CZ294516B6 - Farmaceutický prostředek - Google Patents

Farmaceutický prostředek Download PDF

Info

Publication number
CZ294516B6
CZ294516B6 CZ1998156A CZ15698A CZ294516B6 CZ 294516 B6 CZ294516 B6 CZ 294516B6 CZ 1998156 A CZ1998156 A CZ 1998156A CZ 15698 A CZ15698 A CZ 15698A CZ 294516 B6 CZ294516 B6 CZ 294516B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
pghs
colon
protein
patients
normal
Prior art date
Application number
CZ1998156A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ15698A3 (cs
Inventor
Stacia Kargman
Jilly Evans
Thomas J. Simon
Original Assignee
Merck And Co., Inc.
Merck Frosst Canada & Co.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9603470.7A external-priority patent/GB9603470D0/en
Application filed by Merck And Co., Inc., Merck Frosst Canada & Co. filed Critical Merck And Co., Inc.
Publication of CZ15698A3 publication Critical patent/CZ15698A3/cs
Publication of CZ294516B6 publication Critical patent/CZ294516B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/603—Salicylic acid; Derivatives thereof having further aromatic rings, e.g. diflunisal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/612—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid
    • A61K31/616—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid by carboxylic acids, e.g. acetylsalicylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Lasers (AREA)
  • Harvester Elements (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
  • Soil Working Implements (AREA)

Abstract

Použití 3-fenyl-4-(4-methylsulfonylfenyl)-2-(5H)furanonu pro výrobu farmaceutického prostředku pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva na adenokarcinom u pacientů s anamnézou familiární adenomatosní polyposy nebo u pacientů s jedním nebo více adenomy tlustého střeva.ŕ

Description

(57) Anotace:
Použití 3-fenyl-4-(4-methylsulfonylfenyl)-2-(5H)íuranonu pro výrobu farmaceutického prostředku pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva na adenokarcinom u pacientů s anamnézou familiární adenomatosní polyposy nebo u pacientů s jedním nebo více adenomy tlustého střeva.
CO CQ co
TfO) CN
N
O
Farmaceutický prostředek
Oblast techniky
Tato přihláška je zaměřena na použití nesteroidní protizánětlivé sloučeniny (NSAID) pro výrobu farmaceutického prostředku pro prevenci nebo zpomalování transformace adenomů tlustého střeva na adenokarcinomy tlustého střeva.
Dosavadní stav techniky
Enzym prostaglandin G/H syntasa (PGHS) je klíčovým enzymem v biosentetické dráze vedoucí k transformaci prostaglandinů (Watkins, W.D, Peterson, Μ. B. a Fletcher, J. R. ed., Prostaglandins in Clinical Practice, New York: Raven, 1989 a Dewitt, D.L. Prostaglandin endoperoxide synthase: regulation and enzyme expression, Biochim, Biophys. Acta, 1083: 121 — 134, 1991). Tyto prostanoidy jsou silnými biologickými mediátory s různými normálními fyziologickými účinky a také se účastní v mnoha fyziologických stavech včetně zánětu a neoplastické transformace. (Watkins, W.D., Peterson, M.B., a Fletcher, J. R., ed., Prostaglandins in Clinical Practice, New York: Raven, 1989 a Dewitt, D.L. Prostaglandin endoperoxide synthese: regulation and enzyme expression, Biochim. Biophys. Acta, 1083: 121 - 134, 1991 a Xie, W., Robertson, D.L. a Simmons, D.L., Mitogen-inducible prostaglandin G/H synthase: a new target for nesteroidal anti-inflammatory drugs. Drug Dev. Res., 25: 249 - 265, 1992). Byly identifikovány dvě izoformy PGHS (Loll, P.J. a Garavito, R:M. The isoforms of cyclooxygenase: structure and function, Expert Opin. Invest. Drugs, 3:1171 - 1180, 1994). PGHS-1 je konstitutivně exprivován ve většině tkání a soudí se, že vytváří prostaglandiny pro normální fyziologické funkce. Druhá izoforma, PGHS-2, je charakterizována rychlou indukcí mnoha stimuly, včetně mitogenů, hormon, cytokinů a růstových faktorů (Loll, P.J. a Garavito, R:M. The isoform of cyclooxygenase: structure and function, Expert Opin. Invest. Drugs, 3:1171 - 1180, 1994 a Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y.S. COX-1 and COX-2: Toward the devolopment of more selective NSAIDS. Drug News perspectives 7: 501 - 512, 1994). Za stavů jako je zánět mohou být GPHS-2 odvozené prostaglandiny predominantními efektory (Masferrer, J. L., Zweifel, B.S., Manning, P.T., Hauser, S.D., Leahy, K.M., Smith, W.G., Isakson, P.C. a Seibert, K. Selective inhibition of inducible cyclooxygenase 2 in vivo in anti-inflammatory and non-ulcerogenic. Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 91:3228 - 3232, 1994). Jak u PGHS-1, tak u PGHS-2 bylo ukázáno, že jsou cílem nesteroidních protizánětlivých léčiv (NSAID) (Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y.S. COX-1 and COX-2: Toward the development of more selective NSAIDS. Drug News Perspektives 7: 501 - 512, 1994, a O'Neill, G.P., Mancini, J. A., Kargman, S., Yergey, J., Kwan,
M. Y., Falgueyret, J.-P., Abramovitz, M., Kennedy, B.P., Oullet, M., Cromlish, W., Culp., S., Evans, J.F., Ford-Hutchinson, A. W., a Vickers, P.J., Overexpresion of human Prostaglandin G/H synthase-1 and -2 by recombinant vaccinia virus: inhibition by nesteroidal antiinflammatory drugs and biosynthesis of 15-hydroxyeicosatetraenoic acid. Mol. Pharmacol., 45: 245 - 254, 1994 a DeWitt, D.L., Meade, E.A., a Smith, W.L. PGH synthase isoenzyme selectivity: the potenciál for safer nonsteroidal antiinflammatory drugs, Am. J. Med. (Suppl.), 95: 40S - 44S, 1993). Viz také WO 94/14 977 publikovanou 7.7.1994, která popisuje způsob pro hodnocení účinnosti PGHS-2 inhibijících činidel, stejně jako selektivitu pro PGHS-2 proti PGHS-1.
Zvýšené hladiny prostaglandinů byly prokázány u mnoha karcinomů včetně karcinomu plic a tlustého střeva (McLemore, T.L., Hubbard, W.C., Litterst, C.L., Liu, M.C., Miller, S., McMahon,
N. A., Eggleston, J. C., a Boyd, M.R. Profíles of prostaglandin biosynthesis in normál lung and tumor tissue from lung cancer patients. Cancer Res., 48: 3140 - 3147, 1988 a Rigas, B., Goldman, I.S., a Levine, L., Altered eicosanoids lavels in human colon cancer, J. Lab. Clin. Med., 122: 518 - 523, 1993). Konkrétně, bylo zjištěno, že hladiny prostaglandinů jsou zvýšeny u benigních adenomatosních polypů a dle se zvyšují v nádorové tkáni tlustého střeva ve srovnání
- 1 CZ 294516 B6 s histologicky normální sliznicí. Protože bylo ukázáno, že prostanoidy jsou imunosupresivní, mohou hrát roli při vývoji tumoru (Earnest, D.L., Hixson, L.J., a Alberts, D.S. Piroxicam and other cyclooxygenase inhibitors: potential for cancer chemoprevention. J. Cell. Biochem., 161 (Suppl.): 156- 166, 1992).
Již od roku 1970 zvažovali výzkumníci možnost, ze aspirin a příbuzná nesteroidní antirevmatická léčiva (NSAID) mohou být přínosem pro léčbu jistých nádorových onemocnění, včetně karcinomu tlustého střeva.
První epidemiologická studie naznačují, že aspirin může redukovat riziko kolorektálníhokarcinomu přišla v roce 1988 v retrospektivní, explorativní analýze z Malboum, Australia (Cancer Res., 48: 4399 - 4404, 1988). Studie našla o 40 % nižší riziko incidence karcinomu tlustého střeva mezi osobami, které pravidelně užívali aspirin ve srovnání s osobami, které neužívali aspirin. Novější data, která presentovala Health, et al., naznačují možný přínos NSAID pro prevenci kolorektálních neoplasmat (Health, C.W., Jr., Thun, M.J., Greenberg, E.R., Levin, B., a Marnett, L.J. Norsteroidal antiinflammatory drugs and human cancer. Cancer 74: 2885 - 2888, 1994). Nicméně, i přes tyto a další studie neexistuje žádný významný důkaz vazby mezi užíváním a prevencí karcinomu tlustého střeva, není zde žádný významný důkaz ukazující na patologickou vazbu mezi kolorektálním karcinomem a GPHS nebo důkaz terapeutické hodnoty inhibice PGHS podáváním aspirinu. Například, pacienti s artritidou (z nichž mnoho užívá aspirin) mohou být méně náchylní ke karcinomu tlustého střeva.
V této přihlášce popisujeme studie, ve kterých jsme analyzovali expresi lidského PGHS-1 a PGHS-2 proteinu u 25 párů normálních a autologních tumorů tlustého střeva, 4 premaligních polypů tlustého střeva, 5 kontrolních tkání tlustého střeva (od pacientů bez karcinomu) a 3 odpovídajících normálních a nádorových tkání lidského prsu. Mezi pozorováním z této studie je, že PGHS-1 protein je redukován v nádorové tkáni tlustého střeva ve srovnání s histologicky normální střevní mukosou a že PGHS-2 je detekován ve většině vzorků nádorů tlustého střeva, zatímco je v podstatě nedetekovatelný v normálních tkáních, polypech a vzorcích karcinomu prsu. Zvýšené hladiny prostaglandinů v nádorové tkáni tlustého střeva vyplývají z přítomnosti indukovatelné PGHS-2 izoformy. Tyto studie podporují náš názor, že transformace adenomu tlustého střeva na adenokarcinom tlustého střeva je zprostředkována dramatickou a překvapivou nadprodukcí PGH-2 v adenomu. V souladu s tím jsme překvapivě objevily možnost použití specifické látky typu NSAID pro výrobu farmaceutického prostředku pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva a adenokarcinom tlustého střeva, u pacientů s anamnézou FAP (familiární adenomatosní polyposa) nebo pacientů s jedním nebo více adenomy tlustého střeva.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 - Reprezentativní imunoblotová analýza PGHS-1 a PGHS-2 proteinoví exprese v normální lidské sliznici tlustého střeva a v autologní nádorové tkáni. Obr. IA znázorňuje imunoblotovou analýzu používající anti-PGHS-1 antisérum. Imunoblotová analýza stejných vzorků za použití anti-PGHS-2 antiséra je znázorněna na obr. IB. Purifíkované PGHS standardy a makrosomální proteinové vzorky (50 μg na dráhu) byly separovány SDS-PAGE, přeneseny do nitrocelulózy a imunoblotovány s anti-PGHS antisérem s detekcí intenzifikovanou chemiluminiscencí. Čísla 1 až 4 ukazují vzorky od 4 reprezentativních pacientů z 25 vyšetřovaných pacientů. Densitometrické hodnoty pro pacienty 1 až 4 na tomto obrázku odpovídají pacientům 17 až 20 na obrázku 2. N a T označují páry sliznice tlustého střeva a nádorové tkáně pro každého pacienta, v příslušném pořadí. Přečištěné PGHS-1 a PGHS-2 standardy jsou ukázané nalevo. Je ukázáno umístění markérů molekulové hmotnosti.
