DE2915082C3 - Verfahren und Verwendung eines Reagenzsatzes zum Nachweis und zur Charakterisierung von Nukleinsäuren und ihren Sequenzen - Google Patents
Verfahren und Verwendung eines Reagenzsatzes zum Nachweis und zur Charakterisierung von Nukleinsäuren und ihren SequenzenInfo
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis
einer Nukleinsäure-Sequenz oder
eines Nukleinsäure-Fragments gemäß dem Oberbegriff des Anspruchs 1.
Sie betrifft ferner die Verwendung eines Reagenzsatzes zur Durchführung
des Verfahrens.
Jede biologische Probe, beispielweise Blut, das einem
Lebewesen entnommen werden kann, enthält verschiedene Nukleinsäuren
in außerordentlicher Reichhaltigkeit. Dies trifft
auch für verschiedene Sequenzen zu, beispielsweise zahlreiche
Gene, die jede einzelne Nukleinsäure in diesen Proben enthalten
kann. Daher kann der Genetiker auf große Schwierigkeiten
beim Aufspüren oder bei der Charakterisierung von bestimmten
Nukleinsäuren in einer Probe stoßen. Die Schwierigkeiten werden
noch größer, wenn es darum geht, die Anwesenheit bestimmter
Fragmente, beispielsweise der in diesen Nukleinsäuren enthaltenen
Gene, zu charakterisieren.
Um eine einzelne Nukleinsäure oder einzelne Gene - beispielsweise
im Hinblick auf Studien der Organisation genetischer
Sequenzen der DNA, in der sie enthalten sind - zu charakterisieren,
benötigt man zunächst eine mit dieser Nukleinsäure
angereicherte, aus der untersuchten Probe erhaltene Fraktion.
Zu diesem Zweck wurden bereits Anreicherungsmethoden vorgeschlagen,
die sich die Hybridisierungsreaktionen zwischen der
gesuchten Nukleinsäure bzw. dem Gen und einem Indikator zunutze
machen, sofern ein solcher Indikator verfügbar ist und
die erhaltenen Hybride sodann von der Probe abgetrennt werden
können, beispielsweise durch differentielle Sedimentation aus
einer Lösung mittels Ultrazentrifugieren.
Solche Indikatoren wurden bereits beschrieben: Es handelt
sich dabei im allgemeinen um Ribonukleinsäuren (RNA), beispielsweise
solche, die mittels genetischer Transkription von Strukturgenen erhalten
wurden. Die Strukturgene sind Bestandteile der DNA der einzelnen
Zellorganismen, aus denen sie stammen. Die DNA ist demnach geeignet,
ihrerseits in die Proteine, für welche die Strukturgene
codieren, "übersetzt" zu werden. Es ist bekannt, daß die
RNA-Nukleotid-Sequenzen zu der Sequenz der DNA, von der sie
abstammen, komplementär sind. Dies zeigt sich
in der Eigenschaft der RNA, gemischte Hybride mit den entsprechenden
Sequenzen der zugehörigen DNA zu bilden, die zuvor
denaturiert worden ist, soweit diese anfangs doppelsträngig
war, beispielsweise nach Inkubation bei hoher Ionenstärke und
erhöhter Temperatur oder in basischem Milieu.
Es wurde vorgeschlagen, den Nachweis von gebildeten Hybriden
mit Hilfe einer radioaktiven Markierung der Gene selbst oder
der RNA-Indikatoren vorzunehmen. Die Durchführung dieser Methoden
ist jedoch nicht einfach, und außerdem ist es dabei
nicht immer möglich, die Gene innerhalb der DNA ausreichend
zu lokalisieren.
Um die untersuchten Gene in der sie enthaltenen DNA besser
lokalisieren zu können und eine Methode zur Bildung von
mit bestimmten DNA-Segmenten angereicherten Fraktionen - ausgehend
von derselben DNA - zu entwickeln, haben Manning et al
eine Methode zum physiko-chemischen Nachweis dieser Gene vorgeschlagen.
Diese Methode besteht aus der chemischen Modifizierung
des RNA-Indikators durch Anheftung von Biotingruppen,
d. h. Derivaten des Cytochrom C. Diese Biotingruppen heften
sich durch Brückenbildung bei der Hybridisierung an die DNA an
und sind nun physikalisch im Elektronenmikroskop
als Staubteilchen, die aus submikroskopischen Kügelchen von
einem Durchmesser von 60 nm bestehen, insbesondere auf einem
Untergrund von Polymethacrylsäureester nachweisbar. Die Kügelchen wurden
zuvor chemisch modifiziert und kovalent an Avidin-Moleküle gebunden.
Diese Methode ist in "A New Method of in situ Hybridization",
Chromosoma, Springer Verlag (Berlin), Bd. 53 (1975), S. 107
bis 117 und in "A Method for Gene Enrichment Based on the
Avidin-Biotin Interaction, Application to the Drosophila
Ribosomal RNA Genes", Biochemistry, Bd. 16 (1977), Nr. 7,
S. 1364-1369 beschrieben.
Die Inkubation der Hybride, die durch Biotin und Avidin modifiziert
sind, macht es möglich, die Stelle der gesuchten Gene
in der sie enthaltenden DNA zu "markieren" und sie innerhalb
der globulären Struktur der DNA nachzuweisen. Diese ist ebenfalls
im Elektronenmikroskop sichtbar infolge der sehr starken
nicht kovalenten Interaktionen, die nach wie vor an den Stellen
herrschen, die frei von Biotin und Avidin geblieben sind.
Diese Methode ist jedoch kaum dazu geeignet,
rasch zu bestimmen, ob derartige Gene bzw. DNA in einer biologischen
Probe menschlicher oder tierischer Herkunft anwesend sind oder
nicht. So ist beispielweise eine rasche Diagnose einer Infektion,
von welcher der Wirt möglicherweise befallen ist, oder
der Tatsache, ob ein Gen oder beispielsweise eine DNA-Sequenz
in diesem Wirt unverändert geblieben ist oder nicht nach der
Methode schwer möglich.
Konjugate aus Enzymen und Makromolekülen und ihre Anwendung
für analytische Zwecke sind in US-A 40 02 532 beschrieben.
Aufgabe der Erfindung ist es, ein Verfahren zum Nachweis
einer Nukleinsäure-Sequenz oder eines Nukleinsäure-Fragments zur Verfügung zu stellen, das mit einfachen Mitteln
von Laboranten ohne besondere Ausbildung angewandt werden kann.
Diese Aufgabe wird durch die Erfindung gelöst.
Die Erfindung betrifft somit den in den Patentansprüchen gekennzeichneten
Gegenstand.
Natürlich darf die chemische Modifizierung die gegebenenfalls
zusätzlich stattfindene Hybridisierung des Indikators mit der gesuchten
DNA-Sequenz bzw. dem DNA-Fragment nicht behindern.
Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß mit dieser Methode
die Möglichkeit gegeben ist, rasch festzustellen, ob in einer
biologischen Probe das DNA-Gen bzw. DNA-Fragment, das dem verwendeten
Indikator entspricht, vorhanden ist oder nicht, und
dies sogar bei Anwesenheit einer großen Anzahl anderer Nukleinsäuren.
Dies ist insbesondere darauf zurückzuführen, daß
durch den Nachweis aufgrund der enzymatischen Aktivität, wobei das Enzym
durch das Substrat an das Hybrid gebunden ist, umfassende Anwendungsmöglichkeiten
gegeben sind.
Nach einer ausreichenden Reinigung des Hybrids ist es sogar
möglich, Angaben über die Konzentration der gesuchten DNA in
der untersuchten biologischen Probe bzw. über die Anzahl der
Kopien des gesuchten Gens in der gereinigten DNA zu erhalten,
und zwar durch Bestimmung der Enzymaktivität.
Bei einer zu untersuchenden Nukleinsäureprobe kann man zunächst
die Hybridisierung durchführen. Dann kann die Bindung zwischen
dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem
Enzym stattfinden. Man kann vor Bestimmung der
Enzymaktivität den gegebenenfalls im Überschuß vorhandenen nicht
hybridisierten Indikator bzw. das überschüssige mit dem Indikator
nicht umgesetzte Enzym abtrennen oder abbauen.
Gemäß einer anderen Ausführungsform der Erfindung kann die Abtrennung
oder der Abbau des überschüssigen nicht hybridisierten
Indikators gegebenenfalls vor der Bindung zwischen dem
chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator und dem
Enzym erfolgen.
Der spezifische Indikator kann aus RNA oder einzelsträngiger
DNA bestehen. Verwendet man eine ursprünglich doppelsträngige
DNA (oder RNA) als Indikator, so muß er vorher durch an sich
bekannte Methoden denaturiert worden sein.
Führt man eine chemische Modifizierung des Indikators mit Biotin
durch, so kann man die Methode nach Manning et al (a. a. O.)
mittels des Cytochrom C (durchschnittlich ein Molekül
Biotin pro etwa 100 Nukleotide) anwenden.
Vorzugsweise verwendet man zum Markieren des Hybrids durch
das Enzym den Komplex (Kupplungsprodukt), der sich nach der Methode von Avrameas
(beschrieben in Immunochemistry, Bd. 6 (1969), S. 43-52)
aus Avidin und den Enzym, insbesondere der β-Galactosidase, ergibt.
Man kann natürlich auch andere chemische Modifizierungsmethoden
für den Indikator und gegebenenfalls das Enzym im Hinblick auf deren
Bindung, vorzugsweise nach der Hybridisierungsreaktion, verwenden
und kann die modifizierenden Mittel für Indikator und
Enzym umgekehrt verwenden.
Es kommen noch andere Paare von modifizierenden Mitteln für
Indikator und Enzym in Frage, für die nachstehend einige Beispiele
angegeben sind. Das erste dieser Mittel wird vorzugsweise
jeweils zur chemischen Modifizierung des Indikators und
das zweite zur chemischen Modifizierung des Enzyms eingesetzt.
Der Indikator kann beispielsweise nach einer bekannten Methode
durch Metallionen, wie Quecksilberionen, modifiziert werden,
und der Nachweis wird mittels eines Enzyms durchgeführt, das
Sulfhydrylgruppen (-SH) aufweist oder an einen solche Gruppen
enthaltenden Träger gebunden ist.
Man kann beispielsweise folgendermaßen vorgehen, wenn die zu
untersuchende Probe nur aus wenigen Millilitern Blut besteht:
Die Erythrocyten werden lysiert, und die DNA wird nach üblichen
Methoden extrahiert. Sodann wird eine kleine Menge der erhaltenen
DNA, beispielsweise 1 bis 100 µg, mit 0,1-0,3 N NaOH denaturiert,
die Lösung anschließend neutralisiert und auf einen pH-Wert
von 7 eingestellt.
Die erhaltene Lösung wird mit dem der gesuchten DNA oder dem
DNA-Fragment entsprechenden Indikator versetzt, und zwar etwa
1 µg Indikator pro 100 µg denaturierte DNA (die Menge der gebrauchten
NaOH richtet sich nach dem Anteil der gesuchten DNA in der zu analysierenden
Probe). Die Lösung wird sodann mit Salzen versetzt, um ein
hohes Ionenmilieu zu erreichen, nämlich mit mindestens 0,3
in Gegenwart von 50% Formamid und eines Chelatbildners in geringer
Konzentration. Das Volumen soll vorzugsweise gering sein.
Die Hybridisierung kann sodann bei der hierfür üblichen Temperatur
1 bis 40 Stunden (normalerweise 16 Stunden) durchgeführt
werden. Man kann auch die Methode nach Manning (a. a. O.) oder
andere Hybridisierungsmethoden anwenden, beispielsweise die
Methode nach Kohne et al (Biochemistry, Bd. 16 (1977), S. 5329-5341),
die bei der hierfür üblichen Temperatur in einer phenolhaltigen
Emulsion durchgeführt wird.
Anschließend wird an ein Enzym, beispielsweise die β-Galactosidase,
gebundenes Avidin zugesetzt, und zwar unter Bedingungen,
welche die Bindung des Biotins am Indikator an die freien Gruppen
des Avidins des Komplexes ermöglichen.
Der nicht hybridisierte Indikator wird anschließend vom hybridisierten
Indikator nach üblichen Methoden abgetrennt, beispielsweise
durch Ausfällen mit Polyäthylenglykol, Gelchromatographie
beispielsweise mit Sepharose, oder Ultrazentrifugieren.
Andererseits kann der nicht hybridisierte Indikator vor der
Bindung des Avidins, welches das Enzym mit den an den hybridisierten
Indikator gebundenen Biotingruppen trägt, an die DNA
abgetrennt werden.
Man kann das gegebenenfalls fixierte Enzym und dementsprechend
die gegebenenfalls stattfindende effektive Hybridisierung des Indikators mit
der untersuchten DNA nachweisen, indem man ein Enzymsubstrat, insbesondere
Orthonitrophenolgalactosid (ONPG), mit der Lösung in Berührung bringt.
Sobald die Versuchsbedingungen festgelegt sind, ist es natürlich
möglich, eine meßbare Aktivitätsschwelle zu bestimmen, beispielsweise
durch eine kolorimetrische oder fluorographische Methode.
Oberhalb dieser Schwelle kann auf die Anwesenheit der gesuchten
DNA oder des DNA-Fragments in der behandelten Probe geschlossen
werden.
Das nachstehend beschriebene im Labor durchgeführte Versuchsbei
spiel dient zur Erläuterung des erfindungsgemäßen Verfahrens.
Der Versuch dient dem Nachweis einer Maus-DNA durch Hybridisierung
dieser DNA mit ribosomaler Maus-RNA als Indikator.
100 µg Maus-DNA pro 100 µl wäßrige Lösung werden durch Versetzen
mit 10 µl 1 M NaOH denaturiert. Nach 10 Minuten wird
die Lösung mit 10 µl 1,5 M Natriumphosphorsäure (NaH₂PO₄) versetzt
und auf einen neutralen pH-Wert eingestellt. Die denaturierte
DNA-Lösung wird sodann mit 1 µg ribosomaler RNA, die
mit Biotin mittels Cytochrom C (hergestellt nach der Methode
von Manning et al.) markiert ist, versetzt. Das Volumen wird
mit Wasser auf 160 µl gebracht. Dann werden 40 µl einer Mineralsalzlösung
in einer Konzentration von 20×SSC (Standard
Saline Citrate) und 200 µl redistilliertes oder deionisiertes
Formamid zugegeben. Die Lösung 1×SSC ist eine wäßrige Lösung
von 0,15 M NaCl und 0,015 M Natriumcitrat, bei einem pH-Wert von
7,0. Das Gemisch wird 16 Stunden bei üblicher Temperatur inkubiert,
dann bei 4°C
gegen 2×SSC dialysiert und anschließend
8 Stunden gegen 500 ml Pufferlösung, die 0,1 M Phosphat, 1 M
NaCl und 0,01 M Äthylendiamintetraessigsaures Natrium (EDTA) enthält,
bei einem pH-Wert von 7,0 dialysiert. Letztere Dialyse wird
zweimal wiederholt und je 8 Stunden durchgeführt. Die erhaltene
Lösung wird eine Stunde bei üblicher Temperatur mit pankreatischer
Ribonuclease inkubiert. Die Ribonuclease-Konzentration
beträgt 10 µg/ml. Durch diese Behandlung kann nicht
hybridisierte RNA abgebaut werden.
Sodann werden 1 mg/ml Cytochrom C-Lösung und 1 µl einer Lösung,
die in 1 mg/ml Avidin und 2 mg/ml β-Galactosidase enthält, zugegeben.
Dabei erweist sich, daß eines von 7 Molekülen β-Galactosidase
an Avidin gebunden ist. Die Lösung wird gerührt
und sodann 4 Stunden bei 4°C stehengelassen.
Anschließend wird mit Phosphat-Dialysepuffer auf 10 ml verdünnt,
und die erhaltene Lösung wird eine Stunde bei 35 000 U/Min.
zentrifugiert (im Beckman Rotor SW 41). DNA- und RNA-Hybride
finden sich im Niederschlag zusammen mit den an diese RNA gebundenen
Avidin-β-Galactosidase-Komplexen. Der Überstand enthält
nicht hybridisierte und durch Ribonuclease abgebaute RNA sowie
ungebundene Avidin und β-Galctosidase.
Der Niederschlag wird abgetrennt und erneut in 10 ml Pufferlösung
suspendiert und zentrifugiert. Anschließend wird der Niederschlag
in 0,5 ml Puffer aufgenommen (Tube Nr. 1). Sodann wird
die Aktivität der β-Galactosidase beim Umsetzen des Substrats
ONPG nach der Methode von Miller (Experiments in bacterial genetics
(1972), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor,
New York, USA) durch Messung der optischen Dichte der
Lösung bei 420 mµ bestimmt, und zwar nach mindestens 30minütiger
Inkubation bei 37°C. Es werden unter genauer Einhaltung
der vorgenannten Bedingungen Kontrollproben hergestellt, wobei
jedoch beim ersten Kontrollversuch die Zugabe der ribosomalen
RNA (Tube Nr. 2) und beim zweiten Kontrollversuch die Zugabe
der Maus-DNA (Tube Nr. 3) weggelassen wird. Die Ergebnisse
sind in der Tabelle zusammengefaßt.
Aus der Tabelle ist ersichtlich, daß die in der (das Hybrid
enthaltenden) Tube Nr. 1 gemessene optische Dichte signifikant
höher ist als bei den Kontrollproben.
Das Versuchsbeispiel erläutert also die Bedingungen, unter denen
die gegebenenfalls anwesende DNA bzw. das DNA-Fragment
nachgewiesen werden kann, sofern ein komplementärer Indikator
dieser DNA bzw. des DNA-Fragments verfügbar ist, und zwar
durch eine einfache Methode, die weder kompliziertes Labormaterial
noch besonders große fachmännische Erfahrung erfordert.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann bei diagnostischen in vitro-Verfahren
zum Nachweis verschiedener Viren, wie Herpes,
Epstein Barr, Pox-Virus, Cytomegalo, in biologischen Proben
(wie Blutproben, Stuhlproben) besonders vorteilhaft angewandt
werden. Es kann ferner für die Diagnose bestimmter chromosomaler
Anomalien angewandt werden.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann weiterhin zur Feststellung
der bakteriellen Diagnose, insbesondere bei Trägern pathogener
Gene, seien sie exprimiert, nicht exprimiert oder latent, angewandt
werden.
Für den Fachmann liegt es auf der Hand, daß beim Suchen
einer infektiösen DNA rasch auf den Erkrankungsgrad einer erfindungsgemäß
behandelten biologischen Probe im Hinblick auf
die gesuchte Nukleinsäure bzw. deren Fragmente schließen kann,
wenn keine Induzierung oder zumindest keine Überschreitung der
Aktivitätsschwelle auf dem farbigen Substrat festgestellt wird,
sei es durch Versuche, sei es durch Vergleich mit den virusfreien
Kontrollproben.
Umgekehrt kann die festgestellte nicht vorhandene Aktivität
hinsichtlich des farbigen Substrats, insbesondere oberhalb der
vorgenannten Schwelle, in einem anderen bereits angesprochenen
Bereich Anwendung finden: Sie kann die Anwesenheit einer Anomalie
gesuchter chromosomaler Abnormität durch die festgestellte
nicht vorhandene gesamte oder partielle Hybridisierung zwischen
Indikator und untersuchter DNA anzeigen.
Beispielsweise kann man für medizinische Labors
Reagenzsätze ("Kit") mit allen zur Durchführung des
erfindungsgemäßen Verfahrens notwendigen Reagentien zur Verfügung
stellen. Solche Reagenzsätze können insbesondere
Muster für Indikatoren enthalten, die beispielsweise den DNA von
gut erforschten pathogenen Viren oder Bakterien entsprechen, und
sogar für Indikatoren, die den besonderen Genen entsprechen, die
normalerweise in biologischen zu untersuchenden Proben wie Blut
enthalten sind.
Wie bereits erwähnt, sollte der modifizierte Indikator vorzugsweise
ein Indikator sein, an den Biotin gebunden ist und wobei
das modifizierte Enzym, beispielsweise die β-Galactosidase,
selbst an das Avidin gebunden ist.
Die Erfindung kann noch in anderen Bereichen Anwendung finden,
insbesondere bei der Markierung bestimmter DNA-Fragmente in
bekannten genetischen Versuchen zur Bestimmung des Genotyps
der in Frage stehenden DNA. Sie kann insbesondere Anwendung
finden bei der Bestimmung, ob ein besonderes DNA-Fragment in
genetischen Ausleseversuchen inkorporiert ist oder nicht. Bei
diesen Ausleseversuchen geht es beispielsweise um Transformationen
von Zellen mittels fremder DNA, die das betreffende DNA-Fragment
enthält, oder aber um Transduktionsversuche, bei denen
DNA-Fragmente, die normalerweise in der zellulären DNA enthalten
sind, in die virale DNA übergehen, mit der die Zellen
infiziert worden sind. Eine solche Anwendung ist natürlich nur
möglich, wenn man über einen Indikator verfügt, der das komplementäre
RNA- bzw. DNA-Fragment des Fragments der gesuchten
Nukleinsäure ist.
Claims (9)
1. Verfahren zum Nachweis einer Nukleinsäure-Sequenz
oder eines Nukleinsäure-Fragments in einem
Gemisch unterschiedlicher Nukleinsäuren durch Hybridisierung
der Sequenz oder des Fragments
mit einem eine komplementäre Nukleinsäure (DNA oder RNA) enthaltenden
Indikator,
dadurch gekennzeichnet, daß man
- a) einen chemisch modifizierten Indikator verwendet, der vor oder nach der Hybridisierungsreaktion an ein Enzym gekoppelt werden kann,
- b) daß die Hybridisierungsreaktion durch Zusammenbringen des chemisch modifizierten Indikators mit der vorgenannten Sequenz oder dem Fragment in Gegenwart anderer, in der Probe enthaltener Nukleinsäure, gegebenenfalls nach vorherigem Denaturieren der Nukleinsäuren, erfolgt, und
- c) daß nach dem Abbau oder der Abtrennung eines evtl. Überschusses des nicht-hybridisierten Indikators das Hybridisierungsprodukt mit einem Enzymsubstrat zum Nachweis der Nukleinsäure-Sequenz oder des Nukleinsäure-Fragments in Kontakt gebracht wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß man das Enzym im Hinblick auf seine Fähigkeit auswählt,
auf ein farbiges Substrat einzuwirken, und daß man die Umwandlungsrate
des Substrats, die der Menge der nachzuweisenden
Nukleinsäure in der Ausgangsprobe korrelierbar
ist, durch optische oder analoge Analyse bestimmt.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet,
daß man den Indikator durch eine chemische Gruppe modifiziert,
die mit dem Enzym oder einem Molekül, das stabil
mit dem Enzym verbunden ist, einen stabilen Komplex bilden
kann.
4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet,
daß man sowohl als chemische Gruppe als auch als Molekül
Biotin oder Avidin verwendet.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet,
daß man als Enzym die β-Galactosidase verwendet.
6. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5, dadurch gekennzeichnet,
daß man zunächst die Hybridisierung, dann die Bindung
zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator
und dem Enzym durchführt und anschließend den gegebenenfalls
im Überschuß vorhandenen nicht hybridisierten
Indikator abtrennt bzw. abbaut.
7. Verfahren nach Anspruch 2 bis 5, dadurch gekennzeichnet,
daß man zunächst die Hybridisierung und anschließend
nach Abtrennung bzw. Abbau des gegebenenfalls im Überschuß
vorhandenen nicht hybridisierten Indikators die Bindung
zwischen dem chemisch modifizierten und hybridisierten Indikator
und dem Enzym durchführt.
8. Verwendung eines Reagenzsatzes zur Durchführung des
Verfahrens nach Anspruch 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet,
daß er folgende Bestandteile aufweist:
- a) mindestens einen Indikator aus einer RNA oder einer einzelsträngigen oder denaturierbaren DNA, die charakteristisch ist für die nachzuweisende Nukleinsäuresequenz oder deren Fragment, wobei dieser Indikator im Hinblick auf seine Bindung mit einem Enzym chemisch modifiziert ist,
- b) das gegebenenfalls modifizierte Enzym, das für die Bindung mit dem Indikator verwendet wird,
- c) ein insbesonders farbiges Substrat, das für das Enzym spezifisch ist,
- d) Reagentien, die für die Zellyse, insbesondere bei der Untersuchung von Blut, und für die Extraktion von Nukleinsäuren erforderlich sind.
9. Verwendung eines Reagenzsatzes nach Anspruch 8, dadurch
gekennzeichnet, daß er eine an Biotin gebundene RNA oder
DNA als Indikator und ein Kupplungsprodukt von
Avidin und einem Enzym, wie β-Galactosidase, enthält.
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Publications (3)
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DE2915082C2 DE2915082C2 (de) | 1989-07-13 |
DE2915082C3 true DE2915082C3 (de) | 1995-04-20 |
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Families Citing this family (280)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5605800A (en) * | 1978-04-13 | 1997-02-25 | Institut Pasteur | Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method |
FR2422956A1 (fr) * | 1978-04-13 | 1979-11-09 | Pasteur Institut | Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede |
US6297355B1 (en) | 1978-12-22 | 2001-10-02 | Biogen, Inc. | Polypeptides displaying HBV antigenicity or hbv antigen specificity |
US6835557B1 (en) | 1980-01-08 | 2004-12-28 | Biogen, Inc. | DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing human interferon-like polypeptides |
US4530901A (en) * | 1980-01-08 | 1985-07-23 | Biogen N.V. | Recombinant DNA molecules and their use in producing human interferon-like polypeptides |
ES500966A0 (es) | 1980-04-03 | 1982-12-16 | Biogen Nv | Un metodo de producir un polipeptido que muestra una actividad immunologica obiologica de interferon de fibroblasto hu- mano. |
US4711955A (en) * | 1981-04-17 | 1987-12-08 | Yale University | Modified nucleotides and methods of preparing and using same |
EP0329198B1 (de) * | 1981-04-17 | 1998-06-10 | Yale University | Basenmodifizierte Oligo- und Polynucleotide und Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung |
CA1180647A (en) * | 1981-07-17 | 1985-01-08 | Cavit Akin | Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method |
JPS5840099A (ja) * | 1981-07-17 | 1983-03-08 | アモコ・コ−ポレ−ション | 光−放射ポリヌクレオチドの交雑診断方法 |
EP0155359B1 (de) * | 1981-09-25 | 1988-01-07 | John A. Webster, Jr. | Verfahren zur Identifizierung und Charakterisierung von Organismen |
US4717653A (en) * | 1981-09-25 | 1988-01-05 | Webster John A Jr | Method for identifying and characterizing organisms |
US5614361A (en) * | 1981-09-25 | 1997-03-25 | Webster, Jr.; John A. | Method for identifying and characterizing organisms |
ATE39267T1 (de) * | 1981-09-25 | 1988-12-15 | John A Webster Jr | Verfahren zur identifizierung und charakterisierung von organismen. |
FI63596C (fi) * | 1981-10-16 | 1983-07-11 | Orion Yhtymae Oy | Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser |
JPS58502165A (ja) * | 1981-12-23 | 1983-12-15 | アンステイテユ・パストウ−ル | 特異抗体により認識し得る修飾核酸プローブを使用して核酸配列の存在を検出する方法 |
FR2518755B1 (fr) * | 1981-12-23 | 1986-04-11 | Pasteur Institut | Sonde contenant un acide nucleique modifie et reconnaissable par des anticorps specifiques et utilisation de cette sonde pour detecter et caracteriser une sequence d'adn homologue |
US5260433A (en) * | 1982-06-23 | 1993-11-09 | Enzo Diagnostics, Inc. | Saccharide specific binding system labeled nucleotides |
US5241060A (en) * | 1982-06-23 | 1993-08-31 | Enzo Diagnostics, Inc. | Base moiety-labeled detectable nucleatide |
US7220854B1 (en) | 1982-06-23 | 2007-05-22 | Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. | Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides |
CA1223831A (en) | 1982-06-23 | 1987-07-07 | Dean Engelhardt | Modified nucleotides, methods of preparing and utilizing and compositions containing the same |
US4556643A (en) * | 1982-07-26 | 1985-12-03 | Agracetus | Assay method and probe for polynucleotide sequences |
US6818393B1 (en) | 1982-07-30 | 2004-11-16 | Biomirieux Sa | DNA sequences coding for the DR beta-chain locus of the human lymphocyte antigen complex and polypeptides, diagnostic typing processes and products related thereto |
DE3382137D1 (de) * | 1982-07-30 | 1991-02-28 | Bernard Francois Mach | Dns-sequenzenkodieren fuer den dr-beta-kettenlocus des menschlichen lymphocytantigenkomplexes und polypeptiden, diagnostische typierungsverfahren und produkte die darauf bezug haben. |
US4689295A (en) * | 1983-01-20 | 1987-08-25 | Integrated Genetics, Inc. | Test for Salmonella |
US4994373A (en) * | 1983-01-27 | 1991-02-19 | Enzo Biochem, Inc. | Method and structures employing chemically-labelled polynucleotide probes |
GB8306426D0 (en) * | 1983-03-09 | 1983-04-13 | Malcolm A D B | Detecting polynucleotide sequence |
DE3310337A1 (de) * | 1983-03-22 | 1984-09-27 | Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL), 6900 Heidelberg | Verfahren zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen |
GB8311905D0 (en) * | 1983-04-29 | 1983-06-02 | Cox R A | Isolation and detection of nucleotide sequence |
CA1228811A (en) | 1983-05-05 | 1987-11-03 | Robert G. Pergolizzi | Assay method utilizing polynucleotide sequences |
CA1220818A (en) * | 1983-05-05 | 1987-04-21 | Hugh A.O. Hill | Assay techniques utilising specific binding agents |
ATE78301T1 (de) * | 1983-05-31 | 1992-08-15 | Orgenics Ltd | Molekulare genetische sonde und verfahren zu ihrer herstellung, testmethode und satz in denen diese molekulare genetische sonde gebraucht wird. |
US5221609A (en) * | 1983-05-31 | 1993-06-22 | Orgenics Ltd. | Molecular genetic probe, and method of forming same, assay technique and kit using said molecular genetic probe |
US4987065A (en) * | 1983-07-05 | 1991-01-22 | Enzo Biochem, Inc. | In vivo labelling of polynucleotide sequences |
CA1222705A (en) * | 1983-07-14 | 1987-06-09 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US4737454A (en) * | 1983-07-14 | 1988-04-12 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US4959309A (en) * | 1983-07-14 | 1990-09-25 | Molecular Diagnostics, Inc. | Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays |
US5200313A (en) * | 1983-08-05 | 1993-04-06 | Miles Inc. | Nucleic acid hybridization assay employing detectable anti-hybrid antibodies |
US4626501A (en) * | 1983-09-02 | 1986-12-02 | Integrated Genetics, Inc. | Labeled DNA |
NO843838L (no) * | 1983-09-26 | 1985-03-27 | Ortho Diagnostic Systems Inc | Fremgangsmaate for detektering av nukleinsyre |
FR2552879B1 (fr) * | 1983-10-03 | 1987-08-14 | Pasteur Institut | Procede et reactifs pour la detection d'une anomalie genetique dans une matiere biologique, notamment dans une preparation de leucocytes |
US4743535A (en) * | 1984-11-07 | 1988-05-10 | Miles Inc. | Hybridization assay employing labeled probe and anti-hybrid |
AU583258B2 (en) * | 1983-12-16 | 1989-04-27 | Medisense Inc. | Assay for nucleic acids |
US4943523A (en) * | 1984-01-30 | 1990-07-24 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US5002885A (en) * | 1984-01-30 | 1991-03-26 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method preparation and use |
US4843122A (en) * | 1984-01-30 | 1989-06-27 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US4707440A (en) * | 1984-01-30 | 1987-11-17 | Enzo Biochem, Inc. | Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay |
US4849505A (en) * | 1984-01-30 | 1989-07-18 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
US4849208A (en) * | 1984-01-30 | 1989-07-18 | Enzo Biochem, Inc. | Detectable molecules, method of preparation and use |
AU3844485A (en) * | 1984-02-09 | 1985-08-15 | Enzo Biochem Inc. | Heterologous detection of cabeled dna |
US4748111A (en) * | 1984-03-12 | 1988-05-31 | Molecular Diagnostics, Inc. | Nucleic acid-protein conjugate used in immunoassay |
US4617261A (en) * | 1984-03-21 | 1986-10-14 | Cetus Corporation | Process for labeling nucleic acids and hybridization probes |
US4582789A (en) * | 1984-03-21 | 1986-04-15 | Cetus Corporation | Process for labeling nucleic acids using psoralen derivatives |
US4840892A (en) * | 1984-05-15 | 1989-06-20 | Smithkline Beckman Corporation | Polynucleotide hybridization probes |
US4670380A (en) * | 1984-05-23 | 1987-06-02 | Molecular Diagnostics, Inc. | Assays utilizing labeled nucleic acid probes |
DE3431536A1 (de) * | 1984-08-28 | 1986-03-13 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Derivatisierte nucleinsaeure-sequenz, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zum nachweis von nucleinsaeuren |
US4563417A (en) * | 1984-08-31 | 1986-01-07 | Miles Laboratories, Inc. | Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes |
US4820630A (en) * | 1984-11-23 | 1989-04-11 | Digene Diagnostics, Incorporated | Assay for nucleic acid sequences, particularly genetic lesions, using interactive labels |
US4692509A (en) * | 1984-11-27 | 1987-09-08 | Molecular Diagnostics, Inc. | Radioactive labeling of proteins with nucleosides or nucleotides |
ATE107031T1 (de) * | 1984-12-03 | 1994-06-15 | Hoechst Celanese Corp | Verfahren zur bestimmung eines liganden. |
US4670379A (en) * | 1984-12-19 | 1987-06-02 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Polynucleotide hydridization assays employing catalyzed luminescence |
FR2578847A1 (fr) * | 1985-03-13 | 1986-09-19 | Centre Nat Rech Scient | Sonde adn destinee au diagnostic antenatal de certaines anomalies chromosomiques |
US6197563B1 (en) | 1985-03-28 | 2001-03-06 | Roche Molecular Systems, Inc. | Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences |
US6040166A (en) * | 1985-03-28 | 2000-03-21 | Roche Molecular Systems, Inc. | Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences, including a probe |
GB8509880D0 (en) * | 1985-04-17 | 1985-05-22 | Ici Plc | Testing device |
ES8707343A1 (es) * | 1985-06-13 | 1987-07-16 | Amgen | Un metodo para aislar una secuencia de acido nucleico objetivo seleccionada |
US5273882A (en) * | 1985-06-13 | 1993-12-28 | Amgen | Method and kit for performing nucleic acid hybridization assays |
US4806546A (en) * | 1985-09-30 | 1989-02-21 | Miles Inc. | Immobilization of nucleic acids on derivatized nylon supports |
US4806631A (en) * | 1985-09-30 | 1989-02-21 | Miles Inc. | Immobilization of nucleic acids on solvolyzed nylon supports |
US4789630A (en) * | 1985-10-04 | 1988-12-06 | Cetus Corporation | Ionic compounds containing the cationic meriquinone of a benzidine |
NZ218050A (en) * | 1985-11-13 | 1989-05-29 | Wistar Inst | Test for the presence of htlv-1v |
JPS63502477A (ja) * | 1985-12-03 | 1988-09-22 | エル・ギユ−リイ・エム・ラフアツト | 病気診断のための方法、装置および製品 |
US4882269A (en) * | 1985-12-13 | 1989-11-21 | Princeton University | Amplified hybridization assay |
US4822731A (en) * | 1986-01-09 | 1989-04-18 | Cetus Corporation | Process for labeling single-stranded nucleic acids and hybridizaiton probes |
US5447841A (en) | 1986-01-16 | 1995-09-05 | The Regents Of The Univ. Of California | Methods for chromosome-specific staining |
US5756696A (en) | 1986-01-16 | 1998-05-26 | Regents Of The University Of California | Compositions for chromosome-specific staining |
US6475720B1 (en) | 1986-01-16 | 2002-11-05 | The Regents Of The University Of California | Chromosome-specific staining to detect genetic rearrangements associated with chromosome 3 and/or chromosome 17 |
US6280929B1 (en) | 1986-01-16 | 2001-08-28 | The Regents Of The University Of California | Method of detecting genetic translocations identified with chromosomal abnormalities |
US5721098A (en) * | 1986-01-16 | 1998-02-24 | The Regents Of The University Of California | Comparative genomic hybridization |
US7115709B1 (en) * | 1986-01-16 | 2006-10-03 | The Regents Of The University Of California | Methods of staining target chromosomal DNA employing high complexity nucleic acid probes |
US6872817B1 (en) | 1986-01-16 | 2005-03-29 | The Regents Of The Univ. Of California | Method of staining target interphase chromosomal DNA |
US4935357A (en) * | 1986-02-05 | 1990-06-19 | New England Biolabs, Inc. | Universal restriction endonuclease |
US5418133A (en) * | 1986-08-12 | 1995-05-23 | The Australian National University | Sex determination in cattle, sheep and goats using y-chromosome polynucleotides |
US5714380A (en) | 1986-10-23 | 1998-02-03 | Amoco Corporation | Closed vessel for isolating target molecules and for performing amplification |
US5660983A (en) * | 1986-12-04 | 1997-08-26 | Mycogen Plant Science, Inc. | Maize cytoplasmic male sterility type T (cms-T) mitochondria DNA |
AU619170B2 (en) * | 1987-01-09 | 1992-01-23 | Abbott Laboratories | Diagnostic assays using nucleic acid probes |
AU622104B2 (en) * | 1987-03-11 | 1992-04-02 | Sangtec Molecular Diagnostics Ab | Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore |
EP0304934A3 (de) * | 1987-08-26 | 1989-07-26 | Hunger, Hans-Dieter | Markierte molekulare Sonden, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
US5384241A (en) * | 1987-09-11 | 1995-01-24 | Enzo Diagnostics, Inc. | Specific binding assay compound with inhibitive self-quenching characteristics |
EP0638807B1 (de) * | 1987-09-21 | 2002-07-17 | Gen-Probe Incorporated | Schutztest |
US6004745A (en) * | 1987-09-21 | 1999-12-21 | Gen-Probe Incorporated | Hybridization protection assay |
US5639604A (en) * | 1987-09-21 | 1997-06-17 | Gen-Probe Incorporated | Homogeneous protection assay |
DE3732145A1 (de) * | 1987-09-24 | 1989-04-06 | Merck Patent Gmbh | Verfahren und reagenz zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen |
DE3742706A1 (de) * | 1987-12-16 | 1989-06-29 | Erich Prof Dr Med Liebhardt | Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials |
US5354657A (en) * | 1988-01-12 | 1994-10-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process for the highly specific detection of nucleic acids in solid |
FR2680374B1 (fr) * | 1988-03-25 | 1993-11-12 | Bioprobe Systems Sa | Procede de coloration d'acides nucleiques detectes par marquage non radioactif et ensemble de reactifs pour la mise en óoeuvre de ce procede. |
US6326136B1 (en) * | 1988-04-01 | 2001-12-04 | Digene Corporation | Macromolecular conjugate made using unsaturated aldehydes |
US5109124A (en) * | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
US5858652A (en) * | 1988-08-30 | 1999-01-12 | Abbott Laboratories | Detection and amplification of target nucleic acid sequences |
US6203977B1 (en) * | 1988-11-15 | 2001-03-20 | Yale University | Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization |
US5489507A (en) * | 1988-11-30 | 1996-02-06 | Perkin-Elmer Corporation | DNA detection by color complementation |
US5237016A (en) * | 1989-01-05 | 1993-08-17 | Siska Diagnostics, Inc. | End-attachment of oligonucleotides to polyacrylamide solid supports for capture and detection of nucleic acids |
EP0385410B1 (de) * | 1989-02-28 | 1996-10-02 | Canon Kabushiki Kaisha | Partiell doppelsträngiges Oligonukleotid und Verfahren zu seiner Bildung |
JPH04504059A (ja) * | 1989-03-10 | 1992-07-23 | ミリポア・コーポレーシヨン | 化学発光検出を用いた核酸の配列決定 |
DE4001154A1 (de) * | 1990-01-17 | 1991-07-18 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren |
CA2031659A1 (en) * | 1990-01-26 | 1991-07-27 | John B. Findlay | Water-insoluble reagent, nucleic acid probe, test kit and diagnostic and purification methods |
NL9001639A (nl) * | 1990-07-19 | 1992-02-17 | Amc Amsterdam | Pt-houdende verbinding, werkwijze voor de bereiding ervan, alsmede toepassing van dergelijke verbindingen. |
US5714327A (en) * | 1990-07-19 | 1998-02-03 | Kreatech Diagnostics | Platinum-containing compounds, methods for their preparation and applications thereof |
JPH0499500A (ja) * | 1990-08-17 | 1992-03-31 | Kikkoman Corp | アビジンまたはアビジン標識体の定量法およびビオチンまたはビオチン標識体の定量法 |
EP0557456A4 (en) * | 1990-11-14 | 1995-11-15 | Siska Diagnostics Inc | Non-isotopic detection of nucleic acids using a polystyrene support-based sandwich hybridization assay and compositions useful therefor |
WO1992012176A1 (en) * | 1991-01-14 | 1992-07-23 | New York University | Cytokine-induced protein, tsg-14, dna coding therefor and uses thereof |
ATE185573T1 (de) * | 1991-01-14 | 1999-10-15 | Univ New York | Cytokin-induziertes protein, tsg-6, seine dna und verwendung |
US5843667A (en) * | 1991-03-22 | 1998-12-01 | Amoco Corporation | Nucleic acid probes for the detection for genital mycoplasmas |
US5552279A (en) * | 1991-03-22 | 1996-09-03 | Amoco Corporation | Nucleic acid probes for the detection of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma genitalium |
EP0648281A4 (de) * | 1991-09-10 | 1997-06-04 | Jack D Love | Zielgerichte amplifikation von dna und rna und signalamplifikation. |
EP0644889A4 (de) | 1991-12-24 | 1996-01-10 | Isis Pharmaceuticals Inc | ZUSAMMENSETZUNGEN UND VERFAHREN ZUR MODULATION VON-g(b)-AMYLOID. |
US7534567B2 (en) | 1992-03-04 | 2009-05-19 | The Regents Of The University Of California | Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization |
US5965362A (en) * | 1992-03-04 | 1999-10-12 | The Regents Of The University Of California | Comparative genomic hybridization (CGH) |
EP0631635B1 (de) | 1992-03-04 | 2001-09-12 | The Regents Of The University Of California | Vergleichende genomhybridisierung |
WO1993020234A1 (en) * | 1992-03-31 | 1993-10-14 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | A rapid, high capacity nucleic acid based assay |
WO1995004832A1 (fr) * | 1992-06-18 | 1995-02-16 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | Procede de detection d'un acide nucleique |
WO1994014067A1 (en) * | 1992-12-14 | 1994-06-23 | T Cell Sciences, Inc. | Diagnosis and therapy of sarcoidosis |
US5830645A (en) | 1994-12-09 | 1998-11-03 | The Regents Of The University Of California | Comparative fluorescence hybridization to nucleic acid arrays |
EP0807689B1 (de) * | 1994-12-29 | 2003-08-13 | Eiken Kagaku Kabushiki Kaisha | Verfahren zur zellerkennung |
US5753787A (en) * | 1995-04-10 | 1998-05-19 | Yale University | Nucleic acids encoding ancylostoma secreted protein |
US5731148A (en) * | 1995-06-07 | 1998-03-24 | Gen-Probe Incorporated | Adduct protection assay |
US6297027B1 (en) | 1996-07-31 | 2001-10-02 | Purina Mills, Inc. | Bovine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof |
US6277592B1 (en) | 1996-07-31 | 2001-08-21 | Purina Mills, Inc. | Porcine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof |
US20020137904A1 (en) * | 1998-03-27 | 2002-09-26 | Patricia A. Billing-Medel | Reagents and methods useful for detecting diseases of the gastrointestinal tract |
JP3981416B2 (ja) * | 1997-04-10 | 2007-09-26 | ユニバーシティ メディカル センター ナイメーヘン | Pca3タンパク質、pca3遺伝子、及びこれらの用途 |
US20050208567A1 (en) * | 1997-04-25 | 2005-09-22 | Billing-Medel Patricia A | Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate |
US6558901B1 (en) | 1997-05-02 | 2003-05-06 | Biomerieux Vitek | Nucleic acid assays |
AU738708B2 (en) | 1997-05-02 | 2001-09-27 | Gen-Probe Incorporated | Two-step hybridization and capture of a polynucleotide |
IL124275A (en) * | 1997-05-02 | 2002-03-10 | Bio Merieux Vitek Inc | A method to produce sequences of nucleic acids |
US6534273B2 (en) | 1997-05-02 | 2003-03-18 | Gen-Probe Incorporated | Two-step hybridization and capture of a polynucleotide |
FR2767337B1 (fr) | 1997-08-14 | 2002-07-05 | Pasteur Institut | Sequences nucleiques de polypeptides exportes de mycobacteri es, vecteurs les comprenant et applications au diagnostic et a la prevention de la tuberculose |
GB9722131D0 (en) | 1997-10-20 | 1997-12-17 | Medical Res Council | Method |
KR100735653B1 (ko) | 1997-11-28 | 2007-07-06 | 세로노 제네틱스 인스티튜트 에스.에이. | 클라미디아 트라코마티스 게놈 서열과 폴리펩티드, 이의단편 및 이의 용도, 특히, 감염의 진단, 예방 및 치료 용도 |
US20040062775A1 (en) | 1997-12-05 | 2004-04-01 | Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments | Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD) |
FR2772047B1 (fr) | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
EP1037665A1 (de) | 1997-12-19 | 2000-09-27 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Methoden und zusammensetzungen zur inhibierung von tumorzellwachstum |
US6183957B1 (en) | 1998-04-16 | 2001-02-06 | Institut Pasteur | Method for isolating a polynucleotide of interest from the genome of a mycobacterium using a BAC-based DNA library application to the detection of mycobacteria |
US6322976B1 (en) | 1998-05-28 | 2001-11-27 | Medical Research Council | Compositions and methods of disease diagnosis and therapy |
AU5882000A (en) | 1999-06-22 | 2001-01-09 | Invitrogen Corporation | Improved primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US6830902B1 (en) | 1999-07-02 | 2004-12-14 | Invitrogen Corporation | Compositions and methods for enhanced sensitivity and specificity of nucleic acid synthesis |
EP1422298B1 (de) | 1999-07-09 | 2010-01-27 | Gen-Probe Incorporated | HIV-1 Detektion mittels Nukleinsäureamplifizierung |
JP2003510075A (ja) | 1999-09-29 | 2003-03-18 | ディグノキュアー・インコーポレーテッド | 良性および悪性の前立腺組織におけるpca3メッセンジャーrna種 |
GB9928787D0 (en) | 1999-12-03 | 2000-02-02 | Medical Res Council | Direct screening method |
FR2803913B1 (fr) | 2000-01-13 | 2002-08-16 | Pasteur Sanofi Diagnostics | Procede d'immobilisation de reactif(s) affin(s) sur phase solide hydrophobe |
US6543535B2 (en) | 2000-03-15 | 2003-04-08 | Exxonmobil Upstream Research Company | Process for stimulating microbial activity in a hydrocarbon-bearing, subterranean formation |
EP1925672A1 (de) | 2001-06-22 | 2008-05-28 | Syngeta Participations AG | Auf abiotischen Stress ansprechende Polynukleotide und Polypeptide |
US20030165859A1 (en) * | 2001-10-23 | 2003-09-04 | Invitrogen Corporation | Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US6942972B2 (en) * | 2001-10-24 | 2005-09-13 | Beckman Coulter, Inc. | Efficient synthesis of protein-oligonucleotide conjugates |
US6956484B2 (en) * | 2001-12-21 | 2005-10-18 | Reconnaissance International | Substance testing devices with photo identification |
US20030175828A1 (en) * | 2002-03-15 | 2003-09-18 | Lazar James G. | Signal amplification by Hybrid Capture |
US7199107B2 (en) | 2002-05-23 | 2007-04-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense modulation of kinesin-like 1 expression |
EP1513958B1 (de) | 2002-06-14 | 2011-08-10 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen zum nachweis von hepatitis-b-virus |
EP1583949B1 (de) | 2002-10-16 | 2015-06-17 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zumnachweis des west-nil-virus |
AU2004209578A1 (en) * | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Diagnocure Inc. | Method to detect prostate cancer in a sample |
ES2383947T3 (es) | 2003-12-19 | 2012-06-27 | Gen-Probe Incorporated | Composiciones, métodos y equipos para la detección de ácidos nucleicos del vih-1 y vih-2 |
WO2005079474A2 (en) | 2004-02-17 | 2005-09-01 | The Regents Of The University Of California | Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization |
US7466908B1 (en) * | 2004-04-16 | 2008-12-16 | Spartan Bioscience Inc. | System for rapid nucleic acid amplification and detection |
CA2565980A1 (en) | 2004-05-12 | 2005-12-01 | Luca Technologies, Llc | Generation of hydrogen from hydrocarbon-bearing materials |
ES2392445T3 (es) | 2004-07-13 | 2012-12-10 | Gen-Probe Incorporated | Composiciones y métodos para la detección de ácido nucleico del virus de la hepatitis A |
CA2847930C (en) | 2004-09-30 | 2016-07-05 | Gen-Probe Incorporated | Assay for detecting and quantifying hiv-1 |
AU2005333163B2 (en) * | 2004-11-09 | 2011-06-16 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting Group A streptococci |
US20060275792A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-12-07 | Lee Jun E | Enhancement of nucleic acid amplification using double-stranded DNA binding proteins |
US20060105348A1 (en) * | 2004-11-15 | 2006-05-18 | Lee Jun E | Compositions and methods for the detection and discrimination of nucleic acids |
US7472576B1 (en) | 2004-11-17 | 2009-01-06 | State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Portland State University | Nanometrology device standards for scanning probe microscopes and processes for their fabrication and use |
CA2491067A1 (en) | 2004-12-24 | 2006-06-24 | Stichting Katholieke Universiteit | Mrna rations in urinary sediments and/or urine as a prognostic marker for prostate cancer |
JP4874999B2 (ja) * | 2005-02-07 | 2012-02-15 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | B群連鎖球菌属を検出するための組成物及び方法 |
US20060223159A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Generation of materials with enhanced hydrogen content from microbial consortia including thermotoga |
US20060223153A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Generation of materials with enhanced hydrogen content from anaerobic microbial consortia |
US20060223160A1 (en) * | 2005-04-05 | 2006-10-05 | Luca Technologies, Llc | Systems and methods for the isolation and identification of microorganisms from hydrocarbon deposits |
US7426960B2 (en) | 2005-05-03 | 2008-09-23 | Luca Technologies, Inc. | Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits |
US7993853B2 (en) | 2005-05-06 | 2011-08-09 | Gen-Probe Incorporated | Methods of nucleic acid target capture |
US8124335B2 (en) | 2005-05-06 | 2012-02-28 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and assays to detect influenza virus A and B nucleic acids |
AU2006304721B2 (en) | 2005-10-17 | 2012-01-19 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods to detect Legionella pneumophila nucleic acid |
US8969033B2 (en) * | 2005-11-02 | 2015-03-03 | Battelle Energy Alliance, Llc | Alteration and modulation of protein activity by varying post-translational modification |
US7416879B2 (en) * | 2006-01-11 | 2008-08-26 | Luca Technologies, Inc. | Thermacetogenium phaeum consortium for the production of materials with enhanced hydrogen content |
US7696132B2 (en) | 2006-04-05 | 2010-04-13 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
US7977282B2 (en) * | 2006-04-05 | 2011-07-12 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
US20100248322A1 (en) * | 2006-04-05 | 2010-09-30 | Luca Technologies, Inc. | Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material |
ATE514794T1 (de) * | 2006-05-12 | 2011-07-15 | Gen Probe Inc | Zusammensetzungen und verfahren für den nachweis von enterokokken-nukleinsäuren |
EP3159417B1 (de) | 2006-08-01 | 2021-10-06 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren zur nichtspezifischen zielerfassung von nukleinsäuren |
EP3095873B1 (de) | 2006-12-21 | 2018-04-18 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren und zusammensetzungen zur amplifizierung von nukleinsäuren |
EP1978111B1 (de) | 2007-04-02 | 2013-03-27 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, Kits und zugehörige Verfahren zur Erkennung und/oder Überwachung von Pseudomonas aeruginosa |
EP2384432B1 (de) | 2007-06-21 | 2016-12-28 | Gen-Probe Incorporated | Instrument und behälter zur durchführung von verfahren |
CA2715991A1 (en) | 2007-12-26 | 2009-07-09 | Gen-Probe Incorporated | Amplification oligomers and methods to detect candida albicans 26s rrna or encoding dna |
US7923234B2 (en) * | 2008-01-25 | 2011-04-12 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermal and acid tolerant beta-xylosidases, genes encoding, related organisms, and methods |
US8492114B2 (en) | 2008-01-25 | 2013-07-23 | Battelle Energy Alliance, Llc | Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes |
US8728803B2 (en) | 2008-02-28 | 2014-05-20 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic metabolism genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
US9732330B2 (en) | 2008-01-25 | 2017-08-15 | Battelle Energy Alliance, Llc | Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes |
MX2010008250A (es) * | 2008-01-31 | 2010-11-09 | Battelle Energy Alliance Llc | Genes que degradan el biopolimero termofilico y termoacidofilico y enzimas a partir de alicyclobacillus acidocaldarius, metodos y organismos relacionados. |
US8426185B2 (en) | 2008-01-31 | 2013-04-23 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
US8557557B2 (en) * | 2008-01-31 | 2013-10-15 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
US8497110B2 (en) | 2008-01-31 | 2013-07-30 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
EP2245040A4 (de) | 2008-02-22 | 2013-06-05 | Battelle Energy Alliance Llc | Steuerung der transkription bei alicyclobacillus acidocaldarius und damit assoziierte gene, proteine und verfahren |
AU2009251766A1 (en) | 2008-02-26 | 2009-12-03 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic sugar transporter genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms |
AU2009310370A1 (en) | 2008-02-27 | 2010-05-06 | Battelle Energy Alliance, Llc | Thermophilic and thermoacidophilic glycosylation genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods |
CA3128538C (en) | 2008-04-21 | 2023-08-08 | Gen-Probe Incorporated | Method for detecting chikungunya virus |
EP2479287B1 (de) | 2008-05-13 | 2014-07-23 | Gen-Probe Incorporated | Inaktivierbare Target-Capture-Oligomere zur Verwendung bei der selektiven Hybridisierung und Fangen von Zielnukleinsäuresequenzen |
US8703421B2 (en) | 2008-05-30 | 2014-04-22 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of Salmonella |
US8097412B2 (en) * | 2008-07-12 | 2012-01-17 | Biodiagnostics, Inc. | DNA-based test for detection of annual and intermediate ryegrass |
CA2638458A1 (en) * | 2008-07-31 | 2010-01-31 | Spartan Bioscience Inc. | Thermal recycling by positioning relative to fixed-temperature source |
US20100035309A1 (en) * | 2008-08-06 | 2010-02-11 | Luca Technologies, Inc. | Analysis and enhancement of metabolic pathways for methanogenesis |
AU2009335053B2 (en) | 2008-12-30 | 2013-08-01 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of Listeria |
JP5586631B2 (ja) | 2009-01-30 | 2014-09-10 | ジェン−プローブ・インコーポレーテッド | 信号を検出し、信号伝送要素に熱エネルギーを加えるためのシステム及び方法 |
EP3257859B1 (de) | 2009-02-26 | 2020-09-23 | Gen-Probe Incorporated | Assay zum nachweisen menschlicher parvoviren-nukleinsäure |
US20100248321A1 (en) * | 2009-03-27 | 2010-09-30 | Luca Technologies, Inc. | Surfactant amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous materials |
AU2010266234B2 (en) | 2009-07-01 | 2013-07-25 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for nucleic acid amplification |
US8479813B2 (en) * | 2009-12-16 | 2013-07-09 | Luca Technologies, Inc. | Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits |
US9181593B2 (en) | 2010-02-17 | 2015-11-10 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods to detect Atopobium vaginae nucleic acid |
EP3587593B1 (de) | 2010-04-21 | 2023-09-27 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, verfahren und kits für den nachweis von nukleinsäuren des herpes-simplex-virus |
US20110275135A1 (en) | 2010-05-05 | 2011-11-10 | Battelle Energy Alliance, Llc | Genetic elements, proteins, and associated methods including application of additional genetic information to gram (+) thermoacidophiles |
EP2588629B1 (de) | 2010-06-30 | 2017-05-17 | Gen-Probe Incorporated | Methode und apparatur zur identifizierung von analyt-beinhaltenden proben unter verwendung von single-read determination des analyten und prozesskontrollsignalen |
EP2593569B1 (de) | 2010-07-12 | 2018-01-03 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und tests für den nachweis von nukleinsäuren des saisonalen h1 influenza a virus |
US10865445B2 (en) | 2010-08-18 | 2020-12-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Methods for alleviating facioscapulohumeral dystrophy (FSHD) by N siRNA molecule inhibiting the expression of DUX4-FL |
WO2012030856A2 (en) | 2010-08-30 | 2012-03-08 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, methods and reaction mixtures for the detection of xenotropic murine leukemia virus-related virus |
EP2616555B1 (de) | 2010-09-16 | 2017-11-08 | Gen-Probe Incorporated | Über l-nukleotidenden immobilisierbare fängersonden |
GB2497495B (en) | 2010-10-04 | 2018-06-06 | Gen Probe Prodesse Inc | Compositions, methods and kits to detect adenovirus nucleic acids |
US9512467B2 (en) | 2011-03-10 | 2016-12-06 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for the selection and optimization of oligonucleotide tag sequences |
EP3272886B1 (de) | 2011-04-25 | 2019-09-25 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von bv-assoziierter bakterieller nukleinsäure |
JP6150795B2 (ja) | 2011-07-15 | 2017-06-28 | ジェン−プロウブ インコーポレイテッド | シングルプレックス又はマルチプレックスアッセイにおいてヒトパルボウイルス核酸を検出及びa型肝炎ウイルス核酸を検出するための組成物及び方法 |
EP3255155B1 (de) | 2011-09-08 | 2019-04-24 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von bv-assoziierter bakterieller nukleinsäure |
WO2013044097A1 (en) | 2011-09-21 | 2013-03-28 | Gen-Probe Incorporated | Methods for amplifying nucleic acid using tag-mediated displacement |
DE102011120550B4 (de) | 2011-12-05 | 2013-11-07 | Gen-Probe Prodesse, Inc. | Zusammensetzungen, Verfahren und Kits zur Detektion von Adenovirusnukleinsäuren |
WO2013126793A2 (en) | 2012-02-24 | 2013-08-29 | Gen-Probe Prodesse, Inc. | Detection of shiga toxin genes in bacteria |
US9004162B2 (en) | 2012-03-23 | 2015-04-14 | Transworld Technologies Inc. | Methods of stimulating acetoclastic methanogenesis in subterranean deposits of carbonaceous material |
AU2013205110B2 (en) | 2012-04-24 | 2016-10-13 | Gen-Probe Incorporated | Compositions, Methods and Kits to Detect Herpes Simplex Virus Nucleic Acids |
AU2013205064B2 (en) | 2012-06-04 | 2015-07-30 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Amplifying and Characterizing HCV Nucleic Acid |
ES2761920T3 (es) | 2012-08-30 | 2020-05-21 | Gen Probe Inc | Amplificación de ácido nucleico multifásica |
AU2013205122B2 (en) | 2012-10-11 | 2016-11-10 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Human Papillomavirus Nucleic Acid |
AU2013205090B2 (en) | 2012-12-07 | 2016-07-28 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Gastrointestinal Pathogen Nucleic Acid |
US20160024565A1 (en) * | 2013-03-13 | 2016-01-28 | Tufts University | Fragment complementation of based assays |
US10053742B2 (en) | 2013-08-14 | 2018-08-21 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting HEV nucleic acid |
CA2925281C (en) | 2013-09-25 | 2022-05-03 | Zoetis Services Llc | Pcv2b divergent vaccine composition and methods of use |
EP3739062B1 (de) | 2014-10-20 | 2023-08-16 | Gen-Probe Incorporated | Lyselösung roter blutkörperchen |
WO2016112252A1 (en) | 2015-01-09 | 2016-07-14 | Gen-Probe Incorporated | Methods and compositions for diagnosing bacterial vaginosis |
EP3271484B1 (de) | 2015-03-16 | 2021-06-02 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren und zusammensetzungen zum nachweis von bakterieller nukleinsäure und zur diagnose von bakterieller vaginose |
EP3387107B1 (de) | 2015-12-11 | 2020-08-12 | Spartan Bioscience Inc. | Röhrchenverschlusssystem und verfahren zur nukleinsäureamplifikation |
EP4249609A3 (de) | 2016-01-04 | 2023-12-20 | Gen-Probe Incorporated | Verfahren und zusammensetzungen zum nachweis von candida-spezies |
WO2017136782A1 (en) | 2016-02-05 | 2017-08-10 | Mark Filipowsky | Dried amplification compositions |
EP3448998B1 (de) | 2016-04-27 | 2020-06-03 | Gen-Probe Incorporated | Reagens für blutzelllyse |
AU2017278065B2 (en) | 2016-06-10 | 2020-09-10 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting Zika virus nucleic acid |
AU2017346854B2 (en) | 2016-10-19 | 2024-05-23 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting or quantifying hepatitis C virus |
CN110088302A (zh) | 2016-11-21 | 2019-08-02 | 简·探针公司 | 用于检测或定量乙型肝炎病毒的组合物和方法 |
CA3176517C (en) | 2017-03-24 | 2024-03-05 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detection of viral pathogens in samples |
WO2018175883A1 (en) | 2017-03-24 | 2018-09-27 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting or quantifying parainfluenza virus |
EP3601618A1 (de) | 2017-03-25 | 2020-02-05 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, verfahren und kits zum nachweis von adenovirus-, metapneumovirus- und/oder rhinovirus-nukleinsäuren |
KR102508182B1 (ko) | 2017-05-17 | 2023-03-09 | 썬더 바이오테크 인크. | 형질전환 대식세포, 키메라 항원 수용체, 및 관련 방법 |
EP4276201A3 (de) | 2017-06-07 | 2024-01-17 | Gen-Probe Incorporated | Nachweis von nukleinsäure der babesia-spezies in einer probe |
US20210155978A1 (en) | 2017-07-10 | 2021-05-27 | Gen-Probe Incorporated | Analytical systems and methods for nucleic acid amplification using sample assigning parameters |
EP3665309B1 (de) | 2017-08-11 | 2023-02-22 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von staphylococcus aureus |
EP3673079A1 (de) * | 2017-09-29 | 2020-07-01 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Sensorvorrichtung und verfahren zum testen einer probe |
CN111465707A (zh) | 2017-11-17 | 2020-07-28 | 简·探针公司 | 用于检测C1orf43核酸的组合物和方法 |
EP3724354A1 (de) | 2017-12-15 | 2020-10-21 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von toxigenem clostridium difficile |
US20210052643A1 (en) | 2018-01-05 | 2021-02-25 | Thunder Biotech, Inc. | Modified macrophages and macrophage precursors and associated methods |
WO2019148169A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Gen-Probe Incorporated | Analytical systems and methods |
GB2590210B (en) | 2018-06-13 | 2023-01-25 | Gen Probe Inc | Compositions and methods for detecting group B Streptococcus nucleic acid |
JP7470095B2 (ja) | 2018-07-10 | 2024-04-17 | ジェン-プローブ・インコーポレーテッド | 核酸を検出および定量するための方法およびシステム |
JP7469290B2 (ja) | 2018-08-01 | 2024-04-16 | ジェン-プローブ・インコーポレーテッド | エプスタイン-バールウイルスの核酸を検出するための組成物および方法 |
EP3841223A1 (de) | 2018-08-08 | 2021-06-30 | Gen-Probe Incorporated | Zusammensetzungen, verfahren und kits zum nachweis von mycoplasma genitalium |
WO2020041414A1 (en) | 2018-08-21 | 2020-02-27 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human cytomegalovirus |
KR20210063347A (ko) | 2018-08-24 | 2021-06-01 | 젠-프로브 인코포레이티드 | 세균성 핵산을 검출하고 세균성 질염을 진단하기 위한 조성물 및 방법 |
WO2020069085A2 (en) | 2018-09-27 | 2020-04-02 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for detecting bordetella pertussis and bordetella parapertussis nucleic acid |
US20220017980A1 (en) | 2018-10-01 | 2022-01-20 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying or detecting varicella-zoster virus |
CA3116895A1 (en) | 2018-10-22 | 2020-04-30 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human polyomavirus bk virus |
TW202030333A (zh) | 2018-12-20 | 2020-08-16 | 美商簡 探針公司 | 用於檢測瘧原蟲物種核酸之組成物及方法 |
US20220098647A1 (en) | 2019-03-22 | 2022-03-31 | Gen-Probe Incorporated | Compositions and Methods for Detecting Group A Streptococcus |
CN118083476A (zh) | 2019-05-03 | 2024-05-28 | 简·探针公司 | 用于分析系统的容器输送系统 |
CN114286867B (zh) | 2019-08-20 | 2024-04-16 | 青岛华大智造科技有限责任公司 | 一种基于发光标记物光信号动力学及二次发光信号对多核苷酸进行测序的方法 |
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WO2024054924A1 (en) | 2022-09-08 | 2024-03-14 | Gen-Probe Incorporated | Method of detecting nucleic acid analytes using dual-specificity primers |
Family Cites Families (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3654090A (en) * | 1968-09-24 | 1972-04-04 | Organon | Method for the determination of antigens and antibodies |
NL154598B (nl) * | 1970-11-10 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking. |
NL154599B (nl) * | 1970-12-28 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking. |
US4067774A (en) * | 1971-05-14 | 1978-01-10 | Syva Company | Compounds for enzyme amplification assay |
US3817837A (en) * | 1971-05-14 | 1974-06-18 | Syva Corp | Enzyme amplification assay |
US3880934A (en) * | 1972-02-10 | 1975-04-29 | Syntex Inc | Nitrophenyloxy-butanediols |
NL171930C (nl) * | 1972-05-11 | 1983-06-01 | Akzo Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van haptenen, alsmede testverpakkingen. |
US4002532A (en) * | 1974-10-21 | 1977-01-11 | Weltman Joel K | Enzyme conjugates |
IN142734B (de) * | 1975-04-28 | 1977-08-20 | Miles Lab | |
US4016043A (en) * | 1975-09-04 | 1977-04-05 | Akzona Incorporated | Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies |
US4134792A (en) * | 1976-12-06 | 1979-01-16 | Miles Laboratories, Inc. | Specific binding assay with an enzyme modulator as a labeling substance |
US4139346A (en) * | 1977-11-28 | 1979-02-13 | Enzo Bio Chem Incorporated | Nucleic acid and protein binding paper |
US4318980A (en) * | 1978-04-10 | 1982-03-09 | Miles Laboratories, Inc. | Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label |
FR2422956A1 (fr) * | 1978-04-13 | 1979-11-09 | Pasteur Institut | Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede |
US5605800A (en) * | 1978-04-13 | 1997-02-25 | Institut Pasteur | Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method |
US4228237A (en) * | 1978-09-21 | 1980-10-14 | Calbiochem-Behring Corp. | Methods for the detection and determination of ligands |
EP0041426B1 (de) * | 1980-05-22 | 1985-11-13 | Institut Pasteur | Kupplungsprodukt zwischen einem Lectin und einem spezifischen Liganden, Herstellung und Anwendung auf biologischem Gebiet |
US4358535A (en) * | 1980-12-08 | 1982-11-09 | Board Of Regents Of The University Of Washington | Specific DNA probes in diagnostic microbiology |
US4442204A (en) * | 1981-04-10 | 1984-04-10 | Miles Laboratories, Inc. | Homogeneous specific binding assay device and preformed complex method |
ATE78301T1 (de) * | 1983-05-31 | 1992-08-15 | Orgenics Ltd | Molekulare genetische sonde und verfahren zu ihrer herstellung, testmethode und satz in denen diese molekulare genetische sonde gebraucht wird. |
EP0155854B1 (de) * | 1984-03-22 | 1990-09-26 | Bresatec Limited | Nichtradioaktives biologisches Testmaterial |
EP0187332B1 (de) * | 1985-01-10 | 1989-02-01 | Molecular Diagnostics, Inc. | Photochemisches Verfahren zum Markieren von Nucleinsäuren zum Nachweis in Hybridisationsproben |
US4868105A (en) * | 1985-12-11 | 1989-09-19 | Chiron Corporation | Solution phase nucleic acid sandwich assay |
-
1978
- 1978-04-13 FR FR7810975A patent/FR2422956A1/fr active Granted
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1979
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1982
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