EA032075B1 - Производные аминопиразина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы - Google Patents

Производные аминопиразина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы Download PDF

Info

Publication number
EA032075B1
EA032075B1 EA201692143A EA201692143A EA032075B1 EA 032075 B1 EA032075 B1 EA 032075B1 EA 201692143 A EA201692143 A EA 201692143A EA 201692143 A EA201692143 A EA 201692143A EA 032075 B1 EA032075 B1 EA 032075B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
amino
pyrazin
methyl
hydroxy
triazol
Prior art date
Application number
EA201692143A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201692143A1 (ru
Inventor
Бенджамин Ричард Беллини
Грэм Чарльз Блумфилд
Ян Брюс
Эндрю Джеймс Калшо
Эдвард Чарльз Холл
Грегори Холлингворт
Джеймс Ниф
Мэттью Спендифф
Саймон Джеймс Уотсон
Original Assignee
Новартис Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Новартис Аг filed Critical Новартис Аг
Publication of EA201692143A1 publication Critical patent/EA201692143A1/ru
Publication of EA032075B1 publication Critical patent/EA032075B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

В данном изобретении представлены соединения формулы (I)которые ингибируют активность гамма-изоформы ФИ-3-киназы, которые применяют для лечения заболеваний, медиированных активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы.

Description

Данное изобретение включает все такие возможные стереоизомеры, включая рацемические смеси, диастереомерные смеси и оптически чистые формы. Оптически активные (К)- и (8)-изомеры могут быть получены с применением хиральных синтонов или хиральных реагентов, или разделены с применением обычных методов. Если соединение содержит двойную связь, заместитель может быть в Е или Ζ конфигурации. Если соединение содержит дизамещенный циклоалкил, циклоалкильный заместитель может иметь цис- или транс-конфигурацию. Все таутомерные формы также включены.
Любые полученные смеси изомеров могут быть разделены на основе физико-химических различий составляющих на чистые или практически чистые геометрические или оптические изомеры, диастеореомеры, рацематы, например, хроматографией и/или фракционной кристаллизацией.
Любые полученные рацематы конечных продуктов или промежуточных соединений могут быть разделены на оптические антиподы известными методами, например, разделением их диастереомерных солей, полученных с оптически активной кислотой или основанием, и освобождением оптически активного кислого или основного соединения. В частности, основная группа может применяться для разделения соединений в соответствии с данным изобретением на их оптические антиподы, например, фракционной кристаллизацией соли, полученной с оптически активной кислотой, например, винной кислотой, дибензоилвинной кислотой, диацетилвинной кислотой, ди-О,О'-р-толуоилвинной кислотой, миндальной кислотой, яблочной кислотой или камфор-10-сульфоновой кислотой. Рацемические продукты также мо
- 61 032075 гут быть разделены хиральной хроматографией, например, жидкостной хроматографией высокого давления (ЖХВД) с применением хирального адсорбента.
Более того, соединения в соответствии с данным изобретением, включая их соли, также могут быть получены в форме их гидратов, или включают другие растворители, применяемые для их кристаллизации. Соединения в соответствии с данным изобретением могут по своей природе или принудительно образовывать сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями (включая воду); поэтому подразумевается, что данное изобретение охватывает сольватированные и не сольватированные формы. Термин сольват относится к молекулярному комплексу соединения в соответствии с данным изобретением (включая его фармацевтически приемлемые соли) с одной или более молекулами растворителя. Такие молекулы растворителя включают такие, которые обычно применяют в области фармацевтики, и которые известны как безвредные для реципиента, например, воду, этанол и подобные. Термин гидрат относится к комплексу, в котором молекулой растворителя является вода.
Соединения в соответствии с данным изобретением, включая их соли, гидраты и сольваты, могут по своей природе или принудительно образовывать полиморфы.
В данном описании термины соль или соли относятся к кислотно-аддитивной или основноаддитивной соли соединения в соответствии с данным изобретением. Соли включают, в частности, фармацевтически приемлемые соли. Термин фармацевтически приемлемые соли относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений в соответствии с данным изобретением, которые обычно не являются биологически или другим образом нежелательными. Во многих случаях соединения в соответствии с данным изобретением способны образовывать соли кислоты и/или основания в присутствии амино и/или карбоксильных групп или подобных им групп.
Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть образованы с неорганическими кислотами и органическими кислотами, например, ацетат, аспартат, бензоат, безилат, бромид/гидробромид, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, камфорсульфонат, хлорид/гидрохлорид, хлортеофиллонат, цитрат, этандисульфонат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат, гиппурат, гидройодид/йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, миндалят, мезилат, метилсульфат, нафтоат, напсилат, никотинат, нитрат, октадеканоат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидрофосфат/дигидрофосфат, полигалактуронат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфосалицилат, тартрат, тозилат и трифторацетат.
Неорганические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и подобные.
Органические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, толуолсульфоновую кислоту, сульфосалициловую кислоту и подобные. Фармацевтически приемлемые основноаддитивные соли могут быть получены с неорганическими и органическими основаниями.
Неорганические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, соли аммония и металлов из столбцов I-XII периодической таблицы. В определенных вариантах, соли получают из натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, серебра, цинка и меди; в частности, подходящие соли включают соли аммония, калия, натрия, кальция и магния.
Органические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины, щелочные ионообменные смолы и подобные. Определенные органические амины включают изопропиламин, бензатин, холинат, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и трометамин.
Фармацевтически приемлемые соли в соответствии с данным изобретением могут быть синтезированы из щелочной или кислотной группы, обычными химическими методами. Обычно такие соли могут быть получены взаимодействием свободной кислоты этих соединений со стехиометрическим количеством подходящего основания (такого как гидроксид, карбонат, бикарбонат Ыа, Са, Мд или К или подобные), или взаимодействием свободных оснований этих соединений со стехиометрически количеством подходящей кислоты.
Такие реакции обычно проводят в воде или в органическом растворителе или в смеси их двух. Обычно желательно применение не водной среды, такой как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил, где это применимо. Списки дополнительных подходящих солей могут быть найдены, например, в КеттдЮп'к Р11агтасеиНса1 8с1епсек, 20111 еб.. Маск РиЬНкЫпд Сотрапу, ЕакЮп, Ра. (1985); и в НапбЬоок о£ РБагтасеи!1са1 8а1!к: РгорегИек, 8е1ес!юп, апб Ике Ьу 81аН1 апб \Уетш111 (УНеуУСН, Уешйе1т, Сегтапу, 2002).
Любая указанная здесь формула представляет не меченные формы и изотопно меченные формы соединений в соответствии с данным изобретением. Изотопно меченные соединения имеют структуры, изображенные на формулах, представленных здесь, за исключением того, что один или более атомов
- 62 032075 замещены атомом, имеющим выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть введены в соединения в соответствии с данным изобретением, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как Н, Н, С, С, С, Ν, Р Ρ, Ρ, 358, 36С1, 12Э соответственно. Изобретение включает различные изотопно меченные соединения в соответствии с данным изобретением, например такие, в которых присутствуют радиоактивные изотопы, такие как 3Н и 14С, или такие, в которых присутствуют не радиоактивные изотопы, такие как 2Н и 13С. Такие изотопно меченные соединения применяют в метаболических исследованиях (с 14С), исследованиях кинетики реакции (например, с 2Н или 3Н), в методиках определения и получения изображений, таких как позитронная эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), включая исследования распределения лекарственного средства или субстрата в ткани, или в радиоактивном лечении пациентов. В частности, 18Р меченное соединение в соответствии с данным изобретением может быть, в частности, желательно для исследований ПЭТ или ОФЭКТ. Изотопно меченные соединения в соответствии с данным изобретением обычно могут быть получены обычными методами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными тем, кото рые описаны в прилагаемых примерах и примерах получения с применением подходящего изотопно меченного реагента вместо не меченного реагента, применяемого ранее.
Далее, замещение более тяжелыми изотопами, в частности, дейтерием (т.е. 2Н или Ό), может дать определенные терапевтические преимущества, получаемые из большей метаболической стабильности, например, увеличенного периода полувыведения ίη νΐνο или пониженной дозы, или улучшения терапевтического индекса. Понятно, что дейтерий в этом контексте считается заместителем соединения в соответствии с данным изобретением. Концентрация такого более тяжелого изотопа, в частности, дейтерия, может быть определена через коэффициент изотопного обогащения. Термин коэффициент изотопного обогащения в данном описании означает отношение между изотопным изобилием и распространенностью в природе определенного изотопа. Если заместителем в соединении в соответствии с данным изобретением является дейтерий, такое соединение имеет коэффициент изотопного обогащения для каждого обозначенного атома дейтерии по крайней мере 3500 (52,5% введение дейтерия на каждом обозначенном атоме дейтерия), по крайней мере 4000 (60% введение дейтерия), по крайней мере 4500 (67,5% введение дейтерия), по крайней мере 5000 (75% введение дейтерия), по крайней мере 5500 (82,5% введение дейтерия), по крайней мере 6000 (90% введение дейтерия), по крайней мере 6333,3 (95% введение дейтерия), по крайней мере 6466,7 (97% введение дейтерия), по крайней мере 6600 (99% введение дейтерия) или по крайней мере 6633,3 (99,5% введение дейтерия).
Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с данным изобретением включают такие, где растворитель кристаллизации может быть замещен изотопами, например, Э2О, б6-ацетон, б6-ДМСО.
Соединения в соответствии с данным изобретением, которые содержат группы, способные действовать в качестве доноров и/или акцепторов для водородных связей, могут быть способны образовывать со-кристаллы с подходящими образователями со-кристаллов. Такие со-кристаллы могут быть получены из соединений в соответствии с данным изобретением известными методами получения со-кристалла. Такие методы включают измельчение, нагревание, совместную сублимацию, совместное плавление или взаимодействие в растворе соединений в соответствии с данным изобретением и образователем сокристалла в условиях кристаллизации, и выделение полученных со-кристаллов. Подходящие образователи со-кристаллов включают такие, которые описаны в АО 2004/078163. Следовательно, в изобретении далее представлены со-кристаллы, содержащие соединение в соответствии с данным изобретением.
Соединения в соответствии с данным изобретением являются мощными ингибиторами гаммаизоформы ФИ-3-киназы. Это показано в табл. 4, анализ Е. Более и важнее того, соединения в соответствии с данным изобретением являются селективными к гамма-изоформе ФИ-3-киназы по сравнению с другим классом 1 изоформ ФИ-3-киназы, альфа, бета и дельта, которые показаны в табл. 4, анализы А, В и Р, и по сравнению с родственными жировыми киназами Урз34 и бета ФИ 4-киназа, которые показаны в табл. 4, анализы С и Ό, и также по сравнению с родственными ФИ-3-киназе протеинкиназами, такими как мМРК (табл. 4, анализ С). Селективность к гамма-изоформе ФИ-3-киназы предпочтительно для того, чтобы избежать возможных нежелательных побочных эффектов при лечении пациентов. В частности, селективность к гамма-изоформе ФИ-3-киназы по сравнению с альфа-изоформой ФИ-3-киназы предпочтительна, так как альфа-изоформа ФИ-3-киназы широко экспрессируется в теле и является важной для сигнального пути рецептора инсулина.
Целевой фермент соединений в соответствии с данным изобретением, т.е. гамма-изоформа ФИ-3киназы, является внутриклеточной целью. Таким образом, соединения в соответствии с данным изобретением, которые сохраняют свою активность в клеточной среде, являются предпочтительными. Соединения в соответствии с данным изобретением были тестированы в клеточных анализах (см. табл. 5, анализы Н1, Н2, Π, Р2, Л, 12, К1 и К2). В анализах К1 и К2, соединения тестируют для определения их способности ингибировать образование фосфорилированной АКТ (протеинкиназы В), образованной в зависимом от гамма-изоформы ФИ-3-киназы процессе в колонии клеток человека И937Активность конкретного соединения в клеточном исследовании зависит от множества различных факторов, таких как мощность данного соединения в цели (см. табл. 4), растворимость соединения, ЬодР и проницаемость. Таким
- 63 032075 образом, хорошая клеточная активность соединений в соответствии с данным изобретением обуславливается сочетанием структурных характеристик, дающим хороший общий баланс молекулярных свойств. В общем, предпочтительные соединения в соответствии с данным изобретением обладают высокой мощностью в цели (см. табл. 4) и показывают хорошую активность в клеточных исследованиях (табл. 5).
Для эффективного ингибирования целевой гамма-изоформы ФИ-3-киназы (присутствует в лейкоцитах) в ίη νίνο системе предпочтительно, чтобы лекарственное соединение обладало достаточной активностью в цельной крови. Следовательно, соединения в соответствии с данным изобретением тестировали для определения их способности ингибировать изменение формы нейтрофила в ответ на хемотактический фактор интерлейкин-8 (1Ь-8), который является зависимым от гамма-изоформы ФИ-3-киназы, в цельной крови человека (табл. 5, анализ Ь). Активность в цельной крови зависит от дополнительных факторов, таких как связывание с белками плазмы и стабильности кокнретного соединения в плазме. Предпочтительные соединения в соответствии с данным изобретением обладают, кроме мощности в целевой гамма-изоформе ФИ-3-киназы (табл. 4) и достаточной клеточной мощности (табл. 5), также достаточной активностью в цельной крови человека, что протестировано в анализе Ь. Более предпочтительно, соединения в соответствии с данным изобретением имеют значения 1С50 в анализе цельной крови человека <1 мкМ.
Дополнительно к целевой мощности (табл. 4, анализ Е), селективности (табл. 4, анализы А, В, С, Ό, Б и С), активности в клеточных анализах (табл. 5, анализы Н1, Н2, 11, 12, Л, 12, К1 и К2) и анализе цельной крови человека (табл. 5, анализ Ь), требуется сохранение достаточной концентрации лекарственного средства ίη νίνο после перорального введения для ингибирования цели. Такие фармакокинетические свойства зависят от множества факторов, таких как ЬодР, проницаемость, растворимость в воде и стабильность к окислительному метаболизму. Соединения в соответствии с данным изобретением тестируют для определения стабильности к окислительному метаболизму с применением ίη νίίτο анализа микросомальной стабильности (табл. 5, анализ М). Предпочтительные соединения в соответствии с данным изобретением демонстрируют достаточную стабильность в таком анализе микросом печени. Более того, предпочтительные соединения в соответствии с данным изобретением также обладают достаточной растворимостью в воде.
Таким образом, соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться для лечения состояний, медиированных активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы, в частности, воспалительных или аллергических заболеваний.
Соединения в соответствии с данным изобретением применяют для лечения воспалительных или обструктивных заболеваний дыхательных путей, с получением, например, снижения повреждения ткани, воспаления дыхательных путей, бронхиальной гиперреактивности, ремоделирования или развития заболевания. Воспалительные или обструктивные заболевания дыхательных путей, к которым применимо данное изобретение, включают астму любого типа или генезиса, включая наследственную (не аллергическую) бронхиальную астму и приобретенную (аллергическую) бронхиальную астму, легкую астму, умеренную астму, тяжелую астму, бронхит, астму, вызванную физической нагрузкой, профессиональную астму и астму, вызванную бактериальной инфекцией. Лечение астмы также включает лечение пациентов, например, в возрасте менее 4 или 5 лет, демонстрирующих симптомы бронхо-обструктивного синдрома, которым уже поставлен или ставится диагноз бронхит новорожденных, установленной категории пациентов, требующих особого медицинского подхода, и в настоящее время часто идентифицируемых как начинающие астматики или астматики, находящиеся на ранее фазе заболевания (для удобства это конкретное астматическое состояние называют синдром бронхита новорожденных).
Профилактическая эффективность в лечении астмы подтверждается снижением частоты или тяжести симптоматической атаки, например, острой астматической или бронхосуживающей атаки, улучшением функционирования легких или улучшением гиперреактивности дыхательных путей. Она также может быть подтверждена снижением потребности в другой, симптоматической терапии, т.е. терапии, направленной на или предназначенной для ограничения или снятия симптоматической атаки, когда она возникает, например противовоспалительной (например, кортикостероидом) или бронходилалаторной. Профилактическая польза при астме, в частности, может быть очевидной у пациентов, расположенных к утреннему снижению кровяного давления. Утреннее снижение кровяного давления является признанным астматическим синдромом, характерным для значительного процента астматиков, и характеризуется астматической атакой, например, между 4 и 6 часами утра, т.е. в момент времени, обычно значительно дистанцированного от любой предварительной введенной симптоматической терапии астмы.
Другие воспалительные или обструктивные заболевания и состояния дыхательных путей, к которым применяется данное изобретение, включает острое повреждение легких (ОПЛ), острый респираторный дистресс синдром взрослых (ОРДС), хроническое обструктивное заболевание легких, дыхательных путей или легких (ХОБЛ, ХНДП или ОРВИ), включая хронический бронхит или связанную с ним одышку, эмфизему, а также обострение гиперреактивности дыхательных путей вследствие терапии другим лекарственным средством, в частности, терапии другим ингалируемым лекарственным средством. Изобретение также применяется к лечению бронхита любого типа или генезиса, включая, например, острый, арахиновый, катаральный, крупозный, хронический или гнойный туберкулезный бронхит. Другие воспа
- 64 032075 лительные или обструктивные заболевания дыхательных путей, к которым применяется данное изобретение, включают пневмокониоз (воспалительное, обычно профессиональное, заболевание легких, часто сопровождаемое обструкцией дыхательных путей, хронической или острой, и вызываемое неоднократным вдыханием пыли) любого типа или генезиса, включая, например, алюминоз, антракоз, асбестоз, халикоз, птилоз, сидероз, силикоз, табакоз и биссиноз.
Учитывая их противовоспалительное действие, в частности, в отношении ингибирования активации эозинофила, соединения в соответствии с данным изобретением также применяют в лечении расстройств, связанных с эозинофилами, например, эозинофилии, в частности, связанных с эозинофилом расстройств дыхательных путей (например, включающих патологическую инфильтрацию эозинофилов в ткани легких), включая гиперэозинофилию, поражающую дыхательные пути и/или легкие, а также, например, связанные с эозинофилами расстройства дыхательных путей, возникающие вследствие или одновременно с синдромом Лефлера, эозинофильную пневмонию, заражение паразитами (в частности, многоклеточными) (включая тропическую эозинофилию), бронхолегочный аспергиллоз, нодозный полиартериит (включая синдром Чурга-Страусса), эозинофильную гранулему и связанные с эозинофилами заболевания, поражающие дыхательные пути, вызванные реакцией на лекарственные средства.
Соединения в соответствии с данным изобретением также применяют для лечения воспалительных или аллергических состояний кожи, например, псориаза, контактного дерматита, атопического дерматита, гнездной алопеции, мультиформной эритемы, герпетиформного дерматита, витилиго, аллергического васкулита, крапивницы, буллезного пемфигоида, красной волчанки, пузырчатки, приобретенного буллезного эпидермолиза и других воспалительных или аллергических состояний кожи.
Соединения в соответствии с данным изобретением также могут применяться для лечения других заболеваний или состояний, в частности, заболеваний или состояний, имеющих воспалительный компонент, например, для лечения заболеваний или состояний глаз, таких как конъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит и весенний конъюнктивит, заболеваний, поражающих нос, включая аллергический ринит, и воспалительного заболевания, в котором аутоиммунные реакции вовлечены или имеют аутоиммунный компонент или этиологию, включая аутоиммунные гематологические расстройства (например, гемолитическую анемию, апластическую анемию, анемию красных кровяных телец и идиопатическую тромбоцитопению), системную красную волчанку, полихондрию, склеродому, гранулематоз Вегенера, дерматомиозит, хронический активный гепатит, миастению гравис, синдром Стивена-Джонсона, идиопатическую целиакию, аутоиммунное воспалительное заболевание толстой кишки (например, язвенный колит и болезнь Крона), эндокринную офтальмологию, болезнь Грейвса, саркоидоз, альвеолит, хронический гиперчувствительный пневмонит, рассеянный склероз, лейшманиоз, первичный билиарный цирроз, увеит (передний и задний), сухой кератоконъюнктивит, интерстициальный фиброз легких, псориазный артрит и гломерулонефрит (с и без нефротического синдрома, например, включая идиопатический нефротический синдром или нефроматию с минальными изменениями).
Другие заболевания или состояния, которые могут лечиться соединениями в соответствии с данным изобретением, включают тромбоз, гипертонию, ишемическую болезнь сердца и панкреатит, (№11иге геνίο\ν Νον 2006 Уо1 5), лечение анемии, включая гемолитическую анемию, апластическую анемию и анемию красных кровяных телец (νθ 2006/040318), септический шок, ревматоидный артрит, остеоартрит, пролиферативные заболевания, такие как рак, атеросклероз, отторжение трансплантата после трансплантации, удар, ожирение, рестеноз, диабет, например, сахарный диабет I типа (юношеский диабет) и сахарный диабет II типа, острые кишечные инфекции, ишемические/реперфузионные повреждения, ретинопатию, такую как диабетическую ретинопатию или ретинопатию, вызванную кислородом под повышенным давлением, и состояния, характеризуемые повышенным внутриглазным давлением или секрецией внутриглазной жидкости, такие как глаукома.
Агенты в соответствии с данным изобретением могут применяться в лечении или профилактике сердечной недостаточности, такой как (острая и хроническая) застойная сердечная недостаточность, дисфункции левого желудочка, включая ухудшенную сердечную сократимость, гипертрофическую кардиомиопатию, диабетическую кардиомиопатию и другие типы, разрушающие дисфункции сердца и ремоделирование.
Соединения в соответствии с данным изобретением также могут применяться в лечении висцеральных расстройств, воспалительной болезни толстой кишки, воспалительного расстройства толстой кишки, цистита, например, интерстициального цистита и недержания мочи, включая гиперрефлексию детрузора мочевого пузыря и гиперчувствительность мочевого пузыря.
Эффективность агента в соответствии с данным изобретением в ингибировании воспалительных заболеваний, например, воспалительных заболеваний дыхательных путей, может быть продемонстрирована на животной модели, например, на мышиной или крысиной модели воспаления дыхательных путей или других воспалительных состояний, например, как описано у Зхагка е! а1., 1. Iттиηο1. МеШоШ (1997), 202:49-57; Веп/ί е! а1., Ат. Веν. Векрп. Όίδ. (1993), 148:932-939; Ткиуикг е! а1., 1. С1т. [пгеН. (1995), 96:2924-2931; и Сегпайак е! а1. (1999), Ат. 1. Ве§р1г. Се11 Мо1. Вю1. 20:1-8.
Соединения в соответствии с данным изобретением также применяют с качестве сотерапевтических агентов для применения в сочетании с ингибиторами дельта ФИ-3-киназы, например,
- 65 032075 при аллергической астме или иммуно-медиированных воспалительных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит или рассеянный склероз. Такое действие потенциально может быть достигнуто совместным введением селективного ингибитора гамма-изоформы ФИ-3-киназы с селективным ингибитором дельта-изоформы ФИ-3-киназы.
Соединения в соответствии с данным изобретением также применяют в качестве сотерапевтических агентов для применения в сочетании с другими лекарственными веществами, такими как противовоспалительные, бронходилататорные или антигистаминные лекарственные вещества, в частности, для лечения обструктивных или воспалительных заболеваний дыхательных путей, таких как указаны выше, например, в качестве потенциаторов терапевтический активности таких лекарственных средств, или в качестве средств снижения требуемой дозы или потенциальных побочных эффектов таких лекарственных средств. Агент в соответствии с данным изобретением может быть смешан с другим лекарственным веществом в фиксированной фармацевтической композиции, или он может вводиться отдельно, до, одновременно или после другого лекарственного вещества. Следовательно, изобретение включает сочетание агента в соответствии с данным изобретением, описанного выше, с противовоспалительным, бронходилататорным или антигистаминным лекарственным веществом, где указанный агент в соответствии с данным изобретением и указанное лекарственное вещество находятся в одной или разных фармацевтических композициях.
Применяемые сочетания ингибиторов ФИ-3-киназы с противовоспалительными лекарственными средствами включают сочетания с антагонистами рецепторов хемокина, например, антагонистов ССК-1, ССК-2, ССК-3, ССК-4, ССК-5, ССК-6, ССК-7, ССК-8, ССК-9 и ССК10, СХСК1, СХСК2, СХСК3, СХСК4, СХСК5, в частности, ССК-5, таких как антагонисты 8сЬегтд-Р1оидЬ 8С-351125, 8СН-55700 и 8СН-О; антагонисты Такеда, такие как хлорид К-[[4-[[[6,7-дигидро-2-(4-метилфенил)-5Нбензоциклогептен-8-ил] карбонил] амино] фенил] метил] тетрагидро-Н/-диметил-2Н-пиран-4-аминия (ТАК-770); и антагонисты ССК-5, описанные в и8Р 6,166,037 (в частности, пункты 18 и 19), \О 00/66558 (в частности, пункт 8), \О 00/66559 (в частности, пункт 9), \О 04/018425 и \О 04/026873.
Подходящие противовоспалительные лекарственные средства включают стероиды, в частности, глюкокортикостероиды, такие как буденозид, бекламетазон дипропионат, флутиказон пропионат, циклезонид или мометазон фуроат, или стероиды, описанные в \О 02/88167, \О 02/12266, \О 02/100879, \\О 02/00679 (особенно из примеров 3, 11, 14, 17, 19, 26, 34, 37, 39, 51, 60, 67, 72, 73, 90, 99 и 101), \\О 03/35668, \О 03/48181, \О 03/62259, \О 03/64445, \О 03/72592, \О 04/39827 и \О 04/66920; не стероидные агонисты глюкокортикоидного рецептора, такие как описаны в ΏΕ 10261874, \О 00/00531, \О 02/10143, \О 03/82280, \О 03/82787, \О 03/86294, \О 03/104195, \О 03/101932, \О 04/05229, \О 04/18429, \О 04/19935 и \О 04/26248; антагонисты ЬТО4, такие как монтелюкаст и зафирлюкаст; ингибиторы ΡΏΕ4, такие как циломиласт (Апйо® О1ахо8ш11ЕК1те), рофлумиласт (Вук ОиШеп), У-11294А (Карр), ΒΑΥ19-8004 (Вауег), 8СН-351591 (8сЬеппд-Р1оидЬ), Аго(уШпе (А1ш1га11 РгодезГагша), Ρϋ189659/Ρϋ168787 (Рагке-Оау18), А\О-12-281 (Аз1а Мейса), СОС-801 (Се1депе), 8е1СГО(ТМ) СС10004 (Се1депе), УМ554/иМ565 (УегпаИз), Т-440 (ТапаЬе), К\-4490 (Куоиа Накко Кодуо), и те, которые описаны в \О 92/19594, \О 93/19749, \О 93/19750, \О 93/19751, \О 98/18796, \О 99/16766, \О 01/13953, \О 03/104204, \О 03/104205, \О 03/39544, \О 04/000814, \О 04/000839, \О 04/005258, \О 04/018450, \О 04/018451, \О 04/018457, \О 04/018465, \О 04/018431, \О 04/018449, \О 04/018450, \О 04/018451, \О 04/018457, \О 04/018465, \О 04/019944, \О 04/019945, \О 04/045607 и \О 04/037805; антагонисты аденозин А2В рецептора, такие как описаны в \О 02/42298; и агонисты бета-2 адренорецептора, такие как альбутерол (сальбутамол), метапротеренол, тербуталин, сальметерол фенотерол, прокатерол и, особенно, формотерол, кармотерол и их фармацевтически приемлемые соли, и соединения (в свободной форме, в форме соли или в сольватированной форме) формулы (I) из \О 0075114, который включен сюда в качестве ссылки, предпочтительно, соединения из представленных здесь примеров, особенно, соединение формулы
соответствующее индакатеролу, и его фармацевтически приемлемые соли, а также соединения (в свободной форме, в форме соли или в сольватированной форме) формулы (I) из \О 04/16601, и также соединения из ЕР 1440966, 1Р 05025045, \О 93/18007, \О 99/64035, ϋ8Ρ 2002/0055651, \О 01/42193, \О 01/83462, \О 02/66422, \О 02/70490, \О 02/76933, \О 03/24439, \О 03/42160, \О 03/42164, \О 03/72539, \О 03/91204, \О 03/99764, \О 04/16578, \О 04/22547, \О 04/32921, \О 04/33412, \О 04/37768, \О 04/37773, \О 04/37807, \О 04/39762, \О 04/39766, \О 04/45618, \О 04/46083, \О 04/80964, \О 04/108765 и \О 04/108676.
- 66 032075
Подходящие бронходилататорные лекарственные средства включают антихолинергические или антимускариновые агенты, в частности, ипратропий бромид, окситропий бромид, соли тиотропия и СНЕ 4226 (СЫе81), и гликопирролат, но также такие, как описаны в ЕР 424021, И8Р 3,714,357, И8Р 5,171,744, АО 01/04118, АО 02/00652, АО 02/51841, АО 02/53564, АО 03/00840, АО 03/33495, АО 03/53966, АО 03/87094, АО 04/018422 и АО 04/05285.
Подходящие двойные противовоспалительные и бронходилататорные лекарственные средства включают двойные антагонисты бета-2 адренорецептора/мускариновые антагонисты, такие как описаны в И8Р 2004/0167167, АО 04/74246 и АО 04/74812.
Подходящие антигистаминные лекарственные средства включают цетиризин гидрохлорид, ацетаминофен, клемастин фумарат, прометазин, лоратидин, дезлоратидин, дифенгидрамин и фексофенадин гидрохлорид, активастин, астемизол, азеластин, эбастин, эпинастин, мизоластин и тефенадин, а также те, которые описаны в 1Р 2004107299, АО 03/099807 и АО 04/026841.
Ингибиторы Р13 киназы, например, соединения в соответствии с данным изобретением, могут быть скомбинированы с блокатором рецептора ангиотензина, например, валсартаном (блокатором рецептора ангиотензина) и дают больший терапевтический эффект, чем введение только валсартана. Комбинированный режим также неожиданно снижает скорость развития повреждения сердца, почек и концевых церебральных органов. Сочетание дает улучшенный гипотензивный эффект (при злокачественной, эссенциальной, вазоренальной, диабетической, выделенной систолической или других вторичных гипертониях) и снижает пульсовое артериальное давление. Сочетание также эффективно при лечении суправентрикулярной и вентрикулярной аритмий, фибрилляции предсердий, трепетания предсердий или пагубного ремоделирования сосудов. Также может быть показано, что сочетание является благоприятным для лечения и профилактики инфаркта миокарда и его последствий, и применяется при лечении атеросклероза, стенокардии (стабильной или нестабильной), почечной недостаточности (диабетической и не диабетической), заболевания периферийных сосудов, дисфункции познавательной способности и удара. Более того, улучшение эндотелиальной функции при комбинированной терапии дает преимущество при заболеваниях, при которых нарушена нормальная эндотелиальная функция, таких как сердечная недостаточность, грудная ангина и диабет. Более того, сочетание может применяться для лечения или профилактики первичной и вторичной легочной гипертонии, состояний почечной недостаточности, таких как диабетическая нефропатия, гломерулонефрит, склеродерма, гломерулосклероз, протеинурия при первичном заболевании почек, а также сосудистая гипертония почек, диабетическая ретинопатия, управления другими сосудистыми расстройствами, такими как мигрень, болезнь периферических сосудов, болезнь Рейно, люминальная гиперплазия, познавательная дисфункция (такая как болезнь Альцгеймера), глаукома и удар.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться для лечения заболеваний или расстройств, медиированных взаимодействием лимфоцитов, например, при трансплантации, таких как острое или хроническое отторжение алло- или ксенотрансплантатов клеток, ткани или органа, или отсроченная функция трансплантата, заболевание трансплатат против хозяина, аутоиммунные заболевания, например, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, болезнь Хашимото, рассеянный склероз, миастения гравис, диабет I или II типа и расстройства, связанные с ним, васкулит, пернициозная анемия, синдром Съоргена, увеит, офтальмопатия Грейвса, гнездная алопеция и другие, воспалительные заболевания, необязательно с базовыми аберрантными реакциями, например, воспалительные заболевания кишечника, болезнь Крона или язвенный колит, наследственная бронхиальная астма, воспалительное повреждение легких, воспалительное поражение печени, воспалительное повреждение гломерулярного фильтра, атеросклероз, остеоартрит и другие экзематозные дерматиты, себорейный дерматит, кожные проявления иммуно-медированных расстройств, воспалительные заболевания глаз, миокардит или гепатит, ишемия кишечника, травматический шок, рак, например, рак молочной железы, Т-клеточные лимфомы или лейкоз Т-клеток, инфекционные заболевания, например, токсический шок (например, индуцированный суперантигеном), септический шок, респираторный дистресс-синдром у взрослых или вирусные инфекции, например, СПИД, вирусный гепатит, хронический бактериальная инфекция или старческое слабоумие. Примеры трансплантатов клеток, тканей или твердых органов включают в себя, например панкреатические островки, стволовые клетки, костный мозг, ткани роговицы, нейронную ткань, сердце, легкое, комбинированный аппарат сердце-легкое, почки, печень, толстый кишечник, поджелудочную железу, трахею или пищевод.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут вводиться, например, в сочетании с адъювантом, другими лекарственным средствами, иммунодепрессивными или иммуномодулирующими агентами или другими противовоспалительными агентами, например, для лечения или профилактики острого или хронического отторжения алло- или ксенотрансплантата или воспалительных или аутоиммунных расстройств. Например, соединения формулы I могут применяться в сочетании с ингибитором кальцинейрина, например, циклоспорином А или ЕК 506; ингибитором мМРК, например, рапамицином, 40-О-(2-гидроксиэтил)рапамицином, ССИ79, АВТ578, АР23573, биолимус-7 или биолимус-9; аскомицином, имеющим иммунодепрессивные свойства, например, АВТ-281 или Ά8Μ981; кортикостероидами; циклофосфамидом; азатиопреном; метотрексатом; лефлуномидом; мизорибином; микофенольной кисло- 67 032075 той или солью; микофенолатом мофетилом; 15-деоксиспергуалином или его иммунодепрессивным гомологом, аналогом или производным; ингибитором РКС, например, описанным в АО 02/38561 или АО 03/82859, например, соединением из примера 56 или 70; ингибитором 1ЛК3 киназы, например, α-циано(3,4-дигидрокси)-№бензилциннамамидом №бензил-3,4-дигидроксибензилцденцианоацетамида (ТугрНовНп АС 490), продигиозином 25-С (ΡNυ156804), [4-(4'-гидроксифенил)амино-6,7диметоксихиназолином] (АШ-Р131), [4-(3'-бром-4'-гидроксилфенил)амино-6,7-диметоксихиназолином] (АШ-Р154), [4-(3',5'-дибром-4'-гидроксилфенил)амино-6,7-диметоксихиназолином] АШ-Р97, ККК-211, 3 -{(3К,4К)-4-метил-3-[метил-(7Н-пирроло [2,3-й]пиримидин-4-ил)амино]пиперидин-1 -ил}-3 оксопропионитрилом, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, например, моноцитрата (также называемым СР-690,550), или соединением, описанным в АО 04/052359 или АО 05/066156; агонистом или модулятором 81Р рецептора, например, ΡΤΥ720, необязательно фосфорилированным или его аналогом, например, 2-амино-2-[4-(3-бензилоксифенилтио)-2-хлорфенил]этил-1,3пропандиолом, необязательно фосфорилированным, или 1-{4-[1-(4-циклогексил-3трифторметилбензилоксиимино)этил]-2-этилбензил}азетидин-3-карбоновой кислотой или ее фармацевтически приемлемыми солями; иммунодепрессивными моноклональными антителами, например, моноклональными антителами к рецепторам лейкоцита, например, МНС, СЭ2. СЭ3. СЭ4. СЭ7. СЭ8. СЭ25. СЭ28. СЭ40. СЭ45. СЭ52. СЭ58. СЭ80. СЭ86 или их лиганды; другими иммуномодулирующими соединениями, например, рекомбинантной связывающей молекулой, имеющей, по крайней мере, часть экстраклеточного домена СТЬА4 или его мутант, например, по крайней мере, экстраклеточной частью СТЬА4 или его мутанта, соединенного с последовательностью не-СТЬА4 белка, например, СТГА4[д (например, обозначенного АТСС 68629) или его мутанта, например, Р-ЕА2<^; ингибиторами адгезивной молекулы, например, антагонистами ЬРА-1, антагонистами ТСАМ-1 или -3, антагонистами УСАМ-4 или антагонистами УЬА-4.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут вводиться любым подходящим путем, например, перорально, например, в виде таблеток или капсул; парентерально, например, внутривенно; ингаляцией, например, при лечении воспалительных или обструктивных заболеваний дыхательных путей; интраназально, например, при лечении аллергических ринитов; местно на кожу, например, при лечении атопического дерматита; или ректально, например, при лечении воспалительной болезни толстой кишки.
Таким образом, в другом аспекте, представлено соединение в соответствии с данным изобретением для применения в терапии. В другом варианте терапию выбирают из заболевания или расстройства, которые медиированы активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы. В другом варианте терапию выбирают из заболевания, которое может быть лечено ингибированием гамма-изоформы ФИ-3-киназы. В другом варианте терапию выбирают из заболевания, которое может быть лечено ингибированием гаммаизоформы ФИ-3-киназы селективно к дельта-изоформе ФИ-3-киназы.
Термин терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с данным изобретением относится к количеству соединения в соответствии с данным изобретением, которое вызывает биологическую или медицинскую реакцию у пациента, например, снижение или ингибирование активности фермента или белка или облегчение симптомов, замедление или откладывание развития заболевания, или предотвращение заболевания и т.д. В одном не ограничивающем варианте терапевтически эффективное количество относится к количеству соединения в соответствии с данным изобретением, которое, при введении пациенту, является эффективным для (1) по крайней мере, частичного облегчения, ингибирования, предотвращения и/или ослабления состояния или расстройства или заболевания (1) медиированного активацией ФИ-3-киназы, в частности, гамма-изоформы, или (и) связанного с активностью гамма-изоформы ФИ-3-киназы, или (ш) характеризуемого активностью (нормальной или аномальной) гамма-изоформы ФИ-3-киназы; или (2) снижения или ингибирования активности гамма-изоформы ФИ-3киназы. В другом, не ограничивающем варианте, термин терапевтически эффективное количество относится к количеству соединения в соответствии с данным изобретением, которое, при введении в клетку или ткань или не клеточный биологический материал или среду, эффективного для, по крайней мере, частичного снижения или ингибирования активности гамма-изоформы ФИ-3-киназы.
В данном описании термин пациент относится к животному. Обычно животным является млекопитающее. Пациента также относится, например, к приматам (например, человеку, мужчине или женщине), корове, овце, козе, лошади, собаке, кошке, кролику, крысе, мыши, рыбе, птице и подобным. В определенных вариантах пациентом является примат. В других вариантах пациентом является человек.
В данном описании термин ингибировать, ингибирование или ингибируя относится к снижению или подавлению данного состояния, симптома или расстройства, или значительному снижению базовой активности биологической активности или процесса.
В данном описании термин лечить, лечение или лечение любого заболевания или расстройства относится, в одном варианте, к облегчению заболевания или расстройства (т.е. замедлению или остановке или снижению развития заболевания или, по крайней мере, одного из его клинических симптомов). В другом варианте лечить, лечение или лечение относится к облегчению или ослаблению, по крайней мере, одного физического параметра, включая такие, которые могут быть не видны пациенту. В
- 68 032075 еще одном примере лечить, лечение или лечение относится к модулированию заболевания или расстройства, физически (например, стабилизация невидимого симптома), физиологически (например, стабилизация физического параметра) или и так и так. В еще одном варианте лечить, лечение относятся к профилактике или задержке наступления или развития или прогресса заболевания или расстройства.
В данном описании пациент нуждается в лечении, если такой пациент получит биологическую, медицинскую пользу или улучшение качества жизни при таком лечении.
Все описанные здесь способы могут проводиться в любом подходящем порядке, если не указано иначе или если это явно не противоречит контексту. Применение любого и всех примеров или примерного лексикона (например, такой как) в данном описании предназначено только для лучшего раскрытия изобретения и не ограничивает объем данного изобретения, представленный в формуле изобретения.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться в качестве лекарственных средств и поэтому обычно их составляют в виде фармацевтических композиций.
Следовательно, в другом аспекте данного изобретения представлена фармацевтическая композиция, содержащая соединение в соответствии с данным изобретением и фармацевтически приемлемый носитель.
В данном описании термин фармацевтически приемлемый носитель включает любые и все растворители, дисперсионные среды, покрытия, поверхностно-активные вещества, антиоксиданты, консерванты (например, антибактериальные агенты, противогрибковые агенты), изотонические агенты, агенты, замедляющие абсорбцию, соли, консерванты, стабилизаторы лекарственных средств, связующие агенты, наполнители, разрыхляющие агенты, смазывающие агенты, красители и подобные, и их сочетания, известные специалистам в данной области техники (См., например, КеттдФп'к Рйагтасеи!1са1 8с1епсе§, 18111 ЕФ. Маск Ргт!тд Сотрапу, 1990, р. 1289-1329). За исключением случаев, когда любой обычный носитель несовместим с активным ингредиентом, рассматривается его применение в терапевтической или фармацевтической композициях.
Фармацевтическая композиция может быть составлена для конкретных путей введения, таких как пероральное введение, парентеральное введение и ректальное введение, и т.д. Кроме того, фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением могут быть в твердой форме (включая, без ограничений, капсулы, таблетки, пилюли, гранулы, порошки или суппозитории), или в жидкой форме (включая, без ограничений, растворы, суспензии или эмульсии). Фармацевтические композиции могут быть подвергнуты обычным операциями, таким как стерилизация, и/или могут содержать обычные инертные разбавители, смазывающие агенты или буферные агенты, а также адъюванты, такие как консерванты,, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы и буферы и т.д.
Обычно фармацевтические композиции включают таблетки или желатиновые капсулы, содержащие активный ингредиент вместе с:
a) разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицином;
b) смазывающими агентами, например двуокисью кремния, тальком, стеариновой кислотой, ее магниевой или кальциевой солью и/или полиэтиленгликолем; также для таблеток
c) связующими агентами, например алюмосиликатом магния, крахмальной пастой, желатином, трагакантом, метилцеллюлозой, карбоксиметилцеллюлозой натрия и/или поливинилпирролидоном; при желании
Ф) разрыхлителями, например крахмалами, агаром, альгиновой кислотой или ее натриевой солью или шипучими смесями; и/или
е) абсорбентами, красителями, вкусовыми добавками и подсластителями.
Таблетки могут быть покрыты либо пленкой, либо энтеросолюбильным покрытием способами, известными в данной области техники.
Подходящие композиции для перорального введения включают эффективное количество соединения в соответствии с данным изобретением в форме таблеток, пастилок, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсии, твердых или мягких капсул или сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального применения, готовят с применением любого способа, известного в данной области техники для производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или более агентов, выбранных из группы, включающей подсластители, вкусовые добавки, красители и консерванты, с получением фармацевтически приятных на вид и на вкус препаратов. Таблетки могут содержать активный ингредиент в смеси с не токсичными фармацевтически приемлемыми наполнителями, которые подходят для производства таблеток. Эти наполнители включают, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и разрыхляющие агенты, например, кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, например, крахмал, желатин или аравийская камедь; и смазывающие агенты, например, стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки не покрыты или покрыты с применением известных методов для замедления разрушения и абсорбции в желудочнокишечном тракте, получая отложенное действие в течение более длительного периода времени. Например, может применяться задерживающий материал, такой как глицерил моностеарат или глицерил дис- 69 032075 теарат. Композиции для перорального применения могут быть представлены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешивают с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешивают с водой или масляной средой, например, арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.
Определенные композиции для инъекций включают водные изотонические растворы или суспензии, и суппозитории предпочтительно получают из жирных эмульсий или суспензий. Указанные композиции могут быть стерилизованы и/или содержат адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие или эмульгирующие агенты, промоторы растворения, соли для регулирования осмотического давления и/или буферы. Кроме того, они также могут содержать другие терапевтически ценные вещества. Указанные композиции получают с применением обычных способов смешивания, гранулирования или нанесения покрытия, соответственно, и они содержат около 0,1-75%, или содержат около 150% активного ингредиента.
Подходящие композиции для чрезкожного применения включают эффективное количество соединения в соответствии с данным изобретением с подходящим носителем. Носители, подходящие для чрезкожной доставки, включают абсорбируемые фармакологически приемлемые растворители, способствующие прохождению через кожу хозяина. Например, чрезкожные устройства имеют форму повязки, содержащей покровный слой, резервуар, содержащий соединение, необязательно с носителями, необязательно, барьер, контролирующий скорость для доставки соединения на кожу хозяина с контролируемой и предварительно определенной скоростью в течение длительного периода времени, и средства закрепления устройства на коже.
Подходящие композиции для местного нанесения, например, на кожу и глаза, включают водные растворы, суспензии, мази, кремы, гели или распыляемые композиции, например, для доставки аэрозолем или подобными. Такие системы местной доставки, в частности, будут подходить для нанесения на кожу, например, для лечения рака кожи, например, для профилактического применения в солнцезащитных кремах, лосьонах, спреях и подобных. Они, в частности, подходят для применения в местных, включая косметические, композициях, хорошо известных в данной области техники. Они могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, агенты, улучшающие тоничность, буферы и консерванты.
В данном описании местное введение также может относиться к ингаляциям или интраназальному применению. Они могут удобным образом доставляться в форме сухого порошка (либо отдельно, в виде смеси, например, сухой смеси с лактозой, либо в виде частиц смешанного компонента, например, с фосфолипидами) из порошкового ингалятора или аэрозольного распылителя из контейнера под давлением, помпы, спрея, опрыскивателя или небулайзера, с или без применения подходящего газа-вытеснителя.
Если ингалируемой формой активного ингредиента является аэрозольная композиция, устройством для ингаляции может быть аэрозольный флакон с клапаном, адаптированным для поставки отмеренной дозы, например, от 10 до 100 мкл, например от 25 до 50 мкл, композиции, т.е. устройство, известное как дозированный аэрозольный ингалятор. Подходящие аэрозольные флаконы и методики содержания в них аэрозольных композиций под давлением хорошо известны специалистам в области ингаляционной терапии. Например, аэрозольная композиция может вводиться из баллона с покрытием, например, как описано в ЕР-А-0642992. Если ингалируемой формой активного ингредиента является распыляемая водная, органическая или водная/органическая дисперсия, ингаляционным устройством может быть известный небулайзер, например, обычный пневматический небулайзер, такой как небулайзер с воздушной форсункой, который может содержать, например, от 1 до 50 мл, обычно от 1 до 10 мл, дисперсии; или ручной небулайзер, иногда называемый мягкий душ или мягкий спрей, например, электронное устройство, такое как АЕКх (АгаШдш, И8) или Аегобоке (Аегодеп), или механическое устройство, такое как КЕ8Р1МАТ (Воейлпдег 1пдеШе1ш) небулайзер, который позволяет распылять значительно меньшие объемы, например от 10 до 100 мкл, по сравнению с обычными небулайзерами. Если ингалируемой формой активного ингредиента является тонкоизмельченный порошок, ингаляционным устройством может быть, например, устройство для ингаляции сухого порошка, адаптированное для доставки сухого порошка из капсулы или блистера, содержащего сухой порошок, содержащий дозу (А) и/или (В), или устройство для многоразовой ингаляции сухого порошка (МИСП), адаптированное для доставки, например, 3-25 мг сухого порошка, содержащего дозу (А) и/или (В) на одно нажатие. Композиция сухого порошка предпочтительно содержит разбавитель или носитель, такой как лактоза, и соединение, которое помогает защитить от порчи продукта из-за влажности, например, стеарат магния. Подходящие устройства для ингаляции сухого порошка включают устройства, описанные в И8 3991761 (включая АЕКОЬЕЕК™ бетке), АО 05/113042, АО 97/20589 (включая устройство СЕКТШАЬЕК™), АО 97/30743 (включая устройство ТА18ТНАЬЕК™) и АО 05/37353 (включая устройство ΟΥКОНА^ЕК™).
Следовательно, данное изобретение также включает (А) агент в соответствии с данным изобретением или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, в ингалируемой форме; (В) ингалируемое лекарственное средство, содержащее соединение в соответствии с данным изобретением в ингалируемой форме вместе с фармацевтически приемлемым носителем в ингалируемой форме; (С) фармацевтический
- 70 032075 продукт, содержащий такое соединение в ингалируемой форме в сочетании с устройством для ингаляций; и (Ό) устройство для ингаляций, содержащее такое соединение в ингалируемой форме.
Дозы соединений в соответствии с данным изобретением, применяемые в практике данного изобретения, конечно, в значительной степени варьируется, например, в зависимости от конкретного лечимого состояния, желаемого эффекта и способа введения. В общем, подходящие суточные дозы для введения ингаляцией составляют порядка от 0,0001 до 30 мг/кг, обычно от 0,01 до 10 мг на пациента, а для перорального введения подходящие суточные дозы составляют порядка от 0,01 до 100 мг/кг.
В данном изобретении также представлены безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы, содержащие соединения в соответствии с данным изобретением в качестве активных ингредиентов, так как вода может способствовать разложению определенных соединений.
Безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы в соответствии с данным изобретением могут быть получены с применением безводных или с минимальным содержанием влаги ингредиентов и в сухих или с низкой влажностью условиях. Безводные фармацевтические композиции могут быть получены и храниться так, чтобы сохранить их безводную природу. Следовательно, безводные композиции упаковывают с применением материалов, которые предотвращают контакт с водой так, что они могут быть включены в подходящие фармакологические наборы. Примеры подходящих упаковок включают, но не ограничены ими, герметично запечатанные пленки, пластики, однодозовые контейнеры (например, флаконы), блистерные упаковки и контурные упаковки.
В изобретении также представлены фармацевтические композиции и лекарственные формы, которые содержат один или более агентов, которые снижают скорость, с которой разлагается соединение в соответствии с данным изобретением, применяемое в качестве активного ингредиента. Такие агенты, которые названы здесь стабилизаторы, включают, но не ограничены ими, антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, рН буферы или солевые буферы, и т.д.
Соединение в соответствии с данным изобретением может вводиться либо одновременно с, либо до, либо после одного или более другого терапевтического агента. Соединение в соответствии с данным изобретением может вводиться отдельно, одинаковым или разными путями введения, или вместе в одной фармацевтической композиции в качестве других агентов.
В другом аспекте, представлено фармацевтическое сочетание, содержащее соединение в соответствии с данным изобретением и по крайней мере один другой терапевтический агент, например, для одновременного, раздельного или последовательного применения в терапии. В одном варианте, терапия включает лечение заболевания или расстройства, медиированного активацией ФИ-3-киназы, в частности, гамма-изоформы. Продукты, представленные как фармацевтическое сочетание, включают композицию, содержащую соединение в соответствии с данным изобретением и другой терапевтический агент(ы) вместе в одной фармацевтической композиции, или соединение в соответствии с данным изобретением и другой терапевтический агент(ы) в отдельных формах, например, в форме набора.
В одном варианте, в данном изобретении представлено фармацевтическое сочетание, включающее соединение в соответствии с данным изобретением и другой терапевтический агент(ы). Необязательно, фармацевтическая композиция может содержать фармацевтически приемлемый наполнитель, как описано выше.
В одном варианте, представлен набор, содержащий две или более раздельных фармацевтических композиций, по крайней мере, одна из которых содержит соединение в соответствии с данным изобретением. В одном варианте, набор содержит средства для раздельного хранения указанных композиций, такие как контейнер, разделенная бутылка или разделенный пакет из фольги. Примером такого набора является блистерная упаковка, которая обычно применяется для упаковки таблеток, капсул и подобных.
Набор может применяться для введения различных лекарственных форм, например, пероральной и парентеральной, для введения отдельных композиций с различными интервалами дозирования, или для капельного введения отдельных композиций одна против другой. Для удобства, набор в соответствии с данным изобретением обычно содержит инструкции по введению.
Фармацевтической композицией или сочетанием в соответствии с данным изобретением может быть стандартная лекарственная форма с дозой около 1-1000 мг активного ингредиента(ов) для пациента с массой тела около 50-70 кг, или около 1-500 мг, или около 1-250 мг, или около 1-150 мг, или около 0,5100 мг, или около 1-50 мг активных ингредиентов. Терапевтически эффективные дозы соединения в соответствии с данным изобретением, фармацевтической композиции или их сочетания зависят от вида пациента, массы тела, возраста и индивидуального состояния, лечимого расстройства или заболевания и его тяжести. Терапевт, клиницист или ветеринар может легко определить эффективное количество каждого из активных ингредиентов, необходимых для профилактики, лечения или ингибирования развития расстройства или заболевания.
Свойства представленных выше доз демонстрируются в ίη νίίτο и ίη νίνο тестах с применением предпочтительно млекопитающих, например мышей, крыс, собак, обезьян или выделенных органов, тканей и препаратов. Соединения в соответствии с данным изобретением может применяться ίη νίίτο в виде растворов, например, водных растворов, и ίη νίνο, энтерально, парентерально, внутривенно, например, в виде суспензии или водного раствора. Доза ίη νίίτο может варьировать от около 10-3 молярных до 10-9
- 71 032075 молярных концентраций. Терапевтически эффективное количество ίη νίνο может варьироваться в зависимости от способа введения, около 0,1-500 или около 1-100 мг/кг.
Антагонисты ФИ-3-киназ, такие, как соединения в соответствии с данным изобретением, также применяют в качестве совместных терапевтических агентов для применения в сочетании со вторым активным агентом, таким как, например, органический нитрат и ПО-доноры, такие как натропруссид натрия, нитроглицерин, мононитрат изосорбида, динитрат изосорбида, молсидомин или 81П-1, и ингаляционные ПО; соединения, которые ингибируют разложение циклического монофосфата гуанозина (цГМФ) и/или циклического монофосфата аденозина (цАМФ), такие как ингибиторы фосфодиэстераз (ФДЭ) 1, 2, 3, 4 и/или 5, особенно ингибиторы ФДЭ 5, такие как силденафил, варденафил и тадалафил; ПОнезависимые, но йает-зависимые стимуляторы гуанилатциклазы, такие как, в частности, соединения, описанные в \УО 00/06568, \УО 00/06569, \УО 02/42301 и \УО 03/095451; ПО- и йает-независимые активаторы гуанилатциклазы, такие как, в частности, описанные в \УО 01/19355, \УО 01/19776, \УО 01/19778, \УО 01/19780, \УО 02/070462 и \УО 02/070510; соединения, которые ингибируют человеческую нейтрофильную эластазу, такие как сивелестат или ΌΧ-890 (ВеИгап); соединения, ингибирующие каскад трансдукции сигнала, такие как ингибиторы тирозинкиназы и/или серин/треонинкиназы, в частности, иматиниб, гефитиниб, эрлотиниб, сорафениб и сунитиниб; соединения, влияющие на энергетический метаболизм сердца, например и предпочтительно, этомоксир, дихлорацетат, ранолазин или триметазидин; антитромботические агенты, например и предпочтительно, из группы, включающей ингибиторы агрегации тромбоцитов, антикоагулянты или профибринолитические вещества; активные вещества для снижения кровяного давления, например и предпочтительно, из группы, включающей кальциевые антагонисты, антагонисты ангиотензина II, ингибиторы АСЕ, антагонисты эндотелина, ингибиторы ренина, ингибиторы альдостеронсинтазы, блокаторы альфа рецептора, блокаторы бета рецептора, антагонисты минералокортикоидного рецептора, ингибиторы Шю-киназы и диуретики; и/или активные вещества, которые модифицируют метаболизм жиров, например и предпочтительно, из группы, включающей агонисты рецептора щитовидной железы, ингибиторы синтеза холестерина, например и предпочтительно, ингибиторы НΜС-СοΑ-редуктазы или ингибиторы синтеза сквалена, ингибиторы АСАТ, ингибиторы СЕТР, ингибиторы МТР, агонисты РАПП-альфа, РАПП-гамма и/или РАПП-дельта, ингибиторы абсорбции холестерина, ингибиторы липазы, адсорберы полимерной желчной кислоты, ингибиторы повторной абсорбции желчной кислоты и антагонисты липопротеина, в частности, для лечения РАН или заболеваний и расстройств, таких как указаны выше, например, в качестве усилителей терапевтической активности таких лекарственных средств, или в качестве средств снижения требуемой дозы или потенциальных побочных эффектов таких лекарственных средств.
В конкретном варианте, представлено фармацевтическое сочетание, содержащее соединения в соответствии с данным изобретением и второй агент, где второй агент является ингибитором ФДЭ 5 или ингибитором нейтральной эндопептидазы.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть смешаны со вторым агентом в фиксированной фармацевтической композиции или могут вводиться по отдельности, до, одновременно с или после другого лекарственного вещества.
В частности, изобретение включает, в другом аспекте, сочетание ингибитора ФИ-3-киназы, такого как соединение в соответствии с данным изобретением, с осмотическими агентами (гипертонический физиологический раствор, декстран, магнит, ксилит), блокаторы ЕПаС, противовоспалительные, бронходилататорные, антигистаминные, противокашлевые, антибиотики и/или рибонуклеазные лекарственные вещества, где антагонист ТРН1 и другое лекарственное вещество могут быть в одной или разных фармацевтических композициях.
Подходящие антибиотики включают макролидные антибиотики, например, тобрамицин (ТОВ1™).
Подходящие рибонуклеазные лекарственные вещества включают дорназу альфа (Ри1тοζуте™), высоко очищенный раствор рекомбинантной человеческой деоксирибонуклеазы I (гйКПАке), которые селективно отщепляют ДНК. Дорназу альфа применяют для лечения кистозного фиброза.
Следовательно, изобретение включает, в другом аспекте, сочетание ингибиторов ФИ-3-киназы, такие как соединения в соответствии с данным изобретением со вторыми агентами, которые являются агонистом 1Р рецептора, в частности, соединениями, описанными в \УО 2012/007539.
Следовательно, изобретение включает, в другом аспекте, сочетание ингибиторов ФИ-3-киназы, таких как соединения в соответствии с данным изобретением, со вторыми агентами, которые являются мультитаргетными ингибиторами киназы, такими как иматиниб мизилат, С1ееνес. Иматиниб действует как специфический ингибитор множества ферментов тирозинкиназ. Он занимает ТК активный сайт, что приводит к снижению активности. ТК ферменты в теле включают рецептор инсулина. Иматиниб является специфическим к ТК домену в протоонкогене Абельсона, рецепторной тирозинкиназе и РЛСБ-В (рецепторе фактора роста тромбоцитов).
В конкретном варианте, представлено фармацевтическое сочетание, содержащее соединение в соответствии с данным изобретением и второй активный агент, выбранный из ингибиторов фотодиэстеразы V, ингибиторов нейтральной эндопептидазы 1, ингибиторов АЬК-5, ингибиторов Λο-киназы, ингиби
- 72 032075 торов ТРН1, мультитаргетных ингибиторов киназы, антагониста эндтелина, диуретика, блокатора рецептора альдостерона и блокатора рецептора эндотелина.
В другом варианте представлено фармацевтическое сочетание, содержащее соединение в соответствии с данным изобретением и второй активный агент, выбранный из ингибиторов фотодиэстеразы V, ингибиторов нейтральной эндопептидазы 1, ингибиторов АЬК-5, ингибиторов гНо-киназы, ингибиторов ТРН1, мультитаргетных ингибиторов киназы.
Было обнаружено, что соединения по любому из вариантов 1-42, где оба К3 и К4 являются Н, являются метаболитами соединений в соответствии с данным изобретением.
Экспериментальная часть
Данное изобретение иллюстрировано следующими примерными соединениями.
Из представленного выше описания понятно, что, хотя конкретные варианты изобретения описаны здесь для целей иллюстрации, различные модификации могут быть сделаны не выходя за суть и объем данного изобретения. Следовательно, данное изобретение не ограничено ими, но ограничено формулой изобретения.
Общие условия.
Масс спектр определяют на ЖХМС системах с применением ионизации электрораспылением. Они включают сочетания АдПеп! 1100 НРЬС/М1сготакк Р1а1£огт Макк 8рес!готе!ег или Уа!егк Асс|ш!у ИРЬС с 8ЦЭ Макк 8рес!готе!ег. [М+Н]+ относится к моноизотопным молекулярным массам.
ЯМР спектр определяют на ЯМР спектрометрах Вгикег АУАЫСЕ 400 МГц или 500 МГц с применением ГСОЫ-ЫМК. Спектр измеряют при 298 К и обозначают с применением пика растворителя.
Как понятно специалисту в данной области техники, при определении 'Н ЯМР в дейтерированном ДМСО для соединений из любого из вариантов 1 -42, где К1=метилом, сигнал указанных протонов метила часто закрывается из-за пика растворителя ДМСО при δ около 2,5 ч./млн.
Следующие примеры предназначены для иллюстрации данного изобретения и не должны считаться ограничивающими. Температуры даны в градусах Цельсия. Если не указано иначе, все выпаривания проводят при пониженном давлении, предпочтительно, от около 15 и 30 мм рт. ст. (=20-133 мбар). Структуру конечных продуктов, промежуточных соединений и исходных материалов подтверждают стандартными методами анализа, например, микроанализом, и спектроскопическими характеристиками, например МС, ИК, ЯМР. Применяемые аббревиатуры обычны для данной области техники. Если они не определены, термины имеют общепринятые значения.
Аббревиатуры:
АсОН уксусная кислота
АЦН ацетонитрил водн. водный
- 73 032075
ш широкий
ВиОН бутанол
КОНЦ . концентрированный
д дублет
дд двойной дублет
ДХМ дихлорметан
дцк Ν,N'-дициклогексилкарбодиимид
дхэ 1,2-дихлорэтан
ДЭАД диэтилазодикарбоксилат
ДИПЭА диизопропилэтиламин
ДМА диметилацетамид
ДМЭ 1,2-диметоксиэтан
ДМФ Ν,Ν-диметилформамид
ДМСО диметилсульфоксид
ЕЬ2О диэтиловый эфир
ЕбОАс этилацетат
ЕЕОН этанол
ч час(ы)
ГАТУ гексафторфосфат 0-(7-азабензотриазол-1-ил)-Ν,Ν,Ν,Ν- τε траметилурония
Нех гексан
ГОБт.Н2О гидрат 1-гидроксибензотриазола
ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография
ИПС изо-пропиловый спирт
КОАс Ацетат калия
КОЕВи трет-бутоксид калия
ЖХМС жидкостная хроматография и масс-спектрометрия
МеОН метанол
МеСЫ ацетонитрил
МС масс спектрометрия
м мультиплет
мин минута
мл миллилитр
т/ ζ отношение массы к заряду
ΝΒ3 Ν-бромсукцинимид
ЯМР ядерный магнитный резонанс
ΝΟΕ3Υ спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера
Рб-118 дихлор [1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)]ферроцен палладий (II)
аддукт аддукт дихлорметана [1,1-
Рс1С12 (άρρί) . бис (дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия
СН2С12
- 74 032075
4./млн.
палладия(II) дихлорид енил части на миллион
РЗ на полимерной подложке
РЗ-ΤΒϋ 1,5,7-триазабицикло[4.4,0]дец-5-ен полистирол
Ву время удерживания
кт комнатная температура
с синглет
насыщ. насыщенный
ЗСХ-2 сильный катионный обмен (например, колонки 1зо1ибе® ЗСХ- 2 от Вгобаде)
СЖХ суперкритическая жидкостная хроматография
31-ТМТ эквивалент кремниевой связи 2,4,6-тримеркаптотриазина, коммерчески доступный, например, от Вгобаде
т триплет
МТБЭ метил-трет-бутиловый эфир
ТЭА триэтиламин
ТФК трифторуксусная кислота
ТГФ тетрагидрофуран
тех тонкослойная хроматография
ТЗР® пропилфосфоновый ангидрид
Согласно представленным ниже примерам, соединения из предпочтительных вариантов синтезируют с применением способов, описанных здесь, или других способов, которые известны в данной об ласти техники.
Различные исходные материалы, промежуточные соединения и соединения из предпочтительных вариантов могут быть выделены и очищены, если это применимо, с применением обычных методов, таких как осаждение, фильтрация, кристаллизация, выпаривание, дистилляция и хроматография. Если не указано иначе, все исходные материалы получают из коммерческих источников и применяют без дальнейшей очистки. Соли могут быть получены из соединений известными методами получения солей.
Должно быть понятно, что органические соединения из предпочтительных вариантов могут обладать явлением таутомеризма. Так как химические структуры в данном описании могут представлять только одну из возможных таутомерных форм, должно быть понятно, что предпочтительные варианты охватывают любые таутомерные формы изображенной структуры.
Если применяется микроволновое нагревание, его проводят с применением микроволновой печи Вкладе !ηίΐίαΐ0Γ 8ί\1ν ιηίυΐΌ\νανο в соответствующих реакционных пробирках при указанной температуре и в течение указанного времени.
Если не указано иначе, условия аналитической ЖХМС следующие. Способ А:
Колонка:
Супегдт 2,5 мкМ Мах-КР100А(20x4,0)мм.
Подвижная фаза: А: Вода+0,1% муравьиная кислота В:Ацетонитрил
Градиент: 0,0-0,5 мин 20% В, 2,5-4,5 мин 95% В, 5,0 мин 20% В
Способ 2ттЬС ν003: Колонка: ИаЬегз ВЕН С18 50x2,1 мм, 1,7 мкм
Температура колонки 50°С
Элюенты: А: Н2О, В: ацетонитрил, оба содержат 0,1% ТФК
Скорость потока: 0,8 мл/мин
Градиент: 0,20 мин 5% В; 5% до 95% В за 1,30 мин, 0,25 мин 95%
В
Способ 2ттЬо’АрН:
Колонка:
Иайегз АсдидГу СЗН 1,7 мкм, 2,1x50 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза: А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0,1% Муравьиная кислота
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 5% В, 0,2-1,3 мин 5-98% В, 1,3-1,55 мин 98% В, 1,55-1,6 мин 98-5% В
- 75 032075
Способ 2т1пЬо\рНу01:
Колонка:
Иабегз Асридбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x50 мм
Температура колонки
50°С
Подвижная фаза:
А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0, 1
Муравьиная кислота
Скорость потока:
1,0 мл/мин
Градиент:
0,0 мин 5% В, 0,2-1,55 мин
1,55-1,75 мин
98% В, 1,75-1,8 мин 98-5% В
Способ 2т1пЬо\рНу02:
Колонка:
Асридбу СЗН
Температура колонки
50°С
Элюенты:
А: вода, В:
ацетонитрил, оба содержат
0,1% ТФК
Скорость потока:
1,0 мл/мин
Градиент:
В, 0,2-1,55 мин
1,55-1,75 мин
98% В, 1,75-1,8 мин 98-5% В
Способ 2т1пЬо\рНу03:
Колонка:
Иабегз Асридбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x50 мм
Температура колонки
50°С
Подвижная фаза: А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0, 1 Муравьиная кислота
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 5% В, 0,2-1,8 мин 5-98% В, 1,8-2,1 мин 98 В, 2,1-2,3 мин 98% В
Способ 10тт1.о\\р11:
Колонка: Иабегз Асритбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x100 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза: А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0,1 Муравьиная кислота
Скорость потока: 0,7 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 2% В, 0,5-8,0 мин 2-98% В, 8,0-9,0 мин 98 В, 9,0-9,1 мин 98-2% В
Способ 10ттЬо\рНу01:
Колонка: Иабегз Асридбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x100 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза: А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0,1 Муравьиная кислота
Скорость потока: 0,7 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 2% В, 0,5-8,0 мин 2-98% В, 8,0-9,0 мин 98 В, 9,0-9,1 мин 98-2% В
Способ 10т1пН1дЬрН:
Колонка: Иабегз Асригбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x100 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза: А: вода+0,1% аммиак В: Ацетонитрил+0,1% аммиак
Скорость потока: 0,7 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 2% В, 0,5-8,0 мин 2-98% В, 8,0-9,0 мин 98 В, 9,0-9,1 мин 98-2% В
- 76 032075
Способ 2ιηίηΙ,ονρΙ 1_ТФК:
Колонка :
Температура колонки
Подвижная фаза:
Скорость потока:
Градиент:
Способ ΕονρΗ_ν002:
Колонка:
Температура колонки
Элюенты:
Скорость потока:
Градиент:
Способ 8ηΐηΕο νρΗν01:
Колонка:
ЭДаЬегз Асдцф-Ьу СЗН 1,7 мкм, 2,1x50 мм
50°С
А: вода+0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0,1%
ТФК
1,0 мл/мин
0,0 мин 5% В, 0,2-1,3 мин 5-98% В, 1,3-1,55 мин 98%
В, 1,55-1,6 мин 98-5% В
РНепотепех Сет1п1 С18 50x4,6 мм, 3,0 мкм
50°С
А: Н2О, В: метанол, оба содержат 0,1% ТФК
1,0 мл/мин
5% до 95% В за 2,0 мин, 0,2 мин 95% В
Пабегз Асдитбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x100 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза: А: вода + 0,1% Муравьиная кислота В: Ацетонитрил+0,1% Муравьиная кислота
Скорость потока: 0,7 мл/мин
Градиент: 0,0 мин 2% В, 0,3-6,5 мин 2-98% В, 6,5-7,5 мин 98% В, 7,5-8,0 мин 5-98% В
Способ 2ηΐηΗΐ§ΕρΗν03:
Колонка: У/аСегз Асдитбу СЗН 1,7 мкм, 2,1x50 мм
Температура колонки 50°С
Подвижная фаза:
Скорость потока:
Градиент:
А: вода+0,1% аммиак В: Ацетонитрил+0,1% аммиак
1,0 мл/мин
0,0 мин 5% В, 0,1-1,8 мин 5-98% В, 1,8-2,1 мин 98%
В, 2,1-2,3 мин 98-5% В
Если не указано иначе, препаративную ВЭЖХ проводят с применением подходящей колонки и подвижной фазы 0,1% ТФК в ацетонитриле и 0,1% водной ТФК с подходящим градиентом.
Пример 1. транс-3-[5-Амино-6-(5-метил-[1,3,4]оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил]-Щ4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=3=0
О'/0Н
Перемешиваемую смесь транс-Щ4-гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид 3бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) (0,15 г, 0,47 ммоль), 5-бром-3-(5метил[1,3,4]оксадиазол-2-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С1) (0,122 г, 0,47 ммоль) и ацетата калия (0,14 г, 1,43 ммоль) в диоксане (10 мл) дегазируют барботированием аргона через смесь в течение 10 мин. После добавления бис-(дифенилфосфиноферроцен)дихлорпалладия (39 мг, 0,047 ммоль) и дальнейшего дегазирования аргоном смесь нагревают до 110°С в течение 5 ч. Добавляют холодную воду (50 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (2x50 мл). Органический экстракт сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Очистка препаративной ТСХ с применением силикагеля (ΘΕ 254) в качестве неподвижной фазы и 70% ЕЮАс в петролейном эфире в качестве подвижной фазы дает указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества; ЖХ-МС: [М+Н]+=445,2, способ А.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ) δ 8,45 (1Н, с), 7,83 (1Н, с), 7,75 (1Н, д), 7,70 (2Н, м), 7,55 (1Н, д), 4,50 (1Н, м), 3,30 (1Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,60 (3Η, с), 2,42 (3Η, с), 1,70 (2Н, м), 1,58 (2Н, м), 1,00-1,23 (4Н, м).
Один протон не виден, может быть закрыт пиками ДМСО и/или воды.
- 77 032075
Пример 2.
транс-3 -[5-Амино-6-(3 -метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил] -Х(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2а) и транс-Х(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) в условиях, аналогичных условиям из примера 1.
ЖХМС: Ву 1,79 мин МС т/ζ 445 [М+Н]+: способ А.
1Н ЯМР (400 МГц, СБС13) δ 8,49 (1Н, с), 8,00 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,49 (1Н, д), 6,5-7,5 (2Н, шс), 4,36 (1Н, м), 3,59 (1Н, ш мульт), 3,22 (1Н, ш мульт), 2,55 (6Н, 2хс), 1,95 (4Н, мульт.) 1,2-1,4 (4Н, мульт).
Один протон не виден, может быть широким или закрыт пиками воды.
Пример 3. 3-[5-Амино-6-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2а) и Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид-3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В3а) в условиях, аналогичных условиям из примера 1.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,59 (1Н, с), 7,88 (1Н, с), 7,80 (2Н, шс), 7,75 (1Н, д), 7,59 (1Н, д), 7,45 (1Н, м), 4,25 (1Н, с), 2,85 (2Н, мульт.), 2,52 (3Н, с), 2,49 (3Н, с), 1,54 (2Н, мульт.), 1,03 (6Н, с).
Пример 4.
транс-3 -[5-Амино-6-(3 -метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил] - Х(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из транс-Х(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) и 5-бром-3-(3метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С3) с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 5.
ЖХМС МС т/ζ 444,2 [М+Н]+: способ А.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ 8,39 (1Н, с), 7,90 (1Н, с), 7,73 (1Н, д), 7,60 (1Н, д), 7,52 (1Н, д), 6,95 (1Н, с), 6,92 (2Н, шс), 4,45 (1Н, с), 3,31 (1Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,48 (3Н, с), 2,35 (3Н, с), 1,55-1,75 (4Н, м), 1,00-1,25 (4Н, м).
Пример 5.
3-[5 -Амино-6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил] -4-метил-Х(3 -метилоксетан-3 илметил)бензолсульфонамид
- 78 032075
0=5=0 ι
К раствору 4-метил-№((3-метилоксетан-3-ил)метил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение В4) (116 мг, 0,303 ммоль) и 5-бром-3-(1-метил-1Нпиразол-4-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С4) (70 мг, 0,275 ммоль) в ДМЭ (2 мл) добавляют РдС12(дрр{)-СН2С12 аддукт (11,25 мг, 0,014 ммоль) и пробирку дегазируют Ν2 несколько раз затем добавляют 2 М водный №:СО3 (0,413 мл, 0,826 ммоль). Смесь перемешивают при 100°С в течение 20 мин в микроволновой печи. Смесь разбавляют ДХМ, затем промывают насыщенным раствором соли. Органическую фазу отделяют с применением фазоразделителя. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт разделяют флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 100% игекс: ЕЮАс градиентом на 4д картридже с двуокисью кремния с получением указанного в заголовке со единения;
ЖХМС: ВУ 0,86 мин; МС т/ζ 429,3 [М+Н]+; способ 2ттко\\р11ν0)1.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 8,08 (1Н, с), 8,04 (1Н, с), 7,98 (2Н, с), 7,80 (1Н, д), 7,45 (1Н, д), 4,98 (2Н, шс), 4,83 (1Н, т), 4,39 (4Н, дд), 4,02 (3Н, с), 3,18 (2Н, дд), 2,53 (3Н, с), 1,33 (3Н, с).
Пример 6.
-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Смесь, содержащую 3-бром-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид (промежуточное соединение А2) (164 мг, 0,509 ммоль), КОАс (74,9 мг, 0,763 ммоль), РдС12(дрр{)-СН2С12 аддукт (20,77 мг, 0,025 ммоль) и бис-(пинаколато)дибор (129 мг, 0,509 ммоль) в ДМЭ (2543 мкл) под Ν2 нагревают при 90°С в течение 3 ч. Добавляют 5-хлор-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С5) (100 мг, 0,509 ммоль), 2 М водный №:СО3 (763 мкл, 1,526 ммоль) и РдС12(дрр{)-СН2С12 аддукт (20,77 мг, 0,025 ммоль) и реакционную смесь нагревают с применением микроволнового облучения при 120°С в течение 40 мин. Полученную смесь добавляют в воду (50 мл) и экстрагируют ЕЮАс (2x50 мл). Органические фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и обрабатывают δί-ТМТ для удаления Рд. Эту смесь встряхивают по мере необходимости в течение 1 ч. Твердые вещества удаляют фильтрацией и полученную органическую смесь концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на силикагеле с элюированием градиентом 0-10% [2 М N113 в МеОН] в ДХМ дает указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества. Твердое вещество перекристаллизовывают из горячего ЕЮАс (~1 мл)/Е12О и выстаивают в течение ночи при КТ с полу чением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву=0,81 мин; МС т/ζ 404,3 [М+Н]+; способ 2т1пко\\р11.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 9,33 (1Н, с), 8,41 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,92 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,48 (1Н, т), 7,37 (2Н, шс), 4,51 (1Н, с), 2,61 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 1,05 (6Н, с).
Пример 7.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 79 032075
Указанное в заголовке соединение получают с применением 3-бром-Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А2) и 5-хлор-3-(2-метилтиазол5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С6) в условиях, аналогичных условиям из примера 6.
ЖХМС: Ву=0,87 мин; МС т/ζ 434,2 [М+Н]+; способ 10ттЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,28 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,87 (1Н, с), 7,70 (1Н, д), 7,52 (1Н, д), 7,45 (1Н, т), 6,74 (2Н, с), 4,40 (1Н, с), 2,69 (3Н, с), 2,65 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 1,07 (6Н, с).
Пример 8. 3-[5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамид
НО
Указанное в заголовке соединение получают с применением 3-бром-Ы-(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А9) и 5-хлор-3-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С6) в условиях, аналогичных условиям из примера 6.
ЖХМС: Ву 0,92 мин; МС т/ζ 448,2 [М+Н]+; способ ЗтшЕожрН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,28 (1Н, с), 8,23 (1Н, с), 7,86 (1Н,б), 7,70 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,38 (1Н, т), 6,74 (2Н, с), 4,44 (1Н, т), 3,10 (2Н, д), 2,49 (3Н, с), 2,69 (3Н, с), 2,59 (2Н, д), 0,79 (6Н, с).
Пример 9а и пример 9Ь.
(К)- и (8)-3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт2-ил)-4-метилбензолсульфонамид
Рацемический 3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)-4-метилбензолсульфонамид получают из 3-бром-Ы-(6гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А8) и 5-бром-3(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С7) в условиях, аналогичных условиям из примера 6.
Рацемическую смесь разделяют хиральным разделением с получением отдельных изомеров:
Колонка: 2хСЫга1рак Αϋ-Η, 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С,
Подвижная фаза: 35% Изопропанол+0,1% об./об. ДЭА/65% СОг,
Поток: 10 мл/мин,
Определение: УФ @ 220 нм,
Инструмент: Вегдег М1п1дгат СЖХ1)
Пример 9а.
Первое элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=7,14.
(К)-3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)4-метилбензолсульфонамид или (8)-3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 469,6 [М+Н]+; способ: 2т1пЬо^рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,09 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,82 (2Н, м), 7,64 (1Н, дд), 7,49 (1Н, д), 6,28 (2Н, с), 4,82 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 3,83 (3Н, с), 3,50 (1Н, м), 2,47 (3Н, с), 2,30 (3Н, с), 2,20 (1Н, м), 2,02 (2Н, м), 1,89 (1Н, м), 1, 71 (4Н, м).
Пример 9Ь.
Второе элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=7,93 мин.
(К)-3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)- 80 032075
4-метилбензолсульфонамид или (8)-3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 469,2 [М+Н]+; способ: 2ттЕо\\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,09 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,84-7,79 (2Н, м), 7,63 (1Н, дд), 7,49 (1Н, д),
6,28 (2Н, с), 4,82 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 3,83 (3Н, с), 3,50 (1Н, м), 2,47 (3Н, с), 2,30 (3Н, с), 2,20 (1Н, м), 2,02 (2Н, м), 1,89 (1Н, м), 1, 70 (4Н, м).
Пример 10.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамид
К раствору Ы-(3-гидроксипропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В1) (62,7 мг, 0,176 ммоль) в МеСЫ (882 мкл) добавляют 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С6) (40 мг, 0,176 ммоль), хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (6,19 мг, 8,82 мкмоль) и 2 М Ыа2СО3 (265 мкл, 0,529 ммоль). Реакционную смесь нагревают с применением микроволнового облучения при 150°С в течение 30 мин. Полученную смесь добавляют в воду (50 мл) и экстрагируют ЕЮАе (2x40 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд§О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании 0-10% [2 М ЫН3 в МеОН] в ДХМ дает зеленое твердое вещество, которое обрабатывают ультразвуком в МТБЭ (2 мл) и фильтруют с получением указанного в заголовке соединения; ЖХМС; Ву 0,82 мин; МС ш/ζ 420,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ0 δ 8,28 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,83 (1Н, с), 7,69 (1Н, д), 7,53 (1Н, д), 7,49 (1Н, т), 6,73 (2Н, с), 4,41 (1Н, т), 3,37 (2Н, кв), 2,81 (2Н, кв), 2,68 (3Н, с), 2,48 (3Н, с), 1,54 (2Н, м).
Пример 11. транс-3-(5-Амино-6-(пиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
К раствору транс-3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Э1) (40 мг, 0,101 ммоль) добавляют 4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (24,80 мг, 0,121 ммоль), хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (3,54 мг, 5,04 мкмоль) и 2 М Ыа2СО3 водн. (151 мкл, 0,302 ммоль). Реакционную смесь нагревают с применением микроволнового облучения при 150°С в течение 30 мин. По лученную смесь добавляют к насыщ. Ыа2СО3 (40 мл) и экстрагируют ЕЮАе (2x40 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд§О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на силикагеле при элюировании 0-100% ЕЮАе в изогексане да ет указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву=0,74 мин; МС ш/ζ 440,0 [М+Н]+; способ 2штЬС_т003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 8,71 (2Н, д), 8,29 (1Н, с), 7,89 (1Н, д), 7,77 (2Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,59 (1Н, д), 7,51 (1Н, д), 6,67 (2Н, с), 4,48 (1Н, д), 3,34-3,25 (1Н, м), 2,97-2,86 (1Н, м), 2,49 (3Н, с), 1,73-1,58 (4Н, м), 1,23-1,02 (4Н, м).
- 81 032075
Пример 12.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из бензолсульфонамида 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метила (промежуточное соединение Ώ3) и 3-диметил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола в условиях, аналогичных условиям из примера 11 (с применением ДМЭ/Е!ОН в качестве растворителя вместо МеСЫ).
ЖХ-МС: Ву. 0,81 мин; т/ζ 445,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,08 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,84 (1Н, д), 7,66 (1Н, дд), 7,51 (1Н, д), 7,39
Пример 13.
3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
ΗΝ он
Указанное в заголовке соединение получают из 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение 1)2) и 3-диметил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола в условиях, аналогичных условиям из примера 11 (с применением ДМЭ в качестве растворителя вместо МеСЫ).
ЖХМС: Ву 3,24 мин; т/ζ 431,5 [М+Н]+; способ 10ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,09 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,68 (1Н, дд), 7,50 (1Н, д), 7,44
Пример 14.
транс-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Ν^ΝΗ.
он
Указанное в заголовке соединение получают из транс-3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ1) и 2-Метил-5(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)тиазола в условиях, аналогичных условиям из примера 11.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 460,2 [М+Н]+; способ 2т1пЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,28 (1Н, с), 8,21 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,59 (1Н, д), 7,51 (1Н, д), 6,73 (2Н, с), 4,48 (1Н, д), 3,35-3,25 (1Н, м), 2,98-2,87 (1Н, м), 2,68 (3Н, с), 2,48 (3Н, с), 1,77-1,58 (4Н, м), 1,24-1,03 (4Н, м).
Пример 15.
транс-3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
- 82 032075
Смесь, содержащую бензолсульфонамид транс-3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-М-(4гидроксициклогексил)-4-метила (промежуточное соединение Ό1) (50 мг, 0,126 ммоль), 1Н-[1,2,4]триазол (52,2 мг, 0,756 ммоль), Ν,Ν-диметилглицин (1,299 мг, 0,013 ммоль), Ск2СО3 (123 мг, 0,378 ммоль) и Си (2,399 мг, 0,013 ммоль) в ДМА (1260 мкл) нагревают с применением микроволнового облучения при 180°С в течение 2 ч. Полученную смесь добавляют к насыщенному №2СО3 (50 мл) и экстрагируют
Е1ОАс (2x50 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над М§8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании 0-10% [2 М ΝΗ3 в МеОН] в ДХМ дают масло. К этому маслу добавляют Е12О (2 мл) и смесь обрабатывают ультразвуком до получения мелкого осадка. Избыток Е12О удаляют и твердое вещество сушат с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,86 мин; МС т/ζ 430,3 [М+Н]+; способ 2т1пЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,94 (1Н, д), 7,74 (1Н, дд), 7,63 (1Н, д), 7,53 (1Н, д), 7,38 (2Н, с), 4,47 (1Н, д), 3,30 (1Н, м), 2,92 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, перекрывает пик ДМСО), 1,68 (4Н, м), 1,12 (4Н, м).
Пример 16.
3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-4-метил-№[(К)-1-(тетрагидрофуран-3ил)метил] бензолсульфонамид
0=8=0 ΧΝΗ о
К раствору (К)-4-метил-№((тетрагидрофуран-3-ил)метил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В7) (60 мг, 0,157 ммоль) в ЕЮН/Толуоле (1,5 мл; 1:2) добавляют 5-бром-3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин (промежуточное соединение С7) (35,2 мг, 0,157 ммоль), затем Рб(РРй3)2С12 (5,52 мг, 7,87 мкмоль) и 2 М №2СО3 (0,236 мл, 0,472 ммоль). Реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 100°С в течение 30 мин.
Дополнительные 0,05 экв. катализатора добавляют и реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 100°С в течение еще 1 ч. Добавляют еще катализатор (5,52 мг, 7,87 мкмоль) и реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 100°С в течение еще 2 ч. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают водой и органический слой сушат (М§8О4), фильтруют и концентрируют. Продукт очищают флэш-хроматографией на силикагеле (12 г), элюируя МТБЭ/МеОН градиентом (010%) с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС Ву 0,86, 100%, МС т/ζ 443,5 [М+Н]+; способ 2ттЬо™рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ (ч./млн) 8,09 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 7,85 (1Н, с), 7,68 (2Н, м), 7,52 (1Н, д), 6,28 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,60 (3н, м), 3,32 (1Н, т, частично перекрывается сигналом воды), 2,72 (2Н, т), 2,48 (3Н, с), 2,29 (3Н, с), 2,27 (1Н, м), 1,88 (1Н, м), 1,48 (1Н, м).
Пример 17.
3-[5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-4-метил-№(3-метилоксетан-3илметил)бензолсульфонамид
- 83 032075
К раствору 4-метил-№(3-метилоксетан-3-илметил)-3-(4,4,5,5)тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В4) (511 мг, 1,341 ммоль) и 5-хлор-3-(1,3-диметил1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С7) (200 мг, 0,894 ммоль) в ДМЭ (8 мл) добавляют РйС12(йрр1)СН2С12 аддукт (36,5 мг, 0,045 ммоль), и пробирку дегазируют Ν2 несколько раз затем добавляют 2Ν водный карбонат натрия (1,34 мл, 2,68 ммоль). Смесь перемешивают при 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи. Смесь разбавляют ДХМ, промывают насыщенным раствором соли. Органический слой перемешивают с Ρά поглотительной смолой (тримеркаптотриазин на полимерной подложке). Органическую фазу отделяют с применением фазоразделителя. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Очистка флэш-хроматографией на колонке при элюировании от 0 до 15% МТБЭ/МеОН градиентом на 12 г картридже с двуокисью кремния с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,86, 100%, МС т/ζ 443,5 [М+Н]+; способ 2тт^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф,) δ 8,09 (1Н, с), 7,96 (1Н, с), 7,78 (1Н, д), 7,75 (1Н, с), 7,45 (1Н, д), 4,89 (2Н, шс), 4,75 (1Н, т), 4,37 (4Н, дд), 3,93 (3Н, с), 3,16 (2Н, д), 2,52 (3Н, с), 2,14 (3Н, с), 1,30 (3Н, с).
Пример 18.
3-[5-Амино-6-(2-метил-2Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
О=5=О
I
В 0,5-2-мл микроволновую колбу добавляют №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение В2) (87 мг, 0,235 ммоль), 5-бром-3-(2-метил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С8) (60 мг, 0,235 ммоль) и РйС12(йрр1)-СН2С12 аддукт (9,60 мг, 0,012 ммоль) и 2 М водный карбонат натрия (0,372 мл, 0,745 ммоль) в ДМЭ (1,5 мл). Реакционную смесь нагревают инициирующей микроволновой печи Вю1а§е при 120°С в течение 2 ч. Реакционные смеси объединяют, экстрагируют в этилацетат, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над М§8О4, фильтруют, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя МТБЭ:метанолом (0-10%) на 12 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого масла. Остаток помещают в горячий этанол и перекристаллизовывают с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества;
ЖХМС Ву 0,98 мин т/ζ 418,1 [М+Н]+; способ 2тт1 .οχγρΐ I.
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ (ч./млн) 8,32 (1Н, с), 8,29 (1Н, с), 7,90 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,52 (1Н, д), 7,47 (1Н, т), 7,30 (2Н, широкий с), 4,40 (1Н, с), 4,30 (3Н, с), 2,62 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 1,06 (6Н, с).
Пример 19.
3-[5-Амино-6-(2,5-диметил-2Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Смесь №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (240 мг, 0,650 ммоль), 5-бром-3-(2,5-диметил2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С9) (175 мг, 0,325 ммоль) и хлорида бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (11,41 мг, 0,016 ммоль) и 2 М водного карбоната натрия (0,406 мл,
- 84 032075
0,813 ммоль) в ДМЭ (4 мл) нагревают в микроволновой печи при 120°С в течение 90 мин. Затем добавляют №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (120 мг, 0,325 ммоль, 0,5 экв.), и реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 120°С в течение еще 2 ч. Реакционные смеси объединяют, экстрагируют в этилацетате, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-100%) на 12 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением желтого масла. Остаток помещают в ДМСО и очищают масс-направленной препаративной хроматографией. Требуемые фракции объединяют и продукт экстрагируют в ДХМ, промывают насыщ. NаΗСОз для удаления всех следов ТФК, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Продукт перекристаллизовывают из минимума горячего этанола с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,01 мин МС η/ζ 432,2 [М+Н]+; способ 2ηιηΕονρΗν01.
1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,25 (1Н, с), 7,93 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,52 (1Н, д), 7,46 (1Н, широкий), 7,34 (2Н, широкий), 4,41 (1Н, широкий), 4,21 (3Η, с), 2,62 (2Н, широкий), 2,56 (3Η, с), 2,49 (3Η, с), 1,05 (6Н, с).
Пример 20а. цис-3-[5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидроксициклобутилметил)-4метилбензолсульфонамид.
Пример 20Ь. транс-3-[5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамид
Рацемический 3-[5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидроксициклобутилметил)-4метилбензолсульфонамид получают из 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С6) и 3-бром-№(3-гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А10) в условиях, аналогичных условиям из примера 6.
Стереоизомеры отделяют с применением хиральной СЖХ.
Первый элюированный пик.
Пример 20а. цис-3-[5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,85 мин; МС η/ζ 446,3 [М+Н]+; способ: 2ηιηΕονρΗ.
'И ЯМР (500 МГц, ДМСО-ф,) δ 8,28 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,68 (1Н, дд), 7,54 (2Н, м), 6,73 (2Н, шс), 4,89 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 2,74 (2Н, т), 2,68 (3Η, с), 2,48 (3Η, с), 2,17 (2Н, м), 1,75 (1Н, м), 1,41 (2Н, м).
Второй элюированный пик.
Пример 20Ь. транс-3-[5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,85 мин; МС η/ζ 446,3 [М+Н]+; способ: 2ηιηΕονρΗ.
Ίΐ ЯМР (500 МГц, ДМСО-д6) δ 8,28 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,68 (1Н, дд), 7,60 (1Н, т), 7,52 (1Н, д), 6,73 (2Н, шс), 4,90 (1Н, д), 4,09 (1Н, м), 2,78 (2Н, т), 2,68 (3Η, с), 2,48 (3Η, с), 2,12 (1Н, м), 1,92 (2Н, м), 1,82 (2Н, м).
Обозначение соединений как цис или транс проводят с применением 2Ό ЯМР экспериментов, включая ΝΟΕ8Υ.
Пример 21.
3-[5-Амино-6-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 85 032075
Указанное в заголовке соединение получают с применением П-(2-Гидрокси-2-метилпропил)-4метил-3-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-хлор-3-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С10) в условиях, аналогичных условиям из примера 25.
ЖХМС: Ву 1,03 мин; МС т/ζ 460,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^ρНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ (ч./млн) 8,07 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,84 (1Н, д), 7,68 (1Н, т), 7,65 (1Н, дд), 7,50 (1Н, д), 6,27 (2Н, шс), 3,81 (3Н, с), 3,59 (3Н, м), 3,34 (1Н, м), 2,71 (1Н, т), 2,46 (3Н, с), 2,28 (3Н, с), 2,25 (1Н, м), 1,85 (1Н, м), 1,47 (1Н, м).
Пример 22. транс-3-(5-Амино-6-пиридин-3-илпиразин-2-ил)-П-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из транс-3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-П-(4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό1) и 3-(4,4,5,5тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиридина с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 11.
ЖХМС: Ву 0,74 мин; МС т/ζ 440,2 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,94 (1Н, д), 8,65 (1Н, дд), 8,25 (1Н, с), 8,15 (1Н, дт), 7,90 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,60 (1Н, д), 7,55-7,49 (2Н, м), 6,60 (2Н, с), 4,46 (1Н, д), 3,28 (1Н, ш м), 2,90 (1Н, ш м), 2,49 (3Н, с), 1,74-1,58 (4Н, м), 1,23-1,00 (4Н, м).
Пример 23.
3-[5-Амино-6-(3-изопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-П-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 2 с применением транс-П-(4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) и 5-бром-3-(3-изопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2Ь).
ЖХМС: Ву 1,94 мин; МС т/ζ 473 [М+Н]+: способ А.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,61 (1Н, с), 7,94 (1Н, с), 7,83 (2Н, шс), 7,77 (1Н, д), 7,65 (1Н, д), 7,57 (1Н, д), 4,48 (1Н, с), 3,32 (1Н, мульт.) 3,20 (1Н, м), 2,95 (1Н, шс), 2,45 (3Н, с), 1,68 (4Н, мульт.), 1,37 (6Н, д), 1,15 (4Н, мульт).
Пример 24. транс-3-[5-Амино-6-(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-П-(4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид
- 86 032075
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 2 с применением транс-Х(4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) и 5-бром-3-(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2с).
ЖХМС: Ву 1,94 мин; МС т/ζ 471,1 [М+Н]+: способ А.
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,60 (1Н, с), 7,90 (1Н, с), 7,75 (1Н, д), 7,65 (2Н, шс), 7,55 (1Н, д), 4,48 (1Н, с), 3,32 (1Н, м), 2,95 (1Н, м), 2,49 (3Н, с), 2,25 (1Н, м), 1,93 (1Н, с), 1, 68 (4Н, м), 1,1 (8Н, м).
Пример 25. 3-[5-Амино-6-(3-метил[1,2,4]триазол-1-ил)пиразин-2-ил]-Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=5=0
I
К раствору Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (319 мг, 0,862 ммоль) в ДМЭ (3920 мкл) добавляют 5-бром-3-(3-метил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С12, 200 мг, 0,784 ммоль), хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(П) (27,5 мг, 0,039 ммоль) и №2СО3 (водн. 2,0 М) (1176 мкл, 2,352 ммоль). Реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Реакционную смесь добавляют в воду (50 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮЛс (2x60 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и 81-ΤΜΤ для удаления Рб. Смесь встряхивают по необходимости в течение 1 ч. Твердые вещества удаляют фильтрацией, промывают ЕЮЛс и концентрируют в вакууме. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиентом (2 М N113 в МеОН) в ДХМ на 12 г 81-колонке, загружая ДХМ с получением твердого вещества, которое перекристаллизовывают из горячего ЕЮЛс (~3 мл). При охлаждении продукт кристаллизуют в виде желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,90 мин; МС т/ζ 418,6 [М+Н]+; способ 2ιηίηΙ.ο\νρ11ν(.)1.
X ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 9,19 (1Н, с), 8,37 (1Н, с), 7,93 (1Н, с), 7,72 (1Н, д), 7,53 (1Н, д), 7,49 (1Н, м), 7,42 (2Н, с), 4,41 (1Н, с), 2,63 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 2,45 (3Н, с), 1,07 (6Н, с).
Пример 26.
3-[5 - Амино-6 -(3-циклопропил[1,2,4]триазол-1 -ил)пиразин-2-ил] -Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Смесь 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό3) (250 мг, 0,650 ммоль), 3-циклопропил-1Н-1,2,4-триазола (213 мг, 1,949 ммоль), Ν,Ν-диметилглицина (6,70 мг, 0,065 ммоль), Сз2СО3 (635 мг, 1,949 ммоль) и СЩ (12,37 мг, 0,065 ммоль) в ДМА (3248 мкл) нагревают в микроволновой печи при 150°С в течение 2 ч. Реакционную смесь добавляют к насыщенному №2СО3 (50 мл) и продукт экстрагируют в ЕЮЛс (2x40 мл). Органические фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4, и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают автоматизированной флэш-хроматографией с применением 12 г колонка с двуокисью кремния, элюируя градиентом (0-10% 2 М метанольного N113 в дихлорметане). Продукт кристаллизуют из ЕЮЛс с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого
- 87 032075 твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,95 мин; МС т/ζ 458,5 [М+Н]+; способ 2ттЬС_\003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,13 (1Н, с), 8,35 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,55 (1Н, д), 7,44 (1Н, ш), 7,41 (2Н, с), 4,28 (1Н, с), 2,83 (2Н, ш м), 2,50 (3Н, с, частично закрыт ДМСО), 2,18 (1Н, м): 1,51 (2Н, м), 1,03 (2Н, м) перекрывается с 1,02 (6Н, с), 0,95 (2Н, м).
Пример 27.
Гидрохлорид 3-[5-амино-6-( 1,3-диметил-1 Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил] - №-((К)-1 -этилпирролидин-
2-илметил)-4-метилбензолсульфонамида
0=3=0
НЬк
Указанное в заголовке соединение получают из №((К)-1-Этилпирролидин-2-илметил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В6) и 5хлор-3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С7) с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 16. НС1 соль получают с применением метальной НС1.
ЖХМС: ВУ 0,64 мин; МС т/ζ 470,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо™рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) (НС1 соль) δ 10,1 (1Н шс), 8,15 (2Н, мульт), 7,89 (1Н, с), 7,72 (1Н, д), 7,55 (1Н, д), 6,55 (1Н, шс), 3,82 (3Н, с), 3,50 (2Н, мульт), 3,47 (1Н, мульт), 3,20 (1Н, мульт), 3,15 (3Н, с), 3,12 (1Н, мульт), 3,05 (2Н, мульт), 2,49 (2Н, с), 2,29 (3Н, с), 2,12 (1Н, мульт), 1,95 (1Н, мульт), 1,85 (1Н, мульт), 1,78 (1Н, мульт), 1,23 (3Н, т).
Пример 28.
3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-№-(1-гидроксициклопропилметил)-4метилбензолсульфонамид
В пробирке для микроволновой печи, смесь 5-бром-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С11, 100 мг, 0,415 ммоль), бис-(пинаколато)дибора (116 мг, 0,456 ммоль),
Р0С12(йрр1)-СН2С12 аддукта (33,9 мг, 0,041 ммоль) и ацетата калия (61 мг, 0,622 ммоль) в ДМЭ (1,5 мл) нагревают при 120°С в течение 60 мин. К реакционной смеси затем добавляют 2 М №:СО3 раствор (0,519 мл, 1,037 ммоль), Р0С12(йрр1)-СН2С12 аддукт (17 мг, 0,02 ммоль) и 3-бром-№-(1гидроксициклопропилметил)-4-метилбензолсульфонамид (промежуточное соединение А11, 133 мг, 0,415 ммоль). Реакционную смесь нагревают с применением микроволнового облучения при 90°С в течение 60 мин, затем при 100°С в течение еще 60 мин. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, и органическую фазу промывают водой, затем насыщенным раствором соли. Органический слой сушат над Мд8О4, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток очищают автоматизированной флэшхроматографией на колонке, элюируя градиентом МеОН (0-10%) в МТБЭ в течение более 15 мин с применением 12 г картриджа с двуокисью кремния. Продукт сушат в вакуумной печи при 40°С в течение ночи с получением желтого твердого вещества (51 мг), которое затем очищают с применением препаративной ЖХМС с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,90 мин; МС т/ζ 402,2 [М+Н]+; способ Ι.ο\νρ11 ν(')02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ (ч./млн) 9,34 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,93 (1Н, д), 7,73-7,71 (1Н, дд), 7,67-7,64 (1Н, м), 7,54-7,52 (1Н, д), 7,38 (2Н, широкий с), 5,32 (1Н, с), 2,87-2,86 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 0,50 (2Н, м), 0,46 (2Н, м).
Пример 29.
3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-4-метил-И-(3-метнлоксетан-3илметил)бензолсульфонамид
- 88 032075
К раствору 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1, 100 мг, 0,285 ммоль) в ТГФ (5мл) добавляют ДИПЭА (100 мкл, 0,57 ммоль) и (3-метилоксетан-3-ил)метиламин (29 мг, 0,285 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют ДХМ, затем промывают лимонной кислотой, затем насыщенным раствором соли. Органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества, которое не требует дальнейшей очистки;
ЖХМС: Ву 0,84 мин; МС ш/ζ 416,2 [М+Н]+: способ Ьо^рН_ν002.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 9,33 (1Н, с), 8,42 (2Н, мульт), 7,93 (1Н, д), 7,83 (1Н, мульт), 7,74 (1Н, дд), 7,56 (1Н, д), 7,38 (2Н, ш), 4,31 (2Н, д), 4,16 (2Н, д), 2,92 (2Н, д), 2,50 (3Н, с), 1,20 (3Н, с).
Пример 30.
3-[5-Амино-6-(5-морфолин-4-илметилтиофен-3-ил)пиразин-2-ил]-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Получают из
3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ3) и 4-((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)тиофен-2-ил)метил)морфолина с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 11.
ЖХМС: Ву 0,63 мин; МС ш/ζ 532,3 [М+Н]+: способ 2штЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,15 (1Н, с), 7,98 (1Н, м), 7,83 (1Н, м), 7,69 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,47 (1Н, с), 7,43 (1Н, т), 6,47 (2Н, шс), 4,27 (1Н, с), 3,72 (2Н, с), 3,59 (4Н, м), 2,83 (2Н, м), 2,48 (3Н, с), 2,44 (4Н, м), 1,51 (2Н, м), 1,02 (6Н, с).
Пример 31. 3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропокси)-4метилбензолсульфонамид
Смесь 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1, 200 мг, 0,570 ммоль) и 1-(аминоокси)-2-метилпропан-2-ола (200 г, 1,90 ммоль) в ДХМ (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней. Добавляют пиридин (1 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Смесь затем выпаривают при пониженном давлении и разделяют между этилацетатом и 5% лимонной кислотой. Водную фазу еще экстрагируют этилацетатом, затем ДХМ и объединенные органические фазы сушат, пропускают через фазовый разделитель и затем выпаривают при пониженном давлении. Продукт кристаллизуют из этилацета и сушат под вакуумом с получением 100 мг беловатого твердого вещества. Перекристаллизация из этанола дает указанное в заголовке соединение в виде беловатого твердого вещества;
ЖХ-МС: Ву 0,92 мин; МС ш/ζ 420,3 [М+Н]+: способ Зшппкоир! 1ν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 10,44 (1Н, с), 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,95 (1Н, шс),
- 89 032075
7,78 (1Н, ш д), 7,61 (1Н, д), 7,40 (2Н, с), 4,47 (1Н, с), 3,73 (2Н, с), 2,54 (3Н, с), 1,04 (6Н, с). Пример 32.
3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-Ы-(4-гидрокситетрагидропиран-4-илметил)-4метилбензолсульфонамид
он
4-Аминометилтетрагидро-пиран-4-ол (20 мг, 0,15 ммоль) растворяют в ДМА (1 мл) и добавляют раствор 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1, 35 мг, 0,1 ммоль) в ДМА (2 мл), затем ДИПЭА (0,035 мл, 0,2 ммоль). Реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем растворитель удаляют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт затем перекристаллизовывают из метанола с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,87 мин МС т/ζ 428 [М-ОН]+: способ 2ттЬо\рНу02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 9,35 (1Н, с), 8,40 (2Н, д), 7,93 (1Н, с), 7,72 (1Н, м), 7,54 (2Н, д), 7,40 (2Н, ш), 3,56 (2Н, д), 2,66 (2Н, д), 2,52 (3Н, с), 1,54 (2Н, м), 1,32 (2Н, м).
Пример 33.
Соль трифторуксусной кислоты Ы-(2-Аминоэтил)-3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-4метилбензолсульфонамида
0=3=0
I н νη2
Трет-бутил (2-аминоэтил)карбамат (21 мг, 0,128 ммоль) растворяют в ДМА (1 мл) и добавляют раствор 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1, 30 мг, 0,086 ммоль) в ДМА (1,5 мл), затем ДИПЭА (0,030 мл, 0,171 ммоль). Реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем растворитель удаляют при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт затем суспендируют в ДХМ (2 мл) и добавляют ТФК (0,15 мл, 1,97 ммоль), и смесь встряхивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель затем удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт затем очищают препаративной ВЭЖХ с применением ацетонитрила и воды в качестве элюентов с 0,1% ТФК в качестве модификатора, с получением указанного в заголовке соединения в виде беловатого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,60 мин МС т/ζ 375,2 [М+Н]+: способ 2ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 9,35 (1Н, с), 8,40 (2Н, д), 7,90 (2Н, м), 7,80 (2Н, ш), 7,74 (1Н, д), 7,60 (1Н, д), 7,40 (2Н, ш), 2,95 (2Н, м), 2,87 (2Н, м), 2,52 (3Н, с).
Пример 34.
3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-Ы-(2,2-дифторэтил)-4-метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и 2,2-дифторэтанамина с применением условий, аналогичных тем, которые описаны в примере 32. В этом случае, очистку проводят с применением препаративной ВЭЖХ с градиентом растворителя ацетонитрил/0,1% водная ТФК.
ЖХМС: Ву 1,0 мин МС т/ζ 396,0 [М+Н]+: способ 2ттЬо\рНу01.
- 90 032075 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ 9,30 (1Н, с), 8,41 (2Н, д), 8,22 (1Н, м), 7,92 (1Н, с), 7,75 (1Н, м), 7,55 (1Н, д), 7,40 (2Н, ш), 6,00 (1Н, т), 3,23 (2Н, т), 2,51 (3Н, с).
Пример 35.
3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-№(3-гидроксиметилоксетан-3-илметил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и (3-аминометилоксетан-3ил)метанола с применением условий, аналогичных тем, которые описаны в примере 32. В этом случае, очистку проводят с применением препаративной ВЭЖХ с градиентом растворителя ацетонитрил/0,1% водная ТФК.
ЖХМС: Ву 0,83 мин МС т/ζ 432,2 [М+Н]+: способ 2ттко\\р1 Ιν02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ 9,35 (1Н, с), 8,40 (2Н, д), 7,94 (1Н, с), 7,80 (1Н, м), 7,75 (1Н, м), 7,57 (1Н, д), 7,40 (2Н, ш), 4,30 (2Н, д), 4,25 (2Н, д), 3,52 (2Н, м), 2,29 (2н, д), 2,51 (3Н, с). Одна переменная видна не четко.
Пример 36. 3-(5-Амино-6-[1,2,4]триазол-1-илпиразин-2-ил)-№(3,3-диметил-2-оксобутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-
4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и 1-амино-3,3-диметилбутан-2-она с применением условий, аналогичных тем, которые описаны в примере 32. В этом случае, очистку проводят с применением препаративной ВЭЖХ с градиентом растворителя ацетонитрил/0,1% водная ТФК.
ЖХМС: Ву 1,06 мин МС т/ζ 430,2 [М+Н]+: способ 2ттко\\р1 Ιν02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ 9,35 (1Н, с), 8,40 (2Н, дд), 7,92 (1Н, с), 7,80 (1Н, м), 7,73 (1Н, д), 7,52 (1Н, д), 7,40 (2Н, ш), 4,00 (2Н, д), 2,52 (3Н, с), 1,00 (9Н, с).
Пример 37.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-хлор-№(2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамид
Стадия 1. Хлорид 3-бром-4-хлорбензол-1-сульфонила.
Реагент для хлорсульфонилирования получают барботированием 74 г оксида серы в 740 мл ледяной уксусной кислоты, затем добавлением 30 г СиС12 в 35-40 мл воды. Эту смесь отстаивают, и зеленую надосадочную жидкость применяют для реакции.
- 91 032075
Методика.
К перемешиваемой суспензии 3-бром-4-хлоранилина (1 г, 4,84 ммоль) в уксусной кислоте (8 мл) и конц. хлористоводородной кислоте (8 мл) при 0°С добавляют, по каплям, охлажденный (0°С) раствор нитрита натрия (368 мг, 5,33 ммоль) в воде (5 мл). Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и затем добавляют, по каплям, пока холодная, в охлаждаемую колбу (0°С), перемешивают с реагентом для хлорсульфонилирования (40 мл). Смесь становится черной/коричневой, затем ее нагревают до комнатной температуры и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, к этому времени она превращается в желто/зеленый раствор. Добавляют измельченный лед и, когда он плавится, полученный осадок восстанавливают фильтрацией и сушат на насосе. Ее растворяют в Е1ОАс (50 мл), сушат (Мд8О4), фильтруют и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла. Этот продукт применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки;
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 8,32 (1Н, д), 7,95 (1Н, дд), 7,73 (1Н, д).
Стадия 2. 3-Бром-4-хлор-К-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензолсульфонамид.
К перемешиваемому раствору 3-бром-4-хлорбензол-1-сульфонилхлорида (стадия 1) (500 мг, 1,72 ммоль) и триэтиламина (0,385 мл, 2,76 ммоль) в сухом ТГФ (10 мл) при комнатной температуре добавляют раствор 4-амино-2-метилбутан-2-ола (231 мг, 2,6 ммоль) в сухом ТГФ (5 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь гасят добавлением 50% водн. хлорида аммония (20 мл) и экстрагируют Е1ОАс (3x20 мл). Экстракты Е1ОАс объединяют и промывают насыщ. насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Мд8О4), фильтруют и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества. Этот продукт применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Х) δ 8,14 (1Н, д), 7,86 (1Н, д), 7,80 (1Н, дд), 7,72 (1Н, шс), 4,45 (1Н, шс), 2,65 (2Н, с), 1,05 (6Н, с).
Стадия 3. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-хлор-К-(2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамид.
Смесь 5-бром-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С11) (200 мг, 0,83 ммоль), бис-(пинаколато)дибора (263 мг, 1,04 ммоль), ацетата калия (122 мг, 1,25 ммоль) и РбС12(брр£)-СН2С12 аддукта (34 мг, 0,041 ммоль) растворяют в ДМЭ (5 мл) и нагревают при 90°С в течение 5 ч, затем добавляют 3-бром-4-хлор-К-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензолсульфонамид (стадия 2) (284 мг, 0,83 ммоль), 2 М водн. карбонат натрия (1,25 мл, 2,5 ммоль) и затем РбС12(брр£)-СН2С12 аддукт (34 мг, 0,041 ммоль), и смесь перемешивают при 90°С в течение 16 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют Е1ОАс (3x20 мл). Экстракты Е1ОАс объединяют, промывают насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Мд8О4), фильтруют и абсорбируют непосредственно в силикагель для сухой загрузки в колонку. Смесь очищают хроматографией на силикагеле (24 г колонка), элюируя 0-100% Е1ОАс в изогексане в течение более 20 мин, затем продолжают 100% Е1ОАс в течение еще 3 мин. Фракции продукта объединяют и выпаривают. Растирание с Е1ОАс и фильтрация дают указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого порошка;
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 9,33 (1Н, с), 8,57 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,11 (1Н, м), 7,82 (2Н, м), 7,71 (1Н, шс), 7,49 (2Н, шс), 4,45 (1Н, шс), 2,67 (2Н, с), 1,06 (6Н, с).
ЖХМС: Ву 0,86 мин; МС т/ζ 424/426 [М+Н]+: способ 2т1пЬо^рН.
Пример 38.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-хлор-Х-(3-гидрокси-3метилбутил)бензолсульфонамид
О=5=О
ΝΗ
Указанное в заголовке соединение получают с применением условий, аналогичных тем, которые применяют для синтеза из примера 37.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Х) δ 9,31 (1Н, с), 8,58 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,08 (1Н, д), 7,85 (1Н, д), 7,81 (1Н, дд), 7,67 (1Н, шс), 7,49 (2Н, шс), 4,28 (1Н, шс), 2,87 (2Н, м), 1,52 (2Н, м), 1,02 (6Н, с).
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 438/440 [М+Н]+: способ 2т1пЬо^рН.
Пример 39.
3-(5-Амино-6-(фуран-3-ил)пиразин-2-ил)-Х-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4- 92 032075 метилбензолсульфонамид
О=3=и
ΗΝ
ОН
К перемешиваемой смеси 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ2) (200 мг, 0,54 ммоль), фуран-3-илбороновой кислоты (78 мг, 0,7 ммоль) и РйС12(йрр£)-СН2С12 аддукта (22 мг, 0,027 ммоль) в ДМЭ (3 мл) добавляют карбонат натрия (0,81 мл 2 М водн. раствора, 1,62 ммоль). Смесь нагревают при 90°С в течение 2 ч, затем охлаждают до комнатной температуры, разбавляют 10% водн. гидрофосфатом калия (5 мл) и экстрагируют ЕЮАс (3x15 мл). Экстракты ЕЮАс объединяют, промывают насыщ. насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (МдЗО4), фильтруют и абсорбируют непосредственно в силикагель перед хроматографией. Неочищенный продукт очищают хроматографией на силикагеле (24 г), элюируя 0-100% ЕЮАс в изогексане в течение более 10 мин в качестве элюента. Пик продукта элюируют при 100% ЕЮАс. Фракции продукта объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,40 (1Н, м), 8,17 (1Н, с), 7,89 (1Н, д), 7,82 (1Н, м), 7,69 (1Н, дд), 7,52 (1Н, д), 7,47 (1Н, т), 7,04 (1Н, м), 6,42 (2Н, шс), 4,39 (1Н, с), 2,63 (2Н, д), 2,49 (3Н, с, частично закрыт ДМСО-бб пиком), 1,06 (6Н, с).
ЖХ-МС: Ву 0,98 мин; МС т/ζ 403,6 МН+; способ 2т1пЬо^рНу01.
Пример 40.
3-(5-Амино-6-(2,5-диметилтиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Стадия 1. 3-Амино-6-бром-Ы-метокси-Ы-метилпиразин-2-карбоксамид.
К перемешиваемой суспензии 3-амино-6-бромпиразин-2-карбоновой кислоты (45 г, 206 ммоль) и гидрохлорида О,Ы-диметилгидроксиламина (20,13 г, 206 ммоль) в ДМФ (295 мл) при КТ добавляют триэтиламин (115 мл, 826 ммоль) при подаче Ы2. Полученную смесь охлаждают до 0°С и к этой желтой суспензии ТЗР® (50% в ЕЮАс) (151 г, 237 ммоль) добавляют по каплям в течение более 5 мин (сохраняя Т ниже 10°С-экзотерм). Смесь нагревают до КТ и перемешивают в течение 2-3 ч. Во время реакции содержимое затвердевает в гель. Колбу разбавляют еще 200 мл ДМФ и нагревают до 40°С и выстаивают в течение ночи. Добавляют еще триэтиламин (50 мл, 0,4 экв.), гидрохлорид О,Ы-диметилгидроксиламина (10 г, 0,5 экв.) и ТЗР® (80 г, 0,5 экв.) и реакционную смесь нагревают до 40°С и перемешивают в течение 2-3 ч. Смесь охлаждают до КТ и затем перемешивают в течение трех дней. Смесь обрабатывают добавлением 2 М НС1 (100 мл) и разбавляют этилацетатом (1л) и водой (500 мл). Двухфазную смесь разделяют. Водный слой подщелачивают 2 М ЫаОН (~150 мл), снова добавляют органический экстракт и двухфазную смесь встряхивают. Органическую фазу экстрагируют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над МдЗО4, фильтруют и сушат под вакуумом с получением желтого масла. Неочищенное желтое масло загружают непосредственно в 750 г колонку (в ДХМ ~20 мл) и элюируют изогексаном/ЕЮАс (070% градиент). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяют и выпаривают с получением желтого масла. Диэтиловый эфир (50 мл) добавляют и смесь выпаривают под вакуумом с получением бледножелтого твердого вещества;
ЖХ-МС: Ву 0,88 мин; МС т/ζ 263,1 МН+; способ 2ттЬС_у003.
- 93 032075
Стадия 2. 1-(3-Амино-6-бромпиразин-2-ил)пропан-1-он.
К перемешиваемому раствору 3-амино-6-бром-Ы-метокси-Ы-метилпиразин-2-карбоксамида (стадия 1) (4 г, 15,32 ммоль) в сухом ТГФ (50 мл), охлажденному на ледяной бане под азотом, добавляют по каплям 1 М бромид этилмагния в ТГФ (46,0 мл, 46,0 ммоль). Смесь медленно нагревают до комнатной температуре.
Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и гасят добавлением по каплям воды. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают водой и водную фазу повторно экстрагируют еще этилацетатом. Органические фазы объединяют, сушат (Мд§О4), фильтруют и концентрируют. Коричневый остаток растирают в диэтиловом эфире, фильтруют под вакуумом и сушат.
ЖХ-МС: Ву 1,06 мин; МС ш/ζ 230,0/232,0 [М+Н]+ Способ 2ш1пЬо^рНт01.
Стадия 3. 1-(3-Амино-6-бромпиразин-2-ил)-2-бромпропан-1-он.
К раствору 1-(3-амино-6-бромпиразин-2-ил)пропан-1-она (стадия 2) (3,04 г, 13,2 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (75 мл) при комнатной температуре добавляют трибромид пиридиния на полимерной подложке (14,2 г загрузки 2 ммоль/г, 28,4 ммоль) затем 33% НВг в уксусной кислоте (4,35 мл, 26,4 ммоль). Смесь нагревают при 70°С в течение 1 ч. ЖХМС показывает приблизительно 4:1 продукт к исходному материалу. Нагревание продолжают при 70°С в течение еще 30 мин. После охлаждения летучие вещества (включая АсОН) удаляют при пониженном давлении. Оставшийся темно-коричневый сироп растворяют в Е1ОАс (около 150 мл) и промывают насыщ. бикарбонатом натрия (150 мл). Экстракты Е1ОАс отделяют, промывают насыщенным раствором соли (100 мл), сушат (Мд§О4) фильтруют и выпаривают с получением коричневого масла. Масло растирают в Е12О (50 мл) и добавляют изогексан (200 мл) с получением коричневого твердого вещества, которое восстанавливают фильтрацией и сушат.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,53 (1Н, с), 8,05 (2Н, шс), 5,86 (1Н, кв), 1,77 (3Н, д); чистота приблизительно 90%.
Стадия 4. 5-Бром-3-(2,5-диметилтиазол-4-ил)пиразин-2-амин.
Перемешиваемую смесь 1-(3-амино-6-бромпиразин-2-ил)-2-бромпропан-1-она (стадия 3) (782 мг, 2,53 ммоль) и тиоацетамида (399 мг, 5,32 ммоль) в Е1ОН (25 мл) нагревают при 50°С в течение 30 мин. Смесь охлаждают до КТ и перемешивают в течение ночи. Летучие вещества удаляют при пониженном давлении. Остаток разделяют между Е1ОАс (30 мл) и водой (30 мл) и экстрагируют еще Е1ОАс (3x30 мл). Экстракты Е1ОАс объединяют, промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат (Мд§О4), фильтруют и выпаривают с получением коричневого масла. Неочищенного продукта абсорбируют в силикагель и очищают флэш-хроматографией на силикагеле с применением 40 г колонки и 0-100% Е1ОАс в изогексане в качестве элюента. Желаемое соединение сначала элюируют при приблизительно 35% Е1ОАс. Выпаривание фракций, содержащих продукт, дает бледно-желтое твердое вещество;
ЖХ-МС: Ву 1,24 мин; МС ш/ζ 285,4/287,4 [М+Н]+; способ 2шшЬо^рН_т01.
1Н ЯМР (400 МГц, СРС1;) δ 7,97 (1Н, с), 6,57 (2Н, шс), 2,76 (3Н, с), 2,68 (3Н, с).
Стадия 5. 3-(5-Амино-6-(2,5-диметилтиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид.
К смеси Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (95 мг, 0,26 ммоль), 5-бром-3-(2,5диметилтиазол-4-ил)пиразин-2-амина (стадия 4) (67 мг, 0,24 ммоль) и РбС12(брр£)-СН2С12 аддукт (19 мг, 0,023 ммоль) в ДМЭ (2 мл) в 5 мл пробирке, оборудованной мешалкой, добавляют карбонат натрия (352 мкл 2 М водн. раствор, 0,705 ммоль). Смесь нагревают при 90°С в течение 2 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют Е1ОАс (10 мл) и водой (10 мл) и экстрагируют еще Е1ОАс (3x10 мл). Экстракты Е1ОАс объединяют, промывают насыщ. насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Мд§О4), фильтруют и выпаривают с получением коричневого масла. Неочищенный продукт растворяют в минимальном количестве ДХМ и применяют на 4 г колонке с силикагелем и очищают хроматографией, элюируя 0-100% Е1ОАс в изогексане в качестве элюента. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединяют и выпаривают с получением бледно-желтого масла, которое растирают с применением ДХМ:Е12О (1:10). Полученный желтый порошок восстанавливают фильтрацией и сушат с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХ-МС: Ву 1,07 мин; МС ш/ζ 448,3 [М+Н]+; способ 21птЕо\\рНт01.
1Н ЯМР (400 МГц, СРС1;) δ 8,09 (1Н, с), 7,99 (1Н, д), 7,77 (1Н, дд), 7,44 (1Н, д), 6,73 (2Н, шс), 5,01 (1Н, т), 2,94 (2Н, д), 2,78 (3Н, с), 2,73 (3Н, с), 2,53 (3Н, с), 1,27 (6Н, с). ОН протон отсутствует из-за обмена.
Пример 41.
(Л)-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((1-этилпирролидин-2-ил)метил)-4метилбензолсульфонамид
- 94 032075
Рй-118 (13,58 мг, 0,022 ммоль) добавляют к смеси 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С6) (100 мг, 0,441 ммоль), №((К)-1-этилпирролидин-2-илметил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В6) (198 мг, 0,485 ммоль), фосфата калия (187 мг, 0,882 ммоль), 1,4-диоксана (1765 мкл) и воды (441 мкл). Реакционную смесь нагревают в микроволновом реакторе в течение 90 мин при 120°С.
Реакционную смесь добавляют в воду (50 мл) и экстрагируют Е1ОАс (50 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (50 мл) и сушат над Мд8О4. Твердое вещество отфильтровывают, промывают Е1ОАс и растворитель концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают флэш-хроматографии на колонке, элюируя градиентом 0-10% МеОН в ДХМ с применением 4 г колонки с двуокисью кремния, загружая ДХМ. Полученное масло растирают с Е12О с получением твердого вещества, которое отфильтровывают, промывают Е12О и сушат в течение ночи в вакуумной печи при 50°С с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,74 мин; МС т/ζ 473,6 [М+Н]+; способ 2т1п1.о\\р1 Ι\Ό3.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 8,27 (1Н, с), 8,21 (1Н, с), 7,85 (1Н, с), 7,70 (1Н, д), 7,52 (1Н, д), 7,48 (1Н, шс), 6,73 (2Н, шс), 2,94 (1Н, м), 2,84 (1Н, м), 2,67 (3Н, с), 2,61-2,57 (2Н, м), 2,48 (3Н, с), 2,39 (1Н, м), 2,14 (1Н, м), 2,05 (1Н, м), 1,76 (1Н, м), 1,59-1,54 (3Н, м), 0,92 (3Н, т).
Пример 42.
(К)-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((тетрагидрофуран-3ил)метил)бензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин2-амина (промежуточное соединение С6) и (К)-4-метил-№((тетрагидрофуран-3-ил)метил)-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В7) в условиях, аналогичных условиям из примера 41;
ЖХМС: Ву 1,07 мин; МС т/ζ 446,5 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03.
Пример 43.
3-(5 -Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид
Ο—8—Ο
МН
НО
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-
2-амина (промежуточное соединение С6) и №(3-гидроксициклобутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамиде (получают аналогично промежуточному соединению В1, начиная с 3-аминоциклобутанола) в условиях, аналогичных условиям из примера 41;
ЖХМС: Ву 1,02 мин; МС т/ζ 432,3 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03.
Пример 43 а. цис-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид и
- 95 032075 пример 43Ь: транс-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид
смесь
3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(3гидроксициклобутил)-4-метилбензолсульфонамида (пример 43) разделяют хиральной СЖХ в следующих
Диастереомерную условиях:
Подробности способа:
Колонка: РЬепотепех ЬЮХ А2 250x100 мм 5 мкм @ 35°С
Подвижная фаза: 45% ИПС+0,1% ДЭА/55% СО2
Скорость потока: 10 мл/мин
Две разделенные фракции концентрируют при пониженном давлении. Остатки растворяют в МеОН и выстаивают при комнатной температуре и затем сушат в вакуумной печи при 50°С в течение более трех дней с получением указанных в заголовке соединений.
Пример 43а. цис-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид.
Пик 1: СЖХ время удержания=8,36 мин.
ЖХМС: Ву=0,97 мин, МС т/ζ 432,2 [М+Н]+; способ 2ηιιηΙ.ο\νρΙ Ιν03.
Пример 43Ь. транс-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид.
Пик 2: СЖХ время удержания=10,73 мин.
ЖХМС: Ву=0,97 мин, МС т/ζ 432,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^ρНν03.
2Н ЯМР-АV81762-(400 МГц, МеОЭ) - соответствует предложенной структуре.
Цис/транс распределение подтверждают ЯМР анализом.
Пример 44.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-((3-(гидроксиметил)оксетан-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин2-амина (промежуточное соединение С6) и П-((3-(гидроксиметил)оксетан-3-ил)метил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (получают аналогично промежуточному соединению В1, начиная с (3-(аминометил)оксетан-3-ил)метанола) в условиях, аналогичных условиям из примера 41;
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 462,3 [М+Н]+; способ 2πιιηΙ.ο\\ρΙ Ιν03.
Пример 45.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензолсульфонамид
- 96 032075
К перемешиваемому раствору этаноламина (11,89 мкл, 0,197 ммоль), ДИПЭА (57,3 мкл, 0,328 ммоль) в ДМА (656 мкл) добавляют хлорид 3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4метилбензол-1-сульфонила (промежуточное соединение Е) (50 мг, 0,131 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при КТ и затем добавляют к воде (50 мл) и экстрагируют ЕЮАс (50 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (50 мл) и сушат над Мд8О4. Твердое вещество отфильтровывают, промывают ЕЮАс и растворитель концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя градиентом 0-10% МеОН в ДХМ на 4 г колонке с двуокисью кремния, загружая ДХМ и МеОН. Полученное масло растирают с Е!2О с получением твердого вещества, которое отфильтровывают, промывают Е!2О и сушат в вакуумной печи при 50°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,99 мин; МС т/ζ 406,3 [М+Н]+; способ 2ηίηΕονρΗν03.
1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,27 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,85 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,57 (1Н, т), 7,53 (1Н, д), 6,73 (2Н, шс), 4,67 (1Н, т), 3,38 (2Н, кв), 2,81 (2Н, кв), 2,68 (3Η, с), 2,48 (3Η, с).
Следующие примеры получают по методике, аналогичной примеру 45 из 3-(5-амино-6-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е) и подходящего коммерчески доступного амина:
Пример 45.1.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(оксетан-3илметил)бензолсульфонамид
О “5—О
N11 с/
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 432,3 [М+Н]+; способ 2ηίηΕονρΗν03. Пример 45.2.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((тетрагидро-2Н-пиран-4ил)метил)бензолсульфонамид
0—5—0
ΝΗ
ЖХМС: Ву 1,15 мин; МС т/ζ 460,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ονрΗν03.
- 97 032075
Пример 45.3.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(тетрагидро-2Н-пиран-4ил)бензолсульфонамид
0_3_0
ΝΗ
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 446,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03.
Пример 45.4.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидро-2Н-пиран-2ил)метил)бензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,20 мин; МС т/ζ 460,3 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03. Пример 45.5.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(2,2,2трифторэтил)бензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,22 мин; МС т/ζ 444,8 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03. Пример 45.6.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,14 мин; МС т/ζ 446,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03. Примеры 45.6а и 45.6Ь.
(К)-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамид и (8)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы- 98 032075 ((тетрагидрофуран-2-ил)метил)бензолсульфонамид
В этом случае, рацемическую смесь разделяют хиральным разделением с получением отдельных изомеров:
Колонка: СЫга1рак А5-Н, 250x10 мм, 5 мкмш @ 35°С,
Подвижная фаза: 50% Изопропанол+0,1% об./об. ДЭА/50% СО2,
Поток: 10 мл/мин,
Определение: УФ @ 220 нм,
Инструмент: Вегдег Мтптдгат СЖХ1
Пример 45.6а.
Первое элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=7,00 мин. (К)-3-(5-Амино-6-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2-ил)метил)бензолсульфонамид или (З)3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 1,13 мин; МС т/ζ 446,1 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу03.
Пример 45.6Ь.
Второе элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=8,73 мин. (К)-3-(5-Амино-6-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2-ил)метил)бензолсульфонамид или (З)3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 1,15 мин; МС т/ζ 446,3 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу03.
Пример 45.7.
-(5 -Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(тетрагидрофуран-3 ил)бензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,09 мин; МС т/ζ 432,2 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу03.
Примеры 45.7а и 45.7Ь. (К)-3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(тетрагидрофуран-3ил)бензолсульфонамид и (З)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы(тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид
В этом случае, рацемическую смесь разделяют хиральным разделением с получением отдельных изомеров:
- 99 032075
Колонка: СЫга1рак 1С, 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С,
Подвижная фаза: 50% Метанол+0,1% об./об. ДЭА/50% С02,
Поток: 10 мл/мин,
Определение: УФ @ 220 нм,
Инструмент: Вегдег М1п1дгат СЖХ1
Пример 45.7 а.
Первое элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=11,74 мин. (Я)-3-(5-Амино-6-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-^(тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид или (8)-3-(5Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 432,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν03.
Пример 45.7Ь.
Второе элюируемое соединение: СЖХ Время удержания=13,42 мин. (Я)-3-(5-Амино-6-(2метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид или (8)-3-(5Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 432,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν03.
Пример 45.8.
(1-((3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенил)сульфонил)азетидин-3ил)метанол
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 432,1 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν03.
Пример 45.9.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№((4-(гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-4ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,05 мин; МС т/ζ 490,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν03.
Пример 45.10.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№((4-гидрокситетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метил)-
4-метилбензолсульфонамид
- 100 032075
ЖХМС: Ву 1,03 мин; МС т/ζ 476,3 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу03.
Пример 45.11.
-(5 -Амино-6-(2-метилтиазол-5 -ил)пиразин-2-ил)^-((3 -гидроксиоксетан-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 448,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу03.
Пример 45.12.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамид
0=3—0
I
ΝΗ
ЖХМС: Ву 0,71 мин; МС т/ζ 475,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу03.
Пример 46.
-(5 -Амино-6-(1,5-даметил-1 Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
О— 5==0:
ΗΝ
Смесь 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό2) (60 мг, 0,162 ммоль), 1,5-диметил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (40 мг, 0,180 ммоль), дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (5 мг, 7,12 мкмоль) в ДМЭ (0,75 мл) и 2 М водного карбоната натрия (0,25 мл, 0,500 ммоль) нагревают в микроволновой печи до 130°С в течение 1 ч. Полученную смесь разбавляют 10% метанолом в ДХМ и фильтруют через 1 г Се1йе®, промывая дополнительным 10% метанолом в ДХМ. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (12 г двуокись кремния, градиент 0-20% метанол в МТБЭ). Фракции продукта выпаривают при пониженном давлении и сушат в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения в виде коричнево-оранжевого твердого вещества;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 8,08 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,72 (1Н, с), 7,67 (1Н, дд), 7,49 (1Н, д), 7,44 (1Н, ш м), 6,23 (2Н, с), 4,38 (1Н, с), 3,80 (3Н, с), 2,61 (2Н, д), 2,46 (3Н, с), 2,36 (3Н, с), 1,05 (6Н, с).
ЖХМС: Ву 0,89 мин; МС т/ζ 431,2 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\\рНу01.
- 101 032075
Пример 46.1.
3-(5-Амино-6-(2,4-диметилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
ΗΝ
Указанное в заголовке соединение получают способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 46, начиная с 2,4-диметил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)тиазола;
ЖХМС: Ву 0,91 мин; МС т/ζ 448,0 [М+Н]+; 446,2 [М-Н]-; способ: 2тт1,о\\р)1 Ιν01.
Пример 46.2.
-(5-Амино-6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
он
Указанное в заголовке соединение получают способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 46, начиная с 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 417,3 [М+Н]+; способ: 2тш1,о\\рй Ιν01.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ-Щ) δ 8,26 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 8,00 (1Н, с), 7,93 (1Н, д, I ~2 Гц), 7,80 (1Н, дд, I ~8 и 2 Гц), 7,53 (1Н, д, I ~8 Гц), 4,01 (3Н, с), 2,81 (2Н, с), 2,51 (3Н, с), 1,19 (6Н, с).
Пример 47.
3-(5-Амино-6-(3,4-диметил-1Н-пиразол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
I
ΗΝ
Указанное в заголовке соединение получают из 3,4-диметил-1Н-пиразола и 3-(5-амино-6хлорпиразии-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбеизолсульфоиамида (промежуточное соединение Ό2) способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 15.
ЖХМС: Ву 1,16 мин; МС т/ζ 431,2 [М+Н]+; способ: 2тш1,о\\рй Ιν01.
Пример 48.
3-(5-Амиио-6-(3,5-димеτил-1Н-пиразол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-меτилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 102 032075
Указанное в заголовке соединение получают из 3,5-диметил-1Н-пиразола и 3-(5-амино-6хлорпиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό2) способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 15.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОО-д4) δ 8,19 (1Н, с), 7,94 (1Н, д, 1 ~2 Гц), 7,78 (1Н, дд, 1 ~8 и 2 Гц), 7,52 (1Н, д, 1 ~8 Гц), 6,15 (1Н, с), 2,81 (2Н, с), 2,51 (3Н, с), 2,46 (3Н, с), 2,31 (3Н, с), 1,18 (6Н, с).
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 431,3 [М+Н]+; способ: 2т1пЬо\рНу01.
Пример 49.
3-(5-Амино-6-(3,5-диметил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 3,5-диметил-1Н-1,2,4-триазола и 3-(5-амино-6хлорпиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό2) способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 15.
ЖХМС: Ву 0,88 мин; т/ζ 430,2 [М-Н]-; способ: 2т1пЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,38 (1Н, с), 7,86 (1Н, д, 1 ~2 Гц), 7,71 (1Н, дд, 1 ~8 и 2 Гц), 7,53 (1Н, д, 1 ~8 Гц), 7,47 (1Н, ΐ, 1 ~6,5 Гц), 6,98 (2Н, ш), 2,62 (2Н, д, 1 6,5 Гц), 2,47 (3Н, с), 2,33 (3Н, с), 1,05 (6Н, с).
ОН не виден (под водным пиком/обменен) и одна метильная группа не видна (она часто скрыта пиком растворителя в родственных соединениях). Не идентичные метильные группы на триазоле позволяют предположить, что продукт такой, как нарисован, а не присоединен через Ν между метильными группами.
Пример 50.
3-(5-Амино-6-(2,4-лиметил-1Н-имидазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 2,4-диметил-1Н-имидазола и 3-(5-амино-6хлорпиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό2) способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 15.
ЖХМС: Ву 0,64 мин; МС т/ζ 431,3 [М+Н]+; способ: 2т1пЬо\рНу01.
- 103 032075
Пример 51.
3-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-К-(4,4,4-трифтор-3-
Смесь 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (45 мг, 0,216 ммоль), дихлорида бис-(трифенилфосфин)палладия (14 мг, 0,020 ммоль), 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4метил-К-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение Ό4) (85 мг, 0,200 ммоль), 2 М карбоната натрия (0,300 мл, 0,600 ммоль), 1,2-диметоксиэтана (1 мл) нагревают в микроволновой печи до 120°С в течение 1 ч, затем разделяют между ДХМ и водой и отделяют с применением фазоразделительной колонки. Органическую фазу выпаривают при пониженном давлении с получением коричневой смолы, которую повторно растворяют в этилацетате и связывают с двуокисью кремния, затем очищают флэш-хроматографией на колонке (2 г двуокись кремния, 0-10% метанол в МТБЭ). Подходящие фракции объединяют и выпаривают с получением оранжевой смолы. Ее кристаллизуют из этилацетата/диэтилового эфира с получением красноватого твердого вещества;
1Н ЯМР (400 МГц, МеОЭ-дд) δ 8,21 (1Н, с), 8,05 (1Н, с), 8,03 (1Н, с), 7,90 (1Н, д), 7,78 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 4,02 (1Н, ш м) перекрывается с 4,00 (3Н, с), 3,07 (2Н, м), 2,51 (3Н, с), 1,83 (1Н, м), 1,68 (1Н, м).
ЖХ-МС: Ву 0,83 мин; МС т/ζ 471,4 [М+Н]+; способ: 2т1пЬо\рН.
Пример 52а. (К)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-К-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульфонамид или (8)-3-(5-Амино-6-( 1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-
4-метил-К-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид
Смесь 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-К-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульфонамида (один энантиомер неизвестной конфигурации, Промежуточное соединение 1)4а) (45 мг, 0,106 ммоль), 1,3-диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола (25 мг, 0,113 ммоль) и дихлорида бис-(трифенилфосфин)палладия (4 мг, 5,70 мкмоль) в 1,2диметоксиэтане (0,5 мл) и 2 М карбонате натрия (150 мкл, 0,300 ммоль) нагревают в микроволновой печи до 130°С в течение 1 ч. Полученную смесь разбавляют 10% метанолом в ДХМ и фильтруют через 1 г Се111е®, промывая дополнительным 10% метанолом в ДХМ, затем очищают флэш-хроматографией на колонке (12 г двуокись кремния, 0-20% метанол в МТБЭ) с получением 35 мг оранжевого стеклообразно го твердого вещества;
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,08 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,85 (1Н, д, I ~2 Гц), 7,67 (1Н, дд, ~2 и 8 Гц) перекрывается с 7,72-7,59 (приблизительно, 1Н, в широкий), 7,52 (1Н, д, I ~8 Гц), 6,28 (2Н, с), 6,17 (1Н, в широкий), 3,99 (1Н, широкий м), 3,82 (3Н, с), 2,90 (2Н, м), 2,47 (3Н, с), 2,29 (3Н, с), 1,69 (1Н, широкий м), 1,57 (1Н, широкий м).
ЖХМС: Ву 0,98 мин; МС т/ζ 485,5 [М+Н]+; способ: 2т1п1.о\\р1 Ι\ΌΙ.
Хиральная СЖХ: Ву 5,51 мин; 100% чистота по ДМД.
Способ: СЫга1рак АБ-3, 150x2,1 мм 3 мкм @ 40°С, 0,7 мл/мин, УФ @ 220 нм и 254 нм.
А=СО2, В=Метанол+0,1% об./об. ДЭА; Градиент: 0-1,5 мин 5% В; 1,5-6,0 мин 5-50% В; 6,0-9,0 мин
- 104 032075
50% В.
Пример 52Ь.
(К)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульф онамид или (8)-3 -(5 -амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4метил-Ы-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 52а из Промежуточного соединения И4Ь.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,08 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,85 (1Н, д, I ~2 Гц), 7,69-7,60 (2Н, м), 7,52 (1Н, д, I ~8 Гц), 6,28 (2Н, с), 6,16 (1Н, д, I ~6,5 Гц), 3,98 (1Н, м), 3,81 (3Н, с), 2,89 (2Н, м), 2,47 (3Н, с),
2,29 (3Н, с), 1,73-1,51 (2Н, м).
ЖХМС: Ву 0,93 мин; т/ζ 485,2 [М+Н]+; способ: 2т1пЬо\рНу01.
Хиральная СЖХ: Ву 5,15 мин; 97,4% чистота по ДМД (следовательно ~95% эи);
Способ: СЫга1рак АО-3, 150x2,1 мм 3 мкм @ 40°С, 0,7 мл/мин, УФ @ 220 нм и 254 нм.
А=СО2, В=Метанол+0,1%об./об. ДЭА; Градиент: 0-1,5 мин 5% В; 1,5-6,0 мин 5-50% В; 6,0-9,0 мин 50% В.
Пример 53.
5-(5 -Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-6метилпиридин-3 -сульфонамид
ОН
Стадия 1. 5-Бром-6-хлор-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил) пиридин-3-сульфонамид.
К раствору 1-амино-2-метилпропан-2-ола (0,306 г, 3,44 ммоль) и ДИПЭА (0,62 мл, 3,55 ммоль) в ТГФ (6 мл), охлажденному на ледяной бане, добавляют по каплям раствор 5-бром-6-хлорпиридин-3сульфонилхлорида (1 г, 3,44 ммоль) в ТГФ (6 мл). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем добавляют воду (30 мл), смесь доводят до рН 4-5 добавлением 1 М НС1/1 М бикарбоната натрия, при необходимости, и экстрагируют этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (25 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества, которое сушат в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,03 мин; МС т/ζ 345,0 и 343,0 (Вг изотопы) [М+Н]+; способ: 2т1пЬо\рНу03.
Стадия 2. 5-Бром-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-6-йодпиридин-3-сульфонамид.
К раствору 5-бром-6-хлор-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)пиридин-3-сульфонамида (со стадии 1) (500 мг, 1,455 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляют триметилсилилхлорид (375 мкл, 2,93 ммоль). Через 15 мин добавляют йодид натрия (1 г, 6,67 ммоль) двумя порциями. Полученную оранжевую мутную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух дней, затем выливают в ледяную воду (~50 г). Добавляют гидроксид натрия (1 М раствор, 5 мкл), рН доводят до рН7 с применением 1 М НС1 (достигают рН 3), затем 1 М бикарбоната натрия и смесь экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат пропусканием через гидрофобную мембрану и выпаривают при пониженном давлении. Растирание с этилацетатом/гексаном дает беловатое твердое вещество;
ЖХМС: Ву 1,08 мин; МС т/ζ 435,1 и 437,2 [М+Н]+; способ: 2ттГо\\рНу03.
Стадия 3. 5-Бром-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-6-метилпиридин-3-сульфонамид.
- 105 032075
К смеси метилбороновой кислоты (9 мг, 0,150 ммоль), 5-бром-Ы-(2-гидрокси-2-метилпроиил)-6йодпиридин-3-сульфонамида (со стадии 2) (60 мг, 0,138 ммоль), дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (5 мг, 7,12 мкмоль) в 1,4-диоксане (1,3 мл) добавляют карбонат натрия 2 М (44 мг, 0,415 ммоль), и полученную смесь нагревают в атмосфере азота при 50°С в течение 90 мин, при 80°С в течение 1 ч, затем при 100°С в течение 1 ч. Добавляют дополнительную метилбороновую кислоту (9 мг), и смесь перемешивают при 100°С в течение ночи. Добавляют еще метилбороновую кислоту (9 мг), и полученную смесь перемешивают в течение еще 5,5 ч при 100°С, затем дополнительную порцию метилбороновой кислоты (20 мг) добавляют через 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь разбавляют метанолом и пропускают через колонку ΠοΜ^® 81-ТМТ (1 г), промывая дополнительным метанолом и ДХМ. Объединенные органические фазы выпаривают при пониженном давлении, связывают с силикагелем и очищают флэш-хроматографией на колонке (4 г двуокись кремния, 0-100% этилацетат в изогексане) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой смолы;
ЖХМС: Ву 0,94 мин; МС т/ζ 323,4 [М+Н]+; способ: 2т^η^ονрΗν03.
Стадия 4. 5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-6метилпиридин-3 -сульфонамид.
Смесь 5-бром-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-6-метилпиридин-3-сульфонамида (со стадии 3) (30 мг, 0,093 ммоль), 5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-илбороновой кислоты (см. стадию 1 получения примера 121) (20 мг, 0,097 ммоль), [1,1'-бис-(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (3 мг, 4,60 мкмоль) и фосфата калия (40 мг, 0,188 ммоль) в 1,4-диоксане (1 мл) и воде (0,25 мл) нагревают до температуры кипения с обратным холодильником в течение 30 мин, затем охлаждают до комнатной температурые, разбавляют метанолом:ДХМ (~1:2) и фильтруют через 500 мг колонку ТбюЫе® 81-ТМТ. Смесь выпаривают при пониженном давлении и очищают флэш-хроматографией на колонке (4 г двуокись кремния, 0-10% 7 М метанольный аммиак в ДХМ). Продукт элюируют при ~7% и собирают и выпаривают при пониженном давлении с получением бледно-бежевого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,83 мин; МС т/ζ 405,3 [М+Н]+; способ: 2т^η^ονрΗν03.
1Η ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,39 (1Н, с), 8,83 (1Н, с), 8,49 (1Н, с), 8,44 (1Н, с), 8,29 (1Н, с), 7,73 (1Н, шс), 7,50 (2Н, шс), 4,45 (1Н, шс), 2,74 (3Η, с), 2,69 (2Н, с), 1,07 (6Н, с).
Пример 54.
3-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Н-(4,4-дифторциклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
Указанное в заголовке соединение получают способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 11, с применением 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола и 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(4,4-дифторциклогексил)-4-метилбензолсульфонамида (получают аналогично промежуточному соединению Ό1);
ЖХ-МС: Ву 4,18 мин; МС т/ζ 463,3 [М+Н]+; способ 10т^η^ονрΗ.
Пример 55.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4,4-дифторциклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=5 = 0
- 106 032075
Указанное в заголовке соединение получают способом, аналогичным тому, который применяют для получения примера 11, с применением 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)тиазола и 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-П-(4,4-дифторциклогексил)-4-метилбензолсульфонамида (получают аналогично промежуточному соединению Ό1);
ЖХ-МС: Ву 4,65 мин; МС т/ζ 480,2 [М+Н]+; способ 10т^η^ο\νρН.
Пример 56.
транс-3 -(5-Амино-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)пиразин-2-ил)-П-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=3=0
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 15, с применением 4-метил-1Н имидазола.
ЖХМС: Ву 0,75 мин; МС т/ζ 443,3 [М+Н]+; способ: 2т1иЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,29 (1Н, с), 8,03 (1Н, с), 8,87 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,60 (1Н, д), 7,51 (1Н, д), 7,34 (1Н, с), 6,71 (2Н, с), 4,46 (1Н, д), 3,29 (1Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,47 (3Н, с), 2,20 (3Н, с), 1,70 (2Н, м), 1,61 (2Н, м), 1,23-1,00 (4Н, м).
Пример 57.
3-(5-Амино-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)пиразин-2-ил)-П-(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамид
Получают аналогично примеру 15 с применением 4-метил-1Н-имидазола и 3-(5-амино-6хлорпиразин-2-ил)-П-(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамида (полученного аналогично промежуточному соединению Ό1, с применением Промежуточного соединения В1).
ЖХМС: Ву 0,54 мин; МС т/ζ 403,2 [М+Н]+; способ: 2ю1иЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,29 (1Н, с), 8,02 (1Н, с), 7,82 (1Н, с), 7,68 (1Н, дд), 7,53 (1Н, с), 7,31 (1Н, с), 7,34 (1Н, с), 6,70 (2Н, с), 4,40 (1Н, с), 3,35 (2Н, м), 2,78 (2Н, т), 2,46 (3Н, с), 2,19 (3Н, с), 1,52 (2Н, м).
- 107 032075
Пример 58.
транс-3-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 22, с применением пинаколового эфира 1-метилпиразол-4-бороновой кислоты.
ЖХМС: Ву 0,81 мин; МС т/ζ 443,0 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,32 (1Н, с), 8,08 (1Н, с), 8,00 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,69 (1Н, дд), 7,60 (1Н, д), 7,50 (1Н, д), 6,32 (2Н, с), 4,47 (1Н, д), 3,92 (3Н, с), 3,29 (1Н, м), 2,91 (1Н, м), 2,48 (3Н, с), 1,71 (2Н, м), 1,63 (2Н, м), 1,24-1,01 (4Н, м).
Пример 59. транс-3-(5-Амино-6-(пиримидин-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 22, с применением пиримидин-5-илбороновой кислоты.
ЖХМС: Ву 0,80 мин; МС т/ζ 441,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
Пример 60. транс-3-(5-Амино-6-(2-фторпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=3=0 Р
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 22 с применением пинаколового эфира 2-фторпиридин-4-бороновой кислоты.
ЖХМС: Ву 0,90 мин; МС т/ζ 458,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
Пример 61.
3-(5-Амино-6-( 1 Н-имидазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
- 108 032075
0=8=0
ΝΗ
ОН
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 1Н-имидазола.
ЖХМС: Ву 0,62 мин; МС т/ζ 417,4 [М+Н]+; способ: 2ттБС_у003.
Пример 62.
-(5-Амино-6-( 1 Н-пиразол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
ΝΗ
ОН
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 1Н-пиразола.
ЖХМС: Ву 0,97 мин; МС т/ζ 417,2 [М+Н]+; способ: 2тт1 ,о\\р11.
Пример 63.
3-(5-Амино-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
°=Г°
ЫН
ОН
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 4-метил-1Н-имидазола.
ЖХМС: Ву 0,61 мин; МС т/ζ 431,3 [М+Н]+; способ: 2ттБС_у003.
Пример 64.
-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)^ -(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
- 109 032075
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 1Н-1,2,4-триазола.
ЖХМС: Ву 0,83 мин; МС ш/ζ 418,3 [М+Н]+; способ: 2ш1пЬС_т003.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,89 (1Н, д), 7,72 (1Н, дд), 7,56 (1Н, д), 7,45 (1Н, т), 7,38 (2Н, д), 4,27 (1Н, с), 2,83 (2Н, м), 2,51 (3Н, с под ДМСО), 1,51 (2Н, м), 1,02 (6Н, с).
Пример 65.
3-(5-Амино-6-(3-метил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 3-метил-1Н-1,2,4-триазола.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС ш/ζ 432,3 [М+Н]+; способ: 2ш1пЬС_т003.
Пример 66.
3-(5-Амино-6-(3-изопропил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Ο=5=ι0
ΉΗ
ОН
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 26, с применением 3-изопропил-1Н-1,2,4-триазола.
ЖХМС: Ву 0,99 мин; МС ш/ζ 460,3 [М+Н]+; способ: 2ш1пЬС_т003.
Пример 67.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4метилбензолсульфонамид
- 110 032075
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 29, с применением 6-аминоспиро[3,3]гептан-2-ола.НС1, который получают снятием защиты с коммерчески доступного трет-бутил (6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)карбамата с применением 1,25 М НС1 в МеОН.
ЖХМС: Ву 0,90 мин; МС т/ζ 442,3 [М+Н]+; способ: 2тт^ο^ρНν01.
' Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-А) δ 9,33 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,88 (2Н, м), 7,69 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,38 (2Н, д), 4,82 (1Н, д), 3,85 (1Н, м), 3,53 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 2,21 (1Н, м), 2,03 (2Н, м), 1,91 (1Н, м), 1,76 (2Н, м), 1, 68 (2Н, м).
Пример 68. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(тетрагидро-2Н-пиран-4ил)бензолсульфонамид
О=5=О
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 29, с применением тетрагидро-2Н-пиран-4-амина.
ЖХМС: Ву 0,92 мин; МС т/ζ 416,3 [М+Н]+; способ: 2тт^ο^ρНν01.
Пример 69а. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(транс-4-гидрокси-4метилциклогексил)-4-метилбензолсульфонамид и пример 69Ь: 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(цис-4-гидрокси-4метилциклогексил)-4-метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 29, с применением 4-амино-1 -метилциклогексанола. Полученную стереоизомерную смесь отделяют хиральной СЖХ.
Подробности способа:
Колонка: СЫга1рак 1С 250x10 мм, 5 мкм;
Подвижная фаза: 50% МеОН+О,1%об./об. ДЭА/50% СО2;
Поток: 10 мл/мин; Определение: УФ @ 220 нм; Система:
Вегдег МФпФдгат СЖХ 2
Пример 69а.
Первый элюируемый пик при КТ 6,2 мин в виде 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2
- 111 032075 ил)-№((1г,4г)-4-гидрокси-4-метилциклогексил)-4-метилбензолсульфонамида.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 444,5 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,95 (1Н, д), 7,73 (1Н, дд), 7,59 (1Н, д), 7,53 (1Н, д), 7,38 (2Н, с), 4,11 (1Н, с), 3,06 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 1,60 (2Н, м), 1,50 (2Н, м), 1,32-1,20 (4Н, м), 1,06 (3Н, с).
Пример 69а.
Второй элюируемый пик при КТ 10,67 мин в виде 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2ил)-№((1к,4к)-4-гидрокси-4-метилциклогексил)-4-метилбензолсульфонамида.
ЖХМС: Ву 0,94 мин; МС т/ζ 426,5 (минус ОН) [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,41, (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,94 (1Н, с), 7,73 (1Н, д), 7,60 (1Н, д), 7,53 (1Н, д), 7,38 (2Н, с), 3,98 (1Н, с), 2,93 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 1,53 (2Н, м), 1,40 (2Н, м), 1,25-1,12 (4Н, м), 1,01 (3Н, с).
Цис/транс стереохимия подтверждена NОЕ8У ЯМР спектроскопией.
Пример 70а.
(К)- или (8)-3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2ил)-4-метилбензолсульфонамид и пример 70Ь:
(К)- или (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2ил)-4-метилбензолсульфонамид
-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№(6-гидроксиспиро[3,3] гептан-2-ил)-4метилбензолсульфонамид (пример 67) разделяют на изомеры хиральной СЖХ.
Подробности способа: Колонка: СЫга1рак АЮ-Н 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С; Подвижная фаза: 40%; Изопропанол+0,1% об./об. ДЭА/60% СО2; Поток: 10 мл/мин; Определение: УФ @ 220 нм; Инструмент: Вегдег М1шд;гат СЖХ1.
Пример 70а.
Первый элюируемый пик при 11,87 мин: (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№ (6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4-метилбензолсульфонамид или (К)-3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-
1-ил)пиразин-2-ил)-№(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,88 мин; МС т/ζ 442,5 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,90-7,85 (2Н, м), 7,69 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,39 (2Н, с), 4,82 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 3,53 (1Н, м) 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 2,21 (1Н, м), 2,03 (2Н, м), 1,92 (1Н, м), 1,76 (2Н, м), 1,69 (2Н, с).
Пример 70Ь.
Второй элюируемый пик при 14,41 мин: (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№ (6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4-метилбензолсульфонамид или (К)-3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-
1-ил)пиразин-2-ил)-№(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,90 мин; МС т/ζ 442,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,33 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,91-7,86 (2Н, м), 7,69 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,38 (2Н, с), 4,82 (1Н, д), 3,85 (1Н, м), 3,53 (1Н, м) 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 2,21 (1Н, м), 2,03 (2Н, м), 1,92 (1Н, м), 1,76 (2Н, м), 1,69 (2Н, с).
Пример 71а.
-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№(( 1 г,3г)-3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид и пример 71Ь:
-(5-амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№(( 1к,3 к)-3 -гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамид
- 112 032075
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 29, с применением 3-аминоциклобутанола.
Смесь стереоизомеров разделяют хиральной СЖХ.
Подробности способа: Колонка: СЫга1рак ΑΌ-Н, 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С; Подвижная фаза: 50% Метанол+0,1% об./об. ДЭА/50% СО2; Поток: 10 мл/мин; Определение: УФ @ 220 нм; Инструмент: Вегдег МЫдгаш СЖХ1.
Пример 71а. Первый элюируемый пик при КТ 4,41 мин; 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-№-((1г,3г)-3-гидроксициклобутил)-4-метилбензолсульфонамид или 3-(5-амино-6-(1Н-
1.2.4- триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№-((18,3§)-3-гидроксициклобутил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,83 мин; МС т/ζ 402,4 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рН\Ю1.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 9,34 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,90 (1Н, шс), 7,88 (1Н, с), 7,69 (1Н, д), 7,54 (1Н, д), 7,39 (2Н, с), 4,92 (1Н, д), 4,14 (1Н, м), 3,75 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 1,98 (2Н, м), 1,89 (2Н, м).
Пример 71Ь. Второй элюируемый пик при КТ 5,88 мин; 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-№-((1г,3г)-3-гидроксициклобутил)-4-метилбензолсульфонамид или 3-(5-амино-6-(1Н-
1.2.4- триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№-(( 1з,3 з)-3 -гидроксициклобутил)-4-метилбензолсульфонамид.
ЖХМС: Ву 0,82 мин; МС т/ζ 402,5 [М+Н]+; способ: 2ттко\\р1 Ιν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Т6) δ 9,34 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,89 (1Н, с), 7,86 (1Н, шс), 7,70 (1Н, дд), 7,54 (1Н, д), 7,39 (2Н, с), 4,99 (1Н, д), 3,66 (1Н, м), 3,13 (1Н, м), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 2,24 (2Н, м), 1,60 (2Н, м).
Цис/транс стереохимия подтверждена NОΕ8Υ ЯМР спектроскопией.
Пример 72.
-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-№-((( 1з,3 з)-3 -гидроксициклобутил)метил)-4метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 6 с применением цис-3-бром-№-(3-гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А10) и 5-хлор-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С5).
ЖХМС: Ву 0,80 мин; МС т/ζ 416,3 [М+Н]+; способ: 2ттко\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Т6) δ 9,34 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,89 (1Н, с), 7,71 (1Н, д), 7,607,52 (2Н, м), 7,39 (2Н, с), 4,89 (1Н, с), 3,84 (1Н, м), 2,74 (2Н, т), 2,51 (3Н, с, под ДМСО), 2,17 (2Н, м), 1,75 (1Н, м), 1,41 (2Н, м).
Пример 73. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 113 032075
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 6 с применением 3-бром-Х-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А9) и 5-хлор-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С5).
ЖХМС: Ву 0,86 мин; МС т/ζ 418,2 [М+Н]+; способ: 2т^η^ονрΗ.
1Η ЯМР (400 МГц, ДМСОМ6) δ 9,33 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,91 (1Н, с), 7,72 (1Н, с), 7,55 (1Н, д), 7,43-7,35 (3Η, м), 4,45 (1Н, т), 3,10 (2Н, д), 2,57 (2Н, д), 2,51 (3Η, с, под ДМСО), 0,77 (6Н, с).
Пример 74. 3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Х-(6-гидроксиспиро[3,3]гептан-2-ил)-4метилбензолсульфонамид
Получают с применением условий, аналогичных тем, которые указаны в примере 6, с применением 3-бром-Х-(6-гидроксиспиро[3,3]гепт-2-ил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А8) и 5-бром-3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С7).
ЖХМС Ву 0,87 мин; МС т/ζ 469,2 [М+Н]+; способ: 2т^η^ονрΗν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОМ6) δ 8,08 (1Н, с), 8,05 (1Н, с), 7,82 (1Н, с), 7,80 (1Н, с), 7,63 (1Н, д), 7,48 (1Н, д), 6,28 (2Н, с), 4,82 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 3,82 (3Η, с), 3,50 (1Н, м), 2,46 (3Η, с), 2,29 (3Η, с), 2,18 (1Н, м), 2,00 (2Н, м), 1,88 (1Н, м), 1,69 (4Н, м).
Пример 75. 3-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((18,48)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
0=-3=-.0
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением Ν-((цис)-4-гидроксициклогексил)-4-метил-3 -(4,4,5,5 -тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В8) и 5-хлор-3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-
2-амина (полученного аналогично промежуточному соединению С6, начиная с 1-метил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола).
ЖХМС: Ву 0,80 мин МС т/ζ 443,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ονрΗ.
- 114 032075 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,32 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 7,99 (1Н, с), 7,99 (1Н, с), 7,88 (1Н, д, 1=1,7 Гц), 7,70-7,68 (1Н, дд, 1=1,8, 8,0 Гц), 7,59-7,57 (1Н, д, 1=6,7 Гц), 7,50-7,48 (1Н, д, 1=8,0 Гц), 8,32 (2Н, широкий с), 3,91 (3Н, с), 3,56 (1Н, широкий м), 2,97 (1Н, широкий м), 2,48 (3Н, с), 1,58-1,49 (4Н, м), 1,381,32 (4Н, м).
Пример 76.
3-(5-Амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-N-((I8,48)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением №((цис)-4-гидроксициклогексил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В8) и 5-хлор-3-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2амина (полученного аналогично промежуточному соединению С6, начиная с 2-метил-4-(4,4,5,5тетраметил- 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридина);
ЖХМС: Ву 0,63 мин МС т/ζ 454,3 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,57-8,56 (1Н, д, 1=5,2 Гц), 8,26 (1Н, с), 7,89 (1Н, д, 1=1,8 Гц), 7,727,69 (1Н, дд, 1=1,8, 8,0 Гц), 7,63 (1Н, с), 7,59-7,55 (2Н, м), 7,51-7,49 (1Н, д, 1=8,0 Гц), 6,64 (2Н, с), 4,32 (1Н, широкий с), 3,55 (1Н, м), 2,96 (1Н, м), 2,55 (3Н, с), 2,47 (3Н, с), 1,55-1,50 (4Н, м), 1,37-1,31 (4Н, м).
Пример 77.
-(5-Амино-6-( 1 -метил-1Н-пиразол-5 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
ΗΝ
ОН
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением №(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В3) и 5-хлор-3-(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиразин-
2-амина (полученного аналогично промежуточному соединению С6, начиная с 1-метил-5-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2 -диоксаборолан-2 -ил) -1 Н-пиразола).
ЖХМС: Ву 0,83 мин МС т/ζ 431,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,27 (1Н, с), 7,84 (1Н, д, 1=2,0 Гц), 7,70-7,67 (1Н, дд, 1=2,0, 8,0 Гц), 7,57 (1Н, д, 1=2,0 Гц), 7,54-7,52 (1Н, д, 1=8,10 Гц), 7,44-7,41 (1Н, м), 6,70 (1Н, д), 6,50 (2Н, с), 4,26 (1Н, с), 3,91 (3Н, с), 2,85-2,79 (2Н, м), 2,48 (3Н, с), 1,51-1,47 (2Н, м), 1,00 (6Н, с).
Пример 78.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
- 115 032075
ΗΝ
□Η
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В3) и 5-хлор-3-(3-циклопропилизоксазол-5ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С13).
ЖХМС: Ву 0,98 мин МС т/ζ 458,4 [М+Н]+; способ 2тш1 ,о\\р11.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,37 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,55 (1Н, д), 7,44 (1Н, т), 6,91 (2Н, шс), 6,81 (1Н, с), 4,25 (1Н, очень широкий с), 2,83 (2Н, мульт), 2,47 (3Н, с), 2,09 (1Н, мульт), 1,51 (2Н, мульт), 1,06 (2Н, мульт), 1,02 (6Н, с), 0,89 (2Н, мульт).
Пример 79.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-хлор-3-(3-циклопропилизоксазол-5ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С).
ЖХМС: Ву 1,06 мин МС т/ζ 444,4 [М+Н]+; способ 2тш1,о\\р1 Ιν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,37 (1Н, с), 7,86 (1Н, д), 7,72 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,47 (1Н, т), 6,91 (2Н, шс), 6,81 (1Н, с), 4,39 (1Н, с), 2,62 (2Н, д), 2,46 (3Н, с), 2,09 (1Н, мульт), 1,06 (6Н, с), 1,05 (2Н, мульт), 0,90 (2Н, мульт).
Пример 80. 3-(5-Амино-6-(4-метилтиазол-2-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
О=5=О
НМ
Стадия 1. 3-Амино-6-бромпиразин-2-карботиоамид.
В 100-мл колбу добавляют 3-амино-6-бромпиразин-2-карбоксамид (1,5 г, 6,91 ммоль) и реагент Лавессона (4,19 г, 10,37 ммоль) в ТГФ (30 мл). Реакционную смесь нагревают до 70°С в течение 2 ч. Смесь концентрируют при пониженном давлении и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя
- 116 032075
Нех/ЕЮАе (0-40%) в течение более 30 мин на 24 г колонке с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и концентрируют при пониженном давлении с получением желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,88 мин МС т/ζ 233,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν01.
Стадия 2. 5-Бром-3-(4-метилтиазол-2-ил)пиразин-2-амин.
В 10-мл колбу добавляют 3-амино-6-бромпиразин-2-карботиоамид (стадия 1) (300 мг, 1,287 ммоль) и 1-хлорпропан-2-он (0,154 мл, 1,931 ммоль) в ЕЮН (7 мл) и перемешивают при 70°С в течение ночи. Реакционную смесь экстрагируют в ЕЮАе (10 мл), промывают насыщ. №2СО3 (10 мл), насыщенным раствором соли (10 мл), сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Смесь очищают флэш-хроматографии на колонке, элюируя Нех/ЕЮАе (0-60%) в течение более 15 мин на 12 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции концентрируют при пониженном давлении с получением желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,23 мин МС т/ζ 273,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,27 (1Н, с), 7,99 (2Н, шс), 7, 50 (1Н, м), 2,48 (3Н, с).
Стадия 3. 3-(5-Амино-6-(4-метилтиазол-2-ил)пиразин-2-ил)%-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид.
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-бром-3-(4-метилтиазол-2-ил)пиразин-2амина (стадия 2).
ЖХМС: Ву 1,17 мин МС т/ζ 434,1 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 8,24 (1Н, с), 7,98 (1Н, д), 7,81 (1Н, дд), 7,49 (1Н, д), 7,05 (1Н, с), 4,90 (1Н, т), 2,97 (2Н, д), 2,59 (3Н, с), 2,57 (3Н, с), 1,29 (6Н, с). Три обмениваемых протона не видны.
Пример 81.
3-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=5=0
Стадия 1. 5-Бром-3-(1-метил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин.
К суспензии 5-бром-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амина (см. синтез промежуточного соединения С8, стадия 3) (1 г, 4,15 ммоль) и карбоната калия (1,720 г, 12,45 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляют йодметан (778 мкл, 12,45 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученную смесь экстрагируют в этилацетате, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенную смесь растворяют в ДМСО (10 мл) и очищают масс-направленной препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,87 мин МС т/ζ 255,3 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,73 (1Н, с), 8,12 (1Н, с), 7,54 (2Н, шс), 4,15 (3Н, с).
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-('1-метил-'1Н-'1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)%-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
В 0,5-2-мл пробирку для микроволновой печи добавляют №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение В2) (57,9 мг, 0,157 ммоль), 5-бром-3-(1-метил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (со стадии 1) (40 мг, 0,157 ммоль) и дихлорид бис-(трифенилфосфин)палладия (5,50 мг, 7,84 мкмоль) и карбонат натрия (0,196 мл, 0,392 ммоль) в ДМЭ (1,5 мл). Реакционную смесь нагревают в активаторной микроволновой печи Вю!аде при 120°С в течение 2 ч. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетате, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт загружают в двуокись кремния и очищают флэшхроматографией на колонке, элюируя МТБЭ:метанолом (0-10%) на 12 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением блед но-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,92 мин МС т/ζ 418,6 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,70 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,69 (1Н, дд), 7,52 (3Н, мульт), 7,45 (1Н, широкий), 4,40 (1Н, с), 4,16 (3Н, с), 2,62 (2Н, с), 2,49 (3Н, с), 1,06 (6Н, с).
- 117 032075
Пример 82.
3-(5-Амино-6-(2-этил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=3=0
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 81, начиная с 5-бром-3-(2-этил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С8Ь) и N-(2гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2).
ЖХМС: Ву 1,05 мин МС ш/ζ 432,6 [М+Н]+; способ 2ш1пЬо^рНт01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,34 (1Н, с), 8,29 (1Н, с), 7,90 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,47 (1Н, широкий), 7,31 (2Н, широкий), 4,59 (2Н, кв), 4,40 (1Н, с), 2,63 (2Н, широкий), 2,51 (3Н, с), 1,54 (3Н, т), 1,07 (6Н, с).
Пример 83.
3-(5-Амино-6-(1-этил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 81, начиная с 5-бром-3-(1-этил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С8а) и N-(2гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2).
ЖХМС: Ву 0,98 мин МС ш/ζ 432,6 [М+Н]+; способ 2ш1пЬо^рНт01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,76 (1Н, с), 8,21 (1Н, с), 7,86 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,54 (3Н, мульт), 7,45 (1Н, широкий), 4,50 (2Н, кв), 4,40 (1Н, с), 2,62 (2Н, широкий), 2,48 (3Н, с), 1,50 (3Н, т), 1,06 (6Н,
Пример 84.
3-(5-Амино-6-(2-(2,2,2-трифторэтил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид
0=8=0
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 с применением Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-бром-3-(2-(2,2,2-трифторэтил)-2Н-1,2,3триазол-4-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С8с);
- 118 032075
ЖХМС: Ву 1,11 мин МС т/ζ 486,6 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,53 (1Н, с), 8,35 (1Н, с), 7,90 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,47 (1Н, широкий), 7,33 (2Н, широкий), 5,73 (2Н, кв), 4,40 (1Н, с), 2,63 (2Н, широкий), 2,50 (3Н, с), 1,06 (6Н, с).
19Р ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ -69,51 (СР3).
Пример 85.
3-(5-Амино-6-(2-метил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
ΗΝ
ОН
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В3) и 5-бром-3-(2-метил-2Н-1,2,3-триазол-4ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С8);
ЖХМС: Ву 0,98 мин МС т/ζ 432,3 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,32 (1Н, с), 8,28 (1Н, с), 7,86 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,54 (1Н, д), 7,43 (1Н, мульт), 7,30 (2Н, широкий), 4,30 (3Н, с), 4,27 (1Н, с), 2,83 (2Н, мульт), 2,50 (3Н, с), 1,51 (2Н, мульт), 1,02 (6Н, с).
Пример 87.
3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((1к,4к)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением Ы-цис -4 -гидро ксициклогексил) -4-метил-3-(4,4,5,5 -тетраметил-1,3,2 -диоксаборолан-2 ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В8) и 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2амина (промежуточное соединение С6);
ЖХМС: Ву 0,88 мин МС т/ζ 460,2 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу01.
Пример 88.
3-(5-Амино-6-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 119 032075
0=^=0
ΗΝ
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-бром-3-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2иламина (промежуточное соединение С3);
ЖХМС: Ву 0,98 мин МС т/ζ 418,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,39 (1Н, с), 7,89 (1Н, д), 7,72 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,47 (1Н, т), 6,96 (1Н, с), 6,93 (2Н, шс), 4,39 (1Н, с), 2,63 (2Н, д), 2,48 (3Н, с), 2,33 (3Н, с), 1,06 (6Н, с).
Пример 89.
3-(5 -Амино-6-(3-метилизоксазол-5 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
0=3=0
I
ΗΝ
ОН
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением №(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В3) и 5-бром-3-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2иламина (промежуточное соединение С3);
ЖХМС: Ву 1,00 мин МС т/ζ 432,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ) δ 8,39 (1Н, с), 7,85 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,55 (1Н, д), 7,44 (1Н, т), 6,96 (1Н, с), 6,93 (2Н, шс), 4,27 (1Н, с), 2,84 (2Н, мульт), 2,49 (3Н, с), 2,33 (3Н, с), 1,51 (2Н, мульт), 1,02 (6Н, с).
Пример 90.
3-(5 -Амино-6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил)^-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
О=8=О
ΗΝ
ОН
Получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18, с применением №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-бром-3-(5-метил-[1,3,4]оксадиазол-2ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С1);
ЖХМС Ву 0,89 мин МС т/ζ 419,5 [М+Н]+; способ 2ттЬо\\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,50 (1Н, с), 7,86 (1Н, м), 7,75 (1Н, дд), 7,71 (2Н, шс), 7,55 (1Н, д),
- 120 032075
7,48 (1Н, т), 4,39 (1Н, с), 2,63 (3Н, с), 2,62 (2Н, м), 2,46 (3Н, с), 1,06 (6Н, с). Три обмениваемых протона не видны.
Пример 91.
3-(5-Амино-6-(5-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиразин-2-ил)-К-(2-гидрокси-2-метилпропил)4-метилбензолсульфонамид
ΗΝ
Стадия 1. 3-Амино-6-бром-№-гидроксипиразин-2-карбоксимидамид.
В 20-мл колбу добавляют 3-амино-6-бромпиразин-2-карбонитрил (600 мг, 3,01 ммоль) в МеОН (12 мл) и охлаждают до 0°С. В реакционную смесь добавляют гидрохлорид гидроксиламина (210 мг, 3,01 ммоль) и триэтиламин (0,420 мл, 3,01 ммоль) и смесь нагревают до комнатной температуры, при этом выпадает осадок. Осадок отфильтровывают и промывают МеОН. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и полученное твердое вещество растирают в МеОН с получением второй партии продукта. Твердое вещество растирают в МеОН снова и обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин до образования суспензии. Твердое вещество отфильтровывают и сушат в вакуумной печи при 40°С в течение 3 ч с получением указанного в заголовке соединения;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 10,38 (1Н, с), 8,15 (1Н, с), 7,64 (2Н, шс), 5,88 (2Н, с).
Стадия 2. 5-Бром-3-(5-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиразин-2-амин.
В 10-мл колбу добавляют 3-амино-6-бром-№-гидроксипиразин-2-карбоксимидамид (со стадии 1) (290 мг, 1,250 ммоль) и триэтиламин (0,192 мл, 1,375 ммоль) в ДХМ (7 мл) и охлаждают до <5°С. К этой перемешиваемой смеси добавляют хлорид циклопропанкарбонила (0,113 мл, 1,250 ммоль) по каплям. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч. К смеси добавляют хлорид циклопропанкарбонила (0,028 мл, 0,312 ммоль) и продолжают при комнатной температуре в течение ночи. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении для удаления растворителя и полученный остаток растирают в МеОН. Твердое вещество собирают фильтрацией, сушат в вакуумной печи при 40°С в течение 3 ч, затем объединяют с гексахлорэтаном (483 мг, 2,039 ммоль) в АсОН (6 мл) и нагревают до 100°С в течение 1 ч в активаторной микроволновой печи Вю1аде. В реакционную смесь добавляют гексахлорэтан (241 мг, 1,020 ммоль), и реакционную смесь нагревают снова в микроволновой печи при 100°С в течение 1 ч. Реакцию нейтрализуют добавлением КаОН (1 М) и экстрагируют в Е1ОАс. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором соли и сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Полученное бледно-оранжевое твердое вещество сушат в вакуумной печи при 40°С в течение 3 ч с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,93 мин МС т/ζ 282,0 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 8,37 (1Н, с), 7,34 (2Н, шс), 2,46 (1Н, м), 1,35 (2Н, м), 1,25 (2Н, м).
Стадия 3. 3-(5-Амино-6-(5-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиразин-2-ил)-К-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
В 0,5-2 мл пробирку для микроволновой печи добавляют К-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение В2) (131 мг, 0,354 ммоль), 5-бром-3-(5-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиразин-2-амин (со стадии 2) (100 мг, 0,354 ммоль), РдС12(дрр£)-СН2С12 аддукт (14,47 мг, 0,018 ммоль) и Ка2СО3 (0,532 мл, 1,063 ммоль) в ДМЭ (1,4 мл). Реакционную смесь нагревают при 120°С в течение 45 мин в активаторной микроволновой печи Вю1аде. Реакционную смесь объединяют с водой (10 мл) и экстрагируют в Е1ОАс (10 мл). Объединенные органические экстракты затем промывают насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Реакционную смесь очищают флэшхроматографией на колонке, элюируя гексаном/ЕЮАс (0-100%) в течение более 15 мин на 12 г картридже с двуокисью кремния.
Требуемые фракции объединяют и концентрируют при пониженном давлении, затем сушат в вакуумной печи при 40°С в течение 3 ч с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,04 мин МС т/ζ 445,4 [М+Н]+; способ 2ттГо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 8,46 (1Н, с), 7,86 (1Н, д), 7,73 (1Н, дд), 7,54 (1Н, д), 7,48 (1Н, т), 7,30 (2Н, с), 4,39 (1Н, с), 2,63 (2Н, д), 2,47 (1Н, м), 2,45 (3Н, с), 1,32 (2Н, м), 1,25 (2Н, м), 1,06 (6Н, с).
Пример 92.
- 121 032075
3-(5-Амино-6-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-М-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=8=0
Указанное в заголовке соединение получают с применением 3-бром-Ы-(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А9) и 5-бром-3-(3метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2а) в условиях, аналогичных условиям из примера 28.
ЖХМС: Ву 0,95 мин МС т/ζ 433,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ονрΗ.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЧО δ 8,61 (1Н, с), 7,90 (1Н, д), 7,81 (2Н, шс), 7,74 (1Н, дд), 7,56 (1Н, д), 7,42 (1Н, т), 4,44 (1Н, т), 3,10 (2Н, д), 2,58 (2Н, д), 2,49 (3Η, с), 0,77 (6Н, с). Одна метильная группа не видна; вероятно, закрыта пиком растворителя.
Пример 93. 3-(5-Амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-М-(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 3-бром-Ы-(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А9) и 5-бром-3-(3циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2с) в условиях, аналогичных условиям из примера 28. ЖХМС: Ву 0,96 мин; МС т//=457,2 [М+П|+; способ 2т^η^ονрΗ.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,60 (1Н, с), 7,89 (1Н, д), 7,75 (1Н, дд), 7,72 (2Н, шс), 7,56 (1Н, д), 7,41 (1Н, т), 4,44 (1Н, т), 3,10 (2Н, д), 2,58 (2Н, д), 2,48 (3Η, с), 2,27 (1Н, м), 1,14 (4Н, м), 0,77 (6Н, с).
Пример 94.
-(5-Амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5 -ил)пиразин-2-ил)-М-(((18,3§)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамид
ΝΗ
- 122 032075
Указанное в заголовке соединение получают с применением цис-3-бром-П-(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А10) и 5-бром-3(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2с) в условиях, аналогичных условиям из примера 28;
ЖХМС: Ву 0,96 мин; МС тА=457,2 [М+Н]+; способ 2т^η^ο\νρН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,60 (1Н, с), 7,87 (1Н, д), 7,73 (1Н, дд), 7,71 (2Н, шс), 7,57 (1Н, д), 4,89 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 2,74 (2Н, м), 2,48 (3Н, с), 2,26 (1Н, м), 2,17 (2Н, м), 1,74 (2Н, м), 1,41 (2Н, м), 1,13 (4Н, м).
Пример 95.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(2-гидрокси-2-метилпропил)4-метилбензолсульфонамид
НО
ΝΗ
Указанное в заголовке соединение получают с применением П-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метил-3-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение А2) и 5-бром-3-(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2с) в условиях, аналогичных условиям из примера 28; ЖХМС: Ву 0,98 мин МС т/ζ 445,4 [М+Н]+; способ 2т^η^ο\νρН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,60 (1Н, с), 7,90 (1Н, с), 7,75 (1Н, д), 7,73 (2Н, ш, с), 7,55 (1Н, д),
7,49 (1Н, т), 4,39 (1Н, с), 2,63 (2Н, д), 2,48 (3Н, с), 2,26 (1Н, м), 1,14 (4Н, м), 1, 06 (6Н, с).
Пример 96.
3-(5-Амино-6-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(((18,38)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамид
Ο=ί=Ο
ЫН <_ он
Указанное в заголовке соединение получают с применением цис-3-бром-П-(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А10) и 5-бром-3(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2а) в условиях, аналогичных условиям из примера 28;
ЖХМС: Ву 0,97 мин МС т/ζ 431,4 [М+Н]+; способ 2т^η^ο\νρНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,62 (1Н, с), 7,88 (1Н, с), 7,81 (2Н, шс), 7,73 (1Н, дд), 7,58 (2Н, м), 4,89 (1Н, д), 3,84 (1Н, м), 2,75 (2Н, т), 2,49 (3Н, с), 2,16 (2Н, м), 1,75 (1Н, м), 1,41 (2Н, м). Одна метильная группа не видна в ЯМР; вероятно, под пиком растворителя.
Пример 97.
3-(5-Амино-6-(3-изопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
- 123 032075
Указанное в заголовке соединение получают с применением Ы-(2-Гидрокси-2-метилпропил)-4метил-3-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) и 5-бром-3-(3-изопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2Ь) в условиях, аналогичных условиям из примера 18;
ЖХМС: Ву 1,14 мин МС ш/ζ 445,3 [М+Н]+; способ 2ш1пЕо^рНт01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,62 (1Н, с), 7,91 (1Н, д), 7,82 (2Н, шс), 7,75 (1Н, дд), 7,56 (1Н, д),
7,49 (1Н, т), 4,40 (1Н, с), 3,22 (1Н, м), 2,64 (2Н, д), 2,49 (3Н, с), 1,37 (6Н, д), 1,06 (6Н, с).
Пример 98.
3-(5 -Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-Ы-(1 -(гидроксиметил)циклопропил)-4метилбензолсульфонамид
'Он
Указанное в заголовке соединение получают с применением Ы-(1-(гидроксиметил)циклопропил)-4метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (получают в две стадии в условиях, аналогичных условиям получения промежуточного соединения В1) и 5-бром-3-(1Н-1,2,4триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение СИ) в условиях, аналогичных условиям из примера 18.
ЖХМС: Ву 0,88 мин МС ш/ζ 424,1 [М+Ыа]+; способ Ро\\рН_ν002.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 9,34 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 8,18 (1Н, с), 7,91 (1Н, д), 7,727,69 (1Н, дд), 7,54-7,52 (1Н, д), 7,41 (2Н, широкий с), 4,67-4,64 (1Н, м), 3,30-3,28 (2Н, д), 2,52 (3Н, с), 0,600,57 (2Н, м), 0,53-0,50 (2Н, м).
Пример 99.
3-(5 -Амино-6-(3 -циклопропилизоксазол-5 -ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3 -гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамид
он
Указанное в заголовке соединение получают с применением 3-Бром-Ы-(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А9) и 5-хлор-3-(3циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С13) в условиях, аналогичных условиям из примера 28;
ЖХМС: Ву 1,11 мин МС ш/ζ 458,5 [М+Н]+; способ 2тт^о\\рН.
- 124 032075 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОМ6) δ 8,37 (1Н, с), 7,85 (1Н, д), 7,71 (1Н, дд), 7,53 (1Н, д), 7,38 (1Н, т), 6,91 (2Н, шс), 6,81 (1Н, с), 4,44 (1Н, мульт), 3,09 (2Н, д), 2,56 (2Н, д), 2,46 (3Н, с), 2,08 (1Н, мульт), 1,06 (2Н, мульт), 0,89 (2Н, мульт), 0,77 (6Н, с).
Пример 100.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(((18,38)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамид
он
Указанное в заголовке соединение получают с применением цис-3-Бром-Ы-(3гидроксициклобутилметил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А10) и 5-хлор-3(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С13) в условиях, аналогичных условиям из примера 28.
ЖХМС: Ву 0,94 мин МС т/ζ 456,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОМ6) δ 8,37 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,57 (1Н, т), 7,53 (1Н, д), 6,91 (2Н, шс), 6,81 (1Н, с), 4,88 (1Н, д), 3,84 (1Н, мульт), 2,74 (2Н, т), 2,46 (3Н, с), 2,16 (2Н, мульт), 2,09 (1Н, мульт), 1,74 (1Н, мульт), 1,40 (2Н, мульт), 1,06 (2Н, мульт), 0,89 (2Н, мульт).
Пример 101.
2-(3 -(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)-2азаспиро[3,3]гептан-6-ол
0:=5==0
ОН
Стадия 1. 2-Азаспиро[3,3]гептан-6-он.
В 25-мл круглодонную колбу добавляют трет-бутил 6-оксо-2-азаспиро[3,3]гептан-2-карбоксилат (600 мг, 2,84 ммоль) и 4 М НС1 в диоксане (10 мл) с получением бесцветного раствора Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Получают густую суспензию. Неочищенную реакционную смесь фильтруют при пониженном давлении с получением белого твердого вещества, которое применяют без дальнейшей очистки;
Стадия 2. 2-(3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)-2азаспиро[3,3]гептан-6-он.
В 50-мл круглодонную колбу добавляют хлорид 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2ил)-4-метилбензол-1-сульфонила (промежуточное соединение Е1) (200 мг, 0,570 ммоль) и ТЭА (0,167 мл, 1,197 ммоль) в ДХМ (15 мл) с получением желтой суспензии. К перемешиваемому раствору добавляют 2-азаспиро[3,3]гептан-6-он (со стадии 1) (84 мг, 0,570 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, после чего она становится гомогенной. Реакционную смесь разбавляют ДХМ, промывают лимонной кислотой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Продукт очищают масс-направленной препаративной хроматографией. Фракции продукта объединяют и экстрагируют в ДХМ, промывают насыщ. раствором бикарбоната натрия, органический слой отделяют, сушат над МдЗО4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Полученное масло разбавляют минимальным объемом этилацетата и выпаривают при КТ в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества;
- 125 032075
ЖХМС: Ву 0,94 мин МС т/ζ 426,3 [М+Н]+; способ 2тп11,о\ур11.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 9,32 (1Н, с), 8,45 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 7,85 (1Н, д), 7,76 (1Н, дд), 7,65 (1Н, д), 7,40 (2Н, шс), 3,94 (4Н, с), 3,12 (4Н, с), 2,55 (3Н, с).
Стадия 3. 2-(3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)-2азаспиро[3,3]гептан-6-ол.
В 10-мл круглодонную колбу добавляют 2-(3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4метилфенилсульфонил)-2-азаспиро[3,3]гептан-6-он (40 мг, 0,094 ммоль) и боргидрид натрия (5,34 мг, 0,141 ммоль) в ТГФ (2 мл) с получением белой суспензии. Через 5 мин смесь экстрагируют в этилацетате, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над МдЗО4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Полученный желтый остаток растворяют в ДМСО и очищают масс-направленной препаративной хроматографией. Требуемую фракцию экстрагируют в этилацетате, промывают раствором бикарбоната натрия, органический слой отделяют, сушат над МдЗО4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток сушат в печи при 40°С в течение ночи с получением белого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,89 мин МС т/ζ 428,4 [М+Н]+; способ 2тп11,о\ур11.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 9,31 (1Н, с), 8,44 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 7,83 (1Н, д), 7,73 (1Н, дд), 7,64 (1Н, д), 7,40 (2Н, шс), 4,97 (1Н, д), 3,84 (1Н, мульт), 3,71 (2Н, с), 3,66 (2Н, с), 2,55 (3Н, с), 2,14 (2Н, мульт), 1,76 (2Н, мульт).
Пример 102.
3-(1,3 - Диметил-1 Н-пиразол-4-ил)-5 -(5-(3 -метокси-3 -метилазетидин-1 -илсульфонил)-2метилфенил)пиразин-2-амин
К раствору 3 -(5-амино-6-( 1,3-диметил-1 Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1 сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е3) (165 мг, 0,437 ммоль) и ТЭА (0,183 мл, 1,310 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют гидрохлорид 3-метокси-3-метилазетидина (60 мг, 0,437 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Полученную смесь экстрагируют ДХМ, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над МдЗО4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя МТБЭ:метанолом (0-10%) на 12 г картридже с двуокисью кремния. Фракции продукта объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением желтого масла;
ЖХМС: Ву 0,95 мин МС т/ζ 443,5 [М+Н]+; способ 2т1пТо^рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 8,12 (1Н, с), 8,10 (1Н, с), 7,84 (1Н, д), 7,70 (1Н, дд), 7,61 (1Н, д), 6,31 (2Н, шс), 3,82 (3Н, с), 3,60 (2Н, д), 3,55 (2Н, д), 2,94 (3Н, с), 2,53 (3Н, с), 2,30 (3Н, с).
Пример 103.
3-(5-Амино-6-(1Н-пиразол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 15, начиная с пиразола.
ЖХМС: Ву 0,92 мин; МС т/ζ 429,4 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
Пример 106.
Гидрохлорид (К)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы(пирролидин-2-илметил)бензолсульфонамида
- 126 032075
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 128, начиная с 3-(5-амино-6-(1,3диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е3) и (К)-трет-бутил 2-(аминометил)пирролидин-1-карбоксилата.
Полученный продукт перемешивают в ДХМ:ТФК 3:1 об./об. при комнатной температуре в течение 4 ч с получением указанного в заголовке соединения.
После очистки получают гидрохлорид обработкой 4Ν НС1 в диоксане.
ЖХМС: Ву 0,65 мин; МС т/ζ 442,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу03.
Пример 107. 3-(5-Амино-6-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Смесь 5-бром-2-циклопропилтиазола (80 мг,
0,390 ммоль), КОАс (57,4 мг, 0,585 ммоль),
РбС12(брр1)-СН2С12 аддукта (15,91 мг, 0,019 ммоль) и бис-(пинаколато)дибора (109 мг, 0,429 ммоль) в ДМЭ (1949 мкл), под Ν2, нагревают при 90°С в течение 14 ч. Бензолсульфонамид 3-(5-амино-6хлорпиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метила (промежуточное соединение Ό3) (150 мг, 0,390 ммоль) добавляют в реакционную смесь, затем №2СО3 (585 мкл, 1,169 ммоль) и РбС12(брр1)-СН2С12 аддукт (15,91 мг, 0,019 ммоль). Полученную смесь облучают микроволнами при 120°С в течение 45 мин.
Смесь добавляют в насыщ. Nа2СО3 (50 мл) и продукт экстрагируют в Е1ОАс (2x50 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над М§8О4, и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя модифицированным 0-10% градиентом (2 М ΝΙ13 в МеОН) в ДХМ на 12 г 81-колонке, затем масс-направленной препаративной хроматографией с обращенной фазой с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,97 мин; МС т/ζ 472,3 [М-Н]'; способ: 2ттЬо\рН.
Пример 108.
3-(5-Амино-6-(тиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид
0=5=0 ,ЫН
К раствору бензолсульфонамида 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метила (промежуточное соединение Ό3) (100 мг, 0,260 ммоль) в ТГФ (1299 мкл) добавляют 4(трибутилстаннил)тиазол (146 мг, 0,390 ммоль), Си! (2,474 мг, 0,013 ммоль) и Рб-118 (8,47 мг, 0,013 ммоль). Реакционную смесь нагревают в микроволновой печи 1 час при 100°С. Затем добавляют 4
- 127 032075 (трибутилстаннил)тиазол (146 мг, 0,390 ммоль), Ρά-118 (8,47 мг, 0,013 ммоль) и СШ (2,474 мг, 0,013 ммоль), и реакционную смесь облучают микроволнами при 150°С в течение 3 ч. Полученную смесь добавляют в воду (50 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮАс (2x40 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и смолой ЕоМе® 81-ТМТ для удаления Ρά. Твердые вещества удаляют фильтрацией, промывают ЕЮАс и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиент (2 М Ν43 в МеОН) в ДХМ на 12 г 81-колонке, затем масс-направленной препаративной хроматографией с обращенной фазой с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,04 мин; МС т/ζ 432,2 [М-Н]-; способ: 2тшЕо\\рНу01.
Пример 109.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-
4-метилбензолсульфонамид
К раствору №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (318 мг, 0,861 ммоль) в ДМЭ (3913 мкл) добавляют 5-бром-3-(3-циклопропил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин (полученный аналогично промежуточному соединению С11, начиная с 3-циклопропил-1Н-1,2,4-триазола) (220 мг, 0,783 ммоль), хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(И) (27,5 мг, 0,039 ммоль) и Να2€.Ό3 (водн. 2,0 М) (1174 мкл, 2,348 ммоль). Реакционную смесь облучают микроволнами при 120°С в течение 30 мин. Смесь добавляют в воду (50 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮАс (2x60 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и смолой 81-ТМТ для удаления Ρά. Твердые вещества удаляют фильтрацией, промывают ЕЮАс и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиентом (2 М Ν43 в МеОН) в ДХМ на 12 г 81-колонке. Полученное твердое вещество перекристаллизовывают из горячего ЕЮАс (~3 мл). Медленно добавляют МТБЭ пока смесь горячая (~3 мл). При охлаждении кристаллизуется желтое твердое вещество. Его собирают фильтрацией и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде блед но-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 444,6 [М+Н]+; способ: 2тшЕо\\рНу01.
Пример 110.
3-(5-Амино-6-(2-метокситиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-и(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
ОН
Получают аналогично примеру 108, начиная с 2-метокси-4-(трибутилстаннил)тиазола;
ЖХМС: Ву 1,13 мин; МС т/ζ 464,5 [М+Н]+; способ 2тшЕо\\рНу01.
Пример 111.
3-(5-Амино-6-(4-метил-1Н-пиразол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
- 128 032075
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 15, начиная с 4-метил-1Нпиразола.
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 443,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
Пример 112.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-этокси-4-метилбензолсульфонамид
Οϊ=δ=ο
Ό
Смесь 3 -(5-амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1 -сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) 100 мг, 0,285 ммоль) и гидрохлорида О-этилгидроксиламина (83 мг, 0,855 ммоль) в ДХМ (5 мл). К реакционной смеси добавляют пиридин (1 мл, 12,36 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь промывают 1 М ΗΟ, насыщенным раствором соли и сушат над Мд8О4. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяют в МеОН и добавляют воду до тех пор, пока продукт не выпадет в осадок. Его фильтруют, промывают водой и гексаном с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 3,96 мин; МС т/ζ 376,4 [М+Н]+; способ Ι0ιιιίηΙ.ο\\ρΗ\ΌΙ.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 10,36 (1Н, с), 9,33 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 7,93 (1Н, м), 7,76 (1Н, м), 7,59 (1Н, м), 7,40 (2Н, с), 3,92 (2Н, кв), 2,53 (3Η, с), 1,10 (3Η, т).
Следующие примеры получают аналогично Примеру 112 из 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и подходящего амина (коммерчески доступного, если не указано иначе.
Пример 112.1.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(трет-бутокси)-4-метилбензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 4,48 мин; МС т/ζ 404,5 [М+Н]+; способ 1001^^^^01.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,81 (1Н, с), 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,92 (1Н, м), 7,75 (1Н, м), 7,57 (1Н, м), 7,39 (2Н, с), 2,53 (3Η, с), 1,16 (9Н, с).
Пример 112.2.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-(диметиламино)этокси)-4метилбензолсульфонамид
- 129 032075
ЖХМС: Ву 2,24 мин; МС т/ζ 419,7 [М+Н]+; способ 10ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОО-04) δ ч./млн 9,35 (1Н, с), 8,33 (2Н, с), 8,02 (1Н, д), 7,86 (1Н, дд), 7,57 (1Н, д), 4,14 (2Н, т), 2,68 (2Н, т), 2,58 (3Н, с), 2,30 (6Н, с).
Пример 112.3.
3-(5-Амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-Гил)пиразин-2-ил)-№изопропокси-4-метилбензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 4,23 мин; МС т/ζ 390,5 [М+Н]+; способ 10ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 10,16 (1Н, с), 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,92 (1Н, д), 7,77 (1Н, дд), 7,59 (1Н, д), 7,40 (2Н, с), 4,11 (1Н, м), 2,53 (3Н, с), 1,11 (6Н, д).
Пример 112.4.
3-(5-Амиио-6-(1Н-1,2,4-τриазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-изобуτокси-4-меτилбеизолсульфоиамид
ЖХМС: Ву 4,62 мин; МС т/ζ 404,5 [М+Н]+; способ 10ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-д6) δ 10,37 (1Н, с), 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,93 (1Н, д), 7,77 (1Н, дд), 7,60 (1Н, д), 7,40 (2Н, с), 3,67 (2Н, д), 2,53 (3Н, м), 1,79-1,89 (1Н, м), 0,83 (6Н, д).
Пример 112.5.
-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофураи-3 ил)окси)бензолсульфонамид
- 130 032075
□ _8_о нк
Получают с применением О-(тетрагидрофуран-3-ил)гидроксиламина (промежуточное соединение р).
ЖХМС: Ву 3,60 мин; МС ш/ζ 418,3 [М+Н]+; способ 10ш1пЬо^рНу01.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 10,44 (1Н, с), 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,39 (1Н, с), 7,91 (1Н, д), 7,77 (1Н, дд), 7,60 (1Н, д), 7,40 (2Н, с), 4,68 (1Н, м), 3,79 (1Н, д), 3,63 (3Н, м), 2,53 (3Н, с), 1,97 (2Н, м).
Пример 113.
5-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Ы-(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамид
О=Й=О
он
Получают из 5-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-2-фтор-Ы-(3 -гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ5) и 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)тиазола аналогично Примеру 11. Полученное твердое вещество кристаллизуют из Е1ОАс/Е12О (растворяя соединение в минимуме горячего ЕЮАе и разбавляя Е12О). Полученный раствор охлаждают и твердое вещество собирают фильтрацией, промывают небольшим количеством Е12О и су шат с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,83 мин; МС ш/ζ 438,1 [М+Н]+; способ: 2ш1пЬо^рН.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ) δ 8,27 (1Н, с), 8,20 (1Н, с), 7,81 (1Н, шс), 7,78 (1Н, д), 7,44 (1Н, д), 6,72 (2Н, с), 4,42 (1Н, ш м), 3,38 (2Н, м), 2,93 (2Н, м), 2,68 (3Н, с), 2,47 (3Н, с), 1, 56 (2Н, м).
Пример 114.
5-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Ы-(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамид
Получают из 5-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-2-фтор-Ы-(3 -гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ5) и 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола аналогично примеру 11.
Полученное твердое вещество кристаллизуют из ЕЮАс/Е^О (растворяя соединение в минимуме
- 131 032075 горячего Е1ОАе и разбавляя Е12О). Полученный раствор охлаждают, и твердое вещество собирают фильтрацией, промывают небольшим количеством Е12О и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,75 мин; МС т/ζ 421,2 [М+Н]+; способ: 2т^и^ο^ρН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,31 (1Н, с), 8,06 (1Н, с), 7,98 (1Н, с), 7,80 (1Н, шс), 7,77 (1Н, д), 7,42 (1Н, д), 6,31 (2Н, с), 4,42 (1Н, шс), 3,91 (3Н, с), 3,38 (2Н, т), 2,92 (2Н, т), 2,46 (3Н, с), 1,56 (2Н, м).
Пример 115. 5-(5-Амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-П-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Получают аналогично примеру 11 из 1-метил-4-(4,4, 5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола и 5-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-2-фтор-П-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида (полученного в две стадии аналогично промежуточному соединению Ό5).
Полученное твердое вещество кристаллизуют из Е1ОАе/Е12О (растворяя соединение в минимуме горячего Е1ОАе и разбавляя Е12О). Полученный раствор охлаждают, и твердое вещество собирают Ьу фильтрация, промывают небольшим количеством Е12О и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества;
ЖХМС; Ву 0,82 мин; МС т/ζ 449,2 [М+Н]+; способ: 2т^и^ο^ρН.
Пример 116.
5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-П-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-2фтор-П-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида (получают в две стадии аналогично промежуточному соединению А12) и 5-хлор-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С5) в условиях, аналогичных условиям из примера 6. Полученное твердое вещество кристаллизуют из Е1ОАе/Е12О (растворяя соединение в минимуме горячего Е1ОАе и разбавляя Е12О). Полученный раствор охлаждают, и твердое вещество собирают фильтрацией, промывают небольшим количеством Е12О и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,84 мин; МС т/ζ 436,3 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_у003.
Пример 117.
Г идрохлорид 3 -(5-амино-6-(3 -((диметиламино)метил)- 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-П-(2гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида
- 132 032075
О=я=О
Стадия 1. Ц%диметил-'1-(1Н-'1,2,4-триазол-3-ил)метанамин.
К 3-(хлорметил)-1Н-1,2,4-триазолу (400 мг, 2,60 ммоль) добавляют диметиламин (2,0 М в ТГФ) (51,900 мл, 10,38 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч при комнатной температуре. Смесь концентрируют досуха и неочищенный продукт загружают в 2x10 г Ι8ο1η1ό® 8СХ-2 картриджи, промывают МеОН (50 мл) и продукт элюируют 2,0 М ΝΚ3 в МеОН (50 мл). Концентрация аммиака в метаноле дают указанное в заголовке соединение;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 3,51 (2Н, с), 2,16 (6Н, с).
Стадия 2. 5-Бром-3-(3-((диметиламино) метил)-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин.
Смесь 5-бром-3-хлорпиразин-2-амина (376 мг, 1,801 ммоль), Н%диметил-'1-(1Н-'1,2,4-триазол-3ил)метанамина (со стадии 1) (250 мг, 1,982 ммоль), Сз2СО3 (1174 мг, 3,60 ммоль) в ДМФ (9007 мкл) нагревают до 60°С в течение 16 ч. Смесь концентрируют досуха, добавляют в воду (50 мл) и продукт экстрагируют в ЕЮАе (4x40 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого твердого вещества, которое берут на следующей стадии без дальнейшей очистки.
ЖХМС: Ву 0,84 мин; МС т/ζ 298,4 [М+Н]+; способ: 2014^^^01.
Стадия 3. Гидрохлорид 3-(5-амино-6-(3-((диметиламино)метил)-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2ил)%-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида.
К раствору №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В2) (235 мг, 0,636 ммоль) в ДМЭ (2652 мкл) добавляют 5-бром-3-(3-((диметиламино)метил)-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин (со стадии 2) (158 мг, 0,530 ммоль), хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (18,61 мг, 0,027 ммоль) и №3СО3 (водн. 2,0 М) (795 мкл, 1,591 ммоль). Реакционную смесь облучают микроволнами при 120°С в течение 60 мин. Смесь добавляют в воду (50 мл) и продукт экстрагируют в ЕЮАе (2x50 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и смолой 81-ТМТ для удаления Ρά. Твердые вещества удаляют фильтрацией, промывают ЕЮАе и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиентом (2 М Ν43 в МеОН) в ДХМ на 12 г 81-колонке. Полученное масло растворяют в небольшом количестве МеОН (1 мл) и добавляют 4,0 М НС1 в диоксане (1 мл). Смесь концентрируют досуха и полученное твердое вещество перекристаллизовывают из горячего ЕЮН (~4 мл). При охлаждении кристаллизуется белое твердое вещество. Его собирают фильтрацией и сушат с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,66 мин; МС т/ζ 461,4 [М+Н]+; способ: 2т^η^ο^рНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 10,76 (1Н, шс), 9,42 (1Н, с), 8,45 (1Н, с), 7,93 (1Н, с), 7,73 (1Н, д), 7,58-7,49 (2Н, м), 7,46 (2Н, с), 4,58 (2Н, с), 4,44 (1Н, шс), 2,89 (6Н, с), 2,62 (1Н, д), 2,51 (3Н, с под ДМСО), 1,07 (6Н, с).
Пример 118.
5-(2-Метил-5-(3-(трифторметил)пиперазин-1-илсульфонил)фенил)-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин2-амин
р
Получают аналогично примеру 11 из 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2- 133 032075 ил)тиазола и 3-хлор-5-(2-метил-5-((3-(трифторметил)пиперазин-1-ил)сульфонил)фенил)пиразин-2-амина (получают в две стадии аналогично промежуточному соединению 1)5 из 3-бром-4-метилбензол-1сульфонилхлорида, 5-бром-3-хлорпиразин-2-амина и 2-(трифторметил)пиперазина).
ЖХМС: Ву 0,99 мин; МС т/ζ 499,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
Пример 119. 3-(5-Амино-6-(1-метил-3-(трифторметил)-1Н-пиразол-5-ил)пиразин-2-ил)-К-(3-гидрокси-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид
он
К 1-метил-3-трифторметилпиразол-5-бороновой кислоте (18 мг, 0,094 ммоль) добавляют Рд(РРй3)2С12 (2,74 мг, 3,9 мкмоль), карбонат натрия (2 М водный раствор, 0,117 мкл, 0,234 ммоль) и раствор 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-К-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ3) (30 мг, 0,078 ммоль) в ацетонитриле (0,7 мл). Полученную смесь нагревают в микроволновой печи при 150°С в течение 30 мин, затем фильтруют через 500 мг 1§о1и1е® 81-ТМТ картридж, промывая ацетонитрилом (1 мл). После выпаривания при пониженном давлении остаток растворяют в ДМСО и очищают ВЭЖХ (ацетонитрил/вода градиент, 0,1% ТФК модификатор). Фракции продукта объединяют и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХ-МС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 499,5 [М+Н]+; способ 2т1иЬо\рН.
Представленные ниже примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 119, начиная с 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-К-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение 1)3) и подходящей бороновой кислоты или сложного эфира, полученных из коммерческого источника. Реакции проводят в подходящем растворителе, например, ацетонитриле или ДМЭ. Конечные соединения очищают подходящими методами, известными в данной области техники, например, препаративной ВЭЖХ, как описано для примера 119. Соединения выделяют в виде соли трифторуксусной кислоты (из ТФК модификатора в препаративной ВЭЖХ) или свободного основания, за исключением 119,32 и 119,41 в которых получают гидрохлорид после очистки с применением стандартных условий, например, НС1/диоксана. В 119,42-119,46 (РдС12(дрр£)-СН2С12 аддукт) катализатор применяют вместо Рд(РРй3)2С12.
- 134 032075
Пр. Наименование Ву (мин) МС т/ζ ЖХМС Способ
119.1 3-(5-амино-6-(2-фторпиридин-З- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-З- метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид 0 = 5=0 нг/ V он 0,87 446, 3 2т1пЬомрН Т ФК
119.2 3-(5-амино-6-(4-метоксипиридин-Зил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид ^.Ν ΝΗ? ι. и л, а γ 0 0=8=0 ' н9. он 1,24 458,6 2т1пЬомрН Т ФК
- 135 032075
119.3 3-(5-амино-б-(2-метоксипиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил)-4- ме тилбензолсульфонамид „,Ν МНЙ Ν γ4γ'° 0=8=0 ΗΝ^ он 1,23 458,6 2т1пЬомрН Т ФК
119.4 3-(5-амино-б-(2-метоксипиридин-Зил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил)-4- ме тилбензолсульфонамид Ν .ΝΗ,^ 1 ιί Ύ Ν у 0=5=0 он 1,05 458,6 2т1пЬомрН Т ФК
119.5 3-(5-амино-б-(пиридин-3- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-З- метилбутил)-4- метилбензолсульфонамид ДО 0=8=0 ΗΝ V он 0,99 428,5 2т1пЬомрН Т ФК
119.6 3-(5-амино-б-(2-хлорпиридин-З- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил)-4- метилбензолсульфонамид Ж АН, дм..... Д 0=8=0 X он 1,21 462,6 2т1пЬомрН Т ФК
- 136 032075
119.7 3-(5-амино-6-(5-метилпиридин-З- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил)-4- ме тилбензолсульфонамид ф о 0=5=0 ‘ ΗΝχ он 1,21 нет иониза ции 2т1пЬомрН Т ФК
119.8 3-(5-амино-6-(5-хлор-2- фторпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-З-метилбутил)-4- ме тилбензолсульфонамид Л ΝΗ^ Ν Ν V ν' 0=5=0 С1 ΗΝ. ν он 1,26 нет иониза ции 2т1пЬомрН Т ФК
119.9 3-(5-амино-6-(6-хлор-4метилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил) - Ν- (З-гидрокси-З-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид Ν ΝΗ2 ΑΛγ. 0=5=0 ньц V он 1,21 476, 6 2т1пЬомрН Т ФК
119.10 3-(5-амино-6-(2-фторпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-З- метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид Л ΝΗ, 0=5=0 I ΗΝ А ОН 1,18 нет иониза ции 2т1пЬомрН Т ФК
- 137 032075
3-(5-амино-6-(З-фторпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4Ссылочны й пример
метилбензолсульфонамид
метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
3-(5-амино-6-(6-этоксипиридин-Зил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-З метилбутил)-4метилбензолсульфонамид метилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)Ν-(З-гидрокси-З-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
- 138 032075
119.15 3-(5-амино-б-(фуран-3-ил)пиразин- 2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил)-4- метилбензолсульфонамид I ΥΥ фг 0=8=0 ΗΝχ ч он 1,09 417,5 2т1пЬомрН Т ФК
119.16 3- (5-амино-б-(1-метил-1Л-пиразол- 4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3-гидрокси3-метилбутил)-4- метилбензолсульфонамид ,Ν. „ΝΗ-. 0=8=0 НМ ч он 0,81 431,4 2т1пЬомрН Т ФК
119.17 3-(5-амино-б-(6-(пирролидин-1ил)пиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-Ν(З-гидрокси-З-метилбутил)-4- ме тилбензолсульфонамид ДАЧ/ V .....; 0=8=0 к/ НМ ч он 1,00 497,7 2т.1пЬомрН Т ФК
119.18 3-(5-амино-б-(6-фторпиридин-З- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- метилбензолсульфонамид γΝ^ΝΗ? АЧЧя γ ЧХ 0=5=0 1 ΗΝ Ά он 1,12 446, 6 2т.1пЬомрН Т ФК
- 139 032075
гидрокси-3-метилбутил)-43-(5-амино-6-(пиримидин-53-(5-амино-6-(6-морфолинопиридин3-ил)пиразин-2-ил)-Ν- (3-гидрокси3-метилбутил 3-(э-амино-6-(3-метил-1Я-пиразол4-ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидроксиЗ-метилбутил -4ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил -4- 140 032075 ил)пиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-Ν(З-гидрокси-З-метилбутил)метилбутил)-4119.
пиран-4-илокси)пиридин-3ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зме тилбензолсульфонамид
3-(5-амино-6-(1-пропил-1Япиразол-4-ил)пиразин-2-ил) гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
гидрокси-3-метилбутил)-4-
- 141 032075
119.27 3-(5-амино-6-(пиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-З- метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид ,Ν ΝΗ? λι ι (Υ ρ Υγ Υαν 0=8=0 он 0,68 428,4 2т1пЬомрН
119.28 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид .Ν ΝΗ? ДА/ 0=5=0 1 он 0,65 442,0 2т1пЬомрН
119.29 3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид ι г-лн 9 V 0=8=0 нг-и он 0,9 448,3 2т1пЬомрН
119.30 3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид ] £ΥΗί 9 у- 0=3=0 ΗΝ □н 0,89 448,2 2т1пЬомрН
- 142 032075
119.31 3-(5-амино-6-(1-изопропил-1Япиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3гидрокси-3-метилбутил)-4- метилбензолсульфонамид лАА д 'Ν 0=5=0 }--- 1 / 1ΙΝ „ ОН 0,9 459,3 2т1пЬомрН
119.32 3-(5-амино-6-(1-изобутил-1Япиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3гидрокси-3-метилбутил)-4ме тилбензолсульфонамид гидрохлорид Ν ΝΗ, 1 !ί -I. . ί 'Г Ν ϊ Ν ί 'Ν 0=5=0 —\ ΙΙΝ ' 011 0,96 473,3 2т1пЬомрН
- 143 032075
119.33 3-(5-амино-6-(1Я-пиразол-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид .Ν ΝΗ, ί ί ΐ Π Ν Ό ^N11 0-5-0 ΗΝ. ОН 0,76 417,2 2т1пЬомрН
119.34 3- (5-амино-6-(1-этил-1Я-пиразол- 4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидроксиЗ-метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид Ν ΝΗ, ш; О' Ν А т \ 0-5-0 ι ..... ΗΝ, Ί. ? 1 он 0,86 445,3 2т1пЬомрН
119.35 3-(5-амино-6-(5- (гидроксиметил)тиофен-2- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид >N.,NN2 ψ ΙζΆη 1 0=5=0 но4- А 0,86 463,4 2т1пЬомрН
- 144 032075
119.36 3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Япиразол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид Д.Д ДД” 0-5-0 1 ΗΝ Г он 0,91 445,1 2т1пЬочрНуО 1
119.37 3-(5-амино-6-(1-(пиридин-2илметил)-1Я-пиразол-4-ил)пиразин2-ил)-Ν-(З-гидрокси-З- метилбутил) -4- метилбензолсульфонамид „Ν. ^ΝΗ? 1 [' Ί' ц Д Υ-м' Υ-ν X 0-8-0 ΝΗ Α он 0,81 508,3 2т1пЬочрН
119.38 3-(5-амино-6-(1-(пиридин-3илметил)-1Я-пиразол-4-ил)пиразин2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- метилбензолсульфонамид рХД. --- Гу 0=3=0 νΖ ,ΝΗ 3 он 0,71 508,7 2тФпЬочрН
119.39 3-(5-амино-6-(1-(пиридин-4илметил)-1Я-пиразол-4-ил)пиразин2-ил)-Ν- (З-гидрокси-Зметилбутил) -4- метилбензолсульфонамид ,Ν; ΝΗ, ДА·'.....· ί Ν’' _ Υ -Ν // > 0=3-0 ,ΝΗ [' Ύ он 0,67 508,7 2тФпЬочрН
- 145 032075
119.40 3-(5-амино-б-(2-метилоксазол-5- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид Ν' ΝΗ? 1 ί Ύ ] .1 ' /Г ΚΑ -'Ν 0=3=0 он 0,89 432,5 2т1пЬомрНуО 1
119.41 гидрохлорид 3-(5-амино-б-(1-(2- морфолиноэтил)-1Я-пиразол-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (З-гидрокси-З- метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамида „К .ΝΗ? μ.....К,. , Υ·1 Υ Ϊ 0-5—0 ΝΗ ОН 0,63 530,5 2т1пЬомрНуО 1
119.42 3-(5-амино-б-(1Я-пиразол-3- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- метилбензолсульфонамид Ν ΝΗρ 1 ί ν. Ζ\γ ν V ΝΗ ¥ Ъ 0-5=0 А он 0,96 417,2 ЬомрН ν002
119.43 3-(5-амино-б-(4-метилтиофен-2- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-Зметилбутил) -4- метилбензолсульфонамид 1 £''ν' Т'5 т А 0=5-0 X он 1 447,4 ЬомрН ν002
- 146 032075
119.44 3- (5-амино-б-(5-метилтиофен-2- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(З-гидрокси-З- метилбутил) -4- ме тилбензолсульфонамид 0,99 447,5 ЬомрН ν002
N 1 ί.: о’ т Ν Υ 0-8-0 1 ΗΝ 2 он ,ΝΗ, 'ν-
3-(5-амино-б -(тиофен-2-
ил)пиразин-2 -ил)-Ν-(З-гидрокси-З-
метилбутил)- 4-
метилбензолсульфонамид
Ν4
1 7
(7 Ν'
О—8—О
ΗΝ
к
он
119.45 0,95 433,5 ЬомрН ν002
3-(5-амино-б -(5-
циклопропилтиофен-2-ил)пиразин-2-
ил)-Ν- (З-гидрокси-З-метилбутил)-
4-метилбензолсульфонамид
N ΝΗ,
1 г π
'Χ--3 1
Υ
0-8-0
ΗΝ „ Ί
ι
ιΝ
ОН
119.46 1,18 473,3 ЬомрН ν002
Пример 120.
-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5 -ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((3 -метилоксетан-3 ил)метил)бензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин2-амина (промежуточное соединение С6) и 4-метил-№(3-метилоксетан-3-илметил)-3-(4,4,5,5)тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В4) в условиях, аналогичных условиям из примера 41;
- 147 032075
ЖХМС: Ву 1,09 мин, МС т/ζ 446,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рНу03.
Пример 121.
5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,4диметилбензолсульфонамид
Стадия 1. 5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-илбороновая кислота.
Смесь бис-(пинаколато)дибора (750 мг, 2,95 ммоль), 5-бром-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2амина (промежуточное соединение С11), ацетата калия (435 мг, 4,43 ммоль) и РйС12(йррГ)-СН2С12 аддукта (120 мг, 0,147 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (14 мл) нагревают в микроволновой печи при 120°С в течение 30 мин. Полученную смесь фильтруют через Се1йе®, промывая ДХМ и 5% метанолом в ДХМ, и фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Неочищенный остаток растворяют в ДХМ (10 мл) и обрабатывают пинаколом (320 мг, 2,71 ммоль) и перемешивают при комнатной температуре. Гексан (20 мл) добавляют к смеси, и полученное твердое вещество собирают фильтрацией, промывают водой и сушат в вакуумной печи с получением указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,52 мин; МС т/ζ 207,5 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
Стадия 7. 5-Бром-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,4-диметилбензолсульфонамид.
К перемешиваемому раствору 1-амино-2-метилпропан-2-ола (104 мг, 1,164 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют триэтиламин (0,295 мл, 2,116 ммоль) затем хлорид 5-бром-2,4-диметилбензол-1-сульфонила (300 мг, 1,058 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Полученную смесь разбавляют в ДХМ и выливают в делительную воронку. Раствор промывают 1 М НС1 и отделяют. Органическую часть промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением белого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,12 мин; МС т/ζ 337,4 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
Стадия 3. 5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,4диметилбензолсульфонамид.
5-Бром-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-2,4-диметилбензолсульфонамид (со стадии 2) (176 мг, 0,523 ммоль), 5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-илбороновую кислоту (со стадии 1) (108 мг, 0,523 ммоль), фосфат калия (222 мг, 1,047 ммоль) и [1,1'-бис-(ди-третбутилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11) (17,06 мг, 0,026 ммоль) взвешивают в микроволновой пробирке. Добавляют 1,4-диоксан (2 ил) и воду (0,500 мл), и раствор помещают в микроволновую печь на 10 мин при 100°С. Реакционную смесь разбавляют водой и этилацетатом. Органический слой экстрагируют в делительной воронке разбавлением этилом, сушат над сульфатом магния и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 10% МеОН:ДХМ градиентом на 12 г картридже с двуокисью кремния. Неочищенный продукт загружают в колонку с применением ДХМ. Фракции продукта объединяют и растворитель удаляют с получе нием желтого твердого вещества.
ЖХМС: Ву 3,68 мин; МС т/ζ 418,4 [М+Н]+; способ: 10ттЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 9,32 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 8,38 (1Н, с), 7,89 (1Н, с), 7,53 (1Н, с), 7,37 (1Н, с), 7,34 (1Н, с), 5,76 (1Н, с), 4,39 (1Н, с), 2,72 (2Н, с), 2,59 (3Н, с), 2,47 (3Н, с), 1,05 (6Н, с).
Пример 122.
5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
0=5=0
148 032075
Стадия 1. 5-Бром-2-фтор-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
К перемешиваемому раствору 1-амино-2-метилпропан-2-ола (102 мг, 1,148 ммоль) в ДХМ (10 мл), триэтиламина (0,291 мл, 2,087 ммоль) добавляют хлорид 5-бром-2-фтор-4-метилбензол-1-сульфонила (300 мг, 1,043 ммоль) и перемешивание продолжают в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют ДХМ, промывают 1 М НС1 и промывают насыщенным раствором соли. Органическую часть сушат над Мд8О4 и фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,03 мин; МС т/ζ 341,2 [М+Н]+; способ: 2т1п1.о\\р1 Ι\Ό1.
Стадия 2. 5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-№(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
5-Бром-2-фтор-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид (стадия 1) (100 мг, 0,294 ммоль), 5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-илбороновую кислоту (см. пример 121, стадия 1) (60,5 мг, 0,294 ммоль), фосфат калия (125 мг, 0,588 ммоль) и [1,1'-бис-(ди-третбутилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (9,58 мг, 0,015 ммоль) добавляют в микроволновую пробирку. Добавляют 1,4-диоксан (2 мл) и воду (0,500 мл), и реакционную смесь нагревают в микроволновой печи при 100°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой и насыщенным раствором соли. Органическую часть сушат над Мд8О4, фильтруют и вакуум выпаривают при пониженном давлении. Неочищенный продукт разделяют флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 100% изогексан:ЕЮАс градиентом на 12 г картридже с двуокисью кремния. Фракции продукта объединяют и растворитель удаляют с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 3,44 мин; МС т/ζ 422,2 [М+Н]+; способ: 10тт1.о\\р1 Ι\Ό1.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб) δ 9,32 (1Н, с) 8,42 (1Н, с) 8,38 (1Н, с) 7,84 (1Н, д) 7,72 (1Н, с) 7,46 (1Н, д) 7,37 (2Н, с) 4,42 (1Н, с) 2,80 (2Н, с) 2,54 (3Н, с), 1,07 (6Н, с).
Пример 123.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамид
ΗΝ
Стадия 1. 3-Бром^-(2-гидрокси-2-метилпропил)бензолсульфонамид.
Смесь, содержащую хлорид 3-бромбензол-1-сульфонила (300 мг, 1,174 ммоль), 1-амино-2метилпропан-2-ол (115 мг, 1,292 ммоль), триэтиламин (0,327 мл, 2,348 ммоль) и ДХМ (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученную смесь разбавляют ДХМ и промывают 1 М НС1, насыщ. раствором бикарбоната натрия и сушат над Мд8О4. Раствор затем фильтруют и выпаривают в вакууме для удаления растворитель. Получают указанное в заголовке соединение в виде желтого кристаллического твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,92 мин; МС т/ζ 308,1 [М+Н]+; способ: 2т1п1.о\\р1 Ι\Ό1.
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамид.
3-Бром-№(2-гидрокси-2-метилпропил)бензолсульфонамид (со стадии 1) (100 мг, 0,324 ммоль), 5амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-илбороновую кислоту (см. пример 121, стадия 1) (66,8 мг, 0,324 ммоль), фосфат калия (138 мг, 0,649 ммоль) и [1,1'-бис-(ди-третбутилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (10,57 мг, 0,016 ммоль) добавляют в пробирку для микроволновой печи. Добавляют 1,4-диоксан (2 мл) и воду (0,500 мл), и смесь нагревают с применением микроволнового облучения в течение 10 мин. Реакционную смесь промывают этилацетатом и водой. Раствор промывают насыщенным раствором соли и затем разделяют. Раствор сушат над Мд8О4, фильтруют и выпаривают в вакууме на роторном испарителе с получением коричневого масла. Неочищенный продукт разделяют флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 100% изогексан:ЕЮАс градиентом, на 4 г картридже с двуокисью кремния, неочищенный продукт загружают сухим в колонку. Подходящие фракции объединяют и растворитель удаляют с получением светло-зеленого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 3,28 мин; МС т/ζ 390,5 [М+Н]+; способ: 10тт1.о\\р1 Ι\Ό1.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,56 (1Н, с) 8,85 (1Н, с) 8,48 (1Н, с) 8,44 (1Н, с) 8,34 (1Н, д) 7,79 (1Н, д) 7,68 (1Н, т) 7,63 (1Н, с) 7,46 (2Н, с) 4,43 (1Н, с) 2,65 (2Н, с) 1,07 (6Н, с).
- 149 032075
Пример 124.
5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-хлор-Х-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
Стадия 1. 5-Бром-2-хлор-Х-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
В круглодонную колбу добавляют 1-бром-4-хлор-2-метилбензол (300 мг, 1,460 ммоль). При 0°С добавляют хлорсульфоновую кислоту (2,347 мл, 35,0 ммоль) в СНС13 (10 мл). Реакционную смесь нагревают до КТ и перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь добавляют в ледяную воду и ДХМ и перемешивают. Органический слой отделяют и обрабатывают 1-амино-2-метилпропан-2-олом (143 мг, 1,606 ммоль) и триэтиламином (0,407 мл, 2,92 ммоль) и перемешивание продолжают при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь промывают 1 М НС1 и насыщенным раствором бикарбоната. Органический слой отделяют, сушат над Мд8О4 и фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого масла. Неочищенный продукт разделяют флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 40% изогексан:ЕЮАс градиентом на 4 г картридже с двуокисью кремния, неочищенный продукт загружают сухим в колонку. Подходящие фракции объединяют и растворитель удаляют с получением бе лого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,18 мин; МС т/ζ 356,1 [М+Н]+; способ: 2ттЬо\рНу01.
Стадия 2. 5-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-хлор-Х-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
В пробирку для микроволновой печи добавляют 5-бром-2-хлор-Х-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид (стадия 1) (60 мг, 0,168 ммоль), 5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2илбороновую кислоту (см. пример 121, стадия 1) (34,6 мг, 0,168 ммоль), дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия (5,90 мг, 8,41 мкмоль), карбонат натрия (53,5 мг, 0,505 ммоль) в ДМЭ (1 мл). Реакционную смесь помещают в микроволновую печь на 20 мин при 70°С и затем на 5 мин при 100°С. Реакционную смесь промывают водой и ЕЮАс. Органический слой затем отделяют, сушат над Мд8О4 и затем фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 10% ДХМ:МеОНЖН3 градиентом на 4 г картридже с двуокисью кремния, неочищенный продукт загружают сухим в колонку. Подходящие фракции объединяют и растворитель удаляют с получением желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 3,61 мин; МС т/ζ 438,3 [М+Н]+; способ: 10т1пЬо\рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ) δ 9,33 (1Н, с) 8,422 (1Н, с) 8,419 (1Н, с) 8,02 (1Н, с) 7,67 (1Н, с) 7,62 (1Н, с) 7,42 (2Н, с) 4,43 (1Н, с) 2,50 (3Н, с) 2,80 (2Н, д) 1,07 (6Н, с).
Пример 125.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Х-(2-гидрокси-2-метилпропокси)-4метилбензолсульфонамид
К хлориду 3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1 -сульфонила (промежуточное соединение Е3) (338 мг, 0,895 ммоль) в ТГФ (6 мл) добавляют 1-(аминоокси)-2метилпропан-2-ол (103 мг, 0,984 ммоль) и пиридин (0,080 мл, 0,984 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при КТ в течение более трех дней. Растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества. Продукт растворяют в 1 мл ДМСО и очищают препаративной
- 150 032075
ВЭЖХ. Фракции продукта промывают насыщенным раствором бикарбоната и сушат над Мд8О4, фильт руют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением масла, которое растирают с диэтиловым эфиром с получением бледно-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 3,45 мин; МС т/ζ 447,2 [М+Н]+; способ: 10т^η^ο^ρНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, МеОП-а4) δ 8,03 (1Н, с) 7,97 (1Н, с) 7,96 (1Н, д) 7,83 (1Н, д) 7,54 (1Н, д) 3,91 (3Н, с) 3,85 (2Н, с) 2,51 (3Н, с) 2,36 (3Н, с) 1,15 (6Н, с).
Пример 126.
3-(5-Амино-6-(2-метилоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-П-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамид
О=3=О
К 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-П-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамиду (промежуточное соединение 1)2) (140 мг, 0,378 ммоль), 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)оксазолу (79 мг, 0,378 ммоль), фосфату калия (160 мг, 0,755 ммоль) и [1,1'-бис-(дитрет-бутилфосфино)ферроцен]дихлорпалладию(11) (24,60 мг, 0,038 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляют воду (0,500 мл).
Реакционную смесь перемешивают при 120°С в течение 20 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь выливают в воду, и продукт экстрагируют с применением Е1ОАе. Органический слой отделяют и промывают водой и насыщенным раствором соли, затем сушат над Мд8О4. ΙδοΙιιΧ® 81-ТМТ добавляют к фильтрату и смесь перемешивают в течение 1 ч и фильтруют. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт разделяют флэш-хроматографией на колонке, элюируя от 0 до 10% МТБЭ:МеОН градиентом на 12 г картридже с двуокисью кремния, неочищенного продукта загружают сухим в колонку. Фракции продукта объединяют и растворитель удаляют при пониженном давле нии с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 2,91 мин; МС т/ζ 418,5 [М+Н]+; способ: 8т^η^ο^ρНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,24 (1Н, с), 7,87-7,83 (1Н, м), 7,74-7,65 (2Н, м), 7,56-7,43 (2Н, м), 6,73 (2Н, с), 4,40 (1Н, с), 2,62 (2Н, шс), 2,54 (3Н, с), 2,46 (3Н, с), 1,06 (6Н, с).
Пример 127.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-П-(2,2,2трифторэтил)бензолсульфонамид
К 2,2,2-трифторэтанамину (15 мг, 0,15 ммоль) добавляют ДМА (1 мл), затем ДИПЭ А (0,035 мл, 0,200 ммоль). Реакционную смесь встряхивают при КТ в течение 30 мин и затем обрабатывают хлоридом 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонила (промежуточное соединение Е1) (0,1 ммоль) и ДМА (1 мл). Полученную смесь встряхивают при КТ в течение 3 ч и затем концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают ВЭЖХ (ацетонитрил/вода градиент, 0,1% ТФК модификатор), фракции продукта объединяют и выпаривают с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,82 мин; МС т/ζ 414,1 [М+Н]+; способ: 2т^η^ο^ρНν01.
Следующие примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 127, начиная с 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и подходящего коммерчески доступного амина. (Амины, применяемые в примерах 127.22 и 127.23, могут быть получены по методике, описанной в заявке на патент АО 2011/113894, с. 99). Конечные соединения очищают подходящими методами, известными в данной области техники. Если показано получение соли трифторуксусной кислоты, ее получают благодаря присутствию ТФК в качестве модификатора при очистке с обращенной фазой и основного
- 151 032075 центра в молекуле. Применяют ЖХМС способ если не указано иначе.
Пр. Наименование Ву (мин) МС т/ζ (М+Н)+ если не указано иначе
127.1 5-(5-(3,З-дифторпиперидин-1- илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(1Я-1,2,4триазол-1-ил)пиразин-2-амин Ф ΝΗ? Μ - Ν Г Ν Ν γ ΝΖ 0=5 = 0 αι Ε 1,12 436,2
127.2 5-(5-(З-фторпирролидин-1-илсульфонил)- 2-метилфенил)-3-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-амин Ν ΝΗ. ,1 Л .ί Ν (1 ] Ν и ' ν л 0=5 = 0 I Ν γ· 1,01 404,1
127.3 5-(5-(3,З-дифторпирролидин-1- илсульфонил) -2-метилфенил)-3-(1Я-1,2,4триазол-1-ил)пиразин-2-амин 1,08 422,1
- 152 032075
Ν“ λ 4 ίΐ '3 Ν τ 0-5-0 I Ν ,Ρ Ε —ПЯ------------- Ρν 1 / )- '-К
5-(5-(3,З-дифторазетидин-1-
илсульфонил) - 2-метилфенил)-3-(1Я-1,2,4-
триазол-1-ил) пиразин-2-амин
ι г: Ίι ,ΝΗ,
-1. Λ ί [ί '1 Ν . N к 1
1 Α ’т
I 0-5=0
Ν
Λ
Ε Ε
127.4 1,05 408,1
5-(5-(З-фторазетидин-1-илсульфонил)-2-
метилфенил)-3 -(1Я-1,2 ,4-триазол-1-
ил)пиразин-2- амин
ι А /Н;
Рг'Р 1 к/
т
0-5-0
,М
Г Е
127.5 0,99 390,1
- 153 032075
127.6 3-(5-амино-б-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-(4- (гидроксиметил)циклогексил)-4- ме тилбензолсульфонамид Ν ΝΗ, 0=8=0 II А. .-X. н 1Х°н 0,93 444,2
127.7 3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3,3дифторциклобутил)-4ме тилбензолсульфонамид ΝΚ ΝΗ ; ι: ί ν Γϊ 'Ν ΓΑ 0 = 5=0 I Ν _ Η ΐΧ- Ρ 1,05 422,2
127.8 5-(2-метил-5-(3,3,4,4тетрафторпирролидин-1илсульфонил)фенил)-3-(1Я-1,2,4-триазол1-ил)пиразин-2-амин 1,16 458,1
- 154 032075
) ΥΝΗ' ί V 0-3-0 Λ. Ε Ε
127.9 3- (5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Я-(5-гидроксипентил) - 4- метилбензолсульфонамид Ρ^ΝΗ- ΥρΥν-% 1 д Р 0 = 5 = 0 1 ,ΝΗ Н % 1 он 0,91 418,2
127.10 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (3-метоксипропил)-4метилбензолсульфонамид 0,96 404,2
- 155 032075
ΑΑΑνλ ςΛ % 0=5=0 ι ,.Ν. Η 1 Ί %
127.11 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1гидроксициклогексил)метил)-4метилбензолсульфонамид ,Ν. ЫН. ί Г I ГТ Г 7 0=5=0 II Н Тон Г 1,04 426,2 (М- 17)
127.12 (Я)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν- ( (1-этилпирролидин2-ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид соль трифторуксусной кислоты 0,76 443,2
- 156 032075
Лк Лк ΑΧΑνλ Ί . -Γ ί 0-3-0 г Ν Η я Г Я)
127.13 (К)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-гидроксипропил)4-метилбензолсульфонамид ί /9Н·' 9 Ч' 0=5=0 | Н' 0,87 390,1
127.14 (К)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ( (тетрагидрофуран-2- ил)метил)бензолсульфонамид Ν^ΝΗ Α·ν 9 Ч' 0-3-0 1 А Н Ч γ А 0,97 416, 1
- 157 032075
127.16 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1- гидроксициклобутил)метил)-4- метилбензолсульфонамид 9 у/ 0-3 = 0 II ,Ν н Дон νΥ 0,95 416, 1
127.17 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидро-2Я-пиран-2- ил)метил)бензолсульфонамид ΖγΝΗι ДЛЛД 9 0=5 = 0 Υ~Υ /-Ό 1,05 430,2
127.18 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-((1- ме тилпирр олидин-3- ил)метил)бензолсульфонамид соль трифторуксусной кислоты 0,74 429,2
- 158 032075
Λ X ί Ν < ^-τ Ν Ν' υ 1 и ζ 0-3-0 I Ν λ V, ,Ν \
127.19 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ( (тетрагидро-2Я-пиран-3- ил)метил)бензолсульфонамид ,Ν ΝΗ; сЛМ Ν 0=5=0 0,99 430,2
127.20 (Я)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- (тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид .Ν ΝΗ, х А , А.... ν [ 7 Ν ί 7 -τΝ 0=8=0 '4 0,91 402,1
- 159 032075
127.21 (5)-3-( 5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- (тетрагидрофуран-3-ил)бензолсульфонамид А N ι у Ν 9 > 0=3 = 0 ι > 0,91 402,1
127.22 (Я)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(3,3,3— трифтор-2-гидрокси-2- метилпропил)бензолсульфонамид ,Νχ ,ΝΗ; ΧγΑ -Ν 0=5=0 Н'% Η0,ζΑρ * Ат р 1,01 458,2
127.23 (5)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(3,3,3— трифтор-2-гидрокси-2- метилпропил)бензолсульфонамид 1,01 458,2
- 160 032075
V ν·ΝΗ·' ухААм-у. 0=5 = 0 II ηΝ> / Αε Ε
127.24 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(4,4,4трифтор-З-гидрокси-З- метилбутил) бензолсульфонамид ,МН? 1 Г г II т Ν У4· 0=5=0 I Н % Е V: 7 ОН 1,02 472,2
127.25 3-(5-амино-б-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1- (гидроксиметил)циклопентил)метил)-4- метилбензолсульфонамид 0,91 444,2
- 161 032075
------Х/Н,.------------- /ΡμΑνΛ. 1 и / --Ν 0 = 5=0 0 0
127.26 (5)-3-(5-амино-б-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидрофуран-3- ил)метил)бензолсульфонамид Ж /н, / XI Ν 0=5=0 г-° 1Γ·Ν ΑΑ 0,79 416, 1
127.27 (Я)-3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидрофуран-3- ил)метил)бензолсульфонамид Ν ΝΗ, ч .с ι ,Г '<' Ν Ν' 12 Ч- 0=5=0 1 \ ,Ν ,,А/ К -ЧПГ'-' 0,79 416, 1
- 162 032075
127.28 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-фторэтил)-4ме тилбензолсульфонамид ίΐ 1 и 7 0=3 = 0 1 ж и ί г 0,75 378,2
127.29 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3-фторпропил)-4- ме тилбензолсульфонамид Ν. ,ΝΗρ ί [ Ν X/ 0=3=0 I „X /-χ Л Ή 0,81 392,1
127.30 3-(5-амино-6-(ΙΗ—1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2оксотетрагидрофуран-3- ил)бензолсульфонамид 0,90 416, 1
127.31 X ,ΝΗ 4X1 ν '/-Г Ν Ν' : II . к. N 0-3-0 о ,χ л н О’ 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(3,3,3трифторпропил)бензолсульфонамид Ν ΛΗ; 1 ί Ϊ ΑΛΛ-\ ψ 0=5=0 Е 1,06 428,2
127.32 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2-метил-2морфолинопропил)бензолсульфонамид соль трифторуксусной кислоты 0,73 473,3
- 163 032075
Χτ·ΑΑν-ν. β К 0=5 = 0 Η'£ ' Ό
127.33 5-(5-(4,4-дифторпиперидин-1- илсульфонил) -2-метилфенил)-3-(1Я-1,2,4триазол-1-ил)пиразин-2-амин -Α ΝΜ? I Г Г то ν ν> ЧА 0=5=0 II ¥ Р Р 1,11 436,2
127.34 5- (5- ( 4-фторпиперидин-1-илсульфонил)-2метилфенил)-3-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-амин 1,08 418,2
- 164 032075
α Α -Ά- .Α ρ б Ρ N N . ! иΖ 0 = 3=0 I Ж Ρ
127.35 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1гидроксициклопентил)метил)-4метилбензолсульфонамид ,ΝΗ; гААд Υ 0=3=0 1 О 0,99 412,2 (М- 17)
127.36 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-(1гидроксициклопентил)этил)-4метилбензолсульфонамид 1,02 426,2 (М- 17)
- 165 032075
Ν ,ΝΗ. Λ X X Ζγ Ν ' < ! 1- Ν 0 = 3 = 0 1 Λ 50
127.37 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-(1гидроксициклогексил)этил)-4метилбензолсульфонамид ΥγΝΗ'· хХ Хч А ΧΆ Ν N +. ψ 5/ 0-5-0 || N. Н О [ ОН 1,06 440,2 (М- 17)
127.38 3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1- (гидроксиметил)циклопропил)метил)-4ме тилбензолсульфонамид 0,92 398,1 (М- 17)
- 166 032075
Ν , ΝΗ2 φ '·' 4 0=5=0
Μ ' ΗΟ^^ >
(5)-3-(5- амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1-
ил)пиразин-2-ил)-Ν-((5,5-
диметилте трагидрофуран-2-ил)метил)-4-
метилбензолсульфонамид
ι Г Л ΝΗ
А—
0=3 = 0
.Ν Н
А
127.39 1 1,1 444,2
(£)-3-(5- амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1-
ил)пиразин-2-ил)-Ν-((5,5-
диметилтетрагидрофуран-2-ил)метил)-4-
127.40 ме тилбензолсульфонамид 1,07 444,2
- 167 032075
1 ΑγΝΗ' Α9νλν-ν ; 9 Ύ 0=3 = 0 I Ν н Л 4- 1
127.41 (5)-3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (1-гидроксипропан-2- ил)-4-метилбензолсульфонамид .ΝΗ, 1 1-, / ^9 Ν 0=5=0 нА-и-оп 0,87 390,1
127.42 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (1-гидроксипропан-2- ил)-4-метилбензолсульфонамид . N ί Г Ν Ό 0=5=0 I Ν Λ. Η он 0,87 390,2
- 168 032075
127.43 3- (5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2,2-дифторпропил) - 4- метилбензолсульфонамид N ЫН. I Г Υ А. 7¾ 7-к. N < Ύ Ν Ν' у φ о-з-о II „Ν '.I Р 1,02 410,2
127.44 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(3- метилбутан-2-ил)бензолсульфонамид ΝΗ, ί Г ΐ с/ 0-8-0 I, N. н ..I. 1,13 402,2
127.45 (1-(3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4метилфенилсульфонил)азетидин-3ил)метанол 0,88 402,1
- 169 032075
ι / А φ Ν и 0=5=0 1 Ν ί но
127.46 1-(3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-4- метилфенилсульфонил)-3-метилазетидин-3- ол -'Ъ.? г',-...... А А л ° та. = 0,83 402,4
127.47 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((3-гидроксиоксетан- 3-ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид Ν ΝΗ; Г;.....А'/ Ί Ν 0-5-0 9 ! он о 0,81 418,5
- 170 032075
127.48 (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(1-циано-2гидроксиэтил)-4-метилбензолсульфонамид ι ΓΝγΝΜζ у 0-3-0 Υ'-ρ-οΗ N 0,85 401,1
127.49 3-(5-амино-6-(1Я-1,2 ,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1- (гидроксиметил)циклобутил)метил)-4ме тилбензолсульфонамид Λ/ΑνΛ ιι 2 =ζ 'Ν 0=3 = 0 0,94 430,2
127.50 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((4- (гидроксиметил)тетрагидро-2Я-пиран-4- ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид 0,88 460,2
- 171 032075
--Ж Υν т 0=3-0 N ОН γ о—7 —яре---------------- Г ' •Ч N N.. 4'
3-(5-амино-6 -(1Н-1,2,4-триазол-1-
ил)пиразин-2 -ил)-4-метил-Ы-(2-
оксотетрагидротиофен-3-
ил)бензолсульфонамид
N ΝΗ
1 г Ίι
1 1 А N
< Ύ N Ί
] ...1 г /ν'
0-5-0
N
н Г '
А
0
127.51 0,98 432,1
3-(5-амино-6 -(1Я-1,2 ,4-триазол-1-
ил)пиразин-2 -ил)-Ν- ( (1-
(гидроксиметил)циклогексил)метил)-4-
127.52 метилбензолсульфонамид 1,08 458,3
- 172 032075
---------.Ν. ΜΗ?---------------------- ι ГТ ДтАХ·/. (д А о-з-о „Ы. ОН X
127.53 3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Я-циклопропил-4ме тилбензолсульфонамид ДуТЧл ψ А о-з-о 1’ „Ν- 0,97 372,7
127.54 3-(5-амино-б-(1Я-1,2,4-триазол-1- ил)пиразин-2-ил)-Я-циклобутил-4ме тилбензолсульфонамид 1 ДД4·' ψ А 0=5 = 0 1 ,Ν, „ Н ДА 1,03 386,2
- 173 032075
127.55 3-(5-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Я-циклопентил-4метилбензолсульфонамид „ΝΗ-. 1 о ;ГТ νΎΝ.' 4 γΑ -Ν 0-5 = 0 ι Ъ 1,08 400,2
127.56 1-((3-(5-амино-6-(1Η-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4метилфенилсульфонамидо)метил) циклопропанкарбоксамид Ж .ΝΗ .... Ψ X' 0=5-0 ,Ν О X... 0,88 429,2
Следующие примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 127, начиная с 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) и подходящего моно-Ьοс замещенного амина. Βοο защитную группу удаляют из конечных соединений встряхиванием раствора каждого соединения в ДХМ (2 мл), содержащего ТФК (0,15 мл) в течение 3 ч до очистки.
- 174 032075
3-илметил бензолсульфонамид трифторуксуснои кислоты (3)-3-(5-амино-6-(1Н-1г2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(пирролидинтрифторуксуснои кислоты
3-(о-амино-6-(1Я-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-Ν-((ЗЯ,4К)-4гидроксипирролидин-3-ил)-4трифторуксуснои кислоты (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1г2, 4-триазол-1ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(пирролидинПример 128.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-К-((3-(гидроксиметил)оксетан-3ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид
Хлорид
3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонила
- 175 032075 (промежуточное соединение Е3) (200 мг, 0,53 ммоль) в ДМА (2 мл) добавляют по каплям к перемешиваемому раствору (3-(аминометил)оксетан-3-ил)метанола (68 мг, 0,58 ммоль) и ДИПЭА (0,28 мл, 1,5 ммоль) в ДМА (2 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагревают до КТ и перемешивают в течение 1 ч, затем ЖХМС дает 1: 1 смесь продукта и сульфоновой кислоты. Реакционную смесь разбавляют ЕЮАс и промывают водн. ЫаНСО3. Органический экстракт отделяют, сушат над Мд8О4, и растворитель удаляют с получением бесцветного масла. Хроматография на двуокиси кремния с элюированием ЕЮН, ЕЮН 1:1, дает белое аморфное твердое вещество;
ЖХМС: Ву 0,84 мин; МС т/ζ 459,5 [М+Н]+; способ 2ттЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 8,09 (2Н, с), 7,88 (1Н, с), 7,75 (1Н, шс), 7,70 (1Н, д), 7,52 (1Н, д), 6,29 (2Н, с), 4,85 (1Н шс), 4,28 (4Н, м), 3,82 (3Н, с), 3,52 (2Н, с), 2,95 (2Н, с), 2,45 (3Н, с), 2,29 (3Н, с).
Следующие соединения получают по методике, аналогичной той, которую применяют для синтеза из примера 128, начиная с 3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е3) и подходящего амина.
Пример 128.1.
(8)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((1-этилпирролидин-2-ил)метил)4-метилбензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 0,6 мин; МС т/ζ 470,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 8,09 (1Н, с), 8,05 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,67 (1Н, д), 7,50 (1Н, д), 7,46 (1Н, ш т), 6,29 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 2,95 (1Н, м), 2,80 (1Н, м), 2,60 (2Н, м), 2,48 (3Н, с), 2,38 (1Н, м), 2,27 (3Н, с), 2,13 (1Н, м), 2,05 (1Н, м), 1,74 (1Н, м), 1,52 (3Н, м), 0,92 (3Н, т).
Пример 128.2.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамид
ЖХМС: ВУ 0,67 мин; МС т/ζ 472,4 [М+Н]+; способ 2ттЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб) δ 8,09 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,58 (1Н, д), 7,51 (2Н, м), 6,28 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,62 (2Н, м), 3,41 (1Н, м), 3,19 (1Н, м), 2,95 (1Н, м), 2,69 (1Н, м), 2,58 (1Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,29 (3Н, с), 2,11 (3Н, с), 2,08 (2Н, м).
Пример 128.3а.
(К или 8)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4метилморфолин-3-ил)метил)бензолсульфонамид и пример 128.3Ь:
(К или 8)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4метилморфолин-3-ил)метил)бензолсульфонамид
- 176 032075
Рацемический 3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4метилморфолин-3-ил)метил)бензолсульфонамид очищают хиральной СЖХ.
Подробности способа: (СЫга1рак А8-Н, 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С) элюируя 50% Изопропанолом+0,1% об./об. диэтиламин/50% СО2 со скоростью потока 10 мл/мин.
(Определение: УФ @ 220 нм, система: Вегдег Мтщгаш СЖХ1). Два пика собирают Пик 1 ВУ 3,13 мин, Пик 2 ВУ 4,86 мин.
Пример 128.3а.
Пик 1 (первый элюированный пик): СЖХ время удержания=3,13 мин: (К)-3-(5-Амино-6-(1,3диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-3-ил)метил)бензолсульфонамид или (8)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: ВУ 0,94 мин; МС т/ζ 472,4 [М+Н]+; способ ЗттНтНрН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ) δ 8,09 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,58 (1Н, д), 7,51 (2Н, м), 6,28 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,62 (2Н, м), 3,41 (1Н, м), 3,19 (1Н, м), 2,95 (1Н, м), 2,69 (1Н, м), 2,58 (1Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,29 (3Н, с), 2,11 (3Н, с), 2,08 (2Н, м).
Пример 128.3Ь.
Пик 2 (второй элюированный пик): СЖХ время удержания=4,86 мин: (К)-3-(5-Амино-6-(1,3диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-3-ил)метил)бензолсульфонамид или (8)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамид.
ЖХМС: ВУ 0,94 мин; МС т/ζ 472,4 [М+Н]+ Способ ЗттНтНрН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ) δ 8,09 (1Н, с), 8,07 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,58 (1Н, д), 7,51 (2Н, м), 6,28 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,62 (2Н, м), 3,41 (1Н, м), 3,19 (1Н, м), 2,95 (1Н, м), 2,69 (1Н, м), 2,58 (1Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,29 (3Н, с), 2,11 (3Н, с), 2,08 (2Н, м).
Пример 128.4.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((2-метилтетрагидрофуран2-ил)метил)бензолсульфонамид
ЖХМС: ВУ 0,97 мин; МС т/ζ 457,2 [М+Н]+; способ 2ттЬо\рН.
Пример 128.5.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Ы-((4-метилморфолин-2ил)метил)бензолсульфонамид
- 177 032075
ЖХМС: ВУ 0,96 мин МС т/ζ 472,3 [М+Н]+; способ 2ттН1дйрН.
Следующие соединения получают по методике, аналогичной той, которую применяют для синтеза примера 128, начиная с 3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е3) и подходящего амина, защищенного Βοο группой. После образования сульфонамида Βοο группу удаляют обработкой ДХМ:ТФК при комнатной температуре перед очисткой.
Пример 128.6.
(Κ)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-N-(морфолин-3илметил)бензолсульфонамид
ЖХМС: Ву 0,60 мин; МС т/ζ 458,4 [М+Н]+; способ 2тт1 .тур! I.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,12 (2Н, м), 7,89 (1Н, с), 7,73 (1Н, д), 7,60 (1Н, шс), 7,50 (1Н, д),
6,29 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,66 (1Н, м), 3,58 (1Н, м), 3,26 (2Н, м), 2,99 (1Н, м), 2,62 (5Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,28 (3Н, с).
Пример 128.7.
(8)-3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-^(морфолин-3илметил)бензолсульфонамид
= 6=0
ΗΝ
ЖХМС: ВУ 0,60 мин; МС т/ζ 458,3 [М+Н]+; способ 2т^η^οурН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,09 (2Н, м), 7,85 (1Н, с), 7,65 (1Н, д), 7,59 (1Н, шс), 7,50 (1Н, д),
6,29 (2Н, с), 3,82 (3Н, с), 3,65 (1Н, д), 3,58 (1Н, д), 3,28 (2Н, м), 2,95 (1Н, м), 2,60 (5Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,28 (3Н, с).
Пример 128.8.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-^(морфолин-2илметил)бензолсульфонамид
- 178 032075
ЖХМС: Ву 0,84 мин; МС т/ζ 458,2 [М+Н]+; способ 2тт111уКр11ν(')3.
Пример 129.
Соль трифторуксусной кислоты (Κ)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2гидроксипропил)-4-метилбеизолсульфоиамида
К смеси 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метилбеизолсульфоиата 2,4,6трихлорфенила (промежуточное соединение Е4) (50 мг, 0,093 ммоль), (2К)-1-аминопропан-2-ола (15 мг, 0,2 ммоль), хлорида тетрабутиламмония (41 мг, 1,6 экв.) в ацетонитриле (2 мл) добавляют триэтиламин (100 мкл, 7 экв.). Реакционную смесь нагревают до 140°С в течение 30 мин с применением микроволнового облучения. Растворитель выпаривают при пониженном давлении. Неочищенный продукт обрабатывают ДМСО (1 мл) и очищают ВЭЖХ (ацетонитрил/вода градиент, ТФК модификатор). Фракции продукта объединяют и выпаривают с получением (Κ)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N(2-гидроксипропил)-4-метилбеизолсульфоиамида:трифторуксусиой кислоты (1:1).
ЖХМС: Ву 0,61 мин; МС т/ζ 412,2 [М-Н]-; способ: 2ттко\рН.
Следующие примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 129, начиная с 3-(5-амиио-6-(2-меτилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-меτилбеизолсульфоиаτа 2,4,6-трихлорфенила (промежуточное соединение Е4) и подходящего амина. Применяемые амины коммерчески доступны, за исключением амина, применяемого в синтезе Примера 129.20, который может быть получен методом, описанным в заявке на патент ШО 2011/113894, с. 99. Все соединения получают в виде соли трифторуксусной кислоты, за исключением 129.17-127.19, которые получают в виде свободного основания. ЖХМС способ: 2ттЬо\рН, если не указано иначе.
- 179 032075
Пример Наименование МС т/ζ [М+Н]+ если не указано иначе Ву (мин)
129.1 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(4- (гидроксиметил)циклогексил)-4- ме тилбензолсульфонамид £ '0' Ν' '-'О 1 Н 468,3 0,67
129.2 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3,3дифторциклобутил)-4ме тилбензолсульфонамид 1 ТТ Х° Ν' I Η 446,5 0,73
129.3 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(5гидроксипентил)-4- ме тилбензолсульфонамид ΝΗ; ?н ; ГТ’ \ С “'Ό к „3;° N 0 1 Н 442,4 0,65
129.4 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1гидроксициклогексил)метил)-4ме тилбензолсульфонамид 468,3 0,74
- 180 032075
А ГТ*' [ί γ ’ΥΥ γ А Η .3ΐ° Ν Ό 1 ОН 0
129.5 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1гидроксициклобутил)метил)-4ме тилбензолсульфонамид .Ν _,ΝΗ2 1:γΆτ Η 5 -° Ν Ό НО * ' 438,3 [М-Н]- 0,67
129.6 (5)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν- (1-гидроксибутан2-ил)-4-метилбензолсульфонамид ζΥΝΗ? а к А А4 Л' О ί 1 ОН н 426,4 [М-Н]- 0,64
129.7 (К)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν- (1-гидроксибутан2-ил)-4-метилбензолсульфонамид 428,5 0,64
- 181 032075
АЛ;' . ό' Ύ Γ Ν' Ό ОН Η
129.8 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- (1-гидрокси-2метилпропан-2-ил)-4- ме тилбензолсульфонамид ЫНа 1 Ару А N ΑγΡγ ζ ΙΑ НО^ А ’М ч0 $ н 428,2 0,64
129.9 (5)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2- гидроксипропил)-4- ме тилбензолсульфонамид а /'Г' 0 ’ С' нол А0 ’й N Ό 1 Н 414,2 0,61
129.10 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- (тетрагидро-2Я-пиран-4- ил)бензолсульфонамид 440,2 0,65
- 182 032075
,^Ν ΝΗ; 1 Η
129.11 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3метоксипропил)-4- метилбензолсульфонамид ί< _ΝΗ2 0-8-ΝΗ 0 λ—\ ......0 \ 426, 3 [М-Н]- 0,67
129.12 (Κ)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидрофуран-2- ил)метил)бензолсульфонамид ΐ. /Г (У О' нч N КО о--7 438,3 [М-Н]- 0,68
129.13 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(4,4,4трифтор-З-гидрокси-З- метилбутил) бензолсульфонамид 496,3 0,72
- 183 032075
Ρ,ΑΧλ..... \ ОН γ · Έ'''·Χ Ε Η
129.14 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидро-2Я-пиран-3- ил)метил)бензолсульфонамид ί ιъ ι ν чР 4·Ν н. „зр N 0 V 454,5 0,70
129.15 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-метокси-2метилпропил)-4- ме тилбензолсульфонамид ,Ν ррг н А N 0 ч 442,3 0,71
129.16 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ((тетрагидро-2Я-пиран-2- ил)метил)бензолсульфонамид 454,6 0,73
- 184 032075
γΑΑθ^ Η. ,5ΐ° Ν 0 Υ] <υ
129.17 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ( (тетрагидрофуран-2- ил)метил)бензолсульфонамид ,ΝΗ: Ату 0=8-ΝΗ 440,2 0,67
129.18 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- ( (тетрагидрофуран-3- ил)метил)бензолсульфонамид Ν ,ΝΗι ι ; ι . . гт - ту 0=8 ΝΗ 440,2 0,64
129.19 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(4-гидрокси-4метилциклогексил)-4- ме тилбензолсульфонамид 468,2 0,68
- 185 032075
0=5··· ΝΗ % а да / он
(-К)-З- (5- амино-6-(2-метилпиридин-4-
ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(3,3,3-
трифтор-2 -гидрокси-2-
метилпропил)бензолсульфонамид
Ν ΝΗ?
1 ί I 0 Ί Ν
ДА ДА
Е Р .з-А Ν О
ш Η
129.20 482,5 0,71
Следующие примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 129, начиная с 2,4,6-трихлорфенил 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-4метилбензолсульфоната (промежуточное соединение Е4) и подходящего коммерчески доступного амина. После ВЭЖХ и выпаривания требуется дополнительная стадия очистки с применением твердофазной экстракции (Ιδο1πΐΌ® РЕ-АХ) для удаления примеси сульфоновой кислоты. Продукты 129.21-129.31 поэтому получают в виде солей уксусной кислоты.
- 186 032075
Пример Наименование МС т/ζ [М+Н]+, если не указано иначе ЖХМС Способ: 2т±пЬоюрН, если не указано иначе Ву (мин)
129.21 3- (5-амино-б-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν-(1изопропилпиперидин-4-ил)-4ме тилбензолсульфонамид ΝΗ2 ΛζΧ Ί γζ ΚχΝ кА, ,3ΐ° Ν 0 I Η 481,3 0,51
129.22 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- (1ме тилпиперидин-4- ил)бензолсульфонамид N АН? 1 ί X γν-γν' ТОД V к Ж ΧΐΟ то N 0 1 Н 453,3 0,45
129.23 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3(диэтиламино)пропил)-4- ме тилбензолсульфонамид ΥγΝΗ? „____ д° ТО того ДД -чО < н 469,3 0,52
129.24 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-Ν-(3- (диметиламино)-2,2- диметилпропил)-4метилбензолсульфонамид 469,3 0,52
- 187 032075
ΑΥ Υγ η. Ν 0 4. 1
(Я)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин- 4-ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1этилпирролидин-2-ил)метил)-4метилбензолсульфонамид X АН? ι ί Υ
ό а Н. ,3р'° 'Ν’ ''О Ч®-\ \
129.25 467,3 0,51
3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2- (диметиламино)этил)-4- ме тилбензолсульфонамид 1 гТН;
1 3Г^ Ν' 0 н
129.26 427,3 0,38
129.27 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2- (пирролидин-1- ил)этил)бензолсульфонамид 453,3 0,49
- 188 032075
/Г у ТО N 0 1 Н
129.28 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2морфолиноэтил)бензолсульфонамид ΝΗ? ТО ЧТО ТО ТО N О 3 Н 469,3 0,46
129.29 3-(5-амино-б-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2метил-2- морфолинопропил)бензолсульфонамид ТОАЧ ! ί ί Α СТО то ТО К А V Ν' О 497,3 0,51
129.30 129.31 3- (5-амино-б-(2-метилпиридин-4ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-((1метилпирролидин-3- ил)метил)бензолсульфонамид ΝΗ? ДА/ уу/ то ТО К Дс° Ν Ό ν 4- ((3-(5-амино-б-(2-метилпиридин4-ил)пиразин-2-ил)-4метилфенилсульфонамидо)метил)тетр агидро-2Я-пиран-4-карбоксамид ДД^Дуу \ > Н О=/ 453.5 497.5 0,49 0,60
- 189 032075
Следующие примеры получают в условиях, аналогичных тем, которые описаны для получения примера 129, начиная с 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метилбеизолсульфоиата 2,4,6-трихлорфеиила (промежуточное соединение Е4) и подходящего Ьос-замещенного амина. До очистки ВЭЖХ добавляют 20% ТФК в ДХМ (2 мл) к неочищенному остатку и смеси встряхивают при КТ в течение 30 мин для удаления Вос группы. Смеси выпаривают и повторно растворяют в ДМСО (1 мл), затем очищают ВЭЖХ, . как описано выше с получением солей трифторуксусной кислоты.
Пример Наименование Ву (мин) МС т/ζ [М+Н] + , если не указано иначе
129.32 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((3-гидроксиоксетан- 3-ил)метил)-4-метилбензолсульфонамид ζΝΐ>/ΝΗ? \ ΌΙ11 Н 0,59 442,3
129.33 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(2(метиламино)этил)бензолсульфонамид Н Υ А. .-X .-5 ΝΗ о \ 1 р Ох' Р Υ Αν 7 Н2М 0, 60 413,2
129.34 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(2-аминоэтил)-4метилбензолсульфонамид н О 1 Υ ЭК .-х .Н ° \ . н 7 Η?Ν 0, 60 399,2
- 190 032075
129.35 (К)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я-(пирролидин3-илметил)бензолсульфонамид X ί Λ ‘П Η?Ν Ν' Н ΝΗ 0,63 439,2
129.36 (5)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Я- (пирролидин- 3-илметил)бензолсульфонамид Χγ χχ .ΛΪ х Гу 0,63 439,3
129.37 5-(5-(2,6-диазаспиро[3,3]гептан-2илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(2метилпиридин-4-ил)пиразин-2-амин ХА/ / Т + Л ¥'Ν ЛЛ 0,64 437,2
- 191 032075
129.38 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- ( (15,25)-2аминоциклопентил)-4- метилбензолсульфонамид А о н2м А-У А \. 0 / А II --У- Ξ-0 Η- γγ. η-νΆ-7 н 0,63 439,3
129.39 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν- ( (1Я,2К)-2аминоциклопентил)-4- метилбензолсульфонамид к· У N N \, О —г уз -о \__/ 1 /у н 0,63 439,3
- 192 032075
129.40 (К)-5-(5-(З-аминопирролидин-1илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(2метилпиридин-4-ил)пиразин-2-амин о—з—ν 1 У-Я-Н ТА’ 112Ν ν 0,63 425,2
129.41 5-(5-(4-аминопиперидин-1-илсульфонил)- 2-метилфенил)-3-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-амин N —χ -Ор Т- 0,65 439,3
129.42 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-(((15,ЗЯ)-3(аминометил)циклогексил)метил)-4- метилбензолсульфонамид ,·Ν=\ чР > °·ζ т \ к1 / N /—Ν ι Ύ 0,71 481,3
129.43 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4- ил)пиразин-2-ил)-Ν-((1г,4г)-4аминоциклогексил)-4- ме тилбензолсульфонамид „н ΗΝ А .5' Н А 5„7“ 0,63 453,3
Пример 130.
3-(5-Амино-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Л-(3-гидрокси-3-метилбутил)4-метилбензолсульфонамид
- 193 032075
Стадия 1. 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол.
Карбонат цезия (3,36 г, 10,31 ммоль) добавляют к перемешиваемому раствору 4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (1,0 г, 5,15 ммоль) в сухом ДМФ (12 мл). После перемешивания при КТ в течение 10 мин добавляют 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфонат (1,11 мл, 7,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 дней при КТ, затем растворитель удаляют, и остаток разделяют между диэтиловым эфиром и водой. Органический экстракт отделяют, сушат над Мд8О4 и растворитель удаляют с получением масла;
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС т/ζ 277,4 [М+Н]+; способ 2ттЬСу003.
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид.
Смесь 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразола (стадия 1) (115 мг, 0,417 ммоль), 3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ3) (150 мг, 0,390 ммоль), дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия (14 мг, 0,020 ммоль) в 2 М водном растворе карбоната натрия (0,6 мл, 1,200 ммоль), этаноле (1,2 мл) и ДМЭ (1,8 мл) нагревают до 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи, затем разделяют между ДХМ/водой, отделяют с применением фазоразделителя и органические фазы выпаривают при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (12 г двуокись кремния, 0-5% метанол в МТБЭ). Фракции продукта объединяют и выпаривают, растирают со смесью этилацетата/диэтилового эфира и твердое вещество собирают фильтрацией, промывают холодным сухим диэтиловым эфиром и сушат в вакуумной печи в течение ночи с получением бледно желтого твердого вещества;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОД6) δ 8,49 (1Н, с), 8,16 (1Н, с), 8,13 (1Н, с), 7,83 (1Н, д, ~2 Гц), 7,68 (1Н, дд, ~8 и 2 Гц), 7,53 (1Н, д, ~8 Гц), 7,42 (1Н, т), 6,37 (2Н, с), 5,21 (2Н, кв), 4,27 (1Н, с), 2,83 (2Н, м), 2,48 (3Н, с, частично перекрывается с растворителем), 1,51 (2Н, м), 1,01 (6Н, с).
ЖХ-МС: Ву 0,92 мин; МС т/ζ 499,2 [М+Н]+; способ: 2ттБо\рН.
Пример 131.
3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(оксетан-3илметил)бензолсульфонамид
0=3=0
ΗΝ
К перемешиваемому раствору 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорида (промежуточное соединение Е1) (80 мг, 0,228 ммоль) и триэтиламина (0,035 мл, 0,251 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют оксетан-3-илметанамин (22 мг, 0,251 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, затем экстрагируют в ДХМ, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в этилацетат и перекристаллизовывают в течение ночи при комнатной температуре с получением беловатых кристаллов;
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС т/ζ 402,3 [М+Н]+; способ Ьо\рН_у002.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСОД6) δ (ч./млн) 9,34 (1Н, с), 8,43 (1Н, с), 8,42 (1Н, с), 7,91 (1Н, д), 7,79 (1Н, т), 7,73 (1Н, дд), 7,56 (1Н, д), 7,39 (2Н, шс), 4,54 (2Н, мульт), 4,20 (2Н, мульт), 3,05 (2Н, мульт), 2,99 (1Н, мульт).
- 194 032075
Толилметильная группа не вида, вероятно, закрыта пиком ДМСО.
Пример 132.
Гидрохлорид 3-(5-амино-6-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№-(3-гидрокси-3-метилбутил)-
4-метилбензолсульфонамида
Указанное в заголовке соединение получают из 3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-М-(3-гидрокси-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Ώ3) и 1-бензил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с применением условий, аналогичных Примеру 11. Соединения обрабатывают 1 М хлоридом водорода в простом эфире с получением гидрохлорида.
ЖХ-МС: Ву 0,98 мин; МС т/ζ 507,3 [М+Н]+; способ: 2ιηιηΙ.ο\\ρΙ I.
Пример 133.
2-(3 -(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонамидо)ацетамид
0=3=0
К хлориду 3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонила (промежуточное соединение Е1) (50 мг, 0,143 ммоль) в ДХМ (1,5 мл) добавляют гидрохлорид 2аминоацетамида (15,76 мг, 0,143 ммоль) и ТЭА (0,040 мл, 0,285 ммоль) и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре. Через 3 дня смесь разбавляют насыщ. водн. ΝΗ401 и ДХМ. Белое твердое вещество осаждают из водной фазы, собирают фильтрацией и растирают из диэтилового эфира с получением белого твердого вещества.
ЖХ-МС: Ву 2,84 мин; МС т/ζ 389,3 [М+Н]+; способ 10ιηιηΙ.ο\\ρΙ Ιν01.
Пример 134.
3-(5-Амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(2-оксопиперидин-4ил)бензолсульфонамид
ο=ε=ο
Стадия 1. 3-Бром-4-метил-Р(2-оксопиперидин-4-ил)бензолсульфонамид.
К перемешиваемому раствору 3-бром-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (685 мг, 2,54 ммоль) и ДИПЭА (0,532 мл, 3,05 ммоль) в ДХМ (12,700 мл) под азотом добавляют 4-аминопиперидин-2-он (290 мг, 2,54 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем ДХМ (100 мл). Органическую фазу промывают насыщ. Νπ:('Ό3 (80 мл), 1 М НС1 (80 мл), насыщенным раствором соли, сушат над Мд§04, и концентрируют досуха. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке (24 г двуокись кремния, 0-100% этилацетат в гексане) с получением беловатого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,82 мин; МС т/ζ 349,1 [М+Н]+; способ: 2ιηιπΙ.ο\\ρΙ I.
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Р(2-оксопиперидин-4
- 195 032075 ил)бензолсульфонамид.
Смесь 3-бром-4-метил-Х-(2-оксопиперидин-4-ил)бензолсульфонамида (стадия 1) (100 мг, 0,288 ммоль), ацетата калия (42,4 мг, 0,432 ммоль), РдС12(дрр1)-СН2С12 аддукта (11,76 мг, 0,014 ммоль) и бис(пинаколато)дибора (80 мг, 0,317 ммоль) в ДМЭ (1440 мкл), под азотом, нагревают при 90°С в течение 3 ч. К смеси добавляют 5-хлор-3-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-амин (полученный аналогично промежуточному соединению С6, начиная с 2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридина и 3-бром-5-хлорпиразин-2-амина) (63,5 мг, 0,288 ммоль), затем №2СО3 (2,0 М) (432 мкл, 0,864 ммоль), РдС12(дрр1)-СН2С12 аддукт (11,76 мг, 0,014 ммоль) и реакционную смесь нагревают в течение ночи при 90°С. Полученную смесь добавляют к насыщ. Ш2СО3 (50 мл) и продукт экстрагируют в ЕЮАс (2x40 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт сначала очищают флэш-хроматографией на колонке (12 г двуокись кремния, 0-10% 2 М метанольный аммиак в ДХМ), затем препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,57 мин; МС т/ζ 453,3 [М+Н]+; способ: Зттко^рН.
Пример 135.
3-(5-Амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)А-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 25 из \-(транс-4гидроксициклогексил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В5) и 5-хлор-3-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-амина (полученного аналогично промежуточному соединению С6, начиная с 2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)пиридина и 3-бром-5-хлорпиразин-2-амина).
ЖХМС: Ву 0,66 мин; МС т/ζ 454,4 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу01.
Пример 136.
3-(5-Амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)А-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С2д) и А(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид-3-бороновой кислоты (промежуточное соединение ВЗа) в условиях, аналогичных условиям из примера 1;
ЖХ-МС: МС т/ζ 447,3 [М+Н]+; способ А.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,60 (1Н, с), 7,91 (1Н, с), 7,83 (1Н, шс), 7,75 (1Н, д), 7,57 (1Н, д), 2,85 (4Н, м), 2,50 (2Н, м), 2,35 (3Н, м), 1,00 (6Н, с), ОН, Ме и NН2 не видны, возможно закрыты пиками ДМСО и воды.
Пример 137. 3-(5-Амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)А-(азетидин-3-ил)-4метилбензолсульфонамид
- 196 032075
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С20) и трет-бутил 3-(4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенилсульфонамидо)азетидин-1-карбоксилата (полученного аналогично промежуточному соединению В1) в условиях, аналогичных условиям из примера 1, затем удалением Βοο защитной группы с применением ТФК/ДХМ;
ЖХМС способ.
Колонка: Супегд1 2,5 мкм Мах-КР100А (20x4,0) мм; Подвижная фаза: А: 0,01 М ацетат аммония (водн.) В: АЦН Т% В: 0/20, 1,0/20, 2,5/85, 4,0/95, 4,5/20, 5,0/20.
Поток: 1,0 мл/мин, разбавитель: АЦН.
ЖХ-МС: МС т/ζ 416,2 [М+Н]+.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,62 (1Н, с), 7,90 (1Н, с), 7,85 (1Н, шс), 7,75 (1Н, д), 7,57 (1Н, д), 4,00 (1Н, м), 3,25 (4Н, м), 2,88 (2Н, м), 1,75 (3Н, с), 1,35 (2Н, т).
Два протона не видны, могут быть закрыты пиками ДМСО и/или воды.
Пример 138.
транс-3-(5-Амино-6-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил)-№(( 1 г,4г)-4гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид
О-Д^О
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С1Ь) и транс-№(4-Гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) в условиях, аналогичных условиям из примера 1;
ЖХ-МС: МС т/ζ 459,3 [М+Н]+;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф,) δ 8,50 (1Н, с), 7,88 (1Н, с), 7,75 (2Н, м), 7,35 (1Н, м), 4,45 (1Н, шс),
3,30 (1Н, шс), 3,00 (2Н, м), 2,90 (1Н, шс), 2,50 (1Н, с), 2,48 (3Н, с), 1,70 (4Н, м), 1,32 (3Н, м), 1,10 (4Н, м).
Два протона не видны, могут быть закрыты пиками ДМСО и/или воды.
Пример 139. транс-3-[5-Амино-6-(3-этил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С20) и транс-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) в условиях, аналогичных условиям из примера 1;
ЖХМС: Ву 1,91 мин МС т/ζ 459,3 [М+Н]+.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,60 (1Н, с), 7,92 (1Н, с), 7,82 (1Н, шс), 7,75 (1Н, д), 7,65 (1Н, д), 7,57 (1Н, д), 4,45 (1Н, с), 3,30 (1Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,85 (2Н, кв), 1,78-1,60 (4Н, м), 1,43 (3Н, т), 1,22-1,00 (4Н, м).
Один протон не виден, может быть закрыт пиками ДМСО и/или воды.
Пример 140.
транс-3-[5-Амино-6-(3-пропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4- 197 032075 метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают с применением 5-бром-3-(3-пропил-1,2,4-оксадиазол-
5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С2е) и транс-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида 3-бороновой кислоты (промежуточное соединение В5а) в условиях, аналогичных условиям из примера 1;
ЖХМС: Ву 2,03 мин МС т/ζ 473,3 [М+Н]+.
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,60 (1Н, с), 7,92 (1Н, с), 7,80 (2Н, шс), 7,75 (1Н, д), 7,65 (1Н, д), 7,57 (1Н, д), 4,45 (1Н, с), 3,30 (1Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,80 (2Н, м), 2,47 (3Н, с), 1,80 (2Н, м), 1,60-1,78 (4Н, м), 1,00-1,22 (4Н, м), 0,95 (3Н, т).
Пример 141.
(1-((3-(5-Амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4метилфенил)сульфонил)пиперидин-4-ил)метанол
Указанное в заголовке соединение получают в условиях, аналогичных условиям из примера 1, с применением 5-бром-3-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С2ф и (5-((4-(гидроксиметил)пиперидин-1-ил)сульфонил)-2-метилфенил)бороновой кислоты (полученной в две стадии в условиях, аналогичных тем, которые описаны для промежуточного соединения В5а);
ЖХ-МС: МС т/ζ 459,1 [М+Н]+; способ А.
Ίΐ ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,63 (1Н, с), 7,81 (1Н, шс), 7,80 (1Н, с), 7,70 (1Н, м), 7,60 (1Н, м), 4,44 (1Н, шс), 3,33 (2Н, д), 3,22 (2Н, д), 2,87 (2Н, м), 2,45 (3Н, с), 2,14 (2Н, м), 1,70 (2Н, м), 1,33 (3Н, м),
1,20 (3Н, м).
Один протон не виден, может быть закрыт пиками ДМСО и/или воды.
Пример 142. 3-(5-Амино-6-(1-(2-(диметиламино)этил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид
Стадия 1. 3-(5-Амино-6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
Указанное в заголовке соединение получают аналогично примеру 13 из 2-(4-(4,4,5,5-тетраметил1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этанола (8уп!есй зоМопз-коммерчески доступен) и 3-(5амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение Э2);
ЖХМС: Ву=0,84 мин; МС т/ζ 447,3 [М+Н]+; способ 2ттЬомрНу03.
Стадия 2. 4-Метилбензолсульфонат 2-(4-(3-Амино-6-(5-(Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)сульфамоил)-2-метилфенил)пиразин-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этила.
Ссылка: получают согласно патенту И8 2002/0161004 (с. 44).
- 198 032075
К раствору 3-(5-амино-6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-К-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида (стадия 1) (190 мг, 0,426 ммоль) в ДХМ (1064 мкл) при 0°С, в атмосфере азота, добавляют триэтиламин (74,1 мкл, 0,532 ммоль). К этой смеси добавляют раствор птолуолсульфонилхлорида (81 мг, 0,426 ммоль) в ДХМ (1064 мкл) по каплям в течение более 5 мин, и реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 3,5 ч, затем нагревают до температуры в течение ночи. Добавляют еще п-толуолсульфонилхлорид (81 мг, 0,426 ммоль) и триэтиламин (74,1 мкл, 0,532 ммоль), и перемешивание продолжают в течение ночи. Добавляют п-толуолсульфонилхлорид (81 мг, 0,426 ммоль) и триэтиламин (74,1 мкл, 0,532 ммоль), и перемешивание продолжают в течение ночи. Реакционную смесь добавляют в воду (50 мл) и органическую часть отделяют, промывают 1 М НС1 (50 мл), насыщенным раствором КаНСО3 (50 мл) и насыщенным раствором соли (20 мл). Органические фазы сушат над М§8О4, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением бледножелтого масла. Очистка хроматографией на двуокиси кремния, элюируя 0-10% МеОН в ДХМ, дает указанное в заголовке соединение;
ЖХМС: Ву=1,15 мин; МС т/ζ 601,6 [М+Н]+; способ 2ш1пЬо^рНу03.
Стадия 3. 3-(5-Амино-6-(1-(2-(диметиламино)этил)-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-К-(2-гидрокси2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид.
К перемешиваемому раствору 4-метилбензолсульфоната 2-(4-(3-амино-6-(5-(Ы-(2-гидрокси-2метилпропил)сульфамоил)-2-метилфенил)пиразин-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этила (стадия 2) (25 мг, 0,042 ммоль) в ТГФ (416 мкл) под Ν2 добавляют ДИПЭА (14,54 мкл, 0,083 ммоль) и диметиламин (2,0 М в ТГФ) (250 мкл, 0,499 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавляют еще порцию диметиламина (2,0 М в ТГФ) (250 мкл, 0,499 ммоль), и перемешивание продолжают в течение ночи. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают хроматографией на двуокиси кремния, элюируя 0-10% градиентом (2,0 М ΝΗ3 в МеОН) в ДХМ. Полученный остаток затем очищают загрузкой в 1 г 1зо1и1е®8СХ-2 картридж, промывая МеОН и элюируя соединение 2,0 М ΝΗ3 в МеОН с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву=0,65 мин; МС ш/ζ 474,6 [М-Н]+; способ 2ηιίηΕο\νρΙ Ιν03.
Пример 143.
3-(5-Амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают в условиях, аналогичных тем, которые применяют для получения примера 18 из №(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамида (промежуточное соединение В3) и 5-бром-3-(3циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (промежуточное соединение С2с);
ЖХМС: Ву 1,01 мин; МС ш/ζ 359,2 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003.
Получение промежуточных соединений.
Бромиды (А).
Промежуточное соединение А1.
3-Бром-№-(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамид
К перемешиваемому раствору 3-бром-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (2 г, 7,42 ммоль) в ТГФ (37 мл) под Ν2 добавляют 3-амино-1-пропанол (0,568 мл, 7,42 ммоль), и полученную смесь перемешивают при КТ в течение 24 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и неочищенный продукт добавляют к 0,1 М НС1 (100 мл). Смесь экстрагируют ЕЮАс (150 мл), и органический экстракт промывают насыщ. №2СО3 (60 мл), насыщенным раствором соли, сушат над М§8О4 и концентрируют при по- 199 032075 ниженном давлении с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,89 мин; МС т/ζ 310,1 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003. Промежуточное соединение А2.
3-Бром-П-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид
К перемешиваемому раствору 3-бром-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (3,02 г, 11,22 ммоль) в
шивают при КТ в течение 72 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и полученный неочищенный продукт добавляют к 0,1 М НС1 (100 мл). Смесь экстрагируют Е1ОАе (150 мл), и органический экстракт промывают насыщ. Па2СО3 (100 мл), насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,01 мин; МС т/ζ 324,1 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003. Промежуточное соединение А3.
3-Бром-П-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид
ΌΗ
Получают из 3-бром-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида и 4-амино-2-метилбутан-2-ола аналогично промежуточному соединению А2.
ЖХМС: Ву 1,04 мин; МС т/ζ не ионизируют [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003.
Промежуточное соединение А4.
-Бром-4-метил-П-(3 -метилоксетан-3 -илметил)бензолсульфонамид
ΗΝ
К раствору (3-метилоксетан-3-ил)метанамина (2,026 г, 20,03 ммоль) в ДМА (50 мл) добавляют ДИПЭА (4,37 мл, 25,04 ммоль). Смесь перемешивают при КТ в течение 30 мин, затем добавляют 3-бром-4метилбензол-1-сульфонилхлорид (4,5 г, 16,70 ммоль). Смесь перемешивают при КТ в течение 1 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в Е1ОАе и промывают насыщенным водн. ПаНСО3, затем 0,1 М НС1, затем насыщенным раствором соли. Органический экстракт сушат над Мд8О4, и растворитель удаляют с получением продукта в виде бледно-желтого порошка (5,19 г).
ЖХМС: Ву 1,10 мин; МС т/ζ 336,1 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^ρНν01.
Представленные в таблице промежуточные соединения получают с применением способов, аналогичных тем, которые описаны для промежуточных соединений А1-А4, начиная с 3-бром-4-метилбензол1-сульфонилхлорида и подходящих аминов. Амины либо коммерчески доступны, либо могут быть получены известными способами.
- 200 032075
Таблица 1
Пр. Структура Наименование [М+Н]+/ЯМР
А5 Ϊ;Ο' 0 и Чп 0 Η Транс-З-Бром-Ν-(4гидроксициклогексил)4- метилбензолсульфонами Д ЖХМС: Ву 1,01 мин; МС т/ζ 348,1 [М+Н]+; Способ 2ΓηίηΙΑ_ν0 03
А6 I II /=\ Ц] 2 ' З-Бром-Ν-((К)-1этилпирролидин-2илметил)-4метилбензолсульфонами Д ЖХМС: ВУ 0,64 мин; МС т/ζ 3 63,5 [М+Н]+; Способ 2ιηίηΗθΜρΗνΟ 1
А7 Л Вг А 0-8-0 нТ А 3-Бром-4-метил-Ы- [ (К)-1- (тетрагидрофуран-3- ил)метил]бензолсульфо намид ЖХМС: Ву 1,09 мин; МС т/ζ 336,4 [М+Н]+; Способ 2ιηίηΗθΜρΗν01
- 201 032075
А8 ψ·' 0=8=0 ΗΝ З-Бром-Ν-(6гидроксиспиро[3,3]геп τ-2-ил)-4- метилбензолсульфонами Д ЖХМС: Ву 1,01 мин; МС т/ζ 3 60,3 [М+Н]+; Способ 2т1пЬомрНчО1
η ^он
А9 З-Бром-Ν-(3-гидрокси- ЖХМС: Ву 0,98 мин;
ίΎ ^Вг 2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонами МС т/ζ 33 6,1 [М+Н]+; Способ
Д 2т1пЬС ν003
НГ+ г Ί он
А10 1 Цис-З-Бром-Ν-(3- ЖХМС: ВУ 0,64 мин;
Вг гидроксициклобутилмет МС т/ζ 3 63,5
( Υ ил)-4- [М+Н]+; Способ
Тн Ο=£-Ν ме тилбензолсульфонами 2т1пЬомрНч01
/\^ОН д (прибл. 20% транс
0 4 изомер)
АН I З-Бром-Ν-(1- ХН ЯМР (400МГц,
ίιΥ гидроксициклопропилме ДМСО-бб) δ 7,97
о тил)-4- (1Н, д, 0=1,4Гц),
Т ме тилбензолсульфонами 7,77-7,74 (1Н, м,
О—Ξ —О I Д 0=6,0Гц), 7,71-7,69
1 ΗΝ (1Н, дд, 0=1,4,
Ί 8,0Гц), 7,58-7,56
ν' 'он (1Н, д, 0=8,0Гц),
5,32 (1Н, с), 2,86-
2,85 (2Н, д,
0=6,1Гц), 2,42 (ЗН,
с), 0,52-0,49 (2Н,
м) , 0,46-0,43 (2Н,
м) .
Промежуточное соединение А12.
5-Бром-2-фтор-Л-(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают из 5-бром-2-фтор-4-метилбензол-1-сульфонилхлорида и 3-аминопропан-1-ола аналогично промежуточному соединению А1.
ЖХМС: Ву 0,88 мин; МС т/ζ 328,1 [М+Н]+; способ: 2ттЬС_^03.
Сложные эфиры бороновой кислоты (В).
Промежуточное соединение В1.
№(3-Гидроксипропил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид
- 202 032075
Смесь, содержащую 3-бром-№(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамид (промежуточное соединение А1) (2,25 г, 7,30 ммоль), КОАс (1,075 г, 10,95 ммоль), Р0С12(дрр1)-СН2С12 аддукт (0,298 г, 0,365 ммоль) и бис-(пинаколато)дибор (2,039 г, 8,03 ммоль) в ДМЭ (36,5 мл) под Ν2 перемешивают при 90°С в течение 5 ч. Полученную смесь добавляют в воду (100 мл) и экстрагируют БЮАс (2x100 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над М§804 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании 0100% градиент БЮАс в изогексане дает указанное в заголовке соединение;
ЖХМС: Ву 1,03 мин; МС т/ζ 356,5 [М+Н]+; способ 2ттБС_у003.
Представленные в таблице промежуточные соединения получают аналогично промежуточному соединению В1 из подходящих бромидных исходных соединений (см. промежуточные соединения А1А11).
Таблица 2
Пр. Структура Наименование [М+Н]+/ЯМР
В2 Ν-(2-Гидрокси-2- ЖХМС Ву 1,2 0 мимн.
χθΑ метилпропил)-4-метил- МС т/ ζ 370,3
3-(4,4,5,5- [М+Н]+), Способ:
и тетраметил[1,3,2]диок 2т1пЬомрНу01
I 0=3=0 саборолан-2-
.ΝΗ ил)бензолсульфонамид
ноЛ
ВЗ Ν-(З-Гидрокси-З- ЖХМС: Ву 1, 10 мин;
ι «А метилбутил)-4-метил- МС т/ ζ 384,5
ХЧК 3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2- [М+Н]+; 2т1пЬС ν003 Способ
т диоксаборолан-2-
I ил)бензолсульфонамид
нм с /
ЧУ он
В4 / 4-Метил-Ы-(3- ЖХМС: Ву 1, , 2 2 мин
1 ? V метилоксетан-3- МС т/ζ 382,6
илметил)-3- [М+Н]+; Способ
и (4,4,5,5)тетраметил[1 2т1пЬС_у003
т ,3,2]диоксаборолан-2-
0=8=0 1 ил)бензолсульфонамид
Н1\к
А О
В5 Ν- (транс-4- ЖХМС:Ву 1,14 мин;
1 Ζ Гидроксициклогексил)- МС т/ ζ 396, 3
4-метил-3-(4,4,5,5- [М+Н]+; Способ
тетраметил-1,3,2- 2т1пЬС ν003
диоксаборолан-2-
ΟΙ- Ο Η ил)бензолсульфонамид
- 203 032075
В6 1 /Л 0=3=0 нЧ сЧ Ν-((К)-1- Этилпирролидин-2илметил)-4-метил-3- (4,4,5,5- тетраметил[1,3,2]диок саборолан-2- ил)бензолсульфонамид ЖХМС: ВУ 0,97 мин; МС т/ζ 409,3 [М+Н]+; Способ 2ιηίηΒθΜρΗν02
В7 ф·4 0=5=0 ά 4-Метил-Ы-[(К)-1- (тетрагидрофуран-3- ил)ме тил]— 3 —(4,4,5,5тетраметил[1,3,2]диок саборолан-2- ил)бензолсульфонамид ЖХМС: Ву 1,28 мин; МС т/ζ 382,3 [М+Н]+; Способ 2ιηίηΒθΜρΗν01
В8 уч ч 0=1=0 1 НМ^ у ч„. Ν-((цис)-4гидроксициклогексил)4-метил-3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамид Ч ЯМР (400МГц, ДМСО) δ 8,06 (1Н, д, Я=2,1Гц), 7,797,76 (1Н, дд, Я=2,1, 8,0Гц), 7,58-7,56 (1Н, д, 0=6,8Гц), 7,38-7,40 (1Н, д, 0=8,1Гц), 4,32 (1Н, д, 0=3,0Гц), 3,56 (1Н, широкий м), 2,93 (1Н, широкий м) , 2,53 (ЗН, с), 1,561,48 (4Н, м), 1,361,28 (4Н, м) , 1,33 (12Н, с).
Бороновые кислоты (В).
Промежуточное соединение В3а.
Ы-(3-Гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид-3-бороновая кислота
К перемешиваемому раствору 3-бром-Ы-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А3)(1,0 г, 2,97 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляют п-ВиБ1 (5,9 мл, 14,85 ммоль, 2,5 М) по каплям при -78°С. Реакционную смесь выдерживают при этой температуре в течение 30 мин, затем по каплям добавляют триизопропилборат (8,9 г, 47,6 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревают до КТ, затем перемешивают в течение еще 15 ч. Реакционную смесь гасят 3Ν НС1 (50 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x100 мл). Органический экстракт отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении с получением неочищенного соединения. Продукт растворяют в этилацетате (100 мл) и экстрагируют раствором карбоната натрия (3x150 мл) (рН 9). Водный экстракт доводят до 2 добавлением конц. НС1 и продукт экстрагируют этилацетатом (3x200 мл). Органический экстракт сушат над сульфатом натрия и концентрируют под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (0,29 г).
Промежуточное соединение В5а.
ТрансА-(4-Г идроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид 3-бороновая кислота
- 204 032075
К перемешиваемому раствору транс-3-бром-Ы-(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида (промежуточное соединение А5) (2,0 г, 5,77 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляют н-ВиЬ1 (11,5 мл, 28,8 ммоль, 2,5 М) по каплям при -78°С. Реакционную смесь выдерживают при этой температуре в течение 30 мин, затем по каплям добавляют триизопропилборат (17,35 г, 92,32 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревают до КТ, затем перемешивают в течение еще 15 ч. Реакционную смесь гасят 3Ν НС1 (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x250 мл). Органический экстракт отделяют, сушат над сульфатом натрия и концентрируют под вакуумом с получением неочищенного продукта. Продукт растворяют в этилацетате (500 мл) и экстрагируют раствором карбоната натрия (3x150 мл) (рН 9). Водный экстракт доводят до рН 2 добавлением конц. НС1 и продукт экстрагируют этилацетатом (3x250 мл). Органический экстракт сушат над сульфатом натрия и концентрируют под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения. Промежуточное соединение С1.
-Бром-3 -(5-метил- [1,3,4]оксадиазол-2-ил)пиразин-2-иламин
Стадия 1. Ν'-Ацетилгидразид 3-амино-6-бромпиразин-2-карбоновой кислоты.
ГАТУ (3,4 г, 9,05 ммоль) и триэтиламин (1,2 г, 12,06 ммоль) добавляют к суспензии 2-амино-5бромпиразин-3-карбоновой кислоты (1,40 г, 6,03 ммоль) и ацетогидразида (0,44 г, 6,03 ммоль) в ДХМ (100 мл), и полученный раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 24 ч. Реакцию отслеживают ТСХ. Реакционную смесь выливают в воду (200 мл), и твердое вещество собирают фильтрацией и сушат под вакуумом с получением Ν'-ацетилгидразида 3-амино-6-бромпиразин-2карбоновой кислоты;
ЖХМС: Ву 0,57 мин МС т/ζ 274,0 [М+Н]+; способ 2тп1ко\\р1 Ιν01.
Стадия 2. 5-Бром-3-(5-метил-[1,3,4]оксадиазол-2-ил)пиразин-2-иламин.
Ν'-Ацетилгидразид 3-амино-6-бромпиразин-2-карбоновой кислоты (стадия 1) (0,86 г, 3,15 ммоль) растворяют в ДХМ (40 мл) и триэтиламин (0,95 г, 9,45 ммоль) добавляют по каплям при комнатной температуре под азотом, затем р-толуолсульфонилхлорид (1,79 г, 9,45 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Добавляют ДХМ (20 мл), и твердое вещество удаляют фильтрацией и промывают ДХМ (30 мл). Органический фильтрат промывают водой (2x30 мл) и концентрируют под вакуумом с получением требуемого соединения. Продукт очищают флэшхромтаографией на двуокиси кремния, элюируя ЕЮЛе-гексаном (9:1) с получением продукта в виде желтого твердого вещества:
ЖХМС: Ву 0,86 мин МС т/ζ 256,0 [М+Н]+; способ 2т1пЬо^рНу01. Промежуточное соединение С1Ъ.
5-Бром-3-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-амин
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению С1. Промежуточное соединение С2а.
-Бром-3 -(3 -метил [1,2,4] оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламин
Стадия 1. 3-(3-Метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламин.
ДЦК (1,39 г, 6,75 ммоль) и ГОБт-Н2О (1,03 г, 13,51 ммоль) добавляют к перемешиваемой суспензии Ν'-гидроксиацеимидамида (0,5 г, 10,12 ммоль) и 3-аминопиразин-2-карбоновой кислоты (0,94 г, 6,75 ммоль) в ДМФ (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение 3 ч, затем 100°С в течение 2 ч. После охлаждения реакционную смесь выливают в воду (100 мл) и диэтиловый эфир (100 мл). Твердое вещество удаляют фильтрацией, и фильтрат экстрагируют еще диэтиловым эфиром (2x100 мл).
Объединенные органические экстракты сушат над №28О2 и концентрируют при пониженном дав
- 205 032075 лении с получением неочищенного продукта. Очистка хроматографией на двуокиси кремния, элюируя 10% ЕЮАс в гексане, дает указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (0,35 г, 29%).
Стадия 7. 5-Бром-3-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламин.
Перемешиваемый раствор 3-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламина (стадия 1) (258 мг, 1,45 ммоль) и ЫВ8 (259 мг, 1,45 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 5 ч. Растворитель удаляют и продукт очищают хроматографией на двуокиси кремния, элюируя 7% ЕЮАс в гексане, с получением продукта в виде коричневого твердого вещества (240 мг, 64%).
Промежуточное соединение С2Ь.
5-Бром-3-(3-изопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламин
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению С2а, ная с Ν'-гидроксиизобутиримидамида.
Промежуточное соединение С2с.
5-Бром-3-(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-иламин
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению С2а, ная с Ν'-гидроксициклопропанкарбоксимидамида.
Промежуточное соединение С2Т.
5-Бром-3-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-амин
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению С2а, ная с Ν'-гидроксипропионимидамида.
Промежуточное соединение С2е.
5-Бром-3-(3-пропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-амин
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению С2а, ная с Ν'-гидроксибутиримидамида.
Промежуточное соединение С3.
5-Бром-3-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-иламин начиначиначиначи-
Стадия 1. 3-(3-Метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-иламин.
н-Бутиллитий (7 мл, 9,8 ммоль, 1,4 М в гексане) добавляют к раствору оксима ацетона (0,36 г, 4,9 ммоль) в сухом ТГФ (15 мл) под азотом при 0°С. Смесь нагревают до КТ и перемешивают в течение 30 мин. Добавляют раствор метилового эфира 3-аминопиразин-2-карбоновой кислоты (0,50 г, 3,26 ммоль) в ТГФ (5 мл) и реакционную смесь перемешивают при КТ до полного расхода исходного материала. Добавляют серную кислоту (2 мл) при 0°С, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь подщелачивают водн. №:СС)3 и продукт экстрагируют ДХМ (5x15 мл). Объединенные органические экстракты сушат над Να28Ο4 и растворитель удаляют. Остаток очищают хроматографией на двуокиси кремния, элюируя ЕЮАс:гексан (2:8) с получением указанного в заголовке соедине
- 206 032075 ния.
Стадия 7. 5-Бром-3-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-иламин.
ПВ8 (50 мг, 0,28 ммоль) добавляют к перемешиваемому раствору 3-(3-метилизоксазол-5ил)пиразин-2-иламина (50 мг, 0,28 ммоль) в хлороформе, и реакционную смесь перемешивают в течение 4 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют СНС13. Органический экстракт сушат над ΜΑΟι и очищают хроматографией на двуокиси кремния, элюируя гексаном:ЕЮАе (3:1) с получением указанного в заголовке соединения.
ЖХМС: Ву 0,98 мин МС т/ζ 255,0 [М+Н]+; способ 2т^η^ο^ρНν01.
Промежуточное соединение С4.
5-Бром-3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин
Стадия 1. 3-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин.
Карбонат натрия (17 мл 2 М раствора, 33 ммоль) добавляют к смеси 3-хлорпиразин-2-амина (1,23 г, 9,47 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксоборолан-2-ил)-1Н-пиразола (1,97 г, 9,47 ммоль) и РаС12(арр£)-СН2С12 (0,387 г, 0,473 ммоль) в ДМЭ (60 мл). Смесь дегазируют несколько раз под азотом, затем нагревают при 85°С в течение 3 ч. Растворитель удаляют, и остаток разбавляют водой и экстрагируют несколько раз ЕЮАе. Органический экстракт отделяют, сушат над Мд8О4 и растворитель удаляют с получением темного масла. Хроматография на двуокиси кремния с элюированием ЕЮАе:МеОН (3:1), затем растирание с ЕЮАе и диэтиловым эфиром дают указанное в заголовке соединение в виде серого порошка (1,25 г).
ЖХМС: Ву 0,45 мин; МС т/ζ 176,4 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) 8,01 (2Н, м), 7,93 (2Н, с), 4,75 (2Н, шс), 4,00 (3Н, с).
Стадия 2. 5-Бром-3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин.
Перемешиваемый раствор 3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-амина (стадия 1) (1,3 г, 7,42 ммоль) и ПВ8 (1,45 г, 8,16 ммоль) в ацетонитриле (15 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником под азотом в течение 5 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и остаток разбавляют водн. ПаНСО3 и экстрагируют несколько раз ЕЮАе. Органический экстракт сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении с получением темного масла. Хроматография на двуокиси кремния с элюированием ЕЮАе дает указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества (0,523 г, 26%).
ЖХМС: Ву 0,75 мин МС т/ζ 254,3 [М+Н]+; способ 2ттЬС_у003.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ (ч./млн) 8,01 (2Н, с), 7,96 (1Н, с), 4,75 (2Н, шс), 4,00 (3Н, с). Промежуточное соединение С5.
5-Хлор-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин
Смесь 3-бром-5-хлорпиразин-2-амина (5 г, 23,99 ммоль), 1Н-1,2,4-триазола (1,740 г, 25,2 ммоль), Х,Х-димети.лг.лицина (0,247 г, 2,399 ммоль), Сδ2СО3 (23,45 г, 72,0 ммоль) и Си1 (0,457 г, 2,399 ммоль) в диметиланилине (120 мл) нагревают при 150°С в течение 4 ч. Полученную смесь добавляют в воду (700 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮАе (2x500 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании градиентом 0-10% [2 М ХН3 в МеОН] в ДХМ дает указанное в заголовке соединение в виде желтого твердого вещества; ЖХМС: Ву 0,74 мин; МС т/ζ 197,1 [М+Н]+; способ 21111111,(.)^)11. Промежуточное соединение С6.
5-Хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амин
Смесь 2-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)тиазола (1 г, 4,44 ммоль), 3-бром-5хлорпиразин-2-амина (0,926 г, 4,44 ммоль), РаС12(арр£)-СН2С12 аддукта (0,181 г, 0,222 ммоль) и 2 М Па2СО3 (6,66 мл) в ДМЭ (22,21 мл) под Х3 нагревают с применением микроволнового облучения при 120°С в течение 45 мин. Смесь добавляют в воду (100 мл) и экстрагируют ЕЮАе (2x90 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании 0-10% [2,0 М ХН3 в
- 207 032075
МеОН] в МТБЭ дает указанное в заголовке соединение в виде коричневого твердого вещества; ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС ш/ζ 227,1 [М+Н]+; способ 2шшЬС_у003.
Промежуточное соединение С7. 5-Хлор-3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-иламин
К раствору 3-бром-5-хлорпиразин-2-амина (3,75 г, 18,01 ммоль) в ДМЭ (90 мл) добавляют 1,3диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (4 г, 18,01 ммоль), хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(П) (0,632 г, 0,901 ммоль) и №2СО3 (водн. 2,0 М) (27,0 мл, 54,0 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 90°С в течение ночи. Реакционную смесь добавляют в воду (250 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮАс (2x230 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4. Твердые вещества удаляют фильтрацией, промывают ЕЮАс и фильтрат концентрируют под вакуумом. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиентом (2 М ΝΗ3 в МеОН) в ДХМ на 80 г 81-колонке, загружая с ДХМ с получением продукта (2,5 г).
ЖХМС: Ву 0,81 мин; МС ш/ζ 224,0 [М+Н]+; способ 2штЕо™рНу01.
Промежуточное соединение С8.
5-бром-3-(2-метил-2Н-[1,2,3]-триазол-4-ил)пиразин-2-амин
Стадия 1. 5-Бром-3-триметилсиланилэтинилпиразин-2-иламин.
В 150-мл круглодонную колбу добавляют 3,5-дибромпиразин-2-амин (3 г, 11,86 ммоль) и триэтиламин (16,53 мл, 119 ммоль) в ТГФ (60 мл) с получением желтой суспензии. К перемешиваемому раствору добавляют хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (833 мг, 1,186 ммоль) и йодид меди(1) (452 мг, 2,373 ммоль). Сохраняя температуру ниже 10°С, медленно добавляют этинилтриметилсилан (1,844 мл, 13,05 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при температуре ниже 10°С в течение 30 мин, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение еще 30 мин.
Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. После разбавления этилацетатом органические фазы промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-30%) на 80 г колонке с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением продукта в виде светло-коричневого твердого вещества (2,5 г).
ЖХМС: Ву 1,26 мин МС ш/ζ 272,3 [М+Н]+; способ 2ηΉπΓονρΙ I.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,12 (1Н, с), 6,80 (2Н, шс), 0,26 (9Н, с).
Стадия 2. 5-Бром-3-этинилпиразин-2-иламин.
В 150-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-((триметилсилил)этинил)пиразин-2-амин (2,5 г, 9,25 ммоль) и К2СО3 (1,279 г, 9,25 ммоль) в МеОН (40 мл) с получением коричневого раствора. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь экстрагируют в ДХМ, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением продукт в виде коричневого твердого вещества (1,54 г).
ЖХМС; Ву 0,78 мин МС ш/ζ 200,2 [М+Н]+; способ 2ш1пЬо™рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 8,12 (1Н, с), 6,86 (2Н, широкий с), 4,81 (1Н, с).
Стадия 3. 5-Бром-3-(1Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-иламин.
В 100-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-этинилпиразин-2-амин (800 мг, 4,04 ммоль), аскорбат натрия (0,404 мл, 0,404 ммоль), и пентагидрат сульфата меди(11) (10,09 мг, 0,040 ммоль) в третичном бутаноле (10,00 мл) и воде (20 мл) с получением коричневой суспензии. Туда добавляют триметилсилилазид (1,61 мл, 12,12 ммоль), и реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 4 ч. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетате, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-70%) на 40 г картридже из двуокиси кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением продукта в виде темно-желтого твердого вещества (560 мг, 57%).
ЖХМС: Ву 0,82 мин МС ш/ζ 243,2 [М+Н]+; способ 2штЕо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Л) δ (ч./млн) 15,66 (1Н шс), 8,52 (1Н, шс), 8,14 (1Н, с), 7,46 (2Н, шс).
- 208 032075
Стадия 4. 5-Бром-3-(2-метил-2Н-[1,2,3]-триазол-4-ил)пиразин-2-амин.
В 25-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (250 мг, 1,037 ммоль), карбонат калия (430 мг, 3,11 ммоль) и йодметан (0,195 мл, 3,11 ммоль) в ТГФ (10 мл) с получением желтой суспензии. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, в это время образуется 1: 1 смесь двух региоизомеров. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетате, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенную смесь помещают в ДМСО и очищают масс-направленной препаративной очисткой с получением указанного в заголовке соединения.
ЖХМС: Ву 0,95 мин МС т/ζ 255,2 [М+Н]+; способ 2т^η^οурН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОД) δ 8,27 (1Н, с), 8,18 (1Н, с), 7,30 (2Н, шс), 4,29 (3Н, с).
Промежуточное соединение С8а: 5-бром-3-(1-этил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин и промежуточное соединение С8Ь: 5-бром-3-(2-этил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин
В 25-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С8, стадия 3) (300 мг, 1,245 ммоль), карбонат калия (516 мг, 3,73 ммоль) и йодэтан (0,302 мл, 3,73 ммоль) в ТГФ (10 мл) с получением желтой суспензии. Реакционную смесь нагревают при 70°С в течение 4 ч. Получают 4:6 отношение двух региоизомеров. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Образец растворяют в ДМСО и очищают масс-направленной препаративной хроматографией. Требуемые фракции объединяют, экстрагируют в ДХМ, промывают насыщ. раствором бикарбоната натрия для удаления всех следов ТФК, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением отдельных региоизомеров:
Первый элюированный пик.
Промежуточное соединение С8а 5-бром-3-(1-этил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин.
ЖХМС: Ву 0,99 мин МС т/ζ 269,4 [М+Н]+; способ 2т^η^οурНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,79 (1Н, с), 8,12 (1Н, с), 7,54 (2Н, широкий), 4,49 (2Н, мульт), 1,50 (3Н, т).
Второй элюированный пик.
Промежуточное соединение С8Ь 5-бром-3-(2-этил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин.
ЖХМС: Ву 1,07 мин МС т/ζ 269,3 [М+Н]+; способ 2т^η^οурНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,29 (1Н, с), 8,18 (1Н, с), 7,30 (2Н, широкий), 4,57 (2Н, мульт), 1,52 (3Н, т).
Промежуточное соединение С8с.
5-Бром-3-(2-(2,2,2-трифторэтил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин
В 25 мо круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-(1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С8, стадия 3) (300 мг, 1,245 ммоль), карбонат цезия (1217 мг, 3,73 ммоль) и 2,2,2трифторэтилтрифторметансульфонат (0,359 мл, 2,489 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) с получением желтой суспензии. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь экстрагируют в этилацетате, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Образец растворяют в ДМСО и очищают масс-направленной препаративной хроматографией. Требуемые фракции объединяют, экстрагируют в ДХМ, промывают насыщ. бикарбонатом натрия для удаления всех следов ТФК, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют, и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением беловатого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,17 мин МС т/ζ 323,4 [М+Н]+; способ 2т^η^οурНν01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,49 (1Н, с), 8,24 (1Н, с), 7,33 (2Н, широкий), 5,72 (2Н, кв). Промежуточное соединение С9.
5-Бром-3-(2,5-диметил-2Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-иламин
- 209 032075
Стадия 1. 5-Бром-3-(проп-1-инил)пиразин-2-амин.
В 100-мл круглодонную колбу добавляют 3,5-дибромпиразин-2-амин (2 г, 7,91 ммоль) и хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (0,278 г, 0,395 ммоль) в толуоле (30 мл) с получением желтой суспензии. К перемешиваемому раствору добавляют трибутил(проп-1-инил) станнан (2,41 мл, 7,91 ммоль), и реакционную смесь нагревают при 60°С в течение 1 ч. Неочищенную реакционную смесь загружают в двуокись кремния, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Продукт очищают флэшхроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-50%) на 40 г колонке с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением продукта в виде светло-коричневого твердого вещества (1,3 г).
ЖХМС: Ву 0,87 мин МС т/ζ 212,0 [М+Н]+; способ 2ттЬо^рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ) δ 8,02 (1Н, с), 6,80 (2Н, ш), 2,13 (3Н, с).
Стадия 2. 5 -Бром-3-(5 -метил- 1Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-иламин.
В 25-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-(проп-1-инил) пиразин-2-амин (1,1 г, 5,19 ммоль) и ТМС азид (2,066 мл, 15,56 ммоль) в ДМФ (25 мл) с получением коричневого раствора. Реакционную смесь нагревают при 120°С в течение 2 ч, затем при 150°С в течение еще 4 ч. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетат, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Красновато-коричневый остаток загружают в двуокись кремния и очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-50%) на 40 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением темно-желтого масла. Добавляют ДХМ:изогексан (1:3), и полученную желтую суспензию фильтруют с получением желтого твердого вещества (205 мг).
ЖХМС: Ву 0,95 мин; МС т/ζ 255,3 [М+Н]+; способ 2ттЬо™рНу01.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06) δ 15,40 (1Н, шс), 8,09 (1Н, с), 7,51 (2Н, шс), 2,58 (3Н, с).
Стадия 3. 5 -Бром-3-(2,5 -диметил-2Н- [ 1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-иламин.
В 50-мл круглодонную колбу добавляют 5-бром-3-(5-метил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразин-2-амин (205 мг, 0,804 ммоль), карбонат калия (333 мг, 2,411 ммоль) и йодметан (0,151 мл, 2,411 ммоль) в ТГФ (8 мл) с получением желтой суспензии. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, затем нагревают при 40°С в течение 2 ч с получением 1:1 смеси двух региоизомеров. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетат, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (050%) на 12 г картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением продукта в виде желтого твердого вещества (175 мг), содержащего дополнительный региоизомер.
ЖХМС: Ву 0,96 мин МС т/ζ 269,0 [М+Н]+, 1,07 мин МС т/ζ 269,1 [М+Н]+; способ 2тшЬо™рНу01. Промежуточное соединение С10.
5-Хлор-3-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-иламин ,(I, .
СГ ’Ν ν \ А ι
Указанное в заголовке соединение получают из 2-циклопропил-5-(4,4,5,5тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)тиазола и 3-бром-5-хлорпиразин-2-иламина аналогично промежуточному соединению С7.
ЖХМС: Ву 1,06 мин; МС т/ζ 253,1 [М+Н]+; способ: 2ттЬо™рНу01.
Промежуточное соединение С11.
-Бром-3-(1 Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-амин
N Ад/
Смесь 5-бром-3-хлорпиразин-2-амина (1,3 г, 6,24 ммоль), 1Н-1,2,4-триазола (0,5 г, 7,24 ммоль) и карбоната цезия (3,5 г, 10,74 ммоль) в ДМФ (25 мл) нагревают до 60°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разделяют между этилацетатом (150 мл) и водой (75 мл). Органи
- 210 032075 ческую часть отделяют, и водную фазу экстрагируют этилацетатом (2x75 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат над безводным фильтратом натрия, фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Очистка неочищенного продукта хроматографией на двуокиси кремния с элюированием 10-25% этилацетатом в изогексане дает указанное в заголовке соединение;
ЖХМС: Ву 2,86 мин; т/ζ 241,1 и 243,3 [М+Н]+ изотопы брома; способ 2ш1пЬо^рН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,25 (1Н, с), 8,40 (1Н, с), 8,30 (1Н, с), 7,34 (2Н, с). Промежуточное соединение С12.
5-Бром-3-(3-метил[1,2,4]триазол-1-ил)пиразин-2-иламин
Получают с применением 5-бром-3-хлорпиразин-2-амина и 3-метил-1Н-[1,2,4]триазола аналогично промежуточному соединению С11.
ЖХМС: Ву 0,87 мин; МС ш/ζ 355,0 [М+Н]+; способ 2ιηίιιΙ.ο\νρΙ Ιν01.
Промежуточное соединение С13.
-Хлор-3 -(3 -циклопропилизоксазол-5 -ил)пиразин-2-амин
Стадия 1. 5-Хлор-3-((триметилсилил)этинил)пиразин-2-амин.
В 500-мл круглодонную колбу добавляют 3-бром-5-хлорпиразин-2-амин (5 г, 23,99 ммоль), этинилтриметилсилан (10,17 мл, 72,0 ммоль) и триэтиламин (33,4 мл, 240 ммоль) в ТГФ (100 мл) с получением коричневого раствора. Реакционную смесь дегазируют и продувают азотом. К перемешиваемому раствору добавляют хлорид бис-(трифенилфосфин)палладия(11) (1,684 г, 2,399 ммоль) и йодид меди (I) (914 мг, 4,80 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетате, промывают насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над М§804, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт загружают в двуокись кремния, очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-30%) с применением 80 г картриджа с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества;
ЖХМС: Ву=1,29 мин МС η/ζ 226,2 [М+Н]+; способ 2ηΐηΓονρΗν02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ) δ 8,08 (1Н, с), 6,82 (2Н, широкий с), 0,27 (9Н, с).
Стадия 2. 5-Хлор-3-этинилпиразин-2-амин.
В 250-мл круглодонную колбу добавляют 5-хлор-3-((триметилсилил)этинил)пиразин-2-амин (стадия 1) (3,64 г, 16,12 ммоль) и К2С03 (2,228 г, 16,12 ммоль) в МеОН (75 мл) с получением коричневого раствора. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь экстрагируют в ДХМ, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд804, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества;
ЖХМС: Ву=0,80 мин МС η/ζ 154,1 [М+Н]+; способ 2ш1пЬо™рНу02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 8,13 (1Н, с), 6,92 (2Н, широкий с), 4,85 (1Н, с).
Стадия 3. 5-Хлор-3-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-амин.
В 50-мл круглодонную колбу добавляют циклопропанкарбоксальдегид (0,245 мл, 3,26 ммоль), гидрохлорид гидроксиламина (238 мг, 3,42 ммоль) и ЫаОН (137 мг, 3,42 ммоль) в ΐ-ВиОН (8 мл) и воде (8 мл) с получением бесцветного раствора. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. В реакционную смесь добавляют хлорамин-Т (840 мг, 3,42 ммоль), порошок меди (9 мг, 0,140 ммоль) и пентагидрат сульфата меди(11) (24 мг, 0,098 ммоль), и смесь перемешивают в течение 15 мин. В зеленовато-коричневый раствор добавляют 5-хлор-3-этинилпиразин-2-амин (со стадии 2) (500 мг, 3,26 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 2 ч. Смесь экстрагируют в этилацетат, промывают гидроксидом аммония, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над М§804, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-40%) на 24 г
- 211 032075 картридже с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением светло-коричневого твердого вещества. Твердое вещество растирают в изогексане:этилацетате (4:1), и полученную суспензию фильтруют с получением желтого твердого вещества, которое растворяют в ДХМ (20 мл) и добавляют Р8-ТВЭ (2896 мг, 3,19 ммоль) с получением желтой суспензии. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Суспензию фильтруют через СеШе® картридж для удаления реагента на полимерной подложке. Фильтрат собирают и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением желтого твердого вещества; ЖХМС: Ву=1,12 мин МС т/ζ 237,1 [М+Н]+; способ 2ш1пЬошрНу02.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Ф6) δ 8,24 (1Н, с), 6,94 (2Н, широкий с), 6,82 (1Н, с), 2,12-2,05 (1Н, м), 1,08-1,04 (2Н, м), 0,92-0, 88 (2Н, м).
Промежуточное соединение Ό1. транс-3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-№-(4-гидроксициклогексил)-4-метилбензолсульфонамид
Смесь, содержащую транс-Ν-(4-гидроксициклогексил)-4-метил-3 -(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение А5) (9,48 мг, 2,40 ммоль), 5-бром3-хлорпиразин-2-амин (500 мг, 2,399 ммоль), Р0С12(0рр1)-СН2С12 аддукт (98 мг, 0,120 ммоль) и \α:(Ό3 (6,00 мл, 11,99 ммоль) в ДМЭ (11,400 мл) под Ν2 нагревают с применением микроволнового облучения при 120°С в течение 45 мин. Смесь добавляют в воду (100 мл) и экстрагируют ЕЮАс (2x100 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Очистка хроматографией на двуокиси кремния при элюировании 0-100% ЕЮАс в изогексане, затем облучение ультразвуком полученного твердого вещества дают указанное в заголовке соединение в виде беловатого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,88 мин; МС т/ζ 438,2 [М+Н]+; способ 2шшЬС_у003.
Промежуточное соединение Ό2.
3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению Ό1, заменяя транс-№-(4-гидроксициклогексил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение А5) №(2-гидрокси-2-метилпропил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамидом (промежуточное соединение А2);
ЖХ-МС: КТ 0,93 мин; МС т/ζ 371,2 [М+Н]+; способ 2шшЬошрНу01.
Промежуточное соединение Ό3.
3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-Х-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид
Указанное в заголовке соединение получают аналогично промежуточному соединению Ό1 заменяя транс-Х-(4-гидроксициклогексил)-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение А5) Ш11Ь №(3-гидрокси-3-метилбутил)-4-метил-3(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (промежуточное соединение А3);
ЖХМС: Ву 0,88 мин; МС т/ζ 385,2 [М+Н]+; 2ттЬС_у003.
Промежуточное соединение Ό4:
3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-Х-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид
- 212 032075
К раствору гидрохлорида 4-амино-1,1,1-трифторбутан-2-ола (275 мг, 1,531 ммоль) и 3-бром-4метилбензол-1-сульфонилхлорида (425 мг, 1,577 ммоль) в ТГФ (7 мл) добавляют ДИПЭА (0,55 мл, 3,15 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляют ДХМ, промывают 10% лимонной кислотой, затем сушат, пропуская через фазовый разделитель. Органическую фазу выпаривают при пониженном давлении и очищают флэш-хроматографией на колонке (24 г двуокись кремния, 0-50% этилацетат в изогексане). Полученный продукт [3-бром-4-метил-№-(4,4,4трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид, 530 мг, расчетная чистота 80%] растворяют в 1,2диметоксиэтане (6 мл). Добавляют бис-(пинаколато)дибор (340 мг, 1,339 ммоль), дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия (40 мг, 0,057 ммоль) и ацетат калия (175 мг, 1,783 ммоль), и реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником. Через 2 ч добавляют еще бис(пинаколато)дибор (100 мг) добавляют, и смесь кипятят с обратным холодильником снова в течение 3 ч. Добавляют 5-бром-3-хлорпиразин-2-амин (260 мг, 1,247 ммоль) и водн. 2 М карбонат натрия (1,7 мл, 3,40 ммоль), и полученную смесь нагревают до 90°С в течение 3 ч в микроволновой печи. Полученную смесь разделяют между ДХМ и водой и отделяют с применением картриджа фазоразделителя. Органическую фазу выпаривают при пониженном давлении, связывают с двуокисью кремния и очищают флэшхроматографией на колонке 40 г с двуокисью кремния, 10-70% этилацетат в изогексане. Фракции продукта объединяют и выпаривают при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла;
ЖХМС: Ву 0,94 мин; МС т/ζ 425,1 [М+Н]+; способ: 2ттГо\\р11 Хиральное разделение 3-(5-амино6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-№(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамида с применением сверхкритической жидкостной хроматографии дает отдельные энантиомеры (промежуточное соединение Э4а и Э4Ь).
Подробности способа:
Колонка: РЬепотепех Ы2Х С4 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С
Подвижная фаза: 20% изопропанол+0,1%об./об. ДЭА/80% СО2 Система: Вегдег ШпФдгат СЖХ2
Промежуточное соединение Э4а и промежуточное соединение Э4Ь: (К) и (8)-3-(5-Амино-6хлорпиразин-2-ил)-4-метил-№(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид
Ν ,ΝΗ? 1 Г Т ί
/γΎ С1 ΓΎ4' 01
У У
[ и г
о—з—о 0=5=0
ΗΝ ΗΝ
гз/г к Аг
он он
Хиральное разделение дает два пика, которые анализируют аналитической хиральной СЖХ с применением следующего способа:
Колонка: РЬепотепех ьих С4 250x10 мм, 5 мкм @ 35°С
Подвижная фаза: 20% Изопропанол+0,1%об./об. ДЭА/80% СО2
Поток: 10 мл/мин; время прогона: 15,00 мин
Определение: УФ @ 220 нм
Система: Вегдег МФпгдгат СЖХ2
Промежуточное соединение Э4а. Первый элюированный пик: СЖХ время удержания=10,5 мин (8)3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-№-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид или (К)-3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-№-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид.
Промежуточное соединение Э4Ь. Второй элюированный пик: СЖХ время удержания=13,1 мин (8)3-(5-амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-№-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид или
- 213 032075 (К)-3-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-4-метил-Ы-(4,4,4-трифтор-3-гидроксибутил)бензолсульфонамид. Промежуточное соединение 1)5.
5-(5-Амино-6-хлорпиразин-2-ил)-2-фтор-К-(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамид
Смесь 5-бром-2-фтор-Ы-(3-гидроксипропил)-4-метилбензолсульфонамид (промежуточное соединение А12) (590 мг, 1,809 ммоль), КОАс (266 мг, 2,71 ммоль), РдС12(дррГ)-СН2С12 аддукт (73,9 мг, 0,090 ммоль) и бис-(пинаколато)дибор (505 мг, 1,990 ммоль) в ДМЭ (9043 мкл), под Ν2, нагревают при 90°С в течение 14 ч. 5-Бром-3-хлорпиразин-2-амин (377 мг, 1,809 ммоль) добавляют в реакционную смесь, затем №:СО3 (2713 мкл, 5,43 ммоль) и Р0С12(0рр1)-СН2С12 аддукт (73,9 мг, 0,090 ммоль), и реакционную смесь облучают микроволнами при 120°С в течение 45 мин. К смеси добавляют к насыщ. №:СО3 (100 мл), и продукт экстрагируют в ЕЮАс (2x90 мл). Органические экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Мд8О4 и концентрируют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя 0-10% градиентом (2 М N113 в МеОН) в МТБЭ на 40 г 81-колонке с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,81 мин; МС т/ζ 375,1 [М+Н]+; способ: 2тт2о\рН.
2Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ 8,19 (1Н, с), 7,81 (1Н, шс), 7,73 (1Н, д), 7,42 (1Н, д), 7,02 (2Н, с), 4,41 (1Н, шс), 3,37 (2Н, т), 2,91 (2Н, т), 2,42 (3Н, с), 1,54 (2Н, м).
Промежуточное соединение Е1.
3-(5-Амино-6-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1 -сульфонилхлорид.
Стадия 1. 5-о-Толил-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин
В 20-мл микроволновую пробирку добавляют о-толилбороновую кислоту (0,169 г, 1,245 ммоль), 5бром-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С11, 0,3 г, 1,245 ммоль), Р0С12(брр1)-СН2С12 аддукт (50,8 мг, 0,062 ммоль) и 2 М карбонат натрия (1,556 мл, 3,11 ммоль) в ДМЭ (3,5 мл) с получением оранжевой суспензии. Реакционную смесь нагревают в активаторной микроволновой печи Вю1аде при 120°С в течение 60 мин. Реакционную смесь экстрагируют в этилацетат, промывают водой, насыщенным раствором соли, органический слой отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Очищают флэш-хроматографией на колонке, элюируя изогексаном:этилацетатом (0-100%) на 12 г колонке с двуокисью кремния. Требуемые фракции объединяют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества (230 мг).
ЖХМС Ву 0,96 мин; МС т/ζ 253,2 [М+Н]+; способ 2тт2о\рН.
2Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф) 9,33 (1Н, с), 8,41 (1Н, с), 8,35 (1Н, с), 7,52 (1Н, мульт), 7,32 (3Н, мульт), 7,27 (2Н, ш), 2,42 (3Н, с).
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорид
о=8=о
I
С1
В 50-мл круглодонную колбу, охлажденную до <5°С, добавляют 5-о-толил-3-(1Н-1,2,4-триазол-1ил)пиразин-2-амин (стадия 1, 780 мг, 3,09 ммоль) и хлорсульфоновую кислоту (4,97 мл, 74,2 ммоль) в СНС13 (15 мл) с получением коричневого раствора. Раствор становится двухфазным при полном добавлении кислоты, и его нагревают до комнатной температуры при перемешивании в течение ночи. Реакционную смесь осторожно добавляют по каплям к перемешиваемому раствору ледяной воды и ДХМ (3:1). Получают суспензию. Содержимое переносят в делительную воротку, добавляют ДХМ, и суспензию встряхивают до полного растворения в органическом слое. Органические фазы отделяют, сушат над Мд8О4, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (900 мг).
2Н ЯМР (400 МГц, СНС13) 9,21 (1Н, с), 8,30 (1Н, с), 8,22 (1Н, с), 8,13 (1Н, д), 8,01 (1Н, дд), 7,59 (1Н, д), 6,75 (2Н, ш), 2,61 (3Н, с).
- 214 032075
Промежуточное соединение Е.
-(5 -Амино-6-(2-метилтиазол-5 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1 -сульфонилхлорид
Стадия 1. 3-(2-Метилтиазол-5-ил)-5-(о-толил)пиразин-2-амин.
Ρά-118 (0,136 г, 0,221 ммоль) добавляют к смеси 5-хлор-3-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-амина (промежуточное соединение С6) (1 г, 4,41 ммоль), о-толилбороновой кислоты (0,660 г, 4,85 ммоль), фосфата калия (1,873 г, 8,82 ммоль), 1,4-диоксана (17,65 мл) и воды (4,41 мл). Реакционную смесь нагревают при 100°С в течение 2,5 ч. Реакционную смесь добавляют в воду (100 мл) и экстрагируют ЕЮАе (2x100 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (100 мл) и сушат над Мд8О4. Твердое вещество отфильтровывают, промывают ЕЮАе и растворитель концентрируют при пониженном давлении с получением темно-серого остатка. Остаток растирают из Е£2О с получением твердого вещества, которое отфильтровывают, промывают Е£2О и сушат в вакуумной печи при 50°С в течение 5 ч с получением указанного в заголовке соединения в виде темно-серого твердого вещества.
ЖХМС: Ву 1,24 мин, МС т/ζ 283,2 [М+Н]+; способ 2т^η^οурНν03.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Т6) δ 8,26 (1Н, с), 8,15 (1Н, с), 7,44 (1Н, м), 7,32-7,26 (3Н, м), 6,57 (2Н, шс), 2,67 (3Н, с), 2,40 (3Н, с).
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорид.
Хлорсульфоновую кислоту (4,50 мл, 67,1 ммоль) добавляют по каплям к перемешиваемому раствору 3-(2-метилтиазол-5-ил)-5-(о-толил)пиразин-2-амина (стадия 1) (790 мг, 2,80 ммоль) в СНС13 (14 мл) при 0°С. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до КТ и перемешивают в течение ночи при КТ. Реакционную смесь добавляют по каплям к перемешиваемой ледяной воде, и полученную смесь экстрагируют СНС13 (125 мл). Органическую фазу отделяют и промывают насыщенным раствором соли (100 мл) и сушат над Мд8О4. Твердое вещество отфильтровывают, промывают СНС13 и растворитель концентрируют при пониженном давлении с получением коричневого масла. Остаток растирают с Е£2О с получением твердого вещества, которое отфильтровывают, промывают Е£2О и сушат в вакуумной печи при 50°С в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества, которое применяют непосредственно на следующей стадии.
Промежуточное соединение Е3.
3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1-сульфонилхлорид
О=5 = О
1'
С1
Стадия 1. 3-(1,3-Диметил-1Н-пиразол-4-ил)-5-(о-толил)пиразин-2-амин.
5-Хлор-3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-амин (промежуточное соединение С7) (11,3 г, 50,5 ммоль) и о-толилбороновую кислоту (8,24 г, 60,6 ммоль) растворяют в диоксане (170 мл) при перемешивании и дегазируют азотом. Добавляют фосфат калия (21,45 г, 101 ммоль) в воде (45 мл), затем Ρά118 [РдС12(0£Ьр1)] (1,646 г, 2,53 ммоль). Темно-красная суспензия постепенно темнее при перемешивании. Ее нагревают до 100°С в течение ночи, внутренняя температура 85°С, под азотом.
Реакционную смесь разделяют в этилацетате/воде (1:1, 500 мл). Слои отделяют, и основной органический слой фильтруют через СеШе®. Водный слой повторно экстрагируют этилацетатом (100 мл). Органические экстракты ссыпают, промывают насыщенным бикарбонатом натрия (400 мл), водой (300 мл), насыщенным раствором соли (300 мл), затем сушат над Мд8О4 и углем. Дессикант отфильтровывают, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества. Его суспендируют в диэтиловом эфире (130 мл) и обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин. Остаточное бледно-коричневое твердое вещество удаляют фильтрацией и сушат в вакууме с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 0,95 мин; МС т/ζ 280,3 и 281,4 [М+Н]+; способ 2т^η^οурН.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 8,1 (1Н, с), 7,95 (1Н, с), 7,4 (1Н, м), 7,25 (3Н, м), 6,1 (2Н, шс), 3,8 (3Н, с), 2,35 (3Н, с), 2,25 (3Н, с).
Стадия 2. 3-(5-Амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензол-1сульфонилхлорид.
Хлорсульфоновую кислоту (5,75 мл, 86 ммоль) добавляют по каплям к перемешиваемому раствору 3-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-5-(о-толил)пиразин-2-амина (стадия 1) (1,0 г, 3,58 ммоль) в хлороформе
- 215 032075 (20 мл) при 0°С. После завершения добавления реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 20 ч. Реакционную смесь добавляют по каплям в быстро перемешиваемую ледяную воду, и продукт осаждают в виде бледно-желтого твердого вещества. Когда большая часть льда расплавится, смесь фильтруют через спеченную воронку для сбора продукта, который промывают ЕЮАс и сушат в вакуумной печи при КТ с получением указанного в заголовке соединения;
ЖХМС: Ву 1,08 мин; МС ш/ζ 378,3 [М+Н]+; способ 2штЬо’мрН.
1Н ЯМР (400 МГц, СОС13) δ 8,18 (1Н, с), 7,98 (1Н, с), 7,69 (1Н, с), 7,55 (1Н, д), 7,26 (1Н, д), 3,35 (3Н, с), 3,27 (3Н, с), 2,27 (3Н, с).
Промежуточное соединение Е4.
2,4,6-Трихлорфенил 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метилбензолсульфонат
Стадия 1. 3-Хлор-5-о-толилпиразин-2-амин.
Смесь, содержащую 5-бром-3-хлорпиразин-2-амин (2 г, 9,59 ммоль), о-толилбороновую кислоту (1,35 г, 9,93 ммоль), РйС12(йрр1)-СН2С12 аддукт (0,25 г, 0,306 ммоль) и \а2С()3 (5 г, 47,2 ммоль) в ДМЭ (30 мл) и воду (6,00 мл), под азотом нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 3 ч. Полученную смесь разбавляют водой (100 мл) и экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и выпаривают при пониженном давлении. Полученный коричневый остаток связывают с двуокисью кремния и очищают флэшхроматографией на колонке (80 г двуокись кремния, 0-25% этилацетат в изогексане) с получением блед но-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 1,00 мин; МС ш/ζ 220,1 [М+Н]+; способ: 2штЬо’№рН.
Стадия 2. 3-(2-Метилпиридин-4-ил)-5-о-толилпиразин-2-амин.
Смесь Рй(РРй3)2С12 (0,125 г, 0,178 ммоль), 3-хлор-5-о-толилпиразин-2-амина (стадия 1) (0,78 г, 3,55 ммоль), 2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридина (0,8 г, 3,65 ммоль), карбоната натрия (1,1 г, 10,38 ммоль) в ДМЭ (7,5 мл), Е1ОН (5,00 мл) и воде (2,5 мл) нагревают до 120°С в микроволновой печи в течение 2 ч. Полученную смесь разбавляют этилацетатом и водой, с применением облучения ультразвуком для того, чтобы обеспечить перенос всех материалов из микроволновой пробирки, и выпаривают при пониженном давлении для удаления органических фаз. Оставшуюся водную фазу экстрагируют этилацетатом (2x50 мл), промывают насыщенным бикарбонатом натрия (50 мл) и насыщенным раствором соли (25 мл), сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют. Полученный темнокоричневый раствор выпаривают и связывают с двуокисью кремния, затем очищают флэшхроматографией на колонке (80 г двуокись кремния, 70-100% этилацетат в изогексане, затем 5-10% 2 М метанольным аммиаком в МТБЭ). Фракции продукта выпаривают с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества;
ЖХ-МС: Ву 0,69 мин; ш/ζ 277,6 [М+Н]+; способ: 2штЬо’№рН.
Стадия 3. 2,4,6-Трихлорфенил 3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-4метилбензолсульфонат.
К раствору 3-(2-метилпиридин-4-ил)-5-о-толилпиразин-2-амина (стадия 2) (600 мг, 2,171 ммоль) в хлороформе (10 мл) при 0°С (ледяная баня) под азотом добавляют по каплям хлорсульфоновую кислоту (3,5 мл, 52,3 ммоль) в течение более 10 мин. Полученный красный раствор перемешивают и медленно нагревают до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение ночи при комнатной температуре. Полученную смесь добавляют по каплям в охлажденную на льду перемешиваемую смесь ДХМ (90 мл) и насыщенного бикарбоната натрия (150 мл). Эту смесь пропускают через фазовый разделитель непосредственно в перемешиваемую смесь 2,4,6-трихлорфенола (450 мг, 2,280 ммоль) и триэтиламина (0,75 мл, 5,38 ммоль) в ДХМ (5 мл). Водную фазу и осадок повторно экстрагируют ДХМ (50 мл) и пропускают через фазовый разделитель непосредственно в ту же перемешиваемую смесь. Через 4 ч переме шивания реакционную смесь выпаривают при пониженном давлении, затем растирают в этилацетате и сушат в вакуумной печи в течение ночи с получением желтого твердого вещества (465 мг, партия 1). Оставшуюся водную фазу и твердое вещество снова экстрагируют ДХМ (100 мл), промывают 2 М карбонатом натрия и пропускают через фазовый разделитель непосредственно в перемешиваемую смесь 2,4,6трихлорфенола (200 мг) и триэтиламина (0,3 мл). После перемешивания в течение ночи смесь выпаривают при пониженном давлении и промывают этилацетатом с получением бледно-желтого твердого веще
- 216 032075 ства (480 мг, партия 2). Расчетная чистота 80%, содержит триэтиламин/гидрохлорид триэтиламина, но применяют без дальнейшей очистки.
ЖХМС: Ву 1,00 мин; т/ζ 533,0, 535,1 [М-Н]-; способ: 2ш^η^ο^рН.
Промежуточное соединение Г.
О-(Т етрагидрофуран-3 -ил)гидроксиламин
Стадия 1. 2-((Тетрагидрофуран-3-ил)окси)изоиндолин-1,3-дион.
К перемешиваемому раствору П-гидроксифталимида (5 г, 30,7 ммоль) в ТГФ (200 мл) при 0°С добавляют Р8-трифенилфосфин (загрузка 1,88 ммоль/г) (19,56 г, 36,8 ммоль), затем тетрагидрофуран-3-ол (2,477 мл, 30,7 ммоль) и ди-трет-бутилазодикарбоксилат (7,06 г, 30,7 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 10 мин, затем в течение 21 ч при КТ. Смесь фильтруют, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Полученное желтое твердое вещество растирают из простого эфира, и твердое вещество собирают фильтрацией, промывая дополнительным простым эфиром с получением бледножелтого твердого вещества. Маточные растворы выпаривают при пониженном давлении и растирают снова с простым эфиром с получением бледно-желтого твердого вещества;
ЖХМС: Ву 0,82 мин; МС т/ζ 234,4 [М+Н]+; способ: 200^^^01.
Стадия 2. О-(Тетрагидрофуран-3-ил)гидроксиламин.
К перемешиваемому раствору 2-((тетрагидрофуран-3-ил)окси)изоиндолин-1,3-диона (стадия 1) (3,07 г, 13,16 ммоль) в МеОН (60 мл) добавляют гидрат гидразина (1,097 мл, 14,48 ммоль). Полученную смесь перемешивают при КТ в течение 16 ч в течение ночи с получением желтого раствора с суспензией белого твердого вещества. Белое твердое вещество удаляют фильтрацией и фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Его растирают с ДХМ, и твердое вещество снова удаляют фильтрацией. Фильтрат выпаривают при пониженном давлении с получением желтого масла, которое применяют без дальнейшей очистки на следующей стадии.
Фармацевтическое применение и анализ
Соединения в соответствии с данным изобретением и их фармацевтически приемлемые соли могут применяться в качестве лекарственных средств. В частности, соединения подходят в качестве селективных ингибиторов гамма-изоформы ФИ-3-киназы и могут быть протестированы в следующих анализах.
Аббревиатуры:
АДФ: аденозиндифосфат
АТФ: аденозинтрифосфат
АБС: альбумин бычьей сыворотки
ДМСИ: модифицированная по методу Дульбекко среда Игла
ДМСО: диметилсульфоксид
ДТТ: дитиотреитол
СНАРЗ: 3-[(3-холамидопропил)диметиламмонио]-1пропансульфонат
ЭДТК: Этилендиаминтетрауксусная кислота
ЭГТК: Этиленгликольтетрауксусная кислота
СКАФ: сортировка клеток с активной флуоресценцией
ФБС: фетальная бычья сыворотка
ССРХ: сбалансированный солевой раствор Хенка
ГЕПЕС: 4-(2-Гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота
ГФВР: Гомогенная флуоресценция с временным разрешением
ΜΒΒΙα: макрофагиальный белок воспаления, форма 1а (также известный как ССЬЗ)
ФРФБ: физиологический раствор с фосфатным буфером
ΚΡΜΙ: среда Козме11 Ратк МетогФа1 Ιη36ί6υ6θ
ВР-ФРПЭ: Времяразрешенный флуоресцентный индуктивнорезонансный перенос энергии
Люминесцентный киназный анализ киназы С1о (Кд1о) для ФИ-3-киназы альфа (А), ФИ-3-киназы бета (В), Ур§34 (С), ФИ 4-киназы бета (И)
Проявляющий реагент АТФ на основе люминесценции Κ^ηаδеΘ1ο получают от Ргошеда, (Кат. № У6714, Лот № 236161) через СаЫуз, Ша1^е11ет 8\с1^ег1ап0. Ь-альфа-фосфатидилинозит (ФИ, печень, бычий) получают от Асаий Рο1а^ Ыр1а (Кат. № 840042С, ^οΐ#^РI-274), фосфатидилинозит-4,5-бисфосфат (Р1Р(4,5)2) также получают от Асаий Рο1а^ Ыр1а (Кат. № 840046Х). Ь-а-Фосфатидилсерин (ФС) получают от Ауапй Рο1а^ Ыр1а (Кат. № 840032С), н-Октилглюкозид от Асапй Рο1а^ Ыр1а (Кат. № 10634425001).
- 217 032075
Люминесценция является общепринятым индикатором для определения концентраций АТФ и поэтому может применяться для отслеживания активности многих киназ независимо от их субстрата. К1паве С1о Ьиштевсеп! Ктаве Аввау (Рготеда, Майивоп/νΐ, И8А) является гомогенным НТ8 способом измерения активности киназы через количественную оценку количества АТФ, остающегося в растворе после киназной реакции. 50 нл разведений соединения распределяют в черных 384-луночных низкообъемных планшетах Ыоп Βίπάίπμ 81утепе (ΝΒ8) (Сов1ат Кат. № ΝΒ8#3676). Ь-а-фосфатидилинозит (ФИ) в виде 10 мг/мл раствора в метаноле переносят в стеклянную пробирку и сушат под потоком азота. Его затем повторно суспендируют в 3% 0с1у1С1нсов1бе (1-0-н-октил-бета-О-глюкопиранозид) встряхиванием и хранят при 4°С. Добавляют 5 мкл смеси ФИ/0с1у1С1исов1йе с ФИ-3-киназой альфа и ФИ-3-киназой бета подтипами или Урв34 или ФИ 4-киназой бета. Киназные реакции начинают добавлением 5 мкл АТФ-смеси, содержащей в конечном объеме 10 мкл 10 мМ ТК18-НС1 рН 7,5, 3 мМ МдС12, 50 мМ №С1, 0,05% СНАФС, 1мМ ДТТ и 1 мкМ АТФ при комнатной температуре. Реакции останавливают 10 мкл К1павеС1о и планшеты считывают через 10 мин на ридере 8упет§у2 с применением времени интегрирования 0,1 секунды на лунку. 2,5 мкМ ΝΥΡ-ΒΟΤ226 (1-(3-(трифторметил)-4-(пиперазин-1-ил)фенил)-8-(6метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-2(3Н)-она) добавляют в аналитические планшеты для получения 100% ингибирования киназной реакции, и 0% ингибирование дает растворитель (90% ДМСО в воде). (1-(3-(трифторметил)-4-(пиперазин-1-ил)фенил)-8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-2(3Н)-он) применяют в качестве ссылочного соединения и включают во все аналитические планшеты в форме 16-кратных разведений в двух повторностях.
1С50 значения процента ингибирования каждого соединения в 8 концентрациях (10, 3,0, 1,0, 0,3, 0,1, 0,030, 0,010 и 0,003 мкМ) п=2 получают наложением сигмоидальной кривой доза-реакция на график аналитических выводов к концентрациям ингибитора, как описано. Все соответствия проводят с помощью программы ХЬй!4 (ΙΌ Вивтевв 8о1ийопв, СийЛотй, ИК).
ТК-ЕКЕТ Айар!а анализ для ФИ-3-киназы гамма (Е), ФИ-3-киназы дельта (Е)
ТК-ЕКЕТ Айар1а™ ИпАетва1 К1паве Аввау К11 покупают у йкйгодеп Сотротайоп (СаткЬай/СА, И8А) (Кат. № РУ5099). Набор содержит следующие реагенты: Айар1а Еи-апй-АОР АпйЬойу (меченное европием анти-АДФ антитело в физиологическом растворе с буфером ГЕПЕС, Кат. № РУ5097), А1еха Е1иот® 647-меченный АДФ радиоактивный индикатор (А1еха Е1иот® 647-меченный АДФ радиоактивный индикатор в физиологическом растворе с буфером ГЕПЕС, Кат. № РУ5098), буфер для разведения ВР-ФРПЭ рН 7,5 (Кат. № РУ3574).
Р1К3СИ субстрат фосфатидилинозит (ФИ) получают от ОкНгодеп (везикулы, содержащие 2 мМ фосфатидилинозит (ФИ) в 50 мМ ГЕПЕС рН 7,5; Кат. № РУ5371). Р1К3СС субстрат фосфатидилинозит4,5-бисфосфат (Р1Р(4,5)2 получают от йкйгодеп (Р1Р2: ФС большие однослойные везикулы, состоящие из 1 мМ Р1Р2: 19 мМ ФС в 50 мМ ГЕПЕС рН 7,5, 3 мМ МдС12, 1 мМ ЭГТК; Кат. № РУ5100).
Времяразрешенный флуоресцентный индуктивно-резонансный перенос энергии (ВР-ФРПЭ) представляет собой технологию на основе переноса энергии между двумя соседними красителями, от возбужденного электрона одного красителя (донор) на электрон соседнего красителя (акцептор) через резонанс, с последующим выделением фотона. Этот перенос энергии определяют через повышение испускания флуоресценции акцептором и снижение испускания флуоресценции донором. ВР-ФРПЭ анализы протеинкиназ применяют лантанидные хелаты Тербия или Европия с большим временем жизни в качестве доноров, которые преодолевают помехи от аутофлуоресценции соединения или светорассеяние от выпавших в осадок соединений, введением задержки после возбуждения импульсной лампой в качестве источника возбуждения. Результаты часто выражают как отношение интенсивности флуорофоров акцептора и донора. Логометрическую природу такого значения корректируют для разницы в объемах анализа между лунками, а также корректируют на эффекты тушения из-за окрашенных соединений. Анализ Айар1а™ может быть разделен на две фазы: фаза киназной реакции и фаза определения АДФ. В фазе киназной реакции все компоненты киназной реакции добавляют в лунку и инкубируют реакционную смесь в течение заданного периода времени, определенного для каждой киназы. После реакции раствор для определения из Еи-меченного анти-ДЦФ антитела, А1еха Е1иот® 647-меченного ДЦФ радиоактивного индикатора и ЭДТК (для остановки киназной реакции) добавляют в аналитические лунки. ДЦФ, образованный киназной реакцией, замещает А1еха Е1иот® 647-меченный АДФ радиоактивный индикатор в антителе, что дает снижение сигнала ВР-ФРПЭ. В присутствии ингибитора количество АДФ, образованного в результате киназной реакции, снижается, и полученное не нарушенное взаимодействие антителорадиоактивный индикатор поддерживает высокий ВР-ФРПЭ сигнал. В анализе Айар1а™ донор (Европийанти-АДФ антитело) возбуждают при 340 нм и он переносит свою энергию на акцептор (А1еха Е1иог® 647-меченный АДФ радиоактивный индикатор). Эмиссия из А1еха Е1иог® 647 может отслеживаться фильтром, отцентрованным на 665 нм, так как он расположен между пиками эмиссии донора, которые измеряют при 615/620 нм.
нл разведений соединения распределяют в белом 384-луночном малообъемном полистирольном планшете. Затем 5 мкл ФИ-3-киназы гамма или ФИ-3-киназы дельта и жировой субстрат (ФИ или Р1Р2:ФС), затем 5 мкл АТФ (конечный аналитический объем 10 мкл) инкубируют при КТ. Стандартный
- 218 032075 буфер для реакции для АФар1а™ ВР-ФРПЭ анализа содержит 10 мМ Тп5-НС1 рН 7,5, 3 мМ МдС12, 50 мМ №01, 1 мМ ДТТ, 0,05% СНАФС ((3-[(3-холамидопропил)диметиламмонио]-1-пропансульфонат). Реакции останавливают добавлением 5 мкл смеси ЭДТК, содержащей Еи-меченное анти-АДФ антитело и А1еха Ииог® 647-меченный АДФ радиоактивный индикатор в буфере для разведения ВР-ФРПЭ. Планшеты считывают через 15-60 мин на ридере 8уиегду2 с применением времени интегрирования 0,4 секунды и задержки 0,05 секунд. Контроль для 100% ингибирования киназной реакции проводят замещением ФИ-3-киназы на стандартный буфер для реакции. Контроль для 0% ингибирования получают из растворителя соединений (90% ДМСО в Н2О). Стандартное соединение 1-(3-(трифторметил)-4-(пиперазин-1ил)фенил)-8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-2(3Н)-он (\VР-ВСТ226) применяют в качестве ссылочного соединения и включают во все аналитические планшеты в форме 16кратных разведений в двух повторностях.
Данные анализируют применением программы Ехсе1 й! или СгарйраФ Рпкш. 1С5) значения получают наложением сигмоидальной кривой доза-реакция на график аналитических выводов к концентрациям ингибитора. Все соответствия проводят с помощью программы ХЬГй4 (Ш Ви51пе55 8о1и1юп8, СийФГогФ, иК). Определение 1С5) значений процента ингибирования каждого соединения в в8 концентрациях (обычно 10, 3,0, 1,0, 0,3, 0,1, 0,030, 0,010 и 0,003 мкМ) п получают наложением сигмоидальной кривой доза-реакция на график аналитических выводов к концентрациям ингибитора. Все соответствия проводят с помощью программы ХЫЙ4 (Ш Ви51пе55 8о1и1юп5, СиПФГогФ, ИК).
Анализ связывания киназы ЬапЩазсгееп™ для мМРК (С)
Анализы связывания основаны на связывании и замещении А1еха Ииог® 647-меченных АТФконкурентных ингибиторов целевой киназы. Киназные Индикаторы от 1пуНгодеп разработаны для воздействия на широкий спектр киназных целей и основаны на АТФ-конкурентных ингибиторах киназы, что делает их подходящими для определения любых соединений, которые связываются с АТФ участком или с аллостерическим участком, изменяя структуру АТФ участка.
В анализе киназы ЕапФа^сгееп™ донор (Еи3+-антн-68Т (глутатион 8-странсфераза) антитело) возбуждают при 340 нм и переносят его энергию на акцептор (А1еха Ииог® 647-меченный АТФконкурентный ингибитор киназы=Тгасег-314). Эмиссия из Тгасег-314 (ингибитор А1еха Ииог® 647) может отслеживаться с помощью фильтра, отцентрованного при 665 нм так как он расположен между пиками эмиссии донора, которые измеряют при 615/620 нм. Связывание обоих, Тгасег-314 и Еи3-аитн-С8Т антитела, с киназой дает высокую степень РПЭФ из флуорофора Еи3+-донора на флуорофор А1еха-Т1иог® 647-акцептора на Тгасег-314. Связывание ингибитора с киназой конкурирует в отношении связывания с радиоактивным индикатором, что вызывает потерю РПЭФ.
нл разведений соединения распределяют в белый 384-луиочиый малообъемный полистирольный планшет. Затем 5 мкл С8Т-мМРК и Европнй-аитн-С8Т антитела, затем 5 мкл Тгасег-314 (конечной объем для анализа 10 мкл) инкубируют при КТ. Стандартный реакционный буфер для анализа связывания киназы ЕапФа^сгееп™ содержит 50 мМ ГЕПЕС рН 7,5, 5 мМ МдС12, 1 мМ ЭГТК, 0,01% Р1цгошс Е-127. Планшеты считывают через 60 мин на ридере 8упегду2 с применением времени интегрирования 0,2 мкс и задержку 0,1 мкс.
Для расчета норматива эмиссии, сигнал, испускаемый при 665 нм от акцептора (А1еха Ииог® 647меченый Тгасег-314) делят на сигнал, испускаемый при 620 нм от донора (Еи3'анти-С8Т антитела).
В качестве контроля для 0% ингибирования берут растворитель соединений (90% ДМСО в Н2О). Контроль относительного 100% ингибирования проводят добавлением 10 мкМ в смесь, содержащую С8Т-мМРК и Европий анти-С8Т антитело. Дополнительный контроль абсолютного 0% ингибирования получают из Еи3'анти-С8Т антитела без С8Т-мМРК. Стандартные соединения для профилирования липидкиназной панели применяют в качестве ссылки и они включены во все аналитические планшеты в форме 8-кратных разведений.
Клеточные анализы для ФИ-3-киназы альфа (Н1), бета (II) и дельта (Л): формат 8игейге
А1р11а8сгееп (гомогенный анализ усиленной за счет эффекта близости люминесценции, АЬРНА, Регкт Е1тег) представляет собой основанное на не радиоактивных шариках технологию анализа сближения для изучения биомолекулярных взаимодействий в формате гомогенного титровального микропланшеты. Торговое наименование 8игеЕне означает анализы А1р11а8сгееп, которые адаптированы для количественной оценки фосфорилирования эндогенных клеточных белков в лизатах клеток, с применением подходящих пар антител, которые включают анти-фосфо-киназу и анти-киназное антитело.
Анализ позволяет охарактеризовать подачу сигналов киназой в клетках, а также измерить действие ингибитора киназы.
Колонию клеток Ка1-1, стабильно чрезмерно экспрессирующих активированную изоформы ФИ-3киназы I класса Ка1-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 дельта клон 5 (Ва1-1_Р13К-дельта) и Ка1-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 альфа клон 6 (Ва1-1_Р13К-альфа) и Ва1-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 бета (Ва1-1_Р13-бета), культивируют в готовой питательной среде (ДМСИ с высоким содержанием глюкзы, 10% (об./об.) фетальная бычья сыворотка, 1% (об./об.) МЕМ НОАК, 10 мМ ГЕПЕС, 2 мМ Ь-глутамин, пуромицин (10 мкг/мл для Ва1-1_Р13К-дельта и Ва1-1_Р13К-альфа, 4 мкг/мл для Ва1-1_Р13бета), 1% (об./об.) Реп/81гер) до
- 219 032075
90% конфлюэнтности при 37°С/5% СО2/90% влажности в увлажненном СО2 инкубаторе и расщепляют два раза в неделю.
Следующие материалы применяют для р-АКТ(8473) определения в лизатах клеток Ка!-1: модифицированная по методу Дульбекко среда Игла (ДМСИ) с высоким содержанием глюкозы (С1Ьсо 1пуЦгодеп. Ваке1, 8\\'Цхег1ап± Кат. № 41965), анективированная нагреванием фетальная бычья сыворотка, подготовленная (ИН ФБС; 61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, № партии 16140), МЕМ неосновные аминокислоты (НОАК; 61Ьсо 1иуйгодеп, Ваке1, 8\\'Цхег1ап<Ь Кат. № 11140), ГЕПЕС (61Ьсо 1иуйгодеп, Ваке1, 8М^ег1аиф Кат. № 15630), пенициллин/стрептомицин (Пен/Стреп, 100х; 61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8\\'Цхег1аиф Кат. № 15140-122), Ь-глутамин (61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 25030), пуромицин (8фша А14пс11, Висйк, 8^11/ег1ап4, Кат. № Р9620), ДМСО (МЕКСК, П1е!1кои, 8^11/ег1ап4, Кат. № 8,02912,2500), Н2О, М1Ш0-Н2О, если не указано иначе (М1ЬЬ1РОКЕ 06АКОООК1, М1Шроге, Ζιΐβ, 8\νίΙ/ег1ап4), альбумин бычьей сыворотки (АВС; 8фша А1йпс11, Висйк, 8\\'Цхег1апй Кат. № А8412), набор для анализа 8игеР1ге р-Ак! 1/2 (8ег473) Аккау КИ (Регк1иЕ1шег, 8с11\\'ег/епЬас11, 8^11/ег1ап4, Кат. № Т6КА850К).
В анализе р-Ак! (8473) 8игеР1ге измеряют фосфорилирование эндогенной клеточной Ак! 1/2 при 8ег473 в лизатах клеток. При применении клеток Ка!-1, стабильно экспрессирующих туг-НА-теговые версии изоформ каталитических подъединиц человека Р13К-дельта, Р13К-альфа или Р13К-бета р110, анализ проводят с применением двухпланшетного протокола в 384-луночном формате.
Для тестирования соединения клетки высевают с плотностью 4000 (Ка!-1_Р13К-дельта), 7500 (Ка!1_Р13К-альфа) или 6200 (Ка!-1_Р13К-бета) клеток в 20 мкл обработанные готовой питательной средой 384-луночные планшеты и выращивают при 37°С/5% СО2/90% влажности в течение 24 ч. Непосредственно перед переносом соединения, готовую среду удаляют, добавляют 30 мкл аналитического буфера (ДМСИ с высоким содержанием глюкозы, 1х МЕМ НОАК, 10 мМ ГЕПЕС, 2 мМ Ь-глутамин, 0,1% (масс./об.) АБС), и 10 мкл предварительных разведений соединения переносят в клетки. После обработки соединением в течение 1 ч, клетки лизируют добавлением 20 мкл лизисного буфера с добавлением 0,24% (масс./об.) АБС. Определение р-АКТ (8ег473) проводят с применением набора 8игеР1ге р-Ак! 1/2 (8ег473) Аккау К1! согласно инструкции производителя, с применением 5 мкл клеточного лизата в общем исследуемом объеме 12 мкл.
Значения 1С50 процента ингибирования каждого соединения в 8 концентрациях (обычно 10, 3,0, 1,0, 0,3, 0,1, 0,030, 0,010 и 0,003 мкМ) и=2 получают наложением сигмоидальной кривой доза-реакция на график аналитических выводов к концентрациям ингибитора, как описано. Все соответствия проводят с помощью программы ХЬй!4 (ΙΌ Викшекк 8о1и!юик, СшИГогф ИК).
Клеточные анализы для ФИ-3-киназы альфа (Н2), бета (12) и дельта (Ί2): формат ГФВР (гомогенная флуоресценция с временным разрешением)
Следующие материалы применяют для определения р-АКТ (8473) в лизатах клеток Ка!-1.
Модифицированная по методу Дульбекко среда Игла (ДМСИ) с высоким содержанием глюкозы, 61и!аМАХТМ, Пируват (61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 31966), диализированная фетальная бычья сыворотка (ФБС), происхождением США (61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 36400, № партии 776683), МЕМ не основные аминокислоты (НОАК; 61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 11140), ГЕПЕС (61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 15630), Пенициллин/Стрептомицин (Реп/8!гер, 100х; 61Ьсо 1иуйгодеи, Ваке1, 8^11/ег1ап4, Кат. № 15140-122), Пуромицин (8фша АНпсН, ВисНк, 8^11/ег1ап4, Кат. № Р9620), ДМСО (МЕКСК, П1е!1кои, 8^11/ег1ап4, Кат. № 8,02912,2500), Н2О, М1Ш0-Н2О, если не указано иначе (МШЫРОКЕ 06АКОООК1, М1Шроге, Ζιΐβ, 8\ут!хег1ап0_)- набор для анализа НТКР РНокрНо-АКТ (8ег473) Аккау Кй (СакЬю, Сойо1е!, Егаисе, Кат. № 64АК8РЕН).
Применяют колонию клеток Ка!-1, стабильно чрезмерно экспрессирующих активированные изоформы Р13К I класса Ка!-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 дельта клон 6 (Ка!-1_Р13К-дельта) и Ка!-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 альфа клон 6 (Ка!-1_Р13К-альфа) и Ка!-1 рВАВЕриго Муг-НА-йр110 бета клон 1Е8 (Ка!-1_Р13К-бета). Все колонии клеток культивируют в готовой питательной среде (ДМСИ с высоким содержанием глюкозы 61и!аМАХТМ Пируват, 10% (об./об.) фетальная бычья сыворотка, 0,1 мМ МЕМ НОАК, 25 мМ ГЕПЕС, пуромицин 10 мкг/мл, 100 ед./мл Пенициллин, 100 мкг/мл Стрептомицин) до 90% конфлюэнтности при 37°С/5% СО2/90% влажность в увлажненном СО2 инкубаторе и расщепляют дважды в неделю.
Полуавтоматизированное получением клеточных лизатов: для низких (ингибированных) контролей, 0,9 мМ ЫУР-В6Т226-АР-1 в 90% (об./об.) ДМСО добавляют в соединение в контрольном планшете. Для тестирования соединения клетки высевают с плотностью 4000 (Ка!-1_Р13К-дельта), 8000 (Ка!-1_Р13Кальфа) или 6500 (Ка!-1_Р13К-бета) клеток в 30 мкл готовой питательной среды в обработанные клеточной культурой 384-луночные планшеты и выращивают при 37°С/5% СО2/90% влажности в течение 24 ч. 10 мкл предварительных разведений соединения переносят в клетки. После обработки соединением в течение 1 ч среду удаляют, и клетки лизируют добавлением 20 мкл лизисного буфера с добавлением блокирующего буфера. Определение р-АКТ (8ег473) проводят с применением набора для анализа НТКР рАКТ (8ег473) согласно инструкциям производителя с применением 16 мкл клеточного лизата в общем
- 220 032075 объеме для определения 20 мкл.
Клеточный и937 АКТ анализ для ФИ-3-киназы гамма (К1)
Колонию моноцитов И937 хранят в минимальной среде ΚΡΜΙ 1640 с добавлением 10% инактивированной нагреванием ФБС, 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицин и 2 мМ Ь-глутамина (Ιηνί1годеи). Суспендированную культуру И937 сохраняют засеванием клеток с плотностью 0,125х106 клеток на мл в свежую среду каждые три или четыре дня. Клетки инкубируют при 37°С, 5% СО2. За три или четыре дня до анализа клетки высевают с плотностью 0,25х106 клеток на мл в общем объеме 40 мл в Т162 культуральной колбе.
Перед началом манипуляций с клетками, описанных ниже, аналитический планшет МСЭ (Мезо 8са1е ОАохегу) блокируют добавлением 150 мкл/лунку блокирующего буфера и инкубируют при встряхивании в течение минимум 1 ч при комнатной температуре. Все стадии анализа должны проводиться быстро, с точно отмеренными инкубационными периодами и проверкой датчиков температуры там, где это необходимо.
Клетки, высеянные в количестве 0,25х106/мл за 3 или 4 дня до анализа, отсасывают, переносят в 50 мл пробирку Га1сои, считают и центрифугируют в течение 8 мин при 300д при комнатной температуре.
Надосадочную жидкость отсасывают, сгусток клеток повторно суспендируют и промывают один раз в ССРХ (сбалансированном солевом растворе Хэнка) Наик'з Ва1аисеб 8а11 8о1и1юи) центрифугированием в течение 8 мин при 300д при комнатной температуре. Сгусток клеток повторно суспендируют в ССРХ до концентрации 4х106 на мл, и 100 мкл суспензии клеток добавляют в каждую лунку плоскодонного 96-луночного планшета для культивирования тканей. Аналитические планшеты инкубируют в течение 1,5 ч при 37°С, 5% СО2 для снижения фонового фосфорилирования АКТ до перехода на стадию стимулирования соединением.
мМ исходную концентрацию соединения готовят в 100% ДМСО; из этого готовят разведение 1 в 125 в ССРХ с получением верхней концентрации соединения 40 мкМ, 0,8% ДМСО. Титрации соединения готовят в свежем плоскодонном 96-луночном планшете 10-кратным серийным разведением 40 мкМ в ССРХ 0,8% ДМСО; кончики пипетки меняют после каждого разведения. Концентрации соединения на этой стадии составляют в 4 раза больше конечной концентрации, требуемой для аналитического планшета. Клетки стимулируют соединением или ССРХ 0,8% ДМСО прямым переносом 50 мкл/лунку из планшета для разведения соединения. Аналитический планшет, содержащий обработанные соединением клетки, затем инкубируют в течение 30 мин при 37°С. Стандартное расположение планшета применяют во всех экспериментах.
Обработанные соединением клетки, в дополнение к лункам с положительным контролем (тах МБВ1а), стимулируют 50 мкл на лунку 40 нг/мл МБВ1а (Κ&Ό §у81ет8, каталожный номер 270-ΕΌ, лиофилизированный маточный раствор, восстановленный в 50 мкг/мл ФРФБ 0,1% АБС). Лунки с отрицательным контролем (тт ССРХ) стимулируют 50 мкл/лунку ССРХ при отсутствии МБВ1а. Конечные концентрации соединения разведены 4-кратно начиная с верхней концентрации 10 мкМ; где добавили, конечная концентрация МБВ1а составляет 10 нг/мл. Клетки инкубируют с МБВ1а в течение 3 мин при 37°С, 5% СО2. После стимулирования в течение 3 мин, аналитический планшет хранят на льду все время. Аналитические планшеты центрифугируют в течение 2 мин при 300д, 4°С, и надосадочную жидкость удаляют осторожным переворачиванием с последующим промоканием планшета на ткань. Клетки затем промывают осторожным добавлением 150 мкл/лунку ледяного ССРХ и центрифугированием при 300д в течение 5 мин при 4°С. Надосадочную жидкость отсасывают, и планшет промокают как описано выше. Планшет помещают на лед и клетки сразу же обрабатывают 35 мкл на лунку ледяным лизисным буфером, полученным согласно инструкции, данной в наборе (на аналитический планшет к 5 мл ТгЦ лизисного буфера добавляют 100 мкл 50х раствора протеазного ингибитора и 50 мкл каждого 100х раствора фосфатазного ингибитора I и II). Планшеты инкубируют на льду в течение 20 мин, затем центрифугируют при 841д в течение 5 мин, 4°С. Блокирующий буфер отсасывают из МСЭ планшета, и планшет промывают четыре раза 300 мкл/лунку Тп8 промывочного буфера. 25 мкл клеточного лизата затем переносят из аналитического планшета в промытый МСЭ планшет, который герметично закрывают и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч при встряхивании. Планшет промывают четыре раза 300 мкл на лунку Тп8 промывочным буфером, затем добавляют 25 мкл на лунку 8и1Го-1а§ аий-1о1а1 АКТ/рАКТ идентифицирующим антителом (60 мкл 50 х исходный раствор антитела разводят в 1 мл блокирующем буфере, смешанном с 2 мл промывочного буфера) и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч при встряхивании. Планшет промывают четыре раза 300 мкл на лунку Тп8 промывочным буфером и добавляют 150 мкл на лунку буфером считывания, стараясь избежать появления пузырьков. Планшет сразу же считывают с применением МСЭ 8ЕСТОК 1тадег 6000.
Результаты экспортируют в Ехсе1 и процент фосфорилированной АКТ рассчитывают с помощью уравнения: % фосфобелка=((2хфосфосигнал)/(фосфосигнал+общий сигнал))х100. Медиированное соединение ингибирование АКТ фосфорилирования анализируют с применением программного обеспечения Ρπζιη V Сгарйраб.
- 221 032075
Клеточный Т937 АКТ анализ для ФИ-3-киназы гамма (К2)
Применяемые материалы: Вю-Каб ТС10ТМ автоматизированный счетчик клеток, Вю-КАП счетные стекла (#145-0011), раствор трипанового синего 0,4% (#Т8154 81дта), разведенный 1:2 в ФРФБ), Вюсопсер! МиШбтор сотЫ, УегееИе автоматизированный жидкостной манипулятор (Тйегто 8с1епййс), набор для анализа НТКР Рйокрйо-АКТ (8ег473) 10'000 (СЦЬю #64АК8РЕН), Ртох1Р1а!е-384 Р1и8, \У1Ше, обработанный ТС (Реткт Е1тег #6008239) 384-луночный обработанный планшет для культивирования ткани (ВО Та1соп #353289), КРМ1+О1и!аМАХ (ЬИе ТесНпо1од1е5 #61870-010), ФБС диализированная (ЬИе Тес1по1още5 #26400), Пенициллин/Стрептомицин (ЬИе ТесНпо1од1е5 #15140), ССРХ 1Х (ЬИе ТесНпо1од1е5 #14025-050), Вортманнин (8щта-А1бпс11 # 41628), исходный раствор 10 мМ в 90% ДМСО, рекомбинантный человеческий ССЬ3/МБВ1а (К&О 8у51ет5 #270-ЬО) (исходный раствор 10 мкг/мл), микропланшетный ридер КИВУйаг (ВМС ЬаЫесй #8).
Клетки И937 расщепляют каждые 3-4 дня: 5х106 клеток/колбу (175 см2) в 40 мл. За 3-4 дня до анализа клетки должны быть засеяны: 4-5 колб с 107 клетками в 40 мл.
Полуавтоматизированное получение клеточных лизатов: клетки повторно суспендируют в ССРХ, засевают (200000 клеток/лунку/60 мкл) в 384-луночный планшет и инкубируют в увлажненном 37°С, 5% СО2 инкубаторе в течение 1,5 ч. Соединения разбавляют ССРХ и 40 мкл добавляют к голодающим клеткам (за исключением лунок 24 1-Р). 10 мкМ Вортманина добавляют к отрицательному контролю (\ге115 24 Ι-Р). Затем клетки инкубируют в течение 30 мин при 37°С и 5% СО2. Стимулирование проводят в течение 3 мин добавлением 20 мкл МБВ1а (конечная 10 нг/мл, разбавлен в ССРХ) в инкубаторе. Лунки 24 АН стимулируют только ССРХ. Стимулирование затем останавливают помещением планшетов с клетками на лед (заполняют ледяной водой). Клетки затем центрифугируют при 1200 об/мин и 4°С в течение 3 мин. 80 мкл надосадочной жидкости удаляют. Клетки снова центрифугируют при 1200 об/мин и 4°С в течение 3 мин. Надосадочную жидкость затем удаляют переворачиванием планшетов и добавляют 30 мкл лизисного буфера. Планшет инкубируют при комнатной температуре в течение 30 мин при встряхивании. Затем 16 мкл переносят в 384-луночный Ртох1Р1а!е Р1и§. В каждую лунку добавляют 4 мкл мастермикс (каждый конъюгат разводят 1:20 проявляющим реагентом) и планшет хранят в темноте при комнатной температуре в течение 4 ч. Флуоресценцию измеряют при 665 и 620 нм на КИВУйат Кеабег.
Анализ изменения формы нейтрофилов в цельной крови (Ь)
Способ на основе проточной цитометрии применяют для измерения ингибирования вызванного 1Ь8 (интерлейкином-8) изменения формы нейтрофила в цельной крови человека.
Реагенты, материал и оборудование
Стерильная дистиллированная вода, Вах1ег # ИКР117 10х раствор Се11Р1Х, ВЕСТОN ^IСКIN8ОN Вюкшепсек # 340181 1Ь-8, В&Э 8у51ет5 # 208-1Ь ДМСО, НуЬп-Мах, 8щта-А1бпс11 # Ό2650.
Физиологический раствор с фосфатным буфером Дульбекко 1х [+]СаС12, МдС12, дЬсо Ьу 1Ие 1есНпоЩек #14040.
Раствор альбумина бычьей сыворотки (30%), 8щта А1бпс11 # А9576-50 т1.
Хлорид аммония ΝΉ4Ο, 8щта А1бг1сН # А0171.
Бикарбонат калия КНСО3, 81дта А1бг1сН # Р9144.
К2 ЭДТК вакутейнеры, Вес!оп ОкИпкоп Уаси1ашег® #367525.
96-луночные пропиленовые планшеты с глубокими лунками, У4К # РОКУ219009.
96-луночные планшеты с У-образным дном с крышкой, Сойат # 3894.
96-луночные полипропиленовые планшеты, круглодонные, Отешет # 650261 (для высокопроизводительного пробоотборника СКАФ).
120 мкл предварительно стерилизованные фильтрующие наконечники Вю1Ш, ВюЫ1 #790101Р.
350 мкл предварительно стерилизованные наконечники ВюЫ1, ВюЫ1 #790350.
1200 мкл предварительно стерилизованные наконечники Вю1Ш, Вю1Ш # 791202.
Электронная 8-канальная пипетка ВюЫ1 е1200.
Электронная 8-канальная пипетка ВюЫ1 е120.
100-1000 пипетка ЕррепбогГ Кекеатсй Р1и§.
20-200 мкл пипетка ЕррепбогГ Кекеатсй Р1и§.
Поточный цитометр Вес!оп Оюкпъоп Вюкшепсек РАС8 Сап!о II с высокопроизводительным пробоотборником СКАФ.
1Ь-8 доводят до 2 мкМ исходных растворов в 0,1% альбумине бычьей сыворотки/ФРФБ и хранят при -80°С. На данный момент 1Ь-8 разбавляют в ФРФБ (физиологический раствор с фосфатным буфером) за 10 мин до использования. 1Ь-8 применяют в конечной концентрации 2 нМ и интервале концентрации от 0,003 до 200 нМ для кривой доза-эффект донора.
Аналитический фиксирующий раствор готовят свежий каждый день из 10х концентрированного раствора Се11Р1Х™, разбавленного 1:10 в стерильной дистиллированной воде, и затем 1:4 в ФРФБ. Аналитический фиксирующий раствор хранят на льду до использования.
10х лизисный буфер получают заранее растворением 20,75 г ΝΉ4Ο и 2,5 г КНСО3 в 250 мл стерильной Н2О. Этот 10х лизисный буфер фильтруют в стерильных условиях и хранят вплоть до двух не
- 222 032075 дель при 4°С. На данный момент 1х лизисный раствор готовят со стерильной дистиллированной водой Н2О и хранят на льду до использования.
Тестируемые соединения готовят в виде 10 мМ исходных растворов в 100% ДМСО и хранят при 4°С. Для использования в анализе 10 мМ исходные соединения оттаивают и хранят при КТ в защищенном от света месте. Разведения соединения получают свежими на текущий момент. Первую серию разведений в 100% ДМСО проводят сразу с утра. Как только кровь собрана и доставлена в лабораторию, проводят следующую серию разведений в ФРФБ (1:10 ФРФБ, 10% ДМСО). Это ограничивает контакт разведенного соединения с пластиком и обеспечивает соответствующее время экспозиции между анализами. Соединения добавляют в глубокие 96-луночные планшеты в 10х количестве от конечной желаемой концентрации (при добавлении конечной крови [ДМСО]=1%).
В табл. 3 показаны серии разведений соединения, применяемые в анализе изменения формы нейтрофилов в цельной крови человека.
Таблица 3
100% ДМСО развед. 1 серийное к 4 10% ДМСО 1 в 10 ФРФБ 1% ДМСО аналитический планшет П1жр1а лунки*
10000 мкМ 1000 мкМ 100 мкМ В2; СРП+1Ь-8
2500 250 25 ВЗ; СРБ+1В-8
625 62,5 6,25 В4; СРБ+1В-8
156,25 15,62 1,56 В5; СРБ+1В-8
39,0625 3,9 0,39 В6; СРВ+1В-8
9,765625 0,97 0,097 В7; СРВ+1В-8
2,441406 0,24 0,024 В8; СРБ+1В-8
0,610352 0,06 0,006 В9; СРБ+1В-8
100% ДМСО 10% ДМСО 1% ДМСО В10; +ΙΒ-8
100% ДМСО 10% ДМСО 1% ДМСО В11; ФРФБ
В день проведения анализа готовят аналитический фиксирующий буфер и 1х лизисные растворы и хранят на льду. Разведения соединений в 100% ДМСО готовят как описано выше. Цельную кровь человека собирают в К2 ЭДТК вакутейнеры. Как только кровь поступает в лабораторию, разведение соединения в ФРФБ проводят как описано выше и изображено в табл. 1.
мкл 10х конечную концентрацию соединения добавляют в соответствующие лунки глубокого 96-луночного планшета за исключением контрольных лунок, в которые 10 мкл 10% ДМСО добавляют вместо соединения, как показано для серии разведений в табл. 1. Внешние лунки глубокого аналитического планшета заполняют 1200 мкл стерильной дистиллированной Н2О для того, чтобы ограничить краевой эффект (ряды А1-Н1, А1-А12, А12-Н12).
Реакцию на дозу ΙΓ-8 определяют для каждого исследуемого донора крови для отслеживания реакции донора на П.-8. На этой стадии подготовки анализа для образцов для определения реакции на дозу ΙΙ.-810 мкл ФРФБ добавляют в указанные лунки. Кроме того, аналитическое окно без ДМСО также оценивают каждый день. Для таких образцов на этой стадии подготовки анализа 10 мкл ФРФБ добавляют вместо 10% ДМСО.
мкл цельной крови добавляют в соединение/10% ДМСО/ФРФБ и осторожно смешивают при добавлении. Крышки помещают на 96-луночные планшеты и образцы инкубируют в течение 15 мин при 37°С на водяной бане.
После предварительного инкубирования соединения 10х конечный ΙΙ.-8 добавляют в соответствующие лунки (10 мкл 20 нМ рабочего исходного ΙΙ.-8, конечная концентрация ΙΙ.-8 в крови=2 нМ) и 10 мкл ФРФБ добавляют к не стимулированному контролю. 10х конечный интервал доза-реакция ΙΙ.-8 также добавляют в обозначенные лунки (интервал конечной концентрации в аналитическом планшете от 200 нМ до 0,0005 нМ, 1:5 серийное разведение в ФРФБ). ΙΙ.-8 и ФРФБ добавляют в соответствующие лунки во все аналитические планшеты в той же последовательности, как и добавление крови в соединение. После добавления во все аналитические планшеты, образцы быстро смешивают для равномерного распределения ΙΙ.-8. Образцы инкубируют в течение 5 мин при 37°С на водяной бане. После инкубирования планшеты с образцами переносят на лед, где быстро добавляют 250 мкл охлажденного аналитического во все лунки.
Образцы инкубируют на льду в течение 7 мин (без перемешивания). После фиксации быстро добавляют 1,2 мл 1х лизисного раствора в каждую лунку. После добавления образцы перемешивают и инкубируют на льду в течение 30 мин для получения однородного лизиса красных клеток крови. После лизиса 200 мкл образца переносят в 96-луночный микропланшет на льду. Из образцов получают информацию с применением НТ8 в режиме высокой пропускной способности на Вес1оп Эккшзоп РАС8 Сап1о ΙΙ. Гранулоциты идентифицируют на основе характеристик дифференциального бокового светорассеяния (ДБС) и прямого светорассеяния (ПСР). Нейтрофилы отделяют от эозинофилов с применением фико
- 223 032075 эритринового канала, так как последний имеет высокую ауто-флуоресценцию.
Среднее значение ПСР для популяции нейтрофилов берут как меру изменения формы клеток (чем больше значение ПСР, тем больше степень изменения формы). Данные представляют как % изменения формы к исходной для 1Ь-8 кривой доза-реакция Пю^е и контроля аналитического окна, и представляют как % ингибирования изменения формы для образцов, обработанных соединением.
% изменения формы к исходной
Вычесть значения ПСР не стимулированного контроля из значений ПСР агониста, разделить результаты на не стимулированное значение ПСР и умножить на 100 с получением % изменения формы к исходной.
% ингибирования % ингибирования=(X-Υ)/Хx 100 (фиг. 2. для значений образца)
Х=1Ь-8 ПСР реакция минус ПСР не стимулированного контроля (базового). (120,984-86,163=34821=Х)
Υ=ΙΕ-8 ПСР реакция в образцах, обработанных соединением, минус ПСР не стимулированного контроля (базового). (89,841-86,163=3678=Υ) (34821-3678)/3482^ 100=89% ингибирование изменения формы.
Значения % ингибирования наносят на ось Υ к концентрации соединения по оси X с получением значений 1С50.
Анализ микросомального очищения (М)
Эксперименты проводят в 96-луночных стеклянных планшетах при 37°С на автоматизированной платформе Тесап ЕУО. Тестируемые соединения в концентрации 10 мМ в чистом ДМСО разводят 1:1000 в воде до 10 мкМ. Этот раствор (30 мкл) добавляют в 120 мкл микросомального белка печени крысы (1,25 мг/мл), суспендируют в фосфатном буфере (рН 7,4). Реакции инициируют добавлением 150 мкл раствора кофермента, содержащего 2 мМ ЫАОРН. В определенные моменты времени реакции (0, 5, 20 и 30 мин) берут аликвоты (50 мкл) и реакции заканчивают добавлением ацетонитрила (100 мкл), содержащего аналитические внутренние стандарты (1 мкМ альпренолола и 1,6 мкМ хлорзоксазона) и хранят при -20°С в течение по крайней мере 1 ч для полного осаждения белков. Образцы затем центрифугируют при 5000д при 4°С в течение 35 мин, и 20 мкл надосадочных жидкостей анализируют ЖХ-МС/МС для количественного анализа оставшегося тестируемого вещества. Процент оставшегося тестируемого соединения по отношению к инкубированию в нулевой момент времени применяют для оценки ίη νίίτο константы скорости элиминации (кт1с), которую применяют для расчета ίη νίίτο скорости метаболического очищения.
Данные биохимического анализа для примеров 1-143 представлены в следующей табл. 4.
- 224 032075
Таблица 4
Данные биохимического анализа
Анализ А Анализ В Анализ С Анализ ϋ Анализ Е Анализ Е Анализ С
Р13Кос ΡΙ3Κβ νΡ334 ΡΙ4Κβ ΡΙ3Κγ ΡΙ3Κ5 мМРК
Пример 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
(мкМ) (мкМ) (мкМ) (мкМ) (мкМ) (мкМ) (мкМ)
1 1,30 5,86 >9,1 >9,1 0,015 1,01
2 0,82 7,60 >9,1 >9,1 0,003 0,39 >9,1
3 0,60 5,88 >9,1 >9,1 0,046 0,14 >9,1
4 0,51 3,24 >9,1 3,70 0,026 0,30 6, 51
5 0,68 0,69 >10 6,70 0,012 1,00 >10
6 0,52 2,31 >9,4 7,12 0,039 0,95 9,01
7 0,06 0,99 0,39 1,95 0,006 0,07 0,92
8 0,04 1,52 0,41 1,96 <0,003 0,02 0,27
9а 0,12 0,54 >10 9,60 0,015 0,20 8,10
9Ь 0,21 1,20 >10 9,10 0,012 0,24 >10
10 0,04 0,89 0,21 1,89 0,013 0,06 1,88
11 0,14 2,62 >9,1 3,58 0,010 0,13 5,89
12 0,14 2,65 >9,1 >9,1 0,041 0,24 >9,1
13 0,20 1,09 >10 6, 50 0,034 0,33 >10
14 0,09 0,62 0,42 1,57 0,014 0,04 0,88
15 0,16 1,93 >9,1 5,68 0,018 0,15 >9,1
16 0,14 1,02 >10 6,40 0,009 0,25 5,30
17 0,22 0,90 >10 8,30 0,010 0,59 6, 10
18 0,29 2,80 >10 8,60 0,031 0,62 5,55
19 0,04 0,14 9,40 3,85 0,005 0,02 0,42
20а 0,03 1,06 >9,1 5,28 0,007 0,05 1,88
2 0Ь 0,05 0,88 0,40 4,98 0,011 0,05 3,31
21 0,04 0,15 1,40 1,50 0,006 0,08 0,69
22 0,76 5,71 >9,1 7,08 0,044 0,42 8,02
23 0,39 >9,10 >9,1 >9,1 0,010 0,09 6, 45
24 0,20 6, 06 >9,1 >9,1 0,007 0,06 7,91
25 0,62 3,15 >10 >10 0,079 1,03 0,21
26 0,31 6, 38 >9,1 5,47 0,003 0,07 >9,1
27 0,21 0,87 >10 6, 65 0,047 0,07 7,40
28 0,68 4,30 >9,1 8,90 0,026 0,56 >9,1
29 1,30 6,80 >9,1 5,20 0,009 0,91 >9,1
30 0,30 5,21 >9,1 7,89 0,024 0,05 6, 99
31 0,16 2,00 >9,55 4,40 0,027 0,12 3,80
32 0,66 1,46 >10 4,05 0,094 1,50 >10
33 0,21 0,38 >10 0,91 0,047 0,78 1,50
34 0,70 2,50 >10 3,80 0,074 2,90 2,50
35 0,63 1,90 >10 3,70 0,025 0,99 5,60
36 0,16 0,85 >10 8,00 0,017 0,11 0,25
- 225 032075
38 0,92 3,50 >9,1 4,20 0,025 0,14 8,40
39 0,79 3,95 >9,55 7,05 0,067 1,07 >9,55
40 0,76 1,40 >10 >10 0,036 0,84 3,80
41 0,11 0,25 7,70 9,40 0,010 0,02
42 0,03 0,66 4,65 3,50 0,007 0,03
43 0,05 0,20 0,90 1,40 0,006 0,22
43а 0,1 0,69 2,5 2,3 0,026 0,67
43Ь 0,23 1,5 5,5 4,8 0,042 2,2
44 0,06 0,24 2,30 1,60 0,005 0,15
45 0,06 0,53 1,10 1,60 0,014 0,23
45.1 0,05 0,20 1,90 3,00 0,011 0,08
45.2 0,04 0,37 6, 00 5,80 0,018 0,05
45.3 0,04 0,24 1,60 1,60 0,013 0,10
45.4 0,11 0,88 3,00 1,80 0,009 0,10
45.5 0,04 0,99 0,65 0,78 0,005 0,04
45.6а 0,07 0,29 1,5 4,1 0,009 0,11
45.6Ь 0,38 2,5 4,5 >10 0,042 1,1
45.7а 0,28 0,68 1,1 3,4 0,027 0,42
45.7Ь 0,16 0,31 1,1 1,3 0,010 0,16
45.8 0,09 0,59 2,00 3,30 0,130 0,32
45.9 0,03 0,32 9,40 4,90 0,039 0,10
45.10 0,02 0,34 3,90 1,90 0,010 0,15
45.11 0,04 0,29 1,60 1,20 0,005 0,13
45.12 0,05 0,39 2,60 1,40 0,015 0,10
46 0,22 0,82 >10 >10 0,026 0,45 >10
46.1 1,40 >10 >10 >10 0,210 2,60 >10
46.2 0,48 2,00 >10 6,20 0,054 0,73 9,70
47 0,33 6, 00 >10 8,70 0,049 0,53 >10
48 2,60 7,30 >10 >10 0,081 0,92 >10
49 0,62 5,30 >10 >10 0,049 1,70 >10
50 2,50 2,80 >10 >10 0,850 >10 >10
51 0,37 4,19 7,15 >9,1 0,042 0,49 >9,1
52а 0,17 1,10 >10 5,50 0,016 0,15 2,00
52Ь 0,23 2,10 >10 4,20 0,026 0,53 >10
53 1,70 7,00 >10 >10 0,690 3,70
54 0,19 0,77 >9,1 >9,1 0,017 0,11 4,81
55 0,04 0,12 0,64 3,74 0,026 0,03 0,62
56 0,29 1,75 3,52 7,27 0,019 0,08 2,38
57 0,32 6,48 >9,1 >9,1 0,057 0,58 >9,1
58 0,49 2,93 3,10 5,85 0,019 0,10 >9,1
- 226 032075
60 0,11 4,57 >9,1 3,63 0,040 0,22 8,35
61 5,47 >9,10 >9,1 >9,1 1,823 5,81 >9, 1
62 0,68 1,01 >9,1 3,68 0,056 0,21 >9, 1
63 0,33 3,93 >9,1 7,85 0,068 0,42 6,50
64 0,37 3,85 8,49 6, 61 0,046 0,25 >9, 1
65 0,44 4,03 >9,1 >9,1 0,022 0,24 >9, 1
66 0,19 >9,10 >9,1 7,94 0,006 0,08 5,98
67 0,09 0,86 1,80 7,40 0,003 0,16 2,20
68 0,64 2,55 >10 4,40 0,072 1,50 8,75
69а 0,39 3,50 >10 >10 0,038 0,53 9,20
69Ь 0,39 1,40 >10 >10 0,057 0,69 9,60
70а 0,11 0,75 >10 4,60 0,025 0,29 2,00
7 0Ь 0,84 2,50 >10 >10 0,004 1,10 5,90
71а 0,33 1,10 >10 2,80 0,013 1,00 >10
71Ь 0,76 1,90 >10 4,60 0,021 1,30 >10
72 0,58 2,67 >9,1 >9,1 0,034 0,39 >9, 1
73 0,35 1,83 >9,1 >9,1 0,015 0,39 >9, 1
74 0,19 0,83 >10 6,20 0,041 0,38 3,50
75 0,47 2,48 7,49 7,97 0,056 0,24 4,51
76 0,18 3,71 >9,1 4,47 0,064 0,48 4,19
77 0,23 4,20 >9,1 >9,1 0,034 0,30 5,47
78 0,24 2,20 >9,55 1,55 0,013 0,18 2,35
79 0,28 1,20 7,60 3,90 0,022 0,37 6,50
80 0,25 1,70 >10 4,55 0,077 0,40 >10
81 2,60 6, 30 >10 9,00 0,077 2,50 >10
82 0,18 5,50 >10 >10 0,041 0,54 >10
83 1,90 5,20 >10 4,30 0,085 0,70 >10
84 0,12 2,30 >10 7,05 0,042 0,21 >10
85 0,09 1,20 >10 >10 0,021 0,12 7,90
87 0,06 0,27 0,32 1,57 0,006 0,03 1,84
88 0,52 2,20 9,10 6, 10 0,014 1,10 9,10
89 0,42 1,30 3,40 7,00 0,018 0,84 >10
90 2,10 0,94 >10 >10 0,078 2,00 >10
91 2,35 2,55 >9,55 >9,55 0,270 2,10 >9,55
92 1,40 8,20 >9,1 >9,1 0,073 0,69 >9, 1
93 1,10 >9,10 >9,1 >9,1 0,081 0,33 >9, 1
94 1,70 >9,10 >9,1 >9,1 0,014 0,57 8,90
95 0,90 4,10 >9,55 >9,55 0,036 0,73 7,40
96 0,55 3,35 >9,55 >9,55 0,092 0,55 8,80
97 1,20 >10,00 >10 >10 0,061 1,70 >10
- 227 032075
98 1,70 1,40 >9,1 2,50 0,038 0,31 >9,1
99 0,74 1,65 2,95 2,70 0,014 0,14 4,95
100 0,50 5,30 7,20 5,75 0,003 0,68 >9,55
101 2,00 1,70 >10 2,40 0,210 3,00 >10
102 0,55 1,80 >10 5,90 0,150 0,90 2,90
103 0,39 1,88 >9,1 2,74 0,013 0,15 >9,1
105 0,12 0,16 9,40 2,60 0,014 0,01
106 0,10 0,75 >10 5,60 0,025 0,14
107 0,08 2,09 3,10 0,94 0,006 0,06 1,39
108 0,31 0,26 >10 0,64 0,038 0,33 >10
109 0,44 3,00 >10 8,60 0,028 0,69
110 0,09 0,52 >10 >10 0,010 0,32 >10
111 0,18 1,98 >9,1 1,96 0,018 0,06 >9,1
112 0,86 3,30 >10 3,15 0,019 0,50 6, 30
112.1 0,29 1,70 >10 1,80 0,033 0,21 6, 00
112.2 0,86 1,30 >10 5,40 0,104 1,20 >10
112.3 0,36 1,10 >10 1,20 0,26 1,36
112.4 0,08 0,56 >10 1,10 0,093 0,19 >10
112.5 0,12 2,25 >10 3,00 0,53 1,83
113 0,05 0,44 0,47 1,48 0,008 0,32 3,45
114 0,29 3,70 7,83 5,90 0,044 1,19 >9,1
115 0,32 2,35 8,99 5,64 0,039 0,48 8,64
116 1,20 >9,10 >9,1 8,10 0,028 0,30 >9,1
117 0,90 >10,00 >10 >10 0,036 >10
118 0,03 0,47 1,46 4,72 0,011 0,13 0,46
119 0,60 >9,10 >9,1 >9,1 0,118 0,71 4,31
119.1 0,61 >9,10 >9,1 6,20 1,003 2,30 4,91
119.2 0,45 >9,10 >9,1 >9,1 0,050 0,25 >9,1
119.3 0,09 7,49 >9,1 7,46 0,044 0,13 3,70
119.4 2,83 >9,10 >9,1 >9,1 3,117 5,70 >9,1
119.5 0,75 >9,10 >9,1 8,00 0,082 0,55 >9,1
119.6 0,82 >9,10 7,99 7,70 0,161 0,38 5,61
119.7 2,98 >9,10 >9,1 7,96 0,278 0,72 4,32
119.8 1,05 >9,10 >9,1 4,53 0,167 0,20 5,94
119.9 0,33 7,78 >9,1 0,69 0,178 0,90 >9,1
119.10 0,12 6, 47 >9,1 >9,1 0,030 0,10 6,40
119.11 0,45 >9,10 >9,1 >9,1 0,303 1,10 >9,1
119.13 0,58 >9,10 >9,1 4,14 0,098 0,45 >9,1
119.14 1,16 >9,10 >9,1 7,35 0,667 1,44 8,53
119.15 1,66 8,81 >9,1 4,86 0,162 0,96 >9,1
119.16 0,39 3,79 6,23 6, 61 0,022 0,19 >9,1
- 228 032075
119.17 1,45 >9,10 >9,1 1,56 0,362 2,54 >9,1
119.18 0,49 8,04 >9,1 8,19 0,248 0,58 >9,1
119.19 >9,10 >9,10 >9,1 >9,1 3,468 >9,1 >9,1
119.20 1,48 >9,10 >9,1 >9,1 0,508 2,08 4,82
119.21 1,73 >9,10 >9,1 3,83 0,401 2,18 >9,1
119.22 0,57 1,93 >9,1 2,19 0,157 0,53 2,34
119.23 1,34 >9,10 >9,1 0,94 0,525 2,04 7,60
119.24 1,09 >9,10 >9,1 3,40 0,761 1, 67 9,02
119.25 0,40 5,78 >9,1 4,05 0,031 0,29 8,74
119.26 0,25 3,90 >9,1 1,79 0,037 0, 04 5,87
119.27 0,17 4,97 >9,1 5,75 0,035 0, 12 4,78
119.28 0,23 7,38 >9,1 4,41 0,049 0, 19 6, 00
119.29 0,17 0,92 0,57 2,64 0,009 0, 07 0,59
119.30 0,17 1,50 >9,1 4,71 0,013 0, 11 2,88
119.31 0,16 7,85 >9,1 3,74 0,007 0, 11 2,23
119.32 0,26 3,22 >9,1 2,67 0,011 0,20 6, 04
119.33 0,16 0,69 >9,1 1,00 0,014 0,26 >9,1
119.34 0,18 3,51 >9,1 4,25 0,013 0,22 6, 59
119.35 0,08 0,94 >9,1 0,74 0,013 0, 07 3,90
119.36 0,22 4,41 >9,1 >9,1 0,034 0, 17 >9,1
119.37 0,18 3,00 >9,1 5,30 0,024 0, 04 >9,1
119.38 0,09 3,50 >9,1 6, 30 0,012 0, 03 4,60
119.39 0,10 2,80 >9,1 6, 50 0,006 0, 04 6, 90
119.40 0,15 3,50 >10 6,20 0,023 0, 18 >10
119.41 0,42 3,25 >10 6, 00 0,025 0, 03 >10
119.42 0,71 2,34 >9,1 0,88 0,069 0,36 >9,1
119.43 0,25 1,78 >9,1 >9,1 0,054 0, 10 3,37
119.44 0,12 1,37 >9,1 0,76 0,099 0, 04 3,99
119.45 0,15 3,60 >9,1 2,46 0,012 0, 10 8,69
119.46 0,25 >9,1 0,61 0,110 0, 07 6,70
120 0,02 1,00 1,30 2,50 0,004 0, 06
121 0,12 1,20 >10 0,51 0,092 0, 96 5,20
122 0,49 2,20 >10 1,90 0,085 1, 60 6, 60
123 2,90 5,50 >10 2,50 2,100 4,70 9,00
124 0,04 0,10 >10 0,42 0,022 0, 16 0,71
125 0,28 6, 00 >10 7,60 0,100 0, 13 >10
126 0,28 3,1 >10 >10 0,057 1
127 0,30 1,10 >10 4,40 0,024 0, 88 2,60
127.1 0,29 1,20 >10 1,50 0,011 0,56 1,10
127.2 0,32 1,00 >10 1,70 0,073 0, 85 9,40
127.3 0,38 3,20 >10 3,40 0,160 >10 >10
- 229 032075
127.4 2,55 6, 55 >9,55 4,20 0,260 2,50 >9,55
127.5 0,40 3,10 >10 >10 0,100 3,90 1,80
127.6 0,39 2,20 >10 >10 0,160 1,50 >10
127.7 0,26 1,30 >10 6, 30 0,040 1,10 1,50
127.8 6, 00 >10,00 >10 >10 1,000 >10 >10
127.9 2,30 >10,00 >10 >10 1,600 3,00 >10
127.10 1,70 9,20 >10 >10 0,320 5,50 >10
127.11 0,98 1,30 >10 >10 0,270 0,76 >10
127.12 3,50 1,50 >10 >10 0,091 0,57 >10
127.13 0,28 0,53 >10 3,80 0,026 1,10 6, 10
127.14 0,92 2,60 >10 8,45 0,069 0,90 9,00
127.16 0,33 0,81 >10 5,00 0,045 1,10 8,70
127.17 0,89 1,20 >10 7,40 0,038 1,10 >10
127.18 1,90 2,40 >10 >10 1,300 0,38 >10
127.19 0,26 1,30 >10 3,90 0,061 0,62 >10
127.20 0,97 5,10 >10 5,30 0,130 1,70 >10
127.21 0,36 1,90 >10 >10 0,098 1,20 3,00
127.22 0,27 0,97 >10 8,30 0,040 0,50 3,90
127.23 0,18 0,58 >10 2,90 0,023 0,36 9,10
127.24 0,20 0,79 >10 1,80 0,027 0,32 4,70
127,25 0,13 0,65 >10 4,40 0,031 0,34 3,30
127.26 0,57 2,00 >10 5,20 0,150 0,23 5,90
127.27 0,20 1,80 >10 8,70 0,026 0,79 9,60
127.28 0,45 5,10 >10 8,40 0,160 3,50 >10
127.29 0,24 1,80 >10 3,90 0,124 0,64 >10
127.30 1,90 5,30 >10 7,70 0,130 1,60 >10
127.31 0,19 1,55 >10 4,87 0,067 0,45 7,95
127.32 1,80 4,60 >10 >10 0,140 1,20 6,70
127.33 0,74 >10,00 >10 >10 0,170 8,70 >10
127.34 1,50 5,30 >10 3,00 0,180 3,20 >10
127.35 0,33 1,10 >10 6, 30 0,050 0,81 7,10
127.36 0,19 1,90 >10 5,30 0,024 0,79 7,60
127.37 0,65 1,40 >10 8,00 0,034 1,50 >10
127.38 0,54 3,50 >10 6,70 0,100 2,80 >10
127.39 1,40 2,30 >10 >10 0,100 2,10 9,30
127.40 0,77 1,50 >10 7,60 0,140 1,40 >10
127.41 1,70 3,50 >10 4,20 0,270 6, 60 >10
127.42 1,70 5,90 >10 7,10 0,800 >10 >10
127.43 0,56 1,70 >10 2,90 0,095 3,40 8,80
127.44 0,73 2,20 >10 6, 10 0,120 1,40 3,70
127.45 0,42 6,20 >9,1 3,40 0,060 1,50 >9,1
- 230 032075
127.46 1,30 >9,10 >9,1 6,90 0,073 0,72 >9,1
127.47 1,10 2,20 >10 6, 60 0,060 3,20 >10
127.48 1,20 6,20 >10 5,90 0,060 3,20
127.49 0,10 0,46 >10 4,00 0,013 0,32 7,00
127.50 0,84 1,40 >10 >10 0,032 2,10 5,60
127.51 0,60 1,90 >10 5,30 0,065 0,58 5,90
127.52 0,14 0,34 >10 3,10 0,009 0,33 3,60
127.53 0,43 1,40 >10 1,70 0,025 1,40 3,90
127.54 0,18 1,10 >10 2,60 0,032 1,10 1,80
127.56 0,42 1,20 >10 >10 0,073 1,40 7,40
127.57 1,40 0,73 >10 5,90 0,050 0,76 5,00
127.58 1,30 1,30 >10 >10 0,042 0,46 1,20
127.60 0,96 0,73 >10 3,30 0,140 2,40 >10
128 0,15 0,50 >10 6,80 0,014 0,10
128.1 1,00 3,00 >10 >10 0,25
128.2 0,27 2,90 >10 >10 0,049 0,45
128 . За 0,23 1,90 >10 >10 0,027 0,57
128 . ЗЬ 0,37 2,50 >10 4,60 0,055 0,54
128.4 0,10 1,70 >10 >10 0,045 0,50
128.5 2,30 9,60 >10 >10 0,370 2,20
128.6 0,19 7,70 >10 >10 0,190 0,30
128.7 0,22 1,90 >10 >10 0,079 0,69
128.8 0,59 1,80 >10 >10 0,021 0,10
129 0,13 7,30 >9,1 >9,1 0,024 0,55 >9,1
129.1 0,19 6, 30 >9,1 6,50 0,023 0,25 6,30
129.2 0,28 4,30 >9,1 7,00 0,022 1,20 6,10
129.3 0,49 7,10 >9,1 >9,1 0,016 0,34 >9,1
129.4 0,19 >9,10 >9,1 >9,1 0,069 0,43 5,00
129.5 0,27 >9,10 >9,1 5,00 0,038 0,57 6,50
129.6 0,74 >9,10 >9,1 >9,1 0,270 2,80 >9,1
129.7 0,90 >9,10 >9,1 >9,1 0,270 3,30 7,80
129.9 0,42 6, 90 >9,1 >9,1 0,045 0,94 >9,1
129.10 0,55 >9,10 >9,1 6,20 0,027 0,94 >9,1
129.11 0,64 >9,10 >9,1 >9,1 0,173 0,79 >9,1
129.12 1,20 >9,10 >9,1 >9,1 0,058 0,91 8,70
129.13 0,30 >9,10 >9,1 >9,1 0,028 0,26 >9,1
129.14 0,21 4,50 >9,1 >9,1 0,059 0,48 5,70
129.15 1,90 >9,10 >9,1 >9,1 0,240 2,10 >9,1
129.16 0,63 >9,10 >9,1 >9,1 0,066 2,00 >9,1
129.17 0,35 5,50 >9,1 >9,1 0,056 0,42 >9,1
129.18 0,69 8,11 >9,1 >9,1 0,064 0,40 >9,1
- 231 032075
129.19 0,33 5,11 >9,1 7,20 0,066 0,47 3,02
129.20 0,32 8,50 >9,1 >9,1 0,110 0,29 >9,1
129.21 2,90 >9,10 >9,1 >9,1 0,053 1,00 >9,1
129.22 1,50 >9,10 >9,1 >9,1 0,280 7,50 >9,1
129.23 2,80 3,30 >9,1 >9,1 0,380 1,90 >9,1
129.24 >9,10 >9,10 >9,1 >9,1 0,200 6, 60 >9,1
129.25 0,54 2,30 >9,1 >9,1 0,042 0,38 >9,1
129.26 1,60 1,70 >9,1 >9,1 0,590 1,60 >9,1
129.27 9,00 >9,10 >9,1 >9,1 0,760 2,10 >9,1
129.28 0,26 5,30 >9,1 >9,1 0,140 1,10 >9,1
129.29 0,69 5,40 >9,1 >9,1 0,140 1,20 6, 00
129.30 5,40 >9,10 >9,1 >9,1 0,041 1,20 >9,1
129.31 0,29 1,80 >9,1 6,70 0,120 0,80 >9,1
129.32 2,00 7,00 >9,1 >9,1 0,039 1,80 >9,1
129.33 2,30 >9,10 >9,1 >9,1 0,260 2,00 >9,1
129.34 0,70 >9,10 >9,1 >9,1 0,110 1,20 >9,1
129.35 2,10 >9,10 >9,1 >9,1 0,089 1,20 >9,1
129.36 1,30 6, 90 >9,1 >9,1 0,110 0,96 >9,1
129.37 1,30 >9,10 >9,1 8,30 0,540 2,80 >9,1
129.38 1,60 2,70 >9,1 >9,1 0,820 4,50 >9,1
129.39 0,73 7,50 >9,1 >9,1 0,110 0,91 >9,1
129.40 0,67 6,40 >9,1 >9,1 1,100 4,00 >9,1
129.41 1,60 4,00 >9,1 >9,1 0,320 2,30 >9,1
129.42 2,00 6, 60 >9,1 >9,1 0,150 1,70 >9,1
129.43 3,00 5,70 >9,1 >9,1 1,000 2,30 >9,1
130 0,15 2,83 >9,1 7,01 0,012 0,18 5,11
131 0,37 2,45 4,30 4,95 0,042 0,76 3,70
132 0,18 >9,10 >9,1 2,26 0,017 0,05 >9,1
133 1,02 7,80 >9,55 8,90 0,110 1,14 >9,55
134 0,40 4,33 >9,1 7,17 0,055 0,35 >9,1
135 0,18 5,22 >9,55 4,16 0,051 1,70 4,37
136 0,44 >9,10 >9,1 >9,1 0,012 0,13 >9,1
137 1,74 >9,10 >9,1 >9,1 0,058 0,33 0,95
138 2,70 >9,10 >9,1 8,54 0,004 0,86 >9,1
139 0,54 8,39 >9,1 >9,1 0,016 0,16 8,30
140 0,24 7,16 >9,1 >9,1 0,016 0,09 8,82
141 1,77 >9,10 >9,1 >9,1 0,054 0,34 >9,1
142 1,00 6, 00 >10 >10 0,270 1,00
143 0,2 >9,10 >9,1 >9,1 0,012 0,292 2,19
Соединение 3-(5-амино-6-(2-изопропоксипиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамид (ссылочный пример 119.12) не показывает активность в анализе Е.
Данные клеточного анализа и данные функционального анализа изменения формы в цельной крови для примеров 1-143 представлены в следующей таблице.
- 232 032075
Таблица 5
Клеточные данные в изоформа-специфических анализах (анализы Н, I, 1, К1, К2), данные изменения формы нейтрофилов в цельной крови (ШВ8С, анализ Ь) и данные собственного клиренса в микросомах печени крысы (КГМ, анализ М)
Анализ Н Анализ I Анализ σ Анализ К1 Анализ К2 Анали з Ь Анализ М
Р13Кос ΡΙ3Κβ ΡΙ3Κδ ΡΙ3Κγ ΡΙ3Κγ ИВЗС КЬМ С1 (вн.)
Пример 1С50 (мкМ) 1С50 (мкМ) 1С50 (мкМ) 1С50 (мкМ) 1С50 (мкМ) 1С50 (мкМ) (мкл.мин- Омг-1)
1 9,36 >10 7,42 0, 504 0,803 <3,4
2 3,18 >10 1,07 0, 147 0,687 25
3 1,04 8,33 1,17 0, 394 1,107
4 2,55 4,46 0,91 0, 038 0,675 27
5 >10 >10 3,45 0, 078 0,261 0,696 26
6 4,38 7,28 4,14 0,366 0,215 0,470 14
7 0,84 3,46 0,38 0, 029 0,188 48
8 0,75 6, 03 0,37 0, 021 0,169 50
9а >10 >10 3,53 0, 040 0,327 34
9Ь >10 >10 7,64 0,335 27
10 0,73 6,31 0,60 0, 025 0,045 44
11 2,57 6, 91 3,52 0, 057 0,157 78
12 4,70 >10 3,41 0, 117 0,200
13 >10 >10 1,57 0, 062 0,211 9
14 1,00 1,79 0,31 0, 008 0,044 39
15 1,93 2,01 1,45 0, 061 0,166 24
16 0,90 1,86 0,62 0, 043 0,154 47
17 2,80 8,25 1,92 0, 051 0,166 34
18 1,69 2,60 0,79 0, 145 0,207 0,568 29
19 0,09 0,28 0,07 0, 009 0,076 0,210 65
20а 0,72 1,43 0,42 0, 011 0,023 0,232 55
2 0Ь 0,66 1,73 0,61 0, 014 0,024 0,106 30
21 0,51 0,59 0,46 0, 018 0,090 0,244 109
22 6, 67 >10 4,69 0, 164 0,100 0,256 47
- 233 032075
23 3,01 6,46 1,01 0, 106 0,447
24 1,06 6,25 0,66 0, 053 0,561 43
25 2,19 1,70 1,39 0, 153 2,335 0,742 71
26 1,10 2,03 0,76 0, 054 0,683 223
27 >10 >10 1,02 0, 058 0,562 60
28 0,280 0,759 34
29 4,63 8,08 6, 61 0,206 0,314 0,956 62
30 3,81 1,65 0,48 0, 098 0,407 116
31 1,04 2,51 1,03 0, 040 0,917 37
32 0,387 0,668 28
33 1, 976 0,622 0,742 12
34 0, 137 0,805 52
35 >10 >10 >10 0,418 0,669 25
36 0, 051 0,478 710
37 7,91 1,89 5,92 1,548 33
38 3,02 2,11 2,36 3,375 89
39 0, 192 0,999 88
40 0, 040 92
41 >3 0,98 <0,003 0, 039 0,024 314
42 0,13 0,79 0,16 0, 014 0,018 160
43 1,39 >10 1,19 0, 015 55
43а 2,14* 4,56* 0,97* 0,068 0,992 63
43Ь 5,44* 2,95* 2,18* 0,180 45
44 7,04 >10 >10 0, 022 0,059 0,413 37
45 0,089 83
45.1 0,306 70
45.2 194
45.3 0,494 78
45.4 1,23* 2,13* 0,58* 502
45.5 147
45.6а 0,82* 1,56* 0,27* 228
45.6Ь 1,76* 1,2* 0,96* 237
45.7а 1,05* 2,20* 0,55* 151
45.7Ь 0,31* 1,32* 0,37* 0,001 135
45.8 0,317 67
45.9 0,35* 0,88* 0,28* 0,033 83
- 234 032075
45.10 0,030 0,662 32
45.11 0, 012 0,026 0,079 43
46 0, 145 0,331 0,730 24
46.1 16
46.2 0,597 49
47 3, 138 140
48 0,487 1,526 59
49 0,856 20
50 28
51 6, 17 6,60 3,95 0, 068 55
52а 0,806 60
52Ь 0, 060 0,337 0,550 43
53 >10 >10 >10 29
54 1, 69 7,41 2,03 0, 140 2,011 141
55 1, 04 2,67 1,24 0, 065 0,893 237
56 4,40 5,88 3,12 0, 129 0,211 24
57 >10 >10 >10 0, 329 1,269 17
58 8,58 6,13 2,46 0, 073 0,385 14
59 8,47 >10 6, 42 0,801
60 1,54 3,08 1,30 0, 093 24
61 8, 97 >10 8,18 0, 479 56
62 1,44 >10 0,97 0, 110 7,906 155
63 2,97 >10 3,25 0, 163 0,626 44
64 1,24 4,37 1,19 0, 189 0,543 61
65 1,45 >10 1,44 0, 155 0,802 87
66 0, 99 5,92 0,73 0, 109 311
67 1,33 2,93 0,92 0, 068 0,249 36
68 2,84 6,25 3,11 0, 430 1,791 54
69а 3,30 4,42 2,66 0, 103 1,153 49
69Ь 6, 68 8,47 5,18 0, 135 1,952 227
70а 1, 92 2,64 1,41 0,185 58
7 0Ь 4, 06 >10 3,98 0,687 57
71а 3, 06 8,02 3,65 0,763 18
71Ь 6, 91 >10 5,86 1,622 26
72 3, 11 6,03 2,64 0,293 0,723 41
73 2,26 5,38 2,00 0, 177 0,803 64
- 235 032075
74 >10 >10 6,86 30
75 >10 >10 7,80 0, 091 0,830 13
76 3,37 >10 3,52 0,203 48
77 0, 134 0,881 45
78 0, 066 152
79 0, 053 3,212 63
80 0, 098 2,879 106
81 >10 >10 4,04 29
82 0,86 2,98 0,61 0,825 25
83 >10 8,75 4,05 45
84 0,45 >3 0,44 1,010 64
85 0, 041 0,065 0,497 73
86 62
87 1,34 3,40 1,22 0, 018 0,447 61
88 0, 152 1,641 27
89 3,699 46
90 19
91 46
92 1,158 64
94 2,98 8,96 2,09 3,781
95 0,262 1,589 53
96 0,276 62
97 2,146 60
98 0,200 4,172 31
99 0, 059 3,518 74
100 0, 074 95
101 39
102 4,53 5,30 1,33 0,211 75
103 2,25 3,25 0,85 0, 028 0,515 29
106 >10 >10 >10 2,276 29
107 0,79 1,29 0,96 119
108 5,78 3,01 0,41 0, 058 0,163 5,563 112
109 2,61 >10 1,90 0,935 <3,4
110 0,48 1,73 0,69 254
111 1,47 >10 0,46 0, 020 0,637 74
112 0,79 1,14 0,31 0, 095 0,172 0,586 62
- 236 032075
112.1 0,80 1,47 0,38 0, 091 0,063 1,326
112.2 >10 >10 0, 137
112.3 0,40 >3 0,86 123
112.4 0,07 >3 0,40
112.5 0,13 >10 0,83 0, 036 0,970 40
113 1,08 3,57 1,08 0,055 0,024 0,143 39
114 5,43 >3 7,99 0, 177 0,499 17
115 2,98 3,53 2,21 0, 117 1,109 38
116 2,31 4,75 2,12 0, 197 35
117 >10 >3 >10 0, 577 0,945 0,727 85
118 0,63 1,59 0,53 0, 102 0,898 264
119 1,64 3, 06 1,76
119.1 2,69 3, 81 2,82
119.2 2,74 4, 07 2,38 0, 333 2,184 101
119.3 0,49 1,77 0,87 3, 641 81
119.4 >10 >10 >10
119.5 4,90 1, 66 4,85 0,575 118
119.6 4,07 1,72 2,88 0, 860
119.7 6, 97 4, 05 5,93
119.8 3,85 4,64 5,20
119.9 1,92 3, 07 4,23
119.10 0,63 2,59 1,04 0, 172
119.11 2,54 3,56 6, 94
119.12 >10 >10 >10
119.13 2,45 6, 75 3,26 >10 98
119.14 3,14 4,39 4,96
119.15 1,48 7,33 1,65
119.16 4,01 3,70 2,35 0, 081 1,244 21
119.17 2,81 6, 17 7,16
119.18 1,32 4,48 1,30
119.19 >10 >10 >10
119.20 4,95 4,86 7,03
119.21 5,16 >10 7,48
119.22 4,41 >10 >10
119.23 1,97 8,49 3,53
119.24 2,60 9,22 3,17
- 237 032075
119.25 1,28 4,10 1,20 0, 065 2,092
119.26 0,70 1,80 0,51 380
119.27 0,47 9,24 0,91 0, 128 0,726 87
119.28 1,25 >10 2,15 0, 179 0,963 44
119.29 0,58 9,08 0,47 0, 057 1,464 68
119.30 0,69 6, 99 0,63 0, 042 1,145 77
119.31 2,83 6, 99 1,24 0, 046 1,664 79
119.32 1,68 6, 04 0,79 191
119.33 5,51 >10 3,59 0, 730 0,601 50
119.34 2,27 7,42 1,27 0, 041 1,491 49
119.35 0, 018 1,017 78
119.36 1,283 48
119.37 3,02 2,87 1,14 0, 093 0,581 78
119.38 6, 57 2,21 1,03 0, 034 167
119.39 5,04 2,15 1,61 0, 034 203
119.40 1,10 8,16 1,04 0,047 56
119.41 >10 3,20 6,49 0, 091 73
119.42 0,200 2,238 41
119.43 0, 060 136
119.44 0, 042 7,078 137
119.45 0, 085 188
119.46 0, 081 9,194 122
120 95
121 31
122 2,28 1,49 1,19 0, 151 0,296 0,988 26
123 >10 >10 3,63 85,09 0 62
124 0,25 0,81 0,29 0, 038 79
125 2,81 3,47 0,23 0, 051 0,879 8
126 4* >10* 4,24* 20
127 1,496
127.1 1,57 >10 1,14 2,471 907
127.2 0,084 3,565 375
127.3 0, 371
127.4 1, 968 1,491 85
127.5 0,419 9,682 72
- 238 032075
127.7 3,986
127.12 6, 56 1,54 0,80 0, 359 1,210 233
127.13 0,210
127.14 0, 645 1,793
127.16 1,725
127.17 0, 392
127.19 0, 153 1,618
127.20 0, 850
127.21 0, 320
127.22 0, 156
127.23 0, 082
127.24 0, 168
127.25 0, 066 493
127.26 1,790
127.27 0,242 1,087
127.28 0,290
127.29 0, 131
127.31 0,85 1,71 1,05 0, 103 192
127.32 1, 878
127.33 560
127.34 641
127.35 >10 2,05 >10 0, 085 0,391 0,847 202
127.36 0, 126 3,849
127.37 0,230 0,408 6,223
127.39 6,285
127.40 0,411
127.43 0,275 1,640
127.45 6, 11 9,05 7,27 0,323 2,645 26
127.46 0,708 0,546 3,766 34
127.47 0,266 2,185
127.48 2,489
127.50 0, 179 1,074
127.52 0,97 6,28 1,10 0, 052 1,772 >924
127.53 0,65 >3 6, 51 0, 172 0,198 1,865 129
127.54 >100
127.56 9,61 3,56 6, 00 0,715 25
- 239 032075
127.57 >10 >10 >10 13,76 5 21
127.58 23,59 0
127.60 20
128 >10 9,91 >10 0,209 0,201 2,987 22
128.1 >10 >10 1,64 0,332
128.2 1,91 >10 1,57 0, 09 27
128.За 5,15 >10 2,10 0,241
128.ЗЬ 4,97 >10 3,82
128.4 1,51 1,55 0,78 0, 104 0,280 134
128.5 >10 >10 >10
128.6 >10 >10 >10 0,193 2,175 20
128.7 >10 >10 >10 0,249 0,117 0,826 20
128.8 >3 >10 >10 0, 751 0,421 1,671 <3,4
129 28
129.1 0,721
129.2 2,418 130
129.3 7,60 >10 6, 84 139
129.5 1,167 79
129.9 20
129.10 1,607 78
129.11 2,73 8,38 3,33 5,682 105
129.12 4,29 >10 4,97 0,804 1,602 99
129.13 3,00 >10 5,86 0, 144 170
129.14 2,96 5,15 2,96 347
129.17 2,50 3,72 1,94 0, 354 104
129.18 4,92 >10 5,63 0, 528 97
129.19 8,58 >10 4,37 0,251 3,428 21
129.21 8,953
129.24 755
129.25 2,954
129.28 159
129.29 >924
129.30 >10 >10 >10 >10
129.32 >10 >10 >10 0,800 1,996 18
- 240 032075
129.35 >10
129.36 >10 >3 6,208 >10 15
129.39 >924
129.41 13
130 1,63 4,52 1,20 0, 065 0,735 62
131 0, 493 42
132 1,28 6, 05 0,35 0, 074 0,449
133 19
134 >10 >10 >10
135 7,84 8,75 9,39 0, 063 0,359 30
136 0,99 >10 1,12 0, 124 1,298
137 >10 >10 8,58 28
138 8,80 >10 3,55 0,260 4,830 31
139 1,08 7,96 0,97 0, 102 0,565
140 1,11 6, 38 0,84 0, 051 0,817 82
141 4,70 8,75 5,31 0, 947
142 >10 >10 >10 34
143 2,35 6, 03 1,01 0, 129 1,701 134
Для анализов Н, I и I данные без звездочки означают данные, полученные в версиях Н1, 11, Л (формат 8игейге) этих анализов, и данные, отмеченные звездочкой означают данные, полученные в версиях Н2, 12, 12 (формат ГФВР) этих анализов. Два близкородственных форматов анализа применяют для получения клеточной активности Р13К гамма-изоформы (1С50). Таблица включает все данные из обоих форматов (анализы К1 и К2).
В следующих табл. 6 и 7 представлены данные, подученные в указанных выше анализах, для соединений известного уровня техники.
- 241 032075
Таблица 6
Соединение Анализ А Анализ В Анализ С Анализ ϋ Анализ Ε Анализ Ε Анализ С
ΡΙ3Κα ΡΙ3Κβ νΡ334 ΡΙ4Κβ ΡΙ3Κγ ΡΙ3Κδ мМРК
N ААЧ Т Г Л
ДД Д\ДчА
и о
оДо (8 0,25 1,24 >9,4 3,16 0,064 0,63 -
N ς/
N ЛН2 Т г!)
лА ΑΑνΝ
о 0
0=3=0 . ) 1,50 2,00 >10 3,00 2,00 >10 -
л (] N
N ΑΑυΧ ί Г н '
γνΑ
<Д 0 1 (’ϋ) 0-3-0 0,02 1,70 0,70 0,30 1,200 2,30
.МН <г
Ν νη2 ί γ
/лД < -А ν
ДД 0=3=0 ΙιΙ Да 0,49 1,27 1,76 3,76 0,060 1,50 -
,МН 0% 1 (ϊν)
Л. ,νη;
А 1 Дк Л Ν Л
□АД о=а=с Д γ ν 0,07 0,14 0,91 0,16 0,247 1,97 -
.. но5·' Μ
ΖΝΛ Ж ί Υ
ГА γ Д. л μ А
0==3=0 [1 ΑΑ 0,09 0,19 2,38 0,61 0,034 0,45 -
ΝΗ (Г 1 (νί)
- 242 032075
0=5=0 Υ (νϋ) 0' 1 - - - - - - -
N ХИ? <··.' Р 0=5=0 («ι) 0, 06 0,46 - 0,29 - - -
о 1' 0 м 0,78 0,63 6, 31 4,01 0,007 0,08 -
х/Р- сг γ 0=5=0 (X) А Р 0,46 0,70 1, 80 0,54 0,110 1,40 2,50
.Ν ΝΗ3 γν α Αγ о 0=8=0 (Х|) (X г 1,20 1,60 1, 60 0,41 0,031 1,00 4,50
Υ^ΝΗ2 г ΪΓ ..... г/г 0=8=0 (χϋ) ΝΗ но^ 3,32 1,19 0,753 6,01 -
Соединения (ΐ)-(ΐχ) описаны в АО 09/115517, соединения (х) и (χΐ) описаны у Ьеайу е1 а1., .1. Меб. Сйет., 2012, 55 (11), р. 5467-5482 и соединение (χΐΐ) описано в АО 09/013348.
Таблица 7
Соединение Анализ Η Анализ I Анализ σ Анализ ΚΙ Анализ Κ2 Анализ Ь Анализ М
ΡΙ3Κα ΡΙ3Κβ ΡΙ3Κδ ΡΙ3Κγ ΡΙ3Κγ ПВЗС КЬМ (вн. ) С1
(1) 0,97 3,77 1,10 0,526 0,838 2,39 47
(ϋ) >10* >10* 0,58* - 9,48 11,32 233
(ίίί) - - - - - - 219
(ίν) 0,93 3,96 1,36 0,128 0,264 2,06 465
(V) 0,18 0,23 0,15 - - 0,71 173
(νί) 0,17 0,26 0,17 0,182 - - 630
(νϋ) - - - - - - 283
(νίϋ) - - - - - - -
(ίχ) 0,85 2,29 1,26 0,020 - 2,34 267
(χ) >10 >10 2,87 0,352 - >100 -
(χί) 5,41 5,58 5,87 0,539 - >44 271
(χϋ) >10* 4,37* 5,55* - - 15,12 9
- 243 032075
Нумерация (ΐ)-(χΐΐ) относится к соединениям в табл. 6. Для анализов Н, Ι и I, не отмеченные звездочкой данные означают данные, полученные в версиях Н1, Ι1, Л этих анализов, и данные, отмеченные звездочкой означают данные, полученные в версиях Н2, Ι2, 12 этих анализов.

Claims (13)

    ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
  1. (1 -(3 -(5-амино-6-(3 -этил-1,2,4-оксадиазол-5 -ил)ииразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)иииеридин4-ил)метанола;
    цис-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    транс-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    (Я)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-М-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    1 -(3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)-3 -метилазетидин-
    (1 -(3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)азетидин-3 ил)метанола;
    (1-(3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)азетидин-3ил)метанола;
    1.2.4- оксадиазол-3-ил, изоксазол-5-ил, изоксазол-3-ил, изоксазол-4-ил, пиррол-3-ил, тиен-2-ил, тиен-3-ил и фуран-3-ил, каждый из которых не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из С1-4алкила, С1-4галоалкила, С1-4гидроксиалкила, -(С0-3алкил)-С3-7циклоалкила, -(С=О)-3-7-членного гетероциклила, -(С0-3алкил)-МК'К, -(С=О)^К'К, -(С0-3алкил)фенила и -(С0-3алкил)пиридила; и
    К' и К независимо выбирают из Н и С1-4алкила;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
    1.3.4- оксадиазол-2-ил,
    1.2.4- оксадиазол-5-ил,
    1.2.3- триазол-4-ил, имидазол-1-ил,
    1,2,4-триазол-1-ил,
    1,3,4 -тиадиазо л-2 -ил, изотиазол-5-ил, пиразол-4-ил, пиразол-3-ил, пиразол-1-ил, пирид-4-ил, пирид-3-ил, пирид-2-ил,
    (1) С1-4алкила, который не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, С1-4галоалкила, С1-4алкокси, С1-4алкила, оксо, С^ -(С0-3алкил)^К3аК3Ь, С3-7циклоалкила и 3-7-членного гетероциклила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и где С3-7циклоалкил или 3-7-членный гетероциклил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, С^алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    (и) С1-4алкокси, который не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гндроксналкнла, галогена, С1-4галоалкила, С1-4алкокси, С1-4алкила, оксо, С^ -(С0-3алкил)^К3аК3Ь, С3-7циклоалкила и 3-7-членного гетероциклила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и где С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гндроксналкнла, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    (Ш) -С3-7циклоалкила или -О-С3-7циклоалкила, где С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гндроксналкнла, галогена, С1-4алкила, С1-4алкоксщ С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    (ίν) -(С0-3алкнл)-С3-7цнклоалкнла или -О-(С0-3алкнл)-С3-7цнклоалкнла, где С3-7циклоалкил вместе со вторым С3-7циклоалкилом или 3-7-членным гетероциклилом, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, образует спиробицикл и где С3-7циклоалкил или 3-7-членный гетероциклил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гндроксналкнла, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    (ν) -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила или -О-(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, и где указанный 3-7-членный гетероциклил содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гндроксналкнла, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    (νί) -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила или -(О-С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, и где указанный 3-7-членный гетероциклил содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и вместе со вторым 3-7-членным гетероциклилом, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, или С3-7циклоалкилом образует спиробицикл, и где 3-7-членный гетероциклил или С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь; и (νιι) Н;
    К4 выбирают из Н и С1-4алкила; или
    К3 и К4 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членный гетероциклил, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, где 3-7-членный гетероциклил необязательно вместе со вторым 3-7-членным гетероциклилом, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, или С3-7циклоалкилом образует спиробицикл, и где 3-7-членный гетероциклил и С3-7циклоалкил не замещены или замещены от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)^К3аК3Ь;
    К3а и К3Ь независимо выбирают из Н, С1-4алкила и С1-4галоалкила;
    Υ является 5-6-членным гетероарилом, где указанный гетероарил содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из С1-4алкила, С1-4галоалкила, С1-4алкокси-С1-4алкила, С1-4гидроксиалкила, С1-4алкокси,
    - 244 032075
    С1-4галоалкокси, галогена, Сщгидроксиалкила, -(С0-3алкил)-НК'К, -(С0-3алкил)-С3-7циклоалкила и -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, -(С=О)-3-7-членного гетероциклила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, -(С=О)-НК'К, -(С0-3алкил)фенила и -(С0-3алкил)-5-6-членного гетероарила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы; и
    К' и К независимо выбирают из Н и Сц4алкила;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
    где К1 независимо выбирают из Н, галогена, Сц4алкила, Сц4алкокси, Сщгалоалкила, Сц4галоалкокси, С1-4гидроксиалкила и С3-7циклоалкила;
    К2 выбирают из Н, галогена, СР3 и метила;
    К3 выбирают из:
    (ί) С1-4алкила, который не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, Сщгалоалкила, Сц4алкокси, Сц4алкила, оксо, СН -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь, С3-7циклоалкила и 3-7-членного гетероциклила, где С3-7циклоалкил или 3-7членный гетероциклил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, Сц4алкила, Сц4алкокси, Сщгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)НК3аК3Ь;
    (ΐΐ) С1-4алкокси, который не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, Смгалоалкила, Сц4алкокси, Сц4алкила, оксо, СН -(С0-3алкил)-НК?аК3Ь, С3-7циклоалкила и 3-7-членного гетероциклила, где С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, Смгидроксиалкила, галогена, С1-4алкила, Сц4алкокси, Сщгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь;
    (ιϋ) -С3-7циклоалкила или -О-С3-7циклоалкила, где С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, Сщгидроксиалкила, галогена, Сц4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь;
    (ΐν) -(С0-3алкил)-С3-7циклоалкила или -О-(С0-3алкил)-С3-7циклоалкила, где С3-7циклоалкил вместе со вторым С3-7циклоалкилом или 3-7-членным гетероциклилом образует спиробицикл и где С3-7циклоалкил или 3-7-членный гетероциклил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, Сц4алкила, Сц4алкокси, Смгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь;
    (ν) -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила или -О-(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, где указанный 3-7-членный гетероциклил содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы, и не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, С1-4гидроксиалкила, галогена, Сц4алкила, Сц4алкокси, Сщгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь;
    (νΐ) -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила или -(О-С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, где указанный 3-7-членный гетероциклил вместе со вторым 3-7-членным гетероциклилом или С3-7циклоалкилом образует спиробицикл и где 3-7-членный гетероциклил или С3-7циклоалкил не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, Сщгидроксиалкила, галогена, Сщалкила, Сщалкокси, Сщгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь; и (νΐΐ) Н;
    К4 выбирают из Н и Сц4алкила; или
    К3 и К4 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членный гетероциклил, где 3-7-членный гетероциклил необязательно вместе со вторым 3-7-членным гетероциклилом или С3-7циклоалкилом образует спиробицикл и где 3-7-членный гетероциклил и С3-7циклоалкил не замещены или замещены от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из гидрокси, Сщгидроксиалкила, галогена, С1-4алкила, Сц4алкокси, Смгалоалкила, оксо и -(С0-3алкил)-НК3аК3Ь;
    К3а и К3Ь независимо выбирают из Н, Сц4алкила и Сц4галоалкила;
    Υ выбирают из группы, включающей тиазолил, тиадиазолил, изотиазолил, пиразолил,
    - 245 032075 пиридил, пиримидинил, триазолил, имидазолил, оксадиазолил, изоксазолил, оксазолил, пирролил, тиенил и фуранил;
    каждый из которых не замещен или замещен от 1 до 3 заместителями, независимо выбранными из С1-4алкила, С1-4галоалкила, С1-4алкокси-С1-4алкила, С1-4гидроксиалкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкокси, галогена, С1-4гидроксиалкила, -(С0-3алкил)-МК'К, -(С0-3алкил)-С3-7циклоалкила и -(С0-3алкил)-3-7-членного гетероциклила, -(С=О)-3-7-членного гетероциклила, -(С=О)-МК'К, -(С0-3алкил)фенила и -(С0-3алкил)-5-6членного гетероарила, который содержит 1-3 гетероатома, выбранных из кислорода, азота и серы; и
    К' и К независимо выбирают из Н и С1-4алкила;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
    1. Соединение формулы (Ι) где Е выбирают из N и СКЕ;
    К1, К2 и КЕ независимо выбирают из Н, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, С1-4галоалкокси, С1-4гидроксиалкила и С3-7циклоалкила;
    К3 выбирают из:
  2. 2- (3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонамидо)ацетамида;
    2-амина;
    2- (3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метилфенилсульфонил)-2азаспиро[3.3]гептан-6-ола;
    №(2-аминоэтил)-3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-ил-пиразин-2-ил)-4-метилбензолсульфонамида;
  3. 3-(5-амино-6-(3-циклоироиил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    или его фармацевтически приемлемая соль.
    3-(5-амино-6-(1-(2-(диметиламино)этил)-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида и
    3-(5-амино-6-(3-пропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-М-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-М-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(5-этил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил)-М-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(азетидин-3-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-этил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-М-((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3- (5-амино-6-(2-метилииридин-4-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(2-оксоиииеридин-4ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-бензил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(оксетан-3илметил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-М-((1г,4г)-4-аминоциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-М-(((18,3К)-3-(аминометил)циклогексил)метил)4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-М-((1К,2Я)-2-аминоциклопентил)-4метилбензолсульфонамида;
    (Я)-5-(5-(3-аминопирролидин-1-илсульфонил)-2-метилфенил)-3 -(2-метилииридин-4-ил)ииразин-2амина;
    3-(5-амино-6-(2-метилииридин-4-ил)ииразин-2-ил)-N-((18,28)-2-аминоциклоиентил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(2(метиламино)этил)бензолсульфонамида; 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-амииоэтил)-4-метилбеизолсульфоиамида; (К)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(пирролндии-3илметил)бензолсульфонамида; (8)-3-(5-амиио-6-(2-метилпирндии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(пирролидии-3илметил)бензолсульфонамида;
    - 261 032075
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-((3-гидроксиоксетаи-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(( 1 -метилпирролидии-3 ил)метил)бензолсульфонамида;
    3- (5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(2-метил-2- морфолинопропил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(2морфолиноэтил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-(диэтиламиио)пропил)-4метилбензолсульфонамида; 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-(диметиламиио)-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамида; (К)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-((1-этилпирролидии-2-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида; 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-(диметиламиио)этил)-4метилбензолсульфонамида; 3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(2-(пирролидии-1ил)этил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(1-метилпиперидии-4ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(1-изоπропилпиперидии-4-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(4-гидрокси-4-метилциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофураи-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофураи-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидро-2Н-пираи-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-метокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидро-2Н-пираи-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(4,4,4-трифтор-3-гидрокси-3метилбутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилηиридии-4-ил)ηиразии-2-ил)-N-(3-метоксипроηил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофураи-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5 -амино -6-(2 -метилпиридинД -ил)пиразин-2 -ил)-4 -метил-Ν-(тетрагидро -2Н-пиран-4 ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(1-гидрокси-2-метилпропаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида; (8)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№((1-гидроксициклобутил)метил)-4
    - 260 032075 метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№((1-гидроксициклогексил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(5-гидроксипентил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3,3-дифторциклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(4-(гидроксиметил)циклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(морфолин-2илметил)бензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((4-метилморфолин-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    (К)-3 -(5-амино-6-( 1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(морфолин-3 илметил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((2-метилтетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№((3 -(гидроксиметил)оксетан-3 ил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((3К,4К)-4-гидроксипирролидин-3-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№циклопентил-4-метилбензолсульфонамида; (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(пирролидин-3илметил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№циклобутил-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№циклопропил-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((1-(гидроксиметил)циклогексил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(2-оксотетрагидротиофен-3ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((4-(гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-4ил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((1-(гидроксиметил)циклобутил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№((3-гидроксиоксетан-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(1-циано-2-гидроксиэтил)-4метилбензолсульфонамида;
    3- ол;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(3-метилбутан-2ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2,2-дифторпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(1-гидроксипропан-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил^иразинД-ил^Ы-^ 1 -(гидроксиметил)циклопропил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-(1-гидроксициклогексил)этил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил^иразинД-ил^Ы-^й 1 -гидроксициклопентил)этил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил^иразинД-ил^Ы-^ 1 -гидроксициклопентил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(2-метил-2морфолинопропил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(3,3,3трифторпропил)бензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(2-оксотетрагидрофуран-3 ил)бензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(3 -фторпропил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-фторэтил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(( 1 -(гидроксиметил)циклопентил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(4,4,4-Ίрифтор-3-гидрокси-3метилбутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидро-2Н-ииран-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(тетрагидрофуран-3ил)бензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(( 1 -метилпирролидин-3 ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидро-2Н-ииран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-((1-гидроксициклобутил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Н-((1-гидроксициклогексил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(( 1 -этилпирролидин-2-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидроксиироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Н-(3-метоксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Н-(5-гидроксипентил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3,3-днфторцнклобутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-N-(4-(гндрокснметнл)цнклогекснл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-4-метнл-N-(2,2,2трнфторэтнл)бензолсульфонамнда;
    3-(5-амнно-6-(2-метнлоксазол-5-нл)пнразнн-2-нл)-N-(2-гндроксн-2-метнлπропнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1,3-днметнл-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(2-гндроксн-2-метнлпропоксн)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-N-(2-гндроксн-2метилпропил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(2-метнлтназол-5-нл)пнразнн-2-нл)-4-метнл-N-((3-метнлоксетан-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(5-цнклопропнлтнофен-2-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(тнофен-2-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(5 -метнлтнофен-2-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(4-метнлтнофен-2-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-пнразол-3-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -(2-морфолнноэтнл)-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-
    3-(5-амнно-6-(2-метнлоксазол-5-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1-(пнрнднн-4-нлметнл)-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1-(пнрнднн-3 -нлметнл)-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1-(пнрнднн-2-нлметнл)-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1,3-днметнл-1Η-пнразол-5-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(5-(гндрокснметнл)тнофен-2-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -этнл-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -нзобутнл-1Η-пнразол-4-нл)пнразнн-2-нл)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амнно-6-(1-нзоηроηнл-1Η-ηнразол-4-нл)ηнразнн-2-нл)-N-(3-гндроксн-3-метнлбутнл)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5 -амино-6-(2 -метилтиазол-4 -ил)пиразин-2 -ил) -N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4 - 257 032075 метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(пиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -изопентил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-пропил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-(тетрагидро-2Н-пиран-4-илокси)пиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5 -амино-6-(6 -(пиперидин-1 -ил)пиридин-3 -ил)пиразин-2-ил) -Ν-(3 -гидрокси-3 -метилбутил) -4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-морфолинопиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(пиримидин-5 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,5-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-фторпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(6-(пирролидин-1 -ил)пиридин-3 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(фуран-3 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-метокси-2-метилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-этоксипиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(2-изопропоксипиридин-3 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3 -фторпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-фторпиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(6-хлор-4-метилпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(5 -хлор-2-фторпиридин-3 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(5 -метилпиридин-3 -ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5 -амино-6-(2 -хлорпиридин-3 -ил)пиразин-2 -ил) -Ν-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4 метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(пиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метоксипиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метоксипиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(4-метоксипиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-фторпиридин-3-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -метил-3 -(трифторметил)-1Н-пиразол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(3 -гидрокси-3 метилбутил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-((диметиламино)метил)-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Х(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(тетрагидрофуран-3илокси)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Хизобутокси-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Хизопропокси-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Х(2-(диметиламино)этокси)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Хтретбутокси-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Хэтокси-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(4-метил-1Н-пиразол-1-ил)пиразин-2-ил)-Х((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метокситиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(3 -циклопропил-1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-
    3-(5-амино-6-(тиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3- (5-амино-6-(1Н-пиразол-1-ил)пиразин-2-ил)-Х((1г,4г)-4-гидроксициклогексил)-4- метилбензолсульфонамида; (Я)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-Х(пирролидин-2илметил)бензолсульфонамида;
    3 -(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-5-(5-(3 -метокси-3 -метилазетидин-1-илсульфонил)-2метилфенил)пиразин-2-амина;
    3-(5 -амино-6-(3 -циклопропилизоксазол-5 -ил)пиразин-2 -ил) -Ν-(((1δ,3δ)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Х(1-(гидроксиметил)циклопропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-изопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(((18,38)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-
    3-(5-амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(((18,38)-3гидроксициклобутил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-2,2диметилпропил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(5-циклопропил-1,2,4-оксадиазол-3-ил)пиразин-2-ил)-Х(2-гидрокси-2-метилпропил)-
    3-(5-амино-6-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил)-Ы-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4- 255 032075 метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразии-2-ил)-N-((18,48)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-(2,2,2-трифторэтил)-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2метилпропил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1-этил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-этил-2Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1-метил-1Н-1,2,3-триазол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(4-метилтиазол-2-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразии-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1-метил-1Н-пиразол-5-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-((18,48)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(( 18,48)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(6-гидроксиспиро[3.3]гептаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(((18,38)-3-гидроксициклобутил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-((18,38)-3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-((1^,3^)-3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(6-гидроксиспиро[3.3]гептаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(6-гидроксиспиро[3.3]гептаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-((18,48)-4-гидрокси-4-метилциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-((1^,4^)-4-гидрокси-4-метилциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-4-метил-N-(тетрагидро-2Н-пираи-4ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(6-гидроксиспиро[3.3]гептаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(3-изопропил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-(3 -метил-1Н- 1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(1Н-пиразол-1-ил)пиразии-2-ил)-N-(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амиио-6-(1Н-имидазол-1 -илДиразин^-илУ^Д -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амиио-6-(2-фторпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-((1^,4^)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(ииримидин-5-ил)ииразин-2-ил)-N-((1^,4^)-4-гидроксициклогексил)-4- 254 032075 метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-метил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-((1^,4^)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(3-гидроксиироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(4-метил-1Н-имидазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-((1^,4^)-4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(4,4-дифторциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-метил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(4,4-дифторциклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-метил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(4,4,4-трифтор-3гидроксибутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2,4-диметил-1Н-имидазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3,5-диметил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3,5-диметил-1Н-ииразол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(3,4-диметил-1Н-ииразол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1-метил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2,4-диметилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,5-диметил-1Н-ииразол-4-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((4-метилморфолин-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-((3-гидроксиоксетан-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-((4-гидрокситеΊрагидро-2Н-ииран-4-ил)метил)-
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-N-((4-(гидроксиметил)тетрагидро-2Н-ииран-4ил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(тетрагидрофуран-3ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(2,2,2трифторэтил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидро-2Н-ииран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(тетрагидро-2Н-ииран-4ил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-М-((тетрагидро-2Н-ииран-4ил)метил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-М-(оксетан-3илметил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Н-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Н-((3-(гидроксиметил)оксетан-3-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Н-(3-гидроксициклобутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2,5-диметилтиазол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    (Я)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№((1-этилпирролидин-2-ил)метил)-4метилбензолсульфонамида;
    (Я)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№((тетрагидрофуран-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    - 253 032075
    3-(5-амино-6-(фуран-3-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-хлор-№(3-гидрокси-3метилбутил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-4-хлор-№(2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-ил-пиразин-2-ил)-№(3,3-диметил-2-оксо-бутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1 -ил-пиразин-2-ил)-№(3 -гидроксиметилоксетан-3 -илметил)-4метилбензолсульфонамид;
    3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-ил-пиразин-2-ил)-№(2,2-дифторэтил)-4-метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-ил-пиразин-2-ил)-№(4-гидрокситетрагидропиран-4-илметил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1-ил-пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропокси)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(5-морфолин-4-илметилтиофен-3-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1 -ил-пиразин-2-ил)-4-метил-№(3 -метилоксетан-3 илметил)бензолсульфонамида;
    3 -(5-амино-6-[1,2,4]триазол-1 -ил-пиразин-2-ил)-№( 1 -гидроксициклопропилметил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-№((К)-1-этилпирролидин-2-илметил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3 -циклопропил[ 1,2,4]триазол-1-ил)пиразин-2-ил] -N-(3 -гидрокси-3 -метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-метил[1,2,4]триазол-1-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-циклопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-изопропил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5 -амино -6 -пиридин-3 -ил-пиразин-2 -ил) -N-(4 -гидрокс ициклогекс ил) -4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(2-циклопропилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидроксициклобутилметил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(2,5-диметил-2Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(2-метил-2Н-[1,2,3]триазол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-4-метил-№(3-метилоксетан-3илметил)бензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-4-метил-№[(К)-1-(тетрагидрофуран-3ил)метил]бензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(пиридин-4-ил)пиразин-2-ил)-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-Щ3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    - 252 032075
    3-[5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил]-№(6-гидроксиспиро[3.3]гепт-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидрокси-2,2-диметилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-№(2-гидрокси-2-метилпропил)-4метилбензолсульфонамида;
    3 -[5-амино-6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4 -ил)пиразин-2 -ил] -4 -метил-Ν-(3 -метилоксетан-3 илметил)бензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-метилизоксазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(3-метил[1,2,4]оксадиазол-5-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3-[5-амино-6-(5-метил-[1,3,4]оксадиазол-2-ил)пиразин-2-ил]-№(4-гидроксициклогексил)-4метилбензолсульфонамида;
    3. Соединение по п.1 или 2, где Υ выбирают из группы, включающей оксазол-2-ил, оксазол-5-ил, оксазол-4-ил, тиазол-5-ил, тиазол-4-ил,
  4. 4- ((3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-4- метилфенилсульфонамидо)метил)тетрагидро-2Н-пиран-4-карбоксамида;
    4- метилбензолсульфонамида;
    4-метилбензолсульфонамида;
    4-метилбензолсульфонамида;
    4-метилбензолсульфонамида;
    4-метилбензолсульфонамида;
    4-метилбензолсульфонамида;
    4. Соединение по любому из пп.1-3, где Υ выбирают из группы, включающей
    - 246 032075
    - 247 032075 или его фармацевтически приемлемая соль.
  5. 5-(5-(4-аминоиииеридин-1-илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(2-метилииридин-4-ил)ииразин-2-амина;
    5-(5-(2,6-диазасииро[3.3]геитан-2-илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(2-метилииридин-4-ил)ииразин-2амина;
    5-(5-(4-фторпиперидин-1-илсульфонил)-2-метилфенил)-3-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-амина;
    5-(5-(4,4-дифторпиперидин-1 -илсульфонил)-2-метилфенил)-3 -(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2амина;
    5-(2-метнл-5-(3,3,4,4-тетрафторпирролнднн-1-нлсульфоннл)феннл)-3-(1Η-1,2,4-трназол-1
    - 258 032075 ил)пиразин-2-амина;
    5-(5-(3 -фторазетнднн-1-нлсульфоннл)-2-метнлфеннл)-3 -(1Н-1,2,4-триазол-1 -нл)пнразнн-2-амнна;
    5-(5-(3,3-днфторазетнднн-1-нлсульфоннл)-2-метнлфеннл)-3 -(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2амина;
    5-(5-(3,3-днфторпирролнднн-1-нлсульфоннл)-2-метнлфеннл)-3-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2амина;
    5-(5-(3 -фторпирролидин-1 -нлсульфоннл)-2-метнлфеннл)-3 -(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-амина;
    5-(5-(3,3-днфторпнпернднн-1-нлсульфоннл)-2-метнлфеннл)-3-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2амина;
    5-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-2-хлор-N-(2-гндроксн-2-метнлпропнл)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-2-фтор-N-(2-гндроксн-2-метнлпропнл)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амнно-6-(1Η-1,2,4-трназол-1-нл)пнразнн-2-нл)-N-(2-гндроксн-2-метнлπропнл)-2,4диметилбензолсульфонамида;
    5-(2-метил-5-(3-(трифторметил)пиперазин-1-илсульфонил)фенил)-3 -(2-метилтиазол-5-ил)пиразин- 256 032075
    5-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Х(3-гидрокси-3-метилбутил)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амино-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Х(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-2-фтор-Х(3-гидроксипропил)-4метилбензолсульфонамида;
    5-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(2-гидрокси-2-метилироиил)-6метилпиридин-3-сульфонамида;
    5. Соединение по любому из пп.1-4, где К3 выбирают из
    - 248 032075
    - 249 032075 или К3 и К4 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют кольцо, выбранное из или его фармацевтически приемлемая соль.
  6. 6. Соединение по п. 1 формулы (I)
    - 250 032075 где Е выбирают из Ν и СКЕ;
    К1, К2 и КЕ независимо выбирают из Н, галогена, С1-4алкила, С1-4алкокси, С1-4галоалкила, С1-4галоалкокси, С1-4гидроксиалкила и Сз-7циклоалкила;
    Υ выбирают из группы, включающей
    К4 является Н и К3 выбирают из группы, включающей
    - 251 032075 или К3 и К4 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 3-7-членный гетероциклил, выбранный из группы, включающей или его фармацевтически приемлемая соль.
  7. 7. Соединение по п.1, выбранное из
  8. 8. Фармацевтическая композиция для лечения расстройства или заболевания, опосредованного активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы, содержащая терапевтически эффективное количество соединения или соли по любому из пп.1-7 и один или более фармацевтически приемлемых носителей.
    (8)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(тетрагидрофуран-3ил)бензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофуран-2ил)метил)бензолсульфонамида;
    (Я)-3-(5-амино-6-(2-метилтиазол-5-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-М-(тетрагидрофуран-3ил)бензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(1-гидроксибутаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амиио-6-(2-метилпиридии-4-ил)пиразии-2-ил)-N-(1-гидроксибутаи-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(морфолин-3илметил)бензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(1,3-диметил-1Н-пиразол-4-ил)пиразин-2-ил)-№((1-этилпирролидин-2-ил)метил)-
    (8)-3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пиразин-2-ил)-4-метил-№(пирролидин-3 илметил)бензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-(1-гидроксиироиан-2-ил)-4метилбензолсульфонамида;
    - 259 032075
    (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)пиразин-2-ил)-Ы-((5,5-диметилтетрагидрофуран-2ил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-Ίриазол-1-ил)ииразин-2-ил)-N-((5,5-диметилтетрагидрофуран-2ил)метил)-4-метилбензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((теΊрагидрофуран-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-((тетрагидрофуран-3ил)метил)бензолсульфонамида;
    (8)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(3,3,3-Ίрифтор-2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамида;
    (8)-3 -(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(теΊрагидрофуран-3 ил)бензолсульфонамида;
    (К)-3-(5-амино-6-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ииразин-2-ил)-4-метил-N-(3,3,3-трифтор-2-гидрокси-2метилпропил)бензолсульфонамида;
  9. 9. Применение соединения или соли по любому из пп.1-7 в лечении расстройства или заболевания, опосредованного активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы.
  10. 10. Применение соединения или соли по любому из пп.1-7 в лечении респираторных заболеваний, аллергий, ревматоидного артрита, остеоартрита, ревматических расстройств, псориаза, язвенного колита, болезни Крона, септического шока, рака, атеросклероза, отторжения аллотрансплантата после трансплантации, диабета, инсульта, ожирения и рестеноза.
    - 262 032075
  11. 11. Применение соединения или соли по любому из пп.1-7 в производстве лекарственного средства для лечения расстройства или заболевания, опосредованного активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназ.
  12. 12. Способ лечения расстройства или заболевания, опосредованного активацией гамма-изоформы ФИ-3-киназы, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таковом, терапевтически эффективного количества соединения или соли по любому из пп.1-7.
  13. 13. Способ лечения респираторных заболеваний, аллергий, ревматоидного артрита, остеоартрита, ревматических расстройств, псориаза, язвенного колита, болезни Крона, септического шока, рака, атеросклероза, отторжения аллотрансплантата после трансплантации, диабета, инсульта, ожирения и рестеноза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таковом, терапевтически эффективного количества соединения или соли по любому из пп.1-7.
EA201692143A 2014-04-24 2014-04-24 Производные аминопиразина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы EA032075B1 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB2014/060988 WO2015162459A1 (en) 2014-04-24 2014-04-24 Amino pyrazine derivatives as phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201692143A1 EA201692143A1 (ru) 2017-03-31
EA032075B1 true EA032075B1 (ru) 2019-04-30

Family

ID=50819760

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201692143A EA032075B1 (ru) 2014-04-24 2014-04-24 Производные аминопиразина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы

Country Status (11)

Country Link
US (2) US10004732B2 (ru)
EP (1) EP3134397A1 (ru)
JP (1) JP6433509B2 (ru)
KR (1) KR20160141855A (ru)
CN (1) CN106458979B (ru)
AU (2) AU2014391608A1 (ru)
BR (1) BR112016024533A8 (ru)
CA (1) CA2945212A1 (ru)
EA (1) EA032075B1 (ru)
MX (1) MX2016013812A (ru)
WO (1) WO2015162459A1 (ru)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014149819A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Kalyra Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic analgesic compounds
WO2015089170A1 (en) 2013-12-12 2015-06-18 Kalyra Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic alkyl compounds and synthesis
CN106232567B (zh) 2014-03-07 2021-11-02 里科瑞尔姆Ip控股有限责任公司 螺桨烷衍生物及合成
PL3134395T3 (pl) 2014-04-24 2018-07-31 Novartis Ag Pochodne pirazyny jako inhibitory 3-kinazy fosfatydyloinozytolu
PT3134396T (pt) 2014-04-24 2019-12-16 Novartis Ag Derivados de amino piridina como inibidores da fosfatidilinositol 3-quinase
US10308609B2 (en) 2014-09-17 2019-06-04 Zeno Royalties & Milestones, LLC Bicyclic compounds
US20190321443A1 (en) * 2016-02-16 2019-10-24 President And Fellows Of Harvard College Modulators of MS4A activity
JP6893520B2 (ja) 2016-03-10 2021-06-23 アストラゼネカ・アクチエボラーグＡｓｔｒａｚｅｎｅｃａ Ａｋｔｉｅｂｏｌａｇ ホスファチジルイノシトール３−キナーゼガンマの新規の阻害剤
US20190060257A1 (en) * 2016-03-16 2019-02-28 Zeno Royalties & Milestones, LLC Analgesic compounds
JP7157769B2 (ja) 2017-05-15 2022-10-20 リキュリウム アイピー ホールディングス リミテッド ライアビリティー カンパニー 鎮痛剤化合物
US11306079B2 (en) 2017-12-21 2022-04-19 Incyte Corporation 3-(5-amino-pyrazin-2-yl)-benzenesulfonamide derivatives and related compounds as PI3K-gamma kinase inhibitors
PT3762368T (pt) * 2018-03-08 2022-05-06 Incyte Corp Compostos de aminopirazina diol como inibidores de pi3k-y
KR20210150491A (ko) 2019-04-10 2021-12-10 난징 젱시앙 파마슈티칼스 컴퍼니 리미티드 포스파티딜이노시톨 3-키나제 저해제
CN112409337A (zh) * 2020-12-21 2021-02-26 李寒 一种取代的吡嗪衍生物及其用途
CN112341437A (zh) * 2020-12-21 2021-02-09 李寒 一种取代的吡嗪衍生物及其应用
CN114994215A (zh) * 2022-08-03 2022-09-02 北京华大吉比爱生物技术有限公司 氯唑沙宗的应用、检测酶抑制剂类抗生素药物浓度的方法、试剂盒及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009013348A2 (en) * 2007-07-26 2009-01-29 Novartis Ag Pyrimidine derivatives useful for the treatment of inflammatory or allergic conditions
WO2010071837A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazine derivatives useful as inhibitors of atr kinase

Family Cites Families (139)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1219606A (en) 1968-07-15 1971-01-20 Rech S Et D Applic Scient Soge Quinuclidinol derivatives and preparation thereof
IT1016489B (it) 1974-03-18 1977-05-30 Isf Spa Inalatore
GB8923590D0 (en) 1989-10-19 1989-12-06 Pfizer Ltd Antimuscarinic bronchodilators
PT100441A (pt) 1991-05-02 1993-09-30 Smithkline Beecham Corp Pirrolidinonas, seu processo de preparacao, composicoes farmaceuticas que as contem e uso
JPH0525045A (ja) 1991-07-18 1993-02-02 Tanabe Seiyaku Co Ltd 経皮吸収製剤
WO1993018007A1 (en) 1992-03-13 1993-09-16 Tokyo Tanabe Company Limited Novel carbostyril derivative
US5605923A (en) 1992-04-02 1997-02-25 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful for treating inflammatory diseases and inhibiting production of tumor necrosis factor
WO1993019750A1 (en) 1992-04-02 1993-10-14 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful for treating allergic or inflammatory diseases
US5552438A (en) 1992-04-02 1996-09-03 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful for treating allergic and inflammatory diseases
US6596260B1 (en) 1993-08-27 2003-07-22 Novartis Corporation Aerosol container and a method for storage and administration of a predetermined amount of a pharmaceutically active aerosol
ATE193455T1 (de) 1995-12-07 2000-06-15 Jago Pharma Ag Inhalator zur mehrfachen dosisweisen abgabe eines pharmakologischen trockenpulvers
HU221033B1 (hu) 1996-02-21 2002-07-29 Schering Corp. Poradagoló készülék
GB9622386D0 (en) 1996-10-28 1997-01-08 Sandoz Ltd Organic compounds
US6166037A (en) 1997-08-28 2000-12-26 Merck & Co., Inc. Pyrrolidine and piperidine modulators of chemokine receptor activity
AU9281298A (en) 1997-10-01 1999-04-23 Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. Benzodioxole derivatives
US6362371B1 (en) 1998-06-08 2002-03-26 Advanced Medicine, Inc. β2- adrenergic receptor agonists
BR9815931A (pt) 1998-06-30 2001-02-20 Dow Chemical Co Polióis poliméricos, um processo para sua produção, e espuma de poliuretanoobtida
DE19834047A1 (de) 1998-07-29 2000-02-03 Bayer Ag Substituierte Pyrazolderivate
DE19834044A1 (de) 1998-07-29 2000-02-03 Bayer Ag Neue substituierte Pyrazolderivate
GB9913083D0 (en) 1999-06-04 1999-08-04 Novartis Ag Organic compounds
HUP0203528A3 (en) 1999-05-04 2003-11-28 Schering Corp Piperidine derivatives useful as ccr5 antagonists, pharmaceutical compositions containing them and their use
KR100439358B1 (ko) 1999-05-04 2004-07-07 쉐링 코포레이션 Ｃｃｒ5 길항제로서 유용한 피페라진 유도체
US6683115B2 (en) 1999-06-02 2004-01-27 Theravance, Inc. β2-adrenergic receptor agonists
ES2165768B1 (es) 1999-07-14 2003-04-01 Almirall Prodesfarma Sa Nuevos derivados de quinuclidina y composiciones farmaceuticas que los contienen.
EA006685B1 (ru) 1999-08-21 2006-02-24 Алтана Фарма Аг Синергетическая композиция
DE19943636A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Neuartige Dicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943639A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Dicarbonsäurederivate mit neuartigen pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943635A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943634A1 (de) 1999-09-13 2001-04-12 Bayer Ag Neuartige Dicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
OA11558A (en) 1999-12-08 2004-06-03 Advanced Medicine Inc Beta 2-adrenergic receptor agonists.
HUP0300832A2 (hu) 2000-04-27 2003-08-28 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Új, lassú hatású bétamimetikumok, eljárás előállításukra és alkalmazásuk és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
ES2213703T5 (es) 2000-06-27 2011-11-02 Laboratorios S.A.L.V.A.T., S.A. Carbamatos derivados de arilalquilaminas.
GB0015876D0 (en) 2000-06-28 2000-08-23 Novartis Ag Organic compounds
DE10038639A1 (de) 2000-07-28 2002-02-21 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
WO2002012265A1 (en) 2000-08-05 2002-02-14 Glaxo Group Limited 6.ALPHA., 9.ALPHA.-DIFLUORO-17.ALPHA.-`(2-FURANYLCARBOXYL) OXY&excl;-11.BETA.-HYDROXY-16.ALPHA.-METHYL-3-OXO-ANDROST-1,4,-DIENE-17-CARBOTHIOIC ACID S-FLUOROMETHYL ESTER AS AN ANTI-INFLAMMATORY AGENT
DE60140201D1 (en) 2000-11-07 2009-11-26 Novartis Ag Indolylmaleimidderivative als proteinkinase-c-inhibitoren
GB0028383D0 (en) 2000-11-21 2001-01-03 Novartis Ag Organic compounds
AR031176A1 (es) 2000-11-22 2003-09-10 Bayer Ag Nuevos derivados de pirazolpiridina sustituidos con piridina
EP1345937B1 (en) 2000-12-22 2005-09-28 Almirall Prodesfarma AG Quinuclidine carbamate derivatives and their use as m3 antagonists
ES2266291T3 (es) 2000-12-28 2007-03-01 Almirall Prodesfarma Ag Nuevos derivados de quinuclidina y composiciones medicinales que los contienen.
GB0103630D0 (en) 2001-02-14 2001-03-28 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
DE10110749A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Substituierte Aminodicarbonsäurederivate
DE10110750A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
US7144908B2 (en) 2001-03-08 2006-12-05 Glaxo Group Limited Agonists of beta-adrenoceptors
ATE381537T1 (de) 2001-03-22 2008-01-15 Glaxo Group Ltd Formanilid-derivative als beta2-adrenorezeptor- agonisten
SI1383786T1 (sl) 2001-04-30 2009-02-28 Glaxo Group Ltd Protivnetni 17.beta-karbotioatestrski derivati androstana s ciklično estrsko skupino na položaju 17.alfa
ES2307751T3 (es) 2001-06-12 2008-12-01 Glaxo Group Limited Nuevos esteres heterociclicos centi-inflamatorios 17 alfa de derivados 17 beta de carbotioato de androstano.
EP2327765B1 (en) 2001-06-21 2015-04-01 BASF Enzymes LLC Nitrilases
PL393155A1 (pl) 2001-09-14 2011-03-28 Glaxo Group Limited Pochodne fenetanoloaminy do leczenia chorób układu oddechowego
US7361668B2 (en) 2001-10-17 2008-04-22 Ucb, S.A. Quinuclidine derivatives processes for preparing them and their uses as m2 and/or m3 muscarinic receptor inhibitors
GB0125259D0 (en) 2001-10-20 2001-12-12 Glaxo Group Ltd Novel compounds
AR037517A1 (es) 2001-11-05 2004-11-17 Novartis Ag Derivados de naftiridinas, un proceso para su preparacion, composicion farmaceutica y el uso de los mismos para la preparacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria
TWI249515B (en) 2001-11-13 2006-02-21 Theravance Inc Aryl aniline beta2 adrenergic receptor agonists
US6653323B2 (en) 2001-11-13 2003-11-25 Theravance, Inc. Aryl aniline β2 adrenergic receptor agonists
AU2002356759A1 (en) 2001-12-01 2003-06-17 Glaxo Group Limited 17.alpha. -cyclic esters of 16-methylpregnan-3,20-dione as anti-inflammatory agents
CN1832948B (zh) 2001-12-20 2011-06-15 基耶西药品股份公司 1-烷基-1-氮*双环[2.2.2]辛烷氨基甲酸酯衍生物及其用作蕈毒碱受体拮抗剂的用途
WO2003072592A1 (en) 2002-01-15 2003-09-04 Glaxo Group Limited 17.alpha-cycloalkyl/cycloylkenyl esters of alkyl-or haloalkyl-androst-4-en-3-on-11.beta.,17.alpha.-diol 17.beta.-carboxylates as anti-inflammatory agents
WO2003062259A2 (en) 2002-01-21 2003-07-31 Glaxo Group Limited Non-aromatic 17.alpha.-esters of androstane-17.beta.-carboxylate esters as anti-inflammatory agents
GB0202216D0 (en) 2002-01-31 2002-03-20 Glaxo Group Ltd Novel compounds
GB0204719D0 (en) 2002-02-28 2002-04-17 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
CA2478799C (en) 2002-03-12 2009-12-29 Merck & Co., Inc. Di-aryl substituted tetrazole modulators of metabotropic glutamate receptor-5
ES2298508T3 (es) 2002-03-26 2008-05-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Mimeticos de glucocorticoides, metodos para prepararlos, composiciones farmaceuticas y sus usos.
WO2003082787A1 (en) 2002-03-26 2003-10-09 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
PE20040079A1 (es) 2002-04-03 2004-04-19 Novartis Ag Derivados de indolilmaleimida
DE60335869D1 (de) 2002-04-11 2011-03-10 Merck Sharp & Dohme 1h-benzo(f)indazol-5-yl-derivate als selektive glucocorticoid-rezeptor-modulatoren
ES2206021B1 (es) 2002-04-16 2005-08-01 Almirall Prodesfarma, S.A. Nuevos derivados de pirrolidinio.
ES2298511T3 (es) 2002-04-25 2008-05-16 Glaxo Group Limited Derivados de fenetanolamina.
CA2484209C (en) 2002-05-03 2013-06-11 Exelixis, Inc. Protein kinase modulators and methods of use
DE10220570A1 (de) 2002-05-08 2003-11-20 Bayer Ag Carbamat-substituierte Pyrazolopyridine
EP1507754A1 (en) 2002-05-28 2005-02-23 Theravance, Inc. Alkoxy aryl beta-2 adrenergic receptor agonists
ES2201907B1 (es) 2002-05-29 2005-06-01 Almirall Prodesfarma, S.A. Nuevos derivados de indolilpiperidina como potentes agentes antihistaminicos y antialergicos.
US7186864B2 (en) 2002-05-29 2007-03-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
DE10224888A1 (de) 2002-06-05 2003-12-24 Merck Patent Gmbh Pyridazinderivate
US7074806B2 (en) 2002-06-06 2006-07-11 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
DE10225574A1 (de) 2002-06-10 2003-12-18 Merck Patent Gmbh Aryloxime
DE10227269A1 (de) 2002-06-19 2004-01-08 Merck Patent Gmbh Thiazolderivate
DE60312520T2 (de) 2002-06-25 2007-11-22 Merck Frosst Canada Ltd., Kirkland 8-(biaryl)chinolin-pde4-inhibitoren
WO2004005258A1 (en) 2002-07-02 2004-01-15 Merck Frosst Canada & Co. Di-aryl-substituted-ethane pyridone pde4 inhibitors
ES2204295B1 (es) 2002-07-02 2005-08-01 Almirall Prodesfarma, S.A. Nuevos derivados de quinuclidina-amida.
PT1521733E (pt) 2002-07-08 2014-10-29 Pfizer Prod Inc Moduladores do recetor de glucocorticoides
GB0217225D0 (en) 2002-07-25 2002-09-04 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
AR040962A1 (es) 2002-08-09 2005-04-27 Novartis Ag Compuestos derivados de tiazol 1,3-2-ona, composicion farmaceutica y proceso de preparacion del compuesto
JP4555684B2 (ja) 2002-08-10 2010-10-06 ニコメッド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｐｄｅ４阻害剤としての、ピロリジンジオンにより置換されたピペリジン−フタラゾン
AU2003255376A1 (en) 2002-08-10 2004-03-11 Altana Pharma Ag Piperidine-derivatives as pde4 inhibitors
CA2494643A1 (en) 2002-08-10 2004-03-04 Altana Pharma Ag Piperidine-n-oxide-derivatives
US20060167001A1 (en) 2002-08-10 2006-07-27 Sterk Jan G Pyridazinone-derivatives as pde4 inhibitors
PL373598A1 (en) 2002-08-17 2005-09-05 Altana Pharma Ag Novel benzonaphthyridines
US20060116518A1 (en) 2002-08-17 2006-06-01 Altana Pharma Ag Novel phenanthridines
EP1532113B1 (en) 2002-08-21 2008-08-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Substituted hihydroquinolines as glucocorticoid mimetics, methods of making them, pharmaceutical compositions, and uses thereof
SE0202483D0 (sv) 2002-08-21 2002-08-21 Astrazeneca Ab Chemical compounds
EP1534675B1 (en) 2002-08-23 2009-02-25 Ranbaxy Laboratories, Ltd. Fluoro and sulphonylamino containing 3,6-disubstituted azabicyclo¬3.1.0 hexane derivatives as muscarinic receptor antagonists
KR20050036982A (ko) 2002-08-29 2005-04-20 베링거 인겔하임 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 염증, 알러지 및 증식성 질환의 치료에 글루코코르티코이드모사체로 사용하기 위한 3-(설폰아미도에틸)-인돌 유도체
ES2281658T3 (es) 2002-08-29 2007-10-01 Nycomed Gmbh 3-hidroxi-6-fenilfenantridinas como inhibidores de pde-4.
WO2004019944A1 (en) 2002-08-29 2004-03-11 Altana Pharma Ag 2-hydroxy-6-phenylphenanthridines as pde-4 inhibitors
GB0220730D0 (en) 2002-09-06 2002-10-16 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
CN1688577A (zh) 2002-09-18 2005-10-26 小野药品工业株式会社 三氮杂螺[5.5]十一烷衍生物及以它为活性成分的药物
JP2006096662A (ja) 2002-09-18 2006-04-13 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd 新規６−置換ウラシル誘導体及びアレルギー性疾患の治療剤
JP2004107299A (ja) 2002-09-20 2004-04-08 Japan Energy Corp 新規１−置換ウラシル誘導体及びアレルギー性疾患の治療剤
WO2004026248A2 (en) 2002-09-20 2004-04-01 Merck & Co., Inc. Octahydro-2-h-naphtho[1,2-f] indole-4-carboxamide derivatives as selective glucocorticoid receptor modulators
DE10246374A1 (de) 2002-10-04 2004-04-15 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Betamimetika mit verlängerter Wirkungsdauer, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
EP1440966A1 (en) 2003-01-10 2004-07-28 Pfizer Limited Indole derivatives useful for the treatment of diseases
KR20050047552A (ko) 2002-10-11 2005-05-20 화이자 인코포레이티드 베타-2 작용제로서의 인돌 유도체
US20060205790A1 (en) 2002-10-22 2006-09-14 Coe Diane M Medicinal arylethanolamine compounds
EP1554262B1 (en) 2002-10-23 2007-12-05 Glenmark Pharmaceuticals Limited Novel tricyclic compounds useful for the treatment of inflammatory and allergic disorders: process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
GB0225030D0 (en) 2002-10-28 2002-12-04 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
PL377122A1 (pl) 2002-10-28 2006-01-23 Glaxo Group Limited Pochodne fenetanoloaminy do leczenia chorób układu oddechowego
GB0225287D0 (en) 2002-10-30 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
GB0225535D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
GB0225540D0 (en) 2002-11-01 2002-12-11 Glaxo Group Ltd Medicinal compounds
DE10253220A1 (de) 2002-11-15 2004-05-27 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Dihydroxy-Methyl-Phenyl-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
DE10253426B4 (de) 2002-11-15 2005-09-22 Elbion Ag Neue Hydroxyindole, deren Verwendung als Inhibitoren der Phosphodiesterase 4 und Verfahren zu deren Herstellung
DE10253282A1 (de) 2002-11-15 2004-05-27 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Arzneimittel zur Behandlung von chronisch obstruktiver Lungenerkrankung
HUP0500844A2 (en) 2002-12-09 2007-08-28 Univ Texas Methods for selectively inhibiting janus tyrosine kinase 3(jak3)
DE10261874A1 (de) 2002-12-20 2004-07-08 Schering Ag Nichtsteroidale Entzündungshemmer
AU2004207482B2 (en) 2003-01-21 2009-10-08 Merck Sharp & Dohme Corp. 17-carbamoyloxy cortisol derivatives as selective glucocorticoid receptor modulators
PE20040950A1 (es) 2003-02-14 2005-01-01 Theravance Inc DERIVADOS DE BIFENILO COMO AGONISTAS DE LOS RECEPTORES ADRENERGICOS ß2 Y COMO ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES MUSCARINICOS
JP2007524596A (ja) 2003-02-28 2007-08-30 トランスフォーム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 共結晶医薬組成物
EP1460064A1 (en) 2003-03-14 2004-09-22 Pfizer Limited Indole-2-carboxamide derivatives useful as beta-2 agonists
GB0312832D0 (en) 2003-06-04 2003-07-09 Pfizer Ltd 2-amino-pyridine derivatives useful for the treatment of diseases
CA2528851A1 (en) 2003-06-10 2004-12-16 Ace Biosciences A/S Extracellular aspergillus polypeptides
GB2407042B (en) 2003-10-17 2007-10-24 Vectura Ltd Inhaler
GB2424882B (en) 2004-01-12 2008-08-06 Cytopia Res Pty Ltd Selective kinase inhibitors
GB0410712D0 (en) 2004-05-13 2004-06-16 Novartis Ag Organic compounds
AU2005293556A1 (en) 2004-10-12 2006-04-20 Merck Serono Sa PI3 Kinase gamma inhibitors for the treatment of anaemia
WO2006124874A2 (en) 2005-05-12 2006-11-23 Kalypsys, Inc. Inhibitors of b-raf kinase
MX2008012096A (es) 2006-03-22 2008-12-17 Vertex Pharma Inhibidores de proteina cinasa c-met para el tratamiento de trastornos proliferativos.
PL2001849T3 (pl) 2006-03-29 2015-04-30 Hoffmann La Roche Pochodne pirydyny i pirymidyny jako antagoniści mGluR2
US7989458B2 (en) 2006-07-14 2011-08-02 Novartis Ag Pyrimidine derivatives as alk-5 inhibitors
EP1900727A1 (en) 2006-08-30 2008-03-19 Cellzome Ag Aminopyridine derivatives as kinase inhibitors
GB0713259D0 (en) 2007-07-09 2007-08-15 Astrazeneca Ab Pyrazine derivatives 954
CN101910158A (zh) 2007-10-25 2010-12-08 阿斯利康(瑞典)有限公司 可用于治疗细胞增殖性病症的吡啶衍生物和吡嗪衍生物
US8343966B2 (en) 2008-01-11 2013-01-01 Novartis Ag Organic compounds
US8268834B2 (en) 2008-03-19 2012-09-18 Novartis Ag Pyrazine derivatives that inhibit phosphatidylinositol 3-kinase enzyme
RS54339B1 (en) 2010-01-18 2016-02-29 Mmv Medicines For Malaria Venture NEW ANTIMALARIAN AGENTS
US8247436B2 (en) 2010-03-19 2012-08-21 Novartis Ag Pyridine and pyrazine derivative for the treatment of CF
RS55856B1 (sr) 2010-07-14 2017-08-31 Novartis Ag Heterociklična jedinjenja agonisti ip receptora
DE102010033690A1 (de) 2010-08-06 2012-02-09 Saltigo Gmbh Verfahren zur Herstellung vom Aminoarylalkylverbindungen
PT3134396T (pt) 2014-04-24 2019-12-16 Novartis Ag Derivados de amino piridina como inibidores da fosfatidilinositol 3-quinase
PL3134395T3 (pl) 2014-04-24 2018-07-31 Novartis Ag Pochodne pirazyny jako inhibitory 3-kinazy fosfatydyloinozytolu

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009013348A2 (en) * 2007-07-26 2009-01-29 Novartis Ag Pyrimidine derivatives useful for the treatment of inflammatory or allergic conditions
WO2010071837A1 (en) * 2008-12-19 2010-06-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazine derivatives useful as inhibitors of atr kinase

Also Published As

Publication number Publication date
AU2018200536A1 (en) 2018-02-15
JP6433509B2 (ja) 2018-12-05
BR112016024533A8 (pt) 2021-03-30
AU2018200536A9 (en) 2019-05-30
AU2014391608A1 (en) 2016-10-27
CN106458979A (zh) 2017-02-22
CA2945212A1 (en) 2015-10-29
US20170042889A1 (en) 2017-02-16
CN106458979B (zh) 2020-03-27
EA201692143A1 (ru) 2017-03-31
JP2017513889A (ja) 2017-06-01
MX2016013812A (es) 2017-03-09
US20180243297A1 (en) 2018-08-30
WO2015162459A1 (en) 2015-10-29
KR20160141855A (ko) 2016-12-09
US10004732B2 (en) 2018-06-26
BR112016024533A2 (pt) 2017-08-15
AU2018200536B2 (en) 2019-05-09
EP3134397A1 (en) 2017-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032075B1 (ru) Производные аминопиразина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы
US10364256B2 (en) Biaryl pyrazoles as NRF2 regulators
JP6759514B2 (ja) ブロモドメインに対して活性な化合物
EA024068B1 (ru) Производные бициклических гетероциклов для лечения пульмонарной артериальной гипертонии
AU2019210602A1 (en) Amino pyridine derivatives as phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors
KR20210143263A (ko) 이미다졸로닐퀴놀린 화합물 및 그의 치료적 용도
EP3134395B1 (en) Pyrazine derivatives as phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors
EA020470B1 (ru) 3-аминоциклопентанкарбоксамиды в качестве модуляторов рецептора хемокина
TW201819377A (zh) 新穎萘啶酮衍生物及其於心律不整之治療的用途
US11999715B2 (en) ASK1 inhibiting agents

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU