JP4077014B2

JP4077014B2 - 容器詰ブラックコーヒー飲料の製造方法

Info

Publication number: JP4077014B2
Application number: JP2006206750A
Authority: JP
Inventors: 義信早川; 真士山本; 義和小倉; 千年重野; 英武中村; 祥司山崎
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2005-07-29
Filing date: 2006-07-28
Publication date: 2008-04-16
Anticipated expiration: 2026-07-28
Also published as: JP2007054060A

Description

本発明は、血圧降下作用を有し、かつ、風味が良好である容器詰ブラックコーヒー飲料の製造方法に関する。

高血圧症の治療薬としては、神経因子による調節系に作用する各種神経遮断薬、液性因子に関わる調節系に作用するＡＣＥ阻害薬、ＡＴ受容体拮抗薬、血管内皮由来物質による調節系に関わるＣａ拮抗薬、腎臓での体液調節系に関わる降圧利尿薬などの医薬品が挙げられ、これらは主として医療機関において、重症の高血圧患者に使用される。しかし、現状において高血圧症対策の目的で使用される医薬品は、有効性に関しては満足できる反面少なからず存在する副作用のため患者にかかる負担は大きい。

このため食餌療法、運動療法、飲酒・喫煙の制限などの生活改善による一般療法が、軽症を含む正常高値高血圧症者から重症な高血圧症者に広く適用されている。一般療法の重要性の認識の高まりに伴い、特に食生活の改善が重要であるといわれ続けている。そして血圧降下作用を有する食品から食品由来の降圧素材の探索がさかんに行われ、その有効成分の分離・同定が数多く行われている。

このうち、コーヒー等の食品に含まれているクロロゲン酸、カフェ酸、フェルラ酸等が優れた血圧降下作用を示すことが報告されている（特許文献１〜３）。しかしながら、クロロゲン酸類を多量に含むことが知られているコーヒー飲料では、明確な血圧降下作用が認められず、逆に血圧を上昇させるという報告もある（非特許文献１）。
特開２００２−３６３０７５号公報特開２００２−２２０６２号公報特開２００２−５３４６４号公報 Eur. J. Clin. Nutr., 53(11), 831(1999)

本発明の目的は、優れた高血圧改善作用を有し、通常摂取できる容器詰ブラックコーヒー飲料を提供することにある。

本発明者は、コーヒー飲料がクロロゲン酸を含んでいるにもかかわらず、十分な血圧降下作用を示さないことに着目し、血圧降下作用とコーヒー飲料成分との関係について種々検討した結果、コーヒー飲料に含まれているヒドロキシヒドロキノンがクロロゲン酸類の血圧降下作用を阻害していることを見出した。そして、クロロゲン酸類量を一定範囲に保持し、ヒドロキシヒドロキノン含量を通常含まれる量より十分少ない一定量以下に低下させれば、優れた血圧降下作用を有するコーヒー組成物が得られることを見出した。

しかし、コーヒー組成物を容器詰飲料とした場合、ヒドロキシヒドロキノン含量を低下させても、加熱殺菌処理工程でヒドロキシヒドロキノンが増加してしまうことが判明した。併せて、コーヒー自体の酸味の増加、アロマ感の減少が認められた。そこで更に検討した結果、殺菌条件を限定することで、加熱殺菌処理によるヒドロキシヒドロキノンの生成を抑制でき、優れた血圧降下作用を有し、かつ、風味の良好な容器詰コーヒー飲料を提供できることを見出した。

すなわち、本発明は、下記条件（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）クロロゲン酸類０．０１〜１質量％、
（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノンクロロゲン酸類量の０．１質量％未満
を満たすコーヒー組成物を用いて、ヒドロキシヒドロキノン量がクロロゲン酸類量の０．１質量％未満である容器詰ブラックコーヒー飲料を製造する方法において、前記コーヒー組成物を、殺菌温度１１２〜１５０℃、殺菌時間２０分以内、Ｆ０値１０〜５０の条件で加熱殺菌処理することを特徴とするヒドロキシヒドロキノンの増加抑制方法を提供するものである。

本発明によれば、優れた高血圧改善作用、すなわち血圧降下作用又は血圧上昇抑制作用を有し、かつ風味が良好である容器詰ブラックコーヒー飲料を得ることができる。従って、得られる容器詰ブラックコーヒー飲料は、高血圧改善用の医薬として、更には血圧降下のための飲料として有用である。

本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、血圧降下作用、血圧上昇抑制作用、及び風味の改善の点で、（Ａ）クロロゲン酸類をコーヒー組成物中０．０１〜１質量％含有するが、好ましくは０．０５〜０．８質量％、より好ましくは０．１〜０．６質量％、更に好ましくは０．１３〜０．５質量％、特に好ましくは０．１５〜０．４質量％含有する。（Ａ）当該クロロゲン酸類としては（Ａ¹）モノカフェオイルキナ酸、（Ａ²）フェルラキナ酸、（Ａ³）ジカフェオイルキナ酸の三種を含有する。ここで（Ａ¹）モノカフェオイルキナ酸としては３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸及び５−カフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。また（Ａ²）フェルラキナ酸としては、３−フェルラキナ酸、４−フェルラキナ酸及び５−フェルラキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。（Ａ³）ジカフェオイルキナ酸としては３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸及び４，５−ジカフェオイルキナ酸から選ばれる１種以上が挙げられる。当該クロロゲン酸類の含有量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。ＨＰＬＣにおける検出手段としては、ＵＶ検出が一般的であるが、ＣＬ（化学発光）検出、ＥＣ（電気化学）検出、ＬＣ−Ｍａｓｓ検出等により更に高感度で検出することもできる。

また、本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、クロロゲン酸類の血圧降下作用の点から、ヒドロキシヒドロキノン（Ｂ）の含量がクロロゲン酸類量に対して０．１質量％未満、好ましくは０．００１〜０．０５質量％、より好ましくは０．００２〜０．０２質量％、更に好ましくは０．００２〜０．０１質量％、特に好ましくは０．００３〜０．０２質量％である。特に、クロロゲン酸類量に対してヒドロキシヒドロキノン量が０．０２質量％以下であればクロロゲン酸の血圧降下作用がさらに顕著となる。ここで、組成物中のヒドロキシヒドロキノン含量は０であってもよい。

当該ヒドロキシヒドロキノン含量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定することができる。ＨＰＬＣにおける検出手段としては、ＵＶ検出が一般的であるが、ＣＬ（化学発光）検出、ＥＣ（電気化学）検出、ＬＣ−Ｍａｓｓ検出等により更に高感度で検出でき、特にＥＣ（電気化学）検出が極微量のヒドロキシヒドロキノンを測定できる点で好ましい。

更にヒドロキシヒドロキノン含量は、ＨＰＬＣで直接測定することもできるが、本発明により得られた容器詰コーヒー飲料又はコーヒー組成物から、各種クロマトグラフィーによりヒドロキシヒドロキノンを濃縮して、その濃縮画分の量を測定することによっても定量できる。なお、クロロゲン酸類量及びヒドロキシヒドロキノン量の測定にあたっては、容器詰コーヒー飲料を開封後直ちに、例えば０.１Ｎ(規定)となるように塩酸を加えて、又は、０．１Ｎの塩酸／水酸化ナトリウムバッファー系で測定するのが好ましい。

また本発明の容器詰ブラックコーヒー飲料又はコーヒー組成物は、Ｈ₂Ｏ₂（過酸化水素）の含有量が１ｐｐｍ以下、より好ましくは０．１ｐｐｍ以下、更に０．０５ｐｐｍ以下、特に０．０１ｐｐｍ以下であるのがコーヒー本来の風味の点で好ましい。過酸化水素の測定は通常用いられる過酸化水素計を用いて行うことができ、例えば、セントラル科学社製の高感度過酸化水素計スーパーオリテクターモデル５（ＳＵＰＥＲＯＲＩＴＥＣＴＯＲＭＯＤＥＬ５）等を用いることができる。特にＨ₂Ｏ₂は開缶前は殺菌処理により失われているものの、開缶によって空気に触れると時間経過と共に徐々に増加する傾向があることから、特許文献３７３２７８２号、３７０６３３９号に記載の測定条件に則り、開缶後迅速かつ速やかに分析する。

本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、コーヒー豆からの抽出物、インスタントコーヒーの水溶液などから調製することができる。

本発明において、コーヒー組成物を得るのに用いるコーヒー豆の種類は、特に限定されないが、例えばブラジル、コロンビア、タンザニア、モカ、キリマンジェロ、マンデリン、ブルーマウンテン等が挙げられる。コーヒー豆種としては、アラビカ種、ロブスタ種などがある。コーヒー豆は１種でもよいし、複数種をブレンドして用いてもよい。コーヒー豆を焙煎により焙煎コーヒー豆とする方法については、特に制限はなく、焙煎温度、焙煎環境についても制限はないが、好ましい焙煎温度は１００〜３００℃であり、更に好ましくは１５０〜２５０℃である。好ましい焙煎方法としては直火式、熱風式、半熱風式があり、回転ドラムを有している形式が更に好ましい。また、風味の観点より焙煎後１時間以内に０〜１００℃まで冷却することが好ましく、更に好ましくは１０〜６０℃である。

焙煎コーヒー豆の焙煎度としては、ライト、シナモン、ミディアム、ハイ、シティ、フルシティ、フレンチ、イタリアンがあり、ライト、シナモン、ミディアム、ハイ、シティが好ましい。焙煎度を色差計で測定したＬ値としては、通常１０から３０、好ましくは１５から２５である。尚、焙煎度の違うコーヒー豆を混合しても良い。

コーヒー豆からの抽出方法についてもは、具体的には、焙煎コーヒー豆又はその粉砕物から水〜熱水（０〜１００℃）などの抽出溶媒を用いて１０秒〜３０分抽出する方法等が挙げられる。粉砕度合いは、極細挽き（0.250-0.500μｍ）、細挽き（0.300-0.650μｍ）、中細挽き（0.530-1.000μｍ）、中挽き（0.650-1.500μｍ）、中粗挽き、粗挽き（0.850-2.100μｍ）、極粗挽き（1.000-2.500μｍ）や平均粒径３ｍｍや同５ｍｍ、同１０ｍｍ程度のカット品が挙げられる。抽出方法は、ボイリング式、エスプレッソ式、サイホン式、ドリップ式（ペーパー、ネル等）等が挙げられる。

抽出溶媒としては、水、アルコール含有水、ミルク、炭酸水などが挙げられる。抽出溶媒のｐＨは通常４−１０であり、風味の観点からは５−７が好ましい。尚、抽出溶媒中にｐＨ調整剤、例えば重炭酸水素ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アルコルビン酸Ｎａを含有させ、ｐＨを適宜調整しても良い。

抽出器としては、ペーパードリップ、不織布ドリップ、サイフォン、ネルドリップ、エスプレッソマシン、コーヒーマシン、パーコレーター、コーヒープレス、イブリック、ウォータードリップ、ボイリング、コーヒーカップへ実質的に懸架可能なペーパー又は不織布の袋状構造体、上部にスプレーノズル下部に実質的にコーヒー豆の固液分離可能な構造体（メッシュやパンチングメタルなど）を有するドリップ抽出器、上部及び下部に実質的にコーヒー豆の固液分離可能な構造体（メッシュやパンチングメタルなど）を有するカラム抽出器等が挙げられる。抽出器に加熱又は冷却可能な構造（例えば、電気ヒーター、温水や蒸気、冷水が通液可能なジャケット）を有していても良い。

抽出方法としてはバッチ式抽出法、半バッチ式抽出法、連続式抽出法が挙げられる。バッチ式抽出法又は半バッチ式抽出法の抽出時間は風味の観点より１０秒〜１２０分が好ましく、更に３０秒〜３０分が好ましい。

本発明方法により製造される容器詰ブラックコーヒー飲料は、飲料１００ｇあたりコーヒー豆を生豆換算で１ｇ以上、好ましくはコーヒー豆を２．５ｇ以上、更に好ましくはコーヒー豆を５ｇ以上使用しているものである。また、本発明の容器詰ブラックコーヒー飲料はいわゆる微糖、加糖も含み、砂糖、人工甘味料などの甘味料を使用したものも含まれる。また甘味料の他、安定化剤を加えても良い。

本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、コーヒー抽出液を含む液を吸着剤処理してヒドロキシヒドロキノン量を低減させる方法（吸着剤処理法）、コーヒー抽出液を含む液中の酵素処理によりヒドロキシヒドロキノン含量を低減させることにより得られる方法などによりヒドロキシヒドロキノン量を調整することができる。
吸着剤処理法に用いる吸着剤としては、活性炭、逆相クロマトグラフ担体、白土（活性白土、酸性白土）などが挙げられ、これら２種以上の混合物であってもよい。吸着剤の平均粒径は、通常１μｍ〜２０ｍｍが好ましく、さらに好ましくは５０μｍ〜５ｍｍである。吸着剤処理方法は、バッチ法であってもカラム通液方法であってもよい。

バッチ法としては、例えばコーヒー抽出液を含む液に吸着剤を加え−１０〜１００℃で０．５分〜５時間撹拌した後、吸着剤を除去すればよい。処理時の雰囲気としては、空気下、不活性ガス下（窒素ガス、アルゴンガス、ヘリウムガス、二酸化炭素、炭酸ガス）が挙げられるが、風味の観点より不活性ガス下が好ましい。

カラム通液法としては、例えば吸着カラム内に吸着剤を充填し、コーヒー抽出液を含む液をカラム下部又は上部から通液させ、他方から排出させる。吸着剤のカラム内への充填量は、通液前に吸着カラムに充填できる量であれば良い。吸着カラムの上段又は下段の少なくとも１つにメッシュ（網）又はパンチングメタルなど有し実質的に吸着剤が漏れ出さない分離構造体を有していれば良い。

吸着剤量は、コーヒー抽出液中のコーヒー豆由来可溶性固形分に対して、０．０１〜１００倍である。風味の観点より、活性炭の場合は、０．０２〜１．０倍、逆相クロマトグラフ担体の場合は２〜１００倍用いるのが好ましい。

活性炭としては、ミクロ孔領域における平均細孔半径が５オングストローム（Å）以下、更には、２〜５オングストロームの範囲であることが好ましく、特に３〜５オングストロームの範囲であることが好ましい。本発明におけるミクロ孔領域とは、１０オングストローム以下を示し、平均細孔半径は、ＭＰ法により測定して得た細孔分布曲線のピークト
ップを示す細孔半径の値とした。ＭＰ法とは、文献（Colloid and Interface Science, 2
6, 46(1968)）に記載の細孔測定法であり、株式会社住化分析センター、株式会社東レリ
サーチセンター等にて採用されている方法である。
また、活性炭の種類としては、ヤシ殻活性炭が好ましく、更に水蒸気賦活化ヤシ殻活性炭が好ましい。活性炭の市販品としては、白鷺ＷＨ２Ｃ、ＷＨ２ＣＬ、Ｗ２ＣＬ、Ｗ２Ｃ、ＥＨ（日本エンバイロケミカルズ）、太閣ＣＷ（二村化学）、クラレコールＧＷ（クラレケミカル）等を用いることができる。

白土は、５％のサスペンジョンのｐＨが５〜１０である酸性白土が好ましい。酸性白土の市販品としては、ミズカエース等を用いることができる。
逆相クロマトグラフ担体としては、ＹＭＣ・ＯＤＳ−Ａ（ＹＭＣ）、Ｃ１８（ＧＬサイエンス）等が挙げられる。

これらの吸着剤処理法のうち、活性炭を用いた吸着剤処理法はクロロゲン酸類量を低下させることなく選択的にヒドロキシヒドロキノン含量を低減させることができるだけでなく、風味も良く工業的にも有利であり、更にカリウム含量を低下させない（質量比で１／５以上、特に１／２以上保持）とコーヒー本来の風味が維持されている点からも好ましい。尚、吸着剤処理工程は、コーヒー抽出液のみで処理をおこなうのが好適であるが、乳や乳製品、副原料を混合し処理をおこなっても良い。

本発明方法に用いられるコーヒー組成物は、高速液体クロマトグラフィーによる分析における、没食子酸を標準物質とした場合の没食子酸に対する相対保持時間が０．５４〜０．６１の時間領域に実質的にピークを有しないことが好ましい。当該時間領域に実質的にピークを有しないことを確認するには、一般的なＨＰＬＣを使用することができ、例えば溶離液として０．０５Ｍ酢酸水溶液と０．０５Ｍ酢酸１００％アセトニトリル溶液のグラジエントを用い、ＯＤＳカラムを用いて、紫外線吸光光度計等により検出することで確認することができる。

没食子酸に対する相対保持時間が０．５４〜０．６１の時間領域に実質的にピークを有しないとは、没食子酸の１ｐｐｍ溶液を分析時の面積値をＳ１とし、同条件でコーヒー組成物を分析した時の前記特定の領域に溶出する成分に由来するピーク面積の総和をＳ２としたとき、Ｓ２／Ｓ１＜０．０１であることを意味する。

本発明方法に用いられるコーヒー組成物には、ショ糖、グルコース、フルクトース、キシロース、果糖ブドウ糖液、糖アルコール等の糖分、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、乳化剤、香料等を添加することができるが、実質的に乳成分を含まないコーヒー飲料、いわゆるブラックが好ましい。コーヒー組成物のpHは、飲料の安定性の面で３〜７、更に４〜６．５、特に５〜６が好ましい。

また、本発明方法により製造される容器詰ブラックコーヒー飲料は、コーヒー組成物をＰＥＴボトル、缶（アルミニウム、スチール）、紙、レトルトパウチ、瓶（ガラス）等の容器に詰めて製造することができる。この場合、コーヒー組成物をそのまま容器に詰めて５０〜２５００ｍＬの容器詰コーヒー飲料とすることができる。容器詰ブラックコーヒー飲料は、シングルストレングスであることが好ましい。ここでシングルストレングスとは、容器詰飲料を開封した後、常態として薄めずにそのまま飲めるものをいう。容器詰ブラックコーヒー飲料のｐＨとしては３〜７が好ましく、更に４〜６．５、特に５〜６が好ましい。また、本発明により得られる容器詰ブラックコーヒー飲料中のモノカフェオイルキナ酸の構成比としては、４−カフェオイルキナ酸／３−カフェオイルキナ酸質量比が０．６〜１．２であり、５−カフェオイルキナ酸／３−カフェオイルキナ酸質量比が０．０１〜３であることが好ましい。

容器としては、コーヒー中の成分の変化を防止する観点から、酸素透過度の低い容器が好ましく、例えば、アルミニウムや、スチールなどの缶、ガラス製のビン等を用いるのが良い。缶やビンの場合、リキャップ可能な、リシール型のものも含まれる。ここで酸素透過度は、容器・フィルム酸素透過率測定器で２０℃、相対湿度５０％の環境下で測定した酸素透過度（ｃｃ・ｍｍ／ｍ²・ｄａｙ・ａｔｍ）であり、酸素透過度が５以下が好ましく、更に３以下、特に１以下が好ましい。

本発明において、殺菌時間は、ヒドロキシヒドロキノンの増加を効果的に抑制する点及び風味の点で、２０分以内であり、好ましくは１秒〜１８分、より好ましくは３秒〜１５分、更に好ましくは１５秒〜１０分である。バッチ式殺菌機においての殺菌時間は、風味の観点より好ましくは１〜２０分、更に好ましくは３〜１５分である。連続式殺菌機においての殺菌時間は、風味の観点より好ましくは１０〜９０秒、更に好ましくは２０〜８０秒である。

また、殺菌温度は、微生物学的安定性の点で１１２〜１５０℃が好ましく、特に１１５〜１４５℃が好ましい。比較的短時間で殺菌可能である連続式殺菌機においての殺菌温度は、風味の観点より１３０〜１５０℃が好ましい。

殺菌器はバッチ式殺菌機又は連続式殺菌機が使用可能である。バッチ式殺菌機としては、レトルト釜がある。連続式殺菌機としては、チューブ式殺菌機、プレート式殺菌機、ＨＴＳＴプレート式殺菌装置、ＵＨＴ殺菌機などがある（改訂版ソフトドリンクス、頁５４６−５５８、頁６３３−６３８、監修：全国清涼飲料工業会、発行：光琳）。風味の観点より、連続殺菌機が好ましく。特に、連続加熱殺菌後無菌下で充填する技術が好ましい。

また、殺菌時間及び殺菌温度はＦ０値を管理することにより行うのが好ましい。Ｆ０値は、微生物学的安定性、ヒドロキシヒドロキノンの増加を効果的に抑制する点及び風味の点で、好ましくは１０〜５０、より好ましくは１０〜４０、更に好ましくは１５〜３０、もっとも好ましくは１５〜２５である。ここでＦ０値とは、容器詰コーヒー飲料を加熱殺菌した場合の加熱殺菌効果を評価する値で、基準温度（１２１．１℃）における加熱時間（分）を示す。Ｆ０値は、容器内温度に対する致死率（１２１．１℃で１）に、加熱時間（分）を乗じて算出される。致死率は致死率表（藤巻正生ら、「食品工業」、恒星社厚生閣、１９８５年、１０４９頁）から求めることができる。Ｆ０値を算出するには、一般的に用いられる面積計算法、公式法等を採用することができる（例えば谷川ら《缶詰製造学》頁２２０、厚生閣参照）。本発明において、Ｆ０値を所定の値になるよう設定するには、例えば、予め得た致死率曲線から、適当な加熱温度・加熱時間を決定すればよい。

当該加熱殺菌処理は、上記条件の他、金属缶のように容器に充填後、加熱殺菌できる場合にあっては食品衛生法に定められた殺菌条件で行われる。ＰＥＴボトルや紙容器のようにレトルト殺菌できないものについては、あらかじめ食品衛生法に定められた条件と同等の殺菌条件、例えばプレート式熱交換器で高温短時間殺菌後、一定の温度迄冷却して容器に充填する等の方法が採用される。また無菌下で加熱殺菌後、無菌下でｐＨを中性に戻すことや、中性下で加熱殺菌後、無菌下でｐＨを酸性に戻す等の操作も可能である。

かくして得られる容器詰ブラックコーヒー飲料は、高血圧改善作用を有するクロロゲン酸類を有効量含有しており、かつ加熱殺菌処理後もクロロゲン酸類の高血圧改善作用を阻害しているヒドロキシヒドロキノン量が低減されていることから、血圧降下用、又は血圧上昇抑制医薬組成物、血圧降下用飲料、血圧上昇抑制の風味の良好な飲料として有用である。

クロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。
クロロゲン酸類の分析方法
容器詰ブラックコーヒー飲料又はコーヒー組成物のクロロゲン酸類およびカフェインの分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣを使用した。装置の構成ユニットの型番は次の通り。ＵＶ−ＶＩＳ検出器：Ｌ−２４２０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、カラムオーブン：Ｌ−２３００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、ポンプ：Ｌ−２１３０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、オートサンプラー：Ｌ−２２００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、カラム：ＣａｄｅｎｚａＣＤ−Ｃ１８内径４．６ｍｍ×長さ１５０ｍｍ、粒子径３μｍ（インタクト（株））。
分析条件は次の通りである。サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、ＵＶ−ＶＩＳ検出器設定波長：３２５ｎｍ、カラムオーブン設定温度：３５℃、溶離液Ａ：０．０５Ｍ酢酸、０．１ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液、溶離液Ｂ：アセトニトリル。

濃度勾配条件
時間溶離液Ａ溶離液Ｂ
０．０分１００％０％
１０．０分１００％０％
１５．０分９５％５％
２０．０分９５％５％
２２．０分９２％８％
５０．０分９２％８％
５２．０分１０％９０％
６０．０分１０％９０％
６０．１分１００％０％
７０．０分１００％０％

試料１ｇを精秤後、溶離液Ａにて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、ＨＰＬＣ分析に供した。
クロロゲン酸類の保持時間（単位：分）
（Ａ¹）モノカフェオイルキナ酸：５．３、８．８、１１．６の計３点（Ａ²）フェルラキナ酸：１３．０、１９．９、２１．０の計３点（Ａ³）ジカフェオイルキナ酸：３６．６、３７．４、４４．２の計３点。ここで求めた９種のクロロゲン酸類の面積値から５−カフェオイルキナ酸を標準物質とし、質量％を求めた。

ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法
容器詰ブラックコーヒー飲料又はコーヒー組成物のヒドロキシヒドロキノンの分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣ−電気化学検出器（クーロメトリック型）であるクーロアレイシステム（モデル５６００Ａ、開発・製造：米国ＥＳＡ社、輸入・販売：エム・シー・メディカル（株））を使用した。装置の構成ユニットの名称・型番は次の通りである。
アナリティカルセル：モデル５０１０、クーロアレイオーガナイザー、クーロアレイエレクトロニクスモジュール・ソフトウエア：モデル５６００Ａ、溶媒送液モジュール：モデル５８２、グラジエントミキサー、オートサンプラー：モデル５４２、パルスダンパー、デガッサー：ＤｅｇａｓｙｓＵｌｔｉｍａｔｅＤＵ３００３、カラムオーブン：５０５。カラム：ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫＣ１８ＡＱ内径４．６ｍｍ×長さ２５０ｍｍ粒子径５μｍ（（株）資生堂）。
分析条件は次の通りである。
サンプル注入量：１０μＬ、流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、電気化学検出器の印加電圧：０ｍＶ、カラムオーブン設定温度：４０℃、溶離液Ａ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液、溶離液Ｂ：０．１（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．１ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５０（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液。

溶離液Ａ及びＢの調製には、高速液体クロマトグラフィー用蒸留水（関東化学（株））、高速液体クロマトグラフィー用メタノール（関東化学（株））、リン酸（特級、和光純薬工業（株））、１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（６０％水溶液、東京化成工業（株））を用いた。

濃度勾配条件
時間溶離液Ａ溶離液Ｂ
０．０分１００％０％
１０．０分１００％０％
１０．１分０％１００％
２０．０分０％１００％
２０．１分１００％０％
５０．０分１００％０％

試料５ｇを精秤後、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて１０ｍＬにメスアップし、この溶液について遠心分離を行い上清の分析試料を得た。この分析試料について、ボンドエルートＳＣＸ（固相充填量：５００ｍｇ、リザーバ容量：３ｍＬ、ジーエルサイエンス（株））に通液し、初通過液約０．５ｍＬを除いて通過液を得た。この通過液について、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過し、速やかに分析に供した。

ＨＰＬＣ−電気化学検出器の上記の条件における分析において、ヒドロキシヒドロキノンの保持時間は、６．３８分であった。得られたピークの面積値から、ヒドロキシヒドロキノン（和光純薬工業（株））を標準物質とし、質量％を求めた。

実施例１
中焙煎度のコーヒー豆に対して８倍量のイオン交換水（９５℃）で抽出し、コーヒー抽出液を得た。次に本コーヒー抽出液中のＢｒｉｘを測定し、Ｂｒｉｘに対して５０重量％の量の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）を準備した。その後、活性炭を充填したカラムに温度２５℃、ＳＶ８［１／容量［ｍ３］／流量［ｍ³/ｈｒ］］の条件下でコーヒー抽出液を通液し、活性炭処理してヒドロキシヒドロキノンを除去したコーヒー組成物を得た。
こうして得られたヒドロキシヒドロキノンを除去したコーヒー組成物中のクロロゲン酸類量を測定し、イオン交換水で希釈し、重曹にてｐＨ調整を行った。加熱殺菌前のヒドロキシヒドロキノンは、検出限界以下であった（ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法）。次にこうして得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、表１に示す殺菌条件に従いレトルト殺菌処理を施し、容器詰ブラックコーヒー飲料を得た。また加熱殺菌後のヒドロキシヒドロキノンは、ＨＰＬＣ−電気化学検出器によるヒドロキシヒドロキノンの分析方法を用いた。

実施例２、３、４、５、６及び比較例１
表１に示す殺菌条件（Ｆ０値、殺菌時間および殺菌温度）にそれぞれ制御した以外は実施例１と同様に容器詰ブラックコーヒー飲料を製造した。

比較例２
中焙煎度のコーヒー豆に対して８倍量のイオン交換水（９５℃）で抽出し、コーヒー抽出液を得た。活性炭処理を実施しないこと以外は実施例１と同様の操作で、表１の示す殺菌条件に従い、容器詰ブラックコーヒー飲料を製造した。

実施例７
中焙煎度のコーヒーエキスのＢｒｉｘに対して、５０重量％の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ，長さ１５０ｍｍ）に、温度２５℃，ＳＶ８［１／容量［ｍ³］／流量［ｍ³／ｈｒ］］の条件下で、前記コーヒーエキスを通液した。
予め乳化剤，カゼインＮａ，脱脂粉乳を溶解した溶液に、牛乳，砂糖水溶液，及び上記活性炭処理コーヒーエキスを混合し、重曹を溶解した水溶液を用いてｐＨ調製を行った後、クロロゲン酸類量が１７０ｍｇ／１００ｇとなるようにイオン交換水で希釈した。
得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、１３５℃で１００秒間のレトルト殺菌処理を施し、容器詰ブラックコーヒー飲料を製造した。

実施例８
中焙煎度、及び低焙煎度のコーヒー混合エキスのＢｒｉｘに対して、５０重量％の活性炭（白鷺ＷＨ２Ｃ）を充填したカラム（内径４５ｍｍ，長さ１５０ｍｍ）に、温度２５℃，ＳＶ８［１／容量［ｍ³］／流量［ｍ³／ｈｒ］］の条件下で、前記コーヒー混合エキスを通液した。
予め乳化剤，カゼインＮａ，脱脂粉乳を溶解した溶液に、牛乳，砂糖水溶液，及び上記活性炭処理コーヒーエキスを混合し、重曹を溶解した水溶液を用いてｐＨ調製を行った後、クロロゲン酸類量が３５０ｍｇ／１００ｇとなるようにイオン交換水で希釈した。
得られたコーヒー組成物を１９０ｇ缶に充填後、密封し、１３５℃で１００秒間のレトルト処理を施し、容器詰ブラックコーヒー飲料を製造した。

結果
表１及び表２に示したように、殺菌時間を２０分以内に制御することで加熱殺菌後のヒドロキシヒドロキノンの増加が抑制されることが判った。またＨＨＱ低減処理によってすっきり感が出てきていた。しかしながら殺菌時間が長すぎると風味劣化の一因になることも判った。

＜クロロゲン酸の測定前処理の具体例＞
容器詰ミルクコーヒーを開缶後、直ちに１ｇを精秤後、溶離液Ａ（５０ｍＭ酢酸、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、０．１ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液）にて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。

＜ヒドロキシヒドロキノンの測定前処理の具体例＞
容器詰ミルクコーヒーを開缶後、直ちに５ｇを精秤後、０．５（Ｗ／Ｖ）％リン酸、０．５ｍＭ１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸を含有する５（Ｖ／Ｖ）％メタノール溶液にて１０ｍＬにメスアップし、この溶液について遠心分離を行い上清を得た。この上清について、ボンドエルートＪＲＳＣＸ（固相充填量：５００ｍｇ、ジーエルサイエンス（株））に通液し、初通過液約１．０ｍＬを除いて、通過液を得た。この通過液について、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過し、速やかに分析に供した。

＜過酸化水素の測定具体例＞
過酸化水素分析計SUPER ORITECTOR MODEL 5（セントラル科学（株））を使用し、標準校正液（過酸化水素１ppm）で校正した後、分析計測定セル内に、０．５％臭素酸カリウム配合の０．２Ｍリン酸バッファー（pH７．０）を１mL入れた。窒素送付によりセル内の溶存酸素がゼロになった時点で３０℃恒温槽に静置しておいた市販缶コーヒーならびに試験サンプルを開缶し１mLを速やかに抜き取り、測定セル内に加えた。後は、装置の測定手順に従い、発生した酸素濃度をプリンターから読み取った。尚、外そうする場合には、以後、１５分毎に測定し、得られた１時間後までのデータを用いて最小二乗法で直線を引き、求めた。ここでMODEL５の検出限界は０．１ｍｇ/ｋｇであった。

＜風味の評価＞
２５℃にてパネラー３名で開缶後すぐに飲用して評価した。
風味の評価は、◎風味が良い、○特に問題無い、○△やや風味が劣る、△明らかに風味が劣る、の４段階で行った。

参考例１
コーヒー組成物Ｑを次の方法で製造した。
活性炭処理コーヒーの製造
市販インスタントコーヒー（ネスカフェ（登録商標）ゴールドブレンド赤ラベル）２０ｇを、蒸留水１４００ｍＬに溶解したのち（このコーヒーをコーヒー組成物Ｐという）、活性炭白鷺ＷＨ２Ｃ２８／４２（日本エンバイロケミカルズ）を３０ｇ加え、１時間攪拌したのち、メンブレンフィルター（０．４５μｍ）を用いてろ過し、ろ液を得た（このコーヒーをコーヒー組成物Ｑという）。得られたろ液を、凍結乾燥し、褐色粉末１５．８ｇを得た。この褐色粉末を蒸留水に溶解し、ＨＰＬＣ分析により、クロロゲン酸類及びヒドロキシヒドロキノンの定量を行なったところ、クロロゲン酸類は４．１２質量％含まれ、ヒドロキシヒドロキノンは検出限界以下であった。

参考例２
参考例１で作製したコーヒー組成物Ｑの血圧降下評価
実験材料及び方法
（ａ）１３−１４週齢の雄性自然発症高血圧ラット（ＳＨＲ）を予備的に５日間連続で市販のラット用非観血式血圧測定装置（ソフトロン社製）を用いて血圧測定することにより、ラットを血圧操作に十分慣れさせた後、評価試験を測定した。ラットはすべて温度２５±１℃、相対湿度５５±１０％、照明時間１２時間（午前７時〜午後７時）の条件下（ラット区域内飼育室）で飼育した。
（ｂ）投与方法及び投与量；試験群では参考例２で作製したコーヒー組成物Ｑ（活性炭処理コーヒー）を用いた。対照群は市販のインスタントコーヒーを使用した。活性炭処理コーヒーとインスタントコーヒーをそれぞれ生理食塩水に溶解し、総クロロゲン酸量として２００ｍｇ／ｋｇの投与量となるように作製した。投与方法は経口用ゾンデを用いて、経口投与を行った。投与量は５ｍＬ／ｋｇとした。

（ｃ）試験方法；ＳＨＲを１群４−６匹使用した。経口投与前と１２時間後の尾静脈の収縮期血圧を測定し、投与前血圧から１２時間後の血圧変化率を算出した。
（ｄ）統計学処理方法；得られた測定結果は、平均値及び標準誤差を表してStudent's t-testを行い、有意水準は５％とした。
結果；表３から明らかなように、コーヒー組成物Ｑを摂取することにより、通常のインスタントコーヒーを摂取した場合に比較して、著明な血圧降下を認めた。

Claims

下記条件（Ａ）及び（Ｂ）：
（Ａ）クロロゲン酸類０．０１〜１質量％、
（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノンクロロゲン酸類量の０．１質量％未満
を満たすコーヒー組成物を用いて、ヒドロキシヒドロキノン量がクロロゲン酸類量の０．１質量％未満である容器詰ブラックコーヒー飲料を製造する方法において、前記コーヒー組成物を、殺菌温度１１２〜１５０℃、殺菌時間２０分以内、Ｆ０値１０〜５０の条件で加熱殺菌処理することを特徴とするヒドロキシヒドロキノンの増加抑制方法。
コーヒー組成物の（Ｂ）ヒドロキシヒドロキノンがクロロゲン酸類量の０．００３〜０．０２質量％である請求項１記載のヒドロキシヒドロキノンの増加抑制方法。
容器の酸素透過度が５（ｃｃ・ｍｍ／ｍ²・ｄａｙ・ａｔｍ）以下である請求項１又は２記載のヒドロキシヒドロキノンの増加抑制方法。