KR100473919B1 - 저 밀도 지단백질 콜레스테롤 농도를 저하시키기 위한 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는, 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드에서 선택된 이소플라본을 포함하는 조성물에 관한 것으로, 여기서, 식물성 스테롤은 조성물 중량의 0.49 중량% 이상을 포함한다. 또한, 본 발명은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 사람에게 동시투여하고, 여기서 식물성 스테롤은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본의 총 중량을 기준으로 하여 0.49 중량% 이상을 포함하는 것인 사람의 완전 콜레스테롤 및/또는 LDL 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 사람에게 동시투여하고, 여기서 식물성 스테롤은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본의 총 중량을 기준으로 하여 0.49 중량% 이상을 포함하는 것인 사람의 동맥경화증의 진행을 예방 또는 최소화하는 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키기 위한 조성물 및 그 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 식물성 스테롤, 대두 단백질 및 이소플라본 및 이의 조합물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 이는 LDL-콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키고 동맥경화증의 진행을 방지하거나 또는 최소화하는데 유용하다.
심혈관 질환은 특히 미국 및 서유럽 국가에서 발병률 및 사망률을 높히는 주된 요인이 되고 있다. 질병에 대한 유전적 소인, 성별, 생활 습관, 예컨대 흡연 및 다이어트, 연령, 고혈압, 과지질혈증(콜레스테롤과잉혈증 포함) 등을 비롯한 여러가지의 원인이 되는 요인이 심혈관 질환의 진행에 관련되어 있다. 이러한 여러가지의 요인들 중에서도, 과지혈증 및 콜레스테롤과잉혈증은 혈관 및 심장 질환의 주된 원인이 되는 동맥경화증의 진행에 작용하게 된다.
혈중 콜레스테롤 농도가 높은 것은 사람에게 있어서 혈관 질환 및 관상 심장 질환에 대한 가장 위험한 요인 중의 하나가 된다. 증가된 저밀도 지단백질 콜레스테롤(이후에, "LDL-콜레스테롤"로 칭함) 및 증가된 완전 콜레스테롤은 관상 심장 질환의 위험성을 증가시키는데 있어서 직접적인 관련을 갖는다. 참조 문헌[Cholesterol and Mortality: 30 Years of Follow-Up from the Framingham Study, 앤더슨, 카스텔리 및 레비, JAMA, vol 257, pp. 2176-80 (1987)].
규정식에서의 대두 단백질의 섭취는 관상 심장 질환의 위험성을 저하시키는 것과 관련이 있는데, 이는 혈청 콜레스테롤 농도를 저하시키는 것을 반영할 수 있다. 대두 단백질은 동물의 혈중에서의 완전 콜레스테롤 농도와 LDL-콜레스테롤의 농도를 저하시키는 것으로 공지되어 있다. 사람에서의 혈청 지질에 대한 대두 단백질 섭취의 효과에 대한 최근의 메타-분석에 의하면, 사람에서의 완전 콜레스테롤 및 LDL-콜레스테롤의 혈청 농도를 저하시키는 것에는 식이성 대두 단백질이 지대한 관련을 갖는 것으로 나타났다. 참고 문헌[Meta-Analysis of the Effects of Soy Protein Intake on Serum Lipids, 앤더슨, 존스톤 및 쿡네웰, N. Engl. J. Med., vol. 333, No. 5, pp. 276-82 (1995)].
완전 대두에서 발견되는 화합물인 피토스테롤은 혈액 중에 순환하는 완전 콜레스테롤 및 LDL 콜레스테롤 농도를 저하시키는 것으로 나타났다. 참조 문헌[Dietary Phytosterols: A Review of Metabolism, Benefits, and Side Effects, 링 앤 존즈, Life Sci., Vol. 57:3, pp. 195-206 (1995)]. 피토스테롤은 식물에 의해 생성되는 스테롤 화합물로서, 이들은 스테롤 측쇄상의 C24 위치에서 약간의 치환체를 항상 갖는다는 점을 제외하고는 콜레스테롤과 구조적으로 매우 유사하다. 통상의 식물성 스테롤류의 예로는 도 1에 도시된 불포화 스테롤류 β-시토스테롤, 캄페스테롤 및 스티그마스테롤, 도 2에 도시된 이들의 해당 포화 산물인 시토스타놀 및 캄페스타놀 등이 있다. 피토스테롤의 식이성 공급원의 예로는 비교적 소수성인 화합물을 함유하는 기타의 식물성 오일, 옥수수 오일 및 대두유 등이 있다.
도 3 및 도 4에 도시된 피토에스트로겐성 이소플라본은 완전 대두에서 발견되는 또다른 화합물의 일종으로서, 이는 혈중에서의 LDL 및 완전 콜레스테롤 농도를 저하시키는데 있어서 중요한 인자로서 인식되고 있다. 정제된 농축 이소플라본, 특히 게니스테인은 콜레스테롤의 생합성을 억제할 뿐 아니라, 동맥경화증의 진행에 있어서 중요한 단계인 LDL 콜레스테롤의 산화 반응을 억제하게 된다. 참조 문헌[대한민국 특허 출원 제97-20103호, Oxidized Low Density Lipoprotein-Mediated Activation of Phospholipase D in Smooth Muscle Cells: a Possible Role in Cell Proliferation and Atherogenesis, Natarajan et al., J. Lipid Res. 36:9 pp. 2005-16 (1995년 9월)].
대두유, 대두 단백질 및 약학적 조성물 또는 식이성 보충 조성물을 생성하기 위해 완전 대두를 통상적으로 가공하는 경우에 있어서, 피토스테롤, 이소플라본 및 대두 단백질을 분리한다. 식물성 스테롤은 대두 단백질 및 이소플라본으로부터 대두유 분획으로 분리하고, 이 대두유 분획은 거피시킨 대두의 기계적 또는 화학적 추출에 의해 지방 및 지방 가용물을 함유하게 된다. 대두유 분획은 대두 및 식물성 오일에 사용하기 위한 잔류 대두 물질-"탈지 처리한 대두 물질"-로부터 분리하고, 이를 추가로 처리하여 쇼트닝, 마가린 및 레시틴을 형성할 수가 있다.
탈지 처리된 대두 물질, 일반적으로는 탈지 처리된 대두 박편을 출발 물질로서 사용하여 대두 단백질 농축물 및 대두 단백질 분리물과 같은 대두 단백질을 상당량 함유하는 물질을 생성한다. 또한, 대두 단백질 산물을 생성하는데 사용된 탈지 처리된 대두 물질은 이소플라본을 함유한다. 그러나, 대두 단백질 농축물 및 대두 단백질 분리물과 같은 대두 단백질 물질의 통상의 생성 방법에 있어서, 상당량의 이소플라본은 대두 단백질 물질을 알콜 추출물 또는 수성의 추출물로 세척하여 대두 단백질로부터 분리된다. 참조 문헌[Soy Protein Products, Characteristics, Nutritional Aspects, and Utilization, pp. 3-6 (Pub. Soy Protein Council, 1987].
통상적인 대두 단백질 물질의 제조에 있어서, 이소플라본이 대두 단백질 물질내에 존재하는 경우 이상한 맛, 악취 및/또는 착색과 연관되어 있기 때문에 대두 단백질 물질로부터 이소플라본을 분리시키고자 하는 것에 초미의 관심이 집중되어 있다. 예를 들면 미국 특허 제5,804,234호에는 맛이 더 좋은 대두 단백질을 생성하기 위해 단백질 물질과 흡착제 수지를 접촉시켜 대두 물질로부터 이소플라본을 제거하는 기법이 기재되어 있다. 대두 단백질 물질은 알콜 추출법을 사용하는 것이 특히 바람직한데, 이는 알콜 추출법이 수성 추출법보다도 훨씬 맛이 좋은 식물성 단백질 물질을 생성하기 때문이며, 이는 부분적으로는 알콜이 대두 단백질 물질로부터 이소플라본을 제거하는데 꽤 유효하기 때문이다. 참조 문헌[일본 특허 출원 제63-245,648A호].
최근에는 식물성 물질로부터 이소플라본을 분리시키고자 하는 시도가 이루어지고 있는데, 특히 이소플라본은 대두 및 토끼풀에서 발견되는데, 이는 건강상의 잇점을 제공하는데 사용될 수 있는 정제된 이소플라본 물질을 제공하게 된다. 예를 들면, 미국 특허 제4,428,876호, 동제5,702,752호, 동제5,679,806호, 동제4,390,559호, 동제4,366,248호, 동제4,366,082호, 동제4,264,509호, 동제4,232,122호, 동제4,157,984호, 일본 특허 제1-258669A호, 동제5-170756A호, 동제41-90720A호, 동제62-126186A호, 동제62-126185A호 및 PCT 특허 출원 제WO93/23069호의 특허 문헌에는 식물성 물질로부터 이소플라본을 분리하는 다양한 방법이 기재되어 있다. 분리된 이소플라본 화합물은 약학적 조성물 또는 식이성 보충 조성물에 사용되어 높은 콜레스테롤 농도를 저하시키는 것을 비롯한 여러가지의 해로운 건강 상태를 예방 또는 치료하는데 사용된다. 예를 들면, 미국 특허 제5,516,528호, 동제5,424,331호, 동제5,569,459호, 동제5,654,001호 및 PCT 특허 출원 제 WO93/23069호에 기재되어 있는 바와 같이 분리된 이소플라본 물질은 약학적 또는 식이성 보충 조성물에 사용될 수 있다.
LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 크게 저하시켜서 동맥경화증 및 관상 심장 질환의 위험성을 상당히 저하시킬 수 있는 대두 성분을 이용하는 신규한 방법 및 이의 조성물이 여전히 요망되고 있다.
