicos sobre el microambiente extracelular, etc.). Véase, Schlessinger y Ullrich, 1992, Neuron 9: 303-391. Se ha mostrado que los sitios de fosforilación de la tirosina sobre los receptores del factor de crecimiento funcionan como sitios de unión de alta afinidad para los dominios SH2 (homología src) de las moléculas de señalización. Fantl et al., 1992, CeJI 69: 413-423, Songyang et al., 1994, Mol Cell. Biol. 14: 2777-2785, Songyang et al., 1993, Ce!! 72: 767-778, y Koch et al., 1991 , Science 252: 668-678. Diversas proteínas del sustrato intracelular que se asocian con las RTKs han sido identificadas. Estas se pueden dividir en dos grupos principales: (1 ) los sustratos que tienen un dominio catalítico, y (2) los sustratos que carecen de dicho dominio pero los cuales sirven como adaptadores y se asocian con moléculas catalíticamente activas. Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778. La especificidad de las interacciones entre los receptores y los dominios SH2 de sus sustratos se determina por los residuos de aminoácidos que rodean inmediatamente al residuo fosforilado de tirosina. Las diferencias en las actividades de unión entre los dominios SH2 y las secuencias de aminoácidos que rodean al residuo de fosfotirosina sobre receptores particulares son consistentes con las diferencias observadas en sus perfiles de fosforilación de sustrato. Songyang et al., 1993, Cell 72: 767-778. Estas observaciones sugieren que la función de cada RTK se determina no solamente por su patrón de expresión y de disponibilidad de ligando sino también por el arreglo de las rutas para transducción de la señal cascada abajo que son activadas por un receptor particular. Por lo tanto, la fosforilación provee un paso regulador importante el cual determina la selectividad de las rutas de señalización suministradas por los receptores específicos del factor de crecimiento, así como por los receptores del factor de diferenciación. Las STKs, siendo principalmente citosólicas, afectan la bioquímica interna de la célula, frecuentemente como una respuesta línea abajo a un evento PTK. Las STKs han sido implicadas en los procesos de señalización que inician la síntesis de ADN y la mitosis subsecuente que lleva a la proliferación celular. Por lo tanto, la transducción de la señal mediante PK resulta en, entre otras respuestas, proliferación celular, diferenciación, crecimiento y metabolismo. La proliferación celular anormal puede resultar en una amplia variedad de trastornos y enfermedades, incluyendo desarrollo de neoplasias tales como carcinoma, sarcoma, glioblastoma y hemangioma, trastornos tales como la leucemia, psoriasis, arteriosclerosis, artritis y retinopatía diabética y otros trastornos relacionados con el descontrol de la angiogénesis y/o vasculogénesis. No se requiere una comprensión precisa del mecanismo por medio del cual los compuestos de esta invención inhiben a las PKs con el objeto de practicar la presente invención. No obstante, a pesar de que no se desea atenerse a ningún mecanismo particular o teoría, se cree que los compuestos de la fórmula (1 ) ¡nteractúan con los aminoácidos en la región catalítica de las PKs. Las PKs típicamente poseen una estructura bi-lobular en donde el ATP parece unirse a la hendidura entre los dos lóbulos en una región en donde los aminoácidos están conservados entre las PKs. Se cree que los inhibidores de las PKs se unen mediante interacciones no covalentes tales como los enlaces de hidrógeno, fuerzas de van der Waals e interacciones iónicas en la misma región general en donde el ATP anteriormente mencionado se une a las PKs. Más específicamente, se piensa que el componente 2-¡ndolinona de los compuestos de la fórmula (I) se une en el espacio general normalmente ocupado por el anillo de adenina del ATP. La especificidad de una molécula particular por una PK se puede generar como el resultado de las interacciones adicionales entre los diversos sustituyentes en el núcleo de la 2-¡ndolinona y en los dominios de aminoácidos específicos para las PKs particulares. Por lo tanto, diferentes sustituyentes de indoiinona pueden contribuir para la unión preferencial a PKs particulares. La capacidad para seleccionar compuestos activos en diferentes sitios de unión del ATP (o de otros nucleótidos) hace a los compuestos de la fórmula (1 ) útiles en el direccionamiento de cualquier proteína con dicho sitio. Por lo tanto los componentes de la fórmula (I) descritos en la presente invención tienen utilidad en ensayos in vitro para dichas proteínas así como para la exhibición de efectos terapéuticos in vivo a través de la interacción con dichas proteínas. Adicionalmente, los compuestos de la fórmula (I) proveen un método terapéutico para el tratamiento de muchos tipos de tumores sólidos, incluyendo pero no limitados a carcinomas, sarcomas incluyendo sarcoma de Kaposi, eritroblastoma, glioblastoma, meningioma, astrocitoma, melanoma y mioblastoma. El tratamiento o la prevención de los tumores cancerosos no sólidos tales como la leucemia también se contempla por esta invención. Las indicaciones pueden incluir, pero no se limitan a los cánceres cerebrales, cánceres de la vejiga, cánceres ováricos, cánceres gástricos, cánceres pancreáticos, cánceres del colon, cánceres sanguíneos, cánceres del pulmón y cánceres del hueso. Los ejemplos adicionales, sin limitación, de los tipos de trastornos relacionados con la actividad ¡napropiada de la PK que los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para prevenir, tratar y estudiar, son trastornos proliferativos celulares, trastornos fibróticos y trastornos metabólicos. Los trastornos proliferativos celulares, los cuales se pueden prevenir, tratar o estudiar adicionalmente por la presente invención incluyen cáncer, trastornos proliferativos de los vasos sanguíneos y trastornos proliferativos de la célula mesangial. Los trastornos proliferativos de los vasos sanguíneos se refieren a los trastornos relacionados con la vasculogénesis anormal (formación de vasos sanguíneos) y angiogénesis (extensión de vasos sanguíneos). Mientras que la vasculogénesis y la angiogénesis desempeñan papeles importantes en una variedad de procesos fisiológicos normales tales como el desarrollo embrionario, formación del cuerpo lúteo, cicatrización y regeneración de órganos, éstas también desempeñan un papel importante en el desarrollo del cáncer en donde éstas resultan en la formación de nuevos capilares necesarios para mantener vivo a un tumor. Otros ejemplos de trastornos en la proliferación de vasos sanguíneos incluyen artritis, en donde nuevos vasos sanguíneos capilares invaden la articulación y destruyen el cartílago, y enfermedades oculares, como la retinopatía diabética, en donde los nuevos capilares en la retina invaden al vitreo, sangran y ocasionan ceguera. Dos RTKs estructuralmente relacionadas han sido identificadas para unirse al VEGF con una alta afinidad: el receptor de tirosina semejante a fms 1 (fit-1 ) (Shibuya et al., 1990, Oncoaene. 5: 519-524; De Vries et al., 1992, Science, 255: 989-991 ) y el receptor KDR/FLK-1 , también conocido como VEGF-R2. El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) ha sido reportado como un mitógeno específico de célula endotelial con actividad promotora del crecimiento de la célula endotelial in vitro. Ferrara & Henzel, 1989, Biochem. Biophvs. Res. Comm.. 161 : 851-858; Vaisman et al., 1990, J. Biol. Chem., 265: 19461-19566. La información establecida en la solicitud de patente de los E.U.A. números de serie 08/193,829, 08/038,596 y 07/975,750, sugiere fuertemente que el VEGF no solamente es responsable de la proliferación de la célula endotelial, sino que también es el principal regulador de la angiogénesis normal y patológica. Véase generalmente, Klagsburn & Soker, 1993, Current Bioloqy. 3 (10) 699-702; Houck, et al., 1992, J. Biol. Chem.. 267: 26031-26037. La vasculogénesis y la angiogénesis normales desempeñan papeles importantes en una variedad de procesos fisiológicos tales como el desarrollo embrionario, cicatrización, regeneración de órganos y procesos reproductivos en la hembra tales como el desarrollo del folículo en el cuerpo lúteo durante la ovulación y el crecimiento de la placenta después del embarazo. Folkman & Shing, 1992, J. Bioloaical Chem., 267 (16): 10931 -34. La vasculogénesis y/o angiogénesis descontrolada ha sido asociada con enfermedades tales como la diabetes así como con los tumores sólidos malignos que dependen de la vascularización para el crecimiento. Klagsbum & Soker, 1993, Current Bioloqv. 3 (10): 699-702; Folkham, 1991 , J. Nati. Cáncer lnst. 82: 4-6; Weidner, et al., 1991. New Enal. J. Med.. 324: 1-5. El supuesto papel del VEGF en la proliferación y migración de la célula endotelial durante la angiogénesis y la vasculogénesis indica un papel importante para el receptor KDR/FLK-1 en estos procesos. Las enfermedades tales como la diabetes mellitus (Folkman, 198, en Xlth Conqress of Thrombosis and Haemostasis (Verstraeta, et al., eds.), pp. 583-596, Leuven University Press, Leuven) y la artritis, así como el crecimiento del tumor maligno puede resultar a partir de la angiogénesis descontrolada. Véase por ejemplo, Folkman, 1971 , N. Enql. J. Med., 285: 1 182-1186. Los receptores a ios cuales el VEGF se une específicamente son un blanco terapéutico importante y eficaz para la regulación y modulación de la vasculogénesis y/o angiogénesis y una variedad de enfermedades severas las cuales implican el crecimiento celular anormal ocasionado por dichos procesos. Plowman, et al., 1994, DN&P, 7 (6): 334-339. Más particularmente, el papel altamente específico de los receptores de KDR/FLK-1 en la neovascularización los hace un blanco de elección para los métodos terapéuticos de tratamiento del cáncer y de otras enfermedades las cuales implican la formación descontrolada de vasos sanguíneos. Por lo tanto, la presente invención provee compuestos capaces de regular y/o modular la transducción de la señal por tirosina cinasa incluyendo la transducción de la señal por el receptor de KDR/FLK-1 con el objeto de inhibir o promover la angiogénesis y/o vasculogénesis, es decir, compuestos que inhiben, previenen, o interfieren con la señal transducida por KDR/FLK-1 cuando se activa por ligandos tales como VEGF. A pesar de que se cree que ios compuestos de la presente invención actúan sobre un receptor u otro componente a lo largo de la ruta de transducción de señal de la tirosina cinasa, éstos también pueden actuar directamente sobre las células tumorales que resultan de la angiogénesis descontrolada. A pesar de que la nomenclatura en las contrapartes de humano y murino del receptor genérico "FLK-I" difieren, éstas son, en muchos aspectos, intercambiables. El receptor de murino, Flk-1 , y su contraparte de humano, KDR, comparten una homología de secuencia del 93.4% dentro del dominio intracelular. De manera similar, el receptor FLK-1 de murino se une al VEGF de humano con la misma afinidad que el VEGF de ratón, y por consiguiente, se activa por el ligando derivado a partir de cualesquiera especies. Millauer et al., 1993, CeN, 72: 835-846; Quinn et al., 1993, Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 90: 7533-7537. El FLK-1 también se asocia con y subsecuentemente fosforila a la tirosina de los sustratos RTK de humano (por ejemplo, PLC-y o p85) cuando se co-expresan en las células 293 (fibroblastos de riñon embrionario de humano). Por lo tanto los modelos que dependen del receptor FLK-1 son directamente aplicables para la comprensión del receptor KDR. Por ejemplo, el uso del receptor FLK-1 de murino en los métodos, el cual identifica los compuestos que regulan la ruta de transduccion de la señal en murino, es directamente aplicable a la identificación de los compuestos que pueden ser utilizados para regular la ruta de transduccion de la señal en humano, es decir, la cual regula la actividad relacionada con el receptor KDR. Por lo tanto, los compuestos químicos identificados como los inhibidores de KDR/FLK-1 in vitro, se pueden confirmar en los modelos adecuados in vivo. Se ha demostrado que ambos modelos animales de ratón y de rata in vivo tienen un valor excelente para el análisis del potencial clínico de los agentes que actúan sobre la ruta de transduccion de la señal inducida por KDR/FLK-1. Por lo tanto, la presente invención provee compuestos que regulan, postulan y/o inhiben la vasculogénesis y/o angiogénesis al afectar la actividad enzimática del receptor de KDR/FLK-1 y al interferir con la señal transducida por KDR/FLK-1 . Por lo tanto, la presente invención provee un método terapéutico para el tratamiento de muchos tipos de tumores sólidos incluyendo, pero no limitado a, glioblastoma, melanoma y sarcoma de Kaposi, y carcinoma ovárico, de pulmón, de mama, de próstata, pancreático, de colon y epidermoide. Además, los datos sugieren la administración de compuestos los cuales inhiben la ruta de transducción de la señal mediada por KDR/Flk-1 que también pueden utilizarse en el tratamiento de hemangioma, restenosis y retinopatía diabética. Además, esta invención se refiere a la inhibición de la vasculogénesis y de la angiogénesis por otras rutas mediadas por el receptor, incluyendo la ruta que comprende el receptor FLT-1. La transducción de la señal mediada por el receptor de la tiroslna cinasa se inicia por la interacción extracelular con un factor de crecimiento específico (ligando), seguido por la dimerización del receptor, estimulación transitoria de la actividad intrínseca de la proteína tírosina cinasa y autofosforilación. Los sitios de unión son creados así para las moléculas de transducción de la señal intracelular lo cual lleva a la formación de complejos con un espectro de moléculas citoplásmicas para señalización que facilitan la respuesta celular apropiada, por ejemplo, división celular y efectos metabóllcos en el microambiente extracelular. Véase, Schlesslnger y Ullrich, 1992, euron, 9: 1-20. La homología cercana de las regiones intracelulares de KDR/FLK-1 con la del receptor de PDGF (homología del 50.3%) y/o el receptor FLT-1 relacionado indica la inducción de rutas de transducción de la señal que se sobreponen. Por ejemplo, para el receptor PDGF-P, los miembros de la familia src (Twamley et al., 1993, Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 90: 7696-7700), fosfatidillnositol-3'-cinasa (Hu et al., 1992, Mol. Cell. Blol.. 12: 981-990), fosfolipasa cy (Kashishian & Cooper, 1993, Mol. Cell. Biol.. 4: 49- 51 ), proteína activadora de ras-GTPasa, (Kashishian et al., 1992, EMBO J., 11 : 1373-1382), PTP-ID/syp (Kazlauskas et al., 1993, Proa Nati. Acad. Sci. USA. 10 90: 6939-6943), Grb2 (Arvidsson et al., 1994, Mol. Cell. Biol.. 14: 6715-6726), y se ha mostrado que las moléculas adaptadores Shc y Nck (Nishimura et al., 1993, Mol. Cell. Biol.. 13: 6889-6896), se unen a las regiones que implican diferentes sitios de autofosforilación. Véase generalmente, Claesson-Welsh, 1994, Proq. Growth Factor Res., 5: 37-54. Por lo tanto, es probable que las rutas de transducción de la señal activadas por KDR/FLK-1 incluyan la ruta ras (Rozakis et al., 1992, Nature. 360: 689-692), las rutas mediadas por PI-3'-cinasa, las rutas mediadas por src y las rutas mediadas por plcy. Cada una de estas rutas puede desempeñar un papel crítico en el efecto angiogénico y/o vasculogénico del KDR/FLK-1 en las células endoteliales. Consecuentemente, incluso un aspecto adicional de esta invención se refiere al uso de los compuestos orgánicos descritos en la presente invención para modular la angiogénesis y vasculogénesis puesto que dichos procesos están controlados por estas rutas. Contrariamente, los trastornos relacionados con el encogimiento, contracción o cierre de los vasos sanguíneos, tales como restenosis, también están implicados y pueden ser tratados o prevenidos por los métodos de esta invención. Los trastornos fibróticos se refieren a la formación anormal de matices extracelulares. Los ejemplo de trastornos fibróticos incluyen cirrosis hepática y trastornos p rol iterativos de la célula mesangial. La cirrosis hepática se caracteriza por el incremento en los constituyentes de la matriz extracelular que resulta en la formación de una cicatriz hepática. Una matriz extracelular incrementada que resulta en una cicatriz hepática también puede ser ocasionada por una infección viral tal como hepatitis. Los lipocitos parecen desempeñar un papel principal en la cirrosis hepática. Otros trastornos • fibróticos implicados incluyen la aterosclerosis. Los trastornos proliferativos de la célula mesangial se refieren a los trastornos ocasionados por la proliferación anormal de las células mesangiales. Los trastornos proliferativos mesangiales incluyen diversas enfermedades renales en humano tales como la glomerulonefritis, retlnopatía diabética y nefroesclerosis maligna así como dichos trastornos corrió los síndromes de microangiopatía trombótica, rechazo de transplante, y glomerulopatías. El RTK PDGFR ha sido implicado en el mantenimiento de la proliferación de la célula mesangial. Floege et al., 1993, Kidnev International 43: 47S-54S. Muchos cánceres son trastornos proliferativos celulares y, como se mencionó previamente, las PKs han sido asociadas con los trastornos proliferativos celulares. Por lo tanto, no es sorprendente que las PKs tales como, por ejemplo, los miembros de la familia RTK han sido asociados con el desarrollo del cáncer. Algunos de estos receptores, como EGFR (Tuzi et al., 1991 , Br. J. Cáncer 63: 227-233, Torp et al., 1992, APMIS 100: 713-719) HER2/neu (Slamon et al., 1989, Science 244: 707-712) y PDGF-R (Kumabe et al., 1992, Oncoqene, 7: 627-633) están sobre-expresados en muchos tumores y/o se activan persistentemente por las asas autócrinas. De hecho, en los cánceres más comunes y severos estas sobre-expresiones del receptor (Akbasak y Suner-Akbasak et al., 1992. J. Neurol. Sci., 111 : 1 19-133, Dickson et al., 1992, Cáncer Treatment Res. 61 : 249-273, Korc et al., 1992, J. Clin. Invest. 90: 1352-1360) y de las asas autócrinas (Lee y Donoghue, 1992, Cell. Biol.. 1 18: 1057-1070, Korc et al., anteriormente mencionado, Akbasak y Suner-Akbasak et al., anteriormente mencionado) han sido demostradas. Por ejemplo, el EGFR ha sido asociado con el carcinoma de célula escamosa, astrocitoma, glioblastoma, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de pulmón y cáncer de vejiga. El HER2 ha sido asociado con el cáncer de mama, ovárico, gástrico, de pulmón, de páncreas y de vejiga. El PDGFR ha sido asociado con el glioblastoma y melanoma así como con el cáncer de pulmón, ovárico y de próstata. El RTK c-met también ha sido asociado con la formación de tumores malignos. Por ejemplo, c-met se ha asociado con, entre otros cánceres, los carcinomas colorectales, tiroideos, pancreáticos, gástricos y hepatocelulares y linfomas. Adicionalmente c-met ha sido asociado a la leucemia. La sobre-expresión del gen c-met también se ha detectado en pacientes con la enfermedad de Hodgkins y con la enfermedad de Burkitts. El IGF-IR, además de estar implicado en el abastecimiento nutricional y en la diabetes tipo-ll, también ha sido asociado con diversos tipos de cánceres. Por ejemplo, el 1GF-I ha sido implicado como un estimulante del crecimiento autócrino para diversos tipos de tumores, por ejemplo células de carcinoma del cáncer de mama de humano (Arteaga et al., 1989, J. Clin.

Invest. 84: 1418-1423) y células pequeñas tumorales de pulmón (Macauley et al., 1990, Cáncer Res.. 50: 251 1-2517). Además, el IGF-I, a pesar de que integralmente está implicado en el crecimiento normal y en la diferenciación del sistema nervioso, también parece ser un estimulante autócrino de los gliomas de humano. Sandberg-Nordqvist et al., 1993, Cáncer Res. 53: 2475-2478. La importancia del IGF-IR y sus ligandos en la proliferación celular se apoya adicionalmente en el hecho de que muchos tipos celulares en cultivo (fibroblastos, células epiteliales, células de músculo liso, linfocitos-T, células mieloides, condrocitos y osteoblastos (las células madre de la médula ósea) son estimulados a crecer por el IGF-I. Goldring y Goldring, 1991 , Eukaryotic Gene Expression. 1 : 301 -326. Baserga y Coppola sugieren que el IGF-IR desempeña un papel central en el mecanismo de transformación y, como tal, puede ser un blanco preferido para intervenciones terapéuticas para un amplio espectro de malignidades en humano. Baserga, 1995, Cáncer Res., 55: 249-252, Baserga, 1994, Cel| 79: 927-930, Coppola et al., 1994, Mol. Cell. Biol.. 14: 4588-4595. Las STKs han sido implicadas en muchos tipos de cánceres incluyendo, de manera notable, el cáncer de mama (Canee, et al., Int. J. Cáncer. 54: 571-77 (1993)). La asociación entre la actividad anormal de la PK y la enfermedad no se restringe al cáncer. Por ejemplo, las RTKs han sido asociadas con enfermedades tales como psoriasis, diabetes mellitus, endometriosis, angiogénesis, desarrollo de la placa ateromatosa, enfermedad de Aizheimer, restenosis, enfermedad de von Hippel-Lindau, hiperproliferación epidémica, enfermedades neurodegenerativas, degeneración macular relacionada con la edad y hemangiomas. Por ejemplo, el EGFR ha sido indicado en la cicatrización de heridas corneales y la cicatrización de heridas dermales. Los defectos en la Insulina-R y el IGF- R se indica en ia diabetes mellitus tipo-ll. Una correlación más completa entre las RTKs específicas y sus implicaciones terapéuticas se establece en Plowman et al., 1994, DN&P 7: 334-339. Como se mencionó previamente, no solamente las RTKs sino las CTKs incluyendo, pero no limitadas a, src, abl, fps, yes, fyn, lyn, Ick, blk, hck, fgr y yrk (revisado por Bolen et al., 1992, FASEB J.. 6: 3403-3409) están implicadas en las rutas de transducción de señales proliferativas y metabólicas y por lo tanto se puede esperar, y se ha mostrado, que están implicadas en muchos trastornos relacionados con las PTK a las que se dirige la presente invención. Por ejemplo, se ha mostrado que la src mutada (v-src) es una oncoproteína (PP60v"src) en el pollo. Además, su homólogo celular, el proto-oncogen PP60c"src transmite señales oncogénicas de muchos receptores. La sobre-expresión de EGFR o de HER2/neu en los tumores que lleva a la activación constitutiva de PP60c°src el cual es característico de las células malignas pero está ausente en las células normales. Por otra parte, los ratones deficientes en la expresión de c-src exhiben un fenotipo osteopetrótico, indicando una participación clave del c-src en la función de osteoclastos y una posible participación en los trastornos relacionados.

De manera similar, Zap70 ha sido implicado en la señalización de la célula-T la cual se puede relacionar con los trastornos autoinmunes. Las STKs han sido asociadas con la inflamación, enfermedad autoinmune, inmunorespuestas, y trastornos de hiperproliferación tales como restenosis, fibrosis, psoriasis, osteoartritis y artritis reumatoide. Las PKs también han sido implicadas en el implante del embrión. Por lo tanto, los compuestos de esta invención pueden proveer un método efectivo para prevenir dicha implantación del embrión y por lo tanto pueden ser útiles como agentes para control de la natalidad. Los trastornos adicionales que pueden ser tratados o prevenidos utilizando los compuestos de esta invención son trastornos inmunologicos tales como enfermedades autoinmunes, SIDA y trastornos cardiovasculares tales como aterosclerosis. Finalmente, actualmente se sospecha que tanto las RTKs como las CTKs están implicadas en los trastornos hiperinmunes. Los ejemplos del efecto de diversos compuestos ejemplares de esta invención sobre diversas PTKs se muestran en el cuadro 2 a continuación. Los compuestos y datos presentados no deben considerarse como limitantes del alcance de esta invención de ninguna manera cualquiera que sea. B. Inhibidor de la ciclooxigenasa-2 o inhibidor de COX-2 o inhibidor de la ciclooxigenasa-2 incluyen a los agentes que inhiben específicamente una clase de enzimas, la ciclooxigenasa-2, con menos inhibición significativa que la ciclooxigenasa-1. Preferiblemente, este incluye compuestos los cuales tienen una IC50 de la ciclooxigenasa-2 de menos de aproximadamente 0.2 µ?, y también tienen una relación selectiva de la inhibición de la ciclooxigenasa-2 sobre la inhibición de la ciclooxigenasa-1 de al menos 50, y más preferiblemente de al menos 100. Incluso más preferiblemente, los compuestos tienen una IC50 de la ciclooxigenasa-1 mayor de aproximadamente 1 µ?, y mas preferiblemente mayor de 10 µ?. Los estudios indican que las prostaglandinas sintetizadas por las ciclooxigenasas desempeñan un papel principal en la iniciación y promoción del cáncer. Además, COX-2 se sobre-expresa en las lesiones neoplásicas del colon, de mama, de pulmón, de próstata, de esófago, de páncreas, de intestino, de cérvix, de ovarios, de vejiga urinaria, y de cabeza y cuello. En diversos modelos in vitro y modelos animales, los inhibidores de COX-2 han inhibido el crecimiento tumoral y la metástasis. Además de los cánceres per se, COX-2 también se expresó en la vasculatura angiogénica dentro de y adyacente a las lesiones hiperplásicas y neoplásicas indicando que COX-2 desempeña un papel en la angiogénesis. Tanto en el ratón como en la rata, los inhibidores de COX-2 inhibieron marcadamente la neovascularización inducida por bFGF. La utilidad de los inhibidores de COX-2 como agentes quimiopreventivos, antiangiogénicos y quimioterapéuticos se describe en la literatura (Koki et al., Potential utility of COX-2 inhibitors in chemoprevention and chemotherapy. Exp. Opin. Invest. Drugs (1999) 8 (10) pp. 1623-1638, incorporado en la presente invención • como referencia). La amplificación y/o sobre-expresión de HER- 2/nue (ErbB2) ocurre en 20-30% de los cánceres de mama y de ovarios en humano así como en 5-15% de los cánceres gástricos y esofágicos y está asociado con la prognosis. Adicionalmente, se ha descubierto recientemente in vitro que la expresión de COX-2 esta sobrerregulada en las células que sobre-expresan el oncogen HER-2/neu. (Subbaramaiah et al., Increased expression of cyclooxygenase-2 in HER-2/neu-overexpressing breast cáncer. Cáncer Research (sometido en 1999), incorporado en la presente invención como referencia). En este estudio, se detectaron niveles marcadamente incrementados de la producción de PGE2, de la proteína COX- 2 y del ARNm en células epiteliales de mama transformadas HER-2/neu en comparación con una línea celular partícipe no transformada. Los productos de la actividad de COX-2, por ejemplo, las prostaglandinas, estimulan la proliferación, incrementan la invasión de células malignas, y mejoran la producción del factor de crecimiento endotelial vascular, el cual promueve la angiogénesis. Además, HER-2/neu induce la producción de factores angiogénicos tales como el factor de crecimiento endotelial vascular. Consecuentemente, se contempla la administración de un inhibidor COX-2 en combinación con anticuerpos antí- HER-2/neu tal como trastuzumab (Herceptin®) y otras terapias dirigidas a la inhibición de HER-2/neu para tratar cánceres en los cuales HER-2/neu se sobre-expresa. También, se contempla que los niveles de COX-2 están elevados en los tumores con amplificación y/o sobre-expresión de otros oncogenes incluyendo pero no limitados a c-myc, N-myc, L-myc, K-ras, H-ras, N-ras. Los productos de la actividad de COX-2 estimulan la proliferación celular, inhiben la vigilancia inmune, incrementan la invasión de las células malignas, y promueven la angiogénesis. Consecuentemente, la administración de un inhibidor de la proteína cinasa en combinación con un inhibidor de COX-2 de la presente invención es útil para prevenir o tratar cánceres en los cuales los oncogenes están sobre-expresados. Los inhibidores específicos de COX-2 son útiles en el tratamiento del cáncer (W098/16227) y en diversos modelos animales reducen la angiogénesis dirigida por diversos factores de crecimiento (W098/22101 ). La anti-angiogénesis se logró con un inhibidor de COX-2 en ratas implantadas con bFGF, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) o carragenano, proteínas con propiedades anti-angiogénicas bien conocidas. (Masferrer, et al., 89 Annual Meeting of the American Association for Cáncer Research, March 1998.) Composición farmacéutica y administración. Un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar como tal a un paciente humano o se puede administrar en composiciones farmacéuticas en las cuales los materiales precedentes se mezclan con vehículos o excipiente(s) adecuados. Las técnicas para formulación y administración de los fármacos se pueden encontrar en "Remington's Pharmacological Sciences, "Mack Publishing Co., Easton, PA., última edición. Como se utiliza en la presente invención, "administrar" o "administración" se refiere a la administración de un compuesto de la fórmula (1 ) o a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o de una composición farmacéutica que contiene un compuesto de la fórmula (I) o a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de esta invención a un organismo para el propósito de prevención o tratamiento de un trastorno relacionado con una PK. Las rutas adecuadas para administración pueden incluir, sin limitación, administración oral, rectal, tópica, transmucosal o intestinal o inyecciones intramusculares, subcutáneas, intramedulares, intratecales, intraventriculares directas, intravenosas, ¡ntravitraies, intraperitoneales, intranasales, o infraoculares. Las rutas preferidas de administración son las rutas orales y parenterales. Alternativamente, uno puede administrar el compuesto de una manera local en lugar de sistémica, por ejemplo, mediante la inyección del compuesto directamente dentro de un tumor sólido, frecuentemente en una formulación de depósito o de liberación sostenida. Además, uno puede administrar el fármaco en un sistema de administración de fármacos dirigido, por ejemplo, en un liposoma revestido con anticuerpo específico del tumor. Los Iiposomas serán dirigidos hacia y se tomarán selectivamente por el tumor. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden elaborar mediante procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, por medio de procedimientos convencionales de mezclado, disolución, granulación, elaboración de gragea, pulverización, emulsificación, encapsulación, atrapamiento o liofilización. Las composiciones farmacéuticas para uso de conformidad con la presente invención se pueden formular de manera convencional utilizando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables que comprenden excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos hacia preparaciones que pueden ser utilizadas farmacéuticamente. La formulación adecuada es dependiente de la ruta de administración elegida. Para inyección, los compuestos de la invención se pueden formular en soluciones acuosas, preferiblemente en reguladores de pH fisiológicamente compatibles tales como la solución de Hanks, la solución de Ringer, o reguladores salinos de pH. Para la administración transmucosal, los penetrantes apropiados para la barrera a ser perrneada se utilizan en la formulación. Dichos penetrantes se conocen generalmente en la técnica. Para la administración oral, los compuestos se pueden formular mediante la combinación de los compuestos activos con vehículos farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Dichos vehículos permiten a los compuestos de invención el ser formulados como tabletas, pildoras, tabletas, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, pastas suaves, suspensiones y los similares, para ingestión oral por un paciente. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral se pueden elaborar utilizando un excipiente sólido, opcionalmente moliendo la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos, después añadiendo otros auxiliares adecuados si se desea, para obtener tabletas o núcleos de gragea. Los excipientes útiles son, en particular, llenadores tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol, o sorbitol, preparaciones de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz y almidón de patatas y otros materiales tales como la gelatina, goma tragacanto, metil celulosa, hidroxipropil-metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, y/o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, se pueden añadir agentes desintegrantes, tales como polivinilpirrolidona entrecruzada, agar, o ácido algínico. También se puede utilizar una sal tal como alginato de sodio. Los núcleos de gragea se proveen con revestimientos adecuados. Para este propósito, se pueden utilizar soluciones concentradas de azúcar las cuales opcionalmente pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, gel de carbopol, polietilenglicol, y/o dióxido de titanio, laca, y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes. Los elementos colorantes o pigmentos se pueden añadir a las tabletas o a revestimientos de gragea para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuestos activos. Las composiciones farmacéuticas que pueden ser utilizadas oralmente incluyen cápsulas de ajuste elaboradas de gelatina, así como cápsulas blandas, selladas elaboradas de gelatina y de un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste pueden contener los ingredientes activos en mezcla con un llenador tales como lactosa, un aglutinante tal como almidón, y/o un lubricante tal como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizantes. En las cápsulas blandas, los compuestos activos se pueden disolver o suspender en líquidos adecuados, tales como ácidos grasos, parafina líquida, o polietilenglicoles líquidos. También se pueden añadir estabilizantes en estas formulaciones. Las cápsulas se pueden empaquetar dentro de botellas opacas de cristal o de plástico para proteger al compuesto activo de la luz. Los contenedores que contiene la formulación del compuesto activo en una cápsula se deben almacenar a temperatura ambiente controlada (15-30°C). Para administración mediante inhalación, los compuestos para uso de conformidad con la presente invención se administran convenientemente en la forma de un aerosol pulverizador utilizando un envase presurizado o un nebulizador y un propelente adecuado, por ejemplo, sin limitación, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetra-fluoroetano o dióxido de carbono. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosis se puede controlar mediante la provisión de una válvula para administrar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina para uso en un inhalador o insuflador se pueden formular para que contengan una mezcla en polvo del compuesto y una base en polvo adecuada tal como lactosa o almidón. Los compuestos también pueden formularse para administración parenteral, por ejemplo, mediante inyección de bolo o infusión continua. Las formulaciones para inyección se pueden presentar en forma de dosis unitaria, por ejemplo, en ampolletas o en contenedores de múltiples dosis, con un conservador añadido. Las composiciones pueden tomar dichas formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener materiales para formulación tales como agentes de suspensión, de estabilización y/o de dispersión. Las composiciones farmacéuticas para la administración parenteral incluyen soluciones acuosas de una forma soluble en agua, tal como, sin limitación, una sal, del compuesto activo. Adicionalmente, las suspensiones de los compuestos activos se pueden preparar en un vehículo lipófilo. Los vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de ajonjolí, ésteres de ácido graso sintético tales como oleato de etilo y triglicéridos, o materiales tales como liposomas. Las suspensiones acuosas para inyección pueden contener sustancias que incrementan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetilcelulosa de sodio, sorbitol, o dextrán. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes adecuados y/o agentes que incrementan la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas. Alternativamente, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para su constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril, libre de pirógenos, antes de su uso. Los compuestos también se pueden formular en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, utilizando, por ejemplo, bases convencionales para supositorios tales como mantequilla de cocoa u otros glicéridos. Además de las formulaciones descritas previamente, los compuestos también se pueden formular como preparaciones de depósito. Dichas formulaciones con acción a largo plazo se pueden administrar mediante implante (por ejemplo, subcutáneamente o intramuscularmente) o mediante inyección intramuscular. Un compuesto de esta invención se puede formular para esta ruta de administración con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, en una emulsión con un aceite farmacológicamente aceptable), con resinas de intercambio iónico, o como un derivado escasamente soluble tal como, sin limitación, una sal escasamente soluble. Un ejemplo no limitante de un vehículo farmacéutico para los compuestos hidrófobos de la invención es un sistema solvente . que comprende alcohol bencílico, un agente tensioactivo no polar, un polímero orgánico miscible en agua y una fase acuosa tal como el sistema co-solvente VPD. El VPD es una solución de 3% p/v de alcohol bencílico, 8% p/v del agente tensioactivo no polar Polisorbato 80, y 65% p/v de polietilenglicol 300, llevado hasta el volumen en etanol absoluto. El sistema co-solvente VPD (VPD: D5W) consiste de un VPD diluido 1 :1 con una solución de dextrosa en agua al 5%. Este sistema co-solvente disuelve bien los compuestos hidrófobos, y produce por sí mismo una baja toxicidad después de la administración sistémica. Naturalmente, las proporciones de dicho sistema co- solvente pueden variar considerablemente sin destruir sus características de solubilidad y toxicidad. Además, la identidad de los componentes del co-solvente puede variar: por ejemplo, otros agentes tensioactivo no polares con baja toxicidad pueden ser utilizados en lugar del Polisorbato 80, el tamaño de la fracción del polietilengücol puede variar, otros polímeros biocompatibles pueden reemplazar al polietilengücol, por ejemplo, polivinilpirrolidona, y otros azúcares o polisacáridos pueden sustituir a la dextrosa. Alternativamente, se pueden emplear otros sistemas de administración para compuestos farmacéuticos hidrófobos. Los liposomas y las emulaciones son ejemplos bien conocidos para vehículos o portadores de administración para fármacos hidrófobos. Además, también se pueden emplear ciertos solventes orgánicos tales como el dimetilsulfóxido, aunque frecuentemente con el costo de una mayor toxicidad. Adicionalmente, ios compuestos se pueden administrar utilizando un sistema de liberación sostenida, tal como matrices semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos que contienen el agente terapéutico. Diversos materiales de liberación sostenida han sido establecidos y se conocen bien por aquellos expertos en la técnica. Las cápsulas de liberación sostenida pueden, dependiendo de su naturaleza química, liberar los compuestos por unas pocas semanas o por hasta más de 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y de la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, se pueden emplear estrategias adicionales para la estabilización de la proteína. Las composiciones farmacéuticas en la presente invención también pueden comprender vehículos o excipientes adecuados en fase de sólido o de gel. Los ejemplos de dichos vehículos o excipientes incluyen, pero no se limitan a, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina, y polímeros tales como polietilenglicoles. Muchos - de los compuestos moduladores de la PK de la invención se pueden proveer como sales fisiológicamente aceptables en donde el compuesto reclamado puede formar a las especies cargadas positivamente o negativamente. Los ejemplos de las sales en las que los compuestos forman la porción positivamente cargada incluyen, sin limitación, amonio cuaternario (definido en otro lugar en la presente invención), sales tales como el clorhidrato, sulfato, carbonato, lactato, tartrato, malato, maleato, succinato en donde el átomo de nitrógeno del grupo amonio cuaternario es un nitrógeno del compuesto seleccionado de esta invención el cual ha reaccionado con el ácido apropiado. Las sales en las cuales un compuesto de esta invención forma las especies negativamente cargadas incluyen, sin limitación, las sales de sodio, potasio, calcio y magnesio formadas mediante la reacción de un grupo de ácido carboxílico en el compuesto con una base apropiada (por ejemplo hidróxido de sodio (NaOH), hídróxido de potasio (KOH), hidróxido de calcio (Ca(OH)2), etc.). Las composiciones farmacéuticas adecuadas para uso en la presente invención incluyen composiciones en donde los ingredientes activos están contenidos en una cantidad suficiente para lograr el propósito pretendido, por ejemplo, la modulación de la actividad de la PK o el tratamiento o la prevención de un trastorno relacionado con la PK. Más específicamente, una cantidad terapéuticamente efectiva significa una cantidad del compuesto efectiva para prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto a ser tratado. La determinación de una cantidad terapéuticamente efectiva está dentro de la capacidad de aquellos expertos en la técnica, especialmente a la luz de la descripción detallada provista en la presente invención. Para cualquier compuesto utilizado en los métodos de la invención, la cantidad terapéuticamente efectiva o dosis se puede estimar inicialmente a partir de ensayos de cultivo celular. Luego, la dosis se puede formular para uso en modelos animales de manera que se logra un intervalo de concentración en circulación que incluye la IC5o como se determinó en el cultivo celular (por ejemplo, la concentración del compuesto prueba la cual logra una inhibición máxima de la mitad de la actividad de la PK). Dicha información puede ser utilizada para determinar- más precisamente las dosis útiles en humanos. La toxicidad y eficiencia terapéutica de los compuestos descritos en la presente invención se puede determinar mediante procedimientos farmacéuticos estándares en cultivos celulares o en animales experimentales, por ejemplo, mediante la determinación de la IC50 y de la LD50 (ambas se discuten en la presente invención en otro lugar) para un compuesto sujeto.

