JP2018008903A - 痩身用組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明に係る抽出物、加水分解物又は発酵物を得るために使用するハイビスカス、ヒマワリ及びクズは以下のとおりである。
ハイビスカス(Hibisucas sabdariffa L.)の花部50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り40℃で2時間抽出して、抽出物溶液720g(固形分濃度2.65%)
ハイビスカス(Hibisucas sabdariffa L.)の花部50gを加えて懸濁液を作り、この液にペクチンエステラーゼ1.0g、グルコアミラーゼ0.1g及びパパイン0.1gを加えた後40℃で3時間、加水分解抽出処理を行った。その後、1時間加温して酵素を加熱失活させ、ろ過を行って酵素加水分解物溶液810g(固形分濃度3.78%)を得た。
ハイビスカス(Hibisucas sabdariffa L.)の花部50gに精製水950gを加えて懸濁液を作り、80〜90℃で1時間加温して殺菌を行った。殺菌した懸濁液に乳酸菌(ラクトバシルス プランタラム)を108個/mL接種し、37℃で3日間静置培養した。培養終了後培養液を加熱殺菌し、ろ過して乳酸菌発酵物溶液734g(固形分濃度3.24%)を得た。
ヒマワリの新芽を乾燥し、乾燥物36gに精製水と1,3−ブチレングリコールの混合溶媒(精製水と1,3−ブチレングリコール=1:1)1080gを添加した。これを4℃で抽出を行った後ろ過し、褐色透明のヒマワリ新芽抽出物880gを得た(固形分濃度1.3%)。
ヒマワリの新芽を乾燥し、乾燥物36gに精製水と1,3−プロパンジオールの混合溶媒(精製水と1,3−ブチレングリコール=1:1)1080gを添加した。これを4℃で抽出を行った後ろ過し、褐色透明のヒマワリ新芽抽出物864gを得た(固形分濃度1.1%)。
クズの根の粉末1kgにエタノール10Lに加えて加温抽出した。次に、得られた抽出液をろ過、濃縮後、合成吸着剤のカラムに吸着させ、エタノールで溶出することにより、プエラリンを高濃度含む溶液を回収した。さらに再結晶により、プエラリン濃度を高めた濃縮液を回収した。次に、濃縮液を乾燥して、褐色粉末45gを得た。この粉末40gに水とブチレングルコールの混合溶媒960gを加えて撹拌した後、ろ過し、濃褐色透明の抽出物溶液928gを得た(固形分量3.51%)。
製造例6にて用いた抽出溶媒(エタノール)に代えてメタノールを用いるほかは、製造例6と同様の操作により、褐色粉末43.0gを得た。この粉末40gに水とブチレングルコールの混合溶媒958gを加えて撹拌した後、ろ過し、濃褐色透明の抽出物溶液915gを得た(固形分量:3.10%)。
製造例6と同様の操作により、褐色透明の抽出物溶液920gを得た。この溶液に、活性炭6.7gを加え、1時間撹拌して溶液をろ過し、褐色透明の抽出物溶液876gを得た(固形分量3.10%)。
[成分] 部
オリーブ油 1.0
ポリオキシエチレン(5.5)セチルアルコール 5.0
ブチルパラベン 0.1
製造例1の抽出物 5.0
エタノール 5.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
香料 適量
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例2の加水分解物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例3の発酵物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例4の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例5の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例6の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例7の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
処方例1に含まれる製造例1の抽出物に代えて、製造例8の抽出物5.0部を用いるほかは、処方例1と同様にして化粧水を得た。
[成分] 部
流動パラフィン 6.0
ヘキサラン 4.0
ホホバ油 1.0
ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノステアレート 1.0
親油型ステアリン酸グリセリル 1.0
大豆レシチン 1.5
製造例3の発酵物 3.0
L−アスコルビン酸−2−グルコシド 2.0
水酸化カリウム 0.5
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
カルボキシメチルセルロース 0.3
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
精製水 全量が100部となる量
香料 適量
処方例9の成分中、製造例3の発酵物3.0に代えて、製造例4の抽出物3.0部を用いるほかは処方例9と同様にして乳液を得た。
