JPWO2021173985A5

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Publication number: JPWO2021173985A5
Application number: JP2022551753A
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Publication date: 2024-03-04

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重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む、ＣＤ２８に結合する抗体分子であって、
（ｉ）前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５３８、５３９、５４０、５３０、５３１及び５３２のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５４１、５３９、５４０、５３０、５３１及び５３２のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５４２、５４３、５４０、５３３、５３４及び５３５のアミノ酸配列を含むか；又は
（ｉｖ）前記ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３は、それぞれ配列番号５４４、５４５、５４６、５３６、５３４及び５３２のアミノ酸配列を含む、抗体分子。
（ｉ）配列番号５４７若しくは５４８のアミノ酸配列、又は配列番号５４７若しくは５４８に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＨ；
（ｉｉ）配列番号５３７のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＬ；
（ｉｉｉ）配列番号５４７のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＨ、及び配列番号５３７のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＬ；又は
（ｉｖ）配列番号５４８のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＨ、及び配列番号５３７のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＬ
を含む、請求項１に記載の抗体分子。
（ｉ）完全長抗体、二重特異性抗体、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）である；及び／又は
（ｉｉ）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域と、κ又はλの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域とを含む、請求項１又は２に記載の抗体分子。
請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体分子をコードする単離された核酸分子。
（ｉ）抗ＣＤ３結合ドメイン、及び
（ｉｉ）請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体分子を含む抗ＣＤ２８結合ドメイン
を含む多重特異性結合分子。
（ｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインを含む第１の結合ドメインと、前記抗ＣＤ２８結合ドメインを含む第２の結合ドメインとを含む；又は
（ｉｉ）前記抗ＣＤ２８結合ドメインを含む第１の結合ドメインと、前記抗ＣＤ３結合ドメインを含む第２の結合ドメインとを含む、請求項５に記載の多重特異性結合分子。
（ｉ）第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含み、
（ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、前記第１の結合ドメインのＶＨ及び前記第１の結合ドメインのＶＬを含み、
（ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む；
（ｉｉ）第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含み、
（ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第１の結合ドメインのＶＨ、前記第１の結合ドメインのＶＬ、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含み、
（ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む；又は
（ｉｉｉ）第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含み、
（ａ）前記第１のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、前記第１の結合ドメインのＶＨ、前記第１の結合ドメインのＶＬ、ＣＨ２及びＣＨ３を含み、
（ｂ）前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む、
請求項６に記載の多重特異性結合分子。
第１の結合ドメイン及び第２の結合ドメインを含む多重特異性結合分子であって、
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、前記第１の結合ドメインのＶＨ及び前記第１の結合ドメインのＶＬを含む第１のポリペプチド、及び、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチド；
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記第１の結合ドメインのＶＨ、前記第１の結合ドメインのＶＬ、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む第１のポリペプチド、及び、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチド；又は
（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、前記第１の結合ドメインのＶＨ、前記第１の結合ドメインのＶＬ、ＣＨ２及びＣＨ３を含む第１のポリペプチド、及び、Ｎ末端からＣ末端に、前記第２の結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチド、を含む、多重特異性結合分子。
前記第１の結合ドメインは、抗ＣＤ３結合ドメインを含み、及び前記第２の結合ドメインが共刺激分子結合ドメインを含む、請求項８に記載の多重特異性結合分子。
前記第１の結合ドメインは、共刺激分子結合ドメインを含み、及び前記第２の結合ドメインが抗ＣＤ３結合ドメインを含む、請求項８に記載の多重特異性結合分子。
前記共刺激分子結合ドメインは、抗ＣＤ２結合ドメイン又は抗ＣＤ２８結合ドメインを含む、請求項９又は１０に記載の多重特異性結合分子。
前記抗ＣＤ３結合ドメインは、以下：
（ｉ）それぞれ配列番号４８８、４８６、４８７、４７７、４７８及び４７９；
（ｉｉ）それぞれ配列番号４８９、４９０、４８７、４８０、４８１及び４８２；
（ｉｉｉ）それぞれ配列番号４９１、４９２、４９３、４８３、４８１及び４７９；
（ｉｖ）それぞれ配列番号４８５、４８６、４８７、４７７、４７８及び４７９；
（ｖ）それぞれ配列番号４３１、４２９、４３０、４２０、４２１及び４２２；
（ｖｉ）それぞれ配列番号４３２、４３３、４３０、４２３、４２４及び４２５；
（ｖｉｉ）それぞれ配列番号４３４、４３５、４３６、４２６、４２４及び４２２；
（ｖｉｉｉ）それぞれ配列番号４２８、４２９、４３０、４２０、４２１及び４２２；
（ｉｘ）それぞれ配列番号４５０、４４８、４４９、４３８、４３９及び４４０；
（ｘ）それぞれ配列番号４５１、４５２、４４９、４４１、４４２及び４４３；
（ｘｉ）それぞれ配列番号４５３、４５４、４５５、４４４、４４２及び４４０；
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号４４７、４４８、４４９、４３８、４３９及び４４０；
（ｘｉｉｉ）それぞれ配列番号４７１、４４８、４７０、４５８、４５９及び４６０；
（ｘｉｖ）それぞれ配列番号４７２、４５２、４７０、４６１、４６２及び４６３；
（ｘｖ）それぞれ配列番号４７３、４５４、４７４、４６４、４６５及び４６６；又は
（ｘｖｉ）それぞれ配列番号４６９、４４８、４７０、４５８、４５９及び４６０
のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む、請求項５～７又は９～１１のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子。
（ｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、
（ａ）配列番号４３７、４５６、４５７、４７５、４７６又は４９４のいずれか１つのアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４２７、４４５、４４６、４６７、４６８又は４８４のいずれか１つのアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；
（ｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４９４のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４８４のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；
（ｉｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４３７のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４２７のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；
（ｉｖ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４５６のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４４５のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；
（ｖ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４５７のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４４６のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；
（ｖｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４７５のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４６７のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む；又は
（ｖｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインが、
（ａ）配列番号４７６のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び／又は
（ｂ）配列番号４６８のアミノ酸配列、又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項５～７又は９～１２のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子。
（ｉ）前記抗ＣＤ２８結合ドメインは、配列番号５４７又は５４８のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＨ、及び配列番号５３７のアミノ酸配列又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＬを含む、並びに
（ｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、配列番号４９４のアミノ酸配列、又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＨ、及び配列番号４８４のアミノ酸配列又はそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含むＶＬを含む、
請求項５～７又は１１～１３のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子。
（ｉ）前記抗ＣＤ２８結合ドメインがＦａｂである、および前記抗ＣＤ３結合ドメインがｓｃＦｖであるか、又はリンカー、任意選択で、（Ｇ _４Ｓ） _４リンカーなどのグリシン－セリンリンカーによってＶＬに連結されたＶＨである；及び／又は
（ｉｉ）前記抗ＣＤ２８結合ドメインが抗ＣＤ３結合ドメインのＮ末端に位置し、ここでＦｃ領域が、前記抗ＣＤ２８結合ドメインと抗ＣＤ３結合ドメインとの間に位置する、請求項５～７又は１１～１４のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子。
（ａ）前記Ｆｃ領域が、前記Ｆｃ領域における少なくとも１つのアミノ酸残基の付加、置換または欠失を含む、または
（ｂ）前記Ｆｃ領域が、変異体Ｆｃ領域であって、ここで多重特異性結合分子が、以下：
（１）エフェクター機能の低下（任意選択で、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ及び／若しくはＣＤＣの低下）；（２）１つ以上のＦｃ受容体に対する結合の低減；並びに／又は（３）Ｃ１ｑ補体に対する結合の低減、の特性の１つ以上を有し、ここで（１）～（３）の特性のいずれか１つ又は全ての低下は、野生型Ｆｃ領域を有すること以外には類似した抗体と比較される、変異体Ｆｃ領域である、
請求項１５に記載の多重特異性結合分子。
Ｎ末端からＣ末端に、前記抗ＣＤ２８結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＨ及び前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＬを含む第１のポリペプチド、並びにＮ末端からＣ末端に、前記抗ＣＤ２８結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチドを含む、請求項５～７又は１１～１６のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子。
細胞（例えば、免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞）を活性化する方法であって、細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば凍結された又は新鮮な白血球アフェレーシス産物から単離されたＴ細胞）の集団を、請求項５～１７のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子又は請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体分子と接触させる（例えば、結合させる）ステップを含む方法。
細胞（例えば、免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞）を形質導入する方法であって、細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば凍結された又は新鮮な白血球アフェレーシス産物から単離されたＴ細胞）の集団を、（ｉ）請求項５～１７のいずれか一項に記載の多重特異性結合分子又は請求項１～３のいずれか一項に記載の抗体分子、及び（ｉｉ）核酸分子、任意選択でキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）をコードする核酸分子と接触させる（例えば、結合させる）ステップを含む方法。
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を作製する方法であって、
（ｉ）細胞（例えば、Ｔ細胞、例えば凍結された又は新鮮な白血球アフェレーシス産物から単離されたＴ細胞）の集団を、（Ａ）抗ＣＤ３結合ドメイン、及び（Ｂ）共刺激分子結合ドメイン（例えば、抗ＣＤ２結合ドメイン又は抗ＣＤ２８結合ドメイン）を含む多重特異性結合分子と接触させる（例えば、結合させる）ステップ；
（ｉｉ）前記細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を、前記ＣＡＲをコードする核酸分子（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子）と接触させ、それにより前記核酸分子を含む細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を提供するステップ、及び
（ｉｉｉ）保存（例えば、凍結保存培地中で前記細胞の集団を再製剤化すること）又は投与のために前記細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を採取するステップ
を含み、
（ａ）ステップ（ｉｉ）は、ステップ（ｉ）と一緒に、又はステップ（ｉ）の開始後の２０時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の１２、１３、１４、１５、１６、１７若しくは１８時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の１８時間以内に実施され、及び
ステップ（ｉｉｉ）は、ステップ（ｉ）の開始後の３０（例えば、２６）時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の２４時間以内に実施されるか、
（ｂ）ステップ（ｉｉ）は、ステップ（ｉ）と一緒に、又はステップ（ｉ）の開始後の２０時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の１２、１３、１４、１５、１６、１７若しくは１８時間以内、例えばステップ（ｉ）の開始後の１８時間以内に実施され、及び
ステップ（ｉｉｉ）は、ステップ（ｉｉ）の開始後の３０時間以内、例えばステップ（ｉｉ）の開始後の２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９又は３０時間以内に実施されるか、又は
（ｃ）ステップ（ｉｉｉ）からの前記細胞の集団は、例えば、ステップ（ｉ）の開始時の前記細胞の集団と比べて、生存細胞の数によって評価されて増殖されないか、又は５、１０、１５、２０、２５、３０、３５若しくは４０％以下、例えば１０％以下だけ増殖され、
任意選択で、ステップ（ｉｉ）における前記核酸分子は、ウイルスベクター上にあり、任意選択で、ステップ（ｉｉ）における前記核酸分子は、ウイルスベクター上のＲＮＡ分子であり、任意選択で、ステップ（ｉｉ）は、前記ＣＡＲをコードする核酸分子を含むウイルスベクターで前記細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を形質導入することを含む、方法。
（ｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメイン、例えば抗ＣＤ３ｓｃＦｖは、前記共刺激分子結合ドメイン、例えば抗ＣＤ２Ｆａｂ若しくは抗ＣＤ２８ＦａｂのＮ末端に位置するか；又は
（ｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメイン、例えば抗ＣＤ３ｓｃＦｖは、前記共刺激分子結合ドメイン、例えば抗ＣＤ２Ｆａｂ若しくは抗ＣＤ２８ＦａｂのＣ末端に位置し、任意選択で、
Ｆｃ領域は、前記抗ＣＤ３結合ドメインと前記共刺激分子結合ドメインとの間に位置するか；又は
前記多重特異性結合分子は、ＣＨ２を含み、及び前記抗ＣＤ３結合ドメインは、前記ＣＨ２のＮ末端に位置する、
任意選択で、前記抗ＣＤ３結合ドメインは、ｓｃＦｖを含み、及び前記共刺激分子結合ドメインは、Ｆａｂフラグメントの一部である、請求項２０に記載の方法。
前記多重特異性結合分子は、
（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＨ、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＬ、前記共刺激分子結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む第１のポリペプチドと、Ｎ末端からＣ末端に、前記共刺激分子結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチドとを含む；
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記共刺激分子結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＨ及び前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＬを含む第１のポリペプチドと、Ｎ末端からＣ末端に、前記共刺激分子結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチドとを含む；又は
（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に、前記共刺激分子結合ドメインのＶＨ、ＣＨ１、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＨ、前記抗ＣＤ３結合ドメインのＶＬ、ＣＨ２及びＣＨ３を含む第１のポリペプチドと、Ｎ末端からＣ末端に、前記共刺激分子結合ドメインのＶＬ及びＣＬを含む第２のポリペプチドとを含む、請求項２０又は２１に記載の方法。
前記抗ＣＤ３結合ドメインは、
（ｉ）ｓｃＦｖ；
（ｉｉ）ペプチドリンカー、例えばグリシン－セリンリンカー、例えば（Ｇ _４Ｓ） _４リンカーによってＶＬに連結されたＶＨ；
（ｉｉｉ）ＶＨ及びＶＬであって、前記ＶＨは、前記ＶＬのＮ末端である、ＶＨ及びＶＬ；
（ｉｖ）表２７の抗ＣＤ３抗体分子（例えば、抗ＣＤ３（１）、抗ＣＤ３（２）、抗ＣＤ３（３）又は抗ＣＤ３（４））の重鎖相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含む可変重鎖領域（ＶＨ）、及び軽鎖相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；並びに／又は
（ｖ）表２７に提供される抗ＣＤ３抗体分子（例えば、抗ＣＤ３（１）、抗ＣＤ３（２）、抗ＣＤ３（３）又は抗ＣＤ３（４））のいずれかのＶＨ及び／若しくはＶＬ領域のアミノ酸配列又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列
を含む、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。
前記共刺激分子結合ドメインは、
（Ａ）抗ＣＤ２結合ドメインであり、任意選択で、前記抗ＣＤ２結合ドメインは、
（ｉ）表２７の抗ＣＤ２抗体分子（例えば、抗ＣＤ２（１））のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含むＶＨ並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含むＶＬ；及び／又は
（ｉｉ）表２７に提供される抗ＣＤ２抗体分子（例えば、抗ＣＤ２（１））のいずれかのＶＨ及び／若しくはＶＬ領域のアミノ酸配列又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む；
（Ｂ）抗ＣＤ２８結合ドメインであり、任意選択で、前記抗ＣＤ２８結合ドメインは、
（ｉ）表２７の抗ＣＤ２８抗体分子（例えば、抗ＣＤ２８（１）又は抗ＣＤ２８（２））のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含むＶＨ並びにＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含むＶＬ；及び／又は
（ｉｉ）表２７に提供される抗ＣＤ２８抗体分子（例えば、抗ＣＤ２８（１）又は抗ＣＤ２８（２））のいずれかのＶＨ及び／若しくはＶＬ領域のアミノ酸配列又はそれと少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む；並びに／又は
（Ｃ）Ｆａｂフラグメントの一部、例えばＦｃドメインを含むポリペプチド配列の一部であるＦａｂフラグメントであり、任意選択で、前記Ｆｃドメインは、表２８に提供されるアミノ酸配列又は表２８に提供されるＦｃドメインのアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む、請求項２０～２３のいずれか一項に記載の方法。
（ｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、前記共刺激分子結合ドメインのＮ末端に位置し、任意選択で、前記抗ＣＤ３結合ドメインは、ペプチドリンカー、例えばグリシン－セリンリンカー、例えば（Ｇ_４Ｓ）_４リンカーによって前記共刺激分子結合ドメインに連結されている；又は
（ｉｉ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、前記共刺激分子結合ドメインのＣ末端に位置する、請求項２０～２４のいずれか一項に記載の方法。
（ｉ）Ｆｃ領域は、前記抗ＣＤ３結合ドメインと前記共刺激分子結合ドメインとの間に位置する；
（ｉｉ）前記多重特異性結合分子は、ＣＨ２及びＣＨ３の一方又は両方を含み、任意選択で、前記抗ＣＤ３結合ドメインは、ペプチドリンカー、例えばグリシン－セリンリンカー、例えば（Ｇ_４Ｓ）_４リンカーによって前記ＣＨ３に連結されている；
（ｉｉｉ）前記多重特異性結合分子は、ＣＨ２を含み、及び前記抗ＣＤ３結合ドメインは、前記ＣＨ２のＮ末端に位置する；
（ｉｖ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、ペプチドリンカー、例えばグリシン－セリンリンカー、例えば（Ｇ _４Ｓ） _２リンカーによってＣＨ１に連結されており；及び／又は
（ｖ）前記抗ＣＤ３結合ドメインは、ペプチドリンカー、例えばグリシン－セリンリンカー、例えば（Ｇ _４Ｓ） _４リンカーによってＣＨ２に連結されている、請求項２５に記載の方法。
前記多重特異性結合分子は、
（ｉ）表２８に提供されるいずれかの重鎖のアミノ酸配列若しくはそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列；及び／又は
（ｉｉ）表２８に提供されるいずれかの軽鎖のアミノ酸配列若しくはそれに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列
を含む、請求項２０～２６のいずれか一項に記載の方法。
前記ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインを含む、請求項２０～２７のいずれか一項に記載の方法。
前記抗原結合ドメインは、
（Ｉ）ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＢＣＭＡ、メソテリン、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ２、Ｔｎ抗原、ｓＴｎ抗原、Ｔｎ－Ｏ－グリコペプチド、ｓＴｎ－Ｏ－グリコペプチド、ＰＳＭＡ、ＣＤ９７、ＴＡＧ７２、ＣＤ４４ｖ６、ＣＥＡ、ＥＰＣＡＭ、ＫＩＴ、ＩＬ－１３Ｒａ２、レグマン、ＧＤ３、ＣＤ１７１、ＩＬ－１１Ｒａ、ＰＳＣＡ、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＶＥＧＦＲ２、ルイスＹ、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ－β、ＳＳＥＡ－４、葉酸受容体α、ＥＲＢＢ（例えば、ＥＲＢＢ２）、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＮＣＡＭ、エフリンＢ２、ＣＡＩＸ、ＬＭＰ２、ｓＬｅ、ＨＭＷＭＡＡ、ｏ－アセチル－ＧＤ２、葉酸受容体β、ＴＥＭ１／ＣＤ２４８、ＴＥＭ７Ｒ、ＦＡＰ、レグマイン、ＨＰＶＥ６若しくはＥ７、ＭＬ－ＩＡＰ、ＣＬＤＮ６、ＴＳＨＲ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＡＬＫ、ポリシアル酸、Ｆｏｓ関連抗原、好中球エラスターゼ、ＴＲＰ－２、ＣＹＰ１Ｂ１、精子タンパク質１７、βヒト絨毛性ゴナドトロピン、ＡＦＰ、チログロブリン、ＰＬＡＣ１、グロボＨ、ＲＡＧＥ１、ＭＮ－ＣＡＩＸ、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、腸カルボキシエステラーゼ、ｍｕｔｈｓｐ７０－２、ＮＡ－１７、ＮＹ－ＢＲ－１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＧＰＲ２０、Ｌｙ６ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＲＰ、ＧＦＲα４又はＭＨＣに提示される前記抗原のいずれかのペプチドから選択される抗原に結合する；
（ＩＩ）本明細書に開示されるＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ又はＣＡＲ配列を含み、任意選択で、
（ａ）前記抗原結合ドメインは、ＢＣＭＡに結合し、且つ表３～１５に開示されるＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ若しくはＣＡＲ配列又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％若しくは９９％の同一性を有する配列を含むか；
（ｂ）前記抗原結合ドメインは、ＣＤ１９に結合し、且つ表２に開示されるＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ若しくはＣＡＲ配列又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％若しくは９９％の同一性を有する配列を含むか；
（ｃ）前記抗原結合ドメインは、ＣＤ２０に結合し、且つ本明細書に開示されるＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ若しくはＣＡＲ配列又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％若しくは９９％の同一性を有する配列を含むか；又は
（ｄ）前記抗原結合ドメインは、ＣＤ２２に結合し、且つ本明細書に開示されるＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ若しくはＣＡＲ配列又はそれと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％若しくは９９％の同一性を有する配列を含む；及び／又は
（ＩＩＩ）ＶＨ及びＶＬを含み、前記ＶＨ及びＶＬは、リンカーによって連結され、任意選択で、前記リンカーは、配列番号６３又は１０４のアミノ酸配列を含む、請求項２８に記載の方法。
（ａ）前記膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のα、β又はζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ１５４から選択されるタンパク質の膜貫通ドメインを含むか、
（ｂ）前記膜貫通ドメインは、ＣＤ８の膜貫通ドメインを含むか、
（ｃ）前記膜貫通ドメインは、配列番号６のアミノ酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又は
（ｄ）前記核酸分子は、前記膜貫通ドメインをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列は、配列番号１７の核酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項２８又は２９に記載の方法。
前記抗原結合ドメインは、ヒンジ領域によって前記膜貫通ドメインに連結され、任意選択で、
（ａ）前記ヒンジ領域は、配列番号２、３若しくは４のアミノ酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又は
（ｂ）前記核酸分子は、前記ヒンジ領域をコードする核酸配列を含み、前記核酸配列は、配列番号１３、１４若しくは１５の核酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項２８～３０のいずれか一項に記載の方法。
前記細胞内シグナル伝達ドメインは、