Los datos obtenidos a partir de estos ensayos de cultivo celular y de estudios animales se pueden utilizar para formular un intervalo de dosis para uso en humanos. La dosis puede variar dependiendo de la forma de dosis empleada y de la ruta de administración utilizada. La formulación exacta, ruta de administración y dosis se puede elegir por el médico en vista de la condición del paciente. (Véase por ejemplo, Fingí, et al., 1975, en "The Pharmacological Basis of Therapeutics", Cap. 1 p. 1). La cantidad de dosis y el intervalo se pueden ajustar individualmente para proveer niveles en plasma de las especies activas los cuales son suficientes para mantener los efectos moduladores de la cinasa. Estos niveles en plasma se refieren como las concentraciones efectivas mínimas (MECs). La MEC variará para cada compuesto pero puede ser estimada a partir de los datos in vitro, por ejemplo, la concentración necesaria para lograr una inhibición del 50-90% de una cinasa se puede averiguar utilizando los ensayos descritos en la presente invención. Las dosis necesarias para lograr la MEC dependerán de las características individuales y de la ruta de administración. Los ensayos CLAR o los bioensayos pueden ser utilizados para determinar las concentraciones en plasma. Los intervalos de dosis también se pueden determinar utilizando los valores MEC. Los compuestos se deben administrar utilizando un régimen que mantenga los niveles plasmáticos por arriba de la MEC por 10-90% del tiempo, preferiblemente entre 30-90% y más preferiblemente entre 50-90%. Actualmente, las cantidades terapéuticamente efectivas de los - compuestos de la fórmula (I) pueden tener un intervalo de aproximadamente 0.25 mg/m2 a 1500 mg/m2 por día; preferiblemente de aproximadamente 3 mg/m2/día. Incluso más preferiblemente de 50 mg/qm qd hasta 400 mg/qd. Las cantidades terapéuticamente efectivas del inhibidor de ciclooxigenasa son de aproximadamente 0.1 mg a aproximadamente 10,000 mg para el tratamiento de las condiciones anteriormente mencionadas, con niveles preferidos de aproximadamente 1.0 mg a aproximadamente 1 ,000 mg. La cantidad del ingrediente activo que puede combinarse con otros agentes anti-cancerosos produce una forma de dosis única y variará dependiendo del hospedero tratado y del modo particular de administración. En los casos de administración local o de toma selectiva, la concentración local efectiva del fármaco puede no estar relacionada con la concentración plasmática y otros procedimientos conocidos en la técnica se pueden emplear para determinar la cantidad de dosis correcta y el intervalo. La cantidad de una composición administrada dependerá, por supuesto, del sujeto a ser tratado, la severidad de la enfermedad, el modo de administración, el juicio del médico que prescribe, etc. Las composiciones pueden presentarse, si se desea, en un paquete o dispositivo dispensador, tal como un equipo aprobado por la FDA, el cual puede contener una o más formas de dosis unitarias que contienen el ingrediente activo. Por ejemplo, el paquete puede comprender una lámina de metal o de plástico, tal como un paquete de burbujas. El paquete o dispositivo dispensador se puede acompañar por instrucciones para su administración. El paquete o dispensador también puede acompañarse por una advertencia asociada con el contenedor en una forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la elaboración, uso o venta de los compuestos farmacéuticos, dicha advertencia refleja la aprobación por la agencia de la forma de las composiciones o de la administración para uso en humano o para uso veterinario. Dicha advertencia, por ejemplo, puede ser del . registro aprobado por la U. S. Food and Drug Administration para prescripción de fármacos o de un inserto del producto aprobado. También se pueden preparar las composiciones que comprenden un compuesto de la invención formulado en un vehículo farmacéutico compatible, colocado en un contenedor apropiado, y registrado para tratamiento de una condición indicada. Las condiciones adecuadas indicadas en el registro pueden incluir tratamiento de un tumor, inhibición de la angiogénesis, tratamiento de la fibrosis, diabetes, y los similares. También es un aspecto de esta invención que un compuesto descrito en la presente invención, o su sal o profármaco, pueda combinarse con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de las enfermedades y trastornos discutidos anteriormente. Por ejemplo, un compuesto, sal o profármaco de esta invención puede combinarse con agentes alquilantes tales como fluorouracilo (5-FU) solo o en combinación adicional con leukovorina; u otros agentes alquilantes tales como, sin limitación, otros análogos de pirimidina tales como UFT, capecitabina, gemcitabina y citarabina, los sulfonatos de alquilo, por ejemplo, busulfan (utilizado en el tratamiento de la leucemia granulocítica crónica), improsulfan y piposulfan; aziridinas, por ejemplo benzodepa, carboquona, meturedepa y uredepa; etileneimidas y metilmelaminas, por ejemplo, altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosforamida y trimetilolmelamina; y las nitrógeno mostazas, por ejemplo, clorambucil (utilizado en el tratamiento de leucemia linfocítica crónica, macroglobulinemia primaria y linfoma no de Hodgkin), ciclofosfamida (utilizada en el tratamiento de la enfermedad de Hodgkin, mieloma múltiple, neuroblastoma, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, tumor de Wilm y rabdomiosarcoma), estramustina, ifosfamida, novembriquina, prednimustina y uracil mostaza (utilizada en el tratamiento de trombocitosis primaria, linfoma no de Hodgkin, enfermedad de Hodgkin y cáncer de ovario); y triazinas, por ejemplo, dacarbazina (utilizada en el tratamiento de sarcoma de tejido blando). Un compuesto, sal o profármaco de esta invención también puede ser utilizado en combinación con otros agentes quimioterapéuticos anti-metabolito tales como, sin limitación, análogos del ácido fólico, por ejemplo metotrexato (utilizado en el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda, coriocarcinoma, micosis fungoides cáncer de mama, cáncer de cabeza y de cuello y sarcoma osteogénico) y pteropterina; y los análogos de purina tales como mercaptopurina y tioguanina los cuales se encuentran uso en el tratamiento de las leucemias granulocítica aguda, linfocítica aguda y granulocítica crónica. Se contempla que un compuesto, sal o profármaco de esta invención también puede ser utilizado en combinación con agentes quimioterapéuticos basados en productos naturales tales como, sin limitación, los alcaloides vinca, por ejemplo, vinblastina (utilizada en el tratamiento del cáncer de mama y del cáncer testicular), vincristina y vindesina; las epipodofilotoxinas, por ejemplo, etopósido y tenipósido, ambos útiles en el tratamiento del cáncer testicular y del sarcoma de Kaposi; los agentes quimioterapéuticos antibióticos, por ejemplo, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, mitomicina (utilizados para tratar el cáncer de estómago, de cérvix, de colon, de mama, de vejiga urinaria y el cáncer pancreático), dactinomicina, temozolomida, piicamicina, bleomicina (utilizados en el tratamiento del cáncer de piel, esofágico y del tracto genitourinario); y los agentes quimioterapéuticos enzimático tales como L-asparaginasa. Además del anteriormente mencionado, un compuesto, sal o profármaco de esta invención también puede ser utilizado en combinación con los complejos de coordinación de platino (cisplatina, etc. ); ureas sustituidas tal como hidroxiurea; derivados de metilhidrazina, por ejemplo, procarbazina; supresores adrenocorticales, por ejemplo, mitotano, aminoglutetimida; y hormonas o antagonistas hormonales tales como los adrenocorticosteroides (por ejemplo, prednisona), progestinas (por ejemplo, caproato de dehidroxiprogesterona); estrógenos (por ejemplo, dietilstilbesterol); antiestrógenos tales como tamoxifen; androgenos, por ejemplo, propionato de testosterona; e inhibidores de aromatasa tal como anastrozol. Otros agentes anti-neoplásicos conocidos en la técnica pueden ser utilizados junto con la terapia de combinación de la presente invención. Los ejemplos de estos agentes anti-neoplásicos y otros se dan en la Solicitud de Patente de los Estados Unidos de los solicitantes número de serie 60/113,786, presentada el 23 de diciembre de 1998, y en la Solicitud de publicación PCT No. WO 00/38716 la descripción de la cual se incorpora en la presente invención como referencia. Finalmente, también se contempla que la combinación de un compuesto de esta invención será efectiva en combinación con mitoxantrona o paclitaxel para el tratamiento de cánceres de tumores sólidos o leucemias tales como, sin limitación, leucemia mielógena aguda (no linfocítica).

EJEMPLOS Ejemplos sintéticos Las siguientes preparaciones y ejemplos se dan para permitir que aquellos expertos en la técnica entiendan más claramente y practiquen la presente invención. Estos no deben considerarse como limitantes del alcance de la invención, sino que deben considerarse meramente como ilustrativos y representativos de los mismos.

Síntesis del inhibidor de la proteína cinasa de la presente invención - Compuestos de la fórmula (I) Procedimiento sintético general: La siguiente metodología general se puede emplear para preparar los compuestos de esta invención: El 2-oxindol sustituido apropiado (1 equivalente), el aldehido apropiadamente sustituido (1.2 equivalentes) y una base (0.1 equivalentes) se mezclan en un solvente (1-2 ml/milimol de 2-oxindol) y la mezcla se calienta entonces por aproximadamente 2 a aproximadamente 12 horas. Después del enfriamiento, el precipitado que se forma se filtra, se lava con etanol frío o éter y se seca al vacío para dar el producto sólido. Si no se forma el precipitado, la mezcla de reacción se concentra y el residuo se tritura con diclorometano/éter, el sólido resultante se recolecta mediante filtración y luego se seca. El producto se puede purificar opcionalmente de manera adicional mediante cromatografía. La base puede ser una base orgánica o una base inorgánica. Si se utiliza una base orgánica, preferiblemente ésta es una base de nitrógeno. Los ejemplos de las bases orgánicas de nitrógeno incluyen, pero no se limitan a, diisopropilamina, trimetilamina, trietilamina, anilina, piridina, 1 ,8- diazabiciclo [5.4.1] undec-7-eno, pirrolidina y piperidina. Los ejemplos de las bases inorgánicas son, sin limitación, amonio, hidróxidos de metal alcalino o hidróxidos férreos alcalinos, fosfatos, carbonatas, bicarbonatos, bisulfatos y amidas. Los metales alcalinos incluyen, litio, sodio y potasio mientras que los elementos térreos alcalinos incluyen calcio, magnesio y bario. En una modalidad actualmente preferida de esta invención, cuando el solvente es un solvente prótico, tal como agua o alcohol, la base es una base de metal alcalino o una base inorgánica térrea alcalina, preferiblemente, un metal alcalino o una hidróxido térreo alcalino. Será claro para aquellos expertos en la técnica, basándose tanto en los principios generales conocidos de la síntesis orgánica como en las descripciones en la presente invención cuál base puede ser la más apropiada para la reacción contemplada. El solvente en el que la reacción se lleva a cabo puede ser un solvente prótico o un solvente aprótico, preferiblemente es un solvente prótico. Un "solvente prótico" es un solvente el cual tiene un átomo(s) de hidrógeno covalentemente unido a los átomos de oxígeno o de nitrógeno lo cual vuelve a los átomos de hidrógeno apreciablemente ácidos y por lo tanto capaces de ser "compartidos" con un soluto a través de la formación de enlaces de hidrógeno. Los ejemplos de los solventes próticos son, sin limitación, agua y alcoholes. Un "solvente aprótico" puede ser un solvente polar o no polar pero, en cualquier caso, no contiene hidrógenos ácidos y por lo tanto no es capaz de formar enlaces de hidrógeno con los solutos. Los ejemplos, sin limitación, de solventes apróticos no polares, son pentano, hexano, benzeno, tolueno, cloruro de metileno y tetracloruro de carbono. Los ejemplos de los solventes apróticos polares son cloroformo, tetrahidrofurano, dimetilsulfóxido y dimetilformamida. En una modalidad actualmente preferida de esta invención, el solvente es un solvente prótico, preferiblemente agua o un alcohol tal como etanol. La reacción se lleva a cabo a temperaturas mayores que la temperatura ambiente. Generalmente la temperatura es de aproximadamente 30°C a aproximadamente 150°C, preferiblemente, de aproximadamente 80°C a aproximadamente a 10??, más preferiblemente de aproximadamente 75°C a aproximadamente 85°C, la cual es aproximadamente el punto de ebullición del etanol. Por "aproximadamente" se entiende que el intervalo de temperatura está preferiblemente dentro de los 10 grados Celcius de la temperatura indicada, más preferiblemente dentro de los 5 grados Celcius de la temperatura indicada y, más preferiblemente, dentro de los 2 grados Celcius de la temperatura indicada. Por lo tanto, por ejemplo, por "aproximadamente 75°C" se entiende 75°C + 10°C, preferiblemente 75°C ± 5°C y más preferiblemente, 75°C ± 2°C. Los 2-oxindoles y aldehidos, se pueden sintetizar fácilmente utilizando las técnicas bien conocidas en las artes químicas. Se apreciará por aquellos expertos en la técnica que otras rutas sintéticas para formar los compuestos de la invención están disponibles y que las siguientes rutas se ofrecen a manera de ejemplo y no como limitación.

IV!ETODO A Formilación de pirróles El POCI3 (1.1 equivalentes) se añade gota a gota a la dimetilformamida (3 equivalentes) a -10°C seguido por la adición del pirrol apropiado disuelto en dimetilformamida. Después de agitación por dos horas, la mezcla de reacción se diluye con H20 y se basifica hasta pH 1 con KOH 10 N. El precipitado que se forma se recolecta mediante filtración, se lava con H20 y se seca en un horno al vacío para dar el aldehido deseado.

METODO B Saponificación de los ésteres del ácido pirrolcarboxílico Una mezcla del éster del ácido pirrolcarboxílico y KOH (2-4 equivalentes) en EtOH se somete a reflujo hasta que el término de la reacción se indica mediante cromatografía en capa fina (CCF). La mezcla de reacción enfriada se acidifica hasta pH 3 con HCI 1 N. El precipitado que se forma se recolecta mediante filtración, se lava con H20 y se seca en un horno al vacío para dar el ácido pirrolcarboxílico deseado.

METODO C Amidación A una solución en agitación de una ácido pirrolcarboxílico disuelto en dimetilformamida (0.3 ) se le añade 1 -etil-3- (3-dimetilamíno-propil) carbodiimida (1 .2 equivalentes), 1-hidroxibenzotriazol (1.2 equivalentes), y trietilamina (2 equivalentes). La amina apropiada se añade (1 equivalente) y la reacción se agita hasta que el término se indica mediante CCF. Luego se añade acetato de etilo a la mezcla de reacción y la solución se lava con NaHCÜ3 saturado y salmuera (con sal extra), se seca sobre gS04 anhidro y se concentra para obtener la amida deseada.

METODO D Condensación de los aldehidos y de los oxindoles que contienen sustituyentes de ácido carboxílico Una mezcla del oxindol (1 equivalente), 1 equivalente del aldehido y 1-3 equivalentes de piperidina (o pirrolidina) en etanol (0.4 M) se agitan a 90-100°C hasta que el término de la reacción se indica mediante CCF. Entonces la mezcla se concentra y el residuo se acidifica con HCI 2N. El precipitado que se forma se lava con H20 y EtOH y luego se seca en un horno al vacío para dar el producto.

METODO E Condensación de los aldehidos y de los oxindoles que no contienen sustituyentes de ácido carboxílico Una mezcla del oxindol (1 equivalente), 1 equivalente del aldehido y 1-3 equivalentes de piperidina (o pirrolidina) en etanol (0.4 M) se agita a 90- 00°C hasta que el término de la reacción se indica mediante CCF. La mezcla se enfría a temperatura ambiente y el sólido que se forma se recolecta mediante filtración ai vacío, se lava con etanol y se seca para dar el producto. Si no se forma un precipitado después del enfriamiento de la mezcla de reacción, la mezcla se concentra y se purifica mediante cromatografía en columna.

C. Ejemplos de la síntesis del oxindol Los siguientes ejemplos de la síntesis de los oxindoles representativos no se consideran como limitantes del alcance de esta invención de ninguna forma cualquiera que sea. Se muestran las rutas alternativas a los oxindoles así como otros oxindoles para ser utilizados en la elaboración de los compuestos de esta invención que serán evidentes a aquellos expertos en la técnica basándose en las siguientes descripciones. Dicha síntesis y oxindoles están dentro del alcance y espíritu de esta invención. 5-Amino-2-oxindol El 5-nilro-2-oxindol (6.3 g) se hidrogenó en metanol sobre paladio en carbono al 10% para dar 3.0 g (rendimiento del 60%) del compuesto del título como un sólido blanco. 5-Bromo-2-oxindol El 2-oxindol (1.3 g) en 20 mL de acetonitrilo se enfrió hasta -10°C y se añadieron lentamente 2.0 g de N- bromosuccinimida con agitación. La reacción se agitó por 1 hora a -10°C y por 2 horas a 0°C. El precipitado se recolectó, se lavó con agua y se secó para dar 1.9 g (rendimiento del 90%) del compuesto del título. 4-Metil-2-oxindol El oxalato dietílico (30 mL) en 20 mL de éter seco se añadió con agitación a 19 g de etóxido de potasio suspendido en 50 mL de éter seco. La mezcla se enfrió en un baño con hielo y se añadieron lentamente 20 mL de 3-nitro-o-xileno en 20 mL de éter seco. La mezcla espesa rojo oscuro se calentó a reflujo por 0.5 horas, se concentró hasta un sólido rojo oscuro, y se trató un hidróxido de sodio al 10% hasta que casi todo el sólido se había disuelto. La mezcla rojo oscuro se trató con peróxido de hidrógeno al 30% hasta que el color rojo cambió a amarillo. La mezcla se trató alternativamente con hidróxido de sodio al 10% y peróxido de hidrógeno al 30% hasta que el color rojo oscuro ya no estuvo presente. El sólido se filtró y el filtrado se acidificó con ácido clorhídrico 6N. El precipitado resultante se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con agua, y se secó bajo vacío para dar 9.8 g (rendimiento del 45%) de ácido 2-metil-6-nitrofenilacético como un sólido blancuzco. El sólido se hidrogenó en metanol sobre paladio en carbón al 10 % para dar 9.04 g del compuesto del título como un sólido blanco. 7-Bromo-5-cloro-2-oxindol El 5-cloro-2-oxindol (16.8 g) y 19.6 g de N-bromosuccinimida se suspendieron en 140 ml_ de acetonitrilo y se sometieron a reflujo por 3 horas. La cromatografía en capa fina (sílice, acetato de etilo) a las 2 horas de reflujo mostró 5-cloro-2-oxindol o N-bromosuccinimida (Rf 0. 8), producto (Rf 0.85) y un segundo producto (Rf 0.9) cuyas proporciones no cambiaron después de otra hora de reflujo. La mezcla se enfrió a 10°C, el precipitado se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con 25 mL de etanol y se secó mediante aspiración por 20 minutos en un embudo para dar 14.1 g del producto húmedo (rendimiento del 56%). El sólido se suspendió en 200 mL de etanol desnaturalizado y se lavó con lechada mediante agitación y reflujo por 10 minutos. La mezcla se enfrió en un baño con hielo a 10°C. El producto sólido se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con 25 mL de etanol y se secó bajo vacío a 40°C para dar 12.7 g (rendimiento del 51 %) de 7-bromo-5-cloro-2- oxindol. 5-Fluoro-2-oxindol El 5-fluoroisatin (8.2 g) se disolvió en 50 mL de hidrato de hidrazina y se sometió reflujo por 1 .0 hora. Luego las mezclas de reacción se vertieron en agua con hielo. Luego el precipitado se filtró, se lavó con agua y se secó en un horno de vacío para obtener el compuesto del título. 5-Nitro-2-oxindol El 2-oxindol (6.5 g) se disolvió en 25. mL de ácido sulfúrico concentrado y la mezcla se mantuvo de -10 a -15°C mientras que se añadieron 2.1 mL de ácido nítrico fumante gota a gota. Después de la adición del ácido nítrico la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 0.5 horas y se vertió en agua con hielo. El precipitado se recolectó mediante filtración, se lavó con agua y se cristalizó a partir del ácido acético al 50%. Luego el producto cristalino se filtró, se lavó con agua y se secó bajo vacío para dar 6.3 g (70%) de 5-nitro-2-ox¡ndol. 5-Aminosulfonil-2-oxindol A un matraz de 100 mL cargado con 27 mL de ácido clorosulfónico se le añadieron lentamente 13.3 g de 2-oxindol. La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 30°C durante la adición. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó temperatura ambiente por 1.5 horas, se calentó a 68°C por 1 hora, se enfrió, y se vertió- dentro de agua. El precipitado se lavó con agua y se secó en un horno al vacío para dar 1 .0 g de 5-clorosulfon¡l-2-oxindol (rendimiento del 50%) del cual se utilizó sin purificación adicional. 5-Clorosulfon¡l-2-oxindol (2.1 g) se añadió a 10 mL de hidróxido de amonio en 10 mL de etanol y se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla se concentró y el sólido se recolectó mediante filtración al vacío para dar 0.4 g (rendimiento del 20%) del compuesto del título como un sólido blancuzco. 5-lsopropilaminosulfonil-2-oxindol A un matraz de 100 mL cargado con 27 mL de ácido clorosulfonico se le añadieron lentamente 13.3 g de 2- oxindol. La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 30°C durante la adición. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 .5 horas, se calentó -a 68° C por 1 hora, se enfrió, y se vertió dentro de agua. El precipitado que se formó se filtró, se lavó con agua y se secó en un horno al vacío para dar 1 1.0 g (50%) de 5-clorosulfonil-2-oxindol del cual se utilizó sin purificación adicional. Una suspensión de 3 g de 5-clorosulfonil-2~ox¡ndoi, 1.15 g de isopropilamina y 1.2 mL de piridina en 50 mL de diclorometano se agitó a temperatura ambiente por 4 horas tiempo durante el cual se formó un sólido blanco. El sólido se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con lechada con etanol caliente, se enfrió, se recolectó mediante filtración al vacío y se secó bajo vacío a 40°C durante toda la noche para dar 1.5 g (45%) de 5-isopropilaminosulfonil-2-oxindol.

H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.69 (s, br, 1 H, NH), 7.63 (dd, J= 2 y 8 Hz, H), 7.59 (d, J= 2 Hz, 1 H), 7.32 (d, J= 7 Hz, 1 H, NH-S02-), 6.93 (d, J= 8 Hz, 1 H), 3.57 (s, 2H), 3.14-3.23 (m, 1 H, CH-(CH3)2), 0.94 (d, J = 7 Hz, 6H, 2xCH3). 5-Fenilaminosulfoniio-2-oxindol Una suspensión de 5-clorosulfonil-2-oxindol (1.62 g, 7 milimoles), anilina (0.782 mL, 8.4 milimoles) y piridina (1 mL) en diclorometano (20 mi) se agitó a temperatura ambiente por 4 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (300 mL) y se acidificó en ácido clorhídrico (16 mL). La capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio y salmuera, se secó y se concentró. El residuo se lavó con etanol (3 mL) y luego se sometió a cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con metanol/diclorometano 1 :9 para dar 5- fenilaminosulfonil-2-oxindol. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.71 (s, br, 1 H, NH), 10.10 (s, br, 1 H, NH), 7.57- 7.61 (m, 2H), 7.17-7.22 (m, 2H), 7.06-7.09 (m, 2H), 6.97-7.0 (m, 1 H), 6.88 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 3.52 (s, 2H). 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-indol-5-ácido sulfónico piridin-3-ilamida Una solución de 5-clorosufonil-2-oxindol (3 g) y 3-aminopiridina (1.46 g) en piridina (15 mL) se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche tiempo durante el cual estuvo presente un sólido café. El sólido se filtró, se lavó con etanol y se secó bajo vacío para producir 1.4 g (38%) de 2-oxo-2, 3-dihidro-1 H-indol-5-ácido sulfónico pirid¡n-3-ilam¡da. 1H RMN (360 Hz, DMSO-d6) d 10.74 (s, 1 H, NH), 10.39 (s, 1 H, S02NH), 8.27-8.28 (d, 1 H), 8.21-8.23 (m, 1 H), 7.59-7.62 (m, 2H), 7.44-7.68 (m, H), 7.24-7.28 (m, 1 H), 6.69-6.71 (d, H), 3.54 (s, 2H). 5 EM m/z (APCI+) 290.2. 5-Feniloxindol 5-Bromo-2-oxindol (5 g, 23.5 milimoles) se disolvió en 1 10 mL de tolueno y 1 10 mL de etanol con agitación y un poco de calor. Se añadió í o tetrakis (trifenilfosfina) paladio(O) (1.9 g, 1 .6 milimoles) seguido por 40 mL (80 milimoles) de bicarbonato de sodio acuoso 2M. A esta mezcla se le añadió ácido bencenborónico (3.7 g, 30.6 milimoles) y la mezcla se calentó en un baño de aceite a 100°C por 12 horas. La reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo (500 mL), se lavó con bicarbonato de sodio saturado (200 15 mL), agua (200 mL), en HCI (200 mL) y salmuera (200 mL). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para obtener un sólido café. La trituración con diclorometano produjo 3.8 g (77%) de 5-fenil-2- oxindol como un sólido color canela. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.4 (br s, 1 H, NH), 7.57 (dd, J= 0 1.8 y 7.2 Hz, 1 H), 7.5 a 7.35 (m, 5H), 7.29 (m, 1 H), 6.89 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 3.51 (s, 2H, CH2CO). EM m/z 209 [M+].

De manera similar, los siguientes oxindoles se pueden preparar: 6- (3, 5- D¡clorofenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.46 (br, H, NH), 7.64 (d, J= 1.8 Hz, 2H), 7.57 (m, 1 H), 7.27 (m, 2H), 7.05 (d, J = 1.1 Hz, H), 3.5 (s, 2H). EM-EI m/z 277/279 [M]+. 6- (4-Butilfenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.39 (s, 1 H, NH), 7.49 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 8 Hz, 3H), 7.17 (dd, J = 1 .5 y 7.8 Hz, 1 H), 6.99 (d, J= 1.5 Hz, 1 H), 3.48 (s, 2H, CH2CO), 2.60 (t, J= 7.5 Hz, 2Hz, CH2CH3), 1 .57 (m, 2H, CH2), 1 · 32 (m, 2H, CH2), 0.9 (t, J= 7.5 Hz, 3H, CH3). 6- (5- lsopropil-2- metoxifenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.29 (br s, 1 H, NH), 7.16-7.21 (m, 2H), 7.08 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.97-7.01 (m, 2H), 6.89 (d, J = 0.8 Hz, 1 H), 3.71 (s, 3H, OCH3), 3.47 (s, 2H, CH2CO), 2.86 (m, 1 H, CH(CH3)2), 1 .19 (d, J= 6.8 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 281 [M]+. 6- (4-Et¡lfenil)-1 . 3-d¡hidro¡ndol-2-ona 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.39 (br s, 1 H, NH), 7.50 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.17 (dd, J = 1 .6 & 7.5 Hz, 1 ?), 6.99 (d, J = 1 .6 Hz, 1 ?), 3.48 (s, 2H, CH2CO), 2.63 (q, J= 7.6 Hz, 2H, CH2CH3), .20 (t, J= 7.6 Hz, 3H, CH2CH3). EM-EI m/z 237 [M]+. 6- (3- isopropilfenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.37 (br s, 1 H, NH), 7.43 (m, 1 H), 7.35-7.39 (m, 1 H), 7.17-7.27 (m, 3H), 7.01 (d, J= .8 Hz, 1 H), 3.49 (s, 2H, CH2CO), 2.95 (m, H, CH(CH3)2), 1.24 (d, J= 6.8 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 251 [M]+. 6- (2. 4- Dimetoxifeniiy- , 3- dihidroindol-2-ona H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.28 (br s, 1 H, NH), 7.17 (m, 2H), 6.93 (dd, J= 1.6 & 7.6 Hz, 1 H), 6.86 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 6.63 (d, J= 2.4 Hz, 1 H), 6.58 (dd, J = 2.4 & 8.5 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3. 74 (s, 3H, OCH3), 3.45 (s, 2H, CH2CO). EM-E! rn/z 269 [M]+. 6-Piridin-3-il-1 , 3- dihidroindoi 2-ona H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.51 (s, 1 H, NH), 8.81 (d, J= 2.5 Hz, 1 H), 8.55 (dd, J = 1.8 y 5.7 Hz, 1 H), 8 (m, 1 H), 7.45 (dd, J = 5.7 y 9.3 Hz, 1 H), 7.3 (m, 2H), 7. 05 (s, 1 H), 3.51 (s, 2H, CH2CO). EM m/z 2 0 [Mf. 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-índol-4- ácido carboxílico (3-cloro-4-etoxifeniP-amida A una solución de 4-carboxi-2-oxindol (200 mg, 1.13 milimoles) y 3- cloro-4- metoxifenilamina (178 mg, 1.13 milimoles) en dimetilformamida (15 mL) a temperatura ambiente se le añadió benzotriazol-l -iloxitris(dimetilamino) fosfonio hexafluorofosfato (reactivo BOP, 997 mg, 2.26 milimoles) seguido por 4- dimetilaminopiridina (206 mg, 1.69 milimoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 72 horas. La reacción se diluyó entonces con acetato de etilo (300 mL), se lavó con bicarbonato de sodio saturado (100 mL), agua, ácido clorhídrico 2N (100 mL), agua (3x200 mL) y salmuera. Luego se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró. El residuo se trituró con acetato de etilo para dar 2-oxo-2,3-dihidro-1 H-indol-4- ácido carboxílico (3-cloro-4- metoxifenil)-amida como un sólido rosa. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.50 (s, br, 1 H, NH), 10.12 (s, br, 1 H, NH), 7.9 (s, J= 2.5 Hz, 1 H), 7.62 (dd, J= 2.5 & 9 Hz, 1 H), 7.38 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 7.32 (t, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.13 (d, J = 9 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 3.83 (s, 3H, OCH3), 3.69 (s, 2H, CH2). EM-EI m/z 316 [ ]+. 4- Carboxi-2- oxindol A una solución de trimetilsilildiazometano en hexano (2 M) se le añadió gota a gota a una solución de 2.01 g de 2-cloro-3-carboxi-nitrobenceno en 20 mL de metanol a temperatura ambiente hasta que no ocurrió emisión de gas adicional. Luego se añadió ácido acético para detener el exceso de trimetilsilildiazometano. La mezcla de reacción se evaporó bajo vacio y el residuo se secó en un horno durante toda la noche. El 2-cloro-3-metoxicarbonilnitrobenceno obtenido fue lo suficientemente puro para la siguiente reacción. Se añadió dimetil malonato (6.0 mL) a una suspensión enfriada con hielo de 2.1 g de hidruro de sodio en 15 mL de DMSO. La mezcla de reacción se agitó a 100°C por 1 hora y luego se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió 2-cloro-3- metoxicarbonilnitrobenceno (2.15 g) en una porción y la mezcla se calentó a 100°C por 1.5 horas. La mezcla de reacción se enfrió entonces a temperatura ambiente, se vertió dentro de agua con hielo, se acidificó hasta pH 5 y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para dar 3.0 g del dimetil 2-metoxicarbonil-6-nitrofenil-malonato. Dimetil 2- metoxicarbonil-6- nitrofenilmalonato (3.0 g) se sometió a reflujo en 50 mL de ácido clorhídrico 6 N durante toda la noche. La mezcla se concentró hasta secarla, se añadieron 20 mL de etanol y 1.1 g de cloruro de estaño (II) y la mezcla se sometió a reflujo por 2 horas. La mezcla se filtró a través de Celite, se concentró y se sometió a cromatografía sobre gel de sílice utilizando acetato de etilo: hexano: ácido acético como eluyente para dar 0.65 g (37%) de 4-carboxi-2-oxindol como un sólido blanco. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 12.96 (s, br, 1 H, COOH), 10.74 (s, br, 1 H, NH), 7.53 (d, J = 8HZ, 1 H), 7.39 (t, J= 8 Hz, 1 H), 7.12 (d, J= 8 Hz, 1 H), 3.67 (s, 2H).

D. síntesis de 2-indolinonas sustituidas con pirrol EJEMPL0 1 4-Metii-5- (2-OXO-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico 4-metil-2-ácido pirrolcarboxílico etil éster (comercialmente disponible) se formiló utilizando el método A para dar (73%) de 5-formil-4-metil-2-pirrolácido carboxílico etil éster. Luego éste se hidrolizó utilizando el método B para dar 5-formil-4-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (58%). Oxindol (133 mg, 1 milimoles) se condensó con 5-formil-4-metil-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico (153 mg) utilizando el método D para dar 268 mg (100%) del compuesto del título como un sólido naranja-rojo. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.84 (s, br, 1 H, NH), 12.84 (s, br, 1 H, COOH), 10.98 (s, br, 1 H, NH), 7.82 (d, J= 7.5 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H, H-vinil), 7.18 (t, J= 7.5 Hz, 1 H), 7.01 (t, J= 7.5 Hz, 1 H), 6.88 (d, J= 7.5 Hz, 1 H), 6.71 (d, J= 2.2 Hz, 1 H), 2.32 (s, 3H, CH3). EM (modo negativo) 266.8 [M-1]+.

EJEMPLO 2 4- eti!-5-(1 -metil-2-oxo-1 ,2-dihidromdol-3-itidenmet¡l)-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico 1 - etil-1 , 3-dihidroindol-2-ona (147 mg, 1 milimoles) se condensó con 5-fprm¡!-4- metii- H-pirrol-2-ácido carboxílico (153 mg) utilizando el método D para dar 250 mg (86%) del compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.82 (s, br, 1 H, NH), 12.88 (s, br, 1 H, 7.83 (d, J= 7.5 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H, H-vinil), 7.26 (t, J= 7.5 Hz, H), 7.02-7.09 (m, 2H), 6.70 (d, J= 2.2 Hz, H), 2.32 (s, 3H, CH3). EM m/z 283.0 [M+1]+.

EJEMPLO 3 4- etil-5-(2-oxo-1 ,2-dihidr0indol-3-ilidenmetil)-1H-pirrol-2^cido carboxílico metil éster Oxindol (105 mg, 0.79 milimoles) se condensó con 5-formil-4-metil- H-pirrol-2- ácido carboxílico metil éster (1 10 mg, 0.67 milimoles) utilizando el método E para dar 153.2 mg (81 %) del compuesto del título. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.98 (s, br, H, NH), 10.97 (s, br, 1 H, NH), 7.82 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.67 (s, H, H-vinil), 7.2 (dt, J= 1.2 & 7.7 Hz, 1 H), 7.01 (dt, J= 1.2, 7.7 Hz, 1 H), 6.90 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 6.77 (d, J- 2 Hz, 1 H).

EM (ES) m/z 283 [M++1].

EJEMPLO 4 5- (5-Cloro-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-4-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico etil éster 5-Cloro-l , 3-dihidroindol-2-ona . (2.22 g, 13.2 milimoles) se condensó con 5-formil-4- metil-1 H-pirrol-2-ác¡do carboxílico etil éster (2.43 g) utilizando el método E para dar 4.1 g (94%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.95 (s, br, 1 H, NH), 7.98 (d, J= 2.2 Hz, 1 H, H-4), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7.18 (dd, J= 2. 2 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.87 (d, J= 8.3 Hz, 1 H, H-7), 7.34 (d, J= 1.8 Hz, 1 H, H-3'), 4.27 (q, J= 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.33 (s, 3H, CH3), 1 .29 (t, J= 7.2 Hz, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 330 [M+]„ EJEMPLO 5 5-(5-Cloro-5-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-4-rnetil-1H-pirrol-2-ác¡do carboxílico Una mezcla de 5- (5-cloro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-iIidenmetil)-4-meti H- pirrol-2-ácido carboxílico etil éster (1.3 g, 4 milimoles) y de hidróxido de potasio en metanol (25 mL) y etanol (25 mL) se calentó a reflujo por toda la noche. Los materiales insolubles fueron removidos mediante filtración y la mezcla se neutralizó con ácido clorhídrico 6N para dar 0.876 g (70%) del compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.80 (s, br, 1 H, NH), 12.90 (s, br, 1 H, COOH), 1 1.06 (s, br, 1 H, NH), 8.02 (d, J= 1 .8 Hz, H, H-4), 7.81 (s, 1 H, H-vinil), 7.20 (dd, J= 1 .8 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.89 (d, J= 8.3 Hz, 1 H, H-7), 6.72 (d, J = 1.8 Hz, 1 H, H-3'), 2.35 (S, 3H, CH3). EM-EI m/z 302 [M+].

EJEMPLO 6 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-4-metil-1 H-pirro^ carboxílíco (3-pirrolidin-l-il-propíl) amida 5~Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.16 g, 0.76 milimoles) se condensó con 5-formil-4- metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílíco (3-pirrolidin-1 -¡Ipropil) amida (0.2 g, preparada mediante el método C) para dar 60 mg (17%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 1 1 .02 (s, br, 1 H, NH), 8.42 (t, J= 5.8 Hz, 1 H, CONHCH2), 8.12 (d, J= 1.8 Hz, 1 H, H-4), 7.78 (s, H, H-vinil), 7.30 (dd, J= 1.8 & 8.4 Hz, 1 H, H-6), 6.82 (d, J=8. 4 Hz, 1 H, H-7), 6.77 (d, J = 2.4 Hz, H, H-3'), 3.22-3.31 (m, 2H, CH2), 2.38-2.43 (m, 6H, 3xCH2), 2.35 (s, 3H, CH3), 1 .62-1.71 (m, 6H, 3xCH2). EM-EI m/z 456 y 458 [M+-1 y M++2].

EJEMPLO 7 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidro¡ndol-3-iÍ¡denmet¡l)-4-metil- H-pirrol-2-ácido carboxilico (3-dietilamino-propiQamida 5-Bromo-1 ,3-dih¡dro¡ndol-2-ona (0.16 g, 0.75 milimoles) se condensó con 5-formil-4- met¡l-1 H-p¡rrol-2-ác¡do carboxilico (3-dietilarninopropil) amida (0.2 g, preparada mediante el método C) para dar 30 mg (8%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, H, NH), 11.02 (s, br, 1 H, H), 8.40 (m, 1 H, CONHCH2), 8.12 (d, J= 1.5 Hz, 1 H, H-4), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7. 30 (dd, J= 1.5 & 8.2 Hz, 1 H, H-6), 6.82 (d, J = 8.2 Hz, H, H-7), 6.78 (d, J = 2.4 Hz, 1 H, H-3'), 3.23 (m, 2H, CH2), 2.38-2.45 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.35 (s, 3H, CH3), 1.61 (m, 2H, CH2), 0.93 (t, J = 7.1 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 458 y 460 [M+- y M++2].

EJEMPLO 8 5- (5-Bromo-2-oxo-1, 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1H-pirrol-2-ácido carboxilico (2- dietilaminoetil) amida 5-Bromo-1 ,3-d¡hidroindol-2-ona (212 mg, 1 milimoles) se condensó con 5-formil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (2-dietiiaminoetif) amida (preparada a partir de etil pirrol-2- carboxiiato mediante el método A, B y luego C) para dar 62 mg (38%) del compuesto del título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.53 (s, br, 1 H, NH), 11.06 (s, br, 1 H, NH), 8.37 (t, 1 H, CONHCH2), 7.89 (m, 2H), 7.32 (dd, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.96 (s, 1 H), 6.80-6.84 (m, 2H), 3.3 (m, 2H, CH2), 2.45-2.55 (m, 6H, N(CH2 CH3)2 & CH2), 0.95 (t, J= 7.2 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 430 y 432 [M+-1 y M++ 1].

EJEMPLO 9 5-(2-Oxo-6-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1H-pirrol-2-ácido carboxilico (2- dietilaminoetil) amida 6-Fenil-1 ,3-dihidroindol-2-ona (209 mg, 1 milimol) se condensó con 5-formil-1 H- pirrol-2-ácido carboxilico (2-dietilaminoetil) amida para dar 182 mg (42%) de) compuesto del título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.56 (s, br, 1 H, NH), 11 .06 (s, br, H, NH), 8.36 (t, 1 H, CONHCH2), 7.77 (s, 1 H, H-vinil), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.64 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.46 (m, 2H), 7.32 (m, 2H), 7.1 1 (s, 1 H), 6.96 (m, 1 H), 6.80 (m, 1 H), 3.31-3.32 (m, 2H, CH2), 2.46-2.53 (m, 6H, N(CH2CH3)2 & CH2), 0.96 (t, J= 6.9 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 428 [M+].

EJEMPLO 10 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihtdroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (2- d¡etilaminoeti!)-metil-amida 5-Bromo-1 ,3-dihidroindol-2-ona (212 mg, 1 milimol) se condensó con 5-form¡l-1 H- pirrol-2-ác¡do carboxílico (2-dietilaminoetil) metilamida para dar 246 mg (55%) del compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.54 (s, br, 1 H, NH), 1.06 (s, uf, i H, NH), 7.90 (m, 2H), 7.33 (dd, J = 1.8 & 8.4 Hz, 1 H), 6.82-6.85 (m, 3H), 3.55 (s, br, 2H, CH2), 3.25 (s, br, 3H, NCH3), 2.57 (t, J = 6.5 Hz, 2H, CH2), 2.45 (m, 4H, ?(??2??3)2), 0.91 (m, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 444 y 446 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 11 5-(2-Oxo-6-fenil-1 ,2-dihidro¡ndol-3-¡lidenrnetil)-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil)metilamida 6-Fenii-1 , 3-dihidroindol-2-ona (209 mg, 1 milimoles) se condensó con 5-formil-1 H- pirrol-2-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) metilamida para dar 277 mg (63%) del compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.58 (s, br, 1 H, NH), 1 1.04 (s, br, 1 H, NH), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7.73 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.64 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.46 (m, 2H), 7.33-7.36 (m, 2H), 7.1 1 (s, 1 H), 6.84 (m, 1 H), 6.78 (m, 1 H), 3.55 (s, br, 2H, CH2), 3.25 (s, br, 3H, NCH3), 2.58 (t, 2H, CH2), 2.44 (m, 4H, N(CH2CH3)2), 0.92 (m, 6H, N(CH2CH3)2).

EJEMPLO 12 3-Metil-5-(2oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetin-1H-pirrol-2^cido carboxílíco (3- dietilaminopropil) amida Oxindol (66.5 mg, 0.5 milimoles) se condensó con 5-formil-3-metil-1 H-pirroI-2- ácido carboxílíco (3-dietilaminopropil) amida (preparada a partir de 3-formil-3-met¡l-1 H-pirrol-2- ácido carboxílíco etil éster mediante el método B luego C) para dar 39 mg (21 %) del compuesto del título. H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 13.34 (s, br, 1 H, NH), 10.88 (s, br, 1 H, NH), 7.62-7.67 (m, 3H), 7.17 (m, 1 H), 6.99 (m, 1 H), 6.87 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 6.63 (d, J= 1 Hz, 1 H), 3.26-3.32 (m, 2H, CH2), 2.41-2.48 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.29 (s, 3H, CH3), 1.63 (m, 2H, CH2), 0.93 (t, J= 7.2 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 380 [M+].

EJEMPLO 13 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-¡lidenmetil)-3-metil-1 H-pírrol-2- ácido carboxílco (3-dietilamino-propil)amida 5- Bromo- , 3-dihidroindol-2-ona (106 mg, 0.5 milimoles) se condensó con 5-formil-3-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida para dar 35 mg (15%) del compuesto del título. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.35 (s, br, 1 H, NH), 11.00 (s, br, 1 H, NH), 7.89 (d, J= 1 .9 Hz, H, H-4), 7.80 (s, 1 H, H-vinil), 7.74 (t, J= 5.3 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.31 (dd, J= 1 .9 & 8.4 Hz, 1 H, H-6), 6.83 (d, J= 8.4 Hz, 1 H, H-7), 6.63 (s, 1 H, H-3'), 3.26 (m, 2H, CH2), 2.41-2.48 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.29 (s, 3H, CH3), 1.63 (m, 2H, CH2), 0.93 (t, J= 7.1 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 458 y 460 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 14 3-IVIetil-5-(2-oxo-6-feriil-1,2-dihidroindol-3-il¡derimet¡l)-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (3-díetilaminopropil)amida 6- Fenil-1 ,3-dihidroindol-2-ona (105 mg, 0.5 milimoles) se condensó con 5-formil-3-met¡I-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida para dar 67.8 (30%) del compuesto del titulo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.37 (s, br, 1 H, NH), 11 .02 (s, br, 1 H, H), 7.23-7.73 (m, 1 1 H), 3.29 (m, 2H, CH2), 2.41 -2.48 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.29 (s, 3H, CH3), 1.64 (m, 2H, CH2), 0.94 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2 CH3)2). E -E! m/z 456 [M+].

EJEMPLO 15 5-(5-Metoxi-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3H Ídenmet¡l)-3-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílíco (3-dietilamino-propil) amida 5-Metox¡-1 , 3-dih¡droindol-2-ona (82.5 mg, 0.5 milimoies) se condensó con 5-formil- 3-metil-1 H-p¡rrol-2-ácido carboxílíco (3-díetilaminopropil) amida para dar 80 mg (39%) del compuesto del título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.45 (s, br, 1 H, NH), 10.70 (s, br, 1 H, NH), 7.68-7.70 (m, 2H), 7.32 (d, J= 1 .8 Hz, 1 H), 6.72-6.79 (m, 2H), 6.60 (s, 1 H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.28 (m, 2H, CH2), 2.41-2.48 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.29 (s, 3H, CH3), 1.63 (m, 2H, CH2), 0.93 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). E m/z 410 [M+].

EJEMPLO 16 5-(6- etoxi-2-oxo-1 ,2-dih¡droindol-3-M carboxilico (3-dietilamino-propil) amida 6-Metoxi-1 , 3-dihidroindol-2-ona (82.5 mg, 0.5 milimoles) se condensó con 5-formil- 3-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxilico (3-dietilaminopropil) amida para dar 63 mg (31 %) del compuesto del título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.22 (s, br, 1 H, NH), 10.86 (s, br, 1 H, NH), 7.39-7.63 y 6.37-6.55 (m, 6H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.3 (m, 2H, CH2), 2.45 (m, 6H, CH2 & N(CH2CH3)2), 2.28 (s, 3H, CH3), 1 .63 (m, 2H, CH2), 0.93 (m, 6H, N(CH2CH3)2). EM m/z 410 [M+].

EJEMPLO 17 3- 5-Bromo-2-oxo-1, 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H- isoindol-1- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil)amida 4, 5, 6, 7-Tetrahidro-2H-isoindol-1 -ácido carboxilico etil éster (May, Donald A.; Lash, Timothy D.; J. Org. Chem., 1992, 57: 18, 4820-4828) se formiló utilizando el método A luego el método B para dar 3-formil-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-isoindol-1 -ácido carboxilico. 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (1.43 g, 6.8 milimoles) se condensó con 3-formil- 4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-isoindol- -ácido carboxilico (2- dietilaminoetil) amida (1.97 g) para dar 2.2 g (67%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.47 (s, 1 H, NH), 11.0 (s, 1 H, NH), 8.0 (d, 1 H, NH), 7.70 (s, 1 H, CH), 7.28 (dd, J= 2.1 y 8.2 Hz, 1 H, ArH), 7.16 (m, 1 H, ArH), 6.8 (d, J= 8.3Hz, 1 H, ArH), 3.3 (s, 2H, CONH), 2.5 (m, 6H, 3xNCH2), 2.78 (br m, 2H, pirrol CH2), 2.72 (br m, 2H, pirrol CH2), 1 .7 (br m, 4H, N(CH2CH3)2), 1.74 (br s, 4H, CH2CH2CH2CH2), 0.96 (t, J= 7.4 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 484 y 486 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 18 3- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-d¡hidroindol-3-ilidenmetiQ-4. 5, 6, 7-tetrahídro-2H- isoindol-1- ácido carboxílico (3-dietilamino-propil)amida 5-Bromo-1 ,3-dihidroindol-2-ona (20 mg, 0.1 milimoles) se condensó con 3-formil- 4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-isoindol-1 -ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (30 mg) para dar 33 mg (46%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 10.9 (s, 1 H, NH), 8.0 (m, 1 H, NH), 7.68 (m, 1 H, ArH), 7.4 (m, 1 H, ArH), 7.29 (d, J= 1.9 y 8.5 Hz, 1 H, ArH), 6.8 (d, J= 8 Hz, 1 H, ArH), 2.7 (br m, 4H, 2xNCH2), 2.4 (m, 8H, 4xNCH2), 1 .7 (br m, 4H, N(CH2CH3)2), 1 .6 (br m, 2H, CH2CH2CH2), 0.93 (t, J= 7.4 Hz, 6H, N(CH2CH3)2).

EM-EI m/z 499 y 501 [M+ y M++2].

EJEMPLO 19 3- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dthidro'mdol-3-ilidenmetil)-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H- isoindol-1- ácido carboxílico (3-pirrolidin-1-il propi!) amida 5- Broino-l , 3-dihidroindol-2-ona (80 mg, 0.4 milimoles) se condensó con 3-formil- 4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-iso¡ndol-1 -ácido carboxílico (3-pirrolidin-1-ílpropil) amida (120 mg) para dar 43 mg (22%) del compuesto del título como un sólido color canela-naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.4 (s, 1 H, NH), 10.9 (s, 1 H, NH), 8.0 (m, 1 H, NH), 7.69 (m, 1 H, ArH), 7. 49 (m, H, ArH), 7.28 (d, J = 1.7 y 7.8 Hz, 1 H, ArH), 6.8 (d, J= 8 Hz, 1 H, ArH), 3.3 (br m, 2H, 2xNCH2), 2.8 (m, 4H, 2xpirrolCH2), 2.5 (br m, 4H, N(CH2CH3)2), 1.6 (br m, 8H, 2xpirrolCH2CH2l CH2CH2CH2 y CONHCH2). EM-EI m/z 497 y 499 [M+ y M++2].

EJEMPLO 20 3-í2-Oxo-6-piridin-3-il-1 ,2-dihidroindol-3-ii¡denmet¡Í)-4, 5, 6, 7-tetrahidro- 2H-isoindol- 1-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida 6- Piridin-3-il-1 , 3-dihidroindol-2-ona (60 mg, 0.4 milimoles) se condensó con 3- formil-4, 5, 6, 7-tetrah¡dro-2H-isoindol-1 -ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida (80 mg) para dar 50 mg (38%) del compuesto del titulo como un sólido rojizo. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.4 (s, 1 H, NH), 11 (s, 1 H, NH), 8.9 (d, 1 H, NH), 8.7 (dd, 1 H, ArH), 8.1 (dd, 1 H, ArH), 7.9 (d, 1 H, ArH), 7.6 (s, 1 H, c), 7.5 (dd, 1 H, ArH), 7.3 (dd, 1 H, ArH), 7.1 (m, 2H, ArH), 3.35 (m, 2H, CONHCH2), 2.8 (m, 4H, 2xpirrolCH2), 2.5 (br m, 6H, N(CH2CH3)2 y NCH2), 1 .75 (br s, 4H, 2xp¡rrolCH2CH2), 0.9 (t, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 484 [M+], EJEMPLO 21 4-Benzoi -5- (5-bromo-2-oxo- . 2-di idroindol-3-ilidenmetilV3-metil-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-dietilaminopropiQ amida A una mezcla de cloruro de benzoilo (1 equivalente) y cloruro de aluminio (1 equivalente) en dicloroetano a 0°C se le añadió etil 3, 5-dimetil-2-pirrolcarboxilato (1 equivalente). La mezcla se agitó a 80°C por 4 horas. Luego la mezcla se extrajo con acetato de etilo (EtOAc) y H20. Los extractos orgánicos combinados fueron lavados con bicarbonato de sodio saturado y salmuera, se secaron y se concentraron para dar (51 %) de 4-benzoil-3, 5-dimetiM H- pirrol-2-ácido carboxílico. Una mezcla de 4-benzoil-3, 5-dimetil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico etil éster (4.13 g, 15.2 milimoles) y nitrato de amonio cérico (33 g, 4 equivalentes) en 50 mL de tetrahidrofurano (THF): ácido acético (HOAc): H20 1 : 1 : 1 se sometió a reflujo durante toda la noche. Después la mezcla de reacción se enfrió, se extrajo con EtOAc y luego se basificó a pH 9 con carbonato de sodio. Luego la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y se concentró seguido por cromatografía en columna para dar 3.25 g (75%) de 4-benzoil-5-formil-3-metil-1 H-pirrol-2- ácido carboxílico etil éster como un sólido amarillo. 5-Bromo-1 , 3-dihidro-indol-2-ona se condensó con 4-benzoil-5-formil-3-metil- 1 H-pirrol-2-ácido carboxílico utilizando el método D para dar 4-benzoil-5- (5-bromo-2-oxo-1 , 2- dihidro-¡ndol-3-¡lidenmetü)-3-metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico. El ácido carboxílico anterior se acopló después con N, N-dietil-1 , 3-propandiamina utilizando el método C para dar el compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 7.96 (m, 1 H, CONHCH2), 7.76 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 7.68 (t, 1 H), 7.56 (m, 2H), 7.40 (s, 2H) 7.33 (dd, J = 1.6 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.84 (d, J= 8.3 Hz, 1 H, H-7), 3.33 (m, 2H, CH2), 2.42-2.46 (m, 6H, 3xCH2), 2.10 (s, 3H, CH3), 1.65 (m, 2H, CH2), 0.94 (t, J= 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). E por impacto del electrón m/z 564 [M++1].

EJEMPLO 22 4-Benzoil-5- (5-bromo-2-oxo-1 , 2-dih¡droindol-3-ilidenmettl)-3-metil-1H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-morfolin-4-ilpropil)am¡da 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 14.10 (s, 1 H, NH), 11.14 (br s, 1 H, NH), 7.92 (m, 1 H, CONCH2), 7.75 (m, 2H), 7.69 (t, 1 H), 7.56 (m, 2H), 7.42 (m, 2H), 7.33 (dd, J= .9 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.85 (d, J = 8.3 Hz, 1 H, H-7), 3.56 (m, 4H, 2xCH2), 3.33 (m, 2H, CH2), 2.35 (m, 6H, 3xCH2), 2.10 (s, 3H, CH3), 1.70 (m, 2H, CH2).

EJEMPLO 23 4-Benzo¡l-3-metíl-5- (2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmet¡l)-1H-pirrol-2- ácido carboxílico (3-pirroiidin-1-ilpropil) amida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.18 (s, 1 H, NH), 1 .14 (br s, 1 H, NH), 8.01 (m, 1 H, CONHCH2), 7.74 (m, 1 H), 7.67 (m, 1 H), 7.55 (m, 1 H), 7.32 (s, 1 H, H-vinil), 7.17 (m, 1 H), 6.92 (m, 1 H), 3.36 (m, 2H, CH2), 2.44 (m, H, 3xCH2), 2.11 (s, 3H, CH3), 1.65-1.75 (m, 6H, 3xCH2). EM por impacto del electrón m/z 482 [M+].

EJEMPLO 24 4-Benzoil-5-(5-bromo-2-oxo-1,2-dihidroindol-3-iiidenmetin-3-rnetil-1H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-pirrolidin-1-iipropil) amida 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 14.01 (s, 1 H, NH), 11 .18 (br s, 1 H, NH), 7.98 (m, 1 H, CONHCH2), 7.75 (m, 2H), 7.68 (m, 1 H), 7.55 (m, 2H), 7.40 (m, 2H), 7.33 (dd, J= 2.0 & 8.2 Hz, 1 H, H-6), 6.84 (d, J= 8.2 Hz, 1 H, H-7), 3.34 (m, 2H, CH2), 2.42-2.47 (m, 6H, 3xCH2), 2.09 (s, 3H, CH3), 1.70 (m, 2H, CH2), 1.64 (m, 4H, 2xCH2).

EJEMPLO 25 4-Benzoil-3-metil-5- (2-oxo-6-fenil-1 , 2-dihidroindol-3-il¡denmetil)-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico 3-pirrol¡d¡n-1-ilpropil)amida H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14. 15 (s, 1 H, NH), 11 .16 (br s, 1 H, NH), 7.98 (m, H, CONHCH2), 7.77 (d, J= 7.7 Hz, 2H), 7.69 (m, 1 H), 7.53-7.63 (m, 4H), 7.44 (m, 2H), 7.33-7.37 (m, 2H), 7.24 (s, 2H), 7.12 (s, 1 H), 3.36 (m, 2H, CH2), 2.43-2.48 (m, 6H, 3xCH2), 2.12 (s, 3H, CH3), 1.74 (m, 2H, CH2), 1 . 69 (m, 4H, 2xCH2). EM por impacto del electrón m/z 558 [M+].

EJEMPLO 26 ^Benzoil-S-fB-metoxi^-oxo-l ^-dihidroindol-S-iiidenmetin-S-metil-IH- pirrol-2- ácido carboxílico (3-pirrolidtn-1-ilpropil) amida 1H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 13.99 (s, 1 H, NH), 11 .05 (br s, 1 H, NH), 7.93 (m, 1 H, CONHCH2), 7.72 (m, 2H), 7.65 (m, 1 H), 7.54 (m, 2H), 7.15 (s, 1 H, H-vinil), 7.04 (d, J= 8.4 Hz, 1 H, H-4), 6.51 (dd, J= 2.3 & 8.4 Hz, 1 H, H-5), 6.44 (d, J= 2.3 Hz, 1 H, H-7), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.35 (m, 2H, CH2), 2.42-2.46 (m, 6 H, 3xCH2), 2.10 (s, 3H, CH3), 1.72 (m, 2H, CH2), 1.65 (m, 4H, 2xCH2). E por impacto del electrón m/z 512 [M+].

EJEMPLO 27 4-Benzoil-5-(5-metoxi-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-iiidenmetin-3-metil-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-p¡rrolidín-1-ilpropil) amida H RMN (360 MHz, DMSO~d6) d 14.24 (s, 1 H, NH), 10.90 (br s, 1 H, NH), 7.97 (m, 1 H, CONHCH2), 7.75 (d , J= 7.2 Hz, 2H), 7.69 (m, 1 H) 7.56 (m, 2H), 7.24 (s, 1 H, H-vinil), 6.79 (m, 2H), 6.66 (m, 1H), 3.67 (s, 3H, OCH3), 3.34 (m, 2H, CH2), 2.43-2.48 (m, 6H, 3xCH2), 2.14 (s, 3H, CH3), 1.71 (m, 2H, CH2), 1 . 66 (m, 4H, 2xCH2). EM por impacto del electrón m/z 5 2 [M+], EJEMPLO 28 4-Benzoil-5-(5-fiuoro-2-oxo-1,2-dihidroindol-3-ilidenmetií 3-rnettl-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-pírrolidin-1-ilpropil) amida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.20 (s, 1 H, NH) 1 1.14 (br s, 1 H, NH), 8.03 (m, 1 H, CONHCH2), 7.75 (m, 2H), 7.68 (m, 1 H), 7.55 (m, 2H), 7.38 (s, 1 H, H-vinil), 7.08 (m, 1 H), 7.01 (m, 1 H), 6.87 (m, 1 H), 3.34 (m, 2H, CH2), 2.42-2.48 (m, 6H, 3xCH2), 2.09 (s, 3H, CH3), 1 -70 (m, 2H, CH2), 1.65 (m, 4H, 2xCH2). EM por impacto del electrón m/z 500 [M+].

EJEMPLO 29 4-Acetil-5-(5-bromo-2-oxo-1,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-3-metil-1H-pirrol- 2- ácido carboxílico (3-dietilam¡nopropil) amida 5-Bromo-1 , 3-dihidro-indol-2-ona se condensó con 4-acetil-5-formil-3-metil-1 H- pirrol-2-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (preparada a partir de 4-acetil-5-formil-3- metil-1 H-pirrol-2-ácido carboxílico etil éster mediante ei método B luego el método C) para dar el compuesto del título. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.19 (s, 1 H, NH), 1 1 .19 (br s, 1 H, NH), 8.15 (m, 1 H, CONHCH2), 8.11 (s, 1 H, H-vinil), 7.72 (d, J= 1.8 Hz, H, H-4), 7.38 (dd, J= 1.8 & 8.2 Hz, 1 H, H-6), 6.87 (d, J= 8.2 Hz, 1 H, H-7), 3.27 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.46 (m, 9H, CH3 & 3xCH2), 1.64 (m, 2H, CH2), 0.93 (t,- J= 7.1 Hz, 6H, N(CH2CH3)2).

EJEMPLO 30 4-Ace†.il-5-f5-bromo-2-oxo-1,2-di idroindol-3-ilidenmetil)-3-metil-1H-pirrol- 2- ácido carboxílico (3-pirrolidin-1-ilpropil)amida 1H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 8.14 (m, 1 H, CONHCH2), 8.10 (s, 1 H, H-vinil), 7.70 (d, 1 H, H-4), 7.36 (dd, J= 1 .6 & 8.1 Hz, 1 H, H-6), 6.85 (d, J= 8.1 Hz, 1 H, H-7), 3.32 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.35-2.48 (m, 6H, 3xCH3), 1.65-1.71 (m, 6H, 3xCH2). EM m/z 499 & 501 [M+] & [M++2].

EJEMPLO 31 4-Acetil-5- (5-bromo-2-oxo- , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-3-metil-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-morfolin-4-ilpropil) amida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.20 (s, 1 H, NH), 1 1 .26 (br s, 1 H, NH), 8.09 (m, 2H, H-vinil & CONHCH2), 7.73 (d, J= 1 .5 Hz, 1 H, H-4), 7.38 (dd, J= 1 .5 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.87 (d, J=8.3 Hz, 1 H, H-7), 3.55 (m, 4H, 2xCH2), 3.26 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.35 (m, 6H, 3xCH3), 1.68 (m, 2H, CH2). EM-EI m/z 514 & 516 [M+-1] & [M+-1].

EJEMPLO 32 4-Acetil-5- (5-bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-3-metíl- H- pirrol-2- ácido carboxílico (3-hidroxipropii)amida 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 14.17 (s, 1 H, NH), 11.25 (br, s, 1 H, NH), 8.10 (s, 1 H, H-vinil), 8.03 (m, 1 H, CONHCH2), 7.71 (br s, 1 H, H-4), 7.37 (br d, J = 8.4 Hz, 1 H, H-6), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 1 H, H-7), 4.51 (br s, 1 H, OH), 3.51 (br s, 2H, CH2), 3.36 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.43 (s, 3H, CH3), 1 .70 (m, 2H, CH2). EM-EI m/z 445 & 447 [M+-1] & [M++1].

EJEMPLO 34 4-Acetil-5- (5-bromo-2-oxo- , 2-dihidroindol-3-iiidenmetin-3-metil-1 H- pirrol-2- ácido carboxílico (2-morfolin-4-iletil)amida RMN (350 MHz, DMSO-d6) d 14.19 (s, 1 H, NH), 11.14 (br s, 1 H, NH), 8.10 (s, 1 H, H-vinil), 7.84 (m, 1 H, CONCH2), 7.71 (d, J=1. 8 Hz, 1 H, H-4), 7.38 (dd, J= 1.8 & 8.2 Hz, 1 H, H-6), 6.87 (d, J= 8.2 Hz, 1 H, H-7), 3.58 (m, 4H, 2xCH2), 3.40 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.45 (m, CH3 & CH2). EM-EI m/z 500 & 502 [M+-1] & [M+-1].

EJEMPLO 35 ^Acetil-S-fS-bromo^-oxo-l ^-dihidroindol-S-ilidenmetiiVS-metil-I H-pirrol- 2- ácido carboxílico (2-pírrolidin-1-iletil)amida 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 14.17 (s, 1 H, NH), 1 1.23 (s, 1 H, NH), 8.1 1 (s, 1 H, H-vinil), 7.91 (m, 1 H, CONHCH2), 7.73 (d, J= 1.9 Hz, 1 H, H-4), 7.39 (dd, J= 1 .9 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.88 (d, J= 8.3 Hz, 1 H, H-7), 3.40 (m, 2H, CH2), 2.62 (m, 2H, CH2), 2.57 (s, 3H, CH3CO), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.44 (s, 3H, CH3), 1.69 (m, 4H, 2xCH2).

EJEMPLO 36 4-Acetii-5- (5-bromo-2-oxo-1. 2-d¡hidroindo!-3-ilidenmetíl)-3-metil-1 H- pírrol-2- ácido carboxílico G2- (4-hidrox¡fenil)etin amida 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.21 (s, 1 H, NH), 1.18 (s, 1 H, OH), 9.09 (s, 1 H, NH), 8.06-8.10 (m, 2H), 7.73 (s, 1 H), 7.38 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.04 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 6.88 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 6.67 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 3.42 (m, 2H, CH2), 2.72 (m, 2H, CH2), 2.56 (s, 3H, CH3CO), 2.37 (s, 3H, CH3). EM-EI m/z 507 & 509 [M+-1] & [M++1].

EJEMPLO 37 5- (5-Bromo-2-oxo- , 2-dih¡droindol-3-ilidenmetil)-2-isopropil-4-fen¡l-1 H- pirroi-3- ácido carboxílico (3-dietilaminopropií) amida Una mezcla de hidrocloruro de 2-aminoacetofenona (1 equivalente), isobutirilacetato de etilo (1 .2 equivalentes) y acetato de sodio (2.4 equivalentes) en H20 se agitó a 100°C por 18 horas y luego se enfrió a temperatura ambiente. La capa acuosa se decantó y el aceite se disolvió en acetato de etilo. Luego se lavó con agua y salmuera y luego se secó para dar (93%) de 2- isopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster como un aceite café rojizo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 1 1 .21 (s, br, 1 H, NH), 7.14-7.27 (m, 5H), 6.70 (d, J= 2.7 Hz, H), 4.02 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.65 (m, 1 H, CH(CH3)2), 1 -22 (d, J = 7.5 Hz, 6H, CH(CH3)2), 1.04 (t, J= 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 257 [M+]. El pirrol anterior se formiló utilizando el método A para dar (41 %) 5-form¡l-2- isopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster como un sólido rojizo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 12.35 (s, br, 1 H, NH), 9.14 (s, 1 H, CHO), 7.36 (s, 5H), 3.96 (q, J= 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.74 (m, 1 H, CH(CH3)2), 1 .29 (d, J = 6.9 Hz, 6H, CH(CH3)2), 0.90 (t, J= 7. 1 Hz, 3H, OCH2CH3).

E -EI m/z 285 [ +]. El ácido pirrolcarboxílico éster se hidrolizó utilizando el método B para dar (57%) de 5- formil-2-isopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico como un sólido café claro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 12.28 (s, br, 1 H, COOH), 12.02 (s, br, 1 H, NH), 9.10 (s, 1 H, CHO), 7.35 (s, 5H), 3.81 (m, 1 H, CH(CH3)2), 1.28 (d, J= 6.9 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 257 [M+]. 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (120 mg, 0.31 milimoles) se condensó con 5-formil- 2-¡sopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (preparada mediante el método C) para dar 120 mg (71 %) del compuesto del título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.23 (s, br, 1 H, NH), 11.08 (s, br, 1 H, NH), 7.38- 7.55 (m, 7H, Ar-H & CONHCH2), 7.30 (s, H, H-vinil), 7.26 (dd, J= 1. 8 & 7.8 Hz, 1 H), 6.85 (d, J= 8.7 Hz, 1 H), 3.36 (m, 1 H, CH(CH3)2), 3.07 (m, 2H, CH2), 2.34 (q, J= 7.1 Hz, 4H, N(CH2CH3)2), 2.22 (t, J= 6.9 Hz, 2H, CH2), 1.40 (m, 2H, CH2), 1.31 (d, J= 6.9 Hz, 6H, CH(CH3)2), 0.86 (t, J= 7.1 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM m/z 565.1 [ ++1].

EJEMPLO 38 5* (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenrrietií)-2-ísopropil-4-fenil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3-pirroiidin-1-ilpropi0 amida 5- (5-bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-iIidenmetil)-2-isopropil-4-fenil-1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (127 mg, 0.28 milimoles) se condensó con 3-pirrolidin-1 -il- propilamina (43 mg, 0.336 milimoles) para dar 140 mg (66%) del compuesto del título. 1H R N (300 MHz, DMSO-d6) d 14.40 (s, br, H, NH), 7.38-7.47 (m, 7H), 7.23-7.27 (m, 2H), 6.84 (d, J= 8.1 Hz, H), 3.36 (m, 1 H, CH(CH3)2), 3.08 (m, 2H, CH2), 2. 30 (m, 4H, 2xCH2), 2.20 (t, J= 7.0 Hz, 2H, CH2), 1.62 (m, 4H, 2xCH2), .42 (t, J= 7.0 Hz, 2H, CH2), .31 (d, J= 7.2 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 560 y 562 [ +-1] y [M++1].

EJEMPLO 39 5- 5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmeti)-2-isopropil-4-fenil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (57, g. 0.27 milimoles) se condensó con 5-formil-2- ¡sopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (120 mg) para dar 78 mg (53%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.23 (s, br, 1 H, NH), 1 1 .09 (s, br, 1 H, NH), 7.38-7.51 (m, 6H), 7.25-7.28 (m, 2H), 7.19 (t, 1 H, CONHCH2), 6.85 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 3.43 (m, 1 H, CH(CH3)2), 3. 1 (m, 2H, CH2), 2.28-2.39 (m, 6H, N(CH2CH3)2 & CH2, 1.31 (d, J= 6.9 Hz, CH(CH3)2), 0.85 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2. EM-EI m/z 548 y 550 [M+-1 ] y [M++1 ]. ¦ EJEMPLO 40 S^S-Bromo^-oxo-l ^-dihídroindol-S-ilidenmetin^-isopropil^-fenil-IH- pirrol-3- ácido carboxílico f3-(4-metilpiperazin-1-il) propillamída 5-Bromo-1 , 3-dih¡dro¡ndol-2-ona (53 mg, 0.25 milimoles) se condensó con 5-formil-2- ¡sopropil-4-fen¡l-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico 3- (4-metilpiperazin-1-il) propil amida (300 mg) para dar 65 mg del compuesto del título. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.22 (s, br, 1 H, NH), 1 .08 (s, br, 1 H, NH), 7.23-7.50 (m, 9H), 6.85 (d, J= 8.7 Hz, 1 H), 3.37 (m, 1 H, CH(CH3)2), 3.05 (m, 2H, CH2), 2.24 (m, 8H, 4xCH2), 2.1 1 (m, 5H, CH2 & CH3), 1.42 (m, 2H, CH2), 1.31 (d, J= 7.2 Hz, 6H, CH(CH3)2). E -Ei m/z 589 y 591 [M+-1] y [ ++1].

EJEMPLO 41 5- (5-Bromo-2-oxo-1. 2-dih¡dro¡ndol-3-ilidenmetil)-2-isopropil-4-fenií-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico 5-Bromo-l , 3-di idroindol-2-ona (170 mg, 0.8 milimoles) se condensó con 5-formil-2- isopropil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (205 mg) utilizando el método D para dar 210 mg (58%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.31 (s, br, 1 H, NH), 11.16 (s, br, 1 H, NH), 7.26-7.44 (m, 7H), 7.1 (s, 1 H, H-vinil), 6.85 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 3.78 (m, 1 H, CH(CH3)2), 1 .34 (d, J= 6. 9 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 452 [M++1].

EJEMPLO 42 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol"3-il¡denmetil)-2-metil-4-fenil-1 H-pirrol- 3- ácido carboxílico (2-pirrolid¡n-1-iletil)amida 5-Bromo-1 , 3-d¡hidroindol-2-ona (44 mg, 0.21 milimoles) se condensó con 5-formiI-2- metil-4-fenil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1 -iletiI) amida (70 mg, preparada de la misma manera que el análogo de isopropilo, anteriormente mencionado) para dar 0.03 g (27%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.87 (s, br, 1 H, NH), 1 1.1 1 (s, br, 1 H, NH), 7.36-7.51 (m, 6H), 7.26 (dd, J= 1.8 & 8.1 Hz, 1 H), 7.2 (s, 1 H, H-vinil), 7.09 (m, 1 H, CONHCH2), 6.83 (d, J= 8.1 Hz, 1 H), 3.17 (m, 2H, NCH2), 2.48 (m, CH3), 2.29-2.35 (m, 6H, 3xNCH2), 1.59 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 518 y 520 [M+-1] y [M++1].

EJEMPLO 43 5- 6- (2-fVletoxifenil)-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetii-2-metil-4-fenil- 1H- pirrol-3-ácido carboxílico 2-pirrolidin-1-ilet¾l) amida 6- (2-Metoxifenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (50 mg, 0.21 milimoles) se condensó con 5-formil-2-metíl-4-fenil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1 -iletil) amida (70 mg) para dar 0.04 g (35%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.82 (s, br, 1 H, NH), 11 .02 (s, br, 1 H, NH), 7.48 (m, 2H), 7.43 (m, 1 H), 7.38 (m, 2H), 7.32 (m, 1 H), 7.24 (m, 2H), 7.16 (s, 1 H, H-vinil), 7.08 (m, 2H), 7.03 (m, 1 H), 7.0 (m, 2H), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.19 (m, 2H, NCH2), 2.49 (m, CH3), 2.32-2.38 (m, 6H, 3xNCH2), 1.59 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 546 [M+].

EJEMPLO 44 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindoÍ-3-iíidenmetil)-2-rnetil-4-fenil-1H-p¡rrol- 3- ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida 5-Bromo-1 , 3-di idroindol-2-ona (46 mg, 0.22 milimoles) se condensó con 5-formil~2- metil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida (65 mg) para dar 60 mg (55%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.86 (s, br, 1 H, NH), 11.09 (s, br, 1 H, NH), 7.47-7.49 (m, 2H), 7.38-7.41 (m, 4H), 7.26 (dd, J= 2.2 & 8.3 Hz, 1 H), 7.21 (s, 1 H, H-vinil), 7.04 (m, 1 H, CONHCH2), 6.77 (d, J= 8.3 Hz, 1 H), 3.15 (m, 2H, NCH2), 2.48 (m, CH3), 2.16 (t, J= 6.8 Hz, 2H, 3xNCH2), 2.02 (s, 6H, 2xNCH3). EM m/z 493 y 494.8 [M+ y M++2].

EJEMPLO 45 5- 6- (2-Metoxifer¡il)-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-Hidenmetil-2-metil-4-fenil- 1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetüaminoetií) amida 6-(2-Metoxifenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (53 mg, 0.22 milimoles) se condensó con 5-formil-2-metil-4-fenil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida (65 mg) para dar 0.05 g (44%) del compuesto del título como una goma naranja.

H RMN (300 Hz, DMSO-CÍ6) d 13.82 (s, br, 1 H, NH), .02 (s, br, 1 H, NH), 7.37-7.52 (m, 5H), 7.32 (m, 1 H), 7.22-7.27 (m, 2H), 7.16 (s, 1 H), 7.08 (m, 2H), 7.03 (m, 1 H), 7.0 (m, 2H), 3.74 (s, 3H, OCH3), 3.15 (m, 2H, NCH2), 2.49 (m, CH3), 2.16 (t, J= 6. 5 Hz, 2H, NCH2), 2.02 (s, 6H, 2xNCH3). EM m/z 521 [M++1].

EJEMPLO 46 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilid^ 3- ácido carboxílico etil éster 5-Bromo- , 3-dihidroindol-2-ona (60 mg, 0.29 milimoles) se condensó con 5-formil-2- metil-4-fenil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster (75 mg) para dar 78 mg (60%) del compuesto del" título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 14.01 (s, br, 1 H, NH), 1 1.13 (s, br, 1 H, NH), 7.42-7.46 (m, 3H), 7.27-7.34 (m, 4H), 7.12 (s, 1 H), 6.84 (dd, J = 2.2 & 8.3 Hz, H), 3.99-4.03 (m, 2H, OCH2CH3), 2.61 (s, 3H, CH3), 0.98-1 .03 (m, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 450 y 452 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 47 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2-d¡hidroindol-3-¡lidenmetil)-2-metil-4-f8nii-1H-pirrol- 3- ácido carboxílico (3-dietilamínopropil) amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.47 g, 2.2 milimoles) se condensó con 5-formil-2- metil-4-fen¡l-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (0.75 g) para dar 0.1 1 g (42%) del compuesto del título como un sólido naranja. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.86 (s, br, 1 H, NH), 7.42-7.46 (m, 3H), 7.37-7.50 (m, 7H), 7.24-7.28 (m, 2H), 6.83 (d, J= 8.1 hz, 1 H), 3.09 (m, 2H, NCH2), 2.45 (s, 3H, CH3), 2.38 (q, J= 7.1 Hz, 4H, 2xNCH2CH3), 2.26 (t, J= 6. 9 Hz, 2H, NCH2), 1.42 (m, 2H, NCH2), 0.87 (t, J= 7.1 Hz, 6H, 2xNCH2CH3). EM-EI m/z 535.0 y 537 [M+ y M++2].

EJEMPLO 48 5-(5-Bromo-2-oxo-1 , 2-d¡hidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dimetilamino-etil) amida Una mezcla de tert-butil 3-oxobutirato y nitrito de sodio (1 equivalente) en ácido acético se agitó a temperatura ambiente para dar tert-butil-2-hidroximino-3-oxobutirato. Etil-3-oxobutirato (1 equivalente), polvo de zinc (3.8 equivalentes) y el tert-butil-2- hidroximino-3-oxobutirato sin purificar en ácido acético se agitó a 60° C por 1 hora. La mezcla de reacción se vertió dentro de H20 y el filtrado se recolectó para dar (65%) 2-tert-butiloxicarbonil-3, 5-dimetil-4-etoxicarbonilpirrol. Una mezcla de 2-tert-butiloxicarbonil-3, 5-dimetil-4-etoxicarbonilpirrol y trietilortoformato (1.5 equivalentes) en ácido trifluoroacético se agitó a 15°C por 1 hora. La reacción se concentró y el residuo se purificó para dar (64%) 2,4-dimetil-3- etoxicarbonil-5-formilpirrol como agujas amarillas. 2, 4-Dimetil-3-etoxicarbonil-5-formilpirrol se hidrolizó utilizando el método B para dar (90%) 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 12 (br s, 2H, NH y C02H), 9.58 (s, 1 H, CHO), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3). EM m/z 267 [M+]. 5-Bromo-l , 3-dihidroindol-2-ona (0.17 g, 0.8 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida (0.2 g, preparada mediante el método C) utilizando el método B para dar 0.3 g (83%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, br, 1 H, NH), 10.94 (s, br, 1 H, NH), 8.07 (d, J = 1.8 Hz, 1 H, H-4), 7.75 (s, 1 H, H-vinil), 7.44 (t, J= 5.2 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.24 (dd, J= 1 .8 & 8.4 Hz, 1 H, H-6), 6.82 (d, J= 8.4 Hz, 1 H, H-7), 3.26-3.33 (m, 2H, NCH2), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.38 (t, J= 6.7 Hz, 2H, NCH2), 2.18 (s, 6H, N(CH3)2). EM-EI m/z 430 y 432 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 49 2, 4-Dimeíil-5- (2-oxo-6-fenil-1. 2-dih¡droindol-3-ilidenmetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dímetilam¡noetil)amida 6-Fenil-1 , 3-dihidro¡ndol-2-ona (0.17 g, 0.8 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- d¡metil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida (0.2 g) para dar 0.13 g (36%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.59 (s, br, 1 H, NH), 10.93 (, br, 1 H, NH), 7.85 (d, J= 7.92 Hz, 1 H, H-4), 7.63-7.65 (m, 3H), 7.40-7.47 (m, 3H, ), 7.32-7.36 (m, 1 H, Ar-H), 7.30 (dd, J= 1. 6 & 7.9 Hz, 1 H, H-5), 7.1 1 (d, J= 1.6 Hz, 1 H, H-7), 3.28-3.34 (m, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.38 (t, J= 6. 8 Hz, 2H, NCH2), 2.18 (s, 6H, N(CH3)2). EM-EI m/z 428 [ +].

EJEMPLO 50 5-(5-Cioro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1H-pirrol-3- ácido carboxíüco (2-dimetilamino-efi}) amida 5-Cloro-l , 3-dihidroindol-2-ona (0.1 g, 0.6 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxíüco (2-dimetilaminoetil) amida (0.15 g) para dar 0.22 g (90%) del compuesto de! título como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 10.98 (, br, 1 H, NH), 7.96 (d, J= 2.0 Hz, 1 H, H-4), 7.75 (s, 1 H, H-vinil), 7.50 (t, J - 5.5 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.12 (dd, J= 2.0 & 8.3 Hz, 1 H, H-6), 6.86 (d, J = 8.3 Hz, 1 H, H-7), 3.26-3.31 (m, 2H, NCH2), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 2.36 (t, J = 6.6 Hz, 2H, NCH2), 2.17 (s, 6H, N(CH3)2). EM-EI m/z 386 [M+].

EJEMPLO 51 5 5-Bromo-2-oxo-1 ,2-d¡hidroindol-3-iltdenmetil)-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.17 g, 0.8 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (0.2 g) para dar 0.09 g (26%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 10.98 (, br, 1 H, NH), 8.09 (d, J= 1 .7 Hz, 1 H, H-4), 7.76 (s, 1 H, H-vinii), 7.42 (t, J = 5.5 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.24 (dd, J = 1.7 & 8.0 Hz, 1 H, H-6), 6.82 (d, J= 8.0 Hz, 1 H, H-7), 3.23-3.32 (m, 2H, NCH2), 2.46-2.55 (m, 6H, 3xNCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.42 (s, 3H, CH3), 0.96 (t, J= 7.2 Hz, 6H, 2xNCH2CH3). EM-EI m/z 458 y 460 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 52 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2,4-dimetil-1 H-^ ácido carboxílico (2-pirroíidin-1-il-et¡l)amida 5-Bromo-1 , 3-dih¡droindol-2-ona (0.09 g, 0.4 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida (0.1 g) para dar 0.14 g (81 %) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 10.98 (, br, 1 H, NH), 8.09 (d, J= 1.9 Hz, 1 H, H-4), 7.76 (s, 1 H, H-vinil), 7.53 (t, J = 5.5 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.24 (dd, J= 1 .9 & 8.5 Hz, H, H-6), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 1 H, H-7), 3.29-3.35 (m, 2H, NCH2), 2.54 (t, J= 6.9 Hz, 2H, NCH2), 2.47 (m, bajo DMSO), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.66-1.69 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 456 y 458 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 53 5- (5-Bromo-2-oxo-1, 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3-imidazol-1-il-propi0amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.09 g, 0.4 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- d¡metil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (3-¡midazol-1-ilpropil) amida (0.1 g) para dar 0.1 g (59%) del compuesto del título como un sólido naranja. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.63 (s, br, 1 H, NH), 10.99 (, br, 1 H, NH), 8.09 (d, J= 2.2 Hz, 1 H, H-4), 7.77 (s, 1 H, H-vinil), 7.71 (t, J= 5.7 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.65 (s, 1 H, Ar-H), 7.25 (dd, J= 2.2 & 8.4 Hz, 1 H, H-6), 7.20 (s,' 1 H, Ar-H), 6.89 (s, 1 H, Ar-H), 6.81 (d, J = 8. 4 Hz, 1 H, H-7), 4.02 (t, J = 6. 7 Hz, 2H, NCH2), 3.18 (q, J = 6.7 Hz, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 1.93 (m, 2H, CH2). EM-EI m/z 467 y 469 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 54 5- f6-(2-Metoxifenil)-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil]-2, 4-dimetli-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida 6-(2- etoxifenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (30 mg, 0.13 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dimetilaminoetil) amida (30 mg) para dar 0.06 g (100%) del compuesto del título como una goma amarillo-naranja. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, br, 1 H, NH), 10.89 (s, br, 1 H, NH), 7.79 (d, J= 8.4 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H, H-vinil), 7.46 (t, J= 5.5 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.28-7.35 (m, 2H), 6.99-7.11 (m, 4H), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.27-3.31 (m, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.39 (s, 3H, CH3), 2.37 (m, 2H, NCH2), 2.18 (s, 6H, N(CH3)2). EM-EI m/z 458 [M+].

EJEMPLO 55 5-r6-(3-Metoxifenil)-2-oxo-1,2-dihidroin^ pirrol-3- ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida 6-(3-Metoxifenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (30 mg, 0.13 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida (30 mg) para dar 8 mg (14%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.59 (s, br, H, NH), 10.92 (s, br, 1 H, NH), 7.84 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H, H-vinil), 7.42 (m, 1 H, CONCH2), 7.36 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.29 (dd, J= 1.6 & 7.6 Hz, 1 H), 7.20 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.14 (d, J=2.8 Hz, 1 H), 7.1 1 (d, J- 1 .6 Hz, 1 H), 6.91 (dd, J= 2.8 & 7.8 Hz, 1 H), 3.82 (s, 3H, OCH3), 3.21 -3.33 (m, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 2.36-2.40 (m, 2H, NCH2), 2.18 (s, 6H, N(CH3)2).

EM-EI m/z 458 [M+].

EJEMPLO 56 2, 4-Dimetil-5- (2-oxo-5-fenil-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico 2-dietilaminoetil) amida 5-Fenil-l , 3-dihidroindol-2-ona (80 mg, 0.4 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (0.1 g) utilizando el método B para dar 79 mg (46%) del compuesto del título. 1H R N (300 MHz, DMSO-d6) d 13.66 (s, br, 1 H, NH), 10.95 (, br, 1 H, NH), 8.15 (d, J= 1.2 Hz, 1 H), 7.81 (s, 1 H, H-vinil), 7.71 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.40-7.47 (m, 4H), 7.31 (m, 1 H), 6.95 (d, J= 8.1 Hz, 1 H), 3.2-3.31 (m, 2H, NCH2), 2.46-2.55 (m, 6H, 3xNCH2), 2.44 (s, 6H, 2xCH3), 0.96 (t, J= 7.4 Hz, 6H, 2xNCH2CH3). EM-EI m/z 456 [M+].

EJEMPLO 57 2.4-Dimetil-5-(2-oxo-5-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1H-pirroi-3- ácido carboxílico 2-pirrolidin-1-iietii) amida 5-Fenil-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.04 g, 0.2 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1- ¡letil) amida (0.04 g) para dar el compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H R N (300 MHz, DMSO-d6) d 13.65 (s, br, 1 H, NH), 10.96 (, br, 1 H, NH), 8.15 (d, J= 1.0 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H, H-vinil), 7.71 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.49 (t, J = 6.3 Hz, 1 H, CONCH2), 7.41-7.46 (m, 3H), 7.31 (m, 1 H), 6.95 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 4.08 (m, 4H, 2xNCH2), 3.32 (m, 2H, NCH2), 2.55 (t, J= 7.1 Hz, 2H, NCH2), 2.47 (m, bajo DMSO), 2.43 (s, 6H. 2xCH3), 1.66 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 454 [M+].

EJEMPLO 58 2,4-Pimetil-5-(2-oxo-5-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3-¡midazol-1-ilpropil) amida 5-Fenil-1 , 3-dihidroindol-2-ona (8 mg, 0.04 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-¡midazol-1 -ifpropii) amida (10 mg) para dar 10 mg (59%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.67 (s, br, 1 H, NH), 10.96 (, br, 1 H, NH), 8.16 (d, J= 1.2 Hz, 1 H), 7.81 (s, 1 H, H-vinil), 7.65-7.72 (m, 4H), 7.44 (m, 3H), 7.31 (m, 1 H, CONHCH2), 7.21 (s, 1 H, Ar-H), 4.02 (t, J = 6.5 Hz, 2H, NCH2), 3.19 (q, J = 6.5 Hz, 2H, CONHCH2), 2.44 (s, 6H, 2xCH3), 1.93 (m, 2H, CH2CH2CH2).

EM-EI m/z 465 [M+].

EJEMPLO 59 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-6-fenil-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-d¡etilaminoetil) amida 6-FeniM , 3-dihidroindol-2-ona (0.08 g, 0.4 milimoles) se condensó con 5-formii-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ác¡do carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (0.1 g) para dar 65 mg (38%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 10.99 (, br, 1 H, NH), 7.86 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.62-7.66 (m, 3H), 7.40-7.47 (m, 3H), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.10 (d, J= 1.2 Hz, 1 H), 3.26 (m, 2H, NCH2), 2.46-2.55 (m, 6H, 3xNCH2), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 0.97 (t, J= 7.2 Hz, 6H, 2xNCH2CH3). EM-EI m/z 456 [M+].

EJEMPLO 60 2, 4-Dimetii-5- (2-oxo-6-fenil-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetii)-1H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil)amida 6-Fenil-1 , 3-dihidroindol-2-ona (30 mg, 0.15 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1- ¡letil) amida (40 mg) para dar 5.9 mg (8.5%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, br, 1 H, NH), 10.99 (, br, 1 H, NH), 7.86 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.63-7.66 (m, 3H), 7.51 (m, 1 H, CONCH2), 7.45 (m, 2H), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.10 (d, J= 1 .5 Hz, 1 H), 3.31 (m, 6H, 3xNCH2), 2.55 (t, J= 6.6 Hz, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.67 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 454 [M+].

EJEMPLO 61 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-6-fenil-1 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxilico (3-¡midazol-1-ilpropil) amida 6-FeniM , 3-dihidroindol-2-ona (8 mg, 0.04 milimoles) se condensó con 5-formíl-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (3-imidazol-1 -¡Ipropil) amida (10 mg) para dar 7.3 mg (43%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.62 (s, br, 1 H, NH), 10.99 (, br, 1 H, NH), 7.86 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.62-7.70 (m, 5H), 7.45 (m, 2H), 7.35 (m, 1 H), 7. 30 (dd, J - 1.4 & 8.2 Hz, 1 H), 7.21 (s, 1 H), 7.10 (d, J = 1 .4 Hz, 1 H), 6.89 (s, 1 H), 4.02 (t, J = 6.9 Hz, 2H, CH2), 3.19 (m, 2H, NCH2CH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 1.93 (t, J - 6.9 Hz, 2H, NCH2). EM-EI m/z 465 [M+].

EJEMPLO 62 5-f6-(3, 5-Diclorofenil)-2-oxo-1 ,2-dih¡droindol-3-il¡denmetil1-2,4-climetil-1 H- pirrol- 3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida 6- (3, 5-Diclorofenil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (64 mg, 0.23 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (60 mg) para dar 53 mg (44%) del compuesto del título como un sólido café claro. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.62 (s, br, 1 H, NH), 10.99 (s, 1 H, NH), 7.89 (d, J = 7.9 Hz, 1 H, H-4), 7.69-7.71 (m, 3H), 7.55 (m, 1 H, CONHCH2), 7.37 (m, 2H), 7.14 (d, J= 1.4 Hz, 1 H, H-7), 3.27 (m, 2H, NCH2), 2.48-2.58 (m, 6H, 3xNCH2), 2.45 (s, 3H, CH3), 2.42 (s, 3H, CH3), 0.97 (t, J= 6.8 Hz, 6H, 3xNCH2CH3). EM m/z 526.9 [M++1].

EJEMPLO 63 2. 4-Dimetil-5- í2-oxo-6-piridin-3-il-1. 2-dihidroindol-3-ilidenmetin-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida 6-Piridin-3-¡l-1 , 3-dihidroindol-2-ona (40 mg, 0.19 milimoles) se condensó con 5- formil-2, 4-dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (50 mg) para dar 29 mg (33%) del compuesto del título como un sólido naranja claro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.62 (s, br, 1H, NH), 11.05 (s, br, 1H, NH), 8.86 (s, br, 1H), 8.53 (d, J= 5.8 Hz, 1H), 8.04 (m, 1H), 7.91 (d, J= 8.1 Hz, H), 7.70 (s, 1H, H-vinil), 7.40-7.48 (m, 2H), 7.35 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 3.26 (m, 2H, NCH2), 2.48-2.55 (m, 3xNCH2), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.38 (s, 3H, CH3), 0.96 (t, J= 6.9 Hz, 6H, 2xNCH2CH3). EM-EI m/z 457 [ +].

EJEMPLO 64 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-6-piridin-3-il-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol- 3- ácido carboxilico 2-pirrolidin-1-iletil)amida 6-Piridin-3-il-1, 3-dihidroindol-2-ona (60 mg, 0.28 milimoles) se condensó con 5- formil-2, 4-dimetil-1H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-pirrolid¡n-1-iletil) amida (75 mg) para dar 90 mg (71%) del compuesto del título como un sólido naranja claro. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1H, NH), 11.05 (s, br, 1H, NH), 8.86 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 8.54 (dd, J=1.5 & 4.8 Hz, 1H), 8.05 (m, 1H), 7.91 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H, H-vinil), 7.44-7.53 (m, 2H), 7.36 (dd, J=1.5 & 8.1 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 3.33 (m, 2H, NCH2), 2.47-2.57 (m, 6H, 3xNCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), .67 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 455 [M+].

EJEMPLO 85 2, 4-Dimetil-5- (2-oxo-6-piridin-3-il-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmet¡l)-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3-dimetiiaminopropil) amida 6-Piridin-3-il-1 , 3-d¡hidroindol-2-ona (42 mg, 0.2 milimoles) se condensó con 5- formil-2, 4-dimetii-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-dimetilaminopropil) amida (50 mg) para dar 67 mg (75%) del compuesto del título como un sólido amarillo-café. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.61 (s, br, 1 H, NH), 11 .00 (s, br, 1 H, NH), 8.86 (s, br, H), 8.54 (s, br, H), 8.04 (m, 1 H), 7.90 (d, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H, H-vinil), 7.63 (m, 1 H), 7.45-7.48 (m, 1 H), 7.35 (dd, J= 1.7 & 8.0 Hz, 1 H), 7.15 (d, J= 1 .7 Hz, 1 H), 3.21 -3.27 (m, 2H, NCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.28 (m, 2H, NCH2), 2.14 (s, 6H, 2xNCH3), 1.64 (m, 2H, CH2). EM-EI m/z 443 [M+].

EJEMPLO 66 2, 4-Dimet¡l-5-(2-oxo-5-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmet¡l)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3-dimetilaminopropil)am¡da 5-Fenil-1 , 3-dih¡droindol-2-ona (67 mg, 0.32 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-dimet¡l-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3- dimetilaminopropil) amida (81 mg) para dar 40 mg (28%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.66 (s, br, 1 H, NH), 10.92 (s, br, 1 H, NH), 8.14 (s, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7.71 (m, 2H), 7.62 (m, 1 H), 7.44 (m, 3H), 7.32 (m, 1 H), 6.95 (m, H), 3.33 (m, 2H, NCH2), 2.43 (s, 6H, 2xCH3), 2.27 (m, 2H, NCH2), 2.13 (s, 6H, 2xNCH3), 1 .63 (m, 2H, CH2). EM-EI m/z 442 [M4].

EJEMPLO 67 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-5-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-iiidenmetil)-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida 5-FeniM , 3-dihidroindol-2-ona (1.5 g, 7.16 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (2 g) para dar 1.3 g (40%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.64 (s, 1 H, NH), 10.91 (s, 1 H, NH), 8.14 (d, J= 1 .4 Hz, 1 H, ArH), 7.8 (s, 1 H, ArH), 7.7 (dd, J= 1.2 y 8.5 Hz, 2H, ArH), 7.6 (t, J = 5.3 Hz, 1 H, CONHCH2), 7.4 (m, 3H, ArH), 7.3 (t, J=7.4 Hz, 1 H, ArH), 6.9 (d, J = 8.0 Hz, 1 H, ArH), 3.2 (m, 2H, CONHCH2), 2.5 (m, 12H, 3xNCH2 y 2xCH3), 1.61 (m, 2H, CH2CH2CH2), 0.93 (t, J= 6.7 Hz, 6H, NCH2CH3). EM-EI m/z 470 [M+].

EJEMPLO 68 2, 4-Dimetií-5- (2-oxo-6-fenil-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmeti!)-1 H-pirrol-3- ácido carboxííico (3-dietiiaminopropii) amida 6-Fenil-1 , 3-dihiciroinc(ol-2-ona (1.5 g, 7.16 milimoles) se condensó con 5-formii-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxííico (3-dieíilamlnopropil) amida (2 g) para dar 1.9 g (57%) del compuesto del título como un sólido naranja. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.58 (s, 1 H, NH), 10.94 (s, 1 H, NH), 7.8 (d, J= 7.9 Hz, 1 H, ArH), 7.6 (m, 4H, ArH), 7.4 (t, J = 7.5 Hz, 2H, ArH), 7.3 (m, 2H), 7.1 (d, J= 1 .4 Hz, 1 H, ArH), 3.2 (m, 2H, CONHCH2), 2.5 (m, 12H, 3xNCH2 y 2xCH3), 1 .61 (m, 2H, CH2CH2CH2), 0.93 (t, J= 6.7 Hz, 6H, NCH2CH3). EM-EI m/z 470 [M+].

EJEMPLO 69 3- G4- (3-Dietilaminopropilcarbamoil)-3,5-dimetil-1 H-pirrol-2-ilmetilen1-2- oxo-2,3- dihidro-1 H-indol-4-ácido carboxííico (3-cloro-4-metoxifertil) amida 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-indol-4-ácido carboxííico (3-cloro-4-metoxifenil) amida (1 g, 3.16 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (3- dietilaminopropil) amida (1 g, 3.58 milimoles) para dar 1.7 g (85%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. EM-EI m/z 578.2 [M+].

EJEMPLO 70 S-fS-Bromo^-oxo-l^-dihidroindol-S-ilidenmetin^^-dimetil-I H-pírrol-S- ácido carboxilico (3-dietilamino-propil) amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (0.5 g, 2.36 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (3-dietilaminopropil) amida (0.51 g) para dar 0.84 g del compuesto del título como un sólido rojo-naranja. H RMN (360 MHz, DMSO-Ó6) d 13.61 (s, 1 H, NH), 10.99 (s, 1 H, NH), 8.09 (d, J= 1 .8 Hz, 1 H, ArH), 7.7 (m, 4H), 7.2 (dd, J = 1 .8 y 8.3 Hz, 2H, ArH), 6.8 (d, J = 7.8 Hz, 1 H, ArH), 3.3 (br s, 4H, 2xNCH2), 3.2 (m, 2H, CONHCH2), 2.6 (br s, 2H, NCH2 y 2xCH3), 2.4 (s, 6H, 2xCH3), 1.66 (m, 2H, CH2CH2CH2), 0.98 (t, J= 7.1 Hz, 6H, NCH2CH3). EM-EI m/z 472 y 474 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 71 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenrneti!)-2, 4-diisopropil-1 H- pirroi-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida 5-Bromo-l , 3-d¡hidro¡ndol-2-ona (100 mg, 0.47 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-diisopropil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida (150 mg) para dar 0.15 g (62%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (300 MHz, D SO-d6) d 13.97 (s, 1 H, NH), 10.95 (s, 1 H, NH), 8.09 (d, J = 1.3 Hz, 1 H, ArH), 7.84 (m, 1 H), 7.79 (s, 1 H), 7.23 (dd, J= 1.3 y 8.1 Hz, 1 H, ArH), 6.8 (d, J = 8.1 Hz, 1 H, ArH), 3.5 (m, 1 H, CH), 3.3 (m, 3H, CH y NHCH2), 2.5 (br m, 6H, 3xNCH2), 1 .28 (d, J = 6.9 Hz, 6H, 2xCH3), 1.23 (d, J= 6.6 Hz, 6H, 2xCH3), 0.96 (m, 6H, 2xCH2CH3). EM-EI m/z 514 y 516 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 72 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-diisopropil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (3-dietilamino-propil)amida 5-Bromo-1 , 3-dihidroindol-2-ona (90 mg, 0.42 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-diisopropil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (3-dietilaminopropil) amida (140 mg) para dar 54 mg (25%) del compuesto del título como un sólido rojo-café.

H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.98 (s, 1 H, NH), 10.96 (s, 1 H, NH), 8.09 (d, J= 1.7 Hz, 2H), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7.23 (dd, J= 1.7 y 8.1 Hz, 1 H, ArH), 6.82 (d, J= 8.1 Hz, 1 H, ArH), 3.5 (m, 1 H, CH), 3.25 (m, 2H, NHCH2), 3. 5 (m, 1 H, CH), 2.7 (br s, 6H, 3xNCH2), 1 .7 (br m, 2H, CH2CH2CH2), 1.28 (d, J= 6.9 Hz, 6H, 2xCH3), 1.24 (d, J= 5.9 Hz, 6H, 2xCH3), 1.06 (m, 6H, 2xCH2CH3). EM-EI m/z 528 y 530 [M+-1 y ++1].

EJEMPLO 73 5-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2,4-diisopropil-1H-pirrol- 3- ácido carboxílíco (3-pirro[idin-1-ilpropil) amida 5-Bromo-l , 3-dihidroindol-2-ona (130 mg, 0.6 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-diísopropil-1 H-pirroi-3-ácido carboxílico (3-pirrolidin-1-ilpropil) amida (150 mg, 0.45 milimoles) para dar 36 mg ( 5%) del compuesto del título como un sólido color canela-naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.98 (s, 1 H, NH), 10.97 (s, 1 H, NH), 8.10 (d, J= 1.6 Hz, 2H), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7.23 (dd, J= 1.6 y 7.6 Hz, H, ArH), 6.82 (d, J = 7.6 Hz, 1 H, ArH), 3.5 (m, 1 H, CH), 3.25 (m, 2H, NHCH2), 3.15 (m, H, CH), 2.7 (br s, 6H, 3xNCH2), .7 (br m, 6H, 3xNCH2CH2), 1 .28 (d, J = 5.6 Hz, 6H, 2xCH3), 1.24 (d, J= 5.7 Hz, 6H, 2xCH3). EM-EI m/z 526 y 528 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 74 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (p¡ridin-4-ilmetil)-amida 5-Bromo-1 , 3-d¡hidroindol-2-ona (170 mg, 0.8 milimoles) se condensó con 5-formil- 2, 4-dimetil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (piridin-4-¡Imetíl) amida (200 mg) para dar 14 mg (4%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.67 (s, 1 H, NH), 11 .01 (s, br, 1 H, NH), 8.51 (dd, J = 1. 6 & 4.3 Hz, 2H), 8.23 (t, J= 6.0 Hz, 1 H, CONHCH2), 8.1 1 (d, J= 1.9 Hz, H), 7.78 (s, 1 H, H-vinil), 7.31 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 7.25 (dd, J- 1.9 & 8.1 Hz, 1 H), 6.82 (d, J= 8.1 Hz, 1 H), 4.45 (d, J= 6.0 Hz, 2H, NCH2), 2.46 (s, 6H, 2xCH3). EM-EI m/z 450 y 452 [M+-1 y M++1].

EJEMPLO 75 5- r8-(4-Butilfenil)-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetin-2.4-dimetil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil)amida 5- [6- (4-Butilfenil)]-1 , 3-dihidroindol-2-ona (50 mg, 0.19 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida (50 mg) para dar 74 mg (76%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.58 (s, 1 H, NH), 10.93 (s, br, 1 H, NH), 7.82 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H, H-vinil), 7.54 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 7.46 (m, 1 H, CONH), 7.26 (m, 3H), 7.09 (s, 1 H), 3.30 (m, 2H, CH2), 2.52-2.63 (m, 4H, 2xCH2), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.68 (m, 4H, 2xCH2), 1.58 (m, 2H, CH2), 1.34 (m, 2H, CH2), 0.91 (t, J=7.2 Hz, 3H, CH2CH3). EM-EI m/z 510 [M+].

EJEMPLO 76 5- [6- (5-isopropil-2-metoxifeniQ-2-oxo-1 , 2-d¡hidroindol-3-ilidenmetin-2, 4- dimetil- 1H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida 6- (5-lsopropiI-2-metoxifenil)-1 , 3-dihidro¡ndol-2-ona (50 mg, 0.17 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-il- etil) amida (45 mg) para dar 67 mg (75%) del compuesto del título como un sólido naranja. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, 1 H, NH), 10.82 (s, br, 1 H, NH), 7.77 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H, H-vinil), 7.45 (m, 1 H, CONH), 7.0-7.19 (m, 5H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 3.32 (m, 2H, CH2), 2.87 (m, 1 H, CH(CH3)2), 2.56 (m, 2H, CH2), 2.48 (m, 4H, 2xCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.68 (m, 4H, 2xCH2), 1 .21 (d, J= 6.8 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM m/z 527.2 [M++1].

EJEMPLO 77 5- [6- (4-Etiifentl)-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetin-2, 4-dimetil-1H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-pirrol¡dm-1-ilet¡l)amida 6-(4-Etilfen¡l)-1 , 3-dihidro¡ndol-2-ona (45 mg, 0.19 milimoies) se condensó con 5- formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1 -iletil) amida (50 mg) para dar 60 mg (65%) del compuesto del título como un sólido amarillo-naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.59 (s, 1 H, NH), 10.96 (s, br, 1 H, NH), 7.83 (d, J= 8.4 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H, H-vinil), 7.51 -7.56 (m, 3H), 7.25-7.30 (m, 3H), 7.08 (d, J= 1 Hz, 1 H), 3.31 (m, 2H, CH2), 2.63 (m, 2H, CH2CH3), 2.55 (m, 2H, CH2), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.67 (m, 4H, 2xCH2), 1.20 (t, J=7. 5 Hz, 3H, CH2CH3). EM-Ei m/z 482 [M+].

EJEMPLO 78 5 6-(2,4-Dimetoxifenil)-2-oxo-1 ,2-dihidroin^ 1H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil)amida 6-(2,4-Dimetoxifenil)-1 ,3-dihidroindol-2-ona (51 mg, 0.19 milimoies) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida (50 mg) para dar 30 mg (31 %) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H R N (300 MHz, DMSO-d6) d 13.59 (s, 1 H, NH), 10.86 (s, br, 1 H, NH), 7.75 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H, H-vinil), 749 (m, 1 H, CONH), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.03 (m, 1 H), 6.97 (s, H), 6.58-6.65 (m, 2H), 3.79 (s, 3H, OCH3), 3.76 (s, 3H, OCH3), 3.33 (m, 2H, CH2), 2.55 (m, 2H, CH2), 2.50 (m, 4H, 2xCH2), 2.42 (s, 3H, CH3), 2.39 (s, 3H, CH3), 1 . 67 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 514 [M+].

EJEMPLO 79 5- [6- (3-lsopropiífenil)-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetin-2, 4-dimetíl- 1H-pirrol- 3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida 6-(3-lsopropilfenil)-1 ,3-dihidro¡ndol-2-ona (48 mg, 0.19 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-d¡metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-¡letil) amida (50 mg) para dar 59 mg (63%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.63 (s, 1 H, NH), 10.97 (s, br, 1 H, NH), 7.87 (d, J= 7.8 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H, H-vinil), 7.24-7.55 (m, 6H), 7.13 (s, 1 H), 3.34 (m, 2H, CH2), 3.30 (m, 1 H, CH(CH3)2), 2.60 (m, 2H, CH2), 2.50 (m, 4H, 2xCH2), 2.45 (s, 3H, CH3), 2.43 (s, 3H, CH3), 1.70 (m, 4H, 2xCH2), .27 (d, J= 6.9 Hz, 6H, CH(CH3)2). EM-EI m/z 496 [M+].

EJEMPLO 80 5- (5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetiQ-2, 4-d»metil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil)amida 5-Fluoro-l , 3-d¡hidroindol-2-ona (0.54 g, 3.8 milimoles) se condensó con 5-form¡l-2, 4- dimet¡l-1 H-p¡rrol-3-ác¡do carboxílico (2-dietilaminoetil) amida para dar 0.83 g (55%) del compuesto del título como un sólido amarillo-verde. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.66 (s, 1 H, NH), 10.83 (s, br, 1 H, NH), 7.73 (dd, J = 2.5 & 9.4 Hz, 1 H), 7.69 (s, 1 H, H-vinil), 7.37 (t, 1 H, CONHCH2CH2), 6.91 (m, 1 H), 6.81- 6.85 (m, 1 H), 3.27 (m, 2H, CH2), 2.51 (m, 6H, 3xCH2), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 0.96 (t, J - 6.9 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-EI m/z 398 [M+].

EJEMPLO 80 (Síntesis alternativa) 5- r5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmet¡n-2. 4-dimetil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil)-amida Hidrato de hidrazina (55%, 3000 mL) y 5-fluoroisatin (300 g) se calentaron hasta 100 CC. 5-Fluoro-isatin (500 g) adicional se añadió en porciones (100 g) durante 120 minutos con agitación. La mezcla se calentó a 1 10 °C y se agitó por 4 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío para dar (2-amino-5-f!uoro-fenil)-ácido acético hidrazida (748 g) sin purificar. La hidrazida se suspendió en agua (700 mL) y el pH de la mezcla se ajustó a < pH 3 con ácido clorhídrico12 N. La mezcla se agitó por 12 horas a temperatura ambiente. Los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío y se lavaron dos veces con agua. El producto se secó bajo vacío para dar 5-fluoro-1 , 3-dihidro- indol-2-ona (600 g, rendimiento del 73%) como un polvo café. 1H-RMN (dimetilsulfoxido-d6) d 3.46 (s, 2H, CH2), 6.75, 6.95, 7.05 (3 X m, 3H, aromático), 10.35 (s, 1 H, NH). EM m/z 152 [M+1]. 3, 5-Dimetil- H-pirrol-2, 4-diácido carboxílico 2-tert-butil éster 4-etil éster (2600 g) y etanol (7800 mL) se agitaron vigorosamente mientras que se añadía lentamente ácido clorhídrico 10 N (3650 mL). La temperatura se incrementó de 25°C a 35°C y empezó la emisión de gas. La mezcla se calentó a 54 °C y se agitó con calentamiento adicional por una hora tiempo durante el cual la temperatura fue de 67°C. La mezcla se enfrió a 5°C y 32 L de hielo y agua se añadieron lentamente con agitación. El sólido fue recolectado mediante filtración al vacío y se lavó tres veces con agua. El sólido se secó al aire a peso constante para dar 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico etil éster (1418 g, rendimiento del 87%) como un sólido rosado. 1H-RMN (Dimetilsulfóxido-d6) d 2.10, 2.35 (2xs, 2x3H, 2xCH3), 4.13 (q, 2H, CH2), 6.37 (s, 1 H, CH), 10.85 (s, 1H, NH). EM m/z 167 [M+1]. Dimetilformamida (322 g) y diclorometano (3700 mL) se enfriaron en un baño con hielo a 4°C y se añadió oxicloruro fosforoso (684 g) con agitación. El sólido 2,4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster (670 g) se añadió lentamente en alícuotas durante 15 minutos. La temperatura máxima alcanzada fue de 18°C. La mezcla se calentó a reflujo por una hora, se enfrió a 10°C en un baño con hielo y 1 .6 L de agua con hielo se añadieron rápidamente con agitación vigorosa. La temperatura se incrementó a 15°C. Se añadió ácido clorhídrico 10 N (1 .6 L) con agitación vigorosa. La temperatura se incrementó a 22°C. La mezcla se dejó reposar por 30 minutos y las capas se dejaron separar. La temperatura alcanzó un máximo de 40°C. La capa acuosa se ajustó a pH 12-13 con hidróxldo de potasio 10 N (3.8 L) a una relación que permitió que la temperatura alcanzara y se mantuviera a 55°C durante la adición. Después de que la adición se completara la mezcla se enfrió a 10°C y se agitó por 1 hora. El sólido se recolectó mediante filtración al vacío y se lavó cuatro veces con agua para dar 5-formil-2, 4- dimetií-1 H-pirroí-3-ácido carboxílico etil éster (778 g, rendimiento del 100%) como un sólido amarillo.1H- RMN (DMSO-d6) d 1.25 (t, 3H, CH3), 2.44, 2.48 (2xs, 2x3H, 2XCH3), 4.16 (q, 2H, CH2), 9.59 (s, H, CHO), 12.15 (br s, 1 H, NH). EM m/z 195 [M+1]. 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etil éster (806 g), hidróxido de potasio (548 g), agua (2400 mL) y metanol (300 mL) fueron sometidos a reflujo por dos horas con agitación y luego se enfriaron a 8°C. La mezcla se extrajo dos veces con diclorometano. La capa acuosa se ajustó a pH 4 con 1000 mL de ácido clorhídrico 10 N manteniendo la temperatura debajo de 15°C. Se añadió agua para facilitar la agitación. El sólido se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó tres veces con agua y se secó bajo vacío a 50°C para dar 5- formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácído carboxílico (645 g, rendimiento del 93.5%) como un sólido amarillo. RMN (DMSO-d6) d 2.40, 2.43 (2xs, 2x3H, 2xCH3), 9.57 (s, 1 H, CHO), 12.07 (br s, 2H, NH+COOH). EM m/z 68 [M+1 ]. 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (1204 g) y 6020 mL de dimetilformamida se agitaron a temperatura ambiente mientras que se añadieron 1- (3-dimetil-aminopropil-3- hidrocloruro de etilcarbodiimida (2071 g), hídroxibenzotriazol (1460 g), trietílamina (2016 mL) y dietiletilendiamina (1215 mL). La mezcla se agitó por 20 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con 3000 mL de agua, 2000 mL de salmuera y 3000 mL de solución saturada de bicarbonato de sodio y el pH se ajustó a más de 0 con hidróxido de sodio 10 N. La mezcla se extrajo dos veces con 5000 mL cada vez de metanol al 10% en diclorometano y los extractos se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y se evaporaron en un evaporador rotatorio hasta secarlos. La mezcla se diluyó con 1950 mL de tolueno y se evaporó de nuevo en un evaporador rotatorio hasta secarla. El residuo se trituró con 3:1 hexano: éter dietílico (4000 mL). Los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío, se lavaron dos veces con 400 mL de acetato de etilo y se secaron bajo vacío a 34°C por 21 horas para dar 5-formii- 2, 4-dimetil-1 H-pírrol-3-ác¡do carboxílico (2-dietilamíno-etil) -amida (819 g, rendimiento del 43%) como un sólido café claro.1 H-RMN (Dimetilsulfóxido-d6) d 0.96 (t, 6H, 2xCH3), 2.31 , 2.38 (2xs, 2xCH3), 2.51 (m, 6H 3xCH2), 3.28 (m, 2H, CH2), 7.34 (m, 1 H, amida NH), 9.56 (s, 1 H, CHO), 11 .86 (s, 1 H, pirrol NH). EM m/z 266 [ +1]. 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxi!ico (2-dietilaminoetil) -amida (809 g), 5-fluoro-1 , 3-dihidro-indol-2-ona (438 g), etanol (8000 mL) y pirrolidina ( 3 mL) se calentaron a 78°C por 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío y se lavaron con etanol. Los sólidos se agitaron con etanol (5900 mL) a 72 °C por 30 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío, se lavaron con etanol y se secaron bajo vacío a 54°C por 130 horas para dar 5- 5-fluoro-2-???-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil-2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3-ácldo carboxílico (2-dietilamino-etil) -amida (1013 g, rendimiento del 88%) como un sólido naranja. 1H-RMN (dimetilsulfóxido-d6) d 0.98 (t, 6H, 2xCH3), 2.43, 2.44 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.50 (m, 6H, 3xCH2), 3.28 (q, 2H, CH2), 6.84, 6.92, 7.42, 7.71 , 7.50 (5xm, 5H, aromático, vinil, CONH), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.68 (s, 1 H, pirrol NH). EM m/z 397 [M-1].

EJEMPLO 81 3- f4- (2-Dietilaminoetilcarbamoil)-3, 5-dimetil- H-pirrol-2-ilmetHen 2-oxo- 2, 3- d¡hidro-1H-indol-6-ácido carboxílico 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-indol-6-ácido carboxílico (80 mg, 0.45 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico 7 (2-dietilaminoetil) amida para dar 210 mg (92%) del compuesto del título como un sólido amarillo naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13. 6 (s, 1 H, NH), 7.76 (d, J= 8.0 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H, H-vinil), 7.57 (dd, J= 1 .5 & 8.0 Hz, 1 H), 7.40-7.42 (m, 2H), 3.28 (m, 2H, CH2), 2.88 (m, H-piperidina), 2.54 (m, 6H, 3xCH2), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 1.56 (m, H-piperidina), 0.97 (t, J = 6.98 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM m/z 424 [M+].

EJEMPLO 82 5-(5-Dimet¡lsulfamoiÍ-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-¡lidenmetil)-2^-dirnetil-1H- pirrol-3- ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil)amida 2-Oxo-2, 3-dihidro-1 H-indoi-5-ácido sulfónico dimetilamida (90 mg, 0.38 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-d¡metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1- iletil) amida (100 mg) para dar 100 mg (54%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.65 (s, 1 H, NH), 11.30 (s, br, H, NH), 8.25 (d, 1 H), 7.92 (s, 1 H, H-vinil), 7.48-7.53 (m, 2H), 7.07 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 3.33 (m, 2H, CH2), 2.61 (s, 6H, N(CH3)2), 2.56 (t, 2H, CH2), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.45 (s, 3H, CH3), 2.44 (s, 3H, CH3), 1.67 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 485 [M+].

EJEMPLO 33 5- G5- (3-Clorofenilsulfamoil)-2-oxo-1 , 2-dihidroindoi-3-ilidenmet¡n-2, 4- dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico 2-p¡rrolidin-1-iletiS)amida 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-¡ndol-5-ácido sulfónico (3-cloro-fenil) amida (120 mg, 0.38 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin- 1-iletil) amida (100 mg) para dar 150 mg (69%) del compuesto del titulo como un sólido amarillo naranja. 1H RMN (360 MHz, D SO-d6) d 13.55 (s, 1 H, NH), 11 .26 (br s, 1 H, NH), 10.30 (br s, 1 H, NH), 8.26 (d, 1 H), 7.79 (s, 1 H, H-vinil), 7.51 -7.57 (m, 2H), 7.22 (t, J = 8.1 Hz, 1 H), 7.15 (m, 1 H), 7.07 (m, 1 H), 7.0 (m, 2H), 3.44 (m, 2H, CH2), 2.57 (t, J = 7.0 Hz, 2H, CH2), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.43 (s, 3H, CH3), 1 .68 (m, 4H, 2xCH2). EM m/z 568 [M+].

EJEMPLO 84 2, 4-Dimetil-5- [2-oxo-5- piridin-3-Hsulfamoil)-1 , 2-d¡hidroindol-3- ii¡denmet¡l]-1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-iletil) amida 2-???-2, 3-dihidro-1 H-indol-5-ácido sulfónico piridin-3-ilamida (110 mg, 0.38 milimoles) se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1- iletil) amida (100 mg) para dar 150 mg (74%) del compuesto del título como un sólido naranja.

H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.58 (s, 1 H, NH), 8.21 (d, J= 2.0 Hz, 2H), 8.04 (m, 1 H), 7.76 (s, 1 H, H-vinil), 7.49-7.54 (m, 2H), 7.41 (m, H), 7.14 (m, 1 H), 6.94 (d, J = 8. 5 Hz, 1 H), 3.33 (m, 2H, CH2), 2.56 (t, J= 7.06 Hz, 2H, CH2), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.43 (s, 6H, 2xCH3), 1.68 (m, 4H, 2xCH2). EM m/z 535 [M+].

EJEMPLO 85 3- [3. 5-Dimetii-4- (4-metilpiperazin-1-carbonil)-1 H-pirrol-2-ilmetilenl-4- (2- hidroxietil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona 4-(2-hidroxietil)-1 , 3-dihidroindol-2-ona (71 mg, 0.4 milimoles) se condensó con 3, 5-dimetil-4-(4-metil-piperazina-1 -carbonil)-1 H-pirrol-2-carbaldehído para dar 90 mg (55%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 14.25 (s, H, NH), 10.88 (s, 1 H, NH), 7.57 (s, 1 H, H- vinii), 7.03 (m, 1 H), 6.75-6.82 (m, 2H), 4.86 (m, 1 H, OH), 3.70 (m, 2H, CH2), 3.04 (m, 2H, CH2), 2.48 (m, 4H, 2xCH2), 2.28 (br s, 7H), 2.19 (s, 3H, CH3), 2.18 (s, 3H, CH3). EM m/z (+VE) 4.09.3 [M+].

EJEMPLO 86 3- 3, 5-Dimetil-4- (4-met¡lpiperazin-1-carbonil)-1H»pirrol-2-ilmetilen1-2-oxo- 2, 3- dihidro-1H-indol-5-ácido sulfónico fenilamida 2-0x0-2, 3-dih¡dro-1 H-¡ndol-5-ácido sulfónico fenilamida (110 mg, 0.4 müimoles) se condensó con 3, 5-dimetil-4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1 H-p¡rrol-2-carbaldehído (100 mg) para dar 50 mg (24%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 13.52 (s, 1 H, NH), 11.26 (s, 1 H, NH), 10.08 (s, 1 H, NH), 8.21 (d, J = 1.6 Hz, 1 H), 7.75 (s, 1 H, H-vinil), 7.50 (dd, J = 1. 6 & 8.3 Hz, 1 H), 7.19 (m, 2H), 7.10 (m, 2H), 6.97 (m, 2H), 2.49 (m, 4H, 2xCH2), 2.28 (m, 10H, 2xCH3 & 2xCH2), 2.18 (s, 3H, CH3). EM-EI m/z 519 [M+].

EJEMPLO 87 S-fS-Dimetilsulfamoil^-oxo-l ^-dihidroindol-S-ilidenmeti^^^-dimetil-IH- pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilaminoetil) amida 2-Oxo-2, 3-dihidro-1 H-indol-5-ácido sulfónico dimetilamida (90 mg, 0.38 müimoles) se condensó con 5-formü-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2- dietilaminoetil) amida (100 mg) para dar 80 mg (43%) del compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 11.30 (s, 1 H, NH), 8.27 (d, J = 1 .7 Hz, 1 H), 7.94 (s, 1 H, H-vinil), 7.49 (dd, J = 1.7 & 8.0 Hz, 1 H), 7.44 (m, 1 H, CONHCH2CH2), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 3.26 (m, 2H, CH2), 2.60 (s, 6H, N(CH3)2), 2.53 (m, 2H, CH2), 2.45-2.50 (m, 10H, 2xCH3 & N(CH2CH3)2, 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM-E! m/z 487 [M+].

EJEMPLO 88 5-f5-(3-Clorofenilsulfamoil)-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetin-2,4- dimetil-1 H- pirrol-3-ácido carboxilico (2-dietilaminoetil) amida 2-0x0-2, 3-dihidro-1 H-indol-5-ácido sulfónico (3-cloro-fen¡l) amida (120 mg, 3.8 milimoles) se condensó con 5-form¡l-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2- dietiiaminoetil) amida (100 mg) para dar 80 mg (37%) del compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.55 (s, 1 H, NH), 1 1.24 (s, H, NH), 10.29 (s, 1 H, NH), 8.25 (d, J = 1.87 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H, H-vinil), 7.52 (dd, J = 1.87 & 8.3 Hz, 1 H), 7.42 (m, 1 H, CONHCH2CH2), 7.22 (t, J = 8.02 Hz, 1 H), 7.15 (t, J = 2 Hz, 1 H), 7.08 (m, 1 H), 7.0 (m, 2H), 3.27 (m, 2H, CH2), 2.48-2.57 (m, 6H, 3xCH2), 2.45 (s, 3H, CH3), 2.44 (s, 3H, CH3), 0.97 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM m/z 570.1 [M+].

EJEMPLO 95 3- (2-Oxo-5-fenil-1. 2-dihidroindol-3-ilidenmet¡n-4, 5, 6. 7-tetrahidro-2H- isoindol-1- ácido carboxílico etil éster 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.74 (s, H, NH), 1.00 (s, H, NH), 8.13 (d, J = 1.7 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H, H-vinü), 7.70 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.49 (dd, J = 1.7 & 8.0 Hz, H), 7.44 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.32 (m, 1 H), 6.96 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 4.26 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.79 (m, 2H, CH2), 2.72 (m, 2H, CH2), 1.73 (m, 4H, 2xCH2), 1.30 (t, J= 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 412 [M+].

EJEMPLO 99 3-(2-Oxo-5-fenilsulfamoil-1 ,2-dih¡droindol-3-ilidenmetil)-4, 5, 6, 7- tetrahidro-2H- isoindol-1 -ácido carboxílico etil éster 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.64 (s, 1 H, NH), 11.33 (s, 1 H, NH), 10.07 (s, 1 H, NH), 8.24 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H, H-vinil), 7.57 (dd, J = 1.8 & 8.0 Hz, 1 H), 7.21 (t, J - 7.6 Hz, 2H), 7.1 1 (d, J - 7.6 Hz, 2H), 6.99 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.98 (d, J = 7.6 Hz, H), 4.27 (q, J = 7.0 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.80 (m, 2H, CH2), 2.73 (m, 2H, CH2), 1.73 (m, 4H, 2xCH2), 1.30 (t, J = 7.0 Hz, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 491 [M+].

EJEMPLO 109 3-[3-(Morfo!in-4-carbonil)-4, 5, 6, 7-tetrahídro-2H-isoindol-1-ilmetilen1-2- oxo-2, 3- dihidro-1H-indol-6-ácido carboxílico 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, 1H, NH), 12.75 (br s, 1H, COOH), 11.08 (s, 1H, NH), 7.85 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H, H-vinil), 7.62 (dd, J = 1.4 & 7.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 3.65 (m, 4H, 2xCH2), 3.55 (m, 4H, 2xCH2), 2.81 (m, 2H, CH2), 2.54 (m, 2H, CH2), 1.73 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z421 [M+].

EJEMPLO 112 5-Bromo-3-|3-(pirrolidin-1-carbonil)-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-isoindol-1- ilmetilen]-1 ,3 díhídro-indol-2-ona H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.56 (s, 1H, NH), 11.00 (s, 1H, NH), 8.05 (d, J = 1.8 Hz, H), 7.74 (s, 1H, H-v¡nil), 7.28 (dd, J = 1.3 & 8.3 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.3 Hz, H), 3.57 (m, 4H, 2xCH2), 2.79 (m, 2H, CH2), 2.65 (m, 2H, CH2), 1.88 (m, 4H, 2xCH2), 1.71 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 439 & 441 [M+-1] & [M++1].

EJEMPLO 114 3-(3-Dimetilcarbamoil-4, 5, 6, 7-tetrahidro-2H-isoindol-1-ilmetilen)-2-oxo- 2,3-dihidro- 1H-indol-6-ácido carboxílico 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.60 (s, 1 H, NH), 12.72 (br s, 1 H, COOH), 1 1.05 (s, 1 H, NH), 7.85 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 7.72 (s, 1 H, H-vinil), 7.62 (dd, J = 1.3 & 7.9 Hz, 1 H), 7.42 (d, J = 1.3 Hz, 1 H), 3.03 (s, 6H, N(CH3)2), 2.81 (m, 2H, CH2), 2.55 (m, 2H, CH2), 1.73 (m, 4H, 2xCH2). EM-EI m/z 379 [M+].

EJEMPLO 115 5-Metil-5-(5-metilsulfamoil-2-oxo- 12-dihidro-¡ndol-3-ilidenmetin- H-pirrol- 3- ácido carboxílico 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.56 (br s, 1 H, NH), 8.24 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 7.86 (s, H, H-vinil), 7.74 (d, J = 2.96 Hz, 1 H), 7.56 (dd, J = .5 & 8.1 Hz, 1 H), 7.20 (br m, 1 H, NHCH3), 7.03 (d, J= 8.1 Hz, 1 H), 2.57 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3). EM-EI m/z 361 [M+].

EJEMPLO 116 fr4-Metil-5- (4-metil-5-metilsulfamoil-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-3- ilidenmetil)-1 H- pirro!-3-carbonin-amino}-ácido acético etil éster 4-Metil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico etil éster (Ht. ref. D. O. Cheng, T. L. Bowman y E. LeGoff; J. Heterocyclic Chem.; 1976; 13; 1145-1 147) se formiló utilizando el método A, se hidrolizó utilizando el método B seguido por amidación (método C) para dar [(5-formil-4-met¡l- 1 H-pirrol-3-carbonil)-amino]-ácido acético etil éster. 4-Metil-5-metilaminosulfonil-2-oxindol (50 mg, 0.21 milimoles) se condensó con [(5-formil-4-metil-1 H-pirrol-3-carbonil)-amino]-ácido acético etil éster (100 mg, 0.42 milimoles) y piperidina (0.1 mL) en etanol (2 mL) para dar 50 mg (52%) del compuesto del título. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.59 (s, 1 H, NH), 1 1 .29 (v. br. s, 1 H, NH-CO), 8.33 (t, J = 5.8 Hz, 1 H, CONCH2), 7.83 (d, J = 3.1 1 Hz, 1 H), 7.80 (s, 1 H, H-vinil), 7.71 (d, J - 8.5 Hz, 1 H), 7.34 (br m, 1 H, NHCH3), 6.89 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 4. 1 (q, J = 7.1 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.92 (d, J = 5.8 Hz, 2H, GlyCH2), 2.86 (s, 3H, CH3), 2.48 (s, 3H, CH3), 2.42 (d, J = 4.71 Hz, 3H, NHCH3), 1.20 (t, J = 7.1 Hz, 3H, OCH2CH3). EM-EI m/z 460 [ +].

EJEMPLO 117 {[4- etil-5- (5-metilsulfamoil-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetií)-1 H- pirrol-3- carbonil1-amino -ácido acético eti! éster Una mezcla de 5-metilam¡nosulfonil-2-oxindol (0.06 g, 0.22 milimoles), [(5-formil-4- metil- H-p¡rrol-3-carbonil)-am¡no]-ác¡do acético etil éster (0.075 g, 0.27 milimoles) y piperidina (2 gotas) en etanol (5 mL) se calentó en un tubo sellado a 90°C por 12 horas. Después del enfriamiento, el precipitado se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con etanol, se trituró con diclorometano/éter y se secó para dar 0.035 g (36%) del compuesto del título como un sólido café amarillento. H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.6 (s, 1 H, NH), 1 1 (v. br. s, 1 H, NH-CO), 8.30 (t, J = 5.7 Hz, 1 H, CONCHz), 8.25 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 7.88 (s, 1 H, H-vinil), 7.84 (d, J = 3.3 Hz, 1 H, 7.57 (dd, J = 1.9 & 8.5 Hz, 1 H), 7.14 (br m, 1 H, NHCH3), 7.04 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 4.11 (q, J = 6.7 Hz, 2H, OCH2CH3), 3.92 (d, J = 5.7 Hz, 2H, GlyCH2), 2.55 (s, 3H, CH3), 2.41 (m, 3H, NCH3), 1.20 (t, J = 6.7 Hz, 3H, OCH2CH3). EM m/z 446 [ +].

EJEMPLO 118 {f4-Metil-5-f5-metilsulfamoii-2-oxo-^ pirrol-3- carbonin-amino}-ácido acético Una mezcla de [(5-formil-4-metil-1 H-pirrol-3-carbonil)-amino]-ácido acético etil éster (0.142 g, 0.59 milimoles) y NaOH 1 N (1.2 mL) en metanol (10 mL) se agitó a temperatura ambiente por 1 hora. La reacción se concentró y el residuo se condensó con 5- metilaminosulfonil-2-oxindol (0.13 g, 0.48 milimoles) y piperidina (0.12 mL) en etanol (12 mL) para dar 0.11 g (52%) del compuesto del título. 1H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 13.98 (br s, 1 H, NH), 8.17 (s, 1 H), 7.80 (s, 1 H, 7.75 (d, J = 3.1 Hz, 1 H), 7.51 (dd, J = 2 & 8.2 Hz, 1 H), 7.21 (m on br s, 2H), 6.97 (d, 7 = 8.1 Hz, 1 H), 3.41 (d, J = 4.2 Hz, 2H, CH2NH), 2.54 (s, 3H, pirrol-CH3), 2.39 (s, 3H, ArCH3). EM m/z 417 [M-1]+.

EJEMPLO 120 5-ÍVletil-2-(2-oxo-1 ,2-d¡hidro-indo!-3-ilidenmetil)- H-pirrol-3-ácido carboxílico H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 13.77 (br s, 1 H, NH), 12.49 (s, 1 H, COOH), 11.07 (s, 1 H, NH), 8.39 (s, 1 H, H-vinil), 7.43 (d, J = 7.47 Hz, 1 H), 7.20 (t, J = 7.47 Hz, 1 H), 7.03 (t, J = 7.47 Hz, 1 H), 6.91 (d, J = 7.47 Hz, 1 H), 6.49 (d, J - 1. 53 Hz, 1 H), 2.34 (s, 3H, CH3). EM m/z 269 [M+Hf.

EJEMPLO 121 5-Metil-2-(2-oxo-1 ,2-dihidro-indol-3-ilidenmetil)-1 H-pirrol-3^cido carboxílico etil éster H RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 3.79 (s, 1 H, NH), 11,08 (s, 1 H, NH), 8.31 (s, 1 H, H- vinil), 7.45 (d, J = 7.52 Hz, 1 H), 7.20 (t, J = 7.52 Hz, H), 7.03 (t, J = 7.52 Hz, 1 H), 6.91 (d, J = 7.52 Hz, 1 H), 6.50 (d, J = 2.1 Hz, 1 H), 4.26 (q, J - 7.2 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.33 (s, 3H, CH3), .32 (t, J - 7.2 Hz, 3H, EM m/z 297.1 [M+H]+.

EJEMPLO 122 2- (5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-5-metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico etü éster 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.72 (s, 1 H, NH), 11.16 (s, 1 H, NH), 8.29 (s, 1 H, H- vinil), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J = 2.0 & 8.05 Hz, 1 H), 6.87 (t, J = 8.05 Hz, 1 H), 6.53 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 4.28 (q, J = 7.03 Hz, 2H, OCH2CH3), 2.35 (s, 3H, CH3), 1.33 (t, J = 7.03 Hz, 3H, OCH2CH3).

EM m/z 375 & 377 [M+Hf.

EJEMPLO 123 2- (5-Bromo-2-oxo-1,2-dihidroindol-3-M carboxilico H RMN (300 mHz, DMSO-d6) d 13.72 (s, 1 H, NH), 12.57 (s, H, COOH), 1 1.19 (s, 1 H, NH), 8.36 (s, 1 H, H-vinil), 7.51 (d, J = 1.4 Hz, 1 H), 7.34 (dd, J = 1.4 & 8.17 Hz, 1 H), 6.87 (t, J = 8.17 Hz, 1 H), 6.52 (d, J = 2.5 Hz, 1 H), 2.35 (s, 3H, CH3). EM m/z 347 & 349 [M+Hf .

EJEMPLO 124 2-(5-Bromo-2-oxo-1 ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-5-metil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolídin-1-iletil)-amida A una solución de 2-formil-5-metii-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (250 mg, 1.63 milimoles) en dimetilformamida (3 mL) se le añadió 1 -etil-3- (3-dimetilaminopropil) carbodiimida (376 mg, 1 .2 equivalentes), 1 -hidroxibenzotriazol (265 mg, 1.2 equivalentes), trietilamina (0.45 mL, 2 equivalentes) y 1-(2-aminoetil)pirrolidina (0.23 mL, 1.1 equivalentes). Después de la agitación a temperatura ambiente durante toda la noche, la reacción se diluyó con bicarbonato de sodio saturado y salmuera (con sal extra) y se 30 extrajo con metano! al 10% en diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentró para dar 130 mg de 2-formil-5-metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-il-etíl)-amida. Una mezcla de 5-bromo-2-oxindol (106 mg, 0.5 miümoles), 2- formil-5-metil-1 H-pirrol- 3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-il-etil)-amida (125 mg, 1 equivalente) y piperidina (0.2 ml_) en etanol (2 mL) se calentó en un tubo sellado a 80°C por 1 hora y luego se enfrió. El precipitado que se formó • se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con etanol y acetato de etilo y se secó para dar el compuesto del título como un sólido naranja. H RMN (300 Hz, DMSO-d6) d 13.62 (s, 1 H, NH), 11 .06 (br s, 1 H, NH), 8.56 (s, 1 H, H-vinil), 8.15 (m, 1 H, CONHCH2), 7.48 (d, J = 1 .8 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J = 1.8 & 7.9 Hz, 1 H), 6.86 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 6.60 (d, J = 2.3 Hz, 1 H), 3.35 (m, 2H, HNCH2CH2), 2.56 (t, J = 6.91 Hz, 2H, HNCH2CH2), 2.35 (s, 3H, CH3), 1.67 (m, 4H, 2xCH2). EM m/z 443/445 [M+ y M++2j.

EJEMPLO 125 2-(5-Bromo-2-oxo-1 2-d¡hidroindol-3-ilidenmetil)-5-metil"1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetH) amida A una solución de 2-formil-5-metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (320 mg, 2.1 milimoles) en dimetilformamida (3 mL) se le añadió 1 -etií-3- (3- 31 dimetilaminopropil) carbodiimida (483 mg, 1.2 equivalentes), 1 -hidroxibenzotriazol (340 mg, 1.2 equivalentes), trietilamina (0.59 ml_, 2 equivalentes) y N, N-dietiletilendiamina (0.32 mL, 1 .1 equivalentes). Después de la agitación a temperatura ambiente durante toda la noche, la reacción se diluyó con bicarbonato de sodio saturado y salmuera (con sal extra) y se extrajo con metanol al 10% en diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron para dar 2-formil-5-metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilaminoetil)-amida. Una mezcla de 5-bromo-2-oxindol (106 mg, 0.5 milimoles), 2-formil-5-met¡l-1 H-pirrol- 3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil)-amida (126 mg, 1 equivalente) y piperidina (0.2 mL) en etanol (2 mL) se calentó en un tubo sellado a 80°C por 1 hora y luego se enfrió. El precipitado se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con etanol y acetato de etilo y se secó para dar el compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (360 MHz, DMSO-d6) d 13.62 (s, H, NH), 11.11 (br s, 1 H, NH), 8.54 (s, 1 H, H-vinil), 8.1 (m, 1 H, CONHCH2), 7.49 (d, J = 2.2 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J = 2.2 & 8.3 Hz, 1 H), 6.86 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 6.58 (d, J - 2.24 Hz, 1 H), 3.31 (m, 2H, HNCH2CH2), 2.59 (m, 6H, 3xCH2), 2.36 (s, 3H, CH3), 0.99 (t, J = 6.8 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM m/z 445/447 [M+ y M++2].

EJEMPLO 126 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-1,2 lihidro ndoi-3~iliden^ carboxíiico (2- dietilamino-etiQ-amida Una mezcla de 1 ,3-dihidro-indol-2-ona (266 mg, 2 milimoles), 5-formil-2,4-dimetil-1 H- pirrol-3-ác¡do carboxilico (2-dietilamino-etil) -amida (530 mg, 2 milimoles) y piperidina (1 gota) en etanol se calentó a 90°C por 2 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, el precipitado resultante se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con etanol y se secó para dar 422 mg (55%) del compuesto del título como un sólido amarillo claro. H RMN (400 Hz, D SO-d6) d 13.7 (s, 1 H, NH), 10.9 (s, 1 H, NH), 7. 88 (d, J= 7.6 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H, H-vinil), 7.41 (t, J = 5. 4 Hz, 1 H, NH), 7.13 (dt, J = 1.2 & 7.6 Hz, 1 H), 6.99 (dt, J = 1.2 & 7.6 Hz, 1 H), 6.88 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 3.28 (m, 2H), 2.48-2.55 (m, 6H), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 0.97 (t, J= 7.2 Hz, 6H, N(CH2CH3)2). EM + ve APCI 381 [M+ + 1].

EJEMPLO 127 5-(5-Cloro-2-oxo-1 ,2-dihidro-indol-3-il¡denrnetíl)-2,4-d¡rnetil- H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-diet¡lamino-etil)-amida Una mezcla de 5-Cloro-1 , 3-dihidro-indol-2-ona (335 mg, 2 milimoles), 5-formil-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-dietilamino- etil)-amida (530 mg, 2 milimoles) y piperidina (1 gota) en etanol se calentó a 90°C por 2 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, el precipitado resultante se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con etanol y se secó para dar 565 mg (68%) del compuesto del título como un sólido naranja. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 13.65 (s, 1 H, NH), 11.0 (s, 1 H, NH), 7.98 (d, J = 2.1 Hz, 1 H) 7.77 (s, 1 H H-vinil), 7.44 (t, NH), 7.13 (dd, J = 2.1 & 8.4 Hz, 1 H) 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 3.28 (g, 2H), 2.48-2.53 (m, 6H), 2.44 (s, 3H, CH3), 2.43 (s, 3H, CH3), 0.97 (t, J = 7.0 Hz, 6H, N(CH2CH3)2) EM + ve APCI 415 [M+ + 1].

EJEMPLO 128 2, 4-Dimetil-5-(2-oxo-1 2-dihidro-indol-3-iiidenmetil)-1 H-pirroi-3-ácido carboxílico (2- pirrolidin-1-et¡l)-amida 1 , 3-Dih¡dro-indol-2-ona se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil- 1 H-pirrot-3- ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-il-etil)-amida para dar el compuesto del título. EM + ve APCI 379 [M+ + 1].

EJEMPLO 129 5- (5-FluorO"2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetil)-2. 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-pirrolidin-1-il-eti)-amida 5-Fluoro-1 , 3-dihidro-indol-2-ona se condensó con 5-formil-2, 4-d¡metil-1 H- p¡rrol-3-ác¡do carboxílico (2-pirrolidin-1-il-etil)-amida para dar el compuesto del título. EM + ve APCI 397 [M+ + 1].

Procedimiento a gran escala: 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (61 g), 5-fluoro-1 , 3-dihidro- indol-2-ona (79 g), etanol (300 mL) y pirrolidina (32 mL) fueron sometidos a reflujo por 4.5 horas. El ácido acético (24 mL) se añadió a la mezcla y el reflujo se continuó por 30 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío y se lavaron dos veces con etanol. Los sólidos se agitaron por 130 minutos en acetona al 40% en agua (400 mL) que contenía ácido clorhídrico 12 N (6.5 mL). Los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío y se lavaron dos veces con acetona al 40% en agua. Los sólidos se secaron bajo vacío para dar 5-[5-fluoro-2-oxo- ,2-dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (86 g, rendimiento del 79%) como un sólido naranja. 1H-RMN (dimetilsuifóxido) d 2.48, 2.50 (2xs, 6H, 2xCH3), 6.80, 6.88, 7.68, 7.72 (4xm, 4H, aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 12.12 (s, 1 H, COOH), 13.82 (s, 1 H, pirrol NH). EM m/z 299 [M- ]. 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (100 g) y dimetilformamida (500 mL) se agitaron y se añadieron benzotriazol-1 - iloxitris (dimetilamino) fosfonio hexafluorofosfato (221 g), 1- (2- aminoetil) pirrolidina (45.6 g) y trietilamina (93 mL). La mezcla se agitó por 2 horas a temperatura ambiente. El producto sólido se recolectó mediante filtración al vacío y se lavó con etanol. Los sólidos se lavaron con lechada mediante agitación en etanol (500 mL) por una hora a 64°C y se enfriaron a temperatura ambiente. Los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío, se lavaron con etanol, y se secaron bajo vacío para dar 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-pirrolidin-1- il-etil)-amida (101.5 g, rendimiento del 77%). 1H-RMN (dimetilsulfóxido-d6) d 1.60 (m, 4H, 2xCH2), 2.40, 2.44 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.50 (m, 4H, 2xCH2), 2.57, 3.35 (2xm, 4H, 2XCH2), 7.53, 7.70, 7.73, 7.76 (4xm, 4H, aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.67 (s, 1 H, pirrol NH). EM m/z 396 [M+1].

EJEMPLO 130 5- (5-Cloro-2-oxo-1 , 2-d¾hidro-indoi-3-iiidenemetiQ-2, 4"dimetii-1 H-pirrol-3- ácido carboxíiico (2-pirrolidin-1-il-etíi)-amida 5-Cloro-1 , 3-dih¡dro-indol-2-ona se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3-ácido carboxíiico (2-pirroiidin-1-il-etil)-amida para dar el compuesto del título. EM + ve APCI 413 [M+ + 1]..

EJEMPLO 131 2,4-Dimet¡l-5-(2-oxo-1,2-dihidro-índol-3-ilidenmetil)-1 H"pirrol-3-ácido carboxíiico (2- dimetilam¡noetil)-amida 1 , 3-Dihidro-¡ndol-2-ona se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H-p¡rrol-3- ácido carboxíiico (2-dimetilamino-etil) amida para dar el compuesto del título. H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 13.63 (s, 1 H, NH), 10.90 (s, 1 H, NH), 7.78 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H H-vinil), 7.48 (t, 1 H, NH), 7.13 (dt, 1 H), 6.98 (dt, 1 H), 6.88 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 3.31 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.40 (s, 3H, CH3), 2.38 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H, N(CH2CH3)2) EM + ve APCI 353 [M+ + 1].

EJEMPLO 132 5-(5-Fluoro-2-oxo-1 ,2-dihidro-!ndol-3-ilidenmetil)-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-d¡metilaminoetil)-amida 5-Fluoro-1 , 3-di ¡dro-indol-2-ona se condensó con 5-formil-2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dimetilaminoetil) amida para dar el compuesto del título. 1H R N (400 MHz, DMSO-d6) d 13.68 (s, 1 H, NH), 10.90 (s, 1 H, NH), 7.76 (dd, J = 2.4 & 9.4 Hz, 1 H), 7.71 (s, H H-vinil), 7.51 (t, 1 H, NH), 6.93 (m, 1 H), 6.84 (dd, J = 4.6 & 8.4 Hz, 1 H), 3.31 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H, CH3), 2.41 (s, 3H, CH3), 2.38 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H, N(CH2CH3)2). EM + ve APCI 371 [M+ + 1].

EJEMPLO 193 5-f5 luoro-2-oxo-1 ,2-dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetill-214-dirnetil- H-pirrol- 3- ácido carboxílico (2-etilam¡no-etil)-amida 5-Form¡l-2, 4-dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-etilamino-etil)-amida (99 g), etanol (400 mL), 5-fluoro-2-oxindol (32 g) y pirrolidina (1.5 g) fueron sometidos a reflujo por 3 horas con agitación. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos se recolectaron mediante filtración al vacío. Los sólidos se agitaron en etanol a 60°C, se enfriaron a temperatura ambiente y se recolectaron mediante filtración al vacío. El producto se secó bajo vacío para dar 5-[5-fluoro-2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol- (3z)-ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2- etilamino-etil)-amida (75 g, rendimiento del 95%). 1H-RMN (dimetilsulfóxido-d6) d 1.03 (t, 3H, CH3), 2.42, 2.44 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.56 (q, 2H, CH2), 2.70, 3.30 (2xt, 4H, 2xCH2), 6.85, 6.92, 7.58, 5 7.72, 7.76 (5xm, 5H, aromático, vinil y CONH), 10.90 (br s, 1 H, CONH), 13.65 (br s, H, pirrol NH). EM m/z 369 [M-1].

EJEMPLO 195 5- [5-Fluoro-2-oxo-1. 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetin-2, 4-dimetii-pirrol-3-í o ácido carboxilico (2-dietil-N-oxoamino-etil)-amida METODO A 5-[5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-15 1 H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) -amida (598 mg) y diclorometano (60 mL) en un baño con hielo fueron tratados con 3-ácido cloroperbenzóico (336 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. El solvente se evaporó mediante evaporador rotatorio y el residuo se suspendió en metano! (20 mL). Se añadió agua (20 mL) que 0 contenía hidróxido de sodio (240 mg) y la mezcla se agitó por una hora. El precipitado se recolectó mediante filtración al vacío, se lavó con 5 mL de agua y se secó bajo a vacío para dar 5-[5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)- ilidenmetil] -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-dietil-N-oxoamino-etil)- amida (510 mg, rendimiento del 82%) como un sólido naranja. 1H-RMN (DMSO-d6) d 13.72 (br s, 1 H, NH), 1 1 .02 (br s, 1 H, CONH), 9.81 (br s, 1 H, CONH), 7.75 (dd, 1 H, aromático), 7.70 (s, 1 H, aromático), 6.93 (td, 1 H, aromático), 6.84 (m, 1 H, aromático), 3.63 (m, 2H, CH2), 3.29 (m, 2H, CH2), 3.14 (m, 4H, 2xCH2), 2.47 (s, 1 H, CH3), 2.45 (S, 3H, CH3), 1.64 (t, 6H, 2xCH3). EM m/z 415 [M+1].

METODO B 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil)-amida (10 g) se suspendió en diclorometano (100 mL) y se enfrió en un baño con hielo. Se añadió 3-ácido cloro-peroxibenzóico (13.1 g) con agitación y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y luego se agitó durante toda la noche. La mezcla se evaporó en un evaporador rotatorio hasta secarla y se sometió a cromatografía sobre una columna de gel de sílice eluyendo con 20 % metanol en diclorometano. Las fracciones que contenían el producto fueron combinadas y se evaporaron en un evaporador rotatorio hasta secarlas para dar 5- formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietil-N-oxoamino-etil) -amida (9 g, rendimiento del 83%). 5-Formil-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietil-N-oxoamino-etil)- amida (9 g), 5-fluoro-1 , 3-dihidro-indol-2-ona ((9 g, rendimiento del 83 %)), y pirrolidina ((9 g, rendimiento del 83% (0.1 g) fueron sometidos a reflujo en etanol (30 mL) por 4 horas. La mezcla se enfrió en un baño con hielo y el precipitado se recolectó mediante filtración al vacío y se lavó con etanol. Los sólidos se agitaron en acetato de etilo (30 mL), se recolectaron mediante filtración al vacío, se lavaron con acetato de etilo y se secaron bajo vacío para dar 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico (2-dietil-N-oxoamino-etil) -amida (10.3 g rendimiento del 80%) como un sólido naranja. 1H-RMN (DMSO-d6) d 13.72 (br s, 1 H, NH), 1 1.02 (br s, 1 H, CONH), 9.81 (br s, 1 H, CONH), 7.75 (dd, 1 H, aromático), 7.70 (s, 1 H, aromático), 6.93 (td, 1 H, aromático), 6.84 (m, 1 H, aromático), 3.63 (m, 2H, CH2), 3.29 (m, 2H, CH2), 3.14 (m, 4H, 2xCH2), 2.47 (s, 1 H, CH3), 2.45 (s, 3H, CH3), 1 .64 (t, 6H, 2xCH3). EM m/z 415 [M+1].

EJEMPLO 190 5- f5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenemet¡l1-2, 4-dimetil-1- pirrol-3- ácido carboxílico [2- (piridin-1-il) etill-amida 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (120 mg, 0.4 milimoles) se agitó con EDC, HCI (96 mg, 0.5 milimoles), 1-hidroxi-benzotriazol anhidro (68 mg, 0.5 milimoles), y 2- (2-aminoetilpiridina) obtenida a partir de Aldrich en DMF anhidro (3 mL) por 2-3 días a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con NaHC03 1 M (1.5 mi), luego con 8 mi de agua. El producto precipitado sin purificar se recolectó mediante filtración, se lavó con agua, se secó y se purificó mediante cristalización o cromatografía para dar 5- [5-fluoro-2-0X0-1 , 2-dihidro-indoi- (3Z)-ilidenmeti!]-2, 4- dimeíil-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico [2-(piridin-1-il)-etil] amida.

EJEMPLO 189 5- f5-Cloro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-¡lidenmetin-2, 4-dimetil-1 H- pirrrol-3- ácido carboxílico [2- (piridin-1-il) etil] amida Procediendo como se describió en el ejemplo previo pero sustituyendo 5- [5-fluoro-2-oxo- , 2- dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico con 5- [5- cloro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-¡l'idenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (127 mg) se proveyó 5- [5-doro-2-???-? , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico 2- [(piridin-1-il) etil] amida.

EJEMPL0 192 5- [5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-iíidenmetin-2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3- ácido carboxílico f2-(piridin-1-il)etM amida Procediendo como se describió en el ejemplo 190 anteriormente mencionado pero sustituyendo 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico con 5- [5- bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (145 mg) se proveyó 5- [5-bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmet¡l]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácído carboxílico [2- (piridin-1 -il) etil] amida EJEMPLO 191 5- [2-OXO-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetin-2. 4-dimetil- 1H-pirroí-3- ácído carboxílico G2- (piridin-1-il) etil] amida Procediendo como se describió en el ejemplo 190 anteriormente mencionado pero sustituyendo 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol- (3Z)-¡lidene-metil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico con 5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)-il¡denmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (1 13 mg) se proveyó 5- [2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico [2- (piridin-1-?) etil] amida.

EJEMPLO 203 5-f5-Ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetilI-2, 4-dimetil-1H-pirrol- 3- ácido carboxílico G2- (piridin-1-il) etil] amida Procediendo como se describió en el ejemplo 190 anteriormente mencionado pero sustituyendo 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetií]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico con 5- [5- ciano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (123 mg) se proveyó 5- [5-c¡ano-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilídenmetil]-2, 4-dimet¡l-1 H-p¡rrol-3-ácido carboxílico [2- (piridin-1 -ií) etil] amida.

EJEMPLOS 142. 186, 187, 188 Y 204 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 92, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 1 - (2-aminoetil) pirrolidina, obtenido a partir de Aldrich Chemical Company, Inc. se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 143-147 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 1 -(2-aminoetil) imidazolin-2-ona (preparada mediante calentamiento del carbonato de dimetilo con bis (2-aminoetil) amina (2 equivalentes) en una botella sellada a 150 °C por 30 minutos, siguiendo el procedimiento descrito en la Patente de E.U.A. 2613212 (1950), a Rohm & Haas Co. El producto sin purificar se purificó sobre sílice utilizando una mezcla eluyente de cloroformo- metanol-amonio acuoso 80: 25: 2) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 148-151 Y 184 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 4-(2-aminoetil) piperazina-1 -ácido acético etil éster (preparado como sigue: piperazina-1 -ácido acético etil éster (11.22 g) se trató con iodoacetonitrilo (5.0 ml_) en la presencia de carbonato de potasio (6.9 g) en acetato de etilo (260 mL) a 0°C. Después de la adición completa de iodoacetonitrilo (45 minutos), la mezcla de reacción se agitó subsecuentemente a temperatura ambiente por 1 1 horas. La mezcla de reacción se filtró y los filtrados se evaporaron. El residuo se hidrogenó en la presencia de borohidruro de cobalto (preparado a partir de COCI2 y borohidruro de sodio) a temperatura ambiente a 3.51 kg/cm2 por 2 días en etanol. La purificación mediante filtración, evaporación y cromatográfica utilizando una mezcla eluyente de cloroformo- metanol-amonio acuoso 80: 25: 2 proveyó la amina deseada (3.306 g) como un aceite amarillo claro) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 152-153 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 2- [(2-am¡noetilamino)] acetonitrilo (preparado como sigue: Una solución de iodoacetonitrilo (50 milimoles) en alcohol etílico (80 mi) se añadió a una solución de etilen diamina (150 mi) en alcohol etílico (60 mi) a 0°C durante un periodo de 30 minutos. La agitación se continuó por otra 1 hora a 0°C, luego a temperatura ambiente por 14 horas. Se añadieron 55 milimoles de carbonato de potasio, se agitaron por 30 minutos, se filtraron y el filtrado se concentró a temperatura ambiente. El residuo se purificó sobre sílice utilizando una mezcla eluyente de cloroformo-metanol-amonio acuoso 80: 15: 1.5 para dar 2- [(2- aminoetilamino)] -acetonitrilo (3.550 g) el cual se utilizó inmediatamente) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 154-158 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 1- (3-aminopropil)-azepin-2-ona (preparada de conformidad con el procedimiento en Kraft A.: J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 , 6, 1999, 705-14, exceptó que la hidrólisis de DBU se llevó a cabo a 145°C sin mezcla en la presencia de hidróxído de litio (1 hora, 5 mi de DBU, 2 mi de agua, 420 mg de hidrato de hidróxído de litio). La purificación del producto sin purificar sobre sílice utilizando una mezcla eluyente de cloroformo-metanol-amonio acuoso 80: 40: 4 proveyó 1- (3-aminopropil) azepin-2-ona (4.973g, rendimiento del 87%) ) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 133-135, 159 Y 200 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con N-acetil etilen diamina, (preparado mediante el calentamiento de una mezcla de acetato de etilo con etilen diamina (1.5 equivalentes) a 160°C por 1 hora en una vasija sellada. La destilación al vacío proveyó el producto deseado en un rendimiento al 56%. N-acetiletilen diamina también está disponible a partir de Aldrich) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLOS 146-140 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 1 - (3-aminopropil)-tetrahidro-pirimidin-2-ona (preparada de la misma manera que 1- (3-aminopropil)-azepin-2-ona de conformidad con el procedimiento en Kraft A.: J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 ,6, 1999, 705-14: Brevemente, 1 , 3, 4, 6, 7,8-hexahidro-2H- pirimido[1 , 2-a]pirimidina (4.939 g), hidrato de hidróxido de litio (918 mg) y 2 mi de agua se calentó sin un solvente en una vasija sellada a 145°C por 1 hora. El producto sin purificar se purificó sobre una columna de sílice en cloroformo-metanol-amonio acuoso 80: 40: 4 para dar amina pura (5.265g, rendimiento del 94%).

EJEMPLOS 141. 160-162 Y 135 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 1- (2-aminoetil)-piperazin-2-ona (preparado como sigue: cloruro de tert-butildifenilsilil puro (25 mL, 97.7 milimoles) se añadió gota a gota dentro de una solución de DBU (19.5 mi, 130 milimoles) y bis (2-aminoetil) amina (4.32 mL, 40 milimoles) en anhidro dimetil acetamida (80 mL) a temperatura ambiente después de enfriamiento sobre un baño de agua durante 5 minutos. La mezcla se agitó por 5 horas. Bromoácido acético etil éster (6.70 mL, 60 milimoles) se añadió puro después del enfriamiento a temperatura ambiente. La reacción se agitó por 25 minutos, luego se evaporó a alto vacío. El residuo se disolvió en metanol (200 mi), se añadieron KHC03 (10 g) y KF (12 g, 200 milimoles) y la mezcla se agitó a 60°C por 5 horas. Se añadieron 10 g de Na2C03, se agitó por 10 minutos, se enfrió y se filtró. Los filtrados se evaporaron. El residuo se extrajo con hexanos (2 veces 250 mi). El material insoluble en hexano se disolvió en etanol (60 mL), se filtró y se evaporó. El residuo se purificó sobre una columna de sílice en cloroformo-metanol-amonio acuoso 80: 40: 4 para dar amina pura (4.245g, rendimiento del 74%)) se proveyeron los compuestos deseados. 8 EJEMPLOS 163-167 Procediendo como se describió en los ejemplos 190, 189, 191 , 192, y 203 anteriormente mencionados pero sustituyendo 2- (2-aminoetil) piridina con 3- [(2-aminoetil) amino] propionitrilo (preparado a partir de etilen diamina (150 milimoles) y acrilonitrilo (50 milimoles) en THF a temperatura ambiente, como se describió en Israel, M. et al: J. Med Chem. 7, 1964, 710-16., se proveyó la amina deseada (4.294 g)) se proveyeron los compuestos deseados.

EJEMPLO 168 5- (5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indo!-3-i¡idenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico G2- (4-metilpinerazin-1-il)-etill-amida A una mezcla amarilla turbia en agitación de 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetil -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (90 mg), DMF (0.8 mL) y TEA (0.084 mL) en un tubo de reacción de 20 mL, se añadió reactivo BOP (199 mg). La mezcla se volvió clara en 5 minutos. Se añadió 2- (4- etiipiperazin-l-il) etilamina1 (51 mg) dentro de la mezcla clara. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los productos sólidos amarillos se precipitaron a partir del sistema de reacción. La cromatografía en capa fina (metanol al 10% en cloruro de metileno) mostró que toda la materia prima se había convertido en el producto. El sólido se aisló mediante filtración al vacío y se lavó una vez con etanol (1 mL). El sólido se sónico en éter dietílico (2 mL) por 20 minutos y se recolectó mediante filtración al vacío. Después del secado bajo vacío, se obtuvo 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil- H- pirrol-3-ácido carboxílico (4-metilpiperazin-1-il-etil)-amida (79 mg, rendimiento del 62%). 1H RMN (DMSO-d6) d 2.13 (s, 3H, CH3), 2.40, 2.42 (2xs, 6H, 2x CH3), 2.41 (m, 2H, CH2), 2.47 (m, 8H, 4xCH2), 3.30 (m, 2H, CH2), 6.82 (dd, J = 4.5, 8.7 Hz, 1 H), 6.91 (td, 2J = 2. 4, 3J = 8.8 Hz, 1 H), 7.43 (t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.75 (dd, J = 2.8, 9.6 Hz, 1 H) (aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.67 (s, 1 H, NH). LC-EM (m/z) 424.4 (M-1 ).

EJEMPLO 169 5-(5-Cloro-2-oxo-1 2-dihidro-indol-3-ilidenmeti0-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (4-metilpíperazin-1-il-etil)-amida Siguiendo el procedimiento en el ejemplo 168 anteriormente mencionado pero sustituyendo 5- [5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirroi-3-ácido carboxílico con 5- [5- cloro-2-oxo-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-¡lidenmetil]-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (95 mg, 0.3 milimoles) dio 5- (5-cloro-2-oxo-1 , 2-dih¡dro-indol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimet¡l-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (4-metilpiperazin-1 -il-etil)-amida (76 mg, 58%). 1H RMN (DMSO-d6) d 2.13 (s, 3H, CH3), 2.41 , 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.42 (m, 2H, CH2), 2.48 (m, 8H, 4xCH2), 3.30 (m, 2H, CH2), 6.84 (d, J = 8.0 HZl 1 H), 7.1 1 (dd, J = 2.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.44 (t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.76 (s, 1 H), 7.97 (d, J = 2.0 Hz, H) (aromático y vinil), 10.98 (s, 1 H, CONH), 13.62 (s, H, NH). LC-EM (m/z) 440.2 (M-1 ).

EJEMPLO 170 5- (5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihidro-indoi-3-ilidenmetii)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (4-metilpiperazin-1-il-etil)-amida Siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 168, pero sustituyendo 5- (5-cloro-2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetil)-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico con 5- (5- bromo-2~oxo-1 , 2-dihidro-indol-3-il¡denmetil)-2,4-d¡metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico dio 5- (5-bromo-2-oxo- , 2-dihidro-indoI-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (4-metilpiperazin-1 -il-etil)-amida (39 mg, 54%) que se obtuvo a partir de SU01 1670 (54 mg, 0.15 milimoles).. H RMN (DMSO-d6) d 2.14 (s, 3H, CH3), 2.41 , 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.42 (m, 2H, CH2), 2.48 (m, 8H, 4xCH2), 3.31 (m, 2H, CH2), 6.80 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.23 (dd, J = 2.0, 8.0 Hz, 1 H), 7.44 (t, J = 5.6 Hz, H), 7.76 (s, 1 H), 8.09 (d, J = 2.0 Hz, 1 H) (aromático y vinil), 10.99 (s, 1 H, CONH), 13.61 (s, H, NH). LC-EM (m/z) 486.6 (M).

EJEMPLO 172 5- (2-Oxo-l ,2-dihidro-indol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (4- metllpiperazin-1 -il-eti!)-amida Siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 168 anteriormente mencionado pero sustituyendo 5- (5-fluoro- 2-oxo-1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil- H-pirroI-3-ácido carboxílico SU014900 con 5-(2-oxo- ,2-d¡hidro-indoI-3-ilidenmetil)-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico dio 5- (2-0X0-1 , 2-dihidro-indol-3-ilidenmetil) -2, 4-d¡met¡M H-pirrol-3- ácido carboxílico (4-metilpiperazin-1 -il-etil)-amida, (136 mg, 84%) se obtuvieron (1 2.8 mg, 0.4 milimoles). 1H-RMN (DMSO-d6) 6 2.1 3 (s, 3H, CH3), 2.39, 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.42 (m, 2H, CH2), 2.48 (m, 8H, 4xCH2), 3.30 (t, 2H, CH2), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.96 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.10 (t, J = 7.8Hz, 1 H), 7.41 (t, J - 5.4 Hz, 1 H), 7.62 (s, 1 H), 7.76 (d, J = 7.6 Hz, 1 H) (aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.61 (s, 1 H, NH). LC-EM {miz) 406.6 (M-1 ).

EJEMPLO 171 5- G2-???-1 , 2-dihidro-indol- (3Z)-ilidenmetiri2. 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico G2- (3, 5-dimetilpiperazin-1 -il) etil) amida A una mezcla amarilla turbia en agitación de 5-[2-oxo-1 ,2-d¡hidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]- 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ác¡do carboxílico (1 12.8 mg, 0.4 milimoles), DMF (0.5 mL) y trietilamina (0.111 ml_) en un tubo de reacción de 20 mL, se añadió el reactivo BOP (265 mg). La mezcla se volvió clara en 5 minutos. Se añadió 2-(2,6-dimetilpiperazin-1-il) etilamina (68.6 mg) (véase., Tapia, L. Alonso-Cires, P. Lopez-Tudanca, R. Mosquera, L. Labeaga, A. Innerarity, A. Orjales, J. Med. Chem., 1999, 42, 2870-2880) dentro de la mezcla clara. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La cromatografía en capa fina (metanol al 10% en cloruro metileno) mostró que toda la materia prima se había convertido en el producto. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarla y luego se purificó mediante cromatografía instantánea (CH2Cl2/CH3OH=20/1-15/1 ) seguido por recristaiización para dar 5- [2-oxo- 1 , 2-dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2,4-dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxilico [2- (3, 5- dímetilpiperazin-1-il) etil) amida (83 mg, rendimiento del 50%). H RMN (DMSO-d6) d 1.15, 1.16 (2xs, 6H, 2xCH3), 1.95 (t, J = 1 1.6 Hz, 2H, CH2), 2.4 , 2.47 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.50 (m, 2H, CH2), 3.03 (d, J = 10 Hz, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.30 (m, 2H, CH2), 6.86 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.97 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.1 1 (t, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.48 (t, J = 5.6 Hz, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.75 (d, J = 7.6 Hz, 1 H) (aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.62 (s, 1 H, NH). LC-EM (m/z) 422.2 (M+1 ).

EJEMPLO 173 5- [5-Fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidro-inclol- (3Z)-ilidenmetil]-2, 4-dimetil-1H- pirrol-3- ácido carboxílico [2- (3, 5-dimetilpiperazin-1-il) etii) amida Siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 168 anteriormente mencionado se obtuvo el compuesto deseado (60 mg, 0.2 milimoles). 1H RMN (DMSO-d6) d 0.891 , 0.907 (2xs, 6H, 2xCH3), 1.49 (t, J = 10.4 Hz, 2H), 2.40, 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.41 (m, 2H, CH2), 2.74 (m, 4H), 3.30 (m, 2H), 6.82 (dd, J - 4.5, 8.7Hz, H), 6.90 (td, 2J = 2.4, 3J - 8.4 Hz, 1 H), 7.42 (t, J = 5.6Hz, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.74 (dd, J = 4.6, 8.4 Hz, H) (aromático y vinil), 10.88 (s, 1 H, CONH), 13.65 (s, 1 H, NH). LC-EM (m/z) 438.4 (M-1).

EJEMPLO 174 5-r5-Cloro-2-oxo-1 ,2-dihidro-indol-(3Z)-iiidenm6till-2,4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico G2- (3, 5-dimetilpiperazin-1-il) etil) amida Siguiendo el procedimiento para el ejemplo 171 anteriormente mencionado el compuesto deseado (31.2 mg, 34%) se obtuvo a partir de 5-[5-cloro-2-oxo-1 ,2-dihidro-indol-(3Z)-ilidenmetil]-2,4-dimet¡l-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (63 mg, 0.2 milimoles). 1H RMN (DMSO-d6) d 1.15, 1 .16 (2xs, 6H, 2xCH3), 1.95 (t, J = 11.6 Hz, 2H, CH2), 2.40, 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.50 (m, 2H, CH2), 3.03 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.30 (m, 2H, CH2), 6.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 2.0, 8.0 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.76 (s, H), 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H) (aromático y vinil), 10.99 (s, IH, CONH), 13.63 (s, 1H, NH). LC-EM (m/z) 456.2 (M+1).

EJEMPLO 175 5- r5-Bromo-2-oxo-1 , 2-dihídro-indo!- (3Z)-ilidenmet¡n-2, 4-dimetií-1H- pirrol-3- ácido carboxílico f2-(3, 5-dimetilpiperazin-1-ii) etil) amida Siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 171 el compuesto deseado (40 mg, 40%) se obtuvo a partir de 5- [5-bromo-2-oxo-1, 2-dihidro-indol- (3Z)-il¡denmetil]-2, 4- dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (74 mg, 0.2 milímoles). 1H RMN (DMSO-d6) d 1.15, 1.16 (2xs, 6H, 2xCH3), 1.95 (t, J = 11.6 Hz, 2H, CH2), 2.40, 2.42 (2xs, 6H, 2xCH3), 2.50 (m, 2H, CH2), 3.03 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.30 (m, 2H, CH2), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 2.0, 8.4 Hz, 1H), 7.51 (t, J = 5.6Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.0 Hz, 1H) (aromático y vinil), 10.99 (s, 1H, CONH), 13.62 (s, H, NH). LC-EM (m/z) 498.4 (M-1).

EJEMPLO 205 (3Z)-3- G(3, 5-d¡metil-1 H-pirrol-2-il)-metilidenl-1-n - (4-metilpiperazinil) metiil-l . 3- dih¡dro-2H-indol-2-ona N-metilp¡perazina (10 g, 100 milimoles) se añadió una solución en agitación de formaldehído acuoso (10 g de solución al 38%, 00 milimoles) y 3- (3, 5-dimetil-1 H-pirrol-2- ilmetiliden)-1 , 3-dihidro-indol-2-ona, (2.38 g, 10 milimoles) en metanol (100 mL). La solución se calentó a 60°C por 1 hora, se concentró a un volumen bajo y el precipitado se filtró, se lavó con metanol, y se secó para dar 2.38 g del compuesto del título, pf 60-164°C. CLAR Rt 4.72 minutos. 1H RMN (CDCI3) d 2.26 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.43 (br s, 4H), 2.70 (br s, 4H), 4.59 (s, 2H), 5.96 (d, 1 H), 7.02-7.08 (m, 2H), 7.15 (dd, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 7.48 (dd, 1 H) y 13.0 (br s, 1 H). Análisis calculado para C2iH26N40: C, 71.97; H, 7.48; N, 15.99. Encontrado: C, 71.75; H, 7.46; N, 15.87. (3Z)-3- [(3, 5-Dimetil-1 H-pirrol-2-il)-metiliden]-1-[1- (4-metilpiperazinil)- metil]-1 , 3-dihidro-2H-indol-2-ona se convirtió a una sal de dihidrocloruro.

EJEMPLO 206 Síntesis de (3Z)-3- G(3, 5-ciimetil-1H-pirrol-2-il)-metilidenM- (1- pirrolidinilmetil)-^ 3- dihídro-2H-¡ndol-2-ona Pirrolidina (450 mg, 6.3 milimoles) se añadió a una solución en agitación de formaldehído acuoso (500 mg de solución al 38%, 6.0 milimoles) y 3- (3, 5-dimeti!-1 H-pirrol-2- ilmetiliden)-1 , 3-dihidro-indol-2-ona, (900 mg, 3.8 milimoles) en metanol (50 ml_). Después de 15 minutos, la solución se enfrió a 0°C y el precipitado se filtró, se lavó con agua, y se secó para dar 1.08 g del compuesto del título, pf 29-132°C. CLAR Rt 4.87 minutos. 1H RMN [(CD3)2SO] d 1 .65 (m, 4H), 2.32 9s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.62 (m, 4H), 4.72 (s, 2H) 6.07 (d, 1 H), 7.00 (m, 1 H), 7.15 (m, 2H), 7.61 (s, 1 H), 7.76 (d, 2H) y 13.1 (br s, H). Análisis calculado para C2OH23N3O: C, 74.74; H, 7.21 ; N, 13.07. Encontrado: C, 74.61 ; H, 7.25; N, 13.03.

EJEMPLOS BIOLÓGICOS Inhibidores de la proteína cinasa de la fórmula (I): Los siguientes ensayos se pueden utilizar para determinar el grado de actividad y efecto de los compuestos de la fórmula (I) sobre una o más de las proteínas cinasas (en adelante P s). Ensayos similares se pueden designar junto con las mismas líneas para cualesquiera técnicas que utilizan PK bien conocidas en la técnica.

A. Procedimientos del ensayo. Varios de los ensayos descritos en la presente invención se llevaron a cabo en un formato de ELISA (Ensayo Intercalado Inmunoabsorbente Asociado con Enzima) (Voller, et al., 1980, "Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, "Manual de Clinical Immunology, 2d Ed., Rose and Friedman, Am. Soc. de Microbiology, Washington, D. C. , pp. 359-371 ). El procedimiento general es como sigue: un compuesto de la fórmula (I) se introduce dentro de las células que expresan las cinasa de prueba, ya sea naturalmente o de manera recombinante, por un período de tiempo seleccionado después del cual, si la cinasa de prueba es un receptor, se añade un ligando conocido para activar al receptor. Las células se lisan y el lisado se transfiere a los pozos de una placa para ELISA previamente revestida con un anticuerpo específico que reconoce el sustrato de la reacción enzimática de fosforilación. Los componentes que no pertenecen al sustrato del lisado celular se lavan y la cantidad de fosforilación en el sustrato se detecta con un anticuerpo que reconoce específicamente la fosfotirosina en comparación con las células control que no estuvieron en contacto con un compuesto prueba. Los protocolos actualmente preferidos para llevar a cabo los experimentos de ELISA para PKs específicas se proveen a continuación. No obstante, la adaptación de estos protocolos para determinar la actividad de los compuestos en contra de otros receptores para tirosina cinasas (RTKs), así como para tirosina cinasas citoplásmica (CTKs) y serina treonina tirosina cinasas (STKs), está dentro del alcance del conocimiento de aquellos expertos en la técnica. Otros ensayos descritos en la presente invención miden la cantidad de ADN elaborada en respuesta a la activación de una cinasa prueba, la cual es una medida general de una respuesta proliferativa. El procedimiento general para este ensayo es el siguiente: un compuesto se introduce dentro de las células que expresan las cinasa prueba, ya sea naturalmente o de manera recombinante, por un período de tiempo seleccionado después del cual, si la cinasa prueba es un receptor, se añade un ligando que se sabe que activa al receptor. Después de la incubación por al menos toda la noche, se añade un reactivo para marcado de ADN tal como 5- bromodeoxiuridina (BrdU) o H3-timidina. La cantidad de ADN marcado se detecta ya sea con un anticuerpo anti-BrdU o por la medición de la radiactividad y se compara con las células control que no estuvieron en contacto con un compuesto prueba.

Bioensavo GST-FLK-1 Este ensayo analiza la actividad de la tirosina cinasa de GST-Flk 1 sobre polipéptidos poli (glu, tyr).

Materiales y reactivos: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Corning (Corning número de catálogo 5805-96). 2. Poli (glu, tyr) 4:1 , liofilizado (Sigma # de catálogo P0275). 3. Preparación de placas para ensayo revestidas con poli (glu, tyr) (pEY): revestimiento 2 ug/pozo de poli (glu, tyr) (pEY) en 100 ul de PBS, mantenidas a temperatura ambiente por 2 horas o a 4°C durante toda la noche. Las placas se cubren bien para prevenir la evaporación. 5 4. Regulador de pH PBS: para 1 L, mezclar 0.2 g de KH2P04, 1 .15 g de Na2HP04, 0.2 g de KCI y 8 g de NaCI en aproximadamente 900 mide H20 destilada. Cuando todos los reactivos están disueltos, ajustar el pH a 7.2 con HCI. Llevar a un volumen total de 1 L con H2O destilada. 5. Regulador de pH PBST: a 1 L de regulador de pH PBS, añadir ]0 1.0 mi de Tween-20. 6. Regulador de pH TBB para bloqueo: para 1 L, mezclar 1 .21 g de TRIS, 8.77 g de NaCI, 1 mi de TWEEN- 20 en aproximadamente 900 mi de H20 destilada . Ajustar el pH a 7.2 con HCI. Añadir 10 g de BSA, agitar hasta disolver. Llevar a un volumen total de 1 L con H2O destilada. Filtrar para 15 remover las partículas de materia. 7. 1 % de BSA en PBS: para elaborar una solución de trabajo 1x, añadir 10 g de BSA a aproximadamente 990 mi de regulador de pH PBS, agitar para disolver. Ajustar el volumen total a 1 L con regulador de pH PBS, filtrar para remover las partículas de materia. 0 8. 50 mM de HEPES pH 7. 5. 9. GST-FLKLCD se purificó a partir de la transformación de baculovirus recombinante SF9 (SUGEN, Inc.). 10. 4 % de DMSO en H20 destilada. 11. 10 mM de ATP en H20 destilada. 12. 40 mM de MnCI2 13. Regulador de pH para dilución de la cinasa (KDB): mezclar 10 mi de Hepes (pH 7.5), 1 mi de NaCI 5M, 40 µ?_ 100 mM ortovanadato de sodio y 0.4 mi de 5% de BSA en H20 destilada con 88.56 mi de H20 destilada. 14. Placas de polipropileno con fondo en V de 96 pozos de NUNC, Applied Scientific # de catálogo AS-72092 15. EDTA: mezclar 14.12 g del ácido etilendiamintetraacético (EDTA) a aproximadamente 70 mi de H20 destilada. Añadir NaOH 10 N hasta que se disuelva el EDTA. Ajustar el pH a 8.0. Ajustar el volumen total a 00 mi con H20 destilada. 16. Regulador de pH para dilución del anticuerpo 1 o: mezclar 10 mi de 5% de BSA en regulador de pH de PBS con 89.5 mi de TBST. 17. Anticuerpo monoclonal antl-fosfotlrosina conjugado con peroxidasa de rábano (PY99 HRP, Santa Cruz Biotech). 18. 2, 2'-Azinobis (3-et¡Ibenztiazolin-6- ácido sulfónico (ABTS, Moss, número de catálogo ABST). 19.10% de SDS.

Procedimiento: 1. Revestir las placas para ELISA de 96 pozos de Corning con 2 ig del polipéptido polyEY en PBS estéril como se describió en el paso 3 de los materiales y reactivos. 2. Remover el líquido no unido a partir de los pozos mediante la inversión de la placa. Lavar una vez con TBST. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido. 3. Añadir 100 µ? de 1 % BSA en PBS a cada pozo. Incubar, con agitación, por 1 hora a temperatura ambiente. 4. Repetir el paso 2. 5. Empapar los pozos con HEPES 50 mM (pH 7.5) (150 µ?/????). 6. Diluir el compuesto prueba con H20 destilada/4% de DMSO hasta cuatro veces la concentración final deseada del ensayo en placas de polipropileno de 96- pozos. 7. Añadir 25 µ? del compuesto prueba diluido a una placa para ELISA. En los pozos control, colocar 25 µ? de H20 destilada/4% de DMSO. 8. Añadir 25 µ? de MnCI2 40 mM con ATP 4x (2 M) a cada pozo. 9. añadir 25 µ? de EDTA 0.5 M a los pozos control negativos. 10. Diluir GST-Flk 1 a 0.005 pg (5 ng) /pozo con KDB. 1. Añadir 50 µ? de enzima diluida a cada pozo. 12. Incubar, con agitación, por 15 minutos a temperatura ambiente. 13. Detener la reacción mediante la adición de 50 µ? de EDTA 250 mM (pH 8.0). 14. Lavar 3X con TBST y golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido. 15. Añadir 100 µ? por pozo de anti-fosfotirosina conjugado con HRP, dilución 1 : 5,000 en un regulador de pH para dilución del anticuerpo. Incubar, con agitación, por 90 minutos a temperatura ambiente. 16. Lavar como en el paso 1 . 17. Añadir 100 µ? de solución de ABTS a temperatura ambiente a cada pozo. 18. Incubar, con agitación, por 10 a 15 minutos. Remover cualquier burbuja. 19. Detener la reacción mediante la adición de 20 µ? de 0% de SDS a cada pozo. 20. Leer los resultados sobre un lector de ELISA Dynatech MR7000 con un filtro de prueba a 410 nM y un filtro de referencia a 630 nm.

Bioensayo PYK2 Este ensayo se utilizó para medir la actividad in vitro de la cinasa de una pyk2 de longitud total marcada con un epítope HA (FL. pyk2-HA) en un ensayo de ELISA.

Materiales y reactivos: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Corning. 2. Anticuerpo monoclonal 12CA5 anti-HA (SUGEN, Inc.) 3. PBS (solución salina de Duibecco regulada en su pH con fosfato (Gibco # de catálogo 450-1300EB) 4. Regulador de pH TBST: para 1 L, mezclar 8.766 g de NaCI, 6.057 g de TRIS y 1 mi de Tritón X-100 0.1 % en aproximadamente 900 mi de H20 destilada. Ajustar el pH a 7.2, llevando el volumen hasta 1 L. 5. Regulador de pH para bloqueo: para 1 L, mezclar 100 g de BSA al 10%, 12.1 g de TRIS 100 mM, 58. 44 g de NaCI 1 M y 10 mL de TWEEN-20 1 %. 6. FL. pyk2-HA a partir de los lisados de célula SF9 (SUGEN, Inc.). 7. DMSO al 4% en H20 MilliQue. 8. ATP10 mM en H20 destilada, 9. MnCI2 1 M. 10. MgCI2 1 M 11. Ditiotreitol M (DTT). 12. Regulador de pH 10X para fosforilación de la cinasa: mezclar 5.0 mi de Hepes 1 M (pH 7.5), 0.2 mi de MnCI2 1 M , 1.0 mL de MgCI2 1 M, 1.0 mi de Tritón X-100 al 10% en 2.8 mi de H20 destilada. Justo antes de su uso, añadir 0.1 mi de DTT 1 M. 13. Placas de polipropileno con fondo en V de 96 pozos de NUNC. . EDTA 500 mM en H20 destilada. 15. Regulador de pH para dilución del anticuerpo: para 100 mL, 1 mL de BSA al 5%/PBS y 1 mL de Tween-20 al 0% en 88 mL de TBS. 16. Anti-Ptyr PY99) conjugado con HRP, Santa Cruz Biotech número de catálogo SC-7020. 17. ABTS, Moss, número de catálogo ABST-2000. 18. SDS al 10%.

Procedimiento: 1. Placas revestidas para ELISA de 96 pozos de Corning con 0. 5 ug por pozo del anticuerpo anti-HA 12CA5 en 100 µ? de PBS. Almacenar durante toda la noche a 4°C. 2. Remover el anticuerpo HA no unido a partir de los pozos mediante la inversión de la placa. Lavar la placa con H20 destilada. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido. 3. Añadir a cada pozol 50 µ? de regulador de pH para bloqueo. Incubar, con agitación, por 30 minutos a temperatura ambiente. 4. Lavar la placa 4x con TBS-T. 5. Diluir el lisado en PBS (1 .5 µg de lisado/100 µ? de PBS). 6. Añadir 100 µ? del lisado diluido cada pozo. Agitar a temperatura ambiente por 1 hora. 7. Lavar como en el paso 4. 8. Añadir 50 µ? de regulador de pH para cinasa 2X a la placa para ELISA que contiene el pyk2-HA capturado. 9. Añadir 25 µ? del compuesto prueba 400 uM en DMSO al 4% a cada pozo. Para los pozos control utilizar DMSO al 4% solo. 10. Añadir 25 µ? de EDTA 0.5 M a los pozos control negativos. 11. Añadir 25 µ? de ATP 20 µ? a todos los pozos. Incubar, con agitación, por 10 minutos. 12. Detener la reacción mediante la adición de 25 µ? de EDTA 500 mM (pH 8.0) a todos los pozos. 13. Lavar como en el paso 4. 14. Añadir 100 µ? del anti-Ptyr conjugado con HRP diluido 1 : 6000 en regulador de pH para dilución del anticuerpo a cada pozo. Incubar, con agitación, por 1 hora a temperatura ambiente. 15. Lavar la placa 3X con TBST y 1X con PBS. 16. Añadir 100 µ? de solución de ABST a cada pozo. 17. Si es necesario, detener el desarrollo de la reacción mediante la adición de 20 µ? de SDS al 10% a cada pozo. 18. Leer la placa sobre un lector de ELISA con un filtro de prueba a 4 0 nm y un filtro de referencia a 630 nm.

Bioensavo FGFR1 Este ensayo se utilizó para medir la actividad in vitro del FGF1 -R de la cinasa en un ensayo de ELISA.

Materiales y reactivos: 1. Placas para Elisa de 96 pozos de Costar (Corning # de catálogo 3369). 2. Poli (Glu-Tyr) (Sigma # de catálogo P0275). 3. PBS (Gibco # de catálogo 450- 300EB) 4. Solución de regulador de pH Hepes 50 mM. 5. Regulador de pH para bloqueo (BSA al 5%/PBS). 6. GST-FGFR1 purificado (SUGEN, Inc.) 7. Regulador de pH para dilución de cinasa. Mezclar 500 µ? de Hepes 1 M (GIBCO), 20 µ? de BSA al 5% /PBS, 0 µ? de ortovanadato de sodio 100 mM y 50 pl de NaCI 5M . 8. ATP 10 mM 9. Mezcla para fosforilación de ATP/MnCI2: mezclar 20 µ? de ATP, 400 µ? de MnCI2 1 M y 9.56 mi de H20 destilada. 10. Placas de polipropileno con fondo en V de 96 pozos de NUNC (Applied Scientific # de catálogo AS-72092). 11 . EDTA 0.5 M. 12. TBST al 0.05% añadir 500 µ? de TWEEN a 1 litro de TBS. 13. Suero policlonal anti-fosfotirosina de conejo (SUGEN, Inc.). 14. IgG de cabra anti- conejo conjugado con peroxidasa (Biosource, # de catálogo ALI0404). 15. Solución de ABTS. 16. Solución de ABTS/H202.

Procedimiento: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Costar con 1 µ9 por pozo de Poli (Glu, Tyr) en 100 µ? de PBS. Almacenar durante toda la noche a 4°C. 2. Lavar las placas revestidas una vez con PBS. 3. Añadir 150 µ| de BSA al 5%/regulador de pH en PBS para bloqueo a cada pozo. Incubar, con agitación, por 1 hora a temperatura ambiente. 4. Lavar la placa 2x con PBS, luego una vez con Hepes 50 mM. Golpear las placas sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido y las burbujas. 5. Añadir a la placa 25 µ? del compuesto prueba 0.4 mM en DMSO al 4% o DMSO al 4% solo (controles). 6. Diluir el GST-FGFR1 purificado en regulador de pH para dilución de la cinasa (5 ng cinasa/50 µ? de KDB/pozo). 7. Añadir 50 µ? de la cinasa diluida a cada pozo. 8. Iniciar la reacción de la cinasa mediante la adición de 25 µ?/???? de ATP/Mn++ recientemente preparado (0.4 mL MnCI21 M, 40 µ? de ATP 10 mM, 9.56 mi de H20 destilada), recientemente preparado). 9. Esta es una reacción rápida de la cinasa y debe detenerse con 25 µ? de EDTA 0.5 M de manera similar a la adición del ATP. 10. Lavar la placa 4x con TBST fresco. 11. Elaboración del regulador de pH para dilución del anticuerpo: para 50 mi: mezclar 5 mi de BSA 5%, 250 µ? de leche al 5% y 50 µ? de vanadato de sodio 100 mM, llevarlo a un volumen final con TBST al 0.05%. 12. Añadir 100 1 µ? por pozo de anti-fosfotirosina (dilución 1 : 10000 en ADB). Incubar, con agitación por 1 hora a temperatura ambiente. 13. Lavar como en el paso 10. 14. Añadir 00 µ? por pozo de IgG Biosource de cabra anticonejo conjugado con peroxidasa (dilución 1 : 6000 en ADB). Incubar, con agitación por 1 hora a temperatura ambiente. 15. Lavar como en el paso 10 y luego con PBS para remover las burbujas y el exceso de TWEEN. 16. Añadir 100 µ? de solución de ABTS/H202 a cada pozo. 17. Incubar, con agitación, por 10 a 20 minutos. Remover cualquier burbuja. 18. Leer el ensayo sobre un lector para ELISA Dynatech MR7000: filtro de prueba a 4 0 nm, filtro de referencia a 630 nm.

Bioensayo EGFR Este ensayo se utilizó para la actividad del FGF1-R de la cinasa in vitro en un ensayo de ELISA.

Materiales y reactivos: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Corning. 2. Anticuerpo monoclonal SU O anti-EGFR (SUGEN, Inc.). 3. PBS 4. Regulador de pH TBST 5. Regulador de pH para bloqueo: para 100 mL, mezclar 5.0 g del leche instantánea Carnation descremada) con 100 mi de PBS. 6. Lisado de la célula A431 (SUGEN, Inc.). 7. Regulador de pH TBS: 8. TBS + DMSO al 10%: para 1 L, mezclar 1 .514 g de TRIS, 2.192 g de NaCI y 25 mi de DMSO; llevar a un volumen total de 1 litro con H2O destilada. 9. ATP (Adenosin-5'-trifosfato, a partir de músculos de equino, Sigma número de catálogo A-5394), solución 1 .0 mM en H2O destilada. Este reactivo debe elaborarse inmediatamente antes de su uso y mantenerse sobre hielo. 10. MnCI2 1.0 mM. 1 1. Mezcla para fosforilación ATP/MnC^: para elaborar 10 mi, mezclar 300 µ? de ATP 1 mM , 500 µ? de MnCI2 y 9.2 mi de H2O destilada. Preparar justo antes de su uso, mantener sobre hielo. 12. Placas de polipropileno con fondo en V de 96 pozos de NUNC. 13. EDTA. 14. Suero policlonal de conejo anti-fosfotirosina (SUGEN, Inc.). 15. IgG de cabra anti- conejo conjugada con peroxidasa (Biosource número de catálogo ALI0404). 16. ABTS. 17. Peróxido de hidrógeno al 30%. 18. ABTS/H2O2. 19. HCI 0.2M.

Procedimiento: 1. Revestir placas para ELISA de 96 pozos de Corning con 0.5 9 de SUM01 en 100 µ? de PBS por pozo, almacenar durante toda la noche a 4o C. 2. Remover el SUM01 no unido a partir de los pozos mediante la inversión de la placa para remover el líquido. Lavar 1x con H2O destilada. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido. 3. Añadir 150 µ? de regulador de pH para bloqueo a cada pozo. Incubar, con agitación, por 30 minutos a temperatura ambiente. 4. Lavar la placa 3x con agua deionizada, luego una vez con TBST. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido y las burbujas. 5. Diluir el lisado en PBS (7 µg del lisado/100 µ? de PBS). 6. Añadir 100 µ? del lisado diluido a cada pozo. Agitar a temperatura ambiente por 1 hora. 7. Lavar las placas como en 4, anteriormente mencionado. 8. Añadir 120 µ? de TBS a la placa para ELISA que contiene el EGFR capturado. 9. Diluir el compuesto prueba 1 :10 en TBS, colocarlo en el pozo 10. añadir 13.5 µ? del compuesto prueba diluido a la placa para ELISA. A los pozos control, añadir 13.5 pl de TBS en DMSO al 0%. 1 1. Incubar, con agitación, por 30 minutos a temperatura ambiente. 12. Añadir 15 ul de mezcla para fosforilación a todos los pozos excepto al pozo control negativo. El volumen final del pozo debe ser de aproximadamente 150 µ? con una concentración final de ATP de 3 uM/MnC 5 mM en cada pozo. Incubar con agitación por 5 minutos. 13. Detener la reacción mediante la adición de 16.5 µ? de solución de EDTA mientras se agita. Agitar por 1 minuto adicional. 4. Lavar 4x con agua deionizada, 2x con TBST. 15. Añadir 100 µ? de anti-fosfotirosina (dilución 1 : 3000 en TBST) por pozo. Incubar, con agitación, por 30-45 minutos a temperatura ambiente. 16. Lavar como en 4, anteriormente mencionado. 17. Añadir 100 µ? de IgG Biosource de cabra anti- conejo conjugada con peroxidasa (dilución 1 : 2000 en TBST) a cada pozo. Incubar con agitación por 30 minutos a temperatura ambiente. 18. Lavar como en 4, anteriormente mencionado. 19. Añadir 100 µ? de solución de ABTS/H202 a cada pozo. 20. Incubar de 5 a 10 minutos con agitación. Remover cualquier burbuja. 21. Si es necesario, detener la reacción mediante la adición de 100 µ? de HCI 0.2 M por pozo. 22. Leer el ensayo sobre un lector para ELISA Dynatech MR7000: filtro de prueba a 410 nm, filtro de referencia a 630 nm.

Bioensavo PDGFR Este ensayo se utilizó para la actividad del FGF1-R de la cinasa in vitro en un ensayo de ELISA.

Materiales y reactivos: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Corning 2. Anticuerpo monoclonal 28D4C10 anti-PDGFR (SUGEN, Inc.). 3. PBS. 4. Regulador de pH TBST. 5. Regulador de pH para bloqueo (el mismo que para el bioensayo EGFR). 6. Lisado de la célula NIH 3T3 que expresa PDGFR-ß (SUGEN, Inc.). 7. Regulador de pH TBS. 8. TBS + DMSO al 10%. 9. ATP. 10. nCl2. 11. Mezcla para fosforilación de regulador de pH para cinasa: para 10 mi, mezclar 250 µ| de TRIS 1 M, 200 µ? de NaCI 5M, 100 µ? de MnCI2 1 M y 50 µ? de Tritón X-100 100 mM en suficiente H20 destilada para elaborar 10 mi. 12. Placas de polipropileno con fondo en V de 96 pozos de NUNC. 73 13. EDTA. 14. Suero policlonal de conejo anti-fosfotirosina (SUGEN, Inc. ). 15. IgG de cabra anti- conejo conjugada con peroxidasa (Biosource número de catálogo ALI0404). 16. ABTS. 17. Peróxido de hidrógeno, solución al 30%. 18. ABTS/H202. 19. HCI 0.2 M.

Procedimiento: 1. Revestir placas para ELISA de 96 pozos de Corning con 0.5 µg de 28D4C10 en 00 µ? de PBS por pozo, almacenar durante toda la noche a 4°C. 2. Remover el 28D4C10 no unido a partir de los pozos mediante la inversión de la placa para remover el líquido. Lavar 1x con H20 destilada. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido. 3. Añadir 150 µ? de regulador de pH para bloqueo a cada pozo. Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente con agitación. 4. Lavar la placa 3x con agua deionizada, luego una vez con TBST. Golpear la placa sobre una toalla de papel para remover el exceso de líquido y las burbujas. 5. Diluir el lisado en HNTG (10 del lisado/100 µ? de HNTG). 6. Añadir 100 µ? del lisado diluido a cada pozo. Agitar a temperatura ambiente por 60 minutos 7. Lavar las placas como se describe en el paso 4. 8. Añadir 80 µ? de regulador de pH para trabajo de cinasa mezclar con la placa para ELISA que contiene PDGFR capturado. 9. Diluir el compuesto prueba 1 :10 en TBS en placas de polipropileno de 96 pozos. 10. Añadir 10 µ? del compuesto prueba diluido a la placa para ELISA. A los pozos control, añadir 10 ul de TBS + DMSO al 10%. Incubar con agitación por 30 minutos a temperatura ambiente. 11 . Añadir 10 µ? de ATP directamente a todos los pozos excepto al pozo control negativo (el volumen final del pozo debe ser de aproximadamente 100 ul con ATP 20 µ? en cada pozo.) Incubar 30 minutos con agitación. 12. Detener la reacción mediante la adición de 10 µ? de solución de EDTA a cada pozo. 13. Lavar 4x con agua deionizada, dos veces con TBST. 14. Añadir 100 µ? de anti-fosfotirosina (dilución 1 : 3000 en TBST) por pozo. Incubar con agitación por 30-45 minutos a temperatura ambiente. 15. Lavar como en el paso 4. 16. Añadir 100 µ? de IgG Biosource de cabra anti-conejo conjugada con peroxidasa (dilución 1 :2000 en TBST) a cada pozo. Incubar con agitación por 30 minutos a temperatura ambiente. 7. Lavar como en el paso 4. 18. Añadir 100 µ? de solución de ABTS/H202 a cada pozo. 19. Incubar 10 a 30 minutos con agitación. Remover cualesquiera burbujas. 20. Si es necesario detener la reacción con la adición de 100 µ? de HCI 0.2 M por pozo. 21. Leer el ensayo en un lector para ELISA Dynatech MR7000 con filtro de prueba a 410 nm y filtro de referencia a 630 nm.

Ensayo de cinasa celular HER-2 Este ensayo se utilizó para medir la actividad de la HER-2 cinasa en células totales en un formato de ELISA.

Materiales y reactivos: 1. DMEM (GIBCO # de catálogol 1965-092). 2. Suero de bovino fetal (FBS, GIBCO # de catálogo 16000-044), inactivado mediante calor en un baño con agua por 30 minutos a 56°C 3. Tripsina (GIBCO # de catálogo25200-056). 4. L-Glutamina (GIBCO # de catálogo25030-08 ) 5. HEPES (GIBCO # de catálogol 5630-080). 6. Medio de crecimiento Mezclar 500 mi de DMEM, 55 mi de FBS inactivado mediante calor, 10 mi de HEPES y 5.5 mi de L- Glutamina. 7. Medio agotado Mezclar 500 mi de DMEM, 2.5 mi de FBS ¡nactivado mediante calor, 10 mi de HEPES y 5.5 mi de L- Glutamina. 8. PBS. 9. Placas para microtitulación de cultivo de tejidos de 96 pozos con fondo plano (Corning # de catálogo 25860). 10. Platos para cultivo de tejidos de 15 cm (Corning # de catálogo 08757148). 1 1 . Placas para ELISA de 96 pozos de Corning. 12. Placas de polipropileno de 96 pozos con fondo en V de NUNC. 3. Cartuchos para transferencia de Costar para el Transtar 96 (Costar # de catálogo7610). 14. SUMO 1 : anticuerpo monoclonal anti-EGFR (SUGEN, Inc.). 15. Regulador de pH TBST . 16. Regulador de pH para bloqueo: leche instantánea Carnation® al 5% en PBS. 17. Ligando EGF: EGF-201 , Shinko American, Japón. Polvo en suspensión en 100 µ? de HCI 10 mM. Añadir 100 µ? de NaOH 10 mM. Añadir 800 µ? de PBS y transferir a un tubo Eppendorf, almacenar a -20°C hasta que esté listo para uso. 18. Regulador de pH HNTG para lisis Para HNTG 5X para almacenamiento, mezclar 23.83 g de Hepes, 43.83 g NaCI, 500 mi de glicerol y 100 mi de Tritón X-100 y suficiente 77 H2O destilada para preparar 1 L de solución total. Para HNTG* 1X, mezclar 2 mi de HNTG, 100 µ? de Na3V04 0.1 M, 250 µ? de Na4P207 0.2 y 100 µ? de EDTA. 19. EDTA. 20. NA3V04. Para preparar solución de almacenamiento, mezclar 1.84 g de Na3V04 con 90 mi de H20 destilada. Ajustar el pH a 10. hervir en el horno de microondas por un minuto (la solución se vuelve clara). Enfriar a temperatura ambiente. Ajustar el pH a 10. Repetir el ciclo de calentamiento/enfriamiento hasta que el pH permanezca a 10. 21 . Na4P2O7200 mM. 22. Antisuero policlonal de conejo específico para fosfotirosina (anticuerpo anti-Ptyr, SUGEN, Inc.). 23. Antisuero purificado por afinidad, anticuerpo IgG de cabra anti-conejo, conjugado con peroxidasa (Biosource # de catálogo ALI0404). 24. Solución ABTS. 25. Solución de peróxido de hidrógeno al 30%. 26. ABTS/H2O2. 27. HCI 0.2 M.

Procedimiento: 1. Revestir placas para ELISA de 96 pozos de Corning con SUM01 a 1 .0 µ9 por pozo en PBS, 100 µ? de volumen final/pozo. Almacenar durante toda la noche a 4°C. 2. Al día de uso, remover el regulador de pH para revestimiento y lavar la placa 3 veces con H20 destilada y una vez con regulador de pH TBST. Todos los lavados en este ensayo se deben realizar de esta manera, a menos que se especifique de otra manera. 3. Añadir 100 µ? de regulador de pH para bloqueo a cada pozo. Incubar la placa, con agitación, por 30 minutos a temperatura ambiente. Justo antes de utilizar, lavar la placa. 4. Utilizar la línea celular EGFr/HER-2 quimera/3T3-C7 para este ensayo. 5. Elegir los platos que tengan 80-90 % de confluencia. Colectar las células mediante tripsinización y centrifugar a 1000 rpm a temperatura ambiente por 5 minutos 6. Resuspender las células en medio agotado y contar con azul tripán. Se requiere viabilidad por arriba de 90%. Sembrar las células en medio agotado a una densidad de 2,500 células por pozo, 90 ul por pozo, en una placa para microtitulación de 96 pozos. Incubar las células sembradas durante toda la noche a 37° bajo C02 al 5%. 7. Iniciar el ensayo dos días después de la siembra. 8. Los compuestos prueba se disuelven en DMSO al 4%. Luego las muestras se diluyen adicionalmente de manera directa sobre placas con DMEM agotado. Típicamente, esta dilución será de 1 : 10 o mayor. Todos los pozos se transfieren entonces a la placa de celdas a una dilución adicional 1 : 10 (10 µ? de la muestra y medio a 90 µ? de medio agotado. La concentración final de DMSO debe ser de 1 % o menor. Una dilución serial estándar también puede ser utilizada. 9. Incubar bajo C02 al 5% a 37°C por 2 horas. 10. Preparar el ligando EGF mediante la dilución en EGF de almacenamiento ( 6.5 uM) en DMEM caliente a 150 nM 1 1. Preparar HNTG fresco suficiente para 100 ul por pozo; colocar sobre hielo. 12. Después de 2 horas de incubación con el compuestos prueba, añadir el ligando EGF preparado a las células, 50 ul por pozo, para una concentración final de 50 nM. Los pozos control positivos recibieron la misma cantidad de EGF. Los controles negativos no recibieron EGF. Incubar a 37°C por 10 minutos 13. Remover el compuesto prueba, EGF, y DMEM. Lavar las células una vez con PBS. 14. Transferir HNTG* a las células, 100 ul por pozo. Colocar sobre hielo por 5 minutos. Mientras tanto, remover el regulador de pH para bloqueo a partir de la placa para ELISA y lavar. 15. Raspar las células a partir de la placa con una micropipeta y homogeneizar el material celular mediante aspiración repetida y dispersar el regulador de pH HNTG* para lisis. Transferir el lisado a una placa para ELISA revestida, bloqueada, lavada. O, utilizar un cartucho para transferencia de Costar para transferir el lisado a la placa. 16. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente por 1 hora. 17. Remover el lisado, lavar. Transferir el anticuerpo anti-Ptyr recientemente diluido (1 : 3000 en TBST) a una placa para ELISA, 100 ul por pozo. 18. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente, por 30 minutos 19. Remover el anticuerpo anti-Ptyr, lavar. Transferir el anticuerpo BIOSOURCE recientemente diluido a una placa para ELISA (1 : 8000 en TBST, 100 ul por pozo). 20. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente por 30 minutos 21. Remover el anticuerpo BIOSOURCE, lavar. Transferir la solución ABTS/H2O2 recientemente preparada a una placa para ELISA, 100 ul por pozo. 22. Incubar, con agitación, por 5-10 minutos. Remover cualesquiera burbujas. 23. Detener la reacción con la adición de 100 µ? de HCI 0.2M por pozo. 24. Leer el ensayo en un lector para ELISA Dynatech MR7000 con filtro de prueba establecido a 410 nm y filtro de referencia a 630 nm Ensayo CDK2/ciciina A Este ensayo se utilizó para medir la actividad de serina/treonina cinasa in vitro de cdk2/ciclina A de humano en un ensayo de centelleo por proximidad (SPA).

Materiales y reactivos. 1. Placas de tereftalato de polietileno de 96 pozos de Wallac (flexi) (Wallac # de catálogo 1450-401 ). 2. Amersham Redivue [?33?] ATP (Amersham # de catálogo AH 9968). 3. Lechos de SPA poliviniltolueno revestidos con estreptavidina de Amersham (Amersham # de catálogo RPNQ0007). Los lechos deben reconstituirse en PBS sin magnesio o calcio, a 20 mg/ml. 4. El complejo enzimático cdk2/ciclina A activado se purifica a partir de las células SF9 (SUGEN, Inc.). 5. Sustrato peptídico biotinilado (Debtide). Péptido biotina-X-PKTPKKAKKL se disuelve en H20 destilada a una concentración de 5 mg/ml. 6. Mezcla de péptido/ATP: para 0 mi, mezclar 9.979 mi de H20 destilada, 0.00125 mi de ATP "frío", 0.010 mi de Debtide y 0.010 mi de ?33? ATP. La concentración final por pozo será de ATP " frío" 0.5 µ?, 0.1 µ? de Debtide y 0.2 µ?? de ?33? ATP. 7. Regulador de pH de la cinasa: para 10 mi, mezclar 8.85 mi de H20 destilada, 0.625 mi de TRIS (pH 7.4), 0.25 mi de MgCI2 1 M, 0.25 mi de NP40 10% y 0.025 mi de DTT M, añadido recientemente justo antes de utilizar. 8. 0 mM ATP en H20 destilada. 9. M Tris, pH ajustado a 7.4 con HCI. 10. 1 M MgCI2. 11 . DTT 1 M. 12. PBS (Gibco # de catálogo 14190-144). 13. EDTA 0.5 M. 14. Solución de paro: para 10 mi, mezclar 9.25 mi de PBS, 0.005 mi de ATP 00 mM , 0.1 mi de EDTA 0.5 M , 0.1 mi de Tritón X-100 al 0% y 1 . 25 mi de lechos SPA 20 mg/ml.

Procedimiento: 1. Preparar las soluciones de los compuestos prueba a 5X la concentración final deseada en DMSO al 5%. Añadir 10 ul a cada pozo. Para los controles negativos, utilizar 10 ul de DMSO al 5% sólo en los pozos. 2. Diluir 5 µ? de solución de cdk2/ciclina A con 2.1 mi de regulador de pH para cinasa 2x. 3. Añadir 20 ul de la enzima a cada pozo. 4. Añadir 10 µ? de EDTA 0.5 M a los pozos control negativos. 5. Para iniciar la reacción de la cinasa, añadir 20 µ? de la mezcla de péptido/ATP a cada pozo. Incubar por 1 hora sin agitación. 6. Añadir 200 ul de solución de paro a cada pozo. 7. Mantener por al menos 10 minutos 8. Centrifugar la placa a aproximadamente 2300 rpm por 3-5 minutos 9. Contar la placa utilizando Trilux o un lector similar.

Ensayo de Met transfosforilación Este ensayo se utilizó para medir los niveles de fosfotirosina sobre un sustrato poli (ácido glutámico: tirosina (4:1 ) ) como un medio para identificar a los agonistas/antagonistas de la met transfosforilación del sustrato.

Materiales y reactivos: 1. Placas para ELISA de 96 pozos de Corning, Corning # de catálogo 25805-96. 2. Poli (glu, tyr) 4:1 , Sigma, número de catálogo; P 0275. 3. PBS, Gibco # de catálogo 450-1300EB 4. HEPES 50 mM 5. Regulador de pH para bloqueo: disolver 25 g de albúmina de suero de bovino, Sigma número de catálogo A- 7888, en 500 mi de PBS, filtrar a través de un filtro de 4 um. 6. Proteína de fusión GST purificada que contiene el dominio Met cinasa, Sugen, Inc. 7. Regulador de pH TBST. 8. DMSO acuoso al 10% (H20 MilliQue). 9. Adenosina-5'-trifosfato10 mM acuosa (H20 destilada), Sigma número de catálogo A-5394. 0. Regulador de pH para dilución 2X de la cinasa: para 100 mi, mezclar lo mL de HEPES 1 M a pH 7.5 con 0.4 mL de BSA al 5%/PBS, 0.2 mL de ortovanadato de sodio 0.1 M y 1 mL de cloruro de sodio 5M en 88.4 mL de H2O destilada. 11. Mezcla de reacción para ATP 4X: para 10 mL, mezclar 0.4 mL de cloruro de manganeso 1 M y 0.02 mL de ATP 0.1 M en 9.56 mL de H20 destilada. 12. Mezcla para controles negativos 4X: para 0 mL, mezclar 0.4 mL de cloruro de manganeso 1 M en 9.6 mL de H20 destilada. 13. Placas de polipropileno de 96 pozos con fondo en V de NUNC, Applied Scientific # de catálogo S- 72092 14. EDTA 500 mM. 15. Regulador de pH para dilución del anticuerpo: para 100 mL, mezclar 10 mL de BSA al 5%/PBS, 0.5 mL de leche instantánea Carnation® al 5% en PBS y 0.1 mL de ortovanadato de sodio 0.1 M en 88.4 mL de TBST. 16. Anticuerpo policlonal anti-fosfotirosina de conejo, Sugen, Inc. 17. Anticuerpo de cabra anti-conejo conjugado con peroxidasa de rábano, Biosource, Inc. 18. Solución ABTS: para 1 L, mezclar 19.21 g de ácido cítrico, 35.49 g de Na2HP04 y 500 mg de ABTS con suficiente H20 destilada para 5 preparar 1 L. 19. ABTS/H202: mezclar 15 mL de solución ABST con 2 µ?_ de H2O2 cinco minutos antes de su uso. 20. HCI 0.2 M Procedimiento: 1. Revestir las placas para ELISA con 2 de Poly (Glu-Tyr) en 100 L de PBS, almacenar durante toda la noche a 4 °C 2. Bloquear la placa con 150 µ? de BSA al 5%/PBS por 60 minutos 3. Lavar la placa dos veces con PBS, una vez con regulador de pH Hepes 50 mM, pH 7.4. 4. Añadir 50 µ? de la cinasa diluida a todos los pozos. (La cinasa purificada se diluye con regulador de pH para dilución de cinasa. La concentración final debe de ser de 0 ng/pozo.) 5. Añadir a la placa 25 µ? del compuesto prueba (en DMSO al 4%) o DMSO solo (al 4% en H2O destilada) para los controles. 6. Incubar la mezcla de cinasa/compuesto por 15 minutos. 7. Añadir 25 uL de MnCb 40 mM a los pozos controles negativos. 8. Añadir 25 µ? de la mezcla de ATP/MnCI2 mezcla a todos los otros pozos (excepto a los controles negativos). Incubar por 5 minutos 9. Añadir 25 µ? de EDTA 500 mM para detener la reacción. 0. Lavar la placa 3x con TBST. 1 1 . Añadir 100 µ?_ de anticuerpo policional de conejo anti-Ptyr diluido 1 : 10,000 en un regulador de pH para dilución del anticuerpo a cada pozo. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente por una hora. 12. Lavar la placa 3x con TBST. 13. Diluir del anticuerpo Biosource HRP anti-conejo conjugado 1 : 6,000 en un regulador de pH para dilución del anticuerpo. Añadir 100 µ? por pozo e incubar a temperatura ambiente, con agitación, por una hora. 14. Lavar la placa 1X con PBS. 15. Añadir 100 µ? de solución de ABTS/H202 a cada pozo. 16. Si es necesario, detener el desarrollo de la reacción con la adición de 100 µ? de HCI 0.2 M por pozo. 17. Leer la placa sobre un lector para ELISA Dynatech MR7000 con el filtro de prueba a 410 nm y el filtro de referencia a 630 nm.

Ensayo de transfosforilación por IGF-1 Este ensayo se utilizó para medir el nivel de fosfotirosina en poli (ácido giutámico: tirosina) (4:1 ) para la identificación de agonistas/antagonistas de la transfosforilación de un sustrato por GST-IGF-1 .

