MXPA04010284A - Polimorfo de derivado de ascomicina. - Google Patents

Abstract

Se describen dos nuevos polimorfos cristalinos del compuesto de la formula (I) y metodos para su uso y preparacion.

Description

POLIMORFO DE DERIVADO DE ASCO ICINA CAMPO TÉCNICO La presente invención se refiere a dos polimorfos cristalinos novedosos de un agente inmunoterapéutico conocido; a métodos para su preparación; a métodos para su interconversión, a métodos para su uso como agentes farmacéuticos, y a composiciones farmacéuticas que comprenden los polimorfos cristalinos novedosos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Aunque el macrociclo FK-506, aislado de una cepa de S. tsukuaensis ha demostrado clínicamente actividad inmunosupresora, su toxicidad para los mamíferos ha limitado su utilidad. Sin embargo, la actividad de FK-506 ha acelerado los esfuerzos para descubrir análogos novedosos de los compuestos del tipo FK, que posean propiedades superiores. Un análogo particularmente potente es la lactona macrocíclica representada por la fórmula (I) que viene después. La preparación de este inmunosupresor fue descrita por primera vez en la patente estadounidense No. 5,708,002, de la misma propietaria que la presente, expedida el 13 de enero de 1998, la cual queda incorporada aquí en su totalidad por medio de esta referencia. El proceso descrito en esa patente produce una forma amorfa del compuesto: (D, Se ha descubierto ahora, inesperadamente, que este macrociclo puede ser preparado como dos polimorfos cristalinos novedosos que se denominan las formas cristalinas I y II. Se usa la forma cristalina I en la fabricación del compuesto, y se usa la forma cristalina II en la purificación del compuesto, a fin de eliminar la cromatografía costosa. Adicionalmente, se ha descubierto que cada polimorfo cristalino puede ser preparado independientemente y que la forma cristalina II puede ser convertida a la forma cristalina I.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 es un patrón representativo de difracción de los rayos X en el polvo del polimorfo de la forma cristalina I, sustancialmente puro, del compuesto de la fórmula (I). La figura 2 es un patrón representativo de difracción de los rayos X en el polvo del polimorfo de la forma cristalina II, sustancialmente puro, del compuesto de la fórmula (I). La figura 3 es un espectro representativo de resonancia magnética nuclear, con carbono 13, en estado sólido, a 400 MHz, del polimorfo de la forma cristalina I sustancialmente puro, del compuesto de la fórmula (I). La figura 4 es un espectro representativo de resonancia magnética nuclear, con carbono 13, en estado sólido, a 400 MHz, del compuesto de la fórmula (I). La figura 5 es un termograma calorimétrico de exploración diferencial, representativo, del polimorfo de forma cristalina I sustancialmente puro, del compuesto de la fórmula (I). La figura 6 es un termograma calorimétrico de exploración diferencial representativo del polimorfo de la forma cristalina II, sustancialmente puro, del compuesto de la fórmula (I). Hay dos picos mostrados debido a la conversión de la forma II a la forma I por calentamiento.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con la presente invención hay dos polimorfos cristalinos novedosos del compuesto de la fórmula (I). A fin de identificarlos, están designados estos polimorfos cristalinos como la forma cristalina I y la forma cristalina II del compuesto de la fórmula (i). 0), La forma cristalina I, de preferencia la forma cristalina I sustancialmente pura, tiene el patrón representativo de difracción de los rayos X, el espectro de resonancia magnética nuclear en estado sólido, con carbono 13, y el termograma calorimétrico de exploración diferencial, que aparecen en las figuras 1, 3 y 5, respectivamente. Las posiciones a ángulo dos-theta de los picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo de la forma I, de preferencia la forma I sustancialmente pura, como se muestra en la figura 1, son 8.2° ± 0.1°, 8.4° ± 0.1°, 11.8° ± 0.1°, 12.9° + 0.1°, 13.8° ± 0.1°, 15.1° + 0.1°, 15.4° + 0.1°, 17.0° ± 0.1°, 18.2° ± 0.1° y 18.7° + 0.1°. De preferencia la forma cristalina i, la forma I sustancialmente pura, del compuesto de la fórmula (I), puede ser preparada disolviendo la forma amorfa del compuesto de la fórmula (I) con un solvente adecuado (por ejemplo, un éster de 3 a 6 átomos de carbono, tal como acetato de etilo o acetato de isopropilo; muy preferible, acetato de isopropilo), filtrando opcionalmente la solución, luego tratando el filtrado con un anti-solvente (por ejemplo, un alcano de 5 a 9 átomos de carbono, como hexano o heptano, muy preferible, heptano), y aislando el polimorfo deseado. En un método preferido se disuelve la forma amorfa del compuesto de la fórmula (I) en acetato de isopropilo (aproximadamente de 3 L/kg a 4 L/kg de compuesto, de preferencia 3.5 L/kg de compuesto) con calentamiento (aproximadamente a 70°C hasta alrededor de 75°C) y se filtra. Se trata la solución con heptano (aproximadamente de 3.2 L/kg a 4.3 L/kg de compuesto, de preferencia aproximadamente 3.75 L/kg de compuesto), se enfría a la temperatura ambiente, se agita durante alrededor de tres horas, se trata lentamente con heptano adicional (aproximadamente de 5.0 L/kg a 6.4 L/kg de compuesto, de preferencia aproximadamente 5.7 L/kg de compuesto), y se filtra para dar el polimorfo deseado. De preferencia la forma cristalina II, la forma cristalina II sustancialmente pura, tiene el patrón representativo de difracción de los rayos X en el polvo, el espectro de resonancia magnética nuclear en estado sólido con carbono 13, y el termograma calorimétrico de exploración diferencial, que aparecen en las figuras 2, 4 y 6, respectivamente. Las posiciones a ángulo dos-theta de los picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo de la forma cristalina II sustancialmente pura, como se muestra en la figura 2, son: 6.8° ± 0.1°, 8.2° ± 0.1°, 8.4° ± 0.1°, 8.87° ± 0.1°, 10.7° ± 0.1°, 11.8° + 0.1°, 15.0° ± 0.1°, 15.7° ± 0.1°, 16.1° ± 0.1°, 1.7° ± 0.1 ° y 17.1 ° ± 0.1°.

- - La forma cristalina II, de preferencia la forma cristalina II sustancialmente pura, del compuesto de la fórmula (I) puede ser preparada disolviendo la forma amorfa del compuesto de la fórmula (I) en un solvente adecuado (por ejemplo, un éter de 4 a 7 átomos de carbono, tal como éter dietílico o éter metil-terbutílico, o una mezcla de agua y una cetona de 3 a 6 átomos de carbono, tal como acetona o butanona; muy preferible éter metil-terbutílico o una mezcla de agua y 2 butanona), añadiendo opcionalmente un éter de 4 a 7 átomos de carbono, tal como éter dietílico o éter metil-terbutílico, muy preferible, éter metil-terbutílico, y poniendo en contacto la mezcla resultante con cristales de semilla de la fórmula II. Se trata opcionalmente la mezcla con un anti-solvente (por ejemplo, un alcano de 5 a 9 átomos de carbono, tal como hexano o heptano; muy preferible, heptano); y se aisla el polimorfo deseado. En un método preferido se disuelve la forma amorfa del compuesto de la fórmula (I) en 93:7 en peso/peso de 2-butanona/agua (aproximadamente 1.7 g/g de compuesto a alrededor de 2.1 g/g de compuesto; de preferencia alrededor de 1.9 g/g de compuesto), se calienta a alrededor de 50°C, se trata con éter metil-terbutílico (aproximadamente de 8.5 g/g de compuesto a 10.0 g/g de compuesto, de preferencia alrededor de 9.3 g/g de compuesto), se pone en contacto con dos porciones de cristales de semilla de la forma II, se trata con heptano (aproximadamente de 2 g/g de compuesto a 9 g/g de compuesto, de preferencia alrededor de 5.4 g/g de compuesto), se enfría a la temperatura ambiente, y se filtra para dar el polimorfo deseado.

- - La forma cristalina I, de preferencia la forma cristalina I sustancialmente pura, del compuesto de la fórmula (I) también puede ser preparada usando la forma cristalina II como intermediario, para facilitar la purificación. Se disuelve la forma cristalina II en un solvente adecuado (por ejemplo, un acetato de 3 a 6 átomos de carbono, tal como acetato de etilo o acetato de isopropilo, muy preferible, acetato de isopropilo) y se filtra opcionalmente. Se trata el filtrado con un anti-solvente (por ejemplo, un alcano de 5 a 9 átomos de carbono, tal como hexano o heptano; muy preferible, heptano), y luego se aisla el polimorfo deseado mediante filtración. Se puede repetir opcionalmente todo el proceso para el polimorfo cristalino I. En un método preferido se disuelve la forma cristalina II en acetato de isopropilo (aproximadamente de 2.5 mL/g de compuesto a 3.5 mL/g de compuesto, de preferencia alrededor de 3 mL/g de compuesto) y se filtra. Se trata el filtrado con heptano (aproximadamente de 8 mL/g de compuesto a 10 mL/g de compuesto, de preferencia aproximadamente 9.1 mL/g de compuesto), y se aisla el polimorfo deseado por medio de filtración. La presente invención provee también una composición farmacéutica que comprende la forma cristalina I sustancialmente pura del compuesto de la fórmula (I), en combinación con un portador aceptable para uso farmacéutico. La presente invención provee también una composición farmacéutica que comprende la forma cristalina II sustancialmente pura del compuesto de la fórmula (I) en combinación con un portador aceptable para uso farmacéutico. Una composición farmacéutica preferida para el tratamiento tópico de inflamaciones de la piel, comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de la forma cristalina I o de la forma cristalina II sustancialmente puras, del compuesto de la fórmula (I), en una cantidad aproximada de 1.0 por ciento en peso; 2,6-di-terbutil-4-metilfenol en una cantidad aproximada de 0.1 por ciento en peso; miristato de isopropilo en una cantidad aproximada de 51.4 por ciento en peso; dimetü-isosorbide en una cantidad aproximada de 9.9 por ciento en peso; transcutol en una cantidad aproximada de 14.8 por ciento en peso; monoestearato de glicerol, autoemulsificante (1:1 de monoestearato de glicerol/estearato de polioxietileno 100) en una cantidad aproximada de 0.99 por ciento en peso; monolaurato de glicerol en una cantidad aproximada de 1.98 por ciento en peso; y copolímero de etileno-acetato de vinilo, en una cantidad aproximada de 19.8 por ciento en peso. Se puede preparar esta composición farmacéutica fundiendo una mezcla de miristato de isopropilo, copolímero de etileno-acetato de vinilo, monoestearato de glicerol, autoemulsificante (1:1 de monoestearato de glicerol/estearato de polioxietileno 100) y monolaurato de glicerol, a una temperatura aproximada de 90°C, enfriando la mezcla aproximadamente a 80°C; tratando la mezcla con una solución de la forma cristalina I o de la forma cristalina II sustancialmente puras, del compuesto de la fórmula (I), 2,6-di-terbutil-4-metilfenol, dimetil-isosorbide, y - - transcutol; y enfriando la mezcla resultante a la temperatura ambiente. La presente invención provee también un método para tratar un paciente que tenga necesidad de terapia inmunosupresora, administrándole una cantidad efectiva desde el punto de vista terapéutico de la forma cristalina I sustancialmente pura del compuesto de la fórmula (I). La presente invención provee también un método para tratar un paciente que tenga necesidad de terapia inmunosupresora, que comprende administrarle una cantidad efectiva desde el punto de vista terapéutico, de la forma cristalina II sustancialmente pura del compuesto de la fórmula (I).

