JPH07285876A - 果実ポリフェノールとその製造方法、酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤 - Google Patents
果実ポリフェノールとその製造方法、酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤Info
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- JPH07285876A JPH07285876A JP6300578A JP30057894A JPH07285876A JP H07285876 A JPH07285876 A JP H07285876A JP 6300578 A JP6300578 A JP 6300578A JP 30057894 A JP30057894 A JP 30057894A JP H07285876 A JPH07285876 A JP H07285876A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 バラ科に属する果実の未熟果実より搾汁およ
び／または抽出され、かつその画分が精製されて成る果
実ポリフェノール。バラ科に属する果実の未熟果実より
搾汁および／または抽出され且つ精製されてなる、ポリ
フェノール画分を有効成分とする酸化防止剤、血圧降下
剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及
び消臭剤。 【効果】 各種の生理作用、特に抗酸化性、ACE阻害活
性、抗変異原性作用、ヒアルロニダーゼ阻害活性ならび
にヒスタミン遊離抑制活性、ＧＴａｓｅ活性阻害作用、
悪臭物質に対する消臭および悪臭物質産生抑制作用を有
する果実ポリフェノール画分を提供することができる。
び／または抽出され、かつその画分が精製されて成る果
実ポリフェノール。バラ科に属する果実の未熟果実より
搾汁および／または抽出され且つ精製されてなる、ポリ
フェノール画分を有効成分とする酸化防止剤、血圧降下
剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及
び消臭剤。 【効果】 各種の生理作用、特に抗酸化性、ACE阻害活
性、抗変異原性作用、ヒアルロニダーゼ阻害活性ならび
にヒスタミン遊離抑制活性、ＧＴａｓｅ活性阻害作用、
悪臭物質に対する消臭および悪臭物質産生抑制作用を有
する果実ポリフェノール画分を提供することができる。
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は果実ポリフェノールとそ
の製造方法、さらにはポリフェノール画分を有効成分と
する酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレ
ルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤に関する。
の製造方法、さらにはポリフェノール画分を有効成分と
する酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレ
ルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】バラ科食用果実、特にリンゴ、ナシ、モ
モなどの果樹栽培過程において、通常５月中旬〜７月中
旬にかけて「摘果（みすぐり）」と呼ばれる作業が行な
われる。作業内容は、受粉後房状に結実した果実がまだ
未熟の段階のうちに、一部の果実を残し他を摘果廃棄す
るというものであるが、この作業により多量の未熟果実
が未利用のまま廃棄処分されている。この未熟果実は成
熟果実と比較して極めて苦く、また果実切断面は容易に
褐変する。この事実は、未熟果実中にポリフェノール化
合物が大量に存在することを示唆するものである。
モなどの果樹栽培過程において、通常５月中旬〜７月中
旬にかけて「摘果（みすぐり）」と呼ばれる作業が行な
われる。作業内容は、受粉後房状に結実した果実がまだ
未熟の段階のうちに、一部の果実を残し他を摘果廃棄す
るというものであるが、この作業により多量の未熟果実
が未利用のまま廃棄処分されている。この未熟果実は成
熟果実と比較して極めて苦く、また果実切断面は容易に
褐変する。この事実は、未熟果実中にポリフェノール化
合物が大量に存在することを示唆するものである。
【０００３】ポリフェノール化合物は植物の二次代謝産
物として植物界に普遍的かつ多種・多量に存在すること
で知られているが、これらのあるものは非常に多様な生
理活性を示す点で古くより薬学の分野において、また近
年の食品化学の分野において注目を集めている。
物として植物界に普遍的かつ多種・多量に存在すること
で知られているが、これらのあるものは非常に多様な生
理活性を示す点で古くより薬学の分野において、また近
年の食品化学の分野において注目を集めている。
【０００４】そのなかで、特に最近研究の集中している
茶のポリフェノール（カテキン類）においては、抗菌、
抗ウイルス、抗酸化、抗突然変異、抗癌、血小板凝集抑
制、血圧上昇抑制、血糖上昇抑制、血中コレステロール
低下、抗う蝕、抗アレルギー、腸内フローラ改善、消臭
など非常に広範な生理作用を有することが認知されつつ
ある。（特開昭６３−２１４１８３号、特開平２−６４
９９号、特開平４−１７８３２０号等を参照）
茶のポリフェノール（カテキン類）においては、抗菌、
抗ウイルス、抗酸化、抗突然変異、抗癌、血小板凝集抑
制、血圧上昇抑制、血糖上昇抑制、血中コレステロール
低下、抗う蝕、抗アレルギー、腸内フローラ改善、消臭
など非常に広範な生理作用を有することが認知されつつ
ある。（特開昭６３−２１４１８３号、特開平２−６４
９９号、特開平４−１７８３２０号等を参照）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】このように、例えば茶
から抽出したポリフェノールが広範な生理作用を有する
ことが知られているが、本発明者は別の観点から検討を
進め、より効率良く、しかも経済的にポリフェノールを
製造するための原料の検索および製造方法、更には当該
ポリフェノールの生理作用等を検討、確認した。その結
果、バラ科果実、特にリンゴ、ナシ、モモ等の未熟果実
を原料とし、かつ特定の処理を施すことにより、各種の
生理作用を備えたポリフェノールを効率よく製造できる
ことを見出し、本発明に到達した。
から抽出したポリフェノールが広範な生理作用を有する
ことが知られているが、本発明者は別の観点から検討を
進め、より効率良く、しかも経済的にポリフェノールを
製造するための原料の検索および製造方法、更には当該
ポリフェノールの生理作用等を検討、確認した。その結
果、バラ科果実、特にリンゴ、ナシ、モモ等の未熟果実
を原料とし、かつ特定の処理を施すことにより、各種の
生理作用を備えたポリフェノールを効率よく製造できる
ことを見出し、本発明に到達した。
【０００６】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明によれ
ば、バラ科に属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未
熟果実より搾汁および／または抽出され、かつその画分
が精製されて成ることを特徴とする果実ポリフェノール
が提供される。
ば、バラ科に属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未
熟果実より搾汁および／または抽出され、かつその画分
が精製されて成ることを特徴とする果実ポリフェノール
が提供される。
【０００７】また本発明によれば、バラ科に属する果
実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実を搾汁および／
または抽出し、次いでこの搾汁果汁および／または抽出
液よりポリフェノール画分を精製することを特徴とする
果実ポリフェノールの製造方法、が提供される。
実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実を搾汁および／
または抽出し、次いでこの搾汁果汁および／または抽出
液よりポリフェノール画分を精製することを特徴とする
果実ポリフェノールの製造方法、が提供される。
【０００８】さらに本発明によれば、バラ科に属する果
実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁および
／または抽出され且つ精製されてなる、ポリフェノール
画分を有効成分とする酸化防止剤が提供される。
実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁および
／または抽出され且つ精製されてなる、ポリフェノール
画分を有効成分とする酸化防止剤が提供される。
【０００９】さらにまた本発明によれば、バラ科に属す
る果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁お
よび／または抽出され且つ精製されてなる、アンジオテ
ンシンＩ変換酵素阻害作用を有するポリフェノール画分
を有効成分とする血圧降下剤が提供される。さらにまた
本発明によれば、バラ科に属する果実、特にリンゴ、ナ
シ、モモの未熟果実より搾汁および／または抽出され且
つ精製されてなる、発ガン性物質の変異原性抑制作用を
有するポリフェノール画分を有効成分とする抗変異原性
作用剤が提供される。
る果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁お
よび／または抽出され且つ精製されてなる、アンジオテ
ンシンＩ変換酵素阻害作用を有するポリフェノール画分
を有効成分とする血圧降下剤が提供される。さらにまた
本発明によれば、バラ科に属する果実、特にリンゴ、ナ
シ、モモの未熟果実より搾汁および／または抽出され且
つ精製されてなる、発ガン性物質の変異原性抑制作用を
有するポリフェノール画分を有効成分とする抗変異原性
作用剤が提供される。
【００１０】さらにまた本発明によれば、バラ科に属す
る果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁お
よび／または抽出され且つ精製されてなる、ヒアルロニ
ダーゼ阻害作用ならびにヒスタミン遊離抑制作用を有す
るポリフェノール画分を有効成分とするアレルギー抑制
剤が提供される。さらにまた本発明によれば、バラ科に
属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾
汁および／または抽出され且つ精製されてなる、グルコ
シルトランスフェラーゼ阻害活性を有するポリフェノー
ル画分を有効成分とする抗う蝕剤が提供される。
る果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁お
よび／または抽出され且つ精製されてなる、ヒアルロニ
ダーゼ阻害作用ならびにヒスタミン遊離抑制作用を有す
るポリフェノール画分を有効成分とするアレルギー抑制
剤が提供される。さらにまた本発明によれば、バラ科に
属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾
汁および／または抽出され且つ精製されてなる、グルコ
シルトランスフェラーゼ阻害活性を有するポリフェノー
ル画分を有効成分とする抗う蝕剤が提供される。
【００１１】さらにまた、本発明によれば、バラ科に属
する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁
および／または抽出され且つ精製されてなる、メチルメ
ルカプタン、硫化ジメチル、二硫化ジメチル等の、悪臭
物質に対する消臭作用および悪臭物質産生抑制作用を有
するポリフェノール画分を有効成分とする消臭剤が提供
される。
する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実より搾汁
および／または抽出され且つ精製されてなる、メチルメ
ルカプタン、硫化ジメチル、二硫化ジメチル等の、悪臭
物質に対する消臭作用および悪臭物質産生抑制作用を有
するポリフェノール画分を有効成分とする消臭剤が提供
される。
【００１２】以下、本発明を詳しく説明する。本発明に
おける果実ポリフェノールは、上記のように、バラ科に
属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実の搾汁
果汁、抽出液より精製されたポリフェノール画分からな
るものであるが、このポリフェノール画分の精製は、搾
汁果汁、抽出液を吸着剤で処理することにより行なわ
れ、吸着剤に吸着する画分（以下、吸着画分という）に
ポリフェノールは含有されている。そして吸着画分を含
水アルコール（エタノール等）で溶出させることによ
り、ポリフェノール画分が精製される。
おける果実ポリフェノールは、上記のように、バラ科に
属する果実、特にリンゴ、ナシ、モモの未熟果実の搾汁
果汁、抽出液より精製されたポリフェノール画分からな
るものであるが、このポリフェノール画分の精製は、搾
汁果汁、抽出液を吸着剤で処理することにより行なわ
れ、吸着剤に吸着する画分（以下、吸着画分という）に
ポリフェノールは含有されている。そして吸着画分を含
水アルコール（エタノール等）で溶出させることによ
り、ポリフェノール画分が精製される。
【００１３】このポリフェノール画分は、次いで濃縮処
理することにより液体製剤を得ることができる。さら
に、ポリフェノール画分の濃縮液を噴霧乾燥もしくは凍
結乾燥処理することにより粉末製剤を得ることもでき
る。
理することにより液体製剤を得ることができる。さら
に、ポリフェノール画分の濃縮液を噴霧乾燥もしくは凍
結乾燥処理することにより粉末製剤を得ることもでき
る。
【００１４】本発明で用いる原料としては、バラ科に属
する果実であるが、具体的には例えば、リンゴ、ナシ、
モモ等が挙げられ、特にリンゴが好ましい。また、果実
としては成熟果実、未熟果実ともに用いることができる
が、より多くのポリフェノール化合物を含有すること、
および広範な生理作用を有する各種活性成分を多量に含
むことから、未熟果実が特に好ましい。
する果実であるが、具体的には例えば、リンゴ、ナシ、
モモ等が挙げられ、特にリンゴが好ましい。また、果実
としては成熟果実、未熟果実ともに用いることができる
が、より多くのポリフェノール化合物を含有すること、
および広範な生理作用を有する各種活性成分を多量に含
むことから、未熟果実が特に好ましい。
【００１５】搾汁方法としては原料を洗浄し、そのま
ま、または亜硫酸を添加しながら破砕、圧搾により搾汁
果汁を得、好ましくはペクチン分解酵素を添加する。次
いで遠心分離、濾過等の手段により清澄果汁を得る方法
を挙げることができる。また抽出方法としては、洗浄し
た原料をアルコール（エタノール、メタノール等）と混
合して破砕し、そのまま浸漬及び圧搾、または加熱還流
しながら抽出し、次いで減圧濃縮によりアルコールを留
去した後、遠心分離及び濾過、または有機溶媒（ヘキサ
ン、クロロホルム等）による分配及び濾過を行ない、清
澄抽出液を得る方法を挙げることができる。
ま、または亜硫酸を添加しながら破砕、圧搾により搾汁
果汁を得、好ましくはペクチン分解酵素を添加する。次
いで遠心分離、濾過等の手段により清澄果汁を得る方法
を挙げることができる。また抽出方法としては、洗浄し
た原料をアルコール（エタノール、メタノール等）と混
合して破砕し、そのまま浸漬及び圧搾、または加熱還流
しながら抽出し、次いで減圧濃縮によりアルコールを留
去した後、遠心分離及び濾過、または有機溶媒（ヘキサ
ン、クロロホルム等）による分配及び濾過を行ない、清
澄抽出液を得る方法を挙げることができる。
【００１６】精製方法としては、ポリフェノール類を選
択的に吸着且つ溶離できる吸着剤、例えばスチレン−ジ
ビニルベンゼン系の合成吸着樹脂、陰イオン交換樹脂、
オクタデシル基化学結合型シリカゲル（ＯＤＳ）等を充
填したカラムに、上記の清澄果汁又は清澄抽出液を通す
ことによりポリフェノール画分を吸着させる。次いで、
蒸留水を通すことにより洗浄した後、２０〜１００％ア
ルコール（例えばエタノール）溶液、好ましくは約５０
％アルコール溶液をカラムに通すことによりポリフェノ
ール画分が溶出、回収できる。得られたポリフェノール
溶液を減圧濃縮することによりアルコールを留去し、果
実ポリフェノール液体製剤（好ましくはリンゴ酸等の有
機酸を添加）を得ることができる。さらに、液体製剤を
そのままもしくはデキストリン等の粉末助剤を添加し、
噴霧乾燥又は凍結乾燥を行ない、果実ポリフェノール粉
末製剤を得ることができる。
択的に吸着且つ溶離できる吸着剤、例えばスチレン−ジ
ビニルベンゼン系の合成吸着樹脂、陰イオン交換樹脂、
オクタデシル基化学結合型シリカゲル（ＯＤＳ）等を充
填したカラムに、上記の清澄果汁又は清澄抽出液を通す
ことによりポリフェノール画分を吸着させる。次いで、
蒸留水を通すことにより洗浄した後、２０〜１００％ア
ルコール（例えばエタノール）溶液、好ましくは約５０
％アルコール溶液をカラムに通すことによりポリフェノ
ール画分が溶出、回収できる。得られたポリフェノール
溶液を減圧濃縮することによりアルコールを留去し、果
実ポリフェノール液体製剤（好ましくはリンゴ酸等の有
機酸を添加）を得ることができる。さらに、液体製剤を
そのままもしくはデキストリン等の粉末助剤を添加し、
噴霧乾燥又は凍結乾燥を行ない、果実ポリフェノール粉
末製剤を得ることができる。
【００１７】本発明で得られる果実ポリフェノールの組
成としては、単純ポリフェノール化合物としてカフェー
酸誘導体、ｐ−クマル酸誘導体、フラバン−３−オール
類（カテキン類）、フラボノール類（ケルセチン配糖体
類）、ジヒドロカルコン類（フロレチン配糖体類）な
ど、また高分子ポリフェノール化合物として縮合型タン
ニン類など、により大部分が占められることを本発明者
は確認している。
成としては、単純ポリフェノール化合物としてカフェー
酸誘導体、ｐ−クマル酸誘導体、フラバン−３−オール
類（カテキン類）、フラボノール類（ケルセチン配糖体
類）、ジヒドロカルコン類（フロレチン配糖体類）な
ど、また高分子ポリフェノール化合物として縮合型タン
ニン類など、により大部分が占められることを本発明者
は確認している。
【００１８】従って、本発明で得られる果実ポリフェノ
ールは種々の生理機能を有する可能性があると考えられ
るが、本発明者が鋭意検討した結果、第一に、このポリ
フェノールには、植物油脂であるリノール酸の酸化を防
止する作用を有する成分が多量に含まれていることを見
出した。即ち、本発明で得られる果実ポリフェノールは
酸化防止剤として極めて有効なものである。
ールは種々の生理機能を有する可能性があると考えられ
るが、本発明者が鋭意検討した結果、第一に、このポリ
フェノールには、植物油脂であるリノール酸の酸化を防
止する作用を有する成分が多量に含まれていることを見
出した。即ち、本発明で得られる果実ポリフェノールは
酸化防止剤として極めて有効なものである。
【００１９】また第二に、このポリフェノールには、血
圧上昇に関連する酵素であるアンジオテンシンＩ変換酵
素（以下、ＡＣＥという）の働きを阻害する作用を有す
る成分が多量に含まれていることを見出した。従って、
本発明で得られる果実ポリフェノールは血圧降下剤とし
ても極めて有効なものである。
圧上昇に関連する酵素であるアンジオテンシンＩ変換酵
素（以下、ＡＣＥという）の働きを阻害する作用を有す
る成分が多量に含まれていることを見出した。従って、
本発明で得られる果実ポリフェノールは血圧降下剤とし
ても極めて有効なものである。
【００２０】そして、さらに本発明者は検討を進めて、
果実ポリフェノール中のＡＣＥ阻害活性物質が何かを検
索したところ、図１２の構造式で示される縮合型タンニ
ンであることを確認した。また、近年の多くの研究結果
より発ガン性物質と変異原性物質に高い相関が認めら
れ、発ガン性と変異原性は深い関連があるとされてい
る。すなわち変異原性を抑制する物質は発ガン性を予防
することが期待できる。そこで、本発明で得られる果実
ポリフェノールが抗変異原性作用があるかどうかを確認
したところ、その作用効果があることが判明した。従っ
て、本発明で得られる果実ポリフェノールは抗変異原性
作用剤としても極めて有効なものである。
果実ポリフェノール中のＡＣＥ阻害活性物質が何かを検
索したところ、図１２の構造式で示される縮合型タンニ
ンであることを確認した。また、近年の多くの研究結果
より発ガン性物質と変異原性物質に高い相関が認めら
れ、発ガン性と変異原性は深い関連があるとされてい
る。すなわち変異原性を抑制する物質は発ガン性を予防
することが期待できる。そこで、本発明で得られる果実
ポリフェノールが抗変異原性作用があるかどうかを確認
したところ、その作用効果があることが判明した。従っ
て、本発明で得られる果実ポリフェノールは抗変異原性
作用剤としても極めて有効なものである。
【００２１】さらに、ヒスタミンは様々なアレルギー症
状を引き起こす生体内ケミカルメディエーターとして知
られており、主に肥満細胞や好塩基球から脱顆粒によっ
て遊離する。ヒアルロニダアーゼは結合組織再構築にお
ける細胞活動の一貫を形成していると考えられている酵
素であるが、近年の研究（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕ
ｌｌ．３３．ｐ６４２．１９８５、同．３３．１９８
５，同．３３．ｐ３７８７．１９８５，同．３３．ｐ５
０７９．１９８５，同．４０．１４３９．１９９２）に
よりヒアルロニダーゼ阻害活性と、肥満細胞からのヒス
タミン遊離抑制活性が合成抗アレルギー剤（クロモグリ
ク酸ナトリウムやトラニラスト）に於いて高い相関性を
示し、これらの活性を測定することで天然物から数種の
抗アレルギー物質が検索されている。そこで、本発明で
得られる果実ポリフェノールがヒアルロニダーゼ阻害活
性ならびにヒスタミン遊離抑制活性があるかどうかを確
認したところ、その作用効果があることが判明した。従
って、本発明で得られる果実ポリフェノールはアレルギ
ー抑制剤としても極めて有効なものである。
状を引き起こす生体内ケミカルメディエーターとして知
られており、主に肥満細胞や好塩基球から脱顆粒によっ
て遊離する。ヒアルロニダアーゼは結合組織再構築にお
ける細胞活動の一貫を形成していると考えられている酵
素であるが、近年の研究（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕ
ｌｌ．３３．ｐ６４２．１９８５、同．３３．１９８
５，同．３３．ｐ３７８７．１９８５，同．３３．ｐ５
０７９．１９８５，同．４０．１４３９．１９９２）に
よりヒアルロニダーゼ阻害活性と、肥満細胞からのヒス
タミン遊離抑制活性が合成抗アレルギー剤（クロモグリ
ク酸ナトリウムやトラニラスト）に於いて高い相関性を
示し、これらの活性を測定することで天然物から数種の
抗アレルギー物質が検索されている。そこで、本発明で
得られる果実ポリフェノールがヒアルロニダーゼ阻害活
性ならびにヒスタミン遊離抑制活性があるかどうかを確
認したところ、その作用効果があることが判明した。従
って、本発明で得られる果実ポリフェノールはアレルギ
ー抑制剤としても極めて有効なものである。
【００２２】さらにまた、今日では、う蝕（虫歯）はSt
reptococcus mutansを中心とする口腔連鎖球菌による細
菌感染症の一種であることが確認されているが、う蝕発
生過程の中でも歯垢形成は特に重要な要因と考えられて
いる。すなわち、食物中に含まれるショ糖から、う蝕菌
の産生酵素グルコシルトランスフェラーゼ（以下、ＧＴ
ａｓｅと略す）の作用により粘着性の不溶性グルカンが
合成され、これを介して細菌が歯牙表面に付着し、生じ
た歯垢がう蝕の原因となる。
reptococcus mutansを中心とする口腔連鎖球菌による細
菌感染症の一種であることが確認されているが、う蝕発
生過程の中でも歯垢形成は特に重要な要因と考えられて
いる。すなわち、食物中に含まれるショ糖から、う蝕菌
の産生酵素グルコシルトランスフェラーゼ（以下、ＧＴ
ａｓｅと略す）の作用により粘着性の不溶性グルカンが
合成され、これを介して細菌が歯牙表面に付着し、生じ
た歯垢がう蝕の原因となる。
【００２３】このことより、ＧＴａｓｅ活性を阻害する
物質は効果的な抗う蝕剤として適用できることが期待さ
れている（Appl.Env.Microbiol.,59(4),968-973,1993、
Biosci.Biotech.Biochem.,56(5),766-768,1992、Agric.
Biol.Chem.,54(11),2925-2929,1990、Chem.Pharm.Bul
l.,38(3),717-720,1990）。そこで本発明においては、
う蝕菌の代表種のひとつであるS.sobrinusが産生する、
不溶性グルカン生成ＧＴａｓｅに対する果実ポリフェノ
ールの阻害能について検討したところ、その作用効果が
あることが判明した。従って、本発明で得られる果実ポ
リフェノールは抗う蝕剤としても極めて有効なものであ
る。
物質は効果的な抗う蝕剤として適用できることが期待さ
れている（Appl.Env.Microbiol.,59(4),968-973,1993、
Biosci.Biotech.Biochem.,56(5),766-768,1992、Agric.
