DE2831271C2 - Heptapeptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Heptapeptide enthaltende, angiotensin-II-antagonistisch wirkende Arzneimittel - Google Patents
Heptapeptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Heptapeptide enthaltende, angiotensin-II-antagonistisch wirkende ArzneimittelInfo
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Description
H-Arg(A)-Val-Tyr(B)-IIe-His(E)-Pro-Y-OG
(II)
worin
worin
\ eine Schutzgruppe für den Guanidinorest von
Arg.
B eine Schutzgruppe für die Hydroxylgruppe von
B eine Schutzgruppe für die Hydroxylgruppe von
Tyr.
E eine Schutzgruppe für die Imidazolgruppe von
E eine Schutzgruppe für die Imidazolgruppe von
His und
G eine Schutzgruppe für die Carboxylgruppe der
G eine Schutzgruppe für die Carboxylgruppe der
C-terminalen Aminosäure bedeuten und
Y die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen hat.
Y die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen hat.
mit einem Aminooxycarbonsäure· Derivat der allgemeinen
Formel III
W-X-M
(III)
worin
X' eine Aminooxyacetyl- oder L-«-Aminooxypiopionylgruppe,
W eine durch Acidolyse oder katalytische Hydrogenolyse
abspaltbare Schutzgruppe, und
M eine Hydroxylgruppe oder eine aktivierende Gruppe, bedeuten,
umsetzt und aus der erhaltenen Verbindung der allgemeinen Formel IV
W-X'-ArglAj-VaUTyrtBMIe'HisiEj-'Prü-Y-OG
(IV)
zuerst die Schutzgruppe E und dann die übrigen Schutzgruppen abspaltet und das erhaltene Peptid
der allgemeinen Formel 1 gemäß Anspruch I gegebenenfalls in ein Säureadditionssalz überführt.
9. Angiotensin-II-anatagonistisch wirkende Arzneimittel,
enthaltend ein Heptapeptid gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7 oder deren Säureadditionssalze.
Die Erfindung betrifft Heptapeptide der allgemeinen ίο Formel I
X-Arg-Val-Tyr-Ue-His-Pro-Y
worin
X eine Hydroxyacetyl- oder L-a-Hydroxypropionylgruppe
und
Y eine Leucyl-, Isoleucyl-, Alanyl- oder o-Methylthreonylgruppe
bedeuten, und deren Säureadditionssalze, ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen und diese
Heptapeptide enthaltende, angiotensin-ll-antagonistisch
wirkende Arzneimittel.
Angiotensin-II ist ein blutdrucksteigend wirkendes
Octapeptid, welches im Organismus auf solche Weise entsteht, daß ein aus der Niere freigesetztes Enzym, das
Renin, das durch die Leber produzierte α-Globulin in das Decapeptid Angiotensin-I überführt und dieses dann
im Organismus in Angiotensin-II überführt wird.
Im (ahr 1970 wurde das erste Angiotensin-II-Analogon
beschrieben, eine Verbindung, welche sich sowohl in vivo als auch in vitro als spezifischer kompetitiver
Inhibitor von Angiotensin-II verhält [G. R. Marschall u. Mitarb., Proc NaL Acad. Sei. USA 67, 1624 (1970); P. A.
Khairralah u. Mitarb. J. Med. Chem. 18. 181 (1970)].
Diese Beobachtung hat in breiten Kreisen großes Interesse hervorgerufen; zahlreiche Forscher wurden
dazu angeregt, neue antagonistisch wirkende Angiotensin-II-Analoga
zu synthetisieren und zu untersuchen, welche zur Diagnostizierung und eventuell zur therapeutischen
Behandlung von durch Renin beeinflußten Hypei'.cnsiop^n eingesetzt werden könnten. Es hat sich
gleich .m Aniaig dieser Forschungsarbeit herausgestellt,
'jdß sirh zu diesem Zweck diejenigen Angiotensin-
4-, II-Arialoga am besten bewähren, in welchen die
Phe-Gruppe in der R Stellung des Ang'otensin Il-Moleküls
durch irgendeine eine aliphatisch? Seitenkette enthaltende Aminosäure ersetzt ist. Kine so!<. ne
Abänderung des Moleküls bedeutet nämlich eine
in praktische Aufhebung der agonistisch'n Wirkung bei
gleichzeitiger Erzielung einer starken antagonistischen Wirkung des Produkts [vgl.: D Gagnon u. Mitarb. Br |.
Pharmacol. 43. 409 (1971); D T. Pals Ii Mitarb. C ire Res.
29. 664 (1971)]. Die antagonistische Wirkung kann noch
-,-, erheblich gesteigert werden, wenn man neben der
obenerwähnten Abänderung der 8 Stellung des Moleküls auch die in der 1 Stellung befindliche Asp-Gruppe
durch Sar ersetzt [vgl : D. T PaIs. u. Mitarb., Circ. res. 29,
67 5 (1971)]. Das auf diese Weise hergestellte (Sar1.
bo Ala°)-Anjjiotensin-!I-Analogen wurde später unter dem
Namen »Saralasin« auch in Verkehr gebracht. Seine vorteilhaften Eigenschaften wurden durch eine Herab'
setzung des in vivo eintretenden enzymatischen Abbaus und durch große Affinität des Moleküls zu den
Rezeptorzellen erklärt.
Durch die auf diesem Gebiet durchgeführten klinischen Untersuchungen [H, R. Brunnef U, Mitarb,,
Lancet 1973, 1045; A. j. M. Donker u. Mitarb., Lancet
1974,1535; T. Ogihara u. Mitarb. Lancet 1974, 219; J. H.
Laragh u. Mitarb. New Engl. J. Med. 292, 695 (1975); W.
A. Pettinger u. Mitarb. New Engl. J. Med. 292, 1214
(1975); D. H. B. Streeten u. Mitarb. Circ. res., 36, Suppl. 1,
125 (1975); H. R. Branner u. H. Gavras, Schweiz. Med.
Wschr. 106, 1791 (1976)] wurden die schon am Anfang dieser Forschungsarbeit gemachten Annahmen, daß die
antagonistisch wirkenden Analoga von Angiotensin-II in der Diagnose und in der Therapie von durch Renin
beeinflußten Hypertensionen anwendbar sein werden, in vollem Umfang bestätigt [vgl.: D. Ganton und F.
Gross, Med. Klin, 71,2043 (1976); J. L Marx, Science 194.
821 (1976); P. Needleman und G. R. Marschall, Fed. Proa 35,2486 (1976)].
Ein Vergleich der Strukturen und biologischen Wirkungen der bis dahin hergestellten Angiotensin-II-Analoge
hat zahlreiche wichtige Informationen zur Deutung der agonistischen bzw. antagonistischen
Wirkung geliefert [M. C. Khosia u. Mitarb., Handbook of Experimental Pharmacology, Vol. 37,1. H. Page u. P. M.
Bumpus ed. 1974·, G. R. Marshall, Fed Proc. 35, 2494
(1976)].
In der letzten Zeit steht besonders die Herstellung von nebenwirkungsfreien, längere biologische Halbwertszeiten
aufweisenden Antagonisten im Vordergrand der Forschung [vgl.: M. C. fChosla u. Mitarb. J.
Med. Chem. 19,244 (1976); ibid. 20,253 (1977)].
Es wurde nun gefunden, daß man unter Beibehaltung der bekannten Ersetzung des in der 8-StelIung der
Angiotensin-II-Sequenz befindlichen Phenylalanin-Pestes
durch den rest einer aliphatischen *-Aminocarbonjäure
und durch das Einführen des Reste einer in der «-Stellung eine Hydroxylgruppe enthr'tenden Carbonsäure
in die 1-Stellung der Peptidkette solche angiotensin-II-kompetitiven Inhioitor'i herstellen
kann, weiche die durch Angiotensin-II erzeugte Hypertension in vivo erheblich herabsetzen und diese
Wirkung auch bei subcutaner Verabreichung ausüben können.
Die derartigen angiotensin-II-antagonistischen Pepti- 4η
de können durch die allgemeine Formel I
X-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Y
(1)
worin X und Y die oben angegebenen Bedeutungen haben, gekennzeichnet werden; sie werden im Sinn der 4-,
Erfindung so hergestellt, daß man ein reaktionsfähiges Heptapeptidderivat der allgemeinen Formel II
II- Argr Λ )-Val-Tyr( B )-lle-His( E)-Pro-Y-OG
(II)
worin
worin
A eine Schutzgruppe für den Guanidinorest von Arg. B eine Schutzgrupe für die Hydroxylgruppe von Tyr.
E eine Schutzgruppe für die Imidazolgruppe von His
und
C eine Schutzgruppe für die Carboxylgruppe der
C eine Schutzgruppe für die Carboxylgruppe der
C-terminalen Aminosäure bedeuten und
Y die oben angegebenen Bedeutungen hat,
Y die oben angegebenen Bedeutungen hat,
mit einem Aminooxycarbonsäure-Derivat der allgemeinen
Formel III
-X'-M
(110
worin
eine Aminooxyacetyl- oder L-a-Aminooxypropio*
nylgruppe,
W eine durch Acidolyse oder katalytische Hydrogenolyse abspaltbare Schutzgruppe, insbesondere eine
Benzyloxycarbonyl- oder tert-Butyloxycarbonylgrappe,
und
M eine Hydroxylgruppe oder eine an sich bekannte aktivierende Gruppe, insbesondere eine Pivaloyloxy-,
Nitrophenoxy-, 2,3,5-Trichlorphenoxy-, Pentachlorphenoxy-,
Pentafluorphenoxy-, N-Succinimidoxy- oder Azidograppe, bedeuten,
umsetzt und aus der erhaltenen Verbindung der allgemeinen Formel IV
W-X'-Arg(A)-Val-TYr(B)-Ile-His(E)-Pro-Y-OG
(IV)
zuerst die Schutzgruppe E und dann die übrigen Schutzgruppen abspaltet und gewünschtenfalls das
erhaltene Peptid der allgemeinen Formel I in ein Säureadditionssalz überführt
Schutzgruppe E wird vorteilhaft durch Benandlung mit 2-Mercaptoathanol entfernt; die übrigen Seitenketten-
und terminalen Schutzgrappen werden durch katalytische Hydrogenolyse abgespalten; das Entfernen
dieser weiteren Schutzgrappen kann also in einem Schritt erfolgen. Dabei wird aber von der N-terminalen
a-Aminooxysäure auch die Aminogruppe in der Form von Ammoniak abgespalten, so daß als Endprodukt ein
in der N-terminalen Stellung die entsprechende α-Hydroxycarbonsäure enthaltendes Peptid erhalten
wird. Diese Herstellungrweise von in der N-terminalen
Stellung einen Λ-Hydroxycarbonsäurerest enthaltenden Peptiden ist eine neue, bisher nicht beschriebene
Methode, welche ein für sich neues Element des erfindungsgemäßen Verfahrens bildet.
Die im erfindungsgemäßen Verfahren als Ausangsstoffe einsetzbaren reaktionsfähigen Heptapeptidderivate
der allgemeinen Formel II können nach beliebigen, in der Peptidchemie üblichen Methoden, z. B. nach der
in der ungarischen Patentschrift Nr. 168 4 >' beschriebenen Methode, hergestellt werden. In diesem Herstellungsverfahren
werden zum Schutz der funktionellen Seitengruppen zweckmäßig solche Schutzgruppen
eingesetzt, welche unter den Bedingungen der zum Abspalten der nach der Koppelungsreaktion zu
entfernenden Schutzgrappen durchgeführten Acidolyse stabil bleiben.
Nach einer vorteilhaften Ausführungsweise des erfindungsgemäßen Verfahrens wird zum temporären
-,π Schutz der Carboxylgruppe der C-terminalen Aminosäure
die p-Nitrobenzylgruppe (NB), zum Schutz der Guanidinogruppe von Arginin die Nitrogruppe verwendet,
während die Hydroxylgruppe von Tyrosin durch die Benzylgruppe und der Imidazolring von Histidin durch
die Dinitrophenylgruppe (Dnp) geschützt wird. Diese Schutzgruppen sind unter schwach sauren Bedingungen
stabil, so daß die N-terminale Boc-Gruppe ohne Schädigung dieser Gruppen entfernt werden kann.
Durch diese vorteilhafte Kombination der Schutzgruppen wird es ermöglicht, daß man in den Verbindungen
der allgemeinen Formel IV zuerst die Dinitrophenylgruppe abspaltet und dann durch katalytische Hydrogenolyse in einem einzigen Schritt unmittelbar die
Endprodukte der allgemeinen Formel I erhält.
Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen der allgemeinen Formel I können nach an sich
bekannten Methoden, vorteilhaft durch ionenaus* lauschchromatographie an Carboxymethylcellulose,
gereinigt werden, dabei werden die Produkte meistens
in der Form von lyophilisierten Pulvern erhalten; solche Produkte können unmittelbar zur Bildung von verschiedenen
Salzen oder Komplexen eingesetzt werden.
Die antagonistischen Wirkungen der neuen Verbindungen
der allgemeinen Formel I wurden an narkotisierten männlichen Katzen untersucht Der Blutdruck
der Tiere wurde an der Halsarterie gemessen. Die
Untersuchungen wurden derart durchgeführt, daß in eine Schenkelvene Hypertensin in einer Dosierungsrate
von O^g/kg/min infundiert wurde; nachdem sich die Blutdrucksteigerung stabilisiert hatte, wurde die zu
untersuchende Substanz in physiologischer Kochsalzlösung in einer einmaligen Dosis intravenös oder subcutan
IO
verabreicht, und dann wurde die durch den verabreichten Wirkstoff verursachte Verminderung des Blutdrucks
gemessen.
Die durch die intravenöse Verabreichung von verschiedenen neuen Verbindungen verursachte Verminderung
des Blutdrucks der Tiere wird durch die in der Tabelle I zusammengefaßten Daten veranschaulicht
Diese Daten sind Durchschnittswerte von 6 Messungen mit der Angabe der Streuung der Mittelwerte. Zum
Vergleich wurden auch die mit dem bekannten Saralasin, d.h. l-(N-MethylgIycin)-5-L-vaJin-8-L-alaninangiotensin-II
unter den gleichen Bedingungen erhaltenen Werte angegeben.
Wirkung der in der !-Stellung a-Hydroxysäuren enthaltenden
Angiotensin-II-Analoga auf den Blutdruck unter Infusion von Angiotensin-II
VV irkstoll
(Hydroxyatctyl , Leu*)-Ang-H
(Ilydroxyace'-yl'. He*)-Ang-U
(Hydroxyacetyl1, Alas)-Ang-II
[Ilydroxyacetyl1.
ThriMe^l-Ang-II
ThriMe^l-Ang-II
(L-a-\ lydroxypropionyl',
I eus)-Ang-II
(L-a-Hydroxypropionyl1,
Iles)-Ang-II
Saralasin
| Veränderung drucks (mm Dosen von |
! des üiui- Hg) nach ι. v. |
| IfIv g/kg | 20 ;ig/kg |
| -31 ±4,7 | -42 ± 2,8 |
| -24 ±1,7 | -30 ±2,3 |
| -19 | -25 |
| -33 ±5.3 | -38 ±4,1 |
| -32 ±2,7 | -40 ± 2,7 |
| -31 ±3,3 | -38 ±4.1 |
| -41 ±2.5 |
Aus den Daten der obigen Tabelle ist eindeutig ersichtlich, daß sämtliche in der 1-Stellung durch einen
eine α-Hydroxylgruppe enthaltenden aliphatischen Carbonsäurerest substituierten Angiotensin-II-Analoga
sehr erhebliche blutdrucksenkende Wirkungen haben. Die Höhe dieser Wirkung ist proportional der Größe
der verabreichten Dosen.
Die Untersuchungen wurden auch auf die in der Literatur nicht übliche subcutane Verabreichungsweise
dieser Verbindungen ausgedehnt. In diesem Fall wurde
der die zu untersuchende Substanz enthaltenden physiologischen Kochsalzlösung auch noch Carboxymethylcellulose
oder Gelatine (in der nachstehenden Tabelle: CMC bzw. GIt) zugesetzt. Die in der
nachstehenden Tabelle II zusammengefaßten Versuchsergebnisse sind Durchschnittwerte von an je fünf Tieren
durchgeführten Messungen, wobei die Streuungen der Mittelwerte ebenfalls angegeben sind.
Wirkung der in der 1-Stellung eine a-Hydroxysäure enthaltenden Angiotensin-II-Analoga auf den Blutdruck bei
s. c. Verabreichung unter Infusion von Angiolensin
Wirkstoff
| On.,, | Zusatz |
| ■/μ/kp | zur |
| S C. | 1 ösung |
| 200 | CMC |
| 200 | GIt |
Blutdrucksenkung mm Hg, nach
15 30 60
Minuten
120
(L^rt'I lydroxypropionyl1,
Leu8>Ang'lI
(L-17-Hydroxypropionyl1,
s
Leu8>Ang'lI
(L-17-Hydroxypropionyl1,
s
-28 ±3,1 -38 ±2,4 -25 ±1,5 -5 ±1,8
-28 ±10 -28 ±7,0 -25 ±6,0 -5 ±7,3
-28 ±10 -28 ±7,0 -25 ±6,0 -5 ±7,3
Die Daten dieser Tabelle zeigen, daß die neuen Verbindungen bei subcutaner Verabreichung den
experimentell hervorgerufenen hohen Blutdruck auch nach 60 Minuten noch erheblich herabsetzen.
Auf Grund dieser Eigenschaften können die crfin'
dungsgemäßen neuen Angiotension-II-Analoga sowie
die physiologisch unbedenklichen Salze dieser neuen Verbindungen in der Therapie als blutdrucksenkende
Mittel angewendet werden. Als physiologisch unbedenkliche Salze der neuen Peptide können die üblichen,
pharmazeutisch anwendbaren Säureadditionssalze, z. B. Acetate, hergestellt werden.
Die neuen Peptide sowie deren physiologisch unbedenkliche Salze werden in der Therapie in der
Form von üblichen Arzneimittelpräparaten eingesetzt. Diese Präparate enthalten die neuen Verbindungen
zusammen mit zur enteralen oder parenteralen Verabreichung geeigneten anorganischen oder organischen
Trägerstoffen. Die Arzneimittelpräparate können in der Form von festen Lyophilisaten hergestellt
werden; in diesem Fall kommen als Trägerstoffe verschiedene, mit den Peptiden nicht reagierende
Verbindungen, wie z. B. Kohlenhydrate in Betracht. Ferner kann man konzentrierte oder verdünnte
Suspensionen oder Emulsionen als Arzneimittelpräparate herstellen, welche neben den üblichen flüssigen
Trägerstoffen auch stabilisierende und konservierende Hilfsstoffe enthalten.
Solche Arzneimittelpräparate können in der Therapie zur Behandlung von allen solchen Syndromen verwendet
werden, in deren Ätiologie ein erhöhter Renin-Blutspiegel eine Rolle spielt; sie können ferner als
Diagnostika zu einer differenzierten Unterscheidung von Hypertensionen renaler Herkunft dienen.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen neuen Peptide wird durch die nachstehenden Beispiele näher
veranschaulicht Die in den Beispielen verwendeten Abkürzungen entsprechen den in der Fachliteratur
üblichen Abkürzungen, vgl.: J. Biol. Chem, 247, 977
(1972). Die von ot-Aminooxysäuren stammenden Gruppen
werden durch ein dem üblichen Symbol der entsprechenden Aminosäure vorgesetztes »O« bezeichnet;
so bedeutet z. B. »OGly« Aminooxyessigsäure. »OAla« L-a-Aminooxypropionsäure usw. Als weitere
Abkürzung wird »PFP« für die Bezeichnung von Pentafluorphenyl verwendet
Bei der Herstellung der verschiedenen Verbindungen wurde das Eindampfen von Lösungen immer mit dem
Büchischen »Rotavaporw-Apparat durchgeführt Die Schmelzpunkte wurden mit dem Dr. Tottolischen
Apparat (Büchi) bestimmt Die Dünnschichtchromatogramme wurden auf wat »Kieselgel G nach Stahl« (E.
Merck, Darmstadt) beschichteten Platten aufgenommen; zu der Entwicklung der Chromatogramme wurden
die folgenden Lösungsmittelsysteme verwendet:
1) Äthylacetat: (Pyridin-Essigsäure-Wasser
20:6:ll)=95:5.
20:6:ll)=95:5.
2) Äthylacetat: (Pyridin-Essigsäure-Wasser
20:6:ll) = 90:10,
20:6:ll) = 90:10,
3) Äthylacetat: (Pvridin-Essigsäure-Wasser
20:6:ll) = 80:30,
20:6:ll) = 80:30,
4) Äthylacetat: (Pyridin-Essigsäure-Wasser
20:6:ll) = 70:30,
20:6:ll) = 70:30,
5) n-Butanol: Essigsäure : Wasser=4 :1 :5,
6) n-Butanol: Essigsäure : Pyridin : Wasser
= 30:6:20^24,
= 30:6:20^24,
7) n-Butanol: Äthylacetat: Essigsäure : Wasser
Bei den angegebenen Rr-Werten ist das zur Bestimmung Verwendete Lösungsmittelsystem jeweils
angegeben, z. B. R|<3).
Die papierelektrophoretischen Untersuchungen wurden in einem »LMIM« horizontalen Mittelspannungsapparat,
auf »MN-214«-Papier in einer Pufferlösung von pH = 1,9 neben Glutaminsäure durchgeführt. Die angewandte
Stromspannung war 450 V mit einer Zeildauer
von 3 Stunden.
Die Dünnschichfchromatogramme wurden einerseits mit Ninhydrinlösung, andererseits nach der üblichen
Chlorierung mit o-Tolidin· Jodkaliumlösung entwickelt.
Die Endprodukte wurden nach der folgenden Methode gereinigt: 0.5 g freies Peptid wurde in 4 ml
0,01 n-Ammoniumacetat-Pufferlösung gelöst: die Lösung wurde auf eine 0,5 I Carboxymethylcellulose (CMC
52) enthaltende und vorher mit der obigen Pufferlösung ins Gleichgewicht gebrachte Säule aufgetragen. 1.51.
0,01 m- und 1,5 I 0.4 m-Ammoniumacetatlösungen wurden
mit einem Gradientmischer vermischt, und so wurde eine Gradient-Elution durchgeführt. Die Strömungsgeschwindigkeit
war 25 ml/Stunde; Fraktionen von je 10 ml wurden aufgefangen. Das von der Säule kommende Eluat wurde mit Hilfe eines »LKB-Uvicord-II«-Apparats
(Hersteller: LKB, Uppsala, Schweden) festlaufend registriert Die auf Grund der Registrierkurve
identifizierte Hauptfraktion wurde lyophilisiert und das LyophilUat ebenfalls durch Gradient-Elution rechromatographiert
und wieder lyophilisiert.
Die Herstellung der neuen Angiotensin-II-Arialoga
wird durch die nachstehenden Ausführungsbeispiele näher veranschaulicht; es ist aber zu bemerken, daß das
beschriebene Verfahren sowohl bezüglich der an sich bekannten peptidchemischen Operationen als auch
bezüglich der Wahl der Schutzgruppen verschiedene, dem Fachmann an die Hand gegebene Variationen
zuläßt so daß die Erfindung in keiner Weise auf diese konkreten Beispiele beschränkt ist.
(Hydroxyacetyl1. Leu8)-angiotensin-II
Schritt 1
Schritt 1
Boc-Arg(N02)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
4,2 g (12mMol) Leu-ONB · HBr wurden in 50 ml
Chloroform gelöst und es wurden 1,68 ml Triäthylamin und 3,81g (1OmMoI) Boc-Pro-OPFP der Lösung
zugesetzt Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 20 Minuten gerührt dann mit Wasser und mit 10%iger
wäßriger Citronensäurelösung ausgeschüttelt getrocknet und eingedampft Das als Rückstand erhaltene
geschützte Dipeptid (R("=0,8) wurde unmittelbar ohne
Reinigung in 20 ml einer 8m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 10 Minuten wurde die Lösung mit
trockenem Äther verdünnt und eingedampft Das auf diese Weise erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure
freie Dipeptid-hydrochlorid (RK*)=0,56) wurde in 50 ml
Chloroform gelöst, die Lösung mit Triäthylamin auf pH=8 eingestellt und mit 8,8 g (ISmMoI) Boc-His(Dnp)-OPFP
versetzt Die erhaltene Lösung wurde bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt, wobei der
pH-Wert der Lösung stets bei 8 gehalten wurde. Dann
wurden 1,65 ml Ν,Ν-Dimethylamino-äthyIamin zum
Entfernen des überschüssigen Aktivesters der Lösung zugesetzt, und nach i0 Minuten wurde das Reaklionsgemisch
mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit
1 n*Salzsäure1ösung und mit 5%iger Natriumhydrogencarbonallösung
in der angegebenen Reihenfolge ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft. Das als Rückstand
erhaltene geschützte Tripeptid (R|C) = 0,65) wurde unmittelbar ohne Reinigung in 25 ml einer 8molaren
Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen
Aminosäure freie Tripeptid (Ri<4'=0,47) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt, abfiltriert und sofort im
Gemisch von 50 ml Chloroform und 20 ml Dimethylformamid gelöst. Die Lösung wurde mit Triäthylamin
auf pH = 8 eingestellt und mit 6,0 g (ISmMoI)
Boc-Ile-OPFP versetzt. Nach 30 Minuten Stehen wurde
das Reaktionsgemisch zur Trockne eingedampft, der Rückstand in 100 ml Äthylacetat gelöst und die Lösung
mit IO%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit I n-Salzsäurelösung und mit Wasser ausgeschüttelt. Die
organische Lösung wurde dann getrocknet, das Allylacetat verdampft und der Rückstand mit einem
1 .9-GCiViIsCu vüii Aihcf und i'i-r{c*uri ueiiaiiueii. Da^ m
auf diese Weise erhaltene geschützte Telrapeptid (Ri*'1 = 0,64) wurde in 25 ml einer 8molaren Lösung von
Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure
freie Tetrapeptid (Ri<4) = 0,40) durch Zugabe von
trockenem Äther gefällt und abfiltriert. Das erhaltene Tetrapeptid-hydrochlorid wurde im Gemisch von 50 ml
Chloroform und 30 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung durch Zugabe von Triäthylamin auf pH = 8
eingestellt und mit 6,0 g (11.5 mMol) Boc-Tyr(Bzl)-OPFP
versetzt. Nach 15 Minuten Stehen wurde die Lösung eingedampft, der Rückstand in Äthylacetat
gelöst und mit 0,66 ml N.N-Dimethylamino-äthylamin
versetzt Nach 10 Minuten Stehen wurde die Lösung mit
iO%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung
und mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft, der Rückstand mit trockenem Äther
behandelt und das auf diese Weise erhaltene geschützte Pentapeptid (Ri<2' = 0,8) durch Filtrieren abgetrennt.
Dieses Produkt wurde dann in 25 ml einer 8molaren Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach
15 Minuten wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Pentapeptid (Ri<4)=0,8) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt, abfiltriert, mit Äther gewaschen und sofort in 50 ml Dimethylformamid
gelöst Die Lösung wurde mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt und mit 4,2 g (11 mMol) Boc-VaI-OPFP
versetzt. Die Lösung wurde bei Raumtemperatur einj Stunde gerührt, dann eingedampft, der Rückstand in
Chloroform gelöst und die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung
und mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit Äther gehandelt und
das auf diese Weise erhaltene geschützte Hexapeptid(Rt<2>=0,82)
durch Filtrieren abgetrennt Dieses Produkt wurde in 25 ml einer 8molaren Lösung von
Salzsäure in Dioxan gelöst und nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure
freie Hexapeptid (Ri*3'=0,55) durch Zugabe von
trockenem Äther gefällt, abfiltriert und mit Äther eo
gewaschen. Das Produkt wurde sofort in 5OmI Dimethylformamid gelöst mit Triäthylamin auf pH=8
eingestellt und mit 4,8 g (10 mMol) Boc-ArgfNO2)-OPFP
versetzt Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft und durch Chloroform ersetzt und
diese Lösung mit 1 n-Salzsäurelösung und mit Wasser ausgeschüttelt Die abgetrennte organische Phase
wurde getrocknet eingedampft und der Rückstand mit Äthanol behandelt Auf diese Weise wurden 7,6 g
geschütztes Heptapeptid (Ri<2> = 0,8) erhalten (Ausbeute
für das als Ausgangsverbindung eingesetzte Boc-Pro-OPFP berechnet: 53%); F. F. 192-195°C.
Schrill 2
Z-OGIy-A rg(NO2)- Val-Tyr(Bzl)-lle-His(Dnp)·
Pro-Leu-ONB
Pro-Leu-ONB
1.8 g (1,25 mMol) Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bl>Ile-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
wurden in 10 ml einer 8m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen
Aminosäure freie Heptapeptid·Hydrochlorid durch Zugabe von trockene Äther gefällt, abfiltriert und mit
trockenem Äther gewaschen (Ri<3' = 0.36). Dieses Produkt
wurde sofort in 20 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH =8 eingestellt
und mit 0,9 g (2,3 mMol) Z-OGIy-OPFP versetzt. Nach
und durch Chloroform ersetzt, dann wurde die erhaltene Lösung mit ln-Safzsäurelösung und anschließend mit
Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde mit dem 2 :8-Gemisch von
Äthanol und Äther behandelt und abfiltriert. Es wurden auf diese Weise 1,6 g Z-OGly-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-ile-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
(85<>/o d. Th.) erhalten: \ 165-1740C.
Schritt 3
Das Entfernen der Schutzgruppen
Das Entfernen der Schutzgruppen
1.6 g (1.0 mMol) Z-OGIy-ARG(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
wurden in 5 ml Dimethylformamid gelöst und mit 3,5 ml 2-Mercaptoäthanol
versetzt. Die erhaltene Lösung wurde bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt; dann wurde das Produkt
durch Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert, mit je 10 ml Äther zweimal gewaschen und durch
Umfallen aus Methanol/Äther gereinigt. Es wurden auf
diese Weise 1,3 g Z-OGIy-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His-Pro-Leu-ONB
(95% d. Th.) erhalten; R,ffl=0.2.
Dieses PrcHiikt wurde in 30 ml 5 :1 :1 :1-Gemiscn
von ^' thanol, ."ssigsäure und Wasser gelöst, mit 0,5 g
10% if -.τ Palladium-Aktivkohle versetzt, und unter
lebhaftem Rühren wurde 20 Stunden lang Wasserstoffgas durch das Gemisch geleitet Das Fortschreiten der
Reaktion wurde durch Dünnschichtchromaiographie verfolgt; nach der Beendigung der Reaktion wurde der
Katalysator durch Filtrieren entfernt, mit 20 ml 5:1:1:1-Gemisch von Methanol, Essigsäure und
Wasser nachgewaschen und das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Filtrat zur Trockne eingedampft Der
■Rückstand wurde zum Entfernen der Essigsäure mit einem Gemisch aus Äthanol und Wasser aufgenommen
und das Ganze eingedampft, und diese Operation wurde mehrmals wiederholt Das zuletzt als Rückstand
erhaltene Peptid wurde mit wasserfreiem Äthanol behandelt und abfiltriert. Es wurden auf diese Weise
0,8 g (Hydroxyacetyl1, Leus)-Angiotensin-IT (67% d. Th.)
erhalten, welches dann auf die oben beschriebene Weise gereinigt wurde.
Rj(ä)=0,41; R/61=0p9; RjP>=G\60;
I^): 038.
I^): 038.
Aminosäure-Analyse:
Pro: 1,0(1); VaI: l,0(l);iIe: 1,02(1);
Arg: 1,0 (1); His: 1,0(1); Leu: 5,02 (1);
Tyr 0,73(1).
Arg: 1,0 (1); His: 1,0(1); Leu: 5,02 (1);
Tyr 0,73(1).
Beispiel 2
(L-a-Hydroxypropionyl1, Leu8)-Angiotensin-II
(L-a-Hydroxypropionyl1, Leu8)-Angiotensin-II
Schritt I
Z-OAla*Arg(NO2)-Vai-Tyr(B2!l)-lle;His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
1,8 g (1,25 mMol) BooArg(NOj)'VaNTyr(Bzl)'ile.;
His(Drip)-Prö-Leü-ONB (Beispiel 1, Schritt 1) würden in
8 ml einer 8m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst,
und das erhaltene, an der N-terminalenAminosäure freie Heptapepid wurde durch Zugabe von trockenem
Äther gefällt, abfiltriert, mit trockenem Äther gewaschen (Ri<3>=0.36) und dann sofort in 20 ml Dimethylformamid
gelöst. Diese Lösung wurde mit Triethylamin auf pH =8 eingestellt und mit 0,93 g (2,3 mMol)
Z-OAIa-OPFP versetzt. Nach 15 Minuten Stehen wurde
tiSS LtOäüiigSiiiiiiGi VcTuSinpit UiIu OüTCn ^ιπΰΓΰιυΓΠΊ
ersetzt; die Lösung wurde mit 1 η-Salzsäure und anschließend mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und
eingedampft. Der Rückstand wurde mit einem 4 : 1-Gemisch
von Äthanol und Äther behandelt und das erhaltene Produkt durch Filtrieren isoliert. Es wurden
auf diese Weise 1,75 g Z-OAIa-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-lle-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
(93% d. Th.) erhalten;
Ri<2> = 0,85;F.164-!72oC.
Ri<2> = 0,85;F.164-!72oC.
Schritt 2
Das Entfernen der Schutzgruppen
Das Entfernen der Schutzgruppen
1,6 g Z-OAla-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Leu-ONB
wurden in 5 ml Dimethylformamid gelöst und 3,5 ml 2-Mercaptoäthanol der Lösung zugesetzt;
dann wurde das Gemisch bei Raumtemperatur eine Stunde gerührt und das Produkt durch Zugabe von
trockenem Äther gefällt und durch Umfallen aus Methanol/Äther gereinigt. Es wurden auf diese Weise
1,3 g Z-OAla-Arg(NO2) Yal-Tyr(Bzl)-Ile-His-Pro-
Leu-ONB (92% d.Th.) erhalten (Rf")=0,27). Dieses
Produkt wurde im 5:1:1-Gemisch von Methanol,
Essigsäure und Wasser gelöst und mit 0,5 g 10%iger Palladium-Aktivkohle versetzt, und Wasserstoffgas
wurde unter lebhaftem Rühren 20 Stunden lang durch «las Gemisch geleitet Das Fortschreiten der Reaktion
wurde durch Dünnschichtchromatographie verfolgt; •ach der Beendigung der Reaktion wurde der
Katalysator abfiltriert, mit demselben Lösungsmittelgenisch
nachgewaschen, das Filtrat zur Trockne eingedampft und der Rückstand mit wäßrigem Äthanol
versetzt und wieder eingedampft, und diese Operation wurde mehrmals wiederholt. Zuletzt wurde der
Rückstand mit trockenem Äthanol behandelt, abfiltriert und getrocknet Es wurden 0,65 g (L-a-Hydroxypropionyl1,
Leus)-Angiotensin-II (70% cLTh.) erhalten; das
Produkt wurde auf die oben beschriebene Weise gereinigt
RjPJ=0,36;RjtfO=0,57;RiPl
l,9):0,97.
l,9):0,97.
Aminosäure-Analyse:
Pro: 038 (1); VaI: 1,0(1); He: 1,1 (1);
Arg: ί ,0 (ί); His: 038 (ί); Leu: 038 (i);
Tyr: 0,56(1).
Arg: ί ,0 (ί); His: 038 (ί); Leu: 038 (i);
Tyr: 0,56(1).
(Hydroxyacelyl'.IIe^-Angiotensin-II
Schritt 1
Schritt 1
Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-tle-ONB
4,15 g (15 mMol) He-ONB · HcI wurden in 50 ml
Chloroform gelöst und mit 2,1 ml Triethylamin und 3,81 g (10 mMol) Boc-Pro-OPFP versetzt; Das Gemisch
wurde bei Raumtemperatur 20 Minuten gerührt, dann mit Wasser und mit 10%iger Citronensäurelösung
ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft. Das als Rückstand erhaltene geschützte Dipeptid (Ri<" = 0,9)
wurde ohne Reinigung in 20 ml einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 10 Minuten wurde die
Lösung mit trockenem Äther verdünnt und eingedampft. Das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure
iTcic L-MpcpiiuiiyurOCfrloriu (Γμ"· = 0,44) Vvüfuc ifl 30 mi
Chloroform gelöst und die Lösung durch Zugabe von Triethylamin auf pH =8 eingestellt und mit 8,8 g
(15 mMol) Boc-His(Dnp)-OPFP versetzt. Nach 1,5 Stunden Stehen wurde das Reakttonsgemisch mit
1,65 ml N,N-Dimethylamino-äthylamin versetzt und nach 15 Minuten mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung,
mit 1 n-Salzsäurelösung und schließlich mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft.
Das als Rückstand erhaltene geschützte Tripeptid (Ri<'' = 0,50) wurde ohne Reinigung in 20 ml einer 8
m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst und die Lösung 15 Minuten stehengelassen; dann wurde das
erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Tripeptid (Ri*4'*= 0,25) durch Zugabe von trockenem
Äther gefällt, abfiltriert und mit trockenem Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde sofort im Gemisch
von 50 ml Chloroform und 20 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8
eingestellt und mit 6,0 g (15 mMol) Boc-Ile-OPFP versetzt. Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel
verdampft und durch Äthylacetat ersetzt und die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäure, mit 1
n-Salzsäurelösung und mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit
einem 9 :1-Gemisch von η-Hexan und Äther behandelt,
und das so isolierte geschützte Tetrapeptid (Ri<2'=0,65)
wurde in 25 ml einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst Nach 30 Minuten Stehen wurde das
erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Tetrapeptid (Rr'4>=0,41) durch Zugabe von trockenem
Äther gefällt abfiltriert und mit trockenem Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde sofort in 70 ml
1 :1-Gemisch von Dimethylformamid und Chloroform gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8
eingestellt und mit 6,0 g (114 mMol) Boc-Tyr(Bzl)-OPFP
versetzt Nach 15 Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft und durch Äthylacetat ersetzt; 0,66 ml
Ν,Ν-Dimethylamino-äthylamin wurden der Lösung
zugegeben, und nach 15 Minuten wurde die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung
und mit Wasser ausgeschüttelt getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit trockenem
Äther behandelt und das auf diese Weise erhaltene geschützte Pentapeptid (R[<2>=0,59) in 20 ml einer 8
m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst Nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminaien
Aminosäure freie Pentapeptid-hydrochiorid (Rj(')=0,4) durch Zugabe von trockenem Äther gefällt
abfütricrt und mit 20 ml trockenem Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde sofort in 50 ml Dimethylformamid
gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt und mit 4,62 g (12 mMol) Boc-Val-OPFP
Versetzt. Nach einer Stunde wurde das Lösungsmittel 5 Verdampft und durch Chloroform ersetzt und die
Lösung mit lO%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung und schließlich mit Wasser
ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wurde mit trockenem Äther behandelt und das so
isolierte geschützte Hexapeptid (R(<J) = 0,56) in 20 ml
•hier 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst. Nach
15 Minuten wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Hexapeptid (Ri<2) = 0,47) durch Zugabe
¥on trockenem Äther gefällt, abfiltriert und mit 20 ml v?
trockenem Äther gewaschen. Das Produkt wurde sofort In 50 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit
friäthylamin auf pH =8 eingestellt und mit 5,38 g 112 mMol) Boc-Arg(NO2)-OPFP versetzt. Nach 30
Minuten würde dös Lösungsmittel VSrdäffipii und dutch Kr
Chloroform ersetzt und die Lösung mit 1 n-Salzsäure «nd mit Vvasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft.
Der Rückstand wurde mit Äthanol behandelt ■nd abfiltriert. Es wurden 9,7 g Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ile-ONB
(68% d. Th.. für das •Is Ausgangsstoff eingesetzte Boc-Pro-OPFP berechnet)
erhalten;
30 versetzt, und das Gemisch wurde unter lebhaftem
Rühren 21 Stunden lang mit durch die Lösung geleitetem Wasserstoffgas behandelt. Das Fortschreiten
der Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie verfolgt. Nach der Beendigung der Reaktion wurde
der Katalysator abfiltriert, das Filtrat -:ür TYockne
eingedampft und das als Rückstand erhaltene freie Peptid durch Behandlung mit trockenem Äthanol
isoliert. Es wurden auf diese Weise 0,48 g (Hydroxyacetyl1,
Ile8)-Angiotensin-II (64% d.Th.) erhalten, welches dann auf die oben beschriebene Weise gereinigt wurde:
R,<5> = 0,29; R^ = 0,57; R,<7>
= 0,58; EgIu(P H= 1.9): 1.03.
Aminosäure-Analyse:
Pro:0,99 (1); VaI: 1.15(1); lle:2,06(2); Tyr:0.74(l);His:0.98(l);Arg:0,95(l).
Beispiel 4 (L-ct-Hydroxypropionyl1, He8)-Angiotensin-lI
Schritt 1
Z-OAIa-Ar2(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-IIe-His(Dnp)-Pro-lIe-ONB
Schritt 2
Z-OGly-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-lIe-ONB
1,6 g (1,1 mMol) Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-lle-ONB
wurden in 8 ml einer 8 m-Löiung von Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 15 Minuten wurde das erhaltene, an der N-terminalen
Aminosäure freie Heptapeptidhvdrochlorid (Rf<4>=0,45)
durch Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert •nd mit 20 ml trockenem Äther gewaschen. Diese.,
Produkt wurde sofort in 10 ml Dimethylformamid gelöst lind die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt
lind mit 0,6 g (1,5 mMol) Z-OGIy-OPFP versetzt. Nach
30 Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft und durch Chloroform ersetzt und die Lösung mit 1
«-Salzsäure und mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet, und eingedampft. Das als Rückstand erhaltene gelchützte
Peptid wurde durch Behandlung mit trockenem Äther isoliert Es wurden auf diese Weise 1,45 g
Z-OGly-Arg(NO2)-VaI-Tyr(Bzl)-IIe-His(Dnp)-Pro-Ile-ONB
(85% d. Th.) erhalten;
Ri<2>=0,68; F. 151 -158° C.
Ri<2>=0,68; F. 151 -158° C.
Schritt 3
Das Abspalten der Schutzgruppen
1,45 g (034 mMol) Z-OGly-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-■e-His(Dnp)-Pro-ne-ONB
wurden in 5 ml Dimethylformamid gelöst, mit 3p ml 2-Mercaptoäthanol versetzt
■nd das Gemisch eine Stunde gerührt Das erhaltene
Z-OGly-Arg(NO2)-VaI-Tyr(Bzl)-ne-His-Pro-Ile-ONB
wurde durch Zugabe von trockenem Äther gefällt Nach Umfallen aus Methanol/Äther betrug die Ausbeute as
1,05 g (82% & Th.); R1(2I=O1IO. Dieses Produkt wurde in
30 ml 5:1:1-Gemisch von Methanol, Essigsäure und
Wasser gelöst, mit 0,5 g 10%iger Palladium/Aktivkohle
1,6 g (1,1 mMol) Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-lle-His(Dnp)-Pro-Ile-ONB
wurden in 8 ml einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 15
Minuten wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Heptapeptid (Ri<4)=0,45) durch
Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert und mit trockenem Äther gewaschen. Das erhaltene Produkt
wurde sofort in 10 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH =8 eingestellt und mit
0,61 g (1,5 mMol) Z-OAIa-OPFP versetzt Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft und durch
Chloroform ersetzt, und die Lösung wurde mit 1 η-Salzsäure und mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet
•nd eingedampft. Das erhaltene geschützte Peptid wuiu^ ' -ch Behandlung mit Äther isoliert Es wurden
auf diese Weise 1,4 g Z-OAIa-A^g(NO)2-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ile-ONB
(82% d. Th.) erhalten; Ri<2>=0,63; F. 164 -168° C
Schritt 2
Das Abspalten der Schutzgmppen
Das Abspalten der Schutzgmppen
1,4 g (03 mMol) Z-OAla-Arg(NO)2-Va!-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ile-ONB
wurden in 5 mi Dimethylformamid gelöst und mit 3,5 ml 2-Mercaptoäthanol versetzt
Nach einer Stunde wurde das Produkt durch Zugabe von trockenem Äther gefällt und durch Umfallen aus
Methanol/Äther gereinigt Es wurden 0,8 g Z-OAIa-Arg(NO)rVal-Tyr(Bzi)-ILe-His-Pro-Ile-ONB
(65% d. Th.) erhalten; Rj<2>=0,13; Rf<3>=0,27. Dieses geschützte
Peptid wurde dann in 10 ml 5:1:1-Gemisch von Methanol, Essigsäure und Wasser gelöst und mit 05 g
10%iger Palladium/Aktivkohle versetzt; Wasserstoffgas wurde danach unter Rühren 16 Stunden lang durch
das Gemisch geleitet Nach der Beendigung der Reaktion wurde der Katalysator abfiltriert, die Lösung
eingedampft und das Produkt durch Behandlung mit trockenem Äthanol isoliert. Es wurden auf diese Weise
0,4 g (L-Ä-Hydroxypropionyl1, Iles)-Angiotensin-II
1β
(65% d-Th.) erhalten, welches darm auf die oben
beschriebene Weise gereinigt wurde.
)=O^O; R(t<0=0,58; RjP)=0,58;
)=O^O; R(t<0=0,58; RjP)=0,58;
Aminosäure-Analyse::
Pro: 1,04(1); VaI: 0^8(1); De: 1^8 (2);
Tyr: 038 (1); His: 1,05 (1); Arg: 1,0 (i ).
Tyr: 038 (1); His: 1,05 (1); Arg: 1,0 (i ).
(Hydroxyacetyl1, Ala^Angiotensin-II
Schritt 1
Schritt 1
Boc-Arg(NOBoc-Arg(N02}-Val-Tyr(Bzl)-ne-His(Dnp)-Pro-AIa-ONB
1.21 g (4 mMol) AIa-ONB - HBr wurden in 15 ml
Chloroform gelöst, und 0,56 ml Triäthylamin und 0,76 g
(2 mMol) Boc-Pro-OPFP wurden der Lösung zugesetzt. Die Lösung wurde 20 Minuten bei Raumtemperatur
gerührt und dann mit Wasser und mit 10%iger wäßriger
Cttronensäu-iilösung ausgeschüttelt, getrocknet und
eingedampft Das als Rückstand erhaltene geschützte Dipeptid (RfO=0,64) wurde ohne Reinigung in 1 ml
einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst Nach 10 Minuten Stehen wurde die Lösung mit Äther
verdünnt und eingedampft Das als Rückstand erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Dipeptidhydrochlorid
(RfW = 0,65) wurde in 15 ml Chloroform
gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt und mit 1,76 g (3 mMol) Bos-His(Dnp)-OPFP
versetzt Nach 30 Minuten wurden 0,44 ml Ν,Ν-Dimethylamino-äthylamin
der Lösung zugegeben, welche dann nach 5 Minuten mit 10%iger wäßriger Citronensäurelc'Sung,
mit 1 n· Salzsäurelösung und schließlich mit Wasser ausgeschüttelt getrocknet und eingedanpft
wurde. Das als Rückstand erhaltene geschützte Tripeptid (Ri12'=0,57) wurde ohne Reinigung in 'ImI
einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelö it; nach
10 Minuten wurde das erhaltene, an der N-terrninalen Aminosäure freie Tripeptid (Rf(3I = 0,28) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt abfiltriert und mit Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde sofort in 20 ml
1 :1 -Gemisch von Chloroform und Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH =8
eingestellt und mit 1,58 g (4 mMol) Boc-IIe-OPFP versetzt Nach 20 Minuten wurde das Lösungsmittel
verdampft und durch Äthylacetat ersetzt; danach wurde mit 1O°/oiger wäßriger Citronensäurelösung und mit
Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit 1 : 9-Gemisch von Äther und
Hexan behandelt und abfiltriert. Das auf diese Weise erhaltene geschützte Tetrapeptid (Ri<2' = 037) wurde in
4 ml einer 8 m- Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst
und nach 15 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der
N-terminalen Aminosäure freie Jetrapeptid ^^" = 038)
durch Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert mit trockenem Äther gewaschen und sofort in 15 ml
2 : 1-Gemisch von Chloroform und Dimethylformamid gelöst. Die Lösung wurde mit Triäthylamin auf pH = 8
eingestellt und mit 1.66 g (3 mMol) Boc-Tyr(Bzl)-OPFP
versetzt Nach 15 ^Minuten wurde das Lösungsmittel verdampft, durch Äthylacetat ersetzt und die Lösung
mit 0,22 ml N.N'Dimethylamtno-äthylamin versetzt und
nach 5 Minuten mit 10%iger wäßriger Citronensäure^
sung, mit 1 n^Saizsäurelösung und zuletzt mit Wasser
ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rück* stand wurde mit Äther behandelt, abfiltriert, und mit
Äther gewaschen. Das auf diese Weise erhaltene geschützte Pentapeptid (RjP>=0,60) wurde in 4 ml emei
8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 1C
Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen
Aminosäure freie Pentapeptid (R[W=0,62) durch
Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfütriert und mil
trockenem Äther gewaschen. Das erhaltene Produki
wurde sofort in 20 ml 1 :1-Gemisch von Chloroform
und Dimethyifonnanrid gelöst und die lösung mil
Triäthylamin auf pH=8 eingestellt und mit 1,6 g (4 mMol} Boc-VaI-OPFP versetzt Nach 20 Minuten
wurde das Lösungsmittel abdestflKert, durch Äthylacetat
ersetzt und die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung und mit Wasser ausgeschüttelt
getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mil
Äther behandelt, abfiltriert und mit Äther gewaschen
Das auf diese Weise erhaltene geschützte Hexapeptid (RfP>=0,65) wurde in 8 ml einer 8 m-Lösung vor
Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 20 Minuten Stehen wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure
freie Hexapeptid (RJt4I=O1OS) durch Zugabe von
trockenem Äther gefällt abfiltriert und mit trockenem
Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde sofort in 20 ml
Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH=8 eingestellt und mit 23 g (6 mMol]
Boc-Arg(NO2)-OPFP versetzt Nach 20 Minuten wurde das Lösungsmittel abdestilliert durch Chloroform
ersetzt und die Lösung mit 10%iger wäßrigei Citronensäurelösung -lnd mit Wasser ausgeschüttelt
getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mil einem 1 ^-Gemisch von Äthylacetat und Äther
verrieben, abfiltriert und mit demselben Lösungsmittelgemisch gewaschen. Es wurden auf diese Weise 2,0 g
BiNO^tJiJ
AIa-ONB (72% d. Th.) erhalten;
= 0,70; F. 18.5-137'C
= 0,70; F. 18.5-137'C
Schritt 2
ZOGIy-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ala-ONB
1,35 g (ImMoI) BoC-Ar^NO2)- VaI-Tyr(Bzl)-IIe-His(Dnp)-Pro-AIa-ONB
wurde in 4 ml einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 15 Minuten Steher
wurde das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Heptapeptid-hydrochlorid (Rf<4'=0,63) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt abfiltriert und mil trockenem Äther gewaschen. Dieses Produkt wurde
sofort in 15 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH =8 eingestellt und mil
0,96 g (2JmMoI) Z-OGIy-OPFp versetzt Nach 20
Minuten wurde das Lösungsmittel abdestilliert und durch Chloroform ersetzt und die Lösung mit Wasser
ausgeschüttelt getrocknet und eingedampft. Der Rück-
stand wurde mit Äthanol behandelt und abfiltriert Es
wurden 1.16 g Z-OGIy-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-IIe-His(Dnp;-Pro-AIa-ONB
(83% d. Th.) erhalten;
RfW = 0,72;F. 133-135°C.
RfW = 0,72;F. 133-135°C.
Schritt 3
Das Abspalten der Schutzgruppen
Das Abspalten der Schutzgruppen
1,5 g (ImMqI) Z-ÖGiy^Arg(NÖ2)-Val·Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Ala-ONB
wurden in 5 ml Dimethylformamid gelöst und das Ganze mit 2,95 ml 2*Mercaptoätha*
nol versetzt; nach einer Stunde wurde das Produkt durch Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert
Und mit Äthanol gewaschen. Es wurden auf diese Weise
230 208/417
1,1 g Z-OGIy-ATg(NOi)-Val-Tyr(Bzl)-ne-His-Pro-
AIa-ONB (82% dTh.) erhalten: R|M=0,15; R,P)=0,40.
Dieses geschützte Peptid wurde dann in 15 ml 5:1:1-Gemisch von Methanol, Essigsäure und Wasser
gelöst, mit 0,5 g 10%iger Palladium/Aktivkohle versetzt,
und Wasserstoffgas wurde unter Rühren 24 Stunden lang durch die Lösung geleitet Das Fortschreiten der
Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie verfolgt; nach der Beendigung der Reaktion wurde der
Katalysator abfDtriert, mit 15 ml 5 :1 : !-Gemisch von
Methanol, Essigsäure und Wasser nachgewaschen und das mit der Waschflüssigkeit vereinigte Ffltrat zur
Trockne eingedampft Der Rückstand wurde mit wäßrigem Äthanol wiederholt zur Trockne eingedampft,
und schließlich wurde das als Rückstand erhaltene Produkt mit trockenem Äthanol behandelt
und abfiltriert Es wurden auf diese Weise 0,55 g (Hydroxyacetyl1, Ala8)-Angiotensin-II (80% cLTh.) erhalten,
welches dann nach der oben beschriebenen Methode gereinigt wurde.
Aminosäure- Anelyse:
Pro: 0,95(1); AIa: 1,1(1); VaI: 1,0(1);
IJe: 1,0(1); His: 1,0(1); Arg: 1,0(1);
Tyr: OS(I).
IJe: 1,0(1); His: 1,0(1); Arg: 1,0(1);
Tyr: OS(I).
(Hydroxyacetyl1, Th ifMefJ-Angiotensin-II
Schritt 1
Schritt 1
Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Thr(Me)-OMe
0,69 g (3 mMol) Thr(Me)-OMe ■ HBr wurden in 30 ml
Chloroform gelöst; dann wurden der Lösung 0,42 ml Triäthylamin und 1,7 g (4,5 mMoi) Boc-Pro-OPFP
zugesetzt Nach zwei Stunden wurden 033 ml N1N-Diäthylamino-äthylamin
zugegeben, und nach weiteren 15 Minuten wurde das Lösungsmittel abdestilliert und
durch Äthylacetat ersetzt und die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit Wasser und schließlich
mit 5%iger wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung ausgeschüttelt getrocknet und eingedampft Das
als Rückstand erhaltene geschützte Dipeptid (RIi1I=OJo) wurde ohne Reinigung in 2 ml einer 8
m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst, 15 Minuten stehengelassen, dann mit Äther verdünnt und eingedampft
Das als Rückstand erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Dipeptid (Ri<3) = 0,18) wurde in
20 ml Chloroform gelöst und die Lösung mit Triäthylamin
auf pH = 8 eingestelllt und mit 2,6 g (4,5 mMol)
Boc-His(Dnp)-OPFP versetzt Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden gerührt; dann wurden
0,22 ml Ν,Ν-Dimethylamino-äthylamin zugegeben, und
nach 15 Minuten wurde das Gemisch mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung
und zuletzt mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Das als Rückstand erhaltene geschützte
Tripeptid (Ri<" = 0,5) wurde ohne Reinigung in 4 ml
einer 8 nvLösung von Salzsäure in Dioxan gelöst und nach 15 Minuten das erhaltene, an der N-terminaien
Aminosäure freie Tripeptid (Ri<3)=0,3) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt, abfiitriert, mit trockenem Äther gewaschen und sofort in 20 ml 1 :1-Gemisch von
Chloroform Und Dimethylformamid gelöst Die Lösung wurde mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt und mit
1,6 g (4 mMol) Boc-De-OPFP versetzt Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel abdestilliert und durch
Äthylacetat ersetzt sowie die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung
und zuletzt mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit 1 :9-Gemisch
von Äther und η-Hexan behandelt und abfiltriert. Das auf diese Weise isolierte geschützte Tetrapeptid
(RjP)=0,64) wurde in 7 ml einer 8 m-Lösung von
ίο Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 15 Minuten wurde
das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Tetrapeptid (R1W=O^T) durch Zugabe von trockenem
Äther gefällt, abfiltriert und sofort in 20 ml 1 :1-Gemisch
von Chloroform und Dimethylformamid gelöst Die Lösung wurde mit Triäthylamin auf pH=8
eingestellt und mit 1,6 g (3 mMol) Boc-Tyr(Bzl)-OPFP
versetzt Nach 30 Minuten wurde das Lösungsmittel abdestilliert, durch Äthylacetat ersetzt, und dann
wurden 022 ml Ν,Ν-DimethyIamino-äthyIamin der
Lösung zugegeben. Nach 15 Minuten wurde die Lösung
mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung und zuletzt mit Wasser ausgeschüttelt
getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit Äther behandelt und abfiltriert Fs wurden auf diese
Weise 0,4 g geschütztes Pentapeptid (RfW = 0,63) erhalten;
dieses Produkt wurde in 1 ml einer 8 m-Lösung von Salzsäure in Dioxan gelöst und nach 15 Minuten wurde
das erhaltene, an der N-terminalen Aminosäure freie Pentapeptid (Ri<4>
= 0,47) durch Zugabe von trockenem
Äther gefällt abfiltriert und mit trockenem Äther gewaschen. Das Produkt wurde sofort in 10 ml
Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin auf pH = 8 eingestellt und mit 0,4 g (ImMoI)
Boc-Val-OPFP versetzt Nach einer Stunde wurde das Lösungsmittel abdestilliert und durch Chloroform
ersetzt und die Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung und
zuletzt mit Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit Äther behandelt
und abfiitriert. Das auf diese Weise erhaltene geschützte Hexapeptid (Ri<2!=0,65) wurde in 1,5 ml einer 8
m-Lösung ve Salzsäure in Dioxan gelöst; nach 15 Minut.i wurde das erhaltene, an der N-terminalen
Aminosäure freie Hexapeptid (Ri*4' = 0,48) durch Zugabe
von trockenem Äther gefällt abfiitriert und mit Äther gewaschen und sofort in 10 ml Dimethylformamid
gelöst Die Lösung wurde mit Triathylamin auf pH =8
eingestellt und mit 0.45 g (ImMoI) Boc Arg(NO>)-OPFP
versetzt Nach einer Stunde wurde das Losungsso mittel abdestilliert und durch Äthylace üt ersetzt und die
Lösung mit 10%iger wäßriger Citronensäurelösung, mit 1 n-Salzsäurelösung und zuletzt mit Wasser ausgeschüttelt
getrocknet -ind eingedampft. Der Rückstand wurde
mit einem 9: !Gemisch von Äther und Äthanol
η behandelt und abfiltriert. Es wurden auf diese Weise
0.45 g Boc-Arg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ile-His(Dnp)-Pro-Thr(Me)-OMe(1U%d.Th.)
erhalten;
. l99-203°C(Zers.).
. l99-203°C(Zers.).
Schritt 2
Z-OGIy-Arg(NO2>Val-Tyr(Bzl).Ile-His(Dnp>
Thr(Me>OMe
Thr(Me>OMe
0,45 g (034 mMol) Βο^(;)^(
His(Dnp)'Pro-Thr(Me)-ÖMe wurden in 2 ml einer 8
m-Lösüng von Salzsäure in Dioxan gelöst, und nach 15
Minuten wurde das erhaltene, an der Nnerminalen Aminosäure freie Hepfapeptid (R(W=0,35) durch
Zugabe von trockenem Äther gefällt, abfiltriert und mit
Äther gewaschen. Das Produkt wurde sofort in 10 ml Dimethylformamid gelöst und die Lösung mit Triäthylamin
auf pH=8 eingestellt und mit 0,4 g (ImMoI)
Z-OGIy-OPFP versetzt Nach einer Stunde wurde das Reaktionsgemisch mit 30 ml Chloroform verdünnt, mit
Wasser ausgeschüttelt, getrocknet und eingedampft Der Rückstand wurde mit einem 9 :1-Gemisch von
Äther und Äthanol behandelt und abfiltriert Es wurden auf diese Weise 0,45 g Z-OGIy-ATg(NO2)-Val-Tyr(Bzl)-Ue-His(Dnp)-Pro-Thr(Me)-OMe
(93% d. Th.) erhalten;
RF=0,44;F.158-162°C
RF=0,44;F.158-162°C
Schritt 3
Das Abspalten der Schutzgruppen
Das Abspalten der Schutzgruppen
0,45 g (0,31 mMol) Z-OGIy-ATg(NO2)-Val-Tyr(BzI)-Ile-HIs(Dnp)-Pro-Thr(Me)-OMe
wurden in 1,5 ml Dimethylformamid jrelöst, und 1 ml 2-MercaptoäthanoI
wurde der Lösung zugegeben. Nach einer Stunde wurde das Produkt durch Zugabe von trockenem Äther gefällt,
in Methanol gelöst mit wenig Aktivkohle behandelt abfiltriert und das Filtrat eingedampft Der Rückstand
wurde mit Äther behandelt und abfiltriert Als Rückstand wurden 038 g Z-OGly-Arg(NO2)-VaI-Tyr(BzI)-IIe-His-Pro-Thr(Me)-OMe
(S8% d.Th.) erhalten; Ri<3>=0,16; R(W=O^. Dieses Produkt wurde in 5 ml
Dioxan suspendiert und mit 1,2 ml 1 n-Natriumhydroxydlösung
versetzt Nach einer Stunde wurde die Lösung durch die Zugabe von 1 η-Salzsäure auf pH=3
eingestellt und der erhaltene Niederschlag abfiltriert und in einem 3:1-Gemisch von Chloroform und
Dimethylformamid gelöst Die Lösung wurde getrocknet und eingedampft und der Rückrand mit Äther
behandelt Es wurden 0,26 g an der C-terminalen Aminosäure freies Peptid (70% d.Th.) erhalten;
R1W=0,25. Dieses Produkt wurde in 10 ml 5 :1 :1-Gemisch
von Methanol, Essigsäure und Wasser gelöst, die Lösung mit 0,1 g 10%iger Palladium/Aktivkohle versetzt,
und Wasserstoffgas wurde unter Rühren 16 Stunden lang durch die Lösung geleitet Das Fortschreiten
der Reaktion wurde durch Dünnschichtchromatographie verfolgt; nach der Beendigung der Reaktion
wurde der Katalysator abfiltriert und die Lösung zur Trockne eingedampft Der Rückstand wurde mit
wäßrigem Äthanol behandelt und eingedampft, und diese Operation wurde mehrmals wiederholt Es wurden
auf diese Weise 0,16 g [Hydroxyacetyl1, Thr(Me)8]-Angiotensin-II
erhalten, welches nach oben beschriebener Methode gereinigt wurde;
EG,u(pH = l,9):0,98.
Aminosäure-Analyse:
Thr:0,6(l);Pro: 1,0(1); VaI: 1,0(1);
lie: 1,02 (l);Tyr: 0,85 (1); His: 1,0 (1);
Arg: 0^6(1).
lie: 1,02 (l);Tyr: 0,85 (1); His: 1,0 (1);
Arg: 0^6(1).
Zusammenfassung
Neue. angiotensin-II-antagonistisch wirkende Peptide
der allgemeinen Formel I
X-Arg- Val-Tyr-Ile-His-Pro-Y
worin X den Rest einer in der α-Stellung eine Hydroxylgruppe enthaltende aliphatische Carbonsäure,
besonders eine Hydroxyacetyl- oder a-Hydroxypropionylgruppe, und Y den Rest einer aliphatischen
Ä-Aminocarbonsäure, besonders eine Leucyl-, Isoleucyl-,
Alanyl- oder Threonylgruppe, bedeuten. Die neuen Peptide haben blutdrucksenkende Wirkung; sie können
sowohl i. v. als aucli sübcutan verabreicht werden. Zur
Herstellung der neuen Peptide werden die entsprechenden geschützten Heptapeptide mit einem reaktionsfähigen
Derivat einer entsprechenden N-geschützten «-Aminooxycarbonsäure acyliert und dann das erhaltene,
in der 1-Stellung einen «-Aminooxycarbonsäurerest enthaltende Peptid einer katalytischen Hydrogenolyse
unterworfen, wobei mit der Abspaltung der auf diese Weise entfernbaren Schutzgruppen auch die Aminogruppe
des in der 1-Stellung befindlichen a-Aminooxycarbonylsäurerestes
abgespalten wird.
Claims (8)
1. Heptapeptide der allgemeinen Formel I
X-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Y
X-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Y
worin X eine Hydroxyacetyl- oder L-a-Hydroxypropionylgruppe
und Y eine Leucyl-, Isoleucyl-, Alanyl- oder o-Methylthreonylgruppe bedeuten, und deren
SäureaddiöonssaJze.
2. Hydroxyacetyl-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Leu-OH.
3. L-o.-Hydroxypropionyl-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Leu-OH.
4.Hydroxyacetyl-Arg-Val-Tyr-I]e-His-Pro-Ile-OH.
5. L-a-Hydroxypropionyl-Arg-Val-Tyr-IIe-His-Pro-I!e-OH.
6. Hydroxyacetyl-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Ala-OH.
7. Hydroxyacetyl-Arg-Val-Tyr-IIe-His-Pro-Thr(Me)-OH.
8. Verfahren zur Herstellung der Heptapeptide gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß
man in an sich bekannter Weise ein Heptapeptid-Derivat der allgemeinen Formel II
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU77RI641A HU177134B (en) | 1977-07-18 | 1977-07-18 | Process for preparing angiotensin ii analogues containing alpha-hydroxy-acid in position 1 with angiotensin ii antagonist activity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2831271A1 DE2831271A1 (de) | 1979-03-01 |
| DE2831271C2 true DE2831271C2 (de) | 1982-02-25 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2831271A Expired DE2831271C2 (de) | 1977-07-18 | 1978-07-17 | Heptapeptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Heptapeptide enthaltende, angiotensin-II-antagonistisch wirkende Arzneimittel |
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| JP (1) | JPS5831337B2 (de) |
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| HU181008B (en) * | 1980-01-18 | 1983-05-30 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing angiotenzin-ii analogues of antagonistic activity containing sarcosyl-group at the 1-positon,and an alpha-hydroxy-carboxylic acid at the 8-position |
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| HU191961B (en) * | 1984-08-02 | 1987-04-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing 1,5 and 8 substituted peptides of angiotenzin-ii antagonistic activity |
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