JP2004049154A - サポニン分解物を含む発酵人参およびその製造方法 - Google Patents
サポニン分解物を含む発酵人参およびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2004049154A JP2004049154A JP2002213330A JP2002213330A JP2004049154A JP 2004049154 A JP2004049154 A JP 2004049154A JP 2002213330 A JP2002213330 A JP 2002213330A JP 2002213330 A JP2002213330 A JP 2002213330A JP 2004049154 A JP2004049154 A JP 2004049154A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- ginseng
- saponin
- fermented
- protopanaxadiol
- microorganism
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/20—Preparation of steroids containing heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
- A23L19/10—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof of tuberous or like starch containing root crops
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
【課題】人参中に含まれる配糖体（サポニン）成分を分解し、サポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参を提供する。
【解決手段】人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参、並びにサポニンを分解する能力を有する微生物を人参に接種し培養する上記発酵人参の製造方法。
【効果】本発明によれば、人参中の有効成分であるサポニンを予め発酵して分解させることによって、非発酵物に比し極めて奏効率が向上した人参の発酵食品を提供することができる。
【解決手段】人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参、並びにサポニンを分解する能力を有する微生物を人参に接種し培養する上記発酵人参の製造方法。
【効果】本発明によれば、人参中の有効成分であるサポニンを予め発酵して分解させることによって、非発酵物に比し極めて奏効率が向上した人参の発酵食品を提供することができる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参及びその製造方法を提供するものである。
【０００２】
【従来技術】人参は、様々な効能ゆえに、古来より万能薬として珍重されてきた。ところで、人参中の有効成分であるサポニンは、グルコース、アラビノース、ラムノース等が結合した配糖体として存在しており、経口摂取後、生体消化酵素による分解をほとんど受けず（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ，１２，８５−９１，２０００）、もっぱら腸内細菌の働きにより２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ ２０−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）、２０Ｓ−プロトパナキサジオール（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオール（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ）に分解されたのち吸収される（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）。
【０００３】ところが、腸内細菌の構成は個体差が大きいため、サポニンの吸収は個体差や不利益が生じてしまうものと考えられる。事実、本発明者は、サポニン分解能が薬効に影響することを、マウスを用いた癌転移実験で明らかにした（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６４，６９６−７００，１９９８）。さらに、本発明者は、実際ヒトにおいてもサポニン分解能における個体差が非常に大きいことも確認した（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６３，４３６−４４０，１９９７）。
【０００４】そもそも、腸内細菌は体質並びに食生活の影響を受け易く、したがって、個体差が大きく、さらに民族差に至ってはもっと顕著である。このことが、人参の治療現場で遭遇する薬効の個体差の一因になっていることが容易に想像できる。そこで、本発明者は予め腸内細菌を用いてサポニン分解物を生体外で製造し、腸内細菌による個体差の影響を排除した形で提供することを可能にした（特開平１０−９９０９４号公報，米国特許第５９２５５３７号）。
【０００５】
【解決しようとする課題】しかし、その製造方法では、サポニン分解物の生成率に問題はないが、副次反応による腸内細菌特有のにおい物質を含めた代謝物の生成があるため、生成したサポニン分解物を培養培地から分離・精製する必要があり、そのまま食用として供給することはできない難点があった。本発明は、上記の課題を解決するために行われたものであり、その目的とするところは、サポニン分解物をサポニン分解微生物及び培養培地を含めた形で食用として、且つ風味や物性、作業性等に優れた発酵人参を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題を解決すべく種々の微生物を鋭意検索していたところ、食用として供給される酵母、乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌等の中に、人参を発酵させると同時にサポニンを分解する能力（以下、「サポニン分解能」という）を有する微生物が存在すること、およびこの微生物を用いればサポニン分解物を含む発酵人参が得られることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】すなわち本発明は、人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参を提供するものである。
【０００８】また本発明は、サポニン分解能を有する微生物を人参に接種し培養することを特徴とする発酵人参の製造方法を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】本発明において発酵人参とは、人参に乳酸菌やビフィドバクテリウム属細菌等の微生物を接種し、発酵を行ったものをいう。原料として用いる人参は常法により得られるものでよく、例えば、収穫後水洗いしただけのもの、さらに乾燥したもの、あるいは蒸した後乾燥したものを粉末にしたものが挙げられる。
【００１０】また、原料として用いる人参は、主成分としてサポニン類を含む人参をいい、好適には、高麗人参（Ｋｏｒｅａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、三七人参（Ｓａｎｃｈｉ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ （Ｂｕｒｋ．）Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ）、アメリカ人参（Ａｍｅｒｉｃａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ Ｌ．）、竹節人参（Ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、ヒマラヤ人参（Ｈｉｍａｌａｙａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｐｓｅｕｄｏ−ｇｉｎｓｅｎｇ Ｗａｌｌ．ｓｕｂｓｐ．ｈｉｍａｌａｉｃｕｓ Ｈａｒａ）、及びベトナム人参（Ｖｉｅｔｎａｍｅｓｅ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｖｉｅｔｎａｍｅｎｓｉｓ Ｈａ ｅｔ Ｇｒｕｓｈｖ．）等が挙げられるが、これらに限定されない。そして、これらの人参は単独で、あるいは組み合わせて用いられ得る。
【００１１】本発明の発酵人参は、発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有するものであり、例えば、人参発酵を、サポニン分解能を有する微生物を用いて行うことにより製造される。
【００１２】この発酵においては、サポニン分解能を有する微生物を単独で、あるいは組み合わせて用いても良い。このうち、ある微生物が、サポニン分解能を有するか否かは、例えば、高圧加熱殺菌（１２１℃、１５分間）した人参に微生物を接種して発酵させた発酵人参中に、サポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを、薄層クロマトグラフィー法（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）に従い調べることができる。
【００１３】本発明の発酵人参の製造において、サポニン分解能を有する微生物（以下、「サポニン分解微生物」という）として使用される微生物は、食品に添加することができるβ−グルコシダーゼ・α−アラビノシダーゼ・α−ラムノシダーゼ生産菌であれば特に制限されず、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・マリ（Ｌ．ｍａｌｉ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ブヒネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ジョンソニー（Ｌ．ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス・ガリナラム（Ｌ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、ラクトバチルス・アミロボラス（Ｌ．ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・ラムノーザス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ケフィア（Ｌ．ｋｅｆｉｒ）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・クリスパタス（Ｌ．ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）等のラクトバチルス属細菌、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）等のストレプトコッカス属細菌、ラクトコッカス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）等のラクトコッカス属細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ），ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂ．ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム（Ｂ．ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）等のビフィドバクテリウム属細菌、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）等のバチルス属細菌、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｓｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、トルラスポラ・デルブルエッキー（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、キャンジダ・ケフィア等のサッカロマイセス属、トルラスポラ属、キャンジダ属等に属する酵母等のうち、前記方法でサポニン分解能を有すると判断された微生物が、好ましいものとして挙げられる。
【００１４】中でも、ラクトバチルス属、ストレプトコッカス属、ラクトコッカス属に属する乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌や、サッカロマイセス属細菌がサポニン分解物の生成量や発酵人参の風味等の点から好ましく、特にラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株、ラクトバチルス・プランタラムＡＴＣＣ１４９４７株およびＡＴＣＣ１０２４１株、ラクトバチルス・ブヒネリＡＴＣＣ４００５株、ラクトバチルス・カゼイＡＴＣＣ３９３株、ラクトバチルス・マリＡＴＣＣ２７３０４株、ラクトバチルス・ガリナラムＪＣＭ２０１１株、ラクトバチルス・アミロボラスＪＣＭ１１２６株、ラクトバチルス・ブレビスＡＴＣＣ１４８６９株、ラクトバチルス・ラムノーザスＡＴＣＣ７４６９株及びＡＴＣＣ５３１０３株、ラクトバチルス・ケフィアＮＲＩＣ１６９３株、ラクトバチルス・パラカゼイＮＣＤＯ−１５１株、ラクトコッカス・ラクチスＡＴＣＣ１５５７７株、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティスＡＴＣＣ１５７０３株、サッカロマイセス・セレビシエＩＦＯ−０３０９株およびＩＦＯ−２０１８株は、β−グルコシダーゼ・α−アラビノシダーゼ・α−ラムノシダーゼ活性が特に高いため好ましい。
【００１５】なお、１種のサポニン分解微生物で本発明の発酵人参を得ることができるが、一般には、２種以上を組み合わせて使用する方が培養時間を短縮できるため好ましい。
【００１６】本発明の発酵人参の製造は、サポニン分解微生物を用いる以外は常法により行えばよい。例えば、まず人参を殺菌処理した後、サポニン分解微生物を接種して培養を行い、これを均質化処理することにより発酵人参を得ることができる。人参を発酵するにあたり、サポニン分解微生物を２種以上組み合わせて接種して培養（発酵）する際には、接種したそれぞれの微生物に共通に適した培養条件を選択すればよい。例えば、嫌気性菌であれば、培養基中の酸素を炭酸ガスや窒素ガスなどの不活性ガスで置換するか、または酸素反応剤などで除酸素して嫌気的条件化にて培養を行うこともできる。また、好気性菌であれば、酸素存在下の好気条件を選択すればよい。更に、上記の２種以上の微生物を同時に接種して培養してもよいが、別々に接種して培養してもよい。
【００１７】一方、人参を発酵する際の条件は、用いる微生物の種類に合わせ適宜設定すればよく、例えば乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌や、サッカロマイセス属細菌を用いる場合には、２５℃〜３７℃で、２４〜４８時間程度培養すればよく、人参濃度としては固形分換算で１〜５０％がサポニン分解物の生成量の点から好ましい。
【００１８】この培養、発酵にあたり、原料である人参中に各種糖質等、例えば、米糠、ふすま、とうもろこし等であれば１０重量％〜３０重量％程度、ぶどう糖、蔗糖、果糖、乳糖等であれば０．５重量％〜５．０重量％程度添加してもよい。
【００１９】上記のようにして得られた発酵人参は、そのままでも製品とすることもできるが、一般には、風味を上げたり、必要な形状とする等のために種々の成分を添加、配合し、更にフレーバーを添加して最終製品とすることができる。
【００２０】本発明の発酵人参に添加、混合される成分としては、各種糖質や乳化剤、甘味料、酸味料、果汁等が挙げられる。より具体的には、グルコース、シュークロース、フラクトース、蜂蜜等の糖類、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット等の糖アルコール、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン糖脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤、が挙げられる。この他にも、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等の各種ビタミン類やハーブエキス、穀物成分、野菜成分、乳成分等を配合しても、優れた風味の発酵人参を得ることができる。
【００２１】また、本発明の発酵人参に添加することのできるフレーバーとしては、ヨーグルト系、ベリー系、オレンジ系、花梨系、シソ系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系、ペア、カスタードクリーム、ピーチ、メロン、バナナ、トロピカル、ハーブ系、紅茶、コーヒー系等のフレーバーが挙げられ、これらを１種または２種以上組み合わせて用いることができる。フレーバーの添加量は特に限定されないが、風味面から０．０５〜０．５質量％、特に０．１〜０．３質量％程度が好ましい。
【００２２】以上説明した本発明の発酵人参は、固形状、液状等いずれの形態の製品とすることも可能である。また、発酵終了後、発酵人参に殺菌処理を施し、死菌含有タイプの製品としてもよい。
【００２３】
【実施例】次に実施例および参考例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例等に何ら制約されるものではない。なお、以下の実施例において、サポニン分解物の定性は、本発明者らの方法（Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）に従い、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって行った。
【００２４】まず、発酵人参サンプル約１ｇを秤量し、これに純水２ｍｌと水飽和ｎ−ブタノール１ｍｌを加え、抽出する。この抽出液を遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０分間）し、得られた上清２μｌをＴＬＣ（和光純薬社製シリカゲル７０Ｆ２５４）に塗布する。同時に、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールも標準として塗布する。ＴＬＣを混合溶媒（クロロホルム−メタノール−純水，６０：３５：１０，下層）で展開し、ＴＬＣプレートに８％バニリン−メタノール／７２％硫酸溶液（１：５体積比）を噴霧した後、加熱（１４０度，３分）して赤紫色に呈色するスポットを検出する。サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのＲｆ値は、それぞれ０．６３、０．７０、並びに０．８３である。
【００２５】（実施例１：発酵高麗人参の製造）高麗人参（韓国産乾燥３年根）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間）した。ラクトバチルス・ラムノーザスＡＴＣＣ７４６９株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１７０ｇ）を得た。
【００２６】（参考例１）四肢の冷えを訴える女性４０人を無作為に２０人ずつ２群に分け、２重盲検法によって、内容物の見えないカプセルに充填した非発酵人参および実施例１で製造した発酵人参を、１日３ｇ、１週間投与した。その結果、冷えが改善された有効率は、非発酵人参の場合４５％であったのに比し、発酵人参の場合８５％と顕著な奏効率の上昇が認められた。
【００２７】（実施例２：発酵紅参の製造）紅参（韓国正官庄製）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間）した。ビフィドバクテリウム・アドレスセンティスＡＴＣＣ１５７０３株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１６５ｇ）を得た。
【００２８】（参考例２）肩凝りを訴える女性４０人を無作為に２０人ずつ２群に分け、２重盲検法によって、内容物の見えないカプセルに充填した非発酵人参および実施例２で製造した発酵人参を１日３ｇ、１週間投与した。その結果、肩凝りが改善された有効率は、非発酵人参の場合３５％であったのに比し、発酵人参の場合７０％と顕著な奏効率の上昇が認められた。
【００２９】以上２つ参考例は、発酵人参の即効性を示唆するものである。これは、人参の発酵処理によって、サポニン代謝物の吸収率が増加したことに基づくものと考えられる。
【００３０】（実施例３：発酵アメリカ人参の製造）アメリカ人参（カナダ国・ブリティシュコロンビア産４年根）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１６０ｇ）を得た。
【００３１】（実施例４：発酵三七人参の製造）三七人参（中国・雲南省産４年根）の粉末１００ｇを精製水２００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（８５ｇ）を得た。
【００３２】（実施例５：発酵竹節人参の製造）竹節人参（日本国産４年根）の粉末１００ｇを精製水２００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。サッカロマイセス・セレビシエＩＦＯ−０３０９株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（８８ｇ）を得た。
【００３３】（実施例６：発酵ヒマラヤ人参の製造）ヒマラヤ人参（ネパール国産３年根）の粉末５０ｇを精製水１００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株とビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株をそれぞれ１％接種し、３７℃、４日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（４３ｇ）を得た。
【００３４】（実施例７：発酵ベトナム人参の製造）ベトナム人参（ベトナム国産５年根）の粉末５０ｇを精製水１００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・マリＡＴＣＣ２７３０４株とビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株をそれぞれ１％接種し、３７℃、４日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（４６ｇ）を得た。
【００３５】これらの例からも分かるように、人参をサポニン分解微生物で発酵させることによって、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを含有する発酵人参が得ることが可能となり、その発酵人参を使用する有用性が血行改善試験において実証された。
【００３６】
【発明の効果】本発明によれば、人参をサポニン分解微生物で発酵させることによって、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを含有する発酵人参が得られる。そして、サポニン分解物は分解前のサポニンと比べ生体への吸収性が高いので、本発明の発酵人参は即効性とともに有効性が向上した。このように、発酵人参は健康食品として極めて有利なものである。
【発明の属する技術分野】本発明は、人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参及びその製造方法を提供するものである。
【０００２】
【従来技術】人参は、様々な効能ゆえに、古来より万能薬として珍重されてきた。ところで、人参中の有効成分であるサポニンは、グルコース、アラビノース、ラムノース等が結合した配糖体として存在しており、経口摂取後、生体消化酵素による分解をほとんど受けず（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ，１２，８５−９１，２０００）、もっぱら腸内細菌の働きにより２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ ２０−Ｏ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）、２０Ｓ−プロトパナキサジオール（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ）、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオール（２０Ｓ−ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ）に分解されたのち吸収される（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）。
【０００３】ところが、腸内細菌の構成は個体差が大きいため、サポニンの吸収は個体差や不利益が生じてしまうものと考えられる。事実、本発明者は、サポニン分解能が薬効に影響することを、マウスを用いた癌転移実験で明らかにした（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６４，６９６−７００，１９９８）。さらに、本発明者は、実際ヒトにおいてもサポニン分解能における個体差が非常に大きいことも確認した（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６３，４３６−４４０，１９９７）。
【０００４】そもそも、腸内細菌は体質並びに食生活の影響を受け易く、したがって、個体差が大きく、さらに民族差に至ってはもっと顕著である。このことが、人参の治療現場で遭遇する薬効の個体差の一因になっていることが容易に想像できる。そこで、本発明者は予め腸内細菌を用いてサポニン分解物を生体外で製造し、腸内細菌による個体差の影響を排除した形で提供することを可能にした（特開平１０−９９０９４号公報，米国特許第５９２５５３７号）。
【０００５】
【解決しようとする課題】しかし、その製造方法では、サポニン分解物の生成率に問題はないが、副次反応による腸内細菌特有のにおい物質を含めた代謝物の生成があるため、生成したサポニン分解物を培養培地から分離・精製する必要があり、そのまま食用として供給することはできない難点があった。本発明は、上記の課題を解決するために行われたものであり、その目的とするところは、サポニン分解物をサポニン分解微生物及び培養培地を含めた形で食用として、且つ風味や物性、作業性等に優れた発酵人参を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題を解決すべく種々の微生物を鋭意検索していたところ、食用として供給される酵母、乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌等の中に、人参を発酵させると同時にサポニンを分解する能力（以下、「サポニン分解能」という）を有する微生物が存在すること、およびこの微生物を用いればサポニン分解物を含む発酵人参が得られることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】すなわち本発明は、人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参を提供するものである。
【０００８】また本発明は、サポニン分解能を有する微生物を人参に接種し培養することを特徴とする発酵人参の製造方法を提供するものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】本発明において発酵人参とは、人参に乳酸菌やビフィドバクテリウム属細菌等の微生物を接種し、発酵を行ったものをいう。原料として用いる人参は常法により得られるものでよく、例えば、収穫後水洗いしただけのもの、さらに乾燥したもの、あるいは蒸した後乾燥したものを粉末にしたものが挙げられる。
【００１０】また、原料として用いる人参は、主成分としてサポニン類を含む人参をいい、好適には、高麗人参（Ｋｏｒｅａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、三七人参（Ｓａｎｃｈｉ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ （Ｂｕｒｋ．）Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ）、アメリカ人参（Ａｍｅｒｉｃａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｍ Ｌ．）、竹節人参（Ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、ヒマラヤ人参（Ｈｉｍａｌａｙａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｐｓｅｕｄｏ−ｇｉｎｓｅｎｇ Ｗａｌｌ．ｓｕｂｓｐ．ｈｉｍａｌａｉｃｕｓ Ｈａｒａ）、及びベトナム人参（Ｖｉｅｔｎａｍｅｓｅ ｇｉｎｓｅｎｇ：Ｐａｎａｘ ｖｉｅｔｎａｍｅｎｓｉｓ Ｈａ ｅｔ Ｇｒｕｓｈｖ．）等が挙げられるが、これらに限定されない。そして、これらの人参は単独で、あるいは組み合わせて用いられ得る。
【００１１】本発明の発酵人参は、発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有するものであり、例えば、人参発酵を、サポニン分解能を有する微生物を用いて行うことにより製造される。
【００１２】この発酵においては、サポニン分解能を有する微生物を単独で、あるいは組み合わせて用いても良い。このうち、ある微生物が、サポニン分解能を有するか否かは、例えば、高圧加熱殺菌（１２１℃、１５分間）した人参に微生物を接種して発酵させた発酵人参中に、サポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを、薄層クロマトグラフィー法（Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｈ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）に従い調べることができる。
【００１３】本発明の発酵人参の製造において、サポニン分解能を有する微生物（以下、「サポニン分解微生物」という）として使用される微生物は、食品に添加することができるβ−グルコシダーゼ・α−アラビノシダーゼ・α−ラムノシダーゼ生産菌であれば特に制限されず、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌ．ｇａｓｓｅｒｉ）、ラクトバチルス・マリ（Ｌ．ｍａｌｉ）、ラクトバチルス・プランタラム（Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス・ブヒネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ジョンソニー（Ｌ．ｊｏｈｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス・ガリナラム（Ｌ．ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ）、ラクトバチルス・アミロボラス（Ｌ．ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス・ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス・ラムノーザス（Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス・ケフィア（Ｌ．ｋｅｆｉｒ）、ラクトバチルス・パラカゼイ（Ｌ．ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・クリスパタス（Ｌ．ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）等のラクトバチルス属細菌、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）等のストレプトコッカス属細菌、ラクトコッカス・ラクチス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ）等のラクトコッカス属細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｉｆｉｄｕｍ）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ）、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス（Ｂ．ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（Ｂ．ｉｎｆａｎｔｉｓ），ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂ．ｂｒｅｖｅ）、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム（Ｂ．ｃａｔｅｎｕｌａｔｕｍ）等のビフィドバクテリウム属細菌、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）等のバチルス属細菌、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｓｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、トルラスポラ・デルブルエッキー（Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａ ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、キャンジダ・ケフィア等のサッカロマイセス属、トルラスポラ属、キャンジダ属等に属する酵母等のうち、前記方法でサポニン分解能を有すると判断された微生物が、好ましいものとして挙げられる。
【００１４】中でも、ラクトバチルス属、ストレプトコッカス属、ラクトコッカス属に属する乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌や、サッカロマイセス属細菌がサポニン分解物の生成量や発酵人参の風味等の点から好ましく、特にラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株、ラクトバチルス・プランタラムＡＴＣＣ１４９４７株およびＡＴＣＣ１０２４１株、ラクトバチルス・ブヒネリＡＴＣＣ４００５株、ラクトバチルス・カゼイＡＴＣＣ３９３株、ラクトバチルス・マリＡＴＣＣ２７３０４株、ラクトバチルス・ガリナラムＪＣＭ２０１１株、ラクトバチルス・アミロボラスＪＣＭ１１２６株、ラクトバチルス・ブレビスＡＴＣＣ１４８６９株、ラクトバチルス・ラムノーザスＡＴＣＣ７４６９株及びＡＴＣＣ５３１０３株、ラクトバチルス・ケフィアＮＲＩＣ１６９３株、ラクトバチルス・パラカゼイＮＣＤＯ−１５１株、ラクトコッカス・ラクチスＡＴＣＣ１５５７７株、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティスＡＴＣＣ１５７０３株、サッカロマイセス・セレビシエＩＦＯ−０３０９株およびＩＦＯ−２０１８株は、β−グルコシダーゼ・α−アラビノシダーゼ・α−ラムノシダーゼ活性が特に高いため好ましい。
【００１５】なお、１種のサポニン分解微生物で本発明の発酵人参を得ることができるが、一般には、２種以上を組み合わせて使用する方が培養時間を短縮できるため好ましい。
【００１６】本発明の発酵人参の製造は、サポニン分解微生物を用いる以外は常法により行えばよい。例えば、まず人参を殺菌処理した後、サポニン分解微生物を接種して培養を行い、これを均質化処理することにより発酵人参を得ることができる。人参を発酵するにあたり、サポニン分解微生物を２種以上組み合わせて接種して培養（発酵）する際には、接種したそれぞれの微生物に共通に適した培養条件を選択すればよい。例えば、嫌気性菌であれば、培養基中の酸素を炭酸ガスや窒素ガスなどの不活性ガスで置換するか、または酸素反応剤などで除酸素して嫌気的条件化にて培養を行うこともできる。また、好気性菌であれば、酸素存在下の好気条件を選択すればよい。更に、上記の２種以上の微生物を同時に接種して培養してもよいが、別々に接種して培養してもよい。
【００１７】一方、人参を発酵する際の条件は、用いる微生物の種類に合わせ適宜設定すればよく、例えば乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌や、サッカロマイセス属細菌を用いる場合には、２５℃〜３７℃で、２４〜４８時間程度培養すればよく、人参濃度としては固形分換算で１〜５０％がサポニン分解物の生成量の点から好ましい。
【００１８】この培養、発酵にあたり、原料である人参中に各種糖質等、例えば、米糠、ふすま、とうもろこし等であれば１０重量％〜３０重量％程度、ぶどう糖、蔗糖、果糖、乳糖等であれば０．５重量％〜５．０重量％程度添加してもよい。
【００１９】上記のようにして得られた発酵人参は、そのままでも製品とすることもできるが、一般には、風味を上げたり、必要な形状とする等のために種々の成分を添加、配合し、更にフレーバーを添加して最終製品とすることができる。
【００２０】本発明の発酵人参に添加、混合される成分としては、各種糖質や乳化剤、甘味料、酸味料、果汁等が挙げられる。より具体的には、グルコース、シュークロース、フラクトース、蜂蜜等の糖類、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット等の糖アルコール、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン糖脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤、が挙げられる。この他にも、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等の各種ビタミン類やハーブエキス、穀物成分、野菜成分、乳成分等を配合しても、優れた風味の発酵人参を得ることができる。
【００２１】また、本発明の発酵人参に添加することのできるフレーバーとしては、ヨーグルト系、ベリー系、オレンジ系、花梨系、シソ系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系、ペア、カスタードクリーム、ピーチ、メロン、バナナ、トロピカル、ハーブ系、紅茶、コーヒー系等のフレーバーが挙げられ、これらを１種または２種以上組み合わせて用いることができる。フレーバーの添加量は特に限定されないが、風味面から０．０５〜０．５質量％、特に０．１〜０．３質量％程度が好ましい。
【００２２】以上説明した本発明の発酵人参は、固形状、液状等いずれの形態の製品とすることも可能である。また、発酵終了後、発酵人参に殺菌処理を施し、死菌含有タイプの製品としてもよい。
【００２３】
【実施例】次に実施例および参考例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例等に何ら制約されるものではない。なお、以下の実施例において、サポニン分解物の定性は、本発明者らの方法（Ｐｌａｎｔａ Ｍｅｄｉｃａ，６２，４５３−４５７，１９９６）に従い、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって行った。
【００２４】まず、発酵人参サンプル約１ｇを秤量し、これに純水２ｍｌと水飽和ｎ−ブタノール１ｍｌを加え、抽出する。この抽出液を遠心分離（３０００ｒｐｍ，１０分間）し、得られた上清２μｌをＴＬＣ（和光純薬社製シリカゲル７０Ｆ２５４）に塗布する。同時に、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールも標準として塗布する。ＴＬＣを混合溶媒（クロロホルム−メタノール−純水，６０：３５：１０，下層）で展開し、ＴＬＣプレートに８％バニリン−メタノール／７２％硫酸溶液（１：５体積比）を噴霧した後、加熱（１４０度，３分）して赤紫色に呈色するスポットを検出する。サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのＲｆ値は、それぞれ０．６３、０．７０、並びに０．８３である。
【００２５】（実施例１：発酵高麗人参の製造）高麗人参（韓国産乾燥３年根）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間）した。ラクトバチルス・ラムノーザスＡＴＣＣ７４６９株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１７０ｇ）を得た。
【００２６】（参考例１）四肢の冷えを訴える女性４０人を無作為に２０人ずつ２群に分け、２重盲検法によって、内容物の見えないカプセルに充填した非発酵人参および実施例１で製造した発酵人参を、１日３ｇ、１週間投与した。その結果、冷えが改善された有効率は、非発酵人参の場合４５％であったのに比し、発酵人参の場合８５％と顕著な奏効率の上昇が認められた。
【００２７】（実施例２：発酵紅参の製造）紅参（韓国正官庄製）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間）した。ビフィドバクテリウム・アドレスセンティスＡＴＣＣ１５７０３株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１６５ｇ）を得た。
