MX2010006982A - Extracto de cardo de leche novedoso, metodo de preparacion y uso. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un método para la preparación de un extracto de fruto de cardo de leche, en particular una preparación de flavanolignano que tiene una velocidad de liberación incrementada y capacidad de absorción mejorada, y su uso, en particular para el tratamiento y prevención de enfermedades hepáticas.

Description

EXTRACTO DE CARDO DE LECHE NOVEDOSO. METODO DE PREPARACION Y USO Campo de la Invención La presente invención describe un método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche o cardo mariano, en particular una preparación de flavanolignano que tiene una velocidad de liberación incrementada y capacidad de absorción mejorada, y su uso, en particular para el tratamiento y prevención de enfermedades del hígado.

Antecedentes de la Invención El cardo de leche (Silybum marianum o Carduus marianus) es una planta que se cultiva en particular en el sudoeste de Europa y Europa central (Austria, Hungría), y que ha sido naturalizado en Eurasia, Norteamérica, Sudamérica, y Australia. Las áreas de producción también se encuentran en China.

Es conocida la eficacia del fármaco de cardo de leche (semillas y fruto) en el tratamiento y prevención de varias formas de disfunción de hígado y vesícula biliar. El fármaco se compone del fruto maduro del cual se ha removido la pulpa, que tiene un contenido de silimarina mínimo de 1.5% (Pharmacopoea Europaea (Ph. Eur.), 2007). Tinturas (usualmente extractos alcohólicos del fármaco) hechos de cardo de leche han sido conocidas desde tiempos antiguos. Silimarina aislada es particularmente adecuada (por ejemplo, DE 1 923 982, DE 1 767 666 (Madaus)).

Silimarina es un complejo de flavanolignano, es decir, polihidroxifenilcromanonas, y es primero aislada de la planta en 1960 (Dissertation , Janiak Bernhard, Junio 1960, Universidad de Berlín de ciencias aplicadas (DE 2020407), Pelter A., Hánsel R., Tetrahedron Letters, 25, (1968)).

Silimarina se compone de una mezcla del complejo de flavanolignano I - 1 V ; específicamente, sus componentes primarios son los cuatro flavanolignano silibina (Silybinin) (Silimarina I), silidianina (silimarina II); y silicristina (silimarina III) Silibina Silidianina Silicristina así como isosilibina (Silimarina IV). En estos f lavolignanos la taxifolina se enlaza al alcohol coniferilico.

Otros componentes secundarios conocidos son dehidrosilibina, 3-desoxisilicristina, desoxisilidianina (Silymonin), siliadrina, silibinoma, siliermina, y neosilimerina.

Preferentemente se utiliza fruto del cardo de leche para preparar el extracto. Dichos extractos de cardo de leche y métodos para la preparar los mismos se han descrito previamente en la técnica previa, por ejemplo como se describe en DE 1 923 982, DE 29 14 330 (Madaus).

También se conoce un extracto seco de fruto de cardo de leche (Extr. Cardui mariae Fruct. siccum) que se obtiene a partir del fármaco vegetal usando, entre otros, la extracción de acetato de etilo del agente de extracción, y estandarización de acuerdo con la Ph. Eur. aplicable.

Los requerimientos establecidos para un extracto seco son un contenido de preferiblemente 30-65% en peso de silimarina (otros intervalos de contenido son posibles), la porción de silimarina que contiene las siguientes fracciones: 40-65% en peso: SMibina (en) A y B (mezcla diastereomérica, 10-20% en peso Isosilibinina A y B (mezcla diastereomérica, 20-45% en peso: Silidanina y silicristina (C25H22OH10 PM 482.4).

Para la preparación de un extracto, la materia prima (en este caso, el fármaco vegetal) usualmente se desgasifica, extrae, filtra, concentra y purifica.

Para dicha extracción continua, usando acetato de etilo/etanol/acetona/metanol (opcionalmente en forma acuosa) o mezclas acuosas con solventes referenciados anteriormente, la filtración se realiza usualmente, seguida por la concentración. La purificación después se lleva a cabo usando etanol y hexano (desengrasado adicional), obteniendo de esta manera el contenido referenciado anteriormente de silimarina.

Dicha composición permite una velocidad de liberación de silimarina de 30 a aproximadamente 40% (medida de acuerdo con Ph. Eur. 5.7; 2.9.3 (01/2006:20903 como se enmienda, por ejemplo usando el método de cesto, método de paleta).

Sin embargo, existe una gran necesidad de incrementar la velocidad de liberación de silimarina en el extracto nativo.

Es conocido que estos fiavanoiignanos tienen poca o nada de solubilidad en agua (la solubilidad de silimarina pura es aproximadamente 0.08 mg/ml en pH 6.9). Debido a esta característica de solubilidad la velocidad de liberación de estos compuestos, y de hecho su biodisponibilidad/absorbabilidad en el cuerpo de humanos o mamíferos, es inadecuada.

A fin de incrementar la velocidad de liberación, se han hecho intentos para derivar los flavanolignanos, usando polialcoholes, azúcares de amino, o ésteres, por ejemplo, o para complejos de los mismos usando compuestos de inclusión tal como ciclodextrina (EP 0 422 497 B1 (Madaus)) , o usando compuestos de formación de complejos, por ejemplo fosfatidilcolina.

Sin embargo, es desventajoso que las sustancias anteriores fisiológicas puedan surgir ya que causan efectos secundarios adversos.

También es conocido de la técnica previa que la velocidad de liberación se puede incrementar por el uso de sustancias portadoras tal como 1 -vinil-2-pirrolidona, manitol, y otros (EP 0 722 918 B1, US 5,906,991 (Madaus)). Además, agentes humectantes tal como polisorbatos (tensidas) son necesarios. EP 1 021 198 B1 (Madaus) describe un coprecipitado de silimarina con el uso de PEG. Sin embargo, estos métodos referenciados tienen todas las desventajas de que la dosificación se hace más difícil, y sustancias anteriores pueden surgir las cuales tienen efectos secundarios definidos imprecisamente.

El objeto, por lo tanto, es proveer un extracto de fruto de cardo de leche mejorado, en particular uno que tiene velocidad de liberación de silimarina mejorada ventajosamente mientras se mantiene el carácter nativo. La ayuda es preparar el extracto esencialmente sin aditivos, suplementos, sustancias portadoras, o agentes humectantes.

El objeto es lograr proveer un método para la preparación de un extracto de fruto de cardo de leche, con lo cual en las siguientes etapas: a.) El fármaco vegetal se extrae con un solvente que tiene polaridad media (por ejemplo, acetato de etilo, etanol, acetona, metanol, que contienen opcionalmente fracciones acuosas), preferiblemente a 40-80 grados Celsius, particularmente preferible a 50-70 grados Celsius, b.) separar, preferiblemente filtrar, c.) concentrar, preferiblemente bajo vacio con agitación, a una temperatura menor de 60 grados Celsius, preferiblemente menor de 40 grados Celsius, y c') lavar opcionalmente con agua caliente, d.) combinar con etanol, preferiblemente 96% de etanol o más, o un solvente de polaridad similar, y después combinar con hexano o un solvente de polaridad similar y concentrar, preferiblemente en una presión de 1-100 mbar, y la fase de etanol-agua resultante se remueve, e.) secar y opcionalmente triturar, f. ) tomar en alcohol anhidro, preferiblemente etanol, g. ) filtrar opcionalmente y concentrar, y h. ) secar y opcionalmente triturar.

Sorpresivamente, la etapa adicional f.) resulta en un incremento significante en la velocidad de liberación de similarina a 80% (véase ejemplos comparativos). Esto es particularmente ventajoso, ya que una dosificación inferior del extracto de fruto de cardo de leche de acuerdo con la invención se logra. También es ventajoso que una calidad se logra la cual en la técnica previa es alcanzable solamente usando aditivos, suplementos, sustancias portadoras, y agente humectantes.

El término "alcohol anhidro" en la etapa f.) preferiblemente incluye alcoholes de C1-C4, particularmente preferible etanol, tal como 99% o aún 99.5% puro.

Por lo tanto, la invención además describe un método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una velocidad de liberación de silimarina de 80% o más, en donde un extracto que tiene un contenido de silimarina de 15-85% en peso, en particular 30-65% en peso, se toma en alcohol anhidro, se filtra opcionalmente y se concentra, y después se seca y opcionalmente se desmenuza.

Dentro del alcance de la presente invención, "silimarina" se refiere a una mezcla de sustancia que contiene (al menos) las cuatro sustancias silibina, silidianina, silicristina, e isosilbina en varias concentraciones. Las relaciones de estas sustancias con respecto una de otra, y la presencia de sustancias adicionales en la mezcla, no son importantes. Sin embargo, es preferible que estas sustancias establezcan los requerimientos de Ph. Eur. o DAB como se enmienda. Este es el caso para la presente invención.

