UA77002C2 - Combined therapy in cancer treatment - Google Patents

Description

Опис винаходу

Представлений винахід стосується способів лікування або попередження неоплазії використовуючи інгібітори 2 тірозинкінази в комбінації з інгібіторами циклооксигенази, зокрема, селективними інгібіторами циклооксигенази-2.

Неоплазма або пухлина є ненормальною нерегульованою і дезорганізованою проліферацією клітин, що ростуть. Неоплазма є злоякісною або раковою, якщо вона має властивості, що полягають у руйнівному рості, інвазійності і метастазах. Інвазійність стосується локального розповсюдження неоплазми шляхом інфільтрації або руйнуванні оточуючої тканини, що зазвичай руйнує базальні пластинки, що визначаються як межі тканин, і 70 таким чином часто потрапляє до циркуляторної системи тіла. Метастазування зазвичай стосується розповсюдження ракових клітин через лімфоцитні або кровоносні судини. Метастазування також стосується міграції ракових клітин шляхом безпосереднього розповсюдження Через серозні каверни, або субарахноїдальні або інші місця. За допомогою процесів метастазу, ракові клітини мігрують до інших областей тіла створюючи неоплазми в областях віддалених від місця початкового виникнення.

Рак на сьогоднішній день є другою причиною, що призводить до смерті в Сполучених Штатах і понад 8000000 осіб в Сполучених штатах мають рак. В 1995, рак обумовлював 23,395о всіх смертей в Сполучених Штатах,

Їдивіться О.5. ЮОері. ої Неайй апа Нитап Зегмісез, Майопа! Сепіег тог Неанй (аїйвісв, Неанйп Опіеа

Зіагез 1996-97 апа Іпішгу Спагіроок 117 (1997)).

Рак ще не повністю зрозумілий на молекулярному рівні. Відомо, що вплив на клітину карциногену, такого як віруси, деякі хімічні речовини або радіація, призводить до зміни ДНК, що інактивує "супресивний" ген або активує "онкоген". Супресивні гени є генами, що регулюють ріст, які після мутації не можуть довго контролювати ріст клітини. Онкогени спочатку є нормальними генами (так звані проонкогени), які через мутацію або альтернативних контекстів експресії стають трансформованими генами. Продукти трансформованих генів викликають неприйнятний ріст клітини. Більш ніж двадцять різних нормальних клітинних генів можуть стати с онкогенами завдяки генетичній зміні. Трансформовані клітини відрізняють від нормальних клітин за багатьма Ге) ознаками, включаючи клітинна морфологія, клітинно-клітинна взаємодія, склад мембран, цитоскелетна структура, продукування протеїну, експресія гену і смертність (трансформовані клітини можуть рости нескінченно).

Рак зараз лікують за допомогою однієї або комбінації з трьох типів терапій: хірургічне втручання, сч радіаційне опромінення і хіміотерапія. Хірургічне втручання включає видалення ураженої тканини. Хірургічне ав втручання є іноді ефективним при видаленні пухлин локалізованих в певних місцях, наприклад, в груді, товстій кишці і шкірі, ії воно не може бути використано при лікуванні пухлин розташованих в інших місцях, таких як о хребет, і при лікуванні розосереджених неопластичних станів, таких як лейкемія. ча

Хіміотерапія включає руйнування реплікації клітини або метаболізму клітини. Вона використовується найбільш часто при лікуванні раку грудей, легені і раку яєчників. в

Шкідливий вплив системної хіміотерапії, що використовується при лікуванні неопластичного захворювання, є найбільш страшним для пацієнтів, що лікуються від раку. Нудота і блювота є найбільш загальним і тяжкими сторонніми проявленнями. Іншими шкідливими сторонніми проявленнями є цитопенія, інфекція, кахесія, мукозит « у пацієнтів, що одержують високі дози хіміотерапевтичних препаратів для лікування спинного мозку або З 50 радіаційної терапії; алопеція (втрата волосся); шкірні ускладнення |дивіться: М. О. Абеїйоїї, еї аї!: АІоресіа с апа Сшапеоиз Сотріїсайопе. Р.755-56. В АБеїой, М. О., Агптйаде, 9. О., Гісйіег, А. 5., і Міедегпибег, 4.

Із» Е. «едв) Сіїпіса! Опсо|оду. Спигспій У міповіоп, М.У., 1992, для шкірних реакцій на хіміотерапевтичні агенти, такі як прурити, кропивниця і ангіоедема; неврологічні ускладнення; легеневі і серцеві ускладнення у пацієнтів, що одержують радіаційну терапію або хіміотерапію; і репродуктивні і ендокринні ускладнення.

Сторонні появлення внаслідок хіміотерапії значно впливають на якість життя пацієнту і можуть драматично 7 впливати на згоду пацієнта на лікування. -І Крім того, шкідливі сторонні проявлення викликані хіміотерапевтичними агентами зазвичай обумовлені дозолімітуючої токсичністю (ОТ) при веденні цих лікарських засобів. Наприклад, мукозит, є одним з основних о факторів дозолімітуючої токсичності для ряду протиракових агентів, включаючи антиметаболітичні цитотоксичні ав! 20 агенти 5-Е), метотрексан і протиракові антибіотики, такі як доксорубіцин. Більшість з цих хіміотерапевтичновикликаних сторонніх ефектів, якщо тяжкі, можуть призводити до госпіталізації або потребують о лікування з використанням анальгетиків для пригнічення болю.

Шкідливі сторонні проявлення викликані хіміотерапевтичними агентами і радіаційною терапією набувають основної важливості для клінічного керівництва пацієнтів хворих на рак. 25 На даний час, вчені розглядають можливість лікування раку шляхом використання антиангіогенних агентів.

ГФ) Ангіогенез, як припускають, є механізмом за допомогою якого пухлини одержують необхідні поживні речовини для росту і метастазування до інших місць в тілі. Антиангіогенні агенти перетинаються з цими процесами і о руйнують або контролюють пухлини.

Наприклад, (патент 5 5,854,205) описує виділений ендостатиновий протеїн, що є інгібітором ендотеліальної 60 проліферації клітини і ангіогенезу; (патент И5 5,843,925| описує спосіб інгібування ангіогенезу і ендотеліальної проліферації клітини використовуючи 7-(заміщений аміно|-9-(заміщений гліцилоамідо|-6-деметил-б-деокситетрациклін; (патент 5 5,861,372| описує використання |інгібітору ендотеліальної агрегації, ангіостатин, і він використовується при інгібуванні ангіогенезу, |РСТ/3897/00650) описує використання похідних цинноліну для одержання антиангіогенного ефекту і/або для зменшення бо васкулярної проникності; Таі-Ріпд, ЮО. описує потенційні антиангіогенні терапії, (дивіться Тгтепаз РВіагтасо).

Зсі. 16, Мо.2, 57-66, 1995; Іоде, Н. ей а. описує синергізм між антиангіогенними інтегрин альфа М антагоністами і протеїном злиття антитіло-цитокін, що полягає у зупинення спонтанного метастазу пухлини, дивіться Ргос. Маї. Асай. Зсі. ОБА., 96 (4), 1591-1596, 1999; Сіаппі5, А. еї аїЇ) описує антагоністи інтегріну і інші молекулярні сполуки, як інгібітори ангіогенезу, дивіться Мем агиде іп сапсег (Негару.

Апдем. Спет. Іпіїі. Ей. Епоі. 36(6), 588-590, 1997; УМО 97/41,844| описує спосіб, що використовує комбінації ангіостатичних сполук для попередження і/абол ікування неоваскуляризації у людей; (МУО 98/22,101) описує спосіб, що використовує (піразол-1-іл|Ісензолсульфонаміди, як антиангіогенні агенти; і (патент ОБ 5,792,783) описує використання З-гетероарил-2-індолінону, що є інгібіторами протеїнкінази і антиангіогенними агентами, 7/о для лікування різних видів раку.

Нещодавно було повідомлено, що лікування колоректального раку з використанням селективного інгібітору циклооксигенази-2, особливо ЦелекоксибФ), в комбінації з інгібітором АКТ-2, особливо ХерцептиномФ), є більш ефективним, ніж коли кожен з агентів використовується окремо. Відповідно, існує потреба в дослідженні нових комбінацій хіміотерапевтичних агентів, що можуть бути використані разом, що є більш ефективними, ніж коли 7/5 Використовуються окремо. Представлений винахід задовольняє цю потребу.

В одному з аспектів, цей винахід стосується способу лікування або попередження раку, що включає введення ссавцю, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості: інгібітору протеїнкінази формули (1): с що Ех З й зр пад й

Я Пд В. о М ки че: Ї ген Іжа ри сов КК й с 30 Є | | р о з М ши и й 35 я ча я ге ще я

Си Ве янях в якій: ч 40 К вибирають з о групи, що містить водень, піперазин-1-ілметил, 4-метилпіперазин-1-ілметил, З с піперидин-1-ілметил, 2-гідроксиметилпіролідин-1-ілметил, 2-карбоксипіролідин-1-ілметил і піролідин-1-ілметил; з» в! вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл, заміщений циклоалкіл, арил, гетероарил, гетероаліцикліл, гідрокси, алкокси, -«С(О)МАЗЕУ, -МВ'ЗВЯ, «СОВИ ї «сно; 45 2 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, - алкокси, ціано, -МЕ 3814, «МЕ ЗсС(ОВ, -С(ОВ 5, арил, гетероарил і -5(02МА ЗВ;

ВЗ вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, їх алкокси, арил, гетероарил, -МЕ З, «МА З5(0)5877, -5(02МВ 3874, «МЕ ЗС(ОВ Я, «МЕ ЗС(ФООВ Я, (СО ї о -502879; о 20 7 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, гідрокси, алкокси і -МВЗАЯ;

В? вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9; їз 25 вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9;

В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл, арил, гетероарил, -С(О)К 1 і -С(СО)В 9, при 55 умові, що коли К є воднем, тоді, принаймні, один з о, Вб є -С(ОВ 0; або їв можуть об'єднані утворювати групу, що вибирають з групи, яка містить -(СНо)д-, ««СНа)в- і ««СНа)в-;

ІФ) 28 ї Е? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл і арил; де ВО вибирають з групи, що містить гідрокси, алкокси, арилокси, -М(К")(алкілен),2 2 де алкіленова група є, необов'язково, заміщеною гідроксигрупою, і -МЕ ЗВ; 60 В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл і заміщений алкіл;

В"? вибирають з групи, що містить -МЕ'ЗБ'Я, гідрокси, -С(О)К"У, арил, гетероарил, -М'(0О-873874, -ЩОВ "У ї -ЧНС(ОВ 8 (де "8 є алкілом, заміщеним алкілом, галогеналкілом або аралкілом);

ВЗ Її В" незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл, нижчий алкіл заміщений 65 гідроксиалкіламіно, ціансалкіл, цикл оал кіл, заміщений циклоалкіл, арил і гетероарил; або

ВЗ ЇВ" можуть об'єднані утворювати гетероциклічну групу;

В"? вибирають з групи, що містить водень, гідрокси, алкокси і арилокси;

В" вибирають з групи, що містить гідрокси, -МЕ 387, «(ОВ 5, ї «(ОМА ЗВ;

В" вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл, арил і гетероарил;

ВЗ вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, арил, аралкіл, гетероарил або гетероаралкіл; і п і г є, незалежно, 1, 2, З або 4; в комбінації з інгібітором циклооксигенази; або його фармацевтично прийнятною сіллю.

Переважно, інгібітор протеїнкінази формули (І), що використовується в комбінації з селективним 70 інгібітором циклооксигенази-2, що вибирають з групи, яка містить: (І) сполуку формули (І):

Кур е зр не 5

ШлвлЕєке ях БЕ щи ях БИ па ди ни й ов я рен дай ля ий: я б ви рат; Кт и Й

Кути Б шій : ден й ях КІН В рр: :. сг Нр Б нг дн з іх тв . ЖЕ

Бе ї и са "Ж ще. щі - сч ре З ' ЕЕ. 2 5 З ке що це те Сех ЕК 8. :в я о зн оС 00000 гр о

Лк Бі СЯ Ще я Ес МНК ри їв с вк Ме ач ге. с не Е сан жов е-яя а Ще

Сомом Мария но с зо в якій:

С вибирають з групи, що містить 0, 5, і -МК2-, де КЗ? є воднем або алкілом; | «в)

В ба вибирають з групи, що містить водень і арил; о

Ва вибирають з групи, що містить карбоксил, алкіл, аралкіл, амінокарбоніл, алкілсульфоніламінокарбоніл і алкоксикарбоніл; -

Ва вибирають з групи, що містить галогеналкіл, алкіл, аралкіл, циклоалкіл і арил, необов'язково, ї- заміщений одним або більшою кількістю радикалів, що вибирають з алкілтіо, нітро і алкілсульфонілу; і

Ва є одним або більшою кількістю радикалів, що незалежно вибирають з групи, яка містить водень, галоген, алкіл, аралкіл, алкокси, арилокси, гетероарилокси, аралкілокси, гетероаралкілокси, галогеналкіл, « галогеналкокси, алкіламіно, ариламіно, аралкіламіно, гетероариламіно, гетероарилалкіламіно, нітро, аміно, аміносульфоніл, алкіламіносульфоніл, ариламіносульфоніл, гетероариламіносульфоніл, аралкіламіносульфоніл, т с гетероаралкіламіносульфоніл, гетероциклосульфоніл, алкілсульфоніл, гідроксиарилкарбоніл, нітроарил, ч» необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, аралкілкарбоніл, гетероарилкарбоніл, " арилкарбоніл, амінокарбоніл і алкілкарбоніл; або вза разом з кільцем Е утворюють нафтильне кільце; або (ї) сполуку формули (ІІ): -і - уянее. фі шо і КЕДИ НЯ о вто дя дика КТ др НК («в) КАН ОС де и НИ - За сі се рт ЯН 9 "з Я Же кун нія Лера. тен

Вадкооовнихх сети а НА НН

ПИТИ СН т ' й ще ЗІ; о НЯ г пе іме) в якій: 60 А вибирають з групи, що містить частково ненасичені або ненасичені гетероциклічні і частково ненасичені або ненасичені карбоциклічні кільця;

В"? вибирають з групи, що містить гетероцикліл, циклоалкіл, циклоалкеніл і арил, де К"? є, необов'язково, заміщеним при придатному положенні одним або більшою кількістю радикалів, що незалежно вибирають з алкілу, галогеналкілу, ціано, карбоксилу, алкоксикарбонілу, гідроксилу, гідроксиалкілу, галогеналкокси, 65 аміно, алкіламіно, ариламіно, нітро, алкоксиалкілу, алкілсульфінілу, галогену, алкокси і алкілтіо; 22? вибирають з групи, що містить метил і аміно; і

ВЗ вибирають з групи, що містить радикал, що вибирають з водню, галогену, алкілу, алкенілу, алкінілу, оксо, ціано, карбоксилу, ціаноалкілу, гетероциклілокси, алкілокси, алкілтіо, алкілкарбонілу, циклоалкілу, арилу, галогеналкілу, гетероциклілу, циклоалкенілу, аралкілу, гетероциклілалкілу, ацилу, алкілтіоалкілу, гідроксиалкілу, алкоксикарбонілу, арилкарбонілу, аралкілкарбонілу, аралкенілу, алкоксиалкілу, арилтіоалкілу, арилоксиалкілу, аралкілтіоалкілу, аралкоксиалкілу, алкоксиаралкоксиалкілу, алкоксикарбонілалкілу, амінокарбонілу, амінокарбонілалкілу, алкіламінокарбонілу, М-ариламінокарбонілу,

М-алкіл-М-ариламінокарбонілу, алкіламінокарбонілалкілу, карбоксиалкілу, алкіламіно, М-ариламіно,

М-аралкіламіно, М-алкіл-М-аралкіламіно, М-алкіл-М-ариламіно, аміноалкілу, алкіламіноалкілу, 70 М-ариламіноалкілу, М-аралкіламіноалкілу, М-алкіл-М-аралкіламіноалкілу, М-алкіл-М-ариламіноалкілу, арилокси, аралкокси, арилтіо, аралкілтіо, алкілсульфінілу, алкілсульфонілу, аміносульфонілу, алкіламіносульфонілу,

М-ариламіносульфонілу, арилсульфонілу і М-алкіл-М-ариламіносульфонілу; або її фармацевтично прийнятну сіль.

Переважно, згадані вищі сполуки вводять у вигляді фармацевтичної композиції, що містить один або більшу 75 Кількість згаданих вище сполук і фармацевтично прийнятний екціпієнт. Особливо, терапевтичні агенти цього винаходу можна сформувати як окремі композиції, які вводяться в один і той же час або в різний час, або терапевтичні агенти можуть складати загальну композицію.

Способи представленого винаходу корисні для лікування або попередження неоплазії, включаючи: акральна лентигенозна меланома, актинічний кератоз, аденокарцинома, аденоїдноцистітна карцинома, аденома, аденосаркома, аденосквамозна карцинома, астроцитарна пухлина, карцинома бартолінової залози, карцинома базальних клітин, карциноми бронхіальних залоз, капілярні карциноїди, карцинома, карциносаркома, кавернозна, холонгіокарцинома, кондосаркома, папілома/карцинома хоріоїдних сплетень, світлоклітинна карцинома, цистаденома, ендодермальна синусна пухлина, ендометріальна гіперплазія, ендометріальна стромальна саркома, ендометріоїдна аденокарцинома, епендіма, епітелоїд, саркома Евінга, фіброламелярна, фокально Га Вузелкова гіперплазія, гастринома, пухлини ембріону, гліобластома, глюкагонома, гемангібластоми, гемангіоендотеліома, гемангіома, гепатична аденома, гепатичний аденоматоз, гепатоцелюлярна карцинома, і) інсулінома, інтаепітеліальна неоплазія, інтерепітеліальна неоплазія сквамозних клітин, інвазивна карцинома сквамозних клітин, великоклітинна карцинома, лейоміосаркома, лентигозлоякісні меланома, злоякісна меланома, злоякісні мезотеліальні пухлини, медулобластома, медулоепітеліома, меланома, менінгеальна, мезотеліальна, Ге метастатична карцинома, мукоепідермоїдна карцинома, нейробластома, нейроепітеліальна аденокарцинома, вузелкова меланома, овсяно-клітинна карцинома, олігодендрогліальна, остеосаркома, панкреатичний о поліпептид, сосковидна серозна аденокарцинома, шишковидні клітини, пітуїтарні пухлини, плазмацитома, «3 псевдосаркома, легенева бластома, карцинома ниркових клітин, ретинобластома, рабдоміосаркома, саркома, серозна карцинома, мілкоклітинна карцинома, карциноми м'яких тканин, соматостатин-секретуюча пухлина, - сквамозна карцинома, карцинома сквамозних клітин, субмезотеліальна поверхнева генералізована меланома, недиференційована карцинома, увеальна меланома, бородавкова карцинома, віпома, добре диференційована карцинома, і пухлина Вілма.

Способи представленого винаходу забезпечують одну або більшу кількість переваг. Однією з переваг є те, « що композиції, агенти і терапії представленого винаходу призначаються в комбінації з меншою дозою, і те, що доза нижча за дозу. Яка зазвичай використовується при клінічному використанні кожного окремого компоненту. й с Що призначається окремо. й Користь від зниження дози сполук, композицій, агентів і терапій представленого винаходу, що призначаються "» ссавцю полягає у зменшенні дії сторонніх несприятливих проявлень обумовлених вищими дозами. Наприклад, шляхом зниження дози хіміотерапевтичного агенту, такого як метотрексат, знижується частота і складність нудоти і блювоти порівняно з тим, що спостерігається при вищих дозах. Подібні переваги спостерігаються, коли -І інгібітори протеїнкінази представленого винаходу використовуються в комбінації з інгібітором циклооксигенази, зокрема, селективним інгібітором циклооксигенази-2. і Через зменшення виникнення несприятливих проявлень, покращується якість життя пацієнту, що зазнає ав) лікування від раку. Наступними перевагами зменшення виникнення випадків несприятливих проявлень є покращення прийняття пацієнтами лікування, зменшення кількості госпіталізацій, що необхідні для лікування о сторонніх проявлень і зменшення кількості призначаємих анальгетиків, що необхідні для лікування болю з викликаного сторонніми проявленнями.

Іншою перевагою, що спостерігається, є більше інгібування пухлини, коли призначається інгібітор протеїнкінази в комбінації з інгібітором циклооксигенази, переважно селективним інгібітором ЦИКЛООКСИГенази-2, ніж коли ці агенти призначаються окремо.

Представлений винахід також стосується наборів, що містять інгібітор СОХ-2 і інгібітор протеїнкінази

Ф, формули (1). ко Визначення

Якщо не вказано інше, наступні терміни, що використовуються в описі і пунктах формули, мають значення бр приведені нижче: "Алкіл" стосується насиченого аліфатичного вуглеводневого радикалу, що включає нерозгалужені і розгалужені групи з 1-20 атомами вуглецю (коли б не приводилась область числових значень; наприклад "1-20", є встановленим тут, означає, що група, в цьому випадку алкільна група, може містити 1 атом вуглецю, 2 атоми вуглецю, З атоми вуглецю і т.д. до і включаючи 20 атомів вуглецю). Алкільні групи, що містять від 1 до 4 65 атоми вуглецю, відносять до нижчоалкільних груп. Коли згадані нижчоалкільні групи потребують замісники, такі групи відносяться до нижчоалкільних груп. Більш переважно, алкіл група є середньорозмірним алкілом, що має від 1 до 10 атомів вуглецю, наприклад, метил, етил, пропіл, 2-пропіл, н-бутил, ізо-бутил, трет-бутил, пентил і їм подібні. Найбільш переважно, вона є нижчим алкілом, що має 1 - 4 атоми вуглецю, наприклад, метил, етил, пропіл, 2-пропіл, н-бутил, ізо-бутил або трет-бутил і їм подібні. "Заміщений алкіл" означає алкільну групу, як визначено вище, що є заміщеною одним або більшою кількістю, більш переважно одним - трьома, навіть більш переважно одним або двома замісником(ами), що незалежно вибирають з групи, яка містить галоген, гідрокси, нижчий алкокси, арил, необов'язково, заміщений однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, арилокси, необов'язково, заміщений однією або 70 більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, б--ленний гетероарил, що має від 1 до З атомів азоту в кільці, атоми вуглецю в кільці є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, 5--ленний гетероарил, що має від 1 до З гетероатомів, що вибирають з групи, яка містить азот, /5 Кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту в групі є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, 5- або б-ч-ленна гетероаліциклічна група, що має від 1 до 3 гетероатомів, що вибирають з групи, яка містить азот, кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту (якщо присутні) в групі є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які 2о є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, меркапто, (нижчий алкіл)тіо, арилтіо, необов'язково, заміщеним однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, ціано, ацил, тіоацил, О-карбамоїл, М-карбамоїл, О-тіокарбамоїл, М-тіокарбамоїл, С-амідо, М-амідо, нітро,

М-сульфонамідо, З-сульфонамідо, К"95(0)-, К"98(0)2-, -Ч(0)ОВ"2, в'зс(0)0- і-МА"Ук "У, де кВ? незалежно су

Вибирають з групи, яка містить водень, нижчий алкіл, тригалогенметил, (С 3-Св)циклоалкіл, нижчий алкеніл, нижчий алкініл і арил, необов'язково, заміщений однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома о або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси.

Переважно, алкільна група є заміщеною одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з групи, яка містить гідрокси, 5- або б--ленну гетероаліциклічну групу, що має від 1 до З гетероатомів, що вибирають з. су групи, яка містить азот, кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту (якщо присутні) в групі є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно - одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, 5--ленний гетероарил, що має від'до («з

З гетероатомів, що вибирають з групи, яка містить азот, кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту в групі є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які - є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, б--ленний гетероарил, /|ч- що має від 1 до З атомів азоту в кільці, атоми вуглецю в кільці є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю груп, переважно однією, двома або трьома групами, які є, незалежно одна від одної, галогеном, гідрокси, нижчим алкілом або нижчим алкокси, або -МК "ЗВУ, де "8 ії Е"З незалежно вибирають з « групи, яка містить водень, нижчий алкіл. Навіть більш переважно алкільна група є заміщеною одним або двома замісниками, які є, незалежно один від одного, гідрокси, диметиламіно, етиламіно, діетиламіно, дипропіламіно, - с піролідино, піперидино, морфоліно, піперазино, 4-нижчий алкілпіперазино, феніл, імідазоліл, піридиніл, а піридазиніл, піримідиніл, оксазоліл, триазиніл і їм подібні. "» "Циклоалкіл" стосується 3-8 членного вуглецевого моноциклічного кільця, вуглецевого 5-ч-ленно/б--ленно або б--ленно/б--ленно конденсованого біциклічного кільця або багатоциклічного конденсованого кільця ("конденсована" циклічна система означає, що кожне кільце системи має спільну пару атомів вуглецю з іншим -| кільцем системи), де одне або більша кількість кілець може містити один або більшу кількість подвійних - зв'язків, але відсутні кільця, що мають повністю кон'юговану х-електронну систему.

Прикладами, без обмеження, циклоалкільних груп є циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклопентен, (ав) циклогексан, циклогексадієн, адамантан, циклогептан, циклогептатрієн і їм подібні. о 50 "Заміщений циклоалкіл" означає циклоалкільну групу, як визначено вище, що є заміщеною одним або більшою кількістю, більш переважно одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з групи, яка

І» містить нижчий алкіл, тригалогеналкіл, галоген, гідрокси, нижчий алкокси, арил, необов'язково заміщений однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий алкокси, арилокси, необов'язково заміщений однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий о алкокси, б-членний гетероарил, що має від 1 до З атомів азоту в кільці, атоми вуглецю в кільці є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно іме) одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий алкокси, 5--ленний гетероарил, що має від 1 до З гетероатомів, що вибирають з групи, яка містить азот, кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту групи є, 60 необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий алкокси, 5- або б--ленна гетероаліциклічна група, що має від 1 до З гетероатомів, що вибирають з групи, яка містить азот, кисень і сірку, атоми вуглецю і азоту (якщо присутні) в групі є, необов'язково, заміщеними однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий алкокси, меркапто, (нижчий 65 алкіл)тіо, арилтіо, необов'язково заміщений однією або більшою кількістю, переважно однією або двома групами, незалежно одна від одної, галоген, гідрокси, нижчий алкіл або нижчий алкокси, ціано, ацил, тіоацил,

О-карбамоїл, М-карбамоїл, О-тіокарбамоїл, М-тіокарбамоїл, С-амідо, М-амідо, нітро, М-сульфонамідо, 8-сульфонамідо, К"95(0)-, К198(0)5-, -С(ФОВ 8, в'Зс(0)0- і -МА "ЗЕ "9 є визначеними вище. "Алкеніл" стосується нижчої алкільної групи, як тут визначено, яка складається з, принаймні, двох атомів Вуглецю і, принаймні, одного вуглець-вуглецевого подвійного зв'язка. Прикладами є, але не обмежується, етеніл, 1-пропеніл, 2-пропеніл, 1-, 2-, або 3-бутеніл і їм подібні. "Алкініл" стосується нижчої алкільної групи, як тут визначено, яка складається з, принаймні, двох атомів вуглецю і, принаймні, одного вуглець-вуглецевого потрійного зв'язка. Прикладами є, але не обмежується, етиніл, 1-пропініл, 2-пропініл, 1-, 2- або З-бутиніл і їм подібні. 70 "Арил" стосується вуглецевих моноциклічних або конденсованих поліциклічних (тобто, кільця які мають спільні сусідні атомами вуглецю) груп з 1 - 12 атомами вуглецю, що мають повністю кон'юговану л-електронну систему. Прикладами, без обмеження, арильних груп є феніл, нафталініл і антраценіл. Арильна група може бути заміщена або незаміщена. Коли заміщена, заміщувальних груп переважно одна або більше, більш переважно одна, дві або три, навіть більш переважно одна або дві, і їх незалежно вибирають з групи, яка містить нижчий 75 алкіл, тригалогеналкіл, галоген, гідрокси, нижчий алкокси, меркапто, (нижчий алкіл)тіо, ціано, ацил, тіоацил,

О-карбамоїл, М-карбамоїл, О-тіокарбамоїл, М-тіокарбамоїл, С-амідо, М-амідо, нітро, М-сульфонамідо,

З-сульфонамідо, В'З5(0)-, В'88(0)5-, -С(О)ОВ"З, в'Зс(0)0-, і -Мв'ЗВ"З, з ВЗ Її В"? визначеними вище.

Переважно, арильна група є, необов'язково, заміщеною одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з галогену, нижчого алкілу, тригалогеналкілу, гідрокси, меркапто, ціано, М-амідо, моно або діалкіламіно, карбокси або М-сульфонамідо. "Гетероарил" стосується моноциклічного або конденсованого кільця (тобто, кільця мають спільну сусідню пару атомів) з 5-12 кільцевими атомами, що містить один, два або три кільцевих гетероатоми, які вибирать з М,

О або 5, атоми що залишились є С, і, на додаток, що має повністю кон'юговану л-електронну систему.

Прикладами, без обмеження, незаміщених гетероарильних груп є пірол, фуран, тіофен, імідазол, оксазол, тіазол,ї СМ піразол, піридин, піримідин, хінолін, ізохінолін, пурин і карбазол. Гетероарильна група може бути заміщена о або незаміщена. Коли заміщена, заміщувальних груп переважно одна або більше, більш переважно одна, дві або три, навіть більш переважно одна або дві, і їх незалежно вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, тригалогеналкіл, галоген, гідрокси, нижчий алкокси, меркапто, (нижчий алкіл)тіо, ціано, ацил, тіоацил,

О-карбамоїл, М-карбамоїл, О-тіокарбамоїл, М-тіокарбамоїл, С-амідо, М-амідо, нітро, М-сульфонамідо, ЄМ 8-сульфонамідо, К"88(0)-, К"90)5-, -ОЧ(0)ОНВ 8, В"Зс(0)0- і -МА "ЗВ 9, з К"8 ї КЗ визначеними вище. Переважно, су гетероарильна група є, необов'язково, заміщена одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з галогену, нижчого алкілу, тригалогеналкілу, гідрокси, меркапто, ціано, М-амідо, моно або діалкіламіно, о карбокси або М-сульфонамідо. М

Тетероаліцикліл" стосується моноциклічної або конденсованої кільцевої групи, що має кільце(я) з 5-9 кільцевими атомами, де один або два кільцевих атоми є гетероатомами, що вибирають з М, О або 5(О)» (де п є - цілим числом від 0 до 2), кільцеві атоми, що залишились, є С Кільця також можуть мати один або більшу кількість подвійних зв'язків. Однак, кільця не мають повністю кон'юговану х-електронну систему. Прикладами, без обмеження, незаміщених гетероаліциклічних груп є опіролідино, піперидино, піперазино, морфоліно, « тіоморфоліно, гомопіперазино і їм подібні. Гетероаліциклічне кільце може бути заміщеним або незаміщеним. З

Коли заміщена, заміщувальних груп переважно одна або більше, більш переважно одна, дві або три, навіть с більш переважно одна або дві, і їх незалежно вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, тригалогеналкіл,

Із» галоген, гідрокси, нижчий алкокси, меркапто, (нижчий алкіл)тіо, ціано, ацил, тіоацил, О-карбамоїл,

М-карбамоїл, О-тіокарбамоїл, М-тіокарбамоїл, С-амідо, М-амідо, нітро, М-сульфонамідо, 5-сульфонамідо, в'З85(0)-, в'З8(0)5-, -С(0ОВ'Я, в'бс(0)0- і -МК'9В"У, з в'З Її в'З як визначено вище. Переважно, -1 15 гетероаліциклічна група є, необов'язково, заміщеною одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з галогену, нижчого алкілу, тригалогеналкілу, гідрокси, меркапто, ціано, М-амідо, моно або діалкіламіно, -І карбокси або М-сульфонамідо. о Переважно, гетероаліциклічна група є, необов'язково, заміщеною одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з галогену, нижчого алкілу, тригалогеналкілу, гідрокси, меркапто, ціано, М-амідо, моно о 50 або діалкіламіно, карбокси або М-сульфонамідо. "з Тетероцикл" означає насичений циклічний радикал з 3-8 кільцевими атомами, в якому один або двома кільцеві атоми є гетероатомами, що вибирають з М, О або 5(0), (де п є цілим числом від 0-2), атоми, що залишились, є С, де один або два атоми С можуть, необов'язково, бути замінені карбонільною групою.

Гетероциклільне кільце може бути, необов'язково, заміщеним, незалежно, одним, двома або трьома 59 замісниками, що вибирають з необов'язково заміщеного нижчого алкілу (заміщений 1 або 2 замісниками, що

ГФ) незалежно вибирають з карбокси або естеру), галогеналкілу, ціаноалкілу, галогену, нітро, ціано, гідрокси, 7 алкокси, аміно, моноалкіламіно, діалкіламіно, аралкілу, гетероаралкілу, -СОК (де К є алкілом) або -СООК (де К є воднем або алкілом). Більш особливо термін гетероцикліл включає, але не обмежується, тетрагідропіраніл, 2,2-диметил-1,3-діоксолан, піперидино, М-метилпіперидин-3-іл, піперазине М-метилпіролідин-З-іл, З-піролідино, бо морфоліно, тіоморфоліно, тіоморфоліно-1-оксид, тіоморфоліно-1,1-діоксид, 4-етилоксикарбонілпіперазино,

З-оксопіперазино, 2-імідазолідон, 2-піролідинон, 2-оксогомопіперазино, тетрагідропіримідин-2-он і їх похідні.

Переважно, гетероциклільна група є, необов'язково, заміщеною одним або двома замісниками, що незалежно вибирають з галогену, нижчого алкілу, нижчого алкілу заміщеного карбокси, естером, гідрокси, моно або діалкіламіно. бо "Гідрокси" стосується -ОН групи.

"Алкокси" стосується і -О-(алкіл), і -О-(циклоалкіл) групи. Прикладами є, але не обмежується, наприклад, метокси, етокси, пропокси, бутокси, циклопропілокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси і їм подібні. "Арилокси" стосується і -О-арил, і -О-гетероарил групи, як тут визначено. Характерними прикладами є, але не обмежується, фенокси, піридинілокси, фуранілокси, тієнілокси, піримідинілокси, піразинілокси і їм подібні, і їх похідні. "Меркапто" стосується -ЗН групи. "Алкілтіо" стосується і -5-алкіл, і -З-циклоалкіл групи. Характерними прикладами є, але не обмежується, наприклад, метилтіо, етилтіо, пропілтіо, бутилтіо, циклопропілтіою, циклобутилтіо, циклопентилтіо, 70 циклогексилтіо і їм подібні. "Арилтіо" стосується і -5-арил, і -З-гетероарил групи, як тут визначено. Характерними прикладами є, але не обмежується, фенілтіо, піридинілтіо, фуранілтіо, тієнілтіо, піримідинілтіо і їм подібні, і їх похідні. "Ацил" стосується -С(0)-К" групи, де К" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, тригалогенметил, циклоалкіл, арил, необов'язково, заміщений одним або більшою кількістю, переважно одним, /5 двома або трьома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, тригалогенметил, нижчий алкокси, галоген і -МА "9879, гетероарил (приєднаний через вуглець кільця), необов'язково, заміщений одним або більшою кількістю, переважно одним, двома або трьома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, тригалогеналкіл, нижчий алкокси, галоген і -МК'8З2'З і гетероаліцикліл (приєднаний через вуглець кільця), необов'язково, заміщений одним або більшою кількістю, переважно одним, двома або трьома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, тригалогеналкіл, нижчий алкокси, галоген і -МК8рД 79, Характерними ацильними групами є, але не обмежується, ацетил, трифторацетил, бензоїл і їм подібні. "Альдегід" стосується ацильної групи, в якій К" є воднем. "Тісацил" стосується -С(5)-К" групи, з К" як тут визначено. "Естер" стосується -С(0)0О-К" групи з К" як тут визначено, за винятком того, що К" не може бути воднем. с 29 "Ацетил" стосується -С(О)СН» групи. о "Галоген" стосується фтору, хлору, брому або йоду, переважно фтору або хлору. "Тригалогенметил" стосується -СХ з групи, в якій Х є о галогеном, як тут визначено. "Тригалогенметансульфоніл" стосується ХзС5(-О)2-груп з Х як визначено вище. "Ціано" стосується -С-М групи. "Метилендіокси" стосується -«ОСН»2О-, де два атоми кисню є зв'язаними з сусідніми атомами вуглецю. с "Етилендіокси" стосується -ОСНОСН»О-, де два атоми кисню є зв'язаними з сусідніми атомами вуглецю. о "З-сульфонамідо" стосується -5(0)2МВ 989 групи, з КЗ ї КЗ як тут визначено. "М-сульфонамідо" стосується -МА З5(0328 72 групи, з ВЗ | 2"? як тут визначено. о "О-карбамоїл" група стосується -ОС(О)МЕ ЗЕ" групи, з КЗ ї ВЗ як тут визначено. в. "М-карбамоїл" стосується В ЗОС(О)МА "Я групи, з К"З ї КУ як тут визначено. "О-тіокарбамоїл" стосується р -ос(8)Ме 8 79-групи, з ВЗ ї Е "9 як тут визначено. "М-тіокарбамоїл" стосується В ЗОС(5)МВ "У-групи, з ВЗ їв як тут визначено. "Аміно" стосується -МЕ "9879 групи, в якій КЗ ії К"? обидва є воднями. "С-амідо" стосується -СЩ(ОМв 879 групи з "8 ї КЗ як тут визначено. "М-амідо" стосується В "ЗС(СО)МЕ "У-групи, з ВЗ і "9 як тут « визначено. "Нітро" стосується -МО» групи. "Галогеналкіл" означає алкіл, переважно нижчий алкіл як визначено вище, що є заміщеним одним або З с більшою кількістю однакових або різних атомів галогену, наприклад, -СНоСІ, -СЕз, -«СНЬСЕ», -СНоССІ» і їм подібні. "» "Аралкіл" означає алкіл, переважно нижчий алкіл, як визначено вище, який є заміщеним арильною групою, як " визначено вище, наприклад, -СНофеніл, -«СНо)»феніл, -««"СНо)зфеніл, СНЗСН(СНУЗ)СНофеніл і їм подібні і їх похідні. "Гетероаралкіл" означає алкіл, переважно нижчий алкіл, як визначено вище, який є заміщеним гетероарилом, наприклад, -СНопіридиніл, -«СНо)»піримідиніл, -«(СНо)зімідазоліл, і їм подібні і їх похідні. - "Моноалкіламіно" означає радикал -МНК, де К є незаміщеним алкілом або циклоалкілом, як визначено вище, -1 наприклад, метиламіно, (1-метилетил)аміно, циклогексиламіно і їм подібні. "Діалкіламіно" означає адикал -МКК, де кожен К є, незалежно, незаміщеним алкілом або циклоалкілом, як о визначено вище, наприклад, диметиламіне діетиламіно, (1-метилетил)етиламіно, циклогексилметиламіно, о 50 циклопентилметиламіно і їм подібні. "Ціаноалкіл" означає алкіл, переважно нижчий алкіл, як визначено вище, який є заміщеним 1 або 2 о) ціаногрупами. "Необов'язковий" або "необов'язково" означає, що в подальшому описана подія або умова може але завжди мати місце, Її що опис включає випадки, коли подія або умова має місце і випадки, коли вона відсутня. 255 Наприклад, "гетероцикльна група, необов'язково, заміщена алкільною групою" означає, що алкіл може бути

ГФ! присутнім або ні, і опис включає ситуації, коли гетероцикльна група є заміщеною алкільню групою і ситуації, коли гетероциклільна група не є заміщеною алкільною групою. о Терміни "2-індолінон", "індолін-2-он" і "2-оксиїндол" використовуються почерзі стосовно молекули, що має хімічну структуру: 60 б5 ри тя сука зва сонний сов си як Ге ; ін хв те Б я і й |! й в стр йику

Е РК З кове уд з де ших снгугитьсм; ВЕ ЗА

Яке що ЕЕ жи шетя "ре з й дня НУ сн коти ЕМ кьЯ ен ай ЖЕ рі ніх БЕ й Я 70 Ж пе ках в В

Термін "пірол" стосується молекули, що має хімічну структуру: сх СВ

І шк соя одеса двргдколсвя: тя я; хв и Я 5 я дих о я п: т тн сни о Що іх КИ с ря ся

З

КК

Термін "пірол заміщений 2-індолінон" і "З-піроліденіл-2-індолінон" використовуються по черзі стосовно хімічної сполуки, що має загальну формулу показану на Формулі (1). сч зо Сполуки, що мають однакову молекулярну формулу, але різну природу і послідовність зв'язування її атомів або розташування їх атомів у просторі називаються "ізомерами". Ізомери, що відрізняються розташуванням їх (ав) атомів у просторі називаються "стереоізомерами". о

Стереоізомери, що не є дзеркальними відображеннями один одного називаються "діастереомерами", а такі, що не співпадають при накладанні дзеркальних відображень називаються "енантіомерами". Коли сполука має ї- асиметричний центр, наприклад, до нього приєднано чотири різні групи, можливе існування пари енантіомерів. м

Енантіомер можна охарактеризувати за допомогою абсолютної конфігурації його асиметричного центру і описуються за допомогою правила К- і З-послідовності Кана і Прелога, або за допомогою способу в якому молекула обертає площину поляризованого світла і позначаються як правообертаючий або лівообертаючий (тобто, як (ж) або (-)-ізомери відповідно). Хіральна сполука може існувати як або індивідуальний ізомер або « дю як їх суміш. Суміш, що містить еквівалентні кількості енантіомерів, називається "рацемічною сумішшю". з с Сполуки цього винаходу можуть мати один або більшу кількість асиметричних центрів; такі сполуки можуть тому одержуватись як індивідуальні (К)- або (5)-стереізомери або як їх суміші. Наприклад, якщо ЕВ 9 замісник в :з» сполуці формули (І) є 2-гідроксиетилом, тоді атом вуглецю, до якого приєднана гідроксигрупа є асиметричним центром і тому сполука формули (І) може існувати як (К)- або (5)-стереоізомер. Якщо не вказано інше, опис або назви окремих сполук в описі і пунктах розуміють під собою обидва окремі енантіомери і їх суміші, рацемічні - або інші. Способи визначення стереохімії і розділення стереоізомерів добре відомі в цій галузі (дивіться

Частину 4 "Введення в органічну хімію", 4-те видання Дж. Марч, Джон Вілі енд Сане, Нью Йорк, 1992). - Сполуки представленого винаходу можуть проявляти явища таутомерії і структурної ізомерії. Наприклад, о сполуки формули (І) описані тут можуть приймати Е або 7 конфігурацію навколо подвійного зв'язку, що приєднує 2-індоліноновий замісник до пірольного замісника або вони можуть бути сумішшю Е і 7. Цей винахід охоплює («в будь-які таутомерні або структурні ізомерні форми і їх суміші, які проявляють здатність модулювати РТК, СТК

Кз і/або 5ТК активність і не обмежуються будь-якою одною таутомерною або структурною ізомерною формою.

Термін "фармацевтична композиція" стосується суміші одного або більшої кількості сполук описаних тут, або її фізіологічнол/фармацевтично прийнятних солей або проліків, з іншими хімічними компонентами, такими як фізіологічно/фармацевтично прийнятні носії і екціпієнти. Призначенням фармацевтичної композиції є полегшення введення сполуки в організм. (Ф) Сполуки представленого винаходу також можуть діяти як пролікарська форма. Вираз "пролікарська форма"

ГІ стосується агенту, який перетворюється у вихідний лікарський засіб іп мімо. Пролікарські засоби часто є корисними оскільки, в деяких ситуаціях, їх легше ввести ніж вихідний лікарський засіб. Вони можуть, бр наприклад, бути біодоступними при оральному введенні, в той час як вихідний лікарський засіб ні.

Пролікарський засіб також може мати кращу розчинність в фармацевтичних композиціях ніж вихідний лікарський засіб. Прикладом, без обмеження, пролікарського засобу буде сполука представленого винаходу, яка вводиться як естер ("пролікарський засіб") для полегшення подолання клітинної мембрани, де розчинність у воді є небажаною для рухливості, але потім метаболітично гідролізує у карбонову кислоту, діючи з іншого боку 65 клітини, де розчинність у воді є корисною.

Наступним прикладом пролікарського засобу може бути короткий поліпептид, наприклад, без обмеження,

2-140 амінокислотний поліпептид, приєднаний через термінальну аміногрупу до карбоксигрупи сполуки цього винаходу, де поліпептид гідролізується або метаболізується іп мімо з вивільненням активної сполуки.

Пролікарські форми сполуки формули (І) знаходяться в межах цього винаходу.

Крім того, зрозуміло, що сполука формули (І) буде метаболізувати під дією ферментів в тілі організму, такого як людина утворюючи метаболіт, що може модулювати активність протеїнкіназ. Такі метаболіти знаходяться в межах представленого винаходу.

Як тут використовується, "фізіологічно/фармацевтично прийнятний носі" стосується носія або розріджувача, що не спричиняє значного подразнення організму і не впливає на біологічну активність і властивості сполуки, 7/0 що вводиться.

Вираз "фармацевтично прийнятний екціпієнт" стосується інертного субстрату, що додається до фармацевтичної композиції для наступного полегшення введення сполуки. Прикладами, без обмеження, екціпієнтів є карбонат кальцію, фосфат кальцію, різні цукри і типи крохмалю, похідні целюлози, желатин, рослинні олії і поліетиленгліколі.

Як тут використовується, термін "фФармацевтично прийнятна сіль" стосується тих солей, які зберігають біологічну активність і властивості вихідної сполуки. Такими солями є: () кислотноадитивна сіль, яка утворюється в реакції вільної основи вихідної сполуки з неорганічними кислотами, такими як хлорводнева кислота, бромводнева кислота, азотна кислота, фосфорна кислота, сірчана кислота і перхлорна кислота і їм подібні, або з органічними кислотами, такими як оцтова кислота, щавлева

Кислота, (0) або (І) яблучна кислота, малеїнова кислота, метансульфонова кислота, етансульфонова кислота, п-толуолсульфонова кислота, саліцилова кислота, винна кислота, лимонна кислота, бурштинова кислота або малонова кислота і їм подібні, переважно, хлорводневою кислотою або (І )У-яЯблучною кислотою, такі як | -малатна сіль (2-діетиламіноетил)аміду 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1

Н-пірол-3-карбонової кислоти; або с (2) солі утворені, коли кислотний протон присутній в основній сполуці або замінюється іоном металу, наприклад, іоном лужного металу, іоном лужноземельного металу; або координується з органічною основою. і)

Прикладами іонів є алюміній, кальцій, літій, магній, калій, натрій і цинк в їх звичайних валентностях.

Переважними органічними основами є протоновані третинні аміни і четвертинні амонієві катіони, включаючи частково, триметиламін, діетиламін, / М,М'-дибензилетилендіамін, хлорпрокаїн, холін, діетаноламін, с зо етилендіамін, меглумін (М-метилглюкамін) і прокаїн. "Спосіб" стосується методів, засобів, технік і процедур виконання даних задач включаючи, але не о обмежується, тими методами, засобами, техніками і процедурами. Що або відомі, або легко вивести з відомих о методів, засобів, технік і процедур спеціалістами в хімічній, фармацевтичній, біологічній, біохімічній і медичних галузях. - "Лікування" стосується будь-якого процесу, дії, застосування, терапії або їм подібного, де ссавець, ї- включаючи людину, є суб'єктом медичних дій направлених на покращення стану ссавця, безпосередньо або небезпосередньо. Стосовно раку, цей термін просто означає, що ймовірність виживання суб'єкту, що зазнає лікування від раку буде збільшуватись або що один або більша кількість симптомів хвороби зникнуть. Це можна проконтролювати за допомогою затримки появи первинної або вторинної пухлини, уповільнення розвитку « первинної або вторинної пухлини, зменшення розповсюдження первинної або вторинної пухлини, уповільнення з с або зменшення складності вторинних проявлень хвороби, затримки росту пухлини і регресії пухлини, між іншим.

Термін "попередження" включає або попередження появи клінічно очевидної неоплазії в цілому або ;» попередження появи преклінічно очевидної стадії неоплазії у осіб з таким ризиком. Також призначений для охоплення цим визначенням попередження початку виникнення злоякісних клітин або затримки або обернення розвитку дозлоякісних клітин у злоякісні клітини. Цей термін включає профілактичне лікування ризику розвитку -І неоплазії.

Фраза "терапевтично ефективна" призначена для оцінки кількості кожного агенту, що буде забезпечувати ш- покращення складності неопластичного захворювання і частоти виникнення неопластичного захворювання під о час лікування кожним агентом окремо, в той час як вдається уникнути несприятливих сторонніх проявлень, що

Типово асоціюються з альтернативними терапіями. о Фрази "терапевтичний ефект" або "терапевтично ефективна кількість" призначені для оцінки кількості

Ге протиракового агенту необхідного для зняття до деякого ступеня одного або більшої кількості симптомів неоплазія, включаючи, але не обмежується: 1) зменшення кількості ракових клітин; 2) зменшення розміру пухлини; 3) інгібування (тобто, уповільнення до деякого ступеня, переважно зупинку) інфільтрації ракових дв Клітин в оточуючі органи; 3) інгібування (тобто, уповільнення до деякого ступеня, переважно зупинку) метастазів пухлини; 4) інгібування, до деякого ступеня, росту пухлини; 5) зняття або зменшення, до деякого

Ф) ступеня, одного або більшої кількості симптомів обумовлених розладом; і/або б) зняття або зменшення сторонніх ка проявлень обумовлених введенням протиракових агентів.

Фраза "комбінаційна терапія" (або "котерапія") охоплює введення інгібітору протеїнкінази і інгібітору бор циклооксигенази-2 як частини режиму специфічного лікування призначеного для одержання зцілюючого ефекту від співдії цих терапевтичних агентів. Зцілючий ефект комбінації включає, але не обмежується, фармакокінетичну або фармакодинамічну співдію, що є результатом комбінування терапевтичних агентів.

Введення цих терапевтичних агентів в комбінації зазвичай проводять протягом визначеного проміжку часу (зазвичай хвилини, години, дні або тижні в залежності від вибраної комбінації). "Комбінаційна терапія" 65 зазвичай не призначена для охоплення введення двох або більше цих терапевтичних агентів як частини режимів окремих монотерапій, що випадково і довільно утворюють комбінації представленого винаходу. "Комбінаційна терапія" призначена для охоплення введення цих терапевтичних агентів послідовно, тобто, коли кожен терапевтичний агент вводиться в різний час, також як введення цих терапевтичних агентів, або принаймні двох терапевтичних агентів, по суті, одночасно. По суті, одночасне введення може бути здійснене, наприклад, шляхом введення суб'єкту однієї капсули, що має фіксоване співвідношення кожного терапевтичного агенту або декількох окремих капсул кожного з терапевтичних агентів. Послідовне або, по суті, одночасне введення кожного терапевтичного агенту може бути здійснено будь-яким прийнятним шляхом включаючи, але не обмежується, пероральні шляхи, внутрішньовенні шляхи, внутрішньомязові шляхи і безпосередньо абсорбцію через слизову мембрану тканин. Терапевтичні агенти можуть бути введенні тими ж самими шляхами або різними шляхами. 7/0 Наприклад, перший терапевтичний агент вибраної комбінації може бути введений за допомогою внутрішньовенної ін'єкції, в той час як інші терапевтичні агенти комбінації можуть бути введені перорально.

Альтернативно, наприклад, обидва терапевтичні агенти можуть бути введені перорально або обидва терапевтичні агенти можуть бути введенні за допомогою внутрішньовенної ін'єкції. Послідовність в якій вводять терапевтичні агенти не є критичною. "Комбінаційна терапія" також може використовувати введення /5 терапевтичних агентів як описано вище в комбінації з іншими біологічно активними інгредієнтами (такими як, але не обмежується, другий і інший антинеоплатстичний агент) і не медикаментозні терапії (такі як, але не обмежується, хірургічне втручання або радіаційне лікування). Коли комбінаційна терапія включає радіаційне лікування, радіаційне лікування можна проводити в будь-який придатний час, при умові, що досягається зцілення від спільної дії комбінації терапевтичних агентів і радіаційного лікування. Наприклад, в прийнятних випадках, зцілення досягається, коли час між радіаційним лікуванням і введенням терапевтичних агентів досягає днів або навіть тижнів. "Додаткова терапія" включає лікування суб'єкту агентами, що зменшують або виключають побічні проявлення обумовлені комбінаційною терапією представленого винаходу, включаючи, але не обмежується, такими агентами, наприклад, що зменшують токсичну дію протиракових агентів, наприклад, інгібітори ресорбції сч кістками, кардіозахисні агенти; запобігання або зменшення випадків нудоти і блювоти обумовлених хіміотерапією, радіотерапією або операцією; або зменшення випадків інфекції викликаної введенням і) мієлосуспресивних протиракових лікарських засобів.

ПЕРЕВАЖНІ ВТІЛЕННЯ

Хоча в розділі Короткий опис винаходу приведені найширші визначення, деякі сполуки формули (1), (І) і с зо ЧІ) приведені нижче є переважними для використання в представленому винаході.

А. Інгібітор тірозинкінази - сполуки формули (1): о (1) Переважною групою сполук формули (І) є така, в яких В", ВЗ і В" є воднями. ав! (2) Іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких В", В? і В" є воднями. м (3) Іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких ЕК", В2 і ЕЗ є воднями.

Зо (4) Іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких К2, ВЗ і 27 є воднями. ї- (5) Іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких КЕ", К2, ВЗ і 27 є воднями. (6) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких 27, КЗ або В", переважно В? або 25, більш переважно КЗ є -СОВ 9, де КО є «МА (СНО В У, де: «

В" є воднем або нижчим алкілом, переважно воднем або метилом; в с п є 2, З або 4, переважно 2 або 3; і . В"? є -МАЗВ"Я, де КЗЗ Її К" є, незалежно, алкілом, більш переважно нижчим алкілом або КЗ ії К"Я разом "» утворюють групу, що вибирають з -(СНо)л-, -««СНо)в-, ««СНа)»-О-(СНо)»- або -««СНОМ(СНаХСН»)»-, переважно КЗ і К"" є, незалежно, водень, метил, етил, або разом утворюють морфолін-4-іл, піролідин-1-іл, піперазин-1-іл або 4-метилпіперазин-1-іл. ш- Більш переважно, ВЗ або (ко в (6) вище є М-(2-диметиламіноетил)амінокарбонілом, -І М-(2-етиламіноетил)-М-метиламінокарбонілом, М-(З-диметиламінопропіл)амінокарбонілом,

М-(2-діетиламіноетил)амінокарбонілом, М-(З-етиламінопропіл)амінокарбонілом, о М-(З-діетиламінопропіл)амінокарбонілом, З-піролідин-1-іл-пропіламінокарбонілом, о 20 З-морфолін-4-ілпропіламінокарбонілом, 2-піролідин-1-ілетиламінокарбонілом, 2-морфолін-4-ілетиламінокарбонілом, 2-(4-метилпіперазин-1-іл)етиламінокарбонілом, г» 2-(4-метилпіперазин-1-іл)/упропіламінокарбонілом, 2-(3,5-диметилпіперазин-1-іллетиламінокарбонілом або 2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)/пропіламінокарбонілом, навіть більш переважно

М-(2-діетиламіноетил)амінокарбонілом або М-(2-етиламіноетил)амінокарбонілом. (7) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких 27, 29 або В", переважно В? або

ГФ) 25, більш переважно КО є -«СОВ'О, де В'О є «-МАЕ"ЗВ"Я, де БЕ"З є воднем і В" є алкілом, переважно нижчим 7 алкілом заміщеним гідрокси, арилом, гетероарилом, гетероаліциклілом або карбокси, більш переважно метилом, етилом, пропілом або бутилом заміщеним гідрокси, арилом, гетероаліциклілом, таким як піперидин, піперазин, во морфолін і їм подібні, гетероарилом або карбокси. Навіть більш переважно в межах цієї групи (7), ВЕ? або 5 є 2-етоксикарбонілметиламінокарбонілом, карбоксиметиламінокарбонілом, З-гідроксипропіламінокарбонілом, 2-гідроксиетиламінокарбонілом, З-триазин-1-ілпропіламінокарбонілом, триазин-1-ілетиламінокарбонілом, 4-гідроксифенілетиламінокарбонілом, З-імідазол-1-ілпропіламінокарбонілом, піридин-4-ілметиламінокарбонілом, 2-піридин-2-ілетиламінокарбонілом або 2-імідазол-1-ілетиламінокарбонілом. 65 (8) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких 27, КЗ або В", переважно В? або 25, більш переважно КЗ є -СОВ У, де ВО є -МВ (СНІВ У, де:

В" є воднем або алкілом, переважно воднем або метилом; п є 2, З або 4, переважно 2 або 3; і

В"? є -МА"ЗВ"Я, де КЗ Її К"Я разом утворюють гетероцикл, переважно 5, б або 7 членний гетероцикл, що містить карбонільну групу і 1 або 2 атоми азоту. Переважно, о або до є 2-(З-етоксикарбонілметилпіперазин-1-ілетиламінокарбонілом, 2-(3-оксопіперазин-1-ілетиламінокарбонілом, 2-(імідазолідин-1-іл-2-он)етиламінокарбонілом, 2-(тетрагідропіримідин-1-іл-2-он)етиламінокарбонілом, 2-(2-оксопіролідин-1-іл)етиламінокарбонілом, 3-(4-метилпіперазин-1-іл)упропіламінокарбонілом, 3-(З-етоксикарбонілметилпіперазин-1-іл)іпропіламінокарбонілом, 3-(3-оксопіперазин-1-іл)/пропіламінокарбонілом, 70. З-(імідазолідин-1-іл-2-он)пропіламінокарбонілом, 3-(тетрагідропіримідин-1-іл-2-он)пропіламінокарбонілом, 3-(2-оксопіролідин-1-іл)/пропіламінокарбонілом, 2-(2-оксогомопіперидин-1-іл)етиламінокарбонілом або 3-(2-оксогомопіперидин-1-іл)/пропіламінокарбонілом. (9) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких 27, КЗ або В", переважно В? або 2», більш переважно К є -СОВ О, де: т (а) 879 є -МВИ(СНОВ 2, де:

В" є воднем або алкілом, переважно воднем або метилом; п є 2, З або 4, переважно 2 або 3; і

В"? є -МВ ЗВ Я, де КЕ З є воднем і В "7 є ціаноалкілом або -МСОРВУ, де В є алкілом; або (6) 879 є -МАЗВ"Я, де КЗ ії К7Я разом утворюють гетероцикл, що не містить карбонільну групу в кільці.

Переважно, БК? або Кб є 2-(2-ціаноетиламіно)етиламінокарбонілом, 2-(ацетиламіно)етиламінокарбонілом, морфолінокарбонілом, піперидин-1-ілкарбонілом, 2-ціанометиламіноетиламінкарбонілом або піперидин-1-ілкарбонілом. (10) Іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких В? є -СОВ"О, дев'є-МА ЗВ" дев є С воднем і В"7 є нижчим алкілом заміщеним гідрокси, нижчим алкілом заміщеним гідроксиалкіламіно, карбокси або г) -МВ'8ЗБ'З де 8785 її "9 є, незалежно, воднем або нижчим алкілом, більш переважно БК? є 2-Кдіетиламіно)-2-гідроксиетилІ|амінокарбонілом, 2-(М-етил-М-2-гідроксиетиламіно)етиламінокарбонілом, карбоксиметиламінокарбонілом абог-(2-гідроксиетиламіно)етиламінокарбонілом. зо (11) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких К5 є -СОВ"О, де КО є -МА ЗВ, см де ВЗ є воднем і В"7 є нижчим алкілом заміщеним гідрокси, нижчим алкілом заміщеним гідроксиалкіламіно, | «в) карбокси або -МЕ'ЗВ"У, де В'З ії в"? є, незалежно, воднем або нижчим алкілом; більш переважно КУ є о (2-(діетиламіно)-2-гідрокси|етиламінокарбонілом, 2-(М-етил-М-2-гідроксиетиламіно)етиламінокарбонілом, карбоксиметиламінокарбонілом або 2-(2-гідроксиетиламіно)етиламінокарбонілом. ї- (12) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких ВЗ є -СОКО, дев!" є М -МЕ (СНІВ 2, де 72 є -«М'ЄОЗМЕ ЗАВ Я або -ЩМОНАК "З, де В "З і КЕ!" незалежно вибирають з групи, яка містить водень і нижчий о оалкіл, переважно БК? є /2-(М-гідрокси-М-етиламіно)етиламінокарбонілом або 2-ІЇМ'ЄО Со Нв)о|етиламінокарбонілом. « (13) Ще однією іншою переважною групою сполук формули (І) є така, в яких Б 5 є -СОКОО, де КО є - 70 -МЕ (СНІВ 2, де В"? є -М'ЄО)МЕ ЗВ Я або -ЩОНЕ "З, де ВЗ і В"Є незалежно вибирають з групи, яка містить с водень і нижчий о оалкіл, переважно К9У є /2-(М-гідрокси-М-етиламіно)етиламінокарбонілом або ; » 2-ІЇМ'ЄО ХСоНв)г|етиламінокарбонілом. (14) В вищезгаданих переважних групах (6)-(13), коли 2? є -СОВ 9, тоді більш переважними групами сполук є такі, в яких: -| во вибирають з групи, що містить водень і алкіл, переважно водень, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, -1 ізобутил або н-бутил, більш переважно водень або метил; і

В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, гетероарил і -С(О)К 7", де ВК" є гідрокси, алкілом або (ав) арилом, більш переважно воднем, метилом, етилом, ізопропілом, н-, ізо або трет-бутилом, фенілом, бензоїлом, о 50 ацетилом або карбокси, навіть більш переважно метилом, воднем або фенілом. (15) В вищезгаданих переважних групах (6)-(13), коли 2? є -СОВ "У, тоді іншими більш переважними групами о сполук є такі, в яких КЗ ії В" разом утворюють -(СНо)д- (16) В вищезгаданих переважних групах (6)-(13), коли КЗ є -СОВ "У, тоді іншими більш переважними групами сполук є такі, в яких: во вибирають з групи, що містить водень і алкіл, переважно водень, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, (Ф; ізобутил, або н-бутил, більш переважно водень або метил; і ка В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, гетероарил і -С(О)В 1", де ВК" є гідрокси, алкілом або арилом, більш переважно воднем, метилом, етилом, ізопропілом, н-, ізо або трет-бутилом, фенілом, бензоїлом, бор ацетилом або карбокси, навіть більш переважно метилом, воднем або фенілом. (17) В межах згаданих вище переважних і більш переважних груп (6)-(16), навіть більш переважною групою сполук є така, в яких:

В! є воднем, алкілом, -к(оМмееУ, циклоалкілом або арилом, переважно воднем, фенілом, 3,4-диметоксифеніламінокарбонілом, 4-метокси-3-хлорфеніламінокарбонілом, навіть більш переважно воднем 65 або метилом, найбільш переважно воднем;

В? є ціано, воднем, галогеном, нижчим алкокси, арилом або -5(0)МЕ ЗВ", де КЗ є воднем і К"" є воднем,

арилом або алкілом, переважно К? є воднем, хлором, бромом, фтором, метокси, етокси, фенілом, диметиламіносульфонілом, З-хлорфеніламіносульфонілом, карбокси, метокси, аміносульфонілом, метиламіносульфонілом, феніламіносульфонілом, піридин-З-іламіносульфонілом, диметиламіносульфонілом, ізопропіламіносульфонілом, більш переважно воднем, фтором або бромом;

ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкокси, -С(О)В 2, -МЕ ЗС(О)В ", арил, переважно арил, необов'язково, заміщений одним або двома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, галоген або нижчий алкокси, і гетероарил, переважно гетероарил, необов'язково, заміщений одним або двома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, галоген або нижчий алкокси; переважно водень, 70 метокси, карбокси, феніл, піридин-З-іл, 3,4-дихлорфеніл, 2-метокси-5-ізопропілфеніл, 4-н-бутилфеніл,

З-ізопропілфеніл, більш переважно водень або феніл; і В є воднем. (183 Іншою більш переважною групою сполук формули (І) є така, в яких: В! є воднем, алкілом, -С(О)МеЕЗВУ, циклоалкілом або арилом, переважно воднем, 3,4-диметоксифеніламінокарбонілом, 4-метокси-3-хлорфеніламінокарбонілом, навіть більш переважно воднем або метилом, особливо воднем;

В? є ціано, воднем, галогеном, нижчим алкокси, арилом або -5(0)МЕ ЗВ", де КЗ є воднем і К"" є воднем, арилом або алкілом, переважно БК? є воднем, хлором, бромом, фтором, метокси, етокси, фенілом, диметиламіносульфонілом, З-хлорфеніламіносульфонілом, карбокси, метокси, аміносульфонілом, метиламіносульфонілом, феніламіносульфонілом, піридин-З-іламіносульфонілом, диметиламіносульфонілом, ізопропіламіносульфонілом, більш переважно воднем, фтором або бромом; 7 ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкокси, -С(О)К "5, -МЕЗС(0О)8 77, арил, переважно арил, необов'язково, заміщений одним або двома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, галоген або нижчий алкокси, і гетероарил, переважно гетероарил, необов'язково, заміщений одним або двома замісниками, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, галоген або нижчий алкокси; переважно водень, сч 25 метокси, карбокси, феніл, піридин-З-іл, 3,4-дихлорфеніл, 2-метокси-5-ізопропілфеніл, 4-н-бутилфеніл,

З-ізопропілфеніл, більш переважно водень або феніл; і ВЕ є воднем. (8)

В межах вище згаданої переважної групи (18) більш переважною групою сполук є такі, де:

В? є -СОК"О, де К"О є як визначено в розділі Короткий опис винаходу, переважно -МЕ (СНО)? або -МА ЗД 14 як визначено в розділі Короткий опис винаходу. с 30 по вибирають з групи, що містить водень і алкіл, переважно водень, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, о ізобутил або н-бутил, більш переважно водень або метил; і

В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, гетероарил і -С(О)В 1", де ВК" є гідрокси, алкілом або о арилом, більш переважно воднем, метилом, етил, ізопропілом, н-, ізо або трет-бутилом, фенілом, бензоїлом, р ацетилом або карбокси, навіть більш переважно метилом, воднем або фенілом.

Зо В згаданій вище переважній групі (18) більш переважною групою сполук є такі, де: КЗ? є -«СОКО, де КО є як т визначено в розділі Короткий опис винаходу, переважно -МЕ (СНО)? або -МЕ ЗВ" як визначено в розділі

Короткий опис винаходу. во вибирають з групи, що містить водень і алкіл, переважно водень, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, « ізобутил, або н-бутил, більш переважно водень або метил; і з с В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, гетероарил і -«С(О)В ", де В!" є гідрокси, алкілом або й арилом, більш переважно воднем, метилом, етилом, ізопропілом, н-, ізо або трет-бутилом, фенілом, бензоїлом, «» ацетилом або карбокси, навіть більш переважно метилом, воднем або фенілом. (19) Іншою більш переважною групою сполук формули (І) є така, в яких:

В'ї 87 є воднями; -і В? вибирають з групи, що містить водень, галоген, нижчий алкокси, -«С(О)В З ї «(02 З; -1 ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкокси, -С(О)В 75, -5(035М8 ЗВУ, арил і гетероарил;

В є -С(ОВ 9; о 25 вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл; і

Га ШК В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл і -С(О3В 7.

Кз Іншим переважним втіленням цього винаходу є сполуки, що мають структуру описану в (15):

ВО вибирають з групи, що містить гідрокси, нижчий алкокси і -МАЕ (СНО), де п'є 2 або 3; в" вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл; і,

В"? вибирають з групи, що містить арил і -МЕ ЗВУ,

ІФ) Іншим переважним втіленням цього винаходу є сполуки, що мають структуру описану в попередніх двох їмо) параграфах, КЗ ї БК"? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, нижчий алкіл, і, разом, -(СН 2)д-, «(СН)в «СН О(СН2»- або «СНІОМ(СНЗСН») 2-. бо (20) Іншим переважним втіленням цього винаходу є сполука в якій:

В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, -«СНо) ВЗ ї -(ОМее;

В? вибирають з групи, що містить водень, галоген, арил і -5(02МВ ЗВ;

ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, нижчий алкокси, арил, гетероарил і -С(О)В 75; б ВЕ" є воднем;

ВЕ? вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл;

В є -С(ОВ 9;

В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл і арил; БУ вибирають з групи, що містить гідрокси і -КОВ 5; ї гє2 або 3.

Переважним втіленням цього винаходу є сполука, що має структуру описану в тільки що описаному вище параграфі, в якій ВЗ є арилом, необов'язково, заміщеним однією або більшою кількістю груп, що вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл, нижчий алкокси і галоген. (21) Крім того, переважним втіленням цього винаходу є сполука, в якій:

В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, -«СНо) ВЗ ї -(ОМее;

В? вибирають з групи, що містить водень, галоген, арил і -5(005МВ 384;

ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, нижчий алкокси, арил, гетероарил і -С(О)В 75;

В є воднем;

В? вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл;

В є -С(ОВ 9;

В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл і арил;

ВЗ вибирають з групи, що містить гідрокси і -«С(О)К 5; ї гє2 або 3,

В "9 вибирають з групи, що містить гідрокси, нижчий алкокси, -МЕ 87 ї -МВ (СН) 2, де Н є 1, 2 або 3, В"! є воднем і В"? вибирають з групи, що містить гідрокси, нижчий алкокси, -«С(О)В У, гетероарил і -МА ЗВ, (22) Наступним переважним втіленням цього винаходу є сполука, що має структуру описану в попередньому параграфі вище, в якій КЗ ії К"? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, нижчий алкіл, гетероарил і, сч ов разом, «(СНа)д-, «СНо)в- «СНо)О(СН»)»-або «СНОМ НЗХСН»)»-. (23) Іншим переважним втіленням цього винаходу є сполука в якій: (о)

В" є -С(ОМЕ8Е?, де ЕЗ є воднем і ЕЕ? є арилом, необов'язково, заміщеним однією або більшою кількістю груп, що вибирають з групи, яка містить галоген, гідрокси і нижчий алкокси;

В? вибирають з групи, що містить водень, галоген, арил і -5(005МВ 384; с 30 ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, нижчий алкокси, арил, гетероарил і -С(О)В 75; о

ВЕ" є воднем;

ВЕ? вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл; о

В? є -С(О)ВО; ї- 35 В" вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл і арил; м

В" вибирають з групи, що містить гідрокси і -С(О)В 5; і, гє2 або 3, (24) Ще одним наступним переважним втіленням цього винаходу є сполука, в якій:

В" вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл; « 40 В? вибирають з групи, що містить водень, галоген, нижчий алкокси, арил, -С(О)В 7? ії -8(02МВ Зв; ш с ВЗ вибирають з групи, що містить водень, галоген, арил, гетероарил і -С(О)В 75; ц В є воднем; п » .

Во є-С(ОВО; і, її В" разом утворюють -(СНо)д-групу. -1 15 В сполуках що мають структуру описану в попередньому параграфі, переважними є такі, в яких В 79 вибирають з групи, що містить гідрокси, алкокси, -«МАЕ 9874 ї -МН(СНо) МВ ЗВУ, де п є 2 або 3. -і Переважним втіленням цього винаходу є такі сполуки, що мають структуру описану в двох тільки що о описаних вище попередніх параграфах, де ВЗ ії В"? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, нижчий алкіл, і, разом, -(СНао)г-, -«(СНо)в-, «СНо»О(СНо)»- або -«СНО.М(СНьЗХСН»)»-. Приклади сполук формули (1) (ав) приведені в Таблиці І, нижче.

Ко)

Ф) іме) 60 б5

ТАБЛИЦЯ

Структура 1 он 4-Метип-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3- я о іліденметил)- і Н-піроп-2-карбонова кислота 70 2 о 4-Метип-5-(1-метил-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- 4 Си іліденметил)-1Н-піроп-2-карбонова кислота

ГК

18 З о 4-Метил-5-(2-оксо-1 2-дигідроїндол-3- й о іліденметил)-1Н-пірол-?-карбонової кислоти ; метиловий естер 4 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З-іліденметил)- 0-и , а Й» а 4-метил-1 Н-пірол-2-Карбонової киспоти етиловий н н естер 5 у 5-(5-Хлор-2-оксо-1 2-дигідроіндол-з-іліденметил)- с ви «суб 4-метил-1Н-пірол-2-карбонова кислота о)

М н б що г 5-(5-Бром-2-оксо-1 2-дигідроїндол-3-іліденметип)-

Ко с

Бе о 4-метип-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (3- о

В піролідин- 1-ілпропіл)амід о 7 ну, пи 5(ББром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З-іліденметил)- чн ве фо д-метип-1Н-пірол-2-карбонової киспоти (3- г й дівтиламінопропіл)амід

Й ся Б-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3-іліденметил)- « " дю "оф - 1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2- З с діетиламіноетил)амід з 9 КК сн 5-(2-Оксо-б-феніл-1,2-дигідроіндолп-3- й о ш- ре . . з іліденметип)-1Н-піроп-2-карбонової кислоти (2- - дієтиламічноетил)амід ї то й Ях уви "Як 5-(Б-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-З-іліденметил)- ї-о 5 он, о 1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2- о діетиламіноетил)метиламід

Із 11 Ніни 5-(2-Оксо-б-феніял-1,2-дигідроїндол-3- і й 4 о івіденметип)-1 Н-пірол-2-карбонової кислоти (2- о 7 діетиламіноетил)метиламід юю 12 пли З3-Метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-З- о іпідаенметип)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (3- 60 Й 65

13 г 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-З-іпіденметил)-

Й ення ве Й. о З-метил-1Н-пірол-г-карбонової кислоти (3-

В діетипламінопропіліамід 14 н ї, З-Метил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-

М нших я - . 70 фо іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти /3- й діетиламінопропіл)амід

Я 5-(5-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- з Вся й 15 | о І а іліденметил)-З-метил-1Н-пірол-2-карбонової

Я кислоти (3-діетиламінопропіл)амід 16 г 5-(8-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- н Коси ї фо іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової -6 , . й кислоти (3-діетиламінопропіл)амід 17 3-4(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндоп-З-іліденметил)- зв | ве Ф но 4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової с

В "В кислоти (2-діетиламіноетил)амід о 18 6 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дитідроіїіндол-З-іліденметил)- зо ве ст і И. шо 4,5,8,7-тетрагідро-2Н-ізоіндоп-1-карбонової сч

Й д кислоти (З-детипамінопропіл)амід о г о 19 345-Бром-2-оксо-1,2-дигідроїндоп-З-іліденметил)- ча я Й п 4,5,8,7-тетрагідро-2Н-ізоіндоп-1-карбонової - . Й м кислоти (З-піролідин- 1-ілпропіл)амід : - сти « 20 3-42-Оксо-б-піридин-3-іл-1,2-дигідроіїндол-З- - с й і шо іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїндол-1- з» Й у карбонової кислоти (2-дієтиламіноетил)амід 21 а - 4-Бензоїл-5- 5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-

В в й ма іліденметил)-3-метил-1Н-піроп-2-карбонової т й кислоти (3-діетиламінопропіл)амід 22 й йо 4-Бензоїл-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- - Нови . . че я ї іпіденметил)-3-метил-1 Н-пірол-г2-карбонової кислоти (З-морфолін-4-ілпропіл)амід 23 й 4-Бензоїл-3-метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-З- н 5 о я Ж іліденметил)і-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (3- 7 Й піролідин-1-іппропіл)амід бо 65

КЕН т ИН и і НК Яни ол

Д Я т ж. й їй з й кни кання Яра о орли у; ЗИ:

Як Я в ке ака и З лак А РИ: Е чу Р У ОО сь з З і МУ киев ЗО КВН ИН я г ія й. Все Ен "ШЕ: ИН БЕ бе, що СА ЖЕ ванн З вс щ : - я - пит є В

Я КУ шк: схо КК дово ч . пк а вва БІ и Зо АХ істісй з ще Е ша Ку Я Х пика ану вот НО КО ЛУ ИСН й ти й МК ва - ; й г Е Бе све, | І понині Житній й мил Я Е: Я

Є ї Ек. я але СОН Ач ТА НОСИ, й

І Ї Ек й УНК: ри пе НН Я 5 ИН ЗАДЕНН щк З низів ввів сво а пед вени фан АЖ яШтИ ДЯ што ет: вжив Є НЕукя- ЕК

В птн вима н-то наши ння 2 - ше ра хоп с я свавнні ша. пев те КУН листи но ох т отр и Няни Карт одеса ВЗ т Як шли шин М ве дей й ра Я ан й ен Ко и дво і и

Есе ня й хе с - плн ій ав о А ВЕ а ОТ Белая В і стсеіьной ШИ пн: ж ТОНКА ПАНИ НВ ЗВУКИ ИН н з Е НК СЕ В син їв г я з

Я - и ж Ми и З

Й ; ну сані Ж реа рр аю аюомх пебслвнистави рюють ж колтонлри юс ІЙ ї я і: ке З ї МОВИ нОо ясний ее ие З ре ща: сі ОК и в в во Й НИ БЕ

Е щі р Я

З зн ЕН ін ость канів вана ВЕК У Нд пт с трива: вн ДЕ оре хі; ув ЗА Кф се зайву КАТ УК тустет Я косК У «ж навік ЗВ У Здай де ау ЛЕМ РОКИ тр ка пу Кв Низ зща у

В и с: їй Бе: ЕН й щу в а І АН А а НІ З ї их ще Б Я у й ДЕ Е МЖК Св я НМ Как та як ОМ М ; Гх зе в. у. : ї Се сх ЩІ ЩЕ СЕК ьо г НЕ й б інсти ку ге - В ї

Е с пал х збе лева о най есте БкКножеи УКР писрюстах Я

Я Як Бе: св з : р зи нау ен ди ен ИН Ва Е

Е Ше се шк. 7 Б в пдосже - ша І;

З Ве тк Ж Я вісі осв ува Ен ек війни й шкі а ЖДЕ НА й А | МЕ ОМ їх МБО ОМ Ян с с ееннікуть Ж ї КИ, г ка о же ат кене Ес ТЕ ГЕ п пн ж ну Ану нн

В. -т З Он сих ю ке ОН МА и НИ НИ й ій а З ся ее Ех М Й й й Й Й ййй Кт З ре Же Ах ще Я шлвио вх и гадаю . я с Я :з Я щ З а ПОНІ їх По кн» рев вн котки, ПОД М нянь нд дик вай й

Ж в ГИ дах хі сни Б Ан ероа аа а Й з

З ев Ж Се дося з . Є

Е й МЕ Ше її пише й й й й ї:

Е, зі г й МИ АКА НИКА АД КАНА Гх

Е ї ДЕ з т т ол ли що в з ж Молю нь ше нн нн: нний о т он и они іа НЯ Вус а

Е Бе інк з Ж Ж оси с Клея р Е Е Є. вх Б ніс Ж / Я ау Й г В РЕ: я шк снід ж п - я Е

Е у п А і. вірне ке они А зп вових ВД св анонси во вати й ве

Ей Я гін да у БК ши шо НБН УМА КЕ еле таці р

З З знан сф Б. рес їй Ех Е р З я шия т Мч хх с еру швна ФО нин ен пива - ПИ інн на ЕН кт От й КУТ КЕ пси -

Ж Метннву У Жде 5 З Й ОТО МИНА о т МОЯ жи МО і

Ї : ЗНУ р ОК м Я же т зе укол Ж -з сжврю; :: Я

К Е У яд лак ч ВЕ рати пня кВ кров Бон рова тин нал ана ї

Е. Я постів ее ой ж М ва Я р с А и о се и ЗНЗ Я

Я Е Нссаа зай МЕ» З 5. їй ВХ куті і є ів утри. і СК вза Цирк ток оті ново нкя Я а З с Зоре сни ї Я с

Її: ее Несе. "я ВЕУ Кей у: Ж ж я Е; й Ж в. ЕЕ іо БЕ Пар панна ко крипт ні жи ве їй

КЕ т " г ИСОНИ ДИТ НИ НЯ, ;

Є сомераа днінкввн пнвіні бни-іреч а я опіків сі су ТЕКА Каневі тля ЗДА А о екс ср кт Ас ЗІ мекв Вч Не Е НЕ Ноти НК Я як не т КН ЕЕ С Ин м Кіма нін и и

Ї тей Я ко на дав пн и они ДИ КН Аах Е

З Вау ж ошит е вот їх. Й се Б. Ж дай НУ нена і: ав)

А р; ану сь віт їй к Нснктняся ріс вн се я пн ж ЗАТ Ася - є сша Та

Е е ; М жі уж БЕЖ Брашеині ія м Й ян В Іф ян хтів ІТ Е й : Ж НН ЗЕ», еле ЗЕД МИ ІНН аа ОН : в: У З Ше нив Й в во їх я й ї: і с. У . й Пн ий ав й нки й

ЕЕ ще з ода іа Ед КК А НЕ п иа: Б: її ЖИТ я ви На и БО ПА ОН оа МИ

І: ж я са сли о і. певен ер нер віники влсжя й ях і; В щк стат, Е дна ан Ока УК Етики ка й ших ще З й щі р Зоо син й МИНЕ МЕТА спа Ка МАК ва КЕ ку 5 х Бсеяоа ся ак щи Як Бу зв й ла її Я тб БЖеКя ИН жк г; З - со Ах У пні ос о о секти и си ре ке лили МНИХ КІ р с песен АЖ пня в Ме НИ Ме караОНиВее Б; ї ЕВ ша Ше пд й со я- - з «

Ес Ку :-З й чн ш вико 4 о зеилємщечих мої Вроме а евнку Гу ві г: 5 сіни Я Ж ні з сс НЕ й кн паз Б Тр т їх Е ще а зна иа и т па ДАН У А де р й ще З кИКЦЕ ТИ а ОДН ек яки с Я ш-в й Е - здо бо перше с вЕ Кеш Ж аспек нрю на роки ння у яв

ВЕНИ ЛАНИ КИ Я; КОРЕЯ Ралі ків м одинсофіннтиц оон ло сі надо х ЩІ: ЗЕ ХІН о ЕЕ ЮА Ас ВД рН ШЕ апетитне я "тн: Є ад: ско інн знанні: вна вка ій я Ав Я ол В Ї тики Ре АННИ ре З с з чно й ж до Я а и ОО и ку йк фак НИ в з Мк Е Ж я свя З МК б: х Е

Зі Ж ке З Ко Я ав ДЕ КЕ

З Б ШЕ гЗ шиї їх се Ше Кі а ч - я г ШИ сс два я ужив ат справити вів си МЕЖІ кв зх Бу и з Б Я пен о «й З ї Ода ни ас МНН МИ НА ЗІ

НЕ с» Е ре пра ев ї й вом з Щі й Що Й ме й чх НВ ок, ОЙ я До вух сі рога елр ж соня вк оіє ВИ рот стьвя їх -Е У Шо --щі- М Ж знала Пн пеки я з с са: ВИЙ и Курсив" оновив він Вів иі ЕТ хо

І ох Я ще Бл вс нь яті в тс зі Зилолий нити і роблено остан ой а 2 ви ! З ж ЩЕ сплав що ШОК ріонй п ВК Коко крій КП По я Ківі Пі фік вя- ПК віра -- ЯК,

Денна і. ВЕРН ЕЕ Тане поет п НН т ши В ТВ Ве де нив і МАН аа :Я еще Бе аа в иа кот НЕ Н Ея т -І ще ВК | ка й г АКАДЕМ ин ин БОБИ КИМ М ТЕ ще зн ж: дини їЕ ї? Є ре їв ся КН з 14 й М Б НИ | ко я ск ї- аркою з зе лк ВЕК Ясне ОЕМ р

Ще з до Ді у Х в з и й ня Мона нетсвя Беклевнека кт вветенти о -І ЩЕ Я ча ри З Не еру дела та Я Ка ВИКО НОЇ Де

Іс Е Вена ЖЕ я Я БОКУ ВКУСИВ ВЕЛУКСИ ЕНН ВЕЛИКУ ії.

НЕ ; бо дси: НН ж ст іш фбкювове совет ото одсжулюрітькеч присвя Же щ ї- З ек Кі ен о тям Елі я 1 М (ав) ДЕаНвен-зн р НЕ онов ТНК Не Кт ДЕК о т ін В ето они анна ОС

В ве й ша т ау и он НН з Й г а сЗ ЦЕ

У З ми Ж: ве нку В Р-Н пденоваесви спла швшнесвро Короленка ссср пива янв сакн вивих Я

ІК) : З й о сш й Я З пенкме т инеати етан не каже ВО БК

Е Е пуессссветьс вд КЕ ЗШ. 2Я Я ф ТЕ МАК ЕКОН ВИННИХ Ж КУБИ ок ее че

К В рен т с, ЗДНК Ес кх й т ж си з я ай інашнння т певен ЗНИКтЕВ Аг нн вна ток вніс ою Ва о хі р т х попи рімжні іжтийі ві во АН К ОН ЕН В їх хі риття в Не Ки я у «дивини ік ик ак ОН КВН Ина» Я

Її наш е я ер фо БК зи БУ БИК еВ тн В рак я Ж т щ Я

ГФ) Е ї ЗИ ЕЕ суне КЕ пай жк: Е ре х п и в Кл ол ЕК ост жкетет Іс З ев кнеповинана пов русел ве ні: каре с В осика а «де й сні они я Я Беха й т ЕЕ НИ КИ МЕТИ ж КЕН ЯК Я ко а ї Я ни х диня вечертя Я. ванній г х т р: Е пеки шннновка Микитенко М стеки й їх їЗ ях г ЗАЧ САН І НА М а і сі Е із плин КРАСНЕ і СЕ - рат хуй рве зоре Бе вн ііі ПЕРО о йо ій інв ПКЕЕ ПК Кр ін ВКА ЕЕ ВІ ЗК ік сті В ий НУО кн т ін Кевя оте МК во іще ВИНИ АЧАНАТ ВКо Мя аОЖЕ

36 о 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3- кс с; : ве й он іліденметил)-3-метил-1Н-піроп-2-карбонової

Ех | н кислоти (2-(4-підрокси-феніл)етитамід 37 9 -к 5-5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-з3-іліденметил)- в й й г-ізопропіл-4-феніл-ї Н-пірол-3-карбонової 70 М кислоти (3-діетиламінопропіл)амід

Зв ! о ее 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З-іліденметил)- ц і 7 2-ізопропіл-4-феніл- 1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-піролідин- 1-ілпропіл)амід 39 е й и 5-5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-З-іліденметил)- і . 2-ізопропіл-24-феніп-і Н-піроп-З-карбонової и м й є 9 кислоти (2-діетиламіноетил)амід 40 Ф а и 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- " ве - 2-ізопропіл-4-фаніл-1Н-піроп-З3-карбонової сч

Ф кислоти (3-(4-метилпіперазин-1-іл)пропіліамід о ді о 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)- пт й 2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонова кислота сч еру о 42 о; 5-(5-Вром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)- о

Що 2-метип-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти -

Ве . - - - рч-

В (2-піролідин- 1-ілетил)амід н 43 В; 5-ІВ-(2-Метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-3- « я т Ц - 1 20 з іліденметилі-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3- - с І | і карбонової киспоти (2-піролідин-1-ілетил)амід а

І» | ! 44 АВ- 5АБ-Бром-2-оксо-1 ;2-дигідроіндол-З-іліденметил)- ще 35 оо 2-метил-4-феніл-1 Н-пірол-3-карбонової кислоти

І. г; (2-диметиламікоетил)амід -І о 45 | 9 ..н- 5-16-(2-Метокси-феніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-

Ге Шо | у Е іліденметил|-2-метил-4-феніл-! Н-пірол-3- де. і й Н карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амід 46 «(2 о о- І 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-З-іліденметил)- ні 2-метип-4-феніл-1 Н-піроп-3-карбонової кислоти о пові і з - етиповий естер во б5

47 ух дж 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- що. 2-метип-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (3-діетиламінопропіл)амід чн 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигіпроіндол-3- чия тм іліденметил)-2,4-диметил-1 Н-піроп-3-карбонової 70 Й кислоти (2-диметиламіноетил)амід 49 ха 2,4-диметил-5-(2-оксо-б-феніл-ї, 2-дигідроіїндол-3- в іліденметил)-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-

Я диметиламінсетиламід /-- 50 р 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметип)- 2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-

А "м диметиламіноетил)амід 51 з-й 5-(Б-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)- ев | мете о

Й діветиламіноетил)амід о 52 ун 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- 1 чодть о неттнннтжнттх й н піролідин- 1-іпетил)амід о 53 З н 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- о чофо ниття й

Й імідазол-1-ілпропіл)амід "а 5А З в-(8-(2-Метокси-феніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндолп-3- 5 о кислоти (2-диметиламіноетил)амід з - | 55 х-й 5-(6-(3-Метокси-феніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3- г» й лк іліденметилі-2,4-диметип-1Н-піроп-З-карбонової оо киспоти (2-диметиламіноетил)амід -І « -І 56 і 2.4-диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3- о р водь ун

Га ШК Й діетиламіноетил)амід і» 57 р 2,4-диметил-б-(2-оксо-5-феніл-1 ,2-дигідроїндол-3- водбь ет 59 Я піролідин-1-ілетил)амід о 58 й 2,4-диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроїндол-3-

І 7 вод | нетто бо Я імідазоп-1-ілпропіл)амід б5

59 5 й і 2,4-диметил-5-(2-оксо-б-феніп-1,2-дигідроїндол-3-

Ше лад іліденметип)-1 Н-піроп-3-карбонової кислоти (2- й во рт 2,4-диметип-5-(2-оксо-б-феніл-1,2-дигідроїндол-3- то І й піролідин-1-ілетип)амід 61 5.Н 2,а-диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроїндол-3- ер боєв Іліденметил)-1Н-пірол-3-карбонової киспоти (3- 19 | імідазол-1-ілпропіл)амід ! б2 реч 5-16-(3,5-Дихлор-феніл)-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- ша іліденметилі-2,4-диметил-1Н-пірол-Зз-карбонової ї киспоти (2-діетипаміноетил)амід 53 РИ, 2,4-диметил-5-(2-оксо-6-піридин-З-іл-1,2-

В дигідроїндол-З-іліденметил)-1 Н-пірол-З- сч щі В с карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (о) м 64 . що 2,4-диметил-Б-(2-оксо-6-піридин-З-іл-1,2- зо й ур дигідроіндол-З-Іліденметил)-1 Н-пірол-З- с си карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід о 65 9 -- 2,4-диметил-5-(2-оксо-б-піридин-З-л-1,2- ї- дес й дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-3- т- й Й карбонової кислоти (З-диметиламінопрогіл)амід 66 "у 2,4-диметип-5-(2-оксо-5-феніп-1,2-дигідроїндоп-3- « я | І з и диметиламінопропіл)амід 18 67 | З-Й 2,4-диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіїндол-3- ч 7 вод т, - й | діветиламінопропітамід о 68 3-й 2,а-диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроїндол-3-

Ї їз й | дівтиламінопропіл)змід дв "є 3-І(4-(3-Діетиламінопропілкарбамоїл)-3,5-диметил- о то і, у 1Н-пірол-2-іпметилені-2-оксо-2,3-дипгідро-1Н- й Са Еш метоксифеніл)амід 60 б5

70 щ 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)- й срок хе 2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (3- й діеєтиламінопропіламід 7 9.н -5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- «об 2,4-діїзопропіл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2- т Я діетиламіноєтил)амід 72 Зв 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндоп-З-іліденметил/)- тод | 2,4-дізопропіл-1 Н-пірол-3-карбонової кислоти (3- то й діетиламінопропіл)амід 73 АВ 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3- іліденметил)-2,4-діїзопропіп-1 Н-пірол-3- ; карбонової кислоти (З-піролідин-1-іппропіл)амід 74 з ня Б(Б-Бром-б-оксо-1,2-дийідроїіндоп.- З-іліденметил)- не 2,4-диметил-1Н-піроп-З-карбонової кислоти сч

В (піридин-4-ілметил)амід о 75 | о .ю 5-16-(4-Бутип-феніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З3-

Щщ К іпіденметилі-2,4-диметил-1Н-піроп-3-карбонової сч кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід о 78 п; 5-І6-(5-ізопропіп-2-метоксифеніл)-2-оксо-1,2- о «В дигідроїндоп-3-іліденметилі-2,4-диметил- 1 Н- - щі пірол-3-карбонової кислоти (2-піропідин-1- ї- ілетил)амід 77 о юю 5-6-(4-Єтилфеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3- « я | І » й кислоти (2-піролідин- 1-ілетил)амід 78 в 5-(6-(2,4-Диметокси-феніл)-2-оксо-1,2- й дигідроіндол-3-іліденметиліІ-2,4-диметил-1Н-

В. дей піроп-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1- о 5 тає | ілетил)амід о 79 о 2 5-(6-(З-ізопропіл-феніл)-2-оксо- 1,2-дигідроіндол-З-

Із В іпіденметилі-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової зв ой кислоти (2-піролідин-1-іпетип)амід

Ф) по зн юю во А , 5-(8-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроїндоп-З-іліденметил)- й 2 а-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2- 7 оф діетиламіноетил)амід б5

ВІ | о р и 3-(4-(2-діетиламіноетилкарбамоїп)-3,5-диметил- - 1Н-пірол-2-ілметилені-2-оксо-2,3-дигідро-їНі 9 | зу й індоп-б-карбонова кислота 16 хе З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н.-пірол-3- о? вто карбонової кислоти (2-піролідин- 1-ілетил)амід 83 а; 5-(5-(3-Хлорфенілсульфамоїл)-2-оксо-1,2- 15 по ся дигідроіндол-З-іліденметилі-2,4-диметил-1Н- ні пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1- ілетил)амід 20 ва о дя 2,4-диметил-5-(2-оксо-5-(піридин-3-

С, Засн ілсульфамоїл)-1 2.дигідроїндол-З-іліденметилі- ! фак; 7Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин- 1- 25 ілетил)амід о 85 сн х З Є 3-(З,5-диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніп)- 1нН-пірол-2г-ілметилен|)-4-(2-тідроксиетил)-1,3- сч зо дигідроїндол-2-он о 8б У Зв | З-(3,5-диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніл)- о й зв М індол-Б-сульфонової кислоти феніламід м 87 | ел / 5-(5-диметипсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроїндол- в о | карбонової киспоти /(2-діетиламіноеститамід н - с "88 а си 5-15-(3-Хлорфенілсульфамоїл)-2-оксо-1,9- і 18 Го о піроп-З-карбонової кислоти (2-

Ш- діетиламікоетил)амід 89 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)- і 7 киспоти (2-диметиламіноетил)амід

Із 90 342-Оксо-1,2-дигідроїндол-З-іпіденметил)-4,5,6,7- себе тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти о й шк етиловий естер з а 3-(А-Метил-2-оксо-1,2-дигідроїндол-3- карбонової кислоти етиловий естер б5

92 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)- 9 " кислоти етиловий естер 93 с 3-(3-Етоксикарбонія-4,5,6,7-тетрагідро-2Н- ой С а Я Ізоіндол-1-ілметилен)-2-оксо-2,3-дигідро-18- 70 індол-5-карбонова кислота 94 (і 3-(5-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З-

Тон карбонової кислоти етиповий естер 95 3-(2-Оксо-Б-феніл-1,2-дигідроїндол-З3-

ЩО з іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1- " | карбонової кислоти етиловий естер. 3-(2-Оксо-5-супльфамоїл-1і,2-дигідроіндол-3- бай ШИ зв та карбонової кислоти етиловий естер с 97 345-Метилсульфамоїял-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-З- о хо іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1- зо | й ш карбонової киспоти етиловий естер см 98 У 3-55-диметилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроїндол- о й Че З-ліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїндол-1- о б ОДУ карбонової кислоти етиловий естер рок щі 99 3-(2-Оксо-5-фенілсупьфамоїл-1,2-дигідроіїндол-3- те сл ва іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1- дю | 7 карбонової кислоти етиловий естер їх с 100 3-(8-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З- з» соб іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1- що " карбонової кислоти етиповий естер -1 що 101 3-(2-Оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3- -1 г Мов іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-еН-ізоіндол-1- о Фа карбонової кислоти етиловий естер

Ге Шо 102 3-(3-Етоксикарбонія-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-

Із І от ізоїндоп-1-ілметилен)-2-оксо-2,3-дипгідро-1Н- 103 (і 3-(65-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-3- т пи карбонової кислоти етиловий естер 60 65

104 ! 3-(5-ізопропілсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіїндоп- юс З-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїндоп-1- 9 Кк з карбонової киспоти етиловий естер 105 343-Метилкарбамоїл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н- ей ее 10 " індол-Б-карбонова кислота 106 3-(3-диметилкарбамоїл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н- " індол-5-карбонова кислота. . 107 2-Оксо-3-3-(піролідин-1-карбоніл)-4,5,6,7- 1 сор тетрагідро-2Н-ізвіндол-1-ілметилені-2, 3-дигідро- о 1Н.індоп-5-ка рбонова кислота 108 З13-(Морфолін-4-карбоніл)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н- зо ізоіндол-1-ілметилені-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол- гі й со) 5-карбонова кислота о 109 | (і 34(3-(Морфолін-4-карбоніп)-4,5,6,7-тетрагідро-гнН- з но т ізоіндоп- 1-ілметилені-2-оксо-2,3-дигідро-1А-індол- зо з, їм, б-карбонова кислота їй о 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З-іліденметил)- о «оц 4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїндол-1-карбонової Кк з5 кислоти метиламід Кк 111 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроїндол-З- іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1- « ю й | карбонової кислоти диметиламід - с 50112 (і 5-Бром-3-(3-(піролідин-1-карбоніл)-4,5,6,7- з» "(з ян т тетрагідро-2Н-ізоіндоп-1-ілметилені-1,3- " ів; дигідроїндоп-2-он щи 113 Б:Бром-3-ІЗ-(морфолін-4-карбонія)-4,5,6,7- -І «си тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-ілметилені-1,3- о Ко) дигідроіндоп-2-он ге ШИ 114 3-(3-диметилкарбамоїл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н- бу и індол-б-карбонова кислота 5 115 Зо 4-Метил-5-(5-метилсульфамоїл-2-оксо-1,2- з 6 мо карбонова кислота бо б5 нЕшИЕко свт вер нитини о ЕЕ дн и ПАНИ іт спон рр ек посі гошй д сюкту , я с й киев Биг - Ряд Ол нд кв уран В т рт ЕП АСК Тов рю нд Зою тва их ЦД ква СБІШНІ, Й я Я ке же З ЕЙ Лайн ен мати А нан не

Бе Я ЗКУ. Е Я Ки кас ЕД ка на и а КИ и КТ МДЕ У шен ВИ

ЩЕ ї В: сн: й Я ще ання ні нн сс інв ірон ок нев нка В

ЗУ Г зару: ке й сі а ЕЕ і и нн а Ка ар ак КА, те ке ; Нищеі) У ЕК СНИ ся Й ІЙ ач ЕНН ВИ АК НН г аЕ -Ж й ЗИ ЗЕ ей Мне р зай Оу М СК ОК АННА НЕ Я ще з аль, дв вва М Ай В СИ 4 чЕ З їй ще а М деканів пок сек яп св пром от «то Во Ед тет не танін поро нн ОК х сля в лена нак не нн в у в ноя и а он і в с ї ще Бо адетх Я. ее НЯ а НО КАВА и АНЯ дей

Тк і; Бе й С и р ИН, Н рН АН Же Кт о НМ НН сне сіно пиши БО З ще панни «В Я. БЖ: пеяет. І; Я. писати аа кА Ми АНІ Нвтедй ще

Я: те с Я 5 щ ес ве тих З нина и їй

Кз чав Во се З ев ; див жк бе вра стеня свв рняья. й ще . зі ДЕ затв. сви, я. Я. праве Ету кот сті степів о В ТНВЬХ Зо іже кт ссср Хор: ВЕ Ежен йе рія цк Я пани СВ ес в: Й ї он вуні я вве ай и цк Рене зВІЯ ще

І: хи й НОВ ВИК Ше х я о Я КИ щи: тю 4 ше с Є і " щ

Ж щ рн вм Ф прпатете ство стрсввст дає: спон свн зн овен свванвськ Тв п Мис зе ЗАННИ п. шк Інна ее я Я

Й що т Даний нев опт Енн Ес дні ви ін вин не нин кі тий кт ЕЕ ЕК

Дн-яе зв венинете нн екон» соя БНО ЕЕ он Кф чості інченк ф роаенннннн руку т К-т кед «іісвінканнвтя нн спікання зврее ши ще тк: ще т тяш а емо нн ін ва

Як нев т п кн у В Щодо АК ЕАЖя кН ня вже вв финнк вб танін Квт вени З й

Т- Ще Живи с Я той а: й Й жк

З й МАО о і ее дн ЗНШКСя ян Я Ез

БІ. Ех пана пін роя КУ мер у и: Ми усе ло А ВЕ я " р й ще ще роя со їй Я а в и й фе Я ев вх своє дтеЕ 5 4. Гек з ЕІ пень В у Вест покжкор вд петанк я прі опе ню ери поп не їх КН г ЕЕ Й щі: пане нь НН и НАЕК: р

Р-Н ання кеутченнн вань ня чл Суть -ітвКу Ля тавреценя орні ігкж- сні - НН КВК к-т ява КК в жк зо Б ие я ва КА КИйя нний вера е не ки ЕнС ї лм ЩЕ В ЩОКИ НКИ КЕ УК КУ ае в вт б с БНВЦ тку 1 ух вкие яв Б сі хх м Я

НЯ р унія: МИ до. У. " зу поп ркк нм тот отв с ВІ скат дек сс фі ЗА НА оо сив ВК екол влу МНН Г "т я ре ти те Дос НЯ З ААЧеНЯ чивйй уа НН ТА Її:

Бе те Где зви ЖИ Бе нена аьмя Во саов со с весь кт КВТ В а зок б Мне Знесіння КІ:

Їй ЩЕ ше ее й й ї

ЩЕ З Ж ев шк он ення кр ія я пір ака Р й ! Я

І ї ща Бо кн досить Ес: ерне суто ння Ед и нн усе яв, ща «ря тор не ді снеасьнькея нау оси ШЕ киидажся за гена дрів Соні спон а ссва Бе: Б в ей ви Бе м "Тв їй нах б Б ни ув кн с пива рес сжщквиа:ррян вав 4 нти ій ра ї Нед г оман ки ни нн у ща поем и: В: есте КУ ех й рі ан си в Я р ТАНЕ ЖЕагато ре ИЙ БЕ

Не ЧУ БИнК г сс ЗИ Я Роз су ла вк вн ВЕОЯЯЬ Место В Пес яз ЖАМи, КД: ЖЕ Бл кв скор о Я

Ух й фе Бо. ск кн за жав и; Зк вис, Вк КК ше Ж

Ко ще НИ нин ин к а кре новнис кА Б. ще Реве сікітаюту с пс и р т ЕЕ. я ЖЕ ВИ Е че ние Аа ен Ка ОА КУН ЕІ

Ф ярк ск, ди й Птн Клео МИНА АК Ще т Же ЕК ва В нею й Я: ре ку ж же: ИЙ, ЦІЙ В

ЗА спотнле о: й й Но Я ро ЕЕ ШЕ Я КУ й В и кчовсвводх спидеві: нот пеонасклжнеть-. пеУ степені» - Вемйнилнаєиь:.-: нет сЕичЕ пе пф и Ш КТ пит бе фан КК етичні Ніні ис ут сні оте ій тіні шш С ш тет дви я НЕ яти н «Д. нанні Її. Я оо Я ОКА а а А НА У

ЩЕ Же плн ЩЕ . ИЙ я ОН Пісня - ву р зн фе чі о п новую КОД німе Б око Ки нку сжрия Я 7 з А: в ве з оре й й ЗНО А КИ щі ж; ро дл не ТІ ЗЯ тк СХ х й де й й т Ж

Й СЯ нд с Ре Я ТЯ й Ж а че а яки ЗЧч а Тч ВЕи В дк Я НАХ ВН Ж ТИ НН чан Я: р В НН Пе Ве ТИ й й ро т пекнанех. г ца і: соратник Бери Зіни НИ ЕН Ша іт дом дет со півднеоввті НЕ - ер Боя Ж В дсп рес: «о ПИІЩИЩ где сх я снах стен (ав)

БІ ва як Щи ки В Ак А АН ЕК ОНИ:

Тк Я Ж а її тку Св: ще шк не св Ж МО о

Я ЩЕ; Ще зу ЕЙ соршйннннох: сфнсфкнйек ання. бЕфвх се променя рокі Як вану: |:

ДЕЙ тр не Зх не козам КОС ока ОО КО плоти Милий я щ й совка ЙО с стен ОА НН Ка еф А НИ ВАВ АЛИ Не се 2 б КЕ ев є Я Есе скя ак сосен С ще Б не А, з Й - р іже (е п: и: ах Же стймходіомноу х Зй І щі - Б ле їе сою Бей НКИ "Я

Кен оюетя доні вен Пи Ме нс слі: інн ни Ен несення: ЗЕ ВКЄ Мосс нові ЕЛСНОвВ їй о зе М - : - "КИ а Ж и и МЕ се о: з толь и НЯ дек

ОК би: ном ж ага ву ех ям Іедтяк и ри Я нки

Ю НИ нів Б шо БИЙ. сно сиди сіна не і ей вену ом нава ди снів о я у см й

ЩЕ: і; шк. тя г М и ни 0ЯЕНИХ КссоеВ ж |,

ЗЕ ТЕ ній Ка. БО я А нудити В шо КІ

Ні р: зай на: й КЕ вигля т те тет пеки вищ . ще т ще Зап да в ї МД АНЯ ера и КН а КЕН в й я М ОН я й Че г 5 К Я « х ш ще КС КЕ нний Е зе

У М й щи й Ще а. 5 точ НИ Нд М М ЕЙ Б. фер т ентерит нка пен кв ні де о Не рента акт нт нене НН нд нн Кс вче ті ту спий тини піз ріпи кс я ВІ 8 ж: о чий. Уже я рес г Пи Ей иа ик и М ее вин і рани ій

Е СН с - НИХ нед їй ЗК з про и и и а ЕН НИ НААУ злізти с р ся БО Ж дор ЖИКА вн Кф вн кокони тб ис зі они Ек соло ев

Я р й Б з чен ппрняянх ОКО пні ри зво: . й з. р я м-ех Й 4. А сокднц ВИ с жк: ях: ав " ГЕ Я ее ще ден зв вв зн Вся Кр ли и ке а ЕВ пут вн «й

М ро У ШК дж пере тя У пе у Іди ЖІ: ВІТ З ДЕ НА ран сф 2 К ї хі и. сон неси З Є го З ПАННА лез в ї ЧЕ: на Й: МОЯ ше п днищ ще ех З че. зт В ун фе. Ше с : гей й шив ще. з,

Я що я нив КІ ; що

Жодне с сишаене СЮ рез: с ен. 0 вшежшю осеєенести с: виде о осшесь с алючняе векююн опанатекх жан до петлю уч яті

ИН НТ ЗИ Дав Кт сет ріг НН і Ко ірінрнн і Я й с ні ПЕ ні КАК ен ; Ето лнй ік о Канав клас вас а ЕЕНС Вони сек ск ТИН МОЄ тт кв як ВВ вод кан ЗЕ ТЕ веквх ра ря ств ре сир ж сук савани: З же: чи й 7 ВК. АННИ а ия йх кжа АЛ зву ЕНЕЙ сю

ІК Я що ШЕ кт Не дя й стевія он: с о внз півні со

Б й МЕ ки з РА стержня Ко ЯВИ «це авт; скатної - -І ай і я ВЕ «Ко есузкнтвв Я Б киян В денний В алтви тови нету Я» ге

Її З с ВІК, ЗОНІ вон Ти же дез СОКИ шк тЯ Н ; Я: Костик, ДІЙ Ні ї зр ти нти і причастя зе Щи й

Ж: і. Сх з Й зх ЗНАЧ ОМАН НО ЕН: 508 і би . ЕТ ЩЕ.

І у с д 5 ух лісі ріки коків їх пісні діння М. - с т, вве арк кс Городні» ПАЛ я св-ки ОНИ Спірін тин офі тт Кт Енн урн ДВ стінові Нр нт роко нпіпнінті пні З ПІІ тт м;

хво ВН Мо най пов Я Й Тут екон Я Кк зни ас: ТОВ Тит и -, ек а "Кі гаю Ся МИ став ЛИ в РЕА Да и и Я з А НЕ НЯ я: ки НН

Зв АН ще іп СІЙ соя я КО УМидуВДИ ер м К ЯуЕ ВДН рВА КЕ ше З МН вет р й екон ж ВЕ о о хз НН ВЕС С о в й В вк: М ВИ ШОК ж й роя

ЛА Б; ря, ЕЕ. вк м І ЯНА ВАЛ А ОН Х

У ря шк ель сш С Я т й бе зве НІЙ НІ я

З пон: ве М ВН Е ни и и и Ж Е

Я Е ж бе: Й | пк а ее ти нама ан Е те ан З ра З Я йо т ЩепЕ те ЖК ї

Ям Вл ВШ Я: ИЙ дю ше соя скроні пан: шій дупи НЕ пан НЕ с г НИК СНИ

ІД НП р пев НЕ стр Я ен нанні учи сш Шк Я ск ИНА її Берк диполя а 1 ИН,

Я Пак в з са НЕ Шу зе п Ко них о ТІВ: фа Ж НТК» Є обу ся Ше є Км и ВЕ ти Бл КЕ «й З зерна КОН РОН Вей я БЖ ні ее

Ко Ж й спра у - т ж її з хе Е т й

Ще 6 дя М с УЧИ око. З Ей НЕоЕь ва тт сетекя с ВИТ сн ВЗН і КЕ ЗЯння щ в о У ШЕ схе с й Я Куди я ск Ж Б Ки Б І: і "я ї ода В иа ан и димаря й «й

З т ад орд У Я ІЕЕ МА М МУКИ сти АР ЗНМ их хх В ю З а бан СК І сс ес. вдЕния а поко енн Й і ї

Е Ж | ен, як ї жав ИНА ех НУ щі

З к сне ех з ЕЙ він Я кв В жо в ЕТ: ни я ті Ж

Е й ск тд Б св ї -ї Ж тай й Ну а и ик КМ Кк Юи а ій

Я НК: в: НААН АН З це і я з зи емо уєани що ;

Е. у -К ЕМ я ЕК В вк МИ Е

Несе ДОД: ненні З НИМИ сіре пс БОКООб соеьоя сш М вншвн ЗШ ДЖ гав уся емо ВЕНА івасель пкт ох ллють и НЕ Кн в вв я ше седе Ж. ссшеою в 1 ДИН океані о дидренле в ЗИ.

Т ї НЕ ТВ а А БАД Я и ОНВЯ сік о | -х

Та дннаж нвн и м Ен ом и кни тла в це сю да ро ту ЯК су у ї «Ж НБНй пек ЗМ «ре. ВОМ п ниви Ж УНН МОВИ ММ ЩЕ ле

Е З БОЖЕ вніс кі ьо ня ЖЕ м а Й . . Й її є й с: ан и і в ЕОЛСОЕТО Й есе КВК ЖЖ в ЖКСШИНН: Хар? ва сасЕ ев соди їй с га Я й ВИ ен Я У ша Ен ни пит нн Ан ; Ку

Її СВК снс сен ВИННИЙ я арени киш ню пд фе З й в: НН - ДИН ни в НН Я. Ко г " НК но нжшкх с: стенів ножа фен ні ї й

Ей -Е Ї; Бест м и У с З й ій Есе софту я Ж і ж Й й і керу щи гі

Ї и о а ке З З пана в Ко нав нят осв пс соте Їхав з фс ось й Я жк о Нв нив т Вк нтів ВВ дн с ПВ пар нтьтьнВя Я и и Наш и и АЙ нучнр кіжнтевни Я

Ше еит ть ще «о й БВ гом екв МЕНА Нім ВМ я, Це

Кн АННИ Я сала СЯЕ пив окжений ВО ИН м оо ци а у Я АВК й й о нів: кв о ВЕ НИ й де : Е

НА Бе ї Ко точ ню; М рр ВИ ЖЕ ДК ун кре х БК Ії І г «Я з кг . 5: АН ДЕНИ вішея сешЕ ув ВК певен -й з

В СЯ сфжедхонюх пий шо ; ШЕ вно в сни вини в нн с о Е

І; яко р СО Ж ее т рН дн Ки и Ж Е: й І й ен р в хори Зм явку я у АН деко ня, Що -3 : т ре тевван ВІ БІ. Вк сис дет зи НИ ву ва ка но втра ппіе ОНЕН «СТ Ж я 5 о ЯН Кен ЕНЕР ЕН Б ЕЕ г ЗХ А ще Ейр рак 5 пр Ве Уч НН

ЕЕ я мя ЕЇ ЗЕ Н АЙ а ЕЕ Е в

І СЕ а у ние А Ко шко : ЕЕ у сен А А ДЕ віра Ин ДИН. Ге)

СКЕТ ОСИ ДЕК я ШИ тех ке Ой СІнег: тк. ЯКеК» ав КЕ есе гтвік тарні и ЛИ академ, Пр вл пес сх ей Ще ве В он ВИ с иа и и и А НИ МІ Ей шей те й кн ля и и Я

ПОЕТИ Ко ев нн Мо Ж ЯНОЖ ЕНЖИ ЖЖ СТИ КЛИМ КУКИ Нею КОН пев

СІЙ є й Бех Я МК че Ши ви у шу Нива я Ж З

КЕ ЛЕ: се с ВВ Я Дек МмМетТиНе І ен Ка ОО Е пе ке і я де еяи Я Я пе ен пе ни и ЩЕ а ЕЕ ся Си ії ЩЕ ТЕ ДТ а Ик СТАЯСИЯ Янв не В ОК СВ «Я їх з сч са їх Ше жо тп - 1 ши пок кор вк лій век сі хе щи а у ОЙ. ще й о се и АЮ ВЕ НЕ КЕ З зо їй ; Бере Я ВКА Е не КК ее но Ай п й «Д.

ЩЕ ря Ге тА 1 СЛ КСВ ЧИМ не Ох НИК МІ ИН ВКА. ТЕ Е ЯК снів о вв Кісти Й В Пе іонні коді ос в пов пк во от с дено гсфідіюиюнн птвоВя ккд: ОЙ (ав)

КЕ зпсоматрек нах вва ЗВ М-ва Я ок рова ля Мо і стін КВ і он в НН Кеті п и кі п КИ Ай ет ЕНН тет Як -т Пот я км нин иа иа о ошин і щ о Ба АН ще с ее З Є ре В 5 кое ЛИ а на ОДН я ТВ З В ЗА ВНЕнх Бетони Я

БЕ. ЖАБ й «до ее с ня вальс ВЕ ке уст з КИ ши еди ну ЕВ Я ї бо ех ЛЕ

ТК" Б зай звоовют Ч сснуро А ОСИ я а КЕ и с и в ка її т Ж кіжеваж ЗАВНЕЕ се в м сли ння тт я НН НЕ НКИ ЕЕ ак ВИ (ав) п т Бек НН ровно я ЛІЩИНИ ВЕ ЗИ ; с Бе шу Ще ші

Я 1 Ж нн. БК ДК юн Нд В НЕ и в ру, І З ве

У А Др. ва КА Пе ан ти а НЕ СО ИМЯ о Чет п ряд і та і: й БД т ря а ПЕ ЛЕ Тон ЕН В НЕ и сс Я ВН ма п зи с ек ВИ ни ТЕ. ї ї ве хо ІННИ ї Іо кров зн ее р пото песто осінь поя вий НЯ ща; що і БК сен Е НО НОвВа КСО ее Е їй

ЗБ К КЕ ЕЕ ня т ков нн вв й В и у г: ї Яни хіх Яоотфр й У

З ЕЗ Епонав жкн епі роде С Кене ріс тина кв ЗЕ М

КЗ Е ї ДАЧА АН ТИ А ве у г М СЕ. Й шк й БАН Ки КЕ СК ЕЕ: Ж з й

Е нік ясне сін Ус дні ній вет мий Ту фольги Ічні ть сід ЗАТВ УР З пох рт НВН Є КЕ ен «ВД ТТ Зк кт не т ВК ЗНТУ хи ЛЕ ТОДЕХ пс да тя в а свя я ок ев най ан І З ЯАНН ре З ша хо тк нен ак А На тре НЯ 3 УНН ОК р а. в: НВ вн сення нина дек ке ор зн. тбнеенй от шко еннк СИ у ен я у; й

ОК. Е я вд Що Де ш пом нс Ме їх НЕ М і; ЗК

Дрол МИША шк В В ридання БА І; Не

Но Е: де ве СОС я он ах вні нанні пні ЕНН ЕН ня конс вон пд рн іх сбкнз рен В З шщ ї не рок т о: ЕН і В лих Вк ж АЛ ден А з Бі

І ЧУ я ДВ рес Я сх НН си «В Я

Ж з нсзсеіве з НИЙ ч КН Ми веж ве ЕВ

ЩЕ: г Фк яд вони е нш: с ВЕ У т » Ж Е т Бе : задо в юрннь М кое я Ж: З ге ; р кн вк Бойові пи не М й г й ї- НИ ЕЕ ОНА а ЕК: щ Я г ? ЕЕ ВАК А КАН КИ ра цї Ж

Ед нн БТ ки ОСТ ун підви тт піднос. ох КН ЗЕ: с ав Ви кн Е; Е вся Я ння 1 ев КС ИН ТЕ МАК У ово НК ЕП ТИН реа сані я нен висо писк ника секс раль ЕЕ сту кре Ав Ек о З ДЕ нет ВВЕ ТАН роти ут ІДИ Коди о тав

ЕЯ ие ій а ж: ві та я о М в і Гн вовенуе лан в мовооис ВХ вух рн о Я Кк;

Бе дк Ме В о ТК ееи о ее и м с ве дра киня др твнтен т фот: КН ЯЦЙ дв пр СК - Не а ие Я з с я якіх їй ТК МЖК, ле Й жене Я Ж Ж ж З М, он і ь КІ ща р У я р ЛИН Сх НЕ ЗНИЩ ЗВ т 5 і те Як « ЗИМИ ее ЗИМОВІ НИ. В - 1 Ех З о-ви, Я з: ЗНМ и а КН Й ж Ка З вах Ом ЕН АН а фе ЛК і: НЕ : Е сх СН ЯК тин З БЕ и Наш ік пе, шо т а

З Мне вх ее сх ЗВ Ба НЯ ігри В я ств ВО І: що У -І З й ей ЕЕ кін в я гішйай ее сни ту реак дан ї й ті Е ВЗ У сво с Б й и и Ан КС :- ф в я Бер сви АЙ ЕЕ Вени винен вн века й Ж

Що 23 т я Иван в з вки пр В. ре Я яв іх Х кВ Ка ри ки КИ А рда Е К х АННИ ОВК оодшшня с пддвнння м: ЗІ пов ши ні а ення с. А ОМ ПН Е ве ння Не донна НШЕх зл СП нх ДНУ ль Зх, іще сок ку Ех вд дицн, ГА ха вить У

Ки и ор мА в и нини кт (ав) Бах: ШІ р ШИ: ее З а прово Око же В ішія ет ях й чех г щЯ АИМ, БЕ ОДНЕ се: у Її оф и ОН Я ЕВ йно: оиек, Ей ОА ЖЕ ще : вс У я паж ссикйввх,йо Шен ся ее лику а Корвканить Того: ЕЕ "Е т - АЕ що) р: й і й и о ВККС ев, НІШ щ я Гх кода не хо па ИН не, АН А З З ч І оф у Не 3 лень ета: песня ант, шен ї Б

Я з Береш КМ й У пов іже в вер вн вки Ж г а В Ї - Корона. ха СЯ пе КН я Пойеяй "г о ЗА ще р: ДИ ення 5 Бе ді ерьнЕ А Б сік й ков в в ль Ж Я їй

Е ; М М» щй 2 ПЕД Ки МЖК Не Ж

ГФ) СНЕЕА ТО если НЕТ МКУ С По СВТ КЕ т ІМБЖАВО Я ОТИМ ОТЯ реко ТТ ВЕ бе

135 не З дя ее 2,4-диметил-Б-І2-оксо-1,2-дигідроїндол- | 305 |М-1) г і; й (32)-іліденметилі|-1Н-пірол-З-карбонової мем, 2 і я б киспоти (2-ацетиламіноетил)амід н 136 З 5-І5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-(32)- | 500 Мч ви лі і б й іліденметилі-2,4-диметил-1Н-пірол-3- 5О2 (Ма "7 К. 7 карбонової кислоти (3-(2- іі оксотетрагідропіримідин- 1-іп)пропіліамід ' 137 а і 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроїндол-(32)- І 454 |МА!) не нак; Що й

Е іпіденметилі-2,4-диметил- 1 Н-пірол-3- м'"сн, " В в карбонової кислоти |3-(2- й оксотетрагідропіримідин-1-іл)пропітамід 138 5 дн 5-(Б-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)- 438 |М-1 шик - іліденметил)-2,4-диметил-1 Н-пірол-3-

Е вон,

Фе а" карбонової кислоти І3-(2- сч 29 оксотетрагідропіримідин-1-іл)пропіліамід о) 135 З в 2,4-диметил-5-2-оксо-1,2-дигідроїндол- | 422 ІМ не р І Р . "І (32)-іліденметилі-1 Непірол-3-карбонової сч ! нев, . г. | о кислоти (3-(2-оксотетрагідропіримідин-1- о

Н В іп)пропіліамід о 140 М 5-(5-Ціано-2-оксо-1,2-дигідроіїндол-(32)- | 447 ІМ ї-

Я оя-ин чи іліденметилі-2,4-диметил-! Н-пірол-3- ї- т. Ге сн, . , Фе карбонової кислоти І/3-(2- й оксотетрагідропіримідин- 1-1п)пропіліамід « 14: б Трифторацетат 4-(2-4(5-15-бром-2-оксо- 486 (Ми - с ще Я и 1,2-дигідроїндол-(32)-іліденметил)|-2,4- 488 (МА) о со ще "хо диметил-1 Н-пірол-З-карбоніл)аміно)етил|- ' 2-оксопіперазин-1-їю -і 142 пк З я 5-15-Ціано-2-оксо-1,2-дигідроіндоп-(32)- 430 (М-11 з й іліден 2,4 ІН-пірол-3- и нон, денметилі-2,4-диметил-1Н-пірол- т 50 н «с карбонової кислоти (3-(2-оксопіроплідин- 1- ав! нн щ іл)пропіл|іамід 143 Й кое 5-15-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)- 1 470 |М-1) на (дин зв і й іліденметил!-2,4-диметип-1Н-пірол-3- 472 (МА н о й й о карбонової киспоти (2-(2-

ГФ оксоїмідазолідин-1-іл)єтиліамід во б5 т я а НИ ув и о ес т в в ев

Ши: ЩО ШИ з я ке шк йо Ши с а вия нано а М й Ву

Кк «й ЗД зрос т, Ц Є ше о ОМВО НВК ОЛУЛАННН Я ЕН ОКХ рве тя К

М х Мі ШК ква НН НД и и Ж: Я я СЕ НО ак в й Ії шиДеншйТин и ам Оля те т пе тоже: ДВ НИК ЕЙ ек екв і А виніс во ві нн соя оз сія ШЕ Й ДЕ

Гб В шов Кг ся Ша Жде пі о ВЕУ ЩЕ п : р я ЧК ЗОВ ться свт ВК удюм ил М отувх п. жк ; Е

НЯ ТВ ЕК Под т ЕК НОЙ щі нер В о Все ев пе о ЗЯ Ем у то ЕХ Ен: РЕ З с и пк ун БЕ с: рх

Г: Це ян Б В ей Б а как івііуй 1р-4 МЕДУ паній кс ще і

І: НЯ М нн й ГЕ: ЗЕ ПУ т 6 з вх Я ОСТ ме я кі кн «ж- ес: ИН що гад лк й Щ ще зи оон ік А вн чех КЕ

А «і : Й АОРТИ У ЕНН ще шк

Мк шо ВЕН да икх тво сани в Бе Р.

КЕ сіла ме» савани прос уст ІНВ вас. Св сах содовий Й: ШВЛаоою тет освржн сн Нв п р НгІ В ди ЗЖу су ода Кен уривки БАЯНА КС КЕ и У весни І шк й шк ше нини Й ее ве ее вв тя ес

ОО ЩЕ пак св КЕ ен сни нння і ай ншннсь ев в ше Б ша ев

Як вх Ме КА Акти щем а а БА Я перо МОСК ОЗЗУВЕО 800 ОБЖ ТБ Ин ей р я: ст ДЕ ЗИ Ж К: іейже св: ЗМК М с; З 170 ЩЕ и реве Ж. ей них Ч і: Яр пеки ре ни ЕН сок ле кв я" СЕ ДВК ок НЯ БЕ ро. З

Б: що -Кя сек че ИН ДВА ор А КН я Іще де те и я РОН ок пооневнаста не Зенес Ее ж Зіновій пинсоонй ніс НИЙ БИ ЩЕ

Ех я зе Івке свт СВ Зк Ч ее ЖА Ше ЦЗ Б Я ще ЕЕ НЯ що ши Я Бен З г. шен зе нндж кре Б ще ще й і Я Ук, сну лет ІОН й в пам не кино Ву пп пов ВАЗІ ай ЗЕ (Й й Ше ов ОЙ ' й пани на АК АН АЮ Ж р ще : ву КЛ ав, ще вв іс Ве ЛУ ер Кк ЗЕ ще

І Я ще сер ВН з й Грета хна і нене Ск т ос текс ря кави ся Зно За рінй : ще я їй Я ВАНН ЕВ й ЩЕ А Ж тре

З ї ії Я кер рі пе з те ж. і: ре віта с 7 с Як Пер и Кф УНК КВК шах т, ВОК св а

І: І Бо Я Ех Вина а ана На. Я Я

БЕ СЕО ТИКИ везе ШАНИНБЯНИ СЯ МЕ ТЯ оно нс. АННУ т ВЕ св и з В о Ж де ще ЗЕ ВЕК ЕК Я тега Зв ВИ и Ж

ГЕ вин ев котик в лісо КЕ шах Ве ек іоніана тн ване ЗНА кни А АЙ, ТЕ

Піко ра ОО то Що пржа в: ТИ ооо ОНА р а ЕН КК НА КМУ Ак рай На ще Реве Б: сит У -ДНЯ Є БІВ Р Ще не ие БАК, Яке юне Я шк с не в педве с кут дк Є ЗЕ а Енн, Я. З й

К то МИ ка ЗЖи ЩЕ пити я склер ел БЖ; плюах лини т Уйх

Я І Бе я: кі Як Ша а и о щ

Ка Б.Я (Б Й. НИохани Че. ер АК ТИ р Ка КК КИ Че

Е ріг алу І фу: СИМ і КК Аня Я м ще аву: речах ТЕ ння : я са Бін РК и увея щи ія: З ВЗ Я ра т яні Ж р що пвх пи вдос зді НЕ ся Б З З же Ей ів шо я у Е; АВ ся в Б ще

Куй С Й БО й й ис НК чаги ие ПЕ ще ще ще Боно ЗКУ ЗЕ «ЕП Ек КК А Ве НЕ в Н. Х ЕН і ща скан АЖ ж й ДЕ ля р пк Е де: Петевіств ий ау ж Я

Ж Же р: урн мона ям Тоді вет З с

Я аа їе лрше БОШ З с я кмин во ай аи е А А НЗЯ а стане» БЕ Й Ще: ЗИ Й ре КЕДИ КН КИ рн,

Її гії ди вве "ШК Я ний кА с вх: МИШКИ КН Сай вх у

Бе ще ПН АК фа яв Іфесналют жи В ретее ЕК, ях вн

ІК, й дове я я ій принт и мини АНЯ КИ па ке й Ж. са т, ОО ВИ ТАКЕ. Но й І Бій в и пах и АК со и СЕК пак чик ЕВ еле вв ки оре скота и дк ще ЖЕ шт щі Базар я Ай рок Ве тель вия Зк ЗУ тя г ун нс, Б еЙ Що с

ЩЕ зн З о й Кара АН КИ І ня Я ще й ще у Ка. Ме шк Ще ев е нн сін зе по ій ще с цій

ЩЕ В: сне г. й Ж Ен Ге)

Ще ак те Кк орда но ен лі іван Я Як чк Е, Я а о «ще З з Ди В сукня вві я Х Ем Еотяна ЗК лення Х яння: ЗБЕ: ЖУН оОіХкшн св ОМ ПЕ Б і ку ДИ тен ж кв Янів нон п жтнов иа. плей, ат р НН у таж ви а я в нив В я. й зва Ве ОЗОН ев ил де с Ва М:

Яся Де я Ну п р Бе у ЯНВ Хода пе ак и ОХ іх ні, ве щи

Е ЕЯ ДА І: о КА: ред МЕ ЕВ ТЕТ " Бий о ЗИ ій й ша КУ

КУ ЩЕ днях ТК сна тки вх єлЦІ Коен. ж сті мажуєхюни сіре нейуеи си зна, С фувдее ке

ККЯ з Во ВО яса рай Гейне ВОК саке нні КЕН ВИ сні кн НЯ Я се

ЩЕ З Без осо ок ке: НИ па МИ ка А ИН кА

У си й ще рин я ЯН т Ксеня ща ше

Бех ; Ба ака и т о З гак уКЕ вх сте уко кл то вся пт в укупі: кеВ щ се ве З аб й ой МВ так ий вх і р на ви и Ер о СЕК, НЕ ДІ Бек я Ж ЛЕ ав) 7 ск хв. уж я ак А А НА я Не КЕ

Ш Б. ї я Во і ще ГЕсенк я оленя В дея ваги кое Кві кора Кх ди ж ЕЕ пе й с есе. Й й ся па Й й й ще Й й й пкт, й Но ет ки ДА я три Й Щи й іти, іх Я в з

В; Щ Ж ре з Пд вк сх ЗОН Ен КВ ато Пе ШЕВНЄ АЕКЖСУ: ре В ав) ще .4х ща Ксенію Енн ЗВ ов нія Ле ас о ен на ноу МПрсес ес пе ИН сойнівот я тд Мк се п У Я: ЛА ЕНКа і. Же Кия КИ ве ПО ГІ- з

КК зеккесасрет у п Вшкіньсях ля цист отноесросе норксят кріт т вна тт С рЖрнльмавй Страус вия ВАГ Зіна тато кр в Кр ту ЕІ ЛНР фс на ув Код лив тк ск и рт ення о ТЕЖ ли КО іторєт я ЗІ

Я жа сш й ЙО В У Кові радио. дій АТ

Як НК же й ще о и он В и и ще яр. СИ де п тасле Б. нд рн В а с в по о оо с В В м й я ий уяв: хо ВВ НВ вх седвжюв с ет крхдитя ззгатко щ дню ЩЕ: КЕ

Я Е; Зк Зв зд: г; Де и и ие В А Км Ж 7 кій Я ша Ще даси они нон ак КН р я Ко ви е у ПН с ИН ННЯ КК М ЕЕ НН Бе що «щ

КЗ "Ж а ще Ян й Ех Я есе орлкве сим ШИН Не ЕН З хе более щей щих М. сій ЖК м Ще поли ре ай дин с то де КИТ КЕ АЙ СКУ ЕК кт КЕ ВЕДИ: нт пуен я. І. 5 КАХ я Е в. Ек вУ еК я м в М аа М ще р; «

Кс Ще ЕЕ р шина КЕН СИНОМ ОСЬ КЕ ще

Ех й р; «Бк пи ен ни в я КИ ЗЕ. ЇХ «Б шення ка зних ма я ост она вв Я мо ен, дії Б оЕНяя МНдеЯ ЕІ Тех КЕНЕ янв ЗАВ я ВНЕНЕ КН ст аг шщ шу и ЯКЕ фр рю пил у ой и и ня а я пр Ен и в в Я:

Ме кп й опа и он не по вина В

Ко о КОШ Я ження рн вки яви иа ку НЕ Ве и ри НЯ с соя ВЕ зни Можу БЕ он о В і сх з о оо В Кк в й Ж гав: СЯ за а: З рені вкьнее ель сте опи сг всеж стаю ун Ме мріножЕЕвитеим сокир рве, ЯКЕ. р

Ще й НПК дві Й рев сен и най а ЯНВ Гея "й и Р. Боя нг ер ев ВВ ІКТ со клею ній он ван сонна Ж - ке хг Й ть дн Принт сни ета, МАКИ АН ли и СО п Що М и КВ Бей ря от АНЯ Б п Я Ж

Я ще рен МД рек то Е Веди и и и Др и КН Ес ре ся ТЕ Бони вже НЕ Явно: Я ще Яви киян Ева Ше Те Я з Ко Ше яр а ВН у У ми Я КАН и Я м ВИК, АК р

З Кв ій я 2 Ж Шен сійннв у Ще ху

Я г З сш СН Е На айоли ОН ЩЕ же пЕ ЗЕ я зх я. Б ся ис рН ДЕ Кв ї- ск Я

Її. с й Я ііі ан лини й чан ні ие і Ще

Ж я: Я у Зк лак ЗЕ НИ КУ Ва ЯВИ, У 4

А - Е Шик В кра В рес - | Б Ве А ях ЛЕ КНР ЗМК я ях перше - пвстклиьяне ї ль дос тки У нс чекареньк і поет сжфитен Есть ВА порно нат доріс іт Ве я Кіоск ііі

По сна Ин: А оЕс я ак то фо У зу Рот МУ те хін стад т ВЕЖ рю кл у вв ВНТ ТЯ ПАЛ ОКУ ТУ Бук Менив ку ун вуно З

М сов -йн перс ри р ДЕ Я АНЮ сем -І ще осях еЙ ЩЕ: і аа са сл а КА Й с ПЕ СЯ в; не ен

З ря се п МЕ нести нич ник Кота Ок ступе одн» кірки р

БеН я Б сх х Й Ще: ер жив ви КАТ рак ку занин ви С хо щи Ка Арея с ВД Як: КИ Га КОКОН ИН НАНОВО НН «ЯКУ

Ж. Як Боби й и Ор КИ С й Ж иа, М ТАЖ Ра мк, НН Ше йо Ж Бе щ-

Я шо поййвеьй ий Кох. до я ЯН вх тв кн з орви ХЕ рат Кк коротка Він стат КЕ Ех В щ М др овен В ня БЕ: певна ок Не ери АН Я

З роя есе: С Е М ж дтую ОВТ щи Ж ве с Я са века ЕК й. КС КН ай т ку КВ НАВ ОКА ЕХ Кос Есть ДЕКРЕТ КВЕД НН з п Я КТ о ЕЕ В Нову Ас Ж о ПО г» ше шо ниж ом ов о ВЕ ев т в о КИ жк жом Ж Й пах ск. ДЕ есе На Ки а у Дауе а: Шу ЕК: К нш Я ре Ж бккнеюи А ен А Ше. 0300 ОЕБЕ, га зр ж Як сце В МЕ Форт: ве сн

Е и а: я. КЗ пе. всриннй і й БКЦ снення в С: г уае на икеенмиеМ Іоф сен се ЩО ЕЙ

Я й Бей со ВЕН дн т. ЖИ : ТА о іще т Ха мін СоойН о щ-. Бо с ск В ва З М м со зе сна у йти ВЕН него ТИ, : Я:

Я т тінь ост; с Й тав ЦЯ ера кс вА ск НЯ сов ва тс ни вик их Я Ей 25 Е на ЕНН я ас кис а Око і ще Е, Кер нен є, Дн ка а ть т нансв раи 2 віх ТК сур ре сет ен ЗВ я. хи ай вики я що т 2 1

ГФ) я Ж Сх як рова вся тКЕ «р р Же МЕ ж ЕНН НЕННЯ. Е що й

Бе «ре З вк нано секс В ЧЕ ко Б НИ с З ЗШИКТЕНЯ дід нн і ЕЕ: зош сне зрив се Кк Баш «СЦКК ріки Я тт рвати Інрй ЕЕИИАн Ева несрнисвневьй вс еле р каси каст Мт сн ВЕД тр ЕЕ нот сі тич Ти НК ОРЕ ЕЕ не т рот Ст лий ЕЕ К. Сп рий ні зе ет фА КЕ ре тн а вот Ен ЖЕ Я с сдввжх яз ЗЕ ой вв рід ;

Ем) сх НЕ: й МОН Нв ШЕ Се КАН в один «нн дови прое нм нер я Ат тетилАжтукк ще ЯКО р шо а ВИ ово довшою феКЕ ит ЗМО ще ще звевие В со, жк Я Ме и нс ко ее ДреннНА еле Б Шия є БК ще ще НИ и сиди ОС, БИ ЧЕ Й нн слов рон вони в ше З Пенетн, вв

Щі Кк ОНИ зл НН, з ща ее: пости сш ОНКО ЗК слу УП сен Я Миша ях г й ах а В я Й Тернвнорноде М Я окон тютюн Кон вай КО й я С я о сей СЕ 4- ЗИ ЛЕНДОеч АНЯ ай кн й ця пі те ю шк З о ср й в в ВИ ЕІ сх вон нс Збес М я Ева не, шо ЛИВІ В о ій Б. й

МЕ шк пи. хх Й нь а кот с сс: ШІ нев нс нка сотні МНЕ Є З

ПЕТЯ ії ЗТ ше с -Е в ша ЗК сення ВО Я що . і Те й й ЗІ усе А ств ен В ВЕ ей В де те ї ки Її: ро «ИЙ де вич ВИ КН пор КОЮ БІ; в ЗНЙ В

Як щу ще: ідея д А Й ни З г ЕД ся ШИ й . лх реа ов и Е ЩЕ вежі в ца ШИ се «- спе .оідшні - ШЕ ех ік Вк сіся 7 ті ше ж ЗЕ Сен арте фея Те я ВНИМ ИН МИ МК Я кал п г: рих Ж 5 а рай ТОЙ ЕЕ пи Кс є века нт поевдан те ск б рннінітнє ій нео ноікК ників і я ві : з КЕ м Я Енея Енн он епі скся він БИАВ В онко окуні те

Е А ще ссшнтвюш, ЖК сло Ве їн а ни р ЕМ мені и и ТАЙ м

ЕЯ же ис хе ще ше ши ре ДИгДНЯНДОВА ОА З я ни І

М т Над с Й 00 ЯМИ Чай я вки ско ни о ери о нене ев й Її соя й Кк ОО НЕ они певне УМ ПМЖ озна МКМ Те г іс нт

Ей : З Би я бстнс Як І НАННАЙ ек и НН и вені пер я КОДИ З .. . Еш ИН о дет ШО ТИН дити ад ват БЕ) т Я вес ЕІ м

БЕ СІЯ це Бе ща Позов Я ре Бек лак: Винний Пес нне жов ВЕ с Ж

Я . Ки я ре ДН ад Кг те ШЕ я

Ей щи у т і нерв нок вій ав Сн нових нта те Н і . і І й. ВК СЕН ЕНО Я ово Ж как кв дк КА Не я Б; ; В "ж. профе ісажт в р Е

Як Я «Я по а Ноя З Е ебнний же і сн пінні кий «Бсвщою йо се сь Ей, ОН Ки Ме Кі. г ут5 5 ЯВИ свині Таня Кіш т ЕВ В еяЕя В ом за че ай Як і фе Сер зажання сс: Й Фени Мов НИ Зоо нтктнчено «Нкевной ння

Що. Дрбе дош ше Шкоди гине нер а мк ие тн Кай ще Ж здо ко Ка и ння шви и нене з а Дедал го І. кі. за З. се щі нев т ши ще со екс сне те ства нене ВВ І зар а КВН й

Я пеня В из ти ДиЙ з дерев диму к ЖЕ пін Ех ЕЕ ШИ

ЩЕ ЕЕ ШЕ ге ЕІ ай тен с ван и ЩЕ Щ

Е щи се ЕК а Як кан ЖИ КО КраЯНОВО ї

ПЕ й зб ВО ін ра ен а пелена шви ї рр: ЕЕ поки нк: ливе и З екол ння вані ін Я ке сит» ве снкііікіння КЕ он ККД Ше тре й вип: 7 я Нд Е ро пише мае ДЕ ИЙ рт око х унажн косьіноне ТК внен ЗК ко с ух Ден нонененн нн ря

Пп ПЕК: Я а У и АС І куди КК о У онко кеч т З

У Ши щі о тщох ЖЕНЕ п, НА ще: ща ве СН мая и нан Че А ии

Ж гі нен юс ОВ з Ден зі не ствн нн Ясна В нев да в елнЕйівн ік осів Во вх Ме ке і ПВ ев св и ШИ: НИ й ев ин ай схов велннв еноліс В Кіль о аю В - Й у ак Ши ще ИЙ скін ма ОД: су БЕ ве - М хг. Й в З Шен егНЕ я БІ і зве ОН В Я

Ж яке Кс: фо; ее ен ВИННИЙ МУ ЕЕ. о ООН кв у пи ния Ей й. ща Ще Б Не о тя с КСВ ікс Й рн с ввевнтинн ки в ; ві як

ПЕ Я ее» СНИ п а ме ноя ВА НИЙ усій т ЕЙ КК:

ДК ще и І ев вес и се не ОВ Я ж «й ще пдртьнє еп єь ЗНО | й р . т З Б ОТЕВ та АНКТВВ БЕРИ ї т : Мадищк ШИНИ Шк і НН а НВ г Я й

ЕК он уні нні не ілі ПЕ нів: «ВЕ Зв рвияс Гл ср, пеня й пай й де шо вн 5 ре

Ні ат от ПАНЕ один вні елінксннавя й ДО інн ї нн ЕЕ нні З

В: Я. один х ІНШЕ н В ї тв ди ян сен Ванни ЕК я : Тк вві 2 тера їХ

Б. ла: Зенон й о де т еле тт тт вина МЕ нн ЕЕ ГК ні нн й жи

Я о ау ід Ши в коди в не а, Оса рН АЙ ЕН т ще Кок ЕсЯ я ож а дит. ле ЧИ ЕК ря Ж р

Но з с: І КЕ. от жа І вл и ЗЕ сккавсх се Зк ск ї

Не г: ПСЖ. й я я: шМиДдекМе не ИМЯ ут Й яв їй ТК зе Я щК. кВА К и е Сове ро ме Син ЮКе Піт во ЕВ що Ще ке злет "Ат й ій пе в о ект в вою Зв вен ж пе еееа ек У йо я ї З кв в Е я дерен ОН план ек й діра т яетя "підви ше й се ще «ще Бе нев ИЙ х щі "и АННИ ев А Я т нг ЕЕ Б хя БЕ нт нин ж фон: ЙЕ Е шо ; відн оре ЕЕ ВН Мене сх птн: ТЕЖ ЕНЖВИ Зевня У АЖ. оядяоожуюти ла. як ОББИ КЕ - иа в ни Я в й їх Яр

Ес М ще р едгя ж. ДІ с Кф кн о и ж пера ноту нор вра тво ще Я віх що ще ФО Мйеня МЕГА Я у ня І тора нове вва ай Ж щі Я о свй рі ВКА КАМ КЕНЕ Оки У екс есе неза лена че

Ех щи: не: З Я Я ем і нє КИ, кни о А ІВ ей й Ж: Ба. й ДИН Овни оею І Оде; не й ї

ЖЕ фо жо со ие ши а в о а сі нано он СОВНН в -

Щ ще кеша шен 0 УНІ МИ ЕН не ЕК Нм Кк НИ І

Ж. Те пе Бе Шон ве ах о ис МЕ. ШИН ИН Я - ее реа т ре З; и я пах: із й Те г пу вес щк В

Жив Ж ПА ості цен за АН НЕВИННІ, ше й пав вн Но ні ке св о «ВИ ОНА ноя В ЗІ с:Ш а кс ВКЛ вк СНТКТ ВИН дод: БЕ х сан ї льашюдив тин Мак ти тв МЕН кв яка у, рю її кт кош ествтЕ. у КОНкесі ке тесннт вна пк у ке а гв а ВЕН нище ре Ше Я й ще

ПЕ. ВИК Я я и чнаНЕТИ дин й лини НН А ; я Тез й оз ше А, ПИ У НО кердярудан рез врниквн енвкя, ож яв соже нон і її ТЕЙ о ВШ Яни ан ен иа й о ч - ще їсй ик Я р ери ДОД АН ВЕДЕННЯ ее нан и Ще

Ж, Ще ПК св ШКО МНН: нах Не Те опе в ін І Її ; ї. . пак я сс ВВ о ЩЕ я ситет нвх пера дять й СОТ НАННЯ А еКИи ВЕ

Ж чере а о її ефе аорти ес свй екв св Ин Зола ще ж с Я ТК БЕН ай р БО а "НУ ЗД зи кіна и а ех я г й су нари Уж: Я КН ка у аАНА На А ЕКН: ТЕ с

ЕН й миши и Я її о онко свт, Кок иа нет свя ан ес Б кни ї5 це

Ес нн ен не пис ея сек сня ПИ и в тенор ня х -І Я: НН Я Олю р дк ин не Кор с не: пен ення.

Я нн Че у КЕ п ние нан пи ОКО Ж ик с КЕН нееа вт ой р- Я сиві а Р іш 1 вт ВХ ТНК ши НЕ . й ше На нави Бо он нн вх СВБ свжосьи ве

І ЕЯ ке Кос: ВИ а: ЕКО и нео раз а с М деене стеми ви: тини ще ї Бо. а Кох Да еДеки ет ка ни й я ЕД ен не т Й ; а и КН МеВ сих ЗШЙ і

З І их ве киш вжи: я зу й БЕ ле нний ОМА я в М НЕ й З ав) ВЕ ші сн в НН Зк р Я КН ТК. НА ТС НЕ ЗЕ НИ Я Я

В. ; ох: ай ЯЩИК С. двором вики сотня сощою у ве СОМ М одне:

Ес че жене З ижотиде ореол КрОВНЕЦамно те у (ав) г КЗ са Бе имени Ер Мі А мА ю ще

Я та -- "4 но освіт под І й пана Біе г р й ва а он г я

ПИ ИН й Б АД Пе НИ НА НИ шк ла пу ИН МИ . як; "о с сну Енн рудні н. ен: ї- "ЕЕ

З нин ВЕ ЛАН ТИЖНЯ Тщ и МІД НОЯ шо Я Те шк ин о ВЕ От ве ня Кон М сіні Коні он і і Нв ііі діжі кеВ ВЕ: й

ЖК Ох ще і ще Бен ав нн фс вв ше шк. ! с-ще ВО ВИН Я ЕП а а БІБ й 5 т: В ва ЩО ай нев ай ав Ес о ов Я й ія Я СН те НЕ : т вра МК сен ОО І Що пис а ай ке кт одвннк Си Гененсн павшнн: ДК : ї за бе в ЧИН я а ти вай Я: фе

Е щи я че ДЕК у пере МКС СОН МЕТ МИ сс а : ШИ Й ВН ові же г З дні ода - Ек си ВН По о

Е М наше; нок ТИ, Бр птн Ві г ваші Не я ве

Ф я ана ШЕ с Ванне й Я Зварити ник ех лк: Ес ше ге й пс ос пох сну ха Я івана дії НОМ т иня ще ї ї рн я яке опіку КУМ МИ М ще са й ще пе сій я Кене Ще я

М ЧК я ЗЕ: ще Ел и ак т и а еви р і. ко же НЯ кн: ДИ заносити ламно тил; А: ще з сна аннне ять. Но ванлейнтй Іри шт ЕК ян: РВВЩ ЕВ. : Е З

ВЕ м он оку Я ші: ш ЖЕК МИ Кн ИН ікс КЕНЕ пе пис Ж - ПЕ прах КК но ис фікація пе яв: сте ЕК БД, Коприва фан коні ік НН

ОН. ето в 5 сша ОА, че БИ а в М Р с ЯН І иа

Ще як гів ер ДБ слкк ве едикт пола сп ет ве ен ВЕРоя, нив са ЕН МЕ ше ще Крот оах- ШЙ 0 ЗНА ИН ЕЕ Ве вна ЗБ уже 5 ше Я ! ! І Б. шо Ей пе ИМЕНИ зо оо: СМ: ЗІ у, щи со ЕД хе в щу: Ки жан МЕ кате ев Я ТЕ й ї

ЗЕ 1ав МК с ПО: . ск: дк вк А я Я ї есе ле г ще я вдо Зав с он З квот екон сни г: Я ї (У З си ай»: ЗІНЙ зо ня ОВ ев р Ж У. Її: о з З. о шет звша щей Ей пе КЛЕН) ман коні я ,

Вр с: дес вКея й рей СТАТИ ВТК Ве вен: я М Я :

ЗБ пив пеетнни, ЕЕ Я Я: крвр цес сок сне тек ПИВ г ав и ПЕН В еВ ВИ 1 ШЕ ие Есе код как окт: й ї я ие НВ ЕЕ ен ВЕ Же в я иа вЕх ДІ наши не вима Б ї релі Бе ст МО основе несе нін КЕН конс, сват реутвнтх нене а ож ПЕК, ож Вінн У ме. НН: Е

СЯ юс хода ей, Моди тео дннсуно сон аеро КК ня озон мекв ль і Ж у вс ов я понад рери кре ве АС н Мена ЖЕ .

Б, 55 певен ет. нт ет. сосні НЕ - врі с пис. шко КОМ іа В Закони че не ї я ще іш» НО пелоєе НИ ще: пе ЕН ЕС КН дар ке Я шк

З р М: ши ПИ ин ВК нан ТИВИ ЗА Ач :

Ех в що Ко ее сон ств Й Ж НІнащи ін, со стрсик ев рпвмвис ПВ й ЯВИ ДК а

Ще Фе шко й Кей, Я Я Ша АНЯ мата НВО с. й .

Ї ; щи я. ; нс У пики ний. восени хай я в'я Ще Жесйедв Се ; ЗИ нене коаютх і ее и ЖК ї ї ЕЛ Не ден міни Й З ЕН я Мо В ке крат ше ЕЕ і р: у - най Ес ше Ше; МОЯ свинки вк ве яке . й Ей ри ЩЕ те чаМеану вати кий я : 5 игтвиснця в я в Же нирок оп вн ронксьск нс сенси !

ИЙ Я, вес пи пре гіпо рр Є ИН ШЕ НЕК ИН ЕЕ зе а Ї

Я ТБ 5 г 6, ЗД З Й КИНЕ Ка терен Папи Дня конт Ве; іл КИ Не з о ДЕ хваЕ Й с МД ВВ т ВА НД ки оц их :

Фо Її. ее Я ск но кеди ти пня НЯ с Я !

Її ж ОЛЕ Лео Бе ев ав Ме ная листи оре не : фе і з шо р ЯК. МОМ ЕК Пет А г лик: шт вв овосененесься ще ЖЕ щ. Ледве Ж о Де ке яр Дикун ие ни ні

З Ес соя: бе в ен дн вна в Ша МК ДНО с с В.

ЗВ я яна ки о Е З ЛИН я й З ЕКО сви с корова НИ ТОННУ. паші ! я ие. Ен кан Менш нини Ж ДЕ "г: ев

Я ще Б се: ВК ее а вн а А сін вові В пики ши ! Ян в ї. г Ї КІ АН свита в; Ве в ий сін ува кмклкнтх Р ПК; пад Й

Б Е- пиво Же. РО МЕ ве, не ссвенях ДЕ знай і ВКА Я т Те Сов ОНИ

З. Ж ніо П р, ПЕБИЄ. ЖЕК ри ов рив Карен. Я : ян Я р КЕ ше хі сн ьо елек ин пе ЕМО ЯК лк 7 КК СОджх кети КК ОК і

Е ве чі ИН Я пав, сік

Я Я У І с УВК змій таня зі АНА га ве стае сіна Канів во ше ! вка річ ЕВ нн Ж ШКО я пи ве ен. иа еВ ПЕОМ швея Я і

Ще Як Ко. ВН ни ВНЗ ав ПИ НААН З є ї і ВЕ я: Па кори сімені ше сн Я Ж Е

Й екон кра Сіно ї Щ сш й ; бнеохсВня КЕ Зав «й пов ти Я: Я я де: ОЩШЕ Я : рт айс ЗОЛЯ заккф неті ке сов Бек Де з до де ї

Бей р: діева З: ве Он Ме ОКО Кен пе Кр жені вон

Як й ден З схо ве вс Винний Кк нин аулітою збір пари !Жя ее о кет ФО онже на ен с нин р са В в ИН НЯ з дн; ще З 0 Вел о пюше не вона нови в ін ееАВ НИ З. ж Йой САН ват вай о нин вня ВВ ск сеть ж ши я

Я Єр; ее Кт що Ж Едем) о Мая певний ик Мр Ж ши

Бу. ЕТ фен, Не В ДН і ян оленів не НТУ Те вн З З і й Щш до рей Пед ие й я ще Енн нір тя с онікс ни В ен се У і; во де я І: па хо де нях ст: нЕт ні стей МІ МА зніс дя: ді ЩЕ (Ей Же нн со ВЕ я тд я КАЛ ВК УА зай райй ЩЕ Ге щей К- нос сам о ВИЙ : - віри й сф сан шо і ра ще пк я жав ави Се се. Е аж ери. вс ніхзв;. СИ «В З НИ С НИ а ЖЕ г і чі нку ве: ї Мк днн соні плн вн Життя К і ( 3 ча з р-н н ОМ Евер ек нео Мети Вивих де иа р і сія 145: Ксенія її йпшх я нене р» ж ще

Ку ИН в. еШи вх Я вд не ЗИ кв фони вжитий ій Ж дер -- що З а АНЯ ж КІ ЕЕ но БЕ карні ТЕ | ! енер ре с фе; ж шаднтя т КБ зам ви т ту кажу Ен а ч і

Ко ст З Я коріння Дн сіння тя о ев Ме СЕН ВЕ : і

ЖЕ що Мк в БЖ ще вне я им полтава се. -Е ле В яджо, з Кия ре одн ші шк КАНТА Ба п и я заа і. Кай Ге а й З ве Ви Я са НН ЯКО ММ келвс ення, сш. рзесчик Я ДИ ніц НН есть КТ

Не Я о -- т щи Ина св ве цу ж

Ма вс У се рені ЕВ що ий Бе віків Ви за иДеЕНннЕТИ о | що ав) я ой ззан И зах Ж осн з НК ас рен КАК в ВИКОН я Ще Б. шк У Бе; вазу 5 дві Ше Б пф нави Тел ср кн шення де у іти ко рук й я З р ї Ба шй ВИ Те ТК я ДА таня своя рН оаяажа дому за Е Як

Я У Бізе. САДЕН Ну нище В ВК асан, Ге ЧІ пні вия ТЕ во Кене В ї

Мшею ше. я ТА ЩЕ. ри НИ Ше йони сви з й т

Мен й: й в наве я НЕ ОД АН ПИЛетьи Жюль: ЖЕ: осел ЩЕ А отв волани; шов жо дою я ех и гія я: або ж я ВЛ жа ЕЕ й: Я Я Кінні ВК ї му: ек: їх В Ок БАНЯ и пак жЕи вк й ія ос знан нн Не ся Я ну ак Не дв дана ГЕ Я і у

Ще Кн кттяки Є пе дк пеки: СІВ СЕ денній ання осаунрня ке вини жа і і р т т кадри ж ин ж и ВІ УРЕ Кв ою т сет ВЕУ Я -Е йо нн г М иа он сад й В с нені

З ще ие о: вна іш ре ен ШВА, А А ква З фс

ЗВ ще Ще ем ЗНяиет но уедалів СЕ КО ВАКме «ЯН.

ГЕ Ж. шт ка КИ Е. ЮА антену ВЕ вв: ппдднею Маск сне ж НАВИ. Тло ват, Мт В ЖЕО В у ж Я Євр ДИ НИЙ Й ідвннатит ки ча ні а в. Ж шк: с і щи ів; ди ЕН АЕН ви ання МИНА - ще, СЕС Б сл ВШ НИ з ЯГНЯ ДЯ а вія ес в коня ПОМІТКУ ск конв | ї жк й ЗУ ЦЕ ТТ и не МН позна тевннвввюьт І ї 40. щі Ще з пис ве ЯМ МЕ ЦеЄсвер Нева ИН Не : -Е КЕ т : осн НЕ ер яв она и ВеККсХ роки ен Ех КН З «я: сяк я; дкдінненне Зевс вис св ЕОМ Ж

Зай плн ред : г; В кожно СВ й ши ї прозові АВИННЕЗ пос ЕЙ Вед не З ї с ще. иа, т З іні нн дЕТя про вату Ей наз ЕНЕ ем ІТ те Я З шщ се ств ВІН ЗА енн е і утанй рент шИЖЕщЕ інже НЯ бже ї і ду о дов в сія: ЕМ: ди цей ТЕКИ НИ Ж КЕ . і ! й й Ен о Аня Гонти Акне пек лаву Б й ве З п 2 в. -Я ГЕ Я Бе геНЩ МЕ Я ПН У. ЕВ ій шик М перен фе Дін - Мк уКОтшед з.

Ес І: Нв ей ЖОВ Чех с о вс до нів ВЕбені яи ВЕеив ее сню ВИ Ол в яке р ей пи Й дк: зн ее ня в нд ретта ин Гай ГЕНА іні дна Ек ебуя: сни ння а пи я

Я з в ке, Вих не сйнй Я моде ТАНЕ ПУКР ЕЕ КН ЕН наве те ле віти вн жів Я нх ей : Ми я Й; ОД ЖЕ. Ера тикюовх Епік МА Не и В ІН у що о ; Же п Ее конЕси зак вае еф тесткссо ЕК я и Я ох Ел і, щей З

КІ Я я зи й АВ ВН ВИН НА Полф ке снінй нія ДЕКО прстокняв: г І не вв Б 45. ДЦ ІК у Ж их ШЕ фе. НА Ин І ИНОя Я Я мс 5 дн не ЖЕ очки: ОА іх т І: Я в Е оо ово зкдевстеввою ие ня НІ т і: |В Яке ло ексх НИЙ я Же ЕН нс УВУ И т НЕК ЕК нат т -І Во ЧА с, ЗВ ее з вень діди, НЕ еВ ря АЕ !

Бе о ВКА і ення Пи кл а НЕ свв КЕ вузу Ар Е, КЕ ! | ї. й тоже НД ЯК ее цій УА ПАЗАМИ рен: Е ще ги й СС ИН ННЯ теж село ІЙ ї я ОН МЕ У пкт наовитевня НЕ в Ж М

ГЕ еомдитну зт мкл сять тео дЕКИрЕетьс іоаврритта Ж, : на: Кіт, тт ЛИН Вей ще Її - | на - М вів вт Я. т НЕТ ее щ ї щ- ЩЕ нн а еВ ро вия пис нс се те Ясні мен ей :

Же НО а па В і ОН тет тут т і ! ! о ОК валдят о тя ис нн роя пн Кін восвннн ї о ї НА се с ще КеьванеЯ І дрдлосжтуслов тт іс Ши зт інже ее МСЕК вон В со ва В ее З о Яке Як з во а хе лак косі поки нен нееньсе ев ЕВЕ ср іваея іні в і НК СК Как ве

Е Ще ВИ й тих си Не й РЕМ ПК Да ев ано я ПК вв о йо

Е У ВБесвис до ах ЖІ ау п я ЕЯ дея у ІМ іди Я МК нн Ка, я о в і Бе ен Я У ДН и ак пара Ва ен НН рий Іа ве г

І Го) З (Я ; Я Я. а их нь. ЗЕ ів т Ві шт гншкля ср ЕК Ні не поча Арсен й І я мих г і ще ЇЕ сало ней " аа і мив, ДЕК е Ес лев жх КН скік со Ан в АНІ о некестьяи ее й ях

РО кт, Керосесонннєг х ОНИ ТІ! АН МЕ Кр я ру ен водно : ШИ ше ще ї ді: 5 Р дн: війок оку НО ФА, В пн ев Ко вони ще Ж е ! ДА песни коси ЕВ тет ЗК. ЧА НН Ки нта ТИМ З ще Ж НЕ "В Се и и МИ КАН а ї

Ф: ця ї З пен КОН ЛИН р гу Мав ж

І зх» НН ев тт кіно ПАК ЕЕ УТ НН А Ї ЗМ ШЕ ЕЕ ЕЕ . с я що кволі з З ПНАлЕ етроЕК нт ден и кт я я ЕК Ку сн я у сей 7 Ї

БЕ ж уж ЖЕ стае Віз кокон хв ТЕН те т вк кнКВ іа тн ні - Ї.

ЕК: ; КН Б и, їй. яри ОО. Ме На А ие о пи анти сенат : фе г тч Пер п Марін мк де: Куауєм ДЕРЕВ й Тут в В ве і вн ТЕ, вени тн ниКн у

З й рела т» Ве йон В и оси БЕ екранні

КЗ ІВ КС я я сно пи тя Коох В пс жна НН КА ще Ява Ну МОЖ ; і | рані ЩІ в У пише ПЕНЯ як 0 аж ру з пе. Я й ї В чі се В ера ус ккНуй Кі ЕРИ се онов Я рккрннскиям ВЕ Ко я й Же ев й й ШЕ Не кві ніна сви ов увлея Желе вів я Си ай Що ко с й Ж. СЕ ей я Е ща пилаеЖ она ше Я ин тей нав я і

Яку Й Вк Я в ше не АЙ Емо в зЕвй Як В 60 З ек зй й ек пошани ин їх ще ї.

Пи ндо а пн ЩЕ п прес він | К Її

Ес ЕЕ тт в ве ку як, п- кейс ВЕК й Її Є

Кн ни ііі в вікна» нні нак т й бражки по

ЕОМ ре КО нн Міжн КЗ йньнв й й ще ря т Ен одна ванн вар Стрвен ск: -

Же Я . Зй ке в Я ся тя ЩЕ. шик: сов ВО кн

Як. Бей -істя; з Б КИ ше пу БИ іній пе ня Но

Б я с ре же Ку едняЯ ЩО ледве х. вв Ав ЗИ ее литва п Ек АЛАНА Нет

ЦЕ Я ще Шен ши ше в о є ДОД СЕ сонне дей вен а дес «ЩЕ в о ОН с НИ З нос по ИН на см сйне ван: а ШК соя ек

Не щі ВІ; й Кл . Зо ПИЙ пе ВН с СИНЯ ув я о й А ей кН Кр мь и й ки КІ НЕ ук ер и их ння ве шви сел Е пря: межи М. т ЕД пн св

І ; ЖИ Я лаки кос м пропан ДОЗ еВ сів он в ро» Й п ТОК

ЕКОН Ех зт. сю ВИЙ Еш ж ме каміни ка о А, ект кв С як 7 же код Й же ОК нс Зв він, НА КИи аЯ т НЕ ВІ Е

КТ з І ЯН я В катки ппжиниянат Мені ення сонна нак ілі Й Б Я З ря р й Ве У сь я нев нинно де и у ТНК нак УК ур Е де щі Ес с оОрін ЯНЙ й Я па а В Ин да пк Ж я ре: у У іа Й А Бек нен Кевавт ву НН ик Ес сенатн терен ох г Й ї і: в рос тв АК к ви фан ЖИ Навч» її в 5

Б.Я - ВВ Ж сн ня МИ ин нах Ж й : кв ьсневя са кн ни ЕНН «Е ЗА ст й прання Же р

Еф Ссй в фтнннний айв а У аа Яни ж !

ШИ: й жи с ЗЕ одстннинн РВК екв ріки Ер М НН Бе пе сте ОНИ - Ж Вова нин ка с а М т й й 4 : Кові НУ УРСР со кот вв КК од ця Ж З й; х . що Я МЕ У Ж ач, ій о нази Дб ця ст х 70. Ж ЕЕ че сек: вині: й БАН ТЕ па я тд ен ен НА ЯчИ це с, ; п й Біл Ед ване БОНН. ОМА Ноя нс нвнн м Веде ди ня Ж Прі оно З

Я ще М ск ЛЕНА, ся 1 пуху ле Що т МДЕ АД ПЕД ря при и ма ер Ей р ак ЗА нет 1 пасує шк й, нд він е ся ун фан Кен З КТ

ХЕ Ч щ ек. Вина Зк. НУ пн С ЖИТ. ЖЕ свй еф няй щем

Ки Я «КЕ весла Й шо ек ' ще 0 ЗМО ВО ось Не ій на стане

М З жк сла ТЯ і сек КУ ПІКИ а а НИНІ в Ки сін 5 ПІА Некх

ТЯ: КУ ок те Кн у: ВН ІЯ БК 3 се ян дн ке нні А НА Й їй Ж з Кз бскт лес» - ВИ Я Етатііввщт і роннне інн. ре ще 7-3

В и ЯН З Ще У прави аву А ду и ТЕ со дрн ав р: їх г ЩЕ ПеуЯ в Бо енес анонс зу СІ в нео іх», Я: Й

Бош з Не ще Не и НЯ ПЕ ССЛЮТН а ІЗ

КЕНЕ ЕНнеННЯ я А дл и Я ше ї Ну вий й вс ох лю й ЕЕ т. НЯ Я 15: ри рен й йке сли ииКа диких зр ИНА КН вно В кн НКВД С ИДЕс за Ї я ск а КЕ КВ інн МЕН Вінн ней ННЯ мств я АКА ен. Я ВЕ і "ж би В пив и я є йо и МИ Й - же

Я Я ке пав а г СИ ше ення ше ОКОМ и Не ЕРННИ о ТИ несе де ще Бах ЕВ он ше В Ве Ве ИН ОБІДНЯ й КУ; Ниви

ЕЕ ЯКЕ ос КВ Ек няня М СЕ НІЙ ша осо НИ тен СЕ ЕНЯ ІЙ вон т ЩЕ Сб ВІ каве В к Де РНмМеТИ КВК левова не ай ШИ па вн х їв вки М неза ія реле ИЙ Як Нв ЕК Вер вк я зе он и В с в й НЯ : Яся

ТЕ я ес сни ВКМ й ІІ ТАН в твер вв МЕ тузі сів в: не НА й З

Ж я яна. й Же ВИД фінан Ду ван ве и Бе Е

ЩЕ БИ пф Ще Крик о Б КЕНЕ ДКяН ІК) ще НЯ 20. Ж КЕ сс» В КЕ карбзноної кивав ек т ! У в Я Ба Ж СЯ ява ки сх Я не і Е ; п ЕЕ й я .оашерол в ВАвопеу УВА НЕТ ех ве ан ій еле ев: не ж: ка ден Скотт уасіс живе ж ДИ ще як

До В й ся ДІ М я ан ТАНО я Пр нти Шк ян вне І: я

А Ей птощща 0 Й Сень поз За птн вия Кекси Ка Но СлЯН Ще

ЕЧЕе ПЕ: ОК ЯД.: но нер КЕ Е- ди зи отців: АЙ с ке ЕД Ке ие ВИН Кдисьенх а я з- М ЕЙ

Ей В МЕН: пе с ке кола вела Ж вин рей зей й ва ЖІ Тиса Води МЕНЕ даси гл да

Як й і й до ЗЕ ЦЕХ Ї 7 хм ул свв МНК ДИ ій Ен ЗІ ее Б ЗВ кедах ее МЕ МТ- НИ ЕН п івійих кан свт, ПНЕЖЕН ВК ре ще есе М 8 о а й МЕ с швея. оон КМТ В ж нн. хв соти Ж щи ї ср: свв ВИЙ чех пн ен ее пат рЕаа меи вІл Кс зв на ни

Фе ще ТК. КІ вк КУеЯ ню нон ние СДН сам В ве о я Бр пай и 5 ЗВ М ИНА о ен соваде ес о Ех Я

Ще ву есе: ОЙ Шк ся ЯН с КА оса и КИ вх, Вр ших сесій я Ж я-- АВ Ж Кене стек сс екідтатьих еТе ОН я п "Ап скшер сп стріи нйних -НЕ и УЖ ж алу й пдьк САД й, вна ни Не. ря Най: кер Іа В де ря іаінтівакі дод, Нр дети ПЕНМЯ ана БО в се "Е Б (о)

Ол Е ри вик, асо ік ев, ай ен сдрссто во Й Я ЕЕ ЕЕ ій їй фо Ол ОК жене 1 жо и КК оте вдетн ее КЕ сне - -к іх щ те т ОВК Я Звесще КЕ яв с и в НН Я 4; х

Не З Кк ЕТ се, БИЙ пед СВ БІЙ Сх в Ті умЕ маже аА тк КА и оо ннуанй ех ВАНЯ й Же т Ех, кат о Же КИ КМТ КН паю век Де ен МА аетн АН но нені ЕЕ ій кій их й КОЛИ нік ння ке нн сти днк ан ИН ий ДЖЕК НК Пд НЕ їх ге А ВО я Я ШИНКА МНИХ у вва АВК и Еш: Тони ЕК пд В й

К ж у и в зоба п ОН а ЗК З ВНЯ ес ЯК сс м оп КРИК сення в: ЗИ ЩІ а Я,

У і: сих хх МІЯ Пр осжаай 3 Ех сірка Ку МАЯ екю гори етаткоя Й ій о угттья, повані ВХ ща : | ве ЯН Ге тес нові свині З ЕЕ ЕК ДНК син В ре Ко Ж

Я Я ЕН сл отиЯ ема й тен РЕЯ ННЯ у в я она М я с

Б яр я доіки син дикою не ян Оцеа кеКУцнОВог БЕ р ко ще хз нн ве пн ово сен все Й у

Я ГЕ се - КО НОТИ во Я гене три КВ мо тя Як

Ж м дт В зл вени а а ДМ ВК ек ро з

Бо же не панно ВІН вІНеК, Те Ж Б БЯ (ав)

ЖЕ дхлех КЕ, ви яв ЗНАКИ ск нн й Гей

Ей ра ва Ес НП жна псев ря скеля Ден пі ся Майна, ов Бе я Я: ав)

Же В Х як и АН т ИН ЕНН йннвс нн сени о нене Я: фі ов Є бен соді ее ОН ее тона КВ і ще

Ве В її еле у о Кк ре вн пе Я З

Е -Ж ще ре ва Я СК: тп детнтедянх срекаКо, пз ар щи Н ра м аж я він вия и а ЕН КА ли ЛИН Зі як їй МУ про МАЛИНИ евАО ук ВЕР о КИ ПЕК те й -

Хе: же Ще. У чи пон АКНЕ НИН Ен ові жЕйі ях пе СН а в, г і шснне ЗДЕ я Бог «Е героя практи ЕВ сь во ней но в тки ЕЙ ВНД Б. Й Е хя шк Бе ЗІ З а ем ще БИЙ НК и Кия саше кн ін рава шаі т

В пк хи Ай не НРК НИК сен си тсннжінненися Вефтене ШК ее Мане г Щек Б Ки о: У рими М а я тост о Вій Ба г ГоВсни о Ж й. с; ока ПАТ уко НКя Сини косе НН М а г шва істя й пПувенлича Пи ває имя сах пса МКІинЕ ПИВ ; М Й

Е Я ян ех ВИЙ ВЕНИ лави КИМ ДО дрн яя НН кан з Я в Я

Ч жар зн ще ее в рівне дей ь НК сіл ях ЕЕ ЕІ Х ТБ ткно Ж з

В о я ві з ее Енн ЯКУ ет Тед аин і г ро ні щі впоперек 5 ДИНЯ КК я ЕЕ Кох Я

Б слов НЕ ОЖЕ г. й в ви в М щі рені певне віше НЯ як Е ме Живіт: їх КК щк Б ун о раку пет ун нн іваннй: с ВД ща Кен Ко; хе КЕ ЕА В НЕННН та ЩЕ Тр

Оу ки: оп Й сін Жде БЕЗ од й М ою евн Е Я й ч ро р о ж асан танення дню НЕ кс, пан Же Ж г о Ехесітнні Б Билен І ЯКЕ ДУ: ов ВвинЖи одужанні інки пні ЕК Я АЙ

КЕ сорї Ге А ис види ве ока Відень лог ж вшни ва у в "п » ї ще У жо и ія НА КО ее аг ОНУК ві бій сен понев ння, «й

В ше, МК М що Пр дове й яеж ви ЗЕ ЯКУ ше БА М Й. : т Пет и СД пенні зЯще. ВУ ТАНЕ РМ Тіна кан ее На й НЯНЯ ниж ше дв п АК е ї ЩО ек пере од: Кк ЕЙ радше рда МК я РА нн ен ни й ний піша МИ ДАЕ Ф пні Й ЗІ

Бі сту НЕД сито ге са пси ия Й ДЕ няня вв Ес Аня дату ие дя Кевін ЙН Із ЗА мні з АДЕ

Де. я. Я я ся «ТЕН ЗТ пози не нах ние ор ЕН п Пагвівлн "Я в Я ее ре Й бра Все Бонн ВК 7 чі уникання р ков Ш еВ Кт и: Кор її іх Я Бе і сх вне МН т карчУзНОн кис ЯЗ Нерння ї Ж -І й Б Кер снеюе, ГВННИ М знуреровах ЗНМ Й пе лінЕ КК, ПАННО «Е р Як: Бе КІ Бе ВА черви тре Б с я Ч

Вовк 2. й я че Я вини, ня ва Б Ех

КВ нервові швея Кх ЦИ ЕН Ще Кк о ОО І і панни в азів вия зеокодесв м Си пев ння кв клея і ТЕ ня р ЕсБии меетткя 0 НКСЕАНЄТЮ Ева ся соеунек В НЯ поповнив Що Й ие Ж и

ІВ От в: о ше Ома мон я КВК сойки фіннйнійнй «ну Ї

ЕЕ Ех Бод іже ник с М сао анна і інд отв Ж с 1: ще а щі. Те БиомМ ном ее ле позов дк Бен нс анрднсовЯ ш ні м зчдотнисх пррсН ся В: «Костя ТОБ и ий а ПАН уза Не ї щк ее В ев Яся, о НЕ нн вв ве. М ОЛЯ ж НИ и. Мр ев

В Я БА. БЕК гору М ння а: ДЕН ее КУ А она Коси НАЕК сзідн іскліВ Я Енн ВХ ще ос ИЙ сврх» НН хе ВВ сг тв Й МЕНЕ Же ре ИН мета ен ї- р за Як р (Я

Е з ШЕ ех: я ВАМ же Жж сов дні інн жави С НИ зкитяЯ ж над т ек а УЗ сс вно в ак г пк До ей Бест НИНІ Ваш: В с кт ві ВЕ Ве ве я Б Кт ЗИ Я ї- І «Весна ТЕ. г же дешеву Тости с Я них кн прис вові сорвінес срестя БІВ Женя ГЕНА су МНЕ

Й ЕІ ес вен чо, се ЗВ сін ев во носове Кене Мч и Е нн енннькя Терен і СА де г С дее ток сна є: Ина З и рен кан Келнкаими ВИ фс онднносьві нн, ЩЕ пре

І МНЕ З Се я ня ст і нн в ук я вітка еня, ни вано Те В І її Овен Я СИ ря НУ КО ви хіє КИЙ ах ж, и у ИЙ ще ПАН НЯ Е ж орд У нн кін: Кіасня др т В джнеку стелею Я Енн ннко т ва я Й не Я - о ПЕВ ЗБК. п с аінк-- й акнрєадинк УА т шт; есе М З Б;

Ко схе й Я пе інуЕмеИ. Енн ДК о айва - 5-й «й ТЕ З

ГФ) ї МКК Оле ів ЕК кет АК ст лілнсі што т ор вет те вепло пику Й Ко ще 5 й со вне жав пав у Вт ДЕН ру оон зовн є: Ж си Е: НЯ НН Зо нена атнй ІК ЕМ КИ Дати пи коневі п ен Нв СЕБЕ РЕНІ ШЕННЯ МИ і

Я Б сік т, ВН бе: Зрерове ниє ів ВЕ Я ЗИ Мк нення ве: ква кі віх ря: сере пііжве т, и ЕеЯ т, ци В з в є: За вив не ово к ке ДЯ ке МЕ ща ве

СЯ Й дує ОК осі НЕТ тод Кн КС он, нт прю ПНИНИВЕ Де етос ЕД ЗВ - я аа дрооп нечня ння АН вет нар а Ба

Ж і Я З р ЩЕ ій Ж педеурхвося ев я ОК донні ВОНИ 2 З ща в ї Ен о па КІ уврнва ве ев ПЕВ МИХ МЕНЕ ек ре ще ї ще І ЗИ ИЕМ Шо кі Ето тд Я отв сте ше т ня х 7 г НМ По ейк вес в, ТЕ Ен и Ж ще г сно; ЕЕ ЕК лк Пера нити р: наве и а ВЗН СВ гій ша и сеть секр врв і порнвкр кн йо кЯн ЕМ ПеНИ НД. Я ще

Ся СІЙЕНТИИ ливих не тсл ях Б НЕ я

Що ен Мои я сват кріт Спиши ш «Ех зі

ТОК ж ріж на св НИЙ нави и у 1;

Ж ПЕЧЕ: ЯН Ен Пе ЛА нин няня у Й а НИ ЕК фе роки СНИ п Мн КН ня кн А ЕЕ ОО Кона пев ВЕН НЕК ЕНКНУЕК те они ій и в те есе І НИ АТ т вик і еко ов и і ді етері

Я ее Мел сс в Й Ка я по кН но ЕееК т в от Па ЕЕ г ЗИ ІК В АК ЕЕ ЧЕРВ Ен а шк ШЕ сзстей прак і я ин вонанн й - у ес с океани Кв их в геї 2-.яй В Тятея -р пра ДАК ов а ДИНЬ в рситет З Яд в

Бо: в й ВЕ и неці : в а ана о о нене кксе в нн, мете лей ОВЕН А КЕ її 1 : в вті ще сан ве ек ек в Ат кит виенеКти з КУ іній нів й вт лісів СД А Я 2 Її, Ї; ' і то ідеш се вим пе ен НК З ак

Е вх це КН еИ МЕ в ее ве ак жахи КИ т ілі ЕВМ Бек ков Бе НВ Бо я ЕЗ Бо зе: Я кеон к : Кн вн о КУ; ТЕ «Я Тер БЕ нау ЕВ І. пнжеднрвяняки ПАЩІ ДО о СК зм ее р:

У Я З МН. "З їх прин вія в АСВ з дре кли сив жеть в ЗБрту зр вод Ї

Ж НЕ ЕЕ кще ЗАД р ха и ие си Ї ж Ж ся кет оо ово, ур ЕН вк и ай в . ще Ї пе Зк нс те ек вні сок Й та іхх т. р Ж біда аа ий а не Ей Ї

Жереункиимими: Жанну потнона- деки Б їй МА НИК СНИ АНЯ НЕ У ВЕНУ. | й шани діри ден ій жен: щ 0000 НКТ Ж АМЧЕИиния ДАВ ямі Ви и. СЕТИ Щи й ДК тт оз нн ор -Й ДЕ Кер НКИ те ВН МН соя Борони ей зи ХУ : ЕН іо Й и они Я орендну Ж кинь нені КН В Кн ШЕ ик ши До: зе Ще ван нн Олово ВН ненні "Е цези зеданох Й сао КОМИ Я дк ТЕКИ КВ ень У то Мед в ваонкян ЕОДЛиНН Ве Б се Ия

Ж Т Бод срннсі МВВ ОВ НЕК ре Тло рю з оф ве ет ВЕ ЕЛ ик он ши Ше: клин сне

ТЕ | т ПК. і щ НЯНИ и Я ее вк: ВАНН твя, Б ДИ з М я МО сш шок ро ен ен ИМЕНИ зе сЗШНІЙ Й ТЕ

Ко ж" ШЕ: Б сл: НИЙ ще ее вне аа ох й «еф ЕЕ 1 | Ше Гости, й ще ННЯ ША еле и ца "ее. ТЕ

З Ця пе БІ Би о нс ІЕККВте: вЗних етно пня вн я: й 1

Е Й З уинтих: УРЕНЕЯНре же кое и Петр бери ми їй сх

Те й й ов вк сне оре вки т арт пек | же Б фрерквіненяя вид юр ельнт ще ана а ПЕ кре ще Ве ер вт Кн цу нкк не я ож нКая НК КЕНЕ С ЕЕ Клен ЕК сте ой Ша ше я снвІИе ля о легкій а Ж в Ще ШЕ Що Ка ВШ ня ВЕУ НЕ НЕ не Не СЕ ВА о ши ШК я вес ром . сви в Я Пекин НВ Кент тен и вечВЖ

СЕ ре Я ши й ЩО т аюнх Й ом нн Зета ан а ОВ, шви В : судвядкх В ДИНЯ т зе піни ТЕН КІ АКА КК КУ а ев ех кер; 5 ВІКІ й Й ЖЕ рН срес-аркен Шо млн зів син: ЗД шли пліт очвднея свя й й Козар нав КЕ я пу, Ах зм, НИ і ЯК сиве в кад зви Не ЕВ шюдют 0 НРК ореозістья ПВ: ре Я Ех ек ей ЗК НДО НІ ши влажн СК нини, ЕК ше р З. дак Бе ши а ня ен айв в Км ко зн І а я ша -Е Ше пйсмсвоо БВЙК ре С св нні не ні винен Вік сок ре З

КЕ пі ес ЩЕ лу ук, БІ Й Ед: кад: й цій ЧАБЕ Я лив кю ХК

ТЕ г й: вх ко ная Я веж неровн ней нє нев юрожісня Я БЕЗ яка

Е їк БЕ ей» В ет КВУ ов зе МВА С ВЕ з а тод "в. г

Я В но с. ЗЕД НЕБУ ЗНУ Дж ЕЙ ня ле «Ж ще я а ес М р дили: пе я ІК й

Яр ЕС ще ка не Ми ИН це з Я сера Ка ех он щі Не а в ЕНН меті міевми о КИ ва . Б

Човни Дт косе, я, УНН У ЗНИК ЕНН РНК Не Че ДЕ ссср новій ще нийчині ки АННИ НЕ ї

ОЙ Би КЕ тв нива ай птах ВЕК стя Ні ет ння кання Ех м я о вн й ях ЗЕ ЩЕ Її

М сок ЗИ ВИНИ тя ЕС ТМ ней опи іно ін кт нів, сабо араечИе З се БЖ оси по Я

ВЗ ке ВИ КИ й се вв з Кр а ви ИН не оон ЕН: по ее о

Бе Кей Б зріс ли и НИКИ и КК ані нн нн в а

Кк и сввкнеяо Жов ВЕН ни нин нав Ен ЕЕ о пе; вп и а Шїе АК "Ж о: вкрив ле оо ащ і ин и и с пай пу СЕН я Ей са Би

З й пато сх я Го ведення БАНІ: 1 ях МАЖрих дп ОО хх сі ненні й «г І ах нина і ване С ЛИ ще с ї т с В ван шк Кей піно Вс віт іні вл інн ва схе бо: БАНЬ 5 г

Ехо у пиши на о ен с ї ШО аа :: ре в. ЗИ тн зни во со В коссься туї: здуєс ЕВ, й я НО сссее,: ШИНИ а ен с КИ НЯ З АННУ ав ве те ої

Е Оле о ВА ен ПЕК КЕ КИ НА Бе А не й

НЕ Ко я ЕЕ в: ан нині с рнх нн пойслян ж Ех Я ля як ку из | «А я: КВ рес НОСИН ВИК ві а й ЩЕ «Ї пи и ну рес ще «Ббннния нас Со КН Сх сл Мк ій що НУ Ай 12; й ЕЕ -Е

Ес о свй с т з й і Кві фнкно дуже ПКУ сет ср Пре вет В Не дя р

Б ШЕ оо» Ше т- ж КВН з Й ЗІЙДЕ ук ко квя оф ання те ЕД ста х М Я зо ж шк В ке ВК ох знан ші хною НО

Ж "А ок ді сов Бас В З МИ Зоні вк кан КУМ пе с і, ПЕ. ве рота а ща Мр ав вок ЕН ВК В ект некнтаеко ень П- О.Я ду іє звшм с ся ПИ яв АННА НЯ я с и ву сь зви Я ще "х Ток кнопки и х ОК тей зи я в нео хх пня й енвсю ден ДЕН ТИГІН я ре в "і Пн ее па ХЕ п НЕ уВ Лан Ж вк ссання СВ, зе НЕ я 5 о "З ВТК п ре а Бе пе туда вові чн з Тай ке і

Й «Ко: ПЕ он мий ваша свй сшне ти ас с «т «е

Ж БИ сви еВ каш НЯ М ик пОМИЧ е Е

Но «Що 00 ЗЕ ПЕК ен й ші КА сі вві не оку БНКВ -В

ЩЕ: Б че ен и нний тн Одне че. -х

Ей че че ЩЕ о ее з: Й нн зн вена тло жа Неля пе ав

ЕВ Це ще Ек о ЕР КРУ цк І: ев есе ко ГЕ Не КІВ пеня її З

НК ор тече се я С ет ДьЛ НН ско. кофе віник олиднютсьноє р З Ен он Енн сові ан Я ле сі Е Е я Ор ре сідврію ащВ, і ри и и 2 орні бони й ня пів аноК Ж вок зн: с сети в ий инші Ей Вірні

Ж й ен ві ик ке ДК. ЗІНИ прикамаринним я ка А ЗНО ОН АН се кт РАН ЗІ Ї: р» в Б ро, З Уч МОЙ нав шо си аа М о -

Кк ще тео КДЦ ШЕ же Як ЗЯ я по АН рн сті, лозі: нс зай ЩО ме : НЯ Кен НК 0 В ненепаезевовсння Я зущий Деоаненкнссти я и нд ОК ! з Бо вий М Бе Мне І Бентевіси іс ев, ота ом нен І. Я

У ВЕ Во зйнетиЕ В Ж З Бе ув ДИ АНА ТМ ов а А Е а щі ЦЕ Ми зе Берна сн ен сяк В пут увь. са ЕНН ик ЧЕ и

А ес шен; ва й З МОшИВоОИ жит СН ОО лу уреннт ол ЕНв ву рй і нс свй - "ЧЕ на : во. во " те З вннктетя ОО НАС КД Оу пф Не й і: І о у и й - ЯК пи щя щи Б Я плн НИ ех ще Я

Я ща е ан ки жива Ка пі Яд х пий ний ї Ж пра: ї хе в ПВИМОМЮ ЄТ РМ ЖОТтя пог ол ван су ле ИЙ «

Спрілжени ау тини ВЕН й Пен вето ІА З М:

Й есеюевветтв толока ас, па дей Дня ПИШНИМ Кене нотні ке Й БЕ їй шщ оо са пориви нив дж: ШЕ ПОВЕ неон оінінісня Мк МИ Не Аве п ек о ЩЕ Й я 00 Се рен си наве тися ад ВАЛ аю сан. за Бе гжлейі ше ре т ши З т БІ пере со нон пов ЯН ве щі Же. Тех г: то р ее нс кун Ваня она В НИ пк ЕВ

Я ЧЕ Я ун и КІ пиву І т пане КЗ "кеша: В ЕЕ он и о ПО Б І сві с ХВ г Жанни 0 рве й РАВ НКТ НИ ВИ М рт й 5 ж: Е ее Тс сові вленх сайту які т ни жил а КА в в ет КВ : З Же в і т р и ЯК ЖК ДІВА Ин ни НОЯ, я

ДЕ Я - Зо ; ПК пе ВК дя ЕЕ ріня ВОКня яон т си З Бо

МЕ фі М ск Я оо и КН он де вк : ДЯ че

Є ікя Ярош Но Здаю па Ж нив в ви с й кв ее е А, ЕЗ ЕЕ -І Ше ЖЕК асо опади та Я с 5 0 КОН НКИ нив в ше яру Е Я

Ще т Пай еф Ук ИН БЖ жо Ве К ЕЙ Сени В ин |В р ЇЇ дек етужшк ЗНО Б Де вне ве і й то ет Я ве в жест Г

І В; Пн В етне Їх в вл гер Й РОТ БИЧЕЙМИ опт і-й ге су -І ЕЕ і свв З СЕ І ПАН Ще й же Чх пек й 5 АНЯ: ща БЕ

КСВ ; : НЕ ще Боб ці ля же: БЕ "ПН ненні Енн Вр с опа Ми лвщие що цип БЕ нев ніснй і Е Я

З ЗДЩІе Беь т БО в ПА тя р и с сис КВН нн Дік нінвікекти лійвкдв, ссср Ес: РШМ з:

Ки Й й. во ПК Ан КЕНЕ ца кри ія ня (ав) ЕН Кз КТ тор Па ТЯ що ПИЛ ай Ре пе ще Я т

Е В: вв й о НЕ кві ! Як т

Же Ж о оозх С с: ес З ВІ пас первин ТУ Ж не втівння шрншелє сі. б мжею ще

ЯКЕ ше а а З А слльвьн я и аа я Ра ях ЩЕ ХЕ до) (й Же р ОН ів тес п се о СИ Бі -Е

Ж о ЗК вв й Б а Не зЗЩЙ 7 дев ЛВ «еле БЕ " й Ж

ЦЕ Ця і сернйог-З ВИВМИЙ я шара клени о НИ Но а й Я:

ЛЯ Е Ех ОК и или НО тили т о НК Я :

ЗЕ Е "п Й КЕНЕ Онаірне с Квест кін ЕК пет ан е 4 і ЇВ я Я пе рн кореня ват За Вй ж в рови видри Пе пла Й зе ВЕН: я я

Ов п Ше В, пд в и ин

Ф! й та о сс Енн ві КЕ ШЕ ран но вий сади соеНй ВЕ г; тією азот й ше г ТНК р ре ЕМ ох щу; КВН ДЕ 1 йо МЕке нен сн В ЕК Се су ЗО ль писв с ні ГЕ ос іст КВ чЯ ДАХ се й ЕЕ Ки у Я ше я се Й А

Ж Й іш зхрею «В НЕОН Ей Ех на те У В и в А ще

І: г Бе: дн ЗВ ИЙ . ИН сан мів ки КДЖ. даю мав от на І п: и Ж тре СК пасе здлсвр р. Ех М ех вне он нлх нЯ Ке д ки Я квас ре ВВ Й з ТЕ те сй ее ай нет одтет НЕ У спр зв кет сс Й СКНН М ЯЕН ВЕ КУ ЗНИК : НЯ -- іх у в а реч тат З КУ дк Ве КЛЕН КУ КН кісносьнєх викли снів р т у: шов Кн ве САН ОЦ еАеНИ ве КМ би ян бери у інді | й

В З ТК шк У р МИ НИ ННЯ я уте фу; г ч. п Шо г дока з вн в ікс вні я т неви вся Те со

С: Й З ї БРЕХНЯ сестер А

Й щ, ре вх ЕЕ УА ЛИ ЕЕ

З зв си шеик Ср - вис: - ак «БЕТА ЯК : Зій з вне сів а ВИ ов вве щи с; СУ я НН Не ШЕ З Бо Я

Пі нот ОН ВЕ УКОСИ іт тіні АВНкійи таке и ливо екоемунтх КК ие сь тв ТЯ о ВОК п оон и КК Пр Пів сн званех прове КИ, т сама ЕЕ Ко ФЕВ ЛЕ ПІД: ск АД ЗЕ кто пат с ВИТ с я р. нн й имя ВАТИ п пд а їх а Б Я й дати тварі св наст сн Езшнтайе ніжна, я

З Да ОК гспвіях Ск еВ А денне одних т. МК С ОВК сеценох ве НЕТУ ж а ря вве НЯ дн уми Ен інно пешеаня. ОО ПН: зкюрє де о т Я Пн Во ко ще шина фен винні ун свт чек ОН НетЯЕ ЯН те Я В лей Ше р и й кА си Я а аннно он. ЛИНЕ я р. «Кк ке КК вана й зання вон Ек ЯН ОО ен: п кенки нрня се зни ка ще Ф своде х Ша о ОН ЯКО еоокиатесения нн ний ва юний іствх т з ІННИ ад тер

Ж: БК ОН Мо сннннос чн ян 7 ІТ. Коси м ри те Кн екв соте І й, ско че ре Се ее се М а ЯН Кві: ант т т як нний І: У "К р ОН: р Яни ще ЗДА НН ПЕ вишня яю, САУНИ м Ге Я Я

ЕЕ; ЗІ Я ЧЕ а Ен щи Я ск інт ИН НАМ У соя ВК т дено Що о д ' Е ТЯ Янв Я под сет в Кия Кен ЖИ шк нн и ре кная каль Я це у; ЩЕ ЗИ Я яти СИ: ИН Я и М шатун Ше Й 5 я Ех ен сни на КВ войние З У сЕШВЖ бро ПЕВ Енея ШИЯ ра ує ЇЖУ ще Ех Бех десхи. МНН п І ї пло вен пори Ех ШИ ЕК: : їм БЕ Ве: пий жи: о са нити не вкчнянх я Ба КЕ ее ВЕ

Ж Ей ще Кк КаБООНОВОї кИшлети В з ння в а тр В ки в Я ско ав ди несюти вжи п кан ве ауй Ер са З, ЧЕ

С ТИН ві зви Б деетАЛН. ЗБОКУ: їй по нят ПЕН Кв пр с вх КТ Б

НЕО соки ин, Кей їй раз Ко НУ ие ув не ЯЕКЕ де Ес я пива сьо зася у щАІАЕН, ак ск Ех НН пи не НУТИ Нр Ех ДЕ М а У р.- о ре ее косе інд, г: зрад Ї БК ТУРИ а й фіни Мід ДАНУ сі - ее г ик я и манія ЖЕК сов 0 шувИт . Те КК вва таж соки нн ке р В зе ЕВ Я НЕК К овен Не ИЙ ре о Пенн зна ан ін ок сння ні те Е

Ж ех ЕЕ. ний сні нти нні Е а М. пк Ав Ди ву ЕН вої я ТЕ: ч

М КАХ З їй Па З нн рення о дінннвакі на В и рування хи І та ще Ви схо оса: НОЙ КС це ЕН ДЕ річ сів нний ов на З 2 ак щЕ: ще ібн ня аа ро ост йтю не лися Я щех МІРЕДНИЄ УК сс МЕ: ДАНИНИ Р Я ще з не Ес ОМ у бе нвннені ЕЕ Ко ссед н аз Ен ен вто ЗА МАЙ Не

Я Зх ШК ер кожне й: и я МИ ВИМИ Кия ска рштив тВННИ ісп вн а він

В Жено в Ка и ЩО ние ес рин види не Пе тасіньк ВИЙ в у

Я ПЕ: Зал я ШО Її зве нкн де са с пестнн ск ще г щи БОЖЕ нн ст й Е ПЕН Ди ек ск Ше ся ж, й р 3Я З: БИ поь, ий дищлмеи о Шо см ик кис ДЕ ііі, іван ТАКЕ Ме КЛ а й зу що ри Й ДЕН іні СБдЕчЕНх та і Й десь се руль яекі х З НО ІДЕ те

Бе; з сс сгобтрек я кН ск ЗИ палав Й нні ЕЕ Кент Ват я З ідо ця І:

ОВ р ія й я з оф фія хе нок біт: щен лес ех дя пекар ск й М З

КУ Я як Ненено р карлна Бук Мн ЕЕ кн ск м Я З с За ке. Пе ж ПЕРА м тіфх І ВА, Гена Ж скяй Шо м ОЖЕ ще Б з Ж ПН сни гееек Ек ве еРНЕНЯ БЕіТ ЕВ У В й ов -їк пкддтф дили ТКА А та КУН К их ще ЕХ: Я

Жеешняк зо хеБбне с ЕМ ря А ЯКЕ СВТ ЕИн й ще

Евра дта Я; УК Ук КИНЕ НЕЯВ ших си В Ш. есе узня ие Дня и ве Й ЩА рей я ості «ий нин нив ОТ ВОВ Це пяжени М : що В шен ПИ кій ЗХ пе нлее Ж ЕТ

Ж еййа » й Тіт вна ТИ соду ТЕ нео ння вне ей ен, Нр КАН їх - й, рорлнся є; сит Ор тт іній у фак тестя й: САТ Бена а не щ я

Е Коня Е: КЕ тва ус нт пе Ж нин КЕНЕ А я їй КЕ в в іх де Ре й ОМ Зо вх й Бе я Ей і. аа Х па ноя пен НЯ ЕЧАЕТОВНЕ З ЗЕНННЕ- Ще ще й жде ск Пе АНЯ ЕЛ НЕ олій пен пет іійтиї рт ст У БНШИЙ кт фс інн з

Е Б з днк біс ДИ -СЯЙВАЕ В вве СТЕНКЕННК ФКЕ вне сх ше ня Бо ак ЗНУ І пи З

Е Що ЗАБАВ сонній де ся зе: ана, с нова ПЕК врвелеНе Я В 5 г. и ій Несе нвоо сдеи НВ. пдв. и: ДИН ДУ Какао ах Іжеялю. щи ою Бо -

Ще Бе Кк сер-сст» Не ИН МОН у ее ун иа мене ще Е я І я ДЕ ек кьЯ Ж пкт НН НОТАМИ пек жа вк че

ЕБе. мА ж. Ме кі і М ун етЯ Ж Ману кА М ня шия ЕЕ с окр нос сЙЙ ак БЕ не Ка Ва ля вон я щі й жаром о аву с ка І З ж 200 ЩЕ с ре МЕ ж З Сн ЕНИМ, о дні ее ЕН ЕН аа авт ок ГЕ є; "7. м Й Кок еВ рій укрити ЕЕ м ОН склер: щЕ рей

ЦЕ я Бе сн ВлК КЕ, с оте се пев евн й весно ВИ щ р

Еклери ХАЗЧИШНЕХ НЕТ а Й п Бе У Гніт сон ТАК аа вав Куй з аховивтяй ЗК Ук ще кивннас аж с вват СОМ синій Ї ІЕЕ а ни Й Ше цс кітусейх Не; як ще пот она навко Я сани рн пови сн вий ПЕК дя ЩЕННЯ; Ман: ху щи и Си МНА ля ДК с-г ранку --й й ших ка зе Що сти ЕЕ й що КЕ кг дв. бідні дію - шо г. ков ща . "» -

Можно но не ж ою ов З

ТВ: сен я скзнещи АЖ: ВИК г у дн В ЕРА ИН стиль аа о росі й Я вне Во ко рек ра ПК ор ва в еВ с о с вто г ще БЕ дй Ек БИ Окна «Й ЕН нн неіснн й я о івМоїв в ту я Кі Кіне нини ша і Я МК сля яЕж ОЗ Свій : чо КАН ве: ува: сік ЕТ тя ЯК НИ ГЕ і адиет з хари Я ся Бо НАВ ї КУ зрие ДК ронеторствнясь ши КОКО Мр п З ЕНН ЗЕу тку КІ: ІЗ ре ЦО фе Ме Знов Я ха рт, ЕЕ СИ ЕН роса БІЙ а ШУ Ен В сій ше а й ї МН М пис НЕ ч ка ровно ки о ВИШ;

Бі: й ре «в ї Я А ТИ Й й ле Б яя ко Е че як, ве овівви сх то НН Я ще Я Гесксессо: СЙ Як прекрасних мо ою: Бе ехо вв Я

БЕ ще г я т Бадені АН дане ша ЗК новиевсзввьни Я Що Жах, Же, ТК т стен нав дн АВ НЕВ 5: вф преп певен ее етан ота тенден: ще Р ТЕВАНАНННТНЯ ен нн се е о

Що: Кн ех, ТИНИ: ХНН в як: зані нн ни о сон Ще ЗИ п вх: цеси В я ТК МІВ НИ нік ви о вк дині що З ік Б нев р: зас З ДЕД али сто вк ОКА АТ а КН еВ них Б

КН З ла Б. з тя ие гу Бач Кс й вия о ИН ен інеті с Ме щЕ. т с: Де, нє я ув я В и Кв оті ос с пани ще

ЕЕ ІВ сон ЛЕНИЙ ре ше фони о я у я и шия ЕК НН ен т і.

ТУ о Ес, (8 й тя в не она Бек НИ вв я нь Я учора жт ел, уоеаве .

Як с Й ШК іме ИНА Кен те ИН ОТ а на ве Ж ще ді «Нв Ж. дроти ТТ ЕЕКИХ т ДА ння сть вк КК реіноя пн БІ пекан ВН 10 СЯ Яни ие ЩЕ ук чав в КИ нен ян спання

Ве Ж ек ке ЗЛЕ Же ер иМв сов ет ке оно се ас кис ана и З ще щ.. орекарх Кс рих й «Ж: сі Зв Я КАТ вевташощі А Вл ре вен соте Е:

Ж Ж ея сло. Кр Я. Ба ші рн ера ме зів НИЗ я Ех. ща 2 Я СКУ ін т. вій ВЕ і аа Ав тв вн кафе Ек й; г: сх вки. фі . В Кен Ах а Ж тет в А г ЩА ЩЕ свя хе ки «нев пн кві ї Й тк УНК вій:

Мене рсе шнек ее ве овен йо їй Кс киш: й в З

Пн у а НЯ НИ, ЯКЕ до г жан лук і 4

ЩЕ ка Бо іні кн вів й ня нини Мф: й, ВАС тяг ке а я ВА ПЕ ан ня Ще ще Ед Я де: рес оБН ЗИ ЗА ен в ян кед ані Я ще не Ш Бе. шцезеє ЖЕ пе ее Кл ешаржк в в іон іні. нені нн; Ех

Я ак як и Б не ВІН лен, ВТО сно Галя с нн ов о он ний в

Кс Дату и нен стю не: и Я Крах пе Нонна, нс кс ри ДИНА рос АКА сн на ян вх її Її ща ій. НК зе двом нина свй же іде доза де наат ин. с

Ф Я, й з пкт нак Ек ШО т ОД песни нив сс й М пеки садно Й їх СКМ ніж, БАК Я

БЕ й Ки воннй Я я Я Ж и На Ж Нед іі гилжитау не ти З ШЕ с Я! ще БЕ я шаене; ТВ, і ин п АК е- Речі раса вон ев рен ни р.

ЩЕ ее Енн й с вдвеже он она нн пен но кароюновя Е є я ре аніж и ре ен и ВК сс сіння шен ек оба інкьс ся :

Ж в ЗК с ЗАДНЯ Кр и ИН иа дод ЩЕ

Я нео вперта з т косій с НИ САНИ Витік пита і ви Ед Ах "зажив Бе: ер под ділив ред ще Коен свв я а КИ вед ява о ї не уник жа Зя ВН кетони ре МНЕ АН я НО ИНІй я Б -Я де. иа оН З КЕН пилки иа ЕН ЕЕ КАН Р Мн Е:. Я тю А Ам се кан нон "Бо НН: ІЩЕ - ВИ сн сок м с, ссання о вн кв в вне зе еко шу 0 па ІКЙ есе ВК в Кс ВЕ Во У чн кінзи : фея ге у сток ЖЕ Кк Кк Би и Я кн о сі онко вне кв щі г

Е І ас. па ще и Ти рик ТВО ЕР ДЕРЕВ ЗЯН вус пюре НЯТЬ Ж

Зк й Ж: Зесеутех ЧЕ Си т я ЕВ ИН от Ки ве ПЕН КИДни нов р ще Б. Бо сане ДЕН с ПЕ й о С пОошно і Шемет с х я ННЯ а Ме Кай о и ЕН паж всех кл МВА ВЖИ АК Ман АЕН зе СЯ

Б ще рови БА й. ка ВИ уки и нив в ія. с кН АК СА ВИН Ж ро БЕ ки ни Б я ие сек КИТА У Я НА КИ ут Я Ех МЕНЯ в

Що їх еВ Боісонс ох З Й с рн ов и ня ОН Енн Ж : В ЕН НЯ х ДА й ЕНЕЙ МЕНЕ ване ЕЕ денти ож

Кг одн вв од нн кін В знов і В пороку акнноє Ин я: СИ ек ШІ ще зн нн Кр ви вве все НЕТ зт ня я МЕТ КЕТІ и м резновей че Сен ШЕ СИ сп ДТ и ана жстЯ сяк ЖЕ ска. ПИ й МАЕ ЕК є их вк а; з. й Іжа САН у НВ ее кн о й мат сер відра я ШК, п Е; вого пт, . р І Ро хх ТК нин и осві осві я свт Б

Я в Ко ВН кн. Во секс ОК Ех тен ВЕН доні ен нй я нов Ен т ця Ж. їг г Я Бе ДЕН зкся ов БО ев ні пдв пи й не нев св сно. ПЕРЕ Е ОМ и і ік Е рт іно вело ет сн ву йде Ті? на ин. тов Й

Б з а: аг: ЗД Коркрлке Ой пен с і нан, шкі тн ка клей ОУЕН у еК

Же Ж вісн Ей В Я МЕ вн пос сни Я С у НН

Як. ре о ПД ЕК ши Ці НИ ан квест Св й У В дннне най ШЕ чих С С Кат, Я речи ре ДЕ КЕ ей ДА КОН я і у ліні «ни ВЕК, й з д- 0 се

Я и вве» ри дю о ВИЙ -Н ДЕ ВВЕ деко В ск лет внівк віск Ви ИН а цк ін ушу пня ИН г:

ЗЕ: Нео М ще, Й Й че пе ниннн КИ мя и Ім Ма Б й

Ж, Кк оон . Ще г щі воші я пеня Бе НИ тс Я:

Я - сеї А же сій ук тивів Вк, - н. Не винен ще

Мр но нюх 1 шйх со сне І Я. рел вом ек ЛЕ ід Я Го)

Де І 22-х СОВИ НЕО ЕТ КН 0 ся олово вин с Якби ж сті ой ни Ваш нене рень не що ха ев ЗК г Тел вв сови і НЕВЖЕ ЕН нет ВН ИЙ ех дек, й ск

Же МН Як т. ВЖЕ см Продеи Куен вини вв вуса яЕееК дну сит НУ та пре п Ж

ЖЕ хв ша блоки ще Бод ее дят пи сао скінів кій енвіяняя ЩЕ.

Ку М НК Десни п В КЕ Ма ТЕН Ки аю ока ут он о дис неви сво мдантичо їх. яке ще а ин ие Яд око ВЕНИ ДИТЯ ЯК НОВИНА а и ач ни не

Же с:їй Ж ек й Ж що КИМ КН ОВ квт Ми: ИН я сн, сем ще ЩЕ Жов Еш й пеня вв пре а каВСОнайс, ни У тай; ще ЕН: Хе зок паці піни ве ВИТ ВАК ше ва 2: с Кен ШИ Ж ДЕК ев я МЕ ВИТКИ ат яр. В зна зай Х Р ин «ВК нота ВВ дво с Е ав) о око ЗЕ нерж нені ве йо Е ву я па КЕДИ ПИ во ей ЖЕ

В кА и соді нн КЕР ЕТ ЕК с ня : З іх зн я: Ин всих вінисьч ие ки ЕЛЕ. ЕЕ Рв оч 1 сне е Н сІ зи КЕ мя ко АН 5 детнкнкенсиновк фснвннння ся пня нан днях о ре З р я ОО ЕН М ДЕК нтів дснввни: стен аю х Бе. Я: ав) п Есе ск Щи» Хі о Ки М ан В КК оон і пір - ше як Оу АНІ нерж ВО вЕ ВЕ ДК нт вл КВ ТО Твен ЕСЕ З «4 кі За пе Еге сне НЕОБ ден Мен Кф пес ние вн тонн КВ

І: КЙ шо Не ме дня НК УК п МТ ДА дек як АНА сх Й

КІ Її; яд Б а - Вена екв до ноя Ма ЧАН НА И Це -

НЕ щу ВЕБ да - шк ри: ж циМе 7 иа оотекертненя вини Кене НИ ВЯ

ЩЕ ще. Нв дво ка Кен я ар у ВС екаа НА рапс ноковио р рореьст й же КА ре. ще коні «М ГК я вон т в те КИ ДН УМ под рн вед С пе У 5 і; В о т нт пе Опт ЕВ Ка йти в Ек рдоия ояк КА га пора Я

Бо ій Есть, МНН о нс Кс ня шо ен ють ня АНЯ в. в Я тя Е: р: и м фев ре М ЦІ сь НЕ сит в

Іо сш ник ВЗ се. сш КЗ на вовк ие при прнетзвев й ик «ре

Мах підви НН сто їрще шиї. Б ЕЯ еВ Елі жк мВ ж вис я Ніс МЕ

Но зад стоки ТВЕР о СИЧ ЗЕМ ЯМЕК ай ПО о-ололй, Мрбди їй р ен сн ни АННИ кА Шах Ко

Я до ле екв за ВН Я кет КЕН АК зн - й сан гай сей Зв наЖ пнинах сне В хе щ Бай й КЕ СЕ Яю й пеерре зони. тес ЩЕ оп фар ве -пеет сйбу уд іще Кі ЛИ ще

Шроеекею ки ре с. ще З Зк На Ж рон и вин нн дет ву текс ці й Ех

Я ж сс: Ж 2 м а Я Ен А Ин ее но КН ВІЙНИ ВАВ КН с

Ж щи шт КИ ен З добова дивно бе арки диско прерчртеєкетног Я

Те с Ко и с прі, БАН Яке ск вн ва Кук ол кН и и КОКЕ и акаунт м ПК т ЕРЕКР НН ке г: І чверть У не р ДЖЕ А еко КЕ се ства юнь ит ей іль СУСТЯ Ел пе чаий бІВж гей г; ще Ж Ши Я До я о дрежи ою й ЕВ шен вся ДИН нн ія ан зт рес Фк:оосітавцх ця ее Ма ще ам Я и Яке денно соя ник З щ ре: ня си с я ву у увів В сн ж ска вх ув МТ Я КЕ

ГІ КУ ОК Зо юлемеи я, РЕ м ПЕВНУ У як лляна З ЕІ ЛО ЕЕ ЗИрІя пи ках вв Крит зо да: вед р в Ж - ї и в Би зер і Ж Ж от ЗД не Я ом еВ ня сна нку Тир зів шар С г

ГІ ще р: сени, МОВІ тая ев " А и НН омани я «ик я СЕ ; с Е ай - й те Ом З ння се Енн Я сок сек тктвння ЖК ах Б й

Б Ж ек ев Б і однос чу Ам ук ЯКА КІ

ЖК п еденмтеєни твою Я Пе ко й Я од екз кв Ек ВА ув онов в ВАК ков т ще вся пе ДЕН ня де ЩІ Я но ЕМ нЕинь ро

Гейне пу вив в нави и НИ и ння х М рр шій шк нина КО ЕК іов с ванн З еснконвватаєт їж

Же Я й, В ЕН ОН и в ідея с віці ен ин КІ -І вро вена: Б А Мн вяе на деяка РНК дн ВС ТВ на Ки ВА Я ще Кк що й ЧЕ ис. а м: с ВИК са пе нн й Кк нин я с тут ж здо 5 те а: МОЖ І осв Яни, вера и ин А Зі ЕЕ ВИК і р КЕЯй . ЙХ се Твен ХХ Яр КОНИК пе й Вр ая фе цен али они ще ие вно свй ати р: В ТОНЯ ЖочНА: а теща св сів вели "вв же? ДУ, -І У Бл рев як Я пере ус висувн ант р У ит Еш нива Кен ни о ЯА г: во я і СЕ о со й ее: Я Уа аа ВІ ен онжкотьи лан пр Я Ж р: щей й дл какао Ж І Кинано ЗБ З сх танін у ПОГ НИИИ МИ Кір вес ей Я ж БІ ес, тей що Без ТЕОсЕНЕМ ВЕК В питна інн вві. КАН М така", Я їй ав | Ж Ве: и В исвнніЙ г. . тя во вва вав Дай Ж в Я ще ре ро сни І ї пай ве Н.Й не петанк Я В т. еще. ОВ ой КУА и ЕИ ст су КЕ

Ще. що! Ше Кі жа кизиея інки р ПАреиє дян Б й инвввстивня Що роси Я фАЯЦАЗЕНКИАННИН КЕ С Б; (ав) 50 дах ож нн ся ВИК хх ЩА яд ша ше се й Б.Я я Еге В рем що мі-йкія се я о и ЧИ . З ща Я : ж дові х де і Ям ск, СВЙ рн: ех Етап з- ПЕН д де путь кю ЗЕ де ЛЕ ї че поко Ех нх КЕ Я до ВЕДЕ Я КЕ Кв Ен АК ІЕ сдіна Дт: бе: Ше - р зи ще ще Ж кине китай З Ве я ит ее і ен поря ВНЕІ ЕЕЕОВЬ хо ЩО з че р пи НИ Ов НАУ тему т МИ КІ шо ещи сій. й Я во й НН нн ан сова нен т БАНАН Тео Я а ан ре ТЕ ни сь -: о А Шанси: іш сени ная дн пов сьо Во етвн ДО Ве а ж о о г ло ЗЕ т. ГУ Ден айви Пюнцй гена тен дв А він в віне ї ще Б, ЗБ снсеюсс С ще рин зей В почта и вн ов ШІ що ще Ол и Же а нів міст, а Вісн нан ввсле нн пеівекст Інну ся Оу, р Я ес І: Ее Не Кен ння ожйзкя, рада пе А ви МЕ ет Яке с С ов Я ще ЩЕ Я ЕС ов нд Вес ней Не ксвненю Т ДЕМО кі рей ; В ША шення Гея "в дл Є Тр И АТ соки ся сне Й Ной

Зннйжійи р я ДІ щ ЗБ тво мт влив В ПНЯ пз аа ких Я «ТЕЗА Бере су ПО ОНИ З тА ВЕН КУ нн фе

КТК НН он ТАК я що ( ) Кан сестра кт вроду ке зсоесвіви пиво но Щі сут кН й ВЕН де рнненвв в стЕсЕ ст ВЕ, щей ск нен АЖ лек: ЗА Й

ЖЕ ойяорд сг шо КВН С Бе споді се лани Ес р з пек Киюмомс» Зк пі. бе шо 0203 сх сш, ЗР ПК соту сир ся пси чис ср 000 іди жрнЕноноюх сб од р вет Зк еросваисо евя п кт стіл ТА СТІ кт, д кут ще речам ми и в рова и в се Оуен Я МА ЗБИВ НЕ Ви с ЕЕ я Ями з СЯ дк 5 кн в Ен о у з зв Св ск он в ве ; І ШЕ: ше о жін ау ни чинни :

Чех -й вк ЗНід подшнеди-сву ро свинку оре веди цн ЗК з аква делла в ша сіні і і В др НИКИ у ОВ ПЕ п Ди пси в ж кс и и х ідея БЕ и ни си вь и я А В в Ва СЯ пеки ви ШК як хх ВАВ ЧИЯ к дйни Кк й нні нон й ній фо хо ДЕННЯ рн її виш иешк ок п нн сти вір пі ак т кави дн й

Ї есе нвиуЕЙ у. ї ша і он в і БАБИ .

В Ше: ес Я ші ши нн анна ре во 'Я срмшркн, п М Ку ЩЕ коки я С т па Кн я: Кок ов НЕ Я

З в нн ТИ КНТ они виник й пильно Е й й Е ї "у а. КУ . Ж ТЕКИ Крат ЕВ з | і Ши ї з

Номера сполук відповідають номерам сполук з розділу Приклади. Тобто, синтез Сполуки 1 з Таблиці описується в Прикладі 1. Сполуки представлені в Таблиці І приведені як приклади і не повинні розглядатись як такі, що обмежують рамки цього винаходу будь-яким чином. Додатковими інгібіторами протеїнкіназ що можуть СМ бути використані в цьому способі включають 3-(3,5-диметилпірол-2-ілметиліден)-2-індолінон (зи 5416); о 3-ІЗ,5-диметил-4-(2-карбоксиетил)пірол-2-ілметиліден|-2-індолінон (ви 6668) і 3-І3-(2-карбоксиетил)-5-метилпірол-2-ілметилідин)-2-індолінон.

Б. Селективні інгібітори циклооксигенази-2 - сполуки формул (І) і (ПП): Необмежуючі приклади інгібіторів СОХ-2, що можуть бути використані в представленому винаході приведені в Таблицях ІІ і І, нижче. с

Зо о

Таблиця І!

Сполука Торгова назва/ Посилання Доза ав) дослідницька назва 1,5-Дифеніл-З-заміщені піразоли Мо 97/13755 І - радіцикол МО 96/25928. Кжоп еї - а!. (Сапсег Кев(1992)

Б2 6296) ин Сеповгтев свв 0 - -4- -л - - 1-(4-хлорбензоїл)-3-(4-(4-фтор-феніл)тіазол-2-ілметил|-5-метокси-2-метиліндол А-183827.0 ; - 4-(4-циклогексил-2-метилоксазол-5-іл)-2-фторбензолсульфонамід УТЕ-522 ЗР 9052882 І

Б-хлор-3-4-(метилсульфочіл)феніл)-2-(метил-б-піридиніл)піридин нн ПО 15. 3Б'якдторфенілу 34 (метилоульстоніпхреніт) -циклопентен-т он ШТ 2 - - МК-966; МІОХХ 4 (05 5968974 12,5-100мг о п.о.

Індометацинові похідні індолалканової кислоти Мо 96/374679 20Омг/кг/день («в | 20 1-Метилсульфоніл-4-(1,1-диметил-4-(4-фторфеніл)циклопента-2,4-дієн-3-іл|ІбсСензол МО 95/30656, МО 95Б/30652, МО 96/38418, що) МО 96/38442 2-(4-метоксифеніл)-4-метил-1-(4-сульфамоїлфеніл)пірол ЕР, 799823 в

І-І5-(4-фторфенокси|гіофен-2-метансульфонамід УМО-63556 п

Ф! Б(Е)-(3,5-ди-трет-бутил-4-гідрокси)бензиліден-2-етил-1,2-ізотіазолідин-1, 1-діюоксид -2474 ЕР 595546 І

З-форміламіно-7-метилсульфоніламіно-б-фенокси-4Н-1 -бензопіран-4-он т-614 ОЕ 38/34204 в іме) 4-(5-4-метилфеніл)-3-«(трифторметил)-і Н-піразол-1-іл)Бензолсульфонамід І(целекоксиб 00008 5466823 І св о? я нини НЯ 60 2-(2-хлор-6-фторфеніл)аміно|-5--метилбензолоцтова кислота Луміракоскиб мо 89/11605 (Сох-189) 5Б-хлор-6б'-метил-3-І4-(метилсульфоніл)феніл/|-2,3-біпіридин Еторикоксиб (МК М/о 98/03484 663) в 10111111 мепоколюм (ов 423 1Б-ЗОмгідень 11111111 чмесулід, ов звяовот в й 2 сч о сч зо о о к зв м « з я с г» ' ов вомвваю Б Безаави ЦБ віові| 1

Піразоли можна одержати за способами (описаними в УУО 95/15316). Піразоли також можна одержати за і способами (описаними в УУО 95/15315)Ї. Піразоли також можна одержати за способами (описаними в УМО -1 96/03385)|. Аналоги тіофену можна одержати за способами (описаними в У/О 95/00501)|. Одержання аналогів тіофену також |описано в УУО 94/159321. Оксазоли можна одержати за способами (описаними в УУО 95/005011. о Одержання оксазолів також |описано в УМО 94/27980). Ізоксазоли можна одержати за способами (описаними в о 250 МО 96/25405). Імідазоли можна одержати за способами (описаними в УУО 96/03388). Одержання імідазолів також

Їописано в МУУО 96/03387)|. Циклопентенові інгібітори циклооксигенази-2 можна одержати за способами о) описаними в патенті 05 5,344,991). Одержання циклопентанових інгібіторів Сох-2 також |описано в У/О 95/005011. Терфеніли можна одержати за способами (описаними в МО 96/16934). Тіазоли можна одержати за способами (описаними в УУО 96/03,3921. Піридини можна одержати за способами |описаними в УУО 96/033921.

Одержання піридинів також (описано в УУО 96/24585). о Целекоксиб, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу можна одержати за способом приведеним |в патенті ОЗ 5,466,8231І. о Валдекоксиб, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу, можна одержати за способом приведеним |в патенті О5 5,633,2721. бо Парекоксиб, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу, можна одержати за способом приведеним |в патенті О5 5,932,5981І.

Рофекоксиб, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу можна одержати за способом приведеним |в патенті О5 5,968,974|.

Джапан Тобакко )ТЕ-522, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу, 65 можна одержати за способом приведеним |в УРО0/52,8821.

Луміракоксиб (Сох-189), що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу, можна одержати за способом приведеним |в УУО 99/11605)І.

Еторикоксиб (МК 663), що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу, можна одержати за способом приведеним |в УУО 98/034841.

Брістоль Майєрс Сквібб ВМС 34070, що використовується в терапевтичних комбінаціях представленого винаходу можна одержати за способом приведеним |в патенті О5 6,180,6511.

Перелік приведених вище в Таблицях ІІ і І посилань, що описує різні інгібітори СОХ-2 придатні для використання в представленому тут винаході, і способи їх одержання, включений сюди як посилання.

Переважними інгібіторами СОХ-2. що можуть бути використані в представленому винаходу є, але не 7/0 обмежується:

Сл) ще

ПК скине з і ме й з о ем є й ей і ББое вав ік саккл яЖтеи ік; ж вон і піла-кеюильни Е м сен ще ст ну ще й

Ме А. сч за М ее ДН

УТЕ-522, 4-(4-циклогексил-2-метилоксазол-5-іл)-2-фторбензолсульфонамід; сг) 5-хлор-3-(4-(метилсульфоніл)феніл)-2-(метил-5-піридиніл)піридин; с

С) о 2-(3,5-дифторфеніл)-3-4--метилсульфоніл)феніл)-2-циклопентен-1-он; сС4 | «в) ) сей Кк вия шо

З еле, ди ядин? : Й й ЩІ ні ІЯ -

Я Ес "Я ман. й к пз с горів і

Бу ца ЩЕ: в, щі тя п се ся ї а та й си

С, н- РК ще Хв щи ле я нон іде 7 яр, пай ТИХ с Іс ге --ї. т - ч З таж ях и » У й Б їх ни: «Я щі

В. сво Же сь ко -і КО тот о 4-І(5-(4-метилфеніл)-3-(трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|-бсензолсульфонамід; («в) Сс5)

Ко) піні ше рда Ш їз -- ж х нан: ш ех иа 52 Як є ей де вн зо жахи й у ще

Ге) я з, Весно Ек хх й й Я окре АЙ с ее 60 (й

Бо рофекоксиб, 4-(4-(метилсульфоніл)феніл|-3-феніл-2(5Н)фуранон; б5 Св)

он ин а а й

КК ел іч ка У ри пеня вм ї «Й о

Ме с гЇ ря я ДИ Що «тління в ; ка що з . ще, - Ще ЖОВ ро шк,

Й: Ще

Кок й Ні з Її у

УТ ще зедийк- й. з под Я З ас 15 . ! ні 4-(5-метил-3-фенілізоксазол-4-іл)бензолсульфонамід;

С)

М-(о4-(5-метил-З-фенілізоксазол-4у|феніл|сульфоніл|ргорапамід; св) реле нн "Не оз»

Кая тн - злети вето сина.

ЖЕ ЗЕ ери і ми:

Де ху: 5. І сч 29 ак. з» ДИ кн Ге) сх К ло сов ше "й ще є, те ко я полнннних | ; с юна

Ї З о пах а Ст рин зд Пій але

Бай ї- 4-І5-(4-хлорфеніл)-3-"«трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|!сензолсульфонамід; с) шви «

Бетсі п ї; З с вовк: псів соді а х рев З спа що сій ей що сту, вра ч пили кет м пе чен, о СР бот те дя: и 2 ще табрягя ет їв ення - т (З С - | й ся ж зо ши Не й й ща -| ння пе Як - їх ТИЙ ЩЕ Ех МЕ п здсекетт ВІ -і -Ц о с10)

Ко) іме) 60 б5

КОЖ Я свв М ден З Й час. . ійрлютькя

ЛЕ Я

ЕЕ Кв ча і ие. ввийшй се ен до ви | ст) ее Сай В шт зн ле зго ст ей Зара. са па 70 Тай на ен я й дл с та ги, Й м Я о вне Я ві ок

Кока нс Бе т:

Ен

С11) ма що | Щі. . ай. паті са пе ой слідкх в зі на тя век шанс І ЩЕ г о г зосеивм ВИНИ ТИНИ ще з Я Б. яти 0 мк овес с | й г й Б кій ші спри КОД ОВО І

Кай хан : Те х рити і: ї 2 пс ши «ЖДЕ ще вини дея шій чн те т п ПЕ ре ст Га 6-((5-(4-хлорбензоїл)-1,4-диметил-1Н-пірол-2-іл|метиліІ-3(2Н)-піридазинон; о

С12) опорних мис явну

ЕЕ й Все ЕС З Як М ав

НЕ вся: ре ЖК Я и

Му лю Ре

Пас а біс ков нене

Е Коен ний в. дк

Е ща я де ч-

БУ ти ТК Яке ЯК я сни т за гу С я мех де о Вовк. г В ка я ;; ані

Я Й : « с вк я де я у : к Є, шк х дій за - с Зак ча и ШЕ а Е мя

М-(4-нітро-2-феноксифеніл)Міетансульфонамід;

Ш- Сс13) же о Її їн; свв 2 іще ІЕЕ ще) яд. ї. й Кисті та зай ші плросле па он ис сне; глин Не ве ке

Ше се Шок та Швея я іже яр: сх сей ЗК: ст: й ха сн 60

С14) б5 пекла, сь я С М

Са м

БА раження У ть о я яті ння я ке сеї Но й Я

ЕЕ папи соайх ме ой

Яни Тон що шк: ри Я т ше то зр: І СЕ : ще. р. нзх ; Як сни й ти ще зате Ше я а ЯН

СК же я че Е деле: 75 дика її Е: я ен рев Не я

Ж коня йон, ку лій С

Я де - і. сам ж 3-(3,4-дифторфенокси)-5,5-диметил-4-(4--метилсульфоніл)феніл|-2-(5Н)фуранон;

С15)

Ще їх

Чи еЕ

ЧЕ Як Мк ко сок ВЕН зв ва а ЕЕ ла я см (й : 5 і) я ен " жк зи р: й зо ЕК

Е ді ь, КІ "я (ав) во рі лу -

ІМ-І6-К2,4-дифторфеніл)тіо|-2,3-дигідро-1-оксо-1Н-інден-5-іл|метансульфонамід; ї-

С16)

ХА ссфки Еге ен й Щ «

Нд їх те їх ще я ї щ с 7 Еф І й Й З ад, фр ч Бест НН ще -- п пи й г:

В вх

Б ней сви пн ши н й т 395 ск и и я ся, т васьяй ря ДА Е о Е З Я кедр - а З ее же сн --Ж «ук.

Із Не в вх. 3-(4-хлорфеніл)-4-(4--метилсульфоніл)феніл|-2(ЗН)-оксазолон;

С17) іме) 60 б5

Ки я я я я Ве ; Я Б, : сн от СИНЮ ше нДй сно ий Й ще ад вишні у я жо ре де - - ин

Не сне АН досі о тел я де пр. 4-І3-(4-фторфеніл)-2,3-дигідро-2-оксо-4-оксазоліл|Ісензолсульфонамід;

С18) го ДАЕ ян х я й я. й як ї ше я сч

Бе КЕ УЖ Я

Ко Сх Її Ж

Ехо я й о яЖ: зи пий» -ф4

Ше сч зо ей : СІЙ шо М я й те | «в) селі Е о 3-(4-(метилсульфоніл)феніл|-2-феніл-2-циклопентен-1-он; ї- сС19 ) Ще - лк нн й не

Х і З жк хе Ще їх тя ай ер я тої не « ляти Котов синя г р. о

У 5 од. не)

НУ ях, рен. с ев па т й З сні ДК "з п сне роя ' Я КЕ пивна Я у пише їй п ІЗ ї й ця Е тя й ск ден оКЙ - рі же й ї - Як

Ко жд - оте 4-(2-метил-4-феніл-5-оксазоліл)бензолсульфонамід; («в) С20)

Ко) г сан ор ні дра це . ї зе І

З я | ро Ей З

Б ве: ВИ Й с т НН ; КІ с ох слі отити ке оси чай стей

Н ее ско ож ЦЕ гі ек СИН сх шли Орди 3-(4-фторфеніл)-4-(4--метилсульфоніл)феніл|-2(ЗН)-оксазолон; 65 С21)

паст А же й

В Я х В ще й Ще м 0 Щі. бю

Я : Ї ки у- ве ов сс Кк. о птасовор слон і жшне І: Я, сс од ди Ж м їж й коксу ей

Її Ії й ся

М смаія ХЕ

ЕН

5-(4-фторфеніл)-1-І4-(метилсульфоніл)феніл|-З-(трифторметил)-1Н-піразол; с22)

КТ ме

Я! г Ес ов бла зе, кт Й Й Кс : їй о св що о т СИ 0000000 щ й гак

Ек о

Я й ці те я: т Ще вику Ед о са ж !

Її ен тв ЗІ

Ї ! ї- 5 Й й як, най 4-ІБ-феніл)-3-(трифторметил)-1Н-піразол-1-іл)бензолсульфонамід; «

Сс23) 7 сив 5 їй ол пе с я " | 1 и"? І ; тр М і: ТКА й их 0 КИ т ЖЕО ось 7 я зай як я; нотагій - | 25 ї їх до ій пе Й

В з сере (ав) Ї Я яри ща оз 20 ЛИ ЕЕ сні (ав) Я х дя СЯ я да ж ;

Іо с: У й се я

Ге с. 5 4-(1-феніл-3-(трифторметил)-1Н-піразол-5-іл|бензолсульфонамід; о с24) ко бо б5 -АД-

Й Е т х Я вання за

Б ру ато вок ЯДВ Дн

ЯН ув

КЕ ЗІ й Нх Яке вів В Е з кй ЩО я, г Де сонна ВК

М ей с ях і а А . й 70 х МЕ ст хи як же сей тт, лаг й: З ще

Кн ях

КЕ: ї ей 4-І5-(4-фторфеніл)-3-"трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|Ісензолсульфонамід;

С25) ропривснясваютяе: статтю . ля З ну Як З пре юететм МИЛО «й р з вах ся псих МОН ся Бра жан, -е ні сі й ся зі що ще 7: с г рек й віх р о ща Ще лятн КЕЙ І І ще щі ; хі й т г Я ; с зо й с З зай тий очи «В. | «в) о всих їм

І ї- та 00 бле

М-(2-(циклогексилокси)-4-нітрофеніл|метансульфонамід;

С26) «

БЕ ее дено МЖК ем 2 «ДЕК їди ВІ Вир ТИ: сна

АНІ срок, г ее ну я с ХеЕлюють ах нн З . й ик Ж з» п Ме ІН во т ще Кесхах " тег сет 25 я Ко с р с тд я ще сп зо они ій се Я й емтни нн сем ден ; Я що я

Е | З су , зв си вннй ех «й ой я то - ях, ще тає Е о в в м 5 па

Кз Ба у че

Мт сс я

ІМ-(6-(2,4-дифторфенокси)-2,3-дигідро-1-оксо-1Н-інден-5-іл|метансульфонамід;

С27) іме) 60 б5 ака ак ці овен ЩЕ ее ее г ЕЕ пуеяуєтьух м З; Ко: й пайка 00 би Мов ї ко Ж а гр В Е дя || Я

Ши ся зон янв йо щі чо сонна 7 а соді

Горе дар Кн я дк а. й я х що ї : ен й я р іа Ве АЙ

Бл ие ХЕ ване т дані н) ря т а пило ре : ЕВ зи сої 3-(4-хлорфенокси)-4-(метилсульфоніл)аміно|Їбензолсульфонамід;

С28) і: шще о нед, Я аю: 5 п щи ій З, ше ші Е я. Сак ок арен с: ой НН Жозе й за й ай в и те зд Кх ї с 7 оо ш-й. Но о о

Ше СЯ так кан дитя пів стн НО ес стен В, зва. 0 бутех паті 3-(4-фторфенокси)-4-(метилсульфоніл)аміно|бензолсульфонамід;

С29) -

Киян УВК. ові пінку з й Я ан тАх Те Ержех

Че й їх ще ВЕ я Я « є ше, зе я вд оку я Ге

Щи со Й в я Ес» с сенс ж КЕ Б -о

В се 00 тая, с Й ее Во се ч я. З 1 у Бе п т З х М пав -Жй я

Ще: сти Енн бе ані -І З - т й, м ій ка ї о ЕБкосья ШК и птн ти :, Б зе («в) на

Із 3-(1-метил-1Н-імідазол-2-іл)тіо|-4-Кметилсульфоніл)аміно|бензолсульфонамід;

С30) іме) 60 б5 дн сь ї що

ЗК чані кий

Би " овен й зи ще. Щ

А кр: врач и ОА зн з и ЯН светри

Щдз ях Ж ов ВИ "в со и пика

ОТ р: соБ З 70 Бе те с есс ЧІ й В нкуятья чай Я се Яке ще Ех

ОК й В у Крона ж зах ж гу

ТК. Я хо Я

У СВ Я Песня бури Ш ше 5,5-диметил-4-І(4--(«метилсульфоніл)феніл|-3-фенокси-2(5Н)фуранон;

С31)

Мами се см п ій

Ед дин Зв міш ит, Й

Бо В с са с р: ев я ря Й Е ня й Яма як нн, дв ря Кай ек і г зе тей о ке; КЕ (8) я й де со а Га! (З Ен: гак жі г: ій а Ше (ав)

ШЕ ях

ІМ-ІЄ-К4-етил-2-тіазоліл)тіо|-1,3-дигідро-1-оксо-5-ізобензофураніл|-метансульфонамід; ї-

С32) | | | і - жи ев, ці в. ле я я я й Се «й « пт вд іч п усіх ей й збо У Щ сени ой Ше ге б - с І я ! /. з» ск па ща он " ак я ня ки сс и сти ТЗІ й ши ШЕ тя ве рн в 15 Ен -І ко я и ї СЕ и сами Я Еілнй

В. Це ек. дви о Ж а г ШИ ілі іламі 3-(2,4-дихлорфеніл)тіо|-4-Кметилсульфоніл)аміно|бензолсульфонамід;

Із С33) іме) 60 б5 нн Ко ен, дон а Ки 2 Й ге Шо в зв щ ко і :

ПЕРЕХ сок як: ее

КО денітнрети вк со Кн Я

Я вия й: НЕ Е зе:

Гр М. й з Ж ех: о ян. Я ся ето їй ка В у роя Нед п: а и ши--т ЩА Шк нс як ЯК

УР шах

Я пт тр. лади ; лишки; КАВИ й у 1-фтор-4-(2-(4--«метилсульфоніл)фенілІ|циклопентен-1-іл|Ібензол;

С34) ре нерокенди:

БІЛО, сеансах ке

Др І иоия к і мн Яке сук ср Ге)

Не Е Боня г:

Ж: 15 ща ще хе ї я м : У й піні "р ам ай ї ік ат Жах с оон с я їж Ме

Кн о та ях о во й я яр К ха дей гл, Кк с с || й

Ех 4-(5-(4-хлорфеніл)-3-(дифторметил)-1Н-піразол-1-ілбензолсульфонамід; «

С35) шо - сей стала

Ки вій с Кк іні Її" Я ч Де В ит мА

Беате рак. в ся:

Ех І й

ХЕ к.е. Я -| х зве - седіййіите. Ме «ЩЕ ав | си Янв ке ВК з Кк ще І щі

Ї й ке о | й Ї-

ЛЕЩЕ М Я пай

Із кх зи: БИИ: о ша е ВИ й а, й і. о шт ще вах юю . ШИНИ сей 50 реко КИ а КД ГЕ г Її Я сх й й 3-(1-(4-(метилсульфоніл)феніл|-4-(трифторметил)-1Н-імідазол-2-іл|піридин; бо св) -АВ-

щи ж

ІОВ зізеій їх і х ось лу

НЕ. " шк дленя ЕЙ Ба сн г, йо козйвщая Бен м ех о пен. т як а ЯМ

Ї Го І КЕ диму тах й са ій г

БУ хати

Шо Б рах,

З шкі «в с же Й

ТЕ зйнйс кс ЕВ ві і ду й 4

В хх це: ПИШИ ЗК ж ке С Га щі 6) 4-(2-(З-піридинілі)-4--трифторметил)-1Н-імідазол-1-іл|ІСензолсульфонамід;

С37)

А я Як 30 г ка

ЇЇ о а ШІ сов М Кельн, , що : САТ чи зі Я (ав) вай пе:

Но шт ай рч- 35 кита «до - с В со НН сш т В З

Ша ; и и, зе ОВО «

КЛ, ще кій в Сет сти ост у 20 нави -о с и Рон ря сх ч Ехо Ж а 1 лій 4-І5-(гідроксиметил)-3-фенілізоксазол-4-іл|ІСензолсульфонамід; 45 С38) й : і А со, -І й т й. зх Й Шк не шах а цу І; ки («в) Ж ек ів 50 рах УНК (ав) ПЕ р: Ме г» ИН; ко АН»

ТЕ ее Я

ВЕК. С нкоонй

Кк ЕЕ ня й їй КЕ ча сс ати

З ек я рух и 60 4-І3-(4-хлорфеніл)-2,3-дигідро-2-оксо-4-оксазоліл|Ісензолсульфонамід;

С39) б5

НІ Ж і» Ії : я п т ках ооо пн ща І Кк 4 рег ва ЩЕ о Мних ззхяВ вис ге 70 БЖ свй Боееях "Й с Бена ї

І з оте ьо

ТУ Я ді СИ зо пад: «ик Клео р ск ср Хан ИН ик ТА т

Тов Ск их

Б ЩІ тих и 4-І(З--дифторметил)-3-фенілізоксазол-4-іл|ІсСензолсульфонамід;

С40) сюваланоя сю

ЕД дя ЗВ вас оЙих пір киш см вже ла й ок т ве і о)

ЕЕ у ни к ув Бити ат Ти кр "танк а

І. я с й Ні ск о со а о (ї- с. їм ія ше (1,1:2,1"-терфеніл|-4-сульфонамід; «

Са41) пен - к » ви й та. й пет Ще акннь со діксні тоне. -І 7 її її | Й о вет пи 5Й "й о | , г» НЕ ско НН ше МИ лет ян

Ще ся відс Й сни ово

Ї арх свя и ЩІ і; й хе Кей: (Ф, М но а 4-(метилсульфоніл)-1,1,2,1"-терфеніл;

Са42) 60 б5 -БО0-

ж пл кац

Її й я ТВ шій й щи

Тек я я с, і. Це : МИ Я. ДИ

Бор чле ше

Яка ай пи ее ікс со В ОКУ з 0 і» с ЖОВ стен ві каша й те ще за ко я Боно

ЖЕ ке Й що де

Ї с за Мети ан: Енн Ж рови. той

Бе й Я та йти 4-(2-феніл-З-піридиніл)бензолсульфонамід;

С43)

З ха сей

Я ви ЩО с оон: Я. сли

Ки сер, У Енн СР свтеи й

Й Зк о Прі Р: і)

Бей їй дн і з я с ен

ЕІ КМУ г о ; Є І -

ТВі й Ще їе І ; . Й Ці

Я я рас Я МИНЕ Же за с

До пн вен ря й ее ав)

КН сх МНН

Бе ві ше М.

АБ ЛІ а,

Ша ї-

ІМ-(2,3-дигідро-1,1-діоксидо-б-фенокси-1,2-бензізотіазол-5-іл)уметансульфонамід; «

С44) - уча за яз ит в З ВВ ес де щі ве інн я : 35 саке "у

Ше КеЯ й БЕ що - і Її. КАяь , лей о ЗЕ («в) Я жна мін й Ї

ІМ-ІЗ-«(форміламіно)-4-оксо-б-фенокси-4Н-1-бензопіран-7-іл|метансульфонамід;

С45) іме) 60 б5 де

Ку

СЕК еще ів

Ей Я 1 Б й ; З З |В ех Бере з ї, І ай зай щу я. Е; нндньк 16 їх а ВИН УЮ д мк (9 Боня ї ет дн Як

С46) пвх

В

НЕ ее казан дсп ах осо Ко ет твм М ді з дан, Я ла Й : вашій Жди панська а шия рай т сх св | |, жд ня да

Е й І пе

Бл я: ЧИЙ Як

Берн сен оду сте ех о айя Шо див. тних й вен

Шт-ти ох с з яд ка

Що і що с

СА7) ди: зимами о й. я о шежнаадяь дивани шт діше ин ЯЕ Ах

М итійннв, се нені ва сч

Ж Ж ї. «Ей Х ківш я ї. пяи о я рай Я о щ б З Я (ав) ей т як

Жех он : Т- я па їв ї В Я ш е- я -25х й

Ей А вні кт є Е. ет якщо: ку сезй Я й пк « - . а дав ди дж МЕ сь -1 Са48) дігтотєтаювнин св сво в рн НК - Дача

Бах Зсвнюни ток ях него о М шш бно 7 Бін НІ вк ря і. й Дт Я о Я к. Гек

Гей їй «КИ Ж що) у г Се Я де ін а Ск

Ек: не ні Е ще с Дшй та й 1 . ГА й х Я й й и аа Змі "зн

Ж Йде не Бей "т

ГФ! Б вика чі ня ТВ

Ще Шу т, З ко ї ям ес Й 60 ще

ЗІ г

С В х.

С49) лумі б ' 65 уміракоксиб (СОХ-189)

що ж енер о; їй їй А 2 й

Ї діт піди зоре сс: я де с же ання З че |Е, ся; ДЯ ай "п Кг ЕЕ є о вий ніх 0, й Кв з З ой т ; В х я да ян /5 2-К2-хлор-6-фторфеніл)аміно|-5-метилбензолоцтова кислота

С50) еторікоксиб (МК 663)

ЗЕ х -я Я

Її. сок Ж фр ше ТЕ лів г:

І» па КО а ф що Е Ж Ї. і, яку: сесія сет Ге

БЕ. Пк» НВ «нянь: зону її сх шен Бех і Я «і Е «е їх Ес ЩЕ В Бе не ню, ЛЕН, не зол се ЖЕ сте ся Я те кл ВЕ це с зо Ше З. В. я «БД о а о ї- ен ї- 5Б-хлор-6'-метил-3-І(4--«метилсульфоніл)феніл!/|-2,3'-біпіридин с51)вМ5 34070 « зу ій рт -й са гі шщ с й . пд. Я ;» Не гу У, па

Й ! з я -| Ен де щ р, іон кн

ЕРА й

Я ще Е. пасті и «Ж о М БИ ну: ря схальй сонна НЕО хх г

Я яті іван с з Ї Я ще їй пості вне, СК аа З, кх ж у о ОО й іме) Більш переважні інгібітори СОХ-2, що можуть бути використані в представленому винаході, вибирають з групи, що містить: 60 І) б5

Ї й че стр ОВ се пара З жо

І а. 70 Е З ! ї дей ро Ме А і чи

Кк Ж як

Ж Я Ж

УТЕ-522, 4-(4-циклогексил-2-метилоксазол-5-іл)-2-фторбензолсульфонамід;

І) 5-хлор-3-(4-метилсульфоніл)феніл)-2-(метил-5-піридиніл)піридин;

ПО) 2-(3,5-дифторфеніл)-3-4--метилсульфоніл)феніл)-2-циклопентен-1-он;

ІМ)

Ер вия рай ів ЯН Гн й лот пір с сеотееія шок ік са па вл. ОЙ ще й с св

Кл р н ння х се "ще на Ше

СХ кі Е (ав) 7 (й Кеннет З з ее о р сн о ї-

З

Зо в -

Ж йная

Ук 4-І(5-(4-метилфеніл)-3-(трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|-бсензолсульфонамід; «

М с і Ж у

Г. пе До

Бо сви прах с й Ся й: , а ке; тій ні й Я й Ще я ЗЕ щк зе - Ктлнегуй й теке й кети рив - | й сохне тов сл ВТ

Шо о Ще Ж се Ех "є ШІ г ІЙ рофекоксиб, 4-(4-(метилсульфоніл)феніл|-3-феніл-2(5Н)фуранон;

МІ) іме) 60 б5 -Б4-

Мя.

Ов

НЕ: чЯ й шт гозлнсіль іч я. ТЕ БЕ

ЖЕ ДЕ. х ее, ій щ-- ОК Є ве дей ах я хх СС ран І ра ва хе РУ БО

СЯ і НО годе

У ме

Я нь с й

Я й ее ерете 4-(5-метил-3-фенілізоксазол-4-іл)бензолсульфонамід;

МІ)

М-(4-(5-метил-3З-фенілізоксазол-4-іл|феніл|сульфоніл|пропанамід;

МІ) що КЕ ве ВНУ

Екс ій -и их ек -адуу, зе ІІ й Ти й М де тдеие

Ше жі в Яе ТИЖ ЗИ

Е Ж І зей се пак в жі Й й ме Бр

Н ; . ЕІ х щ в. и. ТМ с - 4-І5-(4-хлорфеніл)-3-"-трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|Ісензолсульфонамід; і

ІХ) яв « дення жи на ж я 2 - ве дк - пре жа ее, й ов що хвоя С. сне НК фея сег кине с Ши ММ я -1 я ет Реочвіа пиши; КЕ КІ кс свиня ЗБ я со : й ; ЗачянА й - і ж Ї Те в е ле їх вто ска дах Ядх. я ля "Пк сля ЯК дя гокіннюь яри о кре рес о тквв: Й сне й Ди й

Ге ПЕН В й

Ге 2-К2-хлор-6-фторфеніл)аміно|-5-метилбензолоцтова кислота.

Навіть ще більш переважно, інгібіторами СОХ-2, що можуть бути використані в представленому винаході є, але не обмежується, целекоксиб, валдекоксиб, парекоксиб, рофекоксиб, луміракоксиб і Джапан Тобакко /ТЕ-522.

Також включені в комбінації винаходу ізомерні форми, пролікарські форми і таутомери описаних сполук і їх фармацевтично прийнятні солі. |Ілюстративні фармацевтично прийнятні солі одержують з мурашиної, оцтової, (Ф) пропіонової, бурштинової, гліколевої, глюконової, молочної, яблучної, винної, лимонної, аскорбінової, ка глюкуронової, малеїнової, фумарової, піровіноградної, аспарагінової, глутамінової, бензойної, антранілової, мезилатної, стеаринової, саліцилової, п-гідроксибензойної, фенілоцтової, манделової, ембонової (памоїнової), бо метансульфонової, етансульфонової, бензолсульфонової, пантотенової, толуолсульфонової, 2-гідроксиетансульфонової, сульфанілової, циклогексиламіносульфонової, алгінової, Б-гідроксимасляної, галактаринової і галактурової кислот.

Застосування

Сполуки представленого винаходу є інгібітором протеїнкіназ (ПК) і циклооксигенази, зокрема 65 циклооксигенази-2, і тому є корисними при лікуванні раку.

ПКи, чия каталітична активність модулюється сполуками формули (І) цього винаходу, включають тірозинкінази, такі як рецептори тірозинкіназ (РТК), клітинні тірозинкінази (КТК) і серін-треонін кінази (СТК). РТК, що медіюється сигнальною трансдукцією, ініціюється завдяки зовнішньоклітинній взаємодії з специфічним фактором росту (ліганд), після чого рецептор димеризується, короткочасно стимулює внутрішню активність тірозинкінази і фосфорилюється. Сайти зв'язування, таким чином, створюють внутрішньоклітинний сигнал що передається молекулам і призводить до утворення комплексів з рядом цитоплазмічних сигнальних молекул, що полегшує прийнятну клітинну відповідь (наприклад, клітинне ділення, метаболітичні ефекти в зовнішньоклітинному мікросередовищі і ті). (Дивіться, Зспіезвіпдег апа Шігіси, 1992, Мешгоп 9:303-3911.

Було показано, що сайти фосфорилювання тирозину на рецепторах гормону росту діють як високоспецифічні 70 сайти зв'язування ЗНО (вгс гомологія) доменів сигнальних молекул. (Рапі! еї аїЇ.,, 1992, Се 69: 413-423,

Зопдуапд еї аїЇ.,, 1994, Мої. Сей. ВіоЇ. 14: 2777-2785), Зопдуапд еї аїЇ., 1993, Се! 72: 767-778, і Косі еї аІ.,, 1991, Зсіепсе 252: 668-678). Були ідентифіковані декілька внутрішньоклітинних субстратних протеїнів, що взаємодіють з КТК. Вони можуть бути розділені на дві принципіальні групи: (1) субстрати, що мають каталітичний домен, і (2) субстрати, які потребують такий домен, але які служать як адаптери і взаємодіють з /5 Каталітичноактивними молекулами. (Зопоуапу еї а. 1993, Сей 72:767-778). Специфічність взаємодії між рецепторами і ЗНО доменами їх субстратів визначається за допомогою амінокислотих залишків, що безпосередньо оточують тірозиновий залишок, що фосфорилюється. Відмінності у спорідненості зв'язування між

ЗН2 доменами і амінокислотними послідовностями, що оточують залишки фосфотирозину на окремих рецепторах безпосередньо випливає з відмінності їх профілів фосфорилювання субстрату. |Зопдуапо еї аї., 1993, Сеї! 72:767-778). Ці спостереження дають можливість припустити, що функція кожного РТК визначається не тільки його здатністю експресування і наявністю ліганду, але також профілем шляхів передачі сигналу, що активує окремий рецептор. Таким чином, фосфорилювання забезпечує важливу регуляторну стадію, яка визначає селективність вибору сигнальних шляхів завдяки специфічним рецепторам фактору росту, також як і рецепторам диференціального фактору. сч

СТК, є спочатку цитозоліками, піддаються дії внутрішніх біохімічних процесів клітини, часто як передача відповіді до РТК. СТК включені в сигнальні процеси які ініціюють ДНК синтез і наступний мітоз, що призводить і) до проліферації клітини.

Таким чином, РК передає сигнал, що призводить до, через інших відповідей, клітинної проліферації, диференціації, росту і метаболізму. Ненормальна проліферація клітин може призводити до широкого переліку с зо розладів і захворювань, включаючи розвиток неоплазій, таких як карцинома, саркома, гліобластома і гемангіома, розладів, таких як лейкемія, псоріаз, атеросклероз, артрит і діабетична ретинопатія і інші розлади, що о залежать від неконтрольованого ангіогенезу і/або васкулогенезу. о

Чітке розуміння механізму за яким сполуки цього винаходу інгібують ПКи не є необхідним для того щоб здійснити представлений винахід. Однак, таким чином не існує зв'язку з будь-яким окремим механізмом або - теорією, зрозуміло, що сполуки формули (І) взаємодіють з амінокислотами в каталітичному регіоні ПКи. ПКи ї- зазвичай мають двояку структуру, де АТФ використовується для зв'язування при розколі двох долей в регіоні, де амінокислоти зберігають серед ПКи. Інгібітори ПКи, як припускають, зв'язують за допомогою нековалентної взаємодії, такої як водневий зв'язок, сили ван дер Ваальса і іонні взаємодії в цьому ж загальному регіоні, де згаданий вище АТФ зв'язується з ПКи. Більш особливо, припускають, що 2-індоліноновий компонент сполук « формули (І) зв'язується в загальному просторі нормально зайняте з аденіновим кільцем АТФ. Особливість з с окремої молекули для окремої РК потім може виявлятись як результат додаткової взаємодії між різними замісниками на 2-індоліноновому кільці і амінокислотними доменами специфічними до окремих ПК. Таким чином, ;» різні замісники індолінону можуть впливати на переважне зв'язування окремих ПК. Здатність деяких сполук діяти в різних сайтах зв'язування АТФ (або іншого нуклеотиду) робить сполуки формули (І) корисними для

Націлювання будь-якого протеїну на такий сайт. Сполуки формули (І), описані тут, мають здатність в іп мйго -І дослідженнях таких протеїнів, також як і іп мімо, проявляти терапевтичну дію через взаємодію з такими протеїнами.

Ш- На додаток, сполуки формули (І) забезпечують терапевтичний підхід до лікування багатьох видів солідних о пухлини, включаючи, але не обмежується, карциноми, саркоми включаючи саркома Капосі, еритробластома, гліобластома, менінгіома, астроцитома, меланома і міобластома. Лікування або попередження несолідних о пухлин, таких як лейкемія, також планується за допомогою цього винаходу. Показаннями можуть бути, але не

Ге обмежується, рак мозку, рак сечового міхура, рак яєчників, рак шлунку, рак підшлункової залози, рак прямої кишки, рак крові, рак легені і рак кістки.

Наступними прикладами, без обмеження, типів розладів, що невідповідають активності ПК, при яких сполуки ов представленого винаходу можуть бути корисні при попередженні, лікуванні і дослідженні, є розлади клітинної проліферації, фібротичні розлади і метаболітичні розлади.

Ф) Розлади клітинної проліферації, які можуть бути попереджені, вилікувані або вподальшому досліджені за ка допомогою представленого винаходу є рак, проліферативні розлади кровоносних судин і проліферативні розлади мезангіальних клітин. 60 Вираз проліферативні розлади кровоносних судин стосується розладів обумовлених ненормальним васкулогенезом (утворення кровоносних судин) і ангіогенезом (розповсюдженням кровоносних судин). В той час як васкулогенез і ангіогенез відіграють важливу роль в різних нормальних фізіологічних процесах, таких як розвиток ембріону, утворення жовтого тіла, ранозагоєння і регенерація органів, вони також відіграють центральну роль в розвитку раку, де вони призводять до утворення нових капілярів необхідних для підтримання б5 Життя пухлини. Іншими прикладами розладів проліферації кровоносних судин є артрит, при якому нові кровоносні капіляри уражають суглоби і руйнують хрящі, і окулярні захворювання, подібні діабетичній -58в-

ретинопатії, при якій нові капіляри в сітківці уражають скловидне тіло, кровоточать і викликають сліпоту.

Були ідентифіковані дві структурно подібні РТК, що зв'язують МЕСЕ з високою спорідненістю: рецептор

Ттв-подібного тірозину (1-1) |Зпірцуа еї аїЇ., 1990, Опсодепе, 5:519-524; Ме Мгіез еїйаЇ.,, 1992, Зсіепсе, 255:989-991) і рецептор КОК/НКІ К-1, також відомий як МЕСРБ-В2. Фактор васкулярного росту ендотелію (МЕСЕ), як повідомлялось, є специфічним мітогеном ендотеліальних клітин з іп мйго промотоючою активністю росту ендотеліальних клітин. (Реггага 5 Неплгеї, 1989, Віоспеіп. Віорпуз. Кев. Сотт., 161:851-858; Маіїзтап еї аї., 1990, 9. Вісі. Спет., 265:19461-19566). Інформація приведена |в заявці О5 з серійним Ме08/193,829, 08/038,596 і 07/975,750), чітко вказує на те, що МЕСЕ не тільки відповідає за ендотеліальну проліферацію клітин, але 70 також є первинним регулятором нормального і патологічного ангіогенезу. |Дивіться, Кіадзригтп 8 ЗокКег, 1993,

Ситепі Віоіоду, 3(10)699-702; Ноиск, еї а!., 1992, 9. Вісі. Спет., 267:26031-260371.

Нормальний васкулогенез і ангіогенез відіграють важливу роль в різних фізіологічних процесах, таких як розвиток ембріону, загоєння ран, регенерація органів і репродуктивні процеси у жінок, такі як розвиток фолікул в жовтому тілі під час овуляції і ріст плаценти під час вагітності. |(ГоїКктап 45 ЗПпіпо, 1992, 9. Віоіодісаї 75 СПпет., 267(16):10931-34). Неконтрольований васкулогенез і/або ангіогенез обумовлені захворюваннями, такими як діабет, також як і злоякісними солідними пухлинами, що потребують васкуляризацію для росту. (Кіадзригп 8 зЗоКег, 1993, Ситепі Віоіоду, 3(10):699-702; РоїКпат, 1991, 9. Май. Сапсег Іпві, 82:4-6; МУеїдпег, еї аї., 1991, Мем Епаї. У. Меад., 324:1-5).

Припущення про роль МЕСЕ в ендотеліальній проліферації клітин і міграції під час ангіогенезу і 2о васкулогенезу вказують на важливу роль рецептору КОК/РІ К-1 в цих процесах. Захворювання, такі як цукровий діабет |(БоЇКтап, 198, іп ХИКй Соподгезз ої Тпготрозіз апа Наетозіазіз (Мегзігаєїа, еї аї., едз.), рр.583-596,

Іецмеп ОМпімегейу Ргезв, Іеймеп| і артрит, також як і ріст злоякісної пухлини можуть бути наслідком неконтрольованого ангіогенезу. |Дивіться, наприклад, БоіЇКтап, 1971, М. ЕпаІ. У. Меа., 285:1182-1186).

Рецептори з якими МЕСЕ специфічно зв'язується є важливими і значними терапевтичними цілями для Га регулювання і модулювання васкулогенезу і/або ангіогенезу і різних складних захворювань, в які включений ненормальний клітинний ріст, що є наслідком цих процесів. |Ріомтап, еї а!., 1994, ОМЕУР, 7(6):334-339). Більш і9) особливо, високоспецифічна роль КОК/РІ К-1 рецепторів в неоваскуляризації робить їх вибір цільовим для терапевтичних підходів при лікуванні раку і інших захворювань, в які включене неконтрольоване утворення кровоносних судин. с

Таким чином, представлений винахід стосується сполук здатних регулювати і/або модулювати сигнальну трансдукцію тірозинкінази включаючи сигнальну трансдукцію рецептору КОК/РІ К-1 для того щоб інгібувати або о промотувати ангіогенез і/або васкулогенез, тобто, сполуки, що інгібують, попереджають або перешкоджають («3 трансдукції сигналу КОК/РІ К-1, коли активовані лігандами такими як МЕСЕ. Хоча, зрозуміло, що сполуки представленого винаходу діють на рецептор або інший компонент вздовж шляху трансдукції сигналу - тірозинкінази, вони також можуть безпосередньо діяти на клітини пухлини, що є результатом некотрольованого / ангіогенезу.

Хоча номенклатури людських і мишачих аналогів генеричного "ЛК-І" рецептору відрізняється, вони є, в багатьох відношеннях, рівноцінними. Мишачий рецептор, РІК-ї, і його людський аналог, КОК, мають « гомологічність послідовності 93,496 в межах внутрішньоклітинного домену. Крім того, мишачий Рі К-! зв'язує 70 людський МЕСЕ з тією ж самою спорідненістю як і мишачий МЕСРЕ, і відповідно, активується лігандом, що є 8 с похідним від будь-якого з видів. (Мійацег еї аїЇ., 1993, СеїЇ, 72:835-846; Оціпп еї аїЇ.,, 1993, Ргоа Маї|. ц Асайд. сі. ОБА, 90:7533-75371|. РІ/К-1 також зв'язується і надалі фосфорилює тірозин субстратів РТК людини "» (наприклад, РІ С-у або ре85), коли співекспресується в 293 клітинах (людські ембріональні фібробласти нирок).

Моделі, які залежать від РІ К-1 рецептору, безпосередньо придатні для розуміння рецептору КОК.

Наприклад, використання мишачого рецептору РІ К-1 в способах, в яких визначаються сполуки, що регулюють - І мишачі шляхи трансдукції сигналу безпосередньо придатні для визначення сполук, які можуть бути використані для регулювання людських шляхів трансдукції сигналу, тобто, які регулюють активність, що залежить від КОК ї рецептору. Таким чином, хімічні сполуки визначені як інгібітори КОРУРІ К-1 іп міо, можуть бути підтверджені (ав) в придатних іп мімо моделях. | іп мімо мишачі, і щурячі тваринні моделі продемонстрували відмінне значення в досліді клінічної активності агентів, що діють на КОК/РІ К-1 включаючи шляхи трансдукції сигналу. о Таким чином, представлений винахід стосується сполук, що регулюють, модулюють і/або інгібують

Що) васкулогенез і/або ангіогенез, шляхом впливу на ензиматичну активність рецептору КОР/РІ К-1 і заважаючи трансдукції сигналу КОК/РІК-1. Таким чином, представлений винахід стосується терапевтичного підходу лікування багатьох видів солідних пухлин, включаючи, але не обмежується, гліобластома, меланома і саркома Капосі і карциноми яєчників, легені, грудей, простати, підшлункової залози, товстої кишки і епідермоїдної карциноми. На додаток, пропонуються дані введення сполук, які інгібують КОК/РІК-1Т, що медіює шляхи

ІФ) трансдукції сигналу, також може бути використана при лікуванні гемангіоми, рестенозу і діабетичної ретинопатії. ко Крім того, цей винахід стосується інгібування васкулогенезу і ангіогенезу Через інші рецептор-медійовані шляхи, включаючи шлях, що включає 1-1 рецептор. 60 Рецептор тірозинкінази, що медіює трансдукцію сигнальну, ініціюється зовнішньоклітинною взаємодією з специфічним фактором росту (ліганд), після чого рецептор димеризується, короткочасно стимулює активність внутрішньої тірозинкінази і аутофосфорилюється. Сайти зв'язування, таким чином, породжують молекули внутрішньоклітинної трансдукції сигналу, що призводить до утворення комплексів з рядом молекул цитоплазматичного сигналювання, що сприяють прийнятній клітинній відповіді, наприклад, ділення клітин і 65 метаболічні явища у зовнішньоклітинному середовищі. Дивіться, Зспіеззіпдег апа ШіІгісн, 1992, Мешйгоп, 9:1-201.

Закрита гомологія внутрішньоклітинних регіонів КОК/РІ.К-1 разом з тим РОСЕ-В рецептор (50,3905 гомологія)

і/або подібним 7-1 рецептором вказує на індукцію перекривання шляхів странсдукції сигналу. Наприклад, для фосфатидилінозитил-3'-кіназа |Ни еї а!., 1992, Мої. СеїІ. Віоі., 12:981-9901, фосфоліпаза су (Казпівзпіап б Соорег, 1993, Мої. СеїЇ. Віої., 4:49-511, газ-СТРазу-активуючий протеїн, (Казпізпіап еї аїЇ.,, 1992, ЕМВО У, 11:1373-13821Ї, РТР-ІЮ/вур (ІКалаийвеКаз еї аїЇ., 1993, Ргос. Май. Асай. сі. ОБА, 10 90:6939-6943), Огр2 (Агуідззоп еї аї.,, 1994, Мої. СеїЇ. Віої., 14:6715-6726)Ї і адаптер молекул ЗПпе і Мек (|Мізпітига еї аї., 1993, Мої. СеїЇ. ВіоЇ., 13:6889-6896), показали зв'язок з регіонами, що включають різні сайти аутофосфорилювання. |Дивіться, Сіаеззоп-УУеівй, 1994, Ргод. Сгомлпй Расіог Кев., 5:37-54)|. Таким чином, 70 імовірно, що шляхи трансдукції сигналу, що активуються КОР/РІ.К-1, включають газ шлях |Когаків еї аї, 1992,

Маїйге, 360:689-6921, Рі-3-кіназу, зго-медійовані і рісу-медійовані шляхи. Кожен з цих шляхів може відігравати критичну роль в ангіогенних і/або васкулогенних ефектах КОК/РІ К-1 в ендолеліальних клітинах.

Відповідно, ще один наступний аспект цього винаходу стосується використання органічних сполук описаних тут для модулювання ангіогенезу і васкулогенезу, також як і процесів, що контролюють ці шляхи.

Навпаки, розлади, що залежать від зменшення, звуження або закупорювання кровоносних судин, такі як рестеноз, також охоплюються і можуть бути вилікувані або попереджені за допомогою способів цього винаходу.

Вираз фібротичні розлади стосується ненормального утворення зовнішньоклітинних матриць. Прикладами фібротичних розладів є цироз печінки і розлади проліферації мезангіальних клітин. Цироз печінки характеризується підвищенням компоненту зовнішньоклітинного матриксу, що призводить до утворення рубців на печінці. Збільшення зовнішньоклітинного матриксу, що призводить до утворення рубців на печінці, також може бути наслідок вірусної інфекції, такою як гепатит. Ліпоцити відіграють основну роль у цирозі печінки. ІншШИмМИ фібротичними розладами є атеросклероз.

Вираз розлади проліферації мезангіальних клітин стосується розладів, що зводяться до ненормальної проліферації мезангіальних клітин. Розладами мезангіальної проліферації є різні захворювання нирок у людей, с такі як гломерулонефріт, діабетична нефропатія і злоякісний нефросклероз, також як і розлади, такі як синдром тромботичної мікроангіопатії, відторгнення трансплантату і гломерулопатія. РТК РОСЕК втягнуті в підтримання о проліферації мезангіальних клітин. |Ріоеде еї аї., 1993, Кіапеу Іпіегпайопаї! 43:475-5451,.

Багато видів раку є розладами проліферації клітин і, як було зазначені раніше, ПКи пов'язані з розладами проліферації клітин. Таким чином, не було сюрпризом, що ПКи, такі які, наприклад, члени РТК родини пов'язані Га зо з розвитком раку. Деякі з цих рецепторів, подібні ЕСЕК |ТГилі еї аї., 1991, Вг. У. Сапсег 63:227-233, Тогр еї аім., 1992, АРМІЗ 100:713-719)| НЕК2/пеи |Зіатоп еї аї., 1989, Зсіепсе 244:707-712| і РОСБР-К ІКитарбе еї аї., о 1992, Онкоген, 7:627-633| надмірно експресуються в багатьох пухлинах і/або персистентно активуються о аутокринними петлями. Факт, було показано, що в найбільш звичайних і тяжких видах раку надмірно експресується рецептор (АКразак апа Зи!ипег-Акразак еї аї., 1992, 9. Меийгої. Зсі., 111:119-133, Оісквоп еї аї., - 1992, Сапсег Тгеайтепі Кев. 61:249-273, Когс еї аі., 1992, 9. Сііп. Іпмеві. 90:1352-1360) і аутокринаа петля ї- (ее і ЮОоподпце, 1992, 9. СеїЇ. ВіоїЇ., 118:1057-1070, Когс еї аїЇ., зирга, АКразак і Зи!ипег-Акразак еї аї., зирга)|. Наприклад, ЕСЕК пов'язаний з карциномою сквамозних клітин, астроцитомою, гліобластомою, раком голови і шиї, раком легені і раком сечовового міхура. НЕК2 пов'язаний з раком грудей, раком яєчників, шлунку, легені, підшлункової залози і раком сечового міхура. РОСЕК пов'язаний з гліобластомою і меланомою, також як і « 470 раком легені, яєчників і простати. РТК с-теї також пов'язаний з утворенням злоякісної пухлини. Наприклад, шщ с с-теї пов'язаний з, серед інших видів раку, колоректальним раком, раком щитовидної залози, підшлункової й залози, шлунку і гепатоцелюлярною карциномою і лімфомою. Додатково, с-теї зв'язаний з лейкемією. Надмірна «» експресія с-теї гену також визначається у пацієнтів з хворобою Ходжкінса і хворобою Буркіттса.

ІСЕР-ІК, на додаток до втягнення в підтримання живлення і діабету типу-ЇЇ, також пов'язаний з деякими типами видів раку. Наприклад, ІСР-І втягнутий як аутокринний стимулятор росту деяких типів пухлин, наприклад, -і карциномні клітини раку грудей людини (Агіеада еї аї., 1989, 9). Сііп. Іпмеві. 84:1418-1423| і клітини малої пухлини легені |Масаціеу еї аіЇ., 1990, Сапсег Кев., 50:2511-2517). Крім того, ІОБ-ІЇІ, в той час як повністю

Ше втягнуті в нормальний ріст і диференціацію нервової системи, також виступають аутокринним стимулятором о гліоми людини. ІЗапарего-Могадміві еї аіІ., 1993, Сапсег Кевз. 53:2475-2478). Важливість ІСБ-ІК і його лігандів 5р в проліферації клітин також підтверджується тим фактом, що багато типів клітин в культурі (фібробласти, - епітеліальні клітини, клітини гладких м'язів, Т-лімфоцити, мієлоїдні клітини, хондроцити і остеобласти з (стволові клітини кісткового мозку)) стимулюються до росту ІОБ-ЇІ. |СоїЇдгіпуд апа Соіагіпд, 1991, ЕиКагуоїйіс

Сепе Ехргезвіоп,1:301-326). Вазегода і Сорроїа запропонували, що ІСБР-ІК відіграють центральну роль в механізмі трансформації і, як такі, можуть бути переважною ціллю для терапевтичного втручання для широкого спектру Зпоякісних утворень у людини. |Вазегда, 1995, Сапсег Кев., 55:249-252, Вазегда, 1994, Сей 79:927-930,

Сорроїа еї аії., 1994, Мої. Сеїі. Віої!., 14:4588-4595). іФ) СТК втягнута в багато типів раку включаючи, винятково, рак грудей |Сапсе, еї аїЇ, Іпі у. Сапсег, ко 54:571-77 (1993)).

Близькість між ненормальною активністю ПК і захворюванням не обмежується раком. Наприклад, РТК бо поєднують з такими захворюваннями як псоріаз, цукровий діабет, ендометріоз, ангіогенез, розвиток атероматозної плями, хвороба Альцгеймера, рестеноз, хвороба вон Хіррель-Ліндай, епідермальна гіперпроліферація, нейродегенеративні захворювання, вікозалежна макулярна дегенерація і гемангіома.

Наприклад, ЕСЕК вказує на корнеальне і дермальне загоєння рани. Дефекти в інсулін-К і ІСБ-1К вказують на цукровий діабет типу-ІІ. Більша кореляція між специфічністю РТК і її терапевтичними показаннями приведена в 65 (Ріожтап ега!., 1994, ОМЕР 7:334-339).

Як зазначалось раніше, не тільки РТК, але і КТК включають, але не обмежується, згс, арі, Тр5, уез, туп,

Іуп, ІсК, рік, йск, їдг і ук (огляд ВоїЇеп еї аїЇ., 1992, БАБЕВ 3., 6:3403-3409| включені в проліферативні і метаболітичні шляхи трансдукції сигналу і таким чином можна очікувати і, було показано, втягнуті в багато

РТК-медійованих розладів, і яких представлений винахід стосується. Наприклад, мутований згс (у-вгс), як було показано, є онкопротеїном (ррбО"е) у курей. Однак, його клітинна гомологія, прото-онкоген ррбО 99 передає онкогенні сигнали багатьом рецепторам. Надмірна експресія ЕСЕК або НЕК2/пеу в пухлинах призводить до значної активації ррбОзс, яка є характеристикою злоякісних клітин, але відсутня у нормальних клітин. З іншого боку, відсутність у мишей експресії с-згс проявляється на остеопетротному фенотипі, що вказує на ключову участь с-8гс в функції остеокласту і можливе втягнення у подібні розлади. 70 Подібним чином, 2ар70 втягнутий в Т-клітинне сигналювання, яке може мати відношення до аутоіїмунних розладів.

СТК пов'язані з запальними, аутоїмуннми захворюваннями, імуновідповідями і гіперпроліреративними розладами, такими як рестеноз, фіброз, псоріаз, остеоартрит і ревматоїдний артрит.

ПК також втягнуті в імплантацію ембріону. Таким чином, сполуки цього винаходу можуть забезпечувати 75 ефективний спосіб попередження такої імплантації ембріону і звідси бути корисними як протизаплідні агенти.

Додатковими розладами, які можуть бути вилікувані або попереджені використовуючи сполуки цього винаходу є імунологічні розлади, такі як аутоімунні захворювання, СНІД і кардіоваскуляні розлади, такі як атеросклероз.

В кінці кінців, і РТК, і КТК є як зараз підозрюють включеними в гіперімунні розлади. Приклади дії ряду характерних сполук цього винаходу на деякі РТК показані в Таблиці 2, нижче. Представлені сполуки і дані не є приведеними з ціллю обмеження рамок цього винаходу будь-яким чином.

Б. Інгібітором циклооксигенази-2 або інгібітором СОХ-2 або інгібітором циклооксигенази-2 є агенти, що специфічно інгібують клас ферментів, циклооксигеназа-2, з менш значним інгібуванням циклооксигенази-1.

Переважно, ним є сполуки, які мають ІСв5о до циклооксигенази-2 менше ніж приблизно 0,2мМкМ, і також мають співвідношення інгібування циклооксигенази-2 до інгібування циклооксигенази-1, принаймні, 50, і більш Ге! переважно, принаймні, 100. Навіть більш переважно, сполуки мають ІСво до циклооксигенази-1ї більше ніж о приблизно 1мкМ, і більш переважно більше ніж 10мкМ.

Дослідження вказують, що простагландини синтезовані циклооксигеназами відіграють критичну роль у ініціації і промотуванні раку. Однак, СОХ-2 надмірно експресуються в неопластичних пошкодженнях товстої кишки, грудей, легені, простати, езофагу, підшлункової залози, кишечнику, шиї, яєчників, сечового міхура і сем голови 4. шиї. В деяких іп міїго і тваринних моделях, інгібтори СОХ-2 інгібують ріст пухлин і метастази.

На додаток раку рег зе, СОХ-2 також експресується в середині ангіогенного васкуляру і по сусідству з о гіперпластичними і неопластичними ушкодженнями, що вказує на те, що СОХ-2 відіграє роль в ангіогенезі Яку «23 мишей, так і щурів, інгібітори СОХ-2 значно інгібують БЕсБР-індуковану васкуляризацію. Здатність інгібіторів

СоОХ-2 як хемопревентивних, антиангіогенних і хемотерапевтичних агентів описується в літературі (Кокі еї аї., - РоїепіаІ! шШйу ої СОХ-2 іппірйоге іп спеторгемепіоп ап спетої(Ппегару. Ехр. Оріп. Іпмеві ЮОгидз (1999) |Їїч- 8(10) рр.1623-1638), який включений сюди як посилання). Збільшена і/або надмірна експресія НЕК-2/пце (ЕгЬВ2) зустрічається у 20-3095 людей з раком грудей і яєчників, тако; як і в 5-1595 людей з раком шлунку і страваходу і пов'язана з поганим прогнозуванням. Крім того, нещодавно було встановлено іп міго, що експресія СОХ-2 « надмірно регулюється в клітинах, що надімрно експресуєють онкоген НЕК-2/пеи. (З5!црБагатаїан еї аї., Іпсгтеазей ехргевзвіоп ої сусіоохудепазе-2 іп НЕК-2/пеи-омегехргеззіпуд ргеаві сапсег. Сапсег Кезеагсп (зибтіцЦей 1999), - с включена сюди як посилання). В цьому дослідженні, детектувалось безперечне збільшення рівнів РОЕ 25 а продукування протеїну СОХ-2 і мРНК в НЕК-2/пеи трансформованих грудних епітелаіальних клітинах порівняно "» з нетраснформованою партнерською лінією клітин. Продукти з активністю СОХ-2, тобто, простагландини, стимулятори проліферації, збільшувачи інвазивності злоякісних клітин і збільшувачи продукування фактору росту ендотеліальної васкулярності промотують ангіогенез. Крім того, НЕК-2/пеш індукує продукування -і ангіогенних факторів, таких як фактор росту ендотедіальної васкулярності. - Відповідно, введення інгібітору СОХ-2 в комбінації з анти НЕК-2/пеи антитілами, такими як трастузумаб (НегсеріїпФ) і інші терапії, що стосуються інгібування НЕК-2/пеи, розглядають лікування раку, в якому (ав) надмірно еспресується НЕК-2/пеи. о 50 Також, планується, що рівні СОХ-2 збільшуються в пухлині із збільшенням і/або надмірною експресією інших онкогенів включаючи, але не обмежується, с-тус, М-тус, І-тус, К-газ, Н-газ, М-газ. Продукти з активністю що) СОХ-2 стимулюють проліферацію клітин, інгібують імунний контроль, збільшують інвазивність злоякісних клітин і промотують ангіогенез. Відповідно, введення |інгібітору протеїнкінази в комбінації з інгібітором СОХ-2 представленого винаходу є корисним для попередження або лікування видів раку, в яких надмірно експресуються онкогени.

Специфічні інгібітори СОХ-2 корисні для лікування раку (М/098/16227) і в деяких тваринних моделях о зменшують ангіогенез, що викликається різними факторами росту (М/098/22101). Анти-ангіогенез досягається з іме) використанням інгібітору СОХ-2 у щурів з імплантованим БЕСЕ, фактором росту ендотеліальної васкулярності (МЕСРЕ) або каррагінаном, протеїнами з добре відомими ангіогенними властивостями. (Мазгіеїтег, еї а!., 89 Й 60 Аппиаї! Меейіпо ої (пе Атегісап Аввосіайоп їог Сапсег Кезеагсп, Магсп 1998.)

Фармацевтична композиція і введення

Сполука представленого винаходу або її фармацевтично прийнятна сіль може бути введена, як така пацієнту або може бути введена в фармацевтичні композиції, в яких згадані вище матеріали змішуються з придатними носіями або екціпієнтом(ама). Методики одержання і введення лікрських засобів можна знайти |в "Кетіпдіоп'з 65 РПаптасоіодіса| Зсіепсевз," Маск Рибіїзпіпуд Со., Еазюп, Ра.|, остання видання.

Як тут використовується, "введення" стосується вивільнення сполуки формули (І) або її фармацевтично прийнятної солі або фармацевтичної композиції, що містить сполуку формули (І) або її фармацевтично прийнятну сіль цього винаходу в організм з ціллю попередження або лікування ПК-залежного розладу.

Придатними шляхами введення є, без обмеження, пероральне, ректальне, місцеве, трансмукозальне або інтестинальне введення або внутрішньом'язові, підшкірні, внутіршньомозкові, інтратекальні, безпосередньо у шлуночок, внутршньовенні, в скловидне тіло, інтраперітонеальні, інтраназальні або інтраокулярні ін'єкції.

Переважними шляхами введення є пероральний і парентеральний.

Альтернативно, локальне введення сполуки є вигіднішим ніж системне введення, наприклад, за допомогою ін'єкції сполуки безпосередньо в солідну пухлину, часто як депо або рецептури з тривалим вивільненням. 70 Крім того, вона може вводити лікарський засіб в системі вивільнення з націлюванням лікарського засобу, наприклад, в ліпосомі покритому пухлиноспецифічним антитілом. Ліпосоми будуть націлювати і доставляти селективно до пухлини.

Фармацевтичні композиції представленого винаходу можна виготовити за способами добре відомими в цій галузі, наприклад, за допомогою засобів звичайного змішування, розчинення, гранулювання, одержання драже, /5 розтирання, емульсифікування, інкапсулювання, включення або ліофілізації.

Фармацевтичні композиції для використання згідно з представленим винаходом можуть бути сформовані загальновідомим чином використовуючи один або більшу кількість фізіологічно прийнятних носіїв, що містять екціпієнти і допоміжні речовини, які полегшують переведення активних сполук в рецептури, які можуть бути використані фармацевтично. Властивості рецептури залежать від вибору шляху введення.

Для ін'єкування, сполуки винаходу можуть бути сформовані в водні розчини, переважно в фізіологічно сумісні буфери, такі як розчин Ханка, розчин Рінгера або фізіологічно забуферений салін. Для трансмукозального введення, пенетранти прийнятні для проникнення через бар'єр використовуються в рецептурі. Такі пенетранти добре відомі в цій галузі.

Для перорального введення, сполуки можуть бути введенні як комбінація активних сполук з фармацевтично с прийнятними носіями добре відомими в цій галузі. Такі носії дають можливість сформувати сполуки у таблетки, пілюлі, лозенги, драже, капсули, рідини, гелі, сиропи, суспензії і їм подібні, придатні для перорального (8) вживання пацієнтом. Фармацевтичні рецептури для перорального використання можна одержати використовуючи твердий екціпієт, необов'язково, змоловши одержану суміш, і піддавши суміш гранулюванню, після додавання інших придатних допоміжних речовин, якщо бажано, з одержанням таблеток або ядер драже. с

З0 Корисними екціпієнтами є, зокрема, наповнювачі, такі як цукри, включаючи лактозу, цукрозу, маніт або сорбіт, похідні целюлози, такі як, наприклад, кукурудзяний крохмаль, пшеничний крохмаль, рисовий крохмаль і о картопляний крохмаль і інші матеріали, такі як желатин, трагакантова камедь, метилцелюлоза, о гідроксипропілметилцелюлоза, натрій карбоксиметилцелюлоза, і/або полівінілпіролідон (ПВП). Якщо бажано, можуть бути додані дезінтегруючі агенти, такі як поперечно зшитий полівінілпіролідон, агар або алгінова ї-

Зв КИСЛОТа. Також може бути використана сіль, така як алгінат натрію. ї-

Ядра драже забезпечують придатними покриттями. Для цих цілей, можуть бути використані концентровані розчини цукрів, які можуть, необов'язково, містити арабську смолу, тальк, полівінілпіролідон, гель карбополю, поліетиленгліколь і/або діоксид титану, розчини глазурей, і придатні органічні розчинники або суміші розчинників. Барвники або пігменти можуть бути додані до покриття таблеток або драже для ідентифікування « 70 або для відображення різних комбінацій доз активної сполуки. в с Фармацевтичні композиції, які можуть бути використані перорально включають щільно підігнані капсули виготовлені з желатину, також як і м'які, закриті капсули виготовлені з желатину і пластифікатору, такого як ;» гліцерин або сорбіт. Щільно підігнані капсули можуть містити активні інгредієти в суміші з наповнювачами, такими як лактоза, зв'язувальні агенти, такі як крохмаль, і/або змащувальні агенти, такі як тальк або стеарат

Магнію і, необов'язково, стабілізатори. В м'яких капсулах, активні сполуки можуть бути розчинені або -І суспендовані в придатних рідинах, таких як жирні олії, рідкі парафіни або рідкі поліетиленгліколі. Також до цих рецептур можуть бути додані стабілізатори. ш- Капсули можуть упаковані у пляшечки з коричневого скла або пластмаси для захисту активної сполуки від о світла. Контейнери, що містять рецептуру капсули активної сполуки повинні зберігатись при контрольованій кімнатній температурі (15-302С). о Для введення за допомогою інгаляції, сполуки для використання у представленому винаході зазвичай

ГЯ6) вивільнюють у формі аерозольного спрею використовуючи контейнер під тиском або розпилювач і придатний попелант, наприклад, без обмеження, дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафторетан або діоксид вуглецю. У випадку стиснутого аерозолю, дозована одиниця може бути відміряна за допомогою клапану для вивільнювання виміряної кількості. Капсули і картриджі, наприклад, желатинові можуть бути сформовані для використання в інгаляторі або інсуфлаторі так, що містять порошкоподібну суміш сполуки і придатну іФ) порошкоподібну основу, таку як лактоза або крохмаль. ко Сполуки також можуть бути сформовані для парентерального введення, наприклад, за допомогою ін'єкції болюсу або безперервного вливання. Рецептури для ін'єкції можуть бути представлені в одиничній дозовані бо формі, наприклад, ампул або мультидозових контейнерів, з додаванням консервантів. Композиції можуть мати такі форми, як суспензії, розчини або емульсії в масляному або водних розчинниках, і можуть містити формулюючі матеріали, такі як суспендувальні, стабілізувальні і/або диспергувальні агенти.

Фармацевтичні композиції для парентерального введення включають водні розчини водорозчинних форм, таких як, без обмеження, сіль активної сполуки. Крім того, суспензії активної сполук можна одержати в 65 Ліпофільному розчиннику. Придатними ліпофільними розчинниками є жирні олії, такі як сезамова олія, синтетичні естери жирних кислот, такі як етил олеат і тригліцериди, або матеріали, такі як ліпосоми. Водні суспензії для ін'єкції можуть містити речовини, що надають вищу в'язкість суспензії, такі як натрій карбоксиметилцелюлоза, сорбіт або декстран. Необов'язково, суспензія також може містити придатні стабілізатори і/або агенти, що збільшують розчинність сполуки і дозволяють одержати висококонцентровані розчини.

Альтернативно, активний інгредієнт може бути порошком для відновлення придатним розчинником, наприклад, стериальною пірогенвільною водою, перед використанням.

Сполуки також можна сформувати в ректальні композиції, такі як супозиторії або клізми, що утримуються, використовуючи, наприклад, загальновідомі основи супозиторіїв, такі як масло какао або інші гліцериди.

На додаток до рецептур описаних раніше, сполуки також можуть бути сформовані як депо. Такі довгодіючі /о рецептури можуть бути введенні шляхом імплантації (наприклад, підшкірно або внутрішньом'язово) або за допомогою внутрішньом'язової ін'єкції. Сполука цього винаходу може бути об'єднана для цього шляху введення з придатними полімерними або гідрофобними матеріалами (наприклад, у вигляді емульсії з фармакологічно прийнятною олією), з іонообмінними смолами, або як поганорозчинне похідне, таке як, без обмеження, паганорозчинна сіль.

Необмежуючим прикладом фармацевтичного носія для гідрофобних сполук винаходу є система співрозчинників, що містить бензиловий спирт, неполярні поверхнево-активні речовини, водозмішувані органічні полімери і водна фаза, така як співрозчинна система МРО. МРО є розчином 3905 в/о бензилового спирту, 8905 в/о неполярної поверхневоактивної речовини Полісорбат 80 і 65905 в/о поліетиленгліколю 300, доведеної до об'єму абсолютним етанолом. МРО співрозчинна система (МРО:ОБМУ) містить МРО розведену 1:1 595 розчином 2о декстрози у воді. Ця співрозчинна система добре розчиняє гідрофобні сполуки і сама по собі має низьку токсичність при системному призначенні. Природно, співвідношення такої співрозчинної системи може змінюватись без руйнування її розчинності і токсичності. Крім того, ідентичні співрозчинні компоненти можуть бути замінені: наприклад, замість Полісорбату 80 можуть бути використані інші низькотоксичні неполярні поверхневоактивні речовини, фракційна частина поліетиленгліколю може бути змінена, замість сч об поліетиленгліколю можуть бути використані інші біосумісні полімери, наприклад, полівінілпіролідон, і інші цукри або полісахариди можуть замінити декстрозу. і)

Альтернативно, можуть бути використані інші системи вивільнення гідрофобним фармацевтичних сполук.

Ліпосоми і емульсії добре відомі приклади розчинників або носіїв вивільнення гідрофобних лікарських засобів.

На додаток, деякі органічні розчинники, такі як диметилсульфоксид також можуть бути використані, хоча часто с

Зо Ціною збільшення токсичності.

Додатково, сполуки можуть бути вивільнені використовуючи систему тривалого вивільнення, таку як о напівпроникні матриці твердих гідрофобних полімерів, що містять терапевтичний агент. Прийняті різними о матеріали тривалого вивільнення і вони добре відомі спеціалістам в цій галузі. Капсули тривалого вивільнення можуть, в залежності від її хімічної природи, вивільнювати сполуки протягом від декількох тижнів до понад 100 в. днів. В залежності від хімічної природи і біологічної стабільності терапевтичного реагенту, можуть бути ї- використані додаткові стратегії стабілізації протеїну.

Фармацевтичні композиції описані тут також можуть містити придатні тверді або гелеподібні носії або екціпієнти. Прикладами таких носіїв або екціпієнтів є, але не обмежується, карбонат кальцію, фосфат кальцію, різні цукри, крохмалі, похідні целюлози, желатин і полімери, такі як поліетиленгліколі. «

Багато ПК модулюючих сполук винаходу можуть бути одержані як фізіологічно прийнятні солі, де заявлена з с сполука може бути у формі негативно або позитивно зарядженої молекули. Прикладами солей, в яких сполуки є позитивно зарядженим замісником є, без обмеження, четвертинні амонієві (обговорені тут в іншому місті) солі, ;» такі як гідрохлорид, сульфат, карбонат, лактат, тартрат, малат, малеат, сукцинат, де атом азоту четвертинної амонієвої групи є азот, що вибирають на сполуці цього винаходу, який реагує з прийнятною кислотою. Солями, в яких сполука цього винаходу утворює негативно заряджені молекули є, без обмеження, натрієві, калієві, -І кальцієві і магнієві солі, що утворюються в наслідок реакції карбокисльної групи сполуки з прийнятною основою (наприклад гідроксидом натрію (маон), гідроксидом калію (КОН), гідроксидом кальцію (Са(ОН)») і т.і.). ш- Фармацевтичними композиціями придатними для використання в представленому винаході є композиції, де о активний інгредієнт міститься кількості достатній для досягнення запланованої цілі, наприклад, модулювання 5р активності ПК або лікування або попередження ПК-залежного захворювання. о Більш особливо, терапевтично ефективна кількість означає кількість сполуки ефективну для попередження,

Із полегшення або покращення симптомів захворювання або пролонгування виживання суб'єктів, що лікуються.

Визначення терапевтично ефективної кількості знаходиться в межах здатності спеціаліста в цій галузі, особливо в світлі детального опису приведеного тут. 5Б Для будь-якої сполуки, що використовується в способах цього винаходу, терапевтично ефективна кількість або доза може бути оцінена виходячи з дослідження культур клітин. Потім, доза може бути сформована для

Ф) використання в тваринних моделях для того щоб досягти інтервала циркулююючої концентрації, що включає ІС со ка визначену в культурі клітин (тобто, концентрації тестованої сполуки, яка забезпечує половину від максимального інгібування активності ПК). Така інформація може бути потім використана для більш точного бор визначення дози корисної для людей.

Токсичність і терапевтичну ефективність сполук описаних тут можна визначити за допомогою стандартних фармацевтичних методик в культурах клітин або на експериментальних тваринах, наприклад, шляхом визначення ІСво і ЇОво (обидва з яких обговорювались тут раніше) для певної сполуки. Дані одержані з цих досліджень культур клітин і дослідженнях тварин можуть бути використані для формування інтервалу доз для 65 Використання людьми. Доза може змінюватись в залежності від дози що використовується і шляху введення.

Точна рецептура, шлях введення і доза може бути вибрана лікарем з огляду на стан пацієнта. |Дивіться наприклад, Ріпа), еї аі., 1975, в "Тпе Ріпагтасоіодіса! Вавзіз ої Тнегареціісв", Сп. 1 р.11.

Розмір дози і інтервал між дозами може встановлювати індивідуально одержавши рівні в плазмі активних речовин, які достатні для підтримання кіназомодулюючих ефектів. Ці рівні в плазмі виражають як мінімальні ефективні концентрації (МЕК). МЕК будуть змінюватись для кожної сполуки, але можуть бути оцінені з іп мйго даних, наприклад, концентрація необхідна для досягнення 50-9095 інгібування кінази може бути встановлена використовуючи дослідження описані тут. Дози необхідні для досягнення МЕК будуть залежати від індивідуальних характеристик і шляху введення. ВЕРХ дослідження або біодослідження можуть бути використані для визначення концентрації в плазмі. 70 Інтервали доз також можна визначити використовуючи значення МЕК. Сполуки повинні бути введені використовуючи інтервал, що підтримує рівні в плазмі вищі за МЕК на 10-9095, переважно 30-90965 і найбільш переважно 50-90905.

На даний момент, терапевтичні кількості сполук формули (І) можуть змінюватись в інтервалі від приблизно 0,25мг/м2 до 1500мг/м2 на день; переважно приблизно Змг/м?/день. Навіть більш переважно Б5Омг/м2 до 400мг/м2 75 на день.

Терапевтично ефективні кількості інгібітору циклооксигенази становлять від приблизно 0,1мг до приблизно 1000Омг для лікування згаданих вище станів, з переважними рівнями від приблизно 1,Омг до приблизно 1,00Омг.

Кількість активного інгредієнту, що може бути об'єднаний з іншими протираковими агентами для держання одиничної дозованої форми буде змінюватись в залежності стану, що лікується, і шляху введення.

У випадку локального введення або селективного поглинання, ефективна локальна концентрація лікарського засобу може не бути зв'язаною з концентрацією в плазмі і інші процедури відомі в цій галузі можуть бути використані для визначення коректної кількості дози і інтервалу.

Кількість композиції, що вводиться буде, безперечно, залежати від суб'єкту, що лікується, складності хвороби, способу введення, рішення лікаря і т... Га

Якщо бажано, композиції можуть бути представлені в упаковці або роздатчика, такому як набір схвалений

ЕВА, який може містити один або більшу кількість одиничних дозованих форм, що містять активний інгредієнт. о

Упаковка може, наприклад, включати металеву або пластикову фольги, така як блістер. Упаковка або роздатчик може доповнюватись інструкцією по прийому. Упаковка або роздатчик також може доповнюватись пам'яткою, що прикріплена до контейнеру у формі, що відповідає запровадженій урядовим агентством з регулювання Ге виробництва, використання або продажу фармацевтичних препаратів, де пам'ятка відображає в схваленій агентством формі склад або введення людині або тварині. Така пам'ятка, наприклад, може бути маркована - відповідно до схваленої Управлінням по санітарному нагляду за якістю харчових продуктів і медикаментів (США) ав! (0.5. Роса апа Огоид Аатіпівігайоп) для рецептів лікарських засобів або схвалених добавок. Композиція, що містить сполуку винаходу сформовану з сумісним фармацевтичним носієм також може бути одержана, поміщена -

В прийнятний контейнер і маркована для лікування вказаного стану. Придатними станами, що вказуються на ча етикетці може бути лікування пухлини, інгібування ангіогенезу, лікування фіброзу, діабету і їм подібних.

Також в аспекті цього винаходу, сполука описана тут або її сіль або пролікарська форма, може бути об'єднанана з іншими хіміотерапевтичними агентами для лікування захворювань і станів, що обговорювались « вище. Наприклад, сполука, сіль або пролікарська форма цього винаходу може бути об'єднана з алкілувальними агентами, такими як фторурацил (5-Р), окремо або в комбінації з лейковоріном; або іншими алкілуванльними й с агентами, такими як, без обмеження, інші аналоги піримідину, такі як ОЕТ, капецитабін, гемцитабін і ц цитарабін, алкілоульфонати, наприклад, бусулфан (використовується для лікування хронічної гранулоцитної "» лейкемії), імпросульфан і піпросульфан; азиридини, наприклад, бензодепа, карбохон, метуредепа і уредепа; етиленіміни і метилмеламіни, наприклад, алтретамін, триетиленмеламін, триетиленфосфорамід, триетилентіофосфорамід і триметилолмеламін; і азотисті сполуки гірчиці, наприклад, хлорамбуцил -І (використовуються в лікуванні хронічної лімфоцитарної лейкемії, первинної макроглоглобулінемії і лімфоми не-Ходжкіна), циклофосфамід (використовуються при лікуванні хвороби Ноджкіна, множинної мієломи, 7 нейробластоми, раку грудей, раку яєчників, раку легені, пухлини Вілма і рабдоміосаркоми), естамустин, ав! іфосфамід, новембрицін, преднімустин і урацилові похідні гірчиці (використовується при лікуванні первинного тромбоцитозу, лімфоми не-Ходжкіна, хвороби Ходжкіна і раку яєчників); і триазини, наприклад, дакарбазин о (використвоується при лікуванні саркоми м'яких тканин).

Кз Сполуку, сіль або пролікарську форму цього винаходу також можна використовувати в комбінації з іншими антиметаболітично хемротерапевтичними агентами, такими як, без обмеження, аналоги фолієвої кислоти, наприклад, метотрексат (використовується для лікування гострої лімфоцитної лейкемії, хоріокарциноми, Ффунгоїдної гранулеми, раку грудей, раку голови і шиї і остеогенної саркоми) і птероптерин; і аналоги пурину, такі як меркаптопурин і тіогуанін, який знаходить використання при лікуванні гострого гранулоциту, гострої

Ф, лімфоцитної і хронічної гранулоцитної лейкемій. ко Розглядається, що сполуку, сіль або пролікарську форму цього винаходу також можна використовувати в комбінації з природними продуктами, що є хемотерапевтичними агентами, такими як, без обмеження, алкалоїди бо в'юнка, наприклад, вінбластин (використовується при лікуванні раку грудей і раку яєчників), вінкристин і віндезин; епідофілотоксини, наприклад, етопозиди і теніпозид, обидва з яких є корисними при лікуванні раку яєчків і саркоми Капосі; антибіотичні хемотерапевтичні агенти, наприклад, даунорубіцин, доксорпубіцин, епірубіцин, мітоміцин (використовується для лікування раку шлунку, шиї, товстої кишки, грудей, сечового міхура і підшлункової залози), дактиноміцин, темозоломід, плікаміцин, блеоміцин (використовується для 65 лікування раку шкіри, стравоходу і сечостатевого тракту); і ферментні хіміотерапевтичні агенти, такі як

І -аспаргіназа.

На додаток до вище згаданого, сполуку, сіль або пролікарську форму цього винаходу також можна використати в комбінації з координаційними комплексами платини (цисплатин і т.І.); заміщені сечовини, такі як гідроксисечовина; похідні метилгідразину, наприклад, прокарбазин; адренокортикоїдні супресанти, наприклад, мітотан, аміноглутетімідин; і гормон і антагоністи гормону, такі як адренокортикостероїди (наприклад, преднізон), прогестини (наприклад, гідроксипрогестерон капроат); естрогени (наприклад, діетилстільбестерол); антиестрогени, такі як томоксифен; андрогени, наприклад, тетстостерону пропіонат; і інгібітори ароматази, такі як анастрозол. Інші антинеоплатичні агенти відомі з літератури і можуть бути використані окремо або в комбінаційній терапії представленого винаходу. Приклади цих неопластичних агентів і інші агенти приведені |в /о заявці на патент ОЗ з серійним номером 60/113,786, що подана 23 грудня 1998, і публікації РСТ МоУу/О 00/387161, опис якої включений сюди як посилання.

На закінчення, також припускається, що комбінація сполуки цього винаходу буде ефективна в комбінації з мітотрексаном або паклитакселем для лікування солідних пухлин або лейкемій, таких як, без обмеження, гострая мієлогенна (не-лімфоцитна) лейкемія.

ПРИКЛАДИ

Синтетичні приклади

Наступні приготування і приклади приведені для того щоб спеціаліст в цій галузі більш ясно зрозумів і відтворив представлений винахід. Вони не повинні розглядатись як такі, що обмежують границі винаходу, але просто приведені для його ілюстрації і розкриття.

Синтез інгібітору протеїнкінази представленого винаходу - сполук Формули (І)

Загальна методика синтезу:

Наступна загальна методика може бути використана для одержання сполук цього винаходу:

Прийнятно заміщений 2-оксиіїндол (Теквів.), прийнятно заміщений альдегід (1,2еквів.) і основу (0,Теквів.) змішували в розчиннику (1-2мл/ммоль 2-оксиіндолц) і суміш потім нагрівали протягом від приблизно 2 до сч ов приблизно 12 годин. Після охолодження, осад, що утворився, фільтрували, промивали холодним етанолом або етером і сушили у вакуумі одержуючи твердий продукт. Якщо осад не утворювався, реакційну суміш і) концентрували і залишок розтирають з дихлорметан/етер, одержану тверду речовину збирають фільтруванням і потім сушать. Продукт може, необов'язково, бути в подальшому очищений за допомогою хроматографії.

Основою може бути органічна або неорганічна основа. Якщо використовується органічна основа, переважно су зо вона є азотвмісною основою. Прикладами органічних азотвмісних основ є, але не обмежується, діізопропіламін, триметиламін, триетиламін, анілін, піридин, 1,8-діазабіцикло(|5.4.1)ундец-7-ен, піролідин і піперидин. о

Прикладами неорганічних основ є, без обмеження, аміак, гідроксиди, фосфати, карбонати, бікарбонати, о бісульфати і аміди лужних і лужноземельних металів. Лужними металами є літій, натрій і калій, в той час як лужноземельними металами є кальцій, магній і барій. ї-

В представленому переважному втіленні цього винаходу, коли розчинник є протонним розчинником, такимяк р вода або спирт, основа є неорганічною основою лужного або лужноземельного металу, переважно, гідроксидом лужного або лужноземельного металу.

Спеціалісту в цій галузі повинно бути зрозуміло, виходячи з загальних відомих принципів органічного синтезу і описаного тут, які основи будуть найбільш прийнятними для проведення реакції. «

Розчинник в якому проводять реакцію може бути протонним або апротонним розчинником, переважно, він Є пт») с протонним розчинником. "Протонним розчинником" є розчинник, який має атом(и) водню ковалентно приєднані до атомів кисню або азоту, які віддають атоми водню сильним кислотам і таким чином здатні бути "розділені" з ;» розчиненою речовиною через водневий зв'язок. Прикладами протонних з розчинників є, без обмеження, вода і спирти. "Апротонним розчинником" може бути полярним або неполярним але, так чи інакше, не містити кислотних -І воднів і таким чином не здатним зв'язуватись через водневий зв'язок з розчиненими речовинами. Прикладами, без обмеження, неполярних апротонних розчинників є пентан, гексан, бензол, толуол, метиленхлорид і ш- тетрахлорид вуглецю. Прикладами полярних апротонних розчинників є хлороформ, тетрагідрофуран, о диметилсульфоксид і диметилформамід.

В представленому переважному втіленні цього винаходу, розчинник є протонним розчинником, переважно, о вода або спирт, такий як етанол.

Із Реакцію проводять при температурах більше ніж кімнатна температура. Температура зазвичай знаходиться в межах від приблизно 302 до приблизно 1502С, переважно від приблизно 802 до приблизно 1002, найбільш переважно від приблизно 752 до приблизно 852С, яка є приблизно температурою кипіння етанолу. "Приблизно" означає, що температура коливається в межах 10 градусів Цельсія від вказаної температури, більш переважно в межах 5 градусів Цельсія вказаної температури і, найбільш переважно, в межах 2 градусів Цельсія вказаної о температури. Таким чином, наприклад, "приблизно 75922" означає 759-102, переважно 7592С-59С; і найбільш ко переважно, 759С--296. 2-Оксиіндоли і альдегіди, можна легко синтезувати використовуючи методики добре відомі в хімічній галузі. бо Для спеціаліста в цій галузі повинно бути зрозуміло, що доступні інші синтетичні шляхи одержання сполук винаходу і що наступні запропоновані в прикладах шляхи не слід розглядати як такі, що обмежують.

