KR20120046064A - 당 비함유 파인애플 추출물과 그 제조 방법 및 그 용도 - Google Patents
당 비함유 파인애플 추출물과 그 제조 방법 및 그 용도 Download PDFInfo
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Abstract
파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지며, 포도당 및 과당을 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물이다.
Description
본 발명은 당 비함유 파인애플 추출물과 그 제조 방법, 및 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제, 음식품, 피부 외용제 및 육모제에 관한 것이다.
피부는 표피, 기저막 및 진피로 구성되어 있다. 진피는 섬유아세포와, 이 세포로부터 분비되는 콜라겐(교원 섬유), 엘라스틴(탄성 섬유), 히알루론산 등의 세포외 매트릭스에 의해 구성되어 있다. 기저막은 표피와 진피 경계부에 존재하며 표피와 진피를 이어줄 뿐 아니라, 피부 기능의 유지에 중요한 역할을 하고 있다(Marinkovich MP et al., J. Cell. Bio 1. 1992 199:695-703 참조). 젊은 피부에서는 이들 피부 조직의 상호 작용이 항상성을 유지함으로써, 수분 유지력, 유연성 및 탄력성 등이 확보되어, 외견적으로도 팽팽함 미 광택이 있어 촉촉한 상태로 유지된다.
그러나, 자외선, 현저한 공기의 건조, 과도한 피부 세정, 스트레스 또는 흡연 등의 외적 인자의 영향을 받거나 나이가 들어가면, 세포외 매트릭스의 주요 구성 성분인 콜라겐의 분해나 변질이 생기거나, 섬유아세포의 증식이 늦어지거나, 혹은 기저막의 주요 구성 성분인 라미닌-5가 분해나 변질을 일으켜 기저막 구조가 파괴되거나 한다(Lavker et al., J. Invest. Dermatol. 1979 73: 59-66 참조). 또한, 천연 보습 인자인 히알루론산 생산량의 저하를 유발한다. 그 결과, 피부의 보습 기능이나 탄력성이 저하되고, 각질의 이상 박리가 일어나며, 주름, 칙칙함, 피부결의 상실, 탄력성 저하 등의 노화 증상을 나타내게 된다.
따라서, 라미닌-5의 생산 및 히알루론산의 생산을 촉진함으로써 피부의 노화를 방지 내지 개선할 수 있을 것이다. 그런 점에서, 라미닌-5 생산 촉진 작용 및 히알루론산 생산 촉진 작용을 갖는 물질을 안전성이 높은 천연물로부터 입수하는 것이 요구되고 있다.
이제까지, 라미닌-5 생산 촉진 작용을 갖는 것으로는 예를 들면, 갈근 추출물, 감초 추출물 또는 그 플라보노이드 분획, 범부채 추출물, 풀라이 추출물, 티노스포라 추출물, 호로파 추출물, 유청 추출물(이상, 일본 특허공개 2003-137767호 공보 참조), 오노니스 추출물, 메리로트 추출물, 숙주 추출물, 팥 추출물(이상, 일본 특허공개 2003-137768호 공보 참조) 및 대두 추출물(일본 특허공개 2004-217618호 공보 참조) 등이 보고되어 있다. 또한, 히알루론산 생산 촉진 작용을 갖는 물질을 천연물로부터 추출하는 것이 시도되고 있다('fragrance 저널' 1992년, No. 11, p43 참조).
한편, 염증성의 질환, 예를 들면, 접촉성 피부염, 건선, 심상성 천연두, 그 외 피부 거칠음을 동반하는 각종 피부 질환 등의 원인 및 발증 기구는 각양각색이다. 그 원인으로서 히알루로니다아제 활성에 의한 것이 알려져 있다.
체조직으로의 친화성을 갖는 히알루론산염은 함수계 안에서는 자외선, 효소 등에 의해 분해되고, 분자량의 저하에 따라 보수 효과도 감소한다. 또한, 히알루론산은 세포간 조직으로서 존재하여, 혈관 투과성에도 관여하고 있다. 또한, 히알루로니다아제는 비만 세포 내에 있어 활성에 의해 비만 세포로부터의 탈과립에 관여하고 있는 것으로 여겨진다. 따라서, 히알루론산의 가수 분해 효소인 히알루로니다아제의 활성을 저해함으로써, 히알루론산의 안정화를 도모하고, 비만 세포로부터의 히스타민 등의 화학적 매개체의 방출을 방지하며, 보습의 강화 및 항염증을 기대할 수 있다.
이러한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 갖는 생약으로는 예를 들면, 오스벡키아속 식물의 추출물(일본 특허공개 2003-055242호 공보 참조), 후지차 추출물(일본 특허공개 2003-012532호 공보 참조), 로즈마리 추출물, 타임 추출물 및 멜리사 추출물(일본 특허공개 평 8-333267호 공보 참조) 등이 보고되어 있다.
또한, 표피는 각화 세포의 분열과 그 후의 분화에 의해, 항상 새로운 각질 세포를 만들어 냄으로써, 외계로부터의 각종 자극으로부터 피부를 보호하는 방어 기능을 갖는다. 특히, 각화 세포의 분화 과정에 있어서, 유극층으로부터 과립층에 걸쳐 인볼루크린 등의 단백질이 발현하여, 효소 트랜스글루타미나아제-1의 작용에 의해 가교되고, 각화 세포를 감싸는 불용성의 세포막 유사 구조체인 각질 비후막(cornified envelope;CE)을 형성하여, 각질 세포의 세포 골격 및 구조의 안정성에 기여한다.
그러나, 다양한 요인으로 표피에서의 트랜스글루타미나아제-1의 생산량이 감소하면, 각질 비후막(CE) 형성이 불완전한 상태가 되어 각화가 정상적으로 일어나지 않게 된다. 그 결과, 각질 배리어 기능 및 피부의 보습 기능이 저하되어, 피부 거칠어짐이나 건조 피부 등의 피부 증상을 나타내는 것으로 사료된다.
