SK5298A3 - Use of nsaid for producing a medicament for retarding or preventing the transformation of a colonic adenoma to a colonic adenocarcinoma - Google Patents

Use of nsaid for producing a medicament for retarding or preventing the transformation of a colonic adenoma to a colonic adenocarcinoma Download PDF

Info

Publication number
SK5298A3
SK5298A3 SK52-98A SK5298A SK5298A3 SK 5298 A3 SK5298 A3 SK 5298A3 SK 5298 A SK5298 A SK 5298A SK 5298 A3 SK5298 A3 SK 5298A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
pghs
nsaid
colon
retarding
adenoma
Prior art date
Application number
SK52-98A
Other languages
English (en)
Inventor
Stacia Kargman
Jilly Evans
Thomas J Simon
Original Assignee
Merck & Co Inc
Merck Frosst Canada Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9603470.7A external-priority patent/GB9603470D0/en
Application filed by Merck & Co Inc, Merck Frosst Canada Inc filed Critical Merck & Co Inc
Publication of SK5298A3 publication Critical patent/SK5298A3/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/603—Salicylic acid; Derivatives thereof having further aromatic rings, e.g. diflunisal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/60—Salicylic acid; Derivatives thereof
    • A61K31/612—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid
    • A61K31/616—Salicylic acid; Derivatives thereof having the hydroxy group in position 2 esterified, e.g. salicylsulfuric acid by carboxylic acids, e.g. acetylsalicylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Harvester Elements (AREA)
  • Lasers (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Superconductors And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
  • Soil Working Implements (AREA)

Description

Použitie NSAID na spomalenie alebo zabránenie transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm
Oblasť techniky
Táto prihláška je zameraná na spôsob liečby adenómov hrubého čreva podaním netoxického terapeuticky účinného množstva nesteroidného protizápalového prostriedku (NSAID). Presnejšie, táto prihláška je zameraná na spôsob na prevenciu alebo spomalenie transformácie adenómov hrubého čreva na adenokarcinómy hrubého čreva podaním netoxického, terapeuticky účinného, špecifického PGHS-2-inhibítora.
Doterajší stav techniky
Enzým prostaglandín G/H syntáza (PGHS) je kľúčovým enzýmom v biosyntetickej dráhe vedúcej k transformácii prostaglandínov (Watkins, W. D., Peterson, M. B. a Fletcher, J. R. a ďalší, Prostaglandins in Clinical Practice, New York: Raven, 1989 a Dewitt, D. L. Prostaglandín endoperoxide synthase: regulation and enzýme expression, Biochim. Biophys. Acta, 1083: 123 až 134,
1991) . Tieto prostanoidy sú silnými biologickými mediátormi s rôznymi normálnymi fyziologickými účinkami a tiež sa zúčastňujú v mnohých fyziologických stavoch vrátane zápalu a neoplastickej transformácie. (Watkins, W. D., Peterson, M. B. a Fletcher, J. R. a ďalší., Prostaglandins in Clinical Practice, New York: Raven, 1989· a Dewitt, D. L. Prostaglandín endoperoxide synthase; regulation . and enzýme expression, Biochim. Biophys. Acta, 1083: 121 až 134, 1991 a Xie, W., Robertson, D. L. a Simmons, D. L., Mitogen-inducible prostaglandín G/H synthase: a new target for nesteroidal anti-inflammatory drugs. Drug Dev. Res., 25:249 až 265,
1992) . Boli identifikované dve izoformy PGHS (Loll, P. J. a Garavito, R: M. The isoforms of cyclooxygenase: structure and functions, Expert Opin. Invest. Drugs, 3:1171 až 1180, 1994). PGHS-1 je konštitutívne exprimovaný vo väčšine tkaniva a predpokladá sa, že vytvára prostaglandíny pre normálne fýziologické funkcie.
-2Druhá izoforma, PGHS-2, je charakterizovaná rýchlou indukciou mnohými stimulmi, vrátane mitogénov, hormónov, cytokínov a rastových faktorov (Loll, P. J. a Garavito, R: M. The isoforms of cyclooxygenáse: structure and function, Expert Opin. Invest. Drugs, 3:1171 až 1180, 1994 a Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y.S. COX-1 and COX-2: Toward the devolopment of more selective NSAIDS. Drug News Pespectives 7: 501 až 512, 1994). Za stavov ako je zápal môžu byť PGHS-2 odvodené prostaglandíny predominantnými efektormi (Masferrer, J. L., Zweifel, B. S., Manning, P. T., Hauser, S. D., Leahy, K. M., Smith, W. G., Isakson, P. C. a Seibert, K. Selective inhibition of inducible cyclooxygenáse 2 in vivo is antiinflammatory and non-ulcerogenic. Prac. Natl. Acad. Sci. USA, 91: 3228 až 3232, 1994). Ako u PGHS-1, tak aj u PGHS-2 bolo ukázané, že sú cieľom nesteroidných protizápalových liečiv (NSAID) (Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y. S. COX-1 a COX-2: Toward the devolopment of more selective NSAID. Drug News Perspectives 7: 501 až 512, 1994 a O'NeilI, G. P., Mancini, J. A., Kargman, S., Yergey, J., Kwan, M. Y., Falgueyret, J. P., Abramovitz, M., Kennedy, B. P., Qullet,
M., Cromlish, W., Culp, S., Evans, J. P., Ford-Hutchinson, A. W., a Vickers, P. J., Overexpresion of human prosdtaglandin G/H synthase-1 and -2 by recombinant vaccinia vírus: inhibition by nesteroidal anti-inflammatory drugs and biosynthesis of 15-hydroxyeicosatetraenoic acid. Mol. Pharmacol., 45: 245 až 254, 1994 a DeWitt, D. L., Meade, E. A., a Smith, W. L. PGH synthase isoenzyme selectivity: the potenciál for safer nonsteroidal antiinflammatory drugs. Am. J. Med. (Suppl.), 95: 40S až 44S, 1993). Viď aj WO 94/14977 publikovanú 7.7.1994, ktorá opisuje spôsob hodnotenia účinnosti PGHS-2 inhibujúcich. činidiel, rovnako ako selektivitu; pre PGHS-2 proti PGHS-1. ' .V. ‘ ‘
Zvýšené hladiny prostaglandínov boli dokázané u mnohých karcinómov vrátane karcinómu pľúc a hrubého čreva (McLemore, T. L., Hubbard, W. C., Litterst, C. L., Liu, M. C., Miller, S., McMahon, N. A., Eggleston, J. C., a Boyd, M. R. Profiles of prostaglandin biosynthesis in normál lung and tumor tissue from lung cancer patients. Cancer Res., 48: 3140 až 3147, 1988 a Rigas, B., Goldman, I. S., a Levine, L., Altered eicosanoids levels in human colon cancer, J. Lab, Clin. Med., 122: 518 až 523, 1993). Konkrétne bolo zistené, že hladiny prostaglandínov sú
-3zvýšené u benígnych adenomatóznych polypov a ďalej sa zvyšujú v nádorovom tkanive hrubého čreva v porovnaní s histologický normálnou sliznicou. Pretože bolo ukázané, že prostanoidy sú imunosupresívne, môžu hrať úlohu pri vývoji tumoru (Earnest, D. L., Hixson, L. J., a Alberts, D. S. Piroxicam and other cyclooxygenase inhibitors: Potential for cancer chemoprevention. J. Celí. Biochem., 161 (Suppl.): 156 až 166, 1992).
Už od roku 1970 zvažovali výskumníci možnosť, že aspirín a príbuzné nesteroidné antireumatické liečivá (NSAID) môžu byť prínosom pre liečbu istých nádorových ochorení, vrátane karcinómu hrubého čreva.
Prvé epidemiologické štúdie naznačujú, že aspirín môže redukovať riziko kolorektálneho karcinómu prišla vraku 1988 v retrospektívnej, exploratívnej analýze z Melbourn, Austrália (Cancer Res., 48: 4399 až 4404, 1988). Štúdia našla o 40 % nižšie riziko incidencie karcinómu hrubého čreva medzi osobami, ktoré pravidelne užívali aspirín v porovnaní s osobami, ktoré neužívali aspirín. Novšie dáta, ktoré prezentovali Health, a ďalší, naznačujú možný prínos NSAID na prevenciu kolorektálnych neoplaziem (Health, C. W., Jr., Thun, M. J., Greenberg, E. R., Levin, B., a Marnett, L. J. Nonsteroidal antiinflammatory drugs and human cancer. Cancer 74: 2885 až 2888, 1994). Aj napriek týmto a ďalším rôznym štúdiám neexistuje žiadny významný dôkaz väzby medzi užívaním a prevenciou karcinómu hrubého čreva, nie je tu žiadny významný dôkaz, ukazujúci, že patologickú väzbu medzi kolorektálnym karcinómom a PGHS alebo dôkaz terapeutickej hodnoty inhibície PGHS podávaním aspirínu. Napríklad, pacienti s artritídou (z ktorých mnoho používa aspirín)- môžu byť menej náchylní ku karcinómu hrubého čreva.
V tejto prihláške sa opisujú štúdie, v ktorých sme analyzovali expresiu ľudského PGHS-1 a PGHS-2 proteínu u 25 párov normálnych a autológnych tumorov hrubého čreva, 4 premalígnych polypov hrubého čreva, 5 kontrolných tkanivách hrubého čreva (od pacientov bez karcinómu) a 3 zodpovedajúcich normálnych a nádorových tkanív ľudského prsníka. Medzi pozorovaniami z tejto štúdie je, že PGHS-1 proteín je redukovaný v nádorovom tkanive hrubého čreva v porovnaní s histologický normálnou črevnou mukózou a že PGHS-2 je
-4detegovaný vo väčšine vzoriek nádorov hrubého čreva, zatiaľ čo je v podstate nedekovateľný v normálnych tkanivách, polypoch a vzorkách karcinómu prsníka. Zvýšené hladiny prostaglandínov v nádorovom tkanive hrubého čreva vyplývajú z prítomnosti indukovateľnej PGHS-2 izoformy. Tieto štúdie podporujú náš názor, že transformácia adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm hrubého čreva je sprostredkovaná dramatickou a prekvapivou nadprodukciou PGHS-2 v adenóme. V súlade s tým sme prekvapivo našli metódu na spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm hrubého čreva, ktorá obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva NSAID pacientovi s anamnézou FAB (familiárny adenomatózna polypóza) alebo pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami hrubého čreva; uvedené množstvo je účinné na inhibíciu PGHS-2 v adenóme.
Podstata vynálezu
Tento vynález je zameraný na spôsob na spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm hrubého čreva, ktorý obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva NSAID pacientovi s anamnézou FAP alebo pacientovi s jedným alebo viacerými uvedenými adenómami hrubého čreva, uvedené množstvo je účinné na inhibíciu PGHS-2 v uvedenom adenóme. Výhodný spôsob obsahuje podanie špecifického PGHS-2 inhibujúceho prostriedku ako je tu definovaný.
V jednom uskutočnení je predkladaný vynález zaberaný na. spôsob na· spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu. .hrubého črevá na adenokarcinóm hrubého čreva, ktorý obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva NSAID pacientovi s anamnézou FAB alebo pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami.
Na účely tejto prihlášky takéto NSAI zahrnujú, ale nie sú obmedzené na aspirín, ibuprofén, Indometacin, Sulindac, Dolobid, Diclofenac, Naproxen, Piroxicam, Etodolac, Ketoprofén, Flurbiprofén, Meloxicam, Flosulide a Nabumetone.
-5Ako je u odborníkov známe, základné udalosti v transformácii adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm hrubého čreva je získanie schopnosti buniek adenómu prenikať do bazálnej membrány podsliznicové tkanivo hrubého čreva.
V súlade s tým je v tomto uskutočnení vynález zameraný na spôsob na spomalenie alebo prevenciu vzniku schopnosti buniek adenómu alebo ich častí prenikať do bazálnej membrány podsliznicové tkanivo hrubého čreva, ktorý obsahuje podanie netoxického, terapeuticky účinného množstva NSAID pacientovi s anamnézou FAP alebo pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami hrubého čreva; uvedené množstvo je účinné na inhibíciu PGHS-2 v uvedenom adenóme.
V jednom druhu tohto uskutočnenia je vynález zameraný na použitie NSAID, ktoré sú silnými inhibítormi PGHS-2. Na účely tohto vynálezu je NSAI silné, pokiaľ má ICS0 na inhibíciu PGHS-2 1 μΜ alebo menej podľa merania v bunkovom alebo mikrozomálnom teste tu opísanom.
V jednom z ďalších uskutočnení je vynález zameraný na použitie NSAID, ktoré sú špecifickými inhibítormi PGHS-2. Na účely tejto prihlášky, NSAID, ktoré sú špecifické inhibítory PGHS-2 sú definované ako tie, ktoré majú aspoň 1OO-krát vyššiu špecificitu na inhibíciu PGHS-2 proti PGHS-1 ako je merané pomerom ICS0 pre PGHS-2 voči IC50 pre PGHS-1 hodnotených v bunkovom alebo mikrozomálnom teste tu opísanom ďalej. Takéto zlúčeniny zahrnujú, ale nie sú obmedzené na tie, ktoré sú opísané vo WO 94/13635 publikovanej 3.6.1994, WO 95/00501, publikovanej 5.1.1995, WO 94/15932, publikovanej 21.7.1994, U.S. 5344991, udelenej 6.6.1994, EP 0418845 publikovanej 27.3.1991, U.S. 5380738 udelenej 10.1.1995 a U.S. 5393790 udelenej-20.2.1995, kedy všetky sú tú uvedené ako odkaz.
Vynález je zameraný na spôsob na spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu na adenokarcinóm, ktorý obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva NSAID pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami, kde uvedené množstvo je účinné na inhibíciu produkcie PGHS-2 v uvedenom adenóme. Výhodný spôsob obsahuje podanie špecifického PGHS-2 inhibujúceho prostriedku ako je tu definovaný.
-6V druhej skupine je vynález zameraný na spôsob na spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu na adenokarcinóm, ktorý obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vzorca I pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami.
kde A, B a C sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3.
(e) vinyl, (f) OCH3 alebo OCF3, (g) SCH3 alebo SCF3, (h) CN, (Í)N3, s tou podmienkou, že aspoň jeden z A, B a C musí byť vodík, • *· * * .
V skupine existuje podskupina zameraná na použitie zlúčeniny, podľa vzorca I, kde A a B sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3, (e) vinyl, (f) SCH3 alebo SCF3,
-7(g) cn, (h) N3i a C je vodík.
V triede existuje podtrieda zameraná na použitie zlúčeniny podľa vzorca
kde B je (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3, (e) vinyl, (f) -OCF3, alebo (g) -sch3.
Ilustráciou tohto vynálezu je použitie zlúčeniny vybranej z
-8CH3S(ObNH
Cl
o
F
CH3S(O);»NH
Cl
O
Cl alebo jej farmaceutický akceptovateľných solí.
V tretej skupine je vynález zameraný na spôsob na spomalenie alebo prevenciu transformácie adenómu na adenokarcinóm, ktorý zahrnuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vzorca II pacientovi s jedným alebo viacerými adenómami, (U) alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, kde X-Y-Z je vybrané zo skupiny, pozostávajúcej z : (a) -CH2CH2CH2-, (b) -C(O)CH2CH2-, (c) -CH2CH2C(O)-, (d) CR5(R5)-O-C(O)-, (e) -C(O)-O-CR5(R5)-, (f) -CH2-NR3-C(O)-, (g) CR5(RS)-NR3-C(O)-, (h) -CR4=CR4-S-,
-9(i) -S-CR4=CR4-,
0) -S-N=CH-, (k) -CH=N-S-, (l) -N=CR4-O-, (m) -O-CR4=N-, (n) -N=CR4-NH-, (o) -N=CR4-S-, a (p) -S-CR4=N-, (q) -C(O)-NR3-CR5(R5)-, (r) -NR3-CH=CH-, s podmienkou, že R1 nie je -S(O)2Me, (s) -CH=CH-NR3-, s podmienkou, že R1 nie je -S(O)2Me, kde strana b je dvojitá väzba a strany a a c sú jednoduché väzby a X-Y-Z je vybrané zo skupiny, pozostávajúcej z :
(a) =CH-O-CH=, a (b) -CH-NR3-CH=, (c) =N-S-CH=, (d) =CH-S-N=, (e) =N-O-CH=, (f) =CH-O-N=, (g) =N-S-N=, (h) =N-O-N=, kde strany a a c sú dvojitá väzba a strana b je jednoduchá väzba; R1 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z “ (a) S(O)2CH3i (b) S(O)2NH2l (c) S(O)2NHC(O)CF3, (d) S(O)(NH)CH3, (e) S(O)(NH)NH2, (f) S(O)(NH)NHC(O)CF3i (g) P(O)(CH3)OH a (h) P(O)(CH3)NH2,
-10R2 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) C,.6 alkyl, (b) C3, C41 C5, C6 a C7, cykloalkyl, (c) mono-, di-, tri-substituovaný fenyl, kde substituent je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (1) vodík, (2) halogén, (3) C,_6 alkoxy, (4) C,.6 alkyltio, (5) CN, (6) CF3, (7) alkyl, (8) N3i (9) -CO2H, (10) -CO2-CM alkyl, (11) -C(R5)(R6)-OH, (12) -C(R5)(R6)-O-C,.4 alkyl a (13) -C,.6 alkyl-CO2-R5;
(d) mono-, di- alebo tri- substituovaný heteroaryl, kde heteroaryl je monocyklciký aromatický kruh s 5 atómami, kde uvedený kruh má jeden heteroatóm, ktorý je S, O alebo N a voliteľne 1, 2 alebo 3 ďalšie N atómy; alebo je heteroaryl monocyklický kruh so 6 atómami, kde uvedený kruh má jeden heteroatóm, ktorý je N a voliteľne 1, 2 alebo 3 ďalšie N atómy; kde uvedené substituenty šú vybrané zo skupiny, skladajúcej sa z:
(1) vodík, (2) halogén, vrátane fluóru, chlóru, brómu a jódu, (3) C,.6alkyl, (4) Ο,.6 alkoxy, (5) C,.6 alkyltio, (6) CN, (7) CF3,
-11 (8) Ν31 (9) -C(R5)(R6)-OH, (10) -C(R5)(R6)-O-Cm alkyl,
R3je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) CF3, (c) CN, (d) 0,.6 alkyl (e) hydroxy C16alkyl a (f) -C(O)-C^alkyl, (g) voliteľne substituovaný (1) -C,.5alkyl-Q, (2) -C,.3alkyl-O-C,.3alkyl-Q, (3) -C,.3alkyl-S-C,.3alkyl-Q, (4) -C,.5alkyl-O-Q, alebo (5) -C,.salkyl-S-Q, kde substituent je umiestnený na alkyle a substituent je C,.3alkyl;
(h) -Q.
R4 a R4' sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) CF3, (c) CN, (d) Ο,.6 alkyl, .
(e) -Q, ./’· (f) -O-Q, (g) -S-Q, a (h) voliteľne substituovaný (1) -C,.salkyl-Q, (2) -O-C,.5alkyl-Q, (3) -S-C,.salkyl-Q, (4) -C,.3alkyl-O-C,.3alkyl-Q,
- 12(5) -C^alkyl-S-C^alkyl-Q, (6) -C^alkyl-O-Q, alebo (7) -C^alkyl-S-Q, kde substituent je umiestnený na alkyle a substituent je CV3alkyi; a
R5, R5’, R6, R7 a R8 sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) vodík, (b) alkyl, alebo R5 a R6 alebo R7 a R8 spolu s uhlíkom, na ktorý sú pripojené, tvoria monocyklický nasýtený uhlíkový kruh s 3, 4, 5, 6 alebo 7 atómami.
Q je CO2H, CO2-CMalkyl, tetrazoIyl-5-yl, C(R7)(R8)(OH), alebo C(R7)(R8)(O-C^alkyl);
s podmienkou, že pokiaľ X-Y-Z je -S-CR4=CR4', potom R4 a R4'sú iné ako CF3.
V tejto skupine je podskupina zameraná na použitie zlúčeniny podľa vzorca
III (III) alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, kde R1 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) S(O)2CH3, (b) S(O)2NH2, (c) S(O)2NHC(O)CF3, (d) S(O)(NH)CH3, (e) S(O)(NH)NH2i (f) S(O)(NH)NHC(O)CF3, (g) P(O)(CH3)OH a (h) P(O)(CH3)NH2 a
-13R2 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) C^alkyl, (b) C3, C4, C5, C6 a C7, cykloalkyl, (c) mono-, di-, tri- substituovaný fenyl, kde substituent je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(1) vodík, (2) halogén, (3) C,.6 alkoxy, (4) 0,.6 alkyltio, (5) CN, (6) CF3, (7) CMalkyl, (8) N3, (9) -CO2H, (10) -CO2-CMalkyl, (11) -C(H)(R6)-OH, (12) -C(H)(R’)-O-CM alkyl, a (13) -C,.6alkyl-CO2-H;
(d) mono-, di- alebo tri- substituovaný heteroaryl, kde heteroaryl je monocyklciký aromatický kruh s 5 atómami, kde uvedený kruh má jeden heteroatóm, ktorý je S, O alebo N a voliteľne 1, 2 alebo 3 ďalšie N atómy; alebo je heteroaryl monocyklický kruh so 6 atómami, kde uvedený kruh má jeden heteroatóm, ktorý je N a voliteľne 1, 2 alebo 3 ďalšie N atómy; kde uvedené substjtuenty sú í , * vybrané zo skupiny, skladajúcej sa z:
(1) vodík, (2) halogén, vrátane fluóru, chlóru, brómu a jódu, (3) C^alkyl, (4) C,.6 alkoxy, (5) C,^ alkyltio, (6) CN, (7) CF3,
- 14(8) Ν3, (9) -C(H)(R6)-OH, (10) -C(H)(Re)-O-CM alkyl,
R5, R5’sú každý metyl alebo etyl,
R5, R5'sú každý vodík,
R6 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) Cvg alkyl.
V tejto podskupine je trieda zameraná na použitie zlúčeniny podľa vzorca III, kde
R1 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) S(O)2CH3, (b) S(O)2NH2, (c) S(O)2NHC(O)CF3, (d) S(O)(NH)CH3, (e) S(O)(NH)NH2, a (f) S(O)(NH)NHC(O)CF3,
R2 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) CMalkyl, (b) C3, C4, C5, C6 a C7l cykloalkyl, (c) mono-, di-, tri- substituovaný fenyl, kde substituent je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z: c .
(1) vodík, “ (2) fluór, chlór a bróm, (3) Ο1-4 alkoxy, (4) C14 alkyltio, (5) CN, (6) CF3i (7) CMalkyl, (8) N3, (9) -CO2H,
- 15(10) -CO2-C1.3alkyl, (11) -C(H)(R6)-OH, a (12) -C(H)(R6)-O·^^ alkyl.
V tejto triede je podtrieda zameraná na použitie zlúčeniny podľa vzorca III, kde
R2 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(a) cyklohexyl, (b) mono- alebo di- substituovaný fenyl, a kde substituenty sú vybrané zo skupiny, pozostávajúcej z:
(1) vodík, (2) halogén, (3) CV4 alkoxy, (4) Ο,.4 alkyltio, (5) CN, (6) CF3, (7) CMalkyl, (8) N3a (9) -C(H)(R6)-OH;
V tejto podtriede je skupina zameraná na použitie zlúčeniny podľa vzorca III, kde (a) S(O)2CH3, (b) S(O)2NH2, .. ..
(c) s(O)(nh)ch3, . b (d) S(O)(NH)NHZ, a
R2 je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
mono-, di-, tri- substituovaný fenyl, kde substituent je vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z:
(1) vodík, (2) halogén, vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z fluóru, chlóru a brómu, (3) C,.3 alkoxy, (4) C,.3 alkyltio,
-16(5) CN, a (6) C^alkyl,
Ilustráciou vynálezu je použitie zlúčenín, vybraných z:
(1) 3-(3-fiuórfenyl)-4-(4-(metylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)-furanón, (2) 3-(3,4-difluórfenyl)-4-(4-(metylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)-furanón, (3) 3-(3,4-dichlórfenyl)-4-(4-(metylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)-furanón, (4) 3-fenyl-4-(4-(metylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)-furanón, a (5) 5,5-dimetyl-3-(3-fluórfenyl)-4-(4-(metylsulfonyl)fenyl)-2-(5H)-furanón alebo ich farmaceutický prijateľných solí.
Farmaceutické kompozície podľa predkladaného vynálezu obsahujú zlúčeninu podľa vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ ako aktívnu zložku z môžu tiež obsahovať farmaceutický prijateľný nosič a voliteľne iné terapeutické prísady. Termín „farmaceutický akceptovateľná soľ“ označuje soli, pripravené z farmaceutický prijateľných netoxických báz, vrátane anorganických báz a organických báz. Soli pripravené z anorganických báza zahrnujú hlinité, amónne, vápenaté, meďnaté, železité, železnaté, lítne, horečnaté, manganité soli, manganaté, draselné, sodné, zinočnaté a podobne. Najmä výhodné sú amónne, vápenaté, horečnaté, draselné a sodné soli. Soli odvodené od farmaceutický prijateľných organických netoxických báz zahrnujú soli primárnych, sekundárnych a terciárnych amínov, substituovaných amínov vrátane prirodzene sa vyskytujúcich substituovaných amínov, cyklických amínov a bázických ionomeničových živíc, ako je arginín, betaín, kofeín, cholín, Ν,Ν-dibenzyletyléndiamín, dietylamín,· 2-, dietylaminoetanol, 2-dimetylaminoetanol, etanolamín.etyléndiamín, N-étylmorfolín,'
I ·,
N-etylpiperidín, glukamín, glukozamín, histidín, hydrab'ámín/ižóprop'ylamín, lyzín, metylglukamín, morfolín, piperazín, piperidín, polyamínové živice, prokaín, puríny, teobromín, trietylamín, trimetylamín, tripeopylamín, trometamín a podobne.
Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu sú inhibítormi cyklooxygenázy-2 a sú preto užitočné na liečenie cyklooxygenázou-2 sprostredkovaných ochorení ako boli vymenované vyššie. Táto aktivita je ilustrovaná ich schopnosťou selektívne inhibovať cyklooxygenázu-2 vzhľadom na cyklooxygenázu-1. Podľa toho môže byť v jednom teste schopnosť zlúčenín podľa predkladaného vynálezu liečiť
- 17cyklooxygenázou sprostredkované ochorenia demonštrované meraním množstva prostaglandínu E2 (PGE2) syntetizovaného za prítomnosti kyseliny arašidovej, cyklooxygenázy-1 alebo cyklooxygenázy-2 a zlúčeniny podľa vzorca I, IC50 hodnoty reprezentujú koncentráciu inhibítora nutnú na zníženie syntézy PGE2 o 50 % vzhľadom na hodnotu, ktorá je získaná pre neinhibovanú kontrolu.
Na liečbu akéhokoľvek ochorenia sprostredkovaného cyklooxygenázou môže byť zlúčenina podľa vzorca I podaná orálne, lokálne, parenterálne, inhalačným sprejom alebo rektálne vo formuláciách dávkových jednotiek obsahujúcich konvenčné netoxické farmaceutický prijateľné nosiče, adjuvans a vehikulá. Termín parenterálny ako je tu použitý zahrnuje subkutánne injekcie, intravenózne, intramuskulárne, intrasternálne injekcie alebo infúzne techniky. Okrem liečby teplokrvných zvierat ako sú myši, potkany, kone, kravy, ovce a psy, mačky a podobne je zlúčenina podľa predkladaného vynálezu účinná v liečbe ľudí.
Ako je ukázané vyššie, farmaceutická kompozícia na liečebu cyklooxygenázou-2 sprostredkovaných ochorení ako sú definované môže voliteľne obsahovať jednu alebo viac zložiek ako sú uvedené vyššie.