Obr. 2 - Kvantifikace změny v PGHS-1 a PGHS-2 proteinové expresi v odpovídajících tumorech ve srovnání s autologní normální sliznicí. Aliquoty PGHS standardů a mikrosomálních
-2CZ 294516 B6 proteinů od 25 pacientů (25 pg na dráhu) byly separovány SDS-PAGE, přeneseny do nitrocelulózy a imunoblotovány s anti-PGHS-1 nebo anti-PGHS-2 antisérem, s detekcí pomocí intenzifikované chemilumiscence. Množství PGHS proteinu bylo určeno densitometrií. Optická densita odečtená z autoradiografického snímku pro známé kvantity přečištěných PGHS-1 a PGHS-22 standardů byla použita pro přibližnou kvantifikaci množství PGHS-1 a PGHS-2 proteinů v mikrosomálních vzorcích z normální sliznice a z nádorových vzorků. Hodnoty reprezentují změny v expresi v ng pro normální sliznici a nádorovou tkáň pro každého pacienta.
Obr. 3 - Imunoblotová analýza ukazující expresi PGHS-1 a PGHS-2 v polypech o velikosti od 0,3 do 5 mm v průběhu. (Dráhy 1 až 5 odpovídají vzorkům z polypů o průměru přibližně 1 až 5 mm, v příslušném pořadí). PGHS-1 protein byl přítomen ve vzorcích polypů a kontrol z tenkého a tlustého strava. PGHS-2 imunoreaktivita nebyla detekována v kontrolních vzorcích z tenkého a tlustého střeva. Ačkoliv nízké hladiny PGHS-2 proteinu byly detekovány ve větších polypech tlustého střeva (3 až 5 mm v průběhu) (dráhy 3,4 a 5), vyšší hladiny PGHS-2 imunoreaktivity byly detekovány ve všech vzorcích polypů tlustého střeva velikosti 1 až 5 mm v průběhu (dráhy 1 až 5), kdy velmi vysoké hladiny PGHS-2 proteinu byly demonstrovány v polypech o velikosti 2 až 3 mm v průměru (dráhy 2 až 3). Přečištěný ovčí PGHS-1 a PGHS-2 protein (5 ng, 10 ng a 20 ng) byl elektroforesován jako standard a odpovídajícím způsoben značen.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří použití 3-fenyl-4-(4-methylsulfonylfenyl)-2-(5H)-furanonu pro výrobu farmaceutického prostředku pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva na denokarcinom u pacientů s anamnézou familiární adenomatosní polyposy nebo u pacientů s jedním nebo více adenomy tlustého střeva.
Jak je odborníkům v oboru známo, základní událostí v transformaci adenomu tlustého střeva na denokarcinom tlustého střeva je získání schopnosti buněk adenomu invadovat do bazální membrány podslizniční tkáně tlustého střeva.
Farmaceutické prostředky mohou kromě účinné látky obsahovat přijatelný nosič a popřípadě jiné účinné látky.
Termín „farmaceuticky akceptovatelná sůl“ označuje soli připravené z farmaceuticky akceptovatelných netoxických bází včetně anorganických bází a organických bází. Sole připravené z anorganických bází zahrnují hlinité, amonné, vápenaté, měďnaté, železité, železnaté, lithné, hořečnaté, manganičité sole, manganaté, draselné, sodné, zinečnaté a podobně. Zejména preferovány jsou amonné, vápenaté, hořečnaté, draselné a sodné sole. Sole odvozené od farmaceuticky akceptovatelných organických netoxických bází zahrnují sole primárních, sekundárních a terciálních aminů, substituovaných aminů včetně přirozeně se vyskytujících substituovaných aminů, cyklických aminů, a bazických iontoměničových pryskyřic, jako je arginin, betain, kofein, cholin, N,N-dibenzylethylendiamin, diethylamin, 2-diethylaminoethanol, 2-dimethylaminoethanol, ethanolamin, ethylendiamin, N-ethylmorfolin, N-ethylpiperidin, glukamin, glukosamin, histidin, hydrabamin, izopropylamin, lysin, methylglukamin, morfolin, piperazin, piperazin, polyaminové pryskyřice, prokain, puriny, theobromin, triethylamin, trimethylamin, tripropylamin, tromethamin a podobně.
Farmaceutické prostředky obsahující aktivní složky mohou být ve formě vhodné pro orální použití, například jako tablety, trocheje, lozengy, vhodné nebo olejové suspenze, rozpustné prášky nebo granule, emulse, tvrdé nebo měkké kapsle, nebo sirupy nebo elixíry. Prostředky zamýšlené pro orální použití mohou být připraveny podle jakékoliv metody v oboru známé pro výrobu farmaceutických prostředků a takové prostředky mohou obsahovat jednu nebo více látek vybraných ze skupiny skládající se ze sladidel, ochucovacích prostředků, barviv a konzervačních látek pro poskytnutí farmaceuticky elegantních a chutných přípravků. Tablety obsahují aktivní
-3 CZ 294516 B6 složku ve směsi s netoxickými farmaceuticky akceptovatelnými přísadami, které jsou vhodné pro výrobu tablet. Těmito přísadami mohou být například inertní ředidla, jako je uhličitan vápenatý, uhličitan, sodný, laktosa, fosforečnan vápenatý a fosforečnan sodný; granulační a desintegrační činidla, například kukuřičný škrob, nebo kyselina alginová; pojivá, například škrob, želatina nebo akacia, a lubrikans, například stearát hořečnatý, kyselina stearová nebo mastek. Tablety mohou být nepotažené nebo potažené známými technikami pro oddálení desintegrace a absorpce v gastrointestinálním traktu a tak pro prodloužení účinku po delší dobu. Například může být použit materiál pro prodloužení doby jako je glycerylmonostearát nebo glyceryldistearát. Tablety mohou být potaženy technikou popsanou v patentu US 4 256 108; 4 166 452; a 4 256 874 za vytvoření osmotických terapeutických tablet sřízeným uvolňováním.
Prostředky pro orální použití mohou být formulovány jako kapsle z tvrdé želatiny, kde je aktivní složka smísena s inertním pevným ředidlem, například, uhličitanem vápenatým, fosforečnanem vápenatým nebo kaolinem, nebo jako kapsle z měkké želatiny, kde je aktivní složka smísena s vodním nebo olejovým médiem, například s arašídovým olejem, kapalným parafínem nebo olivovým olejem.
Vodné suspenze obsahují aktivní materiál ve směsi s excipienty vhodnými pro výrobu vodných suspenzí. Takové excipients jsou suspendující činidla, například sodná sůl karboxymethylcelulózy, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, alginát sodný, polyvinylpyrrolidon, tragantová guma a akaciová guma; disperzačními nebo zvlhčujícími činidly mohou být přirozeně se vyskytující fosfatidy, například lecitin, nebo kondenzační produkty alkylenoxidu s mastnými kyselinami, například polyxyethylenstearát, nebo kondenzační produkty ethylenoxidu s alifatickými alkoholy s dlouhým řetězcem, například heptadekaethylenoxycetanol, nebo kondenzační produkty ethylenoxidu s částečnými estery odvozenými od mastných kyselin a hexitolu jako je polyoxyethylensorbitolmonooleát, nebo kondenzační produkty ethylenoxidu s částečnými estery odvozenými z anhydridů mastných kyselin a hexitolu, například polyoxyethylensorbitanmonooleát. Vodné suspenze mohou také obsahovat jednu nebo více konzervačních látek, například ethyl, nebo n-propyl-p-hydroxybenzoát, jedno nebo více barviva, jednu nebo více ochucovacích látek, jedno nebo více sladidel, jako je celulóza, sacharin nebo aspartam.
Olejové suspenze mohou být připraveny suspendováním aktivní látky v rostlinném oleji, například podzemnicovém oleji, olivovém oleji, sezamovém oleji nebo kokosovém oleji, nebo v minerálním oleji jako je kapalný parafín. Olejová suspenze může obsahovat zahušťovací činidlo, jako je včelí vosk, tvrdý paradin nebo cetylalkohol. Sladidla jako jsou ta uvedená výše a ochucovací prostředky mohou být přidány pro podání chutného orálního přípravku. Tyto prostředky mohou být konzervovány přidáním antioxidantu jako je kyselina askorbová.
Rozpustné prášky a granuláty vhodné pro přípravu vodné suspenze přidáním vody obsahují aktivní složky ve směsi a dispersním nebo zvlhčujícím činidlem, suspendujícím činidlem a jedním nebo více konzervačními látkami. Vhodná dispersní nebo zvlhčující činidla a suspendující činidla jsou stejná, jako bylo uvedeno výše. Další excipiens, například sladidla, příchutě a barviva, mohou být také přítomna.
Farmaceutické prostředky mohou být také ve formě emulsí olej ve vodě. Olejová fáze může být rostlinný olej, například olivový olej nebo podzemnicový olej, nebo minerální olej jako je například kapalný parafín nebo jejich směs. Vhodnými emulgačními činidly mohou být přirozeně se vyskytující fosfatidy, například sója, lecitin, a estery nebo částečně estery odvozené od anhydridů mastných kyselin a hexitolu, například sorbitanmonooleát, a kondenzační produkty uvedených částečných esterů s ethylenoxidem, například polyoxyethylensorbitanmonooleát. Emulse mohou také obsahovat sladidla a příchutě.
Sirupy a elixíry mohou také být připraveny se sladidly, například glycerolem, propylenglykolem, sorbitolem nebo celulózou. Takové prostředky mohou také obsahovat konzervační látky a
-4CZ 294516 B6 ochucovací a barvicí činidla. Farmaceutický prostředek může být ve formě sterilní injikovatelné vodné nebo olejové suspenze. Tato suspenze může být připravena podle znalostí v oboru za použití těch vhodných disperzních nebo zvlhčujících činidel, která byla uvedena výše. Sterilní injikovatelný přípravek může také být sterilní injikovatelný roztok nebo suspenze v netoxickém parenterálně akceptovatelném ředidle nebo rozpouštědle, například jako roztok 1,3-butandiolu. Mezi akceptovatelná vehikula a rozpouštědla, která mohou být použita, patří voda, Ringerův roztok a fyziologický roztok chloridu sodného. Kromě toho, sterilní, fixované oleje jsou běžně používány jako rozpouštěcí nebo suspendující médium. Pro tento účel může být použit nedráždivý fixovaný olej obsahující syntetické mono- nebo diglyceridy. Kromě toho, mastné kyseliny jako je kyselina olejová nacházejí uplatnění v přípravě injikovatelných přípravků.
Účinná látka může být podána také ve formě čípků pro rektální podání léku. Tyto kompozice mohou být připraveny smísením léčiva s vhodnou nedráždivou přísadou, která je pevná při normálních teplotách, ale které je kapalné při rektální teplotě a bude proto tát v rektu za uvolnění léčiva. Takovými materiály jsou kokosové máslo a polyethylenglykoly.
Pro lokální použití jsou připraveny krémy, masti, želé, roztoky a suspenze, atd., které obsahují sloučeninu podle vzorce I. (Pro účely této přihlášky by mělo lokální podání zahrnovat ústní vody a kloktadla).
Dávkové hladiny v rozmezí od asi 0,01 mg do asi 140 mg/kg tělesné hmotnosti a den jsou užitečné v léčbě výše uvedených stavů, nebo alternativně od 0,5 mg do asi 7 g na pacienta a den. Například, zánět může být účinně léčen podáním od asi 0,01 do 50 mg sloučeniny na kilogram tělesné hmotnosti a den, nebo alternativně od 0,5 mg do asi 3,5 g na pacienta a den.
Množství aktivní látky, které může být kombinováno s materiály nosičů pro produkci jedné dávkové formy se bude velmi lišit v závislosti na léčeném objektu a jednotlivém způsobu podání. Například, formulace pro orální podání u lidí může obsahovat od 0,5 mg do 5 g aktivní látky spolu s vhodným a běžným množství nosiče, jehož podíl může být od 5 do asi 95 procent celkové kompozice. Dávková jednotka bude obyčejně obsahovat mezi 1 mg a 500 mg aktivní látky, typicky 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg. Předpokládá se jedna dávka za den.
Bude nicméně jasné, že specifická úroveň dávky pro jakéhokoliv jednotlivého pacienta bude záviset na mnoha faktorech včetně věku, tělesné hmotnosti, celkového zdravotního stavu, pohlaví, dietě, době podání, způsobu podání, stupni vylučování, kombinaci léků a závažnosti jednotlivého léčeného onemocnění.
Následující příklady ilustrují, ale nelimitují, předkládaný vynález.
Příklady provedení vynálezu
Vzorky pacientů
Byly vyšetřeny karcinomy tlustého střeva a párové normální tkáně sliznice, adenomatosní polypy, normální sliznice tlustého střeva od pacientů bez karcinomu a odpovídající normální a karcinomové tkáně prsu. Průměrný věk a věkové rozmezí párových vzorků normální a karcinomové tkáně tlustého střeva byla 63,3 a 41 až 93 let, v příslušném pořadí. Vzorky tkáně tlustého střeva byly získány z nenekrotické oblasti tumoru a z autologní normální sliznice od stejného pacienta z okraje resekátu umístěného nejméně 5 cm od tumoru. Histologicky byly všechny tumory tlustého střeva adenokarcinomy a všichni pacienti měla sporadický karcinom tlustého střeva. Jeden pacient měl ložisko adenokarcinomu v adenomatosním polypu. Adenomy tlustého střeva byly od pacientů s familiární adenomatosní polyposou (FAP).
-5CZ 294516 B6
Příprava mikrosomálních membrán ztkání tlustého střeva
Zmražené tkáně se nechají roztát v ledem ochlazeném homogenizačním pufru (50 mM fosforečnan draselný, pH 7,1, obsahující 0,1 M NaCl, 2 mM EDTA, 0,4 mM fenylmethylsulfonyl fluoridu, 60 pg/ml sojového trypsinového inhibitoru, 2 μg/ml leupeptinu, 2 μg/ml aprotininu a 2 pg/ml pepstatinu, vše od Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO). Tkáně jsou dvakrát rozrušeny na ledu za použití tkáňového drtiče (Biospec Products, Bartesville, OK) a homogenizovány sonikací při 4 °C za použití ultrazvukového homogenizátoru série Cole Parmer 4710 (Cole Parmer Instrument Co., Chicago, IL). Buněčná drť je odstraněna centrifugací při 100 x g po dobu 15 minut při 4 °C a vzniklé supernatanty jsou podrobeny centrifugací při 100000 x g po dobu 60 minut při 4 °C. Membránové frakce jsou resuspendovány v homogenizačním pufru a jsou sonikovány pro získání homogenní membránové suspenze. Koncentrace proteinu je určena pro každý vzorek za použití proteinového testovacího kitu (Bio-Rad, Mississauga, Ontario, Canada).
Antiserum
Přečištěné proteiny kompletní PGHS-1 z ovčích seminálních váčků a placentální PGHS-2 byly nakoupeny od Cayman (Ann Arbor, MI) a jsou použity pro generování králičích polyklonálních protilátek. Samicím novozélandských bílých králíků je injikován 1 ml Freudova kompletního adjuvans obsahující 200 pg přečištěného PGHS-1 nebo PGHS-2. Dva týdny po primární infekci byly králíci dosyceni 100 pg přečištěného PGHS-1 nebo PGHS-2 v 0,5 ml Freudova nekompletního adjuvans. Anti-PGHS antisérum rozpoznávalo lidské PGHS izoformy s přibližně tisícinásobnou selektivitou pro jednotlivé izoformy. Za podmínek použitých ve této studii nevykazovaly anti-PGHS protilátky žádnou zkříženou reaktivitu s druhou PGHS izoformou. Pro každý pokus byly dvě koncentrace PGHS-1 a PGHS-2 proteinových standardů zavedeny na každý gel pro hodnocení selektivity protilátek.
Dodecylsulfat sodný - polyakrylamidová gelová elektroforesa (SDS-PAGE) a imunoblotové analýzy
Membránové frakce byly smíseny s dodecylsulfatem sodným (SDS) pufrem pro vzorek (20 mM Tris-HCl, pH 6,8, obsahující 0,4% (hmotnost/objem) SDS, 4% glycerol, 0,24M β-merkaptoethanol a 0,5% bomofenolovou modř), uvedeny do varu na dobu 5 minut a analyzovány SDSpolyakrylamidovou gelovou elektroforesou podle Laemmliho metody (Laemmli, U.K. Gleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriphage T4, Nátuře 227: 680 - 685, 1970). Proteiny byly elektroforeticky přeneseny na nitrocelulózové membrány jak bylo dříve popsáno (Towbin, H., Staehelin, T. a Gordon, J. Electrohoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: proceduře and some applications, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 75: 4350 - 4354, 1979). Primární protilátky k PGHS-1 a PGHS-2 byly použity v konečném ředění 1:5000 a 1:7500, v příslušném pořadí. Sekundární oslí anti-králičí IgG protilátka s navázanou křenovou peroxidasou (Amersham Life Sciences, Oakville, Ontario, Canada) byla použita v ředění 1:3000. Imunodetekce byla provedena za použití intenzifikované chemiluminiscence podle návodu výrobce (Amersham). Autoradiografý byly snímány za použití počítačového denzitometru (Molecular Dynamics, Sunnyvale, CA) a hodnota optické density odpovídající přečištěné PGHS izoformě byla pouižita pro výpočet kvantity (ng) PGHS proteinu v histologicky normální a nádorové tkáni tlustého střeva.
Statistická analýza
Výsledky této studie byly analyzovány Wilcoxanovým seřazovacím neparametrickým testem pro určení signifikantních rozdílů mezi normální a nádorovou hladinou PGHS-1 a PGHS-2 (Freund, J. E., Mathematical Statistics, Prentice Halí, Englawood Cliffs, New Jersey, 1992).
-6CZ 294516 B6
Výsledky
Exprese PGHS-1 v lidském tlustém střevu: normální a nádorová tkáň
Obrázek 1 je reprezentativní imunoblot ukazující expresi PGHS u 4 z 25 pacientů vyšetřovaných v této studii.
Proužek, který odpovídá popsané molekulové hmotnosti 72000 pro PGHS-1 (Otto, J.C., DeWitt, D.L.S., a Smith, W.L., N-glycosylation of prostaglandin endoperoxide synthases-1 and -2 and their orientations in the endoplasmic reticulum, J. Biol. Chem., 268: 18234 - 18242, 1993), migroval spolu s přečištěným PGHS-1 standardem z ovčích semenných váčků (obrázek IA) a s rekombinantním lidským PGHS-1 exprimovaným v COS-7 buňkách (data nejsou ukázána; 7). Výsledky imunoblotu od všech 25 pacientů byly kvantifikovány densitometrickou analýzou a jsou ukázány ve sloupcovém grafu na obrázku 2. U 21 z 25 pacientů byly hladiny PGHS-1 redukovány v nádorové tkáni ve srovnání s normální tkání tlustého střeva. Průměrný pokles PGHS-1 v nádoru ve srovnání s normální tkání pro všech 25 vyšetřovaných pacientů byl 170 ng na mg mikrosomálního proteinu. Ve srovnání s přečištěným PGHS-1 standardem bylo rozmezí koncentrací PGHS-1 v normální a v nádorové tkáni o 0 až 760 ng (medián 199,8) a 4 až 540 ng (medián 51,1) na mg mikrosomálního proteinu, v příslušném pořadí. Rozdíl v expresi PGHS-1 v normální versus nádorové tkáni byl vysoce statisticky signifikantní podle neparametrické analýzy (Wilcoxonův seřazovací test, p<0,0001).
Exprese PGHS-2 v lidském tlustém střevu: normální a nádorová tkáň
Reprezentativní imunoblotová analýza 4 z 25 párových vzorků tlustého střeva za použití specifické PGHS-2 protilátky je ukázáno na obrázku IB. Dvojité imunogloty byly provedeny pro zhodnocení exprese PGHS—1 (obrázek 1) a PGHS-2 (obrázek IB) ve vzorcích získaných od stejného pacienta. PGHS-2 imunoreaktivta nebyla detekována v žádném ze 4 vzorků normální tkáně tlustého střeva. Oproti tomu, imunoreaktivní proužky s molekulovou hmotností 70000 až 72000, které migrovaly spolu s přečištěným PGHS-2 z ovčí placenty (obrázek IB) a s rekombinantním lidským PGHS-2 exprimovaným v COS-7 buňkách (dále nejsou ukázána; 7) byly detekovány u 3 ze 4 pacientů zde ukázaných. Celkem byl PGHS-2 imunoreaktivní protein detekován v nádorové tkáni od 19 z 25 vyšetřených pacientů (obrázek 2). Celkem, průměrné zvýšení PGHS-2 v nádorech tlustého střeva pro všech 25 vyšetřených pacientů bylo asi 73 ng na mg mikrosomálního proteinu. Ve srovnání s PGHS-2 standardem bylo rozmezí koncentrací PGHS-2 imunoreaktivního proteinu v normální a v nádorové tkáni 0 až 49 ng (medián 3,8) a 1,6 až 580 ng (medián 37,7) na mg mikrosomálního proteinu, v příslušném pořadí. Rozdíl v expresi PGHS-2 v normální versus nádorové tkáni byl vysoce statisticky signifikantní podle neparametrické analýzy (Wilcoxonův seřazovací test, p<0,0001).
Nádory tlustého střeva jsou charakterizovány 4 Dukes‘ stadii: A, tumor ve střevní sliznici; B tumor v muscularis propria; C, metastasy do lymfatických uzlin; a D, metastasy do jiných tkání. V této studii byly tumory tlustého střeva od pacientů se všemi stadii Dukes“ klasifikace (tabulka 1).
-7CZ 294516 B6
Tabulka 1
Data pacientů
Pacient Medikace Dukes stadium Změna v expresi proteinu
PGHS-1 PGHS-2
1 NA NA 6,20 -10,00
2 NA NA 1,70 -6,00
3 NA NA 2,80 -9,40
4 NA NA 1,20 ^1,10
5 žádná B 0,10 ND
6 chlordiazepoxid hydrochlorid clidinium bromid, magaidrate C 3,20 -5,90
7 NSAID A 0,00 -17,30
8 levothyroxin sodný, lorazepam, omeprazol C 0,50 1,50
9 žádná C 0,90 0,50
10 NA c 4,70 -16,30
11 žádná B 0,90 -9,00
12 NA D -20 -14,40
13 NA B 4,30 -7,10
14 aspirin C 0,80 -5,60
15 deltacortison, azathioprim, lovastatin B 0,00 5,70
16 enalapril maleat B 25,60 -6,60
17 žádná B -0,30 -1,50
18 žádná B 9,70 -11,20
19 aspirin C 13,70 -11,10
20 žádná B 8,30 -5,90
21 žádná C -0,10 -9,30
22 aspirin C 0,20 -3,00
23 žádná C 0,00 -12,30
24 diltiazem hydrochloird, omeprazol B 2,20 -17,00
25 fluorbiprofen, aspirin, nifedipin metoprolol tartrat B 0,10 -10,00
NA = data nejsou dostupná; ND = nedekovatelné
Dukes stadia: A = tumor ve sliznici
B = tumor do muscularis mucosae
C = metastasy do lymfatických uzlin D = vzdálené metastasy
Tabulka 1. Data pacientů: Jsou ukázána data pro každého pacienta v této studii. Pokud byla dostupná, pak je ukázána medikace užívaná pacientem. Dukes stadia onemocnění jsou následující: A, tumor ve střevní sliznici; B, tumor v muscularis propria; C, metastasy do lymfatických uzlin; a D, metastasy do jiných tkání. Množství imunoreaktivního PGHS proteinu je vyjádřeno jako relativní změna v expresi u normální sliznice tlustého střeva vzhledem k nádorové tkáni. NA: data nejsou dostupná v ND: Imunoreaktivita není detekovatelná.
Nebyla zde žádná asociace mezi stadiem a změnou v expresi PGHS-1 nebo PGHS-2 proteinu. Chybění této asociace je v souladu s pozorováním, že hladiny PGE2 v lidských nádorech tlustého střeva nekorelují s Dukes‘ stadiem (Rigas, B., Goldman, I.S., a Lavině, L. Altered eicosanoids levels in human colon cancer, J. Lab. Clin. Med., 122: 518 - 523, 1993). Je zajímavé, že exprese PGHS-2 byla buď nízká, nebo detekovatelná u 5 ze 6 pacientů v tu dobu užívajících protizánětlivou medikaci (tabulka 1).
-8CZ 294516 B6
Exprese PGHS-1 a PGHS-2 proteinu v normálním tlustém střevě, premaligních polypech a párované norální a karcinomové tkáni prsu
Exprese PGHS-1 a -2 proteinu byla analyzována v mnoha jiných lidských tkáních včetně 5 tkání tlustého střeva od nenádorových pacientů, 4 premaligních polypů a tří párových norálních a karcinomových tkání prsu. Ačkoliv PGHS-1 protein byl pozorován v normálních a v nádorových tkáních, PGHS-2 protein nebyl detekován v žádném z těchto vzorků.
Diskuse
V této studii, 19 až 25 vyšetřovaných tumorů tlustého střeva exprivovalo PGHS-2 protein, zatímco pouze 2 z 25 normálních tkání tlustého střeva exprivovalo tento protein. Spolu s indukcí exprese PGHS-2 byla exprese PGHS-1 redukována u 21 z 25 nádorových vzorků ve srovnání s normální okolní střevní sliznicí; nicméně, koncentrace PGHS-1 proteinu byly podobné v kontrolních vzorcích tlustého střeva a ve vzorcích polypů.
Podle naších znalostí je toto první studie vyšetřující expresi PGHS-1 a -2 proteinu v lidském karcinomu tlustého střeva. Předešlé výzkumy ukázaly zvýšenou hladinu eikosanoidů, zejména PGE2, v lidském karcinomu tlustého střeva, (J. Lab. Clin. Med. 122: 518 - 523, 1993, Bennett, A., Del Tacca, M., Stamford, I. F., a Zebro, T. prostaglandins from tumours of human large bowel. Br. J. Cancer, 35: 881 - 884, 1977, Bennet, A., Civier, A., Hensby, C.N., Melhuish, P.B., a Stamford, I.F. Measurement of arachidonate and its metabolites extracted from human normál and malignant gastrointestinal tissues. Gut. 28: 315 -318, 1987). Učinili jsme závěr, že zvýšení enzymu PGHS-2, které jsme pozorovali v národové tkáni tlustého střeva, vede ke zvýšení hladin prostagladinů v těchto tumorech. Kromě toho, usoudili jsme, že vzhledem k tomu, že prostaglandiny mohou mít mnoho účinků v biologii nádorů, včetně nastartování růstu a modulování imunologického dohledu, budou elevované hladiny prostanoidů v tumoru vést k růstu a vývoji tumoru (Easners, D.L., Hixson, L.J., a Alberts, D.S., Piroxicam and other cyclooxygenase inhibitors: potential for cancer chemoprevention., J. Cell. Biochem., 196 (Suppl.): 156 - 166, 1992). Zajímavé je, že PGHS-2 protein nebyl pozorován ve vyšetření vzorků karcinomu prsu. Tak je exprese PGHS-2 proteinu typickým znakem při transformaci tkáně zpre-maligní na maligní.
Eberhart a spol. demonstrovali „up-regulaci“ PGHS-2 mRNA v lidských adenomech a adenokarcinomech tlustého strava (Eberhart, C. E., Coffey, R.J., Radhika, A., Giardiello. F.M., Ferrenbach, S., Dubois, R.N., Up-regulation of cyclooxygenase 2 gene expression in human colorectal adenomas and adenocarcinomas. Gastroenterology, 107: 1183 - 1188, 1994). Ačkoliv je tento objem zajímavý, nemusí být ukazatelem aktuální exprese enzymu vzhledem ke komplexní post-transkripční a post-translační regulaci PGHS-2 mRNA. Například, Hoff et al., (Hoff, T., DeWitt, D., Kaever, V., Resch, K., a Goppelt-Struebe, M., Differentiation-associated expresion of prostaglandin G/H synthase in monocytic cells, FEBS Lett., 320: 38 -42, 1993), Lee et al., (Lee, S.H., Soyoola, E., Chanmugam, P., Hart, S., Sun, W., Zhong, H., Liou, S., Simmons, D., a Hwang, D. Seíective expression of mitogen-inducible cyclooxygenase in macrofages stimulated with lipopolysaccharide., J. Biol. Chem., 267: 25934 - 25938, 1992) a naše laboratoř ukázali významnou expresi PGHS-2 mRNA bez současné exprese PGHS-2 proteinu. Proto je vyšetření exprese PGHS proteinu kritické pro hodnocení koncentrace PGHS-2 enzymu.
Žádná odborná zpráva nenaznačuje absenci PGHS-2 proteinu v polypech od 4 pacientů s familiární adenomatosní polyposou, zejména ve světle důkazů od několika skupin, že sulindac (inhibující jak PGHS-2, tak PGHS-1) vede k regresi polypů u pacientů s familiární polyposou. Vzorky lidských polypů byly získány z malých polypů tlustého střeva v rozmezí velikosti od 0,4 až <5 cm v průměru. Podle našeho názoru je PGHS-2 protein exprivován v pozdějším stadiu sekvence polyp-karcinom, kde polypy mají větší průměr, snad větší než nebo rovný 5 mm. Nová studie, kterou provedl Ladenheim et al., popisuje, že slindac nevedl k regresi sporadických polypů tlustého střeva; nicméně, ve studii je zdůrazněno, že byly zahrnuty časné sporadické
-9CZ 294516 B6 polypy (67 % polypů bylo < 5 mm) a naznačuje, že odpověď na NSAID může být lepší u polypů v „určitém stadiu sekvence adenom-karcinom (Ladenheim, J., Garcia, G., Titzer, D., Herzenberg,
H., Lavori, P. Edson. R., a Omasy, B. Effect of sulindac on sporadic colon polyps,
Gastroenterology, 108: 1083- 1087, 1995)“.
Dlouhodobé užívání NSAID je asociováno s vedlejšími účinky včetně renální toxicity, gastrointestinálních ulcerací a zvýšené krvácivosti. Současná NSAID jako je aspirin, sulindac, a indometaci, mají malou selektivitu pro inhibici buď PGHS-1, nebo PGHS-2 (Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y.S. COX-1 and COX-2: Toward the devolopment of more selective NSAIDS. Drug News Perspektives 7: 501 - 512, 1994), O'Neill, G.P., Mancini, J. A., Kargman, S., Yergey, J. Kwan, Μ. Y., Falgueyret, J.-P., Abramovitz, M., Kennedy, B.P., Oullet, M., Cromlish, W., Culp, S., Evans, J.F., Ford-Hutchinson, A.W., a Vickers, P.J., Overexpresion of human prostaglandin G/H synthase-1 and -2 by recombinant vaccinia virus: inhibition by nestaroidal anti-inflammatory drugs and biosynthesis of 15-hydroxyeicosatetraenoic acid. Mol. Pharmacol., 45: 245 - 254, 1994 a DeWitt, D.L., Meade, E.A., a Smith, W.L. PGH synthase isoenzyme selectivity: the potenciál for safer nonsteroidal antiinflammatory drugs. An. J. Med. (Suppl)., 95: 40S - 44S, 1993). Bylo naznačeno, že selektivní inhibitory PGHS-2 budou terapeutický užitek se snížením kapacity pro indukci mechanismů, na kterých jsou založeny vedlejší účinky. Nově, u selektivního PGHS-2 inhibitoru, NS-398, bylo ukázáno, že má u krys protizánětlivý, antipyretický a analgetický účinek bez toho, že by byl ulcerogenní (Futaki, N., Yoshikawa, K., Hamasaka, Y., Arai, I., Higuchi, S., Iizuka, H., a Otomo. S., NS-398. a novel non-steroidal antiinflammatory drug with potent anatgesic and antipyretic effects, which causes minimal stamach lesions. Gen. Pharmacol, 24: 105 - 110, 1993; Futaki, N., Takahashi, S., Yokoyama, M., Arai, I., Higuchi, S., a Otoma, S., NS-398, a new antiinflammatory agent, selectively inhibits prostaglandin G/H synthase/cyclocygenase (COX-2) activity in vitro. Prostaglandins, 47: 55 - 59, 1994). Předkládaná studie vyšetřující expresi PGHS-1 a PGHS-2 ve tlustém střevu demonstruje, že obě izoformy PGHS jsou přítomné v tumorech tlustého střeva.
Myší polypy
MPCA716 knockoutované myši (vyvinuté Dr. Taketo vBanyu Měrek, ref: Oshima, M., Oshima, H., Kitagawa, K., Kobayashi, M., Itakura, C., a Taketo, M. Loss of Apc heterozygosity and abnormal tissue building in nascent polyps in mice carrying a truncated Apc genetruncation mutant mice, Proč. NAtl. Acad. Sci. USA 92: 4482 - 4486, 1995) mají vyvynuto mnoho polypů ve svém zažívacím traktu. Od šesti myší (samců i samic) z křížení NI, N2 a N4 generací myší byly odebrány vzorky malých polypů tenkého a tlustého střeva velikosti od 0,3 do 5,6 od ApcA716 knockoutovaných myší a byly ihned zmraženy.
Výsledky
Exprese PGHS-1 a PGHS-2 v polypech ApcA716 myší
PGHS-1 a PGHS-1 proteinová exprese byla vyšetřována v polypech zvětšující se velikosti od ApcA716 myší. Obrázek 3 je imunoblotová analýza ukazující expresi PGHS-1 a PGHS-2 v polypech v rozmezí velikosti od 0,3 do 5 mm v průměru, (linie 1 až 5 korespondují vzorků z polypů o asi 1 až 5 mm v průměru, v příslušném pořadí). PGHS-1 protein byl demonstrován ve všech kontrolních a polypových vzorcích tenkého a tlustého střeva. PGHS-2 imunoreaktivita nebyla detekována v kontrolních vzorcích tenkého a tlustého střeva. Ačkoliv nízké hladiny PGHS-2 proteinu byly detekovány ve větších polypech střevních (3-5 mm v průměru) (linie 3, 4 a 5), vyšší hladiny PGHS-2 imunoreaktivního druhu byly detekovány ve všech vzorcích polypů tlustého střeva o průměru 1 až 5 mm (linie 1 až 5) s velmi vysokými hladinami PGHS-2 proteinu demonstrovanými v polypech o průměru 2 až 3 mm (linie 2 až 3). Purifikované ovčí PGHS-1 a PGHS-2 proteiny (5 ng, 10 ng a 20 ng) byly elektroforesovány jako standardy a jsou podle toho označeny. Soudíme, že dramatická indukce COX-2 během růstu polypů odráží kritickou úlohu COX-2 v iniciaci transformace z acenomu na adenokarcinom.

Claims (3)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použití 3-fenyl-4-(4-methylsulfonylfenyl)-2-(5H)-furanonu pro výrobu farmaceutického prostředku pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva na adenokarcinom u pacientů s anamnézou familiární adenomatosní polyposy nebo u pacientů s jedním nebo více adenomy tlustého střeva.
  2. 2. Použití podle nároku 1, při němž je farmaceutický prostředek určen pro zpomalení nebo prevenci transformace adenomu tlustého střeva na adenokarcinom tlustého střeva.
  3. 3. Použití podle nároku 1 nebo 2, při němž je farmaceutický prostředek určen pro zpomalení nebo prevenci vzniku schopnosti invaze adenomu do bazální membrány podslizniční tkáně tlustého střeva.
CZ1998156A 1995-07-19 1996-07-15 Farmaceutický prostředek CZ294516B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US124095P 1995-07-19 1995-07-19
GBGB9603470.7A GB9603470D0 (en) 1996-02-19 1996-02-19 Method of treating colonic adenomas

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ15698A3 CZ15698A3 (cs) 1998-09-16
CZ294516B6 true CZ294516B6 (cs) 2005-01-12

Family

ID=26308761

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1998156A CZ294516B6 (cs) 1995-07-19 1996-07-15 Farmaceutický prostředek

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP0839034B1 (cs)
KR (1) KR100454624B1 (cs)
CN (1) CN1196679A (cs)
AT (1) ATE268176T1 (cs)
AU (1) AU706089B2 (cs)
CA (1) CA2227238C (cs)
CZ (1) CZ294516B6 (cs)
DE (1) DE69632632T2 (cs)
EA (1) EA005073B1 (cs)
ES (1) ES2220983T3 (cs)
HU (1) HU225506B1 (cs)
IL (1) IL122960A (cs)
MX (1) MX9800568A (cs)
NO (1) NO980221L (cs)
NZ (1) NZ312997A (cs)
SK (1) SK5298A3 (cs)
WO (1) WO1997003667A1 (cs)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6166024A (en) 1995-03-30 2000-12-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of topical azathioprine and thioguanine to treat colorectal adenomas
WO1999009988A1 (en) * 1997-08-27 1999-03-04 Hexal Ag New pharmaceutical compositions of meloxicam with improved solubility and bioavailability
NZ509376A (en) * 1998-07-09 2003-10-31 Francis A Nardella Indole or carbazole derivatives for the treatment of chronic lyphocytic leukemia
US7105560B1 (en) * 1999-07-23 2006-09-12 The Regents Of The University Of California Use of etodolac in the treatment of multiple myeloma
US20020035107A1 (en) 2000-06-20 2002-03-21 Stefan Henke Highly concentrated stable meloxicam solutions
AR038957A1 (es) 2001-08-15 2005-02-02 Pharmacia Corp Terapia de combinacion para el tratamiento del cancer
DE10161077A1 (de) 2001-12-12 2003-06-18 Boehringer Ingelheim Vetmed Hochkonzentrierte stabile Meloxicamlösungen zur nadellosen Injektion
US7232821B2 (en) 2002-04-08 2007-06-19 Glaxo Group Limited (2-((2-alkoxy)-phenyl) -cyclopent-1enyl) aromatic carbo and heterocyclic acid and derivatives
US8992980B2 (en) 2002-10-25 2015-03-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Water-soluble meloxicam granules
GB0225548D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1568369A1 (en) 2004-02-23 2005-08-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the treatment of respiratory diseases in pigs
AR047894A1 (es) 2004-02-25 2006-03-01 Wyeth Corp Derivados de tiofeno como inhibidores de la proteina tirosina fosfatasa 1b (ptpasa 1b); metodos para su preparacion, composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por ptpasa 1b
TW200735866A (en) * 2005-11-18 2007-10-01 Synta Pharmaceuticals Corp Compounds for the treatment of proliferative disorders
WO2008089459A1 (en) * 2007-01-19 2008-07-24 Ardea Biosciences, Inc. Inhibitors of mek
CN102647971B (zh) 2009-10-12 2016-03-16 贝林格尔.英格海姆维特梅迪卡有限公司 用于包含美洛昔康的组合物的容器
WO2011107150A1 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the long-term treatment of musculoskeletal disorders in cats
US9795568B2 (en) 2010-05-05 2017-10-24 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Low concentration meloxicam tablets

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0739340A1 (en) * 1994-01-10 1996-10-30 Merck Frosst Canada Inc. Phenyl heterocycles as cox-2 inhibitors
JPH10511089A (ja) * 1994-12-21 1998-10-27 メルク フロスト カナダ インコーポレーテツド Ｃｏｘ−２阻害剤としてのジアリール−２−（５ｈ）−フラノン

Also Published As

Publication number Publication date
CA2227238C (en) 2003-10-28
AU706089B2 (en) 1999-06-10
EP0839034B1 (en) 2004-06-02
EA199800139A1 (ru) 1998-08-27
CZ15698A3 (cs) 1998-09-16
ATE268176T1 (de) 2004-06-15
NZ312997A (en) 2000-07-28
EA005073B1 (ru) 2004-10-28
WO1997003667A1 (en) 1997-02-06
IL122960A (en) 2006-07-05
CA2227238A1 (en) 1997-02-06
EP0839034A1 (en) 1998-05-06
IL122960A0 (en) 1998-08-16
AU6496096A (en) 1997-02-18
MX9800568A (es) 1998-04-30
NO980221L (no) 1998-03-18
SK5298A3 (en) 1998-12-02
HUP9901711A2 (hu) 1999-09-28
KR19990029066A (ko) 1999-04-15
CN1196679A (zh) 1998-10-21
KR100454624B1 (ko) 2004-12-31
DE69632632T2 (de) 2005-05-25
EP0839034A4 (en) 2002-06-19
HUP9901711A3 (en) 2001-02-28
DE69632632D1 (de) 2004-07-08
HU225506B1 (en) 2007-01-29
NO980221D0 (no) 1998-01-16
ES2220983T3 (es) 2004-12-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6649649B1 (en) Method of treating colonic adenomas
US20210154155A1 (en) Compositions of bakuchiol and methods of making the same
EP0839034B1 (en) Method of treating colonic adenomas
Kargman et al. Expression of prostaglandin G/H synthase-1 and-2 protein in human colon cancer
Fosslien Cardiovascular complications of non-steroidal anti-inflammatory drugs
Clària Cyclooxygenase-2 biology
Scarpignato Piroxicam-β-cyclodextrin: a GI safer piroxicam
Williams et al. Aspirin use and potential mechanisms for colorectal cancer prevention.
Morteau et al. Impaired mucosal defense to acute colonic injury in mice lacking cyclooxygenase-1 or cyclooxygenase-2
CA2431606C (en) Method and compositions employing formulations of lecithin oils and nsaids for protecting the gastrointestinal tract and providing enhanced therapeutic activity
Lanas et al. Clinical implications of COX-1 and/or COX-2 inhibition for the distal gastrointestinal tract
Takahashi et al. Suppression of azoxymethane-induced aberrant crypt foci in rat colon by nimesulide, a selective inhibitor of cyclooxygenase 2
Arber et al. Chemoprevention of colorectal cancer: ready for routine use?
CZ196796A3 (en) The use of 2-hydroxy-5-phenylbenzoic acid as chemically preventive and chemotherapeutical agents of clon cancer
US6593361B2 (en) Method of treating colonic adenomas
DuBois Nonsteroidal anti-inflammatory drug use and sporadic colorectal adenomas
CN114096240A (zh) 用于治疗家族性腺瘤性息肉病的方法
Villegas et al. Effects of oxicam inhibitors of cyclooxygenase on oxidative stress generation in rat gastric mucosa. A comparative study
de la Lastra et al. Gastric toxicity of racemic ketoprofen and its enantiomers in rat: Oxygen radical generation and COX-expression
Radi Comparative pathophysiology and toxicology of cyclooxygenases
AU717966B2 (en) Method of treating colonic adenomas
Casturi et al. Development of COX-2 selective inhibitors-therapeutic perspectives
Maurer et al. Effects of cyclooxygenase-2 (COX-2) inhibitors in colorectal cancer
Mason NSAID Related Upper Gastrointestinal Damage, Prevalence and Pathogenesis, with Particular Reference to the Role of Epidermal Growth Factor

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 19960715