JP2017140058A - 重鎖抗体を作製するマウス - Google Patents
重鎖抗体を作製するマウス Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017140058A JP2017140058A JP2017106527A JP2017106527A JP2017140058A JP 2017140058 A JP2017140058 A JP 2017140058A JP 2017106527 A JP2017106527 A JP 2017106527A JP 2017106527 A JP2017106527 A JP 2017106527A JP 2017140058 A JP2017140058 A JP 2017140058A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- heavy chain
- mouse
- domain
- gene
- human
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 title abstract description 85
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 abstract description 316
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 275
- 102100021651 SUN domain-containing ossification factor Human genes 0.000 abstract description 246
- 238000012217 deletion Methods 0.000 abstract description 67
- 230000037430 deletion Effects 0.000 abstract description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 35
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 abstract description 19
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 abstract description 19
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 7
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 abstract description 3
- 101150116855 CH1 gene Proteins 0.000 abstract description 2
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 111
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 65
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 40
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 38
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 36
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 36
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 30
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 27
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 27
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 23
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 21
- 101150008942 J gene Proteins 0.000 description 20
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 19
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 19
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 19
- 101150097493 D gene Proteins 0.000 description 16
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 16
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 14
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 13
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 12
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 11
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 11
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 11
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 10
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 9
- 101150117115 V gene Proteins 0.000 description 9
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 9
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 9
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 8
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 8
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 102100034428 Dual specificity protein phosphatase 1 Human genes 0.000 description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 7
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 7
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 6
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 6
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 6
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 6
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 6
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 6
- 210000001948 pro-b lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 102100027088 Dual specificity protein phosphatase 5 Human genes 0.000 description 5
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 5
- 102000002663 Surrogate Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 5
- 108010018324 Surrogate Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 5
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 4
- 101100370002 Mus musculus Tnfsf14 gene Proteins 0.000 description 4
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 102100027272 Dual specificity protein phosphatase 8 Human genes 0.000 description 3
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 108010060686 dual specificity phosphatase 12 Proteins 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 3
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 102220283785 rs1344101243 Human genes 0.000 description 3
- 102220054109 rs72474224 Human genes 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 101710117290 Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 2
- 102220486094 Alpha-galactosidase A_W47G_mutation Human genes 0.000 description 2
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 2
- 102220574842 Gap junction alpha-3 protein_L11S_mutation Human genes 0.000 description 2
- 108700019828 Hinge Exons Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000690301 Homo sapiens Aldo-keto reductase family 1 member C4 Proteins 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 101001057612 Homo sapiens Dual specificity protein phosphatase 5 Proteins 0.000 description 2
- 101000998953 Homo sapiens Immunoglobulin heavy variable 1-2 Proteins 0.000 description 2
- 101001116548 Homo sapiens Protein CBFA2T1 Proteins 0.000 description 2
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 2
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 2
- 208000025750 heavy chain disease Diseases 0.000 description 2
- 102000054751 human RUNX1T1 Human genes 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 102220201545 rs886041401 Human genes 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011714 129 mouse Methods 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 101150058342 CH2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 238000012220 PCR site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102000000434 Pre-B Cell Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010016231 Pre-B Cell Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000013377 clone selection method Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 102000043381 human DUSP5 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000000126 in silico method Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007898 magnetic cell sorting Methods 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 239000003656 tris buffered saline Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0276—Knock-out vertebrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
- C07K16/462—Igs containing a variable region (Fv) from one specie and a constant region (Fc) from another
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
- A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
- A01K2217/075—Animals genetically altered by homologous recombination inducing loss of function, i.e. knock out
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
【解決手段】遺伝子改変された非ヒト動物、ならびにそれを作製および使用するための方法および組成物を提供する。ここで、該遺伝子改変は、IgG、IgA、IgDおよび/またはIgEの免疫グロブリン定常領域のCH1遺伝子における欠失(任意選択で、ヒンジ領域における欠失)を含み、該マウスは機能性IgMを発現できる。遺伝子改変マウス、例えば、機能性IgM遺伝子を有し、IgMではない重鎖定常ドメイン内、例えば、IgG重鎖定常ドメイン内のCH1ドメインおよびヒンジ領域の欠失を有するように改変されたマウスを記載する。ヒト可変/マウス定常キメラ重鎖抗体(軽鎖を欠いている抗体)、完全マウス重鎖抗体、または完全ヒト重鎖抗体が作製される遺伝子改変マウスを提供する。
【選択図】なし
Description
本発明の分野は、重鎖抗体が作製される遺伝子改変された非ヒト動物、特に、免疫グロブリンγ(IgG)遺伝子のCH1ドメイン(またはCH1ドメインとヒンジ領域)をコードしている配列内にヌクレオチド配列の欠失を含むが、機能性CH1ドメインを欠いていないIgMを発現できる遺伝子改変された動物、特に、野生型IgM分子(すなわち、CH1ドメインを有する)の作製能を有するが、機能性CH1ドメイン(またはCH1ドメインとヒンジ領域)が欠如している重鎖IgG抗体が作製されるマウスである。
ほとんどの動物では、正常な免疫グロブリン重鎖は、その同系の(cognate)軽鎖とカップリングされている場合でのみ良好に発現される。ヒトでは、重鎖可変部、CH1、または重鎖可変部とCH1ドメインの配列を欠いている機能不全性の重鎖によって症状発現する重鎖病で孤立重鎖が見られる。軽鎖が欠如している重鎖は、特定の種の魚類およびラクダに見られる。かかる重鎖は、機能性CH1ドメインを欠いており、重鎖可変ドメインにおいて非ヒト特徴を有する。ラクダまたは特定の種の魚類に見られるVHHドメインを模倣するラクダ化遺伝子を発現するようにマウスを改変することにより(一部において、IgMおよびIgG CH1ドメインを除去し、重鎖可変領域をラクダおよび/または特定の種の魚類のものと類似するように適合させることにより)、ラクダ化抗体を作製する試みがなされている。しかしながら、ラクダ化抗体では、非ラクダ動物において免疫応答が誘導されることが予測される。
遺伝子改変された細胞、非ヒト胚、非ヒト動物ならびにそれらを作製および使用するための方法および組成物を提供する。ここで、該動物は、免疫グロブリンG(IgG)において機能性CH1配列を欠くように遺伝子改変され、任意選択で、該改変IgGにおいて機能性IgGヒンジ領域を欠くように改変され、ここで、該細胞、胚および動物には機能性IgM CH1配列が含まれている。一部の態様では、該マウスは、内因性マウス免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントの1つ以上または全部の、1つ以上のヒト免疫グロブリン重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含むものである。一部の態様では、内因性マウスV、DおよびJ遺伝子セグメントの全部が、1つ以上のヒトV、1つ以上のヒトDおよび1つ以上のヒトJ遺伝子セグメントで置き換えられている。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される:
(項目1)
生殖系列遺伝子改変を含むマウスであって、該生殖系列遺伝子改変は、IgGのCH1をコードしているヌクレオチド配列の欠失を含み、該マウスは、
CH1ドメインを含むIgMを発現し、
CH1ドメインおよび軽鎖を欠いているIgG抗体を血清中で発現し、かつ
CH1ドメインをコードしている配列を含むIgG mRNAを発現できない、
マウス。
(項目2)
前記CH1をコードしている前記ヌクレオチド配列の前記欠失が、IgG1遺伝子内に存在している、項目1に記載のマウス。
(項目3)
機能性免疫グロブリン軽鎖遺伝子の遺伝子座を含む、項目1に記載のマウス。
(項目4)
軽鎖を欠いている前記IgG抗体が、ヒト可変ドメインと、CH1ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目5)
軽鎖を欠いている前記IgG抗体が、マウス可変ドメインと、CH1ドメインを欠いているマウス定常ドメインとを含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目6)
IgG2a遺伝子の欠失を含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目7)
IgG2b遺伝子の欠失を含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目8)
IgG2a遺伝子の欠失およびIgG2b遺伝子の欠失を含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目9)
IgG2a遺伝子の欠失およびIgG2b遺伝子の欠失を含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目10)
1つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの1つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目11)
前記1つ以上のヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントがヒトVH1ファミリー遺伝子セグメントである、項目10に記載の遺伝子改変マウス。
(項目12)
前記VH1ファミリー遺伝子セグメントが、ヒトVH遺伝子セグメント1−8、1−18、および1−69のFR1、FR2およびFR3遺伝子セグメントと少なくとも90%同一であるFR1、FR2およびFR3領域を含む、項目11に記載の遺伝子改変マウス。
(項目13)
さらに、ヒトD遺伝子セグメントおよびヒトJ遺伝子セグメントを含む、項目11に記載の遺伝子改変マウス。
(項目14)
項目11に記載の遺伝子改変マウスであって、該マウスが、FR4をコードしている再構成免疫グロブリン遺伝子を含み、該FR4が、ヒトD1−7/J4、D3−16/J6、D4−4/J4、D6−6/J4、D6−6/J2、D6−7/J4、またはD6−19/J6によってコードされたFR4と少なくとも90%同一である、遺伝子改変マウス。
(項目15)
1つ以上の内因性マウス重鎖可変領域遺伝子セグメントの1つ以上のラクダ化ヒト重鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む、項目1に記載の遺伝子改変マウス。
(項目16)
マウスにおいて体細胞変異重鎖抗体を作製するための方法であって、該方法は、
a.マウスを抗原で免疫化する工程であって、ここで、該マウスは、再構成されていないヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントを含み、機能性IgG CH1ドメインをコードする少なくとも1つの対立遺伝子のヌクレオチド配列を欠いており、かつCH1ドメインを含むIgMを発現する、工程;
b.該マウスを、該抗原に対する免疫応答が起こるのに充分な条件下で維持する工程;および
c.該マウスから体細胞変異重鎖抗体を単離する工程であって、ここで、該体細胞変異重鎖抗体は、該ヒトまたはマウス重鎖免疫グロブリンの可変領域遺伝子セグメントに由来する可変ドメインを含み、かつ該抗原に特異的に結合する、工程
を含む、方法。
(項目17)
V、DおよびJ遺伝子セグメントの全部または実質的に全部の1つ以上のヒトV、ヒトDおよびヒトJ遺伝子セグメントでの置き換えを含む遺伝子改変マウスであって、該1つ以上のヒトV、DおよびJ遺伝子セグメントは、内因性マウス遺伝子座でマウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座に作動可能に連結されており、該マウス重鎖定常領域遺伝子の遺伝子座は、完全長IgM遺伝子、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3およびその組合せから選択されるIgG遺伝子内のCH1ドメインをコードしているヌクレオチド配列内に欠失を含むIgG遺伝子を含み、該マウスは、CH1領域を有するIgMを含むB細胞受容体を発現し、該IgMは、同系のλまたはκ軽鎖と会合している重鎖を含む、遺伝子改変マウス。
(項目18)
前記1つ以上のヒトV、DおよびJ遺伝子セグメントが、VH1、VH3、VH4およびその組合せから選択される可変領域ファミリー由来のヒト遺伝子セグメントを含む、項目17に記載の遺伝子改変マウス。
(項目19)
前記1つ以上のヒト遺伝子セグメントが、1−2、1−8、1−18、1−46、1−69、3−21、3−72、4−59およびその組合せから選択される、項目18に記載の遺伝子改変マウス。
(項目20)
前記1つ以上のヒトV、DおよびJ遺伝子セグメントが、D1−7、D3−16、D4−4、D6−6、D6−7、D6−19、J2、J3、J4およびその組合せを含む、項目18に記載の遺伝子改変マウス。
詳細説明
本発明は記載の特定の方法および実験条件に限定されず、したがって、方法および条件は種々であり得る。本明細書で用いる専門用語は、特定の実施形態を説明する目的のためにすぎず、本発明の範囲は特許請求の範囲によってのみ限定されるため、限定を意図するものでない。
CH1ドメインを欠いている抗体、例えば、重鎖抗体、すなわち、軽鎖を欠いている抗体を作製する遺伝子改変された非ヒト動物を提供する。該遺伝子改変された非ヒト動物は、機能性免疫グロブリン重鎖ドメイン(CH1ドメイン)、例えば、IgG1 CH1ドメインの欠如を含む遺伝子改変を含むものであり、一部の実施形態では、機能性CH1ドメインを欠いている該免疫グロブリン重鎖においてヒンジ領域の欠失を含むさらなる改変を含むものであり、該非ヒト動物は機能性IgMを発現する。他の改変としては、IgG1およびIgM以外のアイソタイプを非機能性にすること、例えば、IgD、IgG3、IgG2a、IgG2b、IgAおよびIgEに対して遺伝子における欠失、または遺伝子の欠失を行なうことが挙げられる。また、遺伝子改変された非ヒト胚、細胞、ならびに非ヒト動物、非ヒト胚および細胞を作製するための標的化構築物も提供する。
ラクダ類、特定の魚類および病的状態における観察結果により、ある状況下では、同系の軽鎖の非存在下において、重鎖定常領域のCH1ドメインを欠いている抗体が発現され得ることが示されているが、抗体産生B細胞の正常な発生には、一般的にCH1ドメインの存在が必要とされる。IgMを含む重鎖アイソタイプにはすべてCH1ドメインが含まれている。サロゲート軽鎖および同系の軽鎖はともに、IgMの状況の重鎖のCH1ドメインを介して所与の重鎖と相互作用すると考えられる。重鎖抗体の発生が構造の完全性またはIgMアイソタイプ重鎖の機能性に依存する範囲では、IgMの構造の完全性または機能の破壊は望ましくないであろう。
対象免疫原で非ヒト動物を免疫化することによる抗体の作製に充分な多様性をもたらすために、B細胞発生中に提示されたときにIgMの状況で有効に選択に残り得る適当な数の再構成された重鎖可変領域が維持されていることが望ましい。したがって、免疫グロブリン重鎖に非機能性CH1ドメインまたは非機能性CH1ドメインと非機能性ヒンジ領域を含む遺伝子改変された非ヒト動物は、両方のIgM対立遺伝子にCH1欠失を含むべきではない。
抗体はヒト治療薬として有用である。また、重鎖抗体、すなわち、軽鎖を欠いている抗体もヒト治療薬として有用である。重鎖抗体は軽鎖を欠いているため小型になり、したがって、軽鎖を含む抗体よりも良好な組織浸透を示すが、従来の抗体と比較すると類似した、またはより有利な薬物動態プロフィールを有し、類似したエフェクター機能が保持されていることが予測される。また、重鎖抗体は小型になるため、所与の容量でより高い用量での投与が可能になる。よく使用される抗体投与方法は皮下注射であり、所与の投薬量の抗体に対する投与容量の低減により、患者に有益性がもたらされ、大容量の皮下注射による合併症および痛みが回避され得る。
本発明者らは、通常のヒトまたはマウス重鎖可変領域(hVRまたはmVR)が、機能性CH1ドメインを欠いているIgGの状況のインビトロ系において発現され得ることを確立した。本発明者らは、野生型マウスIgMを有するマウスの再構成されていないhVRミニ遺伝子座からhVRを発現させた。発現されたhVRはCH1ドメインを欠いているIgG2b上にクローニングされ(その結果、hVR−IgG2bΔCH1が発現される)、hVR−IgG2bΔCH1構築物で一過的にトランスフェクトしたCHO細胞によって分泌され、野生型IgMを有するマウスにおいて選択されたhVRは、機能性CH1ドメインを欠いているIgGにスイッチされると、すなわち、重鎖抗体として細胞によって発現され分泌され得ることが有効に確立された。
本発明の重鎖抗体のヒト化型を生成させるためには、該改変についてホモ接合性である動物を抗原で免疫化し、動物の特異的免疫応答が確立されたら、該免疫化動物の脾臓の細胞を適当な不死細胞(例えば、骨髄腫細胞)と融合させてハイブリドーマ細胞を得る。あるいはまた、該免疫化動物のB細胞から直接抗体を得てもよい。ハイブリドーマ細胞(または例えば、単離したB細胞)由来の上清みを、酵素免疫測定法(ELISA)によって抗体の存在についてスクリーニングし、抗原に特異的な抗体が所望の特徴に基づいて選択され得る。
重鎖抗体が発現される動物を作製するための遺伝子改変は、実例としての該マウスを使用することにより簡便に示される。本発明による遺伝子改変マウスはさまざまな様式で作製され得、その具体的な実施形態を以下に論考する。
実施例1:重鎖抗体のインビトロ発現
分子生物学的手法(例えば、Maniatisら 1982.Molecular Cloning:A Laboratory Manual.Cold Spring Harbor Laboratory参照)を用いてヒト可変領域とマウスIgG2b(mIgG2b)定常領域と融合させ、キメラ重鎖構築物を作製した。各構築物のヒト可変遺伝子セグメントは、両方のエキソン(すなわち、リーダー配列+成熟配列)、(内因性マウス免疫グロブリン重鎖の遺伝子座の3つのhVR遺伝子セグメントでの置き換えを含むナイーブRAGマウスから単離されたIgMのhVRから同定)、全hDH遺伝子セグメント、および全hJH遺伝子セグメントを含む完全長ヒト可変遺伝子セグメントとした。IgM抗体の軽鎖はマウス軽鎖とした。
A.マウスIgG1−CH1−ヒンジ標的化ベクター(図3)の調製
VELOCIMMUNE(登録商標)マウス(後述)のES細胞由来のC57BL/6対立遺伝子に対して、マウスIgG1定常ドメインのCH1とヒンジ領域の欠失を導入するための標的化構築物を構築した。
VELOCIMMUNE(登録商標)マウス(後述)のES細胞由来の129/SvEvTac対立遺伝子に対してマウスIgG1定常ドメインのCH1の欠失を導入するための第2の標的化構築物を、この実施例のセクションAに記載のものと同様の様式で構築した。
A.IgG1−CH1−ヒンジ標的化ベクターでのマウスES細胞の標的化
マウスES細胞を、上記の標的化構築物(すなわち、IgG1遺伝子のCH1とヒンジ領域の欠失を導入する標的化構築物)で標的化した。ES細胞はVELOCIMMUNE(登録商標)マウス由来のものとした。このマウスは、129系統とC57BL/6系統の50/50混合型であり、マウス重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントの再構成されていないヒト重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む遺伝子改変を有する。C57BL/6との交配に使用した129系統は、マウス重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントのヒト重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む系統である。
同様の様式で、マウスES細胞を、実施例2のセクションB(図2も参照のこと)に記載のCH1標的化構築物で標的化した。ES細胞はVELOCIMMUNE(登録商標)マウス(129/SvEvTac系統とC57BL/6系統の50/50混合型であり、マウス重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントの再構成されていないヒト重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む遺伝子改変を有するマウス)由来のものとした。C57BL/6との交配に使用した129/SvEvTac系統は、マウス重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントのヒト重鎖および軽鎖可変領域遺伝子セグメントでの置き換えを含む系統である。
A.IgG1−CH1−ヒンジ欠失を有するマウス
上記の標的とされるES細胞をドナーES細胞として使用し、8細胞期のマウス胚にVELOCIMOUSE(登録商標)での方法によって導入した(例えば、米国特許第7,294,754号およびPoueymirouら(2007)F0 generation mice that are essentially fully derived from the donor gene−targeted ES cells allowing immediate phenotypic analyses Nature Biotech.25(1):91−99参照)。標的とされるC57BL/6 IgG1対立遺伝子を有するVELOCIMICE(登録商標)(完全にドナーES細胞に由来するF0マウス)を、欠失しているヒンジおよびCH1領域の上流および下流に位置する配列の存在を検出する変形型の対立遺伝子アッセイ(Valenzuelaら,上掲)を用いて遺伝子型分類することにより確認した。
同様の様式で、IgG1 CH1領域の欠失を有する標的とされるES細胞をドナーES細胞として使用し、8細胞期のマウス胚にVELOCIMOUSE(登録商標)での方法によって導入した(例えば、米国特許第7,294,754号およびPoueymirouら(2007)F0 generation mice that are essentially fully derived from the donor gene−targeted ES cells allowing immediate phenotypic analyses Nature Biotech.25(1):91−99参照)。標的とされる129SvEv/Tac対立遺伝子を有するVELOCIMICE(登録商標)(完全にドナーES細胞に由来するF0マウス)を、欠失しているCH1領域の上流および下流に位置する配列の存在を検出する変形型の対立遺伝子アッセイ(Valenzuelaら,上掲)を用いて遺伝子型分類することにより確認した。
A.IgG1−ΔCH1−Δヒンジマウス
CH1とヒンジの欠失を含むと上記で確認されたマウス幼獣と野生型幼獣を交配し、交配マウス由来の血清をウエスタンブロッティングのために調製し、血清中に発現されたいずれかのIgGを、抗mIgG1抗体を用いて同定した。簡単には、マウス血清の10μLの1:100希釈物を還元性SDS−PAGEに使用し、ゲルをPVDF膜に移した。ブロットを0.05%Tween−20を含む5%脱脂乳含有Tris緩衝生理食塩水(TBST;Sigma)で一晩ブロックし、TBSTで4回洗浄し(1回あたり5分間の洗浄)、次いで、一次抗体(HRPにコンジュゲートさせたヤギ抗mIgG1,Southern Biotech)(1%脱脂乳含有TBST中で1:1,000に希釈)に室温で2時間曝露した。ブロットを6回洗浄した(1回あたり5分間の洗浄)。ブロットを5分間、SuperSignal(商標) West Pico Chemiluminescent Substrate(Thermo Scientific)を用いて発色させ、次いでフィルムに1分間露光した。
同様の様式で、CH1欠失についてホモ接合性のマウス幼獣と野生型幼獣を交配した。交配マウス由来の血漿および血清(5匹のホモ接合型;2匹の野生型について)をウエスタンブロッティングのために調製し、血清中に発現されたいずれかのIgGを、抗mIgG1抗体を用いて同定した(上記のとおりに)。IgG1−ΔCH1欠失についてホモ接合性のマウス由来の血清および血漿のウエスタンブロットでは、混合物バンド:約45kD(CH1ドメインを欠いている一本鎖IgG1の予測サイズ)のバンド1つ、および約75kD(CH1ドメインを欠いている二量体IgGの予測サイズ)にバンド1つが示された(データ表示せず)。この結果は、一方または両方いずれかの重鎖の遺伝子座に由来するIgG1−ΔCH1重鎖が発現されるホモ接合性のVELOCIMICE(登録商標)と整合している。この結果により、機能性IgM遺伝子とCH1ドメインを欠いているIgG遺伝子を有する遺伝子改変マウスは、該動物の免疫系の末梢リンパ球画分において重鎖抗体を発現できることが確立される。
CH1−ヒンジ欠失についてヘテロ接合性のVELOCIMICE(登録商標)同士を交配し、該欠失についてホモ接合性のマウスを得た。4匹のマウス幼獣が、IgG1 ΔCH1−Δヒンジについてホモ接合性であると確認された。これらの4匹のマウスと野生型マウスを交配し、交配マウス由来の血清を、ウエスタンブロッティングのために調製し、血清中に発現されたいずれかのIgGを、抗mIgG1抗体を用いて同定した(上記のとおりに)。図9は、この実験で使用したPVDF膜から発色させたフィルムを示す。血清を1:5および1:10に希釈し、10μLの各希釈物を各マウスに対して並列でゲルに負荷した。ゲル画像の上部において、レーンに各マウスならびにIgG1(1)およびIgG2a(2a)対照の表示をしている。
A.IgG1−CH1−ヒンジ欠失についてホモ接合性のマウス
IgG1 ΔCH1−Δヒンジについてホモ接合性のマウス改変を、V−D−J組換えおよび重鎖遺伝子の使用について、脾細胞から単離されたRNAを用いて逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)によって解析した。
同様の様式で、IgG1 ΔCH1改変についてホモ接合性のマウスを、V−D−J組換えおよびヒト重鎖遺伝子の使用について、脾細胞から単離されたRNAを用いて逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)によって解析した。
Claims (1)
- 図面に記載の発明。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US28525009P | 2009-12-10 | 2009-12-10 | |
US61/285,250 | 2009-12-10 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015008099A Division JP6271450B2 (ja) | 2009-12-10 | 2015-01-19 | 重鎖抗体を作製するマウス |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019088172A Division JP2019141095A (ja) | 2009-12-10 | 2019-05-08 | 重鎖抗体を作製するマウス |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017140058A true JP2017140058A (ja) | 2017-08-17 |
JP6615830B2 JP6615830B2 (ja) | 2019-12-04 |
Family
ID=43534479
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012543304A Active JP5909449B2 (ja) | 2009-12-10 | 2010-12-10 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2015008099A Active JP6271450B2 (ja) | 2009-12-10 | 2015-01-19 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2015094069A Active JP6293702B2 (ja) | 2009-12-10 | 2015-05-01 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2017106527A Active JP6615830B2 (ja) | 2009-12-10 | 2017-05-30 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2019088172A Withdrawn JP2019141095A (ja) | 2009-12-10 | 2019-05-08 | 重鎖抗体を作製するマウス |
Family Applications Before (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012543304A Active JP5909449B2 (ja) | 2009-12-10 | 2010-12-10 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2015008099A Active JP6271450B2 (ja) | 2009-12-10 | 2015-01-19 | 重鎖抗体を作製するマウス |
JP2015094069A Active JP6293702B2 (ja) | 2009-12-10 | 2015-05-01 | 重鎖抗体を作製するマウス |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019088172A Withdrawn JP2019141095A (ja) | 2009-12-10 | 2019-05-08 | 重鎖抗体を作製するマウス |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (9) | US8754287B2 (ja) |
EP (3) | EP2954779B1 (ja) |
JP (5) | JP5909449B2 (ja) |
KR (2) | KR101430514B1 (ja) |
CN (3) | CN102711449B (ja) |
AU (1) | AU2010328046C1 (ja) |
CA (1) | CA2782936C (ja) |
CY (2) | CY1118163T1 (ja) |
DK (2) | DK2509409T3 (ja) |
ES (2) | ES2595376T3 (ja) |
HK (2) | HK1177100A1 (ja) |
HR (1) | HRP20190820T1 (ja) |
HU (2) | HUE043556T2 (ja) |
IL (4) | IL220150A0 (ja) |
LT (2) | LT2954779T (ja) |
MY (2) | MY172472A (ja) |
PL (2) | PL2509409T3 (ja) |
PT (2) | PT2954779T (ja) |
RS (1) | RS58709B1 (ja) |
RU (1) | RU2603102C2 (ja) |
SG (2) | SG10201408181PA (ja) |
SI (2) | SI2954779T1 (ja) |
TR (1) | TR201906488T4 (ja) |
WO (1) | WO2011072204A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE112018003679T5 (de) | 2017-07-19 | 2020-05-07 | Denso Corporation | Fahrzeugsteuervorrichtung und energieversorgungsschaltung |
Families Citing this family (133)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1978032A3 (en) | 2004-07-22 | 2009-02-18 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Binding molecules |
PL2346994T3 (pl) * | 2008-09-30 | 2022-04-19 | Ablexis, Llc | Myszy knock-in do wytwarzania chimerycznych przeciwciał |
GB0905023D0 (en) | 2009-03-24 | 2009-05-06 | Univ Erasmus Medical Ct | Binding molecules |
US9445581B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-09-20 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
HUE055817T2 (hu) | 2009-07-08 | 2021-12-28 | Kymab Ltd | Állatmodellek és terápiás molekulák |
CN102711449B (zh) * | 2009-12-10 | 2015-01-07 | 瑞泽恩制药公司 | 生产重链抗体的小鼠 |
US9796788B2 (en) | 2010-02-08 | 2017-10-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice expressing a limited immunoglobulin light chain repertoire |
US20130045492A1 (en) | 2010-02-08 | 2013-02-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods For Making Fully Human Bispecific Antibodies Using A Common Light Chain |
NZ719253A (en) | 2010-02-08 | 2022-08-26 | Regeneron Pharma | Common light chain mouse |
CA3006800C (en) | 2010-03-31 | 2022-10-04 | Ablexis, Llc | Genetic engineering of non-human animals for the production of chimeric antibodies |
JP6482757B2 (ja) | 2010-07-26 | 2019-03-13 | トリアンニ インコーポレイテッドTrianni,Inc. | トランスジェニック動物および使用方法 |
US10662256B2 (en) | 2010-07-26 | 2020-05-26 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
US10793829B2 (en) | 2010-07-26 | 2020-10-06 | Trianni, Inc. | Transgenic mammals and methods of use thereof |
EP3960865A1 (en) | 2010-08-02 | 2022-03-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice that make binding proteins comprising vl domains |
US8642835B2 (en) | 2011-02-25 | 2014-02-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | ADAM6 mice |
JP2014515598A (ja) * | 2011-03-10 | 2014-07-03 | エイチシーオー アンティボディ, インク. | 二重特異性三鎖抗体様分子 |
SG2014007686A (en) | 2011-08-05 | 2014-03-28 | Regeneron Pharma | Humanized universal light chain mice |
CN103945689B (zh) | 2011-09-19 | 2016-10-19 | 科马布有限公司 | 免疫球蛋白基因多样性的操纵及多抗体治疗剂 |
GB2501753A (en) * | 2012-05-04 | 2013-11-06 | Kymab Ltd | Human antibodies |
WO2013045916A1 (en) | 2011-09-26 | 2013-04-04 | Kymab Limited | Chimaeric surrogate light chains (slc) comprising human vpreb |
US10246509B2 (en) | 2011-10-17 | 2019-04-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Restricted immunoglobulin heavy chain mice |
CA2857645A1 (en) * | 2011-11-30 | 2013-06-06 | Wellstat Diagnostics, Llc | Assays, antibodies, immunogens and compositions related to 5-fu |
US9253965B2 (en) | 2012-03-28 | 2016-02-09 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
BR112014015238B1 (pt) | 2011-12-20 | 2022-11-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc | Método ex vivo para preparar um anticorpo que se liga a um antígeno de interesse compreendendo identificar sequências de ácido nucleico a partir de linfócitos b de camundongo geneticamente modificado pela colocação de um gene adam6 |
US20140013456A1 (en) | 2012-03-16 | 2014-01-09 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Histidine Engineered Light Chain Antibodies and Genetically Modified Non-Human Animals for Generating the Same |
NZ712508A (en) | 2012-03-16 | 2018-06-29 | Regeneron Pharma | Non-human animals expressing ph-sensitive immunoglobulin sequences |
CA2865644A1 (en) | 2012-03-16 | 2013-09-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice that produce antigen-binding proteins with ph-dependent binding characteristics |
RS57414B1 (sr) | 2012-03-16 | 2018-09-28 | Regeneron Pharma | Antitela sa lakim lancem konstruisanim sa histidinom i genetički modifikovani glodari za generisanje istih |
GB2502127A (en) * | 2012-05-17 | 2013-11-20 | Kymab Ltd | Multivalent antibodies and in vivo methods for their production |
US10251377B2 (en) | 2012-03-28 | 2019-04-09 | Kymab Limited | Transgenic non-human vertebrate for the expression of class-switched, fully human, antibodies |
WO2013144567A1 (en) | 2012-03-28 | 2013-10-03 | Kymab Limited | Transgenic non-human vertebrate for the expression of class - switched, fully human, antibodies |
PT2858487T (pt) | 2012-06-12 | 2020-01-15 | Regeneron Pharma | Animais não humanos humanizados com locus de cadeias pesadas imunoglobulina restrito |
MY185881A (en) | 2013-02-20 | 2021-06-14 | Regeneron Pharma | Non-human animals with modified immunoglobulin heavy chain sequences |
EP3699190B9 (en) * | 2013-02-22 | 2023-10-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Murine cell expressing humanized major histocompatibility complex |
WO2014141192A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Erasmus University Medical Center | Generation of heavy chain-only antibodies |
US9788534B2 (en) | 2013-03-18 | 2017-10-17 | Kymab Limited | Animal models and therapeutic molecules |
US9783618B2 (en) | 2013-05-01 | 2017-10-10 | Kymab Limited | Manipulation of immunoglobulin gene diversity and multi-antibody therapeutics |
US9783593B2 (en) | 2013-05-02 | 2017-10-10 | Kymab Limited | Antibodies, variable domains and chains tailored for human use |
US11707056B2 (en) | 2013-05-02 | 2023-07-25 | Kymab Limited | Animals, repertoires and methods |
SG10201802295XA (en) | 2013-10-01 | 2018-04-27 | Kymab Ltd | Animal Models and Therapeutic Molecules |
JP6633520B2 (ja) * | 2013-11-12 | 2020-01-22 | オージーディー2 ファーマ | プロアポトーシス活性を有するヒトigg1由来抗体 |
WO2015143414A2 (en) | 2014-03-21 | 2015-09-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals that make single domain binding proteins |
EP3119811B1 (en) | 2014-03-21 | 2019-10-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Vl antigen binding proteins exhibiting distinct binding characteristics |
SG10201908800YA (en) * | 2014-04-08 | 2019-11-28 | Regeneron Pharma | Non-human animals having humanized fc-gamma receptors |
KR102204937B1 (ko) | 2014-06-06 | 2021-01-18 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 글루코코르티코이드-유도 종양 괴사 인자 수용체 (gitr)에 대한 항체 및 그의 용도 |
CN104177496B (zh) * | 2014-09-02 | 2015-03-11 | 安源生物科技(上海)有限公司 | 人IgG2抗体铰链区修饰体 |
CA2963470A1 (en) | 2014-10-03 | 2016-04-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Antibodies that bind ebola glycoprotein and uses thereof |
CN107002092A (zh) | 2014-10-22 | 2017-08-01 | 克雷森多生物制剂有限公司 | 转基因小鼠 |
CA2968357A1 (en) | 2014-11-21 | 2016-05-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against cd73 and uses thereof |
KR20230137502A (ko) | 2014-12-19 | 2023-10-04 | 레제네상스 비.브이. | 인간 c6에 결합하는 항체 및 이의 용도 |
MY187045A (en) | 2014-12-23 | 2021-08-27 | Bristol Myers Squibb Co | Antibodies to tigit |
CN107438622A (zh) | 2015-03-19 | 2017-12-05 | 瑞泽恩制药公司 | 选择结合抗原的轻链可变区的非人动物 |
ES2936317T3 (es) | 2015-05-29 | 2023-03-16 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos contra OX40 y usos de los mismos |
BR112017028353A2 (pt) | 2015-06-29 | 2018-09-04 | The Rockfeller University | anticorpos para cd40 com atividade agonista melhorada |
CN105384825B (zh) | 2015-08-11 | 2018-06-01 | 南京传奇生物科技有限公司 | 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用 |
KR20180038055A (ko) * | 2015-08-24 | 2018-04-13 | 트리아니, 인코포레이티드 | 면역글로불린의 강화된 생산 |
CN105441455B (zh) * | 2015-10-21 | 2020-08-28 | 重庆金迈博生物科技有限公司 | 一种嵌合核酸分子及其在人源化抗体制备中的应用 |
EP3377532B1 (en) | 2015-11-19 | 2022-07-27 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof |
EP3384030A4 (en) | 2015-12-03 | 2019-07-03 | Trianni, Inc. | IMPROVED IMMUNOGLULINIVITY |
US11053288B2 (en) | 2016-02-04 | 2021-07-06 | Trianni, Inc. | Enhanced production of immunoglobulins |
WO2017152085A1 (en) | 2016-03-04 | 2017-09-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Combination therapy with anti-cd73 antibodies |
EP3423489B1 (en) | 2016-03-04 | 2024-08-07 | The Rockefeller University | Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity |
CA3021098A1 (en) * | 2016-04-21 | 2017-10-26 | Abbvie Stemcentrx Llc | Novel anti-bmpr1b antibodies and methods of use |
KR102417687B1 (ko) | 2016-05-09 | 2022-07-07 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Tl1a 항체 및 그의 용도 |
JP7324583B2 (ja) | 2016-05-20 | 2023-08-10 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 複数のガイドrnaを使用して免疫寛容を破綻させるための方法 |
CN116458475A (zh) | 2016-06-03 | 2023-07-21 | 瑞泽恩制药公司 | 表达外源末端脱氧核苷酸转移酶的非人动物 |
CN109757103B (zh) | 2016-07-14 | 2024-01-02 | 百时美施贵宝公司 | 针对tim3的抗体及其用途 |
WO2018014260A1 (en) | 2016-07-20 | 2018-01-25 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof |
WO2018044970A1 (en) | 2016-08-31 | 2018-03-08 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus k envelope (herv-k) and uses thereof |
WO2018068201A1 (en) | 2016-10-11 | 2018-04-19 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4 |
US11267873B2 (en) | 2016-10-13 | 2022-03-08 | Massachusetts Institute Of Technology | Antibodies that bind zika virus envelope protein and uses thereof |
WO2018144097A1 (en) | 2016-11-04 | 2018-08-09 | Akeagen Llc | Genetically modified non-human animals and methods for producing heavy chain-only antibodies |
CN110506057B (zh) | 2017-02-17 | 2023-09-29 | 百时美施贵宝公司 | Alpha突触核蛋白抗体及其应用 |
TWI788340B (zh) | 2017-04-07 | 2023-01-01 | 美商必治妥美雅史谷比公司 | 抗icos促效劑抗體及其用途 |
LT3645553T (lt) | 2017-06-27 | 2023-04-25 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Modifikuoto tropizmo rekombinantinės viruso dalelės ir jų panaudojimas genetinės medžiagos tiksliniam įvedimui į žmogaus ląsteles |
RS65569B1 (sr) | 2017-06-27 | 2024-06-28 | Regeneron Pharma | Rekombinantni virusni vektori modifikovani tropizmom i njihove upotrebe za ciljano uvođenje genetičkog materijala u humane ćelije |
WO2019000223A1 (en) | 2017-06-27 | 2019-01-03 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | ENABLERS OF IMMUNE EFFECTOR CELLS OF CHIMERIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF |
AU2018302343B2 (en) | 2017-07-21 | 2020-11-26 | Trianni, Inc. | Single chain vh and heavy chain antibodies |
TW201930358A (zh) | 2017-12-28 | 2019-08-01 | 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 | 針對tigit之單域抗體及其變異體 |
US20220135687A1 (en) | 2017-12-28 | 2022-05-05 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Antibodies and variants thereof against pd-l1 |
US20220089720A1 (en) | 2018-01-12 | 2022-03-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies against tim3 and uses thereof |
KR20200120641A (ko) | 2018-01-15 | 2020-10-21 | 난징 레전드 바이오테크 씨오., 엘티디. | Pd-1에 대한 단일-도메인 항체 및 이의 변이체 |
TW202003565A (zh) | 2018-03-23 | 2020-01-16 | 美商必治妥美雅史谷比公司 | 抗mica及/或micb抗體及其用途 |
TWI842701B (zh) | 2018-03-24 | 2024-05-21 | 美商再生元醫藥公司 | 用於產生抗肽-mhc複合物之治療性抗體的經基因修飾的非人類動物、其製法與用途 |
SG11202008620VA (en) * | 2018-03-26 | 2020-10-29 | Regeneron Pharma | Humanized rodents for testing therapeutic agents |
TW202003567A (zh) | 2018-03-30 | 2020-01-16 | 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 | 針對lag-3之單一結構域抗體及其用途 |
KR20210056288A (ko) | 2018-06-01 | 2021-05-18 | 타유 후아시아 바이오테크 메디컬 그룹 컴퍼니 리미티드 | 질환 또는 병태를 치료하기 위한 조성물 및 그의 용도 |
EP3806630A4 (en) * | 2018-06-13 | 2022-02-23 | Crystal Bioscience Inc. | PRODUCTION OF ANTIBODIES BY MODIFICATION OF AUTONOMOUS HEAVY CHAIN VARIABLE DOMAINS THROUGH GENE CONVERSION |
US20210230629A1 (en) * | 2018-06-13 | 2021-07-29 | Crystal Bioscience Inc. | Camelization of a human variable domain by gene conversion |
AU2019284256A1 (en) * | 2018-06-13 | 2020-12-24 | Crystal Bioscience Inc. | Transgenic chicken that makes antibodies with long CDR-H3S stabilized by multiple disulfide bridges and diversified by gene conversion |
KR102444180B1 (ko) | 2018-06-14 | 2022-09-16 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 면역글로불린 중쇄 암호화 서열에서 dh-dh 재배열 가능한 비인간 동물 |
GB2576914A (en) | 2018-09-06 | 2020-03-11 | Kymab Ltd | Antigen-binding molecules comprising unpaired variable domains produced in mammals |
PE20211284A1 (es) | 2018-11-16 | 2021-07-19 | Bristol Myers Squibb Co | Anticuerpos anti-nkg2a y usos de los mismos |
KR20230128134A (ko) | 2019-01-22 | 2023-09-01 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | Il-7r 알파 서브유닛에 대한 항체 및 이의 용도 |
PE20212357A1 (es) | 2019-05-24 | 2021-12-17 | Regeneron Pharma | Particulas virales modificadas y usos de estas |
CA3163549A1 (en) | 2019-12-02 | 2021-06-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Peptide-mhc ii protein constructs and uses thereof |
CN110818795B (zh) | 2020-01-10 | 2020-04-24 | 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 | 抗tigit抗体和使用方法 |
CA3169939A1 (en) | 2020-02-28 | 2021-09-02 | Jie Xue | Anti-cd137 construct and use thereof |
EP4110826A4 (en) | 2020-02-28 | 2024-08-14 | Shanghai Henlius Biotech Inc | ANTI-CD137 CONSTRUCTS, MULTISPECIFIC ANTIBODIES AND THEIR USES |
CN111333719B (zh) * | 2020-03-16 | 2021-10-01 | 西南大学 | 抗hpv16e7蛋白单抗69a6、杂交瘤细胞及其制备方法和应用 |
US20230192867A1 (en) | 2020-05-15 | 2023-06-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Antibodies to garp |
WO2021247769A1 (en) | 2020-06-02 | 2021-12-09 | Dynamicure Biotechnology Llc | Anti-cd93 constructs and uses thereof |
CN116529260A (zh) | 2020-06-02 | 2023-08-01 | 当康生物技术有限责任公司 | 抗cd93构建体及其用途 |
KR20230025005A (ko) | 2020-06-17 | 2023-02-21 | 얀센 바이오테크 인코포레이티드 | 만능 줄기세포의 제조를 위한 재료 및 방법 |
IL299329A (en) | 2020-06-24 | 2023-02-01 | Prothena Biosciences Ltd | Antibodies recognizing sortilin |
WO2022011457A1 (en) * | 2020-07-13 | 2022-01-20 | Kisoji Biotechnology Inc. | Transgenic animals expressing heavy chain antibodies |
CN116783215A (zh) | 2020-07-29 | 2023-09-19 | 当康生物技术有限责任公司 | 抗cd93构建体及其用途 |
CN114134144A (zh) * | 2020-09-04 | 2022-03-04 | 北京仁源欣生生物科技有限公司 | 一种非人哺乳动物或其子代的制备方法及其应用 |
KR20230066386A (ko) | 2020-09-11 | 2023-05-15 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 항원 특이적 항체의 확인 및 제조 |
CA3204101A1 (en) | 2020-12-09 | 2022-06-16 | Trianni, Inc. | Heavy chain-only antibodies |
WO2022132943A1 (en) | 2020-12-16 | 2022-06-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Mice expressing humanized fc alpha receptors |
US20220195014A1 (en) | 2020-12-23 | 2022-06-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acids encoding anchor modified antibodies and uses thereof |
WO2022177394A1 (ko) | 2021-02-19 | 2022-08-25 | (주)샤페론 | Pd-l1 및 cd47에 대한 이중특이적 단일 도메인 항체 및 이의 용도 |
CN116964095A (zh) | 2021-02-19 | 2023-10-27 | 沙裴隆有限公司 | 针对cd47的单域抗体及其用途 |
WO2022177393A1 (ko) | 2021-02-19 | 2022-08-25 | (주)샤페론 | Pd-l1에 대한 단일 도메인 항체 및 이의 용도 |
CN117715933A (zh) | 2021-03-05 | 2024-03-15 | 当康生物技术有限责任公司 | 抗vista的构建体及其用途 |
JP2024511424A (ja) | 2021-03-25 | 2024-03-13 | ダイナミキュア バイオテクノロジー エルエルシー | 抗igfbp7構築物およびその使用 |
WO2022235988A1 (en) * | 2021-05-05 | 2022-11-10 | Leveragen, Inc. | Engineered non-human animals for producing antibodies |
US20240279334A1 (en) | 2021-06-17 | 2024-08-22 | Amberstone Biosciences, Inc. | Anti-cd3 constructs and uses thereof |
MX2023015461A (es) * | 2021-06-17 | 2024-01-18 | Fapon Biotech Inc | Inmunoglobulina quimerica. |
WO2022269473A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Janssen Biotech, Inc. | Materials and methods for hinge regions in functional exogenous receptors |
KR20240095211A (ko) | 2021-11-04 | 2024-06-25 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 골격근에 재표적화된 바이러스 입자 |
WO2023109900A1 (en) | 2021-12-17 | 2023-06-22 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | Anti-ox40 antibodies, multispecific antibodies and methods of use |
CN118574849A (zh) | 2021-12-17 | 2024-08-30 | 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 | 抗ox40抗体和使用方法 |
WO2023164581A2 (en) * | 2022-02-24 | 2023-08-31 | A & G Pharmaceutical, Inc. | Fully human monoclonal antibodies against human progranulin |
WO2023179740A1 (en) | 2022-03-25 | 2023-09-28 | Shanghai Henlius Biotech , Inc. | Anti-msln antibodies and methods of use |
WO2023220603A1 (en) | 2022-05-09 | 2023-11-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Vectors and methods for in vivo antibody production |
WO2024018426A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Janssen Biotech, Inc. | Enhanced transfer of genetic instructions to effector immune cells |
WO2024026494A1 (en) | 2022-07-29 | 2024-02-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Viral particles retargeted to transferrin receptor 1 |
WO2024054929A1 (en) | 2022-09-07 | 2024-03-14 | Dynamicure Biotechnology Llc | Anti-vista constructs and uses thereof |
WO2024056044A1 (en) * | 2022-09-16 | 2024-03-21 | Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. | Genetically modified non-human animals and methods for producing heavy-chain antibodies |
WO2024102454A1 (en) * | 2022-11-09 | 2024-05-16 | Leveragen, Inc. | Engineered non-human animals |
WO2024163477A1 (en) | 2023-01-31 | 2024-08-08 | University Of Rochester | Immune checkpoint blockade therapy for treating staphylococcus aureus infections |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2008035216A2 (en) * | 2006-09-18 | 2008-03-27 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Generation of heavy-chain only antibodies in transgenic animals |
JP2008512987A (ja) * | 2004-07-22 | 2008-05-01 | エラスムス・ユニヴァーシティ・メディカル・センター・ロッテルダム | 結合分子 |
Family Cites Families (57)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3095168B2 (ja) | 1988-02-05 | 2000-10-03 | エル. モリソン,シェリー | ドメイン‐変性不変部を有する抗体 |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US7041871B1 (en) * | 1995-10-10 | 2006-05-09 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5770429A (en) * | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
GB9020282D0 (en) | 1990-09-17 | 1990-10-31 | Gorman Scott D | Altered antibodies and their preparation |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
AU675916B2 (en) | 1991-06-14 | 1997-02-27 | Genentech Inc. | Method for making humanized antibodies |
ES2136092T3 (es) | 1991-09-23 | 1999-11-16 | Medical Res Council | Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados. |
DE69233204T2 (de) | 1991-12-13 | 2004-07-15 | Xoma Corp., Berkeley | Verfahren und materialien zur herstellung von modifizierten variablen antikörperdomänen und ihre therapeutische verwendung |
AU781922B2 (en) * | 1991-12-17 | 2005-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
ATE149570T1 (de) | 1992-08-17 | 1997-03-15 | Genentech Inc | Bispezifische immunoadhesine |
EP1621554B2 (en) | 1992-08-21 | 2012-08-29 | Vrije Universiteit Brussel | Immunoglobulins devoid of light chains |
US6765087B1 (en) | 1992-08-21 | 2004-07-20 | Vrije Universiteit Brussel | Immunoglobulins devoid of light chains |
US6005079A (en) | 1992-08-21 | 1999-12-21 | Vrije Universiteit Brussels | Immunoglobulins devoid of light chains |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
US6838254B1 (en) | 1993-04-29 | 2005-01-04 | Conopco, Inc. | Production of antibodies or (functionalized) fragments thereof derived from heavy chain immunoglobulins of camelidae |
US6080910A (en) | 1997-02-20 | 2000-06-27 | Case Western Reserve University | Transgenic knockout animals lacking IgG3 |
US7083950B2 (en) | 1998-09-25 | 2006-08-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | High affinity fusion proteins and therapeutic and diagnostic methods for use |
US6849425B1 (en) | 1999-10-14 | 2005-02-01 | Ixsys, Inc. | Methods of optimizing antibody variable region binding affinity |
RU2262511C2 (ru) * | 2000-05-18 | 2005-10-20 | Джапан Тобакко, Инк. | Человеческое моноклональное антитело против ailim, костимулирующей молекулы передачи сигнала, и его фармацевтическое применение |
CN1468250A (zh) | 2000-08-03 | 2004-01-14 | ��ķһ����˹��̹ | 在转基因动物中产生人源化抗体 |
US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US6586251B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US7235643B2 (en) | 2000-11-07 | 2007-06-26 | Morphotek, Inc. | Antibodies and methods for generating genetically altered antibodies with high affinity |
CN101016543A (zh) * | 2000-11-17 | 2007-08-15 | 罗切斯特大学 | 筛选编码抗原特异性免疫球蛋白分子或其抗原特异性片段的多核苷酸的方法 |
US7754208B2 (en) | 2001-01-17 | 2010-07-13 | Trubion Pharmaceuticals, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
GB0110029D0 (en) | 2001-04-24 | 2001-06-13 | Grosveld Frank | Transgenic animal |
GB0115256D0 (en) | 2001-06-21 | 2001-08-15 | Babraham Inst | Mouse light chain locus |
WO2003002609A2 (en) | 2001-06-28 | 2003-01-09 | Domantis Limited | Dual-specific ligand and its use |
EP2298809A3 (en) | 2001-07-12 | 2012-02-15 | FOOTE, Jefferson | Super humanized antibodies |
JP2005289809A (ja) | 2001-10-24 | 2005-10-20 | Vlaams Interuniversitair Inst Voor Biotechnologie Vzw (Vib Vzw) | 突然変異重鎖抗体 |
US7393648B2 (en) | 2001-12-03 | 2008-07-01 | Alexion Pharmaceuticals, Inc. | Hybrid antibodies |
CN1678634A (zh) | 2002-06-28 | 2005-10-05 | 多曼蒂斯有限公司 | 免疫球蛋白单个变体抗原结合区及其特异性构建体 |
EP1575499A2 (en) | 2002-06-28 | 2005-09-21 | Centocor, Inc. | Mammalian epo mimetic ch1 deleted mimetibodies, compositions, methods and uses |
GB0228210D0 (en) | 2002-12-03 | 2003-01-08 | Babraham Inst | Single chain antibodies |
GB0230203D0 (en) | 2002-12-27 | 2003-02-05 | Domantis Ltd | Fc fusion |
FR2861255B1 (fr) * | 2003-10-24 | 2006-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Mammifere non-humain transgenique pour la region constante de la chaine lourde des immunoglobulines humaines de classe a et ses applications. |
EP1709081B1 (en) | 2004-01-16 | 2011-04-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Fusion polypeptides capable of activating receptors |
US20060024302A1 (en) * | 2004-03-05 | 2006-02-02 | Ludwig Institute For Cancer Research | Chimeric anti-VEGF-D antibodies and humanized anti-VEGF-D antibodies and methods of using same |
PL1802193T3 (pl) | 2004-10-19 | 2014-09-30 | Regeneron Pharma | Sposób wytwarzania myszy homozygotycznej pod względem modyfikacji genetycznej |
US7462697B2 (en) | 2004-11-08 | 2008-12-09 | Epitomics, Inc. | Methods for antibody engineering |
WO2006117699A2 (en) | 2005-04-29 | 2006-11-09 | Innate Pharma | Transgenic animals and methods of making recombinant antibodies |
EP1973576B1 (en) * | 2005-11-28 | 2019-05-15 | Genmab A/S | Recombinant monovalent antibodies and methods for production thereof |
KR101481843B1 (ko) | 2006-01-25 | 2015-01-12 | 에라스무스 유니버시티 메디컬 센터 로테르담 | 형질전환 동물 내에서의 중쇄만의 항체의 생성 |
ATE485517T1 (de) * | 2006-03-22 | 2010-11-15 | Viral Logic Systems Technology | Verfahren zur identifizierung von polypeptid- targets |
MY159787A (en) | 2006-06-02 | 2017-01-31 | Regeneron Pharma | High affinity antibodies to human il-6 receptor |
GB0706628D0 (en) | 2007-04-04 | 2007-05-16 | Univ Erasmus | Germ-line manipulation 1 |
LT2602323T (lt) | 2007-06-01 | 2018-04-10 | Open Monoclonal Technology, Inc. | Kompozicijos ir būdai endogeninių imunoglobulinų genams slopinti ir transgeniniams žmogaus idiotipo antikūnams gaminti |
CA2689556A1 (en) | 2007-06-08 | 2008-12-11 | Dow Global Technolgies Inc. | Expression of soluble antibody fragment by truncation of ch1 domain |
WO2009013620A2 (en) | 2007-06-11 | 2009-01-29 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Homologous recombination |
KR20100087283A (ko) | 2007-09-07 | 2010-08-04 | 심포젠 에이/에스 | 항rsv 항체의 재조합 제조 방법 |
US20090271884A1 (en) | 2008-03-07 | 2009-10-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | ES Cell-Derived Mice From Diploid Host Embryo Injection |
US20100122358A1 (en) | 2008-06-06 | 2010-05-13 | Crescendo Biologics Limited | H-Chain-only antibodies |
GB0905023D0 (en) | 2009-03-24 | 2009-05-06 | Univ Erasmus Medical Ct | Binding molecules |
CN102711449B (zh) * | 2009-12-10 | 2015-01-07 | 瑞泽恩制药公司 | 生产重链抗体的小鼠 |
JP6023667B2 (ja) * | 2013-06-26 | 2016-11-09 | 矢崎総業株式会社 | コネクタ |
JP5602929B1 (ja) * | 2013-11-08 | 2014-10-08 | 株式会社小松製作所 | モータグレーダのリッパー装置およびこれを備えたモータグレーダ |
-
2010
- 2010-12-10 CN CN201080061812.7A patent/CN102711449B/zh active Active
- 2010-12-10 DK DK10790825.3T patent/DK2509409T3/en active
- 2010-12-10 LT LTEP15177538.4T patent/LT2954779T/lt unknown
- 2010-12-10 EP EP15177538.4A patent/EP2954779B1/en active Active
- 2010-12-10 PT PT15177538T patent/PT2954779T/pt unknown
- 2010-12-10 CA CA2782936A patent/CA2782936C/en active Active
- 2010-12-10 MY MYPI2014003004A patent/MY172472A/en unknown
- 2010-12-10 SG SG10201408181PA patent/SG10201408181PA/en unknown
- 2010-12-10 RS RS20190538A patent/RS58709B1/sr unknown
- 2010-12-10 CN CN201811556345.XA patent/CN110079550A/zh active Pending
- 2010-12-10 EP EP10790825.3A patent/EP2509409B1/en active Active
- 2010-12-10 ES ES10790825.3T patent/ES2595376T3/es active Active
- 2010-12-10 ES ES15177538T patent/ES2724975T3/es active Active
- 2010-12-10 KR KR1020127016851A patent/KR101430514B1/ko active IP Right Grant
- 2010-12-10 MY MYPI2012002491A patent/MY173363A/en unknown
- 2010-12-10 JP JP2012543304A patent/JP5909449B2/ja active Active
- 2010-12-10 SI SI201031888T patent/SI2954779T1/sl unknown
- 2010-12-10 PL PL10790825T patent/PL2509409T3/pl unknown
- 2010-12-10 CN CN201410315732.XA patent/CN104131035A/zh active Pending
- 2010-12-10 TR TR2019/06488T patent/TR201906488T4/tr unknown
- 2010-12-10 HU HUE15177538A patent/HUE043556T2/hu unknown
- 2010-12-10 HU HUE10790825A patent/HUE030208T2/en unknown
- 2010-12-10 RU RU2012128856/10A patent/RU2603102C2/ru active
- 2010-12-10 AU AU2010328046A patent/AU2010328046C1/en active Active
- 2010-12-10 WO PCT/US2010/059845 patent/WO2011072204A1/en active Application Filing
- 2010-12-10 EP EP18208643.9A patent/EP3504964A1/en not_active Withdrawn
- 2010-12-10 LT LTEP10790825.3T patent/LT2509409T/lt unknown
- 2010-12-10 SG SG2012040556A patent/SG181477A1/en unknown
- 2010-12-10 PT PT107908253T patent/PT2509409T/pt unknown
- 2010-12-10 US US12/965,050 patent/US8754287B2/en active Active
- 2010-12-10 DK DK15177538.4T patent/DK2954779T3/da active
- 2010-12-10 SI SI201031301A patent/SI2509409T1/sl unknown
- 2010-12-10 PL PL15177538T patent/PL2954779T3/pl unknown
- 2010-12-10 KR KR1020147003726A patent/KR101553244B1/ko active IP Right Grant
-
2012
- 2012-06-04 IL IL220150A patent/IL220150A0/en unknown
-
2013
- 2013-04-02 HK HK13104042.5A patent/HK1177100A1/xx unknown
-
2014
- 2014-05-01 US US14/267,279 patent/US9888675B2/en active Active
-
2015
- 2015-01-19 JP JP2015008099A patent/JP6271450B2/ja active Active
- 2015-03-19 IL IL237819A patent/IL237819A/en active IP Right Grant
- 2015-03-19 IL IL237818A patent/IL237818A/en active IP Right Grant
- 2015-03-31 US US14/674,203 patent/US20150197554A1/en not_active Abandoned
- 2015-03-31 US US14/674,210 patent/US20150197556A1/en not_active Abandoned
- 2015-03-31 US US14/674,206 patent/US20150196015A1/en not_active Abandoned
- 2015-03-31 US US14/674,211 patent/US20150197557A1/en not_active Abandoned
- 2015-03-31 US US14/674,204 patent/US20150197555A1/en not_active Abandoned
- 2015-03-31 US US14/674,198 patent/US11234419B2/en active Active
- 2015-05-01 JP JP2015094069A patent/JP6293702B2/ja active Active
-
2016
- 2016-06-15 HK HK16106900.8A patent/HK1220865A1/zh unknown
- 2016-10-26 CY CY20161101081T patent/CY1118163T1/el unknown
-
2017
- 2017-05-30 JP JP2017106527A patent/JP6615830B2/ja active Active
-
2018
- 2018-03-01 IL IL257822A patent/IL257822B/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-05-02 HR HRP20190820TT patent/HRP20190820T1/hr unknown
- 2019-05-06 CY CY20191100474T patent/CY1121608T1/el unknown
- 2019-05-08 JP JP2019088172A patent/JP2019141095A/ja not_active Withdrawn
-
2021
- 2021-12-14 US US17/550,927 patent/US20220201993A1/en active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008512987A (ja) * | 2004-07-22 | 2008-05-01 | エラスムス・ユニヴァーシティ・メディカル・センター・ロッテルダム | 結合分子 |
WO2008035216A2 (en) * | 2006-09-18 | 2008-03-27 | Erasmus University Medical Center Rotterdam | Generation of heavy-chain only antibodies in transgenic animals |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE112018003679T5 (de) | 2017-07-19 | 2020-05-07 | Denso Corporation | Fahrzeugsteuervorrichtung und energieversorgungsschaltung |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6615830B2 (ja) | 重鎖抗体を作製するマウス | |
JP2013513388A5 (ja) | ||
US10492476B2 (en) | Non-human mammals for the production of chimeric antibodies | |
JP6636498B2 (ja) | 単一ドメイン結合タンパク質を作る非ヒト動物 | |
US20240023526A1 (en) | Heavy chain-only antibodies | |
AU2017261477C1 (en) | Mice that make heavy chain antibodies |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170530 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180405 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180627 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181115 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190214 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190412 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190508 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20191010 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20191106 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6615830 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |