CN101116469B

CN101116469B - 容器装咖啡饮料

Info

Publication number: CN101116469B
Application number: CN2006101089709A
Authority: CN
Inventors: 山根英史; 小仓义和; 草浦达也; 早川义信; 山本真士
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2005-07-29
Filing date: 2006-07-31
Publication date: 2011-04-13
Anticipated expiration: 2026-07-31
Also published as: CN101116469A

Abstract

本发明涉及遏制了加热杀菌后的羟基氢醌的生成的，具有降血压作用的容器装咖啡饮料。它是一种咖啡组合物，含有下述组分(A)和(B)：(A)绿原酸类0.03～1质量％，(B)咖啡因0.015～0.3质量％，咖啡因/绿原酸类的质量比为0.07以上，且羟基氢醌/绿原酸类的质量比在5/10000以下。

Description

容器装咖啡饮料

技术领域

本发明涉及遏制了加热杀菌后的羟基氢醌的生成的，具有降血压作用的容器装咖啡饮料。

背景技术

作为治疗高血压的药物，可举出作用于依赖神经因子的调节系统的各种神经阻滞剂、作用于与体液因子相关的调节系统的ACE抑制剂、AT受体拮抗剂、与依赖于来自血管内皮的物质的调节系统相关的钙拮抗剂、与肾脏中的体液调节系统相关的降压利尿药剂等医药品，它们主要在医疗机构中用于重度高血压患者。但是，在现阶段，出于应对高血压病的目的而使用的医药品，虽然能满足有效性方面的要求，但由于存在着不小的副作用，因此，给患者造成的负担也很大。

而膳食疗法、运动疗法、控制吸烟·饮酒等改善生活习惯的一般疗法适用于从包括轻度病情的血压正常但血压值偏高的高血压病患者到重度高血压患者的广泛人群。随着对一般疗法重要性认识的提高，生活习惯——尤其是饮食生活的改善越来越受到重视。具有降血压作用的食品很多，而且迄今为止，人们对来自食品的降血压材料如火如荼地进行了大量研究，对其有效成份的分离·鉴定也进行了大量研究。

其中，专利文献1～3表明，咖啡等食品中所含的绿原酸、咖啡酸、阿魏酸等具有优良的降血压作用。然而，也有报告表明，被认为含有大量绿原酸类的咖啡饮料不仅未能确认具有明显的降血压作用，反而还导致了血压上升(非专利文献1)。

专利文献1：日本特开2002-363075号公报

专利文献2：日本特开2002-22062号公报

专利文献3：日本特开2002-53464号公报

非专利文献1：Eur.J.Clin.Nutr.，53(11)，831(1999)

发明内容

本发明涉及一种咖啡组合物，含有下述组分(A)和(B)：

(A)绿原酸类0.03～1质量％，

(B)咖啡因0.015～0.3质量％，

咖啡因/绿原酸类的质量比为0.07以上，且羟基氢醌/绿原酸类的质量比在5/10000以下。

本发明还涉及一种容器装咖啡饮料，含有下述组分(A)和(B)：

(A)绿原酸类0.03～1质量％，

(B)咖啡因0.015～0.3质量％，

附图说明

图1为咖啡组合物P以及Q的HPLC图谱(检测波长258nm)。

图2为咖啡组合物P以及Q的HPLC图谱(检测波长288nm)。

图3为通过给SHR连续给药而得到的，表示除去绿原酸类的咖啡饮料组合物(HHQ(-)C)的降血压作用的示意图。HHQ(+)C为未除去绿原酸类的咖啡给药组。

具体实施方式

本发明的目的在于提供具有优异的高血压改善作用，可日常饮用的容器装咖啡饮料。

本发明人着眼于以下事实——无论咖啡饮料是否含有绿原酸均未表现出充分的降血压作用的事实，对降血压作用与咖啡饮料成分之间的关系进行了各种研究，其结果发现了如下事实——咖啡饮料中所含的羟基氢醌对绿原酸类的降血压作用有妨碍。并且发现了如下事实——如果将绿原酸类的含量控制在一定范围内，并使羟基氢醌含量降低到与通常含量相比十分少的一定量以下，就能得到具有优异的降血压作用的咖啡组合物。

但是，判断表明，在将咖啡组合物制成容器装饮料的情况下，即便使羟基氢醌的含量很低，在加热杀菌处理工序中还是会再生成羟基氢醌。因此，经过进一步的研究结果，发现了如下事实——通过将饮料中的咖啡因与绿原酸类的重量比率控制在一定范围之内，就能遏制因加热杀菌处理导致的羟基氢醌的生成。

本发明的容器装咖啡饮料具有优异的高血压改善作用，即，具有降血压作用，或者，具有遏制血压上升的作用，并能长期摄入。因此，本发明的容器装咖啡饮料可以用作改善高血压的药物，进一步，可以用于降低血压或者遏制血压上升的目的，或者，可以作为饮料——其被表示为是面向血压高的人群。

另外，本发明的咖啡组合物在因加热杀菌处理时生成的羟基氢醌少，因此可有效用于制造具有优异的降血压作用的容器装咖啡饮料的场合。

考虑到降血压作用、遏制血压上升作用以及味道等方面，本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物含有(A)绿原酸类0.03～1质量％、优选为0.04～0.8质量％、更优选为0.1～0.6质量％、进一步优选为0.13～0.5质量％、特别优选为0.15～0.4质量％。该(A)绿原酸类包括三种酸，(A¹)单咖啡酰奎尼酸、(A²)阿魏酰奎尼酸、(A³)二咖啡酰奎尼酸。其中，作为(A¹)单咖啡酰奎尼酸，可举出选自3-咖啡酰奎尼酸、4-咖啡酰奎尼酸、5-咖啡酰奎尼酸的一种以上。另外，作为(A²)阿魏酰奎尼酸，可举出选自3-阿魏酰奎尼酸、4-阿魏酰奎尼酸、5-阿魏酰奎尼酸的一种以上。作为(A³)二咖啡酰奎尼酸，可举出选自3，4-二咖啡酰奎尼酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸、4，5-二咖啡酰奎尼酸的一种以上。该绿原酸类的含量可利用高效液相色谱(HPLC)来进行测量。HPLC的检测方式通常为UV检测，也可利用CL(化学发光)检测、EC(电化学)检测、LC-Mass检测等以更高的灵敏度进行检测。

本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物含有(B)咖啡因0.015～0.3质量％、优选为0.016～0.25质量％、更优选为0.02～0.2质量％、进一步优选为0.025～0.17质量％、特别优选为0.027～0.15质量％、最优选为0.03～0.12质量％。当咖啡因含量低于0.015质量％时，会破坏咖啡固有的味道，而当其含量为0.3质量％以上时，会由于咖啡因的苦味而破坏风味。

在本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物中，饮料中的(B)咖啡因与(A)绿原酸类的比例，即咖啡因/绿原酸类的质量比为0.07以上、优选为0.08～1.0、更优选为0.1～0.8、进一步优选为0.12～0.6、特别优选为0.14～0.5、最优选为0.15～0.4。当该比例低于0.07时，不能充分遏制因加热杀菌处理导致的羟基氢醌的生成。

本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物，其相对于绿原酸类含量的羟基氢醌的含量为低于0.1质量％。如果相对于绿原酸类含量的羟基氢醌的含量为低于0.1质量％，就能充分发挥绿原酸类的降血压作用。相对于绿原酸类的羟基氢醌的含量优选为0.001～0.07质量％、更优选为0.002～0.05质量％、进一步优选为0.003～0.03质量％、特别优选为0.004～0.01质量％。当相对于绿原酸类的羟基氢醌的含量在0.01质量％以下时，将显著地表现出绿原酸的降血压作用。在此，本发明饮料中的羟基氢醌的含量也可以为0。

该羟基氢醌的含量可利用高效液相色谱(HPLC)进行测量。HPLC的检测方式通常为UV检测，也可利用CL(化学发光)检测、EC(电化学)检测、LC-Mass检测等以更高的灵敏度进行检测。尤其是EC(电化学)检测，由于能检测出极微量的羟基氢醌，因此优选。另外，在利用HPLC测量羟基氢醌的含量时，也可在将容器装咖啡饮料浓缩后进行测量。

另外，可以利用HPLC直接测量羟基氢醌的含量，也可以以容器装咖啡饮料为原料利用各种色谱将羟基氢醌浓缩，通过测量其浓缩组分的量来对羟基氢醌的含量进行定量。另外，在测量绿原酸类的含量以及羟基氢醌的含量时，优选在开封容器装咖啡饮料后立即加入盐酸使其浓度达到0.1N(规定)，或在0.1N的盐酸/氢氧化钠缓冲体系下进行测量。

本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物优选为，除了降低羟基氢醌的含量之外，通常的咖啡组分依然保持原含量。

另外，考虑到咖啡的固有风味，本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物的H₂O₂(过氧化氢)含量优选为1ppm以下、更优选为0.1ppm以下、特别优选为0.01ppm以下。过氧化氢的测量可采用常用的过氧化氢仪进行，例如，可采用Central科学公司制SUPER ORITECTORMODEL5型高灵敏度过氧化氢仪等。

对本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物所用的咖啡豆种类没有特别限制，可举出巴西、哥伦比亚、坦桑尼亚、摩卡等。咖啡品种有阿拉伯种、罗布斯塔种等。既可以使用单一品种咖啡豆，也可使用多个品种混合的混合咖啡豆。对烘焙咖啡豆的烘焙方法没有特别限制，对烘焙温度、烘焙环境也没有任何限制，可采用通常方法。另外，对从这些咖啡豆进行提取的提取方法也没有任何限定，例如，可举出以烘焙咖啡豆或其粉碎物为原料，使用冷水～热水(0～100℃)进行10秒～120分钟的提取的方法。提取方法可举出煮沸式、蒸汽加压式、虹吸式、滴滤式(滤纸、绒布等)等。

另外，本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物中可酌情配合鲜奶、牛奶、全脂奶粉、脱脂奶粉、鲜奶酪、浓缩奶、脱脂奶、部分脱脂奶、炼乳等乳质成分。

本发明的容器装咖啡饮料或咖啡组合物，以鲜咖啡豆换算，每100g使用1g以上的咖啡豆，优选为使用2.5g以上的咖啡豆，更优选为使用5g以上的咖啡豆。另外，容器装咖啡饮料优选为单倍浓度(singlestrength)。本发明的“单倍浓度”，是指在开封容器装饮料后，在常态下不经稀释即可直接饮用的饮品。

用于本发明的容器装咖啡饮料的咖啡组合物的重要之处之一，是利用吸附剂处理·酶处理等对烘焙咖啡豆的提取物进行处理，以降低羟基氢醌的含量。作为吸附剂可举出活性炭、反相载体等。更具体而言，向烘焙咖啡豆提取液或烘焙咖啡豆提取液的干燥制品的水溶液中加入吸附剂，在0～100℃下搅拌10分钟～5小时后，除去吸附剂即可。在本发明中，在吸附剂为活性炭的情况下，相对于烘焙咖啡豆的重量，吸附剂的用量优选为0.02～1.0倍；而在吸附剂为反相载体的情况下，吸附剂用量优选为2～100倍。作为活性炭，优选微孔区域的平均细孔半径为5埃()以下、更优选在2～5埃的范围内、特别优选在3～5埃的范围内的活性炭。本发明的“微孔区域”是指10埃以下的区域，“平均细孔半径”是指按照MP法测得的细孔分布图谱的峰值所示的细孔半径的值。MP法是指记载于文献(Colloid and Interface Science，26，46(1968))的细孔测定法，是株式会社住化分析中心、株式会社Toray研究中心所采用的方法。

另外，活性炭种类优选为椰子壳活性炭，更优选为水蒸汽活化椰子壳活性炭。作为活性炭的市售品，可举出白鹭(Japan EnviroChemicals，Ltd.)、太阁CW(二村化学株式会社)、Kuraray COAL GW(KurarayChemical公司)等。作为反相载体可举出YMC·ODS-A(YMC)、C18(GL Siences Inc.)等。

这些吸附剂处理法中，从在不降低绿原酸类的含量的情况下能够选择性地减少羟基氢醌的含量、工业上有利、并且不会降低钾含量(以质量比计为1/5以上，特别是保持1/2以上)的观点出发，优选使用特定活性炭的吸附剂处理法。

另外，咖啡组合物中的咖啡因/绿原酸类的质量比调节到0.07以上也是一个重要方面，为此，发明人考虑采用使咖啡提取液通过活性炭柱的活性炭处理的方案、以及配合咖啡因的方案。

另外，尽管尚未查清加热杀菌导致羟基氢醌再生成的机理，但如果假定羟基氢醌的前体，由于羟基自由基等的作用使该前体被氧化，就有可能生成羟基氢醌。发明人认为，在该生成机理中，由于咖啡因的自由基捕捉能力，将会降低羟基自由基等的浓度，从而遏制了羟基氢醌的再生成。

另外，本发明的容器装咖啡饮料优选为，在高效液相色谱分析中，以没食子酸为标准物质情况下，在相对于没食子酸的相对保留时间为0.54～0.61的时间区域内，实质上不存在峰。在确认该时间区域内实质上不存在峰的事实时，可使用普通HPLC，例如，可使用洗提液为0.05M乙酸水溶液和0.05M乙酸100％乙腈溶液的梯度液，谱柱采用ODS，利用紫外线吸光光度计等检测而确认。

本发明中的“在相对于没食子酸的相对保留时间为0.54～0.61的时间区域内，实质上不存在峰”意为，当以分析1ppm没食子酸溶液时的面积值计为S1，以在同等条件下分析容器装咖啡饮料时在上述特定区域内溶出的组分的峰面积的总和计为S2时，S2/S1<0.01。

本发明的容器装咖啡饮料，可根据需求而添加蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、果糖葡萄糖浆、糖醇等糖分，抗氧化剂，pH值调节剂，乳化剂，香料等。本发明的容器装咖啡饮料优选为基本上不含乳质成分的咖啡饮料，即黑咖啡饮料。

本发明的容器装咖啡饮料可使用PET瓶、罐(铝质、钢质)、纸、软罐头(retort pouch)、瓶(玻璃质)等容器。在此情况下，容器容量可采用50～2500mL。容器装咖啡饮料的pH值优选为5～7、更优选为5.4～6.5、特别优选为5.6～6.3。容器装咖啡饮料中的单咖啡酰奎尼酸的组成比优选为，4-咖啡酰奎尼酸/3-咖啡酰奎尼酸的质量比为0.6～1.2，5-咖啡酰奎尼酸/3-咖啡酰奎尼酸的质量比为0.01～3。为避免咖啡中的成分发生变化，容器优选为透氧率低的容器，例如可使用铝质、钢质等质地的罐，玻璃制的瓶等。在罐、瓶的情况下还包括可再封盖的再封装型的罐和瓶。在本发明中，“透氧率”是指在温度20℃、相对湿度50％的环境下测得的透氧率(cc·mm/m²·day·atm)，优选为在5以下，更优选为在3以下，特别优选为在1以下。

制造容器装咖啡饮料时，通常实施杀菌处理。在填充在金属罐等容器中后能够进行加热杀菌的情况下，该杀菌处理在食品卫生法中规定的杀菌条件下进行。而对于PET瓶、纸容器等不能进行蒸馏杀菌的情况，则采用以下方法：即，在与食品卫生法中规定的条件相同的杀菌条件下——例如，通过板式热交换器在高温下进行短时间的杀菌之后，冷却至一定温度，再向容器内填充。此外，也可以进行如下操作：在无菌条件下加热杀菌后，在无菌条件下使pH回复到中性；或在中性状态下加热杀菌后，在无菌条件下使pH回复到酸性等。

由于本发明的容器装咖啡饮料含有有效量的具有高血压改善作用的绿原酸类，且降低了加热杀菌处理后其中的羟基氢醌(阻碍高血压改善作用)的含量，所以，可用作降血压用或抑制血压上升用的医药组合物，以及降血压用饮料、抑制血压上升用饮料。

绿原酸类以及羟基氢醌的分析方法如下所述。

绿原酸类的分析方法：分析条件A

分析仪器使用HPLC(岛津制作所株式会社)。装置的结构单元的型号如下所述。检测器：SPD-M10A，烘箱：CTO-10AC，泵：LC-10AD，自动取样器：SIL-10AD，谱柱：Inertsil ODS-2，内径4.6mm×长度250mm。

分析条件如下所述。样品注入量：10μl，流量：1.0mL/min，紫外线吸光光度计检测波长：325nm(绿原酸类)、290nm(羟基氢醌)，洗提液A：0.05M乙酸3％乙腈溶液，洗提液B：0.05M乙酸100％乙腈溶液

浓度梯度条件

时间洗提液A 洗提液B

0分 100％ 0％

20分 80％ 20％

35分 80％ 20％

45分 0％ 100％

60分 0％ 100％

70分 100％ 0％

120分 100％ 0％

绿原酸类的保留时间(单位：分钟)：

(A1)单咖啡酰奎尼酸：17.9、20.4、22.0，共计3个数据，

(A2)阿魏酰奎尼酸：22.8、25.8、27.0，共计3个数据，

(A3)二咖啡酰奎尼酸：32.3、33.0、35.8，共计3个数据，根据由此求得的面积，以5-咖啡酰奎尼酸为标准物质求得质量％。

绿原酸类以及咖啡因的分析方法：分析条件K

容器装咖啡饮料或咖啡组合物的绿原酸类以及咖啡因的分析方法如下所述。分析仪器使用HPLC。装置的结构单元的型号如下所述。UV-VIS检测仪：L-2420(Hitachi High Technology株式会社)，谱柱烘箱：L-2300(Hitachi High Technology株式会社)，泵：L-2130(HitachiHigh Technology株式会社)，自动取样器：L-2200(Hitachi HighTechnology株式会社)，谱柱：Cadenza CD-C18，内径4.6mm×长度150mm，粒径3μm(IMTAKT株式会社)。

分析条件如下所述。样品注入量：10μl，流量：1.0mL/min，UV-VIS检测仪设定波长：325nm，谱柱烘箱设定温度：35℃，洗提液A：0.05M乙酸、0.1mM的1-羟基乙烷-1，1-二膦酸、10mM乙酸钠、5(V/V)％乙腈溶液，洗提液B：乙腈

浓度梯度条件

时间洗提液A 洗提液B

0.0分 100％ 0％

10.0分 100％ 0％

15.0分 95％ 5％

20.0分 95％ 5％

22.0分 92％ 8％

50.0分 92％ 8％

52.0分 10％ 90％

60.0分 10％ 90％

60.1分 100％ 0％

70.0分 100％ 0％

在HPLC分析中，精确称量1g试样后，用洗提液A配制成10mL溶液，用薄膜过滤器(GL色谱盘25A，孔径0.45μm，GL Siences Inc.)过滤后，用于分析。

绿原酸类的保留时间(单位：分钟)：

(A¹)单咖啡酰奎尼酸：5.3、8.8、11.6，共计3个数据，

(A²)阿魏酰奎尼酸：13.0、19.9、21.0，共计3个数据，

(A³)二咖啡酰奎尼酸：36.6、37.4、44.2，共计3个数据，根据由此求得的9种绿原酸类的面积值，以5-咖啡酰奎尼酸为标准物质求得质量％。

另外，对于咖啡因的分析，除UV-VIS检测仪设定波长为270nm、以咖啡因为标准物质之外，与绿原酸类一样地进行。咖啡因的保留时间为18.9分钟。

羟基氢醌的HPLC分析：分析条件B

按照下述分析方法也能测量羟基氢醌。以下述分析条件作为分析条件B。分析仪器使用HPLC(株式会社日立制作所)。装置的结构单元的型号如下所述。

检测器：L-7455，烘箱：L-7300，泵：L-7100，自动取样器：L-7200，谱柱：Inertsil ODS-2，内径4.6mm×长度250mm。

分析条件如下所述。

样品注入量：10μl，流量：1.0mL/min，紫外线吸光光度计检测波长：258nm或288nm，洗提液A：0.05M乙酸水溶液，洗提液B：0.05M乙酸100％乙腈溶液

浓度梯度条件

时间洗提液A 洗提液B

0分 100％ 0％

15分 100％ 0％

15.1分 0％ 100％

25分 0％ 100％

25.1分 100％ 0％

30分 100％ 0％

羟基氢醌的保留时间为6.8分钟。根据由此求得的面积，以羟基氢醌为标准物质求得质量％。同样测得的没食子酸的保留时间为11.5分钟。

利用HPLC-电化学检测仪分析羟基氢醌的方法

容器装咖啡饮料或咖啡组合物的羟基氢醌的分析方法如下所述。分析仪器使用HPLC-电化学检测仪(库仑测定型)库仑阵列系统(5600A型，开发·制造：美国ESA公司，进口·销售：MC Medical，Inc.)。装置结构单元的名称·型号如下所述。

分析池：5010型，库仑阵列管理器(CoulArray Organizer)，库仑阵列电子组件·软件(CoulArray Electronics Module·Software)：5600A型，溶剂输送组件：582型，梯度混合器，自动取样器：542型，脉冲阻尼器，脱气装置：Degasys Ultimate DU3003，柱箱：505。谱柱：CAPCELL PAK C18AQ，内径4.6mm×长度250mm，粒径5μm(资生堂株式会社)。

分析条件如下所述。

样品注入量：10μl，流量：1.0mL/min，电化学检测仪外加电压：0mV，柱箱设定温度：40℃，洗提液A：0.1(W/V)％磷酸、0.1mM的1-羟基乙烷-1，1-二膦酸、5(V/V)％甲醇溶液，洗提液B：0.1(W/V)％磷酸、0.1mM的1-羟基乙烷-1，1-二膦酸、50(V/V)％甲醇溶液。

在调制洗提液A和洗提液B时，采用高效液相色谱专用蒸馏水(日本关东化学株式会社)、高效液相色谱专用甲醇(日本关东化学株式会社)、磷酸(特级，日本和光纯药工业株式会社)、1-羟基乙烷-1，1-二膦酸(60％水溶液，日本东京化成工业株式会社)。

浓度梯度条件

时间洗提液A 洗提液B

0.0分 100％ 0％

10.0分 100％ 0％

10.1分 0％ 100％

20.0分 0％ 100％

20.1分 100％ 0％

50.0分 100％ 0％

调制分析试样是在精确称量5g试样后，用0.5(W/V)％磷酸、0.5mM的1-羟基乙烷-1，1-二膦酸、5(V/V)％甲醇溶液配制成10mL溶液，对该溶液进行离心分离，得到上清液。使该上清液通过Bond ElutSCX(固相填充量：500mg，储存容量：3mL，GL Siences Inc.)，舍弃最初通过液约0.5mL，得到通过液。用薄膜过滤器(GL色谱盘25A，孔径0.45μm，GL Siences Inc.)过滤该通过液，尽快用于分析。

在按照上述条件利用HPLC-电化学检测仪进行分析时，羟基氢醌的保留时间为6.38分钟。根据所得峰面积值，以羟基氢醌(日本和光纯药工业株式会社)为标准物质求得质量％。

实施例

下面，举出实施例具体说明本发明，但本发明并非受限于下述实施例。

参考例1：血压下降评价

i)实验材料及实验方法

(a)预先连续5天用市售大鼠用无创伤血压测量装置(Softron株式会社制)测量12周龄的雄性自发性高血压大鼠(SHR)的血压，在大鼠已经充分习惯血压操作之后，在评价实验中进行测量。所有的大鼠都是在温度25±1℃、相对湿度55±10％、照明时间12小时(早七点～晚七点)的条件下(大鼠区域内饲养室)进行喂养的。

(b)投药方法与投药量：对照组是经口投药生理盐水。比较组是使用了以绿原酸为主成分的咖啡豆提取物(Flavor Holder FH1041：日本长谷川香料株式会社制)。制作时，使投药量中的绿原酸总量为300mg/kg。在试验组1中，制作时，使FH1041投药量中的绿原酸总量为300mg/kg、羟基氢醌为0.03mg/kg(相对于绿原酸总量为0.01％)。在下述试验组2中，制作时，使FH1041投药量中的绿原酸总量为300mg/kg，羟基氢醌的量为0.3mg/kg(相对于绿原酸总量为0.1％)。在试验组3中，制作时，使FH1041投药量中的绿原酸总量为300mg/kg，羟基氢醌的量为3mg/kg(相对于绿原酸总量为1％)。投药方法为采用经口探针，进行经口投药。投药量为5mL/只。

(c)实验方法：每组使用3只SHR。测量经口投药前和12小时后的尾静脉收缩期血压，计算出从投药前血压至12小时后血压的变化率。

(d)统计学处理方法：所得测定结果用平均值和标准误差表示，进行多组处理(Scheffe)，显著性水平设定为5％。

ii)结果

从表1可知，由于绿原酸中添加了羟基氢醌，妨碍了绿原酸的降血压作用。

表1

	投药物质	例数	投药12小时后的血压下降率(％)	标准误差
					对照组	生理食盐水	3	—2.1	1.1
比较组	FH1041	3	—13.8	1.5
					试验组1	FH1041HHQ(0.03mg/kg)	3	—14.3	2.4

试验组2	FH1041HHQ(0.3mg/kg)	3	—8.8^*	1.4
					试验组3	FH1041HHQ(3mg/kg)	3	—6.7^*	1.0

HHQ：羟基氢醌

^*：相对于比较组显著水平在5％以下，有显著误差。

参考例2

按照下述方法制造咖啡饮料Q。

活性炭处理咖啡的制造

将20g市售速溶咖啡(Nescafe Gold Blend Red Label)溶解在1400mL的蒸馏水中(该咖啡称作“咖啡组合物P”)，加入30g活性炭白鹭28/42(Japan EnviroChemicals，Ltd.)，搅拌1小时后，用薄膜过滤器(0.45μm)过滤，得到滤液(该咖啡称作“咖啡组合物Q”)。将所得滤液冷冻干燥，得到15.8g褐色粉末。将该褐色粉末溶于蒸馏水，用HPLC分析对绿原酸类和HHQ进行定量的结果，绿原酸类含量为4.12质量％(根据分析条件A)，HHQ在检测限以下(根据分析条件B)。另外，用ICP发光分光分析法测定钾含量的结果，在原料速溶咖啡和活性炭处理咖啡两者中均为约4.2质量％。当用HPLC分析咖啡组合物P、咖啡组合物Q以及没食子酸时，得到图1和图2所示的图谱。咖啡组合物Q在保留时间6.8分钟附近的峰消失，实质上不存在峰。图1中a表示咖啡组合物P的图谱，b表示咖啡组合物Q的图谱，c表示没食子酸的图谱。图2中b表示咖啡组合物P的图谱，c表示咖啡组合物Q的图谱，a表示没食子酸的图谱。

另外，咖啡组合物Q中的羟基氢醌(HHQ)的含量的测定也可以采用利用HPLC-电化学检测仪的方法来进行。

参考例3

将20g市售速溶咖啡(Nescafe Gold Blend Red Label)溶解在1400mL的蒸馏水中(该咖啡称作“咖啡组合物P”)，加入10g活性炭Kuraray COAL GW-H48/100，搅拌1小时后，用薄膜过滤器(0.45μm)过滤，得到滤液(该咖啡称作“咖啡组合物R”)。将所得滤液冷冻干燥，得到16.5g褐色粉末。将该褐色粉末溶于蒸馏水中，用HPLC分析对绿原酸类和HHQ进行定量的结果，绿原酸类的含量为4.31质量％(根据分析条件A)，HHQ在检测极限以下(根据分析条件B)。另外，利用ICP发光分光分析法测定钾含量的结果，在原料速溶咖啡和活性炭处理咖啡两者中均为约4.2质量％。

参考例4

对在参考例2中制作的咖啡组合物Q的降血压效果的评价

实验材料及实验方法

(a)预先连续5天使用市售大鼠用无创伤性血压测量装置(Softron株式会社)测量13～14周龄的雄性自发性高血压大鼠(SHR)的血压，在大鼠已经充分习惯血压操作之后，在评价试验中进行测量。所有的大鼠都是在温度25±1℃、相对湿度55±10％、照明时间12小时(早七点～晚七点)的条件下(大鼠区域内饲养室)进行喂养的。

(b)投药方法与投药量：试验组使用按照参考例2制作的咖啡组合物Q(活性炭处理咖啡)。对照组使用市售速溶咖啡。制作时，将活性炭处理咖啡和速溶咖啡分别溶解在生理盐水中，使投药量中的绿原酸总量为200mg/kg。投药方法采用经口用探针，进行经口投药。投药量为5mL/kg。

(c)实验方法：每组使用4～6只SHR。测量经口投药前和12小时后的尾静脉收缩期血压，算出从投药前血压至12小时后血压的变化率。

(d)统计学处理方法：所得测定结果用平均值和标准误差表示，进行Student′s t-test处理，显著性水平为5％。

结果：如表2所示，相比于摄取普通速溶咖啡的情况，摄取咖啡组合物Q时确认了显著的血压下降。

表2

	投药物质	例数	投药12小时后的血压下降率(％)	标准误差
					对照组	速容咖啡	4	—5.1	1.0
试验组	咖啡组合物Q	6	—10.0^*	0.6

^*：相对于对照组显著性水平在5％以下，具有显著误差。

对按照参考例2制作的咖啡组合物Q的降血压作用的评价

(遏制大鼠血压上升的评价)

实验材料及实验方法

(a)预先连续7天使用市售大鼠用无创伤性血压测量装置(Softron株式会社制)测量使用动物——6周龄的雄性自发性高血压大鼠(SHR)的血压，在大鼠已经充分习惯血压操作之后，开始进行评价试验。所有的大鼠都是在温度25±1℃、湿度55±10％、照明时间12小时(早七点～晚七点)的条件下(大鼠区域内饲养室)进行喂养的。

(b)投药方法与投药量：准备试验区1～2和对照区。投药方法为经口投药，采用金属制胃探针进行强制投药。投药量为10mL/kg/day，以每星期5天投药4星期。

(c)实验方法：每组使用6～9只7周龄的SHR。每周测定试验开始前和开始后7星期间的尾动脉收缩期血压。

(d)统计学处理方法：所得实验结果用平均值和标准误差表示，进行Student′s t-test处理，显著性水平为5％以下。

结果：在图谱中表示试验开始前和开始后7周间的收缩期血压(SBP)。从图3可知，与对照区(生食)和试验区1(HHQ(+)C)相比，除去了HHQ的咖啡的试验区2(HHQ(-)C)显著地遏制了血压上升。

实施例1

对中烘煎度的咖啡豆用8倍量的离子交换水(95℃)进行提取，得到咖啡提取液。然后测量该咖啡提取液中的Brix，准备填充有相对于Brix为50重量％量的活性炭(白鹭)的谱柱(内径45mm，长度150mm)。

然后，在温度25℃、SV8的条件下，使咖啡提取液通过填充有活性炭的谱柱，得到经活性炭处理的除去了羟基氢醌的咖啡组合物A。

测量如此得到的除去了羟基氢醌的咖啡组合物中的绿原酸类的含量，用离子交换水稀释，用碳酸氢钠调节pH值。加热杀菌前的羟基氢醌的含量在检测限以下。然后，将如此得到的咖啡组合物填充到190g罐中，进行密封，实施蒸馏(retort)杀菌处理。

另外，根据分析条件K测量绿原酸的含量和咖啡因的含量，采用使用HPLC-电化学检测仪的分析方法测定羟基氢醌的含量。

实施例2

除了作为原料追加咖啡因之外，与实施例1一样地进行制造。加热杀菌前的羟基氢醌的含量在检测限以下。

比较例1

除了作为原料使用从除去了咖啡因的咖啡豆所得到的咖啡组合物B之外，与实施例1一样地进行制造。加热杀菌前的羟基氢醌的含量在检测限以下。

比较例2

对中烘煎度的咖啡豆用8倍量的离子交换水(95℃)进行提取，得到咖啡组合物C。除了不实施活性炭处理之外，与实施例1一样地进行操作而制造。另外，加热杀菌前的羟基氢醌的含量为0.00131质量％。

实施例1、2和比较例1、2中所得到的容器装咖啡饮料的杀菌条件以及杀菌处理后的分析值如表3所示。从表3可知，咖啡因/绿原酸类之比、以及羟基氢醌/绿原酸类之比经过调节的本发明的容器装咖啡饮料，遏制了羟基氢醌的再生成。

表3

Claims

1.一种咖啡组合物，含有下述组分(A)和(B)：

(A)绿原酸类0.03～1质量％，

(B)咖啡因0.015～0.3质量％，

2.对权利要求1所述的咖啡组合物进行加热杀菌处理后的容器装咖啡饮料。

3.如权利要求2所述的容器装咖啡饮料，含有下述组分(A)和(B)：

(A)绿原酸类0.03～1质量％，

(B)咖啡因0.015～0.3质量％，

4.如权利要求2或3所述的容器装咖啡饮料，其特征在于，

容器的透氧率在5cc·mm/m²·day·atm以下。

5.如权利要求2或3所述的容器装咖啡饮料，其特征在于，

羟基氢醌的含量为通过HPLC-电化学检测仪测定的定量值。