JP4693623B2 - 化粧料 - Google Patents
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Description
この紫外線や大気汚染物質による皮膚の酸化ダメージに起因する皮膚の老化や色素沈着を防ぐため、従来から化粧料や皮膚外用剤中にブチルヒドロキシトルエンやビタミンEなどの抗酸化剤やメラニン色素の生成を抑制するための美白剤を配合することが行われている。
しかしながら、それら従来の抗酸化剤や美白剤を用いる方法の場合にあっては、製剤としての安定性や生体に対する安全性の観点から、化粧料中への配合量がしばしば制限されるため、必ずしも十分満足し得る効果は得られないという問題点がある。
また、活性酸素を消去することを目的として、カタラーゼやスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)などの活性酸素消去能を有する酵素を化粧料に添加することも行われているが、これら酵素は安定性が非常に悪く、化粧料に配合しても経時的に活性が低下して、実使用時においては抗酸化能を十分に発揮されない問題がある。さらにSODについては、感作性が有るなど安全性の点でも問題を抱えている。
例えば、特開平10-17459号公報及び特開平10-25236号公報には、肌の不均一性(くすみ)改善作用の増強作用が、特開平11-263718号公報にはヒト皮膚由来インテグリン発現促進作用が、特開平9-241127号公報には脂質分解作用(痩身作用)が、特開平4-5237号公報にはスーパーオキシド消去作用が、特開2000-169359号公報にセラミド産生促進効果が、特開平08-20522号公報には角化酵素活性促進作用が、特開平10-36279号公報には線維芽細胞増殖作用が有ることがそれぞれ開示されている。
なお、特開平4-5237号公報に於いて、ニンジンなどの生薬のエキスが、スーパーオキサイドアニオンを消去する作用(SOD様作用)を奏することがin vitroで解明され、かかる目的でニンジンエキスを利用することが提案されているが、スーパーオキサイドアニオンはSODによって過酸化水素を生成するため、SOD様作用のみでは充分な抗酸化効果を得ることは困難である。さらに特開平10-36279号公報には、オタネニンジンの根の抽出物が線維芽細胞増殖作用を有することが開示されているが、後に試験例3に示すとおり、本発明者らがオタネニンジンの根の抽出物とその発酵物について、それらの線維芽細胞賦活作用を比較した結果では、発酵物の方が遙かに強い作用を有することが明らかとなっており、従って抽出物と発酵物とでは、線維芽細胞に対する作用成分がそもそも異なるか、もしくは作用機序に於いて明らかな相違があるものと考えられる。
(a)ウコギ科トチバニンジン属の植物であるオタネニンジン(Panax ginseng C.A.
Meyer)及び/又はトチバニンジン(Panax japonica C.A.Meyer)、又はそのエキスを乳酸菌、麹菌、酵母、納豆菌及びテンペ菌から選ばれた微生物により発酵させて得られるものである
(b)カタラーゼ活性亢進作用とヒドロキシラジカル消去作用を併せ持つものである。
ここでエキスとは、トチバニンジン属植物の全体もしくは特定の部位の乾燥粉砕物、抽出物、搾汁液、或いは抽出物や搾汁液の乾燥粉砕物などを言い、該植物の構成成分を含有するものであれば、その調製法等には特に制限はない。
又、本発明に於いて、化粧料なる文言は、所謂化粧料のほかに医薬部外品をも含む広義で用いる。
従って、かかる植物発酵物を有効成分として含む本発明の化粧料は、該有効成分が有する複合的、多面的な皮膚生理活性に基づき、シワやタルミ或いはシミ、ソバカスなどの皮膚の老化や不健全化症状の予防或いは改善にすぐれた効果を発揮し、皮膚を真に健全で若々しい状態に維持、改善する。
さらに本発明化粧料の活性成分は、天然物由来のものであるが故に皮膚刺激性等がなく、このため本発明の化粧料は生体安全性にも大変すぐれている。
本発明で用いるウコギ科トチバニンジン属の植物としては、例えばオタネニンジン(Panax Ginseng C.A. Meyer)或いはトチバニンジン(Panax japonica C.A.Meyer)などが挙げられるが、それらのうちでも、発酵物の奏する総合的な美白、美肌化効果の観点からオタネニンンジン(Panax Ginseng C.A. Meyer)の使用が最も好ましい。
以下、本発明に於けるトチバニンジン属植物の発酵の好ましい具体例を、植物体の懸濁液を資化源として用いる場合、及びエキスのうちでも抽出物を資化源として用いる場合について述べる。
植物体と溶媒との混合比は、植物体の乾燥重量換算で一般に1:1〜1:100、好ましくは1:10〜1:50の範囲である。
それら抽出溶媒のうちでも、発酵工程への移行が簡便である点から、水、低級アルコール類及び多価アルコール類から選ばれた一種の単独溶媒又は二種以上の混合溶媒の使用が好ましく、なかでも水の単独使用が最も好ましい。
水以外の溶媒を含む混合溶媒を用いた場合は、発酵させるために一度溶媒を濃縮などの操作で留去した後、固形分として0.01〜10%となるように水に溶解して発酵の資化源とする。
この雑菌の殺菌除去方法としては、植物体を予め殺菌用エタノール等で洗浄した後無菌水等の無菌溶媒に懸濁する方法を用いてもよく、又植物体を溶媒に懸濁し或いは溶媒で抽出した後、懸濁液或いは抽出物溶液を加熱殺菌等により殺菌するようにしてもよい。
加熱殺菌処理としては、懸濁液或いは抽出物溶液を120〜130℃で10〜20分間加熱するオートクレーブ殺菌法や、80〜90℃に60〜120分間保持することを1日1回2〜3日間繰り返す間断殺菌法といった加熱殺菌法が一般に用いられる。
本発明に於いて、トチバニンジン属植物或いはそのエキスの発酵に用いる菌としては、例えば乳酸菌、麹菌、酵母、納豆菌、テンペ菌などを挙げることができる。
ここで、乳酸菌としては、例えばラクトバシルス プランタラム(Lactobacillus plantarum)、ラクトバシルス ブレビス(L. brevis)、ラクトバシルス カゼイ(L. casei)等のラクトバシルス(Lactobacillus)属の乳酸菌;カルノバクテリウム ディバージェンス(Carnobacterium divergens)、カルノバクテリウム ピシコーラ(C. piscicola)等のカルノバクテリウム(Carnobacterium)属の乳酸菌;ロイコノストック メセンテロイズ(Leuconostoc mesenteroides)、ロイコノストック シトレウム(L. citreum)等のロイコノストック(Leuconostoc)属の乳酸菌;ストレブトコッカス フェーカリス(Streptococcus faecalis)、ストレブトコッカス ピオジェネス(S. pyogenes)等のストレブトコッカス(Streptococcus)属の乳酸菌;エンテロコッカス・カゼリフラバス(Enterococcus caseliflavus)、エンテロコッカス サルフレウス(E. sulfreus)等のエンテロコッカス(Enterococcus)属の乳酸菌;ラクトコッカス・プランタラム(Lactococcus plantarum)、ラクトコッカス ラフィノラクティス(L. rafinolactis)等のラクトコッカス(Lactococcus)属の乳酸菌;ヴェイセラ コンフューザ(Weissella confusa)、ヴェイセラ カンドゥレリ(W. kandleri)等のヴェイセラ(Weissella)属の乳酸菌;アトポビウム ミニュタム(Atopobium minutum)、アトポビウム パービュラス(A. parvulus)等のアトポビウム(Atopobium)属の乳酸菌;バゴコッカス フルビアリス(Vagococcus fluvialis)、バゴコッカス サーモニナラム(V. salmoninarum)等のバゴコッカス(Vagococcus)属の乳酸菌;ペディオコッカス ダムノサス(Pediococcus damnosus)、ペディオコッカス ペントサセウス(P. pentosaceus)等のペディオコッカス(Pediococcus)属の乳酸菌等が挙げられるが、それら乳酸菌のうちでも、得られる発酵物の作用効果の観点と取り扱いのし易さの点から、ラクトバチルス プランタラム(Lactobacillus plantarum)の使用が最も好ましい。
この場合、酵素としては、アクチナーゼ、パパインなどの蛋白分解酵素、グルコアミラーゼ、α-アミラーゼなどの澱粉分解酵素及びセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、ペクチナーゼなどの繊維素分解酵素から選ばれた1種又は2種以上が用いられ、特にそれら3種の酵素群からそれぞれ選ばれた1種又は2種以上の酵素を組み合わせ用いることによって好結果を得ることができる。
酵素の添加量は、懸濁液中のトチバニンジン属植物の固形分に対して、合計で0.01〜10重量%が好ましく、0.1〜5.0重量%がより好ましい。また、トチバニンジン属植物のエキスの固形分に対しては、合計で0.01〜10.0重量%が好ましく、0.1 〜5.0 重量%がより好ましい。
温度、時間の処理条件としては、酵素処理を発酵前に行うのであれば、各酵素の至適温度付近で1〜24時間の処理を行うのがよく、一方発酵と同時に行うのであれば、前記の発酵と同条件が適用される。
又、本発明の発酵物の有効性や特長を損なわない限り、通常用いられる抗酸化剤を併せ配合することもできる。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌発酵米、乳酸菌発酵発芽米、乳酸菌発酵穀類(麦類、豆類、雑穀など)、ジュアゼイロ(Zizyphus juazeiro:Rhamnaceae)抽出物等を配合することもできる。
オタネニンジンの根の細切物100gに精製水900gを混合し、80℃で2時間抽出を行った後ろ過し、約500gの淡黄色透明の抽出物溶液を得た(固形分濃度3.87%)。ここに得られた抽出物溶液を加熱殺菌した。この抽出物溶液にパパイン0.2g、グルコアミラーゼ0.2g及びペクチナーゼ0.2gを加えた後、乳酸菌(ラクトバシルス ブランタラム)を108個/mL接種し、窒素気流下に37℃で18時間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300g(固形分濃度3.89%)を得た。
発酵に用いる菌として乳酸菌に代えて麹菌(アスペルギルス オリゼー)を用いる他は製造例1と同様(但し、培養中の窒素通気なし)にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液350g(固形分濃度3.49%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えて酵母(サッカロミセス セレビシエ)を用いる他は製造例2と同様(但し、培養温度は30℃)にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液380g(固形分濃度3.51%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えて納豆菌(バシルス ナットー)を用いる他は製造例2と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液390g(固形分濃度3.72%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えてテンペ菌(リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス)を用いる他は製造例2と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液370g(固形分濃度3.68%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてラクトコッカス プランタラムを用いる他は製造例1と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液320g(固形分濃度3.65%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてストレプトコッカス フェーカリスを用いる他は製造例1と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液320g(固形分濃度3.59%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてカルノバクテリウム ディバージェンスを用いる他は製造例1と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液290g(固形分濃度3.91%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてロイコノストック メセンテロイズを用いる他は製造例1と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液310g(固形分濃度3.61%)を得た。
麹菌としてアスペルギルス オリゼーに代えてアスペルギルス アワモリを用いる他は製造例2と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液370g(固形分濃度3.45%)を得た。
酵母としてサッカロミセス セレビシエに代えてカンディダ ベルサチリスを用いる他は製造例3と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液360g(固形分濃度3.36%)を得た。
納豆菌としてバシルス ナットーに代えてバシルス サブチルスを用いる他は製造例4と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液380g(固形分濃度3.55%)を得た。
テンペ菌としてリゾプス・ミクロスポラス オリゴスポラスに代えてリゾプス オリゼーを用いる他は製造例5と同様にして、オタネニンジン根抽出物の発酵物溶液330g(固形分濃度3.64%)を得た。
培養期間を3日間とする他は製造例1と同様にしてオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液310g(固形分濃度3.95%)を得た。
培養期間を3日間とする他は製造例2と同様にしてオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液370g(固形分濃度3.84%)を得た。
培養期間を3日間とする他は製造例3と同様にしてオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液360g(固形分濃度3.77%)を得た。
培養期間を3日間とする他は製造例4と同様にしてオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液370g(固形分濃度3.84%)を得た。
培養期間を3日間とする他は製造例5と同様にしてオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液355g(固形分濃度3.63%)を得た。
オタネニンジンの根に代えて葉の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例1と同様にしてオタネニンジン葉抽出物の乳酸菌発酵物溶液480g(固形分濃度1.45%)を得た。
オタネニンジンの根に代えて葉の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例3と同様にしてオタネニンジン葉抽出物の酵母発酵物溶液430g(固形分濃度1.38%)を得た。
オタネニンジンの根に代えて全草の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例1と同様にしてオタネニンジン全草抽出物の乳酸菌発酵物溶液410g(固形分濃度2.21%)を得た。
オタネニンジンの根に代えて全草の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例3と同様にしてオタネニンジン全草抽出物の酵母発酵物溶液425g(固形分濃度2.28%)を得た。
オタネニンジンの根の細切物100gに精製水1900gを混合し、80℃で4時間抽出を行った後ろ過し、約1600gの淡黄色透明の抽出物溶液を得た(固形分濃度1.82%)。ここに得られた抽出物溶液を加熱殺菌した。この抽出物溶液に乳酸菌(ラクトバシルス プランタラム)を108個/mL接種し、窒素気流下に30℃で18時間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、オタネニンジン根抽出物の乳酸菌発酵液1300g(固形分濃度1.89%)を得た。
オタネニンジンの根の細切物100gに精製水900gを混合し、80℃で4時間抽出を行った後ろ過し、約500gの淡黄色透明の抽出物溶液を得た。ここに得られた抽出物溶液を加熱殺菌した。この抽出物溶液に麹菌(アスペルギルス オリゼー)を108個/mL接種し、30℃で18時間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、オタネニンジン根抽出物の麹菌発酵液345g(固形分濃度3.45%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えて酵母(サッカロミセス セレビゼー)を用いる他は製造例24と同様(但し、培養温度は30℃)にして、オタネニンジン根抽出物の酵母発酵液370g(固形分濃度3.41%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えて納豆菌(バシルス ナットー)を用いる他は製造例24と同様にしてオタネニンジン根抽出物の納豆菌発酵液370g(固形分濃度3.50%)を得た。
発酵に用いる菌として麹菌に代えてテンペ菌(リゾプス ミクロスポラス オリゴスポラス)を用いる他は製造例24と同様にしてオタネニンジン根抽出物のテンペ菌発酵液345g(固形分濃度3.37%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジンの根の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例1と同様にしてトチバニンジン根抽出物の乳酸菌発酵物溶液380g(固形分濃度3.42%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジンの根の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例2と同様にしてトチバニンジン根抽出物の麹菌発酵物溶液380g(固形分濃度3.34%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジンの根の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例3と同様にしてトチバニンジン根抽出物の酵母発酵物溶液380g(固形分濃度3.42%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジンの根の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例4と同様にしてトチバニンジン根抽出物の納豆菌発酵物溶液380g(固形分濃度3.55%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジン全草の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例3と同様にしてトチバニンジン全草抽出物の酵母発酵物溶液385g(固形分濃度3.28%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジン全草の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例4と同様にしてトチバニンジン全草抽出物の納豆菌発酵物溶液370g(固形分濃度3.18%)を得た。
オタネニンジンの根に代えてトチバニンジンの葉の細切物を用いて抽出物溶液を調製する他は製造例5と同様にしてトチバニンジン葉抽出物のテンペ菌発酵物溶液375g(固形分濃度3.22%)を得た。
オタネニンジンの根の細切物100gに精製水900gを混合し、懸濁液を調製し、加熱殺菌した。この懸濁液にパパイン1.0g、グルコアミラーゼ1.0g及びペクチナーゼ1.0gを加えた後、乳酸菌(ラクトバシルス プランタラム)を108個/mL接種し、窒素気流下に30℃で3日間静置培養した。培養終了後加熱殺菌し、培養液をろ過して、脱臭、脱色処理を行い、オタネニンジンの根の乳酸菌発酵物溶液610g(固形分濃度4.42%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてストレプトコッカス フェーカリスを用いる他は製造例35と同様にして、オタネニンジンの根の乳酸菌発酵物溶液530g(固形分濃度3.92%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてカルノバクテリウム ディバージェンスを用いる他は製造例35と同様にして、オタネニンジンの根の乳酸菌発酵物溶液570g(固形分濃度3.81%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてロイコノストック メセンテロイズを用いる他は製造例35と同様にして、オタネニンジンの根の乳酸菌発酵物溶液560g(固形分濃度3.78%)を得た。
乳酸菌としてラクトバシルス プランタラムに代えてラクトコッカス プランタラムを用いる他は製造例35と同様にして、オタネニンジンの根の乳酸菌発酵物溶液610g(固形分濃度2.97%)を得た。
発酵に用いる菌として乳酸菌に代えて麹菌(アスペルギルス オリゼー)を用いる他は製造例35と同様(但し、培養中の窒素通気なし)にして、オタネニンジンの根の麹菌発酵物溶液360g(固形分濃度3.87%)を得た。
麹菌に代えて酵母(サッカロミセス セレビシエ)を用いる他は製造例40と同様(但し、培養温度30℃)にして、オタネニンジンの根の酵母発酵物溶液380g(固形分濃度4.05%)を得た。
製造例1と同様にして得たオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300gを凍結乾燥し、これを粉砕しオタネニンジン根抽出物の乳酸菌発酵物粉末11gを得た。
製造例2と同様にして得たオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300gを凍結乾燥し、これを粉砕しオタネニンジン根抽出物の麹菌発酵物粉末10gを得た。
製造例3と同様にして得たオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300gを凍結乾燥し、これを粉砕しオタネニンジン根抽出物の酵母発酵物粉末10gを得た。
製造例4と同様にして得たオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300gを凍結乾燥し、これを粉砕しオタネニンジン根抽出物の納豆菌発酵物粉末11gを得た。
製造例5と同様にして得たオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液300gを凍結乾燥し、これを粉砕しオタネニンジン根抽出物のテンペ菌発酵物粉末11gを得た。
製造例1において、酵素および乳酸菌を添加する前の段階で一部を採取し、脱臭、脱色処理を行い、オタネニンジン根抽出物溶液を得た(固形分3.87%)。
製造例1において、乳酸菌を植菌しない他は製造例1と同様にして、オタネニンジン根抽出物の酵素加水分解物溶液を得た(固形分3.96%)。
[A成分] 部
流動パラフィン 5.0
ヘキサラン (注1) 4.0
パラフィン 5.0
グリセリルモノステアレート 2.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 6.0
ブチルパラベン 0.1
(注1)株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル
[B成分]
製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
グリセリン 5.0
メチルパラベン 0.1
モイストン・C (注2) 1.0
精製水 全量が100部となる量
(注2)株式会社テクノーブル製 NMF成分
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例2のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例3のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例4のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例5のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例6のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例10のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例11のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例12のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例13のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例14のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例36のオタネニンジンの根の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例37のオタネニンジンの根の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例38のオタネニンジンの根の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例41のオタネニンジンの根の発酵物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
[成分] 部
製造例24のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
エタノール 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
メチルパラベン 0.2
クエン酸 0.1
クエン酸ナトリウム 0.3
カルボキシビニルポリマー 0.1
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。
[A成分] 部
オリーブ油 1.0
ポリオキシエチレン(5.5)セチルエーテル 0.5
ブチルパラベン 0.1
[B成分]
製造例15のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
エタノール 5.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
メチルパラベン 0.1
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃以上に加温後、A成分にB成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン(5000rpm)で2分間ホモジナイズを行った。
これを50℃まで冷却した後、C成分を加えて攪拌混合し、さらに30℃以下まで冷却して化粧水を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例19のオタネニンジン葉抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例21のオタネニンジン全草抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例23のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例28のトチバニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例29のトチバニンジン根抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例32のトチバニンジン全草抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例33のトチバニンジン全草抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例34のトチバニンジン葉抽出物の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
実施例16のB成分中、製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて製造例35のオタネニンジンの根の発酵物溶液を用いるほかは実施例16と同様にして乳液を得た。
[A成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 2.0
大豆レシチン 1.5
メチルパラベン 0.15
エチルパラベン 0.03
[B成分]
製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ80℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを50℃まで冷却した後、C成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルマグネシウム2.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルナトリウム2.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてアルブチン2.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えて米糠抽出物加水分解物(株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ*雪*HP」、固形分濃度3.5%)5.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えて白芥子(Brassica Alba)種子抽出物(株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−WH」、固形分濃度1.0%)5.0部を用いるほかは実施例24と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸1.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
実施例28のB成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えて米抽出物加水分解物(株式会社テクノーブル製、商品名「オリゼノーブル」、固形分濃度1.5%)5.0部を用いるほかは実施例28と同様にして乳液を得た。
[成分] 部
製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
エタノール 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
メチルパラベン 0.2
クエン酸 0.1
クエン酸ナトリウム 0.3
アルギン酸ナトリウム 0.1
水酸化カリウム 適量
香料 適量
精製水 全量が100部となる量
上記の成分を混合してローションを得た。
[A成分] 部
ベンガラ 0.5
黄酸化鉄 1.5
黒酸化鉄 0.1
酸化チタン 10.0
6−ナイロンパウダー 4.0
セリサイト 全量が100部となる量
マイカ 23.0
タルク 25.0
製造例42のオタネニンジン根抽出物の発酵物粉末 0.1
[B成分]
スクワラン 1.0
メチルポリシロキサン 4.0
プロピルパラベン 0.1
デヒドロ酢酸 0.1
流動パラフィン 2.0
香料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、200メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
[A成分] 部
ステアリン酸 2.4
モノステアリン酸プロピレングリコール 2.0
セトステアリルアルコール 0.2
液状ラノリン 2.0
流動パラフィン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.5
プロピルパラベン 0.05
[B成分]
製造例22のオタネニンジン全草抽出物の発酵物溶液 5.0
カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.2
ベントナイト 0.5
プロピレングリコール 4.0
トリエタノールアミン 1.1
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
酸化チタン 8.0
タルク 4.0
着色顔料 適量
上記のA成分とB成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のC成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリキッドファンデーションを得た。
[A成分] 部
ステアリン酸 5.0
セタノール 2.0
モノステアリン酸グリセリル 3.0
流動パラフィン 5.0
スクワラン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.0
ポリオキシエチレン(20)モノステアリン酸グリセリル 2.0
プロピルパラベン 0.1
[B成分]
製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 5.0
ソルビトール 3.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
トリエタノールアミン 1.5
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
酸化チタン 8.0
タルク 2.0
カオリン 5.0
ベントナイト 1.0
着色顔料 適 量
[D成分]
香料 0.3
C成分を混合し、粉砕機で粉砕した。B成分を混合し、これに粉砕したC成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。A成分及び均一分散させたB、C成分をそれぞれ80℃に加温後、B、C成分にA成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン(5000rpm)で2分間ホモジナイズを行った。これを50℃まで冷却した後、D成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら30℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
[A成分] 部
エタノール 60.0
O−メチルセファランチン 0.002
l−メントール 0.5
香料 0.1
メチルパラベン 0.1
[B成分]
グリセリン 2.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
製造例26のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
精製水 全量が100部となる量
上記のA成分とB成分をそれぞれ常温で溶解した後、A成分にB成分を攪拌しながら加え溶解させてヘアートニックを得た。
[成分] 部
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 6.0
ポリビニルピロリドン 4.0
グリセリン 1.0
エチルパラベン 0.1
製造例2のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 5.0
精製水 全量が100部となる量
上記の成分を80℃に加温した後混合攪拌してヘアートリートメントを得た。
本品はヘアーパックとしても好適なものであった。
[A成分] 部
N−ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム 10.0
ポリオキシエチレン(3)アルキルエーテル硫酸ナトリウム 20.0
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン 10.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0
メチルパラベン 0.1
[B成分]
クエン酸 0.1
製造例40のオタネニンジンの根の発酵物溶液 5.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアーシャンプーを得た。
[A成分] 部
ポリオキシエチレン(10)硬化ヒマシ油 1.0
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム 1.5
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 2.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 1.0
セタノール 3.2
ステアリルアルコール 1.0
メチルパラベン 0.1
[B成分]
製造例18のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
精製水 全量が100部となる量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してヘアーリンスを得た。
[A成分] 部
N−ラウロイルメチルアラニンナトリウム 25.0
ヤシ油脂肪酸カリウム液(40%) 26.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 3.0
メチルパラベン 0.1
[B成分]
製造例24のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 10.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
[A成分] 部
硬化ヒマシ油 26.0
ヤシ油 10.0
オリーブ油 4.0
[B成分]
水酸化ナトリウム 6.0
砂糖 10.0
グリセリン 5.0
製造例25のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液 0.5
精製水 全量が100部となる量
[C成分]
エタノール 20.0
香料 適量
A成分及びB成分をそれぞれ80℃に加温して均一に溶解した後、A成分にB成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら50℃まで冷却し、C成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて精製水を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
実施例1のB成分中製造例1のオタネニンジン根抽出物の発酵物溶液に代えて比較製造例2のオタネニンジン根抽出物の酵素加水分解物溶液を用いるほかは実施例1と同様にしてクリームを得た。
製造例1、7、23、28及び35の5種の本発明発酵物溶液(グループA)、製造例2〜5、10〜13、15〜18、20、22、24、25、30、31及び41の19種の本発明発酵物溶液(グループB)並びに製造例6、14、19、21、26、27、29、32〜34及び40の11種の本発明発酵物溶液(グループC)を試料として用い、各グループ毎に試料の細胞内カタラーゼ活性亢進作用を調べた。なお、グループCの試験に当たっては、比較のため、比較製造例1の抽出物溶液及び比較製造例2の抽出物酵素加水分解物溶液についても同様の試験を行った。
[試験方法]
(イ)培養細胞からのカタラーゼ活性測定用試験液(粗酵素液)の調製
正常ヒト由来線維芽細胞NB1RGB(lot:050217(5))を3×105個/穴の濃度で6穴マイクロプレートに播種した。培地は10%の新生仔牛血清を含むイーグル最少必須培地を用いた。1日培養後に各試料を含む培地に交換した。さらに1日培養後、トリプシン処理によって細胞を回収し、0.1%トリトン(Triton)X-100を含むトリス-塩酸緩衝液(pH7.8)を用いて細胞を破砕した。それぞれの細胞破砕液の蛋白質量を測定し、すべての細胞破砕液の蛋白質含量が一定になるように希釈調整したものを試料の粗酵素液とした。コントロールとして試料を含まない培地に交換した区を設け、同様の操作を行った。
(ロ)カタラーゼ活性の測定
カタラーゼ活性の測定は次のようにして行った。
基質として10mM 過酸化水素を含むトリス-塩酸緩衝液(pH7.8)3mLに対し、各粗酵素液100μLを添加し、ただちに240nmにおける吸光度を測定した。30℃で30分保温後、同様に240nmにおける吸光度を測定し、30分間の240nmにおける吸光度の変化量を測定し、30分後の過酸化水素残存量から、コントロールを100とした時のカタラーゼ活性率を算出した。
A、B及びCの各グループの結果を、それぞれ表1、表2及び表3に示す。
試験例1と同様のグループA、B及びCの試料について、ヒアルロン酸断片化に対する抑制作用(ヒドロキシラジカル消去作用)を調べた。
[試験方法]
0.04%のヒアルロン酸/燐酸緩衝液(pH 5.3)0.45μLと各試料0.05μLを混合し、5mM過酸化水素水溶液0.15μL及び0.375mM塩化第一鉄水溶液0.10μLを混合して37℃で24時間恒温静置し、フェントン反応によってヒドロキシラジカルを発生させた。その後、反応液を20μL分取し、そこに0.1%アルブミン/酢酸緩衝液(pH 3.75)を200μL加え、その液の濁度を630nmの吸光度で測定した。この場合、ヒアルロン酸が断片化していなければアルブミンと複合体を生成し濁度が高く、ヒアルロン酸がヒドロキシラジカルによって断片化していれば複合体は形成しないため濁度は低い。
対照として、過酸化水素水溶液と塩化第一鉄を加えない区を設け、断片化処理無し区とし、この断片化処理無し区のヒアルロン酸残存率を100%としたときの各々の断片化処理を施した区のヒアルロン酸残存率を算出した。
なお比較のため、試料の代わりに精製水を添加した区を設けヒアルロン酸を断片化させた。
A、B及びCの各グループの結果を、それぞれ表4、表5及び表6に示す。
製造例1〜7、10〜35、40及び41の本発明の発酵物溶液と、比較として比較製造例1の抽出物溶液及び比較製造例2の抽出物酵素加水分解物溶液について、ヒト真皮由来線維芽細胞の活性に対する亢進作用を調べた。
[試験方法]
ヒト皮膚真皮由来線維芽細胞NB1RGBを、0.5%NCS含有最小必須培地を入れた96穴マイクロプレートに1×104個/穴播種し、37℃で1日間プレ培養した後、培地に試料溶液を5.0%の濃度(溶液濃度として)になるように添加して、37℃でさらに3日間培養した。次に培地を除去し界面活性剤(TRITON X−100)を添加した細胞処理液に、0.2%のMTTを添加して37℃に保持した後、波長370〜630nmでMTTが還元されて生成するホルマザンを測定した。また、試験系が正常に機能しているかを確認するために、試験試料の代わりにグルコースを100mM添加した場合及び試料無添加の場合(コントロール)についても同様の試験を行った。
結果を表7に示す。
試験例3と同様の試料について、コラーゲン産生促進作用を調べた。
[試験方法]
ヒト皮膚真皮由来線維芽細胞NB1RGBを、0.5%NCS含有最小必須培地を入れた96穴マイクロプレートに1×104個/穴播種し、37℃で1日間プレ培養した後、培地に試料溶液を5.0%の濃度(溶液濃度として)になるように添加して、37℃でさらに5日間培養した。
次に培養液を除去し、0.04%ファストグリーン、0,05%シリウスレッド溶液を添加し、細胞内のコラーゲン及び非コラーゲンを染色した後、充分に洗浄した。次に0.1%NaOH含有メタノールで抽出し、コラーゲン量は波長540nm、非コラーゲ量は630nmで測定した。また、試験系が正常に機能しているかを確認するために、試験試料の代わりにL−アスコルビン酸−2−リン酸エステルマグネシウム(APM)を2mM添加した場合及び試料無添加の場合(コントロール)について同様の試験を行った。
結果を表8に示す。
実施例1及び2のクリームと比較実施例1及び2のクリームについて、モニターテストにより皮膚に対する効果を調べた。
[試験方法]
無作為に抽出した年齢18〜50歳の女性40名を被験者として20名ずつ2つのグループ(A、B)に分け、各グループに、実施例1と比較実施例1又は実施例2と比較実施例2のクリームの2種の組み合わせのいずれかを割り振り、それぞれ左右の頬部に、実施例又は比較実施例のクリームを1日2回(朝、晩)、1ヵ月間塗布してもらった後、シミ、くすみに対する改善効果、小ジワに対する改善効果及び肌のはり、艶に対する改善効果を、以下の評価基準に基づいて評価した。
(肌のシミ、くすみに対する改善効果)
A:非常に改善された
B:かなり改善された
C:僅かに改善された
D:変わらない
E:かえって目立つようになった
(小ジワに対する改善効果)
A:殆ど目立たなくなった
B:かなり目立たなくなった
C:わずかに目立たなくなった
D:変わらない
E:かえって増えた
(肌のはり、艶に対する改善効果)
A:明らかに改善された
B:かなり改善された
C:僅かに改善された
D:変わらない
E:かえって悪くなった
結果を表9に示す。なお、表中のA〜Eの各評価欄の数字は、被験者20名当該評価を行った被験者の数を示す。
これに対して、ウコギ科トチバニンジン属植物の発酵物に代えて、トチバニンジン属植物の抽出物酵素加水分解物を配合したクリームや精製水を配合したクリームでは、ほとんど改善効果が見られず、明らかに有効性に違いがある結果となった。
[試料]
《本発明試料》
〈グループA〉
(1)製造例1の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料1)
(2)製造例23の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料2)
〈グループB〉
(3)製造例2の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料3)
(4)製造例3の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料4)
(5)製造例4の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料5)
(6)製造例5の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料6)
(7)製造例41の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料7)
〈グループC〉
(8)製造例14の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料8)
(9)製造例19の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料9)
(10)製造例28の発酵物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(本発明試料10)
《比較試料》
(12)比較製造例1の抽出物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(比較試料1)
(13)比較製造例2の抽出物酵素加水分解物溶液を日局親水ワセリンに5%の濃度となるように練合したもの(比較試料2)
《対照》
(14)日局親水ワセリン(対照)
上記のグループA、B及びCの本発明試料について、各グループ毎にそれぞれ比較試料及び対照と対比して、下記の試験方法により皮膚に対する刺激性を調べた。
年齢20〜50歳の成人男子5名を被験者とし、各々の上腕部内側をエタノールで拭って皮脂を除去し、該部位に、フィンチャンバーのアルミ板に本発明試料、比較試料及び対照の日局親水ワセリンをそれぞれ0.2g宛塗布したものを貼付した。24時間後にフィンチャンバーを除去し、皮膚刺激の程度をつぎに述べる方法並びに基準により判定した。
[判定]
パッチ除去後1時間後、24時間後及び48時間後に、貼付部位の紅斑及び浮腫の状況を、以下の「ドレイズ法による皮膚刺激性判定基準」に基づき目視判定し、被験者5名の平均値を求めた。
(紅斑)
スコア 皮膚の状態
0 : 紅斑なし
1 : 極軽度の紅斑
2 : 明らかな紅斑
3 : 中程度から強い紅斑
4 : 深紅色の強い紅斑に軽い痂皮形成
(浮腫)
スコア 皮膚の状態
0 : 浮腫なし
1 : 極軽度の浮腫
2 : 明らかな浮腫(周囲と明らかに区別可能)
3 : 中程度の浮腫(1mm以上の盛り上がり)
4 : 強い浮腫(さらに周囲にも広がり)
Claims (4)
- 以下の(a)(b)によって特徴付けられる発酵物からなる活性酸素消去剤を有効成分とし酸化ダメージによってもたらされるシミ及び/又はソバカスの抑止に用いる美白化粧料(但し、白髪抑止用化粧料を除く)。
(a)ウコギ科トチバニンジン属の植物であるオタネニンジン(Panax ginseng C.A.
Meyer)及び/又はトチバニンジン(Panax japonica C.A.Meyer)、及び/又はそのエキスを乳酸菌、麹菌、酵母、納豆菌及びテンペ菌から選ばれた微生物により発酵させて得られるものである
(b)カタラーゼ活性亢進作用とヒドロキシラジカル消去作用を併せ持つものである。 - オタネニンジンの根を用いる請求項1に記載の美白化粧料。
- オタネニンジン及び/又はトチバニンジン、及び/又はそのエキスを、その発酵前及び/又は発酵時に、蛋白分解酵素、澱粉分解酵素及び繊維素分解酵素から選ばれる少なくとも1種の酵素で加水分解処理する請求項1に記載の化粧料。
- 蛋白分解酵素、澱粉分解酵素及び繊維素分解酵素の3種の酵素を組み合わせ用いる請求項3に記載の化粧料。
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