Materiales y reactivos: . Placas para ELISA de 96 pozos de Corning. 2. Poli (Glu-tyr) (4: 1 ), Sigma número de catálogo P 0275. 3. PBS, Gibco # de catálogo 450-1300EB. 7 4. HEPES 50 mM 5. Regulador de pH TBB para bloqueo: para 1 L, mezclar 100 g de BSA, 12.1 g de TRIS (pH 7.5), 58.44 g de cloruro de sodio y 10 mL de TWEEN-20 al 1 %. 6. Proteína de fusión GST purificada que contiene el dominio de la IGF-1 cinasa (Sugen, Inc.) 7. Regulador de pH TBST: para 1 L, mezclar 6.057 g de Tris, 8.766 g de cloruro de sodio y 0.5 mi de TWEEN-20 con suficiente H20 destilada para preparar 1 litro. 8. DMSO al 4% en H20 Milli-Q . 9. ATP 10 mM en H20 destilada. 10. Regulador de pH para dilución de cinasa 2X: para 100 mL, mezclar 10 mL de HEPES 1 M (pH 7.5), 0.4 mL de BSA al 5% en H20 destilada, 0.2 mL de ortovanadato de sodio 0.1 M y 1 mL de cloruro de sodio 5 M con suficiente H20 destilada para preparar 100 mL. 1 1. Mezcla de reacción para ATP 4X: para 10 mL, mezclar 0.4 mL de MnCI2 1 M y 0.008 mL de ATP 0.01 M y 9.56 mL de H20 destilada. 12. Mezcla para controles negativos 4X: mezclar 0.4 mL de cloruro de manganeso 1 M en 9.60 mL de H20 destilada. 13. Placas de polipropileno de 96 pozos con fondo en V de NUNC. 14. EDTA 500 mM en H20 destilada. 15. Regulador de pH para dilución del anticuerpo: para 100 mL, 88 mezclar 10 mL de BSA 5% en PBS, 0.5 mL de leche instantánea Carnation ® descremada al 5% en PBS y 0.1 mi de ortovanadato de sodio 0.1 M en 88.4 mL de TBST. 16. Anticuerpo policlonal de conejo antifosfotirosina, Sugen, Inc. 17. Anticuerpo de cabra anti-conejo conjugado con HRP, Biosource. 18. Solución ABTS. 20. ABTS/H202: mezclar 15 mL de ABTS con 2 µ? de H202 5 minutos antes de su uso. 2 . HCI 0.2M en H20 destilada.

Procedimiento: 1. Revestir la placa para ELISA con 2.0 de Poli (Glu, Tyr) 4: 1 (Sigma P0275) en 100 µ? de PBS. Almacenar la placa durante toda la noche a 4°C. 2. Lavar la placa una vez con PBS. 3. Añadir 100 µ? de regulador de pH para bloqueo TBB a cada pozo. Incubar la placa per 1 hora con agitación a temperatura ambiente. 4. Lavar la placa una vez con PBS, luego dos veces con regulador de pH Hepes 50 mM pH 7.5. 5. Añadir a la placa 25 µ? del compuesto prueba en DMSO al 4% (obtenido mediante la dilución de una solución de almacenamiento del compuesto prueba 10 mM en DMSO al 100% con H20 destilada). 6. Añadir 10.0 ng de GST-IGF-1 cinasa en 50 µ? de regulador de pH para dilución de cinasa) a todos los pozos. 7. Iniciar la reacción de la cinasa mediante la adición de 25 µ? de la mezcla de reacción para ATP 4X a todos los pozos prueba y pozos control positivos. Añadir 25 µ? de la mezcla para controles negativos 4X a todos los pozos controles negativos. Incubar por 10 minutos con agitación a temperatura ambiente. 8. Añadir 25 µ? de EDTA 0.5 M (pH 8.0) a todos los pozos. 9. Lavar la placa 4x con regulador de pH TBST. 10. Añadir el antisuero policlonal de conejo anti-fosfotirosina a una dilución de 1 : 10,000 en 100 µ? de regulador de pH para dilución del anticuerpo a todos los pozos. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente por 1 hora. 11. Lavar la placa como en el paso 9: 12. Añadir 100 µ? de Biosource anti-conejo HRP a una dilución de 1 : 10,000 en regulador de pH para dilución del anticuerpo a todos los pozos. Incubar, con agitación, a temperatura ambiente por 1 hora. 13. Lavar la placa como en el paso 9, seguido de un lavado con PBS para reducir las burbujas y el exceso de Tween-20. 14. Desarrollar mediante la adición de 100 µ?/???? de ABTS/H202 a cada pozo. 15. Después de aproximadamente 5 minutos, leer sobre un lector para ELISA con filtro de prueba a 410 nm y filtro de referencia a 630 nm.

Ensayos de incorporación de BRDU Los siguientes ensayos utilizan las células diseñadas para expresar un receptor seleccionado y luego evaluar el efecto de un compuesto de interés sobre la actividad de la síntesis de ADN inducida por ligando mediante la determinación de incorporación de BrdU dentro del ADN. Los siguientes materiales, reactivos y procedimientos son generales a cada uno de los siguientes ensayos para incorporación de BrdU. Se mencionan las variaciones en los ensayos específicos.

Materiales y reactivos: 1. El ligando apropiado. 2. Las células diseñadas apropiadas. 3. Reactivo para marcado de BrdU: 10 mM, en PBS (pH 7. 4) (Boehringer Mannheim, Alemania). 4. FixDenat: solución para fijación (lista para utilizar) (Boehringer Mannheim, Alemania). 5. Anti-BrdU-POD: anticuerpo monoclonal de ratón conjugado con peroxidasa (Boehringer Mannheim, Alemania). ¦ 6. Solución de sustrato TMB: tetrametilbenzidina (TMB, Boehringer Mannheim, Alemania). 7. Solución para lavado de PBS: 1X PBS, pH 7.4. 8. Albúmina, de bovino (BSA), fracción V en polvo (Sigma Chemical Co. , USA).

Procedimiento general: 1 . Las células se siembran a 8000 células/pozo en CS al 10%, Gln 2 mM en DMEM, en una placa de 96 pozos. Las células se incuban durante toda la noche a 37°C en C02 al 5%. 2. Después de 24 horas, las células se lavan con PBS, y luego se les priva del suero en medio libre de suero (DMEM con CS al 0% con BSA al 0.1 %) por 24 horas. 3. Al día 3, el ligando apropiado y el compuesto prueba se añaden a las células simultáneamente. Los pozos control negativos reciben el DMEM libre de suero solamente con 0.1 % de BSA; las células control positivas reciben el ligando pero no el compuesto prueba. Los compuestos prueba se preparan en DMEM libre de suero con ligando en una placa de 96 pozos, y se diluyen especialmente para 7 concentraciones de prueba. 4. Después de 18 horas de activación del ligando, el reactivo diluido marcado con BrdU (1 : 100 en DMEM, BSA al 0.1 %) se añade y las células se incuban con BrdU (concentración final =10 µ?) por 1 .5 horas. 5. Después de la incubación con el reactivo de marcado, el medio se remueve mediante decantación y se golpea la placa invertida sobre una toalla de papel. Se añade la solución FixDenat (50 µ?/????) y las placas se incuban a temperatura ambiente por 45 minutos en un agitador para placas. 6. La solución FixDenat se remueve extensivamente mediante decantación y por golpes de la placa invertida sobre una toalla de papel. Se añade la leche (5% de leche descremada en PBS, 200 µ?/????) como una solución para bloqueo y la placa se incuba por 30 minutos a temperatura ambiente sobre un agitador para placas. 7. La solución para bloqueo se remueve mediante decantación y los pozos se lavan una vez con PBS. Se añade la solución anti-BrdU-POD (dilución 1 : 200 en PBS, BSA al1 %) (50 µ?/????) y la placa se incuba por 90 minutos a temperatura ambiente sobre un agitador para placas. 8. El anticuerpo conjugado se remueve extensivamente mediante decantación y enjuague de los pozos 5 veces con PBS, y la placa se seca mediante inversión y se golpea sobre una toalla de papel. 9. Se añade la solución de sustrato TMB (100 µ?/????) y se incuba por 20 minutos a temperatura ambiente sobre un agitador para placas hasta que se desarrolla el color suficiente para la detección fotométrica. 10. La absorbancia de las muestras se mide a 410 nm (en un modo de "longitud de onda dual" con un filtro de lectura a 490 nm, como una longitud de onda de referencia) sobre un lector de placas para ELISA Dynatech.

Ensayo de incorporación de BrdU inducida por EGF Materiales y reactivos: 1. EGF de ratón, 201 (Toyobo Co. , Ltd. , Japón). 2. 3T3/EGFRC7.

Ensayo de incorporación de BrdU dirigida por HER-2- inducida Materiales y reactivos: 1. EGF de ratón, 201 (Toyobo Co. , Ltd. , Japón). 2. 3T3/EGFr/Her2/EGFr (EGFr con un dominio Her-2 cinasa).

Ensayo de incorporación de BrdU dirigida por HER-4- inducida Materiales y reactivos: 1. EGF de ratón, 201 (Toyobo Co. , Ltd. , Japón). 2. 3T3/EGFr/Her4/EGFr (EGFr con un dominio Her-4 cinasa).

Ensayo de incorporación de BrdU inducida por PDGF Materiales y reactivos: 1. PDGF B/B de humano (Boehringer Mannheim, Alemania). 2. 3T3/EGFRc7.

Ensayo de incorporación de BrdU inducida por FGF Materiales v reactivos: 1. FGF2/bFGF de humano (Gibco BRL, EUA). 2. 3T3c7/EGFr Ensayo de incorporación de BrdU inducida por 1GF1 Materiales y reactivos: 1. Recombinante, de humano (G511 , Promega Corp. 2. 3T3/IGF1 r.

Ensayo de incorporación de BrdU inducida por insulina Materiales y reactivos: 1. Insulina, cristalina, de bovino, Zinc (13007, Gibco BRL, EUA). 2. 3T3/H25.

Ensayo de incorporación de BrdU inducida por HGF Materiales y reactivos: 1. HGF recombinante de humano (número de catálogo 249-HG, R&D Systems, Inc. EUA). 2. Células BxPC-3 (ATCC CRL-1687).

Procedimiento: 1. Las células se siembran a 9000 células/pozo en RPMI FBS al 10% en una placa de 96 pozos. Las células se incuban durante toda la noche a 37°C en C02 al 5%. 2. Después 24 horas, las células se lavan con PBS, y luego se les priva del suero en 100 µ? de medio libre de suero (RPMI con BSA al 0.1 %) por 24 horas. 3. Al día 3, 25 pl que contienen en ligando (preparado como 1 g/ml en RPMI con BSA al 0.1 %; la concentración final de HGF es de 200 ng/ml) y los compuestos prueba se añaden a las células. Los pozos control negativos reciben 25 µ? de RPMI libre de suero solamente con 0.1 % de BSA; las células positivas control reciben el ligando (HGF) pero no el compuesto prueba. Los compuestos prueba se preparan a 5 veces su concentración final en RPMI libre de suero con ligando en una placa de 96 pozos, y se diluyen seriamente para dar 7 concentraciones prueba. Típicamente, la mayor concentración final de los compuestos prueba es de 100 µ?, y se utilizan las diluciones 1 :3 (por ejemplo, la concentración final del compuesto prueba en un intervalo de 0.137-100 µ?). 4. Después de 18 horas de activación del ligando, se añaden 12.5 µ? del reactivo para marcado de BrdU (1 : 100 en RPMI, BSA al 0.1 %) a cada pozo y las células se incuban con BrdU (la concentración final es de 10 µ?) por 1 hora. 5. Igual que el procedimiento general. 6. Igual que el procedimiento general. 7. La solución de bloqueo se remueve mediante decantación y los pozos se lavan una vez con PBS. Se añade la solución anti-BrdU-POD (dilución 1 : 100 en PBS, BSA ah %) (100 µ?/????) y la placa se incuba por 90 minutos a temperatura ambiente sobre un agitador para placas. 8. Igual que el procedimiento general. 9. Igual que el procedimiento general, 10. Igual que el procedimiento general.

Ensayo HUV-EC-C Este ensayo se utilizó para medir la actividad de un compuesto en contra de PDGF-R, FGF-R, VEGF, aFGF o Flk-1/KDR, todos los cuales se expresan naturalmente por las células HUV-EC.

Día 0 1. Lavar y tripsinizar las células HUV-EC-C (células endoteliales de la vena umbilical de humano, (American Type Culture Collection, número de catálogo 1730 CRL). Lavar con solución salina de Dulbecco regulada en su pH con un fosfato (D-PBS, obtenido partir de Gibco BRL, número de catálogo 14 90-029) 2 veces aproximadamente 1 ml/10 cm2 de botella de cultivo de tejidos. Tripsinizar con EDTA con 0.05% de tripsina- en una solución no enzimática de disociación celular (Sigma Chemical Company, número de catálogo C-1 544). La tripsina al 0.05% se elabora mediante la dilución de tripsina al 0.25%/EDTA 1 mM (Gibco, número de catálogo 25200-049) en la solución de disociación celular. Tripsinizar con aproximadamente 1 ml/25-30 cm2 de la botella para cultivo de tejidos por aproximadamente 5 minutos a 37°C. Después de que las células se han desprendido a partir de la botella, añadir un volumen igual de medio de ensayo y transferir a un tubo de centrifuga 50 mi estéril (Fisher Scientific, número de catálogo 05-539-6). 2. Lavar las células con aproximadamente 35 mi de medio de ensayo en el tubo para centrifuga de 50 mi estéril mediante la adición del medio de ensayo, centrifugar por 10 minutos aproximadamente 200 x g, aspirar el sobrenadante, y se suspender con 35 mi de D-PBS. Repetir el lavado dos veces más con D- PBS, resuspender las células en aproximadamente 1 mi del medio de ensayo/15 cm2 de la botella para cultivo de tejidos. El medio de ensayo consiste de medio F12K (Gibco BRL, número de catálogo 21 127-014) y suero bovino fetal inactivado mediante calor al 0.5%. Contar las células con un contador Coulter ® (Coulter Electronics, Inc. ) y añadir el medio de ensayo a las células para obtener una concentración de 0.8-1.0 x 105 células/ml. 3. Añadir las células a placas de 96 pozos con fondo plano a 00 µ?/???? o 0.8-1.0 x 104 células/pozo, incubar-24 horas a 37°C, C02 al 5%.

Día 1 1. Elaborar titulaciones dobles del compuesto prueba por separado en placas de 96 pozos, generalmente 50 µ? hacia abajo hasta 0 µ?. Utilizar el mismo medio de ensayo que se mencionó en el día 0, paso 2 anteriormente mencionado. Las titulaciones se realizaron mediante la adición de 90 µ?/???? del compuesto prueba a 200 µ? (4X la concentración final por pozo) al pozo superior de una columna de placa particular. Puesto que el compuesto prueba de almacenamiento es usualmente 20 m en DMSO, la concentración del fármaco de 200 uM contiene 2% de DMSO. Un diluyente elaborado hasta con 2% de DMSO en el medio de ensayo (F12K + suero bovino fetal al 0.5%) se utilizó como diluyente para las titulaciones del compuesto prueba con el objeto de diluir el compuesto prueba pero manteniendo la concentración del DMSO constante. Añadir este diluyente a los pozos remanentes en la columna a 60 µ?/????. Tomar 60 µ? de los 120 µ? de la dilución del compuesto prueba 200 µ? en el pozo superior de la columna y mezclar con los 60 µ? en el segundo pozo de la columna. Tomar 60 µ? a partir de este pozo y mezclar con los 60 µ? en el tercer pozo de la columna, y así continuamente hasta que se hayan completado las titulaciones dobles. Cuando se ha mezclado el pozo previo al último, tomar 60 µ? de los 120 µ? en este pozo y desecharlos. Dejar el último pozo con 60 µ? de DMSO/diluyente del medio como un control que no contiene el compuesto prueba. Hacer 9 columnas del compuesto prueba titulado, suficientes para triplicar los pozos cada uno para: (1 ) VEGF (obtenido a partir de Pepro Tech Inc., número de catálogo 100-200, (2) factor de crecimiento de célula endotelial (ECGF) (también conocido como factor de crecimiento fibroblástico ácido, o aFGF) (obtenido partir de Boehringer Mannheim Biochemica, número de catálogo 1439 600), o, (3) PDGF B/B de humano (1276- 956, Boehringer Mannheim, Alemania) y el medio de ensayo control. ECGF viene como una preparación con heparina sódica. 2. Transferir 50 ul/pozo de las diluciones del compuesto prueba a las placas de ensayo de 96 pozos que contienen 0.8-1.0 x 104 células/100 µ?/???? de las células HUV-EC-C a partir del día 0 e incubar ~2 horas a 37°C, C02 al 5%. 3. Por triplicado, añadir 50 µ?/???? de 80 ng/ml de VEGF, 20 ng/ml de ECGF, o medio control a cada condición de compuesto prueba. Así como con los compuestos prueba, las concentraciones del factor de crecimiento son 4X la concentración final deseada. Utilizando el medio de ensayo a partir del día 0 paso 2 para elaborar las concentraciones de los factores de crecimiento. Incubar aproximadamente 24 horas a 37°C, C02 al 5%. Cada pozo tendrá 50 µ? de la dilución de compuesto prueba, 50 µ? de factor de crecimiento o del medio, y 100 µ? de células, lo cual se calcula a 200 µ?/totales por pozo. Por lo tanto las concentraciones 4X del compuesto prueba y de los factores de crecimiento se vuelven 1X una vez que todo se ha añadido a los pozos.

Día 2 1. Añadir 3H- timidina (Amersham, número de catálogo TRK-686) a 1 µ??/???? (10 µ?/???? de 100 µ?? /mL solución elaborada en el medio RPMI + 10% suero de bovino fetal inactivado mediante calor) e incubando -24 horas a 37°C, C02 al 5%. RPMI se obtiene partir de Gibco BRL, número de catálogo 1 1875-051.

Día 3 1 . Congelar las placas durante toda la noche a -20°C.

Día 4 Descongelar las placas y cosechar con un cosechador de placas de 96 pozos (Tomtec Harvester 969) sobre esterillas de filtro (Wallac, número de catálogo 1205-401 ), leer las cuentas en un contador de centelleo líquido Wallac Betaplate™. El cuadro 2 muestra los resultados de la evaluación biológica de algunos compuestos ejemplares de la formula (I). Estos resultados se reportan en términos de IC50, la concentración micromolar (µ?) de compuesto a ser evaluado que ocasiona un cambio del 50% en la actividad de la PKT blanco en comparación con la actividad de la PTK en un control al cual no se le añadió el compuesto prueba. Específicamente, los resultados mostrados indican la concentración de compuesto prueba necesaria para ocasionar una reducción del 50% en la actividad de la PTK blanco. Los bioensayos que han CUADRO 2 Modelos animales in vivo Modelos animales de xenoinierto La capacidad de los tumores en humano para crecer como xenoinjertos en los ratones atímicos (por ejemplo, Balb/c, nu/nu) provee un modelo útil in vivo para estudiar la respuesta biológica a las terapias para los tumores en humanos. Desde el primer xenotransplante exitoso de tumores humanos dentro de ratones atímicos, (Rygaard y Povlsen, 1969, Acta Pathol. Microbial. Scand. 77: 758-760), muchas diferentes líneas celulares de tumores de humanos (por ejemplo, en mama, de pulmón, genitourinario, gastro-intestinal, de cabeza y de cuello, glioblastoma, óseos, y melanomas malignos) han sido transplantados y han crecido exitosamente en ratones desnudos. Los siguientes ensayos pueden ser utilizados para determinar el nivel de actividad, especificidad y efectos de los diferentes compuestos de la formula (I). Tres tipos generales de ensayos son útiles para evaluar los compuestos de la formula (I): celular/catalítico, celular/biológico e in vivo. El objetivo del análisis celular/catalítico es determinar el efecto de un compuesto de la formula (1 ) sobre la capacidad de una TK para fosforilasa las tirosinas sobre un sustrato conocido en una célula. El objetivo de ios ensayos celulares/biológicos es determinar el efecto de un compuesto de la formula (I) sobre la respuesta biológica estimulada por una TK en una célula. El objetivo de los ensayos in vivo es determinar el efecto de un compuesto de la formula (I) en un modelo animal de un trastorno particular tal como el cáncer. La líneas celulares adecuadas para experimentos de xenoinjerto subcutáneo incluyen a ¡as células C6 (glioma, ATCC # CCL 107), células A375 (melanoma, ATCC # CRL 619), células A431 (carcinoma epidermoide, ATCC # CRL 1555), células Calu 6 (pulmón, ATCC # HTB 56), células PC3 (próstata, ATCC # CRL 1435), células SKOV3TP5 y fibroblastos NIH 3T3 genéticamente diseñados para sobre-expresar EGFR, PDGFR, IGF-1 R o cualquier otra cinasa de prueba. El siguiente protocolo se puede utilizar para llevar a cabo experimentos de xenoinjerto: ratones atímicas (BALB/c, nu/nu) se obtuvieron a partir de Simonsen Laboratories (Gilroy, CA). Todos los animales se mantuvieron bajo condiciones de cuarto limpio en jaulas con Micro-aislamiento con lechos Alpha-dr¡. Estas recibieron croquetas estériles para roedor y agua ad libitum. Las líneas celulares se crecen en medio apropiado (por ejemplo, MEM, DMEM, F10 de Ham, o F12 de Ham más suero bovino fetal al 5%-10% (FBS) a glutamina 2 mM (GLN)). Todos los medios de cultivo celular, la glutamina, y el suero de bovino fetal se obtuvieron a partir de Gibco Life Technologies (Grand Island, NY) a menos que se especifique de otra manera. Todas las células se crecieron en una atmósfera húmeda de aire al 90-95% y CO2 al 5- 0% a 37°C. Todas las líneas celulares se subcultivaron dos veces a la semana y son negativas para micoplasma como se determinó mediante el método Mycotect (Gibco). Las células se cosecharon a confluencia o cerca de la confluencia con tripsina al 0.05% -EDTA y se concentraron a 450 x g por 10 minutos. Los concentrados se resuspendieron en PBS estéril o en medio (sin FBS) a una concentración particular y las células se implantaron dentro del flanco posterior de las ratonas (8-10 ratonas por grupos, 2-10 X 106 células/animal). El crecimiento del tumor se midió durante 3 a 6 semanas utilizando calibradores Vernier. Los volúmenes del tumor se calcularon como un producto de la longitud x grosor x altura a menos de se indique de otra manera. Los valores P se calcularon utilizando la prueba t de Student. Los compuestos prueba de la formula (1 ) en 50-100 µ? de excipiente (DMSO, o VPD: D5W) se pueden administrar mediante inyección IP a diferentes concentraciones generalmente iniciando en el día uno después del implante.

Modelo de invasión del tumor El siguiente modelo de invasión del tumor ha sido desarrollado y puede ser utilizado para la evaluación del valor terapéutico y eficiencia de ios compuestos de la formula (I) identificados para inhibir selectivamente al receptor de KDR/FLK-1 .

Procedimiento Ratonas desnudas de ocho semanas de edad (Simonsen Inc.) son utilizadas como animales experimentales. El implante de las células tumorales se puede llevar a cabo en una campana de flujo laminar. Para la anestesia, se administra un cóctel de Xilazina/Cetamina (100 mg/kg de cetamina y 5 mg/kg de Xilazina) intraperitonealmente. Se realiza una incisión en la línea media para exponer la cavidad abdominal (aproximadamente 1 .5 cm de longitud) para inyectar 07 células tumorales en un volumen de 100 µ? de medio. Las células se inyectan ya sea dentro del lóbulo duodenal del páncreas o bajo la serosa del colon. El peritoneo y los músculos se cierran con una sutura continua de seda 6-0 y la piel se cierra mediante el uso de grapas para heridas. Los animales se observan diariamente.

Análisis Después de 2-6 semanas, dependiendo de las observaciones visibles a simple vista de los animales, las ratonas son sacrificadas, y se disecan y analizan las metástasis tumoraies locales de diversos órganos (pulmón, hígado, cerebro, estómago, bazo, corazón, músculo) (medición del tamaño tumoral, grado de invasión, inmunoquímica, determinación de hibridación in situ, etc.).

Ensayo C-KIT Este ensayo se utiliza para detectar el nivel de c-kit tirosina fosforilación. Las células M07E (leucemia mieloide aguda de humano) se privaron de suero durante toda la noche en suero al 0.1 %. Las células fueron pre- tratadas con el compuesto de la fórmula (I) (de manera concurrente con la privación de suero), antes de la estimulación del ligando. Las células se estimularon con 250 ng/ml de rh-SCF por 15 minutos. Después de la estimulación, las células fueron lisadas y se inmunoprecipitaron con un anticuerpo anti-c-kit. Se determinaron los niveles de fosfotirosina y de proteína mediante Western blot.

Ensayo de proliferación con TT Las células M07E fueron privadas de suero y se pre- trataron con un compuesto de la fórmula (I) como se describió para los experimentos de fosforilación. Las células se sembraron a 4X105 células/pozo en una placa de 96 pozos, en 100 µ? de RPMi + suero al 10%. Se añadió el rh-SCF (100 ng/mL) y la placa se incubó por 48 horas. Después de las 48 horas, se añadieron 10 µ? de mg/ml MTT [3- (bromuro de 4, 5-dímetiltiazol- 2-¡l) -2,5-difeniltetrazolio) y se dejó incubar por 4 horas. Se añadió el isopropanol ácido ( 00 µ? de HCI 0.04 N en isopropanol) y se midió la densidad óptica a una longitud de onda de 550 nm.

Ensayo de apoptosis Las células M07E se incubaron +/-SCF y +/- compuesto de la fórmula (1 ) en FBS al 10% con rh-GM-CSF (10 ng/mL) y rh-IL-3 ( 0 ng/mL). Las muestras se ensayaron a las 24 y 48 horas. Para medir la caspasa-3 activada, las muestras se lavaron con PBS y se permeabilizaron con etanol al 70% enfriado con hielo. Luego las células se tiñeron con anticuerpo policlonal de conejo anti-caspasa activa-3 conjugado con PE y se analizaron mediante FACS. Para medir el PARP escindido, las muestras se Usaron y analizaron mediante western blot con un anticuerpo anti-PARP.

Ensayos adicionales Los ensayos adicionales que pueden ser utilizados para evaluar los compuestos de la fórmula (I) incluyen, sin limitación, un ensayo bio-flk-1 , un ensayo de receptor EGF - receptor quimérico HER2 en células completas, un ensayo bio-src, o un ensayo bio-lck y un ensayo que mide la función de fosforilación de raf. Los protocolos para cada uno de estos ensayos pueden encontrarse en la solicitud de Patente de E.U.A. No. 09/099,842, la cual se incorpora como referencia, incluyendo cualesquiera dibujos, en la presente invención.

Medición de la toxicidad celular Los compuestos terapéuticos deben ser más potentes para inhibir la actividad del receptor de la tirosina cinasa que para ejercer un efecto citotoxico. Una medición de la efectividad y toxicidad celular de un compuesto se puede obtener mediante la determinación del índice terapéutico, por ejemplo, IC5o/LD5o. IC50, la dosis requerida para lograr una inhibición del 50%, se puede medir utilizando técnicas estándares tales como aquellas descritas en la presente invención. LD5o, la dosis que resulta en una toxicidad del 50%, también se puede medir mediante técnicas estándares ( ossman, 1983, J. Immunol. Methods. 65: 55-63), mediante la medición de la cantidad de la LDH liberada (Korzeniewski y Callewaert, 1983, J. Immunol. Methods, 64: 313, Decker y Lohmann-Matthes, 1988, J. Immunol. Methods, 1 15: 61), o mediante la medición de la dosis letal en los modelos animales. Se prefieren los compuestos con un gran índice terapéutico. El índice terapéutico debe ser mayor que 2, preferiblemente de al menos 10, más preferiblemente de ai menos 50.

B. Ejemplo del ensayo celular que resulta de la utilización de 5-(5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3- il¡denmet¡l)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80). Para confirmar la potencia de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2,4- dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) detectada en los ensayos biológicos (vide infra), se evaluó la capacidad de dicho compuesto para inhibir la fosforilación de RTK dependiente de ligando en ensayos basados en célula utilizando células de ratón NIH-3T3 diseñadas para sobre-expresar Flk-1 o PDGFRp de humano. 5-(5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3- ilidenmetil) -2, 4-dimetiM H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió la fosforilación de la tirosina Flk-1 dependiente de VEGF con un valor IC50 de aproximadamente 0.03 µ?. Este valor es similar al valor K¡ 0.009 µ determinado para la inhibición del Flk-1 por 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmet¡l)-2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) determinado en los ensayos biológicos. Esto indica que 5- (5-fluoro-2-oxo- 1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) - 2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) penetra fácilmente dentro de las células. De manera consistente con los datos bioquímicos (vide infra) indicando que 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxilico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) tiene una actividad comparable en contra de Flk-1 y de PDGFRp, también se encontró que inhibe la fosforilación del receptor dependiente de PDGF en las células con un valor IC50 de aproximadamente 0.03 µ?. La capacidad de 5- (5-fluoro- 2- ???-1 , 2- dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino- etil) amida (Compuesto 80) para inhibir una c-kit, una RTK cercanamente relacionada que se une al factor de la célula madre (SCF), se determinó utilizando las células M07E que expresan este receptor. En estas células, 5- (5-fluoro- 2-oxo- ,2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol- 3- ácido carboxílico (2- dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió la fosforilación de c-kit dependiente de SCF con un valor IC50 de 0.01-0.1 µ?. Este compuesto también inhibió la fosforilación de c-kit estimulada por SCF en las descargas de leucemia mieioide acuda (AML) aislado a partir de la sangre periférica de los pacientes. Además de la evaluación de la capacidad de 5- (5-fluoro-2-oxo- , 2-dihidroindol-3- ¡lidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) para inhibir la fosforilación del receptor dependiente de ligando en las células, su efecto sobre la respuesta proliferativa dependiente de ligando de las células también se examinó in vitro (véase el cuadro 4). En estos estudios, las células se mantuvieron quiescentes mediante la privación de suero durante toda la noche y se indujeron a llevar a cabo síntesis de ADN después de la adición del ligando mitogénico apropiado. Como se muestra en el cuadro 3, la 5- (5-fluoro- 2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico(2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió la proliferación inducida por PDGF de las células NIH- 3T3 que sobre-expresan PDGFRp o PDGFRa con ¡os valores IC50 0.031 y 0.069 µ?, respectivamente, y la proliferación inducida por SCF de las células M07E con un valor IC5o de 0.007 µ?.

CUADRO 3 Como se muestra en el cuadro 3, hay un acuerdo general entre las actividades bioquímicas y celulares de 5- (5-f!uoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-¡lidenmetil) -2, 4-dtmetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) apoyando la conclusión de que este compuesto atraviesa las membranas celulares. Además, se puede concluir que las respuestas celulares son un resultado de la actividad del compuesto 80 en contra del blanco indicado. En contraste, cuando se evaluaron en la presencia del medio de crecimiento completo in vitro, se requirieron concentraciones sustancialmente mayores de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimeti H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) (>10 µ?) para inhibir el crecimiento de una variedad de células tumorales de humanos (véase el cuadro 4). Esto indica que el compuesto no inhibió directamente el crecimiento de estas células a las concentraciones requeridas para inhibir la fosforilación del receptor dependiente del ligando y la proliferación celular.

CUADRO 4 Brevemente, los resultados mostrados en el cuadro 4 se obtuvieron mediante la incubación de las células por 48 horas en medio de crecimiento completo en la presencia de diluciones seriales de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2- dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil- H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino- etil) amida. Al término del periodo de crecimiento, se determinó el número relativo de células. Los valores IC5o se calcularon como la concentración del compuesto que inhibió el crecimiento de las células en un 50% con relación a 15 las células no tratadas. Los valores LD50 se calcularon como la concentración del compuesto que ocasionó una reducción del 50% en el número de células con relación a aquellas en el inicio del experimento. Un ensayo basado en célula más relevante el cual evalúa el potencial anti- angiogénico de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-d¡metil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) es el ensayo de mitogénesis in vitro utilizando células endoteliales de vena umbilical de humano (HUVECs) como un sistema modelo para la proliferación de la célula endotelial crítica para el proceso angiogénico. En este ensayo, una respuesta mitogénica, medida como un incremento en la síntesis del ADN, se induce en las HUVECS privadas de suero después de la adición de VEGF o de FGF. En estas células, la 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-iIidenmetil) -2,4- dimetil-1 H-pirrol-3-ác¡do carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió la respuesta mitogénica inducida por VEGF y por FGF de manera dosis dependiente con valores IC50 de 0.004 µ? y 0.7 µ?, respectivamente, cuando el compuesto estuvo presente lo largo de las 48 horas de ensayo. Brevemente, los resultados anteriormente mencionados · se obtuvieron utilizando HUVECS privadas de suero que fueron incubadas con concentraciones mitogénicas de VEGF (100 ng/ml) o de FGF (30 ng/ml) en la presencia de diluciones seriales de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2,4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) por 24 horas . La respuesta mitogénica durante las siguientes 24 horas en la presencia del ligando y del inhibidor se cuantificó mediante la medición de la síntesis de ADN basada en la incorporación de bromodeoxiuridina dentro del ADN celular. En experimentos separados, el compuesto 80 inhibió la fosforilación de ERK 1/2 dependiente de VEGF (p42/44MAP cinasa), un blanco temprano cascada abajo de Flk-1/KDR, de manera dosis dependiente. La actividad inhibidora del compuesto 80 también se demostró que es de larga duración en este sistema; inhibiendo la fosforilación de ERK 1/2 dependiente de VEGF por hasta 48 horas después de la remoción de 5-(5-fluoro-2-oxo- , 2-dihidro-indol-3-¡lidenmetil)-2, 4-dimetil- H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) a partir del medio después de una corta exposición (2 horas) a concentraciones micromolares del compuesto. Se ha reconocido que VEGF es un factor de supervivencia importante para las células endoteliales. Puesto que 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil- H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibe la respuesta mitogénica de las HUVECS dependiente de VEGF, se investigó el efecto del compuesto sobre la supervivencia de las HUVEC. En estos experimentos, la escisión del sustrato de caspasa 3 poli-ADP-ribosil polimerasa (PARP) se utilizó como una lectura de la apoptosis. Las HUVECS cultivadas en condiciones libres de suero por 24 horas exhibieron niveles sustanciales de escisión de PARP, como se detectó mediante la acumulación del fragmento de escisión de PARP de 23 kDa. Esto se previno en gran parte por la adición de VEGF al medio de la célula, indicando que VEGF actúa como un factor de supervivencia en este ensayo. Se ha mostrado que 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3- ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibe la señalización de KDR. Por consiguiente, 5- (5-fluoro-2-OXO-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil)-2, 4-dimetil- 1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió la supervivencia de las HUVEC mediada por VEGF de manera dosis dependiente. Por lo tanto, estos datos indican que el compuesto 80 indujo la apoptosis en las células endoteliales en cultivo en la presencia de VEGF.

C. Estudios de eficiencia in vivo i. Eficiencia en contra de xenoinjertos de tumor establecidos La eficiencia in vivo de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2,4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) se estudió en modelos de xenoinjertos subcutáneos (SC) utilizando células tumorales de humano implantadas dentro de la región del flanco trasero de ratones atímlcos. Después del implante, los tumores se dejaron establecer hasta un tamaño de 100-550 mm3 antes de iniciar el tratamiento oral con el compuesto. La administración oral diaria del compuesto 80 ocasionó una inhibición dosis dependiente del crecimiento del tumor A431 cuando el tratamiento se inició después de que los tumores habían crecido hasta un tamaño de 400 mm3. La inhibición estadísticamente significativa (P <0.05) del crecimiento tumoral se observó a las dosis de 40 mg/kg/día (inhibición del 74%) y a 80 mg/kg/día (inhibición del 84%) (véase el cuadro 6). En experimentos preliminares, una dosis mayor (160 mg/kg/día) del compuesto no fue más eficaz en contra de los tumores A431 establecidos que la dosis de 80 mg/kg/día. Además, los ratones tratados con la dosis de 160 mg/kg/día del compuesto perdieron peso corporal, indicando que la dosis más alta no fue bien tolerada. Se obtuvieron resultados similares en un experimento en el cual los tumores A431 solamente se dejaron alcanzar un tamaño de 100 mm3 (véase el cuadro 4). En este segundo experimento, la regresión completa de los tumores ocurrió en seis de los ocho animales tratados a la dosis de 80 mg/kg/día por 21 días. En estos seis animales, los tumores no crecieron nuevamente durante un período de observación de 1 10 días después del término del tratamiento. En los dos animales en los cuales los tumores crecieron nuevamente hasta un tamaño grande (2000-3000 mm3), los tumores tuvieron una regresión en respuesta a una segunda ronda de tratamiento con el compuesto 80. De manera importante, en todos los experimentos eficaces, la 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindof~3- ilidenmet¡l)-2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) a 80 mg/kg/día ha sido bien tolerada, incluso con dosificación continua por más de 100 días.

CUADRO 5 Brevemente, los resultados mostrados en el cuadro 5 se obtuvieron utilizando células A431 (0.5 x 106 células/ratón) las cuales fueron implantadas SC dentro de la región del flanco trasero de ratones atímicos. La administración oral diaria de 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) en un vehículo basado en cremóforo o en un vehículo control empezó cuando los tumores alcanzaron el volumen promedio indicado. Los tumores se midieron utilizando calibradores Vernier y el volumen del tumor se calculó como el producto de la longitud x grosor x altura. Los valores P se calcularon mediante la comparación del tamaño de los tumores para los animales que fueron tratados con el compuesto 80 (n=8) con respecto a aquellos animales que fueron tratados con un vehículo (n= 6) en el último día del experimento, utilizando la prueba t de Student de dos colas. La eficiencia del compuesto 80 en contra de tumores de humano establecidos de diferentes orígenes se determinó utilizando xenoinjertos de Co!o205 (carcinoma de colon), SF763T (glioma), y NCI-H460 (carcinoma de pulmón que no es de células pequeñas) (véase el cuadro 6). Estos experimentos se llevaron a cabo utilizando 5- (5- fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) administrada oralmente a 80 mg/kg/día; una dosis que fue efectiva y bien tolerada.

CUADRO 6 En los experimentos anteriormente mencionados, el compuesto 80 se administró una vez al día a 80 mg/kg en un vehículo basado en cremóforo una vez que los tumores habían alcanzado el tamaño indicado. La inhibición porcentual comparada con el grupo control tratado con el vehículo se calculó al término de los experimentos. Los valores P se calcularon mediante la comparación de los tamaños de los tumores de los animales que habían sido tratados con el compuesto con respecto a los tamaños de los tumores de aquellos animales que habían sido tratados con el vehículo, utilizando la prueba t de Student de dos colas. A pesar de que la 5- (5-fluoro-2-oxo- , 2-dihidro-indol-3- ¡lidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H- pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida (Compuesto 80) inhibió el crecimiento de todos los tipos tumorales mostrados en el cuadro 7, hubo una diferencia en la respuesta de los diferentes modelos de xenoinjerto. Específicamente, el crecimiento de los tumores NCI-H460 y SF763T se detuvo o se hizo más lento de manera evidente mientras que los tumores Colo205, como los tumores A431 , tuvieron una regresión cuando se trataron con 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroindol-3-ilidenmetil) -2, 4-dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida. Con el objeto determinar la base molecular para la diferencia en la respuesta entre los modelos de los xenoinjertos, los tumores SF763T fueron estudiados. Por lo tanto, los tumores SF763T, los cuales tuvieron una menor respuesta al tratamiento con 5- (5-fluoro-2-oxo-1 , 2-dihidroíndol-3-ilidenmetil) -2,4- dimetil-1 H-pirrol-3-ácido carboxílico (2-dietilamino-etil) amida, han sido evaluados al nivel molecular utilizando técnicas inmunohistológicas para determinar el efecto del tratamiento con el compuesto. Estos estudios se llevaron a cabo inicialmente en este tipo de tumor debido a que ios tumores SF763T están altamente vascularizados con micro-vasos sanguíneos que expresan fuertemente el marcador de célula endotelial CD31 y por lo tanto fueron adecuados para los estudios de densidad de micro-vasos sanguíneos en el tumor (MVD). La evaluación inmunohistológica de los tumores SF763T indicó que los tumores a partir de los animales tratados tenían una MVD reducida en relación con los controles tratados con el vehículo, de manera consistente con un mecanismo de acción anti- angiogénico para el compuesto 80; La MVD fue de 24.2 ± 4.1 en los animales tratados con el compuesto 80, en comparación a 39.3 ± 5.7 para aquellos que solamente fueron tratados con el vehículo. Como se anticipó a partir de la detención asociada con el crecimiento tumoral, una inhibición pronunciada en la proliferación de la célula tumoral fue evidente en los tumores que se trataron con el compuesto 80. Estos tumores tuvieron la mitad del índice mitótico que aquel en los tumores tratados con el vehículo (datos no mostrados). El efecto del compuesto 80 sobre la MVD y la proliferación de la célula tumoral indica que el compuesto tiene profundos efectos anti- angiogénicos y anti- tumoraies, incluso bajo condiciones en las cuales los tumores no llevan a cabo regresión. La capacidad del compuesto 80 para inhibir la fosforilación de PDGFR y la señalización subsecuente in vivo también se estudió en los tumores SF763T, los cuales expresan altos niveles de PDGFRp. El tratamiento de los tumores SF763T con el compuesto 80 inhibió fuertemente la fosforilación de PDGFRp tirosina en tumores establecidos SF763T. El compuesto 80 también redujo los niveles de fosfolipasa C gamma fosforilada (activada) (PLC-?), un indicador inmediato cascada abajo de la activación de PDGFR. Estos datos demuestran que la administración oral del compuesto 80 ocasiona un efecto directo sobre la actividad del blanco (PDGFR) en los tumores in vivo. Basándose en la demostración de que la capacidad del compuesto 80 para Inhibir la señalización dependiente de VEGF en las HUVECs in vitro fue de larga duración (vide supra), la eficiencia del compuesto se evaluó cuando el compuesto se administró de manera poco frecuente en el modelo de tumor Colo205. Como se muestra en el cuadro 7, 80 mg/kg (inhibición del 91%) y 40 mg/kg (inhibición del 84%) fueron eficientes cuando se administraron diariamente, pero no lo fueron cuando se administraron dos veces a la semana. En contraste, una dosis mayor del compuesto 80 (160 mg/kg) inhibió (inhibición del 52%) el crecimiento de los tumores establecidos Colo205 cuando se administraron dos veces a la semana, sugiriendo que este compuesto puede demostrar eficiencia cuando se administra de manera poco frecuente a una dosis superior. Debe mencionarse que los regímenes de dosis pueden ser determinados por aquellos expertos en la técnica sin llevar a cabo experimentación.

