JP5097247B2 - 共焦点顕微鏡装置及び共焦点顕微鏡装置を用いた観察方法 - Google Patents
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Description
図1は、本発明の第1の実施形態に係る共焦点顕微鏡装置の概略構成図である。
図1において、共焦点顕微鏡装置は、第1のレーザ光源101からのレーザ光で標本134の焦点面上を走査する観察用(又は、画像取得用)の第1の走査光学系100と、第2のレーザ光源201から出力されるレーザ光を標本134の任意の位置に照射してケージド試薬を開裂させるため(すなわち、標本刺激用)の第2の走査光学系200とを備えている。第1の走査光学系100の光路と第2の走査光学系200の光路とはダイクロイックミラー120で一致している。これにより、第1の走査光学系100と第2の走査光学系200とが、1つの対物レンズ132を共用している。
図3を参照して、本発明の第2の実施形態に係る共焦点顕微鏡装置を説明する。図3は、本発明の第2の実施形態に係る共焦点顕微鏡装置の概略構成図である。図3において、第2の走査光学系200は、第1の実施形態と同じであるので、同じ符号を付し、詳細な説明は省略する。
W=kλM/NA
となる。ここで、kは係数であり、k=0.5〜1程度の値がよく使われる。
(1) 前記第2の走査光学系が前記レーザ光源のレーザ光のビーム径を変化させるビーム径可変機構を更に備えること。
(2) 前記ビーム径可変機構より出力されるレーザ光のビーム径から標本面上での深さ方向の励起光強度分布を算出し、又は記憶する励起光強度分布算出手段を更に具備すること。
(3) 前記第1のレーザ光源はIRパルスレーザであり、前記ビーム可変機構は、前記第2の走査光学系に設けられていること。
(4) 前記ビーム径可変機構から出力されたレーザ光の標本面上での深さ方向の強度分布を算出する深さ方向強度分布算出手段を更に備えること。
(5) 前記コヒーレントではない光源は、ランプもしくはLED光源であること。
また、例えば各実施形態に示される全構成要件から幾つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとする課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果で述べられている効果が得られる場合には、この構成要件が削除された構成が発明として抽出され得る。
Claims (7)
- コヒーレントではない光源から出力された光によって対物レンズを介して標本を走査し、前記標本からの蛍光を前記対物レンズを介して検出する第1の走査光学系と、
レーザ光源から出力されたレーザ光を標本の特定の部位に照射し、特異現象を発現させるための第2の走査光学系とを具備し、
前記第1の走査光学系は、共焦点効果を得るための回転ディスクを更に具備し、
前記コヒーレントではない光源から出力された光は、前記回転ディスクを介して標本を走査し、
前記蛍光は、前記回転ディスクを介して検出され、
前記第2の走査光学系は回転ディスクを介さずに前記レーザ光を前記標本の特定部位に集光し、
前記第1の光学系及び前記第2の走査光学系の焦点面は同じ深さ位置にあり、
前記第2の走査光学系は、前記レーザ光をXY方向に任意に偏向する走査手段によってそのレーザ光を前記特定の部位に照射することを特徴とする顕微鏡装置。 - 請求項1記載の顕微鏡装置において、前記第2の走査光学系が前記レーザ光源のレーザ光のビーム径を変化させるビーム径可変機構を更に備えることを特徴とする顕微鏡装置。
- コヒーレントではない光源から出力された光によって対物レンズを介して標本を走査し、前記標本からの蛍光を前記対物レンズを介して検出する第1の走査光学系と、
レーザ光源から出力されたレーザ光を標本の特定の部位に照射し、特異現象を発現させるための第2の走査光学系とを具備し、
前記第1の走査光学系は、共焦点効果を得るための回転ディスクを更に具備し、
前記コヒーレントではない光源から出力された光は、前記回転ディスクを介して標本を走査し、
前記蛍光は、前記回転ディスクを介して検出され、
前記第2の走査光学系は回転ディスクを介さずに前記レーザ光を前記標本の特定部位に集光し、
前記第1の光学系及び前記第2の走査光学系の焦点面は同じ深さ位置にあり、前記第2の走査光学系が前記レーザ光源のレーザ光のビーム径を変化させるビーム径可変機構を更に備えることを特徴とする顕微鏡装置。 - コヒーレントではない光源から出力された光によって対物レンズを介して標本をケーラー照明し、前記標本からの蛍光を前記対物レンズを介して検出する第1の光学系と、
レーザ光源から出力されたレーザ光を標本の特定の部位に集光して照射し、特異現象を発現させるための第2の走査光学系とを具備し、
前記第1の光学系及び前記第2の走査光学系の焦点面は同じ深さ位置にあり、
前記第2の走査光学系が前記レーザ光源のレーザ光のビーム径を変化させるビーム径可変機構を更に備えることを特徴とする顕微鏡装置。 - 請求項2〜請求項4記載の顕微鏡装置において、前記ビーム径可変機構より出力されるレーザ光のビーム径から標本面上での深さ方向の励起光強度分布を算出し、又は記憶する励起光強度分布算出手段を更に具備することを特徴とする顕微鏡装置。
- 共焦点顕微鏡装置を用いた観察方法であって、
回転ディスクを介して標本に励起光を照射し、ディスク走査により標本の蛍光像を取得する第1のステップと、
特異現象を発現させるためのレーザ光を前記回転ディスクを介さずに前記標本の所望の位置に集光して照射する第2のステップとを具備し、
前記第1及び第2のステップにおいて同じ深さ位置にある焦点面にそれぞれの光が照射され、
前記第2のステップは、前記標本の所望の位置に前記レーザ光を照射するようにそのレーザ光をXY方向に任意に偏向する走査手段によって偏向させるステップを含むことを特徴とする観察方法。 - 請求項6記載の観察方法において、前記第1又は第2のステップは、前記特異現象を発現させるための光の焦点面を同じ位置に保ったまま、その標本面における深さ方向の強度分布を調整するステップを更に含むことを特徴とする観察方法。
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