FR2893252A1 - Extraits vegetaux stimulant has2 - Google Patents

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Abstract

L'invention concerne des extraits végétaux stimulant la synthèse de Hyaluronane Synthase, et en particulier la synthèse de Hyaluronane Synthase 2 (HAS2). L'invention concerne en particulier l'utilisation d'une quantité efficace d'au moins un extrait d'un végétal choisi parmi Guarana (Paullinia cupana), Millepertuis (Hypericum hircinum), Bambou (Bambusa vulgaris), Haricot mungo (Phaseolus aureus), Groseille (Ribes uva-crispa L.), Petit houx (Ruscus aculeatus), fêve (Vicia faba equina), Pois (Pisum sativum), Lupin (lupinus angustifolius), Ephedra (Ephedra sinica), Tanaisie (Tanacetum vulgare), Galanga (Alpinia galanga), Mûrier blanc (Morus alba), Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci.L'invention a pour but en particulier d'augmenter la fermeté, et/ou l'élasticité, et/ou l'hydratation des tissus, et/ou augmenter l'effet barrière cutanée, et/ou augmenter la résilience des tissus, et/ou moduler l'angiogenèse, ou la néo-création de capillaires sanguins, et/ou améliorer la cicatrisation, et/ou la prolifération, la migration, ou la différenciation cellulaire, et/ou l'atrophie cutanée, et/ou destinée à lutter contre les effets de vieillissement sur la peau, et en particulier contre la perte de fermeté cutanée observée au cours du vieillissement, et/ou les cicatrices atrophiées.

Description

L'invention concerne des compositions cosmétiques et pharmaceutiques
comprenant des extraits végétaux pour obtenir en particulier un effet raffermissant de la peau, et notamment du derme, suite à la stimulation de la protéine HAS. Etat de la technique :
La matrice extracellulaire est constituée d'un réseau complexe de molécules variées d'origine protéique ou glucidique responsables de 10 l'environnement favorable au bon fonctionnement cellulaire. Lors d'événements cellulaires comme la prolifération, la migration ou la différenciation, la matrice extracellulaire se modifie et s'adapte. Dans la famille des polysaccharides, les glycosaminoglycannes (GAG) et parmi eux, l'acide hyaluronique (AH) sont des composants structuraux clefs de 15 cette matrice extracellulaire. De très hauts poids moléculaires, ces GAG possèdent de nombreuses fonctions physiologiques comme l'hydratation des tissus, l'augmentation de l'effet barrière cutané, la promotion de la résilience et de l'élasticité des tissus grâce à leurs capacité de piégeage de l'eau. Par ailleurs, ils ont été décrits dans la modulation de l'angiogénèse 20 ou néo-création de capillaires sanguins, de la cicatrisation, de la prolifération, de la migration et de la différenciation cellulaire par l'intermédiaire de récepteurs membranaires tels le CD44 et les RHAMM (Receptor for Hyaluronan Mediated Motility) situés à la surface des cellules (Lesley J. et al., J. Exp. Med.,175, 257-266 (1992) ; Peck D. et al., Journal 25 of Cell Science, 111, 1595-1601 (1998) ; Assmann V. et al., Journal of Cell Science, 111, 1685-1694 (1998)). Par ailleurs, la présence de l'acide hyaluronique à l'interface derme épiderme permettrait de faciliter les échanges métaboliques entre les deux tissus. Enfin, l'acide hyaluronique permet également des associations avec 30 d'autres molécules comme le versicane, le fibrinogène et les collagènes de5 type I et VI (Mc Devitt et al., FEBS Lett., 3, 294, 167-170 (1991) ; Le Baron et al., J. Biol. Chem., 14, 267, 10003-10010 (1992)).
Plus étudié que les autres GAG, l'acide hyaluronique se présente comme un polysaccharide linéaire composé d'unités disaccharidiques répétitives : N-Acetyl-Dglucosamine-13(1-*4)-D-glucuronic acid f3(1ù>3) ; il est synthétisé sur le coté interne de la membrane plasmique par ajout successifs d'UDP-N-Acetylglucosamine et d'UDP-D-glucuronic acid combinés par des liaisons r3(1-4) et X3(1-3), puis sécrété directement dans l'espace extra cellulaire (Weigel et al., J. Biol. Chem., 272, 1399714000 (1997)). Cette synthèse est réalisée par des enzymes membranaires monomériques appelées Hyaluronan Synthases (HAS), identifiées sous trois isoformes chez les vertébrés : HAS1, HAS2 et HAS3 (Weigel et al., J. Biol. Chem., 272, 13997-14000 (1997)) transcrit à partir de 3 gènes distincts localisés sur différents chromosomes. Plus particulièrement, le gène codant pour la protéine HAS2 se situe sur le chromosome 8 et est sensible à la présence de différents facteurs de croissance comme PDGF-BB, TGF-131, EGF ou encore FGF et KGF. Les GAGs sont retrouvés dans approximativement tous les tissus et leurs quantités dans la matrice extracellulaire sont fortement modifiées dans certaines conditions comme l'atrophie cutanée, l'âge, les cicatrices atrophiées et probablement l'ostéoporose. La peau et plus particulièrement le derme, contient environ 50% de la quantité totale d'acide hyaluronique présent dans l'organisme (Laurent et al., FASEB J., 6, 2397-2404 (1992)) et des études ont montré une forte relation cause-effet de l'âge, avec une absence totale d'acide hyaluronique synthétisée dès 60 ans (Ghersetich et al., Int. J. Dermatol., 33, 119-122 (1994)). Cet acide hyaluronique est synthétisé par les HAS des fibroblastes du derme. Au niveau de l'épiderme, l'acide hyaluronique est synthétisé par les HAS des kératinocytes et joue un rôle dans la migration, la prolifération et la différentiation de ceux-ci. La diminution d'acide hyaluronique entraîne un affinement de l'épiderme attribuable à l'accélération de la différentiation terminale des kératinocytes. Pour des applications cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques, un certain nombre de composés ont été étudiés pour leurs capacités à stimuler, dans des kératinocytes, la production de glycosaminoglycannes en général et d'acide hyaluronique en particulier. Après avoir démontré que HAS2 était inductible par différentes substances telles que TNF alpha, Interferon gamma, Interleukine 1 beta (Ijuin et al. 2001, Arch. Oral Biol. 46(8) : 767-72), différentes équipes ont io tenté de stimuler la production de HAS2 avec des substances telles que l'acide rétinoique, sur un modèle de kératinocytes en culture afin d'évaluer les effets sur la qualité et la structure de l'épiderme de peaux de volontaires sains ainsi traités. La conclusion de ces études est que toutes les cytokines pro-inflammatoires stimulent la production de HAS2 et donc 15 de hyaluronan dans les cellules en culture (Jacobson A, Brinck J, Briskin MJ, Spicer AP et Heldin P. 2000. Expression of human hyaluronan synthases in response to external stimuli. Biochem. J. 348(Pt 1) : 29-35). Ainsi des substances telles que l'acide rétinoique, récemment, la substance K (ou 20 0-beta-D Glucopyranosyl 20 S Protopanaxadiol) du ginseng a été 20 récemment décrite comme étant capable de stimuler la synthèse de HAS2 dans des cellules HaCat de type kératinocytes transformés ou dans des fibroblastes humains en culture (Kim et al., IFSCC Magazine 7(3), 189-196 (2004)).
25 Buts de l'invention
L'invention a pour but principal de résoudre le problème technique consistant en la fourniture de composés extraits de végétaux utilisables par voie topique sur la peau, et notamment utilisables dans des 30 compositions cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques, c'est-à-dire ne présentant pas significativement de réaction inflammatoire au niveau de la peau, mais qui soit capable d'augmenter la fermeté de la peau. En particulier, l'invention a pour but de fournir des composés utilisables par voie topique permettant de stimuler l'expression et/ou s l'activité de HAS2, afin d'augmenter la quantité de glycosaminoglycannes et d'acide hyaluronique dans la peau, en particulier dans le derme, et d'augmenter ainsi la fermeté de la peau. L'invention a notamment pour but de fournir des composés mentionnés ci-dessus pour améliorer au niveau cutané la fermeté, et/ou io l'élasticité, et/ou l'hydratation des tissus, et/ou augmenter l'effet barrière cutanée, et/ou augmenter la résilience des tissus, et/ou moduler l'angiogenèse, ou la néo-création de capillaires sanguins, et/ou améliorer la cicatrisation, la prolifération, la migration, ou la différenciation cellulaire. En particulier, l'invention a pour but de fournir des composés 15 mentionnés ci-dessus pour lutter contre l'atrophie cutanée en particulier contre l'atrophie du derme, les effets du vieillissement sur la peau, les cicatrices atrophiées, ou la perte de fermeté cutanée observée au cours du vieillissement.
20 Description de l'invention
Ainsi, la présente invention décrit, selon un premier aspect, l'utilisation d'une quantité efficace d'au moins un extrait végétal en tant que principe actif stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane 25 Synthase, et en particulier stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase 2 (HAS2), dans une composition cosmétique. L'invention décrit, selon un second aspect, l'utilisation d'une quantité efficace d'au moins un extrait végétal en tant que principe actif stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase, et en 30 particulier stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase 2 (HAS2), pour la fabrication d'une composition pharmaceutique, et notamment dermo-pharmaceutique. Les inventeurs entendent par stimulant l'expression de la Hyaluronane Synthase (HAS, en particulier de HAS2) , en particulier la stimulation de la synthèse de Hyaluronane Synthase (HAS, en particulier HAS2). En particulier, les principes actifs selon la présente invention permettent d'obtenir une stimulation de l'expression du gène codant pour la protéine HAS2 dans les fibroblastes, en particulier dans les fibroblastes humains, et notamment au niveau des tissus cutanés humains tels que le derme. Avantageusement, les principes actifs permettent d'augmenter la fermeté et/ou l'élasticité des tissus cutanés, en particulier du derme. Avantageusement, les principes actifs permettent d'augmenter la production et/ou la quantité de glycosaminoglycannes en général et d'acide hyaluronique en particulier, notamment au niveau dermique. Avantageusement, les principes actifs selon la présente invention n'induisent sensiblement pas de réaction inflammatoire au niveau cutané et sont donc compatibles avec des applications cosmétiques ou dermo- pharmaceutiques. Avantageusement, la composition est destinée à améliorer au niveau cutané la fermeté, et/ou l'élasticité, et/ou l'hydratation des tissus, et/ou augmenter l'effet barrière cutanée, et/ou augmenter la résilience des tissus, et/ou moduler l'angiogenèse, ou la néo-création de capillaires sanguins, et/ou améliorer la cicatrisation, et/ou la prolifération, la migration, ou la différenciation cellulaire, et/ou l'atrophie cutanée, et/ou destinée à lutter contre les effets du vieillissement sur la peau, et en particulier contre la perte de fermeté cutanée observée au cours du vieillissement, et/ou les cicatrices atrophiées et/ou l'atrophie des tissus cutané observée au cours du vieillissement, en particulier contre l'atrophie du derme.
Avantageusement, les composés selon la présente invention sont utilisés pour lutter contre l'affinement des tissus cutanés et en particulier de la peau. Avantageusement, les composés utilisés selon la présente invention sont extraits de végétaux. En particulier, le principe actif est un extrait d'un végétal choisi parmi Guarana (Paullinia cupana), Millepertuis (Hypericum hircinum), Bambou (Bambusa vulgaris), Haricot mungo (Phaseolus aureus), Groseille (Ribes uva-crispa L.), Petit houx (Ruscus aculeatus), Fève (Vicia faba equina), Pois (Pisum sativum), Lupin (lupinus io angustifolius), Ephedra (Ephedra sinica), Tanaisie (Tanacetum vulgare), Galanga (Alpinia galanga), Mûrier blanc (Morus alba), Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci. De préférence, le principe actif est un extrait végétal choisi parmi un extrait de mûrier blanc (Morus alba), un extrait d'Ephedra (Ephedra 15 sinica), un extrait de Guarana (Paullinia cupana), un extrait de Tanaisie (Tanacetum vulgare), un extrait de Galanga (Alpinia galanga), un extrait de Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci. Avantageusement, les composés selon la présente invention sont 20 utilisés pour augmenter la fermeté et/ou l'élasticité des tissus cutanés, en particulier du derme. On utilise de manière avantageuse un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires pour obtenir ledit extrait. Parmi les solvants habituels d'extraction, on peut utiliser un solvant protique choisi parmi le 25 groupe consistant en : l'eau, méthanol, éthanol, propanol, butanol, pentanol, cyclohexanol, diéthylèneglycol, HO-(CH2)2-OH, et un de leurs mélanges. On peut également utiliser un solvant aprotique polaire, notamment choisi parmi le groupe consistant en : pyridine, butanone, acétone, Ac2O, (Me2N)2CO3 PhCN, CH3CH2CN, HMPA, PhNO2, McNO2, 30 DMF, MeCN, sulfolane, DMSO, HCONH2, HCONHMe, CH3CONHMe, et un de leurs mélanges. On utilise de préférence l'eau, un alcool comme l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, ou le butanol, un polyol, tel que le butylène glycol, ou un ester comme l'acétate d'éthyle ou un mélange de ces solvants. Les proportions des mélanges des solvants mentionnés ci-dessus varient généralement entre 1:1 et 1:100, et de préférence entre 1:1 et 1:10, on utilise par exemple un mélange 25/75. L'extraction peut être effectuée avec agitation et/ou chauffage, comme par exemple à entre 30 et 60 C, ou à reflux du solvant utilisé. L'extraction se fait habituellement à pression atmosphérique mais une extraction sous pression peut être utilisée. Le temps d'extraction est apprécié par l'homme de l'art et dépend notamment des conditions d'extraction. Avantageusement, on procède à plusieurs extractions. On peut notamment réunir les fractions obtenues si désiré. Avantageusement, les extraits obtenus sont filtrés puis éventuellement concentrés et/ou évaporés jusqu'à obtenir la qualité de produits secs désirée. Les composés selon la présente invention sont préparés sous forme de compositions topiques, notamment de compositions cosmétiques, dermo-pharmaceutiques, ou pharmaceutiques. De ce fait, pour ces compositions, l'excipient contient par exemple au moins un composé choisi parmi le groupe consistant en les conservateurs, les émollients, les émulsifiants, les tensioactifs, les hydratants, les épaississants, les conditionneurs, les agents matifiant, les stabilisants, les antioxydants, les agents de texture, les agents de brillance, les agents filmogènes, les solubilisants, les pigments, les colorants, les parfums et les filtres solaires. Ces excipients sont de préférence choisis parmi le groupe consistant en les acides aminés et leurs dérivés, les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de Lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrose, les vitamines E et ses dérivés, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytosterols, les esters végétaux, les silicones et ses dérivés, les hydrolysats de protéines, l'huile de Jojoba et ses dérivés, les esters lipo/hydrosolubles, les betaines, les aminoxides, les extraits de plantes les esters de Saccharose, les dioxydes de Titane, les glycines, et les parabens, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le butylène glycol, le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryl éther, le cétéaryl alcool, le phénoxyéthanol, le méthylparaben, l'éthylparaben, le propylparaben, le butylparaben, le butylène glycol, les tocopherols naturels, la glycérine, le sodium dihydroxycétyle, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, le io triisononaoine, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l'hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les caprique/caprylique triglycérides, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépin de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, 15 l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8 Beewax, les glycérides d'huile de coeur de palme hydrogénée, les glycérides d'huile de palme hydrogénée, l'huile de 20 lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée. Avantageusement, les compositions précitées sont formulées sous une forme choisie parmi le groupe consistant en une solution, aqueuse ou 25 huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, un shampoing ; un lait ; une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huiledans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée ; une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en 30 aérosol ; une ampoule ; un sérum ; un savon liquide ; un pain dermatologique ; une pommade ; une mousse ; un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet, notamment sous forme de rouge à lèvre. Les quantités dudit principe actif habituellement utilisées varient entre 0,001 % et 20 % en poids de la composition totale, de préférence entre 0,001% et 10 % en poids, et on utilise de manière encore préférée entre 0,01% et 10 % en poids de la composition totale. On peut éventuellement combiner les composés décrits ci-dessus avec un autre principe actif pour obtenir un effet amélioré. L'invention concerne selon un autre aspect, un procédé de soins io cosmétiques comprenant l'utilisation des compositions mentionnées ci- dessus. L'invention concerne selon un autre aspect, un procédé de traitement pharmaceutique, en particulier de traitement dermopharmaceutique, comprenant l'utilisation des compositions mentionnées 15 ci-dessus, et comprenant notamment l'administration d'une quantité efficace d'au moins un principe actif mentionné ci-dessus à un sujet en ayant besoin. L'application mentionnée précédemment peut s'effectuer en une ou plusieurs fois par jour, notamment par application topique. 20 Sur les figures : La figure 1 représente de la stimulation de HAS2 par un extrait de Mûrier blanc ; - La figure 2 représente la stimulation de HAS2 par un extrait 25 d'Ephédra ; - La figure 3 représente la stimulation de HAS2 par un extrait de Guarana La figure 4 représente la stimulation de HAS2 par un extrait de Tanaisie 30 La figure 5 représente la stimulation de HAS2 par un extrait de Galanga La figure 6 représente l'évolution de la fermeté de la peau après un mois d'utilisation d'une crème comprenant un extrait de Galanga et un extrait de Tanaisie ; - La figure 7 représente l'évolution de la fermeté de la peau après un s mois d'utilisation d'un sérum comprenant un extrait de Galanga et un extrait de Tanaisie.
D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à l'homme de l'art suite à la lecture de la io description explicative qui fait référence à des exemples qui sont donnés seulement à titre d'illustration et qui ne sauraient en aucune façon limiter la portée de l'invention. Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la 1s technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, incluant les exemples, fait partie intégrante de l'invention dans sa fonction et dans sa généralité. Ainsi, chaque exemple a une portée générale. D'autre part, dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés 20 en poids, sauf indication contraire, et la température est exprimée en degré Celsius sauf indication contraire, et la pression est la pression atmosphérique, sauf indication contraire.
Exemples 25 Exemple 1 : Stimulation de l'expression du gène codant pour la protéine HAS2 : A) Les fibroblastes humains normaux sont obtenus après extraction à la collagénase à partir de biopsies abdominales issues de résection 30 chirurgicale.
Les fibroblastes sont amplifiés en Fibroblast Culture Medium (FCM) composé de Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM glutamine stabilisée, Invitrogen) supplémenté par 10% de sérum de veau (Hyclone), 25 mg/I de gentamycine, 100 000 UI/I de pénicilline, 1 mg/I d'amphotéricine B et 50 mg/I d'ascorbate de sodium (Sigma). 1,5 ml de FCM sont distribués par puits et la culture est réalisée à 37 C sous 5% CO2. Le milieu est renouvelé trois fois par semaine. Les fibroblastes sont ensuite ensemencés à 10000 cellules par cm2 dans des plaque 24 puits sous 1 ml de milieu Fibroblast Basal Medium (Promocell) et amplifiés jusqu'à confluence. B) Les actifs (testés pour la méthode de criblage à la concentration de 1%) sont dilués dans le milieu de culture déplété en antibiotiques, antimycotiques et facteurs de croissance. La détection de l'expression du gène est réalisée par RT-PCR temps réel en mesurant l'expression de chaque gène rapportée à l'actine (housekeeping gene) et exprimée en du témoin négatif non traité. 10pi d'ARNtotaux 5ng/pl sont ajoutés à 40pl de mix PCR (composé de 25p1 de SYBR Green Buffer Mix 2X, 0,5pl de mix enzyme, 0,5pM final d'amorce sens et 0,5pM final d'amorce antisens, eau qsp 40p1). La RT-PCR se déroule en différentes étapes dont la retrotranscription à 50 C, 30min, activation de la polymérase 95 C, 15min, réalisation des cycles de PCR (95 C, 15s ; Température d'hybridation spécifique à chaque gène/30s ; 72 C/30s) x 50 cycles. Les oligonucléotides sens et antisens sont respectivement CGAGTTTACTTCCCGCCAAGA et CTTCCGCCTGCCACACTTATTGAT, et la température d'hybridation est de 56 C. Sur l'ensemble des produits évalués, les produits ci-dessous donnent des résultats satisfaisants puisqu'ils stimulent la production de mRNA codant HAS2. Ces produits peuvent donc être utilisés en cosmétique pour stimuler la synthèse de HAS2 dans le derme, et induire une fermeté cutanée.
Tableau 1 Référence Nom latin de la Partie de la Type STIMULATION des produits plante plante utilisée d'extraction de mRNA de sélectionnés HAS2 par rapport à niveau de base JVEG056A (Guarana) Graine entière Fraction x 4 Paullinia cupana aqueuse JVEG057A (Millepertuis) Plante entière Fraction x 3 Hypericum aqueuse hircinum JVEG073N (Bambou) Tiges Fraction x 4 Bambusa aqueuse vulgaris JVEG261A (Haricot mungo) Graines germées Fraction x 2 Phaseolus aureus aqueuse JVEG368A (Groseille) Fruit Fraction x 2 Ribes uva-crispa aqueuse JVEG418A (Petit houx) Racine Fraction x 7,5 Ruscus aculeatus aqueuse JPR0060A (Fêve) Graines entières Fraction x 4 Vicia faba equina aqueuse JPR0065A (Pois) Graines entières Fraction x 2 Pisum sativum aqueuse JPR0057A (Lupin) Graines entières Fraction x 2 Lupinus aqueuse angustifolius 12 JPRO019A (Lupin) Protéines de Fraction x 4 Lupinus graines de lupin aqueuse angustifolius modifiées JVEG166A (Ephedra) Plante Fraction x 9 Ephedra sinica aqueuse JVEG681A (Tanaisie) Fleurs Fraction x 2,6 Tanacetum aqueuse vulgare JVEG 203A (Galanga) Racines ou Fraction x 1,8 Alpinia galanga feuilles aqueuse JVEG022A (Mûrier blanc) Racine Fraction x 17 Morus alba aqueuse JVEG060A Pentadiplandra Racine Fraction x 2 Brazzeana aqueuse On préfère ainsi réaliser une extraction de préférence avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires, éventuellement à reflux, de préférence de la partie de la plante mentionnée dans le tableau 1. Une fois l'extraction réalisée, la solution est filtrée et éventuellement re- solubilisée dans un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Préalablement à l'extraction, on peut avantageusement réaliser le broyage de la ou des parties de la plante utilisée. Il est avantageux d'obtenir un extrait des végétaux utilisés comme io matière première à partir d'un solvant de préférence polaire, et de préférence l'eau, un mélange eau/alcool ou polyol, comme un mélange eau/glycol ou eau/éthanol, ou un polyol, ou un alcool comme l'éthanol. L'extrait est de préférence filtré puis séché. Il est également possible d'effectuer l'extraction avec un chauffage modéré comme par exemple à 15 45 C ou à reflux. L'extraction s'effectue de préférence sous agitation. Les procédés d'extractions sont bien connus de l'homme de l'art. La partie des végétaux utilisée peut varier en fonction de l'extrait à obtenir. De préférence, un extrait est réalisé à partir d'une partie de la plante coupée à 10% (p/p) dans de l'eau, ou de l'éthanol, éventuellement s à reflux. L'extraction est réalisée pendant 1 heure puis la solution est filtrée, l'éthanol éliminé, et le produit obtenu est solubilisé à 5% (p/p) dans un mélange eau/glycol puis ultrafiltré sur filtre céramique à différents seuils de coupure, et enfin filtré à 0,45pm. On peut également utiliser comme solvant l'éthanol, l'acétate d'éthyl, le DMSO, l'acétone ou un io mélange 75% d'eau et 25% de butylène glycol, au lieu de l'eau. Les types d'extractions préférées sont celles indiquées dans le tableau 1.
Exemple 2 : Validation par effet dose des effets obtenus par l'un des ingrédients sélectionnés (Extrait de mûrier blanc û JVEG022A) : 15 Des cultures de fibroblastes sont réalisées comme indiqué dans l'exemple 1 et sont incubées en présence de quantités croissantes de l'extrait sélectionné. Après extraction des ARNm, les quantités de ARNm codant HAS2 sont détectées en utilisant la Q-RT-PCR tel que décrit dans l'exemple 1. Les résultats sont donnés en pourcentage d'activation en 20 fonction de la culture cellulaire non traitée, utilisée comme témoin de l'étude, et sont présentés en Figure 1. On constate un effet dose significatif de cet actif, ce qui signifie que son activité doit être relativement spécifique. Utilisé à 1%, cet extrait permet d'obtenir une stimulation de plus de 900% d'ARNm de HAS2 ce qui représente un 25 résultat très positif et très significatif.
Exemple 3 : Validation par effet dose des effets obtenus par l'un des ingrédients sélectionnés (Extrait d'Ephédra û JVEG166A) : Des cultures de fibroblastes sont réalisées comme indiqué dans 30 l'exemple 1 et sont incubées en présence de quantités croissantes de l'extrait sélectionné (Extrait d'Ephédra). Après extraction des ARNm, les quantités de ARNm codant HAS2 sont détectées en utilisant la Q-RT-PCR tel que décrit dans l'exemple 1. Les résultats sont donnés en pourcentage d'activation en fonction de la culture cellulaire non traitée, utilisée comme témoin de l'étude, et sont présentés en Figure 2. On constate un effet dose significatif de cet actif, ce qui signifie que son activité doit être relativement spécifique. Utilisé à 1%, cet extrait permet d'obtenir une stimulation de 155% d'ARNm de HAS2 ce qui représente un résultat très positif.
io Exemple 4 : Validation par effet dose des effets obtenus par l'un des ingrédients sélectionnés (extrait de Guarana û JVEG056A) : Des cultures de fibroblastes sont réalisées comme indiqué dans l'exemple 1 et sont incubées en présence de quantités croissantes de l'extrait sélectionné (extrait de Guarana). Après extraction des ARNm, les 15 quantités de ARNm codant HAS2 sont détectées en utilisant la Q-RT-PCR tel que décrit dans l'exemple 1. Les résultats sont donnés en pourcentage d'activation en fonction de la culture cellulaire non traitée, utilisée comme témoin de l'étude, et sont présentés en Figure 3. On constate un effet dose significatif de cet actif, ce qui signifie que son activité doit être 20 relativement spécifique. Utilisé à 1%, cet extrait permet d'obtenir une stimulation de 500% d'ARNm de HAS2 ce qui représente un résultat très positif.
Exemple 5 Validation par effet dose des effets obtenus par l'un des 25 ingrédients sélectionnés (Extrait de Tanaisie û JVEG681A) : Des cultures de fibroblastes sont réalisées comme indiqué dans l'exemple 1 et sont incubées en présence de quantités croissantes de l'extrait sélectionné (Extrait de Tanaisie). Après extraction des ARNm, les quantités de ARNm codant HAS2 sont détectées en utilisant la Q-RT-PCR 30 tel que décrit dans l'exemple 1. Les résultats sont donnés en pourcentage d'activation en fonction de la culture cellulaire non traitée, utilisée comme témoin de l'étude, et sont présentés en Figure 4. On constate un effet dose significatif de cet actif, ce qui signifie que son activité doit être relativement spécifique. Utilisé à 1%, cet extrait permet d'obtenir une stimulation de 260% d'ARNm de HAS2 ce qui représente un résultat très positif.
Exemple 6 : Validation par effet dose des effets obtenus par l'un des ingrédients sélectionnés (Extrait de Galanga -JVEG2304A) Des cultures de fibroblastes sont réalisées comme indiqué dans io l'exemple 1 et sont incubées en présence de quantités croissantes de l'extrait sélectionné (Extrait de Galanga). Après extraction des ARNm, les quantités de ARNm codant HAS2 sont détectées en utilisant la Q-RT-PCR tel que décrit dans l'exemple 1. Les résultats sont donnés en pourcentage d'activation enfonction de la culture cellulaire non traitée, utilisée comme 15 témoin de l'étude, et sont présentés en Figure 5. On constate un effet dose significatif de cet actif, ce qui signifie que son activité doit être relativement spécifique. Utilisé à 1%, cet extrait permet d'obtenir une stimulation de 180% d'ARNm de HAS2 ce qui représente un résultat très positif. 20 Exemple 7 : Tests en culture cellulaire : Les produits de l'invention Extrait de Pentadiplandra Brazzeana (JVEG 060A), Extrait de Galanga (JVEG 203A), Extrait de Tanaisie (JVEG 681A) et Extrait de mûrier blanc (JVEG 022A) sont évalués pour 25 leur capacité à stimuler la néosynthèse de glycosaminoglycannes (GAGs, notamment l'acide hyaluronique). Les modèles biologiques sélectionnés sont le derme-équivalent (DE ; lattices libres de collagène rétracté comprenant des fibroblastes) et la culture de fibroblastes dermiques humains normaux en culture monocouche (NHDF). 30 L'évaluation de ces effets a été réalisée en quantifiant l'incorporation de glucosamine tritiée dans la fraction GAGs néosynthétisée par les fibroblastes des modèles sélectionnés. L'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs purifiée rend compte de la néosynthèse de la plupart des GAGs, incluant l'acide hyaluronique (majoritaire). L'analyse a été réalisée séparément sur les fractions secrétées/solubles (GAG sécrétés) et sur les fractions intégrées aux DE (GAG stockés dans la matrice) ou sur l'ensemble d'une culture de fibroblastes (NHDF).
io Dermes équivalents Les dermes équivalents ont été préparés puis placés en milieu DMEM (Invitrogen) à 2 % de SVF et mis à rétracter pendant 7 jours avec changement de milieu tous les 3 jours. Les DE ont ensuite été incubés en absence (témoin) ou en présence des composés à l'essai ou du composé 15 de référence (TGF beta, 10 ng/ml) pendant 48 heures ou 72 heures à 37 C et 5 % de CO2 avec addition de glucosamine tritiée 24 heures avant la fin de l'incubation. Chaque condition a été réalisée en triplicata.
Fibroblastes 20 Les fibroblastes dermiques normaux humains ont été ensemencés en milieu DMEM complet et pré-incubés pendant 24 heures à 37 C et 5 de CO2 puis le milieu de culture a été remplacé par du milieu DMEM à 2 % de sérum contenant ou non (témoin) les composés à l'essai ou le produit de référence (TGF beta, lOng/ml). Chaque condition expérimentale a été 25 réalisée en triplicata. Les cellules ont ensuite été incubées à 37 C pendant 72 heures avec addition de glucosamine tritiée 24 heures avant la fin de l'incubation. 30 Analyse de la radioactivité incorporée
24 heures avant la fin de l'incubation, la glucosamine tritiée (D-[6-3H]-glucosamine, 1,37 Tbq/mmol, 37 Ci/mmol, 33 pCi/ml) est ajoutée à la culture. L'extraction des glycosaminoglycanes est réalisée sur les surnageants de culture des DE (fraction sécrétée/soluble), au sein même des DE par broyage (fraction extraite), ou au sein de la culture de fibroblastes, à l'aide d'un tampon chaotropique (Tris/HCI 50 mM, guanidine 4 M, EDTA 5 mM, pH 8,0). La purification est réalisée par io chromatographie d'échange d'ions : adsorption des molécules anioniques sur billes de Q-Sepharose dans des conditions de forte stringence, désorption des molécules peu et moyennement anioniques avec urée 6 M plus NaCI 0,2 M et lavages. Le comptage de la radioactivité incorporée dans les molécules très cationiques restées sur le support (GAGs, 15 majoritairement ; élués NaCl 2M) est réalisé par scintillation liquide. Les résultats sont exprimés en pourcentage de variation de la synthèse des glycosaminoglycanes par rapport au témoin. Les comparaisons intergroupes ont été réalisées par analyse de variance (ANOVA) à l'aide du test de comparaison multiple de Dunnett. 20 Le produit de référence TGF beta (10ng/ml) a fortement stimulé l'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs (stimulation d'un facteur 4 par rapport au témoin). Ce résultat valide l'essai. Dans les conditions expérimentales de cet essai, l'extrait de Galanga (JVEG203A) et l'extrait de Tanaisie (JVEG681A), testés à 1 %, ont 25 stimulé l'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs synthétisés par les fibroblastes (respectivement 154 % et 143 % du témoin non traité, p<0,01).
Tableau 2 : Effets des différents traitements sur l'incorporation de 3H-30 glucosamine dans la fraction des GAGs synthétisés par des fibroblastes dermiques humains en culture in vitro.
Incorporation de glucosamine - Fibroblastes Traitement cpm sd n % témoin p Témoin 2439 171 6 100 - TGF5 10ng/ml 9582 624 6 393 P < 0.01 JVEG 060A 1% 2606 132 3 107 P> 0.05 JVEG 203A 1% 3744 465 3 154 P < 0.01 JVEG681A 1% 3495 76 3 143 P < 0.01 JVEG 022A 1% 2116 360 3 87 P> 0.05 Sd : écart-type ; n : nombre d'essais ; Cpm : nombre de désintégrations par minute (coups par minute) ; 5 p : significativité évaluée par test statistique.
Fraction soluble Le produit de référence TGF beta a fortement stimulé l'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs soluble et sécrétée 10 des dermes équivalents (stimulation d'un facteur 3 par rapport au témoin). Ce résultat valide l'essai. Dans les conditions expérimentales de cet essai, les produits l'extrait de Tanaisie (JVEG681A) et l'extrait de Mûrier blanc (JVEG022A), testés à 1 %, ont stimulé significativement l'incorporation de glucosamine 15 dans la fraction soluble et sécrétée des dermes équivalents (respectivement 210 %, p<0,01 et 149 %, p<0,05). L'extrait de Galanga (JVEG203A) a également permis d'augmenter l'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs soluble des DE (140 % du témoin).
Fraction extraite Le TGF beta a stimulé l'incorporation de glucosamine dans la fraction GAGs extraite des dermes équivalents mais de façon plus modérée que dans la fraction soluble (stimulation d'un facteur 1,6 par rapport au témoin). Ce résultat valide l'essai. Dans les conditions expérimentales de cet essai, le produit l'extrait de Tanaisie (JVEG681A), testé à 1 %, a stimulé significativement l'incorporation de glucosamine dans la fraction extraite des dermes équivalents (150 % du témoin, p<0,01). Comme pour le TGF beta, cette io stimulation est plus faible que dans la fraction soluble. Tableaux 3 et 4 : effets des différents traitements sur l'incorporation de glucosamine dans la fraction des GAGs synthétisés par les fibroblastes des dermes équivalents (fractions solubles, tableau 3 et extraites, tableau 4). Incorporation de glucosamine - DE / fraction soluble Traitement cpm sd n % témoin p Témoin 6746 1302 3 100 - TGFI3 10ng/ml 20813 1268 3 309 P < 0.01 JVEG 060A 1% 5872 1060 3 87 P> 0.05 JVEG 203A 1 % 9453 492 3 140 P > 0.05 JVEG 681A 1% 14188 1774 3 210 P<0.01 JVEG022A 1% 10018 643 3 149 P<0.05 Incorporation de glucosamine - DE / fraction extraite Traitement cpm sd n % témoin p Témoin 11350 423 3 100 - TGF(3 10ng/ml 18552 3061 3 163 P < 0.01 JVEG 060A 1% 9815 690 3 86 P> 0.05 JVEG 203A 1% 10634 130 3 94 P> 0.05 JVEG 681 A 1 % 17069 506 3 150 P < 0.01 JVEG 022A 1% 8821 1004 3 78 P> 0.05 Exemple 8 : Tests in vivo Ce test a pour objectif d'évaluer les effets des produits de l'invention sur la fermeté et l'élasticité, 30 minutes après une application isolée, ainsi que après 1 mois d'utilisation bi-quotidienne. Les effets sur les propriétés biomécaniques de la peau sont évalués à l'aide du ballistomètre, technique qui repose sur l'enregistrement dynamique du rebond d'un objet lourd sur la surface de la peau. Les rebonds induits, enregistrés pendant 3 secondes, sont alors io traduits en signaux électriques qui peuvent être quantifiés et évalués en terme d'amplitude. Les paramètres mesurés sont : L'indentation (pénétration de la sonde dans la peau pour le premier impact), qui mesure la fermeté de la peau : si l'indentation diminue, 15 il y a raffermissement. - L'aire sous la courbe mesure l'énergie restituée. Cette dernière est affectée à la fois par l'élasticité et par la fermeté de la peau : une diminution de l'aire correspond à un raffermissement. Alpha, le taux d'amortissement des rebonds, qui indique la vitesse à 20 laquelle les rebonds disparaissent, liée à l'élasticité : si alpha augmente, l'élasticité diminue.
Deux formulations (une crème et un sérum) ont été évaluées par application biquotidienne sur l'ensemble du visage pendant un mois, en 25 conditions normales d'utilisation, chaque formulation étant testée sur 20 volontaires de sexe féminin âgées de 45 à 75 ans. La crème était une émulsion H/E contenant 1% d'Extrait de Galanga et 1% d'extrait de Tanaisie, le sérum était un gel émulsionné contenant 1,5 % d'Extrait de Galanga et 1,5 % d'Extrait de Tanaisie. 30 L'analyse des propriétés biomécaniques de la peau a montré, en moyenne sur l'ensemble des volontaires, après un mois d'utilisation biquotidienne de la crème ou du sérum, une diminution significative de l'indentation (pénétration de la sonde dans la peau pour le premier impact) de 12% et 7% respectivement. Cette observation met en évidence une amélioration significative de la fermeté de la peau après application topique des produits de l'invention. Plus précisément, pour la crème, on constate : • une amélioration de l'indentation, mesurée chez 86% des io volontaires, amélioration de 16% chez ces dernières (valeur maximum : -37%), • le coefficient alpha augmente significativement de 62% et l'aire sous la courbe diminue significativement de 32% : ces 2 paramètres sont liés à l'indentation et confirment donc l'effet 15 raffermissant. Après un mois d'utilisation biquotidienne de la crème, la peau est significativement raffermie de 12%, comme illustré en Figure 6.
Plus précisément, pour le sérum, on constate : 20 • Une amélioration de l'indentation, mesurée chez 71% des volontaires, amélioration de 13% chez ces dernières (valeur maximum : -31%), • le coefficient alpha augmente significativement de 8% et l'aire sous la courbe diminue significativement de 18 h, confirmant également 25 un raffermissement de la peau. Après un mois d'utilisation biquotidienne du sérum, la peau est significativement raffermie de 7%, comme illustré en Figure 7.
Exemple 9 : Evaluation de l'absence de potentiel inflammatoire des molécules sélectionnées pour la stimulation de la synthèse de HAS2: Contrairement à l'acide rétinoïque, au TNF alpha et à l'IL1, les molécules sélectionnées pour stimuler la synthèse de HAS2 ne passent pas par un mécanisme pro-inflammatoire, incompatible avec des applications cosmétiques. Ainsi l'utilisation d'un extrait de Galanga dans les conditions de l'exemple 6, sur des cultures de fibroblastes, permet la stimulation de HAS2 tout en ne stimulant pas (dosage sur surnageant de cultures de fibroblastes, 48h io après contact), la synthèse de cytokines pro-inflammatoires connues pour stimuler HAS2 telles que IL1, TNFa ou TGFb (le témoin positif de l'exemple 6). Tableau 5 Interleukines Contrôle Galanga 111 a(f5/6) 1 1 111 b(G5/6) 1 0 I11-ra(H5/6) 1,5 2 112(15/6) 0 0 I13(J5/6) 0 0 114(K5/6) 0 0 115(L5/6) 0 0 117(N5/6) 0 1 1110(65/6) 0,5 0 I113(C5/6) 0 0 1115(D5/6) 1 0 1116(E5/6) 0 0 IFNg(K3/4) 0,5 0,5 TGF-b1(F9/10) 1 1 TGF-b3(G9/10) 2,5 2,5 TNFa(H9/10) 1,5 2 TNFb(19/10) 4,5 5,5 BDNF(G1/2) 4,5 5 CNTF(L1/2). d;f 2,5 2,5 GDNF(H3/4) 1,5 1 NT-3(M7/8) 1,5 2,5 ,facteurs neutrophiques Ainsi l'utilisation d'un extrait de Tanaisie dans les conditions de l'exemple 5, sur des cultures de fibroblastes, permet la stimulation de HAS2 tout en ne stimulant pas (dosage sur surnageant de cultures de fibroblastes, 48h après contact), la synthèse de cytokines pro-inflammatoires connues pour stimuler HAS2 telles que IL1, TNFa ou TGFb (le témoin positif de l'exemple 5). Tableau 6 Interleukines Contrôle Tanaisie 111 a(f5/6) 1 0 111 b(G5/6) 1 1 111-ra(H5/6) 1,5 1,5 112(15/6) 0 1 113(J5/6) 0 0,5 114(K5/6) 0 0,5 I15(L5/6) 0 0, 5 117(N5/6) 0 1 1110(B5/6) 0,5 0,5 I115(D5/6) 1 0 1116(E5/6) 0 0 IFNg(K3/4) 0,5 0 TGF-b1(F9/10) 1 1 TGF-b3(G9/10) 2,5 2 TNFa(H9/10) 1,5 1 TNFb(19/10) 4,5 5 BDNF(G1/2) 4,5 4 CNTF(L1/2) 2,5 1,5 GDNF(H3/4) 1,5 1,5 NT-3(M7/8) 1,5 2 facteurs neutrophiques io Ainsi l'utilisation d'un extrait de Lupin dans les conditions de l'exemple 1, sur des cultures de fibroblastes, permet la stimulation de HAS2 tout en ne stimulant pas (dosage sur surnageant de cultures de fibroblastes, 48h après contact), la synthèse de cytokines pro-inflammatoires connues pour stimuler HAS2 telles que IL1, TNFa ou TGFb 15 (le témoin positif des exemples 1 à 7). 5 Tableau 7 Interleukines Contrôle Lupin 111 a(f5/6) 1 0,5 111 b(G5/6) 1 0 111-ra(H5/6) 1,5 0,5 112(15/6) 0 0 113(J5/6) 0 0 I14(K5/6) 0 0 I15(L5/6) 0 0 I17(N5/6) 0 0,5 1110(B5/6) 0,5 0 1113(C5/6) 0 0 I115(D5/6) 1 0 1116(E5/6) 0 0 IFNg(K3/4) 0,5 0,5 TGF-b1(F9/10) 1 1 TGF-b3(G9/10) 2,5 1,5 TNFa(H9/10) 1,5 1 TNFb(19/10) 4,5 3 BDNF(G 1 /2) 4, 5 4,5 CNTF(L1/2) 2,5 2,5 GDNF(H3/4 1,5 0,5 NT-3(M7/8) 1,5 1,5 facteurs neutrophiques Exemple 10 : Utilisation des produits de l'invention dans des formulations cosmétiques ou pharmaceutiques de type émulsion huile dans eau :
Formulation a : Emulsion H/E A Eau qsp 100 Butylene Glycol 2 Glycerine 3 Sodium Dihydroxycetyl 2 Phosphate, Isopropyl Hydroxycetyl Ether 25 26 B Glycol Stearate SE 14 Triisononaoin 5 Octyl Cocoate 6 C Butylene Glycol, 2 D Methylparaben, Ethylparaben, Propylparaben, pH ajusté à 5,5 Produits de l'invention 0,01 ù 10 % Formulation b : Emulsion H/E A Eau qsp 100 Butylene Glycol 2 Glycerine 3 Polyacrylamide, Isoparafin, 2,8 Laureth-7 B Butylene Glycol, 2,5 Methylparaben, Ethylparaben, Propylparaben ; Phenoxyethanol, 2 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben
D Produits de l'invention 0,01 û 10 %
Formulation c : Emulsion H/E A Carbomer 0,50 Propylene Glycol 3 5 27 Glycerol 5 Eau qsp 100 B Octyl Cocoate 5 Bisabolol 0,30 Dimethicone 0,30 C Sodium Hydroxide 1,60 D Phenoxyethanol, 0,50 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben E Parfum 0,30 F Produits de l'invention 0,01 ù 10 % Exemple 11 : Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type eau dans huile :
A PEG 30ùdipolyhydroxystearate 3 Capric Triglycerides 3 Cetearyl Octanoate 4 Dibutyl Adipate 3 Grape Seed Oil 1,5 Jojoba Oil 1,5 Phenoxyethanol, 0,5 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben Glycerine 3 Butylene Glycol 3 Magnesium Sulfate 0,5 EDTA 0, 05 Eau qsp 100
Cyclomethicone 1 Dimethicone 1
Parfum 0,3
Produits de l'invention 0,01 ù 10 0/0
s Exemple 12 : Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type shampoing ou gel douche : B C D E Xantham Gum Eau 0,8 qsp 100 A B C D io Butylene Glycol, 0,5 Methylparaben, Ethylparaben, Propylparaben Phenoxyethanol, 0,5 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben
Citric acid 0,8
Sodium Laureth Sulfate 40,05 E Produit de l'invention 0,01 ù 10 la
Exemple 13 : Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type rouge à lèvres et autres produits anhydres :
Minerai Wax 17,0 Isostearyl Isostearate 31,5 Propylene Glycol Dipelargonate 2,6 Propylene Glycol Isostearate 1,7 PEG 8 Beewax 3,0 Hydrogenated Palm Kernel Oil 3,4 Glycerides, Hydrogenated Palm Glycerides Lanoline Oil 3,4 Sesame Oil 1,7 Cetyl Lactate 1,7 Minerai Oil, Lanolin Alcohol 3,0
Castor Oil qsp 100 Titanium Dioxide 3,9 CI 15850:1 0,616 CI 45410:1 0,256 CI 19140:1 0,048 CI 77491 2,048
Produits de l'invention 0,01 ù 5 0/0 A B C io Exemple 14 : Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de gels aqueux (contours de l'oeil, amincissants, etc.) :
Eau qsp 100 Carbomer 0,5 Butylene Glycol 15 Phenoxyethanol, Methylparaben, 0,5 Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben
Produits de l'invention 0,01 ù 10 0/0 A B5

Claims (8)

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'une quantité efficace d'au moins un extrait végétal en tant que principe actif stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase, et en particulier stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase 2 (HAS2), dans une composition cosmétique, ledit principe actif étant un extrait d'un végétal choisi parmi Guarana (Paullinia cupana), Millepertuis (Hypericum hircinum), Bambou (Bambusa vulgaris), Haricot mungo (Phaseolus aureus), Groseille (Ribes uva-crispa), Petit houx (Ruscus aculeatus), Fêve (Vicia faba equina), Pois (Pisum sativum), Lupin (lupinus angustifolius), Ephedra (Ephedra sinica), Tanaisie (Tanacetum vulgare), Galanga (Alpinia galanga), Mûrier blanc (Morus alba), Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci.
2. Utilisation d'une quantité efficace d'au moins un extrait végétal en tant que principe actif stimulant l'expression et/ou l'activité de la Hyaluronane Synthase, et en particulier stimulant l'expression et/ou l'activité de la de Hyaluronane Synthase 2 (HAS2), pour la fabrication d'une composition dermo-pharmaceutique, ledit principe actif étant un extrait d'un végétal choisi parmi Guarana (Paullinia cupana), Millepertuis (Hypericum hircinum), Bambou (Bambusa vulgaris), Haricot mungo (Phaseolus aureus), Groseille (Ribes uva-crispa), Petit houx (Ruscus aculeatus), Fêve (Vicia faba equina), Pois (Pisum sativum), Lupin (lupinus angustifolius), Ephedra (Ephedra sinica), Tanaisie (Tanacetum vulgare), Galanga (Alpinia galanga), Mûrier blanc (Morus alba), Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci.
3. Utilisation, selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que le principe actif est un extrait végétal choisi parmi un extrait de Mûrier blanc (Morus alba), un extrait d'Ephédra (Ephedra sinica), un extrait de Guarana 31(Paullinia cupana), un extrait de Tanaisie (Tanacetum vulgare), un extrait de Galanga (Alpinia galanga), un extrait de Brazzéine (Pentadiplandra brazzeana), et un mélange quelconque de ceux-ci.
4. Utilisation, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition est destinée à améliorer au niveau cutané la fermeté, et/ou l'élasticité, et/ou l'hydratation des tissus, et/ou augmenter l'effet barrière cutanée, et/ou augmenter la résilience des tissus, et/ou moduler l'angiogenèse, ou la néo-création de capillaires sanguins, et/ou améliorer la cicatrisation, et/ou la prolifération, la migration, ou la différenciation cellulaire, et/ou l'atrophie cutanée, et/ou destinée à lutter contre les effets de vieillissement sur la peau, et en particulier contre la perte de fermeté cutanée observée au cours du vieillissement, et/ou les cicatrices atrophiées, et/ou l'atrophie des tissus cutanés observée au cours du vieillissement, et en particulier contre l'atrophie du derme.
5. Utilisation, selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour augmenter la fermeté et/ou l'élasticité des tissus cutanés, en 20 particulier du derme.
6. Utilisation, selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour augmenter la production et/ou la quantité de glycosaminoglycannes en général et d'acide hyaluronique en particulier, notamment au niveau 25 dermique.
7. Utilisation, selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, pour lutter contre l'affinement des tissus cutanés.
8. Procédé de soins cosmétiques comprenant l'utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque des revendications 1 à 7.
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