JPS63105003A - ヒアルロン酸の架橋エステル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景および産業上の利用分野 本発明は、ヒアルロン酸多糖類の２またはそれ以上のカ
ルボキシ基で多価アルコールをエステル化することによ
り得られた、ヒアルロン酸の多価アルコールエステルに
関するものであって、このエステルは、同一または別個
のヒアルロン酸分子のカルボキシ基間に架橋結合が存在
することにより「架橋エステル」と記述され得る。これ
らの架橋エステルは、完全、または部分的であり、後者
の場合には架橋結合を形成することなく一価または多価
アルコールによってさらにカルボキシ基がエステル化さ
れ得る（以後、このエステルを「単エステル」と記載す
る）。いずれのタイプの部分的架橋エステルにおいても
、エステル化されていないカルボキシ基は遊離の状態、
あるいは金属または有機塩基の塩のいずれであってもよ
い。

また本発明は医薬および化粧品の分野において、衛生お
よび外科用製品を製造するために、新規なヒアルロン酸
の架橋エステルを生物分解性のプラスチック材料の分野
に利用することに関するものであり、従って、本発明は
そのような分野で同物質から製造される様々な製品を包
含するものである。この新規なエステルの具体的な用途
は、架橋エステル化の程度、即ち上記の多価アルコール
によってエステル化されたカルボキシ基の架橋結合した
基の数、単エステル化された基の数、並びに最終的には
１、塩化された基の数と関連して考察されるものであり
、エステル化または塩化の程度はそれ自体、生成物の溶
解度および生成物の粘−弾性に関連している。例えば、
完全な架橋エステルは実質上、水性液体に不溶性であり
、その分子の構造から、プラスチック材料または合成樹
脂の製造に用いる上で、又、それらの物質の添加物とし
て極めて適している。平均的またはそれ以下のニステレ
化率のエステル、並びにその無機または有機塩基による
塩は多少なりとも水性条件下で可溶性であり、化粧品お
よび医薬の両者、並びに一般的な医療−衛生分野で有用
なゲルの製造に適している。

ヨーロッパ特許出願第０１６１８８７（１９８５年５月
３日、１９８５年１１月２１日公開）には、「多官能性
」と記されたエポキシ化合物との反応によって得られた
ヒアルロン酸の架橋誘導体がいくつか記載されている。

上記特許公開において、「多官能エポキシ化合物」なる
語句は、少なくとも一個のエポキシ官能基を有し、更に
、エポキシ官能基内に転換可能な官能基を有し、エポキ
シ基を介して架橋反応が起こり得る炭化水素を意味して
いる。この特許においては、そのような官能基の内、ハ
ロゲンのみが言及されている。上記特許明細書中には、
このような多官能性エポキシ化合物の内、数例しか挙げ
られていない。即ち、エビクロロヒドリン、エビブロモ
ヒドリン、メチルエビクロロヒドリン、メチルエビブロ
モヒドリン、１゜２−ビス（２，３−エポキシプロポキ
シ）−エタン、１．４−ビス（２，３−エポキシプロポ
キシ）−ブタン、１．６−ビス（（２，３−エポキシプ
ロポキシ）−ヘキサン、並びにビスフェノールＡおよび
ビスフェノールＦのグリシジルエステルが挙げられてい
る。この特許出願に用いられている製造方法は、特許請
求の範囲において、ハロメチルオキシランまたはビスエ
ポキシ化合物の使用に限定されており、又、可能な応用
例は低エステル化率のヒアルロン酸の架橋エステルを得
ることに限定されている。実際、この特許出願の実施例
によると、エビクロロヒドリンを反応させた場合（実施
例４）、最高４％のエステル化率が達成され、低溶解性
の生成物が得られている。

本発明はエステル基が水酸基で置換されていない基を含
んでいる特殊なエステル類（上記エポキシドとヒアルロ
ン酸またはその塩との反応生成物の場合）をも含めて、
広範囲におよぶ架橋エステルの組み合わせを提供するも
のである。重要な点として、本発明は、交差結合したエ
ステル基と交差結合していない幾分かのエステル基とを
含有するエステル基の混合物であって、交差結合してい
る基の割合がヒアルロン酸の二糖類単位全体の１０％以
上である、混合エステルを提供するものである。

英国特許出願第２１５１２４４Ａ（１９８４年８月１３
日、１９８５年７月１７日公開）および独国特許出願第
３４３４０８２ＡＩ（１９８４年９月１７日、１９８５
年７月ｌ１日公開）には、ホルムアルデヒド、ジメチロ
ールウレア、ジメチロールエチレンウレア、ポリアジリ
ジン、ポリイソシアネート、及びジビニルスルホンをヒ
アルロン酸に作用させて得られるヒアルロン酸の架橋誘
導体が幾つか記載されている。そのような誘導体は不溶
性であり、その生物適合性の故に、生体内で用いる心臓
弁、または血管クリップ等の形の様々な補助物質として
、あるいはそれら製品の製造に用いられる様々な高分子
材料に添加して用いることが提唱されている。同じ特許
中には、「架橋」を達成するための試薬としてエチルオ
キシドを用いることが提案されているが、その方法は示
されておらず、又、得られた生成物のタイプも明らかに
されていない。他の架橋誘導体の構造は明記されていず
、又、架橋を形成している結合のタイプについての記載
もない。ホルムアルデヒドおよび上記の置換尿素の場合
、セミアセタール構造を有するヒアルロン酸のカルボキ
シ基が関与した誘導体であり、他の場合は、水酸基のア
ルキル化産物であることを意味するといえる。

従って、本発明の主たる目的は、ヒアルロン酸と脂肪族
系多価アルコールとの完全、または部分的な架橋エステ
ルにあると明言し得る。部分的な架橋エステルにおいて
は、カルボキシ基は脂肪族系、脂環系、芳香性脂肪族系
、または複素環系の一価または多価アルコールによって
エステル化されていてよく、部分的エステル中には、エ
ステル化されていない、無機または有機塩基によって塩
化されたカルボキシ基が存在していてよい、ただし、ヒ
アルロン酸へのハロメチルオキシランまたはビスエポキ
シ−化合物の作用によって生成される架橋エステルは除
く。

発明の詳しい記載 「ヒアルロン酸」という語句は文献中ではＤ−グルクロ
ン酸とＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン酸残基からなる
、天然に存在している様々な分子量の酸性多糖類に用い
られており、それは細胞表面、を推動物の結合組織の塩
基性細胞外物質、関節の髄液、眼球内液、ヒトさい帯お
よび鶏のとさか等に存在している。ヒアルロン酸は生物
において、皮膚、けん、筋肉および軟骨のごとき多くの
組繊細胞の機械的な支持体として重要な役割を担ってお
り、従って、細胞内マトリックスの主成分であるが、そ
れはまた、組織の保湿、潤滑化、および細胞の移動、細
胞機能、および細胞の分化等の他の生物学的プロセスに
も重要な役割を担っている（例、バラズら（Ａ、　Ｂａ
１ａｚｓ）ｒコスメチックスおよびトイレツタリース（
Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ　　ａｎｄ　　Ｔｏｉｌｅｔｒｉｅ
ｓ）」イタリアンエデイションＮｏ５／８４、ｐ。

８−１７）。

ヒアルロン酸は、上記の天然組織、例えば鶏のとさか、
あるいはある種の細菌からも抽出し得る。

今日では、ヒアルロン酸は、微生物学的手法によっても
得られる。抽出によって得られる全ヒアルロン酸の分子
量は約８−１３Ｘ１０’である。しかしながら、この多
糖類の分子鎖は例えば機械的手段、放射線照射の影響下
、あるいは加水分解、酸化または酵素剤等の様々な物理
学的および化学的因子による手段によって極めて容易に
分解される。

この理由によって、原油出物に通常の精製法を適用して
も、分解された分子量の小さい両分（フラクション）が
得られる（バラズら、前出）。

ヒアルロン酸、その分子画分、およびその塩は医薬とし
て用いられており、それらを化粧品として用いることが
提唱されている（上記、バルンらの記事、並びに仏特許
第２４７８４６８号参照）。

治療薬として、ヒアルロン酸およびその塩は特に、関節
症、例えば獣医学分野で馬の関節炎の治療に用いられて
きた「アクタ・ベタ・スカン（ＡｃＬａＶｅｔ、　　５
ｃａｎｄ、　）　　上６７．３７９（１９７６）］。

天然の器官および組織の補助および代用物質として、ヒ
アルロン酸、その分子画分、およびその塩は眼科学の分
野で用いられてきた［バルン等、「眼科学における近年
の問題（Ｍｏｄｅｒｎ　　Ｐ　ｒｏｂｌｅｍｓ　　ｉｎ
　　Ｏｐｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ）」皿、１９７０、ｐ３
、ストリエフ（Ｅ、　Ｂ、　　５ｔｒｉｅｆｆ）　　、
カーガー（Ｓ、Ｋａｒｇｅｒ）　　編、バーセル（Ｂａ
ｓｅｌ）、または［ビスコサージヤリ−および小室内レ
ンズ移植術中におけるヒアルロン酸ナトリウムの使用（
Ｖ　ｉｓｃｏｓｕｒｇｅｒｙａｎｄ　　ｔｈｅ　　Ｕｓ
ｅ　　ｏｆ　　Ｓｏｄｉｕｍ　　Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔ
ｅＤｕｒｉｎｇ　　Ｉ　ｎｔｒａｏｃｕｌａｒ　　Ｌｅ
ｎｓ　　Ｉ　ｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）」、眼内移植に
関する国際会議及び第」回フィルムフェスティバル（カ
ンタ、１９７９）における論文、およびＨＹの眼科学に
おける使用に関する文献の要約を含んだ米国特許第４．
３２８，８０３、並びに米国特許第４．１４７，９７３
参照］。ＥＰ公開第０１３８５７２Ａ３（１９８５年４
月２４日）には例えばヒアルロン酸分子画分のナトリウ
ム塩を眼内、および関節結合部に、それぞれ、眼内の眼
球内液の代わりとして、又、関節炎の治療のために用い
るのに適していることが記載されている。

又、ヒアルロン酸は、ポリウレタン、ポリエステル、ポ
リオレフィン、ポリアミド、ポリシロキサン、ビニルお
よびアクリルポリマー、及びカーボンファイバー等の衛
生及び外科用製品に用いられる種々の高分子材料の添加
剤として用いると、これら材料の生物への適合作用を現
すことができる。この場合、ＨＹまたはその塩の添加は
、例えば、そのような材料の表面を被覆する、またはそ
のような材料中に拡散させる等によって、有効に行える
。そのような材料は様々な衛生及び医療製品、例えば心
臓弁、眼内レンズ、血管クリップ、ペースメーカー、お
よび同様の製品の製造に用いられる（米国特許第４．５
００．６７６参照）。

「ヒアルロン酸」という語句は通常、実際上、これまで
に見られるように、Ｄ−グルクロン酸及びＮ−アセチル
−Ｄ−グルコサミン酸残基が変化した、分子量の異なる
一連の多糖類の全て、あるいはその分解された画分にも
不正確に用いられているので、「ヒアルロン酸類」と、
複数形で用いるほうがより正確である。しかしながら、
本明細書では分子画分の場合も同様に、すべて同じこの
語句で表すこととし、更に、ｒＨＹＪなる省略形をも頻
繁にも用いる。

脂肪族アルコール、芳香性脂肪族アルコール、環状脂肪
族アルコールあるいは複素環式アルコールのエステルの
特性は酸性多糖類自身の特性と同様か、またはそれより
優れており、それらは上記の用途に一層適していると言
える。そのようなエステル類、及びその製造方法は同時
出願の米国特許出願第８８１，４５４（１９８６年７月
２日出願）に記載されている。エステル化の程度の高い
エステル、とりわけ完全にエステル化されたエステルは
、ヒアルロン酸と異なり、例えばジメチルスルホキシド
のような有機溶媒に易溶である。従って、例えば、ＨＹ
のベンジルエステルは室温で２００ｍｇ／ｍ１程度、Ｄ
ＭＳＯに溶解する。このようなある種の有機溶媒にたい
する溶解性、並びに特別なそして著しい粘−弾性により
、生理食塩水に不溶性の、特に好ましい形の衛生、医療
および外科材料を得ることができる。まず、有機溶媒中
でＨＹエステルの溶液を得、ついでこの非常に粘度の高
い溶液を最終製品に好ましい形に成形し、最後に当初の
有機溶媒とは混ざり合うが、ＨＹエステルはそれに溶け
ることのない他の有機溶媒でその有機溶媒を抽出する。

これらの利点は本発明の架橋化合物においてより多く認
めることができた。

本発明の架橋エステルは脂肪族系の多価アルコールから
得られるが、これらの誘導体は最高８個のアルコール官
能基を有し、特にそのような官能基を４個有する炭素原
子数１６までの多価アルコールから導かれるものが好ま
しい。「多価」という語句は、厳密にいえば、一般に３
またはそれ以上の水酸基を有するアルコールを指し「二
価」、または「グリセロール」という語句は一般に２個
の水酸基を有するアルコールを指す。しかしながら、本
明細書では「多価」という語句を２またはそれ以上の水
酸基を有するアルコールを包含するものとして用いる。

従って、「多価」アルコールという語句は二価アルコー
ル、三価アルコール、四価アルコール、三価アルコール
、および六価アルコールを意味しうる。これらの内、グ
リセリン、３種のエリスライト異性体、ペンタエリスラ
イト、４種のキシリトール異性体および１０種のダルシ
トール異性体が特記すべきものである。

新規なエステルにおいて、「架橋結合」は、上記の様々
な多価アルコールから導かれるが、すべての「架橋結合
」が同じ多価アルコールから導かれるようにエステルを
調製することが好ましい。

最も重要な新規エステルは二価アルコール、即ち、グリ
コール類、から導かれるものである。そのようなグリコ
ール類としては、前記の炭素原子数が１６個までのもの
、とりわけ８個までのものが好ましく、特にエチレング
リコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール
、及びペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタンから導
かれたグリコール類、及びそれらの位置異性体が特に好
ましい。しかしながら、そのようなグリコール類はｌ−
３個の二重結合を有していてもよい。