Una "velocidad de liberación de silimarina de 80% o mayor" significa que las sustancias activas son al menos 80% solubles en solución acuosa (estándar de acuerdo con Ph. Eur.; véase ejemplos).

Esto resulta ventajosamente en capacidad de absorción mejorada.

El extracto de fruto de cardo de leche obtenido es particularmente adecuado, en este como el resultado de la etapa del método f.) las fracciones cristalinas en el extracto resultante se reducen significantemente, y un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una modificación cristalina esencialmente amorfa se obtiene.

Breve Descripción de las Figuras La figura 1 muestra la modificación cristalina alterada, basada en una comparación de1- silibinina Ch.B.: 194051 y silibinina Ch.B: 7085 i , usando análisis estructural de rayos X (condiciones correspondientes al ejemplo 2).

Las figuras 2 y 3 ilustran los diagramas obtenidos en el intervalo de medición angular completo. Mezclas de muestra compuestas de fases cristalina y amorfa se usan.

Descripción Detallada de la Invención La invención por lo tanto describe un extracto de fruto de cardo de leche novedoso o preparación de flavanolignano que tiene una modificación cristalina esencialmente amorfa (véase pruebas comparativas del análisis estructural de rayos X en la fig ura 1 ) .

En una modalidad particularmente preferida, la invención se refiere a un extracto de fruto de cardo de leche novedoso o preparación de flavanolignano compuesta de una modificación cristalina amorfa, en donde la fracción cristalina es menor de 20%, preferiblemente menor de 10%, particularmente de manera preferible menor de 7%, incluso 5%.

La invención por lo tanto se refiere a un medicamento compuesto de un extracto de fruto de cardo de leche de acuerdo con la invención, o uso del mismo para el tratamiento y prevención de disfunción de hígado y vesícula biliar, en particular para daño tóxico del hígado (hígado graso, alcohol), hepatosis tales como envenenamiento con hongo, deficiencia hepática aguda, necrosis hepática, distrofia hepática, cirrosis del hígado, fibrosis hepática, hepatomegalia, y degeneración de hígado graso, insuficiencia hepática, y hepatitis, en particular hepatitis C.

La invención además se refiere a una formulación farmacéutica que contiene un medicamento de acuerdo a la invención compuesta de un extracto de fruto de cardo de leche de acuerdo a la invención.

Los extractos de fruto de cardo de leche de acuerdo a la invención se pueden proveer en la forma de preparaciones farmacéuticas en unidades de dosificación. Esto significa que la preparación [puede] estar presente en la forma de porciones individuales, por ejemplo tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, supositorios, y ampolletas, el contenido de sustancia activa del cual [puede] corresponder a una fracción o un múltiplo de una dosis sencilla. Las unidades de dosificación pueden contener, por ejemplo, 1, 2, 3, o 4 dosis sencillas, o 1/2, 1/3, o 1/4 de una dosis sencilla. Una dosis sencilla preferiblemente contiene la cantidad de sustancia activa que se dispensa en una administración, y que típicamente corresponde a una dosis diaria completa o una mitad, una tercera parte o una cuarta parte de una dosis diaria.

Sustancias portadoras adecuadas farmacéuticamente, inertes, no tóxicas, se entiende que son diluyentes, sustancias de relleno y adyuvantes de formulación sólidos, semisólidos o líquidos de todos los tipos.

Tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, gránulos, supositorios, soluciones, jarabes, suspensiones, y emulsiones se nombran como formulaciones farmacéuticas preferidas. Tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, y gránulos pueden contener la sustancia activa o sustancias activas además de las sustancias portadoras habituales, tales como a) sustancias de relleno y extendedores, por ejemplo almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manita, y ácido silícico, b) aglutinantes, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatinas, y polivinilpirrolidona, c) humectantes, por ejemplo, glicerina, d) desintegrantes, por ejemplo agar-agar, carbonato de calcio, y carbonato de sodio, e) retardadores de solubilidad, por ejemplo, parafina, f) aceleradores de absorción, por ejemplo compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes, por ejemplo alcohol cetílico y monoestearato de glicerina, h) adsorbentes, por ejemplo, caolín y bentonita, e i) lubricantes, por ejemplo, talco, calcio, estearato de magnesio, y polietilen glicoles sólidos, o mezclas de las sustancias establecidas bajo a) a i).

Tabletas, grageas, cápsulas, pildoras, y gránulos se pueden proveer con recubrimientos habituales y cubiertas que contienen opcionalmente agentes de opacidad, y también pueden tener una composición de tal manera que suministren la sustancia o sustancias activas solamente en el tracto intestinal o preferiblemente en una porción específica del mismo, opcionalmente de una manera retardada, en donde las sustancias poliméricas y ceras, por ejemplo, se pueden usar como compuestos de encapsulamiento.

La sustancia o sustancias activas también pueden estar presentes en la forma micro-encapsulada, opcionalmente con uno o más de las sustancias portadoras antes referenciadas.

Además de la sustancia o sustancias activas, supositorios pueden contener sustancias portadoras solubles en agua o insolubles en agua habituales, por ejemplo polietilen glicoles, grasas, por ejemplo, manteca de cacao, y esteres superiores (por ejemplo, alcohol C14 con ácido graso C16), o mezclas de estas sustancias.

Además de la sustancia o sustancias activas, soluciones y emulsiones pueden contener sustancias portadoras habituales tales como solventes, solubilizantes, y emulsionantes, por ejemplo agua, alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilen glicol, 1,3-butilen glicol, dimetilformamida, aceites, en particular aceite de semilla de algodón, aceite de cacahuate, aceite de germen de maíz, aceite de olivo, aceite de ricino, y aceite de sésamo, glicerina, glicerina formal, alcohol tetrahidrofurfurilo, polietilen glicoles, y esteres de ácido graso de sorbitán, o mezclas de estas sustancias.

Además de la sustancia o sustancias activas, suspensiones pueden contener sustancias portadoras habituales tales como diluyentes líquidos, por ejemplo agua, alcohol etílico, y propilen glicol, agentes de suspensión, por ejemplo alcoholes isostearílicos etoxilados, polioxietilen sorbito, y sorbitán ásteres, celulosa microcrístalina, metahidróxído de aluminio, bentonita, agar-agar, y goma tragacanto, o mezclas de estas sustancias. Las formas de formulación referenciadas también pueden contener tintas, conservadores, y aditivos de incremento de fragancia y sabor, por ejemplo aceite de menta y aceite de eucalipto, y edulcorantes, por ejemplo sacarina.

Ejemplos y Figuras Los siguientes ejemplos se usan solamente para ilustrar la invención, sin limitar la invención a esto.

EJEMPLO 1 Pruebas comparativas para liberar silimarina: Extractos comparativos (silibinina Ch.-B.: 194051, Ch-B.: 7085i) de acuerdo a la descripción anterior se preparan, silibinina Ch.B.: 7085 i se prepara de acuerdo a la etapa del método adicional f.).

La siguiente liberación de sustancia activa (silimarina) resulta en pH 7.5, bajo las condiciones establecidas en Ph. Eur. (Prueba de disolución de sólidos; Ph. Eur 5.7; 2.9.3 (01/2006:20903): Los resultados muestran que el tratamiento con etanol anhidro en la etapa f.) causa que la mezcla de silibinina escasamente soluble previamente, compuesta de una estructura amorfa y cristalina, se convierta a una modificación amorfa, cristalina (ver la figura 1) (es decir, la estructura reticular cristalina se altera), resultando en solubilidad mejorada y liberación de sustancia activa.

Esta etapa del método adicional permite la preparación del extracto descrito anteriormente que tiene una liberación de sustancia activa de al menos 80% de silimarina total, calculada como silibinina (HPLC- Ph. Eur. 01 2007:2071 ), después de 30 minutos, ya que este método mejora la solubilidad no solo de la silibinina, sino también de los otros isómeros silimarina.

La figura 1 muestra la modificación cristalina alterada, basada en una comparación de silibinina Ch.B.: 194051 y silibinina Ch.B: 7085 i , usando análisis estructural de rayos X (condiciones correspondientes al ejemplo 2).

Se realizan análisis radiográficos en un dif ractometro MPD Pro W'Pert de PANalytical B.V., usando geometría Bragg-Brentano y un detector X'Celerator.

Pruebas comparativas adicionales se describen abajo: EJEMPLO 2 Metodología a.) Preparación de la muestra: Las dos muestras de polvo sólido de productos Ref. 7233¡ con la etapa f.), usando el método de acuerdo a la invención, y Ref. 7232i sin la etapa f.) b.) Análisis de difracción de rayos X usando la técnica de polvo Introducción de porciones del material en polvo insertado en capilares de vidrio Lindemann de 0.5 milímetros de diámetro. c.) Equipo y condiciones de prueba: Difractómetro MPD PRO W'Pert PANalyticai con un goniómetro 9/9 que tiene un radio de 240 milímetros, lentes paralelos con dispositivo monocromático híbrido, y geometría de transferencia con porta-muestras para capilares, con una centrifuga.

Radiación Cu-Ka (k = 1.5406 A).

Energía: 45 kV - 40 mA.

Ranura la cual en 0.19 milímetros fija la cantidad La apertura Soller con radiación 0.02 en la cantidad incidente y la cantidad difractada. d.) Unidad de medición X'Celerator que tiene una longitud activa de 2122.

Purgado 29 de 3 a 60° 29 que tiene un tamaño de paso de 0.017 y un tiempo de medición de 1500 segundos por paso. e.) Objetivo Producción de diagramas de difracción de rayos X usando la técnica de polvo. Determinación de la velocidad de cristalización. f.) Metodología La velocidad de cristalización es el porcentaje en peso de la fase cristalina en una mezcla de muestra compuesta de fases cristalina y amorfa, usando un índice de cristalización Ci: Ci = 100[Xc/(Xa + Xc)], donde Xc representa la fracción en peso de las fases amorfas.

Los valores de Xc se determinan de la suma de las regiones de todos los puntos estrechos (en la fase cristalina) en el intervalo angular del estudio. Los valores de Xa se obtienen al determinar las regiones de los puntos amplios o "halos" (en la fase amorfa). g.) Resultados Las figuras 2 y 3 ilustran los diagramas obtenidos en el intervalo de medición angular completo. Mezclas de muestra compuestas de fases cristalina y amorfa se usan.

Los valores Ci resultantes son 7% para Ref. 7233 i de muestra (ver la figura 2), y donde 24% para la Ref. 7232 i de muestra (ver la figura 3).

Claims (9)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una velocidad de liberación de silimarina de 80% o más, caracterizado porque un extracto que contiene de 15-85% en peso, en particular 30-65% en peso, de silimarina se toma en alcohol anhidro, se filtra opcionalmente y se concentra, y después se seca y opcionalmente se desmenuza.

2. Método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una velocidad de liberación de silimarina de 80% o más, caracterizado porque a.) el fármaco vegetal se extrae con un solvente que tiene polaridad media (por ejemplo, acetato de etilo, etanol, acetona, metanol, que contiene opcionalmente fracciones acuosas), preferiblemente a 40-80 grados Celsius, particularmente preferiblemente a 50-70 grados Celsius, b.) separar, preferiblemente filtrar, c.) concentrar, preferiblemente bajo vacío con agitación, a una temperatura menor de 60 grados Celsius, preferiblemente menor de 40 grados Celsius, y c') lavar opcionalmente con agua caliente, d.) combinar con etanol, preferiblemente 96% de etanol o más, o un solvente de polaridad similar, y después combinar con hexano o un solvente de polaridad similar y concentrar, preferiblemente en una presión de 1-100 mbar, y la fase de etanol-agua resultante se remueve, e. ) secar y opcionalmente triturar, f. ) tomar en alcohol anhidro, preferiblemente etanol, g. ) filtrar opcionalmente y concentrar, y h. ) secar y opcionalmente triturar.

3. Método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una velocidad de liberación de silimarina de 80% o más de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizado porque en la etapa a.) el solvente de polaridad media se selecciona del grupo que comprende acetato de etilo, etanol, y metanol, preferiblemente acetato de etilo.

4. Método para preparar un extracto de fruto de cardo de leche que tiene una velocidad de liberación de silimarina de 80% o mayor de acuerdo a la reivindicación 2, caracterizado porque en la etapa f.) el alcohol anhidro es un alcohol C1-C4 anhidro.

5. Extracto de fruto de cardo de leche que se puede obtener por un método de acuerdo a una de las reivindicaciones 1 a 4.

6. Extracto de fruto de cardo de leche compuesto esencialmente de una modificación cristalina amorfa.

7. Extracto de fruto de cardo de leche compuesto de una modificación cristalina amorfa, en donde la fracción cristalina es menor de 20%, en particular menor de 10%, preferiblemente menor de 7%.

8. El extracto de fruto de cardo de leche de conformidad con una de las reivindicaciones 5 a 7 para el tratamiento y prevención de disfunción de hígado y vesícula biliar, en particular para daño tóxico del hígado (hígado graso, alcohol), hepatosis tales como envenenamiento con hongo, deficiencia hepática aguda, necrosis hepática, distrofia hepática, cirrosis del hígado, fibrosis hepática, hepatomegalia , y degeneración de hígado graso, insuficiencia hepática, y hepatitis, en particular hepatitis C.

9. Preparación farmacéutica que contiene un extracto < de fruto de cardo de leche de acuerdo a la reivindicación 8.