CH647870A5 - Procede d'analyse d'une sequence ou fragment determine d'acide nucleique et moyens de mise en oeuvre du procede. - Google Patents

Procede d'analyse d'une sequence ou fragment determine d'acide nucleique et moyens de mise en oeuvre du procede. Download PDF

Info

Publication number
CH647870A5
CH647870A5 CH3527/79A CH352779A CH647870A5 CH 647870 A5 CH647870 A5 CH 647870A5 CH 3527/79 A CH3527/79 A CH 3527/79A CH 352779 A CH352779 A CH 352779A CH 647870 A5 CH647870 A5 CH 647870A5
Authority
CH
Switzerland
Prior art keywords
enzyme
probe
nucleic acid
dna
coupling
Prior art date
Application number
CH3527/79A
Other languages
English (en)
Inventor
Philippe Kourilsky
Stratis Avrameas
Brigitte-Contamine Cami
Jean-Luc Guesdon
Original Assignee
Pasteur Institut
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9207099&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CH647870(A5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pasteur Institut filed Critical Pasteur Institut
Publication of CH647870A5 publication Critical patent/CH647870A5/fr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81—Packaged device or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/975—Kit

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

L'invention est relative à un procédé d'analyse d'une séquence ou fragment déterminé d'acide nucléique et des moyens de mise en œuvre du procédé selon les préambules des revendications 1,8,10 et 11.
Le procédé d'analyse selon l'invention peut être appliqué au diagnostic rapide in vitro de la présence, dans un échantillon biologique, provenant notamment d'un hôte humain ou animal, de particules nucléiques déterminées, par exemple à caractère infectieux, ou encore de l'intégrité ou non de tel ou tel gène particulier appartenant au patrimoine génétique normal de l'hôte.
Il n'est pas nécessaire d'insister sur l'extraordinaire richesse en acides nucléiques variés que présente tout échantillon biologique, par exemple de sang, qu'il est possible de prélever sur tout être vivant. Il en est encore de même pour ce qui est des séquences différentes, par exemple des nombreux gènes, que peut contenir tout acide nucléique particulier au sein de cet échantillon, d'où les difficultés immenses que le généticien peut rencontrer au niveau de la détection ou de la caractérisation de certains acides nucléiques dans un échantillon, difficultés qui sont encore décuplées dès lors qu'il s'agit de caractériser la présence de certains fragments, par exemple des gènes, contenus dans ces acides nucléiques.
La caractérisation d'un acide nucléique particulier ou de gènes particuliers — par exemple en vue de l'étude de l'organisation des séquences génétiques de l'ADN qui les contient — implique donc au préalable l'obtention, à partir du milieu étudié, d'une fraction enrichie en cet acide nucléique. A cet effet, il a déjà été proposé des techniques d'enrichissement mettant à profit des réactions d'hybridation entre l'acide nucléique ou le gène recherché et une sonde, dans la mesure où celle-ci était disponible et où les hybrides formés pouvaient ensuite être séparés du milieu, par exemple par sédimentation différentielle au sein d'une solution soumise à une ultracentrifu-gation.
De telles sondes ont déjà été décrites: elles sont en général constituées par des acides ribonucléiques (ARN, ADN), tels que les ARN obtenus au cours de la transcription génétique des gènes de structure contenus dans les acides désoxynucléiques (ADN) des organismes cellulaires dont ils sont originaires, ces ARN étant ensuite susceptibles d'être eux-mêmes «traduits» en les protéines susceptibles d'être codées par ces gènes de structure. On sait que ces ARN ont des séquences de nucléotides complémentaires de celles des ADN dont ils dérivent, cette complémentarité se manifestant par la capacité qu'ont ces ARN de former des hybrides mixtes avec les séquences correspondantes de ces ADN préalablement dénaturés, pour autant que ceux-ci étaient initialement bicaténaires, par exemple après incubation dans un milieu de haute force ionique et à température élevée ou dans un milieu basique.
Il a été suggéré d'avoir recours, pour le repérage des hybrides formés, à un marquage radioactif soit des gènes eux-mêmes, soit des sondes d'ARN. Ces techniques sont cependant difficiles à mettre en œuvre et, en outre, ne permettent pas toujours la localisation satisfaisante des gènes en question dans leurs ADN.
C'est dans le but de permettre une localisation plus aisée des gènes étudiés dans les ADN qui les contiennent et de promouvoir une méthode d'obtention de fractions enrichies en segments d'ADN déterminés à partir de ces mêmes ADN que Manning et coll. ont proposé une technique de détection physico-chimique de ces gènes, consistant à modifier chimiquement la sonde d'ARN, par fixation sur celle-ci de groupes biotine, par l'intermédiaire de ponts formés par des groupes dérivés de cytochrome C et fixation sur l'ADN, après hybridation avec la sonde, de repères physiques visualisables au microscope électronique à balayage, formés par des sphères sub5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
3
647870
microscopiques ayant des diamètres de l'ordre de 60 nm, notamment à base de poly(méthacrylate), préalablement modifiées chimiquement et couplées de façon covalente à des molécules d'avidine [notamment dans les articles intitulés «A New Method of in situ Hybri-dization» (Une nouvelle méthode d'hybridation in situ), «Chromo-soma (Beri.)», 53,107-117 (1975), Springer-Verlag 1975 et «A Method for Gene Enrichment Based on the Avidin-Biotin Interaction. Application to the Drosophila Ribosomal RNA Genes» (Une méthode pour l'enrichissement en gènes basée sur l'interaction avidi-ne-biotine. Application aux gènes d'ARN ribosomiques de Drosophila), «Biochemistry», vol. 16, N° 7, 1364-1369, 1977].
En effet, l'incubation des hybrides modifiés à la biotine en présence des sphères submicroscopiques modifiées à l'avidine permet de marquer et de rendre repérables les emplacements des gènes recherchés dans l'ADN qui les contient, vis-à-vis de la structure globale également visible au microscope électronique de cet ADN, du fait des interactions non covalentes très puissantes qui sont alors produites entre les sites demeurés libres de la biotine et de l'avidine.
Cette méthode ne peut cependant guère être mise en œuvre aux fins d'une détection rapide de la présence ou non de tels gènes ou de tels ADN au sein d'un échantillon biologique provenant d'un hôte humain ou animal, par exemple dans le but d'établir un diagnostic rapide soit de l'affection dont l'hôte peut éventuellement être atteint, soit de l'intégrité ou non d'un gène ou d'une séquence d'ADN, par exemple, chez cet hôte.
L'invention découle de la transformation de la méthode de Manning et coll., transformation qui conduit à des techniques de détection, voire de caractérisation, susceptibles d'être mises en œuvre en l'absence d'équipements coûteux, par des personnes n'ayant qu'une expérience de laboratoire réduite.
Le procédé d'analyse selon l'invention d'une séquence ou fragment déterminé d'acide nucléique, notamment d'un gène, voire de l'acide nucléique entier au sein d'un échantillon d'acides nucléiques complexe, par mise en contact de l'échantillon, le cas échéant après dénaturation préalable de l'acide nucléique étudié, avec une sonde comprenant un acide nucléique complémentaire, susceptible de s'hy-brider avec la séquence d'acide nucléique ou l'acide nucléique recherché, est caractérisé en ce que la sonde utilisée est une sonde modifiée chimiquement par couplage ou en vue de son couplage avec une enzyme antérieurement ou postérieurement à la réaction d'hybridation, l'éventuelle présence de la séquence d'acide nucléique ou de l'acide nucléique cherché étant révélable par l'action du produit d'hybridation ainsi transformé de la sonde et de la séquence ou de l'acide nucléique recherché, sur un substrat de l'enzyme.
Avantageusement, l'enzyme est choisie selon sa capacité à agir sur un substrat chromogène, ce qui permet de doser, par analyse optique ou analogue, le taux de transformation du substrat, taux qu'on peut alors mettre en corrélation avec la présence ou non de la séquence d'acide nucléique ou de l'acide nucléique recherché dans l'échantillon initial.
Dans un mode de mise en œuvre préféré de l'invention, la sonde est modifiée par un groupe chimique susceptible de former un complexe stable avec l'enzyme ou une molécule, elle-même liée de façon stable à l'enzyme. Avantageusement, le susdit groupe chimique et la susdite molécule sont respectivement constitués par la biotine et l'avidine ou vice versa, l'enzyme étant elle-même avantageusement constituée par la ß-galactosidase.
Il va de soi que la modification chimique doit être telle qu'elle n'empêche pas l'hybridation ultérieure éventuelle de la sonde avec la séquence ou fragment d'ADN recherché.
Il apparaîtra immédiatement au spécialiste que cette technique permet une détermination rapide de la présence ou non, dans un échantillon biologique, du gène ou fragment d'ADN correspondant à la sonde utilisée, et ce même en présence d'une quantité considérable d'autres acides nucléiques. Il en est particulièrement ainsi du fait de l'amplification au niveau de la détection qui est obtenue par l'action de l'enzyme fixée à l'hybride sur le substrat mis en sa présence. Il est même possible, après une purification suffisante de l'hybride, d'obtenir une indication quant à la concentration de l'échantillon biologique étudié en ADN recherché ou quant au taux de répartition du gène recherché dans un ADN purifié, par dosage de l'activité enzymatique constatée..
Partant d'un échantillon d'acide nucléique à étudier, on peut d'abord réaliser l'hybridation, puis la réaction de couplage entre la sonde chimiquement modifiée et hybridée, d'une part, et l'enzyme, d'autre part, ensuite procéder à la séparation ou à la dégradation de l'éventuel excès de sonde non hybridée et de l'excès d'enzyme qui n'a pas réagi avec la sonde, avant d'effectuer le susdit dosage.
En variante, la séparation ou la dégradation de l'éventuel excès de sonde non hybridée peut être réalisée avant la réaction de couplage entre la sonde chimiquement modifiée et hybridée, d'une part, et l'enzyme, d'autre part.
La sonde spécifique peut être constituée par tout ARN spécifique ou ADN soit à simple brin (monocaténaire), soit dénaturé au préalable par des techniques en soi connues, s'il s'agit d'un ADN (ou d'un ARN) initialement à double brin.
Lorsque la modification chimique de la sonde est effectuée à l'aide de la biotine, on peut avoir recours à la technique décrite par Manning et coll. dans les publications déjà mentionnées, par l'intermédiaire de cytochrome C, notamment à raison d'une molécule de biotine en moyenne pour une centaine de nucléotides.
Avantageusement, on a alors recours, pour le marquage de l'hybride par l'enzyme, au produit résultant du couplage de l'avidine et de l'enzyme, notamment la ß-galactosidase, par la méthode d'Avra-méas («Immunochemistry», 1969, 6, 43-52).
Il va de soi que l'on peut avoir recours à d'autres modifications chimiques de la sonde et, le cas échéant, de l'enzyme, en vue de réaliser leur couplage, de préférence après la réaction d'hybridation, et que l'on peut inverser les agents modificateurs de la sonde et de l'enzyme respectivement.
D'autres couples d'agents modificateurs de la sonde, d'une part, et de l'enzyme, d'autre part, peuvent encore être utilisés. A titre d'exemple, on citera les couples suivants, le premier de ces agents étant de préférence utilisé pour la modification chimique de la sonde et le second pour la modification chimique de l'enzyme. Par exemple, la sonde peut être modifiée, selon une méthode connue, par des ions métalliques (mercure par exemple) et la révélation est faite par l'intermédiaire d'une enzyme dotée de groupements sulfhydryles (—SH) ou couplée à un support comportant de tels groupements.
A titre d'exemple bien entendu non limitatif d'un protocole expérimental qui peut être mis en œuvre dans le cas où l'échantillon à analyser est constitué par une prise de sang de quelques millilitres, on pourra procéder comme suit:
Les cellules sanguines sont d'abord lysées et l'ADN en est extrait par une technique traditionnelle.
Une faible quantité de l'ADN obtenu, par exemple comprise entre 1 et 100 (ig, est dénaturée par la sonde 0,1 à 0,3N, la solution étant ensuite neutralisée et ramenée à pH 7.
A la solution obtenue, on ajoute alors la sonde correspondant au fragment d'ADN ou à l'ADN recherché à raison d'environ 1 |ig de sonde par 100 |ig d'ADN dénaturé (la quantité de sonde à utiliser est fonction de la proportion d'ADN recherchée dans l'échantillon à analyser). La solution est ensuite complétée avec des sels destinés à conférer au milieu une force ionique élevée, au moins 0,3M NaCl, en présence de formamide 50% et d'un agent chélateur à faible concentration, de préférence dans un petit volume. L'hybridation peut ensuite être réalisée à la température ordinaire pendant 1 à 40 h (en général la nuit). On peut aussi utiliser la technique déjà décrite par Manning. En variante, on peut avoir recours à toute autre technique d'hybridation, par exemple celle décrite par Kohne et al. dans «Biochemistry», 1977,16, 5329-5341, à la température ordinaire au sein-d'une émulsion de phénol.
De l'avidine couplée à une enzyme telle que la ß-galactosidase est alors ajoutée au milieu dans des conditions permettant le couplage de la biotine de la sonde aux groupes libres de l'avidine du composé de couplage de l'avidine et de l'enzyme.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
647 870
4
La sonde non hybridée est alors séparée de la sonde hybridée par les techniques traditionnelles, telles que précipitation au polyéthyl-èneglycol, passage sur gel, par exemple celui du type dénommé Se-pharose, ultracentrifugation, etc.
En variante, on peut aussi réaliser la séparation de la sonde non hybridée avant le couplage de l'avidine portant l'enzyme avec les groupes biotine couplés à la sonde hybridée à l'ADN.
L'enzyme éventuellement fixée et corrélativement l'hybridation effective éventuelle de la sonde avec l'ADN étudié peuvent être révélées en mettant en contact avec le milieu un substrat de l'enzyme, notamment celui constitué par l'orthonitrophénol galactoside (ONPG).
Il va de soi que les conditions expérimentales une fois bien fixées, il est possible de déterminer un seuil d'activité mesurable, par exemple par une technique colorimétrique ou fluorographique, au-delà duquel il est possible de conclure à la présence dans l'échantillon traité de l'ADN ou du fragment d'ADN recherché.
La description qui suit d'un essai réalisé au laboratoire a pour simple but d'illustrer la façon dont le procédé selon l'invention peut être mis en œuvre, étant évidemment entendu que les variations au niveau des techniques, en fonction de la nature de l'échantillon biologique étudié et de celle de l'ADN ou du fragment d'ADN recherché sont à l'évidente portée de l'homme de l'art.
L'expérimentation a été réalisée sur le modèle consistant à détecter la présence d'un ADN de souris par hybridation de cet ADN avec un ARN ribosomique de souris utilisé à titre de sonde.
L'ADN de souris (100 ng/100 )il de solution aqueuse) est dénaturé par une addition de soude (10 |xl de NaOH 1M). 10 min plus tard, la solution est ramenée à pH neutre par addition de 10 (il de phosphate acide de sodium NaH2P04 1,5M.
1 |ig d'ARN ribosomique marqué avec de la biotine par l'intermédiaire de cytochrome C, préparé selon la technique de Manning et coll., est ajouté à la solution d'ADN dénaturé. Le volume est ajusté à 160 [il avec de l'eau. On ajoute alors au milieu 40 |il d'une solution ayant une concentration en sels minéraux égale à vingt fois celle de la solution dite SSC (abréviation de l'expression anglaise: standard saline citrate) et 200 jj.1 de formamide redistillé ou désio-nisé. Il est rappelé que la solution SSC est une solution aqueuse de chlorure de sodium 0,15M, de citrate de sodium 0,015M, à pH 7,0.
Le mélange est incubé jusqu'au lendemain à la température ordinaire, puis dialysé à 4°C contre une solution ayant une concentration double de la solution SSC, puis pendant 8 h contre 500 ml d'un tampon phosphate à pH 7,0 contenant du phosphate à une concentration 0,1M, du chlorure de sodium à une concentration 1M et de l'éthylènediaminetétrasodique (EDTA) à une concentration 0,01M. Cette dernière dialyse est ensuite répétée deux fois, chaque fois pendant 8 h.
La solution ainsi obtenue est traitée avec de la ribonucléase pancréatique pendant 1 h à température ordinaire, pour obtenir une concentration finale de 10 ng/ml de ribonucléase, ce traitement permettant la dégradation de l'ARN non hybridé.
On ajoute alors au milieu obtenu une solution du cytochrome C (1 mg/ml) et 1 (il d'une solution contenant 1 mg/ml d'avidine et 2 mg/ml de ß-galactosidase, dont une molécule de ß-galactosidase sur sept se trouve couplée à l'avidine. On mélange et on maintient ensuite la solution au repos à 4°C pendant 4 h. Le milieu est ensuite dilué jusqu'à 10 ml avec le tampon de dialyse au phosphate et on soumet la solution obtenue à une ultracentrifugation pendant 1 h à 35000 tr/min (dans une centrifugeuse Beckman Rotor SW 41). L'ADN et l'ARN hybridés se retrouvent dans le culot de centrifugation,
ainsi que l'avidine ß-galactosidase liée à cet ARN. Le surnageant contient l'ARN non hybridé dégradé par la ribonucléase et l'avidine ß-galactosidase non liée.
On recueille le culot et on le resuspend dans 10 ml de tampon. On recentrifuge et on reprend une nouvelle fois le culot dans 0,5 ml de tampon (tube N° 1) et on dose alors l'activité de la ß-galactosidase sur le substrat ONPG selon la technique décrite par Miller («Experiments in bacterial genetics, 1972, Cold Spring Harbor La-
boratory», Cold Spring Harbor, New York, USA), par mesure de la densité optique du milieu à 420 (im, après incubation du milieu à 37° C pendant 30 min ou plus.
On prépare des témoins dans des conditions rigoureusement identiques à celles qui ont été décrites ci-dessus, sauf que, dans un premier cas, on omet l'addition initiale de l'ARN ribosomique (tube N° 2) et que, dans l'autre cas, on omet l'addition de l'ADN de souris (tube N° 3).
Les résultats des trois dosages effectués figurent dans le tableau ci-dessous:
Tube N°
Contenu
Résultat du dosage (densité optique à 420 um après 30 min à 37° C)
ADN
ARN
1
+
+
0,45
2
+
—
0,14
3
—
+
0,15
Les signes + et —, respectivement dans les colonnes sous les entêtes ADN et ARN, signifient la présence ou l'absence soit de l'ADN, soit de l'ARN, dans le milieu initial.
Comme on peut le constater à l'examen de ce tableau, la densité optique mesurée dans le tube N° 1 (contenant l'hybride) est supérieure de façon très significative aux densités optiques mesurées dans les tubes témoins.
Le modèle expérimental qui vient d'être décrit illustre donc les conditions dans lesquelles peut être détectée l'éventuelle présence d'un ADN ou fragment d'ADN recherché, dans la mesure où l'on dispose d'une sonde complémentaire de cet ADN ou de ce fragment d'ARN, en ayant recours à une technique simple et n'exigeant ni matériel de laboratoire très compliqué ni technicien particulièrement expérimenté.
L'invention est applicable de façon particulièrement avantageuse à des opérations de diagnostic in vitro de la présence, par exemple dans un échantillon biologique (échantillon sanguin, prélèvements de selles, etc.) de virus divers, tels que ceux dénommés herpès, Epstein Barr, virus Pox, cytomégalo, etc. De même, l'invention peut être appliquée au diagnostic par exemple d'anomalies chromosomiques spécifiques.
Elle est applicable également à la réalisation de diagnostics bactériens, en particulier dans le cas où des individus seraient porteurs de gènes pathogènes, tant exprimés que non exprimés (ou latents).
Il apparaîtra naturellement au spécialiste, dans le cas d'une recherche d'un ADN infectieux, que l'on peut rapidement conclure au caractère sain de l'échantillon biologique traité, eu égard à l'acide nucléique ou au fragment d'acide nucléique recherché, en l'absence d'induction constatée sur le substrat chromogène, ou au moins d'un dépassement de seuil d'activité, soit prédéterminé expérimentalement, soit par comparaison avec des témoins exempts du virus.
A l'inverse, l'absence d'action constatée à l'égard du substrat chromogène, notamment au-delà du seuil mentionné ci-dessus, pourra, dans l'autre type d'application, envisagé ci-dessus à titre d'exemple, traduire la présence de l'anomalie chromosomique recherchée, en l'absence d'hybridation constatée, totale ou partielle, entre la sonde et l'ADN étudié.
On peut avantageusement mettre par exemple à la disposition des laboratoires d'analyses médicales des trousses ou kits contenant l'ensemble des réactifs essentiels à la mise en œuvre du procédé selon l'invention. Ces trousses peuvent en particulier contenir un échantillonnage de sondes correspondant par exemple aux ADN des virus ou bactéries pathogènes classiquement recherchés, voire même des sondes relatives à des gènes particuliers que devraient normalement contenir les échantillons biologiques, notamment sanguins, à tester.
A ce titre, l'invention concerne donc un ensemble de moyens permettant la mise en œuvre du procédé d'analyse, caractérisé en ce qu'il comporte:
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
5
647870
— au moins une sonde spécifique formée d'un ARN ou d'un brin d'ADN unique, caractéristique d'une séquence d'acide nucléique ou d'un acide nucléique à rechercher, cette sonde étant modifiée chimiquement en vue de son couplage avec une enzyme, ladite enzyme étant modifiée de façon à pouvoir être couplée avec ladite 5 sonde,
— un substrat, notamment chromogène, spécifique de l'enzyme,
— les réactifs nécessaires à la lyse du milieu cellulaire à étudier, notamment sanguin, et à l'extraction des acides nucléiques des cellules de ce milieu. io
Comme on l'a déjà constaté dans ce qui précède, il est avantageux de constituer la sonde modifiée par une sonde à laquelle est liée de la biotine, l'enzyme modifiée étant alors constituée par l'enzyme elle-même, par exemple la ß-galactosidase, couplée à de l'avidine.
15
L'invention concerne d'ailleurs également, à titre de moyen de mise en œuvre du procédé d'analyse, un produit de couplage d'une enzyme dont l'action peut être révélée à l'égard d'un substrat spécifique de l'enzyme, notamment d'un substrat chromogène, et d'une sonde spécifique formée d'un ARN ou d'un brin d'ADN, soit direc- 20 tement, soit par l'intermédiaire d'un agent de couplage. Elle concerne également, au même titre, encore un produit de couplage de l'enzyme et d'au moins une molécule chimique, l'ensemble étant alors susceptible d'être couplé à son tour avec une sonde ARN ou ADN modifiée à cet effet. A titre d'exemples de tels produits indus- 25 triels nouveaux, on cite les produits de couplage d'une sonde (ARN ou ADN) avec une enzyme, telle que la ß-galactosidase, ou encore les produits de couplage de l'avidine ou de la biotine avec une telle enzyme.
Bien entendu, l'invention peut être appliquée dans d'autres 30 domaines de procédé d'analyse, notamment pour le marquage de certains fragments d'ADN dans les expériences génétiques bien connues visant à établir le génotype de l'ADN en question. En particulier, l'invention peut être appliquée à la détermination de l'incorporation ou non d'un fragment d'ADN particulier dans des expériences de tri génétique comportant par exemple des opérations de transformation de l'ADN d'une cellule infectée avec un ADN étranger contenant le fragment d'ADN en question ou au contraire des opérations de transduction comportant l'incorporation d'un fragment d'ADN en question, normalement contenu dans l'ADN de la cellule, dans l'ADN du virus utilisé pour l'infection de la cellule, etc., dans la mesure où, bien entendu, on dispose d'une sonde constituée par le fragment d'ARN ou d'ADN complémentaire du fragment d'acide nucléique recherché.
Comme il va de soi et comme il résulte d'ailleurs déjà de ce qui précède, l'invention ne se limite nullement à ceux de ses modes d'application et de réalisation qui ont été plus spécialement envisagés;
elle en embrasse au contraire toutes les variantes, notamment celles où l'on a recours aux modifications de la sonde qui peuvent permettre le dosage enzymatique de l'hybride et les modifications concernant la formation et/ou la purification des hybrides, au marquage ou à la modification chimique de l'ADN étudié lui-même, dans des conditions qui ont été exposées plus haut, la sonde ARN ne faisant l'objet d'aucun marquage particulier; une telle inversion des réactifs peut être envisagée, par exemple dans le cas d'un ADN comportant de nombreux exemplaires de gènes répétitifs, que l'on souhaite isoler de l'ADN entier, sous forme d'hybride avec la sonde, après fragmentation de l'ADN en question par des techniques classiques. Il va de soi que ces équivalents sont inclus dans le domaine de protection défini par les revendications.
A titre d'autre variante encore, on peut avoir recours à un procédé d'analyse consistant à repérer l'hybride formé par l'ADN recherché et la sonde, au moyen d'un anticorps antihybride, couplé à une enzyme telle que la ß-galactosidase.
R

Claims (11)

647 870
1. Procédé d'analyse d'une séquence ou fragment déterminé d'acide nucléique, notamment d'un gène, voire de l'acide nucléique entier au sein d'un échantillon complexe d'acides nucléiques, par mise en contact de l'échantillon, le cas échéant après dénaturation préalable de l'acide nucléique étudié, avec une sonde comprenant un acide nucléique complémentaire, susceptible de s'hybrider avec la séquence d'acide nucléique ou l'acide nucléique recherché, caractérisé en ce que la sonde utilisée est une sonde modifiée chimiquement par couplage ou en vue de son couplage avec une enzyme, antérieurement ou postérieurement à la réaction d'hybridation, l'éventuelle présence de la séquence d'acide nucléique ou de l'acide nucléique cherché étant révélable par l'action du produit d'hybridation ainsi transformé de la sonde et de la séquence ou de l'acide nucléique recherché sur un substrat de l'enzyme.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'enzyme est choisie selon sa capacité à agir sur un substrat chromogène, et en ce que l'on dose, par analyse optique ou analogue, le taux de transformation du substrat, taux que l'on peut alors mettre en corrélation avec la présence ou non de la séquence d'acide nucléique ou de l'acide nucléique recherché dans l'échantillon initial.
2
REVENDICATIONS
3. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que la sonde est modifiée par un groupe chimique susceptible de former un complexe stable avec l'enzyme ou une molécule, elle-même liée de façon stable avec l'enzyme.
4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le susdit groupe chimique et la susdite molécule sont respectivement constitués par la biotine et l'avidine ou vice versa.
5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'enzyme est constituée par la ß-galactosidase.
6. Procédé selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que l'on réalise d'abord l'hybridation, puis la réaction de couplage entre la sonde chimiquement modifiée et hybridée, d'une part, et l'enzyme, d'autre part, et en ce que l'on procède ensuite à la séparation ou à la dégradation de l'éventuel excès de sonde non hybridée.
7. Procédé selon l'une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que l'on réalise d'abord l'hybridation et en ce que l'on réalise la réaction de couplage entre la sonde chimiquement modifiée et hybridée, d'une part, et l'enzyme, d'autre part, après séparation ou dégradation de l'éventuel excès de sonde non hybridée.
8. Ensemble de moyens permettant la mise en œuvre du procédé d'analyse selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte:
— au moins une sonde spécifique formée d'un ARN ou d'un brin d'ADN unique, caractéristique d'une séquence d'acide nucléique ou d'un acide nucléique à rechercher, cette sonde étant modifiée chimiquement en vue de son couplage avec une enzyme, ladite enzyme étant modifiée de façon à pouvoir être couplée avec ladite sonde,
— un substrat spécifique de l'enzyme,
— les réactifs nécessaires à la lyse du milieu cellulaire à étudier et à l'extraction des acides nucléiques des cellules de ce milieu.
9. Ensemble de moyens selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il comporte :
— au moins une sonde ARN à laquelle est liée de la biotine,
— le produit de couplage de l'avidine et d'une enzyme, telle la ß-galactosidase.
10. Moyen de mise en œuvre du procédé d'analyse selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte un produit de couplage d'une enzyme révélable par son action à l'égard d'un substrat spécifique de l'enzyme et d'une sonde spécifique formée d'un ARN ou d'un brin d'ADN soit directement, soit par l'intermédiaire d'un agent de couplage.
11. Moyen de mise en œuvre du procédé d'analyse selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comporte un produit de couplage d'une enzyme, dont l'action peut être révélée à l'égard d'un substrat et d'au moins une molécule chimique, l'ensemble étant alors couplable avec une sonde ARN ou ADN modifiée à cet effet.
CH3527/79A 1978-04-13 1979-04-13 Procede d'analyse d'une sequence ou fragment determine d'acide nucleique et moyens de mise en oeuvre du procede. CH647870A5 (fr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR7810975A FR2422956A1 (fr) 1978-04-13 1978-04-13 Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CH647870A5 true CH647870A5 (fr) 1985-02-15

Family

ID=9207099

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CH3527/79A CH647870A5 (fr) 1978-04-13 1979-04-13 Procede d'analyse d'une sequence ou fragment determine d'acide nucleique et moyens de mise en oeuvre du procede.

Country Status (9)

Country Link
US (3) US4581333A (fr)
JP (1) JPS54143297A (fr)
BE (1) BE875598A (fr)
CH (1) CH647870A5 (fr)
DE (1) DE2915082C3 (fr)
FR (1) FR2422956A1 (fr)
GB (1) GB2019408B (fr)
IT (1) IT1119725B (fr)
NL (1) NL191541C (fr)

Families Citing this family (286)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5605800A (en) * 1978-04-13 1997-02-25 Institut Pasteur Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method
FR2422956A1 (fr) * 1978-04-13 1979-11-09 Pasteur Institut Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede
US6297355B1 (en) 1978-12-22 2001-10-02 Biogen, Inc. Polypeptides displaying HBV antigenicity or hbv antigen specificity
US6835557B1 (en) 1980-01-08 2004-12-28 Biogen, Inc. DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing human interferon-like polypeptides
US4530901A (en) * 1980-01-08 1985-07-23 Biogen N.V. Recombinant DNA molecules and their use in producing human interferon-like polypeptides
PT72786B (en) 1980-04-03 1983-01-10 Biogen Nv Process for producing dna sequences recombinant dna molecules and human fibroplast interferon-like polypeptides
US4711955A (en) * 1981-04-17 1987-12-08 Yale University Modified nucleotides and methods of preparing and using same
ATE48140T1 (de) * 1981-04-17 1989-12-15 Univ Yale Modifizierte nukleotide und verfahren zu ihrer herstellung und anwendung.
CA1180647A (fr) * 1981-07-17 1985-01-08 Cavit Akin Methode de diagnostic d'hybridation de polynucleotides par emission de lumiere
JPS5840099A (ja) * 1981-07-17 1983-03-08 アモコ・コ−ポレ−ション 光−放射ポリヌクレオチドの交雑診断方法
ATE39267T1 (de) * 1981-09-25 1988-12-15 John A Webster Jr Verfahren zur identifizierung und charakterisierung von organismen.
US4717653A (en) * 1981-09-25 1988-01-05 Webster John A Jr Method for identifying and characterizing organisms
EP0155359B1 (fr) * 1981-09-25 1988-01-07 John A. Webster, Jr. Méthode d'identification et de caractérisation d'organismes
US5614361A (en) * 1981-09-25 1997-03-25 Webster, Jr.; John A. Method for identifying and characterizing organisms
FI63596C (fi) * 1981-10-16 1983-07-11 Orion Yhtymae Oy Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser
FR2518755B1 (fr) * 1981-12-23 1986-04-11 Pasteur Institut Sonde contenant un acide nucleique modifie et reconnaissable par des anticorps specifiques et utilisation de cette sonde pour detecter et caracteriser une sequence d'adn homologue
JPS58502165A (ja) * 1981-12-23 1983-12-15 アンステイテユ・パストウ−ル 特異抗体により認識し得る修飾核酸プローブを使用して核酸配列の存在を検出する方法
US5260433A (en) * 1982-06-23 1993-11-09 Enzo Diagnostics, Inc. Saccharide specific binding system labeled nucleotides
CA1223831A (fr) 1982-06-23 1987-07-07 Dean Engelhardt Nucleotides modifies, methodes de preparation et d'utilisation et composes les contenant
US5241060A (en) * 1982-06-23 1993-08-31 Enzo Diagnostics, Inc. Base moiety-labeled detectable nucleatide
US7220854B1 (en) 1982-06-23 2007-05-22 Enzo Life Sciences, Inc. C/O Enzo Biochem, Inc. Sugar moiety labeled nucleotide, and an oligo- or polynucleotide, and other compositions comprising such sugar moiety labeled nucleotides
US4556643A (en) * 1982-07-26 1985-12-03 Agracetus Assay method and probe for polynucleotide sequences
US6818393B1 (en) 1982-07-30 2004-11-16 Biomirieux Sa DNA sequences coding for the DR beta-chain locus of the human lymphocyte antigen complex and polypeptides, diagnostic typing processes and products related thereto
DE3382137D1 (de) * 1982-07-30 1991-02-28 Bernard Francois Mach Dns-sequenzenkodieren fuer den dr-beta-kettenlocus des menschlichen lymphocytantigenkomplexes und polypeptiden, diagnostische typierungsverfahren und produkte die darauf bezug haben.
US4689295A (en) * 1983-01-20 1987-08-25 Integrated Genetics, Inc. Test for Salmonella
US4994373A (en) * 1983-01-27 1991-02-19 Enzo Biochem, Inc. Method and structures employing chemically-labelled polynucleotide probes
GB8306426D0 (en) * 1983-03-09 1983-04-13 Malcolm A D B Detecting polynucleotide sequence
DE3310337A1 (de) * 1983-03-22 1984-09-27 Europäisches Laboratorium für Molekularbiologie (EMBL), 6900 Heidelberg Verfahren zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen
GB8311905D0 (en) * 1983-04-29 1983-06-02 Cox R A Isolation and detection of nucleotide sequence
CA1228811A (fr) 1983-05-05 1987-11-03 Robert G. Pergolizzi Methode d'analyse utilisant des sequences de polynucleotides
CA1220818A (fr) * 1983-05-05 1987-04-21 Hugh A.O. Hill Methodes d'essais biologiques utilisant des agents de liaison specifiques
EP0128018B1 (fr) * 1983-05-31 1992-07-15 Orgenics Ltd. Sonde moléculaire génétique et méthode pour sa préparation, technique d'analyse et trousse utilisant cette sonde moléculaire génétique
US5221609A (en) * 1983-05-31 1993-06-22 Orgenics Ltd. Molecular genetic probe, and method of forming same, assay technique and kit using said molecular genetic probe
US4987065A (en) * 1983-07-05 1991-01-22 Enzo Biochem, Inc. In vivo labelling of polynucleotide sequences
US4737454A (en) * 1983-07-14 1988-04-12 Molecular Diagnostics, Inc. Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays
US4959309A (en) * 1983-07-14 1990-09-25 Molecular Diagnostics, Inc. Fast photochemical method of labelling nucleic acids for detection purposes in hybridization assays
CA1222705A (fr) * 1983-07-14 1987-06-09 Molecular Diagnostics, Inc. Methode photochimique rapide de marquage des acides nucleiques pour les deceler dans les epreuves d'hybridation
US5200313A (en) * 1983-08-05 1993-04-06 Miles Inc. Nucleic acid hybridization assay employing detectable anti-hybrid antibodies
US4626501A (en) * 1983-09-02 1986-12-02 Integrated Genetics, Inc. Labeled DNA
NO843838L (no) * 1983-09-26 1985-03-27 Ortho Diagnostic Systems Inc Fremgangsmaate for detektering av nukleinsyre
FR2552879B1 (fr) * 1983-10-03 1987-08-14 Pasteur Institut Procede et reactifs pour la detection d'une anomalie genetique dans une matiere biologique, notamment dans une preparation de leucocytes
US4743535A (en) * 1984-11-07 1988-05-10 Miles Inc. Hybridization assay employing labeled probe and anti-hybrid
EP0149339B1 (fr) * 1983-12-16 1989-08-23 MediSense, Inc. Essai pour acides nucléiques
US4849208A (en) * 1984-01-30 1989-07-18 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4707440A (en) * 1984-01-30 1987-11-17 Enzo Biochem, Inc. Nucleic acid hybridization assay and detectable molecules useful in such assay
US5002885A (en) * 1984-01-30 1991-03-26 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method preparation and use
US4849505A (en) * 1984-01-30 1989-07-18 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4943523A (en) * 1984-01-30 1990-07-24 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
US4843122A (en) * 1984-01-30 1989-06-27 Enzo Biochem, Inc. Detectable molecules, method of preparation and use
AU3844485A (en) * 1984-02-09 1985-08-15 Enzo Biochem Inc. Heterologous detection of cabeled dna
US4748111A (en) * 1984-03-12 1988-05-31 Molecular Diagnostics, Inc. Nucleic acid-protein conjugate used in immunoassay
US4582789A (en) * 1984-03-21 1986-04-15 Cetus Corporation Process for labeling nucleic acids using psoralen derivatives
US4617261A (en) * 1984-03-21 1986-10-14 Cetus Corporation Process for labeling nucleic acids and hybridization probes
US4840892A (en) * 1984-05-15 1989-06-20 Smithkline Beckman Corporation Polynucleotide hybridization probes
US4670380A (en) * 1984-05-23 1987-06-02 Molecular Diagnostics, Inc. Assays utilizing labeled nucleic acid probes
DE3431536A1 (de) * 1984-08-28 1986-03-13 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Derivatisierte nucleinsaeure-sequenz, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zum nachweis von nucleinsaeuren
US4563417A (en) * 1984-08-31 1986-01-07 Miles Laboratories, Inc. Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes
US4820630A (en) * 1984-11-23 1989-04-11 Digene Diagnostics, Incorporated Assay for nucleic acid sequences, particularly genetic lesions, using interactive labels
US4692509A (en) * 1984-11-27 1987-09-08 Molecular Diagnostics, Inc. Radioactive labeling of proteins with nucleosides or nucleotides
EP0184701B1 (fr) * 1984-12-03 1994-06-08 Hoechst Celanese Corporation Procédé pour déterminer un ligand
US4670379A (en) * 1984-12-19 1987-06-02 E. I. Du Pont De Nemours And Company Polynucleotide hydridization assays employing catalyzed luminescence
FR2578847A1 (fr) * 1985-03-13 1986-09-19 Centre Nat Rech Scient Sonde adn destinee au diagnostic antenatal de certaines anomalies chromosomiques
US6197563B1 (en) 1985-03-28 2001-03-06 Roche Molecular Systems, Inc. Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences
US6040166A (en) 1985-03-28 2000-03-21 Roche Molecular Systems, Inc. Kits for amplifying and detecting nucleic acid sequences, including a probe
GB8509880D0 (en) * 1985-04-17 1985-05-22 Ici Plc Testing device
US5273882A (en) * 1985-06-13 1993-12-28 Amgen Method and kit for performing nucleic acid hybridization assays
IL79112A (en) * 1985-06-13 1992-01-15 Abbott Lab Method for the isolation of a nucleic acid sequence and kit for performing a hybridization assay
US4806546A (en) * 1985-09-30 1989-02-21 Miles Inc. Immobilization of nucleic acids on derivatized nylon supports
US4806631A (en) * 1985-09-30 1989-02-21 Miles Inc. Immobilization of nucleic acids on solvolyzed nylon supports
US4789630A (en) * 1985-10-04 1988-12-06 Cetus Corporation Ionic compounds containing the cationic meriquinone of a benzidine
NZ218050A (en) * 1985-11-13 1989-05-29 Wistar Inst Test for the presence of htlv-1v
WO1987003621A1 (fr) * 1985-12-03 1987-06-18 El Gewely M Raafat Procede, kit et produit pour le diagnostic de maladie
US4882269A (en) * 1985-12-13 1989-11-21 Princeton University Amplified hybridization assay
US4822731A (en) * 1986-01-09 1989-04-18 Cetus Corporation Process for labeling single-stranded nucleic acids and hybridizaiton probes
US6475720B1 (en) 1986-01-16 2002-11-05 The Regents Of The University Of California Chromosome-specific staining to detect genetic rearrangements associated with chromosome 3 and/or chromosome 17
US5756696A (en) * 1986-01-16 1998-05-26 Regents Of The University Of California Compositions for chromosome-specific staining
US6280929B1 (en) 1986-01-16 2001-08-28 The Regents Of The University Of California Method of detecting genetic translocations identified with chromosomal abnormalities
US5447841A (en) 1986-01-16 1995-09-05 The Regents Of The Univ. Of California Methods for chromosome-specific staining
US7115709B1 (en) * 1986-01-16 2006-10-03 The Regents Of The University Of California Methods of staining target chromosomal DNA employing high complexity nucleic acid probes
US5721098A (en) * 1986-01-16 1998-02-24 The Regents Of The University Of California Comparative genomic hybridization
US6872817B1 (en) 1986-01-16 2005-03-29 The Regents Of The Univ. Of California Method of staining target interphase chromosomal DNA
US4935357A (en) * 1986-02-05 1990-06-19 New England Biolabs, Inc. Universal restriction endonuclease
US5418133A (en) * 1986-08-12 1995-05-23 The Australian National University Sex determination in cattle, sheep and goats using y-chromosome polynucleotides
US5714380A (en) 1986-10-23 1998-02-03 Amoco Corporation Closed vessel for isolating target molecules and for performing amplification
US5660983A (en) * 1986-12-04 1997-08-26 Mycogen Plant Science, Inc. Maize cytoplasmic male sterility type T (cms-T) mitochondria DNA
AU619170B2 (en) * 1987-01-09 1992-01-23 Abbott Laboratories Diagnostic assays using nucleic acid probes
AU622104B2 (en) * 1987-03-11 1992-04-02 Sangtec Molecular Diagnostics Ab Method of assaying of nucleic acids, a reagent combination and kit therefore
HU204559B (en) * 1987-08-26 1992-01-28 Akad Wissenschaften Ddr Process for producing molecular proobes connected with enzymes and detecting biomolecules with them
US5384241A (en) * 1987-09-11 1995-01-24 Enzo Diagnostics, Inc. Specific binding assay compound with inhibitive self-quenching characteristics
DE3854029T2 (de) * 1987-09-21 1995-10-26 Gen Probe Inc Homogener Abschirmungstest.
US6004745A (en) * 1987-09-21 1999-12-21 Gen-Probe Incorporated Hybridization protection assay
US5639604A (en) * 1987-09-21 1997-06-17 Gen-Probe Incorporated Homogeneous protection assay
DE3732145A1 (de) * 1987-09-24 1989-04-06 Merck Patent Gmbh Verfahren und reagenz zur durchfuehrung von hybridisierungsreaktionen
DE3742706A1 (de) * 1987-12-16 1989-06-29 Erich Prof Dr Med Liebhardt Verfahren zum identifizieren unbekannten biologischen materials
US5354657A (en) * 1988-01-12 1994-10-11 Boehringer Mannheim Gmbh Process for the highly specific detection of nucleic acids in solid
FR2680374B2 (fr) * 1988-03-25 1993-11-12 Bioprobe Systems Sa Procede de coloration d'acides nucleiques detectes par marquage non radioactif et ensemble de reactifs pour la mise en óoeuvre de ce procede.
US6326136B1 (en) * 1988-04-01 2001-12-04 Digene Corporation Macromolecular conjugate made using unsaturated aldehydes
US5109124A (en) * 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5858652A (en) * 1988-08-30 1999-01-12 Abbott Laboratories Detection and amplification of target nucleic acid sequences
US6203977B1 (en) * 1988-11-15 2001-03-20 Yale University Delineation of individual human chromosomes in metaphase and interphase cells by in situ suppression hybridization
US5489507A (en) * 1988-11-30 1996-02-06 Perkin-Elmer Corporation DNA detection by color complementation
US5237016A (en) * 1989-01-05 1993-08-17 Siska Diagnostics, Inc. End-attachment of oligonucleotides to polyacrylamide solid supports for capture and detection of nucleic acids
DE69028725T2 (de) * 1989-02-28 1997-03-13 Canon Kk Partiell doppelsträngiges Oligonukleotid und Verfahren zu seiner Bildung
WO1990010718A1 (fr) * 1989-03-10 1990-09-20 Millipore Corporation Mise en sequence d'acides nucleiques utilisant la detection chimioluminescente
DE4001154A1 (de) * 1990-01-17 1991-07-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von modifizierten nukleinsaeuren
CA2031659A1 (fr) * 1990-01-26 1991-07-27 John B. Findlay Reactif hydrosoluble; sonde d'acide nucleique; trousse d'essai et diagnostic; methodes de purification
US5714327A (en) * 1990-07-19 1998-02-03 Kreatech Diagnostics Platinum-containing compounds, methods for their preparation and applications thereof
NL9001639A (nl) * 1990-07-19 1992-02-17 Amc Amsterdam Pt-houdende verbinding, werkwijze voor de bereiding ervan, alsmede toepassing van dergelijke verbindingen.
JPH0499500A (ja) * 1990-08-17 1992-03-31 Kikkoman Corp アビジンまたはアビジン標識体の定量法およびビオチンまたはビオチン標識体の定量法
WO1992008808A1 (fr) * 1990-11-14 1992-05-29 Siska Diagnostics, Inc. Detection non isotopique d'acides nucleiques utilisant une technique d'hybridation en sandwich base sur des supports en polystyrene et compositions prevues a cet effet
AU1235392A (en) * 1991-01-14 1992-08-17 New York University Cytokine-induced protein, tsg-14, dna coding therefor and uses thereof
WO1992012175A1 (fr) * 1991-01-14 1992-07-23 New York University Poteine induite par la cytokine, adn tsg-6 codant pour cette proteine et ses utilisations
US5843667A (en) * 1991-03-22 1998-12-01 Amoco Corporation Nucleic acid probes for the detection for genital mycoplasmas
US5552279A (en) * 1991-03-22 1996-09-03 Amoco Corporation Nucleic acid probes for the detection of mycoplasma pneumoniae and mycoplasma genitalium
EP0648281A4 (fr) * 1991-09-10 1997-06-04 Jack D Love Amplification de cibles et de signaux d'adn/arn.
JPH06511387A (ja) * 1991-12-24 1994-12-22 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド β−アミロイド調節のための組成物および方法
US5976790A (en) 1992-03-04 1999-11-02 The Regents Of The University Of California Comparative Genomic Hybridization (CGH)
US7534567B2 (en) 1992-03-04 2009-05-19 The Regents Of The University Of California Detection of nucleic acid sequence differences by comparative genomic hybridization
WO1993018186A1 (fr) 1992-03-04 1993-09-16 The Regents Of The University Of California Hybridation genomique comparative
WO1993020234A1 (fr) * 1992-03-31 1993-10-14 E.I. Du Pont De Nemours And Company Dosage rapide, a haute capacite, fonde sur l'acide nucleique
WO1994014067A1 (fr) * 1992-12-14 1994-06-23 T Cell Sciences, Inc. Diagnostic et traitement de la sarcoïdose
KR0169057B1 (ko) * 1993-08-10 1999-01-15 도다 미키오 핵산의 검출법
US5830645A (en) 1994-12-09 1998-11-03 The Regents Of The University Of California Comparative fluorescence hybridization to nucleic acid arrays
EP0807689B1 (fr) * 1994-12-29 2003-08-13 Eiken Kagaku Kabushiki Kaisha Procede de detection cellulaire
US5753787A (en) * 1995-04-10 1998-05-19 Yale University Nucleic acids encoding ancylostoma secreted protein
US5731148A (en) * 1995-06-07 1998-03-24 Gen-Probe Incorporated Adduct protection assay
US6297027B1 (en) 1996-07-31 2001-10-02 Purina Mills, Inc. Bovine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof
US6277592B1 (en) 1996-07-31 2001-08-21 Purina Mills, Inc. Porcine leptin protein, nucleic acid sequences coding therefor and uses thereof
US20020137904A1 (en) * 1998-03-27 2002-09-26 Patricia A. Billing-Medel Reagents and methods useful for detecting diseases of the gastrointestinal tract
WO1998045420A1 (fr) 1997-04-10 1998-10-15 Diagnocure Inc. Pca3, genes de pca3, et procedes d'utilisation
US20050208567A1 (en) * 1997-04-25 2005-09-22 Billing-Medel Patricia A Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate
US6534273B2 (en) 1997-05-02 2003-03-18 Gen-Probe Incorporated Two-step hybridization and capture of a polynucleotide
US6558901B1 (en) * 1997-05-02 2003-05-06 Biomerieux Vitek Nucleic acid assays
IL124275A (en) * 1997-05-02 2002-03-10 Bio Merieux Vitek Inc A method to produce sequences of nucleic acids
JP4222635B2 (ja) 1997-05-02 2009-02-12 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド ２段階ハイブリダイゼーションおよびポリヌクレオチドの捕捉
FR2767337B1 (fr) 1997-08-14 2002-07-05 Pasteur Institut Sequences nucleiques de polypeptides exportes de mycobacteri es, vecteurs les comprenant et applications au diagnostic et a la prevention de la tuberculose
GB9722131D0 (en) 1997-10-20 1997-12-17 Medical Res Council Method
KR100735652B1 (ko) 1997-11-28 2007-07-06 세로노 제네틱스 인스티튜트 에스.에이. 클라미디아 트라코마티스 게놈 서열과 폴리펩티드, 이의단편 및 이의 용도, 특히, 감염의 진단, 예방 및 치료 용도
US20040062775A1 (en) 1997-12-05 2004-04-01 Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD)
FR2772047B1 (fr) 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
AU1631399A (en) 1997-12-19 1999-07-12 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods and compositions for inhibiting tumor cell growth
US6183957B1 (en) 1998-04-16 2001-02-06 Institut Pasteur Method for isolating a polynucleotide of interest from the genome of a mycobacterium using a BAC-based DNA library application to the detection of mycobacteria
US6322976B1 (en) 1998-05-28 2001-11-27 Medical Research Council Compositions and methods of disease diagnosis and therapy
JP2003510017A (ja) 1999-06-22 2003-03-18 インビトロジェン コーポレイション 核酸の検出および識別のために改良されたプライマーおよび方法
US6830902B1 (en) * 1999-07-02 2004-12-14 Invitrogen Corporation Compositions and methods for enhanced sensitivity and specificity of nucleic acid synthesis
ATE456677T1 (de) 1999-07-09 2010-02-15 Gen Probe Inc Hiv-1 detektion mittels nukleinsäureamplifizierung
PT1222266E (pt) * 1999-09-29 2006-07-31 Diagnocure Inc Arn mensageiro de pca3 em tecidos benignos e malignos da prostata
GB9928787D0 (en) 1999-12-03 2000-02-02 Medical Res Council Direct screening method
FR2803913B1 (fr) 2000-01-13 2002-08-16 Pasteur Sanofi Diagnostics Procede d'immobilisation de reactif(s) affin(s) sur phase solide hydrophobe
US6543535B2 (en) 2000-03-15 2003-04-08 Exxonmobil Upstream Research Company Process for stimulating microbial activity in a hydrocarbon-bearing, subterranean formation
EP1925672A1 (fr) 2001-06-22 2008-05-28 Syngeta Participations AG Polynucléotides et polypeptides sensibles au stress abiotique
US20030165859A1 (en) * 2001-10-23 2003-09-04 Invitrogen Corporation Primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US6942972B2 (en) 2001-10-24 2005-09-13 Beckman Coulter, Inc. Efficient synthesis of protein-oligonucleotide conjugates
US6956484B2 (en) * 2001-12-21 2005-10-18 Reconnaissance International Substance testing devices with photo identification
US20030175828A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-18 Lazar James G. Signal amplification by Hybrid Capture
US7199107B2 (en) * 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
JP4716727B2 (ja) 2002-06-14 2011-07-06 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド Ｂ型肝炎ウイルスを検出するための組成物および方法
WO2004036190A2 (fr) 2002-10-16 2004-04-29 Gen-Probe Incorporated Compositions et methodes de detection du virus du nil occidental
EP1592809B1 (fr) 2003-02-07 2013-04-10 Diagnocure Inc. Procede de detection de cancer de la prostate dans un echantillon
US7255996B2 (en) 2003-12-19 2007-08-14 Gen-Probe Incorporated Compositions, methods and kits for detecting the nucleic acids of HIV-1 and HIV-2
WO2005079474A2 (fr) 2004-02-17 2005-09-01 The Regents Of The University Of California Detection de differences de sequences d'acide nucleique par hybridation genomique comparative
US7466908B1 (en) 2004-04-16 2008-12-16 Spartan Bioscience Inc. System for rapid nucleic acid amplification and detection
EP1766037B1 (fr) * 2004-05-12 2015-07-01 Transworld Technologies Limited Production d'hydrogene a partir de matieres comportant des hydrocarbures
AU2005262317B2 (en) 2004-07-13 2009-07-16 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detection of hepatitis A virus nucleic acid
JP5692954B2 (ja) 2004-09-30 2015-04-01 ジェン−プロウブ インコーポレイテッド Ｈｉｖ−１を検出しそして定量するためのアッセイ
JP5192238B2 (ja) * 2004-11-09 2013-05-08 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド Ａ群連鎖球菌属を検出するための組成物及び方法
US20060275792A1 (en) * 2004-11-15 2006-12-07 Lee Jun E Enhancement of nucleic acid amplification using double-stranded DNA binding proteins
US20060105348A1 (en) * 2004-11-15 2006-05-18 Lee Jun E Compositions and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US7472576B1 (en) 2004-11-17 2009-01-06 State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Portland State University Nanometrology device standards for scanning probe microscopes and processes for their fabrication and use
CA2491067A1 (fr) 2004-12-24 2006-06-24 Stichting Katholieke Universiteit Rapport entre arnm dans les sediments urinaires ou l'urine en tant que marqueur pronostique du cancer de la prostate
ATE490342T1 (de) * 2005-02-07 2010-12-15 Gen Probe Inc Zusammensetzungen und verfahren zum nachweis von streptokokken der gruppe b
US20060223160A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Systems and methods for the isolation and identification of microorganisms from hydrocarbon deposits
US20060223159A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Generation of materials with enhanced hydrogen content from microbial consortia including thermotoga
US20060223153A1 (en) * 2005-04-05 2006-10-05 Luca Technologies, Llc Generation of materials with enhanced hydrogen content from anaerobic microbial consortia
US7426960B2 (en) * 2005-05-03 2008-09-23 Luca Technologies, Inc. Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits
WO2006121773A2 (fr) 2005-05-06 2006-11-16 Gen-Probe Incorporated Compositions et analyses permettant de detecter des acides nucleiques des virus a et b de la grippe
ES2381279T3 (es) 2005-05-06 2012-05-24 Gen-Probe Incorporated Métodos y productos para la captura de ácido nucleico diana
WO2007047912A2 (fr) 2005-10-17 2007-04-26 Gen-Probe Incorporated Compositions et procedes destines a detecter des acides nucleiques de legionella pneumophila
US8969033B2 (en) 2005-11-02 2015-03-03 Battelle Energy Alliance, Llc Alteration and modulation of protein activity by varying post-translational modification
US7416879B2 (en) 2006-01-11 2008-08-26 Luca Technologies, Inc. Thermacetogenium phaeum consortium for the production of materials with enhanced hydrogen content
US7977282B2 (en) * 2006-04-05 2011-07-12 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
US20100248322A1 (en) * 2006-04-05 2010-09-30 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
US7696132B2 (en) * 2006-04-05 2010-04-13 Luca Technologies, Inc. Chemical amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous material
ATE514794T1 (de) * 2006-05-12 2011-07-15 Gen Probe Inc Zusammensetzungen und verfahren für den nachweis von enterokokken-nukleinsäuren
US9051601B2 (en) 2006-08-01 2015-06-09 Gen-Probe Incorporated Methods of nonspecific target capture of nucleic acids
AU2007336839C1 (en) 2006-12-21 2013-12-19 Gen-Probe Incorporated Methods and compositions for nucleic acid amplification
EP1978111B1 (fr) 2007-04-02 2013-03-27 Gen-Probe Incorporated Compositions, kits et procédés associés pour la détection et/ou la surveillance de Pseudomonas aeruginosa
CN103418295B (zh) 2007-06-21 2015-11-18 简.探针公司 用于混合检测腔室的内容物的仪器和方法
AU2008343380B2 (en) * 2007-12-26 2012-07-12 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods to detect Candida albicans nucleic acid
US9732330B2 (en) 2008-01-25 2017-08-15 Battelle Energy Alliance, Llc Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes
US8492114B2 (en) 2008-01-25 2013-07-23 Battelle Energy Alliance, Llc Methods of combined bioprocessing and related microorganisms, thermophilic and/or acidophilic enzymes, and nucleic acids encoding said enzymes
US8728803B2 (en) 2008-02-28 2014-05-20 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic metabolism genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
EP2242841A4 (fr) * 2008-01-25 2011-05-18 Battelle Energy Alliance Llc Beta-xylosidases tolérante à l'acide et à la chaleur, gènes codant pour ces beta-xylosidases, organismes associés et procédés
US8557557B2 (en) * 2008-01-31 2013-10-15 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
US8426185B2 (en) 2008-01-31 2013-04-23 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
WO2009099858A1 (fr) * 2008-01-31 2009-08-13 Battelle Energy Alliance, Llc Gènes et enzymes thermophiles et thermoacidophiles de décomposition d’un biopolymère provenant d’alicyclobacillus acidocaldarius et d’organismes apparentés et procédés correspondants
US8497110B2 (en) 2008-01-31 2013-07-30 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic biopolymer-degrading genes and enzymes from alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
MX2010008575A (es) 2008-02-22 2010-12-07 Battelle Energy Alliance Llc Control transcripcional en alicyclobacillus acidocaldarius y genes, proteinas y metodos asociados.
WO2009145944A2 (fr) 2008-02-26 2009-12-03 Battelle Energy Alliance, Llc Gènes et enzymes transporteurs de glucides thermophiles et thermoacidophiles d’alicyclobacillus acidocaldarius et organismes et procédés associés
AU2009310370A1 (en) * 2008-02-27 2010-05-06 Battelle Energy Alliance, Llc Thermophilic and thermoacidophilic glycosylation genes and enzymes from Alicyclobacillus acidocaldarius and related organisms, methods
JP5646455B2 (ja) 2008-04-21 2014-12-24 ジェン−プロウブ インコーポレイテッド チクングニヤウイルスを検出するための方法
JP5733796B2 (ja) 2008-05-13 2015-06-10 ジェン−プロウブ インコーポレイテッド 標的核酸配列の選択的ハイブリダイゼーションおよび捕捉における使用のため不活化可能型標的捕捉オリゴマー
AU2009262870B2 (en) 2008-05-30 2014-03-20 Gen-Probe Incorporated Compositions, kits and related methods for the detection and/or monitoring of Salmonella
US8097412B2 (en) * 2008-07-12 2012-01-17 Biodiagnostics, Inc. DNA-based test for detection of annual and intermediate ryegrass
CA2638458A1 (fr) * 2008-07-31 2010-01-31 Spartan Bioscience Inc. Recyclage thermique au moyen du positionnement d'une source de temperature allant de relative a fixe
US20100035309A1 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Luca Technologies, Inc. Analysis and enhancement of metabolic pathways for methanogenesis
WO2010078374A1 (fr) 2008-12-30 2010-07-08 Gen-Probe Incorporated Composition, kits et méthodes correspondantes pour la détection et/ou la surveillance de listeria
US8368882B2 (en) 2009-01-30 2013-02-05 Gen-Probe Incorporated Systems and methods for detecting a signal and applying thermal energy to a signal transmission element
EP2401287B3 (fr) 2009-02-26 2018-09-26 Gen-Probe Incorporated Test de détection de l'acide nucléique du parvovirus humain
US20100248321A1 (en) * 2009-03-27 2010-09-30 Luca Technologies, Inc. Surfactant amendments for the stimulation of biogenic gas generation in deposits of carbonaceous materials
EP2449132B1 (fr) 2009-07-01 2015-05-13 Gen-Probe Incorporated Procédés et compositions pour l'amplification d'acide nucléique
US8479813B2 (en) * 2009-12-16 2013-07-09 Luca Technologies, Inc. Biogenic fuel gas generation in geologic hydrocarbon deposits
WO2011103274A1 (fr) 2010-02-17 2011-08-25 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés pour détecter l'acide nucléique d'atopobium vaginae
EP3037555B1 (fr) 2010-04-21 2019-07-24 Gen-Probe Incorporated Compositions, procédés et trousses pour la détection d'acides nucléiques du virus de l'herpès simplex
US20110275135A1 (en) 2010-05-05 2011-11-10 Battelle Energy Alliance, Llc Genetic elements, proteins, and associated methods including application of additional genetic information to gram (+) thermoacidophiles
EP2588629B1 (fr) 2010-06-30 2017-05-17 Gen-Probe Incorporated Methode et appareil pour l'identification d'echantillons contenant un analyte utilisant une determination de l'analyte en lecture simple et des signaux de controle du procede.
US9234249B2 (en) 2010-07-12 2016-01-12 Gen-Probe Incorporated Compositions and assays to detect swine H1N1 influenza A virus, seasonal H1 influenza A virus and seasonal H3 influenza A virus nucleic acids
EP4050109A1 (fr) 2010-08-18 2022-08-31 Fred Hutchinson Cancer Center Agents destinés à être utilisés dans le traitement de la dystrophie facioscapulohumérale (fshd)
EP2611932A2 (fr) 2010-08-30 2013-07-10 Gen-Probe Incorporated Compositions, procédés et mélanges réactionnels pour détection du virus xénotrope apparenté aux virus de la leucémie murine
EP2616555B1 (fr) 2010-09-16 2017-11-08 Gen-Probe Incorporated Sondes de capture immobilisables par l'intermédiaire d'une queue nucléotidique l
WO2012046219A2 (fr) 2010-10-04 2012-04-12 Gen-Probe Prodesse, Inc. Compositions, méthodes et kits pour détecter des acides nucléiques adénoviraux
EP2683833B1 (fr) 2011-03-10 2018-09-26 Gen-Probe Incorporated Procédés de sélection et d'optimisation de séquences de marquage oligonucléotidiques
EP3604559A1 (fr) 2011-04-25 2020-02-05 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection d'acide nucléique bactérien associé au bv
AU2012284307A1 (en) 2011-07-15 2013-05-09 Gen-Probe Incorporated Compositions and method for detecting human parvovirus nucleic acid and for detecting hepatitis A virus nucleic acids in single-plex or multiplex assays
US9663829B2 (en) 2011-09-08 2017-05-30 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting BV-associated bacterial nucleic acid
WO2013044097A1 (fr) 2011-09-21 2013-03-28 Gen-Probe Incorporated Procédés d'amplification d'acide nucléique à l'aide d'un déplacement à médiation par étiquette
DE102011120550B4 (de) 2011-12-05 2013-11-07 Gen-Probe Prodesse, Inc. Zusammensetzungen, Verfahren und Kits zur Detektion von Adenovirusnukleinsäuren
EP2817416B1 (fr) 2012-02-24 2018-10-31 Gen-Probe Prodesse Inc. Détection de gènes de toxine dysentérique dans des bactéries
US9004162B2 (en) 2012-03-23 2015-04-14 Transworld Technologies Inc. Methods of stimulating acetoclastic methanogenesis in subterranean deposits of carbonaceous material
AU2013205110B2 (en) 2012-04-24 2016-10-13 Gen-Probe Incorporated Compositions, Methods and Kits to Detect Herpes Simplex Virus Nucleic Acids
AU2013205064B2 (en) 2012-06-04 2015-07-30 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Amplifying and Characterizing HCV Nucleic Acid
DK2890814T3 (da) 2012-08-30 2019-12-16 Gen Probe Inc Flerfaset nukleinsyreamplificering
AU2013205122B2 (en) 2012-10-11 2016-11-10 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Human Papillomavirus Nucleic Acid
AU2013205090B2 (en) 2012-12-07 2016-07-28 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Gastrointestinal Pathogen Nucleic Acid
WO2014160432A1 (fr) * 2013-03-13 2014-10-02 Tufts University Dosages à base de complémentation de fragments
CN105452488B (zh) 2013-08-14 2020-07-14 简·探针公司 用于检测hev核酸的组合物和方法
CN105579060B (zh) 2013-09-25 2021-03-16 硕腾服务有限责任公司 Pcv2b趋异株疫苗组合物以及使用方法
WO2016064887A1 (fr) 2014-10-20 2016-04-28 Gen-Probe Incorporated Solution de lyse de globules rouges
US10865433B2 (en) 2015-01-09 2020-12-15 Gen-Probe Incorporated Reaction mixtures for diagnosing bacterial vaginosis
US10550438B2 (en) 2015-03-16 2020-02-04 Gen-Probe Incorporated Methods and compositions for detecting bacterial nucleic acid
EP3387107B1 (fr) 2015-12-11 2020-08-12 Spartan Bioscience Inc. Système et procédés de fermeture étanche de tubes pour l'amplification d'acide nucléique
JP6894439B2 (ja) 2016-01-04 2021-06-30 ジェン−プローブ・インコーポレーテッド Ｃａｎｄｉｄａ種を検出するための方法及び組成物
JP7015785B2 (ja) 2016-02-05 2022-02-15 ジェン－プローブ・インコーポレーテッド 乾燥増幅組成物
WO2017189746A1 (fr) 2016-04-27 2017-11-02 Gen-Probe Incorporated Réactif de lyse de cellules sanguines
AU2017278065B2 (en) 2016-06-10 2020-09-10 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting Zika virus nucleic acid
EP3529381B1 (fr) 2016-10-19 2022-07-06 Gen-Probe Incorporated Compositions et méthodes de détection ou quantification du virus de l'hépatite c
EP3541959A1 (fr) 2016-11-21 2019-09-25 Gen-Probe Incorporated Compositions et méthodes pour détecter ou quantifier le virus de l'hépatite b
AU2018237331B2 (en) 2017-03-24 2022-02-03 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detection of viral pathogens in samples
EP3601617B3 (fr) 2017-03-24 2024-03-20 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection ou quantification du virus parainfluenza
CA3225861A1 (en) 2017-03-25 2018-10-04 Gen-Probe Incorporated Compositions to detect adenovirus nucleic acids
KR102508182B1 (ko) 2017-05-17 2023-03-09 썬더 바이오테크 인크. 형질전환 대식세포, 키메라 항원 수용체, 및 관련 방법
EP3635140B1 (fr) 2017-06-07 2023-05-31 Gen-Probe Incorporated Détection d'acide nucléique d'espèce babesia dans un échantillon
EP4282533A3 (fr) 2017-07-10 2024-03-13 Gen-Probe Incorporated Systèmes analytiques et procédés d'amplification d'acide nucléique à l'aide de paramètres d'attribution d'échantillon
EP4219766A3 (fr) 2017-08-11 2023-10-11 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection de staphylococcus aureus
CA3074349A1 (fr) * 2017-09-29 2019-04-04 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Appareil capteur et procede pour tester un echantillon
WO2019099629A1 (fr) 2017-11-17 2019-05-23 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés pour détecter l'acide nucléique de c1orf43
WO2019118735A1 (fr) 2017-12-15 2019-06-20 Gen-Probe Incorporated Compositions et méthodes pour la détection de clostridium difficile toxigène
US20210052643A1 (en) 2018-01-05 2021-02-25 Thunder Biotech, Inc. Modified macrophages and macrophage precursors and associated methods
EP3746225B1 (fr) 2018-01-29 2024-10-30 Gen-Probe Incorporated Systèmes et procédés analytiques
CN112654721A (zh) 2018-06-13 2021-04-13 简·探针公司 用于检测b群链球菌核酸的组合物和方法
US20210317515A1 (en) 2018-07-10 2021-10-14 Gen-Probe Incorporated Methods and systems for detecting and quantifying nucleic acids
US20210332449A1 (en) 2018-08-01 2021-10-28 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting nucleic acids of epstein-barr virus
CA3108105A1 (fr) 2018-08-08 2020-02-13 Gen-Probe Incorporated Compositions, procedes et kits pour la detection de mycoplasma genitalium
US20220074002A1 (en) 2018-08-21 2022-03-10 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for amplifying, detecting or quantifying human cytomegalovirus
EP3841222A1 (fr) 2018-08-24 2021-06-30 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés pour détecter un acide nucléique bactérien et diagnostiquer une vaginose bactérienne
EP3856934A2 (fr) 2018-09-27 2021-08-04 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection d'acides nucléiques de bordetella pertussis et de bordetella parapertussis
JP7432610B2 (ja) 2018-10-01 2024-02-16 ジェン－プローブ・インコーポレーテッド 水痘帯状疱疹ウイルスを増幅または検出するための組成物および方法
CA3116895A1 (fr) 2018-10-22 2020-04-30 Gen-Probe Incorporated Compositions et procedes d'amplification, de detection ou de quantification de polyomavirus bk humain
TW202030333A (zh) 2018-12-20 2020-08-16 美商簡 探針公司 用於檢測瘧原蟲物種核酸之組成物及方法
US20220098647A1 (en) 2019-03-22 2022-03-31 Gen-Probe Incorporated Compositions and Methods for Detecting Group A Streptococcus
CA3137749C (fr) 2019-05-03 2023-12-05 Gen-Probe Incorporated Systeme de transport de receptacle pour systeme analytique
US20230242979A1 (en) 2019-08-20 2023-08-03 Egi Tech (Shen Zhen) Co., Limited Method for sequencing polynucleotides based on optical signal kinetics of luminescent labels and secondary luminescent signals
EP4018004A1 (fr) 2019-08-23 2022-06-29 Gen-Probe Incorporated Compositions, procédés et kits pour la détection de treponema pallidum
CA3153514A1 (fr) 2019-09-05 2021-03-11 Gen-Probe Incorporated Detection de variants d'acide nucleique de chlamydia trachomatis
JP2023516683A (ja) 2020-03-04 2023-04-20 ジェン－プローブ・インコーポレーテッド ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２核酸を検出するための組成物および方法
CN115698325A (zh) 2020-05-07 2023-02-03 盖立复诊断解决方案公司 用于检测SARS-CoV-2核酸的方法和组合物
CA3177256A1 (fr) 2020-10-21 2022-04-28 Gen-Probe Incorporated Systeme de gestion de conteneurs de fluide
EP4382621A3 (fr) 2021-07-27 2024-08-21 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection de c. coli et d'au moins une des salmonella, c. jejuni, shigella et stec
AU2023235558A1 (en) 2022-03-15 2024-10-03 Diagenode S.A. Detection of methylation status of a dna sample
WO2024054924A1 (fr) 2022-09-08 2024-03-14 Gen-Probe Incorporated Procédé de détection d'analytes d'acides nucléiques à l'aide d'amorces à double spécificité
WO2024137379A2 (fr) 2022-12-19 2024-06-27 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection d'agents pathogènes gastro-intestinaux
WO2024161179A1 (fr) 2023-01-31 2024-08-08 Mobidiag Oy Compositions et procédés de détection d'acides nucléiques stx
WO2024192338A1 (fr) 2023-03-16 2024-09-19 Gen-Probe Incorporated Compositions et procédés de détection de parasites gastro-intestinaux
EP4455304A1 (fr) 2023-04-28 2024-10-30 Mobidiag Oy Commandes de processus d'amplification d'acide nucléique
EP4455303A1 (fr) 2023-04-28 2024-10-30 Mobidiag Oy Commandes de processus d'amplification d'acide nucléique
EP4454758A1 (fr) 2023-04-28 2024-10-30 Mobidiag Oy Commandes de processus d'amplification d'acide nucléique

Family Cites Families (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3654090A (en) * 1968-09-24 1972-04-04 Organon Method for the determination of antigens and antibodies
NL154598B (nl) * 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
NL154599B (nl) * 1970-12-28 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking.
US4067774A (en) * 1971-05-14 1978-01-10 Syva Company Compounds for enzyme amplification assay
US3817837A (en) * 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3880934A (en) * 1972-02-10 1975-04-29 Syntex Inc Nitrophenyloxy-butanediols
NL171930C (nl) * 1972-05-11 1983-06-01 Akzo Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van haptenen, alsmede testverpakkingen.
US4002532A (en) * 1974-10-21 1977-01-11 Weltman Joel K Enzyme conjugates
IN142734B (fr) * 1975-04-28 1977-08-20 Miles Lab
US4016043A (en) * 1975-09-04 1977-04-05 Akzona Incorporated Enzymatic immunological method for the determination of antigens and antibodies
US4134792A (en) * 1976-12-06 1979-01-16 Miles Laboratories, Inc. Specific binding assay with an enzyme modulator as a labeling substance
US4139346A (en) * 1977-11-28 1979-02-13 Enzo Bio Chem Incorporated Nucleic acid and protein binding paper
US4318980A (en) * 1978-04-10 1982-03-09 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a cycling reactant as label
US5605800A (en) * 1978-04-13 1997-02-25 Institut Pasteur Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method
FR2422956A1 (fr) * 1978-04-13 1979-11-09 Pasteur Institut Procede de detection et de caracterisation d'un acide nucleique ou d'une sequence de celui-ci, et reactif enzymatique pour la mise en oeuvre de ce procede
US4228237A (en) * 1978-09-21 1980-10-14 Calbiochem-Behring Corp. Methods for the detection and determination of ligands
EP0041426B1 (fr) * 1980-05-22 1985-11-13 Institut Pasteur Produit de couplage entre une lectine et un ligand spécifique, obtention et application dans le domaine biologique
US4358535A (en) * 1980-12-08 1982-11-09 Board Of Regents Of The University Of Washington Specific DNA probes in diagnostic microbiology
US4442204A (en) * 1981-04-10 1984-04-10 Miles Laboratories, Inc. Homogeneous specific binding assay device and preformed complex method
EP0128018B1 (fr) * 1983-05-31 1992-07-15 Orgenics Ltd. Sonde moléculaire génétique et méthode pour sa préparation, technique d'analyse et trousse utilisant cette sonde moléculaire génétique
EP0155854B1 (fr) * 1984-03-22 1990-09-26 Bresatec Limited Matériel de test biologique non-radioactif
DE3568063D1 (en) * 1985-01-10 1989-03-09 Molecular Diagnostics Inc Photochemical method of labelling nucleic acids for detection in hybridization assays
US4868105A (en) * 1985-12-11 1989-09-19 Chiron Corporation Solution phase nucleic acid sandwich assay

Also Published As

Publication number Publication date
IT7921838A0 (it) 1979-04-13
DE2915082C3 (de) 1995-04-20
FR2422956B1 (fr) 1980-11-28
NL191541B (nl) 1995-05-01
DE2915082C2 (fr) 1989-07-13
JPH0364119B2 (fr) 1991-10-03
JPS54143297A (en) 1979-11-08
US4581333A (en) 1986-04-08
IT1119725B (it) 1986-03-10
BE875598A (fr) 1979-10-15
FR2422956A1 (fr) 1979-11-09
DE2915082A1 (de) 1979-10-31
NL7902911A (nl) 1979-10-16
GB2019408B (en) 1982-08-18
NL191541C (nl) 1995-09-04
US5876928A (en) 1999-03-02
US5955262A (en) 1999-09-21
GB2019408A (en) 1979-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CH647870A5 (fr) Procede d'analyse d'une sequence ou fragment determine d'acide nucleique et moyens de mise en oeuvre du procede.
EP0486661B1 (fr) Procede de detection d'une sequence nucleotidique selon la technique d'hybridation sandwich
EP0412883B1 (fr) Procédé rapide de détection et/ou d'identification d'une seule base sur une séquence d'acide nucléique, et ses applications
EP0843738B1 (fr) Procede de detection d'acides nucleiques utilisant des sondes nucleotidiques permettant a la fois une capture specifique et une detection
EP0935674B1 (fr) Procede de positionnement de clones par peignage moleculaire
EP0158758B1 (fr) Sonde contenant un acide nucléique modifié et reconnaissable par des anticorps spécifiques et utilisation de cette sonde et de ces anticorps spécifiques pour détecter et caractériser une séquence d' ADN homologue
EP0672186B1 (fr) Technique amelioree du deplacement des brins et complexe utilise a cet effet
EP1318203A2 (fr) Procédé d'amplification d'acides nucléiques par élongation et déplacement
AU2016271384A1 (en) Nucleic acid detection
EP0713922A1 (fr) Oligonucléotide utilisable comme amorce dans une méthode d'amplification basée sur une réplication avec déplacement de brin
WO1987005907A1 (fr) Sondes oligonucleotidiques et procedes pour la detection par hybridation des acides nucleiques de bacteries et autres etres vivants
FR2723950A1 (fr) Fragments nucleotidiques capables de s'hybrider specifiquemennt a l'adnr ou arnr des rickettsia et leur utilisation comme sondes ou amorces.
EP0827552B1 (fr) Detection d'une sequence nucleotidique avec amplification de signal
US5389515A (en) Isolated nucleotide sequences for identifying Neisseria gonorrhoeae
EP0763602B1 (fr) Détection des Entérobactéries
EP0943010B1 (fr) Procede de mise en evidence de contaminants microbiologiques vivants dans un echantillon de produit a usage alimentaire
FR2769323A1 (fr) Moyens pour l'analyse qualitative et quantitative des populations microbiennes eventuellement presentes dans un echantillon
FR2730234A1 (fr) Detection de bacteries du genre listeria selon des techniques d'hybridation de sondes nucleiques
US5605800A (en) Method of detecting and characterizing a nucleic acid or a sequence of the latter, and enzymatic reactant for the application of this method
CA2175515A1 (fr) Fragment nucleotidique de l'arn ribosomique 16s de corynebacteries, sondes et amorces derivees, reactif et procede de detection
WO2003048386A2 (fr) Procede de detection et d'analyse quantitative de molecules d'acides nucleiques comprenant une etape d'extraction par une base forte et applications.
EP1254253B1 (fr) Oligonucleotides monocatenaires, sondes, amorces et procede de detection des spirochetes
WO1998055646A1 (fr) Fragment nucleotidique de l'arn 23s de bacteries du genre chlamydia, utlisations comme sonde, amorce, et dans un reactif et un procede de detection
FR2659086A1 (fr) Fragments nucleotidiques caracteristiques de fragments d'adn de mycobacteries. leur utilisation comme amorce pour la detection d'une infection due a des mycobacteries.
EP0550610B1 (fr) Procedes, oligonucleotides amorces et oligonucleotides sondes pour la detection de bacteries pathogenes de la cavite buccale

Legal Events

Date Code Title Description
PL Patent ceased