CN110403890A - 包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于皮肤美容的组合物 - Google Patents

Abstract

提供一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物。所述组合物可有效地用于皮肤美容、皮肤损伤或皮肤老化的改善及治疗等。

Description

包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于皮肤美容的组 合物

技术领域

本发明涉及一种用于皮肤美容的组合物。

背景技术

在现代社会中，紧致的面部是童颜和健康的象征。许多女性希望以各种方法增加面部饱满丰润度和弹性，并且已经正积极地进行涉及对皮肤美容有用的材料和成分的研究。

一方面，鱼子酱(caviar)是鲟鱼卵加盐的腌制品，是众所周知的被称为世界三大珍味的高级食材。它不仅富含蛋白质、脂肪、糖、维生素等的各种营养素以及如亮氨酸和精氨酸等的必需氨基酸，更富含谷氨酸、丝氨酸和丙氨酸等各种氨基酸。此外，鱼子酱中含有的脂肪主要由胆固醇和卵磷脂组成，并起到再生表皮脂质膜的作用，而丰富的奥米茄-3(omega-3)脂肪酸具有抗衰老效果。因此，一些化妆品包括鱼子酱。

然而，鲟鱼羊水的效果仍然不太知名，而且，鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的混合物对皮肤美容改善的效果仍然没有人知道。

发明内容

本公开的一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于皮肤美容的化妆品组合物。

本公开的另一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于皮肤美容的保健功能食品的组合物。

本公开的另一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于预防或治疗皮肤皱纹或皮肤老化的药物组合物。

本公开的另一方面提供了包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于皮肤美容的化妆品中的用途。

本公开的另一方面提供了包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于预防或治疗皮肤损伤、皮肤皱纹或皮肤老化的药剂中的用途。

本公开的一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于改善皮肤状况的化妆品组合物。本公开的另一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于改善皮肤美容的保健功能食品的组合物。本公开的另一方面提供了一种包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的用于预防或治疗皮肤损伤或皮肤老化的药物组合物。本公开的另一方面提供了包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于皮肤美容的化妆品中的用途。本公开的另一方面提供了包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于预防或治疗皮肤损伤、皮肤皱纹或皮肤老化的药剂中的用途。

在本公开中，术语“鱼子酱”不仅用于表示鲟鱼卵加盐的腌制品，还包括天然鲟鱼卵和其所有加工产品。因此，“鱼子酱”可与“鲟鱼卵”互换使用。一方面，鲟鱼羊水可以通过使用在不切开鲟鱼肚子的情况下挤压出鲟鱼卵以从鲟鱼采获鱼卵的方法时获得。所述鲟鱼卵和鲟鱼羊水可以直接从鲟鱼中采获，或者通过购买商业销售的产品轻松能够获得。

术语“皮肤美容”是指以皮肤皱纹改善、体积增强，弹性改善或皮肤再生等方法将因皮肤损伤或皮肤老化而受损的皮肤恢复到皮肤受损之前的状态。所述皮肤包括身体的所有部位，包括面部、手部、手臂、腿部、脚部、胸部、腹部、背部、臀部和头皮。

术语“皮肤损伤”是包括皮肤组织或细胞的临床和美容观点上的损伤，其包括外部物理损伤、化学物质、细菌、真菌和病毒等的渗透、暴露在紫外线下、皮肤水分流失、老化引起的皱纹、自由基(活性氧)引起的氧化、皮肤色素沉着、皮肤炎症、脂溢性皮炎、发红(红肿和红斑)、浮肿、苔藓样硬化、湿疹、瘙痒感(瘙痒)和特应性皮炎。

术语“皮肤老化”包括随时间的内源性老化和外部环境引起的外源性老化。所述皮肤老化可以包括皮肤皱纹、斑痕和痣等。所述皮肤皱纹可以是由于皮肤衰老而产生的细线条纹。皮肤皱纹可以是由光老化、年龄、面部表情、水分不足或其组合而引起。所述光老化可以通过暴露于紫外线(包括UVA、UVB和UVC)而使皮肤老化。所述皮肤皱纹改善可以抑制或阻碍皮肤皱纹的产生，或者缓和已经形成的皱纹。

所述提取物可以使用水、丙酮、醇，例如C1-C6醇、C3-C6多元醇或其混合物作为溶剂来提取。所述C1-C6醇包括甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、1，3-丙二醇、丁醇、戊醇或己醇。所述溶剂可以是例如水和醇的混合物，即醇水溶液。醇水溶液的醇浓度可以是1(w/w)％至100(w/w)％，例如，10(w/w)％至90(w/w)％、20(w/w)％至90(w/w)％、30(w/w)％至90(w/w)％、40(w/w)％至90(w/w)％、50(w/w)％至90(w/w)％、60(w/w)％至80(w/w)％，或70(w/w)％。所述醇水溶液可以是甲醇、乙醇或丁醇水溶液。另外，所述提取物可以以1∶1至1∶20、1∶5至1∶15，或1∶8至1∶12的浓度与水混合。例如，所述鲟鱼卵提取物可以用60(w/w)％至80(w/w)％的醇水溶液来提取，所述鲟鱼羊水提取物可以以1∶1至1∶20、1∶5至1∶15，或1∶8至1∶12的浓度与水混合。

所述鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的混合比例可以是例如1∶0.25至1∶4、1∶0.8至1∶1.2，或1∶1。当鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的混合比例小于上述范围或超过上述范围时，存在不会产生根据鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物结合的协同效应的问题。

所述提取物可以通过本领域的常规方法来提取，例如，加温提取、加压提取、超声波提取、热水提取、回流冷却提取、亚临界提取或超临界提取。

所述提取可以在4℃至70℃的温度下进行，例如在以下温度下进行：4℃至50℃、4℃至40℃、4℃至30℃、10℃至70℃、15℃至70℃、20℃至70℃、4℃至50℃、10℃至50℃、4℃至40℃、4℃至30℃、10℃至40℃、10℃至35℃，或10℃至30℃，或室温。所述提取时间可以根据所选温度和提取方法而不同，例如可以是1小时至3天、1小时至2天、1小时至1天、5小时至3天、5小时至2天、5小时至1天、10小时至3天、15小时至2天、15小时至36小时、18小时至30小时、1天至3天、1天至2天，或24小时。例如，可以将提取原料在室温下浸入提取溶剂中12小时至48小时，然后进行超声波提取1小时至8小时。

所述提取可以重复一次或以上，例如可以重复一次至五次，每次提取可以以相同方法或以不同方法进行。所述提取可以进一步包括通过已知方法如过滤分离残余物和提取物的过程。所述提取还可以包括通过如在减压下浓缩的已知方法从所得提取物中除去溶剂。所述提取还可以对所得提取物进行包括如氮气干燥或冻结干燥的干燥来制备干燥的提取物。所述提取物可以是浓缩液的形式，或者在干燥后根据需要使用如二甲基亚砜(DMSO)等适当的溶剂再次溶剂化的形式，或通过冻结干燥的粉末形式。

所述组合物可进一步包括所述提取物的馏分。馏分(fraction)是指所述提取物被分成其一部分的成分的物质，即即分馏(fractionation)物质，并且可以根据本领域公知的方法通过分馏获得。

所述组合物可以包括基于组合物的总重量的以下重量百分比的鲟鱼卵提取物或鲟鱼羊水提取物：0.001重量百分比至80重量百分比、0.01重量百分比至60重量百分比、0.01重量百分比至40重量百分比、0.01重量百分比至30重量百分比、0.01重量百分比至20重量百分比、0.01重量百分比至10重量百分比、0.01重量百分比至5重量百分比、0.05重量百分比至60重量百分比、0.05重量百分比至40重量百分比、0.05重量百分比至30重量百分比、0.05重量百分比至20重量百分比、0.05重量百分比至10重量百分比、0.05重量百分比至5重量百分比、0.1重量百分比至60重量百分比、0.1重量百分比至40重量百分比、0.1重量百分比至30重量百分比、0.1重量百分比至20重量百分比、0.1重量百分比至10重量百分比，或0.1重量百分比至5重量百分比。当小于在上述范围内的0.001重量百分比时，皮肤美容效果可能变弱而并不优选，当超过80重量百分比时，在经济学方面或制备制剂方面并不优选。

所述提取物可以是在分别提取鲟鱼卵和鲟鱼羊水的单独提取物后混合的提取物，或者可以是鲟鱼卵和鲟鱼羊水的混合物的提取物。当分别单独提取鲟鱼卵和鲟鱼羊水时，分别可以使用相同或不同的提取方法和提取条件。提取的鲟鱼卵和鲟鱼羊水，或其提取物的重量比可根据目的而适当调整。例如，鲟鱼卵提取物与鲟鱼羊水提取物的比例可以是1∶0.5至2、1∶0.7至1.5，或1∶0.9至1.1。

所述组合物可以根据其用途包括提取物作为有效量或有效成分。所述有效量可以根据个体而适当选择。所述有效量可以根据包括以下项的因素以及在生理至医学领域中熟知的其他因素来决定：疾病至疾病状况的严重程度、个体的年龄、体重、健康、性别、个体的对提取物的敏感度、施用时间、施用途径和排出比率、施用期间、与所述组合物配合或同时使用的其他组合物。

当所述组合物是化妆品组合物时，提取物可制备为包括以下的剂型：化妆水(润肤液)、柔肤水、爽肤水、收敛剂(Astringent)、乳液、牛奶润肤露(milk lotion)、保湿乳液、营养液、按摩霜、营养霜、保湿霜、手霜、粉底、精华、营养精华、膜、肥皂、洁面泡沫、洁面乳、洁面霜、身体乳液、身体清洁液、悬浮液、凝胶、粉末、粘膏(paste)、面膜或片装面膜或喷雾组合物。可根据本领域常规方法制备此类剂型的组合物。所述化妆品组合物可以进一步包括保存剂、稳定剂、表面活性剂、溶剂、保湿剂、润肤剂、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、pH调节剂、有机和无机颜料、香料、冷感剂或止汗剂。在不损害本发明的目的和效果的范围内，本领域技术人员可以容易地选择诸如上述保湿剂等的附加成分的混合量，该混合量可以是基于组合物的总重量的0.001重量百分比至5重量百分比，具体而言，0.01重量百分比至3重量百分比。

所述提取物可以是用于皮肤美容、预防或改善皮肤损伤的外用剂组合物。所述皮肤外用剂组合物可以制备成本领域常规制备的任何制剂，例如，乳液(emulsion)、面霜、化妆水，乳液、面膜、粉底、乳液(lotion)、美容液和头发化妆品等。具体而言，所述皮肤外用剂组合物可以包括以下制剂：润肤液、柔肤水、爽肤水、收敛剂、乳液、牛奶润肤露、保湿乳液、营养液、按摩霜、营养霜、保湿霜、手霜、粉底、精华、营养精华、膜、肥皂、洁面泡沫、洁面乳、洁面霜、身体乳液和身体清洁液。

当所述组合物是保健食品组合物时，可以制备成本领域已知的常规保健食品的剂型。所述保健食品组合物可以制备为如散剂、颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮液、油剂、糖浆剂、浸渍剂、液剂、萃取剂等的一般剂型，并制备为肉类、香肠、面包、巧克力、糖果类、零食类、饼干类、比萨饼、拉面、其他面类、口香糖类、果冻、包括冰淇淋类的乳制品、各种汤、饮料、茶、饮剂、酒精饮料和维生素复合物的等任意的保健食品形式。为了将所述保健食品制成制剂，可以使用食品学上可接受的载体或添加剂，并且可以将本领域已知的任何载体或添加剂用于制备想要制备的剂型。作为所述添加剂，可以含有各种营养剂、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇、用于碳酸饮料的碳酸化剂等。此外，所述添加剂可以含有用于制备天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些添加剂成分可以单独使用或组合使用，添加剂的比例可以为基于组合物的总重量的0.001重量百分比至5重量百分比，具体地，0.01重量百分比至3重量百分比。

所述保健食品组合物的所述提取物的含量可以根据使用目的(预防或改善)来适当地决定。通常，可以包括食品总重量的0.01重量百分比至15重量百分比，当作为饮料制造时，以100mL为基准，可以含有0.02g至10g的比例，具体地，0.3g至1g的比例。所述饮料可以进一步包括所述提取物之外的其他成分，并且可以进一步包括通常用于饮料的各种香料或天然碳水化合物等。所述天然碳水化合物可以含有如单糖类(例如葡萄糖、果糖等)、二糖类(例如麦芽糖、蔗糖等)、多糖类(例如糊精、环式糊精等)的常规糖以及木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等的糖醇。另外，香料可以含有天然香料(例如：奇异果甜蛋白(Thaumatin)、甜叶菊提取物等)及合成香料(例如：糖精、阿斯巴甜等)。所述天然碳水化合物的比例通常为每100mL饮料约1g至20g，具体地，约5g至12g。

当所述组合物是药物组合物时，可以包括药学上可接受的稀释剂或载体。所述稀释剂可以是乳糖、玉米淀粉、大豆油、微晶纤维素或甘露糖醇，润滑剂可以是硬脂酸镁，滑石或其组合。所述载体可以是赋形剂、崩解剂、结合剂、润滑剂或其组合。所述赋形剂可以是微晶纤维素、乳糖、低取代羟基纤维素或其组合。所述崩解剂可以是羟甲基纤维素钙、淀粉乙醇酸钠、无水磷酸氢钙或其组合。所述结合剂可以是聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、羟丙基纤维素或其组合。所述润滑剂可以是硬脂酸镁、二氧化硅、滑石或其组合。

本发明人在使用鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的试验中，确认了显着促进脂肪前体细胞向脂肪细胞的分化，以及脂联素的表达水平显着增加。

脂联素(adiponectin)是脂肪细胞在分化期间分泌的脂肪因子。脂联素在人体内诱导各种反应，有助于通过促进皮肤中角质细胞的增殖和迁移来治疗伤口，通过增加胶原蛋白合成来抑制衰老，以及通过增加透明质酸的合成来增强屏障。另外，已知在敏感性皮肤的患者中，脂联素的表达减少，导致疼痛传递物质的表达增加。加上，由于脂肪细胞在皮肤组织的再生中起主要作用，因此将脂肪干细胞和脂肪细胞移植到皮肤中用于皮肤再生的技术是众所周知的。

因此，包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物可有效地用于改善和治疗皮肤美容、皮肤损伤或皮肤老化。

有益效果

包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物可有效地用于改善和治疗皮肤美容、皮肤损伤或皮肤老化。

附图说明

图1显示鲟鱼卵提取物、鲟鱼羊水提取物和其混合提取物的脂联素增加的效果。

具体实施方式

本发明将参考实施例以详细描述下文。然而，这些实施例旨在描述本发明，本发明的范围不限于下面描述的实施例。

比较例1.鱼子酱提取物的制备

通过从国内鲟鱼养殖公司ALMAS CAVIAR购入鱼子酱，并制备了鱼子酱提取物。为了制备鱼子酱提取物，将100g鱼子酱放入1L含70％乙醇的溶液中，然后在室温下密封72小时。用威迪文(Waterman)滤纸在减压下过滤提取液，然后除去固体材料，并将剩余的提取液在配备有冷凝器的真空旋转蒸馏装置中进行浓缩。然后悬浮在1L蒸馏水中，为了进行灭菌，并使用0.2μm注射器过滤器进行了灭菌。

比较例2.鲟鱼羊水提取物的制备

为了制备鲟鱼羊水提取物，将100g鲟鱼羊水(ALMAS CAVIAR)在减压下通过威迪文滤纸过滤以除去固体材料，然后在室温下悬浮在1L蒸馏水中24小时，为了进行灭菌，并使用0.2μm注射器过滤器进行了灭菌。

实施例1.鱼子酱和鲟鱼羊水混合提取物的制备

将所述比较例1和2中获得的鱼子酱提取物和鲟鱼羊水提取物以1∶1的比例混合，并用于以下试验例中。

试验例1.确认在脂肪干细胞中的分化诱导

从美国模式培养物集存库(ATCC)购入成为脂肪细胞之前的一种干细胞3T3-L1细胞，并在加入了10％小牛血清(BCS，美国)的DMEM培养基(美国)上在37℃和5％二氧化碳的條件下进行培养。然后，使用3T3-L1细胞测量比较例1、比较例2和实施例1的提取物的脂肪分化诱导效果，并将脂肪分化诱导效果与1μM被称为脂肪诱导物质的曲格列酮(TR0)进行比较以比较脂肪诱导效果。

具体而言，如下。

将3T3-L1细胞稀释至1X 10⁵个细胞/孔的浓度，并将细胞分株到6孔板中后培养。培养2天后，当细胞生长到约80％程度时，将培养基替换成分化诱导培养基(DMEM，10％胎牛血清((FBS)，美国)、1μM地塞米松(Sigma Co.，美国)、0.mM 5甲基异丁基黄嘌呤(IBMX，Sigma，美国)、胰岛素(Sigma，美国))，并将干细胞分化为脂肪细胞。在试验组的情況下，在诱导脂肪细胞分化时，对实施例1、比较例1和比较例2分别以1％的浓度进行处理后，在37℃和5％二氧化碳的條件下进行培养。

在开始诱导分化后14天，除去细胞培液，并用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤细胞，然后用10％福尔马林处理0.5ml/孔以固定细胞。用60％异丙醇洗涤固定的细胞，并完全干燥。然后，将溶解了油红O(Oil Red-O)在60％异丙醇中的染色液以1ml/孔进行处理，并将脂肪细胞中的脂质体进行染色10分钟。然后，为了确认染色脂肪的含量，加入100％异丙醇并将混合物搅拌10分钟以溶出在中性脂肪中渗出的油红O。将溶出的溶液转移到1.5ml微量管中，并在20℃下以10,000×g进行离心，然后将200μl上清液转移至96孔ELISA板中，并在510nm波长下测量吸光度。结果如下表1所示。

【表1】

内容	油红O染色率(％)
		无处理组	100％
曲格列酮0.1μM	433.1％
		比较例1(1％)	360.1％
比较例2(1％)	339.4％
		实施例1(1％)	422.5％

如表1所示，可以确认到与处理比较例1和2的提取物的情况相比，当处理实施例1的混合提取物时的吸光度增加，特别是显示了与用作阳性对照组的曲格列酮类似的吸光度。因此，可以确认实施例1的混合提取物显着促进脂肪干细胞向脂肪细胞的分化。

试验例2.确现对在脂肪干细胞中的脂联素表达量的效果

将3T3-L1细胞(ATCC，美国)在加入了10％小牛血清(BCS，美国)的DMEM培养基(美国)上在37℃和5％二氧化碳的條件下进行培养。此后，使用3T3-L1细胞测量比较例1、比较例2和实施例1的提取物的脂联素表达量，并使用1μM的曲格列酮作为阳性对照组。具体而言，如下。

将3T3-L1细胞稀释至1X 10⁵个细胞/孔的浓度，并将细胞分株到6孔板中后培养24小时。然后，对实施例1、比较例1和比较例2分别以1％的浓度进行处理后，在37℃和5％二氧化碳的條件下进行培养24小时。用磷酸盐缓冲盐水洗涤培养的细胞，并加入1ml Trizol试剂回收细胞。加入0.2ml氯仿(Chloroform)(1/5比例的Trizol试剂)进行涡流(voltexing)处理，并在通过在4℃下以14,000rpm进行离心15分钟来获得上清液。向上清液加入0.5ml异丙醇，并在进行反应10分钟后，以14000rpm进行离心15分钟来获得沉淀物。除去上清液并用200μl 100％乙醇(EtOH)洗涤两次。然后将沉淀物在室温下完全干燥后，溶解在20μl至30μlDEPC水中。将溶解在DEPC中的RNA定量，并使用每组相同量的RNA合成cDNA。使用作为花青染料的赛博格林(SYBR Green master mix)以合成的cDNA为靶标进行实时聚合酶链反应(PCR)，以最终评价脂联素的基因表达程度。

结果如图1所示。如图1所示，可以确认与单独处理的比较例1和2相比，当处理实施例1的提取物时的表达水平有显着增加，并显示出比用作阳性对照组的曲格列酮有更高的表达增加。

Claims (9)

1.一种用于皮肤美容的化妆品组合物，其包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物。

2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述鲟鱼卵提取物是60(w/w)％至80(w/w)％的乙醇提取物。

3.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述鲟鱼羊水提取物与水以1∶8至1∶12(w/w)的浓度混合。

4.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物增加脂肪干细胞向脂肪细胞的分化或脂联素的表达量。

5.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其中，所述鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物以1∶0.25至1∶4的比例混合。

6.一种用于皮肤美容的保健功能食品的组合物，其包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物。

7.一种用于预防或治疗皮肤皱纹或皮肤老化的药物组合物，其包括鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物。

8.一种包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于皮肤美容的组合物中的用途。

9.一种包含鲟鱼卵提取物和鲟鱼羊水提取物的组合物在制备用于预防或治疗皮肤损伤、皮肤皱纹或皮肤老化的药剂中的用途。