EA005073B1 - Применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5h)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки - Google Patents

Применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5h)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки Download PDF

Info

Publication number
EA005073B1
EA005073B1 EA199800139A EA199800139A EA005073B1 EA 005073 B1 EA005073 B1 EA 005073B1 EA 199800139 A EA199800139 A EA 199800139A EA 199800139 A EA199800139 A EA 199800139A EA 005073 B1 EA005073 B1 EA 005073B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
pch8
colon
apb
polyps
samples
Prior art date
Application number
EA199800139A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199800139A1 (ru
Inventor
Стейша Каргман
Джилли Эванс
Томас Дж. Саймон
Original Assignee
Мерк Энд Ко., Инк.
Мерк Фросст Кэнада Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9603470.7A external-priority patent/GB9603470D0/en
Application filed by Мерк Энд Ко., Инк., Мерк Фросст Кэнада Инк. filed Critical Мерк Энд Ко., Инк.
Publication of EA199800139A1 publication Critical patent/EA199800139A1/ru
Publication of EA005073B1 publication Critical patent/EA005073B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/603—Salicylic acid; Derivatives thereof having further aromatic rings, e.g. diflunisal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/612—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid
    • A61K31/616—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid by carboxylic acids, e.g. acetylsalicylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lasers (AREA)
  • Harvester Elements (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
  • Soil Working Implements (AREA)

Abstract

Предложено применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5Н)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки.

Description

Предпосылки создания изобретения
Данное изобретение касается применения 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5Н)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки. В частности, данное изобретение касается предотвращения или замедления трансформации аденомы толстой кишки в аденокарциному толстой кишки.
Фермент простагландин С/Н синтаза (РСН8, также известная как циклооксигеназа СОХ) является ключевым ферментом биосинтетического процесса, приводящего к образованию простагландинов (УаЙлиз, \νΌ.. Рс1сг5оп. М.В., апб Р1ексЫег, кВ. еб. Ргозкад1апб1пз ίη С11шса1 Ргасбсе. Νο\ν Уогк: Вауеп, 1989, апб Ωο^ίΙΙ. О.Ь. Ргозкад1апбт епборегох1бе зупкЫазе: геди1акюп апб епхуте ехргеззюп. ВюсЫт. ВюрНуз. Ас1а, 1083; 121-134, 1991). Эти простаноиды являются сильными биологическими медиаторами с разнообразными нормальными физиологическими эффектами, и они также имеют отношение к ряду патологических состояний, включая воспаление и неопластическую трансформацию ^акктз, ν.Ό., Рекегзоп, М.В., апб Р1ексЫег, кВ. еб. Ргозкад1апбш8 ш С11шса1 Ргасбсе. №\ν Уогк: Вауеп, 1989, апб Иедакк, Э.Ь. Ргозкад1апб1п епборегох1бе зупкЫазе: геди1акюп апб епхуте ехргеззюп. ВюсЫт. В юрку з. Аска, 1083; 121-134, 1991, апб Х1е, V., ВоЬегкзоп, Э.Ь., апб 81ттопз, Э.Ь. М1кодеп-тбис1Ь1е ргозкад1апбт С/Н зупкЫазе: а пе\у 1агде1 Гог попзкего1ба1 апбтйаттакогу бгидз. Эгид Эеу. Вез., 25; 249-265, 1992). Идентифицированы две изоформы РСН8 (Ьо11, Р.1. апб Сагау1ко, В.М. ТЫе 1зоГогтз оГ сус1оохудепазе: зкгискиге апб кипскюп. Ехрегк Орт. 1пуезк. Огидз, 3; 1171-1180, 1994). РСН8-1 обычно экспрессирует в большинство тканей и предлагалась для синтеза простагландинов, опосредующих нормальные физиологические функции. Вторая изоформа, РСН8-2, характеризуется быстрой индукцией под влиянием различных стимулов, включая митогены, гормоны, цитокины и факторы роста (Ьо11, Р.1. апб Сагау1ко, В.М. ТЫе 1зоГогтз оГ су с1ооху депазе: зкгискнге апб Гипскюп. Ехрегк Орт. Гпуезк. Игидз, 3; 1171-1180, 1994 апб ВакЕзбЫ, В., Вокктд, В., апб ВакЫе, Υ.8. СОХ-1 апб СОХ-2: То\гагб кЫе беуе1ортепк оГ тоге зе1есбуе Ν8ΑΙΌ8. Эгид №\гз Регзресбуез, 7; 501-512, 1994). При воспалительных процессах простагландины, синтезируемые РСН8-2, могут быть главными эффекторами (МазГеггег, 1.Ь., Ζ\\όιΕΓ В.8., МапЫпд, Р.Т., Наизег, 8.Ό., Ьеайу, К.М., 8ιηίΐ6 ν.Π, 1закзоп, Р.С., апб 8е1Ьегк, К. 8е1есбуе 1пЫЬ1боп оГ тбис1Ь1е сус1оохудепазе 2 ш у1уо 1з апб1Ы1аттакогу апб поп-и1сегодешс. Ргос. Νη11. Асаб. 8с1. И8А, 91; 3228-3232, 1994). Показано, что как РСН8-1, так и РСН8-2 являются мишенью для нестероидных противовоспалительных средств (НСПВС) (ВакбзбЫ, В., Вокбпд, В., апб ВакЫе, Υ.8. СОХ-1 апб СОХ-2: То\гагб кЫе беуе1ортепк оГ тоге зе1еск1уе ЖА1Э8. Эгид №\гз
Регзресбуез, 7; 501-512, 1994 апб О'ЖПГ С.Р., МапЫЫ, кА., Кагдтап, 8., Υе^деу, 1., К^ап, М.У Ра1диеугек, 1.-Р., АЬгатоу1кх, М., Кеппебу, В.Р., Оие11ек, М., Сготбзб, V., Си1р, 8., Еуапз, кР., Рогб-НиксЫпзоп, А.\\;. апб Уккегз, Р.1. Оуегехргеззюп оГ Нитап ргозкад1апбт С/Н зупкЫазе-1 апб -2 Ьу гесотЫпапк уасЫЫа У1гиз: шЫЫбоп Ьу попзкего1ба1 апб-тйаттакогу бгидз апб ЫозупкНез1з оГ 15-Ьубгохуе1созакекгаепо1с ааб. Мо1. РЫагтасоР 45; 245-254, 1994 апб Эе νίΗ, ИЪ., Меабе, Е.А., апб 8ιηίΐ6 ν.6. РСН зупкбазе 1зоепхуте зе1еск1У1ку: кНе рокепба1 Гог заРег попзкего1ба1 апкыпПаттакогу бгидз. Ат. 1. Меб. (8ирр1.), 95; 408-448, 1993). См. также заявку VО 94/14977, публ. 7 июля 1994, в которой описан способ оценки активности ингибиторов РСН8-2, а также их селективности к РСН8-2 по сравнению с РСН8-1.
Повышенные уровни простагландинов отмечены при различных видах рака, включая карциномы легкого и толстой кишки (МсЬетоге, Т.Ь., НиЬЬагб, ν.Ο, Ыккегзк, С.Ь., Ыи, М.С., МШег, 8., МсМабоп, КА., Едд1езкоп, 1.С., апб Воуб, М.В. РгоГбез оГ ргозкад1апбт ЬюзупкНез1з т погта1 1ипд апб китог Оззпе Ггот 1ипд сапсег рабепкз. Сапсег Вез., 48; 3140-3147, 1988, а также В1даз, В., Со1бтап, Ι.8., апб Ьеуте, Ь. А1кегеб еюозапо1б 1еуе1з ш Нитап со1оп сапсег. 1. ЬаЬ. С1Ы. Меб., 122; 518-523, 1993). В частности, показано повышение уровней простагландинов в доброкачественных полипах аденомы и их дальнейшее увеличение в злокачественной ткани толстой кишки по сравнению с гистологически нормальной слизистой оболочкой. Так как у простаноидов отмечена иммуносупрессивная активность, эти вещества могут иметь значение для развития опухоли (Еатезк, ИЪ., Н1хзоп, Ь.к, апб А1Ьегкз, Ό.8. Р1гох1сат апб окНег сус1оохудепазе шЫЫкогз: рокепйа1 Гог сапсег сНеторгеуепбоп. (8ирр1 1. Се11. ВюсНет., 161.); 156-166, 1992).
С конца 1970-х годов исследователи рассматривают возможность того, что аспирин и подобные ему нестероидные противовоспалительные средства (НСПВС) могут быть успешно использованы для лечения некоторых видов рака, включая рак толстой кишки.
Первое эпидемиологическое исследование, предполагающее, что аспирин может снижать риск возникновения рака прямой и толстой кишки, было проведено в 1988г. с помощью ретроспективных пробных анализов в Мельбурне, Австралия (Сапсег, Вез., 48: 4399-4404, 1988). В результате этого исследования обнаружено 40%-ное снижение риска возникновения рака толстой кишки среди лиц, регулярно принимающих аспирин, по сравнению с теми, кто не принимает аспирин. Недавно данные НеакН, ек а1. позволили предположить возможность применения НСПВС для профилактики новообразований прямой и толстой кишки (НеакЫ, Ον., 1г., ТЫип, М.1., СгеепЬегд, Е.В., Ьеут, В., апб Магпекк, Ь.1. №пз1егспба1 апб-тйаттакогу бгидз апб Питал сапсег. Сапсег, 74; 2885-2888, 1994). Однако, несмотря на это и последующие исследования, не существовало надежных доказательств, связывающих применение аспирина и предотвращение рака толстой кишки, а также демонстрирующих патологическую связь между раком прямой и толстой кишки и РСН8 или терапевтического ингибирования РСН8 путем введения аспирина. Например, пациенты, больные артритами, просто могут иметь меньшую предрасположенность к раку толстой кишки.
В данной заявке описаны исследования, в которых проанализирована экспрессия человеческого РОН8-1 и РОН8-2 белка в 25 парах нормальных и аутологичных опухолей толстой кишки, в 4 предзлокачественных полипах толстой кишки, 5 контрольных образцов ткани толстой кишки (взятых у неонкологических пациентов) и в 3 парах нормальной и раковой ткани молочной железы человека. К результатам этого исследования относятся следующие факты: уменьшение белка РСН8-1 в опухолевой ткани толстой кишки по сравнению с гистологически нормальной слизистой оболочкой толстой кишки, и наличие РСН8-2 в большинстве образцов опухолевых тканей толстой кишки, тогда как в нормальных тканях, полипах и образцах раковых тканей молочной железы этот белок практически не определяется. Увеличение уровня простагландинов в опухолевой ткани толстой кишки происходит в результате деятельности индуцируемой изоформы РСН8-2. Эти исследования подтверждают предположение авторов о том, что трансформация аденомы толстой кишки в аденокарциному опосредуется значительной и неожиданно высокой продукцией РСН8-2 в аденоме. Следовательно, неожиданно обнаружен способ замедления или предотвращения трансформации аденомы толстой кишки в аденокарциному, заключающийся во введении пациенту, страдающему ЕЛР (РатШа1 абепота1оиз Ро1уро818, семейный аденоматозный полипоз), или пациенту с одной или несколькими аденомами толстой кишки, нетоксичного терапевтически эффективного количества 3-фенил-4-(4метилсульфонилфенил)-2-(5Н)-фуранона (рофекоксиб), при этом указанное количество эффективно для ингибирования РСН8-2 в указанной аденоме.
Краткое описание фигур
Фиг. 1. Показательный анализ иммуноблотинга экспрессии белка РСН8-1 и РОН8-2 из нормальной слизистой оболочки толстой кишки человека и аутологичной опухолевой ткани.
Фиг. 2. Количественная оценка изменений в экспрессии белка РСН8-1 и РОН8-2 в соответствующих опухолевых тканях по сравнению с аутологичной нормальной слизистой оболочкой.
Фиг. 3. Анализ иммуноблотинга, демонстрирующий экспрессию РСН8-1 и РОН8-2 в полипах мышей с удаленным геном АрсА716 размером от 0,3 до 5 мм в диаметре.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение относится к применению 3 -фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)2-(5Н)-фуранона, являющегося нестероидным противовоспалительным средством (НСПВС), для лечения или профилактики аденомы толстой кишки.
Указанное соединение известно как препарат рофекоксиб, выпускаемый фирмой Мерк под торговой маркой Уюхх®.
Подробное описание фигур
Фиг. 1. Показательный анализ иммуноблотинга экспрессии белка РСН8-1 и РОН8-2 в нормальную слизистую оболочку толстой кишки человека и в аутологичную опухолевую ткань.
Исследование иммуноблотинга проводили с использованием анти-РСН8-1 антисыворотки (фиг. 1А) и исследование иммуноблотинга тех же образцов, что представлены на фиг. 1А, проводили с использованием анти-РОН8-2 антисыворотки (фиг. 1В). Очищенные стандарты РСН8 и образцы микросомальных белков (50 мкг/дорожку) разделяли с помощью 8П8-РАОЕ, переносили на нитроцеллюлозу и подвергали иммуноблотингу с использованием анти-РОН8 антисывороток, регистрируя путем усиления хемилюминесценции. Номера 1-4 соответствуют образцам, взятым у 4 выбранных пациентов из 25 тестируемых пациентов. Денситометрические значения для пациентов 1-4 на этой фигуре соответствуют пациентам под номерами 17-20, как показано на фиг. 2. Буквы N и Т обозначают подходящие образцы нормальных и опухолевых тканей слизистой оболочки толстой кишки каждого пациента, соответственно. Очищенные стандарты РОН8-1 и РОН8-2 показаны в левой части рисунка. Обозначены положения маркеров молекулярного веса.
Фиг. 2. Сравнительная количественная оценка изменения экспрессии белков РОН8-1 и РОН8-2 в аутологичных образцах соответствующих опухолевой и нормальной тканей слизистой оболочки.
Аликвоты стандартов РОН8 и микросомальных белков от 25 пациентов (50 мкг/дорожку) разделяли с помощью 8П8-РАОЕ, переносили на нитроцеллюлозу и подвергали иммуноблотингу с использованием анти-РОН81 и анти-РОН8-2 антисывороток, регистрируя путем усиления хемилюминесценции. Количества белка РОН8 определяли с помощью денсиометрии. Для приблизительной оценки количества белка РОН8-1 и РОН8-2 в микросомальных образцах нормальной и опухолевой ткани слизистой оболочки использовали значения оптической плотности, полученные при авторадиографическом сканировании известных количеств очищенных стандартов РОН8-1 и РОН8-2. Представленные значения демонстрируют изменения экспрессии (в нг) в опухолевую ткань слизистой оболочки по сравнению с нормой у каждого пациента.
Фиг. 3. Исследования иммуноблотинга, демонстрирующие экспрессию РСН8-1 и Р6Н8-2 в полипы диаметром 0,3-5 мм (дорожки 1-5 соответствуют образцам, полученным из полипов с приблизительным диаметром 1-5 мм соответственно). Белок РСН8-1 обнаружен во всех контрольных образцах тонкой и толстой кишки и в образцах полипов. Иммунореактивность РСН82 не обнаружена в контрольных образцах кишечника и толстой кишки. Хотя в крупных полипах кишечника (диаметр 3-5 мм) обнаружены низкие уровни белка РСН8-2 (дорожки 3, 4 и 5), были обнаружены повышенные уровни иммуноактивности РСН8-2 во всех образцах полипов толстой кишки с диаметром 1-5 мм (дорожки 15) и очень высокие уровни белка РСН8-2 найдены в полипах с диаметром 2-3 мм (дорожки 2 и 3). В качестве стандартов для электрофореза применяли очищенный бараний белок РСН8-1 и РСН8-2 (5, 10 и 20 нг), что соответственно отмечено на фигуре.
Подробное описание изобретения
По оценкам специалистов, ключевым событием в трансформации аденомы толстой кишки в аденокарциному толстой кишки является приобретенная способность клеток аденомы внедряться в базальную мембрану субмукозного слоя толстой кишки.
Соответственно, замедление или профилактика появления способности аденомы или части ее клеток внедряться в базальную мембрану субмукозного слоя толстой кишки является важным для лечения и профилактики аденомы толстой кишки.
Указанная способность аденомы, как показано, ингибируется ингибированием образования РСН8-2 в указанной аденоме.
Поэтому настоящее изобретение касается применения 3 -фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)2-(5Н)-фуранона, представленного структурной формулой о
II СН — 8 3 II
О и обладающего сильным избирательным ингибирующим действием в отношении РСН82, для лечения или профилактики аденомы толстой кишки.
Указанное соединение известно как препарат рофекоксиб (КоГесохФ), выпускаемый фирмой Мерк под торговой маркой Уюхх®.
Применение 3 -фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5Н)-фуранона при лечении или профилактике аденомы толстой кишки включает введение его перорально, наружно, парентерально, путем вдыхания спрея или ректально в виде стандартных лекарственных препаратов, содержащих подходящие нетоксичные фарма
цевтически приемлемые наполнители, добавки и разбавители. Термин парентеральный в том смысле, в котором он здесь используется, включает подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, внутригрудинные инъекции или вливания. Рофекоксиб может эффективно применяться не только для лечения теплокровных животных, таких как мыши, крысы, лошади, рогатый скот, овцы, собаки, кошки и т.д., но и для лечения человека.
Фармацевтические композиции, содержащие активный ингредиент, могут быть в форме, удобной для перорального применения, например в виде таблеток, облаток, лепешек, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул и сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, могут быть приготовлены с помощью любого метода, известного специалистам в области производства фармацевтических препаратов. Такие композиции могут содержать один или несколько компонентов, выбранных из группы, состоящей из подсластителей, ароматизаторов, красителей и консервантов, добавляемых для получения фармацевтически изысканных и приятных на вкус препаратов. Таблетки содержат активный ингредиент в смеси с нетоксичной фармацевтически приемлемой средой для лекарства, применяющейся в производстве таблеток. Этими средами для лекарства могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и разрыхляющие средства, например кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, например крахмал, желатин или гуммиарабик; смазывающие агенты, например стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть не покрыты или покрыты оболочкой с помощью стандартных методик для того, чтобы замедлить распад и адсорбцию в желудочно-кишечном тракте и, таким образом, получить препарат, действующий в течение более продолжительного времени. Например, можно применять такие продлевающие действие препарата вещества, как моностеарат глицерина или дистеарат глицерина. Может быть также использован метод покрытия оболочкой с целью получения осмотических таблеток с регулируемым высвобождением препарата, который описан в и. 8. Ра1сп1 4256108; 4166452 и 4265874.
Композиции для перорального использования могут быть представлены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например арахисо вым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.
Водные суспензии содержат активное вещество в смеси со средами, которые применяются при получении водных суспензий. Такие лекарственные среды представляют собой суспендирующие агенты, например натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидин, клей трагакант и клей гуммиарабик; диспергирующие или увлажняющие агенты, а именно фосфатиды природного происхождения, например лецитин, или продукты конденсации алкиленоксидов с жирными кислотами, например стеарат полиоксиэтилена, или продукты конденсации оксида этилена с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации оксида этилена с неполностью этерифицированными жирными кислотами и 6-атомным спиртом (гекситол), такие как моноолеат полиоксиэтиленсорбитола, или продукты конденсации оксида этилена с частично этерифицированными жирными кислотами и ангидридами гекситола, например моноолеат полиэтиленсорбитана. Водные суспензии могут также содержать один или несколько консервантов, например этиловый или н-пропиловый эфиры п-гидроксибензойной кислоты, один или несколько красителей, один или несколько ароматизаторов и один или несколько подсластителей, таких как сахароза, сахарин или аспартам.
Масляные суспензии могут быть приготовлены суспендированием активного ингредиента в растительном масле, например арахисовом, оливковом, кунжутном или кокосовом, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Для получения приятного на вкус препарата для перорального применения могут быть добавлены подсластители из числа перечисленных выше и ароматизаторы. Для продления срока хранения этих композиций могут быть добавлены антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота.
Диспергируемые порошки и гранулы используются для приготовления водных суспензий путем добавления воды с получением смеси активного ингредиента с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или несколькими консервантами. Необходимые диспергирующие, увлажняющие и суспендирующие агенты выбирают из перечисленных выше. Могут быть также добавлены дополнительные компоненты, например подсластители, ароматизаторы и красители.
Фармацевтические композиции по данному изобретению могут быть также представлены в виде масляно-водных эмульсий. В качестве масляной фазы может использоваться растительное масло, например оливковое или арахисовое, или минеральное масло, например жидкий парафин, или их смеси. В качестве эмульга тора могут использоваться фосфатиды природного происхождения, например лецитин соевых бобов и продукты полной или частичной этерификации жирных кислот и ангидридов гекситола, например моноолеатсорбитана, а также продукты конденсации частично этерифицированных сложных эфиров, упомянутых выше, с оксидом этилена, например моноолеат полиоксиэтиленсорбитана. Эмульсии также могут содержать подсластители и ароматизаторы.
Для приготовления сиропов и эликсиров могут использоваться подсластители, например глицерин, пропиленгликоль, сорбит или сахароза. Такие препараты могут также содержать успокоительные средства, консерванты, ароматизаторы и красители. Фармацевтические композиции могут быть представлены в виде стерильных водных или масляных суспензий для инъекций. Эти суспензии могут быть приготовлены с помощью известных методов с использованием необходимых диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов, упомянутых выше. Стерильные препараты для инъекций могут быть представлены в виде стерильных растворов или суспензий для инъекций в нетоксичном разбавителе или растворителе, пригодном для парентерального введения, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. В качестве подходящих сред и растворителей могут использоваться вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Дополнительно в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этих целей могут использоваться любые нераздражающие нелетучие масла, включая синтетические, моно- или диглицериды. Дополнительно такие жирные кислоты, как олеиновая кислота, могут применяться для приготовления инъекционных препаратов.
3-Фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5Н)фуранон (рофекоксиб) может также использоваться в виде свечей для ректального введения препарата. Эти композиции могут быть приготовлены путем смешивания препарата с соответствующей нераздражающей средой для лекарства, которая является твердой при обычной температуре и жидкой при температуре тела, и, следовательно, свечи будут расплавляться в прямой кишке с освобождением препарата. Такими веществами могут являться кокосовое масло и полиэтиленгликоли. Для наружного применения используют кремы, мази, гели, растворы, суспензии и т.д., содержащие рофекоксиб. (В контексте данной заявки под наружным применением понимается также промывание рта и полоскание горла.) Для лечения перечисленных выше заболеваний применяют уровни дозировки, порядок которых составляет приблизительно 0,01-140 мг/кг веса тела в день или альтернативно 0,5 мг-7 г на пациента в день. Например, при лечении воспалительных заболеваний эффективная доза для введения составля ет приблизительно 0,01-50 мг вещества на кг веса тела в день или приблизительно 0,5 мг-3,5 г на пациента в день.
Количество активного ингредиента, которое в сочетании с наполнителями образует стандартную лекарственную форму, изменяется в зависимости от пациента и способа введения. Например, препарат, предназначенный для перорального введения человеку, может содержать от 0,5 мг до 5 г активного вещества в сочетании с соответствующим и приемлемым количеством наполнителя, которое изменяется от 5 до 95% от массы всей композиции. Дозировочные единичные формы в общем случае содержат приблизительно 1-500 мг активного ингредиента, а именно 25, 50, 100, 200, 300, 400, 500 мг. Допускается применение дозы 1 раз в день.
Очевидным является то, что конкретный уровень дозы для каждого пациента определяется различными факторами, включая возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, питание, время и метод введения, скорость экскреции, сочетание лекарств, степень тяжести переносимого заболевания. Приводимые ниже примеры раскрывают, но не ограничивают область данного изобретения.
Примеры
Образцы, взятые у пациентов
Исследовали пары образцов раковых и нормальных тканей слизистой оболочки толстой кишки, ткани аденомных полипов, нормальной слизистой оболочки нераковых пациентов и пары образцов нормальной и раковой ткани молочной железы. Средний возраст и возрастной диапазон пациентов, у которых брали в пары образцов нормальной и раковой ткани толстой кишки, составлял 63,3 и 41-93 лет, соответственно. Образцы тканей толстой кишки были взяты из района опухоли, не подверженного некрозу, и из аутологичной нормальной слизистой оболочки того же пациента, при том, что область резекции располагалась на расстоянии более 5 см от опухоли. По данным гистологии, все опухоли толстой кишки были представлены аденокарциномами, причем у всех пациентов наблюдали спорадический рак толстой кишки. У одного пациента фокус аденокарциномы находился внутри аденомного полипа. Аденомы толстой кишки принадлежали пациентам с множественным аденомным полипозом (ЕАР).
Получение микросомальных мембран из тканей толстой кишки
Замороженные ткани оттаивают в охлаждаемом льдом буфере для гомогенизации [50 мМ фосфат калия, рН 7,1, содержащий 0,1 М хлорид натрия, 2 мМ этилендиаминтетрауксусную кислоту, 0,4 мМ фенилметилсульфонилфторида, 60 мкг/мл ингибитора трипсина из соевых бобов, 2 мкг/мл лейпептина (1еирер1ше), 2 мкг/мл апротинина (аргойшпе) и 2 мкг/мл пепстатина (рерЦабпе). полученных от 81дта Сйе1шса1 Со., 81. Ьошк, МО]. Ткани дважды из мельчают на льду, используя размельчитель тканей (Вюкрес Ргобис1к, Ваг11екуШе, ОК) и гомогенизируют при 4°С с помощью ультразвукового гомогенизатора типа Со1е Еагтег 4710 (Со1е Еатшег 1пк1гитеп1 Со., СЫсадо, 1Ь). Клеточные обломки удаляют центрифугированием при 1000хд в течение 15 мин при 4°С и полученные супернатанты центрифугируют при 100000хд в течение 60 мин при 4°С. Мембранные фракции ресуспендируют в буфере для гомогенизации и обрабатывают ультразвуком для получения гомогенной мембранной суспензии. Концентрации белка определяют в каждом образце с помощью набора для определения белка (Вю-Каб, МЦщккаида, Оп1ало, Сапаба).
Антисыворотка
РОН8-1 из семенных пузырьков барана и РОН8-2 из плаценты были получены от Саутап (Апп АтЬог, М1) и использовались для получения кроличьих поликлональных антител. Самкам новозеландских белых кроликов вводили 1 мл полного адъюванта Фрейнда, содержащего 200 мкг очищенных препаратов РОН8-1 или РОН8-2. Через 2 недели после первой инъекции для усиления эффекта кроликам вводили 100 мкг очищенной РОН8-1 или РОН8-2 в 0,5 мл неполного адъюванта Фрейнда. Антисыворотка против РОН8 селективно распознает изоформы гомологичных человеческих РОН8 при приблизительно тысячекратном разбавлении. При условиях, используемых в данном исследовании, антитела против РОН8 не демонстрировали значительных перекрестных реакций с альтернативными изоформами РОН8. В каждом эксперименте две концентрации стандартов как РОН8-1, так и РОН8-2 помещали на каждый гель для исследования селективности антител.
Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (8Ό8РАОЕ) и анализ методом иммуноблотирования Фракции мембран перемешивают с 808буфером (20 мМ трис-НС1, рН 6,8, содержащий 0,4% (вес./об.) 8Ό8, 4% глицерина, 0,24 М βмеркаптоэтанола и 0,5% бромфенолового синего), кипятят 5 мин и анализируют электрофорезом (808-РАСЕ) по методике, описанной Ьаеттй (Ьаеттй, и.К. С1еауаде οί К1гис1ига1 рго1ешк бшгпд 1Не аккетЬ1у οί 1йе йеаб οί Ьас1епорйаде Т4. Ыа1иге, 227; 680-685, 1970). Белки с помощью электрофореза переносят на нитроцеллюлозные мембраны, как описано ранее (То^Ьш, Н; 81аейе1ш, Т. апб Оогбоп, 1. Е1ес1горйогейс (гапкГег οί рго1ешк Ггот ро1уасгу1ат1бе де1к 1о ш1госе11и1оке кйее1к: ргосебиге апб коте аррйсабопк. Ргос. №11. Асаб. 8сг И8А, 75; 43504354, 1979). Первичные антитела к РОН8-1 и РОН8-2 применяли при конечном разведении 1:5000 и 1:7500 соответственно. Вторичные связанные с пероксидазой хрена антитела осла против кроличьих 1дС (Атегкйат ЫГе 8аепсек, ОакуШе, Оп1ало, Сапаба) применяют при разведении 1:3000. Иммунодетектирование проводят методом индуцированной хемилюминесценции в соответствии с инструкцией производителя (Атеткйат). Авторадиограммы сканируют, используя компьютерный денситометр (Мо1еси1аг Ωνηαιηίοδ. 8ипиууа1е, СА), и, используя оптическую плотность, соответствующую очищенной изоформе РСН8, рассчитывают количество (нг) РСН8 в гистологически нормальной и опухолевой ткани толстой кишки.
Статистические анализы
Результаты этого исследования анализировали с помощью непараметрического теста Вилькоксона (ХУПсохоп) с выделенным рангом для определения существенных различий между уровнями РСН8-1 и РСН8-2 в нормальной и опухолевой тканях (Ртеипб, РЕ. Ма1йетайса1 81аЙ511С5. Ртепйсе На11, Епд1е\\'ооб СВГГз, Ыете 1ет8еу, 1992).
Результаты
Экспрессия РСН8-1 в нормальную и опухолевую ткани толстой кишки человека Фиг. 1 представляет результаты иммуноблотинга, демонстрирующие экспрессию РСН8 у 4 из 25 обследованных пациентов. Полоса, соответствующая белку с молекулярным весом 72 кД, является характерной для РСН8-1 (Ойо, ЕС., ПеУйр Ό.Ε.8., 8ιηί11ι, XV. Е П-д1усо8у1а1юп оГ рто81ад1апбт епборетохйе 8ш1йе8щ-1 апб -2 апб (Не опегИабощ ίη 1Не епбор1а§т1с тейси1ит.
1. Бю1. СНет. 268; 18234-18242, 1993) и совпадает с очищенным стандартом РОН8-1 из семенных пузырьков барана (фиг. 1А), а также с рекомбинантным РОН8-1 человека, экспрессированным в клетках СО 8-7 (данные не приводятся; 7). Количественный обсчет результатов иммуноблотирования у всех 25 пациентов проводили методом денситометрии; данные представлены на диаграмме фиг. 2. У 21 из 25 пациентов уровни РОН8-1 в опухолевой ткани были меньше, чем в нормальной ткани толстой кишки. Усредненное значение падения уровня РОН8-1 в опухолевой по сравнению с нормальной тканью для всех 25 обследованных пациентов составляло 170 нг/мг микросомального белка. В сравнении с очищенным стандартом РОН8-1 диапазон концентраций РОН8-1 в нормальной и опухолевой тканях составлял 0-760 нг (среднее значение 199,8) и 4-540 нг (среднее значение 51,1) на мг микросомального белка соответственно. Различие в экспрессии РОН8-1 между нормальной и опухолевой тканями является статистически достоверным по данным непараметрического анализа (тест Вилькоксона (Уйсохоп) с выделенным рангом, р<0,0001).
Экспрессия РОН8-2 в нормальную и опухолевую ткани толстой кишки человека На фиг. 1В представлены данные иммуноблотирования парных образцов толстой кишки 4 из 25 пациентов, полученные с использованием специфических антител против РОН8-2. Для сравнительной оценки экспрессии РОН8-1 (фиг. 1А) и РОН8-2 (фиг. 1В) в образцах, полу ченных от одного и того же пациента, проводили двойное иммуноблотирование. В каждом из 4 образцов нормальной ткани толстой кишки иммунореактивность против РОН8-2 не была обнаружена. Напротив, иммунореактивные полосы, соответствующие молекулярному весу 7072 кД и совпадающие с очищенным РОН8-2 из плаценты овцы (фиг. 1В) и рекомбинантным РОН8-2 человека, экспрессированным в клетках СО8-7 (данные не приводятся; 7), были обнаружены в опухолевых тканях 3 из 4 обследованных пациентов. Вообще, РОН8-2 был обнаружен в опухолевой ткани у 19 из 25 обследованных пациентов (фиг. 2). Среднее значение прироста РОН8-2 в опухолях толстой кишки для всех 25 обследованных пациентов составляло примерно 73 нг/мг микросомального белка. Как показано в сравнении со стандартом РОН8-2, диапазон концентраций РОН8-2 в нормальной и опухолевой тканях составлял соответственно 049 нг (среднее значение 3,8 нг) и 1,6-580 нг (среднее значение 37,7) на мг микросомального белка. Различие в экспрессии РОН8-2 между нормальной и опухолевой тканями является статистически достоверным по данным непараметрического анализа (тест Вилькоксона (ХУПсохоп) с выделенным рангом, р<0,0001).
Опухоли толстой кишки классифицируют по Эикек на 4 стадии: А - опухоль слизистой оболочки кишечника; В - опухоль слизистой оболочки с проникновением в мышечную ткань; С - метастазы в лимфоузлах и Ό - метастазы в других тканях. В данном исследовании изучались опухоли толстой кишки всех стадий по классификации Эикек.
Данные обследования пациентов
Пациент # Препарат Стадии по Оикез Изменения в экспрессии белков (нг)
РСН5-2 РСН5-1
1 ΝΑ ΝΑ 6, 20 -10,00
2 ΝΑ ΝΑ 1,70 -6, 00
3 ΝΑ ΝΑ 2,80 -9, 40
4 ΝΑ ΝΑ 1,20 -4, 10
5 отсутствует В 0, 10 ΝΒ
6 хлордиазэпоксид гидрохлорид/клидиниум бромид, магалдрат С 3,20 -5, 90
7 Рофекоксиб А 0, 00 -17,30
8 левотироксин натрия, лоразепам, омепразол С 0, 50 1, 50
9 отсутствует С 0, 90 0, 50
10 ΝΑ с 4,70 -16,30
11 отсутствует в 0, 90 -9,00
12 ΝΑ ϋ -0,20 -14,40
13 ΝΑ в 4,30 -7,10
14 аспирин с 0, 80 -5, 60
15 дельтакортизон, азатиоприн, ловастатин в 0, 00 5,70
16 эналаприл малеат в 25,60 -6,60
17 18 19 20 отсутствует отсутствует аспирин отсутствует В В с в -0,30 9.70 13.70 8,30 -1,50 -11,20 -11,10 -5,90
21 22 23 24 25 отсутствует аспирин отсутствует дилтиазем гидрохлорид, омепразол флюбипрофен, аспирин, нифедипин, метопролол тартрат с с с в в -0,10 0,20 0,00 2,20 0,10 -9, 30 -3, 00 -12,30 -17,00 -10,00
ΝΑ = данные отсутствуют
ΝΏ = иммунореактивность не обнаружена
Стадии по Энкек: Α = опухоль слизистой оболочки
В = опухоль слизистой оболочки с проникновением в мышечную ткань
С = метастазы в лимфоузлах
Ό = метастазы в других тканях
Таблица. Данные обследования пациентов. Приведена информация по каждому обследованному пациенту. При наличии данных указаны препараты, принимаемые пациентами. Стадии заболевания по Энкек соответствуют следующим сокращениям: А - опухоль слизистой оболочки; В - опухоль слизистой оболочки с проникновением в мышечную ткань; С - метастазы в лимфоузлах и Ό - метастазы в других тканях. Количество экспрессируемого РСН8 соответствует относительному изменению в экспрессии при сравнении нормальной ткани слизистой оболочки толстой кишки и опухолевой ткани. ΝΑ: данные отсутствуют, и ΝΏ: иммунореактивность не обнаружена.
Не было обнаружено взаимосвязи между стадией опухоли и изменением экспрессии РСН8-1 или РСН8-2. Данное отсутствие взаимосвязи согласуется с результатами исследования, показывающего отсутствие корреляции между уровнем простагландина Е2 в опухолях толстой кишки человека и стадиями опухолей по Иикек (ЯБдак, В., Со1бтап, 1.8., Ьеуте, Ь. А1Бегеб еБсокапоБб 1еуе1к ίη йитап со1оп сапсег. Б. ЬаЬ. С11п. Меб., 122; 518-523, 1993). Следует отметить, что экспрессия РСН8-2 была очень низкой или не обнаружена у 5 из 6 пациентов, принимавших противовоспалительные препараты в процессе исследования (таблица). Экспрессия РСН8-1 и -2 в нормальную толстую кишку, предраковые полипы и в пары образцов нормальной и опухолевой тканей молочной железы
Экспрессию РСН8-1 и -2 анализировали в различных тканях человека, включая 5 образцов ткани толстой кишки нераковых пациентов, 4 предраковых полипа и 3 пары образцов нормальной и опухолевой тканей молочной железы. Несмотря на то, что РСН8-1 обнаруживали в нормальной и раковой тканях, РСН8-2 не наблюдали ни в одном из образцов.
Обсуждение результатов
В данном исследовании экспрессию РСН8-2 наблюдали в 19 из 25 образцов опухолей толстой кишки, в то время как экспрессию этого белка обнаружили только в 2 из 25 образцов нормальной ткани. Индуцирование экспрессии РСН8-2 сопровождается уменьшением экспрессии РСН8-1 в 21 из 25 образцах опухолей по сравнению с соседней нормальной тканью слизистой оболочки толстой кишки; тем не менее, концентрации РСН8-1 имели близкие значения в контрольных образцах толстой кишки и полипов.
Насколько нам известно, это исследование является первым, в котором определяли экспрессию РСН8-1 и -2 при раке толстой кишки человека. Предыдущие исследования продемонстрировали увеличение уровня эйкозаноидов, в частности РСЕ2, при раке толстой кишки человека (КБдак, В., Со1бтап, Ι.8., Ьеуте, Ь. А1Бегеб еБсокапоБб 1еуе1к ίη йитап со1оп сапсег. Б. ЬаЬ. Сйп. Меб., 122; 518-523, 1993, ВеппеББ, А., Ие1 Тасса, М., 81атГогб. Ι.Ε., апб 2еЬго, Т. РгокБад1апб1пк Ггот Битогк оГ йитап 1агде Ьо\\е1. Вг. Б. Сапсег, 35; 881-884, 1977, ВеппеББ, А., СБуБег, А., НепкЬу, С.К, Ме1йшкй, Р.В., апб 8БатГогб, Ι.Ε. МеакигетепБ оГ агасйБбопаБе апб ББь теБайойБек ехБгасБеб Ггот йитап погта1 апб тайдпапБ дакБгоБпБекББпаБ ББккиек. СиБ, 28; 315-318, 1987). Заявители сделали вывод, что наблюдаемое увеличение количества фермента РСН8-2 в опухолевой ткани толстой кишки приводит к повышению уровня простагландинов в этих опухолях. Более того, мы сделали вывод, что, поскольку простагландины могут иметь множественные эффекты в биологии рака, включающие стимулирование роста и модулирование иммунного надзора, повышенный уровень простаноидов в опухолях способствует их росту или развитию (ЕагпекБ, И.Ь., НБхкоп, Ь.Б., апб А1ЬегБк, Ό.8. РБтохБсат апб оБйег сус1оохудепаке БпйБЫБотк: роБепс1а1 Гог сапсег сйеторгеуепБюп. Б. Се11. ВБосйет., 161 (8ирр1.); 156-166, 1992). Интересно, что изоформа РСН82 не обнаруживалась при исследовании образцов рака молочной железы. Таким образом, экспрессия РСН8-2 является отличительной чертой трансформации тканей от промалигнизированной к малигнизированной фазе.
Эберхарт (ЕЬегйагБ) и соавторы продемонстрировали увеличение уровня мРНК РСН8-2 в аденомах и аденокарциномах толстой и прямой кишки человека (ЕЬегйагБ, С.Е., СоГГеу, КБ., ЯабйБка, А., С1агб1е11о, Е.М., ЕеггепЬасй, 8., ИиЬоБк, Κ..Ν. ир-теди1аБ1оп оГ сус1оохудепаке 2 депе ехргеккюп Бп йитап со1огесБа1 абепотак апб абепосагапотак. СакБгоепБего1оду, 107; 1183-1188, 1994). Хотя это интересное наблюдение, оно не демонстрирует действительную экспрессию фермента из-за наличия комплексной посттранскрипционной и -трансляционной регуляции мРНК РСН8-2. Например, НоГГ еБ а1. (НоГГ, Т., Ие^1ББ, И., Каеует, V., Яексй, К. апб Сорре1Б15
81гиеЬе, М. ПШегепкакоп-аззощайк ехргеззюп оГ ргоз1ад1апкш С/Н зугИказе ίη топосукс се11з. ЕЕВ8 ЬеВ, 320; 38-42, 1993), Ьее е! а1. (Ьее, 8.Н., 8оуоо1а, Е., Скаптидат, Р., Нагк 8., 8ип, V., Дкопд, Н., Ьюи, 8., 81ттопз, Ό., апк Нтеапд, Ό. 8е1ес1|уе ехргеззюп оГ ткодеп-шкискк сус1оохудепазе т тасгоркадез зктикйек \\кк Ироро1узасскапке. 1. Вю1. Скет., 267; 25934-25938, 1992), а также в лабораториях заявителя была показана существенная экспрессия мРНК РСН8-2, которая не сопровождалась экспрессией РСН8-2. Следовательно, определение экспрессии РСН8 является критическим моментом в вычислении концентрации РСН8-2. Нет оснований предполагать отсутствие РСН8-2 в полипах 4 пациентов, страдающих семейным аденоматозным полипозом, особенно в свете того, что некоторые препараты, такие как сулиндак (зи1ткас) (ингибирующие как РСН8-1, так и РСН82), приводят к регрессии полипов. Образцы полипов человека представляли собой совокупность маленьких полипов толстой кишки, диаметр которых варьирует от 0,4 до 5 мм. На наш взгляд, экспрессия РСН8-2 происходит на более поздней стадии полип-раковой последовательности, когда полипы становятся больше в диаметре, возможно, 5 мм или более. Недавние исследования Ьакепкеш е! а1. показали, что сулиндак не приводит к регрессии единичных полипов толстой кишки; однако, они подчеркнули, что их исследования касались ранних единичных полипов (67% полипов были <5 мм), и предположили, что ответ на НСПВС мог бы быть более благоприятным в полипах с особой стадией аденомо-карциномной последовательности (Ьакепкет, 1., Сагаа, С., Тй/егг Ό., НегхепЬегд, Н., Ьауоп, Р., Екзоп, В., апк Отагу, В. ЕГГес! оГ зикпкас оп зрогакк со1ошс ро1урз. Саз1гоеп1его1оду, 108; 1083-1087, 1995).
Пролонгированное применение НСПВС связано с побочными эффектами, которые включают почечную токсичность, изъязвление желудочно-кишечного тракта и усиление кровотечения. Современные НСПВС, такие как аспирин, сулиндак и индометацин, имеют невысокую селективность в ингибировании как РСН8-1, так и РСН8-2 (ВаШзйш, В., Воктд, В., апк Вакк1е, Υ.8. СОХ-1 апк СОХ-2: Тотеагк !ке кеуе1ортеп( оГ тоге зе1ескуе Ν8ΆΙΌ8. Эгид Ыетез Регзрескуез, 7; 501-512, 1994, О'ЫеШ, С.Р., Мапсшф ЕЛ., Кагдтап, 8., Υе^деу, 1., Ктеап, Μ.Υ., Еа1диеугек Е-Р., АЬгатоуйх, М., Кеппеку, В.Р., Оие11ек М., Сготкзк, V., Си1р, 8., Еуапз, ЕЕ., Еогк-Никктзоп, АЛУ. апк Лккегз, Р.1. Оуегехргеззюп оГ китап ргоз!ад1апкт С/Н зуйказе-1 апк -2 Ьу гесотЬтап! уассйпа У1гиз: шЫЬкюп Ьу попз1егсйка1 апк-шПат тайгу кгидз апк Ьюзуп1кез1з оГ 15-кукгохуе1созайкаепо1с ас1к. Мо1. Ркагтасо1., 45; 245-254, 1994, ЭеУк1, Ό.Ε., Меак, Е.А., апк 8ткк, XV. Б. РСН зуп!казе коепхуте зе1ескгйу: !ке ро!еп(1а1 Гог заГег попзйго1ка1 апктПаттаЮгу кгидз. Ат. 1. Мек. (8ирр1.), 95; 408-448, 1993). Предполагают, что селективные ингибиторы РСН8-2 будут оказывать положительное терапевтическое действие и обладать пониженной способностью индуцировать побочные эффекты. Недавно было показано на крысах, что Ν8-398, селективный ингибитор РСН8-2, оказывает противовоспалительное, жаропонижающее и анальгезирующее действие, не вызывая при этом изъязвления (ЕШакй Ν., Уозкйцпуа, К., Натазака, Υ., Ага1, I., ШдисЫ, 8., Ихнка, Н., апк ОЮто, 8. N8-398, а поуе1 попз!его1ка1 апктПаттаЮгу кгид текк ро1еп( апа1дезю апк ап11руге(1с еПсс1з. теккк саизез тш1та1 з!отаск 1езюпз. Сеп. Ркагтасо1., 24; 105-110, 1993; Еи1акк Ν., Такаказк1, 8., Υοкοуата, М. , Ага1, I., Н1диск1,
8., апк ОЮто, 8. N8-398, а пете апк-тПаттаЮгу адепк зе1ескге1у 1пк1Ь11з ргоз!ад1апкт С/Н зукказе/ сус1оохудепазе (СОХ-2) аскгйу ш укго. Ргоз!ад1апктз, 47; 55-59, 1994). В данном исследовании экспрессии РСН8-1 и РСН8-2 в толстой кишке показано, что обе изоформы РСН8 характерны для опухолей.
Полипы мышей
У мышей с утраченным геном АрсА716 (полученных от Эг. Таке!о из Вапуи Мегск: ОзЫша, М., ОзЫша, Н., Ккадатеа, К., КоЬауазЫ, М., Никита, С. апк Таке!о, М. Ьозз оГ Арс кейгохудозйу апк аЬпогта1 кззпе Ьш1кшд т пазсеп! 1 п1ез!1 па1 ро1урз ш тке саггутд а 1гппса1ек Арс депеШтсакоп тп1ап1 тке. Ргос. №111. Асак. 8сЕ И8А, 92, 4482-4486, 1995) развивали множественные полипы кишечника. Небольшие полипы (от 0,3 до 5,6 мм) кишечника и толстой кишки мышей с утраченным геном АрсА716 собирали и сразу же замораживали. Были собраны полипы от 6 мышей (как самцов, так и самок), полученных в результате обратного скрещивания поколений Ν1, Ν2 и Ν4.
Результаты
Экспрессия РСН8-1 и РСН8-2 в полипах АрсА716 мышей
Определяли экспрессию РСН8-1 и РСН8-2 в полипах увеличивающегося размера АрсА716 мышей. На фиг. 3 представлены результаты анализа экспрессии РСН8-1 и РСН8-2 методом иммуноблотирования в полипах, размер которых варьирует от 0,3 до 5 мм в диаметре (линии 1-5 соответствуют образцам, полученным из полипов диаметром приблизительно 1-5 мм соответственно). Продемонстрировано наличие РСН8-1 во всех контрольных образцах кишечника и толстой кишки и в полипах. Иммунореактивность РСН8-2 не была обнаружена в контрольных образцах тканей кишечника и толстой кишки. Низкий уровень РСН8-2 обнаруживали в кишечных полипах большего размера (3-5 мм в диаметре, линии 3, 4 и 5), более высокие уровни РСН8-2 детектировали во всех полипах толстой кишки, размер которых варьирует от 1 до 5 мм в диаметре (линии 1-5), причем очень высокий уровень РСН8-2 детектировали в полипах диаметром 2-3 мм (линии 2 и 3). В каче17 стве стандартов электрофорезу подвергали очищенные образцы бараньих РСНБ-1 и РСНБ2 (5, 10 и 20 нг) , которые обозначены на фигуре соответствующим образом. Мы предполагаем, что драматическая индукция СОХ-2 в процессе роста полипов отражает критическую роль это го фермента в инициации трансформации аденомы в аденокарциному.

Claims (1)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    Применение 3 -фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5Н)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки.
EA199800139A 1995-07-19 1996-07-15 Применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5h)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки EA005073B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US124095P 1995-07-19 1995-07-19
GBGB9603470.7A GB9603470D0 (en) 1996-02-19 1996-02-19 Method of treating colonic adenomas
PCT/US1996/011761 WO1997003667A1 (en) 1995-07-19 1996-07-15 Method of treating colonic adenomas

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199800139A1 EA199800139A1 (ru) 1998-08-27
EA005073B1 true EA005073B1 (ru) 2004-10-28

Family

ID=26308761

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199800139A EA005073B1 (ru) 1995-07-19 1996-07-15 Применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5h)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP0839034B1 (ru)
KR (1) KR100454624B1 (ru)
CN (1) CN1196679A (ru)
AT (1) ATE268176T1 (ru)
AU (1) AU706089B2 (ru)
CA (1) CA2227238C (ru)
CZ (1) CZ294516B6 (ru)
DE (1) DE69632632T2 (ru)
EA (1) EA005073B1 (ru)
ES (1) ES2220983T3 (ru)
HU (1) HU225506B1 (ru)
IL (1) IL122960A (ru)
MX (1) MX9800568A (ru)
NO (1) NO980221L (ru)
NZ (1) NZ312997A (ru)
SK (1) SK5298A3 (ru)
WO (1) WO1997003667A1 (ru)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6166024A (en) 1995-03-30 2000-12-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of topical azathioprine and thioguanine to treat colorectal adenomas
WO1999009988A1 (en) * 1997-08-27 1999-03-04 Hexal Ag New pharmaceutical compositions of meloxicam with improved solubility and bioavailability
NZ509376A (en) * 1998-07-09 2003-10-31 Francis A Nardella Indole or carbazole derivatives for the treatment of chronic lyphocytic leukemia
US7105560B1 (en) * 1999-07-23 2006-09-12 The Regents Of The University Of California Use of etodolac in the treatment of multiple myeloma
US20020035107A1 (en) 2000-06-20 2002-03-21 Stefan Henke Highly concentrated stable meloxicam solutions
AR038957A1 (es) 2001-08-15 2005-02-02 Pharmacia Corp Terapia de combinacion para el tratamiento del cancer
DE10161077A1 (de) 2001-12-12 2003-06-18 Boehringer Ingelheim Vetmed Hochkonzentrierte stabile Meloxicamlösungen zur nadellosen Injektion
US7232821B2 (en) 2002-04-08 2007-06-19 Glaxo Group Limited (2-((2-alkoxy)-phenyl) -cyclopent-1enyl) aromatic carbo and heterocyclic acid and derivatives
US8992980B2 (en) 2002-10-25 2015-03-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Water-soluble meloxicam granules
GB0225548D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1568369A1 (en) 2004-02-23 2005-08-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the treatment of respiratory diseases in pigs
AR047894A1 (es) 2004-02-25 2006-03-01 Wyeth Corp Derivados de tiofeno como inhibidores de la proteina tirosina fosfatasa 1b (ptpasa 1b); metodos para su preparacion, composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por ptpasa 1b
TW200735866A (en) * 2005-11-18 2007-10-01 Synta Pharmaceuticals Corp Compounds for the treatment of proliferative disorders
WO2008089459A1 (en) * 2007-01-19 2008-07-24 Ardea Biosciences, Inc. Inhibitors of mek
CN102647971B (zh) 2009-10-12 2016-03-16 贝林格尔.英格海姆维特梅迪卡有限公司 用于包含美洛昔康的组合物的容器
WO2011107150A1 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the long-term treatment of musculoskeletal disorders in cats
US9795568B2 (en) 2010-05-05 2017-10-24 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Low concentration meloxicam tablets

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0739340A1 (en) * 1994-01-10 1996-10-30 Merck Frosst Canada Inc. Phenyl heterocycles as cox-2 inhibitors
JPH10511089A (ja) * 1994-12-21 1998-10-27 メルク フロスト カナダ インコーポレーテツド Ｃｏｘ−２阻害剤としてのジアリール−２−（５ｈ）−フラノン

Also Published As

Publication number Publication date
CA2227238C (en) 2003-10-28
AU706089B2 (en) 1999-06-10
EP0839034B1 (en) 2004-06-02
EA199800139A1 (ru) 1998-08-27
CZ15698A3 (cs) 1998-09-16
ATE268176T1 (de) 2004-06-15
NZ312997A (en) 2000-07-28
WO1997003667A1 (en) 1997-02-06
IL122960A (en) 2006-07-05
CA2227238A1 (en) 1997-02-06
EP0839034A1 (en) 1998-05-06
IL122960A0 (en) 1998-08-16
AU6496096A (en) 1997-02-18
MX9800568A (es) 1998-04-30
NO980221L (no) 1998-03-18
SK5298A3 (en) 1998-12-02
HUP9901711A2 (hu) 1999-09-28
KR19990029066A (ko) 1999-04-15
CN1196679A (zh) 1998-10-21
KR100454624B1 (ko) 2004-12-31
DE69632632T2 (de) 2005-05-25
EP0839034A4 (en) 2002-06-19
HUP9901711A3 (en) 2001-02-28
DE69632632D1 (de) 2004-07-08
HU225506B1 (en) 2007-01-29
CZ294516B6 (cs) 2005-01-12
NO980221D0 (no) 1998-01-16
ES2220983T3 (es) 2004-12-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA005073B1 (ru) Применение 3-фенил-4-(4-метилсульфонилфенил)-2-(5h)-фуранона для лечения или профилактики аденомы толстой кишки
Tüzün et al. The role of Helicobacter pylori infection in skin diseases: facts and controversies
Matsuhashi et al. Effects of sulindac on sporadic colorectal adenomatous polyps.
US5968974A (en) Method of treating colonic adenomas
US10933134B2 (en) Combination therapies for treatment of cancer
Markham et al. Topical 5‐aminolaevulinic acid photodynamic therapy for tumour‐stage mycosis fungoides
Chng et al. Suppurative panniculitis associated with alpha 1‐antitrypsin deficiency (PiSZ phenotype) treated with doxycycline
US6593361B2 (en) Method of treating colonic adenomas
Choonhakarn Non‐pigmenting fixed drug eruption: a new case due to eperisone hydrochloride
IE59739B1 (en) The use of nitrofurantoin for the treatment and prophylaxi of gastrointestinal disorders
Mair et al. Medical treatment of equine colic
Malakar et al. Post‐inflammatory depigmentation following allergic contact dermatitis to chloroxylenol
Cho The role of endogenous ulcerogenic mediators in the pathogenesis of peptic ulcer
Mauritz et al. Esophageal mucosal integrity recovers after laparoscopic fundoplication in children with gastroesophageal reflux disease
Takahashi et al. A case of fibro‐osseous pseudotumour of the digits
Fändriks et al. Duodenal wall motility, mucosal net fluid and alkaline secretion in response to luminal acid: role of the vagal nerves and cholinergic transmission
KR20240127107A (ko) 진토닌을 포함하는 위장 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
Watanabe et al. Subcutaneous cellular neurothekeoma: a pseudosarcomatous tumour
Vatankhah et al. Chemical chaperon 4-phenylbutric acid improves cardiac function following isoproterenol-induced myocardial infarction in rats
JP2024521519A (ja) 全身性硬化症の予防または治療用薬学的組成物
JP2022041479A (ja) 皮膚癌又はその前癌病変治療用医薬用組成物
Ikeda et al. Severe Anemia from Multiple Gastric Hyperplastic Polyps in a Hemodialysis Patient after Long-term Use of a Proton-pump Inhibitor
Chowdhury et al. Intact nerve supply for eczema: reply from authors
Desai et al. DOPAMINE RECEPTOR SUB-TYPES IN GASTRIC AND DUODENAL ULCERATION
Katsinelos et al. Colorectal cancer risk in cholelithiasis and after cholecystectomy in Northern Greece

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU