JP3880634B2

JP3880634B2 - 結晶性マクロライドおよびその調製方法

Info

Publication number: JP3880634B2
Application number: JP50628799A
Authority: JP
Inventors: ドーゼンバッハ，コルネリア; グラスベルガー，マクシミリアン; ハルトマン，オットー; ホルバト，アマリュラ; ミュッツ，ジャン−ポール; ペン，ゲルハルト; プフェッファー，ザビーネ; ビークフーゼン，ディールク
Original assignee: ノバルティスアクチエンゲゼルシャフト
Priority date: 1997-06-30
Filing date: 1998-06-26
Publication date: 2007-02-14
Anticipated expiration: 2018-06-26
Also published as: DE69828692T2; TR199903189T2; ID24897A; CN1261365A; JP4504323B2; AU739211B2; JP2006151999A; SK285665B6; ATE287410T1; EP0994880A1; HUP0003053A3; HK1028597A1; GB9713730D0; NZ500994A; ZA985655B; NO312765B1; CZ474099A3; KR20010020423A; CA2290412A1; PT994880E

Description

本発明はマクロライド化学に関係する。それは、結晶型の式Ｉ化合物

即ち、｛［１Ｅ-(１Ｒ，３Ｒ，４Ｓ)］１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ，１８Ｅ，２１Ｓ，２３Ｓ，２４Ｒ，２５Ｓ，２７Ｒ｝-１２-［２-(４-クロロ-３-メトキシシクロヘキシル)-１-メチルビニル]-１７-エチル-１，１４-ジヒドロキシ-２３,２５-ジメトキシ-１３，１９，２１，２７-テトラメチル-１１，２８-ジオキサ-４-アザトリシクロ［２２．３．１．０(４，９)］オクタコス-１８-エン-２，３，１０，１６-テトラオンに関係し、以下では簡単に“３３-エピクロル-３３-デゾキシ-ＦＲ５２０”または“３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシン”と呼ぶ。
単純に、この明細書で言及する式Ｉは、様々な互変異性体型の式Ｉ化合物を含むと理解すべきであり、その化合物は、特に溶液状態において、平衡状態にあり、そして溶媒和されており、例えば式

の互変異性体型のような水和型である。
式Ｉ化合物は無定型であることが知られており、例えばSandoz EP427680、実施例66aには無色泡樹脂型[¹H-NMR=4.56(m,H-33)]で記載されており、Merck EP480623、実施例53(物理化学的特性は記載されず)にも記載されている。様々な名前および炭素原子番号がその文献中で使用されている。
本発明より以前では、式Ｉ化合物は結晶型で回収されることはなかった。
分子のシクロヘキシル部分において、特にその４位（本明細書の式ＩおよびＩcでは３３位と記載している。）のハロゲン原子、特に塩素の存在がこの構造クラスの化合物群の結晶性に好ましくない影響を与えると考えられている。すなわち、EP427680において、ハロゲン化されている最終生成物はいずれも結晶形で得られておらず、それらは無色泡または泡状樹脂であり、NMRスペクトルで特性化されている。
同様に、専ら、シクロヘキシル部分がハロゲン化されたマクロライド最終生成物を対象とするEP480623において、具体的に開示された化合物のいずれについても融点のような結晶性を示唆するデータで特性化されているものはなく、その明細書中で殆どの最終生成物が物理化学的データによる特性化がなされておらず、特性化がなされている場合でも、それはマススペクトルで行われているに過ぎず、物理的状態を示すものではない。そして開示の4-クロロ最終生成物は全く特性化されていない。