이러한 점에서, 각화 세포의 표피에서의 트랜스글루타미나아제-1의 생산을 높이고, 각질 비후막의 형성을 촉진하여 각화를 정상화함으로써, 건조나 자외선 등의 외부 자극에 따른 피부 배리어 기능의 저하를 억제하여, 피부의 건조나 피부 거칠어짐 등, 다양한 피부 증상을 예방 내지 개선할 수 있을 것으로 사료된다.
피부에 있어서 멜라닌은 자외선으로부터 생체를 보호하는 역할도 하고 있지만, 과잉 생성이나 불균일한 축적은 피부의 흑화 내지 기미의 원인이 된다. 일반적으로 멜라닌은 색소 세포 내에서 생합성되는 효소 티로시나아제의 작용에 의해 티로신으로부터 도파, 도파로부터 도파키논으로 변화하고, 이어서 5, 6-디하이드록시인도페놀 등의 중간체를 거쳐 형성된다. 따라서, 피부의 색흑(피부 색소 침착증)을 예방 내지 개선하기 위해, 즉 미백을 위해서는, 멜라닌의 생산을 억제하는 것, 또는 이미 생산된 멜라닌을 담색 표백하는 것이 유효할 것으로 생각된다. 이러한 배경에서, 멜라닌 생산을 억제하여 미백 효과를 이끌어내는 물질의 개발이 활발하게 수행되고 있다.
모발의 성장은 성장기, 퇴행기, 휴지기로 이루어지는 주기적인 헤어 사이클(모주기)에 따라 성장 및 탈락을 반복하고 있다. 이 헤어 사이클 중, 휴지기에서 성장기에 걸친 새로운 모포가 형성되는 스테이지가 발모에 가장 중요한 것으로 여겨지고 있다. 그리고, 이 스테이지에서의 모포 상피계 세포의 증식 내지 분화에 중요한 역할을 하고 있는 것이 모유두세포인 것으로 생각되어지고 있다. 모유두세포는 모근 근방에 있는 외모근초 세포와 매트릭스 세포로 이루어지는 모포상피계 세포의 내측에 있으며, 기저막에 싸여 있는 모근의 근간 부분에 위치하는 세포로서, 모포 상피계 세포에 작용하여 그 증식을 돕는 등, 모발로의 분화에 중요한 역할을 담당하고 있다('Trends Genet', 1992년, 제 8권, p. 56-61 참조).
한편, 파인애플 과실 착즙액 내지 파인애플 과실 추출물을 미백, 피부 개선 성분으로서 함유하는 피부 외용제가 보고되어 있다(일본 특허공개 2002-275081호 공보 참조).
그러나, 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 천연계의 각종 제제에 대한 수요자의 요망은 매우 강하지만, 아직 충분히 만족할 만한 것이 제공되고 있지 않은 것이 현실이다.
본 발명은 종래의 상기 과제를 해결하고, 이하의 목적을 달성하는 것을 과제로 한다. 즉, 본 발명은 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 라미닌-5 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 표피 히알루론산 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 가지며, 안전성이 높은 히알루로니다아제 활성 저해제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 가지며, 안전성이 높은 멜라닌- 생산 억제제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 우수한 모유두세포 증식 작용을 가지며, 안전성이 높은 모유두세포 증식 촉진제를 제공하는 것을 목적으로 한다. 또한, 본 발명은 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 음식품, 피부 외용제 및 육모제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명자들은 거듭 연구 검토한 결과, 다음과 같은 지견을 얻었다. 즉, 파인애플의 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지는 파인애플 추출물이 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용을 갖는다는 사실로부터, 상기 파인애플 추출물이 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제, 그리고 음식품, 피부 외용제 및 육모제로서의 용도에 적합함으로 발견하였다.
본 발명은 본 발명자들에 의한 상기 지견에 기초한 것으로, 상기 과제를 해결하기 위한 수단은 다음과 같다. 즉,
(1) 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지며, 포도당 및 과당을 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물이다.
(2) 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지는 상기 (1)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물이다.
(3) 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 상기 (1) 또는 (2)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물이다.
(4) 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출하여, 포도당 및 과당을 제거하는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.
(5) 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출하는 상기 (4)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.
(6) 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 상기 (4) 또는 (5)에 기재된 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법이다.
(7) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 라미닌-5 생산 촉진제이다.
(8) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 표피 히알루론산 생산 촉진제이다.
(9) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 히알루로니다아제 활성 저해제이다.
(10) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제이다.
(11) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 멜라닌 생산 억제제이다.
(12) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 모유두세포 증식 촉진제이다.
(13) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 음식품이다.
(14) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제이다.
(15) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제이다.
본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법에 따르면, 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖는 당 비함유 파인애플 추출물 및 그 제조 방법을 제공할 수 있다.
본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 라미닌-5 생산 촉진제를 제공할 수 있다.
본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 표피 히알루론산 생산 촉진제를 제공할 수 있다.
본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 가지며, 안전성이 높은 히알루로니다아제 활성 저해제를 제공할 수 있다.
본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 가지며, 안전성이 높은 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제를 제공할 수 있다.
본 발명의 멜라닌 생산 억제제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 가지며, 안전성이 높은 멜라닌 생산 억제제를 제공할 수 있다.
본 발명의 모유두세포 증식 촉진제에 따르면, 종래의 많은 문제를 해결할 수 있는, 우수한 모유두세포 증식 작용을 가지며, 안전성이 높은 모유두세포 증식 촉진제를 제공할 수 있다.
(파인애플)
파인애플(Pinapple)은 파인애플과 파인애플속에 속하는 다생년의 식물로, 학명: Ananas comosus(L.) Merr. 내지 Ananas sativus Schult이고, 중국에서는 펑리(鳳梨)라고도 불리고 있다. 과실은 대각형으로 다육, 노랗게 숙성되어 향을 방출하며, 식용으로 이용된다. 파인애플의 산지는 미국, 필리핀, 말레이시아, 브라질, 오스트레일리아 등이 주된 산지이나, 본 발명에 이용되는 추출물을 얻음에 있어서는 그 종류나 산지는 특별히 한정되지 않는다.
