DE3783579T2

DE3783579T2 - Derivate des alpha-anp und ihre herstellung.

Info

Publication number: DE3783579T2
Application number: DE8787308586T
Authority: DE
Inventors: Masahiko Fujino; Kohei Nishikawa; Mitsuhiro Wakimasu
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-09-17
Filing date: 1987-09-29
Publication date: 1993-05-13
Anticipated expiration: 2007-09-30
Also published as: JP2508755B2; EP0269220A2; JPH0726436A; EP0269220A3; US5159061A; DE3783579D1; EP0269220B1; ATE84545T1; CA1339678C; JPS63179891A

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein atriales natriuretisches Peptid-Derivat, welches als ein therapeutischer Wirkstoff bei Überdruck, ein Diuretikum, ein therapeutischer Wirkstoff bei Herz- und Hirnkreislauferkrankungen und als ein Muskelrelaxans brauchbar ist.
Kürzlich sind 3 Peptide mit starker natriuretischer Wirksamkeit aus dem menschlichen Vorhof isoliert worden und ihre Strukturen sind aufgeklärt worden. Von diesen Peptiden wurde dasjenige mit dem niedrigsten Molekulargewicht, welches aus 28 Aminosäurebruchstücken besteht, menschliches α-atriales natriuretisches Polypeptid (nachfolgend als α-hANP bezeichnet) [Biochemical Biophysical Research Communications, 118, 131-139 (1984)] genannt.
Die Strukturformel von α-hANP wird nachstehend gezeigt.
Als Ergebnis von Untersuchungen zur Struktur-Wirkungsbeziehung von α-hANP wurde später gefunden, daß α-hANP[7-28], welches sich aus dem Verkürzen des N-Terminus von α-hANP ergibt, eine derjenigen von α-hANP gleichwertige natriuretische Wirksamkeit ergibt. Von keiner anderen kurzkettigen Peptid-Verbindung außer α-hANP[7-28] ist berichtet worden, daß sie eine derjenigen von α-hANP gleichwertige oder höhere Wirksamkeit besitzt [PEPTIDE CHEMISTRY 1984, herausgegeben von N. IZUMIYA, s. 229-234, 241-246 (1984)].
Blutdrucksenkende Nicht-Peptid-Diuretika sind herkömmlicherweise als therapeutische Wirkstoffe bei Überdruck verwendet worden, aber sie sind dafür bekannt geworden, im Fall von Herzkrankheiten Nebenwirkungen hervorzurufen; sicherere Wirkstoffe sind daher erwünscht. Im Hinblick darauf wird angenommen, daß α-hANP das Potential besitzt, ein sehr sicherer Wirkstoff zu sein. Es müssen jedoch noch viele Probleme gelöst werden, wie etwa die enzymatische Zersetzung und die kurze Wirkungszeit, da es selbst ein endogenes Peptid ist.
Indem von der Tatsache Kenntnis genommen wurde, daß α-hANP[7-28] denjenigen von α-hANP gleichwertige blutdrucksenkende und natriuretische Wirkungen zeigt, während alle anderen kurzkettigen Peptide eine sehr stark verringerte Wirkung zeigen, arbeiteten die gegenwärtigen Erfinder daran, ein neues α-hANP-Derivat mit ausgezeichneter Enzymtoleranz, Wirkungsdauer usw. wie oben erwähnt zu synthetisieren. Als Ergebnis fanden die vorliegenden Erfinder, daß die neue Verbindung der vorliegenden Erfindung eine starke blutdrucksenkende und natriuretische Wirksamkeit besitzt und vervollständigten so die Erfindung.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf:
(1) Ein Peptid der Formel
worin A α-Aminoisobuttersäure, L-Ala oder D-Ala ist, C Met oder Ile ist und E L-Arg oder D-Arg ist oder ein pharmakologisch annehmbares Salz derselben.
(2) Ein Verfahren zur Herstellung eines wie vorstehend definierten Peptid-Derivates oder eines pharmakologisch annehmbaren Salzes desselben, welches das Unterziehen eines Peptid-Derivates der Formel
A-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-C-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys- Asn-Ser-Phe-E-Tyr-OH
worin A, C und E dieselbe Bedeutung wie vorstehend definiert haben, oder eines pharmakologisch annehmbaren Salzes desselben, der Oxidation umfaßt.
In der vorliegenden Beschreibung werden Aminosäuren und Peptide auch durch Abkürzungen wiedergegeben, welche gemeinhin in verwandten Gebieten verwendet werden oder, wie nachstehend gezeigt, von der IUPAC-IUB-Komission für Biochemische Nomenklatur festgelegt sind. Es ist anzumerken, daß die L-Form gemeint ist, solange die optische Konfiguration nicht festgelegt ist.
Ala: Alanin
Asp: Asparaginsäure
Asn: Asparagin
Cys: Cystein
Glu: Glutaminsäure
Gln: Glutamin
Phe: Phenylalanin
Gly: Glycin
Ile: Isoleucin
Leu: Leucin
Met: Methionin
Ser: Serin
Tyr: Tyrosin
Trp: Tryptophan
Arg: Arginin
βAla: β-Alanin
Gaba: γ-Aminobuttersäure
Ava: 5-Aminovaleriansäure
Aca: 8-Aminocaprylsäure
Chg: 2-Cyclohexylglycin
Aib: α-Aminoisobuttersäure
Achc: 1-Amino-1-cyclohexancarbonsäure
Gua: Guanidinoessigsäure
Die im Text häufig erwähnten Schutzgruppen und Reagenzien werden durch die folgenden Abkürzungen wiedergegeben:
Z: Carbobenzoxy
Boc: t-Butoxycarbonyl
Bzl: Benzyl
MBzl: p-Methoxybenzyl
Ac: Acetyl
Pme: Pentamethylbenzolsulfonyl
Mtr: 4-Methoxy-2,3,6-trimethylbenzolsulfonyl
OBzl: Benzylester
OBut: t-Butylester
DCC: N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid
DCU: N,N'-Dicyclohexylharnstoff
HONB: N-Hydroxy-5-norbornan-2,3-dicarboximid
-ONB: HONB-Ester
HOBt: 1-Hydroxybenzotriazol
Boc-ON: 2-t-Butoxycarbonyloxyimino-2-phenylacetonitril
TEA: Triethylamin
CHA: Cyclohexylamin
DCHA: Dicyclohexylamin
p-Tos-OH: para-Toluolsulfonsäure
AcOH: Essigsäure
TFA: Trifluoressigsäure
HF: wasserfreier Fluorwasserstoff
HCl: Salzsäure
AcOEt: Ethylacetat
DMF: N,N-Dimethylformamid
MeOH: Methanol
Die α-Aminobuttersäure kann in der L-Form oder D-Form sein. C bedeutet Met oder Ile. Wenn ein optisches Isomer vorliegt, spielt es keine Rolle, ob die Aminosäure in der L-Form oder D-Form ist.
Das Verfahren zur Herstellung des Peptid-Derivats (I) der vorliegenden Erfindung wird nachstehend beschrieben.
Das Peptid-Derivat (I) der vorliegenden Erfindung kann durch herkömmliche Verfahren der Peptidsynthese hergestellt werden. Irgendein Festphasen- und Flüssigphasenverfahren kann benützt werden, aber letzteres ist in vielen Fällen geeigneter. Derartige Verfahren der Peptidsynthese können gemäß irgendeinem wohlbekannten Verfahren durchgeführt werden. Peptidsyntheseverfahren, welche verwendet werden können, schließen die in PEPTIDE SYNTHESIS, M. Bodansky und M. A. Ondetti, Interscience, New York, 1966; THE PROTEINS, Bd. 2, F.M. Finn und K. Hofmann, herausgegeben von H. Nenrath und R.L. Hill, Academic Press Inc., New York, 1976; und "The Basis and Experiment of Peptide Synthesis", Nobuo Izumiya et al., Maruzen, 1985, beschriebenen Verfahren, wie etwa das Azidverfahren, das Chloridverfahren, das Säureanhydridverfahren, das Verfahren über ein gemischtes Säureanhydrid, das DCC-Verfahren, das Verfahren über einen aktiven Ester, das Verfahren mittels Woodwards Reagenz K, das Carbodiimidazolverfahren, das Oxidations-Reduktionsverfahren und das DCC/HONB-Verfahren ein.
Die Verbindung (I) der vorliegenden Erfindung kann durch Zusammenkondensieren zweier Ausgangsmaterialien hergestellt werden, einem, welches eine reaktionsfähige Carboxyl-Gruppe besitzt, die einem der 2 Bruchstücke, welche sich eine beliebige Stellung der Peptidbindung teilen, entspricht, und einemn weiterem, welches eine dem zweiten Fragment entsprechende reaktionsfähige Amino-Gruppe besitzt, nach herkömmlichen Verfahren der Peptidsynthese und Oxidieren des sich daraus ergebenden Kondensationsprodukts und, falls das Kondensationsprodukt eine Schutzgruppe besitzt, nach Entfernen der Schutzgruppe durch ein herkömmliches Verfahren.
Das Verfahren des Schützens funktioneller Gruppen, welche nicht dazu bestimmt sind, bei der Reaktion des Ausgangsmaterials beteiligt zu sein, die Schutzgruppen selbst und das Verfahren des Aktivierens an der Reaktion beteiligter funktioneller Gruppen können ebenfalls aus herkömmlichen Gruppen oder Verfahren ausgewählt werden.
Als Beispiel von Schutzgruppen für die Amino-Gruppe des Ausgangsmaterials können Carbobenzoxy, t-Butyloxycarbonyl, t-Amyloxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl, p-Methoxybenzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, Adamantyloxycarbonyl, Trifluoracetyl, Phthalyl, Formyl, o-Nitrophenylsulfenyl, Diphenylphosphinothioyl und 9-Fluorenylmethyloxycarbonyl usw. angeführt werden. Als Beispiele von Schutzgruppen für die Carboxyl-Gruppe, können Alkylester (z.B. Ester-Gruppen, wie etwa Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl und t-Butyl), Benzylester, p-Nitrobenzylester, p-Methoxybenzylester, p-Chlorbenzylester, Benzhydrylester, Phenacylester, Carbobenzoxyhydrazid, t-Butyloxycarbonylhydrazid und Tritylhydrazid usw. angeführt werden.
Als Beispiele für Schutzgruppen für das Thiol von Cystein können para-Methoxybenzyl, 4-Methylbenzyl, Benzyl, t-Butyl, Adamantyl, Trityl, Acetamidomethyl, Carbomethoxysulfenyl und 3-Nitro-2-pyridinsulfenyl usw. angeführt werden.
Als Beispiele für Schutzgruppen für die Guanidino-Gruppe von Arginin können Nitro, Tosyl, p-Methoxybenzolsulfonyl, Mesitylensulfonyl, Pentamethylbenzolsulfonyl, 4-Methoxy-2,3,6-trimethylbenzolsulfonyl, Carbobenzoxy, Isobornyloxycarbonyl und Adamantyloxyxarbonyl usw. angeführt werden. Die Guanidino- Gruppe kann in Form eines Salzes einer Säure (z.B. Benzolsulfon-, Toluolsulfon-, Salz- oder Schwefelsäure) geschützt werden.
Die Hydroxyl-Gruppe von Serin kann zum Beispiel durch Veresterung oder Veretherung geschützt werden. Als Beispiele von zu dieser Veresterung geeigneten Gruppen können Niederalkanoyl- Gruppen, wie etwa Acetyl-Gruppen, Aroyl-Gruppen, wie etwa eine Benzoyl-Gruppe, und von Kohlensäure ableitbare Gruppen, wie etwa eine Benzyloxycarbonyl-Gruppe und eine Ethyloxycarbonyl- Gruppe usw., angeführt werden. Gruppen, welche zur Veretherung geeignet sind, schließen eine Benzyl-Gruppe, Tetrahydropyranyl-Gruppe und t-Butyl-Gruppe ein. Es ist jedoch nicht immer erforderlich, die Hydroxyl-Gruppe von Serin zu schützen.
Als Beispiele von Schutzgruppen für die phenolische Hydroxyl- Gruppe von Tyrosin können Benzyl, 2,6-Dichlorbenzyl und 2-Nitrobenzyl usw. angeführt werden, aber es ist nicht immer erforderlich, die phenolische Hydroxy-Gruppe zu schützen.
Als Beispiele von Schutzgruppen für das β-Carboxyl von Asparaginsäure können Benzylester, p-Nitrobenzylester, p-Chlorbenzylester und Alkylester (z.B. t-Butylester, Cyclopentylester, Cyclohexylester und Cycloheptylester) usw. angeführt werden. Das Methionin kann in Form des Sulfoxids geschützt werden.
Als Beispiele für die aktivierte Carboxyl-Gruppe des Ausgangsmaterials können die entsprechenden Säureanhydride, Azide und aktiven Ester [Ester mit Alkohol (z.B. Pentachlorphenol, 2,4,5-Trichlorphenol, 2,4-Dinitrophenol, Cyanmethylalkohol, p-Nitrophenol, N-Hydroxy-5-norbornan-2,3-dicarboximid, N-Hydroxysuccinimid, N-Hydroxyphthalimid und N-Hydroxybenzotriazol)] erwähnt werden. Als Beispiele der aktivierten Amino- Gruppe des Ausgangsmaterials können die entsprechenden Phosphamide angeführt werden.
Die Kondensation kann in Gegenwart eines Lösungsmittels durchgeführt werden. Das Lösungsmittel kann geeigneterweise aus Lösungsmitteln ausgewählt werden, welche als bei Peptidkondensationsreaktionen nützlich bekannt sind. Als Beispiele derartiger Lösungsmittel können wasserfreies oder wäßriges Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Pyridin, Chloroform, Dioxan, Dichlormethan, Tetrahydrofuran, Acetonitril, Ethylacetat, N-Methylpyrrolidon und geeignete Gemische derselben erwähnt werden.
Die Reaktionstemperatur kann geeigneterweise aus dem Bereich gewählt werden, welcher bei der die Peptidbindung bildenden Reaktion angewandt werden kann, normalerweise im Bereich von etwa -20 bis 30ºC. Der Vorläufer (geschütztes Peptid) der Verbindung der vorliegenden Erfindung kann leicht durch Festphasen-Syntheseverfahren hergestellt werden.
Das auf diese Weise erhaltene geschützte Peptid wird dann einer Entschützugsreaktion unterzogen. Diese Reaktion hängt von der Art der verwendeten Schutzgruppe ab, in jedem Fall ist es aber bei der industriellen Herstellung bevorzugt, alle Schutzgruppen in einem einzigen Verfahren zu entfernen, ohne die Peptidbindung zu beeinflussen. Schutzgruppen werden daher ausgewählt, indem dieser Gesichtspunkt bedacht wird. Im Falle eines Cystein enthaltenden Peptids ist es manchmal günstiger, die Schutzgruppen in 2 Schritten zu entfernen, d.h. erst die anderen Schutzgruppen als diejenigen für Thiol zu entfernen, gefolgt von der Eliminierung der Schutzgruppe für Thiol, da die Reinigung leicht ist. Als Beispiele von in diesem Fall verwendeten Schutzgruppen für Thiol können die Acetamidomethyl- Gruppe und die 3-Nitro-2-pyridinsulfenyl-Gruppe erwähnt werden.
Mögliche Mittel zum Entfernen von Schutzgruppen schließen die Säurebehandlung mittels zum Beispiel wasserfreiem Fluorwasserstoff, Methansulfonsäure, Trifluormethansulfonsäure, Trifluoressigsäure oder einer gemischten Lösung derselben ein. Die Reduktion in flüssigem Ammoniak mittels Natrium kann ebenfalls angeführt werden. Die vorstehende Entschützungsreaktion durch Säurebehandlung wird normalerweise bei einer geeigneten Temperatur von -20 bis 40ºC durchgeführt. Der Zusatz eines Kationenfängers wie etwa Anisol, Phenol, Thioanisol oder Dimethylsulfid ist bei der Säurebehandlung wirkungsvoll. Schutzgruppen für Thiol, welche gegenüber einer Säurebehandlung stabil sind, wie etwa Acetamidomethyl und 3-Nitro-2-pyridinsulfenyl, können mit Iod oder Quecksilberacetat im ersteren Fall und mit Mercaptoethanol oder ähnlichem im letzteren Fall entfernt werden.
Das auf diese Weise durch Entfernen der Schutzgruppen des geschützten Peptids erhaltene Thiolpeptid wird der Oxidation unterzogen.
Mögliche Oxidationsmethoden schließen Methoden ein, welche in einem Lösungsmittel wie etwa Wasser durchgeführt werden können, oder welche Luft, Kaliumferricyanid, Iod, Diiodethan oder dergleichen verwenden.
Es ist normalerweise wünschenswert, daß die vorstehende Oxidation nach der Hochverdünnungsmethode bei einer geeigneten Temperatur von etwa 0 bis 40ºC und einem pH von etwa 6 bis 7,5 durchgeführt wird.
Das auf diese Weise hergestellte Peptid-Derivat (I) wird mittels einer Peptidtrennung, wie etwa Extraktion, Verteilung, Umfällung, Umkristallisation oder Säulenchromatographie, nach Vervollständigung der Reaktion gewonnen.
Das Peptid-Derivat (I) der vorliegenden Erfindung kann auch in Form eines Säureadduktes eines Salzes, besonders eines pharmakologisch annehmbaren Säureaddukts eines Salzes durch ein bekanntes Verfahren erhalten werden. Als Beispiele derartiger Salze können Salze anorganischer Säuren (z.B. Salzsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure) oder organischer Säuren (z.B. Essigsäure, Propionsäure, Zitronensäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Oxalsäure und Methansulfonsäure) usw. angeführt werden.
Die pharmakologische Wirkung des Peptid-Derivats der vorliegenden Erfindung wird nachstehend beschrieben.

Bluthochdruckwirkung in Spontanhochdruckratten (SHR)

Drei männliche SHRs im Alter von 20 Wochen in jeder Gruppe wurden mit Pentobarbital (50 mg/kg, intraperitoneale Verabreichung) anästhesiert. SP-10- und SP-45-Polyethylenröhrchen (hergestellt von Natsume Seisakusho, Japan) wurden in die Leistenarterie beziehungsweise -vene eingeführt und durch jede dieser wurde eine Kanüle zur Halsstelle über das subkutane Rückengewebe hindurchgeführt, und ein Ende der Kanüle wurde dort befestigt. Die Ratten wurden am folgenden Tag in den Experimenten verwendet. Als α-hAPN-Derivate wurden in Beispiel 1 erhaltenes [Aib&sup6;]-α-hANP[6-28] und in Bespiel 8 erhaltenes [Aib&sup6;, Ile¹²]-α-hANP[6-28] und als Kontrolle α-hANP[7-28] in Lösung in physiologischer Kochsalzlösung jeweils im Verhältnis von 100 ug/250 ul/kg Körpergewicht intravenös verabreicht. Die Hochdruckwirksamkeiten werden als Ausmaß der maximalen Abnahme des Blutdrucks (Unterschied zum Wert vor der Administration) gezeigt, welcher nach der Verabreichung der Titelverbindung auftrat. Hochdruckwirksamkeiten in SHR Ausmaß der Blutdruckabnahme (Δmm Hg)
Das Peptid-Derivat (I) der vorliegenden Erfindung und ihre Salze zeigen eine starke blutdrucksenkende Wirksamkeit in Spontanhochdruckratten (SHR) und zusätzlich ist die Wirkung stärker als irgendeines bekannten α-hANP-Derivats.
Zusätzlich sind das Peptid-Derivat (I) der vorliegenden Erfindung und seine Salze im allgemeinen von niedriger Toxizität.
Das Peptid-Derivat (I) der vorliegenden Erfindung oder sein Salz können daher zum Behandeln von Hochdruck, Herzinsuffizienz, Nephritis, peripherer Durchblutungsstörung oder ähnlichen Zuständen in Säugern (z.B. Mäuse, Ratten, Kaninchen, Hunde, Katzen und Menschen) verwendet werden.
Das Peptid-Derivat der vorliegenden Erfindung kann in der Form einer freien Base oder eines Säureaddukts seines Salzes verabreicht werden. Die Dosierung ist normalerweise ein entsprechender Wert im Bereich von 1 ng bis 10 mg je kg Körpergewicht, berechnet als freie Base, sowohl für die freien Basen als auch die Säureaddukt-Salze des Derivats (I). Das Derivat der vorliegenden Erfindung wird hauptsächlich parenteral verabreicht (z.B. durch intravenöse oder subkutane Injektion, intraventrikuläre, intraspinale, nasale oder rektale Verabreichung); in einigen Fällen wird es jedoch oral verabreicht.
Dosierungsformen, welche verwendet werden können, schließen eine Injektion und ein Suppositorium ein. Das Derivat der vorliegenden Erfindung ist in Substanz stabil und es kann daher in Lösung in physiologischer Kochsalzlösung gelagert werden, aber es kann auch in Anwesenheit von Mannit oder Sorbit lyophilisiert werden, um eine Ampulle zu bilden, und kann vor Gebrauch gelöst werden.

Beispiele

Die vorliegende Erfindung wird nachfolgend mit einigen Beispielen in größerer Einzelheit beschrieben. Zum Reinigen des Endprodukts verwendetes Sephadex LH-20 wird von Pharmacia Biotechnology, Schweden, produziert. Die Reinheiten der hergestellten Verbindungen wurden durch Dünnschichtchromatographie mittels Kieselgel 60F-254 (Merck, Westdeutschland) bestimmt. Die verwendeten Entwicklungslösungsmittel waren wie folgt:
Rf¹: Chloroform-Methanol (19:1)
Rf²: Chloroform-Methanol-Essigsäure (9:1:0,5)
Rf³: Chloroform-Methanol-Wasser (7:3:0,5)
Rf&sup4;: Ethylacetat-n-Butanol-Essigsäure-Wasser (1:1:1:1)

Beispiel 1

Herstellung von [Aib&sup6;]-α-hANP[6-28]

(I) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

5,6 g Boc-Tyr(Bzl)-OBzl wurden in 30 ml TFA gelöst und eingeengt, darauf wurden 10 ml 3N-HCl/Dioxan zugesetzt. Ether wurde darauf zugesetzt, um Kristalle auszufällen, welche darauf durch Filtration isoliert und getrocknet wurden. Die trockenen Kristalle wurden in 50 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 1,9 ml TEA, 5,8 g Boc-Arg(Pme)-OH, 1,78 g HOBt und 2,72 g DCC zugesetzt und dies wurde vom Rühren über Nacht gefolgt. Der daraus folgende DCU wurde filtriert, dieses Filtrat wurde eingeengt, der daraus folgende Rückstand wurde in AcOEt gelöst, die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat und darauf mit Wasser gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Nach Filtrieren des Trocknungsmittels wurde das Filtrat eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 9,15 g (Ausbeute: 92,0%)
Schmp. : 114 bis 116ºC, Rf¹: 0,39
[α]D²&sup5;: -5,2º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub7;N&sub5;O&sub8;S):

Berechnet: C 65,27; H 6,94; N 8,46; S 3,87
Gefunden: C 65,29; H 7,05; N 8,43; S 3,86

(II) Herstellung von Boc-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

9,0 Boc-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl wurden mit TFA in derselben Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 100 ml Acetonitril gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 4,4 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Phe-ONB (hergestellt mit 3,2 g Boc- Phe-OH, 2,4 g HONB und 2,7 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über Nacht gefolgt. Diesem Gemisch wurde 1 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt, gefolgt von 30 Minuten Schütteln, darauf wurde das Gemisch eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die daraus folgende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Material wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 10,2 g (95,9%)
Schmp. : 136 bis 137ºC, Rf¹: 0,39
[α]D²&sup5;: -8,5º (c=0,9, in DMF)
Elementaranalyse (als C&sub5;&sub4;H&sub6;&sub6;N&sub6;O&sub9;S):
Berechnet: C 66,51; H 6,82; N 8,62; S 3,29
Gefunden: C 66,56; H 6,91; N 8,61; S 3,22

(III) Herstellung von Boc-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

9,8 g Boc-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl wurden mit TFA auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 100 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 3 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Ser(Bzl)-ONB (hergestellt mit 3,6 g Boc- Ser(Bzl)-OH, 2,4 g HONB und 2,7 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Diesem Gemisch wurden 0,5 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt, gefolgt von 30 Minuten Schütteln, danach wurde das Gemisch eingeengt. Der daraus folgende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die daraus folgende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Material wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 10,9 g (94,4%)
Schmp. : 117 bis 119ºC, Rf¹: 0,41
[α]D²&sup5;: -7,7º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub4;H&sub7;&sub7;N&sub7;O&sub1;&sub1;S):

Berechnet: C 66,70; H 6,73; N 8,51; S 2,78
Gefunden: C 66,47; H 6,75; N 8,53; S 2,84

(IV) Herstellung von Boc-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)- OBzl

4,5 g Boc-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl wurden mit TFA auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminverbindung wurde in 50 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 1,5 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Asn-ONB (hergestellt mit 1,2 g Boc-Asn-OH, 1,0 g HONB und 1,2 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren während einer Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Wasser gefällt und durch Filtration gesammelt. Das gesammelte Filtrat wurde in DMF gelöst und unlösliches Material wurde filtriert, dann wurde die Lösung eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 4,75 g (96,0%)
Schmp. : 148 bis 150ºC, Rf¹: 0,18
[α]D²&sup5;: -21,0º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub8;H&sub8;&sub3;N&sub9;O&sub1;&sub3;S):

Berechnet: C 63,93; H 6,63; N 9,87; S 2,51
Gefunden: C 63,75; H 6,66; N 10,23; S 2,58

(V) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)- Tyr(Bzl)-OBzl

4,6 g Boc-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl wurden mit TFA auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminverbindung wurde in 50 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 0,9 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Cys(MBzl)-ONB (hergestellt mit 2,0 g Boc-Cys(MBzl)-OH.CHA, 0,90 g HONB und 1,04 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 5,25 g (96,9%)
Schmp. : 177 bis 183ºC, Rf¹: 0,24
[α]D²&sup5;: -18,6º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub7;&sub9;H&sub9;&sub6;N&sub1;&sub0;O&sub1;&sub5;S&sub2;.H&sub2;O):

Berechnet: C 62,92; H 6,55; N 9,29; S 4,25
Gefunden: C 62,92; H 6,47; N 9,35; S 4,74

(VI) Herstellung von Boc-Leu-Gly-OBzl

20,2 g H-Gly-OBzl.p-Tos-OH wurden 200 ml Acetonitril zugesetzt und nachfolgend wurde das Gemisch mit Eis gekühlt und darauf wurden 8,4 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Leu-ONB (hergestellt mit 11,6 Boc-Leu-OH, 9,9 g HONB und 11,3 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde darauf in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Material wurde eingeengt, um das gewünschte Produkt in Form einer öligen Substanz zu erhalten.
Ausbeute: 19,0 g (quantitativ), Rf¹: 0,78

(VII) Herstellung von Boc-Gly-Leu-Gly-OBzl

16,1 g Boc-Leu-Gly-OBzl wurden mit 50 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 150 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, gefolgt von der Neutralisation mit TEA. Dieser neutralisierten Lösung wurde Boc-Gly-ONB (hergestellt mit 5,3 g Boc-Gly-OH, 6,0 g HONB und 6,8 g DCC) zugesetzt, und dies wurde vom Rühren während einer Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt, wonach es mit Petrolbenzin kristallisiert wurde und durch Filtration gesammelt wurde.
Ausbeute: 13,0 g (quantitativ)
Schmp. : 110 bis 111ºC, Rf¹: 0,39
[α]D²&sup5;: -13,4º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub2;H&sub3;&sub3;N&sub3;O&sub6;):

Berechnet: C 60,67; H 7,64; N 9,65
Gefunden: C 61,20; H 7,32; N 9,65

(VIII) Herstellung von Boc-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl

8,7 g Boc-Gly-Leu-Gly-OBzl wurden mit TFA auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 100 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 3,3 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc- Ser(Bzl)-ONB (hergestellt mit 6,3 g Boc-Ser(Bzl)-OH, 4,1 g HONB und 4,7 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Dem Gemisch wurden 2 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt, gefolgt von 30 Minuten Schütteln. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Nach dem Einengen wurde das getrocknete Produkt mit Ether-Petroleumbenzin gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 9,6 g (78,3%)
Schmp. : 79 bis 81ºC, Rf¹: 0,33
[α]D²&sup5;: -12,0º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub2;H&sub4;&sub4;N&sub4;O&sub8;):

Berechnet: C 62,73; H 7,24; N 9,14
Gefunden: C 62,92; H 7,52; N 9,16

(IX) Herstellung von Boc-Gln-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl

3,6 g Boc-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl wurden mit TFA auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1-(I) behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 40 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 1,1 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Gln-ONB (hergestellt mit 1,93 g Boc-Gln-OH, 1,55 g HONB und 1,77 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren während einer Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Wasser gewaschen und durch Filtration gesammelt. Der gesammelte Niederschlag wurde erneut in DMF gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde nach dem Abfiltrieren unlöslichen Materials eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gewaschen und durch Filtration gesammelt. Das gesammelte Filtrat wurde mit AcOEt und dann mit Acetonitril gewaschen.
Ausbeute: 3,35 g (76,9%)
Schmp. : 182 bis 184ºC, Rf²: 0,50
[α]D²&sup5;: -11,3º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub7;H&sub5;&sub2;N&sub6;O&sub1;&sub0;):

Berechnet: C 59,99; H 7,07; N 11,34
Gefunden: C 59,98; H 7,14; N 11,44

(X) Herstellung von Boc-Ala-Gln-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl

3,2 g Boc-Gln-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl wurden mit 25 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminverbindung wurde in 30 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 0,9 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Ala-ONB (hergestellt mit 1,0 g Boc-Ala-OH, 1,05 g HONB und 1,20 g DCC) zugesetzt und dies wurde von 5 Stunden Rühren gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 3,5 g (quantitativ)
Schmp. : 205 bis 211ºC (zersetzt), Rf²: 0,44
[α]D²&sup5;: -14,6º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub0;H&sub5;&sub7;N&sub7;O&sub1;&sub1;.1/2H&sub2;O):

Berechnet: C 58,72; H 7,12; N 11,94
Gefunden: C 58,54; H 6,90; N 11,74

(XI) Herstellung von Boc-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-OH

1,50 g Boc-Ala-Gln-Ser(Bzl)-Gly-Leu-Gly-OBzl wurden in 100 ml AcOH gelöst und 8 Stunden der katalytischen Reduktion in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator unterzogen. Nach Filtrieren des Katalysators wurde die reduzierte Lösung eingeengt, der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 1,10 g (94,3%)
Schmp. : 178 bis 180ºC (zersetzt), Rf³: 0,14
[α]D²&sup5;: -15,3º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub6;H&sub4;&sub5;N&sub7;O&sub1;&sub1;):

Berechnet: C 49,44; H 7,18; N 15,52
Gefunden: C 49,14; H 7,15; N 15,52

(XII) Herstellung von Z-Ile-Gly-OBzl

8,0 g H-Gly-OBut.HCl wurden 200 ml Acetonitril zugesetzt und diese Gemisch wurde nachfolgend mit Eis gekühlt, darauf wurden 6,7 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Z-Ile-ONB (hergestellt mit 14,6 g Z-Ile-OH, 11,0 g HONB und 12,5 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Dem Gemisch wurden 2,5 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt und dies wurde von 30 Minuten Schütteln gefolgt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt, der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether-Petroleumbenzin kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 17,8 g (85,0%)
Schmp. : 127 bis 128ºC, Rf²: 0,81
[α]D²&sup5;: -4,5º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub0;H&sub3;&sub0;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 63,47; H 7,99; N 7,40
Gefunden: C 63,56; H 8,16; N 7,47

(XIII) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Ile-Gly-OBut

5,0 g Z-Ile-Gly-OBut wurde in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator in 150 ml MeOH reduziert. Die so erhaltene Aminkomponente wurde in 50 ml DMF gelöst. Der sich daraus ergebenden Lösung wurden 5,8 g Boc-Arg(Pme)-OH und 1,8 g HOBt zugesetzt und dies wurde vom Kühlen mit Eis gefolgt, darauf wurden 2,8 g DCC zugefügt, gefolgt vom Rühren über eine Nacht. Der daraus folgende DCU wurde filtriert und das Filtrat wurde eingeengt, darauf wurde der sich daraus ergebende Rückstand in 200 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde nach Einengen mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 8,52 g (quantitativ)
Schmp. : 115 bis 118ºC, Rf¹: 0,32
[α]D²&sup5;: -10,4º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub4;H&sub5;&sub8;N&sub6;O&sub8;S):

Berechnet: C 57,44; H 8,22; N 11,82; S 4,51
Gefunden: C 58,24; H 8,20; N 11,68; S 4,54

(XIV) Herstellung von Boc-Asp-(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH.CHA

8,50 g Boc-Arg(Pme)-Ile-Gly-OBut wurden in 60 ml TFA gelöst und das Gemisch wurde nachfolgend 1 Stunde bei Raumtemperatur geschüttelt. Das Gemisch wurde nach Einengen mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Das gesammelte Filtrat wurde in 100 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 3,8 ml TEA zugesetzt. Dem Gemisch wurde Boc-Asp-(OBzl)-ONB (hergestellt mit 4,85 g Boc-Asp(OBzl)-OH, 2,97 g HONB und 3,40 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde nach Einengen mit Zitronensäure angesäuert und mit 200 ml AcOEt extrahiert. Der sich daraus ergebende Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, wonach er mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde nach Einengen mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Der gesammelte Niederschlag wurde in AcOEt gelöst, darauf wurden 1,1 ml CHA zugesetzt. Das Gemisch wurde mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt und die gesammelten Kristalle wurden mit Acetonitril umkristallisiert.
Ausbeute: 7,40 g (64,3%)
Schmp. : 146 bis 148ºC, Rf²: 0,43
[α]D²&sup5;: -4,2º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub7;H&sub7;&sub4;N&sub8;O&sub1;&sub1;S):

Berechnet: C 58,85; H 7,78; N 11,68; S 3,34
Gefunden: C 58,59; H 7,74; N 11,61; S 3,50

(XV) Herstellung von Boc-Met-Asp-(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

3,0 g Boc-Asp-(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH.CHA wurden in 100 ml AcOEt suspendiert. Der sich daraus ergebenden Suspension wurden 4 ml 1N-H&sub2;SO&sub4; und 50 ml Wasser zugesetzt und dieses Gemisch wurde nachfolgend geschüttelt. Das Gemisch wurde darauf mit Wasser gewaschen, wonach es mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit 30 ml TFA behandelt. Die sich daraus ergebende Aminkomponente wurde in 40 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, darauf wurden 0,9 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Met-ONB (hergestellt mit 4,3 g Boc-Met-OH.DCHA, 2,0 g HONB und 2,3 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Nach Zusatz von 1 ml AcOH wurde das Gemisch eingeengt; der entstandene Rückstand wurde mit AcOEt kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 3,1 g (quantitativ)
Schmp. : 175 bis 178ºC, Rf²: 0,41
[α]D²&sup5;: -11,2º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub6;H&sub7;&sub0;N&sub8;O&sub1;&sub2;S&sub2;):

Berechnet: C 55,74; H 7,12; N 11,30; S 6,47
Gefunden: C 55,95; H 7,42; N 11,26; S 5,96

(XVI) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Met-Asp-(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH

2,6 g Boc-Met-Asp-(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH wurden mit 20 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 50 ml DMF gelöst und mit Eis gekühlt, dann wurde 1 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Arg(Pme)-ONB (hergestellt mit 1,52 g Boc-Arg(Pme)-OH, 1,62 g HONB und 0,71 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Diesem Gemisch wurden 2 ml AcOH zugesetzt und dies wurde gefolgt vom Einengen. Das sich daraus ergebende Konzentrat wurde mit AcOEt gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 3,03 g (85,2%)
Schmp. : 230ºC (zersetzt), Rf²: 0,37
[α]D²&sup5;: -10,2º (c=0,2, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub3;H&sub9;&sub6;N&sub1;&sub2;O&sub1;&sub5;S&sub3;):

Berechnet: C 55,73; H 7,13; N 12,38; S 7,09
Gefunden: C 56,33; H 7,34; N 12,17; S 6,87

(XVII) Herstellung von Boc-Gly-Gly-OBzl

22,2 g H-Gly-OBzl.p-Tos-OH wurden 200 ml Acetonitril zugesetzt und das Gemisch wurde nachfolgend mit Eis gekühlt, darauf wurden 9,2 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Gly-ONB (hergestellt mit 10,5 g Boc-Gly-OH, 11,9 g HONB und 13,6 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Darauf wurde das Gemisch nach der Zugabe von 1 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst und die Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Petroleumbenzin kristallisiert und durch Filtration gesammelt; die gesammelten Kristalle wurden mit Ether gewaschen.
Ausbeute: 18,2 g (94,1%)
Schmp. : 81 bis 82ºC, Rf¹: 0,53

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub6;H&sub2;&sub2;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 59,62; H 6,88; N 8,69
Gefunden: C 59,85; H 6,96; N 8,66

(XVIII) Herstellung von Boc-Phe-Gly-Gly-OBzl

17,0 g Boc-Gly-Gly-OBzl wurden mit 150 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 150 ml DMF gelöst und dieses Gemisch wurde nachfolgend mit Eis gekühlt und mit TEA neutralisiert. Dieser Lösung wurde Boc-Phe-ONB (hergestellt mit 10,0 g Boc-Phe-OH, 7,5 g HONB und 8,6 g DCC) zugesetzt und dies wurde gefolgt vom Rühren über eine Nacht.
Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Nach Einengen des getrockneten Produkts wurde der sich daraus ergebende Rückstand mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 16,9 g (95,5%)
Schmp. : 94 bis 96ºC, Rf¹: 0,41
[α]D²&sup5;: -6,9º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub5;H&sub3;&sub1;N&sub3;O&sub6;):

Berechnet: C 63,95; H 6,65; N 8,95
Gefunden: C 63,96; H 6,68; N 9,20

(XIX) Herstellung von Boc-Phe-Gly-Gly-OH.CHA

7,0 g Boc-Phe-Gly-Gly-OBzl wurden in Anwesenheit von Pd- Schwarz als Katalysator in 200 ml MeOH reduziert und dies wurde vom Einengen gefolgt. Das sich daraus ergebende Konzentrat wurde nach der Zugabe von 1,72 ml CHA mit AcOEt kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 6,90 g (96,1%)
Schmp. : 159 bis 161ºC, Rf²: 0,25
[α]D²&sup5;: -10,1º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub8;N&sub4;O&sub6;):

Berechnet: C 60,28; H 8,00; N 11,71
Gefunden: C 59,94; H 7,99; N 11,97

(XX) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH

Boc-Phe-Gly-Gly-OH (hergestellt mit 6,9 g Boc-Phe-Gly- Gly-OH.CHA und 18 ml 1N-H&sub2;SO&sub4;) wurde mit TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in DMF gelöst und dieses Gemisch wurde nachfolgend mit Eis gekühlt, darauf wurden 4,62 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc- Cys(MBzl)-ONB (hergestellt mit 6,35 g Boc-Cys(MBzl)-OH.CHA, 2,88 g HONB und 3,30 DCC) zugesetzt und dies wurde von 3 Stunden Rühren gefolgt. Das Gemisch wurde nach der Zugabe von 0,57 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 200 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde nach Einengen mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 6,0 g (69,1%)
Schmp. : 120 bis 122ºC, Rf²: 0,51
[α]D²&sup5;: -19,8º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub9;H&sub3;&sub8;N&sub4;O&sub8;S):

Berechnet: C 57,79; H 6,35; N 9,30; S 5,32
Gefunden: C 57,48; H 6,63; N 9,31; S 4,89

(XXI) Herstellung von Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH

300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH wurden mit 5 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 3 ml DMF gelöst, darauf wurden 0,2 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Aib-ONB (hergestellt mit 112 mg Boc-Aib-OH, 110 mg HONB und 124 mg DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Das Gemisch wurde nach der Zugabe von 0,1 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in AcOEt gelöst. Das sich daraus ergebende Gemisch wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach es mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 240 mg (69,8%)
Schmp. : 84 bis 86ºC, Rf²: 0,34
[α]D²&sup5;: -38,8º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub3;H&sub4;&sub5;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 57,63; H 6,59; N 10,18; S 4,66
Gefunden: C 57,87; H 6,95; N 9,81; S 4,76

(XXII) Herstellung von Boc-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

500 mg Boc-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl wurden in 5 ml TFA gelöst und dies wurde vom Einengen gefolgt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Der ausgefällte Niederschlag wurde in 3 ml DMF gelöst und dieses Gemisch wurde nachfolgend mit Eis gekühlt, darauf wurden 0,47 ml TEA zugesetzt und dies wurde vom Rühren gefolgt. Das Gemisch wurde darauf mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Der ausgefällte Niederschlag wurde in 5 ml DMF gelöst. Dieser Lösung wurden 222 mg Boc-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-OH und 121 mg HONB zugesetzt und dies wurde gefolgt vom Kühlen mit Eis. Darauf wurden 138 mg DCC zugesetzt, gefolgt von 3 Tagen Rühren. Der daraus folgende DCU wurde filtriert und das sich daraus ergebende Filtrat wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Acetonitril gefällt und durch Filtration gesammelt. Der gesammelte Niederschlag wurde mit wäßrigem Acetonitril gewaschen.
Ausbeute: 585 mg (87,1%)
Schmp. : 235 bis 237ºC (zersetzt), Rf²: 0,14
[α]D²&sup5;: -18,4º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub0;&sub0;H&sub1;&sub3;&sub1;N&sub1;&sub7;O&sub2;&sub3;S&sub2;):

Berechnet: C 59,95; H 6,59; N 11,89; S 3,20
Gefunden: C 60,00; H 6,76; N 11,83; S 3,82

(XXIII) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 500 mg der in Beispiel 1-(XXII) erhaltenen Verbindung, 357 mg Boc-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH, 90 mg HONB und 309 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 680 mg (84,0%)
Schmp. : 220 bis 224ºC, Rf²: 0,29
[α]D²&sup5;: -14,7º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub5;&sub8;H&sub2;&sub1;&sub7;N&sub2;&sub9;O&sub3;&sub5;S&sub5;):

Berechnet: C 58,52; H 6,75; N 12,53; S 4,94
Gefunden: C 58,82; H 6,92; N 12,23; S 5,13

(XXIV) Herstellung von Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly- Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu- Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 95 mg Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 290 mg (82,3%)
Schmp.: 232 bis 233ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub6;H&sub2;&sub5;&sub2;N&sub3;&sub4;O&sub4;&sub1;S&sub6;):

Berechnet: C 58,60; H 6,66; N 12,49; S 5,05
Gefunden: C 58,48; H 7,14; N 12,28; S 4,62 (XXV) Herstellung von
200 mg der in Beispiel 1-(XXIV) erhaltenen Verbindung wurden 0,3 ml Anisol, 0,3 ml Thioanisol und 3 ml HF zugesetzt und dies wurde vom Rühren bei 0ºC über 60 Minuten gefolgt, darauf wurde das Gemisch eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und die Etherschicht wurde durch Dekantieren enfernt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 10 ml Wasser gelöst, gefolgt vom Ionenaustausch über eine Säule (1 x 10 cm) aus Amberlite IRA-400 (Rohm and Haas Co., USA, Acetat-Typ). Die Lösung wurde darauf mit Wasser auf ein Volumen von 1 l verdünnt und mit wäßrigem C-NH&sub3; auf pH 6,9 gestellt. Die verdünnte Lösung wurde nach der Zugabe von 500 mg AcONH&sub4; 4 Stunden bei Raumtemperatur mit Luft oxidiert und dies wurde von der Lyophilisierung gefolgt. Das lyophilisierte Produkt wurde der Elution mit 1N wäßriger AcOH über eine Sephadex LH-20- (2,6 x 120 cm) Säule unterzogen. Eine Fraktion von 263 bis 305 ml wurde gesammelt und lyophilisiert.
Ausbeute: 16 mg (12%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,03, Ser 1,89, Glu 1,03, Gly 5,04, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,82, Met 1,00, Ile 1,00, Leu 1,00, Tyr 0,90, Phe 1,96, Arg 3,06, Aib 0, 97

Beispiel 2

Herstellung von [Achc&sup6;]-α-hANP[6-28]

(1) Herstellung von Boc-Achc-OH

2,0 g 1-Amino-1-cyclohexancarbonsäure wurden in Dioxan-Wasser (5 ml-5 ml) suspendiert und 3 ml TEA wurden zugesetzt. Diesem Gemisch wurden 3,8 g Boc-ON zugesetzt und dies wurde gefolgt vom Rühren über 2 Tage. Das Gemisch wurde darauf eingeengt. Das sich daraus ergebende Konzentrat wurde nach dem Zusetzen von Wasser mit Ether gewaschen. Die Wasserschicht wurde mit Eis gekühlt und mit HCl angesäuert, wonach sie mit AcOEt extrahiert wurde. Der sich daraus ergebende Extrakt wurde nach dem Waschen mit Wasser mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Petroleumbenzin kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 0,60 g (17,6%)
Schmp. : 173 bis 175ºC, Rf²: 0,51

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub2;H&sub2;&sub1;NO&sub4;):

Berechnet: C 59,24; H 8,70; N 5,76
Gefunden: C 59,04; H 8,87; N 5,64

(II) Herstellung von Boc-Achc-Cys(MBzl)Phe-Gly-Gly-OH

Unter Verwendung von 300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 134 mg Boc-Achc-OH, 108 mg HONB und 124 mg DCC, wurde das gewünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXI) erhalten.
Ausbeute: 202 mg (54,9%)
Schmp. : 74 bis 77ºC, Rf²: 0,40
[α]D²&sup5;: -30,7º (c=1,2, In DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub6;H&sub4;&sub9;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 59,40; H 6,79; N 9,62; S 4,41
Gefunden: C 59,87; H 7,19; N 9,39; S 4,69

(III) Herstellung von Boc-Achc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly- Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu- Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 101 mg Boc-Achc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 301 mg (84,5%)
Schmp.: 235 bis 240ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub9;H&sub2;&sub5;&sub6;N&sub3;&sub4;O&sub4;&sub1;S&sub6;):

Berechnet: C 58,92; H 6,70; N 12,36; S 4,99
Gefunden: C 58,68; H 7,11; N 12,07; S 4,66 (IV) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 2-(III) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) durchgeführt.
Ausbeute: 30 mg (22%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,04, Ser 1,87, Glu 1,06, Gly 5,03, Ala 1,00, Cys-Hälfte 1,80, Met 0,99, Ile 1,00, Leu 1,01, Tyr 0,91, Phe 1,94, Arg 3,09, Achc 1,05

Beispiel 3

Herstellung von [D-Ala&sup9;]-α-hANP[7-28]

(1) Herstellung von Boc-D-Ala-Gly-OBzl

7,4 g H-Gly-OBzl.p-Tos-OH wurden 100 ml Acetonitril zugesetzt und dies wurde vom Kühlen mit Eis gefolgt. Darauf wurden 3,1 ml TEA, 3,78 g Boc-D-Ala-OH, 3,96 g HONB und 4,54 g DCC zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Der sich daraus ergebende DCU wurde filtriert und das Filtrat wurde eingeengt, darauf wurde der sich daraus ergebende Rückstand in 300 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde nach Einengen mit Petroleumbenzin kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 6,70 g (quantitativ)
Schmp.: 77 bis 78ºC, Rf²: 0,66
[α]D²&sup5;: +10,5º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub7;H&sub2;&sub4;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 60,70; H 7,19; N 8,33
Gefunden: C 61,08; H 7,21; N 8,07

(II) Herstellung von Boc-Phe-D-Ala-Gly-OBzl

3,70 g Boc-D-Ala-Gly-OBzl wurden in 30 ml TFA gelöst und dies wurde vom Einengen gefolgt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 40 ml Acetonitril gelöst und mit Eis gekühlt und dies wurde von der Neutralisation mit TEA gefolgt. Dieser Lösung wurden 4,26 g Boc-Phe-ONB zugesetzt und dieses Gemisch wurde nachfolgend über eine Nacht gerührt. Das Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 200 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 4,25 g (87,9%)
Schmp. : 127 bis 129ºC, Rf²: 0,60
[α]D²&sup5;: -0,5º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub3;N&sub3;O&sub6;):

Berechnet: C 64,58; H 6,88; N 8,69
Gefunden: C 64,45; H 7,07; N 8,78

(III) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-D-Ala-Gly-OH

0,48 g Boc-Phe-D-Ala-Gly-OBzl wurden in 50 ml MeOH in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator reduziert. Das reduzierte Produkt wurde eingeengt, der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 5 ml TFA gelöst, gefolgt vom Einengen. Das sich daraus ergebende Konzentrat wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Der gesammelte Niederschlag wurde in 5 ml DMF gelöst und dies wurde vom Kühlen mit Eis gefolgt. Dieser Lösung wurden 0,35 ml TEA zugesetzt, darauf wurde Boc- Cys(MBzl)-ONB (hergestellt mit 0,48 g Boc-Cys(MBzl)-OH-CHA, 0,22 g HONB und 0,25 g DCC) zugesetzt und dieses Gemisch wurde nachfolgend über eine Nacht gerührt. Diesem Gemisch wurden 0,2 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt und das Gemisch wurde eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 50 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt. Der gesammelte Niederschlag wurde mit dem Lösungsmittel CHCl&sub3;-MeOH-AcOH (9:0,5:0,2) über eine Kieselgel-Säule (25 g Kieselgel) eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktion wurde gesammelt und eingeengt. Das sich daraus ergebende Konzentrat wurde mit Ether gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 0,24 g (38,9%)
Schmp. : 104 bis 107ºC, Rf²: 0,49
[α]D²&sup5;: -6,0º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub0;H&sub4;&sub0;N&sub4;O&sub8;S):

Berechnet: C 58,43; H 6,54; N 9,08; S 5,20
Gefunden: C 58,57; H 6,66; N 9,16; S 5,17

(IV) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-D-Ala-Gly-Arg(Pme)- Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 86 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-D-Ala-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 290 mg (83,8%)
Schmp. : 235 bis 240ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub3;H&sub2;&sub4;&sub7;N&sub3;&sub3;O&sub4;&sub0;S&sub6;):

Berechnet: C 58,74; H 6,65; N 12,36; S 5,14
Gefunden: C 58,77; H 7,03; N 12,54; S 4,81 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 3-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 22 mg (16%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,08, Ser 1,94, Glu 1,08, Gly 4,07, Ala 2,02, Cys-Hälfte 1,43, Met 0,85, Ile 1,00, Leu 1,03, Tyr 0,83, Phe 1,95, Arg 3,08

Beispiel 4

Herstellung von [Ava&sup9;, desGly¹&sup0;]-α-hANP[7-28]

(I) Herstellung von Boc-Phe-Ava-OBzl

6,3 g H-Ava-OBzl.p-Tos-OH wurden in 50 ml DMF gelöst und dies wurde vom Kühlen mit Eis gefolgt, darauf wurden 3,5 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Phe-ONB (hergestellt mit 4,0 g Boc-Phe-OH, 3,0 g HONB und 3,4 g DCC) zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Dem Gemisch wurde 1 ml (CH&sub3;)&sub2;N(CH&sub2;)&sub3;NH&sub2; zugesetzt, gefolgt vom Einengen. Darauf wurde der sich daraus ergebende Rückstand in 200 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Petroleumbenzin kristallisiert, durch Filtration gesammelt und getrocknet.
Ausbeute: 6,8 g (quantitativ)
Schmp. : 89 bis 90ºC, Rf²: 0,66
[α]D²&sup5;: -2,7º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub6;H&sub3;&sub4;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 68,70; H 7,54; N 6,16
Gefunden: C 68,65; H 7,50; N 6,40

(II) Herstellung von Boc-Phe-Ava-OH

2,0 g Boc-Phe-Ava-OBzl wurden in 50 ml MeOH in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator reduziert und dies wurde gefolgt vom Einengen. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Petroleumbenzin kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 1,50 g (94,6%)
Schmp. : 111 bis 112ºC, Rf²: 0,57
[α]D²&sup5;: -3,3º (c=1,2, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub9;H&sub2;&sub8;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 62,62; H 7,74; N 7,69
Gefunden: C 62,75; H 7,84; N 7,78

(III) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Ava-OH.CHA

Unter Verwendung von 1,00 g Boc-Phe-Ava-OH, 1,32 g Boc- Cys(MBzl)-OH.CHA, 0,60 HONB und 0,68 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XX) erhalten und wurde darauf in AcOEt-Ether gelöst, wonach es mit 0,2 ml CHA kristallisiert und durch Filtration gesammelt wurde.
Ausbeute: 1,15 g (60,6%)
Schmp. : 111 bis 113ºC, Rf²: 0,61
[α]D²&sup5;: -21,7º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub6;H&sub5;&sub4;N&sub4;O&sub7;S):

Berechnet: C 62,94; H 7,92; N 8,16; S 4,67
Gefunden: C 63,11; H 7,93; N 8,19; S 4,63

(IV) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Ava-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Cys(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, Boc-Cys(MBzl)-Phe-Ava-OH (hergestellt mit 96 mg des entsprechenden CHA-Salzes), 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) hergestellt.
Ausbeute: 325 mg (97,3%)
Schmp. : 230 bis 233ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub7;&sub7;H&sub2;&sub3;&sub5;N&sub3;&sub1;O&sub3;&sub9;S&sub6;):

Berechnet: C 58,83; H 6,56; N 12,02; S 5,32
Gefunden: C 58,86; H 7,01; N 12,01; S 4,84 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 4-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 41 mg (30%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,10, Ser 2,01, Glu 1,11, Gly 3,16, Ala 1,05, Cys-Hälfte 1,80, Met 0,99, Ile 1,00, Leu 1,06, Tyr 0,92, Phe 1,92, Arg 3,13, Ava 0,96

Beispiel 5

Herstellung von [Gaba&sup9;, desGly¹&sup0;]-α-hANP[7-28]

(I) Herstellung von Boc-Phe-Gaba-OBzl

8,77 g H-Gaba-OBzl-p-Tos-OH wurden in 100 ml Acetonitril suspendiert und dies wurde gefolgt vom Kühlen mit Eis, darauf wurden 3,36 ml TEA zugesetzt. Diesem Gemisch wurde Boc-Phe-ONB (hergestellt mit 5,3 g Boc-Phe-OH, 4,0 g HONB und 4,5 g DCC) zugesetzt und dies wurde gefolgt vom Rühren über eine Nacht. Dieses Gemisch wurde darauf eingeengt und der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 200 ml AcOEt gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde mit 4%igem wäßrigem NaHCO&sub3; und 10%igem wäßrigem Citrat gewaschen, wonach sie mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet wurde. Das getrocknete Produkt wurde eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether kristallisiert, durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 7,15 g (81,2%)
Schmp. : 94 bis 95ºC, Rf¹: 0,66
[α]D²&sup5;: -2,9º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub5;H&sub3;&sub2;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 68,16; H 7,32; N 6,36
Gefunden: C 68,13; H 7,50; N 6,55

(II) Herstellung von Boc-Phe-Gaba-OH

3,0 g Boc-Phe-Gaba-OBzl wurden in 50 ml MeOH in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator reduziert und dies wurde gefolgt vom Einengen. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 2,1 g (88,0%)
Schmp. : 133 bis 134ºC, Rf¹: 0,14
[α]D²&sup5;: -4,0º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;H&sub2;&sub6;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 61,70; H 7,48; N 7,99
Gefunden: C 61,85; H 7,66; N 8,15

(III) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gaba-OH

Unter Verwendung von 1,05 g Boc-Phe-Gaba-OH, 1,02 g Boc- Cys(MBzl)-OH, 0,60 g HONB und 0,68 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XX) erhalten und wurde darauf mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 1,05 g (61,0%)
Schmp. : 103 bis 104ºC, Rf¹: 0,16
[α]D²&sup5;: -24,5º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub9;H&sub3;&sub9;N&sub3;O&sub7;S):

Berechnet: C 60,71; H 6,85; N 7,32; S 5,59
Gefunden: C 60,94; H 6,99; N 7,44; S 5,44

(IV) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gaba-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 283 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 60 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gaba-OH, 38 mg HONB und 130 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 246 mg (78,4%)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub7;&sub6;H&sub2;&sub3;&sub3;N&sub3;&sub1;O&sub3;&sub9;S&sub6;):

Berechnet: C 58,73; H 6,53; N 12,06; S 5,35
Gefunden: C 59,06; H 6,74; N 11,89; S 5,14 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 5-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 27 mg (20%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,03, Ser 1,86, Glu 1,05, Gly 3,03, Ala 1,00, Cys-Hälfte 1,84, Met 0,98, Ile 1,00, Leu 0,99, Tyr 0,92, Phe 1,97, Arg 3,04, Gaba 1,01

Beispiel 6

Herstellung von [βAla&sup9;, desGly¹&sup0;]-α-hANP[7-28]

(I) Herstellung von Boc-Phe-βAla-OBzl

Unter Verwendung von 8,43 g H-βAla-OBzl.p-Tos-OH, 3,36 ml TEA, 5,3 g Boc-Phe-OH, 4,0 g HONB und 4,5 g DCC wurde das gewünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 5-(I) erhalten und wurde darauf mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 4,15 g (48,7%)
Schmp. : 96 bis 97ºC, Rf¹: 0,66
[α]D²&sup5;: -2,0º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub0;N&sub2;O&sub5;):

Berechnet: C 67,59; H 7,09; N 6,57
Gefunden: C 67,38; H 7,07; N 6,65

(II) Herstellung von Boc-Phe-βAla-OH.CHA

3,0 g Boc-Phe-βAla-OBzl wurden in 50 ml MeOH in Anwesenheit von Pd-Schwarz als Katalysator reduziert und dies wurde gefolgt vom Einengen. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde in 30 ml AcOEt gelöst, wonach er mit 0,80 ml CHA kristallisiert und durch Filtration gesammelt wurde.
Ausbeute: 3,0 g (98,0%)
Schmp. : 155 bis 165ºC, Rf¹: 0,06
[α]D²&sup5;: -4,4º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub3;H&sub3;&sub7;N&sub3;O&sub5;):

Berechnet: C 63,42; H 8,56; N 9,65
Gefunden: C 63,42; H 8,56; N 9,51

(III) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-βAla-OH

Unter Verwendung von Boc-Phe-βAla-OH (hergestellt mit 1,31 g Boc-Phe-βAla-OH.CHA), 1,02 g Boc-Cys(MBzl)-OH, 0,60 g HONB und 0,68 g DCC wurde das gewünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XX) erhalten und wurde darauf mit Ether kristallisiert und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 1,22 g (72,7%)
Schmp. : 149 bis 150ºC, Rf¹: 0,13
[α]D²&sup5;: -20,3º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub2;&sub8;H&sub3;&sub7;N&sub3;O&sub7;S):

Berechnet: C 60,09; H 6,66; N 7,51; S 5,73
Gefunden: C 60,33; H 6,79; N 7,80; S 5,46

(IV) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-βAla-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 283 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 59 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-βAla-OH, 38 mg HONB und 130 mg DCC, wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 294 mg (94,0%)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub7;&sub5;H&sub2;&sub3;&sub1;N&sub3;&sub1;O&sub3;&sub9;S&sub6;):

Berechnet: C 58,62; H 6,49; N 12,11; S 5,37
Gefunden: C 58,95; H 6,73; N 11,95; S 5,18 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 6-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 23 mg (17%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,01, Ser 1,85, Glu 1,03, Gly 3,07, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,82, Met 0,99, Ile 1,00, Leu 1,01, Tyr 0,89, Phe 1,95, Arg 3,02, βAla 1,02

Beispiel 7

Herstellung von [desGly&sup9;]-α-hANP[7-28])

(I) Herstellung von Boc-Gly-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH

1,0 g Boc-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH wurden mit 10 ml TFA behandelt. Die auf diese Weise erhaltene Aminkomponente wurde in 10 ml DMF gelöst und dies wurde gefolgt vom Kühlen mit Eis; darauf wurden 0,25 ml TEA zugesetzt. Dieser Lösung wurden 280 mg Boc-Gly-ONB zugesetzt und dies wurde vom Rühren über eine Nacht gefolgt. Dem Gemisch wurde 1 ml AcOH zugesetzt und dieses Gemisch wurde nachfolgend eingeengt. Der sich daraus ergebende Rückstand wurde mit AcOEt gefällt und durch Filtration gesammelt.
Ausbeute: 0,99 g (94,8%)
Schmp. : 176 bis 180ºC, Rf²: 0,37
[α]D²&sup5;: -11,4º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub5;H&sub9;&sub9;N&sub1;&sub3;O&sub1;&sub6;S&sub3;):

Berechnet: C 55,18; H 7,05; N 12,87; S 6,80
Gefunden: C 55,41; H 7,43; N 12,48; S 6,30

(II) Herstellung von Boc-Phe-Gly-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)- Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 400 mg Boc-Gly-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)- Arg(Pme)-Ile-Gly-OH und 134 mg Boc-Phe-ONB wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 7-(I) erhalten und wurde darauf mit Acetonitril gewaschen.
Ausbeute: 337 mg (76,3%)
Schmp. : 176 bis 180ºC, Rf²: 0,38
[α]D²&sup5;: -12,6º (c=0,8, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub7;&sub4;H&sub1;&sub0;&sub8;N&sub1;&sub4;O&sub1;&sub7;S&sub3;):

Berechnet: C 56,90; H 6,97; N 12,55; S 6,16
Gefunden: C 56,92; H 7,44; N 12,37; S 5,83

(III) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 270 mg Boc-Phe-Gly-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH und Boc-Cys(MBzl)-ONB (hergestellt mit 65 mg Boc-Cys(MBzl)-OH, 38 mg HONB und 43 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 7-(1) erhalten und wurde darauf mit Acetonitril gewaschen.
Ausbeute: 240 mg (77,7%)
Schmp. : 192 bis 195ºC, Rf²: 0,41
[α]D25: -14,8º (c=0,6, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub8;&sub5;H&sub1;&sub2;&sub1;N&sub1;&sub5;O&sub1;&sub9;S&sub4;.3/2H&sub2;O):

Berechnet: C 56,33; H 6,90; N 11,59; S 7,08
Gefunden: C 56,33; H 6,77; N 11,77; S 6,87

(IV) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 1-(XXII) erhaltenen Verbindung, 196 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Arg(Pme)-Met- Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH, 36 mg HONB und 82 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 289 mg (78,0%)
Schmp. : 235 bis 237ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub0;H&sub2;&sub4;&sub2;N&sub3;&sub2;O&sub3;&sub9;S&sub6;.2H&sub2;O):

Berechnet: C 58,33; H 6,69; N 12,09; S 5,19
Gefunden: C 58,25; H 6,96; N 12,18; S 5,00 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 7-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 24 mg (18%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,05, Ser 1,92, Glu 1,06, Gly 4,12, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,85, Met 0,99, Ile 1,00, Leu 1,01, Tyr 0,92, Phe 1,98, Arg 3,03

Beispiel 8

Herstellung von [Aib&sup6;,Ile¹²]-α-hANP[6-28]

(1) Herstellung von Boc-Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 1,0 g Boc-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly- OH.CHA und Boc-Ile-ONB (hergestellt mit 276 mg Boc-Ile- OH.1/2H&sub2;O, 230 mg HONB und 262 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XV) erhalten.
Ausbeute: 0,83 g (82,0%)
Schmp. : 176-178ºC, Rf²: 0,47
[α]D²&sup5;: -16,0º (c=0,6, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub7;H&sub7;&sub2;N&sub8;O&sub1;&sub2;S.H&sub2;O):

Berechnet: C 56,95; H 7,52; N 11,30; S 3,24
Gefunden: C 57,11; H 7,34; N 11,41; S 3,07

(II) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH

Unter Verwendung von 0,39 g Boc-Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH und Boc-Arg(Pme)-ONB (hergestellt mit 0,21 g Boc- Arg(Pme)-OH, 90 mg HONB und 100 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XVI) erhalten.
Ausbeute: 0,33 g (61,6%)
Schmp. : 182 bis 184ºC, Rf²: 0,51
[α]D²&sup5;: -9,8º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub4;H&sub9;&sub8;N&sub2;O&sub1;&sub5;S&sub2;):

Berechnet: C 57,38; H 7,37; N 12,55; S 4,79
Gefunden: C 57,25; H 7,62; N 12,17; S 4,86

(III) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXII) erhaltenen Verbindung, 221 mg Boc-Arg(Pme)-Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH, 60 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 0,41 g (84,7%)
Schmp. : 210 bis 215ºC, Rf²: 0,52
[α]D²&sup5;: -15,0º (c=0,8, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub5;&sub9;H&sub2;&sub1;&sub9;N&sub2;&sub9;O&sub3;&sub5;S&sub4;):

Berechnet: C 59,22; H 6,84; N 12,60; S 3,98
Gefunden: C 58,89; H 7,02; N 12,51; S 4,17

(IV) Herstellung von Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Ile-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 500 mg der in Beispiel 8-(III) hergestellten Verbindung, 160 mg Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 83 mg HONB und 288 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 409 mg (69,2%)
Schmp. : 230 bis 233ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub7;H&sub2;&sub5;&sub4;N&sub3;&sub4;O&sub4;&sub1;S&sub5;):

Berechnet: C 59,19; H 6,75; N 12,55; S 4,22
Gefunden: C 59,39; H 7,14; N 12,40; S 4,24 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 8-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 25 mg (18%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,02, Ser 1,85, Glu 1,05, Gly 5,06, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,79, Ile 2,00, Leu 0,99, Tyr 0,92, Phe 1,99, Arg 3,05, Aib 1,01

Beispiel 9

Herstellung von [D-Arg²&sup7;]-α-hANP[7-28]

(I) Herstellung von Boc-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 2,32 g Boc-Tyr(Bzl)-OBzl, 2,37 g Boc-D- Arg(Tos)-OH, 0,75 g HONB und 1,14 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(I) erhalten.
Ausbeute: 3,9 g (quantitativ)
Schmp. : 66 bis 69ºC, Rf¹: 0,30
[α]D²&sup5;: -7,8º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub1;H&sub4;&sub9;N&sub5;O&sub8;S):

Berechnet: C 63,79; H 6,40; N 9,07; S 4,15
Gefunden: C 64,18; H 6,54; N 8,77; S 4,13

(II) Herstellung von Boc-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 3,7 g Boc-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl, 1,40 g Boc-Phe-OH, 1,05 g HONB und 1,20 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(II) erhalten.
Ausbeute: 4,10 g (93,0%)
Schmp. : 78 bis 80ºC, Rf¹: 0,30
[α]D²&sup5;: -6,0º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub5;&sub0;H&sub5;&sub8;N&sub6;O&sub9;S):

Berechnet: C 65,34; H 6,36; N 9,14; S 3,49
Gefunden: C 65,41; H 6,63; N 9,17; S 3,27

(III) Herstellung von Boc-Ser(Bzl)-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)- OBzl

Unter Verwendung von 3,90 g Boc-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl, 1,60 g Boc-Ser(Bzl)-OH, 1,08 g HONB und 1,24 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(III) erhalten.
Ausbeute: 4,50 g
Schmp. : 80 bis 82ºC, Rf¹: 0,30
[α]D²&sup5;: +2,5º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub0;H&sub6;&sub9;N&sub7;O&sub1;&sub1;S.1/2H&sub2;O):

Berechnet: C 65,20; H 6,38; N 8,87; S 2,90
Gefunden: C 65,29; H 6,47; N 9,04; S 3,19
(IV) Herstellung von Boc-Asn-Ser(Bz1)-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bz1)- OBzl
Unter Verwendung von 2,20 g Boc-Ser(Bzl)-Phe-D-Arg(Tos)- Tyr(Bzl)-OBzl, 0,61 g Boc-Asn-OH, 0,51 g HONB und 0,58 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(IV) erhalten.
Ausbeute: 2,10 g (86,6%)
Schmp. : 200 bis 201ºC, Rf¹: 0,30
[α]D²&sup5;: -17,4º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub4;H&sub7;&sub5;N&sub9;O&sub1;&sub3;S.1/2H&sub2;O):

Berechnet: C 62,93; H 6,27; N 10,32; S 2,63
Gefunden: C 63,03; H 6,52; N 10,52; S 2,91

(V) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-D- Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Das erwünschte Produkt wurde mit 2,0 g Boc-Asn-Ser(Bzl)-Phe- D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl, 0,88 g Boc-Cys(MBzl)-OH.CHA, 0,40 g HONB und 0,46 g DCC auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(V) erhalten.
Ausbeute: 2,20 g (92,9%)
Schmp. : 90 bis 92ºC, Rf¹: 0,36
[α]D²&sup5;: -17,3º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub7;&sub5;H&sub8;&sub8;N&sub1;&sub0;O&sub1;&sub5;S&sub2;.H&sub2;O):

Berechnet: C 61,96; H 6,24; N 9,64; S 4,41
Gefunden: C 62,26; H 6,15; N 9,75; S 4,55

(VI) Herstellung von Boc-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)- Asn-Ser(Bzl)-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 500 mg der in Beispiel 9-(V) erhaltenen Verbindung, 241 mg Boc-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-OH, 126 mg HONB und 288 mg DCC wurde das gewünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 0,65 g (95,9%)
Schmp. : 225 bis 227ºC (zersetzt), Rf²: 0,38
[α]D²&sup5;: -16,2º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub9;&sub6;H&sub1;&sub2;&sub3;N&sub1;&sub7;O&sub2;&sub3;S&sub2;):

Berechnet: C 59,21; H 6,37; N 12,23; S 3,29
Gefunden: C 59,43; H 6,81; N 12,11; S 2,99

(VII) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gln-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 500 mg der in Beispiel 9-(VI) erhaltenen Verbindung, 384 mg Boc-Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH, 100 mg HONB und 360 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXIII) erhalten.
Ausbeute: 0,63 g (76,9%)
Schmp. : 223 bis 225ºC (zersetzt), Rf²: 0,45
[α]D²&sup5;: -13,8º (c=1,1, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub5;&sub4;H&sub2;&sub0;&sub9;N&sub2;&sub9;O&sub3;&sub5;S&sub5;):

Berechnet: C 58,04; H 6,61; N 12,75; S 5,03
Gefunden: C 58,22; H 6,97; N 12,54; S 4,92

(VIII) Herstellung von Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-D-Arg(Tos)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 9-(VI) erhaltenen Verbindung, 99 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXIV) erhalten.
Ausbeute: 270 mg (78,1%)
Schmp.: 230 bis 233ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub7;&sub8;H&sub2;&sub3;&sub7;N&sub3;&sub3;O&sub4;&sub0;S&sub6;):

Berechnet: C 58,23; H 6,51; N 12,59; S 5,24
Gefunden: C 58,05; H 6,73; N 12,57; S 4,87 (IX) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 9-(VIII) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 35 mg (25%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,06, Ser 1,92, Glu 1,07, Gly 5,02, Ala 1,00, Cys-Hälfte 1,63, Met 0,98, Ile 1,00, Leu 1,01, Tyr 0,76, Phe 1,89, Arg 3,06

Beispiel 10

Herstellung von [D,L-Chg¹²]-α-hANP[7-28]

(1) Herstellung von Boc-D,L-Chg-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 1,0 g Boc-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly- OH.CHA, 0,30 g Boc-D,L-Chg-OH, 0,23 g HONB und 0,26 g DCC wurde das erwünschte Produkt auf genau die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XV) erhalten.
Ausbeute: 0,90 g (85,1%)
Schmp. : 160 bis 165ºC, Rf²: 0,44
[α]D²&sup5;: -15,6º (c=0,8, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub9;H&sub7;&sub4;N&sub8;O&sub1;&sub2;S.H&sub2;O):

Berechnet: C 57,85; H 7,53; N 11,02; S 3,15
Gefunden: C 57,54; H 7,27; N 11,17; S 3,50

(II) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-D,L-Chg-Asp(OBzl)- Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 400 mg Boc-D,L-Chg-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH, 210 mg Boc-Arg(Pme)-OH, 90 mg HONB und 100 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XVI) erhalten.
Ausbeute: 430 mg (78,7%)
Schmp. : 146 bis 147ºC, Rf²: 0,51
[α]D²&sup5;: -15,3º (c=0,9, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub6;H&sub1;&sub0;&sub0;N&sub1;&sub2;O&sub1;&sub5;S&sub2;.H&sub2;O):

Berechnet: C 57,29; H 7,43; N 12,15; S 4,63
Gefunden: C 57,44; H 7,38; N 12,41; S 5,16

(III) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-D,L-Chg-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXII), 225 mg Boc-Arg(Pme)-D,L-Chg-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH, 60 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXIII) erhalten.
Ausbeute: 410 mg (84,1%)
Schmp. : 218 bis 220ºC, Rf²: 0,53
[α]D²&sup5;: -15,1º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub6;&sub1;H&sub2;&sub2;&sub1;N&sub2;&sub9;O&sub3;&sub5;S&sub4;):

Berechnet: C 59,48; H 6,85; N 12,49; S 3,94
Gefunden: C 59,34; H 7,05; N 12,55; S 4,19

(IV) Herstellung von Boc-Cys-(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)-D,L- Chg-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 10-(III) erhaltenen Verbindung, 82 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXIV) erhalten.
Ausbeute: 295 mg (86,2%)
Schmp. : 235 bis 238ºC

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub5;H&sub2;&sub4;&sub9;N&sub3;&sub3;O&sub4;&sub0;S&sub5;):

Berechnet: C 59,48; H 6,72; N 12,37; S 4,29
Gefunden: C 59,58; H 7,22; N 12,22; S 3,88 (V) Herstellung von
Unter Verwendung der in Beispiel 10-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung in der gleichen Weise wie Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 52 mg (38%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,01, Ser 1,81, Glu 1,01, Gly 4,92, Ala 0,97, Cys-Hälfte 1,82, Ile 1,00, Leu 0,98, Tyr 0,84, Phe 1,90, Arg 2,99, Chg 1,15

Beispiel 11

Herstellung von [Ala&sup6;]-α-hANP[6-28]

(I) Herstellung von Boc-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH

Unter Verwendung von 300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 104 mg Boc-Ala-OH, 110 mg HONB und 120 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXI) erhalten.
Ausbeute: 265 mg (79,0%)
Schmp.: 133 bis 137ºC, Rf²: 0,34
[α]D²&sup5;: -27,0º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub2;H&sub4;&sub3;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 57,04; H 6,43; N 10,39; S 4,76
Gefunden: C 57,48; H 6,81; N 10,16; S 4,12

(II) Herstellung von Boc-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 69 mg Boc-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 335 mg (95,3%)
Schmp. : 225 bis 228ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub5;H&sub2;&sub5;&sub0;N&sub3;&sub4;O&sub4;&sub1;S&sub6;):

Berechnet: C 58,48; H 6,65; N 12,54; S 5,06
Gefunden: C 57,96; H 7,01; N 12,37; S 4,82 (III) Herstellung von
Unter Verwendung der in Beispiel 11-(II) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 19 mg (14%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,03, Ser 1,89, Glu 1,00, Gly 4,98, Ala 2,05, Cys-Hälfte 1,86, Met 1,03, Ile 1,00, Leu 1,01, Tyr 0,93, Phe 1,97, Arg 2,99

Beispiel 12

Herstellung von [D-Ala&sup6;]-α-hANP[6-28]

(I) Herstellung von Boc-D-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH

Unter Verwendung von 300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 104 mg Boc-D-Ala-OH, 110 mg HONB und 120 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXI) erhalten.
Ausbeute: 255 mg (76,0%)
Schmp. : 153 bis 156ºC, Rf²: 0,29
[α]D²&sup5;: -18,2º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub2;H&sub4;&sub3;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 57,04; H 6,43; N 10,39; S 4,76
Gefunden: C 57,24; H 6,55; N 9,98; S 4,32

(II) Herstellung von Boc-D-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly- Arg(Pme)-Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu- Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII), 69 mg Boc-D-Ala-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXIII) erhalten.
Ausbeute: 325 mg (92,5%)
Schmp.: 222 bis 227ºC (zersetzt)

Berechnet: C 58,48; H 6,65; N 12,54; S 5,06
Gefunden: C 58,07; H 6,84; N 12,39; S 4,85 (III) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 12 erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 23 mg (17%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,04, Ser 1,88, Glu 0,98, Gly 5,01, Ala 2,00, Cys-Hälfte 1,90, Met 0,97, Ile 1,00, Leu 1,03, Tyr 0,94, Phe 2,03, Arg 3,02

Beispiel 13

Herstellung von [Aib&sup6;, Leu¹²]-α-hANP[6-28]

(I) Herstellung von Boc-Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 1,0 g Boc-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly- OH.CHA und HONB (hergestellt mit 279 mg Boc-Leu-OH, 230 mg HONB und 262 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XV) erhalten.
Ausbeute: 0,93 g (87,8%)
Schmp. : 148-153ºC, Rf²: 0,47
[α]D²&sup5;: -14,9º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub7;H&sub7;&sub2;N&sub8;O&sub1;&sub2;S):

Berechnet: C 58,01; H 7,46; N 11,51; S 3,29
Gefunden: C 57,77; H 7,76; N 11,34; S 3,21

(II) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH

Unter Verwendung von 0,39 g Boc-Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH, Boc-Arg(Pme)-ONB (hergestellt mit 0,21 g Boc-Arg(Pme)-OH, 90 mg HONB und 100 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XVI) erhalten.
Ausbeute: 403 mg (73,2%)
Schmp. : 154-158ºC, Rf²: 0,46
[α]D²&sup5;: -12,6º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub6;&sub4;H&sub9;&sub7;N&sub1;&sub2;O&sub1;&sub5;S&sub2;):

Berechnet: C 57,42; H 7,30; N 12,56; S 4,79
Gefunden: C 57,44; H 7,63; N 11,98; S 4,82

(III) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXII) erhaltenen verbindung, 221 mg Boc-Arg(Pme)-Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH, 60 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 0,48 g (quantitativ)
Schmp. : 205-208ºC (zersetzt), Rf²: 0,43
[α]D²&sup5;: -11,7º (c=1,0, in DMF)

Berechnet: C 59,22; H 6,84; N 12,61; S 3,98
Gefunden: C 60,36; H 6,94; N 12,33; S 3,71

(IV) Herstellung von Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Leu-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 13-(III) erhaltenen Verbindung, 74 mg Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 298 mg (84,4%)
Schmp.: 220-225ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub3;H&sub2;&sub5;&sub4;N&sub3;&sub4;O&sub3;&sub9;S&sub5;):

Berechnet: C 59,17; H 6,89; N 12,82; S 4,32
Gefunden: C 59,50; H 7,08; N 12,50; S 4,11 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 13-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 30 mg (22%)
Aminosäureanalyse: Asp 1,96, Ser 1,85, Glu 1,04, Gly 4,98, Ala 1,00, Cys-Hälfte 1,87, Ile 1,00, Leu 1,98, Tyr 0,89, Phe 2,04, Arg 3,05, Aib 0,94.

Beispiel 14

Herstellung von [Aib&sup6;, Nle¹²]-α-hANP[6-28]

(I) Unter Verwendung von 1,0 g Boc-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH.CHA und Boc-Nle-ONB (hergestellt mit 279 mg Boc-Nle-OH, 230 mg HONB und 262 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XV) erhalten.
Ausbeute: 1,03 g (97,0%)
Schmp. : 162-167ºC, Rf²: 0,43
[α]D²&sup5;: -13,5º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub4;&sub7;H&sub7;&sub2;N&sub8;O&sub1;&sub2;S):

Berechnet: C 58,01; H 7,46; N 11,51; S 3,29
Gefunden: C 57,85; H 7,60; N 11,36; S 3,09

(II) Herstellung von Boc-Ang(Pme)-Nle-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-OH

Unter Verwendung von 0,39 g Boc-Nle-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile- Gly-OH und Boc-Arg(Pme)-ONB (hergestellt mit 0,21 g Boc- Arg(Pme)-OH, 90 mg HONB und 100 mg DCC) wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XVI) erhalten.
Ausbeute: 403 mg (73,2%)
Schmp. : 17l-177ºC, Rf²: 0,49
[α]D²&sup5;: -10,6º (c=1,0, in DMF)

Berechnet: C 57,42; H 7,30; N 12,56; S 4,79
Gefunden: C 57,51; H 7,57; N 12,32; S 4,97

(III) Herstellung von Boc-Arg(Pme)-Nle-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe- Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXII) erhaltenen Verbindung, 221 mg Boc-Arg(Pme)-Nle-Asp(OBzl)-Arg(Pme)- Ile-Gly-OH, 60 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 0,48 g (quantitativ)
Schmp. : 205-208ºC, Rf²: 0,41
[α]D²&sup5;: -11,0º (c=1,0, in DMF)

Berechnet: C 59,22; H 6,84; N 12,61; S 3,98
Gefunden: C 59,69; H 6,95; N 12,42; S 3,94

(IV) Herstellung von Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Nle-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 14-(III) erhaltenen Verbindung, 74 mg Boc-Aib-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 200 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 280 mg (82,5%)
Schmp.: 225-228ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub3;H&sub2;&sub5;4N&sub3;&sub4;O&sub3;&sub9;S&sub5;):

Berechnet: C 59,17; H 6,89; N 12,82; S 4,32
Gefunden: C 59,30; H 7,03; N 12,44; S 4,16 (V) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 14-(IV) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 20 mg (14,4%)
Aminosäureanalyse Asp 2,02, Ser 1,89, Glu 0,98, Gly 4,97, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,88, Ile 1,00, Leu 1,02, Tyr 0,94, Phe 2,02, Arg 3,03, Aib 0,96, NIe 0,97

Beispiel 15

Herstellung von [Val&sup6;]-α-hANP[6-28]

(1) Herstellung von Boc-Val-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH

Unter Verwendung von 300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 118 mg Boc-Val-OH, 110 mg HONB und 124 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXI) erhalten.
Ausbeute: 324 mg (92,7%)
Schmp. : 146-150ºC, Rf²: 0,42
[α]D²&sup5;: -20,7º (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub4;H&sub4;&sub7;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 58,19; H 6,75; N 9,98; S 4,57
Gefunden: C 58,43; H 6,94; N 10,08; S 4,26 (II) Herstellung von Boc-Val-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl
Unter verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 72 mg Boc-Val-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 176 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 323 mg (91,2%)
Schmp.: 222-230ºC (zersetzt)

Berechnet: C 59,19; H 6,75; N 12,55; S 4,23
Gefunden. C 59,05; H 6,97; N 12,29; S 4,25 (III) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 15-(II) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXV) erhalten.
Ausbeute: 21 mg (16%)
Aminosäureanalyse: Asp 1,98, Ser 1,86, Glu 0,98, Gly 5,06, Ala 1,01, Cys-Hälfte 1,86, Met 1,02, Ile 1,00, Leu 0,99, Tyr 0,91, Phe 2,04, Arg 2,99, Val 0,97

Beispiel 16

Herstellung von [Ile&sup6;]-α-hANP[6-28]

(1) Herstellung von Boc-Ile-Cys(Mbzl)-Phe-Gly-Gly-OH

Unter verwendung von 300 mg Boc-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 131 mg Boc-Ile-OH.1/2H&sub2;O, 110 mg HONB und 120 mg DCC wurde das erwünschte produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 296 mg (83,0%)
Schmp. 146-150ºC, Rf²: 0,45
[α]D²&sup5;: 22,30 (c=1,0, in DMF)

Elementaranalyse (als C&sub3;&sub5;H&sub4;&sub9;N&sub5;O&sub9;S):

Berechnet: C 58,72; H 6,90; N 9,78; S 4,48
Gefunden: C 58,53; H 6,94; N 9,65; S 4,55

(II) Herstellung von Boc-Ile-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-Arg(Pme)- Met-Asp(OBzl)-Arg(Pme)-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly- Cys(MBzl)-Asn-Ser(Bzl)-Phe-Arg(Pme)-Tyr(Bzl)-OBzl

Unter Verwendung von 300 mg der in Beispiel 1-(XXIII) erhaltenen Verbindung, 73 mg Boc-Ile-Cys(MBzl)-Phe-Gly-Gly-OH, 50 mg HONB und 167 mg DCC wurde das erwünschte Produkt auf die gleiche Weise wie in Beispiel 1-(XXII) erhalten.
Ausbeute: 338 mg (95,2%)
Schmp.: 216-226ºC (zersetzt)

Elementaranalyse (als C&sub1;&sub8;&sub8;H&sub2;&sub5;&sub6;N&sub3;&sub4;O&sub4;&sub1;S&sub5;):

Berechnet: C 59,29; H 6,77; N 12,50; S 4,21
Gefunden: C 59,16; H 6,98; N 12,21; S 4,16 (III) Herstellung von
Unter Verwendung von 200 mg der in Beispiel 16-(II) erhaltenen Verbindung wurde das erwünschte Produkt über eine HF-Behandlung, Luftoxidation und Reinigung auf die gleiche Weise wie in Beispiel (XXV) erhalten.
Ausbeute: 15 mg (11%)
Aminosäureanalyse: Asp 2,01, Ser 1,90, Glu 0,97, Gly 4,98, Ala 1,02, Cys-Hälfte 1,89, Met 0,97, Ile 2,00, Leu 1,01, Tyr 0,94, Phe 1,98, Arg 3,03

Claims

1. Peptid-Derivat der Formel

worin A α-Aminoisobuttersäure, L-Ala oder D-Ala ist;

C Met oder Ile ist und

E L-Arg oder D-Arg ist oder ein pharmakologisch annehmbares Salz davon.

2. Peptid-Derivat gemäß Anspruch 1, worin A D-Ala ist.

3. Peptid-Derivat gemäß Anspruch 1, worin E L-Arg ist.

4. Verfahren zur Herstellung eines Peptid-Derivats nach Anspruch 1 oder eines pharmakologisch annehmbaren Salzes davon, umfassend das Unterwerfen eines Peptid-Derivats mit der Formel

A-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-C-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys- Asn-Ser-Phe-E-Tyr-OH

worin A, C und E dieselbe Bedeutung wie in Anspruch 1 definiert, haben oder ein pharmakologisch annehmbares Salz davon, der Oxidation.

5. Pharmazeutische Zusammensetzung, die ein Peptid-Derivat nach Anspruch 1 oder ein pharmakologisch annehmbares Salz davon enthält.

6. Verwendung eines Peptid-Derivats nach Anspruch 1 oder eines pharmakologisch annehmbaren Salzes davon, zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Bluthochdruck, Herzversagen, Nephritis, peripherer Durchblutungsstörung oder ähnlichen Zuständen.