さらに、シクロヘキシル部分がハロゲン化された類似マクロライドも、例えばFisons WO91/13889、特に実施例４２a)、42b)および49b)に開示されているが、その明細書中の化合物群も結晶形は得られておらず、泡または油として回収されているに過ぎない。
結局、FK506から誘導される２３員トリシクロマクロライドは、結晶形で得ることが困難であり、結晶形で得られるとしても、例えば、Merck WO97/8182からも明らかなように、塩を形成しうる塩基性置換基を有するマクロライド化合物（それは結晶形で得られるが酒石酸塩である。）に限られている。本発明化合物には、そのような塩基性置換基はない。
本発明は式Ｉ化合物の結晶型に関係する。結晶型は、溶媒和型、例えば水和型であるか、もしくは無水型、または互変異性体として得られる。
結晶型の式Ｉ化合物の最初の回収は化合物の最初の合成から数年後であり、最初は無定型のみが得られ、さらにその後の最初の結晶化において化合物は無定型から実に容易に結晶化が誘発されることとなった。そのため、今では、最初に用いた再結晶条件（無定型化合物のエタノール性溶液に水を加えることを含む）の延長線上の種々の実験条件を用い、結晶物質を容易に作成することが出来る。
本発明は、結晶型の式Ｉ化合物、またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型を調製する方法にも関係し、結晶誘発条件下、溶液から式Ｉ無定型化合物を適切に変換することを含む。
本発明は、当該方法により調製される限り、結晶型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型にも関係し、結晶型から生成される限り、例えば溶解されている状態の非結晶性の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型にも関係する。
本発明の方法は通常の方法に有効である。結晶が形成する正確な条件は今では経験的に決定され、数多くの方法が実施可能であり、それらの方法は無定型の式Ｉ化合物のエタノール性溶液に水を最初に加えることを含む。
結晶誘発条件は、メタノール、エタノール、イソプロパノールもしくは水またはそれらの混合物のような適当な結晶誘発溶媒の使用を通常含む。通常、無定型化合物は通常の温度少なくとも１０℃で溶媒に溶解する。溶液は、溶媒に何れか１種以上の無定型化合物および溶媒和物、例えば水和、メタノレート、エタノレート、イソプロパノレートおよびアセトニトリレートを溶解することにより調製する。次いで、結晶を溶液からの変換により形成し、約１０℃と溶解の沸点との間の温度で結晶化が生じる。溶解および結晶化は種々の通常方法で行い得る。例えば、無定型化合物は溶媒または溶媒混合物に溶解し得、それは高温で容易に可溶化するが、低温では可溶量が減少する。高温で溶解後、溶液か望ましい結晶が生ずるまで冷却する。適当な溶媒は酢酸メチルおよび酢酸エチルのようなエステル、トルエンおよびアセトニトリルを含む。化合物が容易に溶解、好ましくは３０℃での溶解量が少なくとも１重量％である良好な溶媒、および溶解量の少ない、好ましくは３０℃での溶解量が約０．０１重量％以下である貧溶媒を含む混合溶媒を用いることも出来る。ただし、選択溶媒混合物を用いると低温、通常低くとも１０℃の混合物からの結晶化が可能となることが条件である。
さらに、異なる溶媒における結晶の溶解性の相違を使用し得る。例えば、無定型化合物は、約３０℃で溶解量が少なくとも１重量％である溶媒といった可溶性の高い良好な溶媒に溶解し、その後、約３０℃での溶解量が約０．０１重量％以下である溶媒といった溶解性の低い貧溶媒と溶液を混合する。そのため、約１０℃を超える温度に通常に維持しつつ良好な溶媒中の化合物溶液を貧溶媒に加えるか、また約１０℃を超える温度に通常に維持しつつ貧溶媒を良好な溶媒中の化合物溶液に加えることが出来る。良好な溶媒の例に、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールのような低級アルコール、ならびにアセトン、テトラヒドロフランおよびジオキサンを含む。貧溶媒の例に、水、ヘキサンおよびジエチルエーテルを含む。好ましくは、結晶化は約１０℃から約６０℃の範囲の温度で生ずる。
本発明の方法の他の実施態様では、通常の温度、低くとも約１０℃で、当該温度で可溶が不完全、好ましくはわずかに可溶するのみの溶媒に固定無定型を懸濁する。懸濁液は、固体微粒子を分散し、溶媒中に不完全に溶解したままの状態を生ずる。好ましくは、固体は攪拌により、例えばシェイキングまたはスターリングより懸濁状態が維持される。懸濁液は、出発固体から結晶に変換するために約１０℃以上の通常温度で維持される。適当な溶媒に懸濁された無定型固体化合物は溶媒和物、例えば水和、メタノレート、エタノレート、イソプロパノレートまたはアセトニトリレートであってもよい。無定型粉末は溶媒和物を乾燥することにより得られる。
結晶化を誘発するために溶液に結晶物質の“種”を加えることが好ましい。
結晶型の式Ｉ化合物は容易に単離し得る。その単離は、例えば結晶媒質から濾取または遠心分離（望ましいならば冷却後）し、洗浄し乾燥し、さらに同様の条件を用い再結晶してもよい。
最初の回収により、この明細書中で“Ａ型”と名付けた結晶型の物質が生じ、その一方、驚くべきことに少なくとも１つの他の結晶型の化合物を回収でき（この明細書中では“Ｂ型”と名付ける）、その化合物は溶解性のような種々の特性において式Ａとは相違するという知見が更に得られた。そのため、本発明は、このような結晶型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型に関係し、更に特にＡ型およびＢ型に関係する。Ａ型が好ましい。
Ａ型は室温で通常水和型である。水和型は約１１０℃の加熱により可逆的に脱水できる。それによってＡ型が得られる。水和型は室温でより安定な状態のＡ型の状態である。Ｂ型は室温でも通常水和型にならない。それはＡ型よりも熱力学的に安定な型である。
この明細書で定義する結晶型は、他の型を多くとも約０．５％(ｗ／ｗ)、例えば多くとも約０．１％(ｗ／ｗ)含むときに“結晶学的に純粋”であるとしている。そのため、例えば“結晶学的に純粋なＡ型”は約０．５％(ｗ／ｗ)以下、例えば約０．１％(ｗ／ｗ)以下のＢ型および／または無定型物を含む。
Ａ型およびＢ型の調製は通常の手段で行われ得、出発は無定型物質または個々のＢ型もしくはＡ型、もしくはその混合物の何れかから始まる。通常、出発物質は適当な溶媒に溶解され、好ましくはＡ型またはＢ型の何れかを生成する条件下その溶媒から結晶または再結晶し、結晶学的に純粋なＡ型またはＢ型を生ずる。
そのため、本発明は、結晶性Ａ型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型の調製の変法を含み、Ａ型の選択的結晶化を誘発する条件下、溶液から他のＡ型中の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型に適当に変換することを含む。その変法により調製されるときはＡ型中の式Ｉ化合物にも関係する。
逆に言えば、本発明は、結晶性Ｂ型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型の調製の変法を含み、Ｂ型の選択的結晶化を誘発する条件下、溶液からＢ型以外の式Ｉ化合物を適当に変換することを含む。その変法により調製される限り、本発明はＢ型の式Ｉ化合物にも関係する。
Ａ型の調製の場合、出発物質を、適当な溶媒、好ましくはエタノール／水、好ましくは９．５：０．５(ｖ／ｖ)の割合の溶媒に通常溶解する。溶解のための温度は約６０℃から約７０℃、好ましくは約７０℃である。溶媒に対する出発物質の割合は重量比で約１：５から約１：６、好ましくは約１：５(ｗ／ｗ)である。溶液を濾過し、次いで低温、好ましくは約７０℃から約２０℃、約１０℃に冷却し、Ａ型が不溶性である水のような液体を注意深く加える。それにより過飽和溶液が生ずる。Ａ型の結晶が自然に生じるが、好ましくは過飽和溶液を結晶学的に純粋な数個のＡ型の結晶で種植えする。融解顕微鏡(melt microscope)を使って種晶(seeding crystal)の純度を調べることは通常有益である。さらに、注意深く攪拌しながら液体を加えるとＡ型の結晶がさらに得られる。低温、即ち約２０℃未満および結晶学的に純粋なＡ型の結晶による種植えによりＢ型の結晶の形成は妨げられると考えられる。Ｂ型は熱力学的に、より安定であるから、長く攪拌しすぎると逆効果となり、特に約１０℃以上では逆効果となる。
便利がよいのは、初期段階として、出発物質を、アルコールのような極性有機溶媒、例えばメタノール、エタノール、イソプロパノール、好ましくはエタノールに、またはアセトンに、特にアセトンに、好ましくは沸騰温度で好ましくは完全に溶解し、溶媒は乾燥するまで蒸発させる。
Ｂ型の調製のために、出発物質を、Ａ型の上記調製のような溶媒に、好ましくはエタノール／水９．５：０．５(ｖ／ｖ)に再び溶解する。溶解のための温度を再び約６０℃から約７５℃、好ましくは約７０℃にし、生じた溶液を濾過する。溶媒に対する出発物質の割合は、Ａ型を調製する場合よりも幾分少なく、好ましくは約１：７(ｗ／ｗ)である。しかし、冷却はＢ型を調製するときよりも高く、好ましくは約２０℃、例えば２５℃または３０℃であり、更に仕上げもその温度または同様の温度で行う。Ｂ型の結晶を用いたシーディングは任意であるが、結晶化はより促進され、例えば温度について許容範囲が広がる。過飽和溶液の形成速度もまた、得られる結果に幾分効果を与えると考えられ、速い過飽和によりＢ型の形成が増加する。
溶媒和物、例えば水和物は、通常の方法で相当する非溶媒和型に変換され得、逆に適当に溶媒和型を加熱することにより、または溶媒和可能な結晶型の非溶媒和型を冷却することにより変換し得る。
同一の２つの結晶型は、以下の物理化学的データにより特性解析がされる
１)Ａ型：
様子：白から灰色がかった白、良好な結晶粉末(エタノール／水由来)；
ＤＳＳ(１０°Ｋ／分)で測定した融点：約１３２℃で融解開始；
溶解度(５℃)：水：不溶性
メタノール、エタノール、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル：＞１００ｍｇ／ｍｌ
ヘキサン：＜１０ｍｇ／ｍｌ；
溶解度(２５℃)：アセトン、アセトニトリル、エタノール、酢酸エチル、イソプロパノール、メタノール：＞５０ｍｇ／ｍｌ
水：＜１ｍｇ／ｍｌ；
クリームの油相中の溶解度(オレイルアルコール／ミグリオール８１２^R４：６)：２．４９％；
化学的純度：９８．５％；
熱重量分析：融解までの乾燥減少質量：１．４６％(カールフィッシャー滴定)；
形態(ＳＥＭ)；棒状および塊(１-１００μｍ)；
吸湿性(熱重量分析により吸収量を測定)：１．４９％(１日、相対湿度９２％)；
１．７８％(１週間、２５℃、相対湿度７５％)；
ＤＳＣカーブ：図１参照(Perkin Elmer DSC-7 ディファレンシャル・スキャンニング・カロリーメーター；４０℃から２００℃で測定、スキャン加熱速度１０°Ｋ／分)；
ＦＴ−ＩＲスペクトル：図３および５参照(PE FT-IRスペクトルメーター1725X；ＫＢｒ、パラフィンオイル；スキャンレンジ４０００ｍ^-1)
Ｘ線粉末回折パターン：図６参照(Scintag XDS 2000 粉末回折計;Scintag,Santa Clara, CA, USA)；スキャン速度０．５°または１°／分(２θ値)
２)Ｂ型：
ＤＳＣ(１０°Ｋ／分)で測定した融点：約１９５℃で融解開始；
溶解度(５℃)：水：０．３ｍｇ／ｍｌ
メタノール：４６．８ｍｇ／ｍｌ
エタノール：１８．１ｍｇ／ｍｌ
酢酸エチル：＞５０ｍｇ／ｍｌ
ジエチルエーテル：９．３ｍｇ／ｍｌ
ジイソプロピルエーテル：１．９ｍｇ／ｍｌ
ヘキサン：０．８ｍｇ／ｍｌ；
溶解度(２５℃)：水０．４ｍｇ／ｍｌ
メタノール：＞５０ｍｇ／ｍｌ
エタノール：＞３４．４ｍｇ／ｍｌ
酢酸エチル：＞５０ｍｇ／ｍｌ
ジエチルエーテル：１６．３ｍｇ／ｍｌ
ジイソプロピルエーテル：３．１ｍｇ／ｍｌ
ヘキサン：１．５ｍｇ／ｍｌ；
ＴＭＦクリームの油相中の溶解度(オレイルアルコール／ミグリオール８１２^R４：６)：０．３７％；
化学的純度：９９．９％；
熱重量分析：融解までの乾燥減少質量：＜０．０５％；
形態(ＳＥＭ)：針状；
吸湿性(熱重量分析により吸収量を測定)：１日、相対湿度９２％および１週間、２５℃、相対湿度７５％：なし；
ＤＳＣカーブ：図２参照(Perkin Elmer DSC-7;４０℃から２００℃、スキャン加熱速度１０°Ｋ／分)；
ＦＴ−ＩＲスペクトル：図４および５参照(PE FT-IRスペクトルメーター1725X;ＫＢｒ、パラフィンオイル；スキャンレンジ４０００-４００ｍ^-1)；
Ｘ線粉末回折パターン：図６参照(Scintag XDS 2000 粉末回折計)；スキャン速度０．５°または１°／分(２θ値)
３)参考のために無定型の相当するＦＴ-ＩＲスペクトルを図７に示す。
化合物全ての型の特性解析データを更に以下に示す。
旋光度：[α]_D ²⁰＝-４８．０°（±０．２°）（ＣＤＣｌ₃）；
ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．１８(シリカゲル；ヘキサン／酢酸エチル２：１)
Ｒ_f＝０．６２(シリカゲル；ヘキサン／酢酸エチル１：１)；
¹Ｈ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)：２配座異性体(Ｚ：Ｅ＝１：２)主な配座異性体d[ppm]の特徴的なシグナル：5.35(d,J =1.7Hz,H-26,5.12(d,J=9.0Hz,H-29),5.05(d,J=9.4Hz,H-20),4.60(d,J=5.0Hz,H-2),4.56(m,W_1/2=10Hz,H-33),4.43(d,J=13.8Hz,H-6e),3.66(dd,J=9.6Hz,J=1.0Hz,H-14),3.92(m,H-24),2.80(dd,J=15.9Hz,J=2.7Hz,H-23a)¹³Ｃ-ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)：２配座異性体(Ｚ：Ｅ＝１：２)主な配座異性体d[ppm]の特徴的なシグナル：213.7(C-22),196.3(C-9),169.1(C-1),164.8(C-8),138.8(C-19),132.5(C-28),129.2(C-29),122.0(C-20),97.0(C-10),79.2(C-32),76.7(C-26),75.2(C-15),73.7(C-14),72.9(C-13),70.2(C-24),59.3(C-33),56.7(C-2),54.7(C-21),48.6(C-18),39.2(C-6),42.7(C-23),39.4(C-25),34.7(C-30),34.6(C-11),32.8(C-12),32.1(C-35),31.7(C-34),27.7(C-3),26.4(C-17),25.5(C-31),24.5(C-5),24.2(C-36),21.1(C-4),20.6(17-Me),16.2(11-Me),15.9(19-Me),14.2(28-Me),11.7(C-37),9.3(25-Me)
上記ＮＭＲスペクトルにおいて、炭素原子番号は以下の式Ｉｃに示した通りである。

略語：
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＳＣ：ディファレンシャル・スキャンニング・カロリーメーター
ＦＴ-ＩＲ：フーリエ変換した赤外線
ｍ．ｐ．：溶解温度
ｒ．ｈ．：相対湿度
ＳＥＭ：スキャンニング電子顕微鏡
Ｔ：トランスミッション
ＴＧ：熱重量分析
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄相クロマトグラフィー
図の説明
図１：Ａ型のＤＳＣカーブ（水和物）
図２：Ｂ型のＤＳＣカーブ（無水物）
図３：Ａ型のＦＴ-ＩＲスペクトル（水和物）
(％Ｔ＝パーセントトランスミッション)
図４：Ｂ型のＦＴ-ＩＲスペクトル
(％Ｔ＝パーセントトランスミッション)
図５：Ａ型(水和物)およびＢ型とのＦＴ-ＩＲスペクトルの比較
(％Ｔ＝パーセントトランスミッション)
Ａ型(水和物)＝グラフは９０％Ｔから始まる
Ｂ型＝グラフは８２％Ｔから始まる
図６：Ａ型(水和物)およびＢのＸ-線粉末回折パターン
Mod. A=Ａ型(水和物)
Mod. B=Ｂ型
左縱座標：密度(cps=秒あたりの数)
右縱座標：相対密度(%=パーセント)
上部横座標：レゾリューション
下部横座標：２θ角度(度)
図７：無定型のＦＴ-ＩＲスペクトル(%=パーセントトランスミッション)
無定型の式Ｉ化合物は医薬として知られており、特に、全身性および局所性の抗炎症、免疫抑制および抗増殖剤として使用される。クリーム、エマルジョンおよび軟膏のような、医薬的使用に適当なガレヌス製剤の調製は困難である。そのため、化合物の無定型は、バルク状態では不安定となるという問題を抱えており、例えば、バルク物質の分解、吸湿性、溶解特性および物質全体の純度の低下に関し、正確に定義づけられた結晶型と比べて通常ガレヌス製剤に適当ではない。
それゆえに、局所剤形、例えばクリーム、エマルジョンおよび軟膏(通常溶解状態ではあるが慎重に制御された条件下で化合物を含むことが望ましい)の調製におけるような上記不利の克服が示唆される場合、特徴的な式Ｉ化合物の結晶型の利用により、化合物のガレヌス製剤の調製における使用が特に示唆される。そのため、クリームの調製において、Ａ型は約１０分間で油相中に溶解するが、Ｂ型は約６時間かかる。それゆえ、特徴的な特性の結晶産物の使用に非常に有利であり、それによってＡ型またはＢ型が特に適用に依存して、例えば低い融点またはより高い溶解性が望ましいときにはＡ型が、高い融点または室温でより熱力学的に安定な生成物が適当であるときはＢ型が好ましくは用いられる。
結晶型で得られる有効な効果は、例えば：
溶解状態のような最終薬剤物質中の溶媒残留が少ない
結晶により更なる精製が行われる効果
有効成分が高い安定性
製造プラントにおける簡易な取り扱い
である。
結晶型の式Ｉ化合物は何れかの通常の方法で投与できるよう製剤化され得る。それは、好ましくは最終ガレヌス製剤の溶解状態であるのが好ましい。
そのため、本発明は、Ａ型およびＢ型のような結晶型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型を含む(または製剤するときは何時でも)医薬組成物を含む。それは、抗炎症性、免疫抑制性および抗増殖性活性を有する医薬として使用され、または薬剤の調製に使用される、結晶型の式Ｉ化合物またはそれらの互変異性体もしくは溶媒和型も含む。
以下の実施例は本発明を解説するものであるが、これらに限定するものではない。全ての温度は特記しない限り摂氏温度である。
実施例１：結晶性３３-エピクロル-３３-３３-デゾキシアスコマイシン(Ａ型)
(エタノール中の無定型物の溶液より)
エタノール１８０ｍｌ中の無定型３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシン(無色泡樹脂)２７ｇの溶液に、一時的ににごりが表われるまで室温で慎重に水を加える(水、約６５ｍｌ)。溶液を４℃で１６時間静置する。無色結晶が生ずる。水１０ｍｌを加え、混合物を４℃で更に４時間静置する。結晶物質を吸引で分離し、エタノールおよび水１：１(ｖ／ｖ)の氷冷混合物で洗浄し、減圧下(１２ｍｍＨｇ)、２０時間室温で乾燥する。標題化合物が得られる(収量１８ｇ；融点１３５-１３６℃；化学的純度９８％以上、即ち、ＨＰＬＣの分析検出限界以下の不純物；水和物)。
実施例２：１％クリーム中のＡ型およびＢの可溶化
ａ）クリーム製剤中のＡ型の溶解度は室温で約１％であると推定される。クリームの製造において、薬物は６０-７５℃で油相に完全に溶解する。溶解した薬物の一部が１％クリームから結晶化するかどうかおよび保存期間経過結晶化するかどうか評価するために、ある一連のバッチで結晶を調べる。１０のバッチの調査により、製造後ならびに５°、２５°および４０°での保存後、結晶は観察されない。約３ヶ月間の温度サイクル試験を行う試料中でさえ、結晶は検出されない。ある前製剤(preformulation)(１％)においてのみ、薬物結晶が２５°１年の保存後散在して生じ、これは薬物の飽和に関し１％クリームがボーダーラインであることを示唆する。
バッチに用いた薬物および上記前製剤は１００％のＡ型を含む。
ｂ）Ｂ型を含む薬物が製造クリームに完全に溶解するかどうか評価するために、および長時間の結晶化挙動を評価するために、式Ｉ化合物の全含有量に対し０％、１％、５％および１０％Ｂ型を含む幾つかの前製剤(クリーム１％)を製造し、様々な温度で安定試験を行う。
これら前製剤の調製の間、クリームの油相中の結晶性Ｂ型の溶解速度は結晶性Ａ型よりもかなり遅いことが観察された。製造直後に型を調べると、残存する結晶は観察されない。
これら型の長期に渡る結晶化の挙動についての情報を得るために、安定試料を６週間、３、６および９ヶ月保存後さらに調査する。保存を延長しても結晶は形成されないという結果となる。
実施例３：３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンの結晶性Ａ型
(エタノール／イソプロパノール／水の溶液より)
３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンＢ型(または他に粗Ａ型、または無定型物質)１０ｇをエタノール／イソプロパノール／水９：０．５：０．５(ｖ／ｖ)の混合物１０ｇに７０℃で１：５(ｗ／ｗ)で溶解し、混合物を０．５μｍフィルターで濾過(clearfiltration)する。結晶芽(crystallization germ)のない生じた溶液を１０°に冷却し、水を加え溶液を可飽和する(生成物量に基き２５％ｗ／ｗ)。種晶植えはＡ型の結晶０．０６ｇで行い(次にサーマル顕微鏡で調査する)、水(生成物量の７．５倍を超える)を１０℃で４時間に渡り慎重に加え、その後溶液を２時間その温度で撹拌する。標題化合物が得られる(水和物；９．３ｇ)。
可能な限り結晶学的に純粋なＡ型の結晶でシードすることが望ましい。そのため、純度としてＢ型の結晶２％を含むＡ型の結晶を用いるシーディングにより、純度としてＢ型の結晶２０％を含むＡ型の結晶を回収できる。しかしながら、低温において熱力学的により安定なＢ型の形成は明らかに阻害され、そのためＡ型およびＢ型の両方の混合物１：１を用いる０℃のシーディングにより、Ａ型７５％を含む生成物を生ずる。
実施例４：３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンの結晶性Ｂ型
(エタノール／イソプロパノール／水中の溶液より)
３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンＡ型(水和型)(または他に粗Ｂ型)または無定型物質)２５ｇを７０℃でエタノール／イソプロパノール／水９：０．５：０．５(ｖ／ｖ)の混合物７５ｇ中に１：７(ｗ／ｗ)で溶解し、混合物を完全濾過する。生じた溶液を３０°に冷却し、Ｂ型の結晶０．１ｇでシードしてもよい。水(生成物量の３．５倍を超える)を慎重に４時間に渡って加え、標題化合物を得る(２４．６ｇ)。
実施例５：３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンの結晶性Ａ型
(アセトン中の粗生成物溶液より)
アセトン１５００ｍｌ中の粗３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシン(例えば以下のクロマトグラフィーで得られるような)(Ａ型および／またはＢ型および／または無定型生成物の種々の量を含む)９４．５ｇの溶液を４８-５２°(４００-５０mbar)で蒸発させる。生じた無定型泡をエタノール／イソプロパノール９．５：０．５(ｖ／ｖ)５００ｍｌに溶解する。溶液を４８-５２°(４００-５０mbar)で蒸発させる。生じた泡をエタノール／イソプロパノール９．５：０．５(ｖ／ｖ)４００ｍｌに溶解し、加熱溶液(７０-７５°)を０．４５μｍフィルターで濾過する。溶液を３０-４０分間に渡り２０-２５°に冷却し、水２００ｍｌを加え、混合物をＡ型結晶でシードする。攪拌は２０-２５°で１時間続ける。懸濁液をつくり、それを０-５°に冷却し、更に４時間攪拌する。結晶を濾過し、前もって冷却したエタノール／水１：３(ｖ／ｖ)３００ｍｌで洗浄する。４５-５０°(１０-２０mbar、１６時間)で乾燥すると、標題化合物(水和物；無色結晶)を得る。
実施例６：３３-エピクロル--３３-デゾキシアスコマイシンの結晶性Ａ型
(アセトン中のＢ型の溶液より)
３３-エピクロル-３３-デゾキシアスコマイシンＢ型９４．５ｇを沸騰アセトン１５００ｍｌに溶解する。次いで、アセトン溶液(Ｂ型のシードは全くない)を上記実施例５の通りに処理する。標題化合物を得る(水和物；無色結晶)。

Claims

式Ｉ

の化合物またはその互変異性体もしくは溶媒和物の結晶であって、図３のＦＴ−ＩＲスペクトルを有し、かつ図６（下）のＸ線粉末回折パターンを有するＡ型結晶および図４のＦＴ−ＩＲスペクトルを有し、かつ図６（上）のＸ線粉末回折パターンを有するＢ型結晶のいずれかである、結晶。