CUADRO 7 Brevemente, los resultados mostrados en el cuadro 7 se obtuvieron utilizando células Colo205 (0.5 x 06 células/ratón) que habían sido implantadas SC dentro de la región del flanco trasero de ratones atímicos. La administración oral del compuesto 80 de conformidad con el programa indicado empezó cuando los tumores alcanzaron 400 mm3. Los tumores se midieron utilizando calibradores Vernier y el volumen del tumor se calculó como el producto de la longitud x grosor x altura. Los valores P se calcularon mediante la comparación del tamaño de los tumores para los animales que fueron tratados con el compuesto 80 con respecto a aquellos animales que habían sido tratados con un vehículo en el último día del experimento, utilizando la prueba t de Student de dos colas. ii. Eficiencia del compuesto 80 en un modelo de enfermedad diseminada Además de apoyar el crecimiento sostenido de los tumores primarios, la angiogénesis también es un componente esencial que apoya el desarrollo de la enfermedad diseminada debido a las metástasis a partir del tumor primario. El efecto del compuesto 80 sobre el desarrollo de la enfermedad diseminada se examinó en el modelo de colonización de pulmón por melanoma B16-F1 en el ratón. En este modelo, las células B16-F1 inoculadas intravenosamente por la vena de la cola de ratones atímicos colonizaron los pulmones y formaron tumores. Como se muestra en el cuadro 7, la administración oral del compuesto 80 a 80 mg/kg/día redujo efectivamente la carga de las células B16-F1 en los pulmones como se evaluó mediante las mediciones del peso total del pulmón. Estos datos sugieren que el compuesto 80 puede inhibir la enfermedad diseminada in vivo.

CUADRO 8 Brevemente, los resultados mostrados en el cuadro 8 se obtuvieron utilizando ratones atímicos que habían sido inoculados con células tumorales B16-F1 (5X105 células/ratón) por la vena de la cola. Los ratones fueron tratados diariamente con el compuesto 80 administrado oralmente a 80 mg/kg/día (n=10) o con el vehículo (n=18) por 24 días después de la inoculación de la célula tumoral. Al término del periodo de tratamiento, los ratones fueron sacrificados y sus pulmones se removieron y se pesaron. El porcentaje de inhibición se calculó mediante la comparación del peso del pulmón de aquellos animales que habían sido tratados con el compuesto 80, en comparación con el peso del pulmón de los animales que solamente habían sido tratados con el vehículo. Los valores P se determinaron utilizando la prueba t de Student de dos colas.

II. Inhibidores COX-2 La capacidad de los inhibidores COX-2 para retrasar el crecimiento de los tumores se evaluó utilizando el modelo del pulmón de Lewis descrito continuación. Los ratones fueron inyectados subcutáneamente en la pata izquierda (1 x 106 células tumorales suspendidas en Matrigel al 30%) y el volumen del íumor se evaluó utilizando un fletismómetro dos veces a la semana por 30-60 días. La sangre se colectó dos veces durante el experimento en un protocolo de 24 horas para evaluar la concentración plasmática y la exposición total mediante el análisis AUC. Los datos se expresaron como la media +/- SEM. Las pruebas de Student y de Mann-Whitney se utilizaron para evaluar las diferencias entre las medias utilizando el paquete de software InStat. El celecoxib que se dio en la dieta a dosis entre 160-3200 ppm retardó el crecimiento de estos tumores. El efecto inhibidor del celecoxib fue dosis dependiente y tuvo un intervalo de 48% a 85% en comparación con los tumores control. El análisis de las metástasis en pulmón se realizó en todos los animales mediante el conteo de las metástasis en un estereomicroscopio y mediante análisis histoquímico de secciones consecutivas del pulmón. El celecoxib no afectó las metástasis en pulmón a la dosis más baja de 160 ppm, no obstante las metástasis superficiales se redujeron por más del 50% cuando se dio a dosis entre 480-3200 ppm. Además, el análisis histopatológico reveló que el celecoxib redujo de manera dosis dependiente el tamaño de las lesiones metastásicas en el pulmón. 2. Modelo HT-29: Los ratones fueron inyectados subcutáneamente en la pata izquierda (1 x 106 células tumorales suspendidas en Matrigel al 30%) y el volumen del tumor se evaluó utilizando un fletismómetro dos veces a la semana por 30-60 días. El Implante de células cancerosas de colon de humano (HT-29) dentro de ratones desnudos produce tumores que alcanzarán 0.6-2 mi entre 30-50 días. La sangre se colectó dos veces durante el experimento en un protocolo de 24 horas para evaluar la concentración en plasma y la exposición total mediante análisis de AUC. Los datos se expresan como la media +/-SEM. Las pruebas de Student y de Mann-Whitney fueron utilizadas para evaluar las diferencias entre las medias utilizando el paquete de software InStat. A. Los ratones inyectados con células cancerosas HT-29 fueron tratados con cytoxin i. p a dosis de 50 mg/kg a los días 5, 7 y 9 en la presencia o ausencia de celecoxib en la dieta. La eficiencia de ambos agentes fue determinada por la medición del volumen total. El tratamiento utilizando un inhibidor COX-2 relacionado con celecoxib (SC-58236) redujo el tamaño del tumor en un 89%. En el mismo ensayo, la indometacina dada a cerca de la dosis máxima tolerada de 2 rng/kg/día en el agua para beber inhibió la formación tumoral en un 77%. Además, el inhibidor selectivo de COX-2 inhibió completamente la formación de metástasis en el pulmón mientras que la indometacina no selectiva a NSAID no fue efectiva. Los resultados a partir de estos estudios demuestran que el celecoxib administrado en la dieta a ratones que contienen tumores puede retrasar el crecimiento de tumores y de metástasis cuando se administra como una terapia única. Además, se observó un beneficio positivo cuando el celecoxib se administró en combinación con un agente citotóxico tal como ciclofosfamida.

B. En un segundo ensayo, los ratones inyectados con células cancerosas de colon HT-29 fueron tratados con celecoxib (10, 40 ó 160 ppm) en la dieta empezando al día 10. Se observó un efecto dosis dependiente aproximado. (Cuadro 9).

CUADRO 9 III. Ensayos in vivo utilizando proteína cinasas en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxiqenasa-2 para tratar el cáncer La capacidad del inhibidor de proteína cinasas para retrasar el crecimiento de tumores en combinación con un inhibidor selectivo de COX-2 se puede evaluar en el modelo de xenoinjerto 1483 descrito a continuación. El xenoinjerto 1483 es un xenoinjerto animal que se utiliza como modelo de los cánceres epiteliales de humano que expresan ciclooxigenasa-2 (COX-2) en las células tumorales y en la vasculatura. Un modelo de carcinoma de cabeza y de cuello de célula escamosa en ratón desnudo con xenoinjerto de tumor de humano (línea celular 1483) que expresa COX-2 en las células tumorales y en la vasculatura, es similar a los cánceres epiteliales en humanos. Los inventores creen que este modelo representa los cánceres epiteliales en humano y podría ser un buen modelo para correlacionar la eficiencia de los fármacos anti-cancerosos incluyendo los inhibidores COX-2 con respecto a ¡a eficiencia en humanos.

Materiales y métodos: Cultivo celular: Células de carcinoma de cabeza y de cuello de célula escamosa 1483 de humano (HNSCC) fueron almacenadas en viales congelados que contenían 3 x 106 células, suero de bovino fetal al 90% (FBS) dimetilsulfóxido al 10% (DMSO). Se tomó un vial congelado y se descongeló rápidamente a 37°C y se colocó dentro de una botella T-162 cm2 (Corning) que contenía medio D-MEM/F12 (GibcoBRL) con reguladores de pH Hepes 15 mM , L-glutamina, hidrocloruro de piridoxina y FBS al 10%. Las células se crecieron en una incubadora con C02 al 5% y temperatura a 37°C. El medio se cambió cada tercer día y las células se sometieron a un pasaje cuando estaban a una confluencia del 80-90%. Para someter a pasaje a las células, la botella se lava con 10 mi de solución salina con pH regulado con fosfato (PBS), se aspira y se añaden 2 mi de tripsina/EDTA (0.25 %/1 mM, GibcoBRL) se colocan de regreso en la incubadora, después de 5 minutos, las células se desprenderán. Añadir 8 mi del medio anterior a la botella, enjuagar y transferir a un tubo de centrífuga estéril de 50 mi. Añadir 30 mi más de medio y mezclar y contar las células utilizando un hemocitómetro, sembrar las células en una T-162 cm2 que contiene 3-4 x 106 células.

Modelo animal 1 83: Cambiar el medio 24 horas antes de cosechar las células 1483 antes de la inyección dentro de los ratones desnudos. Tripsinizar las células 1483 como se describió anteriormente en la sección de cultivo de células. Contar las células y determinar el número de células. Centrifugar las células a 1000 rpm por 5 minutos a temperatura ambiente. Resuspender los concentrados celulares y agruparlos (si se encuentran en múltiples tubos de centrífuga de 50 mi) dentro de un tubo de centrífuga de 50 mi con solución salina de Hank con pH regulado (HBSS, GibcoBRL) y centrifugar como se mencionó anteriormente. Usted deseará tener aproximadamente 25% más células de lo que realmente necesita para la inyección para tener células extra. Si usted está inyectando 72 ratones y tiene 100 X 106 células, prepare todas las células para inyectar dentro de los ratones. Inyecte 1483 células a 1 X 106 células en 0.03 ml/ratón. Inyecte las células con Matrigel al 30% (Collaborative Biomedical Products) y HBSS al 70%. Resuspenda los concentrados agrupados con 2.1 mi (70%) de HBSS frío y luego añada 0.9 mi (30%) de Matrigel descongelado frío líquido y mezcle bien sobre hielo. Mantenga esta preparación celular sobre hielo en todo momento antes de la inyección dentro de los ratones. Ratones desnudos de 4-6 semanas de edad son utilizados en estos estudios (Harlen). Anestesiar a los ratones utilizando a gas C02/02 y luego inyectarlos en la parte media de la pata trasera derecha utilizando una jeringa de tuberculina de 0.5 ce (Beckerson & Dickerson). Pesar a los ratones para peso corporal el día de la inyección (Día 0) para la línea basal de peso para el inicio del estudio. Pesar a los ratones al día 7 a inhibir la pata trasera derecha para volumen tumoral en la pata utilizando un fletismómetro (Stoelting Co. ). El fletismómetro es una máquina que mide el volumen de la pata mediante desplazamiento de agua. Medir una de las pocas patas izquierdas no inyectadas y promediar para una medición de fondo para sustraer a partir de la pata derecha que contiene el tumor. Colocar a los animales que se van a probar con compuestos prueba en una comida de croquetas cuando los tumores tienen un tamaño de 100-200 uL y continuar con la comida con compuestos hasta el término del estudio. A algunos ratones se les da solamente un inhibidor de proteínas cinasa o un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa -2. A algunos ratones se les da tanto un inhibidor de proteína cinasa como un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa -2 diariamente a una dosis adecuada determinada basándose en los resultados de ensayo in vitro. Pesar y medir a los ratones a lo largo del estudio a los días 7,10, 14, 17, 21 , 24 y 28. Los animales pueden ser iniciados con el tratamiento del compuesto al día 0 (profiláctico) o una vez que se ha establecido el tumor alrededor del día 7 (terapéutico). Alrededor del día 30 los ratones que recibieron el vehículo (control) tendrán tumores grandes (-1.0 -1.5 mi) e inician a perder peso, en este momento se finaliza el tratamiento con los animales tratados con el vehículo. Si se observa inhibición del tumor en los grupos tratados y están en buenas condiciones de salud, se eutaniza a la mitad de los grupos tratados y se mantiene la mitad del grupo tratado vivo para determinar el retraso en el crecimiento del tumor. Un experto en la técnica también podría apreciar fácilmente que la presente invención se adapta bien para llevar a cabo los objetivos y obtener los fines y ventajas mencionados, así como aquellas inherentes en la presente invención. Los complejos moleculares y los métodos, procedimientos, tratamientos, moléculas, compuestos específicos descritos en la presente invención son actualmente representativos de las modalidades preferidas, son ejemplares, y no se pretenden como limitaciones del alcance de la invención. Los cambios en la presente invención y otros usos se les ocurrirán a aquellos expertos en la técnica los cuales se abarcan dentro del espíritu de la invención y se definen por el alcance de las reivindicaciones. Será fácilmente evidente para un experto en la técnica que sustituciones y modificaciones variables se pueden elaborar a la invención descrita en la presente invención sin apartarse del alcance y espíritu de la invención. Todas las patentes y publicaciones mencionadas en la especificación son indicativas de los niveles de aquellos expertos en la técnica a los cuales pertenece la invención. Todas las patentes y publicaciones se incorporan en la presente invención como referencias hasta el mismo grado

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesita de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (I): en donde: R se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, piperazin-1-ilmetilo, 4-metilpiperazin-1-ilmetilo, piperidin-1-i!metilo, 2-hidroximetiipirrolidin-1-ilmetilo, 2-carboxipirrolidin-1 -ilmetilo, y pirrolidin-1-¡Imetilo; R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alquilcicloalquilalquilo sustituido, cicloalquilo sustituido, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi,- C(0)NR8R9, -NR13R14,-(CO)R15, y -(CH2)rR1e; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, ciano, -NR13R14, - NR13C(0)R14, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, arilo, heteroarilo, -NR 3R14, -NR 3S(0)2R14, -S(0)2NR13R14, -NR13C(0)R14, -NR13C(0)OR14, -(CO)R15, y -S02R19; R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, hidroxi, alcoxi, y -NR13R14; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, heteroarilo, -C(0)R17, y -C(0)R10 con la condición de que cuando R es hidrógeno entonces al menos uno de R5, R6 y R7 es -C(0)R10; o R6 y R7 se pueden combinar para formar un grupo seleccionado a partir del grupo que consiste de -(CH2)4-, -(CH2)5- y -(CH2)6-; R8 y R9 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y arilo; R10 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi, ariloxi,-N(R 1)(alquileno)nR12 en donde el grupo alquileno está opcionalmente sustituido con un grupo hidroxi, y -Nl3R14; R11 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y alquilo sustituido; R12 se selecciona a partir del grupo que consiste de -NR13R14, hidroxi, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, -N+(0-)R13R14, -N(OH)R13, y -NHC(0)R18 (en donde R 8 es alquilo, alquilo sustituido, haloalquilo, o aralquilo); R13 y R 4 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, cianoalquilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, arilo y heteroarilo; o R13 y R14 se pueden combinar para formar un grupo heterociclo; R 5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi y ariloxi; R 6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, -NR13R14, -C(0)R15, y -C(0)NR13R14; R 7 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo y heteroarilo; R19 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, arilo, alquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; y n y r son independientemente 1 , 2, 3, ó 4; en combinación con un inhibidor de clclooxigenasa; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 2.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesita de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (I): donde: R se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, piperazin-1 -ilmetilo, 4-metilpiperazin-1 -ilmetilo, piperidin-1 -ilmetilo, 2-hidroximetilpirrolidin-1 -ilmetilo, 2-carboxipirrolidin-1 -ilmetilo, y pirrolidin-1-ilmetilo; R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alquilcicloalquilalquilo sustituido, cicloalquilo sustituido, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi,- C(0)NR8R9, -NR 3R 4,-(CO)R15, y -(CH2)rR16; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, ciano, -NR13R14, -NR 3C(0)R14, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, y -S(0)2NR13R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, arilo, heteroarilo, -NR 3R14, -NR13S(0)2R14, -S(0)2NR 3R14, -NR13C(0)R14, -NR 3C(0)OR14, -(CO)R15, y -SO2R19; R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, alquilo sustituido, hidroxi, alcoxi, y -NR13R14; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y- C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, arilo, heteroarilo, -C(0)R17, y -C(0)R10 con la condición de que cuando R es hidrógeno entonces al menos uno de R5, R6 y R7 es -C(0)R10; o R6 y R7 se pueden combinar para formar un grupo seleccionado a partir del grupo que consiste de -(CH2)4-, -(CH2)5- y -(CH2)6-; R8 y R9 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, y arilo; R 0 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi, ariloxi,- N(R11)(alquileno)nR12 en donde el grupo alquileno está opcionalmente sustituido con un grupo hidroxi, y -N 3R14; R11 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y alquilo sustituido; R12 se selecciona a partir del grupo que consiste de -NR13R14, hidroxi, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, -N+(0")R 3R14, -N(OH)R13, y -NHC(0)R18 (en donde R18 es alquilo, alquilo sustituido, haloalquilo, o aralquilo); R13 y R14 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, cianoalquilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, arilo y heteroarilo; o R13 y R14 se pueden combinar para formar un grupo heterociclo; R 5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi y ariloxi; R16 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, -NR13R14 -C(0)R15, y -C(0)NR13R14; R 7 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, cicloalquilo, arilo y heteroarilo; R 9 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, alquilo sustituido, arilo, aralquilo, heteroarilo, o heteroaralquilo; y n y r son independientemente 1 , 2, 3, ó 4; en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 seleccionado a partir del grupo que consiste de: (i) un compuesto de la fórmula (II): en donde: G se selecciona a partir del grupo que consiste de O, S, y -NRa- en donde Ra es hidrógeno o alquilo; R10a se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno y arilo; R1 1a se selecciona a partir del grupo que consiste de carboxilo, alquilo, aralquilo, aminocarbonilo, alquilsulfonilaminocarbonilo, y alcoxicarbonilo; R12a se selecciona a partir del grupo que consiste de haloalquilo, alquilo, aralquilo, cicloalquilo y arilo opcionalmente sustituido con uno o más radicales seleccionados a partir de alquiltio, nitro y alquilsulfonilo; y R13a es uno o más radicales independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, aralquilo, alcoxi, ariloxi, heteroariloxi, aralquiloxi, heteroaralquiloxi, haloalquilo, haloalcoxi, alquilamino, arilamino, aralquilamino, heteroarilamino, heteroarilalquilamino, nitro, amino, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, heteroarilaminosulfonilo, aralquilaminosulfonilo, heteroaralquilaminosulfonilo, heterociclosulfonilo, alquilsulfonilo, hidroxiarilcarbonilo, nitroarilo, arilo opcionalmente sustituido, heteroarilo opcionalmente sustituido, aralquilcarbonilo, heteroarilcarboniio, arilcarbonilo, aminocarbonilo, y alquilcarbonilo; o R13a junto con el anillo E forma un anillo naftilo; o (¡i) un compuesto de la fórmula (III): (II I) en donde: A se selecciona a partir del grupo que consiste de heterociclilo parcialmente insaturado o insaturado y anillos de carbocíclicos parcialmente insaturados o insaturados; R1b se selecciona a partir del grupo que consiste de heterociclilo, cicloalquilo, cicloalquenilo y arilo, en donde R1b está opcionalmente sustituido en una posición sustituible con uno o más radicales independientemente seleccionados a partir de alquilo, haloalquilo, ciano, carboxilo, alcoxicarbonilo, hidroxilo, hidroxialquilo, haloalcoxi, amino, alquilamino, arilamino, nitro, alcoxialquilo, alquilsulfinilo, halo, alcoxi, y alquiltio; R2b se selecciona a partir del grupo que consiste de metilo y amino; y R3b se selecciona a partir del grupo que consiste de un radical seleccionado a partir de hidrógeno, halo, alquilo, alquenilo, alquinilo, oxo, ciano, carboxilo, cianoalquilo, heterocicliloxi, alquiloxi, alquiltio, alquilcarbonilo, cicloalquilo, arilo, haloalquilo, heterociclilo, cicloalquenilo, aralquilo, heterociclilalquilo, acilo, alquiltioalquilo, hidroxialquilo, alcoxicarbonilo, arilcarbonilo, aralquilcarbonilo, aralquenilo, alcoxialquilo, ariltioalquilo, ariloxialquilo, aralquiltioalquilo, aralcoxialquilo, alcoxiaralcoxialquilo, alcoxicarbonilalquilo, aminocarboniio, aminocarbonilalquilo, alquilaminocarbonilo, N-arilaminocarbonilo, N-alquil-N-arilaminocarbonilo, alquilaminocarbonilalquilo, carboxialquilo, alquilamino, N-arilamino, N-aralquilamino, N-alquil-N-aralquilamino, N-alquil-N-arilamino, aminoalquilo, alquilaminoalquilo, N-arilaminoalquilo, N-aralquilaminoalquilo, N-alquil-N-aralquilaminoalquilo, N-alquil-N-arilaminoalquilo, ariloxi, aralcoxi, ariltio, aralquiltio, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, amlnosulfonilo, alquilaminosulfonilo, N-arilaminosulfonilo, arilsuifonilo, y N-aiquil-N-arilaminosulfonilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 3. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 es un compuesto de la fórmula (II) en donde: G se selecciona a partir del grupo que consiste de oxígeno y azufre; R1 a se selecciona a partir del grupo que consiste de carboxilo, alquilo inferior, aralquilo inferior, y alcoxicarbonilo inferior; R12a se selecciona a partir del grupo que consiste de haloalquilo inferior, cicloalquilo inferior y fenilo; y R13a es uno o más radicales seleccionados a partir del grupo que consiste de H, halo, alquilo inferior, alcoxi inferior, haloalquilo inferior, haioalcoxi inferior, alquilamino inferior, nitro, amino, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo inferior, heteroarilalquilaminosulfonilo de 5 miembros, heteroarilalquilaminosulfonilo de 6 miembros, aralquilaminosulfonilo inferior, heterociclosulfonilo que contiene 5 miembros de nitrógeno, heterociclosulfonilo que contiene 6 miembros de nitrógeno, alquilsulfonilo inferior, fenilo opcionalmente sustituido, aralquilcarbonilo inferior, y aiquilcarbonilo inferior; o R13a junto con el anillo E forma un radical naftilo. 4. - El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque: R11a es carboxilo; R12a es haloalquilo inferior; y R 3a es uno o más radicales seleccionados a partir del grupo que consiste de H, halo, alquilo inferior, haloalquilo inferior, haioalcoxi inferior, alquilamino inferior, amino, aminosulfonilo, alquilaminosulfonilo inferior, heteroarilalquilaminosulfonilo de 5 miembros, heteroarilalquilaminosulfonilo de 6 miembros, aralquilaminosulfonilo inferior, alquilsulfonilo inferior, heterociclosulfonilo que contiene 6 miembros de nitrógeno, fenilo opcionalmente sustituido, aralquilcarbonilo inferior, y alquilcarbonilo inferior; o R 3a junto con el anillo E forma un radical naftilo. 5.- El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque: R12a se selecciona a partir del grupo que consiste de fluorometilo, clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, heptafluoropropilo, difluoroetilo, difluoropropilo, dicloroetilo, dicloropropilo, difluorometilo, y trifluorometilo; y R 3a es uno o más radicales seleccionados a partir del grupo que consiste de hídrido, cloro, fluoro, bromo, yodo, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, metoxi, etoxi, isopropiloxi, tertbutiloxi, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometoxi, amino, N,N-dimetilamino, ?,?-dietilamino, N-fenilmetilaminosulfonilo, N-feniletilaminosulfonilo, N-(2-furilmetil)aminosulfonilo, nitro, ?,?-dimetilaminosulfonilo, aminosulfonilo, N-metilaminosulfonilo, N-etilsulfonilo, 2,2-dimetiletilaminosulfonilo, N,N-dimetilaminosulfonilo, N-(2-metilpropil)aminosulfonilo, N-morfolinosulfonilo, metilsuifonilo, bencilcarbonilo, 2,2-dimetilpropilcarbonilo, fenilacetilo y fenilo; o R13a junto con el anillo E forma un radical naftilo. 6 - El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque: R12a se selecciona a partir del grupo que consiste de trifluorometilo y pentafluoroetilo; y R13a es uno o más radicales seleccionados a partir del grupo que consiste de hídrido, cloro, fluoro, bromo, yodo, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, metoxi, trífluorometilo, trifluorometoxi, N-fenilmetilaminosulfonilo, N-feniletilaminosulfonilo, N-(2-furilmetil)aminosulfonilo, ?,?-dimetilaminosulfonilo, N-metilaminosulfonilo, N-(2,2-dimetiletil)aminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, 2-metilpropilaminosulfonilo, N-morfolinosulfonilo, metilsulfonilo, bencilcarbonilo, y fenilo; o en donde R13a junto con el anillo E forma un radical naftilo. 7.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 se selecciona a partir del grupo que consiste de: ácido 6-cloro-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-7-metil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-(1-metiletil)-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-7-(1 ,1-dimetiletil)-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-8-(1-metiletil)-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 2-trifluorometil-3H-naftopiran-3-carboxíl¡co; ácido 7-(1 ,1-dimetiletil)-2-trifluoromet¡l-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-bromo-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-cloro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-trifluorometoxi-2-trifluorometíl-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 5,7-dicloro-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-fenil-2-tr¡fluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 7,8-dimetil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6,8-bis(d¡metiletil)-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 7-(1 -metiletíl)-2-trif !uorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 7-fenil-2- tr¡fluorometil-2H-1-benzop¡ran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-7-etil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico¡ ácido 6-cioro-8-etil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-7-fenil-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxíl¡co; ácido 6,7-dicloro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6,8-dicloro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 2-trifluorometil-3H-nafto[2, 1 -b]piran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-8-metil-2-trifluorometil-2H-1-benzop¡ran-3-carboxílico; ácido 8-cloro-6-metil-2-tr¡fluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-cloro-6-metoxi-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-bromo-8-cloro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-bromo-6-fluoro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-bromo-6-metil-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-bromo-5-fluoro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-cloro-8-fluoro-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-bromo-8-metoxi-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[[(fen¡lmetil)am¡no]sulfonil-2-trifluoromet¡l-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[(d¡metilamino)suifon¡l]-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[(metilamino)sulfonil]-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[(4-morfolino)sulfonil]-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[(1 ,1-dimetilet¡l)aminosulfon¡l]-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[(2-metilprop¡l) am¡nosulfonil]-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxíl¡co; ácido 6-metilsulfonil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-cloro-6- [[(fenilmetil)amino]sulfonii]-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxilico ácido 6-fenilacetil-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6,8-dibromo-2-trifluorometiI-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 8-cloro-5,6-d¡metil-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico; ácido 6,8-dicloro-(s)-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxíiico; ácido 6-bencilsulfonil-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 6-[[N-(2-furilmetil)amino]sulfonil]-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxíl¡co; ácido 6-[[N-(2-feniletil)amino]sulfonil]-2-trifluorometil-2H-1-benzop¡ran-3-carboxílico; ácido 6-iodo-2-trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; ácido 7-(1 ,1-dimetiletil)-2-pentafluoroetil-2H-1-benzopiran-3-carboxílico; y ácido 6-cloro-2-trifluorometil-2H-1-benzotiopiran-3-carboxílico; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 8.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de ciclooxígenasa-2 es un compuesto seleccionado a partir del grupo que consiste de: a) ácido 6-Nitro-2-trifluorometil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico ácido 6-Cloro-8-metil-2-trifluorometil -2H-1 -benzopiran-3-carboxílico ácido ((S)-6-Cloro-7-(1 ,1-dimetiletil)-2- (trifluorometil-2H-1-benzopiran-3-carboxilico ácido 2-Trifluorometil-2H-nafto[2,3-b]piran-3-carboxílico e) ácido 6-Cloro-7-(4-nitrofenoxi)-2-(trifluorometil)-2H-1-benzopiran-3-carboxíl¡co f) ácido ((S)-6,8-Dicloro-2-(trifluorometii)-2H-1-benzopiran-3-carboxílico ácido 6-Cloro-2- (trifluorometil)-4-fenil-2H-1 -benzopiran-3-carboxílico h) ácido 6-(4-Hidroxibenzoil)-2- (trifluorometii) -2H-1-benzopiran-3-carboxílico i) ácido 2-(Trifluorometil)-6-(tr¡fluorometil)tio-2H-1-benzotiopiran-3-carboxílico j) ácido 6,8-Dicloro-2-trifluorometil-2H-1-benzotiopiran-3-carboxilico k) ácido 6-(1 ,1-Dimeti[etil)-2-(trifluorometil)-2H-1-benzotiopiran-3-carboxílico ácido 6,7-Difluoro-1 ,2-dihidro-2- (trifluorometii)-3-quinoiincarboxílico m) ácido 6-Cioro-1 ,2-dihidro-1-metil-2-(trifluorometil)-3-quinolincarboxílico n) ácido 6-CIoro-2-(trifluorometil)-1 ,2-dihidro [1 ,8]naftiridin-3-carboxíiico o) ácido ((S)-6-Cloro-1 ,2-dihidro-2-(trifluorometil)-3-quinolincarboxílico o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos; y cualquier combinación de los mismos. 9.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque dicho inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es un compuesto de la fórmula (III) seleccionado a partir del grupo que consiste de: a) 350 f) o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y cualquier combinación de los mismos. 10.- El método de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque dicho inhibidor selecctivo de la ciclooxigenasa-2 se selecciona a partir del grupo que consiste de: a) b) o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y cualquier combinación de los mismos. 11.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque dicho inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 12.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque dicho inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 13.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 4-[4-(metil)-sulfonil)fenil]-3-fenil-2(5H)-furanona, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 14. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 4-[(5-metil-3-fenil)-4-isoxazolil]fenilsulfonamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 15. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 2-(6-metilpir¡d-3-¡l)-3-(4-metilsulfonilfenil)-5-cloropiridina, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 16. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 4-[5-(4-metilfenil)-3-(trifluorometil)- H-pirazol-1-il]fenilsulfonamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 17. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 4-[(2-metil-4-ciclohexil)-5-oxazolil]fenilsulfonamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 18. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es 4-[5-(3-fluoro-4-metoxifenil)-3-(dlifluorometil)-1 H-pirazol-1-il]-benzenesulfonamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 19. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 es (S)-6,8-d¡cloro-2-(trifluoromet¡l)-2H-1-benzop¡ran-3-ác¡do carboxílico, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 20.- El método de conformidad con la reivindicación 2 caracterizado además porque el inhibidor selectivo de la ciclooxigenasa-2 un compuesto de la fórmula: en donde: X es O o S; R es haloalquilo inferior; R se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido y halo; R13b' se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, halo, alquilo inferior, haloalcoxi inferior, aicoxi inferior, aralquilcarbonilo inferior, dialquilamino inferior, alquilaminosulfonilo inferior, aralquilaminosulfonilo inferior, heteroaralquilaminosulfonilo inferior, un heterociclosulfonilo que contiene 5 miembros de nitrógeno, y un heterociclosulfonilo que contiene 6 miembros de nitrógeno; R13b se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, alquilo inferior, halo, aicoxi inferior, y arilo; y R13b se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, halo, alquilo inferior, aicoxi inferior, y arilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 21 .- El método de conformidad con la reivindicación 20 caracterizado además porque: R se selecciona a partir del grupo que consiste de trifluorometilo y pentafluoroetilo; R13b se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, cloro, y fluoro; R13b se selecciona a partir del grupo que consiste de hídrido, cloro, bromo, fluoro, yodo, metilo, tert-butilo, trifluorometoxi, metoxi, bencilcarbonilo, dimetilaminosulfonilo, isopropilaminosulfonilo, metilaminosulfonilo, bencilaminosulfonilo, feniletilaminosulfonilo, metilpropilaminosulfonilo, metilsulfonilo, y morfolinosulfonilo, R 3b se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, metilo, etilo, isopropilo, tert-butilo, cloro, metoxi, dietilamino, y fenilo; y R13b se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrido, cloro, bromo, fluoro, metilo, etilo, tert-butilo, metoxi, y fenilo. 22.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heteroalicíclico, hidroxi, alcoxi, -(CO)R15, -NR 3R14 -(CH2)rR16 y C(0)NR8R9; R2 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halo, alquilo, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, -NR 3R14, -NR 3C(0)R14, -C(0)R15, arilo, heteroarilo, y -S(0)2NR 3R14; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, trihalometilo, hidroxi, alcoxi, , -(CO)R15, -NR13R14, arilo, heteroarilo, -NR13S(0)2R14, -S(0)2NR13R14, -NR13C(0)R14, y -NR13C(0)OR14; R4 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, y -NR13R14; R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y- C(0)R10; R6 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y- C(0)R10; R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, 3-carboxipropiio, heteroarilo, -C(0)R17, y -C(0)R10; R6 y R7 se pueden combinar para formar un grupo seleccionado a partir del grupo que consiste de -(??2)4-, -(Ch^s- y -(CI- )6-; R8 y R9 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, y arilo; R10 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, alcoxi, ariloxi,- N(R11)(CH2)nR12 y -NR 3R14; R1 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, y alquilo; R 2 se selecciona a partir del grupo que consiste de -NR 3R14, hidroxi, -C(0)R15, arilo, y heteroarilo; R13 y R 4 se seleccionan independientemente a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, arilo y heteroarilo; R 3 y R14 se pueden combinar para formar un grupo seleccionado a partir del grupo que consiste de -(CH2)4-, -(CH2)5-, -(CH2)20(CH2)2-, y -(CH2)2N(CH3)(CH2)2-; R15 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi y ariloxi; R16 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidroxi, -C(0)R15, -NR 3R14, y -C(0)NR 3R14; R 7 se selecciona a partir del grupo que consiste de alquilo, cicloalquilo, arilo y heteroarilo; y n y r son independientemente 1 , 2, 3, ó 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 23.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R6 es -COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde: R 1 es hidrógeno o alquilo inferior; n es 2 ó 3; y R12 es -NR13R14 en donde R13 y R 4 son independientemente alquilo inferior. 24. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R6 es -COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde: R11 es hidrógeno o alquilo inferior; n es 2 ó 3; y R12 es -NR13R14 en donde R 3 y R14 se combinan para formar un grupo seleccionado a partir de -(CH2 , -(CH2)5- -(CH2)20(CH2)2-, o - 25. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de ia fórmula (I) en donde R6 es N-(2-dimetilamino-etil)aminocarbonilo, N-(2-dietil-aminoetil)-N-metilaminocarbonilo, N-(3-dimetilamino-propil)-aminocarbonilo, N-(2-dietilaminoetil)-aminocarbonilo, N-(2-etilaminoetil)-aminocarbonilo, N-(3-etilaminopropil)-aminocarbonilo, o N-(3-dietilamino-propil)aminocarbonilo. 26. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde R6 es N-(2~ dimet¡laminoetil)aminocarbonilo o N-(2-etilamino-etil)-aminocarbonilo. 27. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde R6 es 3-pirrolidin-1-ilpropilaminocarbonilo, 3-morfolin-4-ilpropilamino-carbonilo, 2-pirrolidin-1 -¡letilamino-carbonilo, 2-morfolin-4-iletilaminocarbonilo, 2-(4-metilpiperazin-1 - ii)etil-am¡nocarbon¡lo, 2-(3,5-d¡met¡!piperazin-1-¡l)etil-am¡nocarbonilo, 3-(4-met¡lpiperazin-1-il)prop¡lamino-carbonilo o 3-(3,5-dimet¡lpiperazin-1-il)propilamino-carbon¡io. 28. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde R6 es -COR10 en donde R 0 es -NR 3R14 en donde R13 es hidrógeno y R 4 es alquilo inferior sustituido con hidroxi, arilo, heteroalicíclico, heteroarilo, o carboxi. 29. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde R6 es 2-triazin-1-ilpropilaminocarbonilo, 2-triazin-1-ilet¡laminocarbonilo, 3-imidazol-l-ilpropilaminocarbonilo, piridin-4-ilmetil-aminocarbonilo, 2-piridin-2-iletilaminocarbonilo o 2-imidazol-1-¡letilaminocarbonilo. 30.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R6 es -COR10 en donde R10 es -NR 1(CH2)nR12 en donde: R11 es hidrógeno o alquilo inferior; n es 2 ó 3; y R 2 es -NR13R14 en donde R13 y R14 juntos se combinan para formar un heterociclo. 31.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R6 es -COR10 en donde R10 es - NR11(CH2)nR12 en donde: R11 es hidrógeno o alquilo inferior; n es 2 ó 3; y R12 es -NR13R14 en donde R13 y R14 juntos se combinan para formar un heterociclo de 5, 6 ó 7 átomos que contiene un grupo carbonilo y uno o dos átomos de nitrógeno dentro del anillo. 32.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde R6 es 2-(3-oxopiperazin-1-il)etilaminocarbonilo, 2-(imidazolidin-1 -il-2-ona)etilaminocarbonilo, 2-(tetrahidropirimidin-1 -il-2-ona)etilaminocarbonilo, 2-(2-oxopirrolidin-1-il)-etilaminocarbonilo, 3-(3-oxopiperazin-1-il)propil-am¡nocarbonilo, 3-(imidazolidin-1 -il-2-ona)propil-aminocarbonilo, 3-(tetrah¡dropirimidin-1 -il-2-ona)-propilaminocarbonilo, o 3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil-aminocarbonilo. 33. - El método de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 22-32, caracterizado además porque el inhibidor de la proteína cinasa es un compuesto de la fórmula (I) en donde: R5 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo inferior, y R7 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo y -C(0)R17, en donde R17 es hidroxi, alquilo inferior o arilo. 34. - El método de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado además porque: R es hidrógeno, alquilo inferior, C(0)NR8R9, cicloalquilo o arilo; R2 es hidrógeno, halo, alcoxi inferior, ciano, arilo, -SO2R20, o -S(0)2NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R 4 es hidrógeno, arilo o alquilo; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alcoxi inferior, -C(0)R15, -NR13C(0)OR14, arilo y heteroarilo; y R4 es hidrógeno. 35. - El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado además porque: R es hidrógeno o fenilo; R2 es hidrógeno, cloro, bromo, fluoro, metoxi, etoxi, fenilo, dimetilaminosulfonilo, ciano, metiisulfonilo, etiisulfonilo, benciisulfonilo, 3-clorofenil-aminosulfonilo, carboxi, metoxi, aminosulfonilo, metilaminosulfonilo, feniiaminosulfonilo, piridin-3-il-aminosulfonilo, dimetilaminosulfonilo, o isopropilamino-sulfonilo; R3 es hidrógeno, metoxi, carboxi, fenilo, piridin-3-ilo, 3,4-diclorofenilo, 2-metox¡-5-isopropilfenilo, 4-n-butilfenilo, 3-isopropilfenilo; y R4 es hidrógeno. 36. - El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque: R1 es hidrógeno; R2 es hidrógeno, ciano, fluoro, cloro o bromo; R3 es fenilo; y R4 es hidrógeno. 37. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque: R es hidrógeno, alquilo inferior, -C(0)NR8R9, cicloalquilo o arilo; R2 es hidrógeno, halo, alcoxi inferior, ciano, arilo o -S(0)2NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R14 es hidrógeno, arilo o alquilo; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno, alcoxi inferior, -C(0)R15-, -NR13C(0)R14, arilo, y heteroarilo; y R4 es hidrógeno. 38. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque: R1 es hidrógeno, o metilo; R2 es hidrógeno, ciano, cloro, fluoro o bromo; R3 se selecciona a partir del grupo que consiste de hidrógeno o fenilo; y R4 es hidrógeno. 39 - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque R6 es -COR10 en donde R10 es -NR13R14 en donde R13 es hidrógeno y R14 es alquilo inferior sustituido con hidroxi, alquilo inferior sustituido con hidroxialquilamino, carboxi, o -NR18R19 en donde R18 y R19 son independientemente hidrógeno o alquilo inferior. 40 - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque R6 es [2-(dietilamino)-2-hidroxijetilaminocarbonilo, 2-(N-etil-N-2-hidroxietilamino)-etilaminocarbon¡lo, carboximetilaminocarbonilo, o 2-hidroxietil-aminocarbonilo. 41. - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque R6 es -COR10 en donde R10 es -NR11(CH2)nR12 en donde R12 es -N+(O')NR 3R14 o -N(OH)R13 en donde R13 y R14 son independientemente seleccionados a partir del grupo que consiste de alquilo inferior. 42. - El método de conformidad con la . reivindicación 2, caracterizado además porque R6 es 2-(N-hidroxi-N-etilamino)etilaminocarbonilo o 2-[N+(O")(C2H5)]2etil-aminocarbonilo. 43. - El método de conformidad con la reivindicación 41 o 42, caracterizado además porque: R5 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno o metilo, y R7 se selecciona del grupo que consiste de metilo, hidrógeno o fenilo. 44.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque: R1 es hidrógeno; R2 es hidrógeno, ciano, cloro, fluoro, o bromo; R3 es hidrógeno; y R4 es hidrógeno. 45 - El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de cinasa se selecciona a partir del grupo que consiste de: o una sal L-malato de los mismos. 46.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el inhibidor de cinasa es un compuesto de la fórmula: 47.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesite de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de la proteína cinasa de la fórmula (I): en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 48.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesite de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de proteína cinasa de la fórmula (I): o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 49.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesita de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de proteína cinasa de la fórmula (I): en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 50.- Un método para el tratamiento o prevención de cánceres que comprende la administración a un mamífero que necesita de dicho tratamiento de una cantidad terapéuticamente efectiva de: un inhibidor de proteína cinasa de la fórmula (I): en combinación con un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2 de la fórmula: