DE2431916C3

DE2431916C3 - Acetylthio- und/oder Mercaptogruppen enthaltende 17alpha-(2'-Carboxyäthyl)-17beta-ol-lacton-Steroide, diese enthaltende Arzneimittel, Verfahren zur Herstellung derselben sowie entsprechende Brom enthaltende Steroide als Zwischenprodukte

Info

Publication number: DE2431916C3
Application number: DE2431916A
Authority: DE
Inventors: Gyoergy Beer; Eva Czajlik Geb. Csizer; Antal Dudas; Gyoergy Dr. Hajos; Tibor Kekesy; Szabolcs Dr. Szeberenyi; Laszlo Dr. Szporny
Original assignee: Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar RT
Current assignee: Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Nyrt
Priority date: 1973-07-09
Filing date: 1974-07-03
Publication date: 1979-02-22
Also published as: AT348692B; DE2431916A1; DD113902A5; NL158184B; SE7408605L; FR2236509A1; JPS5484566A; NL7408253A; DE2431916B2; DK364774A; CS174136B2; JPS5526157B2; CH616946A5; US3988322A; HU167833B; ATA436874A; GB1453342A; SE406768B; SU517262A3; BE817351A

Description

jedoch mit der weiteren Maßgabe, daß mindestens einer der Substituenten Xi, X2, X; und X4 eine Mercapto- oder Acetylthiogruppe ist und, im Falle, daß X4 eine Acetylthiogruppe bedeutet, mindestens eines von X1, X2 und Xj von Wasserstoff verschieden ist.

2. ÖÄ-Acetylthioandrost-'l-en-17«-(2'-carboxyäthyl)-1 7jS-ol-3-onlacton.

3. 4-Acelylthioandrosta-4,6-dien-17Ä-(2'-carboxyäthyl)-17(3-ol-3-onlacton.

4. 4-Mercaptoandrosta-4,6-dien-17a-(2'-carboxyäthyl)-17j?-ol-3-onlacton.

5. 2|,4-Diacetylthioandrosta-4,6-dien-17a-(2'-carboxyäthyl)-17/i-ol-3-onlacton.

6.4-Bromandrosta-4,6-dien-17a-(2'-carboxyäthyl)-17j?-ol-3-onlacton.

7. 2«,6ß-Dibrom-7a-acetylthioandrost-4-en-l7<x-(2'-carboxyathyl)-17/J-ol-3-onlacton.

8. Arzneimittel, gekennzeichnet durch einen Gehalt an 1 beziehungsweise mehreren Verbindungen nach Anspruch I bis 5 als Wirkstoff beziehungsweise Wirkstoffen und üblichen pharmazeutischen Träger- und Hilfsstoffen.

9. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen nach Anspruch 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel

(III)

Zi und 7.2 zusammen eine chemische Bindung bedeuten,

bromieri und gegebenenfalls die erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel

(III

worin

Yi und Yi für Wasserstoff beziehungsweise Brom stehen,

Y) Brom bedeutet und

Y4 Wasserstoff oder eine Acetylthiogruppe

darstellt oder

Yj und Y4 zusammen eine chemische Bindung bedeuten,

mit einem Alkalithioacetat, vorzugsweise Kaliumthioacetat, oder einem Alkalihydrogensulfid umsetzt, worauf man gegebenenfalls an das erhaltene Produkt Thioessigsäure addiert und/oder gegebenenfalls das erha'tene Acetylthioprodukt einer Umesterung, vorzugsweise Alkoholyse. unterwirft.

worin

fur Wasserstoff sieht und

Wasserstoff oder eine Acetylthiogruppe

bedeutet oder

Die Erfindung betrifft neue Acetylthio- und/oder Mercaptogruppen enthaltende 17<x-(2'-Carboxyäthyl)-17/f-ol-lacton-Steroide, diese enthaltende Arzneimittel, insbesondere solche gegen Schwermetallvergiflungen, ein Verfahren zur Herstellung derselben sowie neue Zwischenprodukte darstellende entsprechende Brom enthaltende Steroide.

Bekanntlich zeigen in der 7a-Stcllung oder in den Ia- und 7a-Stellungen Acetylthiogruppen und in der 6-Stellung eine Doppelbindung aufweisende Derivate des Androst-4-en-17<v-(2'-carboxyäthyl)-l7j3-ol-3-onlactones (|.Org. Chem. 24 [1959], 1109 und US-Patentschrift 30 13 012) sowie das entsprechende 7<x-Mercaptoderivat (US-Patentschrift 37 15 349) eine antialdosteron-diuretische Wirkung. In anderen Veröffentlichungen (Science 169 [1970], 775, Arzneimittelforschung 21, Nr. 6 [1971], 815 und Steroids 20 (1)[I972], 41) wird die quecksilberentgiftende Wirkung der 7«-Acetylthio- und 7<x-Mercapto- beziehungsweise liX,7ix-Diacetylthiosteroide der Androstanreihe behandelt. So ist aus der französischen Patentschrift 514 M und Steroids 20 (1) [1972], Seite 41 bis 42 7&-Acetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthyl)-17j3-ol-3-onlaclon und dessen therapeutischen Wirkungen, wie die Wirkung gegen Quecksilbervergiftungen, bekannt. Seine Wirkung gegen Quecksilbervergiftungen ist jedoch in allen Richtungen nicht zufriedenstellend. In Chcm. Ber. 96 (10) [1963], 2803 sind anabolisch wirksame 4-Acetylthio- und 4-Mercaptoderivale des Testosterons erwähnt. In Chem. Pharm. Bull. 12 (12) [1964], 1433 ist die Herstellung von 6vAcetyl-thioderivaten von eine

4-en-3-keto-Gruppe aufweisenden Verbindungen mit Androstan- i:nd Pregnanstruktur beschrieben. Diese fvK-Acetylthioderivate zeigen antiöstrogene und gonadotrophemmende beziehungsweise geschlechtsdrüsenhemmende Wirkungen.

Die Quecksilbervergiftung hat als Umweltschädigung und als industrielle Berufskrankheit im Gesundheitswesen steigende Bedeutung erlangt. Für therapeutische Zwecke gegen Quecksilbervergiftungen wird gegenwärtig als wirksamstes Mittel das Dimercaptopropanol (BAL) angesehen und fast ausschließlich verwendet, obwohl die Verabreichung außerordentliche Umsicht erfordert, da die Verbindung toxisch ist und nicht peroral verabreicht werden kann, sondern in Form öliger intramuskulär zu verabreichender Injektionen angewandt wird.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, überlegene Wirkungen gegen Quecksilbervergiftungen und andere Schwermetallvergiftungen bei geringer Toxizität aufweisende neue Acetylthio- und/oder Mercaptogruppen aufweisende Steroide ohne die Nachteile der bekannten Mittel, solche enthaltende Arzneimittel sowie ein Verfahren und neue Zwischenprodukte zur Herstellung derselben vorzusehen.

Durch die Erfindung wurde überraschenderweise das Obige erreicht.

Gegenstand der Erfindung sind Acetylthio- und/oder Mercaptogruppen enthallende 17«-(2'-Carboxyäthyl)-1 7j9-ol-lacton-Steroide der allgemeinen Formel

X₂ X.,

Xi und X2 für Wasserstoff, eine Mercaptogruppe beziehungsweise eine Acetylthiogruppe stehen und

X1 und X₄ Wasserstoff beziehungsweise eine Acetylthiogruppe oder zusammen eine chemische Bindung bedeuten,

jedoch mit der weiteren Maßgabe, daß mindestens einer derSubstituenten Xi₁X₂, Xi und X4cine Mercapto-oder Acetylthiogruppe ist und, im Falle, daß X4 eine Acetylthiogruppe bedeutet, mindestens eines von Xi, Xj und Xi von Wasserstoff verschieden ist.

Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen der Formel I sind

6a-Acetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxy-

äthyl)-17/?-ol-3-onlacton,
4-Acetylthioandrosta-4,6-dien-17a-(2"-carboxy-Hi äthyl)-170-ol-3-onlacton,

4-Mercaptoandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carboxy-

äthyl)-17j3-ol-3-onlacton,
2|,4-Diacetylthio-androsta-4,6-dien-

17«-(2'-carboxyäthyl)-l 7/?-ol-3-onlacton,
π 2J,4-Dimercaptoandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carb-

oxysthyl)-l 7j3-ol-3-onlacton,
4,7öc-Diacetylthioandrost-4-en-17Ä-(2'-carboxy-

äthyl)-17/3-ol-3-onk->cton und
4-Mercapto-7«-acetylthioandrost-4-en-17«-(2'-carboxyäthyl)-170-ol-3-onlacton.

Ferner sind erfindungsgemäß Arzneimittel, welche 1 oder mehr der obigen Verbindungen als Wirkstoff beziehungsweise Wirkstoffe und übliche pharmazeutisehe Träger- und Hilfsstoffe enthalten, vorgesehen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I haben nämlich wertvolle pharmakologische Eigenschaften, vor allem gegen Schwermetallvergiflungen, insbesondere Quecksilbervergiftungen.

κι Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I wurden in erster Linie in den für die Symptome der Quecksilbervergiftung am meisten kennzeichnenden 3 Hauptrichtungen untersucht.

I. Wirkung bei
tödlichen akuten Quecksilbervergiftungen

Es wurden Wistar-Ratten 3,5 mg HgCb/kg Körpergewicht verabreicht. Die Dosis hatte eine Sterblichkeit von 100% zur Folge. Mit den erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I kann die giftige Wirkung des HgCI> stark vermindert werden. Zum Nachweis dieser Wirkung wurden Wistar-Ratten 1 Stunde vor deren Vergiftung mit 3,5 mg HgCMkg Körpergewicht erfindungsgemäße Verbindungen beziehungsweise die

A=i als Mittel gegen Quecksilbervergiftungen bekannte Verbindung 7«-Acetylthioandrost-4-en-1 7«-(2'-carboxyäthyl)-17j3-ol-3-onlacton als Vergleichssubstanz jeweils in einer Dosis von 100 mg/kg Körpergewicht peroral verabreicht. Auch die peroralen LD™-Werte in

>o mg/kg hier und weiter unten wurden an Wistar-Ratten ermittelt. Die Ergebnisse sind it· der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt.

Tabelle

Verbindung
Bezeichnung

	I'ero ralc	Uberlc-
Zuordnung	Dosis in mg/kg	bensrute
	Körper
	gewicht
erfindungsgemäßes	100	100%
Beispiel 6
erfindungsgemäßes	100	95%
Beispiel 8

Perorulcr LDsn-Wert in mg/kg

4-Mcrcaptoandrosta-4,6-

dien-l7£i-(2'-carboxyäthyl)-

17/?-ol-3-onlacton

24-Diniercaploandrosta-4,6-

dicn-17ci-(2'-carboxyäthyl)-

17/i-ol-3-onlacton

6100

ähnlich hoch wie bei den
anderen erfindungsgemäßen Verbindungen

Kort sctzung

Verbindung
Bezeichnung

Zuordnung

7a-Acetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthyl )-

l'eroralc Übcrle- l'ernrüler LD^,,-Wert in mg/k;;

Dosis in bensrale
mg/kg
Körpergewicht

(Vergleichssubstanz)
Blindversuch

französische
Patentschrift 514 M
und Steroids 20 (1)
[1972], Seite 41 und

72%

0%

5200

Aus dem Obigen geht eindeutig hervor, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen der Vergleichssubstanz stark überlegen sind.

2. Die pharmakologische Abwehrwirkung

in bezug auf für Quecksilbervergiftungen

sehr charakteristischen Nierenschädigungen

a) Nephrocalcinose

Die intravenöse Verabreichung von 3,5 mg HgCb/kg Körpergewicht führt in 90% der Fälle makroskopische Nephrocalcinose herbei. Bei der Behandlung mit den erfindungsgemäßen Verbindungen durch Verabreichung derselben 1 Stunde vor der Verabreichung der 3,5 mg HgCb/kg Körpergewicht wird die Nephrocalcinose völlig verhindert (100%).

b) Wirkung auf die durch

Quecksilbervergiftung verursachte

Nierenbeckenenizündung durch Nierenödeine

Die Wirkung kann durch Bestimmen des Wassergehaltes des Nierengewebes gewertet werden. Bei intravenöser Verabreichung von 2.0 mg HgC'b/kg Körpergewicht wird ein pathologisches Anwachsen des Wassergehaltes um 42 bis 54% beobachtet. Die erfindungsgemäßen Verbindungen schützen die Nieren der vergifteten Tiere. Die Ergebnisse bei Verabreichung von erfindungsgemäßen Verbindungen beziehungsweise der als Mittel gegen Quecksilbervergiftungen bekannten Verbindung 7a-Acelyllhioandrost-4-en-17*- (2'-carboxyäthyl)-17/i-ol-3-onlacton als Vergleichssubstanz 1 Stunde vor der Verabreichung der 2.0 mg HgCb/kg Körpergewicht sind in der folgenden Tabelle 2 zusammengestellt.

Tabelle 2

Verbindung	Zuordnung	l'erorale	Schuiz-	l'erorulcr LD^-Wrrl in mg/kg
Bszeichnung		Dosis in mg/kg	wirkung
		Körper
	erfindungsgemäßes	gewicht
oa-AcetylthioandrosM-cn-	Beispiel 3	100	71 %	ähnlich hoch wie bei den
17a-(2'-carboxyäthyD-				anderen erfindungsgemiiße
17/J-o1-3-on-lacton	erfindungsgemäßes			Verbindungen
4,7fl--Diacetylthioandrost-	Beispiel 9	100	68%	4900
4-en-17CT-(2'-carboxy-
äthyl-17jS-ol-3-onlacton	erfindungsgemäßes
4-Mercaptoandrosta-4,6-	Beispiel 6	100	65%	6100
dien-17a-(2'-carboxy-
üthyn-1 7jö-ol-3-onlacton	französische
7a-Acetylthioandrost-4-	Patentschrift 514 M	100	52%	5200
en-17ff-(2'-carboxy-	und Steroids 20 (1)
iithyl)-17j8-ol-3-onlacton	[1972], Seite 41 und 42
(Vergleichssubstanz)
Blindversuch		0%

Aus dem Obigen geht eindeutig hervor, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen der Vergleichssubstanz erheblich überlegen sind.

c) Den Quecksilberspiegel
im Nierengewebe vermindernde Wirkung

Bekanntlich häuft sich bei Quecksilbervergiftungen das Quecksilber im Nierengewebe an. Das Maß der Schädigung hängt von der Quecksilberanhäufung ab.

Zum Nachweis dieser Wirkung wurden den Versuchstieren erfindungsgemäße Verbindungen beziehungsweise die als Mittel gegen Queü. -lioeivergiftungcn bekannte Verbindung 7\-AcUylih'o;indrost-4 cn-17-* (2'-carboxyäthyl)-i7/i-ol-3onlacton jeweils in einer Dosis von 100 mg/kg Körpergewicht peroral verabreicht. 1 Stunde nach der Verabreichung dieser

Verbindungen wurden den Versuchstieren eine das ^2<))Hg-lsotop enthaltende Quccksilber(ll)-chloiidlösuiig in einer Dosis von 200 mg -'"'HgCli/IOO g Körpergewicht iiiiiavenö\ dngespritzt. Die Versuchstiere wui den I. 4 beziehungsweise 18 Stunden nach der Quecksilber;iij-chloridbuir.udlung getötet, und es wur-

Tabelle 3

de der Quecksilbergchall von deren Nierengewebe bestiiniiK. Der '"'Hg-Gehalt der Nierengewcbo der mit keinem Mittel gegen Üueeksiibei \.ergiftungen behandelten Blindversuchsticrc wurde mit 100% bewertet. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle i /uSuinmengosiclil.

Verbindung	Zuordnung	/eit naii.	¹ Hg-üehiill	'"'llg-Gehalt de:,	l'eroralei
Bezeichnung		der Qucck- silber(ll)-	des Nicren- geuehes,	Nicrengewebcs. be zogen auf die mit	Ll),„-Wcrl in mg/kg
		chloridbc-	bezogen au!	Tu-Ai ctylthinandrosl-
		handlung	die Blindver-	4-cn-l7ff-(2'-carboxy-
		in Stunden	suehsliere	ätMvii-i7/>-iil-3-iiniiictoi"i
				behandelten Ver
	erllndungs-			suchstiere
4.7,,-Diaceivlthioandrost-	gemäßes	I	19,6%	83.8%	49(X)
4-en-l7<H2'-carboxyüthy1)-	Beispiel 9	4	13,1%	40,7%
l7/J-ol-3-onlacton	erfindungs-	18	57,1%	74,2%
2.4-Diacetylthioandrosta-	gemäßes	1	22,1%	94,4%	5300
4,6-dien-17i/-(2'-carboxy-	Beispiel 7	4	28,1 %	86,9%
äthyI)-17/J-ol-3-onlacton	französische	18	41,3%	52,3%
7ff-Acetylthioandrost-4-en-	Patentschrift 514 M	1	23,4%	100%	5200
17ff-(2'-carboxyä thy Ο	und Steroids 20 (I)	4	32,3%	100%
Ι T/i-ol-3-onlacton	[1972], Seite 41	18	77,1 %	100%
	und 42

Blindversuch		1	100%
		j	100%
	I *	100%

3. Die beschleunigende Wirkung auf die _4f)

Quecksilberausscheidung

Das Quecksilber wird größtenteils über die Galle beziehungsweise mit dem Stuhl ausgeschieden. Die erfindungsgemäßen Verbindungen verändern die Verteilung des Quecksilbers im Organismus und beschleunigen die Ausscheidung durch die Galle. Mit der wirksamsten Verbindung, dem 4-Acetylthio-androsta-4.6-dien-17\-(2'-carboxyäthyl)-17/2-ol-3-onlacton, wird die durch die Galle je Zeiteinheit ausgeschiedene Quecksilbermenge um 376% erhöht. Auch die am wenigsten aktive Verbindung, das 2|,4-Dimercaptoandrosta-4,6-dien-17*-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton. erhöht die Menge der ausgeschiedenen Quecksilber(II)-ionen um 273%.

Sonstige pharmakologische Angaben

Bei Quecksilbervergiftungen verschlechtert sich die Entgiftungswirkung der Leber in bezug auf körperfremde Verbindungen wesentlich. Die erfindungsgemäßen Verbindungen wehren die leberschädigende Wirkung &o der Quecksilber(ll)-ionen ab. Bei in vivo vorgenommenen Untersuchungen der N-Methyl-cyclohexenyl-methylbarbitursäureoxydaseaktivität [Hexobarbitaloxydaseaktivität] wurde eine 70- bis 85%ige Schutzwirkung beobachtet.

In den verwendeten Dosen zeigen die erfindungsgemäßen Verbindungen keinerlei toxische Nebenwirkungen. Die bei einem großen Teil der Verbindungen nachweisbare Antialdosteronwirkung hat auf die Anwendbarkeit der Verbindungen bei Quecksilbervergiftungen keinen nachhaltigen Einfluß, da sie bei normalem Aldosteronhaushalt keinerlei Symptome herbeiführen.

Die Abwehrwirkung beziehungsweise therapeutische Wirkung gegen Quecksilbervergiftungen wurde deshalb ausführlicher untersucht, weil diese Vergiftung vom Gesichtspunkt des Gesundheitswesens aus die größte Bedeutung hat. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind aber beispielsweise auch bei Blei- und Arsenvergiftungen erfolgreich anwendbar, wie es durch Untersuchungen bezüglich der bei sonstigen Schwermeiallvergiftungen erreichbaren Abwehrwirkung festgestellt werden konnte.

Als Trägerstoffe, mit welchen die erfindungsgemäße Verbindungen enthaltenden Arzneimittelpräparate zubereitet sein können, kommen organische und anorganische Substanzen, die mit den erfindungsgemäßen Verbindungen nicht in Reaktion treten und zur parenteralen oder enteralen beziehungsweise intestinalen Verabreichung geeignet sind, in Frage.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in den Arzneimittelpräparaten als alleinige Wirkstoffe oder zusammen mit bekannten anderen Wirkstoffen vorliegen.

Die erfindungsgemäße Verbindungen enthaltenden Arzneimittelpräparate können gegebenenfalls sterilisiert werden und ferner können sie noch sonstige Hilfsstoffe, zum Beispiel zur Beeinflussung des osmotischen Druckes geeignete Salze oder Puffer, enthalten.

Gegenstand der Erfindung ist auch ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen, welches dadurch gekennzeichnet ist. daß eine Verbin-

Jung der allgemeinen Formel
O

I
O

Ζ, für Wasserstoff steht und

Z₂ Wasserstoff oder eine Acetylthiogruppe

bedeutet oder
Zi und Z> zusammen eine chemische Bindung bedeuten, bromiert wird und gegebenenfalls die erhaltene Verbindung der allgemeinen Formel

(H)

worin

Yi und Yt für Wasserstoff beziehungsweise Brom stehen,

Yj Brom bedeutet und

Y4 Wasserstoff oder eine Acetylthiogruppe

darstellt oder

Yi und Y4 zusammen eine chemische Bindung bedeuten,

mit einem Alkalithioacetat, vorzugsweise Kaliumthioacetat, oder einem Alkalihydrogensulfid umgesetzt wird, worauf gegebenenfalls an das erhaltene Produkt Thioessigsäure addiert (angelagert) wird und/oder gegebenenfalls das erhaltene Acetylthioprodukt einer Umesterung, vorzugsweise Alkoholyse, unterworfen wird.

Gegenstand der Erfindung sind auch die neue wertvolle Zwischenprodukte zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen

4-Mercaptoandrosta-4,6-dien-!7ai-(2'-carboxy-

äthyl)-! 7,S-ol-3-onlacton und
4-Acetylthioandrosta-4,6-dien-17ot-(2'-carboxy-

äthyl)-17,3-ol-3-onlacton beziehungsweise
2|,4-Diacetylthioandrosta-4,6-dien-

17a-(2'-carboxyäthyI)-17j?-ol-3-onlacton und
2|,4- Dimercaptoandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carb-

oxyäthyl)-17jS-ol-3-onIacton
der Formel I darstellenden
4- Bromandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthy I)-

17/?-ol-3-onlacton und
2«,6j9-Dibrom-7a-acetyIthioandrost-4-en-

17«-(2'-carboxyäthyl)-17/}-oI-3-onlacton
der Formel II.

Die Bromierung wird vorzugsweise mit N-Bromsuceinimic! odor Brom durchgeführt.

Die Umsetzung mit dem A Ikaliihioaceiat wird vortcilhüfterweise in einem dipcilarcn aprolonischen ^r> Lösungsmittel, insbesondere Dimethylformamid, durchgeführt.

Die Umsetzung mil dem Alkalihydrogensulfid wird zweckmäßigcrweise in Gegenwart eines Lösungsmittels, insbesondere von Tetrahydrofuran, durchgeführt. ¹⁽¹ Vorzugsweise wird bei der gegebenenfalls vorgenommenen Addition (Anlagerung) der Thioessigsäure aIs Lösungsmittel ein großer Überschuß an Thioessigsäure oder ein Alkohol oder ein Lösungsmittel mit einem tertiären Stickstoffatom verwendet

^r- Dse Alkoholyse wird zweckmäßigerweise mit einem Alkohol, insbesondere Methanol, in Gegenwart eines Alkalialkoholates durchgeführt.

Die im erfindiüigsgeniäßcn Verfahren als Ausgangsstoffe zu verwendenden Verbindungen der Formel III ■"» sind bekannt (|.Org. Chem. 24 [1959], 1109). Die im erfindungsgemäßen Verfahren als Zwischenprodukte dienenden Verbindungen der Formel Ii, deren Eigenschaften die Ursache für die überlegenen pharmakologisehen Wirkungen der erfindungsgemäßen Verbindun-2^r> gen der Formel I sind, sind dagegen mit Ausnahme des 6/?-Bromandrost-4-en-17i\-(2'-carboxyäthyl)-17/i-o!-3-onlactones ebenso wie die als Endprodukte des erfindungsgemäßen Verfahrens zu erhaltenen erfindungsgemäßen Verbindungen dtr Formel I neue s<> Verbindungen.

Zweckmäßige Ausführungsformen des Bromierens zur Herstellung der Zwischenprodukte der Formel Il beziehungsweise der ersten Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens sind wie folgt:

i"> a) Androst-4-en-17a-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton wird mit Bromsuccinimid in Gegenwart von Tetrachlorkohlenstoff zu 6,?-Bromandrost-4-en-17ix-(2'-carboxyälhyl)-17/J-ol-3-onlacton umgesetzt (US-Patentschrift 30 36 069).

b) Androsta-4,6-dien-17<x-(2'-carboxyäthyl)-17/J-ol-3-onlacton wird mit N-Bromsuccinimid in Gegenwart von Lösungsmitteln, zweckmäßigerweise eines Lösungsmittelgemisches, zum Beispiel von Dioxan und Wasser, und von Überchlorsäure oder mit in einem Gemisch von Dioxan und Äther oder noch zweckmäßigerweise in Eisessig gelöstem Brom, vorzugsweise bei Temperaturen unter Zimmertemperatur, zur Umsetzung gebracht, und das erhaltene Produkt wird bei erhöhter Temperatur mit Pyridin behandelt (Chem. Ber. 94 [1961], 1225), wodurch das neue 4-Bromandrost-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthyl)-17/3-ol-3-onlacton erhalten wird.

c) Androst-4-en-7«-acetylthio-17ix-(2'-carboxyäthyl)-

17/?-ol-3-onlacton wird mit 2 Mol in Eisessig gelöstem Brom in Gegenwart eines Lösungsmittels, zweckmäßigerweise in ätherischer Suspension, und in Gegenwart von Bromwasserstoff (]. A. C. S. 72 [1950], 4534) oder mit in Dioxan gelöstem Brom zur bo Umsetzung gebracht. So wird das neue 2a,6/?-Di-

brom-7«-acetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthy])-l 7j3-ol-3-onlacton erhalten. Zweckmäßige Ausführungsformen der Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I beziehungsweise der zweiten und gegebenenfalls darauffolgenden Stufen des erfindungsgemäßen Verfahrens sind wie folgt:
a) Als eine Möglichkeit können die Acetylthioderiva-

Ii

te durch Umsetzung der entsprechenden Bromderivate mit Kaliumthioacetal in Gegenwart eines Lösungsmittels, vorzugsweise eines dipolaren aprotonischen (aprotischen) Lösungsmittels, insbesondere von Dimethylformamid, bei Zimmertemperatur (Chem. Pharm. Bull. 12 |12|[1964], 1433 und Chcm. Ber. 96 {10} [1963], 1803) erhalten werden. Als andere Möglichkeit können sie durch Addition von Thiocssigsäure an bereits einen schwefelhaltigen SubstituciHen und in der 6-Stellung eine Doppelbindung aufweisende Verbindung erhalten werden. Die Addition der Thioessigsäure kann mit im Überschuß vorliegender Thioessigsäure (US-Pulenlschrifl 30 13 012) oder unter Verwendung eines geringen Überschusses von Thioessigsäure in einem geeigneten Lösungsmittel, zum Beispiel Methanol oder Dimethylformamid, durchgeführt werden (ungarische Patentschrift 1 60 369). So können zum Beispiel oiX-Acetylthioandrost^-en-17(x-(2'-carboxyäthyl)-17/}-ol-3-onlacton aus dem entsprechenden b/J-Bromderivat und 4-Acetylthioandrosta-4,6-dien-17ix-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3 onlacton aus dem entsprechenden 4-Bromderivat hergestellt werden. Bei der Umsetzung von ?«,6/?-Dibrom-7«-acetyl-thioandrost-4-en-17i\-(2'-carboxyäthyl)-17ß-ol-3-onlaclon mit Kaliumthioacetat entsteht durch gleichzeitig auftretende Abspal'·."g und Umlagerung in unerwarteter Weise das 2ij,4-Diacetylthioandrosta-4,6-dien-17i\- (2'-carboxyläthyl)-17ß-ol-3-onlacton.

b) Durch Addition von Thioessigsäure an ein in 4-Stellung acetylsubstituiertes Derivat des Androsla-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthyl)-17/3-01-3-OnIaC-tones kann das 4,7A-Diacetylthio-androst-4-en-1 7λ-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton erhalten werden. Da die Addition der Thioessigsäure an 4-Acetylthioderivate nur unbefriedigend verläuft, wird in einer bevorzugten Ausführungsform des Verfahrens die obige Verbindung aus dem 4-Mercaptodcrivat hergesicllt, wobei in der Reaktion außer der Addition der Thioessigsäure an die Doppelbindung in der 6-Stellung überraschenderweise auch die in der 4-Stellung befindliche Mercaptogruppe acetyliert und auf diese Weise das Produkt mit kurzer Reaktionsdauer in guter Ausbeute erhalten wird.

c) Die Mercaptoderivate können durch Umsetzung der entsprechenden Bromverbindungen mit einem Alkalihydrogensulfid, wie Natriumhydrogensulfid, hergestellt werden. Die Substitution wird zweckmäßigerweise in einem Lösungsmittel, insbesondere in wasserfreiem Tetrahydrofuran, bei erhöhter Temperatur, zweckniäßigerweise beim Siedepunkt des Systems durchgeführt. Als andere Möglichkeit können die Mercaptoverbindungen auch ausgehend von den die entsprechenden Acetylthiogruppen aufweisenden Verbindungen durch Umesterung, vorzugsweise Alkoholyse in Alkoholen, insbesondere in wasserfreiem Methanol, in Gegenwart eines Alkalialkohoiates, insbesondere Alkalimethylates, ganz besonders bevorzugt durch bei Zimmertemperatur durchgeführte Alkoholyse der Acetylthioverbindungen, erhalten werden (Chem. Ber. 96 {10} [1963], 2803 und US-Patentschrift 31 54 542). So können aus den entsprechenden 4-Brom- beziehungsweise 4-Acetylthioverbindungen das 4-Mercaplo-androsta-4,6-dien-17a-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-on!acton und aus der entsprechenden 2|,4-Dilhioacetylvcrbindung das

2£,4-Dimercaptoandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton hergestellt werden. Bei der mit Methanol in Gegenwart von Natriuminel- ^r> hylat durchgeführten Alkoholyse von 4,7«-Diace-

tylthioandrost-4-cn-17(X-(2'-carboxyäthyl)-17jS-ol-3-onlacton wurde beobachtet, daß eine Acetylthiogruppe entfernt wird, während sich aus der anderen eine Mercaptogruppe bildet, so daß sich die ■" 4-Mercapto-4,b-dien-3-ketovurbindung zurückbildet. Wird diese Umsetzung unter Einleiten von Schwefelwasserstoff beziehungsweise mit Natriumhydrogensulfid in einem alkoholischen Medium, wie Methanol, durchgeführt, dann wird selektiv nur ι' die ir der 4-Stellung befindliche Acetylthiogruppc zur Mercaptogruppe umgesetzt, und es wird

4-Mercapto-7r\-acetylihioandrost-4-en-17ix-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-on-lacton erhalten.
Die Erfindung wird an Hand der folgenden nicht ;iK 2" Beschränkung aufzufassenden Beispiele näher erläutert.

Beispiel 1

Es wurden 3,40 g Androsta-4,6-dic!i-17ix-(2'-carboxy-2' äthyl)-17/?-ol-3-onlacton in einem Gemisch von "Scm¹ Dioxan und 42 cm'Äther gelöst. Zur auf 1O⁰C gekühlten Lösung wurden während 2 Minuten 1,70 g Brom in 9cm^! Eisessig zugegebc" ^us dem Reaktionsgemisch wurde der Äther unter Vakuum abdestilliert, die als *<> Rückstand verbliebene Dioxanlösung wurde in 250 cm^J Wasser eingegossen, das ausgeschiedene Produkt wurde abfiltriert und das noch nutschenfeuchte Material wurde in 80 cm¹ Pyridin gelöst. Die Lösung wurde 1 Stunde lang unier Rückfluß zum Sieden erhitzt, dann i' abgekühlt und in 500cm¹ 10%ige wäßrige Salzsäure eingegossen. Das ausgeschiedene Produkt wurde abfiltriert und aus Methanol umkristallisiert. So wurden 1,80 g 4-Bromandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton erhalten.
Ausbeute: 43% der Theorie
Schmelzpunkt: 193 bis 194°C
[λ]2>·= +101°(c= 1; Chloroform)
A„,.„ = 302 πιμ(εΜ = 22 000)
r„_m = 1780cm-¹,1670cm ',1615cm 'und
⁴"' 1550 cm"¹

Beispiel 2

Es wurden 4,16 g 7«-Acetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthyl)-17/J-ol-3-onlacton in 160 cm³ Dioxan gelöst, und der Lösung wurden während 20 Minuten bei Zimmertemperatur 3,36 g Brom in 80 cm³ Dioxan zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde weitere 20 Minuten gerührt beziehungsweise geschüttelt und dann in 2 1 Wasser eingegossen. Das Produkt wurde abfiltriert, bis zur Erreichung der neutralen Reaktion gewaschen, gut abgesaugt, dann in Methanol suspendiert, erneut filtriert, getrocknet und schließlich aus Aceton umkristallisiert. So wurden 4,20 g 2<x,6/?-Dibrom-7«-acetylbo thioandrost-4-en-17*-(2'-carboxyäthyl)-17/?-ol-3-onlacton erhalten.

Ausbeute: 73% der Theorie
Schmelzpunkt: 186 bis 187° C
[λ] T= + 7,2° (c = 1; Chloroform)

A ma»- = 254 πιμίε» = 14 200)
j,„_m = 1775cm'-¹,1700 cm-¹,1685 cm-' und
1612cm-¹

Beispiel 3

Es winden 4,21 g 6/i-Bromandros!■■<* -en-17«-(2'-carboxyathyl)-17ß-ol-3-onlacton in 62 cm³ Dimethylformamid gelöst, und der Lösung wurden bei Zimmertempi:- "> ratur unter Rühren beziehungsweise Schütteln 3,4 g Kaliumthioacetat zugesetzt. Danach, wurde das Reaklionsgemisch noch 3 Stunden gerührt und anschließend in 300 cm³ Wasser pingegossen. Der ausgeschiedene Niederschlag wurde abfiltriert, bis /.ji Eritniiung der κι neutialen Reaktion gewaschen und getrockne;. Pas Rohprodukt wurde aus Methanol umkristallisien. So wurden 3,00 g 6\-Ac;i>hhiuandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthyl)-! 7/J-ol-3-onlacton erhalten.

Ausbeute: 72% der Theorie ''

Schmelzpunkt: 194 bis 196°C

[Vp₀ ⁰⁰= +37° (c= 1 !Chloroform)

X_1111n = ?36:iiL -h.t= 15900)

}',„.» = l/ZOcrn- ',1700cm '.1675cm 'und

1620 cm ^; -¹"

Beispiel 4

Es wurden 4,19 g 4-Bromandrosta-4,6-dien-17i\-(2'-carboxyäthyl)-17ß-ol-3-onlacton in 50 cm³ Dimethylformamid gelöst. Zur Lösung wurden bei Zimmertem- 2"> peratur unter Rühren beziehungsweise Schütteln 2.8 g Kaliumthioacetat zugegeben und dann wurde das Ganze 10 Stunden lang gerührt beziehungsweise geschüttelt. Danach wurde das Reaktionsgemisch in 300 cm³ Wasser eingegossen. Der ausgeschiedene κι Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen, scharf abgesaugt und dann im nutschenfeuchten Zustand aus Aceton umkristallisiert. So wurden 2.5 g 4-Acetylthioandrosta-4,6-dien-17«-(2'-carboxyäthyl)-17ß-ol-3-onlacton erhalten. r,

Ausbeute: 61 % der Theorie

Schmelzpunkt: 230 bis 233°C

[«]»„»·= +52,5° (c= 1;Chloroform)

λ,,,.·,, = 300 Γημ(ε_Λί = 18 600)

}',„.,< = 1780 cm-'. 1705 cm-', 1670 cm¹. -»o

16!0cm-'und S545cm '

Beispiel 5

Es wurden 4,19 g 4-Bromandrosta-4,6-dien-17*-(2'-carboxyäthyl)-17^-ol-3-onlacton unter Ausschluß von Feuchtigkeit in einem Stickstoffstrom in 50 cm³ wasserfreiem Tetrahydrofuran gelöst. Die Lösung wurde mit 5,6 g Natriumhydrogensulfid versetzt und dann 5 Stunden lang unter Rückfluß zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt, sein pH-Wert -,0 wurde mit Eisessig auf 6 eingestellt, und die Flüssigkeit wurde in 400 cm³ Wasser eingegossen. Das ausgeschiedene Produkt wurde abfiltriert, gewaschen, im nutschenfeuchten Zustand in Methanol suspendiert, erneut filtriert und dann getrocknet. So wurden 2,20 g

4-Mercaptoandrosta-4,6-dien-17<x-(2'-carboxyäthyI)-17jS-ol-3-onlacton erhalten.

Ausbeute: 59% der Theorie

Schmelzpunkt: 180 bis 185°C

[_a]»⁰= +140.8° (c = 1 !Chloroform) wi

λ,,_ων=338!ημ(εΜ= 11 700)

_ym.,_<
= 2545 cm-¹,1775 cm-¹,1660 cm-¹.

16l2cm-^lundl545cm-¹

Bcispi el 6 _b5

Es wurde 0,46 g metallisches Natrium unter Ausschluß von Feuchtigkeit in einem Stickstoffstrom in 170 cm³ wasserfreiem Methanol gelöst, und der Lösung wurden unter Rühren beziehungsweise Schütteln 4,14 g 4-Aceiylthioandrosia-4.6-dien-1 7a-(2'-cui box> alhyl)-1 7/f-ol-3-onlacton zugesetzt. Nachdem sich alles gelöst hatte, wurde das Reaktionsgemisch bei Zimmertemperatur noch jO Minuten gerührt beziehungsweise geschüttelt, worauf der pH-Wert mit usessig auf b eingestellt und das Reaktiunsgemisch in einem Stickstoffstrom auf 'Λ seines Volumens eingeengt wurde. Die ausgeschiedenen Kristalle wurden abfiltriert, mit kaltem Methanol gewaschen und dann getrockne!. So wurden 2,50 g

<i-Mercaptoundrostü-4,b dien- i 7A-(2'-curboxyäthyl)-17/f-ol-3-onlacion erhalten.

Ausbeute: 67% der Theoi ic

Schmelzpunkt: 188 bis 1°2°C

Ms?'= H-146,8° (r= !!Chloroform)

/U,. = 338ηιμ(ε_Α; = 11 900)

}'„,.,, = 2345 cm ^;. 1775 cm '
1612 cm ' und 1545 cm '

1660 cm

B e i s ρ i c I 7

Es wurden 5.74 g 2a.6/}-Dibrom-7<\-aceiylihioandrost-4-en-17A-(2'-carboxyäthyl)-17j?-ol-3-onlacton in 90 cm³ Dimethylformamid gelöst und der Lösung >mter Rühren beziehungsweise Schütteln bei Zimmertcinperatur 4,56 g Kaliumthioacetat zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde noch 2 Stunden gerührt beziehungsweise geschüttelt und dann in 400 cm³ Wasser eingegossen. Das wäßrige Gemisch wurde mit 3 χ 100 cm³ Methylenchlorid extrahiert. Die Methylenchloridphasen wurden miteinander vereinigt und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, das Natriumsulfat wurde abfiltriert, und das Filtrat wurde zur Trockene eingedampft. Das erhaltene Produkt wurde aus Äthanol umkristallisiert. So wurden 4.00 g 2c.4-Diacctylthioandrosta-4,6-dien-17\-(2'-carboxyäthyl)-17|9-ol-3-onlacton erhalten.

Ausbeute: 82% der Theorie

Schmelzpunkt: 160 bis 170' C

A„,„ = 231 mu und 301 πιμ(ε_Λί = 14 700 beziehungsweise 11 900)

>■„,.„= 1775 cm

1610cm 'und 1545cm '

Beispiel 8

Es wurde 0,92 g metallisches Natrium unter Ausschluß von Feuchtigkeit in einem Stickstoffstrom in 240 cm³ wasserfreiem Methanol gelöst und der Lösung wurden unter Rühren beziehungsweise Schütteln bei Zimmertemperatur 4,88 g 2|,4-Diacetyllhioandrosta-4.6-dien-17[\-(2'-carboxyäthyI)-17ß-ol-3-onlacton zugesetzt. Nachdem sich alles gelöst hatte, wurde das Gemisch noch 5 Minuten nachreagieren gelassen. Dann wurde der pH-Wert mit Eisessig auf 6 eingestellt und das Reaktionsgemisch in einem Stickstoffstrom auf '/4 seines Volumens eingeengt. Das ausgeschiedene Produkt wurde abfiltriert, mit Methanol gewaschen und dann getrocknet. So wurden 2.95 g 2£,4-Dimercaptoandrosta-4,6-dien-17ft-(2'-carboxyäthyI)-17/?-ol-3-onlacton erhalten.

Ausbeute: 73% der Theorie

Schmelzpunkt: 233 bis 240° C λ™, = 337 ΐημ(εΜ = 6200)

_;._m.„ = 2550 cm-', 1775 cm-¹,1660 cm-¹, 16l0cm-^lund1545cm-¹

Beispiel 9

Es wurden 3,72 g 4-Mercaptoandrosta-4,6-dien-17\- (2'-carboxyäthyl)-!7/?-ol-3-onlacton in 20 cm³ Thio-

essigsäure gelöst. Die Lösung wurde 1,5 Stunde lang unter Rückfluß zum Sieden erhitz;. Die überschüssige Thioessigsäure wurde unter Vakuum abdes'.illiert. und det erhaltene ölige Rückstand wurde aus Äthanol umkristallisiert. So wurden 3,00 g 4,7i\-Diacetylthioandrost-4-en-17&-(2'-carboxyäthyl)-170-ol-3-onlactcn erhalten.

Ausbeute: 61% der Theorie

Schmelzpunkt: 186 bis 194^CC

[«] »·= + 72,8= (c= I; Chloroform)

λ™, = 234ηιμ(ϊΛί= 14 100)

ν™· = 1775 cm -'. 1705 cm - '. 1685 cm -' und

1575cm-¹

Beispiel 10

Es wurde 0.46 g metallisches Natrium unter Ausschluß von Feuchtigkeit in 250 cm³ wasserfreiem Methanol gelöst. In die Lösung wurde bei Zimmertemperatur 15 Minuten lang Schwefelwasserstoff eingeleitet. Der mit Schwefelwasserstoff gesättigten Lösung wurden dann 4.90 g 4,7«-Diacetylthioandrost-4-en-17a-(2'-carboxyäthy!)-17^-ol-3-onlacton zugesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde unter Einleiten von weiterem Schwefelwasserstoff bei Zimmertemperatur gerührt beziehungsweise geschüttelt. Dann wurde der pH-Wert der Lösung mit Eisessig auf 6 eingestellt und die Lösung zur Trockene eingedampft. Das Rohprodukt wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und dann aus Isopropa-ηοΐ umkristallisien. So wurden 2.45 g 4-Mercapto-7\-

onlacton erhalten.

Ausbeute: 55% der Theorie
Schmelzpunkt: 186 bis 188³C
[_Λ]*>°= +37,2° (c- 1: Chloroform)
A_n:jy = 302πιμ(ε*, = 6300)
3',μ» = 2550 cm-',1770 cm-'.1695 cm-'

909 608/262

Claims

Patentansprüche:

1. Acetylthio- und/oder Mercaptogruppen enthaltende Wix-P'-CarboxyäthylJ-^jS-ol-lacton-Steroide der allgemeinen Formel

ο χ, χ,

Xj und X₄ Wasserstoff beziehungsweise eine Acelyllhiogruppe oder zusammen eine chemische Bindung bedeuten,