JPS5831337B2 - アンジオテンシン２類似体及びその製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアンジオテンシン■拮抗作用を有する新規なア
ンジオテンシン■類似体並びにその製法に関する。

この新規なアンジオテンシン■ペプチドは一般式（Ｉ） （式中、Ｘはヒドロキシアセチル基又はα−ヒドロキシ
プロピオニル基であり、そして、Ｙはロイシル基、イン
ロイシル基、アラニル基又はメチルスレオニル基である
）によって表わされる。

脂肪族α−ヒドロキシカルボン酸から誘導され、Ｘによ
って表わされる基の好ましい代表例はヒドロキシアセチ
ル及びα−ヒドロキシプロピオニル基であり、他方Ｙは
ロイシル、インロイシル、アラニルもしくはスレオニル
基を好適に表わす。

一般式（Ｉ）のペプチドの酸付加塩もまた本発明の範囲
内である。

アンジオテンシン■は血圧上昇作用をもつオクタペプチ
ドである。

アンジオテンシンＩは生体内でレニンと呼ばれる腎臓で
遊離された酵素によって、肝臓が生成したα−グロブリ
ンから製造される。

生体内では、この化合物がアンジオテンシン■に転換さ
れる。

最初のアンジオテンシン■類似体は１９７０年にはじめ
て報告された。

この化合物が生体内及び試験管内試験でも同じようにア
ンジオテンシン■の特異的競合拮抗作用を示すことが見
出された（Ｇ、 Ｒ，Ｍａｒｓｈａｌｌ 外二 Ｐｒｏ
ｃ、 Ｎａｔｌ 、Ａｃａｄ、 Ｓｅｉ 。

ＵＳＡ６７．１６２４（１９７０）：Ｐ、Ａ。

Ｋｈａｉｒａｌｌａｈ外： Ｊ、Ｍｅｄ−Ｃｈｅｍ、１
３．１８１（１９７０））。

この知見があまねく興味を引起こし、そして沢山の実験
を促して、新規なアンジオテンシン■の合成及び観察を
行わしめるに至った。

アンジオテンシン■類似体はアンジオテンシン■拮抗作
用を有し、かつレニンによる高血圧症の診断及び治療に
さえ使用できる。

既にこの研究業績のごくはじめに、脂肪族側鎖を有する
ア□ノ酸で８−Ｐｈｅ基を置換した類似体がこの目的に
は最も卓越した化合物であることが判明した。

アンジオテンシン■分子の構造上のこの変化は、即ち、
実際本来作用の消失及び強力な拮抗作用の出現を意味す
る（ Ｄ 、Ｇａｇｎｏｎ外： Ｂｒ、 Ｊ、Ｐｈａｒ
ｍａｃｏｌ、、４３．４０９（１９７１）：Ｄ、Ｔ、Ｐ
ａ１ｓ外：Ｃ１ｒｃ、 Ｒｅｓ、、２９．６６４（１９
７１））。

８位に実施した変換の他１−Ａｓｐ基をＳａｒ基で置換
するときこの拮抗作用はかなり高められる（Ｄ、Ｔ。

Ｐａ１ｓ外： Ｃ１ｒｃ、Ｒｅｓ、 ２９．６７３（１
９７１））。

こうして製造された（Ｓａｒ’、Ａｌａ８） −アン
ジオテンシン■は既に市販されている。

この化合物の有利性は生体内での酵素分解の低下及び受
容体部位に対する強い親和性にある。

拮抗作用をもつアンジオテンシン■類似体がレニンによ
る高血圧症の診断及び、何例かには治療に適用できると
いう説（Ｄ 、 Ｇａｎｔｅｎ及びＦ。

Ｇｒｏｓｓ ： Ｍｅｄ、Ｋ１１ｎ、７１．２０４３
（１９７６）；Ｊ、 Ｌ、Ｍａｒｘ ： ５ｃｉｅｎｃ
ｅ １９４．８２１（１９７６）：Ｐ 、 Ｎｅｅｄｌ
ｅｍａｎ及びＧ、ＲｌＭａｒｓｈａｌｌ ： Ｆｅｄ。

Ｐｒｏｃ、３５．２４８６ （１９７６））は臨床試験
によって証明された（ＨｏＲ、Ｂｒｕｎｎｅｒ外： Ｌ
ａｎｃｅｔ。

１０４５（１９７３）：Ａ、Ｊ、Ｍ、Ｄｏｎｋｅｒ外：
Ｌａｎｃｅｔ、１５３５ （１９７４） ： Ｔ、０ｇ
１ｈａｒａ外：Ｌａｎｃｅｔ１２１９ （１９７４）
： Ｊ、Ｈ，Ｌａｒａｇｈ外：ＮｅｗＥｎｇｌ、 Ｊ、
Ｍｅｄｏ、２９２．６９５（１９７５）：Ｗ、 Ａ、
Ｐｅｔｔｉｎｇｅｒ外： Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ、Ｊ、 Ｍ
ｅｄ６．２９２．１２１４（１９７５）；Ｄ、Ｈ，Ｐ。

５ｔｒｅｅｔｅｎ外： Ｃ１ｒｃ、Ｒｅｓ、 ３６．５
ｕｐｐ１．１．１２５ （１９７５） ： Ｈ，Ｒ，Ｂ
ｒｕｎｎｅｒ及びＨ８Ｇａｖｒａｓ ： Ｓｃｈｗｅｉ
ｔｚ １ｍｅｄ、Ｗｓｃｈｒ、１０６．１７９１（１９
７６）。

現在までに製造されたアンジオテンシン■類似体の構造
及び生物学的活性の比較は競合−拮抗作用の解釈に極め
て重要な情報を提供した（Ｍ、Ｃ１Ｋｈｏｓｌａ外：Ｈ
ａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ” ３７巻、Ｉ 、 Ｈ，Ｐａ
ｇｅ及びＦ’、ＨｌＢｕｍｐｕｓ ｅｄｓ、１９７４
： Ｇ、Ｒ，Ｍａｒｓｈａｌｌ ： Ｆｅｄ。

Ｐｒｏｃ、、３５．２４９４ （１９７６））。

不所望な副作用のない生物学的半減期の長い新規な拮抗
薬を製造することが現在の研究作業の中心にある（ Ｍ
、Ｃ６Ｋｈｏｓｌａ外： Ｊ、 Ｍｅｄ、 Ｃｈｅｍ
、、１９．２４４（１９７６）；同、２０，２５３（１
９７７））。

さて、アンジオテンシン■の分子中の８−フェニルアラ
ニン基を脂肪族α−アミノ酸基で置換し、同時に１−位
に脂肪族α−オキシ酸基を付けたとき、新規なアンジオ
テンシン■競合拮抗薬が得られ、これは、皮下投与の場
合でさえ、生体内試験においてアンジオテンシンＨによ
って誘発された※※高血圧症をかなり低下させることが
判った。

本発明によれば、一般式（Ｉ） ｒｇ Ｖａｌ −Ｔｙｒ −Ｉ １ｅ Ｈｉ ｓ −Ｐｒｏ −Ｙ （Ｉ） （式中、Ｘ及びＹは上記定義の通りである）の化合物は
、一般式（ｎ） （式中、Ｇはｐ−ニトロベンジル基又はメチル基であり
、そしてＹは上記の定義通りである）の反応性へブタペ
プチド誘導体を、一般式（ト）＊ （式中、Ｘ′はア□ノオキシアセチル基又はα−アミノ
オキシプロピオニル基である）の反応性アミノオキシ酸
誘導体と反応させ、得られた一般式（式中、Ｇ、Ｘ’及
びＹは上記定義の通りである）の化合物から保護基Ｄｎ
ｐを開裂し、そして引続いて、その他の側鎖及び末端保
護基を接触水添により開裂し、そして所望ならば、得ら
れた一般式（Ｉ）の化合物をその酸付加塩に転換するこ
とによって製造される。

保護基Ｄｎｐは２−メルカプトエタノールで開裂するこ
とが好ましく、他方残存している側鎖及び末端保護基は
接触水添によって除去される。

このことは、又、保護基Ｄｎｐを別として全ての側鎖及
び末端保護基がたった一回の工程で除去できることを意
味する。

Ｎ−末端α−アミノオキシ酸からアミン基をアンモニア
の形で除去する結果、αオキシ酸が得られる。

α−オキシ酸基のこの除去方法が文献に報告されるのは
はじめてである。

本発明の化合物を台底する際出発原料として用いた一般
式（ｎ）の反応性へブタペプチド誘導体はヘフチドの化
学で知られた任意の方法によって製造できる。

適当な方法はハンガリー特許明細書第１６８４３１号に
記載されている。

この方法によれば、結合後保護基を除く際に行われるア
シドリシスの条件下で安定な基によって側鎖の官能基は
保護される。

本発明による製法の好ましい態様に従えば、Ｃ末端アミ
ノ酸のカルボキシル基を一時的に保護するために、ｐ−
ニトロベンジル基（以後、ＮＢで表わす）を用い、アル
ギニンのグアニジノ基はニトロ基によって保護され、他
方チロシン（ｔｉｒｏｚｉｎ ）のヒドロキシル基はベ
ンジル基（以後、Ｂｚｌで表わす）で保護され、そして
ヒスチジンのイミダゾロ環の保護基はジニトロフェニル
基（以後、Ｄｎｐで表わす）である。

これらの保護基はすべて温和な酸条件下で安定であり、
従ってＮ−末端ｔ−ブトキシカルボニル基（以後、Ｂｏ
ｃで表わす）はこれらの基を開裂する危険もなく除去す
ることができる。

保護基のこの特殊な組合せは最初にジニトロフェニル基
の除去を、そして次にただ一つの反応工程中、接触水添
による一般式（Ｉ）の化合物の製造を可能ならしめる。

一般式（Ｉ）の化合物は公知方法、好ましくはカルボキ
シメチルセルロースイオン交換クロマトグラフィーによ
って好適に精製できる。

この技法の結果として、化合物は様々な塩もしくは複合
体に容易に転換できる凍結乾燥粉末剤として一般的には
得られる。

一般式（Ｉ）の化合物の拮抗作用は雄ネコ（ｔｏｍｃａ
ｔ ）につＬ・て試験した。

この血圧は頚動脈において測った。

本試験はハイパーテンシン（Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｎ
（ＣＩＢＡ））注入液を外側の大腿静脈に０．５μＰ／
ｋｇ／分の速度で導入することによつて実施した。

血圧上昇が安定化したとき、供試化合物及びサララシン
（５ａｒａｌａｓｉｎ ）の生理的もしくは担体含有水
溶液を一回、静脈内もしくは皮下に投与し、そして血圧
の低下を測定した。

表１では、供試化合物の静脈内投与の影響下で※※の動
脈血圧の低下が説明される。

比較にはサララシンを用いた。

表１に示したデータは６回の実験の結果の平均を計算し
て得た。

誤差限界は主要値の分散範囲を示す。

上記表に記載の結果から、脂肪族α−オキシ酸から誘導
された基で１位を置換したアンジオテンシン■類似体釜
々は有意な血圧降下作用をもつことがはっきり理解でき
よう。

この活性の程度は用いた用量に比例する。

皮下投与した場合においても試験を行った。

この投与方法でアンジオテンシン■もしくはその類斗七
似体を服用する方法は今までの刊行物に公表されていな
かったことに留意すべきである。

皮下投与用の供試化合物を含む生理塩類溶液はカルボキ
シメチルセルロース及びゼラチンそれぞれで補った。

５回の別々の試験の平均に対応する結果は下記表２に示
す。

誤差限界は主要値に関するものである。上記結果によれ
ば、皮下投与した本発明の新規化合物は故意に誘発され
た高血圧を有意に、投与後６０分でさえも低下させる。

本発明によるペプチド及び医薬として許容され得るそれ
らの塩は慣用の医薬組成物の形態で薬理目的に用いられ
る。

これらの医薬組成物は本発明による化合物を経口もしく
は非経口投与に適した有機もしくは無機担体と混合して
含む。

かくして医薬組成物はペプチドと反応しない様々な不活
性化合物、例えば炭化水素を担体として使用することが
できる固体の凍結乾燥物質として剤型化してもよい。

前記医薬組成物は希もしくは濃懸濁液もしくは乳液とし
て製剤化されるとき、色々な保存及び安定化剤も含む。

本発明による化合物を含む医薬組成物は腎性高血圧症の
鑑別診断並びに腎血圧の上昇に起因する各症状の処置に
使用してもよい。

本発明の詳細は以下の非限定例で説明されよう。

これらの例に用いられる略語は文献（Ｊ、Ｂｉｏｌ。

Ｃｈｅｍ 、２４７．９７７（１９７２））で通常用い
られている略語に当たる。

α−アミノオキシ酸は問題のアミノ酸に相当する記号の
前に”Ｏｊｌという一語を置くことによって指摘される
。

従ってＯＧ ｌｙはアミノオキシ酢酸を示し、０Ａｌａ
はα−アミノオキシプロピオン酸を表わす。

更に略語としてＰＥＰ＝ペンタフルオロフェニル及びＺ
−カルボメトキシが挙げられる。

本発明による方法では、Ｂ面ｈｉ Ｒｏｔａｖａｐｏｒ
装置中で必らず蒸発を行った。

融点はＤｒ、 Ｔｏｔｔｏｌｉ装置（ＢＧｃｈｉ製）で
測った。

薄層クロマトグラフィーはＫｉｅｓｅ１ｇｅｌ Ｇ ｎ
ａｃｈ ５ｔａｈｌ ”のシリカゲルプレート（Ｅ、Ｍ
ｅｒｃｈ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ ）上で実施した。

クロマトグラムは下記の溶媒混液中で展開した。

１、酢酸エチル：（ピリジン：酢酸：水の２０：６：１
１混液）＝９５：５ ２、酢酸エチル：（ピリジン：酢酸：水の２０：６：１
１の混液）＝９０：１０ ３、酢酸エチル：（ピリジン：酢酸：水の２０：６：１
１の混液）＝８０：２０ ４、酢酸エチル：（ピリジン：酢酸：水の２０：６：１
１の混液）＝７０：３０ ５、ｎ−ブタノール：酢酸：水の４：１：５の混液 ６、ｎ−ブタノール：酢酸：ピリジン：水の３０：６
： ２０ ： ２４の混液 ７、ｎ−ブタノール：酢酸エチル：酢酸：水の１：１：
１：１の混液 下記例中、Ｒｆ値を示すとき、上記溶媒系の番号を引用
する。

ＬＭＩＭ中間−電圧水平装置（ｍｅｄｉｕｍ −ｖｏｌ
ｔａｇｅ ｈｏｒｉｚｏｎｔａｌ ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ
）中、ＭＮ２１４Ｆ紙上、グルタミン酸の外、ｐＨ＝
１．９の緩衝液を用いて沢紙電気泳動法を行った。

電圧：４５０Ｖ 時間：３時間 一部二ンヒドリン溶液を用い、一部０−）ルイジンーＫ
Ｊ溶液で実施される慣用の塩素化技法を用いて薄層クロ
マトグラムを展開した。

目的生成物は下記のように精製した： 遊離ペプチド０．５ｒをしかる後に０．０１Ｎ酢酸アン
モニウム緩衝液４ｍｌに溶かした。

得られた溶液を０．５７のカルボキシメチルセルロース
（ＣＭＣ５２）カラム上でオーバーレイした。

このカラムは予め上記緩衝剤溶液で平衡状態にもってい
った。

０．０１Ｍ酢酸アンモニウム溶液１．５１及び０．４
Ｍ酢酸アンモニウム溶液１．５１は傾斜攪拌器で混合し
、そして傾斜溶出を実施した。

流出速度を２５ｍ１／時に調節し、そして１０７７１１
留分を集めた。

このカラムを出る溶出液はＬＫＢＵｖｉｃｏｒｄ−ＩＩ
装置によって連続的に記録され、得られた曲線をベース
にしてＬｅｙｂｏｌｄ−Ｈｅｒｅｕｓ凍結乾燥装置中で
主要留分を凍結乾燥した。

かくして製造された凍結乾燥物質は同じ傾斜溶出技法を
用いて再びクロマトグラフィーにかけ、そして得られた
溶出液を再び凍結乾燥した。

例１ （ヒドロキシアセチル１、Ｌｅｕ８）−アンジオテンシ
ン■ 工程Ｉ Ｂｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ
−（Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐ
ｒｏ −Ｌｅｕ −０ＮＢりｏロホルム５０ｍ１中のＬ
ｅｕ −０ＮＢ 、 ＨＢｒ４．２ｆ（１２ミリモル）
の溶液にトリエチルア□ンｌ、６８ｍ１及びＢｏｃ −
Ｐｒｏ −０ＰＦＰ ３．８１ ？（１０ミリモル）
を加えた。

この反応混液を室温で２０分間攪拌し、水で振盪し、次
に１０％クエン酸水溶液で振盪し、そして乾燥した。

このクロロホルム溶液を蒸発した。

得られた保護ジペプチド（Ｒ７＝０．８）をジオキサン
中の８Ｍ塩酸溶液２０Ｔｒｔｌに溶かした。

１０分後に、この溶液を乾燥エーテルで希釈し、そして
蒸発させた。

かくして製造されたジペプチドクロロヒドレート（Ｒ１
−０，５６）をクロロホルム５０ｍ１に溶かし、この溶
液のｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そしてＢ
ｏｃ −Ｈｌｓ（Ｄｎｐ ） ０ＰＦＰ ８．８ ？
（１５ミリモル）を加えた。

この溶液のｐＨを８の値に注意深く保ちながら、この溶
液を室温で１時間攪拌した。

しかる後、Ｎ−Ｎ−ジメチルーア□ノエチルアミン１．
６５ｍ１を前記溶液に加えて活性エステルの過剰量な除
き、そして１０分後に、この反応混液を１０％クエン酸
水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び５％炭酸水素ナトリウム水
溶液で振盪した。

乾燥してこの溶液を蒸発させた。

残留している保護トリペプチド（Ｒ４＝０．６５）をジ
オキサン中の塩酸の８Ｍ溶液２５ｒｒＬｌに溶かし、そ
して１５分後、得られたトリペプチド（Ｒ７＝０．４７
）は乾燥エーテルを添加することによって沈殿させた。

この沈殿を沢過し、そして直ちにクロロホルム５０ｍ１
とジメチルホルムアミド２０ｍ１との混液中に溶かした
。

このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そしてＢ
ｏｃ −１１ｅ −０ＰＦＰ ６．０ ？＜ １５ミリ
モル）を加えた。

３０分後、この反応混液を蒸発乾固して、この残渣を酢
酸エチル１００ｍ１にとかした。

この酢酸エチル溶液をクエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液
及び最後に水で抽出した。

乾燥すると、酢酸エチルを蒸発によって除去し、そして
との残渣をエーテルとｎ−ヘキサンとの１：９混液で処
理した。

得られた保護トリペプチド＜Ｒ４＝０．６４）を単離し
、そしてジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液２５ｍ１に溶かし
た。

１５分後、乾燥エーテルでテトラペプチド（Ｒ，？＝０
．４０）と沈殿させ、そして次に濾過した。

得られたテトラペプチドクロロヒトレートをクロロホル
ム５Ｑｍｌ及びジメチルホルムアミド３０ｍ１の混液に
とかし、そしてこノ溶液ＯｐＨ値をトリエチルアミンで
８に調節した。

Ｂｏｃ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −０ＰＦＰ ６．０
？ （１１，５ミリモル）を加えた。

１５分後、この溶液を蒸発し、そしてこの残渣を酢酸エ
チルに溶かし、そしてＮ−Ｎ−ジメチルーアミノエチル
ア□ン０．６６ｍ１を添加した。

１０分間放置した後、この酢酸エチル溶液を１０％クエ
ン酸水溶液で、ＩＮ塩酸水溶液で、そして最後に水で振
盪し、乾燥し、そして蒸発させた。

この蒸発残渣を乾燥エーテルで処理し、そして保護した
ペンタペプチド（Ｒ＃＝０．８）を沢過して単離した。

この生成物をジオキサン中の８Ｎ塩酸溶液２５ｍ１にと
かし、そして１５分後に、得られたペンタペプチド（Ｒ
４＝０．８）を乾燥エーテルで沈殿させ、濾過し、そし
てエーテルで洗った。

次にこの沈殿物を直ちにジメチルホルムアミド５０ｒｎ
ｌにとかし、ｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、
そしてＢｏｃ −ＶａｌＯＰＦＰ ４．２ ′？（１１
モル）を添加した。

室温で１時間攪拌した後、この溶液を蒸発させ、との残
渣をクロロホルムにとかし、そして１０％クエン酸水溶
液次いでＩＮ塩酸水溶液で、そして最後に水で振盪した
。

この溶液を乾燥し、蒸発し、そしてこの残渣をエーテル
で処理した。

得られた保護へキサペプチド（Ｒ７＝０．８２）をｔ過
単離した。

この生成物をジオキサン中の８Ｎ塩酸溶液２５ｒｒＬｌ
にとかし、そして１５分後、ヘキサペプチド（Ｒ７＝０
．５５）を乾燥エーテルで沈殿させ、濾過し、そしてエ
ーテルで洗った。

このヘキサペプチドをジメチルホルムアミド５０ｍ１に
直ちに溶かし、ｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し
、そしてＢｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −０ＰＦＰ
４．８ ？ （１０ミリモル）を加えた。

３０分後に溶媒をクロロホルムにかえ、そしてこの溶液
をＩＮ塩酸水溶液で、そして次に水で振盪した。

この溶液を乾燥腰蒸発させ、そしてこの残渣をエタノー
ルで処理した。

保護へブタペプチド（Ｒ７＝０．８ ）を単離すると出
発Ｂｏｃ−Ｐｒｏｃ −０ＰＦＰについて５３％に当た
る７．６ｔ？を生成した。

融点：１９２−１９５℃ ■程２ Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （Ｎｏ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ｌｅｕ −０ＮＢＢｏｃ −Ａｒｇ（Ｎ
Ｏ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ
−Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐｒｏ −Ｌｅｕ −０
ＮＢ １．８９（１，２５ミリモル）をジオキサン中の
８Ｍ塩酸溶液１０ｍ１に溶かした。

１５分後、遊離のへブタペプチド クロロヒトレートを
乾燥エーテルで沈殿させ、沢過しそして乾燥エーテル（
Ｒ１−０，３６）で洗浄した。

この生成物を直ちにジメチルホルムアミド２０ｍ１中に
溶かし、このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、
そして０．９？（２，３ミリモル）のＺ−ＯＧＩｙ−Ｏ
ＰＦＰを加エタ。

１５分後、溶媒をクロロホルムで置きかえて、この溶液
をＩＮ塩酸水溶液及び水で振盪した。

乾燥及び蒸発後、この残渣をエタノール及びエーテルの
２：８混液で処理し、この生成物を１過単離した。

目的化合物１．６Ｐ（８５％）を得た。

融点：１６５−１７４℃（Ｒ７＝０．８０）工程３ 保護基の除去 Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ｌｅｕ −０ＮＢ １．６ｙ（ｉ、ｏ
□リモル）をジメチルホルムアミド５ｍｌにとかし、そ
して２−メルカプトエタノール３．５ｍｌを加えた。

この溶液を室温で１時間攪拌した。その後、乾燥エーテ
ルを前記混合物に添加して沈殿した物質を１過し、そし
てエーテルｌｏｍｌ宛で２回洗浄し、そしてメタノール
−エーテルから沈殿することによって精製した。

Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ −ＨｌｓＰｒｏ −
Ｌｅｕ −０ＮＢ １．３ ？ （９５％）を得た。

Ｒｆ＝ ０．２ 上で得たペプチドをメタノール、酢酸及び水の５：１：
１混液３０ｍ１にとかした。

木炭担持１０％パラジウム触媒０．５１を加え、そして
激しく溶液を攪拌しながら２０時間水素を泡立てて通し
た。

この反応の進行は薄層クロマトグラフィーで監視した。

この反応の終了時に触媒を１過し、メタノール、酢酸及
び水の５：１：１の混液２０１ｒＬｌで洗い、そしてこ
の溶液を蒸発乾固した。

この残渣をエタノールと水の混液にとかして酢酸を除く
りめに蒸発させ、これを倒産も行った。

次にこのペプチドを乾燥エタノールで処理することによ
って単離し、そして１過した。

（ヒドロキシアセチル１、Ｌｅｕ ８） −アンジオ
テンシンｌｌｌ０．８？（６７％）を得た。

上記のように精製を行った。Ｒｆ＝０．４１ ；Ｒｆ＝
０．５９ ：Ｒｆ＝０．６０ ：ＥＧＩｕ（ｐＨ＝１．
９ ） ＝０．９８アミノ酸分析： Ｐｒｏ ： １．
０（１） ： Ｖａｌ ： １．０１（１）：１１ｅ
： １．０２（１）：Ａｒｇ： １．０］［）：Ｈｉｓ
ｌ（１）：Ｈｉｓ ： １．０（１）：Ｌｅｕ ： １
．０２（１） ： Ｔｙｒ ： ０．７３（１）例２ （Ｌ−α−ヒドロキシプロピオニル１ 、Ｌｅｕ ８
）アンジオテンシン■ 工程Ｉ Ｚ −０Ａｌａ −Ａｒｇ （Ｎｏ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ｌｅｕ −０ＮＢ例１の工程１で得たＢ
ｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −ＶａｌＴｙｒ （Ｂｚ
ｌ ） −１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐｒ。

Ｌｅｕ −０ＮＢ １．８ ？ （１，２５ミリモル）
をジオキサン中の塩酸の８Ｍ溶液８ｍｌにとかした。

この溶液から乾燥エーテルで遊離のへブタペプチドを沈
殿させ、その後濾過し、そして乾燥エーテルで洗浄した
（Ｒ７＝ｏ、３６）。

この化合物を直ちにジメチルホルムアミド２０ｍ１中に
溶かし、このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、
そしてＺ−ＯＡｌａ −０ＰＦＰ ０．９３ ？ （２
，３’Ｚリモル）を加えた。

１５分後、この溶媒をクロロホルムでおきかえて、得ら
れた溶液をＩＮ塩酸水溶液で、次いで水で振盪した。

この抽出物を乾燥及び蒸発した。この残渣をエタノール
とエーテルとの４：１混液で処理して目的化合物１．７
５ｙ（９３％）を生成した。

融点：１６４−１７２℃Ｒ７＝０．ｓ５工程２ 保護基の除去 Ｚ −０Ａｌａ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ−Ｈｉｓ（Ｄｎｐ） −Ｐ
ｒｏ −Ｌｅｕ −０ＮＢ １．６２をジメチルホル
ムアミド５ｍｌ中に溶かし、２−メルカブトエタノール
３．５ ｒｄを加え、そしてこの混液を室温で１時間攪
拌した。

しかる後に、乾燥エーテルを加え、そして得られた沈殿
物をｔ過及びメタノール−エーテル沈殿によって精製し
た。

Ｚ −０Ａ１ａ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ −Ｈｌｓ −Ｐｒｏ
−Ｌｅｕ −０ＮＢ １．３ ？ （９２％）を得た
（Ｒ７＝ｏ、２７）。

このペプチドをメタノール、酢酸及び水の５：１：１の
混液に溶かし、木炭担持１０％パラジウム触媒０．５Ｐ
を加え、激しく攪拌しながらこの溶液に水素ガスを２０
時間泡立てて通した。

この反応の進行は薄層クロマトグラフィーによって監視
した。

この反応が終了したとき、触媒を１過し、洗浄し、そし
てこの溶液を蒸発乾固した。

この残渣をエタノールと水との混液に溶かし、そして蒸
発させ、これを数回くりかえした。

この残渣を次に乾燥エタノールで処理すると（Ｌ−α−
ヒヒトキシプロピル’−Ｌｅｕ８）アンジオテンシン■
を生成した。

収量：０．６５ｆ（７０％）得られた生成物は上記のよ
うに精製した。

Ｒン−０，３６： Ｒ７＝ ０．６０ ： Ｒｊ ＝０
．６０．ＥＧＩｕ（ｐＨ＝ １．９ ） ＝０．９７゜
アミノ酸分析： Ｐｒｏ ： ０．９８（］） ： Ｖ
ａｌ ： １．０（１） ：１１ｅ ： １．１（１）
：Ａｒｇ： １．０（１）：Ｈｉｓ ： ０．９８（１
）：Ｌｅｕ ： ０．９８ ； Ｔｙｒ ： ０．５６
（１）。

例３ （ヒドロキシアセチル１、■１ｅ８）−アンジオテンシ
ン■ ■程Ｉ Ｂｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ
（Ｂｚｌ ） −１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ） −
Ｐｒｏ −１１ｅ −０ＮＢりＤＯホルム５０Ｔｎｌ中
のＩｌｅ −０ＮＢ −ＨＣｌ２、ＩＦｌ（１５ミリモ
ル）の溶液に、トリエチルアミ７２．１ ｍｌを加え、
次いで、Ｂｏｃ −Ｐｒ。

０ＰＦＰ３．８１ｒ（１０ミリモル）を添加した。

この反応混液を室温で２０分間攪拌した。

次いで水及び１０％クエン酸水溶液で振盪し、乾燥し、
そして蒸発させた。

得られたこの保護ジペプチド（Ｒ，！＝ｏ、９）はジオ
キサン中の塩酸８ Ｍ溶液２０ＴＩｌｌに溶かし、そし
て１０分後、この反応混液を乾燥エーテルで希釈し、そ
して蒸発した。

この遊離ジペプチド塩酸塩（Ｒｐ ＝０．４４ ）をク
ロロホルム３０ｍ１に溶かし、ｐＨ値をトリエチルアミ
ンで８に調節し、そして８．８Ｐ（１５ミリモル）のＢ
ｏｃ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）−０ＰＦＰを加えた。

１時間後、この反応混液に１．６５ｍ１のＮ−Ｎ−ジメ
チルーアミノエチルア□ンを加え、これを１５分後、１
０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び最終的に水で
振盪した。

この抽出物を乾燥して蒸発させた。

保護トリペプチド（Ｒ７＝０．５０）を単離せずにジオ
キサン中の８Ｎの塩酸溶液２０ｍ１に溶かした。

１５分後、トリペプチド（Ｒ７＝０．２５）を乾燥エー
テルで沈殿させ、濾過し、そして乾燥エーテルで洗浄し
た。

次いで直ちにクロロホルム５０ｍ１とジメチルホルムア
ミド２０７７１１との混液に溶かした。

得られたこの溶液のｐＨ値をトリエチルアミンで８に調
節し、そしてＢｏｃ−■１ｅＯＰＦＰ ６．Ｏｆ （１
５ミリモル）を加えた。

この混合物を３０分間放置し、次いでこの溶媒を酢酸エ
チルでおきかえ、そしてこの溶液を１０％クエン酸水溶
液、ＩＮ塩酸水溶液及び最終的に水で振盪した。

得られた抽出液を乾燥し、蒸発させ、そして残存してい
る保護ペプチドをｎ−ヘキサンとエーテルとの９：１混
液で抽出することによって単離した。

保護テトラペプチドＣＲ＃＝０．６５）をジオキサン中
の８Ｍ塩酸溶液２５ｍ１に溶かした。

３０分後、得られたテトラペプチド（Ｒ？ ＝０．４１
）を乾燥エーテルの添加によって沈殿させ、１過し、
そして洗浄した。

直ちに、ジメチルホルムアミドとクロロホルムとの１：
１混液７０ｍ１に溶かした。

その後、この溶液のｐＨ値を８に調節し、そしてＢｏｃ
−Ｔｙｒ（Ｂｚｌ ） −０ＰＦＰ ６．０ ？ （１
１，５ミリモル）を加えた。

１５分後に、溶媒を酢酸エチルでおきかえてＮ−Ｎ−ジ
メチル−アミノエチルアミン０．６６ｍＡ！を加えた。

１５分後に、１０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及
び最後に水で振盪させた。

乾燥及び蒸発後に得られた保護ペンタペプチド（Ｒ７＝
ｏ、ｓ９）は乾燥エーテルを添加することによって単離
した。

次いでジオキサン中の塩酸２０ｍ１にとかした。

１５分後、乾燥エーテルを加えることによってペンタペ
プチド塩酸塩（Ｒ？＝０．４）を沈殿させ、濾過し、そ
して乾燥エーテル２０ＴＬｌで洗った。

直ちに、ジメチルホルムアミド５０ｍ１に溶かし、トリ
エチルアミンでこのｐＨ値を８にし、そしてＢｏｃ −
Ｖａｌ −０ＰＦＰ４．６２ｆ（１２ミリモル）を加え
た。

１時間後、溶媒をクロロホルムで置換えてこの溶液を１
０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び最後に水で振
盪した。

得られた抽出液を乾燥し、蒸発し、そしてこの蒸発残渣
を乾燥エーテルで処理して保護へキサペプチド（ｐ４＝
ｏ、５６）を沈殿した。

次いで、ジオキサン中の８Ｍ塩酸２０ｍ１にとかし、そ
して１５分後に、得られた溶液から乾燥エーテルを添加
することによってヘキサペプチド（Ｒ４＝０．４７）を
沈殿させた。

このヘキサペプチドをｒ過し、そして乾燥エーテル２ｏ
ｍｌで洗浄した。

直ちにジメチルホルムアミド５０ｍ１を溶かし、このｐ
Ｈ値をトリエチルアミンで８に調節し、そして５．３８
？（１２ミリモル）のＢｏｃ −Ａｒｇ（ＮＯ２）ＯＰ
ＦＰを加えた。

この混液を３０分間放置した。しかる後、溶媒をクロロ
ホルムで置換し、そしてこの溶液を１Ｎ塩酸水溶液及び
水で振盪した。

こノ抽出液を乾燥し、蒸発しそしてエタノールによって
保護へブタペプチドを単離した。

出発ＢｏｃＰｒｏ−ＯＰＦＰについて計算すると目的化
合物（Ｒｐ ＝０．６７ ） ９．７１（６８％）が得
られた。

工程２ Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −１１ｅ −０ＮＢジオキサン中の８Ｍ塩
酸溶液８ＴｌｌにＢｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖ
ａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅＨｉｓ（Ｄｎ
ｐ） −Ｐｒｏ−１１ｅ−ＯＮＢｌ、６ ？ （１，１
ミリモル）を溶かした。

この溶液を１５分間放置し、次いで得られたヘプタペプ
チド塩酸塩（Ｒ７＝０．４５）を乾燥エーテルで沈殿さ
せ、１過し、そして乾燥エーテル２０ｍ１で洗った。

直ちにジメチルホルムアミド１０ｍ１に溶かし、このｐ
Ｈ値をトリエチルアミンで８に調節し、そしてｚ−ｏＧ
ｉｙ−ＯＰＦＰ Ｏ，６Ｆ（１，５ミリモル）を加えた
。

３０分後、溶媒をクロロホルムでおきかえ、そしてこの
溶液をＩＮ塩酸水溶液及び水で振盪した。

この抽出液を乾燥及び蒸発して保護ペプチドを乾燥エー
テルで単離した。

目的化合物１．４５Ｓ’（８５％）を得た。

融点：１５１−１５８℃； Ｒｒ ＝ ０．６８工程３ 保護基の除去 Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ）−Ｉｌｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −１１ｅ −０ＮＢ１．４５Ｐ（０，９４
ミリモル）をジメチルホルムアミド５ｍｌに溶かした。

２−メルカプトエタノール３．５ｍｌを加え、この溶液
を１時間攪拌し、そしてＺＯＧｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ
２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ−
Ｈｉｓ −Ｐｒｏ −１１ｅ−ＯＮＢを乾燥エーテルで
沈殿させた。

メタノール−エーテル沈殿後、ペプチド（Ｒ＃ ＝ｏ、
ｔｏ）１．ｏｓｙ（ｓ２％）を得た。

これをメタノール、酢酸及び水の５：１：１混液３０ｍ
１Ｋ溶かし、木炭担持１０％パラジウム触媒０．５Ｐを
加え、そして激しく攪拌した反応混液に水素カスを２１
時間泡立てて通した。

この反応の進行は薄層クロマトグラフィーで監視した。

前記触媒を除去し、この溶液を蒸発乾固し、そして得ら
れた遊離のペプチドを乾燥エタノールで単離した。

（ヒドロキシアセチル１、Ｉｌｅ８）−アンジオテンシ
ンｎｏ、４８？（６４，５％）を得た。

この生成物は公知方法で精製した。

Ｒｔ ＝ ０．２９ ： Ｒ（＝０．５７ ； Ｒ，７
＝０．５ ｓ ； ＥＧｌｕ（ｐＨ＝ １．９ ） ＝
１．０３．アミノ酸分析： Ｐｒｏ ： ０．９９（１
） ： Ｖａｌ ：１．１５（１）： Ｉｌｅ ： ２
．０６（２）：Ｔｙｒ ： ０．７４（１）：Ｈｉｓ：
０．９８（１）；Ａｒｇ：０．９５゜例４ （Ｌ−α−ヒドロキシプロピオニル１、Ｉｌｅ８）−ア
ンジオテンシン■ 工程Ｉ Ｚ −０Ａｌａ −Ａｒｇ（ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔ
ｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ｉ ｌｅ −０ＮＢジオキサン中の８Ｍ塩
酸溶液８ｍｌにＢｏｃＡｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ
−Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎ
ｐ） −Ｐｒｏ−１１ｅ −０ＮＢ １．６ｆ （１，
１ミリモル）を溶かした。

この溶液を１５分間放置してヘプタペプチド（Ｒ；＝０
．４５）を乾燥エーテルを添加することによって沈殿さ
せ、ｐ過及び洗浄した。

直ちに、ジメチルホルムアミド１０ｍ１に溶かし、この
ｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そしてＺ −
０Ａｌａ −０ＰＦＰ０．６１ ？ （１，５ミリモル
）を加えた。

３０分後、溶媒をクロロホルムで置換し、そしてこの溶
液をＩＮ塩酸水溶液及び水で振盪した。

乾燥及び蒸発後、得られた保護ペプチド（Ｒ７＝０．６
３）をエーテルで単離した。

目的化合物１．４Ｐ（８３％）を得た。融点：１６４−
１６８℃ 工程２ 保護基の除去 Ｚ −０Ａ１ａ −Ａｒｇ （Ｎｏ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ−１１ｅ −ＯＮＢ １．４ ？（０，９□
リモル）をジメチルホルムアミド５ｍｌに溶かし、そし
て、２−メルカプトエタノール３．５ｍｌを加えた。

この溶液を１時間放置し、そして次にＺ −０Ａｌａ
−Ａｒｇ（ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ
）１１ｅ −Ｈｌｓ −Ｐｒｏ−１１ｅ−ＯＮＢをエー
テルで沈殿させ、そしてメタノール−エーテル沈殿によ
って精製した。

収量：０．８グ（６５％） ： Ｒ＃ ＝０．１３ ：
Ｒ，’ ＝０．２７上で得た保護ペプチドをメタノー
ル、酢酸及び水の５：１：１混液ＩＱｍｌに溶かした。

この溶液に木炭担持１０％パラジウム触媒０．５１を加
え、そして攪拌しながら、この混液に水素ガスを１６時
間泡立てて通した。

この反応の終了時に、触媒を１過して除き、この溶液を
蒸発させ、そして生成物を乾燥エタノールによって単離
した。

（Ｌ−α−ヒドロキシ−プロピオニル’−１１ｅ８）−
アンジオテンシンＩＩ Ｏ，４，１（０，６５％）を得
た。

上と同じ方法で精製を実施した。Ｒｐ ＝０．３０ ：
Ｒｐ ＝０．５８ ：Ｒ７＝０．５８ ：ＥＧＩｕ（
１）Ｈ＝１．９ ）＝１．０７．アミノ酸分析：Ｐｒｏ
： １．０４（１） ：Ｖａｌ ： ０．９８（１）
： Ｉｌｅ ：１．９８（２）；Ｔｙｒ： ０．９８
（１）：Ｈｉｓ： １．０５（ＩＩＡｒｇ ： １．０
（１）。

例５ （ヒドロキシアセチル１、Ａｌａ８）−アンジオテンシ
ン■ 工程Ｉ Ｂｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ
（Ｂｚｌ ） −１１ｅＨｉｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐｒ
ｏ −Ａｌａ −０ＮＢりＯＤホルム１５Ｔｌｌ中のＡ
ｌａ −０ＮＢ −ＨＢ ｒｌ、２１Ｐ（４ミリモル）
の溶液にトリエチルアミ７０．５６ｍ１及びＢｏｃ −
Ｐｒｏ −０ＰＦＰ Ｏ，７６？（２ミリモル）を加え
た。

この溶液を室温で２０分間攪拌し、水及び１０％クエン
酸水溶液で抽出し、乾燥し、そして蒸発した。

得られた保護ジペプチド（Ｒｊ ＝０−６４ ）を単離
せずにジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液４ｍｌに溶かした。

この溶液を１０分間放置し、エーテルで希釈し、そして
蒸発した。

このジペプチド塩酸塩（Ｒ，？ ＝０．６５ ）をクロ
ロホルム１５ｍ１に溶かした。

このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そしてＢ
ｏｃＨｉｓ （Ｄｎｐ ） −０ＰＦＰ １．７６ ？
（３ミリモル）を加えた。

３０分後、Ｎ−Ｎ−ジメチルアミノエチルアミン０．４
４ｍ１を前記溶液に加えた。

５分間放置し、次いで１０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸
水溶液及び５％炭酸水素ナトリウム水溶液で振盪した。

この抽出液を乾燥し、蒸発し、そして保護トリペプチド
（Ｒ７＝０．５７ ）をジオキサン中の塩酸８Ｍ溶液４
ｍｌに溶かした。

このトリペプチド（Ｒｐ ＝０．２ ｓ ）を１０分後
に乾燥エーテルで沈殿させ、濾過し、そしてエーテルで
洗浄した。

直ちに、クロロホルム及びジメチルホルムアミドの１：
１混液２０ｍ１に溶かした。

このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そして１
．５８Ｐ（４□リモル）のＢｏａ −１１ｅ −０ＰＦ
Ｐ を加えた。

２０分後、溶媒を酢酸エチルで置き換えて、この酢酸エ
チル溶液を１０％クエン酸水溶液で、次いで水を振盪し
た。

乾燥及び蒸発後、保護テトラペプチド（Ｒ７＝０．５７
）をエーテルとｎ−ヘキサンとの１：９混液と混合し
、そして濾過した。

しかる後に、ジオキサン中の塩酸８Ｍ溶液４ｍｌにとか
し、１５分間放置し、そしてトリペプチド（Ｒ７＝０．
３８）を乾燥エーテルで沈殿させ、１過及び洗浄した。

直ちに、クロロホルム及びジメチルホルムアミドの２：
１混液１５ｍ１に溶かし、このｐＨ値をトリエチルアミ
ンで８に調節し、そして１．６６Ｐ（３ミリモル）のＢ
ｏｃ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ）−（）ＰＰＰを得た。

１５分後、溶媒を酢酸エチルで置換して０．２２ｍ１の
Ｎ−Ｎ−ジメチルアミノエチルアミンを加えた。

５分後、１０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び最
後に水で振盪した。

乾燥及び蒸発後、保護ペンタペプチド（Ｒ，’ ＝０．
６０ ）をエーテルに吸収させ、濾過し、そしてエーテ
ルで洗浄した。

しかる後、ジオキサン中の塩酸８Ｍ溶液４ｍｌに溶かし
た。

１０分後、ペンタペプチド（Ｒ，？＝０．６２）をエー
テルで沈殿させ、濾過し、そして乾燥エーテルで洗浄し
た。

直ちにクロロホルム及びジメチルホルムアミドの１：１
混液２０献に溶かし、この溶液のｐＨ値をトリエチルア
ミンで８に調節し、そして１．６Ｐ（４ミリモル）のＢ
ｏｃ −Ｖａｌ −０ＰＦＰを加えた。

この混合物を２０分間放置した。

しかる後に溶媒を酢酸エチルで置換し、得られた溶液を
水及び１０％クエン酸水溶液で振盪した。

この抽出液を乾燥し、蒸発し、そして得られた保護へキ
サペプチド（Ｒ７＝０．６５）をエーテルで処理し、１
過し、そしてエーテルで洗浄した。

直ちにジメチルホルムアミド２０ｍ１に溶かし、このｐ
Ｈ値をトリエチルアミンで８に調節し、そして２．９Ｐ
（６□リモル）のＢｏａＡｒｇ（ＮＯ２）−〇ＰＰＰを
加えた。

２０分後に、この溶媒をクロロホルムで置換して、この
溶液を１０％クエン酸水溶液及び水で振盪した。

乾燥及び蒸発後、この残渣を酢酸エチル及びエーテルの
１：２混液で処理し、１過し、そして同混合溶媒で洗浄
した。

対応する保護へブタペプチド２．１’（７２％）を得た
。

融点：１８５−１８７℃；噌−〇、７０ 工程２ Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ （Ｂｚｌ）１１ｅ −Ｐｉｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ａｌａ （）ＮＢＢｏｃ −Ａｒｇ （Ｎ
Ｏ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ） −１１ｅ−
Ｈｉｓ（Ｄｎｐ） −Ｐｒｏ −Ａｌａ−ＯＮＢｌ、３
５１ （１ミリモル）をジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液４
ｍｌに溶かした。

この溶液を１５分間放置し、そしてヘプタペプチド塩酸
塩（Ｒ７＝０．６３）を乾燥エーテルで沈殿させ、濾過
し、そしてエーテルで洗った。

直ちに１５ｍ１のジメチルホルムアミドに溶かし、この
溶液のｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そして
Ｚ −ｏＧｌｙ −ｏｐＦｐ ｏ、 ９６ Ｐ（２５ミ
リモル）を加えた。

２０分後、溶媒をクロロホルムで置換し、そしてこの溶
液を水で振盪した。

この水性抽出液を乾燥し、蒸発し、そして保護ペプチド
をエタノールで処理して単離した。

収量：１．１６グ（８３％）融点：１３３−１３５’ｃ
； Ｒｆ＝０．７２ 工程３ 保護基の除去 ジメチルホルムアミド５ｍｌ中にＺ−ＯＧＩｙ−Ａｒｇ
（ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −
１１ｅＨｉｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐｒｏ −Ａｌａ −
〇ＮＢ １．５ ｆ（１ミリモル）を溶かし、そして２
．９５ｍ１の２−メルカプトエタノールを加えた。

この溶液を１時間放置し、そして乾燥エーテルを加え、
得られた沈殿をｔ過し、そしてエタノールで洗浄した。

Ｚ−ＯＧｌｙＡｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ
（Ｂｚｌ ） −１１ｅ −ＨｌｓＰｒｏ−Ａｌａ−
（）ＮＢ １．１ ？ （８２％）を得た。

Ｒｐ ＝０．１５ ： Ｒｐ ＝０．４０この保護ペ
プチドをメタノール、酢酸及び水の５：１：１の混液に
溶かし、木炭担持１０％パラジウム触媒０．５′ｉ？を
加え、そして攪拌しながらこの混液に水素ガスを泡立て
て２４時間通した。

この反応の進行を薄層クロマトグラフィーで８筏した。

反応終了時に触媒を１過し、メタノール、酢酸及び水の
５：１：１混液１５ｍ１で洗浄した。

この溶液を次に蒸発乾固し、残渣をエタノール及び水の
混液に溶かし、蒸発し、これを数回実施して次に乾燥エ
タノールによって単離した。

（ヒドロキシアセチル１、Ａｌａ８）−アンジオテンシ
ンＩ［０，５５Ｐ（８０％）を得たが、これは次に上記
のように精製した。

Ｒ７−０，２８；Ｒ’ｉ ＝ ０．４８ ： Ｒ７＝
０．５０ ： ＥＧｌｕ（１）Ｈ＝ ｉ、 ９ ）＝１
．０アミノ酸分析： Ｐｒｏ ： ０．９５（１） ：
Ａｌａ ：１．１（１）：Ｖａｌ ： １．０（１）
： Ｉｌｅ ： １．０（１）：Ｈｉｓ ：１．０（１
） ： Ａｒｇ ： １．０（１） ： Ｔｙｒ ：
０．’］Ｉ）例６ （ヒドロキシアセチル１、Ｔｈｒ （Ｍ ｅ）８）−ア
ンジオテンシン■ 工程Ｉ Ｂｏｃ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −Ｔｙｒ
（Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ） −Ｐｒ
ｏ −Ｔｈｅ （Ｍｅ） −〇Ｍｅり００ホルム３０ｍ
１中にＴｈｒ （Ｍｅ ） −０Ｍｅ−ＨＢｒ０．６９
ｆ（３ミリモル）を溶かし、トリエチルアミン０．４２
ｍ１；及びＢｏｃ −Ｐｒｏ −０ＰＦＰ １．７Ｐ（
４，５ミリモル）を加えた。

この溶液を２時間放置し、そして０．３３ｍ１のＮ−Ｎ
−ジメチルアミノエチルアミンを加えた。

１５分後、溶媒を酢酸エチルで置きかえて、得られた溶
液を１０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液、水及び最
終的には５％炭酸水素ナトリウム水溶液で振盪した。

乾燥及び蒸発後、保護ジペプチド（Ｒｐ ＝０．７６
）を単離せずに、ジオキサン中の塩酸８Ｍ溶液２ｍ１Ｋ
溶かした。

１５分後浴液をエーテルで希釈して蒸発した。

残留ジペプチド（Ｒ７−０，１８）をクロロホルム２０
ｍ１に溶かし、このｐＨ値をトリエチルアミンで８に調
節し、そして２．６ ？ （４，５ミリモル）のＢｏｃ
−Ｈｌｓ （Ｄｎｐ）−０ＰＦＰを加えた。

室温で２時間放置した後、この溶液に０．２２ｍ１のＮ
・Ｎ−ジメチルアミノエチルアミンを加え、これを１５
分後に１０％のクエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び水
で振盪した。

乾燥及び蒸発後、保護トリペプチド（Ｒ１！ ＝ Ｏ
，ｓ ）を前もって単離しなＬ・で８Ｎ塩酸水溶液４ｍ
ｌに溶かし、そして１５分後、トリペプチド（Ｒ７＝０
．３）を乾燥エーテルで沈殿させ、汗過し、そしてエー
テルで洗った。

直ちに、クロロホルムとジメチルホルムアミドとの１：
１混液２０ｍ１に溶かし、この溶液のｐＨ値をトリエチ
ルアミンで８に調節し、そして１．６Ｐ（４ミリモル）
のＢｏｃ −１１ｅ −０ＰＦＰ を加えた。

３０分後浴媒を酢酸エチルで置換し、そしてこの酢酸エ
チル溶液を１０％クエン酸溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び最
後に水で振盪した。

乾燥及び蒸発した後、この残渣をエーテルとｎヘキサン
との１：９混液で処理し、そしてか（して保護テトラペ
プチドを単離した。

次いでジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液７ｍｌに溶かし、こ
の溶液を１５分間放置し、そのときテイラペプチド（Ｒ
４＝０．２７）を乾燥エーテルで沈殿させた。

直ちに、クロロホルム及びジメチルホルムアミドの１：
１混液２０ｒＩ′ｌｌに溶かし、このｐＨをトリエチル
アミンで８に調節し、そしてＢｏｃ −Ｔｙｒ（Ｂｚｌ
）ＯＰＦＰｌ、６Ｐ（３ミリモル）を加えた。

３０分後、この溶媒を酢酸エチルで置換し、そしてＮ・
Ｎ−ジメチルアミノエチルアミン０．２２ｍ１を加えた
。

この溶液を１５分間放置し、そしてその時１０％クエン
酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び最後に水で振盪した−８
この抽出液を乾燥及び蒸発し、そして保護したペンタペ
プチド（Ｒ＃ ＝ ｏ、 ６３）をエーテルによって単
離した。

保護したペンタペプチド０．４１を得た。

得られた化合物をジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液１ｍｌに
とかし、そして１５分後にペンタペプチド（Ｒ４＝ｏ、
４７）を乾燥エーテルで沈殿させ、１過し、そしてエー
テルで洗浄した。

直ちにジメチルホルムアミド１０ｍ１に溶かし、この溶
液のｐＨ値をトリエチルアミンで８に調節し、そして０
．４ｆ（１ミリモル）のＢｏｃＶａｌ −０ＰＦＰ
を加えた。

１時間後、溶媒をクロロホルムで置換し、そして得られ
た溶液を１０％クエン酸水溶液、ＩＮ塩酸水溶液及び水
で振盪した。

乾燥及び蒸発後、保護へキサペプチド（Ｒ１＝０．６５
）をエーテルによって単離した。

しがる後にこの生成物をジオキサン中の８Ｍ塩酸溶液１
．５ｍｌに溶かし、この溶液を１５分間放置し、そのと
きへキサペプチド（Ｒ７＝ｏ、４ｓ ）を乾燥エーテル
で沈殿させた。

この沈殿物を濾過し、エーテルで洗浄し、そして直ちに
ジメチルホルムアミド１０ｍ１に溶かした。

この溶液のｐＨ値はトリエチルアミンで８に調節し、そ
してＢ ｏｃ −Ａｒｇ（ＮＯ２）ＯＰＦＰ Ｏ，４！
Ｖ （１ミＩＪ モ＃） ヲ加エタ。

１時間後、この溶媒を酢酸エチルで置換してこの溶液を
１０％クエン酸水溶液で、ＩＮ塩酸水溶液で、及び最後
に水で振盪した。

得られた抽出液を乾燥し、蒸発し、そしてエーテル及び
エタノールの９：１混液で処理して保護へブタペプチド
０．４！１１’（１１，３％）を生成した。

Ｒ７＝ｏ、３８：融点：１９９−２０３℃（分解） 工程２ Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２）Ｖａｌ −Ｔｙ
ｒ （Ｂｚｌ ）−Ｉｌｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ） −
Ｐｒｏ−Ｔｈｒ （Ｍｅ）−（）Ｍｅｏ、４５？（０，
３４ミリモル）のＢｏｃＡｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ
−Ｔｙｒ （Ｂｚｌ ） −１１ｅ −Ｈｌｓ（Ｄｎ
ｐ ） −Ｐｒｏ −Ｔｈｒ （Ｍｅ） −０Ｍｅをジ
オキサン中の８Ｍ塩酸２ｍｌに溶かした。

この溶液を１５分間放置してから乾燥エーテルを添加す
るとヘプタペプチド（Ｒ７＝０．３５）が単離した。

直ちに１０ｒＩＬｌのジメチルホルムアミド１０ｒＩｌ
ｌに溶かし、この溶液のｐＨ値をトリエチルアミンで８
に調節し、そして０．４Ｐ（１ミリモル）のｚ−ｏｃｔ
ｙＯＰＦＰを加えた。

１時間後、この反応混液をクロロホルム３０ｍ１で希釈
し、そして水で振盪した。

乾燥及び蒸発後に保護したペプチドをエーテルとエタノ
ールとの９：１混液で単離した。

収量：０．４５グ（９３％）：融点：１５８−１６２℃
（Ｒｐ ＝ ０．４４ ） 工程３ 保護基の除去 Ｚ −０Ｇｌｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｙｒ（Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ （Ｄｎｐ ）
−Ｐｒｏ −Ｔｈｒ （Ｍｅ） −〇Ｍｅ０．４５Ｐ（
０，３１ミリモル）をジメチルホルムアミド１．５ｍｌ
中に溶かし、そして１ ｍｌの２−メルカプトエタノー
ルを加えた。

１時間後、この物質を乾燥エーテルで沈殿し、メタノー
ルに溶かし、少量の木炭で脱色し、そして最後に蒸発し
た。

この蒸発残渣をエーテルデ処理し、そして１過した。

Ｚ −０Ｇ１ｙ −Ａｒｇ （ＮＯ２） −Ｖａｌ −
Ｔｈｙ （Ｂｚｌ ）１１ｅ −Ｈｌｓ −Ｐｒｏ −
Ｔｈｒ （Ｍｅ ） −〇Ｍｅ ０．３８ ？（９８％
）を得た。

ＲｒＯ，１６： Ｒ７＝ ０．２５この生成物をジオキ
サン５ｍｌに懸濁させ、そしてＩＮ水酸化ナトリウム水
溶液１．２ｍｌを加えた。

この溶液を１時間放置し、その時ＩＮ塩酸水溶液でこの
ｐＨ値を３に調節した。

得られた沈殿物をクロロホルムとジメチルホルムアミド
の３：１混液に溶かした。

乾燥及び蒸発後、Ｃ−末端基の遊離しているペプチドを
エーテルで処理した。

遊離ペプチド０．２６１（７０％）を得た。

Ｒ？＝０．２５ 次いでメタノール、酢酸及び水の５：１：１の混液１０
ｍ１に溶かし、木炭担持パラジウム触媒０、ＩＰを加え
、そしてかきませながらこの溶液に水素ガスを１６時間
泡立てて通した。

この反応の進行は薄層クロマトグラフィーで監視した。

この反応が終了したとき、触媒を１過し、そして溶液を
蒸発乾固した。

この残渣を水及びエタノールの混液に溶かし、そして蒸
発し、これを数回くり返えした。

（ヒドロキシアセチル１、Ｔｈｒ （Ｍｅ） −７ンジ
オテンシン［０，１６Ｐ（８０％）を得たが、これは前
記のように精製できた。

Ｒｐ ＝０．２２ ： Ｒｐ ＝０．５３ ： Ｒｉ”
＝０．５０ ：ＥＧＩｕ（ｐＨ＝ １．９ ） ＝０
．９８．アミノ酸分析：Ｔｈｒ ： ０．６（１） ：
Ｐｒｏ ： １．０（１） ：Ｖａｌ ： １．０（
１） ：１１ｅ ： １．０２（１）：Ｔｙｒ ： ０
．８５（１）：Ｈｉｓ ： １．０（１）：Ａｒｇ ：
０．９６（１）。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １一般式（Ｉ） （式中、Ｘはヒドロキシアセチル基又はα−ヒドロキシ
   プロピオニル基であり、そして、Ｙはロイシル基、イソ
   ロイシル基、アラニル基又はメチルスレオニル基である
   ）のペプチド及びその酸付加塩。 ２一般式（Ｉ） （式中、Ｘはヒドロキシアセチル基又はα−ヒドロキシ
   プロピオニル基であり、そして、Ｙはロイシル基、イソ
   ロイシル基、アラニル基又はメチルスレオニル基である
   ）のペプチド及びその酸付加塩を製造するに当たり、一
   般式（ＩＩ） （式中、Ｇはｐ−ニトロベンジル基又はメチル基であり
   、そして、Ｙは上記定義通りである）の反応性へブタペ
   プチド誘導体を、一般式（２））＊（式中、Ｘ′はアミ
   ノオキシアセチル基又はα−アミノオキシプロピニル基
   である）の反応性アミノオキシ酸誘導体と反応させ、得
   られた一般式） （式中、Ｇ、Ｘ’及びＹは上記定義の通りである）の化
   合物から、保護基Ｄｎｐを開裂し、そして引続いてその
   他の側鎖及び末端保護基を接触水添により開裂し、そし
   て所望ならば、得られた一般式（Ｉ）の化合物をその酸
   付加塩に転換することを特徴とする前記化合物の製法。