DE2707881C2 - Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren - Google Patents
Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden FaktorenInfo
- Publication number
- DE2707881C2 DE2707881C2 DE2707881A DE2707881A DE2707881C2 DE 2707881 C2 DE2707881 C2 DE 2707881C2 DE 2707881 A DE2707881 A DE 2707881A DE 2707881 A DE2707881 A DE 2707881A DE 2707881 C2 DE2707881 C2 DE 2707881C2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- igg
- aggregated
- analytically detectable
- rheumatoid factors
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 23
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 23
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- GHWVXCQZPNWFRO-UHFFFAOYSA-N butane-2,3-diamine Chemical compound CC(N)C(C)N GHWVXCQZPNWFRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical class O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/80—Fluorescent dyes, e.g. rhodamine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/819—Multifunctional antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/821—Chemistry: analytical and immunological testing involving complement factors or complement systems
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/826—Additives, e.g. buffers, diluents, preservatives
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Rehabilitation Therapy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren mindestens einer der Immunoglobulinklassen
IgM, IgG undlgA in einer wäßrigen Probe.
Anti-immunoglobuline werden auch als rheumatoide
Faktoren bezeichnet und können den Immunoglobulinklassen IgM, IgG, IgA oder gegebenenfalls auch anderen
Immunoglobulinklassen zugehören. Der rheumatoide Faktor kann seinerseits gegen Immunoglobuline der
Klassen IgG oder IgM oder gegebenenfalls anderer Immonoglobulinklassen gerichtet sein, welche Immonoglobuline
durch Immonokomplexbildung oder Aggregation in der Struktur geändert worden sind.
Bereits vorgeschlagene Testmethoden zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren basieren auf einer Agglutination
von z. B. Blutkörperchen oder Latexpartikeln, die mit nativem oder aggregiertem IgG überzogen sind, vgl.
z. B. US-PS 36 89 632. Diese Methoden weisen vor allem rheumatoide Faktoren vom IgM-Typ gerichtet gegen
geändertes IgG nach. Patienten mit rheumatoider Arthritis sind in einem solchen Test in der Regel positiv,
aber 20 bis 30% sind negativ.
Erfindungsgemäß wurde nun ein Verfahren zum Nachweis rheumatoider Faktoren in einer wäßrigen
Probe bereitgestellt, das vollständiger als bereits bekannte Verfahren den Nachweis sämtlicher rheumatoider
Faktoren in der Probe ermöglicht, d. h. auch solcher, welche der Immunoglobulinklasse IgM nicht angehören
und früher nicht in erwünschtem Maße weder in Anwesenheit noch in Abwesenheit solcher IgM zugehöriger
Faktoren nachgewiesen werden konnten.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß ein in der Probe etwa vorkommender
Kon ,)lementfaktor CIq in an sich bekannter Weise inaktiviert
wird, worauf die Probe mit löslichem, aggregiertem Immunoglobulin, das mit einem oder mehreren
analytisch nachweisbaren Atomen oder Gruppe markiert ist, zur Bildung von Aggregaten zwischen rheumatoiden
Faktoren und aggregiertem, markiertem Immunogl'.ibulin
umgesetzt wird, welche Aggregate gefällt werden, worauf der entstehende Niederschlag abgeschieden
wird und das analytisch nachweisbare Atom oder die analytisch nachweisbare Gruppe bzw. die ana-Iytisch
nachweisbaren Atome oder die analytisch nachweisbaren Gruppen in der Fällungsphase und/oder in
der Lösung nachgewiesen werden.
Die Inaktivierung des Komplementfaktors CIq in der Probe kann beispielsweise durch Erwärmung oder
ίο durch Zusatz von Diaminobutan oder Desoxyribonucleinsäure
in an sich bekannter Weise durchgeführt werden.
Lösliches, aggregiertes Immunoglobulin kann beispielsweise durch Erhitzung einer Lösung eines Immunoglobulins
und anschließende Trennung von löslichem, aggregiertem Immunoglobulin aus monomerem Immunoglobulin
und aus etwa entstehender geringerer Menge an unlöslichen Aggregaten durch Gelfiltrierung hergestellt
werden. Vorzugsweise wird als Immunoglobulin in diesem Zusammenhang ein solches der IgG-Klasse
verwendet. Die Aggregation wird nicht weiter getrieben, als daß der Hauptteil des aggregierten Immunoglobulins
in der wäßrigen Phase löslich ist.
Zur Markierung des aggregierten Immunoglobulins kann jedes im Zusammenhang mit der Markierung von Immunoglobulin bekannte analytisch nachweisbare Atom oder jede Gruppe verwendet werden. Die Markierung von aggregiertem Immunoglobulin mit einem radioaktiven Isotop kann somit in konventioneller Weise durchgeführt werden, wobei ein zweckmäßiges Isotop gewählt wird, z. B. 125I (siehe z. B. die Methode gemäß Hunter und Greenwood, Nature, Band 194, 1962, Seite 495). Ebenfalls kann die Markierung mit einer fluoreszierenden Gruppe in konventioneller Weise gemacht werden, z. B. mit einem Fluoresceinderivat wie Fluoresceinisothiocyanat. Auch die Markierung mit beispielsweise enzymatisch aktiven Gruppen oder mit freie Radikale enthaltenden Gruppen zum Nachweis kann grundsätzlich angewandt werden.
Zur Markierung des aggregierten Immunoglobulins kann jedes im Zusammenhang mit der Markierung von Immunoglobulin bekannte analytisch nachweisbare Atom oder jede Gruppe verwendet werden. Die Markierung von aggregiertem Immunoglobulin mit einem radioaktiven Isotop kann somit in konventioneller Weise durchgeführt werden, wobei ein zweckmäßiges Isotop gewählt wird, z. B. 125I (siehe z. B. die Methode gemäß Hunter und Greenwood, Nature, Band 194, 1962, Seite 495). Ebenfalls kann die Markierung mit einer fluoreszierenden Gruppe in konventioneller Weise gemacht werden, z. B. mit einem Fluoresceinderivat wie Fluoresceinisothiocyanat. Auch die Markierung mit beispielsweise enzymatisch aktiven Gruppen oder mit freie Radikale enthaltenden Gruppen zum Nachweis kann grundsätzlich angewandt werden.
Um eine vollständigere Fällung des erhaltenen Aggregats zwischen rheumatoiden Faktoren und aggregiertem,
markiertem Immunoglobulin herbeizuführen, kann man beispielsweise ein wasserlösliches, ungeladenes
Polymeres zusetzen, wie es zur Erleichterung des Ausfällens von Makromolekülen verwendet wird (z. B.
bei immunologischen Reaktionen, um die Fällung von Antikörper-Antigenkomplex Zu erleichtern), indem man
das den Makromolekülen zugängliche Flüssigkeitsvolumen in der Lösung durch sog. sterische Aussschließung
reduziert, wodurch eine reduzierte Löslichkeit der Makromoleküle erreicht wird (siehe z. B. Hellsing, Acta
Chem. Scand. 20 (1966) Seite 1251). Beispiele solcher Polymeren sind wasserlösliche Polyäthylenglykole, Polysaccharide
und (ungeladene) Polysaccharidderivate,
z. B. Dextran und wasserlösliche Cellulosederivate. Das
Polymere kann während oder nach der Reaktion, aber vorzugsweise vor derselben zugesetzt werden. Die Zusatzmenge
v/ird in sämtlichen diesen Fällen so gewählt, daß die Konzentration des Polymeren unmittelbar unterhalb
derjenigen liegt, bei welcher man eine Fällung einer der an der Reaktion teilnehmenden einzelnen
Komponenten (d. h. in erster Linie aggregiertem, markiertem Immunoglobulin) erhält. Die geeignete Konzentration
läßt sich leicht durch einfache Vorversuche feststellen.
Die Erfindung wird im folgenden anhand einer Anzahl von spezifischen Ausführungsbeispielen näher beschrieben.
3
Beispiel 1 und mit gemäß konventioneller Testtechnik negativer
Reaktion erhielt man in 16 Fällen deutlich erhöhte Meß-
A. Herstellung von werte, welche das Vorhandensein rheumatoider Fakto-
aggregiertem Human-IgG (agg IgG) ren anzeigen.
Human-IgG (Fraktion Il der Cohn-Fraktionierung) aus zusammengezogenen Humansera wurde von der
Kabi AB, Schweden, erhalten und inForm einer 2%igen IgG-Lösung 20 Minuten bei 60° C erhitzt Somit erhaltenes
aggregiertes IgG (agg IgG) wurde durch Gelfiltrierung
auf einer 90x 1,5 cm Kolonne von mit Epichlorohydrin vernetzten! Dextran (Sephadex® G-200 von Pharmacia
Fine Chemicals AB, Schweden) äquilibriert mit 0,1 M Tris(hydroxymethyI)aminomethan-HCl-Puffer
enthaltend 0,5 M NaCl mit pH 7,4 aus monomeren! IgG abgetrennt. Konzentrationen von agg IgG wurden bei
280 nm spektrophotometrisch bestimmt.
3. Herstellung von markiertem agg IgG
20
20 μΐ einer Lösung enthaltend 40 μg agg IgG, erhalten
gemäß A, wurden 500 \iC\ Na125I und 10 μΙ 0,5 M Natriumphosphatpuffer
mit pH 7,4 und 10 μg Chloramin T in 10 μ! Wasser zugesetzt Nach 50 Sekunden wurden
24 μg Natriummethabisulfit zugesetzt. Das Reaktionsgemisch
wurde auf Sephadex® G-200 getrennt (d. h. Gelpartikel bestehend aus mit Epichlorohydrin vernetztem
Dextran), wobei die erste Fraktion mit dem Voidvolumen aufbewahrt wurde. Das eluierte, markierte agg Ig
wurde bei 3500 g 5 Minuten geschleudert, um spontan präzipitierbares IgG zu entfernen. Das markierte Protein
wurde mit einer Pufferlösung, hergestellt aus 500 ml 0,1 M Natriumphosphatpuffer pH 7,5, 500 ml 0,15 M
NaCl, 10 ml 5% (m/v) NaM3 und 5 ml Tween® 20, auf etwa 40 μg/l (40 000 cpm in 0,1 ml) verdünnt.
C. Bestimmung der rheumatoiden Faktor-Aktivität
Blutproben wurden den Patienten aseptisch entnommen und man ließ das Blut bei Raumtemperatur gerinnen,
worauf bei 3000 g geschleudert wurde und Sera aufbewahrt wurden.
Serum wurde 30 Minuten bei einer Temperatur von 56°C wärmebehandelt. Serum wurde dann 1 :40 in einer
Lösung verdünnt, welche die folgende Zusammensetzung hatte: 500 ml 0,1 M Natriumphosphatpuffer, pH
7,5, 500 ml 0,15 M NaCl, 10 ml 5% NaN3, 5 ml Tween® 20 und 2 g Polyäthylenglykol (Molekulargewicht
6000). 400 μΐ dieser Serumverdünnung sowie 100 μΐ von I125 markiertem agg IgG (40 000 cpm) (erhalten
gemäß B) wurden Kunststoffröhren zugeführt. Die Röhren wurden zugepfropft und 16 Stunden bei +40C
unter konstanter Drehung inkubiert. Darauf wurden die Röhren 3 Minuten bei 3500 g geschleudert. Die Kunststoffpfropfen
wurden entfernt und 2 ml der 0,9 M NaCl-Lösung enthaltend 0,5% Tween® wurden jeder Röhre
zugesetzt. Die Röhren wurden erneut 3 Minuten bei 3500 g geschleudert. Die Oberflüssigkeit wurde dann
abgesaugt. Dieser Waschvorgang wurde dreimal wiederholt. Die Röhren wurden dann zugepfropft und in
einem automatischen Gammarechner untergebracht.
Hohe Meßwerte wurden mit Proben von Patienten mit rheumatoider Arthritis erreicht. Im Vergleich zu
konventioneller Meßtechnik erhielt man bessere Übereinstimmung zwischen den Meßergebnissen und klinischer
Diagnose mit vorliegender Methode.
Für 28 Patienten mit Gelenkbeschwerden, von denen man vermutete, vom Typ rheumatoider Arthritis zu sein,
Claims (2)
1. Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren mindestens einer der Immunoglobulinklassen
IgM, IgG und lgA in einer wäßrigen Probe, dadurch gekennzeichnet, daß ein in der Probe
etwa vorkommender Komplementfaktor CIq in an sich bekannter Weise inaktiviert wird, worauf die
Probe mit löslichem, aggregiertem Immunoglobulin, das mit einem oder mehreren analytisch nachweisbaren
Atomen oder Gruppen markiert ist zur Bildung von Aggregaten zwischen rheumatoiden Faktoren
und aggregiertem, markiertem Immunoglobulin umgesetzt wird, welche Aggregate gefällt weiden,
worauf der entstehende Niederschlag abgeschieden wird und das analytisch nachweisbare
Atom oder die analytisch nachweisbare Gruppe bzw. die analytisch nachweisbaren Atome oder die
analytisch nachweisbaren Gruppen in der Fällungsphase und/oder in der Lösung nachgewiesen werden.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß das markierte aggregierte Immunoglobulin der IgG-Klasse zugehört.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE7609906A SE441042B (sv) | 1976-09-08 | 1976-09-08 | Sett att pavisa rheumatoida faktorer |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2707881A1 DE2707881A1 (de) | 1978-03-09 |
| DE2707881C2 true DE2707881C2 (de) | 1985-05-30 |
Family
ID=20328828
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2707881A Expired DE2707881C2 (de) | 1976-09-08 | 1977-02-24 | Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4153417A (de) |
| JP (1) | JPS6057544B2 (de) |
| CA (1) | CA1076937A (de) |
| DE (1) | DE2707881C2 (de) |
| FR (1) | FR2364456A1 (de) |
| GB (1) | GB1576400A (de) |
| NL (1) | NL7708078A (de) |
| SE (1) | SE441042B (de) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4302536A (en) * | 1978-08-15 | 1981-11-24 | Longenecker Robert W | Colorimetric immunoassay process |
| US4342566A (en) * | 1980-02-22 | 1982-08-03 | Scripps Clinic & Research Foundation | Solid phase anti-C3 assay for detection of immune complexes |
| US4434227A (en) * | 1982-02-08 | 1984-02-28 | Abbott Laboratories | Immunoassay for class specific immunoglobulin antibodies |
| US4450231A (en) * | 1982-03-31 | 1984-05-22 | Biostar Medical Products, Inc. | Immunoassay for determination of immune complexes with polymer-coated plastic base |
| US4582793A (en) * | 1982-10-29 | 1986-04-15 | Research Corporation | Anti-RNA polymerase I antibody test for the diagnosis of rheumatological diseases |
| SE8304836D0 (sv) * | 1983-09-09 | 1983-09-09 | Pharmacia Ab | Sett att bestemma forendringar i ledbrosk |
| CA1261257A (en) * | 1984-09-19 | 1989-09-26 | Helgi Valdimarsson | Prognostic value of rheumatoid factor isotypes and their association with disease activity |
| US4914041A (en) * | 1988-02-12 | 1990-04-03 | Beckman Instruments, Inc. | Reagent and method for detecting rheumatoid factor |
| DE68924783T2 (de) * | 1988-09-30 | 1996-03-28 | Neorx Corp | Wässrige additivsysteme, verfahren und polymerteilchen. |
| US5066789A (en) * | 1988-09-30 | 1991-11-19 | Neorx Corporation | Targeting substance-diagnostic/therapeutic agent conjugates having Schiff base linkages |
| US4986979A (en) * | 1989-03-14 | 1991-01-22 | Neorx Corporation | Imaging tissue sites of inflammation |
| JPH02144560U (de) * | 1989-05-12 | 1990-12-07 | ||
| US6303758B1 (en) | 1996-11-08 | 2001-10-16 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Dye-labeled and polymerized antibody and method for preparing the same |
| US6303759B1 (en) | 1996-11-08 | 2001-10-16 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Dye-labeled and polymerized antibody and method for preparing the same |
| JP3601972B2 (ja) * | 1998-05-14 | 2004-12-15 | 松下電器産業株式会社 | 色素標識タンパク質複合体およびその製造方法 |
| JP3625250B2 (ja) * | 1998-05-14 | 2005-03-02 | 松下電器産業株式会社 | 色素標識重合抗体およびその製造方法 |
| US6300480B1 (en) | 1996-11-08 | 2001-10-09 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Dye-labeled protein conjugate and method for preparing the same |
| JPH11322798A (ja) * | 1998-05-14 | 1999-11-24 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 色素標識重合抗体およびその製造方法 |
| CA2416277C (en) | 2000-07-14 | 2010-10-26 | Immunivest Corporation | Increased separation efficiency via controlled aggregation of magnetic nanoparticles |
| US20060159680A1 (en) * | 2005-01-14 | 2006-07-20 | Smith Henry J | Targeted apherisis for the treatment of rheumatoid arthritis |
| US20130068691A1 (en) * | 2011-08-05 | 2013-03-21 | Henry John Smith | Targeted apheresis for the treatment of rheumatoid arthritis and immune disorders |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1484727A (fr) * | 1966-04-19 | 1967-06-16 | Réactif immunologique et son procédé d'obtention | |
| GB1179435A (en) * | 1966-06-17 | 1970-01-28 | Ortho Pharma Corp | Stable Reagent for the Detection of Rheumatoid Arthritis |
| US3689632A (en) * | 1969-01-06 | 1972-09-05 | Kowa Co | Rheumatoid agglutination test and reagent |
| GB1508132A (en) * | 1974-05-20 | 1978-04-19 | Technicon Instr | Analysis of biological fluids |
-
1976
- 1976-09-08 SE SE7609906A patent/SE441042B/xx not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-02-24 DE DE2707881A patent/DE2707881C2/de not_active Expired
- 1977-07-20 NL NL7708078A patent/NL7708078A/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-07-25 US US05/818,646 patent/US4153417A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-07-25 CA CA283,447A patent/CA1076937A/en not_active Expired
- 1977-07-26 FR FR7722925A patent/FR2364456A1/fr active Granted
- 1977-07-27 GB GB31492/77A patent/GB1576400A/en not_active Expired
- 1977-07-28 JP JP52090878A patent/JPS6057544B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE7609906L (sv) | 1978-03-09 |
| FR2364456A1 (fr) | 1978-04-07 |
| FR2364456B1 (de) | 1981-08-28 |
| JPS6057544B2 (ja) | 1985-12-16 |
| CA1076937A (en) | 1980-05-06 |
| SE441042B (sv) | 1985-09-02 |
| JPS5334918A (en) | 1978-03-31 |
| DE2707881A1 (de) | 1978-03-09 |
| US4153417A (en) | 1979-05-08 |
| NL7708078A (nl) | 1978-03-10 |
| GB1576400A (en) | 1980-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE2707881C2 (de) | Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren | |
| DE2806146C2 (de) | Tumor-spezifisches Glykoprotein und dessen Verwendung zur Krebsdiagnose beim Menschen | |
| DE2029499C3 (de) | Verfahren zum Nachweis der Anwesenheit von carcinoembryonalen Antigenen im Blut | |
| DE2630753C2 (de) | ||
| DE2126680A1 (de) | Carcinoembryonisches Antigen | |
| CH627187A5 (de) | ||
| DE2653032A1 (de) | Radioimmun-nachweisverfahren fuer ein schilddruesenhormon und dafuer geeignetes reagens | |
| DE2403994A1 (de) | Herstellung von antisera | |
| DE2707913C2 (de) | Verfahren zum Nachweis von rheumatoiden Faktoren | |
| DE2934757C2 (de) | Zusammensetzung und Verfahren zur Bestimmung von Humanimmunglobulin-G | |
| CH625345A5 (de) | ||
| CH630643A5 (en) | Process for concentrating a placenta-specific glycoprotein. | |
| DE2934756A1 (de) | Zusammensetzung zur bestimmung von beta 2 -humanmikroglobulin und verfahren zu deren herstellung und deren verwendung | |
| DE2310280A1 (de) | Tubocurarin-antigene | |
| DE3887727T2 (de) | Partikelstabilisierte Epitope zur Standardisierung und Kontrolle von Immuntests. | |
| DE1617734B1 (de) | Verfahren zur Herstellung eines immunologischen Reagens | |
| DE3410694C2 (de) | ||
| DE2714751A1 (de) | Herstellung von alpha-l-antikoerpern, reinigung von alpha-l-antigenen und reagenz fuer die bestimmung von alpha-l-antikoerpern und alpha-l-antigenen | |
| DE2126128A1 (de) | Medizinisches Testverfahren, Reagens und Additiv zur Durchführung des Verfahrens | |
| DE3024270A1 (de) | Masse zur bestimmung von menschlichem erythropoietin und deren anwendung | |
| DE2445677C2 (de) | Hochmolekulares alpha-Globulin und Verfahren zu dessen Herstellung | |
| DE2353035A1 (de) | Verfahren zur stabilisierung menschlicher oder tierischer koerperfluessigkeiten oder pflanzlicher extrakte | |
| DE3511199A1 (de) | Verfahren zur immunologischen bestimmung von heparansulfat-proteoglykan, verfahren zur herstellung bzw. reinigung von dafuer geeignetem heparansulfat-proteoglykan aus basalmembran-haltigen geweben | |
| DE2539219A1 (de) | Radioimmunologisches untersuchungsverfahren zur in-vitro-bestimmung der renin-aktivitaet und besteck zur durchfuehrung dieses verfahrens | |
| CH633825A5 (en) | Preparation of sub-units of the inner capsid of the rotavirus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8110 | Request for examination paragraph 44 | ||
| D2 | Grant after examination | ||
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |