SK285665B6

SK285665B6 - Kryštalické makrolidy, spôsob ich prípravy, farmaceutický prostriedok a ich použitie

Info

Publication number: SK285665B6
Application number: SK1866-99A
Authority: SK
Inventors: Cornelia Dosenbach; Maximilian Grassberger; Otto Hartmann; Amarylla Horvath; Jean-Paul Mutz; Gerhard Penn; Sabine Pfeffer; Dierk Wieckhusen
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1997-06-30
Filing date: 1998-06-26
Publication date: 2007-05-03
Also published as: US6423722B1; DK0994880T3; GB9713730D0; IL132761A0; HUP0003053A2; CZ474099A3; CZ297244B6; JP4504323B2; PT994880E; JP3880634B2; DE69828692T2; TR199903189T2; AR017754A1; ZA985655B; NO995909D0; JP2006151999A; KR20010020423A; CA2290412A1; PE97699A1; TW552264B

Abstract

Opisuje sa 33-epichlór-33-deoxyaskomycín vzorca (I) a jeho rôzne tautomérne a solvatované formy v kryštalickom stave, ako je forma A alebo forma B. Ich príprava zahŕňa vhodné prevedenie amorfnej zlúčeniny vzorca (I) alebo zlúčeniny vzorca (I) v inejforme, ako je forma A, alebo zlúčeniny vzorca (I)v inej forme, ako je forma B, v tomto poradí, z ich roztoku v podmienkach vyvolávajúcich kryštalizáciu alebo v podmienkach vyvolávajúcich prednostnú kryštalizáciu formy A alebo formy B, v tomto poradí. Tieto kryštály sú určené na použitie pri príprave miestnych galenických foriem zlúčeniny na farmaceutické použitie, napríklad v krémoch, emulziách a mastiach.

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka chémie makrolidov. Vynález sa týka zlúčeniny vzorca (I)

to znamená {[1E-(1R,3R,4S)]1R,9S,12S,13R,14S,17R,18E,21S,24R,-25S,27R}-12-[2-(4-chlór-3-metoxycyklohexyl)-1 -metyl vinyl] -17-etyl-1,14-dihydroxy-23,25 -dimetoxy-13,19,21,27-tetrametyl-11,28-dioxa-4-azatricyklo-[22,3,l,0(4,9)]oktakos-18-én-2,3,10,16-tetraónu, ktorý sa ďalej krátko nazýva ako „33-epichlór-33-deoxy-FR520“ alebo „33-epichlór-33-deoxyaskomycín“, v kryštalickej forme.

Na zjednodušenie sa v opise zlúčeninou vzorca (I) rozumie zlúčenina vzorca (I) v rôznych tautomémych formách, v ktorých je v rovnováhe, najmä v roztoku a v solvatovanej forme, napríklad v hydratovaných formách, ako sú tautoméme formy vzorca (la)

a vzorca (lb)

Doterajší stav techniky

Zlúčenina vzorca (J) je známa v amorfnej forme, napríklad 7 EP 427 3 80, firmy Sandoz, príklad 66a, vo forme bezfarebnej penovej živice ('H-NMR = 4,56 (m, H-33)) a z EP 480 623, firmy Merck, príklad 53 (bez fyzikálno chemickej charakterizácie). V literatúre sa používajú rôzne názvy a číslovanie atómov uhlíka.

Podľa doterajšieho stavu techniky sa zlúčenina vzorca (I) nikdy nezískala v kryštalickej forme.

Ukázalo sa, že prítomnosti atómu halogénu, najmä atómu chlóru v cyklohexylovej skupine molekuly, najmä v jej polohe 4 (tiež označovanej ako poloha 33 vo vzorci (I) a (lc)), má nepriaznivý vplyv na kryštalizačné vlastnosti tejto štruktúrnej triedy zlúčenín. V EP 427 680 sa teda nezískajú žiadne halogénované výsledné produkty v kryštalickej forme, ale sa získajú bezfarebné peny, ktoré sú charakterizované pomocou NMR spektier.

Podobne v EP 480 623, ktorý opisuje len makrolidové výsledné produkty halogénované na cyklohexylovej skupine, nie sú pri žiadnej zo špecifických zlúčenín uvedené dáta potvrdzujúce kryštalickosť, ako je teplota topenia, väčšina koncových produktov tohto patentu nie je vôbec charakterizovaná pomocou fyzikálno chemických údajov a tie, ktoré sú charakterizované, sú charakterizované pomocou hmotnostných spektier, ktoré nenapovedajú nič o fyzikálnom stave; a žiadny zo 4-chlórsubstituovaných výsledných produktov nie je charakterizovaný vôbec.

Ďalšie analogické makrolidy, halogénované na cyklohexylovej skupine, sú tiež opísané napríklad vo WO 91/13889 od Fisons, presnejšie v príkladoch 42a), 42b) a 49a): tieto zlúčeniny sa tiež nezískajú v kryštalickej forme, ale sa získajú vo forme peny alebo oleja.

Dvadsaťtri členné tricyklomakrolidy odvodené od FK 506 sa môžu získali v kryštalickej forme len ťažko, keď ich je možné v tejto forme vôbec pripraviť, čo je zrejmé napríklad tiež z Merck WO 97/8182, ktorá sa týka makrolidových zlúčenín, ktoré majú zásadité substituenty schopné tvoriť soli, ktoré sa môžu získať v kryštalickej forme, ale len ako soľ s kyselinou vínnou. Zlúčenina podľa predloženého vynálezu neobsahuje taký zásaditý substituent.

Je prekvapujúce, že sa teraz dosiahla kryštalizácia zlúčeniny vzorca (I).

Podstata vynálezu

Predložený vynález sa týka zlúčeniny vzorca (I) v kryštalickej forme. Kryštalická forma môže byť solvatovaná, napríklad hydratovaná alebo bezvodá forma, alebo môže byť tautorméma.

Aj keď sa prvýkrát získala zlúčenina vzorca (I) v kryštalickej forme až niekoľko rokov potom, ako sa prvýkrát pripravila, pôvodne len v amorfnej forme, po jej prvej kryštalizácii sa ukázalo, že sa zlúčenina môže previesť z amorfnej formy do kryštalickej formy pomerne ľahko. Kryštalická látka sa stala ľahšie dostupnou s použitím rôznych experimentálnych podmienok rozširujúcich pôvodne používané podmienky na kryštalizáciu, ktoré zahŕňajú pridanie vody k etanolickému roztoku amorfnej zlúčeniny.

Predložený vynález sa týka tiež spôsobu prípravy zlúčeniny vzorca (I) alebo jej tautomémej alebo solvatovanej formy, v kryštalickej forme, ktorý zahŕňa vhodnú formu amorfnej zlúčeniny vzorca (I) z jej roztoku pri podmienkach vyvolávajúcich kryštalizáciu.

Vynález sa týka tiež zlúčeniny vzorca (I) alebo jej tautomémej, alebo solvatovanej formy, v kryštalickej forme, pripravenej pomocou tohto spôsobu a zlúčeniny všeobecného vzorca (I) v nckryštalickom, napríklad rozpustenom stave alebo v jej tautomémej, alebo solvatovanej forme, pripravenej z kryštalickej formy.

Spôsob podľa predloženého vynálezu sa uskutočňuje bežným spôsobom. Presné podmienky, pri ktorých vznikajú kryštály, sa teraz môžu empiricky stanoviť, a prakticky je možné použiť viac spôsobov, vrátane začiatočného pridania vody k etanolickému roztoku zlúčeniny vzorca (I) v amorfnej forme.

Podmienky vyvolávajúce kryštalizáciu bežne zahŕňajú použitie vhodného rozpúšťadla vyvolávajúceho kryštalizá2 ciu, ako je metanol, etanol, izopropanol alebo voda, alebo ich zmesi.

Obvykle sa amorfná zlúčenina rozpusti v rozpúšťadle pri teplote najmenej 10 °C. Roztok sa môže pripraviť rozpustením akejkoľvek jednej alebo viacerých amorfných foriem zlúčeniny a ich solvátov, ako sú hydráty, metanoláty, etanoláty, izopropanoláty a acetonitriláty, v rozpúšťadle. Kryštály sa potom môžu vytvorili konverziou z roztoku, keď kryštalizácia prebieha pri teplote v rozsahu 10 °C a teplotou varu rozpúšťadla. Rozpustenie a kryštalizácia sa môžu uskutočňovať akýmkoľvek bežným spôsobom. Napríklad sa môže amorfná zlúčenina rozpustiť v rozpúšťadle alebo v zmesi rozpúšťadiel, v ktorej sa ľahko rozpúšťa pri zvýšenej teplote, ale v ktorej sa len mierne rozpúšťa pri nižšej teplote. Po rozpustení pri zvýšenej teplote nasleduje ochladenie, v priebehu ktorého z roztoku vykryštalizujú požadované kryštály. Medzi rozpúšťadlá, ktoré sú vhodné, patria estery, ako je metylacetát a etylacetát, toluén a acetonitril. Môžu sa tiež použiť zmiešané rozpúšťadlá obsahujúce dobré rozpúšťadlo, v ktorom sa zlúčenina ľahko rozpustí, výhodne v množstve najmenej 1 % hmotnostné pri 30 °C a zlé rozpúšťadlo, v ktorom sa zlúčenina ťažšie rozpúšťa, výhodne v množstve nie väčšom ako 0,01 % hmotnostných pri 30 °C, s podmienkou, že je možná kryštalizácia s použitím vybranej zmesi rozpúšťadiel pri zníženej teplote, bežne najmenej 10 °C.

