MXPA99011294A - Macrolidos cristalinos y proceso para su preparacion - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a 33-epicloro-33-desoxiascomicina de la fórmula I, y diferentes formas tautoméricas o solvatadas de la misma, en forma cristalina, tal como la Forma A y la Forma B. Su preparación involucra convertir apropiadamente el compuesto amorfo de la fórmula I, o el compuesto de la fórmula I, a una forma diferente de la Forma A, o el compuesto de la fórmula I a una forma diferente de la Forma B, respectivamente, a partir de una solución del mismo, bajo condiciones inductoras de cristalización, o bajo condiciones que induzcan la cristalización preferencial de la Forma AóB, respectivamente. Estos cristales se indican particularmente para utilizarse en la preparación de formas galénicas tópicas del compuesto para uso farmacéutico, por ejemplo cremas, emulsiones, y ungüentos.

Description

MACROLIDOS CRISTALINOS Y PROCESO PARA SU PREPARACIÓN La invención se refiere a la química de macrólidos Se refiere al compuesto de la fórmula I : es decir { [ÍE- (IR, 3R, 4S) 3 IR, 9S, 12S, 13R, 14S, 17R, 18E, 21S, 23S, 24R, -25S, 27R} -12- [2- (4 -cloro-3 -metoxiciclohexil ) -1-metilvinil] -17-etil-1, 14-dihidroxi-23 , 25-dimetoxi-13 , 19, 21, 27-tetrametil-ll, 28-dioxa-4-azatriciclo [22.3.1.0(4,9)] octacos-18 -eno-2 ,3,10,16-tetraona, denominada posteriormente en la presente de una manera breve como : "33-epicloro-33-desoxi-FR520" ó "33 -epicloro-33-desoxiascomicina" , en forma cristalina. Para mayor simplicidad, se debe entender que la fórmula I, como se refiere en la presente, incluye al compuesto de la fórmula I en las diferentes formas tautoméricas con las que está en equilibrio, particularmente en solución, y las formas solvatadas, por ejemplo hidratadas, tales como las formas tautoméricas de la fórmula: y de la fórmula: Ib El compuesto de la fórmula I es conocido en una forma amorfa, por ejemplo, de la Patente Europea Número EP 427,680, de Sandoz, Ejemplo 66a, en la forma de una resina espumosa incolora [con 1H-RMN=4.56 (m, H-33)] , y de la Patente Europea Número EP 480,623, de Merck, Ejemplo 53 (sin caracterización fisicoquímica) . Los diferentes nombres y numeraciones de átomos de carbono se utilizan en la literatura. Antes de la presente invención, el compuesto de la fórmula I nunca se había recuperado en forma cristalina. Se puede ver que la presencia de un átomo de halógeno, especialmente cloro, en la fracción de ciciohexilo de la molécula, particularmente en la posición 4 de la misma (también marcada como la posición 33 en las fórmulas I y le de la presente) , tiene un efecto desfavorable sobre las propiedades de cristalización de esta clase estructural de compuestos. Por consiguiente, en la Patente Europea Número EP 427,680, ninguno de los productos finales halogenados se obtiene en forma cristalina, son espumas incoloras o resinas espumosas, y se caracterizan por sus espectros de resonancia magnética nuclear. De una manera similar, en la Patente Europea Número EP 480,623, que cubre exclusivamente productos finales de macrólido halogenados en la fracción de ciciohexilo, ninguno de los compuestos específicos dados a conocer se caracteriza por datos que indiquen cristalinidad, tales como un punto de fusión; la mayoría de los productos finales de la misma no se caracterizan por datos fisicoquímicos del todo, y aquellos que se caracterizan, se caracterizan por sus espectros de masas, que no son indicativos con respecto al estado físico; y ninguno de los productos finales de 4 -cloro dados a conocer se caracteriza del todo . Otros macrólidos análogos halogenados en la fracción de ciciohexilo, también se dan a conocer, por ejemplo, en la Publicación Internacional Número WO 91/13889 de Fisons, específicamente como los Ejemplos 42a) , 42b) , y 49a) : los compuestos de la misma tampoco se obtienen en forma cristalina, pero se recuperan como una espuma o como un aceite . Sobre todo, los triciclomacrólidos de 23 miembros derivados a partir de FK 506, se pueden obtener en forma cristalina solamente con dificultad, si es que se puede, como se puede ver también, por ejemplo, de la Publicación Internacional Número WO 97/8182 de Merck, que se refiere a un compuesto de macrólido que tiene un sustituyente básico capaz de formar sales, que se podrían obtener en forma cristalina, pero como una sal de tartrato. El compuesto de la presente invención no tiene este sustituyente básico. Por consiguiente, es sorprendente que ahora se ha logrado con éxito la cristalización del compuesto de la fórmula I . La invención se refiere al compuesto de la fórmula I en forma cristalina. La forma cristalina puede aparecer solvatada, por ejemplo, hidratada, o en forma anhidra, o puede ser un tautómero. Aunque la primera recuperación del compuesto de la fórmula I en forma cristalina se presentó varios años después de la primera síntesis del compuesto, inicialmente obtenido solamen-te en forma amorfa, resultó que subsecuentemente a su primera cristalización, se pudo inducir al compuesto para cristalizarse a partir de la forma amorfa muy fácilmente. Ahora el material cristalino ha llegado a ser fácilmente accesible, utilizando una variedad de condiciones experimentales que se extienden más allá de las condiciones de recristalización inicialmente utilizadas, que involucran la adición de agua a una solución etanólica del compuesto amorfo. >' La invención también se refiere a un proceso para la preparación del compuesto de la fórmula I, o una forma tautoméri-ca o solvatada del mismo, en forma cristalina, el cual comprende convertir apropiadamente el compuesto amorfo de la fórmula I desde una solución del mismo, bajo condiciones inductoras de cristalización. También se refiere al compuesto de la fórmula I ó a una forma tautomérica o solvatada del mismo, en forma cristalina, siempre que se prepare mediante ese proceso, y al compuesto de la fórmula I en un estado no cristalino, por ejemplo disuelto, o a una forma tautomérica o solvatada del mismo, siempre que se produzca a partir de una forma cristalina. El proceso de la invención se efectúa de una manera convencional. Las condiciones precisas bajo las cuales se forman los cristales se pueden determinar ahora empíricamente, y en la práctica son adecuados un número de métodos, incluyendo la adición inicial de agua a una solución etanólica del compuesto de la fórmula I en forma amorfa. Las condiciones inductoras de cristalización normalmente involucran el uso de un solvente inductor de cristalización apropiado, tal como metanol, etanol, isopropanol, o agua, o mezclas de los mismos. Convenientemente, el compuesto amorfo se disuelve en el solvente a una temperatura normalmente de cuando menos 10 °C. La solución se puede producir disolviendo en un solvente cualquiera o más de las formas amorfas del compuesto, y los solvatos del mismo, tales como hidratos, metalonatos, etanolatos, isopropanolatos, y acetonitrilatos . Luego se pueden formar los cristales mediante una conversión a partir de una solución, teniendo lugar la cristalización a una temperatura de entre aproximadamente 10 °C y el punto de ebullición del solvente. La disolución y la cristalización se pueden realizar de diferentes maneras convencionales. Por ejemplo, el compuesto amorfo se puede disolver en un solvente o una mezcla de solventes en donde sea fácilmente soluble a temperaturas elevadas, pero en donde solamente sea escasamente soluble a temperaturas más bajas. La disolución a una temperatura elevada es seguida por enfriamiento durante el cual se cristalizan los cristales deseados de la solución. Los solventes que son adecuados incluyen esteres, tales como acetato de metilo y acetato de etilo, tolueno y acetonitrilo. También se pueden emplear solventes mixtos que comprendan un buen solvente en donde el compuesto sea fácilmente soluble, de preferencia, en cantidades de cuando menos el 1 por ciento en peso a 30°C, y un solvente pobre en donde sea más escasamente soluble, de preferencia en cantidades de no más de aproximadamente el 0.01 por ciento en peso a 30°C, en el entendido de que sea posible la cristalización a partir de la mezcla a una temperatura reducida, normalmente de cuando menos aproximada-mente 10 °C, utilizando la mezcla de solventes seleccionada. De una manera alternativa, se puede utilizar la diferencia en la solubilidad de los cristales en diferentes solventes. Por ejemplo, el compuesto amorfo se puede disolver en un buen solvente en donde sea altamente soluble, tal como uno en donde sea soluble en cantidades de cuando menos el 1 por ciento en peso a aproximadamente 30°C, y la solución subsecuentemente se mezcla con un solvente pobre en donde sea más escasamente soluble, tal como uno en donde sea soluble en cantidades de no más de aproximadamente el 0.01 por ciento en peso a aproximada-mente 30°C. Por consiguiente, la solución del compuesto en el buen solvente, se puede agregar al solvente pobre, mientras que se mantenga normalmente una temperatura mayor de aproximadamente 10 °C, o el solvente pobre se puede agregar a la solución del compuesto en el buen solvente, nuevamente mientras que se mantenga normalmente una temperatura mayor de aproximadamente 10°C. Los ejemplos de los buenos solventes incluyen alcoholes inferiores, tales como metanol, etanol, e isopropanol, así como acetona, tetrahidrofurano, y dioxano. Los ejemplos de los solventes pobres son agua, hexano, y éter dietílico. De prefe-rencia, la cristalización se efectúa a una temperatura en la escala de aproximadamente 10°C a aproximadamente 60°C. En una modalidad alternativa del proceso de la invención, el compuesto amorfo sólido se suspende a una temperatura normalmente de cuando menos aproximadamente 10°C, en un solvente en donde sea incompletamente soluble, de preferencia sólo escasamente soluble, a esa temperatura. Resulta una suspensión en la que se dispersan partículas de sólido, y permanecen incompletamente disueltas en el solvente. De preferencia, los sólidos se mantienen en un estado de suspensión mediante agita-ción, por ejemplo, mediante sacudimiento o agitación. La suspensión se mantiene a una temperatura normalmente de aproximadamente 10°C ó más alta, con el objeto de efectuar una transformación de los sólidos de partida en cristales. El compuesto sólido amorfo suspendido en un solvente adecuado puede ser un solvato, por ejemplo, hidrato, metanolato, etanolato, isopropano-lato, o acetonitrilato . El polvo amorfo se puede derivar secando un solvato . Se prefiere agregar "semillas" de material cristalino a la solución, con el objeto de inducir la cristalización. El compuesto de la fórmula I en forma cristalina se puede aislar fácilmente, por ejemplo, se puede filtrar o centrifugar a partir del medio de cristalización, si se desea después de enfriarse, y se lava y se seca, y opcionalmente se recristaliza adicionalmente empleando condiciones similares. Aunque la recuperación inicial ha dado como resultado un material en una forma cristalina designado como la "Forma A" en la presente, de una manera sorprendente, ha resultado, después de una investigación adicional, que se puede recuperar cuando menos una forma de cristal adicional del compuesto, designada en la presente como la "Forma B", que difiere de la Forma A en diferentes características, tales como su solubilidad. Por consiguiente, la invención se refiere al compuesto de la fórmula I, o a una forma tautomérica o solvatada del mismo, en forma cristalina como tal, y más particularmente la Forma A y la Forma B. Se prefiere la Forma A. La Forma A normalmente está en una forma hidratada a temperatura ambiente . La forma hidratada puede deshidratarse de una manera reversible mediante calentamiento a aproximadamente 110 °C. De esta manera permanece en la Forma A. La forma hidratada es el estado más estable de la Forma A a temperatura ambiente. La Forma B normalmente no está en una forma hidratada, inclusive a temperatura ambiente. Es termodinámicamente una forma más estable que la forma A. Una forma de cristal se define en la presente como "cristalográficamente pura", cuando contiene cuando mucho aproximadamente el 0.5 por ciento (peso/peso), por ejemplo cuando mucho aproximadamente el 0.1 por ciento (peso/peso) de otra forma. Por consiguiente, por ejemplo, la "Forma A cristalográficamente pura" contiene aproximadamente <0.5 por ciento (peso/peso), por ejemplo, aproximadamente <0.1 por ciento (peso/peso) de la Forma B y/o de una forma amorfa. La preparación de las Formas A y B se puede efectuar empleando elementos convencionales, empezando ya sea desde un material amorfo, o bien desde la Forma B o la Forma A, respecti-vamente, o mezclas de las mismas. Normalmente, el material de partida se disuelve en un solvente apropiado, y se cristaliza o se recristaliza a partir del mismo bajo condiciones que produzcan de preferencia la Forma A o la Forma B, dando como resultado la Forma A o la Forma B cristalográficamente puras. Por consiguiente, la invención incluye una variante del proceso para la preparación del compuesto de la formula I, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, en la Forma cristalina A, el cual comprende convertir apropiadamente el compuesto de la fórmula I a una forma diferente de la Forma A, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, a partir de una solución del mismo, bajo condiciones que induzcan la cristalización preferencial de la Forma A. También se refiere al compuesto de la fórmula I en la Forma A, siempre que se prepare mediante esa variante del proceso. . Inversamente, la invención incluye una variante del proceso para la preparación del compuesto de la fórmula I, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, en la Forma Cristalina B, el cual comprende convertir apropiadamente el compuesto de la fórmula I a una forma diferente de la Forma B, a partir de una solución del mismo, bajo condiciones que induzcan la cristalización preferencial de la Forma B. También se refiere al compuesto de la fórmula I en la Forma B siempre que se prepare mediante esa variante del proceso. Para la preparación de la Forma A, el material de partida convenientemente se disuelve en un solvente apropiado, de preferencia etanol/agua, de preferencia en las proporciones de 9.5:0.5 (volumen/volumen) . La temperatura para la disolución es de aproximadamente 60 °C a aproximadamente 75 °C, de preferencia de aproximadamente 70 °C. La proporción del material de partida al solvente de preferencia es de aproximadamente 1:5 a aproximadamente 1:6 sobre una base en peso, de preferencia de aproximadamente 1:5 (peso/peso) . La solución se filtra y luego se enfría a una temperatura reducida, de preferencia de aproximadamente 70 °C hasta aproximadamente 20 °C, de preferencia a aproximadamente 10°C, y se agrega cuidadosamente un líquido en donde sea insoluble la Forma A, tal como agua. De esta manera resulta una solución supersaturada . Aunque se pueden formar espontáneamente cristales de la Forma A, de preferencia la solución supersaturada se siembra con unos cuantos cristales de la Forma A cristalográ-ficamente pura. Normalmente es benéfico verificar la pureza de los cristales de siembra con un microscopio de fusión. Otra adición de líquido bajo una agitación cuidadosa, conduce a más cristales de la Forma A. La baja temperatura, es decir, menor de aproximadamente 20°C, y la siembra con cristales cristalográfica-mente puros de la Forma A, parecen impedir la formación de cristales de la Forma B. Una agitación demasiado larga puede ser contraproducente, particularmente a temperaturas mayores de 10°C, siendo la Forma B la forma termodinámicamente más estable. De una manera conveniente, como un paso preliminar, el material de partida de preferencia se disuelve completamente en un solvente orgánico polar, tal como un alcohol, por ejemplo metanol, etanol, isopropanol, de preferencia etanol, o en acetona, especialmente en acetona, de preferencia a la temperatura de ebullición, y el solvente se evapora a sequedad. Para la preparación de la Forma B, el material de partida se disuelve nuevamente en un solvente como se describió anteriormente para la preparación de la Forma A, de preferencia etanol/agua, 9.5:0.5 (volumen/volumen). La temperatura para la disolución nuevamente es de aproximadamente 60 °C a aproximadamen-te 75°C, de preferencia de aproximadamente 70°C, y la solución resultante se filtra. La proporción del material de partida al solvente es un poco menor que para la preparación de la Forma A y es de preferencia de aproximadamente 1:7 (peso/peso) . Sin embargo, el enfriamiento es a una temperatura más alta que cuando se preparó la Forma B, es de preferencia mayor de 20°C, por ejemplo de aproximadamente 25°C ó 30°C, y el trabajo adicional también se efectúa aproximadamente a esa temperatura o a una temperatura similar. La siembra con los cristales de la Forma B es opcional, pero facilita mucho la cristalización, y permite tener mayor latitud con respecto, por ejemplo, a la temperatura. La velocidad de formación de la solución supersaturada parece también ejercer algún efecto sobre el resultado obtenido, dando una supersaturación rápida, como resultado, una formación incrementada de la Forma B. Un solvato, por ejemplo un hidrato, se puede convertir a la forma no solvatada correspondiente de una manera convencional, y viceversa, por ejemplo, calentando apropiadamente la forma solvatada, o enfriando la forma no solvatada de la forma de cristal susceptible de ser solvatada. Las dos formas de cristal identificadas se caracterizan, entre otras cosas, por los siguientes datos fisicoquímicos : 1) Forma A apariencia: polvo blanco finamente cristalino (a partir de etanol/agua) ; punto de fusión determinado mediante DSS (283°C/minuto) : establecimiento de fusión a aproximadamente 132°C; solubilidad (a 5°C) : agua: insoluble metanol, etanol, acetato de etilo, éter dietílico, éter diisopropílico: > 100 miligramos/-mililitro, hexano: <10 miligramos/-mililitro; solubilidad (a 25°C) : acetona, acetonitrilo, etanol, acetato de etilo, isopropanol, metanol: >50 miligramos/mililitro; agua: <1 miligramo/mililitro; solubilidad en la fase de aceite de crema (alcohol oleílico/migliol 812R 4:6): 2.49 por ciento; pureza química: 98.5 por ciento; termogravimetría : pérdida de masa al secarse hasta la fusión: 1.46" por ciento (Titulación de Cari Fischer); morfología (SEM) : se adhiere y se aglomera (1-100 mieras) ; higroscopicidad (recuperación determinada medíante termogravimetría) : 1.49 por ciento (1 día, 92 por ciento de humedad relativa); 1.78 por ciento (1 semana, 25°C, 75 por ciento de humedad relativa) ; curva de DSC: ver la Figura 1 (calorímetro de exploración diferencial Perkin Elmer DSC- 7; medición desde 40°C hasta 200°C, velocidad de calentamiento de la exploración de 283°C/minuto) ; - espectro FT-IR: ver las Figuras 3 y 5 (espectróme-tro PE FT-IR 1725X; KBr, aceite de parafina; rango de exploración de 4000 a 400 cm"1) ; patrón de difracción de polvo de rayos X: ver la Figura 6 (difractómetro de polvo Scintag, XDS 2000; Scintag, Santa Clara, CA, EUA); velocidad de exploración de 0.5° ó de Io /minuto (valor 2 teta) ; 2) Forma B; punto de fusión determinado mediante DSC (10°K/mi-ñuto) : establecimiento de fusión a aproximadamente 159 °C; -solubilidad (a 5°C) : agua: 0.3 miligramos/mililitro metanol: 46.3 miligramos/mililitro etanol: 18.1 miligramos/mililitro acetato de etilo: >50 miligramos/mililitro éter dietílico: 9.3 miligramos/mililitro éter di-isopropílico : 1.9 miligramos/mililitro hexano: 0.8 miligramos/mililitro; solubilidad (a 25°C) : agua: 0.4 miligramos/mililitro metanol: >50 miligramos/mililitro etanol: 34.4 miligramos/mililitro acetato de etilo: >50 miligramos/mililitro éter dietílico: 16.3 miligramos/mililitro éter di-isopropílico : 3.1 miligramos/mililitro hexano: 1.5 miligramos/mililitro solubilidad en la fase de aceite de crema TMF (alcohol oleílico/migliol 812R 4:6) : 0.37 por ciento; pureza química: 99.9 por ciento; - termogravimetría : pérdida de masa al secarse hasta la fusión: < 0.05 por ciento; morfología (SEM) : aguj s; higroscopicidad (recuperación determinada mediante termogravimetría) : 1 día, 92 por ciento de humedad relativa, y 1 semana, 25°C, 75 por ciento de humedad relativa: ninguna; curva de DSC: ver la Figura 2 (Perkin-Elmer DSC-7; 40 °C a 200 °C; velocidad de calentamiento de la exploración de 283°C/minuto) ; espectro FT-IR: ver las Figuras 4 y 5 (espectróme-tro PE FT-IR 1725X; KBr; aceite de parafina; rango de exploración de 4000 a 400 cm"1) ; patrón de difracción de polvo de rayos X: ver la Figura 6 (difractómetro de polvo Scintag XDS 2000) ; velocidad de exploración de 0.5° o de l°/minuto (valor 2 teta) . 3) Para una referencia, en la Figura 7 se indica el espectro FT-IR correspondiente de la forma amorfa. Los datos de caracterización para todas las formas del compuesto, son además como sigue: - rotación óptica: [ ] D 0=-48.0o (±0.2°) (CDC13) ; cromatografía de capa delgada: Rf= 0.18 (gel de sílice; hexano/acetato de etilo, ~2 :1) Rf= 0.62 (gel de sílice; hexano/acetato de etilo, 1:1); -^-H-RMN (CDC13) Dos conformadores (Z:E=1:2) : Señales características del conformador mayor d [ppm] : 5.35 (d,J=1.7 Hz , H-26, 5.12 (d,J= 9.0 Hz , H-29) , 5.05 (d,«J=9.4 Hz , H-20), 4.60 (d,J=5.0 Hz, H-2) , 4.56 (m,w1/2= 10 Hz , H-33), 4.43 (d,J = 13.8 Hz, H-6e) , 3.66 (dd, J=9.6 Hz , J=1.0 Hz , H-14), 3.92 (m,H-24), 2.80 (dd,J = 15.9 Hz , J=2.7 Hz , H-23a) . -13C-RMN (CDCI3) : Dos conformadores (Z:E=1:2) : Señales del conformador mayor d [ppm] : 213.7 (C-22), 196.3 (C-9), 169.1 (C-1), 164.8 (C-8) , 138.8 (C-19), 132.5 (C-28), 129.2 (C-29), 122.0 (C-20) , 97.0 (C-10), 79.2 (C-32), 76.7 (C-26), 75.2 (C-15), 73.7 (C-14) , 72.9 (C-13), 70.2 (C-24), 59.3 (C-33), 56.7 (C-2), 54.7 (C-21) , 48.6 (C-18), 39.2 (C-6), 42.7 (C-23), 39.4 (C-25), 34.7 (C-30), 34.6 (C-11), 32.8 (C-12), 32.1 (C-35), 31.7 (C-34), 27.7 (C-3), 26.4 (C-17) , 25.5 (C-31) , 24.5 (C-5), 24.2 (C-36), 21.1 (C-4), 20.6 (17-Me), 16.2 (11-Me) , 15.9 (19 -Me) , 14.2 (28- Me) , 11.7 (C-37) , 9.3 (25-Me) .

En los espectros de resonancia magnética nuclear anteriores, la numeración de los átomos de carbono es como aparece en la fórmula le siguiente: Abreviaturas i DMSO: sulfóxido de dimetilo DSC: calorimetría de exploración diferencial FT-IR: transformación Fourier-infrarroj a p.f. "punto de fusión r . h. : humedad relativa SEM: microscopio de electrones de exploración T: transmisión TG: termogravimetría THF: tetrahidrofurano TLC: cromatografía de capa delgada Explicación de las Figuras : Figura 1 curva de DSC de la Forma A (hidrato) Figura 2 curva de DSC de la Forma B (anhidro) Figura 3 espectro FT-IR de la Forma A (hidrato) (% T = porcentaje de transmisión) Figura 4 espectro FT-IR de la Forma B (% T = porcentaje de transmisión) Figura 5 Comparación entre los espectros FT-IR de las Formas A (hidrato) y B (% T = porcentaje de transmisión) Forma A (hidrato) = gráfica empezando en el 90% T Forma B = gráfica empezando en el 82% T Figura 6 Patrón de difracción de polvo de rayos X de las Formas A (hidrato) y B Mod. A = Forma A (hidrato) Mod. B = Forma B ordenada izquierda: intensidad (cps= conteos por segundo) ordenada derecha: intensidad relativa (% = porcentaje) abscisa superior: resolución abscisa inferior: ángulo 2 teta (grados) Figura 7 espectro FT-IR de la forma amorfa (% = porcentaje de transmisión) El compuesto de la fórmula I en la forma amorfa se conoce como un producto farmacéutico, en particular, para utilizarse como un agente anti-inflamatorio, inmunosupresor, y antiprolifera ivo, tanto sistémicamente como tópicamente. Sin embargo, es difícil la preparación de formas galénicas adecuadas para uso farmacéutico, tales como cremas, emulsiones y ungüentos. Por consiguiente, la forma amorfa del compuesto sufre de problemas de inestabilidad, tal como a granel, y en general no es adecuada para el procesamiento galénico, comparándose con una forma cristalina exactamente definida, por ejemplo con respecto a la degradación del material a granel, la higroscopicidad, las propiedades de disolución, y la pureza global del material. Por consiguiente, la disponibilidad de las formas cristalinas bien definidas del compuesto de la fórmula I se indica particularmente para utilizarse en la preparación de formas galénicas del compuesto en donde se indique para superar los inconvenientes anteriores, tal como en la preparación de formas tópicas, por ejemplo cremas, emulsiones, y ungüentos, en donde se desee incluir el compuesto normalmente en un estado disuelto pero bajo condiciones cuidadosamente controladas. Por lo tanto, en la"preparación de una crema, se ha observado que la Forma A se disuelve en la fase de aceite en aproximadamente 10 minutos mientras que la Forma B toma aproximadamente 6 horas . Por consiguiente, es muy conveniente utilizar el producto cristalino de características bien definidas, en donde de preferencia se emplee la Forma A o la Forma B, dependiendo de la aplicación particular, por ejemplo, la Forma A en donde se desee un punto de fusión más bajo o una solubilidad más pronunciada, o la Forma B en donde sea apropiado un punto de fusión más alto, o un producto termodinámicamente más estable a la temperatura ambiente . Los efectos benéficos obtenidos con la forma cristalina son, por ejemplo: menos residuo de solvente en la sustancia de fármaco final en cualquier forma, tal como en el estado disuelto; se obtiene un efecto de purificación adicional mediante la cristalización; una estabilidad más alta de la sustancia de fármaco; y - un manejo más fácil en la planta de producción. El compuesto de la fórmula I en forma cristalina se puede formular para su administración de cualquier manera conveniente. De preferencia está en un estado disuelto en la forma galénica final . Por consiguiente, la invención también incluye composiciones farmacéuticas que comprenden, o preparadas de cualquier manera a partir de, el compuesto de la fórmula I o una forma tautomérica o solvatada del mismo, en forma cristalina, tal como la Forma A y la Forma B . También incluye el compuesto de la Fórmula I, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, en forma cristalina, para utilizarse como un producto farmacéutico, o para utilizarse en la preparación de un medicamento con una actividad anti-inflamatoria, inmunosupresora, y antiproliferativa. Los siguientes Ejemplos ilustran la invención, pero son limitantes. Todas las temperaturas están en grados Centígrados, a menos que se indique de_ otra manera.

Ejemplo 1; 33-epicloro-33-desoxiascomicina cristalina (Forma A) (a partir de una solución del producto amorfo en etanol) A una solución de 27 gramos de 33-epicloro-33-desoxias-comicina amorfa (resina espumosa incolora) en 180 mililitros de etanol a temperatura ambiente, se le agrega cuidadosamente agua hasta que aparezca una nebulosidad transitoria (aproximadamente 65 mililitros de agua) . La solución se deja sin alterar durante 16 horas a 4°C. Se forman cristales incoloros. Se agregan 10 mililitros de agua, y la mezcla se deja sin alterar durante otras 4 horas a 4°C. El material cristalino se separa por succión, se lava con una mezcla helada de etanol y agua, 1:1 (volumen/volumen) , y se seca bajo presión reducida (12 mm Hg) durante 20 horas a temperatura ambiente. Se obtiene el compuesto del título (rendimiento de 18 gramos; p.f. 135-136°C; pureza química .=. 98 por ciento, es decir, nivel de impurezas en o debajo de los límites analíticamente detectables después de la cromato-grafía de líquido de alto rendimiento; hidrato) .

Ejemplo 2: Solubilización de las Formas A y B en cremas al 1 por ciento. a) Se estima que la solubilidad de la Forma A en una formulación de crema es de aproximadamente el 1 por ciento a temperatura ambiente. En la fabricación de crema, la sustancia de fármaco se disuelve completamente en la fase oleosa a 60-75°C. Para evaluar si, y después de cuál tiempo de almacenamiento, se cristalizará parte de la sustancia de fármaco disuelta a partir de la crema al 1 por ciento, se examinan una serie de lotes para determinar si hay cristales. La investigación de 10 lotes muestra que no se observan cristales después de la fabricación, así como después del almacenamiento a 5°C, 25°C, y 40°C. Inclusive en las muestras que se someten a una prueba de ciclo de temperatura durante aproximadamente 3 meses, no se detectan cristales. Solamente en una preformulación (al 1 por ciento) , se presentaron cristales de sustancia de fármaco muy escasamente después de un almacenamiento de un año a 25°C, lo cual indica que la crema al 1 por ciento está en la línea límite con respecto a la saturación con la sustancia de fármaco. La sustancia de fármaco utilizada en los lotes y en las preformulaciones mencionadas anteriormente, contuvo el 100 por ciento de la Forma A. b) Para evaluar si la sustancia de fármaco que contenía la Forma B, se podía disolver completamente en la fabricación de crema, y para evaluar el comportamiento de cristalización a largo plazo, se fabricaron varias preformulacio-nes (crema al 1 por ciento) conteniendo el 0 por ciento, el 1 por ciento, el 5 por ciento, y el 10 por ciento de la Forma B en relación con el contenido total del compuesto de la fórmula I, y se pusieron en la prueba de estabilidad a diferentes temperaturas . Durante la preparación de estas preformulaciones, se observa que la velocidad de solución de la Forma de cristal B en al fase oleosa de la crema, es mucho más lenta que aquella de la Forma de cristal A. Inmediatamente después de la fabricación, se investigan las formas, y no se observan cristales restantes. Para obtener información acerca del comportamiento de cristalización a largo plazo de estas formas, se investigan adicionalmente las muestras de estabilidad después de 6 semanas, de 3 , 6 y 9 meses de almacenamiento. Los resultados muestran que no se forman cristales, inclusive después de un almacenamiento prolongado .

Ejemplo 3: Forma Cristalina A de 33-epicloro-33-desoxiascomicina (a partir de una solución en etanol/isopropanol/agua) 10 gramos de la Forma B de 33-epicloro-33-desoxiascomi-cina (o alternativamente, la Forma A cruda, o el material amorfo) , se disuelven a 1:5 (peso/peso) , en 10 gramos de una mezcla de etanol/isopropanol/agua, 9:0.5:0.5 (volumen/volumen) a 70 °C y la mezcla se somete a filtración de aclaración sobre un filtro de 0.5 mieras. La solución resultante exenta de gérmenes de cristalización se deja a enfriar a 10 °C, se agrega agua (al 25 por ciento en peso/peso, basándose en la cantidad del producto) para supersaturar la solución. La siembra se efectúa con 0.06 gramos de cristales de la Forma A (en seguida de una verificación con un microscopio térmico) , y se agrega cuidadosamente agua (un exceso de 7.5 veces, basándose en la cantidad del producto) durante un período de 4 horas a 10 °C, y después la solución se agita durante 2 horas a esa temperatura. Se obtiene el compuesto del título (hidrato; 9.3 gramos) . Es deseable sembrar con cristales de Forma A tan cristalográficamente puros como sea posible. Por consiguiente la siembra con cristales de la Forma A que contienen el 2 por ciento de cristales de la Forma B como impureza, puede conducir a la recuperación de cristales de la Forma A que contienen el 20 por ciento de cristales de la Forma B como impureza. Sin embargo, a una baja temperatura, claramente se inhibe la formación de la Forma B termodinámicamente más estable: la siembra de esta manera a 0°C con una mezcla de 1:1 de ambas Formas A y B, da como resultado un producto que contiene el 75 por ciento de la Forma A.

Ejemplo 4: Forma Cristalina B de 33-epicloro-33-desoxiascomicina (a partir de una solución en etanol/isopropanol/agua) 25 gramos de la Forma A de 33-epiclors-33-desoxiascomi-ciña (hidrato) (o alternativamente, la Forma B cruda, o el material amorfo), se disuelven a 1:7 (peso/peso) en 75 gramos de una mezcla de etanol/isopropanol/agua, 9:0.5:0.5 (volumen/volumen) a 70 °C, y la mezcla se somete a filtración de aclaración. La solución resultante se deja enfriar a 30°C, y opcionalmente se siembra con 0.1 gramos de cristales de la Forma B. Se agrega cuidadosamente agua (un exceso de 3.5 veces, basándose en la cantidad del producto) durante un período de 4 horas; se obtiene el compuesto del título (24.6 gramos) .

Ejemplo 5: Forma Cristalina A de 33-epicloro-33 -desoxiascomicina (a partir de una solución del producto crudo en acetona) Una solución de 94.5 gramos de 33-epicloro-33-desoxias-comicina cruda (por ejemplo, como se obtiene en seguida de la cromatografía) (que contiene diferentes cantidades de la Forma A y/o de la Forma B y/o del producto amorfo) en 1500 mililitros de acetona, se evapora a 48-52 °C (400 - 50 mbar) . La espuma amorfa resultante se disuelve en '5.00 mililitros de etanol/isopropanol, -9.5:0.5 (volumen/volumen) . La solución se evapora a 48-52°C (400 - 50 mbar) . La espuma resultante se disuelve en 400 mililitros de etanol/isopropanol, 9.5:0.5 (volumen/volumen), y la solución caliente (70-75°C) se filtra sobre un filtro de 0.45 mieras. La solución se enfría a 20-25°C durante 30 a 40 minutos, se agregan 200 mililitros de agua, y la mezcla se siembra con cristales de la Forma A. La agitación se continúa durante 1 hora a 20-25°C.

Se forma una suspensión que se enfría a 0-5°C, y se agita adicionalmente durante 4 horas . Los cristales se filtran y se lavan con 300 mililitros de etanol/agua previamente enfriados, 1:3 (volumen/volumen). El secado a 45-50°C (10-20 mbar, 16 horas) da el compuesto del título (hidrato; cristales incoloros) .

Ejemplo 6; Forma Cristalina A de 33-epicloro-33-desoxiascomicina (a partir de una solución de la Forma B en acetona) Se disuelven 94.5 gramos de la Forma B* de 33-epicloro-33-desoxiascomicina en 1500 mililitros de acetona en ebullición.

Luego la solución de acetona (ahora exenta de siembras de la Forma B) se trata como se describe en el Ejemplo 5 anterior. Se obtiene el compuesto del título (hidrato; cristales incoloros) .

Claims (6)

1. REIVINDICACIONES El compuesto de la fórmula I o un forma tautomérica o solvatada del mismo, en forma cristalina.
2. 2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en la Forma cristalina A.
3. 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en la Forma cristalina B.
4. 4. Un proceso para la preparación del compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, el cual comprende convertir apropiadamente el compuesto amorfo de la fórmula I a partir de una solución del mismo, bajo condiciones inductoras de cristalización.
5. 5. Una variante del proceso de acuerdo con la reivindicación 4, para la preparación del compuesto cristalino de acuerdo con la reivindicación 2, la cual comprende convertir apropiadamente el compuesto de la fórmula I a una forma diferente de la Forma A, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, a partir de una solución del mismo, bajo condiciones que induzcan la cristalización preferencial de la Forma A. 6. Una variante del proceso de acuerdo con la reivindicación 4, para la preparación del compuesto cristalino de acuerdo con la reivindicación 3, la cual comprende convertir apropiadamente el compuesto de la fórmula I a una forma diferente de la Forma B, o una forma tautomérica o solvatada del mismo, a partir de una solución del mismo, bajo condiciones que induzcan la cristalización preferencial de la Forma B. 7. Una composición farmacéutica que comprende, o siempre que se prepare a partir de, el compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3. 8. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para utilizarse como un producto farmacéutico, o para utilizarse en la preparación de un medicamento. 9. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, siempre que se prepare mediante un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a
6. 6.