(당 비함유 파인애플 추출물 및 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법)
본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물은 추출 원료로서의 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어진다. 이 당 비함유 파인애플 추출물은 포도당 및 과당을 함유하지 않아야 한다.
본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법은 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출하여, 포도당 및 과당을 제거하는 것을 포함하며, 필요에 따라 적절히 선택한, 그 외의 공정을 포함한다.
상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 원료로는 과육, 과심부(심) 등 파인애플 식용부이면 특별히 제한없이 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있지만, 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사, 즉 파인애플 과즙을 섭취한 후에 잔류한 섬유질(파인애플 펄프)이 특히 바람직하다.
상기 추출 원료는, 섭취 후 세척하고 건조하여 분쇄한 것을 이용하는 것이 바람직하다. 여기에서 건조는 햇볕에 건조하여도, 통상 사용되는 건조기를 사용하여도 무방하다.
상기 당 비함유 파인애플 추출물은 상기 파인애플 식용부를 상기 용매에 투입하여, 실온 내지 용매의 비점 이하의 온도에서 임의의 장치를 이용하여 추출함으로써 용이하게 얻을 수 있다.
상기 용매는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있으며, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올 등의 탄소수 1-5의 저급 지방족 알콜; 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 저급 지방족 케톤; 1, 3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 등의 탄소수 2-5의 다가알콜; 헥산; 저급 지방족 알콜, 저급 지방족 케톤, 다가 알콜 등의 친수성 유기 용매와 물과의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 이들 중에서도, 친수성 유기 용매와 물과의 혼합 용매가 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로는 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 1, 3-부틸렌글리콜, 글리세린, 프로필렌글리콜 등이 바람직하며, 에탄올이 보다 바람직하다.
물과 친수성 유기 용매와의 혼합 용매에 있어서, 상기 친수성 유기 용매로서 저급 알콜을 이용하는 경우, 상기 저급 지방족 알콜의 상기 혼합 용매에 있어서의 함유량은 10 체적%-100 체적%가 바람직하며, 70 체적%-100 체적%가 보다 바람직하고, 90 체적%가 특히 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로서 저급 지방산 케톤을 이용하는 경우, 상기 저급 지방족 케톤의 상기 혼합 용매에서의 함유량은 10 체적%-80 체적%가 바람직하다. 상기 친수성 유기 용매로서 다가 알콜을 이용하는 경우, 상기 다가 알콜의 상기 혼합 용매에서의 함유량은 10 체적%- 90 체적%가 바람직하다.
상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 방법은 상기 파인애플 식용부에 포함되는 지용성 성분을 상기 용매에 용출시키는 것이 가능하다면 특별히 한정되지 않고 통상법에 따라 수행할 수 있다. 또한, 추출 처리시에는 특수한 추출 방법을 채용할 필요는 없으며, 실온 내지 환류 가열 하에서 임의의 장치를 사용할 수 있다.
구체적으로는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 추출 방법으로는, 예를 들면 에탄올 수용액 등의 상기 용매를 채운 처리조에, 파인애플 식용부를 압착한 후의 잔사(파인애플 펄프) 등의 상기 추출 원료를 투입하여, 필요에 따라 적절하게 교반하면서 환류 추출기로 80℃에서 2시간 가열 추출하고, 열 여과하여 지용성 성분을 용출한 후, 증발기를 이용하여 감압하에서 농축하고, 다시 동일한 여과 처리를 수행하여, 얻어진 중간 추출물을 물로 세척하여 포도당 및 과당 등의 당질을 제거함으로써, 목적으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물을 얻는 방법을 들 수 있다.
이 때, 추출 조건은 상기 추출 원료 등에 따라 적절하게 조정할 수 있으나, 상기 추출 용매량은 상기 추출 원료로서의 파인애플 식용부에 대하여 5배량 - 20배량(질량비)이 바람직하며, 추출 시간은 1시간 - 3시간이 바람직하고, 추출 온도는 상온 - 95℃가 바람직하다.
또한, 얻어진 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 희석물, 농축물, 건조물, 초벌 정제물, 정제물 등을 얻기 위하여, 상법에 따라 희석, 농축, 건조, 정제 등의 처리를 실시할 수도 있다.
또한, 얻어진 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 그대로도 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나로서 사용할 수 있지만, 이용하기 쉽다는 점에서 상기 농축액, 상기 건조물이 바람직하다. 상기 건조물을 얻는데 있어서, 흡습성을 개선하기 위하여 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 캐리어를 가할 수도 있다.
(비함유 성분)
본 발명에 있어서, '당 비함유'의 '당'이라 함은 포도당 및 과당을 의미한다. 또한, '비함유', '당을 함유하지 않는다', '당을 제거한다'라 함은 각 당의 상기 당 비함유 파인애플 추출물에 대한 함유량이 0.5 질량% 이하임을 의미하지만, 0.2 질량% 이하가 바람직하다.
상기 포도당 및 과당의 함유량은 예를 들면, 글루코오스/프룩토오스 분석 키트(F-키트(글루코오스/프룩토오스), 주식회사 J. K. 인터내셔널제)를 이용하여, 키트 첨부된 프로토콜에 따라 측정할 수 있다. 또한, 피험 시료로는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 50 체적% 에탄올 수용액에 샘플 농도 5 체적%가 되도록 용해한 것을 이용할 수 있다.
(라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제, 모유두세포 증식 촉진제)
본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본발명의 모유두세포 증식 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하고 있으며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 라미닌-5 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 표피 히알루론산 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 히알루로니다아제 활성 저해제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 멜라닌 생산 억제제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물만으로 이루어진 것일 수도 있고, 그 외의 성분을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 모유두세포 증식 촉진제 중의 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 함유량은 특별히 제한은 없으며, 목적에 따라 적절하게 선택할 수 있다.
