ES2262135T3

ES2262135T3 - Matrices polimericas y sus usos en composiciones farmaceuticas.

Info

Publication number: ES2262135T3
Application number: ES94926894T
Authority: ES
Inventors: Murat Acemoglu; Siegfried Bantle; David Bodmer; Salvatore Cammisuli; Peter Hiestand; Fritz Nimmerfall; Georg Stoll
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1993-08-27
Filing date: 1994-08-26
Publication date: 2006-11-16
Anticipated expiration: 2014-08-26
Also published as: CA2168012C; PT719295E; CN1506116A; EP1028137A3; HUT74568A; DK0719295T3; US6262127B1; AU697995B2; EP0719295A1; JPH09501967A; FI960892A; WO1995006077A2; NO960721D0; CN1129947A; US6083521A; CZ55296A3; DE69434743T2; JP2003002844A; NO20021141D0; SK25496A3

Abstract

ESTA INVENCION SUMINISTRA COMPOSICIONES FARMACEUTICAS QUE COMPRENDEN MATRICES POLIMERICAS, ESPECIALMENTE AQUELLAS QUE COMPRENDEN IL-6 COMO INGREDIENTE ACTIVO. TAMBIEN SE SUMINISTRAN NUEVOS POLIMEROS DE POLI(ETILENOCARBONATO) ESPECIFICOS PARA SU USO MAS GENERAL COMO MATERIALES DE MATRIZ EN COMPOSICIONES DE LIBERACION SOSTENIDA QUE CONTIENEN COMPUESTOS FARMACOLOGICAMENTE ACTIVOS, QUE SON METODOS PARA LA UTILIZACION DE LA IL-6 PARA EL TRATAMIENTO DE LAS CONDICIONES INTERMEDIADAS POR LA IL-1 Y/O EL TNF{AL}, POR EJEMPLO, CIERTAS CONDICIONES AUTOINMUNES E INFLAMATORIAS, ASI COMO PARA SOCK SEPTICO.

Description

Matrices poliméricas y sus usos en composiciones farmacéuticas.

Esta invención se relaciona con las composiciones farmacéuticas que comprenden matrices poliméricas, especialmente aquellas que contienen IL-6 para su utilización en el tratamiento de enfermedades mediadas por IL-1 y/o TNF, por ejemplo, condiciones inflamatorias crónicas. Los polímeros específicos de la invención, especialmente los polímeros poli(carbonato de etileno) descritos en ésta, sin embargo, se muestran por ser generalmente más útiles como materiales de matrices en composiciones de liberación sostenida que contienen compuestos activos farmacológicamente, y en particular por tener la novedosa, inesperada, y altamente deseable propiedad de experimentar la erosión superficial no hidrolítica in vivo. Por consiguiente, las matrices que comprenden otros medicamentos también ilustradas y proporcionadas, juntas con procesos para la preparación de polímeros y las composiciones farmacéuticas que los contienen. Además, el empleo de la IL-6 para tratar condiciones mediadas por IL-1 y/o TNF\alpha es novedoso e inesperado (muchas de tales condiciones fueron previamente consideradas por ser exacerbadas por la IL-6), así la invención además provee un nuevo uso para IL-6 en el tratamiento de, por ejemplo, condiciones inflamatorias crónicas patógenas-inducidas, enfermedad desmielizante, y condiciones inflamatorias hiperagudas y agudas tales como choque séptico.

I. Tratamiento de enfermedades mediadas por IL-1 y/o TNF\alpha

Muchas condiciones inflamatorias crónicas, que ocurren espontáneamente, tienen una etiología desconocida (posiblemente autoinmune) y son consideradas por ser mediadas por IL-1 y/o TNF\alpha. Por ejemplo, esclerosis múltiple (MS), un desorden de nervio estropeado caracterizado por parches diseminados de desmielinización en el cerebro y en la médula espinal, tiene ocupada la atención de organizaciones de investigación por muchos años. Aunque la etiología precisa de esclerosis múltiple no se entiende completamente, se cree que tiene un componente fuerte autoinmune, según lo indicado, por ejemplo, por el incremento de la incidencia de ciertos antígenos HLA en pacientes que tienen la enfermedad. Las drogas anti-inflamatorias disponibles actualmente tales como ACTH (hormona adrenocorticotropa) o corticosteroides, por ejemplo, prednisona, aparece para acelerar la recuperación en ataques agudos, especialmente cuando se administra con anticipación en el episodio, pero no afecta la etiología fundamental de la enfermedad. La administración a largo plazo de corticosteroides o inmunosupresores lleva riesgo de efectos secundarios serios. Una forma recombinante del IFN-I se mostró recientemente para reducir la formación de placa a corto plazo, pero no se ha mostrado que afecte la progresión a largo plazo de la enfermedad. La evaluación de la eficiencia del tratamiento se complica por el hecho de que la progresión natural de la enfermedad es de remisión espontánea y reincidencia crónica. En resumen a pesar de muchos años de intensa investigación, no hay hasta ahora una terapia específica aceptada generalmente para ésta muy seria enfermedad.

Otras condiciones inflamatorias crónicas se consideraban por ser inducidas por agentes, por ejemplo, patógenos. Por ejemplo, la enfermedad de Lyme es una condición crónica seria iniciada por infección con Borrelia burgdorferi espiroqueta adherente. Siguiendo una fase inicial aguda caracterizada por lesiones de piel y síntomas similares a influenza, la enfermedad progresa a una fase crónica que puede ser caracterizada por artritis y anormalidades neurológicas crónicas. La enfermedad se trata usualmente con antibióticos y agentes antiinflamatorios no esteroides, pero una terapia óptima, particularmente para la enfermedad establecida, no se determina aún.

Condiciones inflamatorias incontroladas, agudas o hiperagudas, también pueden ser causadas por agentes externos, por ejemplo, quemaduras severas o infecciones severas. Por ejemplo, choque séptico, y en particular síndrome de dificultad respiratoria del adulto (ARDS), es una condición amenazante de vida para la cual actualmente no existe un tratamiento efectivo. El inicio es rápido y la mortalidad generalmente excede el 50%. El choque séptico usualmente resulta de infección bacteriana severa y se caracteriza típicamente por fiebre, frecuentemente seguida por hipotermia en las últimas etapas, la fluctuación de la presión sanguínea (síndrome hiperdinámico) seguida por hipotensión en las últimas etapas, acidosis metabólica, funcionamiento mental deteriorado, y disfunción orgánica generalizada, finalmente, en muchos casos, termina en muerte. Más comúnmente, el choque séptico resulta de infección bacteriana gram-negativa (choque endotóxico), pero también puede resultar de infecciones bacterianas gram-positivas u otras infecciones. El término "choque séptico" como se usa en esta es de esta manera para ser interpretado en el sentido amplio para significar un estado de choque, incluyendo ARDS, que resulta de una infección microbiana, especialmente de una infección bacteriana, más especialmente de una infección bacteriana gram-negativa.

La IL-5 es una conocida citoquina. Se conoce por ser útil en el tratamiento de varias condiciones, por ejemplo, trombocitopenia y ciertos cánceres. Se produce por el cuerpo usualmente en respuesta a infecciones bacterianas y ha sido implicada en la mediación de la inflamación, fiebre, y choque séptico. Es una potente inmunoestimulante y ciertamente alguna literatura sugiere que la IL-6 maneja mecanismos que causan ciertas enfermedades autoinmunes o inflamatorias, que incluyen lupus eritematoso sistémico, esclerosis múltiple, y artritis reumatoide, lo mismo que choque séptico.

De esta manera es muy sorprendente descubrir que la IL-6 es útil en el tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas (otra que glomerulonefritis), por ejemplo, esclerosis múltiple, y en el tratamiento de condiciones inflamatorias agudas e hiperagudas, por ejemplo, choque séptico. El mecanismo de ésta acción es poco claro pero sin tener la intención de ser sujeto por ninguna teoría en particular, nosotros creemos que, a través de un mecanismo de retroalimentación, la IL-6 puede suprimir o inhibir la expresión, liberación o función de otras citoquinas, particularmente TNF\alpha y/o IL-I, probablemente por sobre regulación de la liberación del receptor TNF\alpha soluble y/o el receptor antagonista IL-I, en consecuencia la supresión de la actividad y el resultado de las condiciones autoinmunes, inflamatorias, o de choque que son principalmente mediadas por estas citoquinas. En el caso de las condiciones caracterizadas por los complejos antígeno-anticuerpo de activación complementaria (IgG) mediadas por IL-6, particularmente glomerulonefritis (que es usualmente causada por la acumulación de tales complejos en el riñón), sin embargo la IL-6 se muestra por exacerbar la condición. De ésta manera, nosotros hemos demostrado que la IL-6 es curativa en modelos de animales para artritis MS y Lyme, por ejemplo, los que son creados para ser conducidos por IL-I y/o TNF\alpha, pero exacerban la glomerulonefritis en lupus en ratones, los que se crean para ser directamente conducidos por IL-6. También nosotros hemos mostrado que IL-6 es curativa por si misma en modelos de ratón en choque endotóxico, que es igualmente supuesto por ser conducido principalmente por BL-1 y/o TNF\alpha.

La IL-6 es por consiguiente considerada por ser útil como un agente para la supresión o la inhibición de la expresión, liberación o función de TNF\alpha y/o IL-I, y especialmente en el tratamiento de condiciones inflamatorias con excepción de la glomerulonefritis, y en el tratamiento de choque séptico. Las condiciones inflamatorias que pueden ser tratadas empleando la IL-6 incluyen, por ejemplo, condiciones artríticas, particularmente condiciones artríticas patógeno-inducidas, por ejemplo, artritis de la enfermedad de Lyme, artritis inducida por bacterias, y polioartritis; esclerosis múltiple y otras enfermedades desmielinizantes (i.e., enfermedades caracterizadas por desmielinización en los nervios, cerebro, y/o médula espinal, incluyendo, por ejemplo, esclerosis múltiple, encefalomielitis diseminada aguda o encefalitis postinfecciosa, neuromielitis óptica, tinnitus, esclerosis cerebral difusa, enfermedad de Schilder, adrenoleucodistrofia, enfermedad de Lyme terciaria, paraparesia espástica tropical, y otras enfermedades en donde la desmielinización, especialmente desmielinización autoinmune- mediada, es un síntoma mayor): condiciones inflamatorias severas agudas tales como quemaduras, choque séptico, meningitis, y neumonía: y enfermedades autoinmunes que incluyen policondritis, esclerodoma, granulomatosis de Wegener, dermatomiositis, hepatitis activa crónica, miastemia gravis, psoriasis, artritis psoriática, síndrome de Steven-Johnson, esprue idiopático, enfermedad inflamatoria autoinmune intestinal (que incluye por ejemplo, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), oftalmopatía endocrina, enfermedad de Graves, sarcoidosis, cirrosis biliar primaria, diabetis juvenil (diabetis mellitus tipo I), uveitis (anterior y posterior), queratoconjuntivitis sicca y queratoconjuntivitis vernal, y fibrosis pulmonar intersticial.

De tal manera la invención

provee:

i) Un método de

inhibición de la expresión, liberación o función de TNF\alpha y/o IL-I;

del tratamiento o prevención de una condición inflamatoria otra que la glomerulonefritis;

del tratamiento o prevención de una condición mediada por IL-I y/o TNF\alpha;

del tratamiento o prevención de cualquiera de las condiciones descritas anteriormente;

del tratamiento o prevención de una enfermedad desmielinizante, por ejemplo, esclerosis múltiple;

del tratamiento o prevención de una condición inflamatoria inducida externamente;

del tratamiento o prevención de una repuesta inflamatoria a una infección aguda severa, por ejemplo, choque séptico, meningitis, o neumonía;

del tratamiento de quemaduras;

del tratamiento o prevención de una condición inflamatoria patógeno-inducida crónica, por ejemplo, enfermedad de Lyme;

dicho método comprende la administración de una cantidad efectiva profiláctica o terapéuticamente de IL-6, por ejemplo, una cantidad de IL-6 que inhibe

el TNF\alpha y/o IL-I, por ejemplo, rhIL-6, (por ejemplo, especialmente en donde IL-6 se administra como el agente terapéutico o profiláctico solo, u opcionalmente administrado en conjunto con agentes antimicrobianos o vasoactivos, por ejemplo, opcionalmente no en conjunto con agonistas o antagonistas de TNF\alpha o con anticuerpos anti-TNF\pm); opcionalmente en liberación controlada o forma de depósito, por ejemplo, en asociación con una matriz polimérica, por ejemplo, una matriz poli(carbonato de etileno) como se describe más adelante en ésta, a un sujeto, por ejemplo, un mamífero, por ejemplo, un ser humano, en necesidad de dicho tratamiento o profilaxis;

ii) El uso de la IL-6, por ejemplo, rhIL-6. en la manufactura de un medicamento para emplear en el método de (i), por ejemplo, para el tratamiento o prevención de cualquiera de las condiciones enumeradas arriba (i), en donde el medicamento es opcionalmente en forma de liberación controlada, por ejemplo, opcionalmente además comprende una matriz polimérica, por ejemplo, una matriz poli(carbonato de etileno) como se describe más adelante en ésta;

iii) El uso de la IL-6, por ejemplo, rhIL-6, para el tratamiento o prevención de cualquiera de las condiciones listadas arriba (i); y

iv) Una composición farmacéutica que comprende la IL-6, por ejemplo, rhIL-6, para emplear en el método de (i), por ejemplo, para el tratamiento o prevención de cualquiera de las condiciones descritas anteriormente en (i), opcionalmente en forma de liberación controlada, opcionalmente además comprende una matriz polimérica, por ejemplo, una matriz poli(carbonato de etileno) como más adelante se describe en ésta; por ejemplo, una composición de liberación sostenida (i.e., una composición la cual biodegrada in vivo sobre un período de días, semanas, o meses) que contiene la IL-6 en una matriz polimérica, por ejemplo, en la forma de una micropartícula o depósito, por ejemplo, cuando el polímero exhibe una erosión superficial no hidrolítica in vivo, especialmente cualquiera de los sistemas de entrega del medicamento descritos en ésta, para emplear en el tratamiento de cualquiera de las condiciones mencionadas arriba, por ejemplo, para el tratamiento de una condición inflamatoria crónica.

Por IL-6 se entiende cualquier compuesto correspondiente a las conocidas variedades de interleucina-6 (también conocidas como interferón beta-2 (IFN-^{2}I), factor estimulatorio 2 de B-célula (BSF-2), interleucina HP-(HRI), factor estimulador de hepatocitos (HSF), factor de crecimiento de plamocitoma e hibridoma (HPGF), y factor 26kD). La IL-6
recombinante se prefiere, aunque también se puede usar la IL-6 no recombinante, por ejemplo, como se produce por las líneas celulares del cáncer que segregan la IL-6. La IL-6 está comercialmente disponible o puede ser producida por métodos conocidos, por ejemplo, como se describe en EPA 0 220 574, EPA 0 257 406. EPA 0 326 120, WO 88/00206, GB 2 063 882, o GB 2 217 327, los contenidos de tales aplicaciones se incorporan en ésta por referencia. La IL-6 puede ser glicosilada, por ejemplo, como se produce por las células eucariotas, por ejemplo, células CHO, o noglicosiladas, por ejemplo, como las producidas por células procariotas, por ejemplo, E. coli. Se prefiere la IL-6 humana recombinante (rhIL-6), aunque la IL-6 es conocida por ser de activad cruzada entre especies, así que la IL-6
derivado a partir de fuentes no humanas podría ser empleada y se incluye dentro del significado de IL-6 en esta. Las proteínas que tienen menos variaciones en la secuencia de la IL-6, por ejemplo, adición, deleción, o mutación de 1, 2, 3 o más aminoácidos; Proteínas de fusión que contienen la EL-6 y otras proteínas; fragmentos activos de IL-6; y/o otras variantes semejantes, formas truncadas, o mutadas de la EL-6, las cuales tienen actividad IL-6 pretenden ser comprendidas dentro del significado de IL-6 en ésta.

Apropiadas composiciones farmacéuticas que comprenden IL-6 junto con un vehículo o diluente farmacéuticamente aceptable, son conocidas. La IL-6 puede ser administrada por vía parenteral, por ejemplo, en la forma de una solución inyectable o en suspensión, por ejemplo, de acuerdo con o analógicamente con la descripción en
Remington's Pharmaceutical Science, 16th ed. (Mack Publishing Company, Easton, PA 1980). Apropiados vehículos incluyen vehículos acuosos tales como solución salina, solución de Ringer, solución de dextrosa, y solución de Hank, también como excipientes no acuosos tales como aceites fijos y oleato de etilo. Para administración parenteral común, la IL-6 está disponible en forma liofilizada en cantidades de dosis por unidad que pueden ser mezcladas con el vehículo para formar una apropiada solución o suspensión para inyección.

Alternativamente, la IL-6 puede ser administrada empleando un sistema de suministro de medicamento de liberación controlada o implantable, por ejemplo, en forma de depósito o micropartícula en asociación con un polímero, para formar una matriz polimérica por la cual el medicamento se libera lentamente a partir de la matriz. Esta es preferida, por ejemplo, donde la condición para ser tratada es crónica, por ejemplo, una condición inflamatoria crónica, y el tratamiento requerido se amplia sobre un periodo de semanas o meses. Por polímero se entiende cualquier molécula de alto peso molecular, lineal apropiada (por ejemplo, farmacológicamente aceptable) formada de unidades repetitivas (que incluyen homopolímeros, co-polímeros, y heteropolímeros), opcionalmente ramificadas o entrecruzadas, que pueden ser hechas, por ejemplo, por polimerización de una sola molécula o a partir de la co-polimerización de más de una molécula (por ejemplo, poli(carbonato de etileno) a partir de óxido de etileno y dióxido de carbono como se describe abajo), y opcionalmente que contiene interrupciones en la cadena del polímero con otras unidades. Preferiblemente, el polímero es lineal y se compone de carbono, oxígeno e hidrógeno, por ejemplo, poli-DL-lactideco-glicolido, polietilen glicol, o poli(carbonato de etileno). Preferiblemente, el polímero exhibe erosión superficial no-hidrolítica, por ejemplo, un poli(carbonato de etileno) como se describe adicionalmente en ésta.

La dosificación, por supuesto variará dependiendo del tipo exacto de la IL-6 empleada, el huésped, el modo de administración, y la naturaleza y la severidad de la condición que es tratada. La IL-6 es administrada para mamíferos grandes, por ejemplo, el hombre, por inyección subcutánea o en forma de liberación controlada para suministrar una dosificación desde 0.5 \mug/kg/día a 30 \mug/kg/día, preferiblemente desde 2.5 \mug/kg/día a 10 \mug/kg/día, o en cualquier otra dosificación que sea segura y efectiva para actividad in vivo en aplicaciones terapéuticas conocidas de la IL-6,
por ejemplo, en una dosificación que incrementa las plaquetas. En el caso de condiciones inflamatorias agudas severas, por ejemplo, choque séptico, dosificaciones más altas administradas i.v. pueden ser deseadas para lograr una respuesta fuerte y rápida. La frecuencia de la administración de la IL-6 opcionalmente puede ser reducida desde diariamente a cada otro día o cada semana, o más larga en el caso de las formas de liberación controlada, que son preferidas, cuando el tratamiento se da por periodos de tiempo más largos. El tratamiento con IL-6 puede resultar en escalofríos, fiebre, y síntomas similares a la influenza, que normalmente pueden ser tratados o prevenidos con co-administración de analgésicos no narcóticos tales como aspirina, acetaminofen o indometacina. Frecuentemente otros efectos secundarios significantes aparecen únicamente a altas dosificaciones, por ejemplo, arriba de 10 \mug/kg/día, y pueden ordinariamente ser aliviados por la reducción de la dosificación.

II. Matrices poliméricas para liberación controlada

La invención además provee composiciones farmacéuticas apropiadas de liberación controlada de fármacos, las cuales son adecuadas, por ejemplo, para la administración de la IL-6, por ejemplo, en las indicaciones descritas anteriormente, así como para otros fármacos. Las composiciones farmacéuticas especialmente son aquellas que comprenden polímeros de poli(carbonato de etileno), algunas veces referidas como poli(carbonato de etileno) o PECs.

Aunque el oficio previo provee algunos ejemplos de poli(carbonato de etileno) para emplear en sistemas de suministro del fármaco, el oficio previo no revela los polímeros particulares de la invención y no revela los polímeros capaces de sufrir erosión superficial no hidrolítica in vivo. Los oficios previos no revelan tampoco tales sistemas de suministro de fármacos para el suministro de ciertos de los fármacos particulares revelados en ésta, por ejemplo, la
IL-6, no sugiere que el sistema de liberación controlado fuera deseable para el suministro de tales fármacos.

Particularmente sorprendentes son las características de degradación de los polímeros de la invención. En base al conocimiento químico general, se espera que las uniones carbonato de éster estén en principio incrustadas. Sin embargo, los policarbonatos han sido comprobados por ser estables bajo condiciones moderadas in vitro.

De acuerdo con Chem. Pharm. Bull. 31 (4), 1400 - 1403 (1983), los poli(s) (carbonato de etileno) son degradables in vivo, pero el polímero probado no se identificó claramente, por ejemplo, por métodos espectroscópicos modernos. De acuerdo con la página 1402, la degradación in vivo únicamente fue explicable como debida a la influencia de enzimas hidrolíticas.

De acuerdo con Chem. Pharm. Bull. 32 (7), 2795-2802 (1984), las micropartículas se hicieron de poli(carbonato de etileno) que contiene Dibucaina. Aunque la descripción se relaciona con el oficio citado en primer lugar, la liberación de Dibucaina no se vio por ser relacionada con la degradación patrón in vitro o in vivo del polímero, sino con la difusión a través del polímero. Tampoco las propiedades físicas y químicas del poli(carbonato de etileno) probadas no fueron suficientemente evaluadas aquí.

De acuerdo con Makromol. Chem. 183, 2085 - 2092 (1982), especialmente la página 2086, los polímeros epóxido de dióxido de carbono se consideran por ser biodegradables y se dice que los resultados preliminares confirman la biodegradabilidad de polímeros de dióxido de carbono-óxido de etileno y de esa manera su empleo en medicamentos de liberación controlada. Para la ayuda de la alegación respecto a la biodegradabilidad se citó a Jinko Zoki 3 (Suppl.), 212 (1974). En ésta publicación se dice que el poli(carbonato de etileno) pertenece al grupo de compuestos que son más fácilmente hidrolizados y aún la enzima pronasa no tuvo dificultad en descomponerse. Esto significa que una hidrólisis enzimática in vitro e in vivo sería posible, dado que la pronasa está compuesta de una mezcla de enzimas hidrolíticas. Si embargo, este comentario parece muy dudoso. Nosotros sometimos los poli(s) (carbonato de etileno) de nuestra invención en la forma de discos comprimidos de 5 mm de diámetro y 25 mg de peso para 10 mg/ml de pronasa y 5 mM CaCl_{2}. 2H_{2}O en solución salina reguladora de fosfato (PBS) de pH 7.4 y en 10 mg/ml de pronasa E y 5 mM CaCl_{2}. 2H_{2}O en solución salina reguladora de fosfato de pH 7.4 (a 37°C) y no se pudo observar degradación (ver Fig. 1). La solución de pronasa se renovó cada día.

Sorprendentemente se descubre ahora que una selección de poli(s) (carbonato de etileno) que tiene un contenido especial de carbonato de etileno, viscosidad y rango de temperatura de transición del estado vítreo, las cuales no son degradables por hidrólisis (por ejemplo, en la presencia de enzimas hidrolíticas, por ejemplo, pronasa, o bajo condiciones básicas) no obstante son degradables in vitro e in vivo, particular y exclusivamente por erosión superficial. La expresión "erosión superficial" se usa en la literatura, especialmente en relación con la degradación hidrolítica de polianhídridos y ésteres poliorto, pero nunca se definió claramente.

La erosión superficial ocurre, si hay una degradación de la masa solamente en la superficie de las partículas del polímero, sin reducción de peso molecular del residuo del polímero remanente. Donde en literatura fue alegado que la erosión superficial se observó, nunca se llevaron a cabo, las determinaciones del peso molecular de la masa residual paralelas a las determinaciones de pérdida de masa, y de esta manera en realidad la erosión superficial nunca se comprobó.

De hecho, en aproximadamente todos los polímeros probados hasta ahora, se observó la erosión en volumen del polímero. Los sistemas que muestran erosión en volumen del polímero tienen la desventaja significante que si el polímero se carga con un compuesto de fármaco, por ejemplo, un péptido, que es relativamente inestable bajo la influencia del medio biológico por el cual será liberado, el compuesto de fármaco ya está en contacto con el medio en la parte del volumen y puede perder su actividad mucho antes si se libera del polímero. Sí el polímero experimentara una erosión superficial, i.e. cuando no ocurre erosión en volumen, el compuesto del fármaco incrustado, por ejemplo, el péptido, permanecería protegido de la influencia perjudicial del medio biológico justo hasta el momento que la erosión superficial progresiva alcance las partículas del fármaco y la partícula del fármaco se libere de la superficie de la masa del polímero residual. En el caso de sistemas de suministro de fármacos con matriz de polímero que muestran erosión superficial como opuesta a la erosión en volumen, la partícula del fármaco está de esta manera expuesta a la influencia perjudicial del medio biológico durante un periodo de tiempo corto, por consiguiente permitiendo una liberación larga, alta y más consistente del fármaco activo farmacológicamente a partir de la matriz del
polímero.

Para los polianhídridos en publicaciones resientes en Proc. Nat. Acad. Sci. USA 90, 552-556 (1993) y 90, 4176-4180 (1993) se describieron, algunas características de un comportamiento similar a la erosión superficial. Sin embargo, todo el volumen parece ser influenciado y no se realizaron determinaciones de peso molecular. Además la erosión es del tipo hidrolítico. Ahora se descubrió, que un grupo selecto de poli(s) (carbonato de etileno), definido abajo, muestra, in vitro así como in vivo, exclusivamente una erosión superficial no-hidrolítica.

La invención proporciona un polímero degradable in vivo e in vitro por erosión superficial que es controlado por un mecanismo no-hidrolítico y que tiene unidades de carbonato de etileno de la fórmula A

A-(-C(O)-O-CH_{2}-CH_{2}-O-)-

Teniendo un contenido de carbonato de etileno de 70 a 100% Mol, que tiene una viscosidad intrínseca de 0.4 a 4.0 dl/g, medida en cloroformo a 20°C, y que tiene una temperatura de transición del estado vítreo desde 15 a 50°C.

El contenido del carbonato de etileno del polímero de acuerdo con la invención es de 70 a 100% Mol, particularmente 80-100%, preferiblemente desde 90-99.9%, tal como desde 94 a 99.9%. La viscosidad intrínseca del polímero es de 0.4 a 4.0 dl/g, medida en cloroformo a 20°C. Preferiblemente el polímero tiene una viscosidad inherente de 0.4 a 3.0 dl/g, medida a 20°C y una concentración de cloroformo de 1 g/dl.

Su temperatura de transición del estado vítreo es de 15° a 50°C, preferiblemente desde 18° a 50°C.

En la literatura ha sido descrito, que los poli(s) (carbonato de etileno) tienen una temperatura de transición del estado vítreo desde 5 a 17°C.

Los polímeros de la invención preferiblemente se hacen por co-polimerización de óxido de etileno y dióxido de carbono, el proceso de la producción, también es parte de esta invención. Como una consecuencia de este método de producción, el polímero contiene la mayor parte de los casos una co-unidad de la unidad del óxido de etileno de la fórmula B

B-(-CH_{2}-CH_{2}-O-)-

Si los polímeros de la invención se exponen a un medio acuoso, por ejemplo, una solución salina reguladora de fosfato de pH 7.4, prácticamente ningún medio se transportará a su parte de volumen, por ejemplo, como se ve de la Fig. 2. Por consiguiente no ocurrirá erosión en volumen y la masa remanente se mantendrá constante (100%) por un periodo de al menos 28 días, por ejemplo, como se muestra en la gráfica derecha de la Fig. 3.

Los poli-DL-láctido-co-glicólidos son actualmente los más comúnmente usados como materiales de matriz para sistemas de liberación controlada del fármaco. Tales polímeros, sin embargo, son diferentes a los polímeros de la invención, se degradan por hidrólisis. Por ejemplo, degradación de la masa en PBS como se muestra en la parte izquierda de la Fig. 3 para uno de los más sofisticados tipos de poli-DL-láctido-co-glicólido, particularmente una glucosa iniciada poli-DL-láctido-co-glicólido (DL-PLGGLU), descrita en la Patente UK GB 2 145 422.

La diferencia en el comportamiento de degradación entre los poli(s) (carbonato de etileno) de la invención y los poli-DL-láctido-co-glicólidos (DL-PLG) del oficio in vivo también se muestra en la Fig. 3. mientras que el poliláctido-co-glicólido experimenta erosión en volumen, como se ve de la disminución del peso molecular de la masa residual de DL-PLGGLU, el peso molecular de la masa residual de los poli(s) (carbonato de etileno) permanece constante (100%).

La masa residual del implante total disminuye a cero in vivo, en ambos casos dentro de 1 mes, lo que significa que el poli(carbonato de etileno) experimenta erosión superficial, más bien que erosión en volumen. Como una consecuencia de la ausencia de erosión en volumen, el polímero cargado está durante el almacenamiento, i.e. antes de su administración, impermeable a la humedad y permanece en la misma condición seca, en la que ha sido producido. Su fármaco incrustado, permanece estable, si es sensible a la humedad.

También la invención proporciona un proceso para la producción del polímero en el cual el óxido de etileno y el CO_{2} son polimerizados en una relación molar de 1:4 a 1:5 bajo la influencia de un catalizador. Es claro que en el alcance de esta reacción, la introducción de unidades de óxido de etileno en la cadena del polímero es posible, si dos moléculas de epóxido reaccionan el uno con el otro sin la intervención de una molécula de CO_{2}, i.e. si un anión intermedio oxi ataca otra molécula de óxido de etileno antes de ser carboxilada por el CO_{2}. De esta manera es probable que el polímero contenga muchas unidades de óxido de etileno. Si el polímero de la invención, contiene unidades de óxido de etileno, tiene una distribución aleatoria de carbonato de etileno y unidades de óxido de etileno de acuerdo con la suma de la fórmula Am-Bn =

-(O)-O-CH_{2}-CH_{2}-O-)-m-(-CH_{2}-CH_{2}-O-)-n

en la que

\frac{m}{n + m} \ x \ 100 = 70 \ a \ 100

Sin embargo, la mayoría de las unidades de óxido de etileno en los polímeros de la invención tiene, estadísticamente, unidades de carbonato de etileno adyacente, especialmente en aquellos casos, en los que la relación molar de las unidades de óxido de etileno, es pequeña. Esto significa que en estos casos la mayoría de las funciones de éter resultante son distribuidas aleatoriamente entre las funciones del carbonato a o largo de la cadena del polímero. Los espectros ^{1}H-RMN de los productos de la invención en CDCl_{3} confirma esta suposición. Ellos muestran señales a \delta= ca. 4.37 ppm (Integral Ia) de las unidades de carbonato de etileno (unidades de etileno entre dos funciones de carbonato), a ca. 4.29 y 3.73 ppm (Integrales Ib y Ic) de unidades de etileno entre una función carbonato y una función éter, y a ca. 3.65 ppm (Integral Id) de unidades de etileno entre dos funciones de éter. La proporción de unidades de carbonato de etileno (A) luego se calcula dentro de los límites de precisión RMN de acuerdo con la fórmula:

% Mol de Unidades de carbonato de Etilo (A): Ia/(Ia + Ib + Ic + Id) \ x \ 100

Como un rango estructural de los poli(carbonato de etileno), en literatura frecuentemente, se da su contenido de funciones de éter, en lugar de su contenido de carbonato de etileno. La relación de las funciones de éter (E) en los polímeros de la invención puede ser calculada de acuerdo con la fórmula:

% Mol de Funciones de éter (E): (Ic +Id)/(Ia + Ib + Ic + Id) \ x \ 100

De acuerdo con la Solicitud de Patente-PCT WO 92/22600 los poli(s) (carbonato de etileno) son preparados, los que contienen unidades de óxido de etileno y unidades de carbonato de etileno en una relación molar de 2 a 400:2, lo que significa que el polímero contiene al menos el 50% Mol de óxido de etileno y de esta manera menos que el 50% Mol de unidades de carbonato de etileno. La aplicación menciona la biodegradabilidad de los polímeros y su empleo como matrices biodegradables bioerosionable para la liberación controlada de compuestos farmacológicamente activos. Sin embargo ningún dato ha dado que los polímeros son biodegradables ciertamente. Generalmente, los poli(s) (carbonato de etileno) que tienen tal extenso número de funciones de éter son apenas biodegradables. La aplicación no menciona ningún indicio de la posibilidad de erosión superficial de los polímeros.

En los ejemplos de la Patente US-3 248 415 los poli(s) (carbonato de etileno) de bajo peso molecular, Pm = 700 - 5000 se reporta que tienen menos del 70% Mol de unidades de carbonato de etileno, diferente de los polímeros de la invención y no se ha mencionado nada acerca de su biodegradabilidad.

De acuerdo con la Solicitud-PCT WO 89/05664 poli(s) (carbonato de etileno) se describe que contienen en la descrita estructura II, óxido de etileno y unidades de carbonato de etileno en una relación molar de 1 a 8:1, lo que significa que el polímero contiene al menos el 50% Mol de óxido de etileno y de ese modo como máximo el 50% Mol de unidades de carbonato de etileno, diferentes de los polímeros de la invención. Aunque, los polímeros se describen para ser empleados para dispositivos médicos biodegradables, por ejemplo, implantes que pueden contener un compuesto del fármaco, no ha sido dada información acerca de erosión superficial.

En el proceso de la invención el contenido de la unidad del óxido de etileno y así el contenido de funciones de éter, que retardan o inhiben la velocidad de biodegradación del polímero, se reduce considerablemente y por la especificación de las condiciones de reacción tales como las descritas para la relación molar de la reacción de componentes, la temperatura de reacción y además por la selección de un apropiado catalizador, por ejemplo, como la preparada del Zn(C_{2}H_{5})_{2} y un solvente seleccionado del grupo que consiste de agua, acetona, un diol, especialmente etilen glicol, y un di- o trifenol, por ejemplo floroglucina, en donde, la relación molar de Zn(C_{2}H_{5})_{2} con nueva agua, acetona o diol es de 0.9:1 a 1:0.9 y la relación molar de Zn(C_{2}H_{5})_{2} con el di- o trifenol es de 2:1 a 1:2.

El proceso se lleva a cabo preferiblemente en un solvente o un sistema de agente de dispersión de un solvente orgánico, por ejemplo, dioxano y CO_{2}. El CO_{2} se aplica preferiblemente en forma líquida y se presenta en un exceso. La presión es preferiblemente de 20 a 70 bares y la temperatura preferiblemente de 10 a 80°C, especialmente desde 20 a 70°C.

Los polímeros de la invención obtenidos así usualmente contienen menos del 15% de funciones de éter, preferiblemente menos del 10%, particularmente menos del 5%, por ejemplo, menos del 3%. Los poli(s) (carbonato de etileno) de la invención, si se preparan empleando el catalizador a partir del etilen glicol o acetona y dietilzinc muestran baja polidispersidad polidispersities (Pm/Mn), usualmente menos del 5, tal como menos del 2.5.

En el proceso de acuerdo con la invención, el catalizador o una parte de este se considera para ser el iniciador de la cadena para el (co)-polímero. Cuando la reacción se termina y la cadena está completa, su grupo terminal final es un grupo hidroxilo. Al lado opuesto de la cadena, allí la cadena fue iniciada arriba en su arranque, puede ser ocupada por el grupo catalizador o un fragmento de este. Si el catalizador se prepara a partir del etilen glicol y dietilzinc o agua y dietilzinc, ambos extremos de una cadena de polímero se suponen para ser idénticos. Sin embargo si el catalizador se prepara a partir del di- o trifenol y dietilzinc, el grupo aromático se incorporará dentro del extremo de una cadena, donde la cadena inicia arriba su arranque, mientras que el otro extremo de la cadena será un grupo hidroxilo. De la
Fig. 4 se ve, que si uno de los grupos terminales del poli(carbonato de etileno), se bloquea por ejemplo, por un iniciador aromático tal como floroglucina, se biodegradará más lento. Por esta razón, se asume, que la degradación de la cadena del polímero inicia en el grupo(s) hidroxilo terminal(s). Alternativamente, una derivatización posterior de un grupo hidroxilo terminal también puede ser considerada, por ejemplo, por esterificación, para bloquear los grupos hidroxilo terminales y para controlar la biodegradación del poli(s) (etilencarbonato) de la invención. Apropiados grupos éster terminales, son grupos éster biocompatibles, grupos de éster de ácidos grasos (C_{1-48}) similares, preferiblemente (C_{1-30}), especialmente (C_{1-18}) grupos de éster de ácidos grasos, por ejemplo, los grupos de ésteres de ácido acético y ácido esteárico, o un grupo éster de ácido carbónico, por ejemplo, el grupo carbonato de etileno, o el grupo éster de ácido pamóico o un grupo éster de ácido láctico o glicólico o poliláctico o poliglicólico o poliláctico-co-glicólico.

Los poli(s) (carbonato de etileno) de la invención son estables por muchas horas en agua caliente (90-100°C) sin reducción considerable del peso molecular. Un incremento significante de la temperatura de transición del estado vítreo se observa después de la exposición a agua destilada en ebullición durante 5 horas, por ejemplo, hasta arriba de 18°C, por ejemplo, 28°C. Realizando ésta etapa de reacción, se alcanza una pureza del polímero más alta. Nosotros hemos encontrado que los polímeros tratados de ésta manera también son mejor procesados.

La porción poli(carbonato de etileno) de los polímeros de la invención es, como se dijo antes, no hidrolizable, es decir durante al menos 1 mes por enzimas hidrolíticas bajo condiciones fisiológicas o por agua a pH 12 y 37°C (ver Fig. 1 y 8). Sin embargo, Se descubrió que los polímeros de la invención se degradan in vivo e in vitro por erosión superficial bajo la influencia del anión radical superóxido O_{2}-. Los aniones radical superóxido O_{2}- se generan en células inflamatorias in vivo y ex vivo en la presencia de los poli(s) (carbonato de etileno) de la invención como se ha visto de la Fig. 5. Los poliláctido-co-glicólidos, actualmente los materiales de la matriz más comúnmente empleados para sistemas de liberación controlada del fármaco degradados por hidrólisis en volumen, no inducen la generación de aniones radical superóxido O_{2}-, los que se muestran en la misma figura para la glucosa iniciada poli-DL-láctido-co-glicólido, que también fue empleada para la Fig. 3.

In vitro, se estableció un sistema acuoso, que contiene superóxido de potasio como fuente de O_{2}- y mostrando erosión superficial de los poli(s) (carbonato de etileno) de la invención (ver Fig. 8). In vitro se escogió un pH 12, dado que el radical O_{2} es suficientemente estable a este valor de pH.

Interesantemente, el poli(carbonato de propileno), diferente del poli(carbonato de etileno) por sustitución de un hidrógeno de la unidad de etileno por un grupo metilo, no es en absoluto biodegradable, como se muestra por autores Japoneses en Chem. Pharm. Bull 31 (4), 1400-1403 (1983).

Empleando suspensiones de micropartículas de poli(s) (carbonato de etileno) de la invención un estudio toxicológico se dirigió en 48 ratas por 21 días y en 24 perros por 35 días. Se hicieron dos aplicaciones a cada especie en el día 1 y día 17. Después de la aplicación subcutánea e intramuscular de 10 y 40 mg de micropartículas de polímero/kg de peso corporal, no presentan señales clínicas de toxicidad sistémica, se observaron efectos no relevantes sobre parámetros hematológicos, sobre parámetros de química clínica sanguínea, sobre el peso corporal, y sobre el consumo de alimentos. Los sitios de aplicación se probaron para cambios histopatológicos 4 y 21 días después de la aplicación en ratas, y 18 y 35 días después de la aplicación en perros. Adicionalmente a la reacción de inflamación esperada, no se encontraron cambios histopatológicos inusuales.

El índice de degradación de los polímeros de la invención puede ser ajustado dentro de amplios límites, dependiendo de su peso molecular, su contenido de óxido de etileno, la identidad de los grupos terminales, por ejemplo, grupos éster biocompatibles, y la presencia de atrapadores del radical O_{2}, por ejemplo, vitamina C, y puede durar entre 5 días y 6 meses o más, por ejemplo hasta 1 año. Un atrapador de radical puede preferiblemente ser incrustado en el polímero como un aditivo.

El peso molecular Pm de los (co)-polímeros de la invención es de 200,000 a 2,000,000 Daltons, determinados por cromatografía de permeación con gel con cloruro de metileno como el eluente y poliestireno como la referencia con la condición de que se excluye, el polímero que tenga un peso molecular (Pm) de 200,000.

Los planteamientos anteriores de, Chem. Pharm. Bull. 32 (7) 2795-2802 (1984), mencionan que se emplearon, los poli(s) (carbonato de etileno) que tienen un peso molecular desde 50,000 a 150,000 Daltons. Nosotros hemos encontrado que una degradación in vitro e in vivo del polímero únicamente puede ser alcanzada en una proporción satisfactoria cuando el peso molecular es superior de 80,000, preferiblemente arriba de 100,000 (Fig. 6); este es un aspecto preferido de la invención.

Los polímeros de la invención pueden ser empleados en composiciones farmacéuticas, especialmente como materiales de matriz para incrustar los compuestos activos farmacológicamente. Dado que bajo condiciones in vitro e in vivo no ocurre erosión en volumen y el compuesto activo se protege por el polímero, el compuesto activo se libera tan pronto como este aparece (y no antes) a la superficie de la matriz debido a la erosión superficial de la matriz. En un sistema acuoso in vitro a pH 7.4 que no contiene O_{2}, únicamente se liberaron, trazas del compuesto activo (ver Fig. 9).

Una ventaja adicional de la erosión superficial es que el tamaño de la molécula del compuesto activo farmacológicamente no influye en su índice de liberación.

Por consiguiente, la invención proporciona una composición farmacéutica de un compuesto activo farmacológicamente en un polímero, mostrando erosión superficial no-hidrolítica, especialmente con una correlación lineal, especialmente una correlación lineal 1:1 de la liberación del compuesto activo y la degradación de masa del polímero no-hidrolítica y la protección del compuesto activo en la matriz del polímero.

Las composiciones se emplean preferiblemente en la forma de micropartículas o de implantes.

La preparación de formas farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden realizarse por métodos conocidos per se, las micropartículas por técnicas apropiadas de emulsificación o secado por atomizador, los implantes mediante la mezcla de compuesto del fármaco y los poli(s) (carbonato de etileno) ambos en partículas, estado sólido a altas temperaturas a las que los poli(s) (carbonato de etileno) llegan a ser suaves y de ésta manera procesables, opcionalmente seguido por el enfriamiento de la mezcla a un estado sólido y el moldeo de este a una forma apropiada. También es posible mezclar el compuesto del fármaco en un estado disperso o disuelto con una solución del poli(carbonato de etileno) y evaporar el solvente, después de lo que el residuo sólido es formado en formas apropiadas de implante.

Las composiciones farmacéuticas que contienen micropartículas pueden ser hechas mediante la elaboración de las descritas arriba con excipientes galénicos apropiados y opcionalmente trayéndolos en apropiados dispensadores.

Dependiendo de las propiedades del fármaco y el proceso de producción el contenido de carga del fármaco puede variar entre límites amplios, en el orden de 0.001 a aproximadamente 70%, por ejemplo 0.001 a 20%, preferiblemente de 0.001 a 5% en peso. La percolación del medio dentro del polímero debido a una carga alta del fármaco podría evitarse y restringir el valor superior del contenido de la carga.

En la práctica médica de la administración de compuestos de fármacos, cada tipo de compuesto activo farmacológicamente puede ser empleado en combinación con el poli(carbonato de etileno) de la invención. En el caso de las micropartículas preferiblemente se emplean, aquellos tipos de compuestos del fármaco, que son farmacológicamente activos en bajas cantidades y necesitan tener un nivel sanguíneo continuo durante periodos extensos, por ejemplo, hormonas, péptidos o proteínas, por ejemplo, somatostatinas, interferones, o interleucinas, pero en aquellos que son inestables y se desintegraran después del uso oral en el sistema gastro-intestinal y de esta manera preferiblemente son administradas por vía parenteral.

La formulación de depósito de acuerdo con la invención puede ser empleada para administrar una amplia variedad de clases de agentes activos, por ejemplo, agentes activos farmacológicamente tal como anticonceptivos, sedantes, esteroides, sulfonamidas, vacunas, vitaminas, medicamentos anti-migraña, enzimas, broncodilatadores, medicamentos cardiovasculares, analgésicos, antibióticos, antígenos, medicamentos anticonvulsivos, medicamentos anti-inflamatorios, medicamentos anti-parkinson, inhibidores de secreción de prolactina, medicamentos anti-asmáticos, geriátricos y medicamentos anti-malaria. El agente activo puede ser escogido a partir de una amplia variedad de compuestos químicos, por ejemplo, agentes activos lipofílicos y/o hidrofílicos, incluyendo péptidos, tales como octréotido (descritos en la Patente UK GB 2 234 896 A).

Las proteínas o péptidos activos son preferiblemente citoquinas, por ejemplo, interleucinas, G-CSF, M-CSF, GM-CSF o LIF, interferones, eritroproteínas, ciclosporinas, u hormonas, o sus análogos, por ejemplo, octréotido.

Las composiciones farmacéuticas pueden emplearse parainmunomodulación en donde el ingrediente activo comprende una citoquina, por ejemplo, una interleucina (IL-3. IL-6), o factores de estimulación de colonias hematopoyéticas (G-CSF por ejemplo, Filgrastim, GM-CSF, por ejemplo, Molgramostim, Sargramostim, M-CSF), por ejemplo, como adyuvante de vacuna

lograr la reconstitución hematopoyética después de terapia mielosupresiva o después del transplante de médula espinal, en donde el ingrediente activo comprende un factor de crecimiento hematopoyético, por ejemplo GM-CSF, G-CSF, IL-3, IL-6, Factor inhibidor de Leucemia (LIF), Factor de las Células Madre(SCF), o combinaciones de
estos

lograr la concentración local alta del ingrediente activo, por ejemplo, en donde el ingrediente activo comprende un fármaco o citoquina, GM-CSF, IL-6, IL-2, IL-4 o combinaciones de estos, para estimular la respuesta inmune protectora, por ejemplo, cuando se administra junto con células de tumor irradiado o vacuna de antígenos (una analogía para irradiar células sometidas a transfección con los genes respectivos de citoquina)

inducción de respuestas inmunes potentes en donde el ingrediente activo comprende, por ejemplo, GM-CSF administrado en combinación con antígenos, especialmente antígenos de tumor, antígenos virales o antígenos bacterianos

inducción a la cicatrización de heridas con inyección local de las composiciones, por ejemplo, en donde el ingrediente activo comprende GM-CSF

inducción a la tolerancia inmune específica Ag en donde el ingrediente activo es, por ejemplo, GM-CSF combinado con inhibidores de moléculas accesorio (co-receptores), especialmente inhibidores para interacción CD28-B7, para interacción del ligando CD40-CD40, para interacciones del factor de adhesión.

Terapia de acompañamiento con un tratamiento citostático, o como una vacuna adyuvante, en donde el ingrediente activo es por ejemplo, una citoquina, especialmente una interleucina (IL-3, IL-6) o inductor de secreción de citoquina, por ejemplo, un derivado de lípido, por ejemplo, el compuesto descrito en EP 0309411, especialmente en el ejemplo 1, conocido también como MRL 953

supresión inmune específica, por ejemplo, en donde el ingrediente activo es un inmunosupresivo inmunofilina-unión, por ejemplo, una ciclosporina (por ejemplo, Ciclosporina A), una ascomicina (por ejemplo, FK506), o una rapamicina (por ejemplo, rapamicina o derivado como se describe en WO 94/09010, por ejemplo, 40-O-hidroxietil-rapamicina)

tratamiento o profilaxis de enfermedades autoinmunes y condiciones inflamatorias por liberación controlada de citoquinas anti-inflamatorias, por ejemplo, IL-6, IL-10, o TGF;

o interferones, por ejemplo, IFN-\betaI o Betaseron; o receptores de citoquina solubles o antagonistas de receptores de citoquina por ejemplo, para IL-I, TNF\alpha o IL-4

tratamiento o profilaxis de enfermedades alérgicas por liberación controlada de una cadena soluble del receptor de alta afinidad para IgE (FcE RI)

tratamiento de cáncer, por ejemplo, con octréotido, citoquinas especialmente interleucinas,

reconocimiento selectivo por ejemplo, para el tratamiento de leishmaniasis, de infecciones por hongos, de enfermedades del almacenamiento de enzimas (Tay Sachs, Gauckerillness),

terapia para SIDA o ARC,

vacunación por ejemplo, con vacuna de toxoide tetánico

hematopoyesis, por ejemplo, en donde el ingrediente activo es eritropoyetina

inyección intraarticcular dentro de articulaciones inflamadas en donde el ingrediente activo es un medicamento antiinflamatorio, especialmente uno que oralmente no es biodisponible o tiene una vida media muy corta por ejemplo, inhibidores de enzimas que convierten el IL-1\beta, inhibidores de metaloproteasas.

En la solicitud internacional PCT WO 94/01133, se ha descrito un método para incrementar una respuesta inmune de un mamífero en una vacuna que comprende la administración a un mamífero en necesidad de vacunación de una cantidad efectiva de GM-CSF en conjunción con una vacuna. Sin embargo, el GM-CSF no fue cuidadosamente retardado en la manera de acuerdo con la invención instantánea, lo que da una liberación más o menos constante del compuesto activo sobre un largo periodo de tiempo por lo cual los tiempos de administración repetida de GM-CSF pueden ser disminuidos.

La invención especialmente proporciona una composición farmacéutica de un compuesto activo farmacológicamente en un polímero que muestra erosión superficial no-hidrolítica para administración parenteral de una interleucina o CSF, particularmente en un polímero como se define más arriba.

La invención también proporciona un método de administración tal como una composición a un sujeto, la cual comprende la administración por vía parenteral a un sujeto con necesidad de dicho tratamiento.

Las formulaciones de depósito de acuerdo con la invención pueden ser usadas por las indicaciones conocidas de los compuestos del fármaco particular incorporados en estas.

Las cantidades exactas de compuesto del fármaco y de las formulaciones de depósito para ser administradas dependen de un número de factores, por ejemplo, la condición para ser tratada, la duración deseada del tratamiento, el índice de liberación del compuesto del fármaco y la degradabilidad del poli(carbonato de etileno).

Las formulaciones deseadas pueden producirse de maneras conocidas. La cantidad del agente farmacológicamente activo requerido y el índice de liberación del mismo, puede ser determinado con base en técnicas conocidas in vitro o in vivo, por ejemplo, cuanto tiempo una concentración del agente activo particular permanece en el plasma sanguíneo a un nivel aceptable. La degradabilidad de la matriz también se puede obtener por técnicas in vitro o especialmente por técnicas in vivo, por ejemplo en donde la cantidad de los materiales de la matriz en el tejido subcutáneo se determina después de periodos de tiempo particulares.

Las formulaciones de depósito de la invención pueden ser administradas en la forma de por ejemplo, micropartículas para administración oral, nasal o pulmonar, preferiblemente subcutánea, intramuscular o intravenosa, particularmente como una suspensión en un vehículo líquido apropiado o en la forma de implantes, por ejemplo, subcutáneamente.

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La administración repetida de las formulaciones de depósito de la invención puede efectuarse cuando la matriz del polímero ha sido degradada suficientemente, por ejemplo, después de 1, 2 o 3 semanas o 1 mes.

Una ventaja de las matrices del poli(carbonato de etileno) de la invención es que durante la liberación del compuesto del fármaco, las cadenas del polímero se degradan en partes de un tamaño molecular pequeño, el que se transporta por los fluidos corporales desde el sitio de administración.

Ejemplos de cargas del medicamento para el compuesto preferido, octréotido, están para la acromegalia, en una formulación de depósito líquida parenteral que tiene micropartículas que contienen el péptido en una cantidad desde al menos 0.1 preferiblemente de 0.5 a 20 por ciento en peso relativo a la matriz del (co)-polímero, preferiblemente de 2.0 a 10, especialmente de 3 a 6% en peso. La dosis total del octréotido es de 20 a 30 mg en acromegalia y hasta 100 a 200 mg en cáncer de seno, por ejemplo, para 1 mes de tratamiento.

El tiempo de liberación del péptido desde las micropartículas puede ser desde 5 días a aproximadamente 2 semanas o más largo.

Convenientemente la formulación de liberación controlada comprende el octréotido en el vehículo del (co)-polímero, el cual, cuando se administra a un conejo o a una rata por vía subcutánea a una dosificación de 2 mg de octréotido por kg de peso corporal del animal, exhibe una concentración de octréotido en el plasma sanguíneo de al menos 0.3 ng/ml y preferiblemente menos que 20 ng/ml durante un largo periodo.

Las composiciones farmacéuticas de la invención además pueden contener aditivos, también preferiblemente incrustados en el (co)-polímero por ejemplo, un atrapador de radical, especialmente como un atrapador del radical anión superóxido O_{2}-. La presencia de tal atrapador, por ejemplo, menadiona o vitamina C, disminuye el índice de degradación del poli(carbonato de etileno) (Fig. 7).

Otro tipo de aditivo es un atrapador del radical hidroxilo, probablemente desarrollado bajo la influencia del radical anión superóxido O_{2}-, por ejemplo un poliol, especialmente un alcohol de azúcar, particularmente manitol. este aditivo se desarrollo por tener también una influencia favorable sobre la ganancia de peso corporal de los animales probados los cuales, por ejemplo, se administran con IL-3 microencapsulado. Sin este aditivo la ganancia del peso corporal se suspende. Cuando la composición está en la forma de micropartículas el mismo aditivo u otro puede adicionarse externamente a las existentes micropartículas, dado que esto tiene una influencia favorable en la estabilidad de una suspensión de micropartículas contra floculación y precipitación.

Si un aditivo está presente, además preferiblemente en una cantidad de 1 al 90% del peso, relacionada con el peso total de la formulación.

La favorable degradación de masa in vitro e in vivo bajo la influencia del radical anión superóxido O_{2}- puede ser vista de la Fig. 8. Las curvas de degradación para la masa residual son aproximadamente lineales y tienen una pendiente diferente, dado que las condiciones de degradación in vivo e in vitro son diferentes. La cantidad de masa degradada por unidad de tiempo es casi constante.

Las curvas para la liberación in vivo de un compuesto activo farmacológicamente, por ejemplo, IL-3 humano, bajo la influencia del radical anión superóxido O_{2}- son, similares a las curvas de degradación, aproximadamente lineales (Fig. 10), lo que significa que la cantidad liberada del compuesto del fármaco por unidad de tiempo es casi
constante.

Una combinación de ambas liberación de la IL-3 humana in vivo y la degradación de masa in vivo se registraron en la Fig. 11, mostrando una correlación 1:1 entre degradación de masa in vivo y liberación del medica-
mento.

Ejemplos 1-5

Procedimiento general para la síntesis de los poli(s) (carbonato de etileno) con un catalizador preparados a partir de dietilzinc y agua

Para las cantidades de los reaccionantes, solvente, catalizador etc. para un experimento determinado ver la tabla 1.

200 ml de dioxano seco y 19.5 g (158 mmol) Zn(C_{2}H_{5})_{2} se colocaron en un matraz de 750 ml bajo una atmósfera de N_{2}. Los matraces se equiparon con un agitador mecánico, embudo de goteo, termómetro y una entrada de N_{2}. El embudo de goteo se equipo con un tubo de CaCl_{2}. La solución se enfrió a 10°C en un baño de hielo y una solución de 2.7 ml de H_{2}O en dioxano, ver la tabla 1) se adicionó lentamente manteniendo así la temperatura entre 10-15°C. La mezcla de reacción se agitó adicionalmente por 45 min. a temperatura ambiente, hasta que la solución inicial incolora cambiara a amarillo pálido. Esta solución catalizadora se transfirió al autoclave, se trató con 40 g de CO_{2} y se calentó a 125°C por el tiempo indicado en la tabla 1. Luego la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se adicionaron 560 g (12.7 mole) de CO_{2}, seguido por la adición lenta de 132 g (3 moles) de óxido de etileno durante un periodo de tiempo de 1 hora. Se permitió que la reacción continuara por el tiempo indicado en la tabla 1. Después de este tiempo, la presión se liberó lentamente durante muchas horas. El producto, una suspensión pegajosa, se diluye con dioxano y se precipita mediante el vertimiento de la solución de dioxano dentro de HCl 0.25 M acuoso. El precipitado se disolvió en una cantidad apropiada de CH_{2}Cl_{2} (2-4 litros), se lavó con HCl 0.5 M acuoso (2x) y con H_{2}O (1x). La solución se secó sobre Na_{2}SO_{4} anhidro y se evaporo a un volumen final de 0.5 a 1.5 litros, dependiendo de la viscosidad de la solución. El producto se precipito mediante el vertimiento de la solución de CH_{2}Cl_{2} dentro de un volumen 4 veces de metanol. El precipitado blanco se filtró y se secó toda la noche a 0.5 mbar/50°C. El producto crudo se reprecipitó a partir de la acetona para una purificación posterior, ver la tabla 2. Todos los productos proporcionan espectros ^{1}H-RMN idénticos, excepto las intensidades relativas de las señales a 3.65, 3.73, 4.29 y 4.37 ppm debido a las diferencias en el contenido de la unidad de carbonato de etileno.

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TABLA 1 Experimentos para la preparación de poli(s) (carbonato de etileno)

Ejemplo	Óxido de etileno	CO_{2}	Zn(C_{2}H_{5})_{2}	Dioxane	Temp. Tiempo
	[mol]	[mol]	[mmol]	[ml]	[°C][h]

1	3	13.6	158	300	5064
2	3	9.1	158	500	2064
3	3	13.6	158	300	20 240
4	3	13.6	158	300	2040
5	3	13.6	158	300	2022
6	3	13.6	238	300	5064

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Todos los experimentos se corrieron en un autoclave NB2 de 1.0 litro. Proporción Molar de H_{2}O: Zn(C_{2}H_{5})_{2} = 0.95 para todos los experimentos. El catalizador fue pre-tratado con 40 g de CO_{2} a 125°C por 1 hora, excepto en el ejemplo 1 (10 horas).

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TABLA 2 Propiedades físicas seleccionadas de los poli(s) (carbonato de etileno) sintetizados

Ejemplo	Pm[kDa]	Nm [kDa]	Pm/Nm	Tg [°C]	^{n}inhEtileno [dl/g] Carbonato en
					CHCl_{3} ^{a)} Content [%]

1	141.9	32.2	4.40	19.3	0.6087
2	627.3	133.5	4.70	23.5	1.4691
3	477.0	83.6	5.71	18.7	1.2791
4	758.0	97.5	7.77	20.6	1.7590
5	721.6	80.7	8.95	22.9	2.44 ^{b)} 90
6	310.9	103.1	3.02	20.1	88

\hskip0.87cm ^{a)} a 20°C y una concentración de 10 mg/ml si no se indica nada más
\hskip0.87cm ^{b)} a una concentración de 1 mg/ml

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 7-11

Procedimiento general para la síntesis de los poli(s) (carbonato de etileno) con un catalizador preparado a partir de un dietilzinc y un diol 1. Preparación del catalizador

200 ml de dioxano seco se colocaron en un matraz seco de 750 ml de 4-cuellos bajo una atmósfera de nitrógeno. Se adicionaron, 19.50 g (158 mmol) de dietilzinc, por medio de una jeringa de vidrio. El matraz se equipó con un agitador mecánico, embudo de goteo, termómetro y una entrada de argón. El embudo de goteo se cargo con 100 ml de dioxano seco y se equipo con un tubo de cloruro de calcio. Luego el equipo se coloca bajo una corriente de argón. Se adicionan 9.00 g (145 mmol, 0.92 molequiv.) de etilenglicol seco, (mantenido sobre tamiz molecular) recién destilado, al dioxano en el embudo de goteo bajo una corriente de argón. El matraz se agitó mecánicamente, se enfrió a 10°C en un baño de hielo pasándole argón. La solución de etilenglicol en dioxano se adicionó gota a gota a la solución agitada de dietil de zinc en dioxano sobre un periodo de tiempo 30 minutos, durante éste tiempo la temperatura se mantuvo entre 10-14°C. Se observó simultáneamente, una evolución de gas de etano y una precipitación sobre la adición de la solución de etilenglicol. Después se completó la adición, se retiró el baño de enfriamiento y la mezcla se agitó por 60 minutos adicionalmente, mientras se permite el calentamiento a temperatura ambiente. La mezcla heterogénea luego se transfiere a un autoclave (autoclave NB2 de 1 litro) pasándole argón. El autoclave se cargo con ca. 40 g (0.9 mol) de dióxido de carbono y se calentó a 125°C por 1 hora bajo la agitación para pre-tratar el catalizador con dióxido de carbono.

2. Polimerización

El autoclave con el catalizador pre-tratado se enfrió a temperatura ambiente y se cargó con 560 g (12.7 mol) de dióxido de carbono adicionalmente. Luego, se adicionaron 132 g (3 mol) de óxido de etileno (99.8%) a la mezcla agitada en el autoclave mediante inyección lenta durante 1 hora. Después se completó la adición, el autoclave se calentó a la temperatura indicada en la tabla 3 y la mezcla se agitó por el tiempo dado a esta temperatura.

3. Desarrollo

El autoclave se enfría a temperatura ambiente y la presión se libera lentamente a presión atmosférica. El producto, una suspensión pegajosa, blanca, se lleva a un total de 7 litros de diclorometano, se adicionaron 1035 ml de una solución de HCl 0.4 M y la mezcla se agitó por 3 horas a temperatura ambiente. La fases se separaron y la capa orgánica se lavó con 3 litros de HCl 0.5 M y dos veces con 4.5 litros de agua. La solución de diclorometano luego se secó sobre 120 g de sulfato de sodio y se concentró a un volumen final de ca. 2 litros. El producto se precipitó mediante la adición lenta de esta solución dentro de 6 litros de metanol. El precipitado se secó 16 horas in vacuo a 40°C para dar el polímero crudo, que fue purificado además como sigue:

El producto crudo se disolvió en diclorometano y la solución se vertió dentro de un volumen 5 veces de acetona durante 15 minutos para precipitar el producto. El precipitado se secó 16 horas in vacuo a 40°C para dar el correspondiente poli(carbonato de etileno). Las propiedades físicas de los productos son publicadas en la Tabla 4. Todos los productos mostraron absorciones fuertes de IR a 1750 y 1225 cm^{-1}. La señal ^{1}H-RMN- de las unidades de carbonato de etileno aparece a 4.37 ppm.

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TABLA 3 Síntesis de poli(s) (carbonato de etileno) con un catalizador preparado a partir de dietilzinc y un diol

Ejemplo	Óxido	CO_{2}	Solvente	(C_{2}H_{5})_{2}Zn	Diol^{b)}	Temperatura	Tiempo
	de etileno	[mol]	[ml]	[mol]	[mol]	de reacción	de reacción
	[mol]					[ºC]	[hrs]

7	3,0	13,6	300	158	145	20	96

8	3,0	13,6	300	158	145	50	96

9	3,0	13,6	300	158	145	60	96

10	3,0	13,6	300^{c)}	158	145	50	144

11	3,0	13,6	300	158	145^{d)}	50	96

\hskip0.5cm ^{a)} Dioxano, si no se indica nada más
\hskip0.5cm ^{b)} etilen glicol, si no se indica nada más
\hskip0.5cm ^{c)} Tetrahidrofurano como solvente en lugar de dioxano
\hskip0.5cm ^{d)} 1,4-Butanodiol en lugar de etilen glicol

TABLA 4 Propiedades físicas seleccionadas de los poli(s) (carbonato de etileno) sintetizados empleando un catalizador preparado a partir del dietilzinc y un diol

Ejemplo	Pm [kDa]	Nm [kDa]	Pm/Nm	Tg [°C]	^{n}_{inh}[dl/g]	Contenido
					en CHCl_{3} ^{b)}	carbonato de
						etileno

7	-	-	-	16.7	2.88 b)	98
8	328.0	149.0	2.20	16.4	0.97	95
9	207.0	103.0	2,00	21.2	0.65	92
10	231.0	83.8	2.76	32.6	0.72	96
11	110.0	53.4	2.06	31.1	0.49	90

\hskip0.88cm ^{a)} a 20°C y una concentración de 10 mg/ml, si nada más se indica
\hskip0.88cm ^{b)} a una concentración de 1 mg/ml

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 12 Procedimiento experimental para la síntesis de poli(carbonato de etileno) con un catalizador preparado del dietilzinc y floroglucina 1. Preparación del catalizador

200 ml de dioxano seco se colocan dentro de un matraz de 750 ml de 4 cuellos, bajo una atmósfera de nitrógeno. Se adicionaron 19.60 g (158.7 mmol) de dietilzinc por medio de una jeringa de vidrio. Los matraces se equiparon con un agitador mecánico, embudo de goteo, termómetro y una entrada de argón. El embudo de goteo se cargó con 100 ml de dioxano seco y se equipó con un tubo de cloruro de calcio. El equipo se colocó bajo una corriente de argón. Se adicionaron 13.34 g (105.8 mmol, 0.92 molequiv.) de floroglucina seca en el embudo de goteo al dioxano bajo una corriente de argón. El matraz agitado mecánicamente se enfrió a 10°C en un baño de hielo pasándole argón. La solución de floroglucina en dioxano se adicionó gota a gota a la solución de dietilzinc en dioxano durante un periodo de tiempo 30 minutos, durante este tiempo la temperatura se mantuvo entre 10-14°C. Una evolución de gas de etano y se observó simultáneamente un precipitado bajo la adición de la solución de floroglucina. Después se completó la adición, el baño de enfriamiento se retiró y la mezcla se agitó por 30 minutos más, mientras se deja calentar a temperatura ambiente. Luego la mezcla heterogénea se transfirió a un autoclave (autoclave BN2 de1 litro) pasándole argón. El autoclave se cargó con ca. 40 g (0.9 mol) dióxido de carbono y se calentó a 125°C por 1 hora bajo agitación para pre-tratar el catalizador con dióxido de carbono.

2. Polimerización

El autoclave con el catalizador pre-tratado se enfrió a temperatura ambiente y se cargó con 560 g (12.7 mol) de dióxido de carbono adicionales. Luego, se adicionaron 132 g (3 mol) de óxido de etileno (99.8%) a la mezcla agitada en el autoclave mediante inyección lenta durante 1 hora. Después se completó la adición del óxido de etileno, el autoclave se agitó a 21°C por 260 horas.

3. Desarrollo

La presión del autoclave se liberó lentamente a presión atmosférica. El producto se toma en un total de 4 litros de diclorometano, se adicionan 1035 ml de una solución de HCl 0.4 M y la mezcla se agitó por 3 horas a temperatura ambiente. Las fases se separaron y la capa orgánica se lavó dos veces con 1.5 litros de HCl 0.5 M y dos veces con 2 litros de agua. Luego la solución de diclorometano se secó sobre 120 g de sulfato de sodio y se concentró a un volumen final de ca. 1 litro. El producto se precipitó mediante la adición lenta de ésta solución dentro de 3 litros de metanol. El precipitado se secó 16 horas in vacuo a 40°C para dar el polímero crudo, que se purifica además como
sigue:

El producto crudo se disolvió en diclorometano y la solución se adicionó dentro de un volumen 5 veces de acetona durante 15 minutos para precipitar el producto. El precipitado se disolvió de nuevo en diclorometano, se volvió a precipitar con metanol y se secó 16 horas in vacuo a 40°C para dar el correspondiente poli(carbonato de etileno).

Propiedades Físicas del producto:

Pm = 258000 Da, Nm = 35600 Da, Tg = 15.4°C.

IR: Absorciones Fuertes a 1751 y 1225 cm^{-1}.

De acuerdo con ^{1}H-RMN, el producto tiene un contenido de carbonato de etileno del ca. 96%.

Ejemplo 13 Procedimiento experimental para la síntesis del poli(carbonato de etileno) con un catalizador preparado del dietilzinc y acetona

132 g (3 Mol) de óxido de etileno fueron co-polimerizados con 600 g (13.6 Mol) de CO_{2} a 50°C durante 96 horas empleando un catalizador preparado a partir de 8.43 g (145.16 mmol) de acetona y 19.62 g (159 mmol) de dietilzinc.

La preparación del catalizador así como la polimerización se realiza de manera similar al procedimiento descrito para los ejemplos 7-11, excepto que la acetona se empleo en lugar de un diol para preparar el catalizador.

El poli(carbonato de etileno) obtenido así, tiene un contenido de carbonato de etileno del 93% y las siguientes propiedades:

Pm = 233 kDa, Nm = 109 kDa, Pm/Mn = 2.14, Tg = 22.4°C.

Ejemplo 14 Síntesis del poli(carbonato de etileno) grupo terminal-estearoilado

1 g de poli(carbonato de etileno) que tiene Pm = 153000 Da, Nm = 68900 Da, Tg = 29.1ºC) se disolvió en 30 ml de diclorometano seco. La solución se trató subsecuentemente con 0.98 g (12.38 mmol) de piridina y 10 g (33.0 mmol) de cloruro de estearoil. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 48 horas, que se diluye con 50 ml de diclorometano y se lavó sucesivamente con 2 x 150 ml bicarbonato de sodio saturado y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro y el producto se precipitó por adición gota a gota de la solución de diclorometano dentro de 300 ml de n-hexano. Además el producto obtenido así, se purificó por la solubilización en diclorometano y la precipitación a partir de 3 veces un volumen de dietil éter. Finalmente, el producto se secó in vacuo a 40°C por 16 horas para dar el poli(carbonato de etileno) grupo terminal-estearoilado.

Pm = 144000 Da. Nm = 71000 Da, Tg = 25.6°C.

Ejemplo 15 Síntesis del poli(carbonato de etileno) grupo terminal-acetilado

1 g poli(carbonato de etileno) (que tiene Pm = 153000 Da, Nm = 68900 Da, Tg = 29.1ºC) se disolvió en 10 ml de diclorometano seco. Se adicionaron 0.98 g (12.38 mmol) de piridina, seguido por la adición de 10.08 g (98.7 mmol) de anhídrido acético. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 120 horas. Luego, se diluyó con 50 ml de diclorometano y se vertió lentamente sobre 200 ml de bicarbonato de sodio saturado. La mezcla se agitó por 30 minutos y luego las capas se separaron. La capa orgánica se lavo nuevamente con 150 ml de carbonato de sodio saturado y finalmente con agua. La solución de diclorometano se secó sobre sulfato de sodio anhidro y el producto se precipitó por goteo adicional de esta solución dentro de 300 ml de dietil éter. El precipitado se disolvió nuevamente en diclorometano y se precipitó otra vez del dietil éter. El producto se secó por 16 horas a 40°C in vacuo para dar el poli(carbonato de etileno) con el grupo éster acetato terminal.

Pm = 150000 Da, Nm = 69100 Da, Tg = 26.8°C.

Ejemplo 16 Purificación del poli(carbonato de etileno) por tratamiento con agua en ebullición

1 g de poli(carbonato de etileno) (del ejemplo 8, que tiene Pm = 328000 Da, Nm = 149000 Da, Tg = 16.4°C) se corto en pequeñas piezas y se agitó en 50 ml de agua bidestilada en ebullición por 2 horas. El agua se retiró y se reemplazó por agua fresca, que se calienta nuevamente a temperatura de ebullición. Después de 3 horas adicionales, las piezas del polímero se aislaron y secaron in vacuo a 40°C por 16 horas. El producto obtenido tiene las siguientes propiedades físicas: Pm = 340000 Da, Nm = 148000 Da, Tg = 28.3°C. De esta manera un incremento dramático de la temperatura de transición del estado vítreo se observó, lo cual es atribuible al cambio en el peso molecular del polímero.

Ejemplo 17 Composición (micropartículas) con 1% de carga del medicamento hIL-3 1. Preparación del medicamento que contiene micropartículas

1 g de poli(carbonato de etileno), Pm = 328.000 del ejemplo 8 (PEC) de disolvió en 10 ml de cloruro de metileno mientras se agita, seguido por la adición de 12.1 mg de interleucina 3 (hIL-3) humana disuelta en 0.6 ml de agua. La mezcla se homogeniza intensamente con el Ultra-Turrax por un minuto a 20,000 rpm (=fase-W/O interior). 1 g de Gelatina A se disuelve en 2000 ml de agua desionizada a 50°C y la solución se enfría a 20°C (=fase W externo). La fase W/O y la fase W- se mezclaron intensamente. Por consiguiente la fase-W/O interior se dispersó homogéneamente en la fase-W-externa en finas gotitas. La emulsión triple resultante se agitó lentamente por 1 hora. Mediante esto el cloruro de metileno se evaporó y las micropartículas se generaron a partir de las gotitas de la fase interior y se endure-
cieron.

Después de la sedimentación de las micropartículas, el sobrenadante se succionó y las micropartículas se recuperaron por filtración al vacío o centrifugación y se enjuagaron con agua para eliminar la gelatina. Finalmente, las micropartículas se liofilizaron usando el manitol como un agente de abultamiento o se secaron en una estufa a vacío (formulaciones libres de manitol) por 72 horas y se tamizaron (0.125 mm tamaño de malla) para obtener el producto final.

2. Formulación del placebo

1 g de PEC Pm = 328.000 del ejemplo 8 se disolvió en 10 ml de cloruro de metileno mientras se agita (Fase O interior). 1 g de Gelatina A se disolvió en 2000 ml de agua desionizada a 50°C y la solución se enfrió a 20°C (=fase W exterior). Las fases O- y W- se mezclaron intensamente. Por consiguiente la fase O- se dispersó homogéneamente en finas gotitas en la fase W-exterior. La emulsión resultante se agitó lentamente por 1 hora y se trató adicionalmente de la manera descrita arriba.

Ejemplos 18-26

Todas las formulaciones galénicas descritas a partir de ahora se prepararon empleando el sintetizado PEC de acuerdo con el ejemplo 8 en la Tabla 3 y además purificadas de una manera similar a la, descrita en el ejemplo 16. Todos ellos tienen un Pm de 300,000 a 450,000, un contenido de carbonato de etileno de más del 94% y un Tg dentro del rango de 18 a 50°C.

Ejemplo 18

Composición (micropartículas) que tienen una carga al 0.2% de hIL-2

2.9 mg de interleucina 2 (h IL-2) humana se disolvieron en 1.5 ml de agua y IL-2 que contiene micropartículas se prepararon como se describe en el ejemplo 17. Las micropartículas se liofilizaron usando el manitol como agente de abultamiento y se tamizaron (tamaño de malla 0.125 mm) para obtener el producto final.

Ejemplo 19

Composición (micropartículas) que tienen una carga al 0.2% de hIL-2 (libre de agua)

La formulación se preparó como se describe en el ejemplo 18, sin embargo, 2,9 mg de interleucina 2 humana se dispersó directamente en la fase orgánica (el PEC se disolvió en cloruro de metileno).

Ejemplo 20

Composición (implantes) que tienen una carga al 0.8% de hIL-3 1. Moldeado por compresión

25 mg de micropartículas, que consisten del 100% (p/p) de poli(carbonato de etileno) (placebo), 99% (p/p poli(etileno carbonato) y 1% (p/p) interleucina-3 humana o 79.2% (p/p) de poli(carbonato de etileno), 20% (p/p) de manitol y 0.8% (p/p) de interleucina-3 humana, se moldearon por compresión por 3 min a 60-70°C y 160 bares para los implantes (tabletas) de 5 mm diámetro. Las tabletas se almacenaron a 4°C en frascos de vidrio cerrados hasta que se utilizaron para los experimentos de liberación del medicamento in vitro e in vivo.

2. Experimentos de liberación del medicamento in vitro

Tres tabletas cada una de las formulaciones libres de manitol y interleucina-3 humana que contiene manitol y formulación de placebo se agitaron a 37°C en un medio de cultivo sintético que contenía 2.5% (v/v) N-[2-hidroxietil]-piperazina-N'-[ácido 2-etanosulfónico] (1 m), 10% (v/v) suero fetal de becerro, y 2% (v/v) solución de penicilina/estreptomicina. Las muestras se sacaron del medio a 0.5, 1, 2, 5 horas y 1, 2, 3, 7, 14, 20 días y, subsecuentemente, el medio se renovó. El contenido de interleucina-3 humana de las muestras se midió por ELISA.

3. Experimento de liberación del medicamento in vivo

Ratas macho, se conservaron bajo óptimas condiciones, se anestesiaron mediante la inhalación de un narcótico y en cada rata, se implanto en una bolsa de la piel subcutáneamente, una tableta de las formulaciones de interleucina-3 humana y de la formulación del placebo. Después de 1, 4, 7, 14, 21 días las ratas se mataron con una sobredosis del narcótico de inhalación. Las tabletas remanentes se sacaron, se libraron del tejido adherido, y se secaron. La pérdida de masa de las tabletas de determinó gravimétricamente. Subsecuentemente, el contenido de interleucina-3 humana de las tabletas remanentes se midió por HPLC y ELISA.

Ejemplo 21

Composición (micropartículas p/o/p) que tiene, una carga al 0.0002% - 2% de hIL-2

4 g de PEC se disolvieron en 80 ml de cloruro de metileno con agitación magnética. Para esta solución una apropiada cantidad de IL-2 (113.2 mg para el 2%, 11.32 mg para el 0.2% etc.) se disolvió en 6 ml de agua destilada o agua con algunas gotas de etanol adicionado. La mezcla se homogenizó intensamente con un Ultra-'Turax para dispersar la solución de IL-2 en la fase del polímero (= fase W/O interior). 1 g de gelatina A se disolvió en 200 ml de solución reguladora de fosfato 1/15 M (pH 7.4) a 50° C y la solución se enfrió a 20°C (= Fase W exterior). Las fases W/ O- y W- se mezclaron intensamente. Por consiguiente la fase W/O-interior se separó en pequeñas gotitas que se dispersaron homogéneamente en la fase W-exterior. La emulsión triple resultante se agitó lentamente por 1 hora. De esta manera el cloruro de metileno se evapora y las micropartículas se endurecen a partir de las gotitas de la fase interior.

Después de la sedimentación (o centrifugación) de las micropartículas el sobrenadante se succionó y las micropartículas se recuperaron por filtración a vacío y se enjuagaron con agua para eliminar la gelatina. Finalmente, las micropartículas se secaron en estufa a vacío por 24 horas y se tamizaron para obtener el producto final.

La eficiencia de la encapsulación, probada con HPLC y bioensayo, esta entre 10 y 100%.

Ejemplo 22

Composición (micropartículas s/o/w) que tiene una carga de 0.0002% - 2% del IL-2

Las formulaciones se prepararon como se describe en el ejemplo 21, excepto que la IL-2 no se disolvió en agua. En lugar de disolverse la IL-2, el medicamento se disperso directamente dentro de la fase del polímero (= fase O-). La eficiencia de encapsulación, probada con HPLC y bioensayo, está entre 10 y 100%.

Nota: La cantidad del polímero, cloruro de metileno, agua y medicamento se varía en un amplio rango sin cambiar la calidad del producto. Se obtienen cargas más altas de los medicamentos hasta el 20%. En la fase exterior la gelatina se reemplaza por otros emulsificantes tales como polivinilalcohol etc., y/o la concentración del emulsificador/solución reguladora se cambia. Los procedimientos de separación y secado descritos son reemplazados por otras técnicas farmacéuticas bien conocidas, tales como filtración, liofilización y secado por pulverización.

Ejemplo 23

Composición (micropartículas w/o/w y s/o/w) que tienen una carga del 1% de hGM-CSF

La preparación se lleva a cabo de acuerdo con el proceso descrito en los ejemplos 21 y 22. Como se describe allí las preparaciones S/O/W y de W/O/W- se preparan. Sin embargo, la eficiencia de encapsulación de las formulaciones W/O/W fue del 60%, mientras que las formulaciones S/O/W mostraron eficiencias de encapsulación más bajas.

Ejemplo 24

Composición (micropartículas w/o/w y s/o/w) que tiene una carga de I al 10% de Octréotido-namoato (SMS-PA)

La preparación se llevo a cabo de acuerdo con el método descrito en los ejemplos 19 y 20. Sin embargo, el SMSPA no es soluble en agua. De esta manera, el medicamento se dispersa, no se disuelve, en agua, para las formulaciones W/O/W. La eficiencia de encapsulación se determinó por HPLC y esta entre 20 y 100%.

Ejemplo 25

Composición (micropartículas w/o/w y s/o/w) que tiene una carga del 1 al 10% Octréotido-acetato

La preparación se llevo a cabo de acuerdo con el método descrito en los ejemplos 21 y 22. La eficiencia de encapsulación se determinó por HPLC y esta entre 2 y 40%, que es claramente más baja que para el lipofílico SMS-PA. Valores más altos se obtuvieron en las formulaciones S/O/W después de emplear el material activo del compuesto liofilizado (partícula del medicamento más pequeña).

Ejemplo 26

Liberación del Pamoato de octréotido (SMS-PA) a partir de las micropartículas en conejos e implantes en conejos y ratas

La implantación subcutánea de los discos poli(carbonato de etileno) o inyección de las micropartículas de poli(carbonato de etileno) (carga del medicamento 1.95%) en una cantidad aproximadamente de 2 mg de la sustancia del medicamento/kg de peso corporal se realizaron en conejos macho (bastardo de chinchilla, peso corporal aproximadamente de 3 kg) e implantación subcutánea de discos de ratas macho (Wistar, peso corporal aproximado de 375 g). Se administraron cantidades para rata y conejo de aproximadamente 40 respectivamente, 300 mg del medicamento que contiene el polímero en la forma de micropartículas respectivamente comprimido para un implante o como una suspensión.

Los discos de implantes para ratas y conejos tienen un diámetro de 0.5 y 1 cm respectivamente y se producen como se describe en el ejemplo 20.

Para determinar la liberación del medicamento, se recolectaron muestras de sangre para los días 14 y 21 en ratas y conejos respectivamente y los residuos del medicamento se midieron en implantes por radioinmunoensayo y HPLC.

Se pudo comprobar, una correlación lineal de la pérdida de masa del poli(carbonato de etileno) y la liberación de SMS-PA (Fig. 13), como se muestra para la masa molecular alta de hIL-3 (Fig. 11). Un máximo del 75% de material implantado se degradó en 3 semanas después de la administración en conejos, un máximo de 95% del material implantado se degrado en 2 semanas después de la administración en ratas.

Una reacción de inflamación (que incluye invasión de leucocitos poliformonucleares y otras células) es un prerrequisito para la biodegradación de poli(carbonato de etileno). El curso de una reacción de inflamación puede ser anticipado por ser dando origen a perfiles de niveles de plasma especie-específico de un medicamento. Esto se comprobó por SMS-PA (Fig. 12). En ratas, la biodegradación de poli(carbonato de etileno) es mucho más rápida en conejos. En conejos, los niveles de plasma de SMS-PA incrementan lentamente para alcanzar la fase de liberación constante a aproximadamente el día 9 durando al menos hasta el día 21.

Ejemplo 27 Composición (micropartículas w/o/w) que tiene una carga de 0.0002% - 2% de rhIL-6

4 g de PEC se disuelven en 80 ml de cloruro de metileno con agitador magnético. Para esta solución una cantidad apropiada de rhIL-6 (113.2 mg para el 2%, 11.32 mg para el 0.2% etc.) se disuelve en 6 ml de agua destilada o agua con algunas gotas de etanol adicionado. La mezcla se homogeniza intensamente con un Ultra-Turax para dispersar la solución IL-6 en la fase del polímero (= fase W/O interior). 1 g de gelatina A se disuelve en 200 ml de solución reguladora de fosfato 1/15 M (pH 7.4) a 50° C y la solución se enfría a 20°C (= fase W exterior). Las fases W/ O- y W- se mezclan intensamente. Por consiguiente la fase W/O-interior se separa dentro de pequeñas gotitas que se dispersan homogéneamente en la fase W exterior. La triple emulsión resultante se agita lentamente por 1 hr., el cloruro de metileno se evapora, y las micropartículas se endurecen a partir de las gotitas de la fase interior.

Después de la sedimentación (o centrifugación) de las micropartículas el sobrenadante se succiona y las micropartículas se recuperan por filtración al vacío y se enjuagan con agua para eliminar la gelatina. Finalmente, las micropartículas se secaron en una estufa al vacío por 24 horas y se tamizaron para obtener el producto final.

La eficiencia de encapsulación, probada con HPLC y bioensayo, esta entre 10 y 100%.

Ejemplo 28 Composición (micropartículas s/o/w ) que tiene una carga de 0.0002% - 2% de rhIL-6

Las formulaciones se preparan como se describe en el ejemplo 27, excepto que la IL-6 no se disuelve en agua. En lugar de disolverse la IL-6, el medicamento se dispersa directamente dentro de la fase del polímero (= fase O-). La eficiencia de encapsulación, probada con HPLC y bioensayo, está entre 10 y 100%.

Nota: La cantidad de polímero, cloruro de metileno, agua y medicamento se varió en un rango amplio sin cambiar la calidad del producto. Se obtienen cargas del medicamento hasta el 20% más altas. En la fase exterior la gelatina se reemplaza por otros emulsificantes tales como polivinilalcohol, etc., y/o se cambian la concentración del emulsificante/solución reguladora. La separación y los procedimientos de secado descritos se reemplazan por otras técnicas farmacéuticas notorias tales como filtración, liofilización y secado por pulverización:

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Ejemplos 29-31

Uso de la IL-6 en el tratamiento de condiciones mediado por TN, NF\alpha y/o IL-1

Ejemplo 29

Modelo animal para la esclerosis múltiple: modelo de recaída crónica de encefalomielitis alérgica inducida experimentalmente en la rata Lewis (CR-EAE)

La encefalomielitis alérgica inducida experimentalmente (EAE) en la rata es un modelo experimental bien conocido para esclerosis múltiple en humanos. [Paterson, ADV. IMMUNOL. 5 (1966) 131-208; Levine et al., AM. J. PATH. 47 (1965) 61; McFarlin et al. J. IMMUNOL. 113 (1974) 712; Borel, TRANSPLANT & CLIN. IMMUNOL. 13 (1981) 3]. Las ratas se inyectaron con tejido nervioso de otras especies junto con un adyuvante, y la respuesta alérgica resultante conduce las lesiones en los nervios de la rata que imita las lesiones autoinmunes producidas en esclerosis múltiple. Las ratas quedan parcialmente o completamente paralizadas, y la severidad de la enfermedad se mide con y sin administración de los medicamentos probados. Un número de medicamentos, tal como esteroides e inmunosupresores, son activos en desacelerar el inicio de la enfermedad pero no son capaces de prevenir la reincidencia una vez la enfermedad se establece.

El modelo de reincidencia crónica de encefalomielitis alérgica inducida experimentalmente (CR-EAE) [Feürer, et al., J. NEUROIMMUNOL: 10 (1985) 159-166] es en consecuencia considerado un modelo severo particularmente que imita con detalle las dificultades actuales en el tratamiento esclerosis múltiple a pacientes quienes tienen establecida la enfermedad. En este modelo, la enfermedad se induce por la inyección de una mezcla de médula espinal de cerdo de guinea y adyuvante de Freund completo enriquecido con Mycobacterium tuberculosis. Típicamente el 75 - 80% de las ratas sensibilizadas desarrollaron un CR-EAE mostrando 2 - 3 reincidencias clínicas durante los primeros 40 días. Después de 60 - 80 días, aproximadamente el 50% de las ratas con CR-EAE tienen una reincidencia adicional que es seguida por recuperación completa en únicamente el 35% de todos los casos. El 65% remanente de estos animales muestran un estado progresivo de la enfermedad. El tratamiento con el medicamento inicia en el día 16, después de la recuperación del primer ataque de la enfermedad.

La interleucina 6 recombinante humana (rh IL-6, Sandoz) disuelta en salina se inyectó vía i.p. todo el segundo día iniciando el día 16 empleando 10 microgramos de la IL-6 por rata (ca. 50 \mug/kg). Animales control y animales en el grupo IL-6 tienen el ataque de la enfermedad severa usual (aguda) a 11-14 días. Sobre una escala de severidad desde 0 = no enfermedad a 4 = completa parálisis del animal, el grupo control promedio 3.0 y el grupo IL-6 promedio 3.2. La aplicación de la IL-6 cada segundo día desde el día 16 al día 30 (en total 7 aplicaciones) resulta en una casi completa inhibición de la enfermedad. Únicamente una entre 5 de las ratas tratadas con IL-6 mostró un segundo ataque de la enfermedad leve (severidad 0.4). Cinco entre 5 animales control tienen un segundo ataque de la enfermedad con una evaluación de la severidad media de 1.8 después del día 16, y un tercer ataque de la enfermedad en los días 22 - 29. Ninguna otra recaída se observó en el grupo tratado con IL-6.

Ejemplo 30

Modelo animal para artritis: Artritis inducida por Borrelia en ratones de inmunodeficiencia combinada severa (SCID)

Artritis Lyme (artritis o enfermedad de Lyme) representa una forma única de artritis crónica porque la iniciación del evento es conocido con certeza. La enfermedad es una de las características prominentes inducidas por la infección con la Borrelia burgdorferi, espiroqueta gruesa. Las características de lesiones sinoviales en pacientes con artritis de Lyme se parecen estrechamente a aquellos en la membrana sinovial de pacientes con artritis reumatoide. En ambos grupos de pacientes pueden observarse, hipertrofia celular de recubrimiento sinovial, hiperplasia celular sinovial, proliferación vascular e infiltración de células mononucleares en las áreas de recubrimiento subsinovial. Muchas células del plasma, endotelio venoso alto, macrófago disperso y células dendríticas pequeñas se encuentran con presentación intensa de antígeno clase II MHC. Además, las citoquinas, tales como IL-1, IL-6 y 1'NF-alfa han sido detectadas en fluido sinovial a partir de los pacientes con varias artritis, sugiriendo que estas citoquinas pueden contribuir a la patogénesis de la destrucción común. Recientemente, un modelo de ratón para artritis Lyme ha sido desarrollado en ratones SCID que carecen de células funcionales T y B (M. M. Simon, et al. (1991) Immunology Today 12:11). La infección de los ratones inmunodeficientes con Borrelia burgdorferi dirige a una prominente y persistente oligoartritis. La artritis Inducida por Borrelia en ratones SCID responde a corticosteroides (prednisolona 30 mg/kg sc) pero no a agentes similares inmunosupresivos SIM (ciclosporina A) hasta la dosis de 30 mg/kg s.c. Se considera un buen modelo para artritis citoquina-conducida, incluyendo otros tipos de artritis por lo que el evento de iniciación no se conoce con certeza.

Ratones de seis semanas de vida C.B-17 SCID (homocigóticos para la mutación SCID, obtenidos de Bomholtgard, Dinamarca, grupos de animales 5-6) se inocularon con 100 mio. De organismos de Borrelia burgdorferi por inyección en la base de la cola s.c. Ratones Inmunocompetentes C.B-17 (de la misma fuente) se utilizaron como animales control. Ellos no desarrollaron ninguna enfermedad bajo la inyección de Borrelia burgdorferi. La IL-6 recombinante humana (rhIL-6, Sandoz, stock sol. 5 mg/ml) se diluyó con solución salina fisiológica y se dio 5 veces por semana para un total de 17 inyecciones a una dosis de 10 microgramos/ratón i.p. Los ratones se monitorearon diariamente en manera cegada por señales clínicas de artritis en el tibiotarsal y articulaciones ulnacarpal. La artritis clínica se apunta de acuerdo con los siguientes parámetros:

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: - sin signos

: ? signos cuestionable

: (+) enrojecimiento de articulaciones

: + leve hinchazón

: ++ moderado hinchazón

: +++ severa hinchazón de las articulaciones tibiotarsal y ulnacarpal.

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En el pico de la artritis clínica, los ratones se sacrificaron y las articulaciones de fijaron en la solución de Schaffer, se incrustaron en plástico 9100 y se tiñeron con eosina hematoxilina.

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Grupo	Signos clínicos (número de articulaciones inflamadas/total) en los días

	13	14	15	16	17	20
Control	0/30	0/30	0/30	0/30	0/30	0/30
	13	14	15	16	17	20
SCID, no IL-6	6.5/36	12.5/36	15/36	21/36	30/36	35/36
% p. artrit.	18%	35%	42%	58%	83%	97%
SCID, IL-6 tratada	4/30	3.5/30	11/30	7.5/30	12/30	10.5/30
% p. artrit.	13%	12%	37%	25%	40%	35%

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Los ratones SCID que no se trataron con IL-6 desarrollaron artritis severa debida a la infección con Borrelia burgdorferi iniciando alrededor del día 13 después de la inyección del antígeno. Una dosis baja de rh IL-6 reduce la severidad de la artritis por una media de 60 - 75% en todos los animales afligidos.

Ejemplo 31

Modelo de murina para choque séptico

Se decidió investigar los efectos de la IL-6 en el modelo de choque endotóxico de ratón utilizando ratones sensibilizados con d-galactosamina, dado que este es empleado como un modelo para choque séptico. Nuestros métodos y resultados son como sigue:

Ratones hembra OF1 con pesos de 18-22 g, se estimularon con una inyección i.p. de 0.2 ml de una solución de PBS que contiene 0.15 mg/kg de endotoxina lipopolisa

acárido (LPS) y 500 mg/kg de d-galactosamina. Los ratones se dividieron en grupos de 10 ratones cada uno y se trataron como sigue:

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Experimento 1

Tiempo	11:00	14:00	16:00
Grupo 1:	PBS	LPS + d-GAL	PBS
Grupo 2:	ImH sHL-6 (50 \mug)	LPS + d-GAL	PBS
Grupo 3:	PBS	LPS + d-GAL + IL-6 (50 \mug)	PBS
Grupo 4:	PBS	LPS + d-GAL	IL-5 (50 \mug)

Experimento 2

Tiempo	11:00	14:00	16:00
Grupo 1:	PBS	LPS + d-GAL	PBS
Grupo 2:	IL-6 (100 \mug)	LPS + d-GAL	PBS
Grupo 3:	PBS	LPS + D-GAL + IL-6 (100 \mug)	PBS
Grupo 4:	PBS	LPS + d-GAL + IL-6 (20 \mug)	PBS
Grupo 5:	PBS	LPS + d-GAL + IL-6 (5 \mug)	PBS
Grupo 6:	PBS	LPS + d-GAL + IL-6 (0.8 \mug)	PBS
Grupo 7:	PBS	LPS + d-GAL + IL-2 (100 \mug)	PBS
Grupo 8:	PBS	LPS + d-GAL + IL-4 (50 \mug)	PBS
Grupo 9:	PBS	LPS + d-GAL	IL-6 (100 \mug)

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rhIL-6 (IL, S 969, Sandoz), rhIL-2 (Sandoz) y rhIL-4 (Sandoz) se diluyeron en PBS. Todas las inyecciones (0.2 ml volumen) se hicieron vía intraperitoneal. En 3 grupos (exp. 1) y grupos 3 a 8 (exp. 2) IL-6 y IL-2 se diluyeron en la solución de LPS/d-GAL así que los ratones recibieron una sola inyección de 0.2 ml. Los números en paréntesis indican la dosis de interleucina dada a cada ratón. La dosificación múltiple de PBS se requirió para controlar la variabilidad de inter-grupo debida al estrés inducida por las respuestas debido a la manipulación a diferentes veces antes o después de la estimulación con LPS.

La supervivencia del ratón se observa por 48 horas. Para el cálculo estadístico, nosotros usamos la prueba del Chi cuadrado. Después de 24 horas a partir de la estimulación con LPS, 9 hasta 10 ratones control murieron. Con el tratamiento de IL-6 3 horas antes de la inyección LPS o 2 horas después de LPS después de la inyección LPS, reduce la mortalidad respectivamente al 60% (p = 0.12) y 70% (p = 0.26). Por otro lado, la IL-6 dada al tiempo con la estimulación de LPS, reduce la mortalidad del grupo al 10% (p< 0.01). Los efectos protectores fueron duraderos por mucho tiempo, dado que después de 48 horas la mortalidad en el grupo 3 incremento ligeramente, i.e. al 30%, indicando aún una protección significantemente alta respecto al grupo control (p<0.01). La mortalidad del grupo 4 pasó de 70% a 80%, mientras se observaron cambios en los grupos 1 y 2.

Basado en estos resultados, nosotros probamos el efecto de IL-6 a diferentes dosis. Nosotros administramos el IL-6 al tiempo con la inyección de LPS, dado que de acuerdo con el primer experimento este fue el tiempo óptimo. Nosotros exploramos adicionalmente el efecto de IL-2 y IL-4 dado a la vez con el LPS como una manera de excluir los posibles artefactos debidos al uso de proteínas recombinantes en la preparación LPS/d-GAL. También nosotros probamos si la IL-6 fue efectiva en la protección de los ratones de la muerte endotóxica a una dosis de 100 Pg/ratón dado antes o después del LPS.

Los resultados del experimento 2 están en línea con aquellos del experimento 1. También en este experimento, el tratamiento con IL-6 protegió los ratones de la muerte endotóxica. Cuando la IL-6 se dio junto con LPS, la protección resultante 24 horas después del LPS se dosifica dependiendo de la dosis de 20 (30% de muertes, p = 0.03), 4 (50% de muertes, p = 0.16) y 0.8 (70% de muertes, p = 0.61) Pg/ratón, mientras que a la dosis de 100 Pg/ratón (60% de muertes, p = 33) los ratones se protegieron menos eficientemente que a una dosis de 20 Pg/ratón. Pre- o post-tratamiento con 100 Pg IL-6/ratón resulta una protección comparable con la observada cuando la misma dosis de IL-6 se da junto con LPS. Resultados similares de supervivencia de ratones se obtienen 48 horas después del LPS.

La IL-4 dada a la vez con la estimulación con LPS no fue efectiva en la protección de ratones de la muerte endotóxica, mientras que la IL-2 disminuye la supervivencia del ratón.

Claims

1. Un polímero biodegradable que comprende las unidades del carbonato de etileno de la fórmula A

A-(-C(O)-O-CH_{2}CH_{2}-O-)-

y que tiene un contenido de carbonato de etileno de 70 a 100% Mol, una viscosidad intrínseca de 0.4 a 4.0 dl/g medidos en cloroformo a 20°C, y una temperatura de transición del estado vítreo desde 15 a 50°C y que tiene un peso molecular (Pm) de 200,000 a 2,000,000, determinado por cromatografía por permeación sobre gel, con cloruro de metileno como el eluente y poliestireno como la referencia con la condición de que se excluye el polímero que tiene peso molecular (Pm) de 200,000.

2. Un polímero de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que tiene un contenido de carbonato de etileno de 90 - 100% Mol.

3. Un polímero de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que tiene un viscosidad inherente de 0.4 - 3.0 dl/g, medida a una concentración de 1 g/dl en cloroformo a 20°C.

4. Un polímero de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que tiene una temperatura de transición del estado vítreo de 18 a 50°C.

5. Un polímero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene un grupo hidroxilo como un grupo terminal polímero.

6. Un proceso para la producción del polímero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en las que el óxido de etileno y el CO_{2} son polimerizados en un relación molar desde 1:4 a 1:5 bajo la influencia de un catalizador preparado de Zn(C_{2}H_{5})_{2} y un solvente seleccionado del grupo que consiste de agua, acetona, un diol y un di- o trifenol en donde la relación molar de Zn(C_{2}H_{5})_{2} a agua, acetona o diol es desde 0.9:1 a 1:0.9 y la relación molar de Zn(C_{2}H_{5})_{2} al di- o trifenol es desde 2:1 a 1:2.

7. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 6 en el que un catalizador empleado se prepara a partir de Zn(C_{2}H_{5})_{2}
y etilenglicol.

8. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 6, en el que un catalizador empleado se prepara a partir de
Zn(C_{2}H_{5})_{2} y floroglucina.

9. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, realizadas en un solvente o sistema de agente dispersante de un solvente orgánico y CO_{2}.

10. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, realizadas bajo una presión de 20 a 70 bares y a una temperatura de 10 a 80°C.

11. Una composición farmacéutica que contiene un polímero de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones de 1 a 5.

12. Una composición farmacéutica de la reivindicación 11 que contiene un atrapador de radical en o sobre el polímero.

13. Una composición farmacéutica de las reivindicaciones 11 ó 12 que contienen una proteína activa o un péptido.

14. Una composición farmacéutica de la reivindicación 13 que contiene una proteína activa o péptido elegido entre citoquinas, interleucinas, G-CSF, M-CSF, GM-CSF o LIF, interferones, eritroproetínas, ciclosporinas, o hormonas, o sus análogos, o el octreótido.

15. Una composición farmacéutica de la reivindicación 14 que contiene GM-CSF.

16. Una composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15 en una forma implantable.

17. Una composición farmacéutica de cualquiera de las reivindicaciones 11 a 15 en forma de micropartícula.