DE60018185T2

DE60018185T2 - Induktion von pharmakologischem stress mit adenosin-rezeptor agonisten

Info

Publication number: DE60018185T2
Application number: DE60018185T
Authority: DE
Inventors: M. Joel LINDEN; K. David GLOVER; A. George BELLER; Timothy L. Macdonald
Original assignee: University of Virginia UVA; University of Virginia Patent Foundation
Current assignee: University of Virginia UVA; University of Virginia Patent Foundation
Priority date: 1999-06-18
Filing date: 2000-06-12
Publication date: 2005-06-30
Anticipated expiration: 2020-06-13
Also published as: CA2375374C; AR030151A1; WO2000078774A3; MXPA01013213A; AU5605100A; BR0011725A; IL146939A; ZA200200342B; HU229005B1; PT1194440E; DK1194440T3; DE60018185D1; ATE289317T1; HUP0202094A3; HUP0202094A2; EP1194440B1; CA2375374A1; NO20015974L; NO20015974D0; TW585870B

Description

Bereich der Erfindung
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf Verfahren und Zusammensetzungen für die Durchführung von pharmakologischer Stressbildgebung (Engl.: stress imaging) mit bestimmten Alkynyladenosinverbindungen.
Hintergrund der Erfindung
Die vorliegende Erfindung wurde mit Unterstützung der Finanzierung durch die U.S. Staatsregierung (NIH Grant ROL HL37942) gemacht. Die U.S. Staatsregierung hat bestimmte Rechte an dieser Erfindung.
Pharmakologischer Stress wird zunehmend als eine Alternative zu dem Stress durch körperliche Betätigung bei Patienten eingesetzt, die sich einer nuklearen oder echokardiographischen Bildgebung (Engl.: imaging) zur Detektion von koronararteriellen Erkrankungen unterziehen. Dieser wird häufig mit Adenosin oder Dipyridamol in Patienten mit einer vermuteten Koronararterienerkrankung vor der Bildgebung mit radiomarkierten Perfusionsindikatoren wie ²⁰¹T1 oder ^99mTc-Sestamibi oder mittels einer Echocardiographie induziert. Es wurde 1999 vorhergesagt, dass 1,7 Millionen Patienten unter Verwendung der pharmakologischen Stressbildgebung in den Vereinigten Staaten allein untersucht werden werden. Der Vorteil von pharmakologischen Vasodilation über der körperlichen Betätigung ist, dass der pharmakologische Stess zu einem wiederholbaren Level an koronaler Flußzunahme führt, die nicht von der Fitness des Patienten und/oder Motivation abhängt. Die Sensitivität und Spezifität für die Detektion einer koronararteriellen Erkrankung ist sowohl für die Adenosin- als auch für die Dipyridamol-Stressperfusionsbildgebung sehr hoch und liegt zwischen 85 – 90%.
Ein großer Nachteil bei der Verwendung von Adenosin- oder Dipyridamolstress ist, dass es ein ungewöhnlich häufiges Auftreten von ungünstigen Nebenwirkungen bei diesen beiden Vasodilatoren gibt. In einer prospektiven Untersuchung an 9256 Patienten, die sich einer Adenosin-Stress-Radionuklidbildgebung unterzogen, erfuhren 82% ungünstige Nebenwirkungen (M. D. Cequiera et al., J. Am. Coll. Cardiol., 23, 384 (1994)). Die häufigsten Nebenwirkungen waren Flushing (37%), Brustschmerzen (35%), Kurzatmigkeit oder Atemnot (35%), Kopfschmerz (14%), ECG-Veränderungen (9%) und eine A-V-Leitungsstörung (8%). Es wurde von einem ähnlichen Nebenwirkungsprofil für Dipyridamol berichtet. In einer Untersuchung von A. Ranhosky et al. (Circulation, 81, 1205 (1990)) mit 3911 Patienten, die Dipyridamol erhielten, erfuhren 19,7% Brustschmerzen, 12% hatten Kopfschmerzen und 8% ST-Segmentveränderungen in ihrem EKG. Zusätzlich zu diesen Nebenwirkungen erfuhr eine wesentliche Zahl der Patienten eine bezeichnende Abnahme des Blutdrucks während der Verabreichung dieser Vasodilatoren. In weiteren 3715 Patienten, die Dipyridamol erhielten, fiel der mittlere systolische Blutdruck um 14 mm Hg, wobei 11% der Patienten einen >20%-Abfall des systolischen Blutdrucks aufwiesen (J. Lette et al., J. Nucl. Cardiol., 2, 3 (1995)).
Während die gewünschte koronare Vasodilation durch die Stimulation des Adenosin-A_2A-Rezeptors durch Adenosin vermittelt wird, werden die meisten Nebenwirkungen durch die Stimulation der anderen drei Adenosinrezeptorsubtypen verursacht: A₁, A_2B und A₃. Während eine Vorbehandlungsstrategie mit einem Adenosinrezeptorantagonisten einige Nebenwirkungen reduzieren kann und das Wohlbefinden und die Sicherheit des Patienten verbessern kann, wäre es eine einfachere Strategie einen Vasodilator zu entwickeln, der wenig oder keine Affinität für die Adenosin-A₁-, A_2B- oder A₃-Rezeptorsubtypen hat, der aber selektiv die A_2A-Rezeptoren stimuliert. Tatsächlich gab es eine fortschreitende Entwicklung von Verbindungen, die mehr und mehr wirksam und/oder selektiv als Agonisten von A_2A-Adenosinrezeptoren (AR) sind, basierend auf Radioligandbindungsnachweisen und physiologischen Reaktionen. Anfänglich wurden Verbindungen mit einer geringen oder keiner Selektivität für die A_2A-Rezeptoren entwickelt wie Adenosin selbst oder 5'-Carboxamide von Adenosin, wie 5'-N-Ethylcarboxamidoadenosin (NECA) (B. N. Cronstein et al., J. Immunol., 135, 1366 (1985)). Später wurde gezeigt, das die Zugabe von 2-Alkylaminosubstituenten die Wirksamkeit und die Selektivität erhöhten, zum Beispiel CV 1808 und CGS21680 (M.F. Javis et al., J. Pharmacol, Exp. Ther., 251, 888 (1989)). 2-Alkyoxy-substituierte Adenosinderivate wie WRC-0090 sind sogar noch wirksamer und selektiver als Agonisten an dem koronararteriellen A_2A-Rezeptor (M. Ueeda et al., J. Med. Chem., 34, 1334 (1991)).
Olsson et al. (U.S. Pat. Nr. 5,140,015) offenbart bestimmte Adenosin-A₂-Rezeptoragonisten der Formel:
worin (C(X)BR₂ CH₂OH und R₁ Alkyl- oder Alkoxyalkyl sein kann. Für die Verbindungen wird offenbart, dass sie als Vasodilatoren oder Antihypertensiva nützlich sind.
Linden et al. (U.S. Pat. Nr. 5,877,180) basiert auf der Entdeckung, dass bestimmte entzündliche Erkrankungen wie Arthritis und Asthma wirksam durch die Verabreichung von Verbindungen behandelt werden können, die selektive Agonisten von A_2A-Adenosinrezeptoren sind, vorzugsweise in Kombination mit einem Typ-IV-Phosphodiesteraseinhibitor. Eine Ausführungsform der Erfindung von Linden et al. stellt ein Verfahren zur Behandlung von entzündlichen Erkrankungen durch die Verabreichung einer wirksamen Menge eines A_2A-Adenosinrezeptors mit der folgenden Formel bereit:
worin R und X wie in dem Patent beschrieben sind.
Mohiuddin et al. (U.S. Pat. Nr. 5,070,877) offenbart die Verwendung des relativ unspezifischen Adenosinanalogons 2-Chloradenosin (C1-Ado) als einen pharmakologischen Stessor. Das C1-Ado-Analog ist jedoch eigentlich ein wirksamerer Aktivator der A₁-Adenosinrezeptoren als der A_2A-Adenosinrezeptoren und folglich verursacht es wahrscheinlich Nebenwirkungen, die auf Grund der Aktivierung der A₁-Rezeptoren auf dein Herzmuskel und auf anderen Geweben Nebenwirkungen Nebenwirkungen wie einen "Herzblock" verursachen.
G. Cristalli (U.S. Pat. Nr. 5,593,975) offenbart 2-Arylethynyl-,2-Cycloalkylethynyl- oder 2-Hydroxyalkylethynyl-Derivate, worin der Ribosidrest durch ein Carboxyamino substituiert ist oder ein substituiertes Amino(R₃HNC(O)-) ist. 2-Alkynylpurinderivate wurden auch in Miyasaka et al. (U.S. Pat. Nr. 4,956, 345) offenbart, worin die 2-Alkynylgruppe mit (C₃-C₁₆)Alkyl substituiert ist. Für die '975-Verbindungen wird offenbart, dass sie Vasodilatoren sind und die Blutplättchenaggregation inhibieren und folglich als antiischämische, antiatherosklerotische und antihypertensive Mittel nützlich sind.
R. A. Olsson et al. (U.S. Pat. Nr. 5,278,150) offenbart selektive Adenosin-A₂-Rezeptoragonisten der Formel:
worin Rib Ribosyl ist, R₁ H und R₂ Cycloalkyl sein kann. Für die Verbindungen wird offenbart, dass sie zur Behandlung von Hypertension, Atherosklerose und als Vasodilatoren nützlich sind.
Diese 2- Alkylhydrazinoadenosinderivate wie 2-Cyclohexylmethylidenhydrazinoadenosin (WRC-0470) wurden bewertet, Agonisten an dem koronararteriellen A_2A-Rezeptor zu sein (K. Niiya et al., J. Med. Chem., 35, 4557 (1992)). WRC-0470 wurde ferner im Hundemodel für die Verwendung bei der pharmakologischen Stress-Thallium-Bildgebung bewertet. Siehe D. K. Glover et al. Circulation, 94, 1726 (1996).
Manger, P. P. offenbart in Med. Chem. Res. (1998), 8(6), 277 – 290 2-Aralkynyl- und 2-Heteroaralkynyl-Derivate von Adenosin-5'-N-ethyluronamiden als selektive A_2a-Adenosinrezeptoragonisten. Ihre Blutplättchenaggragationswirkungen werden in WO 00/44763 gemessen, veröffentlicht am 3. August 2000 und beanspruchen Priorität am 15. Juni 1999 und fällt unter Artikel 54(3)EPC. Dieses Dokument offenbart dieselben Verbindungen wie in der vorliegenden Anmeldung und ihre Verwendung für die Behandlung von entzündlichen Reaktionen.
Folglich besteht ein anhaltender Bedarf für selektive A₂-Adenosinrezeptoragonisten, die für die Verwendung als pharmakologische Stressoren bei der Stressbildgebung oder in anderen ventrikulären Funktionsbildgebungsverfahren nützlich sind, die vorzugsweise reduzierte Nebenwirkungen haben, während sie chemisch stabil und kurz wirksam sind.
Zusammenfassung der Erfindung
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf 2-Alkynyladenosinderivate, die an der Ethynposition mit substituierten Cycloalkylhälften substituiert sind. Vorzugsweise ist der Riboserest an der 5'-Position ("X") mit einer N-Alkyl- (oder N-Cycloalkyl)aminocarbonylhälfte substituiert und die Verbindung hat die allgemeine Formel (I):
worin
(a) jeder R individuell Wasserstoff, ein C₁-C₆-Alkyl, C₃-C₇-Cycloalkyl, Phenyl oder Phenyl(C₁-C₃)-alkyl ist;
(b) X -CH₂OH, -CO₂R², -OC(O)R², -CH₂OC(O)R² oder C(O)NR³R⁴ ist,
(c) jeder R², R³ und R⁴ individuell H, C_1–6-Alkyl ist; C_1–6-Alkyl, substituiert mit 1 – 3 C_1–6-Alkoxy, C₃-C₇-Cycloalkyl, C_1–6-Alkylthio, Halogen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_1–10-Aryl ist, worin Aryl mit 1 – 3 Halogen, C_1–6-Alkyl, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino oder Di(C_1–6-alkyl)amino substituiert sein kann; oder C_6–10-Aryl ist, substituiert mit 1 – 3 Halogen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_1–6-Alkyl;
(d) R¹ (X-(Z)-)_n[(C₃-C₁₀)Cycloalkyl]-(Z')- ist, worin Z und Z' individuell (C₁-C₆)alkyl sind, optional unterbrochen von 1 – 3 S oder nichtperoxid O, oder nicht vorhanden ist und n 1 – 3 ist.
Die vorliegende Erfindung umfasst die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) zur Detektion der Anwesenheit von myokardialen Perfusionsabnormalitäten wie einer Koronararterienstenose in Säugetieren wie dem Menschen oder einem domestizierten Tier. Vorzugsweise werden die Verbindungen als pharmakologische stressinduzierende Mittel oder Stressoren verwendet, die nützlich für die pharmakologische Stressbildgebung und zur Detektion einer Koronararterienstenose auf Grund einer koronararteriellen Erkrankung nützlich sind. Die Verbindungen der Formel (I) sind wirksam und selektiv für die A_2A-Adenosinrezeptoren, sind aber kurzzeitig wirksam, so dass sie schnell von dem Körper im Anschluß an das Bildgebungsverfahren entfernt werden.
Die vorliegende Erfindung stellt die Verwendung einer Verbindung der Formel I zur Herstellung eines pharmakologischen Vasodilators bereit, der mit Perfusionsbildgebungsverfahren zur Detektion einer Koronararterienstenose verwendet werden kann. Obwohl die Stenose auf Grund einer Koronararterienerkrankung sein kann, das heißt einer Atherosklerose, kann sie auch auf Grund einer Angioplastie, einer Stentprotese oder eines Stentversagens und der gleichen sein.
Die bevorzugten Perfusionsbildgebungsverfahren sind die planare oder Single-Photon-Emissionscomputertomographie (SPECT), Gammakameraszintigraphie, Positronenemissionscomputertomographie (PET), Kernspinresonanz (NMR) -Bildgebung, Perfusionskontrastechokardiographie, digitale Subtraktionsangiographie (DSA) und die ultraschnelle Röntgencomputertomographie (CINE CT).
Kurze Beschreibung der Figuren
1: Kompetitiver Bindungsnachweis, der die relative Fähigkeit von drei Adenosin A_2A-Rezeptoragonisten versus CGS-21680 in rekombinanten humanen Adenosinrezeptoren zeigt.
2: Reaktion des linken Circumflex (LCx) Koranrarterienflusses auf verschiedene Dosen JMR-193, verabreicht über 10 Minuten mittels einer i.v. Infusion.
3: Reaktion des mittleren Arteriendrucks auf verschiedene Dosen JMR-193, verabreicht über 10 Minuten mittels einer i.v. Infusion.
4: Reaktionen des koronararteriellen Höchstflusses und Reaktionen des mittleren Arteriendrucks auf eine Bolusinjektion von JMR-193 (0,3 μg/kg).
5: Pharmakodynamische Halbwertszeit einer Bolusinjektion von JMR-193 (0,3 μg/kg).
6: Reaktionen des linken Circumflex (LCx) Koranrarterienflusses auf verschiedene Dosen DWH-146e, verabreicht mittels einer i.v. Bolusinjektion.
7: Reaktionen des mittleren Arteriendrucks auf verschiedene Dosen DWH-146e, verabreicht mittels einer i.v. Bolusinjektion.
8: Pharmakodynamische Halbwertszeit einer Bolusinjektion von DWH-146e. Beachte, dass die Plateauphase in Folge der Bolusverabreichung von ausreichender Dauer ist, um die Injektion eines Bildgebungsindikators zu ermöglichen.
9: Vergleich zwischen den Reaktionen des koronaren Flusses auf eine 3 min. i.v. Adenosininfusion versus einer Bolusinjektion von DWH-146e in demselben Hund. Beachte, dass die Reaktion des koronaren Flusses auf eine i.v. Bolusinjektion von DWH-146e ein größeres Ausmaß hat und von gleicher oder längerer Dauer ist als die Standardadenosininfusion.
Detaillierte Beschreibung der Erfindung
Es werden die folgenden Definitionen, wenn nicht anders beschrieben, verwendet. Halo ist Fluor, Chlor, Brom oder Iod. Alkyl, Alkoxy, Aralkyl, Alkylaryl, etc. bezeichnen sowohl gerade als auch verzweigte Alkylgruppen; der Verweis auf ein individuelles Radikal jedoch wie "Propyl" umfasst nur das geradkettige Radikal und auf ein verzweigtkettiges Isomer wie "Isopropyl" wird spezifisch Bezug genommen. Aryl schließt ein Phenylradikal oder ein orthofusioniertes bicyclisches carbocyclisches Radikal ein, dass etwa neun bis zehn Ringatome hat, in welchem wenigstens ein Ringatom aromatisch ist. Heteroaryl umfasst ein Radikal, das über einen Ringkohlenstoff eines monocyclischen aromatischen Rings gebunden ist, der fünf oder sechs Ringatome enthält, bestehend aus Kohlenstoff und ein bis vier Heteroatomen, die jeweils aus gewählt sind aus der Gruppe, die aus nichtperoxid Sauerstoff, Schwefel und N(X) besteht, worin X abwesend oder H, O, (C₁-C₄)Alkyl, Phenyl oder Benzyl ist, sowie das Radikal eines orthofusionierten bicyclischen Heterocyclus mit etwa acht bis zehn Ringenatomen, welcher davon abgeleitet ist, insbesondere ein Benzderivat oder eines, das durch die Fusion eines Propylens, Trimethylens oder Tetramethylendiradikals daran erhalten wird.
Es wird von Fachleuten sehr geschätzt werden, dass die Verbindungen der Formel (I) mehr als ein chirales Zentrum haben und in optisch aktiven und rezemischen Formen isoliert werden können. Vorzugsweise ist die Ribosehälfte der Formel (I) von D-Ribose abgeleitet, das heisst die 3', 4'-Hydroxylgruppen sind alpha an dem Zuckerring und die 2'- und 3'-Gruppen sind beta (3R, 4S, 2R, 5S). Wenn die zwei Gruppen an der Cyclohexylgruppe in der 4-Position sind, sind sie vorzugsweise trans. Einige Verbindungen können Polymorphismen aufweisen. Es versteht sich, dass die vorliegende Erfindung alle razemischen, optisch aktiven, polymorphen oder stereoisomeren Formen oder Mischungen davon von einer Verbindung der Erfindung umfasst, welche die hierin beschriebenen nützlichen Eigenschaften besitzt, und dass es im Stand der Technik gut bekannt ist wie solche optisch aktiven Formen hergestellt werden (zum Beispiel durch die Auflösung der razemischen Form durch Rekristallisationstechniken oder enzymatische Techniken, durch die Synthese aus optisch aktiven Ausgangsmaterialien, durch eine chirale Synthese oder durch eine chromatographische Auftrennung, wobei eine chirale stationäre Phase verwendet wird) und wie die adenosinagonistische Aktivität bestimmt wird, wobei die Tests, die hierin beschrieben sind, oder ähnliche Tests verwendet werden, die im Stand der Technik gut bekannt sind.
Spezifische und bevorzugte Werte für Radikale, Substituenten und Bereiche, welche unten aufgelistet sind, dienen nur der Illustration; sie schießen anders definierte Werte oder andere Werte innerhalb der definierten Bereich für Radikale und Substituenten nicht aus.
Spezifisch kann (C₁-C₆)-Alkyl Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, iso-Butyl, sec-Butyl, Pentyl, 3-Pentyl oder Hexyl sein. Der Begriff "Cycloalkyl", wie er hierin verwendet wird, umfasst (Cycloalkyl)alkyl sowie Bicycloalkyl und Tricycloalkyl. Folglich kann (C₃-C₆)Cycloalkyl Cyclopropyl, Norbonyl, Adamantyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl oder Cyclohexyl sein; (C₃-C₆)Cycloalkyl(C₁-C₆)alkyl kann Cyclopropylmethyl, Cyclobutylmethyl, Cyclopentylmethyl, Cyclohexylmethyl sein;, 2-Cyclopropylethyl, 2-Cyclobutylethyl, 2-Cyclopentylethyl oder 2-Cyclohexylethyl sein; (C₁-C₆)Alkoxy kann Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Isopropoxy, Butoxy, iso-Butoxy, sec-Butoxy, Pentoxy, 3-Pentoxy oder Hexyloxy sind; (C₂-C₆)Alkenyl kann Vinyl, Allyl, 1-Propenyl, 2-Propenyl, 1-Butenyl, 2-Butenyl, 3-Butenyl, 1-Pentenyl, 2-Pentenyl, 3-Pentenyl, 4-Pentenyl, 1-Hexenyl, 2-Hexenyl, 3-Hexenyl, 4-Hexenyl oder 5-Hexenyl sein; (C₂-C₆)Alkynyl kann Ethynyl, 1-Propynyl, 2-Propynyl, 1-Butynyl, 2-Butynyl, 3-Butynyl, 1-Pentynyl, 2-Pentynyl, 3-Pentynyl, 4-Pentynyl, 1-Hexynyl, 2-Hexynyl, 3-Hexynyl, 4-Hexynyl oder 5-Hexynyl sein; (C₁-C₆)Alkanoyl kann Acetyl, Propanoyl oder Butanoyl sein; Halo(C₁-C₆)alkyl kann Iodmethyl, Brommethyl, Chlormethyl, Fluormethyl, Trifluormethyl, 2-Chlorethyl, 2-Fluorethyl, 2,2,2-Trifluorethyl oder Pentafluorethyl sein; Hydroxy(C₁-C₆)alkyl kann Hydroxymethyl, 1-Hydroxyethyl, 2-Hydroxyethyl, 1-Hydroxypropyl, 2-Hydroxypropyl, 3-Hydroxypropyl, 1-Hydroxybutyl, 4-Hydroxybutyl, 1-Hydroxypentyl, 5-Hydroxypentyl, 1-Hydroxyhexyl oder 6-Hydroxyhexyl sein; (C₁-C₆)Alkoxycarbonyl (CO₂R²) kann Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Propoxycarbonyl, Isopropoxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Pentoxycarbonyl oder Hexyloxycarbonyl sein; (C₁-C₆)Alkylthio kann Methylthio, Ethylthio, Propylthio, Isopropylthio, Butylthio, Isobutylthio, Pentylthio oder Hexylthio sein; (C₂-C₆)Alkanoyloxy kann Acetoxy, Propanoyloxy, Butanoyloxy, Isobutanoyloxy, Pentanoyloxy oder Hexanoyloxy sein; Aryl kann Phenyl, Indenyl, oder Naphthyl sein; und Heteroaryl kann Furyl, Imidazolyl, Triazolyl, Triazinyl, Oxazoyl, Isoxazoyl, Thiazolyl, Isothiazoyl, Pyraxolyl, Pyrrolyl, Pyrazinyl, Tetrazolyl, Puridyl (oder sein N-Oxid), Thientyl, Pyrimidinyl (oder sein N-Oxide), Indolyl, Isoquinolyl (oder sein N-Oxid) oder Quinolyl (oder sein N-Oxid) sein.
Ein spezifischer Wert für R ist Amino, Monomethylamino oder Cyclopropylamino.
Ein spezifischer Wert für R¹ ist Carboxy- oder (C₁-C₄)Alkoxycarbonylcyclohexyl(C₁-C₄)alkyl.
Ein spezifischer Wert für R² ist H oder (C₁-C₄)Alkyl, das heisst Methyl oder Ethyl.
Ein spezifischer Wert für R³ ist H, Methyl oder Phenyl.
Ein spezifischer Wert für R⁴ ist H, Methyl oder Phenyl.
Ein spezifischer Wert für Z ist -CH₂- oder -CH₂-CH₂-.
Ein spezifischer Wert für X ist CO₂R², (C₂-C₅)Alkanoyloxymethyl oder Amido.
Ein spezifischer Wert für n ist 1.
Die bevorzugten Verbindungen der Formel (I) sind jene, worin jeder R H ist, X Ethylaminocarbonyl und R³ 4-Carboxycyclohexylmethyl (DWH-146a), R¹ 4-Methoxycarbonylcyclohexylmethyl (DWH-146e) oder R¹ 4-Acetoxymethylcyclohexylmethyl (JMR-193) ist. Sie sind unten dargestellt (DWH-146 (Säure) und Methylester (e)) und JMR-193.
Die Synthese von Methyl-4[3-(6-amino-9(5-[(ethylamino)carbonyl]-3,4-dihydroxytetrahydro-Z-furanyl-9H-2-purinyl)-2-propynyl]-1-cyclohexancarboxylat (DWH-146e) wurde durch die Kreuzkopplung eines Iod-Adenosinderivats (N-Ethyl-1'-deoxy-1'-(amino-2-iod-9H-purin-9-yl)-β-D-ribofuranuoramid) mit Methyl-4-(2-propynyl)-1-cyclohexancarboxylat unter Verwendung eines Pd¹¹-Katalysators durchgeführt. Die Synthese des Iod-Adenosinderivats wurde aus Guanosin erreicht. Das Guanosin wird als erstes mit Essigsäureanhydrid behandelt, das die Zuckerhydroxyle acetyliert (Engl.: acatalate), gefolgt von der Chlorinierung der Position 6 mit Tetramethylammoniumchlorid und Phosphoroxychlorid. Die Iodierung der Position 2 wurde mittels einer modifizierten Sandmeyer-Reaktion bewerkstelligt, gefolgt von der Verdrängung des 6-C1 und der Zuckeracetate mit Ammonium. Die 2'- und 3'-Hydroxyle wurden als das Acetonid geschützt und das 5'-Hydroxyl wurde mit Kaliumpermanganat zur der Säure iodiert. Die Deprotektion des 2'- und 3'-Acetonids, die Fisherveresterung der 5'-Säure mit Ethanol und die Konversion der resultierenden Ethylester zu dem Ethylamid mit Ethylamin ergab N-Ethyl-1'-deoxy-1'-(amino-2-iod-9H-purin-9-yl)-β-D-ribofuranuoramid.
Das Acetylen(methyl-4-(2-propynyl)-1-cyclohexancarboxylat) wurde ausgehend von trans-1,4-Cyclohexandimethanol synthetisiert. Anfänglich wurde das trans-Diol monotosyliert, gefolgt von einer Verdrängung des Tosylats mit einem Acetylenanion. Das Hydroxyl der resultierenden Hydroxylacetylenspezies wurde zu der Säure mittels Jones-Reagenz oxidiert, gefolgt von der. Methylierung mit (Trimethylsilyl)diazomethan, um Methyl-4-(2-propynyl)-1-cyclohexancarboxylat zu ergeben.
Die Kreuzkopplungsreaktion wurde unter den folgenden, zuvor berichteten Bedingungen durchgeführt. Zu einer Lösung aus NN-Dimethylformamide (0,5 ml), Acetonitril (1 ml), Triethylamin (0,25 ml) und N-Ethyl-1'-deoxy-1'-(amino-2-iod-9H-purin-9-yl)-β-D-ribofuranuroamid (25 mg, 0,06 mMol) wurden Bis(triphenylphosphin)palladiumdichlorid (1 mg, 2 Mol %) und Kupfer(I)iodid (0,06 mg, 0,5 Mol %) zugegeben. Zu der resultierenden Mischung wurde Methyl-4-(2-propynyl)-1-cyclohexancarboxylat (54 mg, 0,3 mMol) zugegeben und die Reaktion wurde unter einer N₂-Atmosphäre für 16 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter Vakuum entfernt und der resultierende Rest in 20% Methanol in Chloroform (R_f = 0,45) flash-chromatographiert, um 19 mg (cremefarbener Feststoff, Smp. 125 °C (zerfallen)) 4[3-(6-Amino-9(5-[(ethylamino)carbonyl]-3,4-dihydroxytetrahydro-Z-furanyl)-9H-2-purinyl)-2-propynyl]-1-cyclohexancarboxylate (DWH-146e) zu ergeben.
Andere Verbindungen der Formel (I) können durch die Methodologien hergestellt werden, die in den U.S. Pat. Nummern. 5,278,150, 5,140,015, 5,877,180, 5,593,975 und 4,956,345 offenbart sind.
Beispiele für pharmazeutisch akzeptable Salze sind organische Säureadditionssalze, die mit Säuren gebildet werden, die ein physiologisch akzeptables Anion bilden, zum Beispiel Tosylat, Methansulfonat, Malat, Acetat, Citrat, Malonat, Tartarat, Succinat, Benzoat, Ascorbat, α-Ketoglutarat und α-Glycerophosphat. Es können auch geeignete anorganische Salze gebildet werden, einschießlich Hydrochlorid-, Sulfat-, Nitrat-, Bicarbonat-, und Carbonatsalze.
Die pharmazeutisch akzeptablen Salze können unter Verwendung von Standardverfahren, die im Stand der Technik bekannt sind, erhalten werden, zum Beispiel durch die Reaktion einer ausreichend basischen Verbindung wie einem Amin mit einer geeigneten Säure, was ein physiologisch akzeptables Anion hervorbringt. Es können auch Alkalimetall- (zum Beispiel Natrium, Kalium oder Lithium) oder Erdalkalimetall- (zum Beispiel Kalzium) salze von Carbonsäuren hergestellt werden.
Die Verbindungen der Formel (I) können als pharmazeutische Zusammensetzungen formuliert und an einen Säugetierwirt, wie einen humanen Patienten, in einer Vielzahl von Formen verabreicht werden, die an den ausgewählten Verabreichungsweg angepasst sind, das heißt oral oder vorzugsweise parenteral, auf intravenösem, intramuskulären, topikalen oder subkutanen Wegen.
Die aktive Verbindung kann auch intravenös oder intraperitoneal mittels Infusion oder Injektion verabreicht werden. Die Lösungen der aktiven Verbindung oder ihrer Salze können in Wasser hergestellt werden, optional mit nichttoxischen oberflächenaktiven Stoffen vermischt. Dispersionen können auch in Glycol, flüssigen Polyethylenglycolen, Triacetin und Mischungen davon und in Ölen hergestellt werden. Unter gewöhnlichen Lager- und Verwendungsbedingungen enthalten diese Präparationen einen Konservierungsstoff, um dem Wachstum von Mikroorganismen vorzubeugen.
Die pharmazeutischen Dosierungsformen, die für eine Injektion oder Infusion geeignet sind, können sterile wässerige Lösungen oder Dispersionen oder sterile Pulver einschließen, die die aktive Ingredienz umfassen, welche an eine extemporane Präparation von sterilen injezierbaren und infusiblen Lösungen oder Dispersionen angepasst sind, optional in Liposomen verkapselt. In allen Fällen muss die letztendliche Dosierungsform steril, flüssig und unter den Herstellungs- und Lagerbedingungen stabil sein. Der flüssige Träger oder das flüssige Vehikel kann ein Lösungsmittel oder ein flüssiges Dispersionsmedium sein, umfassend zum Beispiel Wasser, Ethanol ein Polyol (zum Beispiel Gylcerol, Propylenglycol, flüssige Polyethylenglycole und dergleichen), pflanzliche Öle, nichttoxische Glycerylester und geeignete Mischungen davon. Die geeignete Fluidität kann zum Beispiel durch die Bildung von Liposomen, durch die Aufrechterhaltung der benötigten Partikelgröße im Fall von Dispersionen oder durch die Verwendung von oberflächenaktiven Stoffen aufrechterhalten werden. Die Prävention der Wirkung von Mikroorganismen kann durch verschiedene antibakterielle und antifungizide Mittel bewirkt werden, zum Beispiel Parabene, Chlorbutanol, Phenol, Sorbinsäure, Thimerosal und dergleichen. In vielen Fällen wird es bevorzugt werden isotonische Mittel mit einzuschließen, zum Beispiel Zucker, Puffer oder Natriumchlorid. Eine verlängerte Absorption der injezierbaren Zusammensetzungen kann bewirkt werden, indem in dem Zusammensetzungen Mittel verwendet werden, die die Absorption verzögern, zum Beispiel Aluminiummonostearat und Gelatine.
Sterile injezierbare Lösungen werden durch die Inkorporation der aktiven Verbindung in der benötigten Menge in einem geeigneten Lösungsmittel mit verschiedenen der anderen oben aufgezählten Ingredienzien hergestellt, wenn nötig gefolgt von einer Filtersterilisation. Im Fall von sterilen Pulvern zur Herstellung von sterilen injezierbaren Lösungen sind die bevorzugten Herstellungsverfahren Vakuumtrocknungs- und Gefriertrocknungstechniken, welche ein Pulver der aktiven Ingredienz plus irgendeiner zusätzlich gewünschten Ingredienz, die in den vorher sterilfiltrierten Lösungen vorhanden ist.
Brauchbare Dosierungen der Verbindungen der Formel (I) können durch den Vergleich ihrer in vitro-Aktivität und in vivo-Aktivität in Tiermodellen bestimmt werden. Es sind im Stand der Technik Verfahren für die Extrapolation der wirksamen Dosierungen in Mäusen und anderen Tiermodellen auf den Menschen bekannt; zum Beispiel siehe U.S. Pat. Nr. 4,938,949.
Die vorliegenden Verbindungen und Zusammensetzungen, die sie enthalten, werden als pharmakologische Stressoren verabreicht und in Verbindung mit irgendeinem von mehreren nichtinvasiven diagnostischen Verfahren verwendet, um die Aspekte der myokardialen Perfusion zu messen. Zum Beispiel kann intravenöses Adenosin in Verbindung mit einer Thallium-201 myokardialen Perfusionsbildgebung verwendet werden, um die Schwere einer myokardialen Ischämie zu beurteilen. In diesem Fall kann irgendeines von mehreren verschiedenen Radiopharmazeutikas durch Thallium-201 ersetzt werden, wie jene Mittel, die Tc-99m, Iod-123, Stickstoff-13, Rubidium-82 und Sauerstoff-13 umfassen. Solche Mittel schließen Technetium-99m markierte Radiopharmazeutika, das heißt Technetium-99m-Sestamibi, Technetium-99m-Teboroxim; Tetrafosmin und NOET; und Iod-123 markierte Radiopharmazeutika ein wie I-123-IPPA oder BMIPP ein. Ähnlich kann eine der vorliegenden Verbindungen als ein pharmakologischer Stressor in Verbindung mit einer Radionuklidventrikulographie verabreicht werden, um die Schwere einer myokardialen kontraktilen Dysfunktion zu beurteilen. In diesem Fall können die Radionuklidventrikulographischen Untersuchungen Firtst-Pass- oder Gated-Gleichgewichtsuntersuchungen von dem rechten und/oder dem linken Ventrikel sein. Ähnlich kann eine Verbindung der Formel (I) als ein pharmakologischer Stressor in Verbindung mit einer Echokardiographie verabreicht werden, um die Präsenz von regionalen Wandbewegungsabnormalien zu beurteilen. Ähnlich kann die aktive Verbindung als ein pharmakologischer Stressor in Verbindung mit invasiven Messungen des koronalen Blutflusses verabreicht werden wie durch einen intrakardialen Katheter, um die funktionale Signifikanz der stenotischen Koronargefäße zu beurteilen.
Das Verfahren bezieht typischerweise die Verabreichung von einer oder mehrerer Verbindungen der Formel (I) durch eine intravenöse Infusion in Dosen ein, welche wirksam sind, um für eine Koronararteriendilation zu sorgen (etwa 0,25 – 500, vorzugsweise 1 – 250 mcg/kg/min). Ihre Verwendung in dem invasiven Setting kann jedoch die intrakoronare Verabreichung des Medikaments in Bolusdosen von 0,5 – 50 mcg miteinbeziehen.
Bevorzugte Verfahren umfassen die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) als einen Ersatz für körperliche Betätigung in Verbindung mit einer myokardialen Perfusionsbildgebung, um die Anwesenheit und/oder die Schwere einer Koronararterienerkrankung in Menschen zu detektieren, an welchen eine mykardiale Perfudionsbildgebung mittels irgendeiner von mehreren Techniken durchgeführt wird, einschließlich der radiopharmazeutischen myokardialen Perfusionsbildgebung, wobei eine planare Szintigraphie oder Single-Photon-Emissionscomputertomographie (SPECT), Positronenemissionstomographie (PET), Kernspinresonanz (NMR)-Bildgebung, Perfusionskontrastechokardiographie, digitale Subtraktionsangiographie (DSA) und eine ultraschnelle Röntgencomputertomographie (CINE CT) verwendet werden.
Es wird auch ein Verfahren bereitgestellt, das die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) als einen Ersatz für körperliche Betätigung in Verbindung mit der Bildgebung umfasst, um die Anwesenheit und/oder die Schwere einer ischämischen ventrikukären Dysfunktion in Menschen zu detektieren, in welchen eine ischämische ventrikuläre Dysfunktion durch irgendeines von mehren Bildgebungsverfahren gemessen wird, einschließlich der Echokardiographie, der Kontrastventrikulographie oder der Radionuklidventrikulographie.
Es wird auch ein Verfahren bereitgestellt, das die Verwendung einer Verbindung der Formel (I) als ein koronares hyperemisches Mittel in Verbindung mit Mittels zur Messung der koronaren Blutflussgeschwindigkeit umfasst, um die vasodilatorische Kapazität (Reservekapazität) der Koronararterien in Menschen zu beurteilen, in welchen die koronare Blutflussgeschwindigkeit mittels irgendeiner von mehreren Techniken gemessen wird, einschließlich einem Doppler-Fluss-Katheter oder einer digitalen Subtraktionsangiographie.
Die Erfindung wird weiter mit Bezug auf die folgenden detaillierten Beispiele beschrieben werden, welche zur Illustration der Erfindung gegeben werden und welche nicht gedacht sind die Erfindung einzuschränken.
BEISPIEL 1
Trans-(1-[4-hydroxymethyl)cyclohexyl]methyl)-4-methylbenzensulfonat (5,2)
Es wurde Natriumhydrid (1,68 g, 70 mMol) zu einer Lösung aus 10 g (70 mMol) [4-(Hydroxymethyl)cyclohexyl]methan-1-ol (5.1) in 700 ml Tetrahydrofuran zugegeben und für 1 Stunde gerührt, dann wurde p-Toluolsulfonylchlorid (13,3 g, 70 mMol) zugegeben und die Reaktionsmischung für 5 Stunden refluxiert. Die Reaktion wurde dann auf 0°C abgekühlt und langsam mit Wasser abgeschreckt bis kein reaktives Hydrid mehr vorhanden war. Sobald das Hydrid abgeschreckt war wurde die Reaktionsmischung mit Ether verdünnt (700 ml) und 2 mal mit 10% wässerigem Kaliumcarbonat (700 ml) extrahiert. Die organischen Bestandteile wurden getrocknet, wobei Natriumsulfat verwendet wurde, und das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt. Das Produkt wurde mittels Chromatographie auf einer Silikagelsäule aufgereinigt, wobei mit Aceton-Dichlormethan (5:95) eluiert wurde, um 5.2 (35%) zu ergeben.
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 3,79 (d, J = 6,35 Hz, 2H), 3,39 (d, J = 6,35 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H), 1,75 (m, 4H), 1,59 (m, 1H), 1,37 (m, 1H), 0,9 (m, 4H). ¹³C NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 145,3, 133,4, 130,3, 130,3, 128,3, 128,3, 75,8, 68,5, 40,6, 37,8, 28,9, 28,9, 28,9, 28,9, 22,1.
BEISPIEL 2
(4-Prop-2-ynylcyclohexyl)methan-1-ol (5.3)
Es wurde der Lithiumacetylidethylendiaminkomplex (90%) (6,4 g, 70 mMol) sehr langsam zu einer Lösung aus 5.2 (3 g, 10 mMol) in 40 ml Dimethylsulfoxide zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde für 5 Tage gerührt und dann langsam bei 0°C mit Wasser abgeschreckt. Diese Mischung wurde mit Ether verdünnt (300 ml) und 3 mal mit gesättigtem wässerigem Ammoniumchlorid (200 ml) extrahiert. Die organischen Bestandteile wurden mit Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt und das Produkt mittels Chromatographie über einer Silikagelsäule aufgereinigt, wobei mit Ethylacetat-Hexanen (20:80) eluiert wurde, um 5.3 (85%) zu ergeben.
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 3,41 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,07 (dd, J = 2,5, 6,5 Hz, 2H), 1,96–1,75 (m, 5H), 1,41 (m, 2H), 0,095 (m, 4). ¹³C NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 83,8, 69,6, 68,9, 40,7, 37,7, 32,3, 32,3, 29,6, 29,6, 26,5.
BEISPIEL 3
4-Prop-2-ynylcyclohexancarbonsäure (5.4)
Es wurde eine Lösung aus Chromtrioxid (1,1 g, 11 mMol) in 1,5 M Schwefelsäure (40 ml, 27 mMol) auf 0°C gehalten, während 5.3 (0,46 g, 3 mMol) in 80 ml Aceton über 2 Stunden zugegeben wurde. Die Reaktion wurde dann für weitere 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde dann mit Ether (200 ml) verdünnt und 2 mal mit Wasser extrahiert. Die organischen Bestandteile wurden mit Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter reduziertem Druck entfernt und das Produkt mittels Chromatographie auf einer Silikagelsäule aufgereinigt, wobei mit Aceton-Dichlormethan (70:30) eluiert wurde, um 5.4 (75%) zu ergeben.
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2,24 (dt, J = 3,66, 12,1 Hz, 1H), 2,10 (dd, J = 2,7, 6,5 Hz, 2H), 2,04–1,89 (m, 5H), 1,76 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 1,43 (dq, J = 3,28, 13,1 Hz, 2H), 1,03 (dq, J = 3,28, 13,1 Hz, 2H). ¹³C NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 183,2, 83,3, 69,9, 43,4, 36,7, 31,8, 28,9, 26,3.
BEISPIEL 4
Methyl-4-prop-2-ynylcyclohexancarboxylate (5.5)
Es wurde eine (Trimethylsilyl)diazomethan- (2,0 M) lösung in Hexanen (1 ml, 2 mMol) zu einer Lösung aus 5.4 (0,34 g, 2 mMol) in 15 ml Methanol:Dichlormethan (3:7) zugegeben. Die Lösungsmittel wurden unter reduziertem Druck entfernt, was zu einer 100% Konversion des Ausgangsmaterials zu dem Produkt führte.
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2,24 (dt, J = 3,66, 12,1 Hz, 1H), 2,10 (dd, J = 2,7, 6,5 Hz, 2H), 2,06 (dd, J = 1,54, 6,54 Hz, 1H), 2,00–1,89 (m, 3H), 1,76 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 1,43 (dq, J = 3,28, 13,1 Hz, 2H), 1,03 (dq, J = 3,28, 13,1 Hz, 2H).
¹³C NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 176,8, 83,3, 69,8, 51,9, 43,4, 36,7, 31,9, 29,2, 26,3.
BEISPIEL 5
[(2R,3R,4R,5R)-3,4-Diacetyloxy-5-(2-amino-6-oxohyropurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetat (6.2)
Es wurde eine Suspension aus 113 g (0,4 Mol) trockenem Guanosin (6.1), Essigsäureanhydrid (240 ml, 2,5 Mol), trockenem Pyridin (120 ml) und trockenem DMF (320 ml) für 3,75 Stunden auf 75°C erhitzt ohne dass die Temperatur 80°C überschritt. Die klare Lösung wurde dann in einen 3 1 Erlenmeyerkolben transferriert und mit 2-Propanol aufgefüllt. Nach dem Abkühlen der Lösung auf Raumtemperatur wurde die Rekristallisierung initiiert und bei 4°C über Nacht fortgesetzt. Das weiße feste Filtrat wurde gefiltert, mit 2-Propanol gewaschen und aus 2-Propanol rekristallisiert, um 6.2 (96%) zu ergeben.
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8,20 (s, 1H, H-8), 6,17 (d, J = 5,41 Hz, 1H, H-1') 5,75 (t, J = 5,39 Hz, 1H, H-2'), 5,56 (t, J = 5,0, H-3'), 4,41 (m, 3H, H-4',5'), 2,14 (s, 3H, Ac), 2,11 (s, 3H, Ac), 2,10 (s, 3H, Ac). ¹³C NMR (300 MHz, CD3 OD) δ 171,0, 170,3, 170,2, 157,7, 154,8, 152,4, 136,7, 117,7, 85,5, 80,4, 73,0, 71,3, 64,0, 31,3, 21,2, 21,0.
BEISPIEL 6
[(2R,3R,4R,5R)-3,4-Diacetyloxy-5-(2-amino-6-chlorpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetat (6.3)
In einen 1000 ml Kolben wurden 80 g (0,195 Mol) [(2R,3R,4R,5R)-3-4-Diacetyloxy-5-(2-amino-6-oxohyropurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetat (6.2), Tetramethylammoniumchlorid (44 g, 0,4 Mol), wasserfreies Acetonitril (400 ml) und N,N-Dimethylanilin (25 ml) gegeben. Der Kolben wurde in ein Eis-Salz-Bad gegeben und auf 2°C abgekühlt. Zu dieser Lösung wurden tropfenweisen POCl₃ (107 ml, 1,15 Mol) mit einer Geschwindigkeit zugegeben, die die Temperatur unter 5°C aufrechterhielt (45 Minuten). Der Kolben wurde dann von dem Eis genommen, mit einem Kondensor ausgestattet, in ein Ölbad gegeben und für 10 Minuten refluxiert, während die Lösung ihre Farbe zu einer rotbraunen Farbe änderte. Das Lösungsmittel wurde dann unter reduziertem Druck entfernt, um einen öligen Rest zu ergeben, welcher in ein Becherglas transferriert wurde, das 1000 g Eis und 400 ml CHCl₃ enthielt, und für 1,5 Stunden gerührt um alles verbleibende POCl₃ zu zersetzen. Die organische Phase wurde dann entfernt und die wässerige Phase mit 3 × 50 ml CHCl₃ extrahiert und mit der organischen Phase vereinigt. Die vereinigten organischen Bestandteile wurden dann mit 50 ml Wasser zurückextrahiert, gefolgt vom Rühren mit 200 ml gesättigtem NaHCO₃. Die organischen Bestandteile wurden weiter mit NaHCO₃ extrahiert bis der wässerige Extrakt neutral war (2 ×). Die organischen Bestandteile wurden schließlich mit Lauge (Engl.: brine) extrahiert und dann über MgSO₄ für 16 Stunden getrocknet. Zu der Lösung wurden 800 ml 2-Propanol zugegeben, wonach die Lösung unter reduziertem Druck konzentriert wurde. Zu dem öligen Feststoff wurden 200 ml 2-Propanol zugegeben und die Lösung über Nacht gekühlt. Das kristalline Produkt wurde gefiltert, gewaschen und über Nacht getrocknet, um 6.3 (77%) zu ergeben.
¹H NMR (300 MHz, CD₃ OD) δ 8,31 (s, 1H, H-8), 7,00 (s, 2H, NH₂) 6,06 (d, J = 5,8 Hz, 1H, H-1'), 5,83 (t, J = 6,16 Hz, 1H, H-2'), 5,67 (m 1H, H-3'), 4,29 (m, 3H, H-4',5'), 2,07 (s, 3H, Ac), 1,99 (s, 3H, Ac), 1,98 (s, 3H, Ac).
¹³C NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 171,0, 170,4, 170,2, 160,8, 154,6, 150,8, 142,2, 124,5, 85,8, 80,6, 72,8, 71,2, 63,9, 21,4, 21,3, 21,1
BEISPIEL 7
[(2R,3R,4R,5R)-3,4-Diacetyloxy-5-(6-chlor-2-iodpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetate (6.4)
Es wurde Isoamylnitrit (5 ml, 37 mMol) zu einer Mischung aus 5,12 g (12 mMol) [(2R,3R,4R,5R)-3-4-Diacetyloxy-5-(2-amino-6-chlorpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetat (6.3), I₂ (3,04 g, 12 mMol), CH₂I₂ (10 ml, 124 mMol) und CuI (2,4 g, 12,6 mMol) in THF (60 ml) zugegeben. Die Mischung wurde unter Reflux für 45 Minuten erhitzt und dann erlaubt auf Raumtemperatur abzukühlen. Zu dieser Lösung wurden 100 ml gesättigtes Na₂S₂O₃ zugegeben, was die rötliche Farbe auf Grund des Iods entfernte. Die wässerigen Bestandteile wurden 3 × mit Chloroform extrahiert und vereinigt, über MgSO₄ getrocknet und unter reduziertem Druck konzentriert. Das Produkt wurde dann auf einer Silikagelsäule aufgereinigt, wobei CHCl₃-MeOH (98:2) verwendet wurde, um [(2R,3R,4R,5R)-3,4-Diacetyloxy-5-(6-chlor-2-iodpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetat (6.4) zu kollektieren (80% aus EtOH kristallisiert).
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 8,20 (s, 1H H-8), 6,17 (d, J = 5,41 Hz, 1H, H-1'), 5,75 (t, J = 5,39 Hz, 1H, H-2'), 5,56 (t, J = 5,40 Hz, 1H, H-3'), 4,38 (in, 3H, H-4',5'), 2,14 (s, 1H, Ac), 2,11 (s, 1H, Ac), 2,10 (s, 1H, Ac).
BEISPIEL 8
(4S,2R,3R,5R)-2-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolan-3,4-diol (6.5)
In einen Kolben, der 6,0 g (11,1 mMol) [(2R,3R,4R,5R)-3,4-Diacetyloxy-5-(6-chlor-2-iodpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methylacetate (6.4) enthielt, wurden 100 ml flüssiger NH₃ bei –78°C zugegeben und die Lösung für 6 Stunden gerührt. Nach dieser Zeit wurde der Lösung über Nacht erlaubt sich unter gleichzeitiger Evaporation des NH₃ auf Raumtemperatur einzustellen, um ein braunes Öl zu ergeben. Das Produkt wurde aus heißem Isopropanol rekristallisiert, um 6.5 (80%) zu ergeben, Smp. 143 – 145°C, r.f. = 0,6 in 20% MeOH/CHCl₃.
¹H NMR(300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,24 (s, 1H), 7,68 (s, 2H), 5,75 (d, J = 6,16, 1H), 5,42 (d, J = 5,40 Hz, 1H), 5,16 (d, J = 4,62 Hz, 1H), 4,99 (t, J = 5,39 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 4,81 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 3,37 Hz, 1H), 3,89 (m, 1H), 3,54 (m, 2H).
BEISPIEL 9
[(1R,2R,4R,5R)-4-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-7-7-dimethyl-3,6,8-trioxabicyclo[3.3.0]oct-2-yl]methan-1-ol (6.6)
Zu einer Lösung aus 2,0 g (5,08 mMol) (4S,2R,3R,5R)-2-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolan-3,4-diol (6.6) in 100 ml Aceton wurden 9,6 g p-Toluolsulfonsäure und 5 ml Dimethoxypropan zugegeben. Die Reaktion wurde für 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt, nach welcher Zeit 15 g NaHCO₃ zugegeben wurden, und dann wurde für weitere 3 Stunden gerührt. Der Rest wurde gefiltert und 2 × mit EtOAc gewaschen. Das Filtrat wurde dann unter reduzietem Druck konzentriert. Der Rest wurde über eine Silikagelsäure mit MeOH-CHCl₃ (1:99) chromatographiert, um 6.6 (72%) als einen Feststoff zu ergeben, Smp. 185 – 187°C.
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,22 (s, 1H, H-8), 7,69 (s, 2H), NH₂), 6,00 (d, J = 2,70 Hz, 1H, H-1'), 5,21 (m, 1H, H-2'), 5,07 (bs, 1H, OH), 4,88 (m, 1H, H-3'), 4,13 (in, 1H, H-4'), 3,47 (m, 2H, H-5'), 1,49 und 1,28 (s, 3H, C(CH₃)₂).
BEISPIEL 10
(2S,1R,4R,5R)-4-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-7,7-dimethyl-3,6,8-trioxabicyclo[3.3.0]octan-2-carbonsäure (6.7)
Zu einer gerührten Lösung aus 1,6 g (3,7 mMol) [(1R,2R,4R,5R)-4-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-7-7-dimethyl-3,6,8-trioxabicyclo[3.3.0]oct-2-yl]methan-1-ol(6.6) in 200 ml of H₂O wurden 0,60 g KOH und tropfenweise eine Lösung aus 1,70 g (10,8 ml) KMnO₄ in 50 ml H₂O zugegeben. Die Mischung wurde für 225 Stunden in einem dunklen Raum beiseite gestellt. Die Reaktionsmischung wurde dann auf 5 – 10°C abgekühlt und mittels einer Lösung aus 4 ml 30% H₂O₂ in 16 ml Wasser entfärbt, während die Temperatur auf unter 10 °C gehalten wurden, wobei ein Eis-Salz-Bad verwendet wurde. Die Mischung durch Celite gefiltert und das Filtrat unter reduziertem Druck auf etwa 10 ml konzentriert und dann mit 2N HCl auf pH 4 angesäuert. Das resultierende Präzipitat wurde abgefiltert und mit Ether gewaschen, um nach dem Trocknen als einen weißen Feststoff 6.7 (70%) zu ergeben, Smp. 187 – 190°C.
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,11 (s, 1H, H-8), 7,62 (s, 2H, NH₂), 7,46 (s, 1H, COOH), 6,22 (s, 1H, H-1'), 5,42 (d, J = 5,71 Hz, 1H, H-2'), 5,34 (d, J = 6,16 Hz, 1H, H-3'), 4,63 (s, 1H, H-4'), 1,46 und 1,30 (s, 3H, C(CH₃)₂).
BEISPIEL 11
(2S,3S,4R,5R)-5-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-carbonsäure (6.8)
Es wurde eine Lösung aus 1,72 g (3,85 mMol) (2S,1R,4R,5R)-4-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-7,7-dimethyl-3,6,8-trioxabicyclo[3.3.0]octan-2-carbonsäure (6.7) in 80 ml 50% HCOOH bei 80°C für 1,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde unter reduziertem Druck evaporiert, in H₂O gelöst und die Lösung wieder evaporiert. Dieses Verfahren wurde wiederholt bis in dem Rest der Geruch nach Ameisensäure verschwunden war. Die Rekristallisierung aus Wasser ergab 1,33 g (85%) 6.8 als einen. weißen Feststoff, Smp. 221 – 223°C, zerfallen.
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,31 (s, 1H, H-8), 7,68 (s, 2H, NH₂), 5,90 (d, J = 6,55 Hz, 1H, H-1'), 4,42 (m, 1H, H-2'), 4,35 (d, J = 2,31 Hz, 1H, H-4'), 4,22 (m, 1H, H-3').
BEISPIEL 12
[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-N-ethylcarboxamid (6.9)
Zu einer gekühlten (5°C) und gerührten Lösung aus 1,29 g (3,17 mMol) (2S,3S,4R,5R)-5-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-carbonsäure (6.8) in 150 ml absoluten Ethanol wurden tropfenweise 1,15 ml eisgekühltes SOCl₂ zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und mit gesättigtem wässerigem NaHCO₃ auf einen pH 8 gebracht. Die Mischung wurde filtriert und dann wurde das Filtrat unter reduziertem Druck konzentriert, um einen weißen Feststoff zu ergeben, welcher getrocknet und dann in 20 ml trockenem Ethylamin bei –20°C für 3 Stunden und dann bei Raumtemperatur über Nacht wieder gelöst wurde. Die Reaktionsmischung wurde mit absolutem Ethanol verdünnt und das präzipitierte Produkt abgefiltert und mit trockenem Ether gewaschen, um 530 mg (72%) 6.9 als einen reinen Feststoff zu ergeben, Smp. 232 – 234°C.
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,34 (s, 1H, H-8), 8,12 (t, 1H, NH), 7,73 (s, 2H, NH₂), 5,85, (d, J = 6,93 Hz, 1H, H-1'), 4,54 (m, 1H, H-2'), 4,25 (d, J = 1,92 Hz, 1H, H-4'), 4,13 (m, 1H, H-3'), 3,28 (m, 2H, CH₂CH₃), 1,00 (t, J = 7,2 Hz, 3H, CH₂CH₃).
BEISPIEL 13
Methyl-4-(3-{9-[(4S,5S,2R,3R)-5-(N-ethylcarbamoyl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-6-aminopurin-2-yl)}prop-2-ynyl)cyclohexancarboxylat (DWH-146e)
Zu einer entgasten Lösung aus 25 mg (0,063 mMol) [(2S,3S,4R,5R)-5-(6-Amino-2-iodpurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-N-ethylcarboxamid (6.9), 16,9 mg (0,094 mMol) (5.5) und 0,75 mg CuI in jeweils 5 ml TEA und Acetonitril wurden 15 mg Pd(PPh₃)₄ zugegeben. Die Lösung wurde für 24 Stunden bei 70°C gerührt, wonach die Lösung durch Celite gefiltert wurde und über Silikagel mit MeOH-CHCl₃ (5:95) chromatographiert wurde, um DWH-146e (24%) zu ergeben.
BEISPIEL 14
(4-Prop-2-ynylcyclohexyl)methylacetat (5.6)
Es wurden Essigsäureanhydrid (0,92 ml, 8,25 mMol) und Pyridin (0,2 ml, 2,5 mMol) zu einer Lösung aus 5.3 (250 mg, 1,65 mMol) in 25 ml Ether zugeben. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur für 24 Stunden gerührt. Es wurde Wasser zu der Reaktion zugegeben und die organischen Bestandteile weiter mit 10% NaHCO₃ extrahiert. Die organischen Schichten wurden mit MgSO₄ getrocknet und evaporiert. Der Rest wurde über Silikagel mit EtOAc-Hexanen (5:95) extrahiert, um 5.6 (47%) zu ergeben.
BEISPIEL 15
[4-(3-{9[(4S,5S,2R,3R)-5-(N-Ethylcarbamoyl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-6-aminopurin-2-yl}prop-2-ynyl)cyclohexyl]methylacetat (JMR193)
Zu einer entgasten Lösung aus 125 mg (0,29 mMol) [(2S,3S,4R,5R)-5-(6-amino-2-iodpurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]-N-ethylcarboxamid (6.9), 150 mg (0,77 mMol) (5.6) und 1,0 mg CuI in 1,3 ml TEA und 4 ml DMF wurden 25 mg Pd(PPh₃)₄ zugegeben. Die Lösung wurde für 72 Stunden bei 60°C gerührt, wonach die Lösung durch Celite gefiltert und über Silikagel mit MeOH-CHCl₃ (5:95) chromatographiert wurde, um JMR193 (10%) zu ergeben.
BEISPIEL 16
Radioligandbindungsuntersuchungen
Die Bindung an die A_2A-Rezeptoren wurde mit dem Radioliganden ¹²⁵I-ZM241385 beurteilt. Die 1 stellt die Kompetition durch selektive Agonisten für die Bindung an rekombinante humane A_2A-Adenosinzeptoren dar. DWH-146e ist hochselektiv für den rekombinanten humanen A_2A (hA2A)-Subtyp. Die Selektivität für den A₃-Rezeptor (nicht gezeigt) ist weniger beeindruckend, aber immernoch etwa 50-fach. DWH-146e ist etwa 5 bis 50 mal potenter als WRC0470 beziehungsweise CGS21680 (1). Ein unerwarteter und interessanter Befund ist, dass der Ester, DWH-146e, auch etwa 50 mal potenter als die Säure, DWH-146a, ist (1).
BEISPIEL 17
Wirkung von verschiedenen Dosen JMR-193 auf den koronaren Fluss und den arteriellen Druck im Hundemodel
Es wurden alle Experimente an nüchternen adulten Mongrelhunden durchgeführt, die mit Pentobarbitalnatrium (30 mg/kg IV) anästhesiert wurden. Die Tiere wurden intubiert und mechanisch mit Raumluft mit einem positiven endexpiratorischen Druck von 4 cm H₂O ventiliert (Harvard Apparat). Die arteriellen Blutgase wurden überwacht (Model ABL5, Radiometer) und es wurden angemessene Einstellungen vorgenommen, um den pH und die Blutgase innerhalb des normalen physiologischen Bereichs zu halten. In die linke Femoralvene wurde mit einem 8F-Katheter für die Verabreichung der Flüssigkeiten und, wenn nötig, für eine zusätzliche Anästhesie eine Kanüle gelegt. Es wurde ein zusätzlicher 7F-Katheter in die rechte Femoralarterie zur Überwachung des systemischen arteriellen Drucks gelegt. In beide Femoralarterien wurden 8F-Katheter gelegt und für die Abnahme von Mikrosphären-Referenzblut (Engl.: microsphere reference blood) verwendet. Ein A 7F Millar high fidelity Druckkatheter wurde in das linke Ventrikel durch eine 8F-Schleuse in die linke Karotisarterie inseriert.
Es wurde eine Thorakotomie auf der Höhe des fünften interkostalen Raums durchgeführt und das Herz an eine perikardiale Gabel angehängt (Engl.: suspended in a pericardial cradle). Es wurde ein cut-down auf der linken Seite des Halses durchgeführt und ein Millar-Druckkatheter durch die Karotisarterie vorgeschoben bis dessen Spitze innerhalb des linken Ventrikels ruhte. Die erste Ableitung des LV-Drucks (dP/dt) wurde durch elektronische Differenzierung erhalten. Ein beleuchteter Polyethylenschlauch wurde in den linken Atriumfortsatz (Englisch: atrial appendage) zur Druckmessung und für die Injektion von Mikrosphären plaziert. Um den proximalen Teil der linken anterioren absteigenden Koranorarterie (LAD) wurde locker eine Schlingenbinde gelegt. Es wurden Ultraschallflusssonden (T206, Transonic Systems, Inc.) an einen mehr distalen Teil der LAD und an die linke Zirkumflexkoronararterie (LCX) angelegt. Für beide Protokolle, ECG lead II, wurden die arteriellen und die linken Atriumdrücke, LAD- und LCX-Flüsse, und der LV-Druck gemessen und die erste Ableitung davon wurde durchgehend überwacht und auf einem 16-Kanal thermal array stripchart Rekorder (Model K2G, Astromed, Inc.) aufgezeichnet. Zusätzlich zu der Analogaufzeichung wurden alle physiologischen Signale digitalisiert und auf einer optischen Platte zur anschließenden Analyse und zu Archivierungszwecken gespeichert.
Im Anschluß an die operative Vorbereitung wurden drei Hunden unterschiedliche Dosen JMR-193 entweder durch eine 10 Minuten dauernde i.v. Infusion oder durch eine Bolusverabreichung gegeben und die hämodynamischen Reaktionen mit dem i.v. Adenosin (ADO) (250 μg/kg/min × 3 min) verglichen. Wie in 2 gezeigt erhöhte JMR-193 den LCX koronaren Fluß in einer dosisabhängigen Weise von 42 ml/min an der Basislinie auf 66, 75, 124, 153 und 140 ml/min bei 0,05, 0,1, 0,2, 0,3 beziehungsweise 0,4 μg/kg/min × 10 min. Die maximale Floßzunahme trat bei der 0,3 μg/kg/min-Dosis ohne eine signifikante Hypotension (117 auf 103 mm Hg), wie in 3 gezeigt, auf. Bei der höchsten Dosis wurde der maximale Fluß durch eine schwache Abnahme des arteriellen Drucks (112 auf 96 mm Hg) abgeschwächt. Im Vergleich dazu erhöhte ADO den LCX-Fluss auf 139 ml/min, verursachte aber einen bezeichnenden Abfall im arteriellen Druck von 109 auf 80 mm Hg. Nach Beendigung der JMR-193-Infusion kehrten die hämodynamischen Werte auf die Basislinie mit der Pharmakodynamik t_1/2 = 12 ± 2 min zurück.
Bei der Bolusverabreichung (0,3 μg/kg) erhöhte JMR-193 den LCX-Fluss von 41 auf 140 ml/min bei einer minimalen Abnahme des arteriellen Drucks (111 auf 100 min Hg) (4). Der maximale LCX-Fluss trat 2,3 min postinjektion auf und der Fluss blieb mehr als 2 × normal für 3 – 4 min erhöht (4). Diese verlängerte Flußreaktion in Folge der Bolusverabreichung sollte JMR-193 für klinische Bildgebungsprotokolle gut geeignet machen. Zum Schluss zeigen diese Daten, dass JMR-193 als ein pharmakologischer Stressor bei der myokardialen Perfusionsbildgebung nützlich ist.
BEISPIEL 18
Verwendung von DWH-146e bei der pharmakologischen Stressperfusionsbildgebung
Es wurde die kanine operative Vorbereitung aus Beispiel 15 eingesetzt. Nach einer 15 min dauernden Basislinienstabilisierungsperiode wurde der LAD-Schlingenverschuß verengt, um eine kritische LAD-Stenose hervorzurufen. Eine kritische Stenose wurde als eine Stenose definiert, die keine Veränderung in dem ruhenden koronaren Fluss verursachte, die koronare Flussreserve jedoch vollständig aufgehoben wurde. Fünfzehn Minuten später wurde mit einer i.v. Infusion von DWH-146e (0,3 μg/kg/min) begonnen und für 5 Minuten fortgesetzt, zu welcher Zeit der LCX koronare Fluss maximal war. Es wurde dann das ^99mTc-N-NOET (Bis(n-ethyldithiocarbamato)nitrido ^99mTc(V)), ein myokardiales Perfusionsbildgebungsmittel mit ekzellenten Flussextraktionseigenschaften, intravenös injeziert (8 mCi). Fünf Minuten später wurde ein in vivo-Bild ermittelt und das Tier dann umgehend getötet, um eine Redistribution des ^99mTc-N-NOET zu verhindern. Das Herz wurde entfernt und in 4 Ringe vom Apex zur Basis geschnitten. Die Herzschnitte wurde auf ein Pappkartonblatt gelegt, mit einer Kunststoffhülle bedeckt und eine ex vivo-Bilddarstellung der Herzschnitte direkt auf dem Kollimator einer konventionellen planaren Gammakamera durchgeführt.
Die Bildhintergrundssubtraktion wurde an dem in vivo-Bild durchgeführt, wobei eine nuklearmedizinische Standardsoftware verwendet wurde, die für diesen Zweck entwickelt wurde. Das Fehlergröße wurde als ein LAD/LCX-Zahlverhältnis zwischen den Zählungen in den LAD- und LCX-Regionen von Interesse ausgedrückt, die auf die in vivo- und ex vivo-Herzbilder gezeichnet waren. Die hämodynamischen Parameter in Folge einer i.v. Infusion von DWH-146e sind in Tabelle 1 zusammengefasst.
Tabelle 1: Hämodynamische Parameter
Man kann sehen, dass die DWH-146e-Infusion den koronaren Fluss nahezu 5-fach in der normalen koronaren LCX-Arterie erhöhte. Der Fluss in der koronaren LAD-Arterie blieb jedoch konstant auf Grund der Anwesenheit der flusslimitierenden Koronarstenose. Folglich gab es ein 5:1 Missverhältnis im koronaren Fluss zu dem Zeitpunkt als ^99mTc-N-NOET injeziert wurde. Wichtig ist, dass es keine Veränderung im mittleren arteriellen Druck mit der DWH-146e-Infusion gab.
Die in vivo- und ex vivo-Bilder von diesen Hunden wiesen leicht erkennbare große anteroseptale Perfusionsdefekte auf. Das ^99mTc-N-NOET-Defektzahlverhältnis war auf sowohl dem in vivo- als auch auf dem ex vivo-Bild identisch und ähnlich zu dem, was unter Verwendung der Adenosin- und ²⁰¹Thalliumbildgebung in Hunden mit demselben Koronarstenosegrad beobachtet wurde.
Das exzellente Missverhältnis im koronaren Blutfluss, das durch diese neue Klasse von Agonisten des Adenosin A_2A-Rezeptorsubtyps gebildet wurde, war leicht unter Verwendung einer pharmakologischen Stressperfusionsbildgebung detektierbar. Die nahezu 5-fache Zunahme des koronalen Flusses ohne die Entwicklung einer Hypotension zeigt an, dass die vorliegenden Verbindungen als Vasodilatoren für die klinische Bildgebung nützlich wären.
BEISPIEL 19
Verwendung eines i.v. bolus von DWH-146e bei der pharmakologischen Stressperfusionsbildgebung
Es wurde die kanine operative Vorbereitung aus Beispiel 15 eingesetzt. Nach einer 15 min dauernden Basislinienstabilisierungsperiode wurde der LAD-Schlingenverschuß verengt, um eine kritische LAD-Stenose hervorzurufen. Eine kritische Stenose wurde als eine Stenose definiert, die keine Veränderung in dem ruhenden koronaren Fluss verursacht, die koronare Flussreserve jedoch vollständig aufgehoben wurde. Fünfzehn Minuten später wurde eine Bolusinjektion von DWH-146e (0,25 – 1,5 mcg/kg) verabreicht. Das ^99mTc-Sestamibi wurde intravenös injeziert (8 mCi). Fünf Minuten später wurde ein in vivo-Bild ermittelt und die Tiere dann umgehend getötet. Das Herz wurde entfernt und in 4 Ringe vom Apex zur Basis geschnitten. Die Herzschnitte wurde auf ein Pappkartonblatt gelegt, mit einer Kunststoffhülle bedeckt und eine ex vivo-Bilddarstellung der Herzschnitte direkt auf dem Kollimator einer konventionellen planaren Gammakamera durchgeführt.
Wenn DWH-146e durch eine i.v. Bolusinjektion verabreicht wird erhöhte es den koronaren Fluss auf eine dosisabhängige Weise (6). Die Bolusdosen im Bereich von 0,5 – 1,5 mcg/kg riefen eine 3- bis 5-fache Zunahme des koronalen Flusses hervor ohne eine klinisch signifikante Hypotension zu verursachen (6 und 7).
Wie in 8 gezeigt steigt der koronare Fluss schnell im Anschluss an eine i.v. Bolusinjektion (1,4 mcg/kg) an und erreichte ein Plateau, das für mehrere Minuten anhielt. Danach kehrte der koronare Fluss zu der Basislinie mit einer pharmakodynamischen Halbwertszeit von etwa 3 Minuten zurück und war nach 20 Minuten vollständig auf der Basislinie wieder hergestellt. In 8 war die mittlere Zeit bis zum Höchstwert des Flusses 2,4 ± 0,1 Minuten, die mittlere t_1/2 war 2,9 ± 0,5 min. Die "y"-Werte wurden unter Verwendung der Formel: y = 249,7 · e(–x/3,85) = 0,31 · x + 54,2berechnet und r ist 0,996.
Wenn die koronare Flussreaktion auf eine i.v. Bolusinjektion von DWH-146e (0,5 mcg/kg) mit der koronaren Flussreaktion auf eine i.v. Infusion von Adenosin (250 mcg/kg/min × 3 min) in demselben Hund verglichen wird (9), kann erkannt werden, dass das Ausmass der Flusszunahme größer mit einer Bolusinjektion von DWH-146e war und die Dauer der Reaktion mindestens so lang war als jene auf eine 3 min Standardadenosininfusion.

Claims

Verwendung einer Verbindung der Formel (I):
worin (a) jeder R individuell Wasserstoff, C₁-C₆-Alkyl, C₃-C₇-Cycloalkyl, Phenyl oder Phenyl(C₁-C₃)-alkyl ist; (b) X -CH₂OH, -CO₂R², -OC(O)R², -CH₂OC(O)R² oder C(O)NR³R⁴ ist, (c) jeder R², R³ und R⁴ individuell Wasserstoff, C_1–6-Alkyl; C_1–6-Alkyl, substituiert mit 1 – 3 C_1–6-Alkoxy, C₃-C₇-Cycloalkyl, C_1–6-Alkylthio, Halogen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_6–10-Aryl, worin Aryl mit 1 – 3 Halogenen, C_1–6-Alkyl, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino oder Di(C_1–6-alkyl)amino substituiert sein kann; C_6–10-Aryl; oder C_6–10-Aryl ist, substituiert mit 1 – 3 Halogenen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_1–6-Alkyl; (d) jeder R³ und R⁴ individuell Wasserstoff, C_3–7-Cycloalkyl ist oder irgendeine der Bedeutungen von R² hat, und (e) R¹ (X-(Z)-)_n((C₃-C₁₀)Cycloalkyl]-(Z')- ist, worin Z und Z' individuell (C₁-C₆)alkyl sind, optional unterbrochen von 1 – 3 S oder nichtperoxid O, oder nicht vorhanden ist, und n 1 – 3 ist; oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, bei der Detektion der Anwesenheit einer Koronararterienstenose.
Verwendung nach Anspruch 1, worin 5'-X CH₂OH oder -C(O)NR³R⁴ ist.
Verwendung nach Anspruch 1, worin R³ H und R⁴ (C₁-C₄)Alkyl ist.
Verwendung nach Anspruch 1, worin jeder R H oder (C₁-C₄)Alkyl ist.
Verwendung nach Anspruch 1, worin Z' -CH₂- oder -CH₂-CH₂- ist.
Verwendung nach Anspruch 5, worin Z -CH₂- oder -CH₂-CH₂- ist.
Verwendung nach Anspruch 1, worin C₃-C₁₀-Cycloalkyl Cyclohexyl oder Cyclopentyl umfasst.
Verwendung nach Anspruch 7, worin X (C₁-C₄)Alkoxycarbonyl, C(O)NR³R⁴ oder Acetoxymethyl ist.
Verwendung nach Anspruch 6, worin X-Z HO₂C-Z ist.
Verwendung nach Anspruch 6, worin X-Z und Z' an dem Cycloalkyl in trans vorliegen.
Verwendung nach Anspruch 1, worin R H, 5'-X Ethylaminocarbonyl und R¹-C≡C- 2-(4-Methoxycarbonylcyclohexylmethyl)ethynyl oder 2-(4-Carboxycyclohexylmethyl)ethynyl ist.
Verwendung nach Anspruch 1, worin R H, 5'-X Ethylaminocarbonyl und R¹-C≡C- 2-(4-Acetoxymethylcyclohexylmethyl)ethynyl ist.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I):
worin (a) jeder R individuell Wasserstoff, C₁-C₆-Alkyl, C₃-C₇-Cycloalkyl, Phenyl oder Phenyl(C₁-C₃)-alkyl ist; (b) X -CH₂OH, -CO₂R², -OC(O)R², -CH₂OC(O)R² oder C(O)NR³R⁴ ist, (c) jeder R², R³ und R⁴ individuell Wasserstoff, C_1–6-Alkyl; C_1–6-Alkyl, substituiert mit 1 – 3 C_1–6-Alkoxy, C₃-C₇-Cycloalkyl, C_1–6-Alkylthio, Halogen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_1–6-Aryl, worin Aryl mit 1 – 3 Halogenen, C_1–6-Alkyl, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino oder Di(C_1–6-alkyl)amino substituiert sein kann; C_6–10-Aryl; oder C_6–10-Aryl ist, substituiert mit 1 – 3 Halogenen, Hydroxy, Amino, Mono(C_1–6-alkyl)amino, Di(C_1–6-alkyl)amino oder C_1–6-Alkyl; (d) jeder R³ und R⁴ individuell Wasserstoff, C_3–7-Cycloalkyl ist oder irgendeine der Bedeutungen von R² hat, und (e) R¹ (X-(Z)-)_n[(C₃-C₁₀)Cycloalkyl]-(Z')- ist, worin Z und Z' individuell (C₁-C₆)alkyl sind, optional unterbrochen von 1 – 3 S oder nichtperoxid O, oder nicht vorhanden ist, und n 1 – 3 ist; oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon, für die Herstellung eines pharmakologischen Vasodilators für die Verwendung mit Perfusions-Bildgebungsverfahren zur die Detektion einer Koronararterienstenose.
Verwendung nach Anspruch 13, worin das besagte Bildgebungsverfahren ausgewählt wird aus der myokardialen Perfusionsbildgebung, ventrikulären Funktionsbildgebung und einem Verfahren zur Messung der koronaren Blutflussgeschwindigkeit.
Verwendung nach Anspruch 14, worin die besagte myokardiale Perfusionsbildgebung ausgewählt wird aus einer planaren Szintigraphie, Single-Photon-Emissionscomputertomographie (SPECT), Positronenemissionstomographie (PET), Kernspinresonanz (NMR)-Bildgebung, Perfusionskontrastechokardiographie, digitalen Subtraktionsangiographie (DSA) und einer ultraschnellen Röntgencomputertomographie (CINE CT).
Verwendung nach Anspruch 15, worin die besagte myokardiale Perfusionsbildgebung eine planare Szintigraphie, eine Single-Photon-Emissionscomputertomographie (SPECT) und eine Positronenemissionstomographie (PET) ist, die in Verbindung mit einem radiopharmazeutischen Mittel verwendet wird, umfassend Thallium-201, Technetium-99m, Stickstoff-13, Rubidium-82, Iod-123 oder Sauerstoff-15.
Verwendung nach Anspruch 16, worin die myokardiale Perfusionsbildgebung eine Szintigraphie und das besagte radiopharmazeutische Mittel Thallium-201 ist.
Verwendung nach Anspruch 14, worin das besagte ventrikuläre Funktionsbildgebungsverfahren ausgewählt wird aus einer Echokardiographie, einer Kontrastventrikulographie und einer Radionuklidventrikulographie.
Verwendung nach Anspruch 14, worin das besagte ventrikuläre Funktionsbildgebungsverfahren eine Echokardiographie ist.
Verwendung nach Anspruch 14, worin das besagte Verfahren zur Messung der koronalen Blutflussgeschwindigkeit aus einem Doppler-Fluß-Katheter, einer digitalen Subtraktionsangiographie und radiopharmazeutischen Bildgebungsverfahren ausgewählt wird.