본 발명의 제1의 특징은 대두 단백질 물질의 건조 중량의 49 중량% 이상의 대두 단백질을 포함하는 대두 단백질 물질 및, 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군에서 선택된 이소플라본 1 종 이상 및 식물성 스테롤을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 이때, 식물성 스테롤은 조성물의 0.49 중량%를 형성한다
본 발명의 제2의 특징은 대두 단백질 물질의 건조 중량의 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 및 식물성 스테롤을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 이때 식물성 스테롤은 조성물의 0.49 중량% 이상을 형성한다.
본 발명의 제3의 특징은 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군에서 선택된 이소플라본 1 종 이상 및 식물성 스테롤을 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 식물성 스테롤은 조성물의 0.49 중량% 이상을 형성한다.
본 발명의 제4의 특징은 사람의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 방법에 관한 것으로서, 대두 단백질 물질의 건조 중량을 기준으로 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질, 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군에서 선택된 이소플라본 및 식물성 스테롤을 사람에게 동시투여하여 사람 혈중의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 농도를 저하시킨다. 식물성 스테롤은 동시투여된 대두 단백질 물질, 이소플라본 및 식물성 스테롤의 총 중량의 0.49% 이상을 포함하도록 하는 함량으로 동시투여된다. 바람직한 특징에 있어서, 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및 이소플라본을 사람에게 동시투여하여 사람에 있어서의 동맥경화증의 진행을 방지 또는 최소화하는 것이다.
본 발명의 제5의 특징은 사람의 혈중에서의 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 농도를 저하시키는 방법에 관한 것으로서, 이때, 대두 단백질 물질의 건조 중량의 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 및 식물성 스테롤을 사람에게 동시투여하여 사람의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시킨다. 식물성 스테롤은 동시투여된 대두 단백질 물질 및 식물성 스테롤의 총 중량의 0.49% 이상을 포함하도록 하는 함량으로 동시투여된다. 바람직한 특징에 있어서, 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질을 사람에게 동시투여하여 사람에 있어서의 동맥경화증의 진행을 방지 또는 최소화하는 것이다.
본 발명의 제6의 특징은 사람의 혈중에서의 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 농도를 저하시키는 방법에 관한 것으로서, 이때, 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군에서 선택된 이소플라본 및 식물성 스테롤을 사람에게 동시투여하여 사람의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시킨다. 식물성 스테롤은 동시투여된 이소플라본 및 식물성 스테롤의 총 중량의 0.49% 이상을 포함하도록 하는 함량으로 동시투여된다. 바람직한 특징에 있어서, 식물성 스테롤 및 이소플라본을 사람에게 동시투여하여 사람에 있어서의 동맥경화증의 진행을 방지 또는 최소화하는 것이다.
본 발명의 제7의 특징은 대두 배축 물질 및 식물성 스테롤을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 이때, 식물성 스테롤은 조성물의 0.49 중량% 이상을 형성한다.
바람직한 실시태양의 설명
본 명세서에서 사용한 용어 "Mal"은 "말로닐"을 의미하며, "Ac"는 "아세틸"을 의미한다. 용어 "최소화한다" 또는 이의 변형어는 특이성 생물학적 효능의 완전 또는 부분적인 억제를 포함하는 것을 의미한다(이는 용어 최소화한다라는 것을 사용한 명세서의 내용으로부터 명백함). 또한, 본 명세서에 사용된 용어 "이소플라본" 또는 "피토에스트로겐"은 모두 단일의 이소플라본 또는 피토에스트로겐 또는, "이소플라본" 또는 "피토에스트로겐"이 이소플라본류의 선택된 군 중 1 종 이상으로서 정의되는 경우에는 다수의 이소플라본류 또는 피토에스트로겐류 모두를 의미한다. 용어 "이소플라본 글리코시드"라는 것은 탄수화물 단량체 부분이 공유결합되어 있는 이소플라본 부분을 의미한다. 용어 "이소플라본 글리코시드 접합체"라는 것은 이소플라본 글리코시드의 탄수화물 부분에 결합된 에스테르와 같은 기타의 분자 부분을 갖는 이소플라본 글리코시드를 의미한다. 또한, 본 명세서에 사용된 바와 같이, "약학적 제제"라는 것은 주치의에 의해 처방된 것으로, 사람에게 화합물(들)을 전달하는데 효과적인 부형제와 혼합된 화합물의 혼합물 또는 화합물을 의미한다. 용어 "OTC (over-the-counter) 제제"라는 것은 사람에게 화합물(들)을 전달하는데 효과적인 부형제와 혼합된 화합물의 혼합물 또는 화합물로서, 사람에게 투여하기 위해 주치의의 처방전이 필요치 않은 것을 의미한다.
본 발명은 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본과 혼합된 식물성 스테롤이 동시투여된 각 성분의 콜레스테롤 저하 활성을 유발시키는 유효량으로 동시투여할 경우 사람의 저밀도 지단백질 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는데 있어서 상승효과를 지닌다는 발견을 토대로 한 것이다. 그래서, 본 발명은 식물성 스테롤(또한, 이는 "피토스테롤"로서도 공지되어 있음) 대두 단백질 물질 및/또는 선택된 이소플라본의 혼합물을 사용하여 혈중의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테를의 농도를 저하시키기 위한 조성물 및 그 방법에 관한 것이다. 또한, 대두 단백질 물질 및 특히 이소플라본과 혼합된 식물성 스테롤은 혈중의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 농도를 저하시키므로써 그리고 산화방지 효능 및 티로신 키나제 억제에 의해 동맥경화증의 진행을 예방 또는 최소화하기에 효과적이다. 그러므로, 본 발명은 동맥경화증의 진행을 예방 또는 최소화하기 위한 방법 및 이를 위한 조성물에 관한 것이다.
조성물
한 실시태양에 있어서, 본 발명의 조성물은 대두 단백질 물질의 건조 중량의 49 중량% 이상을 함유하는 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 또는, 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본과 혼합된 식물성 스테롤 또는, 이소플라본 및 대두 단백질 물질 모두와 혼합된 식물성 스테롤을 포함한다. 본 발명의 조성물은 이들 3 가지의 성분, 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및 이소플라본을 모두 함유하여 각 성분의 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤 저하 효과를 상호적으로 이용하도록 한다.
또다른 실시태양에 있어서, 본 발명의 조성물은 통상적으로 약 37∼약 44 중량%의 대두 단백질을 함유하는 대두 배축 물질과 혼합된 식물성 스테롤을 포함한다. 대두 배축/식물성 스테롤 조성물은 추가로 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본을 포함할 수 있다.
식물성 스테롤
본 발명의 조성물에 사용될 수 있는 식물성 스테롤은 포화 식물성 스테롤 및 불포화 식물성 스테롤 모두를 포함할 수 있다. 본 발명의 조성물에 사용할 수 있는 불포화 식물성 스테롤의 예로는 도 1에 도시된 β-시토스테롤, 캄페스테롤 및 스티그마스테롤이 바람직하며, 본 발명의 조성물에 사용할 수 있는 포화 식물성 스테롤의 예로는 도 2에 도시된 캄페스타놀 및 시토스타놀이 바람직하다. 불포화 스테롤류 β-시토스테롤 및 캄페스테롤이 특히 바람직하다.
본 발명의 조성물 중에서의 식물성 스테롤의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.49% 이상, 더욱 바람직하게는 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0.5∼약 99.5 중량%, 가장 바람직하게는 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 1∼약 60 중량%가 된다. 조성물 중의 식물성 스테롤의 상대적 함량은 조성물이 대두 단백질 물질을 함유하느냐의 여부에 따라 결정된다. 조성물이 대두 단백질 물질을 함유하는 경우, 일반적으로 조성물의 총 중량%로서 조성물 중의 식물성 스테롤의 함량은 조성물이 대두 단백질 물질을 함유하지 않을 경우보다 훨씬 적게 된다.
대두 단백질 물질
한 실시태양에 있어서, 본 발명의 조성물에 사용할 수 있는 대두 단백질 물질은 대두 단백질 함유 물질의 건조 중량의 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질이다. 건조 중량의 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질은 대두 단백질을 49∼약 65 중량% 함유하는 탈지 대두 분말 및 대두 플레이크, 약 65% 이상∼약 90%의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 농축물; 90 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 분리물이 바람직하다. 대두 단백질 농축물 및 대두 단백질 분리물이 특히 바람직하다. 또다른 실시태양에 있어서, 본 발명의 조성물에 사용할 수 있는 대두 단백질 물질은 대두 배축 물질이다.
본 발명의 조성물 중의 대두 단백질 물질의 함량은 조성물 총 중량의 0∼99.55 중량%가 된다. 대두 단백질 물질이 조성물이 포함될 경우, 이는 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 적어도 바람직하게는 대부분의 조성물, 더욱 바람직하게는 약 55∼약 99.55 중량%, 더더욱 바람직하게는 약 75∼약 99.55 중량%, 가장 바람직하게는 약 80∼약 99.5 중량%로 존재한다. 조성물이 이소플라본을 함유하지 않는 경우 조성물에는 항상 대두 단백질 물질이 포함된다.
이소플라본
본 발명의 조성물에 사용할 수 있는 이소플라본은 도 3에 도시된 아글루콘 이소플라본류 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및, 도 4에 도시된 게니스테인, 6"-O-Mal 게니스틴, 6"-O-Ac 게니스틴, 다이드진, 6"-O-Mal 다이드진, 6"-O-Ac 다이드진, 글리시틴 및 6"-O-Mal 글리시틴을 비롯한 이들 아글루콘 이소플라본류의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체 등이다. 조성물에는 1 종 이상의 이소플라본이 사용될 수 있다. 아글루콘 이소플라본류가 특히 바람직한데, 이는 이소플라본의 생물학적 활성이 가장 크기 때문이다. 본 발명의 조성물에 사용하기 위한 이소플라본류로는 게니스테인, 다이드제인, 바이오카닌 A 및/또는 포르모노네틴이 가장 바람직하다.
조성물 중의 이소플라본의 함량은 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0∼약 66 중량%이다. 대두 단백질 물질을 조성물에 사용할 경우, 조성물 중의 이소플라본의 함량이 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 약 0∼약 15 중량%가 된다. 이소플라본은 조성물의 총 중량의 약 0.0066∼약 10 중량%의 함량으로 존재하는 것이 가장 바람직하다. 조성물이 대두 단백질 물질을 함유하지 않는 경우 이소플라본이 조성물에 항상 포함된다.
본 발명의 조성물은 전술한 성분을 입수 및 공지의 공정 및 절차를 사용하여 혼합하므로써 제조될 수 있다.
식물성 스테롤은 식물로부터 얻은 식물성 스테롤을 추출 및 분리시키거나 또는 스테롤을 화학적으로 합성하여 얻을 수 있다. 또는, 식물성 스테롤을 함유하는 식물로부터 추출한 식물성 스테롤을 함유하는 오일은 조성물 중에 식물성 스테롤의 소정 농도를 제공하기에 충분량으로 조성물에 사용할 수 있으며, 이때, 오일은 식물성 오일을 수집하기 위한 통상의 방법을 사용하여 식물로부터 추출한다.
바람직한 실시태양에 있어서, 식물성 스테롤은 본 명세서에서 참고로 인용하는 미국 특허 제3,993,756호(특히 실시예 10)에 기재된 방법에 의해 대두 오일의 비-비누화 분획으로서 대두유로부터 얻는다. 간략하게, 약 40∼50 중량%의 식물성 스테롤을 함유하는 대두유의 비-비누화 분획을 완전 대두로부터 얻는다. 대두유는 통상의 열분해, 거피, 박편화 및 추출 절차에 의해 완전 대두로부터 얻는다. 대두유는 최종 탈취 단계 때까지 통상의 대두유 정제 공정에 의해 정제한다. 대두유의 탈취 공정은 2∼3 ㎜Hg의 감압하에서 225℃∼235℃에서 수행하여 증류시키고, 식물성 스테롤을 함유하는 추출물을 대두유로부터 분리한다. 추출물을 메탄올 및 진한 황산과 함께(추출물 1 g:메탄올 1.72 g:황산 0.019 g) 65℃∼70℃에서 3∼4 시간 동안 환류하여 추출물 중에 함유된 유리 지방산을 메틸 에스테르로 전환시킨다. 이 반응을 중지시킨 후, 메탄올을 감압하에 제거하고, 잔류 오일 물질을 80℃∼100℃에서 물로 세척하여 황산을 제거한다. 그후, 지방산의 메틸 에스테르를 170℃∼190℃에서 20∼30 ㎜Hg에서의 증류로 제거하였다. 생성된 잔류물을 정제하여 40∼50%의 식물성 스테롤을 함유하는 대두유의 비-비누화 분획을 얻었다. 비-비누화 분획 중의 식물성 스테롤은 β-시토스테롤, 캄페스테롤 및 스티그마스테롤이다. 비-비누화 유분은 HPLC에 의해 추가로 정제하여 각각의 식물성 스테롤을 얻거나 또는 본 발명의 조성물 중의 식물성 스테롤 공급원으로서 직접 사용할 수 있는 것이 더욱 바람직하다.
또한 β-시토스테롤은 공지의 절차에 의해 여러가지의 기타 식물성 오일로부터 추출할 수 있다. 본 명세서에서 참고로 인용하는 참조 문헌[Anderson et al., J. Am. Chem. Soc., 48, 2897 (1926)]에 기재된 절차에 의해 맥아유 또는 옥수수유로부터; 참조 문헌[Gloyer et al., J. Am. Chem. Soc., 61, 1901 (1939)]에 기재된 절차에 의해 호밀배로부터; 참조 문헌[Wallis, J. Org. Chem., 2, 335 (1937)]에 기재된 절차에 의해 면실유로부터; 참조 문헌[Sandqvist et al., Ber. 64, 2167 (1931)]에 의해 기재된 절차에 의해 톨유로부터 β-시토스테롤을 분리할 수 있다.
본 명세서에서 참고로 인용하는 참조 문헌[Fernholz et al., J. Am. Chem. Soc., 63, 1155 (1941)]에 기재된 공지의 절차에 의해 기타의 식물성 오일로부터 캄페스테롤을 추출할 수 있다. 또한, 본 명세서에서 참고로 인용하는 참조 문헌[Tarzia et al., Gazz. Chim. Ital., 97, 102 (1967) 및 Chem Abstr., 67, 32883q (1967)]에 기재된 절차에 의해 캄페스테롤을 합성할 수 있다. 스티그마스테롤은 대두 또는 칼라바 열매로부터 분리될 수 있다.
포화 식물성 스테롤은 수소화 반응에 의해 이의 불포화 대응물로부터 얻을 수 있다. 통상의 수소화 절차를 사용하므로써 β-시토스테롤 및 스티그마스테롤을 시토스타놀로 전환시킬 수 있으며, 캄페스테롤을 캄페스타놀로 전환시킬 수 있다.
특정의 식물성 스테롤은 시판되고 있으며, 이는 본 발명의 조성물에 직접 혼입시키기 위해 구입할 수 있다. 예를 들면, 캄페스테롤 및 스티그마스테롤은 미국 위스컨신주 밀워키 웨스트 세인트 폴 애비뉴 940에 소재하는 알드리치 케미칼 캄파니, 인코포레이티드로부터 구입할 수 있다. β-시토스테롤 및 시토스타놀은 미국 미주리주 세인트 루이스 스프루스 스트리트 3050에 소재하는 시그마 케미칼 캄파니로부터 구입할 수 있다.
한 실시태양에 있어서, 대두 단백질 물질은 탈지 대두 단백질 분말 또는 그릿, 대두 단백질 농축물 또는 대두 단백질 분리물이 되며, 이들 각각은 대두 단백질 중량의 49 중량% 이상을 함유한다. 탈지된 대두 분말 또는 대두 그릿을 얻기 위해, 완전 대두를 통상의 대두 처리 공정에 의해 세정, 열분해, 박편화, 탈지 처리하여 탈지된 대두 플레이크, 칩, 밀 또는 케이크를 생성하며, 이로부터 대두 분말 및 대두 그릿을 생성할 수 있다. 탈지된 대두 플레이크 및 대두 밀 또한 시판되고 있다. 통상의 공정에 의해 이들 물질을 미분 형태로 분쇄하므로써 탈지된 대두 플레이크, 칩, 밀 또는 케이크로부터 탈지 대두 분말 및 탈지 대두 그릿이 생성된다. 탈지된 대두 분말을 입자 크기가 150 μ 미만(입자가 No. 100 US 스크린 메쉬를 통과하기에 충분한 크기)으로 분쇄되고, 탈지된 대두 그릿은 약 150 μ∼약 2,000 μ(입자가 No. 10∼No. 80 US 스크린 메쉬를 통과하기에 충분한 크기)로 분쇄한다. 탈지된 대두 분말 및 탈지된 대두 그릿은 대두 단백질을 49∼약 65 중량%로 함유하는 반면, 그 외의 대두 분말 및 대두 그릿은 주로 탄수화물, 대두 섬유 및 회분으로 형성된다. 탈지된 대두 분말 및 대두 그릿은 시판되고 있으며, 이는 본 발명의 조성물에 직접 혼입하기 위해 구입할 수도 있다.
본 발명의 조성물에 사용되는 대두 단백질 물질은 대두 단백질 농축물 또는 대두 단백질 분리물인 것이 바람직한데, 이는 대두 단백질 물질이 대두 분말 또는 대두 그릿보다도 상당히 더 많은 양의 대두 단백질을 함유하고 있기 때문이다. 대두 단백질 농축물은 약 65 중량%의 대두 단백질 내지 약 90 중량%의 대두 단백질을 함유하고, 그 나머지는 주로 대두 섬유 및 다른 다당류로 구성되어 있다. 본 발명의 조성물에 사용되는 대두 단백질 농축물은 (i) 탈지된 대두 플레이크 또는 대두 분말을 수성 알콜(바람직하게는 수성 에탄올 또는 메탄올)로 세척하는 단계, (ii) 탈지된 대두 플레이크 또는 대두 분말을 대두 단백질의 등전점과 거의 유사한 pH 4.4-4.6를 갖는 묽은 산으로 세척하는 단계, (iii) 탈지된 대두 플레이크 또는 대두 분말을 수분과 함께 가열시켜 그 단백질을 변성시키고, 이후 그 플레이크 또는 대두 분말을 물로 세척하는 단계를 포함하는 대두 단백질 농축물의 통상 제조 방법에 의해 생성된다. 대두 단백질 농축물은 상업적으로 시판되는 것으로서 본 발명의 조성물내로 직접 혼입하여 얻을 수 있다.
본 발명의 조성물에 사용되는 대두 단백질 물질은 대두 단백질 분리물(또는 분리된 대두 단백질로 알려져 있음)인 것이 가장 바람직한 데, 이는 그 재료가 가공된 대두 단백질 물질중에서 가장 높은 대두 단백질 함량을 가지고 있기 때문이다. 대두 단백질 분리물은 약 90 중량% 이상이 대두 단백질이고, 그 나머지는 회분 및 수분으로 주로 구성되어 있다. 본 발명의 조성물에 사용되는 대두 단백질 분리물은 대두 단백질 분리물을 제조하는 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는데, 그 방법은 탈지된 대두 플레이크를 pH 약 6-약 11인 수용액(바람직하게는 수산화나트륨, 수산화칼슘, 수산화암모늄 용액)으로 추출한 후, 가용성 단백질 함유의 추출물을 대두 섬유 및 기타 다른 불용성 다당류와 같은 불용성 재료로부터 분리한다. 분리된 추출물의 pH를 대두 단백질의 등전점, 바람직하게는 pH 4.4∼4.6으로 조정하여 대두 단백질을 침전시킨다. 침전된 단백질을 액체 추출물 분획으로 부터 분리하여 단백질과 가용성 탄수화물을 서로 분리한다. 분리한 단백질을 세척한 후 중성화하여 대두 단백질 분리물을 제공하는 것이다. 대두 단백질 분리물은 상업적으로 시판되는 것으로서 본 발명의 조성물내로 직접 혼입시켜 얻을 수 있다.
다른 구체화로서, 대두 단백질 물질은 약 37 중량%∼약 44 중량%를 함유하는 대두 배축물이다. 이러한 대두 배축물을 얻기 위해서는 완전 대두를 거피시키고, 통상의 대두 가공 기술에 따라 대두 자엽을 분리한다. 자엽 분리후, 배축이 분리되며, 작은 배축을 선택적으로 제거하기에 충분한 공극 크기의 체에 흩어진 대두를 통과시켜 분리 및 단리시킬 수 있다. 미가공 배축을 분쇄 또는 마쇄하여 분말 또는 가루를 생성한다.
본 발명의 조성물에 이용되는 이소플라본 화합물은 레구메, 토끼풀, 쿠드주 포도나무(푸에라리아 뿌리)와 같은 식물에서 발견될 수 있는 천연 성분이다. 이들 이소플라본 화합물의 통상의 레구메 공급원으로는 대두, 이집트 콩 및 기타 여러 종류의 강낭콩과 완두콩 등이 있다. 이들 이소플라본 화합물의 클로버 공급원으로는 붉은 토끼풀 및 땅속에서 자라는 토끼풀 등이 있다. 이소플라본 화합물의 특히 바람직한 공급원은 대두이다(단, 대두에 존재하지 않는 바이오카닌 A 및 이의 글리코시드는 제외함).
이소플라본 화합물은 천연 식물 공급원으로부터 얻을 수 있으며, 몇몇 이소플라본 화합물은 공지된 방식에 의해 합성 제조될 수 있다. 예를 들면, 참조 문헌[Wong, J. Sci. Food. Agr., Vol. 13, p. 304(1962)]에서 개시된 다이드제인은 붉은 토끼풀에서 분리되거나 또는 참조문헌[Ganguly 및 Sarre, Chem & Ind(런던), p 201 (1970)]에 의해 제공된 곰팡이 마이크로모노스포라 할로피티카 (Micromonospora halophytica)로부터 얻을 수 있다. 상기 두 문헌은 본 명세서에서 참고로 인용된 것이다. 다이드제인은 본 명세서에 참고로 인용된 참조 문헌[Baker et al., J. Chem. Soc., p 274 (1933), Wesley et al., Ber, Vol. 66, p, 685 (1933), Mahal et al., J. Chem. Soc., p 1769(1934), Baker et al., J. Chem. Soc., p 1852 (1953), Farkas Ber. Vol 90, p 2940(1957)]에 제시된 방법에 따라 합성 제조하는 것도 가능하다. 이소플라본 글리코시드 다이드제인은 Farkas et al.이 제시한 방법에 의해 합성 제조할 수 있다. 참조 문헌[Ber., Vol 92, p 819(1959)]. 6'-O-Mal 다이드제인과 6'-O-Ac 다이드제인의 다이드제인 이소플라본 글리코시드 접합체는 말로닐 무수물 또는 아세틸 무수물로 각기 다이드제인을 통상적으로 비누화 반응시켜 제조할 수 있다.
게니스테인은 참조 문헌[Baker et al., J. Chem. Soc., p, 3115 (1928); Narasimhachari et al., J. Sci. Ind. Res., Vol. 12, p 287(1953); Yoder et al., Prod. Iowa Acad.Sci., Vol. 61, p 271 (1954); Zemplen et al., Acta. Chim, Acad, Sci. Hung., Vol. 19, p.277 (1959)]에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있는데 이들 문헌은 본 명세서에 참고로 인용된 것이다. 이소플라본 글리코시드 제니스틴은 참조 문헌[Zemplen et al., Ber., Vol 76B, p 1110 (1943)]의 방법에 따라 합성 제조될 수 있다. 6'-O-Mal 제니스틴 및 6'-O-Ac 제니스틴과의 이소플라본 접합체는 말로닐 무수물 또는 아세틸 무수물로 각기 제니스틴을 통상적으로 비누화시키므로써 제조될 수 있다.
바이오카닌 A는 참고로 인용된 참조 문헌[Baker et al., Nature 169:706 (1952))에 제공된 방법에 의해 합성 제조가능하다. 바이오카닌 A는 참조 문헌[Pope et al., Chem. & Ind. (런던) p. 1092 (1953)]등에 의해 제공된 방법에 따라 붉은 토끼풀로부터 제조될 수 있다. 포르모노네틴은 본 명세서에 참고로 인용하는 참조 문헌[Wessley et al., Ber, 66:685 (1933)] 및 참조 문헌[Kagel et al., Tetrahedron Letters, p 593(1962)]에 의해 개시된 방법에 의해 합성 제조가능하다. 프로모노네틴은 본 명세서에서 참고로 인용하는 참조 문헌[Walz, Ann. 489:118 (1931)]의 방법에 의해 대두 밀로부터 분리될 수 있거나 또는 참조 문헌[Bradbury et al., J. Chem. Soc. p3447 (1951)]의 방법에 의해 토끼풀 종으로부터 분리한다.
바람직한 구체화에 있어서, 본 발명 조성물의 이소플라본 성분은 본 조성물에 또한 이용되는 대두 단백질 물질로 회수된다. 상술한 바와 같이, 이소플라본은 대두 중에 존재하는 천연 화합물이다. 대두 단백질 가루, 대두 단백질 그릿, 대두 단백질 농축물 및 대두 단백질 분리물의 생산에 있어서, 이소플라본 일부는 대두 단백질 물질에 보유될 수 있다. 대두 단백질 분말, 대두 단백질 그릿, 대두 단백질 농축물, 또는 대두 단백질 분리물을 생산하기 위해서 상술한 대두 단백질을 가공하면서 적당한 기술을 이용하면 통상적으로 가공된 대두 단백질 물질에 비해 대두 단백질 물질에 보유되는 이소플라본의 양이 상당히 증가된다. 특히, 대두 단백질의 알콜 세척 또는 알콜 추출을 피하여야 하는 데, 그 이유는 이소플라본이 수성 알콜중에서 용해성이 높고, 또한 대두 단백질 농축물의 경우 이소플라본이 대두 단백질 물질중에 보유될 경우 알콜 세척에 의해 생성되지 않기 때문이다. 또한, 대두 단백질 물질의 수성 세척은 최소로 수행되어야 하는 것은 세척시 대두 단백질로부터 이소플라본이 제거되어 나가기 때문이다. 세척을 하는 경우라면, 물에 의한 세척을 통해 이소플라본이 최대로 불용화되도록 하면서 세척중에 이소플라본의 손실이 최소화되는 온도로서 시원하게 느껴지는 온도 및 저온 온도(0℃∼45℃)에서 시행한다. 대두 단백질 물질중의 이소플라본은 후술하는 바와 같이 이의 아글루콘 형으로 전환되어야 물에 의해 대두 단백질 물질을 세척 또는 추출하기 전에 물에 대한 용해도를 최소화시킬 수 있다. 이러한 조치는 대두 단백질 물질 중에 이소플라본이 보유되게 조력하므로써 산출된 대두 단백질 물질이 상당량의 이소플라본을 함유하게 한다.
다른 구체화에 있어서, 이소플라본(들)은 본 발명 조성물에서의 사용을 위해서 천연상의 식물성 재료로부터 분리된다. 천연 식물성 재료로부터 바람직한 이소플라본 화합물을 분리하는 방법은 식물성 재료를 알콜(바람직하게는 메탄올 또는 에탄올) 또는 수용액(바람직하게는 알칼리 수용액)으로 추출하여 이소플라본을 상기 식물로부터 제거하는 것이다. 식물성 재료로부터의 이소플라본 화합물의 회수율을 최대로 하기 위해서 이소플라본 화합물을 추출하기 전에 식물성 재료를 분쇄하는 것이 바람직하다. 이소플라본 화합물은 역상 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)같은 통상의 분리 기술에 의해 추출물로부터 분리될 수 있다.
바람직한 구체화에 있어서, 이소플라본 화합물인 게니스테인, 제니스틴, 6'-O-Mal 제니스틴, 6'-O-Ac 제니스틴, 다이드제인, 다이드진, 6'-O-Mal 다이드진, 6'-O-Ac 다이드진, 글리시테인, 글리시틴 및 6'-O-Mal 글리시틴은 대두 물질, 바람직하게는 상업적으로 시판되는 대두 물질로부터 분리된다. 이소플라본 화합물에서 분리할 수 있는 대두 물질로는 대두, 거피 대두, 대두 밀(meal), 대두 분말, 대두 그릿, 대두 플레이크(완전 지질 또는 탈지됨), 대두 자엽, 대두 배축, 대두 당밀, 대두 단백질 농축물, 대두 휘장, 대두 휘장 단백질 및 대두 단백질 분리물 등이 있다. 하나의 구체예로서, 이소플라본은 저분자량의 유기 추출제, 바람직하게는 알콜, 에틸 아세테이트, 아세톤, 또는 에테르, 가장 바람직하게는 수성 에틸 알콜 또는 메틸 알콜을 사용한 거피 대두, 대두 밀, 대두 분말, 대두 그릿, 대두 플레이크, 대두 단백질 농축물, 대두 휘장 단백질, 또는 대두 단백질 분리물, 바람직하게는 대두 밀, 대두 분말, 대두 그릿, 대두 플레이크로부터 추출된다. 추출제는 추출제에 의해 추출된 대두 단백질의 양을 최소화하기 위하여 대두 단백질의 등전점과 유사한 pH(약 pH 4∼pH 5)를 갖는 것이 가장 바람직하다.
이소플라본을 함유하는 추출물은 불용성 대두 물질로부터 분리되어 이소플라본이 농축된 추출물을 형성한다. 필요하다면, 이소플라본 농축 재료는 용매를 제거하기 위해 추출물을 농축 회수하므로써 생성된 고형의 이소플라본 농축 재료를 본 발명의 조성물 및 방법에 사용한다.
더욱 바람직한 구체화에 있어서, 이소플라본 화합물은 추출물에 용해되는 기타 다른 대두 물질로부터 추가 정제된다. 추출물 함유의 이소플라본은 추출물중에 이소플라본을 흡착하는 재료와 접촉하고, 용매를 사용하여 흡착재로부터 상기 흡착된 이소플라본을 용출하면 이소플라본이 흡착재로부터 차별적으로 용출된다.
바람직한 구체화에 있어서, 통상의 역상 HPLC 분리를 수행하여 추출물중의 불순물로부터 이소플라본을 분리한다. 대두 물질로부터 이소플라본을 추출하고 불용성 대두 물질로부터 추출물을 분리한 후, 추출물을 여과하여 HPLC 컬럼을 폐색시킬 수 있는 불용성 재료를 제거한다. 통상적으로 상업적으로 시판되는 HPLC 컬럼을 입상 흡착재로 충전시켜 HPLC 컬럼을 제조하는데, 여기서 상기 흡착재는 화합물 특이성 방식에 의해 추출물중의 이소플라본과 불순물에 착탈 가능하게 결합하게 된다. 하지만, 흡착재는 임의의 역상 HLPC 충전재가 될 수 있지만, 충전 용량, 분리 효율, 비용이라는 기준하에 바람직한 충전재를 선택하는 것도 가능하다. 이러한 바람직한 충전재로는 스웨덴의 에카 노벨, 노벨 인더스리즈에서 시판되는 C18 16 ㎛ 100 Å 비드가 있다.
여과된 추출물은 칼럼의 모든 결합 부위가 이소플라본으로 완전 포화될 때까지 충전된 HLPC 칼럼에 통과하는 데, 이것은 칼럼으로부터 나온 용출물중에 이소플라본이 존재하는 것에 의해 검출 확인된다. 이후 HLPC 칼럼을 용매로 용출하여 분리를 수행한다. 바람직한 구체화에 있어서, 용출물은 에탄올, 메탄올, 에틸 아세테이트, 또는 아세토니트릴과 같은 극성 용매로서 약 30 중량%∼약 90 중량%의 알콜 함량을 가진 수성 알콜인 것이 바람직하며, 약 50 중량%이고, 알콜은 에탄올인 것이 가장 바람직하다.
이소플라본 화합물과 불순물은 칼럼 용출물로부터 별도로 수거된다. 용출물중 이소플라본 분획은 통상의 HPLC 및 분석 화학 기법에 따라 기타 다른 용출 분획과 구별가능하다. 용출물중의 이소플라본 분획을 칼럼으로부터 수거한 후, 용매(예, 알콜)의 휘발성 성분을 증발로 제거할 수 있다. 모든 용매가 증발에 의해 제거된다면 이소플라본 화합물은 직접 회수될 수 있으며, 또는 잔류 용매(예, 물)를 차게 한 후, 잔류 용매로부터 이소플라본을 원심분리 또는 여과하는 것도 가능하다.
특히 바람직한 구체화에 있어서, 식물성 재료로부터 회수된 이소플라본 글리코시드 접합체와 이소플라본 글리코시드는 각기 이들의 아글루콘 이소플라본 형태로 전환된다. 이소플라본 글리코시드 접합체 및 이소플라본 글리코시드를 아글루콘 이소플라본으로 전환하는 것은 추출전에 식물성 에스트로겐성 이소플라본이 추출되는 기질중에서 수행되거나 또는 불용성 식물성 재료로부터 추출물을 분리한 후 이소플라본 농축의 추출물중에서 수행하는 것이 효과적이다. 아글루콘 이소플라본 화합물은 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 경우에 특히 활성이 있으며, 또한 동맥경화증이 진전되는 것을 예방 또는 최소화시키는 데 특히 효과가 있다. 아글루콘 이소플라본은 글리코시드 접합체 및 글리소시드 각각보다는 물을 함유하는 추출물로부터 쉽게 분리되는데, 이는 아글루콘이 물에 덜 용해되기 때문이다.
약 pH 6∼약 pH 13, 바람직하게는 약 pH 9∼약 pH 11의 이소플라본을 함유하는 추출물 또는 기질의 알칼리 수용액을 형성한 후 약 2℃∼약 121℃, 바람직하게는 약 25℃∼약 75℃의 온도에서 전환이 일어나기에 충분한 시간 동안, 바람직하게는 약 30 분∼약 5 시간, 더욱 바람직하게는 약 30 분∼약 1.5 시간동안 처리하면 이소플라본 글리코시드 접합체(예, 6"-O-Mal 제니스틴, 6"-O-Ac 제니스틴, 6"-O-Mal 다이드진, 6"-O-Ac 다이드진 및 6"-O-Mal 글리시틴)를 각각의 글리코시드(예, 제니스틴, 다이드진 및 글리시틴)으로 전환시킬 수 있다. 이소플라본 글리코시드를 1,4-β-글리코시드 결합을 분해할 수 있는 효소(바람직하게는 상업적으로 시판되는 베타-글루코시다제 효소, 알파-갈락토시다제 효소, 베타-갈락토시다제 효소, 펙티나제 효소, 락타제 효소, 또는 글루코-아밀라제 효소)와 접촉시키되, 효소활성 pH, 일반적으로는 약 pH 3∼약 pH 9에서 약 25℃∼약 75℃의 온도, 바람직하게는 약 45℃∼약 65℃의 온도에서 전환이 일어나기에 충분한 시간인 약 1 시간∼약 24 시간, 바람직하게는 약 1 시간∼약 3 시간 동안 접촉시켜 이소플라본 글리코시드(예, 제니스틴, 다이드진 및 글리시틴)를 이들 각각의 아글루콘형(예, 게니스테인, 다이드제인 및 글리시테인)으로 전환시킬 수 있다.
아글루콘 이소플라본은 통상의 분리 방법을 사용하여 식물 기질로부터 분리될 수 있다. 예를 들면, 아글루콘 이소플라본은 저분자량의 알콜을 사용하여 대두 기질 또는 토끼풀 기질로부터 추출될 수 있다. 아글루콘 이소플라본은 통상의 재결정 공정 또는 HPLC에 의해 추출물로부터 분리될 수 있다. 특히 바람직한 구체예에 있어서, 대두 기질로부터 분리되어 본 발명의 조성물 또는 방법에 사용되는 이소플라본 조성물은 40 중량% 이상의 게니스테인, 15 중량% 이상의 다이드제인, 1 중량% 이상의 글리시테인을 포함하고 있다. 또 다른 특히 바람직한 구체화에 있어서, 대두 기질로부터 분리되며 본 조성물 및 본 방법에 이용되는 이소플라본 조성물은 85 중량 이상%의 게니스테인, 5 중량 이상%의 다이드제인 및 0.5 중량%의 글리시테인을 포함한다.
본 발명의 조성물에 이용되는 이소플라본 화합물 몇가지는 상업적으로 시판되는 것으로서 제제형으로 구입하여 본 발명의 조성물 또는 방법에 사용할 수 있다. 예를 들면, 게니스테인, 다이드제인 및 글리시테인은 상업적으로 시판되는 것으로서 미국 뉴저지주 08876 서머빌 피.오. 박스 473에 소재하는 인도핀 케미칼 컴파니 인코포레이티드로부터 구입할 수 있다. 바이오카닌 A는 미국 위스콘신주 53233 밀워키 웨스트 세인트 폴 애비뉴 940에 소재하는 알드리히 케미칼 컴파니 인코포레이티드로부터 구입할 수 있다.
식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 함께 첨가한 후 바람직하게는 이들을 완전 혼합하는 방식으로 본 발명의 조성물로 혼합할 수 있다. 예를 들면, 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본은 이들 재료를 카터기 또는 혼합기에 넣고 완전하게 혼합되기에 충분한 시간동안 혼합하는 방식으로 서로 혼합될 수 있다.
LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도가 저하되기 위해서는 조성물이 1회 이상 투여되어야 되기 때문에 그 안에 들어 있는 각 성분의 생물학적 활성량만을 갖는 것으로 제한하는 것은 아니지만, 성분들을 서로 혼합한 후에 산출된 조성물은 각 성분들의 생물학적 활성량을 함유하는 것이 바람직하다. 조성물은 그 안에 약 500 ㎎∼약 50 g의 식물성 스테롤, 바람직하게는 약 1 g∼약 10 g의 식물성 스테롤을 함유하는 것이 바람직하다. 조성물이 대두 단백질 물질을 함유하는 경우, 대두 단백질 물질의 약 5 g∼약 100 g이 조성물 중에 존재하는 것이 바람직하며, 약 10 g∼약 40 g의 대두 단백질 물질이 조성물 중에 존재하는 것이 더욱 바람직하다. 조성물이 이소플라본을 함유하는 경우, 조성물중에 약 10 ㎎∼약 1,000 ㎎의 이소플라본이 조성물중에 존재하는 것이 바람직하며, 약 25 ㎎∼약 200 ㎎의 이소플라본이 조성물중에 존재하는 것이 더욱 바람직하다.
바람직한 구체화에 있어서, 식물성 스테롤과 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본은 적당한 부형제와 함께 약학적 전달 시스템 또는 OTC 전달 시스템으로 제형화된다. 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 혼입하는 약학적 제제 또는 OTC 제제는 종래 기술에 공지된 방식으로 제조될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 성분은 정제, 캡슐, 파우더, 현탁제, 비경구 투여 액제(예, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하내 투여)로 제제화되며, 또한 통상의 담체, 결합제, 희석제 및 부형제와 함께 경피 투여용 패치상으로 적합한 용제로 제제화될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 제제 또는 OTC 제제를 형성하는데 유용한 불활성 약학적 허용 부형제는 전분, 만니톨, 황산칼슘, 인산이칼슘, 스테아르산마그네슘, 살리실산 유도체 및/또는 당(슈크로즈, 락토오즈, 글루코스) 등이 있다. 결합제로는 카르복시메틸 셀룰로오스 및 기타의 셀룰로오스 유도체, 젤라틴, 천연 및 합성 고무(알긴산나트륨과 같은 알긴산염, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등)과 같은 고무를 포함한다. 본 발명에 유용하게 사용되는 희석제의 예로는 오일, 염수, 슈가 용액(예를 들면 수성 덱스트로오즈, 또는 수성 글루코스), 글리콜(예, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 폴리프로필렌 글리콜) 등이 적절하다. 기타 부형제로는 올레산나트륨, 아세트산나트륨, 스테아르산나트륨, 염화나트륨, 안식향산나트륨, 활석 및 스테아르산마그네슘 등과 같은 윤활제; 한천, 탄산칼슘, 중탄산나트륨, 전분, 크산탄 껌 등을 비롯한 붕해제; 벤토나이트 및 카올린과 같은 흡착성 담체를 포함한다. 착색제 및 방향제가 또한 약학적 제제 또는 OTC 제제에 첨가될 수 있다.
다른 바람직한 구체화에 있어서, 식품 성분으로서 식이에 각각의 성분을 첨가하거나 또는, 각 성분들의 혼합물을 첨가하므로써 식물성 스테롤과 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 혼입한 식이성 보충제를 제조할 수 있다. 이들 첨가되는 성분은 거의 모든 식이를 포함하지만, 식물성 스테롤을 함유하는 대두 단백질 물질 또는 광물성 오일을 기능성 성분으로 사용하는 식품이 바람직하다. 예를 들면, 식물성 스테롤과 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 갈은 고기, 유화된 고기 및 다진 고기같은 고기류; 영양 음료, 스포츠 음료, 단백질 강화 음료, 쥬스, 우유, 우유 대체물, 체중 저하 음료를 비롯한 음료; 단단한 치즈 및 부드러운 치즈등의 치즈, 크림 치즈, 카티지 치즈등의 치즈류; 아이스 크림, 아이스 밀크, 저지방 냉동 디저트, 비낙농 냉동 디저트와 같은 냉동 디저트류; 요구르트; 수프; 푸딩; 베이커리 제품; 샐러드 드레싱; 마요네즈 및 칩 딥스와 같은 딥스 및 스프레드와 같은 비제한적인 식이에 첨가한다. 이소플라본을 함유 또는 함유하지 않는 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질을 수성 슬러리에 혼합하여 샐러드 드레싱, 요구르트, 대두 치즈, 유화된 고기 및 분말 음료를 비롯한 유화 식품 및 음료으로서 특히 효과적인 에멀젼을 생성할 수 있다.
하기의 비제한 제제는 본 발명의 조성물 및 본 발명의 방법에 따라 식물성 스테롤, 대두 단백질 및/또는 이소플라본 화합물을 비롯한 약학적 제제 및 식이성 제제를 서술한 것이다.
제제
하기의 제제 1∼4는 본 발명의 조성물에 효과적인 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 포함하는 약학적 제제 또는 OTC 제제를 나타낸 것이다.
제제 1
젤라틴 캡슐
경질 젤라틴 캡슐을 이소플라본 5-100 ㎎/캡슐; 식물성 스테롤 500-2000 ㎎/캡슐; 전분 NF 0-1000 ㎎/캡슐; 전분 유동성 파우더 0-1000 ㎎/캡슐; 실리콘 유체 350 센티스토크 0-20 ㎎/캡슐을 사용하여 제조한다. 성분들을 혼합한 후 체에 걸러서 이를 캡슐내에 충전시킨다.
제제 2
정제
식물성 스테롤 250∼500 ㎎/정제; 대두 단백질 물질 1,000∼2,000 ㎎/정제; 미정질 셀룰로오스 20∼300 ㎎/정제; 전분 0∼50 ㎎/정제; 스테아르산마그네슘 또는 스테아레이트산 0∼15 ㎎/정제; 발연 이산화규소 0∼400 ㎎/정제; 콜로이드성 이산화규소 0∼1 ㎎/정제 및 락토오즈 0∼100 ㎎/정제를 사용하여 정제를 제조한다. 성분들을 혼합하고 이들을 압축하여 정제로 만든다.
제제 3
현탁제
이소플라본 0.1-200 ㎎/5 ㎖, 식물성 스테롤 250∼2,000 ㎎/5 ㎖, 대두 단백질 물질 500∼2,000 ㎎/5 ㎖, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로오스 50∼700 ㎎/5 ㎖, 안식향산나트륨 0∼10 ㎎/5 ㎖, 정제수 5 ㎖; 필요한 경우 향미제와 착색제를 사용하여 현탁제를 제조한다.
제제 4
비경구성 용제
비경구 조성물은 10 부피%의 프로필렌 글리콜 및 물중에 1.5 중량%의 활성 성분(활성 성분은 5:4:1 중량비의 대두 단백질 물질, 식물성 스테롤 및 이소플라본)을 교반하여 제조한다. 용액을 염화나트륨을 사용하여 등장성으로 만들고 이를 멸균 처리한다.
하기의 제제 5∼8은 본 발명의 조성물에 이용되는 이소플라본 화합물 중에 풍부하게 존재하는 대두 단백질 분리물과 식물성 스테롤을 사용하여 성형될 수 있는 식이성 보충제를 설명한 것이다. 하기 실시예에서 이소플라본 농축 대두 단백질 분리물은 일반적으로 약 1∼약 7 ㎎의 이소플라본을 대두 단백질 1 g에 대해 사용한다.
제제 5
드링크 음료 제조
하기의 성분을 사용하여 드링크 음료를 만든다.
성분
조성(중량%)
물 75-82
이소플라본 농축의 대두 단백질 분리물 10-15
식물성 스테롤 3-5
슈크로즈 5-8
코코아 0.1-1
비타민/미네랄 0.1-1
향미제 0.1-1
셀룰로오즈 겔 0.1-0.5
드링크 음료(8 온스)을 제조하되, 이 음료는 약 20∼약 140 ㎎의 이소플라본 화합물과 약 6 g의 식물성 스테롤을 포함하는 분리된 대두 단백질 약 20 g을 함유한다.
제제 6
분말형 음료
하기의 성분을 사용하여 분말형 음료를 제조한다.
성분
조성(중량%)
이소플라본 농축 대두 단백질 분리물 75-85
식물성 스테롤 5-10
슈크로즈 8-15
말토덱스트린 1-5
비타민/미네랄 0.5-2
아스파탐 0-0.5
향미제 0-0.5
30 g의 분말형 음료 제제를 물에 첨가하여 약 23 ㎎∼약 161 ㎎의 이소플라본 화합물과 약 2.5 g의 식물성 스테롤을 함유하는 대두 단백질 분리물 약 23 g을 포함하는 음료를 제공한다.
제제 7
식품 바아
식품 바아는 다음의 성분으로 구성된다.
성분
조성(중량%)
이소플라본 농축 대두 단백질 분리물 20-30
식물성 스테롤 1-5
콘 시럽 30-45
라이스 시럽 고형물 7-14
글리세린 1-5
코코아 2-7
화합물 코팅 15-25
약 15∼약 105 ㎎의 이소플라본 화합물과 약 2 g의 식물성 스테롤을 갖는 약 15 g의 대두 단백질 분리물을 함유하는 70 g의 양의 식품 바아를 제공한다.
제제 8
대두 요구르트
대두 요구르트는 하기의 성분을 사용하여 제조한다.
성분
조성(중량%)
물 50-70
이소플라본 농축 대두 단백질 분리물 5-15
식물성 스테롤 5-15
슈크로즈 3-8
콘 전분 1-5
덱스트린 0.3-1
셀룰로오스 겔 1-3
배양액(요구르트) 0.01-0.1
과일 10-20
비타민/미네랄 0.05-0.3
대두 요구르트는 약 17 g의 식물성 스테롤을 함유하며, 약 17 g∼약 170 ㎎의 이소플라본 화합물을 갖는 약 17 g의 대두 단백질 분리물을 함유하는 170 g으로 제공된다.
방법
본 발명은 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본 화합물을 사용하여 사람에서 저밀도 지단백 콜레스테롤의 혈중 농도 또는 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 방법에 관한 것이다. LDL 콜레스테롤의 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키기 위해서, 식물성 스테롤은 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본 화합물을 함께 규칙적으로, 바람직하게는 매일 사람에게 투여한다. 식물성 스테롤은 바람직하게는 전술한 β-시토스테롤, 캠페스테롤, 스티그마스테롤, 시토스나놀 또는 캠프에스타놀이 바람직하다. 대두 단백질 물질은 대두 분말, 대두 그릿, 대두 농축물 또는 대두 분리물과 같은 대두 단백질 물질의 건조 중량을 기준으로 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 배축 물질 또는 대두 단백질 물질이다. 이소플라본 화합물은 1 이상의 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들의 천연 글리코시드 또는 글리코시드 접합체에서 선택된다. 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본은 약학 조성물 또는 OTC 조성물에 또는 식이성 보조제로서 효과적이거나 허용가능한 경로에 따라 투여하는 것이 바람직하다.
식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본 화합물은 특정 시간, 바람직하게는 매일 동시에 또는 순차적으로 동시투여될 수 있다. 상기한 바와 같이 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본 화합물은 본 발명의 조성물중에 동시에 동시투여된다. 대안적으로, 식물성 스테롤 및 대두 단백질 및/또는 이소플라본 화합물을 개별적인 성분으로 순차적으로 투여된다. "순차적으로"라는 의미는 특정된 주기적 시간, 예를 들면 하루내에 개체에 각각의 성분을 투여하는 것을 의미하는 것이지만, 각 성분을 즉각 연속적으로 투여한다는 것으로만 제한하는 것은 아니다.
식물성 스테롤 및 대두 단백질 및/또는 이소플라본 화합물은 사람에게 각 성분의 혈중 콜레스테롤 농도를 저하시키는 유효량으로 사람에게 투여한다. 각 성분의 혈중 콜레스테롤 농도 저하량을 전달하는 데 효과가 있는 특정량은 성분을 투여하게 되는 사람의 크기, 성분을 투여하게 되는 사람의 혈중 콜레스테롤 농도 및 성분의 투여 경로를 포함하는 여러가지 인자에 좌우된다. 식물성 스테롤은 1일 500 ㎎∼50 g의 양, 바람직하게는 1 g∼5 g의 양으로 투여되어 식물성 스테롤의 혈중 콜레스테롤 저하량을 전달한다. 대두 단백질 물질을 투여하는 경우, 1일 5 g∼100 g의 양으로, 더욱 바람직하게는 10 g∼30 g의 양으로 투여되어 대두 단백질 물질의 혈중 콜레스테롤 저하량을 전달한다. 이소플라본을 투여하는 경우, 1일 10 ㎎∼1,000 ㎎의 양으로, 더욱 바람직하게는 25 ㎎∼200 ㎎의 양으로 투여되어 이소플라본 화합물의 혈중 콜레스테롤 저하량을 전달한다.
LDL 콜레스테롤의 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 개체별로 저하시키도록 하는 유효량으로 동시투여하는 경우, 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본이 상호 작용하여 사람에서의 혈중 콜레스테롤 농도를 저하시킨다. 본 발명의 방법에 사용되는 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및 이소플라본은 사람에서 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 확실한 메카니즘 또는 이들 메카니즘의 조합(어느 정도는 메카니즘이 서로 중복됨)에 의해 저하시키게 된다. 이들 각 물질의 콜레스테롤 저하 메카니즘은 기타의 물질의 저하 메카니즘을 가속화시키기 위하여 기타의 물질의 메카니즘과 상호작용하는 것으로 밝혀졌다. 결합된 콜레스테롤 저하 성분의 콜레스테롤 저하 메카니즘의 가속화된 활성은 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 집합적으로 저하시키게 되며, 이는 각 성분이 개별적으로 일으키는 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도의 저하보다 훨씬 큰 폭이다.
예를 들면, LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 상승 효과적으로 저하시킬 수 있는 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및 이소플라본을 동시투여하는 한 메카니즘은 제안된 콜레스테롤의 저하 메카니즘의 특정 양상을 상호 결합한 것이다. 식물성 스테롤은 장내에서 식용 콜레스테롤의 흡수를 막는 방식으로 콜레스테롤과 담즙산간에 장간 순환 균형에 영향을 끼친다는 것은 공지되어 있다. 이것은 담즙산을 합성하기 위해 간에 콜레스테롤의 필요를 창출하면서 장간 콜레스테롤 순환 조정에서의 콜레스테롤 피드백을 저하시킨다. 간은 식물성 스테롤의 투여에 의하여 상향조절되는 간세포중의 LDL 콜레스테롤 수용체를 통하여 혈액으로부터 필요한 콜레스테롤을 얻을 수 있거나 또는 필요한 콜레스테롤을 합성할 수 있다. 간에 의해 필요한 콜레스테롤이 혈액으로부터 제거되면 혈중 콜레스테롤 농도를 저하시킬 수 있다.
대두 단백질이 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 한가지 공지된 메카니즘은 배설 담즙산 분비를 증가시키는 것에 의한 것이다. 배설 담즙산의 분비가 증가되면 담즙산 생성의 기질로서 콜레스테롤을 이용하여 간으로 하여금 더 많은 담즙산을 생성하도록 한다. 상술한 바와 같이, 간은 혈중 콜레스테롤 농도를 저하시키면서 혈액으로부터 담즙산을 합성하는 데 필요한 콜레스테롤을 얻을 수 있게 한다.
본 발명에 따른 식물성 스테롤과 대두 단백질을 함께 투여하면 장간 콜레스테롤 항상성이 상호 협동적으로 조절되어 상당히 낮은 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 보인다. 식물성 스테롤에 의해 식이성 콜레스테롤의 장내 흡수를 방지하면 혈액으로부터 콜레스테롤이 제거되어 부분적으로 경감된 간 콜레스테롤 결핍이 나타날 수 있다. 대두 단백질에 의해 유발된 배설 담즙산 배출의 증가는 담즙산 기질로서 간으로부터의 콜레스테롤 제거율을 증가시키면서 식물성 스테롤에 의해 유발된 간 콜레스테롤 결핍을 악화시킬 수 있는 데, 이는 혈액으로부터 콜레스테롤이 추가로 배출되므로써 부분적으로 경감되었기 때문이다.
본 발명에 사용되는 이소플라본은 식물성 스테롤과 조합 사용되거나 또는 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질과 조합되어 사용되므로써 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 상호 협동적으로 저하시키는 데 효과적인데 이는 부분적으로 이소플라본이 간 LDL 콜레스테롤-수용체의 수를 상향조절하거나 증가시키기 때문이다. 본 발명에 이용되는 이소플라본은 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 포르모노네틴, 바이오카닌 A 및 이들의 각 글리코시드(들) 접합체로서, 이들은 생체내에서 에스트로겐 효과를 갖는 것으로 알려진 식물성 에스트로겐이다. 에스트로겐은 간 LDL 콜레스테롤 수용체의 수를 증가시키고, 이는 혈장에서 간으로의 콜레스테롤 입자의 청소률을 증가시킨다. 본 발명에 따르면, 식물성 스테롤 및/또는 대두 단백질 물질에 의해 유발된 간내의 콜레스테롤의 요구가 증가됨에 따라 이소플라본(들)의 에스트로겐 효과에 의해 유발된 간 LDL 콜레스테롤 수용체의 수 및 이의 상향조절 작용이 증가되면 혈액에서 간으로의 LDL 콜레스테롤 청소율이 상당히 개선된다.
하지만, 본 발명의 방법은 작용의 특정 메카니즘에만 국한되지 않는데, 그 이유는 동시투여되는 식물성 스테롤, 이소플라본 및/또는 대두 단백질 물질이 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 몇개의 메카니즘이 있기 때문이다. 예를 들면, 담즙산의 분비를 증가시켜 콜레스테롤 항상성을 변경시키는 것 이외에도, 대두 단백질은 단백질의 7S 저장 유니트의 특이적 작용, 혈청 글루카곤을 간에서의 콜레스테롤 대사에 영향을 주는 혈청 인슐린으로의 비율을 변경시키는 작용 또는 혈청 유리 티록신 농도를 증가시키는 작용에 의해 아르기닌 아미노산 함량이 높아진 결과, 혈중에서 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시킬 수 있다. 식물성 스테롤은 혈류로의 직접 주사에 의해 콜레스테롤의 농도를 저하시키는 것으로 밝혀졌기 때문에, 식물성 스테롤은 콜레스테롤의 장내 흡수의 억제 이외의 메카니즘에 의해 콜레스테롤을 저하시키는 기능을 발휘할 수 있다.
본 발명은 또한 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴, 이들 각각의 천연 글리코시드로부터 선택된 1 이상의 이소플라본 및/또는 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 또는 배축 물질 중 하나인 대두 단백질 물질과 식물성 스테롤을 사람에게 동시투여하므로써 동맥경화의 진행을 예방 또는 최소화시키는 방법에 관한 것이다. 식물성 스테롤은 β-시토스테롤, 캄페스테롤, 스티그마스테롤, 시토스타놀 및 캄페스타놀 중 하나인 것이 바람직하다. 대두 단백질 물질은 대두 분말, 대두 그릿, 대두 단백질 농축물 또는 대두 단백질 분리물인 것이 바람직하다. 바람직한 투여 방법 및 복용량은 LDL 콜레스테롤 및 완전 혈중 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키기 위하여 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 투여하는 것과 관련하여 전술한 바와 동일하다.
전술한 바와 같이, 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본은 각 화합물의 콜레스테롤 저하 활성을 유발하는 데 충분량으로 사람에게 투여시 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 상호 협동적으로 저하시키는 데 효과적이다. 혈중 LDL 콜레스테롤의 농도 증가는 동맥경화증의 진전과 관련이 있는 데, 이는 LDL 콜레스테롤이 동맥경화성 플라크의 형성에 주요한 성분이기 때문이다. 그러므로, LDL 콜레스테롤 저하 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본의 조합 사용은 동맥경화 진전을 예방 또는 최소화하는 데 효과적이다.
바람직한 구체화에 있어서, 대두 단백질이 투여되는지 여부와 무관하게, 동맥경화의 진전을 예방 또는 최소화 하기 위하여 이소플라본을 항상 식물성 스테롤과 조합하여 사용하는데, 이는 LDL 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 것 이외에 이소플라본이 항-동맥경화 작용을 제공하기 때문이다. 구체적으로, 이들 이소플라본은 혈관 농도에서 동맥경화에 대해 상당한 보호작용을 제공한다. 이소플라본 --특히 아글루콘 이소플라본 게니스테인, 다이드제인, 바이오카닌 A 및 포르모노네틴-- 은 LDL 콜레스테롤의 산화를 억제한다. LDL 콜레스테롤의 산화는 동맥경화 플라크의 형성에 주요한 단계인데, 이는 LDL 콜레스테롤의 산화가 동맥경화 발생을 높이기 때문이다. 일부의 이소플라본, 특히 게니스테인, 다이드제인 및 바이오카닌 A는 효소 티로신 키나제 활성을 억제하므로써 동맥경화 병변과 트롬빈의 형성을 억제하는 티로신 키나제 억제제이다. 그러므로, 본 발명에 따른 식물성 스테롤과 1 이상의 이소플라본은 대두 단백질과 함께 또는 대두 단백질 없이 동시투여하면 상호 협동적으로 작용하여 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도가 저하되고, 그리고 동맥경화 플라크의 형성 및 성장 메카니즘이 억제되므로써 동맥경화의 진전을 예방 또는 최소화한다.
실시예 1
임상 실험을 위해서 5-50 명의 남자를 선택한다. 이들 남자들은 콜레스테롤 농도가 250 ㎎/㎗ 이상이어서 중간 정도 내지 높은 콜레스테롤 과다혈증이 있는 것으로 진단받은 사람들이다. 남자들을 5그룹으로 나누고, 첫번째 그룹에는 30 g의 이소플라본 유리의 (알콜 추출에 의해서 이소플라본을 제거한 것) 분리된 대두 단백질 식이성 보충제를 투여하고("대두" 그룹), 두번째 그룹에는 식물성 스테롤 β-시토스테롤을 함유하는 5 g의 식물성 스테롤 식이성 보충제를 투여하고("식물성 스테롤" 그룹), 세번째 그룹에는 이소플라본 게니스테인 및 다이드제인을 함유하는 이소플라본 식용 보충제 75 ㎎을 투여하고("이소플라본" 그룹), 네번째 그룹에는 30 g의 분리된 대두 단백질, 5 g의 식물성 스테롤 β-시토스테롤 및 75 ㎎의 이소플라본 게니스테인 및 다이드제인을 투여하고("조합" 그룹), 다섯번째 그룹에는 식이성 보충제를 전혀 투여하지 않았다("대조 그룹"). 이들 그룹의 식이에는 이소플라본, 식물성 스테롤 및 대두 단백질의 추가의 공급원을 함유하지 않도록 하는 한편, 두개 그룹중 어느 하나에는 에스트로겐 공급원을 투여하지 않았다. 이 식이를 6 개월 동안 섭취했다.
이 식이를 섭취하기 전에, 환자들에게서 완전 및 저밀도의 지단백질 혈중 콜레스테롤 농도를 측정 기준점으로 삼는다. 각각의 식이를 6 개월간 섭취한 후 각 그룹 멤버간을 비교하고, 또 이러한 멤버간의 연구 시작 및 연구 종료시의 수치와 비교하였다. 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질 및 이소플라본을 조합하여 얻은 LDL 콜레스테롤 및 완전 콜레스테롤의 혈중 농도를 저하시키는 활성의 증가는 대두 그룹, 식물성 스테롤 그룹, 이소플라본 그룹 및 대조 그룹에 비해 조합 그룹에서 LDL 콜레스테롤 또는 완전 콜레스테롤의 혈중 농도의 저하율이 훨씬 높게 나타났다.
사람에서 혈중 LDL 콜레스테롤 농도를 저하시키기 위해 식물성 스테롤 및 대두 단백질 및/또는 이소플라본을 조합 사용하면 상기 실시예에서 제시한 바와 같이 활성이 입증되었다.
실시예 2
5 명∼50 명의 여성을 임상연구 대상자로 선택하였다. 이들 여성은 폐경기 여성으로서 동맥경화증으로 진단 받은 사람, 즉 협착성 플라크 및 폐색성 플라크를 비롯한 동맥경화성 플라크로 진단 받은 사람들이었다. 이들 여성들을 5그룹으로 나누고, 첫번째 그룹에는 30 g의 이소플라본 유리의 (알콜 추출에 의해서 이소플라본을 제거한 것) 분리된 대두 단백질 식이성 보충제를 투여하고("대두" 그룹), 두번째 그룹에는 식물성 스테롤 β-시토스테롤을 함유하는 5 g의 식물성 스테롤 식이성 보충제를 투여하고("식물성 스테롤" 그룹), 세번째 그룹에는 이소플라본 게니스테인 및 다이드제인을 함유하는 이소플라본 식이성 보충제 75 ㎎을 투여하고("이소플라본" 그룹), 네번째 그룹에는 30 g의 분리된 대두 단백질, 5 g의 식물성 스테롤 β-시토스테롤 및 75 ㎎의 이소플라본 게니스테인 및 다이드제인을 함유하는 식이성 보충제를 투여하고("조합" 그룹), 다섯번째 그룹에는 식이성 보충제를 전혀 투여하지 않았다("대조 그룹"). 이들 그룹에 이소플라본, 식물성 스테롤 및 대두 단백질의 추가의 공급원을 함유하지 않도록 식이를 선택하고, 두 그룹당 어느 하나에는 에스트로겐 공급원을 전혀 투여하지 않았다. 이 식이를 6 개월 동안 섭취했다.
이 식이를 섭취하기 전에, 환자들은 완전 혈중 콜레스테롤 농도가 낮고; 고밀도 및 저밀도의 지단백 콜레스테롤 혈중 농도; 에스트로겐 농도; 표면적인 대퇴부 동맥 또는 상완 동맥과 같은 혈관 반응도 비 공격성에 대해 고해상 초음파를 사용하여 연구하고자 하는 선택된 혈관에서의 협착정도 및 동맥 경화성 플라크 정도를 측정 기준점으로 삼는다. 각각의 식이를 6 개월간 섭취한 후 이러한 기준점의 증후군을 각 그룹에 대하여 다시 측정하였다. 그 결과치를 각각 그룹의 멤버간에 비교하는 한편, 멤버간의 연구 개시 및 연구 종료시의 수치와 비교하였다. β-시토스테롤, 분리된 대두 단백질, 이소플라본 게니스테인 및 다이드제인에 비해 화합물을 조합하여 사용하면 항동맥경화증 작용이 증가되며, 또한 대두 그룹, 식물성 스테롤 그룹, 이소플라본 그룹 및 대조 그룹에 비해 조합 그룹이 동맥경화성 플라크 또는 협심증의 증가량이 최소화되거나 또는 동맥경화 플라크 및 협착증이 더 많이 저하되므로 더이상의 치료가 필요 없음을 보여주었다.
사람에서 동맥경화성 플라크의 진행을 방지 또는 최소화하기 위한 식물성 스테롤 및 대두 단백질 물질 및/또는 이소플라본을 조합 사용하는 유용성은 상기 실시예서 알 수 있는 바와 같이 그 활성이 입증되었다.
도 1은 식물성 불포화 스테롤 β-스테롤, 캄페스테롤 및 스티그마스테롤의 분자 구조를 도시한다.
도 2는 식물성 포화 스테롤 시토스타놀 및 캄페스타놀의 분자 구조를 도시한다.
도 3은 본 발명에 사용된 아글루콘 이소플라본의 분자 구조를 도시한다.
도 4는 대표적인 이소플라본 글리코시드 및 이소플라본 글리코시드 접합체의 분자 구조를 도시한다.
Claims (6)
- 대두 단백질 물질의 건조 중량을 기준으로 하여 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 55∼99.50 중량% (조성물의 총 중량 기준),게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군으로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본 0.0066∼66 중량% (조성물의 총 중량 기준) 및식물성 스테롤 0.49∼15 중량% (조성물의 총 중량 기준)를 포함하며,물을 더 포함하며, 여기서 식물성 스테롤, 대두 단백질 물질, 이소플라본 및 물은 혼합되어 수성 유제가 되며, 식품 물질로 혼입되는 것인 조성물.
- 대두 단백질 물질의 건조 중량을 기준으로 하여 49 중량% 이상의 대두 단백질을 함유하는 대두 단백질 물질 55∼99.50 중량% (조성물의 총 중량 기준),게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군으로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본 0.0066∼66 중량% (조성물의 총 중량 기준) 및식물성 스테롤 0.49∼15 중량% (조성물의 총 중량 기준)를 포함하고, 식품 물질로 혼입되는 것인 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군으로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본 0.0066∼66 중량% (조성물의 총 중량 기준) 및식물성 스테롤 0.49∼15 중량% (조성물의 총 중량 기준)를 포함하고, 물을 더 포함하며, 여기서 식물성 스테롤 및 이소플라본은 혼합되어 수성 유제가 되며, 식품 물질로 혼입되는 것인 조성물.
- 게니스테인, 다이드제인, 글리시테인, 바이오카닌 A, 포르모노네틴 및 이들 각각의 천연 글리코시드 및 글리코시드 접합체로 구성된 군으로부터 선택된 1 종 이상의 이소플라본 0.0066∼66 중량% (조성물의 총 중량 기준) 및식물성 스테롤 0.49∼15 중량% (조성물의 총 중량 기준)를 포함하고, 식품 물질로 혼입되는 것인 조성물.
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