KR100503704B1

KR100503704B1 - 세포 유착 저해제

Info

Publication number: KR100503704B1
Application number: KR10-2002-7007342A
Authority: KR
Inventors: 지히로마사또시; 마쓰자끼다까유끼; 나가모또히사시; 미야꼬다고로; 스에요시시노부; 모리도요끼; 기따노가즈요시; 다께무라이사오; 야마시따히로시; 구리무라무네아끼; 다부사후지오
Original assignee: 오쓰까 세이야꾸 가부시키가이샤
Priority date: 1996-09-30
Filing date: 1997-09-29
Publication date: 2005-07-25
Also published as: AR009376A1; EP0957915B1; ID21933A; CN1190193C; US20020013469A1; ATE288267T1; CN1494904A; BR9712140A; HK1064038A1; HK1022419A1; DE69732428T2; CN1236769C; PT957915E; US20040014792A1; AR068695A2; KR20000048603A; AU4322197A; TW529950B; KR20050042829A; US6583163B2

Abstract

본 발명은 하기 식에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 화합물을 유효 성분으로 함유한 사이토카인 생성 또는 세포 유착의 저해제에 관한 것이다 :

{식중, R¹ 은 페닐 고리 상의 치환체(들)로서 저급 알콕시기(들)을 가질 수 있는 페닐기이고; R² 는 하기 식에 의해 표현되는 기이다:

[식중, 동일하거나 상이할 수 있는 R³ 은 각각, 카르복실기, 저급 알콕시기, 등이다]}.

Description

세포 유착 저해제 {AGENT FOR INHIBITION OF CELL ADHESION}

본 발명은 사이토카인 생성 저해제 및 세포 유착 저해제에 관한 것이다.

다수의 사이토카인이 면역 반응, 염증, 조혈 등과 같은 사람의 생리 활성의 발현을 저해하는 단백질 인자로서 발견되었으며, 이들의 구조 및 작용이 점점 명확해져 왔다. 그 결과, 사이토카인이 사람 면역 시스템에만 영향을 주는 것이 아니라, 사람의 기타 각종 생리학적 활성에도 영향을 주며, 또한, 인체의 발육, 분화, 항상성 및 질병과도 관련이 있음이 명확해지고 있다.

TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ 등과 같은 다수의 사이토카인이 확인되었다. 이들은 또한, 다양한 약리학적 활성을 가지는 것으로 알려져 있다.

상기 사이토카인 중, TNF-α (종양 괴사 인자-α) 는 항종양 사이토카인으로 밝혀졌으며, 항암제로서 사용될 것으로 기대되었다. 그러나, TNF-α 는 후에, 악액질 (악액질 유도 물질) 과 동일 물질인 것으로 밝혀졌고, 예를 들면, 하기와 같은 활성을 가지는 것으로 보고되었다 : IL-1 및 기타 사이토카인의 생성 자극 활성, 섬유아세포의 증식 활성, 엔도톡신 쇽 (shock) 유도 활성, 백혈구를 내피 세포에 유착시키는 것을 가속화하는 ICAM-1, ICAM-2 (세포내 유착 분자), ELAM (내피 백혈구 유착 분자 1) 등 (이들 분자는 백혈구를 내피 세포에 유착시키는 단백질이다) 을 증가시키는 활성, 그리고, 골흡수, 연골 파괴 등과 같은 관절염 유도 활성 : [Beutler, B., 등, Nature, 316, 552-554 (1985); Peetre, C., 등, J. Clin. Invest., 78, 1694-1700 (1986); Kurt-Jones, E.A., 등, J. Immunol., 139, 2317-2324 (1987); Bevilacqua, M.P., 등, Science, 241, 1160-1165 (1989); Akatu, K. & Suda, T., Medical Practice, 8 (9) 1393-1396 (1991)].

또한, 혈액 또는 신경림프 중의 TNF 농도는 박테리아 또는 기생충에 의한 감염성 질병일 때 증가하는 것으로 보고되어 있다 : [Mitsuyama, M., Journal of Clinical and Experimental Medicine (IGAKU NO AYUMI), 159 (8) 467-470 (1991); Nakao, M., Journal of Clinical and Experimental Medicine (IGAKU NO AYUMI), 159 (8) 471-474 (1991)].

또한, TNF 의 활성은 만성 류머티스성 관절염일 때, 활액 (synovial fluid) 또는 혈청 중에서 발견되며, 그 활성은 TNF-α 활성인 것으로 보고되어 있다 : [Saxne, T., 등, Arthritis Rheum., 31, 1041 (1988); Chu, C.Q., 등, Arthritis Rheum., 34, 1125-1132 (1991); Macnaul, K.L., 등, J. Immunol., 145, 4154-4166 (1990); Brennan, F.M., 등, J. Immunol., 22, 1907-1912 (1992); Brennan, F.M., 등, Bri. J. Rheum., 31, 293-298 (1992)].

또한, TNF 의 농도는 중증 호흡기 질환인 ARDS (급성 호흡 곤란 증후군) 환자의 담에서 높게 나타나며 [Millar, A.B., 등, Nature, 324, 73 (1986)], TNF 는 바이러스성 급성 간염과 관련이 있는 것으로 보고되어 있다 [Muto, Y., 등, Lancet, ii, 72-74 (1986)].

또한, 혈중 TNF-α 의 농도는 급성 심근 경색증과 같은 심근 허혈일 때 높은 것으로 보고되어 있다 [Latini, R., 등, J. Cardiovasc. Pharmacol., 23, 1-6 (1994)]. TNF-α 가 이와 같은 질병과 관련이 있는 것으로 추측된다 [Lefer, A.M., 등, Science, 249, 61-64 (1990)]. 최근에는 TNF-α 가 심근 수축을 억제하는 것으로 보고된 적이 있다 [Finkel, M.S., 등, Science, 257, 387-389 (1992); Pagani, D.F., 등, J. Clin. Invest., 90, 389-398 (1992)].

현재로서는 만성 류머티스성 관절염, 엔도톡신 쇽, ARDS 등과 같은 상기에 언급한 여러 가지 질병에 대해 만족스러운 화학요법이 개발되지 못했다. 이들 질병에 대해서는 단지, 대중 치료로서, 스테로이드성 제제, 항염증제, 혈소판 응집 저해제, 항생제 등이 적용된다. 상기에 언급한 바와 같이, 상기 질병들과 TNF-α 의 농도 또는 활성의 증가 사이에는 밀접한 관련이 있는 것으로 추측되며, 최근 TNF-α 항체 등을 이들 질병에 적용하려는 시도가 있었지만; 이와 같은 접근도 또한 만족스러운 결과를 가져오지 못했다. 그러므로, 당 기술 분야에서는 신규 메카니즘에 따라, 특히 TNF-α 의 과잉 생성을 억제할 수 있는, 상기 질병들의 치료용 약제를 개발하는 것이 요망된다.

B 세포는 항원에 의해 활성화되며, 항체 생성 세포로 증식 및 분화된다. IL-6 은 이러한 분화에 관여하는 사이토카인인 것으로 알려져 있다.

IL-6 이 B 세포의 항체 생성에 중요한 역할을 할 뿐만 아니라, T 세포의 증식 및 분화를 유도한다는 것은 명백하다. 또한, IL-6 은 간 세포에 작용하여 급성상 (acute phase) 에서 단백질의 합성을 유도하고, 조혈 세포에 작용하여 다능성 집락 (pluripotential colonies) 의 형성을 촉진하며, 면역 시스템, 조혈 시스템, 신경 시스템, 간 등과 같은 생체 방어 시스템에 있어 중요한 인자임이 명백하다.

IL-6 이 관련된 질병으로는 하기를 언급할 수 있다 : 일련의 자가면역 질환, 예컨대, 고 감마(γ) 글로불린 혈증, 만성 류머티스성 관절염, 전신성 루푸스 홍반증 (SLE) 등; 단클론성 B 세포 이상증 (예로, 골수종); 다클론성 B 세포 이상증; 심방 점액종; 캐슬맨(Castleman) 증후군; 1차 사구체 신염; 사구체 간질 증식성 신염; 암성 악액질; 레난더(Lennander's) 림프종; 건선; AIDS 에서 나타나는 카포시 육종; 폐경기후 골다공증; 등.

IL-1β 는 여러 가지 생리학적 활성을 가진 것으로 알려져 있다. 이러한 활성의 구체적인 예를 들면 하기와 같다 : 종양 세포의 저해, 활성화된 T 세포로부터의 사이토카인 생성의 증가, 섬유아세포, 활막 세포 및 혈관 내피의 증식, 세포의 이화 작용 및 발열 작용, 활성화된 B 세포의 분화, NK 활성의 증가, 호중구의 유착, 항염증, 방사 장애 (radiation disorder) 의 저해 등.

IL-1β 가 증가된 속도로 생성되어 과잉이 될 때, IL-1β 가 만성 류머티스성 관절염, 만성 염증성 질환 등과 같은 각종 질병을 유발하는 것으로 생각된다.

IFN 은 여러 가지 생리학적 활성을 가진 것으로 알려져 있고, 여러 질병 시에, 조직 및 혈액중에서 실제로 검출된다. 질병의 개시가 IFN 과 밀접한 관련이 있다고 생각되는 질병으로는 하기가 포함된다 : 바이러스성 감염증, 바이러스 외의 미생물에 의한 감염증, 만성 류머티스성 관절염, 콜라겐 질환 (예로, SLE), I-형 알러지, 포도막염, 베세트 병, 사르코이도시스, 동맥경화증, 당뇨병, 급성 간염, 악성 종양, 카와사끼 병, 피부 또는 점막의 상처 등 [Journal of Clinical and Experimental Medicine (IGAKU NO AYUMI), 174 (14), p. 1077, 1995].

호중구는 유주, 식작용, 활성 산소의 생성 및 리소좀 효소의 방출에 의해, 인체내로 침입하는 유해물에 대해 살균 작용을 한다. 그러나, 호중구는 여러 조직의 급성 염증, 또는 허혈 또는 재관류 시에, 혈관 내피 세포에 유착하고, 나아가 조직내로 침윤하여 조직 이상을 야기하는 것으로 알려져 있다.

상기에 서술한 바와 같이, 각종 사이토카인은 예를 들어, 사이토카인의 과다한 생성으로 인해 과잉이 될 때, 각종 질병을 유발하는 것으로 알려져 있다. 그러므로, 사이토카인의 비정상적인 상태를 개선하여 각종 질병을 예방 또는 치료하는 것이 요망된다.

또한, 호중구가 혈관 내피 세포에 유착함으로써 유발된 조직 이상을 저해하기 위한 약제의 개발이 요망된다.

하기 화학식 (1) 로 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염 중 몇몇은 예를 들면, JP-A-5-51318 호 및 JP-A-6-65222 호에 공지되어 있다 :

{식중, R¹ 은 페닐 고리 상의 치환체(들)로서 저급 알콕시기(들)을 가질 수 있는 페닐기이고; R² 는 하기 식에 의해 표현되는 기, 또는 질소 원자, 산소 원자 및 황 원자로 구성된 군에서 선택된 1∼2 개의 헤테로 원자를 갖는 복소환 잔기 (이 복소환 잔기는 복소환 상에 치환체(들)로서 카르복실기 및 저급 알콕시기로 구성된 군에서 선택된 1∼3 개의 기를 가질 수 있다) 이다:

[식중, 동일하거나 상이할 수 있는 R³ 은 각각, 카르복실기, 저급 알콕시기, 저급 알킬기, 저급 알케닐기, 식 -(A)_ℓ-NR⁴R⁵ (A 는 저급 알킬렌기이고; 동일하거나 상이할 수 있는 R⁴ 및 R⁵ 는 각각, 수소 원자 또는 저급 알킬기이고; ℓ 은 0 또는 1 이다) 에 의해 표현되는 기, 히드록실기로 치환된 저급 알킬기, 저급 알콕시기로 치환된 저급 알콕시기, 저급 알콕시기로 치환된 저급 알콕시카르보닐기 또는 카르복실기로 치환된 저급 알콕시기이고; m 은 1∼3 의 정수이다]}. 이들 티아졸 유도체 및 그의 염은 또한, 활성 산소 저해제로서도 유용한 것으로 잘 알려져 있다.

본 발명의 목적은 당 기술 분야의 요구를 충족시키는, 과다한 사이토카인의 이상 생성 또는 호중구가 혈관 내피 세포에 유착하는 것을 저해하기 위한 제제, 즉 사이토카인 생성 저해제 또는 세포 유착 저해제를 제공하는 것이다.

본 발명자는 상기 화학식 (1) 에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염의 약리학적 작용에 대해 더욱 연구하였다. 그 결과, 본 발명자는 티아졸 유도체 및 그의 염이 상기 본 발명의 목적을 충족시키는 사이토카인 생성 저해제 또는 세포 유착 저해제로서 작용할 수 있음을 발견하였다. 본 발명은 이러한 발견을 토대로 완성되었다.

본 발명에 따라, 상기 화학식 (1) 에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 화합물을 유효 성분으로 함유한 사이토카인 생성 저해제가 제공된다.

또한, 본 발명에 따라, 상기 화학식 (1) 에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 화합물을 유효 성분으로 함유한 세포 유착 저해제가 제공된다.

또한, 본 발명에 따라, 상기 화학식 (1) 에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 화합물을 유효 성분으로 함유한 TNF-α 생성 저해제가 제공된다.

화학식 (1) 에 의해 표현되는 티아졸 유도체 중, 6-[2-(3,4-디에톡시페닐)티아졸-4-일]피리딘-2-카르복실산이 바람직하다.

상기에 설명한 바와 같이, 화학식 (1) 의 티아졸 유도체 및 그의 염 중 일부 및 그의 제조 방법이 JP-A-5-51318 호 및 JP-A-6-65222 호에 기재되어 있으며, 이들 티아졸 유도체는 활성 산소 저해제로서 유용한 것으로 알려져 있다. 그런데, 본 발명에 따른 사이토카인 생성 저해 또는 세포 유착 저해는, 티아졸 유도체에 의한 상기의 활성 산소 저해와는 관계가 없으며, 활성 산소의 저해로부터 예측할 수 없는 것이다.

본 발명에 따른 사이토카인 생성 또는 세포 유착의 저해제는 사이토카인, 특히 TNF-α, IL-1β, IL-6, IFN-γ 의 과다한 이상 생성, 또는 증가된 유착과 관련된 각종 질병에 있어 유용하다. 본 제제는 특히 하기와 같은 질환의 치료 또는 예방제로서 적합할 수 있다 : 만성 류머티스성 관절염; 위 내용물의 흡인, 독성 기체, 패혈증 등으로 인한 ARDS; 화상; 천식; 심근 허혈 중의 심근 경색; 급성상 바이러스성 심근염; 만성 심부전증 (예로, 특발성 확장 심근증); 등. 본 제제는 또한, 하기와 같은 질환의 예방 또는 치료제로서 적합하게 사용될 수 있다 : 관상 동맥 바이패스 그라프트 (CABG) 시 또는 인공 심장 폐 장치의 사용으로 인한 허혈-재관류 상해; 전신성 염증성 반응 증후군 (SIRS) 으로부터 기관 부전 (예로, 중증 급성 췌장염, 파종성 혈관내 응고 (DIC)) 로의 쉬프트 (shift); 급성 췌장염, 또는 간암의 절제와 같은 간 절제 후의 간 부전으로 인한 다장기 부전 (multiple organ failure); 중증 급성 췌장염; 염증성 장 질환, 예컨대, 궤양성 대장염, 크론병 등; 일련의 자가면역 질환, 예컨대, 고 감마(γ) 글로불린 혈증, 만성 류머티스성 관절염, 전신성 루푸스 홍반증 (SLE), 다발성 경화증 등; 암의 전이; 이식시 거부 반응; 단클론성 B 세포 이상증 (예로, 골수종); 다클론성 B 세포 이상증; 심방 점액종; 캐슬맨 증후군; 1차 사구체 신염; 사구체 간질 증식성 신염; 암성 악액질; 레난더 림프종; 건선; 아토피 피부염; AIDS 에서 나타나는 카포시 육종; 폐경기후 골다공증; 당뇨병; 패혈증 (예로, 엔도톡신 쇽); 동맥경화증; 및 염증성 질환 (예로, 맥관염 및 간염).

하기는 사이토카인 생성 저해 또는 세포 유착 저해를 위한 본 제제가 효험이 있는 질병에 대한 문헌의 목록이다.

(1) 이식에 대한 문헌

(a) Kojima, Y. 등, (1993) Cardiovasc. Surg., 1, 577-582

(b) Yamataka, T. 등, (1993) J. Pediatr. Surg., 28, 1451-1457

(c) Stepkowshi, S.M. 등, (1994) J. Immunol., 153, 5336-5346

(2) 천식에 대한 문헌

(a) Ohkawara, Y. 등, (1995) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 12, 4-12

(b) Chihara, J. 등, (1995) Immunol. Lett., 46, 241-244

(c) Hakansson, L. 등, (1995) J. Allergy Clin. Immunol., 96, 941-950

(3) 동맥경화증에 대한 문헌

(a) Poston, R.N. 등, (1992) Am. J. Pathol., 140, 665-673

(b) Ross, P., (1993) Nature, 362, 801-809

(c) Li, H. 등, (1993) Arterioscler. & Thromb., 13, 197-204

(d) Walpola, P.L. 등, (1995) Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 15, 2-10

(4) 암 전이에 대한 문헌

(a) Garofalo, A. 등, (1995) Cancer Res., 55, 414-419

(b) Gardner, M.J. 등, (1995) Cancer Lett., 91, 229-234

(5) 당뇨병에 대한 문헌

(a) McLeod, D.S. 등, (1995) Am. J. Pathol., 147, 642-653

(b) Schmidt, A.M. 등, (1995) J. Clin. Invest., 96, 1395-1403

(c) Jakubowski, A. 등, (1995) J. Immunol., 155, 938-946

(6) 다발성 경화증에 대한 문헌

(a) Dore-Duffy, P. 등, (1993) Adv. Exp. Med. Biol., 331, 243-248

(b) Mizobuchi, M. 및 Iwasaki, Y., (1994) Nippon Rinsho, 52, 2830-2836

(c) Cannella, B. 및 Raine, C.S., (1995) Ann. Neurol., 37, 424-435

(7) 다장기 부전에 대한 문헌

(a) Law, M.M. 등, (1994) J. Trauma., 37, 100-109

(b) Anderson, J.A. 등, (1996) J. Clin. Invest., 97, 1952-1959

(8) 아토피 피부염에 대한 문헌

(a) Meng, H. 등, (1995) J. Cell Physiol., 165, 40-53

(b) Santamaria, L.F. 등, (1995) Int. Arch. Allergy Immunol., 107, 359-362

(c) Wakita, H. 등, (1994) J. Cutan. Pathol., 21, 33-39

(9) 건선에 대한 문헌

(a) Groves, R.W. 등, (1993) J. Am. Acad. Dermatol., 29, 67-72

(b) Uyemura K., (1993) J. Invest. Dermatol., 101, 701-705

(c) Lee, M.L. 등, (1994) Australas J. Dermatol., 35, 65-70

(d) Wakita, H. 및 Takigawa, M., (1994) Arch. Dermatol., 130 , 457-463

(10) 만성 류머티스성 관절염에 대한 문헌

(a) Hale, P.L. 등, (1993) Arthritis Rheum., 32, 22-30

(b) Iigo Y. 등, (1991) J. Immunol., 147, 4167-4171

(11) 급성 호흡 곤란 증후군에 대한 문헌

(a) Tate, R.M. 및 Repine, J.E., (1983) Am. Rev. Respir. Dis., 128, 552-559

(b) Beutler, B., Milsark, I.W. 및 Cerami, A.C., (1985) Science, 229, 869-871

(c) Holman, R.G. 및 Maier, R.V., (1988) Arch. Surg., 123, 1491-1495

(d) Windsor, A. 등, (1993) J. Clin. Invest., 91, 1459-1468

(e) van der Poll, T. 및 Lowry, S.F., (1995) Prog. Surg. Basel. Karger, 20, 18-32

(12) 허혈성 재관류 상해에 대한 문헌

(a) Yamazaki, T. 등, (1993) Am. J. Pathol., 143, 410-418

(b) Vaage, J. 및 Valen, G., (1993) Acand. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. Suppl., 41

(c) McMillen, M.A. 등, (1993) Am. J. Surg., 166, 557-562

(d) Bevilacqua, M.P. 등, (1994) Annu. Rev. Med., 45, 361-378

(e) Panes, J. 및 Granger, D.N., (1994) Dig. Dis., 12, 232-241

(13) 염증성 장 질환에 대한 문헌

(a) Mahida, Y.R. 등, (1989) Gut, 30, 835-838

(b) Nakamura, S. 등, (1993) Lab. Invest., 69, 77-85

(c) Beil, W.J. 등, (1995) J. Leukocyte Bio., 58, 284-298

(d) Jones, S.C. 등, (1995) Gut, 36, 724-730

(14) 전신성 염증성 반응 증후군에 대한 문헌

(a) K. Mori 및 M. Ogawa, (1996) Molecular Medicine, 33, 9, 1080-1088

(b) Dinarello, C.A. 등, (1993) JAMA, 269, 1829

화학식 (1) 에 사용된 각 기의 구체적인 예는 하기와 같다.

