KR101266574B1 - 용기에 담긴 밀크 커피 음료 - Google Patents

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Abstract

우수한 혈압 강하 작용을 갖는 용기에 담긴 밀크 커피 음료의 제공.
하기의 조건 (A) ∼ (C) :
(A) 클로로겐산류 0.01 ∼ 1 질량%,
(B) 하이드록시하이드로퀴논 클로로겐산류량의 0.1 질량% 미만
(C) pH 5.0 ∼ 6.4 인 용기에 담긴 밀크 커피 음료.

Description

용기에 담긴 밀크 커피 음료{CONTAINER-PACKED MILK COFFEE BEVERAGE}
본 발명은 가열 살균 후의 하이드록시하이드로퀴논을 억제한 혈압 강하 작용을 갖는 용기에 담긴 밀크 커피 음료에 관한 것이다.
고혈압증의 치료약으로는 신경 인자에 의한 조절계에 작용하는 각종 신경 차단약, 액성 인자에 관련되는 조절계에 작용하는 ACE 저해약, AT 수용체 길항약, 혈관 내피 유래 물질에 의한 조절계에 관련되는 Ca 길항약, 신장에서의 체액 조절계에 관련되는 강압 (降壓) 이뇨약 등의 의약품을 들 수 있고, 이들은 주로 의료 기관에서 중증 고혈압 환자에게 사용된다. 그러나, 현상황에 있어서 고혈압증 대책의 목적으로 사용되는 의약품은 유효성에 관해서는 만족할 수 있는 반면 적지 않게 존재하는 부작용 때문에 환자에게 가해지는 부담은 크다.
이 때문에 식이 요법, 운동 요법, 음주·흡연 제한 등의 생활 개선에 의한 일반 요법이 경증을 포함하는 정상 고치 (高値) 고혈압증자에서부터 중증 고혈압증자에게 널리 적용되고 있다. 일반 요법의 중요성 인식이 높아짐에 따라, 특히 식생활 개선의 중용성이 계속 전해지고 있다. 그리고 혈압 강하 작용을 갖는 식품으로부터 식품 유래의 강압 소재의 탐색이 활발히 이루어지고, 그 유효 성분의 분리·동정(同定)이 수많이 실시되고 있다.
이 중, 커피 등의 식품에 함유되어 있는 클로로겐산, 카페산, 페룰산 등이 우수한 혈압 강하 작용을 나타내는 것이 보고되어 있다 (특허 문헌 1 ∼ 3). 그러나, 클로로겐산류를 다량으로 함유하는 것이 알려져 있는 커피 음료에서는 명확한 혈압 강하 작용이 확인되지 않고, 반대로 혈압을 상승시킨다는 보고도 있다 (비특허 문헌 1).
특허 문헌 1 : 일본 공개특허공보 2002-363075호
특허 문헌 2 : 일본 공개특허공보 2002-22062호
특허 문헌 3 : 일본 공개특허공보 2002-53464호
비특허 문헌 1 : Eur.J.Clin.Nutr.,53 (11), 831 (1999)
발명의 개시
본 발명은 하기 조건 (A) ∼ (C) :
(A) 클로로겐산류 0.01 ∼ 1 질량%,
(B) 하이드록시하이드로퀴논 클로로겐산류량의 0.1 질량% 미만
(C) pH 5.0 ∼ 6.4 인 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제공하는 것이다.
발명의 상세한 설명
본 발명은 우수한 고혈압 개선 작용을 갖고, 통상 섭취할 수 있는 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제공하는 것에 관한 것이다.
본 발명자는 커피 음료가 클로로겐산을 함유하고 있음에도 불구하고 충분한 혈압 강하 작용을 나타내지 않는 것에 주목하여, 혈압 강하 작용과 커피 음료 성분의 관계에 대하여 여러 가지 검토한 결과, 커피 음료에 함유되어 있는 하이드록시하이드로퀴논이 클로로겐산류의 혈압 강하 작용을 저해하고 있는 것을 알아내었다. 그리고, 클로로겐산류량을 일정 범위로 유지하고, 하이드록시하이드로퀴논 함량을 통상 함유되는 양보다 충분히 적은 일정량 이하로 저하시키면, 우수한 혈압 강하 작용을 갖는 커피 조성물이 얻어지는 것을 알아내었다.
그러나, 이 커피 조성물에 유성분을 배합하여 용기에 담긴 밀크 커피 음료로 한 경우, 하이드록시하이드로퀴논 함량을 저하시켜도 가열 살균 처리 공정에서 하이드록시하이드로퀴논이 증가되는 것이 판명되었다. 그래서 더 검토한 결과, 음료 중의 PH 를 일정 범위로 함으로써, 가열 살균 처리에 의한 하이드록시하이드로퀴논의 증가를 억제할 수 있고, 또한 풍미가 양호한 용기에 담긴 밀크 커피 음료가 얻어지는 것을 알아내었다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 우수한 고혈압 개선 작용, 즉 혈압 강하 작용 또는 혈압 상승 억제 작용을 갖고 또한 장기 계속 섭취할 수 있다. 따라서, 본 발명의 밀크 커피 음료는 고혈압 개선용의 의약으로서, 나아가서는 혈압 강하를 위하여 또는 혈압 상승 억제를 위하여 사용되는 취지, 또는 혈압이 높은 분에게라고 표시된 음료로서 유용하다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 혈압 강하 작용, 혈압 상승 억제 작용, 및 맛의 면에서 (A) 클로로겐산류를 0.01 ∼ 1 질량% 함유하는데, 바람직하게는 0.05 ∼ 0.8 질량%, 보다 바람직하게는 0.1 ∼ 0.6 질량%, 더욱 바람직하게는 0.13 ∼ 0.5 질량%, 특히 바람직하게는 0.15 ∼ 0.4 질량% 함유한다. (A) 당해 클로로겐산류로는 (A1) 모노카페오일퀸산, (A2) 페룰로일퀸산, (A3) 디카페오일퀸산의 3 종을 함유한다. 여기서 (A1) 모노카페오일퀸산으로는 3-카페오일퀸산, 4-카페오일퀸산 및 5-카페오일퀸산에서 선택되는 1 종 이상을 들 수 있다. 또 (A2) 페룰로일퀸산으로는 3-페룰로일퀸산, 4-페룰로일퀸산 및 5-페룰로일퀸산에서 선택되는 1 종 이상을 들 수 있다. (A3) 디카페오일퀸산으로는 3,4-디카페오일퀸산, 3,5-디카페오일퀸산 및 4,5-디카페오일퀸산에서 선택되는 1 종 이상을 들 수 있다. 당해 클로로겐산류의 함유량은 고속 액체 크로마토그래피 (HPLC) 로 측정할 수 있다. HPLC 에 있어서의 검출 수단으로는 UV 검출이 일반적인데, CL (화학 발광) 검출, EC (전기 화학) 검출, LC-Mass 검출 등에 의해 더욱 고감도로 검출할 수도 있다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료의 하이드록시하이드로퀴논 (B) 의 함유량은 클로로겐산류량에 대하여 0.1 질량% 미만이다. 클로로겐산류량에 대하여 하이드록시하이드로퀴논량이 0.1 질량% 미만이면 클로로겐산류의 혈압 강하 작용이 충분히 발휘된다. 클로로겐산류량에 대하여 하이드록시하이드로퀴논량은 바람직하게는 0.001 ∼ 0.08 질량%, 보다 바람직하게는 0.002 ∼ 0.05 질량%, 더욱 바람직하게는 0.003 ∼ 0.04 질량%, 특히 바람직하게는 0.004 ∼ 0.03 질량% 이다. 또한, 클로로겐산류량에 대하여 하이드록시하이드로퀴논량이 0.05 질량% 이하이면 클로로겐산의 혈압 강하 작용이 현저하게 나타난다. 여기서, 본 발명 음료 등 중의 하이드록시하이드로퀴논 함량은 0 이어도 된다.
당해 하이드록시하이드로퀴논 함량은 고속 액체 크로마토그래피 (HPLC) 로 측정할 수 있다. HPLC 에 있어서의 검출 수단으로는 UV 검출이 일반적인데 CL (화학 발광) 검출, EC (전기 화학) 검출, LC-Mass 검출 등에 의해 더욱 고감도로 검출할 수도 있다. 특히 EC (전기 화학) 검출이 극미량의 하이드록시하이드로퀴논을 측정할 수 있는 면에서 바람직하다. 또한, HPLC 에 의한 하이드록시하이드로퀴논 함량의 측정에 있어서는 커피 음료 등을 농축시킨 후에 측정할 수도 있다.
또한 하이드록시하이드로퀴논 함량은 HPLC 로 직접 측정할 수도 있는데, 용기에 담긴 밀크 커피 음료 또는 밀크 커피 조성물로부터 각종 크로마토그래피에 의해 하이드록시하이드로퀴논을 농축시키고, 그 농축 획분의 양을 측정함으로써도 정량할 수 있다.
또한, 클로로겐산류량의 측정에 있어서는 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 개봉 후 즉시, 예를 들어 50mM 아세트산, 10mM 아세트산 나트륨, 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 5% 아세토니트릴 용액으로 10 배로 희석한 용액, 또는 40 ∼ 50mM 아세트산, 9 ∼ 10mM 아세트산 나트륨, 0.09 ∼ 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 4 ∼ 5(V/V)% 아세토니트릴 용액계로 측정하는 것이 바람직하다. 또한, 하이드록시하이드로퀴논의 측정에 있어서는, 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 개봉 후 즉시, 0.5(W/V)% 인산, 0.5mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 5(V/V)% 메탄올 용액으로 2 배로 희석한 용액, 또는 0.25 ∼ 0.5(W/V)% 인산, 0.25 ∼ 0.5mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 2.5 ∼ 5(V/V)% 메탄올 용액계로 측정하는 것이 바람직하다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 가열 살균 처리 후의 pH 가 5.0 ∼ 6.4, 바람직하게는 5.4 ∼ 6.4, 더욱 바람직하게는 5.5 ∼ 6.3 이다. 음료 중의 pH 가 5.0 미만이면 하이드록시하이드로퀴논의 생성량은 낮아지지만 음료의 풍미나 안정성이 나빠지고, 한편 pH 6.4 를 초과하면 하이드록시하이드로퀴논의 생성량이 증가된다. pH 조정은 가열 살균 처리에 의한 pH 의 변화를 미리 시험해 두고, 가열 살균 전의 pH 를 가열 살균 처리 후의 pH 를 예측하여 미리 조정해 두는 것이 바람직하다. 이는 가열 살균 전후에는 pH 가 변화되기 때문이다. 따라서, 가열 살균 전의 밀크 커피 조성물의 pH 는 대략 5.2 ∼ 6.7, 바람직하게는 5.6 ∼ 6.6, 더욱 바람직하게는 5.7 ∼ 6.5 이다. 또 가열 살균한 후, 무균하에서 pH 를 상기 범위가 되도록 되돌리는 등의 조작에 의해 실시할 수도 있다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 하이드록시하이드로퀴논 함유량을 저감시키는 것 이외에는 통상적인 커피 성분을 그대로 함유하고 있는 것이 바람직하다.
또, 본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 H2O2 (과산화 수소) 의 함유량이 1ppm 이하, 보다 바람직하게는 0.1ppm 이하, 더욱 0.05ppm 이하, 특히 0.01ppm 이하인 것이 커피 본래의 풍미면에서 바람직하다. 과산화 수소의 측정은 통상 사용되는 과산화 수소계를 사용하여 실시할 수 있고, 예를 들어 센트럴 과학사 제조의 고감도 과산화 수소계 슈퍼 오리텍터 모델 5 (SUPER ORITECTOR MODEL5) 등을 사용할 수 있다. 특히 H2O2 는 캔 개봉 전에는 살균 처리에 의해 손실되어 있지만, 캔 개봉에 의해 공기에 접하면 시간 경과와 함께 서서히 증가하는 경향이 있기 때문에 일본 특허 문헌 제3732782호, 제3706339호에 기재된 측정 조건에 준거하여 캔 개봉 후 신속하고 빠르게 분석한다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료에 사용하는 커피 원두의 종류는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 브라질, 콜롬비아, 탄자니아, 모카 등을 들 수 있다. 커피종으로는 아라비카종, 로브스타종 등이 있다. 커피 원두는 1 종이어도 되고 복수종을 블렌드하여 사용해도 된다. 배전 (焙煎) 커피 원두의 배전 방법에 대해서는 특별히 제한되지는 않고 배전 온도, 배전 환경에 대해서도 아무런 제한은 없어 통상적인 방법을 채용할 수 있다. 또한 그 원두로부터의 추출 방법에 대해서도 전혀 제한되지는 않고, 예를 들어 배전 커피 원두 또는 그 분쇄물로부터 물 ∼ 열수 (0 ∼100℃) 를 사용하여 10 초 ∼ 30 분 추출하는 방법을 들 수 있다. 추출 방법은 보일링식, 에스프레소식, 사이폰식, 드립식 (페이퍼, 플란넬 등) 등을 들 수 있다.
또, 본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료에 사용하는 유성분으로는 생유, 우유, 전분유, 탈지 분유, 생크림, 농축유, 탈지유, 부분 탈지유, 연유, 식물유 등을 들 수 있다. 이들 유성분은 합계로 용기에 담긴 밀크 커피 음료 중에 유고형분 환산으로 0.1 ∼ 10 질량%, 더욱 0.5 ∼ 6 질량%, 특히 1 ∼ 4 질량% 함유하는 것이 바람직하다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 음료 100g 당 커피 원두를 생원두 환산으로 1g 이상 사용한 것을 말하고, 바람직하게는 커피 원두를 2.5g 이상 사용하고 있는 것이다. 더욱 바람직하게는 커피 원두를 5g 이상 사용하고 있는 것이다. 또, 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 싱글 스트렝스인 것이 바람직하다. 여기서 싱글 스트렝스란 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 개봉한 후, 상태 (常態) 로서 엷게 하지 않고 그대로 마실 수 있는 것을 말한다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료에 사용하는 밀크 커피 조성물은 배전 커피 원두 추출물을 흡착제 처리하여 하이드록시하이드로퀴논 함량을 저감시키고, pH 5.2 ∼ 6.7 로 조정함으로써 얻어진다. 흡착제로는 활성탄, 역상 크로마토그래프 담체 등을 들 수 있다. 보다 구체적으로는 배전 커피 원두 추출액 또는 배전 커피 원두 추출액의 건조품의 수용액에 흡착제를 첨가하여 0 ∼ 100℃ 에서 10 분 ∼ 5 시간 교반한 후 흡착제를 제거하면 된다. 여기서, 흡착제는 배전 커피 원두 중량에 대하여 활성탄의 경우에는 0.02 ∼ 1.0 배, 역상 크로마토그래프 담체의 경우에는 2 ∼ 100 배 사용하는 것이 바람직하다. 활성탄으로는 미크로 구멍 영역에 있어서의 평균 세공 반경이 5 옹스트롬 (Å) 이하, 나아가서는 2 ∼ 5 옹스트롬의 범위인 것이 바람직하고, 특히 3 ∼ 5 옹스트롬의 범위인 것이 바람직하다. 본 발명에 있어서의 미크로 구멍 영역이란 10 옹스트롬 이하를 나타내고, 평균 세공 반경은 MP 법으로 측정하여 얻은 세공 분포 곡선의 피크 탑을 나타내는 세공 반경의 값으로 하였다. MP 법이란 문헌 (Colloid and Interface Science, 26, 46 (1968)) 에 기재된 세공 측정법으로서, 주식회사 스미카 분석 센타, 주식회사 토오레 리서치 센터 등에서 채용되고 있는 방법이다.
또, 활성탄의 종류로는 야자 껍질 활성탄이 바람직하고, 더욱 수증기 부활화 야자 껍질 활성탄이 바람직하다. 활성탄의 시판품으로는 시라사기 WH2C (닛폰 엔바이로 케미컬즈), 타이카쿠 CW (니무라 화학), 쿠라레코르 GW (쿠라레 케미컬) 등을 사용할 수 있다. 역상 크로마토그래프 담체로는 YMC·ODS-A (YMC), C18 (GL 사이언스) 등을 들 수 있다.
이들 흡착제 처리법 중, 특정한 활성탄을 사용한 흡착제 처리법은 클로로겐산류량을 저하시키지 않고 선택적으로 하이드록시하이드로퀴논 함량을 저감시킬 수 있을 뿐만 아니라, 공업적으로도 유리하고 또한 칼륨 함량을 저하시키지 않는 (질량비로 1/5 이상, 특히 1/2 이상 유지) 면에서도 바람직하다.
본 발명에 있어서의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 HPLC 에 의한 분석에 있어서의, 갈산을 표준 물질로 한 경우의 갈산에 대한 상대 유지 시간이 0.54 ∼ 0.61 인 시간 영역에 실질적으로 피크를 갖지 않는 것이 바람직하다. 당해 시간 영역에 실질적으로 피크를 갖지 않는 것을 확인하려면, 일반적인 HPLC 를 사용할 수 있고, 예를 들어 용리액으로서 0.05M 아세트산 수용액과 0.05M 아세트산 100% 아세토니트릴 용액의 그레이디언트를 사용하고 ODS 칼럼을 사용하여 자외선 흡광 광도계 등에 의해 검출함으로써 확인할 수 있다.
본 발명에 있어서 갈산에 대한 상대 유지 시간이 0.54 ∼ 0.61 인 시간 영역에 실질적으로 피크를 갖지 않는다는 것은 갈산의 1ppm 용액을 분석시의 면적치를 S1 로 하고, 동 조건에서 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 분석하였을 때의 상기 시간의 영역에 용출되는 성분에서 유래하는 피크 면적의 총합을 S2 로 하였을 때, S2/S1 < 0.01 인 것을 의미한다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료에는 자당, 글루코오스, 프룩토오스, 자일로오스, 과당 포도당액, 당 알코올 등의 당분, 항산화제, pH 조정제, 유화제, 향료 등을 첨가할 수 있다.
용기에 담긴 밀크 커피 음료 중의 모노카페오일퀸산의 구성비로는 4-카페오일퀸산/3-카페오일퀸산 질량비가 0.6 ∼ 1.2 이고, 5-카페오일퀸산/3-카페오일퀸산 질량비가 0.01 ∼ 3 인 것이 바람직하다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료의 용기는 PET 병, 캔 (알루미늄, 스틸), 종이, 레토르트 파우치, 병 (유리) 등의 용기를 사용할 수 있다. 이 경우, 50 ∼ 2500mL 의 용기를 사용할 수 있다. 용기로는 특히, 커피 중의 성분의 변화를 방지하는 관점에서 산소 투과도가 낮은 용기가 바람직하고, 예를 들어 알루미늄이나 스틸 등의 캔, 유리제의 병 등을 사용하는 것이 양호하다. 캔이나 병의 경우, 리캡 가능한 리시일 (reseal) 형의 것도 포함된다. 여기서 산소 투과도란 용기·필름 산소 투과율 측정기로 20℃, 상대 습도 50% 의 환경하에서 측정한 산소 투과도 (cc·㎜/㎡·day·atm) 로서 산소 투과도가 5 이하, 더욱 3 이하, 특히 1 이하이면 보다 바람직하다.
용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제조하는 경우 통상 살균 처리되는데, 당해 살균 처리는 금속캔과 같이 용기에 충전한 후, 가열 살균할 수 있는 경우에 있어서는 식품 위생법에 정해진 살균 조건에서 실시된다. PET 병, 종이 용기와 같이 레토르트 살균할 수 없는 것에 대해서는, 미리 식품 위생법에 정해진 조건과 동등한 살균 조건, 예를 들어 플레이트식 열교환기로 고온 단시간 살균한 후, 일정한 온도까지 냉각시켜 용기에 충전하는 등의 방법이 채용된다.
본 발명의 용기에 담긴 밀크 커피 음료는 고혈압 개선 작용을 갖는 클로로겐산류를 유효량 함유하고 있고, 또한 가열 살균 처리 후에도 클로로겐산류의 고혈압 개선 작용을 저해시키고 있는 하이드록시하이드로퀴논량이 저감되어 있기 때문에, 혈압 강하용, 또는 혈압 상승 억제 의약 조성물, 혈압 강하용 음료, 혈압 상승 억제 음료로서 유용하다.
클로로겐산류 및 하이드록시하이드로퀴논의 분석법은 다음과 같다.
클로로겐산류의 분석 방법
용기에 담긴 밀크 커피 음료 또는 밀크 커피 조성물의 클로로겐산류의 분석법은 다음과 같다. 분석 기기는 HPLC 를 사용하였다. 장치의 구성 유닛의 형번은 다음과 같다. UV-VIS 검출기 : L-2420 ((주) 히타치 하이테크놀로지즈), 칼럼 오븐 : L-2300 ((주) 히타치 하이테크놀로지즈), 펌프 : L-2130 ((주) 히타치 하이테크놀로지즈), 오토 샘플러 : L-2200 ((주) 히타치 하이테크놀로지즈), 칼럼 : Cadenza CD-C18 내경 4.6㎜ × 길이 150㎜, 입자 직경 3㎛ (인택트 (주)).
분석 조건은 다음과 같다. 샘플 주입량 : 10μL, 유량 : 1.0mL/min, UV-VIS 검출기 설정 파장 : 325㎚, 칼럼 오븐 설정 온도 : 35℃, 용리액 A : 0.05M 아 세트산, 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산, 10mM 아세트산 나트륨, 5(V/V)% 아세토니트릴 용액, 용리액 B : 아세토니트릴.
농도 구배 조건
시간 용리액 A 용리액 B
0.0 분 100% 0%
10.0 분 100% 0%
15.0 분 95% 5%
20.0 분 95% 5%
22.0 분 92% 8%
50.0 분 92% 8%
52.0 분 10% 90%
60.0 분 10% 90%
60.1 분 100% 0%
70.0 분 100% 0%
HPLC 로는 시료 1g 을 정칭한 후, 용리액 A 로 10mL 로 메스업하고, 멤브레인 필터 (GL 크로마토디스크 25A, 구멍 직경 0.45㎛, GL 사이언스 (주)) 로 여과한 후 분석에 제공하였다.
클로로겐산류의 유지 시간 (단위 : 분)
(A1) 모노카페오일퀸산 : 5.3, 8.8, 11.6 의 합계 3 점 (A2) 페룰로일퀸산 : 13.0, 19.9, 21.0 의 합계 3 점 (A3) 디카페오일퀸산 : 36.6, 37.4, 44.2 의 합계 3 점. 여기서 구한 9 종의 클로로겐산류의 면적치로부터 5-카페오일퀸산을 표준 물질로 하여 질량% 를 구하였다.
HPLC-전기 화학 검출기에 의한 하이드록시하이드로퀴논의 분석 방법
용기에 담긴 밀크 커피 음료 또는 밀크 커피 조성물의 하이드록시하이드로퀴논의 분석법은 다음과 같다. 분석 기기는 HPLC-전기 화학 검출기 (쿠로메트릭형) 인 쿠로어레이 시스템 (모델 5600A, 개발·제조 : 미국 ESA 사, 수입·판매 : MC 메디컬 (주)) 을 사용하였다. 장치의 구성 유닛의 명칭·형번은 다음과 같다.
아나리티컬 셀 : 모델 5010, 쿠로어레이 오거나이저, 쿠로어레이 엘렉트로닉스 모듈·소프트 웨어 : 모델 5600A, 용매 송액 모듈 : 모델 582, 그레이디언트 믹서, 오토 샘플러 : 모델 542, 펄스 댐퍼, 데가서 : Degasys Ultimate DU3003, 칼럼 오븐 : 505. 칼럼 : CAPCELL PAK C18 AQ 내경 4.6㎜ × 길이 250㎜ 입자 직경 5㎛ ((주) 시세이도).
분석 조건은 다음과 같다.
샘플 주입량 : 10μL, 유량 : 1.0mL/min, 전기 화학 검출기의 인가 전압 : 0mV, 칼럼 오븐 설정 온도 : 40℃, 용리액 A : 0.1(W/V)% 인산, 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산, 5(V/V)% 메탄올 용액, 용리액 B : 0.1(W/V)% 인산, 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산, 50(V/V)% 메탄올 용액.
용리액 A 및 B 의 조제에는 고속 액체 크로마토그래피용 증류수 (칸토 화학 (주)), 고속 액체 크로마토그래피용 메탄올 (칸토 화학 (주)), 인산 (특급, 와코 쥰야꾸 공업 (주)), 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산 (60% 수용액, 토쿄 화성 공업 (주)) 을 사용하였다.
농도 구배 조건
시간 용리액 A 용리액 B
0.0 분 100% 0%
10.0 분 100% 0%
10.1 분 0% 100%
20.0 분 0% 100%
20.1 분 100% 0%
50.0 분 100% 0%
시료 5g 을 정칭한 후 0.5(W/V)% 인산, 0.5mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산, 5(V/V)% 메탄올 용액으로 10mL 로 메스업하고, 이 용액에 대하여 원심 분리하여 상청의 분석 시료를 얻었다. 이 상청에 대하여, 본도에르토 SCX (고상 충전량 : 500㎎, 레저버 용량 : 3mL, GL 사이언스 (주)) 에 통액하고, 첫 통과액 약 0.5mL 를 제거하여 통과액을 얻었다. 이 통과액에 대하여 멤브레인 필터 (GL 크로마토디스크 25A, 구멍 직경 0.45㎛, GL 사이언스 (주)) 로 여과하고 신속하게 분석에 제공하였다.
상기한 조건에 있어서의 HPLC-전기 화학 검출기에 의한 분석에 있어서, 하이 드록시하이드로퀴논의 유지 시간은 6.38 분이었다. 얻어진 피크의 면적치로부터 하이드록시하이드로퀴논 (와코 쥰야꾸 공업 (주)) 을 표준 물질로 하여 질량% 를 구하였다.
실시예 1
중배전도의 커피 원두에 대하여 8 배량의 이온 교환수 (95℃) 로 추출하여 커피 추출액을 얻었다. 이어서 이 커피 추출액 중의 Brix 를 측정하고, Brix 에 대하여 50 중량% 의 양의 활성탄 (시라사기 WH2C) 을 충전한 칼럼 (내경 45㎜, 길이 150㎜) 을 준비하였다. 그 후, 활성탄을 충전한 칼럼에 온도 25℃, SV8[1/용량[㎥]/유량[㎥/hr]] 의 조건하에서 커피 추출액을 통액하고, 활성탄 처리하여 하이드록시하이드로퀴논을 제거한 커피 조성물을 얻었다.
이렇게 하여 얻어진 하이드록시하이드로퀴논을 제거한 커피 조성물 중의 클로로겐산량을 측정하고 이온 교환수로 희석하여, 우유를 11.5% 가 되도록 배합하고, 가열 살균 처리 후의 pH 치가 표 1 에 나타내는 값이 되도록 중조로 pH 를 조정하였다. 가열 살균 전의 하이드록시하이드로퀴논은 검출 한계 이하였다 (HPLC-전기 화학 검출기에 의한 하이드록시하이드로퀴논의 분석 방법). 이어서 이렇게 하여 얻어진 커피 조성물을 190g 캔에 충전한 후 밀봉하고, 표 1 에 나타내는 살균 조건에 따라 레토르트 살균 처리하여 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 얻었다. 또 가열 살균한 후의 하이드록시하이드로퀴논은 HPLC-전기 화학 검출기에 의한 하이드록시하이드로퀴논의 분석 방법을 사용하였다.
실시예 2 ∼ 3 및 비교예 1
가열 살균 처리 후의 pH 치가 표 1 에 나타내는 값이 되도록 각각 제어한 것 이외에는 실시예 1 과 동일하게 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제조하였다.
실시예 4
중배전도의 커피 엑기스의 Brix 에 대하여 50 중량% 의 활성탄 (시라사기 WH2C) 을 충전한 칼럼 (내경 45㎜, 길이 150㎜) 에 온도 25℃, SV8[1/용량[㎥]/유량[㎥/hr]] 의 조건하에서 상기 커피 엑기스를 통액하였다.
미리 유화제, 카제인 Na, 탈지 분유를 용해한 용액에 우유, 설탕 수용액, 및 상기 활성탄 처리 커피 엑기스를 혼합하고, 중조를 용해한 수용액을 사용하여 pH 를 조정한 후, CGA 량이 170㎎/100g 이 되도록 이온 교환수로 희석하였다.
얻어진 커피 조성물을 190g 캔에 충전한 후 밀봉하고, 135℃ 에서 100 초간 레토르트 살균 처리하여 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제조하였다.
비교예 2
중배전도, 및 저배전도의 커피 혼합 엑기스의 Brix 에 대하여 50 중량% 의 활성탄 (시라사기 WH2C) 을 충전한 칼럼 (내경 45㎜, 길이 150㎜) 에 온도 25℃, SV8[1/용량[㎥]/유량[㎥/hr]] 의 조건하에서 상기 커피 혼합 엑기스를 통액하였다.
미리 유화제, 카제인 Na, 탈지 분유를 용해한 용액에 우유, 설탕 수용액, 및 상기 활성탄 처리 커피 엑기스를 혼합하고, 중조를 용해한 수용액을 사용하여 pH 를 조정한 후, CGA 량이 350㎎/100g 이 되도록 이온 교환수로 희석하였다.
얻어진, 커피 조성물을 190g 캔에 충전한 후 밀봉하고, 135℃ 에서 100 초간 레토르트 살균 처리하여 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제조하였다.
비교예 3
고배전도의 커피 엑기스의 Brix 에 대하여 50 중량% 의 활성탄 (모르시본 X2M) 을 충전한 칼럼 (내경 45㎜, 길이 150㎜) 에 온도 25℃, SV8[1/용량[㎥]/유량[㎥/hr]] 의 조건하에서 상기 커피 엑기스를 통액하였다.
미리 유화제, 카제인 Na, 탈지 분유를 용해한 용액에 우유, 설탕 수용액, 및 상기 활성탄 처리 커피 엑기스를 혼합하고, 중조를 용해한 수용액을 사용하여 pH 를 조정한 후, CGA 량이 170㎎/100g 이 되도록 이온 교환수로 희석하였다.
얻어진 커피 조성물을 190g 캔에 충전한 후 밀봉하고, 127℃ 에서 11 분간 레토르트 살균 처리하여 용기에 담긴 밀크 커피 음료를 제조하였다.
결과
표 1 및 표 2 에 나타낸 바와 같이, 가열 살균 처리 후의 pH 를 5.0 ∼ 6.4 로 제어함으로써 가열 살균한 후의 하이드록시하이드로퀴논의 증가가 억제되는 것을 알 수 있었다.
<클로로겐산의 측정 전처리의 구체예>
용기에 담긴 밀크 커피를 개봉 후 즉시 1g 을 정칭한 후, 용리액 A (50mM 아세트산, 10mM 아세트산 나트륨, 0.1mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 5(V/V)% 아세토니트릴 용액) 로 10mL 로 메스업하고, 멤브레인 필터 (GL 크로마토디스크 25A, 구멍 직경 0.45㎛, GL 사이언스 (주)) 로 여과한 후 분석에 제공하였다.
<하이드록시하이드로퀴논의 측정 전처리의 구체예>
용기에 담긴 밀크 커피를 개봉 후 즉시 5g 을 정칭한 후, 0.5(W/V)% 인산, 0.5mM 1-하이드록시에탄-1,1-디포스폰산을 함유하는 5(V/V)% 메탄올 용액으로 10mL 로 메스업하고, 이 용액에 대하여 원심 분리를 실시하여 상청을 얻었다. 이 상청에 대하여 본도에르토 JR SCX (고상 충전량 : 500㎎, GL 사이언스 (주)) 에 통액하고, 첫 통과액 약 1.0mL 를 제거하여 통과액을 얻었다. 이 통과액에 대하여 멤브레인 필터 (GL 크로마토디스크 25A, 구멍 직경 0.45㎛, GL 사이언스 (주)) 로 여과하고 신속하게 분석에 제공하였다.
<과산화 수소의 측정 구체예>
과산화 수소 분석계 SUPER ORITECTOR MODEL 5 (센트럴 과학 (주)) 를 사용하고, 표준 교정액 (과산화 수소 1ppm) 으로 교정한 후 분석계 측정 셀 내에 0.5% 브롬산 칼륨 배합의 0.2M 인산 버퍼 (pH 7.0) 를 1mL 넣는다. 질소 송부에 의해 셀 내의 용존 산소가 제로가 된 시점에서 30℃ 항온조에 정치 (靜置) 시켜 둔 시판되는 캔커피 및 시험 샘플을 개봉하고 1mL 를 신속하게 빼내어 측정 셀 내에 첨가한다. 그 후에는 장치의 측정 순서에 따라 발생한 산소 농도를 프린터로부터 판독한다. 또한, 외삽 (外揷) 하는 경우에는 이후 15 분 마다 측정하고 얻어진 1 시간 후까지의 데이터를 사용하여 최소 이승법으로 직선을 그어 구한다. 여기서 MODEL5 의 검출 한계는 0.1㎎/㎏ 이었다.
<풍미의 평가>
25℃ 에서 패널리스트 3 명이 캔 개봉 후 즉시 음용하여 평가하였다.
Figure 112008007325458-pct00001
Figure 112008007325458-pct00002
참고예 1
커피 조성물 Q 를 다음의 방법으로 제조하였다.
활성탄 처리 커피의 제조
시판되는 인스턴트 커피 (네스카페 (등록 상표) 골드 블렌드 적색 라벨) 20g 을 증류수 1400mL 에 용해한 후 (이 커피를 커피 조성물 P 라고 한다), 활성탄 시라사기 WH2C 28/42 (닛폰 엔바이로 케미컬즈) 를 30g 첨가하고 1 시간 교반한 후, 멤브레인 필터 (0.45㎛) 를 사용하여 여과하여 여과액을 얻었다 (이 커피를 커피 조성물 Q 라고 한다). 얻어진 여과액을 동결 건조시켜 갈색 분말 15.8g 을 얻었다. 이 갈색 분말을 증류수에 용해하고, HPLC 분석에 의해 클로로겐산류 및 하이드록시하이드로퀴논의 정량을 실시한 바, 클로로겐산류는 4.12 질량% 함유되고 하이드록시하이드로퀴논은 검출 한계 이하였다. 또, ICP 발광 분광 분석법으로 칼륨 함량을 측정한 결과, 원료 인스턴트 커피 및 활성탄 처리 커피 모두 약 4.2 질량% 였다.
참고예 2
참고예 1 에서 제조한 커피 조성물 Q 의 혈압 강하 평가
실험 재료 및 방법
(a) 13-14 주령의 웅성 자연 발증 고혈압 래트 (SHR) 를 예비적으로 5 일간 연속으로 시판되는 래트용 비관혈식 혈압 측정 장치 (소프토론사 제조) 를 사용하여 혈압 측정함으로써, 래트를 혈압 조작에 충분히 익숙해지게 한 후 평가 시험을 측정하였다. 래트는 모두 온도 25 ± 1℃, 상대 습도 55 ± 10%, 조명 시간 12 시간 (오전 7 시 ∼ 오후 7 시) 의 조건하 (래트 구역 내 사육실) 에서 사육하였다.
(b) 투여 방법 및 투여량 ; 시험군에서는 참고예 1 에서 제조한 커피 조성물 Q (활성탄 처리 커피) 를 사용하였다. 대조군은 시판되는 인스턴트 커피를 사용하였다. 활성탄 처리 커피와 인스턴트 커피를 각각 생리 식염수에 용해하고, 총 클로로겐산량으로서 200㎎/㎏ 의 투여량이 되도록 제조하였다. 투여 방법은 경구용 존데를 사용하여 경구 투여하였다. 투여량은 5mL/㎏ 으로 하였다.
(c) 시험 방법 ; SHR 을 1 군 4-6 마리 사용하였다. 경구 투여 전과 12 시간 후의 꼬리 정맥의 수축기 혈압을 측정하고, 투여 전 혈압으로부터 12 시간 후의 혈압 변화율을 산출하였다.
(d) 통계학 처리 방법 ; 얻어진 측정 결과는 평균치 및 표준 오차를 나타내고 Student’s t-test 를 실시하고 유의 수준은 5% 로 하였다.
결과 ; 표 3 로부터 분명한 바와 같이, 커피 조성물 Q 를 섭취함으로써 통상적인 인스턴트 커피를 섭취한 경우와 비교하여 저명한 혈압 강하를 확인하였다.
투여물 예 수 투여 12 시간 후의 혈압 저하율 (%) 표준 오차
대조군 인스턴트 커피 4 -5.1 1.0
시험군 커피 조성물 Q 6 -10.0 * 0.6
* ; 대조군에 대하여 위험률 5% 이하로 유의차 있음.

Claims (3)

  1. 하기의 조건 (A) ∼ (C) :
    (A) 클로로겐산류 0.01 ∼ 1 질량%,
    (B) 하이드록시하이드로퀴논 클로로겐산류량의 0.1 질량% 미만
    (C) pH 5.0 ∼ 6.4
    인 용기에 담긴 밀크 커피 음료.
  2. 제 1 항에 있어서,
    4-카페오일퀸산/3-카페오일퀸산 질량 비율이 0.6 ∼ 1.2 이고, 또한 5-카페오일퀸산/3-카페오일퀸산 질량 비율이 0.01 ∼ 3 인 용기에 담긴 밀크 커피 음료.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
    용기의 산소 투과도가 5 [cc·㎜/㎡·day·atm] 이하인 용기에 담긴 밀크 커피 음료.
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