Biol.Chem.,54(11),2925-2929,1990、Chem.Pharm.Bul
l.,38(3),717-720,1990）。そこで本発明においては、
う蝕菌の代表種のひとつであるS.sobrinusが産生する、
不溶性グルカン生成ＧＴａｓｅに対する果実ポリフェノ
ールの阻害能について検討したところ、その作用効果が
あることが判明した。従って、本発明で得られる果実ポ
リフェノールは抗う蝕剤としても極めて有効なものであ
る。
【００２４】さらにまた、食品由来の悪臭成分の中で、
口臭の強さと含有量が比例するのは、硫化水素、メチル
メルカプタン、硫化ジメチル等揮発性硫黄化合物である
とされている（日歯周誌、17,233-245,1975）。なかで
も、メチルメルカプタン濃度との間に強い相関が認めら
れている（日歯周誌、18,1-12,1976及び歯学会報、76,1
923,1976）。そこで、本発明で得られる果実ポリフェノ
ールのメチルメルカプタン、硫化ジメチルに対する消臭
効果を測定したところ、その作用効果があることが判明
した。さらに、果実ポリフェノールのメチルメルカプタ
ン、硫化ジメチルおよび二硫化ジメチルに対する産生抑
制効果を測定したところ、その作用効果があることも判
明した。従って、本発明で得られる果実ポリフェノール
は消臭剤としても極めて有効なものである。
口臭の強さと含有量が比例するのは、硫化水素、メチル
メルカプタン、硫化ジメチル等揮発性硫黄化合物である
とされている（日歯周誌、17,233-245,1975）。なかで
も、メチルメルカプタン濃度との間に強い相関が認めら
れている（日歯周誌、18,1-12,1976及び歯学会報、76,1
923,1976）。そこで、本発明で得られる果実ポリフェノ
ールのメチルメルカプタン、硫化ジメチルに対する消臭
効果を測定したところ、その作用効果があることが判明
した。さらに、果実ポリフェノールのメチルメルカプタ
ン、硫化ジメチルおよび二硫化ジメチルに対する産生抑
制効果を測定したところ、その作用効果があることも判
明した。従って、本発明で得られる果実ポリフェノール
は消臭剤としても極めて有効なものである。
【００２５】
【実施例】次に、本発明を実施例に基づいて更に詳細に
説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもの
ではない。
説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるもの
ではない。
【００２６】（実施例１） ［リンゴ未熟果果汁の成分分析］以下の試料について一
般成分分析を行った。 −試料 リンゴ（ふじ）成熟果：市販品（無袋栽培品） リンゴ（ふじ）未熟果：６月中旬に採取 −試料処理法 果実試料に対し酸化防止剤として適量のメタ重亜硫酸カ
リウムを添加しながら、ミキサーで破砕・搾汁した。搾
汁液は遠心分離・濾過により清澄果汁として、以下の測
定に供した。
般成分分析を行った。 −試料 リンゴ（ふじ）成熟果：市販品（無袋栽培品） リンゴ（ふじ）未熟果：６月中旬に採取 −試料処理法 果実試料に対し酸化防止剤として適量のメタ重亜硫酸カ
リウムを添加しながら、ミキサーで破砕・搾汁した。搾
汁液は遠心分離・濾過により清澄果汁として、以下の測
定に供した。
【００２７】−測定項目（および方法） −一個体平均重量（ｎ＝５０） −搾汁率（％） −ｐＨ −酸度（リンゴ酸換算ｇ／ｌ） −Ｂｒｉｘ −総フェノール（クロロゲン酸換算、ｐｐｍ） −総アスコルビン酸 −有機酸組成 −糖組成 −金属イオン組成 −遊離アミノ酸組成 測定結果を表１に示した。
【００２８】
【表１】
【００２９】表１よりわかるように、リンゴ未熟果果汁
は成熟果果汁と比較すると成分的に大きな差異が見られ
た。特に強調すべき点として、フェノール成分、アスコ
ルビン酸、有機酸（特にキナ酸）、金属イオン、遊離ア
ミノ酸（特にアスパラギン、フェニルアラニン、γ−ア
ミノ酪酸）に富んでいるといえる。一方、糖類は非常に
少なかった。
は成熟果果汁と比較すると成分的に大きな差異が見られ
た。特に強調すべき点として、フェノール成分、アスコ
ルビン酸、有機酸（特にキナ酸）、金属イオン、遊離ア
ミノ酸（特にアスパラギン、フェニルアラニン、γ−ア
ミノ酪酸）に富んでいるといえる。一方、糖類は非常に
少なかった。
【００３０】次にリンゴ未熟果のポリフェノール成分組
成について、高速液体クロマトグラフ法により調べた。
測定試料は果実抽出液からポリフェノール成分を固相抽
出法により精製したもの（実施例２を参照）を使用し
た。測定結果を図１に示す。
成について、高速液体クロマトグラフ法により調べた。
測定試料は果実抽出液からポリフェノール成分を固相抽
出法により精製したもの（実施例２を参照）を使用し
た。測定結果を図１に示す。
【００３１】これより、リンゴ未熟果の単純ポリフェノ
ール化合物組成は、カフェー酸誘導体（クロロゲン酸
他）、ｐ−クマル酸誘導体、フラバン−３−オール類
（カテキン、エピカテキン、他）、フラボノール類（ケ
ルセチン配糖体類）、ジヒドロカルコン類（フロレチン
配糖体、特にフロリジン）で大半を占めることが判明し
た。量的にはクロロゲン酸、カテキン、エピカテキン、
フロリジンが高含量であると推定された。
ール化合物組成は、カフェー酸誘導体（クロロゲン酸
他）、ｐ−クマル酸誘導体、フラバン−３−オール類
（カテキン、エピカテキン、他）、フラボノール類（ケ
ルセチン配糖体類）、ジヒドロカルコン類（フロレチン
配糖体、特にフロリジン）で大半を占めることが判明し
た。量的にはクロロゲン酸、カテキン、エピカテキン、
フロリジンが高含量であると推定された。
【００３２】（実施例２） ［果実未熟果ポリフェノールの抗酸化作用］−原料 原
料素材としては以下の果実を使用した。 リンゴ成熟果：市販品（無袋栽培品） リンゴ未熟果：６月中旬に採取 「ふじ」 − 平均重量 ４．９７ ｇ（ｎ＝５０） 「津軽」 − 平均重量 ７．８０ ｇ（ｎ＝５０） 「ジョナゴールド」− 平均重量 ３．８６ ｇ（ｎ＝５０） 「北斗」 − 平均重量 ３．３２ ｇ（ｎ＝５０） 「王林」 − 平均重量 １０．３４ ｇ（ｎ＝５０）
料素材としては以下の果実を使用した。 リンゴ成熟果：市販品（無袋栽培品） リンゴ未熟果：６月中旬に採取 「ふじ」 − 平均重量 ４．９７ ｇ（ｎ＝５０） 「津軽」 − 平均重量 ７．８０ ｇ（ｎ＝５０） 「ジョナゴールド」− 平均重量 ３．８６ ｇ（ｎ＝５０） 「北斗」 − 平均重量 ３．３２ ｇ（ｎ＝５０） 「王林」 − 平均重量 １０．３４ ｇ（ｎ＝５０）
【００３３】ナシ未熟果：６月上旬に採取 「豊水」−平均重量 ８．９８ｇ（ｎ＝５０） モモ未熟果：６月上旬に採取。 「あかつき」−平均重量 ５．０３ｇ（ｎ＝５０）
【００３４】−試料調製 果汁試料−実施例１と同様の処理により清澄果汁を得
た。 抽出試料−抽出方法としては、原料４００ｇを１％塩酸
酸性メタノールと共にホモジナイズした後、加熱還流し
ながら抽出し（３回）、抽出液を減圧濃縮してメタノー
ルを留去後、クロロホルムを加えて分配し（２回）、水
層を回収し、濾過後蒸留水で２００ｍｌにメスアップし
て抽出試料とした。なお、必要に応じ、果汁試料、抽出
試料からポリフェノール成分をSep-pak C18 を用いた固
相抽出法により精製した。
た。 抽出試料−抽出方法としては、原料４００ｇを１％塩酸
酸性メタノールと共にホモジナイズした後、加熱還流し
ながら抽出し（３回）、抽出液を減圧濃縮してメタノー
ルを留去後、クロロホルムを加えて分配し（２回）、水
層を回収し、濾過後蒸留水で２００ｍｌにメスアップし
て抽出試料とした。なお、必要に応じ、果汁試料、抽出
試料からポリフェノール成分をSep-pak C18 を用いた固
相抽出法により精製した。
【００３５】−抗酸化試験法 抗酸化試験法は以下の通りとした。即ち、基質溶液（４
％リノール酸含有エタノール）５ｍｌにリン酸緩衝液(p
H7.0) ４ｍｌと試験液１ｍｌを密栓試験管中で混和した
後、５０℃の恒温槽中に遮光保存した。この際、コント
ロールとして基質の代わりにエタノールを添加したも
の、またブランクとして試料溶媒を試料の代わりに添加
したものを、同条件下で保存した。
％リノール酸含有エタノール）５ｍｌにリン酸緩衝液(p
H7.0) ４ｍｌと試験液１ｍｌを密栓試験管中で混和した
後、５０℃の恒温槽中に遮光保存した。この際、コント
ロールとして基質の代わりにエタノールを添加したも
の、またブランクとして試料溶媒を試料の代わりに添加
したものを、同条件下で保存した。
【００３６】保存期間中、反応液を経時的にサンプリン
グし、生成した過酸化物をイソチオシアネート法（ロダ
ン鉄法）により定量した。
グし、生成した過酸化物をイソチオシアネート法（ロダ
ン鉄法）により定量した。
【００３７】−測定結果 リンゴ（ふじ）の未熟果と成熟果の抽出物について抗酸
化性の有無を調べた。「ふじ」未熟果と成熟果の抽出液
を1-1000μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１
週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値）と
添加濃度のグラフを図２に示した。これより、「ふじ」
未熟果と成熟果のいずれの抽出物においてもリノール酸
に対する抗酸化作用が認められたが、特に未熟果抽出物
に強力な作用が認められた。
化性の有無を調べた。「ふじ」未熟果と成熟果の抽出液
を1-1000μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１
週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値）と
添加濃度のグラフを図２に示した。これより、「ふじ」
未熟果と成熟果のいずれの抽出物においてもリノール酸
に対する抗酸化作用が認められたが、特に未熟果抽出物
に強力な作用が認められた。
【００３８】続いて、この強力な活性成分がどのような
物質であるか探る目的で、未熟果と成熟果の抽出物をSe
p-pak C18 によりおおまかに２つに分画した（画分Ａ：
Sep-pak C18 非吸着画分。画分Ｂ：Sep-pak C18 吸着画
分（ポリフェノール画分））。抽出物ならびに各画分を
1 −1000μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１
週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値) と
添加濃度のグラフを図３に示した。
物質であるか探る目的で、未熟果と成熟果の抽出物をSe
p-pak C18 によりおおまかに２つに分画した（画分Ａ：
Sep-pak C18 非吸着画分。画分Ｂ：Sep-pak C18 吸着画
分（ポリフェノール画分））。抽出物ならびに各画分を
1 −1000μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１
週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値) と
添加濃度のグラフを図３に示した。
【００３９】この結果、成熟果抽出物の抗酸化性は画分
Ｂの成分に由来するものであることが判明した。未熟果
抽出物では画分Ａ，Ｂ共に抗酸化作用が見られたが画分
Ｂのほうが強力な作用を示した。以上の結果から、両抽
出物において観察される抗酸化性は主として画分Ｂの成
分、すなわちポリフェノール化合物の存在に起因するこ
とが強く示唆された。
Ｂの成分に由来するものであることが判明した。未熟果
抽出物では画分Ａ，Ｂ共に抗酸化作用が見られたが画分
Ｂのほうが強力な作用を示した。以上の結果から、両抽
出物において観察される抗酸化性は主として画分Ｂの成
分、すなわちポリフェノール化合物の存在に起因するこ
とが強く示唆された。
【００４０】さらにリンゴに含まれる単純ポリフェノー
ル化合物のうち、純品が入手できるものについて抗酸化
性の有無を検討した。各物質２μmol/gLA を反応系に添
加したときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸
光度500nm 値）の比較グラフを図４に示した。図４では
ポリフェノール化合物以外にも、比較物質として既知抗
酸化剤のBHA、BHT、ビタミンＥの３種類について、また先
の画分Ａ中の代表的な成分としてキナ酸、リンゴ酸、γ
−アミノ酪酸(GABA)についても検討した。
ル化合物のうち、純品が入手できるものについて抗酸化
性の有無を検討した。各物質２μmol/gLA を反応系に添
加したときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸
光度500nm 値）の比較グラフを図４に示した。図４では
ポリフェノール化合物以外にも、比較物質として既知抗
酸化剤のBHA、BHT、ビタミンＥの３種類について、また先
の画分Ａ中の代表的な成分としてキナ酸、リンゴ酸、γ
−アミノ酪酸(GABA)についても検討した。
【００４１】その結果、ポリフェノール化合物のうちカ
フェー酸、クロロゲン酸、(+)-カテキン、(-)-エピカテ
キン、ケルセチン、ルチン(quercetin-3-glu-rha) の６
種類は、BHA やBHT に匹敵する抗酸化力を有していた。
しかし同じポリフェノール化合物でもｐ−クマル酸やフ
ロレチン、フロリジンには全く抗酸化作用が見られなか
った。また画分Ａ中の諸成分にも抗酸化作用を有するも
のは見られなかった。なお、リンゴにおける各成分の含
有量と抗酸化力の比較より、リンゴ未熟果の抽出液及び
果汁液の発揮する強い抗酸化作用は、主としてクロロゲ
ン酸、(+)-カテキン、(-)-エピカテキンの存在によるも
のと推定できた。
フェー酸、クロロゲン酸、(+)-カテキン、(-)-エピカテ
キン、ケルセチン、ルチン(quercetin-3-glu-rha) の６
種類は、BHA やBHT に匹敵する抗酸化力を有していた。
しかし同じポリフェノール化合物でもｐ−クマル酸やフ
ロレチン、フロリジンには全く抗酸化作用が見られなか
った。また画分Ａ中の諸成分にも抗酸化作用を有するも
のは見られなかった。なお、リンゴにおける各成分の含
有量と抗酸化力の比較より、リンゴ未熟果の抽出液及び
果汁液の発揮する強い抗酸化作用は、主としてクロロゲ
ン酸、(+)-カテキン、(-)-エピカテキンの存在によるも
のと推定できた。
【００４２】これまでの結果より、リンゴ（ふじ）の未
熟果には強い抗酸化作用があること、およびその活性成
分を明らかにした。続いて「ふじ」以外のリンゴの未熟
果も同様の作用を有するかどうかについて検討した。各
種リンゴ未熟果（「ふじ」「津軽」「ジョナゴールド」
「北斗」「王林」）の抽出液の画分Ｂ（ポリフェノール
画分）について、各画分を1-500 μl/gLA の範囲で反応
系に添加したときの、１週間後における生成過酸化脂質
量 (吸光度500nm 値）と添加濃度のグラフを図５に示し
た。
熟果には強い抗酸化作用があること、およびその活性成
分を明らかにした。続いて「ふじ」以外のリンゴの未熟
果も同様の作用を有するかどうかについて検討した。各
種リンゴ未熟果（「ふじ」「津軽」「ジョナゴールド」
「北斗」「王林」）の抽出液の画分Ｂ（ポリフェノール
画分）について、各画分を1-500 μl/gLA の範囲で反応
系に添加したときの、１週間後における生成過酸化脂質
量 (吸光度500nm 値）と添加濃度のグラフを図５に示し
た。
【００４３】図５には対照として「ふじ」の成熟果の結
果も加えて示した。その結果、いずれのリンゴ品種にお
いても強い抗酸化性が認められ、品種の違いによる抗酸
化力の差はほとんど見られなかった。
果も加えて示した。その結果、いずれのリンゴ品種にお
いても強い抗酸化性が認められ、品種の違いによる抗酸
化力の差はほとんど見られなかった。
【００４４】さらに、リンゴ以外の果実未熟果の抗酸化
作用についても検討した。各種果実未熟果（リンゴ「ふ
じ」、ナシ「豊水」、モモ「あかつき」）の抽出液の画
分Ｂ（ポリフェノール画分）について、各画分を1-500
μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１週間後に
おける生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値）と添加濃度
のグラフを図６に示した。
作用についても検討した。各種果実未熟果（リンゴ「ふ
じ」、ナシ「豊水」、モモ「あかつき」）の抽出液の画
分Ｂ（ポリフェノール画分）について、各画分を1-500
μl/gLA の範囲で反応系に添加したときの、１週間後に
おける生成過酸化脂質量 (吸光度500nm 値）と添加濃度
のグラフを図６に示した。
【００４５】その結果、モモ未熟果はリンゴ未熟果とほ
ぼ同等の抗酸化力を有すること、またナシ未熟果はリン
ゴ程ではないがかなり強い抗酸化力を有することが判明
した。
ぼ同等の抗酸化力を有すること、またナシ未熟果はリン
ゴ程ではないがかなり強い抗酸化力を有することが判明
した。
【００４６】（実施例３）［果実未熟果ポリフェノール
のアンジオテンシンＩ変換酵素(ACE) 阻害作用］−原料
原料素材としては以下の果実を使用した。 リンゴ未熟果：実施例２と同様 −試料調製：実施例２と同様に「抽出試料」と「ポリフ
ェノール画分」を調製した。
のアンジオテンシンＩ変換酵素(ACE) 阻害作用］−原料
原料素材としては以下の果実を使用した。 リンゴ未熟果：実施例２と同様 −試料調製：実施例２と同様に「抽出試料」と「ポリフ
ェノール画分」を調製した。
【００４７】−ＡＣＥ阻害試験法 ＡＣＥ阻害試験は常法に従って行なった。すなわち市販
ＡＣＥ溶液に試料溶液を加え、プレインキュベーション
後、基質としてBz-Gly-His-Leuを添加し反応させた。反
応により生じたHis 断片をオルトフタルジアルデヒドで
蛍光ラベル化した後、蛍光強度（Ex.360nm、Em.490nm)
を測定した。
ＡＣＥ溶液に試料溶液を加え、プレインキュベーション
後、基質としてBz-Gly-His-Leuを添加し反応させた。反
応により生じたHis 断片をオルトフタルジアルデヒドで
蛍光ラベル化した後、蛍光強度（Ex.360nm、Em.490nm)
を測定した。
【００４８】この時、被験液の蛍光強度をＳ、試料の代
わりに水を加えたときの値をＣ、Ｓの酵素ブランク（酵
素の代わりに水を加えたもの）の値をＳB、Ｃの酵素ブラ
ンクの値をＣB とし、｛１−（Ｓ−ＳB)/(C-CB)}×100
(%)としてＡＣＥ阻害活性度を表わした。
わりに水を加えたときの値をＣ、Ｓの酵素ブランク（酵
素の代わりに水を加えたもの）の値をＳB、Ｃの酵素ブラ
ンクの値をＣB とし、｛１−（Ｓ−ＳB)/(C-CB)}×100
(%)としてＡＣＥ阻害活性度を表わした。
【００４９】−測定結果− リンゴ未熟果と成熟果（いずれも「ふじ」）の抽出物
を、Sep-pak C18 を用いて、非吸着画分（→画分Ａ）と
ポリフェノール画分（→画分Ｂ）に分画した。各画分の
ＡＣＥ阻害活性を調べた。結果を図７に示した。その結
果、未熟果・成熟果のいずれにおいても画分Ｂに強いＡ
ＣＥ阻害活性が見られた。特に未熟果の画分Ｂでは１０
０％阻害が観察されたが、両者の阻害活性の強さをさら
に詳しく比較するために、反応系へ添加する両者の画分
Ｂの添加量を変化させた場合のＡＣＥ阻害活性の変動を
調べた。結果を図８に示した。
を、Sep-pak C18 を用いて、非吸着画分（→画分Ａ）と
ポリフェノール画分（→画分Ｂ）に分画した。各画分の
ＡＣＥ阻害活性を調べた。結果を図７に示した。その結
果、未熟果・成熟果のいずれにおいても画分Ｂに強いＡ
ＣＥ阻害活性が見られた。特に未熟果の画分Ｂでは１０
０％阻害が観察されたが、両者の阻害活性の強さをさら
に詳しく比較するために、反応系へ添加する両者の画分
Ｂの添加量を変化させた場合のＡＣＥ阻害活性の変動を
調べた。結果を図８に示した。
【００５０】その結果、成熟果の画分ＢのＡＣＥに対す
る５０％阻害濃度(IC50)が約３ulであったのに対し、未
熟果の画分Ｂは０．１ul以下と非常に強い活性を示し
た。未熟果におけるこの強い阻害活性は「ふじ」以外の
栽培品種においても同様に観察された。以上の結果よ
り、リンゴ未熟果にはＡＣＥに対する強力な阻害物質が
存在し、その活性本体はポリフェノール化合物であるこ
とが強く示唆された。なお、ナシとモモ未熟果のＡＣＥ
阻害活性はリンゴに比べて弱いものであった。
る５０％阻害濃度(IC50)が約３ulであったのに対し、未
熟果の画分Ｂは０．１ul以下と非常に強い活性を示し
た。未熟果におけるこの強い阻害活性は「ふじ」以外の
栽培品種においても同様に観察された。以上の結果よ
り、リンゴ未熟果にはＡＣＥに対する強力な阻害物質が
存在し、その活性本体はポリフェノール化合物であるこ
とが強く示唆された。なお、ナシとモモ未熟果のＡＣＥ
阻害活性はリンゴに比べて弱いものであった。
【００５１】次に、リンゴ未熟果中より見出され、かつ
純品が入手可能な単純ポリフェノール化合物について、
ＡＣＥの阻害活性の有無を検討した。具体的には、物質
間の活性の強さを比較できるように、反応系へ添加する
各物質の添加濃度を変化させた場合のＡＣＥ阻害活性の
変動を調べた。結果を図９に示した。
純品が入手可能な単純ポリフェノール化合物について、
ＡＣＥの阻害活性の有無を検討した。具体的には、物質
間の活性の強さを比較できるように、反応系へ添加する
各物質の添加濃度を変化させた場合のＡＣＥ阻害活性の
変動を調べた。結果を図９に示した。
【００５２】図９では比較のため、既にＡＣＥ阻害活性
を有することが知られている茶のカテキン類についても
測定を行なった。その結果、(-)-エピガロカテキンガレ
ート(EGCg)と(-)-エピカテキンガレート(ECg) のIC50値
がそれぞれ0.3mM、2mM であり、強い阻害活性を示した。
また加工により茶葉中のGABA濃度を高めた「ギャバロン
茶」が高血圧自然発症ラットを用いた実験で血圧降下作
用を示したという報告があるが、本実験においてはGABA
にはＡＣＥ阻害活性は全く見られなかった。
を有することが知られている茶のカテキン類についても
測定を行なった。その結果、(-)-エピガロカテキンガレ
ート(EGCg)と(-)-エピカテキンガレート(ECg) のIC50値
がそれぞれ0.3mM、2mM であり、強い阻害活性を示した。
また加工により茶葉中のGABA濃度を高めた「ギャバロン
茶」が高血圧自然発症ラットを用いた実験で血圧降下作
用を示したという報告があるが、本実験においてはGABA
にはＡＣＥ阻害活性は全く見られなかった。
【００５３】肝心のリンゴフェノール類は、いずれも高
濃度では阻害活性を有していたものの、IC50値は低く、
最も活性の強かったケルセチンでも約5mM であり、EGCg
やECg よりも阻害活性ははるかに弱いものであった。
濃度では阻害活性を有していたものの、IC50値は低く、
最も活性の強かったケルセチンでも約5mM であり、EGCg
やECg よりも阻害活性ははるかに弱いものであった。
【００５４】ここでリンゴ未熟果画分Ｂ中のポリフェノ
ールが全てEGCgであると仮定し、EGCgの検量線により画
分Ｂ中の総フェノール量を算出したところ、約15000ppm
であり、画分Ｂのポリフェノール濃度はEGCg換算で33.8
2mM 相当であると計算された。この計算値を使用し、図
９上に画分Ｂの活性曲線をプロットしたところ、ＥＧＣ
ｇを上回る（ＩＣ５０＝０．２ ｍＭ） 強力な阻害活
性が認められた。実際上は画分Ｂ中にEGCgやECg は存在
しておらず、また上述のとおり他の単純ポリフェノール
類には顕著な阻害活性が見られない。図９において観察
される未熟画分Ｂの強力なＡＣＥ阻害活性は、混在する
他の未同定ポリフェノールの存在によるものであること
が強く示唆された。
ールが全てEGCgであると仮定し、EGCgの検量線により画
分Ｂ中の総フェノール量を算出したところ、約15000ppm
であり、画分Ｂのポリフェノール濃度はEGCg換算で33.8
2mM 相当であると計算された。この計算値を使用し、図
９上に画分Ｂの活性曲線をプロットしたところ、ＥＧＣ
ｇを上回る（ＩＣ５０＝０．２ ｍＭ） 強力な阻害活
性が認められた。実際上は画分Ｂ中にEGCgやECg は存在
しておらず、また上述のとおり他の単純ポリフェノール
類には顕著な阻害活性が見られない。図９において観察
される未熟画分Ｂの強力なＡＣＥ阻害活性は、混在する
他の未同定ポリフェノールの存在によるものであること
が強く示唆された。
【００５５】（実施例４） ［リンゴ未熟果ポリフェノール中のＡＣＥ阻害物質の同
定］ −試料 実施例３と同様に、リンゴ「ふじ」未熟果より
抽出試料を得て、さらに固相抽出法によりポリフェノー
ル画分を精製し、以下の試料とした。 −実験方法 試料溶液をSephadex LH-20カラムに負荷した。カラムを
蒸留水で洗浄後、２０％〜６０％メタノール（塩酸酸
性）、７０％アセトン（塩酸酸性）を順時用いて、ポリ
フェノールを溶出・分画した。得られた画分について、
HPLC組成分析、総フェノール測定、ＡＣＥ阻害試験を行
った。また必要に応じて、吸収スペクトル測定、ゲル浸
透クロマトグラフィーを行なった。
定］ −試料 実施例３と同様に、リンゴ「ふじ」未熟果より
抽出試料を得て、さらに固相抽出法によりポリフェノー
ル画分を精製し、以下の試料とした。 −実験方法 試料溶液をSephadex LH-20カラムに負荷した。カラムを
蒸留水で洗浄後、２０％〜６０％メタノール（塩酸酸
性）、７０％アセトン（塩酸酸性）を順時用いて、ポリ
フェノールを溶出・分画した。得られた画分について、
HPLC組成分析、総フェノール測定、ＡＣＥ阻害試験を行
った。また必要に応じて、吸収スペクトル測定、ゲル浸
透クロマトグラフィーを行なった。
【００５６】−実験結果 試料中のＡＣＥ阻害活性本体を他のポリフェノールから
単離するための具体的手段としてSephadex LH-20 colum
n による分画を試みた。実験により得られた溶出画分に
ついて、HPLCによる単純ポリフェノール分析とACE 阻害
試験を行なったところ、６０％メタノール溶出時点で全
ての単純ポリフェノール類が完全に溶出されたことを確
認した。
単離するための具体的手段としてSephadex LH-20 colum
n による分画を試みた。実験により得られた溶出画分に
ついて、HPLCによる単純ポリフェノール分析とACE 阻害
試験を行なったところ、６０％メタノール溶出時点で全
ての単純ポリフェノール類が完全に溶出されたことを確
認した。
【００５７】ＡＣＥ阻害活性は次の溶出溶媒である７０
％アセトン溶出画分に集中していた。単離した画分は、
溶媒を留去後、凍結乾燥し粉末化した。活性本体は水に
易溶（水溶液はオレンジ色）であり画分Ｂ100ml から約
０．７ｇ得られた。次に得られた粉末を水に溶解し、分
光光度計により吸収スペクトルを測定した。結果を図１
０に示した。
％アセトン溶出画分に集中していた。単離した画分は、
溶媒を留去後、凍結乾燥し粉末化した。活性本体は水に
易溶（水溶液はオレンジ色）であり画分Ｂ100ml から約
０．７ｇ得られた。次に得られた粉末を水に溶解し、分
光光度計により吸収スペクトルを測定した。結果を図１
０に示した。
【００５８】得られたスペクトルは２８０ nm に極大吸
収を示し、その形状は(+)-カテキンや(-)-エピカテキン
と酷似していた。また同水溶液を120 ℃、１０分間オー
トクレープ処理したところ、液は赤色を呈し、アントシ
アニジンが生成したものと思われた。これらの結果より
活性本体は、縮合型タンニンとして知られるプロシアニ
ジン類（カテキン類の規則的な重合体）であることが強
く示唆された。しかし先のSephadex LH-20における溶出
挙動ならびにシリカゲル HPTLCにおける溶出挙動などか
ら、本物質はプロシアニジンＢ2 のような二量体程度の
重合度ではなく、より高次のポリマー物質であることが
推定された。
収を示し、その形状は(+)-カテキンや(-)-エピカテキン
と酷似していた。また同水溶液を120 ℃、１０分間オー
トクレープ処理したところ、液は赤色を呈し、アントシ
アニジンが生成したものと思われた。これらの結果より
活性本体は、縮合型タンニンとして知られるプロシアニ
ジン類（カテキン類の規則的な重合体）であることが強
く示唆された。しかし先のSephadex LH-20における溶出
挙動ならびにシリカゲル HPTLCにおける溶出挙動などか
ら、本物質はプロシアニジンＢ2 のような二量体程度の
重合度ではなく、より高次のポリマー物質であることが
推定された。
【００５９】そこで本物質につき、GPC による分子量測
定を試みた。一般にポリフェノール化合物は疎水結合や
水素結合によるカラム充填剤との親和性が強いため、通
常タンパク質等で使用される水系でのGFC(Gel Filtrati
on Chromatography)による分子量測定は困難とされる。
そこで活性本体のフェノール性水酸基をピリジン／無水
酢酸によりアセチル化して有機溶媒に可溶とした後、有
機溶媒(THF) 中でのGPC 分析を試みた。結果を図１１に
示した。
定を試みた。一般にポリフェノール化合物は疎水結合や
水素結合によるカラム充填剤との親和性が強いため、通
常タンパク質等で使用される水系でのGFC(Gel Filtrati
on Chromatography)による分子量測定は困難とされる。
そこで活性本体のフェノール性水酸基をピリジン／無水
酢酸によりアセチル化して有機溶媒に可溶とした後、有
機溶媒(THF) 中でのGPC 分析を試みた。結果を図１１に
示した。
【００６０】その結果、クロマトグラム上にブロードな
単一ピークが現れ、同時に作成したポリスチレンによる
分子量較正曲線より、本物質の平均分子量は約2000であ
ると算出された。なお、ここでは示さないが他の実験
（トルエン−α−チオールによる部分分解、FAB-MS測定
など）結果も加味した上で、現時点において推定される
ＡＣＥ阻害活性物質の構造式を図１２に示した。これよ
り本物質は縮合型タンニンの一種であると判定された。
単一ピークが現れ、同時に作成したポリスチレンによる
分子量較正曲線より、本物質の平均分子量は約2000であ
ると算出された。なお、ここでは示さないが他の実験
（トルエン−α−チオールによる部分分解、FAB-MS測定
など）結果も加味した上で、現時点において推定される
ＡＣＥ阻害活性物質の構造式を図１２に示した。これよ
り本物質は縮合型タンニンの一種であると判定された。
【００６１】また、精製ポリフェノール画分をSephadex
LH-20で分画する際に、分画前（すなわち精製ポリフェ
ノール画分）と分画後（７０％アセトン溶出画分：すな
わち縮合型タンニン画分）について総フェノール量を測
定し、値を比較した。結果を表２に示した。
LH-20で分画する際に、分画前（すなわち精製ポリフェ
ノール画分）と分画後（７０％アセトン溶出画分：すな
わち縮合型タンニン画分）について総フェノール量を測
定し、値を比較した。結果を表２に示した。
【００６２】
【表２】
【００６３】これより、リンゴ未熟果中の全ポリフェノ
ールの約半分が、この縮合型タンニンであり量的に最も
多い成分であることが判明した。なお、本物質のＡＣＥ
に対するIC50を算出したところ、重量比較でEGCgのIC50
の約1/10以下と非常に低い値であり、すなわち本物質が
非常に強力なＡＣＥ阻害活性物質であることが確認でき
た。以上の結果より、リンゴ未熟果ポリフェノールが強
力なＡＣＥ阻害活性剤になりうると判断できた。
ールの約半分が、この縮合型タンニンであり量的に最も
多い成分であることが判明した。なお、本物質のＡＣＥ
に対するIC50を算出したところ、重量比較でEGCgのIC50
の約1/10以下と非常に低い値であり、すなわち本物質が
非常に強力なＡＣＥ阻害活性物質であることが確認でき
た。以上の結果より、リンゴ未熟果ポリフェノールが強
力なＡＣＥ阻害活性剤になりうると判断できた。
【００６４】（実施例５） ［未熟果実ポリフェノールの製造例］リンゴ未熟果実
（５〜１０ｇ／個）約５０ｋｇにSO2 を適量添加しなが
ら破砕機にて破砕し、オイルプレスで圧搾した。得られ
た果汁にペクチン分解酵素を約５０ｐｐｍ添加し、遠心
分離またはケイソウ土濾過を施し、さらに精密濾過を施
すことにより清澄果汁３５Ｌを得た。次いで、この清澄
果汁をスチレン−ジビニルベンゼン系の工業用合成吸着
樹脂（６Ｌ）を充填したカラムに通液した。さらに０．
１％ＨＣｌ含有水を６Ｌ通して糖類を除去した後、０．
１％ＨＣｌ含有５０％エタノールで溶出させ、主要なポ
リフェノール画分３Ｌを得た。
（５〜１０ｇ／個）約５０ｋｇにSO2 を適量添加しなが
ら破砕機にて破砕し、オイルプレスで圧搾した。得られ
た果汁にペクチン分解酵素を約５０ｐｐｍ添加し、遠心
分離またはケイソウ土濾過を施し、さらに精密濾過を施
すことにより清澄果汁３５Ｌを得た。次いで、この清澄
果汁をスチレン−ジビニルベンゼン系の工業用合成吸着
樹脂（６Ｌ）を充填したカラムに通液した。さらに０．
１％ＨＣｌ含有水を６Ｌ通して糖類を除去した後、０．
１％ＨＣｌ含有５０％エタノールで溶出させ、主要なポ
リフェノール画分３Ｌを得た。
【００６５】得られた画分をエバポレーターで減圧濃縮
して濃縮画分１．５Ｌとし、噴霧乾燥機にて乾燥させ、
リンゴ未熟果実ポリフェノール粉末製剤２２８．２ｇを
得た。回収率に関するデータを以下に記した。
して濃縮画分１．５Ｌとし、噴霧乾燥機にて乾燥させ、
リンゴ未熟果実ポリフェノール粉末製剤２２８．２ｇを
得た。回収率に関するデータを以下に記した。
【００６６】カラム回収率 ；９５．６％ 噴霧乾燥回収率；９３．０％ 果汁からの回収率 ；０．６５％ 果汁中ポリフェノールからの粉末回収率；８８．９％
【００６７】（実施例６） ［果実未熟果ポリフェノールの抗変異原性作用］本実施
例に於いて、抗変異原性の測定はエイムス法（Ｍｕｔａ
ｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ．３１，ｐ３４
７、１９７５年）の改変法で行った。 −原料ならびに試料調製 実施例２、３、４と同様。ただし実施例４で得られた
「縮合型タンニン」を以下「リンゴタンニン」と略す。
例に於いて、抗変異原性の測定はエイムス法（Ｍｕｔａ
ｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｖｏｌ．３１，ｐ３４
７、１９７５年）の改変法で行った。 −原料ならびに試料調製 実施例２、３、４と同様。ただし実施例４で得られた
「縮合型タンニン」を以下「リンゴタンニン」と略す。
【００６８】−抗変異原性測定法 変異原生物質（ベンゾ（ａ）ピレン、Ｔｒｐ−Ｐ−２）
溶液にリン酸緩衝液、試料溶液、Ｓ９−ｍｉｘ、サルモ
ネラ菌（Salmonella typhimurium ＴＡ９８またはＴＡ
１００）一晩培養液を混和し、３７℃で２日間培養後、
出現したコロニー数をカウントした。各ポリフェノール
は１〜３００（μｇ／plate ）の間で等比級数的濃度勾
配をとり、変異原性抑制活性率は、以下の式で算出し
た。
溶液にリン酸緩衝液、試料溶液、Ｓ９−ｍｉｘ、サルモ
ネラ菌（Salmonella typhimurium ＴＡ９８またはＴＡ
１００）一晩培養液を混和し、３７℃で２日間培養後、
出現したコロニー数をカウントした。各ポリフェノール
は１〜３００（μｇ／plate ）の間で等比級数的濃度勾
配をとり、変異原性抑制活性率は、以下の式で算出し
た。
【００６９】変異原性抑制活性率＝｛（Ｃ−Ｂ）−（Ｓ
−Ｂ）｝／（Ｃ−Ｂ）×１００（％）
−Ｂ）｝／（Ｃ−Ｂ）×１００（％）
【００７０】この時、被検液のコロニー数をＳ、試料の
代わりに水を加えたコントロールをＣ、試料と変異原の
代わりに水を加えたブランクをＢとした。
代わりに水を加えたコントロールをＣ、試料と変異原の
代わりに水を加えたブランクをＢとした。
【００７１】−結果 各種ポリフェノールとリンゴタンニンに関して、Ｔｒｐ
−Ｐ−２に対する変異原性抑制活性率を図１３に、ベン
ゾ（ａ）ピレンに対する変異原性抑制活性率を図１４に
示した。縦軸は変異原性抑制活性率で、自然復帰（ブラ
ンク）と同等にまで抑制したものを１００％とした。横
軸は、プレート１枚当たりのサンプル量を示した。
−Ｐ−２に対する変異原性抑制活性率を図１３に、ベン
ゾ（ａ）ピレンに対する変異原性抑制活性率を図１４に
示した。縦軸は変異原性抑制活性率で、自然復帰（ブラ
ンク）と同等にまで抑制したものを１００％とした。横
軸は、プレート１枚当たりのサンプル量を示した。
【００７２】その結果、リンゴタンニンは各変異原に対
し濃度依存的にその変異原性を抑制し、またエピガロカ
テキンガレートと同等かより低濃度領域で抑制効果を示
した。本実験の条件ではＴｒｐ−Ｐ−２、１μｇに対し
てリンゴタンニンは約１７μｇ（エピガロカテキンガレ
ートは約５１μｇ）、ベンゾ（ａ）ピレン５μｇに対し
ては約３７μｇ（同約５６μｇ）で、５０％の変異原性
抑制活性を示した。すなわちこのポリフェノールには、
変異原性物質（発ガン性物質）に作用させると、その変
異原性を強く抑制する成分が多量に含まれていた。従っ
て、本発明で得られる果実ポリフェノールは抗変異原性
作用剤としても極めて有効である。
し濃度依存的にその変異原性を抑制し、またエピガロカ
テキンガレートと同等かより低濃度領域で抑制効果を示
した。本実験の条件ではＴｒｐ−Ｐ−２、１μｇに対し
てリンゴタンニンは約１７μｇ（エピガロカテキンガレ
ートは約５１μｇ）、ベンゾ（ａ）ピレン５μｇに対し
ては約３７μｇ（同約５６μｇ）で、５０％の変異原性
抑制活性を示した。すなわちこのポリフェノールには、
変異原性物質（発ガン性物質）に作用させると、その変
異原性を強く抑制する成分が多量に含まれていた。従っ
て、本発明で得られる果実ポリフェノールは抗変異原性
作用剤としても極めて有効である。
【００７３】（実施例７） ［果実未熟果ポリフェノールのヒアルロニダーゼ阻害作
用ならびにヒスタミン遊離抑制作用］本実施例に於い
て、アレルギー抑制作用は、ヒアルロニダーゼ阻害活性
度ならびに動物細胞を用いたヒスタミン遊離抑制作用を
指標とすることで測定した。 −原料 ；リンゴ未熟果、ナシ未熟果、モモ未熟果、リ
ンゴ成熟果 −試料調製 実施例２と同様に各果実抽出物を調製し、さらに「ポリ
フェノール画分」をセファデックス(Sephadex) LH-20で
精製したものをリンゴタンニンとした。
用ならびにヒスタミン遊離抑制作用］本実施例に於い
て、アレルギー抑制作用は、ヒアルロニダーゼ阻害活性
度ならびに動物細胞を用いたヒスタミン遊離抑制作用を
指標とすることで測定した。 −原料 ；リンゴ未熟果、ナシ未熟果、モモ未熟果、リ
ンゴ成熟果 −試料調製 実施例２と同様に各果実抽出物を調製し、さらに「ポリ
フェノール画分」をセファデックス(Sephadex) LH-20で
精製したものをリンゴタンニンとした。
【００７４】−ヒアルロニダーゼ阻害活性測定法 ヒアルロニダーゼ阻害活性測定法は基本的にＪ．Ｂｉｏ
ｌ．，vol.２５０，ｐ７９，１９７５年の改変法で行っ
た。すなわち市販ヒアルロニダーゼ溶液に試料溶液を加
え、プレインキュベーション後、ヒスタミン遊離剤のコ
ンパウンド４８／８０溶液を加え、３７℃でヒアルロニ
ダーゼの活性化を行い、基質としてヒアルロン酸溶液を
添加し反応させた。反応で生じたＮ−アセチルグルコサ
ミンをモルガン・エルソン法により発色させ、吸光度
（５８６ｎｍ）で測定し、以下の式でヒアルロニダーゼ
阻害活性率を算出した。
ｌ．，vol.２５０，ｐ７９，１９７５年の改変法で行っ
た。すなわち市販ヒアルロニダーゼ溶液に試料溶液を加
え、プレインキュベーション後、ヒスタミン遊離剤のコ
ンパウンド４８／８０溶液を加え、３７℃でヒアルロニ
ダーゼの活性化を行い、基質としてヒアルロン酸溶液を
添加し反応させた。反応で生じたＮ−アセチルグルコサ
ミンをモルガン・エルソン法により発色させ、吸光度
（５８６ｎｍ）で測定し、以下の式でヒアルロニダーゼ
阻害活性率を算出した。
【００７５】ヒアルロニダーゼ阻害活性率＝｛（Ｃ−Ｃ
B）−（Ｓ−ＳB）｝／（Ｃ−ＣB）×１００（％）
B）−（Ｓ−ＳB）｝／（Ｃ−ＣB）×１００（％）
【００７６】この時、被検液の吸光度をＳ、試料の代わ
りに緩衝液を加えたものをＣ、Ｓの酵素ブランクを
ＳB、Ｃの酵素ブランクをＣBとした。
りに緩衝液を加えたものをＣ、Ｓの酵素ブランクを
ＳB、Ｃの酵素ブランクをＣBとした。
【００７７】−ヒスタミン遊離抑制活性測定法 ヒスタミン遊離抑制活性測定法はJ.Food Hyg. Soc.Japa
n,vol.35,p497,1994年の方法で行った。即ち、ラット好
塩基球白血病細胞ＲＢＬ−２Ｈ３を１０％ＦＢＳ，α−
ＭＥＭ培地で培養（３７℃、５％ＣＯ2）し、抗体ＤＮ
Ｐ−ｌｇＥを９０分間作用させ、ＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆ
ｅｒで洗浄した後、抗原ＤＮＰ−ＢＳＡを３５分間作用
させる。リンゴの成分は抗体あるいは抗原作用時に添加
する。反応停止のため氷冷ＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆｅｒを
加え、細胞外液をとり、過塩素酸を添加、冷却後遠心分
離した後、０．４５μ濾過したものをＨＰＬＣで分析
し、細胞から遊離されたヒスタミン量を測定した。ヒス
タミン遊離抑制活性は以下の式で算出した。
n,vol.35,p497,1994年の方法で行った。即ち、ラット好
塩基球白血病細胞ＲＢＬ−２Ｈ３を１０％ＦＢＳ，α−
ＭＥＭ培地で培養（３７℃、５％ＣＯ2）し、抗体ＤＮ
Ｐ−ｌｇＥを９０分間作用させ、ＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆ
ｅｒで洗浄した後、抗原ＤＮＰ−ＢＳＡを３５分間作用
させる。リンゴの成分は抗体あるいは抗原作用時に添加
する。反応停止のため氷冷ＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆｅｒを
加え、細胞外液をとり、過塩素酸を添加、冷却後遠心分
離した後、０．４５μ濾過したものをＨＰＬＣで分析
し、細胞から遊離されたヒスタミン量を測定した。ヒス
タミン遊離抑制活性は以下の式で算出した。
【００７８】ヒスタミン遊離抑制活性率＝｛（Ｃ−Ｂ）
−（Ｓ−Ｂ）｝／（Ｃ−Ｂ）×１００（％）
−（Ｓ−Ｂ）｝／（Ｃ−Ｂ）×１００（％）
【００７９】この時、被検液のヒスタミン量をＳ、試料
の代わりにＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆｅｒを加えたものを
Ｃ、抗体あるいは抗原を加えないブランクをＢとした。
の代わりにＨＥＰＥＳ ｂｕｆｆｅｒを加えたものを
Ｃ、抗体あるいは抗原を加えないブランクをＢとした。
【００８０】−結果 各果実エキスおよびクロモグリク酸ナトリウムとリンゴ
タンニンに関してヒアルロニダーゼ阻害活性率を図１５
および図１６に示した。その結果、各果実エキスおよび
リンゴタンニンは濃度依存的にヒアルロニダーゼを阻害
しその活性が認められた。対照とした合成抗アレルギー
剤のクロモグリク酸ナトリウムと比較したところ、５０
％活性を阻害する濃度であるＩＣ５０値に関してはクロ
モグリク酸ナトリウムが約０．０５１ｍｇ／ｍｌである
のに対し、リンゴタンニンは約０．０８６ｍｇ／ｍｌと
近い値であった。
タンニンに関してヒアルロニダーゼ阻害活性率を図１５
および図１６に示した。その結果、各果実エキスおよび
リンゴタンニンは濃度依存的にヒアルロニダーゼを阻害
しその活性が認められた。対照とした合成抗アレルギー
剤のクロモグリク酸ナトリウムと比較したところ、５０
％活性を阻害する濃度であるＩＣ５０値に関してはクロ
モグリク酸ナトリウムが約０．０５１ｍｇ／ｍｌである
のに対し、リンゴタンニンは約０．０８６ｍｇ／ｍｌと
近い値であった。
【００８１】又、各果実エキスおよびリンゴタンニンに
関する抗原ＤＮＰ−ＢＳＡ作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ
作用時のヒスタミン遊離抑制活性率を図１７および図１
８に示した。これらの結果から明らかなように、ポリフ
ェノール画分に含まれるリンゴタンニンは濃度依存的に
ヒスタミン遊離抑制活性が認められた。以上のことか
ら、このポリフェノールには、Ｉ型アレルギーに関する
酵素であるヒアルロニダーゼの働きを阻害する作用を有
する成分、ならびにヒスタミン遊離抑制作用を有する成
分が多量に含まれていた。従って、本発明で得られる果
実ポリフェノールはアレルギー抑制剤としても極めて有
効である。
関する抗原ＤＮＰ−ＢＳＡ作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ
作用時のヒスタミン遊離抑制活性率を図１７および図１
８に示した。これらの結果から明らかなように、ポリフ
ェノール画分に含まれるリンゴタンニンは濃度依存的に
ヒスタミン遊離抑制活性が認められた。以上のことか
ら、このポリフェノールには、Ｉ型アレルギーに関する
酵素であるヒアルロニダーゼの働きを阻害する作用を有
する成分、ならびにヒスタミン遊離抑制作用を有する成
分が多量に含まれていた。従って、本発明で得られる果
実ポリフェノールはアレルギー抑制剤としても極めて有
効である。
【００８２】（実施例８） ［果実未熟果ポリフェノールのグルコシルトランスフェ
ラーゼ阻害作用］本実施例においては、う蝕菌の代表種
のひとつであるS.sobrinusが産生する、不溶性グルカン
生成ＧＴａｓｅに対する果実ポリフェノールの阻害能に
ついて検討した。 −原料および試料調製 実施例６、７と同様 −使用菌体；Streptococcus sobrinus ＡＴＣＣ ３３４
７８
ラーゼ阻害作用］本実施例においては、う蝕菌の代表種
のひとつであるS.sobrinusが産生する、不溶性グルカン
生成ＧＴａｓｅに対する果実ポリフェノールの阻害能に
ついて検討した。 −原料および試料調製 実施例６、７と同様 −使用菌体；Streptococcus sobrinus ＡＴＣＣ ３３４
７８
【００８３】−ＧＴａｓｅの調製；S.sobrinusのＧＴａ
ｓｅは以下の方法にて調製した。 S.sobrinusをＴＴＹ培地（Agric.Biol.Chem.,54(11),29
25-2929,1990）で３７℃、１８時間培養後、遠心分離に
より菌体を除き上清を得た。この上清に５０％飽和まで
硫酸アンモニウムを添加した後、遠心分離により生じた
沈澱を回収した。沈澱は０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
６．５）で再溶解した後、同緩衝液で透析した。透析液
中のＧＴａｓｅはヒドロキシルアパタイトクロマトグラ
フ法により精製、回収した。このとき約０．４Ｍのリン
酸緩衝液濃度で不溶性グルカン生成ＧＴａｓｅは溶出し
た。溶出画分を回収し、以下の実験に供した。
ｓｅは以下の方法にて調製した。 S.sobrinusをＴＴＹ培地（Agric.Biol.Chem.,54(11),29
25-2929,1990）で３７℃、１８時間培養後、遠心分離に
より菌体を除き上清を得た。この上清に５０％飽和まで
硫酸アンモニウムを添加した後、遠心分離により生じた
沈澱を回収した。沈澱は０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ
６．５）で再溶解した後、同緩衝液で透析した。透析液
中のＧＴａｓｅはヒドロキシルアパタイトクロマトグラ
フ法により精製、回収した。このとき約０．４Ｍのリン
酸緩衝液濃度で不溶性グルカン生成ＧＴａｓｅは溶出し
た。溶出画分を回収し、以下の実験に供した。
【００８４】−ＧＴａｓｅ阻害活性測定法 １ｍｌの基質溶液（２％ショ糖、０．１％アジ化ナトリ
ウム、４０μＭデキストランＴ１０含有０．１Ｍリン酸
緩衝液（ｐＨ６．５））に精製ＧＴａｓｅ溶液と試料溶
液を添加し、水で全量２ｍｌに希釈した後、３７℃で１
８時間反応させた。反応により生じた不溶性グルカン量
を５５０ｎｍの吸光度で示される濁度として測定し、下
記の式より生成率を算出した。 不溶性グルカン生成率＝（ＳＳ−ＳＢ）／（ＣＳ−Ｃ
Ｂ）×１００（％） ＳＳ：サンプル ＳＢ：サンプルの酵素ブランク ＣＳ：コントロール ＣＢ：コントロールの酵素ブランク
ウム、４０μＭデキストランＴ１０含有０．１Ｍリン酸
緩衝液（ｐＨ６．５））に精製ＧＴａｓｅ溶液と試料溶
液を添加し、水で全量２ｍｌに希釈した後、３７℃で１
８時間反応させた。反応により生じた不溶性グルカン量
を５５０ｎｍの吸光度で示される濁度として測定し、下
記の式より生成率を算出した。 不溶性グルカン生成率＝（ＳＳ−ＳＢ）／（ＣＳ−Ｃ
Ｂ）×１００（％） ＳＳ：サンプル ＳＢ：サンプルの酵素ブランク ＣＳ：コントロール ＣＢ：コントロールの酵素ブランク
【００８５】−結果 各果実抽出物のポリフェノール画分、ならびに各ポリフ
ェノール成分のＧＴａｓｅ阻害活性を図１９、２０に示
した。縦軸は不溶性グルカンの生成率で、試料無添加の
コントロールにおける生成量を１００％として算出し
た。横軸は反応系への試料もしくはポリフェノールの添
加量を容量もしくは濃度で示した。図１９に示したとお
り、各種果実抽出物のポリフェノール画分のうち、特に