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Cuando se usan en la presente, las formas singulares "un", "una", "el", "la", incluyen la referencia al plural, a menos que el contexto exija claramente lo contrario. Tal como se usa en la presente memoria descriptiva, los siguientes términos tienen los significados indicados: El término "alquilo", cuando se usa en la presente, se refiere a un grupo monovalente, derivado de un hidrocarburo saturado de cadena recta o de cadena ramificada. El término "alcano de 5 a 9 átomos de carbono", cuando es usado aquí, se refiere a un hidrocarburo de cadena recta o ramificada que contiene entre cinco y nueve átomos de carbono. Los ejemplos de aléanos de 5 a 9 átomos de carbono incluyen, pero sin limitación a ellos: pentano, 2,2-dimetilpentano, hexano y nonato. El término "antisolvente", cuando es usado en la presente, se refiere a un solvente que hace que un compuesto precipite de una solución. El término "éster de 3 a 6 átomos de carbono", cuando es usado en la presente, se refiere a un solvente de la fórmula RC02R\ que contiene entre tres y seis átomos de carbono; donde R y R' son grupos alquilo de cadena recta o de cadena ramificada. Los ejemplos de ésteres de 3 a 6 átomos de carbono incluyen, pero sin limitación a ellos: acetato de metilo, acetato de etilo y acetato de isopropilo. El término "éter de 4 a 7 átomos de carbono", cuando es usado en la presente, se refiere a un solvente de la fórmula ROR', que contiene entre cuatro y siete átomos de carbono; donde R y R' son grupos alquilo de cadena recta o de cadena ramificada. Los ejemplos de éteres de 4 a 7 átomos de carbono incluyen, pero sin limitación a ellos: éter dietílico y éter metil-terbutílico. El término "cetona de 3 a 6 átomos de carbono", cuando es usado en la presente, se refiere a un solvente de la fórmula RC(0)R', que contiene entre tres y seis átomos de carbono; donde R y R' son grupos alquilo de cadena recta o de cadena ramificada. Los ejemplos de las cetonas de 3 a 6 átomos de carbono incluyen, pero sin limitación a ellas: 2-butanona, 2-hexanona y 3-hexanona.

El término "solvente adecuado", cuando es usado en la presente, se refiere a una sustancia o una mezcla de sustancias que son un líquido entre alrededor de 20 y alrededor de 35°C, y es capaz de ser usado en una recristalización. El término "sustancialmente puro", cuando se usa en referencia a un polimorfo del compuesto de la fórmula (I), se refiere a un polimorfo del compuesto de la fórmula (I), en la forma cristalina I o la forma cristalina II, que tiene una pureza de más de aproximadamente 90 por ciento. Esto significa que el polimorfo del compuesto de la fórmula (I) no contiene más de aproximadamente 10 por ciento de ningún otro compuesto y, en particular, que no contiene más de aproximadamente 10 por ciento de ninguna otra forma del compuesto de la fórmula (I). Es más preferible que el término "sustancialmente puro" se refiera a un polimorfo del compuesto de la fórmula (I), en la forma cristalina I o la forma cristalina II, que tiene una pureza de más de aproximadamente 95 por ciento. Esto significa que el polimorfo del compuesto de la fórmula (I) no contiene más de aproximadamente 5 por ciento de ningún otro compuesto y, en particular, que no contiene más de aproximadamente 5 por ciento de ninguna otra forma del compuesto de la fórmula (I). Todavía es más preferible que el término "sustancialmente puro" se refiera a un polimorfo del compuesto de la fórmula (I), en la forma cristalina I o la forma cristalina II, que tiene una pureza de más de alrededor de 97 por ciento. Esto significa que el polimorfo del compuesto de la fórmula (I) no contiene más de alrededor de 3 por ciento de ningún otro compuesto y, en particular, que no contiene más de alrededor de 3 por ciento de ninguna otra forma del compuesto de la fórmula (I). Se llevó a cabo el análisis de difracción de rayos X en el polvo de las muestras de la siguiente manera: Se molieron las muestras para el análisis de difracción de los rayos X, a un polvo fino y se las empacó en un portamuestras de estilo de cavidad, que contenía una placa de fondo cero. Se analizaron las muestras en un difractómetro Scintag X-2 theta/theta, equipado con un tubo de rayos X de cobre, de foco normal, operado a 1.8 kW y que usa un sistema detector enfriado Peltier. Se exploraron las muestras continuamente desde 2.00 a 40.00 grados, a razón de 1 grado/minuto. Se recogieron los datos de difracción mediante una computadora, usando el Diffraction Management SoftwareNT (DMSNT) de Scintag. Las posiciones de pico del patrón de difracción de los rayos X en el polvo, características, están informadas para los polimorfos en términos de las posiciones angulares (dos-theta) con una variabilidad permisible de ± 0.1°. Esta variabilidad permisible está especificada por la Farmacopea de los Estados Unidos, páginas 1843-1884 (1995). La variabilidad de ± 0.1° está destinada a ser usada cuando se comparan dos patrones de difracción de los rayos X en el polvo. En la práctica, si se asigna a un pico del patrón de difracción, de un patrón, un rango de posiciones angulares (dos-theta) que es la posición de pico medida ± 0.1°, y si esos rangos de las posiciones de pico se traslapan, entonces se considera que los dos picos tienen la misma posición angular (dos-theta). Por ejemplo, si se determina que un pico del patrón de difracción de un patrón tiene una posición de pico de 5.2°, para fines de comparación, la variabilidad permisible permite que se le asigne al pico una posición en la escala de 5.1° a 5.3°. Si se determina que un pico de comparación del otro patrón de difracción tiene una posición de pico de 5.3°, para los fines comparativos, la variabilidad tolerable permite que se le asigne al pico una posición en la escala de 5.2° a 5.4°. Debido a que hay traslape entre los dos rangos de posiciones de pico (es decir, de 5.1° a 5.3°, y de 5.2° a 5.4°), se considera que los dos picos que están siendo comparados tienen la misma posición angular (dos-theta). Se llevó a cabo el análisis de resonancia magnética nuclear en estado sólido de las muestras, de la siguiente manera. Se usó un instrumento AMS-400 MHz de Broker con los siguientes parámetros: CP-MAS (giro de ángulo mágico transversalmente polarizado); la frecuencia del espectrómetro para el carbono 13 fue 100.627950087186 MHz; la secuencia de pulsos fue vacp21ev; el tiempo de contacto fue 3 milisegundos; la temperatura fue la temperatura ambiente del exterior; la velocidad de giro fue de 7000 Hz; el retardo de relajación fue de 5.000 segundos; la anchura de pulso de carbono 13 a 90 grados fue de 3.6 microsegundos; la anchura de pulso de 1H a 90 grados fue de 4.5 microsegundos; el tiempo de adquisición fue de 0.067 segundos; la anchura de barrido fue de 30487.8 Hz; 4,000 barridos. El análisis calorimétrico de exploración diferencial de las dos muestras fue efectuado de la siguiente manera: Se usó para adquirir los datos un calorímetro de exploración diferencial TA Instrument modelo 2920, y el software de operación Thermal Solutions, versión 2.1J. Se analizaron los datos usando el software Universal Analysis, versión 2.6D. El peso de muestra para la forma cristalina I fue 4.740 mg, y el peso de muestra para la forma cristalina II fue 7.485 mg. Se colocaron ambas muestras en bandejas de aluminio (separadas) que luego fueron cubiertas, pero no selladas. Se calentaron ambas muestras desde la temperatura ambiente hasta 250°C, a 10°C/min. Se purgó con nitrógeno el horno a 50 mL/min. Una composición farmacéutica preferida para uso tópico de inflamación cutánea comprende: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva de la forma cristalina II sustancialmente pura del compuesto de la fórmula (I), en una cantidad aproximada de 1.0 por ciento en peso; (b) 2,6-dí-terbut¡l-4-metilfenol en una cantidad aproximada de 0.1 por ciento; (c) miristato de ¡sopropilo en una cantidad aproximada de 51.4 por ciento en peso; (d) dimetill-isosorbide en una cantidad aproximada de 9.9 por ciento en peso; (e) transcutol en una cantidad aproximada de 14.8 por ciento en peso; (f) monoestearato de glicerol, autoemulsificante (1:1 de monoestearato de glicerol/estearato de polioxietileno 100), en una cantidad aproximada de 0.99 por ciento en peso; (g) monolaurato de glicerol en una cantidad aproximada de 1.98 por ciento en peso; y (h) copolímero de etileno-acetato de vinilo, en una cantidad aproximada de 19.8 por ciento en peso. Esta formulación fue consistentemente superior en la prueba de eficacia para la hipersensibilidad al contacto in vivo en cerdos (>50 por ciento de inhibición, fármaco frente a placebo), mostró penetración de fármaco dentro de la epidermis y la dermis humanas in vitro, y fue física y químicamente estable (<10% de degradación a 40°C, seis meses). Los resultados de las formulaciones que contienen porcentajes variables del compuesto activo están mostrados a continuación.

TABLA 1 Datos para la formulación R+* de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) en el modelo in vivo en cerdos de la eficacia para la hipersensibilidad al contacto - - *Se pueden encontrar las abreviaturas de la formulación en los ejemplos que aparecen en la lista de más abajo. † Delta = (% de inhibición por fármaco vs no tratado)-(% de inhibición por placebo vs no tratado) ** p < 0.05 TABLA 2 Datos de formulación R+* de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) en la penetración in vitro en piel human * Se pueden encontrar las abreviaturas de formulación en los ejemplos que aparecen más abajo. ** Penetración = cantidad (% o vg) de fármaco penetrada dentro de la epidermis viable+dermis + receptor TABLA 3 - - Observaciones de estabilidad para la formulación R+* de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) * Se pueden encontrar las abreviaturas de formulación en los ejemplos que aparecen más adelante. fEstabilidad física: observaciones después de 3 meses a 40°C de la formulación que contiene 1 por ciento del compuesto de la fórmula (I).

TABLA 4 Datos para formulaciones de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) en el modelo de eficacia de hipersensibilidad al contacto in vivo en cerdos Fórmula* %de Formulación Compuesto %de %de %de compuesto (mg/cm2) de fórmula inhibi-ción inhibiinhibi-ción, de fórmula (I) Mg/cm2 Delta ción, fárma-co (1) fárma-co vs placebo vs no tratado R+ 1 2 20 68 92±2.9 90+3.5 ** ** R+ 0.3 5 15 26 76+5.1 60+6.5 ** ** R+ 1 5 50 28 78+5.4 59+6.8 ** ** R+ 1 5 50 30 90+3.2 79±7.3 ** ** L 1 2 13.2 76 71+4.7 74±4.9 ** ** L 0.3 5 15 11 74±4.6 39±9.4 ** ** L 1 5 50 20 83±4.5 59+11.8 ** ** A+ 0.8 2 16 27 38±3.8 31+4.5 ** ** A+ 0.8 5 40 21 28±7.0 21+7.8 ** ** BB+ 3 2 60 26 42±9.0 30+11.7 ** ** BB+ 3 5 150 18 55±7.8 26+14.5 ** U 0.75 5 37.5 27 51+4.3 29+6.7 ** ** * Se pueden encontrar las abreviaturas de formulación en los ejemplos que vienen después. †Delga = (% de inhibición por fármaco vs no tratado)-(% de inhibición por placebo vs no tratado) ** p < 0.05 TABLA 5 Datos para formulaciones de forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) en la penetración in vitro en piel humana pueden encontrar las abreviaturas de formulación ejemplos que vienen posteriormente. ** Penetración = cantidad (% o µ9) de fármaco penetrada epidermis viable + dermis + receptor.

TABLA 6 Observaciones de estabilidad para formulaciones de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) * Se pueden encontrar las abreviaturas de formulación en los ejemplos que aparecen más adelante. †Estabilidad física: observaciones después de tres meses a 40°C de la formulación que contiene 1% del compuesto de la fórmula (I). n.d. = no determinado. Los siguientes ejemplos servirán para ilustrar adicionalmente la preparación de los polimorfos cristalinos novedosos del compuesto de la fórmula (I), así como la síntesis de la forma cristalina I a través de la forma cristalina II. Los puntos de fusión no están corregidos.

EJEMPLO 1 Preparación de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula general (I) Se calentó una solución del compuesto de la fórmula (1) (1,029 g, preparada de. acuerdo con el procedimiento descrito en la patente estadounidense No. 5,708,002, expedida el 13 de enero de 1998) en 3.5 L de acetato de isopropilo, a una temperatura entre 70 y 75°C, y se filtró a través de un embudo de vidrio fritado grueso. Se trató la solución con 3.75 L de heptano, se agitó a la temperatura ambiente durante tres horas, y se trató con 5.65 L adicionales de heptano, mediante el embudo de adición, durante alrededor de tres horas. Se recogió por filtración el precipitado resultante y se lavó la torta de filtro secuencialmente con alrededor de 2 litros de acetato de isopropilo al 15 por ciento/heptano, y con dos litros de heptano.

Se secó la torta de filtro al vacío, con una purga con nitrógeno a 95°C durante 60 horas, para dar 837 g de la forma cristalina I, como un sólido blanco, con p. f. de 180-182°C.

EJEMPLO 2 Preparación de la forma cristalina II del compuesto de ia fórmula íil Se calentó a alrededor de 50°C una solución de 7.56 g del compuesto de la fórmula (I) (preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en la patente estadounidense No. 5,708,002, expedida el 13 de enero de 1998), en 14.2 g de 93:7 en peso/peso de 2-butanona/agua, y se trató con 69.9 g de éter metil-terbutílico. Se trató la solución con dos porciones de cristales de semilla de la forma cristalina II (alrededor de 10 a 15 mg en total) y, después de alrededor de 30 minutos, se trató la mezcla con 41.2 g de heptano, a gotas, durante varios minutos. Se mantuvo la temperatura aproximadamente a 50°C durante alrededor de una hora; luego se enfrió a la temperatura ambiente a razón de alrededor de 5°C/hora. Se agitó la suspensión a la temperatura ambiente durante aproximadamente cuatro días, y luego se filtró. Se secó la torta de filtro al vacío para dar 4.72 g de la forma cristalina II, como un sólido blanco, con p. f. de 121-124°C.

EJEMPLO 3 Preparación de cristales de semilla de la forma cristalina II del compuesto de la fórmula (I) Se pueden preparar los cristales de semilla mediante el método descrito en el ejemplo 2, omitiendo el sembrado del cristal.

EJEMPLO 4 Purificación de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I), mediante la forma cristalina II Se agitó una solución de 12.0 g del compuesto crudo de la fórmula (I) (razón 3:2 de los isómeros N1/N2/tetrazol, preparada de acuerdo con el procedimiento descrito en la patente estadounidense No. 5,708,002, expedida el 13 de enero de 1998) en 240 mL de éter metil-terbutílico, a la temperatura ambiente; hasta que la concentración en la solución se estabilizó a alrededor de 6 mg/mL, y luego se filtró. Se lavó la torta de filtro con éter metil-terbutílico y se secó al vacío para dar 4.29 g de la forma cristalina II, como un sólido blanco (p. f. 125-131°C, 87 por ciento de pureza en el área de pico, mediante HPLC). Se disolvió el sólido en 25 mL de acetato de isopropilo, con calentamiento moderado (aproximadamente 50 a 70°C), se concentró y se disolvió en 45 mL de éter metil-terbutílico. Se calentó la suspensión a reflujo moderado durante alrededor de dos horas, se enfrió a la temperatura ambiente y se agitó durante alrededor de dos días. Se recogió el precipitado mediante filtración y se lavó con éter metil-terbutílico, para dar 3.78 g de la forma cristalina II, como un sólido (p. f. 125-127°C, 91 por ciento de pureza en el área de pico, mediante HPLC). Se disolvió el sólido en 25 mL de acetato de isopropilo, se concentró, se volvió a disolver en 25 mL de acetato de isopropilo y se concentró. Se disolvió el residuo en 37 mL de éter metil-terbutílico, se calentó a reflujo moderado durante alrededor de 90 minutos, se enfrió a la temperatura ambiente y se agitó durante alrededor de 20 horas. Se recogió el precipitado mediante filtración para dar 3.27 g de la forma cristalina II como un sólido (p. f. 126-129°C, 904 por ciento de pureza en el área de pico, mediante HPLC). Se disolvió el sólido en 10 mL de acetato de isopropilo y se filtró a través de un filtro de 10-15 mM. Se lavó el filtro con 2 mL adicionales de acetato de isopropilo y se trató las soluciones combinadas con 12 mL de heptano. Se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante alrededor de 10 minutos, se trató con otros 18 mL de heptano durante 30 minutos, y se agitó durante 16 horas. Se recogió por filtración el precipitado, se enjuagó con acetato de isopropilo al 20 por ciento/heptano, y se secó al vacío (alrededor de 0.5 mm de Hg), para dar 3.00 g de un sólido (p. f. 125-130°C y alrededor de 188°C, lo que indica una mezcla de la forma cristalina I y de la forma cristalina II; 96 por ciento de pureza en el área de pico, mediante HPLC). Se disolvió el sólido en 12 mL de acetato de isopropilo, se calentó a aproximadamente 70°C, se enfrió a la temperatura ambiente y se agitó durante 1.5 horas. Una muestra del sólido no mostró fusión a 120-135°C, lo que indica la ausencia de la forma cristalina II. Se trató el sólido con 21 mL de heptano, se agitó durante 12-16 horas, y se filtró. Se enjuagó la torta de filtro con acetato de isopropilo al 20%/heptano, y se secó al vacío (0.05 mm de Hg) para dar 250 g de la forma cristalina I (p. f. 185-188°C, 96 por ciento de pureza en el área de pico mediante HPLC, con 0.26% del isómero N2-tetrazol, recuperación, 35 por ciento).

EJEMPLO 5 Preparación de una composición farmacéutica de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) (formulación "R+" de ungüento polimérico) Se fundió a 90°C, con agitación, una mezcla de 51.4 g de miristato de isopropileno, 19.8 g de copolímero de etileno-acetato de vinilo (AC400), comprado de Allied Signal); 0.99 g de monoestearato de glicerol autoemulsificante (Arlacel 1656, comprado de Uniqema) y 1.98 g de monolaurato de gllcerilo (Imwitor 312, comprado de Sasol). Se enfrió la mezcla a 80°C y se trató con una solución a la temperatura ambiente de 1.0 g de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) y 0.1 g de 2,6-di-terbutil-4-metilfenol en 9.9 g de dietil-isosorbide y 14.8 g de transcutol. Se enfrió la mezcla a la temperatura ambiente, con agitación, para dar el producto deseado.

EJEMPLO 6 Preparación de una composición farmacéutica de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) (formulación "L" de ungüento polimérico) Se fundió a 90°C, con agitación, una mezcla de 29.7 g de miristato de isopropilo, 19.8 g de copolímero de etileno-acetato de vinilo (AC400), comprado de Allied Signal) y 34.7 g de monolaurato de propilenglicol (comprado de Gattefosse). Se enfrió a 80°C la mezcla y se trató con una solución a la temperatura ambiente de 1.0 g de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) en 14.9 g de dimetil-isosorbide. Se enfrió la mezcla a la temperatura ambiente con agitación, para dar el producto deseado.

EJEMPLO 7 Preparación de una composición farmacéutica de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) (formulación "A+" de ungüento de petrolato) Se fundió una mezcla de 74.8 g de petrolato blanco USP, 7.4 g de cera blanca, 2.0 g de ceresina y 5.0 g de Brij 72, en un baño de agua a 60-70°C. Mientras se agitaba con un homogeneizador, se trató la mezcla con una solución a 60-70°C de 0.8 g de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I) y 0.1 g de 2,6-di-terbutil-4-metilfenol, en 9.9 g de carbonato de propileno.

Se agitó la mezcla durante otros 1-2 minutos a alta velocidad, se retiró del baño de agua, se agitó a baja velocidad durante tres minutos, luego se agitó con una barra agitadora magnética para mezclar con bajo esfuerzo cortante, y se dejó enfriar a la temperatura ambiente, para dar el producto deseado.

EJEMPLO 8 Preparación de una composición farmacéutica de la forma cristalina i del compuesto de la fórmula (I) (formulación "BB + " en crema) Se fundió a 50-60°C, con agitación, una mezcla de 10 g de alcohol cetoestearílico, 10 g de monoestearato de glicerilo, 2.0 g de monoestearato de glicerol autoemulsificante (Arlacel 165, comprado de Uniqema), y 2.0 g de cera blanca. Mientras se mezclaba con un homogeneizador se añadió 42 g de agua (calentada a 50°C). Se trató la mezcla con una suspensión a 50-60°C de 3.0 g de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (I), 10 g de dimetil-isosorbide, 10 g de transcutol, 10 g de carbonato de propileno y 0.1 g de 2,6-di-terbutil-4-metilfenol. Se añadió 1.0 g de Germaben y se enfrió la mezcla a la temperatura ambiente, con agitación, para dar el producto deseado.

EJEMPLO 9 Preparación de una composición farmacéutica en crema. alternativa, de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (? formulación "U" en crema alternativa) Se disolvió 0.75 g de la forma cristalina I del compuesto de la fórmula (1) en 58 g de Capmul MCM (comprado de Abitec) a 65°C, con agitación. Se añadió 11.6 g de cera blanca y se fundió mientras se mezclaba con un agitador Motomatic. Se añadió una dispersión de 0.6 g de Carbopol 980 (comprado de B. F. Goodrich) en 29 g de agua, seguidos por 0.1 g de trietanolamina, mientras se mezclaba perfectamente para neutralizar y gelificar el Carbopol. Se mezcló el producto con el homogeneizador Biospec durante 1-2 minutos y se dejó que llegara a la temperatura ambiente. Lo anterior es simplemente ilustrativo de la invención y no está destinado a limitar la invención a las modalidades descritas. Las variaciones y los cambios que son obvios para los expertos en la materia se pretende que estén dentro del alcance y la naturaleza de la invención, que están definidos en las reivindicaciones que vienen a continuación.

Claims (35)

1. REIVI DICACIO ES
2. El polimorfo cristalino del compuesto de la fórmula (I) con picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo, a valores de dos theta, de: 8.2° ± 0.1°, 8.4 ± 0.1°, 11.8° ± 0.1°, 12.9° ± 0.1°, 13.8° + 0.1°, 15.1° ± 0.1°, 15.4° ± 0.1°, 17.0° ± 0.1°, 18.2° + 0.1°, y 18.7° ± 0.1°. 2. - El polimorfo cristalino sustancialmente puro del compuesto de la fórmula (I), con picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo, a valores de dos t eta, de 8.2° ± 0.1°, 8.4° ± 0.1°, 11.8° ± 0.1°, 12.9° ± 0.1°, 13.8° ± 0.1°, 15.1° + 0.1°, 15.4° + 0.1°, 17.0° + 0.1°, 18.2° ± 0.1°, y 18.7° ± 0.1°.
3. 3. - El polimorfo cristalino del compuesto de la fórmula (I), con picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo, a valores de dos theta, de: 6.8° ± 0.1°, 8.2° + 0.1°, 8.4° + 0.1°, 8.87° ± 0.1°, 10.7° ± 0.1°, 11.8° ± 0.1°,, 15.0° ± 0.1°, 15.7° ± 0.1 °, 16.1° ± 0.1°, 16.7° ± 0.1°, y 17.1 + 0.1°.
4. 4. - El polimorfo cristalino sustancialmente puro del compuesto de la fórmula (I), con picos característicos en el patrón de difracción de los rayos X en el polvo, a valores de dos theta, de: 6.8° ± 0.1°, 8.2° ± 0.1°, 8.4° ± 0.1°, 8.87° ± 0.1°, 10.7° ± 0.1°, 11.8° ± 0.1°, 15.0° ± 0.1°, 15.7° + 0.1°, 16.1° ± 0.1°, 16.7° ± 0.1°, y 17.1° + 0.1°.
5. 5. - Un proceso para la preparación del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2, caracterizado porque comprende: (a) disolver el compuesto de la fórmula (I) en un solvente adecuado; (b) filtrar opcionalmente el producto del paso (a); (c) tratar el filtrado del paso (b) con un antisolvente; y (d) aislar el polimorfo deseado, así obtenido.
6. 6.- El proceso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque el solvente adecuado es un éster de 3 a 6 átomos de carbono.
7. 7. - El proceso de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque el solvente adecuado es acetato de isopropilo.
8. 8. - El proceso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque el antisolvente es un alcano de 5 a 9 átomos de carbono.
9. 9. - El proceso de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque el antisolvente es heptano.
10. 10. - El proceso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque se lleva a cabo el paso (a) aproximadamente a 70-75°C.
11. 11. - El proceso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque se lleva a cabo el paso (c) aproximadamente a 20-25°C.
12. 12. - Un proceso para la preparación del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 4, caracterizado porque comprende: (a) disolver el compuesto de la fórmula (I), con un solvente apropiado; (b) tratar opcionalmente el producto del paso (a) con un éter de 4 a 7 átomos de carbono; (c) tratar opcionalmente el producto del paso (b) con un antisolvente; (d) agitar el producto del paso (c); y (e) aislar el polimorfo deseado, así obtenido.
13. 13. - El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque se usa la forma cristalina II del compuesto de la fórmula (I) para inducir la cristalización.
14. 14. - El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque el solvente adecuado es un éter de 4 a 7 átomos de carbono.
15. 15. - El proceso de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado además porque el solvente adecuado es éter metil- terbutílico.
16. 16.- El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque el solvente adecuado es una mezcla de una cetona de 3 a 6 átomos de carbono, y agua.
17. 17.- El proceso de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque el solvente adecuado es una mezcla de 2-butanona y agua.
18. 18. - El proceso de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque el éter de 4 a 7 átomos de carbono es éter metil-terbutílico.
19. 19. - El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque el antisolvente es un alcano de 5 a 9 átomos de carbono.
20. 20. - El proceso de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque el antisolvente es heptano.
21. 21. - El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque se llevan a cabo los pasos (a), (b) y (c9 aproximadamente a 50°C.
22. 22. - El proceso de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque se lleva a cabo el paso (d) aproximadamente a 20-25°C.
23. 23. - Un proceso para la preparación del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2, caracterizado porque comprende: (a) disolver el polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 4, en un solvente apropiado; (b) filtrar opcionalmente el producto del paso (a); (c) tratar el filtrado del paso (b) con un antisolvente; y (d) aislar el polimorfo deseado así obtenido.
24. 24.- El proceso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque el solvente apropiado es un éster de 3 a 6 átomos de carbono.
25. 25. - El proceso de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque el solvente apropiado es acetato de isopropilo.
26. 26. - El proceso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque el antisolvente es un alcano de 5 a 9 átomos de carbono.
27. 27. - El proceso de conformidad con a reivindicación 26, caracterizado además porque el antisolvente es heptano.
28. 28. - El proceso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque se lleva a cabo el paso (a) aproximadamente a 70°C.
29. 29. - El proceso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado además porque se lleva a cabo el paso (c) aproximadamente a 25°C.
30. 30. - Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2, en combinación con un portador aceptable para uso farmacéutico.
31. 31. - Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende el polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 4, en combinación con un portador aceptable para uso farmacéutico.
32. 32. - Una composición farmacéutica para tratamiento tópico de inflamación cutánea, caracterizada porque comprende: (a) una cantidad terapéuticamente efectiva del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2, en una cantidad aproximada de 1.0 por ciento en peso; (b) 2,6-di-terbutil-4-metilfenol, en una cantidad aproximada de 0.1 por ciento; (c) miristato de isopropilo, en una cantidad aproximada de 51.4 por ciento en peso; (d) dimetil-isosorbide en una cantidad aproximada de 9.9 por ciento en peso; (e) transcutol, en una cantidad aproximada de 14.8 por ciento en peso; (f) monoestearato de glicerol, autoemulsificante (1:1 de monoestearato de glicerol/estearato de polioxietileno 100), en una cantidad aproximada de 0.99 por ciento en peso; (g) monoiaurato de glicerol, en una cantidad aproximada de 1.98 por ciento en peso; y (h) copolímero de etileno-acetato de vinilo, en una cantidad aproximada de 19.8 por ciento en peso.
33. 33. - Un método para preparar una composición farmacéutica para tratamiento tópico de inflamación cutánea, caracterizado porque comprende: (a) fundir una mezcla de miristato de isopropilo, copolímero de etileno-acetato de vinilo, monoestearato de glicerol, autoemulsificante (1:1 de monoestearato de glicerol/estearato de polioxietileno 100) y monolaurato de glicerol, a una temperatura aproximada de 90°C; (b) enfriar el producto del paso (a) aproximadamente a 80°C; (c) tratar el producto del paso (b) con una solución del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2 y 2,6-di- terbutil-4-metilfenol, en dimetil-isosorbide y transcutol; y (d) enfriar el producto del paso (c) a la temperatura ambiente.
34. 34. - Un método para tratar un paciente que tenga necesidad de terapia ¡nmunosupresora, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva desde el punto de vista terapéutico, del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 2.
35. 35. - Un método para tratar un paciente que tiene necesidad de terapia ¡nmunosupresora, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva desde el punto de vista terapéutico, del polimorfo cristalino sustancialmente puro de la reivindicación 4.