Alternatívne sa môže využiť rozdiel v rozpustnosti kryštálov v rôznych rozpúšťadlách. Napríklad sa môže amorfná zlúčenina rozpustiť v dobrom rozpúšťadle, v ktorom je veľmi dobre rozpustná, ako je rozpúšťadlo, v ktorom je rozpustné množstvo najmenej 1 % hmotnostné pri 30 °C, a roztok sa potom zmieša so zlým rozpúšťadlom, v ktorom je látka horšie rozpustná, ako je rozpúšťadlo, v ktorom je rozpustné množstvo nie vyššie ako 0,01 % hmotnostných pri asi 30 °C. Teda roztok zlúčeniny v dobrom rozpúšťadle sa môže pridať k zlému rozpúšťadlu, pri udržiavaní teploty okolo 10 °C alebo sa môže zlé rozpúšťadlo pridať k roztoku zlúčeniny v dobrom rozpúšťadle, znova pri bežnej teplote okolo 10 °C. Medzi príklady dobrých rozpúšťadiel patria nižšie alkoholy, ako je metanol, etanol a izopropanol, a tiež acetón, tetrahydrofurán a dioxán. Príklady zlých rozpúšťadiel sú voda, hexán a dietyléter. Výhodne sa kryštalizácia uskutočňuje pri teplote v rozsahu 10 až 60 ^CC.

V alternatívnom uskutočnení podľa predloženého vynálezu sa pevná amorfná zlúčenina suspenduje pri teplote najmenej 10 °C v rozpúšťadle, v ktorom nie je pri tejto teplote úplne rozpustná, výhodne je len obmedzene rozpustná. Vznikne suspenzia, v ktorej sú dispergované pevné častice a zostávajú v rozpúšťadle neúplné rozpustené. Pevná látka sa výhodne udržiava v stave suspenzie pomocou premiešavania, napríklad pomocou trepania alebo miešania. Aby sa mohla uskutočniť transformácia východiskovej pevnej látky na kryštály, suspenzia sa udržiava pri teplote okolo 10 °C alebo vyššej. Amorfná pevná zlúčenina suspendovaná vo vhodnom rozpúšťadle môže byť solvát, napríklad hydrát, metanolát, etanolát, izopropanolát alebo acetonitrilát. Amorfný prášok sa môže získať sušením solvátu.

Aby sa vyvolala kryštalizácia, je výhodné pridať k roztoku „očko“ kryštalickej látky.

Zlúčenina vzorca (Ϊ) v kryštalickej forme sa môže ľahko izolovať, napríklad sa môže odfiltrovať alebo odstrediť z kryštalizačného média, keď je vhodné, po ochladení, a premyť a sušiť a prípadne znova rekryštalizovať s použitím podobných podmienok. Aj keď sa najskôr získala látka v kryštalickej forme označená ako „forma A“, po ďalšom výskume sa zistilo, že sa môže získať najmenej jedna ďalšia kryštálová forma zlúčeniny, ktorá sa nazvala ako „forma B“, ktorá sa odlišuje od formy A v mnohých charakteristikách, ako je napríklad jej rozpustnosť. Predložený vynález sa teda týka zlúčeniny vzorca (I) alebo jej tautomémej alebo solvatovanej formy v kryštalickej forme samej obebe a presnejšie sa týka formy A a formy B. Forma A je výhodná.

Forma A je pri teplote miestnosti normálne v hydratovanej forme. Hydratovaná forma sa môže vratne dehydratovať zohriatím na 110 °C. Takto zostane vo forme A. Hydratovaná forma je pri teplote miestnosti stabilnejším stavom formy A. Forma B je normálne, dokonca aj pri teplote miestnosti, v nehydratovanej forme. Je termodynamicky stabilnejšou formou, ako je forma A.

Kryštálová forma sa podľa vynálezu definuje ako „kryštalograficky čistá“, keď obsahuje najviac 0,5 % hmotnostných, napríklad najviac 0,1 % hmotnostných, inej formy. Napríklad „kryštalograficky čistá forma A“ obsahuje asi < 0,5 % hmotnostných, napríklad asi s 0,1 % hmotnostných formy B a/alebo amorfnej formy.

Prostriedky formy A a B sa môžu pripraviť pomocou bežných postupov, pričom sa vychádza z amorfného materiálu alebo z formy B alebo A, v tomto poradí, alebo z ich zmesi. Bežne sa východisková látka rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle a z nej sa kryštalizuje alebo rekryštalizuje za podmienok, ktoré zvýhodňujú vznik formy A alebo formy B, pričom vzniká kryštalograficky čistá forma A alebo forma B.

Predložený vynález zahŕňa variant postupu prípravy zlúčeniny vzorca (I) alebo jej tautomémej, alebo solvatovanej formy, v kryštálovej forme A, pričom tento variant postupu zahŕňa vhodné prevedenie zlúčeniny vzorca (I) v inej forme, ako je forma A alebo jej tautoméma, alebo solvatovaná forma, z roztoku za podmienok vyvolávajúcich prednostnú kryštalizáciu formy A. Vynález sa týka tiež zlúčeniny vzorca (I) vo forme A pripravenej pomocou tohto variantu spôsobu.

Na druhej strane predložený vynález zahŕňa variant spôsobu prípravy zlúčeniny vzorca (I) alebo jej tautomérnej, alebo solvatovanej formy, v kryštálovom stave B, pričom tento variant postupu zahŕňa vhodné prevedenie zlúčeniny vzorca (I) v inej forme, ako je forma B, z roztoku za podmienok vyvolávajúcich prednostnú kryštalizáciu formy B. Vynález sa týka tiež zlúčeniny vzorca (I) vo forme B pripravenej pomocou tohto variantu spôsobu.

Na prípravu formy A sa východisková látka bežným spôsobom rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle, výhodne v zmesi etanol/voda, výhodne v pomere 9,5 : 0,5 (objemovo). Teplota sa pri rozpúšťaní pohybuje v rozsahu 60 °C až 75 °C, výhodne je 70 °C. Hmotnostný pomer východiskovej látky k rozpúšťadlu je výhodne 1 : 5 až 1 : 6, výhodne 1 : 5. Roztok sa filtruje a potom sa ochladí na zníženú teplotu, výhodne 70 až 20 °C, výhodnejšie asi 10 °C a opatrne sa pridá rozpúšťadlo, v ktorom je forma A nerozpustná. Týmto spôsobom vznikne presýtený roztok. Aj keď môže forma kryštalizovať spontánne, presýtený roztok sa výhodne naočkuje niekoľkými kryštálmi kryštalograficky čistej formy A. Obvykle je výhodné kontrolovať čistotu očkovacích kryštálov pomocou mikroskopu na určenie teploty topenia. Ďalšie pridanie rozpúšťadla pri opatrnom miešaní vedie k vylúčeniu väčšieho množstva formy A. Ukázalo sa, že nízka teplota, to znamená nižšia ako 20 °C a naočkovanie kryštalograficky čistými kryštálmi formy A pôsobí preventívne proti vzniku kryštálovej formy B. Veľmi dlhé miešanie môže byť kontraproduktívne, najmä pri teplote vyššej ako 10 °C, pretože forma B je termodynamicky stabilnejšia.

Obvykle sa ako predbežný krok východiskový materiál výhodne dobre rozpustí v polárnom organickom rozpúšťadle, ako je alkohol, napríklad metanol, etanol, izopropanol, výhodne etanol, alebo v acetóne, najmä v acetóne, výhodne pri teplote varu a rozpúšťadlo sa odparí do sucha.

Na prípravu formy B sa východisková látka znova rozpusti v rozpúšťadle, ako je opísané pre formu A, výhodne v zmesi etanol/voda 9,5 : 0,5 (objemovo). Teplota pri rozpúšťaní sa znova pohybuje v rozsahu 60 až 75 °C, výhodne 70 °C a vzniknutý roztok sa filtruje. Pomer východiskovej látky k rozpúšťadlu je trocha nižší, ako pri príprave formy A, aje výhodne 1 : 7 (objemovo). Ochladzuje sa však na vyššiu teplotu, ako pri príprave formy A, výhodne vyššiu ako 20 °C, napríklad 25 až 30 °C a ďalšie spracovanie sa tiež uskutoční asi pri tejto teplote alebo podobnej teplote. Znova sa môžu pridať očkovacie kryštály formy B, čo uľahčí kryštalizáciu a umožní širší rozsah, napríklad teploty. Ukázalo sa, že rýchlosti vzniku presýteného roztoku má tiež vplyv na konečný výsledok, keď pri rýchlejšom presýtení dochádza k vzniku väčšieho množstva kryštálov vo forme B.

Solvát, napríklad hydrát, sa môže bežným spôsobom previesť na zodpovedajúcu nesolvátovanú formu a naopak, napríklad vhodným zohriatím solvátovanej formy alebo ochladením nesolvátovanej formy kryštálovej formy, ktorá je citlivá na vznik solvátu.

Obidve identifikované kryštálové formy sa charakterizovali pomocou nasledujúcich fyzikálno chemických údajov:

1. Forma A

- vzhľad: biely až špinavobiely, jemný kryštalický prášok (zo zmesi etanol/voda);

- teplota topenia určená pomocou DSS (10°K/min.): začiatok topenia asi 132 °C;

- rozpustnosť (pri 5 °C): voda: nerozpustná metanol, etanol, etylacetát, dietyléter, diizopropyléter: > 100 mg/ml hexán: < 10 mg/ml

- rozpustnosť (pri 25 °C): acetón, acetonitril, etanol, etyl- acetát, izopropanol, metanol > 50 mg/ml; voda: < 1 mg/ml;

- rozpustnosť v olejovej fáze krému (oleylalkohol/myglyol 812*4:6): 2,49%;

- chemická čistota: 98,5 %;

- termogravimetria: strata hmotnosti pri sušení do roztavenia: 1,46 % (Carl Fischerova titrácia);

- morfológia (SEM): tyčinky a aglomeráty (1 až 100 /pm);

- hygroskopickosť (absorpcia určená pomocou termogravimetrie): 1,49 % (1 deň, 92 % r.h.); 1,78 % (1 týždeň, 25 °C, 75 % r.h.);

- DSC krivka: pozri obrázok 1 (Perkin Elmer DSC-7 diferencíálny skenovací kalorimeter; meranie od 40 °C do 200 °C, rýchlosť zohrievania pri snímaní 10°K/min.);

- FT-IČ spektrum: pozri obr. 3 a 5 (PE FT-IČ spektrometer 1725X; KBr, parafínový olej; rozsah snímania 4000 až 400 cm'¹);

- práškový rôntgenogram: pozri obr. 6 (Scintag XDS 2 000 práškový difraktometer; Scintag, Šanta Čiara, CA, USA); rýchlosť snímania 0,5° alebo l°/min. (hodnota 2 théta).

2. Forma B

- teplota topenia určená pomocou DSS (10°K/min.): začiatok topenia asi 159 °C;

- rozpustnosť (pri 5 °C): voda: 0,3 mg/ml metanol: 46,3 mg/ml etanol: 18,1 mg/ml etylacetát > 50 mg/ml dietyléter: 9,3 mg/ml diizopropyléter: 1,9 mg/ml hexán: 0,8 mg/ml

- rozpustnosť (pri 25 °C): voda: 0,4 mg/ml metanol: > 50 mg/ml etanol: 34,4 mg/ml etylacetát >50 mg/ml dietyléter: 16,3 mg/ml diizopropyléter: 3,1 mg/ml hexán: 1,5 mg/ml

- rozpustnosť v olejovej fáze TMF krému (oleylalkohol/myglyol 812*4 : 6): 0,37 %;

- chemická čistota: 99,9 %;

- termogravimetria: strata hmotnosti pri sušení do roztavenia: < 0,05 %;

- morfológia (SEM): ihly;

- hygroskopickosť (absorpcia určená pomocou termogravimetrie): 1 deň, 92 % r.h.; 1 týždeň, 25 °C, 75 % r.h., žiadna;

- DSC krivka: pozri obrázok 2 (Perkin Elmer DSC-7; meranie od 40 °C do 200 “C, rýchlosť zohrievania pri snímaní 10°K/min.);

- FT-IČ spektrum: pozri obr. 4 a 5 (PE FT-IČ spektrometer 1725X; KBr, parafínový olej; rozsah snímania4000 až 400 cm);

- práškový rôntgenogram: pozri obr. 6 (Scintag XDS 2000 práškový difraktometer) ; rýchlosti snímania 0,5° alebo 10°K'min. (hodnota 2 théta).

3. Na porovnanie je na obrázku Ί uvedené FT-IČ spektrum amorfnej formy.

Údaje o charakteristických vlastnostiach všetkých foriem sú uvedené ďalej:

- optická otáčavosť [a]n²⁰ = -48,0° (± 0,2°) (deuterochloroform);

- TLC: R_f= 0,18 (silikagél; hexán/etylacctát 2:1);

Rf= 0,62 (silikagél; hexán/etylacetát 1:1);

- H-NMR (deuterochloroform): dva konforméry (Z: E = 1 :2).

Charakteristické signály pre hlavný konformér δ [ppm]: 5,35 (d, J = 1,7 Hz, H-26), 5,12 (d, J = 9,0 Hz, H-29), 5,05 (d, J = 9,4 Hz, H-20), 4,60 (d, J = 5,0 Hz, H-2), 4,56 (m, w_i;2 = 10 Hz, H-33), 4,43 (d, J = 13,8 Hz, H-6e), 3,66 (dd, J = 9,6 Hz, J = 1,0 Hz, H-14), 3,92 (m, H-24), 2,80 (dd, J = = 15,9 Hz, J=2,7 Hz, H-23a);

- ¹³C-NMR (deuterochloroform): dva konforméry (Z : E = = 1 : 2).

Signály hlavného konforméru δ [ppm]: 213,7 (C-22), 196,3 (C-9), 169,1 (C-l), 164,8 (C-8), 138,8 (C-19), 132,5 (C-28), 129,2 (C-29), 122,0 (C-20), 97,0 (C-10), 79,2 (C-32), 76,7 (C-26), 75,2 (C-15), 73,7 (C-14), 72,9 (C-13), 70,2 (C-24), 59,3 (C-33), 56,7 (C-2), 54,7 (C-21), 48,6 (C-18), 39,2 (C-6), 42,7 (C-23), 39,4 (C-25), 34,7 (C-30), 34,6 (C-l 1), 32,8 (C-12), 32,1 (C-35), 31,7 (C-34), 27,7 (C-3), 26,4 (C-17), 25,5 (C-31), 24,5 (C-5), 24,2 (C-36), 21,1 (C-4), 20,6(17-Me), 16,2 (11-Me), 15,9 (19-Me), 14,2 (28-Mc), 11,7 (C-37), 9,3 (25-Me).

V už uvedených NMR spektrách sú atómy uhlíka číslované spôsobom uvedeným vo vzorci (lc):

SK 285665 Β6

(Ic)

Skratky:

DMSO: dimetylsulfoxid

DSC: diferenčná skanovacia kalorimetria

FT-IČ: infračervené spektrum s Fouriérovou transformáciou

1.1.: teplota topenia

r. h.: relatívna vlhkosť

SEM: riadkovacia elektrónová mikroskopia

T: transmisia

TG: termogravimetria

THF: tetrahydrofurán

TLC: chromatografia na tenkej vrstve

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1: DSC krivka formy A (hydrát).

Obr. 2. DSC krivka formy B (bezvodá).

Obr. 3: FT-IČ spektrum formy A (hydrát). (% T = percentuálna hodnota transmisie).

Obr. 4: FT-IČ spektrum formy B.

(% T = percentuálna hodnota transmisie).

Obr. 5: porovnanie FT-IČ spektier foriem A (hydrátu) a B (% T = percentuálna hodnota transmisie). Forma A (hydrát) = graf začína pri 90 % T.

Forma B = graf začína pri 82 % T.

Obr. 6: práškový rôntgenogram foriem A (hydrát) a B Mod. A = forma A (hydrát).

Mod. B = forma B.

ľavá zvislá os: intenzita (cps = počet impulzov za sekundu) pravá zvislá os: relatívna intenzita (% = percentuálna hodnota) horná vodorovná os: rezolúcia dolná vodorovná os: uhol 2 théta (v stupňoch)

Obr. 7: FT-IČ spektrum amorfnej formy (% = percentuálna hodnota transmisie)

Zlúčenina vzorca (I) v amorfnej forme je známa ako liečivo, najmä na použitie ako protizápalové, imunosupresivne a antiproliferativne činidlo, ktoré pôsobí tak systémovo, ako aj miestne. Úprava do vhodnej galenickej formy na farmaceutické použitie, ako sú krémy, emulzie a masti, je ťažká. Amorfná forma zlúčeniny má určité problémy súvisiace so stabilitou, napríklad v sypkej forme a obvykle nie je vhodná na galenické spracovanie v porovnaní s presne definovanou, kryštálovou formou, napríklad z dôvodu degradácie sypkého materiálu, hygroskopickosti, rozpúšťacich vlastností a celkovej čistoty látky.

Na použitie pri príprave galenických foriem tejto zlúčeniny je teda potrebné nájsť vhodný spôsob prípravy jej formy, pomocou ktorej by sa prekonali už uvedené nevý hody, súvisiace s prípravou foriem na miestne použitie, napríklad krémov, emulzií a mastí. Pri príprave týchto foriem je potrebné, aby bola zlúčenina prítomná v normálne rozpustenom stave, ale za prísne kontrolovaných podmienok. Pri príprave krému sa zistilo, že sa forma A rozpúšťa v olejovej fáze asi za 10 minút, zatiaľ čo forma B asi za 6 hodín. Je veľmi výhodné použiť kryštalický produkt, ktorý má dobre definovanú charakteristiku, pričom sa výhodne použije forma A alebo forma B, v závislosti od konkrétnej aplikácie, napríklad sa použije forma A, keď sa požaduje nižšia teplota topenia alebo výraznejšia rozpustnosť, alebo forma B, keď sa požaduje vyššia teplota topenia alebo termodynamicky stabilnejší produkt pri teplote miestnosti.

Kryštalická forma má napríklad nasledujúce výhodné vlastnosti:

- menší zvyšok rozpúšťadla vo výslednom liečive v akejkoľvek forme, ako je rozpustený stav;

- čistiaci efekt pomocou ďalšej kryštalizácie;

- vyššia stabilita liečiva a

- ľahšia manipulácia vo výrobnom závode.

Zlúčenina vzorca (I) v kryštalickej forme sa môže na podávanie upraviť akýmkoľvek bežným spôsobom. Výhodne je vo výslednej galenickej forme v rozpustenom stave.

Predložený vynález zahŕňa tiež farmaceutické prostriedky obsahujúce zlúčeninu vzorca (I) alebo jej tautomému, alebo solvátovanú formu, v kryštalickej forme, ako je forma A alebo forma B, alebo farmaceutické prostriedky akýmkoľvek spôsobom pripravené z tejto zlúčeniny. Tiež zahŕňa zlúčeninu vzorca (I) alebo jej tautomému, alebo solvátovanú formu, v kryštalickej forme na použitie ako liečivo alebo na použitie pri príprave liečiv s protizápalovou, imunosupresívnou a antiproliferatívnou aktivitou.

Nasledujúce príklady ilustrujú vynález, ale ho neobmedzujú. Keď nie je uvedené inak, všetky teploty sú uvedené v stupňoch Celzia.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Kryštalický 33-epichlór-33-deoxyaskomycín (forma A)

K roztoku 27 g amorfného 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu (bezfarebná penová živica) v 180 ml etanolu sa pri teplote miestnosti opatrne pridá voda, pokiaľ sa neobjaví prechodné zakalenie (asi 65 ml vody). Roztok sa nechá v pokoji 16 hodín pri 4 °C. Vylúčia sa bezfarebné kryštály. Pridá sa 10 ml vody a zmes sa nechá v pokoji ďalšie 4 hodiny pri 4°C. Kryštalická látka sa oddelí pri nasávaní, premyje sa ľadovo studenou zmesou etanolu a vody 1 : 1 (objemovo) a suší sa pri zníženom tlaku (1,6 kPa) 20 hodín pri teplote miestnosti. Získa sa zlúčenina uvedená v názve (výťažok 18 g; 1.1. 135 - 136 °C; chemická čistota s 98 %, to znamená množstvo nečistôt na alebo pod analyticky detegovateľným množstvom podľa HPLC; hydrát).

Príklad 2

Rozpustenie formy A a B v 1 % kréme

a) Rozpustnosť formy A v krémovom prostriedku sa pri teplote miestnosti odhaduje asi na 1 %. Pri výrobe krému sa liečivo úplne rozpustí v olejovej fáze pri 60 - 75 °C. Aby sa zistilo, či a po akom čase skladovania rozpustené liečivo bude z 1 % krému kryštalizovať, testovalo sa niekoľko dávok kryštálov. Výskum 10 dávok ukazuje, že sa neobjavili žiadne kryštály po výrobe, ani po skladovaní pri 5, 25 a 40 °C. Dokonca aj vo vzorkách, ktoré sa podrobili testu s opakovaním teplôt počas 3 mesiacov, sa nedetegovali žiadne kryštály. Len pri jednom prostriedku (1 %) liečiva sa po jednom roku skladovania pri 25 °C objavilo malé množstvo kryštálov, čo ukazuje, že 1 % krém je hraničný, keď ide o nasýtenosť liečivom.

Liečivo použité v už uvedených dávkach a prostriedkoch obsahovalo 100 % formy A.

b) Aby sa určilo, či sa liečivo obsahujúce formu B môže celkom rozpustiť pri výrobe krému a aby sa zhodnotilo správanie pri dlhodobej kryštalizácii, pripravilo sa niekoľko prostriedkov (krém, 1 %) obsahujúcich 0 %, 1 %, 5 % a 10 % formy B vzhľadom na celkový obsah zlúčeniny vzorca (I) a podrobili sa testu stability pri rôznych teplotách.

V priebehu prípravy týchto prostriedkov sa zistilo, že rýchlosť rozpúšťania formy B v olejovej fáze krému je oveľa pomalšia ako rýchlosť rozpúšťania kryštálovej formy A. Formy sa testovali ihneď po vyrobení a zistilo sa, že neobsahujú žiadne zvyšné kryštály.

Aby sa získali informácie o správaní sa týchto foriem pri dlhodobom skladovaní, testovala sa stabilita vzoriek po 6 týždňoch, 3, 6 a 9 mesiacov. Z výsledkov je zrejmé, že pri dlhšom skladovaní sa neobjavujú žiadne kryštály.

Príklad 3

Kryštálová forma A 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu (z roztoku etanol/izopropanol/voda) g 33-epichlór-33-deoxyaskomycinu formy B (alebo alternatívne surová forma A alebo amorfná látka) sa rozpustí v pomere 1 : 5 v 10 g zmesi etanol/izopropanol/voda 9 : 0,5 : 0,5 pri 70 °C a zmes sa filtruje na 0,5 gm filtri. Vzniknutý roztok už bez kryštalizačných zárodkov sa nechá ochladiť na 10 “C, pridá sa voda (25 % hmotnostných vzhľadom na množstvo produktu) do presýtenia roztoku. Očkovanie sa uskutoční pomocou 0,0 6 g kryštálov formy A (po kontrole pomocou tepelného mikroskopu) a v priebehu 4 hodín pri 10 “C sa pomaly pridá voda (7,5 násobný prebytok vzhľadom na množstvo produktu) a potom sa roztok mieša 2 hodiny pri tejto teplote. Získa sa zlúčenina uvedená v názve (hydrát; 9,3 g).

Je vhodné očkovať kryštály formy A v kryštálograficky čo najčistejšej forme. Očkovanie kryštálmi formy A obsahujúcimi 2 % kryštálov formy B ako nečistoty môže viesť k získaniu kryštálov formy A obsahujúcich 20 % kryštálov formy B ako nečistoty. Pri nižšej teplote sa vznik termodynamicky stabilnejšej formy B zreteľne potláča: teda očkovanie pri 0 C zmesou 1 : 1 obidvoch foriem A a B vedie k produktu obsahujúcemu 75 % formy A.

Príklad 4

Kryštálová forma B 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu (z roztoku etanol/izopropanol/voda) g 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu formy A (hydrátu) (alebo alternatívne surovej formy B, alebo amorfnej látky) sa rozpustí v zmesi 1 : 7 (hmotnostne) v 75 g zmesi etanol/izopropanol/voda 9 : 0,5 : 0,5 (objemovo) pri 70 °C a zmes sa sfiltruje. Vzniknutý roztok sa nechá ochladili na 30 °C a prípadne sa naočkuje 0,1 g kryštálov formy B. V priebehu 4 hodín sa opatrne pridá voda (3,5-násobný prebytok vzhľadom na hmotnosť produktu); získa sa zlúčenina uvedená v názve (24,6 g).

Príklad 5

Kryštálová forma A 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu (z roztoku etanol/izopropanol/voda)

Roztok 94,5 g surového 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu (získaného napríklad po chromatografii) (obsahujúceho rôzne množstvá formy A a/alebo formy B a/alebo amorfnej látky) v 1500 ml acetónu sa odparí pri 48 až 52 °C (40 až 5 kPa). Vzniknutá amorfná pena sa rozpustí v 500 ml zmesi etanol/izopropanol 9,5 : 0,5 (objemovo). Roztok sa odparí pri 48 až 52 °C (40 až 5 kPa). Vzniknutá pena sa rozpustí v 400 ml zmesi etanol/izopropanol 9,5 : : 0,5 (objemovo) a horúci roztok sa filtruje na 0,45 gm filtri. Roztok sa v priebehu 30 až 40 minút ochladí na 20 až 25 °C, pridá sa 200 ml vody a zmes a naočkuje kryštálmi formy A. Miešanie pokračuje 1 hodinu pri 20 až 25 °C. Vznikne suspenzia, ktorá sa ochladí na 0 až 5 °C a mieša sa ďalšie 4 hodiny. Kryštály sa filtrujú a premyjú sa 300 ml ochladenej zmesi etanol/voda 1 : 3 (objemovo). Po sušení pri 45 až 50 °C (1 až 2 kPa, 16 hodín) sa získa zlúčenina uvedená v názve (hydrát; bezfarebné kryštály).

Príklad 6

Kryštálová forma A 33-epíchlór-33-deoxyaskomycínu (z roztoku formy B v acetóne)

94,5 g 33-epichlór-33-deoxyaskomycínu formy B sa rozpustí v 1500 ml vriaceho acetónu. Acetónový roztok (bez očiek kryštálov formy B) sa potom spracuje tak, ako je opísané v príklade 5. Získa sa zlúčenina uvedená v názve (hydrát; bezfarebné kryštály).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina vzorca (I) alebo jej tautoméma, alebo solvatovaná forma, v kryštalickej forme.
2. Zlúčenina podľa nároku 1 v kryštalickej forme A, ktorá má FT-IC spektrum s charakteristickými pásmi pri 3651,3458 a 3311 cm'.
3. Zlúčenina podľa nároku 1 v kryštalickej forme B, ktorá má FT-IC spektrum s charakteristickými pásmi pri 3577 a 3487 cm'¹.
4. Spôsob prípravy kryštalickej zlúčeniny podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že zahŕňa príslušné prevedenie amorfnej zlúčeniny vzorca (I) z jej roztoku, v podmienkach vyvolávajúcich kryštalizáciu, rozpustením amorfnej zlúčeniny vzorca (1) ako je definovaná v nároku 1 alebo jej tautomémej, alebo solvátovanej formy v rozpúšťadle pri teplote od 60 °C do 75 °C, filtráciou výsledného roztoku, ochladením, a pridaním kvapaliny, v ktorej je výsledná kryštalická forma nerozpustná, predovšetkým na prípravu zlúčeniny vo forme A, prevedením zlúčeniny vzorca (I) v inej ako forme A, alebo jej tautomémej, alebo solvátovanej formy, z jej roztoku v podmienkach vyvolávajúcich prednostnú kryštalizáciu formy A, a to rozpustením východiskovej zlúčeniny vzorca (I) v rozpúšťadle pri teplote od 60 °C do 75 °C, pričom pomer východiskového materiálu k rozpúšťadlu je od 1 : 5 do 1 : 6 na základe hmotnosti, filtrovaním výsledného roztoku a potom ochladením pod 20 °C, a pridaním kvapaliny, v ktorej je výsledná forma A nerozpustná, výhodne naočkovaním roztoku kryštálmi formy A, pričom kryštalizácia sa uskutočňuje pri rovnakej teplote, a na prípravu zlúčeniny vo forme B, prevedením zlúčeniny vzorca (I) v inej ako forme B, alebo jej tautomémej, alebo solvátovanej formy, zjej roztoku v podmienkach vyvolávajúcich prednostnú kryštalizáciu formy B, a to rozpustením východiskovej zlúčeniny vzorca (I) v rozpúšťadle pri teplote od 60 °C do 75 °C, pričom pomer východiskového materiálu k rozpúšťadlu je 1 : 7 na základe hmotnosti, filtrovaním výsledného roztoku a potom ochladením nad 20 °C, a pridaním kvapaliny v ktorej je výsledná forma B nerozpustná, výhodne naočkovaním roztoku kryštálmi formy B, pričom kryštalizácia sa uskutočňuje pri rovnakej teplote.
5. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje kryštalickú zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3.
6. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje alebo je pripraviteľný zo zlúčeniny vzorca (I) podľa nárokov 1 až 3.
7. Kryštalická zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3 na použitie ako farmaceutikum alebo na použitie na prípravu liečiva.
8. Použitie kryštalickej zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3 na prípravu liečiva na použitie ako protizápalové, imunosupresívne alebo antiproliferatívne činidlo na liečenie ochorení, pri ktorých je účinná terapia so zlúčeninou vzorca (I) alebo jej tautomémou, alebo solvátovanou formou.