「ふじ」未熟果と「新高」未熟果のポリフェノール画分
に顕著なＧＴａｓｅ阻害活性が見られた。この時、「ふ
じ」成熟果のＧＴａｓｅに対する５０％阻害量が約５０
μｌであるのに対して「ふじ」未熟果のそれは約０．７
μｌであることから、リンゴの未熟果は成熟果よりも約
７０倍強力なＧＴａｓｅ阻害活性を有していることが判
明した。
ェノール成分のＧＴａｓｅ阻害活性を図１９、２０に示
した。縦軸は不溶性グルカンの生成率で、試料無添加の
コントロールにおける生成量を１００％として算出し
た。横軸は反応系への試料もしくはポリフェノールの添
加量を容量もしくは濃度で示した。図１９に示したとお
り、各種果実抽出物のポリフェノール画分のうち、特に
「ふじ」未熟果と「新高」未熟果のポリフェノール画分
に顕著なＧＴａｓｅ阻害活性が見られた。この時、「ふ
じ」成熟果のＧＴａｓｅに対する５０％阻害量が約５０
μｌであるのに対して「ふじ」未熟果のそれは約０．７
μｌであることから、リンゴの未熟果は成熟果よりも約
７０倍強力なＧＴａｓｅ阻害活性を有していることが判
明した。
【００８６】次にリンゴに含まれる成分を中心に各種ポ
リフェノール成分のＧＴａｓｅ阻害活性について検討し
た。図２０に示したとおり、リンゴ中の成分のうち、ク
ロロゲン酸とフロリジンのＧＴａｓｅ阻害活性はごく弱
いものであった。一方、各種カテキン類のうち、エピカ
テキンモノマーの阻害活性は微弱であったのに対し、図
１２の推定化学構造式で示される高分子エピカテキン重
合体（図２０ではリンゴタンニンと表記）は強力なＧＴ
ａｓｅ阻害活性を有していることが判明した。図２０で
は対照として、既にＧＴａｓｅ阻害物質であることが知
られている緑茶の代表的カテキン類であるエピカテキン
ガレート（Agric.Biol.Chem.,5(11),2925-2929,1990,Ch
em.Pharm.Bull.,38(39,717-720,1990)の結果も同時に示
したが、エピカテキンガレートのＧＴａｓｅに対する５
０％阻害濃度が約２００ｐｐｍであるのに対して、リン
ゴタンニンのそれは約２ｐｐｍと約１００倍程度強力で
あると算出された。これらの結果よりまた、図１９で見
られた「ふじ」未熟果の強力なＧＴａｓｅ阻害活性は本
物質の存在によるものと推定された。以上の結果より、
本発明で得られる果実ポリフェノールは強力なＧＴａｓ
ｅ阻害活性成分を有することから、抗う蝕剤としても極
めて有効であると考えられる。
リフェノール成分のＧＴａｓｅ阻害活性について検討し
た。図２０に示したとおり、リンゴ中の成分のうち、ク
ロロゲン酸とフロリジンのＧＴａｓｅ阻害活性はごく弱
いものであった。一方、各種カテキン類のうち、エピカ
テキンモノマーの阻害活性は微弱であったのに対し、図
１２の推定化学構造式で示される高分子エピカテキン重
合体（図２０ではリンゴタンニンと表記）は強力なＧＴ
ａｓｅ阻害活性を有していることが判明した。図２０で
は対照として、既にＧＴａｓｅ阻害物質であることが知
られている緑茶の代表的カテキン類であるエピカテキン
ガレート（Agric.Biol.Chem.,5(11),2925-2929,1990,Ch
em.Pharm.Bull.,38(39,717-720,1990)の結果も同時に示
したが、エピカテキンガレートのＧＴａｓｅに対する５
０％阻害濃度が約２００ｐｐｍであるのに対して、リン
ゴタンニンのそれは約２ｐｐｍと約１００倍程度強力で
あると算出された。これらの結果よりまた、図１９で見
られた「ふじ」未熟果の強力なＧＴａｓｅ阻害活性は本
物質の存在によるものと推定された。以上の結果より、
本発明で得られる果実ポリフェノールは強力なＧＴａｓ
ｅ阻害活性成分を有することから、抗う蝕剤としても極
めて有効であると考えられる。
【００８７】（実施例９） ［果実未熟果ポリフェノールの消臭効果］本実施例にお
ける消臭効果試験は、宇井らの方法（日食工誌、38,109
8-1102,1991）の改変法で行った。 −試料 実施例２に記載のリンゴ未熟果実果汁より精製したポリ
フェノール画分の噴霧乾燥品（リンゴポリフェノール粉
末製剤）を使用した。さらに比較対照として、既知消臭
物質である市販緑茶ポリフェノール製剤と銅クロロフィ
リンナトリウムを使用した。
ける消臭効果試験は、宇井らの方法（日食工誌、38,109
8-1102,1991）の改変法で行った。 −試料 実施例２に記載のリンゴ未熟果実果汁より精製したポリ
フェノール画分の噴霧乾燥品（リンゴポリフェノール粉
末製剤）を使用した。さらに比較対照として、既知消臭
物質である市販緑茶ポリフェノール製剤と銅クロロフィ
リンナトリウムを使用した。
【００８８】−消臭効果試験法 予め氷冷下で１ｐｐｍメチルメルカプタン溶液および１
ｐｐｍ硫化ジメチル溶液を調製した。内容量３０ｍｌの
バイアル瓶中に各濃度の試料を含む０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．５）１ｍｌを入れ（比較対照は試料無添
加）、これに１ｐｐｍメチルメルカプタン溶液１ｍｌ、
または１ｐｐｍ硫化ジメチル溶液１ｍｌを加え、直ちに
栓をして撹拌した。これを３７℃で５分間インキュベー
トした後、ヘッドスペースガス５ｍｌをＧＣに注入し、
メチルメルカプタンもしくは硫化ジメチルのピーク高を
測定した。
ｐｐｍ硫化ジメチル溶液を調製した。内容量３０ｍｌの
バイアル瓶中に各濃度の試料を含む０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ７．５）１ｍｌを入れ（比較対照は試料無添
加）、これに１ｐｐｍメチルメルカプタン溶液１ｍｌ、
または１ｐｐｍ硫化ジメチル溶液１ｍｌを加え、直ちに
栓をして撹拌した。これを３７℃で５分間インキュベー
トした後、ヘッドスペースガス５ｍｌをＧＣに注入し、
メチルメルカプタンもしくは硫化ジメチルのピーク高を
測定した。
【００８９】−測定結果 各試料について悪臭成分に対する消臭効果の有無を調べ
た。試料を０．０５−０．５％もしくは０．０５−５％
の範囲で反応系に添加したときのヘッドスペースガス中
のメチルメルカプタンもしくは硫化ジメチル濃度と試料
添加濃度との関係を図２１、図２２に示した。この結果
から明らかなように、リンゴポリフェノール粉末製剤は
濃度依存的にメチルメルカプタン、硫化ジメチルに対す
る消臭効果を有することが認められた。
た。試料を０．０５−０．５％もしくは０．０５−５％
の範囲で反応系に添加したときのヘッドスペースガス中
のメチルメルカプタンもしくは硫化ジメチル濃度と試料
添加濃度との関係を図２１、図２２に示した。この結果
から明らかなように、リンゴポリフェノール粉末製剤は
濃度依存的にメチルメルカプタン、硫化ジメチルに対す
る消臭効果を有することが認められた。
【００９０】（実施例１０） ［果実未熟果ポリフェノールの悪臭物質産生抑制効果］
本実施例における悪臭物質産生抑制効果試験は、宇井ら
の方法（日食工誌、38,1098-1102,1991）の改変法で行
った。 −試料 実施例９と同様にリンゴポリフェノール粉末製剤、市販
緑茶ポリフェノール製剤および銅クロロフィリンナトリ
ウムを使用した。
本実施例における悪臭物質産生抑制効果試験は、宇井ら
の方法（日食工誌、38,1098-1102,1991）の改変法で行
った。 −試料 実施例９と同様にリンゴポリフェノール粉末製剤、市販
緑茶ポリフェノール製剤および銅クロロフィリンナトリ
ウムを使用した。
【００９１】−悪臭物質産生抑制効果試験法 予め唾液採集２時間前からの飲食を禁じた者から自然流
出唾液を採取した。内容量３０ｍｌのバイアル瓶中に各
濃度の試料および４０ｍＭのＬ−メチオニンを含む０．
１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）１ｍｌを入れ（比較対
照は試料無添加）、これに予め採取した唾液１ｍｌを加
え、直ちに栓をして撹拌した。これを３７℃で２４時間
インキュベートした後、ヘッドスペースガス５ｍｌをＧ
Ｃに注入し、反応により産生したメチルメルカプタン、
硫化ジメチルおよび二硫化ジメチルのピーク高を測定し
た。
出唾液を採取した。内容量３０ｍｌのバイアル瓶中に各
濃度の試料および４０ｍＭのＬ−メチオニンを含む０．
１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）１ｍｌを入れ（比較対
照は試料無添加）、これに予め採取した唾液１ｍｌを加
え、直ちに栓をして撹拌した。これを３７℃で２４時間
インキュベートした後、ヘッドスペースガス５ｍｌをＧ
Ｃに注入し、反応により産生したメチルメルカプタン、
硫化ジメチルおよび二硫化ジメチルのピーク高を測定し
た。
【００９２】−測定結果 各試料について悪臭物質産生抑制効果の有無を調べた。
試料を０．００１５−０．５％の範囲で反応系に添加し
たときのヘッドスペースガス中のメチルメルカプタン、
硫化ジメチルおよび二硫化ジメチル濃度と試料添加濃度
との関係を図２３〜図２５に示した。この結果から明ら
かなように、リンゴポリフェノール粉末製剤は濃度依存
的にメチルメルカプタン、硫化ジメチル、二硫化ジメチ
ルに対する産生抑制効果を有することが認められた。
試料を０．００１５−０．５％の範囲で反応系に添加し
たときのヘッドスペースガス中のメチルメルカプタン、
硫化ジメチルおよび二硫化ジメチル濃度と試料添加濃度
との関係を図２３〜図２５に示した。この結果から明ら
かなように、リンゴポリフェノール粉末製剤は濃度依存
的にメチルメルカプタン、硫化ジメチル、二硫化ジメチ
ルに対する産生抑制効果を有することが認められた。
【００９３】
【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
バラ科果実、特にリンゴ、ナシ、モモ等の未熟果実を原
料とし、かつ特定の処理を施しているため、各種の生理
作用、特に抗酸化性およびACE 阻害活性を備えた果実ポ
リフェノールを提供することができる。また、本発明に
よれば、抗酸化作用を有するポリフェノール画分を有効
成分とする酸化防止剤を提供することができる。
バラ科果実、特にリンゴ、ナシ、モモ等の未熟果実を原
料とし、かつ特定の処理を施しているため、各種の生理
作用、特に抗酸化性およびACE 阻害活性を備えた果実ポ
リフェノールを提供することができる。また、本発明に
よれば、抗酸化作用を有するポリフェノール画分を有効
成分とする酸化防止剤を提供することができる。
【００９４】さらに、本発明によれば、アンジオテンシ
ンＩ変換酵素阻害作用を有するポリフェノール画分を有
効成分とする血圧降下剤を提供することができる。ま
た、本発明によれば、変異原性抑制作用を有するポリフ
ェノール画分を有効成分とする抗変異原性作用剤を提供
することができる。さらにまた、本発明によれば、ヒア
ルロニダーゼ阻害作用ならびにヒスタミン遊離抑制作用
を有するポリフェノール画分を有効成分とするアレルギ
ー抑制剤を提供することができる。
ンＩ変換酵素阻害作用を有するポリフェノール画分を有
効成分とする血圧降下剤を提供することができる。ま
た、本発明によれば、変異原性抑制作用を有するポリフ
ェノール画分を有効成分とする抗変異原性作用剤を提供
することができる。さらにまた、本発明によれば、ヒア
ルロニダーゼ阻害作用ならびにヒスタミン遊離抑制作用
を有するポリフェノール画分を有効成分とするアレルギ
ー抑制剤を提供することができる。
【００９５】さらに、本発明によれば、グルコシルトラ
ンスフェラーゼ阻害活性を有するポリフェノール画分を
有効成分とする抗う蝕剤を提供することができる。さら
にまた、本発明によれば、悪臭物質に対する消臭および
悪臭物質産生抑制作用を有するポリフェノール画分を有
効成分とする消臭剤を提供することができる。
ンスフェラーゼ阻害活性を有するポリフェノール画分を
有効成分とする抗う蝕剤を提供することができる。さら
にまた、本発明によれば、悪臭物質に対する消臭および
悪臭物質産生抑制作用を有するポリフェノール画分を有
効成分とする消臭剤を提供することができる。
【図１】リンゴ未熟果ポリフェノールの波長可変クロマ
トグラムと各ピークの紫外部吸収スペクトルの比較を示
すグラフ。
トグラムと各ピークの紫外部吸収スペクトルの比較を示
すグラフ。
【図２】リンゴ「ふじ」抽出液を反応系に添加したとき
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
【図３】リンゴ「ふじ」各画分を反応系に添加したとき
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
【図４】ポリフェノール化合物を反応系に添加したとき
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）の比較を示すグラフ。
の、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度500nm
値）の比較を示すグラフ。
【図５】各リンゴポリフェノール画分を反応系に添加し
たときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度
500nm 値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
たときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度
500nm 値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
【図６】各未熟果ポリフェノール画分を反応系に添加し
たときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度
500nm 値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
たときの、１週間後における生成過酸化脂質量 (吸光度
500nm 値）と添加濃度の関係を示すグラフ。
【図７】各画分のACE 阻害活性を示すグラフ。
【図８】画分Ｂの添加量を変化させた場合の ACE阻害活
性を示すグラフ。
性を示すグラフ。
【図９】反応系へ添加する各物質の添加濃度を変化させ
た場合のACE 阻害活性を示すグラフ。
た場合のACE 阻害活性を示すグラフ。
【図１０】単離した画分について分光光度計により測定
した吸収スペクトルを示すグラフ。
した吸収スペクトルを示すグラフ。
【図１１】GPC による分子量測定結果を示すグラフ。
【図１２】推定されるACE 阻害活性物質の構造式。
【図１３】Ｔｒｐ−Ｐ−２に対するポリフェノールの変
異原性抑制活性を示すグラフ。
異原性抑制活性を示すグラフ。
【図１４】ベンゾ（ａ）ピレンに対するポリフェノール
の変異原性抑制活性を示すグラフ。
の変異原性抑制活性を示すグラフ。
【図１５】各種果実抽出物のヒアルロニダーゼ阻害活性
を示すグラフ。
を示すグラフ。
【図１６】抗アレルギー剤とリンゴタンニンのヒアルロ
ニダーゼ阻害活性を示すグラフ。
ニダーゼ阻害活性を示すグラフ。
【図１７】各果実エキスおよびリンゴタンニンに関する
抗原ＤＮＰ−ＢＳＡ作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ作用時
のヒスタミン遊離抑制活性率を示すグラフ。
抗原ＤＮＰ−ＢＳＡ作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ作用時
のヒスタミン遊離抑制活性率を示すグラフ。
【図１８】リンゴタンニンに関する抗原ＤＮＰ−ＢＳＡ
作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ作用時のヒスタミン遊離抑
制活性率を示すグラフ。
作用時、抗体ＤＮＰ−ｌｇＥ作用時のヒスタミン遊離抑
制活性率を示すグラフ。
【図１９】各果実ポリフェノール画分を反応系に添加し
たときの、不溶性グルカン生成量と添加量の関係を示す
グラフ。
たときの、不溶性グルカン生成量と添加量の関係を示す
グラフ。
【図２０】各ポリフェノール化合物を反応系に添加した
ときの、不溶性グルカン生成量と添加濃度の関係を示す
グラフ。
ときの、不溶性グルカン生成量と添加濃度の関係を示す
グラフ。
【図２１】リンゴポリフェノール、緑茶ポリフェノー
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、メチルメルカプタン残存量を示すグラフ。
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、メチルメルカプタン残存量を示すグラフ。
【図２２】リンゴポリフェノール、緑茶ポリフェノー
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、硫化ジメチル残存量を示すグラフ。
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、硫化ジメチル残存量を示すグラフ。
【図２３】リンゴポリフェノール、緑茶ポリフェノー
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、メチルメルカプタン発生量を示すグラフ。
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、メチルメルカプタン発生量を示すグラフ。
【図２４】リンゴポリフェノール、緑茶ポリフェノー
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、硫化ジメチル発生量を示すグラフ。
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、硫化ジメチル発生量を示すグラフ。
【図２５】リンゴポリフェノール、緑茶ポリフェノー
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、二硫化ジメチル発生量を示すグラフ。
ル、銅クロロフィリンナトリウムを反応系に添加したと
きの、二硫化ジメチル発生量を示すグラフ。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 35/78 ＡＥＤ 8217−4Ｃ 7/26 Ａ６１Ｌ 9/01 Ｒ Ｃ０７Ｇ 17/00 Ｚ Ｃ０９Ｋ 15/34
Claims (16)
- 【請求項１】 バラ科に属する果実の未熟果実より搾汁
および／または抽出され、かつその画分が精製されて成
ることを特徴とする果実ポリフェノール。 - 【請求項２】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシまた
はモモである請求項１記載の果実ポリフェノール。 - 【請求項３】 バラ科に属する果実の未熟果実を搾汁お
よび／または抽出し、次いでこの搾汁果汁および／また
は抽出液よりポリフェノール画分を精製することを特徴
とする果実ポリフェノールの製造方法。 - 【請求項４】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシまた
はモモである請求項３記載の果実ポリフェノールの製造
方法。 - 【請求項５】 バラ科に属する果実の未熟果実より搾汁
および／または抽出され且つ精製されてなる、ポリフェ
ノール画分を有効成分とする酸化防止剤。 - 【請求項６】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシまた
はモモである請求項５記載の酸化防止剤。 - 【請求項７】 バラ科に属する果実の未熟果実より搾汁
および／または抽出され且つ精製されてなる、アンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害作用を有するポリフェノール画
分を有効成分とする血圧降下剤。 - 【請求項８】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシまた
はモモである請求項７記載の血圧降下剤。 - 【請求項９】 バラ科に属する果実の未熟果より搾汁お
よび／または抽出され且つ精製されてなる、変異原性抑
制作用を有するポリフェノール画分を有効成分とする抗
変異原性作用剤。 - 【請求項１０】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシま
たはモモである請求項９記載の抗変異原性作用剤。 - 【請求項１１】 バラ科に属する果実の未熟果より搾汁
および／または抽出され且つ精製されてなる、ヒアルロ
ニダーゼ阻害作用ならびにヒスタミン遊離抑制作用を有
するポリフェノール画分を有効成分とするアレルギー抑
制剤。 - 【請求項１２】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシま
たはモモである請求項１１記載のアレルギー抑制剤。 - 【請求項１３】 バラ科に属する果実の未熟果より搾汁
および／または抽出されかつ精製されてなる、グルコシ
ルトランスフェラーゼ阻害活性を有するポリフェノール
画分を有効成分とする抗う蝕剤。 - 【請求項１４】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシ、
モモである請求項１３記載の抗う蝕剤。 - 【請求項１５】 バラ科に属する果実の未熟果より搾汁
および／または抽出されかつ精製されてなる、悪臭物質
に対する消臭作用および悪臭物質産生抑制作用を有する
ポリフェノール画分を有効成分とする消臭剤。 - 【請求項１６】 バラ科に属する果実がリンゴ、ナシ、
モモである請求項１５記載の消臭剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30057894A JP3521155B2 (ja) | 1993-12-06 | 1994-12-05 | 果実ポリフェノールの製造方法 |
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30563293 | 1993-12-06 | ||
| JP2443594 | 1994-02-22 | ||
| JP6-24435 | 1994-02-22 | ||
| JP5-305632 | 1994-02-22 | ||
| JP30057894A JP3521155B2 (ja) | 1993-12-06 | 1994-12-05 | 果実ポリフェノールの製造方法 |
Related Child Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8086859A Division JPH08259453A (ja) | 1993-12-06 | 1996-04-09 | 果実ポリフェノール含有果汁とその製造方法、酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤 |
| JP2001190347A Division JP4142859B2 (ja) | 1993-12-06 | 2001-06-22 | 果実ポリフェノール、酸化防止剤、血圧降下剤、抗変異原性作用剤、アレルギー抑制剤、抗う蝕剤及び消臭剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07285876A true JPH07285876A (ja) | 1995-10-31 |
| JP3521155B2 JP3521155B2 (ja) | 2004-04-19 |
Family
ID=27284648
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP30057894A Expired - Lifetime JP3521155B2 (ja) | 1993-12-06 | 1994-12-05 | 果実ポリフェノールの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3521155B2 (ja) |
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| JP2006096694A (ja) * | 2004-09-29 | 2006-04-13 | Asahi Breweries Ltd | 食物アレルギー予防剤 |
| JP2006096693A (ja) * | 2004-09-29 | 2006-04-13 | Tohoku Univ | 抗アレルギー剤 |
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