JPH11343485A - 活性酸素消去作用を有する抗酸化剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 活性酸素消去作用を有する抗酸化剤を提供す
る。 【解消手段】 ぶな科植物の虫えいのエタノール可溶成
分、特に１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−
Ｄ−グルコースは、強力な活性酸素消去作用を有し、飲
食品、医薬品、化粧品などの素材として利用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ぶな科に属する植物の
虫えいの溶媒抽出物、特に、加水分解型タンニンで高い
活性酸素消去活性を有する１，２，３，６−テトラ−Ｏ
−ガロイル−β−Ｄ−グルコースを有効成分として含有
する抗酸化剤、及び１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロ
イル−β−Ｄ−グルコースを効率よく製造する製造方法
に関する。

【０００２】

【従来の技術】活性酸素ラジカルは、単に活性酸素ある
いはフリーラジカルとも称され、不安定な不対電子を持
つ反応性に富んだ原子や分子であり、更に１電子を取り
込むかあるいは逆に与えることにより安定性を保とうと
する。一般には、スーパーオキサイド（・Ｏ₂ −）、ヒ
ドロキシラジカル（ＨＯ・）、過酸化水素（Ｈ
₂ Ｏ₂ ）、一重項酸素（１Ｏ₂ ）の４種をさして活性酸
素と呼んでいる。その他に、ヒドロペルオキシラジカル
（ＨＯＯ・）、ペルオキシラジカル（ＬＯＯ・），アル
コキシラジカル（ＬＯ・）なども広い意味で活性酸素と
考えられ、これらは活性酸素種やラジカル種と呼ばれて
いる。

【０００３】活性酸素ラジカルからは、新たな活性酸素
ラジカルが二次、三次的に産生されて加速度的に増加
し、細胞やＤＮＡの損傷、脂質の過酸化等を引き起こし
て多くの疾患に関与することが近年明らかになってき
た。なかでもヒドロキシラジカル（ＨＯ・）は最も反応
性が高く、細胞損傷など障害作用の大きな活性酸素ラジ
カルであることが明らかにされている（二木悦雄（１９
８８）Ｍｅｂｉｏ．，５，２２−２６）。紫外線（Ｕ
Ｖ）による皮膚等での炎症発生においても、ヒドロキシ
ラジカル（ＨＯ・）産生とその関与が確認されている。
ウィルスの感染もまた、感染者の過剰な免疫応答の結果
として、活性酸素ラジカルが生体バランス維持の必要量
以上に生成され、有害な作用を与える（Ｔ．Ｏｄａら
（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４，９７４−９７
６）。

【０００４】かような生体での活性酸素ラジカルによる
障害に対し、スーパーオキサイド・デスムターゼ（ＳＯ
Ｄ）やカタラーゼなどの酵素にて、またアスコルビン酸
やグルタチオンなどの活性酸素消去作用成分を用いる除
去方法については、薬理学的観点から幅広く研究課題と
され、数多くの報告がなされている。

【０００５】また、活性酸素ラジカルは、生体へ悪影響
を及ぼすばかりでなく、食品その他における品質劣化の
引き金となったり加速したりすることは、著名な事実と
して知られているところである。

【０００６】最近、活性酸素ラジカルを除去するいわゆ
る活性酸素ラジカルスカベンジャー成分に関し、各種の
フラボノイド類およびそれらの関連成分（カテキン、ケ
ルセチン、ケンフェロール、ミリセチン、ルチン、アン
トシアニン、ポリフェノール、他）やサポニン類など、
食素材に由来し、これまであまり顧みられていなかった
天然成分についての研究に多くの注目と期待が集められ
ている。

【０００７】例えば、緑茶中の天然成分であり、化学構
造にガロイル（ｇａｌｌｏｙｌ）残基を有するフラバン
−３−オール型のカテキン類では、活性酸素ラジカルに
よるＤＮＡの破壊（Ｔ．Ｎａｋａｙａｍａら（１９９
３）Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．，５７，１７４−１７６）、脂質の過酸化（Ｔ．Ａ
ｒｉｇａら（１９９０）Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅ
ｍ．，５４，２４９９−２５０４）、酸化的細胞損傷
（Ｔ．Ｎａｋａｙａｍａら（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅ
ｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４５，２６５−２６７）に
対し、各々いずれも阻止効果を示し、従ってラジカルス
カベンジャー作用を有することが報告されている。

【０００８】従来、タンニンは広く植物体に存在しその
化学構造により、縮合型タンニン、加水分解型タンニ
ン、及び複合タンニンに分類される。例えば、縮合型タ
ンニンは小豆〔アグリカルチュラル・バイオロジカル・
ケミストリー（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．）Ｖ
ｏｌ．５２，ｐ２７１７−１７２２，１９８８参照）や
ブドウ種子（特開平３−２００７８１号公報参照）など
に存在することが知られ、そこから抽出精製され取得す
ることができる。単純縮合型タンニンの最小単位である
フラバン−３−オール類の一つである（＋）−カテキン
に澱粉またはシクロデキストリンを加えて、シクロマル
トデキストリン−グルカノトランスフェラーゼを反応さ
せ、（＋）カテキン配糖体を得る方法が知られている
（日本農芸化学会会誌、６５巻、３号、第５頁、２Ａｐ
１４、平成３年３月１５日発行、特開平４−２７３８９
０号公報）。

【０００９】

【発明が解決しようとする問題点】前記した従来技術に
おいて、十分に高い活性酸素消去作用を有する加水分解
型タンニン並びにそれを効率よく製造する方法について
はこれまで報告されていない。また特開平０５−１８６
７６９号公報に示されたユーカリの葉からの抽出には、
葉を乾燥しておかないと腐敗したり、葉からの抽出生産
には、抽出効率が季節的に変動したり、悪い欠点があっ
た。

【００１０】

【問題点を解決するための手段】本発明者らは活性酸素
を強力に消去する物質を得る目的で研究を進めた結果、
ぶな科植物の虫えい（学名：Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｕｓｉ
ｔａｎｉｃａ Ｌａｍｋ、ブナ科高木の若芽にフシバチ
の雌が産卵し、その刺激によってできた虫こぶ）の溶媒
抽出物、特にその中に含まれる加水分解型タンニンの一
つである１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−
Ｄ−グルコースが生体内で生成する活性酸素を強力に消
去することを見いだした。また、ぶな科植物の虫えい
（学名：Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｕｓｉｔａｎｉｃａ Ｌａ
ｍｋ）から、抽出することによって、非常に高い活性酸
素消去活性がある１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイ
ル−β−Ｄ−グルコースを効率よく製造できることを見
出した。本発明はかかる研究をもって完成されたもので
ある。

【００１１】即ち、本発明は、ぶな科に属する植物の虫
えいの溶媒抽出物を有効成分として含有する活性酸素消
去作用を有する抗酸化剤に関する。更に本発明は、１，
２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコー
スを有効成分として含有する活性酸素消去作用を有する
抗酸化剤に関する。更に本発明は、ぶな科に属する植物
の虫えいのエタノール可溶成分から、クロマトグラフィ
ーにより分画することを特徴とする、１，２，３，６−
テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースの製造法に
関する。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明で対象とする植物は、虫え
いを形成するぶな科に属する植物であればいずれの植物
でもよく、例えば学名Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｕｓｉｔａｎ
ｉｃａ Ｌａｍｋなどが挙げられる。虫えいは、ぶな科
の植物に良く形成することが知られており、食経験のあ
るものであって、ぶな科の植物の高木の若芽にフシバチ
の雌が産卵し、その刺激によってできた虫こぶを指す。
このような虫えいを、粉砕し、その粉砕物を溶媒で抽出
することによって活性酸素消去作用を有する抽出物を得
ることができる。抽出に使用する溶媒としては、メタノ
ール、エタノール、プロパノールなどの低級アルコー
ル；アセトン、ヘキサンなどが通常用いられる。これら
の溶媒は水を含有していてもよい。なかでも特にエタノ
ールを溶媒として用いるのが好ましい。これらの溶媒に
虫えいの粉砕物を加えて、例えば室温で数日間放置し、
その後、溶液を濾過し、必要に応じて、カラムクロマト
グラフィー等の精製を行って、活性酸素消去作用を有す
る溶媒抽出物が得られる。

【００１３】本発明により、これらの溶媒抽出物中に
は、１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−
グルコース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ
−グルコース、２，３−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−
（Ｏ−４，４’，５，５’，６，６’−ヘキサヒドロキ
シジフェノイル）−Ｄ−グルコースなどの加水分解型タ
ンニンが含まれており、これらの成分が活性酸素消去作
用を有することが確認された。なかでも、特に１，２，
３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースが
強力な活性酸素消去作用を有することが明らかになっ
た。本物質そのものは公知である（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒ
ｍ．Ｂｕｌｌ．，２９，２８６２（１９８１））。１，
２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコー
スは、ぶな科に属する植物の虫えいの粉砕物をエタノー
ルで抽出して、エタノール可溶成分を得、次いでクロマ
トグラフィー等で精製することによって、精製された形
態で効率良く得ることができる。

【００１４】虫えいの溶媒抽出物、並びに１，２，３，
６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースは、活
性酸素消去作用を有し、また脂質の過酸化を抑制する効
果を有する。従って、抗酸化剤として、飲食品、医薬
品、化粧品の素材として広く応用できる。飲食品として
は、例えばコーヒー、紅茶、ジュースなどの飲料水、パ
スタなどの食品などが挙げられる。飲食品への溶媒抽出
物または１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−
Ｄ−グルコースの添加量は、通常、飲食品に対して０．
００５〜０．２重量％である。

【００１５】飲食品以外の用途としては、炎症、発癌、
免疫などに関係した諸疾患の予防または治療用の医薬品
として利用することができる。医薬品としては、経口投
与、塗布、その他の非経口投与により使用できる。例え
ば、経口投与のための製剤としては、錠剤、丸剤、顆粒
剤、軟・硬カプセル剤、散剤、細粒剤、粉剤、乳濁剤、
懸濁剤、シロップ剤、ペレット剤、エリキシル等が挙ら
れる。非経口投与のための製剤としては、注射剤、点滴
剤、輸液、軟膏、ローション、トニック、スプレー、懸
濁剤、油剤、乳剤、坐剤等が挙られる。本発明の有効成
分を製剤化するには、常法にしたがえばよく、界面活性
剤、賦形剤、着色料、着香料、保存料、安定剤、緩衝
剤、懸濁剤、等張剤その他常用される坐薬を適宜使用す
る。外用剤の場合も同様である。本発明の有効成分であ
る溶媒抽出物、または１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガ
ロイル−β−Ｄ−グルコースを医薬品として使用する場
合、その投与量は通常、１日当り０．５〜５０ｍｇ／ｋ
ｇである。

【００１６】また、本発明の有効成分を化粧品として使
用する場合には、クリーム、ローション、軟膏などの形
態で用いることができる。これらの化粧品として使用す
る場合には、通常使用される保湿剤、界面活性剤、防腐
剤などともに化粧品として成形される。化粧品として使
用する場合の本発明の溶媒抽出物または１，２，３，６
−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−グルコースの添加量は、
通常化粧品に対して０．０５〜１．０重量％である。

【００１７】次に本発明の有効成分である溶媒抽出物、
加水分解型タンニンの製造方法および該成分が活性酸素
消去の効果および脂質の過酸化を抑制する効果を示す例
を実施例として以下に示す。

【００１８】

【実施例】実施例１ １）方法 以下の方法により１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイ
ル−β−Ｄ−グルコースの精製を行った。

【００１９】ぶな科植物の虫えい（学名：Ｑｕｅｒｃｕ
ｓ ｌｕｓｉｔａｎｉｃａ Ｌａｍｋ）をミキサーで粉
砕したものに対して、２５℃にて９９．５％エタノール
で７日間抽出した。その後、ろ紙Ｎｏ２で濾過した液を
用いて、セファデックスＬＨ２０カラムクロマトグラフ
ィーにより粗分画を行った。この粗分画を減圧乾固する
ことによって本発明の溶媒抽出物を得ることができる。

【００２０】上記抽出液１０ｍｌを５０ｍｌの蒸留水に
溶解し、カラム担体ＳｅｐｈｄｅｘＬＨ２０ ５０ｍｌ
つめたガラスカラム（カラム口径３２ｍｍ、担体長２５
０ｍｍ）にチャージした。溶出溶媒として０，１０，５
０，８０，９９．５％エタノール水溶液を各１０００ｍ
ｌずつ用い、０から９９．５％エタノール水溶液まで順
次変化させて分取した。流量は１０ｍｌ／ｍｉｎ、最高
圧力は１．５ｋｇ／ｃｍ² である。２８０ｎｍの吸収を
モニターしながら、各溶媒中に溶出された物質を回収
し、エバポレーターで乾固した。

【００２１】上記の精製により９９％エタノール水溶液
で溶出させた画分をさらに高速液体クロマトグラフィー
により分離した。分離条件は以下の通りである。カラム
としてＳＨＩＭＡＺＤＵ社製 ＰＲＥＰ−ＯＤＳ（Ｈ）
ＫＩＴ（内径２０ｍｍ，長さ２５ｃｍ）、流量は１０ｍ
ｌ／ｍｉｎ、溶媒は０．０１％トリフルオロ酢酸７：メ
タノール３の混合溶液、あるいは０．０１％トリフルオ
ロ酢酸７５：メタノール２５の混合溶液を用いた。

【００２２】上記により得られたピークをＮＭＲおよび
質量スペクトル分析により、構造決定した。まず、本物
質５ｍｇを、質量分析計（ＪＯＥＬ ＳＸ−１０２Ａ）
に導入し、ＦＡＢ−ＭＡＳＳ スペクトルを測定した。
また、活性物質５ｍｇを重クロロホルム（ＣＤＣｌ₃ ）
に溶解した液を、核磁気共鳴装置に導入し、共鳴周波数
５００ＭＨｚで１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを測定した。同
様にして共鳴周波数１２５．６５ＭＨｚで１３Ｃ−ＮＭ
Ｒスペクトルを測定した。同様に、Ｈ−Ｈ ＣＯＳＹ，
ＤＥＰＴ，ＨＭＢＣ，ＨＭＱＣスペクトルも同様に測定
した。０ｐｐｍのスタンダードにはテトラメチルシラン
を用いた。

【００２３】２）試験結果 質量スペクトル分析の結果、リチウム塩の添加時に（Ｍ
＋Ｌｉ）＋の分子イオンピークとして７９５が、ナトリ
ウム塩添加時には（Ｍ＋Ｎａ）＋の分子イオンピークと
して８１１が認められた。これより、活性物質の分子量
は７８８と考えられた。

【００２４】Ｈ−ＮＭＲおよびＣ−ＮＭＲの結果より、
六員環の糖にガロイル基が結合している構造が推定され
た。また、Ｈ−Ｈ ＣＯＳＹ，ＤＥＰＴ，ＨＭＢＣ，Ｈ
ＭＱＣの結果とこれまでの結果を総合すると分子式はＣ
₃₄Ｈ₂₈Ｏ₂₂であり、グルコースがβ結合した六員環に４
つのガロイル基がデプシド結合している１，２，３，６
−テトラ−ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースであるこ
とが明らかになった。

【００２５】実施例２ １）方法 ぶな科植物の虫えい（学名：Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｕｓｉ
ｔａｎｉｃａ Ｌａｍｋ）をミキサーで粉砕したものに
対して、エチルアルコールを１０倍量加えて、２５℃で
７日間抽出を行った。抽出後、ろ紙Ｎｏ２で濾過し、抽
出液をエバポレーターで減圧乾固し、本発明の溶媒抽出
物を得た。本抽出液をＬＨ２０カラムクトマトグラフィ
ーおよびＯＤＳカラムを用いたＨＰＬＣにより分画し、
１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グル
コース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グ
ルコース、２，３−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−（Ｏ−
４，４’，５，５’，６，６’−ヘキサヒドロキシジフ
ェノイル）−Ｄ−グルコースの３成分を得た。

【００２６】試験管に０．４ｍＭキサンチンと０．２４
ｍＭニトロブルーテトラゾリウムの混合液１．０ｍｌ
に、１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−
グルコース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ
−グルコース、２，３−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−
（Ｏ−４，４’，５，５’，６，６’−ヘキサヒドロキ
シジフェノイル）−Ｄ−グルコースのジメチルスルホキ
シド水溶液０．１ｍｌを加えた試液を調製し、これにキ
サンチンオキシデース（０．０４９ｕｎｉｔ／ｍｌ）
１．０ｍｌを加えた後、セ氏３７度で２０分間反応させ
る。反応後、６９ｍＭドデシル硫酸ナトリウム２．０ｍ
ｌを加えて反応を停止させ、十分に撹拌して波長５６０
ｎｍでの吸光度を測定した。

【００２７】２）試験結果 同上の方法においてタンニンの代わりに牛の赤血球より
精製されたスーパーオキサイドディスミューテース（Ｃ
ｕ，Ｚｎ−ＳＯＤ）を添加して、その吸光度から検量線
を作成した。得られた検量線から１，２，３，６−テト
ラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコース１，２，６−ト
リ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコース、２，３−ジ−
Ｏ−ガロイル−４，６−（Ｏ−４，４’，５，５’，
６，６’−ヘキサヒドロキシジフェノイル）−Ｄ−グル
コースの活性を算出した。下記の表１にこれらタンニン
のスーパーオキサイドディスミューテース（ＳＯＤ）様
活性を示す。

【００２８】

【表１】

【００２９】以上の結果より明らかなように、１，２，
３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースは
スーパーオキサイドアニオンラジカルに対する消去作用
を持ち、低分子物質として実用に供されるものである。
また、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グル
コース及び２，３−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−（Ｏ−
４，４’，５，５’，６，６’−ヘキサヒドロキシジフ
ェノイル）−Ｄ−グルコースよりも高い活性酸素消去効
果がある。

【００３０】実施例３ １）方法 試験管に兎の赤血球ゴースト膜（２．５ｍｇ蛋白／ｍ
ｌ）０．９ｍｌと１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイ
ル−β−Ｄ−グルコース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロ
イル−β−Ｄ−グルコース及び２，３−ジ−Ｏ−ガロイ
ル−４，６−（Ｏ−４，４’，５，５’，６，６’−ヘ
キサヒドロキシジフェノイル）−Ｄ−グルコースのジメ
チルスルホキシド溶液０．１ｍｌを入れ、ジメチルスル
ホキシドに溶解したｔｅｒｔ−ブチルハイドロパーオキ
サイド（１０ｍｇ／ｍｌ）９μｌを添加して、反応を開
始させた。反応はセ氏３７度で３０分間行ない、２Ｍト
リクロロ酢酸１．０ｍｌを加えて反応を止めた。これに
０．６７％チオバルビツール酸２．０ｍｌを添加して沸
騰水浴中で１５分間反応させ、この反応により生じるマ
ロンジアルデヒドをはじめとするチオバルビツール酸反
応陽性物質の量を波長５３５ｎｍでの吸光度測定により
求めた。この値をもとに脂質過酸化を５０％抑制する濃
度を求め、市販の合成活性酸素消去剤であるブチルヒド
ロキシアニソールに対する活性酸素消去活性を算出し
た。

【００３１】２）試験結果 兎赤血球膜脂質の過酸化を５０％抑制する濃度を指標と
して、１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ
−グルコース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β−
Ｄ−グルコース、１，２，６−トリ−Ｏ−ガロイル−β
−Ｄ−グルコース及び２，３−ジ−Ｏ−ガロイル−４，
６−（Ｏ−４，４’，５，５’，６，６’−ヘキサヒド
ロキシジフェノイル）−Ｄ−グルコースの活性酸素消去
活性を下記の表２に示す。

【００３２】

【表２】

【００３３】以上の結果より明らかなように、１，２，
３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースの
活性酸素消去活性は市販の合成活性酸素消去剤であるブ
チルヒドロキシアニソールの活性に比較して、モル比で
９倍程度強力である。

【００３４】３）毒性試験 本発明における１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル
−β−Ｄ−グルコースは、毒性が低く、毎日１００、２
５０、５００ｍｇ／ｋｇの投与量で、５０、１００、１
５０日間という長期間にわたってラットに投与した結
果、いずれの投与量および期間でも死亡例は認められ
ず、体重変化も観察されなかった。

【００３５】実施例４ １）方法 上記の１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ
−グルコースのＳＯＤ様活性を市販のタンニン酸、没食
子酸、Ｌ−アスコルビン酸、（−）エピガロカテキンガ
レート、緑茶抽出物、Ｍａｊａｋａｎのエタノール粗抽
出物と比較した。これらをそれぞれ１０，１，０．１，
０．０１，０．００１ｍｇ／ｍｌになるように溶解し、
ＳＯＤ様活性を次の方法で測定した。

【００３６】上記により調整した各サンプルの試験液の
ＳＯＤ様活性を、（株）和光純薬のＳＯＤ様テストワコ
ーを用いて測定した。試験液３０μｌに、発色試薬
（０．１Ｍ りん酸緩衝液 ｐＨ８．０，キサンチン
０．４０ｍｍｏｌ／ｌ，ニトロブルーテトラゾリウム
（ＮＯ２−ＴＢ）０．２４ｍｍｏｌ／ｌ）３００μｌお
よび酵素液（キサンチンオキシダーゼ ０．０４９ｕ／
ｍｌ）３００μｌを加え、十分混合した後、３７℃で１
０分間反応させた。その後、反応停止液（ドデシル硫酸
ナトリウム ６９ｍｍｏｌ／ｌ）を６００μｌ加え３７
℃で２０分間保温後、９６穴タイタープレートに２００
μｌずつ分注し、（株）大日本製薬のタイタープレート
リーダーＭＫIIを用いて、５６０ｎｍの吸収を測定し
た。なお、吸光度の測定は２反復行い、下記の計算式に
従って、阻害率（％）を求めた。阻害率が高いほどＳＯ
Ｄ様活性が高いことを示している。阻害率（％）＝１０
０ｘ（１−（試験区の吸光度／蒸留水を用いた対照の吸
光度））

【００３７】本法の測定原理は、以下の通りである。キ
サンチンにキサンチンオキシダーゼが作用するとＯ２・
−が生成する。生成したＯ２・−は共存するニトロブル
ーテトラゾリウムを還元し、ジホルマザンを形成する
が、反応液中にＳＯＤ様物質が存在すると、Ｏ２・−の
一部はＨ２Ｏ２とＯ２に不均化され、ジホルマザンの形
成が減少する。したがって、Ｏ２・−とニトロブルーテ
トラゾリウムの反応に基づくジホルマザン形成の減少の
程度を阻害率として求めることにより、試料中のＳＯＤ
様活性値を求めた。

【００３８】２）試験結果 上記試験の結果を表３に示す。緑茶抽出物、タンニン
酸、没食子酸、Ｌ−アスコルビン酸、（−）エピガロカ
テキンガレートはいずれもＳＯＤ様活性があることが知
られている。１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−
β−Ｄ−グルコースは０．００１ｍｇ／ｍｌにおいても
活性があり、他の対照試薬のいずれよりも強い活性が認
められた。また、本物質はＭａｊａｋａｎエタノール粗
抽出物よりも活性が高く、粗抽出物中の本物質が活性に
寄与する割合は大きいと考えられた。

【００３９】タンニン酸の構造は、１，２，３，６−テ
トラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースあるいは１，
２，３，５，６−ペンタ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グル
コースを基本骨格とし、さらに数個から十数個のガロイ
ル基あるいはＨＨＤＰ基やＤＨＨＤＰ基などがデプシド
結合した構造物の混合体である。１，２，３，６−テト
ラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースのＳＯＤ様活性
がタンニン酸より高いことより、ガロイル基がグルコー
ス４位への配位していないことおよび１，２，３，６位
へ配位しているガロイル基が１分子であることが高比活
性に寄与している可能性が高い。また、ガロイル基の類
縁体であるよりもガロイル基の方がＳＯＤ様活性への寄
与が大きい可能性も高い。

【００４０】

【表３】

【００４１】実施例４ 下記の配合によりコーヒーを製造した。 成 分 重量％ インスタントコーヒー １．７ グラニュー糖 ５．０ 実施例２の抽出物 ０．００５ 湯 適量 １００

【００４２】実施例５ 下記の配合により化粧品としての軟膏を製造した。 成 分 重量％ 固体パラフィン １０．０ ビースワックス １０．０ スクワラン １０．０ １，２，３，６−テトラ−Ｏ− ガロイル−β−Ｄ−グルコース ０．１ 香料 適量 ワセリン ５９．０ １００

【００４３】実施例６ 下記の配合により錠剤を製造した。 成 分 重量％ １，２，３，６−テトラ−Ｏ− ０．２ ガロイル−β−Ｄ−グルコース 乳糖 ７８ デンプン １９ ポリビニルピロリドン ２ ステアリン酸マグネシウム １ １００

【００４４】

【発明の効果】食習慣があるぶな科植物の虫えい（学
名：Ｑｕｅｒｃｕｓ ｌｕｓｉｔａｎｉｃａ Ｌａｍ
ｋ）より抽出することにより、活性酸素消去作用を有す
る抽出物、特に１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル
−β−Ｄ−グルコースを安全かつ能率よく製造すること
が出来る。本方法を用いることにより、飲食品、医薬
品、化粧品の素材などとして広く産業上利用できる製品
を効率よく製造することができる。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ぶな科に属する植物の虫えいの溶媒抽出
   物を有効成分として含有する活性酸素消去作用を有する
   抗酸化剤。
2. 【請求項２】 溶媒抽出物が、ぶな科に属する植物の虫
   えいのエタノール可溶成分から得られる、請求項１の活
   性酸素消去作用を有する抗酸化剤。
3. 【請求項３】 溶媒抽出物が、１，２，３，６−テトラ
   −Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコースである、請求項１
   または２の活性酸素消去作用を有する抗酸化剤。
4. 【請求項４】 １，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル
   −β−Ｄ−グルコースを有効成分として含有する活性酸
   素消去作用を有する抗酸化剤。
5. 【請求項５】 ぶな科に属する植物の虫えいのエタノー
   ル可溶成分から、クロマトグラフィーにより分画するこ
   とを特徴とする、１，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイ
   ル−β−Ｄ−グルコースの製造方法。