Farmaceutické kompozície obsahujúce aktívnu zložku môžu byť vo forme vhodnej na orálne použitie, napríklad ako tablety, trocheje, lozengy, vodné alebo olejové suspenzie, rozpustné prášky alebo granuly, emulzie, tvrdé alebo mäkké kapsuly, alebo sirupy alebo elixíry. Kompozície zamýšľané na orálne použitie môžu byť pripravené podľa akejkoľvek metódy v danej oblasti techniky známej na výrobu farmaceutických kompozícií a takéto kompozície môžu obsahovať jedno alebo viac činidiel, vybraných zo skupiny,*’ pozostávajúcej zo. sladidiel, . 1 1 ochucovacích prostriedkov, farbív a konzervačných látok na poskytnutie farmaceutický elegantných a chutných prípravkov. Tablety obsahujú aktívnu zložku v zmesi s netoxickými farmaceutickými prijateľnými prísadami, ktoré sú vhodné na výrobu tabliet. Týmito prísadami môžu byť napríklad inertné riedidlá, ako je uhličitan vápenatý, uhličitan sodný, laktóza, fosforečnan vápenatý a fosforečnan sodný; granulačné a dezintegrujúce činidlá, napríklad kukuričný škrob, alebo kyselina alginová; spojivá, napríklad škrob, želatína alebo akácia, a lubrikanty, napríklad stearát horečnatý, kyselina stearová alebo mastenec. Tablety môžu byť
-18nepotiahnuté alebo potiahnuté známymi technikami na oddialenie dezintegrácie a absorpcie v gastrointestinálnom trakte a tak na predĺženie účinku na dlhšiu dobu. Napríklad môže byť použitý materiál na predĺženie doby ako je glycerylmonostearát alebo glyceryldistearát. Tablety môžu byť potiahnuté technikou opísanou v U.S. patente 4256108; 4166452; a 4256874 za vytvorenia osmotických terapeutických tabliet z kontrolovaným uvoľňovaním.
Formulácie na orálne použitie môžu byť tiež formulované ako kapsuly z tvrdej želatíny, kde je aktívna zložka zmiešaná s inertným tuhým riedidlom, napríklad, uhličitanom vápenatým, fosforečnanom vápenatým alebo kaolínom alebo ako kapsuly z mäkkej želatíny, kde je aktívna zložka zmiešaná s vodným alebo olejovým médiom, napríklad s arašidovým olejom, kvapalným parafínom alebo olivovým olejom.
Vodné suspenzie obsahujú aktívny materiál v zmesi s excipientami vhodnými na výrobu vodných suspenzií. Takéto excipienty sú suspendujúce činidlá, napríklad karboxymetylcelulóza. sodná, metylcelulóza, hydroxypropylmetylcelulóza, alginát sodný, polyvinylpyrolidón, tragantová guma a akáciová guma; dispergačné činidlá alebo zvlhčujúce činidlá môžu byť prirodzene sa vyskytujúce fosfatidy, napríklad lecitín, alebo kondenzačné produkty alkllénoxidu s mastnými kyselinami, napríklad polyoxyetylénstearát, alebo kondenzačné produkty etylénoxidu s alifatickými alkoholmi s dlhým reťazcom, napríklad heptadekaetylénoxycetanol, alebo kondenzačné produkty etylénoxidu s čiastočnými estermi odvodenými od mastných kyselín a hexitolu akp je. .< polyoxyetylénsorbitolmonooleát, alebo kondenzačné produkty etylénoxidu· s čiastočnými estermi derivovanými z anhydridu mastných' kyselín a hexitolu, napríklad polyoxyetylénsorbitanmonooleát. Vodné suspenzie môžu tiež obsahovať jednu alebo viac konzervačných látok, napríklad etyl, alebo n-propyl, phydroxybenzát, jedno alebo viac farbív, jeden alebo viac ochucovacích látok, jedno alebo viac sladidiel, ako je sacharóza, sacharín alebo aspartám.
Olejové suspenzie môžu byť formulované suspendovaním aktívnej látky v rastlinnom oleji, napríklad arašidovom oleji, olivovom oleji, sezamovom oleji alebo kokosovom oleji, alebo v minerálnom oleji ako je kvapalný parafín. Olejová
-19suspenzia môže obsahovať zahusťovacie činidlo, ako je včelí vosk, tvrdý parafín alebo cetylalkohol. Sladidlá ako sú tie uvedené vyššie a ochucovacie prostriedky môžu byť pridané na dodanie chutného orálneho prípravku. Tieto kompozície môžu byť konzervované pridaním antioxidantu ako je kyselina askorbová.
Rozpustné prášky a granuly vhodné na prípravu vodnej suspenzie pridaním vody poskytujú aktívnu zložku v zmesi s disperzným alebo zvlhčujúcim činidlom, suspenzným činidlom a jedným alebo viacerými konzervačnými látkami. Vhodné disperzné alebo zvlhčujúce činidlá a suspenzné činidlá sú rovnaké, ako bolo uvedené vyššie. Ďalšie excipienty, napríklad sladidlá, príchute a farbivá, môžu byť tiež prítomné.
Farmaceutické kompozície podľa predkladaného vynálezu môžu byť tiež vo forme emulzií olej vo vode. Olejová fáza môže byť rastlinný olej, napríklad olivový olej alebo podzemnicový olej, alebo minerálny olej ako je napríklad kvapalný parafín alebo ich zmes. Vhodnými emulzifikačnými činidlami môžu byť prirodzene sa vyskytujúce fosfatidy, napríklad sója, lecitín, a estery alebo čiastočne estery odvodené od anhydriduňov mastných kyselín a hexitolu, napríklad sorbitanmonooleát, a kondenzačné produkty uvedených čiastočných esterov s etylénoxidom, napríklad polyoxyetylénsorbitanmonooleát. Emulzie môžu tiež obsahovať sladidlá a príchute.
Sirupy a elixíry môžu tiež byť formulované so sladidlami, napríklad glycerolom, propylénglykolom, sorbitolom alebo sacharózou. Takéto formulácie môžu tiež obsahovať demulgátory, konzervačnú látku a ochucovacie a farbiace ► činidlá. Farmaceutická kompozícia môže byť vo forme · sterilnej injikovateľnej' t · » vodnej alebo olejovej suspenzie. Táto suspenzia môže býť formulovaná podľa znalosti v danej oblasti techniky za použitia tých vhodných disperzných alebo zvlhčujúcich činidiel, ktoré boli uvedené vyššie. Sterilný injikovateľný prípravok môže byť tiež sterilný injikovateľný roztok alebo suspenzia v netoxickom parenterálne prijateľnom riedidle alebo rozpúšťadle, napríklad ako je roztok 1,3butándiolu. Medzi prijateľné vehikulá a rozpúšťadlá, ktoré môžu byť použité, patrí voda, Ringerov roztok a fyziologický roztok chloridu sodného. Okrem toho, sterilné, fixované oleje sú bežné používané ako rozpúšťacie alebo suspenzné médium. Na
-20tento účel môže byť použitý nedráždivý fixovaný olej, obsahujúci syntetické monoalebo digiyceridy. Okrem toho, mastné kyseliny ako je kyselina olejová, nachádzajú uplatnenie v príprave injikovateľných prípravkov.
Zlúčeniny podľa vzorca I môžu byť podávané aj vo forme čapíkov na rektálne podanie lieku. Tieto kompozície môžu byť pripravené zmiešaním liečiva s vhodnou nedráždivou prísadou, ktorá je tuhá pri normálnych teplotách, ale ktorá je kvapalná pri rektálnej teplote a bude sa preto topiť v rekte za uvoľnenia liečiva. Takýmito materiálmi sú kokosové maslo a polyetylénglykoly.
Na lokálne použitie sú pripravené krémy, masti, želé, roztoky a suspenzie, atd’., ktoré obsahujú zlúčeninu podľa vzorca I. (Na účely tejto prihlášky by malo lokálne podanie zahrnovať ústne vody a kloktadlá).
Dávkové hladiny v rozmedzí od asi 0,01 mg do asi 140 mg/kg telesnej hmotnosti a deň sú užitočné v liečbe vyššie uvedených stavov, alebo alternatívne od 0,5 mg do asi 7 g na pacienta a deň. Napríklad zápal môže byť účinne liečený podaním od asi 0,01 do 50 mg zlúčeniny na kilogram telesnej hmotnosti a deň, alebo alternatívne od 0,5 mg do asi 3,5 g na pacienta a deň.
Množstvo aktívnej látky, ktoré môže byť kombinované s materiálmi nosičov na produkciu jednej dávkovej formy sa bude veľmi líšiť v závislosti na liečenom objekte v jednotlivom spôsobe podania. Napríklad, formulácie na orálne podanie u ľudí môže obsahovať od 0,5 mg do 5 g aktívnej látky spolu s vhodným a bežným množstvom nosiča, ktorého podiel môže byť od 5 do asi 95 percent celkovej kompozície. Dávková jednotka bude obyčajne obsahovať medzi 1 mg a 500 mg b
aktívnej látky, typicky 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg-, 500. mg.'
I Ί
Predpokladá sa jedna dávka za deň.
Špecifická úroveň dávky pre akéhokoľvek jednotlivého pacienta bude samozrejme závisieť na mnohých faktoroch, vrátane veku, telesnej hmotnosti, celkového zdravotného stavu, pohlavia, diéte, dobe podania, spôsobe podania, stupni vylučovania, kombinácii liekov a závažnosti jednotlivého liečeného ochorenia.
Nasledujúce príklady ilustrujú, ale nelimitujú, predkladaný vynález.
-21 Prehraď obrázkov na výkresoch
Obr. 1 znázorňuje reprezentačnú imunoblotovú analýzu PGHS-1 a PGHS-2 proteínovej expresie v normálnej ľudskej sliznici hrubého čreva a v autonómnom nádorovom tkanive.
Obr. 2 znázorňuje zmeny v PGHS-1 a PGHS-2 proteínovej expresie v zodpovedajúcich tumoroch v porovnaní s autológnou normálnou sliznicou.
Obr. 3 znázorňuje imunoblotovú analýzu ukazujúcu expresiu PGHS-1 a PGHS-2 v polypoch s veľkosťou od 0,3 do 5 mm v priemere u ApcA716 knockoutových myší.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Obr. 1 - Reprezentačná imunoblotová analýza PGHS-1 a PGHS-2 proteínovej expresie v normálnej ľudskej sliznici hrubého čreva a v autológnom nádorovom tkanive. Imunoblotová analýza používajúca anti-PGHS-1 antisérum (panel A§ a imunoblotová analýza rovnakých vzoriek ako na paneli A za použitia anti-PGHS-2 antiséra (panel B). Purifikované PGHS štandardy a mikrozomálne proteínové vzorky (50 pg na líniu) boli separované SDS-PAGE, prenesené do nitrocelulózy a imunoblotované s anti-PGHS antisérom s detekciou intenzifikovanou chemiluminiscenciou. Čísla 1 až 4 ukazujú vzorky od 4 reprezentačných pacientov z 25 vyšetrovaných pacientov. Denzitometrické hodnoty pre pacientov 1 až 4 na tomto b
obrázku zodpovedajú pacientom 17 až 20 na obrázku 2:'N a T označujú, páry
I ·, * sliznice hrubého čreva a nádorového tkaniva pre každého'pacienta v príslušnom poradí. Prečistené PGHS-1 a PGHS-2 štandardy sú ukázané naľavo. Je ukázané umiestnenie markérov molekulovej hmotnosti.
Obr. 2 - Kvantifikácia zmeny v PGHS-1 a PGHS-2 proteínovej expresie v zodpovedajúcich tumoroch v porovnaní s autológnou normálnou sliznicou. Alikvóty PGHS štandardov a mikrozomálnych proteínov od 25 pacientov (25 pg na líniu) boli separované SDS-PAGE, prenesené do nitrocelulózy a imunoblotované
-22s anti-PGHS-1 alebo anti-PGHS-2 antisérom, s detekciou pomocou intenzifikovanej chemiluminiscencie. Množstvo PGHS proteínu bolo určené denzitometriou. Optická denzita odčítaná z autoradiografickej snímky pre známe kvantity prečistených PGHS-1 a PGHS-2 štandardov bola použitá pre približnú kvantifikáciu množstva PGHS-1 a PGHS-2 proteínov v mikrozomálnych vzorkách z normálnej sliznice a z nádorových vzoriek. Hodnoty reprezentujú zmenu v expresii v ng pre normálnu sliznicu a nádorové tkanivo pre každého pacienta.
Obr. 3 - Imunoblotová analýza ukazujúca expresiu PGHS-1 a PGHS-2 v polypoch s veľkosťou od 0,3 do 5 mm v priemere. (Línie 1 až 5 zodpovedajú vzorkám z polypov s priemerom približne 1 až 5 mm, v príslušnom poradí). PGHS1 proteín bol prítomný vo vzorkách polypov a kontrol s tenkého a hrubého čreva. PGHS-2 imunoreaktivita nebola detagovaná v kontrolných vzorkách z tenkého a hrubého čreva. Hoci nízke hladiny PGHS-2 proteínu boli detagované vo väčších polypoch hrubého čreva (3 až 5 mm v priemere) línie 3, 4 a 5), vyššie hladiny PGHS-2 imunoreaktivity boli detegované vo všetkých vzorkách polypov hrubého čreva veľkosti 1 až 5 mm v priemere (línie 1 až 5), kedy veľmi vysoké hladiny PGHS-2 proteínu boli demonštrované v polypoch s veľkosťou 2 až 3 mm v priemere (línie 2 a 3). Prečistený ovčí PGHS-1 a PGHS-2 proteín (5 ng, 10 ng a 20 ng) bol elektroforezovaný ako štandard a zodpovedajúcim spôsobom značený.
Vzorky pacientov
Boli vyšetrované karcinómy hrubého čreva a párového normálneho tkaniva sliznice, adenomatózne polypy, normálne sliznice hrubého čreva od pacientov bez karcinómu a zodpovedajúce normálne a karcinomové tkanivá prsníka. Priemerný vek a vekové rozmedzí párových vzoriek normálneho a karcinomového tkaniva hrubého čreva boli 63,3 a 41 až 93 rokov, v príslušnom poradí. Vzorky tkaniva hrubého čreva boli získané z nenekrotickej oblasti tumoru a z autológnej normálnej sliznice od rovnakého pacienta z okraja resekátu, umiestneného najmenej 5 cm od tumoru. Histologický boli všetky tumory hrubého čreva adenokarcinómy a všetci pacienti mali sporadicky karcinóm hrubého čreva. Jeden pacient mal ložisko
-23adenokarcinómu v adenomatóznom polype. Adenómy hrubého čreva boli od pacientov s familiárnou adenomatóznou polypózou (FAP).
Príprava mikrozomálnych membrán z tkaniva hrubého čreva
Zmrazené tkanivá sa nechajú roztopiť v ľadovom ochladenom homogenizačnom pufri (50 mM fosforečnan draselný, pH 7,1, obsahujúci 0,1 M NaCI, 2 mM EDTA, 0,4 mM fenylmetylsuifonyl fluoridu, 60 pg/ml sójového trypsínového inhibítora, 2 pg/ml leupeptínu, 2 pg/ml aprotinínu a 2 pg/ml pepstatínu, všetko od Sigma Chemicals Co., St. Luis, MO). Tkanivá sú dvakrát rozrušené na ľade za použitia tkanivového drviča (Biospec Products, Bartesville, OK) a homogenizované sonifikáciou pri 4 °C za použitia ultrazvukového homogenizátora série Cóle Parmer 4710 (Cóle Parmer Inštrument Co., Chicago, IL). Bunková drvina je odstránená centrifugáciou pri 1000 x g počas 15 minút pri 4 °C z vzniknuté supernatanty sú podrobené centrifugácii pri 100 000 x g počas 60 minút pri 4 °C. Membránové frakcie sú resuspendované v homogenizačnom pufri a sú sonifikované na získanie homogénnej membránovej suspenzie. Koncentrácia proteínu je určená pre každú vzorku za použitia proteínového testovacieho kitu (Bio-Rad, Mississauga, Ontario, Canada).
Antisérum
Prečistené proteíny kompletnej PGHS-1 z ovčích seminálnych -.váčkov a·
I · * placentálnej PGHS-2 boli nakúpené od Cayman (Ann'Arbor; Ml) a Sú použité na generovanie králičích polyklonálnych protilátok. Samiciam novozélandských bielych králikov je injikovaný 1 ml Freundovho kompletného činidla, obsahujúceho 200 pg prečisteného PGHS-1 alebo PGHS-2. Dva týždne po primárnej infekcii boli králiky dosýtené 100 pg prečisteného PGHS-1 alebo PGHS-2 v 0,5 ml Freundovho nekompletného činidla. Anti-PGHS antisérum rozpoznávalo ľudské PGHS izoformy s približne tisícnásobnou selektivitou pre jednotlivé izoformy. Za podmienok použitých v tejto štúdii nevykazovali anti-PGHS protilátky žiadnu skríženú reaktivitu
-24s druhou PGHS izoformou. Pre každý pokus boli dve koncentrácie PGHS-1 a PGHS-2 proteínových štandardov zavedené na každý gén na hodnotenie selektivity protilátok.
Dodecylsulfát sodný - polyakrylová gélová elektroforéza (SDS-PAGE) a imunoblotové analýzy
Membránové frakcie boli zmiešané s dodecylsulfátom sodným (SDS) pufrom pre vzorku (20 mM Tris-HCI, pH 6,8, obsahujúce 0,4% (hmotnosť/objem) SDS, 4% glycerol, 0,24 M β-merkaptoetanol a 0,5% brómfenolová modrá), uvedené do varu na dobu 5 minút a analyzované SDS-polyakrylamidovou gélovou elektroforézou podľa Laemmliho metódy (Laemmli, U.K. Cleavage of structure proteins during the assembly of the head of bacteriphage T4, Náture 227: 680 až 685, 1970). Proteíny boli elektroforeticky prenesené na nitrocelulózové membrány ako bolo uvedené vyššie (Towbin, H., Staehelin, T., a Gordon, J., Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: Procedúre and some applications, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75: 4350 až 4354, 1979). Primárne protilátky k PGHS-1 a PGHS-2 boli použité v konečnom riedení 1:5000 a 1:7500, v príslušnom poradí. Sekundárna oslia anti-králičia IgG protilátka s naviazanou chrenovou peroxidázou (Amersham Life Sciences, Oakville, Ontario, Canada) bola použitá v riedení 1:3000. Imunodetekcia bola uskutočnená s použitím intenzifikovanej chemiluminiscencie podľa návodu výrobcu b
(Amersham). Autoradiografy boli snímané s použitím počítačového denzitometra » t (Molecular Dynamics, Sunnyvale, CA) a hodnota optickej dénsity, zodpovedajúca prečistenej PGHS izoforme bola použitá na výpočet kvantity (ng) PGHS proteínu v histologický normálnom a v nádorovom tkanive hrubého čreva.
Štatistická analýza
Výsledky štúdie boli analyzované Wilcoxonovým zorad’ovacím neparametrickým testom na určenie signifikantných rozdielov medzi normálnou a
-25nádorovou hladinou PGHS-1 a PGHS-2 (Freund, J. E., Mathemetical Statistics, Prentice Halí, Englewood Cliffs, New Jersey, 1992).
Výsledky
Expresia PGHS-1 v ľudskom hrubom čreve: normálne a nádorové tkanivo
Obr. 1 je reprezentatívny imunoblot, ukazujúci expresiu PGHS u 4 z 25 pacientov vyšetrovaných v tejto štúdii. 72 kDa prúžok, ktorý zodpovedá opísanej molekulovej hmotnosti pre PGHS-1 (Otto, J. C., DeWitt, D. L. S., a Smith, W. L., Nglykosylation of prostaglandin endoperoxide synthase-1 and -2 their orientations in the endoplasmic reticulum, J. Biol. Chem., 268: 18234 až 18242, 1993), migroval spolu s prečisteným PGHS-1 štandardom z ovčích semenných vačkov (obr. 1A) a s rekombinantným ľudským PGHS-1 exprimovaným v COS-7 bunkách (data nie sú ukázané; 7). Výsledky imunoblotu od všetkých 25 pacientov boli kvantifikované denzitometrickou analýzou a sú ukázané v stĺpcovom grafe na obr. 2. U 21 z 26 pacientov boli hladiny PGHS-1 redukované v nádorovom tkanive v porovnaní s normálnym tkanivom hrubého čreva. Priemerný pokles PGHS-1 v nádore v porovnaní s normálnym tkanivom pre všetkých 25 vyšetrovaných pacientov bol 170 ng na mg mikrozomálneho pratému. V porovnaní s prečisteným PGHS-1 štandardom bolo rozmedzie koncentrácií PGHS-1 v normálnom a v nádorovom tkanive 0 až 760 ng (stredná hodnota 199,8) a 4 až 540 ng (stredná hodnota 51,1) b
na mg mikrozomálneho proteínu, v príslušnom poradí. Rozdiel v expresii PGHS-1 v normálnom versus nádorovom tkanive bol vysoko štatistický signifikantný podľa neparametrickej analýzy (Wilcoxonov zorad’ovací test, p < 0,0001).
Expresia PGHS-2 v ľudskom hrubom čreve: normálne a nádorové tkanivo
Reprezentatívna imunoblotová analýza 4 z 25 párových vzoriek hrubého čreva s použitím špecifickej PGHS-2 protilátky je ukázaná na obr. 1B. Dvojité imunobloty boli uskutočnené na zhodnotenie expresie PGHS-1 (obr. 1A) a PGHS-262 (obr. 1B) vo vzorkách získaných od rovnakého pacienta. PGHS-2 imunoreativita nebola detegovaná v žiadnej zo 4 vzoriek normálneho tkaniva hrubého čreva. Oproti tomu, imunoreaktívne prúžky 70 až 72 kDa, ktoré migrovali spolu s prečisteným PGHS-2s ovčej placenty (obr. 1B) a s rekombinantným ľudským PGHS-2 exprimovaným v COS-7 bunkách (dáta nie sú ukázané; 7), boli detagované u 3 zo 4 pacientov tu ukázaných. Celkom bol PGHS-2 imunoreaktivny proteín detegovaný v nádorovom tkanive od 19 z 25 vyšetrovaných pacientov (Obr. 2). Celkom, priemerné zvýšenie PGHS-2 v nádoroch hrubého čreva pre všetkých 25 vyšetrovaných pacientov bolo asi 73 ng na mg mikrozomálneho proteínu. V porovnaní s PGHS-2 štandardom bolo rozmedzie koncentrácií PGHS-2 imunoreaktívneho proteínu v normálnom a nádorovom tkanive 0 až 49 ng (stredná hodnota 3,8) a 1,6 až 580 ng (stredná hodnota 37,7) ma mg mikrozomálneho proteínu, v príslušnom poradí. Rozdiel v expresii PGHS-2 v normálnom versus nádorovom tkanive bol vysoko štatisticky signifikantný podľa neparametrickej analýzy (Wilcoxonov zorad’ovací test, p < 0,0001).
Nádory hrubého čreva sú charakterizované 4 Dukes' štádiami: A) tumor v črevnej sliznici; B) tumor v muscularis propria; C) metastázy do lymfatických uzlín; a D) metastázy do iných tkanív. V tejto štúdii boli tumory hrubého čreva od pacientov so všetkými štádiami Dukes' klasifikácie (tabuľka 1).
-27Tabuľka 1
Pacient Medikácia Dukes' štádium Zmena v expresii proteínu
PGHS-1 PGHS-2
1 NA NA 6,20 -10,00
2 NA NA 1,70 -6,90
3 NA NA 2,80 -9,40
4 NA NA 1,20 -4,10
5 žiadna B 0,10 ND
6 chlórdiazepoxid hydro- chlorid clidinium bromid, magaidrate C 3,20 -5,90
7 NSAID A 0,00 -17,30
8 levotyroxín sodný, loraze- pam, omeprazol C 0,50 1,50
9 žiadna C 0,90 0,50
10 NA C 4,70 -16,30
11 žiadna B 0,90 -9,00
12 NA D -0,20 -14,40
13 NA B 4,30 -7,10
14 aspirín C 0,80 -5,60
15 deltacortison, azatioprim, lovastatín B 0,00 5,70
16 enalaprilmaleát B 25,60 -6,60
17 žiadna B -0,30 -1,50
18 žiadna B 9,70 -11,20
19 aspirín C 13,70 ' «11,-10
20 žiadna B 8,30 -5,90
21 žiadna C -0,10 -9,30
22 aspirín C 0,20 -3,00
23 žiadna C 0,00 -12,30
24 diltiazem hydrochlorid, omeprazol B 2,20 -17,00
25 flurbiprofen, aspirín, nife- dipín metoprolol vinan B 0,10 -10,00
-28ΝΑ = dáta nie sú dostupné; ND = nedekovateľné
Dukes' štádiá: A = tumor v sliznici
B = tumor do muscularis mucosae C = metastázy do lymfatických uzlín D = vzdialené metastázy
Tabuľka 1: Dáta pacientov: Sú ukázané dáta pre každého pacienta v tejto štúdii. Pokiaľ bola dostupná, potom je ukázaná medikácia používaná pacientom. Dukes' štádiá ochorenia sú nasledujúce: A) tumor v črevnej sliznici; B) tumor v muscularis propria; C) metastázy do lymfatických uzlín; a D) metastázy do iných tkanív. Množstvo imunoreaktívneho PGHS proteínu je vyjadrené ako relatívna zmena vexpresii u normálnej sliznice hrubého čreva vzhľadom na nádorové tkanivo. NA: dáta nie sú dostupné a ND: imunoreaktivita nie je detegovateľná.
Nebola tu žiadna asociácia medzi štádiom a zmenou vexpresii PGHS-1 alebo PGHS-2 proteínu. Chýbanie tejto asociácie je v súlade s pozorovaním, že hladiny PGE2 v ľudských nádoroch hrubého čreva nekorelujú s Dukes' štádiom (Rigas, B., Goldman, I. S., a Levine , L. Altered eicosanoids levels in human colon cancer, J. Lab. Clin. Med., 122: 518 až 523, 1993). Je zaujímavé, že expresia PGHS-2 bola buď nízka alebo nedetegovateľná u 5 zo 6 pacientov v tej dobe používajúcich protizápalovú medikáciu (tabuľka 1).
Expresia PGHS-1 a PGHS-2 proteínu v normálnom hrubom čreve, premalígnych h
polypoch a párovom normálnom a karcinómovom tkanive prsníka ·
Expresia PGHS-1 a -2 proteínu bola analyzovaná v mnohých iných ľudských tkanivách vrátane 5 tkanív hrubého čreva od nenádorových pacientov, 4 premalígnych polypov a troch párových normálnych a karcinómových tkanív prsníka. Hoci PGHS-1 proteín bol pozorovaný v normálnych a v nádorových tkanivách, PGHS-2 proteín nebol detegovaný v žiadnom z týchto vzoriek.
Diskusia
-29V tejto štúdii, 19 z 25 vyšetrovaných tumorov hrubého čreva exprimovalo PGHS-2 proteín, zatiaľ čo 2 z 25 normálnych tkanív hrubého čreva exprimovalo tento proteín. Spolu s indukciou expresie PGHS-2 bola expresia PGHS-1 redukovaná u 21 z 25 nádorových vzoriek v porovnaní s normálnou okolitou črevnou sliznicou; avšak koncentrácie PGHS-1 proteínu boli podobné v kontrolných vzorkách hrubého čreva a v vzorkách polypov.
Podľa našich znalostí je toto prvá štúdia vyšetrujúca expresiu PGHS-1 a -2 proteínu v ľudskom karcinóme hrubého čreva. Predošlé výskumy ukázali, zvýšenú hladinu eikosanosidov, najmä PGE2l v ľudskom karcinóme hrubého čreva, (J. Lab.
Clin. Med. 122: 518 až 523, 1993, Bennett, A., Del Tacca, M.m Stamford, I.F., a
Zebro, T. Prostaglandins from tumors of human large bowel. Br. J. Cancer, 35: 881 až 884, 1977, Bennett, A., Civier, A., Hensby, C. N., Melhuish, P. B., a Stamford, I.
P. Measurement of arachidonate and its metabolites extracted from human normál and malignant gastrointestinal tissues. Gut, 28: 315 až 318, 1987). Záverom je, že zvýšenie enzýmu PGHS-2, ktoré sme pozorovali v nádorovom tkanive hrubého čreva, vedie k zvýšeniu hladín prostaglandínov v týchto tumoroch. Okrem toho, sme usúdili, že vzhľadom na to, že prostaglandíny môžu maž mnoho účinkov v biológii nádorov, vrátane naštartovania rastu a modulovania imunologického dohľadu, budú elevované hladiny prostanoidov v tumore viesť k rastu s vývoju tumoru (Earnest, D. L., Hixson, L. J., a Alberts, D. S., Piroxicam and other cyclooxygenase inhibitors: potential for cancer chemoprevention., J. Celí.
Biochem., 161 (Suppl.): 156 až 166, 1992). Zaujímavé je', · že PGHS-2 proteín » » nebol pozorovaný vo vyšetrení vzoriek karcinómu prsníka. Tak je expresia PGHS2 proteinu typickým znakom pri transformácii tkaniva z pre-malígneho na malígne.
Eberhart a spol. demonštrovali „up-reguláciu“ PGHS-2 mRNA v ľudských adenómoch a adenokarcinómoch hrubého čreva (Eberhart, C. E., Coffey, R. J. Radhika, A., Giardiello, F. M., Ferrenbach, S., Dubois, R. N., Up-regulation of cyclooxygenase 2 gene expression in human colorectal adenomas and adenocarclnomas. Gastroenterologu, 107: 1183 až 1188, 1994). Hoci je toto zistenie zaujímavé, nemusí byť ukazovateľom aktuálnej expresie enzýmu
-30vzhľadom ku komplexnej post-transkripčnej a post-translačnej regulácii PGHS-2 mRNA. Napríklad, Hoff a ďalší., (Hoff, T., DeWitt, D., Kaever, V., Resch, K., a Goppelt-Struebe, M., Differentiation-associated expresion of prostaglandin G/H synthase in monocytic cells. FEBS Lett., 320: 38 až 42, 1993), Lee a ďalší, (Lee,
S. H., Soyoola, E., Chanmugam, P., Hart, S., Sun, W., Zhong, H., Liou, S., Simmons, D., a Hwang, D. Selective expression of mitogen-inducible cyclooxygenase in macrofages stimulated with lipopolysacharide., J. Biol. Chem., 267: 25934 až 25938, 1992) a naše laboratória ukázali významnú expresiu PGHS2 mRNA bez súčasnej expresie PGHS-2 proteínu. Preto je vyšetrenie expresie PGHS proteínu kritické pre hodnotenie koncentrácie PGHS-2 enzýmu.
Žiadna odborná správa nenaznačuje absenciu PGHS-2 proteínu v polypoch od 4 pacientov s familiárnou adenomatóznou polypózou, najmä vo svetle dôkazov od niekoľkých skupín, že sulindac (inhibujúci tak PGHS-2, ako aj PGHS-1) vedie k regresii polypu u pacientov s familiárnou polypózou. Vzorky ľudských polypov boli získané z malých polypov hrubého čreva v rozmedzí veľkosti od 0,4 do < 5 cm v priemere. Podľa nášho názoru je PGHS-2 proteín exprimovaný v neskoršom štádiu sekvencie polyp-karcinóm, kde polypy majú priemer väčší alebo rovný 5 mm. Nová štúdia, ktorú vykonal Ladenheim a ďalší, opisuje, že sulindac neviedol k regresii sporadických polypov hrubého čreva; aj tak v štúdii je zdôraznené, že boli zahrnuté sporadické polypy (67% polypov < 5 mm) a naznačuje, že odpoveď na NSAID môže byť lepšia u polypov v „určitom štúdiu sekvencie adenómkarcinóm (Ladenheim, J., Garcia, G., Titzer, D., Herzenberg, H., Lavori, P., Edson, to
R., a Omary, B. Effect of sulindac on sporadic colon polyps,· Gastroenterology, » 1
108: 1083 až 1087,1995).
Dlhodobé užívanie NSAID je asociované s vedľajšími účinkami vrátane renálnej toxicity, gastrointestinálnych ulcerácií a zvýšeného krvácania. Súčasná NSAID ako je aspirín, sulindac a indometacín, majú malú selektivitu na inhibíciu buď PGHS-1 alebo PGHS-2 (Battistini, B., Botting, R. a Bakhle, Y. S., COX-1 and COX-2: Toward the devolopment of more selective NSAIDS. Drugs News Perspective 7: 501 až 512, 1994), O'Neiil, G. P., Mancini, J. A., Kargman, S., Yergey, J., J) Kwan, M. Y., Faigueyret, J. P., Abramovitz, M., Kennedy, B. P.,
-31 Oullet, M., Cromlish, W., Culp, S., Evans, J. F., Ford-Hutchinson, A. W., a Vickers, P. J., Overexpresion of human prostaglandin G/H synthase-1 and -2 by recombinant vaccinia virus: inhibition by nesteroidal anti-inflammatory drugs and biosynthesis of 15-hydroxyeicosatetraenoic acid. Mol. Pharmacol., 45: 245 až 254, 1994 a DeWitt, D., L., Meade, E. A., a Smith, W. L. PGH synthase isoenzyme selectivity: the potential for safer nonsteroidal antiinflammatory drugs. Am. J. Med. (Suppl.), 95: 40S až 44S, 1993). Bolo naznačené, že selektívne inhibítory PGHS2 budú terapeutický úžitok so znížením kapacity na indukciu mechanizmov, na ktorých sú založené vedľajšie účinky. Teraz, u selektívneho PGHS-2 inhibítora, NS-398, bolo ukázané, že má u potkanov protizápalový, antipyretický a analgetický účinok bez toho, že by bol ulcerogénny (Futaki, N., Yoshikawa, K., Hamasaka, Y., Arai, I., Higuchi, S., lizuka, H., a Otomo, S., NS-398 a novel nonsteroidal antiinflammatory drug with potent analgesic and antipyretic effects, which causes minimal stamach lesion. Gen. Pharmacol., 24: 105 až 110, 1993; Futaki,
N., Takahashi, S., Yokoyama, M., Arau, I., Higuchi, S., a Otomo, S., NS-398, a new antiinflammatory agent, selectively inhibitors prostaglandin G/H synthase/cyclooxygenase (COX-2) activity in vitro. Prostaglanins, 47: 55 až 59, 1994). Predkladaná štúdia vyšetrujúca expresiu PGHS-1 a PGHS-2 v hrubom čreve demonštruje, že obe izoformy PGHS sú prítomné v tumoroch hrubého čreva.
Myšie polypy
ApcA716 knockoutované myši (vyvinuté Dr. Takéto 'v Banyu Merck. .Ref:' ι Ί
Oshima, M., Oshima, H., Kitagawa, K., Kobayashi, M.; Itakúra, C., a Takéto, M. Loss of Apo heterozygosity and abnormal tissue building in nascent polyps in mice carrying a truncated Apo genetruncation mutant mice, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 4482 až 4486, 1995) majú vyvinutých mnoho polypov vo svojom tráviacom trakte. Od šiestich myší (samcov i samíc) z kríženia N1, N2 a N4 generácií myší boli odobrané vzorky malých polypov tenkého a hrubého čreva veľkosti od 0,3 do
5,6 od ApcA716 knockoutovaných myší a boli ihneď zmrazené.
-32Výsledky
Expresia PGHS-1 a PGHS-2 v polypoch ApcA716 myší
PGHS-1 a PGHS-2 proteínová expresia bola vyšetrovaná v polypoch zväčšujúcej sa veľkosti od ApcA716 myší. Obr. 3 je imunoblotová analýza ukazujúca expresiu PGHS-1 a PGHS-2 v polypoch v rozmedzí veľkosti od 0,3 do 5 mm v priemere. (Línie 1 až 5 korešpondujú vzorkám z polypov s asi 1 až 5 mm v priemere, v príslušnom poradí). PGHS-1 proteín bol demonštrovaný vo všetkých kontrolných a polypových vzorkách tenkého a hrubého čreva. PGHS-2 imunoreaktivita nebola detegovaná v kontrolných vzorkách tenkého a hrubého čreva. Hoci nízke hladiny PGHS-2 proteínu boli detegované vo väčších polypoch črevných (3 až 5 mm v priemere) (Línie 3, 4 a 5), vyššie hladiny PGHS-2 imunoreaktívneho druhu boli detegované vo všetkých vzorkách polypov hrubého čreva s priemerom 1 až 5 mm (línie 1 až 5) s veľmi vysokými hladinami PGHS-2 proteínu demonštrovanými v polypoch s priemerom 2 až 3 mm (línie 2 a 3). Purifikované ovčie PGHS-1 a PGHS-2 proteíny (5 ng, 10 ng a 20 ng) boli elektroforezované ako štandardy a sú podľa toho označené. Usudzuje sa, že dramatická indukcia COX-2 počas rastu polypu odráža kritickú úlohu COX-2 v iniciácii transformácie z adenómu na adenokarcinóm.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie NSAID na výrobu liečiva na spomalenie alebo zabránenie transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm.
  2. 2. Použitie podľa nároku 1,vyznačujúce sa tým, že NSAID je silný inhibítor PGHS-2.
  3. 3. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že NSAID je vybraný zo skupiny aspirín, ibuprofén, Indometacin, Sulindac, Dolobid, Diclofenac, Naproxen, Piroxicam, Etodolac, Ketoprofén, Flurbiprofén, Meloxicam, Flosulide a Nabumetone.
  4. 4. Použitie podľa nároku 3, vyznačujúce sa tým, že NSAID má špecificitu na inhibíciu PGHS-2 voči PGHS-1 aspoň päťdesiatnásobnú, ako je merané pomerom IC50 na inhibíciu PGHS-2 k IC50 na inhibíciu PGHS-1 ako je merané v teste celých buniek.
  5. 5. Použitie NSAID na výrobu liečiva na spomalenie alebo zabránenie vzniku schopnosti adenómu prenikať do bazálnej membrány podsliznicového tkaniva hrubého čreva.
  6. 6. Použitie NSAID na výrobu liečiva na spomalenie alebo zabránenie transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm, vyznačujúce sa t ý m, že obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vzorca I pacientovi s anamnézou FAP alebo pacientovi s jedným alebo viacerými uvedenými adenómami
    -34(I) kde A, B a C sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3.
    (e) vinyl, (f) OCH3 alebo OCF3l (g) SCH3 alebo SCF3l (h) CN, (i) N3, s tou podmienkou, že aspoň jeden z A, B a C musí byť vodík.
  7. 7. Použitie podľa nároku 6, vyznačujúce sa tým, že A a B sú každý nezávisle vybraný zo skupiny, pozostávajúcej z (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3, (e) vinyl, (f) SCH3 alebo SCF3, (9) CN, (h) N3, a C je vodík.
    -358. Použitie podľa nároku 7, vyznačujúce sa tým, že NSAID má vzorec kde B je (a) vodík, (b) F, Cl, Br alebo I, (c) metyl alebo etyl, (d) CF3) (e) vinyl, (f) -OCF3, alebo (g) -SCH3.
  8. 9. Použitie podľa nároku 8, vyznačujúce sa tým, že NSAID má vzorec kde
    -36A je F, Cl, Br a
    B je F, Cl. Br.
  9. 10. Použitie podľa nároku 9, vyznačujúce sa tým, že NSAID má vzorec alebo jeho farmaceutický akceptovateľná soľ.
  10. 11. Použitie NSAID na výrobu liečiva na spomalenie alebo zabránenie transformácie adenómu hrubého čreva na adenokarcinóm, vyznačujúce sa
    -37t ý m, že obsahuje podanie netoxického terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa vzorca II pacientovi s jedným alebo viacerými uvedenými adenómami (II) alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, kde
    X-Y-Z je vybrané zo skupiny, pozostávajúcej z:
    (a) -CH2CH2CH2-, (b) -C(O)CH2CH2-, (c) -CH2CH2C(O)-, (d) CR5(R5 )-O-C(O)-, (e) -C(O)-O-CR5(R5)-, (f) -CH2-NR3-C(O)-, (g) CR5(R5')-NR3-C(O)-, (h) -CR4=CR4-S-, (i) -S-CR4=CR4-,
    0) -S-N=CH-, (k) -CH=N-S-, (l) -N=CR4-O-, (m) -O-CR4=N-, (n) -N=CR4-NH-, (o) -N=CR4-S-, a (p) -S-CR4=N-, (q) -C(O)-NR3-CR5(R5)-, (r) -NR3-CH=CH-, s podmienkou, že R1 nie je -S(O)2Me, (s) -CH=CH-NR3-, s podmienkou, že R1 nie je -S(O)2Me, kde strana b je dvojitá väzba a strany a a c sú jednoduché väzby a
SK52-98A 1995-07-19 1996-07-15 Use of nsaid for producing a medicament for retarding or preventing the transformation of a colonic adenoma to a colonic adenocarcinoma SK5298A3 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US124095P 1995-07-19 1995-07-19
GBGB9603470.7A GB9603470D0 (en) 1996-02-19 1996-02-19 Method of treating colonic adenomas
PCT/US1996/011761 WO1997003667A1 (en) 1995-07-19 1996-07-15 Method of treating colonic adenomas

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK5298A3 true SK5298A3 (en) 1998-12-02

Family

ID=26308761

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK52-98A SK5298A3 (en) 1995-07-19 1996-07-15 Use of nsaid for producing a medicament for retarding or preventing the transformation of a colonic adenoma to a colonic adenocarcinoma

Country Status (17)

Country Link
EP (1) EP0839034B1 (sk)
KR (1) KR100454624B1 (sk)
CN (1) CN1196679A (sk)
AT (1) ATE268176T1 (sk)
AU (1) AU706089B2 (sk)
CA (1) CA2227238C (sk)
CZ (1) CZ294516B6 (sk)
DE (1) DE69632632T2 (sk)
EA (1) EA005073B1 (sk)
ES (1) ES2220983T3 (sk)
HU (1) HU225506B1 (sk)
IL (1) IL122960A (sk)
MX (1) MX9800568A (sk)
NO (1) NO980221L (sk)
NZ (1) NZ312997A (sk)
SK (1) SK5298A3 (sk)
WO (1) WO1997003667A1 (sk)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6166024A (en) 1995-03-30 2000-12-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of topical azathioprine and thioguanine to treat colorectal adenomas
KR20010023256A (ko) * 1997-08-27 2001-03-26 헥살 아게 용해도와 생체 이용성이 개선된 신규의 멜록시캄 의약조성물
NZ509376A (en) * 1998-07-09 2003-10-31 Francis A Nardella Indole or carbazole derivatives for the treatment of chronic lyphocytic leukemia
US7105560B1 (en) * 1999-07-23 2006-09-12 The Regents Of The University Of California Use of etodolac in the treatment of multiple myeloma
US20020035107A1 (en) 2000-06-20 2002-03-21 Stefan Henke Highly concentrated stable meloxicam solutions
AR038957A1 (es) 2001-08-15 2005-02-02 Pharmacia Corp Terapia de combinacion para el tratamiento del cancer
DE10161077A1 (de) 2001-12-12 2003-06-18 Boehringer Ingelheim Vetmed Hochkonzentrierte stabile Meloxicamlösungen zur nadellosen Injektion
CN1659131A (zh) 2002-04-08 2005-08-24 葛兰素集团有限公司 2－((2－烷氧基)－苯基)－环戊－1－烯基)芳香碳－以及杂环羧酸及其衍生物
US8992980B2 (en) 2002-10-25 2015-03-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Water-soluble meloxicam granules
GB0225548D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1568369A1 (en) 2004-02-23 2005-08-31 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the treatment of respiratory diseases in pigs
AR047894A1 (es) 2004-02-25 2006-03-01 Wyeth Corp Derivados de tiofeno como inhibidores de la proteina tirosina fosfatasa 1b (ptpasa 1b); metodos para su preparacion, composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso en el tratamiento de enfermedades mediadas por ptpasa 1b
TW200735866A (en) * 2005-11-18 2007-10-01 Synta Pharmaceuticals Corp Compounds for the treatment of proliferative disorders
BRPI0806898A2 (pt) * 2007-01-19 2015-07-14 Ardea Biosciences Inc Inibidores de mek
CN102647971B (zh) 2009-10-12 2016-03-16 贝林格尔.英格海姆维特梅迪卡有限公司 用于包含美洛昔康的组合物的容器
WO2011107150A1 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Use of meloxicam for the long-term treatment of musculoskeletal disorders in cats
US9795568B2 (en) 2010-05-05 2017-10-24 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Low concentration meloxicam tablets

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU1269495A (en) * 1994-01-10 1995-08-01 Merck Frosst Canada Inc. Phenyl heterocycles as cox-2 inhibitors
CA2206978A1 (en) * 1994-12-21 1996-06-27 Merck Frosst Canada Inc. Diaryl-2-(5h)-furanones as cox-2 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
DE69632632D1 (de) 2004-07-08
ATE268176T1 (de) 2004-06-15
IL122960A0 (en) 1998-08-16
IL122960A (en) 2006-07-05
KR19990029066A (ko) 1999-04-15
CA2227238C (en) 2003-10-28
EA199800139A1 (ru) 1998-08-27
AU6496096A (en) 1997-02-18
EP0839034A4 (en) 2002-06-19
CN1196679A (zh) 1998-10-21
CZ15698A3 (cs) 1998-09-16
WO1997003667A1 (en) 1997-02-06
EP0839034B1 (en) 2004-06-02
EA005073B1 (ru) 2004-10-28
HU225506B1 (en) 2007-01-29
NZ312997A (en) 2000-07-28
HUP9901711A2 (hu) 1999-09-28
CA2227238A1 (en) 1997-02-06
AU706089B2 (en) 1999-06-10
MX9800568A (es) 1998-04-30
ES2220983T3 (es) 2004-12-16
CZ294516B6 (cs) 2005-01-12
HUP9901711A3 (en) 2001-02-28
DE69632632T2 (de) 2005-05-25
EP0839034A1 (en) 1998-05-06
NO980221L (no) 1998-03-18
KR100454624B1 (ko) 2004-12-31
NO980221D0 (no) 1998-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6649649B1 (en) Method of treating colonic adenomas
SK5298A3 (en) Use of nsaid for producing a medicament for retarding or preventing the transformation of a colonic adenoma to a colonic adenocarcinoma
Goldman et al. Meloxicam inhibits the growth of colorectal cancer cells.
Kargman et al. Expression of prostaglandin G/H synthase-1 and-2 protein in human colon cancer
Fosslien Cardiovascular complications of non-steroidal anti-inflammatory drugs
Halter et al. Cyclooxygenase 2—implications on maintenance of gastric mucosal integrity and ulcer healing: controversial issues and perspectives
Leone et al. Dual acting anti-inflammatory drugs
Rao et al. NSAIDs and chemoprevention
Vane et al. New insights into the mode of action of anti-inflammatory drugs
Botting Mechanism of action of acetaminophen: is there a cyclooxygenase 3?
Clària Cyclooxygenase-2 biology
EP1126841B1 (en) Combinations of a 5ht1b/1d agonist and a selective cox-2 inhibitor for the treatment of migraine
KR100586754B1 (ko) 지단백질 산화의 억제
Scarpignato Piroxicam-β-cyclodextrin: a GI safer piroxicam
Lanas et al. Clinical implications of COX-1 and/or COX-2 inhibition for the distal gastrointestinal tract
Golden et al. Selective cyclooxygenase-2 inhibitors
US6573290B1 (en) DFMO and celecoxib in combination for cancer chemoprevention and therapy
Sánchez-Fidalgo et al. PARP inhibition reduces acute colonic inflammation in rats
Paiotti et al. The role of nonsteroidal antiinflammatory drugs and cyclooxygenase-2 inhibitors on experimental colitis
US6593361B2 (en) Method of treating colonic adenomas
DuBois Nonsteroidal anti-inflammatory drug use and sporadic colorectal adenomas
Laudanno et al. In vivo selectivity of nonsteroidal antiinflammatory drugs and gastrointestinal ulcers in rats
AU717966B2 (en) Method of treating colonic adenomas
Chung et al. Profiles of COX-2 inhibitors: present and future
JP2005247807A (ja) Ｎｓａｉｄを利用した癌治療用組成物