【００２８】（参考例２）肩凝りを訴える女性４０人を無作為に２０人ずつ２群に分け、２重盲検法によって、内容物の見えないカプセルに充填した非発酵人参および実施例２で製造した発酵人参を１日３ｇ、１週間投与した。その結果、肩凝りが改善された有効率は、非発酵人参の場合３５％であったのに比し、発酵人参の場合７０％と顕著な奏効率の上昇が認められた。
【００２９】以上２つ参考例は、発酵人参の即効性を示唆するものである。これは、人参の発酵処理によって、サポニン代謝物の吸収率が増加したことに基づくものと考えられる。
【００３０】（実施例３：発酵アメリカ人参の製造）アメリカ人参（カナダ国・ブリティシュコロンビア産４年根）の粉末２００ｇを精製水４００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（１６０ｇ）を得た。
【００３１】（実施例４：発酵三七人参の製造）三七人参（中国・雲南省産４年根）の粉末１００ｇを精製水２００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（８５ｇ）を得た。
【００３２】（実施例５：発酵竹節人参の製造）竹節人参（日本国産４年根）の粉末１００ｇを精製水２００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。サッカロマイセス・セレビシエＩＦＯ−０３０９株を１％接種し、３７℃、７日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（８８ｇ）を得た。
【００３３】（実施例６：発酵ヒマラヤ人参の製造）ヒマラヤ人参（ネパール国産３年根）の粉末５０ｇを精製水１００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・ガセリＤＳＭ２０２４３株とビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株をそれぞれ１％接種し、３７℃、４日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（４３ｇ）を得た。
【００３４】（実施例７：発酵ベトナム人参の製造）ベトナム人参（ベトナム国産５年根）の粉末５０ｇを精製水１００ｍｌに懸濁し、高圧加熱殺菌（１２１℃，１５分間分間）した。ラクトバチルス・マリＡＴＣＣ２７３０４株とビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ７００２株をそれぞれ１％接種し、３７℃、４日間培養した。発酵培地をＴＬＣで分析し、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールの生成を確認した。８０度で６時間過熱乾燥し、発酵人参（４６ｇ）を得た。
【００３５】これらの例からも分かるように、人参をサポニン分解微生物で発酵させることによって、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを含有する発酵人参が得ることが可能となり、その発酵人参を使用する有用性が血行改善試験において実証された。
【００３６】
【発明の効果】本発明によれば、人参をサポニン分解微生物で発酵させることによって、サポニン分解物、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールを含有する発酵人参が得られる。そして、サポニン分解物は分解前のサポニンと比べ生体への吸収性が高いので、本発明の発酵人参は即効性とともに有効性が向上した。このように、発酵人参は健康食品として極めて有利なものである。
Claims (7)
- 人参を微生物により発酵して得られる発酵人参であって、当該発酵人参中にサポニン分解物、すなわち、２０Ｓ−プロトパナキサジオール２０−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノサイド、２０Ｓ−プロトパナキサジオール、並びに２０Ｓ−プロトパナキサトリオールのうち少なくとも一つを含有することを特徴とする発酵人参。
- 発酵に使用される微生物がサポニン分解能を有する微生物である請求項１記載の発酵人参。
- 発酵に使用される微生物が乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌又はサッカロマイセス属細菌であることを特徴とする請求項１記載の発酵人参。
- 人参が、高麗人参、三七人参、アメリカ人参、竹節人参、ヒマラヤ人参、及びベトナム人参からなる群から選択される請求項１記載の発酵人参。
- サポニン分解能を有する微生物を人参に接種し培養することを特徴とする発酵人参の製造方法。
- 微生物が乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌又はサッカロマイセス属細菌である請求項５記載の発酵人参の製造方法。
- 人参が、高麗人参、三七人参、アメリカ人参、竹節人参、ヒマラヤ人参、及びベトナム人参からなる群から選択される請求項５記載の発酵人参の製造方法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002213330A JP3678362B2 (ja) | 2002-07-23 | 2002-07-23 | サポニン分解物を含有する発酵人参の製造法 |
| KR10-2002-0046668A KR100472964B1 (ko) | 2002-07-23 | 2002-08-07 | 사포닌분해물을 함유하는 발효인삼 및 그 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002213330A JP3678362B2 (ja) | 2002-07-23 | 2002-07-23 | サポニン分解物を含有する発酵人参の製造法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2004049154A true JP2004049154A (ja) | 2004-02-19 |
| JP2004049154A5 JP2004049154A5 (ja) | 2005-06-30 |
| JP3678362B2 JP3678362B2 (ja) | 2005-08-03 |
Family
ID=31935948
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002213330A Expired - Fee Related JP3678362B2 (ja) | 2002-07-23 | 2002-07-23 | サポニン分解物を含有する発酵人参の製造法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3678362B2 (ja) |
| KR (1) | KR100472964B1 (ja) |
Cited By (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007145790A (ja) * | 2005-03-07 | 2007-06-14 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| KR100813997B1 (ko) | 2006-09-19 | 2008-03-14 | 주식회사 에이치 엔 비티 | 인삼 추출물의 제조방법 |
| KR100824285B1 (ko) | 2006-11-01 | 2008-04-24 | 주식회사 에이치 엔 비티 | 당화 인삼 및 인삼 추출물의 제조방법 |
| CN100413880C (zh) * | 2005-03-09 | 2008-08-27 | 北京大学 | 原人参二醇衍生物及其制备方法与应用 |
| JP2008255084A (ja) * | 2007-04-04 | 2008-10-23 | Isako Hashimoto | 抗花粉症剤または食品 |
| WO2008155998A1 (ja) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Nagase & Co., Ltd. | 抗不安抗うつ剤 |
| WO2008155999A1 (ja) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Nagase & Co., Ltd. | Ｇａｂａ作動性ニューロン賦活剤 |
| CN100448886C (zh) * | 2005-03-09 | 2009-01-07 | 北京大学 | 原人参三醇衍生物及其制备方法与应用 |
| JP2009179643A (ja) * | 2005-03-07 | 2009-08-13 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| JP2010132625A (ja) * | 2008-12-08 | 2010-06-17 | Nagase & Co Ltd | 抗糖尿病剤 |
| WO2010137846A3 (ko) * | 2009-05-26 | 2011-03-31 | (주)아모레퍼시픽 | 사포닌의 생체 이용률 증진 조성물 |
| CN102459623A (zh) * | 2009-05-19 | 2012-05-16 | 株式会社一和 | 制备发酵人参浓缩物或粉末的方法 |
| KR101164529B1 (ko) | 2010-03-17 | 2012-07-10 | 정종배 | 진세노사이드 증대를 위한 인삼발효 방법 |
| US8541035B2 (en) | 2009-05-14 | 2013-09-24 | Il Hwa Co., Ltd. | Methods for preparing a fermented ginseng concentrate or powder |
| JP2015168614A (ja) * | 2014-03-04 | 2015-09-28 | 長瀬産業株式会社 | Ｇｌｐ−１分泌促進剤 |
| JP6450878B1 (ja) * | 2018-03-28 | 2019-01-09 | 株式会社ナガセビューティケァ | 発酵物の製造方法 |
| JP2021132544A (ja) * | 2020-02-25 | 2021-09-13 | 株式会社機能性食品開発研究所 | 高麗人参の発酵物の製造方法 |
| KR102312450B1 (ko) * | 2020-06-11 | 2021-10-13 | 제너럴바이오(주) | 인삼발효추출액 및 고삼추출물을 유효성분으로 함유하는 구강질환의 예방 또는 개선용 조성물 |
| JPWO2023084839A1 (ja) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100496731B1 (ko) * | 2002-09-26 | 2005-06-22 | (주)휴먼사이언스 | 파피아 로도지마 균주를 이용한 항산화 활성향상과진세노사이드의 생산방법 |
| KR100497895B1 (ko) * | 2002-12-05 | 2005-06-29 | 홍림통산(주) | 인삼의 유산균 발효물, 그를 함유하는 인삼 요구르트 및그에 이용되는 유산균 균주 |
| KR100789261B1 (ko) * | 2004-12-28 | 2007-12-31 | 김재백 | 배당체 분해물을 함유하는 발효인삼 및 이의 제조방법 |
| KR100866504B1 (ko) * | 2008-09-23 | 2008-11-11 | 주식회사 비티씨 | 홍삼 발효용 미생물 및 발효 홍삼을 함유하는 식품 조성물 |
| KR101083039B1 (ko) | 2009-11-27 | 2011-11-16 | 중앙대학교 산학협력단 | 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 레이프소니아 속 ｇａｌ45의 용도 |
| KR101718351B1 (ko) | 2015-06-26 | 2017-03-21 | 충남대학교산학협력단 | 신규한 패니바실러스 속 rmks 72 균주, 이를 이용한 발효인삼 및 이를 이용한 발효인삼 추출물을 함유하는 항산화 활성을 갖는 조성물 |
| JP7265834B2 (ja) * | 2016-12-08 | 2023-04-27 | 小林製薬株式会社 | 植物エキス末の製造方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3075572B2 (ja) * | 1991-02-18 | 2000-08-14 | 明治乳業株式会社 | 薬用ニンジンエキスの発酵飲料およびその製造方法 |
| KR0178863B1 (ko) * | 1996-11-29 | 1999-04-01 | 김진하 | 인삼 사포닌 대사 생산물의 제조법 |
| KR100424438B1 (ko) * | 1998-05-07 | 2004-05-20 | 주식회사 케이티앤지 | 효소적 방법에 의한 진세노사이드 알디의 제조방법 |
| CN1105781C (zh) * | 1999-03-17 | 2003-04-16 | 金凤燮 | 酶法改变人参皂甙糖基制备人参皂甙的方法 |
| KR100517899B1 (ko) * | 2002-01-30 | 2005-09-30 | 주식회사 일화 | 생물전환 인삼 조성물 및 그 제조 방법 |
-
2002
- 2002-07-23 JP JP2002213330A patent/JP3678362B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-07 KR KR10-2002-0046668A patent/KR100472964B1/ko active IP Right Review Request
Cited By (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2009179643A (ja) * | 2005-03-07 | 2009-08-13 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| JP4693623B2 (ja) * | 2005-03-07 | 2011-06-01 | 共栄化学工業株式会社 | 化粧料 |
| JP2007145790A (ja) * | 2005-03-07 | 2007-06-14 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| CN100413880C (zh) * | 2005-03-09 | 2008-08-27 | 北京大学 | 原人参二醇衍生物及其制备方法与应用 |
| CN100448886C (zh) * | 2005-03-09 | 2009-01-07 | 北京大学 | 原人参三醇衍生物及其制备方法与应用 |
| KR100813997B1 (ko) | 2006-09-19 | 2008-03-14 | 주식회사 에이치 엔 비티 | 인삼 추출물의 제조방법 |
| KR100824285B1 (ko) | 2006-11-01 | 2008-04-24 | 주식회사 에이치 엔 비티 | 당화 인삼 및 인삼 추출물의 제조방법 |
| JP2008255084A (ja) * | 2007-04-04 | 2008-10-23 | Isako Hashimoto | 抗花粉症剤または食品 |
| WO2008155999A1 (ja) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Nagase & Co., Ltd. | Ｇａｂａ作動性ニューロン賦活剤 |
| JPWO2008155998A1 (ja) * | 2007-06-21 | 2010-08-26 | 長瀬産業株式会社 | 抗不安抗うつ剤 |
| WO2008155998A1 (ja) * | 2007-06-21 | 2008-12-24 | Nagase & Co., Ltd. | 抗不安抗うつ剤 |
| JP5204771B2 (ja) * | 2007-06-21 | 2013-06-05 | 長瀬産業株式会社 | Ｇａｂａ作動性ニューロン賦活剤 |
| JP2010132625A (ja) * | 2008-12-08 | 2010-06-17 | Nagase & Co Ltd | 抗糖尿病剤 |
| US8541035B2 (en) | 2009-05-14 | 2013-09-24 | Il Hwa Co., Ltd. | Methods for preparing a fermented ginseng concentrate or powder |
| CN102459623A (zh) * | 2009-05-19 | 2012-05-16 | 株式会社一和 | 制备发酵人参浓缩物或粉末的方法 |
| US10172900B2 (en) | 2009-05-26 | 2019-01-08 | Amorepacific Corporation | Composition with improved bioavailabilty of saponin and method for improving the bioavailability of saponin |
| WO2010137846A3 (ko) * | 2009-05-26 | 2011-03-31 | (주)아모레퍼시픽 | 사포닌의 생체 이용률 증진 조성물 |
| KR101164529B1 (ko) | 2010-03-17 | 2012-07-10 | 정종배 | 진세노사이드 증대를 위한 인삼발효 방법 |
| JP2015168614A (ja) * | 2014-03-04 | 2015-09-28 | 長瀬産業株式会社 | Ｇｌｐ−１分泌促進剤 |
| JP6450878B1 (ja) * | 2018-03-28 | 2019-01-09 | 株式会社ナガセビューティケァ | 発酵物の製造方法 |
| JP2019170246A (ja) * | 2018-03-28 | 2019-10-10 | 株式会社ナガセビューティケァ | 発酵物の製造方法 |
| JP2021132544A (ja) * | 2020-02-25 | 2021-09-13 | 株式会社機能性食品開発研究所 | 高麗人参の発酵物の製造方法 |
| JP7021752B2 (ja) | 2020-02-25 | 2022-02-17 | 株式会社機能性食品開発研究所 | 高麗人参の発酵物の製造方法 |
| KR102312450B1 (ko) * | 2020-06-11 | 2021-10-13 | 제너럴바이오(주) | 인삼발효추출액 및 고삼추출물을 유효성분으로 함유하는 구강질환의 예방 또는 개선용 조성물 |
| JPWO2023084839A1 (ja) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | ||
| WO2023084839A1 (ja) * | 2021-11-12 | 2023-05-19 | 株式会社皇漢薬品研究所 | サルコペニア抑制食品の製造方法、サルコペニア抑制食品及び筋肉増強食品 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20040013653A (ko) | 2004-02-14 |
| JP3678362B2 (ja) | 2005-08-03 |
| KR100472964B1 (ko) | 2005-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100618171B1 (ko) | 인삼사포닌분해물을 함유하는 발효홍삼 및 그 제조방법 | |
| JP2004049154A (ja) | サポニン分解物を含む発酵人参およびその製造方法 | |
| CN102578226B (zh) | 含有双歧杆菌属细菌的发酵食品及其制造方法 | |
| EP3124031B1 (en) | Sleep quality improver | |
| KR101370386B1 (ko) | 유익균을 이용한 발효홍삼의 제조방법 | |
| KR102144395B1 (ko) | 홍삼을 이용한 유산균의 증식 향상 배양공정 | |
| WO2017047777A1 (ja) | ストレス負荷解放後のセロトニン欠乏改善剤 | |
| KR100789261B1 (ko) | 배당체 분해물을 함유하는 발효인삼 및 이의 제조방법 | |
| CN101184398A (zh) | 含有双歧杆菌属细菌的发酵食品及其制造方法 | |
| JP4354611B2 (ja) | イソフラボンアグリコンを含む発酵豆乳およびその製造方法 | |
| JP2020061977A (ja) | ストレプトコッカス・サリバリウスに属する新規乳酸菌およびその利用 | |
| KR100773059B1 (ko) | 배당체 가수분해능을 가진 신규한 미생물, 이를 함유한 프로바이오틱스 및 이의 제조방법 | |
| KR20160126591A (ko) | 인삼류 발효 추출물의 제조방법, 이의 방법으로 제조된 인삼류 발효 추출물 및 이를 포함하는 건강기능식품 | |
| CN112616932A (zh) | 保护口腔健康的羊奶片及其制备方法 | |
| KR101368634B1 (ko) | 산삼배양근 발효물을 유효성분으로 하는 숙취해소 및 면역증진용 건강기능식품 및 이의 제조방법 | |
| WO2018123910A1 (ja) | 男性ホルモン増加促進用組成物 | |
| KR20190135902A (ko) | 마늘 및 곤드레 유산균 발효물, 그의 제조방법 및 용도 | |
| KR101324282B1 (ko) | 유인균을 이용한 면역력 강화 발효홍삼의 제조방법 | |
| CN111631393B (zh) | 一种含芜青的益生菌发酵物及其应用 | |
| KR102405006B1 (ko) | 다이어트 기능을 가진 콤부차 조성물 | |
| JP2001333692A (ja) | 発酵豆乳の製造方法 | |
| WO2017047776A1 (ja) | 血中トリプトファン濃度上昇抑制剤 | |
| CN115153006A (zh) | 一种淡竹叶发酵液制品及其制备方法 | |
| KR20240029907A (ko) | 홍삼 오일을 포함하는 유산균 생장 촉진용 조성물 및 유산균 배양 배지 | |
| JP2011030530A (ja) | ２−フェニルエタノールを生成する乳酸菌およびその利用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20020724 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20041015 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041015 |
|
| A871 | Explanation of circumstances concerning accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871 Effective date: 20041015 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20041015 |
|
| A975 | Report on accelerated examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971005 Effective date: 20041208 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050208 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20050419 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20050506 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 3678362 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| R370 | Written measure of declining of transfer procedure |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R370 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130520 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150520 Year of fee payment: 10 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313532 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |