JP5129440B2 - 植物発酵物及びこれを含む化粧料 - Google Patents
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Description
この皮膚の老化や不健全化を防止し或いは改善して、皮膚を健全かつ若々しい状態に保持するため、従来より種々の活性成分の使用が提案され、それら成分を配合した化粧料が上市されている。例えばα−ヒドロキシカルボン酸類、胎盤抽出物、ホルモン類などの細胞賦活成分、コラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸などの真皮マトリックス成分、ビタミンE類などの抗酸化剤、グリチルレチン酸などの抗炎症剤、各種紫外線防御剤等がそれである。
しかしながら、それら従来の成分は一般に、上述した皮膚の老化乃至不健全化要因の一つを予防し或いは改善し得るに過ぎないため、それら成分を配合した化粧料によっては、真に満足し得る老化防止効果、美肌化効果を得ることは困難である。また、成分によっては、有効性を高めるため配合量を増すと皮膚刺激の問題を生ずるなど安全性の面に於いても改善を要するものがある。
例えば、フヨウ(ハイビスカス)属植物のムクゲ(Hibiscus syriacus)の抽出物を含有したメラニン生成抑制剤(特開2003-171300号)、ローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)の萼から得られた赤色色素を含有してなるコラーゲン産生促進剤(特開2004-67552号)、アクネ菌(P.acnes)のヒアルロニダーゼ活性阻害剤としてフヨウ属植物抽出物を含有する保湿化粧料(特開2003-12489号)ハイビスカス抽出物を含有してなる活性酸素消去剤(特開2001-122765号)、ハイビスカス フルセラータス抽出物の抗ラジカル作用及び還元型グルタチオン自己合成促進作用を利用した局所適用のための化粧用製品(特開2002-503242号)、ローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)の抽出液を含有する美白、活性酸素消去、抗菌外用剤(特開2000-95663号)、フヨウ(ハイビスカス)属植物抽出物の示す紫外線防御作用及び抗炎症作用と生理活性成分(美白剤等)の作用との相乗効果を利用してなる皮膚・毛髪機能亢進効果を有する化粧料(特開2000-7545号)、フヨウ属植物抽出物を含有してなる紫外線防御化粧料(特開平11-349469号)、ハイビスカス抽出物を含有するメイラード反応阻害剤(特開平11-106336号)、ローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)又はその抽出物の有する皮膚線維芽細胞増殖活性化作用及び細胞外マトリックス産生増加作用を利用した皮膚老化防止化粧料(特開平09-295928号)、フヨウ(ハイビスカス)属植物の花の抽出物を有効成分として含有する抗炎症・抗アレルギー剤(特開平09-87188号)、ハイビスカス抽出物を有効成分とするムコ多糖類断片化抑制剤、活性酸素消去剤及び抗酸化剤、並びにそれらの剤を含有する化粧料(特開平06-24937号)、フヨウ属の植物体の汁液または抽出液を必須成分として含有する、脱脂状態や炎症状態にある皮膚や粘膜を保護するための皮膚保護剤(特開昭57-99517号)、ムクゲの抽出物を含有する線維芽細胞増殖促進剤(特開平10-36279号)などの特許がそれぞれ開示されている。
加えて、フヨウ(ハイビスカス)属植物含有成分をそのまま利用する従来技術の場合にあっては、未だ十分満足し得る有効性が得られているとは言い難い面があり、皮膚に対する改善効果の点で本発明には及ばないものである(後述の試験例参照)。
ここで、化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品をも含む広義で用いる。
又、本発明化粧料で活性成分として用いる発酵物は、皮膚に対する刺激性が全くなく、このため本発明の化粧料は生体安全性にも大変すぐれている。
本発明で用いるアオイ科フヨウ(ハイビスカス)属の植物としては、例えばローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)、ムクゲ(Hibiscus syriacus),、フヨウ(Hibiscus mutabills)、モミジアオイ(Hibiscus coccineus)、オオハマボウ(Hibiscus tiliaceus)、フウリンブッソウゲ(Hibiscus schizopetalus)などが挙げられるが、それらのうちでも、発酵物の表皮細胞賦活作用及び紫外線損傷防御作用の観点からローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)の使用が最も好ましい。
上記の各菌種のうちでも、特に乳酸菌を用いた場合、得られる発酵物はとりわけ顕著な表皮細胞賦活作用と紫外線損傷からの表皮細胞の保護作用を示し、それら両作用の相乗的・複合的な働きによってすぐれた美肌化効果、皮膚健全化効果を奏することから、本発明に於いては、乳酸菌から選ばれる一種又は二種以上の菌を用いることが特に好ましい。
アスペルギルス ニガー(Aspergillus niger)等の黒麹菌、モナスカス アンカ(Monascus anka)、モナスカス ピロサス(Monascus pilosus)等の紅麹菌などが挙げられる。それらのうちでも、得られる発酵物の有効性の観点とさらに発酵液の着色や発酵臭が比較的少ないことから、アスペルギルス オリゼー(Aspergillus oryzae)が最も好ましい。
omyces soya)、ジゴサッカロミセス サケ(Zygosaccharomyces sake)、ジゴサッカロミセス ミソ(Zygosaccharomyces miso)、ジゴサッカロミセス ラクティス(Zygosaccharomyces lactis)等のジゴサッカロミセス属の酵母、カンディダ ベルサチリス(Candida versatilis)、カンディダ エチェリシイ(Candida etchellsii)、カンディダ ケフィール(Candida kefyr)、カンディダ サケ(Candida sake)、カンディダ スコッティ(Candida scottii)等のカンディダ属の酵母、オーレオバシディウム プルランス(Aureobasidium Pullulans)、オーレオバシディウム マンソニー(Aureobasidium mansonii)、オーレオバシディウム マイクロスティクタム(Aureobasideium microstictum)等のオーレオバシディウム属の酵母などが挙げられる。
それらのうちでも、食品に最も広く利用され、発酵力が強いという点からサッカロミセス セレビシエ(Saccharomyces cerevisiae)が最も好ましい。
まず、発酵しようとするフヨウ(ハイビスカス)属植物(以下、発酵素材ということがある)を発酵媒体中に浸漬乃至懸濁させて、発酵のための懸濁液を調製する。この場合、フヨウ(ハイビスカス)属植物は生のまま用いても、又予め乾燥もしくは半乾燥した上用いてもよい。又、形状としては、採取したものをそのまま用いることもできるが、細断或いは粉砕して微細化すれば発酵効率を上げることができる。
発酵素材と発酵媒体との混合比(重量比)は、発酵素材の乾燥重量換算で一般に1:1〜1:1000、好ましくは1:5〜1:100、より好ましくは1:10〜1:50の範囲である。
加熱殺菌法としては、懸濁液を120〜130℃で10〜20分間加熱するオートクレーブ殺菌法や、懸濁液を80〜90℃に60〜120分間保持することを1日1回2〜3日間繰り返す間断殺菌法が一般に用いられる。
微生物の接種量は107〜108個/mLが適量である。接種量が上記の範囲より多くなっても発酵の進行時間は殆ど変わらず、一方上記の範囲より少なくなると発酵完了までに長時間を要することとなって好ましくない。
この場合、酵素としては、蛋白分解酵素、糖質分解酵素及びペクチン質分解酵素から選ばれた少なくとも1種の酵素が用いられる。
pH、温度、時間などの処理条件としては、酵素処理を発酵の前に行うのであれば、使用する酵素の至適pH及び至適温度付近で1〜24時間の処理を行うのがよく、一方発酵と並行して行うのであれば、当該発酵と同条件であって差し支えない。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌発酵米、乳酸菌発酵発芽米、乳酸菌発酵穀類(麦類、豆類、雑穀など)、ジュアゼイロ(Zizyphus juazeiro:Rhamnaceae)抽出物等を配合することもできる。
乾燥したローゼル(Hibisucas sabdariffa L.)の萼50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り、アルカリで中和してpH約6とした後、80〜90℃で1時間加温して殺菌を行った。
殺菌した懸濁液に乳酸菌(ラクトバシルス プランタラム)を108個/mL接種し、37℃で3日間静置培養した。
培養終了後培養液を加熱殺菌し、ろ過してフヨウ(ハイビスカス)属植物ローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液720g(固形分濃度3.1%)を得た。
ローゼルに代えてムクゲ(Hibiscus syriacus)の萼を用いる他は実施例1と同様にしてフヨウ(ハイビスカス)属植物ムクゲの萼の乳酸菌発酵物溶液650g(固形分濃度2.7%)を得た。
乳酸菌としてラクトバチルス プランタラムに代えてストレプトコッカス フェーカリスを用いる他は実施例1と同様にして、ローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液770g(固形分濃度3.3%)を得た。
乾燥したローゼルの萼50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り、この液にペクチンエステラーゼ1.0gを加えた後40℃で3時間加水分解処理を行った。
この加水分解懸濁液をアルカリで中和してpH約6とした後、80〜90℃で1時間加温し、酵素の失活と殺菌を行った。
殺菌した加水分解懸濁液に乳酸菌(ラクトバシルス・プランタラム)を108個/mL接種し、37℃で3日間静置培養した。
培養終了後培養液を加熱殺菌し、ろ過してローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液800g(固形分濃度3.9%)を得た。
乳酸菌に代えて麹菌であるアスペルギルス オリゼーを用いる他は実施例4と同様にして、ローゼルの萼の麹菌発酵物溶液810g(固形分濃度3.4%)を得た。
乳酸菌に代えて納豆菌であるバシルス ナットーを用いる他は実施例4と同様にして、ローゼルの萼の納豆菌発酵物溶液790g(固形分濃度3.4%)を得た。
乳酸菌に代えて酵母であるサッカロミセス セレビシエを用いる他は実施例4と同様にして、ローゼルの萼の酵母発酵物溶液800g(固形分濃度3.2%)を得た。
乳酸菌に代えてテンペ菌であるリゾプス ミクロポラス オリゴスポラスを用いる他は実施例4と同様にして、ローゼルの萼のテンペ菌発酵物溶液820g(固形分濃度3.2%)を得た。
乾燥したローゼルの萼50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り、この液をアルカリで中和してpH約6とした後、80〜90℃で1時間加温して殺菌した。
殺菌した懸濁液に、ペクチンエステラーゼ1.0g、グルコアミラーゼ0.1g及びパパイン0.1gを加え、さらに乳酸菌(ラクトバシルス・プランタラム)を108個/mL接種し、37℃で3日間静置培養と酵素加水分解処理を行った。
培養終了後85〜90℃で1時間加熱して殺菌と酵素失活を行い、冷却後に培養液をろ過してローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液850g(固形分濃度4.1%)を得た。
酵素として、ペクチンエステラーゼ1.0g、グルコアミラーゼ0.1g及びパパイン0.1gに代えてグルコアミラーゼ0.1gを用いるほかは実施例9と同様にしてローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液810g(固形分濃度3.5%)を得た。
酵素として、ペクチンエステラーゼ1.0g、グルコアミラーゼ0.1g及びパパイン0.1gに代えてパパイン0.1gを用いるほかは実施例9と同様にしてローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液805g(固形分濃度3.4%)を得た。
乾燥したローゼルの萼に代えて乾燥したローゼルの葉の細切物を用いるほかは実施例4と同様にしてローゼルの葉の乳酸菌発酵物溶液820g(固形分濃度3.6%)を得た。
乾燥したローゼルの萼に代えて乾燥したローゼルの根の細切物を用いるほかは実施例4と同様にしてローゼルの根の乳酸菌発酵物溶液720g(固形分濃度2.6%)を得た。
乾燥したローゼルの萼に代えて乾燥したローゼルの全草の細切物を用いるほかは実施例4と同様にしてローゼルの全草の乳酸菌発酵物溶液780g(固形分濃度2.8%)を得た。
実施例4で得られたローゼルの萼の乳酸菌発酵物溶液500gを濃縮後凍結乾燥し、これを粉砕して発酵物粉末18gを得た。
乾燥したローゼルの萼50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り、この液にペクチナーゼ1.0gを加えた後40℃で3時間加水分解処理を行った。
この加水分解懸濁液をアルカリで中和してpH約6とした後、80〜90℃で1時間加温して酵素を加熱失活させ、ろ過を行ってローゼルの萼の酵素加水分解物溶液810g(固形分濃度4.0%)を得た。
乾燥したローゼルの萼50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り加熱した。冷却後、この懸濁液をアルカリで中和してpH約6とし、ろ過してローゼルの萼の抽出物溶液720g(固形分濃度2.8%)を得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 5.0
ヘキサラン (注1) 4.0
パラフィン 5.0
グリセリルモノステアレート 2.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 6.0
ブチルパラベン 0.1
(注1)株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル
[B成分]
実施例4の発酵物溶液 10.0
グリセリン 5.0
カルボキシメチルモノステアレート 0.1
モイストン・C (注2) 1.0
精製水 全量が100部となる量
(注2)株式会社テクノーブル製 NMF成分
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
処方例1のB成分中実施例4の発酵物溶液に代えて実施例2の発酵物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
処方例1のB成分中実施例4の発酵物溶液に代えて実施例3の発酵物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
処方例1のB成分中実施例4の発酵物溶液に代えて実施例12の発酵物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
処方例1のB成分中実施例4の発酵物溶液に代えて実施例13の発酵物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
処方例1のB成分中実施例4の発酵物溶液に代えて実施例14の発酵物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
実施例1の発酵物溶液 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。こ
れを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
処方例7のB成分中実施例1の発酵物溶液に代えて実施例5の発酵物溶液を用いるほかは処方例7と同様にして乳液を得た。
処方例7のB成分中実施例1の発酵物溶液に代えて実施例6の発酵物溶液を用いるほかは処方例7と同様にして乳液を得た。
処方例7のB成分中実施例1の発酵物溶液に代えて実施例7の発酵物溶液を用いるほかは処方例7と同様にして乳液を得た。
処方例7のB成分中実施例1の発酵物溶液に代えて実施例8の発酵物溶液を用いるほかは処方例7と同様にして乳液を得た。
[成分] 部
実施例9の発酵物溶液 10.0
エタノール 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
メチルパラベン 0.2
クエン酸 0.1
クエン酸ナトリウム 0.3
カルボキシビニルポリマー 0.1
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。
処方例12の成分中実施例9の発酵物溶液に代えて実施例4の発酵物溶液を用いるほかは処方例12と同様にしてローションを得た。
処方例12の成分中実施例9の発酵物溶液に代えて実施例14の発酵物溶液を用いるほかは処方例12と同様にしてローションを得た。
[A成分] 部
オリーブ油 1.0
ポリオキシエチレン(5.5)セチルアルコール 5.0
ブチルパラベン 0.1
[B成分]
実施例10の発酵物溶液 10.0
エタノール 5.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
メチルパラベン 0.1
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃以上に加温後、A成分にB成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン(5000rpm)で2分間ホモジナイズを行った。
これを50℃まで冷却した後、C成分を加えて攪拌混合し、さらに30℃以下まで冷却して化粧水を得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
実施例4の発酵物溶液 10.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルマグネシウム2.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルナトリウム2.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてアルブチン2.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えて米糠抽出物加水分解物(株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ*雪*HP」、固形分濃度3.5%)5.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えて白芥子抽出物(株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−WH」、固形分濃度1.0%)5.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
処方例16のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸1.0部を用いるほかは処方例16と同様にして乳液を得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
実施例11の発酵物溶液 10.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
コエンザイムQ−10 0.1
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
実施例3の発酵物溶液 10.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
豆乳乳酸菌発酵エキス 1.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
[A成分] 部
ベンガラ 0.5
黄酸化鉄 1.5
黒酸化鉄 0.1
酸化チタン 10.0
ナイロンパウダー 4.0
セリサイト 全量が100部となる量
マイカ 23.0
タルク 25.0
実施例15の発酵物粉末 1.0
[B成分]
スクワラン 1.0
メチルポリシロキサン 4.0
プロピルパラベン 0.1
デヒドロ酢酸 0.1
流動パラフィン 2.0
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、200メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
[A成分] 部
ステアリン酸 2.4
モノステアリン酸プロピレングリコール 2.0
セトステアリルアルコール 0.2
液状ラノリン 2.0
流動パラフィン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.5
プロピルパラベン 0.05
[B成分]
実施例4の発酵物溶液 5.0
カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.2
ベントナイト 0.5
プロピレングリコール 4.0
トリエタノールアミン 1.1
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
酸化チタン 8.0
タルク 4.0
着色顔料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のC成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。
処方例26のB成分中、実施例4の発酵物溶液に代えて実施例12の発酵物溶液を用いるほかは処方例26と同様にしてリクイドファンデーションを得た。
[A成分] 部
ステアリン酸 5.0
セタノール 2.0
モノステアリン酸グリセリル 3.0
流動パラフィン 5.0
スクワラン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.0
ポリオキシエチレン(20)モノステアリン酸グリセリル 2.0
プロピルパラベン 0.1
[B成分]
実施例1の発酵物溶液 5.0
ソルビトール 3.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
トリエタノールアミン 1.5
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
酸化チタン 8.0
タルク 2.0
カオリン 5.0
ベントナイト 1.0
着色顔料 適 量
[D成分]
香料 0.3
C成分を混合し、粉砕機で粉砕した。B成分を混合し、これに粉砕したC成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。A成分及び均一分散させたB、C成分をそれぞれ80℃に加温後、B、C成分にA成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン(5000rpm)で2分間ホモジナイズを行った。これを50℃まで冷却した後、D成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら30℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
処方例28のB成分中、実施例1の発酵物溶液に代えて実施例13の発酵物溶液を用いるほかは処方例28と同様にしてクリームファンデーションを得た。
[A成分] 部
N−ラウロイルメチルアラニンナトリウム 25.0
ヤシ油脂肪酸カリウム液(40%) 26.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 3.0
メチルパラベン 0.1
[B成分]
実施例9の発酵物溶液 10.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
[A成分] 部
硬化ヒマシ油 26.0
ヤシ油 10.0
オリーブ油 4.0
[B成分]
水酸化ナトリウム 6.0
砂糖 10.0
グリセリン 5.0
実施例10の発酵物溶液 5.0
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
エタノール 20.0
香料 適量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら50℃まで冷却し、C成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
処方例1のB成分中、実施例4の発酵物溶液に代えて比較実施例2の抽出物溶液を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
処方例1のB成分中、実施例4の発酵物溶液に代えて精製水を用いるほかは処方例1と同様にしてクリームを得た。
[試料]
実施例1及び4で得られた本発明の発酵物溶液、並びに比較実施例1の酵素加水分解物溶液及び比較実施例2の抽出物溶液を試料として用い、それらの表皮細胞賦活作用を調べた。
[試験方法]
ヒト表皮細胞PHK16−0b(Lot.040817(4))を、96穴マイクロプレートに1×104個/穴の濃度となるように播種した。培地としては、MCDB153(SIGMA社製)に増殖促進剤としてエピダーセルHKGS(クラボウ社製)を添加したものを用いた。37℃で2日間プレ培養した後、培地に試料溶液を5.0%の濃度(溶液濃度として)となるように添加し、37℃でさらに4日間培養した。次に培地を除去し、PBS(−)を用いて調製した0.03%のMTT溶液を添加して37℃に保持した後、マイクロプレートリーダー(MODEL680、バイオラッド社製)を用い、波長570−630nmでMTT値を測定した。
試料無添加の場合(対照)についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたMTT値に対する各試料添加時のMTT値の相対値を求め、ヒト表皮細胞MTT活性率(%)とした。
なお比較のため、試料溶液の代わりにグルコースを100mM添加した場合(陽性対照)についても、同様の試験を行った。
又表1の結果から、本発明の発酵物溶液の示す表皮細胞賦活作用は、発酵に際して酵素加水分解処理を併用した場合(実施例4)に於いて特に顕著となることが判る。
[試料]
実施例4、5、6、7及び8で各々得られた発酵物溶液を試料として用い、それら発酵物溶液の表皮細胞賦活作用を調べた。
[試験方法]
試験例1と同様にして行った。
[試料]
実施例4、12、13及び14で各々得られた発酵物溶液を試料として用い、それら発酵物溶液の表皮細胞賦活作用を調べた。
[試験方法]
試験例1と同様にして行った。
[試料]
実施例1及び4で各々得られた発酵物溶液を試料として用い、ヒト表皮細胞の紫外線損傷に対するそれら発酵物溶液の抑制作用を調べた。
[試験方法]
ヒト表皮細胞PHK16−0b(Lot.050506(12))を、96穴マイクロプレートに1×104個/穴の濃度となるように播種した。培地としては、MCDB153(SIGMA社製)に増殖促進剤としてエピダーセルHKGS(クラボウ社製)を添加したものを用いた。37℃で2日間プレ培養した後、底面より紫外B波を90mJ/cm2 の量になるように照射した。その後、試料溶液を5.0%の濃度(溶液濃度として)で含む培地と交換し、37℃でさらに4日間培養した。次に培地を除去し、PBS(−)を用いて調製した0.03%のMTT溶液を添加して37℃に保持した後、マイクロプレートリーダー(MODEL680、バイオラッド社製)を用い、波長570−630nmでMTT値を測定した。
紫外線照射・試料無添加の場合(対照)についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたMTT値に対する各試料添加時のMTT値の相対値を求め、ヒト表皮細胞MTT活性率(%)とした。
なお比較のため、試料溶液の代わりにグルコースを100mM添加した場合(陽性対照)についても、同様の試験を行った。
又表4の結果から、本発明の発酵物溶液の示す表皮細胞の紫外線損傷防御作用は、発酵に際して酵素加水分解処理を併用した場合(実施例4)に於いてとりわけ顕著となることが判る。
[試料]
実施例4、5、6、7及び8で各々得られた発酵物溶液を試料として用い、ヒト表皮細胞の紫外線損傷に対するそれら発酵物溶液の抑制作用を調べた。
[試験方法]
試験例4と同様にして行った。
[試料]
実施例4、12、13及び14で各々得られた発酵物溶液を試料として用い、ヒト表皮細胞の紫外線損傷に対するそれら発酵物溶液の抑制作用を調べた。
[試験方法]
試験例1と同様にして行った。
モルモットを用いて、本発明のフヨウ(ハイビスカス)属植物発酵物の皮膚一次刺激性を調べた。
[試料]
(1) 実施例1の発酵物溶液
(2) 実施例4の発酵物溶液
(3) 実施例8の発酵物溶液
Hartley系モルモット(雄、4週齢)3匹(GA、GB及びGC)を用い、その背部をバリカン及び電気シェーバーで除毛した後、除毛部に、パッチテスト用絆創膏の布地部(直径25mm)に実施例1、4もしくは8の発酵物溶液、又は対照として精製水0.5mLを湿潤させたものを貼付した。貼付開始から24時間後に絆創膏を除去し、除去直後(貼付開始から24時間後)、除去24時間後(貼付開始から48時間後) 及び除去48時間後(貼付開始から72時間後)に、絆創膏貼付部位の紅斑、痂皮及び浮腫形成の程度を観察し、下記のドレイズ(Draize)の判定基準に従って評価した。
スコア 皮膚の状態
0 : 紅斑なし
1 : 極く軽度の紅斑
2 : 明らかな紅斑
3 : 中程度から強い紅斑
4 : 深紅色の強い紅斑に軽い痂皮形成
(浮腫)
スコア 皮膚の状態
0 : 浮腫なし
1 : 極く軽度の浮腫
2 : 明らかな浮腫(周囲と明らかに区別可能)
3 : 中程度の浮腫(1mm以上の盛り上がり)
4 : 強い浮腫(さらに周囲にも広がり)
処方例1のクリームと比較処方例1及び2のクリームについて、モニターテストにより皮膚に対する効果を調べた。
[試験方法]
無作為に抽出した年齢18〜50歳の女性40名を被験者として20名ずつ2つのグループ(A、B)に分け、各グループに、処方例1と比較処方例1のクリーム又は処方例1と比較処方例2のクリームの2種の組み合わせのいずれかを割り振り、それぞれ左右の頬部に、実施例又は比較例のクリームを1日2回(朝、晩)、1ヵ月間塗布してもらった後、シミ、くすみに対する改善効果、小ジワに対する改善効果及び肌のはり、艶に対する改善効果を、以下の評価基準に基づいて評価した。
(肌のシミ、くすみに対する改善効果)
A:非常に改善された
B:かなり改善された
C:僅かに改善された
D:変わらない
E:かえって目立つようになった
(小ジワに対する改善効果)
A:殆ど目立たなくなった
B:かなり目立たなくなった
C:わずかに目立たなくなった
D:変わらない
E:かえって増えた
(肌のはり、艶に対する改善効果)
A:明らかに改善された
B:かなり改善された
C:僅かに改善された
D:変わらない
E:かえって悪くなった
これに対して、従来公知のフヨウ(ハイビスカス)植物ローゼルの抽出物を配合したクリーム(比較処方例1)や精製水を配合したクリーム(比較処方例2)では殆ど改善効果が見られず、明らかに有効性に違いがある結果となった。
Claims (4)
- アオイ科(Malvaceae)フヨウ(ハイビスカス)属(Hibiscus L.)の植物であるローゼル(Hibiscus sabdariffa L.)の萼を、乳酸菌により発酵させて得られる発酵物。
- 乳酸菌としてラクトバチルス プランタラム(Lactobacillus plantarum)を用いる請求項1に記載の発酵物。
- アオイ科フヨウ(ハイビスカス)属植物を、その発酵前及び/又は発酵時に、蛋白分解酵素、糖質分解酵素及びペクチン質分解酵素から選ばれた少なくとも1種の酵素で加水分解処理する請求項1に記載の発酵物。
- 請求項1乃至3のいずれか1項に記載の発酵物を配合したことを特徴とする化粧料。
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