(그 외의 성분)
상기 당 비함유 파인애플 추출물은 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 약학적으로 허용할 수 있는 캐리어, 그 외의 임의의 보조제를 이용하여, 상법에 따라 분말상, 과립상, 정제상, 액상 등의 임의의 제형으로 제제화하여 제공할 수 있으며, 다른 조성물(예를 들면, 경구 의약품 등)에 배합하여 사용할 수 있는 외에도, 연고제, 외용액제, 첩부제 등으로 사용할 수 있다. 이 때, 보조제로는 예를 들면 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 안정제, 교미제, 교취제 등을 이용할 수 있다.
상기 부형제로는 예를 들면, 유당, 백당, 염화나트륨, 포도당, 전분, 탄산칼슘, 카올린, 미결정 셀룰로오스, 규산 등을 들 수 있다. 또한, 상기 결합제로는 예를 들면, 물, 에탄올, 프로판올, 단일 시럽, 포도당, 전분액, 젤라틴액, 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필셀룰로오스, 하이드록시프로필스타치, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 셸락, 인산칼슘, 폴리비닐피롤리돈 등을 들 수 있다. 상기 붕괴제로는 예를 들면, 건조 전분, 알긴산나트륨, 한천말, 탄산수소나트륨, 탄산칼슘, 라우릴황산나트륨, 스테아린산모노글리세리드, 유당 등을 들 수 있다. 상기 활택제로는 예를 들면, 정제 탈크, 스테아린산염, 붕사, 폴리에틸렌글리콜 등을 들 수 있다. 상기 안정화제로는 예를 들면 피로아황산나트륨, EDTA, 티오글리콜산, 티오유산 등을 들 수 있다. 상기 교미제 내지 교취제로는 예를 들면 백당, 등피(橙皮), 구연산, 주석산 등을 들 수 있다.
또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는, 필요에 따라 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 어느 하나를 갖는 다른 천연 추출물 등을 함께 배합하여 이용할 수 있다.
상기 라미닌-5 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 라미닌-5 생산 촉진 작용을 발휘한다.
상기 표피 히알루론산 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 발휘한다.
상기 히알루로니다아제 활성 저해제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 발휘한다.
상기 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 발휘한다.
상기 멜라닌 생산 억제제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 멜라닌 생산 억제 작용을 발휘한다.
상기 모유두세포 증식 촉진제는 유효 성분으로서 함유되는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 작용에 의해 모유두세포 증식 촉진 작용을 발휘한다.
본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제에 따르면, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 피부의 기저막 형성을 촉진하여, 주름, 탄력성 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 라미닌-5 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제에 따르면, 우수한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 보습력, 탄력성을 향상시켜, 피부 거칠어짐, 주름, 탄력성 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 표피 히알루론산 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 표피 히알루론산 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제에 따르면, 우수한 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 통하여, 예를 들면 히알루론산의 분해를 억제하고, 히스타민 유리를 촉진하여, 보습의 강화를 도모하고, 염증이나 알러지를 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 히알루로니다아제 활성 저해제는 이들 용도 이외에도 히알루로니다아제 활성 저해 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제에 따르면, 우수한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 피부 표피의 배리어 기능을 향상시켜, 피부 거칠어짐, 피부결의 상실, 탄력성의 저하 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제는 이들 용도 이외에도 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 멜라닌 생산 억제제에 따르면, 우수한 멜라닌 생산 억제 작용을 통하여, 예를 들면 자외선으로부터 피부를 보호하여, 피부의 흑화, 기미 등 피부의 노화 증상을 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 멜라닌 생산 억제제는 이들 용도 이외에도 멜라닌 생산 억제 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 모유두세포 증식 촉진제에 따르면, 우수한 모유두세포 증식 촉진 작용을 통하여, 예를 들면 모포 상피계 세포의 증식 및 모발의 분화를 촉진하여, 세모(細毛)화를 예방 및 개선할 수 있게 된다. 단, 본 발명의 모유두세포 증식 촉진제는 이들 용도 이외에도 모유두세포 증식 촉진 작용을 발휘하는 것에 의의가 있는 모든 용도로 이용할 수 있다.
본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 우수한 작용을 가짐과 동시에 식용이 되는 파인애플로부터 얻어진 추출물로서, 안전성이 우수하기 때문에 음식품, 피부 외용제 및 육모제에 배합하기에 매우 적합하다.
또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 우수한 작용을 갖기 때문에, 라미닌-5, 표피 히알루론산, 히알루로니다아제, 트랜스글루타미나아제-1 및 모유두세포의 연구나, 히알루로니다아제, 라미닌-5, 표피 히알루론산, 트랜스글루타미나아제-1, 멜라닌 및 모유두세포에 관련된 기능 내지 질환의 연구를 위한 시약으로서 매우 적합하게 이용할 수 있다.
또한, 본 발명의 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 인간에 대하여 매우 적합하게 적용되는 것이지만, 각각의 작용 효과가 발휘되는 한, 인간 이외의 동물에 대하여 적용할 수도 있다.
(음식품)
본 발명의 음식품은, 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
상기 음식품은 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 음식품에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 음식품일 수도 있다. 또한, 상기 음식품은 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.
상기 음식품이라 함은 인간의 건강에 위해를 가할 위험이 적고, 통상적인 사회 생활에 있어서 경구 또는 소화관 투여에 의해 섭취되는 것을 말하며, 행정 구분 상의 식품, 의약품, 의약부외품 등의 구분으로 제한되는 것이 아니라, 예를 들면, 경구적으로 섭취되는 일반 식품, 건강 식품, 보건 기능 식품, 미용용 식품, 의약부외품, 의약품 등을 폭넓게 포함하는 것을 의미한다.
또한, 본 발명의 음식품은 음료, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 과립 등의 형상으로 가공함으로써 간편하게 섭취할 수 있어 광범위하게 이용 가능하다.
상기 음식품은 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선정할 수 있으며, 예를 들면 청량음료, 탄산음료, 영양음료, 과일음료, 유산음료 등의 음료(이들 음료의 농축액 및 조정용 분말을 포함한다.); 아이스크림, 아이스셔벗, 팥빙수 등의 냉동 과자; 소바, 우동, 녹두 국수, 만두피, 슈마이피, 중화면, 즉석면 등의 면류; 사탕, 캔디, 껌, 쵸콜렛, 정과, 스낵 과자, 비스켓, 젤리, 쨈, 크림, 구운 과자, 빵 등의 과자류; 게, 연어, 바지락, 참치, 정어리, 새우, 가다랑어, 고등어, 고래, 굴, 꽁치, 오징어, 피조개, 가리비, 전복, 성게, 연어알, 오분자기 등의 수산물; 어묵, 햄, 소시지 등의 수산/축산 가공 식품; 가공유, 발효유 등의 유제품; 샐러드유, 튀김유, 마가린, 마요네즈, 쇼트닝, 휘핑크림, 드레싱 등의 유지 및 유지 가공 식품; 소스, 양념장 등의 조미료; 카레, 시튜, 닭고기계란 덮밥, 죽, 영양죽, 중화 덮밥, 돈까스 덮밥, 튀김 덮밥, 장어 덮밥, 해시라이스, 오뎅, 마파두부, 불고기 덮밥, 미트소스, 계란 스프, 오므라이스, 만두, 슈마이, 햄버거, 미트볼 등의 레토르트 파우치 식품; 샐러드, 장아찌 등의 반찬; 각종 형태의 건강/미용/영양 보조 식품; 정제, 과립제, 캡슐제, 드링크제, 트로키 등의 의약품, 의약부외품 등을 들 수 있다. 또한, 상기 음식품은 상기 예시에 한정되는 것이 아니다.
상기 음식품에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은, 첨가하는 음식품에 따라 달라 일률적으로 규정할 수는 없지만, 정제, 캡슐제 등의 경우에는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 1 질량% - 90 질량%가 바람직하고, 그 외의 음식품에서는 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.001 질량% - 50 질량%가 바람직하다. 또한, 첨가 대상 음식품의 일반적 섭취량을 고려하여, 성인 1일당 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 섭취량이 약 1㎎ - 1,000㎎ 정도가 되도록 조제하는 것이 바람직하다.
상기 그 외의 성분으로는 상기 음식품을 제조하는데 통상적으로 이용되는 보조적 원료, 첨가물 등을 들 수 있다.
상기 보조적 원료 내지 첨가물은 특별한 제한없이 목적에 따라 적절하게 선정할 수 있으며, 예를 들면, 포도당, 과당, 자당, 말토스, 솔비톨, 스테비오사이드, 루부소사이드, 콘시럽, 유당, 구연산, 주석산, 사과산, 호박산, 유산, L-아스코르빈산, d1-α-토코페롤, 에리소르빈산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 자당지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, 아라비아검, 카라기난, 카제인, 젤라틴, 펙틴, 한천, 비타민B류, 니코틴산아미드, 판토텐산칼슘, 아미노산류, 칼슘염류, 색소, 향료, 보존제 등을 들 수 있다.
본 발명의 음식품은 일상적으로 경구 섭취하는 것이 가능하며, 유효 성분인 상기 파인애플 추출물의 작용에 의해, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 매우 효과적으로 달성할 수 있다.
또한, 본 발명의 음식품은 인간에 대하여 매우 적합하게 적용되는 것이지만, 각각의 작용 효과가 발휘되는 한, 인간 이외의 동물에 대하여 적용할 수도 있다.
(피부외용제)
본 발명의 피부 외용제는 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
여기에서 상기 피부외용제라 함은 피부에 적용되는 각종 약제를 의미하며, 그 구분은 특별히 제한되는 것이 아니라, 예를 들면 피부화장료, 의약부외품, 의약품 등을 폭넓게 포함하는 것이다.
상기 피부외용제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 피부외용제에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 피부외용제일 수도 있다. 또한, 상기 피부외용제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.
상기 피부외용제는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절히 선택할 수 있으며, 예를 들면 연고, 크림, 유액, 미용액, 로션, 팩, 파운데이션, 립크림, 입욕제, 헤어토닉, 헤어로션, 비누, 바디샴푸 등을 들 수 있다.
상기 그 외의 성분으로는 특별한 제한없이 목적에 따라 적절히 선택할 수 있으며, 피부외용제를 제조함에 있어서 통상적으로 이용되는 성분, 예를 들면 수렴제, 살균, 항균제, 미백제, 자외선 흡수제, 보습제, 세포 부활제, 항노화제, 소염/항알러지제, 항산화제, 활성산소 제거제, 유지류, 납류, 탄화수소류, 지방산류, 알콜류, 에스테르류, 계면활성제, 향료 등을 들 수 있다.
상기 피부외용제에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은 특별한 제한없이 피부외용제의 종류 등에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 예를 들면 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.0001 질량% - 10 질량%가 바람직하고, 0.001 질량% - 5 질량%가 보다 바람직하다.
(육모제)
본 발명의 육모제는 본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물과, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 적어도 어느 하나를 함유하여 이루어지며, 필요에 따라 그 외의 성분을 더 함유하여 이루어진다.
상기 육모제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물을, 그 활성을 방해하지 않도록 임의의 육모제에 배합한 것일 수도 있고, 상기 당 비함유 파인애플 추출물을 주성분으로 한 육모제일 수도 있다. 또한, 상기 육모제는 상기 당 비함유 파인애플 추출물 그 자체일 수도 있다.
본 발명의 육모제에 따르면, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용 및 모유두세포 증식 촉진 작용 등을 통하여, 예를 들면 유두세포 및 모포 상피계 세포의 증식, 모발의 분화 등을 촉진하여, 세모화, 탈모 등을 예방 및 개선하는데 매우 적합하게 이용할 수 있다.
또한, 본 명세서의 '육모제'라 함은 모를 발육시키는 것, 모의 발육을 촉진하는 것, 모의 건강 상태를 유지하는 것, 탈모를 예방하는 것 및 탈모를 저감시키는 것 중 어느 하나의 효과를 갖는 약제를 의미하며, '양모제'도 포함한다. 따라서, 본 발명의 육모제는 양모제로서도 매우 적합하게 이용할 수 있다.
본 발명의 육모제는 우수한 작용을 가짐과 동시에, 피부에 적용한 경우의 사용감과 안전성이 우수하기 때문에, 두발용 육모제, 두발 화장료 등의 피부외용제에 배합하기에 매우 적합하다. 상기 피부외용제의 투여 부위는 예를 들면, 두발, 두발의 모근, 두피, 두피의 피지선 등의 두부가 바람직하다. 상기 피부외용제의 제형으로는, 예를 들면 연고, 크림, 로션, 겔, 졸, 스프레이, 용액 등을 들 수 있다. 두발 화장료로는 예를 들면, 헤어토닉, 헤어리퀴드, 샴푸, 포마드, 린스 등을 들 수 있다.
상기 육모제에 있어서, 상기 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스 글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제 중 어느 하나의 함유량은 특별한 제한없이 피부외용제의 종류 등에 따라 적절히 선택할 수 있지만, 예를 들면 상기 당 비함유 파인애플 추출물의 양으로 환산하여 0.0001 질량% - 10 질량%가 바람직하고, 0.001 질량% - 5 질량%가 보다 바람직하다.
(실시예)
이하, 제조예 및 시험예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명하겠지만, 본 발명은 이들에 제한되는 것이 아니다.
(제조제 1: 당 비함유 파인애플 추출물의 제조)
파인애플 식용부의 압착 후의 잔사(파인애플 펄프) 100g을 90 체적% 에탄올 1,000㎖에 가하여, 환류 추출기로 80℃에서 2시간 가열 추출하고, 열 여과하였다. 그 후, 에버포레이터를 이용하여 감압 하에서 농축하고, 다시 동일한 여과 처리를 수행하였다. 얻어진 잔사에 대하여 500㎖의 물로 세정하고, 당질을 제거한 페이스트상의 당 비함유 파인애플 추출물 1.5g을 얻었다. 추출물의 수율은 1.5(질량%)였다.
얻어진 당 비함유 파인애플 추출물에 대하여 이하와 같이 성분 분석을 수행하였다.
상기 당 비함유 파인애플 추출물을 50 체적% 에탄올에 샘플 농도 20 체적%가 되도록 용해한 것을 피험 시료로서 이용하여, 글루코오스/프룩토오스 분석 키트(F-키트(글루코오스/프룩토오스), 주식회사 J.K. 인터내셔널제)에 의해 포도당 및 과당의 함유량을 측정하였다. 측정 결과, 상기 당 비함유 파인애플 추출물은 0.03 질량%의 포도당, 0.01 질량%의 과당을 함유함을 알 수 있었다.
상기의 제조예 1에서 얻어진 당 비함유 파인애플 추출물을 피험 시료로 이용하여, 이하의 시험예 1-6에 나타낸 바와 같이, 당 비함유 파인애플 추출물에 관한 피부 개선, 미백 및 육모에 관한 평가를 수행하였다.
또한, 대조 파인애플 추출물로서, 100% 파인애플 과즙(시판 파인애플 착즙물) 200㎖를 에버포레이터를 이용하여 감압 하에서 농축하고, 동결 건조를 수행하여 얻어진 26.3g의 파인애플 착즙 동결 건조물을 이용하였다. 이 파인애플 착즙 동결 건조물 0.413g/L에 대하여 상기 당 비함유 파인애플 추출물과 마찬가지로 포도당 및 과당의 함유량을 측정한 결과, 이 파인애플 착즙 동결 건조물은 29.1 질량%의 포도당, 26.6 질량%의 과당을 함유함을 알 수 있었다.
(시험예 1: 라미닌-5 생산 촉진 작용 시험)
<시험 방법)
인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK, 쿠라시키 방적 주식회사제)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM, 쿠라시키 방적 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 BPE 무첨가 KGM(KGM-BPE, 쿠라시키 방적 주식회사제)으로 희석한 후, 24웰 플레이트에 1웰당 500㎕씩 파종하여 2일간 배양하였다. 배양 종료 후, 배지를 빼고, KGM-BPE로 용해한 피험 시료를 각 웰에 500㎕ 첨가하여 48시간 배양하였다. 배양 종료 후, 상청액 100㎕를 ELISA 플레이트에 옮겨 37℃에서 2시간 플레이트에 흡착시킨 후, 용액을 버리고, 0.05 체적%의 Tween20을 포함하는 인생산리완충액(0.05% PBS-T, pH 7.4)으로 세정하였다.
그 후, 1 체적% 소혈청 알부민을 포함하는 인생산리완충액(pH 7.4)으로 블록킹 조작을 수행하였다. 용액을 버리고 0.05% PBS-T로 세정을 수행하여, 항 인간라미닌-5 항체(마우스 IgG, 니폰 케미콘 주식회사제)를 반응시켰다. 용액을 버리고 0.05% PBS-T로 세정한 후, 발색 반응을 수행하였다. 얻어진 측정 결과로부터, 하기식에 의해 라미닌-5 생산 촉진율(%)을 산출하였다.
라미닌-5 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 1에 나타낸다.
[수학식 1]
라미닌-5 생산 촉진률(%)=A/B×100
(단, 상기 식 1 중, A: 피험 시료 첨가시의 파장 405nm에서의 흡광도
B: 피험 시료 무첨가시(컨트롤)의 파장 405nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 라미닌-5 생산 촉진율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 2.5 | 114.3±3.3** | 91.3±5.8 |
| 10 | 121.3±3.0** | 88.7±2.2 |
Mean±S.E., n=4, **: p<0.01
표 1의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 농도 의존적인 라미닌-5 생산 촉진 작용이 인정되었다.
(시험예 2: 표피 히알루론산 생산 촉진 작용 시험)
<시험 방법>
인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 KGM으로 희석한 후, 96웰 플레이트에 1웰당 100㎕씩 파종하여 24시간 배양하였다. 배양 종료 후, KGM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 100㎕ 첨가하여 7일간 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 배지 중의 히알루론산량을, 히알루론산 결합 단백(HABP, 생화학 바이오비지니스 주식회사제)을 이용한 샌드위치법에 의해 측정하였다.
히알루론산 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 2에 나타낸다.
[수학식 2]
1웰당 히알루론산 생산 촉진률(%)=A/B×100
(단, 상기 식 2 중,
A: 피험 시료 첨가시의 히알루론산량
B: 피험 시료 무첨가시의 히알루론산량을 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 표피 히알루론산 생산 촉진율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 25 | 108.5±1.3** | 78.8±4.4 |
| 100 | 149.7±2.1*** | 79.6±4.6 |
Mean±S.E., n=5, **: p<0.01, ***: p<0.001
표 2의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 유의한 표피 히알루론산 생산 촉진 작용이 인정되었다.
(시험예 3: 히알루로니다아제 활성 저해 작용 시험)
<시험 방법>
시험 시료를 용해한 0.1mol/L 초산 완충액(pH 3.5) 0.2mL에 히알루로니다아제 용액(Type IV-S(소 정소 유래), 400 NF units/mL; Sigma-Aldrich Japan제) 0.1mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 또한, 활성제로서 2.5mmol/L 염화칼슘 0.2mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 여기에 0.4mg/ml 히알루론산나트륨 용액(닭볏 유래 히알루론산나트륨, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 0.5mL을 가하여 37℃에서 40분간 반응시켰다. 그 후, 0.4mol/L 수산화나트륨 0.2mL을 가하여 반응을 중지하고 냉각한 후, 각 반응 용액에 붕산 용액 0.2mL을 가하여 3분간 끓였다. 냉각 후, p-DABA 시약(p-디메틸아미노벤즈알데히드, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 6mL을 가하여 37℃에서 20분간 반응시켰다. 그 후, 파장 585nm에서의 흡광도를 측정하였다. 동일한 방법으로 공시험을 수행하여 보정하였다.
히알루로니다아제 활성 저해 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 3에 나타낸다.
[수학식 3]
히알루로니다아제 활성 저해율(%)={1-(St-Sb)/(Ct-Cb)}×100
(단, 상기 식 3 중,
St: 피험 시료 용액의 파장 585nm에서의 흡광도
Sb: 피험 시료 용액 블랭크의 파장 585nm에서의 흡광도
Ct: 컨트롤 용액의 파장 585nm에서의 흡광도
Cb: 컨트롤 용액 블랭크의 파장 585nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 히알루로니다아제 활성 저해율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 2.5 | 27.6 | -22.6 |
표 3의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에 히알루로니다아제 활성 저해 작용이 인정되었다. 또한, 파인애플 착즙 동결 건조물에는 반대로 히알루로니다아제 활성을 촉진하는 작용이 있음이 확인되었다.
(시험예 4: 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용 시험)
<시험 방법>
인간 정상 신생아 피부 표피 각화세포(NHEK)를 인간 정상 신생아 표피 각화세포용 배지(KGM)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 1×105세포/mL의 농도가 되도록 KGM으로 희석한 후, 96웰 플레이트에 1웰당 100㎕씩 파종하여 2일간 배양하였다. 배양 종료 후, KGM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 100㎕ 첨가하여 24시간 배양하였다. 배양 후, 배지를 빼고, 세포를 플레이트에 고정시켜 세포 표면에 발현한 트랜스글루타미나아제-1의 양을 모노클로널 항 인간 트랜스글루타미나아제-1 항체(Anti-Keratinocyte Transglutaminase, Biomedical Technologies. Inc제)를 이용한 ELISA법에 의해 측정하였다.
트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 4에 나타낸다.
[수학식 4]
트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진률(%)=A/B×100
(단, 상기 식 4 중,
A: 피험 시료 첨가시의 파장 405nm에서의 흡광도
B: 피험 시료 무첨가시(컨트롤)의 파장 405nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 100 | 122.2±2.8*** | 99.5±1.0 |
Mean±S.E., n=6, ***: p<0.001
표 4의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 유의한 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용이 인정되었다.
(시험예 5: 멜라닌 생산 억제 작용 시험)
<시험 방법>
B16 멜라노머 세포를 10 체적% FBS(STANDARD FETAL BOVINE SERUM, HyClone제) 함유 둘베코 MEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린(Theophylline, 와코준야쿠 공업 주식회사제) 함유 둘베코 MEM으로 24.0×104 세포/mL의 농도로 희석한 후, 48웰 플레이트에 1웰당 300㎕씩 파종하여 6시간 배양하였다. 배양 종료 후, 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린 함유 둘베코 MEM으로 용해한 피험 시료를 각 웰에 300㎕ 첨가하여 4일간 배양하였다. 배양 종료 후, 각 웰로부터 배지를 제거하고, 2mol/L의 NaOH 용액 200㎕를 첨가하여 초음파 파쇄기에 의해 세포를 파괴하고, 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하여 멜라닌 생산량으로 하였다.
또한, 세포 생존률의 측정을 위하여, 동일하게 배양 후, 400㎕의 PBS(-) 인산 생리 완충액으로 세정하여, 최종 농도 0.05mg/㎖로 10 체적% FBS 함유 둘베코 MEM에 용해한 13.8mmol/L 뉴트럴 레드를 각 웰에 200㎕ 첨가하였다. 2.5시간 배양한 후, 뉴트럴 레드 용액을 버리고, 에탄올/초산 용액(에탄올:초산:물=50:1:49)을 각 웰에 200㎕ 첨가하여 색소를 추출하였다. 추출 후, 파장 540nm에서의 흡광도를 측정하였다.
공시료로서, 10 체적% FBS 및 1mmol/L 테오필린 함유 둘베코 MEM만으로 배양한 세포를 동일한 방법으로 시험하였다.
멜라닌 생산 억제 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 5에 나타낸다.
[수학식 5]
멜라닌 생산 억제율(%)={1-(B/D)/(A/C)}×100
(단, 식 5 중,
A: 피험 시료를 첨가하지 않은 세포에서의 파장 475nm에서의 흡광도
B: 피험 시료를 첨가한 세포에서의 파장 475nm에서의 흡광도
C: 피험 시료를 첨가하지 않은 세포에서의 파장 540nm에서의 흡광도
D: 피험 시료를 첨가한 세포에서의 파장 540nm에서의 흡광도를 각각 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 멜라닌 생산 억제율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 12.5 | 14.2±1.4 | 6.5±0.5 |
| 25 | 13.8±1.3 | 8.8±4.6 |
| 50 | 20.4±1.6 | 11.6±1.8 |
| 100 | 23.0±1.6 | 15.4±2.8 |
표 5의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에, 대조군인 파인애플 착즙 동결 건조물보다도 강하고 농도 의존적인 멜라닌 생산 억제 작용이 인정되었다.
(시험예 6: 모유두세포 증식 촉진 작용 시험)
<시험 방법>
정상 인간 두발 모유두세포(동양 방적 주식회사제)를 모유두세포 증식 배지(동양 방적 주식회사제)를 이용하여 배양한 후, 트립신 처리에 의해 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 10 체적% FBS 함유 둘베코 MEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)을 이용하여 1.0×104 세포/mL의 농도로 희석한 후, 콜라겐 코팅한 96웰 플레이트에 1웰당 200㎕ 파종하여 3일간 배양하였다. 배양 후, 배지를 빼고, 무혈청 DMEM(둘베코 변법 이글 배지(1), 닛스이 제약 주식회사제)에 용해한 피험 시료를 각 웰에 200㎕ 첨가하여 4일간 더 배양하였다. 모유두세포 증식 작용은 MTT 어세이를 이용하여 측정하였다. 배양 종료 후, 배지를 빼고 최종 농도 0.4mg/mL로 무혈청의 DMEM에 용해한 3-(4, 5-디메틸-티아졸-2-일)-2, 5-디페닐테트라졸륨브로마이드(MTT, 주식회사 도진 화학연구소제)를 각 웰에 100㎕ 첨가하였다. 2시간 배양한 후에, 세포 내에 생성한 블루 포르마잔을 2-프로판올 100㎕로 추출하였다. 추출 후, 파장 570nm에서의 흡광도(OD570)를 측정하였다. 동시에 탁도로서 파장 650nm에서의 흡광도(OD650)를 측정하여, 양자의 차를 블루 포르마잔 생성량으로 하였다.
모유두세포 증식 촉진 작용의 계산 방법은 하기와 같다. 결과를 표 6에 나타낸다.
[수학식 6]
모유두세포 증식 촉진율(%)=A/B×100
(단, 상기 식 6 중,
A: 피험 시료 첨가시의 OD570-OD650
B: 피험 시료 무첨가시의 OD570-OD650을 각각 나타낸다.)
| 농도(㎍/㎖) | 모유두세포 증식 촉진율(%) | |
| 당 비함유 파인애플 추출물 | 파인애플 착즙 동결 건조물 | |
| 25 | 114.3±1.1*** | 99.0±1.8 |
Mean±S.E., n=6, ***: p<0.001
표 6의 결과로부터, 당 비함유 파인애플 추출물에서만 유의한 모유두세포 증식 촉진 작용이 확인되었다.
산업상 이용 가능성
본 발명의 당 비함유 파인애플 추출물, 라미닌-5 생산 촉진제, 표피 히알루론산 생산 촉진제, 히알루로니다아제 활성 저해제, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제, 멜라닌 생산 억제제 및 모유두세포 증식 촉진제는 안전성 및 생산성이 우수하여 일상적으로 섭취 가능하며, 동시에 저가이면서, 우수한 라미닌-5 생산 촉진 작용, 표피 히알루론산 생산 촉진 작용, 히알루로니다아제 활성 저해 작용, 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진 작용, 멜라닌 생산 억제 작용, 및 모유두세포 증식 촉진 작용 중 적어도 어느 하나를 갖기 때문에, 미용용 음식품에 배합하거나, 피부외용제 및 육모제에 배합하거나, 연구용 시약으로서 아주 적합하게 이용할 수 있다.
Claims (15)
- 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지며, 포도당 및 과당을 함유하지 않는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물.
- 제 1 항에 있어서, 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출함으로써 얻어지는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물.
- 파인애플 식용부를 용매에 의해 추출하여, 포도당 및 과당을 제거하는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법.
- 제 4항에 있어서, 파인애플 식용부의 압착 후의 잔사를 용매에 의해 추출하는 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법.
- 제 4항 또는 제 5항에 있어서, 용매가 70 체적%-100 체적% 에탄올 수용액인 것을 특징으로 하는 당 비함유 파인애플 추출물의 제조 방법.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 라미닌-5 생산 촉진제.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 표피 히알루론산 생산 촉진제.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 히알루로니다아제 활성 저해제.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 트랜스글루타미나아제-1 생산 촉진제.
- 제 1항 또는 제 2항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 멜라닌 생산 억제제.
- 제 1항 또는 제 2항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 모유두세포 증식 촉진제.
- 제 1항 또는 제 2항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 음식품.
- 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 외용제.
- 제 1항 또는 제 2항에 따른 당 비함유 파인애플 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
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