DE102006054621A1 - Pflanzliche Extrakte zur HAS-Stimulierung, insbesondere zur HAS2-Stimulierung - Google Patents
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Abstract
Description
- GEBIET DER ERFINDUNG
- Die vorliegende Erfindung betrifft kosmetische und pharmazeutische Zusammensetzungen, welche pflanzliche Extrakte umfassen, um insbesondere eine straffende Wirkung der Haut, und insbesondere des Koriums, infolge der Stimulierung des HAS-Proteins zu erhalten.
- STAND DER TECHNIK
- Die extrazelluläre Matrix besteht aus einem komplexen Netz aus unterschiedlichen Molekülen mit Protein- oder Kohlenhydrat-Ursprung, welche für die Umgebung verantwortlich sind, die für eine gute zelluläre Funktionsweise günstig ist.
- Bei zellulären Ereignissen, wie der Proliferation, der Migration oder Differentiation, wird die extrazelluläre Matrix geändert und paßt sich an. In der Familie der Polysaccharide sind die Glycosaminoglycane (GAG), und unter ihnen die Hyaluronsäure (HA), wichtige bauliche Bestandteile dieser extrazellulären Matrix.
- Da sie sehr hohe Molekulargewichte aufweisen, besitzen diese GAG zahlreiche physiologische Funktionen wie die Hydratisierung von Geweben, die Steigerung der Hautbarriere-Wirkung, die Förderung der Nachgiebigkeit und Elastizität der Gewebe, dank ihrer Eigenschaft Wasser einzufangen. Darüber hinaus wurden sie in der Modulierung der Angiogenese oder Neuschaffung von Blutkapillaren, der Vernarbung, der zellulären Proliferation, Migration und Differentiation mittels Membranrezeptoren beschrieben, wie zum Beispiel CD44 und RHAMM (Receptor for Hyaluronan Mediated Motility), die sich auf der Oberfläche der Zellen befinden (Lesley J. et al., J. Exp. Med., 175, 257-266 (1992); Peck D. et al., Journal of Cell Science, 111, 1595-1601 (1998); Assmann V. et al., Journal of Cell Science, 111, 1685-1694 (1998)).
- Die Gegenwart von Hyaluronsäure an der Schnittstelle zwischen Korium und Epidermis erlaubt es, die Stoffwechselaustausche zwischen den beiden Geweben zu erleichtern. Schließlich erlaubt die Hyaluronsäure auch Verbindungen mit anderen Molekülen wie Versican, Fibrinogen und Collagenen vom Typ I und VI (Mc Devitt et al., FEBS Lett., 3, 294, 167-170 (1991); Le Baron et al., J. Biol. Chem., 14, 267, 10003-10010 (1992)).
- Die Hyaluronsäure wurde genauer untersucht als die anderen GAG und stellt sich als ein lineares Polysaccharid dar, das aus repetitiven Disaccharideinheiten zusammengesetzt ist: N-Acetyl-Dglucosamin-β(1→4)-D-Glucuronsäure β(1→3); sie wird auf der Innenseite der Plasmamembran durch aufeinander folgende Zugabe von UDP-N-Acetylglucosamin und UDP-D-Glucuronsäure synthetisiert, kombiniert durch Verbindungen β(1→4) und β(1→3), danach direkt in den extrazellulären Raum abgesondert (Weigel et al., J. Biol. Chem., 272, 13997-14000 (1997)). Diese Synthese erfolgt durch monomere Membranenzyme, die als Hyaluronansynthasen (HAS) bezeichnet werden, welche in drei Isoformen bei den Wirbeltieren zu finden sind: HAS1, HAS2 und HAS3 (Weigel et al., J. Biol. Chem., 272, 13997-14000 (1997)), transkribiert ausgehend von 3 unterschiedlichen Genen, die auf unterschiedlichen Chromosomen angeordnet sind. Insbesondere befindet sich das für das Protein HAS2 codierende Gen auf dem Chromosom 8 und ist für die Gegenwart von unterschiedlichen Wachstumsfaktoren wie PDGF-BB, TGF-β1, EGF oder FGF und KGF empfänglich.
- Die GAGs finden sich in annähernd allen Geweben wieder, wobei ihre Mengen in der extrazellulären Matrix unter bestimmten Bedingungen stark modifiziert sind, zum Beispiel bei kutaner Atrophie, Alter, atrophierten Narben und wahrscheinlich Osteoporose. Die Haut und insbesondere das Korium enthalten ungefähr 50 % der Gesamtmenge an Hyaluronsäure, die im Organismus vorhanden ist (Laurent et al., FASEB J., 6, 2397-2404 (1992)), wobei Studien eine starke Ursachen-Wirkung-Beziehung des Alters gezeigt haben, bei völliger Abwesenheit von synthetisierter Hyaluronsäure ab dem 60. Lebensjahr (Ghersetich et al., Int. J. Dermatol., 33, 119-122 (1994)). Diese Hyaluronsäure wird durch die HAS der Fibroblasten des Koriums synthetisiert.
- Im Bereich der Epidermis wird die Hyaluronsäure durch HAS der Keratinocyten synthetisiert und spielt eine Rolle bei der Migration, Proliferation und Differentiation von letzteren. Die Verringerung der Hyaluronsäure bringt eine Reifung der Epidermis mit sich, die auf die Beschleunigung der terminalen Differentiation der Keratinocyten zurückzuführen ist.
- Für kosmetische oder dermo-pharmazeutische Anwendungen wurde eine bestimmte Anzahl an Verbindungen in Bezug auf ihre Fähigkeiten untersucht, in den Keratinocyten die Produktion von Glycosaminoglycanen im Allgemeinen und von Hyaluronsäure im Besonderen zu stimulieren.
- Nachdem bewiesen wurde, daß HAS2 durch verschiedene Substanzen wie TNF-Alpha, Interferon-Gamme, Interleukin 1 Beta (Ijuin et al. 2001, Arch. Oral Biol. 46(8):767-72) induziert werden kann, haben verschiedene Teams versucht, die Produktion von HAS2 mit Substanzen wie Retinolsäure auf einem Keratinocytenmodell in Kultur zu stimulieren, um die Auswirkungen auf die Qualität und die Struktur der Epidermis von Häuten gesunder Freiwilliger zu untersuchen, die auf diese Weise behandelt wurden. Die Schlußfolgerung aus diesen Untersuchungen ist, daß alle pro-entzündlichen Cytokine die Produktion von HAS2 und somit von Hyaluronsäure in den Zellen in Kultur stimulieren (Jacobson A, Brinck J, Briskin MJ, Spicer AP und Heldin P. 2000. Expression of human hyaluronan synthases in response to external stimuli. Biochem. J. 348 (Pt1): 29-35). So wie Substanzen wie Retinolsäure, wurde vor kurzem die Substanz K (oder 20 O-beta-D Glucopyranosyl 20 S Protopanaxadiol) von Ginseng als Substanz beschrieben, die imstande ist, die Synthese von HAS2 in den Zellen von HaCat vom Typ transformierter Keratinocyten zu stimulieren, oder in Humanfibroblasten in Kultur (Kim et al., IFSCC Magazine 7(3), 189-196 (2004)).
- AUFGABEN DER ERFINDUNG
- Die Hauptaufgabe der vorliegenden Erfindung besteht darin, das technische Problem zu lösen, das in der Bereitstellung von Verbindungen besteht, die aus pflanzlichen Extrakten zusammengesetzt sind, die durch lokale Anwendung auf der Haut verwendbar sind, und insbesondere in kosmetischen oder dermo-pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendbar sind, d.h. keine wesentliche entzündliche Reaktion im Bereich der Haut aufweisen, die aber imstande sind, die Festigkeit der Haut zu stärken.
- Insbesondere besteht die Aufgabe der Erfindung darin, Zusammensetzungen bereitzustellen, die lokal verwendbar sind und es ermöglichen, die Expression und/oder Aktivität von HAS2 zu stimulieren, um die Menge an Glycosaminoglycanen und von Hyaluronsäure in der Haut, insbesondere in dem Korium, zu erhöhen und somit die Festigkeit der Haut zu verbessern.
- Die Erfindung hat insbesondere die Aufgabe, die oben genannten Verbindungen bereitzustellen, um im kutanen Bereich die Festigkeit und/oder Elastizität und/oder Hydratisierung der Gewebe zu verbessern und/oder die Hautbarriere-Wirkung zu verbessern und/oder die Nachgiebigkeit der Gewebe zu verbessern und/oder die Angiogenese zu modulieren oder die Neuschaffung von Blutkapillaren und/oder die Vernarbung, die zelluläre Proliferation, Migration oder Differentiation zu verbessern.
- Insbesondere hat die Erfindung die Aufgabe, die oben genannten Verbindungen bereitzustellen, um gegen kutane Atrophie, insbesondere die Atrophie des Koriums, die Auswirkungen des Alterns der Haut, atrophierte Narben oder den Verlust an kutaner Festigkeit zu bekämpfen, der im Zuge der Alterung zu beobachten ist.
- ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
- Die vorliegende Erfindung beschreibt gemäß einem ersten Aspekt die Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einem pflanzlichen Extrakt als Wirkstoff, welcher die Expression und/oder Aktivität von Hyaluronansynthase und insbesondere die Expression und/oder Aktivität der Hyaluronansynthase 2 (HAS2) in einer kosmetischen Zusammensetzung stimuliert.
- Die Erfindung beschreibt gemäß einem zweiten Aspekt die Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einem pflanzlichen Extrakt als Wirkstoff, welcher die Expression und/oder die Aktivität der Hyaluronansynthase und insbesondere die Expression und/oder Aktivität der Hyluronansynthase 2 (HAS2) stimuliert, um eine pharmazeutische Zusammensetzung und insbesondere eine dermo-pharmazeutische Zusammensetzung herzustellen.
- Die Erfinder verstehen unter „welcher die Expression der Hyaluronansynthase (HAS, insbesondere HAS2) stimuliert" insbesondere die Stimulierung der Synthese der Hyaluronansynthase (HAS, insbesondere HAS2).
- Insbesondere ermöglichen es die Wirkstoffe gemäß der vorliegenden Erfindung, eine Stimulierung der Expression des Gens zu erhalten, das für das Protein HAS2 in den Fibroblasten codiert, insbesondere in den humanen Fibroblasten und insbesondere im Bereich der humanen kutanen Gewebe wie dem Korium.
- Vorteilhafterweise erlauben es die Wirkstoffe, die Festigkeit und/oder Elastizität der kutanen Gewebe, insbesondere des Koriums, zu erhöhen.
- Vorteilhafterweise ermöglichen es die Wirkstoffe, die Produktion und/oder die Menge von Glycosaminoglycanen im Allgemeinen und Hyaluronsäure im Besonderen zu erhöhen, insbesondere im Bereich des Koriums.
- Vorteilhafterweise induzieren die Wirkstoffe gemäß der vorliegenden Erfindung im Wesentlichen keine entzündliche Reaktion im kutanen Bereich und sind somit mit kosmetischen oder dermo-pharmazeutische Anwendungen kompatibel.
- Vorteilhafterweise ist die Zusammensetzung dazu bestimmt, im kutanen Bereich die Festigkeit und/oder Elastizität und/oder Hydratisierung der Gewebe zu verbessern und/oder die Hautbarriere-Wirkung und/oder die Nachgiebigkeit der Gewebe zu erhöhen und/oder die Angiogenese zu modulieren oder die Neuschaffung von Blutkapitllaren zu modulieren und/oder die Vernarbung zu verbessern und/oder die zelluläre Proliferation, Migration oder Differentiation und/oder die kutane Atrophie und/oder ist dazu bestimmt, die Auswirkungen der Alterung auf die Haut zu bekämpfen und insbesondere den Verlust der kutanen Festigkeit, der im Zuge der Alterung beobachtet wird, und/oder die atrophierten Narben und/oder die Atrophie der kutanen Gewebe, die im Zuge der Alterung beobachtet wird, insbesondere die Bekämpfung der Atrophie des Koriums.
- Vorteilhafterweise werden die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung dazu verwendet, das Reifen der kutanen Gewebe und insbesondere der Haut zu bekämpfen.
- Vorteilhafterweise sind die Verbindungen, die gemäß der vorliegenden Erfindung verwendet werden, pflanzliche Extrakte. Insbesondere ist der Wirkstoff ein Extrakt aus einer Pflanze, die ausgewählt ist aus Guarana (Paullinia cupana), Johanniskraut (Hypericum hircinum), Bambus (Bambusa vulgaris), Mungobohne (Phaseolus aureus), Johannisbeere (Ribes uva-crispa L.), stechendem Mäusedorn (Ruscus aculeatus), Ackerbohne (Vicia faba equina), Erbse (Pisum sativum), schmalblättriger Lupine (Lupinus angustifolius), Meerträubel (Ephedra sinica), gemeinem Rainfarn (Tanacetum vulgare), großem Galgant (Alpinia galanga), weißem Maulbeerbaum (Morus alba), Brazzein (Pentadiplandra brazzeana) und einer beliebigen Mischung des Vorhergehenden.
- Vorzugsweise handelt es sich bei dem Wirkstoff um ein pflanzliches Extrakt, das ausgewählt ist aus einem Extrakt aus weißem Maulbeerbaum (Morus alba), einem Extrakt aus Meerträubel (Ephedra sinica), einem Extrakt aus Guarana (Paulinia cupana), einem Extrakt aus gemeinem Rainfarn (Tanacetum vulgare), einem Extrakt aus großem Galgant (Alpinia galanga), einem Extrakt aus Brazzein (Pentadiplandra brazzeana) und einer beliebigen Mischung des Vorhergehenden.
- Vorteilhafterweise werden die Verbindungen der vorliegenden Erfindung verwendet, um die Festigkeit und/oder Elastizität der kutanen Gewebe, insbesondere des Koriums, zu verbessern.
- Vorteilhafterweise wird ein polares Lösemittel oder eine Mischung aus polaren Lösemitteln verwendet, um das Extrakt zu erhalten. Unter den gewöhnlichen Lösemitteln für die Extraktion kann ein protisches Lösemittel verwendet werden, das aus der Gruppe ausgewählt wird, die besteht aus: Wasser, Methanol, Ethanol, Propanol, Butanol, Pentanol, Cyclohexanol, Diethylenglycol, HO-(CH2)2-OH und einer ihrer Mischungen. Ebenso kann ein aprotisches polares Lösemittel verwendet werden, das insbesondere aus der Gruppe ausgewählt wird, die besteht aus: Pyridin, Butanon, Aceton, Ac2O, (Me2N)2CO, PhCN, CH3CH2CN, HMPA, PhNO2, McNO2, DMF, MeCN, Sulfolan, DMSO, HCONH2, NCONHMe, CH3CONHMe und einer ihrer Mischungen. Vorzugsweise wird Wasser, ein Alkohol wie Ethanol, Propanol, Isopropanol oder Butanol, ein Polyol wie Butylenglycol oder ein Ester wie Ethylacetat oder eine Mischung dieser Lösemittel verwendet. Die Mischungsverhältnisse der oben erwähnten Lösemittel variieren im Allgemeinen zwischen 1:1 und 1:100 und vorzugsweise zwischen 1:1 und 1:10; zum Beispiel wird eine Mischung von 25/75 verwendet.
- Die Extraktion kann durch Rühren und/oder Erhitzen durchgeführt werden, zum Beispiel zwischen 30 und 60 °C oder durch Rückfluß des verwendeten Lösemittels. Die Extraktion erfolgt üblicherweise bei atmosphärischem Druck, wobei aber auch eine Extraktion unter Druck durchgeführt werden kann. Die Extraktionszeit wird vom Fachmann bestimmt und hängt insbesondere von den Extraktionsbedingungen ab.
- Vorteilhafterweise werden mehrere Extraktionen durchgeführt. Insbesondere können die erhaltenen Fraktionen vereint werden, falls dies gewünscht wird.
- Vorteilhafterweise werden die erhaltenen Extrakte gefiltert, danach eventuell konzentriert und/oder verdampft, bis die gewünschte Qualität der Trockenprodukte erzielt wird.
- Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung werden in Form von lokalen Zusammensetzungen hergestellt, insbesondere von kosmetischen Zusammensetzungen, dermo-pharmazeutischen Zusammensetzungen oder pharmazeutischen Zusammensetzungen. Daher enthält für diese Zusammensetzungen der Träger zum Beispiel mindestens eine Verbindung, die aus der Gruppe ausgewählt wird, die aus Konservierungsstoffen, Weichmachern, Emulgatoren, oberflächenaktiven Stoffen, Hydratisierungsmitteln, Verdickungsmitteln, Konditionierungsmitteln, Mattierungsmitteln, Stabilisatoren, Antioxydantien, Texturmitteln, Glanzmitteln, filmbildenden Mitteln, Lösungsmitteln, Pigmenten, Farbmitteln, Duftstoffen und Sonnenfiltern besteht. Diese Träger werden vorzugsweise aus der Gruppe ausgewählt, die aus Aminosäuren und ihren Derivaten besteht, Polyglycerolen, Estern, Polymeren und Derivaten von Zellulose, Derivaten von Lanolin, Phospholipiden, Lactoferrinen, Lactoperoxidasen, Stabilisatoren auf der Basis von Sucrose, Vitaminen E und seinen Derivaten, natürlichen und künstlichen Wachsen, pflanzlichen Ölen, Triglyceriden, unverseifbaren Mitteln, Phytosterolen, pflanzlichen Estern, Silikon und seinen Derivaten, Proteinhydrolysate, Jojoba-Öl und seinen Derivaten, Lipoester/wasserlöslichem Ester, Betaine, Aminoxide, Pflanzenextrakten, Saccharose-Ester, Titan-Dioxyde, Glycinen und Parabenen und vorzugsweise aus der Gruppe bestehend aus Butylenglycol, Steareth-2, Steareth-21, Glycol-15, Searylether, Cetearylalkohol, Penoxyethanol, Methylparaben, Ethylparaben, Proplyparaben, Butylparaben, Butylenglycol, natürlichen Tocopherolen, Glycerin, Natriumdihydroxycetyl, Isopropylhydroxycetylether, Glycolstearat, Triisononaoin, Octylcocoat, Polyacrylamid, Isoparaffin, Laureth-7, einem Carbomer, Propylenglycol, Glycerol, Bisabolol, einem Dimethicon, Natriumhydroxyd, PEG 30-Dipolyhydroxysterat, Capric-/Capryl-Triglyceride, Cetearyloctanoat, Dibutyladipat, Traubenkernöl, Jojobaöl, Magnesiumsulfat, EDTA, einem Cyclomethicon, Xanthangummi, Zitronensäure, Natriumlaurylsulfat, Mineralwachsen und Mineralölen, Isostearylisostearat, Propylenglycoldipelargonat, Propylenglycolisostearat, PEG 8 Beewax, Glyceriden des hydrierten Öls von Palmenherzen, Glyceriden von hydriertem Palmenöl, Lanolinöl, Sesamöl, Cetyllactat, Lanolinalkohol, Rizinusöl, Titandioxyd, Lactose, Saccharose, Polyethylen niedriger Dichte, einer isotonischen salzigen Lösung.
- Vorteilhafterweise werden die zuvor genannten Zusammensetzungen in einer Form formuliert, die aus der Gruppe ausgewählt wird, die aus einer wässerigen oder öligen Lösung, einer Creme oder einem wässerigen Gel oder einem öligen Gel, insbesondere in einem Tegel oder einer Tube, insbesondere einem Duschgel, einem Shampoo; einer Milch; einer Emulsion, einer Mikroemulsion oder einer Nanoemulsion, insbesondere Öl-in-Wasser oder Wasser-in-Öl oder mehrfach oder silikoniert; einer Lotion, insbesondere in einem Glasfläschchen, einem Kunststofffläschchen oder einem Dosier- oder einem Aerosolfläschchen; einer Ampulle; einem Serum; einer Flüssigseife; einem dermatologischem Block; einer Salbe; einem Schaum; einem wasserfreien Produkt, vorzugsweise flüssig, pastenartig oder fest, zum Beispiel in Form eines Stabs, insbesondere in Form eines Lippenstifts, besteht.
- Die Mengen des üblicherweise verwendeten Wirkstoffes variieren zwischen 0,001 Gew.% und 20 Gew.% der Gesamtzusammensetzung, vorzugsweise zwischen 0,001 Gew.% und 10 Gew.%, und noch bevorzugter werden zwischen 0,01 Gew.% und 10 Gew.% der Gesamtzusammensetzung verwendet.
- Man kann eventuell die oben beschriebenen Verbindungen mit einem anderen Wirkstoff verbinden, um eine verbesserte Wirkung zu erzielen.
- Die Erfindung betrifft gemäß einem anderen Aspekt ein Verfahren zur kosmetischen Pflege, welches die Verwendung der oben genannten Zusammensetzungen umfaßt.
- Die Erfindung betrifft gemäß einem anderen Aspekt ein Verfahren zur pharmazeutischen Behandlung, insbesondere zur dermo-pharmazeutischen Behandlung, welches die Verwendung der oben erwähnten Zusammensetzungen umfaßt, und umfaßt insbesondere die Verabreichung einer wirksamen Menge von mindestens einem oben erwähnten Wirkstoff an ein Subjekt, das diesen benötigt.
- Die zuvor erwähnte Anwendung kann einmal oder mehrmals pro Tag erfolgen, insbesondere durch lokale Anwendung.
- Weitere Ziele, Eigenschaften und Vorteile der Erfindung werden dem Fachmann nach der Lektüre der erläuternden Beschreibung offenbar werden, die sich auf Beispiele bezieht, die lediglich zu Illustrationszwecken angeführt werden und in keiner Weise den Schutzumfang der Erfindung einschränken.
- KURZE BESCHREIBUNG DER FIGUREN
- Es zeigen
-
1 die Stimulierung von HAS2 durch ein Extrakt von weißem Maulbeerbaum; -
2 die Stimulierung von HAS2 durch ein Meerträubel-Extrakt; -
3 die Stimulierung von HAS2 durch ein Guarana-Extrakt; -
4 die Stimulierung von HAS2 durch ein Rainfarn-Extrakt; -
5 die Stimulierung von HAS2 durch ein Galgant-Extrakt; -
6 die Entwicklung der Festigkeit der Haut nach einem Monat Verwendung einer Creme, welche ein Galgant-Extrakt und ein Rainfarn-Extrakt umfaßt; -
7 die Entwicklung der Festigkeit der Haut nach einem Monat Anwendung eines Serums, das ein Galgant-Extrakt und ein Rainfarn-Extrakt umfaßt. - BESCHREIBUNG VON AUSFÜHRUNGSBEISPIELEN
- Die Beispiele sind Bestandteil der vorliegenden Erfindung, wobei jede Eigenschaft, die im Vergleich zu einem beliebigen Stand der Technik ausgehend von der in ihrer Gesamtheit betrachteten Beschreibung, einschließlich der Beispiele, als neu erscheint, Bestandteil der Erfindung in ihrer Funktion und in ihrer Allgemeinheit ist. Daher besitzt jedes Beispiel eine allgemeine Reichweite Ferner werden in den Beispielen alle Prozentsätze als Gewichtsprozente angeführt, sofern keine anders lautende Feststellung gemacht wird, und die Temperatur wird – sofern nicht anders festgehalten – in Grad Celsius angegeben und der Druck ist – sofern nicht anders angeführt – als atmosphärischer Druck angegeben.
- BEISPIEL 1: Stimulierung der Expression des Gens, das für das HAS2-Protein codiert
-
- A) Die normalen humanen Fibroblasten werden nach Extraktion von der Kollagenase ausgehend von abdominalen Biopsien erhalten, die aus chirurgischer Resektion resultieren. Die Fibroblasten werden in Fibroblast Culture Medium (FCM) amplifiziert, das aus Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM stabilisiertes Glutamin, Invitrogen) zusammengesetzt ist, ergänzt durch 10 % Kalbserum (Hyclon), 25 mg/l Gentamycin, 100.000 UI/l Penicillin, 1 mg/l Amphotericin B und 50 mg/l Natriumascorbat (Sigma). 1,5 ml FCM werden durch Vertiefungen verteilt und die Kultur bei 37 °C unter 5 % CO2 realisiert. Das Milieu wird drei Mal pro Woche erneuert. Die Fibroblasten werden in der Folge mit 10.000 Zellen pro cm2 in den Platten mit 24 Vertiefungen unter 1 ml Milieu Fibroblast Basal Medium (Promocell) eingeimpft und bis zur Konfluenz amplifiziert.
- B) Die Wirkstoffe (getestet durch das Siebungsverfahren mit einer Konzentration von 1 %) werden in dem Kulturmilieu, das eine Antibiotika-, Antimycotika- und Wachstumsfaktorenverarmung aufweist, verdünnt. Das Erfassen der Expression des Gens erfolgt durch RT-PCR in Echtzeit, unter Messung der Expression von jedem Gen, die dem Actin (Housekeeping-Gen) zugeordnet und in % der nicht behandelten negativen Kontrollgruppe ausgedrückt wird. 10 μl ARNtotaux 5 ng/μl werden 40 μl PCR-Gemisch hinzugefügt (Verbindung aus 25 μl SYBR Green Buffer Mix 2X, 0,5 μl Enzym-Gemisch, 0,5 μM Endwert Vorwärts-Primer und 0,5 μM Endwert Rückwärts-Primer, Wasser zum Auffüllen auf 40 μl).
- Die RT-PCR erfolgt in unterschiedlichen Schritten, wobei die Retrotranskription bei 50 °C, 30 Minuten lang erfolgt, Aktivierung der Polymerase bei 95 °C, 15 Minuten lang, Realisierung der PCR-Zyklen (95 °C, 15s; für jedes Gen spezifische Hybridisierungstemperatur/30s; 72 °C/30s) × 50 Zyklen. Die Vorwärts- und Rückwärts-Oligonukleotide sind jeweils CGAGTTTACTTCCCGCCAAGA und CTTCCGCCTGCCACACTTATTGAT und die Hybridisierungstemperatur liegt bei 56 °C.
- Aus der Gesamtheit der evaluierten Produkte ergeben die unten genannten Produkte zufriedenstellende Ergebnisse, weil sie die Produktion von mRNA stimulieren, welche HAS2 codiert. Diese Produkte können somit in der Kosmetik zum Stimulieren der Synthese von HAS2 in dem Korium verwendet werden und eine kutane Festigkeit induzieren.
- Somit wird bevorzugt, eine Extraktion vorzugsweise mit einem polaren Lösemittel oder einem Gemisch aus polaren Lösemitteln durchzuführen, eventuell mit Rückfluß, vorzugsweise des Teils der Pflanze, der in der Tabelle 1 angeführt wird. Sobald die Extraktion durchgeführt wurde, wird die Lösung filtriert und eventuell in einem polaren Lösemittel oder einem Gemisch aus polaren Lösemitteln wieder aufgelöst.
- Vor der Extraktion kann man vorteilhafterweise den oder die Teile der verwendeten Pflanze zerkleinern.
- Es ist vorteilhaft, ein Extrakt der verwendeten Pflanzen als Rohstoff ausgehend von einem Lösemittel, das vorzugsweise polar und Wasser, ein Gemisch aus Wasser/Alkohol oder ein Polyol wie ein Gemisch aus Wasser/Glykol oder Wasser/Ethanol oder ein Polyol oder ein Alkohol wie Ethanol ist, zu erhalten. Das Extrakt wird vorzugsweise filtriert, danach getrocknet. Es ist auch möglich, die Extraktion durch gemäßigtes Erhitzen durchzuführen, beispielsweise bei 45 °C oder mit Rückfluß. Die Extraktion erfolgt vorzugsweise unter Rühren. Die Extraktionsverfahren sind dem Fachmann wohl bekannt. Der verwendete Teil der Pflanzen kann in Abhängigkeit vom zu erhaltenden Extrakt variieren.
- Vorzugsweise wird ein Extrakt ausgehend von einem Teil der gespaltenen Pflanze zu 10 % (p/p) in Wasser oder Ethanol, eventuell mit Rückfluß, gewonnen. Die Extraktion wird eine Stunde lang durchgeführt, danach wird die Lösung filtriert, Ethanol eliminiert und das erhaltene Produkte zu 5 % (p/p) in einem Wasser/Glykol-Gemisch aufgelöst, danach auf einem Keramikfilter mit unterschiedlichen Spaltungsschwellen ultrafiltriert und schließlich auf 0,45 μm filtriert. Man kann als Lösemittel auch Ethanol, Ethylacetat, DMSO, Aceton oder ein Gemisch aus 75 Wasser und 25 % Glycolbutylen – anstatt des Wassers – verwenden. Die bevorzugten Extraktionstypen sind die in Tabelle 1 genannten Typen.
- BEISPIEL 2: Validierung durch Wirkungsdosis der Wirkungen, die durch einen der ausgewählten Inhaltsstoffe erhalten werden (Extrakt aus weißem Maulbeerbaum – JVEG022A):
- Fibroblast-Kulturen werden so wie in Beispiel 1 angeführt gewonnen und in Gegenwart von steigenden Mengen an ausgewähltem Extrakt inkubiert. Nach der Extraktion der ARNm werden ARNm, welche HAS2 codieren, durch Verwendung der Q-RT-PCR erfaßt, so wie in Beispiel 1 beschrieben. Die Resultate werden in Prozent der Aktivierung in Abhängigkeit von der nicht behandelten zellulären Kultur angegeben, die als Kontrollgruppe für die Studie verwendet wird. Die Ergebnisse sind in
1 dargestellt. Es läßt sich eine bedeutende Wirkungsdosis dieses Wirkstoffes feststellen, was bedeutet, daß seine Aktivität relativ spezifisch sein muß. Mit 1 % verwendet, ermöglicht dieses Extrakt, eine Stimulierung von mehr als 900 % von ARNm von HAS2 zu erhalten, was ein sehr positives und bedeutendes Ergebnis darstellt. - BEISPIEL 3: Validierung durch Wirkungsdosis der Wirkungen, die durch einen der ausgewählten Inhaltsstoffe erzielt werden (Meerträubel-Extrakt – JVEG166A):
- Fibroblast-Kulturen werden – so wie in Beispiel 1 angeführt – erstellt und in Gegenwart von steigenden Mengen an ausgewähltem Extrakt (Meerträubel-Extrakt) inkubiert. Nach der Extraktion der ARNm werden die Mengen von ARNm, die HAS2 codieren, mit Hilfe von Q-RT-PCR erfaßt, so wie in Beispiel 1 beschrieben. Die Ergebnisse werden in Prozent der Aktivierung in Abhängigkeit von der nicht behandelten zellulären Kultur angegeben, die als Kontrollgruppe der Studie verwendet wird. Die Ergebnisse sind in
2 angeführt. Es läßt sich eine signifikante Dosiswirkung dieses Wirkstoffes feststellen, was bedeutet, daß seine Aktivität relativ spezifisch sein muß. Mit 1 % verwendet, ermöglicht dieses Extrakt, eine Stimulierung von 155 % der ARNm von HAS2 zu erzielen, was ein sehr positives Ergebnis darstellt. - BEISPIEL 4: Validierung durch Dosiswirkung der Wirkungen, die durch einen der ausgewählten Inhaltsstoffe (Guarana-Extrakt – JVEG056A) erzielt werden:
- Fibroblast-Kulturen werden – so wie in Beispiel 1 angeführt – erstellt und in Gegenwart von steigenden Mengen des ausgewählten Extrakts (Guarana-Extrakt) inkubiert. Nach der Extraktion der ARNm werden die Mengen von ARNm, welche HAS2 codieren, unter Verwendung von Q-RT-PCR erfaßt, so wie in Beispiel 1 beschrieben. Die Ergebnisse werden in Aktivierungsprozentsätzen in Abhängigkeit von der nicht behandelten zellulären Kultur angegeben, die als Kontrollgruppe der Studie verwendet wird. Die Ergebnisse werden in
3 dargestellt. Es läßt sich eine signifikante Dosiswirkung dieses Wirkstoffes feststellen, was bedeutet, daß seine Aktivität relativ spezifisch sein muß. Mit 1 % verwendet, erlaubt dieses Extrakt, eine Stimulation von 500 % ARNm von HAS2 zu erhalten, was ein sehr positives Ergebnis darstellt. - BEISPIEL 5: Validierung durch Dosiswirkung der Wirkungen, die durch einen der ausgewählten Inhaltsstoffe (Rainfarn-Extrakt – JVEG681A) erzielt wurden:
- Fibroblast-Kulturen werden – so wie in Beispiel 1 angeführt – erstellt und in Gegenwart von steigenden Mengen an ausgewähltem Extrakt (Rainfarn-Extrakt) inkubiert. Nach der Extraktion der ARNm werden die Mengen an ARNm, welche HAS2 codieren, mit Hilfe der Q-RT-PCR erfaßt, so wie in Beispiel 1 beschrieben. Die Ergebnisse werden in Aktivierungsprozentsätzen in Abhängigkeit von der nicht behandelten zellulären Kultur angegeben, die als Kontrollgruppe der Studie verwendet wurde. Die Ergebnisse werden in
4 dargestellt. Es läßt sich eine signifikante Wirkungsdosis dieses Wirkstoffes feststellen, was bedeutet, daß seine Aktivität relativ spezifisch sein muß. Mit 1 % verwendet, erlaubt dieses Extrakt, eine Stimulierung von 260 % von ARNm von HAS2 zu erhalten, was ein sehr positives Ergebnis darstellt. - BEISPIEL 6: Validierung durch Dosiswirkung der Wirkungen, die durch einen der ausgewählten Inhaltsstoffe (Galgant-Extrakt – JVEG2304A) erzielt werden:
- Fibroblast-Kulturen werden – so wie in Beispiel 1 angeführt – erstellt und in Gegenwart von steigenden Mengen an ausgewähltem Extrakt (Galgant-Extrakt) inkubiert. Nach der Extraktion der ARNm werden die Mengen an ARNm, welche HAS2 codieren, mit Hilfe der Q-RT-PCR erfaßt, so wie in Beispiel 1 beschrieben.
- Die Ergebnisse werden in Aktivierungsprozentsätzen in Abhängigkeit von der nicht behandelten zellulären Kultur angegeben, die als Kontrollgruppe der Studie verwendet wurde. Die Ergebnisse werden in
5 dargestellt. Es läßt sich eine signifikante Wirkungsdosis dieses Wirkstoffes feststellen, was bedeutet, daß seine Aktivität relativ spezifisch sein muß. Mit 1 % verwendet, erlaubt dieses Extrakt, eine Stimulierung von 180 % von ARNm von HAS2 zu erhalten, was ein sehr positives Ergebnis darstellt. - BEISPIEL 7: Tests in der zellulären Kultur
- Die Produkte der Erfindung, nämlich Extrakt von Pentadiplandra Brazzeana (JVEG 060A), Galgant-Extrakt (JVEG 203A), Rainfarn-Extrakt (JVEG 681A) und Extrakt von weißem Maulbeerbaum (JVEG 022A) werden in Bezug auf ihre Fähigkeit, die Neosynthese von Glycosaminoglycanen (GAGs, insbesondere Hyaluronsäure) zu stimulieren, evaluiert. Die ausgewählten biologischen Modelle sind das Korium-Äquivalent (DE; freie Gitter von zurückgezogenem Kollagen, welche Fibroblasten enthalten) und die Kultur von humanen, normalen Korium-Fibroblasten in Einschicht-Kultur (NHDF).
- Die Evaluierung dieser Wirkungen wurde durchgeführt, indem die Aufnahme von tritiiertem Glucosamin in der Fraktion GAGS quantifiziert wurde, welche durch die Fibroblasten der ausgewählten Modelle neosynthetisiert wurde. Die Aufnahme von Glucosamin in die gereinigte Fraktion GAGs berücksichtigt die Neosynthese des Großteils der GAGs, einschließlich der Hyaluronsäure (mehrheitlich). Die Analyse wurde getrennt auf den abgesonderten/löslichen Fraktionen (abgesonderte GAG) und auf den Fraktionen durchgeführt, die in DE integriert wurden (in der Matrix gelagerte GAG) oder auf der Gesamtheit einer Kultur von Fibroblasten (NHDF).
- ÄQUIVALENTE KORIA
- Die äquivalenten Koria wurden hergestellt, danach in DMEM (Invitrogen)-Milieu zu 2 % von SVF platziert und 7 Tage lang zum Retraktieren gebracht, wobei alle 3 Tage das Milieu geändert wurde. Die DE wurden in der Folge in Abwesenheit (Kontrollgruppe) oder in Gegenwart der Testverbindungen oder der Referenzverbindung (TGF beta, 10 ng/ml) 48 Stunden lang oder 72 Stunden lang bei 37 °C und 5 % CO2 inkubiert, mit Zugabe von tritiiertem Glucosamin 24 Stunden vor dem Ende der Inkubation. Jede Bedingung wurde dreifach hergestellt.
- FIBROBLASTEN
- Die normalen humanen Korium-Fibroblasten wurden in vollständigem DMEM-Milieu eingeimpft und 24 Stunden lang bei 37 °C und 5 % CO2 vorinkubiert, danach wurde das Kulturmilieu durch DMEM-Milieu zu 2 % Serum ersetzt, welches die Testverbindungen oder das Referenzprodukt (TGF beta, 10 ng/ml) enthielt oder nicht (Kontrollgruppe). Jede experimentelle Bedingung wurde dreifach hergestellt.
- Die Zellen wurden im Anschluss bei 37 °C 72 Stunden lang unter Zugabe von tritiiertem Glucosamin 24 Stunden vor dem Ende der Inkubation inkubiert.
- ANALYSE DER AUFGENOMMENEN RADIOAKTIVITÄT
- 24 Stunden vor dem Ende der Inkubation wird tritiiertes Glucosamin (D-[6-3H]-Glucosamin, 1,37 TBq/mmol, 37 Ci(mmol, 33 μCi/ml) zur Kultur hinzugefügt. Die Extraktion der Glycosaminoglycane wird auf den Kulturüberständen der DE (abgesonderte/lösliche Fraktion) im Inneren der DE durch Zerkleinern (Fraktionsextrakt) oder im Inneren der Kultur der Fibroblasten mit Hilfe eines chaotropischen Puffers durchgeführt (Tris/HCl 50 mM, Guanidin 4 M, EDTA 5 mM, ph-Wert 8,0). Die Reinigung erfolgt durch Ionenaustausch-Chromatographie: Adsorption der anionischen Moleküle auf Q-Sepharose-Kugeln unter hochstringenten Bedingungen, Desorption der gering und durchschnittlich anionischen Moleküle mit Harnstoff 6 M plus NaCl 0,2 M und Waschungen. Die Zählung der aufgenommenen Radioaktivität in den auf dem Träger (mehrheitlich GAGs; eluierte NaCl 2M) verbleibenden sehr kationischen Molekülen erfolgt durch Flüssig-Szintillation. Die Ergebnisse werden in Prozentsätzen der Schwankung der Synthese der Glycosaminoglycane im Vergleich zur Kontrollgruppe ausgedrückt. Die Zwischengruppen-Vergleiche wurden durch Schwankungsanalyse (ANOVA) mit Hilfe des Mehrfachvergleichstests von Dunnett durchgeführt.
- Das Referenzprodukt TGF beta (10 ng/ml) hat die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion GAGs (Stimulierung eines Faktors 4 im Vergleich zur Kontrollgruppe) stark stimuliert. Dieses Ergebnis bestätigt den Versuch.
- Unter den experimentellen Bedingungen dieses Tests haben das Galgant-Extrakt (JVEG203A) und das Rainfarn-Extrakt (JVEG681A), getestet zu 1 %, die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion GAGs, die durch Fibroblasten synthetisiert wurden (jeweils 154 % bzw. 143 % der nicht behandelten Kontrollgruppe, p <0,01), stimuliert. Tabelle 2: Auswirkungen der unterschiedlichen Behandlungen auf die Aufnahme von 3H-Glucosamin in die Fraktion der GAGs, die durch humane Korium-Fibroblasten in In-Vitro-Kulturen synthetisiert wurden. Aufnahme von Glucosamin-Fibroblasten
- Sd: Standardabweichung; n: Anzahl der Versuche.
- Cpm: Anzahl der Desintegrationen pro Minute (Puls pro Minute);
- p: Signifikanz, die durch statistischen Test evaluiert wurde.
- LÖSLICHE FRAKTION
- Das Referenzprodukt TGF beta hat die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion von GAGs, löslich und von den äquivalenten Koria abgesondert, stark stimuliert (Stimulierung mit einem Faktor 3 im Vergleich zur Kontrollgruppe). Dieses Ergebnis bestätigt den Versuch.
- Unter den experimentellen Bedingungen dieses Versuches haben die Produkte Rainfarn-Extrakt (JVEG681A) und Extrakt des weißen Maulbeerbaums (JVEG022A, die zu 1 % getestet wurden, die Aufnahme von Glucosamin in die lösliche und von den äquivalenten Koria abgesonderte Fraktion signifikant stimuliert (jeweils 210 %, p< 0,01 und 149 %, p < 0,05). Das Galgant-Extrakt (JVEG) hat auch ermöglicht, die Aufnahme von Glucosamin in die lösliche Fraktion GAGs der DE zu erhöhen (140 der Kontrollgruppe).
- Extrahierte Fraktion
- TGF beta hat die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion GAGs stimuliert, welche aus den äquivalenten Koria extrahiert wurde, aber in gemäßigterer Form als in der löslichen Fraktion (Stimulierung mit einem Faktor 1,6 im Vergleich zur Kontrollgruppe). Dieses Ergebnis bestätigt den Versuch.
- Unter den experimentellen Bedingungen dieses Versuchs hat das Produkt Rainfarn-Extrakt (JVEG681A), getestet zu 1 %, die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion, die aus den äquivalenten Koria extrahiert wurde, signifikant stimuliert (150 % der Kontrollgruppe, p < 0,01). Wie bei TGF beta, ist diese Stimulierung schwächer als in der löslichen Fraktion. Tabellen 3 und 4: Wirkungen der unterschiedlichen Behandlungen auf die Aufnahme von Glucosamin in die Fraktion der GAGs, die durch Fibroblasten der äquivalenten Koria synthetisiert wurden (lösliche Fraktionen, Tabelle 3, und Extrakte, Tabelle 4). AUFNAHME VON GLUCOSAMIN – DE/LÖSLICHE FRAKTION AUFNAHME VON GLUCOSAMIN – DE/EXTRAHIERTE FRAKTION
- BEISPIEL 8 In-Vivo-Test
- Das Ziel dieses Tests besteht darin, die Wirkungen der Produkte der Erfindung auf die Festigkeit und Elastizität, 30 Minuten nach einer isolierten Anwendung, sowie nach einem Monat Anwendung zwei Mal täglich zu überprüfen. Die Wirkungen auf die biomechanischen Eigenschaften der Haut werden mit Hilfe eines Ballistometers untersucht, wobei diese Technik auf der dynamischen Registrierung des Rückfederns eines schweren Objektes auf der Oberfläche der Haut beruht.
- Die herbeigeführten Rückfederungen, die während drei Sekunden aufgezeichnet werden, werden im Anschluß daran in elektrische Signale umgewandelt, die quantifiziert und in Bezug auf die Amplitude evaluiert werden können. Folgende Parameter werden gemessen:
- – Indentation (Eindringen der Sonde in die Haut für den ersten Kontakt), welche die Festigkeit der Haut mißt: wenn die Indentation abnimmt, dann kommt es zu Straffung.
- – Der Bereich unter der Kurve mißt die zurückgegebene Energie. Letztere wird sowohl von der Elastizität als auch der Festigkeit der Haut beeinträchtigt: eine Verringerung des Bereichs entspricht einer Straffung.
- – Alpha, der Dämpfungsgrad des Rückfederns, welcher die Geschwindigkeit anzeigt, mit welcher die Rückfederungen verschwinden, steht mit der Elastizität in Zusammenhang: Wenn der Alpha-Wert zunimmt, nimmt die Elastizität ab.
- Zwei Formulierungen (eine Creme und ein Serum) wurden durch zwei Mal täglich durchgeführtes Auftragen auf das gesamte Gesicht über einen Zeitraum von einem Monat, unter normalen Verwendungsbedingungen, evaluiert, wobei jede Formulierung bei 20 freiwilligen Frauen im Alter von 45 bis 75 Jahren getestet wurde. Die Creme war eine Öl-in-Wasser-Emulsion, die 1 % Galganter-Extrakt und 1 % Rainfarn-Extrakt enthielt, während es sich bei dem Serum um ein emulgiertes Gel handelte, das 1,5 % Galganta-Extrakt und 1,5 % Rainfanr-Extrakt enthielt.
- Die Analyse der biomechanischen Eigenschaften der Haut hat gezeigt, daß im Durchschnitt bei allen Freiwilligen nach einem Monat Anwendung der Creme oder des Serums – zwei Mal täglich – eine signifikante Verringerung der Indentation (Eindringen der Sonde in die Haut für den ersten Kontakt) von 12 % bzw. 7 % festzustellen war. Diese Beobachtung hebt die signifikante Verbesserung der Festigkeit der Haut nach lokaler Anwendung der Produkte der Erfindung hervor.
- Genauer gesagt läßt sich für die Creme wie folgt feststellen:
- – eine Verbesserung der Indentation, gemessen bei 86 % der Freiwilligen, Verbesserung von 16 % bei letzteren (Maximalwert: -37%),
- – der Alpha-Koeffizient steigt deutlich um 62 % und der Bereich unterhalb der Kurve nimmt signifikant um 32 % ab: Diese beiden Parameter stehen mit der Indentation in Zusammenhang und bestätigen die straffende Wirkung.
- Nachdem die Creme einen Monat lang zwei Mal täglich angewendet wurde, ist die Haut signifikant um 12 % straffer, wie in
6 dargestellt. - Genauer gesagt läßt sich für das Serum wie folgt festhalten:
- – eine Verbesserung der Indentation, gemessen bei 71 % der Freiwilligen, Verbesserung um 13 % bei letzteren (Maximalwert: -31 %),
- – deutliche Steigerung des Alpha-Koeffizienten um 8 % und der Bereich unter der Kurve nimmt signifikant um 18 % ab, was ebenfalls eine Straffung der Haut bestätigt.
- Nachdem das Serum einen Monat lang zwei Mal täglich verwendet wurde, ist die Haut signifikant um 7 % straffer, wie in
7 dargestellt. - BEISPIEL 9: Evaluierung der Abwesenheit des Entzündungspotentials der Moleküle, die für die Stimulierung der HAS2-Synthese ausgewählt wurden:
- Im Gegensatz zur Retinolsäure, TNF-Alpha und IL1, durchlaufen die Moleküle, die für die Stimulierung der Synthese von HAS2 ausgesucht wurden, keinen proentzündlichen Mechanismus, der mit kosmetischen Anwendungen unvereinbar ist.
- Somit erlaubt die Verwendung eines Galgant-Extraktes unter den Bedingungen von Beispiel 6 auf Fibroblast-Kulturen die Stimulierung von HAS2, während die Synthese von pro-entzündlichen Cytokinen, von denen bekannt ist, daß sie HAS2, wie IL1, TNFa oder TGFb, stimulieren (die positive Kontrollgruppe von Beispiel 6), nicht stimuliert wird (Dosierung auf Überstand von Fibroblast-Kulturen, 48 Stunden nach dem Kontakt). Tabelle 5
- ** Neutrophe Faktoren
- Somit erlaubt die Verwendung eines Rainfarn-Extraktes unter den Bedingungen von Beispiel 5 auf Fibroblast-Kulturen die Stimulierung von HAS2, während es zu keiner Stimulierung (Dosierung auf Überstand von Fibroblast-Kulturen, 48 Stunden nach Kontakt) der Synthese von pro-entzündlichen Cytokinen kommt, von denen bekannt ist, daß sie HAS2, wie IL1, TNFa oder TGFb, stimulieren (positive Kontrollgruppe von Beispiel 5). Tabelle 6
- ** Neutrophe Faktoren
- Somit ermöglicht die Verwendung eines Lupine-Extraktes unter den Bedingungen von Beispiel 1 auf Fibroblast-Kulturen die Stimulierung von HAS2, während es zu keiner Stimulierung (Dosierung auf Überstand von Fibroblast-Kulturen, 48 Stunden nach Kontakt) der Synthese von pro-entzündlichen Cytokinen kommt, von denen bekannt ist, daß sie HAS2, wie IL1, TNFa oder TGFb, stimulieren (positive Kontrollgruppe der Beispiele 1 bis 7). Tabelle 7
- ** Neutrophe Faktoren
- BEISPIEL 10: Verwendung der Produkte der Erfindung in kosmetischen oder pharmazeutischen Formulierungen vom Typ Emulsion Öl-in-Wasser
Claims (8)
- Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einem Pflanzenextrakt als Wirkstoff, welcher die Expression und/oder Aktivität der Hyaluronansynthase, und insbesondere die Expression und/oder Aktivität der Hyaluronansynthase 2 (HAS2) stimuliert, in einer kosmetischen Zusammensetzung, wobei der Wirkstoff ein Extrakt einer Pflanze ist, die ausgewählt wird aus Guarana (Paullinia cupana), Johanniskraut (Hypericum hircinum), Bambus (Bambusa vulgaris), Mungobohne (Phaseolus aureus), Johannisbeere (Ribes uva-crispa), stechendem Mäusedorn (Ruscus aculeatus), Ackerbohne (Vicia faba equina), Erbse (Pisum sativum), schmalblättriger Lupine (Lupinus angustifolius), Meerträubel (Ephedra sinica), gemeinem Rainfarn (Tanacetum vulgare), großem Galgant (Alpinia galanga), weißem Maulbeerbaum (Morus alba), Brazzein (Pentadiplandra brazzeana) und einer beliebigen Mischung der zuvor genannten Pflanzen.
- Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einem Pflanzenextrakt als Wirkstoff, der die Expression und/oder Aktivität der Hyaluronansynthase, und insbesondere die Expression und/oder Aktivität der Hyaluronansynthase 2 (HAS2) stimuliert, für die Herstellung einer dermo-pharmazeutischen Zusammensetzung, wobei der Wirkstoff ein Pflanzenextrakt ist, das ausgewählt wird aus Guarana (Paullinia cupana), Johanniskraut (Hypericum hircinum), Bambus (Bambusa vulgaris), Mungobohne (Phaseolus aureus), Johannisbeere (Ribes uva-crispa), stechendem Mäusedorn (Ruscus aculeatus), Ackerbohne (Vicia faba equina), Erbse (Pisum sativum), schmalblättriger Lupine (Lupinus angustifolius), Meerträubel (Ephedra sinica), gemeinem Rainfarn (Tanacetum vulgare), großem Galgant (Alpinia galanga), weißem Maulbeerbaum (Morus alba), Brazzein (Pentadiplandra brazzeana) und einer beliebigen Mischung der zuvor genannten Pflanzen.
- Verwendung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Wirkstoff ein Pflanzenextrakt ist, das ausgewählt wird aus einem Extrakt des weißen Maulbeerbaums (Morus alba), einem Meeresträubel-Extrakt, einem Guarana-Extrakt (Paullinia cupana), einem Rainfarn-Extrakt (Tanacetum vulgare), einem Galgant-Extrakt (Alpinia galanga), einem Brazzein-Extrakt (Pentadiplandra brazzeana) und einer beliebigen Mischung dieser Extrakte.
- Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die Zusammensetzung dazu bestimmt ist, im Hautbereich die Festigkeit und/oder Elastizität und/oder die Hydratisierung der Gewebe zu verbessern und/oder die Hautbarriere-Wirkung oder die Nachgiebigkeit der Gewebe zu erhöhen und/oder die Angiogenese zu modulieren, oder die Neuschaffung von Blutkapillaren, und/oder die Vernarbung zu verbessern, und/oder die zelluläre Proliferation, Migration oder Differentiation und/oder die kutane Atrophie und/oder dazu bestimmt ist, die Wirkungen der Alterung auf die Haut zu bekämpfen, und insbesondere den Verlust der kutanen Festigkeit, die im Laufe der Alterung zu beobachten ist, und/oder die atrophierten Narben und/oder die Atrophie der kutanen Gewebe, die im Laufe der Alterung beobachtet wird, und insbesondere die Atrophie des Koriums.
- Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, um die Festigkeit und/oder Elastizität der kutanen Gewebe, insbesondere des Koriums, zu erhöhen.
- Verwendung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, um die Produktion und/oder die Menge von Glycosaminoglycanen im Allgemeinen und Hyaluronsäure im Besonderen, insbesondere im Bereich des Koriums, zu erhöhen.
- Verwendung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, um die Reifung der kutanen Gewebe zu bekämpfen.
- Verfahren zur kosmetischen Pflege, welches die Verwendung einer Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7 umfaßt.
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