架橋結合した基に付加的に存在し得る単エステル基は脂
肪族系、芳香性脂肪族系、環状脂肪族系アルコールある
いは複素環式アルコールから導かれ、置換された、また
は置換されていない、あるいは、飽和まＩ：は不飽和で
あってよい。脂肪族系アルコールは例えば、炭素原子数
３４までの飽和または不飽和アルコールであってよく、
又、アミノ、ヒドロキ゛シ、アルデヒド、ケト、メルカ
プト、カルボキシ基のごとき他の遊離の機能的な基また
は機能的に修飾された基、あるいはこれらから導かれる
基、例えば、ヒドロカルビルまたはジヒドロカルビルア
ミノ基（ここに、又、これ以後「ヒドロカルビル」とい
う語句は、−ＣｎＨ２ｎや、タイプの一価の炭化水素基
のみならず、「アルキレン」、−ＣｎＨ２ｎ−または「
アルキリデン」、）ＣｎＨ，ｎ等の二価または三価の基
をも意味するものとする）、エーテルまたはエステル基
、アセタールまたはケタール基、チオエーテルまたはチ
オエステル基、およびエステル化されたカルボキシ基ま
たはカルバミジン基、および１または２個のヒドロカル
ビル基、ニトリル基またはハロゲンによって置換された
カルバミジン基等によって置換されていてもよい。置換
アルコールの内、上記の官能基から選択されるｌまたは
２個を有するアルコールが好ましい。

上記のヒドロカルビルを含んだ基の内、炭素原子数が６
個までのアルキルのごとき低級脂肪族基のものが好まし
い。又、そのようなアルコール類は、その炭素原子鎖が
酸素原子、窒素原子、または硫黄原子等のへテロ原子に
よって中断されていてもよい。上記のアルコール群の内
、本発明に限って優先的に用いられるのは、炭素原子数
１２、とりわけ６個までのものであって、置換された上
記のヒドロカルビル基、記述のアミノ、エーテル、エス
テル、チオエーテル、チオエステル、アセタール基、炭
素原子数４個までのアルキル基を有するケタール基で置
換されたもの、又、エステル化されたカルボキシ基、置
換されたカルバミジン基でも同様であり、ヒドロカルビ
ル基は同数の炭素原子を有するアルキル、ここに、アミ
ノまたはカルバミジン基は８個までの炭素原子を有する
ものである。これらのアルコールの内、第一にまたは真
先に言及されるべきものはメチル、エチル、プロピル、
イソプロピルアルコール、ｎ−７’チル、イソブチル、
ｔ−ブチルアルコール、アミルアルコール、ペンチル、
ヘキシル、オクチル、ノニルおよびドデシルアルコール
のような飽和かつ非置換アルコール、特にｎ−オクチル
、ｎ−ドデシルアルコールのような直鎖アルコールであ
る。

置換アルコールの内、好ましいのは既述の、さもなけれ
ば「架橋結合」の形成に使用されるグリコール類である
が、グリセリンのような多価アルコール、タルドロニル
アルコールのようなアルデヒドアルコール、乳厳のよう
なカルボキシアルコール、例えば　α−オキシプロピオ
ン酸、グリコール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、ア
ミノエタノール、アミノプロパツール、ｎ−アミノブタ
ノール等のアミノアルコール類、及びそれらのアミノ基
のジメチルおよびジエチル誘導体、コリン、ピロリジニ
ルエタノール、ピペリジニルエタノール、ピペラジニル
エタノール、並びにｎ−プロピルアルコールまたは、ｎ
−ブチルアルコールの対応する誘導体、モノチオエチレ
ングリコールまたはメルカプト基のエチル誘導体の如き
、そのアルキル誘導体も好ましい。例えば、飽和高級脂
肪族アルコールの内、セチルアルコールやミリチルアル
コール等が好ましいが、本発明の目的にとって特に好ま
しいのは１または２個の二重結合を有する高級不飽和ア
ルコール、とりわけ、多くの精油に含有されておりシト
ロネロール、ゲラニオール、ネロール、ネロリドール、
リナロール、ファルネソール、及びフィトール等のテル
ペン類に親和性を有するアルコールである。不飽和低級
アルコールの内、アリルアルコールおよびグロパルギル
アルコールが有用である。

芳香性脂肪族アルコールの内、特記すべきは、唯一個の
ベンゼン残基を有し、脂肪鎖の炭素原子数が最高４個で
あり、ベンゼン残基が１−３個のメチル基、水骸基また
はハロゲン原子、とりわけ塩素、臭素、ヨウ素によって
置換されており、脂肪族鎖が遊離のアミノ基、モノまた
はジメチル基、あるいはピロロジニルまたはピペリジニ
ン基カラ選択されるｌまたはそれ以上の基によって置換
されていることもあるすべてのアルコールである。

こレラのアルコールの内、ベンジルアルコール及びフェ
ネチルアルコールが最も好ましい。

環状脂肪族系アルコール（環状脂肪族アルコール−脂肪
族アルコールをも含めて）は、単環または多環系炭化水
素から導かれ、炭素原子数が３４個までのものであるこ
とが好ましい。置換アルコールの場合、置換基は脂肪族
アルコールについて述べた置換基であってよい。

七ノアニュラー（一本輪）環状炭化水素から導かれるア
ルコールの内、特記すべきは、炭素原子数１２個までで
あって、環炭素原子数が５−７個の、メチル、エチル、
プロピル、またはイソプロピル等の１−３個の低級アル
キル基によって置換されていてよい。このようなアルコ
ール群の内、特に好ましいのは、シクロヘキサノール、
シクロヘキサンジオール、１．２．３−シクロヘキサン
トリオール、１．３．５−シクロヘキサントリオール（
７００ログルシトール、およびイノシトールである。

複素環アルコールは、線状または環状鎖が例えば、基ニ
ー〇−１−Ｓ−１−Ｎ＝及び−ＮＨ−によって形成され
る基から選択されるｉ３個の異種原子のような１−３個
の異種原子によって中断されており、ｌまたはそれ以上
、特に１−３個の２重結合を有しており、環状脂肪族ま
たは環状脂肪族−脂肪族アルコールから導かれると考え
てよく、従って、芳香環構造を有する複素環化合物に包
含される。それらはフルフリルアルコールのような簡単
なアルコール、または多くのアルカロイド誘導体および
多くの医薬に含まれているようなより複雑な構造のアル
コールであってよい。

既述の如く、本発明の新規な架橋誘導体は、上記の同時
出願に係る米国特許出願に記載のヒアルロン酸またはそ
の塩、あるいは上記エステルに適した主要な適用例会て
に使用しうる。従って、既に述べたように、この新規な
誘導体は、特に、■）医薬 ２）医薬の製薬用賦形剤 ３）化粧品及び化粧品用の賦形剤 ４）衛生、医療、及び外科用のプラスティック製品 の製造に有用であり、本発明は、これらのすべてにおけ
る使用例を包含するものである。

架橋エステルの型は、明らかに、それがおかれる用途に
応じて選択される。通常、全てのヒアルロン酸がエステ
ル化された、高いエステル化率の場合には親油性が増し
、従って水溶性は減少する。

治療または化粧品に用いるためには、充分な水溶性を有
するが、ヒアルロン酸またはその塩に比べて親油性に優
れているよう、エステル化の程度を調整することが重要
である。通常、エステル化される成分そのものの分子量
は、逆比例関係によって水への溶解性に影響するので、
それを銘記しておくべきである。医薬への使用に関する
限り、親水性または親油性の程度は、処置すべき組織の
タイプとの関連において考察されるべきであり、例えば
、皮膚の場合は、真皮性医薬である。

本発明の新規な架橋誘導体は、ヒアルロン酸に固有の性
質に基づいて、例えば、ヒトの医療および獣医学におけ
る関節症の治療薬として用い得る。

この場合、それらは薬理作用がまったく無いか、または
無視しうる程度である多価アルコール、特に、炭素原子
数２−８個の二価アルコールから導かれ、また、存在し
うる他の単エステルは例えば、炭素原子数８個までのｍ
個脂肪族アルコールの如き薬理作用のないアルコールか
ら導かれる。投与方法は非経口、より正確には、経関節
投与が有効である。

本発明の他の架橋誘導体は、薬理作用のあるアルコール
から導かれるものであってよく、このことは特に、それ
から誘導されている単エステルに関して正しい。それら
の誘導体は、アルコールと質的に似通った性質を有して
いるが、活性域はより分化されており、バランスのよい
、一定で規則的な薬理作用が確実なものとなっており、
通常、著しい「遅延」効果を有している。まｔ；、他の
架橋誘導体は、それ自身、薬理作用を有するかまｌ；は
有しない、２またはそれ以上の異なるタイプのアルコー
ルによる単エステルを含有していてもよい。

異なるタイプのアルコールを適当な割合に処方すること
により、ヒアルロン酸の特異活性を有さす、薬理学的に
活性なアルコールの所望の活性、及び特性に関する上記
の安定性と生物利用性を有する、薬理活性なアルコール
のエステルを得ることができる。

本明細書に記載の薬理学的に活性なアルコールから導か
れた誘導体において、架橋結合したヒアルロン酸分子は
、基本的には薬理活性な成分の賦形剤として作用するの
で、それらもまた、２）および３）群に分類され得る。

新規な架橋誘導体は２）および３）での使用において、
実質的に賦形剤として作用するので、それらはまた、上
記の治療上非活性な多価アルコールから導かれているこ
とが好ましく、さらに、−価アルコールから導かれたエ
ステル基は薬理活性の全く持たないことが好ましい。活
性物質と新規誘導体とを物理的に混合して得られる医薬
は、通常の医薬製剤に含有されている成分及び賦形剤を
も含有していてよい。−個の活性物質の代わりに活性物
質の会合物（アソシエーション）を用いてもよい。この
種の医薬の内、特に重要なものは、ヒアルロン酸誘導体
が賦形剤として作用し、局所活性を有する物質を含有し
ている医薬である。

本発明の新規な誘導体内で架橋結合を形成せずに、カル
ボキシ基のエステル化に用いられる薬理活性なアルコー
ルは、既述のリストとは別個に、例えば、性ホルモンお
よびその合成同族体、特にコルチコステロイド及びその
誘導体等のステロイド類の如き脂肪族−環状脂肪族多価
アルコールであり、例えば、エストラジオール及びその
メチル誘導体、１７位におけるエチニルまたはプロピ、
ニル誘導体、１７−α−メチル−テストステロン、１７
−σ−エチニルーテストステロン％　　ｌ’１ｌ１２−
デヒドロ−テストステロン、ｎｏｒ−ゲストレル、１９
−ｎｏｒ−テストステロン、１９−ｎ、ｏｒ−１７−α
−メチル−テストステロンのようなテストステロン及び
その誘導体、サイプロチロン（ｃｙｐｒ。

ｔｅｒｏｎｅ）のような抗ホルモン、コルチゾン、ハイ
ゾロコルチゾン、デキサメサゾン、ベタメサゾン、パラ
メサゾン、フルメサゾン、フルオシノロン、クロベタソ
ール、ベタメサゾン、アル７アキソロン、ボラステロン
である。その他の治療上活性なアルコールは、例えば、
アクセロフトール、ビタミンＤ２及びＤｓ、アノヌリン
、ラクトフラビン、アスコルビン酸、リボフラビン、チ
アミン及びパントテン酸等のビタミン類である。複素環
アルコールの内、アトロピン、スコポラミン、シンコニ
ン、シンコニジンン、キニン、モルフイン、コディン、
ナロルフイン、Ｎ−プチルスコポールアンモニウムブロ
ミド、アジュマリン；エフェドリン、イソプロテレノー
ル、エビネフィリンのようなフェニルエチルアミン、バ
ーフェナジン、ビポチアジン、カルフェナジン、ホモツ
ェナジン、アセトフェナジン、フルフニナジン、Ｎ−ヒ
ドロキシエチルプロメタシン　クロリドのようなフェノ
チアジン薬物、アルペンチキソール（ｆ　１ｕｐｅｎｔ
ｉｘｏｌ）及びクロペンチキソールのようなチオキサン
チン医薬；メプロフエンジオールのような抗けいれん剤
、オピプラモールのような抗精神薬、オキシペンシルの
ような制吐剤、カルベチジン、フェノピリジンおよびメ
タドールのような鎮痛剤；エトドロキシンのような催眠
薬；ベンズヒドロール及びジフエメトキシジンのような
食欲減退剤；ヒドロキシジンのようなマイナートランキ
ライザー；シナメトリン、ジフィリン、メフェネシン、
メトカルバモール、クロルフェネシン、２．２−’；エ
チル、３−プロパンジオール、グアヤフェネシン、ヒド
ロルアミドのような筋弛緩剤；ジピリダモールおよびオ
キシフェトリンのような冠血管拡張剤：プロパノロール
、チモロール、ピンドロール、ブプラノロール、アテノ
ロール、メトプロロール、プラグトロールのようなアド
レナリン遮断薬；６−アザウリジン、シタラビン、７０
クスウリジンのような抗新生物剤；クロラムフェニコー
ル、チアンフェニコール、エリスロマイシン、オレアン
ドマイシン、リンコマイシンのような抗生物質：ヨード
キシウリジンのような抗ウィルス剤；イソニコチニルア
ルコールのような抹消血管拡張剤；スル才力ルビレート
のような炭酸脱水酵素阻害剤：チアラミドのような抗喘
息および抗炎症剤；２−ｐ−スルファニルアニリノエタ
ノールのようなルファ剤ヲも挙げることができる。

本明細書に記載の新規な架橋誘導体は、当然ながら、遊
離のアルコールと同様の場合にも使用され得る。

本発明の特に重要な点は、今日までに得られたものより
も安定な医薬を調製しうる点にある。従って、一方では
、ヒアルロン酸自身に典型的な特徴よって用いられる架
橋誘導体を製造する事ができ、例えば、関節内緒合部の
ための潤滑剤として作用する架橋誘導体の製造、；遊離
の酸と比べた場合、ヒアルロニダーゼにより安定であり
、著しく作用が遅延されている誘導体の製造である。他
方、上記の誘導体が治療活性なアルコールから導かれＩ
；エステル基を含有することで「遅延」効果を有する薬
物を得ることができる。これらの医薬において、薬理活
性なアルコールはエステラーゼによって極めてゆっくり
器官中に放出される。前記４）に従って用いるためには
、新規な架橋誘導体を、特に、薬理学的に不活性なアル
コール、例えば、二価の飽和脂肪族アルコール、特に炭
素原子数２−８（１の該アルコール、グリセリンおよび
ｍ個アルコール、とりわけ、脂肪族アルコールから調製
するが、その他、上記の架橋していない、カルボキシ基
の部分的なエステル化のための、一連のアルコールの内
のどれかで調製してもよい。この最後の化合物群の内、
とりわけ重要なのは、例えば、ビニルアルコールまたは
アリルアルコールのようなｌまＩ；はそれ以上の二重結
合を有する不飽和アルコール、およびその縮合誘導体（
特にポリビニルアルコールおよびグリセリン）である。