処方例9の成分中、製造例3の発酵物3.0に代えて、製造例5の抽出物3.0部を用いるほかは処方例11と同様にして乳液を得た。
処方例9の成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてアルブチン3.0部を用いるほかは処方例9と同様にして乳液を得た。
処方例9の成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてトラネキサム酸2.0部を用いるほかは処方例9と同様にして乳液を得た。
処方例9の成分中、L−アスコルビン酸−2−グルコシド2.0部及び水酸化カリウム0.5部に代えてニコチン酸アミド3.0部を用いるほかは処方例9と同様にして乳液を得た。
[成分] 部
製造例3の発酵物 10.0
エタノール 10.0
グリセリン 3.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
メチルパラベン 0.2
クエン酸 0.1
クエン酸ナトリウム 0.3
カルボキシビニルポリマー 0.1
キサンタンガム 0.1
香料 適量
水酸化カリウム 適量
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
エタノール 2.0
グリセリン 5.0
1、3−ブチレングリコール 5.0
メチルパラベン 0.1
ヒアルロン酸 0.1
製造例4の抽出物 5.0
クエン酸 0.3
クエン酸ナトリウム 0.6
精製水 全量が100部となる量
処方例16の成分中、製造例4の抽出物に代えて製造例8の抽出物5.0部を用いるほかは処方例16と同様にしてエッセンスを得た。
[成分] 部
ステアリン酸 2.4
モノステアリン酸プロピレングリコール 2.0
セトステアリルアルコール 0.2
液状ラノリン 2.0
流動パラフィン 3.0
ミリスチン酸イソプロピル 8.5
プロピルパラベン 0.05
製造例6の抽出物 5.0
カルボキシメチルセルロースナトリウム 0.2
ベントナイト 0.5
プロピレングリコール 4.0
トリエタノールアミン 1.1
メチルパラベン 0.1
精製水 全量が100部となる量
酸化チタン 8.0
タルク 4.0
着色顔料 適量
[成分] 部
N−ラウロイルメチルアラニンナトリウム 25.0
ヤシ油脂肪酸カリウム液(40%) 26.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 3.0
メチルパラベン 0.1
製造例8の発酵物 5.0
1,3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
モノニトログアヤコールナトリウム 0.02
塩酸ピリドキシン 0.03
l−メントール 0.8
タマサキツヅラフジ根エキス 0.3
褐藻エキス 0.3
オタネニンジンエキス 0.3
ゲンチアナエキス 2.0
製造例4の抽出物 3.5
トリメチルグリシン 0.5
乳酸 0.2
1、3−ブチレングリコール 10.0
フェノキシエタノール 0.2
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.4
L−アルギニン 適量
エタノール 20.0
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
N−ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム 10.0
ポリオキシエチレン(3)アルキルエーテル硫酸ナトリウム 20.0
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン 10.0
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド 4.0
メチルパラベン 0.1
クエン酸 0.1
製造例3の発酵物 2.0
1、3−ブチレングリコール 2.0
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
ポリオキシエチレン(10)硬化ヒマシ油 1.0
塩化ジステアリルジメチルアンモニウム 1.5
塩化ステアリルトリメチルアンモニウム 2.0
2−エチルヘキサン酸グリセリル 1.0
セタノール 3.2
ステアリルアルコール 1.0
メチルパラベン 0.1
製造例1の加水分解物 2.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
製造例3の発酵物 10.0
コラーゲン 8.0
クエン酸 0.1
甘味料(スクロース) 0.01
酸化防止剤(ビタミンC) 0.01
精製水 全量が100部となる量
[成分] 部
製造例4の抽出物 20.0
ビタミンC 20.0
脂肪酸エステル 10.0
乳酸カルシウム 20.0
乳糖 30.0
上記重量部の各成分を混合した後、加圧成形し、錠剤とした。
以下、本発明に係る抽出物、加水分解物又は発酵物の脂肪蓄積の抑制効果を、脂肪細胞内の脂肪滴周辺に存在するタンパク質[ペリリピン1(perilipin1)]の合成抑制効果により評価する。このペリリピン1が減少すると、脂肪滴数の減少及び脂肪滴サイズの縮小が生じることが知られていることから、ペリリピン1の合成抑制効果を評価する。
[試験方法]
マウス線維芽細胞(3T3-L1)を、10%FBS含有ダルベッコ変法イーグル最少必須培地(DMEM)[日水製薬株式会社]を入れた96穴マイクロプレートに1.5×104個/穴播種し、37℃、5.0%CO2の条件下で3日間プレ培養した後、分化誘導培地[10%FBS、0.5mM 3-イソブチル-1-メチルキサンチン(IBMX)、0.25μMデキサメタソン(DEX)、及び1.1μg/mLインスリンを混合したDMEM]を添加後、さらに2日間培養した。その後、試料溶液として本発明に係る製造例2の酵素分解物、製造例3の発酵物、製造例4の抽出物のそれぞれを規定の濃度(溶液として)となるように調整した10%FBS含有DMEMに交換し、同条件でさらに5日間培養した。ここで、各試料溶液の濃度は、追添加するDMEMの全量に対して溶液として終濃度が1.0%となるように調整した。5日培養後、ペリリピン1の抗体を用いた免疫的検出を行った。すなわち、PBS(-)洗浄後、15%中性緩衝ホルマリン液を用いて細胞を30分処理して固定、0.5%Triton X-100溶液で1時間浸透処理、5倍希釈ブロッキングワンP(ナカライテスク社)溶液で2時間処理によるブロッキングを行った後、ペリリピン1抗体を添加し、室温で1時間静置した。その後、PBS(-)洗浄し、蛍光ラベルした二次抗体を添加してさらに暗所で一定時間静置した。その後、PBS(-)洗浄し、蛍光強度の測定を行った。先ず二次抗体の蛍光ラベル(Alexa Fluor488)をEx=485nm、Em=520nmで、蛍光マイクロプレートリーダー(フルオロスキャンアセント、Thermo Fisher Scientific社製)を用いて測定し、その後、Hoechst33342によるDNA染色を行い、Ex=355nm、Em=460nmの測定を行った。それぞれの試験区のAlexa Fluor488の蛍光強度をHoechst33342の蛍光強度で割ることで、ペリリピン1の生成度合いを求めた。試料溶液に代えて30BGを添加した試料無添加の場合(対照)についても上記と同様の操作を行い、ここに得られたペリリピン1生成度合いに対する各試料添加時のペリリピン1生成度合いの相対値を求め、ペリリピン1生成量(%)とした。
[表1]
[実験方法]
マウス線維芽細胞(3T3-L1)を、10%FBS含有ダルベッコ変法イーグル最少必須培地(DMEM)[日水製薬株式会社]を入れた96穴マイクロプレートに1.5×104個/穴播種し、37℃、5.0%CO2の条件下で3日間プレ培養した後、分化誘導培地[10%FBS、0.5mM 3-イソブチル-1-メチルキサンチン(IBMX)、0.25μMデキサメタソン(DEX)、及び1.1μg/mLインスリンを混合したDMEM]を添加後、さらに2日間培養した。その後、試料溶液として本発明に係る製造例2の酵素分解物、製造例3の発酵物、製造例4の抽出物及び製造例5の抽出物のそれぞれを規定の濃度(溶液として)となるように調整した10%FBS含有DMEMを追添加し、同条件でさらに5日間培養した。ここで、各試料溶液の濃度は、追添加するDMEMの全量に対して溶液として終濃度が0.5%、1.0%となるように調整した。5日培養後、オイルレッドO(和光純薬工業株式会社)を用いて細胞内の脂肪滴の染色を行った。すなわち、PBS(-)洗浄後、10%ホルマリン水溶液を用いて細胞を10分処理して固定、60%イソプロパノール水溶液で1分間浸透処理を行った後、染色液(0.18%オイルレッドO含有60%イソプロパノール水溶液)を添加し、室温で30分間静置した。その後、60%イソプロパノール水溶液で洗浄し、100%イソプロパノールを加えてオイルレッドOを抽出し、吸光度ABS540nmをマイクロプレートリーダー(Model 680、バイオラッド社製)で測定し、これを脂肪滴蓄積量とした。また、別プレートでオイルレッドO染色をせずに同様の操作を行い、その後、Hoechst33342によるDNA染色を行い、Ex=355nm、Em=460nmの測定を行った。それぞれの試験区のABS540nmの吸光度をHoechst33342の蛍光強度で割ることで、脂肪滴の蓄積量を求めた。試料溶液に代えて30BGを添加した試料無添加の場合(対照)についても上記と同様の操作を行い、ここに得られた脂肪滴蓄積量に対する各試料添加時の脂肪滴蓄積量の相対値を求め、脂肪滴蓄積量(%)とした。
[表2]
Claims (3)
- ハイビスカス、ヒマワリ及びクズからなる群より選択される1又は2以上の植物の抽出物若しくはその加水分解物、又は当該植物の発酵物を有効成分として含有する痩身用組成物。
- 請求項1に記載の痩身用組成物を配合する皮膚外用剤。
- 請求項1に記載の痩身用組成物を配合する経口組成物。
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JP2016139672A JP2018008903A (ja) | 2016-07-14 | 2016-07-14 | 痩身用組成物 |
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