페닐 고리 상의 치환체(들)로서 저급 알콕시기(들)을 가질 수 있는 페닐기로는 하기가 포함된다 : 페닐 고리 상의 치환체(들)로서 1∼3 개의 C_1∼6 직쇄 또는 측쇄 알콕시기를 가질 수 있는 페닐기, 예컨대, 페닐, 2-메톡시페닐, 3-메톡시페닐, 4-메톡시페닐, 2-에톡시페닐, 3-에톡시페닐, 4-에톡시페닐, 4-이소프로폭시페닐, 4-펜틸옥시페닐, 4-헥실옥시페닐, 3,4-디메톡시페닐, 3-에톡시-4-메톡시페닐, 2,3-디메톡시페닐, 3,4-디에톡시페닐, 2,5-디메톡시페닐, 2,6-디메톡시페닐, 3-프로폭시-4-메톡시페닐, 3,5-디메톡시페닐, 3,4-디펜틸옥시페닐, 3,4,5-트리메톡시페닐, 3-메톡시-4-에톡시페닐 등.

저급 알킬기로는 하기가 포함된다 : C_1∼6 직쇄 또는 측쇄 알킬기, 예컨대, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, tert-부틸, 펜틸, 헥실 등.

저급 알콕시기로는 하기가 포함된다 : C_1∼6 직쇄 또는 측쇄 알콕시기, 예컨대, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 부톡시, tert-부톡시, 펜틸옥시, 헥실옥시 등.

저급 알케닐기로는 하기가 포함된다 : C_2∼6 직쇄 또는 측쇄 알케닐기, 예컨대, 비닐, 알릴, 2-부테닐, 3-부테닐, 1-메틸알릴, 2-펜테닐, 2-헥세닐 등.

식 -(A)_ℓ-NR⁴R⁵ (A 는 저급 알킬렌기이고; 동일하거나 상이할 수 있는 R⁴ 및 R⁵ 는 각각, 수소 원자 또는 저급 알킬기이고; ℓ 은 0 또는 1 이다) 로 표현되는 기로는 하기가 포함된다 : 식 -(A)_ℓ-NR⁴R⁵ (A 는 C_1-6 알킬렌기이고; 동일하거나 상이할 수 있는 R⁴ 및 R⁵ 는 각각, 수소 원자 또는 C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알킬기이고; ℓ 은 0 또는 1 이다) 로 표현되는 기, 예컨대, 아미노, 메틸아미노, 에틸아미노, 프로필아미노, 이소프로필아미노, tert-부틸아미노, 부틸아미노, 펜틸아미노, 헥실아미노, 디메틸아미노, 디에틸아미노, 메틸에틸아미노, 메틸프로필아미노, 아미노메틸, 2-아미노에틸, 3-아미노프로필, 4-아미노부틸, 5-아미노펜틸, 6-아미노헥실, 1,1-디메틸-2-아미노에틸, 2-메틸-3-아미노프로필, 메틸아미노메틸, 에틸아미노메틸, 프로필아미노메틸, 부틸아미노메틸, 펜틸아미노메틸, 헥실아미노메틸, 디메틸아미노메틸, 2-디메틸아미노에틸 등.

히드록실기로 치환된 저급 알킬기로는 하기가 포함된다 : 1∼3 개의 히드록실기를 갖는 C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알킬기, 예컨대, 히드록시메틸, 2-히드록시에틸, 1-히드록시에틸, 1,2-디히드록시에틸, 3-히드록시프로필, 2,3-디히드록시프로필, 4-히드록시부틸, 1,1-디메틸-2-히드록시에틸, 5,5,4-트리히드록시펜틸, 5-히드록시펜틸, 6-히드록시헥실, 1-히드록시이소프로필, 2-메틸-3-히드록시프로필 등.

저급 알콕시기로 치환된 저급 알콕시기로는 하기가 포함된다 : 알콕시 부분이 각각 C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알콕시기인 알콕시알콕시기, 예컨대, 메톡시메톡시, 3-메톡시프로폭시, 에톡시메톡시, 4-에톡시부톡시, 6-프로폭시헥실옥시, 5-이소프로폭시펜틸옥시, 1,1-디메틸-2-부톡시에톡시, 2-메틸-3-tert-부톡시프로폭시, 2-펜틸옥시에톡시, 헥실옥시메톡시 등.

저급 알콕시카르보닐기의 예로는 하기를 들 수 있다 : C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알콕시카르보닐기, 예컨대, 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 프로폭시카르보닐, 이소프로폭시카르보닐, 부톡시카르보닐, tert-부톡시카르보닐, 펜틸옥시카르보닐, 헥실옥시카르보닐 등.

저급 알콕시기로 치환된 저급 알콕시카르보닐기로는 하기가 포함된다 : 알콕시 부분이 각각, C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알콕시기인, 알콕시기로 치환된 알콕시카르보닐기, 예컨대, 메톡시메톡시카르보닐, 3-메톡시프로폭시카르보닐, 에톡시메톡시카르보닐, 4-에톡시부톡시카르보닐, 6-프로폭시헥실옥시카르보닐, 5-이소프로폭시펜틸옥시카르보닐, 1,1-디메틸-2-부톡시-에톡시카르보닐, 2-메틸-3-tert-부톡시프로폭시카르보닐, 2-펜틸옥시에톡시카르보닐, 헥실옥시메톡시카르보닐 등.

카르복실기로 치환된 저급 알콕시기로는 하기가 포함된다 : 알콕시 부분이 C_1-6 직쇄 또는 측쇄 알콕시기인, 카르복실기로 치환된 알콕시기, 예컨대, 카르복시메톡시, 2-카르복시에톡시, 1-카르복시에톡시, 3-카르복시프로폭시, 4-카르복시부톡시, 5-카르복시펜틸옥시, 6-카르복시헥실옥시, 1,1-디메틸-2-카르복시에톡시, 2-메틸-3-카르복시프로폭시 등.

질소 원자, 산소 원자 및 황 원자로 구성된 군에서 선택된 1∼2 개의 헤테로 원자를 갖는 헤테로고리 잔기의 예로는 하기가 포함된다 : 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 모르폴리노, 피리딜, 1,2,5,6-테트라히드로피리딜, 티에닐, 퀴놀릴, 1,4-디히드로퀴놀릴, 벤조티아졸릴, 피라지닐, 피리미딜, 피리다지닐, 피롤릴, 카르보스티릴, 3,4-디히드로카르보스티릴, 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀릴, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리닐, 벤즈이미다졸릴, 벤족사졸릴, 이미다졸리디닐, 이소퀴놀릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 시놀리닐, 프탈라디닐, 카르바졸릴, 아크리디닐, 크로마닐, 이소인돌리닐, 이소크로마닐, 피라졸릴, 이미다졸릴, 피라졸리디닐, 페노티아지닐, 벤조푸릴, 2,3-디히드로[b]푸릴, 벤조티에닐, 페녹사티에닐, 페녹사지닐, 4H-크로메닐, 1H-인다졸릴, 페나지닐, 크산테닐, 티안트레닐, 2-이미다졸리닐, 2-피롤리닐, 푸릴, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 피라닐, 2-피라졸리닐, 퀴누클리디닐, 1,4-벤족사지닐, 3,4-디히드로-2H-1,4-벤족사지닐, 3,4-디히드로-2H-1,4-벤즈티아지닐, 1,4-벤즈티아지닐, 1,2,3,4-테트라히드로퀴녹살리닐, 1,3-디티아-2,4-디히드로나프탈레닐, 페난트리디닐 및 1,4-디티아나프탈레닐.

카르복실기 및 저급 알콕시기로 구성된 군에서 선택된 1∼3 개의 기를 갖는, 질소 원자, 산소 원자 및 황 원자로 구성된 군에서 선택된 1∼2 개의 헤테로원자를 갖는 복소환 잔기의 예로는 하기가 포함된다 : 4-카르복시-2-푸릴, 5-카르복시-2-푸릴, 4-카르복시-2-피리딜, 6-카르복시-2-피리딜, 4-메톡시-5-카르복시-2-티오페닐, 4-카르복시-2-티아졸릴, 2-카르복시-4-피리딜 및 4-카르복시-2-피리미딜.

화학식 (1) 로 표현되는 티아졸 유도체 중, 염기성 기를 갖는 화합물들은 약리학적으로 허용가능한 통상적인 산과 용이하게 반응하여 각각 염을 형성한다. 이러한 산의 예로는 하기를 들 수 있다 : 무기산, 예컨대, 황산, 질산, 염산, 인산, 브롬산 등; 및 유기산, 예컨대, 아세트산, p-톨루엔술폰산, 에탄술폰산, 옥살산, 말레산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 숙신산, 벤조산 등.

화학식 (1) 로 표현되는 티아졸 유도체 중, 산성 기를 갖는 화합물들은 약리학적으로 허용가능한 통상적인 염기성 화합물과 용이하게 반응하여 각각 염을 형성한다. 이러한 염기성 화합물의 예로는 하기가 포함된다 : 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 수산화 칼슘, 탄산 나트륨, 탄산수소 칼륨.

물론, 본 발명의 화합물은 광학 이성질체도 포함한다.

화학식 (1) 의 화합물의 각각은 일반적으로, 통상적인 약학 제제의 형태로 사용된다. 약학 제제는 통상적으로 사용되는 희석제 또는 부형제, 예컨대, 충전제, 벌크제, 결합제, 보습제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제 등을 사용하여 제조된다. 약학 제제는 처방의 목적에 따라 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 통상적인 형태로는 정제, 환제, 산제, 액제, 현탁제, 유탁제, 과립제, 캡슐제, 좌제, 주사제 (예로, 주사용 액제 또는 현탁액) 등이 포함된다. 정제를 제조할 때에는 당 기술 분야에 공지된 각종 담체가 사용될 수 있다. 담체의 예로는 하기를 들 수 있다 ; 부형제, 예컨대, 락토스, 백당, 염화 나트륨, 글루코스, 우레아, 전분, 탄산 칼슘, 카올린, 결정질 셀룰로스, 규산 등; 결합제, 예컨대, 물, 에탄올, 프로판올, 단미 시럽, 글루코스 용액, 전분 용액, 젤라틴 용액, 카르복시메틸 셀룰로스, 쉘락, 메틸 셀룰로스, 인산 칼륨, 폴리비닐피롤리돈 등; 붕해제, 예컨대, 건조 전분, 알긴산 나트륨, 분말 한천, 분말 라미나린, 탄산수소 나트륨, 탄산 칼슘, 폴리옥시에틸렌 소르비탄-지방산 에스테르, 소듐 라우릴 술페이트, 스테아르산 모노글리세라이드, 전분, 락토스 등; 붕해 저해제, 예컨대, 백당, 스테아린, 카카오 버터, 수소화 오일 등; 흡수 촉진제, 예컨대, 4차 암모늄염, 소듐 라우릴 술페이트 등; 보습제, 예컨대, 글리세린, 전분 등; 흡착제, 예컨대, 전분, 락토스, 카올린, 벤토나이트, 콜로이드성 규산 등; 및 윤활제, 예컨대, 정제된 탈크, 스테아르산염, 붕산 분말, 폴리에틸렌 글리콜 등. 정제는 필요하다면, 통상적인 코팅정, 예컨대, 당의정, 젤라틴 코팅정, 장용성 코팅정, 필름 코팅정의 형태, 또는 이중정 또는 다층정의 형태로 제조될 수 있다. 환제를 제조할 때에는, 당 기술 분야에 공지된 각종 담체를 사용할 수 있다. 담체의 예로는 하기를 들 수 있다 : 부형제, 예컨대, 글루코스, 락토스, 전분, 카카오 버터, 경화 식물성 오일, 카올린, 탈크 등; 결합제, 예컨대, 분말 아카시아, 분말 트래가칸트, 젤라틴, 에탄올 등; 및 붕해제, 예컨대, 라미나린, 한천 등. 좌제를 제조할 때에는, 당 기술 분야에 공지된 각종 담체를 사용할 수 있다. 담체의 예로는 폴리에틸렌 글리콜, 카카오 버터, 고급 알콜, 고급 알콜 에스테르, 젤라틴 및 반합성 글리세라이드를 들 수 있다. 캡슐은 통상적인 방법에 따라, 상기에 언급한 유효 성분과 상기에 언급한 각종 담체를 혼합하고, 생성된 홉합물을 경질 젤라틴 캡슐, 연질 젤라틴 캡슐 등에 충전시킴으로써 제조된다. 주사제 (주사용 액제, 유탁액 또는 현탁액) 을 제조할 때에는, 이를 멸균하고, 바람직하게는 혈액과 등장이 되게 한다. 주사용 액제, 유탁액 또는 현탁액을 제조할 때에는 당 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 하기와 같은 모든 희석제가 사용될 수 있다 : 물, 에틸 알콜, 마크로골, 프로필렌 글리콜, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시-이소스테아릴 알콜 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄-지방산 에스테르. 이 경우, 주사제는 주사제를 등장으로 하기에 충분한 양으로 염화 나트륨, 글루코스 또는 글리세린을 함유할 수 있고, 용해 보조제, 완충액, 평활제 등과 같은 모든 통상적으로 사용되는 것들을 더 함유할 수 있다. 약학 제제는 또한, 필요하다면, 착색제, 방부제, 방향제, 풍미제, 감미제 및 기타 약학 제제를 더 함유할 수도 있다.

본 발명의 약학 제제에 함유될 유효 성분 화합물의 양은 특별히 제한되지 않고 넓은 범위에서 적당히 선택될 수 있지만, 바람직한 양은 일반적으로, 약학 제제의 약 1∼70 중량% 이다.

본 발명의 약학 제제를 투여하는 방법은 특별히 제한되지 않는다. 투여 방법은 제형, 환자의 연령, 성별 및 기타 조건, 환자의 질병 상태 등에 따라 결정된다. 예를 들어, 정제, 환제, 액제, 현탁액, 유탁액, 과립제 또는 캡슐제는 경구로 투여된다. 주사제는 단독으로, 또는 글루코스, 아미노산 등의 통상적인 보조 용액과의 혼합물로 정맥내 투여되거나, 필요하다면 단독으로 근육내, 경피, 피하 또는 복강내 투여된다. 좌제는 직장내로 투여된다.

본 발명의 약학 제제의 투여량은 투여 방법, 환자의 연령, 성별 및 기타 조건, 환자의 질병 상태 등에 따라 적합하게 선택지만, 바람직한 투여량은 일반적으로, 유효 성분, 즉, 화학식 (1) 의 화합물 또는 그의 염의 양으로 환산하여 1 일당 체중 1 ㎏ 당 약 0.2∼200 ㎎ 이다.

[실시예]

본 발명을 하기 참고예, 실시예, 약리학적 시험 및 제제예에 의해 더욱 상세히 설명한다.

참고예 1

8.8 ㎖ 의 아세트산 중의 0.88 g 의 6-아세틸-3-아세틸옥시-2-에톡시카르보닐피리딘의 용액에, 0.19 ㎖ 의 브롬을 적가하고, 혼합물을 75 ℃ 에서 5 분간 교반한다. 용매를 증발시켜, 0.77 g 의 6-(2-브로모아세틸)-2-에톡시카르보닐-3-히드록시피리딘 히드로브로마이드를 수득한다.

참고예 2

참고예 1 에 나타낸 과정을 이용하여 5-아세틸-2-메톡시카르보닐푸란으로부터 5-(2-브로모아세틸)-2-메톡시카르보닐푸란을 제조한다.

참고예 3

120 ㎖ 의 10 % 염산-DMF 중의 29 g 의 3,4-디에톡시벤조니트릴 및 23 g 의 티오아세트아미드의 용액을 90 ℃ 에서 3 시간 동안 교반한 다음, 130 ℃ 에서 5 시간 동안 교반한다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 디에틸 에테르 (2×100 ㎖) 및 물 (2×100 ㎖) 로 세척한다. 생성된 결정을 여과에 의해 수집한 후 건조시켜, 21.7 g 의 3,4-디에톡시티오벤즈아미드를 수득한다.

참고예 4

참고예 3 에 나타낸 과정을 이용하여 4-메톡시-3-프로폭시벤조니트릴로부터 4-메톡시-3-프로폭시티오벤즈아미드를 제조한다.

참고예 5

40 ㎖ 의 메탄올 중의 877 ㎎ 의 5-(2-브로모아세틸)-2-메톡시카르보닐푸란의 용액에, 800 ㎎ 의 4-메톡시-3-프로폭시티오벤즈아미드를 첨가하고, 혼합물을 1 시간 동안 환류시킨다. 반응 혼합물을 약 1/4 로 농축한 다음, 디에틸 에테르를 첨가한다. 용액을 냉각시킨 후, 침전물을 여과에 의해 수집하고 건조시켜, 1.05 g 의 2-(4-메톡시-3-프로폭시페닐)-4-(5-메톡시카르보닐-2-푸릴)티아졸을 갈색 분말로 수득한다. 융점 141.0∼142.0 ℃.

참고예 6∼36

적당한 출발 물질을 사용하고, 상기 참고예들에서 사용된 것과 유사한 과정을 이용하여, 하기 표 1 내지 표 6 에 나타낸 화합물들을 수득한다.

[표 1a]

[표 1b]

[표 2a]

[표 2b]

[표 3a]

[표 3b]

[표 4a]

[표 4b]

[표 5a]

[표 5b]

[표 6]

상기 수득된 화합물은 하기 NMR 스펙트럼을 갖는다.

실시예 1

30 ㎖ 의 메탄올 중의 970 ㎎ 의 2-(4-메톡시-3-프로폭시페닐)-4-(5-메톡시카르보닐-2-푸릴)티아졸의 현탁액에, 20 ㎖ 의 1,4-디옥산 및 5 ㎖ 의 5 N 수산화 나트륨 수용액을 첨가한다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 환류시킨 다음, 약 1/10 로 농축한다. 잔류물에 물을 첨가하고, 에틸 아세테이트로 세척한다. 수성층에 5N 염산을 첨가하여 산성화한 후, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기층을 모은 다음, 물 및 염화 나트륨 포화 수용액으로 세척하고, 황산 마그네슘으로 건조시킨다. 용액을 증발시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트로부터 재결정하여 420 ㎎ 의 2-(4-메톡시-3-프로폭시페닐)-4-(5-카르보닐-2-푸릴)티아졸을 백색 분말로 수득한다. 융점 191.0∼192.0 ℃.

실시예 2∼35

적당한 출발 물질을 사용하고, 실시예 1 에서 사용된 것과 유사한 과정을 이용하여 하기 표 7 내지 표 12 에 나타낸 화합물들을 수득한다.

[표 7a]

[표 7b]

[표 8a]

[표 8b]

[표 9a]

[표 9b]

[표 10a]

[표 10b]

[표 11a]

[표 11b]

[표 12]

상기에서 수득된 화합물은 하기 NMR 스펙트럼을 갖는다.

약리학적 시험 1 (유착 저해 작용 1)

시험 화합물을 0.1 M 수산화 나트륨에 용해시킨다. 생성된 용액에 9 배 부피의 PBS (인산염 완충 식염액) Dulbecco 제제 (Takara Co. 제조) 를 첨가하여 1 mM 시험 화합물 용액을 제조한다. 이 용액에 0.1 M 수산화 나트륨/PBS (1:9) 를 첨가하여 희석함으로써, 0.1 mM 시험 화합물 용액 및 0.01 mM 시험 화합물 용액을 제조한다. 두 가지 시험 화합물 용액에 각각 RPMI-1640 배지 [10 % FCS (소 태아 혈청) 함유] 를 첨가하여 40 배 희석한다. 따로, N-포르밀메티오닐류실페닐알라닌 (fMLP) (디메틸포름아미드중의 2 mM) 을 RPMI-1640 배지 (10 % FCS 함유) 로 희석하여, 0.25 mM fMLP 용액을 제조한다.

건강한 사람의 완전 혈액으로부터 덱스트란 침강, 피콜-플라크-밀도 그레디엔트 원심분리 및 적혈구 용혈에 의해 정제된 호중구를 수득한 다음; 이를 PBS (3 ㎖) 에 현탁시키고; 실온에서 1 시간 동안 50 ㎕ 의 형광 라벨링제 (BCECF-AM, Dojindo Lab. 제조) 로 라벨링한다. 사람 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC) (Clonetics Co. 제조) 를 24-웰 배양 플레이트 상에서 배양하여, 세포가 융합될 때 시험을 시작한다.

배양 플레이트의 각 웰의 배지를 제거한다. 웰에 0.2 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 또는 0.2 ㎖ 의 희석된 시험 화합물 용액, 및 0.2 ㎖ 의 fMLP 용액을 첨가한다. 마지막으로, 10⁶ 개의 형광 라벨된 호중구를 각 웰에 첨가하고, 각 생성된 혼합물을 37 ℃ 에서 30 분간 배양한다. 유착 호중구 및 비유착 호중구 세포를 각각 수집하여 형광 강도를 측정한다. 따로 제조된, 호중구의 수와 형광 강도 간의 표준선을 이용하여, 세포수를 측정하고, 50 % 유착 저해의 시험 화합물 농도, 즉 IC₅₀ 를 측정한다.

결과를 하기 표 13 에 나타낸다.

[표 13]

약리학적 시험 2

[유착 저해 작용 2 (내피 세포에 ICAM-1 또는 VCAM-1 의 출현에 대한 작용)]

시험 화합물을 0.1 M 수산화 나트륨에 용해시킨다. 생성된 용액에 9 배 부피의 Dulbecco 제제의 PBS (Takara Co. 제조) 를 첨가하여 1 mM 시험 화합물 용액을 제조한다. 이 용액을 0.1 M 수산화 나트륨/PBS (1:9) 로 희석하여, 각각 300 μM, 100 μM, 30 μM, 10 μM 및 3 μM 의 시험 화합물을 함유한 용액을 제조한다. 이 용액들을 각각, RPMI-1640 배지 (10 % FCS 함유) 로 10 배 희석하여, 100 μM, 30 μM, 10 μM, 3 μM, 1 μM 및 0.3 μM 의 시험 화합물을 함유한 용액을 제조한다.

TNF-α (R & D Systems 제조, 10 ㎍/㎖ 용액) 를 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 로 희석하여, 6 ng/㎖ TNF-α 용액을 제조한다. 사람 대동맥 내피 세포 (HAEC) 및 사람 제대 정맥 내피 세포 (HUVEC) 를 따로 96-웰 배양 플레이트에서 배양하고, 세포가 융합될 때, 각 웰의 배지를 제거한다. 그 다음, 각 50 ㎕ 의 상기 제조된 시험 화합물 용액을 웰에 첨가한다. 양성 대조 웰 및 음성 대조 웰에 50 ㎕ 의 배지 및 100 ㎕ 의 배지를 각각 첨가한다. 플레이트를 37 ℃ 에서 30 분간 배양한다. 50 ㎕ 의 상기 제조한 TNF-α 용액을 음성 대조 웰을 제외한 모든 웰에 첨가하고, 플레이트를 37 ℃ 에서 24 시간 동안 배양한다. 각 웰의 배지를 제거하고, 100 ㎕ 의 파라포름알데히드 (PBS 중의 2 %) 를 각 웰에 첨가한다. 실온에서 10 분간 고정화를 수행한다. 생리 식염수로 6 회 세척한 후, 차단 용액 (0.1 % BSA (소 태아 혈청)/PBS) 을 각 웰에 첨가한다. 플레이트를 실온에서 1 시간 동안 배양한다. 차단 용액을 제거한다. 100 ㎕ 의 1차 항체 용액 (0.1 % BSA/PBS 로 1,000 배 희석된 항체) 을 첨가하고, 반응 혼합물을 4 ℃ 에서 18 시간 동안 배양한다. 생리 식염수로 5 회 세척한 후, 100 ㎕ 의 2차 항체 용액 (0.1 % BSA/PBS 로 1,000 배 희석된 항체) 을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 배양한다. 생리 식염수로 5 회 세척한 후, 100 ㎕ 의 퍼옥시다제로 표지된 아비딘 용액 (DAKO Co. 제조, 0.1 % BSA/PBS 로 1,000 배 희석된 것) 을 첨가한다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 배양한다. 생리 식염수로 5 회 세척한 후, 100 ㎕ 의 OPD (o-페닐렌디아민 디히드로클로라이드) 기질 용액을 첨가하고, 색이 전개되도록 37 ℃ 에서 방치한다. 492/692 nm 에서의 흡광도를 측정하고, ICAM-1 또는 VCAM-1 의 50 % 출현 저해의 시험 화합물 농도, 즉, IC₅₀ 를 측정한다.

시험 화합물로서 실시예 2 의 화합물을 사용한다. 1차 항체 및 2차 항체는 하기와 같다.

1차 항체:

마우스의 항 사람 ICAM-1 (Becton, Dickinson & Co. 제조)

마우스의 항 사람 VCAM-1 (Becton, Dickinson & Co. 제조)

2차 항체:

토끼의 항 사람 면역글로불린 (DAKO Co. 제조)

결과를 하기 표 14 에 나타낸다.

[표 14]

약리학적 시험 3 (TNF-α 생성 저해 작용)

시험 화합물을 0.1 M 수산화 나트륨에 용해시킨다. 여기에, 9 배 부피의 PBS (Dulbecco 제제, Takara Co. 제조) 를 첨가하여, 1 mM 시험 화합물 용액을 제조한다. 이 용액을 0.1 M 수산화 나트륨/PBS (1:9) 으로 희석하여 0.1 mM, 0.01 mM, 1 μM, 0.1 μM 및 0.01 μM 시험 화합물 용액을 제조한다.

RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 를 사용하여 50 ㎍/㎖ 리포폴리사카라이드 (LPS) 용액을 제조한다. 24-웰 배양 플레이트를 사용한다. 1.35 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 를 LPS-비자극 대조 웰에 첨가하고, 1.32 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 를 LPS-자극 대조 웰에 첨가한다. 다른 웰에는 1.17 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 및 0.15 ㎖ 의 상기에서 제조된 각 시험 화합물 희석 용액을 첨가한다. 모든 웰에 0.15 ㎖ 의 사람 완전 혈액을 첨가하고, 웰을 37 ℃ 에서 30 분간 배양한다. 마지막으로, LPS-비자극 대조 웰 이외의 모든 웰에 0.03 ㎖ 의 상기에서 제조된 LPS 용액을 첨가하고, 모든 웰을 37 ℃ 에서 24 시간 동안 배양한다. 저속 원심분리를 수행하여, 각 웰의 상청액을 수집한 다음, 시판용 ELISA 키트를 사용하여 TNF-α 농도를 측정한다. 50 % TNF-α 생성 저해의 시험 화합물 농도, 즉, IC₅₀ 을 측정한다. 결과를 하기 표 15 에 나타낸다.

[표 15]

약리학적 시험 4 (IL-1 생성 저해 작용)

약리학적 시험 3 에서와 동일한 방법으로 IL-1 생성을 측정하고, 50 % 생성 저해의 시험 화합물 농도, 즉, IC₅₀ 을 측정한다. 시험 화합물이 실시예 2 의 화합물일 때, IC₅₀ 은 80 μM 이다.

약리학적 시험 5 (IL-6 생성 저해 작용)

약리학적 시험 3 에서와 동일한 방법으로 IL-6 생성량을 측정하고, 50 % 생성 저해의 시험 화합물 농도, 즉, IC₅₀ 을 측정한다. 시험 화합물이 실시예 2 의 화합물일 때, IC₅₀ 은 100 μM 이상이다.

약리학적 시험 6 (IFN-γ 생성 저해 작용)

RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 을 사용하여 50 ㎎/㎖ 콘카나발린(concanavalin) A (Con A, Seikagaku Co. 제조) 용액을 제조한다. 24-웰 배양 플레이트를 사용한다. 1.35 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 를 Con A-비자극 대조 웰에 첨가하고, 1.32 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 를 Con A-자극 대조 웰에 첨가한다. 다른 웰에는 1.17 ㎖ 의 RPMI-1640 (10 % FCS 함유) 및 0.15 ㎖ 의 상기에서 제조된 각 시험 화합물 희석 용액을 첨가한다. 모든 웰에 0.15 ㎖ 의 사람 완전 혈액을 첨가하고, 웰을 37 ℃ 에서 30 분간 배양한다. 마지막으로, Con A-비자극 대조 웰 이외의 모든 웰에 0.03 ㎖ 의 상기에서 제조된 Con A 용액을 첨가하고, 모든 웰을 37 ℃ 에서 48 시간 동안 배양한다. 저속 원심분리를 수행하여, 각 웰의 상청액을 수집한 다음, 시판용 ELISA 키트를 사용하여 IFN-γ 농도를 측정한다. 50 % 생성 저해의 시험 화합물 농도, 즉, IC₅₀ 을 측정한다. 시험 화합물이 실시예 2 의 화합물일 때, IC₅₀ 은 5 μM 이다.

제제예 1

실시예 1 의 화합물 150 g

아비셀 (Avicel) (미소결정 셀룰로스의 상품명, Asahi Chemical Industry Co., Ltd. 제조) 40 g

옥수수 전분 30 g

마그네슘 스테아레이트 2 g

히드록시프로필메틸셀룰로스 10 g

폴리에틸렌 글리콜-6000 3 g

피마자 오일 40 g

에탄올 40 g

본 유효 성분 화합물, 아비셀, 옥수수 전분 및 마그네슘 스테아레이트를 함께 혼합하여 연마한 다음, 통상적인 당의정용 타정기 (지름 10 mm) 를 사용하여 혼합물을 정제로 성형한다. 히드록시프로필메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜-6000, 피마자 오일 및 에탄올로 구성된 필름 코팅제로 정제를 코팅하여 필름 코팅정을 제조한다.

제제예 2

실시예 2 의 화합물 150 g

시트르산 1.0 g

락토스 33.5 g

디칼슘 포스페이트 70.0 g

플루로닉 (Pluronic) F-68 30.0 g

소듐 라우릴 술페이트 15.0 g

폴리비닐 피롤리돈 15.0 g

폴리에틸렌 글리콜 (Carbowax 1500) 4.5

폴리에틸렌 글리콜 (Carbowax 6000) 45.0 g

옥수수 전분 30.0 g

건조 소듐 라우릴 술페이트 3.0 g

건조 마그네슘 스테아레이트 3.0 g

에탄올 필요량

본 유효 성분 화합물, 시트르산, 락토스, 디칼슘 포스페이트, 플루로닉 F-68 및 소듐 라우릴 술페이트를 함께 혼합한다.

혼합물을 60 호 스크린을 통해 체질한다. 체질한 혼합물을, 폴리비닐 피롤리돈, Carbowax 1500 및 Carbowax 6000 을 함유한 에탄올 용액으로 습식 과립화한다. 필요하다면, 에탄올을 첨가하여 혼합물을 반죽 덩어리로 만든다. 옥수수 전분을 첨가하고, 균일한 입자가 형성될 때까지 혼합 조작을 수행한다. 입자를 10 호 스크린을 통과시킨 다음, 트레이 (tray) 에 두고 100 ℃ 오븐에서 12∼14 시간 동안 건조시킨다. 건조된 입자를 16 호 스크린을 통과시킨다. 그 다음, 건조 소듐 라우릴 술페이트 및 마그네슘 스테아레이트를 체질한 입자에 첨가한다. 타정 기계를 사용하여, 혼합물을 원하는 모양의 핵정 (core tablet) 으로 압축한다.

핵정을 니스제 (varnish) 로 처리한 다음, 탈크를 그 위에 분무하여 수분 흡수를 방지한다. 생성된 핵정의 표면에 하부 코팅층을 형성시킨다. 하부 코팅층 상에 니스제를 충분히 여러 번 코팅하여 정제를 내복용으로 적합하도록 한다. 또한, 하부 코팅층 형성 및 평활 코팅을 수행하여, 코팅정이 완전히 둥글고 평활하도록 만든다. 정제 표면이 원하는 색깔로 될 때까지 착색 코팅을 수행한다. 건조시킨 후, 코팅정을 닦아 균일한 광택을 갖는 정제를 수득한다.

제제예 3

실시예 2 의 화합물 5 g

폴리에틸렌 글리콜 (분자량: 4000) 0.3 g

염화 나트륨 0.9 g

폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트 0.4 g

소듐 메타비술파이트 0.1 g

메틸파라벤 0.18 g

프로필파라벤 0.02 g

주사용 증류수 10.0 ㎖

파라벤, 소듐 메타비술파이트 및 염화 나트륨을 80 ℃ 에서 교반하면서 상기 부피의 반 정도의 증류수에 용해시킨다. 생성된 용액을 40 ℃ 로 냉각시킨다. 이 용액에 본 유효 성분 화합물, 폴리에틸렌 글리콜 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레에이트를 용해시킨다. 생성된 용액에 나머지 증류수를 첨가하여 최종 부피를 수득한다. 이렇게 수득된 용액을 적절한 여과지를 통과시켜 멸균함으로써 주사제를 제조한다.

Claims

하기 식에 의해 표현되는 티아졸 유도체 및 그의 염으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 화합물을 유효 성분으로 함유하는, ARDS, 천식, 다장기 부전, 크론병, 전신성 루푸스 홍반증 (SLE), 다발성 경화증, 암성 악액질, 건선, 아토피 피부염, 및 패혈증으로 이루어진 군에서 선택된, 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진(acceleration of adhesion)에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제:

[화학식 1]

{식중, R¹ 은 페닐 고리 상의 치환체(들)로서 저급 알콕시기(들)을 가질 수 있는 페닐기이고; R² 는 하기 식에 의해 표현되는 기, 또는 피리딜기, 푸릴기, 티에닐기, 티아졸릴기 또는 피리미디닐기(피리딜, 푸릴, 티에닐, 티아졸릴 또는 피리미디닐 고리 상에 치환체(들)로서 카르복실기 및 저급 알콕시기로 구성된 군에서 선택된 1∼3 개의 기를 가질 수 있다) 이다:

[식중, 동일하거나 상이할 수 있는 R³ 은 각각, 카르복실기, 저급 알콕시기, 저급 알킬기, 저급 알케닐기, 식 -(A)_ℓ-NR⁴R⁵ (A 는 저급 알킬렌기이고; 동일하거나 상이할 수 있는 R⁴ 및 R⁵ 는 각각, 수소 원자 또는 저급 알킬기이고; ℓ 은 0 또는 1 이다) 에 의해 표현되는 기, 히드록실기로 치환된 저급 알킬기, 또는 카르복실기로 치환된 저급 알콕시기이고; m 은 1∼3 의 정수이다]}.
제 1 항에 있어서, 유효 성분이 6-[2-(3,4-디에톡시페닐)티아졸-4-일] 피리딘-2-카르복실산인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 1 항에 있어서, 질환이 ARDS 인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 1 항에 있어서, 질환이 천식인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 1 항에 있어서, 질환이 크론병인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 3 항에 있어서, 유효 성분이 6-[2-(3,4-디에톡시페닐)티아졸-4-일]피리딘 -2-카르복실산인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 4 항에 있어서, 유효 성분이 6-[2-(3,4-디에톡시페닐)티아졸-4-일]피리딘 -2-카르복실산인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
제 5 항에 있어서, 유효 성분이 6-[2-(3,4-디에톡시페닐)티아졸-4-일]피리딘 -2-카르복실산인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.
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제 4 항에 있어서, 질환이 알레르기성 천식인 호중구의 혈관 내피 세포로의 유착 촉진에 의해 유발된 질환의 예방 및 치료제.