この場合においても、特定の使用目的に応じて混合エス
テルを用いることができる。シクロペンタンおよびシク
ロヘキサン、あるいはそれらの、より低級なアルキル、
例えば、炭素原子数１−４個のアルキル、とりわけメチ
ル基によって置換されている誘導体から導かれる脂環式
アルコールも有用である。

化粧品に用いるには、上記の衛生、医療、及び外科的使
用のために挙げた、エステル化された基と実質上同様な
化合物で架橋された誘導体を用いることが好ましい。ま
た、上記のテルペンアルコール類についても考慮すべき
であり、特に、香料あるいは匂い入りのクリームを製造
するためには、芳香を有するアルコールについて考慮す
べきである。

本発明にかかる全ての架橋誘導体において、「架橋結合
」されていない、またはエステル化されていないカルボ
キシ基は、遊離または塩化されていてよい。塩は、例え
ば、カリウムおよびとりわけナトリウムの如きアルカリ
金属およびアンモニウム　カルシウムの如きアルカリ土
類金属、又はマグネシウムおよびアルミニウム塩の如き
無機塩基を含んでいるか、あるいは有機塩基、とりわけ
、アゾ化された（ａｚｏｔａｔｅｄ）塩基類、従って、
例えば脂肪族アミン、芳香性脂肪族アミン、環状脂肪族
アミン、又は複素環式アミンを含有していてよい。

これらの塩は、治療上許容し得るが、不活性なアミン、
または治療活性を有するアミンから導かれ得る。

前者の内、特に考慮されるべきものは、脂肪族アミン、
例えば、炭素原子数１８個までのアルキル基を有するモ
ノ、ジ、およびトリーアルキルアミン、または、脂肪族
部分に同数の炭素原子を有するアリールアルキルアミン
であって、ここに、アリールとは、ｌ−３個のメチル基
、ハロゲン原子または水酸基によって置換されているこ
ともあるベンゼン基を意味する。塩形成のための生物学
的に不活性な塩基は、環が窒素、酸素、硫黄からなる群
から選択される異種原子によって中断されていることも
ある炭素原子数４−６個の環からなる単環式アルキレン
アミンの如き環状化合物、例えば、ピペリジン、ピペラ
ジン、またはモルホリンであってよく、あるいは、アミ
ノエタノール、エチレンジアミン、エフェドリンまたは
コリンのようなアミノまたは水酸基によって置換されて
いてもよい。

又、部分エステルの４級アンモニウム塩、例えば、上記
炭素原子数のテトラアルキルアンモニウム塩でもよく、
この場合、第４アルキル基の炭素原子数が１−４個、例
えばメチルである同タイプの塩が好ましい。

治療活性を利用し得るそれらの生物学的に活性なアミン
には次に示す化合物群に含まれる、アゾ化された、およ
び塩基性の薬物がある。アルカロイド、ペプチ゛ド、フ
ェノチアジン、ベンゾジアゼピン、チオキサンチン、ホ
ルモン、ビタミン、抗けいれん剤、抗精神薬、制吐剤、
麻酔薬、催眠薬、食欲減退剤、トランキライザー、筋弛
緩剤、冠血管拡張剤、抗新生物剤、抗生物質、抗菌剤、
抗ウィルス剤、抗マラリア剤、炭酸脱水酵素阻害剤、非
ステロイド系抗炎症剤、血管収縮剤、コリン作動薬、コ
リン拮抗物質、アドレナリン作動薬、アドレナリン遮断
薬、ナルコチン拮抗物質。

本明細書に記載したこれらの塩基性のアゾ化された基を
有する薬物はすべて、エステルの使用例であると言い得
る。エステル化されていないカルボキシ基の、治療上活
性な塩基による塩化は、治療上活性なアルコールによる
エステル化で得られる新規な架橋誘導体の賦形剤機能を
置き換え、あるいは強化し、従って、２）の治療用賦形
剤としての本発明の新規化合物の他の特別な使用例を示
す。活性な塩基類は、化学量論量の塩基を付加すること
によって得られる中性塩、過剰量の塩基を付加すること
によって得られる塩基性塩、および不足量の塩基を付加
することによっつで得られる酸類の両方、のいずれによ
っても、賦形剤化される。

本発明に係る新規なヒアルロン酸誘導体は、局所または
局部への使用に有用であり、とりわけ、眼科的な使用に
おいて、角膜上皮への適合性に優れているので、感作作
用を示す事なく、非常に良く耐容さ、殊に有用である。

更に、医薬を、粘−弾性を有する濃縮溶液、または固形
物の状態で医薬を投与すると、角膜上皮に、ホモジーニ
アスで安定な、完壁な透過性と完全な吸着性を有する膜
（フィルム）が得られるので、薬物の生物学的利用の延
長が保証され、そのために、遅延効果を有する優れた製
剤が得られることになる。

これらの眼科用薬物は、今日、獣医学において、化学物
質を含有している専門的な薬物がないので、獣医学分野
において極めて価値がある。実際には、ヒトへの使用を
意図した製品を動物に適用しており、これらの作用域は
常に明確に保証されているとは限らず、時には投与すべ
き情況の下でも、投与すること力（不適当な場合がある
。そのような例は、通常、牛、羊、および山羊を襲う感
染症である感染性角結膜炎、急性伝染性結膜炎またはＩ
ＢＫの治療の場合である。おそらく、これらの３種にお
いては、特異的な病因学的因子が存在しており、更に詳
しくは、牛において関連する主な微生物は、モラキセラ
　ボビス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ　　ｂｏｖｉｓ）である
［しかし、羊マイコプラズマにおけるライノトラキテイ
ス・ウィルス（Ｒｈｉｎｏｔｒａｃｈｅｉｔｉｓ　　ｖ
ｉｒｕｓ）、山羊リケッチアにおけるリケッチアおよび
タラミゾイアの如き他のウィルス起源の物質も除外すべ
きでない１０これらの疾患は急性症状を呈し、迅速に進
行する：初期症状は眼痙牽と過剰の流涙を特徴とし、つ
いで、膿排出、結膜炎および角膜炎に進み、これにはし
ばしば発熱、食欲減退および乳生産の減少を伴なうこと
が多い。特に深刻なのは角膜炎であって、最終段階では
角膜穿孔自身に至ることもある。臨床経過は数日から数
週間に及ぶ。

化学物質の局所投与（しばしばステロイド系抗炎症剤を
併用する）、および全身投与、例えば、オキシテトラサ
イクリンのようなテトラサイクリン類、クロキサシリン
やベンジルペニシリンのようなペニシリン類、サルファ
剤、ポリミキシンＢ（ミコナゾールおよびプレゾニゾロ
ンを併用する）、クロラムフェニコール、タイロシンお
よびクロロマイセチン等の投与、の両者を含む膨大な範
囲に及ぶ化学物質を用いた治療が採用されている。疾患
の局所治療は見掛は上単純であるが、今日までに用いら
れている眼科用製剤は１つのまたは別の理由から、涙分
泌液中に治療有効濃度の抗生物質またはサルファ剤を得
ることができないので、依然として公然の問題を有すし
ている。このことは溶液の場合、上記の動物における頭
部の位置が著しく傾いていることから容易に理解し得る
が、半固形製剤の場合であっても、その中に通常用いら
れている賦形剤は角膜表面に付着するに必要な性質を有
していないので同様のことがいえる。このことは、通常
、それらの活性成分濃度が、充分に高くないので、活性
酸を完全に分布させることができないこ左による［分布
勾配（グラディエンド）の存在］。これらの従来の眼科
用液剤の問題点は例えば、スラッターら（Ｓ　１ａｔｔ
ｅｒ）、ｒＡｕｓｔｒ、　ｖｅｔ。

Ｊ」、１９８２．５９（３）、ｐ、６９−７２１によっ
て記述されている。本発明のエステルによればこれらの
問題点を克服することができる。実際、眼科用製剤中に
ヒアルロン酸を賦形剤として存在さると、活性成分の濃
度勾配のない、従って、完全にホモジーニアスで透過性
の、角膜上皮への付着性を有する感作作用の無い、活性
成分と一緒になって、優れた賦形剤として作用し、遅延
効果をも有する優れた製剤を製造することができる。眼
科治療に用いられる新規な誘導体を含有する薬物は主と
して縮瞳、傷の治癒、抗炎症、抗−微生物／抗生物質作
に関連している。抗生物質の例としては、アミノグルコ
ジッド、マクロライド、テトラサイクリンおよびペグチ
ド、のような塩基性または非塩基性抗生物質、例えば、
ゲンタマイシン、ネオマイシン、ストレプトマイシン、
ジヒドロストレプトマイシン、カナマイシン、アミカシ
ン、トブラマイシン、スペクチノマイシン、エリスロマ
イシン、オレアンドマイシン、カルボマイシン、スピラ
マイシン、オキシテトラサイクリン、ロリテトラサイク
リン、バシトラシン、ポリミキシンＢ１グラミシジン、
コリスチン、クロラムフェニコール、リンコマイシン、
バンコマイシン、ノボビオシン、リストセチン、クリン
ダマイシン、アンプォテリシンＢ１グリセオファルピン
、ニスタチン、並びにそれらの硫醸塩や硝酸塩等の塩、
更には、同−内または相互間での会合物、あるいは下記
の如き他の活性物質との会合物を挙げることができる。

本発明に用いるのに有用な他の眼科用薬物はつぎの通り
である：ジエチルカルバマジン、メベンダゾール、サル
７アセタミド、サル７アジアジン、スルフイソキサゾー
ル等のサルファ剤のような他の抗感染症剤：ヨードデオ
キシウリジン、アデニンアラビノジッド、トリフルオロ
チミジン、アシクロバー、エチルデオキシウリジン、ブ
ロモビニルデオキシウリジン、５−ヨード−５′−アミ
ノ−２’、５″−ジデオキシウリジンのような抗ウィル
スおよび抗腫瘍剤；デキサメサゾン、ヒドロコーチゾン
、プレゾニゾロン、フルオロメソロン、メドリソンおよ
びりん酸エステル等のそれらのエステルのようなステロ
イド系抗炎症剤；インドメタシン、オキシ７エンブタゾ
ン、フルルビプロ７エンのような非ステロイド系抗炎症
剤；上皮性成長ホルモンＥＧＦのような傷治療剤；ベノ
キシナート、ブロパラ力インおよびその塩等の局所麻酔
剤：ピロカルピン、メタコリン、カリバミルコリン、ア
セクリジン、フィソスチグミン、ネオスチグミン、デメ
カリウムおよびその塩等のコリン作動薬；アトロピンお
よびその塩のようなコリン遮断薬：ノルアドレナリン、
アドレナリペナファドリン、メトキサミンおよびその塩
等のアドレナリン作動薬；プロパノローノ呟チモロール
、ピンドロール、フフラノローノ呟アテノロール、メト
プロロール、オキシプレノローノ呟　プラグトロール、
ブトキサミン、メタロール、ブタドリン、ラベタロール
およびその塩等のアドレナリン遮断薬。

それ自身で、または活性な他の物質と一緒に皮膚科学に
おいて用いられる活性物質の例はつぎの通りである：抗
感染症剤、抗生物質、抗微生物剤、抗炎症剤、制細胞製
剤、細胞毒素、抗ウィルス剤および麻酔薬のような治療
薬、および遮光（サンシールド）剤、脱臭剤、防腐剤お
よび殺菌剤のような防御用物質。

眼科学および皮膚科学に関して述べられている例から類
推して、本発明の医薬が、耳喉頭学、婦人科学、脈管学
、神経学その他、直腸への作用の如く、局部の局所適用
によって処置されるべき型の内器室の病理学等の様々な
医療分野で用いるのに適していると考えるのは合理的で
ある。本発明の新規な誘導体を用いて非経口投与に適し
た、治療活性な物質の会合（アソシエーション）物を調
製することができることはもちろんである。後者の場合
、注射用の水溶液を得るために、低レベルに架橋され、
かつ／またはエステル化されたヒアルロン酸誘導体を選
択する必要がある。極く僅かしか水に溶けないか、全く
不溶の誘導体は、例えば油性溶液のような有機物質の溶
液として投与する、活性物質含有会合物を形成するのに
用いることができる。

本明細書に記載した局所投与型の医薬は唯２種の成分を
混合物として、あるいは別個に含有する凍結乾燥粉末の
如く固型の剤形で局所的に用いることができる。その様
な固型剤形の薬物と処置すべき上皮との接触に際し、予
めインビトロで調製され、特定の上皮と同様の特性を有
する溶液で多少の濃縮液を形成する。このことはまた本
発明のもう一つの重要な点を示している。その様な溶液
は蒸留水または滅菌食塩水の溶液であることが好ましく
、また、ヒアルロン酸エステル、またはその塩以外の薬
学的賦形剤を含有していないことが好ましい。その様な
溶液の濃度も広い制限域内で変化し得るものであり、例
えば、２成分の個々について、並びにそれらの混合物ま
たは塩について、０．０１〜７５％の範囲とすることが
できる。特に好ましいのは、既述の弾粘性を有する液体
であり、例えば、薬物またはその構成成分を１０〜９０
％含有する溶液である。このタイプの薬物の内特に重要
なものは、眼科的な使用のために、特別な殺菌性物質ま
たは賦形剤その他として作用する鉱物の塩の如き付加物
あるいは補助物質を含有していることもある、無水剤形
（凍結乾燥粉末）、並びに濃縮液または水または生理食
塩水中の希釈液の剤形のものである。

本発明の医薬は、それを適用すべき環境に適しＩ；酸性
度、即ち、生理的に耐容可能なｐＨのものを場合に応じ
て選択すべきである。ｐＨは、例えば、上記のヒアルロ
ン酸エステルの塩基性活性物質による塩では、多糖類、
その塩、および塩基性物質自身の量を調整することによ
り調節される。

従って、例えば、塩基性物質によるヒアルロン酸エステ
ルの塩の酸性度が高すぎるときには、過剰の遊離の酸基
を上記無機塩基（例、ナトリウムまたはカリウム、また
はアンモニウム水）によって中和する。

本発明のＨＹエステルの製造方法 本発明の新規な架橋誘導体は、カルボン酸類のエステル
化に関する既知の方法によって製造することができ、例
えば、遊離のヒアルロン酸を強い無機酸または酸型のイ
オン交換体等の触媒の存在下、上記の多価アルコールで
処理するか、あるいは、無機または有機塩基の存在下、
所望のアルコール残基を導入し得るエーテル化剤で処理
することにより、製造され得る。エーテル化剤としては
、文献に指示されているものを用いることができるが、
特に、様々な無機酸または有機スルホン酸のエステル、
水素酸、ヨウ化メチノ呟その他上記二価アルコールの基
礎となっているアルキル基のハロゲン化アルキル等を用
いる。

