KR101083039B1 - 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 레이프소니아 속 ｇａｌ45의 용도 - Google Patents

프로토파낙사트리올의 제조를 위한 레이프소니아 속 ｇａｌ45의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 Leifsonia sp. GAL45의 용도, 즉 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법을 제공한다. Leifsonia sp. GAL45를 이용하면 인삼 또는 홍삼에 포함된 진세노사이드 성분을 프로토파낙사트리올로 전환시키는 것이 가능하다. 따라서, 프로토파낙사트리올을 높은 수율로 제조할 수 있으므로, 이를 식품 또는 의약의 유효 성분으로서 활용할 수 있게 된다.
프로토파낙사트리올, Leifsonia sp. GAL45

Description

프로토파낙사트리올의 제조를 위한 레이프소니아 속 ＧＡＬ45의 용도{Use of Leifsonia sp. GAL45 for preparation of protopanaxatriol}
본 발명은 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 Leifsonia sp. GAL45의 용도, 즉 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법에 관한 것이다.
인삼은 오래전부터 한국과 중국을 비롯한 동양에서 약재로서 이용되어온 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)로 식물학적으로 오가과(Araliaceae), 인삼속(Panax)에 속하는 다년생 초본류이다.
인삼의 구성 성분으로는 60~70%, 질소화합물 12~16%, 지용성 성분 1~2%이며, 다른 식물체에서는 볼수 없는 인삼의 주요한 생리활성물질인 인삼사포닌, 인삼 단백질, 다당체(polysaccharides)등의 독특한 성분을 함유하고 있다. 사포닌이란 식물계에서 널이 존재하는 배당체에서 당이 아닌 부분이 여러 고리화합물로 이루어진 물질을 말하며 인삼에 함유되어 있는 사포닌은 다른 식물에서의 사포닌과 비교했을 때 그 구조가 다르며 그에 따라 약리효능이 다르기 때문에 특이적으로 진세노사이 드(ginsenoside)라고 명명하고 있다. 기존에 알려져 있는 진세노사이드의 약리효능에 대해 살펴보면 항암작용, 중추신경 억제작용, 간 기능 촉진 및 숙취제거효과, 항산화작용, 면역 증각작용 등이 있음이 밝혀졌다.
진세노사이드는 화학구조의 특성에 따라 프로토파낙스다이올(protopanaxadiol, PD)계, 프로토파낙스트리올(protopanaxatriol, PT)계, 올레아난(oleanane)으로 구분하고 각 화합물의 구조가 밝혀졌다. 그 중 한국산 인삼에는 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re 및 Rg1의 함량이 비교적 높다.
진세노사이드의 하나인 프로토파낙사트리올은 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 감마(Peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ) 의 활성화로 항당뇨(Anti-diabetic)에 유용하다고 알려져 있는 성분이다. 그러나 프로토파낙사트리올은 인삼에 미량 존재할 뿐이어서 그 유용성에도 불구하고 유효성분으로서 활용할 만큼 많은 양으로 수득하기가 쉽지 않다. 약리 효능면에서 인삼의 주요 성분들보다 뛰어나나 인삼에는 거의 존재하지 않는 진세노사이드인 Rg3, Rh2, Compound K 등의 미량 성분을 얻기 위해, 인삼에 주요하게 존재하는 진세노사이드를 거의 존재하지 않는 진세노사이드로 전환, 제조하고자 하는 연구가 수행되고 있고 있으나 프로토파낙사트리올을 높은 수율로 얻기 위한 방안에 대해서는 아직까지 제시된 바 없다.
인삼에 다량 포함되어 있는 주요 진세노사이드나 인삼 사포닌 추출물(조사포닌)을 이용하여 인삼에 거의 존재하지 않는 프로토파낙사트리올을 높은 수율로 제조하는 방법을 제공하고자 한다.
이를 위해, 본 발명은 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 Leifsonia sp. GAL45의 용도의 용도, 즉 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법을 제공한다.
Leifsonia sp. GAL45를 이용하면 인삼 또는 홍삼에 포함된 진세노사이드 성분을 프로토파낙사트리올로 전환시키는 것이 가능하다. 따라서, 프로토파낙사트리올을 높은 수율로 제조할 수 있으므로, 이를 식품 또는 의약의 유효 성분으로서 활용할 수 있게 된다.
프로토파낙사트리올을 인삼에 미량 함유되어 있는 진세노사이드의 일종으로, 하기 화학식 1의 구조를 갖는다.
[화학식 1]
Figure 112009073146576-pat00001
본 발명자들은 항당뇨 효과를 갖는 프로토파낙사트리올을 보다 높은 함량으로 수득하고자 조사포닌이나 인삼에 댜량 함유된 다른 진세노사이드를 프로토파낙사트리올로 전환시킬 수 있는 균주를 찾고자 노력하였다.
그 결과, 인삼이 재배되고 있는 토양으로부터 프로토파낙사트리올 전환능을 가지고 있는 균주를 선별, 분리하였으며 이를 GAL45로 명명하였다. 상기 GAL45를 동정하기 위하여 16S rRNA의 유전자 서열을 분석한 결과, Leifsonia shinshuensis JCM 1059T와 98.8%의 가장 높은 서열 유사도를 나타내어 본 발명의 균주를 레이프소니아 속 (Leifsonia sp.) GAL45로 명명하고, 2009년 11월 19일자로 이를 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하고, 기탁번호 KCTC18183P를 부여받았다.
하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, Leifsonia sp. GAL45는 조사포닌이나 Re, Rg1, Rg2, Rh1, F1 등과 같은 진세노사이드를 프로토파낙사트리올로 전 환할 수 있는 능력이 매우 뛰어난 것으로 확인되었다.
따라서, 본 발명은 프로토파낙사트리올의 제조를 위한 Leifsonia sp. GAL45의 용도 및 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법을 제공한다.
한 구체예에서, 본 발명은 Leifsonia sp. GAL45(기탁번호 KCTC18183P)의 배양상등액을 인삼 추출물과 반응시키는 단계; 및 상기 반응물로부터 프로토파낙사트리올을 수득하는 단계를 포함하는 프로토파낙사트리올의 제조방법을 제공한다.
다른 구체예에서, 본 발명은 Leifsonia sp. GAL45(기탁번호 KCTC18183P)를 인삼추출물을 함유한 배지에서 배양하는 단계; 및 상기 배양물로부터 프로토파낙사트리올을 수득하는 단계를 포함하는 프로토파낙사트리올의 제조방법을 제공한다.
상기 Leifsonia sp. GAL45가 프로토파낙사트리올을 제조하기 위해 이용하는 기질은 인삼 추출물의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명에 있어서, '인삼 추출물'은 사포닌, 특정 진세노사이드 또는 이들의 혼합물; 또는 사포닌 분획, 특정 진세노사이드를 포함하는 분획 또는 이들의 혼합물 등을 모두 포함한다. 또한 '인삼 추출물'은 물, 완충용액, 유기용매 등과 같은 용매를 포함하는 것일 수 있다. 본 발명에 있어서, 프로토파낙사트리올의 제조를 위해 사용되는 인삼추출물은 사포닌을 함유하고 있는 것으로 알려져 있는 파낙스속의 식물, 이에 제한되는 것은 아니나, 예를 들어, 고려 인삼(Panax ginseng), 전칠삼(Panax notoginseng), 미국삼(Panax quinquefolia), 죽절삼(Panax japonica), 삼엽삼(Panzx trifolia), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis), 파낙스 엘레가티오 르(Panax enegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티푸스(Panax bipinratifidus) 및 파낙스 안구스티롤리움(Panax angustifolium)으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 식물의 추출물일 수 있다.
상기 인삼 추출물은 조사포닌 또는 진세노사이드를 포함하는 것일 수 있다. 바람직하게는 상기 인삼 추출물은 프로토파낙스트리올계 진세노사이드를 포함할 수 있다. 한 구체예에서, 상기 인삼 추출물은 Re, Rg1, Rg2, Rh1, 및 F1로부터 선택되는 하나 이상의 진세노사이드를 포함하는 것일 수 있다. 사포닌 또는 특정 진세노사이드를 포함하는 인삼 추출물 또는 특정 인삼 추출물 분획의 제조 방법에 대해서는 당업계에 잘 알려져 있으며, 또한 사포닌 또는 특정 진세노사이드는 상업적으로 입수하여 사용할 수도 있다. 하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, 조사포닌 추출물을 사용한 경우에 비해 프로토파낙스트리올계 진세노사이드를 프로토파낙사트리올로 전환시키는 것이 훨씬 수율이 우수하다.
Leifsonia sp. GAL45의 배양상등액을 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법에 있어서, 상기 배양상등액은 Leifsonia sp. GAL45을 인삼 추출물 함유 배지에서 유도배양하고 상기 배지를 원심분리하고 농축시킨 것일 수 있다. 유도배양은 프로토파낙사트리올의 생성량을 보다 증가시켜 줄 수 있다. Leifsonia sp. GAL45의 배양상등액을 이용하여 프로토파낙사트리올을 제조하는 경우 Leifsonia sp. GAL45를 배지에 직접 접종하여 배양하는 경우에 비해 추출 및 정제 과정이 보다 유리하다.
Leifsonia sp. GAL45의 배양상등액 또는 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법에 있어서, 반응 또는 배양의 조건은 특별히 한정되지 않는다. 다만 Leifsonia sp. GAL45 또는 이에 포함된 효소의 반응성을 고려할 때, 반응 또는 배양은 10℃ 내지 40℃, 바람직하게는 실온 내지 35℃에서 수행되는 것이 좋다. 한편, 반응 또는 배양 시간은, Leifsonia sp. GAL45 배양상등액을 이용할 경우에는 약 1 내지 24시간, 바람직하게는 4시간 내지 12시간, Leifsonia sp. GAL45를 직접 이용할 경우에는 12시간 내지 60시간, 바람직하게는 24시간 내지 48시간일 수 있다.
Leifsonia sp. GAL45의 배양상등액 또는 Leifsonia sp. GAL45를 이용한 프로토파낙사트리올의 제조방법에 있어서, 반응물 또는 배양물로부터 프로토파낙사트리올을 수득하는 단계는 수포화부탄올을 이용하여 반응물 또는 배양물로부터 프로토파낙사트리올을 추출해 냄으로써 수행할 수 있다.
상기와 같은 방법을 이용하면 프로토파낙사트리올을 대량으로 수득할 수 있어 의약 또는 식품의 활성 성분으로 유용하게 이용할 수 있다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
<실시예 1> 인삼 토양으로부터 베타 글루코시데이즈 및 베타 갈락토시데이즈 활성을 가진 균주들 중 진세노사이드 전환능 가진 균주 선별
(1) 조사포닌의 추출
균주를 선별하기 위한 실험을 진행하기 위하여 홍삼농축액에서 조사포닌을 추출하였다. 홍삼농축액을 증류수에 용해시킨 후 에틸에테르(ethylether)로 3회 처리하여 지용성 성분을 제거하고, 수포화부탄올로 3회 처리하여 얻은 수포화부탄올층을 감압 농축하여 조사포닌을 얻었다.
(2) 진세노사이드 전환능 가진 균주선별 및 분리
Esculin 및 X-gal plate assay를 통해 베타글루코시데이즈 및 베타갈락토시데이즈 활성을 가진 균주들을 분리하였다. 사포닌 전환능력을 시험하기 위해서 96well에 R2A 액체배지와 멸균처리된 조사포닌액을 1000ppm의 농도로 첨가시켰다. 30℃에서 48시간 배양후 원심분리를 통해 사포닌이 녹아있는 배양상등액 200μl 샘플을 취하여 1.5ml 튜브에서 shibata법을 이용한 에틸에테르와 수포화부탄올의 사포닌 추출방법을 진행하였으며, 이렇게 추출된 결과물은 40% 아세토니트릴에 녹여서 HPLC분석을 진행하였다. 그 결과 진세노사이드 전환능이 있는 균주를 선별 및 분리하여 GAL45로 명명하였다.
(3) 레이프소니아 속( Leifsonia sp.) GAL45 균주의 동정
프로토파낙사트리올의 전환능이 있는 균주를 동정하기 위해 16S rRNA의 유전 자 서열을 분석하였다. 먼저 균주를 R2A 플레이트에 도말하여 얻은 콜로니를 멸균수에 현탁한 후 100℃에서 10분간 중탕하고 원심분리를 이용하여 침전물을 제거하여 상등액을 얻었다. 이를 주형(template)으로 이용하여 유전자를 증폭하는 PCR을 하였으며 이 때, pBact 27F primer (5'-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-3')와 pUniv 1492R (5'-GGYTACCTTGTTACGACTT-3')를 사용하였다. 이렇게 PCR을 하여 증폭된 유전자는 전기영동을 하여 확인하였으며, 겔 추출키트 (QIAGEN, Germany)를 이용하여 아가로즈에서 DNA를 분리하였다. 분리한 샘플을 (주)솔젠트에 의뢰하여 염기서열을 분석한 결과, 상기 균주의 16S rRNA유전자는 서열번호 1의 염기서열을 갖는 것으로 확인되었다. 상기 서열을 Eztaxon 데이터베이스에서 비교 분석한 결과, Leifsonia shinshuensis JCM 1059T와 98.8%의 가장 높은 서열 유사도를 나타내었다. 따라서 본 발명의 균주를 Leifsonia sp. GAL45로 명명하였으며, 이를 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2009년 11월 18일자로 기탁하고, 기탁번호 KCTC18183P를 부여받았다.
<실시예 2> 조사포닌으로 유도된 효소액 제조
조사포닌이 첨가된 액체 R2A배지를 효소액으로 이용하였다. 플라스크에 250ml의 100ml R2A 액체배지를 만들고 멸균처리된 조사포닌액을 1000ppm의 농도로 첨가시켰다. 조사포닌이 들어있는 R2A 액체배지에 레이프소니아 속 (Leifsonia sp.) GAL45 균주를 접종하였으며, 30℃에서 배양을 진행하였다. 72시간 후에, 원심분리를 통해 배양상등액 30ml 샘플을 취하였다. 30ml의 배양상등액을 한외여과 법(Ultrafiltration)을 이용해 1ml로 농축을 진행하였다. 농축된 1ml의 배양상등액을 효소로 이용하였다.
<실시예 3> 프로토파낙사트리올 제조
프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Re, Rg1, Rg2, Rh1, F1, 및 인삼 사포닌 추출물 (조사포닌)을 각각 기질로 이용하여 프로토파낙사트리올을 제조하였다.50mM Tris-Hcl (pH 7.5) 완충용액에 녹아있는 진세노사이드 기질에 실시예 2에 의해 농축된 배양상등액을 효소로 이용해 30℃ 인큐베이터에서 12~24시간 동안 충분히 효소반응을 시켰다. 적정시간 효소반응 후, 반응이 끝난 결과물을 HPLC로 분석하였다. 그 결과, 도 1-6 및 표1에서 볼 수 있는 바와 같이 높은 수율로 프로토파낙사트리올을 수득할 수 있었다( 도 1 내지 6의 HPLC 크로마토그램에서, 기질과 프로토파낙사트리올 이외의 별도로 표시하지 않은 피크들은 효소액을 제조하는 과정에서 포함된 물질의 피크이다). Leifsonia sp. GAL45를 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Re, Rg1, Rg2, Rh1, F1, 및 인삼 사포닌 추출물 (조사포닌)을 각각 기질로 포함하는 배지에 접종하여 배양했을 때에도 거의 동일한 (오차범위 5%이내) 결과를 얻을 수 있었다.
[표1] 기질에 따른 프로토파낙사트리올의 제조 수율
Substrate Product (g) * Yield(%)
인삼 사포닌 추출물 0.109 10.9
Re 0.763 76.3
Rg1 0.693 69.3
Rg2 0.844 84.4
Rh1 0.819707 82.0
F1 0.726467 72.6
*기질 1g을 사용하였을때의 생산물(프로토파낙사트리올)의 양
[수탁번호]
기탁기관명 : 한국생명공학연구원
수탁번호 : KCTC18183P
수탁일자 : 20091118
도 1은 실시예 3의 방법에 따라 인삼사포닌 추출물 (조사포닌)을 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
도 2는 실시예 3의 방법에 따라 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Re를 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
도 3은 실시예 3의 방법에 따라 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Rg1을 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
도 4는 실시예 3의 방법에 따라 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Rg2를 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
도 5는 실시예 3의 방법에 따라 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 Rh1을 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
도 6은 실시예 3의 방법에 따라 프로토파낙사트리올계 진세노사이드 F1을 프로토파낙사트리올로 전환시킨 결과를 보여주는 HPLC 크로마토그램이다.
<110> Chung-Ang University Industry-Academy Cooperation Foundation <120> Use of Leifsonia sp. GAL45 for preparation of protopanaxatriol <130> P091128 <160> 1 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1383 <212> DNA <213> Leifsonia sp. GAL45 <220> <221> rRNA <222> (1)..(1383) <400> 1 cgaacgatga acctggagct tgctctaggg gattagtggc gaacgggtga gtaacacgtg 60 agtaacctgc ccttgactct gggataacct ccggaaacgg aagctaatac cggatatgac 120 gcacggaggc atctcctgtg cgtggaaaga atttcggtca aggatggact cgcggcctat 180 caggtagttg gtgaggtaac ggcccaccaa gcctacgacg ggtagccggc ctgagagggt 240 gaccggccac actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa 300 tattgcacaa tgggcgaaag cctgatgcag caacgccgcg tgagggacga cggccttcgg 360 gttgtaaacc tcttttagta gggaagaagc gaaagtgacg gtacctgcag aaaaagcacc 420 ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat acgtagggtg cgagcgttgt ccggaattat 480 tgggcgtaaa gagctcgtag gcggtctgtc gcgtctgctg tgaaatcccg aggctcaacc 540 tcgggcctgc agtgggtacg ggcagactag agtgcggtag gggagattgg aattcctggt 600 gtagcggtgg aatgcgcaga tatcaggagg aacaccgatg gcgaaggcag atctctgggc 660 cgtaactgac gctgaggagc gaaagcgtgg ggagcgaaca ggattagata ccctggtagt 720 ccacgcccgt aaacgttggg cgctagatgt ggggaccatt ccacggtttc cgtgtcgcag 780 ctaacgcatt aagcgccccg cctggggagt acggccgcaa ggctaaaact caaaggaatt 840 gacgggggcc cgcacaagcg gcggagcatg cggattaatt cgatgcaacg cgaagaacct 900 taccaaggct tgacatatac gagaacgggc tagaaatagt caactctttg gacactcgta 960 aacaggtggt gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa 1020 cgagcgcaac cctcgttcta tgttgccagc gcgtaatggc gggaactcat aggagactgc 1080 cggggtcaac tcggaggaag gtggggatga cgtcaaatca tcatgcccct tatgtcttgg 1140 gcttcacgca tgctacaatg gccggtacaa agggctgcaa taccgtaagg tggagcgaat 1200 cccaaaaagc cggtctcagt tcggattgag gtctgcaact cgacctcatg aagtcggagt 1260 cgctagtaat cgcagatcag caacgctgcg gtgaatacgt tcccgggcct tgtacacacc 1320 gcccgtcaag tcatgaaagt cggtaacacc cgaagccggt ggcctaaccc ttgtggaagg 1380 agc 1383

Claims (9)

  1. Leifsonia sp. GAL45(기탁번호 KCTC18183P)의 배양상등액을 인삼 추출물과 반응시키는 단계; 및
    상기 반응물로부터 프로토파낙사트리올을 수득하는 단계를 포함하는 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 추출물은 고려 인삼(Panax ginseng), 전칠삼(Panax notoginseng), 미국삼(Panax quinquefolia), 죽절삼(Panax japonica), 삼엽삼(Panzx trifolia), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis), 파낙스 엘레가티오르(Panax enegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티푸스(Panax bipinratifidus) 및 파낙스 안구스티롤리움(Panax angustifolium)으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 식물의 추출물인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 추출물은 조사포닌 또는 진세노사이드를 포함하는 것인 프로토파 낙사트리올의 제조방법.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 추출물을 Re, Rg1, Rg2, Rh1 및 F1로부터 선택되는 하나 이상의 진세노사이드를 포함하는 것인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 배양상등액은 Leifsonia sp. GAL45을 인삼 추출물 함유 배지에서 유도배양하고 상기 배지를 원심분리하고 농축시킨 것인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  6. Leifsonia sp. GAL45(기탁번호 KCTC18183P)를 인삼추출물을 함유한 배지에서 배양하는 단계; 및
    상기 배양물로부터 프로토파낙사트리올을 수득하는 단계를 포함하는 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 인삼 추출물은 고려 인삼(Panax ginseng), 전칠삼(Panax notoginseng), 미국삼(Panax quinquefolia), 죽절삼(Panax japonica), 삼엽삼(Panzx trifolia), 히말라야삼(Panax pseudoginseng), 베트남삼(Panax vietnamensis), 파낙스 엘레가티오르(Panax enegatior), 파낙스 완지아누스(Panax wangianus), 파낙스 비핀라티푸스(Panax bipinratifidus) 및 파낙스 안구스티롤리움(Panax angustifolium)으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 식물의 추출물인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  8. 제6항에 있어서,
    상기 인삼 추출물은 조사포닌 또는 진세노사이드를 포함하는 것인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
  9. 제6항에 있어서,
    상기 인삼 추출물을 Re, Rg1, Rg2, Rh1 및 F1로부터 선택되는 하나 이상의 진세노사이드를 포함하는 것인 프로토파낙사트리올의 제조방법.
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