（Ｉ）一次シグナル伝達ドメインを含み、任意選択で、前記一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ２７８（ＩＣＯＳ）、ＦｃεＲＩ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２又はＣＤ６６ｄに由来する機能性シグナル伝達ドメインを含み、任意選択で、
（ａ）前記一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζに由来する機能性シグナル伝達ドメインを含むか、
（ｂ）前記一次シグナル伝達ドメインは、配列番号９若しくは１０のアミノ酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又は
（ｃ）前記核酸分子は、前記一次シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列は、配列番号２０若しくは２１の核酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有する核酸配列を含む；
（ＩＩ）共刺激シグナル伝達ドメインを含み、任意選択で、前記共刺激シグナル伝達ドメインは、ＭＨＣクラスＩ分子、ＴＮＦ受容体タンパク質、免疫グロブリン様タンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、活性化ＮＫ細胞受容体、ＢＴＬＡ、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、Ｂ７－Ｈ３、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＫＩＲＤＳ２、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２８－ＯＸ４０、ＣＤ２８－４－１ＢＢ又はＣＤ８３と特異的に結合するリガンドに由来する機能性シグナル伝達ドメインを含み、任意選択で、
（ａ）前記共刺激シグナル伝達ドメインは、４－１ＢＢに由来する機能性シグナル伝達ドメインを含むか、
（ｂ）前記共刺激シグナル伝達ドメインは、配列番号７のアミノ酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、又は
（ｃ）前記核酸分子は、前記共刺激シグナル伝達ドメインをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列は、配列番号１８の核酸配列又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有する核酸配列を含む；及び／又は
（ＩＩＩ）４－１ＢＢに由来する機能性シグナル伝達ドメインと、ＣＤ３ζに由来する機能性シグナル伝達ドメインとを含み、任意選択で、前記細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号７のアミノ酸配列（又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）と、配列番号９若しくは１０のアミノ酸配列（又はそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％若しくは９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列）とを含み、任意選択で、前記細胞内シグナル伝達ドメインは、配列番号７のアミノ酸配列と、配列番号９又は１０のアミノ酸配列とを含む、請求項２０～３１のいずれか一項に記載の方法。
請求項２０～３２のいずれか一項に記載の方法によって作製されるＣＡＲ発現細胞（例えば、自家又は同種異系ＣＡＲ発現Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の集団。
請求項３３に記載のＣＡＲ発現細胞の集団と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
（ｉ）対象の免疫応答を増加させること；又は
（ｉｉ）対象の癌を処置すること、における使用のための請求項３３に記載のＣＡＲ発現細胞の集団又は請求項３４に記載の医薬組成物。
（ｉ）対象の免疫応答を増加させる；又は
（ｉｉ）対象の癌を処置する、ための医薬の製造における、請求項３３に記載のＣＡＲ発現細胞の集団又は請求項３４に記載の医薬組成物の使用。
前記癌は、
（ａ）固形癌、例えば、中皮腫、悪性胸膜中皮腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、扁平上皮癌、大細胞肺癌、膵臓癌、膵管腺癌、食道腺癌、乳癌、膠芽腫、卵巣癌、大腸癌、前立腺癌、子宮頸癌、皮膚癌、黒色腫、腎癌、肝臓癌、脳腫瘍、胸腺腫、肉腫、癌腫、子宮癌、腎臓癌、消化管癌、尿路上皮癌、咽頭癌、頭部及び頸部癌、直腸癌、食道癌若しくは膀胱癌の１つ以上から選択される固形癌又はその転移である；又は
（ｂ）液性癌、例えば、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性炎症を伴うＤＬＢＣＬ、慢性骨髄性白血病、骨髄増殖性腫瘍、濾胞性リンパ腫、小児性濾胞性リンパ腫、ヘアリー細胞白血病、小細胞型若しくは大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性リンパ球増殖性病態、ＭＡＬＴリンパ腫（粘膜関連リンパ組織型節外性濾胞辺縁帯リンパ腫）、辺縁帯リンパ腫、骨髄形成異常、骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽球性リンパ腫、形質細胞様樹状細胞新生物、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、脾辺縁帯リンパ腫、脾リンパ腫／白血病、脾臓びまん性赤脾髄小細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ヘアリー細胞白血病－変異型、リンパ形質細胞性リンパ腫、Ｈ鎖病、プラズマ細胞骨髄腫、孤立性骨形質細胞腫、骨外性形質細胞腫、節性辺縁帯リンパ腫、小児性節性辺縁帯リンパ腫、原発性皮膚濾胞中心リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、原発性縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ＋大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病に発生する大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）又は分類不能なリンパ腫から選択される液性癌である、
請求項３５に記載のＣＡＲ発現細胞の集団又は医薬組成物、又は請求項３６に記載の使用。