JP2006519621A5 - - Google Patents

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  1. 核酸分子を調製する方法であって、以下：
    少なくとも１つの核酸分子を取得する工程；
    複数のプライマーに対して該核酸分子を供して核酸分子／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが、実質的に自己非相補的でありそして該複数の中のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；ならび に
    該核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に定常領域の全てまたは一部を含む複数の分子を生成する条件下である、工程、
    を包含する、方法。
  2. 前記核酸分子が一本鎖核酸分子である、請求項１に記載の方法。
  3. 前記一本鎖核酸分子がＤＮＡ、ＲＮＡ、またはＤＮＡ−ＲＮＡキメラである、請求項２に記載の方法。
  4. 前記核酸分子が二本鎖核酸分子である、請求項１に記載の方法。
  5. 前記二本鎖核酸分子がＤＮＡ、ＲＮＡ、またはＤＮＡ−ＲＮＡキメラである、請求項４に記載の方法。
  6. 前記核酸分子が一本鎖核酸分子および二本鎖核酸分子の混合物である、請求項１に記載の方法。
  7. 前記一本鎖核酸分子がＲＮＡでありそして前記二本鎖核酸分子がＤＮＡである、請求項６に記載の方法。
  8. 複数のプライマーが実質的に自己非相補的でありそして該複数の中の他のプライマーに対して実質的に非相補的であることを意図して、該複数のプライマーを設計する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
  9. 前記方法が、定常領域の全てまたは一部を含む複数の分子を増幅して、増幅された分子を生成する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
  10. 前記増幅する工程がポリメラーゼ連鎖反応を包含する、請求項９に記載の方法。
  11. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、同一の２つの非相補的なヌクレオチドからなる、請求項１に記載の方法。
  12. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、グアニン、アデニンまたはその両方からなる、請求項１１に記載の方法。
  13. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、シトシン、チミジンまたはその両方からなる、請求項１１に記載の方法。
  14. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、アデニン、シトシンまたはその両方からなる、請求項１１に記載の方法。
  15. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、グアニン、チミジンまたはその両方からなる、請求項１１に記載の方法。
  16. 前記定常領域が約６〜約１００ヌクレオチドを含む、請求項１１に記載の方法。
  17. 前記可変領域が約４ヌクレオチド〜約２０ヌクレオチドを含む、請求項１１に記載の方法。
  18. 前記プライマーがさらに、その遠位３’末端の０〜約３個のランダムな塩基からなる、請求項１１に記載の方法。
  19. 前記定常領域および可変領域がそれぞれ、グアニンおよびチミジンからなり、そして前記ポリヌクレオチドが遠位３’末端に０個、１個、２個または３個のランダムな塩基を含む、請求項１１に記載の方法。
  20. 前記ヌクレオチドが塩基アナログまたは骨格アナログである、請求項１１に記載の方法。
  21. 前記ポリメラーゼが鎖交換性ポリメラーゼである、請求項１に記載の方法。
  22. 請求項２１に記載の方法であって、ここで、前記鎖交換性ポリメラーゼが、φ２９ポリメラーゼ、Ｂｓｔポリメラーゼ、Ｖｅｎｔポリメラーゼ、９°Ｎｍポリメ ラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼＩのクレノウフラグメント、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ＡＭＶ逆転写酵素、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ヒトＨＩＶ逆転写酵素、３’−５’エキソヌクレアーゼ活性を欠損した変異型Ｔ７ファージＤＮＡポリメラーゼ、またはこれらの混合物で ある、方法。
  23. 前記鎖交換性ポリメラーゼがクレノウ Ｅｘｏ−である、請求項２２に記載の方法。
  24. 前記鎖交換性ポリメラーゼが３’−−>５’エキソヌクレアーゼ活性を欠損した変異型Ｔ７ファージＤＮＡポリメラーゼである、請求項２２に記載の方法。
  25. 前記鎖交換性ポリメラーゼがＭＭＬＶ逆転写酵素である、請求項２２に記載の方法。
  26. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物を、ポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
  27. 前記化合物が一本鎖化ＤＮＡ結合性タンパク質またはヘリカーゼである、請求項２６に記載の方法。
  28. 前記混合物をポリメラーゼに供する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡおよび／またはＲＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１に記載の方法。
  29. 前記薬剤がジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはそれらの混合物を含む、請求項２８に記載の方法。
  30. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項９に記載の方法。
  31. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはそれらの混合物を含む、請求項３０に記載の方法。
  32. 前記複数のプライマーの各々が同一の定常領域を含む、請求項１に記載の方法。
  33. ２つ以上の定常領域が複数のプライマーの混合物中に示される、請求項１に記載の方法。
  34. 請求項９に記載の方法であって、ここで前記方法が以下の工程：
    増幅された分子を修飾して修飾ヌクレオチド塩基を組み込み、これによって標識化分子を生成する工程であって、該増幅された分子がさらに一本鎖ＤＮＡ分子、二本鎖ＤＮＡ分子、またはそれらの混合物として規定される、工程；
    該標識化分子から一本鎖分子を生成する工程であって、該一本鎖分子が基材上の既知の位置に整列された相補的配列にハイブリダイズし得る、工程；および
    少なくとも１つのハイブリダイゼーション信号を分析する工程、
    をさらに包含する、方法。
  35. 前記修飾する工程が修飾ヌクレオチド塩基の化学的組み込み、酵素的組み込みまたは物理的組み込みを包含する、請求項３４に記載の方法。
  36. 前記修飾塩基が放射性または蛍光性である、請求項３４に記載の方法。
  37. 前記生成する工程が、前記二本鎖分子の変性を含む、請求項３４に記載の方法。
  38. 前記基材がマイクロアレイ基材を含む、請求項３４に記載の方法。
  39. 前記分析する工程が、少なくとも１つのハイブリダイゼーション信号のバックグラウンドを差し引いた強度を測定する工程を包含する、請求項３４に記載の方法。
  40. 前記分析する工程が、増幅されたライブラリーのコピー数、代表物またはその両方の測定を含む、請求項３４に記載の方法。
  41. 前記増幅された分子の末端にタグが取り込まれ、そして該増幅された分子の各々の末端の該タグに対して前記定常領域が末端から２番目である、請求項９に記載の方法。
  42. 前記タグがホモポリマー性配列である、請求項４１に記載の方法。
  43. 前記ホモポリマー性配列がポリシトシン（ポリＣ）またはポリグアニン（ポリＧ）を含む、請求項４２に記載の方法。
  44. ホモポリマー性ポリＧの組み込みが末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ活性を含む、請求項４３に記載の方法。
  45. ホモポリマー性のポリＧまたはポリＣの組み込みが、前記増幅された分子の末端に対する、該ホモポリマー性のポリＧまたはポリＣを含むアダプターのライゲーションを含む、請求項４３に記載の方法。
  46. ホモポリマー性ポリＣの組み込みがＤＮＡポリメラーゼを用いて増幅された分子を複製する工程を包含し、該複製する工程が５’から３’方向において：
    ホモポリマー性ポリＣ；および
    定常領域
    を含むプライマーを利用する、請求項４３に記載の方法。
  47. ホモポリマー性ポリＣを含む増幅された分子が、核酸分子中の所望の配列およびポリＣに対して相補的なプライマーを使用してさらに増幅される、請求項４３に記載の方法。
  48. 少なくともいくつかの増幅されたＤＮＡが、配列決定、ハイブリダイゼーションまたはその両方にさらに供される、請求項４７に記載の方法。
  49. ホモポリマー性配列ポリＣを含む増幅された分子が、核酸分子中の異なる所望の配列およびポリＣプライマーに対して相補的であるプライマーの混合物を用いてさらに増幅される、請求項４３に記載の方法。
  50. いくつかの増幅された所望のＤＮＡ分子の混合物が、配列決定、ハイブリダイゼーションまたはその両方にさらに供される、請求項４９に記載の方法。
  51. ＤＮＡ分子を増幅する方法であって、以下：
    少なくとも１つの二本鎖ＤＮＡ分子または一本鎖ＤＮＡ分子を取得する工程；
    該二本鎖ＤＮＡ分子を加熱に供して、少なくとも１つの一本鎖ＤＮＡ分子を生成する工程；
    該一本鎖ＤＮＡ分子を複数のプライマーに供してＤＮＡ分子／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的でありそ して該複数の中の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該ＤＮＡ分子／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して該複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該定常領域に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    を包含する、方法。
  52. 前記ＤＮＡ分子がゲノムＤＮＡを含むようにさらに規定される、請求項５１に記載の方法。
  53. 前記ＤＮＡ分子がヒトサンプルから取得される、請求項５１に記載の方法。
  54. 前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、請求項５３に記載の方法。
  55. 前記サンプルが生検材料を含む、請求項５３に記載の方法。
  56. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項５３に記載の方法。
  57. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項５３に記載の方法。
  58. 前記ポリメラーゼが鎖交換性ポリメラーゼである、請求項５１に記載の方法。
  59. 請求項５８に記載の方法であって、ここで、前記鎖交換性ポリメラーゼが、φ２９ポリメラーゼ、Ｂｓｔポリメラーゼ、Ｖｅｎｔポリメラーゼ、９ｏＮｍポリメ ラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼＩのクレノウフラグメント、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ＡＭＶ逆転写酵素、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ヒトＨＩＶ逆転写酵素、３’−５’エキソヌクレアーゼ活性を欠損した変異型Ｔ７ファージＤＮＡポリメラーゼ、またはこれらの混合物で ある、方法。
  60. 前記鎖交換性ポリメラーゼがクレノウ Ｅｘｏ−である、請求項５９に記載の方法。
  61. 前記鎖交換性ポリメラーゼが３’−−>５’エキソヌクレアーゼ活性を欠損した変異型Ｔ７ファージＤＮＡポリメラーゼである、請求項５９に記載の方法。
  62. 前記鎖交換性ポリメラーゼがＭＭＬＶ逆転写酵素である、請求項５９に記載の方法。
  63. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物を、ポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項５１に記載の方法。
  64. 前記化合物が一本鎖ＤＮＡ分子結合タンパク質またはヘリカーゼである、請求項６３に記載の方法。
  65. 前記ポリメラーゼに供する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進することが公知の添加物の存在下で起こる、請求項５１に記載の方法。
  66. 前記添加物がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはそれらの混合物を含む、請求項６５に記載の方法。
  67. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項５１に記載の方法。
  68. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはそれらの混合物を含む、請求項６７に記載の方法。
  69. 前記サンプルから調製された核酸分子がゲノムのコピー数情報を提供する、請求項５３に記載の方法。
  70. 前記サンプルから調製された核酸分子がゲノム配列情報を提供する、請求項５３に記載の方法。
  71. 前記サンプルから調製された核酸分子が対立遺伝子の多様性の情報を提供する、請求項５３に記載の方法。
  72. 前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項５３に記載の方法。
  73. 前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項５３に記載の方法。
  74. ＲＮＡ分子を増幅する方法であって、以下：
    少なくとも１つのＲＮＡ分子を取得する工程；
    必要に応じて、分子を加熱して、少なくとも１つの一本鎖ＲＮＡ分子を生成する工程；
    一本鎖ＲＮＡ分子を複数のプライマーに供して、ＲＮＡ分子／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的でありそ して該複数の中の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該ＲＮＡ分子／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して該複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該定常領域に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    を包含する、方法。
  75. 前記ＲＮＡ分子がサンプルから取得される、請求項７４に記載の方法。
  76. 前記サンプルが全細胞内ＲＮＡ、トランスクリプトームまたはその両方を含む、請求項７５に記載の方法。
  77. 前記サンプルが１つ以上のウイルスから取得される、請求項７５に記載の方法。
  78. 前記サンプルが１つ以上の細菌から取得される、請求項７５に記載の方法。
  79. 前記サンプルが動物細胞、細菌および／またはウイルスの混合物から取得される、請求項７５に記載の方法。
  80. 前記サンプルがヒトから取得される、請求項７５に記載の方法。
  81. 前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、請求項８０に記載の方法。
  82. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項８０に記載の方法。
  83. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項８０に記載の方法。
  84. 前記サンプルがｍＲＮＡを含む、請求項８０に記載の方法。
  85. 前記ｍＲＮＡが親和性捕捉によって取得される、請求項８４に記載の方法。
  86. 前記ポリメラーゼが逆転写酵素である、請求項７４に記載の方法。
  87. 前記逆転写酵素が、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ＡＭＶ逆転写酵素、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ＨＩＶ逆転写酵素、またはこれらの混合物である、請求項８６に記載の方法。
  88. 前記逆転写酵素がＭＭＬＶ逆転写酵素である、請求項８６に記載の方法。
  89. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項７４に記載の方法。
  90. 前記化合物が一本鎖ＤＮＡ結合性タンパク質もしくは一本鎖化ＲＮＡ分子結合性タンパク質またはヘリカーゼである、請求項８９に記載の方法。
  91. 前記ポリメラーゼに混合物を供する工程が、ＧＣ−リッチなＲＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項７４に記載の方法。
  92. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはそれらの混合物を含む、請求項９１に記載の方法。
  93. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項７４に記載の方法。
  94. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはそれらの混合物を含む、請求項９３に記載の方法。
  95. 前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子発現情報を提供する、請求項８０に記載の方法。
  96. 前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子配列情報を提供する、請求項８０に記載の方法。
  97. 前記サンプルから調製された核酸分子がエクソン対立遺伝子の多様性の情報を提供する、請求項８０に記載の方法。
  98. 前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項８０に記載の方法。
  99. 前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項８０に記載の方法。
  100. 少なくとも１つのｍＲＮＡ分子から生成されたＤＮＡ分子を増幅する方法であって、以下：
    該ｍＲＮＡ分子からｃＤＮＡ分子を取得する工程；
    ｃＤＮＡ分子を改変して、少なくとも１つのｓｓＤＮＡ分子を生成する工程；
    該ｓｓＤＮＡ分子を複数のプライマーに供してｓｓＤＮＡ分子／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的であり そして該複数の中の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工 程；
    該ｓｓＤＮＡ分子／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該定常領域に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    を包含する、方法。
  101. 前記ｍＲＮＡがヒトサンプルから取得される、請求項１００に記載の方法。
  102. 前記ヒトサンプルが生検材料を含む、請求項１０１に記載の方法。
  103. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項１０１に記載の方法。
  104. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項１０１に記載の方法。
  105. 前記取得する工程が、逆転写酵素を用いてｍＲＮＡ分子を逆転写することによるｃＤＮＡ分子の生成を含むようさらに規定される、請求項１００に記載の方法。
  106. 前記逆転写酵素が、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ＡＭＶ逆転写酵素、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ヒトＨＩＶ逆転写酵素、またはこれらの混合物である、請求項１０５に記載の方法。
  107. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項１００に記載の方法。
  108. 前記化合物が一本鎖ＤＮＡ分子結合タンパク質、ヘリカーゼまたはそれらの混合物である、請求項１０７に記載の方法。
  109. 前記ポリメラーゼに混合物を供する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１００に記載の方法。
  110. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはそれらの混合物を含む、請求項１０９に記載の方法。
  111. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する薬剤の存在下で起こる、請求項１００に記載の方法。
  112. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはそれらの混合物を含む、請求項１１１に記載の方法。
  113. 前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子発現情報を提供する、請求項１０１に記載の方法。
  114. 前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子配列情報を提供する、請求項１０１に記載の方法。
  115. 前記サンプルから調製された核酸分子がエクソン対立遺伝子の多様性の情報を提供する、請求項１０１に記載の方法。
  116. 前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１０１に記載の方法。
  117. 前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１０１に記載の方法。
  118. ＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を含むサンプルから総ての核酸を取得する方法であって、以下：
    ＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を提供する工程；
    必要に応じて、二本鎖核酸を変性させる温度に該混合物を加熱する工程；ならびに
    一本鎖ＤＮＡおよび一本鎖ＲＮＡの両方を複製するポリメラーゼに該混合物を供する工程
    を包含する、方法。
  119. 前記方法が本質的に、前記提供する工程、必要に応じて加熱する工程、および供する工程からなる、請求項１１８に記載の方法。
  120. 請求項１１８に記載の方法であって、ここで前記供する工程が、以下：
    前記混合物を複数のプライマーに供して核酸／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的でありそして該複数の中 の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該核酸／プライマー混合物をＤＮＡおよびＲＮＡの両方を効率的に複製するポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に一定の核酸配列を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該定常領域に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    としてさらに規定される、方法。
  121. 前記ポリメラーゼが逆転写酵素である、請求項１１８に記載の方法。
  122. 前記逆転写酵素が、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ＡＭＶ逆転写酵素、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ＨＩＶ逆転写酵素、またはこれらの混合物である、請求項１２１に記載の方法。
  123. 前記逆転写酵素がＭＭＬＶ逆転写酵素である、請求項１２２に記載の方法。
  124. 前記サンプルがヒト由来である、請求項１１８に記載の方法。
  125. 前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、請求項１２４に記載の方法。
  126. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項１２４に記載の方法。
  127. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項１２４に記載の方法。
  128. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項１１８に記載の方法。
  129. 前記化合物が一本鎖ＤＮＡ分子結合タンパク質またはＲＮＡ結合性タンパク質またはヘリカーゼである、請求項１２８に記載の方法。
  130. 前記ポリメラーゼに混合物を供する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡまたはＲＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１２０に記載の方法。
  131. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはそれらの混合物を含む、請求項１３０に記載の方法。
  132. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１２０に記載の方法。
  133. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはそれらの混合物を含む、請求項１３２に記載の方法。
  134. 前記サンプルから調製された核酸分子が核酸配列情報を提供する、請求項１２４に記載の方法。
  135. 前記サンプルから調製された核酸分子が対立遺伝子の多様性の情報を提供する、請求項１２４に記載の方法。
  136. 前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１２４に記載の方法。
  137. 前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１２４に記載の方法。
  138. ＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を含むサンプルからＤＮＡまたはＲＮＡをそれぞれ区別して取得する方法であって、以下：
    該ＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を提供する工程；
    ＤＮＡまたはＲＮＡに選択的に影響する温度に、該混合物を加熱する工程；ならびに
    それぞれＤＮＡまたはＲＮＡを選択的に複製するポリメラーゼに該混合物を供する工程
    を包含する、方法。
  139. 請求項１３８に記載の方法であって、前記提供する工程が、以下：
    前記混合物を複数のプライマーに供して核酸／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的でありそして該複数の中 の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該核酸／プライマー混合物を、それぞれＤＮＡまたはＲＮＡを選択的に複製するポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に既知の核酸配列を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該定常領域に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    としてさらに規定される、方法。
  140. 前記サンプルがヒト由来である、請求項１３８に記載の方法。
  141. 前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、請求項１３８に記載の方法。
  142. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項１３８に記載の方法。
  143. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項１３８に記載の方法。
  144. ＤＮＡおよびＲＮＡを含むサンプルからＤＮＡを区別して取得する方法であって、以下：
    ＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を提供する工程；
    少なくとも約９４℃〜約１００℃の温度に該混合物を加熱して、一本鎖核酸を生成する工程；ならびに
    ＤＮＡテンプレートのみを複製するポリメラーゼに該混合物を供する工程
    を包含する、方法。
  145. 請求項１４４に記載の方法であって、以下の工程：
    前記混合物を複数のプライマーに供して核酸／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで該プライマーが実質的に自己非相補的でありそして該複数の中 の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで該配列が５’から３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該核酸／プライマー混合物を、選択的にＤＮＡを複製するポリメラーゼに供する工程であって、該供する工程が各々の末端に一定の核酸配列を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して各々の末端に該一定の核酸配列を含む複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応が該一定の核酸配列に対して相補的なプライマーを利用する、工程
    をさらに包含する、方法。
  146. 前記ポリメラーゼがＤＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼである、請求項１４５に記載の方法。
  147. 請求項１４６に記載の方法であって、ここで、前記ＤＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼが、φ２９ポリメラーゼ、Ｂｓｔポリメラーゼ、Ｖｅｎｔポリメラーゼ、９°Ｎｍポリメラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼＩのクレノウ Ｅｘｏ−フラグメント、３’−５’エキソヌクレアーゼ活性を欠損した変異型Ｔ７ファージＤＮＡポリメラーゼ、またはこれらの混合物である、方法。
  148. 前記ポリメラーゼがＤＮＡポリメラーゼＩのクレノウ Ｅｘｏ−フラグメントである、請求項１４７に記載の方法。
  149. 前記方法が、前記核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、請求項１４５に記載の方法。
  150. 前記化合物が一本鎖ＤＮＡ分子結合タンパク質またはヘリカーゼである、請求項１４９に記載の方法。
  151. 前記ポリメラーゼに混合物を供する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１４５に記載の方法。
  152. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはこれらの混合物を含む、請求項１５１に記載の方法。
  153. 前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチなＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、請求項１４５に記載の方法。
  154. 前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはこれらの混合物を含む、請求項１５３に記載の方法。
  155. 前記サンプルがヒト由来である、請求項１４４に記載の方法。
  156. 前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、請求項１５５に記載の方法。
  157. 前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、請求項１５５に記載の方法。
  158. 前記サンプルが１つの細胞を含む、請求項１５５に記載の方法。
  159. 前記サンプルから調製された核酸分子がゲノムのコピー数情報を提供する、請求項１５５に記載の方法。
  160. 前記サンプルから調製された核酸分子がゲノム配列情報を提供する、請求項１５５に記載の方法。
  161. 前記サンプルから調製された核酸分子が対立遺伝子の多様性の情報を提供する、請求項１５５に記載の方法。
  162. 前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１５５に記載の方法。
  163. 前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、請求項１５５に記載の方法。
  164. ｄｓＤＮＡおよびＲＮＡを含むサンプルからＲＮＡを区別して得る方法であって、該方法は、以下：
    該ｄｓＤＮＡおよびＲＮＡの混合物を提供する工程；
    ｄｓＤＮＡの変性を防ぐように、該混合物を、約７５℃を超えない温度まで必要に応じて加熱する工程；および
    該混合物を、一本鎖ＲＮＡテンプレートのみを複製するポリメラーゼに供する工程
    を包含する、方法。
  165. 請求項１６４に記載の方法であって、ここで、前記供する工程が、以下：
    前記混合物を複数のプライマーに供して核酸／プライマー混合物を形成する工程であって、該プライマーは、実質的に非自己相補的であり、かつ、該複数あるう ちの他のプライマーに対して、実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで、該配列は、５’→３’方向で、定常領域および可変領域を含む、工程；
    該供する工程によって、該定常核酸配列を各々末端に含む複数のＤＮＡ分子が生成される条件の下、該核酸／プライマー混合物を、一本鎖ＲＮＡのみをプライミングし、かつ、複製するポリメラーゼに供する工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して、各末端の該定常領域を含む該複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応は、該定常領域に相補的なプライマーを利用する、工程
    として、さらに規定される、方法。
  166. 請求項１６５に記載の方法であって、ここで、前記ポリメラーゼが、逆転写酵素である、方法。
  167. 請求項１６６に記載の方法であって、ここで、前記逆転写酵素は、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ＡＭＶ逆転写酵素、ＭＭＬＶ逆転写酵素、ＨＩＶ逆転写酵素、またはそれらの混合物である、方法。
  168. 請求項１６６に記載の方法であって、前記逆転写酵素が、ＭＭＬＶ逆転写酵素である、方法。
  169. 請求項１６５に記載の方法であって、ここで、該方法は、
    前記核酸分子／プライマー混合物をポリメラーゼ連続移動性増強化合物に供する工程をさらに包含する、方法。
  170. 請求項１６９に記載の方法であって、ここで、前記化合物が、一本鎖ＤＮＡ結合タンパク質もしくは一本鎖ＲＮＡ結合タンパク質、またはヘリカーゼである、方法。
  171. 請求項１６５に記載の方法であって、ここで、前記ポリヌクレアーゼに供する工程が、ＧＣリッチなＲＮＡを介する重合を促進する１以上の薬剤の存在下で生じる、方法。
  172. 請求項１７１に記載の方法であって、ここで、前記薬剤は、ＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、またはこれらの混合物を含む、方法。
  173. 請求項１６５に記載の方法であって、ここで、前記増幅する工程が、ＧＣ−リッチＤＮＡを介した重合反応を促進する１つ以上の薬剤の存在下で起こる、方法。
  174. 請求項１７３に記載の方法であって、前記薬剤がＤＭＳＯ、７−デアザ−ｄＧＴＰ、ベタイン、またはこれらの混合物を含む、方法。
  175. 請求項１６４に記載の方法であって、前記サンプルがヒト由来である、方法。
  176. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルが血液、血清または血漿を含む、方法。
  177. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルが、毛包、乳頭吸引物、精液、脳脊髄液、尿、痰、唾液、気管洗浄物、子宮洗浄物、便、汗、頬擦過標本、免疫沈降されたクロマチン、物理的に単離されたクロマチン、またはホルマリン固定化組織を含む、方法。
  178. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルが１つの細胞を含む、方法。
  179. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子発現情報を提供する、方法。
  180. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルから調製された核酸分子が遺伝子配列情報を提供する、方法。
  181. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルから調製された核酸分子がエキソン対立遺伝子の多様性の情報を提供する、方法。
  182. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルから調製された核酸分子が、疾患の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、方法。
  183. 請求項１７５に記載の方法であって、前記サンプルから調製された核酸分子が、癌の検出、モニタリングおよび／または処置のための情報を提供する、方法。
  184. 複数のポリヌクレオチドであって、ここで、該複数であるポリヌクレオチドは、実質的に非自己相補的であり、かつ、該複数のもののうち他のポリヌクレオチドに対して実質的に非相補的である、核酸配列を含む、ポリヌクレオチド。
  185. 請求項１８４に記載の複数のものであって、ここで、前記核酸配列が、前記ポリヌクレオチドを、以下：自己ハイブリダイゼーション：自己プライミング；該複数のものうちの別のポリヌクレオチドに対するハイブリダイゼーション；複数の重合反応の開始
    のうちの少なくとも１つが実質的に不可能であるものとする
    としてさらに定義される、複数のもの。
  186. 請求項１８４に記載の複数のものであって、ここで、前記ポリヌクレオチドが、５’→３’の方向を有し、可変領域に対して５’側にある定常領域を含むとしてさらに規定される、複数のもの。
  187. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域は、その後の増幅のためのものである、複数のもの。
  188. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記可変領域が、ランダムアニーリング、ランダムプライミングまたはそれらの両方のためのものである、複数のもの。
  189. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域および可変領域は、各々、２つの非相補的ヌクレオチドから構成される、複数のもの。
  190. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域および可変領域は、各々、グアニン、アデニン、または両方から構成される、複数のもの。
  191. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域および可変領域は、各々、シトシン、チミジン、または両方から構成される、複数のもの。
  192. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域および可変領域は、各々、アデニン、シトシンまたは両方から構成される、複数のもの。
  193. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域および可変領域は、各々、グアニン、チミジンまたはその両方から構成される、複数のもの。
  194. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記定常領域が、約６〜約１００のヌクレオチドを含む、複数のもの。
  195. 請求項１８６に記載の複数のものであって、ここで、前記第２の領域は、約４ヌクレオチド〜約２０ヌクレオチドを含む、複数のもの。
  196. 請求項１８６に記載の複数のものであって、前記ポリヌクレオチドが、その遠位の３’末端の約０個〜約３個のランダムな塩基からさらに構成される、複数のもの。
  197. 請求項１８６に記載の複数のものであって、第１の領域および第２の領域は、各々、グアニンおよびチミジンから構成され、該ポリヌクレオチドは、その３’末端に、０、１、２、または３のランダムな塩基を含む、複数のもの。
  198. 請求項１８４に記載の複数のものであって、前記核酸配列が、塩基または骨格アナログから構成される、複数のもの。
  199. 請求項１８４に記載の複数のものであって、ここで、前記複数のプライマーのうちのポリヌクレオチドの各々の濃度が、所定の核酸の最適なプライミングについて調節された、複数のもの。
  200. 請求項１９９に記載の複数のものであって、ここで、前記複数のもののうちの全てのポリヌクレオチドの濃度が、等モル濃度である、複数のもの。
  201. 請求項１９９に記載の複数のものであって、ここで、前記所定の核酸が、ゲノムの一部分または全てを含む、複数のもの。
  202. 請求項１９９に記載の複数のものであって、前記所定の核酸が、トランスクリプトームの一部分または全てを含む、複数のもの。
  203. ゲノム、トランスクリプトーム、またはその両方を増幅する方法であって、該方法は、以下：
    ゲノムＤＮＡ、ＲＮＡ、または両方を取得する工程；
    該ゲノムＤＮＡ、ＲＮＡ、または両方を改変して、少なくとも１つの一本鎖核酸分子を生成する工程；
    該一本鎖核酸分子を複数のプライマーに供して、核酸／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで、該プライマーは、実質的に自己非相補的でありかつ その複数の中の他のプライマーに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで、該配列は、５’→３’方向に定常領域および可変領域を含む、工程；
    該核酸／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程であって、その供する工程が各々の末端に該定常領域を含む複数のＤＮＡ分子を生成する条件下である、 工程；ならびに、ポリメラーゼ連鎖反応を介してその複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、その反応は、該定常領域に対して相補的なプライマーを利用す る、工程
    を包含する、方法。
  204. 請求項２０３に記載の方法であって、ここで、該方法は、以下の工程：
    増幅したＤＮＡ分子を改変して、一本鎖分子を生成する工程であって、該一本鎖分子は、その５’末端および３’末端に該定常領域を含み、ここで、該ＤＮＡが、一本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、またはそれらの混合物としてさらに規定される、工程；
    該一本鎖ＤＮＡ分子のうちの少なくとも１つの領域を、支持体に固定されたオリゴヌクレオチドの３’末端にある相補的領域にハイブリダイズさせて、一本鎖ＤＮＡ／オリゴヌクレオチドハイブリッドを生成する工程；および
    該オリゴヌクレオチドの３’末端を伸長させて、伸長ポリヌクレオチドを生成する工程
    を包含する、方法。
  205. 請求項２０３に記載の方法であって、該方法は、前記一本鎖ＤＮＡ／オリゴヌクレオチドハイブリッドから前記一本鎖ＤＮＡを取り出す工程をさらに包含する、方法。
  206. 複数のポリヌクレオチドを備えるキットであって、ここで、該ポリヌクレオチドは、実質的に自己非相補的でありかつ、該複数の中の他のポリヌクレオチドに対して実質的に非相補的である核酸配列を含み、ここで、その複数のものが、適切な容器中に分散されている、キット。
  207. ポリメラーゼをさらに備える、請求項２０６に記載のキット。
  208. 前記ポリメラーゼが、鎖置換ポリメラーゼである、請求項２０７に記載のキット。
  209. 請求項２０８に記載のキットであって、ここで、前記鎖置換ポリメラーゼが、φ２９ポリメラーゼ、Ｂｓｔポリメラーゼ、Ｖｅｎｔポリメラーゼ、９°Ｎｍポリメ ラーゼ、ＤＮＡ ポリメラーゼＩのクレノウフラグメント、ＭＭＬＶ逆転写酵素、Ｔｔｈ ＤＮＡポリメラーゼ、ＡＭＶ逆転写酵素、ヒトＨＩＶ逆転写酵素、３’−５’エキソヌクレアーゼ活性を欠く変異型Ｔ７ ファージＤＮＡポリメラーゼ、またはそれらの混合物である、キット。
  210. ＤＮＡ分子の複数の集団に含まれるあるＤＮＡ集団を増幅する方法であって、該方法は、以下の工程：
    ＤＮＡ分子の複数の集団を取得する工程であって、ここで、該複数あるうちの少なくとも１つの集団は、５’→３’方向に、以下：該集団に特異的な既知の同定配列および既知のプライマー増幅配列を有するＤＮＡ分子を含む、工程；ならびに、
    ポリメラーゼ連鎖反応によって該ＤＮＡ分子の集団を増幅する工程であって、該反応では、該同定配列についてのプライマーを利用する、工程
    を包含する、方法。
  211. 請求項２１０に記載の方法であって、前記取得工程は、
    既知プライマー増幅配列を含むＤＮＡ分子の集団を得る工程；
    ５’→３’方向に、既知の同定配列と該既知のプライマー増幅配列とを有するプライマーを用いて該ＤＮＡ分子を増幅する工程；および
    該集団を、少なくとも１つの他のＤＮＡ分子の集団を混合する工程
    として、さらに、規定される、方法。
  212. 請求項２１０に記載の方法であって、ここで、ＤＮＡ分子の前記集団が、ゲノムＤＮＡを含む、方法。
  213. 請求項２１０に記載の方法であって、ここで、ＤＮＡ分子の前記集団が、ゲノムを含む、方法。
  214. 請求項２１０に記載の方法であって、ここで、ＤＮＡ分子の前記集団は、トランスクリプトームを含む、方法。
  215. ＤＮＡ分子の複数の集団に含まれるあるＤＮＡ集団を増幅する方法であって、
    該方法は、以下の工程：
    ＤＮＡ分子の複数の集団を取得する工程であって、該複数のうちの少なくとも１つの集団は、ＤＮＡ分子を含み、ここで、該ＤＮＡ分子のうちの５’末端が、５’→３’方向に、
    以下：
    該集団に特異的な既知の同定配列を含む一本鎖領域；および
    既知のプライマー増幅配列
    を含む、工程；
    複数の該ＤＮＡ分子の一本鎖既知同定配列の少なくとも一部分が表面に対して結合することを介して、該集団を単離する工程；および
    該プライマー増幅配列についてのプライマーを利用するポリメラーゼ連鎖反応によって該単離されたＤＮＡ分子を増幅する工程
    を包含する、方法。
  216. 請求項２１５に記載の方法であって、ここで前記得る工程は、以下：
    ＤＮＡ分子の集団を得る工程であって、該分子は、既知のプライマー増幅配列を含む、工程；
    該ＤＮＡ分子を、５’→３’方向で、以下を含むプライマー：
    既知の同定配列；
    複製不能リンカー；および
    該既知のプライマー増幅配列；
    で増幅する工程；ならびに
    該集団を、ＤＮＡ分子の少なくとも１つの他の集団と混合する工程、
    としてさらに規定される、方法。
  217. 請求項２１６に記載の方法であって、ここで前記単離する工程は、前記一本鎖の既知の同定配列の少なくとも一部を、該既知の同定配列に相補的な領域を含む固定化オリゴヌクレオチドに結合する工程としてさらに規定される、方法。
  218. 増幅されたゲノム、増幅されたトランスクリプトーム、またはその両方を固定化する方法であって：
    増幅したゲノム、増幅されたトランスクリプトーム、またはその両方を得る工程であって、ここで該ゲノム、トランスクリプトームまたはその両方に由来する複数の分子は、既知のプライマー増幅配列を、該分子の５’末端および３’末端の両方に含む、工程；ならびに
    該複数の分子を支持体に結合する工程、
    を包含する、方法。
  219. 請求項２１８に記載の方法であって、ここで前記結合する工程は、前記複数の分子を前記支持体に、前記既知のプライマー増幅配列を介して共有結合する工程を包含するとさらに規定される、方法。
  220. 請求項２１９に記載の方法であって、ここで前記共有結合する工程は、以下：
    少なくとも一本鎖分子の領域を、前記支持体に固定化されたオリゴヌクレオチドの３’末端における相補的領域にハイブリダイズさせる工程；ならびに
    該オリゴヌクレオチドの３’末端を伸長して、一本鎖分子／伸長したポリヌクレオチドハイブリッドを生成する工程、
    としてさらに規定される、方法。
  221. 請求項２２０に記載の方法であって、ここで該方法は、前記一本鎖ＤＮＡ分子を、前記一本鎖分子／伸長したポリヌクレオチドのハイブリッドから除去して、伸長したポリヌクレオチドを生成する工程をさらに包含する、方法。
  222. 請求項２２０に記載の方法であって、該方法は、前記伸長したポリヌクレオチドを複製する工程をさらに包含する、方法。
  223. 請求項２２２に記載の方法であって、ここで前記複製する工程は、以下：
    前記伸長したポリヌクレオチドに、ポリメラーゼと、前記既知のプライマー増幅配列に相補的なプライマーとを提供する工程；
    該プライマーの３’末端を伸長させて、伸長したプライマー分子を形成する工程；ならびに
    該伸長したプライマー分子を遊離させる工程、
    としてさらに規定される、方法。
  224. 増幅したゲノムを固定化する方法であって：
    増幅したゲノムを得る工程であって、ここで該ゲノムに由来する複数のＤＮＡ分子は、以下：
    タグ；ならびに
    該分子の５’末端および３’末端の両方に既知のプライマー増幅配列、
    を含む、工程；ならびに
    複数の該ＤＮＡ分子を支持体に結合する工程、
    を包含する、方法。
  225. 請求項２２４に記載の方法であって、ここで前記結合する工程は、前記複数のＤＮＡ分子を、前記タグを介して前記固体支持体に結合する工程を包含するとしてさらに規定される、方法。
  226. 請求項２２４に記載の方法であって、ここで前記タグはビオチンを含み、前記支持体はストレプトアビジンを含む、方法。
  227. 請求項２２４に記載の方法であって、ここで前記タグは、アミノ基またはカルボキシ基を含む、方法。
  228. 請求項２２４に記載の方法であって、ここで前記タグは一本鎖領域を含み、前記支持体は、該タグの一領域に相補的な配列を含むオリゴヌクレオチドを含む、方法。
  229. 請求項２２８に記載の方法であって、ここで前記一本鎖領域は、同定配列を含むとさらに規定される、方法。
  230. 請求項２２９に記載の方法であって、ここで前記ＤＮＡ分子は、前記同定配列に対して３’側にある複製不能リンカーと、前記既知のプライマー増幅配列に対して５’側にある複製不能リンカーとを含むとさらに規定される、方法。
  231. 請求項２２４に記載の方法であって、ここで前記方法は、前記固定化されたゲノムから夾雑物を除去する工程をさらに包含する、方法。
  232. ゲ ノムＤＮＡを含む複数のｄｓＤＮＡ分子であって、ここで該分子が変性されて、第１鎖および第２鎖の分子を生成するとき、該第１鎖および該第２鎖の分子の各 々は、該第１鎖および該第２鎖の分子のそれぞれの末端で第１の末端領域および第２の末端領域を含み、該第１の分子の第１の末端領域および第２の末端領域の 各々は、該第１の分子における該第１の末端領域および該第２の末端領域における配列に対して実質的に非自己相補的である核酸領域を含み、そして該第２の分 子の該第１の末端領域および該第２の末端領域の各々は、該第２の分子における該第１の末端領域および該第２の末端領域における配列に対して実質的に非自己 相補的である核酸配列を含む、ｄｓＤＮＡ分子。
  233. 請求項２３２に記載の複数のものであって、ここで前記第１鎖の分子の前記 第１の末端領域および前記第２の末端領域の各々は、該複数のものにおける他の分子の第１鎖の第１の末端領域および第２の末端領域に対して実質的に非自己相 補的であり、そして前記第２鎖分子の第１の末端領域および第２の末端領域の各々は、該複数のものにおける他の分子の該第２鎖の第１末端領域および第２末端 領域に対して実質的に非自己相補的である、複数のもの。
  234. 請求項２３２に記載の複数のものであって、ここで前記ＤＮＡ分子は、前記第１の末端領域および前記第２の末端領域においてホモポリマータグをさらに含み、そして該末端領域は、該分子上の最後から２番目から該ホモポリマータグまでである、複数のもの。
  235. 請求項２３２に記載の複数のものであって、ゲノムライブラリーとしてさらに規定される、複数のもの。
  236. 物質の限定された供給源からゲノムの配列決定を行う方法であって、該方法は、以下の工程：
    物質の限定された供給源から少なくとも１つの二本鎖ＤＮＡ分子または一本鎖ＤＮＡ分子を得る工程；
    該二本鎖ＤＮＡ分子を熱に供して、少なくとも１つの一本鎖ＤＮＡ分子を生成する工程；
    該一本鎖ＤＮＡ分子を複数のプライマーに供して、ＤＮＡ分子／プライマー混合物を形成する工程であって、ここで、該プライマーは、非自己相補的でありかつ 該複数あるうちの他のプライマーに対して実質的に非相補的である、核酸配列を含み、ここで、該配列は、５’→３’方向で、定常領域および可変領域を含む、 工程；
    該定常核酸配列を各々末端に含む複数のＤＮＡ分子を生成される条件の下、該ＤＮＡ分子／プライマー混合物をポリメラーゼに供する工程；ならびに
    ポリメラーゼ連鎖反応を介して、該複数のＤＮＡ分子を増幅する工程であって、該反応は、該定常領域に相補的なプライマーを利用する、工程；
    該複数の増幅した分子から、増幅したＤＮＡ分子の第１のサンプルおよび第２のサンプルを提供する工程；
    該第１のサンプルからの該増幅した少なくともいくらかのＤＮＡ分子の配列決定を行い、少なくとも１つの特定のＤＮＡ配列を得る工程；
    ホモポリマー性のポリＣ／ポリＧ配列を、該第２のサンプルからの増幅したＤＮＡ分子の末端に組み込み、ホモポリマー性増幅分子を生成する工程；
    ホモポリマー性増幅分子のうち少なくともいくつかを、ポリＣプライマーおよび該特定のＤＮＡ配列に相補的なプライマー用いて該第２のサンプルから増幅する工程；および
    さらなる特定配列に関連して、該配列決定工程および増幅工程を反復して、それによって、該ゲノムの実質的に完全なコンティグを生じる工程
    を包含する、方法。
  237. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、前記ホモポリマー性配列を取り込む工程は、以下：
    ｄＧＴＰの存在下で、末端デオキシヌクレオチドトランスフェラーゼによって、 前記増幅したＤＮＡフラグメントの３’末端を伸長する工程；
    前記ホモポリマー性ポリＣ／ポリＧ配列を含むアダプターを、前記増幅したＤＮＡフラグメントの末端に連結させる工程；または、
    該増幅したＤＮＡフラグメントと、その５’末端にホモポリマー性ポリＣ配列を含みかつ該３’末端に定常領域を含むプライマーとを用いて、該増幅したＤＮＡフラグメントを複製する工程
    のうち１つを包含する、方法。
  238. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、前記配列決定工程は、
    ベクターに、前記第１のサンプルからの増幅されたＤＮＡフラグメントをクローニングする工程；および該クローニングされたフラグメントのうちの少なくともいくつかを配列決定する工程として、
    さらに規定される、方法。
  239. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、前記増幅分子のうちの特異的配列が、前記第１のサンプルの配列決定工程によって、得られ、かつ、前記さらなる特定配列うちの1以上が、前記第２のサンプルからの増幅された分子の配列決定工程によって得られる、方法。
  240. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、物質の前記限定された供給源が、培養工程に対して実質的に耐性である微生物である、方法。
  241. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、物質の前記限定された供給源が、絶滅種である、方法。
  242. 請求項２３６に記載の方法であって、ここで、前記ゲノムの配列決定工程は、最小の冗長性をもって達成される、方法。
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Families Citing this family (147)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006071776A2 (en) * 2004-12-23 2006-07-06 Ge Healthcare Bio-Sciences Corp. Ligation-based rna amplification
US20040024193A1 (en) * 2002-07-26 2004-02-05 Williams Gregg T. Method of detecting and quantifying hepatitis C virus
US20090124514A1 (en) * 2003-02-26 2009-05-14 Perlegen Sciences, Inc. Selection probe amplification
US20060183132A1 (en) * 2005-02-14 2006-08-17 Perlegen Sciences, Inc. Selection probe amplification
US8206913B1 (en) * 2003-03-07 2012-06-26 Rubicon Genomics, Inc. Amplification and analysis of whole genome and whole transcriptome libraries generated by a DNA polymerization process
EP1636337A4 (en) 2003-06-20 2007-07-04 Illumina Inc METHODS AND COMPOSITIONS USEFUL FOR THE AMPLIFICATION AND GENOTYPING OF THE GENOME
US20050181394A1 (en) * 2003-06-20 2005-08-18 Illumina, Inc. Methods and compositions for whole genome amplification and genotyping
US7459274B2 (en) * 2004-03-02 2008-12-02 Orion Genomics Llc Differential enzymatic fragmentation by whole genome amplification
JP3972106B2 (ja) * 2004-03-03 2007-09-05 大学共同利用機関法人情報・システム研究機構 ゲノムライブラリー作製方法、および同方法により作製されたゲノムライブラリー
EP2380993B1 (en) 2004-03-08 2015-12-23 Rubicon Genomics, Inc. Method for generating and amplifying DNA libraries for sensitive detection and analysis of DNA methylation
ES2610781T3 (es) * 2004-09-14 2017-05-03 Argos Therapeutics, Inc. Amplificación de patógenos independiente de la cepa y vacunas para estos
EP1848819A4 (en) * 2005-02-16 2010-01-06 Genetic Technologies Ltd METHOD FOR GENETIC ANALYSIS WITH AMPLIFICATION OF COMPLEMENTARY DUPLICATES
US7449297B2 (en) 2005-04-14 2008-11-11 Euclid Diagnostics Llc Methods of copying the methylation pattern of DNA during isothermal amplification and microarrays
EP3492602A1 (en) 2005-06-15 2019-06-05 Complete Genomics, Inc. Single molecule arrays for genetic and chemical analysis
US20070003938A1 (en) * 2005-06-30 2007-01-04 Perlegen Sciences, Inc. Hybridization of genomic nucleic acid without complexity reduction
US20070031857A1 (en) 2005-08-02 2007-02-08 Rubicon Genomics, Inc. Compositions and methods for processing and amplification of DNA, including using multiple enzymes in a single reaction
EP1924705A1 (en) * 2005-08-02 2008-05-28 Rubicon Genomics, Inc. Isolation of cpg islands by thermal segregation and enzymatic selection-amplification method
US20090137415A1 (en) * 2005-08-05 2009-05-28 Euclid Diagnostics Llc SUBTRACTIVE SEPARATION AND AMPLIFICATION OF NON-RIBOSOMAL TRANSCRIBED RNA (nrRNA)
CA2620081A1 (en) * 2005-09-16 2007-03-29 454 Life Sciences Corporation Cdna library preparation
US9127302B2 (en) * 2005-09-20 2015-09-08 Janssen Diagnostics, Llc System for the detection and enumeration of suspect target cells in a mixed cell population
US9134237B2 (en) * 2005-09-20 2015-09-15 Janssen Diagnotics, LLC High sensitivity multiparameter method for rare event analysis in a biological sample
US20070092899A1 (en) * 2005-10-21 2007-04-26 The Regents Of The University Of California Multiple displacement amplification with blocker DNA
AU2006339538A1 (en) 2005-11-08 2007-09-13 Euclid Diagnostics Llc Materials and methods for assaying for methylation of CpG islands associated with genes in the evaluation of cancer
US20080057499A1 (en) * 2006-02-06 2008-03-06 Affymetrix, Inc. Methods for high specificity whole genome amplification and hybridization
ES2337207T3 (es) * 2006-04-12 2010-04-21 Medical Research Council Procedimiento para determinar el numero de copias.
WO2007136874A2 (en) * 2006-05-18 2007-11-29 President And Fellows Of Harvard College Genomic library construction
EP2061801A4 (en) * 2006-06-14 2009-11-11 Living Microsystems Inc DIAGNOSIS OF FETAL ANOMALIES BY COMPARATIVE GENOMIC HYBRIDIZATION ANALYSIS
EP2765202B1 (en) * 2006-08-01 2017-02-01 Gen-Probe Incorporated Methods of nonspecific target capture of nucleic acids
WO2008143627A2 (en) * 2006-09-14 2008-11-27 Ibis Biosciences, Inc. Targeted whole genome amplification method for identification of pathogens
ES2725003T3 (es) * 2007-03-28 2019-09-18 Signal Diagnostics Sistema y método de análisis de alta resolución de ácidos nucleicos para detectar variaciones de secuencia
US7794985B2 (en) * 2007-04-04 2010-09-14 Ghc Technologies, Inc. Methods and compositions for rapid amplification, capture and detection of nucleic acids and proteins
CN101720359A (zh) * 2007-06-01 2010-06-02 454生命科学公司 从多重混合物中识别个别样本的系统和方法
WO2009017743A2 (en) * 2007-07-30 2009-02-05 Argos Therapeutics, Inc. Improved primers and probes for the amplification and detection of hiv gag, rev and nef polynucleotides
DK2198042T3 (en) 2007-09-17 2017-01-23 Mdxhealth Sa New markers for bladder cancer detection
US20090099040A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-16 Sigma Aldrich Company Degenerate oligonucleotides and their uses
US8592150B2 (en) 2007-12-05 2013-11-26 Complete Genomics, Inc. Methods and compositions for long fragment read sequencing
US20090291475A1 (en) * 2008-04-23 2009-11-26 Kai Qin Lao Sequence amplification with linear primers
WO2009148560A2 (en) * 2008-05-30 2009-12-10 Board Of Regents, The Universtiy Of Texas System Methods and compositions for nucleic acid sequencing
US20100028955A1 (en) * 2008-07-22 2010-02-04 Life Technologies Corporation Sequence Amplification with Target Primers
JP5652843B2 (ja) * 2008-10-17 2015-01-14 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 Ｄｎａ増幅法
US10669574B2 (en) 2008-11-18 2020-06-02 XCR Diagnostics, Inc. DNA amplification technology
JP2012514461A (ja) * 2009-01-06 2012-06-28 ヨウ，キミン 標的核酸の交差プライミング増幅
WO2010102823A1 (en) 2009-03-13 2010-09-16 Oncomethylome Sciences Sa Novel markers for bladder cancer detection
US9524369B2 (en) * 2009-06-15 2016-12-20 Complete Genomics, Inc. Processing and analysis of complex nucleic acid sequence data
FR2949120A1 (fr) * 2009-08-13 2011-02-18 Centre Nat Rech Scient Procede de detection d'un adn circularise et utilisation de ce procede pour la detection de mutations
US9243290B2 (en) 2009-10-09 2016-01-26 Stc.Unm Polony sequencing methods
US8835358B2 (en) 2009-12-15 2014-09-16 Cellular Research, Inc. Digital counting of individual molecules by stochastic attachment of diverse labels
US20110195457A1 (en) * 2010-02-09 2011-08-11 General Electric Company Isothermal amplification of nucleic acid using primers comprising a randomized sequence and specific primers and uses thereof
US20190300945A1 (en) 2010-04-05 2019-10-03 Prognosys Biosciences, Inc. Spatially Encoded Biological Assays
US10787701B2 (en) 2010-04-05 2020-09-29 Prognosys Biosciences, Inc. Spatially encoded biological assays
DK201000356A (en) * 2010-04-22 2011-10-23 Statens Seruminstitut New nucleotide sequence amplification Method
KR101334072B1 (ko) * 2010-11-25 2013-11-29 한국표준과학연구원 핵산 정량 방법 및 키트
EP2668294B1 (en) 2011-01-28 2021-04-07 The Broad Institute, Inc. Paired end bead amplification and high throughput sequencing
US9290815B2 (en) 2011-02-21 2016-03-22 Qiagen Gmbh Method for quantifying human DNA
GB201106254D0 (en) 2011-04-13 2011-05-25 Frisen Jonas Method and product
WO2012166425A2 (en) * 2011-05-27 2012-12-06 President And Fellows Of Harvard College Methods of amplifying whole genome of a single cell
WO2013022961A1 (en) * 2011-08-08 2013-02-14 3The Broad Institute Compositions and methods for co-amplifying subsequences of a nucleic acid fragment sequence
EP2798089B1 (en) 2011-12-30 2018-05-23 Bio-rad Laboratories, Inc. Methods and compositions for performing nucleic acid amplification reactions
CA2865575C (en) 2012-02-27 2024-01-16 Cellular Research, Inc. Compositions and kits for molecular counting
AU2013232131B2 (en) * 2012-03-13 2018-09-20 Integrated Dna Technologies, Inc. Methods and compositions for size-controlled homopolymer tailing of substrate polynucleotides by a nucleic acid polymerase
WO2013143133A1 (zh) * 2012-03-30 2013-10-03 深圳华大基因科技服务有限公司 全基因组扩增方法及其应用
EP2844766B1 (en) * 2012-04-30 2016-11-23 Qiagen GmbH Targeted dna enrichment and sequencing
US10870099B2 (en) 2012-07-26 2020-12-22 Illumina, Inc. Compositions and methods for the amplification of nucleic acids
CN104797718B (zh) * 2012-09-12 2020-05-08 加利福尼亚大学董事会 通过单链扩增和测序对单个细胞进行精确基因组测序
EP2722399A1 (en) * 2012-10-18 2014-04-23 Roche Diagniostics GmbH Method for preventing high molecular weight products during amplification
KR101451874B1 (ko) * 2013-02-27 2014-10-16 국민대학교산학협력단 실시간 ｐｃｒ을 이용한 미생물의 최단시간 검출방법
US9868979B2 (en) 2013-06-25 2018-01-16 Prognosys Biosciences, Inc. Spatially encoded biological assays using a microfluidic device
SG10201806890VA (en) 2013-08-28 2018-09-27 Cellular Res Inc Massively parallel single cell analysis
KR102323375B1 (ko) 2013-10-09 2021-11-08 플루어레센트릭 인코포레이티드 다중 프로브
JP2016537003A (ja) 2013-11-18 2016-12-01 ルビコン ゲノミクス インコーポレイテッド バックグラウンド減少のための分解可能なアダプター
US9293316B2 (en) * 2014-04-04 2016-03-22 Thermo Finnigan Llc Ion separation and storage system
CN105463585B (zh) * 2014-09-12 2018-04-20 清华大学 基于单链dna分子构建测序文库的方法及其应用
US10344317B2 (en) 2014-10-13 2019-07-09 Mgi Tech Co., Ltd Method and a sequence combination for producing nucleic acid fragments
US10563196B2 (en) * 2014-10-17 2020-02-18 Mgi Tech Co., Ltd Primer for nucleic acid random fragmentation and nucleic acid random fragmentation method
WO2016138292A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 Igenomx International Genomics Corporation Methods and compositions for in silico long read sequencing
EP3262192B1 (en) 2015-02-27 2020-09-16 Becton, Dickinson and Company Spatially addressable molecular barcoding
ES2934982T3 (es) 2015-03-30 2023-02-28 Becton Dickinson Co Métodos para la codificación con códigos de barras combinatorios
US10301660B2 (en) 2015-03-30 2019-05-28 Takara Bio Usa, Inc. Methods and compositions for repair of DNA ends by multiple enzymatic activities
US20180148716A1 (en) * 2015-03-31 2018-05-31 Qiagen Gmbh Efficiency improving ligation methods
ES2955916T3 (es) 2015-04-10 2023-12-11 Spatial Transcriptomics Ab Análisis múltiplex de especímenes biológicos de ácidos nucleicos espacialmente distinguidos
WO2016172373A1 (en) 2015-04-23 2016-10-27 Cellular Research, Inc. Methods and compositions for whole transcriptome amplification
CA2983819A1 (en) * 2015-04-24 2016-10-27 Atila Biosystems Incorporated Amplification with primers of limited nucleotide composition
AU2016297510B2 (en) 2015-07-17 2021-09-09 President And Fellows Of Harvard College Methods of amplifying nucleic acid sequences
WO2017021449A1 (en) * 2015-08-06 2017-02-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Target enrichment by single probe primer extension
CN105602939A (zh) * 2015-09-02 2016-05-25 序康医疗科技（苏州）有限公司 扩增dna的方法
US10619186B2 (en) 2015-09-11 2020-04-14 Cellular Research, Inc. Methods and compositions for library normalization
CN105506125B (zh) * 2016-01-12 2019-01-22 上海美吉生物医药科技有限公司 一种dna的测序方法及一种二代测序文库
US11339427B2 (en) 2016-02-12 2022-05-24 Jumpcode Genomics, Inc. Method for target specific RNA transcription of DNA sequences
US10301677B2 (en) 2016-05-25 2019-05-28 Cellular Research, Inc. Normalization of nucleic acid libraries
US10202641B2 (en) 2016-05-31 2019-02-12 Cellular Research, Inc. Error correction in amplification of samples
US10640763B2 (en) 2016-05-31 2020-05-05 Cellular Research, Inc. Molecular indexing of internal sequences
JP7343264B2 (ja) * 2016-06-29 2023-09-12 トヨタ自動車株式会社 Ｄｎａライブラリーの作製方法及びｄｎａライブラリーを用いたゲノムｄｎａ解析方法
WO2018003220A1 (ja) * 2016-06-29 2018-01-04 トヨタ自動車株式会社 Ｄｎａライブラリーの作製方法及びｄｎａライブラリーを用いたゲノムｄｎａ解析方法
EP3485037B1 (en) * 2016-07-18 2022-02-09 F. Hoffmann-La Roche AG Asymmetric templates and asymmetric method of nucleic acid sequencing
CA3034959A1 (en) * 2016-08-31 2018-03-08 President And Fellows Of Harvard College Methods of whole genome digital amplification
WO2018048957A2 (en) * 2016-09-06 2018-03-15 Swift Biosciences, Inc. Normalization of ngs library concentration
EP3516400B1 (en) 2016-09-26 2023-08-16 Becton, Dickinson and Company Measurement of protein expression using reagents with barcoded oligonucleotide sequences
WO2018061674A1 (ja) 2016-09-30 2018-04-05 富士フイルム株式会社 脊椎動物由来の単一細胞の塩基配列情報を取得する方法
WO2018144240A1 (en) 2017-02-01 2018-08-09 Cellular Research, Inc. Selective amplification using blocking oligonucleotides
JP2020522262A (ja) 2017-06-05 2020-07-30 ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニーＢｅｃｔｏｎ， Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ 単一細胞用のサンプルインデックス付加
WO2019018561A1 (en) * 2017-07-19 2019-01-24 The Scripps Research Institute GENOMIC LIBRARY GENERATION IN SOLID PHASE FOR HIGH FLOW SEQUENCING
CN111183229A (zh) 2017-08-11 2020-05-19 阿提拉生物系统股份有限公司 使用有限核苷酸组成的引物的数字扩增
AU2018378827B2 (en) * 2017-12-07 2023-04-13 Massachusetts Institute Of Technology Single cell analyses
CN109971843B (zh) * 2017-12-27 2022-11-11 复旦大学泰州健康科学研究院 一种单细胞转录组的测序方法
US11773441B2 (en) 2018-05-03 2023-10-03 Becton, Dickinson And Company High throughput multiomics sample analysis
EP3788170A1 (en) 2018-05-03 2021-03-10 Becton, Dickinson and Company Molecular barcoding on opposite transcript ends
US11639517B2 (en) 2018-10-01 2023-05-02 Becton, Dickinson And Company Determining 5′ transcript sequences
JP2022506546A (ja) 2018-11-08 2022-01-17 ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー ランダムプライミングを使用した単一細胞の全トランスクリプトーム解析
EP3894592A2 (en) 2018-12-10 2021-10-20 10X Genomics, Inc. Generating spatial arrays with gradients
CN113195717A (zh) 2018-12-13 2021-07-30 贝克顿迪金森公司 单细胞全转录组分析中的选择性延伸
US11926867B2 (en) 2019-01-06 2024-03-12 10X Genomics, Inc. Generating capture probes for spatial analysis
US11649485B2 (en) 2019-01-06 2023-05-16 10X Genomics, Inc. Generating capture probes for spatial analysis
EP4242322A3 (en) 2019-01-23 2023-09-20 Becton, Dickinson and Company Oligonucleotides associated with antibodies
WO2020168239A1 (en) * 2019-02-15 2020-08-20 Takara Bio Usa, Inc. Methods of preparing and analyzing nucleic acid libraries
CN113557300A (zh) * 2019-03-22 2021-10-26 深圳华大智造科技股份有限公司 核酸序列、rna目标区域测序文库的构建方法及应用
EP3976820A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 10X Genomics, Inc. Methods of detecting spatial heterogeneity of a biological sample
CA3144058A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Stratos Genomics, Inc. Enhancement of nucleic acid polymerization by aromatic compounds
US11939622B2 (en) 2019-07-22 2024-03-26 Becton, Dickinson And Company Single cell chromatin immunoprecipitation sequencing assay
GB201911515D0 (en) * 2019-08-12 2019-09-25 Univ London Queen Mary Methods for generating a population of polynucleotide molecules
EP4025711A2 (en) 2019-11-08 2022-07-13 10X Genomics, Inc. Enhancing specificity of analyte binding
JP2023500679A (ja) 2019-11-08 2023-01-10 ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー 免疫レパートリーシーケンシングのための完全長ｖ（ｄ）ｊ情報を得るためのランダムプライミングの使用
WO2021127406A1 (en) * 2019-12-19 2021-06-24 The Regents Of The University Of California Methods of producing target capture nucleic acids
EP3891300B1 (en) 2019-12-23 2023-03-29 10X Genomics, Inc. Methods for spatial analysis using rna-templated ligation
EP4090763A1 (en) 2020-01-13 2022-11-23 Becton Dickinson and Company Methods and compositions for quantitation of proteins and rna
US11702693B2 (en) 2020-01-21 2023-07-18 10X Genomics, Inc. Methods for printing cells and generating arrays of barcoded cells
US11732299B2 (en) 2020-01-21 2023-08-22 10X Genomics, Inc. Spatial assays with perturbed cells
US11898205B2 (en) 2020-02-03 2024-02-13 10X Genomics, Inc. Increasing capture efficiency of spatial assays
US11732300B2 (en) 2020-02-05 2023-08-22 10X Genomics, Inc. Increasing efficiency of spatial analysis in a biological sample
US11891654B2 (en) 2020-02-24 2024-02-06 10X Genomics, Inc. Methods of making gene expression libraries
ES2965354T3 (es) 2020-04-22 2024-04-12 10X Genomics Inc Métodos para análisis espacial que usan eliminación de ARN elegido como diana
US11702689B2 (en) 2020-04-24 2023-07-18 Microsoft Technology Licensing, Llc Homopolymer primers for amplification of polynucleotides created by enzymatic synthesis
EP4150118A1 (en) 2020-05-14 2023-03-22 Becton Dickinson and Company Primers for immune repertoire profiling
WO2021236929A1 (en) 2020-05-22 2021-11-25 10X Genomics, Inc. Simultaneous spatio-temporal measurement of gene expression and cellular activity
AU2021275906A1 (en) 2020-05-22 2022-12-22 10X Genomics, Inc. Spatial analysis to detect sequence variants
EP4162074B1 (en) 2020-06-08 2024-04-24 10X Genomics, Inc. Methods of determining a surgical margin and methods of use thereof
US11761038B1 (en) 2020-07-06 2023-09-19 10X Genomics, Inc. Methods for identifying a location of an RNA in a biological sample
US11981960B1 (en) 2020-07-06 2024-05-14 10X Genomics, Inc. Spatial analysis utilizing degradable hydrogels
US11932901B2 (en) 2020-07-13 2024-03-19 Becton, Dickinson And Company Target enrichment using nucleic acid probes for scRNAseq
US11981958B1 (en) 2020-08-20 2024-05-14 10X Genomics, Inc. Methods for spatial analysis using DNA capture
US11926822B1 (en) 2020-09-23 2024-03-12 10X Genomics, Inc. Three-dimensional spatial analysis
US11827935B1 (en) 2020-11-19 2023-11-28 10X Genomics, Inc. Methods for spatial analysis using rolling circle amplification and detection probes
CN116635533A (zh) 2020-11-20 2023-08-22 贝克顿迪金森公司 高表达的蛋白和低表达的蛋白的谱分析
AU2021409136A1 (en) 2020-12-21 2023-06-29 10X Genomics, Inc. Methods, compositions, and systems for capturing probes and/or barcodes
US11280028B1 (en) 2021-02-24 2022-03-22 Agency For Science, Technology And Research (A*Star) Unbiased and simultaneous amplification method for preparing a double-stranded DNA library from a sample of more than one type of nucleic acid
WO2023034489A1 (en) 2021-09-01 2023-03-09 10X Genomics, Inc. Methods, compositions, and kits for blocking a capture probe on a spatial array
WO2023086880A1 (en) * 2021-11-10 2023-05-19 10X Genomics, Inc. Methods, compositions, and kits for determining the location of an analyte in a biological sample
DE102022211087A1 (de) * 2022-10-19 2024-04-25 Robert Bosch Gesellschaft mit beschränkter Haftung Verfahren und Vorrichtung zur Voramplifikation eines Nukleinsäuregemisches

Family Cites Families (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4883750A (en) 1984-12-13 1989-11-28 Applied Biosystems, Inc. Detection of specific sequences in nucleic acids
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
AU622104B2 (en) 1987-03-11 1992-04-02 Sangtec Molecular Diagnostics Ab Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore
IL86724A (en) 1987-06-19 1995-01-24 Siska Diagnostics Inc Methods and kits for amplification and testing of nucleic acid sequences
AU622426B2 (en) 1987-12-11 1992-04-09 Abbott Laboratories Assay using template-dependent nucleic acid probe reorganization
DE68908054T2 (de) 1988-01-21 1994-03-10 Genentech Inc Verstärkung und nachweis von nukleinsäuresequenzen.
US6107023A (en) 1988-06-17 2000-08-22 Genelabs Technologies, Inc. DNA amplification and subtraction techniques
JPH04501353A (ja) 1988-07-26 1992-03-12 ジエネラブス・テクノロジーズ・インコーポレイテツド Ｒｎａ及びｄｎａ増幅法
US4932207A (en) 1988-12-28 1990-06-12 Sundstrand Corporation Segmented seal plate for a turbine engine
US5106727A (en) 1989-04-27 1992-04-21 Life Technologies, Inc. Amplification of nucleic acid sequences using oligonucleotides of random sequences as primers
US5043272A (en) 1989-04-27 1991-08-27 Life Technologies, Incorporated Amplification of nucleic acid sequences using oligonucleotides of random sequence as primers
US6040138A (en) * 1995-09-15 2000-03-21 Affymetrix, Inc. Expression monitoring by hybridization to high density oligonucleotide arrays
US5104792A (en) 1989-12-21 1992-04-14 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method for amplifying unknown nucleic acid sequences
CZ291877B6 (cs) 1991-09-24 2003-06-18 Keygene N.V. Způsob amplifikace přinejmenším jednoho restrikčního fragmentu z výchozí DNA a způsob přípravy sestavy amplifikovaných restrikčních fragmentů
WO1993014217A1 (en) * 1992-01-10 1993-07-22 Life Technologies, Inc. Use of predetermined nucleotides having altered base pairing characteristics in the amplification of nucleic acid molecules
KR100249110B1 (ko) * 1992-05-06 2000-04-01 다니엘 엘. 캐시앙 핵산 서열 증폭 방법, 이에 이용되는 조성물 및 키트
US5514545A (en) 1992-06-11 1996-05-07 Trustees Of The University Of Pennsylvania Method for characterizing single cells based on RNA amplification for diagnostics and therapeutics
US5731171A (en) * 1993-07-23 1998-03-24 Arch Development Corp. Sequence independent amplification of DNA
US5523204A (en) * 1993-12-10 1996-06-04 Becton Dickinson And Company Detection of nucleic acids in cells by strand displacement amplification
US5710000A (en) 1994-09-16 1998-01-20 Affymetrix, Inc. Capturing sequences adjacent to Type-IIs restriction sites for genomic library mapping
GB9422891D0 (en) 1994-11-12 1995-01-04 Univ Nottingham Improvements in and relating to the amplification and identification of nucleotide sequences
JPH08173164A (ja) 1994-12-22 1996-07-09 Hitachi Ltd Ｄｎａ調製法
US5565340A (en) 1995-01-27 1996-10-15 Clontech Laboratories, Inc. Method for suppressing DNA fragment amplification during PCR
US5994058A (en) 1995-03-20 1999-11-30 Genome International Corporation Method for contiguous genome sequencing
US5871820A (en) 1995-04-06 1999-02-16 General Electric Company Protection of thermal barrier coating with an impermeable barrier coating
US5750341A (en) * 1995-04-17 1998-05-12 Lynx Therapeutics, Inc. DNA sequencing by parallel oligonucleotide extensions
US5648245A (en) 1995-05-09 1997-07-15 Carnegie Institution Of Washington Method for constructing an oligonucleotide concatamer library by rolling circle replication
US5814444A (en) 1995-06-07 1998-09-29 University Of Washington Methods for making and using single-chromosome amplfication libraries
US5882864A (en) 1995-07-31 1999-03-16 Urocor Inc. Biomarkers and targets for diagnosis, prognosis and management of prostate disease
US5631147A (en) * 1995-09-21 1997-05-20 Becton, Dickinson And Company Detection of nucleic acids in cells by thermophilic strand displacement amplification
EP0880598A4 (en) * 1996-01-23 2005-02-23 Affymetrix Inc RAPID EVALUATION OF NUCLEIC ACID ABUNDANCE DIFFERENCE, WITH A HIGH-DENSITY OLIGONUCLEOTIDE SYSTEM
AU723900B2 (en) 1996-02-14 2000-09-07 Akzo Nobel N.V. Isolation and amplification of nucleic acid materials
WO1997041261A1 (en) * 1996-05-02 1997-11-06 Immunological Associates Of Denver Quantitation of rna transcripts using genomic dna as the internal amplification competitor
WO1998002575A1 (en) 1996-07-16 1998-01-22 Periannan Senapathy Method for contiguous genome sequencing
EP0835935A1 (en) * 1996-10-03 1998-04-15 Roche Diagnostics GmbH Thermostable DNA Polymerase from Anaerocellum thermophilum
US6030814A (en) * 1997-04-21 2000-02-29 Epicentre Technologies Corporation Reverse transcription method
US6124120A (en) 1997-10-08 2000-09-26 Yale University Multiple displacement amplification
US5932451A (en) 1997-11-19 1999-08-03 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Method for unbiased mRNA amplification
DE19813317A1 (de) 1998-03-26 1999-09-30 Roche Diagnostics Gmbh Verbessertes Verfahren zur Primer Extension Präamplifikations-PCR
US6232067B1 (en) * 1998-08-17 2001-05-15 The Perkin-Elmer Corporation Adapter directed expression analysis
IL141749A0 (en) 1998-09-18 2002-03-10 Micromet Ag Dna amplification of a single cell
US6506594B1 (en) * 1999-03-19 2003-01-14 Cornell Res Foundation Inc Detection of nucleic acid sequence differences using the ligase detection reaction with addressable arrays
US6521428B1 (en) 1999-04-21 2003-02-18 Genome Technologies, Llc Shot-gun sequencing and amplification without cloning
US6491752B1 (en) 1999-07-16 2002-12-10 Sumco Oregon Corporation Enhanced n-type silicon material for epitaxial wafer substrate and method of making same
WO2001009384A2 (en) 1999-07-29 2001-02-08 Genzyme Corporation Serial analysis of genetic alterations
US6846626B1 (en) * 1999-09-01 2005-01-25 Genome Technologies, Llc Method for amplifying sequences from unknown DNA
US6692918B2 (en) 1999-09-13 2004-02-17 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for linear isothermal amplification of polynucleotide sequences
US6271002B1 (en) 1999-10-04 2001-08-07 Rosetta Inpharmatics, Inc. RNA amplification method
US6958225B2 (en) 1999-10-27 2005-10-25 Affymetrix, Inc. Complexity management of genomic DNA
AU2001232485A1 (en) * 2000-01-13 2001-07-24 Amsterdam Support Diagnostics B.V. A universal nucleic acid amplification system for nucleic acids in a sample
US6379932B1 (en) 2000-07-17 2002-04-30 Incyte Genomics, Inc. Single primer PCR amplification of RNA
US6713257B2 (en) * 2000-08-25 2004-03-30 Rosetta Inpharmatics Llc Gene discovery using microarrays
WO2002020843A1 (en) * 2000-09-06 2002-03-14 Rutgers, The State University A method for sequencing nucleic acid sequences without chain termination
AU2002213882A1 (en) 2000-09-08 2002-03-22 Biomerieux B.V.A. Attenuated hiv strains and use thereof
US6794141B2 (en) 2000-12-22 2004-09-21 Arcturus Bioscience, Inc. Nucleic acid amplification
WO2002061140A2 (en) * 2001-01-31 2002-08-08 Ambion, Inc. Competitive population normalization for comparative analysis of nucleic acid samples
WO2002065093A2 (en) 2001-02-14 2002-08-22 Baylor College Of Medicine Methods and compositions of amplifying rna
AU2002252279B2 (en) 2001-03-09 2005-05-12 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for amplification of RNA sequences
WO2002103054A1 (en) 2001-05-02 2002-12-27 Rubicon Genomics Inc. Genome walking by selective amplification of nick-translate dna library and amplification from complex mixtures of templates
JP2002345466A (ja) 2001-05-08 2002-12-03 Takara Bio Inc Ｄｎａの増幅方法
US6638722B2 (en) 2001-06-13 2003-10-28 Invitrogen Corporation Method for rapid amplification of DNA
EP1275738A1 (en) 2001-07-11 2003-01-15 Roche Diagnostics GmbH Method for random cDNA synthesis and amplification
EP1275734A1 (en) 2001-07-11 2003-01-15 Roche Diagnostics GmbH Method for random cDNA synthesis and amplification
US20040175715A1 (en) 2001-08-21 2004-09-09 Burgoyne Leigh A. Method and device for simultaneously molecularly cloning and polylocus profiling of genomes or genomes mixtures
US20040019005A1 (en) * 2001-10-01 2004-01-29 Jeffrey Van Ness Methods for parallel measurement of genetic variations
AU2002359436A1 (en) 2001-11-13 2003-06-23 Rubicon Genomics Inc. Dna amplification and sequencing using dna molecules generated by random fragmentation
US20030211528A1 (en) * 2002-03-12 2003-11-13 Norman Iscove Exponential amplification of sub-picogram nucleic acid samples with retention of quantitative representation
KR100545295B1 (ko) * 2003-09-29 2006-01-24 현대모비스 주식회사 차량용 조향장치의 너클 어셈블리
EP2380993B1 (en) 2004-03-08 2015-12-23 Rubicon Genomics, Inc. Method for generating and amplifying DNA libraries for sensitive detection and analysis of DNA methylation
US8312249B1 (en) 2008-10-10 2012-11-13 Apple Inc. Dynamic trampoline and structured code generation in a signed code environment
FR2957821B1 (fr) 2010-03-24 2014-08-29 Inst Francais Du Petrole Nouvelle zone de regeneration du catalyseur divisee en secteurs pour unites catalytiques regeneratives

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