Спосіб А: Формілювання піролів

РОСІ» (1,Теквів.) додавали по краплям до диметилформаміду (Зеквів.) при -102С з наступним додаванням прийнятного піролу розчиненого в диметилформаміді. Після перемішування протягом двох годин, реакційну б5 суміш розводили НоО і підлуговували до рНІ1І1 використовуючи ТОМ КОН. Осад, який утворився збирали фільтруванням, промивали НО і сушили у вакуумній печі одержуючи бажаний альдегід.

Спосіб Б: Омилення естерів піролкарбонової кислоти

Суміш естеру піролкарбонової кислоти і КОН (2-4еквів-) в ЕЮН кип'ятили із зворотнім холодильником до завершення реакції, що визначали за допомогою тонкошарової хроматографії (ТШХ). Охолоджену реакційну суміш підкислювали до рНЗ використовуючи 1М НОСІЇ. Осад, що утворився, збирали фільтруванням, промивали

НО і сушили у вакуумній печі одержуючи бажану піролкарбонову кислоту.

Спосіб В: Амідування

До розчину, що перемішується, піролкарбонової кислоти розчиненої в диметилформаміді (0,3м) додавали 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)карбодіїмід (1,2еквів.), 1-гідроксибензотриазол (1,2еквів.) і триетиламін 7/0 (деквів.). Додавали прийнятний амін (Теквів.) і реакцію перемішували до завершення, що визначали за ТШХ.

Потім до реакційної суміші додавали етилацетат і розчин промивали насиченим Мансо» і насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили над безводним Моа5О), і концентрували одержуючи бажаний амід.

Спосіб Г: Конденсування альдегідів і оксиіндолів, що містять замісники з карбоксильною групою

Суміш оксиїндолу (1 еквівалент), 1 еквіваленту альдегіду і 13 еквівалентів піперидину (або піролідину) в 7/5 етанолі (04м) перемішували при 90-10092С до завершення реакції що визначали за ТШХ. Суміш потім концентрували і залишок підкислювали 2М НС. Осад, що утворився, промивали НО і ЕЮН і потім сушили у вакуумній печі одержуючи продукт.

Спосіб Д: Конденсування альдегідів і оксиіндолів, що не містять замісників з карбоксильною групою

Суміш оксиіндолу (1 еквівалент), 1 еквіваленту альдегіду і 1-3 еквівалентів піперидину (або піролідину) в етанолі (0,4м) перемішували при 90-1002С до завершення реакції, що визначали за ТШХ. Суміш охолоджували до кімнатної температури і тверду речовину, що утворилась збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом і сушили одержуючи продукт. Якщо після охолодження реакційної суміші осад не утворювався, суміш концентрували і очищали за допомогою колонкової хроматографії.

В. Приклади синтезів оксиіндолу Га

Наступні приклади синтезу типових оксиіндолів не повинні розглядатись як такі, що обмежують рамки цього винаходу будь-яким чином. Альтернативні шляхи одержання оксиіїндолів, також як і інші оксиіндоли, що о використовуються для одержання сполук цього винаходу будуть очевидні спеціалісту в цій галузі виходячи з наступного опису. Такі синтези і оксиіндоли є в межах і дусі цього винаходу. 5-Аміно-2-оксиіндол сі 5-Нітро-2-оксиіндол (6,3г) гідрували в метанолі над 1095 паладієм на вугіллі одержуючи З,0г (6090 вихід) вказаної в заголовку сполуки як білу тверду речовину. о 5-Бром-2-оксиіїндол о 2-Оксиіїндол (1,3г) в 20мл ацетонітрилу охолоджували до -109С і повільно при перемішуванні додавали 2,0г

М-бромсукцініміду. Реакцію перемішували протягом 1 годину при -109С і 2 години при 02С. Осад збирали, - промивали водою і сушили одержуючи 1,9 г (90905 вихід) вказаної в заголовку сполуки. - 4-Метил-2-оксиіндол

Діетил оксалат (ЗОмл) в 20Омл сухого етеру додавали при перемішуванні до 19г етоксиду калію суспендованого в Бб5Омл сухого етеру. Суміш охолоджували в бані з льодом і повільно додавали 20мл «

З-нітро-о-ксилену в 20мл сухого етеру. Мутну темно-червону суміш нагрівали при температурі кипіння протягом 0,5г, концентрували до темно-коричневої твердої речовини і обробляли 10905 гідроксидом натрію до розчинення - с майже усієї твердої речовини. Темно-червону суміш обробляли 30956 пероксидом водню до зміни червоного и кольору на жовтий. Суміш обробляли, альтернативно, 1095 гідроксидом натрію і 3095 пероксидом водню до є» зникнення темно-червоного кольору. Тверду речовину відфільтровували і фільтрат підкислювали бМ хлорводневою кислотою. Одержаний осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали водою і сушили у вакуумі одержуючи 9,8г (4595 вихід) 2-метил-б-нітрофенілоцтової кислоти як майже-білу тверду -і речовину. Тверду речовину гідрували в метанолі над 1095 паладієм на вугіллі одержуючи 9,04г вказаної в - заголовку сполуки як білу тверду речовину. 7-Бром-5-хлор-2-оксиіндол («в) 5-Хлор-2-оксиіндол (16,8г) і 19,6бг М-бромсукцініміду суспендували в 140мл ацетонітрилу і кип'ятили о 50 протягом З годин. Тонкошарова хроматографія (силікагель, етилацетат) після 2 годин кип'ятіння показала

Б-хлор-2-оксиїндол або М-бромсукцінімід (КТ 0,8), продукт (КТ 0,85) і другий продукт (КІ 0,9) співвідношення до) яких не змінювалось після години кип'ятіння. Суміш охолоджували до 10 оС, осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали 25мл етанолу і відсмоктували до суха протягом 20 хвилин у воронці одержуючи 14,1г вологого продукту (56950 вихід). Тверду речовину суспендували в 200мл денатурованого етанолу і суспензію перемішували і кип'ятили протягом 10 хвилин. Суміш охолоджували в бані з льодом до

ГФ! 1022. Твердий продукт збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали 25мл етанолу і сушили у вакуумі при 4023 одержуючи 12,7г (5195 вихід) 7-бром-5-хлор-2-оксиіндолу. о 5-Фтор-2-оксиіндол 5-Фторізатин (8,27) розчиняли в БОмл гідрату гідарзину і кип'ятили протягом 1,0г. Реакційну суміш 60 виливали у льодяну воду. Осад потім фільтрували, промивали водою і сушили у вакуумній печі одержуючи вказаний в заголовку продукт. 5-Нітро-2-оксиіндол 2-Оксиіїндол (6,5г) розчиняли в 25мл концентрованої сірчаної кислоти і суміш витримували при -10 - -1590 і в цей час по краплям додавали 2,1мл азотної кислоти, що димить. Після додавання азотної кислоти реакційну бо суміш перемішували при 02С протягом 0О,5г і виливали у лід-вода. Осад збирали фільтруванням, промивали водою і кристалізували з 5095 оцтової кислоти. Кристалічний продукт потім фільтрували, промивали водою і сушили у вакуумі одержуючи 6,Зг (70905) 5-нітро-2-оксиіндолу. 5-Аміносульфоніл-2-оксиіндол

До 1О00О0мл колби, що містила 27мл хлорсульфонової кислоти, повільно додавали 13,3Зг 2-оксиіндолу.

Температуру реакції підтримували нижче 3092С під час додавання. Після додавання, реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1,5г, нагрівали при 682 протягом 1г, охолоджували і виливали у воду. Осад промивали водою і сушили у вакуумній печі одержуючи /-11,0г 5-хлорсульфоніл-2-оксиіндолу (5095 вихід), який використовували без подальшого очищення. 5-Хлорсульфоніл-2-оксиіндол (2,1г) додавали до 1Омл гідроксиду амонію в 1Омл етанолу і перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Суміш концентрували і тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування одержуючи 0,4г (20905 вихід) вказаної в заголовку сполуки як майже-білу тверду речовину. 5-Ізопропіламіносульфоніл-2-оксиіндол

До 1О00О0мл колби, що містила 27мл хлорсульфонової кислоти, повільно додавали 13,3Зг 2-оксиіндолу. 75 Температуру реакції підтримували нижче 302С під час додавання. Реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 1,5 годин, нагрівали при 682 протягом 1 години, охолоджували і виливали у воду. Осад, що утворився, фільтрували, промивали водою і сушили у вакуумній печі одержуючи 11,0г (50905) 5-хлорсульфоніл-2-оксиіндолу, який використовували без подальшого очищення.

Суспензію Зг 5-хлорсульфоніл-2-оксиіндолу, 1,15г ізопропіламіну і 1,2мл піридину в 5Омл дихлорметану перемішували при кімнатній температурі протягом 4 годин під час чого утворювалась біла тверда речовина.

Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування, суспендували в гарячому етанолі, охолоджували, збирали за допомогою вакуумного фільтрування і сушили у вакуумі при 402 протягом ночі одержуючи 1,5г (4595) 5-ізопропіламіносульфоніл-2-оксиіндолу. "НЯМР (З3б0мгц, ДМСО-4в6) 5 10,69 (с, ш, 1Н, МН), 7,63 (дд, 9-2 і 8Гц., 1Н), 7,59 (д, 9-2Гц., 1), 7,32... «ЄМ (д, У-7ГЦ., 1Н, МН-8О»-), 6,93 (д, У-8Гц., 1Н), 3,57 (с, 2Н), 3,14-3,23 (м, 1Н, СН-(СН)»), 0,94 (д, У-7Гц., 6Н, 2хСНа). ге) 5-Феніламіносульфоніл-2-оксиіндол

Суспензію 5-хлорсульфоніл-2-оксиіндолу (1,62г, 7ммоль), аніліну (0,782мл, 8,4ммоль) і піридину (мл) в дихлорметані (20мл) перемішували при кімнатній температурі протягом 4 годин. Реакційна суміш розводили етилацетатом (З0Омл) і підкислювали 1М хлорводневою кислотою (1бмл). Органічний шар промивали с бікарбонатом натрію і насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили і концентрували. Залишок «3 промивали етанолом (Змл) і потім хроматографували на силікагелі використовуючи як елюент метанол/дихлорметан 1:9 одержуючи 5-феніламіносульфоніл-2-оксиіндолу. о "НЯМР (Збомгу, ДМСО-йв) 5 10,71 (с, ш, 1Н, МН), 10,10 (с, ш, 1Н, МН), 7,57-7,61 (м, 2Н), 7,17-722 (м, ї- 2Н), 7,06-7,09 (м, 2Н), 6,97-7,0 (м, 1Н), 6,88 (д, У-8,4ГцЦ., 1Н), 3,52 (с, 2Н). , , й . п, і - 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти піридин-3-іламід

Розчин 5-хлорсульфоніл-2-оксиіїндолу (Зг) і З-амінопіридину (1,46бг) в піридині (Ябмл) перемішували при кімнатній температурі протягом ночі під час чого утворювалась коричнева тверда речовина. Тверду речовину фільтрували, промивали етанолом і сушили у вакуумі одержуючи 1,4г (3890) « 20 2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-5--сульфонової кислоти піридин-З-іламіду. -о с "НЯМР (Збомгц, ДМСО-дв) 5 10,74 (с, 1Н, МН), 10,39 (с, ІН, 8О2МН), 8,27-8,28 (д, 1Н), 8,21-8,23 (м, 1Н), . 7,59-7,62 (м, 2Н), 7,44-7,68 (м, 1Н), 7,24-7,28 (м, 1Н), 6,69-6,71 (д, 1Н), 3,54 (с, 2Н). «» МС ті/з (ХІА Т.Ю 290,2. 5-Фенілоксиіндол 5-Бром-2-оксиіндол (5г, 23,5ммоль) розчиняли в 110мл толуолу і 110мл етанолу при перемішуванні і легкому -І нагріванні. Додавали тетракіс(трифенілфосфін)паладію (0) (1,9г, 1,бммоль) після додавання 40мл (8Оммоль) 2М водного розчину карбонату натрію. До цієї суміші додавали бензолборну кислоту (3,7г, 30,бммоль) і суміш це. нагрівали в 1002 масляній бані протягом 12 годин. Реакцію охолоджували, розводили етилацетатом (500мл), ав! промивали насиченим бікарбонатом натрію (200мл), водою (200мл), 1М НСІ (200мл) і насиченим водним розчином хлориду натрію (200мл). Органічний шар сушили над сульфатом магнію і концентрували одержуючи о коричневу тверду речовину. Розтирали з дихлорметаном одержуючи 3,8г (7790) 5-феніл-2-оксиїндолу як з жовто-коричневу тверду речовину. "ЯН яЯМР (З6бО0мгц, ДМСО-дв) 5 10,4 (ш с, ІН, МН), 7,57 (дд, У-1,8 їі 7,2Гц., 1Н), 7,5-7,35 (м, 5Н), 7,29 (м, 1Н), 6,89 (д, У-8,2ГцЦ., 1Н), 3,51 (с, 2Н, СНЬСО). 99 МС ті/ 209 (М 7.

ГФ! Подібним чином, можна одержати наступні оксиіндоли: 6-(3,5-Дихлорфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он о "ЯН ЯМР (Збомгц4, ДМСО-йв) 5 10,46 (ш, 1Н, МН), 7,64 (д, У-1,8Гц., 2Н), 7,57 (м, 1Н), 7,27 (м, 2Н), 7,05 (д, 9-1,1ГцЦ., 1Н), 3,5 (с, 2Н). бо МО-ЕЇ т/» 277/279 (МІ. 6-(4-Бутилфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он "ЯН яЯМР (З6бО0мгц, ДМСО-4дв) 5 10,39 (с, ІН, МН), 7,49 (д, 9У-8,0Гц., 2Н), 7,25 (д, 9-8Гц., ЗН), 7,17 (дд, 9-1,5 і 7,8ГЦ., 1Н), 6,99 (д, 9У-1,5ГцЦ., 1Н), 3,48 (с, 2Н, СНЬСО), 2,60 (т, 9-7,5Гц., 2Гц., СНоСН»), 1,57 (м, 2Н, СН»), в'о0132 (м, 2Н, СН»), 0,9 (т, 9-7,5Гц., ЗН, СН). 6-(5-ізопропіл-2-метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он

ТН ЯМР (Збомгц, ДМСО-йв) 5 10,29 (ш с, 1Н, МН), 7,16-7,21 (м, 2Н), 7,08 (д, уУ-2,4Гц., 1Н), 6,97-7,01 (м, 2Н), 6,89 (д, 9У-0,8ГцЦ., 1Н), 3,71 (с, ЗН, ОСН»У), 3,47 (с, 2Н, СНЬСО), 2,86 (м, ІН, СН(СН»)»), 1,19 (д,

У-6,8Гц., 6Н, СН(СН»)»).

МО-ЕЇ т/з 281 (МІ". 6-(4-Етилфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он "ЯН яЯМР (З6б0мгц, ДМСО-дв) 5 10,39 (ш с, 1Н, МН), 7,50 (д, 9-8,2Гц., 2Н), 7,28 (д, 9-8,2Гц., 2Н), 7,25 (д, 9-7,5ГцЦ., 1), 7,17 (дд, 9У-1,6 8 7,5Гц., 1Н), 6,99 (д, У-1,6ГцЦ., 1Н), 3,48 (с, 2Н, СНЬСО), 2,63 (к, 9У-7,6Гц., 2Н,

СНоСНУ»), 1,20 (т, 9-7,6Гц., ЗН, СНЬСН»). то МО-ЕЇ т/2 237 МІ". 6-(3-ізопропілфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он

ТН ЯМР (Збомгц4, ДМСО-йв) 5 10,37 (ш с, ІН, МЕ), 7,43 (м, 1Н), 7,35-7,39 (м, 1Н), 7,17-7,27 (м, ЗН), 7,01 (д, 9-1,8ГцЦ., 1Н), 3,49 (с, 2Н, СНЬСО), 2,95 (м, 1ІН, СН(СН»У)»), 1,24 (д, У-6,8Гц., 6Н, СН(СН»)»).

МО-ЕЇ т/ 251 (М/". 6-(2,4-Диметоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он "ЯН ЯМР (Збомгц, ДМСО-йв) 5 10,28 (ш с, ІН, МН), 7,17 (м, 2Н), 6,93 (дд, 9У-1,6 85 7,6Гц., 1Н), 6,86 (д,

У-1,6Гц., 1), 6,63 (Д, 9-2,4Гц., 1Н), 6,58 (дд, уУ-2,4 5 8,5Гц., 1Н), 3,79 (с, ЗН, ОСН»),3,74 (с, ЗН, ОСН»), 3,45 (с, 2Н, СНьЬСО).

МО-ЕЇ т/: 269 МІ". 6-Піридин-3-іл-1,3-дигідроіндол-2-он "ЯН яЯМР (З6бО0мгц, ДМСО-дв) 5 10,51 (с, ІН, МН), 8,81 (д, У-2,5ГцЦ., 1Н), 8,55 (дд, У-1,8 і 5,7Гц., 1Н), 8 (м, 1Н), 7,45 (дд, 9У-5,7 і 9,93ГцЦ., 1Н), 7,3 (м, 2Н), 7,05 (с, 1Н), 3,51 (с, 2Н, СНЬСО).

МС т/2 219 |МГ. с 2-Оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-4-карбонової кислоти (3-хлор-4-етоксифеніл)амід Ге)

До розчину 4-карбокси-2-оксиіндолу (200мг, 1,13ммоль) і З-хлор-4-метоксифеніламіну (178мг, 1,13ммоль) в диметилформаміді (1Ббмл) при кімнатній температурі додавали бензотриазол-1-ілокситрис(диметиламіо)фосфонію гексафторфосфат (ВОР реагент, 997мг, 2,2бммоль) після чого 4-диметиламінопіридин (20бмг, 1,69ммоль). Суміш перемішували при кімнатній температурі протягом 72 с годин. Реакцію потім розводили етилацетатом (З00мл), промивали насиченим бікарбонатом натрію (10Омл), «з водою, 2М хлорводневою кислотою (100мл), водою (3Х200мл) і насиченим водним розчином хлориду натрію. її потім сушили над сульфатом магнію і концентрували. Залишок розтирали з етилацетатом одержуючи о 2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-4-карбонової кислоти (3З-хлор-4-метоксифеніл)амід як рожеву тверду речовину. їч- "НЯМР (З6омгц, ДМСО-йв) 5 10,50 (с, ш, 1Н. МН), 10,12 (с, ш, 1ТН, МН), 7,9 (с, 9У-2,5ГЦ., 1Н), 7,62 (дд, У-2,5 5 м

ОГЦ., 1), 7,38 (д, У-7,6Гц., 1Н), 7,32 (т, У-7,6ГцЦ., 1Н), 7,13 (д, 9У-9Гц., 1Н), 6,98 (д, 9У-7,6ГцЦ., 1Н), 3,83 (с, ЗН,

ОСНУ»), 3,69 (с, 2Н, СН»).

МО-ЕЇ т/2 316 (МІ. 4-Карбокси-2-оксиіндол «

Розчин триметилсилілдіазометану в гексані (2м) додавали по краплям до розчину 2,01г шщ с 2-хлор-3-карбоксинітробензолу в 20мл метанолу при кімнатній температурі до завершення виділення газу. Потім . додавали оцтову кислоту для гасіння надлишку триметилсилілдіазометану. Реакційна суміш випарювали у а вакуумі і залишок сушили в печі протягом ночі. Одержаний 2-хлор-3-метоксикарбонілнітробензол був достатньо чистим для наступної реакції.

Диметилмалонат (б,0мл) додавали до охолодженої льодом суспензії 2,1г гідриду натрію в 1ї5мл ДМСО. -і Реакційну суміш перемішували при 1002 протягом 1 години і охолоджували до кімнатної температури. Однією порцією додавали 2-хлор-3З-метоксикарбонілнітробензол (2,15г) і суміш нагрівали при 1002 протягом 1,5 годин. - Реакційна суміш потім охолоджували до кімнатної температури, виливали у льодяну воду, підкислювали до рН5 і (ав) екстрагували етилацетатом. Органічний шар промивали насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили 50о над безводним сульфатом натрію і концентрували одержуючи З,Ог диметил о 2-метоксикарбоніл-б-нітрофенілмалонату.

Кк» Диметил 2-метоксикарбоніл-б-нітрофенілмалонат (3,0г) кип'ятили в 5О0мл ЄМ хлорводневої кислоти протягом ночі. Суміш концентрували до суха, додавали 20Омл етанолу і 1,1г хлориду олова (Іі суміш кип'ятили протягом 2 годин. Суміш фільтрували крізь Целіт, концентрували і хроматографували на силікагелі використовуючи етилацетат:гексан:оцтова кислота як елюент одержуючи 0,65 г (37965) 4-карбокси-2-оксиіндолу як білу тверду речовину. о "НЯМР (Збомгц, ДМСО-сів) 5 12,96 (с, ш, ІН, СООН), 10,74 (с, ш, 1Н, МН), 7,53 (д, У-8Гц., 1Н), 7,39 (т, ко У8ГЦ., 1Н), 7,12 (д, У-8Гц., 1Н), 3,67 (с, 2Н).

Г. Синтез піролзаміщених 2-індолінонів. 60 Приклад 1 4-Метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонова кислота 4-Метил-2-піролкарбонової кислоти етиловий естер (комерційно доступний) формілювали використовуючи спосіб А одержуючи (7395) 5-форміл-4-метил-2-піролкарбонової кислоти етиловий естер. Його потім гідролізували використовуючи спосіб Б одержуючи 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбонову кислоту (5890). 65 Оксиїндол (13З3мг, Іммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбоновою кислотою (153Змг) використовуючи спосіб Г одержуючи 268мг (100905) вказаної в заголовку сполуки як оранжево-червону тверду речовину. "НЯМР (З6бомгц, ДМСО-йв) 5 13,84 (с, ш, 1Н, МН), 12,84 (с, ш, ІН, СООН), 10,98 (с, ш, 1Н, МН), 7,82 (д,

У-7,5ГЦ., 1Н), 7,67 (с, 1Н, Н-вініл), 7,18 (т, 9У-7,5Гц., 1Н), 7,01 (т, 9У-7,5Гц., 1Н), 6,88 (д, 9У-7,5Гц., 1Н), 56,71 (д, 9-2,2ГЦ., 1Н), 2,32 (с, ЗН, СН»).

МС (негативний метод) 266,8 М-11".

Приклад 2 4-Метил-5-(1-метил-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонова кислота 1-Метил-1,3-дигідроїндол-2-он (147мг, ммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбоновою 70. кислотою (153мг) використовуючи спосіб Г одержуючи 25Омг (8695) вказаної в заголовку сполуки. "НЯМР (Збомгу, ДМСО-йв) 5 13,82 (с, ш, 1Н, МН), 12,88 (с, ш, 1Н, 7,83 (д, 9У-7,5Гц., 1Н), 7,65 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,26 (т, 9У-7,5Гц., 1Н), 7,02-7,09 (м, 2Н), 6,70 (д, У-2,2ГЦ., 1Н), 2,32 (с, ЗН, СН»).

МС ті/ 283,0 |МА1)".

Приклад З 4-Метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти метиловий естер

Оксиїндол (105мг, 0,79ммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти метиловим естером (110мг, 0,67ммоль) використовуючи спосіб Д одержуючи 153,2мг (81905) вказаної в заголовку сполуки. "НЯМР (Збомгц4, ДМСО-дв) 5 13,98 (с, ш, 1Н, МН), 10,97 (с, ш, ІН, МН), 7,82 (д, 9У-7,6Гц., 1Н), 7,67 (с, 1Н, Н-вініл), 7,2 (дт, 9У-1,2 8 7,7Гц., 1Н), 7,01 (дт, 9У-1,2, 7,7ГцЦ., 1Н), 6,90 (д, 9У-7,6Гц., 1Н), 6,77 (д, У9-2Гц., 1Н).

МС (ЕС) т/ 283 М" 1).

Приклад 4 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етиловий естер 5-Хлор-1,3-дигідроіндол-2-он (2,22г, 13,2ммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової с об Кислоти етиловим естером (2,43г) використовуючи спосіб Д одержуючи 4,1г (94965) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. і) "'НЯМР (Збомгц, ДМСО-дв) 5 13,95 (с, ш, 1Н, МН), 7,98 (д, 9У-2,2Гц., 1Н, Н-4), 7,78 (с, 1Н, Н-вініл), 7,18 (дд, 9У-2,2 8 8,3Гц., 1Н, Н-6), 6,87 (д, 9У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 7,34 (д, 9-1,8Гц., 1Н, Н-3), 4,27 (к, 9-7,2Гц., 2Н,

ОСНоСН»), 2,33 (с, ЗН, СН»), 1,29 (т, 9-7,2Гц., ЗН, ОСНЬСН»). Ге!

МО-ЕЇ т/г 330 ІМ. «в)

Приклад 5 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-4-метил-1Н-пірол-2-карбонова кислота (ав)

Суміш 5-(5-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етилового м естеру (1,3г, 4ммоль) і гідроксиду калію в метанолі (25мл) і етанолі (25мл) нагрівали при температурі кипіння протягом ночі. Нерозчинні матеріали видаляли фільтруванням і суміш нейтралізували ЄМ хлорводневою - кислотою одержуючи 0,876г (70905) вказаної в заголовку сполуки. "НЯМР (Збомгц, ДМСО-сів) 5 13,80 (с, ш, 1Н, МН), 12,90 (с, ш, ІН, СООН), 11,06 (с, ш, 1Н, МН), 8,02 (д, 4-1,8Гц., 1Н, Н-4), 7,81 (с, 1Н, Н-вініл), 7,20 (дд, У-1,8 8. 8,3Гц., 1Н, Н-6), 6,89 (д, У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 6,72 «ХК (д, 9-1,8ГцЦ., 1Н, Н-3), 2,35 (с, ЗН, СН»). 70 МО-ЕЇ ті/» 302 (М 7. 8 с Приклад 6 : з» 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-1-іл-пропіл)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,16г, 0,7бммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)їамідом (0,2г, одержували за способом В) одержуючи бОмг (1790) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. -і "НЯМР (З00МГЦц, ДМСО-йдв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 11,02 (с, ш, 1Н, МН), 8,42 (т, 9У-5,8Гц., ІН, СОМНСН»), о 8,12 (д, У-1,8Гц., 1Н, Н-4), 7,78 (с, 1Н, Н-вініл), 7,30 (дд, У-1,8 5 8,4Гц., 1Н, Н-6), 6,82 (д, У-8,4Гц., 1Н, Н-7), 6,77 (д, У-2,4ГцЦ., 1Н, Н-3), 3,22-3,91 (м, 2Н, СН»), 2,38-2,43 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,35 (с, ЗН, СНУ), 1,62-1,71 (м, бН, о Зх). з МО-ЕЇ т/ 456 і 458 |М"-1 і М'2).

Приклад 7 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід 5-Бром-1,3-дигідроіїндол-2-он (0,16г, 0,75ммоль) конденсували з 5-форміл-4-метил-1Н-пірол-2-карбонової іФ) кислоти (З-діетиламінопропіл)уамідом (0,2г, одержували за способом В) одержуючи ЗОмг (895) вказаної в ко заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З00МГуц, ДМСО-йдв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 11,02 (с, ш, 1Н, МН), 8,40 (м, ІН, СОМНСН»), 8,12 (д, 60 д1,5Гц., 1Н, Н-4), 7,78 (с, 1Н, Н-вініл), 7,30 (дд, 9У-1,5 5 8,2Гц., 1Н, Н-6), 6,82 (д, 9У-8,2Гц., 1Н, Н-7), 6,78 (д, 9-2,4ГЦ., 1Н, Н-3), 3,23 (м, 2Н, СН»), 2,38-2,45 (м, 6Н, СНь 5 М(СНЬСН»)»), 2,35 (с, ЗН, СН»), 1,61 (м, 2Н,

СН»), 0,93 (т, У-71Гц., 6Н, Щ(СНоСН»з)»).

МО-ЕЇ т/ 458 і 460 |М"-1 і М'2).

Приклад 8 65 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 5-Бром-1,3-дигідроїндол-2-он. (212мг, 7ммоль) конденсували з 5-форміл-1Н-пірол-2-карбонової кислоти

(2-діетиламіноетил)амідом (одержували з етил пірол-2-карбоксилату за способом А, Б і потім В) одержуючи 162мг (3896) вказаної в заголовку сполуки. "ІН ЯМР (З300МГЦц, ДМСО-йв) 5 13,53 (с, ш, 1Н, МН), 11,06 (с, ш, 1Н, МН), 8,37 (т, ІН, СОМНСН»), 7,89 (м, 2Н), 7,32 (дд, У-2,0ГцЦ., 1Н), 6,96 (с, 1Н), 6,80-6,84 (м, 2Н), 3,3 (м, 2Н, СН»), 2,45-2,55 (м, 6Н, Щ(СНоСН»)» У СН»), 0,95 (т, 9-7,2Гц., 6Н, М(СНоСН»)»).

МО-ЕЇ т/ 430 і 432 |М"-1 ії М").

Приклад 9 5-(2-Оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід б6-Феніл-1,3-дигідроїндол-2-он (209мг, тммоль) конденсували з 5-форміл-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідоий одержуючи 182мг (42905) вказаної в заголовку сполуки. "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-адйв) 5 13,56 (с, ш, 1Н, МН), 11,06 (с, ш, 1Н, МН), 8,36 (т, ІН, СОМНСН»), 7,77 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,73 (д, 9У-7,8ГцЦ., 71Н), 7,64 (д, 9У-7,2ГцЦ., 2Н), 7,46 (м, 2Н), 7,32 (м, 2Н), 7,11 (с, 1Н), 6,96 (м, 1Н), 6,80 (м, 1Н), 3,31-3,32 (м, 2Н, СН»), 2,46-2,53 (м, 6Н, МІСНоСН»)» 4 СНео), 0,96 (т, У-6,9Гц., 6Н, Щ(СНоСН 3)2).

МО-ЕЇ т/» 428 (М.

Приклад 10 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)метиламід 5-Бром-1,3-дигідроїндол-2-он. (212мг, 7ммоль) конденсували з 5-форміл-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)метиламідом одержуючи 24бмг (55965) вказаної в заголовку сполуки.

ТН ЯМР (З60МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,54 (с, ш, 1Н, МН), 11,06 (с, ш, 1Н, МН), 7,90 (м, 2Н), 7,33 (дд, 9-1,8 5 8.4ГЦ., 1Н), 6,82-6,85 (м, ЗН), 3,55 (с, ш, 2Н, СН»), 3,25 (с, ш, ЗН, МОН»), 2,57 (Т, 9-6,5Гц., 2Н, СН»), 2,45 (м, 4Н,

М(СНоСН»)»), 0,91 (м, 6Н, МІСНЬСНІ)») сч

МО-ЕЇ т/ 444 і 446 |М"-1 ії М").

Приклад 11 о) 5-(2-Оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)метиламід б6-Феніл-1,3-дигідроїндол-2-он (209мг, тммоль) конденсували з 5-форміл-1Н-пірол-2-карбонової кислоти с зо (2-діетиламіноетил)метиламідом одержуючи 277мг (63905) вказаної в заголовку сполуки. "ЯН ЯМР (З360МГгц, ДМСО-йв) 5 13,58 (с, ш, 1Н, МН), 11,04 (с, ш, 1Н, МН), 7,78 (с, 1Н, Н-вініл), 7,73 (д, о

У-7,8ГЦ., 1), 7,64 (д, 9У-7,5Гц., 2Н), 7,46 (м, 2Н), 7,33-7,36 (м, 2Н), 7,11 (с, 1Н), 6,84 (м, 1), 6,78 (м, Фє 1Н), 3,55 (с, ш, 2Н, СН»), 3,25 (с, ш, ЗН, МОН»), 2,58 (т, 2Н, СН»), 2,44 (м, 4Н, ЖЩ(СНоСН»)»), 0,92 (м, БН,

М(СНоСН»)»). те

Приклад 12 - 3-Метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3З-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід

Оксиїіндол (66б,5мг, О,бммоль) конденсували з 5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)яуамідом (одержували з 3-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етилового естеру « за способом Б потім В) одержуючи ЗОмг (21905) вказаної в заголовку сполуки.

ТН яЯМР (З00МГЦц, ДМСО-йв) 5 13,34 (с, ш, 1Н, МН), 10,88 (с, ш, 1Н, МН), 7,62-7,67 (м, ЗН), 7,17 (м, - с 1Н), 6,99 (м, 71Н), 6,87 (д, 9У-7,6ГЦ., 1Н), 6,63 (д, 9У-1ГцЦ., 1), 3,26-3,32 (м, 2Н, СН»), 2,41-2,48 (м, бН, "» СНо 8 МЩ(СНоСН»)»), 2,29 (с, ЗН, СН»), 1,63 (м, 2Н, СН»), 0,93 (т, У-7,2Гц., 6Н, МЩ(СНЬСН»5)»). " МО-ЕЇ ті/г 380 (М.

Приклад 13 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти ш- (З-діетиламінопропіл)амід -І 5-Бром-1,3-дигідроїндол-2-он (10бмг, О,Бммоль) конденсували з 5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)уамідом одержуючи З5мг (15965) вказаної в заголовку сполуки. о ТН ЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,35 (с, ш, 1Н, МН), 11,00 (с, ш, 1Н, МН), 7,89 (д, У-1,9Гц., 1Н, Н-4), (ав) 50 7,80 (с, 1Н, Н-вініл), 7,74 (т, 955,3Гц., 1Н, СОМНеСН»), 7,91 (дд, 9У-1,9 5 8,4Гц., 1Н, Н-6), 6,83 (д, У-84Гц., 1Н,

Н-7), 6,63 (с,1Н, Н-3), 3,26 (м, 2Н, СН»), 2,41-2,48 (м, 6Н, СНьо 5 М(СНоСН»)»), 2,29 (с, ЗН, СН»), 1,63 (м, 2Н, СН»),

Іо 0,93 (т, 9-7 1Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)»).

МО-ЕЇ т/з 458 і 460 М"-1 І М"--1І. 5 Приклад 14 3-Метил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти

ГФ) (З-діетиламінопропіл)амід

Ге 6-Феніл-1,3-дигідроїндол-2-он (105мг, О,5ммоль) конденсували з 5-форміл-З-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)уамідом одержуючи 67,8мг (3095) вказаної в заголовку сполуки. во "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО- дв) 5 13,37 (с, ш, 1Н, МН), 11,02 (с, ш, 1Н, МН), 7,23-7,73 (м, 11Н), 3,29 (м, 2Н, СН»), 2,41-2,48 (м, 6Н, СНь 5. МЩ(СНЬСН»)»), 2,29 (с, ЗН, СН»), 1,64 (м, 2Н, СН»), 0,94 (т, У-7,0Гц., 6Н, МІСНоОСН»)»).

МО-ЕЇ т/2 456 (М.

Приклад 15 5-(5-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти 65 (З-діетиламінопропіл)амід 5-Метокси-1,3-дигідроіндол-2-он (82,5мг, О,5ммоль) конденсували з 5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амідом одержуючи 8Омг (39905) вказаної в заголовку сполуки.

ТН яЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,45 (с, ш, 1Н, МН), 10,70 (с, ш, 1Н, МН), 7,68-7,70 (м, 2Н), 7,32 (д,

У-1,8ГЦ., 1), 6,72-6,79 (м, 2Н), 6,60 (с, 1Н), 3,73 (с, ЗН, ОСНУ5), 3,28 (м, 2Н, СН»), 2,41-2,48 (м, 6Н,

СНо 5 М(СНоСН»)»), 2,29 (с, ЗН, СН»), 1,63 (м, 2Н, СН»), 0,93 (т, У-7,0Гц., 6Н, М(СНЬСН»З)»).

МС ті/ 410 (М 7.

Приклад 16 5-(6-Метокси-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід 6-Метокси-1,3-дигідроіндол-2-он (82,5мг, О,5ммоль) конденсували з 5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)уамідом одержуючи бЗмг (31905) вказаної в заголовку сполуки. "ЯН ЯМР (З00МГгц, ДМСО-йв) 5 13,22 (с, ш, 1Н, МН), 10,86 (с, ш, 1Н, МН), 7,39-7,63 і 6,37-6,55 (м, 6Н), 3,73 (с, ЗН, ОСН»), 3,3 (м, 2Н, СН»), 2,45 (м, 6Н, СНь 5 М(СНоСН»)»), 2,28 (с, ЗН, СН»), 1,63 (м, 2Н, СН»), 0,93 (м, 6Н, МЩ(СНоСН»З)»).

МС ті/» 410 (М.

Приклад 17 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 4,5,6,7-Тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти етиловий естер |Мау, Юопаїй А.; Газ, Тітоїйу 0.; 3.

Огд. Спет., 1992, 57:18, 4820-4828| формілювали використовуючи спосіб А потім Б одержуючи

З-форміл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїіндол-1-карбонову кислоту. 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (1,43г, 6б,вммоль) конденсували з З3-форміл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (1,97г) одержуючи 2,2г (6790) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину.

ТН ЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,47 (с, ІН, МН), 11,0 (с, ІН, МН), 8,0 (д, ІН, МН), 7,70 (с, ІН, СН), сч 7,28 (дд, 9-21 і 8,2ГцЦ., 1Н, АгН), 7,16 (м, 1Н, АгН), 6,8 (д, У-8,3Гц., 1Н, АгН), 3,3 (с, 2Н, СОМН), 2,5 (м, 6Н, (о)

ЗХМСН»), 2,78 (ш м, 2Н, пірол СН»), 2,72 (ш м, 2Н, пірол СН»), 1,7 (ш м, 4Н, МЩ(СНоСН»)»), 1,74 (ш с, 4Н,

СНоСнНоСНоСН 5), 0,96 (т, У-7,4Гц., 6Н, М(ІСНЬОСН)»).

МО-ЕЇ т/ 484 і 486 |М"-1 ії М"). с

Приклад 18 3-(5-Бром-2-оксо-0,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти - (З-діетиламінопропіл)амід ав! 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (20мг, О,Тммоль) конденсували Кк!

З-форміл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоїндол-1-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)яамідом (ЗОмг) одержуючи - ЗЗмг (46905) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. - "ЯН ЯМР (З360МГц, ДМСО-ав) 5 10,9(с, 1Н, МН), 8,0 (м, 1Н, МН), 7,68 (м, 1Н, АгН), 7,4 (м, 1Н, АгН), 7,29 (д, 9У-1,9 і 8,5Гц., 1Н, АгН), 6,8 (д, У-8Гц., 1Н, АгН), 2,7 (ш м, 4Н, 2хМСН»), 2,4 (м, 8Н, 4ХМСН»), 1,7 (ш м, 4Н,

М(СНоСН»)»), 1,6 (ш м, 2Н, СНСНоСНВ»), 0,93 (т, 9-7 4Гц., 6Н, М(ІСНЬСН)»). «

МО-ЕЇ т/ 499 і 501 |М" і М" 2).

Приклад 19 в) с 3-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти "з (З-піролідин-1-ілпропіл)амід " 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (вОмг, О 4ммоль) конденсували Кк!

З-форміл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)їамідом (120мг) одержуючи 4Змг (2295) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. - ТН яЯМР (З60МГц, ДМСО-йв) 5 13,4 (с, 1Н, МН), 10,9 (с, ІН, МН), 8,0 (м, 1Н, МН), 7,69 (м, 1Н, Аг), -| 7,49 (м, 1Н, АгН), 7,28 (д, 9У-1,7 і 7,8Гц., 1Н, АН), 6,8 (д, У-8Гц., 1Н, АгН), 3,3 (ш м, 2Н, 2хМСН»), 2,8 (м, 4Н, 2х о пірол СН»), 2,5 (ш м, 4Н, М(СНЬСН»)»), 1,6 (ш м, 8Н, 2х пірол СНСНо, СНЬСНЬСН» і СОМНСН»).

МО-ЕЇ т/2 497 і 499 |М' і М" 2). о Приклад 20

Ге 3-(2-Оксо-6-піридин-3-іл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 6-Піридин-3-іл-1,3-дигідроіндол-2-он (бомг, О 4ммоль) конденсували Кк!

З-форміл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (8Омг) одержуючи 50мг (3890) вказаної в заголовку сполуки як червонувату тверду речовину. о "ЯН ЯМР (З360МГгц, ДМСО-йв) 5 13,4 (с, 1Н, МН), 11 (с, ІН, МН), 8,9 (д, 1Н, МН), 8,7 (дд, 1Н, АгН), 8,1 іме) (дд, ТН, АгН), 7,9 (д, ТН, АгН), 7,6 (с, 1Н, СН), 7,5 (дд, 1Н, АгН), 7,3 (дд, 1Н, АгН), 7,1 (м, 2Н, Ан), 3,35 (м, 2Н, СОМНеСН»), 2,8 (м, 4Н, 2х пірол СН»), 2,5 (ш м, 6Н, М(СНоСН»)» і МОН»), 1,75 (ш с, 4Н, 2х пірол 60 СНоСсН»), 0,9 (т, ВН, ЩСНЬСН»5)»).

МО-ЕЇ т/» 484 (М.

Приклад 21 4-Бензоїл-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід б5 До суміші бензоїлхлориду (Теквів.) і хлориду алюмінію (Теквів.) в дихлоретані при 09С додавали етил

3,5-диметил-2-піролкарбоксилат (Теквів.). Суміш перемішували при 809С протягом 4 г. Суміш потім екстрагували етилацетатом (ЕФАс) і НО. Об'єднані органічні екстракти промивали насиченим бікарбонатом натрію і насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили і концентрували одержуючи (51905) 4-бензоїл-3,5-диметил-1Н-пірол-2-карбонову кислоту.

Суміш 4-бензоїл-3,5-диметил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етилового естеру (4,13г, 15,2ммоль) і церію амонію нітрату (ЗЗг, З4еквів.) в 5ХО0мл тетрагідрофуран (ТГФ):оцтова кислота (НОАс):НоО 1:1:1 кип'ятили протягом ночі. Реакційну суміш потім охолоджували, екстрагували Е(Ас і підлуговували до рНО карбонатом натрію.

Органічний шар потім промивали насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили (Мо5О,) і 70 Концентрували за допомогою колонКової хроматографії одержуючи 3,25г (7590) 4-бензоїл-5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етилового естеру як жовту тверду речовину. 5-Бром-1,3-дигідроїндол-2-он конденсували з 4-бензоїл-5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбоновою кислотою використовуючи спосіб Г одержуючи 4-бензоїл-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонову кислоту.

Згадану вище карбонову кислоту потім конденсували з М,М-діетил-1,3-пропандіаміном використовуючи спосіб

В одержуючи вказаний в заголовку продукт.

ТН ЯМР (360МГц, ДМСО-дв) 5 7,96 (м, ТН, СОМНСН»), 7,76 (д, 9У-7,0Гц., 2Н), 7,68 (т, 1Н), 7,56 (м, 2Н), 7,40 (с, 2Н) 7,33 (дд, 9У-1,6 8 8,3Гц., 1 Н, Н-6), 6,84 (д, 9У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 3,33 (м, 2Н, СН»), 2,42-2,46 (м, БбН,

ЗхСН»), 2,10 (с, ЗН, СН»), 1,65 (м, 2Н, СН»), 0,94 (т, У-7,О0Гц., 6Н, М(ІСНоСН»У)»).

МС електронний удар т/2 564 |М"-11.

Приклад 22 4-Бензоїл-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З--ї уюрфолін-4-ілпропіл)амід

ТН ЯМР (З360МГЦц, ДМСО-сів) 5 14,10 (с, 1 Н, МН), 11,14 (ш с, 1 Н, МН), 7,92 (м, ІН, СОМНСНУ»), 7,75 (м, 2Н), с 7,69 (Т, 1Н), 7,56 (м, 2Н), 7,42 (м, 2Н), 7,33 (дд, 9У-1,9 8. 8,3Гц., 1Н, Н-6), 6,85 (д, 9У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 3,56 (м,4н,. ОО 2хСН»), 3,33 (м, 2Н, СН»), 2,35 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,10 (с, ЗН, СНУ), 1,70 (м, 2Н, СН»).

Приклад 23 4-Бензоїл-3-метил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти с зо (З-піролідин-1-ілпропіл)амід

ТН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-ав) 5 14,18 (с, 1Н, МН), 11,14 (ш с, 1Н, МН), 8,01 (м, ІН, СОМНСН»), 7,74 (м, 1Н), о 7,67 (м, 1Н), 7,55 (м, 1Н), 7,32 (с, 1Н, Н-вініл), 7,17 (м, 1Н), 6,92 (м, 1Н), 3,36 (м, 2Н, СН»), 2,44 (м, 6Н, 3ХСНо), о 2,11 (с, ЗН, СН»), 1,65-1,75 (м, 6Н, ЗхСН»). М

МС Електронний удар т/2 482 ІМ.

Приклад 24 ї- 4-Бензоїл-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)амід

ТН ЯМР (З360МГЦц, ДМСО-ав) 5 14,01 (с, 1Н, МН), 11,18 (ш с, 1Н, МН), 7,98 (м, ІН, СОМНСН»), 7,75 (м, 2Н), « 7,68 (м, 1Н), 7,55 (м, 2Н), 7,40 (м, 2Н), 7,33 (дд, 9У-2,0 5 8,2Гц., 1Н, Н-6), 6,84 (д, У-8,2Гц., 1Н, Н-7), 3,34 (м, 2Н, сно), 2,42-2,А7 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,09 (с, ЗН, СН), 1,70 (м, 2Н, СН»), 1,64 (м, 4Н, 2хСН»). З с Приклад 25 ; з» 4-Бензоіл-3-метил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-і-ілпропіл)амід 15 "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-йв) 5 14,15 (с, 1 Н, МН), 11,16 (ш с, 1 Н, МН), 7,98 (м, ІН, СОМНСН»), 7,77 (д, -1 У-7,7ГЦ., 2Н), 7,69 (м, 1Н), 7,53-7,63 (м, 4Н), 7,44 (м, 2Н), 7,33-7,37 (м, 2Н), 7,24 (с, 2Н), 7,12 (с, 1Н), 3,36 (м, 2Н, СН»), 2,43-2,48 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,12 (с, ЗН, СН»), 1,74 (м, 2Н, СН»), 1,69 (м, 4Н, 2хСН»). це. МС Електронний удар т/з2 558 МІ. о Приклад 26 4-Бензоїл-5-(6-метокси-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти ші (З-піролідин-1-ілпропіл)амід кз ТН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-ав) 5 13,99 (с, 1Н, МН), 11,05 (ш с, 1Н, МН), 7,93 (м, ІН, СОМНСН»), 7,72 (м, 2Н), 7,65 (м, 1Н), 7,54 (м, 2Н), 7,15 (с, 1Н, Н-вініл), 7,04 (д, У-8,4Гц., 1Н, Н-4), 6,51 (дд, У-2,3 5 84Гц., 1Н, Н-5), 6,44 (д, 9-2,3ГцЦ., 1Н, Н-7), 3,74 (с, ЗН, ОСН»), 3,35 (м, 2Н, СН»), 2,42-2,46 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,10 (с, ЗН, СН»), 1,72 (м, 2Н, СН»), 1,65 (м, 4Н, 2хСН»о).

ГФ) МС Електронний удар т/2 512 ІМ.

Приклад 27 де 4-Бензоїл-5-(5-метокси-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)амід 60 "НН ЯМР (З360МГгц, ДМСО-йв) 5 14,24 (с, ІН, МН), 10,90 (ш с, 1Н, МН), 7,97 (м, ІН, СОМНСН»), 7,75 (д,

У-7,2Гц., 2Н), 7,69 (м, 1Н), 7,56 (м, 2Н), 7,24 (с, 1Н, Н-вініл), 6,79 (м, 2Н), 6,66 (м, 1Н), 3,67 (с, ЗН, ОСН»), 3,34 (м, 2Н, СнНе»), 2,43-2,48 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,14 (с, ЗН, СНУ), 1,71 (м, 2Н, СН»), 1,66 (м, 4Н, 2хСН»5).

МС Електронний удар т/з 512 (МІ. в5 Приклад 28 4-Бензоїл-5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти

(З-піролідин-і-ілпропіл)амід "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-айв) 5 14,20 (с, 1Н, МН), 11,14 (ш с, 1 Н, МН), 8,03 (м, ІН, СОМНСН»), 7,75 (м, 2Н), 7,68 (м, 1Н), 7,55 (м, 2Н), 7,38 (с, 1Н, Н-вініл), 7,08 (м, 1Н), 7,01 (м, 1Н), 6,87 (м, 1Н), 3,34 (м, 2Н, СН»), 2,42-2,48 (м, 6Н, ЗхСН»), 2,09 (с, ЗН, СН»), 1,70 (м, 2Н, СН»), 1,65 (м, 4Н, 2хСН»о).

МС Електронний удар т/з2 500 (МІ.

Приклад 29 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід 5-Бром-1,3-дигідроїндол-2-он конденсували з 4-ацетил-5-форміл-З-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-діетгиламінопропіл)ламідом (одержували з 4-ацетил-5-форміл-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти етилового естеру за способом Б потім В) одержуючи вказаний в заголовку продукт. "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-ав) 5 14,19 (с, 1 Н, МН), 11,19 (ш с, 1 Н, МН), 8,15 (м, ІН, СОМНСН»), 8,11 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,72 (д, 9У-1,8Гц., 1Н, Н-4), 7,38 (дд, 9У-1,8 5 8,2Гц., 1Н, Н-6), 6,87 (д, У-8,2Гц., 1Н, Н-7), 3,27 (м, 2Н, 19 СН»), 2,57 (с, ЗН, СНУСО), 2,46 (м, 9Н, СН» 5. З3ХСН»), 1,64 (м, 2Н, СН»), 0,93 (т, 9-7 1Гц., 6Н, Щ(СНьЬСН»)»).

Приклад 30 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)амід

ТН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-дв) 5 8,14 (м, ІН, СОМНОН»), 8,10 (с, 1Н, Н-вініл), 7,70 (д, 1Н, Н-4), 7,36 (дд, 4-1,6 85 8,1Ггц., 1Н, Н-6), 6,85 (д, У-8,1ГцЦ., 1Н, Н-7), 3,32 (м, 2Н, СН»), 2,57 (с, ЗН, СНЗСО), 2,44 (с, ЗН, СНУ), 2,35-2,48 (м, 6Н, ЗхСНУ»), 1,65-1,71 (м, 6Н, ЗхСН»5).

МС ті/з 499 8. 501 М") 5 ІМ 2).

Приклад 31 с 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (З-морфолін-4-ілпропіл)амід о "ІН ЯМР (З00МГЦц, ДМСО-айв) 5 14,20 (с, 1Н, МН), 11,26 (ш с, 1Н, МН), 8,09 (м, 2Н, Н-вініл 5 СОМНСН»), 7,73 (д, 9-1,5Гц., 1Н, Н-4), 7,38 (дд, У-1,5 5. 8,3Гц., 1Н, Н-6), 6,87 (д, У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 3,55 (м, 4Н, 2хСН»о), 3,26 (м, 2Н, СН»), 2,57 (с, ЗН, СНЗСО), 2,44 (с, ЗН, СНУ), 2,35 (м, 6Н, ЗхСН3»), 1,68 (м, 2Н, СН»). с

МО-ЕЇ т/г2 514 8. 516 |М7-11 5 (М7-Н11. о

Приклад 32 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти о (З-гідроксипропіл)амід че "Н ЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 14,17 (с, 1 Н, МН), 11,25 (ш с, ІН, МН), 8,10 (с, 1Н, Н-вініл), 8,03 (м, 1Н, СОМНеН»О), 7,71 (ш с, 1Н, Н-4), 7,37 (ш д, У-8,4ГцЦ., 1Н, Н-6), 6,87 (д, 9У-8,4Гц., 1Н, Н-7), 4,51 (ш с, ге 1Н, ОН), 3,51 (ш с, 2Н, СН»), 3,36 (м, 2Н, СН»), 2,57 (с, ЗН, СНЗСО), 2,43 (с, ЗН, СНУ), 1,70 (м, 2Н, СН»).

МО-ЕЇ т/» 445 8. 447 |М'-1) 5 ІМ 1).

Приклад 34 « 20 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти ш-в с (2-морфолін-4-ілетил)амід

Й "ІН ЯМР (З360МГгц, ДМСО-ав)б 14,19(с, 1Н, МН), 11,14 (ш с, 1Н, МН), 8,10 (с, 1 Н, Н-вініл), 7,84 (м, 1Н, и?» СОМНеН»), 7,71 (д, 9У-1,8Гц., 1Н, Н-4), 7,38 (дд, уУ-1,8 5 8,2Гц., 1Н, Н-6), 6,87 (д, У-8,2Гц., 1Н, Н-7), 3,58 (м, 4Н, 2хСН»), 3,40 (м, 2Н, СН»), 2,57 (с, ЗН, СНЗСО), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,45 (м, СНз « СН»).

МО-ЕЇ т/2 500 5 502 (М-1) 8 (М 11. -| Приклад 35 - 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід о "ЯН ЯМР (З360МГЦ, ДМСО-йв) 5 14,17 (с, 1Н, МН), 11,23 (с, ІН, МН), 8,11 (с, 1Н, Н-вініл), 7,91 (м, МН, о 20 СОМНеН.), 7,73 (д, У-1,9Гц., 1Н, Н-4), 7,39 (дд, У-1,9 8 8,3Гц., ТТН, Н-6), 6,88 (д, У-8,3Гц., 1Н, Н-7), 3,40 їз (м, 2Н, СН»), 2,62 (м, 2Н, СН»), 2,57 (с, ЗН, СНЗСО), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 1,69 (м, 4Н, 2хСН»).

Приклад 36 4-Ацетил-5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-3-метил-1Н-пірол-2-карбонової кислоти (2-(4-гідроксифеніл)етил|амід "ЯН ЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 14,21 (с, 1Н, МН), 11,18 (с, ІН, ОН), 9,09 (с, ІН, МН), 8,06-8,10 (м, 2Н), (Ф. 7,73 (с, 1Н), 7,38 (д, 9У-7,8ГцЦ., 1Н), 7,04 (д, 9У-7,1ГцЦ., 2Н), 6,88 (д, 9У-7,8Гц., 1Н), 6,67 (д, 9У-7,1Гц., 2Н), г 3,42 (м, 2Н, СН»), 2,72 (м, 2Н, СН»), 2,56 (с, ЗН, СНЗСО), 2,37 (с, ЗН, СН»).

МО-ЕЇ т/2 507 8 509 (М7-1) 8 ІМ 1). во Приклад 37 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід

Суміш гідрохлориду 2-аміноацетофенону (Теквів.), етилу ізобутирилацетату (1,2еквів.) і ацетату натрію (2,4еквів.) в НО перемішували при 1002 протягом 18 годин і потім охолоджували до кімнатної температури. 65 Водний шар декантували і масло розчиняли в етилацетаті. Його потім промивали водою і насиченим водним розчином хлориду натрію і потім сушили одержуючи (9395) 2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти етилового естеру як червоно-коричневе масло. "НяЯМР (ЗО0МГц, ДМСО-йв) 5 11,21 (с, ш, 1Н, МН), 7,14-7,27 (м, 5Н), 6,70 (д, 9-2,7ГЦ., 1Н), 4,02 (Кк,

У-7,1Гц., 2Н, ОСНоСНУ»), 3,65 (м, ІН, СН(СНУ)»), 1,22 (д, 9-7,5Гц., 6Н, СН(СН»)»), 1,04 (т, 9-7 1Гц., ЗН, ОСНЬСНУ»).

МО-ЕЇ т/ 257 (М.

Згаданий вище пірол формілювали використовуючи спосіб А одержуючи (4196) 5-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти етиловий естер як червонувату тверду речовину. "НЯМР (З300МГц, ДМСО-йв) 5 12,35 (с, ш, 1Н, МН), 9,14 (с, ІН, СНО), 7,36 (с, 5Н), 3,96 (к, 9-7 1ГцЦ., 2Н,

ОСН.СН»), 3,74 (м, 1Н, СН(СН»У)»), 1,29 (д, У-6,9Гц., 6Н, СН(СН»з)»2), 0,90 (т, У-7,1Гц., ЗН, ОСНЬСН»). 0 Мов т/х 285 М.

Естер піролкарбонової кислоти гідролізували використовуючи спосіб Б одержуючи (57905) 5-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонову кислоту як бежеву тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 12,28 (с, ш, ІН, СООН), 12,02 (с, ш, 1Н, МН), 9,10 (с, ІН, СНО), 7,35 (с, 75... 5Н), 3,81 (м, ІН, СН(СН») 2), 1,28 (д, У-6,9Гц., 6Н, СН(СН»)»2).

МО-ЕЇ ті/г 257 (М. 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (12Омг, О,Зммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)їамідом (одержували за способом В) одержуючи 12Омг (7195) вказаної в заголовку сполуки. "НЯМР (З00МГЦц, ДМСО-дв) 5 14,23 (с, ш, 1Н, МН), 11,08 (с, ш, 1Н, МН), 7,38-7,55 (м, 7Н, Аг-Н 5 СОМНСН»), 7,30 (с, 1Н, Н-вініл), 7,26 (дд, У-1,8 85. 7,8Гц., 1Н), 6,85 (д, У-8,7Гц., 1Н), 3,36 (м, ІН, СН(СНЗ)»), 3,07 (м, 2Н, СН»), 2,34 (к, 9-7 ,1Гц., 4Н, Щ(СНоСН»)»), 2,22 (т, 9-6,9Гц., 2Н, СН»), 1,40 (м, 2Н, СН»), 1,91 (д, У-6,9Гц., 6Н, СН(СНЗ)»), 0,86 (т, 9-7 1Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)»).

МС т/ 565,1 |М"-11. с

Приклад 38 о 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-піролідин-і-ілпропіл)амід 5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонову кислоту (127мг, 0,28ммоль) конденсували з З-піролідин-1-іл-пропіламіном (4Змг, 0,33бммоль) одержуючи 14Омг (6695) вказаноїв СМ заголовку сполуки. о "'НЯМР (З00МГц, ДМСО-4в) 5 14,40 (с, ш, 1Н, МН), 7,38-7,47 (м, 7Н), 7,23-7,27 (м, 2Н), 6,84 (д, 8, 1ГцЦ., 1Н), 3,36 (м, 1Н, СН(СН»)»), 3,08 (м, 2Н, СН»), 2,30 (м, 4Н, 2хСН»), 2,20 (т, 9-7,0Гц., 2Н, СНО), 1,62 (м, о 4Н, 2хСН»), 1,42 (т, 9-7,0Гц., 2Н, СН»), 1,91 (д, 9У-7,2Гц., 6Н, СН(СН»)»). ча

МО-ЕЇ т/ 560 і 562 |М"-1 ії М" 1). і -

Приклад 39 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (57г, 0,27ммоль) конденсували Кк! « 20 5-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (120мг) одержуючи 78мг -в с (5395) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 14,23 (с, ш, 1Н, МН), 11,09 (с, ш, 1Н, МН), 7,38-7,51 (м, 6Н), 7,25-7,28 (м, ;» 2Н), 7,19 (т, ІН, СОМНеОН»), 6,85 (д, 9У-7,8Гц., 1Н), 3,43 (м, 1Н, СН(СН»З)»), 3,11 (м, 2Н, СН»), 2,28-2,39 (м, бН,

М(СНоСН»)» в СНаь, 1,31 (д, У-6,9Гц., СН(СН»)»), 0,85 (Т, У-7,0Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)».

МО-ЕЇ т/з 548 і 550 |М"-1 ії М" 1). -І Приклад 40 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти

ІЗ-(4-метилпіперазин-1-іл)/пропіл|амід ав | 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (5Змг, О,25ммоль) конденсували Кк! о 50 5-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти ІЗ-(4-метилпіперазин-1-іл)упропіл|їамідом (ЗО0Омг) одержуючи б5мг вказаної в заголовку сполуки.

Ко) "НЯМР (ЗО0МГц, ДМСО-йв) 5 14,22 (с, ш, 1Н, МН), 11,08 (с, ш, 1Н, МН), 7,23-7,50 (м, 9Н), 6,85 (д, -8,7ГЦ., 1Н), 3,37 (м, 1ТН, СН(СН»)»), 3,05 (м, 2Н, СН»), 2,24 (м, 8Н, 4хСН»), 2,11 (м, БН, СН» к СНУ),1,42 (м, 2Н,

СНУ»), 1,931 (д, 9У-7,2Гц., 6Н, СН(СНУ)»). 59 МО-ЕЇ т/з 589; і 591 |М"-1 ї М'-н1).

Ф! Приклад 41 юю 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-ізопропіл-4-феніл-Н-пірол-3-карбонова кислота 122 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (17Омг, О,вммоль) конденсували Кк! 60 Б-форміл-2-ізопропіл-4-феніл-1Н-пірол-3-карбоновою кислотою (205мг) використовуючи спосіб Г одержуючи 21Омг (58905) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 14,31 (с, ш, 1Н, МН), 11,16 (с, ш, 1Н, МН), 7,26-7,44 (м, 7Н), 7,11 (с, 1Н,

Н-вініл), 6,85 (д, У-7,8ГЦ., 1Н), 3,78 (м, 1Н, СН(СН»)»), 1,34 (д, У-6,9Гц., 6Н, СН(СН»)»). в МО-ЕїІт/2452|М 11.

Приклад 42

5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (44мг, 0О,21ммоль) конденсували з 8 00/ З-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (7Омг, одержували таким же самим чином що і ізопропіловий аналог, вище) одержуючи 0,03г (2795) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НЯМР (З00МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,87 (с, ш, 1Н, МН), 11,11 (с, ш, 1Н, МН), 7,36-7,51 (м, 6Н), 7,26 (дд, У-1,8 5 81Гц., 1 Н), 7,2 (с, 1 Н, Н-вініл), 7,09 (м, ІН, СОМНОН»), 6,83 (д, 9У-8,1Гц., 1Н), 3,17 (м, 2Н, МОН»), 2,48 (м, СНУ), 70. 2,29-2,35 (м, 6Н, ЗхМСН»5), 1,59 (м, 4Н, 2хСН»о).

МО-ЕЇ пт/з 518 і 520 |М"-1 ії М" 1).

Приклад 43 5-І(6-(2-Метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 6-(2-Метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (5Омг, 0О,21ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)уамідом (7Омг) одержуючи 0,04г (3595) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йдв) 5 13,82 (с, ш, 1Н, МН), 11,02 (с, ш, 1Н, МН), 7,48 (м, 2Н), 7,43 (м, 1Н), 7,38 (м, 2Н), 7,32 (м, 1Н), 7,24 (м, 2Н), 7,16 (с, 1Н, Н-вініл), 7,08 (м, 2Н), 7,03 (м, 1Н), 7,0 (м, 2Н), 3,74 (с, ЗН, ОСН»), 319 (м, 2Н, МОН»), 2,49 (м, СН), 2,32-2,38 (м, 6Н, ЗхМСН»), 1,59 (м, 4Н, 2хСНоа).

МО-ЕЇ т/2 546 (М.

Приклад 44 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти ря (2-диметиламіноетил)амід сч 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (4бмг, 0,22мМмоль) конденсували Кк! о 5-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3З-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)іамідом (б5мг) одержуючи бОомг (5590) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НЯМР (З360МГгц, ДМСО-дв) 5 13,86 (с, ш, 1Н, МН), 11,09 (с, ш, 1Н, МН), 7,47-7,49 (м, 2Н), 7,38-7,41 (м, с зо ЗН), 7,26 (дд, 9У-2,2 8 8,3Гц., 1Н), 7,21 (с, 1Н, Н-вініл), 7,04 (м, 1Н, СОМНСН»), 6,77 (д, У-8,3Гц., 1Н), 3,15 (м, 2Н, МСН»), 2,48 (м, СН»), 2,16 (т, У-6,8Гц., 2Н, ЗхМСН»), 2,02 (с, 6Н, 2хМСН»). о

МС т/2 493 і 494,8 |М' і М 2. ав!

Приклад 45 5-І(6-(2-Метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової -

Кислоти (2-диметиламіноетил)амід че 6-(2-Метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (5Змг, 0,22мМмоль) конденсували Кк! 5-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3З-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амідом (бб5мг) одержуючи 0,05г (4495) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву гуму. « "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,82 (с, ш, 1Н, МН), 11,02 (с, ш, 1Н, МН), 7,37-7,52 (м, 5Н), 7,32 (м, 1Н), 40.7,22-7,217 (м, 2Н), 7,16 (с, 1Н), 7,08 (м, 2Н), 7,03 (м, 1Н), 7,0 (м, 2Н), 3,74 (с, ЗН, ОСН»), 3,15 (м, 2Н, МСН»), 2,49 т с (м, СНУ), 2,16 (т, У-6,5Гц., 2Н, МОН»), 2,02 (с, 6Н, 2хМСН»). з» МС ті/» 521 |М" 1).

Приклад 46 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти етиловий естер це. 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (бомг, О,29мМмоль) конденсували Кк! -І 5-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти етиловим естером (75мг) одержуючи 78мг (60905) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. о "НяЯМР (З60МГц, ДМСО-йв6) 5 14,01 (с, ш, 1Н, МН), 11,13 (с, ш, 1 Н, МН), 7,42-7,46 (м, ЗН), 7,27-7,34 (ав) 20 (м, 4Н), 7,12 (с, 1Н), 6,84 (дд, 9У-2,2 5 8,3ГцЦ., 1Н), 3,99-4,03 (м, 2Н, ОСНЬСН»), 2,61 (с, ЗН, СН»), 0,98-1,03 (м,

Кз ЗН, ОСНЬСН»).

МО-ЕЇ т/ 450 і 452 |М"-1 і М" 1.

Приклад 47 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід (Ф; 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,47г, 2,2мМмМоль) конденсували Кк! ко 5-форміл-2-метил-4-феніл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)дамід (0,75г) одержуючи 0,11г (4290) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. во ТНЯМР (ЗО00МГц, ДМСО-йдв) 5 13,86 (с, ш, ІН, МН), 7,42-7,46 (м, ЗН), 7,37-7,50 (м, 7Н), 7,24-7,28 (м, 2Н), 6,83 (д, 9У-8,1ГцЦ., 1Н), 3,09 (м, 2Н, МОН»), 2,45 (с, ЗН, СНУ), 2,38 (к, 9-7 ,1Гц., 4Н, 2хХМСНьоСН»), 2,26 (т, 5-6,9Гц., 2Н, МОН»), 1,42 (м, 2Н, МОН»), 0,87 (т, 9-7 1Гц., 6Н, 2хМСНоСН»).

МО-ЕЇ т/2 535,0 і 537 |М' і М 21.

Приклад 48 бо 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амід

Суміш трет-бутилу 3-оксобутирату і нітриту натрію (Теквів.) в оцтовій кислоті перемішували при кімнатній температурі одержуючи трет-бутил 2-гідроксиіміно-3-оксобутират.

Етил З-оксобутират (Теквів.), цинковий пил (3З,веквів.) і неочищений трет-бутил 2-гідроксиіміно-3-оксобутирату в оцтовій кислоті перемішували при 602С протягом 1г. Реакційну суміш виливали в Нос і фільтрат збирали одержуючи (6595) 2-трет-бутилоксикарбоніл-3,5-диметил-4-етоксикарбонілпірол.

Суміш 2-трет-бутилоксикарбоніл-3,5-диметил-4-етоксикарбонілпіролу і триетилортоформіату (1,5беквів.) в трифтороцтовій кислоті перемішували при 15923 протягом 1 години. Реакцію концентрували і залишок очищали одержуючи (6495) 2,4-диметил-3-етоксикарбоніл-5-формілпірол як жовті голки. 2,4-диметил-З-етоксикарбоніл-5--формілпірол гідролізували використовуючи спосіб Б одержуючи (90965) 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонову кислоту. "Н ЯМР (360МГЦц, ДМСО-а) 5 12 (ш с, 2Н, МН і СОН), 9,58 (с, 1Н, СНО), 2,44 (с, ЗН, СН»), 2,40 (с, ЗН, СН).

МС ті/ 267 М 7). 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,17г, О,вммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової 75 кислоти (2-диметиламіноетил)амідом (0,2г, одержували за способом В) використовуючи спосіб Б одержуючи 0,Зг (8390) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину.

ТНЯМР (З360МГц, ДМСО-46) 5 13,60 (с, ш, 1Н, МН), 10,94 (с, ш, 1Н, МН), 8,07 (д, 9У-1,8Гц., 1Н, Н-4), 7,75 (с, 1Н, Н-вініл), 7,44 (т, 9-5,2Гц., ІН, СОМНеСН»), 7,24 (дд, 9У-1,8 5 8,4Гц., 1Н, Н-6), 6,82 (д, У-8.4Гц., 1Н,

Н-7), 3,26-3,33 (м, 2Н, МСН»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СН»), 2,38 (т, 9У-6,7Гц., 2Н, МСН»), 2,18 (с, ЄН, (сна). 3)2.

МО-БЕЇ т/ 430 і 432 |М'-1 ії М'1).

Приклад 49 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти ря (2-диметиламіноетил)амід сч 6-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (0,17г, О0,вммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової о кислоти (2-диметиламіноетил)амідом (0,2г) одержуючи 0,13г (3695) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З360МГЦ, ДМСО-4д5) 5 13,59 (с, ш, 1Н, МН), 10,93 (ш, 1Н, МН), 7,85 (д, 9У-7,92Гц., М1Н, Н-4), с зо 7.63-7,65 (м, ЗН), 7,40-7,47 (м, ЗНУ), 7,32-7,36 (м, 1Н, А-Н), 7,30 (дд, У-1,6 85 7,9Гц., ТТН, Н-5), 7,11 (д, -1,6Гц., 1Н, Н-7), 3,28-3,34 (м, 2Н, МОН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СН»), 2,38 (т, У-6,8Гц., 2Н, МСН»), 2,18 о (с, ВН, М(СНз)»). о

МО-ЕЇ т/» 428 (М.

Приклад 50 - 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти - (2-диметиламіноетил)амід 5-Хлор-1,3-дигідроіндол-2-он (0,1г, О,бммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амідом (0,15г) одержуючи 0,22г (9095) вказаної в заголовку сполуки як жовту « тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 10,98 (ш, ІН, МН), 7,96 (д, 9-2,0Гц., 1Н, Н-4), 7,75 - с (С, 1Н, Н-вініл), 7,50 (т, 9-5,5Гц., 1Н, СОМНеСН»), 7,12 (дд, У-2,0 8 8,3Гц., 1Н, Н-6), 6,86 (д, У-8,3Гц., 1Н, в Н-7), 3,26-3,31 (м, 2Н, МСН»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 2,40 (с, ЗН, СН»), 2,36 (т, У-6,6Гц., 2Н, МСН»), 2,17 (с, 6Н, я М(СНЗ)») 3/2).

МО-ЕЇ т/ 386 (М.

Приклад 51 - 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти -І (2-діетиламіноетил)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,17г, О,вммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової о кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (0,2г) одержуючи 0,09г (2695) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду о 0500 речовину. "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 10,98 (ш, ІН, МН), 8,09 (д, 9-1,7Гц., 1Н, Н-4), 7,76 їз (с, 1Н, Н-вініл), 7,42 (т, 9-5,5Гц., 1Н, СОМНОН»), 7,24 (дд, 9У-1,7 8 8,0Гц., їн, Н-6), 6,82 (д, У-8,0Гц., 1Н,

Н-7), 3,23-3,32 (м, 2Н, МСН»), 2,46-2,55 (м, 6Н, ЗхМСН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 0,96 (т, 9-7 ,2Гц., ря 6Н, 2хМСНоСН»).

МО-ЕЇ т/з 458 і 460 |М"-1 ії М" 1). (Ф; Приклад 52 ко 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід во 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,09г, О4ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)іамідом (0,1г) одержуючи 0,14г (8195) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 10,98 (ш, ІН, МН), 8,09 (д, 9-1,9Гц., 1Н, Н-4), 7,76 (с, 1Н, Н-вініл), 7,53 (т, 9-5,5Гц., ІН, СОМНОН»), 7,24 (дд, 9У-1,9 85 8,5Гц., їн, Н-6), 6,81 (д, У-8,5Гц., 1Н, 65 Н-7), 3,29-3,35 (м, 2Н, МОН»), 2,54 (т, У-6,9Гц., 2Н, МОН»), 2,47 (м, під ДМСО), 2,42 (с, ЗН, СНа), 2,40 (с, ЗН,

СНУ»), 1,66-1,69 (м, 4Н, 2хСН»).

МО-БЕЇ п/з 456 і 458 |М'-1 ії М'1).

Приклад 53 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-імідазол-і-іл-пропіл)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,09г, О4ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-імідазол-і-ілпропіл)яамідом (0,1г) одержуючи 0,1г (5995) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,63 (с, ш, 1Н, МН), 10,99 (ш, ІН, МН), 8,09 (д, 9-2,2Гц., 1Н, Н-4), 7,77 70. (с, 1Н, Н-вініл), 7,71 (т, У-5,7Гц., 1ІН, СОМНОСН»), 7,65 (с, 1Н, Аг-Н), 7,25 (дд, 9У-2,2 5 8,4Гц., 1Н, Н-6), 7,20 (с, 1Н, Аг-Н), 6,89 (с, 1Н, Аг-Н), 6,81 (д, У-8,4ГцЦ., 1Н, Н-7), 4,02 (т, 9-6,7Гц., 2Н, МОН»), 3,18 (к, 9-6,7Гц., 2Н, МОН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СН»), 1-.93 (м, 2Н, СН»).

МО-ЕЇ пт/ 467 і 469 |М7"-1 ії М" 1).

Приклад 54 5-І(6-(2-Метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амід 6-(2-Метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (ЗОмг, О,1Зммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)іамідом (ЗОмг) одержуючи 0,06бг (10095) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву гуму. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,60 (с, ш, 1Н, МН), 10,89 (с, ш, ІН, МН), 7,79 (д, У-8,4Гц., 1Н), 7,63 (с, 1Н, Н-вініл), 7,46 (Т, 9У-5,5Гц., 1Н, СОМНеСН»5), 7,28-7,35 (м, 2Н), 6,99-7,11 (м, 4Н), 3,76 (с, ЗН, ОСНУ), 3,27-3,31 (м, 2Н, МСН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,39 (с, ЗН, СН»), 2,37 (м, 2Н, МОН»), 2,18 (с, 6Н, М(СНЗ)»).

МО-ЕЇ т/2 458 (М.

Приклад 55 с 5-І6-(3-Метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти Го) (2-диметиламіноетил)амід 6-(3-Метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (ЗОмг, О,1Зммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-диметиламіноетил)амідом (ЗОмг) одержуючи 8мг (1495) сч вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З360МГц, ДМСО-йв) 5 13,59 (с, ш, 1Н, МН), 10.92 (с, ш, ІН, МН), 7,84 (д, 9-7,6Гц., 1), 7,65 (с, (2 1Н, Н-вініл), 7,42 (м, ІН, СОМНеСН»), 7,36 (д, У-7,8ГцЦ., 1Н), 7,29 (дд, 9У-1,6 5 7,6Гц., 1), 7,20 (д, 9У-7,8Гц., о 1Н), 7,14 (д, 9-2,8Гц., 1Н), 7,11 (д, 9У-1,6Гц., 1Н), 6,91 (дд, У-2,8 8 7,8Гц., 1Н), 3,82 (с, ЗН, ОСН»), 3,21-3,33 (м, 2Н, МСНа»), 2,43 (с, ЗН, СНУ»), 2,40 (с, ЗН, СН»), 2,36-2,40 (м, 2Н, МОН»), 2,18 (с, ЄН, М(СН»У)»). в.

МО-ЕЇ т/2 458 (М. ї-

Приклад 56 2,4-Диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 5-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (8Омг, 0,4ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової « кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (0,1г) використовуючи спосіб Б одержуючи 7О9мг (4696) вказаної в заголовку й) с сполуки. ц ТНЯМР (ЗО0МГц, ДМСО-4в) 5 13,66 (с, ш, 1Н, МН), 10,95 (ш, 1Н, МН), 8,15 (д, 9-1,2Гц., 1Н), 7,81 (с, ,» 1Н, Н-вініл), 7,71 (д, 9У-7,5ГцЦ., 1Н), 7,40-7,47 (м, 4Н), 7,31 (м, 1Н), 6,95 (Д, 9-8,1ГцЦ., 1Н), 3,2-3,31 (м, 2Н, МОН»), 2,46-2,55 (м, 6Н, ЗХМСН»5), 2,44 (с, 6Н, 2хСН»), 0,96 (т, У-7,4Гц., 6Н, 2хХМСНоСН»).

МО-ЕЇ т/2 456 (М. - Приклад 57 -І 2,4-Диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід о 5-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (0,04г, О0,2ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової о 20 кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (0,04г) одержуючи вказаний в заголовку продукт як жовто-оранжеву тверду речовину. із "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-4в6) 5 13,65 (с, ш, ІН, МН), 10,96 (ш, ІН, МН), 8,15 (д, У-1,0Гц., 1Н), 7,80 (с, 1Н, Н-вініл), 7,71 (д, 9У-7,2Гц., 2Н), 7,49 (Т, 9-6,3ГЦц., ТН, СОМНСН»), 7,41-7,46 (м, ЗН), 7,31 (м, 1Н), 6,95 (д, 3-7,8ГЦ., 1Н), 4,08 (м, 4Н, 2хМСН»), 3,32 (м, 2Н, МСН»), 2,55 (Т, 9-7 1Гц., 2Н, МСН»5), 2,47 (м, під ДМСО), 2,43 (с, вН, 2ХСНа), 1,86 (м, 4Н, 2хСН»).

Ф) МО-ЕЇ пух 454 (М"). ка Приклад 58 2,4-Диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 60 (З-імідазол-і-ілпропіл)амід 5-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (8мг, О0,04ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-імідазол-і-ілпропіл)яамідом (1Омг) одержуючи 1ТОмг (5995) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,67 (с, ш, 1 Н, МН), 10,96 (ш, ІН, МН), 8,16 (д, У-1,2ГцЦ., 1Н), 7,81 (с, 65 ЗН, Н-вініл), 7,65-7,72 (м, 4Н), 7,44 (м, ЗН), 7,931 (м, ІН, СОМНеН»), 7,21 (с, 1Н, Аг-Н), 4,02 (т, 9У-6,5Гц., 2Н,

МОН»), 3,19 (к, У-6,5Гц., 2Н, СОМНОН»), 2,44 (с, 6Н, 2хСН»), 1,93 (м, 2Н, СНоСНЬСН»).

МО-ЕЇ т/: 465 М.

Приклад 59 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід б-Феніл-1,3-дигідроіїндол-2-он (0,08г, О0,4ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (0,1г) одержуючи б5мг (3895) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 10,99 (ш, 1 Н, МН), 7,86 (д, 9-7,8Гц., 1), 7,62-7,66 70 (м, ЗН), 7,40-7,47 (м, ЗН), 7,28-7,36 (м, 2Н), 7,10 (д, 9-1,2Гц., 1Н), 3,26 (м, 2Н, МОН»), 2,46-2,55 (м, 6Н, ЗхМСН»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СН»), 0,97 (т, 9-7,2Гц., 6Н, 2хМСНЬСН»).

МО-ЕЇ т/2 456 (М.

Приклад 60 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 12 (2-піролідин-1-ілетил)амід 6-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (ЗОмг, 0,15ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)уамідом (4О0мг) одержуючи 5,9мг (8,590) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-дв) 5 13,60 (с, ш, 1Н, МН), 10,99 (ш, 1Н, МН), 7,86 (д, 9У-7,8Гц., 1Н), 7,63-7,66 (м,.ЗН), 7,51 (м, ІН, СОМНеСН»), 7,45 (м, 2Н), 7,28-7,36 (м, 2Н), 7,10 (д, 9У-1,5ГцЦ., 1Н), 3,31 (м, ЄН, ЗхМСН»), 2,55 (т, У-6,6Гц., 2Н, МОН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,40 (с, ЗН, СН»), 1,67 (м, 4Н, 2хСНа5).

МО-ЕЇ т/2 454 (М.

Приклад 61 с 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти о (З-імідазол-і-ілпропіл)амід 6-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (8мг, О0,04ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-імідазол-і-ілпропіл)уамідом (1Омг) одержуючи 7,Змг (4390) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. Га

ТНЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,62 (с, ш, 1Н, МН), 10,99 (ш, 1Н, МН), 7,86 (д, уУ-8,2Гц., 1), 7,62-7,70 о (м, 5Н), 7,45 (м, 2Н), 7,35 (м, 1Н), 7,30 (дд, 9-14 5 8,2ГцЦ., 1), 7,21 (с, 1Н), 7,10 (д, 9У-1,4Гц., 1Н), 6,89 (с, 1Н), 4,02 (т, 9-6,9Гц., 2Н, СН»), 3,19 (м, 2Н, МСНоСН»), 2,43 (с, ЗН, СНУ), 2,41 (с, ЗН, СНУ), 1,93 (т, У-6,9Гц., «(з 2Н, МСНА»). м

МО-ЕЇ т/2 465 (М.

Приклад 62 - 5-І6-(3,5-Дихлорфеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметиліІ-2-4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 6-(3,5-Дихлорфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (б4мг, О,2Зммоль) конденсували Кк! « 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетиліуамідом (бОмг) одержуючи 5Змг (44965) вказаної в заголовку сполуки як світло-коричневу тверду речовину. т с ТНЯМР (З36ОМГц, ДМСО-дв) 5 13,62 (с, ш, 1Н, МН), 10,99 (с, ІН, МН), 7,89 (д, 9У-7,9Гц., М1Н, Н-4), з» 7,69-7,71 (м, ЗН), 7,55 (м, ІН, СОМНеСН»), 7,37 (м, 2Н), 7,14 (д, 9-1,4Гц., 1Н, Н-7), 3,27 (м, 2Н, МСН»), 2,48-2,58 (м, ЄН, ЗхМСН»5), 2,45 (с, ЗН, СНУ»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 0,97 (т, У-6,8Гц., 6Н, ЗхХМСНьоСН 5).

МС т/ 526,9 |М" 11. -1 Приклад 63 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-піридин-3-іл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти - і (2-діетиламіноетил)амід о 6-Піридин-3-іл-1,3-дигідроіндол-2-он (4Омг, О,19ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетиліуамідом (5Омг) одержуючи 29мг (33965) (ав) 20 вказаної в заголовку сполуки як світло-оранжеву тверду речовину.

ГЕ ТНЯМР (ЗО0МГц, ДМСО-йв) 5 13,62 (с, ш, 1Н, МН), 11,05 (с, ш, ІН, МН), 8,86 (с, ш, 1Н), 8,53 (д, 3-5,8Гц., 1), 8,04 (м, 1), 7,91 (д, 9У-8,1ГцЦ., 1), 7,70 (с, МН, Н-вініл), 7,40-7,48 (м, 2Н), 7,35 (д, 9-7,5ГЦ., 1Н), 7,14 (с, 1Н), 3,26 (м, 2Н, МСН»), 2,48-2,55 (м, ЗхМСН»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 2,38 (с, ЗН, СН»), 0,96 5 (т,96,9Гц., 6Н, 2хМСНоСН»). о МО-ЕЇ пт/г 457 (М.

Приклад 64 ко 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-піридин-3-іл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 6о0 6-Піридин-3-іл-1,3-дигідроіндол-2-он (бомг, О,28мМмоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (75мг) одержуючи 9Омг (71965) вказаної в заголовку сполуки як світло-оранжеву тверду речовину. "НЯМР (300МГу, ДМСО-дв) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 11,05 (с, ш, 1Н, МН), 8,86 (д, 9У-1,5Гц., 1Н), 8,54 (дц, 9-1,5 5 4,8Гц., 1Н), 8,05 (м, 1Н), 7,91 (д, У-7,8Гц., 1Н), 7,70 (с, 1Н, Н-вініл), 7,44-7,53 (м, 2Н), 7,36 (дд, У-1,5 5 81ГЦц., бо /1Н), 7,15 (д, 9У-1,2ГцЦ., 1Н), 3,33 (м, 2Н, МОН»), 2,47-2,57 (м, 6Н, ЗхМСН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СНу),

1,67 (м, 4Н, 2хСН»).

МО-ЕЇ пт/г 455 (М.

Приклад 65 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-піридин-3-іл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-диметиламінопропіл)амід 6-Піридин-3-іл-1,3-дигідроіндол-2-он (42мг, О,2ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (З-диметиламінопропіл)їамідом (5Омг) одержуючи б7мг (7595) вказаної в заголовку сполуки як жовто-коричневу тверду речовину. 710 "НяЯМР (З36ОМГц, ДМСО-4в6) 5 13,61 (с, ш, 1Н, МН), 11,00 (с, ш, 1Н, МН), 8,86 (с, ш, 1Н), 8,54 (с, ш, 1Н), 8,04 (м, 1Н), 7,90 (д, У-8,0ГцЦ., 1Н), 7,69 (с, 1Н, Н-вініл), 7,63 (м, 1Н), 7,45-7,48 (м, 1Н), 7,35 (дд, 9У-1,7 Кк 8,ОГц., 1Н), 7,15 (д, 9-1,7ГцЦ., 1Н), 3,21-3,27 (м, 2Н, МОН»), 2,43 (с, ЗН, СНУ), 2,41 (с, ЗН, СНУ»), 2,28 (м, 2Н, МСН»), 2,14 (с, 6Н, 2хМСН»), 1,64 (м, 2Н, СН»).

МО-ЕЇ пі/г 443 (М.

Приклад 66 2,4-Диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-диметиламінопропіл)амід 5-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (67мг, 0,32ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-диметиламінопропіл)амідом (81мг) одержуючи 4Омг (28905) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,66 (с, ш, 1Н, МН), 10,92 (с, ш, 1Н, МН), 8,14 (с, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,71 (м, 2Н), 7,62 (м, 1Н), 7,44 (м, ЗН), 7,32 (м, 1Н), 6,95 (м, 1Н), 3,33 (м, 2Н, МСН»), 2,43 (с, 6Н, 2хСН»), 2,27 (м, 2Н,

МОН»), 2,13 (с, 6Н, 2хМСН»), 1,63 (м, 2Н, СН»). сч

МО-ЕЇ т/з 442 ІМ.

Приклад 67 і) 2,4-Диметил-5-(2-оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід 5-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (1,5г, 7,1бммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової су кислоти (З-діетиламінопропіл)амідом (2г) одержуючи 1,3г (40905) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. о "НяЯМР (З360МГц, ДМСО-йв) 5 13,64 (с, 1Н, МН), 10,91 (с, ІН, МН), 8,14 (д, 9-1,4Гц., 1Н, АгН), 7,8 (с; Ф 1Н, АгН), 7,7 (дд, 9У-1,2 і 8,5Гц., 2Н, АгН), 7,6 (т, 9У-5,3Гц., 1Н, СОМНСН»), 7,4(м, ЗН, АгНн), 7,3 (5.9-7 4Гц., м 1Н, АгН), 6,9 (д, 9У-8,0ГцЦ., 1Н, АгН), 3,2 (м, 2Н, СОМНСН»), 2,5 (м, 12Н, ЗХМСН» і 2хСН»), 1,61 (м, 2Н,

СНоСнНоСН»), 0,93 (т, У-6,7Гц., 6Н, МСНЬСН»). -

МО-ЕЇ т/2 470 (М.

Приклад 68 2,4-Диметил-5-(2-оксо-6-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти « (З-діетиламінопропіл)амід 6-Феніл-1,3-дигідроіндол-2-он (1,5г, 7,1бммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової З с кислоти (З-діетиламінопропіл)амідом (2г) одержуючи 1,9г (5795) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду "» речовину. " ТНЯМР (З360МГц, ДМСО-йдв) 5 13,58 (с, 1Н, МН), 10,94 (с, ІН, МН), 7,8 (д, 9-7,9Гц., 1Н, АгН), 7,6 (м,

АН, АгН), 7,4 (т, 9У-7,5Гц., 2Н, АгН), 7,3 (м, 2Н), 7,1 (д, 9У-1,4ГцЦ., 1Н, АгН), 3,2 (м, 2Н, СОМНеСН»), 2,5 (м, 12Н, -1 395 ЗХМСН» і 2хСН»), 1,61 (м, 2Н, СНСНоСНВ»), 0,93 (т, У-6,7Гц., 6Н, МСНоСН»).

МО-ЕЇ т/2 470 (М. - Приклад 69 о 3-І4-(3-Діетиламінопропілкарбамоїл)-3,5-диметил-1Н-пірол-2-ілметилені-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-4-карбон ової кислоти (З-хлор-4-метоксифеніл)амід о 2-Оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-4-карбонової кислоти (3-хлор-4-метоксифеніл)амід (1г, З, 1бммоль) конденсували

ГІ з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амідом (1г, 3,58ммоль) одержуючи 1,7г (8595) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину.

МО-ЕЇ т/2 578,2 (М.

Приклад 70 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти іФ) (З-діетиламінопропіл)амід ко 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (0,5г, 2,3бммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амідом (0,51г) одержуючи 0,84г вказаної в заголовку сполуки як червоно-оранжеву бо тверду речовину. "НЯМР (З60МГц, ДМСО-йв6) 5 13,61 (с, ІН, МН), 10,99 (с, ІН, МН), 8,09 (д, У-1,8ГцЦ., 1Н, АгН), 7,7 (м,

АН), 7,2 (дд, У-1,8 і 8,3Гц., 2Н, АгН), 6,8 (д, У-7,8ГцЦ., 1Н, АгН), 3,3 (ш с, 4Н, 2хМСН»), 3,2 (м, 2Н, СОМНеСН»), 2,6 (ш с, 2Н, МОН» і 2хСН»), 2,4 (с, 6Н, 2х СН), 1,66 (м, 2Н, СНСНоСН9о), 0,98 (т, 9-7 1Гц., 6Н, МСНоСН»).

МО-ЕЇ т/2 472 і 474 |(М'-1 ії М7-н1). бо Приклад 71

5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-діїізопропіл-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (10Омг, О,47ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-діізопропіл-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)іуамідом (150мг) одержуючи 0,15г (6290) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину.

ТНЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,97 (с, 1Н, МН), 10,95 (с, 1Н, МН), 8,09 (д, У-1,3Гц., 1Н, АгН), 7,84 (м, 1Н), 7,79 (с, 1Н), 7,23 (дд, 9У-1,3 і 8,1ГцЦ., 1Н, АгН), 6,8 (д, У-8,1Гц., 1Н, АгН), 3,5 (м, 1Н, СН), 3,3 (м, ЗН, СН і

МНеН»), 2,5 (ш м, 6Н, ЗхМСН»), 1,28 (д, У-6,9Гц., 6Н, 2хСН»), 1,23 (д, 9У-6,6Гц., 6Н, 2хСН»), 0,96 (м, 6Н, 70. 2хСНоСН»).

МО-ЕЇ т/ 514 і 516 (М"-1 ії М").

Приклад 72 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-діїізопропіл-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (9Омг, О,42мМмоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-діізопропіл-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (З-діетиламінопропіл)їамідом (14О0мг) одержуючи 54мг (2590) вказаної в заголовку сполуки як червоно-коричневу тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йдв) 5 13,98 (с, 1Н, МН), 10,96 (с, 1Н, МН), 8,09 (д, 9У-1,7Гц., 2Н), 7,78 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,23 (дд, 9У-1,7 і 8,1ГцЦ., 1Н, АгН), 6,82 (д, 9У-8,1ГцЦ., 1Н, АгН), 3,5 (м, 1Н, СН), 3,25 (м, 2Н, МНОН»), 3,15 (м, 1Н, СН), 2,7 (ш с, 6Н, ЗХхМСН»), 1,7 (ш м, 2Н, СНЬСНЬСН»), 1,28 (д, 9У-6,9Гц., 6Н, 2хСН»), 1,24 (д, 9-5,9Гц., бН, 2хСН»), 1,06 (м, 6Н, 2хСНЬСН»).

МО-ЕЇ т/: 528 і 530 |М"-1 ії М").

Приклад 73 с 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-діїізопропіл-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)амід (8) 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (13Омг, О,бммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-діізопропіл-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (З-піролідин-1-ілпропіл)у'амідом (150мг, 0,45бммоль) одержуючи Збмг (1595) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. с "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йдв) 5 13,98 (с, 1Н, МН), 10,97 (с, ТН, МН), 810 (д, 9У-1,6Гц., 2Н), 7,78 (с, 1Н, о

Н-вініл), 7,23 (дд, 9У-1,6 і 7,6ГцЦ., 1Н, АгН), 6,82 (д, 9У-7,6Гц., 1Н, АгН), 3,5 (м, 1Н, СН), 3,25 (м, 2Н, МНН»), 3,15 (м, 1Н, СН), 2,7 (ш с, 6Н, ЗХхМСН»), 1,7 (ш м, 6Н, ЗхХМСНоСН»), 1,28 (д, У-5,6Гц., 6Н, 2хСНаь), 1,24(д,9У-5,7Гц,, Ф є бН, 2хСНу»). м

МО-ЕЇ т/: 526 і 528 |М"-1 ії М").

Зо Приклад 74 - 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (піридин-4-ілметил)амід 5-Бром-1,3-дигідроіндол-2-он (17Омг, О,вммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової « кислоти (піридин-4-ілметил)амідом (200мг) одержуючи 14мг (490) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. З с "НЯМР (З00МГц, ДМСО-ав) 5 13,67 (с, 1Н, МН), 11,01 (с, ш, 1Н, МН), 8,51 (дд, У-1,6 5 4,3Гц., 2Н), 8,23 (т,

Із» У-6,0Гц., ІН, СОМНеН»), 8,11 (д, 9-1,9ГцЦ., 1), 7,78 (с, 1Н, Н-вініл), 7,31 (д, 9У-6,0ГцЦ., 2Н), 7,25 (дд, 9У-1,9 8,1ГцЦ., 1Н), 6,82 (д, У-8,1ГцЦ., 1Н), 4,45 (д, У-6,0Гц., 2Н, МСН»), 2,46 (с, 6Н, 2х СН»).

МО-ЕЇ т/з 450 і 452 |М"-1 ії М"). -1 Приклад 75 5-І(6-(4-Бутилфеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти -і (2-піролідин-1-ілетил)амід о 5-І6-(4-Бутилфеніл)|-1,3-дигідроіндол-2-он (5Омг, О,19ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (5Омг) одержуючи 74мг (76965) («в) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. кз "НяЯМР (З36ОМГц, ДМСО-4в6) 5 13,58 (с, ІН, МН), 10,93 (с, ш, 1Н, МН), 7,82 (д, У-7,9ГцЦ., 1Н), 7,63 (с, 1Н, Н-вініл), 7,54 (д, 9У-7,9ГцЦ., 2Н), 7,46 (м, ІН, СОМН), 7,26 (м, ЗН), 7,09 (с, 1Н), 3,30 (м, 2Н, СН»), 2,52-2,63 (м,

АН, 2хСН»), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,40 (с, ЗН, СН»), 1,68 (м, 4Н, 2хСН»), 1,58 (м, 2Н, СН»), 1,34 (М, 2Н, СН»), 0,91 (т, У-7,2Гц., ЗН, СНЬСН»).

МО-БЕЇ пт/2 510 (М 7. і) Приклад 76 іме) 5-І6-(5-Ізопропіл-2-метоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліден-метилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбоново ї кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 60 6-(5-Ізопропіл-2-метоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (5Омг, О,17ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (45мг) одержуючи 6б7мг (75965) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З36ОМГц, ДМСО-4в6) 5 13,60 (с, ІН, МН), 10,82 (с, ш, 1Н, МН), 7,77 (д, 9У-7,9ГцЦ., 1Н), 7,61 (с, 1Н, Н-вініл), 7,45 (м, ТІН, СОМН), 7,0-7,19 (м, 5Н), 3,73 (с, ЗН, ОСН»), 3,32 (м, 2Н, СН»), 2,87 (м, ІН, СН(СН»)»), бо 2,56 (м, 2Н, СН»), 2,48 (м, 4Н, 2хСН»), 2,43 (с, ЗН, СНУ), 2,40 (с, ЗН, СНУ), 1,68 (м, 4Н, 2хСН»), 1,21 (д,

У-6,8Гц., 6Н, СН(СН»)»).

МС т/ 527,2 |М"-11.

Приклад 77 5-І(6-(4-Етилфеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 6-(4-Етилфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (45мг, О,19ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (5Омг) одержуючи бомг (65965) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-4в6) 5 13,59 (с, ІН, МН), 10,96 (с, ш, 1Н, МН), 7,83 (д, У-8,4ГцЦ., 1Н), 7,64 (с, 1Н, Н-вініл), 7,51-7,56 (м, ЗН), 7,25-7,30 (м, ЗН), 7,08 (д, 9У-1ГцЦ., 1Н), 3,31 (м, 2Н, СН»), 2,63 (м, 2Н, СНьоСН»), 2,55 (м, 2Н, СН»), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,42 (с, ЗН, СНУ), 2,40 (с, ЗН, СН»), 1,67 (м, 4Н, 2хСН»), 1,20 (т,

У-7,5Гц., ЗН, СНоСН»).

МО-ЕЇ т/» 482 (М.

Приклад 78 5-І(6-(2,4-Диметоксифеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметилі|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 6-(2,4-Диметоксифеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (51мг, О,19ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (5Омг) одержуючи ЗОмг (31965) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-4в6) 5 13,59 (с, ІН, МН), 10,86 (с, ш, 1Н, МН), 7,75 (д, У-7,8Гц., 1Н), 7,60 (с, 1Н, Н-вініл), 749 (м, ІН, СОМН), 7,22 (д, У-8,4Гц., 1Н), 7,03 (м, 1Н), 6,97 (с, 1Н), 6,58-6,65 (м, 2Н), 3,79 (с, ЗН,

ОСНУ»), 3,76 (с, ЗН, ОСН»), 3,33 (м, 2Н, СН»), 2,55 (м, 2Н, СН»), 2,50 (м, 4Н, 2хСН»), 2,42 (с, ЗН, СН»), 2,39 (с,

ЗН, СНУ), 1,67 (м, 4Н, 22хСН»а). с

МО-ЕЇІТ/2514(М7. і)

Приклад 79 5-І6-(3-Ізопропілфеніл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід с зо 6-(3-Ізопропілфеніл)-1,3-дигідроіндол-2-он (48мг, О,19ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амідом (5Омг) одержуючи 59мг (63965) о вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. о "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-4в) 5 13,63 (с, ІН, МН), 10,97 (с, ш, 1Н, МН), 7,87 (д, У-7,8Гц., 1Н), 7,68 (с, 1Н, Н-вініл), 7,24-7,55 (м, 6Н), 7,13 (с, 1Н), 3,34 (м, 2Н, СН»), 3,30 (м, ІН, СН(СН»)»), 2,60 (м, 2Н, СН»), 2,50 (м, -

АН, 2хСН»), 2,45 (с, ЗН, СН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 1,70 (м, 4Н, 2хСН»), 1,27 (д, 9-6,9Гц., 6Н, СН(СНЗ)»). ч-

МО-ЕЇ т/з 496 (М.

Приклад 80 5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти « (2-діетиламіноетил)амід 5-Фтор-1,3-дигідроіїндол-2-он (0,54г, З, вммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової - с кислоти (2-діетиламіноетил)амідом одержуючи 0,83г (55965) вказаної в заголовку сполуки як жовто-зелену тверду "» речовину. " "НЯМР (З360МГц, ДМСО-ав) 5 13,66 (с, ІН, МН), 10,83 (с, ш, 1Н, МН), 7,73 (дд, уУ-2,5 5 94Гц., 1Н), 7,69 (с, 1Н, Н-вініл), 7,37 (т, ІН, СОМНОНЬоСН»), 6,91 (м, 1Н), 6,81-6,85 (м, 1Н), 3,27 (м, 2Н, СН»), 2,51 (м, 6Н, ЗхСН»), -І 75 2,43 (с, ЗН, СН»), 2,41 (с, ЗН, СН»), 0,96 (т, У-6,9Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)»).

МО-ЕЇ т/: 398 (М. -і Приклад 80 (Альтернативний синтез) о 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)-іліденметилі|-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід («в) 50 Гідрат гідразину (5595, З00Омл) і 5-фторізатин (З00г) нагрівали при 10020. При перемішуванні порціями (100ОГг)

Кз протягом 120 хвилин додавали 5-фторізатин (500г). Суміш нагрівали до 1109 і перемішували протягом 4 годин.

Суміш охолоджували до кімнатної температури і тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування одержуючи неочищений "гідразид (2-аміно-5--фторфеніл)оцтової кислоти (748г). Гідразид Ссуспендували у воді (/ООмл) і рН суміші доводили до «рН З використовуючи 12М хлорводневу кислоту. Суміш перемішували протягом 12 годин при кімнатній температурі. Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного (Ф. фільтрування і двічі промивали водою. Продукт сушили у вакуумі одержуючи 5-фтор-1,3-дигідроіндол-2-он (бООг, ко 7395 вихід) як коричневий порошок. ТН-ЯМР (диметилсульфоксид-дв) 65 3,46 (с, 2Н, СН»), 6,75, 6,95, 7,05 (З2хм,

ЗН, ароматика), 10,35 (с, 1Н, МН). МС п/з 152 |М'-1). 60 3,5-Диметил-1Н-пірол-2,4-дикарбонової кислоти 2-трет-бутиловий естер 4-етиловий естер (2600г) і етанол (7800мл) інтенсивно перемішували і повільно додавали 10М хлорводневу кислоту (365О0мл). Температура збільшувалась від 252С до 352С і починав виділятись газ. Суміш нагрівали до 542 і перемішували з наступним нагріванням протягом години, причому температура піднімалась до 67 С. Суміш охолоджували до 59С і повільно при перемішуванні додавали 32л води і льоду. Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного 65 фільтрування і промивали три рази водою. Тверду речовину сушили на повітрі до постійної ваги одержуючи 2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти етиловий оестер (1418г, 8795 вихід) як розувату тверду речовину. ТН-яЯМР (диметилсульфоксид-дв) 6 2,10, 2,35 (2хс, 2хЗН, 2хСНе»), 4,13 (к, 2Н, СН»), 6,37 (с, 1Н, СН), 10,85 (с, ІН, МН). МС п/з 167 (М'-11.

Диметилформамід (322г) і дихлорметан (3700мл) охолоджували на бані з льодом до 42С і при перемішуванні додавали оксихлорид фосфору (684г). Повільно аліквотами протягом 15 хвилин додавали твердий етиловий естер 2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (670г). Температура зьбільшувалась максимум до 1826.

Суміш нагрівали при температурі кипіння протягом години, охолоджували до 102 в бані з льодом і швидко при інтенсивному перемішуванні додавали 1,6 л льодяної води. Температуру збільшували до 15 9С, при інтенсивному перемішуванні додавали 10М хлорводневу кислоту (1,6бл).

Температура підвищувалась до 2292С. Суміш залишали стояти протягом ЗО хвилин і шари залишали розділятись. Температура підвищувалась максимум до 402С. Водний шар доводили до рН12-13 використовуючи 10ОМ гідроксид калію (3,вл) із швидкістю при якій температура піднімалась і залишалась під час додавання на позначці 5590. Після завершення додавання суміш охолоджували до 10 С і перемішували протягом 1 години.

Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування і промивали чотири рази водою одержуючи т 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти етиловий естер (778г, 10095 вихід) як жовту тверду речовину. ІН-ЯМР (ДМСО-адв) 5 1,25 (т, ЗН, СН»), 2,44, 2,48 (2хс, 2хЗН, 2хСНу»), 4,16 (к, 2Н, СН»), 9,59 (с, 1Н,

СНО), 12,15 (ш с, ІН, МН). МС т/: 195|М 11. 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти етиловий естер (806бг), гідроксид калію (548г), воду (2400мл) і метанол (З0Омл) кип'ятили протягом двох годин при перемішуванні г потім охолоджували до 8 260.

Суміш екстрагували двічі дихлорметаном. Водний шар доводили до рНі4 використовуючи 100О0мл 1ОМ хлорводневої кислоти підтримуючи температуру близько 153. Додавали воду для полегшення перемішування.

Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали три рази водою і сушили у вакуумі при 502 одержуючи 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (645г, 93,59о вихід) як жовту тверду с ов речовину. ЯМР (ДМСО-айв) 5 2,40, 2,43 (2хс, 2хЗН, 2хСН»), 9,57 (с, ІН, СНО), 12,07 (ш с, 2Н, МНАСООН). МС т/2 168 |М--1). і9) 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (1204г) і 6б20мл диметилформаміду перемішували при кімнатній температурі і в цей час додавали гідрохлорид 1-(З-диметил-амінопропіл-З-етилкарбодіїміду (2071г), гідроксибензотриазол (1460г), триетиламін (201бмл) і діетилетилендіамін (1215мл). Суміш перемішували с 3о протягом 20 годин при кімнатній температурі. Суміш розводили З00Омл води, 2000мл насиченого водного розчину хлориду натрію і ЗО0Омл насиченого розчину бікарбонату натрію і рН збільшували до більше ніж 10 о використовуючи ТОМ гідроксид натрію. Суміш двічі екстрагували 5000мл 1095 метанолу в дихлорметані і «з екстракти об'єднували, сушили над безводним сульфатом магнію і випарювали на роторі до суха. Суміш розводили 1950мл толуолу і ЗНову випарювали на роторі до суха. Залишок розтирали з 3:1 гексан:діетиловий в

Зз5 етер (4000мл). Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування, двічі промивали 400мл ча етилацетату і сушили у вакуумі при 349 протягом 21 години одержуючи 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)іамід (819г, 4395 вихід) як світло-коричневу тверду речовину. "Н-ЯМР. (диметилсульфоксид-4в) 5 0,96 (т, 6Н, 2хСНа), 2,31, 2,38 (2хс, « 2хСНУ), 2,51 (м, 6Н зЗхСН»), 3,28 (м, 2Н, СН»), 7,34 (м, 1Н, амід МН), 9,56 (с, 1Н, СНО), 11,86 (с, 1Н, пірол

МН). МС т/» 266 |М-н1). З с 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (809г), "» 5-фтор-1,3-дигідроіндол-2-он (438г), етанол (800Омл) і піролідин (1Змл) нагрівали при 782 протягом З годин. " Суміш охолоджували до кімнатної температури і тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування і промивали етанолом. Тверду речовину перемішували з етанолом (5900мл) при 7223 протягом 30 75 хвилин. Суміш охолоджували до кімнатної температури. Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом і сушили у вакуумі при 54 С протягом 130 годин одержуючи - І 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-діпуд-го-індол-(32)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти о (2-діетиламіноетил)амід (1013г, 8895 вихід) як оранжеву тверду речовину. "Н-ЯМР (диметилсульфоксид-дв) 5 0,98 (т, 6Н, 2хСН»), 2,43, 2,44 (2хс, 6Н, 2хСН»), 2,50 (м, 6Н, ЗхСН»), 3,28 (к, 2Н, СН»), 6,84, 6,92, 7,42, 7,71, о 7,50 (5(м, 5Н, ароматика, вініл, СОМН), 10,88 (с, 1Н, СОМН), 13,68 (с, 1Н, пірол МН). МС п/з 397 |М-1).

Ге Приклад 81 3-(4--2-Діетиламіноетилкарбамоїл)-3,5-диметил-1Н-пірол-2-ілметилен|-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-б6-карбоно ва кислота 2-Оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-6-карбонову кислоту (вОмг, О,45ммоль) конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)яуамідом одержуючи 210мг (92965) (Ф, вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. іме) "НЯМР (З360МГц, ДМСО-ав) 5 13,6 (с, 1Н, МН), 7,76 (д, У-8,0Гц., 1Н), 7,66 (с, 1Н, Н-вініл), 7,57 (дд, 9-1,5 5 8,ОГц., 1Н), 7,40-7,42 (м, 2Н), 3,28 (м, 2Н, СН»), 2,88 (м, Н-піперидин), 2,54 (м, 6Н, ЗхСНо»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 2,40 60 «с, ЗН, СН»), 1,56 (м, Н-піперидин), 0,97 (т, У-6,98Гц., 6Н, М(СНЬСН»)»).

МС ті/ 424 |М 7.

Приклад 82 5--5-Диметилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід бо 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти диметиламід (9Омг, 0,38ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетиллуамідом (100мг) одержуючи 100мг

(5490) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "'НЯМР (З60МГЦ, ДМСО-ав) 5 13,65 (с, 1Н, МН), 11,30 (с, ш, ІН, МН), 8,25 (д, 1Н), 7,92 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,48-7,53 (м, 2Н), 7,07 (д, 9У-8,2Гц., 1Н), 3,33 (м, 2Н, СН»), 2,61 (с, 6Н, МЩ(СНУ)»), 2,56 (т, 2Н, СН»), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,45 (с, ЗН, СН»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 1,67 (м, 4Н, 2хСН»о).

МО-ЕЇ т/з 485 (М.

Приклад 83 5-І5-(3-Хлорфенілсульфамоїл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти (З-хлор-феніл)амід (120мг, 0,3в8ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетиллуамідом (100мг) одержуючи 150мг (6990) вказаної в заголовку сполуки як жовто-оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,55 (с, ІН, МН), 11,26 (ш с, ІН, МН), 10,30 (ш сн, МН), 8,26 (д, 1Н), 7,79 (с, 1Н, Н-вініл), 7,51-7,57 (м, 2Н), 7,22 (т, У-8,1ГцЦ., 1Н), 7,15 (м, 1Н), 7,07 (м, 1Н), 7,0 (м, 2Н), 3,44 (м, 2Н, 19 СН»), 2,57 (т, У-7,0Гц., 2Н, СН»), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 1,68 (м, 4Н, 2хСН»).

МС ті/ 568 М 7.

Приклад 84 2,4-Диметил-5-|(2-оксо-5-(піридин-3-ілсульфамоїл)-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил|-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти піридин-З-іламід (110мг, О,38ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетиллуамідом (100мг) одержуючи 150мг (7490) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину. "'НЯМР (З60МГЦ, ДМСО-йав) 5 13,58 (с, ІН, МН), 8,21 (д, 9-2,0Гц., 2Н), 8,04 (м, 1), 7,76 (с, ІН, сч

Н-вініл), 7,49-7,54 (м, 2Н), 7,41 (м, 1Н), 7,14 (м, 1Н), 6,94 (д, У-8,5Гц., 1Н), 3,33 (м, 2Н, СН»), 2,56 (т, У-7,06Гц., 2Н, СН»), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), 2,43 (с, 6Н, 2хСН»), 1,68 (м, 4Н, 2хСН»о). і)

МС т/ 535 МА.

Приклад 85 3-ІЗ,5-Диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніл)-1Н-пірол-2-ілметилені-4-(2-гідроксиетил)-1,3-дигідроіндол-2 Га -он 4-(2-Пдроксиетил)-1,3-дигідроіндол-2-он (7/1мг, О 4ммоль) конденсували Кк! о

З,5-диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніл)-1Н-пірол-2-карбальдегідом одержуючи ЗОмг (5590) вказаної в («3 заголовку сполуки як оранжеву тверду речовину.

ТНЯМР (З00МГц, ДМСО-йдв) 5 14,25(с, 1Н, МН), 10,88 (с, 1Н, МН), 7,57 (с, 1Н, Н-вініл), 7,03 (м, 1Н), - 6,75-6,82 (м, 2Н), 4,86 (м, 1Н, ОН), 3,70 (м, 2Н, СН»), 3,04 (м, 2Н, СН»), 2,48 (м, 4Н, 2хСНо), 228 (ш с, 7Н), 2,19. .ДДЦїч- (с, ЗН, СНУ), 2,18 (с, ЗН, СН»).

МС ті/ (ме) 4,09,3 М.

Приклад 86 « 3-ІЗ,5-Диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніл)-1Н-пірол-2-ілметилені|-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-5-сульфон ової кислоти феніламід З с 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти феніламід (11Омг, О4ммоль) конденсували з "» 3,5-диметил-4-(4-метилпіперазин-1-карбоніл)-1Н-пірол-2-карбальдегідом (100мг) одержуючи 5Омг (24905) вказаної " в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,52(с, ІН, МН), 11,26 (с, ІН, МН), 10,08 (с, ІН, МН), 8,21 (д, 9У-1,6Гц., 75 1Н), 7,75 (с, 1Н, Н-вініл), 7,50 (дд, У-1,6 5. 8,3Гц., 1Н), 7,19 (м, 2Н), 7,10 (м, 2Н), 6,97 (м, 2Н), 2,49 (м, 4Н, 2хСН»), їм 2,28 (м, ОН, 2хСНь б 2хСН»), 2,18 (с, ЗН, СН»). - МО-ЕЇ т/г2 519 (М. о Приклад 87 5--5-Диметилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти о (2-діетиламіноетил)амід

ГІ 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти диметиламід (9Омг, 0,38ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)іамід (100мг) одержуючи 8Омг (43965) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. "НЯМР (З00МГЦц, ДМСО-дев) 5 11,30 (с, 1Н, МН), 8,27 (д, 9У-1,7Гц., 1Н), 7,94 (с, 1Н, Н-вініл), 7,49 (ДД, 9У-1,7 8 8,ОГцЦ., 1Н), 7,44 (м, ІН, СОМНеНЬСН»), 7,07 (д, У-8,0ГцЦ., 1Н), 3,26 (м, 2Н, СН»), 2,60 (с, 6Н, М(СНЗ)»), 2,53 (м, і) 2Н, СН»), 2,45-2,50 (м, ОН, 2хСНа 8 М(СНоСН З)», 0,96 (т, У-7,2Гц., 6Н, М(СНЬСН»)»). іме) МО-ЕЇ т/г 487 (М 7.

Приклад 88 60 5-І5-(3-Хлорфенілсульфамоїл)-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід 2-Оксо-2,3-дигідро-ІН-індол-5-сульфонової кислоти (З-хлор-феніл)амід (120мг, З, ммоль) конденсували з 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (100мг) одержуючи 8Омг (37965) вказаної в заголовку сполуки як жовту тверду речовину. бо "НЯМР (З360МГц, ДМСО-йв) 5 13,55 (с, 1Н, МН), 11,24 (с, ІН, МН), 10,29 (с, ІН, МН), 8,25 (д, 9У-1,87Гц.,

1Н), 7,79 (с, 1Н, Н-вініл), 7,52 (дд, У-1,87 85 8,3Гц., 1Н), 7,42 (м, ІН, СОМНОСНоСН»), 7,22 (т, 9У-8,02ГцЦ., 1Н), 7,15 (т, У-2Гц., 1Н), 7,08 (м, 1Н), 7,0 (м, 2Н), 3,27 (м, 2Н, СН»), 2,48-2,57 (м, 6Н, ЗхСНе»), 2,45 (с, ЗН, СН»), 2,44 (с, ЗН, СН»), 0,97 (т, У-7,0Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)»).

МС ті/ 570,1 (М.

Приклад 95 3-(2-Оксо-5-феніл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти етиловий естер "НЯМР (З360МГц, ДМСО-йв) 5 13,74 (с, 1Н, МН), 11,00 (с, 1ТН, МН), 8,13 (д, 9-1,7Гц., 1Н), 7,74 (с, 1Н, 70 Н-вініл), 7,70 (д, 9У-7,7Гц., 2Н), 7,49 (дд, 49-1,7 85 8,0ГцЦ., 1), 7,44 (т, 9-7,7Гц, 2Н), 7,32 (м, 1Н), 6,96 (д, -8,ОГцЦ., 1Н), 4,26 (к, 9-7,0Гц., 2Н, ОСНоСН»), 2,79 (м, 2Н, СН»), 2,72 (м, 2Н, СН»), 1,73 (м, 4Н, 2хСН»), 1,30 (т,

У-7,0Гц., ЗН, ОСНЬСН5»).

МО-ЕЇ т/з 412 (М.

Приклад 99 3-(2-Оксо-5-фенілсульфамоїл-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-4,5,6,-7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-карбонової кислоти етиловий естер "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,64 (с, ІН, МН), 11,33 (с, ІН, МН), 10,07 (с, ІН, МН), 8,24 (д, У-1,8Гц., 1Н), 7,74 (с, 1Н, Н-вініл), 7,57 (дд, 9У-1,8 5 8,0ГцЦ., 1Н), 7,21 (т, 9У-7,6Гц., 2Н), 7,11 (д, 9У-7,6Гц., 2Н), 6,99 (д, 9-8,0ГцЦ., 1Н), 6,98 (д, 9У-7,6Гц., 1Н), 4,27 (к, 9-7,0Гц., 2Н, ОСНЬСН»), 2,80 (м, 2Н, СН»), 2,73 (м, 2Н, СН»), 1,73 (м, 4Н, 2хСН»), 1,30 (т, У-7,0Гц., ЗН, ОСНОСН»).

МО-ЕЇ т/» 491 М.

Приклад 109 3-ІЗ-"Морфолін-4-карбоніл)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-ілметилен|)|-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-6-карбо сч г Нова кислота "НЯМР (З60МГц, ДМСО-4в) 5 13,60 (с, ІН, МН), 12,75 (ш с, ІН, СООН), 11,08 (с, ІН, МН), 7,85 (д, і9)

У7,8Гц., 1Н), 7,71 (с, 1Н, Н-вініл), 7,62 (дд, 9У-1,4 85 7,8Гц., 1Н), 7,41 (д, У-1,4Гц., 1Н), 3,65 (м, 4Н, 2хСН»), 3,55 (м, 4Н, 2хСН»), 2,81 (м, 2Н, СН»), 2,54 (м, 2Н, СН»),1,73 (м, 4Н, 2хСН»о).

МО-ЕЇ т/г 421 (М 7. с

Приклад 112 о 5-Бром-3-ІЗ-(піролідин-1-карбоніл)-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-ілметилен|)-1,3-дигідроіндол-2-он "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,56 (с, 1 Н, МН), 11,00 (с, ІН, МН), 8,05 (д, 9У-1,8ГЦ., 1), 7,74 (с, 1Н, о

Н-вініл), 7,28 (дд, 9У-1,3 8 8,3Гц., 1Н), 6,83 (д, 9У-8,3Гц., 1Н), 3,57 (м, 4Н, 2хСН»), 2,79 (м, 2Н, СНО), 2,65(м, 2Н, їн

СН»), 1,88 (м, 4Н, 2хСН»), 1,71 (м, 4Н, 2хСН»). м

МО-ЕЇ т/» 439 8. 441 |М'-1) (М 1).

Приклад 114 3-(3-Диметилкарбамоїл-4,5,6,7-тетрагідро-2Н-ізоіндол-1-ілметилеп-е)-2-оксо-2,3-дигідро-1Н-індол-б6-карбонов а кислота « "НяЯМР (З60МГц, ДМСО-4в) 5 13,60 (с, ІН, МН), 12,72 (ш с, ІН, СООН), 11,05 (с, ІН, МН), 7,85 (д, ВЗ с Уе7,9Гц.,.1Н), 7,72 (с, 1Н, Н-вініл), 7,62 (дд, У-1,3 5 7,9Гц., 1Н), 7,42 (д, 9-1,9Гц., 1Н), 3,03 (с, 6Н, МЩ(СНУЗ)»), 2,81 ц (м, 2Н, СН»), 2,55 (м, 2Н, СН»), 1,73 (м, 4Н, 2хСН»). ,» МО-ЕЇ т/» 379 (М.

Приклад 115 4-Метил-5-(5-метилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-3З-карбонова кислота і "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 13,56 (ш с, ІН, МН), 8,24 (д, 9-1,5Гц., 1Н), 7,86 (с, 1Н, Н-вініл), 7,74 (д, - 3-2,96ГЦ., 1), 7,56 (дд, У-1,5 8 8,1ГцЦ., 1Н), 7,20 (ш м, 1Н, МНУН»), 7,03 (д, 9У-8,1Гц., 1Н), 2,57 (с, ЗН, СНУя), 2,41 (с, ЗН, СН»). о МО-ЕЇ т/г 361 (М. с ШІ Приклад 116

Д4-Метил-5-(4-метил-5--метилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-3-карбоніл|іаміноо г» цтової кислоти етиловий естер 4-Метил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти етиловий естер (пос. на літ. Ю. ОО. СНепо, Т. Ї. Вомтап і Е. І есоїї;

У. Гетеросусіс Спет.; 1976; 13; 1145-1147) формілювали використовуючи спосіб А, гідролізували використовуючи спосіб Б після чого амідували (спосіб В) одержуючи

ГФ) Ко-форміл-4-метил-1Н-пірол-3-карбоніл)аміно|оцтової кислоти етиловий естер. 4-Метил-5-метиламіносульфоніл-2-оксиіндол (5Омг, 0О,21ммоль) конденсували з ді Ко-форміл-4-метил-1Н-пірол-3-карбоніл)аміноїоцтової кислоти етиловим естером (100мг, 0,42ммоль) і піперидином (0,Тмл) в етанолі (2мл) одержуючи 5Омг (5290) вказаної в заголовку сполуки. 60 "НЯМР (З360МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,59 (с, 1Н, МН), 11,29 (д.ш. с, ІН, МН-СО), 8,33 (т, У-5,8Гц., 1ІН, СОМНСН»), 7,83 (д, 9-3,11ГЦ., 1Н), 7,80 (с, 1Н, Н-вініл), 7,71 (д, У-8,5ГцЦ., 1Н), 7,34 (ш м, 1Н, МНеН»), 6,89 (д, 9У-8,5Гц., 1Н), 4,11 (к, 9-7 1Гц., 2Н, ОСНЬСН»), 3,92 (д, 9-5,8Гц., 2Н, СІУСН»), 2,86 (с, ЗН, СН»), 2,48 (с, ЗН, СНУ»), 2,42 (д, -4,71Гц., ЗН, НМСНУ»), 1,20 (т, 9-7 1Гц., ЗН, ОСНоОСН»). в5 МО-БЕЇ пт/з: 460 (М 7.

Приклад 117

Д4-Метил-5-(5-метилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3З-іліденметил)-1Н-пірол-3-карбонілІаміноюцтової кислоти етиловий естер

Суміш 5-метиламіносульфоніл-2-оксиіндолу (0,06г, 0,22мМмоль), 500 Кб-форміл-4-метил-1Н-пірол-З3-карбоніл)аміно)оцтової кислоти етилового естеру (0,075г, 0,27ммоль) і піперидину (2 краплі) в етанолі (5мл) нагрівали в закритій пробірці при 902С протягом 12г: Після охолодження, осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом, розтирали з дихлорметан/етер і сушили одержуючи 0,035г (3695) вказаної в заголовку сполуки як жовтувато-коричневу тверду речовину.

ТН ЯМР (З60МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,6 (с, 1Н, МН), 11 (д.ш. с, ІН, МН-СО), 8,30 (т, У-5,7Гц., 1Н, СОМНОН»), 8,25 70. (д, 9У-1,2Гц., 1Н), 7,88 (с, 1Н, Н-вініл), 7,84 (д, 9-3,3Гц., 1Н), 7,57 (дд, 9У-1,9 8. 8,5Гц., 1Н), 7,14 (ш м, 1Н, МНН»), 7,04 (д, 9-8,5Гц., 1Н), 4,11 (к, У-6,7Гц., 2Н, ОСНоСН»), 3,92 (д, 9У-5,7Гц., 2Н, СІУСН»), 2,55 (с, ЗН, СН»), 2,41 (м,

ЗН, МОН»), 1,20 (т, 9-6,7Гц., ЗН, ОСНоСН»).

МС т/з 446 (МГ).

Приклад 118

Я4-Метил-5-(5-метилсульфамоїл-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-3-карбоніл|іамінодоцтова кислота

Суміш ((5-форміл-4-метил-1Н-пірол-3-карбоніл)аміно|їоцтової кислоти етилового естеру (0,142г, О,5Оммоль) і 1М Маон (1,2мл) в метанолі (1Омл) перемішували при кімнатній температурі протягом 1г. Реакцію концентрували і залишок конденсували з 5-метиламіносульфоніл-2-оксиіндолом (0,13г, 0,48ммоль) і піперидином (0,12мл) в етанолі (12мл) одержуючи 0,11г (52905) вказаної в заголовку сполуки. "НЯМР (З00МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,98 (ш с, 1Н, МН), 8,17 (с, 1Н), 7,80 (с, 1Н), 7,75 (д, 9-3,1Гц., 1Н), 7,51 (дд,

У-2 а 8,2ГЦ., 1Н), 7,21 (м на ш с, 2Н), 6,97 (д, 9У-8,1ГцЦ., 1Н), 3,41 (д, 9-42Гц., 2Н, СНоМН), 2,54 (с, ЗН, пірол-СН»), 2,39 (с, ЗН, АгОНУ»).

МС т/г 417 (М-А1Г.. с 29 Приклад 120 Ге) 5-Метил-2-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-3-карбонова кислота "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,77 (ш с, 1Н, МН), 12,49 (с, ІН, СООН), 11,07 (с, 1Н, МН), 8,39 (с, 1Н,

Н-вініл), 7,43 (д, 9У-7,47ГцЦ., 1), 7,20 (т, 9-7,47ГЦ., 1Н), 7,03 (т, 9-7,47ГцЦ., 1Н), 6,91 (д, 9У-7,47ГцЦ., 1Н), сч зо 6,49 (д, 9-1,53ГЦ., 1Н), 2,34 (с, ЗН, СН»).

МС т/» 269 МАНІ". о

Приклад 121 о 5-Метил-2-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-1Н-пірол-3-карбонової кислоти етиловий естер

ТНЯМР (ЗО00МГЦц, ДМСО-дв) 5 13,79 (с, 1Н, МН), 11,08 (с, ІН, МН), 8,31 (с, М1Н, Н-вініл), 7,45 (д, -

ЕТ, 2Гц., 1Н), 7,20 (т, 9-7,52ГЦ., 1), 7,03 (т, 9У-7,52ГЦ., 1Н), 6,91 (д, 9У-7,52Гц., 1Н), 6,50 (д, 9521ГЦ.,, ра 1Н), 4,26 (к, У-7,2Гц., 2Н, ОСНоСН»), 2,33 (с, ЗН, СНУ), 1,32 (т, У-7,2Гц., ЗН, ОСНоСНУ»).

МС т/ 297,1 (МАНІ".

Приклад 122 « 2-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-5-метил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти етиловий естер "'НЯМР (З360ОМГЦ, ДМСО-4д6) 5 13,72(с, 1Н, МН), 11,16 (с, ІН, МН), 8,29 (с, М1Н, Н-вініл), 7,53 (д, т с 3-2,0ГЦ., 71), 7,35 (дд, У-2,0 85 8,05ГцЦ., 1 Н), 6,87 (Т, 9-8,05ГЦ., 1 Н), 6,53 (д, 9У-2,4ГцЦ., 1Н), 4,28 (к, "» У-7,03Гц.,2Н, ОСНоСН»), 2,35 (с, ЗН, СН»), 1,33 (т, У-7,03Гц., ЗН, ОСНЬСН»). " МС т/ 375 8. 377 МАНІ".

Приклад 123 2-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-5-метил-1Н-пірол-З3-карбонова кислота їв. "НяЯМР (З00МГц, ДМСО-йв) 5 13,72 (с, ІН, МН), 12,57 (с, ІН, СООН), 11,19 (с, ІН, МН), 8,36 (с, 1Н, -і Н-вініл), 7,51 (д, 9У-1,4Гц., 1Н), 7,34 (дд, 9-1,4 85 8,17Гц., 1Н), 6,87 (т, 9У-8,17Гц., 1Н), 6,52 (д, 9У-2,5Гц., 1Н), о 2,35 (с, ЗН, СН»).

МС ті/ 347 8. 349 |МАНІ" («в) Приклад 124

Кз 2-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-5-метил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід

До розчину 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (250мг, 1,63ммоль) в диметилформаміді (Змл) додавали 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)карбодіїмід (37бмг, 1,2еквів.), 1-гідроксибензотриазол (265мг, 59 1,2еквів.), триетиламін (0,45мл, 2еквів.) і 1-(2-аміноетил)піролідин (0,2Змл, 1,1еквів.). Після перемішування

ГФ) при кімнатній температурі протягом ночі, реакцію розводили насиченим бікарбонатом натрію і насиченим водним з розчином хлориду натрію і екстрагували 1095 метанолом в дихлорметані. Об'єднані органічні шари промивали насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували во одержуючи 13Омг 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)аміду.

Суміш 5-бром-2-оксиіндолу (10бмг, 0О,бммоль), 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)іаміду (125мг, Леквів-) і піперидину (0,2мл) в етанолі (2мл) нагрівали в закритій пробірці при 802С протягом 1 г і потім охолоджували. Осад, що утворився, збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом і етилацетатом і сушили одержуючи вказаний в заголовку продукт як дь оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З00МГц, ДМСО-йдв) 5 13,62 (с, ІН, МН), 11,06 (ш с, 1 Н, МН), 8,56 (с, 1Н, Н-вініл), 8,15 (м, 1Н,

СОМНеСН»), 7,48 (д, 9У-1,8Гц., 1Н), 7,31 (дд, У-1,8 8 7,9Гц., 1Н), 6,86 (д, 9У-7,9Гц., 1Н), 6,60 (д, 9-2,ЗГц., 1Н), 3,35 (м, 2Н, НМСНоСН»), 2,56 (Т, У-6,91Гц., 2Н, НМСНьЬСН»), 2,35 (с, ЗН, СН»), 1,67 (м, 4Н, 2хСН»).

МС т/: 443/445|М'і М'21.

Приклад 125 2-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-5-метил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід

До розчину 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (320мг, 2,1ммоль) в диметилформаміді (Змл) додавали 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)карбодіїмід (48Змг, 1,2еквів.), 1-гідроксибензотриазол (З34ОмгГ, 70 1,2еквів.), триетиламін (0,5Омл, 2еквів.) і М,М-діетилетилендіамін (0,32мл, 1,Теквів.). Після перемішування при кімнатній температурі Протягом ночі, реакцію розводили насиченим бікарбонатом натрію і насиченим водним розчином хлориду натрію і екстрагували 1095 метанолом в дихлорметані. Об'єднані органічні шари промивали насиченим водним розчином хлориду натрію, сушили над безводним сульфатом натрію і концентрували одержуючи 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід.

Суміш 5-бром-2-оксиіндолу (10бмг, 0О,бммоль), 2-форміл-5-метил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (126бмг, Теквів.) і піперидині (О0,2мл) в етанолі (2мл) нагрівали в закритій пробірці при 802С протягом 1 г і потім охолоджували. Осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом і етилацетатом і сушили одержуючи вказаний в заголовку продукт як оранжеву тверду речовину. "НЯМР (З360МГц, ДМСО-дв) 5 13,62 (с, 1Н, МН), 11,11 (ш с, 1 Н, МН), 8,54 (с, 1Н, Н-вініл), 8,1 (м, 1Н,

СОМНОНО), 7,49 (д, 9У-2,2ГЦ., 1Н), 7,91 (дд, У-2,2 8 8,3ГЦ., 1Н), 6,86 (д, У-8,3Гц., 1Н), 6,58 (д, 9У-2,24Гц., 1Н), 3,931 (м, 2Н, НМСНоСН»), 2,59 (м, ЄН, ЗхСНео), 2,36 (с, ЗН, СН»), 0,99 (т, У-6,8Гц., 6Н, Щ(СНоСН»З)»).

МС т/ 445/447 |М'Ї М'21.

Приклад 126 сч 2,4-Диметил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід о

Суміш 1,3-дигідроїндол-2-ону (26бмг, 2ммоль), 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (53О0мг, 2ммоль) і піперидину (1 крапля) в етанолі нагрівали при 9029 протягом 2 годин. Реакцію охолоджували до кімнатної температури, Одержаний осад збирали за допомогою вакуумного сч зо фільтрування, промивали етанолом і сушили одержуючи 422мг (5590) вказаної в заголовку сполуки як світло-жовту тверду речовину. о

ТН яЯМР (400МГц, ДМСО-дв) 5 13,7 (с, ІН, МН), 10,9 (с, ІН, МН), 7,88 (д, 9-7,6ГЦ., 1Н), 7,64 (с, 1Н, о

Н-вініл), 7,41 (т, У-5,4Гц., 1Н, МН), 7,13 (дт, 9У-1,2 8. 7,6ГцЦ., 1Н), 6,99 (дт, 9У-1,2 5 7,6Гц., 1Н), 6,88 (д, 9У-7,6Гц., 1Н), 3,28 (м, 2Н), 2,48-2,55 (м, 6Н), 2,44 (с, ЗН, СНУ), 2,41 (с, ЗН, СН»), 0,97 (т, 9-7 ,2Гц., 6Н, МІСНОСН»)»). т

МСЯХІАТ 381 |М 7-11. -

Приклад 127 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід «

Суміш 5-хлор-1,3-дигідроїндол-2-ону (335мг, 2ммоль), 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (53Омг, 2ммоль) і піперидину (1 крапля) в етанолі нагрівали при 9029 протягом 2 - с годин. Реакцію охолоджували до кімнатної температури, одержаний осад збирали за допомогою вакуумного ч фільтрування, промивали етанолом і сушили одержуючи 565мг (6895) вказаної в заголовку сполуки як оранжеву » тверду речовину.

ТН яЯМР (400МГц, ДМСО-дв) 5 13,65 (с, ІН, МН), 11,0 (с, ІН, МН), 7,98 (д, У-2,1Гц., 1) 7,77 (с, 1Н

Н-вініл), 7,44 (т, МН), 7,13 (дд, 9-2,1 85 84Гц., 1) 6,87 (д, У-84ГЦ., 1Н), 3,28 (д, 2Н), 2,48-2,53 (м, бН),

Ше 2,44 (с, ЗН, СН»), 2,43 (с, ЗН, СН»), 0,97 (т, У-7,0Гц., 6Н, Щ(СНоСН»)») -І МСХІАТ 415 |М 7-11.

Приклад 128 о 2,4-Диметил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти

І ав | 250 (2-піролідин-1-етил)амід 1,3-Дигідроіндол-2-он конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти їз (2-піролідин-1-ілетил)іамідом одержуючи вказаний в заголовку продукт.

МСХІАТ 379 (М 7-11.

Приклад 129 5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти

ГФ) (2-піролідин-1-ілетил)амід з 5-Фтор-1,3-дигідроіндол-2-он конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти (2-піролідин-1-ілетил)іамідом одержуючи вказаний в заголовку продукт. во МСЯХІАТ 397 |М 1).

Детальна методика: 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонову кислоту (61г), 5-фтор-1,3-дигідроїндол-2-он (79г), етанол (З0Омл) і піролідин (З2мл) кип'ятили протягом 4,5 годин. До суміші додавали оцтову кислоту (24мл) і кип'ятили протягом 30 хвилин. Суміш охолоджували до кімнатної температури і тверду речовину збирали за допомогою во вакуумного фільтрування і двічі промивали етанолом. Тверду речовину перемішували протягом 130 хвилин в 4090 ацетоні в воді (400мл), що містив 12М хлорводневу кислоту (6б,5мл). Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування і двічі промивали 4095 ацетон в воді. Тверду речовину сушили у вакуумі одержуючи 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонову кислоту (86бг, 7990 вихід) як оранжеву тверду речовину. ТН-ЯМР (диметилсульфоксид-дв) 6 2,48, 2,50 (2хс, 6Н, 2хСН»), 6,80, 6,88, 7,68, 57,12 (4(м, 4Н, ароматика і вініл), 10,88 (с, 1ТН, СОМН), 12,12 (с, ІН, СООН), 13,82 (с, 1Н, пірол МН). МС т/2 299 |М-1). 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонову кислоту /(100г) і диметилформамід (500мл) перемішували і додавали бензотриазол-1-ілокситрис(ідиметиламіно)фосфонію гексафторфосфат (221г), 1-(2-аміноетил)піролідин (45,6бг) і триетиламін (9Змл). Суміш перемішували протягом 2 70 годин при кімнатній температурі. Твердий продукт збирали за допомогою вакуумного фільтрування і промивали етанолом. Тверду речовину суспендували в етанолі (5Х0О0мл) і перемішували протягом години при 649 і охолоджували до кімнатної температури. Тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етанолом і сушили у вакуумі одержуючи 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти 15. (2-піролідин-1-ілетил)амід (101,5г, 7795 вихід). ТН-ЯМР (диметилсульфоксид-дв) 5 1,60 (м, 4Н, 2хСН»), 2,40, 2,44 (2хс, БН, 2хСНУ»), 2,50 (м, 4Н, 2хСН»), 2,57, 3,35 (2хм, 4Н, 2хСН»), 7,53, 7,70, 7,73, 7,76 (дхм, 4Н, ароматика і вініл), 10,88 (с, ЛН, СОМН), 13,67 (с, 1Н, пірол МН). МС т/л 396 |М 1 |.

Приклад 130 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-піролідин-1-ілетил)амід 5-Хлор-1,3-дигідроіндол-2-он конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти (2-піролідин-1-ілетил)іамідом одержуючи вказаний в заголовку продукт.

МСЯХІАТ 413 |М 1).

Приклад 131 с 2,4-Диметил-5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-1Н-пірол-З-карбонової кислоти Ге) (2-диметиламіноетил)амід 1,3-Дигідроіндол-2-он конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти (2-диметиламіноетил)амідом одержуючи вказаний в заголовку продукт. зо ТН ЯМР (400МГгЦц, ДМСО-йв) 5 13,63 (с, ІН, МН), 10,90 (с, 1Н, МН), 7,78 (д, У-7,8ГЦ., 1Н), 7,63 (с, 1Н с

Н-вініл), 7,48 (т, 1Н, МН), 7,13 (дт, 1Н), 6,98 (дт, 1Н), 6,88 (д, У-7,7Гц., 1Н), 3,31 (к, У-6,6Гц., 2), 2,43 (с, ЗН, Ф

СНУ), 2,40 (с, ЗН, СН»), 2,38 (т, У-6,6Гц., 2Н), 2,19 (с, 6Н, Щ(СНоСН»У)») о

МСХ1АТЗ53|М 11.

Приклад 132 в. 5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти ї- (2-диметиламіноетил)амід 5-Фтор-1,3-дигідроіндол-2-он конденсували Кк! 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти (2-диметиламіноетил)амідом одержуючи вказаний в заголовку продукт. "ІН ЯМР (400МГЦц, ДМСО-ав) 5 13,68 (с, 1Н, МН), 10,90 (с, 1Н, МН), 7,76 (дд, уУ-2,4 5 94Гц., 1Н), 7,71 (с, ІН « 40. Н-вініл), 7,51 (Т, 1Н, МН), 6,93 (м, 1Н), 6,84 (дд, 4-4,6 8: 8,4Гц., 1Н), 3,31 (к, У-6,6Гц., 2Н), 2,43 (с, ЗН, СНа), 2,41. - с (с, ЗН, СНУ), 2,38 (т, У-6,6Гц., 2Н), 2,19 (с, 6БН, МІСНЬСНІ)») в МСЯХІАТ 371 |М 7-11. є» Приклад 193 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-етиламіноетил)амід -і 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-етиламіноетил)амід (99г), етанол (40Омл), -1 5-фтор-2-оксиіндол (З32г) і піролідин (1,5г) кип'ятили протягом З годин при перемішуванні. Суміш охолоджували до кімнатної температури і тверду речовину збирали за допомогою вакуумного фільтрування. Тверду речовину (ав) перемішували в етанолі при 602С, охолоджували до кімнатної температури і збирали за допомогою вакуумного о 20 фільтрування. Продукт сушили у вакуумі одержуючи 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти г» (2-етиламіноетил)амід (75г, 9590 вихід). ТН-ЯМР (диметилсульфоксид-дв) 6 1,03 (т, ЗН, СН»), 2,42, 2,44 (2хс, 6Н, 2хСНу»), 2,56 (к, 2Н, СН»), 2,70, 3,30 (2хт, 4Н, 2хСН»), 6,85, 6,92, 7,58, 7,72, 7,716 (б5хм, ЗН, ароматика, вініл і

СОМН), 10,90 (ш с, 1Н, СОМН), 13,65 (ш с, 1Н, пірол МН). МС т/: 369 |М-1).

Приклад 195

ГФ) 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти т (2-діетил-М-оксоаміноетил)амід

Спосіб А: 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 60 (2-діетиламіноетил)амід (598мг) і дихлорметан (бОмл) в бані з льодом обробляли З-хлорпербензойною кислотою (33бмг) і суміш перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Розчинник випарювали на роторі і залишок суспендували в метанолі (20мл). Додавали воду (2О0мл), що містить гідроксид натрію (24Омг), і суміш перемішували протягом однієї години. Осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали бмл води і сушили у вакуумі одержуючи бо 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти

(2-діетил-М-оксоаміноетил)амід (51Омг, 8295 вихід) як оранжеву тверду речовину. "Н-ЯМР (ДМСО-айв) 5 13,72 (ш с, 1Н, МН), 11,02 (ш с, ІН, СОМН), 9,81 (ш с, ІН, СОМН), 7,75 (дд, 1Н, ароматика), 7,70 (с, 1Н, ароматика), 6,93 (тд, 1Н, ароматика), 6,84 (м, 1Н, ароматика), 3,63 (м, 2Н, СН»), 3,29 (м, 2Н, СН»), 3,14 (м, 4Н, 2хСН»), 2,47 (с, 1Н, СН»), 2,45 (с, ЗН, СН»), 1,64 (т, 6Н, 2хСНз). МС т/з: 415 |М'1).

Спосіб Б: 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (10г) суспендували в дихлорметані (10Омл) і охолоджували в бані з льодом. При перемішуванні додавали З-хлорпероксибензойну кислоту (13,1г) і суміш залишали нагріватись до кімнатної температури і потім перемішували протягом ночі. 70 Суміш випарювали на роторі до суха і хроматографували на колонці з силікагелем використовуючи як елюент 2096 метанол в дихлорметан. Фракції, що містили продукт, об'єднували і випарювали на роторі до суха одержуючи 5-форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетил-М-оксоаміноетил)амід (9г, 8395 вихід). 5-Форміл-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетил-М-оксоаміноетил)амід (9г), 5-фтор-1,3-дигідроїндол-2-он (Ог, 8390 вихід) і піролідин ((9г, 8395 вихід (0,1г)) кип'ятили в етанолі (ЗОмл) 75 протягом 4 годин. Суміш охолоджували в бані з льодом і осад збирали за допомогою вакуумного фільтрування і промивали етанолом. Тверду речовину перемішували в етилацетаті (ЗОмл), збирали за допомогою вакуумного фільтрування, промивали етилацетатом і сушили у вакуумі одержуючи 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-діетил-М-оксоаміноетил)амід (10,3г 8095 вихід) як оранжеву тверду речовину. "Н-ЯМР (ДМСО-айв) 5 13,72. (ш с, 1Н, МН), 11,02 (ш с, ІН, СОМН), 9,81 (ш с, 1Н, СОМН), 7,75 (дд, 1Н, ароматика), 7,70 (с, 1Н, ароматика), 6,93 (тд, 1Н, ароматика), 6,84 (м, 1Н, ароматика), 3,63 (м, 2Н, СН»), 3,29 (м, 2Н, СН»), 3,14 (м, 4Н, 2хСН»), 2,47 (с, 1Н, СНУ), 2,45 (с, ЗН, СН»), 1,64 (Т, 6Н, 2хСНз). МС т/2415 (М'-1І.

Приклад 190 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти с 29 І2-(піридин-1-іл)етиліамід. о 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (12Омг,

О,4ммоль) збовтували з ЕОС, НСІ (9бмг, 0,бммоль), безводним 1-гідроксибензтриазолом (б8мг, О,б5ммоль) і 2-(2-аміноетилпіридином, одержаним від АїЇдгісй в безводному ДМФА (Змл) протягом 2-3 днів при кімнатній температурі. Реакційну суміш розводили 1М Мансо»з (1,5мл), потім Змл води. Неочищений осад збирали с фільтруванням, промивали водою, сушили і очищали за допомогою кристалізації або хроматографії одержуючи о 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (2-(піридин-1-іл)етилі|амід. о

Приклад 189 че 5-І5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти

Іг-(піридин-1-іл)етиліамід. -

Використовували методику описану в попередньому прикладі, але замінюючи 5-ІБ-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на 5-(5-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (127мг) « одержуючи 5-(5-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти |2-(піридин-1-іл)етилі амід. но) с Приклад 192 "» 5-І5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти " (2-(піридин-1-іл)етилі|амід.

Використовували методику Прикладу 190 вище, але замінюючи 5-ІБ-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на це. 5-(І5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (145мг) -І одержуючи 5-І5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-(піридин-1-іл)етилі|амід. о Приклад 191 о 20 5-(2-Оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил|-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-(піридин-1-іл)етил|амід їз Використовували методику Прикладу 190 вище, але замінюючи 5-І5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліден-метилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонову кислоту (113мг) одержуючи 59 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)-іліденметилі-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти

Ф! (2-(піридин-1-іл)етилі|амід.

Приклад 203 о 5-(5-Ціано-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-(піридин-1-іл)етил|амід 60 Використовували методику Приклад 190 вище, але замінюючи 5-ІБ-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на 5-(5-ціано-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(372)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (123Змг) одержуючи 5-(5-ціано-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(372)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-(піридин-1-іл)етилі|амід. бо Приклади 142,186,187,188 і 204

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин на 1-(2-аміноетил)піролідин, одержували від Аїдгіспй Спетіса! Сотрапу, Іпс., одержуючи бажані сполуки.

Приклади 143-147

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин на 1-(2-аміноетил)імідазолін-2-он (одержували нагріванням диметилкарбонату з біс2-аміноетил)аміном (2 еквіваленти) в закритій колбі при 1502 протягом ЗОхв., слідуючи методиці (описаній в патенті О5 2,613,212 (1950), Копт 4 Нааз Со| Неочищений продукт очищали силікагелі використовуючи як елюент суміш хлороформ-метанол-водний аміак 80:25:2) одержуючи бажані сполуки. 70 Приклади 148-151 і 184

Використовували методики Приклади 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин на /4-(2-аміноетил)піперазин-1-оцтової кислоти етиловий оестер (одержували наступним чином:

Піперазин-1-оцтової кислоти етиловий естер (11,22г) обробляли йодацетонітрилом (5,О0мл) в присутності карбонату калію (6,9г) в етилацетаті (2б6О0мл) при 02С. Після завершення додавання йодацетонітрилу (45хв.), 75 реакційну суміш перемішували при кімнатній температурі проятгом 11 годин. Реакційна суміш фільтрували і фільтрати випарювали. Залишок гідрували в присутності бориду кобальту (одержували з СоСі»о і боргідриду натрію) при кімнатній температурі при 50 псі протягом 2 днів в етанолі. Фільтрували, випарювали і хроматографічно очищали використовуючи як елюент суміш хлороформ-метанол-водний аміак 80:25:22 одержуючи бажаний амін (3,306г) як блідо-жовте масло) одержуючи бажані сполуки.

Приклад 152-153

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин на 2-(2-аміноетиламіно))ацетонітрил (одержували наступним чином: Розчин йодацетонітрилу (ббммоль) в етиловому спирті (8Омл) додавали до розчину етилендіаміну (15Омл) в етиловому спирті (бОмл) при ОС протягом ЗО хвилин. Перемішували ще протягом 1г при 0 С, потім при кімнатній температурі протягом 14 Ге годин. Додавали 5бммоль карбонату калію, перемішували протягом ЗО хвилин, фільтрували і фільтрат (5) концентрували при кімнатній температурі. Залишок очищали силікагелі використовуючи як елюент суміш хлороформ-метанол-водний аміак 80:15:1,5 одержуючи 2-Ї(2-аміноетиламіно))ацетонітрил (3,550г), який егацно використовували) одержуючи бажані сполуки.

Приклад 154-158 с

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин о на 1-(З-амінопропіл)азепін-2-он (одержували згідно методиці Ктгапй А.) Спет. ос. РегКкіп Тгапв. 1, б, 1999, 705-14, за винятком того, що гідроліз ОВО проводили чітко при 14592 в присутності гідроксиду літію (1г, бмл «(2

ОВ, 2мл води, 42Омг гідрату гідроксиду літію). Очищали неочищений продукт на силікагелі використовуючи як їч- елюент суміш хлороформ-метанол-водний аміак 80:40:4 одержуючи 1-(3-амінопропіл)азепін-2-он (4,973г, 8790 вихід). ї-

Приклади 133-135,159 і 200

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але з'амінюючи 2-(2-амінсоетил)піридин на М-ацетилетилендіамін, (одержували нагріваючи суміш етилацетату з етилендіаміном (1,5 еквівалентів) при « 1602 протягом іг в закритій колбі. Вакуумною перегонкою одержували бажаний продукт з 5695 виходом. М-ацетилетилендіамін також можна одержати від Аїагіси. о, с Приклади 146-140 "» Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин " на 1-(3-амінопропіл)тетрагідропіримідин-2-он (одержували тим же самим шляхом, що і 1-(3-амінопропіл)азепін-2-он згідно з методикою Кгапй А.: 9. Спет. Бос. РегКіп Тгапв. 1, 6, 1999, 705-14: Впепу, 1,3,4,6,7,8-гексагідро-2Н-піримідо|1,2-а|піримідин (4,939г), гідрат гідроксиду літію (918мг) і 2мл - вода нагрівали без розчинника в закритій колбі при 1459 протягом 1г. Неочищений продукт очищали на колонці -і з силікагелем з хлороформ-метанол-водний аміак 80:40:4 одержуючи чистий амін (5,265г, 9490 вихід).

Приклади 141,160-162 і 185 о Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин о 20 на 1-(2-аміноетил)піперазин-2-он (одержували наступним чином: Чистий трет-бутилдифенілсилілхлорид (25мл, 97,7ммоль) додавали краплями до розчину ОВИ (19,5мл, 130ммоль) і біс(2-аміноетил)аміну (4,32мл, 4О0ммоль) в г» безводному диметилацетаміді (8Омл) при кімнатній температурі з охолодженим на водяній бані протягом 5 хвилин. Суміш перемішували протягом 5 годин. Додавали чистий етиловий естер бромоцтової кислоти (6,7Омл, бОоммоль) охолоджуючи до кімнатної температури. Реакцію перемішували протягом 25 хвилин, потім випарювали 22 при високому вакуумі. Залишок розчиняли в метанолі (200мл), КНСО з (10г)і додавали КЕ (12г, 200ммоль) і

ГФ) суміш перемішували при 602 протягом 5 годин. Додавали 10г Ма 2СО3, перемішували протягом 10 хвилин, юю охолоджували і фільтрували. Фільтрати випарювали. Залишок екстрагували гексанами (2х250Омл).

Гексаннерзчинний матеріал розчиняли в етанолі (бОмл), фільтрували і випарювали. Залишок очищали на колонці з силікагелем в хлороформ-метанол-водний аміак 80:40:4 одержуючи чистий амін (4,245г, 74905 вихід). 60 Приклади 163-167

Використовували методики Прикладів 190, 189, 191, 192, і 203 вище, але замінюючи 2-(2-амінсетил)піридин на 3-(2-аміноетил)аміно|пропіонітрил (одержували з етилендіаміну (15Оммоль) і акрилонітрилу (ХОммоль) в ТГФ при кімнатній температурі, |як описано Ізгає!ї, М. еї аІ: У. Мей Спет. 7, 1964, 710-164), одержуючи бажаний амін (4,294Гг). бо Приклад 168

5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-(4-метилпіперазин-1-іл)етил|амід

До перемішуваної жовтої неочищеної суміші 8-00 5-15-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(327)-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (90мг), ДМФА (О,вмл) і ТЕА (0,084мл) в 20мл реакцій колбі додавали ВОР реагент (199мг). Суміш ставала прозорою через 5хв.

Додавали 2-(4-Метилпіперазин-1-іл)етиламін (5імг) до прозорої суміші. Одержаний розчин перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. З реакційної системи випадав жовтий осад. Тонкошарова хроматографія (1095 метанолу в метиленхлориді) показала, що всі вихідні матеріали перетворились у продукт. Тверду речовину 70 виділяли за допомогою вакуумного фільтрування і промивали один раз етанолом (Імл). Тверду речовину сонікували в діетиловому етері (2мл) протягом 20хв. і збирали за допомогою вакуумного фільтрування. Після висушування у вакуумі одержували 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід (7Умг, 6290 вихід).

Т"Н ЯМР (ДМСО-дь) 5 2,13 (с, ЗН, СН»), 2,40, 2,42 (2хс, БН, 2хСН»а), 2,41 (м, 2Н, СН»), 2,47 (м, 8Н, 4хСН»), 3,30 (м, 2Н, СН»), 6,82 (дд, 4-45, 8,7Гц., 1Н), 6,91 (тд, У-2,4,3)-8,8Гц., 1Н), 7,43 (т, 9-5,6ГЦ., 1.Н), 7,70 (с, 1Н), 7,75 (дд, 9У-2,8, 9,6ГЦ., 1Н) (ароматика і вініл), 10,88 (с, 1Н, СОМН), 13,67 (с, ІН, МН). РХ-МС (п/з) 424 4 (М-1).

Приклад 169 5-(5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1-Н-пірол-З-карбонової кислоти (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід

Використовували методику Прикладу 168 вище, але замінюючи 5-ІБ-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на 5-(5-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту (95мг, 0О,Зммоль) «М одержуючи 5-(5-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти о (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід (7бмг, 5890).

Т"Н ЯМР (ДМСО-дь) 5 2,13 (с, ЗН, СН»), 2,41, 2,42 (2хс, БН, 2хСН»), 2,42 (м, 2Н, СН»), 2,48 (м, 8Н, 4хСН»), 3,30 (м, 2Н, СН»), 6,84 (д, 9У-8,0ГцЦ., 1), 7,11 (дд, 9У-2,0, 8,0Гц.1Н), 7,44 (т, 9У-5,6ГЦ., 1Н), 7,76 (с, 1Н), 7,97 (д, У-2,0Гц., 1Н) (ароматика і вініл), 10,98 (с, 1Н, СОМН), 13,62 (с, 1Н, МН). с

РХ-МС (ті/г) 440,2 (М-1). о

Приклад 170 5-(5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти о (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід ч-

Використовували методику описану в Прикладі 168, але замінюючи

Зо 5-(Б-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту на ї- 5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту одержуючи 5-(5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід (ЗОмг, 5495) одержували З0ШО11670 (54мг, 0,15мМмоль). « "ІН ЯМР (ДМСО-дь) 5 2,14 (с, ЗН, СНа), 2,41, 2,42 (2хс, 6Н, 2хСНуа), 2,42 (м, 2Н, СН»), 2,48 (м, 8Н, 4хСН»), - 70 3,31 (м, 2Н, СНо), 6,80 (д, 9У-8,0ГЦ., 1 Н), 7,23 (дд, У-2,0, 8,0ГцЦ., 1Н), 7,44 (Т, 9У-5,6ГЦ., 1), 7,76 (с, с 1Н), 8,09 (д, У-2,0ГцЦ., 1Н) (ароматика і вініл), 10,99 (с, ІН, СОМН), 13,61 (с, 1Н, МН). з РХ-МС (т/з2) 486,6 (М).

Приклад 172 5-(2-Оксо-1,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти -1 395 (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід

Використовували методику описану в Прикладі 168 вище, але замінюючи - І 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту 5Ц0014900 на 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонову кислоту одержуючи 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (ав) 50 (4-метилпіперазин-1-ілетил)амід, (1Збмг, 84965) одержували (112,8мг, О0,4ммоль).

КЗ "Н-ЯМР (ДМСО-дь) 5 2,13 (с, ЗН, СН»), 2,39, 2,42 (2хс, БН, 2хСН»у), 2,42 (м, 2Н, СН»), 2,48 (м, 8Н, 4хСН»), 3,30 (т, 2Н, СНО), 6,86 (д, 9У-8,0Гц., 1), 6,96 (т, 9У-7,4ГЦ., 1), 7,10 (т, 9У-7,8Гц., 1), 7,41 (т, У-554ГЦц., 1Н), 7,62 (с, 1Н), 7,76 (д, 9-7,6Гц., 1Н) (ароматика і вініл), 10,88 (с, ІН, СОМН), 13,61 (с, 1Н, МН).

РХ-МС (т/з2) 406,6 (М-1).

Приклад 171 (Ф; 5-(2-Оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил|-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти ко (2-(3,5-диметилпіперазин-1 -іл)етил)амід

До перемішуваної неочищеної суміші во 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32-)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (112,8мг, 0,4ммоль),

ДМФА (0,5мл) і триетиламіну (0,111мл) в 20мл реакційній колбі, додавали ВОР реагент (265мг). Суміш ставала прозорою через бхв. До прозорої суміші додавали 2-(2,6-диметилпіперазин-1-іл)оетиламін (68,бмг) |дивіться,

Таріа, Ї. Аіопзо-Сігез, Р. Іоре2-Тидапса, К. Моздцега, Ї. І ареада, А. Іппегагіу, А. Ода|ев5, У. Мед. Спет,., 1999, 42, 2870-2880). Одержаний розчин перемішували при кімнатній температурі протягом ночі. Тонкошарова 65 хроматографія (1095 метанолу в метиленхлориді) показала, що весь вихідний матеріал перетворився у продукт.

Реакційну суміш випарювали до суха і потім очищали за допомогою флеш хроматографії

(СНоСІЯ/СнНЗОоН-20/1-15/1)) після чого перекристалізували одержуючи 5-(2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)-іліденметиліІ-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)етил)амід (8Змг, 5090 вихід). "ІН ЯМР (ДМСО-адйв) 61,15, 1,16 (2хс, 6Н, 2хСН»), 1,95 (т, 9-11,6Гц., 2Н, СН»), 2,41,2,47 (2хс, 6Н, 2хСНа), 2,50 (м, 2Н, СНО), 3,03 (д, 9У-10ГцЦ., 2Н), 3,19 (м, 2Н), 3,30 (м, 2Н, СНО), 6,86 (д, У-8,0Гц., 1Н), 6,97 (т, У-7,2Гц., 13, 7,11 (т, 9У-7,8ГцЦ., 1), 7,48 (т, 9-56ГЦ., 1), 7,61 (с, 1), 7,75 (д, 9У-7,6ГЦ., 1Н) (ароматика і вініл), 10,88 (с, ІН, СОМН), 13,62 (с, 1Н, МН).

РХ-МС (ті/з2) 422,2 (М--1).

Приклад 173 5-І5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)етил)амід

Використовуючи методику описану в Прикладі 168 вище одержували бажану сполуку (бОмг, 0,2ммоль). "ІН ЯМР (ДМСО-дйв) 5 0,891, 0,907 (2хс, БН, 2хСНа), 1,49 (т, 9-10,4Гц., 2Н), 2,40, 2,42 (2хс, БН, 2хСНу), 2,41 79 (м, 2Н, СН»), 2,74 (м, 4Н), 3,30 (м, 2Н), 6,82 (дд, 9-45, 8,7Гц., 1Н), 6,90 (тд, 2-24, 3)-8,4ГЦ., 1Н), 7,42 (Т, 5,6ГЦ., 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,74 (дд, У-4,6, 8,4Гц., 1Н) (ароматика і вініл), 10,88 (с, ІН, СОМН), 13,65 (с, 1Н, МН).

РХ-МС (т/з2) 438,4 (М-1).

Приклад 174 5-І5-Хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)етил)амід

Використовуючи методику Прикладу 171 вище одержували бажану сполуку (31,2мг, 3490) з 5-(Б-хлор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (бЗмг, О0,2мМмоль). "ІН ЯМР (ДМСО-д) 5 1,15, 1,16 (2хс, 6Н, 2хСН»а), 1,95 (т, У-11,6Гц., 2Н, СН»), 2,40,2,42 (2хс, ВН, 2хСНа), 2,50 (м, 2Н, СНо), 3,03 (д, 9У-11,2ГцЦ., 2Н), 3,19 (м, 2Н), 3,30 (м, 2Н, СН»), 6,85 (д, У-84ГцЦ., 1Н), 7,11 (дд, сч 29 у-2,0, 8,0Гц., 1), 7,52 (Т, 9У-5,6ГЦ., 1), 7,76 (с, 1Н), 7,97 (д, 9-2,0ГцЦ., 1Н) (ароматика і вінілу, 10,99. (У (с, ЯН, СОМН), 13,63 (с, 1Н, МН).

РХ-МС (т/з2) 456,2 (М--1)

Приклад 175 5-І5-Бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(32)-іліденметил/|-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти см (2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)етил)амід (ав)

Використовуючи методику описану в Прикладі 171 одержували бажану сполуку (4Омг, 4095) з 5-І5-бром-2-оксо-1,2-дигідроіндол-(37)-іліденметилІ-2,4-диметил-1Н-пірол-З3-карбонової кислоти (74мг, 0,2мМмоль). о "ІН ЯМР (ДМСО-д) 5 1,15, 1,16 (2хс, 6Н, 2хСН»У), 1,95 (т, У-11,6Гц., 2Н, СН»), 2,40, 2,42 (2хс, ВН, 2хСНа), ї- 2,50 (м, 2Н, СНо), 3,03 (д, 9У-10,4ГцЦ., 2Н), 3,19 (м, 2Н), 3,30 (м, 2Н, СН»), 6,81 (д, У-84ГцЦ., 1Н), 7,24 (дд, чн -2,0, 8,4ГцЦ., 1Н), 7,51 (т, У-56ГЦ., 1), 7,76 (с, 1Н), 8,10 (д, 9У-2,0ГЦ., 1Н) (ароматика і вініл), 10,99 (с, ЯН, СОМН), 13,62 (с, 1Н, МН).

РХ-МС (т/з2) 498,4 (М-1).

Приклад 205 « 20 (32)-3-(3,5-диметил-1Н-пірол-2-іл)-метилідені|-1-(1-(4-метилпіперазиніл)метил|д|-1,3-дигідро-2Н-індол-2-он - с М-Метилпіперазин (10г, 100ммоль) додавали до розчину, що перемішується, водного формальдегіду (10г

З890 розчину, ТООммоль) і 3-(3,5-диметил-1Н-пірол-2-ілметиліден)-1,3-дигідроіндол-2-ону (2,38г, 1Оммоль) в :з» метанолі (10О0мл). Розчин нагрівали при 6б0еС протягом іг, концентрували до меншого об'єму і осад відфільтровували, промивали метанолом і сушили одержуючи 2,38г вказаної в заголовку сполуки, Тпл. 160-1642С. ВЕРХ БІ 4,72хв. "Н ЯМР (СОСІв) 5 2,26 (с, ЗН), 2,33 (с, ЗН), 2,38 (с, ЗН), 2,43 (ш с, 4Н), 2,70 -і (ш с, 4Н), 4,59 (с, 2Н), 5,96 (д, 1Н), 7,02-7,08 (м, 2Н), 7,15 (дд, 71Н), 7,38 (с, 1Н), 7,48 (дд, 1Н) і 13,0 - (ш с, 1Н). Елементний аналіз розраховано для С24Нов6М.О: С, 71,97; Н, 7,48; М, 15,99. Знайдено: С, 71,75; Н, 7,46; М, 15,87. (ав) (32)-3-(3,5-диметил-1Н-пірол-2-іл)метилідені-1-(1--4-метилпіперазиніл)метил/)|-1,3-дигідро-2Н-індол-2-он о 50 перетворювали у дигідрохлоридну сіль.

Приклад 206 що) Синтез (32)-3-(3,5-диметил-1Н-пірол-2-іл)-метилідені|-1-(1-піролідинілметил)-1,3-дигідро-2Н-індол-2-ону

Піролідин (450мг, б,Зммоль) додавали до розчину, що перемішується, водного формальдегіду (500мг 3890 розчину, б Оммоль) і 3-(3,5-диметил-1Н-пірол-2-ілметиліден)-1,3-дигідроіндол-2-ону, (90О0мг, З, ммоль) в метанолі (5Омл). Через 15хв., розчин охолоджували до 02С і осад відфільтровували, промивали водою і сушили

ГФ! одержуючи 1,08г вказаної в заголовку сполуки, Тпл. 129-1322С. ВЕРХ ВІ 4,87 хв. "Н ЯМР ((СО4)5501 5 1,65 (м, 4Н), 2,32 (с, ЗН), 2,34 (с, ЗН), 2,62 (м, 4Н), 4,72 (с, 2Н) 6,07 (д, 1Н), 7,00 (м, 1Н), 7,15 (м, 2Н), 7,61 о (с, 1), 7,76 (д, 2Н) ї 13,1 (ш с, 1Н). Елементний аналіз розраховано для С 20НозМаО: С, 74,74; Н, 7,21; М, 13,07. Знайдено: С, 74,61; Н, 7,25; М, 13,03. 60 Біологічні приклади Інгібітори протеїнкінази формули (1):

Наступні дослідження можуть бути використаня для визначення ступеня активності і ефективності сполук

Формули (І) по відношенню до однієї або більшої кількості протеїнкіназ (тут далі ПК). Подібні дослідження можуть бути використані для тих же самих ліній будь-яких ПК використовуючи методики добре відомі в цій галузі.

А. Методики дослідження. бо Деякі дослідження описані тут проводять в форматі ЕГІЗА (твердофазний імуносорбентний аналіз Сендвіча)

ІМоїІег, еї аїЇ, 1980, "Епгуте-ї іпкей Іттипозогрепі Авззау," Мапиа! ої Сіїпісаї ІттипоІоду, 24 ейд., Козе апа

Епедтап, Ат. ос. ОЇ МісгобіоІоду, УУазпіпдіоп, О.С., рр.359-371|Ї. Загальна методика є наступною: сполуку формули (І) вводять в клітини, що експресують тестовану кіназу, або природну, або рекомбінантну, для вибраного проміжок часу після якого, якщо тестована кіназа є рецептором, додають ліганд, що відомий як такий що активує рецептор. Клітини лізують і лізат переносять до лунок планшету ЕІ ІЗА, що попередньо був оброблений специфічним антитілом, що розпізнає субстрат реакції ензиматичного фосфорилювання.

Несубстратні компоненти лізату клітин вимивають і визначають кількість фосфорилювання субстрату за допомогою антитіла, що специфічно розпізнає фосфотирозин, порівняно з контрольними клітинами, що не 7/0 контактували з сполукою, що тестується.

Представлені переважні протоколи проведення експериментів ЕГІЗА для специфічних ПК приведені нижче.

Тим не менше, адаптування цих протоколів для визначення активності сполук по відношенню до інших рецепторів протеїнкіназ (КТК), також як і цитоплазмів тірозинкіназ (СТК) і серинтреонін тірозинкіназ (ЗТК),

ЗНаходиться в межах знань середнього спеціаліста в цій галузі. Інші дослідження описані тут вимірюють 7/5 Кількість продукованої ДНК у відповідь на активування кінази, що тестується, яка зазвичай вимірюється проліферативною відповіддю. Загальна методика цього дослідження є наступною: сполуку вводять в клітини, що експресують кіназу, що тестується, або природню, або рекомбінантну, для вибраного проміжку часу після якого, якщо тестована кіназа є рецептором, додають ліганд, що відомий як такий що активує рецептор. Після інкубування, принаймні, протягом ночі, додають реагент, що мітить ДНК, такий як 5-бромдеоксиуридин (Вгау) 2о або НЗ-тімидин. Визначають кількість міченої ДНК або з кількості анти-ВгаО антитіла або вимірюючи радіоактивність і порівнюють з контрольними клітинами, що не контактують з сполукою, що тестується.

О5Т-РК-1 БЮДОСЛІДЖЕННЯ

Це дослідження визначає активність тірозинкінази З51-РІК1 на полі(діюуг) пептидах.

Матеріали і Реагенти: Га 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Сотіпда (Согпіпд Садаіюд Мо.5805-96). 2. полі(діи Луг) 4:71, ліофілізат (Зідта Сайаіод ЯРО275). і9)

З. Одержували полі(діюУуг(рЕУ) покриті планшети для дослідження: Покриття 2мгк/лунку полі(дійуУгрРЕУ) в 100мкл СЗФ, витримують при кімнатній температурі протягом 2 годин або при 42 протягом ночі. Лунки планшетів накривають для попередження випарювання. с 4. СЗФ буфер: для т1л, суміш 0,2г КНоРО,, 1,15г Ма»НРО,, 0,2г КСІ ії г Масі в приблизно 900мл ДНО. Коли всі реагенти розчинялись, Доводять рН до 7,2 використовуючи НСІ. Доводять загальний об'єм до 1л о використовуючи ДНО. ав) 5. СЗФТ Буфер: до Тл СЗФ Буферу, додають 1,0мл Тмееп-20. 6. ТВВ-Блокувальний Буфер: для Тл, суміш 1,21г ТКІ5, 8,77г Масі, їмл ТУМЕЕМ-20 в приблизно 900мл ДНО. т Доводять рН до 7,2 використовуючи НС. Додають 10г БСА, перемішують для розчинення. Доводять загальний че об'єм до 1л використовуючи ДНО. Фільтрують для видалення осаду. 7. 190 БСА в СЗФ: Одержують 1х обробкою розчину, додають 10г БСА до приблизно 990мл СЗФ буферу, перемішують для розчинення. Доводять загальний об'єм до 1л використовуючи СЗФ буфер, фільтрують для « видалення осаду. 8. 50мММ Нерез рн7,5. - с 9. 51-РІК1са виділяли з 519 рекомбінантної трансформації бациловірусу (ЗОСЕМ, Іпс.). ц 10. 4965 ДМСО в дноо. "» 11. /0ММАТФвВДН-О. 12.4а0ММ МпсІ» 13. Буфер для розведення кінази (БРК): суміш 1Омл Нерез (рН7,5), їмл 5М Масі, 40мкл 100 мМ ортованадату -І натрію і О,4мл 5905 БСА в ДНО з 88,5бмл дно. 14. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМС, Арріїей Зсіепійіс Саїаіюд ЖА5-72092 ї 15. ЕДТА: суміш 14,12г етилендіамінтетраоцтової кислоти (ЕДТА) до приблизно 7Омл дНоО. Додають ТОМ о Маон до розчинення ЕДТА. Доводять рН до 8,0. Доводять загальний об'єм до 100мл використовуючи дно. о 50 16. 12 Буфер для розведення антитіла: суміш 1Омл 595 БСА в СЗФ буфері з 89,5мл ТВ5Т. 17. Антифосфотирозин моноклональне антитіло кон'юговане з пероксидазою хріну (РМ99 НЕР, Запіа Стги: що) Віогесп). 18. 2,2'-Азинобіс(З-етилбензтіазолін-б-сульфонової кислоти (АВТ5, Мозз, Саї. Мо. АВТ). 19. 1096505.

Методика: о 1. Наносять на 96-луночні планшети ЕГІЗА Согпіпда 2мкг полігєУ пептиду в стерильному СЗФ як описано на стадії З розділу Матеріали і Реагенти. іме) 2. Видаляють незв'язану рідину з лунок шляхом перевертання планшету. Промивають один раз ТВ5Т.

Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини. 60 3. Додають 100мкл 1956 БСА в СЗФ до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, протягом 1 г при кімнатній температурі. 4. Повторюють стадію 2. 5. Просочують лунки 5Х0ОММ НЕРЕЗ (рН7,5) (15Омкл/лунку). 6. Розводять сполуку, що тестується, дН»О/496 ДМСО до 4 разів бажаної кінцевої концентрації дослідження в 65 96б-луночних поліпропіленових планшетах. 7. Додають 25мкл розведеної сполуки, що тестується, до планшету ЕГІЗА. В контрольні лунки поміщають

25мкл дНьО/496 ДМСО. 8. Додають 25мкл 40мМ Мпсі» з 4ХАТФ (2 мкМ) до кожної лунки. 9. Додають 25мкл 0,5М ЕДТА до негативних контрольних лунок. 10. Розводять О51Т-РІК1 до 0,0О05мкг (Знг//лунку використовуючи КОВ. 11. Додають 5Омкл розведеного ферменту до кожної лунки. 12. Інкубують, при збовтуванні, протягом 15 хвилин при кімнатній температурі. 13. Зупиняють реакцію додаючи 5Омкл 250мММ ЕДТА (рнваг,о0). 14. Промивають Зх використовуючи ТВ5Т і хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення 70 надлишку рідини. 15. Додають 10Омкл на лунку анти-фосфотирозин НЕР кон'югату, 1:5000 розведення в антитілі розведеному буфером. Інкубують, при збовтуванні, протягом 9Охв. при кімнатній температурі. 16. Промивають як на стадії 14. 17. Додають 10О0мкл АВТ5 розчину кімнатної температури до кожної лунки. 18. Інкубують, при збовтуванні, протягом 10-15 хвилин. Видаляють будь-які бульбашки. 19. Зупиняють реакцію додаючи 20мкл 1095 505 до кожної лунки. 20. ЗНімають результати на зчитувальному пристрої ЕГІЗА ОБупагесп МК7000 з тестувальним фільтром при

Аа4ЛОНМ їі фільтром посилання при б6ЗОНМ.

РУК2 БІОДОСЛІДЖЕННЯ

Це дослідження використовують для вимірювання іп мійго активності кінази НА епітопу-міченого повнодовжинним рука (РІ.рук2-НА) в дослідженні ЕГІЗА.

Матеріали і Реагенти: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Сопіпа. 2. 12СА5 моноклональне анти-НА антитіло (ФОСЕМ, Іпс.) Га 3. СЗФ (салін забуферений фосфатом Дульбекко (бібсо Сайаіод 2450-1300ЕВ) 4. ТВ5Т Буфер: для 1л, суміш 8,766бг Масі, 6,057г ТКІЗ і Тмл ої 0,195 Ттйоп Х-100 в приблизно 900мл дно. і9)

Доводять рН до 7,2, доводять об'єм до 1л. 5. Блокувальний Буфер: для Тл, суміш 100г 1095 БСА, 12,1г 100мММ ТКІБ5, 58,44г 1М Масі ї 1Омл ої 195

ТУМЕЕМ-20. Ге 6. ЕУрук2-НА з лізатів 519 клітин (ЗОСЕМ, Іпс.). 7. 496 ДМСО в МіПОце НО. о 8. 10мММ АТФ в дно. ав! 9. 1М Мпеі». 10. 1М МоСі». - 11. 1М Дитіотреїтол (ДТ). ч- 12. 10х буфер фосфорилювання кінази: суміш 5,Омл 1М Нерез (рН7,5), О0,2мл 1М МпсІі», 1,0мл 1М Масі», 1,0мл 10905 Тпйоп Х-100 в 2,8мл дНоО. Тільки перед використанням додають 0,1мл 1М ДТТ. 13. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМ. « 14. БО0ММ ЕДТА в дно. 15. Буфер для розведення антитіла: для 100мл, їмл 5906 БСА/СЗФ і Тмл 1095 Тмееп-20 в 8в8мл ТВ5. - с 16. НЕР-кон'юговані анти-Ріуг РУ99), Запіа Стих Віоїесп Саї. Мо. 5С-7020. ц 17. АВТ5, Мозгв, Саї. Мо. АВЗТ-2000. ,» 18. 1095505. Методика: 1. Наносили на 96 луночні планшети ЕГІЗА Согпіпда 0,5мкг на лунку 12СА5 анти- НА антитіла в 100мкл СЗФ.

Зберігають протягом ночі при 490. -і 2. Видаляють незв'язане НА антитіло з лунок шляхом перевертання планшету. Промивають планшет ДН 20.

Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини.

З. Додають 15О0мкл блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, протягом ЗОхв. при («в) кімнатній температурі. о 50 4. Промивають планшет 4х ТВ5-Т. 5. Розводять лізат в СЗФ (1,5мкг лізату/ЛООмкл СЗФ).

ІК) 6. Додають 100Омкл розведеного лізату до кожної лунки. Збовтують при кімнатній температурі протягом 1г 7. Промивають як на стадії 4. 8. Додають 5Омкл 2х буферу кінази до планшету ЕП ІЗА, що містить захоплений рук2-НА. 99 9. Додають 25мкл 400мкМ сполуки, що тестується, в 496 ДМСО до кожної лунки. Для контрольних лунок

ГФ! використовують тільки 495 ДМСО. 10. Додають 25мкл 0,5 М ЕДТА до негатичних контрольних лунок. о 11. Додають 25мкл 20мкМ АТФ до всіх лунок. Інкубують, при збовтуванні, протягом 10 хвилин. 12. Зупиняють реакцію додаючи 25мкл 500мММ ЕДТА (рнеа,0) до всіх лунок. 60 13. Промивають як на стадії 4. 14. Додають 100мкл НКР кон'югованого анти-Ріуг розводеного 1:6000 в антитіло розведене буфером до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, протягом 1г при кімнатній температурі. 15. Промивають планшет Зх ТВ5Т і їх СЗ3Ф. 16. Додають 100мкл АВ5Т розчину до кожної лунки. бо 17. Якщо необхідно, зупиняють реакцію додаючи 20мкл 1095 5О5 до кожної лунки.

18. Зчитують планшет на зчитувальному пристрої ЕГІЗА з тестувальним фільтром при 4Т1ОНМ їі фільтром посилання при 6ЗОНМ.

ЕОЕКТ БІОДОСЛІДЖЕННЯ

Це дослідження використовують для вимірювання іп міїго активності кінази ЕСЕ1-К в дослідженні ЕГ ІЗА.

Матеріали і Реагенти: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Созвзіаг (Соптпіпд СайаІод 3369). 2. Полі(біи-Туг) (Зідта Сайаіод ХРО275). 3. СЗФ (бірсо Сайаіод 2450-1300ЕВ) 70 4. БОММ забуференого розчину Нерез. 5. Блокувальний Буфер (595 БСА/СЗФ). 6. Очищений О5Т-ЕОЕМК1 (З0СЕМ, Іпс.) 7. Буфер для розведення кінази. Суміш 500мкл 1М Нерез (СІВСО), 20мкл 590 БСА/СЗФ, 10мкл 100ММ ортованадату натрію і 5Омкл 5М Масі. 8. 10м МАТФ 9. АТФ/МпСІ» фосфорилювальна суміш: суміш 20мкл АТФ, 400мкл 1М МпсІі» і 9,5бмл дно. 10. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМ (Арріїед Зсіепійс Сайаіод ЯА5-72092). 11. О,5М ЕДТА. 12. 0,0595 ТВЗТ

Додають 500мкл Г/УЕЕМ до 1 літра ТВ5. 13. Поліклональна анти-фосфотирозинова сироватки кроликів (ЗОСЕМ, Іпс.). 14. Козлиний анти-кролячий кон'югат дО пероксидази (Віозоигсе, СаїйаІод ХА! 10404). 15. АВТ5 розчин. 16. АВТ5З/Н2ЬО» розчин. сч

Методика: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Совіаг з мкг на лунку Полі(дій у) в 1ї0Омкл СЗФ. Зберігають протягом ночі і) при 426. 2. Промивають покриті планшети один раз СЗФ.

З. Додають 150мкл 590БСА/СЗФ блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, протягом с г при кімнатній температурі. 4. Промивають планшет 2х СЗФ, потім один раз 5ХОмММ Нерез. Вибивають планшети на паперовий рушник для - видалення надлишку рідини і бульбашок. ав! 5. Додають 25мкл 0,4мМ сполуки, що тестується, в 496 ДМСО або тільки 49565 ДМСО (контролі) до планшету. 6. Розводять очищену З5Т-ЕОЕК1 в кіназі розведеній буфером (5нг кінази/5О0мкл КОВ/лунку). - 7. Додають 5Омкл розведеної кінази до кожної лунки. ч- 8. Для початку реакції кінази додають 25мкл/лунку свіхеодержаного АТФ/Мпи-я (0,4мл 1М МпсіІ», 40мкл 10ММ

АТФ, 9,5бмл дНоо), свіжеодержаний). 9. Це швидка реакція кінази і повинна бути зупинена 25мкл 0,5М ЕДТА за способом подібним до додавання «

АТФ. 10. Промивають планшет 4х свіжим ТВ5Т. - с 11. Одержують антитіло розведене буфером: на 5Омл: суміш бБмл 595 БСА, 250мкл 595 молока і Хомкл 100ММ а ванадату натрію, доводять до кінцевого об'єму 0,0595 ТВ5Т. "» 12. Додають 100мкл на лунку анти-фосфотирозину (1:10000 розведення в АОВ). Інкубують при збовтуванні протягом 1 г при кімнатній температурі. 13. Промивають як на стадії 10. -і 14. Додають 1ООмкл на лунку козлиного анти-кролячого кон'югатк ДС пероксидази Віозоцгсе (1:6000 -1 розведення в АОВ). Інкубують, при збовтуванні протягом 1 г при кімнатній температурі. 15. Промивають як на стадії 10 і потім СЗФ для видалення бульбашок і надлишку ТУ/ЕЕМ. (ав) 16. Додають 100мкл АВТЗ/НьО» розчин до кожної лунки. о 50 17. Інкубують, при збовтуванні, протягом 10-20 хвилин. Видаляють будь-які бульбашки. 18. ЗНімають результати на зчитувальному пристрої ЕГІЗА ЮОупаїеспй МЕК7000: тестувальний фільтр при що) А41ОНМ, фільтрат посилання 6ЗОНМ.

ЕСЕК БІОДОСЛІДЖЕННЯ

Це дослідження використовують для визначення іп міїго активності кінази ЕСЕ1-К в дослідженні ЕГ ІЗА.

Матеріали і Реагенти: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Сопіпада. о 2. ЗОМОІ1 моноклональне анти-ЕСЕК антитіло (ЗОСЕМ, Іпс.). іме) 3. С3Ф 4. ТВ5Т Буфер 60 5. Блокувальний Буфер: для 100мл, суміш 5,0г Сагпайоп Іпвіапі Моп-Таї МКФ з 100мл СЗФ. 6. Лізат А431 клітин (ЗОСЕМ, Іпс.). 7. ТВ5 Буфер: 8. ТВ51096 ДМСО: для Тл, суміш 1,514г ТКІ5, 2,192г Масі ії 25мл ДМСО; доводили до 1 літру загального об'єму дНоо. 6Е 9. АТФ (аденозин-5-трифосфат, з м'язів коняки, Зідта Саї. Мо. А-5394), 1,0ММ розчин в дН»О. Цей реагент повинен одержуватись тільки перед використанням і триматись на льоду.

10. 1,0мММ Мапс». 11. АТФ/МиСІ» фосфорилювальна суміш: одержують 1Омл, суміш ЗОбмкл їмМ АТФ, 500мкл Мписі» і 9,2мл

ДНО. Одержують тільки перед використанням, тримають на льоду. 12. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМС . 13. ЕДТА. 14. Поліклональна анти-фосфотирозинова сироватка кроля (ЗОСЕМ, Іпс.). 15. Козлиний анти-кролячий кон'югат до пероксидази (Віозоигсе Саї. Мо. А 10404). 16. АВТ5. 76 17. 3095 Пероксид водню. 18. АВТ5/НьЬО» 19. 0,2М НОЇ.

Методика: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Соогпіпд з О,5мкг ЗОМО1 в 100мкл СЗФ на лунку, зберігають протягом ночі при 75. 2. 2. Видаляють незв'язане БОМО1 з лунок шляхом перевертання планшету видаляючи рідину. Промивають 1 х дно. Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини.

З. Додають 15О0мкл блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, протягом ЗОхв. при кімнатній температурі. 4. Промивають планшет Зх деіонізованою водою, потім один раз ТВ5Т. Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини і бульбашок. 5. Розводять лізат в СЗФ (7мкг лізат/ЛООмкл СЗФ). 6. Додають 100Омкл розведеного лізату до кожної лунки. Збовтують при кімнатній температурі протягом 1г 7. Промивають планшети як в 4, вище. Ге 8. Додають 120мкл ТВ5 до планшету ЕГІ5А, що містить захоплений ЕСЕК. о 9. Розводять сполуки, що тестується, 1:10 в ТВ5, вносять у лунки 10. Додають 13,5мкл розведеної сполуки, що тестується, до планшету ЕЇ ІЗА. До контрольних лунок, додають 13,5мкл ТВ в 1095 ДМСО. 11. Інкубують, при збовтуванні, протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Ге 12. Додають 15мкл фосфорилюючої суміші до всіх лунок, за винятком лунок негативного контролю. Кінцевий об'єм лунок повинен бути приблизно 150мкл з ЗмкМ АТФ/5ММ Мапсі» кінцевої концентрації в кожній лунці. о

Інкубують при збовтуванні протягом 5 хвилин. («в 13. Зупиняють реакцію додаючи 16,5мкл розчину ЕДТА при збовтуванні. Збовтують ще хв. 14. Промивають 4х деіонізованою водою, 2х ТВ5Т. - 15. Додають 100мкл анти-фосфотирозину (1:3000 розведення в ТВ5Т) на лунку. Інкубують, при збовтуванні, - протягом 30-45хв. при кімнатній температурі. 16. Промивають як в 4, вище. 17. Додають 10О0мкл козлиного анти-кролячого кон'югату ЇД пероксидази Віозоигсе (1:2000 розведення в «

ТВ5Т) до кожної лунки. Інкубують при збовтуванні протягом ЗОхв. при кімнатній температурі. 18. Промивають як в 4, вище. - с 19. Додають 100мкл АВТЗ/Н2О» розчину до кожної лунки. и 20. Інкубують 5-10 хвилин при збовтуванні. Видаляють будь-які бульбашки. є» 21. Якщо необхідно, зупиняють реакцію додаючи 10Омкл 0,2М НС на лунку. 22. Зчитують результати на зчитувальному пристрої ЕГІЗА ЮОупаїесн МЕ7000: тестувальний фільтр при

АЛОНМ, фільтр посилання при 6ЗОНМ. -і РОСЕК БІОДОСЛІДЖЕННЯ -1 Це дослідження використовують для визначення іп міїго активності кінази ЕСЕ1-К в дослідженні ЕГ ІЗА.

Матеріали і Реагенти: («в) 1. 96-луночні планшети ЕГІ5А Согпіпа 2. 28004210 моноклональне анти-РОСЕК антитіло (ЗОСЕМ, Іпс.). («в) 3. С3Ф. що) 4. ТВ5Т Буфер. 5. Блокувальний буфер (такий же самий як для ЕСЕК біодослідження). 6. Лізат клітин МІН ЗТ3, що експресують РОСЕН-В (БОСЕМ, Іпс.). 7. 185 Буфер. о 8. ТВ5-10956ДМСО. 9. АТФ. ко 10. Мпсі». 11. Фосфорилювальна суміш буферу кінази: для 1Омл, суміш 25О0мкл 1М ТКІ5, 200мкл 5М Масі, 100мкл 1М бо /Мапсі» і Бомкл 100мММ Ттйоп Х-100 доводили ДНО до необхідних 10мл. 12. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМ. 13. ЕДТА. 14. Поліклональна анти-фосфотирозинова сироватка кроля (ЗОСЕМ, Іпс.). 15. Козлиний анти-кролячий кон'югат до пероксидази (Віозоигсе Саї. Мо. А 10404). 65 16. АВТ. 17. Пероксид водню, 3095 розчин.

18. АВТ5З/Н2»О». 19. 0,2 М НС. Методика: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Соппіпо з 0,5мкг 2804210 в 100мкл СЗФ на лунку, зберігають протягом ночі при б. 2. Видаляють незв'язане 2804210 з лунок шляхом перевертання планшету для видалення рідини.

Промивають їх дНоО. Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини.

З. Додають 15О0мкл блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують протягом ЗОхв. при кімнатній температурі при збовтуванні. 4. Промивають планшет Зх деіонізованою водою, потім один раз ТВ5Т. Хлопають планшетом над паперовим рушником для видалення надлишку рідини і бульбашок. 5. Розводять лізат в НМТО (1Омкг лізат/ЛООмкл НМТ). 6. Додають 100Омкл розведеного лізату до кожної лунки. Збовтують при кімнатній температурі протягом бохв. 7. Промивають планшети як описано на стадії 4. 8. Додають 8Омкл робочої суміші буферу кінази до планшету ЕЇ ІЗА, що містить захоплений РОСЕК. 9. Розводять сполуки, що тестується, 1:10 в ТВ5 в 9б-луночних поліпропіленових планшетах. 10. Додають 1Омкл розведеної сполуки, що тестується, до планшету ЕГІ5А. До контрольних лунок, додають 10мкл ТВ5:-1095 ДМСО. Інкубують при збовтуванні протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. 11. Додають 1О0мкл АТФ безпосередньо до всіх лунок, за винятком лунки негативного контролю (кінцевий об'єм в лунках повинен бути приблизно 10О0мкл з 20мкМ АТФ в кожній лунці). Інкубують ЗО хвилин при збовтуванні. 12. Зупиняють реакцію додаючи 1Омкл розчину ЕДТА до кожної лунки. 13. Промивають 4х деіонізованою водою, двічі ТВ5Т. 14. Додають 100мкл анти-фосфотирозину (1:3000 розведення в ТВ5Т) на лунку. Інкубують при збовтуванні Ге протягом 30-45хв. при кімнатній температурі. (5) 15. Промивають як на стадії 4. 16. Додають 10О0мкл козлиного анти-кролячого кон'югату ЇД пероксидази Віозоигсе (1:2000 розведення в

ТВ5Т) до кожної лунки. Інкубують при збовтуванні протягом ЗОхв. при кімнатній температурі. 17. Промивають як на стадії 4. с 18. Додають 100мкл розчину АВТ5З/Н2О» до кожної лунки. о 19. Інкубують 10-30 хвилин при збовтуванні. Видаляють будь-які бульбашки. 20. Якщо необхідно зупиняють реакцію додаючи 100мкл 0,2М НСЇ на лунку. (ав) 21. Зчитують результати на зчитувальному пристрої ЕГІЗА Юупаїесп МК7000 з тестувальним фільтром при м

Аа4ЛОНМ їі фільтром посилання при б6ЗОНМ.

ДОСЛІДЖЕННЯ КЛІТИННОЇ НЕБ-2 КІНАЗИ -

Це дослідження використовують для вимірювання активності НЕК-2 кінази в цілих клітинах в форматі ЕГІ5А.

Матеріали і Реагенти: 1. ОМЕМ (СІВСО СаїаІод 411965-092). « 2. Сироватка ембріону теляти (СЕТ, ЗІВСО Саїйаюд й16000-044), ін активували нагріванням у водяній бані протягом ЗОхв. при 5620. - с З. Трипсин (СІВСО Саїаіюод 525200-056). ч 4. | -Глутамін (9ІВСО Саїйаіюд й525030-081) ни 5. НЕРЕЗ (СІВСО Саїа|Іод й15630-080). б. Середовище росту. Суміш 500мл ЮОМЕМ, 55мл інактивованого нагріванням СЕТ, 1Омл НЕРЕЗ і 5,бмл 1|-Глутаміну. -і 7. Виснаженого середовища. Суміш 500мл ОМЕМ, 2,5мл інактивованого нагріванням СЕТ, 1Омл НЕРЕЗ і - 5,5мл І -глутаміну. 8. СЗ3Ф. («в 9. Пласкодонні 96-луночні тканино-культуральні мікротитровані планшети (Согпіпд СайаІод 525860). о 20 10. 15см тканино-культуральні чашки (Согпіпд Са(аіод 2508757 148). 11. 96-луночні планшети ЕГІЗА Согпіпа.

ІК) 12. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМ. 13. картриджі для переносу Совіаг для Тгапзіаг 96 (Совіаг СайаІод 87610). 14. БОМО 1: моноклональне анти-ЕСЕК антитіло (БОСЕМ, Іпс.). 15. ТВ5Т Буфер. о 16. Блокувальний Буфер: 595 Сагпайоп Іпеіапі МіЇК? в СЗФ. 17. ЕСЕ ліганд: ЕСЕ-201, Зпіпко Атегісап, Ухарап. Суспендований порошок в 100мкл 10мММ НСЇ. Додають де 100мкл 10мМ Маон. Додають 80О0мкл СЗФ і переносять до пробірки Еппендорфа, зберігають при -209С до готовності до використання. бо 18. НМТО буфер лізису

Для готового БХНМТО, суміш 23,83г Нерез, 43,83г Масі, 50Омл гліцерин і 1ї0Омл Тітйоп Х-100 і достатня кількість ДНО для одержання 1л розчину.

Для ІхНМТО", суміш 2мл НМТО, 10Омкл 0,1М МазмМО,, 250мкл 0,2М Ма/Р»О; і 10Омкл ЕДТА. 19. ЕДТА. 65 20. МазМО,. Одержують готовий розчин, суміш 1,84г МазмМО, з 9Омл дН.О. Доводять рН до 10. Кип'ятять в мікрохвильовій печі протягом однієї години (розчин стає прозорим). Охолоджують до кімнатної температури.

Доводять рН до 10, повторюють цикл нагрівання/охолодження до рН10. 21. 200мМ Ма; Р»О». 22. Поліклональна антисироватка кролика специфічна до фосфотирозину (анти-Ріуг антитіло, ЗОСЕМ, Іпс.). 23. Споріднено очищена антисироватка, козлине антитіло анти-кролик дос, кон'югат пероксидази (Віозоигсе

Са тА 10404). 24. АВТ5 розчин. 25. 3095 розчин пероксиду водню. 26. АВТ5З/Н2»О». 70 27. 02М НОЇ.

Методика: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Согпіпд з БЗОМО!1 з 1,О0мкг на лунку в СЗФ, 100Омкл кінцевого об'єму/лунку.

Зберігають протягом ночі при 496. 2. Через один день, видаляють буфер і промивають планшет З рази дНоО і один раз ТВ5Т буфером. Всі 7/5 промивання в цьому дослідженні повинні робитись таким способом, якщо не вказано інше.

З. Додають 100мкл блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують планшет, при збовтуванні, протягом

ЗОхв. при кімнатній температурі. Тільки перед використанням, промивають планшет. 4. Використовують ЕСЕ ГНЕК-2 хімера/3Т3-С7 клітинну лінію для цього дослідження. 5. Вибирають чашки, що мають 80-9095 злиття. Збирають клітини за допомогою трипсинизації і центрифугують при 1000об./хв.. при кімнатній температурі протягом 5хв. б. Ресуспендують клітини у виснаженому середовищі і оцінюють використовуючи трипан блакитний.

Необхідна життєздатність вище 9095. Вносять клітини у виснаженому середовищі з густиною 2500 клітин на лунку, 9Омкл на лунку, в 96 лунковому мікротитрованому планшеті. Інкубують внесені клітини протягом ночі при 372 в атмосфері 595 СО». с 7. Дослідження починають через два дні після внесення. 8. Сполуку, що тестується, розчиняють в 495 ДМСО. Зразки потім розводять безпосередньо на планшетах о виснажене-ОМЕМ. Зазвичай, це розведення було 1:10 або більше. Всі лунки потім переносили до клітин планшету з наступним 1:10 розведенням (1Омкл зразка і середовища в 9УОмкл виснаженого середовища. Кінцева концентрація ДМСО повинна бути 195 або нижче. Також можна використати стандартне серійне розведення. сі 9. Інкубують в 595 СО» при 372С протягом 2 годин. 10. Одержані ЕСЕ ліганди розводять готовим ЕСЕ (16,5мкМ) в нагрітому ОМЕМ до 15ОнМ. о 11. Одержують свіжий ІІМТО" достатній для 10Омкл на лунку; поміщають на лід. І ав 12. Через 2 години інкубування з сполукою, що тестується, додають одержаний ЕСЕ ліганд до клітин, 5Омкл на лунку, з кінцевою концентрацією 5ОНМ. Лунки позитивного контролю одержують ту ж саму кількість ЕОР. -

Негативний контроль не одержує ЕСЕ. Інкубують при 372С протягом 1Охв. ї- 13. Видаляють сполуки, що тестується, ЕСЕ і ОМЕМ. Промивають клітини один раз СЗФ. 14. Переносять НМТО" до клітин, ТООмкл на лунку. Поміщають на лід на 5 хвилин. Тим часом, видаляють блокувальний буфер з планшету ЕГІ5А і промивають. « 15. Вискрібають клітини з планшету мікропіпетором і гомогенізують клітинний матеріал неодноразово видаляючи рідину і додаючи НМТО" лізисний буфер. Переносять лізат до покриття, блокують, промивають - с планшет ЕГІ5А. Або, використовують картридж для переносу Созіаг для переносу лізату до планшету. и 16. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі протягом 1г є» 17. Видаляють лізат, промивають. Переносять свіжорозведене анти-Ріуг антитіло (1:3000 в ТВ5Т) до планшету ЕГІЗА, 10Омкл на лунку. 18. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі, протягом ЗОхв. - і 19. Видаляють анти-Ріуг антитіло, промивають. Переносять свіжорозведене ВІОБОШКСЕ антитіло до -1 планшету ЕГІЗА (1:8000 в ТВ5Т, 10Омкл на лунку). 20. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі протягом ЗОохв. (ав) 21. Видаляють ВІОБОШКСЕ антитіло, промивають. Переносять свіхеодержаний АВТ5/Н 205 розчин до о 50 планшету ЕГІЗА, 10Омкл на лунку. 22. Інкубують, при збовтуванні, протягом 5-10 хвилин. Видаляють будь-які бульбашки. що) 23. Зупиняють реакцію додаючи 1О0Омкл 0,2М НОЇ на лунку. 24. Зчитують результати на зчитувальному пристрої ЕГІЗА Оупаїесп МЕ7000 з тесту вальним фільтрувальним набором при 410ОнНМ і фільтром посилання при 6ЗОНМ.

СОК2г/СУСІ ІМ ДОСЛІДЖЕННЯ о Це дослідження використовують для вимірювання іп міго активності серін/треонін кінази людини сакг/циклін

А в дослідженні схожості сцинтиляції (ДСС). їмо) Матеріали і Реагенти. 1. Поліетилентерефталатні 9б-луночні планшети УМаїЇас (гнучкі) (У/аПас Сайаіод 1450-4001). бо 2. 1уУЗР| АТФ Атегзпат Кедімце (Атегенат саїаіод ЖАН 9968).

З. Стрептавидін Атегепат покривали полівініллолуольними кульками ДСС (Атегепат саїаіод ЯКРМОО0007).

Кульки повинні бути відновлені в СЗФ без магнію або кальцію, з 20мг/мл. 4. Активований сакг/циклін А ферментний комплекс виділяли з 519 клітин (ЗОСЕМ, Іпс.). 5. Біотинильований субстрат пептиду (Оебріїде). Пептиду біотин-Х-РКТРККАККІ розчиняли в дН 20 з бо концентрацією 5мг/мл. 6. Суміш Пептид/АТФ: для 1Омл, суміш 9,979мл дНос, 0,00125мл "холодного" АТФ, 0,010мл Оебііае і О,01О0мл уЗр АТФ. Остання концентрація на лунку була 0,5мкМ "холодного" АТФ, 0,1мкг Оебііде і 0,2мксСі ур АТФ. 7. Буфер кінази: для 1Омл, суміш 8,85мл ДНО, 0,625мл ТКІЗ (РН 7,4), 0,25мл 1М Мосі», 0,25мл 1095 МРАО і 0,025мл 1М ДТТ, додають свіжий тільки перед використанням. 8. 10мММ АТФ в дно. 9. 1М Ттів, рН доводили до 7,4 використовуючи НОЇ. 10. 1М Мдеї». 11. 1мМ ДТТ. 12. СЗФ (бірсо Сааюд 414190-144). 70 13. 0О.5М ЕДТА. 14. Розчин зупинення: для 1Омл, суміш 9,25мл СЗФ, 0,005мл 100мММ АТФ, 0,мл 0,5М ЕДТА, О,Тмл 1095 Топ

Х-100 і 1,25мл 20мг/мл ДСС кульок.

Методика: 1. Одержують розчини сполуки, що тестується, з 5х бажаною кінцевою концентрацією в 5956 ДМСО. Додають 75 ЗОмкл до кожної лунки. Для негативного контролю, використовують тільки ТОмкл 595 ДМСО на лунку. 2. Розводять 5мкл сакг/сусіїп А розчину 2,1мл 2х буферу кінази.

З. Додають 20мкл ферменту до кожної лунки. 4. Додають 1Омкл 0,5М ЕДТА до негативних контрольних лунок. 5. Починають реакцію кінази, додають 20мкл суміші пептиду/АТФ до кожної лунки. Інкубують протягом 1г без збовтування. 6. Додають 200Омкл розчину зупинення до кожної лунки. 7. Витримують, принаймні, 1Охв. 8. Обертають планшет приблизно при 2300об./хв. протягом 3-5хв. 9. Аналізують планшет використовуючи Тих або подібний зчитувальний пристрій. с

МЕТ ТРАНСФОСФОРИЛЯЦІЙНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ о

Це дослідження використовують для вимірювання рівнів фосфотирозину на полі(глютамінова кислота:тірозин (4:1)) субстраті, як засоби для визначення агоністів/антагоністів теї трансфосфорилювання субстрату.

Матеріали і Реагенти: 1. 96-луночні планшети ЕГ ІЗА Согпіпо, Согпіпд СайаІод 525805-96. с 2. Полі(діч, (уг) 4-1, Бідта, Саї. Мо; Р 0275. о 3. СЗФ, бірсо СайаІод 5450-1300ЕВ 4. БОММ НЕРЕЗ | «в) 5. Блокувальний буфер: розчиняють 25г бичачого сироваткового альбуміну, Зідта Саї. Мо А-7888, в 500мл їм

СЗФ, фільтрують крізь 4мкм фільтр. 6. Очищений О5Т злитий протеїн, що містить домен Меї кінази, Зидеп, Іпс. - 7. ТВ511 Буфер. 8. 1096 водний (МІШСЮе НьО) ДМСО. 9. 10мММ водний (ДНО) Аденозин-5'-трифосфат, бідта Саї. Мо. А-5394. « 10. 2х буфер для розведення кінази: для 100мл, суміш їОмл 1М НЕРЕЗ з рН7,5 з О04мл 595 БСА/СЗФ, 0,2мл 0/1М ортованадату натрію і їмл 5М хлориду натрію в 88,4мл ДНО. З с 11. 45 АТФ реакційна суміш: для 10мл, суміш О,4мл 1М хлориду магнію і О0,02мл 0,1М АТФ в 9,5бмл дно. "» 12. 4х суміш негативного контролю: для 10мл, суміш О,4мл 1М хлориду магнію в 9,бмл ДНО. " 13. 96-луночні М-подібні поліпропіленові планшети МОМС, Арріїед Зсіепійіс Сагаіюд й5-72092 14. БООММ ЕДТА. 15. Буфер для розведення антитіла: для 100мл, суміш їОмл 5956 БСА/СЗФ, 0,5мл 5905 Сагпаїйоп Іпвіапі МІіЇКФ в - СЗФ і 0,мл 0О,1М ортованадату натрію в 88,4мл ТВ5Т. -І 16. Поліклональне антифосфотирозинове антитіло кроля, Зцудеп, Іпс. 17. Козлине анти-кроляче антитіло кон'юговане з пероксидазою хріну, Віозоишгсе, Іпс. - 18. АВТЗ Розчин: для 1л, суміш 19,21г лимонної кислоти, 35,49г МаоНРО, і 500мг АВТЗ достатньою кількістю о 50 ДНО доводили до 1л. 19. АВТЗ/НЬО»: змішують 15мл АВ5Т розчину з 2мкл НоО» за п'ять хвилин до використання. ї» 20. 02М НС

Методика: 1. Наносять на планшети ЕГІЗА 2мкг Полі(сІШ-Туг) в 10О0мкл СЗФ, зберігають протягом ночі при 4296. 99 2. Блокують планшет 150мкл 5906 БСА/СЗФ на бохв.

ГФ) 3. Промивають планшет двічі СЗФ, один раз 5ХОмММ буфером Нерез з рН7 4. юю 4. Додають 5Омкл розведеної кінази до всіх лунок. (Очищену кіназу розводять буфером для розведення кінази. Кінцева концентрація повинна бути 1Онг/лунку.) 5. Додають 25мкл сполуки, що тестується, (в 49565 ДМСО) або тільки ДМСО (4965 в дНО) для контрольних. 60 6. Інкубують суміш кіназа/сполука протягом 15 хвилин. 7. Додають 25мл 40мММ Мп!» до негативних контрольних лунок. 8. Додають 25мкл суміші АТФ/МпсСі» до всіх інших лунок (за винятком негативного контролю). Інкубують протягом 5хв. 9. Додають 25мкл 500мММ ЕДТА для зупинення реакції. бо 10. Промивають планшет Зх ТВ5Т.

11. Додають 100мкл поліклонального анти-Ріуг кролика розведеного 1:10000 в буфері для розведення антитіла до кожної лунки. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі протягом однієї години. 12. Промивають планшет Зх ТВ5Т. 13. Розводять Віозоцгсе НКР кон'югованим з анти-кролячим антитілом 1:6000 в буфері для розведення антитіла. Додають 1О0Омкл на лунку і інкубують при кімнатній температурі, при збовтуванні, протягом однієї години. 14. Промивають планшет їх СЗФ. 15. Додають 100мкл розчину АВТ5З/Н2О» до кожної лунки. 16. Якщо необхідно, зупиняють реакцію додаючи 10Омкл 0,2М НС на лунку. 17. Зчитують планшет на зчитувальному пристрої ЕГІЗА Юупаїесп МК7000 з тестувальним фільтром при

Аа4ЛОНМ їі фільтром посилання при б6ЗОНМ.

ІСЕ-ї ТРАНСФОСФОРИЛЯЦІЙНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ

Це дослідження використовують для вимірювання рівню фосфотирозину в полі(глутамінова 75 Кислота:тірозин)(4:1) для визначення агоністів/антагоністів д98Їі4-І15Е-1 трансфосфорилюючого субстрату.

Матеріали і Реагенти: 1. 96-луночні планшети ЕГІЗА Сопіпа. 1. На планшет ЕГІЗА наносили 2,Омкг/лунку Пол(сіІШ, Туг) 411 (Зідта РО275) в 100мкл СЗФ, Зберігають планшет протягом ночі при 426. 2. Промивають планшет один раз СЗФ.

З. Додають 100мкл ТВВ блокувального буферу до кожної лунки. Інкубують планшет протягом 1 години при збовтуванні при кімнатній температурі. 4. Промивають планшет один раз СЗФ, потім двічі ХОММ буферу Нерез з рН7,5. 5. Додають 25мкл сполуки, що тестується, в 490 ДМСО (одержують шляхом розведення готового розчину с

ЛОММ сполуки, що тестується, в 100956 ДМСО з дно) до планшету. о 6. Додають 10,Онг дві-ІСЕ-1 кінази в 5ХОмкл буферу для розведення кінази) до всіх лунок. 7. Починають реакцію кінази додаючи 25мкл 4х реакційної суміші АТФ до всіх лунок тестування і лунок позитивного контролю. Додають 25мкл 4х суміші негативного контролю до всіх лунок негативного контролю.

Інкубують протягом 10 хвилин при збовтуванні при кімнатній температурі. с 8. Додають 25мкл 0,5М ЕДТА (рнНВ,0) до всіх лунок. о 9. Промивають планшет 4х ТВ5Т буфером. 10. Додають поліклональну анти-фосфотирозинову анти сироватку кроля з розведенням 1:10000 в 10Омкл о буфер для розведення антитіла до всіх лунок. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі протягом 1 їм- години.

Зо 11. Промивають планшет як на стадії 9. о 12. Додають 100мкл антикролячої НКР Віозоцгсе з розведенням 1:10000 в буфері для розведення антитіла до всіх лунок. Інкубують, при збовтуванні, при кімнатній температурі протягом 1 години. 13. Промивають планшет як на стадії 9, після чого один раз промивають СЗФ для зменшення кількості « бульбашок і надлишку Тмееп-20. 14. Розвивають реакцію додаючи 10О0мкл/лунку АВТ5/Н2О» до кожної лунки. о) с 15. Через приблизно 5 хвилин, зчитують на зчитувальному пристрої ЕПІЗА з тестувальним фільтром при "» 41Онм і фільтром посилання при 6ЗОнм. " ДОСЛІДЖЕННЯ ВКЛЮЧЕННЯ ВК

Наступні дослідження використовують клітини створені генетично для експресування вибраного рецептору і подальшого визначення ефективності сполуки, що цікава, на активність ліганд-індукованого синтезу ДНК для і визначення включення Вга) в ДНК. -І Зазвичай для кожного з наступних досліджень включення Вгд) використовують наступні матеріали, реагенти і методику. Відмічені відміни окремих досліджень. о Матеріали і реагенти: о 20 1. Прийнятний ліганд. 2. Прийнятні сконструйовані клітини. г» 3. Вга)0 мічений реагент: 10мММ, в СЗФ (рН7,4уХВоепгіпдег Маппнеїт, Сегптапу). 4. Ріхрепаї: фіксувальний розчин (готовий до використання)(Воейгіпдег Мапппеїт, Септапу). 5. Анти-Вг(40-РрОЮр: мишаче моноклональне антитіло кон'юговане з пероксидазою (Воейгіпдег Мапппеїіт, 29 Сегтапу).

ГФ! 6. ТМВ субстратний розчин: тетраметилбензидин (ТМВ, Воейгіпдег Мапппеїт, Септапу). 7. СЗ3Ф промивальний Розчин: 1хСЗФ, рн7,4. ді 8. Альбумін, телячий (БСА), фракція М, порошок (Зідта Спетіса! Со., БА). Загальна Методика: 1. Клітини вносять в концентрації 8000 клітин/лунку в 1095 С5, 2мММ Сіп в ОМЕМ, на 96 лунковий планшет. 60 Клітини інкубують протягом ночі при 372С в 595 СО». 2. Через 24 години, клітини промивають СЗФ і потім сироватко-виснаженим в середовищі вільним від сироватки (0965 5 ОМЕМ з 0,195 БСА) протягом 24 годин.

З. На З день, до клітин одночасно додають прийнятний ліганд і сполуку, що тестується. Негативні контрольні лунки одержують тільки ОМЕМ з 0,195 БСА вільним від сироватки; клітини позитивного контролю бо одержували ліганд без сполуки, що тестується, Сполуки, що тестуються, одержували в ОМЕМ вільному від сироватки з лігандом в 96 луночному планшеті, і серійно розводили до 7 концентрацій тестування. 4. Через 18 годин активації ліганду, додають розведений Вга) маркувальним реагентом (1:100 в ОМЕМ, 0,195

БСА) і клітини інкубують з ВгаШ (кінцева концентрація - 1О0мкМ) протягом 1,5 годин. 5. Після інкубування з маркувальним реагентом, середовище видаляють десантуванням і витрушують перевернутий планшет на паперовий рушник. Додають розчин РіхОепаї (5Омкл/лунку) і планшети інкубують при кімнатній температурі протягом 45 хвилин на планшетному шейкері. 6. Розчин РіхОепаї повністю видаляють десантуванням і витрушують перевернутий планшет на паперовий рушник. Додають молоко (595 де гідратоване молоко в СЗФ, 200мкл/лунку) як блокувальний розчин і планшет 70 інкубують протягом 30 хвилин при кімнатній температурі на планшетному шейкері. 7. Блокувальний розчин видаляють десантуванням і лунки промивають один раз СЗФ. Додають

Анти-Вга0О-го0 розчин (1:200 розведення в СЗФ, 195, БСА) (5Омкл/лунку) і планшет інкубують протягом 90 хвилин при кімнатній температурі на планшетному шейкері. 8. Кон'югат антитіла повністю видаляють десантуванням і промиванням лунок 5 разів СЗФ, і планшет /5 висушують перевертаючи і витрушуючи на паперовий рушник. 9. Додають розчин ТМВ субстрат (10Омкл/лунку) і інкубують протягом 20 хвилин при кімнатній температурі на планшетному шейкері для достатнього для фотометричного детектування розвитку забарвлення. 10. Абсорбцію зразків вимірюють при 41Онм (в "двоканальному" способі з фільтром зчитування 49Онм, як довжина хвилі відгулу) на зчитувальному пристрої планшеті ЕГІЗА Оупаїйесі.

ЕСР-індуковане дослідження включення Вга

Матеріали і Реагенти: 1. Миші ЕСБЕ, 201 (Тоуоро Со., Ца., дарап). 2. ЗТУ/ЕСЕКсС?7.

ЕСР-індуковане дослідження включення Нег-2-Огімеп Вга сч

Матеріали і Реагенти: 1. Миші ЕСБЕ, 201 (Тоуоро Со., Ца., дарап). і) 2. ЗТУЛЕСЕМ/Нег/ЕСЕЛЕСН г з доменом Нег"-2 кінази).

ЕСР-індуковане дослідження включення Нег-4-Огімеп Вга

Матеріали і Реагенти: с зо 1. Миші ЕСБЕ, 201 (Тоуоро Со., Ца., дарап). 2. ЗТУУ/ЕСЕ/Нега/ЕСЕтг (ЕСЕтг з доменом Нег-4 кінази). о

РОСР-індуковане дослідження включення Вга) о

Матеріали і Реагенти: 1. ЕОСЕ В/В людини (Воеїгіпдег Мапппеїт, Сегтапу). ї- 2. ЗТУ/ЕСЕКсС?7. ча

ЕСРЕ-індуковане дослідження включення Вга

Матеріали і Реагенти: 1. ЕСЕ2/БЕСЕ людини (Спсо ВК, ОА). 2. ЗТЗСТЕОНЕг «

ІСЕ1-індуковане дослідження включення Вгау з с Матеріали і Реагенти:

Й 1. Людський, рекомбійанічий (5511, РготедасСогр., ОБА) и? 2. ЗТЗЛОРІ.

Інсулін-індуковане досі ідження включення Вга)

Матеріали і Реагенти: -І 1. Інсулін, кристалічний, телячий, Цинк (13007, Сірсо ВК, ОА). 2. ЗТЗ/Нов. - НеоР-індуковане дослідження включення Вгау о Матеріали і Реагенти: 1. Рекомбінантний НОЕ людини (Саї. Мо. 249-НО, КО Зузіетв, Іпс. ОБА). о 2. ВХРО-3 клітини (АТСС СТІ -1687).

Ге Методика: 1. Наносять клітини 900Оклітин/лунку в КРМІ 1095 СЕТ на 96 лунковий планшет. Клітини інкубують протягом ночі при 372С в 595 СО». 2. Через 24 годин, клітини промивають СЗФ і потім виснажують в 100мкл сироватковільного середовища (КРМІ з 0,195 БСА) протягом 24 годин. (Ф, З. На З день, до клітин додають 25мкл суміші, що містить ліганд (одержували Тмкг/мл в КРМІ з 0,195 БСА; ко кінцева концентрація НОЕ становить 2О0Онг/мл) і сполуки, що тестується. Негативні контрольні лунки одержують 25мкКл сироватковільного КРМІ тільки з 0,195 БСА; клітини позитивного контролю одержують ліганд (НОР), але не бо сполуку, що тестується. Сполуки, що тестуються, одержують в 5 їх кінцевих концентраціях в сироватковільному

КРМІ з лігандом в 96 луночному планшеті, і серійно розводять одержуючи 7 концентрацій тестування. Зазвичай, найвища кінцева концентрація сполуки, що тестується, становить 100мкМ, і використовують 1:3 розведення (тобто, інтервал концентрації кінцевої сполуки, що тестується, становить 0,137-100мкМ). 4. Через 18 годин ліганд активують, 12,5мкл розведеного ВгаО маркувального реагенту (1:100 в КРМІ, 0,190 65 БСА) додають до кожної лунки і клітини інкубують з Вга) (кінцева концентрація становить 10мкМ) протягом 1 години.

5. Теж сама як і в Загальній Методиці. 6. Теж сама як і в Загальній Методиці. 7. Блокувальний розчин видаляють десантуванням і лунки промивають один раз СЗФ. Додають анти-Вга0О-РОЮ розчин (1:1100 розведення в СЗФ, 195 БСА) (100мкл/лунку) і планшет інкубують протягом 90 хвилин при кімнатній температурі на планшетному шейкері. 8. Теж сама як і в Загальній Методиці. 9. Теж сама як і в Загальній Методиці. 10. Теж сама як і в Загальній Методиці. 70 Дослідження НОМ-ЕС-С

Це дослідження використовують для вимірювання активності сполуки по відношенню до РОСБ-К, ЕОБ-К,

МЕСРБЕ, агсЕ або РІКЛ/КОК, всі з яких природно екс пресуються НОМ-ЕС клітинами.

День 0 1. Промивають і трипсинізують НМ-ЕС-С клітини (ендоліальні клітини пупочної вени людини, (Атегісап Туре 7/5 Сийиге СоїІПесіоп, номер в каталозі 1730 СК). Промивають саліном забуференим фосфатом ЮОишрессо (0-СЗФ, одержували від Сірсо ВЕ, номер в каталозі 14190-029) 2х приблизно 1мл/10см? культуральної тканини.

Трипсинізують 0,0595 трипсин-ЕДТА в неферментному розчині дисоціації клітин (Зідта Спетіса! Сотрапу, номер в каталозі С-1544). Одержують 0,0595 трипсин розводячи 0,2595 трипсин/1мММ ЕДТА (сбібсо, номер в каталозі 25200-049) в розчині дисоціації клітин. Трипсинізують приблизно 1Тмл/25-30см? культуральної тканини протягом приблизно 5 хвилин при 372С. Після виділення клітин з колби, додають еквівалентну кількість середовища дослідження і переносять до 50мл стерильної пробірки для центрифугування (Різпег Зсіепійіс, номер в каталозі 05-539-6). 2. Промивають клітини приблизно Збмл середовища дослідження в БбБОмл стерильну пробірку для центрифугування додаючи середовище дослідження, центрифугують протягом 10 хвилин приблизно при с 200об./хв., видаляють надосадкову рідину і ресуспендують з Збмл Ю-СЗФ. Повторюють промивання два рази о

О-СЗФ, ре суспендують клітини в приблизно їмл середовищі дослідження/15см ? культуральної тканини.

Середовищі дослідження містить Е12К середовища (Сібсо ВКІ, номер в каталозі 21127-014) ії 0,595 ін активованої нагріванням сироватки ембріону теляти. Підраховують клітини використовуючи Соцег Соципіек? (Соцег ЕІесігопісв, пс.) і додають середовище дослідження до клітин одержуючи концентрацію с 0,8-1,0Х105клітин/мл. о

З. Додають клітини до 9б-луночних планшетів з пласким дном в кількості 1О0Омкл/лунку або 0,8-1,0х107 о клітин/лунку, інкубують приблизно 24г при 372С, 595 СО».

День 1 ї- 1. Одержують подвійно титровані сполуки, що тестується, в окремих 96-луночних планшетах, зазвичай 50МкМ м до ОмкМ. Використовують теж саме середовище дослідження як згадано в Дні 0, стадія 2 вище. Титрування проводять додаючи 9УОмкл/лунку сполуки, що тестується, при 200мкМ (4 х кінцева концентрація на лунку) до верхньої лунки окремої колонки планшету. Оскільки готова сполук, що тестується, зазвичай має концентрацію 20мММ в ДМСО, 200мкМ лікарського засобу відповідає концентрації 296 ДМСО. « 20 Розведення проводять до 296 ДМСО в середовищі дослідження (Е12К--0,595 сироватки ембріону теляти) з використовуючи як розчинник для сполуки, що тестується, для того щоб розвести сполуки, що тестується, але с підтримуючи концентрацію ДМСО постійною. Додають цей розріджувач до лунок, що залишились, в колонці в :з» концентрації бОмкл/лунку. Відбирали бОмкл від 120мкл 200мкМ розведення сполуки, що тестується, з верхньої лунки колонки і змішували з бОмкл в другій лунці колонки. Відбирали бОмкл з цієї лунки і змішували з бОмкл в 415 третій лунці колонки, і так до завершення двократного титрування. Коли остання з кінця лунка змішується, - відбирають бОмкл з 120Омкл в цій лунці і відкидають її. Залишають останню лунку з ббмкл ДМСО/середовище розведення як таку, що не містить сполуку, що тестується, - контроль. Одержують 9 колонок титрованої сполуки, - що тестується, достатню для набору з трьох лунок кожного: (1) МЕСЕ (одержували від Рерго Тесі Іпс., номер в о каталозі 100-200, (2) фактор ендотеліального росту клітин (ЕСОРЕ) (також відомий як фактор росту кислого фібробласту або агсєг) (одержували від Воейгіпдег Мапппеїт Віоспетіса, номер в каталозі 1439 600), або, (3) («в РОСЕ В/В людини (1276-956, Воепгіпдег Мапппеійт, Септапу) і контрольне середовище дослідження. ЕСОГ

Кз надається як рецептура з гепарином натрію. 2. Переносять розведення 5Омкл/лунку сполуки, що тестується, до 9б-луночних планшетів для дослідження, що містять 0,8-1,0х 10"клітин/100мкл/лунку НОМ-ЕС-С клітин з Дня 0 і інкубують приблизно 2г при 372С, 595 СО». 3. В трьох екземплярах, додають 5Омкл/лунку ЗОмкг/мл МЕСЕ, 20нг/мл ЕСОЕ або контрольного середовища до кожної сполуки, що тестується. Як з сполуками, що тестуються, концентрації гормону росту є 4 х бажаної о кінцевої концентрації. Використовується середовище дослідження з Дня 0 стадія 2 для одержання концентрацій ко факторів росту. Інкубують приблизно 24 годин при 372С, 5956 СО». Кожна лунка повинна мати 5О0мкл розведеної сполуки, що тестується, 5Омкл фактору росту або середовища, і 1ООмкл клітин, з розрахунку загалом до 60 200Омкл/лунку. Таким чином 4х концентрації сполуки, що тестується, і факторів росту стає 1 х як тільки додаються до всіх лунок.

День2 1. Додають ЗН-тімидин (Атегепат, номер в каталозі ТЕК-686) в кількості 1мкСі/лунку (1Омкл/лунку 100мксСі/мл розчину одержаного в КРМІ середовищін1095 інактивованої нагріванням сироватки ембріону теляти ) бо іінкубують приблизно 24г при 372С, 5956 СО». КРМІ одержують від Сібсо ВК, номер в каталозі 11875-051.

День З 1. Планшети зберігають в холодильнику протягом ночі при -2096.

День 4

Відтоплюють планшети і збирають харвестером з 9б-луночних планшетів (Тотіес НагмесТер 965) на фільтрувальні папірці (У/аПас, номер в каталозі 1205-401), ЗНімали результати на рідинному сцинтиляційному лічильнику У/аІМас Вей(аріа(етм,

Таблиця 2 показує результати біологічних досліджень деяких прикладів сполук формули (І). Результати приведені в значеннях ІС, мікромолярна (мкМ) концентрація сполуки, що тестується, яка викликає 5095 зміну активності цільової РКТ порівняно з активністю РТК в контрольній, в якій відсутня сполука, що тестується, особливо, показані результати вказують концентрацію сполуки, що тестується, необхідну для 5095 ЗНиження активності цільової РТК. Біодослідження, які були або можуть бути використані для оцінки сполук описані більш детально нижче.

Таблиця 2

Приклад (біо ЙЯКОЗТ біо ЕСЕКІ1 біо РОСЕ біо ЕСЕ (клітинна ЕСЕ |Нег2 кіназа саковра |біо рук2

ІСво(мкМ) ІСво(мкМ) ПІСво(мкмМ) ІСво(мкм ІСво(мкмМ) ІСво(мкМ) ПСво(мкмМ) ІСво(мкмМ) яю юю яю 100010 зво вяю м | юю юю 00000000 вв юю юю юю яю 6 1мюяжт» з 10000 7 м вв ля сч мов | 711111мою | юю мою | мо 11771 в о з ав» 100100 м ям м рюмі яв « с яю вив

ЛИ НИ ПО ПОСТ НЄ НЯ ПОЛЕ НОЯ ПОЛЯ що вав мого ває | лет - 2 | ав | тот | вав з | 1 та 1 вита - во ва 17711111 рве 11 31 »БО »100 9,83 47,19 («в) - ж єю 10000мю юю м »20 »100 80 54,14

Ко) 1111ю юю

ІЙ | м 11во6ввяи 06 10000 о бю а817т8 в 811 юю яви |77111111ома | мев/тавв | м я | ов | ївб боб | мо | ява

БО «0,78 »100 20,34 »100 в вн) мю 000 в 0000000 ав вв) т» 00000000 вв 10000083 во зв | ля 000100 в; а 10011010 10 вт | во |771111тево | юю 1веї |в в 10 тм рю мою) м о в 171 111 юю рю мю 3) мю а 171111 ва вою |1111ваа | юю мою | мо в оя1000000ув | вою) м 000 і | осв золюмю 0 мю 10 ов обв юю тав | вн 0000 в; юю ля ав 10 плине и Ех НЕСЕ З НН НО НО НОЛНЯ 61011005 м зва 0 зи 0000 20 | 031 вв; м яля 0 мю 100 об яво бохо | ві вла | т85 0 лав о55 яв мю0001вя10010 вв 1000000лові юю за вв60001 вам звв 100000 см 5 м 172 | 777711ове | яви | ом 1 | о вві мом

ПЕСНИ ШЕ: ННЯ МЕР ПОС ЕННИ ПОЛОН ПОЛЕ НОЯ НОЯ яв вим 000001 м трав я5 10001 сч зо ЕтІИ ШЕУ І НИМИ СНИ НЕ: Е НОЯ ПЕН НО ОЛЯ о в | вив | 455 ою 10000000 воля | тля ов ям мю0010мю 101 о волозі юю 00000000 м 0000000 м в | оз | ом возив 00000000 вв 000000 ов з моля 00000 ав вя 00000000 56000000 й 021 б81аю юю 00000031 вв оляв | їз 16 | | ом 17 оз в ває левова) 00001800 « ю вв | оз | ллвовоб 02500000 10000005 З с вт 01000явво |) ввво0ввя000

ПОЕТИ НЕ НОЯ НКУ У ПОСТ НОНННННЯ ВОЄН ПОСУЕ ННННЯ

І» ме |» |7711111мою | юю 17111111 |ромоо зов! я вв юю 0000001 мюою вл 100001101214ю00000001жю 005 - ме | тв | 1 в'єз | ою |) | осв) - ІМ МІМО ТВАРИННІ МОДЕЛІ о Тваринні моделі ксенотрансплантатів

Здатність пухлин людини рости як ксенотрансплантат в атимічних мишах (наприклад, Ваїр/с, пи/пи) (ав) забезпечує корисність іп мімо моделі для дослідження біологічної відповіді на терапію пухлин людини.

Кз Починаючи з першої успішної ксенотрансплантації пухлини людини в атимічну мишу, (Куддага і Ромізеп, 1969,

Асіа Раїйої. МісгоріаІ. Зсапа. 77:758-760), було трансплантовано і успішно вирощено в голих мишах багато різних ліній ракових клітин людини (наприклад, грудей, легенів, генітоуренарних, гастроінтестинальних, голови і шиї, гіобластом, кісток і злоякісних меланом). Наступні дослідження можуть бути використані для визначення рівнів активності, специфічності і дії різних сполук формули (1). (Ф) Для оцінки сполук формули (І) корисні три загальні типи досліджень: клітинно/каталітичний,

ГІ клітинно/біологічний і іп мімо. Об'єктом клітинно/каталітичних досліджень є визначення дії сполуки формули (І) на здатність ТК до фосфорилювання тірозинів на відомому субстраті в клітині. Об'єктом во клітинно/біологічних досліджень є визначення дії сполуки формули (І) на біологічну відповідь стимульовану ТК в клітині. Об'єктом іп мімо досліджень є визначення дії сполуки формули (І) в тваринній моделі певного розладу, такого як рак.

Придатними лініями клітин для експериментів з підшкірною ксенотрансплантацією є Сб клітини (гліома, АТОС

ЯССІ 107), АЗ7У5 клітини (меланома, АТСС ЯСКІ 1619), А431 клітини (епідермоїдна карцинома, АТСОС ЯСНІ. 65 1555), Са|ш 6 клітини (легеня, АТСС ЯНТВ 56), РОЗ клітини (простата, АТОС ЯСКІ 1435), БКОМЗТР5 клітини і МІН

ЗТЗ фібробласти генетично модифіковані для надмірної експресії ЕСЕК, РОСЕК, ІСЕ-1К або будь-яка інша кіназа, що тестується. Наступний протокол може бути використаний для проведення експериментів з ксенотрансплантацією:

Самиць атимічних мишей (ВАЇ В/с, пи/пи) одержували від Зітопвеп І арогайгіез (Сіїгоу, Саїїї.). Всіх тварин витримували за умов кімнати проведення досліду в клітках Місгоізоіаюг з підстилкою Альфадрай. Вони вільно одержують стерильну їжу гризунів і воду.

Лінії клітин вирощували в прийнятному середовищі (наприклад, МЕМ, ОМЕМ, Напт'в Е10 або Нат'з Е12 плюс 5956-1096 сироватка ембріону теляти (СЕТ) і 2мМ глутамін (01 М)). Всі культуральні середовища клітин, глутамін і сироватку ембріону теляти одержували від бірсо І бе Тесппоіодієз (Сгапа Ізіапа, М.У.), якщо не вказано інше. 7/0 Всі клітини вирощували у вологому повітрі 90-9595 і 5-1096 СО» при 372С. Всі лінії клітини зазвичай підкультурювали двічі на тиждень і є негативними для мікоплазми за методом Мусоїесі (бірсо).

Клітини віджимали або об'єднували з 0,05956 Трипсин-ЕДТА і осаджували при 450об./хв. протягом 10хв. Осад ресуспендованого в стерильному СЗФ або середовищі (без СЕТ) до специфічної концентрації і клітини імплантували в задній бік миші (8-10 мишей на групу, 2-10х10Уклітин/тварині). Вимірювали ріст пухлини через 75 3-6 тижнів використовуючи кронциркуль Венієра. Об'єм пухлин розраховували як продукт множення довжинахширинахвисота, якщо не вказано інше. Р значення розраховували використовуючи і-тест Стюдента.

Сполуки, що тестуються, формули (І) в 50-100мкл екціпієнту (ДМСО або МРО:ОБМУ) можна вводити за допомогою

ІП ін'єкції різних концентрацій зазвичай починаючи з дня першого після імплантації.

МОДЕЛЬ ІНВАЗІЇ ПУХЛИНИ

Була розроблена наступна модель інвазії пухлини і вона може бути використана для оцінки терапевтичної цінності і ефективності сполук формули (І), що ідентифікуються для селективного інгібування рецептору

КОРІ К-1.

Методика

Голий мишей віком вісім тижнів (самиці) (Зітопзеп Іпс.) використовували як експериментальні тварини. се |мплантацію клітин пухлини можна провести у витяжній шафі з ламінарним потоком. Для анестезії о інтраперітонеально вводять суміш кислазин/кетамін (1ООмг/кг кетамін і мг/кг ксилазину). Роблять середній розріз розкриваючи черевинну порожнину (приблизно 1,5 см за довжиною) для введення 10 / клітин пухлини в 10Омкл середовища. Клітини ін'єктували або в дуаденальну долю підшлункової залози або під серозну оболонку кишечнику. Черевину і м'язи закривали 6-0 шовковими нитками з безперервним швом і шкіру закривали с використовуючи зажими. Тварин обстежували щоденно. о

Аналіз

Через 2-6 тижні, в залежності від росту, що спостерігається у тварин, мишей умертвляють, і вирізають і о аналізують (вимірюючи розмір пухлини, ступінь інвазії, імунохімію, іп зйи гібридизаційне визначення і т.і.) ча метастази локальної пухлини до різних органів (легеня, печінка, мозок, шлунок, селезінка, серце, м'язи).

Зо ДОСЛІДЖЕННЯ С-КІТ ї-

Це дослідження використовували для визначення рівню фосфорилювання с-Кії тірозину.

МО?Е (гостра мієлоїдна лейкемія людини) клітини виснажували на сироватку протягом ночі в 0,195 сироватці.

Клітини попередньо обробляли сполукою формули (І) (конкурент з сироваткою виснаження), перед « стимулюванням ліганду. Клітини стимулювали 25Онг/мл гп-5СЕ протягом 15 хвилин. Після стимулювання, клітини лізували і імунопреципітували з анти-со-кі антитілом. Визначали рівні фосфотирозину і протеїну за в) с допомогою вестерн-блотингу. "» ДОСЛІДЖЕННЯ МТТ ПРОЛІФЕРАЦІЇ " МО7Е клітини виснажували сироваткою і попередньо обробляли сполукою формули (І) як описано для експерименту фосфорилювання. Клітини вносили в кількості 4 х1ОУклітин/лунку на 96 лунковий планшет, в 100мкл ВРМІННТО9Ь сироватки. Додавали г-5СЕ (10Онг/мл) і планшет інкубували протягом 48 годин. Через 48 це. годин, додавали 1Омкл БбБмг/мл МТТ 1(|3-4,5-диметилтіазол-2-іл)-2,5-дифенілтетразолію бромід) і залишали -І інкубуватись протягом 4 годин. Додавали кислий ізопропанол (100мкл 0,04М НСЇІ в ізопропанолі) і вимірювали оптичну густину при довжині хвилі 55Онм. о ДОСЛІДЖЕННЯ АПОПТОЗУ ав | 20 МО7Е клітини інкубували ж/-5СЕ і ж/- сполуку формули (І) в 1095 СЕТ з гп-ЗМ-С5Е (1Онг/мл) і гп-1Ї/-3 (1Онг/мл). Зразки досліджували на 24 і 48 годині. Для вимірювання активованого каспас-3, зразки промивали і» СЗФ і пермеабілізували охолодженим льодом 7095 етанолом. Клітини потім мітили РеЕ-кон'югованим поліклональним кролячим анти-активним каспас-3 і аналізували за допомогою БАС5. Для вимірювання розщеплення РАКР, зразки лізували і аналізували за допомогою вестерн-блотингу з анти-РАКР антитілом. 52 Додаткові дослідження

ГФ) Додаткові дослідження, які можуть бути використані для оцінки сполук формули (І) включають, без обмеження, біс-їЯк-1 дослідження, дослідження хімерного рецептору ЕСЕ рецептор-НЕЇ1-!2 в цільних клітинах, о біо-згс дослідження, біо-ІсСК дослідження і дослідженні по вимірюванню фосфорилювання гаї. Протоколи для кожного з цих досліджень можна знайти в заявці 05 з серінйим Мо09/099,842, яка включена сюди як посилання, 60 включають будь-які малюнки, тут.

Вимірювання клітинної токсичності

Терапевтичні сполуки повинні бути більш активними у інгібуванні активності рецептору тірозинкінази, ніж викликана ними цитотоксична дія. Вимірювання ефективності і клітинної токсичності сполук можна провести шляхом визначення терапевтичного індексу, тобто, ІС 50//ЮО»во. ІСво, доза, що необхідна для досягнення 5095 бо інгібування, може бути виміряна використовуючи стандартні методики, такі як ті що були описані тут. ГО «о,

доза, що призводить до 5095 токсичності, також може бути виміряна з використанням стандартних методик

ІМоззтап, 1983, у. Іттипої. Ме(йподвз, 65:55-63), шляхом вимірювання кількості вивільненої ІОН (ІКоггепігмузкКі апа СаПемаепй, 1983, .). Іттипої. Меїпоаз, 64:313, ЮОесКег і І оптапп-Майнпевз, 1988, .). Іттипої. Меїйпоав, 115:61), або шляхом вимірювання летальної дози для тваринних моделей. Сполуки з великим терапевтичним індексом є переважними. Терапевтичний індекс повинен бути більшим 2, переважно, принаймні 10, більш переважно, принаймні 50.

Б. Приклад результатів клітинного дослідження використовуючи 5-(5-фтор-2-оксо-1-,2-дигідроіндол-З-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 7/0. 2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80).

Підтвердження активності 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-детиламіноетил)іаміду (Сполука 80) визначали в біохімічних дослідженнях (міде іпіга), здатність згаданої сполуки інгібіувати ліганд-залежне РТК фосфорилювання оцінювали в дослідженнях на клітинах використовуючи /5 Клітини мишей МІН-3ТЗ3 сконструйовані для надмірної експресії РІКк-ї або людського РОСЕКР. 5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібувала МЕСЕ-залежне фосфорилювання РІК-1 тірозину із значенням

ІСво приблизно 0,0З3мкМ. Це значення є подібним до 0,009мкМ К, значення визначеного для інгібування РІК-1 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом (Сполука 80), що визначали в біохімічних дослідженнях. Це показує, що 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) легко проникає у клітини. Стійкі біохімічні дані (міде іпіта) вказують, що 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) мають порівнювану активність по відношенню до РІК-1 і РОСЕКЗ, також сч було встановлено, що вона інгібує РОСЕ-залежне фосфорилювання рецептору в клітині із значенням

ІСво приблизно 0,оЗмМКМ. Здатність (8) 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) інгібувати с-КіЇ, близькі РТК, що зв'язує фактор стволових клітин (ЗСЕ), визначали використовуючи МО7Е клітини, що експресують цей рецептор. В цих клітинах, с зо 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібує ЗСЕ-залежне с-кії фосфорилювання із значенням ІС 50 0,01-0,1мкМ. о

Ця сполука також інгібує ЗСЕ-стимульоване фосфорилювання с-Кії при гострій мієлоїдній лейкемії (АМІ) бластів о виділених з периферійної крові пацієнтів.

На додаток до тестування здатності - 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти ї- (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) інгібувати лігандзалежне фосфорилювання рецептору в клітинах, також визначали дію на лігандзалежну проліферативну відповідь клітин іп мійго (дивіться Таблицю 4). В цих дослідженнях, клітини заморожували протягом ночі у виснаженому середовищі викликаючи ДНК синтез після додавання прийнятного мітогенетичного ліганду. як показано в Таблиці З, « 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти з с (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) проявляє РОСЕ-індуковану проліферацію МІН-З3ТЗ клітин, що надмірно експресують РОСЕКР або РОСЕКсс із значенням ІС 50 0,031 і 0,069 мкМ, відповідно, і ЗСЕ-індіковану ;» проліферацію МО?7Е клітин із значенням ІСво 0,007мМкМ. в

ТР ння сення пня пев чен ження пет з

Ф о й

НВ - не визначали 1 Визначали використовуючи рекомбінантний фермент 2Визначали використовуючи сироватко-виснажені МІН-З3ТЗ клітини, що експресують РІК-1

ГФ) ЗВизначали використовуючи сироватко-виснажені НОМЕС 4Визначали використовуючи сироватко-виснажені МІН-З3ТЗ клітини, що експресують РОСЕКО, іме) ЗВизначали використовуючи сироватко-виснажені МІН-З3ТЗ клітини, що експресують РОСЕКД бвизначали використовуючи сироватко-виснажені МО7Е клітини 60

Як показано в Таблиці 3, спостерігається узгоджуваність між біохімічною і клітинною активністю 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80), що підтверджує висновок, що ця сполука перетинає мембрани клітини.

Крім того, можна зробити ти висновок, що клітинна відповідь є результатом активності Сполуки 80 по 65 відношенню до вказаної цілі. На противагу, при тестуванні в присутності повного живильного середовища іп мікго, необхідні, по суті, вищі концентрації

5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) (»1ОмкМ) для інгібування росту різних пухлинних клітин людини (дивіться

Таблицю 4). Це вказує, що сполука не безпосередньо інгібує ріст цих клітин при концентрації необхідній для інгібування ліганд залежного фосфорилювання рецептору і клітинної проліферації. о

Мсінаво (кс серциномеа лен 89 | 20 дязі Епідермоїдна карцинома! 6018

Коротко, результати показані в Таблиці 4 одержували шляхом інкубування клітин протягом 48г в повному живильному середовищі в присутності ряду розведень 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду. В кінці періоду вирощування, визначали відносну кількість клітин. ІС во значення розраховували як концентрація сполуки, що інгібує ріст клітин на 5095 порівняно з необробленими клітинами. го Значення ГО Бо розраховували як концентрацію сполуки, що призводить до 5090 зменшення кількості клітин порівняно з клітинами, що починали експеримент.

Більш релевантним дослідженням на основі клітин, в якому оцінюють анти-ангіогенну активність 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліден-метил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) є іп міго дослідження мітогенезу використовуючи ендотеліальні клітини сч ов пуп очної вени людини (НОМЕС) як модель критичної проліферації ендотеліальних клітин в ангіогенному процесі.

В цьому дослідженні, мітогенну відповідь, вимірюють як збільшення ДНК синтезу, індукують о сироватко-виснаженому НОМЕС при додаванні МЕСЕ або ЕСЕ. в цих клітинах, 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібує МЕСБ- і РОБ-індуковану мітогенну відповідь з дозозалежним с зо профілем із значенням ІС 5о 0,004мкМ і 0,7мкМ, відповідно, коли сполука була присутня протягом 48 годин дослідження. («в»)

Коротко, приведені вище результати одержували використовуючи сироватко-виснажені НОМЕС, що о інкубували з мітогенними концентраціями МЕСЕ (10Онг/мл) або ЕСЕ (ЗОнг/мл) в присутності ряду розведень 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигщроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти в. 35 (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) проятгом 24г. Мітогенну відповідь під час наступних 24г в присутності їм ліганду і інгібітору була кількісною шляхом ДНК синтезу грунтуючись на включенні бромдеоксиурідину в клітинну

ДНК.

В окремих експериментах, Сполука 80 інгібує МЕСЕ-залежне фосфорилювання ЕКК 1/2 (р4а2/44МАР кіназа), раньо спадаючої цілі РІК-Л/КОК, дозозалежним чином. Інгібуюча активність Сполуки 80 також показала довгу « тривалість цієї системи; інгібування МЕСЕ-залежного фосфорилювання ЕКК 1/2 триває ще через 48 годин після - с видалення 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) з середовища з наступною короткою (2г) витримкою з мікромолярними з концентраціями сполуки.

Стало зрозуміло, що МЕОРБе важливим фактором виживання ендотеліальних клітин. Оскільки 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти -1 (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібує МЕСЕ-залежну мітогенну відповідь НОМЕС, досліджували дії сполуки на виживання НОМЕС. В цих експериментах, розщеплювали каспас 3 субстрат і полі-АОР-рібозилполімерази (РАКР) використовуючи як зчитувач даних апоптозу. НОМЕС культивували в о сироватко-вільних умовах протягом 24 годин, що показує значні рівні РАКР розщеплення, як визначено за допомогою акумулювання 2ЗкДа фрагменту розщеплення РАКР. Це в значній ступені було попереджено шляхом о додавання МЕСЕ до середовища клітини, що вказує що МЕСЕ діє як фактор виживання в цьому дослідженні. кз 5-(5-Фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)ліамід (Сполука 80) показав інгібування КОК оссигналювання. Відповідно, 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібує МЕСЕ-медійоване виживання НОМЕС до залежним чином. Таким чином, ці дані показують, що Сполука 80 індукує апоптоз в культурі ендотеліальних клітин в присутності МЕОБЕ. (Ф; В. Дослідження іп мімо ефективності ко і. Ефективність проти прийнятих ксенотрансплантатів пухлин

Іп мімо ефективність 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденеметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової бо Кислоти (2-діетиламіноетил)аміду (Сполука 80) досліджували на моделях підшкірного (ПШ) ксенотрансплантату використовуючи клітини пухлини людини імплантовані в задній бік атимічної миші. Після імплантації, пухлини залишали розвиватись до розміру 100-550мм? перед початком перорального лікування сполукою.

Щоденно перорально вводили Сполуку 80 викликаючи дозозалежне інгібування росту А431 пухлини, починаючого після того як пухлини досягали розміру 400мм 3. Статистично значне (Р«0,05) інгібування росту 65 пухлини спостерігалось при дозі 4Омг/кг/день (7495 інгібування) і вОмг/кг/день (8495 інгібування) (дивіться

Таблицю 6). В підготовчих експериментах, вища (16бОмг/кг/день) доза сполуки не була більш ефективною проти прийнятих А431 пухлин, ніж доза в 8Омг/кг/день. Крім того, миша, що лікували дозою в 16бОмг/кг/день сполуки, втрачала вагу, що вказує на те що вища доза не була досить толерантною. Подібні результати були одержані в експерименті, в якому пухлини А431 вирощували до розміру 100мм З (дивіться Таблиця 4). В цьому другому експерименті, повна регресія пухлин спостерігається у шести з восьми тварин, що лікують дозою 8Омг/кг/день протягом 21 день. У цих шести тварин, пухлини не починали рости протягом 110 днів спостереження після закінчення лікування. У двох тварин, у яких пухлини вирощували до великого розміру (2000-3000мм У), пухлини регресували у відповідь на другий цикл лікування Сполукою 80. Важливо, в всіх ефективних експериментах, 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти 70 (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) при 8Омг/кг/день була добре толерантною, навіть коли вводилась більше ніж 100 днів. 400 в1вявю оо 100 нти А ЕТ

Коротко, результати показані в Таблиці 5 одержували використовуючи А431 клітини (0,5х10Уклітини/мишії), які імплантували ПШ і задній бік атимічної миші. Щоденне пероральне введення с 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти ге) (2-діетиламіноетил)іаміду (Сполука 80) в розчиннику на основі Стеторпоге або контрольного розчинника починали, коли пухлини досягали вказаного середнього об'єму. Пухлини вимірювали використовуючи кронциркуль верн'є і об'єм пухлин розраховували як результат довжина хширинахвисота. Р-значення розраховували порівнюючи розміри пухлин тварин, що лікували Сполукою 80 (п-8) з тими тваринами, що с лікували розчинником (п-16) в останній день експерименту, використовуючи тест з подвійною вибіркою «3

Стюдента.

Ефективність Сполуки 80 проти привитих пухлин людини різних джерел визначали використовуючи о ксенотрансплантати Соо25 (карцинома товстої кишки), ЗЕ76ЗТ (гліома) і МСІ-Н46О (немаленькоклітинна карцинома легені) (дивіться Таблицю б). Ці експерименти проводили використовуючи 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти - (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80), що вводили перорально 8Омг/кг/день; доза, що була ефективною і добре толерантною. їх о 7 Ттетяєяни |понатювий обсм пухлини пли ж нування дено Рнечення, щі - х» в - -І о В описаних вище експериментах, Сполуку 80 вводили один раз на день 8Омг/кг в розчиннику на основі

Стгеторпог в пухлини, що досягли вказаного об'єму. Відсоток інгібування порівнювали з контрольною групою, якій о вводили розчинник, розраховували в кінці експерименту. Р-значення розраховували порівнюючи розміри пухлин

ГІ тварин, що лікували сполукою з тими тваринами, що лікували розчинником, використовуючи тест з подвійною вибіркою Стюдента.

Хоча 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-3-карбонової Кислоти 5Б (2-діетиламіноетил)амід (Сполука 80) інгібує ріст всіх типів пухлин показаних в Таблиці 7, існує відмінність у відповіді різних моделей ксенотрансплантатів. Специфічно, ріст МСІ-Н460 і ЗЕ763Т пухлин затримувався або (Ф) значно уповільнювався у випадку Соо205 пухлин, аналогів А431 пухлин, регресував коли обробляли ка 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом. 60 Для того щоб визначити молекулярну основу різної відповіді у різних моделей ксенотрансплантатів, досліджували пухлини ЗЕ763Т. Відповідно, 5Е763Т пухлини, які були менш чутливими до обробки 5-(5-фтор-2-оксо-1,2-дигідроіндол-3-іліденметил)-2,4-диметил-1Н-пірол-З-карбонової кислоти (2-діетиламіноетил)амідом, оцінювали на молекулярному рівні використовуючи |імуногістологічну техніку визначення дії лікування сполукою. Ці дослідження спочатку проводять на цьому типі пухлини, оскільки БЕ76З3Т бд5 пухлини є високоваскуляризованими мікросудинами, що сильно експресують ендотеліальний клітинний маркер

СО31 і відповідно добре підходящими для дослідження мікрокапілярної густини пухлини (МГП). Імуногістологічна оцінка ЗЕ76ЗТ пухлин, вказую на те, що в пухлинах оброблених тварин зменшуєтьсямгП порівняно з контролем обробленим розчинником, що є сумісним анти-ангіогсенним механізмом дії сполуки 80; МГП був 242-441 у тварин, що обробляли сполукою 80, порівняно з 39,3 45,7 у тварин яких обробляли тільки розщчинником. Як очікується з пов'язаної затримки росту пухлини, спостерігається чітке інгібування проліферації ракової пухлини, яку обробляли сполукою 80. Ці пухлини мали половинний мітотичний індекс порівняно з тими пухлинами що обробляли розчинником (дані не показані). Дія сполуки 80 на МГП і проліферацію клітин пухлини вказує на те, що сполука має сильну анти-ангіогенну і антиракову дію, навіть за умов, при яких пухлини не регресують.

Здатність сполуки 80 інгібувати РОСЕК фосфорилювання і наступним сигналізуванням іп мімо також було досліджено в пухлинах 5Е763Т, які експресують високі рівні РОСЕК ВД. Обробка ЗЕ763Т пухлин сполукою 80 значно інгібує РОСЕКрВ фосфорилювання тірозину в прийнятих ЗЕ763Т пухлинах. Сполука 80 також зменшує рівні фосфорилюваної (активованої) фосфоліпази С гамма (РІС-у), негайне падіння індикатору РОСЕК активації. Ці дані показують, що пероральне введення сполуки 80 викликає безпосередню дію на цільову (РОСЕК) активність в пухлинах іп мімо.

Виходячи з продемонстрованої здатності сполуки 80 інгібувати МЕСЕ-залежне сигналювання в НОМЕС іп міго було довготривалим (міде зирга), ефективність сполуки оцінювали, коли сполука вводилась не часто в модель пухлини Соіо205. Як показано в Таблиці 7, 8Омг/кг (9195 інгібування) і 4Омг/кг (8495 інгібування) ефективні, коли призначаються щоденно, але не коли вводяться двічі на день. На противагу, вища доза сполуки 80 (160мг/кг) інгібувала (5295 інгібування) ріст прийнятих пухлин Соіо205, коли вводиться двічі на тиждень, що наводить на думку, що ця сполука може демонструвати активність, коли вводиться рідко в вищій дозі. Слід відзначити, що режим дозування може бути визначений середнім спеціалістом в цій галузі без надмірних експериментів. с о 7 динразнаткден о 711 во щедяню 01910 бою сч зо 7 дв 1079 о 7 одрюнатеден о | на

Ф

00000оодвмінатяюдеьо | 0360001 не м з ч

Коротко, результати показні в Таблиці 7 одержували використовуючи Соіо205 клітини (0,5х10бклітини/миші), що імплантували ПШ в задній бік атимічної миші. Пероральне введення сполуки 80, згідно з вказаним прописом, « починали, коли пухлина досягала 400мм З. Пухлини вимірювали використовуючи кронціркуль верн'є і об'єм пухлин розраховували як продукт довжина хширинахвисота. Р-значення розраховували шляхом порівняння - с розмірів пухлин у тварин, що обробляли сполукою 80, з тими тваринами що обробляли розчинником, в останній в день експерименту, використовуючи тест з подвійною вибіркою Стюдента. » ії. Ефективність сполуки 80 на моделі розсіяного захворювання

На додаток до підтримання тривалого росту первинних солідних пухлин, інгіогсенез також є суттєвим компонентом, що підтримується розвитком розсіяного захворювання завдяки метастазам з первинної пухлини. - Дію сполуки 80 на розвиток розсіяного захворювання досліджували на моделі колонізації легені В16-Е1 - меланомою у миші. В цій моделі, В16-Е1 клітини інокулювали внутрішньовенно через хвостову вену атимічної миші колонізуючі легені і одержуючи пухлини. Як показано в Таблиці 7, пероральне введення сполуки 80 в («в кількості 8Омг/кг;/день ефективно зменшує кількість В16-Е1 клітин в легені, що оцінювали вимірюючи загальну о 50 вагу легені. Ці дані показують, що сполука 80 може інгібувати розсіяного хворобу іп мімо. їз 7 ватлеєн о ж нпвування|р-значення.

Бони овеювт 00 5 о іме)

Коротко, результати показані в Таблиці 8 одержували використовуючи атимічних мишей, яким інокулювали бо В16-Е1 пухлинні клітини (5х1О"клітин/миша) через хвостову вену. Мишам щоденно перорально вводили сполуку 80 в кількості 8Омг/кг/день (п-10) або розчинник (п-18) протягом 24 днів після інокуляції клітин пухлини, в кінці лікування, мишей умертвляли і їх легені видаляли і зважували. Розраховували відсоток інгібування шляхом порівняння ваги легені тварин, що обробляли сполукою 80, з вагою легені тварин, яких вводили тільки розчинник. Р-значення визначали використовуючи тест з подвійною вибіркою Стюдента. 65 ПП. СОХ-2 інгібітори

Здатність інгібіторів СОХ-2 затримувати ріст пухлин досліджували використовуючи модель легені Левіса описану нижче.

Мишам підшкірно в ліву лапу ін'єктгували (1х10Упухлинних клітин суспендованих в 3095 Матригелі) і оцінювали об'єм пухлини використовуючи флетісмометр двічі на тиждень протягом 30-60 днів. Кров відбирали двічі під час експерименту в 24г протоколі для дослідження концентрації в плазмі і загального аналізу за допомогою АШС аналізу. Дані виражали як значення -/-5ЕМ. Тести Стюдента і Мана-Уїтні використовували для виявлення відмінностей між значеннями використовуючи пакет програмного забезпечення Іпе(аї. Целекоскиб дають під час їжі в дозах в межах 160-3200м.ч. уповільнюючи ріст цих пухлин. Інгібуюча активність целекоксибу була дозозалежною і змінювалась в інтервалі від 4895 - 8595 порівняно з котнтрольними пухлинами. Аналіз 70 метастазування легені проводили у всіх тварин підраховуючи метастази в стереомікроскопі і за допомогою гістохімічного аналізу сусідніх частин легені. Целекосксиб не діє на метастазування легені при низьких дозах 16Ом.ч., однак поверхня метастазування зменшується більше ніж на 5095, коли вводиться доза в 480-3200м.ч..

На додаток, гістопатологічний аналіз показав, що целеккоскиб дозозалежним чином зменшує розмір метастатичних ушкоджень легені. 2. Модель НТ-29:

Мишам підшкірно в ліву лапу ін'єктгували (1х109 пухлинних клітин суспендованих в 3096 Матригелі) і оцінювали об'єм пухлини використовуючи флетісмометр двічі на тиждень протягом 30-60 днів. Імплантація клітин раку товстої кишки людини (НТ-29) голим мишам призводить до утворення пухлин, що будуть збільшуватись до розмірів 0,6-2мл на 30-50 день. Кров відбирали двічі під час експерименту в 24г протоколі для дослідження концентрації в плазмі і загального аналізу за допомогою АОС аналізу. Дані виражали як значення /-5ЕМ. Тести

Стюдента і Мана-Уіїтні використовували для виявлення відмінностей між значеннями використовуючи пакет програмного забезпечення Іпоіаї.

А. Мишей ін'єктованих НТ-29 пухлинними клітинами обробляли цитокисном і.п. в дозі 5Омг/кг на 5, 7 і 9 день в присутності або у відсутності целекоксиб в дієті. Визначали ефективність обох агентів шляхом с вимірювання об'єму пухлини. Лікування з використанням целекоксиб подібного інгібутору СОХ-2 (50С-58236) о зменшує об'єм пухлини на 8995. В тому ж самому дослідженні, введення індометацину в максимально толерантній дозі 2мг/кг/день в питній воді інгібує утворення пухлини на 7795. Однак, селективний інгібітор

СОХ-2 повністю інгібує утворення метастазування легені в той час як неселективний МЗАЇЮО індометацин був неефективним. Результати цих досліджень показують, що введення целекоксибу в дієту миші зпухлиною може «М затримувати ріст пухлин і метастазування, коли вводиться як єдина терапія. Однак, спостерігаються позитивні моменти, коли целекоксиб вводиться в комбінації з цитотоксичним агентом, таким як циклофосфамід. о

В. В другому дослідженні, мишей з ін'єкгованими клітинами НТ-29 раку товстої кишки обробляли і «в) целекоксибом (10, 40 або 16бОм.ч.) в дієті починаючи на 10 день. Спостерігалась приблизно дозо-залежна дія. (Таблиця 9). - і - карциноми НТ-29 товстої кишки людини « - с ї» во | лю (ля ло ов з бен

Об'єм (мл) -І

Ш. їй омімо дослідження використовуючи протеїнкінази в комбінації з селективним інгібітором о циклооксигенази-2 для лікування раку. (ав) 50 Здатність інгібтору протеїнкінази уповільнювати ріст в комбінації з селективним інгібітором СОХ-2 можна дослідити на моделі ксенотрасплантату 1483, що писана нижче. їз Ксенотрансплантат 1483 є тваринним ксенотрансплантатом, що є моделлю епітеліального раку людини, що експресують циклооксигеназу-2 (СОХ-2) в пухлинних клітинах і в васкуляризрваній тканині.

Модель голої миші з ксенотрансплантатом пухлини карциноми сквамозних клітин людини голови і шиї (лінія 99 клітин 1483), що експресує СОХ-2 в пухлинних клітинах і в васкуляризорваній тканині, подібна епітеліальному

ГФ) раку людини. При припускаємо, що ця модель представляє епітеліальний рак людини і буде доброю моделлю т для корелювання ефективності протиракових лікарських засобів, включаючи СОХ-2 інгібітори, до ефективності на людях.

Матеріали і методи: 60 Культура клітин:

Сквамозні клітин карциноми 1483 голови і шиї (НМЗСС) людини зберігають в замороженій пляшечці, що містить Зх105 клітин, 9096 сироватки ембріону теляти (СЕТ) і 1095 диметилсульфоксиду (ДМСО). Брали заморожену пляшечку і швидко підтаювали при 37 9С і поміщали в колбу Т-162см? (Корнінг), що містить 65 О-МЕМ/Е12 середовище (СірсоВк/) з 15ММ буфером Нерез, І -глутаміну, гідрохлориду піридокисну і 1095 СЕТ.

Клітини вирощують в інкубаторі з 595 СО» і температурі 372С. Середовище змінюють кожен другий день і клітини придатні, коли досягають 80-9095 злиття. Для пропуску клітин, промивають колбу 1О0мл саліну забуференого фосфатом (СЗ3Ф), видаляють рідину і додають 2мл трипсин/ЕДТА (0,2595 1мМ, бірсовк/) поміщають назад в інкубатор, через 5хв., клітини будуть відокремлюватись. Додають 8Змл згаданого вище середовища до промитої

Колби і переносять до стерильної 50мл пробірки для центрифугування. Додають ЗОмл середовища і змішують і підраховують кількість клітин використовуючи гемацитометр, клітин на планшеті в Т-162см2-3-4х105 клітин.

Тваринна модель 1483:

Змінюють середовище за 24 години до подрібнення 1483 клітин перед ін'єкцією в голих мишей. Трипсинізують 1483 клітини як описано вище в розділі культура клітин. Підраховують кількість клітин і визначають кількість 70 клітин. Центрифугують клітини при 1000об./хв.. протягом 5 хвилин при кімнатній температурі. Ресуспендують клітинні залишки і об'єднують їх (якщо використовують декілька 5О0мл пробірок для центрифугування) в одній

БОмл пробірці для центрифугування з забуференому розчині саліну Ханка (НВ5О5, сірсовк/І) і цетрифугують як раніше. Ви повинні одержати приблизно більше 2595 клітин, що потім ви дійсно ін'єктуєте для одержання екстраклітин. Якщо ви ін'єктуєте 72 мишей і ви маєте 100х1059 клітин, готуйте всі клітини для ін'єкування 75 мишам. Ін'єкуйте 1483 клітини в кількості 1х105 клітин в О0,О0Змл/миші.

Ін'єктгують клітини з 3095 Матригелем (СоІІарогайме Віотедіса! Ргодисів) і 7095 НВ5З5. Ресуспендований об'єднаний залишок з 2,1мл (7095) холодного НВ5ОЗ з 0,Умл (3095) відтаюювали холодним Матригелем і суміш поміщали на лід. Тримали ці одержані клітини на льоду весь час до ін'єктування мишам. Самиць голих мишей віком 4-6 тижнів використовували в цих дослідженнях (Нагіеп). Для анестезії використовували СО 5/О5 газ і потім робили їм ін'єкцію в середній правий бік лапи використовуючи 0,5 сс туберкуліновий шприць (ВескКегзоп 8

ОісКегзоп). Зважували мишей в день ін'єкції (День 0) для початку досліду базелінової ваги. Зважували мишей на 7 день і вимірювали об'єм пухлини правої задньої лапи використовуючи плетисмометр (5іоеціпд Со.)

Плетисмометр є пристроєм, що вимірює об'єм лапи зануреної у воду. Вимірювали декілька лівих неін'єктованих лап і виводили середнє число для фонового вимірювання для віднімання від значення для правої лапи з с 259 пухлиною. о

Вводили тваринам сполуки, що тестуються, в подрібненій їжі, коли пухлини досягали розміру 100-200 і продовжували давати сполуку протягом дослідження. Деяких тваринам давали тільки інгібітор протеїнкінази або селективний інгібітор циклооксигенази-2. Деяким мишам давали і інгібітор протеїнкінази і селективний інгібітор циклооксигенази-2 щоденно в придатній дозі, що визначали на основі результатів іп міго дослідження. с

Зважували і вимірювали мишей протягом дослідження на 7, 10, 14, 17, 21, 24 і 28 день. Тваринам починали о давати сполуку з 0 дня (профілактика) або починаючи з дня встановлення пухлини, приблизно 7 день (терапія).

Приблизно на 30 день введення розчинника (контроль) миші мали великі пухлини (-1,0-1,5мл) і починали о втрачати вагу, і в цей час завершували введення розчинника тваринам. Якщо помічено інгібування пухлини в їм групах, що лікуються, і вони мають добрий стан, умертвляють половину тварин з груп, що лікуються, визначаючи

Зо затримку росту пухлини. в.

Спеціаліст в цій галузі повинен також легко зрозуміти, що представлений винахід є добре адаптованим для здійснення об'єктами і одержання кінцевих і згаданих переваг, також як і особливостей приведених тут.

Молекулярні комплекси і способи, методики, способи лікування, молекули, специфічні сполуки описані тут « приведені як приклади переважних втілень, і є прикладами, і не повинні розглядатись як такі що обмежують рамки винаходу. Зміни і інші використання будуть мати місце і будуть очевидні для спеціаліста в цій галузі і о) с вони охоплюються межами цього винаходу і є визначеними в пунктах формули. "» Для спеціаліста в цій галузі повинно бути зрозуміло, що різні заміни і модифікації можуть бути зроблені у " винаході описаному тут без відходу від рамок і сутності винаходу.

Всі патенти і публікації згадані в описі є показовим рівнем техніки до якого відноситься винахід. Всі патенти і публікації включені сюди як посилання в тій самій ступені, як кожна окрема публікація була - специфічно і окремо вказана для включення як посилання. -І о

Claims (1)

1. Формула винаходу о 50

   1. Спосіб лікування або попередження раку, який включає введення ссавцю, що потребує такого лікування, Із терапевтично ефективної кількості інгібітора протеїнкінази формули (1): й ш НО о Бех рек не Том сте по вк рено й Кяхх ше зоосаайн ж сел зара Й до ЖЕО в'я в в якій: К вибирають з о групи, що містить водень, піперазин-1-ілметил, 4-метилпіперазин-1-ілметил, 65 піперидин-1-ілметил, 2-гідроксиметилпіролідин-1-ілметил, 2-карбоксипіролідин-1-ілметил і піролідин-1-ілметил; К! вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл,

   заміщений циклоалкіл, арил, гетероарил, гетероаліцикліл, гідрокси, алкокси, -С(О)МеЕЗВУ, «МЕ ЗВ, («СО і «сно є; 2 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, алкокси, ціано, -МЕ 384, «МЕ ЗсС(ОВ, -С(ОВ У, арил, гетероарил і -5(02МА ЗВ; ВЗ вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, алкокси, арил, гетероарил, -МЕ З, «МА З5(0)5877, -5(02МВ 3874, «МЕ ЗС(ОВ Я, «МЕ ЗС(ФООВ Я, (СО ї -502879; 70 7 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, гідрокси, алкокси і -МВЗАЯ; В? вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9; ВЕ? вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9; В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл, арил, гетероарил, -С(О)К 1 і -С(СО)В 9, при умові, що коли Е. є воднем, тоді, принаймні, один з РЕ, В5 і В" є -С(О)В 0; або 19 25 її В" можуть разом утворювати групу, що вибирають з групи, яка містить -«(СНо)д-, ««СНо)в- і ««СНа)в-; 28 ї Е? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл і арил; ВО вибирають з групи, що містить гідрокси, алкокси, арилокси, -М(В)(алкілен),В 7, де алкіленова група є, необов'язково, заміщеною гідроксигрупою і -МА 3874; В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл і заміщений алкіл; В"? вибирають з групи, що містить -МАЕ ЗВ, гідрокси, -С(О)В "У, арил, гетероарил, -М'(0ЗВ 387, «ЩО і -МНС(ОВ "З (де В "З є алкілом, заміщеним алкілом, галогеналкілом або аралкілом); ВЗ їв" незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл, нижчий алкіл, заміщений гідроксіалкіламіно, ціансалкіл, циклоалкіл, заміщений циклоалкіл, арил і гетероарил; або с ВЗ ЇВ" можуть об'єднані утворювати гетероциклічну групу; о В"? вибирають з групи, що містить водень, гідрокси, алкокси і арилокси; ВЗ вибирають з групи, що містить гідрокси, -МА 3874, -С(ОВ 75 ї -«С(О)МВ ЗВ; В" вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл, арил і гетероарил; с ВЗ вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, арил, аралкіл, гетероарил або гетероаралкіл; і п і г є, незалежно, 1, 2, З або 4; - в комбінації з інгібітором циклооксигенази ав! або його фармацевтично прийнятною сіллю.

   2. Спосіб лікування або попередження раку, який включає введення ссавцю, що потребує такого лікування, - терапевтично ефективної кількості сполуки - ши: ШО не ЕН що они НЯ НЕ ках фе с що а пе з а нд в якій: - 15 К вибирають з о групи, що містить водень, піперазин-1-ілметил, 4-метилпіперазин-1-ілметил, піперидин-1-ілметил, 2-гідроксиметилпіролідин-1-ілметил, 2-карбоксипіролідин-1-ілметил і піролідин-1-ілметил; -і в! вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл, заміщений о циклоалкіл, арил, гетероарил, гетероаліцикліл, гідрокси, алкокси, -«С(О)МАЗЕУ, -МВ'ЗВЯ, «СОВИ ї «сно; 2 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, о алкокси, ціано, -МЕ З, «МЕ ЗС(ОВ 1, -«С(ОВ У, арил, гетероарил і -5(002МА ЗВ; Ко) ВЗ вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, тригалогенметил, гідрокси, алкокси, арил, гетероарил, -МЕ З, «МА З5(0)5877, -5(02МВ 3874, «МЕ ЗС(ОВ Я, «МЕ ЗС(ФООВ Я, (СО ї -502879; 59 7 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, заміщений алкіл, гідрокси, алкокси і -МВЗАЯ; (Ф) 2? вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9; ка 25 вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл і -С(О)В 9; В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, заміщений алкіл, арил, гетероарил, -С(О)В 7 ії -С(О)В У, за 6о умови, що коли Е є воднем, тоді, принаймні, один з БУ, В5 і В" є -С(О)В 0; або 25 їв можуть об'єднані утворювати групу, що вибирають з групи, яка містить -(СНо)д-, ««СНа)в- і ««СНа)в-; 28 ї Е? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл і арил; ВО вибирають з групи, що містить гідрокси, алкокси, арилокси, -М(К)(алкілен),В 7, де алкіленова група є, де необов'язково, заміщеною гідроксигрупою і -МА 3874; В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл і заміщений алкіл;

   В"? вибирають з групи, що містить -МЕ "ЗВ, гідрокси, -«С(О)В У, арил, гетероарил, -М'(ОЗВ Зв, «Що З і -МНС(ОВ З (де 2 "З є алкілом, заміщеним алкілом, галогеналкілом або аралкілом); ВЗ їв" незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, заміщений алкіл, нижчий алкіл, заміщений гідроксіалкіламіно, ціаноалкіл, циклоалкіл, заміщений циклоалкіл, арил і гетероарил; або ВЗ ве" можуть об'єднані утворювати гетероциклічну групу; ВЗ вибирають з групи, що містить водень, гідрокси, алкокси і арилокси; В" вибирають з групи, що містить гідрокси, -МЕ ЗВ, «(385 ї «(ОМ Зв; 70 В" вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, циклоалкіл, арил і гетероарил; ВЗ вибирають з групи, що містить алкіл, заміщений алкіл, арил, аралкіл, гетероарил або гетероаралкіл; і п і г є, незалежно, 1, 2, З або 4; в комбінації з селективним інгібітором циклооксигенази-2, що вибирають з групи, яка містить: (І) сполуку формули (І): /5 бе ме , и в іди ов в пі ОДВАНННЕЬ м; сДенет Хна т ль інт Що в якій: С вибирають з групи, що містить О, 5 і -МК2-, де КЗ? є воднем або алкілом; В ба вибирають з групи, що містить водень і арил; 2712 вибирають з групи, що містить карбоксил, алкіл, аралкіл, амінокарбоніл, алкілсульфоніламінокарбоніл.ї СМ | алкоксикарбоніл; о Ва вибирають з групи, що містить галогеналкіл, алкіл, аралкіл, циклоалкіл і арил, необов'язково заміщений одним або більшою кількістю радикалів, що вибирають з алкілтіо, нітро і алкілсульфонілу; і ва є одним або більшою кількістю радикалів, що незалежно вибирають з групи, яка містить водень, галоген, алкіл, аралкіл, алкокси, арилокси, гетероарилокси, аралкілокси, гетероаралкілокси, галогеналкіл, с галогеналкокси, алкіламіно, ариламіно, аралкіламіно, гетероариламіно, гетероарилалкіламіно, нітро, аміно, о аміносульфоніл, алкіламіносульфоніл, ариламіносульфоніл, гетероариламіносульфоніл, аралкіламіносульфоніл, гетероаралкіламіносульфоніл, гетероциклосульфоніл, алкілсульфоніл, гідроксіарилкарбоніл, нітроарил, о необов'язково заміщений арил, необов'язково заміщений гетероарил, аралкілкарбоніл, гетероарилкарбоніл, М арилкарбоніл, амінокарбоніл і алкілкарбоніл; Зо або вза разом з кільцем Е утворюють нафтильне кільце; або - (і) сполуку формули (І): сотня Р ск ;» ше в якій: А вибирають з групи, що містить частково ненасичені або ненасичені гетероциклічні і частково ненасичені ш- або ненасичені карбоциклічні кільця; -І В"? вибирають з групи, що містить гетероцикліл, циклоалкіл, циклоалкеніл і арил, де ВК"? є необов'язково заміщеним в придатному положенні одним або більшою кількістю радикалів, що незалежно вибирають з алкілу, о галогеналкілу, ціано, карбоксилу, алкоксикарбонілу, гідроксилу, гідроксіалкілу, галогеналкокси, аміно, ав | 20 алкіламіно, ариламіно, нітро, алкоксіалкілу, алкілсульфінілу, галогену, алкокси і алкілтіо; "з В» вибирають з групи, що містить метил і аміно; і ВЗ вибирають з групи, що містить радикал, що вибирають з водню, галогену, алкілу, алкенілу, алкінілу, оксо, ціано, карбоксилу, ціаноалкілу, гетероциклілокси, алкілокси, алкілтіо, алкілкарбонілу, циклоалкілу, арилу, галогеналкілу, гетероциклілу, циклоалкенілу, аралкілу, гетероциклілалкілу, ацилу, алкілтіоалкілу, гідроксіалкілу, алкоксикарбонілу, арилкарбонілу, аралкілкарбонілу, аралкенілу, алкоксіалкілу, арилтіоалкілу, (Ф) арилоксіалкілу, аралкілтіоалкілу, аралкоксіалкілу, алкоксиаралкоксіалкілу, алкоксикарбонілалкілу, ГІ амінокарбонілу, амінокарбонілалкілу, алкіламінокарбонілу, М-ариламінокарбонілу, М-алкіл-М-ариламінокарбонілу, алкіламінокарбонілалкілу, карбоксіалкілу, алкіламіно, М-ариламіно, во М-аралкіламіно, М-алкіл-М-аралкіламіно, М-алкіл-М-ариламіно, аміноалкілу, алкіламіноалкілу, М-ариламіноалкілу, М-аралкіламіноалкілу, М-алкіл-М-аралкіламіноалкілу, М-алкіл-М-ариламіноалкілу, арилокси, аралкокси, арилтіо, аралкілтіо, алкілсульфінілу, алкілсульфонілу, аміносульфонілу, алкіламіносульфонілу, М-ариламіносульфонілу, арилсульфонілу і М-алкіл-М-ариламіносульфонілу; або її фармацевтично прийнятної солі. 65 3. Спосіб згідно з пунктом 2, де селективним інгібітором циклооксигенази-2 є сполука формули (ІІ), де: С вибирають з групи, що містить кисень і сірку;

   В 12 вибирають з групи, що містить карбоксил, нижчий алкіл, нижчий аралкіл і нижчий алкоксикарбоніл; 2772 вибирають з групи, що містить нижчий галогеналкіл, нижчий циклоалкіл і феніл; і вза є одним або більшою кількістю радикалів, що вибирають з групи, яка містить Н, галоген, нижчий алкіл, нижчий алкокси, нижчий галогеналкіл, нижчий галогеналкокси, нижчий алкіламіно, нітро, аміно, аміносульфоніл, нижчий алкіламіносульфоніл, 5--ленний гетероарилалкіламіносульфоніл, б--ленний гетероарилалкіламіносульфоніл, нижчий аралкіламіносульфоніл, 5-ч-ленний азотвмісний гетероциклосульфоніл, б--ленний азотвмісний гетероциклосульфоніл, нижчий алкілсульфоніл, необов'язково заміщений феніл, нижчий аралкілкарбоніл і нижчий алкілкарбоніл; або К 132 разом з кільцем Е утворюють нафтил.

   4. Спосіб згідно з пунктом 3, де: В 12 є карбоксилом; ла є нижчим галогеналкілом; і За є одним або більшою кількістю радикалів, що вибирають з групи, яка містить Н, галоген, нижчий алкіл, нижчий галогеналкіл, нижчий галогеналкокси, нижчий алкіламіно, аміно, аміносульфоніл, нижчий алкіламіносульфоніл, 5--ленний гетероарилалкіламіносульфоніл, б-членний гетероарилалкіламіносульфоніл, нижчий аралкіламіносульфоніл, нижчий алкілсульфоніл, б-членний азотвмісний гетероциклосульфоніл, необов'язково заміщений феніл, нижчий аралкілкарбоніл і нижчий алкілкарбоніл; або Б 733 разом з кільцем Е утворюють нафтил.

   5. Спосіб згідно з пунктом 4, де: Ва вибирають з групи, що містить фторметил, хлорметил, дихлорметил, трихлорметил, пентафторетил, гептафторпропіл, дифторетил, дифторпропіл, дихлоретил, дихлорпропіл, дифторметил і трифторметил; і За є одним або більшою кількістю радикалів, що вибирають з групи, яка містить водень, хлор, фтор, бром, йод, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, бутил, ізобутил, пентил, гексил, метокси, етокси, ізопропілокси, С трет-бутилокси, трифторметил, дифторметил, трифторметокси, аміно, М,М-диметиламіно, М,М-діетиламіно, о М-фенілметиламіносульфоніл, М-фенілетиламіносульфоніл, М-(2-фурилметил)аміносульфоніл, нітро, М,М-диметиламіносульфоніл, аміносульфоніл, М-метиламіносульфоніл, М-етилсульфоніл, 2,2-диметилетиламіносульфоніл, М,М-диметиламіносульфоніл, М-(2-метилпропіл)аміносульфоніл, М-морфоліносульфоніл, метилсульфоніл, бензилкарбоніл, 2,2-диметилпропілкарбоніл, фенілацетил і феніліабо С В'за разом з кільцем Е утворюють нафтил. о

   6. Спосіб згідно з пунктом 5, де: Ва вибирають з групи, що містить трифторметил і пентафторетил; і Ка є одним або більшою кількістю о радикалів, що вибирають з групи, яка містить водень, хлор, фтор, бром, йод, метил, етил, ізопропіл, ї- трет-бутил, метокси, трифторметил, трифторметокси, М-фенілметиламіносульфоніл, Зо М-фенілетиламіносульфоніл, М-(2-фурилметил)аміносульфоніл, М,М-диметиламіносульфоніл, - М-метиламіносульфоніл, М-(2,2-диметилетил)аміносульфоніл, диметиламіносульфоніл, 2-метилпропіламіносульфоніл, М-морфоліносульфоніл, метилсульфоніл, бензилкарбоніл, і феніл; або, де Б/За разом з кільцем Е утворюють нафтил. «

   7. Спосіб згідно з пунктом 2, де селективний інгібітор циклооксигенази-2 вибирають з групи, що містить: б-хлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; З с б-хлор-7-метил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; "» 8-(1-метилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; " б-хлор-7-(1,1-диметилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; б-хлор-8-(1-метилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 2-трифторметил-ЗН-нафтопіран-3-карбонову кислоту; ш- 7-(1,1-диметилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; -І б-бром-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 8-хлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; о б-трифторметокси-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; о 20 5,7-дихлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-феніл-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; г» 7,8-диметил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6,8-біс(диметилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 7-(1-метилетил)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 59 7-феніл-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; ГФ) б-хлор-7-етил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; б-хлор-8-етил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; де б-хлор-7-феніл-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6,7-дихлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6о 6,в-дихлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 2-трифторметил-ЗН-нафто!|2,1-в|піран-3-карбонову кислоту; б-хлор-8-метил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-хлор-6-метил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-хлор-6-метокси-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; бо б-бром-8-хлор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту;

   8-бром-6-фтор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 8-бром-6-метил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-бром-5-фтор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; б-хлор-8-фтор-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; б-бром-8-метокси-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 6-(І(фенілметил)аміно|сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 6-(диметиламіно)сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6-Кметиламіно)сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 70 6-(4-морфоліно)сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 6-(1,1-диметилетил)аміносульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6-(2-метилпропіл)аміносульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; б-метилсульфоніл-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-хлор-6-І(фенілметил)аміно|сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; б-фенілацетил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6,8-дибром-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 8-хлор-5,6-диметил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; 6,в8-дихлор-(5)-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту; б-бензилсульфоніл-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6-(М-(2-фурилметил)аміно|сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6-(М-(2-фенілетил)аміно|сульфоніл|-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонову кислоту; 6-йод-2-трифторметил-2Н-1-бензо-піран-З-карбонову кислоту; 7-(1,1-диметилетил)-2-пентафторетил-2Н-1-бензопіран-3-карбонову кислоту і б-хлор-2-трифторметил-2Н-1-бензотіопіран-3-карбонову кислоту; сч або її фармацевтично прийнятну сіль.

   8. Спосіб згідно з пунктом 2, де селективним інгібітором циклооксигенази-2 є сполука, що вибирають з групи: і) а)

   7 І.Д Ї ней б-нітро-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-3-карбонова кислота; М б)

   Ж м. щі вена р о ях Те Нав їх то ще. - с Есе "з б-хлор-8-метил-2-трифторметил-2Н-1-бензопіран-З-карбонова кислота; п в) ух мере: ак бен ЦІ, -1 оеЕденя п несе нетя я о ; ЖЕ (ав) 20 (5)-6-хлор-7-(1,1-диметилетил)-2-(трифторметил)-2Н-1-бензопіран-З-карбонова кислота; що) 7 ї вд пдсал пд щй Ї. щи й. іме) 2-трифторметил-2Н-нафто!|2,3-в|піран-3-карбонова кислота; д) й 6о ЖЕ я ска І а нок, Я, Й сх я , ць дже Ме те мякі КУН: бо б-хлор-7-(4-нітрофенокси)-2-(трифторметил)-2Н-1-бензопіран-3-карбонова кислота;

   е) й Ї ЕЕ но не ке тя ДИ рних СЕ епі Ор НЯ З

   І. хе Зони 70 (5)-6,8-дихлор-2-(трифторметил)-2Н-1-бензопіран-3-карбонова кислота; є) Ї тя ви всТЯ рен ЦО ШЕ я» пря я НЕ ше пен ЛКК се тлромя хе Моне б-хлор-2-(трифторметил)-4-феніл-2Н-1-бензопіран-З3-карбонова кислота; ж) кал ркекя кн р сафая хе еще вон ві дк Парнек й під ся ще хе сі сет седан о я в п Ер є ти й й шШщо в 6-(4-гідроксибензоїл)-2-(трифторметил)-2Н-1-бензопіран-3-карбонова кислота; з) що с МД; зд же о ни КК ну нки: | «в) 2-(трифторметил)-6-Ктрифторметил)тіо|-2Н-1-бензотіопіран-3-карбонова кислота; ї- ї) Й с Б ок сне гесв ще « Цей в р. НЩИ - хз Ж " 6,8-дихлор-2-трифторметил-2Н-1-бензотіопіран-3-карбонова кислота; ю І С щ і но ренні пір ре Ї. - і "у : й т Б уБЕрай о 6-(1,1-диметилетил)-2-«трифторметил)-2Н-1-бензотіопіран-3-карбонова кислота; Пе л) до сь ще ня й птн ЕН ее х в : : СН ГФ) крови Вени ци з я Б шля 6,7-дифтор-1,2-дигідро-2-(трифторметил)-3-хінолінкарбонова кислота; бо м) б5

   Бей ЇЇ. ч денне Шев; 95 ей я ще суша ше. ЖК я хи б-хлор-1,2-дигідро-1-метил-2-(трифторметил)-3-хінолінкарбонова кислота; н) ря ТІЙ ЧІ| тя Я ЕК: ТіК ОО б-хлор-2-(трифторметил)-1,2-дигідро/1,8)нафтиридин-3З-карбонова кислота; о) ї не нан : пеки яку Енея я рент нед Ге Вт ьн ї мк ТЖЕна Та (5)-6-хлор-1,2-дигідро-2--(трифторметил)-3-хінолінкарбонова кислота; або її фармацевтично прийнятна сіль, с і будь-які їх комбінації. о

   9. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є сполука формули (І), що вибирають з групи, яка містить: а) Б здо ще я о ВХ ни : як Я оперою Кай ще (ав) сови сей М: ї- Матв кю 5 о й лай б)

   Яї.. ей « нин НЕ зм Дике ЦЕХ й ках 50 ее ля ве диткея ЩІ З х |. светра днк; се І-Ь каз ра з Зо «КІ -І в) слой тах х Н і ма її ' ш- ПЕВНЕ вари: гпкат ШМК терор В тен ск В Я КН о ЩЕ сени са ср ее драдн нене В; Ме Й ці Є й с Даня (ав) й: ї Я З те І Я о) щи. Н чі м Ї, рн, й я "- г) ГФ) не ю й Шк що ще пеня ви д) б5

   Я нн Ше Й а ' шия ШЕ паз ЗЕД Ех ся Кен у й й ж й І щи пен їй лине, й ме поли бе БЕ ІЙ щи є) СЕ ї: Не

   І. спенмкраят пруяще велх їй Квесо най й у й ен їх НЕ плит або її фармацевтично прийнятна сіль, і будь-які їх комбінації.

   10. Спосіб згідно з пунктом 3, де згаданий селективний інгібітор циклооксигенази-2 вибирають з групи, що містить: а) І БД І кй Е бо я ше кине о ря лет Мей пен йо, жо т сви ес с ун Ка І (ав) і б) (ав) Ніс ть пани и са ся щ ве - Теаниннии т ня Г ес Яр я сн ник нен ет дено ге ЕЕт та ОВ ї ій К- зт зх ак Ле МЕЖ: ЕІ ЖАН Її Я; їх « їщикс: Ко зо ВЕЕЄ НИХ 2 с або її фармацевтично прийнятна сіль, і будь-які їх комбінації. :з» 11. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є сив и прак тех бра пен ятки що ет Бель нти . вин ни; о ше шк Но У й («в або її фармацевтично прийнятна сіль. Кз 12. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є вет їп--ьх пакт ХА -з реа й, т ня й ес ри я сн Яни нен ет дено КЕ т че і ій ж тя Ф) «хе Це пиву ЕІ ЖАН Ше: жа ДАЕ ян бо або її фармацевтично прийнятна сіль.

   13. Спосіб згідно Кк! пунктом 1, де селективним інгібітором циклооксигенази-2 є 4-(4-(метил)сульфоніл)феніл)|-3-феніл-2(5Н)фуранон або його фармацевтично прийнятна сіль.

   14. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є 65 4-К5-метил-З-феніл)-4-ізоксазоліл|фенілсульфонамід або його фармацевтично прийнятна сіль.

   15. Спосіб згідно з пунктом 71, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є

   2-(6-метилпірид-3-ил)-3--4-метилсульфонілфеніл)-5-хлорпіридин або його фармацевтично прийнятна сіль.

   16. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є 4-(5-(4-метилфеніл)-3-"-трифторметил)-1Н-піразол-1-іл|френілсульфонамід або його фармацевтично прийнятна сіль.

   17. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є 4-(2-метил-4-циклогексил)-5-оксазоліл|фенілсульфонамід або його фармацевтично прийнятна сіль.

   18. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є 4-І5-(3-фтор-4-метоксифеніл)-3--дифторметил)-1Н-піразол-1-іл|"- бензолсульфонамід або його фармацевтично 7/0 прийнятна сіль.

   19. Спосіб згідно з пунктом 2, де згаданим селективним інгібітором циклооксигенази-2 є (5)-6,8-дихлор-2-(трифторметил)-2Н-1-бензопіран-3-карбонова кислота або її фармацевтично прийнятна сіль.

   20. Спосіб згідно з пунктом 2, де селективним інгібітором циклооксигенази-2 є сполука формули: ве , пліч ше стек Бе о де: Х є О або 5; 2725 є нижчим галогеналкілом; ВЗ вибирають з групи, що містить водень і галоген; с ВЗ вибирають з групи, що містить водень, галоген, нижчий алкіл, нижчий галогеналкокси, нижчий алкокси, о нижчий аралкілкарбоніл, нижчий діалкіламіносульфоніл, нижчий алкіламіносульфоніл, нижчий аралкіламіносульфоніл, нижчий гетероаралкіламіносульфоніл, 5--ленний азотвмісний гетероциклосульфоніл і б--ленний азотвмісний гетероциклосульфоніл; ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкіл, галоген, нижчий алкокси і арил; і сч 35" вибирають з групи, що містить водень, галоген, нижчий алкіл, нижчий алкокси і арил; Га») або її фармацевтично прийнятна сіль.

   21. Спосіб згідно з пунктом 20, де: о 225 вибирають з групи, що містить трифторметил і пентафторетил; - В 35 вибирають з групи, що містить водень, хлор і фтор; їм ВЗ вибирають з групи, що містить водень, хлор, бром, фтор, йод, метил, трет-бутил, трифторметокси, метокси, бензилкарбоніл, диметиламіносульфоніл, ізопропіламіносульфоніл, метиламіносульфоніл, бензиламіносульфоніл, фенілетиламіносульфоніл, метилпропіламіносульфоніл, метилсульфоніл і « морфоліносульфоніл; ВЗ" вибирають з групи, що містить водень, метил, етил, ізопропіл, трет-бутил, хлор, метокси, - с діетиламіно і феніл; і н 35" вибирають з групи, що містить водень, хлор, бром, фтор, метил, етил, трет-бутил, метокси і феніл. » 22. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: В" вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, циклоалкіл, арил, гетероарил, гетероаліцикліл, гідрокси, алкокси, -С(О)К 75, «МЕ ЗА Я, (СН) Во і -С(О)МА в; ї 2 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, тригалогенметил, гідрокси, алкокси, -МЕ'ЗВ Я, - -МВ Зе(о3В8 7, -С(ОВ У, арил, гетероарил і -(0)25МВ ЗВ; о 3 вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, тригалогенметил, гідрокси, алкокси, --СОВ5, МА ЗВ", арил, гетероарил, -МА 35(0)28 77, -5(02М8 Зв, «Ме Зс(08 и і -МА ЗС(О)0В и; о ВЕ" вибирають з групи, що містить водень, галоген, алкіл, гідрокси, алкокси і -МАЕ ЗВ; ІК) В? вибирають з групи, що містить водень, алкіл і -С(О)В 79; В? вибирають з групи, що містить водень, алкіл і -С(О)В 79; В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, З-карбоксипропіл, гетероарил, -С(О)К 7 ії -С(ОВ 9; В5 ЇВ можуть об'єднані утворювати групу, що вибирають з групи, яка містить -(СНо)а-, ««СНа)в- і -«СНа)в-; (Ф; ВЗ ї Е? незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл і арил; г В "9 вибирають з групи, що містить гідрокси, алкокси, арилокси, -ЩВ ХСН 2 і -МА'ЗВ Я; В" вибирають з групи, що містить водень і алкіл; бо В": вибирають з групи, що містить -МЕ "ЗВ 74, гідрокси, -С(О)В "5, арил і гетероарил; ВЗ" незалежно вибирають з групи, яка містить водень, алкіл, циклоалкіл, арил і гетероарил; ВЗ їв" можуть об'єднані утворювати групу, що вибирають з групи, яка містить -(СН о)4-, -««(СНао)в-, «(СНУ О(СН2»- 1 «СНгЬМ(СНзХСНо)2-; В"? вибирають з групи, що містить водень, гідрокси, алкокси і арилокси; 55 В" вибирають з групи, що містить гідрокси, -«С(О)В 75, «МВ Зв ї -«С(О)Ме Зв;

   В" вибирають з групи, що містить алкіл, циклоалкіл, арил і гетероарил; і пі г є, незалежно, 1, 2, 3, або 4; або її фармацевтично прийнятна сіль.

   23. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: В5 є -СОВ 9, де 279 є -МВ (СНО, де: В" є воднем або нижчим алкілом; пеєг або З;і 272 є-МВ ЗАВ, де КЗ | ВК" є, незалежно, нижчим алкілом.

   24. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: 25 є -СОВ 9, де КО є -МВ (СНО) 1, де: В" є воднем або нижчим алкілом; пеєг або З;і /5 В" є-МА ЗВ, де КЗ ї КУ разом утворюють групу, що вибирають з -«СНао)д-, ««СНо)в-, ««СНо)»-О-(СНо)ю- або «СНгоМ(СНЗуСН оч.

   25. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де КО є М-(2-диметиламіноетил)амінокарбонілом, М-(2-діетиламіноетил)-М-метиламінокарбонілом, М-(З-диметиламінопропіл)амінокарбонілом, М-(2-діетиламіноетил)амінокарбонілом, М-(2-етиламіноетил)амінокарбонілом, М-(З-етиламінопропіл)амінокарбонілом або М-(З-діетиламінопропіл)амінокарбонілом.

   26. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де КО є М-(2-діетиламіноетил)амінокарбонілом або М-(2-етиламіноетил)амінокарбонілом.

   27. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де 9 є с З-піролідин-1-ілпропіламінокарбонілом, З-морфолін-4-ілпропіламінокарбонілом, о 2-піролідин-1-ілетиламінокарбонілом, 2-морфолін-4-ілетиламінокарбонілом, 2-(4-метилпіперазин-1-іл)етиламінокарбонілом, 2-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)етиламінокарбонілом, 3-(4-метилпіперазин-1-іл)упропіламінокарбонілом або 3-(3,5-диметилпіперазин-1-іл)упропіламінокарбонілом.

   28. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де БУ є-СОВО, дев'о є С -МАК'7ЗВМ, де в'З є воднем і БК" є нижчим алкілом заміщеним гідрокси, арилом, гетероаліциклілом, о гетероарилом або карбокси.

   29. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де Б9 є о 2-триазин-1-ілпропіламінокарбонілом, 2-триазин-1-ілетиламінокарбонілом, З-імідазол-1-ілпропіламінокарбонілом, /- че піридин-4-ілметиламінокарбонілом, 2-піридин-2-ілетиламінокарбонілом або 2-імідазол-1-ілетиламінокарбонілом. Зо 30. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: т 25 є СОВ ОО, де КО є -МВ (СНО) У, де: В" є воднем або нижчим алкілом; пеєг або з; « 20 В" є -МВ "ЗВ, де КЗ ії "Я разом утворюють гетероцикл. - с 31. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: й 25 є -СОВ У, де КО є МА(СНО) В У, де: "» 2" є воднем або нижчим алкілом; пеєг або з; В" є-МА ЗВУ, де ВЗ ї ВУ разом утворюють 5-, 6- або 7--ленний гетероцикл, що містить карбонільну групу - і один або два атоми азоту в кільці. -І 32. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де К9У є 2-(3-оксопіперазин-1-іл)етиламінокарбонілом, 2-(імідазолідин-1-іл-2-он)етиламінокарбонілом, ші 2-(тетрагідропіримідин-1-іл-2-он)етиламінокарбонілом, 2-(2-оксопіролідин-1-іллетиламінокарбонілом, о 20 3-(3-оксопіперазин-1-іл)/пропіламінокарбонілом, 3-(імідазолідин-1-іл-2-он)пропіламінокарбонілом, З-(тетрагідропіримідин-1-іл-2-он)пропіламінокарбонілом або 3-(2-оксопіролідин-1-іл)упропіламінокарбонілом. їз 33. Спосіб згідно з будь-яким з пунктів 22-32, де інгібітором протеїнкінази є сполука формули (І), де: В? вибирають з групи, що містить водень і нижчий алкіл; і ря В" вибирають з групи, що містить водень, алкіл, арил, гетероарил і -С(О)В, де В є гідрокси, нижчим алкілом або арилом. ГФ) 34. Спосіб згідно з пунктом 33, де: ко ВЕ! є воднем, нижчим алкілом, -к(оМе в, циклоалкілом або арилом; В? є воднем, галогеном, нижчим алкокси, ціано, арил, або -5(0)2МВ ЗВ", де КЗ є воднем і К"" є воднем, бо арилом або алкілом; ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкокси, -С(О)В 75, -МВ'ЗС(ОВ , арил і гетероарил; і ВЕ" є воднем.

   35. Спосіб згідно з пунктом 34, де: ВЕ! є воднем або фенілом; бо 22 є воднем, хлором, бромом, фтором, метокси, етокси, фенілом, диметиламіносульфонілом, ціано,

   метилсульфонілом, етилсульфонілом, бензилсульфонілом, З-хлорфеніламіносульфонілом, карбокси, метокси, аміносульфонілом, метиламіносульфонілом, феніламіносульфонілом, піридин-3-іламіносульфонілом, диметиламіносульфонілом або ізопропіламіносульфонілом; ЕЗ є воднем, метокси, карбокси, фенілом, піридин-3-ілом, 3,4-дихлорфенілом, 2-метоксі-5-ізопропілфенілом, 4-н-бутилфенілом, З-ізопропілфенілом; і В є воднем.

   36. Спосіб згідно з пунктом З5, де: В! є воднем; В2 є воднем, ціано, фтором, хлором або бромом; ВЗ є фенілом; і В є воднем.

   37. Спосіб згідно з пунктом 2, де: ВЕ! є воднем, нижчим алкілом, -к(оМе в, циклоалкілом або арилом; В? є воднем, галогеном, нижчим алкокси, ціано, арилом або -5(0)МЕ ЗВ", де КЗ є воднем і К"" є воднем, арилом або алкілом; ВЗ вибирають з групи, що містить водень, нижчий алкокси, -С(О)В 75, -«МЕ ЗС(ОВ 1, арил і гетероарил; і В є воднем.

   38. Спосіб згідно з пунктом 2, де: В" є воднем або метилом; В2 є воднем, ціано, хлором, фтором або бромом; ВЗ вибирають з групи, що містить водень або феніл; і КЕ" є воднем. с 29 39. Спосіб згідно з пунктом 2, де КЗ є -«СОВО, де ВО є «-«МЕ ЗВ, де К"З є воднем і Б" є нижчим алкілом, (3 заміщеним гідрокси, нижчим алкілом, заміщеним гідроксіалкіламіно, карбокси або -МЕ'ЗВ"У, де ві в є незалежно воднем або нижчим алкілом.

   40. Спосіб згідно з пунктом 2, де Кб є (2-(діетиламіно)-2-гідрокс|етиламінокарбонілом, с зо 2-(М-етил-М-2-гідроксіетиламіно)етиламінокарбонілом, карбоксиметиламінокарбонілом або 2-гідроксіетиламінокарбонілом. о

   41. Спосіб згідно з пунктом 2, де КЗ є -СОВК ОО, де КО є «МЕ (СНО), де В"? є -«М'ЄО3ЗМВ ЗВ"? або «3 -ЩОНЖ 13, де КЗ | Б7я незалежно вибирають з групи, яка містить нижчий алкіл. М

   42. Спосіб згідно з пунктом 2, де БКб5 є 2-(М-гідрокси-М-етиламіно)детиламінокарбонілом або 32 2-ІЇМ'ЄО(СоНв)г|етиламінокарбонілом. -

   43. Спосіб згідно з пунктом 41 або 42, де: В? вибирають з групи, що містить водень або метил; і Б вибирають з групи, що містить метил, водень або феніл. «

   44. Спосіб згідно з пунктом 2, де: 70 В! є воднем; як с В2 є воднем, ціано, хлором, фтором або бромом; ;з» ВЗ є воднем; і ВЕ" є воднем.

   45. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітор кінази вибирають з групи, що містить: зи ; їЕ соня ЕД - І удресей ско ягрчи пс: с щі ре: АН с вс: ЦІЙ їз ши и як '

   , з. щ вах о Я мийна о : ше В бо пір що Ї; док б5 ай . Пе ' пх пк пса й сн та, теля пекти ттресяв їте щкк Кк п тилнви Же пах я хе що Її й Коен поши 000ОИК кла ей де Зх нй лох ее 70 - В ще . зи! гне ще кли ї й вт ке КІХа Й їй Щье сн ХК У ек с Ск -ЯЯнти БЕ ши Ж тре з Он рек кій о ши дн я то й хе п їх ре а ща т? ще си т 2 ря «й ШЕ Ї дя. Щ се р ре т Кей Я НОВЕ нн о є и т Б Й семи й ще хе : с Се ' в - В о о ронкх зна НЕ рхук ся Мо в ШІ ШЕ сло Як си сек НВ сек нен ШК : ці у зе те В ї- не Все з. : РА Ки т ях наший і «

   НА. й Яке Зетуири сь МЕ пкт ГИ тя га ; 2 мя й і й ЕЕ СКК ле: Е т ше Е с сЕкежен М зеспрвнув ЕЕ ЗЕ за нн 7 пити -1 ше їЕ й то кам е а Не; ва о й Га» Ж Я І сей І З сов ве ре ля Ява НИЙ десни БЕНВ : ЖЕ тех НК | зі. Ба до ко або їх І -малат.

   46. Спосіб згідно з пунктом 2, де інгібітором кінази є сполука формули: бо б5 ж . з СеуВа рег сосвен я й и її НЕ ве Я щ оВвАіА-Е яр сн кт м рен все Его шт р пт де, при она кій

   47. Спосіб лікування або попередження раку, що полягає у введенні ссавцеві, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості інгібітора протеїнкінази формули (1): г дк , ЕЗ що ні Ка Я. А ска в го ен -й МІ 7 у не Те ие ей ЧЕ ен вищ есе СКК ти "7 уд Є кенвня в кра р в за в комбінації з селективним інгібітором циклооксигенази-2 формули: с ех о т, вет: защокх ЯВНО: Леди десант ШІ ШИ Хє жкщеенеиче писиененннях шт сч або його фармацевтично прийнятною сіллю. | «в)

   48. Спосіб лікування або попередження раку, що полягає у введенні ссавцеві, що потребує такого лікування, їч- терапевтично ефективної кількості інгібітора протеїнкінази формули (1): - ліж ГЕ сія й З їй ще - ШІ НЯ - годе ЗО пееююе с я ше ве а й Шерсть ДЕ стрес и » | я Вов Я Тс кожи есе , щ ни -1 в комбінації з селективним інгібітором циклооксигенази-2 формули: А ї- яти те Ух З ЕВ Шо ще гу дей зо І В Кв Неон с ко вет: Оуен, о м а ши ши шш шо "є ШІ «фо ще ДМ вв Каже ПНЯ ; як п Із Пе се ДАЕ ян або його фармацевтично прийнятною сіллю. о 49. Спосіб лікування або попередження раку, що полягає у введенні ссавцеві, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості ко інгібітора протеїнкінази формули (1): 60 б5 ж а ЯНІЕ я касу Явокя Я ДеястЕня Сеня ст піде яв я ія Ж Тв я си яЕ я р ан 70 Її. зво Це в комбінації з селективним інгібітором циклооксигенази-2 формули: де й яке ПА ВС, ще екс ян ер ся ВИ син з ВЕ я КА ав с ре рон вирі дор о ВЕ й ж - НН я я зве їх Верн МК їз або його фармацевтично прийнятною сіллю.

   50. Спосіб лікування або попередження раку, що полягає у введенні ссавцеві, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості інгібітора протеїнкінази формули (1): й с зви содНЯх 8 ВИОде ст піде яв я ія Ж Тв Е: с окр Меянв о Це в комбінації з селективним інгібітором циклооксигенази-2 формули: ї- Ес щи каже Що ще тик ч св у ТЕ СЕ, х люту с де Дт І зи, нені їЕ пон ьнштя з пав окт, НЯ Де ше ве « ВЕЖ: ПИВ 20 ій ке - Ше: жа с ДАЕ ян ;» , або його фармацевтично прийнятною сіллю. Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних -і мікросхем", 2006, М 10, 15.10.2006. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. -І У р («в) («в) Ко) іме) 60 б5