反応は、適当な溶媒、例えばアルコール、好ましくはカ
ルボキシ基に導入すべきアルキル基に相当するアルコー
ルの中で行われるが、ジオキサンの様なケトンやエーテ
ル、あるいはジメチルスルホキシドの如き中性溶媒中で
も進行し得る。塩基としでは、例えば、アルカリ金属、
アルカリ土類金属またはマグネシウムの水和物、銀の酸
化物、まＩ；はこれらの金属のあるものの塩基性の塩（
炭酸塩）、並びに有機塩基、ピリジンまたはコリジンの
如き４級アゾ化塩基等を用いることができる。

塩基の代りに、塩基型のイオン交換体を用いてもよい。

他のエステル化法は、金属塩、あるいはアンモニウムま
たは置換アンモニウム塩のような有機アゾ化塩基の塩類
を用いる。アルカリ金属またはアルカリ土類金属の塩を
用いることが好ましいが、他の金属塩を用いることがで
きる。上記のエーテル化剤はこの場合も適用され、溶媒
についても同様のことがいえる。ジメチルスルホキシド
およびジメチルホルムアミドのような中性溶媒を用いる
の好ましい。これらのエステル化法は、当然、上記の単
エステルの製造にも用いられる。

前記の同時出願の米国特許出願に記載した新規な、初め
ての方法では、ヒアルロン酸の単エステルに関し、これ
らのエステルは、ヒアルロン酸の４級アンモニウム塩と
エーテル化剤とを、ジアルキルスルホキシド、ジアルキ
ルカルボキシルアミド、特に低級アルキルのジアルキル
スルホキシド、とりわけジメチルスルホキシド、並びに
下級脂肪酸の低級アルキルジアルキルアミド、例えばジ
メチルまたはジエチルホルムアミドあるいはジメチルま
たはジエチルアセトアミドのような中性溶媒中で反応を
開始することにより好都合に製造される。反応は、温度
約０″〜１００’、とりわけ、約２５°〜７５°、例え
ば約３０°で行うのが好ましい。エステル化は、記載し
た溶媒の１つ、例えばジメチルスルホキシドに溶かした
上記のアンモニウム塩にエステル化剤を徐々に加えるこ
とによって行うことが好ましい。

本発明の代表的な架橋エステルの製造に同一の方法を採
用することができる。即ち、上記の多価アルコールから
導かれるヒアルロン酸の４級アンモニウム塩に対するエ
ーテル化剤により、２９のカルボキシ間に架橋結合が形
成される。出発物質の４級アンモニウム塩としては、１
〜６個の炭素連子を有するアルキル基の、低級なテトラ
アルキル化アンモニウム類を用いることが好ましい。ヒ
アルロン酸テトラブチルアンモニウムが使用に最適であ
る。これらの４級アンモニウム塩は、ヒアルロン酸の金
属塩、好ましくは上記の金属塩の内の１つ、特にナトリ
ウムまたはカリウム塩を水溶液中で、４級アンモニウム
塩によって塩化されたスルホン系樹脂と反応させること
により製造される。ヒアルロン酸テトラアルキルアンモ
ニウムは溶出液を凍結乾燥することによって得られる。

低級アルキルから導かれるヒアルロン酸テトラアルキル
アンモニウム、特に炭素原子数が１〜６個のアルキル基
からなるものは新規であり、これもまた本発明の目的で
ある。予想外なことに、その様な塩は上記の中性溶媒に
可溶性であるとか分かり、従って、上記の新規な方法に
よるヒアルロン酸のエステル化はが極めて容易であり、
収量は大きい。従って、その様の方法によってのみ、エ
ステル化すべきヒアルロン酸のカルボキシ基の数を正確
に割当てることができる。

前に詳述し！：方法の１つの変法は、ジメチルスルホキ
シドの如き適当な溶媒に懸濁したヒアルロン酸のナトリ
ウムまたはカリウム塩を、触媒量のヨウ化テトラブチル
アンモニウムの如き４級アンモニウム塩の存在下、適当
なエーテル化剤と反応させることからなる。本発明の新
規なエステルの製造には、例えば、鶏のとさかのような
上記の天然の供給源から抽出した酸の如く、どのような
起源のヒアルロン酸を用いてもよい。その様な酸の製造
は文献に記載されている。精製されたヒアルロン酸を用
いることが好ましい。本発明においては、分子量が非常
に異なる、有機材料からの抽出で直接得られた、完全な
酸の分子量の、例えば、約９０〜８０％から０．２％の
間で大きく変化している分子量の分子画分１、好ましく
は５％〜０゜２％の間の分子画分を含むヒアルロン酸を
用いることが好ましい。これらの両分は、文献記載の様
々な方法、即ち、加水分解、酸化または酵素試薬、ある
いは機械的な手法や照射の如き物理的な方法により得る
ことができ、従って、これらの精製工程中に始原的（ｐ
ｒｉｍＯｒｄｉａｌ）抽出物が形成されることが多い［
前記の文献、バルンら、「コスメティックス・アンド・
トイレツタリーズ」参照］。得られた分子画分の分離お
よび精製は、例えば、分子濾過のような既知の方法で行
われる。

本発明に用いるのに適した精製ＨＹ画分の１つは、例え
ば、バルンによってリーフレット「ヘアロン（Ｈｅａｌ
ｏｎ）Ｊ−眼外科１こそれを用いるための指針−ミラー
（Ｄ、　Ｍｉｌｌｅｒ）およびステツブマン（Ｒ。

Ｓ　ｔｅｇｍａｎｎ）編、ジョーンウィリー・アンド・
ソン（Ｊｏｈｎ　　Ｗｉｌｅｙ　　＆　　５ｏｎｓ）、
ＮＹ８１９８３：ｐ、５に記載されている「非炎症性ヒ
アルロン酸ナトリウム−Ｎ　Ｉ　Ｆ−ＮａＨＡＪと命名
されたものである。本発明のエステルを得る出発物質と
して特に重要なものは、ヒアルロン酸から得られる２９
の精製画分であり、そのタイプの例は、鶏のとさかから
抽出された「ヒアラスチン（Ｈｙａｌａｓｔｉｎｅ）」
と「ヒアレクチン（Ｈｙａｌｅｃｔｉｎ）Ｊと名付けら
れたものである。ヒアラスチン画分の平均の分子量は約
５０．０００から１００，０００の間であるのに対し、
ヒアレクチンの平均分子量は約５００．０００から７３
０．０００の間である。これらの２画分と一緒になった
１つの両分も単離されており、平均分子量が約２５０．
０００から３５０．０００であると特性化された。この
−緒になった両分は特定の出発物質から得られる全ヒア
ルロン酸の収率（８０％に匹敵）で得られるが、ヒアレ
クチン画分は出発物質ＨＹの３０％の収率で、また、ヒ
アラスチン画分は５０％の収率で得られる。これらの両
分の製造は実施例３８および４０に記載されている。

新規なヒアルロン酸の架橋エステルにおいて、エステル
化されていないカルボキシ基は遊離状態か、塩化されて
いるか、あるいは部分的に塩化されていてよく、従って
、様々な形の架橋産物が得られる。即ち、残余のカルボ
キシ基は遊離しているか塩化されているか、残余のカル
ボキシ基は完全にエステル化されているか、または部分
的にエステル化されているかであり、この後者の場合、
さらに残余の基は遊離であるか、または塩化されていよ
い。この様に、物性、特に、酸性度、粘弾性、およびゲ
ル形成能に関する物性において異なる、あらゆる範囲の
生産物を得ることができる。

特定のｐＨの薬物を調製するためには、遊離状態に保つ
べき酸残基の数が重要であろう。

新規な誘導体の塩の製造は、例えば、ヒアルロン酸誘導
体に、塩基としての計算量のアルカリ性水和物等、また
はアルカリ金属の塩基性の塩（炭酸塩まｌ；は重炭酸塩
）を作用することにより行うことができる。このことは
、まず、ヒアルロン酸誘導体の水溶液と塩基の水溶液を
調製し、これらの物質をイオン交換体を用いてそれらの
塩の水溶液から除去し、２溶液を低温で保ち（例、０″
〜２０°）、得られた塩が水に易溶の場合には凍結乾燥
するが、難溶性の塩の場合には遠心、濾過またはデカン
テーションによって分離した後、乾燥することができる
。有機塩基の場合、新規な架橋誘導体を賦形剤として、
その様な塩基と新規な誘導体との塩として得られる薬物
は、塩基を化学量論量を加えるか、あるいは塩基が不足
か過剰であるかによって中性、酸性または塩基性である
。

また本発明によれば、特に、既に得られｔ；塩（精製さ
れ、無定形等の無水状態であるかもしれない）を出発物
質として、処置すべき組織に接触させるときに、ゼラチ
ン状の物性の、粘稠な、弾性を有する濃厚な水溶液を構
成する上記のタイプの薬物を調製することができる。こ
れらの性質はより大きく希釈されても維持されており、
これを、賦形剤、およびｐＨおよび浸透圧を調整するた
めの他の鉱物塩等の添加物を加えて水または生理食塩水
の、多少濃縮された溶液として、上記の無水塩の代りに
用いることができる。塩を用いて、ゲル、挿入体、クリ
ームまたは軟膏を、これらの医薬製剤の通常の製造に用
いられる賦形剤や成分を含有せしめて調製し得ることは
当然である。

本発明の新規な生産物の内、上記のエステルおよびその
塩並びに以下の例示的な実施例に示した化合物は特定の
事例であり、本発明を限定するものではない。

本発明はまた新規なエステルおよびその塩の製造方法の
改良法であって、その方法はどの段階で途切れてもよく
、まＩ；は、中間体を出発物質として行う場合には、残
りの段階が有効であり、あるいは、出発物質を系中で形
成して行うことをも含む。

本発明を以下の実施例により説明するが、これらは本発
明の範囲を制限するものでなく、実施例中、ＤＭＳｏは
ジメチルスルホキシドを表わす、実施例に記載しＩ；生
成物は多価アルコールによってエステル化された、ある
割合のヒアルロン酸のカルボキシルを有し、残余の塩化
され、かつ／またはｍ個アルコールでエステル化された
カルボキシル基を有する本発明の架橋エステルを含有す
る。

表１は、実施例１〜３７で得られた様々な生成物を示す
ものであって、明記した多価アルコールでエステル化さ
れたカルボキシル基の数、およびナトリウム／または明
記したｍ個アルコールでエステル化されたカルボキシル
基の数が記載されている。

実施例１　エタノールにより部分的にエステル化され、
■−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
°Ｃの温度で、ＨＹ（１ＯｍＥｑ（ミリ当量））のテト
ラブチルアンモニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８
ｍｆｆに溶解する。ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（
０，５ｍＭ）、得られた溶液を３０℃で１５時間撹拌す
る。ｌ−３シヨートプロパン０゜０７４ｇを加え（０，
２５ｍＭ、０．５ｍＥｑに相当）、均一にした後、この
溶液を３０℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱｌ：Ｎａ
（１２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００＋＋Ｑを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）１００ｍ１２で３回、アセト
ン１００ｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０１ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフ（ＣｕｎｄｉｆＤらの
方法［アナリチカル・バイオケミストリー（Ａｎａｌ、
Ｂ　ｉｏｃｈｅｍ、）　３３．１０２８．１９６１］に
従って行ない、得られた化合物にはエタノールが０゜５
６％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は
０．５７４％）。過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５
０°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の
分析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノ
ールフタレインを用いた０゜ｌＮＨＣｌ２による滴定に
よって測定する。この方法によれば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は０．２４ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は０゜２５）。

実施例２　エタノールにより部分的にエステル化され、
■−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
℃の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアン
モニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍＱに溶解す
る。ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（０，５ｍＭ）、
得られた溶液を３０℃で１５時間撹拌する。■−３ショ
ートプロパン０．１４８ｇを加え（０，５ｍＭ、１ｍＥ
ｑに相当）、均一にした後、コノ溶液を３０°Ｃで２４
時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ４にＮａＣ
Ｏ３，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：１）１００ｍ（２で３回、アセトン
ｌｏＯｍ４で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９９ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが０．５６
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は０
．５７４％）。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０
°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分
析を行う。過剰量のＮａ０Ｉ（は、指示薬としてフェノ
ールフタレインを用いたＯ、１ＮＨＣＱによる滴定によ
って測定する。

この方法によれば、全エステル基の測定が可能であり、
その含有量は０．３６ｍＥｑ／ｇである（理論値は０．
３７４）。

実施例３　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
℃の温度で、ＨＹ（１０＋ＩＩＲＱ）のテトラブチルア
ンモニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍＱに溶解
する。ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（０，５ｍＭ）
、得られた溶液を３０℃で１５時間撹拌する。■−３シ
ョートプロパン０．２９６ｇを加、ｔ（１ｍＭ、２ｍＥ
ｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０℃で２４時
間放置する。

残っｔ；テトラブチルアンモニウム・カルボキシル基を
ナトリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を
用いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍａにＮａ
ＣＯ３，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍＩ２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：　ｌ）ｌ　ＯＯｍＱで３回、アセ
トンｌｏＯｍｆｆで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９８ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが０．５６
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は０
．５７４％）。過剰量の０．ＩＮ　ＮａＯＨを用いて５
０℃で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分
析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノー
ルフタレインを用いたＯ、ｌＮ　ＨＣ（２による滴定に
よって測定する。

この方法によれば、全エステル基の測定が可能であり、
その含有量は０．６１ｍＥｑ／ｇである（理論値は０．
６２３）。

実施例４　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
℃の温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．１５６ｇを加え（１ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。

１−３ショートプロパン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０℃で
２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｆｆにＮａ
Ｃ４２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｒｎＱを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍＱで３回、アセトン
ｌｏｏ＋＋＋Ｑで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．００ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが１．０８
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は１
．１５％）。過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜ＩＮ　ＨＣＱによる滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は０．７３５ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は０．７４７）。

実施例５　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌｏ＋１ｌＥＱ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８蛯に溶解する。

ヨウ化エチル０．３１２ｇを加え（２ｍＭ）、得られた
溶液を３０℃で１５時間撹拌する。ｌ−３ショートプロ
パン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ。

２ｒＲＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０℃
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、二の溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
Ｃｌ２２．’５ｇを溶かした水溶液ヲ加よる。

アセトン５００ｍ０．を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）１００蛯で３回、アセトンＬ
ｏｏｍ＜２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する７ これにより、標題に示した化合物４．Ｏｌｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが２．１８
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は２
．２９％）。過剰量のＱ、１ＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は０．９８ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は０．９９５）。

実施例６　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
℃の温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得られ
た溶液を３０℃で１５時間撹拌する。

１−３ショートプロパン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残っｔ；テトラブチルアンモニウム・カルボキシル基を
ナトリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を
用いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｎＱにＮａ
ＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００１を加え、濾過して沈澱物を分離し、ア
セトン／水（５：ｌ）１００ｍ１２で３回、アセトン１
００ｉｆｆで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．００ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが４．５％
（ｖ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は４．
５７％）。過剰量の０−ＩＮＮａＯＨを用いて５０℃で
３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行
う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬として７ニノールフタ
レインを用いた０゜１ＮＨＣＱによる滴定によって測定
する。このような方法に従えば、全エステル基の測定が
可能であり、その含有量は１．４３ｍＥｑ／ｇである（
理論値は１．４９）。

実施例７　エタノールにより部分的にエステル化され、
■−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍ１２ニ溶解
する。ヨウ化エチル０．９３４ｇを加え（６ｍＭ）、得
られた溶液を３０°Ｃ″ｔ’１５時間撹拌する。ｌ−３
ショートプロパン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ。

２＋ＩＩＲＱに相当）、均一にした後、この溶液を３０
°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するｔ；め、この溶液に、水／氷浴を
用いて外側から冷却しながら、蒸留水１００１１１１２
にＮａＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ１２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ＋２で３回、アセト
ン１００ＩＩＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示しｔ；化合物４．０３ｇが得られ
る。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが６．７４
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は６
．８３％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０°
Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０゜ＩＮ　ＨＣＱによる滴定によっ
て測定する。このような方法に従えば、全エステル基の
測定が可能であり、その含有量は１．９６ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は１．９８）。

実施例８　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニウ
ム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍＱに溶解する。ヨ
ウ化エチル１．１７０ｇを加え（７，５ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。

１−３ショートプロパン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ。

２１１１ＥＱに相当）、均一にした後、この溶液を３０
００で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｇにＮａＣ
ｌ２２．５ｇを溶カシタ水溶液ヲ加よる。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）ｌｏＯｍｆｆで３回、アセトン
ｌｏｏｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０２ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが８．４６
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は８
．５２％）。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜１ＮＨＣＩ２による滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は２．２８ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は２．３４）。

実施例９　エタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−３プロパンジオールにより 部分的に架橋されたヒアルロン酸（Ｈ Ｙ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌｏｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍＱに溶解する。

ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得られた
溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。１−３ショートプ
ロパン０．５９２ｇを加え（２ｍＭ。

４ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ（２にＮａ
（１２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ２を加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：１）１００ｍ１２で３回、アセトン
ｌｏＯｍ（２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９９ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが４．４２
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かつＩ；（理論値は
４．５７％）。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０
℃で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０１ＩＮＨ（ｌによる滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量はｌ　、９６ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は１．９９）。

実施例ＩＯエタノールにより部分的にエステル化され、
ｌ−４ブタンジオールによ り部分的に架橋されたヒアルロン酸 （ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．３１２ｇを加え（２ｍＭ）、得られ
た溶液を３０℃で１５時間撹拌する。ｌ−３ショートブ
タン０．３１０ｇを加え（１ｍＭ、２ｍＥｑに相当）、
均一にした後、この溶液を３０℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルホキシル基をナ
トリウム塩に変換するＩ；め、この溶液に、水／氷浴を
用いて外側から冷却しながら、蒸留水１００−にＮａＣ
ｌ２２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ４で３回、アセトン１
００ｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０２ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが２．３％
（ｖ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は２．
２８％）。過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５０°Ｃ
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜１ＮＨＣＱによる滴定によって測
定する。このような方法に従えば、全エステル基の測定
が可能であり、その含有量は０．９７ｍＥｑ／ｇである
（理論値はＣ１９９）。

実施例１１　　エタノールにより部分的にエステル化さ
れ、ｌ−４ブタンジオールによ り部分的に架橋されたヒアルロン酸 （ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（１０＋ｎＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍ０Ｌ：溶解
する。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得
られた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。１−４ジョ
ードブｌン０．３１０ｇを加、ｔ（１ｍＭ、２ｍＥｑに
相当）、均一にした後、この溶液を３０’０で２４時間
放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｆｆにＮａ
ＣＱ２．５ｇを溶がした水溶液を加える。

アセトン５００ｍｄを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ１２で３回、アセトン
１００ｍｆｆで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９５ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが２．２５
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は２
．２８％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜１ＮＨＣＱによる滴定によって測
定する。このような方法に従えば、全エステル基の測定
が可能であり、その含有量は１．４１ｍＥｑ／ｇである
（理論値は１．４８）。

実施例１２　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−４ブタンジオールによ り部分的に架橋されたヒアルロン酸 （ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ１２４ｍ溶解す
る。ヨウ化エチル０．９３６ｇを加え（６ｍＭ）、得ら
れた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ｌ−４ショー
トブタン０．３１０ｇを加え（１ｍＭ、２ｍＥｑに相当
）、均一にした後、この溶液を３０”０で２４時間放置
する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｄにＮａＣ
Ｑ２．５ｇを溶カシタ水溶液ヲ加よる。

アセトン５００罰を加え、濾過して沈澱物を分離し、ア
セトン／水（５：ｌ）ｌ　Ｏｆ）＋ｆｆＴ３回、アセト
ンｌｏｏｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９８ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが６．６９
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は６
．８１％）。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は１．９１ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は１．９７）。

実施例１３　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−６ヘキサンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．３１２ｇを加え（２ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。１−６ジプロモ
ヘキサン０．２４４ｇを加え（１ｍＭ。

２ｒｎＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３００
０で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水Ｌｏｏｍ（２にＮａ
ＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）ｌｏＯｍ（２で３回、アセトン
１００ｍ（２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０５ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが２．１８
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は２
．２７％）。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０°
Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬石してフェノール
フタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣｌ２による滴定によ
って測定する。このような方法に従えば、全エステル基
の測定が可能であり、その含有量は０．９６ｍＥｑ／ｇ
である（理論値は０．９８５）。

実施例１４　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−６ヘキサンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、０ＭＳ０２４８ｒｎ（ｔに溶解
する。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（２ｍＭ）、得
られた溶液を３０℃で１５時間撹拌する。ｌ−〇ジブロ
モヘキサン０．２４４ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０℃で
２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ＋２にＮａ
ＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００蛯を加え、濾過して沈澱物を分離し、ア
セトン／水（５：ｌ）１００ｍ１２で３回、アセトン１
００ｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０２ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが４．４６
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は４
．５２％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０°
Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によっ
て測定する。このような方法に従えば、全エステル基の
測定が可能であり、その含有量は１．４３ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は１．４７）。

実施剥土ｊ　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−６ヘキサンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ１２に溶解する
。ヨウ化エチル０．９３４ｇを加え（６ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ｌ−〇ジブロモ
ヘキサン０．２４４ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
Ｃ（２２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｒＡＱを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）ｌｏｏｍＱで３回、アセトン
ｌｏｏ＋＋＋１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．００ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが６．６８
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は６
．７６％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０°
Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によっ
て測定する。このような方法に従えば、全エステル基の
測定が可能であり、その含有量は１．９１ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は１．９６）。

実施例１６　エタノールにより部分的にエステル化され
、■−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ１２に溶解する
。ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（０，５ｍＭ）、得
られた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。

１−８ジブロモオクタン０．０６８ｇを加え（０，２５
ｍＭ、０．５ｍＥｑに相当）、均一にした後、コノ溶液
を３０℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
Ｃｆｆ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００＋ｌＩＱを加え、濾過して沈澱物を分離
し、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ１２で３回、アセ
トンｌｏｏ＋＋＋１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥す
る。

これにより、標題に示した化合物３．９９ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが０．５４
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は０
．５７１％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０
°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分
析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノー
ルフタレインヲ用いた０、１Ｎ　ＨＣｆ２による滴定に
よって測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．２３ｍＥｑ／ｇである（理論値
は０．２５）。

実施例１７　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１０７１Ｅｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ○２４８ｍＱに溶解する。

ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（０，５ｍＭ）、得ら
れた溶液を３０℃で１５時間撹拌する。

■−８ジブロモオクタン０．１３６ｇを加え（０，５ｍ
Ｍ、１ｍＥｑに相当）、均一にした債、この溶液を３０
°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルポキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
（２２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００＋Ｊを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：１）１００ｍ１２で３回、アセトン
１００ｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９７ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディ７らの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが０．５５
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は０
．５６９％）。過剰量のＱ、１ＮＮａＯＨを用いて５０
℃で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０、１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によっ
て測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．３５ｍＥｑ／ｇである（理論値
は０．３７）。

実施例１８　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８−に溶解する。

ヨウ化エチル０．０７８ｇを加え（０，５ｍＭ）、得ら
れた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。

、１−８ジブロモオクタン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ
。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
（２２，５ｇを溶かした水溶液を加え。

る。

アセトン５００ｄを加え、濾過して沈澱物を分離し、ア
セトン／水（５：ｌ）ｌｏｏｍ＜２で３回、アセトンｆ
Ｏ（ｈ＋１＋で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０５ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが０．５５
％（ｖ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は０
．５６４％）。・過剰量のＱ、１ＮＮａＯＨを用いて５
０°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の
分析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノ
ールフタレインを用いた０、ＩＮ　ＨＣＱによる滴定に
よって測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．６０ｍＥｑ／ｇである（理論値
は０．６１）。

実施例１９　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニウ
ム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解する。

ヨウ化エチルＯ，１５６ｇを加え（１ｍＭ）、得られた
溶液を３０℃で１５時間撹拌する。ｌ−８ジブロモオク
タン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ。

２１ＲＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°
Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａ（
ｊ２２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ１２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）ｌｏｏｍＱで３回、アセトン
１００ｍｆｆで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０１ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンデイフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノ−ルが１．０９
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は１
．１３％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０℃
で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を
行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフ
タレインを用いた００ＩＮ　ＨＣＱによる滴定によって
測定する。このような方法に従えば、全エステル基の測
定が可能であり、その含有量は０．７０ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は０．７３）。

実施例２０　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌｏｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８１１１１２に溶解
する。ヨウ化エチル０．３１２ｇを加え（２ｍＭ）、得
られた溶液を３０℃で１５時間撹拌する。ｌ−８ジブロ
モオクタン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ。

２＋１ｌＥＱに相当）、均一にした後、この溶液を３０
℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ（２にＮａ
Ｃ（２２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍｆｆを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：　１）ｌ　００ｍＱで３回、アセ
トンｌｏｏｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０５ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られｔ；化合物にはエタノールが２．０
５％（ｗ／ｖ）含まれていることが分がった（理論値は
２．２５％）。過剰量の０．１ＮＮａＯＨを用いて５０
°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分
析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノー
ルフタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣ（２による滴定に
よって測定する。このような方法に従えば、全エステル
基の測定が可能であり、その含有量は０．９６ｍＥｑ／
ｇである（理論値は０．９８）。

実施例２１　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌｏｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得られ
た溶液を３０℃で１５時間撹拌する。■−８ジブロモオ
クタン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０℃で
２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ａｆｆにＮａ
Ｃｆｆ２．５ｇを溶かした水溶液を加えアセトン５００
ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、アセトン／水（
５：１）ｌｏｏ＋＋１２で３回、アセトンｌＯＱ＋ｎＱ
で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９９ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが４．３９
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かった（理論値は４
．４９％）。過剰量の０．ｌＮ　ＮａＯＨを用いて５０
℃で３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣｌ２による滴定によ
って測定する。このような方法に従えば、全エステル基
の測定が可能であり、その含有量は１．４３ｍＥｑ／ｇ
である（理論値は１．４６）。

実施例２２　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル０．９３４ｇを加え（６ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ｌ−８ジブロモ
オクタン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０００
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ（２にＮａ
Ｃｌ２２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍｆｆを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）ｌｏＯｍ！２で３回、アセト
ン１００１１１１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥すこ
れにより、標題に示した化合物４．１０ｇが得られる。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが６．６６
％（ｗ／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は６
．７２％）。過剰量のＱ、１ＮＮａＯＨを用いて５０°
Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析
を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノール
フタレインを用いた０゜１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によっ
て測定する。このような方法に従えば、全エステル基の
測定が可能であり、その含有量は１．８９ｍＥｑ／ｇで
ある（理論値は１．９４）。

実施例２３　エタノールにより部分的にエステル化され
、ｌ−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解する
。ヨウ化エチル１．１７０ｇを加え（７，５ｍＭ）、得
られた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。

１−８ジブロモオクタン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残りＩ；テトラブチルアンモニウム・カルボキシル基を
ナトリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を
用いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮ
ａＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液ヲ加よる。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）ｌ　ＯＯｍαで３回、アセトン
ｌｏＯｍ（２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０３ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法（既述）に従
って行ない、得られた化合物にはエタノールが８．２７
％（Ｗ／Ｗ）含まれていることが分かつた（理論値は８
．３８％）。過剰量の０−ＩＮＮａ。

Ｈを用いて５０°Ｃで３０分間ケン化反応を行ない、全
エステル基の分析を行う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬
としてフェノールフタレインを用いた０゜ＩＮ　ＨＣＱ
による滴定によって測定する。このような方法に従えば
、全エステル基の測定が可能であり、その含有量は２．
０５ｍＥｑ／ｇである（理論値は２．３）。

実施例２４　エタノールにより部分的にエステル化され
、■−８オクタンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（１ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ（２に溶解する
。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ｌ−８ジブロモ
オクタン０．５４４ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３００Ｃ
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
（１２２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ（２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）１００ｍ＜２で３回、アセト
ンｌｏｏｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１５ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法に従って行な
い、得られｔ；化合物にはエタノールが４゜３６％（ｗ
／ｗ）含まれていることが分かった（理論値は４．４２
％）。過剰量のＯ，ｉＮ　ＮａＯＨを用いて５０℃で３
０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う
。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレ
インを用いた０、ｌＮＭＣＩ２による滴定によって測定
する。このような方法に従えば、全エステル基の測定が
可能であり、その含有量は１．９０ｍＥｑ／ｇである（
理論値は１．９２）。

実施例２５　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−１０デカンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアンモニウ
ム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍＱに溶解する。ヨ
ウ化エチル０．３１２ｇを加え（２ｍＭ）、得られた溶
液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。１−１０ジブロモデ
カン０．３００ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０°Ｃ
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
Ｑ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００罰を加え、濾過して沈澱物を分離し、ア
セトン／水（５：１）ｌｏＯ＋ｎ（２で３回、アセトン
ｌｏｏｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１２ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法に従って行な
い、得られた化合物にはエタノールが２゜１２％（Ｗ／
１１）含まれていることが分かった（理論値は２．２４
％）。過剰量のＯ’、ｌＮＮａＯＨを用いて５０℃で３
０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う
。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレ
インを用いた０、１ＮＨＣＱによる滴定によって測定す
る。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可
能であり、その含有量は０．９４ｍＥｑ／ｇである（理
論値は０．９７）。

実施例２６　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−１０デカンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌｏｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍ＜２に溶解する
。ヨウ化エチル０．６２４ｇを加え（４ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。１−１０ジブロ
モデカン０．３００ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３０００
で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２ｉ：Ｎ
ａＣｌ２２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５ＱＱ＋ｎ（２を加え、濾過して沈澱物を分離
し、アセトン／水（５：１）１００ｍＱで３回、アセト
ン１００＋＋ＩＣで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１０ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法に従って行な
い、得られた化合物にはエタノールが４゜３６％（ｗ／
ｗ）含まれていることが分かった（理論値は４．４６％
）。過剰量の０．ｌＮ　ＮａＯＨを用いて５０℃で３０
分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。

過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレイ
ンを用いた０、１Ｎ　ＨＣＤ、による滴定によって測定
する。このような方法に従えば、全エステル基の測定が
可能であり、その含有量は１．４３ｍＥｑ／ｇである（
理論値は１．４５）。

実施例２７　エタノールにより部分的にエステル化され
、１−１０デカンジオールに より部分的に架橋されたヒアルロン 酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（Ｉ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ１２に溶解す
る。ヨウ化エチル０．９３４ｇを加え（６ｍＭ）、得ら
れた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。■−１０ジブ
ロモデカン０．３００ｇを加え（１ｍＭ。

２ｍＥｑに相当）、均一にしＩ；後、この溶液を３０°
Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｆ２にＮａ
Ｃｌ２２．５ｇを溶カシタ水溶液ヲ加よる。

アセトン５００ｍｆｆを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍＱで３回、アセトン
１００酎で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１２ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法に従って行な
い、得られた化合物にはエタノールが６゜５％（ｖ／ｗ
）含まれていることが分かった（理論値は６．６７％）
。過剰量の０．ｌＮＮａＯＨを用いて５０°Ｏ−’ｌ；
３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行
う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタ
レインｔ−用いたＯ、１ＮＨＣＱによる滴定によって測
定する。このような方法に従えば、全エステル基の測定
が可能であり、その含有量は１．８７＋ｎＥｑ／ｇであ
る（理論値は１゜９３）。

実施例２８　エタノールにより部分的にエステル化され
、α　、ｌ−パラキシレンジオ ールにより部分的に架橋されたヒア ルロン酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解す
る。ヨウ化エチルＯ、’６２４　ｇを加え（４ｍＭ）、
得られた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。α。

α′−ジブロモーｐ−キシレン０．２６４ｇを加え（１
ｍＭ、２１１ＥＱに相当）、均一にした後、この溶液を
３０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００１１１２にＮ
ａＣ（２２，５ｇを溶かした水溶液を加工アセトン５０
０ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、アセトン／水
（５：ｌ）１００ｍｉ２で３回、アセトン１００ｍ１２
で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０４ｇが得られる
。

エトキシル基定量法をクンディフらの方法に従って行な
い、得られた化合物にはエタノールが４゜４％（ｐ／ｐ
）含まれていることが分かった（理論値は４．５％）。

過剰量の０．ＩＮ　ＮａＯＨを用いて５０°Ｃで３０分
間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過
剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレイン
を用いた０、１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって測定する
。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能
であり、その含有量は１．３６ｍＥｑ／ｇである（理論
値は１゜４７）。

実施例２９　ベンジルアルコールにより部分的にエステ
ル化され、ｌ−８オクタンジ オールにより部分的に架橋されｊ；ヒ アルロン酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍＱに溶解す
る。臭化ベンジル０．３４２ｇを加え（２ｍＭ）、得ら
れた溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ジブロモオク
タン０．２７２ｇを加え（１ｍＭ、２ｍＥｑに相当）、
均一にした後、この溶液を３０℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍｆｆにＮａ
Ｃ（２２，５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ＋２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：　ｌ）１００ｍＱで３回、アセト
ンｌｏｏｍαで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１５ｇが得られる
。

過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５０℃で３０分間ケ
ン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過剰量
のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレインを用
いた０、１Ｎ　ＨＣｌ２による滴定によって測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．９３ｍＥｑ／ｇである（理論値
は０．９５）。

実ｍ例３０　　ベンジルアルコールにより部分的にエス
テル化され、ａ、ａ’−パラキシ レンジオールにより部分的に架橋さ れたヒアルロン酸（ＨＹ）の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍＱに溶解する
。臭化ベンジル０．３４２ｇを加え（２ｍＭ）、得られ
た溶液を３０°Ｃで１５時間撹拌する。ａ。

α°−ジブロモーｐ−キシレン０．２６４ｇを加え（１
ｍＭｓ　２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を
３０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００＋＋＋ＱにＮ
ａＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍ（２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）１００−で３回、アセトンｔ
ｏｏｍｃで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．１１ｇが得られる
。

過剰量の０．１ＮＮａＯＨ’を用いて５０℃で３０分間
ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過剰
量のＮ　ＢＯＨ’　％指示薬としてフェノールフタレイ
ンを用いた０、ＩＮ　　ＨＣＱによる滴定によって測定
する。このような方法に従えば、全エステル基の測定が
可能であり、その含有量は０．９２ｍＥｑ／ｇである（
理論値は０．９５）。

実７１ＪＩＩ３１　１−３プロパンジオールにより部分
的に架橋されたヒアルロン酸（ＨＹ） の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍｆｆに溶解する
。ｌ−３ショートプロパン０．２９６ｇを加え（１ｍＭ
、２ｍＥｑに相当）、均−ｒ：Ｉ、ｆ−ＩＪｋ、この溶
液を３０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
ＣＱ２．５ｇを溶かした水溶液を加よる。

アセトン５００ｍ１２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）ｉｏＯｎ＋Ｑで３回、アセト
ンｌｏＯ＋ｎ（２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９８ｇが得られる
。

過剰量の０．ＩＮ　ＮａＯＨを用いて５０℃で３０分間
ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過剰
量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレインを
用いたＯ、ｌＮ　ＨＣＱによる滴定によって測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．４７ｍＥｑ／ｇである（理論値
は０．４９９）。

実施例３２　１−３プロパンジオールにより部分的に架
橋されたヒアルロン酸（ＨＹ） の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアンモニウ
ム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　０２４８ｍｌ、：溶解する
。■−３ショートプロパン０．７４０ｇを加え（２，５
ｍＭ、５ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３
０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
Ｑ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ１２で３回、アセトン
ｌｏｏｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、探題に示した化合物３．８９ｇが得られる
。

過剰量の０．ｌＮ　ＮａＯＨを用いて５０°ｃ−ｃ３０
３０分間ケン化を行ない、全エステル基の分析を行う。

過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレイ
ンを用いたＯ、ｌＮ　ＨＣＱによる滴定によって測定す
る。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可
能であり、その含有量は１．２１ｍＥｑ／ｇである（理
論値は１．２５）。

実施例３３　１−３プロパンジオールにより部分的に架
橋されたヒアルロン酸（）ＩＹ）の製造。

窒素雰囲気下、高度に除湿した条件下かつ遮光下、２５
°Ｃの温度で、ＨＹ（１０ｍＥｑ）のテトラブチルアン
モニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ０２４８ｍ（ｌに溶解
する。１−３ショートプロパン１．１８４ｇを加え（４
＋ｃＭ、８ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を
３０℃で２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
Ｑ２．５ｇを溶かした水溶液を加よる。

アセトン５００ｍ＋２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：１）１００ｍ＋２で３回、アセト
ンｌｏＯｍｆｆで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．８７ｇが得られる
。

過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５０°Ｃで３０分間
ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過剰
量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレインを
用いたＯ、ｌＮ　ＨＣｌ２による滴定によって測定する
。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能
であり、その含有量は１．９７ｍＥｑ／ｇである（理論
値は２．００）。

実施例３４　　ｌ−４ブタンジオールにより部分的に架
橋されたヒアルロン酸（ＨＹ：Ｍ）製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（１０ｙａＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ　Ｏ２４８ｍＱに溶解す
る。ｌ−４ショートブタン０．３１０Ｆ、を加え（１ｍ
Ｍ、　２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３
０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ１２にＮａ
Ｃｆ２２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍｆｆを加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ＋２で３回、アセト
ンｌｏｏｍ１２で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．００ｇが得られる
。

過剰量のＯ，ｌＮ　ＮａＯＨを用いて５０°Ｃで３θ分
間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過
剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレイン
を用いた０、１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって測定する
。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能
であり、その含有量は０．４９２ｍＥｑ／ｇである（理
論値は０．４９７）。

実施例３５　　ｌ−６ヘキサンジオールにより部分的に
架橋されたヒアルロン酸（ＨＹ） の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌ　ＯｍＥｑ）のテトラブチルアンモ
ニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳ○２４８罰に溶解する。

テトラブチルアンモニウム・ヨウ化物塩０．３７０ｇを
加え（１ｍＭ）、得られた溶液を２０℃で１１間撹拌す
る。１−６ジブロモヘキサン０．２４４　ｇを加え（１
ｍＭ、２ｍＥｑに相当）、均一にした後、この溶液を３
０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ（２にＮａ
ＣＱ２−５ｇを溶かしｔ；水溶液ヲ加、する。

アセトン５００ｍＩ２を加え、濾過して沈澱物を分離し
、アセトン／水（５：ｌ）１００ｍ（２で３回、アセト
ンｌｏｏｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０１ｇが得られる
。

過剰量の０　、　Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨを用いて５０°Ｃで
３０分間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行
う。過剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタ
レインを用いた０、１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって測
定する。このような方法に従えば、全エステル基の測定
が可能であり、その含有量は０．４８６ｍＥｑ／ｇであ
る（理論値は０．４９４）。

実施例３６　　ｌ−８オクタンジオールにより部分的に
架橋されたヒアルロン酸（ＨＹ） の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５°Ｃ
の温度で、ＨＹ（ｌｏ＋ＩＩＥＱ）のテトラブチルアン
モニウム塩６．２１ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍ（２に溶解
する。テトラブチルアンモニウム・ヨウ化物塩０．３７
０　ｇを加え（１ｍＭ）、得られた溶液を２０°Ｃで１
時間撹拌する。１−８ジブロモオクタン０．２７２ｇを
加え（１ｍＭ、２＊Ｅｑに相当）、均一にした後、この
溶液を３０°Ｃで２４時間放置する。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍＱにＮａＣ
Ｑ２．５ｇを溶かした水溶液を加える。

アセトン５００ｍαを加え、濾過して沈澱物を分離し、
アセトン／水（５：ｌＮＯＯｍＱで３回、アセトン１０
０ｍＱで３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．０２ｇが得られる
。

過剰量のＯ，ｌＮ　ＮａＯＨを用いて５０°Ｃで３０分
間ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過
剰量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレイン
を用いｊ二Ｏ，ｌＮ　ＨｃＱによる滴定によって測定す
る。このような方法に従えば、全エステル基の測定が可
能であり、その含有量は０．４７８＋＋＋Ｅｑ／ｇであ
る（理論値は０．４９０）。

実施例３７　１−１０デカンジオールにより部分的に架
橋されたヒアルロン酸（ＨＹ） の製造。

窒素雰囲気下、完全な乾燥条件下かつ遮光下、２５℃の
温度で、ＨＹ（１０＋＊Ｅｑ）のテトラブチルアンモニ
ウム塩６．２１．ｇを、ＤＭＳＯ２４８ｍｉ２に溶解す
る。ヨウ素０．３６９　ｇを加え（１ｍＭ）、得られた
溶液を２０°Ｃで１時間撹拌する。■−１０ジブロモデ
カン０．３００ｇを加え（１ｍＭ、　２ｍＥｑに相当）
、均一にした後、この溶液を３０°Ｃで２４時間放置す
る。

残ったテトラブチルアンモニウム・カルボキシル基をナ
トリウム塩に変換するため、この溶液に、水／氷浴を用
いて外側から冷却しながら、蒸留水１００ｍ０．にＮａ
Ｃｌ２２．５ｇを溶かした水溶液を加えアセトン５００
ｍＱを加え、濾過して沈澱物を分離し、アセトン／水（
５：１）ｌｏｏ＋＋＋Ｑで３回、アセトンｌｏｏｍ１２
で３回洗浄し、次いで減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物３．９９ｇが得られる
。

過剰量のＯ，１ＮＮａＯＨを用いて５０°Ｃで３０分間
ケン化反応を行ない、全エステル基の分析を行う。過剰
量のＮａＯＨは、指示薬としてフェノールフタレインを
用いた０、１Ｎ　ＨＣＱによる滴定によって測定する。

このような方法に従えば、全エステル基の測定が可能で
あり、その含有量は０．４７６ｍＥｑ／ｇである（理論
値は０．４８７）。

実施例３７Ａ　　オクタンジオールおよびコルチゾンに
より混同して部分的に架橋されたヒアルロン酸（ＨＹ）
［オクタンジオールによりエステル化されたカルボキシ
ル基４０％、コルチゾン（ＣＷｔ）によりエステル化さ
れたカルボキシル基２０％、塩化されたカルボキシル基
４０％］の製造。

ＨＹのテトラブチルアンモニウム塩（分子ｍ１２５．０
００）６．２　ｇ（ｌ　ＯｍＥｑに対応）を、ジメチル
スルホキシド３１０ｍＱに温度２５°Ｃにて溶解し、ｌ
−８ジブロモオクタン１．０９ｇ（４ｍＥｑ）を加え、
得られた溶液を３０℃にて２４時間放置する。２１−プ
ロモー４−プレグネン−１７α−■−３，１１，２０−
１リオン０．８５　ｇ（５ｍＥｑ）を加え、この溶液を
３０℃にて２４時間放置する。

次いで、塩化ナトリウム５ｇの水溶液（ｌｏｏｍＱ）を
加え、得られた混合物を、一定速度で撹拌させながらア
セトン２．ＯＯＯｍＱにゆっくりと注加する。濾過して
得た沈澱物を、アセトン／水（５：１）ｌｏｏｍｆｆで
３回、アセトン１００ｍ１２で３回洗浄し、最後に３０
°Ｃで８時間減圧乾燥する。

これにより、標題に示した化合物４．５ｇが得られる。

Ｎａ２Ｇｏ、の水性アルコール溶液を用いて緩やかにア
ルカリ性加水分解を行い、クロロホルムで抽出した後、
ブリティッシュ・ファーマコビア（Ｂｒｉｔｉｓｈ　Ｐ
ｈａｒｍａｃｏｐｅａ）［１９８（Ｌ　２２４頁］に従
ってコルチゾンの定量を行った。

笈上表 各種架橋化合物の組成パーセンテージ（百分率）実施例
　　エステル化　　　　　架橋　　　　塩化Ｉ’ｄ　　
　　ｌυ　ｉ　　ｔ−しｈｔ−２０／　　−（ＣＨｚ）
ｓ−６０ａ）数字は右列の基によってエステル化された
カルボキシル基数の百分率 ｂ）数字は右列の基によって架橋されたカルボキシル基
数の百分率 Ｃ）数字はナトリウムによって塩化されたカルボキシル
基数の百分率 実施例３８　炎症作用を持ｔ；ないヒアラスチン画分と
ヒアレクチン画分との混合 物を得る方法 新鮮な、または凍結した鶏のとさか（３００ｇ）をミン
サーで刻んだ後、機械的なホモジナイザーで注意深くホ
モジナイズする。この様にして得られたペーストをＡｌ
５Ｉステンレス鋼製の容器またはグラスに入れ、１０容
量の無水アセトンで地理する。全体を５０ｒｐｍで６時
間撹拌する。１２時間放置して分離させた後、アセトン
を吸い上げて除去する。捨てたアセトンの湿度が適正に
なるまでアセトン抽出を繰り返す（カール・フィッシャ
ー法）。次いで、全体を遠心し、適当な温度で５〜８時
間減圧乾燥する。かくして鶏とさかの乾燥粉末約５００
〜６００ｇが得られる。

乾燥粉末３００ｇを、りん酸バッファーで緩衝化した水
性溶媒中で、適量の塩酸システィンの存在下、パパイン
（０，２９）により酵素消化する。６０〜６５℃の定温
において、６０ｒｐｍで２４時間撹拌する。次いで、全
体を２５°Ｃに冷却してセライト（ＣｅｌｉｔｅＲ）（
６０９）を加え、更に１時間撹拌を続ける。得られた混
合物を、透明な液体が得られるまで濾過する。この透明
な液体を分子排除限界３０．０００のメンプランで分子
限外濾過することにより、メンプラン上に分子量３０．
０００以上の分子を得る。

限外濾過される生成物に蒸留水を連続的に加えながら、
元の体積の５〜６倍容量を限外濾過する。

水の添加を保留し、元の体積の１／３に減少されるまで
限外濾過を続ける。塩化ナトリウムを加えて残りの液体
を０．１Ｍ塩化ナトリウムとし、温度を５０°Ｃにする
。６０ｒｐｍで撹拌しながらセチルピリジニウム・クロ
ライド４５ｇを加える。６０分間撹拌した後、Ｃｅ１ｉ
ｔｅＲ５０９を加える。撹拌下、全体の温度を２５°Ｃ
にし、析出した沈澱を遠心して集める。得られた沈澱を
０．５％セチルピリジニウム・クロライドを含んだＯ，
０１Ｍ塩化ナトリウム溶液（５Ｑ）に懸濁する。これを
５０°Ｃで６０分間撹拌する。次いで温度を２５°Ｃに
して沈澱を遠心する。３回洗浄を行い、最後に、０゜５
％セチルピリジニウム・クロライドを含んだ０゜０５Ｍ
塩化ナトリウム溶液３Ｑの入った容器に集める。

６０ｒｐｍで６０分間撹拌し、温度を２時間、２５°Ｃ
の定温に保つ。上溝を遠心して除く。０．０５％セチル
ピリジニウム・クロライドを含んだ０゜１Ｍ塩化ナトリ
ウム溶液を用いて数回、この工程を繰り返す。混合物を
遠心し、上清を捨てる。沈澱を０．５％セチルピリジニ
ウム・クロライドを含んだ０．３０Ｍ塩化ナトリウム溶
液（３ａ）に分散させる。この混合物を撹拌し、沈澱と
透明な液体の両者を集める。沈澱については、同一の水
溶液０．５Ｑづつを用いて３回抽出を繰り返す。

最後に、残渣沈澱を捨て、１個の容器に透明な液体をと
る。撹拌しながら液体の温度を５０°Ｃにする。次いで
、液体を塩化ナトリウムで０．２３Ｍにする。セチルピ
リジニウム・クロライド１ｇを加え、１２時間撹拌を続
ける。

混合物を２５°Ｃに冷却した後、まずＣｅ１ｉｔｅＲで
、次にフィルターで濾過する。次いで、分子排除限界３
０，０００のメンプランで分子限外濾過し、０．３３Ｍ
塩化ナトリウムを加えて初期容量の３倍の容量で限外濾
過する。塩化ナトリウム溶液の添加を中止して容量を１
／４に減少する。このようにして濃縮した溶液を３容量
のエタノール（９５％）と−緒に２５°Ｃで撹拌（６０
ｒｐｍ）すると沈澱が析出する。遠心して沈澱を集め、
上溝を捨てる。沈澱をＯ，１Ｍ塩化ナナトウム溶液ＩＱ
に溶かし、３容量の９５％エタノールで沈澱を繰り返す
。沈澱を採取し、まず７５％エタノールで３回、次いで
無水エタノールで３回、最後に無水アセトンで３回洗浄
する。

このようにして得られる生成物（ヒアラスチン士ヒアレ
クチン）の平均の分子量は２５０，０００〜３５０．０
００である。

ＨＹの収率は最初の新鮮な組織に対して０．６％に相当
する。

実施例３９　実施例３８に記載の方法で得られた混合物
からヒアラスチン画分を 得る方法 実施例３８に記載の方法で得られた混合物を発熱物質不
含の蒸留水に、水１ｍ（ｌについて生成物１０ｍｇの割
合で溶かす。得られた溶液を分子排除限界２００．ＯＯ
Ｏのフィルターメンプランを用い、メンプランの頂部か
ら水を加えることなく、濃縮法で分子濾過する。分子排
除限界２００．０００のメンプランで限外濾過を行うと
、この間に、２ｏｏ、ｏｏｏ以上の分子量を持つ分子は
通過することができないが、それより小さい分子は水と
一緒にメンプランを通過する。濾過工程の間、メンプラ
ンの頂部に水を加えないので、その結果、容量が減少し
、分子量２００．０００以上の分子の濃度が増大する。

メンプランの頂部の容量が初期容量の１０％に減少され
るまで限外濾過を続ける。

２容量の発熱物質不含の蒸留水を加え、元の容量の１／
３に減少されるまで限外濾過を続ける。さらに２回操作
を繰り返す。メンプランを通過した溶液を塩化ナトリウ
ムでＯ，１Ｍにし４容量の９５％エタノールにより沈澱
させる。沈澱を７５％エタノールで３回洗浄した後、減
圧乾燥する。

このようにして得られる生成物（ヒアラスチン画分）の
平均分子量は５０．０００〜１００．０００である。

ＨＹの収率は最初の出発物質である新鮮な組織について
、０．４％に相当する。

実施例４０　ヒアレクチン画分を得る方法実施例３９の
如くにして分子排除限界２００゜０００の限外濾過メン
プランの頂部にある容器に採取した濃縮液を、グルクロ
ン酸の用量に基づく定量分析測定によって５ｍｇ／ｍａ
ヒアルロン酸含有溶液が得られるまで水で希釈する。

溶液を塩化ナトリウムでＯ，１Ｍにし、次いで、４容量
の９５％エタノールで沈澱させる。沈澱を７５％エタノ
ールで３回洗浄した後、減圧乾燥する。

このようにして得られた生成物（ヒアレクチン画分）の
分子量は５００．０００〜７３０，０００である。これ
は分子鎖測定値が約２．５００〜３゜５００糖単位のｖ
４製度の高い、特定のヒアルロン酸画分に対応する。Ｈ
Ｙの収率は元の新鮮な組織出発物質の０．２％に相当す
る。

実施例４１　ヒアルロン酸の架橋誘導体、および様々な
アルコールによる部分的 エステル（ＩＪ！導体のフィルムの調 製 実施例６〜１５．１９〜２０および３７のようにして全
成分を加えた後、ホモジナイズして得たＤＭＳＯ溶液を
ガラス皿に所望の厚みで重層し、窒素雰囲気下、完全な
除湿条件下、遮光して２４時間おく。

このようにして得られた架橋し、エステル化されたヒア
ルロン酸誘導体のジイルムであって、テトラブチルアン
モニウム・カルボキシ基が存在しているフィルムを、ま
ず、１％ＮａＣＱ、次いで蒸留水に対し、溶液を定期的
に交換しながら４℃で透析する。上記の架橋誘導体のナ
トリウム塩を含んだフィルムを次に、２枚のセロファン
膜の間に挾み、スラブドライヤー中、３７°Ｃで減圧乾
燥する。

本発明の新規な架橋誘導体およびその塩を活性物質とす
る医薬製剤は、その架橋誘導体がさらに治療活性なアル
コールでエステル化されており、さらに／または塩化さ
れていてもよ＜、ＨＹそのものの特徴と同じ目的のもの
、および、治療活性なアルコールのエステルの場合には
、そのアルコールの特徴に相当する用途を意図している
もの、のいずれの場合であっても、通常の賦形剤を含有
し、経口、経直腸、非経口、皮下、局部、皮肉、あるい
は局所的に用いられる。従って、それらは大割、錠剤、
ゼラチンカプセル剤、カプセル剤、庄薬、軟ゼラチンカ
プセル剤等の固形または半固形の剤形をとる。非経口お
よび皮下投与のためには、筋肉内または皮肉投与のため
の剤形、あるいは注入、または静注に適した剤形を用い
ることができる。従って、本発明の活性物質を、溶液ま
たは凍結乾燥粉末として、活性化合物を薬学的に許容し
うるｌまたはそれ以上の賦形剤または希釈剤（生理的な
液体に適合した浸透圧型を有する）とプールしておくと
、上記の使用に便利である。局部使用については、鼻ス
プレーのようなスプレー製剤をも考慮すべきであり、硬
膏剤の局所使用のだめのクリームまたは軟膏は、皮肉投
与用に適切に製造され得る。

本発明の製剤はヒトまたは動物への投与を目的とするも
のである。それらは、溶液、スプレー、軟膏およびクリ
ームの場合には活性物質を０．０ｌ−１ｏ％、固形剤形
の場合にはｌ−１００％、好ましくは５−５０％含有し
ている。投与すべき用量は、所望の効果および選択され
た投与経路に関する指示に従って変化しうる。そのよう
な製剤の１日当たりの用量は、例えばにトまたは馬に対
する、関節炎の治療等の対応する治療におけるヒアルロ
ン酸の使用、並びにその活性を利用すべき治療活性なア
ルコールの両者について、既知の対応する製剤における
使用から推測しうる。従って、例えば、コーチゾンを併
ったヒアルロン酸エステルの用量は、そのエステル中の
含有量および既知の医薬製剤中の通常の用量から導かれ
る。

化粧品製品においては、本発明の新規な架橋誘導体およ
びその塩を、当該技術分野で通常用いられている賦形剤
、例えば既に医薬製剤に関して列挙したもの、と混合す
る。特に、局所使用のためのクリーム、軟膏、ローショ
ンは、プレグネノロンのようなステロイド、または上記
の活性物質等の活性な化粧品用物質を付加して構成され
得る。

これらの製品中での本発明の新規な架橋誘導体は、既述
の低級脂肪族アルコールのような化粧品活性ヲ有シない
アルコールのエステルであることが望ましい。これらの
製品においては、化粧品効果は、遊離のヒアルロン酸ま
たはその塩の場合のように、多糖類の本来の性質によっ
ている。

しかしながら、化粧品製品はヒアルロン酸の作用とは異
なる特異的な作用を有する物質、例えば、殺菌剤、遮光
剤、防水剤、または再生性物質、しわ防止剤または発香
性物質に基づいていてもよい。

この場合、本発明の新規な架橋誘導体はそれ自身が活性
物質であって、それらの性質を有するアルコールから導
かれたもの、例えば香水の場合、高級脂肪酸アルコール
またはテルペンアルコールから導かれるものであるか、
あるいは、特に、それに伴っている、そのような性質を
有する物質のための賦形剤として機能するものであって
よい。従って、特に重要なのは、前記の薬剤において、
薬学的に活性な成分を化粧品学的な因子で置き換えた、
薬物類似の化粧品組成物である。

香料工業において用いられているアルコールから導かれ
る上記エステルの使用は、発香成分の緩慢かつ一定した
、遅延された放出を可能にするので、技術の重要な進歩
である。

本発明の重要な応用の１つは既述の衛生および外科用製
品、その製造および方法に係る。従って本発明は、市場
化されている、ヒアルロン酸含有製品と同様の製品であ
るが、遊離の酸またはその塩の代わりに本発明の架橋誘
導体をも含有している製品、例えば挿入体または眼科用
レンズ等を包含する。

本発明の完全に新規な衛生および外科用製品は、シート
または糸状に形成しうる適当な有機溶媒によってそのよ
うに再生し、外科用のフィルム、シートおよび糸に形成
し、火傷後の皮膚の深刻な損傷の場合における皮膚補助
または代用品、あるいは外科的な縫合用の糸を得る。特
に本発明はこれらの使用法およびこれらの製品の１つの
製造方法であって、（ａ）ヒアルロン酸またはその塩の
１つを、ケトン、エステル、またはカルボン酸アミド、
特にｌ−５個の炭素原子を有し、炭素原子数１−６個の
アルキル基から導かれた脂肪族酸のジアルキルアミド、
特に、有機スルホキシドからえられるもの即ち、炭素原
子数６個までのアルキル基を有するジアルキルスルホキ
シド、特にジメチルスルホキシド、ジエチルスルホキシ
ド、のような中性溶媒、更にまた第一に、低沸点のフッ
化溶媒、特にヘキサフルオロインプロパツール等の適当
な有機溶媒中溶液とし、（ｂ）　　この溶液をシート又
は糸状に成形し、（ｃ）　　第１の溶媒とは混ざり合う
が、その中にヒアルロン酸エステルが溶けることのない
別の有機または水性溶媒、特に、エチルアルコールのよ
うな低級脂肪族アルコール（湿式紡績、Ｗｅｔ　　ｓｐ
ｉｎｎｉｎｇ）と接触させることにより有機溶媒を除く
、または、ヒアルロン酸誘導体ノ溶液を調製するのに左
程高くない沸点の溶媒を用いたときにはこの溶媒をガス
気流により、特に適当に過熱した窒素の存在下で除去す
る（乾式紡績法、Ｄ　ｒｙ　　ｓｐｉｎｎｉｎｇ）。

本発明除新規な架橋誘導体から得られた糸は、傷または
外科の医療に用いるリントの製造に有用である。そのよ
うなリントを用いると、それが含有している酵素の作用
によって器官内で生物分解を受けるので極めて好都合で
ある。これらの酵素はエステルを、ヒアルロン酸と対応
するアルコールおよび既に器官内に存在している化合物
、あるいは、アルコールのような無害な化合物とに分解
する。従って、そのようなリント、および上記の糸は、
該分解作用によって、徐々に吸収されるので、それを術
後も生体内に残してお（ことができる。

上記の衛生および外科用製品の製造において、機械的特
性を促進する（糸の場合には、絡まりにたいする抵抗を
増強する）ために可塑剤を加えると好都合である。これ
らの可塑剤は例えば、脂肪酸のアルカリ塩、例えば、ス
テアリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、多数
の炭素原子を有する有機酸のエステル等である。

本発明の新規な架橋誘導体の生物分解性を生物内に存在
しているエステラーゼを介して利用する他の応用例は、
医薬の皮下埋め込み用のカプセルの製造、または皮下ま
たは筋肉的注射等のＩ；めのマイクロカプセルの製造で
ある。皮下薬物を徐々に放出し、「遅延」作用をもって
適用するために、今日までシリコン材料のカプセルが用
いられてきたが、そのようなカプセルは器官内を移動し
やすく、回収が不可能であるという不利益を有していた
。本発明の新規な架橋誘導体に、このようなおそれのな
いことは明らかである。又、本発明の新規な架橋誘導体
を含有するマイクロカプセルは今日までその使用を極め
て制限されていた、その使用に伴う問題点を回避してい
るという点で重要である。この製剤は、注射による「遅
延」効果が得られる、という適用の全く新しい境地を拓
くものである。

更に本発明の新規な架橋誘導体の医療および外科の分野
での応用例は、プレート、ディスクおよびシート等の様
々な固形挿入体の製造にあり、これらは今日用いられて
いる合成プラスチック材料を含んだ金属製のもの（この
場合、ある期間の経過後、関連の挿入体を除去すること
を意図して用いる）の代わりとなる。動物のコラーゲン
を含有する製剤はそれがタンパク性であるために炎症や
拒絶反応のような不快な反応を引き起こす。本発明の新
規な架橋誘導体の場合、ヒトヒアルロン酸でなく、動物
起源であっても、種々の動物種で多糖類に関しては不適
合が存在しないので、このような危険性は生じない。

もう１つの用途は軟組織の損傷の修正および増加である
。途去された、または損傷された軟組織の代替となる、
安全かつ有効な生物材料の必要性が時折感じられていた
。パラフィン、テフロンペースト、シリコンおよびウシ
コラーゲン等の多くの同種移植形成術用材料が、失われ
た軟組織の代わりに用いられていた。しかしながら、こ
れらの材料は、その場所で動き、負の反応を伴い、皮膚
組織に望ましくない、永久的な変化をもたらす。。

従って、医療分野で多方面に用いられる生物材料への要
望は根強い。本発明の新規な架橋誘導体は丘疹、術後の
萎縮性異常、モー（Ｍｏｈｓ）の化学的外科、口唇の裂
傷、加令によるしわ等の損傷を修正するために用いて安
全かつ有効である。

本発明の新規な架橋誘導体の医療および外科分野への適
用には、様々な性質の傷または病巣の医療のための膨張
性材料からなる製剤、特にスポンジ状の製剤が含まれる
。

以下に製剤例を挙げ、本発明の代表的な製剤を示す。

製剤例１　コーチゾンを含有するコリリウム（Ｃｏｌｌ
ｉｒｉｕｍ） 成　　分　　　　　　　　　　　　　１００ｍ１中ヒア
ルロン酸のコーチゾンおよ　０．３００ｇびオクタンジ
オールとの部分 的かつ混合エステル （実施例３７Ａ） ｐ−オキシ安息香酸エチル　　　　Ｏ，ＯＩＯｇｐ−オ
キシ安息香酸メチル　　　　０．０５０ｇ塩化ナトリウ
ム　　　　　　　　　０．９００ｇ注射製剤用の水／ｇ
、ｂ、ａ、　　　　１００．００ｍ１製剤例２　ヒアル
ロン酸と１，３−プロパンジオールとの部分エステルを
含有する クリーム 成　　分　　　　　　　　　　　　ｇ／１００ｇヒアル
ロン酸と１．３−プロパ　０．２ンジオールとの部分エ
ステル （実施例３１） モノステアリン酸ポリエチレ　１０．０００ングリコー
ル　４００ セチオール　ｖ　　　　　　　　　　５．０００う不ツ
テ　ＳＸ　　　　　　　　　　　２．０００バラオキシ
安息香酸メチル　　　　０．０７５パラオキシ安息香酸
プロピル　　　０．０５０ジヒドロ酢酸ナトリウム　　
　　　０．１００グリセリン　Ｆ、Ｕ　　　　　　　１
．５００ソルビトール　７０　　　　　　　１．５００
テストクリーム　　　　　　　　　０．０５０注射製剤
用の水／ｇ、ｂ、ａ、　　　　１００．００特許出願人
　フィディーア・ソシエタ・ベル・アチオニ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ヒアルロン酸と脂肪族多価アルコールとの完全なま
   たは部分的な架橋エステル、並びに、そのような部分的
   架橋エステルの無機または有機塩基の塩（ただし、該架
   橋エステルは、ヒアルロン酸とアロメチルオキシラン又
   はビスエポキシ化合物との架橋エステルではない）。 ２、該脂肪族多価アルコールが二価アルコールである第
   １項記載の架橋エステル。 ３、該脂肪族多価アルコーが２−１６個の炭素原子を有
   する第１項記載の架橋エステル。 ４、該二価アルコールがエチレングリコール、プロピレ
   ングリコール、ブチレングリコールおよびペンタン、ヘ
   キサン、ヘプタンおよびオクタンから導かれるグリコー
   ル、並びにそれらの位置異性体からなる群から選択され
   る第２項記載の架橋エステル。 ５、脂肪族多価アルコールが、グリセリン、エリスライ
   トおよびペンタエリスライトからなる群から選択される
   第１項記載の架橋エステル。 ６、該ヒアルロン酸の架橋結合していないカルボキシ基
   の少なくとも一個が、炭素原子数３４個までの脂肪族ア
   ルコールであって、アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、
   アルデヒド、ケト、カルボキシ、ヒドロカルビルおよび
   ジヒドロカルビルアミノ基、エーテル、エステル、チオ
   エーテル、チオエステル、アセタール、ケタール、カル
   バルコキシ、カルバミド基および１または２個のアルキ
   ル基によって置換されている置換カルバミド基、これら
   機能的に修飾された基のヒドロカルビル残基の炭素原子
   数は最高６個である、によって置換されていることもあ
   り、その脂肪族アルコールの炭素原子鎖が、酸素、硫黄
   および窒素からなる群から選択される異種原子によって
   中断されていることもある脂肪族アルコールによってエ
   ステル化されている第１項−第５項のいずれかに記載の
   架橋エステル。 ７、該脂肪族アルコールがエチルアルコール、プロピル
   アルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアル
   コール、イソブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアル
   コール、アミルアルコール、ペンチルアルコール、ヘキ
   シルアルコール、またはオクチルアルコールである第６
   項記載の架橋エステル。 ８、該ヒアルロン酸の架橋結合していないカルボキシ基
   の少なくとも一個が唯一個のベンゼン残基を有する芳香
   性脂肪族アルコールであって、その脂肪鎖の炭素原子数
   は最高４個であり、ベンゼン残基は１−３個のメチルま
   たはヒドロキシ基、又はハロゲン原子で置換されている
   こともあり、脂肪鎖は、遊離の、またはモノ−メチルア
   ミノ基、ジ−エチルアミノ基、ピロリジン基およびピペ
   リジン基からなる群から選択される１またはそれ以上の
   機能的な基で置換されていることもある、芳香性脂肪族
   アルコールによってエステル化されている第１項−第５
   項のいずれかに記載の架橋エステル。 ９、該ヒアルロン酸の架橋結合していないカルボキシ基
   の少なくとも一個が、炭素原子数３４個までの単環式ま
   たは多環式炭水化物から導かれる環状脂肪族アルコール
   または脂肪族−環状脂肪族アルコールであって、アミノ
   、ヒドロキシ、メルカプト、アルデヒド、ケト、カルボ
   キシ、ヒドロカルビルアミノおよびジヒドロカルビルア
   ミノ基、エーテル、エステル、チオエーテル、チオエス
   テル、アセタール、ケタール、カルバルコキシ、カルバ
   ミド基および１またはそれ以上のアルキル基によって置
   換されている置換カルバミド基、これらの機能的に修飾
   された基のヒドロカルビル基の炭素原子数は最高６個で
   ある、によって置換されていることもあり、更に、炭素
   原子鎖が酸素、硫黄および窒素からなる群から選択され
   る異種原子によって中断されていることもあり、また、
   １またはそれ以上の芳香性結合を有していることもある
   アルコールによつてエステル化されている第１項−第５
   項のいずれかに記載の架橋エステル。 １０、該架橋結合していないカルボキシ基の少なくとも
   一個がコーチゾン、ヒドロコーチゾン、プレドニゾン、
   プレドニゾロン、フルオロコーチゾン、デキサメサゾン
   、ベータメサゾン、コルチコステロン、デオキシコルチ
   コステロン、パラメサゾン、フルメサゾン、フルシノロ
   ンおよびそのアセトニド、フルプレドニリデン、クロベ
   タゾールおよびベクロメサゾンからなる群から選択され
   るアルコールによってエステル化されている第９項記載
   の架橋エステル。 １１、該架橋エステルと、アルカリまたはアルカリ土類
   金属、マグネシウムまたはアルミニウムとの塩である第
   １項−第１０項のいずれかに記載の部分的エステルの塩
   。 １２、ナトリウムまたはアンモニウム塩である第１１項
   記載の架橋エステルの塩。 １３、アンモニウム、芳香性脂肪族、環状肪族または複
   素環基から導かれる、第１項−１０項のいずれかに記載
   の部分的エステル。 １４、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルと薬学的に許容し得る担体、賦形剤または希釈剤とを
   含有する医薬組成物。 １５、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルをビヒクルとし、薬学的に活性な物質と混合してなる
   医薬組成物。 １６、第８項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルを含有する医薬組成物であって、該架橋結合していな
   いカルボキシ基でエステル化されたアルコールが、薬学
   的に活性なアルコールである医薬組成物。 １７、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を活性成分とする化粧品。 １８、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を化粧品用ビヒクルとして含有する化粧
   品。 １９、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を含有する衛生、医療または外科用製品
   。 ２０、治療上不活性なアルコールから導かれる架橋エス
   テルのフィルムを含有する第１９項記載の衛生、医療ま
   たは外科用製品。 ２１、治療上不活性なアルコールから導かれる架橋エス
   テルの糸を含有する第１９項記載の衛生、医療または外
   科用製品。 ２２、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を含有する薬物用のカプセルまたはマイ
   クロカプセル。 ２３、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を人工の皮膚として皮膚科学において用
   いるためのフィルムの製造に使用する方法。 ２４、第１項−第１３項のいずれかに記載の架橋エステ
   ルまたはその塩を外科手術に用いるために、縫合糸の製
   造に使用する方法。 ２５、中性溶媒中でヒアルロン酸のカリウム、ナトリウ
   ムまたは４級アンモニウム塩とエーテル化剤とを反応さ
   せることからなる完全または部分的なヒアルロン酸の架
   橋エステルの製造方法。 ２６、ヒアルロン酸の該塩がナトリウムまたはカリウム
   塩であり、反応を触媒量の４級アンモニウム塩の存在下
   で行うことからなる第２５項記載の方法。 ２７、該４級アンモニウム塩がヨウ化テトラブチルアン
   モニウムである第２６項記載の方法。 ２８、該中性溶媒がジアルリルスルホキシド、ジアルキ
   ルカルボキシルアミド、低級脂肪酸の低級アルキルのジ
   アルキルアミドである第２５項−第２７項のいずれかに
   記載の方法。 ２９、該多価アルコールが脂肪族多価アルコールであり
   、該エーテル化剤が脂肪族多価アルコールのアルキルハ
   ロゲン化物である第２５項−第２８項のいずれかに記載
   の方法。 ３０、該脂肪族多価アルコールが二価アルコールである
   第２９項記載の方法。 ３１、該脂肪族多価アルコールがエチレングリコール、
   プロピレングリコール、ブチレングリコール、およびペ
   ンタン、ヘキサン、ヘプタンおよびオクタンから導かれ
   るグリコール類およびそれらの位置異性体、グリセリン
   、エリスライトおよびペンタエリスライトからなる群か
   ら選択されるものである第２９項記載の方法。 ３２、該ヒアルロン酸またはヒアルロン酸の該部分的架
   橋エステルの架橋結合していないカルボキシ基を脂肪族
   、芳香性脂肪族または環状脂肪族アルコールでエステル
   化する第２５項−第３１項のいずれかに記載の方法。 ３３、該架橋結合していないカルボキシ基でエステル化
   されたアルコールが薬理学的に活性なアルコールである
   第３２項記載の方法。 ３４、少なくとも一個の遊離のカルボキシ基を有する該
   部分的架橋エステルがアルカリ金属またはアルカリ土類
   金属、マグネシウムまたはアンモニウムで塩化されてい
   る第２５項−第３３項のいずれかに記載の方法。 ３５、該ヒアルロン酸が平均分子量５０，０００−７３
   ０，０００の画分であり、実質上、平均分子量３０，０
   ００以下のヒアルロン酸を含有しないものである第２５
   項−第３４項のいずれかに記載の方法。 ３６、ヒアルロン酸画分の平均分子量が５０，０００−
   １００，０００、２５０，０００−３５０，０００、ま
   たは５００，０００−７３０，０００である第３５項記
   載の方法。